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ARCHIV 


für 


Mikroskopische Anatomie 


I. Abteilung 


für vergleichende und experimentelle 
Histologie und Entwicklungsgeschichte 


II. Abteilung 
für Zeugungs- und Vererbungslehre 


herausgegeben 
von 


O0. Hertwig und W. Waldeyer 


in Berlin 


Dreiundachtzigster Band 
I. Abteilung 
Mit 17 Tafeln und 69 Textfiguren 


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Verlag von Friedrich Cohen 
1913 


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Inhalt. 


Abteilung I. 
Erstes und zweites Heft. Ausgegeben am 22. Sept. 1913. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. Von Dr. F. Wassermann, 
Assistent am Anatomischen Institut München. (Aus dem Anat. 
Institut München. [Direktor Prof. Dr. J. Rückert.)) Hierzu 
Tafel I—IV und 43 Textfiguren ar 

Die Entwicklung von Forelleneiern nach Bettdchtung alt lin. 
bestrahlten Samenfäden. Von Karl Oppermann. Hierzu 
Tafel V—VII und 10 Textfiguren . 


Drittes Heft. Ausgegeben am 25. Oktober 1913. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten des Pferdes 
unter besonderer Berücksichtigung der Heterochromosomen- 
forschung. Von Kurt Kühtz. (Aus dem Biologischen Institut 
der Universität Berlin.) Hierzu Tafel VIII—X und 8 Textfiguren 


Viertes Heft. Ausgegeben am 8. Dezember 1913. 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen durch chemische Stoffe. Von 
Günther und Paula Hertwig. (Aus dem Anat.-biologischen 
Institut zu Berlin und der Zoologischen Station zu Neapel.) 
Hierzu Tafel XI, XII und 6 Textfiguren . 5 BI 

Die Entwicklung von Forelleneiern nach Befruchtung ik an 
bestrahlten Samenfäden. II. Teil. Das Verhalten des Radium- 
ehromatins während der ersten Teilungsstadien. Von Dr. Karl 
Oppermann. Hierzu Tafel XIII und 2 Textfiguren . : 

Die Samenbildung bei den Enten. Von Karl Schöneberg. (Aus 
dem Anatomisch-biologischen Institut der Berliner Universität.) 
Hierzu Tafel XIV— XVII. 

Literarisch-kritische Rundschau: Hartog, Mateities nd Mitosis 


Seite 


141 


191 


267 


307 


324 
370 


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Aus dem Anatomischen Institut München, Direktor Prof. Dr. J. Rückert. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 
von 


Dr. F. Wassermann 
Assistent am Anatomischen Institut München. 


Hierzu Tafel I—-IV und 43 Textfiguren. 


Inhalt: 
. Einleitung . . 
. Material und Methoden 
Die Normalzahl der Chromosomen 
. Oogonien 
. Die Oozyten- Eintwieklung. 
I. Periode der Oozyten- Entwicklung no zum ee 
a) Die Befunde . Ä £ 
b) Bemerkungen zur Methode der Untersuchung : 
1. Die Erhebung der Befunde 
2. Die Synapsisfrage ; 
3. Begründung der Seriierung ! 
e) Die frühe Oogenese von Fasciola hepatica En 
d) Allgemeiner Teil . 
1. Die Entstehung der reduzierten Chromatinslemente 
«) Der gegenwärtige Stand der Frage . 
3) Die Frage nach der Entstehung der reduzierten 
Elemente bei Zoogonus mirus ; 
y) Die Einwände gegen die Parasyndese | im all- 
gemeinen . 5 
ö) Der prinzipielle Unterschied "zwischen Para- 
syndese und Metasyndese 
. Versuch einer Erklärung der während. der Ernie 
Oogenese beobachteten Chromainumlakerungen 2 
II. Periode der Oozyten-Entwicklung von der Auflösung des Buketts 
bis zur Prophase der I. Reifungsteilung . 
a) Befunde . ; 
b) Allgemeiner Teil . : Ä 
III. Periode der Oozyten- Entwicklung — die, Reifungsteilungen J 
a) Befunde . 
1. Die Prophase der. L Reifunsatedne ’ 
2. Die I. Reifungsteilung Su: 
3. Die II. Reifungsteilung . 
b) Allgemeiner Teil . 
1. Die Frage nach der Kontinuität der "Chromosomen 
2. Das Reduktionsproblem 


Booab» 


Archiv f. mikr. Anat. Bd.S3. Abt. II. | 


96 

96 
104 
115 
115 
115 
122 
125 
127 
127 
130 


[&6) 


F. Wassermann: 


A. Einleitung. 


Im Jahre 1905 veröffentlichte Goldschmidt (05) eine 
Arbeit über die Embryonalentwicklung und die Eireifung von 
Zoogonus mirus. Was die Oogenese dieses Trematoden betrifft, 
so beschränkte sich Goldschmidt auf die Untersuchung der 
Fier von dem Ende der Wachstumsperiode bis zum Abschluss 
der Reifung, die jüngeren Oozytenstadien aber hat er nicht 
genauer berücksichtigt. Das Resultat nun, zu welchem Gold- 
schmidt gekommen ist, schien für die Reduktionsfrage von 
weittragender Bedeutung zu sein. Denn er glaubte hier einen 
Modus der Eireifung gefunden zu haben, der eine schematisch 
einfache Verwirklichung der Weismannschen Vorstellung von 
der Chromosomenreduktion darstellen würde. Seines offenbar 
primitiven Charakters wegen nannte Goldschmidt diesen 
Reduktionsvorgang den „Primärtypus“. Für ihn sei charak- 
teristisch, dass die zehn oder zwölf Chromosomen von Zoogonus 
mirus in dieser Normalzahl in die erste Reifungsspindel eintreten 
und dass also die Bildung von bivalenten Elementen, die Pseudo- 
reduktion, welche sonst die Erkenntnis des Reduktionsvorganges 
erschwert, unterbleibe. Die längsgespaltenen Chromosomen werden 
in der ersten Reifungsteilung äquationell halbiert, die zweite 
Reifungsteilung aber führe die zehn Stäbchen, deren jedes ein 
ganzes Uhromosom repräsentiert, in zwei Gruppen auseinander. 
Hier wäre also die postulierte qualitative Reduktion, die Elimi- 
nierung ganzer Chromosomen aus dem Ei, verwirklicht. 

Die Konstatierung des Primärtypus beruht, wie man sieht, 
auf der Übereinstimmung der in den Körperzellen des Zoogonus 
vorgefundenen Normalzahl der Chromosomen mit der Zahl der in 
die erste Reifungsteilung eintretenden Chromatinelemente. Diese 
Übereinstimmung konnten aber die späteren Untersucher des 
Zoogonus nicht auffinden und sie leugneten daher die Existenz 
des Primärtypus. 

Die erste Nachprüfung erfuhr die Eireifung von Zoogonus 
mirus durch A. und K. E. Schreiner (08), welchen Gold- 
schmidt auf ihr Ersuchen hin seine Präparate zur Verfügung 
gestellt hatte. Sie fanden wie Goldschmidt zwölf Chromosomen 
in der ersten Reifungsteilung, aber 24 in den somatischen Zellen. 
Daher mussten ihnen die Reifungsteilungs-Chromosomen bivalent 
erscheinen und sie schlossen aus gewissen Bildern der frühen 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 3 


Gonozytogenese, ohne diese jedoch genau zu untersuchen, dass 
auch bei Zoogonus, wie bei allen von ihnen untersuchten Objekten, 
insbesondere bei den Spermatozyten von Tomopteris, die bivalenten 
Elemente der ersten Reifungsteilung auf dem Wege der „Parallel- 
konjugation“ gebildet würden. Die Oogenese des Zoogonus ver- 
laufe daher nach dem von den Autoren für allgemein gültig 
gehaltenen „Tomopteristypus“. 

Dieser Darstellung gegenüber hielt Goldschmidt (09) seinen 
Standpunkt mit Entschiedenheit aufrecht. Er ergänzte dabei seine 
früheren Darlegungen durch Beibringung neuer Bilder, aber auf 
die frühe Oogenese ging er auch dieses Mal nicht ein. 

Wiederum an denselben Präparaten Goldschmidts, ja 
an den nämlichen Zellen, kam dann der dritte Untersucher, 
Gregoire (09), zu einer anderen, sowohl von der Gold- 
schmidts als auch von der Schreiners abweichenden An- 
schauung. Er stimmte zwar hinsichtlich der Chromosomennormal- 
zahl mit Goldschmidt überein, wenn er gleich nicht 10—12, 
sondern 10—14 Chromosomen in den somatischen Mitosen fand, 
konnte aber in den Stadien der Reifungsteilungen nur sechs bis 
sieben Elemente erkennen. Also stellte auch Gregoire eine 
die Existenz des Primärtypus ausschliessende Pseudoreduktion 
fest und auch er glaubte, wie A. und K. E. Schreiner, und 
gleichfalls ohne ein genaueres Studium der frühen Gonozytogenese 
vorgenommen zu haben, dass die bivalenten Elemente der ersten 
Reifungsteilung durch Parallelvereinigung je zweier Einzelchromo- 
somen zustande kämen. Die Reifungsteilungen selbst aber ver- 
laufen nach dem hetero-homeotypischen Schema, welches nach 
Gregoire den für das Pflanzen- und Tierreich allgemein und 
allein gültigen Modus der Reduktion darstellt. 

Bei dieser Sachlage und in Rücksicht auf den gegenwärtigen 
Stand der die Geschlechtszellen-Entwicklung betreffenden Fragen 
musste eine erneute Vornahme der Eireifung des Zoogonus mirus 
von dem Streben geleitet sein, ein möglichst abgerundetes Bild 
der Entwicklung der Eizelle, wenigstens von der letzten Oogonien- 
teilung bis zur zweiten Reifungsteilung, zu liefern. Durch die 
Verlegung des Schwerpunktes der Untersuchung in die frühe 
Oogenese wurde es möglich, die Entstehung der Elemente 
der ersten Reifungsteilung aufzuklären und so die Frage nach 
der Existenz des Primärtypus, die vorher ausschliesslich auf 

1* 


4 F. Wassermann: 


Grund der beiden Reifungsteilungen behandelt worden war, auf 
eine breitere Basis zu stellen. Dies war um so erspriesslicher, 
als das Studium der frühen Oogenese zu besonders klaren Resul- 
taten führte, während die beiden Reifungsteilungen unseres 
Objektes einer genauen Analyse so wenig zugänglich sind, dass 
auf sie allein gerichtete Betrachtungen weder hinreichen, die 
schwebende Streitfrage vollständig zu entscheiden, noch auch 
geeignet sind, die an die Reifungsteilungen sich anknüpfenden 
Fragen zu fördern. 

Über die Eireifung anderer Trematoden liegen Unter- 
suchungen von Cary (09), Goldschmidt (02, 08), v. Kemnitz 
(13), Schellenberg (08) und Schubmann (05) vor. Die 
Resultate derselben werden an den einschlägigen Stellen mit 
den unsrigen verglichen werden. Besonders eingehende Berück- 
sichtigung wird die Arbeit Schellenbergs erfahren, weil dieser 
Autor bei seinem Objekt neben dem gewöhnlichen pseudoreduk- 
tionellen Typus der Reifungsteilungen gelegentlich auch den Primär- 
typus auftreten sah und ferner, weil sich herausgestellt hat, dass 
die die frühe Vogenese betreffenden Befunde Schellenbergs sich 
in weitgehender Weise mit den unsrigen zur Deckung bringen lassen. 

Herr Prof. Dr. J. Rückert hat die vorliegende Untersuchung 
veranlasst und durch seinen Rat und seine Hilfe in reichstem 
Maße gefördert. Es ist dem. Verfasser ein Bedürfnis, seinen 
hochverehrten Lehrer und Chef auch an dieser Stelle hiefür des 
aufrichtigen Dankes zu versichern. 


B. Material und Methoden. 


Der Trematode Zoogonus mirus wurde von Loos im End- 
darm eines den Golf von Triest bewohnenden Fisches, des zu 
den Labriden gehörigen Labrus merula, entdeckt. Loos (01) 
und später Goldschmidt (02) haben die charakteristischen 
anatomischen Merkmale dieses Parasiten so genau dargestellt, 
dass man ihn nicht mit anderen Trematoden verwechseln kann. 

Das Material zu dieser Untersuchung wurde im Herbst 1910 
und im Frühjahr 1911 in Triest gesammelt. Für die Unter- 
stützung, die dem Verfasser dabei von seiten des Direktors der 
dortigen K. u. K. Zoologischen Station, Herrn Prof. Dr. J. Cori, 
gewährt wurde, sei auch hier der verbindlichste Dank aus- 
gesprochen. 


ou 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 


" Die Wirtstiere wurden sowohl im Golf von Triest selbst 
wie auch an verschiedenen Punkten der Küste Istriens, so bei 
Umago, Cittanuova und Pola, gefangen. Im ganzen gelangten 
96 Fische in unsere Hände; von diesen bargen 26 die gesuchten 
Parasiten. Die Anzahl der in einem Enddarm befindlichen Trema- 
toden schwankte sehr; man konnte nur einige wenige antreffen, hie 
und da aber waren auch etwa 100 und mehr vorhanden. In dem 
Darmbrei sind sie mit freiem Auge gerade noch erkennbar. Um 
uns bei jedem Exemplar davon zu überzeugen, dass es auch wirk- 
lich der gesuchten Spezies angehörte und um nicht ein oder das 
andere abgestorbene Tier zur Untersuchung zu bekommen, haben 
wir uns bei der Entnahme der Objekte aus dem Darmbrei stets 
der Lupe bedient. Die Konservierung geschah durch Sublimat- 
Eisessig (5proz.) und die Gemische von Flemming, Zenker, 
Gilson, Carnoy, Brasil und Bouin. Besonders das letzt- 
genannte gab ausgezeichnete Resultate. Die Färbung (Häma- 
toxylin nach Hansen, ev. mit Eosin oder Orange G, Eisenhäma- 
toxylin nach Heidenhain, Boraxkarmin, Safranin, Methylgrün) 
wurde gewöhnlich erst am Paraffinschnitt, dessen Dicke ent- 
sprechend der Grösse der Eier gewöhnlich 10 u betrug, -vor- 
genommen, einzelne Exemplare von Zoogonus wurden aber auch 
in toto mit Boraxkarmin behandelt. Dies geschah, um durch 
Zerzupfen derselben Totalpräparate der Eier anfertigen zu können. 
Es wird sich später ergeben (S. 123), dass die Totalpräparate den 
in Paraffin eingebetteten und mikrotomierten Objekten in bezug 
auf die Klarheit der Reifungsteilungsstadien, denn nur für diese 
kommen sie in Betracht, nicht wesentlich überlegen sind. 


Bei der Untersuchung der frühen Oozytenstadien war die 
Benutzung monochromatischen Lichtes von grossem Vorteil. 


C. Die Normalzahl der Chromosomen. 


In der Kontroverse über die Eireifung des Zoogonus mirus 
zwischen Goldschmidt, Schreiners und Gregoire spielen die 
sich widersprechenden Angaben über die spezifische Chromosomen- 
Normalzahl eine grosse Rolle (s. S. 2). Deswegen war bei einer 
erneuten Untersuchung des strittigen Objekts gerade auf diese 
Verhältnisse besonders zu achten, und sie müssen auch in grösserer 
Breite, als dies sonst üblich ist, abgehandelt werden. 


6 F. Wassermann: 


Die Gewebszellen des Zoogonus findet man nur selten in 
Teilung begriffen und noch seltener ist es bei der Kleinheit 
dieser Zellen möglich, eine Zählung der Chromosomen vorzunehmen. 
Dies gilt auch für die relativ häufigeren Mitosen im sogenannten 
Dotterstock. Aus diesem Grunde führen wir nur eine einzige Fe 
Zwischengewebe angehörige Teilungsfigur hier vor (Fig. 1); e 
handelt sich um die Polansicht einer Äquatorialplatte, in Bu 5 
die Chromosomen radiär angeordnet sind. Die Analyse dieses 
Bildes wird hauptsächlich durch die Übereinanderlagerung wahr- 
scheinlich dreier Chromosomen erschwert, während alle anderen 
Chromosomen, gut gegeneinander abgrenzbar, annähernd in einer 
Ebene liegen. Mit einiger Wahrscheinlichkeit sind hier zwölf 
Chromosomen zu zählen. Klar zu erkennen sind zehn Stäbchen 
und unter dem einen in der Zeichnung links unten von der Zell- 
mitte gelegenen und zentral weit vorgeschobenen befinden sich, wie 
es scheint, noch zwei andere sich überlagernde Chromosomen, das 
elfte und zwölfte. Jedenfalls sind in dieser Äquatorialplatte nicht 
nur zehn Chromosomen vorhanden, wie es nach Goldschmidts 
ursprünglicher Angabe der Fall sein müsste; es sind aber nicht 
viel mehr als zehn und niemals könnte es gelingen, hier ent- 
sprechend der Angabe von Schreiners, zwanzig und mehr 
Chromosomen herauszubringen. 

Die beste Aussicht auf eine sichere Ermittelung der 
Chromosomenzahl des Zoogonus mirus bieten die Mitosen der 
in Furchung begriffenen Eier und der embryonalen Zellen, die 
man im Uterus der Tiere, wo die Entwicklung der Nachkommen- 
schaft bis zum Larvenstadium gedeiht, in grosser Anzahl findet. 
Allerdings kann man nur die Prophasen und Metaphasenstadien 
dieser Mitosen zur Untersuchung heranziehen und auch diese nur, 
wenn sie in günstiger Ansicht vorliegen und wenn sich die ganze 
Teilungsfigur im Schnitt befindet. So kommt es, dass auch bei 
einem relativ reichen Material die Ausbeute an klaren Bildern, 
die zur Entscheidung der schwebenden Frage herangezogen werden 
können, recht gering ist. Dieser Mangel fällt um so mehr ins 
(Gewicht, als, wie wir sehen werden, auch unter den Bildern, 
welche von der Diskussion nicht ausgeschlossen werden durften, 
ein beträchtlicher Teil nicht eindeutig analysiert werden kann. 
Es ist unseres Erachtens von Wert, festzustellen, dass aus den 
angeführten Gründen eine Untersuchung über die Chromosomen- 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. gi 


zahl, wenn sie in den einzelnen Fällen noch so gewissenhaft aus- 
geführt sein mag, und für die Einzelfrage, wie die vorliegende, 
auch von entscheidender Bedeutung sein kann, im Hinblick auf all- 
gemeine Gesichtspunkte meistens recht unzulänglich bleiben muss. 

Von den nun zu betrachtenden Embryonalzellenmitosen führen 
wir zunächst in Fig. 2 eine Äquatorialplatte in nahezu reiner Pol- 
ansicht vor. Die Chromosomen sind hier offenbar schon in ihre 
beiden Tochterhälften zerlegt. Bei einer Anzahl derselben gelingt 
es nämlich, die übereinander gelegenen und anscheinend kon- 
gruenten Spalthälften zu sehen. Wo nur ein Stäbchen wahr- 
nehmbar ist, muss angenommen werden, dass das darunter ge- 
legene zweite von dem allein sichtbaren oberen vollständig gedeckt 
wird. Diese Überlegung schliesst hier mit Sicherheit eine 
Täuschung aus, der man bei der Zählung von Metaphasenchromo- 
somen unter Umständen anheim fallen könnte, dass man nämlich 
die Tochterchromosomen, wenn sie etwa schon voneinander ab- 
gerückt wären, für je ein ganzes Chromosom hielte und ‚so mehr 
Chromosomen zählte, als in Wahrheit vorhanden sind. Die Mehr- 
zahl der vorliegenden Stäbchen, von denen einige von der bei 
Zoogonus oft zu beobachtenden Keulenform sind, liegen in radiärer 
Anordnung zum Mittelpunkt der Äquatorialplatte. Eines liegt 
rechts aussen; an diesem fällt auf, dass das nach unten gekehrte 
Ende gegen die Hauptmasse durch eine Einschnürung oder einen 
Einschnitt abgesetzt ist. Dieser Prozess ist hier aber keineswegs 
so weit gediehen, dass man in Zweifel darüber geraten könnte, 
ob nicht etwa zwei mit ihren Enden zusammenstossende Chromo- 
somen vorliegen möchten. Aber man muss die Möglichkeit im 
Auge behalten, dass in einzelnen Fällen eine solche Segmentierung 
eines Chromosoms, die auch bei anderen Objekten beobachtet 
worden ist, und die ein durch die Fixierung erzeugtes Kunst- 
produkt sein dürfte, zu falschen Zählungsresultaten Veranlassung 
geben kann. Zwischen den zentralen Enden der radiären Chromo- 
somen sind in dem vorliegenden Fall noch zwei ganz kurze 
Doppelstäbchen eingelagert. Solche in das Zentrum des Mutter- 
sterns vorgeschobene kurze Chromosomen sind für unser Objekt 
charakteristisch. Und auch Schreiners (1908) stellen fest, es 
seien „immer einige ganz kleine Chromosomen vorhanden, die in 
der Äquatorialplatte zwischen den dicht gedrängten zentralen 
Enden der radiär angeordneten längeren Chromosomen gelegen 


8 F. Wassermann: 


E} 


sind, und die sich deshalb nur schwer zählen lassen“. Zu diesem 
Punkte ist aber zu bemerken, dass nur dann kleine Chromosomen 
als solche angesprochen werden dürfen, wenn jeder Zweifel dar- 
über ausgeschlossen ist, dass es sich nicht um abgeschnürte Enden 
der langen Chromosomen handle. Wir werden später zeigen (Fig. 9), 
dass eine Verwechslung dieser Art wohl möglich ist, und wir halten 
dafür, dass Schreiners auch deswegen, weil sie mit der An- 
nahme kleiner zentral gelegener Chromosomen nicht vorsichtig 
genug gewesen sind, zu ihren unglaublich hohen Zahlen gekommen 
sein mochten. In der vorliegenden Äquatorialplatte sind die 
beiden kurzen Chromosomen jedoch so gut abgegrenzt, dass ihre 
Selbstständigkeit ausser Frage steht. Die Zählung der Chromo- 
somen dieser Teilungsfigur führt zu dem unanfechtbaren Resultat, 
dass deren zwölf vorhanden sind. 

Ebenfalls zwölf Chromosomen stellen wir in einer weiteren 
Embryonalzelle, Fig. 3, fest. Die Chromosomen liegen hier noch 
nicht in einer Ebene, sondern überlagern sich zum Teil. Ein 
solcher Umstand erschwert jedoch viel weniger die Zählung als 
die jeweilige Wiedergabe der Chromosomen, von der es wünschens- 
wert wäre, dass sie eine Kontrolle unserer Befunde ermöglichte. 
So ist hier zu der Zeichnung eigens zu bemerken, dass das auf- 
fallend dünne Chromosom, welches von rechts oben sich gegen 
die Mitte der Figur hereinzieht, einheitlich nach links unten 
weiter geht, bis es zu dem nach rechts abgebogenen Ende des 
von links unten zur Mitte gestellten anderen gelangt. Da es von 
den zwei oberflächlichen mit ihren Enden nahe zusammentretenden 
Stäbchen überlagert wird, ist auf der Zeichnung seine Einheitlich- 
keit nicht ohne weiteres ersichtlich. Einige Schwierigkeit könnte 
bei dieser Figur auch die Frage machen, ob die beiden durch 
ihre Schleifenform auffallenden Elemente, von denen das eine mit 
dem nach oben sehenden kürzeren Schleifenschenkel rechts, das 
andere, dessen kürzerer Schenkel nach unten gerichtet ist, links 
liegt, einheitliche Chromosomen sind, oder ob hier selbstständige 
mit ihren freien Enden bloss zusammenstossen. Dieselbe Frage 
könnte man ja auch erheben bezüglich der beiden in ihrer Länge 
nicht erheblich voneinander abweichenden rechts unten befind- 
lichen Chromosomen, deren unteres von einem kurzen, plumpen, 
oberflächlichen überlagert wird. Hier sind in der Zeichnung zwei 
deutlich gegeneinander abgesetzte und in verschiedenen Ebenen 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. I 


gelegene zentrale Enden angegeben, während die erwähnten 
schleifenförmigen Chromosomen als einheitliche Gebilde dargestellt 
sind. Wir wollen gelegentlich dieses Beispiels, welches zeigt, 
dass sowohl schleifenförmig abgebogene einheitliche, als auch mit 
ihren zentralen Enden zusammenstossende Einzelchromosomen 
vorkommen können, bemerken, dass wir die Frage, ob in einem 
solchen Fall ein einheitliches oder zwei Chromosomen angenommen 
werden müssen, jedesmal mit grösster Gewissenhaftigkeit geprüft 
haben. Man wird sehen, dass wir diese Frage hie und da offen 
lassen müssen und dass wir, je nachdem zwischen den beiden 
Komponenten einer solchen suspekten Schleife ein Spalt nach- 
gewiesen werden konnte oder nicht, einmal in diesem und dann 
wieder in dem anderen Sinne entscheiden zu müssen glaubten. 
Bei Goldschmidt aber finden wir die abgebogenen einheitlichen 
Chromosomen sehr häufig und wir können das Bedenken nicht 
unterdrücken, dass Goldschmidt der Möglichkeit der blossen 
Konvergenz zweier Chromosomen vielleicht nicht genügend Rech- 
nung getragen hat. An Präparaten, die mit Eisenhämatoxylin 
gefärbt sind, können übrigens sehr leicht mit ihren Enden nahe 
beisammen liegende Chromosomen eine einheitliche zweischenklige 
Schleife vortäuschen. Auf diesen Nachteil, den die Eisenhämatoxylin- 
färbung für die Chromosomenzählung mit sich bringt, hat bereits 
Gregoire (09) in der Diskussion über die Chromosomenzahl 
von Zoogonus hingewiesen. Aus diesem Grunde haben wir es vor- 
gezogen, unsere Chromosomenzählungen in der Regel an Objekten 
auszuführen, die mit Delafieldschem Hämatoxylin gefärbt waren. 

In Anbetracht der besonderen Schwierigkeiten, die sich, wie 
wir gesehen haben und an späteren Beispielen noch zeigen werden, 
der gegenseitigen Abgrenzung der einzelnen Chromosomen ent- 
gegenstellen, wenn dieselben ihre definitive Form erreicht haben, 
erschien es wünschenswert, auch frühe Prophasen der Embryonal- 
zellenmitosen zu untersuchen. Ein solches Stadium eines segmen- 
tierten Knäuels stellt Fig. 4 dar. Freilich erfordert es viel Mühe, 
die den Kernraum durchziehenden, sich vielfach überkreuzenden 
und in diesem Zustand nur schwach gefärbten Fäden zu verfolgen. 
Aber in günstigen Fällen kommt man hier zu ganz sicheren 
Resultaten. So sind in dem vorliegenden Kern neben dem kleinen 
zentral gelegenen Nukleolus in Übereinstimmung mit den bisher 
gezeigten Fällen gleichfalls zwölf Schleifen zu zählen. Wie in den 


10 F. Wassermann: 


späten Prophasen und Äquatorialplatten die definitiven Chromo- 
somen von verschiedener Länge sind, so kann man auch hier 
zwei ganz besonders kurze Fäden zeigen, die links oben gelegen 
sind, und zwei besonders lange, von denen das eine S-förmige 
rechts und nahe der Kernmembran und das andere spiralig ein- 
gerollte am unteren Kernpol sich befindet. 

Der nächste in der Fig. 5 dargestellte Fall betrifft die 
Äquatorialplatte einer Furchungsmitose, deren Chromosomen 
sämtlich in einer Ebene gelegen und radiär angeordnet sind. 
Diese Teilungsfigur, welche vollständig in dem betreffenden Schnitt 
gelegen ist, scheint für die Chromosomenzählung ganz besonders 
günstig zu sein. Sonderbarerweise findet man nun hier nicht, 
wie die bisher angeführten Beispiele es erwarten liessen, zwölf 
Chromosomen und auch nicht zehn, welche Anzahl die meisten von 
Goldsehmidt (05, 09) aufgezeichneten Äquatorialplatten ent- 
halten, sondern man zählt deren elf. Dieses unerwartete Zählungs- 
resultat lässt sich nur dann zugunsten der Goldschmidtschen 
Normalzahl abändern, wenn man die beiden oben gelegenen, mit 
den zentralen Enden nahe zusammenstossenden Elemente als ein 
einziges umgebogenes auffassen wollte. In den Bildern Gold- 
schmidts (09), z. B. in Fig. 5 oder 10 (Taf. 24) sind solche 
schleifenförmige Chromosomen mit etwa gleich langen Schenkeln 
zu sehen. Indessen konnten wir uns in diesem Falle zu einer 
solchen Auffassung nicht entschliessen und müssen daher die 
Tatsache, dass hier elf Chromosomen vorliegen, bestehen lassen. 

Das nächste Bild, Fig. 6, stellt einen analogen Fall dar, 
indem wir hier in anscheinend ganz klarer Weise 13 Chromo- 
somen zählen. Freilich könnte auch hier die Frage erhoben 
werden, ob nicht die zwei oben gelegenen und rechtwinklig 
gegeneinander gestellten Stäbe, von denen der rechte deutlich 
längsgespalten ist, nicht etwa die beiden Schenkel eines 
Elementes darstellen. Aber auch hier wollten wir lieber den 
ungewöhnlichen Befund einer ungeraden Chromosomenzahl regi- 
strieren, als die Tatsachen einer Auffassung unterordnen. 

Dieser Fall, bei dem wir mehr als zwölf Chromosomen fest- 
stellen mussten, soll uns zu der Äquatorialplatte der Fig. 7 über- 
leiten, in der wir ganz einwandfrei 14 Chromatinteile zählen können. 
Dies ist wenigstens das Resultat einer unvoreingenommenen Fest- 
stellung, an der an und für sich nicht zu zweifeln ist. Auch hat 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 11 


ja Gregoire (09) gleichfalls sowohl 12 als auch 14 Chromosomen 
bei Zoogonus gefunden. Anzweifeln liesse sich dieser vorliegende 
Befund nur durch die Vermutung, dass etwa unter dem Einfluss 
der Fixierung bei einzelnen Chromosomen eine Zerschnürung 
stattgefunden hätte, eine Möglichkeit, auf die bereits hingewiesen 
wurde. Insbesondere die beiden nahezu gleich langen, mit ihren 
etwas aufgebogenen Enden aneinanderstossenden Stäbe, die sich 
im rechten oberen Quadranten des Zellenquerschnittes befinden, 
könnten zu dieser Vermutung Anlass geben. Es wird vielleicht 
zunächst befremden, dass wir der Frage, ob wirklich 14 Chromo- 
somen neben der zunächst ermittelten Zwölfzahl vorkommen, so 
skeptisch gegenüber stehen. Weitere Darlegungen werden dies 
jedoch begreiflich machen. In der vorliegenden Fig. 7 nur zehn 
Chromosomen festzustellen, wäre aber durchaus unmöglich. Selbst 
wenn man die oben erwähnten beiden Chromosomen als ein ge- 
knicktes und die links oben von ihnen gelegenen beiden, bogen- 
förmig gegeneinander geneigten und endlich die beiden senkrecht 
unter den oben genannten, übereinander gelegenen als je ein 
hakenförmiges Chromosom ansprechen wollte, wozu aber nur 
unter gewissen in der Fixierung oder Färbung gelegenen und 
hier nicht gegebenen Umständen Veranlassung bestände, auch 
dann käme man erst auf elf Elemente. Andererseits ist es bei 
diesem Beispiel, ebenso wie bei allen bisher gezeigten, als völlig 
ausgeschlossen zu erachten, etwa 24 Chromosomen herauszufinden. 
Wir sehen nicht einmal die Möglichkeit, zu erklären, auf welch 
irrtümliche Weise man in unseren Fällen zu dieser hohen von 
Schreiners (08) gefundenen Chromosomenzahl gelangen könnte. 

Auch die nächste Äquatorialplatte, Fig. 8, ist nicht dazu 
geeignet. volle Sicherheit über das wirkliche Vorkommen von 
14 Chromosomen zu geben, obwohl auch hier die Summe sämt- 
licher in der Zeichnung sichtbarer Gebilde die Zahl 14 ergibt. 
Von dem runden Chromatinkörper nämlich, der oben links von 
dem terminal längsgespaltenen Chromosom liegt, ist es zweifel- 
haft, ob er nicht der Rest des Nukleolus ist. v. Schustow (12) 
hat gelegentlich noch in den Metaphasenstadien der Wurzelspitzen- 
zellen von Allium cepa mittels der spezifischen Färbung einen 
Nukleolus feststellen können, der bei gewöhnlicher Kernfärbung 
sicher für ein Chromosom gehalten würde. Dann bestehen 
Bedenken über die Natur des einheitlich gezeichneten haken- 


12 F. Wassermann: 


förmigen Chromosoms, welches im Zentrum des Sternes zu sehen 
ist. Es ist nicht mit Sicherheit zu entscheiden, ob hier nicht 
zwei kleine Chromosomen vorliegen. 

Wenn man ferner die Äquatorialplatte der Fig. 9 betrachtet, 
so sieht man neben den 13 grossen und bis auf das längsgespaltene 
links oben gelegene !) durchaus radiär angeordneten Chromosomen 
noch drei kleine Elemente in der Mitte; zählt man diese als 
vollwertige Uhromosomen mit, so ergeben sich 16 Elemente. Wir 
möchten es bei der auffallenden Kleinheit besonders zweier dieser 
(rebilde nicht für wahrscheinlich halten, dass sie sämtlich als 
Chromosomen anzusprechen sind, aber eme Entscheidung über die 
wirkliche Chromosomenzahl ist eben auch hier nicht zu treffen. 
Man kann lediglich sagen, dass deren 12—14 vorhanden sind. 

Zu der sicheren Konstatierung von 14 Chromosomen ge- 
langen wir dagegen bei der Analyse der Äquatorialplatte, welche 
in Fig. 10 wiedergegeben ist. Hier kommt die Möglichkeit, dass 
je zwei mit ihren zentralen Enden einander zugeneigte Stäbe in 
Wirklichkeit als einheitliche umgebogene aufzufassen seien, gar 
nicht in Betracht. Die Chromosomenenden sind ebenso deutlich 
wie auf der Zeichnung voneinander getrennt. 

Im Anschluss an diese Figur wollen wir noch einer Fest- 
stellung des Ehepaares Schreiner (08) in bezug auf die Chromo- 
somen bei Zoogonus gedenken. Die Autoren sagen nämlich: „In 
allen Mitosen, die uns klar zur Ansicht gekommen sind, sowohl 
in Embryonalzellen, wie in Oo- und Spermatogonien (nur mit 
Ausnahme der ersten Furchungsmitosen und selbstverständlich 
der Reifungsmitosen), zeigen nun bei Zoogonus die Chromosomen 
eine ausgeprägte paarige Gruppierung. Die Paarlinge sind von 
gleicher Länge und ihre zentralen Enden liegen einander ganz 
nahe (vel. 1. c. Fig. 26, wo die Einstellung der Chromosomen in 
die Teilungsebene jedoch noch nicht zu Ende gebracht ist).“ Wir 
glauben nicht, dass ein Betrachter unserer Figuren aus ihnen 
eine Bestätigung dieser von Schreiners hervorgehobenen Be- 
ziehung zwischen je zwei Chromosomen wird herauslesen können. 
Allerdings konvergieren, wie wir oft betont haben, sehr häufig 
je zwei Chromosomen mit ihren zentralen Enden. Diese weit- 

1) Dieses Chromosom liegt als einziges in einem vorhergehenden Schnitt 


durch die vorliegende Zelle. In diesem einen Fall wurde, da hier ein Irrtum 
unmöglich erschien, eine Kombination zweier Schnitte vorgenommen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 13 


gehende Annäherung tritt aber anscheinend regellos zwischen 
einem oder mehreren Chromosomenpaaren einer Äquatorialplatte 
auf und man kann darin doch nicht den Ausdruck einer be- 
sonderen Beziehung zwischen den betreffenden Chromosomen sehen. 
Dazu kommt noch, dass solche „Paarlinge“ nicht, wie Schreiners 
es gesehen haben wollen, von gleicher Länge sind, sondern dass 
sie, wie die Fig. 9 und 10 zeigen, von recht verschiedener Grösse 
sein können. 

Eine Frage, die von der eben besprochenen verschieden ist, 
ist aber die, ob die Chromosomen der einzelnen Teilungsfiguren, 
abgesehen von ihren gegenseitigen Lagebeziehungen, etwa in ihren 
(Grössenverhältnissen konstante relative Maße aufweisen. Dass 
dem vielleicht so sein könnte, erscheint nicht ausgeschlossen, 
wenn man die Chromatinfäden des Prophasenknäuels der Fig. 4 
sowie die Chromosomen der von den Embryonalzellenmitosen 
zuerst gezeigten Äquatorialplatte (Fig. 2) hinsichtlich ihrer Länge 
untersucht. Man kommt dabei, wie die nebenstehenden, die 
Chromosomenlängen veranschaulichenden Textfig. 1 und 2 zeigen, 


Fig. 1. Fig. 2. 


zu dem Ergebnis, dass in beiden Fällen je ein Paar Chromosomen 
durch besondere Länge und je ein Paar durch besondere Kürze 
sich von den anderen unterscheiden, die ihrerseits wieder zu 
Paaren von annähernd gleicher Länge zusammengeordnet werden 
können. An die Möglichkeit konstanter relativer Chromosomen- 
grössen in unserem Fall zu denken, lag um so näher, als, wie 
wir später zeigen werden, auch unter den reduzierten Uhromatin- 
schleifen der Oozyten im Bukettstadium regelmässig ein langes 
und eın kurzes Chromosom unter den anderen auffällt. Aber 
abgesehen davon, dass der Versuch, bei den anderen Mitosen 
ebenfalls gleich lange Chromosomen festzustellen, kein positives 
Ergebnis zeitigt, ist das vorliegende Material zu klein und, wie 
aus dem bisher Mitgeteilten hervorging, vor allem zu arm an 
wirklich klaren Stadien, als dass es eine Seen sichere Basis 
für eine solche Untersuchung sein könnte. 


14 F. Wassermann: 


Zu der Frage nach der spezifischen Chromosomenzahl bei 
Zoogonus mirus zurückkehrend, fassen wir zunächst unsere Befunde 
kurz zusammen. Wir können in einigen Fällen mit Sicherheit 
zwölf Chromosomen zählen. Zu dieser Kategorie von Mitosen 
gesellen sich dann noch die in den Fig. 13—16 wiedergegebenen 
Oogonien-Teilungen, bei denen ebenfalls zwölf Chromosomen vor- 
handen sind. In zwei Fällen mussten wir uns mit der Feststellung 
von 11 resp. 13 Chromatinteilen zufrieden geben. Wir können 
aber in Anbetracht der möglichen Fehlerquellen nicht glauben, dass 
diesen Teilungsfiguren mit anscheinend ungeraden Chromosomen- 
zahlen eine Bedeutung zukomme. Dann besprachen wir Beispiele von 
Mitosen, die zwar die Annahme, es könnten bei ihnen 14 Chromo- 
somen vorliegen, sehr wahrscheinlich machten, die aber nicht ganz 
eindeutig analysiert werden konnten. Schliesslich zeigten wir aber 
doch eine Äquatorialplatte, in der ganz sicher 14 Chromosomen 
liegen. Wiederholt hatten wir Gelegenheit, zu betonen, dass so hohe 
Chromosomenzahlen, wie sie von A. und K.E. Schreiner mit 
erstaunlicher Sicherheit zum Teil an denselben Mitosen, an denen 
Goldschmidt weniger als die Hälfte gezählt hatte, festgestellt 
worden sind, unmöglich vorhanden sein können. Bedenkt man, 
dass es lediglich diese irrtümlichen Zählungen waren, welche das 
Ehepaar Schreiner, das ja hinsichtlich der in die erste Reifungs- 
teilung eintretenden Chromosomen mit Goldschmidt überein- 
stimmte, zur Ablehnung des Primärtypus der Reduktion führten, 
so begreift man, warum Goldschmidt dieser „Widerlegung“ 
gegenüber mit solcher Entschiedenheit auf seinem Standpunkt 
beharren konnte. Die von Goldschmidt (05, 09) als die typische 
angegebene Zehnzahl der Chromosomen, neben der er zufolge von 
Befunden an Stadien der II. Reifungsteilung auch die Zwölfzahl als 
Variation für möglich hält, konnten wir freilich ebensowenig finden. 
Nun ist ja für eine Reihe von Bildern Goldschmidts (09), die 
wie die Fig. 10, 16, 20b nach seiner Auffassung mit unbestreit- 
barer Sicherheit genau zehn Chromosomen erkennen lassen, von 
Gregoire (09) festgestellt worden, dass auch in diesen Fällen 
mehr als zehn, meistens zwölf Chromosomen gegeneinander ab- 
gegrenzt werden können. Bemerkenswert ist auch, dass es unter 
den Dokumenten, die Goldschmidt (09) zur Sicherstellung seiner 
Normalzahl vorführt und die den Zeichnungen nach alle diesen 
Zweck in gleich einwandfreier Weise zu erfüllen scheinen, zwei, 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 15 


durch die Fig. 5 und S repräsentierte gibt, von deren Entzifferung 
ein Mikroskopiker wie Gr&egoire glaubte absehen zu sollen, 
weil dabei kein hinreichend sicheres Resultat erzielt werden könnte 
(Gregoire, 1. c., S. 253). Immerhin wollte Gregoire das ge- 
legentliche Vorkommen der Zehnzahl nicht leugnen und man wird 
angesichts von Bildern, wie sie in den Fig. 7a und b von Gold- 
schmidt (09) niedergelegt sind, geneigt sein, diesen Standpunkt 
zu teilen. So können wir unter Einrechnung aller beobachteten 
und von Goldschmidt und Gregoire mitgeteilten Fälle der 
Ansicht des letztgenannten beitreten, dass die Chromosomenzahl 
von Zoogonus 10—14 betrage. 

Dieses Resultat ist allerdings kein befriedigendes im Hinblick 
auf das Gesetz der Konstanz der Chromosomenzahl. Aber es ist 
bekanntlich auch kein ungewöhnliches, sondern man begegnet sogar 
in der Regel derartig unbestimmten Angaben über die Chromosomen- 
zahl der jeweils untersuchten Arten. Dafür liessen sich Beispiele 
in grosser Zahl anführen. So entnehmen wir der Zusammenstellung, 
die M. Athias (1912) über die bei Säugetieren ermittelten Chromo- 
somenzahlen gibt, dass nicht nur die Angaben verschiedener Unter- 
sucher über ein und dasselbe Objekt differieren, sondern dass die 
einzelnen Autoren selbst bei ihren Zählungen zu Resultaten von 
beträchtlicher Schwankungsbreite kamen; Athias z.B. findet bei 
Eliomys querquus 16—32 Chromosomen. Aber auch wenn die 
Chromosomenzahl gering ist. wie in unserem Fall, kann sie oft- 
mals nicht sicher ermittelt werden; so vermag Kühn (1908) für 
Daphnia pulex nicht zu entscheiden, ob acht oder zehn Chromosomen 
vorhanden sind. Angesichts ähnlicher Angaben, die ihm darzutun 
scheinen, dass die Chromosomenzahl in den somatischen Zellen 
„nicht ganz streng“ sei, kommt ein so skeptischer Kritiker der 
herrschenden zellulären Theorien wie R. Fick (06) gleichwohl zu 
dem Schlusse: „Immerhin dürfen wir einstweilen doch wohl als 
Regel annehmen, dass einer Organismenart eine bestimmte 
Chromosomenzahl zukommt und dass diese Chromosomenzahl sich 
in allen Körperzellen der betr. Art konstant erhält.“ Aber es 
fehlt auch nicht an Stimmen, die sich gegen die allgemeine 
Gültigkeit des Gesetzes von der Konstanz der Chromosomenzahl 
aussprechen. So hat in neuester Zeit (1911) de la Valle (zitiert 
nach R. H. Erdmann [1912]) im Peritoneum von Salamandra 
Chromosomenzahlen von 19—27 konstatiert und dabei berechnet, 


16 F. Wassermann: 


dass 24 die häufigste Zahl ist, und dass sich die vorliegende 
Schwankungsbreite als ein Fall von fluktuierender Variation auf- 
fassen lässt. Daraus erkennt man, welch überraschende Gesichts- 
punkte durch eine sorgfältige und quantitativ zureichende Unter- 
suchung hier gewonnen werden können und wie wenig andererseits 
die üblichen Angaben über die spezifischen Chromosomenzahlen 
und also auch die für unseren Fall vorliegenden geeignet sind, 
zum Ausgangspunkt für Schlüsse allgemeiner Art zu dienen. 
Wenn uns also dem Dargelegten zufolge eine Stellungnahme 
für oder gegen das Gesetz der Zahlenkonstanz nicht zukommt 
und auch das oben aufgestellte Resultat der die Ohromosomenzahl 
des Zoogonus betreffenden Ermittelungen, das die verschiedenen 
Möglichkeiten noch ofien lässt, für unseren Fall eine ausreichende 
Sicherheit besitzt, so können wir zum Schlusse dieser Betrachtung 
doch darauf hinweisen, dass der Zwölfzahl gegenüber den Zahlen 
10 und 14 eine ungleich höhere Wahrscheinlichkeit zukommt. 
Und auch bei einer solchen Präzisierung unseres Standpunktes 
befinden wir uns im Einklang mit Gregoire. Zu dieser Stellung- 
nahme berechtigt uns nicht nur der bereits hervorgehobene Um- 
stand, dass die Zahl 12 allein jeweils einwandfrei zu ermitteln 
war, wenn wir von der einen Äquatorialplatte mit 14 Chromo- 
somen zunächst absehen, sondern vor allem auch die Heranziehung 
gewisser die reduzierte Anzahl von Kernschleifen enthaltender 
Oozytenkerne. Sämtliche pachytänen Kerne nämlich, die wir später 
vorführen werden (Fig. 33—44) und die wir als die einzigen 
Stadien mit absolut sicher bestimmbaren Chromosomenzahlen 
bezeichnen müssen, enthalten sechs Chromatinteile; ein solcher 
Kern, der sieben Schleifen enthalten hätte, ist uns nie begegnet 
und wir haben nur einen einzigen Knäuel mit sieben segmen- 
tierten Teilstücken zu verzeichnen. Demgegenüber fällt es wenig 
ins Gewicht, wenn wir schliesslich bei dem Versuch, die Chromo- 
somen der ersten Reifungsteilung zu zählen, in dem Bestreben, 
den Voruntersuchern gerecht zu werden und nicht zu wenig 
Elemente anzunehmen, als mögliche Maximalzahl 7 angeben werden; 
denn in diesen Fällen werden wir sehen, dass die Ungunst des 
Objekts ganz sichere Zählungen unmöglich macht. Es kommt 
aber noch ein weiterer Punkt hinzu, der zugunsten der Annahme, 
die Zahl 12 sei die spezifische, verwertet werden kann. Die 
Mitose der Fig. 6 nämlich, in der wir 13 Chromatinteile fest- 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 17 


stellen müssen, entstammt als Furchungsteilung dem Uterus des- 
selben Tieres, dessen somatische Teilung, Fig. 1, nur 12 Chromo- 
somen aufweist und, ein Fall, der noch wichtiger ist, die Äquatorial- 
platte der Fig. 10, die einzige, in der anscheinend einwandfrei 
14 Chromosomen zu zählen sind, wurde im Uterus eines Tieres 
gefunden, in dessen Ovarium die beiden in den Fig. 38 und 39 
abgebildeten Bukettstadien mit je sechs Chromatinschleifen liegen. 
Diesen Unstimmigkeiten gegenüber bleibt nur die Frage, ob man 
annehmen darf, dass etwa nicht einmal die Zellen ein und des- 
selben Organismus von gleicher Chromosomenzahl seien, oder ob 
man nicht vielmehr den gelegentlichen Befund von 14 Chromo- 
somen, der dem Augenschein nach zunächst nicht zu bezweifeln 
ist, einer Zerschnürung einzelner Chromosomen in scheinbar 
selbständige Elemente zur Last legen soll. Eine Entscheidung 
dieser Frage ist freilich nicht zu treffen. Aber auch der letzt- 
genannte Punkt scheint im Zusammenhalt mit den übrigen die 
Wahrscheinlichkeit zu erhöhen, dass in der Regel für Zoogonus 
mirus 12 Chromosomen typisch sind, und dass 14 Chromosomen resp. 
7 reduzierte Elemente nur ausnahmsweise einmal als atypisches 
Vorkommnis angetroffen werden. 


D. Oogonien. 


Der Aussenfläche des etwa birnförmigen Ovariums zunächst 
gelegen findet man einzelne Oogonien (Fig. 11 und 12). Ihre 
Zahl ist jeweils lange nicht so gross, dass sie eine geschlossene 
Aussenzone des Ovariums zu bilden vermöchten, sondern sie be- 
finden sich in der genannten Lage einzeln oder nur mit einigen 
wenigen anderen zusammen; daher trifft man höchstens vereinzelte 
Nester in der Peripherie des Ovariums, zwischen denen auch 
Oozyten in jungen Entwicklungsstadien an die Aussenfläche der 
Keimdrüse gelangen. Die Oogonienkerne sind durch eine fein- 
körnige Verteilung des Chromatins charakterisiert. Sie sind von 
rundem oder ovalem Durchschnitt und besitzen einen kleinen 
Nukleolus. 

Das zum Oogonienkern gehörige Plasmaterritorium lässt 
sich nicht abgrenzen, doch können wir aus der Tatsache, dass die 
Kerne den nachbarlichen Oogonien- oder Oozytenkernen sehr oft 
fast bis zur Berührung angenähert und andererseits beinahe bis 


zum Oberflächenniveau des Ovariums herangerückt sind, schliessen, 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. IL 2 


— 
Rn 


F. Wassermann: 


dass nur ein äusserst dünner Protoplasmamantel zu einem solchen 
Kern gehören kann. Die Grösse der Oogonienkerne schwankt 
innerhalb enger Grenzen. 

Was die Teilungen der Oogonien betrifft, so findet man in 
der Mehrzahl der Ovarien überhaupt keine und nur selten einmal 
eine vereinzelte. Dieser Befund macht die Angabe Goldschmidts 
(1905), dass niemals Teilungsfiguren im Ovarium zur Beobachtung 
kämen, verständlich. Man gewinnt hiernach den Eindruck, als ob 
im geschlechtsreifen Zoogonus nur noch eine sehr spärliche Ver- 
mehrung der Eier stattfände. Zieht man dazu in Betracht, dass das 
ÖOvarıum dieses Trematoden überhaupt keine grosse Anzahl von 
Eiern enthält — es können rund 50 Kerne in demselben gezählt 
werden — so muss uns eine etwaige spärliche Eiproliferation 
von einem allgemein biologischen Gesichtspunkte aus noch merk- 
würdiger erscheinen. Es ist bekannt (siehe Korschelt und 
Heider, 1902, S. 251), dass die parasitischen Cestoden und Trema- 
toden bei ihrem komplizierten Entwicklungsgang, in dessen Ver- 
lauf die meisten Eier und Larven zugrunde gehen, eine „enorme 
Menge von Eiern“ hervorbringen. Zoogonus würde nach unseren 
Befunden dieser Erfahrung nicht entsprechen. Dass aber die 
Proliferation der Eier periodisch vor sich gehe, was Schellen- 
berg (1911) für Fasciola hepatica in Betracht zieht, können 
wir in unserem Fall kaum für wahrscheinlich halten, da doch 
das untersuchte wie auch schon Goldschmidts Material in 


verschiedenen Jahreszeiten gesammelt wurde und -— dies gilt 
besonders für unsere Objekte — von verschiedenen Fundorten 
stammt. 


Die beobachteten Oogonienteilungen sind in den Fig. 13—17 
abgebildet. Es handelt sich hierbei um eine frühe und eine späte 
Prophase (Fig. 13, 14), um zwei Metaphasenstadien (Fig. 15, 16) 
und um eine Telophase (Fig. 17). Wenn die Chromosomen dieser 
Mitosen gezählt werden können, wie in den beiden Metaphasen- 
bildern und der frühen Prophase, so ergibt sich, dass sie in der 
Zwölfzahl, die wir als Normalzahl des Zoogonus erkannt haben, 
vorliegen. 

E. Die Oozyten-Entwicklung. 

Nach der Mitteilung des Wenigen, was wir über die Vogonien 
in Erfahrung gebracht haben, werden wir die Ei-Entwickung im 
engeren Sinn, die Oozyten-Genese, in drei aufeinanderfolgenden 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 19 


Perioden, welche durch ganz natürliche Grenzen voneinander ge- 
schieden sind, schildern. Die I. Periode umfasst den Entwicklungs- 
gang der Oozyten bis zum Bukettstadium oder, im Hinblick auf 
die Bedeutung dieses Abschnittes gesprochen, die Chromatin- 
umlagerungen des Oozytenkerns, welche zur Entstehung der 
reduzierten Anzahl von Chromosomen führen. Die folgende Etappe 
der Oogenese lässt sich als die Hauptwachstumsperiode der Eier 
bezeichnen; morphologisch betrachtet ist diese II. Periode durch 
den wiedereingetretenen Ruhezustand des Oozytenkerns gekenn- 
zeichnet. Und schliesslich folgt dann als III. die Periode der 
beiden Reifungsteilungen. 


I. Periode der Dozyten-Entwicklung bis zum Bukett- 
stadium. 


a) Die Befunde. 


Ausser den Oogonienkernen wird zumeist ebenfalls in der 
Peripherie des Ovariums noch eine zweite Art von Kernen gefunden, 
die sich von ersteren insbesondere durch ihre Struktur unter- 
scheiden (Fig. 18). Auch sind diese Kerne in der Regel.oval und 
ihr Nukleolus liegt einem Pol nahe. Was ihre Struktur anlangt, 
so sind sie, im Gegensatz zu den Oogonienkernen mit ihren dem 
Kerngerüst eingelagerten Chromatinkörnern, gleichmässig von einem 
feinmaschigen Netz schwachgefärbter Fäden erfüllt; nur die 
Knotenpunkte des Netzes treten als feine dunklere Punkte etwas 
stärker hervor. Es kann als Charakteristikum dieser Kerne an- 
geführt werden, dass in vielen Fällen, wohl unter dem Einfluss 
der Fixierung, ihr Inhalt von einem Kernpol, zumeist demjenigen, 
welchem der Nukleolus benachbart liegt, ein wenig zurückgezogen 
ist. Es handelt sich also um Kerne, die von wesentlich zarterem, 
unseren Reagenzien gegenüber ungleich empfindlicherem Bau sind 
als die Oogonienkerne. In diesen so charakteristischen Kernen 
haben wir, wie ihre weiteren Veränderungen zeigen, Oozytenkerne!') 
zu sehen. 

Diese Ausgangsstadien der Oozyten-Entwicklung erfahren 
nun Veränderungen, die allerdings bei der Kleinheit der Objekte 


'!) Es wird später (S. 48) erörtert werden, aus welchen Gründen wir 
diese Öozytenkerne nicht für die aus der letzten Oogonienteilung hervor- 
gegangenen Oozytenruhekerne halten können. 

9% 


- 


20 F. Wassermann: 


und bei ihrer offenkundigen Labilität gegenüber den Wirkungen 
der Fixierung nicht leicht zu erkennen sind. Es kommen Kerne 
zur Beobachtung, die sich zunächst gar nicht von den vorher be- 
schriebenen zu unterscheiden scheinen, in deren Inneren man aber 
bei genauer Betrachtung des Kernnetzes ein paar kompaktere 
Züge wahrnimmt (Fig. 19). Dann begegnen wir Stadien mit be- 
reits bedeutend weiter fortgeschrittener Herausarbeitung solcher 
Strukturen (Fig. 20). Wir sehen auf dem Bild eines derartigen 
Kernes, das die komplizierte Wirklichkeit natürlich nicht absolut 
getreu, sondern nur ihrem wesentlichen Eindruck nach wieder- 
gibt, schon eine ganze Anzahl von teils scholligen, teils strang- 
föürmigen und oft abgebogenen Bildungen. Diese sind von sehr 
lockerem Bau und haben keine scharfen Konturen. Wenngleich 
sie nur schwach gefärbt sind, so besitzen sie doch eine unver- 
kennbare Affinität zu den Kernfarbstoffen, so dass wir sie als 
CUhromatin-Ansammlungen bezeichnen dürfen. 

Kernbilder, die von dem Ausgangsstadium nun schon stark 
abweichen, sind dann in den Fig. 21 und 22 als die Repräsen- 
tanten eines weiteren Entwicklungsstadiums der Oozyte wieder- 
gegeben. Der gesamte Inhalt dieser ovalen, einen polständigen 
Nukleolus enthaltenden Kerne hat sich infolge von Schrumpfung 
etwas von der Membran zurückgezogen. Dies ist um so bemerkens- 
werter, als die vorliegenden Objekte aus Ovarien stammen, deren 
übrige Kerne auf das beste konserviert sind. Es scheint also, 
dass auch diesen Kernen noch eine besonders empfindliche Struktur 
eigen ist und wir werden später bei der Besprechung der Synapsis- 
trage Beispiele dafür geben, dass die Schrumpfung bei diesen 
Kernen unter Umständen sehr weit gehen kann. Bei der Be- 
trachtung dieser Kerne gewinnen wir den Eindruck, dass das 
ursprüngliche feinfädige Gerüst nunmehr fast ganz von den ent- 
standenen chromatischen Elementen aufgebraucht worden ist. Nur- 
mehr Reste desselben sind zwischen den neuen Inhaltsgebieten 
des Kernes wahrzunehmen. Die neben den chromatischen Zügen 
noch erhaltenen Gerüstreste sind aber nicht von der Beschaffenheit 
des ursprünglichen Kernnetzes, sind nicht Teile eines Maschen- 
werks, sondern bestehen aus einzelnen oder auch zu zweien parallel 
verlaufenden feinen Fäden. Letztere Anordnung ist, da die betr. 
Fäden hier oberflächlich liegen, besonders gut in Fig. 21 zu sehen. 
So können wir aus dem Vergleich dieses älteren Kernes mit dem 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 21 


Ausgangsstadium eine Vorstellung gewinnen über die Art, wie die 
nunmehr vorhandenen Chromatinelemente entstanden sein werden. 
Es ist anzunehmen. dass sich der Prozess mit einer Reduktion des 
Kerngerüstes einleitet; aus dem feinmaschigen Netzwerk bilden sich 
vielleicht durch Zusammentfliessen der auf den anastomosierenden 
Fäden feinstverteilten chromatischen (?) Substanz auf wenige Haupt- 
strassen einzelne Fäden, von denen je zwei sich aneinanderlagern. 
Und wenn wir weiter schliessen, dass möglicherweise aus einen 
Doppelfädchen ein dickeres Chromatinelement sich entwickelt, so 
gründen wir diese Annahme auf den gleichfalls in Fig. 21 so 
deutlich in Erscheinung tretenden Umstand, dass die Chromatin- 
bänder hie und da an einem oder beiden Enden sich in zwei 
dünne, vielleicht spiralig umeinander gewundene Fädchen fort- 
setzen. Keinem, der mit der Literatur über die Entwicklung 
der generativen Zellen vertraut ist, wird die Ähnlichkeit dieser 
Bilder mit jenen entgehen, die z. B. bei Tomopteris-Spermatozyten 
beobachtet und für die Theorie von der Parallelkonjugation in 
Anspruch genommen worden sind. Wir werden später Gelegenheit 
nehmen, auf diese allgemeinen Gesichtspunkte näher einzugehen.') 
Was die Chromatinfäden anlangt, welche die vorliegenden Kerne 
in den verschiedensten Richtungen durchziehen, so sind sie an- 
scheinend ganz locker zusammengefügt und an ihrer Oberfläche 
aufgerauht. Sie besitzen, wenn sie auch zum Teil noch durch das 
Substrat, auf dem sie entstanden sind, nämlich durch das Kern- 
netz oder dessen Reste zusammenhängen, doch eine so deutliche 
Selbstständigkeit, dass man längere oder kürzere Einzelelemente 
voneinander unterscheiden kann. An eine Zählung derselben ist 
aber natürlich nicht zu denken. Ferner sei noch eigens hervor- 
gehoben, weil wir von dieser Tatsache bei der Begründung unserer 
Seriierung der Oozyten - Entwicklungsstadien Gebrauch machen 
werden, dass die Chromatinfäden und -schleifen keine bestimmte 
Richtung ihres Verlaufes erkennen lassen und dass insbesondere 
von einer Orientierung derselben gegen einen Pol des ovalen 
Kerns keine Rede sein kann. 


Der Prozess der Herausdifferenzierung von selbstständigen 
Chromatinelementen, den wir in den bisher gezeigten Oozyten- 
kernen sich einleiten und ablaufen sahen, hat in dem Stadium 


!) Siehe S. 60 und S. 74. 


22. F. Wassermann: 

der Fig. 23, Textfig. 3') seinen Abschluss erreicht; hier sind alle 
Chromosomen ausgebildet und keine feinen Gerüstfäden mehr 
zwischen ihnen zu sehen. An einzelnen von ihnen, so an den 
Chromosomen 9 oder 3, fällt eine, allerdings nur eben wahr- 
nehmbare Duplizität des Baues auf. Man hat den Eindruck, als 
ob zwei parallel liegende Reihen feinster Chromatinkörnchen, die 
eine ganz schmale Lichtung zwischen sich 
lassen, das Chromosom zusammensetzten. 
Die einzelnen Elemente sind von ver- 
schiedener Länge, das mit 1 bezeichnete 
fällt durch seine besondere Kürze auf. 
Von wesentlicher Bedeutung aber ist die 
Tatsache, dass es gelingt, die Fäden und 
Schleifen zu zählen. Es sind wahrschein- 
lich deren zwölf vorhanden; wenn aber 
auch über die Selbstständigkeit eines oder 
des anderen Elementes gestritten werden könnte, soviel ist 
hier wie bei den nachher zu besprechenden Kernen des gleichen 
Stadiums ganz sicher, dass die Normalzahl der Chromosomen 
und nicht die haploide Anzahl vorliegt; und so können wir 
sagen, dass in den Oozyten vielleicht durch Aneinanderlagerung 
je zweier feiner Chromatinfäden zwölf Chromosomen entstehen. 
Es ist möglich, wie auch noch andere Beispiele zeigen werden, 
dass zunächst an den Chromosomen ihre ursprüngliche Duplizität 
in Erscheinungen, wie die oben erwähnten, sich noch bemerk- 
bar macht, aber solche Strukturen scheinen sich nicht lange 
zu erhalten, denn die Mehrzahl der Schleifen ist von einheit- 
lichem, lockeren Gefüge. In dem vorliegenden Kern könnte 
man die Chromosomenanordnung zunächst als eine bestimmte 


') Zu den nunmehr vorzuführenden Figuren sei bemerkt, dass sie bis 
auf eine (Fig. 54) Totalbilder der untersuchten, immer vollständig im Mikrotom- 
schnitt gelegenen Kerne sind. Bekanntlich ist die Orientierung in einer 
derartigen plastischen Wiedergabe des ganzen Kerninhaltes, von dem der 
Untersucher selbst oft erst nach tagelanger Durcharbeitung eine räumliche 
Vorstellung gewinnt, mit Schwierigkeiten verbunden. Wir hoffen diesen zu 
begegnen, wenn wir zu jeder Tafelfigur als der möglichst naturgetreuen 
Abbildung eine auf Grund einer Pause angefertigte schematische Abbildung 
im Text geben, auf der infolge Überlagerung verdeckte, aber für die Auf- 
fassung wichtige Stellen sichtbar gemacht und die Chromosomen und Knäuel- 
segmente zwecks leichterer Verständigung mit Nummern bezeichnet sind. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 23 
betrachten, weil tatsächlich die Mehrzahl der Fäden in der Längs- 
richtung des Kernes verlaufen. Eigentlich fallen nur die Chromo- 
somen 5 und S aus diesem Plane heraus. Wenn wir aber dann 
noch eine Reihe von Oozyten derselben Entwicklungsstufe vor- 
geführt und dabei gezeigt haben werden, dass bei ihnen eine 
bestimmte Orientierung der Chromosomen nicht festzustellen ist, 
so werden wir den Verhältnissen des vorliegenden Beispiels keine 
grosse Bedeutung zuerkennen wollen. Sei es, dass die Orien- 
tierung der Schleifen in der Längsrichtung des Kernes hier nur 
zufällig, vielleicht in Anpassung an die Raumverhältnisse zustande 
kam, sei es, dass sie ein Produkt der Fixierung wäre, welche 
Möglichkeit der Vergleich mit einem anderen später zu erörternden 
Fall (Fig. 54, siehe S. 42) bedenken lässt, sei es endlich, dass 
diese Oozytenkerne wirklich für eine ganz kurze Zeit bestimmt 
gerichtete Chromosomen besitzen, jedenfalls hat diese Erscheinung 
nichts mit der viel charakteristischeren anderen zu tun, die wir 
in dem Bukettstadium als polare Orientierung der Chromatin- 
schleifen bezeichnen werden.) 

In dem Oozytenkern der Fig. 24 sehen wir gleichfalls eine 
grössere Anzahl selbständiger Chromatinteile. Die mit 1 und 6 
(Textfig. 4) bezeichneten scheinen längsgespalten, letzteres aller- 
dings nur an seinem oberen Ende. Eine Zählung der Kerngebilde 
ergibt wiederum die Zahl 12. 


Auch der in Fig. 25, Textfig. 5, abgebildete Kern enthält 
die Chromatinelemente in der Normalzahl. Freilich macht hier 
die Zählung recht grosse Schwierigkeiten. So ist z. B. nicht ganz 
sicher zu entscheiden, ob die mit 11 und 12 bezeichneten Elemente 
wirklich mit ihren freien Enden zusammenstossen oder ob es sich 


!) Siehe die Anmerkung auf S. 42. 


24 F. Wassermann: 


hier um ein abgeknicktes Chromosom handelt. Die Schwierig- 
keiten, welche der genauen Zählung der Chromosomen in solchen 
Stadien entgegentreten, sind ja bekannt und oft hervorgehoben 
worden. Denn wir müssen vom rein morphologischen Standpunkt 
aus diese Kerne jenen Stadien der Mitose vergleichen, die man 
Prophasenstadien oder segmentierte Knäuel nennt. Wenn wir 
diese Bezeichnung hier nicht anwenden, so geschieht es natürlich, 
was den Ausdruck „Prophasenkerne“ anlangt, um nichts über 
die Bedeutung dieser Kerne zu präjudizieren. Aber wir werden 
später (S. 92) an die erwähnte Ähnlichkeit dieser und auch der 
noch zu zeigenden Oozytenkernbilder mit den Prophasenstadien 
der somatischen Mitosen allgemeine Erörterungen anknüpfen. Von 
segmentierten Knäueln aber wollen wir deswegen nicht reden, 
weil wir diese Bezeichnung auf spätere Entwicklungsformen der 
Oozytenkerne werden anwenden müssen. Trotz der erwähnten 
Schwierigkeit im einzelnen lässt sich aber doch sowohl von diesem 
Kern wie von allen anderen in dieselbe Kategorie gehörigen mit 
voller Sicherheit angeben, dass sie die Normalzahl der Kernelemente 
und nicht etwa bloss die haploide Anzahl derselben enthalten. 

Zwölf Chromosomen zählen wir auch in dem Oozytenkern, 

welchen die Fig. 26, Textfig. 6 darstellt. (Gegenüber den beiden 
zuerst gezeigten Stadien dieser Art ist hier 
zu bemerken, dass ebensowenig wie bei 
dem vorherigen (Fig. 25) Kern von einer 
' bestimmten Orientierung der Elemente ge- 
sprochen werden kann. Wir bemerken hier, 
dass einzelne Chromatinelemente mit ihren 
Enden zusammenstossen. Wir werden aber 
erst, wenn wir derselben Erscheinung in 
den weiteren Kernen, wo sie uns noch 
deutlicher entgegentritt, begegnet sein werden, erkennen, dass 
diese zunächst nicht beachtenswert erscheinende Aneinanderlagerung 
der Chromosomen den Anfang eines Prozesses der Chromosomen- 
verkettung darstellt. 

Ein ferneres Beispiel für den Oozytenkern mit der Normal- 
zahl der Chromosomen ist in Fig. 27, Textfig. 7, abgebildet. Auch 
hier kann man ein Zusammenstossen einzelner Chromosomen mit 
ihren Enden bemerken. Aber auch in diesem Fall ist diese 
Beziehung zwischen nahe beieinander liegenden Chromosomen nicht 


_ 


Fig. 6. 


ent 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 2 


hervorstechender als in den Prophasenstadien der somatischen 
Mitosen, wo man denselben Befund bekanntlich sehr oft erheben 
kann, und man wäre sicher nicht geneigt, ihm angesichts solcher 
Bilder, wie die Fig. 27 eines darstellt, eine besondere Bedeutung 
zuzuerkennen. 

In dieser Beziehung werden wir aber anderer Ansicht, wenn 
wir die nun zu beschreibenden Kerne betrachtet haben. 


Da ist zunächst in Fig. 28, Textfig. S zu erkennen, dass 
dieser Kern mit den vorigen wohl jenes gemeinsame Merkmal 
besitzt, das im Vorhandensein der Normalzahl der Chromatin- 
elemente besteht. Aber diese sind nicht mehr wie in dem Kern 
der Fig. 25 und wie in den anderen wenigstens in der über- 
wiegenden Mehrzahl unabhängig voneinander im Kernraum ver- 
teilt, sondern sie stossen zu mehreren mit ihren Enden an- 
einander, so dass oft nur ein feiner Querspalt die Grenze zwischen 
ihnen angibt. So sind die Chromosomen 6 und 12, 7 und 9, 
10 und 4 und die Chromosomen 1, welches übrigens an seinem 
Ende gespalten ist, und 8, ferner 
2 und 3 hintereinander zu längeren G—— 
gekerbten Fäden angeordnet. Die JR 


$ 


ee) 


Enden der mit 5 und 6, wie auch /% 
die Enden der mit 3 und 4 be- 
zeichneten Elemente stehen einander \ 
so nahe, dass sie sich nur einander u 
zuzuneigen brauchen, damit der Pro- fie 9. 
zess der Chromosomenverknüpfung 
noch weiter schreitet. Denn um einen fortschreitenden Vorgang 
handelt es sich, wie wir jetzt erkennen, ohne Zweifel. 

Die Fig. 29, Textfig. 9, die einen den vorigen entsprechenden 
Kern darstellt, zeigt dies ebenso deutlich. Hier sind, während 


26 F. Wassermann: 


die Chromosomen 10 und 11 noch ausserhalb des Verbandes der 
übrigen sind und die Chromosomen 7 und 4 mit ihren freien Enden 
noch keine weitere Verknüpfung gefunden haben, aus 3—1—5—6 
und aus 8—-9—2 schon längere Fäden gebildet worden. Übrigens 
ist auch hier innerhalb der Chromosomen 8, 3 und 1 an je einer 
Stelle die Andeutung einer Längslichtung zu bemerken. 
Nunmehr wollen wir auf die vorher gezeigten Oozytenkerne 
zurückgreifen und zeigen, dass die Chromosomenverkettung, die 
uns in den beiden letzten Beispielen in so auffallender Weise 
entgegentritt, bei jenen in ihren Anfängen zu beobachten ist, 
dass wir also die Entwicklung dieses allmählich fortschreitenden 
Vorgangs aus unseren Präparaten erschliessen können. So zeigt 
uns die Fig. 26, Textfig. 6, dass dort die Chromosomen 6 und 7, 
wie auch die mit 9 und 11 bezeichneten mit je einem Ende bis 
auf einen ganz schmalen Spalt einander angenähert sind. Ein 
etwas grösserer Zwischenraum besteht noch zwischen dem freien 
Ende von 11 und dem unteren Ende von 10, während 10 und 3 
wiederum ein Paar bilden. Wir können jetzt sagen, dass sich in 
diesem Falle wahrscheinlich aus 9—11—10—3 eine Kette her- 
gestellt hätte. Und in Fig. 27, Textfig. 7, treffen wir ganz ent- 
sprechende Verhältnisse. Hier sind die Schleifen 2 und 6 schon 
ein Paar und mit dem freien Ende steht erstere dem mit 8, 
_ letztere dem mit 11 bezeichneten Element sehr nahe. 10 und 11 


6) 


konvergieren nach links oben und die Chromosomen 3 und 8 
sind mit je einem Ende des hufeisenförmigen Chromosoms 7 in 
Kontakt getreten. Es ist wahrscheinlich, dass 
hier eine Verknüpfung der Chromosomen 
3—7—8—2—6—11— 10 zu einem längeren 
Kernfaden zustande gekommen wäre. 

Die zuletzt vorgeführten Kerne mit 
Chromosomenketten stellen aber noch nicht 
das Ende des Prozesses der Chromosomen- 
verknüpfung dar. Dieser läuft vielmehr 
weiter, bis ein kontinuierlicher Kernfaden 
gebildet ist, den man von einem Ende bis zum anderen durch- 
verfolgen kann. 

Ein soleher Knäuel ist in Fig. 30, Textfig. 10, wiedergegeben. 
Man wird sich mit Hilfe des Schemas leicht davon überzeugen, 
dass der Kernfaden tatsächlich von dem frei in den Kernraum 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 27 


ragenden, links oben befindlichen Ende bis zu dem anderen unter 
dem Nukleolus gelegenen in grossen, in verschiedenen Ebenen 
gelegenen und sich unter Umständen nach Art eines gelösten 
Knotens durchsetzenden Windungen durchläuft. Bei der Ver- 
folgung des Fadens kommt man an drei, im Schema noch ver- 
deutlichte quere Unterbrechungen, während er sonst ganz einheit- 
lich ist und seine Entstehung aus zwölf hintereinander gelagerten 
Einzelelementen ohne die Kenntnis der vorausgehenden Stadien 
der fortschreitenden Chromosomenverkettung an ihm selbst nicht 
ersichtlich wäre. 

Wenn wir uns vor Augen halten, dass dem nahezu ganz 
einheitlichen Kernfaden Uhromatinformationen von der Art voraus- 
gegangen sein müssen, wie wir sie bei dem Kern der Fig. 29, 
Textfig. 9, in den längeren und je nach der Anzahl ihrer Kom- 
ponenten segmentierten Chromosomenketten kennen gelernt haben, 
so werden wir sagen, dass das ideale Zwischenglied zwischen 
jenen Vorstadien und dem völlig einheitlichen, jeder Unterbrechung 
entbehrenden Chromatinband, zu dessen Bildung es, wenn auch viel- 
leicht nur für ganz kurze Zeit, offenbar kommen kann, durch einen 
Knäuel repräsentiert wäre, der aus zwölf durch Querkerben von- 
einander getrennten Gliedern bestünde. Aber im Hinblick auf die 
uns bekannte Entstehungsgeschichte des einheitlichen Kernfadens 
wird es uns nicht wundern, dass wir dieser seiner hypothetischen 
Vorstufe in Wirklichkeit nicht begegnen. Haben wir ja doch 
gesehen, dass die Chromosomenverkettung allmählich vor sich 
geht und dass also manche Elemente des eben gebildeten Knäuels 
bereits längere Zeit hindurch miteinander in Verbindung sein 
werden, während andere kurz vor seiner Entstehung erst zusammen- 
getreten sind. Es könnten z. B. — und ein Kernbild wie das der 
Fig. 29, Textfig. 9, wird diese Annahme berechtigt erscheinen lassen 
— in einem Oozytenkern aus je sechs Elementen zwei, zunächst 
gegliederte Ketten entstehen, die längere Zeit nebeneinander liegen 
bleiben, bis schliesslich durch ihre endweise Vereinigung der letzte 
Schritt zur Bildung des durchlaufenden Fadens getan wird. Da 
ist es doch wahrscheinlich, dass bis zu diesem Zeitpunkt die Quer- 
kerben zwischen den Elementen der beiden Ketten verschwunden 
sein werden, da doch, wie es der Augenschein lehrt, die Tendenz 
zur völligen Verlötung der hintereinander gereihten Chromosomen 
vorhanden ist. Ein so entstandener kontinuierlicher Knäuel würde 


28 F. Wassermann: 


dann zunächst nur eine einzige quere Unterbrechung aufweisen. So 
ist es also wahrscheinlich, dass der theoretisch postulierte, elfmal 
unterbrochene Chromatinfaden niemals wirklich zustande kommt. 
Wenn sich andererseits auch keine Kerne mit nur ganz wenigen 
einheitlichen Fäden gefunden haben, wobei allerdings zu bedenken 
ist, dass dieser negative Befund bei der relativ doch geringen 
Anzahl von beobachteten Kernen keine Entscheidung über die 
Existenz oder Nichtexistenz der hypothetischen Zwischenglieder 
zulässt'), so bleibt noch eine weitere Annahme, für deren Be- 
rechtigung gerade der Knäuel der Fig. 30, Textfig. 10, sprechen 
dürfte. Es könnte nämlich sein, dass erst bei oder kurz nach dem 
Zusammenschluss der gegliederten Ketten ein völliges Verschmelzen 
sowohl zwischen den neuverbundenen freien Enden wie auch 
zwischen den schon länger im einheitlichen Verbande stehenden 
Kettengliedern eintritt. Kurz vor dem Abschluss dieses Verlötungs- 
prozesses müsste der Knäuel aussehen wie der oben gezeigte, 
welcher noch drei Dehiszenzen besitzt und also streng genommen 
erst eine Übergangsform zu dem Endresultat des Chromosomen- 
verkettungsprozesses, nämlich zum kontinuierlichen völlig einheit- 
lichen Kernfaden, darstellt. 

Einem solchen entspricht aber der in Fig. 51, Textfig. 11. 
abgebildete Knäuel. Hier könnte höchstens eine einzige nahe 
dem linken nach oben sehenden Ende ge- 
legene Lichtung als Querkerbe angesprochen 
werden. Aber wir dürfen wohl in Anbetracht 
dessen, dass die Unterbrechung des Fadens 
an dieser Stelle nur eben wahrnehmbar 
und sein weiterer Verlauf ganz ununter- 
brochen ist, hier von einem wirklich konti- 
nuierlichen Knäuel sprechen. In diesem 
Betracht kann die einseitige Zusammen- 
drängung dieses Knäuels, der wir bei der Besprechung der 
Synapsisfrage später gedenken werden, ausser Acht bleiben. 

Was den feineren Bau dieses und des vorigen Kernfadens 
anbelangt, so ist er von eben dem lockeren aus Chromatinkörnern 
und Schollen bestehenden Gefüge und von derselben rauhen Ober- 


= 


Fig. 11. 


!) Dass solche Übergangsformen vielleicht unter den später zu zeigenden 
Segmentierungsstadien des Knäuels verborgen sein könnten, erscheint wegen 
der gesetzmässigen Zahlenverhältnisse derselben ausgeschlossen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 29 


fläche wie die Chromosomen, die ihn gebildet haben. Damit ist 
schon gesagt, dass an keiner Stelle dieser Kernfäden die Andeutung 
eines Längsspaltes vorhanden ist. 

Wohl aber gewinnt man an mehreren Stellen des kontinuier- 
lichen Knäuels der Fig. 32, Textfig. 12, den Eindruck einer zwei- 
reihigen Anordnung feiner Chromatinkörnchen. Wie sich bei der 
Betrachtung späterer Stadien, an denen 
wir die gleiche Wahrnehmung auch hier 
und da einmal machen, zeigen wird, handelt 
es sich bei der erwähnten Erscheinung 
keineswegs um die Anbahnung eines Längs- 
spaltes, sondern es kann gesagt werden, 
dass ein wirklicher Längsspalt nur an den 
in der Normalzahl vorhandenen Chromo- 
somen der jüngsten Oozyten, später aber 
nicht mehr beobachtet wird.') 

Der erwähnte kontinuierliche Knäuel der Fig. 32, Textfig. 12, 
ist von den vorher gezeigten darin verschieden, dass er eine 
grössere Anzahl querer Unterbrechungen besitzt. Bei einem Ver- 
gleich der Originalfigur mit dem Schema des Knäuels sind diese 
Stellen leicht zu finden. Nun wird man ja in Erinnerung an die 
vorausgegangenen, die Querkerben im kontinuierlichen Faden be- 
treffenden Ausführungen zunächst glauben wollen, es handle sich 
auch hier um noch übrig gebliebene Dehiszenzen zwischen den 
zwölf Komponenten des Knäuels. Ganz ausschliessen lässt sich 
diese Möglichkeit natürlich nicht. Aber ein ausschlaggebendes 
Moment spricht dafür, dass die Unterbrechungen im Verlaufe 
dieses Knäuels anderer Art sind als die früher besprochenen 
primären -Querkerben, dass hier sekundäre Kerben im vorher 
einheitlichen Faden neu entstanden sind. Die Entstehung dieser 
sekundären Unterbrechungen des Knäuels leitet seine Segmen- 
tierung ein. 

Wenn wir begründen wollen, warum wir hier geneigt sind, 
sekundäre Kerben anzunehmen, so müssen wir der Schilderung 
der Oogenese vorausgreifen und auf das Stadium des Oozyten- 
kernes verweisen, das wir als das Bukettstadium am Ende der 


') Dass wir die erwähnte Erscheinung zweier Körnchenreihen im 
Chromatinfaden natürlich nicht für etwas Zufälliges halten, werden spätere 
Darlegungen (S. 92) zeigen. 


30 F. Wassermann: 


ersten Periode der Oogenese antreften werden. Dort finden wir 
ausnahmslos und in selten klarer Weise feststellbar die haploide 
Anzahl der Chromosomen. Man kann also sagen, dass die 
Chromatinumlagerungen im Oozytenkern während der ersten 
Periode seiner Entwicklung die Herabsetzung der Zahl der Kern- 
elemente auf die Hälfte der Normalzahl, also auf sechs, mit sich 
bringen. Nun fragt es sich angesichts der Zerschnürung des 
kontinuierlichen Knäuels, bis zu welchem Moment ja noch keine 
Reduktion stattgefunden hat, ob etwa der kontinuierliche Knäuel 
wiederum in die Anzahl seiner Komponenten zerfällt, oder ob 
jetzt sich die numerische Reduktion vollzieht. Letzteres ist 
der Fall. Der kontinuierliche Knäuel zerfällt in die haploide 
Zahl von Kernschleifen, und der Prozess seiner Segmentierung 
ist somit als diejenige Phase der Oogenese zu betrachten, während 
welcher die numerische Reduktion der Chromosomen eintritt. Den 
Beweis für diese Feststellung wird die Demonstration der Oozyten- 
kernstadien liefern, die in lückenloser Reihenfolge vom Knäuel 
bis zum Bukettstadium führen werden. 

Wenn dem aber so ist, dass der kontinuierliche Knäuel in 
sechs Chromatinelemente zerfällt, so muss ein Knäuel, der so 
gekerbt ist, dass gerade sechs Teile gegeneinander abgegrenzt 
werden können, als sekundär unterbrochen zu betrachten sein. 
Diese Voraussetzung erfüllt nun der zuletzt gezeigte Kernfaden 
der Fig. 32, Textfig. 12, der aus sechs Segmenten besteht. Nach 
dem Gesagten wird wohl kaum jemand geneigt sein, die hier 
vorgefundenen Querkerben des Fadens für zufällig noch stehen- 
gebliebene primäre Einschnitte zu halten. Überdies wird ein 
weiteres Argument für unsere Auf- 
fassung später beigebracht werden, wenn 
wir die Längenmaße der Knäuelseg- 
mente und der Bukettschleifen mit- 
einander vergleichen werden. 

Eine weitere Phase der Segmen- 
tierung des Kernfadens in die redu- 
zierte Anzahl von Chromatinelementen 

SE; 2 wird durch den Kern der Fig. 33, Text- 

| figur 13, dargestellt. An dieser hier vor- 

liegenden Chromatinformation können wir zunächst zeigen, dass 
von den beiden im Schema mit X bezeichneten Fadenenden ein 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 31 


mehrfach unterbrochener Knäuel durchläuft und somit diese Kern- 
figur an den kontinuierlichen bezw. sekundär unterbrochenen 
Knäuel anzureihen ist. Untersuchen wir, in wie viele Segmente 
dieser Chromatinfaden abgeteilt ist, so ergibt sich, dass fünf 
Fadenteile hintereinander liegen. Diese fünf Abschnitte haben sich 
nun im Vergleich mit jenen des Knäuels der Fig. 32, Textfig. 12, 
bereits weiter voneinander entfernt, zwischen den Enden der 
einzelnen Schleifen, die sich allerdings noch so nahe stehen, dass 
ihr vorheriger Zusammenhang im kontinuierlichen Knäuel nicht 
in Frage gestellt werden kann, sind schon etwas breitere Spalten 
entstanden, ja, an einer links unten im Kern befindlichen Stelle, 
auf die im Schema ein Pfeil hindeutet, ist das untere der beiden 
voneinander abgerückten Fadenenden hakenförmig umgebogen und 
so von dem zugehörigen oberen Ende nunmehr abgewandt. Während 
die eben demonstrierten fünf Segmente bei gegenseitiger schärferer 
Abgrenzung immer noch in der Knäuelformation gruppiert sind, 
hat das bisher nicht betrachtete sechste Segment den Zusammen- 
hang mit den anderen bereits völlig aufgegeben. Es liegt als 
eine nach links offene Schleife mit zwei ganz freien Enden selbst- 
ständig im Kern. Das obere der beiden freien Enden ist viel- 
leicht bei der Emanzipation dieses Elements vom Knäuel nach 
rechts und oben umgeschlagen worden. Denkt man es sich 
zurückgebogen, dann triftt es nämlich auf das obere Ende des 
segmentierten Knäuels auf, und es ist daher nicht unwahrscheinlich, 
dass es sich an eben dieser Stelle abgeschnürt hat, während das 
andere Ende zugleich als das des ursprünglichen kontinuierlichen 
Knäuels zu betrachten ist. 

Auf derselben Stufe der Segmentierung wie der vorige befindet 
sich der Knäuel der Fig. 34, Textfig. 14. Hier ist das links unten 
nahe der Kernmembran gelegene Chromosom 
bereits selbständig geworden. Wahrscheinlich 
stand es mit dem in der Tiefe des Kernraums 
befindlichen Fadenende im Zusammenhang, zu 
dem es nach rechts unter dem Nukleolus hin- 
zieht. Geht man von diesem Fadenende aus der Se Sn 
Chromatinfigur nach, so kann man auch bier ae 
wieder einen segmentierten und mehrfach ab- ne 
geknickten Knäuel bis zu dem anderen nach unten umgebogen Ende 
(X im Schema) finden; das andere Ende des ehemaligen einheit- 


nn 


32 F. Wassermann: 


lichen Kernfadens bildete offenbar das Chromosom I mit seinem 
links oben gelegenen Haken. Innerhalb der Knäuelformation lassen 
sich auch in dem vorliegenden Falle sechs Segmente unterscheiden. 
Auffallend ist hier, dass der mit III bezeichnete Teil gerade an 
der Stelle seiner Biegung in zwei divergente Schenkel die An- 
deutung einer (Querkerbe aufweist und dass das V-förmige fünfte 
Segment innerhalb seines linken Schenkels eine scharfe, annähernd 
rechtwinklige Knickung besitzt. Man wird wohl in Anbetracht 
des geringen Hervortretens solcher Stellen gegenüber den sehr 
deutlichen Dehiszenzen nicht verlangen, dass man sie diesen gleich- 
setze und etwa diesen Knäuel statt in sechs in sieben oder acht 
Segmente zerlege. Bei der auch hier deutlich genug hervor- 
tretenden Segmentierung in sechs Schleifen, bei der Gleichartigkeit 
dieser Figur und der vorigen und in Ansehung endlich der klaren 
Bilder, die wir noch beschreiben werden, hiesse es schon der 
Auffindung regelmässiger Strukturen aus dem Wege gehen wollen, 
wenn man nicht auch hier nur die Haupteäsuren des Knäuels in 
den Vordergrund der Betrachtung stellte. Immerhin erscheinen 
die erwähnte Lichtung im Chromosom III und die scharfe Knickung 
in V beachtenswert, denn solche Beobachtungen weisen darauf hin, 
dass der Vorgang der Knäuelzerschnürung natürlich nicht mit 
absoluter Präzision abläuft. Es kann, wie wir später noch mehrmals 
sehen werden, vorkommen, dass eine oder die andere der redu- 
zierten Kernschleifen eine Unterbrechung ihres Verlaufes aufweist, 
in derselben, gerade nur angedeuteten Weise wie das Chromosom Ill 
des in Rede stehenden Kernes. Wir werden nicht fehl gehen, 
wenn wir ein derartiges akzidentelles Vorkommnis auf Rechnung 
von Störungen im Segmentierungsprozess des Knäuels setzen.') 


') Es erheben sich natürlich im Anschluss an die durch die erwähnten 
Beobachtungen nahe gelegte Möglichkeit von Störungen im Ablauf der 
Knäuelzerschnürung einige Fragen. Man kann daran denken, dass vielleicht 
manchmal die Entstehung der reduzierten Schleifen auf einem abgekürzten 
Wege vor sich geht, dass noch bevor der kontinuierliche Knäuel ganz ge- 
schlossen ist, also noch während des Bestehens primärer Kerben, bereits ein 
Zerfall in einzelne Teile von reduzierter Anzahl eintrete. Es ist ferner nicht 
ausgeschlossen, dass die Kerben innerhalb der reduzierten Elemente als ein 
Zeichen für das unter gewissen unbekannten Bedingungen mögliche Wieder- 
hervortreten der die bivalenten Elemente zusammensetzenden Einzelchromo- 
somen wäre. Wir werden später (S. 62) dieser Möglichkeiten noch einmal 
Erwähnung tun. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 33 


Keinesfalls treten solche Beobachtungen jemals so sehr in den 
Vordergrund, dass wir durch sie in Zweifel über die Richtigkeit 
unserer Feststellung der Segmentierung des kontinuierlichen 
Knäuels in einheitliche Elemente von reduzierter Anzahl geraten 
könnten. Wir heben aber das gelegentliche Auftreten von eben 
wahrnehmbaren Querkerben innerhalb der als einheitlich zu be- 
trachtenden Chromatinteile deswegen hervor, damit man sieht, 
dass die Stadien, welche den Segmentierungsvorgang illustrieren 
sollen, auch einer skeptischen Betrachtungsweise gegenüber stand- 
gehalten haben. 

Unsere bisherige Darstellung hat ergeben, dass der erste 
Schritt zur Segmentierung des kontinuierlichen Fadens in dem 
Auftreten sekundärer Kerben beobachtet werden konnte, dass in 
einer weiteren Phase die durch die Kerben voneinander getrennten 
Fadenteile weiter auseinander liegen, sodass zwischen ihren Enden 
grössere Dehiszenzen entstehen, bis endlich ein Segment und zwar 
wahrscheinlich das an einem Knäuelende gelegene sich von den 
übrigen vollständig loslöst. 

Einen Fall, der sich an diesen zuletzt beobachteten Segmen- 
tierungsschritt anschliesst, repräsentiert der in Fig. 35, Textfig. 15, 
wiedergegebene Kern. Hier sind drei 
Chromosomen aus dem Knäuelverband 
bereits ausgetreten. Die anderen drei 
aber hängen noch zusammen. Von Al 
ihnen trägt das mit IV bezeichnete an ( 7 


dem Scheitel seiner Umbiegung eine 
Querlichtung von der besprochenen ı 
Art, die wiederum im Vergleich zu 7" 
den zwischen den Abschnitten ge- ” 
legenen Dehiszenzen die Einheitlich- 
keit des betr. Segmentes nicht in Frage stellt. Es ist im Hinblick 
auf spätere Stadien beachtenswert, dass. wie der vorliegende Fall 
zeigt, die Schleifen, welche den Knäuel eben verlassen haben, zu- 
nächst keine bestimmte Orientierung im Kernraum besitzen müssen. 
In deutlicher Knäuelformation, wenn wir so sagen dürfen, 
liegen auch die Segmente noch, welche der Kern der Fig. 36, 
Textfig. 16, enthält. Die Tatsache, dass hier nicht wie in den 
bisher gezeigten Fällen sechs, sondern sieben Chromatinteile aus 


dem Knäuel hervorgegangen sind, wollten wir registrieren, ohne 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.S3. Abt. II. 3 


Fig. 15. 


34 F. Wassermann: 


uns dabei aufzuhalten. Unsere Erörterungen über die Normalzahl 
der Chromosomen bei Zoogonus überheben uns der Notwendigkeit. 
hier auseinanderzusetzen, warum wir dem gelegentlichen Vor- 
kommen der Zahl sieben als der redu- 
zierten keine besondere Bedeutung beizu- 
messen haben. Für unsere Betrachtung ist 
vielmehr von Wichtigkeit, dass der tatsäch- 
liche Befund an dem vorliegenden Kern 
ohne Zwang für die Herkunft der Kern- 
schleifen aus einem kontinuierlichen Knäuel 
spricht. Die Elemente VII, VI und V liegen 
noch hintereinander geordnet und man 
braucht nur das obere Ende von IV mit dem freien Ende von V, die 
beiden nach abwärts sehenden Enden von IV und III und schliess- 
lich das in der Figur rechts gelegene Ende von I mit dem 
ihm zunächst befindlichen von II zu vereinigen, um zu der höchst 
wahrscheinlichen Beschaffenheit des kontinuierlichen Knäuels vor 
seiner Segmentierung zu gelangen. Die Rekonstruktion ist in 
der nebenstehenden Textfig. 17 versucht worden. 

Zu den Kernen mit eben vollendeter Segmentierung des 
Knäuels gehört auch der in der Fig. 37, Textfig. 18, abgebildete, 


Fig. 16. 


£ = Traa Een 


Biel. 


dessen im Schema mit V und II bezeichnete Schleifen das wieder- 
holt erwähnte gelegentliche Hervortreten einer Längslichtung er- 
kennen lassen. In einer gewissen Beziehung aber unterscheidet 
sich dieser Kern von dem zuletzt betrachteten. Seine Chromatin- 
elemente haben sich nicht nur sämtlich voneinander getrennt, 
sondern sie sind auch in ihrem Gesamtverlauf selbständiger ge- 
worden, insofern als die für den Knäuel charakteristischen Durch- 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 928) 


schlingungen bei ihnen nicht mehr in nennenswerter Weise vor- 
handen sind und wir hier nicht mehr wie in dem vorhergehenden 
Fall von einer noch erkennbaren Knäuelformation zu reden 
berechtigt wären. Wir beobachten ferner, dass drei von den 
Schleifen in der Längsachse des ovoiden Kernes orientiert sind, 
die drei anderen wenigstens einen Schenkel nach demjenigen 
Kernpol gerichtet haben, welchen die freien Enden der im 
ganzen orientierten V-förmigen Elemente einnehmen. Nun könnte 
man ja sagen, es sei wahrscheinlich hier der Knäuel gerade so 
formiert gewesen und schliesslich so durchgebrochen, dass die 
Segmente sich nach vollbrachter Knäuelzerschnürung in der vor- 
gefundenen Lage befinden müssen. Es ist natürlich nicht nur 
möglich, sondern sogar wahrscheinlich, dass dies für eine oder 
die andere Schleife zutrifft. Wir brauchen nur den Knäuel der 
Fig. 34 zu betrachten, um zu erkennen, dass auch hier, wo unserer 
Darstellung zufolge nur ein Segment aus der Knäuelformation 
bereits ausgetreten ist, einige Schleifen und die Enden mehrerer 
anderer schon durch ihre Lage im Knäuel gegen einen Pol des 
Kernes gerichtet sind. Wenn aber schliesslich nach der Segmen- 
tierung des Knäuels eine bestimmte Orientierung seiner Elemente 
eintritt — und sie muss ja erfolgen, da wir am Ende dieser Ent- 
wicklungsperiode das Bukettstadium (Fig. 40—45) antreffen —, so 
ist es ja belanglos, ob die ordnenden Kräfte, die dabei im Spiele 
sind, alle Elemente in eine bestimmte Richtung führen oder nur 
einige davon, während sie auf andere, deren Verlauf der endlichen 
Orientierung schon von vornherein entspricht, nicht einzuwirken 
brauchen, ja sehr wahrscheinlich gar nicht einwirken können. 
Man pflegt sich das Zustandekommen der polaren Orientierung 
der Kernschleifen durch eine bestimmt gerichtete, den flüssigen 
Kerninhalt betreffende Strömung verursacht zu denken; unter 
dieser Vorstellung ist däs soeben (resagte wohl verständlich. Genug, 
wir dürfen von dem Vorgang einer Orientierung der Kernschleifen 
reden oder besser von einer solchen des gesamten geformten Kern- 
inhalts. Denn wir werden sehen, dass diese Orientierung nicht 
nur die Chromatinelemente, sondern auch den Nukleolus betrifft. 
Bislang war es nicht nötig, von seiner Stellung im Kernraum zu 
sprechen; er lag stets exentrisch ohne erkennbare bestimmte Be- 
ziehung zur Chromatinformation des Kernes. Nun aber werden 


wir eine solche Beziehung nie vermissen. Denn im Bukettstadium 
5% 


36 F. Wassermann: 


liegt der Nukleolus stets auf derjenigen Seite des Kernes, welcher 
die freien Enden der Schleifen zugekehrt sind. Und man kann nicht 
etwa sagen, dass der Nukleolus bei dem Vorgang der Orientierung 
der Kernschleifen richtunggebend wäre, dass er seine Lage behielte 
und die freien Enden der Schleifen durch irgend einen Attraktions- 
vorgang ihm zugewendet würden, sondern der Nukleolus und die 
Kernschleifen dürften in gleicher Weise von der ordnenden Kraft 
getroffen werden. Für diese Anschauung spricht das Beispiel der 
Fig. 37. In diesem Falle wäre es freilich nicht ausgeschlossen, dass 
die definitive Ordnung der Chromosomen von der vielleicht vor- 
läufigen und scheinbaren, die dann eine zufällige wäre, abweichen 
und senkrecht zu dieser gerichtet schliesslich doch nach dem 
Nukleolus hin erfolgen würde; denn — darum gedenken wir dieser 
Möglichkeit — die Orientierung der Chromosomen im Bukett er- 
folgt wie das Beispiel der Fig. 40 erweist, durchaus nicht immer 
in der Richtung des längsten Kerndurchmessers und ist sicher keine 
blosse Raumfrage. Aber in der Regel sehen wir insbesondere bei 
deutlich ovoiden Kernen den Längsdurchmesser mit der Schleifen- 
richtung zusammenfallen, so dass es eine Annahme ohne zureichenden 
(rund wäre, wenn wir der erwähnten Möglichkeit einer Umordnung 
der Schleifen gegen den Nukleolus hin für unseren Fall wirklich 
Raum geben wollten. Halten wir aber daran fest, dass die bereits 
gegen den unteren Pol des Kernes der Fig. 37, Textfig. 18, ge- 
richteten Schleifenenden auch dort bis zum voll entwickelten 
Bukett verbleiben, dann muss, da wir unseren Beobachtungen 
zufolge ein Bukett ohne gleichsinnige Orientierung des Nukleolus 
und der Schleifenenden nicht annehmen können, der Nukleolus 
seine Wanderung zum Schleifenendenpol des Kernes erst antreten 
oder vollenden. (Gegen einen Zusammenhang zwischen Schleifen- 
enden und Nukleolus im Sinne eines in dem letzteren gelegenen 
Attraktionszentrums sprechen ferner alle übrigen nunmehr zu 
betrachtenden Bilder; denn wir werden sehen, dass die Schleifen- 
enden gar niemals zum Nukleolus konvergieren oder gar an ihm 
haften, sondern dass immer nur einige derselben in einer näheren, 
lediglich örtlichen Beziehung zum Nukleolus stehen. 

Indem wir zum besseren Verständnis der Umordnung, welche 
sich an den Schleifen des Kernes der Fig. 37 zu vollziehen beginnt, 
bereits auf das Bukett als das Ziel dieses Prozesses hinweisen 
mussten, sind wir der geordneten Darstellung unserer Befunde 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 37 


vorausgeeilt Wir wollen zunächst noch in den Fig. 38 und 39 
weitere Etappen der Chromatinschleifen - Orientierung vorführen. 
Was den ersteren dieser beiden Kerne (Textfig. 19) betrifft, 
so ist hier der Nukleolus zwar dem Schleifenendenpol bereits nahe- 
gerückt, aber er befindet sich noch nicht E 
in gleicher Höhe mit den Schleifenenden 
selbst, wie es meistens, aber nicht aus- 
nahmslos, (siehe Fig. 41) beim Bukett der 
Fall ist. Von den Schleifen sind die mit 
I, II bezeichneten mit beiden Schenkeln in 
die Bukettstellung eingerückt, während die 
vier übrigen erst mit je einem Ende dort 
angekommen sind, die anderen Enden der Schleifen III, IV, V 
und VI scheinen sich auf der Wanderung zum Pol zu befinden. 

Ganz analoge Verhältnisse finden wir an dem anderen Kern 
der Fig. 39. 

Von dem vollendeten Bukettstadium sprechen wir dann, wenn 
sämtliche U-förmig abgebogenen Schleifen in der Richtung eines 
Kerndurchmessers orientiert sind, wenn also ihre Bügel nach der 
einen, die freien Enden ihrer Schenkel nach der entgegengesetzten 
Seite gerichtet sind (siehe Fig. 40—45). Dabei befindet sich, wie 
erwähnt, der Nukleolus auf der Seite der freien Schleifenenden: 
diese aber stehen annähernd in der gleichen Höhe und liegen 
entweder der Kernmembran direkt an oder befindet sich doch in 
deren unmittelbarer Nähe. Wie weit nun eine Schleife mit ihrem 
Bügel in den Kernraum hineinragt, hängt natürlich von ihrer 
Länge, aber auch von ihrer Form ab. Was die letztere betrifft, so 
beobachten wir recht mannigfache Abweichungen von der U-Form, 
bei welcher, wie z. B. an zwei Schleifen der Fig. 41 zu sehen ist, 
aus dem gleichmässig gerundeten Bügel zwei annähernd parallele 
und in einer einzigen Ebene fortlaufende Schenkel hervorgehen. 
Die Schenkel des U können nun gekrümmt oder geknickt ver- 
laufen oder können zueinander konvergieren, sich schliesslich auch 
überkreuzen, andererseits sich so weit öffnen, dass ein weiter 
Bogen entsteht. Die Schleife als Ganzes ist oft in ihrer Längs- 
richtung winkelig geknickt oder gebogen. Endlich findet man 
häufig Elemente, deren Schenkel im spitzen Winkel und nicht im 
Bogen zusammentreffen. In ihrer gegenseitigen Beziehung lassen 
die Schleifen keine Regelmässigkeit erkennen; sie liegen über- 


Fig. 19. 


38 F. Wassermann: 


einander, in der gleichen Ebene ineinander und sehr oft durch- 
setzen sie einander in mannigfacher Weise. Ihre Enden sind aber 
immer sehr deutlich unabhängig voneinander. Dies erkennt man 
sowohl in Profilansichten des Buketts, wie auch, wenn man wie bei 
dem Kern der Fig. 39 schräg von oben her auf die Enden herein- 
sieht oder wenn man, wie es in Fig. 45 dargestellt ist, das Bukett 
vom Bügelteil aus betrachtet.') Dank der relativ weiten Abstände 
zwischen den freien Enden und der geringen Anzahl der Chromo- 
somen kann man bei Zoogonus die Elemente des Bukettstadiums 
mit seltener Klarheit zählen. 

In ihrem feineren Bau unterscheiden sich die Schleifen des 
Buketts nicht von dem Knäuel und seinen Segmenten vor der 
Orientierung; auch sie bestehen aus relativ groben, locker gefügten 
Chromatinschollen, die an einzelnen Stellen zusammengeschoben, 
an anderen wieder etwas weiter auseinander gerückt sein können, 
woher es kommt, dass innerhalb einzelner Schleifen hier und da 
Schwankungen des Kalibers beobachtet werden. Auch hinsichtlich 
des gelegentlichen Auftauchens von Längslichtungen oder Quer- 
kerben verhalten sich die Bukettschleifen wie ihre Vorläufer. 

Nun trifft man Kerne von ausserordentlich locker gebauten 
und sehr blass gefärbten Elementen, deren Verlauf sich nur mit 
grosser Mühe feststellen lässt. Gelingt es aber einen solchen 
Oozytenkern zu analysieren, dann erweist es sich, wie die Fig. 46 
zeigt, dass auch hier die reduzierte Anzahl von polar orientierten 
Schleifen vorhanden ist. Wie die Zeichnung erkennen lässt, sind 
einzelne Schleifen meistens zunächst am Bügelteil bereits so sehr 
in ihrer Struktur verändert, dass ihre Kontinuität kaum mehr zu 
erkennen ist. 

Es kann kein Zweifel darüber bestehen, dass wir es hier 
mit Bukettstadien zu tun haben, deren Schleifen im Verblassen 
begriffen sind. Dieser Veränderung begegnet man zwar nicht 
allzuselten, aber sie ist im Bilde sehr schwer wiederzugeben. 

(reht dieser Vorgang weiter, so entstehen Kernbilder, von 
denen eines in Fig. 47 abgebildet ist. Hier sind nur mehr einzelne 
schwach gefärbte Züge und Schollen zu sehen und nur ein einziges 


!) Fig. 45 stellt den seltenen Fall eines Buketts mit 7 Chromatin- 
teilen dar; dies muss einschränkend zu dem auf S. 16 über die Anzahl der 
Bukettschleifen Gesagten bemerkt werden, ändert aber nichts an den die 
Chromosomen-Normalzahl betreffenden Ausführungen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 39 


noch bestehen gebliebenes, immer noch polar orientiertes Element 
legt zuweilen Zeugnis davon ab, dass dieser Kern sich direkt vom 
Bukett herleitet. So geht der Oozytenkern allmählich in den 
Ruhezustand über, in dem wir ihn zu Anfang der Hauptwachstums- 
periode (Fig. 55) antreffen werden. 


b) Bemerkungen zur Methode der Untersuchung. 


1. Die Erhebung der Befunde. 


Goldschmidt (05, 09) hat von den demonstrierten Ent- 
wicklungsstadien der jungen Oozytenkerne nichts gesehen. Er 
spricht nur von einem „Knäuel“ in der frühen Wachstumsperiode 
und hat unter diesen nicht näher definierten Begriff alle Ent- 
wicklungsformen von den Kernen mit der Chromosomen-Normal- 
zahl bis zum Bukett zusammengefasst. Aber auch die neueren 
Untersuchungen über die Oogenese von Trematoden (Schellen- 
berg [11], v. Kemnitz [13]) haben nur einige wenige mit den 
unsrigen vergleichbare Kernformen aus der frühen Oozytogenese 
zur Darstellung gebracht. 

Unter diesen Umständen ist eine Bemerkung über die Er- 
hebung unserer Befunde wohl nicht überflüssig. Die einzelnen 
Entwicklungsstadien der Oozytenkerne sind natürlich nicht ohne 
weiteres im Ovarium des Zoogonus aufzufinden. Die vorgeführten 
Oozytenkerne, von jenen mit der Chromosomen-Normalzahl bis zu 
den dem Bukett unmittelbar vorausgehenden Stadien, bieten zu- 
nächst auf jedem optischen Querschnitt ganz genau das gleiche 
Aussehen. Um dies deutlich zu machen, haben wir in den Fig. 27a, 
30a, 34a je einen optischen Querschnitt zu dem daneben ge- 
zeichneten Totalbild des betreffenden Kernes gegeben.') So sehr 
sich die Totalbilder voneinander unterscheiden, es handelt sich um 
einen Kern mit der Chromosomen-Normalzahl, um einen kontinuler- 

!) Bei den Totalbildern der jungen Oozytenkerne war es aus technischen 
Gründen notwendig, die Chromatinschleifen etwas dünner zu zeichnen als 
sie im Verhältnis zum ganzen Kern bei der angewandten Vergrösserung 
tatsächlich erscheinen. Die optischen Querschnitte geben das wirkliche Ver- 
halten in dieser Beziehung möglichst richtig wieder; auch konnte bier der 
Kernraum, der nie so hell erscheint, wie er auf den Totalbildern der Klar- 
heit zuliebe gelassen wurde, einen dunkleren Ton bekommen, welcher der 
ihm anhaftenden leichten Färbung entspricht. So kommt es, dass sich die 


Bilder der optischen Querschnitte von den Totalbildern in den genannten 
Punkten unterscheiden. 


40 F. Wassermann: 


lichen Knäuel und um ein Segmentierungsstadium des Knäuels, 
so vollständig gleichartig ist das Bild ihres optischen Quer- 
schnittes. Nur das vollentwickelte Bukett (Fig. 44a) ist von vorn- 
herein zu erkennen, weil hier die Schleifen aus einer Ebene in der 
Regel nicht erheblich abweichen. So konnten also die gezeigten 
Entwicklungsstadien des Oozytenkernes nur dadurch ermittelt 
werden, dass in jedem Falle alle im optischen Querschnitt vor- 
liegenden Chromatinteile auf das Sorgfältigste nach höher und 
tiefer gelegenen Einstellungsebenen verfolgt wurden. Man kann 
vorher durchaus nicht sagen, ob sich herausstellen wird, dass 
zwölf Chromatinteile in einem solchen Kern gelegen sind, oder 
dass ein kontinuierlicher Knäuel vorliegt. 

So halten wir es für höchst wahrscheinlich, dass verschiedene 
Etappen in der Oogenese anderer Trematoden deswegen ver- 
borgen geblieben sind, weil die allerdings schwer feststellbaren 
Unterschiede zwischen gleichartig aussehenden Kernen nicht be- 
achtet wurden, sofern nicht, wie wir bei Besprechung der Arbeit 
Schellenbergsnoch sehen werden, unzulängliche Konservierung 
den Einblick in diese Strukturen überhaupt unmöglich machten. 


2. Die Synapsisfrage. 


Während die Untersucher der frühen Oogenese anderer 
Trematoden, mit Ausnahme von v. Kemnitz (13, Brachycoelium 
Salamandrae), wie Goldschmidt (08, Dierocoelium lanceolatum) 
und Schellenberg (11, Fasciola hepatica), in der Reihe der von 
ihnen beschriebenen Entwicklungsstadien auch das Synapsisstadium 
in der üblich gewordenen Weise schildern und abbilden, fehlt 
in unserer Darstellung der Kern mit dem einseitig zusammen- 
gedrängten Inhalt. 


Wir haben uns daher in diesem Zusammenhang darüber zu 
äussern, ob in der frühen Oogenese des Zoogonus ein Synapsis- 
stadium gar nicht vorkommt, oder aus welchen Gründen wir Kerne 
mit synaptisch „kontrahiertem“ Chromatinbestand, wenn uns solche 
begegnet sind, nicht unter die Entwicklungsstadien der Oozyte 
aufgenommen haben. Der letztere Fall ist gegeben. Wohl haben 
auch wir Kernbilder gefunden, die, wie die betreffenden Abbildungen 
(45—54) zeigen, den Synapsisstadien der genannten Autoren ent- 
sprechen. Aber wir sind zur Überzeugung gekommen, dass es 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 41 


sich hierbei um nichts anderes handeln kann, als um Modifikationen 
der nicht synaptischen Entwicklungsstadien. 

Wie wir früher schon (Wassermann, 12) dar- 
gelegt haben, hielten wir uns im Falle desZoogonus 
mirus berechtigt, das synaptische Phänomen für ein 
Kunstprodukt der Fixierung oder für eine während 
des Lebens der Zelle eingetretene Kernschädigung 
zu erklären. Wo es eingetreten ist, verdecktesden 
Ablauf der chromatischen Umlagerungen, die in den 
nicht synaptischen Kernenin einer der Wirklichkeit 
näher stehenden Form erhalten sind. 

Dieser Standpunkt deckt sich zum Teil mit dem von 
Buchner (09) gegenüber der Synapsis eingenommenen. Buchner 
beschreibt nämlich (S. 347) Degenerationsformen der Spermatozyten- 
kerne von Oedipoda, die ganz der von v. Winiwarter (00), von 
Popoff (07) oder von van Molle (07) beschriebenen Synapsis 
gleichen. Andere Grade der Degeneration entsprechen wieder 
anderen synaptischen Zuständen, wie sie von Gross (04), Wilke 
(06) und Paulmier (99) abgebildet worden sind. 

Da wir unsere Anschauung, dass eine Synapsis bei Zoogonus 
nicht existiert, bereits früher eingehend begründet haben, wollen 
wir im Rahmen dieser Arbeit nur kurz den Weg schildern, der 
uns zu der oben gekennzeichneten Stellungnahme geführt hat. 

Zunächst war zu konstatieren, dass die „Synapsisstadien“ 
nur in einigen wenigen Ovarien unseres Objekts, und zwar gerade 
in solchen, deren Zellen nicht einwandfrei fixiert sind, zur Be- 
obachtung kommen, während sie in der Regel und also in Ovarien, 
über deren vorzüglichen Konservierungszustand kein Zweifel sein 
kann, vollständig fehlen. Schon dieser Umstand musste eine 
skeptische Betrachtung der fraglichen Kernbilder veranlassen. 

Dann aber war die weitere wichtige Tatsache hervorzuheben, 
dass in jenen Ovarien, welche die synaptischen Kerne aufwiesen, 
die anderen nicht synaptischen Chromatinformationen, die wir Im 
vorstehenden geschildert haben, nicht ermittelt werden konnten. 

Diese Wahrnehmung legte den Gedanken nahe, es möchten 
die Synapsisstadien und die nicht synaptischen, gut analysierbaren 
Kerne identisch sein. War dies zu erweisen, dann bestand keine Not- 
wendigkeit, die synaptischen Figuren neben den anderen, die dann 
als die normalen zu gelten hatten, noch weiter zu berücksichtigen. 


42 F. Wassermann: 


Der Nachweis der Identität zwischen synaptischen und nicht- 
synaptischen Kernen konnte tatsächlich geführt werden und zwar 
mit Hilfe von Übergangsformen, als welche z. B. der Knäuel der 
Fig. 31 und der Kern mit der diploiden Chromosomenzahl der 
Fig. 54 zu betrachten sind. 

Es liess sich erweisen, dass die Stadien der Fig. 48—51 
nur verschiedene Grade der Zusammenballung der frühen fein- 
fädigen Kerne darstellen, wie sie durch die Oozyten der Fig. 19 
bis 22 demonstriert worden sind. Neben der Fig. 54 ist wohl 
auch die Fig. 52 als das Bild eines Kernes mit der diploiden 
Chromosomenzahl zu betrachten, der normalerweise wie der durch 
die Fig. 23 wiedergegebene aussieht. Von den beschriebenen 
feineren Details ist infolge der Schrumpfung nichts mehr zu sehen, 
und man könnte, wenn man nur solche Kerne vor sich hätte, 
niemals eine Anschauung von der Entstehung der zwölf Chromo- 
somen aus dem feinfädigen jungen Oozytenkern bekommen, ja, 
man würde überhaupt von dem Auftreten der Chromosomen in 
der Normalzahl angesichts von Bildern, wie das der Fig. 53 eines 
ist, keine Kenntnis erhalten. Ebensowenig wäre es natürlich hier 
möglich, über die Ohromosomenverkettung und die Knäuelbildung 
etwas zu erfahren; auch der Knäuel selbst und seine Zerfällungs- 
stadien würden unter dem Bilde einer späten Synapsis verborgen sein. 

Dann würde das Bild der Oozytenentwicklung selır viel 
Ähnlichkeit mit dem von Schellenberg für die frühe Oogenese 
von Fasciola hepatica gegebenen erhalten. Nach Schellenberg 
verbleiben dort die Oozyten vom feinfädigen Anfangs- bis zum 
"Bukettstadium im Zustand der Synapsis (Fig. 5—10 der zitierten 
Arbeit). Eine weitere Analyse solcher geschrumpfter Kerne war 
dem Autor natürlich nicht möglich. Wie fern es ihm auch lag, 
einen Versuch nach dieser Richtung zu unternehmen, geht daraus 
hervor, dass er nach einer der unsrigen ganz entgegengesetzten 
Methode verfuhr, indem er gerade diejenigen Kerne für die am 
meisten charakteristischen hielt, welche das synaptische Phänomen 
am deutlichsten zeigten. Er sagt in dieser Beziehung (S. 447): „Am 
besten geben diese frühe Phase der Synapsis die mit ‚Zenker‘ 
konservierten Präparate wieder“ und „zum Studium der älteren 
synaptischen Stadien benützen. wir besser mit 70proz. Alkohol 
konservierte Präparate“. Ein solches Verfahren ist unseres Er- 
achtens der sicherste Weg, um die Erkennung der von uns 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 43 


ermittelten Chromatinumlagerungen unmöglich zu machen! Dabei 
ist sich Schellenberg dessen wohl bewusst, dass „die starke 
Zusammenziehung des Knäuels“ „zweifellos ein Konservierungs- 
artefakt“ ist, „denn bei anderen Reagenzien zeigt sich diese 
extreme Kontraktion nicht“. Wenn er dann fortfährt: „Aber gerade 
durch diese künstliche Kontraktion werden die Bilder in bezug auf 
das hier besonders interessierende Moment prägnant ete.“, so müssen 
wir dieser Methode die ganz selbstverständliche Forderung entgegen- 
halten, dass es unsere Aufgabe ist, die schädigende Wirkung der 
Fixierung auf ein unvermeidliches Mindestmaß einzuschränken und 
nur die Kerne zur Untersuchung heranzuziehen, welche die aller- 
geringste Schädigung erlitten haben und somit dem Zustand, wie 
ihn das lebende Objekt besass, am nächsten kommen. Eine andere 
Richtschnur gibt es hier nicht; und wenn die am besten kon- 
servierten Kerne gewisse interessierende Momente, wie in diesem 
Fall die Duplizität des Fadens, weniger deutlich zeigen als andere 
oder gar nicht erkennen lassen, dann muss das Interesse an diesen 
Momenten eben fallen gelassen werden; denn dann handelt es 
sich um Kunstprodukte. 

Von den Figuren Schellenbergs stellen die mit 5—8 
bezeichneten die frühen feinfädigen Stadien dar. Wir können nach 
den an unserem Objekt gewonnenen Erfahrungen nicht glauben, 
dass der verschiedene Grad der Synapsis einer Verschiedenheit 
in der Entwicklungsstufe dieser Kerne entspricht, sondern es wird 
sich hier um eine verschiedene Grösse der Fixierungsschädigung 
bei ein und demselben Stadium handeln. In den Fig. 9 und 10 
der Schellenbergschen Arbeit verbirgt sich unter der starken 
Schrumpfung wohl ein kontinuierlicher Knäuel; für die Fig. 10 
scheint dies ganz sicher zuzutreffen. Hier handelt es sich um 
einen Kernfaden, der um ein geringes stärker zusammengedrängt 
ist als unser geschrumpfter Knäuel der Fig. 31. Wäre dieser 
noch etwas mehr zusammengeschoben, so könnte man bei ihm 
ebensowenig wie bei dem Schellenbergs die Kontinuität fest- 
stellen. Was das Bukett anbelangt, so ist es auch bei Fasciola 
hepatica recht klar zu erkennen. Über das zweite nicht reduzierte 
Bukett, welches Schellenberg bei seinem Objekt gefunden bat, 
werden wir später sprechen (siehe S. 51). 

Es ist ferner noch bemerkenswert, dass unter unseren 
„synaptischen“ Oozyten Beispiele gefunden werden können, die 


44 F. Wassermann: 


den von Goldschmidt (08) bei Dierocoelium lanceolatum be- 
schriebenen Kernen im Synapsisstadium ganz gleich sind. Man halte 
unsere Fig. 43 gegen den nebenstehenden „Oozytenkern in der 
dichten Synapsis“ (Textfig. 20), welcher der 
Goldsehmidtschen Arbeit (Fig. 4) ent- 
nommen ist, und man wird zugeben, dass sich 
die beiden Kerne in jedem wesentlichen Zug 
vollständig entsprechen. Es ist nur eine un- 
abweisbare Konsequenz aus dem oben Fest- 
gestellten, wenn wir auf Grund eines solchen 
Vergleiches die von Goldschmidt gelieferte Beschreibung der 
frühen Oogenese von Dierocoelium in diesem Punkte sehr skeptisch 
betrachten. 


3. Begründung der Seriierung. 

Im Ovarium des Zoogonus sind die Entwicklungsstadien der 
Oozyten nicht in einzelne Schichten geordnet, deren räumliche 
Aufeinanderfolge die genetischen Beziehungen zwischen den ver- 
schiedenen Kernformen würden erkennen lassen. Was die Grösse 
der einzelnen Kerne anlangt, so ist sie relativ beträchtlichen 
individuellen Schwankungen unterworfen. Wäre es möglich, einem 
einzigen Ovarium sämtliche Entwicklungsstadien des Oozytenkernes 
zu entnehmen, so würden sich diese wohl in eine Reihe von 
steigender Grösse ordnen lassen; da aber die vorgeführten Kern- 
bilder aus verschiedenen Ovarien stammen, können etwaige (srössen- 
unterschiede nicht als Anhaltspunkte zur Seriierung gebraucht 
werden. 

Unter diesen Umständen muss die Frage erwogen werden, 
nach welchen Gesichtspunkten eine Entwicklungsreihe aus den 
aufgefundenen Zustandsbildern der Kerne zusammengestellt werden 
kann. Darauf dürfen wir zunächst antworten, dass neben den 
Hauptetappen der Oozytenentwicklung, welche wir in der Aus- 
gangsform, d.h. dem feinfädigen Oozytenkern, dem Stadium mit 
der diploiden Anzahl von Chromatinelementen, dem kontinuier- 
lichen Knäuel und dem Bukettstadium sehen, eine Reihe von 
anderen Kernformen zur Beobachtung gekommen sind, die den 
kontinuierlichen Übergang von einer Hauptetappe zur anderen 
ganz sicherstellen. So hat die gelieferte Beschreibung der Ent- 
wicklungsstadien zugleich den genetischen Zusammenhang der- 
selben erwiesen. Von der Richtigkeit unserer Serlierung werden 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 45 


wir aber erst dann überzeugt sein, wenn sie gegenüber jedem 
Einwand, den man gegen sie erheben könnte, aufrecht erhalten 
werden muss. 

Wir haben die Entwicklungsstadien des Oozytenkernes so 
angeordnet, dass sie als Phasen eines von der Ausgangsform bis 
zum Bukett verlaufenden Prozesses erscheinen. ‘Nun hat uns 
aber z. B. Skrobansky (03) durch seine Beschreibung der 
Oogenese beim Schwein ein Beispiel für die Annahme gegeben, 
dass auf ein im Anfang der Entwicklung auftretendes Synapsis- 
stadium, während dem der Vorgang der numerischen Chromo- 
somenreduktion stattfindet, das Bukettstadium und auf dieses 
erst als letzte Etappe vor der Hauptwachstumsperiode der Knäuel 
folgen kann. Übertragen wir diese Anschauung auf unseren F all, 
so hätten wir etwa an ein Kernbild der Fig. 22 das Bukettstadium 
anzuschliessen') und jene Chromatinformationen, die wir als Über- 
gänge vom Knäuel zum Bukett betrachtet haben, würden um- 
gekehrt vom Bukett zum Knäuel führen. Dann hätte der Knäuel 
auch keine Beziehung zur Reduktion mehr; diese würde vor dem 
Bukettstadium erfolgen und ihr Zustandekommen wäre nicht auf- 
geklärt. Die Möglichkeit, dass eine solche Seriierung hier zu 
treffen ist, kann aber mit voller Sicherheit ausgeschlossen werden; 
denn das Bukettstadium ist das Endstadium der 
ersten Periode der Dozytenentwicklung des Zoogonus. 
Dafür spricht erstens der Umstand, dass von den gezeigten Kern- 
formen das Bukettstadium allein in manchen Fällen eine Grösse 
erreicht, die der Kerngrösse von Oozyten im Anfang der Haupt- 
wachstumsperiode gleichkommt. Um dies zu veranschaulichen, 
haben wir neben das Bukett der Fig. 44 und 46 den grössten 
Durchmesser eines Oozytenruhekernes der Hauptwachstumsperiode 
aus demselben Ovarium gezeichnet (Fig. 44b und 46a). Dagegen 
zeigt ein Vergleich der Knäuelstadien der Fig. 33 und 34 mit 
der entsprechenden Grösse (Fig. 46b), dass diese vor dem Bukett 
gelegenen Stadien die am Ende der ersten Periode erreichte 
Grösse noch nicht besitzen. Wenn die Bukettstadien allein in 
dieser Grösse angetroffen werden, so beweist das, dass sie dem 
Ruhekern der Hauptwachstumsperiode unmittelbar vorausgehen. 

‘) Dazu könnte die besprochene (siehe S. 23), in dem Kern der Fig. 23 


beobachtete, vielleicht durch die Fixierung hervorgerufene polare Orientierung 
der nicht reduzierten Elemente zunächst verleiten. 


46 F. Wassermann: 


Dann aber beweisen auch die Chromatinauflösungsfiguren, die wir 
beobachten konnten und beschrieben haben (S. 35), dass es das 
Bukettstadium ist, welches in die Ruhestruktur des Oozytenkernes 
eingeht und nicht etwa der Knäuel. Es ist demnach in unserem 
Fall unmöglich, zwischen dem kontinuierlichen Knäuel und dem 
Bukett eine andere genetische Beziehung als die beschriebene 
anzunehmen oder irgend ein anderes der gezeigten Stadien nach 
dem Bukett in die Entwicklung einzuordnen. Letztere Möglichkeit, 
so ferneliegend sie zunächst erscheinen mag, ist deshalb eigens 
von der Hand zu weisen, weil Schellenberg bei Fasciola 
hepatica nach dem Bukett mit der reduzierten Anzahl von 
Chromatinelementen ein zweites nichtreduziertes angenommen hat, 
ohne allerdings, wie wir später zeigen werden, für diese Seriierung 
irgend einen Grund anzugeben. 

Wenn demnach die Beziehungen zwischen Knäuel und Bukett 
durchaus sichergestellt sind, so bleibt noch die zweite Hauptfrage, 
ob auch die Entstehung des Knäuels aus zwölf Chromatinelementen 
sich aus den vorhandenen Kernbildern mit Recht folgern lässt. 
Denn man könnte einwenden, dass jene Chromatinformationen, 
welche uns vom sekundär gekerbten Knäuel bis zur vollständigen 
Segmentierung zu führen schienen, ebensogut den Aufbau des 
Knäuels aus sechs Elementen darstellen könnten. Dabei würden 
die besprochenen Beziehungen zwischen Knäuel und Bukett doch 
zu Recht bestehen. Dieselben Bilder würden eben dann der 
Ausdruck für den Aufbau und für den Abbau des Knäuels sein 
und man könnte im einzelnen Fall nicht entscheiden, zu welcher 
Etappe die jeweils vorliegende Figur gehörte. Auch in diesem 
Fall bestünde kein Zusammenhang zwischen der Chromosomen- 
reduktion und dem Knäuel. Die Seriierung wäre dann so zu 
treffen, dass aus einem Stadium, wie es durch die Fig. 21 repräsen- 
tiert wird, also aus einem leptozygotaenen Kern, die reduzierten 
Schleifen hervorgehen, wie sie etwa in der Fig. 37 vorliegen, und 
dass diese Schleifen sich zum Knäuel zusammenordneten. Eine solche 
Aufreihung der genannten Kernbilder würde den Tomopteris- 
Typus der Chromosomenreduktion von A. und K. E. Schreiner 
auch auf den Zoogonus anwenden lassen. Aber sie ist völlig aus- 
geschlossen, da wir ja Kerne aufgefunden haben, welche zwölf 
Chromatinelemente enthalten und darunter solche, in denen eine 
Verkettung der Chromosomen zu längeren Fäden stattgefunden 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 47 


hat. Die in Erwägung gezogene Seriierung könnte nur unter 
Ausserachtlassung dieser Stadien getroffen werden. Sie müssen 
aber, da zwischen Knäuel und Bukett und auch nach dem Bukett 
kein Raum für sie sein kann, notwendigerweise vor den Knäuel 
gestellt werden, wobei wir zunächst ganz davon absehen können, 
dass sie schon deswegen an den Anfang der Oozytenentwicklung 
gehören, weil sie sich aus den jüngsten Stadien mit Sicherheit 
ableiten lassen. So ergibt sich also die von uns gegebene Inter- 
pretation, dass der Knäuel, der in sechs Elemente zerfällt, aus 
zwölf Elementen entstanden ist, aus den vorliegenden Bildern 
mit zwingender Notwendigkeit. 

Wir haben hier noch einem weiteren Bedenken zu begegnen: 
Wäre es nicht möglich, dass die Kerne mit der Normalzahl der 
Chromosomen (Fig. 24—29) überhaupt keine Oozytenkerne sind, 
sondern Oogonienkerne im Zustand der Prophase? Diese Frage 
muss aufgeworfen werden, damit derjenige, welcher unser Objekt 
nicht kennt, ihre Stellung und Beantwortung nicht vermisse. 
Gerade weil wir bei Zoogonus ein Ovarium haben, in welchem 
die einzelnen Kernformen nicht schichtenweise voneinander ge- 
trennt sind, wäre ja eine derartige Verwechslung nicht von vorn- 
herein ausgeschlossen. Tatsächlich aber ist es nicht möglich, 
Teilungsstadien der Oogonien mit den fraglichen Oozytenkernen 
zu verwechseln. Die Prophase einer Oogonienmitose ist in Fig. 13 
abgebildet. Ein Vergleich dieser Figur mit einem der in Betracht 
kommenden Oozytenkerne lehrt, dass zwischen beiden ein in die 
Augen springender Unterschied besteht. Zwar sind beide an Grösse 
nicht erheblich voneinander verschieden und besitzen beide zwölf 
Chromosomen, aber eben die Chromosomen bilden ein auffallendes 
Unterscheidungsmerkmal. In dem Prophasenkern haben wir, wie 
bei der Mitose anderer Zellen, kompakte, sich stark färbende und 
scharf konturierte Elemente, im Oozytenkern dagegen schwach 
gefärbte, unscharf Konturierte, schollige Elemente, wie sie in 
ganz gleicher Art auch in den späteren Oozytenkernen immer 
wieder auftreten. Wollte man trotzdem noch nicht jedes Bedenken 
fallen lassen und erwägen, ob nicht das als Oozytenkern ange- 
sprochene Stadium vielleicht eine frühere Prophase der Oogonien- 
teilung darstellte als die, mit der wir es soeben verglichen haben, 
so ist das schon durch den Hinweis darauf auszuschliessen, dass 
die Oogonienmitosen überhaupt im (Gegensatz zu den Oozyten- 


48 F. Wassermann: 


stadien mit der Chromosomen-Normalzahl nur sehr selten vor- 
kommen. Hat doch Goldschmidt überhaupt keine Oogonien- 
mitosen beobachtet und konnten auch wir nur einige wenige 
feststellen. Sollte man unter diesen Umständen einräumen müssen, 
dass gerade gewisse ungewöhnlich aussehende Prophasenstadien, 
die man zunächst gar nicht für solche halten möchte, die einzige 
häufiger vorkommende Teilungsfigur der Oogonienmitose wäre? 
Das würde unseren diesbezüglichen Erfahrungen über die Zell- 
teilung direkt widersprechen. Bringt man dann noch den Um- 
stand mit in Rechnung, dass von diesen Oozytenkernen mit der 
Chromosomen-Normalzahl alle Übergänge zum kontinuierlichen 
Knäuel aufgefunden werden konnten, dann muss das vorgebrachte 
Bedenken auch für den, der das Objekt nicht kennt, schwinden. 

So istalso unsere Serilerung: Vozytenkerne mit 
zwölf Chromatinteilen — kontinuierlicher Knäuel — 
Oozytenkern mit sechs Chromatinschleifen — Bukett, 
nicht nur eine wahrscheinliche, sondern sie ergibt 
sich als die allein mögliche mit Notwendigkeit aus 
den vorliegenden Tatsachen. 

Nach all dem Gesagten ist eine weitere Begründung der 
Beziehung zwischen den Kernen mit zwölf Chromatinteilen und 
den frühesten Stadien, in welche wir die Herausdifferenzierung eben 
jener Elemente verlegt haben, wohl nicht nötig. Über die fein- 
fädigen Kerne, die sich gegenüber dem Oogonienruhekern als 
jüngste Vozyten unterscheiden liessen, sei nur das eine hier bemerkt, 
dass wir nicht glauben, sie als Oozyten-Ruhekerne ansprechen zu 
sollen. Dass auf die letzte Vogonien- bezw. Spermatogonienteilung 
ein Ruhestadium folgt, ist von den meisten Autoren angegeben 
worden. So beschreiben z. B. Mar&chal und de Saedelaer (10) 
bei Raja einen Oozyten-Ruhekern („Repos initial oocytaire“) 
und sagen im Zusammenhang mit dieser Feststellung: „L’existence 
tres generale de ce premier repos oozytaire semble devenu un 
fait acquis, et nous jugeons superflu de reprendre, a propos des 
Rajides, la d&monstration faite prec@demment par l’un des nous 
pour les Squales: les arguments d’ailleurs seraient de tout point 
identiques“. Hier wird also der auf die letzte Oogonienteilung 
folgende Ruhekern Vozyten-Ruhekern genannt. Wir halten aber 
dafür, dass v. Winiwarter und Sainmont (09) die richtigere 
Ausdrucksweise gefunden haben, wenn sie sagen: „L’oogonie apres 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 49 


un nombre indetermind de mitoses, rentre au repos. Mais bientöt 
de nouvelles modifications surviennent“. Diese Autoren bezeichnen 
damit nämlich den auf die letzte Oogonienteilung folgenden Ruhe- 
kern noch als Oogonien-Ruhekern und beginnen die neue 
Periode der Entwicklung, d. h. die Oozyten-Entwicklung mit den 
Veränderungen, die bald an dem Ruhekern einsetzen. So glauben 
wir auch die Verhältnisse bei Zoogonus beurteilen zu müssen. Den 
feinfädigen Oozytenkern, von dem wir ausgegangen sind, können 
wir wohl nicht mehr als Ruhekern betrachten; nach Analogie mit 
anderen Objekten und im Vergleich zu den eigentlichen als Oogonien- 
kerne bezeichneten Ruhekernen im Ovarium selbst, scheinen diese 
frühesten Oozytenkerne vielmehr ganz jungen Prophasenstadien 
vergleichbar zu sein. Was das Ruhestadium betrifft, welches auf 
die letzte Oogonienteilung folgt, so wird sich dieses von den 
zwischen zwei Oogonienmitosen gelegenen wahrscheinlich nicht 
unterscheiden und kann daher in unserem Ovarium nicht ermittelt 
werden. Wir haben diese Überlegung angestellt, weil wir glauben, 
dass die Erwägung, ob ein Oogonien- oder ein Vozyten-Ruhekern 
auf die letzte Teilung der Vermehrungsperiode folgt, nicht nur 
die Nomenklatur betrifft, sondern dass es sich auch dabei um eine 
Diskussion über das Wesen der vorliegenden Erscheinungen handelt. 
Das Problem, welches durch die Erörterung über die Bezeichnung 
des Anfangsstadiums der Oozytenentwicklung angeschnitten wird, 
liegt unseres Erachtens in der Frage nach dem Zeitpunkt, in 
dem die zur Geschlechtszelle sich entwickelnde Zelle diejenigen 
Faktoren treffen, welche dem Kern derselben seine besonderen 
„heterotypischen“ morphologischen Charaktere aufprägen. Es tritt 
uns also hier ein Teilproblem der auf die kausale Erklärung der 
(onozytenentwicklung überhaupt gerichteten Bestrebungen ent- 
gegen. Wir werden später Gelegenheit nehmen, an dem Beispiel 
der frühen Oogenese des Zoogonus den Versuch zu einer kausalen 
Erklärung der hier beobachteten Chromatinumlagerungen zu 
demonstrieren. 


c) Die frühe Oogenese von Fasciola hepatica L. 


Von den bis jetzt vorliegenden Untersuchungen über die 
Oogenese bei Trematoden ist nur die von Schellenberg (11) an 
Fasciola hepatica ausgeführte in bezug auf die frühe Oozyten- 


entwicklung zu einem Vergleich mit unseren Befunden geeignet; 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 4 


50 F. Wassermann: 


die Arbeit von Goldschmidt (08) über Dierocoelium und die 
neuerdings erschienene Bearbeitung der Oogenese von Brachy- 
coelium salamandrae von v. Kemnitz (13) sind in dem hier 
interessierenden Teil allzu wenig vollständig. 

Wir sind schon gelegentlich der Erörterung der Synapsis- 
frage auf die einschlägigen Stadien der Oogenese von Fasciola 
hepatica zu sprechen gekommen. Wenn wir auf die dort be- 
gründeten Feststellungen verweisen, so können wir uns kurz dahin 
zusammenfassen, dass die Stadien der Oogenese von Fasciola 
hepatica, welche in unserer Serie zu fehlen scheinen, ihr eigenartiges 
Aussehen lediglich infolge von Fixierungsschädigungen erhalten 
haben und sich unschwer mit Hilfe von ebenfalls unzulänglich 
fixierten Kernen unseres Objekts, die ihnen gleichen und andererseits 
bestimmten wohlfixierten Kernbildern unseres Objekts entsprechen, 
auf unsere Chromatinformationen zurückführen lassen und dass, 
dies vorausgesetzt, sämtliche Hauptstadien, die wir für die frühe 
Vogenese des Zoogonus beschrieben haben, auch bei Fasciola hepatica 
von Schellenberg (11) gesehen und abgebildet worden sind. 

Schellenberg (11) demonstriert die frühe Oogenese durch 
die in den Fig. 5—16 abgebildeten Stadien. Man sieht, dass die 
Schilderung dieser Periode nur mit Rücksicht auf die anderen 
Arbeiten über die Trematodenoogenese, welche in diesem Punkt 
noch weniger ausführlich sind, eingehend genannt werden kann. 
Wir erkennen in diesen Figuren die frühen feinfädigen Oozyten- 
kerne (Fig. 5, 6, 7, 8), die hier allerdings je nach dem Grade der 
„synaptischen“ Verklumpung des Kerninhaltes als Repräsentanten 
verschiedener Entwicklungszustände aufgeführt sind, dann sehen 
wir Oozytenkerne mit der Normalzahl der Chromatinelemente 
(Fig. 15, 16), ferner den Knäuel (Fig. 9 und 10) und das Bukett- 
stadium (Fig. 11 und 12). 

Nun werden aber diese Stadien nicht in der Reihenfolge, 
wie wir sie aufgeführt haben, seriiert, sondern auf die feinfädigen 
bezw. synaptischen Stadien soll hier unter Anflockerung des 
synaptischen Knäuels der dicke, immer noch einseitig zusammen- 
gedrängte, nach Analogie mit unserem Stadium als kontinuierlich 
zu bezeichnende Kernfaden folgen und aus diesem soll sich das 
Bukett mit der reduzierten Schleifenzahl entwickeln. Schliesslich 
aber werden nach dem Bukett die Kerne mit der diploiden 
Chromosomenzahl aufgeführt. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 


Was Schellenberg (11) zu dem höchst merkwürdigen 
Vorkommnis, dass die im Bukett vollzogene Reduktion wieder 
aufgehoben wird, bemerkt, ist folgendes (S. 448): „Die zum Teil 
verschieden langen Schleifen (d. h. des Buketts) spalten sich an- 
scheinend sehr bald, nachdem sie sich aus dem Knäuel losgelöst 
haben, der Quere nach und stellen sich wiederum mit ihren freien 
Enden auf den synaptischen Kernpol ein, an dem auch der 
Nukleolus liegt“. Beweise aber dafür, dass sich der vermutete 
Vorgang wirklich abspielt, vermissen wir ganz und gar. Die Tat- 
sache, dass sich die Bukettfäden bald der Quere nach durchteilen, 
soll dadurch erwiesen werden, dass je eine Schleife der beiden ab- 
gebildeten Bukettstadien einen Querspalt zeigt. Wir wollen ganz 
davon absehen, dass auch wir. solche quere Dehiszenzen in den 
reduzierten Elementen hier und da gesehen haben, ohne den 
geringsten Anhaltspunkt dafür zu finden, dass die Doppelelemente 
wieder in ihre Komponenten auseinander fallen, sondern wollen 
nur daran erinnern, dass auch vor Schellenberg (11) z.B. 
von Popoff (07) bei Paludina quere Unterbrechungen in den 
reduzierten Schleifen der. frühen Oogenese beobachtet worden 
sind und dass dieser Erscheinung niemand die ihr von Schellen- 
berg zuerkannte Bedeutung beigelegt hat. Wollte Schellen- 
berg (11) gegenüber der geltenden Anschauung, dass die quere 
Unterbrechung lediglich der Ausdruck der Zusammensetzung der 
Chromatinelemente aus zwei endvereinigten Chromosomen sei, 
eine neue Interpretation geben, so hätte er zeigen müssen, dass 
die quere Unterbrechung an den Schleifen seines Buketts besonders 
häufig auftrete und besonders weit klaffe, er hätte Übergänge von 
dem reduzierten Bukett zu dem nichtreduzierten suchen und demon- 
strieren müssen. Keine dieser selbstverständlichen Forderungen 
ist von ihm erfüllt worden. Nach dem Bukett wird ganz un- 
vermittelt, ohne dass irgend eine Beziehung zu diesem herstellbar 
wäre, ein Kern gezeigt, der regellos gelagerte kürzere Chromo- 
somen in der Normalzahl enthält. Er ist noch dazu kleiner als 
die vorhergehenden Stadien und muss daher eine Ausnahme gegen- 
über den anderen bilden, für die es offenbar allein gelten kann, 
dass die Kerngrösse der Oozyte „während der eben beschriebenen 
Phase“, d. h. während unserer ersten Periode der Oogenese, „von 
etwa 6 auf 11 « Durchmesser hinaufgegangen“ ist. Was die 
weitere Tatsache betrifft, dass die Ühromosomen, nachdem sie aus 

4* 


52 F. Wassermann: 


der Reduktion wieder befreit sind, nochmals eine polare Orientierung 
erfahren, so ist dies ja von untergeordneter Bedeutung im Hin- 
blick auf die Seriierung. Es ist zwar richtig, dass in der Fig. 14 
Schellenbergs, der einzigen, die das nicht reduzierte Bukett 
vorführt, einige, durchaus nicht alle Schleifen bügelförmig gegen 
den Nukleoluspol gekehrt sind. Auf Grund unserer Erfahrung, die 
uns in dem in der Fig. 54 abgebildeten Kern ein Beispiel dafür 
gibt, dass auch die Kerne mit der nichtreduzierten Chromosomen- 
zahl gelegentlich einmal eine einseitige Zusammendrängung ihres 
Inhalts bei der Fixierung erfahren können, die dann den Anschein 
einer polaren Orientierung ergibt, müssen wir sagen, dass die 
Schellenbergsche einzige nichtreduzierte Bukettfigur höchst 
wahrscheinlich bloss eine rein äusserliche Ähnlichkeit mit dem 
wahren Bukett besitzt. Dass die Chromosomen hier im Gegen- 
satz zu denen des Kerns der Fig. 13, wo sie „noch nicht“ polar 
orientiert sind, einseitig zusammengeschoben sind, sieht man ja 
ohne weiteres. Es ist überdies gar nicht unmöglich, dass es sich 
bei dem Kern der Fig. 14 von Schellenberg um ein durch 
die Fixierung alteriertes Knäuelsegmentierungsstadium handelte. 
Jedenfalls kann ein so ungewöhnliches Kernbild. wie es ein nicht- 
reduziertes Bukett wäre, nicht durch eine einzige Figur als wirk- 
lich existierend erwiesen werden. Es ist also von Schellenberg 
gar kein Anhaltspunkt dafür beigebracht worden, welcher es recht- 
fertigen würde, die Kerne mit der Uhromosomennormalzahl als 
aus dem Bukett hervorgegangen zu bezeichnen. 

Nur ein Moment könnte angeführt werden, das die Seriierung 
Schellenbergs begreiflich erscheinen lässt. Der Autor fand 
nämlich nach dem Ruhekern der Hauptwachstumsperiode in der 
Prophase der ersten Reifungsteilung gelegentlich anstatt der 
reduzierten Anzahl von Chromosomen die Normalzahl derselben 
und sieht hierin eine Bestätigung der Existenz des Gold- 
schmidtschen „Primärtypus“ der Reduktion. Diese Tatsache 
würde freilich verständlicher sein, wenn in den Ruhekern der 
Oozyte die nichtreduzierte Chromosomenzahl einträte und erst 
kurz vor der ersten Reifungsteilung nach dem Ophryotrocha-Typus 
von Korschelt (95) eine Tetradenbildung, deren gelegentliches 
Unterbleiben dann nichts Befremdendes an sich hätte, erfolgen 
würde. Dass solche Erwägungen Schellenberg in seiner Aulf- 
fassung der frühen Oogenese beeinflusst haben, erscheint nicht 


[sb 
o 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 


unmöglich. Es sei zunächst dahingestellt, ob das sporadische 
Auftreten des „Primärtypus“ in den Eiern von Fasciola hepatia 
einwandfrei erwiesen ist, jedenfalls kann der Umstand, dass gewisse 
Vorkommnisse der späteren Eireifung besser verständlich wären, 
wenn die vollzogene Reduktion der Chromosomen vor Eintritt 
des Oozyten - Ruhestadiums wieder aufgehoben würde, nun und 
nimmer als Beweis dafür gelten, dass die Wiederaufhebung der 
Reduktion wirklich stattfindet. Wenn somit die Berechtigung der 
von Schellenberg getroffenen Seriierung nicht erwiesen ist, 
so steht der Annahme kein Hindernis entgegen, dass 
dieselben Stadien bei Fasciola hepatica und bei 
Zoogonus auch dieselben genetischen Beziehungen 
zueinander haben. 

Wir können also sagen, dass die frühen oogene- 
tischen Kernveränderungen bei Zoogonus mirus und 
bei Fasciola hepatica im grossen und ganzen in 
gleicher Weise ablaufen. Die von Schellenberg (11) 
gelieferte Beschreibung der Oogenese von Fasciola hepatica stimmt 
nur insofern nicht mit den von uns dargestellten entsprechenden 
Vorgängen bei Zoogonus überein, als hier die Hauptstadien der 
Entwicklung in weitaus klareren Bildern zur Anschauung gebracht 
werden konnten, was zum Teil auf bessere Fixierungsresultate 
zurückzuführen sein dürfte, und dass ferner bei Zoogonus auch 
die die Hauptstadien verbindenden Übergangsbilder aufgefunden 
werden konnten, wodurch eine richtige Seriierung der Entwicklungs- 
stadien überhaupt erst möglich wurde. 


d) Allgemeiner Teil. 
1. Die Entstehung der reduzierten Chromatinelemente. 
«) Der gegenwärtige Stand der Frage. 

Meves (07) hat die Anschauung vertreten, dass die Tat- 
sache der numerischen Chromosomenreduktion vorerst nicht erklärt 
werden könne. Man dürfe lediglich sagen, dass in der Prophase 
der ersten Reifungsteilung nicht wie in den entsprechenden Stadien 
der somatischen Mitosen die für die betreffende Art spezifische 
Zahl von Chromatinelementen, sondern nur die Hälfte derselben 
aus dem Prophasenknäuel hervorgehe. 

Mit diesem Standpunkt befindet sich Meves im Gegensatz 
zu der allgemein angenommenen, zuerst durch die Befunde von 


54 F. Wassermann: 


Henking im Jahre 1891 nahegelegten Vorstellung, dass die 
Chromosomen der ersten Reifungsteilung bivalente Elemente sind, 
entstanden durch eine Koppelung je zweier Einzelchromosomen. 

Was aber die Art der Chromosomenpaarung betrifft, so 
gehen hierüber bekanntlich die Anschauungen nach den zwei 
möglichen Richtungen auseinander. 

vom Rath (92), Haecker (93) und Rückert (94) haben 
angenommen, dass ein kontinuierlicher Knäuel in der Prophase 
der ersten Reifungsteilung in die haploide Anzahl von Uhromatin- 
elementen zerfalle, wobei immer zwei Chromosomen miteinander 
endweise verbunden bleiben. Später glaubte dann Montgomery 
(03) zeigen zu können, dass in dem Synapsisstadium je zwei bis 
dahin getrennte Chromosomen mit ihren Enden zusammentreten. 
Beide Anschauungen fallen unter den Begriff der Theorie von der 
Endvereinigung der Chromosomen (end to end — Konjugation, 
Metasyndese). Die neueren Verfechter dieser Anschauung sind 
insbesondere Montgomery, Farmer und Moore, Foot und 
Strobell, Wassilieff, Popoff, Goldschmidt und 
Buchner. 

Die weitaus grössere Zahl der Untersucher steht aber auf 
dem zweiten Standpunkt, der in der Theorie von der parallelen 
Konjugation der Chromosomen (Parasyndese) gegeben ist. Als 
die Hauptvertreter dieser Richtung seien genannt: Gregoire, 
Jannsens, A. undK.E. Schreiner, K. Bonnevie, v. Wini- 
warter, Lundegärdh, Strasburger und Vejdovsky. 

Man muss mit Rücksicht auf die Frage, ob eine der beiden 
Reifungsteilungen eine Reduktionsteilung im Sinne Weismanns 
ist oder ob keine echte qualitative Chromosomenreduktion erfolgt, 
hervorheben, dass die genannten Vertreter der Theorie der 
Parallelkonjugation wieder in verschiedene Gruppen zerfallen, je 
nachdem sie annehmen, dass lediglich eine Paarung der Chromo- 
somen vor sich geht, dass der die Paarlinge trennende Längsspalt 
sich bis zur ersten Reifungsteilung erhält und dann an Stelle eines 
äquationellen Längsspaltes der gewöhnlichen Mitose in die Äquatorial- 
ebene der ersten Reifungs- und also Reduktionsteilung eingestellt 
wird, oder ob sie, wie namentlich Bonnevie und Vejdovsky, 
erklären, dass die Vereinigung der Paarlinge bis zur völligen 
Verschmelzung zu einem Mixochromosom fortschreitet, welches dann 
in den beiden Reifungsteilungen zweimal äquationell geteilt wird. 


O1 
or 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 


Diese Frage ist aber für unsere Betrachtung nicht von 
Belang, ebensowenig wie die zuerst von Montgomery auf- 
gestellte und mit beiden Arten der Chromosomenpaarung verein- 
bare These der Konjugation je eines väterlichen und mütterlichen 
Chromosoms in der reifenden Geschlechtszelle, in der bis zum 
Moment der Herabsetzung der Chromosomenzahl die elterlichen 
Elemente unabhängig voneinander bestehen sollen. 

Über den Zeitpunkt der Chromosomenpaarung liegen ver- 
schiedene Angaben vor. Nach dem Vorgang Montgomerys 
haben auch Vertreter der Parasyndese die Reduktion in das 
Synapsisstadium verlegt; insbesondere v. Winiwarter und 
Sainmont (09) haben für die Säugetieroogenese eine solche 
synaptische Syndesis (Häcker) beschrieben. Die meisten Unter- 
sucher, wie z. Be Gregoire, Bonnevie, Jannsens und 
Vejdovsky, verlegen die Paralleikonjugation aber an den 
Anfang der Gonozytogenese, indem sie nach dem Vorgang von Stras- 
burger und insbesondere von A. und K.E. Schreiner, welch 
letztere diesen Typus zuerst in den Spermatozyten von Toomopteris 
festgestellt haben (Tomopteristypus), annehmen, dass innerhalb des 
feinfädigen Kerngerüstes der jungen Geschlechtszellen (Leptonema) 
sich die Uhromosomen in Gestalt parallel und paarweise ange- 
ordneter Fäden herausdifferenzieren (Zygonema), also die Paarung 
vor dem Synapsisstadium und unabhängig von ihm an den gewisser- 
massen in statu nascendi befindlichen Chromosomen vor sich gehe 
(präsynaptische Parasyndese nach Häcker). 

Die Mehrzahl der Untersucher der tierischen und pflanzlichen 
(sonozytogenese ist also für die Theorie der Parallelkonjugation 
eingetreten, und es waren gerade führende Männer auf diesem 
(Gebiete, wie Gregoire und Strasburger, welche diese 
Theorie aufgegriffen und in Gemeinschaft mit ihren Schülern aus- 
gebaut haben. Weiterhin haben Gregoire und das Ehepaar 
Schreiner, nachdem sie einmal die Überzeugung von der 
Existenz der Parasyndese gewonnen hatten, diesen Vorgang bei 
einer ganzen Reihe von Objekten zu demonstrieren versucht. Dass 
die genannten Autoren bei diesem Bemühen aber auch fehlgegangen 
sein können, das beweist der Fall des Zoogonus mirus, and wir 
müssen gerade darauf später noch hinweisen. 

Die neueren Untersucher der frühen Gonozytogenese haben, 
wahrscheinlich zum Teil unter dem Einfluss der als Arbeits- 


56 F. Wassermann: 


hypothese dienenden Vorstellung von der Parasyndese, eine Reihe 
von morphologischen Details ermittelt, die mit der genannten 
Theorie zunächst im besten Einklang zu stehen scheinen, wenn 
man die Bedenken, die wir später namhaft machen werden, und von 
denen einige von Fick (08), Goldschmidt (08) und Meves (08) 
schon hervorgehoben worden sind, nicht für beachtenswert genug 
gegenüber den vorgebrachten positiven Argumenten hält. Von 
der grossen Zahl der zugunsten der Parasyndese sprechenden 
Beobachtungen gewinnt man einen vollständigen Eindruck aus 
der Übersicht, die sich in der kritischen Zusammenfassung 
Gre&goires (05, 10) darüber findet. Wie entschieden ferner 
die Hauptvertreter der Theorie von der Parasyndese ihre Über- 
zeugung verfechten, davon legen die Arbeiten von A. und 
K. E. Schreiner (siehe 08) und namentlich auch die im vorigen 
Jahre erschienene Schrift von Vejdovsky (12) Zeugnis ab. 
Die Theorie der Metasyndese hat demgegenüber keine starken 
Stützen aufzuweisen. Die Angriffe, welche man gegen die Parallel- 
konjugation gerichtet hat, können doch nur mittelbar der gegen- 
teiligen Anschauung gutgeschrieben werden, und wie aus dem 
oben Gesagten hervorgeht, gehört einer der Hauptgegner der 
Parasyndese, nämlich Meves, nicht etwa zu den Anhängern der 
anderen Anschauung über die Chromosomenkopulation, sondern 
dieser Autor hält überhaupt keine der beiden hypothetischen 
Möglichkeiten für erweisbar. Fick (06) kommt in seinem 
kritischen Referat vom Jahre 1906 bei der Besprechung dieser 
Frage zu dem Schluss, „dass einstweilen weder die ‚parallele‘ 
noch die ‚endweise‘ Konjugation der Chromosomen im Frühstadium 
der Reifeteilung wirklich bewiesen ist“. Es ist dabei charakte- 
ristisch dafür, dass sich der Stand der Diskussion zuungunsten 
der Theorie von der Metasyndese verschoben hat, wenn Fick 
zwar mit den Beweisen der Anhänger der Parallelkonjugation, 
besonders mit den von A. und K. E. Schreiner beigebrachten 
Beobachtungen, sich kritisch auseinandersetzt, aber auf die Arbeiten 
der Autoren, welche die Endvereinigung vertreten, nicht näher 
eingeht. Eine ähnliche Haltung nimmt Häcker (09) in seiner 
zusammenfassenden Betrachtung über die Chromosomen als an- 
genommene Vererbungsträger vom Jahre 1909 ein. Zwar steht auch 
er den Argumenten v. Winiwarters und der anderen Autoren 
dieser Richtung skeptisch gegenüber und glaubt nicht, „dass die 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 57 


vorgebrachten Argumente zwingender Natur sind“ (8. 86). Aber 
für die Metasyndese, eine Anschauung, die Häcker, wie bereits 
erwähnt, selber mitbegründet hat, vermag auch er keine positiven 
Argumente beizubringen und kommt bei der Diskussion der dies- 
bezüglichen Kontroverse zu einem vorsichtigen, einen Kompromiss 
darstellenden Schluss, wenn er sagt: „Alles in allem möchte ich 
auf Grund eigener, bei verschiedenen Objekten gesammelter Er- 
fahrungen glauben, dass allerdings bei manchen Formen 
schon in den präsynaptischen und synaptischen Stadien die Paarung 
je zweier Uhromosomen perfekt geworden sein kann... ., dass aber 
bei der Mehrzahl der Objekte die in der frühen Synapsis 
zutage tretende Doppelfadenstruktur auf einer frühzeitigen Längs- 
spaltung beruht, und dass also im ganzen die Faltungstheorie im 
Recht ist, wenn sie die Bildung des dickfädigen synaptischen 
Knäuels auf eine vorübergehende Verschmelzung der Spalthälften 
und die Entstehung der diakinetischen „gemini“ auf eine Meta- 
syndese und eine darauffolgende Umbiegung und Durchbrechung 
der bivalenten Elemente zurückführt“. Wenn ein Autor wie 
Häcker, den wir doch zu den Hauptvertretern der Theorie der 
Metasyndese rechnen müssen, im Gegensatz zu der entschiedenen 
Haltung von Gregoire, Schreiners, Vejdovsky dem 
zitierten Satze gemäss einen mehr zurückhaltenden, vorsichtigen 
Standpunkt zu gewinnen trachtet, so muss er dazu wohl seine 
guten Gründe haben. Und es sind wirklich keine Tatsachen ins 
Treffen zu führen, die als entscheidende Beweise für die Existenz 
einer Metasyndese gelten könnten. Zumeist finden wir, dass die 
Autoren mit dem von Rückert (94) bei seiner Untersuchung 
über die Eireifung der Copepoden eingeführten Argument des 
Tetradenquerspalts für die Metasyndese eintreten, wobei allerdings 
diese Beobachtung nunmehr auch für die Schleifen des Bukett- 
stadiums vielfach erhoben wurde (Popoff [07], Buchner [09]; 
hier S. 349 diesbezügliche Literaturangaben).. Man muss aber 
bedenken, dass eine Querlichtung im reduzierten Element nur 
einen Schluss auf seine Entstehung zulässt, keineswegs ist damit 
eine Beobachtungstatsache über die Entstehung der Tetraden 
selbst beigebracht. Somit ist dieses Argument jenen Beobachtungen 
nicht gleichzustellen, welche z. B. Schreiners für die Parallel- 
konjugation bei Tomopteris erhoben haben; denn diese sollen, 
wenigstens nach der Meinung der genannten Autoren, den Vor- 


58 F. Wassermann: 


gang der Parallelkonjugation direkt demonstrieren. Dazu kommt 
noch, dass dieses Hauptargument der Metasyndese an Bedeutung 
viel verloren hat, nachdem Lerat (05) bei Copepoden gerade 
auch hinsichtlich der Entstehung der Doppelchromosomen eine 
andere Anschauung gewonnen hat als Rückert und nachdem 
Gregoire und Deton (06) der Auffassung von Korschelt 
über die Tetradengenese bei Ophryotrocha puerilis widersprochen 
haben. So sagt denn auch Vejdovsky (12, S. 145): „Die 
Querkerben stellen offenbar ein charakteristisches Merkmal der 
CUhromosomen von Üyclopiden und vielleicht auch einigen Ascariden 
vor, deren Bedeutung aber noch nicht klar genug ist. Am 
wenigsten vermag ich aber der Anschauung Häckers beizu- 
pflichten, dass man in der Querkerbe ein Merkmal der statt- 
gefundenen ‚Metasyndese‘ suchen soll“. Vejdovsky scheint 
allerdings in der Ablehnung der Bedeutung des Tetradenquer- 
spaltes zu weit zu gehen, da doch diese Erscheinung gar nicht 
bloss bei Uyclopiden und einigen Ascariden vorkommt, sondern 
mit Einschluss der an pachytänen Schleifen beobachteten Quer- 
kerben viel weiter verbreitet sein dürfte; aber im allgemeinen 
wird man Vejdovsky keine schwerwiegenden Einwände machen 
können, wenn er sagt: „Die meisten neueren Forscher, welche die 
„parallele“ Konjugation ablehnen, gelten als warme Anhänger der 
„end to end“ Konjugation, obwohl es meist schwierig ist, aus deren 
Darstellungen diese Annahme als wahrscheinlich anzuerkennen“. 

Aus all dem Angeführten ergibt sich, dass gegenwärtig dem 
Fernerstehenden die Theorie von der Parallelkonjugation als die 
herrschende - erscheinen muss. 

Man sollte aber doch bedenken, dass die Vertreter dieser 
Anschauung sich auf die Deutung von frühen, schwer analysier- 
baren Gonozytenstadien stützen und dass ein Beweis für die 
Richtigkeit dieser Deutung bislang noch nicht erbracht ist, dass 
andererseits Einwände gegen die Theorie von Seite erfahrener 
Forscher gemacht worden sind. Dazu kommt ferner, dass der 
von Gregoire (09) und Schreiner (08) für ihre Anschauung 
in Anspruch genommene Fall des Zoogonus mirus der Theorie 
der Parasyndese durchaus nicht angepasst werden kann. 

Unter diesen Umständen können wir es nicht für gerecht- 
fertigt halten, dass Vejdovsky die Diskussion über die Frage 
nach der Entstehung der sogenannten heterotypischen Chromo- 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. A) 


somen endgültig geschlossen wissen möchte, wenn er sagt (l. c. 
S. 145): „Obwohl wir schon den strikten Beweis durch Tatsachen 
geführt haben, dass es keine mit der Parallelkopulation ver- 
gleichbare endweise Chromosomenpaarung gibt, so müssen wir 
doch in Anbetracht der Anschauungen Häckers die Frage näher 
erörtern, um die angenommene „Metasyndese“ in der 
hier besprochenen Fassung definitiv aus der Zyto- 
logie zu eliminieren“ (vom Ref. gesperrt). Wir werden 
demgegenüber zeigen, dass die von uns über die frühe Oogenese 
von Zoogonus mirus ermittelten Tatsachen einer Eliminierung 
der Metasyndese aus der Zytologie im Wege stehen und wir 
werden, weil uns dies durch den gegenwärtigen Stand der Frage 
geboten erscheint, im Anschluss daran’ auf verschiedene Einwände 
aufmerksam machen, die gegen die Annahme einer Parasyndese 
auch heute noch mit Recht erhoben werden können. 

Stevens (05) behauptet an Sagitta bei der Eireifung 
parallele und bei der Samenreifung endweise Konjugation fest- 
gestellt zu haben. Nun meinte Heider (zitiert nach Fick [06]), 
solche Beobachtungen beweisen, „dass dieser Verschiedenheit in 
der Art der Aneinanderfügung der homologen Chromosomen keine 
prinzipielle Bedeutung zukommt“. Dieselbe Anschauung spricht 
eigentlich auch aus dem oben zitierten Satz Häckers. In 
neuester Zeit endlich hat v. Kemnitz (13) eben dieselbe ver- 
mittelnde Stellung eingenommen, weil er auf Grund von Be- 
obachtungen bei seinem Objekt (Brachycoelium salamandrae) es 
für ein häufiges Vorkommnis halten möchte, dass nach voraus- 
gegangener Endvereinigung das bivalente Element im Bukett- 
stadium bis zur Parallellagerung seiner beiden Komponenten 
abgebogen wird und dass also Metasyndese und Parasyndese bei 
einem Objekt nacheinander eintreten können. Es ist ja richtig, 
dass zunächst gerade im Hinblick auf die Hauptfrage der (Grono- 
zytogenese, nämlich die Frage nach der Bedeutung der Reifungs- 
teilungen für eine etwaige Reduktion der Chromosomen im Sinne 
Weismanns, der Streit über die Entstehung der Chromosomen 
der ersten Reifeteilung unwichtig erscheinen könnte, weil nämlich 
der Endeffekt in dieser Hinsicht derselbe sein kann, ganz gleich, 
ob man eine Metasyndese mit nachherigem Umbiegen der Kom- 
ponenten, also einen sekundären Parallelismus der Paarlinge 
(Faltungstheorie) oder eine von Anfang an bestehende parallele 


60 F. Wassermann: 


Aneinanderlagerung der kopulierten Chromosomen annimmt, voraus- 
gesetzt, dass man mit Gr&goire die Entstehung von Mixochromo- 
somen ablehnt. 

Aber gegenüber der Möglichkeit eines solchen Kompromisses 
zwischen Metasyndese und Parasyndese muss man entschieden 
darauf hinweisen, dass zwischen den beiden hypothetischen Arten 
der Chromosomenkopulation von einem allgemein zytologischen 
Standpunkt aus wohl ein prinzipieller Unterschied ‚besteht. Wir 
werden versuchen, diesen prinzipiellen Unterschied im Verlaufe 
unserer Erörterung hervorzuheben. 


3) Die Frage nach der Entstehung der reduzierten Elemente bei 
Zoogonus mirus. 


Wir haben die Entstehung der am Schlusse der ersten 
Periode der Oogenese zum Bukett geordneten reduzierten Schleifen 
eingehend dargestellt und es ist nunmehr die Frage zu beant- 
worten, wie sich diese Beobachtungen zu dem oben skizzierten 
gegenwärtigen Stand der Frage nach der Entstehung der nume- 
rischen Chromosomenreduktion überhaupt verhalten. 

Ihren unmittelbaren Ausgang nehmen die sechs. Schleifen 
des Buketts von dem kontinuierlichen Knäuel, dieser aber wird 
durch das Zusammentreten von zwölf Chromatinteilen gebildet. 

Es ist klar, dass wir bei dieser Sachlage von einer Para- 
syndese nicht sprechen können. Stadien, die für sich allein be- 
trachtet, eine Parallelkonjugation im Sinne des „Tomopteristypus“ 
nahelegen würden, haben wir ebenso wie A. und K. E. Schreiner 
(08) und Gregoire (09) auch unsererseits bei Zoogonus zu ver- 
zeichnen (Fig. 21 und 22). Aber, wenn wirklich hier zwei Fäden 
zur Bildung eines Chromosoms zusammentreten, so sind es uni- 
valente Chromosomen, die aus der Fadenpaarung hervorgehen und 
diese Parallelfädigkeit hat somit nichts mit der Chromosomen- 
koppelung zu tun, sondern ist jenen frühesten doppelfädigen 
Prophasenstadien gleichzustellen, wie sie z. B. im Zyklus der 
somatischen Mitosen von Lundegärdh (13) und von v. Schustow 
(13) bei Allium cepa einwandfrei festgestellt worden sind. 

Wenn wir somit eine parasyndetische Entstehung der pachy- 
tänen Schleifen ganz entschieden von der Hand weisen können, 
so bleibt die weitere Frage, ob wir andererseits von einer Meta- 
syndese im eigentlichen Sinne sprechen dürfen, oder ob wir uns 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 61 


bei dem Standpunkt von Meves bescheiden und auch in unserem 
Falle einfach die Tatsache registrieren müssen, dass eben aus 
dem kontinuierlichen Knäuel nicht die diploide, sondern die 
haploide Anzahl von Elementen hervorgeht. Wir können ja eine 
Metasyndese nur dann behaupten, wenn wir Anhaltspunkte dafür 
haben, dass wirklich je zwei ursprüngliche Chromosomen mit 
ihren Enden zusammengetreten sind oder dass bei der Segmen- 
tierung des Knäuels immer je zwei seiner Komponenten miteinander 
in Verbindung geblieben sind. Letztere Bedingung müsste in 
unserem Fall erfüllt sein, damit wir hier eine Metasyndese an- 
nehmen dürften. Die direkte Beobachtung lässt uns bei dem 
Versuch, diese Frage zu entscheiden, im Stich. Aber es wird 
nicht unverständlich sein, dass man gerade angesichts der vor- 
liegenden Stadien die gestellte Frage nicht ohne weiteres offen 
lässt oder sich gar dem resignierten Standpunkt von Meves 
anschliesst. Sehen wir doch hier, dass zwölf Elemente in den 
Knäuel eintreten und deren sechs aus ihm hervorgehen. Sollten 
wir da annehmen müssen, dass die Segmentierung des Fadens 
an ganz beliebigen Punkten ohne Beziehung zu den Vereinigungs- 
stellen der ursprünglichen Chromosomen vor sich gehe? Diese 
Möglichkeit dünkt uns gegenüber der anderen, dass je zwei 
Elemente miteinander verbunden bleiben, als die unwahrschein- 
lichere und zwar aus folgenden Gründen. 

Wir müssen uns erstens vor Augen halten, dass die Zer- 
teilung des Fadens gerade in sechs Segmente ein gesetzmässiger 
Vorgang ist, dessen regelmässiger Ablauf an bestimmte, in jedem 
Fall gleichartige Bedingungen geknüpft sein muss. Die eigent- 
liche Ursache dieses gesetzmässigen Vorganges kennen wir nicht. 
Aber wir kennen eine für jeden Knäuel vorhandene Bedingung 
für seine Zerteilung in sechs Abschnitte und diese ist in seiner 
Zusammensetzung aus zwölf Elementen gegeben. Damit haben 
wir zwei Tatsachen, die Zusammensetzung und Zerteilung des 
Knäuels, deren ursächliche Verknüpfung sehr nahe liegt, weil 
dadurch allein die Gresetzmässigkeit der Segmentierung auf eine 
einfache Weise verständlich wird, während sie uns ganz rätsel- 
haft erscheinen müsste, wenn wir den ursächlichen Zusammen- 
hang zwischen den beiden bekannten Faktoren leugnen würden. 
Nehmen wir aber diese zunächst liegende Auffassung an, so 
deuten wir den Vorgang im Sinne der Metasyndese. Das Gesagte 


62 F. Wassermann: 


lässt sich auch in der Überlegung ausdrücken, dass die Aufgabe, 
eine aus zwölf Segmenten bestehende Kette regelmässig und mit 
absoluter Sicherheit in sechs Teile zu zerlegen, auf keine ein- 
fachere Weise zu lösen ist als durch die Zerteilung der Kette 
zwischen je zwei Gliedern derselben. 

Zweitens ist es doch wahrscheinlich, dass die Nahtstellen 
zwischen den einzelnen Chromosomen auch beim sekundären Durch- 
brechen des Knäuels Prädilektionsstellen für die Entstehung von 
Querkerben sein werden; dies wäre insbesondere dann der Fall, 
wenn der Knäuel nicht lange bestehen bleiben sollte, wofür ja 
der Umstand spricht, dass man ihn nur sehr selten zu Gesicht 
bekommt. 

Dann aber ist drittens zu bedenken, dass vielleicht nicht 
einmal in unserem Falle immer ein kontinuierlicher Knäuel ge- 
bildet wird. Wir haben einen solchen konstatiert und mussten 
daher bei der Seriierung unserer Stadien den kontinuierlichen 
Knäuel zwischen den primär und den sekundär gekerbten ein- 
setzen. Aber nichts ist wahrscheinlicher, als dass auch bei 
unserem Objekt öfters und bei anderen Objekten vielleicht in 
der Regel ein abgekürztes Verfahren eingeschlagen wird, dass 
der segmentierte Faden. in dem sämtliche Chromosomen gegen- 
einander abgesetzt sind, wieder zerfällt, bevor die einzelnen 
Komponenten miteinander verlötet sind. Und in diesem Falle 
könnte doch nur von einer Endvereinigung je zweier Chromo- 
somen die Rede sein. Denn man wird doch nicht zu der ge- 
zwungenen, Annahme greifen wollen, dass einmal ein einziges 
Chromosom für sich und dafür drei andere miteinander in be- 
liebiger Kombination aus der Segmentierung hervorgehen und 
dass trotzdem immer sechs Segmente entstehen können. 

Dazu kommt dann noch viertens der Anhaltspunkt, den uns 
jene Querlichtungen an die Hand geben, die wir des öfteren inner- 
halb der reduzierten Schleifen demonstrieren konnten und die wir 
dem von Buchner (09) und anderen an den pachytänen Schleifen 
beobachteten Querspalt gleichsetzen können. Es ist dabei ganz 
gleichgültig, ob wir in diesen Querlichtungen bestehen gebliebene 
primäre Kerben vor uns haben, oder ob sie der Ausdruck dafür 
sind, dass der kontinuierliche Knäuel hie und da gewissermassen 
den Versuch macht, sich in seine sämtlichen Komponenten zu 
gliedern. Für unsere gegenwärtige Betrachtung ist folgendes von 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 63 


Wichtigkeit. Wenn der Knäuel an beliebigen Stellen durchbricht, 
so müssen solche Querkerben unter Umständen auch zu mehreren 
innerhalb eines Segmentes auftreten können, und sie werden an 
beliebigen Stellen des Segmentes, ein oder das andere Mal auch 
ganz nahe seinem Ende, gelegen sein. Im anderen Fall aber, 
wenn der Knäuel zwischen je zweien seiner Komponenten durch- 
bricht, dann darf, unter der Voraussetzung, dass die (Querkerben 
die Bedeutung. haben, die wir ihnen zuerkennen, ein Segment 
niemals mehr als eine solche Dehiszenz aufweisen, und sie muss 
wenigstens annähernd in der Mitte seines Verlaufes gefunden 
werden. Diese Bedingungen sind nun in allen Fällen von solchen 
Querkerben innerhalb der reduzierten Elemente, die wir demon- 
striert haben, erfüllt (siehe Fig. 34, 35 und 36). 

Schliesslich können wir noch daran erinnern, dass die ge- 
wichtigen Gründe, die für eine Individualität der Chromosomen 
überhaupt sprechen (Boveri [04]), auch hier zugunsten einer 
Endvereinigung je zweier Individuen und gegen die Möglichkeit 
einer die Knäuelkomponenten nicht berücksichtigenden Zerfällung 
des Fadens angeführt werden können. 

Zum Schlusse dieser zugunsten der Metasyndese sprechenden 
Auseinandersetzung wollen wir noch einer Methode gedenken, die 
uns an und für sich sehr geeignet erscheinen würde, die soeben 
behandelte Frage in einer viel exakteren Weise, als dies durch 
Indizienbeweise von der angeführten Art möglich ist, aufzuklären. 
Die geringe Anzahl von Fällen, die der zu schildernden Methode 
unterzogen werden konnten, und die im Objekt liegenden Schwierig- 
keiten, welche die Genauigkeit des Verfahrens beeinträchtigen, 
gestatteten uns freilich nicht, den erhofften Erfolg dabei zu 
erzielen; wenn wir trotzdem das eingeschlagene Verfahren zu 
schildern nicht unterlassen, so geschieht dies in der Überzeugung, 
dass es in anderen günstiger gelagerten Fällen von Vorteil sein 
müsste. 

Wenn man imstande ist, vergleichende Messungen der 
Längen der Knäuelsegmente und der Bukettschleifen anzustellen, 
und dabei zu dem Resultat kommt, dass konstante Relationen 
zwischen diesen Grössen bei den einzelnen Kernen vorhanden sind, 
so wird man es als erwiesen erachten dürfen, dass die Gesetz- 
mässigkeit der Segmentierung des Knäuels nicht allein darin 
besteht, dass überhaupt immer sechs Segmente entstehen, sondern 


64 F. Wassermann: 


auch darin, dass diese Segmente durch eine an bestimmte gesetz- 
mässig festgelegte Punkte des Knäuels gebundene Teilung ent- 
stehen. Und schon dadurch wäre die angenommene Metasyndese 
so gut wie sichergestellt. Denn wenn der Beweis erbracht ist, 
dass die Segmentierung nicht an beliebigen Punkten des Knäuels ein- 
setzen kann, sondern nur an ganz genau determinierten, so könnten 
doch schwerlich andere Stellen des Knäuels in Betracht kommen, 
als die Nahtstellen zwischen den Uhromosomen. Wenn wir aber 
ferner erkennen könnten, dass auch die Segmente des primär 
gekerbten Knäuels zu Paaren hintereinander geordnet, doppel- 
wertige Stücke von eben denselben Längenrelationen ergeben, wie 
die reduzierten Schleifen, dann wäre für unseren Fall der strikte 
Beweis einer Metasyndese erbracht. 

Ein Blick auf die Fig. 39—44 lehrt, dass jedes Bukett eine 
besonders kurze Schlinge enthält. Desgleichen macht es die blosse 
Anschauung schon wahrscheinlich, dass auch ein die anderen 
Schleifen an Länge übertreffendes Element bei der Mehrzahl der 
Bukettformationen vorhanden ist. 

Mit einer solchen Feststellung ist aber kaum eine irgendwie 
verwertbare Erkenntnis gewonnen; denn wenn die Bukettschleifen 
durch Segmentierung des kontinuierlichen Knäuels entstehen und 
diese Segmentierung ganz regellos erfolgen würde, dann wäre es 
ja von vornherein wahrscheinlich, dass unter den sechs Teilstücken 
des Fadens eines das längste und ein anderes das kürzeste sein 
könnte. 

Wenn ’wir den Versuch wagen wollen, zu prüfen, ob bestimmte 
Relationen zwischen den einzelnen Knäuelsegmenten vorhanden 
sind, müssen wir anders zu Werke gehen. Wir müssen in sämt- 
lichen uns vorliegenden Fällen vom sekundär gekerbten Knäuel bis 
zum vollendeten Bukett die Längenmaße der einzelnen Segmente 
ermitteln und die gefundenen Werte miteinander vergleichen. 
Dazu haben wir keine andere Methode als die Messung der mit 
dem Prisma aufgezeichneten Chromatinschleifen, wie sie in unseren 
Figuren vorliegen, in einzelnen jeweils einer Geraden nahe- 
kommenden Teilstücken und die Abtragung dieser Teilmaße auf 
einer Geraden. Dieser Methode haften natürlich ganz bedenkliche 
Fehler an, die uns vor die Frage stellen, ob durch ein so un- 
genaues Verfahren Maße gewonnen werden, die zu weiteren 
Schlüssen verwertet werden dürfen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 65 


Wir haben aber unser Vorgehen noch von einer weiteren 
Voraussetzung abhängig zu machen, und die Prüfung in dieser 
Richtung kann zugleich eine Anschauung davon geben, wie weit 
unsere Methode der Messung zur Ermittlung von Annäherungs- 
werten brauchbar ist. Der Vergleich der gefundenen Längenmaße 
untereinander und ihre Beziehung zum Knäuel in der oben an- 
gegebenen Richtung hat nur dann einen Sinn, wenn wir annehmen 
dürfen, dass die Gesamtlänge der Schleifen eines Buketts gleich 
sei der Gesamtlänge des Knäuels, von dem das Bukett stammt. 
Denn wenn dies nicht der Fall wäre und sich die Segmente nach 
ihrem Freiwerden hinsichtlich der Länge in wechselnder Weise 
veränderten, dann müssten wir unser Vorhaben aufgeben. Eine 
vergleichende Messung in diesem Punkt lässt sich natürlich nur 
dann durchführen, wenn wir Knäuel und Bukettstadium aus dem- 
selben Ovarium besitzen. Denn bei der Grössendifferenz zwischen 
den Kernen aus verschiedenen Ovarien lässt sich nur in diesem 
Fall je ein Bukett und ein Knäuel gleich wie zwei Stadien ein 
und desselben Kernes betrachten. An diese Bedingung geknüpft, 
ist die Messung natürlich nur sehr selten ausführbar, und so ver- 
fügen wir nur über zwei derartige Beispiele; bei einem derselben 
stehen der Knäuellänge allerdings zwei unter sich gleiche Gesamt- 
längen von Bukettschleifen des betreffenden Ovars gegenüber, 
welcher Umstand das Ergebnis des Vergleiches wohl noch ver- 
trauenswürdiger macht. Im ersten Fall (Textfig. 21) ist der Knäuel 
der Fig. 32 und das Bukett der Fig. 42, im zweiten (Textfig. 22 
der Knäuel und die Buketts der Fig. 30, 38 und 39 miteinander 
in Vergleich gesetzt worden. Man sieht, dass die Geraden, auf 
welche die entsprechenden Grössen abgetragen wurden, von bei- 
nahe gleicher Länge sind. Ob man dem Umstand, dass in beiden 
Fällen die Knäuellänge die Gesamtlänge der Bukettschleifen um 
ein Geringes übertrifft, irgend eine Bedeutung zuerkennen darf, 
ist bei unserer groben Methode und an der Hand von nur zwei 
derartigen Fällen nicht zu entscheiden. Wenn dieses Verhalten 
aber die Regel bilden sollte, so wäre es das Wahrscheinlichste, 
dass während der Segmentierung, vielleicht als ein dieselbe unter- 
stützendes mechanisches Moment, jedes Teilstück um einen ge- 
ringen Bruchteil seiner Länge sich verkürzte. Da aber hierbei 
die Relationen zwischen den einzelnen Segmenten sich nicht zu 


verändern brauchen, so können wir trotz dieser Möglichkeit 
Archiv f.mikr. Anat. Bd.S3. Abt. II. h) 


66 F. Wassermann: 


Fig. 21. 
a — Länge des Knäuels der Fig. 32; 
b = Gesamtlänge der Schleifen des 
Buketts der Fig. 42. 


Fig. 22. 
a — Länge des Knäuels der Fig. 30; 
b und c — Gesamtlängen der Bukett- 
schleifen der Fig. 38 und 39. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 67 


die Voraussetzung, dass Knäuellänge und Bukettschleifenlänge 
einander entsprechen, im Hinblick auf unsere Untersuchung für 
gegeben halten. 

Für den ersten Teil unserer Untersuchung, der die Frage 
betrifft, ob die Segmentierung an bestimmte Punkte des Knäuels 
gebunden ist, lassen sich nun gewisse rechnerische Voraussetzungen 
machen. Der Knäuel, d. h. eine Strecke von jeweils bestimmter 
Länge, wird in sechs Teilstücke zerlegt. Die Frage, wie viele 
Teilungsmodi hierbei eingeschlagen werden könnten, ist natürlich 
zunächst dahin zu beantworten, dass deren unendlich viele denk- 
bar sind. Zieht man aber nicht die absoluten Werte der Teilungs- 
produkte, sondern nur deren gegenseitiges Verhältnis im allge- 
meinen in Betracht, so kann man feststellen, dass unter diesem 
Gesichtspunkt nur elf Varianten bei dem Teilungsprozess auftreten 
können, die sich folgendermassen darstellen: 

1. Sämtliche Teilstrecken sind einander gleich. 

Sämtliche Teilstrecken sind untereinander ungleich. 
Von den Teilstrecken sind zwei unter sich gleich und 
vier sind von diesen und unter sich verschieden. 

4. Von den Teilstrecken sind je zwei unter sich gleich und 
zwei von diesen und unter sich verschieden. 
5. Von den Teilstrecken sind je drei unter sich gleich. 
6. Von den Teilstrecken sind drei unter sich gleich und 
drei von diesen und unter sich verschieden. 
. Von den Teilstrecken sind drei und zwei unter sich 
gleich und eine von beiden Gruppen verschieden. 
Ss. Von den Teilstrecken sind je zwei unter sich gleich. 
9. Von den Teilstrecken sind vier unter sich gleich und 
zwei unter sich gleich. 

10. Von den Teilstrecken sind vier unter sich gleich und 

zwei von diesen und unter sich verschieden. 

11. Von den Teilstrecken sind fünf unter sich gleich und 

eine davon verschieden. 

Wir haben also zuzusehen, ob bei der Segmentierung unseres 
Knäuels regelmässig einer von diesen elf Teilungsmodi einge- 
schlagen wird. Ist dies der Fall, dann würden wir die gestellte 
Frage, ob die Segmentierung an bestimmte Punkte des Fadens 
gebunden ist, bejahen können. Wenn dem aber so wäre, so hätten 
wir weiterhin zu bedenken, dass jede dieser Teilungsformen in 

5* 


aD 


—I] 


63 F. Wassermann: 


unzähligen Varianten verwirklicht sein kann, wovon man sich 
sofort überzeugen kann, wenn man irgend einen der elf Fälle auf 
bestimmte Grössen anwendet. Wenn also in unserem Fall bei der 
Teilung des Knäuels eine Regelmässigkeit im Längenverhältnis 
der einzelnen Segmente zutage treten sollte, dann muss sie zu- 
nächst in dem regelmässigen Auftreten eines der elf Teilungsmodi 
ausgedrückt sein, kann aber weiterhin noch bestimmter festgelegt 
sein in irgend einer Variante der allgemeinen Form. 

Nach diesen Vorbemerkungen wollen wir an die Vergleichung 
der gewonnenen Messungsresultate herantreten. Sie sind in den 
Textfig. 23—34 niedergelegt und es ist bei jeder Maßtabelle an- 
gegeben, welcher Oozytenkern ihr jeweils zugrunde liegt. 

Bei der schon betonten Unzulänglichkeit unserer Methode, 
die uns zwingt, die aus der Horizontalebene vielfach abweichenden 
Fäden in ihrer Projektion auf die Horizontale zu messen und die 
krummen Linien in eine Anzahl von kleinen einer Geraden gleich- 
zusetzenden Strecken mit dem Zirkel abzuteilen, lässt sich nur 
folgendes aussagen: Wahrscheinlich würde sich bei einer viel 
grösseren Anzahl von Messungen herausstellen, dass immer zwei 
oder immer drei von den Knäuelsegmenten und Bukettschleifen 
untereinander gleich sind und dass von den übrigen ein Element 
durch besondere Kürze auffällt, so dass es sich zu einem ihm an 
Länge zunächststehenden anderen etwa wie 1:2 verhält. Sind 
aber die Relationen soweit festgelegt, dann müssen im einzelnen 
konkreten Falle alle Segmente untereinander in einem bestimmten 
Längenverhältnis stehen. Dieser Vermutung widersprechen nur 
die Knäuelsegmente des Oozytenkernes der Fig. 37 (Textfig. 33). 

Soweit können wir also die erste Frage beantworten, welche 
auf die Längenrelation der Segmente vom sekundär gekerbten 
Knäuel bis zum Bukett gerichtet war. 

Noch schwieriger ist natürlich zu ermitteln, ob auch die zur 
Vereinigung bestimmten zwölf Elemente des Oozytenkernes vor der 
Knäuelbildung doppelwertige Elemente geben von eben denselben 
relativen Längenmaßen, wie sie die Knäuelsegmente und Bukett- 
schleifen darzubieten scheinen. Hier haben wir ja nur in ganz 
seltenen Fällen Gelegenheit, die mutmassliche Zusammengehörigkeit 
einzelner Chromatinstücke mit einiger Sicherheit zu bestimmen. 
Um so bemerkenswerter aber ist es, dass in den beiden in den 
Fig. 35 und 36 dargestellten Fällen, bei denen wir glaubten, unser 


"68 "ST1--68 


"SE "SLI— CZ 


‘OF SIT —-88 


‘Fr SI 97 


"Ep DL EZ 


F. Wassermann: 


70 


31 Fig. 33. 


34—Fig. 34. 


32—-Fig. 35. 


Ss] 4 


35 Fig. 29. 


(0 
‘/ 


/+ 2 


33—Fig. 37. 


36--Fig. 28. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. zl 


Verfahren anwenden zu dürfen, ein Ergebnis zutage trat, welches 
der Erwartung sehr nahe kommt. Die Tabellen sind mit den zu 
den Kernen gezeichneten schematischen Textfiguren auf S. 25 zu 
vergleichen, wobei die Zahlen erkennen lassen, welche von den 
Einzelelementen zusammengestellt worden sind.) Das oben für 
die Bukettschleifen Gesagte lässt sich tatsächlich auch auf diese 
(Grössen anwenden. 

Und so ergibt sich also im ganzen, dass bei einer der Brauch- 
barkeit des Verfahrens entsprechenden Anwendungsmöglichkeit ein 
Resultat würde zustande kommen können, welches den Nachweis 
der Metasyndese auf eine ganz sichere Grundlage stellen müsste. 

Was Schreiners (08) für die Anschauung, dass auch bei 
Zoogonus die Chromosomenreduktion nach dem „Tomopteristypus“ 
erfolge, an tatsächlichen Belegen beibringen, kann nicht in eine 
ernsthafte Diskussion gezogen werden. Denn diese Autoren stellen 
nicht etwa die Kernvorgänge, die zur reduzierten Chromosomen- 
zahl führen, in einer Entwicklungsreihe der Spermatozyten oder 
Oozyten dar, sondern begnügen sich damit, in den Hoden und 
Ovarien von Zoogonus gleichfalls einige Stadien aufzufinden von 
der Art, wie sie von ihnen bei anderen Objekten und insbesondere 
bei Tomopteris — hier allerdings im Rahmen einer vollständig 
beschriebenen Spermatogenese — festgestellt und als Beweise 
für die Parallelkonjugation angesprochen worden sind. Da nun 
Schreiners unter Zugrundelegung ihrer an anderen Objekten 
gewonnenen Erfahrung über den Ablauf der Geschlechtszellen- 
entwicklung hier bei Zoogonus nur nach jenen Entwicklungsstadien 
suchten, die dem „Tomopteristypus“ angehören und da sie glaubten, 
ihre Untersuchung für vollständig halten zu dürfen, als jene 
Stadien gefunden waren, sind ihnen alle anderen Stadien ent- 
sangen, die wir in dem Streben, möglichst alle Stadien der frühen 
Oogenese kennen zu lernen, ausserdem noch finden konnten. Zu 
diesen von Schreiners nicht bemerkten Entwicklungsstufen der 
Oozyten gehören die in den Fig. 23—46 wiedergegebenen.”) Nun 
9 In dem Kern der Fig. 29, Textfig. 9 konnten nur elf Chromatinteile 
ermittelt werden. Wir vermuten daher, dass eines von den relativ langen 
Elementen (2) bereits bivalent ist. 

?) Wenn wir zu diesen von A.und K.E. Schreiner nicht gewürdigten 
Stadien auch das Bukettstadium rechnen, so müssen wir hierzu allerdings 


bemerken, dass der in Fig. 8 ihrer Arbeit abgebildete Spermatozytenkern 
(„Stadium der dicken Schleifen“) wohl einem solchen entsprechen dürfte. 


"2 F. Wassermann: 


sind diese Stadien, wie man sieht, eben jene, welche uns eine 
Verfolgung des Vorganges der numerischen Chromosomenreduktion 
gestatten. Wir hoffen, A. und K. E. Schreiner möchten durch 
unsere Darstellung in ihrem Glauben an die Allgemeingültigkeit 
des „Tomopteris-Typus“ soweit erschüttert werden, dass sie 
wenigstens für Zoogonus eine andere Möglichkeit der Reduktion 
einräumen. Dessen sind wir jedenfalls sicher, dass sie jetzt 
ungleich mehr Mühe hätten, die Eientwicklung des Zoogonus 
ihrem Typus anzugleichen, nachdem wir eine ganze Reihe von 
Stadien der Oogenese, die der „Tomopteris-Typus“ nicht vorsieht, 
aufgedeckt haben. Wenn allerdings die Deutung aufrecht erhalten 
werden könnte, die Schreiners den von ihnen abgebildeten 
Kernstrukturen der Oo- und Spermatozyten von Zoogonus gegeben 
haben, dass nämlich die ohne Zweifel beobachtete und richtig 
wiedergegebene Parallelität einzelner Chromatinfäden wirklich als 
Ausdruck für eine Längskonjugation ganzer Chromosomen zu er- 
achten ist, dann wäre freilich das prinzipiell ausschlaggebende 
Moment des „Tomopteris-Typus“, nämlich die Existenz der Parallel- 
konjugation, auch in unserem Falle gegeben, unbeschadet des Um- 
standes, dass der kontinuierliche Knäuel und die ihm unmittelbar 
vorausgehenden und nachfolgenden Stadien der Chromosomen- 
Umlagerung in das Bild der Oozytenentwicklung neu einzufügen 
wären. Um zu diesem der Theorie der Parallelkonjugation 
günstigen und unseren Befunden widersprechenden Resultat zu 
gelangen, müsste man aber vor allem den Nachweis führen können, 
dass die Darstellung, welche wir von der Aufeinanderfolge der 
Oozytenkernzustände im Ablauf der Oogenese gegeben haben, nicht 
richtig ist oder wenigstens nicht die allein richtige zu sein braucht, 
dass vielmehr noch eine andere Seriierung dieser Entwicklungs- 
stadien möglich wäre. Denn solange die durch den Augenschein 


Demnach hatten sie zwar unter den durchmusterten Spermatozyten jenes 
Stadium vor Augen, aber in den Ovarien ist es ihnen sicher entgangen; 
denn gerade die Kenntnis und die gründliche Beschäftigung mit diesem 
Bukettstadium hätte die genannten Autoren vor dem Irrtum, in den sie 
bezüglich der Zahlenverhältnisse der Chromosomen verfallen sind, bewahren 
müssen, da, wie wir gezeigt haben, eben in diesem Stadium die reduzierte 
Anzahl mit absoluter Sicherheit zahlenmässig festzustellen ist. So berechtigen 
also schon die falschen Angaben Schreiners über die Chromosomenzahl 
zu der Konstatierung, dass sie kein wohlentwickeltes Bukettstadium genau 
betrachtet haben. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 73 


zwanglos sich ergebende Auffassung zu Recht besteht, dass die 
Normalzahl der Chromosomen sich zum kontinuierlichen Knäuel 
aufreiht und dieser in Segmente von reduzierter Anzahl zerfällt, 
solange ist überhaupt keine Möglichkeit für die Annahme einer 
Parallelkonjugation vorhanden. Erst dann also, wenn die von uns ge- 
gebene Begründung der Seriierung der Oozytenstadien (siehe S. 48) 
durch irgend einen zureichenden Gegengrund ins Wanken gebracht 
worden wäre, käme eine Diskussion über die Frage in Betracht, 
ob die von Schreiners in den Fig. 5, 6 und 7 ihrer Zoogonus- 
arbeit abgebildeten Chromatinfaden-Paarlinge wirklich als Beweis- 
mittel für die Existenz einer Parallelkonjugation gebraucht werden 
dürfen. Dennoch wollen wir uns mit dieser in unserem Falle 
sekundären Frage in Kürze beschäftigen, weil es uns von all- 
gemeiner Bedeutung erscheint, die Unterlassung methodologischer 
Art darzulegen, welche Schreiners bei der Verwertung der 
fraglichen Kernbilder für ihre theoretischen Anschauungen sich 
unseres Erachtens haben zu schulden kommen lassen. Die be- 
treffenden Bilder der Schreinerschen Arbeit (Tab. I, Fig. 5, 6 
und 7), welche den Vorgang der Uhromosomenpaarung in den 
Oo- und Spermatozyten demonstrieren sollen, sind nur optische 
Schnitte durch die untersuchten Kerne und geben schon aus 
diesem Grunde keinen Aufschluss über die entscheidende Frage, 
ob die Entstehung der paarigen Chromatinfäden in Wahrheit mit 
einer Reduktion der Chromosomenanzahl einhergeht oder nicht. 
Hier kann nur die Erforschung des ganzen Kerninhaltes und die 
Zählung der Kernfäden Aufschluss geben und es kann in einem 
solchen Falle dem Autor die Wiedergabe seiner Beobachtungen 
in ihrem ganzen Umfange wohl nicht erlassen werden.') Freilich 
9) Wenn wir diesen Einwand gegen die Schreinersche Arbeit er- 
heben, so sind wir uns dabei wohl bewusst, dass man uns entgegenhalten 
könnte, wir beanstanden zwar die Abbildungen der Autoren mit Recht, dürfen 
aber keinen Schluss von der Art der Wiedergabe auf die Art der Erhebung 
der Befunde machen. Diese Zurechtweisung müssten wir in diesem Falle 
um so eher gewärtigen, als A. und K. E. Schreiner selbst an anderer 
Stelle (08b, S. 13) sich „über die Beurteilung und den Wert von Abbildungen 
nach zytologischen Präparaten mit starken Vergrösserungen“ geäussert haben 
und unter Hinweis auf diese prinzipielle Auseinandersetzung wohl verlangen 
werden, dass man ihr Urteil über die Frage, wie weit man in der zeichne- 
rischen Verdeutlichung seiner durch Beobachtung begründeten Überzeugung 


gehen dürfe, nicht anzweifle. Es liest uns ja auch ferne, uns gegen die 
an der erwähnten Stelle angeführten Möglichkeiten der Wiedergabe mikro- 


74 F. Wassermann: 


hätten Schreiners zu dem geforderten Vorgehen die in der 
Kenntnis der Chromosomen-Normalzahl gelegene Voraussetzung 
nicht besessen, weil sie sich eben, wie dies an anderer Stelle 
gezeigt werden konnte, eine ganz irrige Vorstellung von der 
Normalzahl der Chromosomen gebildet hatten. Aber wir dürfen 
wohl, nachdem wir durch alle Stadien der Oogenese die zahlen- 
mässige Feststellung der Chromatinteile mit Erfolg durchgeführt 
haben, im allgemeinen sagen, dass in einem Falle wie dem 
unsrigen, wo die niedrige Chromosomenzahl den Versuch. sie 
jeweils festzustellen, aussichtsreich erscheinen lässt, nur nach 
genauer Durchforschung des ganzen Kerninhalts und, wenn irgend 
möglich, nach Vornahme der Zählung der Chromatinelemente eine 
Beziehung hergestellt werden darf zwischen morphologischen Er- 
scheinungen an den Chromosomen und der Art und Weise ihrer 
Reduktion. Wir wiederholen, dass wir Oozytenkerne von der Art 
jener, die den Fig.5 und 6 von Schreiners zugrunde liegen, 
gleichfalls gesehen und abgebildet haben (Fig. 21 und 22); aber 
wir konnten zeigen, dass die hier tatsächlich zu beobachtende 
Parallelität der Chromatinfäden in keiner Beziehung zur Reduktion 
steht (S. 21). 

Was die Stellungnahme Gr&goires (09) in der Frage nach 
der Herkunft der bivalenten Chromosomen bei Zoogonus betrifft, 
so veranlassen ihn zur Annahme einer Parasyndese die nämlichen 
Kernbilder, wie sie von Schreiners in ihren Fig. 5, 6 und 7 
wiedergegeben worden sind und von denen er in seiner Textfig. F 
„ein klares Beispiel“ demonstriert. Dieser Spermatozytenkern 
oder besser dieses Detailbild aus einem solchen ist der einzige 
skopischer Befunde im allgemeinen zu wenden, und wir geben zu, dass in 
gewissen Fällen Detailbilder und Schnittbilder von Kernen Totalbildern der- 
selben vorzuziehen sein werden. Aber wenn Detailbilder und Schnittbilder 
als Dokumente vorgebracht werden, da, wo nicht etwa bloss Strukturen, 
wie z. B. ein spiraliges Chromonema im Chromosom (Vejdovsky [12]) 
aufgezeigt werden sollen, sondern wo bestimmte Formverhältnisse an allen 
Elementen des Kernes vorhanden sein müssen und wo ihr Vorhandensein 
mit einer bestimmbaren Verringerung der Kernelemente gegenüber deren 
Normalzahl verknüpft sein muss, damit man ihnen die in Rede stehende 
Bedeutung zuerkennen kann, dann soll wenigstens die textliche Darlegung 
der Befunde jene Zweifel, die durch die Bilder notwendigerweise erregt 
werden, zum Schweigen bringen. Da nun die Schreinersche Arbeit auch 


nach dieser Richtung hin durchaus nicht befriedigt, schien der erhobene 
Einwand berechtigt. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 15) 


Beleg, den Gr&goire für seine Anschauung vorführt; wir haben 
dieses Dokument in der untenstehenden Textfig. 37 reproduziert. 
Allem Anschein nach handelt es sich dabei, wie auch Gregoire 
selbst angibt, um einen pachytänen Kern, also um ein Spermato- 
zytenstadium, welches dem von uns für die Oozyten demonstrierten 
Bukettstadium analog ist. Diese Auffassung wird noch gestützt 


Fig. 37. 


durch die Angabe Gregoires, dass die beiden Schenkel der 
Schleifen meist noch bedeutend weiter auseinander gespreizt er- 
scheinen, als die der abgebildeten Doppelelemente. Nun haben 
wir aus dem Bukettstadium unserer Fig. 42 zwei Elemente heraus- 
gezeichnet (Textfig. 38), also ein Detailbild wie Gr&goire her- 
gestellt, damit man sieht, wie leicht man solche Dokumente sich 
verschaffen kann und wie wenig sie beweisen. Besonders günstig 
ist hierbei noch, dass auch eine der von uns gewählten Schleifen 
an der vom Nukleolus abgekehrten Seite eine Dehiszenz aufweist, 
wie wir sie öfters an den bivalenten Elementen gesehen und 
besprochen haben. Aber diese Dehiszenz ist nicht die Regel, 
sondern mit wenigen Ausnahmen sind die Schleifen im Bügelteil 
vollständig geschlossen (siehe Fig. 35—45). Und das ist sehr 
wichtig; denn wären sie immer offen, so könnte dies ebenso für 
eine stattgehabte Parallelkonjugation sprechen, wie ihr geschlossener 
Bügel und eine hie und da vorkommende, als Querlichtung er- 
scheinende Dehiszenz für die Metasyndese in die Wage fällt. 

So kann man also der Abbildung von Gregoire keine 
Beweiskraft zuerkennen; es handelt sich hier wie bei Schreiners 
um eine ohne jeden Zusammenhang dastehende morphologische 
Erscheinung, die ja an und für sich für die Theorie der Para- 
syndese sprechen mag, aber diese Bedeutung verliert, sobald sie 
dem Zyklus der Chromatin-Umlagerungen, wie wir ihn für die 
“frühe Oogenese aufgedeckt haben, eingeordnet wird. 

Wenn Gregoire weiterhin zugunsten seiner Auffassung 
und in Übereinstimmung mit Schreiners anführt, dass bei 


76 F. Wassermann: 


Zoogonus nicht wie bei anderen Objekten aus dem Ruhekern der 
Gonozyte sofort Doppelfäden, sondern zuerst ein einfachfädiges 
‚Gerüst (Leptonema) entsteht, und dann erst ein doppelfädiges 
Stadium (Zygonema) und dass diese Tatsachen die Annahme von 
Meves, die Dualität sei lediglich der Ausdruck einer vorzeitigen 
Längsspaltung der Chromosomen, hinfällig machen, so sei dem- 
gegenüber wiederum daran erinnert, dass auf die doppelfädigen 
Stadien in der Oogenese von Zoogöonus Kerne folgen, welche die 
diploide Anzahl von Chromatinteilen enthalten. 

Im Gegensatz zu Schreiners muss Gregoire zugebilligt 
werden, dass er sich des Mangels an strikten Beweisen für die 
Parasyndese bei Zoogonus bewusst ist und dass er dieser Er- 
kenntnis auch Ausdruck gibt, wenn er sagt: „Seulement, nous 
ne pretendons pas que le materiel present suffise a etablir cet 
interpretation A une facon incontestable.“ „Aussi prions nous le 
lecteur de ne pas considerer les conclusions que nous avons enonc6es 
plus haut au sujet des cineses elles-m&mes comme £tant solidaire 
de ce que nous allons dire maintenant sur la prophase synaptique* 
(5. 275). Auch gibt Gregoire zu verstehen, dass die Annahme 
einer Parasyndese bei Zoogonus in der Hauptsache eben ein 
Analogieschluss sei, gestützt auf die Verhältnisse bei anderen 
Objekten: „C’est la conclusion qui s’accorde le mieux avec les 
aspects observes et elle se trouve corroboree, pour nous, par la 
parfaite ressemblance des images du Zoogonus avec celles qu’on 
observe d’une facon plus complete dans d’autres objets, pour 
lesquels, selon nous, la conjugaison zygotenique est bien demon- 
tree“ (8. 276). 

Trotzdem finden wir in der zusammenfassenden Darstellung 
Gregoires vom Jahre 1910 auf S. 342 den Zoogonus ohne jede 
Einschränkung in der Reihe derjenigen Objekte aufgeführt, bei 
welchen die Parasyndese beschrieben worden ist. Nunmehr aber 
ist erwiesen, dass Zoogonus mirus zu Unrecht für die Theorie 
von der Parallelkonjugation in Anspruch genommen wurde. 


y) Die Einwärde gegen die Parasyndese im allgemeinen. 

In diesem Abschnitt soll gezeigt werden, dass der Deutung 
der frühen, sogenannten zygotänen Gonozytenkerne im Sinne einer ' 
präsynaptischen Parasyndese folgende, auf bestimmte Tatsachen 
gestützte Bedenken entgegenstehen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 


-1 
-1 


1. Die Erscheinungen der Parasyndese stehen 
nachgewiesenermassen ausser Zusammenhang mit 
der numerischen Chromosomenreduktion. 

a) Bei Zoogonus mirus, worauf im Anfang des vorigen Ab- 
schnittes und bei Besprechung der Schreinerschen Bearbeitung 
dieser Oogenese (S. 74) bereits nachdrücklich hingewiesen wurde. 

b) Bei der Samenreifung von Pachyiulus varius Fabre zufolge 
den Untersuchungen von Oettinger (09), welcher sagt (S. 588): 
„Der Konjugationstypus von A. und K. E. Schreiner musste bei 
Pachyiulus sehr wohl in Erwägung gezogen werden, da in ganz 
analoger Weise wie bei den Schreinerschen Objekten der 
parallele (sich überkreuzende) Verlauf von chromatischen Doppel- 
fäden in den synaptischen Stadien wahrgenommen wurde. Aber 
trotz dieser äusseren Ähnlichkeit konnte im speziellen Teil nach- 
gewiesen werden, dass damit keineswegs eine wirkliche Kopulation 
von Doppelfäden angedeutet war; denn die Reduktion der 
Chromosomen hat nach Fertigstellung der aus den 
Doppelfäden entstandenen UÜhromosomen nicht statt- 
gefunden. Der Nachweis konnte durch die Erfüllung 
derdenkbargrössten Anforderung durch einen Befund 
und eine Beobachtung am lebenden Objekt geführt 
werden. Es konnte im speziellen Teil gezeigt werden, dass 
eine Spermatozyte erster Ordnung im lebenden Zu- 
stand noch die unreduzierte Normalzahlder Chromo- 
somen wie dieSpermatogonien, also eine Zahl von 24 
bezw. 25 aufwies. Auch die weiterhin am Präparat gemachten 
Analysen für die Prophasen der ersten Reifungsteilung führten 
zu dem unbedingten Schluss, dass bei den aus den Doppelfäden 
hervorgegangenen Chromosomen vorerst noch keine wirkliche oder 
auch nur scheinbare Reduktion der Chromosomenzahl eingetreten 
war. Diese erfolgt, wie gezeigt wurde, erst direkt bei der Ein- 
stellung der Chromosomen in die Äquatorialplatte.“ 

Wie aus dem letzten Satz des zitierten zusammenfassenden 
Passus der Arbeit Oettingers hervorgeht, vertritt der Autor 
für Pachyiulus denselben Modus der Chromosomenkoppelung wie 
Korschelt (95) für Ophryotrocha. Wenn Gre&goire (10, S. 393) 
der Untersuchung Vettingers gegenüber einen sehr skeptischen 
Standpunkt einnimmt, so muss man das angesichts der eigentüm- 
lichen und merkwürdigen Details («regoire), die der Autor 


75 F. Wassermann: 


hier beschreibt, nur für gerechtfertigt halten. Aber solange eine 
von Gregoire als wünschenswert bezeichnete Nachprüfung nicht 
dargetan hat, dass Oettinger in dem für uns wesentlichen 
Punkt geirrt hat, kann man seine Befunde nicht ignorieren. 
Und so wie sie uns vorliegen, stellen sie ein Hindernis dar 
gegen die Annahme des allgemeinen Vorkommens der Parasyndese. 

Bei Vejdovsky (12) finden wir die Arbeit Oettingers 
nicht erwähnt. 

2. Esbesteht die Möglichkeit, dass auch an Mono- 
somen die Erscheinungen der Parasyndese auftreten. 

v. Baehr (09) sieht in den Spermatozyten von Aphis 
saliceti drei Chromosomen, von welchen zwei bivalent sein müssen, 
eines aber univalent, weil in den Spermatogonien und somatischen 
Zellen fünf Elemente gefunden werden. Nun zeigen von diesen 
drei Chromosomen in der Regel nur die zwei grösseren eine sehr 
deutlich ausgesprochene Duplizität, während das kleinere dritte — 
das Monosom nach v. Baehrs Anschauung — „kaum eine 
Andeutung davon“ besitzt (l. c., S. 291), aber doch, wie wir im 
Sinne unserer gegenwärtigen Betrachtung hinzusetzen dürfen, 
auch nicht völlig einheitlich ist, wie es sein müsste, wenn die 
Duplizität der grösseren Elemente für ihre Entstehung auf dem 
Weg der Parasyndese beweisend sein sollte. Auch ist ja gar 
nicht sicher, ob dasjenige Chromosom, welches im einzelnen Fall 
nur die Andeutung einer Duplizität besitzt, wirklich das unpaare 
Monosom, ist. Wenn man das betreffende Element wegen des 
Mangels einer ausgesprochenen Duplizität als das Monosom be- 
zeichnet, so kann man das nur in der Voraussetzung tun, dass 
eben die Doppelfädigkeit der Ausdruck der stattgehabten Para- 
syndese sei. Diese Voraussetzung ist aber hypothetisch. Dazu 
kommt dann noch, dass v. Baehr Kerne fand, in denen alles 
chromatische Material eine deutliche Duplizität aufwies; hier 
konnte der Autor allerdings nicht sicher unterscheiden, ob wirklich 
alle drei Chromosomen oder nur Teile der beiden grossen im 
Schnitt getroffen waren. So kommt v. Baehr selbst nicht zur 
Entscheidung der Frage, ob längsgespaltene endvereinigte oder 
parallel konjugierte Chromosomen bei seinem Objekt anzunehmen 
sind. Unter unserem Gesichtswinkel aber bedeuten die Verhält- 
nisse der Spermatozyten von Aphis saliceti ein Bedenken gegen 
die Parasyndese. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 713 


Auch Gr&egoire(10) erwähnt die Untersuchung v. Baehrs. 
Er wendet gegen sie ein, dass sie unvollständig sei (S. 397), aber 
seine diesbezüglichen Ausstellungen berühren den von uns be- 
sprochenen Punkt zunächst nicht. 

Vejdowsky (12) zitiert die Arbeit v. Baehrs nicht. 

Hier sei dann noch hinzugefügt, dass auch Buchner (09) 
bei Gryllus eine entsprechende Beobachtung am accessorischen 
Körper mitgeteilt hat. Er sagt (S. 352): „Auch ist der interessante 
Fall, dass der accessorische Körper einen etwas längeren Faden 
ausschicken kann, der dann auch deutlich längsgespalten wird, 
ein Gegenbeweis gegen die Konjugation. Wo bleibt hier die 
Konjugationsmöglichkeit!“ Nun halten wir es ja nicht für an- 
gebracht, einer solchen Beobachtung, die sich noch dazu auf ein 
späteres Stadium der früheren Oogenese, nämlich das Bukett, und 
nicht auf das kritische, das Zygonema, bezieht, gleich die Be- 
deutung eines „Gegenbeweises gegen die Konjugationslehre* zu- 
zuerkennen, aber man ist berechtigt, auch sie dem extremen 
Standpunkt, wie ihn z. B. Vejdowsky in der Konjugationsfrage 
einnimmt, entgegenzuhalten. 

3. Die Erscheinungen der Parasyndese trifft man 
auch im Entwicklungsgang parthenogenetsicher 
Eier, bei welchen keine Uhromosomen-Reduktion 
stattfindet. 

Kühn (08) findet in den jungen Oozyten der partheno- 
genetischen Generationen der Uladoceren Daphnia pulex und Poly- 
phemus pediculus doppelfädige Chromatinelemente. Kühn bemerkt 
im Anschluss an diesen Befund selbst (S. 552): „Betrachtet man 
diese (sc. doppelfädigen Chromatinstrukturen) allein, so erinnern 
sie ohne Zweifel an die Bilder, welche A. und K. E. Schreiner 
für Tomopteris geben und aus bestimmten Gründen als parallele 
Konjugation deuten“. Wie aus Kühns Beschreibung und seinen 
Figuren zu ersehen ist, kann man bei seinen Objekten gerade 
jenes Moment, das A. und K. E. Schreiner als den Ausdruck 
des Vorgangs der Konjugation ansprechen, nämlich das Diver- 
gieren von streckenweise parallel laufenden Fädchen, auf das 
deutlichste sehen. Und doch tritt hier gar keine numerische 
Reduktion der Chromosomen ein, zu welcher Feststellung sich die 
genannten Objekte wegen ihrer geringen Chromosomenzahlen sehr 
gut eignen. 


80 F. Wassermann: 


Dass diese Arbeit einen Einwand gegen die Parasyndese 
bedeutet, hat bereits Goldschmidt (08) hervorgehoben. 

v. Winiwarter und Sainmont (09, S. 242) nehmen, durch 
den Hinweis soldschmidts dazu veranlasst, zuKühns Arbeit 
Stellung. Die Autoren formulieren zunächst eine Argumentation 
Goldschmidts („Voiei son argumentation“) folgendermassen: 
„Les figures qu’on observe dans l’accroissement d’une generation 
issue de parthönogenese, concordent avec les images d’individus 
nes par fecondation; comme iln’y a pas de r@duction, c’est-a-dire 
conjugaison des chromosomes, cette homologie ne devrait pas 
exister“. Und sie fahren dann fort: „En realite, elle n’existe 
pas non plus, c'est Goldschmidt seul qui le pretend. Car 
Vauteur, Kühn, insiste sur ce qu’il n’a pas constate de parallelisme 
des filaments, ni de synapsis“. Was Kühn selbst angibt, haben 
wir bereits zitiert. Goldschmidt (08) sagt wörtlich: „Zum 
Schlusse noch eins: Auch bei parthenogenetischen Eiern partheno- 
genetischer Generationen findet man genau die gleichen Bilder, 
die sonst als parallele Konjugation homologer Chromosomen ge- 
deutet werden (siehe die Arbeit von Kühn in diesem Heft). Wo 
bleibt da die Theorie.“ 

Also sagt Goldschmidt nichts anderes als Kühn selbst. 
Sie konstatieren beide die Tatsache, dass in den Fällen von Daphnia 
pulex und Polyphemus pediculus die Erscheinungen der Para- 
syndese ohne eine Reduktion zur Beobachtung kommen. Gold- 
schmidt. zieht freilich aus dieser Tatsache eine Folgerung, die 
Kühn ferne lag. Aber dass Goldschmidt etwa im Gegensatz 
zu Kühn behauptet hätte, die Bilder der aus parthenogenetischen 
Generationen hervorgegangenen Individuen seien identisch mit 
denen jener Individuen, die auf dem Wege der Befruchtung 
entstanden sind, ist nicht richtig. Es ist ja über die aus be- 
fruchteten Eiern hervorgehende Generation von Daphnia pulex 
und Polyphemus pediceulus in bezug auf die Oogenese gar nichts 
bekannt. So ist also die Argumentation Goldschmidts von 
v. Winiwarter und Sainmont nicht ganz zutreffend gekenn- 
zeichnet. 

Was aber den Satz betrifft: „L’auteur, Kühn, insiste sur 
ce qu’il n’a pas constat& des parallelisme des filaments ni de 
synapsis“, so vergleiche man dazu die von uns zitierten Worte 
Kühns. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. sl 


Auch Gregoire (10) bestreitet die Stichhaltigkeit des von 
Goldschmidt auf Grund der Arbeit Kühns vorgebrachten 
Einwandes gegen die T'heorie der Parasyndese. 

Was Gregoire in dieser Beziehung mit Recht vorbringen 
kann und auch erwähnt), das ist die Tatsache, dass Kühn die 
Chromosomen lediglich in den Oogonienmitosen und dann erst 
wieder unmittelbar vor der ersten Reifungsteilung, nicht aber im 
kritischen Stadium der doppelfädigen Elemente einwandfrei zählen 
kann. Ebenso liegen ja auch in allen Fällen, in denen eine 
Parallelkonjugation angenommen wird, die Verhältnisse. Aber 
Kühn folgert trotzdem ausdrücklich, nachdem er in den Oozyten 
unmittelbar vor der ersten Reifungsteilung die Normalzahl der 
Chromosomen festgestellt hat: „Es kann somit in der Zwischen- 
zeit (d. h. von der letzten Oogonienteilung bis zum Moment der 
Zählbarkeit der Chromosomen) keine Syndese, die zu einer Pseudo- 
reduktion auf eine halbe Zahl führen müsste, stattgefunden haben“. 
In seiner Zusammenfassung indessen (Anmerkung S. 576) räumt 
Kühn als „eine blosse Möglichkeit“ ein, es könnten die Doppel- 
fäden vielleicht doch der Ausdruck einer Parasyndese sein, die 
dann aber bis zu dem Zeitpunkt, da die Chromosomen wieder 
gezählt werden können, rückgängig gemacht sein müsste. Darin 
also, in dieser Möglichkeit einer Wiederaufhebung der Reduktion, 
die sich dann der Beobachtung entziehen würde, liegt das einzige 
(Gegenargument, das man dem Einwand Goldschmidts entgegen- 
setzen könnte. Dieses Argument würde dann eben auf derselben 
Basis stehen, wie die übrigen Beweise für die Parallelkonjugation 
im Zygonema-Stadium auch, d. h. es würde ebenfalls aus dem 
Umstand, dass die feinen Doppelfäden nicht gezählt werden können, 
seine Existenzberechtigung herleiten. Weil man hier, in den 
Zygonemastadien, nicht entscheiden kann, ob die Doppelfäden in 
diploider oder in haploider Anzahl vorliegen, darum darf man von 
einer Reduktion sprechen; dies ist für viele Beweisobjekte der 
Parallelkonjugation der letzte Grund ihrer Unbestreitbarkeit. Die 
von Kühn eingeräumte „blosse Möglichkeit“ erscheint übrigens 
bei der geringen Anzahl von somatischen Chromosomen seiner 
Objekte (7”—10) so gut wie ausgeschlossen; man betrachte nur 


') 8.381: „Pour @lucider completement, au point de vue actuel, le cas 
des oeufs parthenog£netiques, il faudra done y 6tablir avec soin des donnees 


numeriques des stades pachytenes et strepsitenes. 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 6 


82 F. Wassermann: 


die Kerne mit den Doppelfäden der Fig. 26 und 27 der Arbeit 
Kühns, und man wird unmöglich zu dem Schlusse kommen 
können, dass hier etwa nur fünf Doppelelemente vorliegen. 
Merkwürdigerweise ist die soeben durchgeführte Argumen- 
tation gar nicht der Weg, den Gregoire geht, um den Einwand 
Goldschmidts zu entkräften. Er beschäftigt sich mit dem 
von uns erörterten Punkt lediglich in dem zitierten Satz. (Siehe 
die Anmerkung.) Vielmehr bringt Gregoire (S. 390) insbesondere 
von Strasburger erhobene Befunde vor, welche die pflanzliche 
Apogamie betreften. Hiernach werde in manchen Fällen in der 
Pollenmutterzelle anfänglich die haploide Chromosomenzahl ge- 
bildet, und die beiden Schenkel dieser reduzierten Uhromosomen 
werden erst in der Diakinese, also unmittelbar vor der Reifungs- 
teilung, wieder selbständig, während in anderen Fällen von Apo- 
gamie durch die ganze Entwicklung der Pollenmutterzelle hindurch 
die diploide Chromosomenzahl vorhanden sei. In den ersteren 
Fällen finde man im Verlauf der Gonozytogenese das Synapsis- 
stadium, in den Fällen der zweiten Art komme ein solches nicht 
zur Beobachtung. Aus diesen von Gregoire herangezogenen 
Befunden Strasburgers lassen sich zwei Folgerungen machen. 
Man erkennt erstens, dass eine stattgehabte Reduktion wieder 
aufgehoben werden kann und zweitens — diese Folgerung erscheint 
aber angesichts der Synapsisbilder Strasburgers (04) nicht 
so einwandfrei wie die erste — kann man annehmen, dass die 
Reduktion der Chromosomen und die Synapsis, d. h. die Zusammen- 
drängung des Kerninhaltes, in diesen Fällen in kausalem Zusammen- 
hang miteinander stehen. Was die erste Folgerung betrifft, die 
Gregoire übrigens nicht ausdrücklich zieht, die aber wie aus 
dem oben Gesagten hervorgeht, einzig und allein mit Recht aus der 
Gegenüberstellung der pflanzlichen Apogamie und der tierischen 
Parthenogenese abgeleitet werden kann, so haben wir uns mit Ihr, 
veranlasst durch den von Kühn selbst ausgesprochenen Hinweis 
auf die Möglichkeit einer Wiederaufhebung der Reduktion, bereits 
auseinandergesetzt und konnten nicht finden, dass man dieser 
Möglichkeit hier ernstlich Raum zu geben braucht. Die zweite 
Folgerung aber, nämlich der kausale Zusammenhang zwischen 
Reduktion und Synapsis, stellt das Hauptargument Gregoires 
gegen den Einwand Goldschmidts dar. Vorausgesetzt nun, dass 
durch die Befunde Strasburgers wirklich der von Gregoire 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 33 


angenommene Zusammenhang zwischen Reduktion und Synapsis 
erwiesen wäre, so ist damit für unseren Fall nichts gewonnen. 
Denn es muss gegenüber der Argumentation Gr&egoires nach- 
drücklich betont werden, dass der synaptische Kernzustand, in 
welchen doch von Montgomery mit demselben Recht oder 
Unrecht die endweise erfolgende Vereinigung der homologen 
Chromosomen verlegt wurde wie von anderen Autoren die parallele 
Konjugation, durchaus nicht identisch ist mit dem leptozygotänen 
Kern. Im speziellen sind noch dazu die Bilder der synaptischen 
Kerne, welche Strasburger (04) in seiner Arbeit über die 
Apogamie der Eualchimillen geliefert hat (siehe die Fig. 9 und 10 
dieser Arbeit) derart, dass die Skepsis, die man so vielen anderen 
synaptischen Kernen der Gonozytogenese entgegenbringen muss, 
hier die besten Angriftspunkte finden könnte, und ausserdem er- 
kennt man auf diesen Bildern keine feineren Details und besonders 
keine Doppelfädigkeit. So hat also für die von Gr&egoire heran- 
gezogenen Fälle unsere Behauptung, dass die Synapsis mit den 
leptozygotänen Stadien nicht identifiziert werden dürfe, in ganz 
besonderem Maße Geltung. Wenn Gregoire also durch die 
Strasburgerschen Beobachtungen dartun will, dass ein gesetz- 
mässiger Zusammenhang zwischen der Chromosomenreduktion id 
est der Parasyndese mit den doppelfädigen Stadien bestehe und 
daraus für den Fall Kühns den Schluss ziehen will, dass also 
auch hier, weil die doppelfädigen Stadien vorhanden seien, eine 
Parasyndese angenommen werden müsse, gleichviel ob die hierdurch 
erzielte Chromosomenreduktion bis zur ersten Reifungsteilung be- 
stehen bleibt oder nicht, so müssen wir diese Argumentation 
ablehnen, weil die Begriffe Synapsis und doppelfädiges Stadium 
zusammengelegt worden sind. Es steht hier einzig die Frage zur 
Diskussion, ob die parallelfädigen Strukturen, die in den Arbeiten 
der Anhänger der Parallelkonjugation als Beweise für diese Theorie 
vorgeführt werden, angesichts der parthenogenetischen Eier mit 
denselben Strukturen, aber ohne numerische Chromosomenreduktion, 
die ihnen beigelegte Bedeutung beanspruchen dürfen. Es ist fest- 
zustellen, dass diese, erstmalig von Goldschmidt aufgeworfene 
Frage auch heute noch offen steht, trotzdem sich von Wini- 
warter und Sainmont wie auch Gregoire mit ihr in 
einem für die Theorie der Parallelkonjugation günstigen Sinn 


beschäftigt haben. 
6* 


54 F. Wassermann: 


In der zusammenfassenden Arbeit Vejdovskys (1912) 
wird die Arbeit Kühns nicht erwähnt. 

4. Die Stadien, welche die Existenz der Para- 
syndese erweisen sollen, sind nicht den Geschlechts- 
zellen allein eigentümlich. 

Fick sagt (06, S. 65) gelegentlich der Begründung seiner 
ablehnenden Haltung gegenüber einer „Konjugation vorher selb- 
ständiger Chromosomen“ in den Frühstadien der Gonozytogenese: 
„Übrigens scheinen die Abbildungen von Schreiners gewissen 
Figuren Gregoires bei der prophasischen Längsspaltung 
der somatischen Zellen auffallend ähnlich und es erscheint 
nicht ausgeschlossen, dass vielleicht auch in anderen Fällen ein 
Entstehen stärkerer Chromatinfäden durch Zusammenfluss dünner 
Primitivfibrillen direkt aus dem Ruhegerüst vorkommt und ferner 
dass sich dieser Vorgang bis zur Bildung dieker Balken mehr- 
fach wiederholt.“ 

Auch nach Häcker (09, S. 86) „lassen sich zahlreiche 
Befunde, z. B. die für die Kenntnis der heterotypischen Teilung 
klassischen Bilder bei Flemming und viele Abbildungen bei 
Farmer und Moore wohl nur mit einigem Zwange im Sinne 
der Junktionstheorie deuten, weil eben hier schon beim Auftreten 
der Doppelfäden ein ausgesprochener enger Parallelismus der 
Einzelfäden vorliegt und so die Analogie mit den längs- 
gespaltenen Chromosomen der somatischen Mitosen 
ohne weiteres zutage tritt“. (Im Original nicht gesperrt.) 

In beiden Äusserungen, sowohl der von Fick wie der von 
Häcker, wird nicht bloss der Verdacht ausgesprochen, es könnte 
der Fadenparallelismus der Ausdruck einer frühen Längsspaltung 
sein, sondern, was uns hier von wesentlicher Bedeutung ist, es 
wird auf die Analogie zwischen den doppelfädigen 
Gonozytenkernen mit den Prophasenkernen der 
somatischen Mitose ganz deutlich aufmerksam gemacht. 

Noch weiter als Fick und Häcker geht Meves, wenn er sagt 
(08, 8. 617): „Ich behaupte nun auf Grund eigener Beschäftigung 
mit dem Gegenstand, dass bei somatischen Zellen von 
Salamandra ganz ähnliche Bilder von Fadendoppel- 
heit wie bei den Spermatozyten dieses Tieres vor- 
kommen.“ (Vom Ref. gesperrt.) Er beruft sich auf das Zeugnis 
Flemmings, der die Längsspaltung schon bei sehr engen Spiremen 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 85 


und „in noch frühzeitigeren Formen des Knäuels“ beobachtet hat 
und der auseinandersetzt, dass der Ausdruck Längsspaltung nicht 
wörtlich zu nehmen ist, sondern sich lediglich auf eine Zweireihen- 
anordnung der Uhromatinsubstanz beziehen soll. Meves leugnet 
durchaus nicht, „dass die Schwesterfäden in den Spermatozyten 
anderer Tiere (ausnahmsweise vielleicht auch in denen des 
Salamanders) völlig voneinander getrennt angelegt werden können, 
so dass von vornherein wirkliche Fadenpaare vorhanden sind“ 
und „dass die Schwesterfäden sich stellenweise voneinander ent- 
fernen, sich an ihren Enden mehr oder weniger weit spreizen oder 
sich umeinander herumwickeln können“. Das Wesentliche sei, 
„dass die sich anlegenden Chromosomen von vornherein doppelt 
sind. Dieses ist sowohl bei der Mitose von Sperma- 
tozyten und Oozyten als auch bei derjenigen von 
somatischen Zellen der Fall“.') 

Meves muss allerdings zugeben, dass die Vorstadien des 
Spirems der somatischen Mitose „überhaupt noch nicht mit ge- 
nügender Genauigkeit“ beschrieben worden sind und aus diesem 
Grunde standen bisher die Behauptungen von einer Analogie 
zwischen den feinfädigen (sonozytenkernen und den somatischen 
Prophasen auf keiner sicheren Basis. Nun aber besitzen wir genaue 
Untersuchungen der somatischen Mitosen mit besonderer Berück- 
sichtigung der Prophasen und zwar solche, die man mit jenen an 
den (reschlechtszellen des gleichen Objekts angestellten vergleichen 
kann. Es sind die Beobachtungen von K. Bonnevie (08, 11) 
über die Mitosen der Wurzelspitzenzellen und über die Gonozyto- 
genese von Allium cepa und die das gleiche und verwandte Objekte 
betr. Arbeiten von Lundegärdh (13) und von v. Schustow (13). 
Bonnevie ist zu dem Schluss gekommen, dass die Doppelfaden- 
strukturen nur gewissen Entwicklungsstadien der Geschlechtszellen 
eigen seien, in den somatischen Prophasen aber nur einfache 
Chromatinfäden beobachtet werden könnten. So hat Bonnevie, 
welche den Standpunkt der Parasyndese überhaupt vertritt, die 
Doppelfädigkeit der Chromatinstrukturen für einen heterotypischen 
Charakter gehalten und damit der Theorie von der Parallel- 
konjugation eine wertvolle Stütze gereicht. Aber die Befunde 
Bonnevies können in diesem Punkt als widerlegt gelten, seit 


!) Wir kommen auf diese Anschauung von Meves noch einmal zu 
sprechen (siehe S. 132). 


Ss6 F. Wassermann: 


Lundeeärdh (10 und 13) und v. Schustow (13) den einwand- 
freien Nachweis erbracht haben, dass in den frühen Prophasen der 
somatischen Mitosen, insbesondere in den sogenannten Intermediär- 
kernen der meristematischen Zone der Wurzelspitze von Allium 
cepa (Lundegärdh, v. Schustow) und in entsprechenden 
Stadien von Vicia faba und Curcubita pepo (Lundegärdh) genau 
dieselben doppelfädigen Chromatinstrukturen vorhanden sind wie 
in den Gonozytenkernen überhaupt und speziell in denen von 
Allium cepa. Diese völlige Übereinstimmung ergibt sich einwandfrei 
aus einem Vergleich der in den Textfig. 39 und 40 wiedergegebenen 


Figuren 19b und 12 v. Schustows und der Fig. 20 (Textfig. 41) 
Bonnevies (11): die ersteren stellen Prophasenkerne aus der 
Wurzelspitze von Allium cepa, letztere eine Pollenmutterzelle im 
präsynaptischen Stadium dar. Die nämliche Übereinstimmung 
zwischen doppelfädigen somatischen Prophasen und ebensolchen 
(onozytenkernen hatte schon im Jahre 1910 Digby (10) für 
Galtonia candicans festgestellt. Ausserdem sind doppelfädige frühe 
Prophasenstadien noch bei einer Reihe anderer Objekte ermittelt 
worden, allerdings ohne dass die betr. Autoren die Konsequenz 
für das Problem der numerischen Chromosomen-Reduktion daraus 
gezogen hätten. Die einschlägigen Arbeiten sind bei v. Schustow 
(13) aufgeführt. 

v. Schustow kommt demgemäss zu dem Schluss: „Die 
doppelfädige Anordnung der CGhromatinsubstanz in 
der Prophase ist nichts für die heterotypische Pro- 
phase Charakteristisches und somit auch kein Beweis 
und keine Stütze der Theorie der Parallelkonjugation.“ 

Lundegärdh (13) aber, obwohl er genau dieselben Be- 
funde erhoben hat wie v. Schustow, nimmt in der vorliegenden 
Frage einen prinzipiell anderen Standpunkt ein. Er ist so 
sicher überzeugt von der Existenz der Parasyndese, dass für ihn 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 87 


die aufgefundene Identität der somatischen und der sogenannten 
heterotypischen Stadien nichts gegen die Parasyndese beweist; 
er glaubt vielmehr, dass diese Identität lediglich eine morpho- 
logische sei. Der gleichen Erscheinungsform liegen seiner Ansicht 
nach zwei prinzipiell verschiedene Zustände zugrunde und es 
bestehen „stoffliche Verschiedenheiten der Doppelfäden in den 
beiden Prophasen“. 

Lundegärdh nimmt an, dass dem Chromatin eine Tendenz 
zum dualistischen Bau innewohne. Diese äussere sich in den soma- 
tischen Zellen in der Verteilung der Substanz eines Chromosoms 
auf zwei Fäden, während andererseits in den generativen Zellen 
den Chromatin-Elementen die Fähigkeit zukomme, sich paarweise 
einander gegenüberzustellen. Der Umschlag der gewöhnlich be- 
stehenden Tendenz zur dualistischen Anordnung identischer Elemente 
in die Fähigkeit zur Paarung qualitativ verschiedener „Caryotin- 
substanzen“ werde durch „eine neue Konstellation der inneren 
Bedingungen bei Beginn der Reifungsteilung veranlasst“. 

Man sieht, dass Lundegärdhs Spekulation auf der Prämisse 
beruht, dass die Parasyndese eine sichergestellte Tatsache sei. 
Nur wenn man von dem Satz ausgeht: in den generativen Kernen 
bedeutet die Fadenpaarung ganz sicher eine Konjugation ganzer 
Chromosomen, kann man wie Lundegärdh folgern, dass eine 
gleiche Erscheinung in den Kernen der somatischen Zellen ebenso 
sicher eine andere Bedeutung haben muss. Ein solches Vorgehen 
ist dem von uns eingeschlagenen ganz entgegengesetzt. Es handelt 
sich aber bei diesem (Gegensatz nicht um Meinungsverschieden- 
heiten, die man bestehen lassen muss, sondern der von uns ge- 
kennzeichnete Stand des Konjugationsproblems verbietet unseres 
Erachtens jede andere als eine ganz vorurteilsfreie Betrachtung 
der Tatsachen. Wir müssen erklären, dass die angenommene 
Parasyndese, weil sie eben noch nicht erwiesen ist und sicher noch 
keinen Anspruch auf Gesetzmässigkeit und Allgemeingültigkeit 
machen kann, nicht zum Ausgangspunkte so weittragender Schluss- 
folgerungen gemacht werden darf, wie sie Lundegärdh gezogen 
hat. Für den Unbefangenen muss vorerst die auch sonst geltende 
Anschauungsweise bestimmend sein, wonach für gleiche morpho- 
logische Erscheinungen gleiche Bedingungen angenommen werden, 
solange nicht zwingende Gründe im speziellen Fall zu einer anderen 
Annahme drängen. 


[0 s) 


5 F. Wassermann: 


3) Der prinzipielle Unterschied zwischen Parasyndese und Metasyndese. 

Gerade die Ausführungen Lundegärdhs (13) scheinen uns 
ein Schlaglicht auf den prinzipiellen Unterschied zu werfen, der 
unseres Erachtens entgegen der zitierten Äusserung Heiders 
und entgegen dem Standpunkt v. Kemnitz’s (13) zwischen den 
beiden in Betracht gezogenen Möglichkeiten der Uhromosomen- 
koppelung besteht. 

Wenn wir diesen Unterschied nun kurz erörtern, so wollen 
wir vorher ausdrücklich bemerken, dass diese Auseinandersetzung 
keineswegs den besprochenen, auf Tatsachen beruhenden Einwänden 
gegen die Annahme einer Parasyndese etwa als ein weiterer Ein- 
wand aprioristischer Natur angereiht werden soll. Solche Er- 
örterungen sind nach keiner Richtung hin beweisend, aber sie 
zeigen die Konsequenzen an, die aus einer Entscheidung zwischen 
Parasyndese und Metasyndese gezogen werden müssten. 

Sollten entsprechend der Annahme einer Parasyndese die 
Chromosomen während oder kurz nach ihrer Herausdifferenzierung 
aus dem Ruhegerüst des Gonocytenkernes sich zu je zweien an- 
einanderlegen, während sie sonst im Verlauf der vorhergehenden 
Mitosen selbständig geblieben waren, so müssen hierbei Kräfte 
im Spiel sein, die allein in den (sonozytenkernen wirksam wären 
und die ein gegenseitiges Sichaufsuchen der Chromosomen oder 
ihrer Anlagen herbeiführten. Man müsste eine in der Vorbereitung 
zur ersten Reifeteilung plötzlich auftretende, wie Lundegärdh (13) 
sagt, „durch eine neue Konstellation der inneren Bedingungen“ 
hervorgerufene Affinität zwischen den Chromosomen überhaupt 
oder gar etwa nach der Hypothese von Montgomery zwischen 
je zwei homologen väterlichen und mütterlichen Chromosomen 
annehmen. Welche Vorstellung man sich von der Wirksamkeit 
solcher im Verlauf der somatischen Mitosen nicht vorhandener, 
rätselhafter Kräfte macht, geht aus gewissen Darlegungen 
Vejdovskys (12) hervor. Dieser Autor findet nämlich in der 
Oogenese von Diestramena meistens keine Synapsiıs und die von 
ihm konstatierte Fadenpaarung geht also unabhängig von einer 
solchen vor sich. Mitunter konnte er aber auch synaptische Ver- 
klumpungen der Leptomena-Kerne beobachten. Vejdovsky 
glaubt nun, dass das Zustandekommen der Synapsis von der gegen- 
seitigen Lagerung der zur Vereinigung bestimmten Chromatin- 
fäden abhängig sei. Sind diese nahe beisammen, so entsteht seiner 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 89 


Meinung nach keine Synapsis, denn der Kopulationsvorgang „ist 
dann durch blosse Annäherung erleichtert“. „Ist aber die Lage 
je zweier homologer Chromosomen durch andere zwischenliegende 
unterbrochen und setzen wir bei dem Vorgange eine Attraktions- 
bewegung der kopulierenden Chromosomen voraus, so ist die Ver- 
klumpung leicht erklärlich“ (S. 97). Wie energisch müsste, dieser 
Vorstellung zufolge, eine derartige „Attraktionsbewegung“ sich 
geltend machen und wie zielsicher müsste dabei das Kräftespiel 
funktionieren, damit die durch dazwischenliegende andere Chromo- 
somen getrennten Partner aus dem Synapsisklumpen wirklich 
ordnungsmässig vereinigt hervorgehen könnten. Mit der Annahme 
einer Parasyndese verlegt man also in den Gonozytenkern ganz 
besondere, nur in den Geschlechtszellen auftretende, uns völlig 
rätselhafte Vorgänge und man entzieht die Geschehnisse in den 
Gonozytenkernen damit jedem Vergleich mit den Umwandlungen, 
welche der Kern während der somatischen Mitose erfährt.') 


Die Endverklebung der Chromosomen hingegen ist kein 
heterotypischer Prozess. Sie stellt ein sehr gewöhnliches Vor- 
kommnis auch in den Prophasen der somatischen Mitosen dar 
und sie kann auch hier bis zur Bildung kontinuierlicher Spireme 
fortschreiten. In den Vorkernen von Ascaris z. B. (O. Zacharias 
[12]) ebenso wie in den Pronuclei des Mäuseeies (Sobotta [95|]) 
sind kontinuierliche Spireme ganz sicher beobachtet worden. Auch 
in späten Prophasenstadien während lange dauernder Diakinesen 


') Es ist wiederholt behauptet worden, dass in Prophasen somatischer 
Mitosen je zwei gleichgrosse Chromosomen paarweise beieinander lägen. 
Diese Beobachtung wollten ja auch Schreinersin den Furchungszellen und 
Somazellen des Zoogonus gemacht haben; hier aber hat sie sich als irrig 
erwiesen (5.12). Abgesehen davon, dass das häufigere oder gar gesetzmässige 
Vorkommen einer Chromosomenpaarung durchaus nicht sichergestellt ist, wäre 
sie doch mit einer paarweisen Aneinanderlagerung der aus dem Ruhegerüst 
eben entstandenen Chromosomen, wie sie die Vorstellung von der präsynap- 
tischen Parasyndese zur Voraussetzung hat, nicht vergleichbar und man 
könnte, wenn eine Chromosomenpaarung in den somatischen Prophasen hier 
und da wirklich vorkommen sollte, nicht sagen, dass der Vorgang der Para- 
syndese sein Seitenstück in der somatischen Prophase habe. Man müsste 
im Gegenteil gerade dann erst recht besondere den Gonozytenkernen allein 
eigentümliche Kräfte annehmen, weil es hier zu einer wirklichen Vereinigung 
der Chromosomenpaarlinge käme, in den somatischen Prophasen dagegen die 
beieinander liegenden Chromosomen, trotzdem ihrer Vereinigung kein mecha- 
nisches Hindernis im Wege stünde, immer selbständig bleiben. 


90 F. Wassermann: 


macht sich die nämliche Neigung der Chromosomen zur End- 
verklebung unter Umständen bemerkbar; solche Beobachtungen 
haben z. B. Strasburger und sein Schüler Miyake (zitiert 
nach Häcker [09]) bei der Embryosack- und Pollenbildung von 
Galtonia und Tradescantia gemacht. Gerade das Vorkommen von 
Endverklebungen während der Diakinese spricht auch für die 
Möglichkeit des von Korschelt für Ophryotrocha behaupteten 
Typus der Reduktion. Besonders erwähnenswert erscheint dann 
in diesem Zusammenhang die Entwicklung der parthenogenetischen 
Eier von Diplodiscus temporatus, welche Cary (09) beschrieben 
hat. Hier wird in der Prophase der ersten Reifungsteilung ein 
ungemein klarer kontinuierlicher Knäuel gebildet, der dann in 
die Elemente der Richtungsspindel zerfällt (siehe die Fig. 32 
dieser Arbeit). Eine numerische Reduktion der Chromosomen 
findet hierbei nicht statt. Die klaren Abbildungen Carys zeigen 
ferner, dass in den Prophasen der somatischen Mitosen des gleichen 
Organismus immer nur segmentierte Knäuel vorkommen. Dieser 
Fall legt doch den Gedanken nahe, dass es lediglich die lange 
Dauer einzelner Vorstadien der Reifungsteilung ist, welche die 
den Chromosomen eigentümliche Neigung zur Endverklebung zur 
Wirkung kommen lässt, so dass ein einheitlicher Chromatinfaden 
zustande kommt. 

Wenn wir sehen, dass im parthenogenetischen Diplodiscusei 
aus dem kontinuierlichen Knäuel die diploide Chromosomenzahl 
hervorgeht, so können wir daraus weiterhin folgern, dass die 
Bildung des Spiremms und die Endverklebung überhaupt keineswegs 
die Reduktion der Chromosomenzahl zur Folge haben muss. Mit 
der Feststellung, dass bei Zoogonus mirus die Segmentierung des 
Knäuels zur reduzierten Zahl der Chromatinschleifen führt, sind 
wir also der Ursache der numerischen Reduktion noch nicht nahe 
gekommen. Die Metasyndese d.h. die Endverklebung der Chromo- 
somen stellt nur das Mittel dar, durch welches die Bildung von 
5 Chromosomen herbeigeführt wird. 

Und so kommen wir zu folgendem, den prinzipiellen Gegen- 
satz zwischen Parasyndese und Metasyndese präzisierendem Schluss: 
Die Ursache der numerischen Zahlenreduktion ist unbekannt. 
Die Mittel aber, welche die Reduktion zustande bringen, wären 
im Fall der Parasyndese ohne Analogie im sonstigen Geschehen 
bei der Mitose, im Fall der Metasyndese hingegen wäre die weit 


Are ie 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 91 


verbreitete Neigung der Chromosomen zur Endverklebung in den 
Dienst des Reduktionsvorganges gestellt. 


2. Versuch einer Erklärung der während der frühen 
Oogenese beobachteten Chromatinumlagerungen. 


Unsere Beschreibung der frühen Oogenese von Zoogonus 
mirus liess erkennen, auf welche Weise hier die Bildung der 
Doppelelemente zuwege gebracht wird. 

Aber wir haben damit noch keine Einsicht in die Ursachen 
dieser Vorgänge gewonnen. Und doch ist es allein die Frage nach 
den zellphysiologischen Gründen für die eigentümlichen Chromatin- 
umlagerungen in der frühen Gonozytogenese, wodurch wir zu einem 
Verständnis derselben gelangen können. Den Kenner unserer 
Literatur wird es nicht befremden, dass wir diese anscheinend selbst- 
verständliche Erkenntnis so sehr betonen. Denn wir wissen, dass 
die Genese der Geschlechtszellen zumeist nur im Hinblick auf deren 
Bedeutung als Träger der Erbsubstanzen betrachtet wurde und 
dass daher das Augenmerk der Untersucher in erster Linie auf 
die Frage gerichtet war, ob und auf welche Weise die Vorbereitung 
und der Vollzug der Reduktion und Verteilung der Chromosomen 
id est der Erbmasse vonstatten geht. Dabei werden aber die 
vorgefundenen morphologischen Zustände lediglich zu einem theo- 
retisch geforderten Endzweck in Beziehung gebracht, ohne dass 
den Gründen für dieselben nachgegangen würde, welche sich 
doch ungeachtet des etwa in bezug auf die Vererbung erreichten 
Zweckes für sich allein sollten ausfindig machen lassen. Wenn- 
gleich die Eizelle sicher nicht, wie es schon behauptet worden 
ist, die Zelle kat’ exochen ist, so ist sie doch ganz sicher eine 
Zelle und unterliegt daher den das Zellenleben im allgemeinen 
regulierenden Faktoren. Die Besonderheiten, welche an den Ge- 
schlechtszellen auftreten, so vor allem die numerische Reduktion 
der Chromosomen, müssen auf Modifikationen jener Faktoren und 
insbesondere derjenigen, welche die Zellteilung beherrschen, zurück- 
zuführen sein. Nur dann, wenn man künftig solche Zusammen- 
hänge zu erforschen sucht und damit einer kausalen Betrachtungs- 
weise mehr Raum geben wird als bisher, was zunächst zu neuen 
Fragestellungen in der allgemeinen Zytologie führen dürfte, wird 
man damit rechnen können, ein Verständnis für die Vorgänge 
der frühen Gonozytogenese zu gewinnen und Erklärungen an 


92 F. Wassermann: 


Stelle der bisher auf die verschiedenste Weise versuchten Inter- 
pretationen zu setzen. 

Wir können beim gegenwärtigen Stand unserer Kenntnisse 
von der Zelle nur den Versuch machen, die beschriebenen 
oogenetischen Kernveränderungen einer kausalen Betrachtungs- 
weise zu unterziehen. 

Wenn wir sehen, dass aus dem Kerngerüst der jungen Oozyte 
die Chromosomen in der Normalzahl herausgebildet werden, wobei 
einzelne dieser Chromosomen bereits eine Längsspaltung zeigen, 
so dürfen wir diese ganz typische Veränderung des Kernes wohl 
auch hier für den ersten Schritt zur beginnenden Teilung halten. 
Die darauffolgende Phase der Mitose müsste in der Auflösung 
der Kernmembran und dem Erscheinen der Polstrahlung bestehen. 
Davon ist aber nichts wahrzunehmen, sondern die Kernmembran 
bleibt erhalten und der Zellenleib scheint sich an den Teilungs- 
vorbereitungen, die sich im Kern abspielen, durchaus nicht zu 
beteiligen. So ist denn die Annahme gewiss gerechtfertigt — 
und wir folgen hier dem Weg, den Richard Hertwig (03) 
und einige seiner Schüler für die Auffassung der Oogenese vor- 
gezeichnet haben — dass die am Kern einsetzende Teilung in 
ihrem Beginn unterdrückt wird. Ob die Hemmung, die gegen- 
über dem offenbar vorhandenen Teilungsfaktor das Übergewicht 
behält, etwa nur im Protoplasma gelegen ist, vielleicht in dem 
Sinne, dass dessen kleinste Teilchen durch lebhaften Stoffwechsel 
in einer für dessen Bewältigung notwendigen Anordnung fest- 
gehalten sind, so dass sie nicht in die zur Teilung erforderliche 
Lage gelangen können, oder ob der Zustand des Kernes selbst 
oder endlich das Verhältnis zwischen Kern und Plasma — die 
Kernplasmarelation Hertwigs — für den Stillstand der Mitose 
verantwortlich zu machen sind, darüber dürften zurzeit nicht 
einmal Vermutungen gestattet sein. 

Nun bleiben in den folgenden Stadien der Oogenese die 
Chromosomen erhalten, nicht anders, wie auch beim Fortschreiten 
der Mitose das Chromatin, wenn es eine die Kernteilung er- 
heischende Massenzunahme erfahren hat, in der Form der Kern- 
schleifen in Erscheinung bleibt, so lange, bis wiederum der Zu- 
stand eingetreten ist, der seine Verteilung auf dem Kerngerüst 
gestattet. Da aber hier die ordnenden Kräfte fehlen, die sonst 
im Verlauf der Mitose jedes Chromosom auf gesonderter Bahn 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 93 


in die Äquatorialplatte führen, sind die Chromosomen innerhalb 
des Keimbläschens der auch unter anderen Umständen bemerk- 
baren Neigung zur Endvereinigung überlassen. Die ungehinderte 
Wirksamkeit dieses Umstandes führt aber zum kontinuierlichen 
Knäuel. 

Die Segmentierung, welche der Knäuel nach einem Bestand 
von unbestimmter Zeitdauer erleidet, scheint der Ausdruck für 
den Beginn einer erneuten Teilung zu sein.) Würde es sich hier 
nur um den ersten Schritt zur beginnenden Kernruhe handeln, 
so wäre durchaus nicht einzusehen, warum nicht einfach eine 
Verteilung des Chromatins auf dem Kerngerüst erfolgen sollte. 
Der Umstand, dass wiederum Chromosomen in Erscheinung 
treten, lässt sich wohl nur unter der Annahme einer beginnenden 
Mitose verstehen. Diese nach dem ersten erfolglosen Teilungs- 
schritt nunmehr mit der Segmentierung des Knäuels einsetzende 
Mitose muss aber unter ungewöhnlichen Bedingungen stehen; denn 
es werden jetzt nur mehr halb so viel Chromosomen gebildet als 
bei jeder vorausgegangenen Kernteilung. 

Der Frage nach der Ursache für die Entstehung der halben 
Chromosomenzahl können wir vielleicht näher kommen, wenn wir 
die experimentellen Untersuchungen von Nemec (10) über Kern- 
teilungsfiguren in chloralisierten Wurzelspitzen zum Vergleich 
heranfehen. 

Wurden die Wurzelspitzen von Lilium candidum, Pisum etc. 
für eine gewisse Zeit in Chloralhydratlösung gelegt, so sistierten 
in ihnen die karyokinetischen Prozesse. Nach Wiederaufhebung 
der Narkose durch Herausnahme der Wurzelspitzen aus der 
Chloralhydratlösung trat manchmal in Zellen der meristematischen 
Zone eine rückläufige Bewegung an den unterbrochenen Mitosen 
ein, so dass die beiden bereits gegen die Pole des noch ungeteilten 
Zellkörpers vorgerückten Tochterchromosomengruppen wieder zu 
einem einheitlichen besonders grossen Kern sich vereinigten. Die 
also erzeugten syndiploiden Kerne enthielten natürlich eine doppelte 
Chromosomenzahl gegenüber den diploiden. Was aber die Chro- 
matinmenge anlangt, auf die Nemec kein Gewicht legt, so war 
sie im Moment der Verschmelzung der beiden Tochterkerne die 
dem Kern zukommende. Während dieser aber nach Auflösung 


!) Auch das gelegentlich beobachtete Wiederauftreten von Längs- 
lichtungen an den Kernschleifen spricht für diese Annahme. 


94 F. Wassermann: 


der Chromosomen im Ruhezustand verharrte, dürfte sie, wie stets 
zwischen zwei Teilungen der in der meristematischen Zone ge- 
legenen Zellen, auf das Doppelte angewachsen sein (Gesetz des 
proportionalen Kernwachstums von Boveri, 04), ohne dass sie 
vorher halbiert worden wäre. So werden die syndiploiden Kerne 
nicht nur die doppelte Chromosomenzahl, sondern auch die doppelte 
Chromatinmenge besitzen. Schicken sich solche Kerne aber zur 
Teilung an, so entstehen manchmal, d. h. in den selteneren Fällen, 
aus dem Spirem statt der zu erwartenden und gewöhnlich auch 
vorhandenen doppelten Zahl von Chromosomen nur die normale 
eines diploiden Kernes. Es tritt also, wie Nemec beobachtete, 
infolge unvollständiger Segmentierung des Spirems, oder, wie wir 
im Hinblick auf die oogenetischen Vorgänge sagen können, durch 
Metasyndese je zweier Einzelchromosomen eine Zahlenreduktion 
der Chromosomen ein. Ebensolche „Reduktionsteilungen“ wie 
Nemec an pflanzlichen Zellen, beobachtete Godlewsky jun. (08) 
an Zellen von Echinidenkeimen, in denen er durch Cos-haltiges 
Wasser die Mitosen zum Stillstand gebracht und ebenfalls manchmal 
eine nachträgliche Verschmelzung neugebildeter Tochterkerne er- 
zielt hatte. 

Nun ist ja die nächstliegende Vermutung angesichts dieser 
Tatsachen diejenige, welche auch Nemec ausgesprochen hat, dass 
nämlich der Zelle bezw. dem Kern die Fähigkeit zukomme, die 
Chromosomenzahl zu regulieren (l. c., S. 29). Dieser Satz ist 
aber unvereinbar mit den Tatsachen, welche Boveri zu seinem 
(sesetz der Zahlenkonstanz der Chromosomen geführt haben. Es 
sei nur daran erinnert, dass in Embryonen von Ascaris megaloc. 
unival., die aus Eiern mit abnorm verlaufenen Reduktionsteilungen 
stammten, dauernd die vermehrte Chromosomenzahl in den Mitosen 
beobachtet werden konnte. Es kann also die Ursache der er- 
wälinten experimentell erzeugten Reduktionsteilungen nicht darin 
gelegen sein, dass etwa die verdoppelte Chromosomenzahl wieder 
notwendigerweise auf die normale zurückgeführt werden müsste. 
Dagegen spricht schon die Überlegung, dass nur hie und da 
einmal ein syndiploider Kern Nemecs eine Reduktionsteilung 
zeigt. Verursachte nämlich die doppelte Chromosomenzahl die 
Reduktion, so müsste diese bei jeder erstmaligen Teilung eines 
syndiploiden Kernes eintreten, da doch jeder die doppelte Chromo- 
somenzahl enthält. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 95 


Wenn wir nun nach Ablehnung des Erklärungsversuches, 
welchen Nemec für seine Beobachtungen gibt, nach einer anderen 
denkbaren Ursache für die Reduktionsteilungen in Zellen chlorali- 
sierter Wurzelspitzen uns umsehen, so scheint manches dafür zu 
sprechen, dass die angenommene, abnorm erhöhte Chromatinmenge 
derselben als ein nächstes ursächliches Moment betrachtet werden 
darf. Mit dieser Annahme liesse sich auch ohne weiteres ver- 
einbaren, dass nicht an allen syndiploiden Kernen die Teilung mit 
der reduzierten Chromosomenzall eintritt. Denn abgesehen davon, 
dass wir überhaupt nicht wissen, ob die Chromatinanreicherung 
während der Kernruhe immer mit gesetzmässiger Regelmässig- 
keit vor sich geht, können wir uns sehr wohl denken, dass die 
Zellen chloralisierter Wurzelspitzen in den feinsten Stoffwechsel- 
vorgängen, deren intakter Ablauf für die proportionale Chromatin- 
vermehrung doch wohl vorausgesetzt werden muss, gestört sein 
könnten. Darüber aber, warum die doppelte Chromatinmenge zur 
Bildung der halben Uhromosomenzahl führt, lässt sich natürlich 
nichts sagen, weil wir eben hier an der vorläufigen Grenze der 
Interpretationsmöglichkeit angekommen sind. 

Wenn wir nach dieser Deutung der Nemecschen Versuche 
zu unserem Fall zurückkehren, so können wir den Oozytenkern beim 
zweiten, in der Segmentierung des Knäuels sich manifestierenden 
Teilungsschritt mit den syndiploiden Kernen der chloralisierten 
Wurzelspitze vergleichen. Das Vergleichsmoment ist in der abnorm 
gesteigerten Ohromatinmenge gegeben, die wir den syndiploiden 
Kernen glaubten zusprechen zu dürfen. Denn auch die Oozyten- 
kerne können nach dem ersten erfolglosen Teilungsschritt, welcher 
zu einer Halbierung der Chromatinmenge hätte führen müssen, 
ihren Chromatinbestand vermehrt haben, ja dies ist um so wahr- 
scheinlicher, als hier Kerne gegeben sind, welche unter besonders 
günstigen Stoffwechselbedingungen stehen. Hier wie dort haben 
wir also eine Kernteilung, von der angenommen werden kann, dass 
sie mit einer abnorm gesteigerten Chromatinmenge zu operieren 
hat. Wenn wir für die syndiploiden Kerne der Wurzelspitzen 
die Vermutung aufgestellt haben, dass bei ihnen die vermehrte 
Chromatinmenge zur Verringerung der Chromosomenzahl führt, so 
könnte bei den Oozytenkernen dasselbe Moment zu der prinzipiell 
gleichen Erscheinung führen. Während aber die endweise Ver- 
knüpfung je zweier Chromosomen bei den syndiploiden Kernen 


96 F. Wassermann: 


der Wurzelspitzen die Normalzahl der Chromosomen hervorbringt, 
weil diese Kerne die doppelte Anzahl derselben enthalten haben, 
muss beim Oozytenkern mit der einfachen Chromosomenzahl durch 
die gleichen Umstände die Reduktion der Chromosomen auf die 
Hälfte der Normalzahl erreicht werden. 

Auch der zweite während der Oogenese von Zoogonus mirus 
einsetzende Teilungsschritt kommt nicht zum Abschluss, sondern 
wird wie der erste bald nach der völligen Herausbildung der 
Chromosomen zum Stillstand gebracht. Wahrscheinlich sind hier 
aber andere Faktoren für die Störung der Mitose verantwortlich 
zu machen als das erste Mal. Es scheinen nämlich nach der 
Segmentierung des Knäuels die Momente wirksam zu werden, 
welche die Auflösung des Chromatins, d. h. den Ruhezustand des 
Kernes, herbeiführen. Was am Schluss der ersten Mitose hätte 
geschehen müssen, aber infolge ihrer Unterbrechung unterblieben 
ist, nämlich die Auflösung der Chromosomen, das geschieht jetzt, 
nachdem sich der Kern aufs neue zur Teilung angeschickt hat. 
Es macht den Eindruck, als ob hier eine zeitliche Inkongruenz 
eingetreten wäre zwischen zwei Prozessen, die unbedingt parallel 
laufen müssen, wenn die Zellteilung richtig abgewickelt werden soll. 

An dem Gesagten ändert es nichts, wenn wir sehen, dass 
die Chromosomen vor ihrer Auflösung zum Bukett angeordnet 
werden. Denn eine solche Lagerung der Chromatinschleifen mit 
den freien Enden gegen einen Kernpol ist durchaus nicht „hetero- 
typisch“, sondern wir sehen sie auch sonst manchmal von den 
neugebildeten Prophasenchromosomen oder den vor der Auflösung 
stehenden Telophasenchromosomen eingenommen. Zum Zeugnis 
dessen sei auf die bei Boveri (04. S.5) nach C. Rabl abge- 
bildeten Kerne von Epidermiszellen der Larven von Salamandra 
maculosa hingewiesen. 


II. Periode der Oozytenentwicklung von der Auflösung 
des Buketts bis zur Prophase der I. Reifeteilung. 


a) Befunde. 

Der Übergang von der ersten Periode der Oozytogenese zur 
Hauptwachstumsperiode, als welche wir die zweite zu bezeichnen 
haben, wird durch die Stadien der Bukettauflösung vermittelt 
(Fig. 46 und 47). Wie wir gesehen haben, geht der Auflockerung 
und dem Verblassen der reduzierten Schleifen bei unserem Objekt 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 97, 


keine Desorientierung des Buketts voraus, wie das v. Kemnitz 
(13) für Brachycoelium salamandrae angibt und wie es nach Gold- 
schmidt (08) bei Dichrocoelium lanceolatum der Fall ist. Die 
Bukettschleifen verharren bei Zoogonus in ihrer polaren Orien- 
tierung, bis sie so weit aufgelockert und abgeblasst sind, dass 
man sie nicht mehr verfolgen kann und nur einzelne noch übrig 
gebliebene Schollen als eben noch erkennbare Reste der Schleifen 
im Kernraum zerstreut gefunden werden. Diesen Vorgang der 
Auflockerung und des Verblassens der Bukettschleifen illustrieren 
die Fig. 46 und 47. In einer ganz besonders klaren Weise voll- 
zieht sich nach der Darsteliung von Jörgensen (10) das Ver- 
blassen des Buketts ohne jede Desorientierung seiner Schleifen 
bei Proteus. 

Auch die Reste der Bukettschleifen bleiben nicht bestehen, 
sondern die chromatischen Partikel, welche sie zusammensetzen, 
scheinen noch eine weitere Verteilung auf das Kerngerüst zu 
erfahren. 

So kommt wohl das Aussehen des Oozytenkernes zustande, 
den wir an den Anfang der Hauptwachstumsperiode zu stellen 
haben. Hier ist zu bemerken, dass die Frage nach der Aufeinander- 
folge der vorgefundenen Stadien in diesem Abschnitt der Oogenese 
keine Schwierigkeiten macht, weil wir, innerhalb des einzelnen 
Ovariums wenigstens, in der Grösse des Kernes einen sicheren 
Anhaltspunkt für die Seriierung haben und die Endstadien durch 
ihren Übertritt in den Uterusschlauch als solche gekennzeichnet sind. 

Der Oozytenkern nun, welcher in die Hauptwachstumsperiode 
eintritt (Fig. 55), enthält neben einem grossen, meist exzentrisch 
gelegenen und kompakten Nukleolus zahlreiche, mit Chromatin- 
farbstoffen, insbesondere mit Eisenhämatoxylin, tingierbare korpus- 
kuläre Elemente. Viele von ihnen haben die Gestalt von scholligen 
Bändern, wie wir sie auf dem Weg der Bukettauflösung haben 
entstehen sehen. Neben diesen gröberen Bestandteilen sind aber 
auch feinere, fädige oder aus aufgereihten Körnchen zusammen- 
gesetzte Bildungen und anscheinend isolierte Körner und Körnchen 
in dem Kernraum verteilt. Alle diese Inhaltsgebilde des Kernes 
sind sehr unscharf konturiert und man sieht oft von ihrer Ober- 
fläche feinste Fäden wegziehen, wie man ja auch zwischen ihnen 
und insbesondere in der Umgebung des Nukleolus, von dem sie 


oft radiär wegziehen, feinste Fadenstrukturen wahrnimmt. So 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 7 


95 F. Wassermann: 


gewinnt man den Eindruck, dass die erwähnten chromatischen 
Substanzanhäufungen einem überaus feinen und nur an manchen 
Stellen hervortretenden Kerngerüst aufgelagert sind. Die Kern- 
membran ist auf dem optischen Querschnitt als scharfe Kontur 
wahrnehmbar. Ihrer Innenfläche liegen in wechselnden Abständen 
stets Chromatinpartikel einzeln oder in grösserer Anzahl auf. 

Das Plasma der Eizelle, welches anscheinend eine sehr eng- 
maschige Wabenstruktur besitzt, lässt sich nach aussen nicht ab- 
grenzen. Nur bei den älteren Eiern kurz vor ihrem Austritt aus 
dem Ovarıum kann man eine Zellkontur feststellen und auch hier 
scheint dies nur auf dem Vorhandensein von Spalten zu beruhen, 
die infolge von Schrumpfung bei der Fixierung zwischen den 
Eizellen auftreten. Im allgemeinen stellt das Ovarium eine einzige 
Plasmamasse mit eingelagerten Oozytenkernen dar und erst die 
austretende Eizelle ist gegen die benachbarten Oozyten deutlich 
abgesetzt (siehe Fig. 11). 

Immer finden wir im Plasma der jüngsten Oozyten dieser 
Entwicklungsperiode einen die Chromatinfarbstoffe annehmenden 
Einschluss, der zunächst nur in Form eines Körnchens auftritt, 
das nicht grösser ist als die kleinen Chromatinkörner im Kern. 
Zumeist liegt dieses Gebilde einem Pol des ovalen Oozytenkernes 
gegenüber nahe der Kernmembran, jedoch nur hie und da die- 
selbe direkt berührend. Bald wächst dieser Körper zu einem 
ovoiden Gebilde heran und auf dieser Stufe treffen wir den 
Plasmaeinschluss in der Oozyte, die unsere Fig. 55 wiedergibt. 
Das Plasma ist in seiner nächsten Umgebung in der Regel etwas 
aufgehellt. Von besonderer Bedeutung sind nun die Beziehungen 
zwischen dem extranukleären Körper und der ihm gegenüber 
liegenden Stelle der Kernmembran. Diese ist meistens, obwohl 
eine direkte Berührung mit dem Aussengebilde nicht statthat, 
der Ausdehnung des Plasmaeinschlusses entsprechend eingebuchtet 
und oft sieht man ferner, dass gerade dieser Stelle der Kern- 
membran besonders viele und grössere Chromatinpartikel innen 
anliegen 

Mit dem fortschreitenden Wachstum des Kernes geht nun 
eine weitere Verteilung seines chromatischen Inhalts auf das 
Gerüst vor sich. So weit geht dieser Prozess allerdings niemals, 
dass in dem Kern keine Chromatinzüge und -partikel mehr zu 
sehen wären, dass wie in manchen Eiern von Proteus (Jörgensen 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 2) 


[1910]) eine Zerstäubung des Chromatins einträte. Aber die 
scholligen Züge, die in ihrem Bau noch den Charakter des ehe- 
maligen Buketts bewahren, werden seltener; an ihrer statt sieht 
man schwächere Chromatinzüge, die sich allerdings nur über 
eine ganz kurze Strecke ausdehnen und es herrschen die fädigen 
Strukturen vor. Einen so beschaffenen Zustand repräsentiert der 
Kern der Fig. 56. Die eben besprochene Veränderung erhellt 
aus einem Vergleich mit dem Kerne der Fig. 55, dem gegenüber 
der jetzt in Rede stehende natürlich grösser ist, aber von dem 
er sonst, d. h. in betreff des Nukleolus, der Membran, der Form 
(letzteres im allgemeinen ohne Rücksicht auf die Besonderheit 
des Kernes der Fig. 55) nicht wesentlich abweicht. Was die 
deutoplasmatische Bildung betrifft, so kann sich diese auf der 
vorliegenden Entwicklungsstufe der Oozyte noch ebenso verhalten, 
wie auf der vorigen. In vielen Fällen liegt auch diesem Kern 
ein einziger Plasmaeinschluss an einem Pole nahe, wenn nicht 
schon jetzt, wie es später immer der Fall ist, mehrere Plasma- 
einschlüsse zu konstatieren sind. Für unsere Zeichnung (Fig. 56) 
haben wir einen besonderen Fall gewählt, der in dieser Deutlich- 
keit sehr selten ist. Der Plasmaeinschluss, welcher in diesem 
Ei nach links von dem oberen Kernpol sich findet. setzt sich, 
wie man durch Drehen der Mikrometerschraube einwandfrei fest- 
stellen kann, in den Kernraum hinein fort und sein Fortsatz 
schliesst sich an ein der Membran nahe liegendes Chromatin- 
gebilde an. Man beobachtet auch, dass in der nächsten Um- 
gebung der Stelle, wo diese wurstförmige Chromatinbildung die 
Kernmembran durchsetzt, der strichförmige Ausdruck der Kern- 
membran auf dem Querschnittsbild verwischt ist. 

Eine Strecke weiter unten liegt an der Innenfläche der 
Kernmembran ein Chromatinpartikel und ihm entsprechend weist 
das anliegende Plasma in einem ganz kleinen Umkreis eine 
eigentümliche, gegenüber seinem sonstigen wabigen Bau als 
homogen zu bezeichnende Beschaffenheit auf. Eine Störung in 
der Integrität der Kernmembran ist hier nicht festzustellen. 

Ein nächstes Stadium der wachsenden Oozyte zeigt die 
Fig. 57. Der Kern ist gegenüber dem vorausgehenden nicht 
beträchtlich gewachsen. Wir können aber nicht sagen, ob nicht die 
individuellen Schwankungen in der Grösse der Eier das Wachstum 


in diesem Fall zu gering erscheinen lassen. Die verglichenen Kerne 
7* 


100 F. Wassermann: 


stammen zwar aus einem Ovarium, sonst dürften sie ja überhaupt 
nicht gegeneinander gehalten werden; aber auch die Beachtung 
dieser Voraussetzung gibt noch kein zuverlässiges Urteil über 
das wirkliche Maß der Grössenzunahme zwischen den einzelnen 
Stadien der Oozyten dieser Periode; denn es sind sicher individuelle 
Schwankungen in dieser Beziehung vorhanden, indem auch die Eier 
ein und desselben Tieres eine verschiedene Endgrösse erreichen, 
was auch in anderen Fällen, so z. B. beim Axolotl von Fick (98) 
und bei Proteus von Jörgensen (10) festgestellt worden ist. Der 
Kern der Fig. 57 unterscheidet sich von dem der Fig. 56 also nicht 
so sehr durch seine Grösse, als vielmehr durch die Beschaffenheit 
des Kerninhalts und durch die Anzahl und die Formation der 
protoplasmatischen Einschlüsse. Was den ersteren Punkt anlangt, 
so treffen wir hier ein chromatisches Gerüst, das vielfach aus 
relativ, d. h. im Vergleich zum jüngeren Stadium, langen und 
dünnen, oft klumpig angeschwollenen und verzweigten, sowie durch 
feine Ausläufer miteinander verbundenen Zügen besteht. Daneben 
finden sich auch kleine Körner und Brocken, und solche sind es, 
die der Innenfläche der Kernmembran auch hier anliegen. Wie 
aus der Zeichnung hervorgeht, besteht im Kern nicht etwa ein 
zusammenhängendes Netz der geschilderten Stränge, sondern man 
kommt bei der Verfolgung der verzweigten und anastomosierenden 
Züge immer an ein Ende, wo feinste, eben noch sichtbare Fäden 
in dem-Kernraum sich zu verlieren scheinen, vielleicht aber auch 
in ein achromatisches Gerüst sich fortsetzen. Freilich sind diese 
grossen Kerne in den Schnitten niemals ganz enthalten, aber diese 
Tatsache berührt das eben Gesagte natürlich nicht. Die Plasma- 
einschlüsse treten nun sehr in den Vordergrund. Man sieht zu- 
weilen noch Erscheinungen, wie sie oben für die jüngeren Stadien 
beschrieben worden sind. So kann man auch in der Fig. 57 am 
rechtsseitigen Umfang, der Kernmembran anliegend, eine Bildung 
wahrnehmen, die von der in Fig. 56 dargestellten, abgesehen von 
der dort vorliegenden Besonderheit, nicht wesentlich verschieden 
sein dürfte. Aber hauptsächlich wird unser Interesse nunmehr 
auf das ansehnliche Depot offenbar derselben deutoplasmatischen 
Substanz, die wir bisher nur in kleinen Ansammlungen beobachtet 
haben, hingelenkt. Diese dunkel tingierte Masse stellt körperlich 
betrachtet einen unregelmässig geformten Klumpen dar, der etwa 
2!/smal so gross ist wie das Kernkörperchen, und der in seinen 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 101 


zentralen Teilen von kompaktem, peripher aber von aufgelockertem 
Bau ist. Das Plasma bildet einen hellen Hof um das eingelagerte 
Gebilde. Die Lage solcher deutoplasmatischer Anhäufungen ist, 
wie ein weiterer Fall zeigen wird, nicht konstant, aber es ist ein 
häufiges Vorkommnis, dass sie gegen die Zellgrenze und relativ 
weit von der Kernmembran entfernt und, wie hier, in einem 
zungenförmigen Ausläufer des Zellenleibes getroffen werden. Bei 
Eiern dieser Grösse ist übrigens häufig in der oben gekenn- 
zeichneten Weise eine Abgrenzung ihres Plasmaterritoriums 
möglich. Neben diesem Hauptkörper finden sich stets noch 
andere Plasmaeinschlüsse. Sie können in der Form kleiner Körner 
und Stäbe auftreten (Fig. 59) oder in Gestalt von mehr oder 
weniger dichten, oft in mehrere wurstförmige und kugelige 
Teile gegliederten grösseren Substanzanhäufungen. Bemerkenswert 
ist, dass diese Gebilde, auch die kleinsten der Kernmembran 
in der Regel nicht anliegen, sondern überall im Plasma an- 
zutreffen sind. 

Das folgende Oozytenkernbild Fig 60 ist gegenüber dem 
vorhergehenden von recht charakteristischem Aussehen. Die 
chromatischen Bildungen, die wir jetzt im Kern antreffen, sind 
von viel ansehnlicherem Volumen als die Fäden, die den Oozyten- 
kern vorher erfüllt haben. Lange und dicke, zackig konturierte, 
oft bizarr geformte Chromatinkörper durchziehen jetzt den Kern- 
raum. Neben diesen hervorstechenden und dem Kern sein Gepräge 
gebenden Ohromatinfiguren. die, wie Fig. 55 zeigt, oft auch in 
der Mehrzahl als nukleolenartige Körper auftreten können, finden 
wir auch hier kleinere Chromatinkonglomerate und feinfädige 
Strukturen. Für die deutoplasmatischen Gebilde dieses Stadiums 
gilt das für das vorhergehende (Gresagte. Es lässt sich sehr schwer 
entscheiden, ob die Zahl dieser Einschlüsse während dieser Periode 
des Eiwachstums noch zunimmt, oder ob die Gesamtmasse der 
fraglichen Substanz nun konstant bleibt. Es scheinen hier weit- 
gehende individuelle Schwankungen zu herrschen, und da man 
nie den ganzen Zelleib auf einem Schnitt vor sich hat, in vielen 
Fällen auch jetzt noch die Abgrenzung der Zellen gegeneinander 
nicht gelingt, kann man eine Anschauung über den gesamten 
Inhalt eines Eileibes am Deutoplasma nur sehr schwer gewinnen. 

Der eben geschilderte Zustand des Eies wird festgehalten, 
bis die Zelle das Ovarium verlässt. In Fig. 61 ist noch einmal 


102 F. Wassermann: 


ein solches Endstadium der innerhalb des Ovariums sich voll- 
ziehenden Entwicklung abgebildet, und neben diesem liegt eine 
ganz anders geartete, eben die aus dem Ovarium austretende 
Eizelle. Die Veränderungen, welche in diesem Moment am Ei 
vor sich gehen, müssen als eine stürmisch verlaufende, die ganze 
Eizelle betreffende Umwälzung bezeichnet werden. Im Kern, 
dessen Nukleolus an den Vorgängen unbeteiligt zu sein scheint, 
verschwinden die Chromatinstränge und Schollen bis auf einzelne 
Reste. An manchen Stellen erscheint ein blasses, feinfädiges und 
weitmaschiges Netz. Dabei ist der ganze Kernraum in erheblichem 
Maße verdunkelt. Diese Erscheinung kann man allerdings nur bei 
einer gewissen Intensität der Färbung wahrnehmen. Sie fehlt z. B. 
bei dem schwächer gefärbten Kern der Fig. 64, um so deutlicher 
fällt aber bei diesem Kern seine Armut an chromatischer Substanz 
in die Augen. In der Peripherie des Kernes finden sich besonders 
dunkel gefärbte, zum Teil schollige, aber auch wolkige Substanz- 
anhäufungen. Die Plasmaeinschlüsse erfahren eine Vermehrung, 
und es kommt vor, dass ganze zusammenhängende Lagen chro- 
matisch gefärbter Substanz der Kernmembran aufliegen (Fig. 64). 
Ausserdem bildet sich oft eine grosse Vakuole im Plasma, die 
den Kern komprimiert und bohnenförmig gestaltet; sie dehnt sich 
aber nicht über die ganze Höhe des Keimbläschens aus, so dass 
man sie nicht auf jedem durch den Kern gelegten Schnitt antrifft 
(Fig. 62). 

Sobald das Ei in den Anfangsteil des Uterus gelangt ist, 
scheint ein Gleichgewichtszustand erreicht zu sein. Der Kern 
rekonstruiert sein chromatisches Gerüst wieder zu einer Form, 
die der im Ovarium zuletzt erreichten sehr ähnlich ist. Damit 
geht eine Aufhellung des Kernsaftes einher. Während dieser 
Vorgänge scheint der Nukleolus eine stoffliche Veränderung zu 
erleiden. Er wird kleiner und blasser, und es treten Vakuolen 
in seinem Innern auf. Der Protoplasmaleib hat in erkennbarem 
Maße an Umfang zugenommen. Die Einschlüsse, die zuletzt in 
ihm aufgetreten waren, sind bis auf einen oder zwei in den Polen 
des Ovoids gelegene grosse und einige wenige kleine verschwunden. 
Ihrer Menge, Form und Lage nach entsprechen diese Einschlüsse 
im Plasma ganz den vor dem Austritt des Eies gebildeten. Es 
ist daher anzunehmen, dass die auf der Kernmembran des aus- 
tretenden Eies abgelagerten Bildungen nicht jenen zuerst und 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 105 


während der ganzen Wachstumsperiode allmählich entstandenen 
hinzugefügt werden, sondern dass sie sogleich nach ihrem Auf- 
treten wieder resorbiert werden. Vielleicht ist die gezeigte Vakuole 
im Eileib der Ausdruck für eine massenhaft erfolgende Ein- 
schmelzung dieser beim Austritt des Eies gebildeten Substanzen. 
Auch sprechen eben noch wahrnehmbare, dunklere Stellen des 
Eileibes dafür, dass in diesen Stadien der angenommene Resorptions- 
prozess sein Ende erreicht. Es ist sehr wahrscheinlich, dass die 
Vergrösserung, die der Plasmaleib des ausgewachsenen, im Uterus 
angelangten Eies gegenüber dem noch im Ovarium befindlichen, 
wie erwähnt, aufweist, mit Hilfe der resorbierten Massen geschieht. 
Nun ündet auch die Befruchtung des Eies statt. Man sieht einen 
spiralig aufgerollten, scharf konturierten Spermafaden neben dem 
Eikern liegen. Selten begegnet man einem polyspermen Ei, wie 
es in Fig. 74 abgebildet ist. Da man in späteren Stadien niemals 
mehr als einen Spermakern antrifft, so ist anzunehmen, dass 
entweder überzählige Spermien zugrunde gehen, oder dass die 
Polyspermie die Eier an der weiteren Entwicklung hemmt. Endlich 
treten auch die beiden, dem sogenannten Dotterstock ent- 
stammenden Zellen an einen Pol heran und bilden die Eihülle. 
Diesen Zustand des ausgewachsenen, befruchteten und von der 
Hüllmembran umgebenen Eies repräsentiert die Fig. 65. Diese 
Stadien sind sehr selten: es scheint, dass das Ei nach seinem 
Austritt aus dem Ovarium die weiteren Veränderungen bis zum 
Abschluss der Reifeteilungen sehr rasch durchläuft. So musste 
die abgebildete Zelle zur Darstellung des Endzustandes, von dem 
aus dann die eigentliche Prophase der ersten Reifeteilung beginnt, 
herangezogen werden, obwohl sie des Nukleolus zu ermangeln 
scheint. Er ist vielleicht in einem vorausgehenden oder folgenden 
Schnitt enthalten, was aber bei der Schwierigkeit, Kernanschnitte 
in einem relativ dicken Schnitt zu ermitteln und als zu dem in 
einem abgetrennten Niveau gelegenen Hauptteil gehörig zu er- 
kennen, nicht festgestellt oder ausgeschlossen werden kann, zumal 
da man mit der Möglichkeit eines Substanzverlustes beim Mikro- 
tomieren immer zu rechnen hat; vielleicht verbirgt er sich aber 
auch unter einer Chromatinansammlung. Dass der Nukleolus hier 
fehlen sollte, ist nicht glaubhaft, da er in allen folgenden Stadien 
der Prophase der ersten Reifeteilung immer in der besprochenen 
veränderten Form vorhanden ist. 


104 F. Wassermann: 


Es ist am Schlusse dieses Abschnittes noch anzugeben, dass 
die beschriebenen Kernbilder der wachsenden Oozyten bei allen 
angewandten Fixierungsmitteln in wesentlich gleicher Weise auf- 
treten. Je nach der angewandten Färbung sind die Strukturen 
natürlich mehr oder weniger deutlich; die vorgeführten Beispiele 
sind mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain behandelt. 


b) Allgemeiner Teil. 

Soweit sie die Struktur des Keimbläschens betreffen, sind 
die für die II. Periode der Oozytenentwicklung des Zoogonus 
gemachten Angaben neu. Während sich Gregoire (09) und 
Schreiners (08) mit diesen Verhältnissen gar nicht beschäftigen, 
erledigt Goldschmidt in dem beschreibenden Teil seiner 
Zoogonus-Arbeit die ganze Periode mit folgenden Worten (05, 
S. 610): „Mit dem Beginn der Wachstumsperiode verschwindet 
das Spirem wieder und es stellt sich ein lockeres, achromatisches 
Kerngerüst mit eingestreuten chromatischen Partikeln und einem 
grösseren, chromatischen Nukleolus her. Die Eizelle und ihr 
blasiger Kern beginnen nun auf das Vielfache ihres Volumens 
heranzuwachsen.“ 

Auch in den anderen, mehrfach erwähnten, die Oogenese 
von Trematoden betreffenden Arbeiten finden wir keine mit unseren 
Befunden vergleichbaren detaillierten Angaben über die Keim- 
bläschenstruktur während der Hauptwachstumsperiode. 

Unsere Befunde über die deutoplasmatischen Ablagerungen 
im Eileib dagegen lassen sich mit den von Schellenberg (11) 
bei Fasciola hepatica „ohne Präjudiz für ihre Synthese“ als Dotter- 
kugeln bezeichneten Gebilden und mit den Plasmaeinschlüssen, die 
v. Kemnitz (13) im Ei von Brachycoelium salamandrae findet, 
vergleichen. Goldschmidt (09) hat dem Auftreten der fraglichen 
Substanz besondere Aufmerksamkeit geschenkt. Er beschreibt 
unter Zugrundelegung von Bildern, die mit manchen der unserigen 
im grossen und ganzen übereinstimmen, eine „Dotterkernbildung“, 
durch Chromatinausschwitzung aus dem Kern. Wir haben unserer- 
seits die Bezeichnung Dotterkern bei der Beschreibung der 
Ablagerungen nicht angewandt und halten sie auch nicht für 
angebracht, weil bei Zoogonus kein dem Dotter anderer Eier 
vergleichbares Reservematerial entsteht. Wenn Jörgensen (10) 
davon absteht, ähnliche, von ihm allerdings genauer analysierte 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 105 


Plasmaeinschlüsse der Oozyten von Proteus mit dem Namen Dotter- 
kern zu belegen, weil sie „auch nicht den geringsten morpho- 
logischen Zusammenhang mit dem definitiv gebildeten Dotter“ 
haben, so führt ihn im Grunde die gleiche Überlegung wie uns zur 
Ablehnung der fraglichen Bezeichnung. Korschelt und Heider 
(1902, S. 263) sagen, „dass sehr verschiedene Dinge als ‚Dotter- 
kern‘ beschrieben worden sind“. Da nun, wie aus Jörgensens 
diesbezüglicher Literaturzusammenstellung hervorgeht, die An- 
schauungen der verschiedenen Autoren über die Herkunft des 
sogenannten Dotterkernes weit auseinander gehen, je nachdem sie 
eine Entstehung desselben im Plasma oder aus dem Kern an- 
nehmen oder von einer Meinungsäusserung über diesen Punkt 
ganz abstehen zu müssen glauben, wäre ja mit der Bezeichnung 
„Dotterkern“ über die Natur der Plasmaeinschlüsse nichts prä- 
judiziert und höchstens läge darin der Ausdruck der Meinung, 
dass die Substanzen trophische Funktion für das Ei haben. Dies 
aber ist, wie auch aus unserer Darstellung hervorgeht, wahr- 
scheinlich. Indessen ist es doch wohl besser, eine bestimmte Be- 
zeichnung für solche deutoplasmatische Bestandteile der Zelle 
vorerst zu vermeiden, da wir heute in den bedeutungsvollen 
Fragen nach dem Wesen der verschiedenen Plasmaeinschlüsse 
wie der „Chromidien“ und „Mitochondrien“ noch nicht über 
das Stadium der vorurteilslosen Sammlung von Beobachtungen 
hinausgekommen sind. 

Nach Goldschmidt steht das erste Auftreten des Dotter- 
kernes „zweifellos in Beziehung zu dem Kern der Eizelle“. „Man 
sieht zunächst auf der Oberfläche des ganzen Kernes zerstreute 
chromatische Massen wie feine Niederschläge auftreten, man er- 
hält den Eindruck, dass sie auf der Oberfläche der Kernmembran 
sozusagen ausgeschwitzt sind. Sie liegen der Kernmembran so 
dicht auf, dass diese vollständig undeutlich wird und die Kern- 
grenze kaum zu bestimmen ist. Später kondensieren sich diese 
Partikel dann zu mehr oder minder kompakten Brocken .. . Bis- 
weilen.... sitzt die Hauptmasse dieser Dotterkernsubstanz kappen- 
artig dem einen Pol des an dieser Stelle undeutlich begrenzten 
Kernes auf. Nunmehr fliessen die verschiedenen Massen zu einigen 
wenigen grossen Brocken zusammen, die sich fast intensiver als 
das Kernchromatin färben und stets in der Nähe des Kernes liegen 
bleiben. Meist kommt es dann zur Ausbildung eines einheitlichen 


106 F. Wassermann: 


Dotterkernes ..... Nur in seltenen Fällen findet man noch im aus- 
gebildeten Ei den Dotterkern in mehrere Brocken zerteilt.“ 

Für Goldschmidt ist damit die Herkunft des Dotterkernes 
aus dem Eikern sicher erwiesen. v. Kemnitz dagegen erklärt 
ganz bestimmt, dass die deutoplasmatischen Substanzen, die bei 
seinem Objekt „sowohl als grössere Brocken und Schollen als 
auch als Stäbchen (Chondriokonten), wie in Gestalt feiner Mito- 
chondrien auftreten können und häufig in einem schnabelartigen 
Fortsatz des Plasmas eingelagert sind“ und die seiner Ansicht 
nach sicherlich den von Goldschmidt bei Zoogonus als chro- 
midialer „Dotterkern“ bezeichneten Gebilden entsprechen „jeden- 
falls im Plasma“ entstehen. Chromatinaustrittsfiguren sind diesem 
Autor niemals zu Gesicht gekommen. Er hält die deutoplasma- 
tischen Ablagerungen, wie aus den zitierten Worten hervorgeht, 
für eine Art von Plastosomen, ohne allerdings durch spezifische 
Färbungen hierfür einen Beweis anzutreten. 

Wenn wir zunächst die Beschreibung, welche Goldschmidt 
für das Entstehen des „Dotterkernes“ geliefert hat, mit unseren 
Beobachtungen vergleichen, so decken sich manche davon, nämlich 
die, welche das aus dem Ovarium austretende Ei betreffen, voll- 
ständig mit seinen Angaben. Auch wir haben, wie Fig. 64 deutlich 
zeigt, Kerne gesehen, auf deren Membran chromatisch gefärbte 
Partikel in grosser Zahl, stellenweise in einheitlicher Masse liegen. 
Die Fig. 63 zeigt die Aufsicht auf einen solchen Eikern und gibt 
eine körperliche Vorstellung davon, dass der ganze Kern wie 
bespickt ist mit aufgelagerten Substanzen. Solche Bilder scheinen 
eine glänzende Bestätigung der von Goldschmidt vertretenen 
Anschauung zu liefern. Aber es handelt sich bei diesen die Er- 
scheinungen der „Chromatin-Ausschwitzung“ darbietenden Eiern, 
wie gesagt, um solche, die das Ovarium eben verlassen. Niemals 
kommen solche Zustände bei den jüngeren Oozyten der Haupt- 
wachstumsperiode vor. Die als „Dotterkern“ im Sinne Gold- 
schmidts zu bezeichnenden Bildungen sind aber schon vor dem Auf- 
treten der für ihre Bildung verantwortlich gemachten Erscheinungen 
vorhanden, sind zuerst als kleine neben dem Kern gelegene Ab- 
lagerungen, dann als grössere Deutoplasmaansammlungen er- 
schienen, wobei immer wieder kleinere Schollen im Plasma offen- 
bar neu aufgetreten sind. Es ist also nicht richtig, wenn Gold- 
schmidt nach der Schilderung des Chromatinaustritts fortfährt: 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 107 


„Nunmehr fliessen die verschiedenen Massen zu einigen wenigen 
Brocken zusammen etc.“ Die grossen Brocken waren vielmehr 
schon vorher entstanden und überdauern, anscheinend unberührt 
davon, die Umwälzungen, die in der Eizelle zum Teil unter dem 
Bilde der „Chromatin-Ausschwitzung“ bei ihrem Austritt aus dem 
Ovarium vor sich gehen. Goldschmidt hat also die eigent- 
liche Entstehung des „Dotterkernes“ gar nicht geschildert. Wenn 
wir auch zu dem Schlusse kommen werden, dass sich seine An- 
nahme eines Chromatinaustritts für die aus dem Ovarium los- 
lösende Eizelle sehr wohl begründen lässt, so können wir anderer- 
seits, wie dann zu zeigen sein wird, seiner Anschauung, dass die 
deutoplasmatischen Massen, deren Entstehung während der ganzen 
Hauptwachstumsperiode vor sich geht, chromidialer Natur sind, 
d.h aus dem Kernchromatin stammen, nicht ohne weiteres bei- 
treten, sondern wir werden noch einer anderen Vorstellung über 
die Herkunft der deutoplasmatischen Substanz Raum geben müssen. 

Unsere Beobachtungen lassen es geboten erscheinen, zwei 
Prozesse während der Hauptwachstumsperiode der Eier streng 
auseinander zu halten. Wir müssen erstens die Bildung der deuto- 
plasmatischen Substanz und zweitens die geschilderten stürmischen 
Umwandlungen innerhalb der Eizelle im Moment ihres Austritts 
aus dem Ovarium unterscheiden. Dann haben wir uns zuerst die 
Frage vorzulegen, ob diese beiden Vorgänge nur verschieden 
intensive Entwicklungsphasen ein und derselben stofflichen Um- 
wandlung sind, oder als unabhängig voneinander zu erachten sind. 
Es steht unserer Meinung nach ausser Zweifel, dass wir es hier mit 
zwei voneinander unabhängigen Prozessen zu tun haben. Wie bereits 
hervorgehoben, sind die deutoplasmatischen Ablagerungen schon 
vor dem Erscheinen der charakteristischen Austrittsphänomene 
des Eies vorhanden und haben nach dem Abklingen derselben 
keine Vermehrung erfahren. Immerhin aber könnten beide Pro- 
zesse wesensgleich sein, es könnte sich immer um eine im ersten 
Falle allmählich vor sich gehende, im zweiten um eine plötzlich 
einsetzende und in grossem Ausmaße ablaufende CUhromatin- 
ausstossung handeln. Somit entsteht die für jeden Prozess ge- 
trennt zu behandelnde Frage, ob sichere Anzeichen dafür vor- 
handen sind, dass Kernchromatin ins Eiplasma übertritt. 

Wenn wir die Entstehung der deutoplasmatischen Substanzen 
ganz unvoreingenommen betrachten, so können wir für ihre 


108 F. Wassermann: 


genetische Ableitung aus dem Chromatin des Kernes nur folgende 
Beobachtungen verwerten. Wir haben gesehen, dass gegenüber 
der Stelle, wo in unmittelbarer Nähe des Kernes der erste Plasma- 
einschluss gelegen ist, die Kernmembran eine Einbuchtung auf- 
weist, die wir vielleicht auf eine Veränderung derselben zurück- 
führen können; immer liegen der Kernmembran hier Chromatin- 
körner in etwas grösserer Zahl als an ihrer übrigen Innenfläche 
auf. Weiterhin beobachteten wir hie und da einmal, dass sich 
eine im Plasma gelegene Substanzanhäufung in das Innere des 
Kernes fortsetzt. Diese Erscheinungen könnte man für den 
morphologischen Ausdruck eines Chromatinaustrittes ansprechen. 
Nur dann übrigens, wenn man einen solchen Vorgang annimmt, 
kann man die deutoplasmatischen Substanzen für Chromatin oder 
„Chromidien“ erklären; denn ihr färberisches Verhalten allein 
berechtigt hierzu noch nicht. Mit v. Kemnitz (12, S. 579) 
müssen wir nämlich sagen, dass für die Entscheidung, ob eine 
im Plasma gelegene Substanz als Chromatin bezeichnet werden 
darf, nicht ihr tinktoriell-morphologisches Verhalten, sondern 
lediglich die genetischen Beziehungen zum Kern massgebend sein 
dürfen. Das färberische Verhalten unserer deutoplasmatischen 
Substanz ist durchaus nicht eindeutig. Am intensivsten tingieren 
sie sich natürlich mit Eisenhämatoxylin, nur schwach färben sie 
sich mit Hämatoxylin und Boraxkarmin, treten dagegen bei An- 
wendung der Bendaschen Mitochondrienfärbung in einer für 
die Plastosomen charakteristischen Tinktion hervor und nehmen 
in älteren Eizellen, die einen einheitlichen „Dotterkern“ besitzen, 
bei Anwendung der Nukleolenfärbung von Montgomery intensiv 
Eosin an. Hier könnte also wirklich nur die genetische Beziehung 
zum Kern ein Recht geben. in den Plasmaeinschlüssen aus- 
gestossenes Chromatin zu sehen. 

Während also gewisse morphologische Erscheinungen allein 
der Annahme eines Chromatinaustrittes aus dem Kern das Wort 
reden, sprechen eine Reihe gewichtiger Momente gegen eine 
solche Möglichkeit. 

Erstens werden die erwähnten Erscheinungen, wie gesagt, 
nur sehr selten beobachtet und treten durchaus nicht häufiger 
auf, wenn die Ablagerung der deutoplasmatischen Substanz reich- 
licher wird. Würden schwerwiegende sonstige Argumente für 
einen Chromatinaustritt ins Feld geführt werden können, so 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 109 


brauchte man diese Überlegung freilich nicht als triftigen Gegen- 
srund zu betrachten; denn man könnte annehmen, dass das 
Chromatin in gelöstem Zustand und somit in nicht wahrnehm- 
barer Weise die Kernmembran passiere, eine Hypothese, die 
wiederholt z. B. von Moroff (10), welcher sogar von „farblosen 
Chromidien“ spricht, aufgestellt worden ist. Aber im Zusammen- 
halt mit den folgenden Bedenken muss man wohl auch den an- 
geführten Beobachtungstatsachen einiges (rewicht beilegen. 
Zweitens lehrt ein Blick auf die Fig. 59, dass die deuto- 
plasmatischen Ansammlungen kleinsten Kalibers durchaus nicht 
in der Regel in unmittelbarer Nähe des Kernes gelegen sind 
und dass vollends die grossen Schollen ganz nahe am Zellrande, 
also so weit wie möglich vom Kern entfernt, sich befinden können, 
gerade so, wie dies v. Kemnitz bei Brachycoelium salamandrae 
beobachtet hat. Dabei führen ganz sicher keine Bahnen von 
Substanzpartikeln von der etwaigen Herkunftsstelle, dem Kern, 
zur Ablagerungsstätte hin. Nun wird man ja auch diesen Tat- 
sachen für sich allein keine hinreichende Beweiskraft gegen die 
fragliche Möglichkeit zuerkennen müssen; denn man könnte ein- 
wenden, dass das Chromatin in gelöstem Zustande den Zellenleib 
durchwandere, bis es an einer vom Kern relativ weit entfernten 
Stelle kondensiert werde. Dabei wäre aber die Frage schwer 
zu beantworten, warum dann die ausgeschiedenen kleinsten 
Chromatinquantitäten sich zu grösseren Anhäufungen zusammen- 
finden und nicht, wenn schon nach einer gewissen Zeit die Be- 
dingungen für die Ablagerung eintreten, eine viel grössere Menge 
kleiner Partikel im Ei zerstreut gefunden werden. Es wäre also 
noch eine weitere unbeweisbare Hilfsannahme zu machen, etwa 
so, dass man die im Anfang des Abscheidungsprozesses nieder- 
geschlagenen Teilchen für Kristallisationszentren hielte, an welche 
die neuen Massen dann immer wieder anschiessen. Sehr viel un- 
gezwungener ist es dagegen, aus den vorgeführten Bildern zu 
schliessen, dass eine im Plasma gelöste Substanz an beliebigen 
Stellen zum Ausfall komme; hierdurch wäre sowohl das multi- 
lokuläre Auftreten von Niederschlägen im Zellenleib, wie auch das 
Vorkommen von grösseren Ansammlungen der ausgefallenen Sub- 
stanz verständlich. Die quantitativen Unterschiede würden dann 
dadurch hervorgerufen, dass die Bedingungen zum Ausfall der 
gelösten Substanz einmal nur an einer punktförmigen Stelle, ein 


110 F. Wassermann: 


anderes Mal aber in grösserem Umkreis innerhalb des Plasma- 
leibes eintreten können. 

Drittens ferner drängt sich uns die Annahme einer Chromatin- 
ausstossung doch nur dann mit einiger Notwendigkeit auf, wenn 
wir am Kern Wahrnehmungen machen, die eine ad maximum 
beanspruchte Chromatin-Aufspeicherungsfähigkeit vermuten lassen 
und wenn wir ferner beobachten können, dass der Kern desto 
ärmer an färbbarer Substanz wird, je weiter der angenommene 
Chromatinaustritt fortschreitet. Letztere Bedingung wenigstens 
ist bei jenen Oozyten von Proteus gegeben, bei denen Jörgensen 
(10) die Bildung von Chromidien für erwiesen hielt. v. Kemnitz 
hat auf Grund eben dieser Überlegung gewisse hierher gehörige 
Befunde Schaxels (10) in Zweifel gezogen, wenn er meint 
(S. 583), die Schaxelschen Untersuchungen bewiesen durchaus 
nicht, „dass die bei „Uhromasie“ des Plasmas dann gleichzeitig 
zu postulierende Achromasie des Kernes wirklich besteht“. Bei 
unserem Objekt nun kann man zu der Zeit, da die deutoplasma- 
tischen Substanzen entstehen, nicht nur keine Abnahme des 
Chromatins am Kern beobachten, sondern das Gegenteil ist der 
Fall Mit dem Wachstum des Kernes geht eine Anreicherung 
desselben an Chromatin vor sich, wie eine Betrachtung der 
Fig. 55—60 ohne weiteres dartut. 

In Anbetracht der angeführten Bedenken können wir der 
Annahme eines Chromatinaustrittes nicht so bereitwillig wie 
Goldsehmidt Raum geben. Wir werden aber in unserem 
Zweifel noch bestärkt, wenn wir sehen, dass weitere Überlegungen, 
zu denen wir in Übereinstimmung mit v. Kemnitz (12) gekommen 
sind, eine ganz andere, der besprochenen Möglichkeit gerade ent- 
gegengesetzte Anschauung nahe legen. 

v. Kemnitz glaubte bei seinen Untersuchungen über die 
Morphologie des Stoffwechsels bei Ascaris lumbricoides in den 
Muskelzellen dieses Organismus eine Chromatinsyndese aus dem 
Plasma heraus annehmen zu müssen, und er begründet diese 
Annahme einer sichtbaren Chromatinzufuhr aus dem Plasma in 
den Kern hinein eingehend gegenüber der Chromidienlehre, nach 
welcher seine Bilder zunächst einen Chromatinaustritt illustrieren 
würden (S. 559—564). Und v. Kemnitz weist auch (S. 584) 
auf Angaben anderer Autoren hin, die zugunsten einer im Plasma 
vor sich gehenden Chromatin- resp. Prochromatinsyndese sprechen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. ill 


v. Kemnitz verallgemeinert dann seinen Befund, indem 
er sagt: „Ich halte damit den Beweis für erbracht, 
dass ineiner ganzen Reihe von Fällen, die im Sinne 
derChromidienlehre verwertet wurden, tatsächlich 
der umgekehrte Prozess stattfindet, dass den mor- 
phologisch sichtbar zu machenden Chromatin-bezw. 
Prochromatinsyndesen innerhalb des Zellplasmas 
eine viel grössere Bedeutung zukommt als man bis- 
her angenommen hat“. 

Ob die Resultate v. Kemnitz’s in diesem Punkte wirklich 
über jeden Zweifel sicher gestellt sind, und ob sie in der vom 
Autor angegebenen Weise Anspruch auf allgemeinere Gültigkeit 
haben, brauchen wir hier nicht zu erwägen. Für uns ist von 
Bedeutung lediglich der Hinweis auf die Möglichkeit, dass die 
von den Anhängern der Uhromidienlehre als Uhromatinaustritts- 
phänomene gedeuteten Bilder und also auch entsprechende Er- 
scheinungen unserer Oozyten im Anfang der Hauptwachstums- 
periorde an und für sich ebenso gut durch den umgekehrten 
Prozess zustande kommen könnten. Diese Möglichkeit kann der 
Unvoreingenommene nicht von der Hand weisen. Und auch wir 
wurden für unsere Fälle durch die gegen den CUhromatinaustritt 
sprechenden oben angeführten Bedenken, besonders aber durch 
die Würdigung der im Ovarium herrschenden Bedingungen des 
Zellstoffwechsels dazu gedrängt, die besprochene Möglichkeit in 
Betracht zu ziehen. 

Was die im Ovarium bestehenden Bedingungen für den 
Zellstoffwechsel in besonderer Berücksichtigung des Chromatins 
anbelangt, so haben wir uns darüber folgende Vorstellung zu 
machen. 

Das Ovarium des Zoogonus (Fig. 11) stellt ein Syneytium dar. 
Die Kerne beherrschen gemeinschaftlich eine anscheinend ganz 
einheitliche Plasmamasse. Insbesondere während der Wachstums- 
periode der Oozyten, da die Kerne und auch die zwischen ihnen 
gelegenen Plasmaterritorien eine Massenzunahme erfahren, müssen 
wir eine lebhafte stoffliche Wechselwirkung zwischen Kern und 
anliegendem Protoplasma voraussetzen. Was das Chromatin be- 
trifft, so wird es zu dieser Zeit, wie schon betont, entsprechend 
dem Kernwachstum vermehrt. Dies kann nicht anders geschehen 
als durch die Einverleibung von im Plasma befindlichen Vorstufen 


Im F. Wassermann: 


des Chromatins in den Kern. Es muss also vom Kern aus be- 
trachtet auf diese Stoffe eine zentripetale Wirkung ausgeübt 
werden. In einer gegen die Umgebung abgegrenzten Zelle nun 
ist diese Wirkung auf alle Teile des Plasmaleibes einheitlich. Im 
syreytialen Verbande aber muss es oft vorkommen, dass derartige 
von verschiedenen nachbarlichen Kernen auf das gemeinsame 
Plasma ausgeübte Einflüsse sich widerstreben, ja sich aufheben. 
Die für den Kern bestimmten und durch Fermente vielleicht 
schon zur Einverleibung vorbereiteten Substanzen werden durch 
die von verschiedenen Richtungen her auf sie einsetzenden Kräfte 
festgehalten und können ihrem Bestimmungsort oft gar nicht zu- 
geführt werden, während bei der reichlichen Stoffzufuhr, die wir 
für das Ovarıum anzunehmen haben, immer neue Substanzen der- 
selben Art gebildet werden. So kann man sich vorstellen, dass 
gerade wegen der engen nachbarlichen Beziehungen der lebhaft 
funktionierenden Kerne in den zwischen ihnen gelegenen, relativ 
zu kleinen Plasmastrecken Störungen im Stoffwechsel eintreten. 
Diese Störungen bestehen in einer Prochromatinretention im 
Plasma und deren Ausdruck ist eben die Ablagerung deuto- 
plasmatischer Massen. Es ist denkbar, dass die Chromatinvor- 
stufen, wenn sie einmal in grösserer Menge in ungelösten Zustand 
übergeführt worden sind, dann nicht mehr für ihre eigentliche 
Verwendung brauchbar sind, sei es, dass ihre erneute Verflüssigung 
nicht mehr rechtzeitig ausgeführt werden kann, sei es, dass bei 
dem Reichtum des Plasmas an gelöster Substanz auf die aus- 
gefallenen Mengen keine Wirkung mehr ausgeübt wird. Aus- 
genommen sind aber vielleicht von diesem Verharren in unge- 
löstem Zustand Substanzpartikel, welche in unmittelbarer Nähe 
des Kerns ausgefallen sind. Sie können. wenn die entgegen- 
wirkenden Kräfte nachlassen, dem Kern noch einverleibt werden, 
und hierbei entstehen vielleicht die morphologischen Erscheinungen 
des „Ühromatineintrittes“ in den Kern. 

Wenn wir damit den Vorgang der Prochromatinretention und 
des etwaigen Chromatineintrittes in sichtbarer Form in Erwägung 
gezogen haben, so handelt es sich natürlich nur um eine Deutung 
der Befunde. Aber diese Deutung dürfte nach all dem Gesagten 
begründeter erscheinen als die Annahme eines Chromatinaustrittes. 

Dies wird noch mehr hervortreten, wenn wir nun die Vor- 
gänge an dem aus dem Ovarium austretenden Ei im Sinne der 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 413 


oben aufgestellten Frage betrachten. Hier kommen wir nämlich 
ohne jede Einschränkung zu der Überzeugung, dass in grossem 
Umfang Chromatin aus dem Keimbläschen ausgestossen wird. 
Alle nur denkbaren Kriterien sprechen für den Chromatinaustritt. 
Tatsächlich vermögen wir bei der Betrachtung eines Querschnittes 
durch einen solchen Kern (Fig. 64) und bei der Aufsicht auf den- 
selben (Fig. 63) keinen anderen Eindruck als den einer Chromatin- 
ausschwitzung zu gewinnen. Dazu kommt dann noch, dass der 
Kern die chromatischen Strukturen, die er vorher in grosser Zahl 
besessen hatte (Fig. 60), nunmehr fast völlig verliert, und dass 
gleichzeitig der ungeformte Inhalt des Keimbläschens, also der 
Kernsaft, die Chromatinfarbstoffe sehr intensiv annimmt. Im 
Plasmaleib tritt dabei gewöhnlich eine grosse Vakuole auf (Fig. 62), 
so dass wir annehmen müssen, dass entweder neben den geformten 
Partikeln auch Flüssigkeit aus dem Kern ins Plasma gelangt, 
oder dass, was das wahrscheinlichere ist, die ausgestossenen 
Chromatinteilchen sogleich wieder aufgelöst werden. 

So steht es also für uns fest, dass ein Uhromatinaustritt 
aus dem Oozytenkern erfolgt und in diesem Punkt bestätigen 
wir die Darlegungen Goldschmidts (05). Die Tatsache aber, 
dass hier bei Zoogonus ein ausser Zweifel stehender Chromatin- 
austritt statt hat, ist von prinzipieller Bedeutung. Bekanntlich 
stehen sich die Anschauungen der Vertreter der von R. Hertwig 
durch seine an Protozoen erhobenen Befunde begründeten „Chro- 
midienlehre“ (Goldschmidt, Moroff, Popoff u.a.) und die 
jener Forscher, die wie Meves, Duesberg u. a. den Stand- 
punkt der extranukleären plasmatischen Entstehung der deuto- 
plasmatischen Substanzen (Plastosomen, Mitochondrien, Chondrio- 
konten) vertreten, schroff gegenüber (siehe Duesberg 1912). 
Die ablehnende Haltung der Vertreter der letzteren Gruppe gegen- 
über der chromidialen Natur gewisser Plasmaeinschlüsse geht nun 
so weit, dass sie die Möglichkeit eines Chromatinaustrittes, wie 
ihn z. B. Schaxel (10) und Buchner (09) bei ihren Objekten 
angenommen haben, überhaupt in Zweifel ziehen. Sogar die dies- 
bezüglichen Beobachtungen von Jörgensen (10) am Ei des 
Proteus, die auch einer strengen Kritik standhalten dürften, 
wurden von Meves (10) bestritten und Duesberg (12) spricht 
ihnen ihren „allgemeinen Wert“ ab, weil sie sich auf patho- 


logische Kernbilder beziehen könnten. Demgegenüber muss nun 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 8 


114 F. Wassermann: 


auch der Chromatinaustritt aus dem Oozytenkern des Zoogonus 
an die Seite der gleichsinnigen Feststellungen von Schaxel, 
Buchner u.a. gestellt werden. Aber wir konnten nicht zu der 
Anschauung gelangen, dass die Bildung der deutoplasmatischen 
Substanz vom Kern aus erfolge und glaubten ferner angeben zu 
können, dass nach erfolgtem Chromatinaustritt (Fig. 65) keinerlei 
Vermehrung der deutoplasmatischen Substanzen eingetreten ist. 
Freilich bedürfte es zur genauen Feststellung in dieser Richtung 
der ausgedehnten Anwendung spezifischer Methoden, wozu bei einem 
Material, das nicht in beliebig grosser Menge zu bekommen ist, 
keine Möglichkeit gegeben war. Indessen müsste doch, wenn der 
ausgiebige Uhromatinaustritt eine Chromidienbildung zur Folge 
hätte, in dem ausgewachsenen Fi des Zoogonus eine ungleich 
grössere Menge von Plasmaeinlagerungen vorhanden sein als vor 
erfolgtem Chromatinaustritt. Wäre dies der Fall, so hätte es 
uns auch bei blosser Eisenhämatoxylinbehandlung nicht entgehen 
können. Wenn also hier Chromatinaustritt ohne Chromidien- 
bildung vorliegt, so spricht dies im Sinne jener Autoren, welche 
eine plasmatische Entstehung der von anderer Seite als „Chromidien“ 
bezeichneten Plasmakörper annehmen. 

Die Chromatinausstossung aus dem Eikern des Zoogonus gab 
Goldschmidt (O5) Veranlassung, eine schon von Lubosch (02) 
vertretene und zuerst, wenn auch nicht mit den später eingeführten 
Bezeichnungen von Rückert (92) bei seinen Untersuchungen am 
Selachierei begründete Anschauung von neuem zu betonen und 
auszubauen. Er sieht nämlich in dem Chromatinaustritt ein Mittel, 
durch welches die beiden sonst im anscheinend einheitlichen Kern 
vereinigten Chromatinarten, das Trophochromatin und das Idio- 
chromatin, voneinander getrennt werden, was für das Ei deswegen 
von besonderer Bedeutung sei, weil dadurch die Erbsubstanz — 
das Idiochromatin — in reiner Form den Reifungsteilungen zu- 
geführt werde Wir wollen hier auf diese Theorie nicht eingehen; 
sie wäre im Rahmen der Frage nach der Chromosomenkontinuität 
zu erörtern. 

Wir können aber zum Schlusse im Gegensatz zu Gold- 
schmidt, welcher sich über die Bedeutung des Chromatin- 
austrittes verbreitete, auf die mutmassliche Ursache desselben 
hinweisen. Wir haben gesehen, dass der plötzlich einsetzende und 
rasch abklingende Ohromatinaustritt in dem Moment erfolgt, da die 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 115 


Eizelle das Ovarium verlässt oder mit anderen Worten, da sie aus 
dem syneytialen Verbande, welchen das Ovarium darstellt, zur 
Selbstständigkeit gelangt. In diesem Umstande scheinen die in der 
Zelle vor sich gehenden Veränderungen begründet zu sein. Konnte 
der Kern vorher, allerdings im Wechselspiel mit seinen Nachbarn, 
mit einem grossen, gemeinsamen Plasmaterritorium einen leb- 
haften Stoffaustausch unterhalten, so ist er im Moment der Los- 
lösung der Oozyte aus dem Syneytium genötigt, sich auf einen 
begrenzten Plasmaleib einzustellen. Es muss die dem selbstständig 
gewordenen Zellorganismus zukommende Kern - Plasma- oder 
Chromatin-Plasma-Relation (R. Hertwig |03]) hergestellt werden 
und dies geschieht dadurch, dass sich der Kern des Überschusses 
an Chromatin bis zu der der Zelle entsprechenden Grenze ent- 
ledigt. 


I. Periode der Vozytenentwicklung. 
a) Befunde. 


1. Die Prophase der L.Reifungsteilung. 


Nach ihrem Austritt aus dem ÖOvarium besitzt die Eizelle, 
wie die Fig. 65 zeigte, einen Kern, in welchem locker gefügte, 
chromatische Stränge von wechselndem Kaliber anscheinend auf 
einem feinfädigen achromatischen Gerüst verteilt sind (siehe S. 102). 

Ein etwas älterer Kern, der in der Fig. 66 abgebildet ist, 
zeigt nun eine ganz andere Chromatinverteilung. Hier sind kom- 
paktere und über längere Strecken verfolgbare Chromatinzüge 
vorhanden, neben welchen freilich auch noch Chromatinansamm- 
lungen von der vorher beobachteten Art bestehen. Die längeren, 
oft schleifenförmig abgebogenen Züge entsenden von ihrer un- 
scharf konturierten Oberfläche da und dort feine und ganz blasse 
Stränge, die in das achromatische Gerüst des Kernes überzugehen 
scheinen. Der Nukleolus färbt sich nur mehr schwach und ist 
bedeutend kleiner als in den Keimbläschen der Hauptwachstums- 
periode. 

Wenn wir sehen, dass mit dem Hervortreten der chro- 
matischen Züge die ehemaligen unregelmässigen Schollen und 
Stränge im Kern bis auf einige wenige verschwinden und dass 
der achromatische Teil des Keimbläschens nunmehr sehr deutlich 
wird, so dürfen wir uns wohl vorstellen, dass das gesamte chro- 


matische Material des Kernes, das vorher über das ganze un- 
g* 


116 F. Wassermann: 


gefärbte Gerüst verteilt war, zu den nunmehr vorliegenden Strängen 
zusammenfliesst. 

Ein weiter vorgeschrittenes Stadium dieses Prozesses zeigt 
die Eizelle der Fig. 67. In diesem Keimbläschen ist das Chromatin 
auf eine zwar nicht genau feststellbare aber offenbar kleine Anzahl 
von Strängen konzentriert. An einzelnen Stellen scheint noch, 
wie die anastomosierenden Ausläufer der Chromatinzüge vermuten 
lassen, ein Zuströmen von Ghromatinpartikeln vor sich zu gehen. 
Aber in der Hauptsache ist die färbbare Substanz auf die neuen 
Inhaltsgebilde des Kernes vollständig verteilt. An dem nahe an 
den (dem Keimbläschen aufgelagerten) Spermafaden heranreichenden 
Strang fällt zum ersten Mal eine deutliche Duplizität auf. Sonst 
ist von einer solchen noch nichts wahrzunehmen. Die Chromatin- 
züge scheinen aus hintereinander gereihten gröberen und feineren 
Schollen zu bestehen und es ist nirgends die Andeutung einer 
Doppelstruktur vorhanden. Der Nukleolus birgt in diesem Fall 
eine grosse Vakuole 

Dass in manchen Fällen die Chromatinzüge schon gleich 
bei ihrer Entstehung doppelt sein können, sei es, dass sie von 
vornherein so angelegt oder gleich nach ihrer Bildung gespalten 
werden, zeigt das Keimbläschen der Fig. 68. Der hakenförmig 
gekrümmte Teil des am meisten hervortretenden Chromatinstranges 
besitzt noch den lockeren Bau und die Ausläufer, wodurch er sich 
als im Entstehen begriffen erweist, setzt sich aber in zwei kom- 
pakte und relativ scharf konturierte Fäden fort, die an ihren 
Enden eine leichte Verdickung tragen. Die übrigen gefärbten 
Bestandteile des Kernes sind anscheinend noch lange nicht so 
weit entwickelt, wie die Chromatinstränge der in Fig. 67 ab- 
gebildeten Eizelle. 

Die folgenden Stadien erweisen nun, dass diese Stränge zu 
den definitiven Chromosomen der ersten Reifungsteilung umge- 
wandelt werden. Infolge des Umstandes, dass die Veränderungen, 
die sich dabei abspielen, an den einzelnen Chromosomen sehr 
verschieden rasch vor sich gehen, kann man in einem einzigen 
Keimbläschen alle Stufen der Chromosomenbildung nebeneinander 
antreffen. So zeigt der Kern der Fig. 69 noch ein Element, das 
eben entsteht und zwar scheint hier eine Entstehung durch Ver- 
einigung von getrennt und ziemlich weit voneinander entfernt 
gebildeten, dünneren Fäden vorzuliegen. An der gegenüber- 


Die Oogenese des Zogoonus mirus Lss. 117 


liegenden Seite des Keimbläschens befinden sich zwei übereinander 
gelagerte Chromatinstränge, die etwa auf der Stufe der im Ei der 
Fig. 66 befindlichen stehen. Dagegen ist das lange umgebogene 
Element von ganz anderer Beschaffenheit. Es besteht aus zwei 
dünnen zackig konturierten und kompakten Fäden, welche parallel 
nebeneinander verlaufen, so dass nur ein schmaler Spalt zwischen 
ihnen bleibt, sich etwa in der Mitte ihrer Länge überkreuzen 
und mit ihren kolbig verdickten Enden auseinander weichen. Die 
beiden am weitesten gegen die Mitte des optischen Kernquer- 
schnittes vorgeschobenen Chromosomen sind ebenfalls doppelt, 
doch ganz bedeutend kürzer als die übrigen. Dabei ist das eine 
derselben, dessen Längshälften sich überkreuzen, in so auffallendem 
Maße dicker und kompakter als das lange Chromosom, dass man 
zur Annahme geführt wird, es werde aus einem langen und dünnen 
durch Verkürzung entstanden sein. In dem vorliegenden Keim- 
bläschen ist das achromatische Gerüst besonders deutlich aus- 
geprägt; man sieht hier, dass es nicht aus gleichmässigen Fäden, 
sondern aus kompakteren durch mannigfach gestaltete Fortsätze 
und feine Fäden miteinander vielfach verbundenen Formationen 
besteht. Denkt man sich auf diese blassen Figuren das Chromatin, 
welches jetzt in den Chromosomen enthalten ist, wieder verteilt, 
so gelangt man zu einem Bilde des Kernes ganz gleich jenem, 
welches das Keimbläschen vor der Herausdifferenzierung der 
Chromosomen dargeboten hat. Diese Überlegung bestärkt uns 
in der oben ausgesprochenen Auffassung, dass die Chromosomen 
durch Zusammentfliessen der färbbaren Substanz auf einige Haupt- 
strassen zustande gebracht werden. 

Nicht immer verhalten sich die Chromosomen in ihrer Ent- 
wicklung so heterochron, wie die des Keimbläschens der Fig. 69 
Die Fig. (0 liefert uns ein Beispiel dafür, dass unter Umständen 
auch die Mehrzahl der Elemente zu gleicher Zeit in dem Zustand 
langer dünner und sich mehrmals überkreuzender Doppelfäden 
angetroffen werden können. Diese Tatsache beweist wohl, dass 
unsere oben ausgesprochene Annahme richtig ist, dass diese Form 
erst auf dem Wege der Verkürzung in die definitive übergeführt 
wird. Im einzelnen verhalten sich die Chromosomen dieses Keim- 
bläschens verschieden; zwei davon sind auffallend kurz, jedoch 
nicht dicker als die anderen, so dass bei ihnen nicht eine bereits 
vollzogene Verkürzung, sondern eher eine von vornherein gegebene 


118 F. Wassermann: 


relativ geringe Länge anzunehmen sein wird. Das eine von diesen 
beiden ist in seiner Mitte scharf abgeknickt. Von den langen 
Chromosomen sind drei ebenfalls abgeknickt und ein anderes ist 
bis zu dem Grad abgebogen, dass seine beiden so entstandenen 
Schenkel sich aneinander legen. 

Bei allen Chromosomen tritt aber schliesslich am Ende der 
Prophase eine weitgehende Verkürzung und Verdickung auf. In 
diesem Stadium befinden sich die Elemente des in Fig. 71 wieder- 
gegebenen Keimbläschens.. Man erkennt, dass die Verkürzung so 
weit fortschreitet, dass man die Form der definitiven Chromo- 
somen vielfach gar nicht mehr analysieren kann; es entstehen, 
wie auch spätere Stadien der Metaphase I zeigen, Chromatin- 
klumpen ohne jede sichtbare Struktur. Es ist sicher, dass hier 
die Wirkung der Fixierung eine Rolle spielt, aber wenn man die 
definitiven Chromosomen von Zoogonus und Fasciola hepatica 
(Schellenberg [11]) mit denen von Brachycoelium salamandrae 
(v. Kemnitz |13]) vergleicht, so erscheint es ebenso sicher, dass 
bei unserem Objekt und bei Fasciola hepatica eine ungewöhnlich 
weitgehende Verkürzung der Chromosomen eintritt, die den Ein- 
blick in das Geschehen bei den Reifungsteilungen ungemein er- 
schwert. Nur an drei Chromosomen der späten Prophase der 
Fig. 71 kann man noch eine Duplizität wahrnehmen und das eine 
von den dreien, welches durch seine ganze Länge eine feine 
Lichtung eben erkennen lässt, ist in der Mitte zu der bekannten 
Biskuitform eingeschnürt. Auch hier ist noch der Rest eines 
Nukleolus vorhanden. Die Kernmembran ist, wie ihre starke 
Faltung zeigt, bereits verändert, und würde sich wohl bald auf- 
gelöst haben. Somit haben wir das Recht, dieses Stadium an 
den Schluss der Prophase der ersten Reifungsteilung zu stellen. 
Was die deutoplasmatischen Einschlüsse des Eileibes anlangt, so 
haben sie sich im Verlauf der Prophase nicht verändert und auch 
das Spermium scheint sich in der Regel während dieser Periode 
unverändert als Faden zu erhalten. 

In alle vorgeführten Kernbilder ist der gesamte Bestand des 
Kernes an Chromatinfiguren eingezeichnet worden, wenn es hierbei 
auch öfters nötig war, mehrere Schnitte miteinander zu kom- 
binieren. Es wurde aber immer darauf geachtet, dass die Chromo- 
somen wenigstens in den einzelnen Schnitten vollständig enthalten 
waren; die Chromosomen selbst sind niemals aus mehreren, durch 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 119 


das Mikrotom voneinander getrennten Teilen zusammengesetzt 
worden. So konnte ein Irrtum hinsichtlich der Zahl der jeweils 
vorhandenen Elemente mit absoluter Sicherheit ausgeschlossen 
werden Betrachtet man nun die gezeigten Keimbläschen in 
Rücksicht auf die Anzahl der in ihnen enthaltenen Chromatin- 
elemente, so wird man keines unter ihnen finden, bei dem es 
zweifelhaft wäre, dass die reduzierte Anzahl von Chromatinstücken 
und nicht die Normalzahl festgestellt werden kann. In dem Keim- 
bläschen der Fig. 69 sind fünf ausgebildete, d.h. deutlich abgrenz- 
bare Elemente zu zählen, das sechste ist im Entstehen begriffen. 
Wollte man annehmen, dass der stärker gefärbte Strang, von dem die 
zwei dünnen, sich schliesslich zu einem kurzen und deutlich längs- 
gespaltenen Gebilde vereinigenden Fäden ihren Ausgang nehmen, 
noch ein weiteres Ühromosom aus sich hervorgehen lässt, so würde 
man hier auf sieben Elemente kommen; aber dass zwölf Chromatin- 
teile in diesem Kern enthalten sind, wird niemand behaupten 
wollen. Ebenso liegen diese Verhältnisse in den Eikernen der 
Fig. 70 und 71. Im ersteren kann man sieben Doppelfäden unter- 
scheiden und in letzterem gleichfalls sieben definitive Chromo- 
somen, wenn man danach trachtet, möglichst viele Elemente 
herauszufinden. Man kann nämlich in dem Fall der Fig. 71 von den 
beiden in der Mitte der Kernfigur gelegenen und als aneinander- 
stossende selbständige Chromosomen gezeichneten Elementen nicht 
mit Sicherheit sagen, ob sie sich nicht doch zu einem einheitlichen 
Gebilde nach der Tiefe zu vereinigen. Wir haben aber, wie hier, 
so auch in allen späteren Fällen grundsätzlich im Zweifelsfall 
immer für die höhere Zahl entschieden, weil wir immer mit der 
Möglichkeit rechnen mussten, in den vor der ersten Reifungsteilung 
gelegenen Stadien und in der ersten Reifungsteilung selbst, ent- 
sprechend den Befunden von Goldschmidt und auch den von 
Schellenberg bei Fasciola hepatica erhobenen, die nicht 
reduzierte Anzahl von Chromosomen zu finden. Wenn wir dann 
aber bei dieser Art des Vorgehens doch nicht mehr als sieben 
Chromosomen herausfinden konnten, dann durften wir um so 
sicherer von der reduzierten Anzahl sprechen. 

So können wir also feststellen, dass in der Prophase der ersten 
Reifungsteilung die reduzierte Anzahl von Chromosomen entsteht. 

Nur ein einziger Fall (Fig. 72) ist uns begegnet, der davon 
eine Ausnahme macht. Es handelt sich hier um eine Eizelle, die 


120 F. Wassermann: 


sich in ganz ungewöhnlicher Lage, nämlich in einem distalen Ab- 
schnitte des Uterus zwischen schon ziemlich weit fortgeschrittenen 
Furchungsstadien befindet. Ein Ei, welches sich regelmässig ent- 
wickelt, bereitet sich alsbald nach seinem Austritt aus dem Ovarium, 
also im Anfangsteil des Uterusschlauches, auf die erste Reifungs- 
teilung vor. Die anormale Lage dieses Keimbläschens lässt es 
also gerechtfertigt erscheinen, es als ein in der Entwicklung ge- 
hemmtes zu bezeichnen. Wenn wir nun hier eine grössere Anzahl 
von Chromatinteilen finden, so kann das gegenüber unseren Be- 
funden, wie wir sie oben mitgeteilt haben, nicht in Betracht 
kommen. Nicht einmal in dem Sinn lässt sich dieses Vorkommnis 
verwerten, in welchem Schellenberg solche Beobachtungen 
interpretiert hat. Dieser Autor nimmt ja an, dass gelegentlich 
neben der reduzierten auch die nicht reduzierte Anzahl von Chromo- 
somen in der Prophase zur ersten Reifungsteilung bei seinem 
Objekt gefunden werden kann. Unsere eben mitgeteilte Be- 
obachtung nötigt uns keineswegs, die Anschauung Schellenbergs 
auf unser Objekt zu übertragen, sondern sie besagt nur, dass 
in Eiern, die eine weitere Entwicklung nicht mehr erfahren, 
gelegentlich die Kernelemente in mehrere Stücke, vielleicht in 
ihre Komponenten zerfallen können; aber das ist ein pathologischer 
Vorgang; in dem normalen Verlauf der Entwicklung tritt, nach- 
dem einmal die numerische Reduktion der Chromosomen voll- 
zogen ist, nur mehr die reduzierte Anzahl derselben auf. 

Ein weiterer, anscheinend nicht in die normale Entwicklungs- 
reihe gehöriger Befund, der gleichfalls nur ein einziges Mal in 
dieser ausgesprochenen Form zur Beobachtung kam, ist in der 
Fig. 73 wiedergegeben. In diesem Keimbläschen sind die noch 
nicht ad maximum verkürzten Chromosomen zu einem dichten 
Haufen zusammengedrängt; der Kern ist in ihrer Umgebung etwas 
verdunkelt. Dieses Bild erinnert an Entwicklungsstadien des 
Keimbläschens, die bei anderen Formen, so z. B. bei Diestramena 
von Vejdovsky (12) als „Innenkerne“ beschrieben worden sind. 
Bei unserem Objekt dürfte eine solche Bildung jedoch nur dann 
zustande kommen, wenn sich der Ablauf der Prophase verzögert. ' 
Um ein Fixierungsartefakt kann es sich in dem vorliegenden Fall 
nicht handeln, denn die ganze Eizelle und insbesondere das Kern- 
gerüst sind anscheinend ohne jede gröbere Veränderung der Form 
und Struktur und auch die einzelnen Chromosomen sind, soweit 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 121 


sie sich voneinander abheben, deutlich als längsgespaltene Doppel- 
stäbe zu erkennen. 

Die Beschreibung, welche wir von der Entstehung der 
Chromosomen der ersten Reifungsteilung gegeben haben, hat 
nicht viel Ähnlickeit mit der entsprechenden Darstellung G old- 
schmidts (O5), die folgenden Wortlaut hat: „Der Beginn der 
Reifungsvorgänge macht sich dadurch bemerkbar, dass die bisher 
unregelmässig im achromatischen Gerüst, verteilte chromatische 
Substanz sich an einigen Knotenpunkten des Kerngerüstes in un- 
regelmässigen Massen zu sammeln beginnt, während der Nukleolus 
noch vollständig intakt ist (Fig. 8). In einem wenig vorgerückten 
Stadium beginnt dieser jedoch sich ebenfalls aufzulösen; seine 
Begrenzung wird undeutlich. und er zerfällt in kleine chromatische 
Partikel, die sich auf dem achromatischen Gerüst zu Strängen 
anordnen (Fig. 9). Das gleiche geschieht innerhalb der erwähnten 
chromatischen Ansammlungen, die sich ebenfalls zu Strängen aus- 
ziehen, die bereits die künftigen Chromosomen ahnen lassen, ja 
durch eine zweireihige Lagerung der Körnchen zum Teil schon 
eine Andeutung des späteren Längsspaltes zeigen. Dieser Vor- 
gang schreitet nun weiter fort, indem sich das Chromatin zu 
typischen Chromosomen verdichtet, die noch ihre Zusammen- 
setzung aus feinsten Partikeln erkennen lassen. Von Anfang 
an sind diese Chromosomen längsgespalten und liegen vollständig 
voneinander getrennt im Kernraum zerstreut. Stets treten zehn 
solcher längsgespaltener Chromosomen auf, wie z. B. die Fig. 10 
nach einem Totalpräparat zeigt... Es tritt also hier nicht, 
wie meist, von vornherein die reduzierte Zahl in Tetradenform 
auf, sondern einfach die Normalzahl; Tetraden fehlen völlig. 
Dadurch wird von vornherein eine wohl beispiellose Einfachheit 
des Reduktionsvorgangs vorbereitet.“ Der prinzipiell wichtigste 
Unterschied zwischen unseren Befunden und denen von Gold- 
schmidt besteht also in der Verschiedenheit der Zahlenangaben. 
Bei Goldschmidt findet sich als Beleg für seine Anschauung, 
dass die Chromosomennormalzahl in der Prophase vorliege, nur 
eine einzige Abbildung; sie kann unseren eingehend dargelegten 
Standpunkt nicht erschüttern. Die Art der Chromosomengenese 
ist, wie man seinen Worten und Abbildungen entnehmen kann, von 
Goldschmidt nicht in ihren Einzelheiten verfolgt worden; ins- 
besondere ist ihm das Stadium der langen Doppelfäden entgangen. 


122 F. Wassermann: 


Eine direkte Beteiligung des Nukleolus am Aufbau der Chromo- 
somen müssen wir in Abrede stellen: wohl wird er während der 
Prophase kleiner und blasser, und oft finden sich eine oder mehrere 
Vakuolen in seinem Innern. Aber dass er, wie Goldschmidt 
angibt, zur Zeit der Chromosomenbildung zerfiele und gar seine 
in Körnchen verteilte Substanz zum Aufbau der Chromosomen 
verwendet würde, ist sicher nicht richtig. 

Dass die Herausbildung der Chromosomen auch bei anderen 
Trematoden in Form langer Doppelfäden geschieht, beweisen die 
entsprechenden Figuren von Schellenberg (11) und von 
v. Kemnitz (13). 


2..Die-Tomemunesteiluns. 


Die Untersuchung der Reifungsteilungen stösst bei Zoogonus 
mirus auf ungemein grosse Schwierigkeiten. Entsprechend der 
geringen Zahl der von einem Tier gebildeten Eier kann man 
überhaupt nur relativ wenige Stadien der Reifungsteilungen finden 
und von diesen sind die meisten wegen der weitgehenden Ver- 
klumpung des Chromatins zur Untersuchung vollständig unbrauch- 
bar. Der Tatsache zufolge, dass diese Verklumpungen, die in der 
Art auftreten, wie sie das polysperme Ei der Fig. 74 zeigt. bei 
jeder Fixierung, auch der in bezug auf die frühen Stadien am 
besten gelungenen vorkommen, müssen wir annehmen, dass das 
Chromatin. hier besonders empfindlich gegen die angewandten 
Reagenzien ist. Schellenberg (11) hatte bei Fasciola hepatica 
mit derselben Schwierigkeit zu kämpfen. 

Das Ei des Zoögonus mirus eignet sich demnach durchaus 
nicht zu Feststellungen, welche die Reduktionsfrage betreffen. 
Wer das Objekt kennt, ist nicht erstaunt darüber, dass die ver- 
schiedenen Untersucher dieser Reifungsteilungen zu so wider- 
sprechenden Ergebnissen gelangt sind. 

Die fragmentarische Darstellung, auf welche wir uns aus den 
angeführten Gründen hier beschränken müssen, und über welche 
auch Gregoire (U9) nicht hinausgekommen ist, wird aber inso- 
fern nicht wertlos sein als sie erweisen wird, dass der Primärtypus, 
dessen Existenz schon mit den Beobachtungen über die frühe 
Oogenese in Widerspruch stehen würde, tatsächlich nicht vorkommt. 

Am besten zu analysieren sind natürlich die frühesten Stadien 
der ersten Reifungsteilung, bei denen wie im letzten Prophasen- 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 123 


stadium die Chromosomen weit voneinander entfernt liegen. Das 
klarste Beispiel dieser Art ist in der Fig. 75 wiedergegeben. Es 
handelt sich hier um das Totalpräparat einer Eizelle, welche mit 
spitzen Nadeln aus dem Uterus des in toto gefärbten Tieres 
unter der Lupe herauspräpariert wurde. Solche Zellen, die den 
Schädigungen der Paraffineinbettung nicht ausgesetzt waren, und 
die man zum Zweck eines genauen Studiums unter dem Deck- 
gläschen hin- und herdrehen kann, eignen sich natürlich am besten 
zur Untersuchung. Aber man kommt auch mit dieser Methode 
bei unserem Objekt nicht sehr weit, denn wenn einmal bei der 
Fixierung eine Verklumpung des Uhromatinbestandes eingetreten 
ist, dann ist ein Totalpräparat ebensowenig zu enträtseln, wie eine 
im Mikrotomschnitt gelegene Eizelle. In dem vorliegenden Ei 
nun sind sechs Chromatinelemente gelegen. Während sich diese 
in der Äquatorialzone des Eies befinden, ist der Spermakern nahe 
dem Hüllzellenpol gelegen und ist ausserdem noch durch die Auf- 
hellung des ihn umgebenden Plasmas als solcher gekennzeichnet. 

In dem nämlichen Stadium, wie es dieses Totalpräparat 
repräsentiert, befindet sich die Reifungsteilung der in den Fig. 76 
und 77 abgebildeten Eier. In diesen beiden Fällen führt die 
Zählung der Chromosomen zu keinem ganz einwandfreien Resultat, 
da man bei je einem Element nicht angeben kann, ob es einheit- 
lich ist, oder ob zwei Ohromosomen sich überlagern (Fig. 76) oder 
miteinander verklebt sind (Fig. 77). Aber mehr als sieben Chro- 
mosomen sind sicher nicht vorhanden. 

Näher zusammengeschoben und also offenbar auf dem Wege 
zur Einstellung in die Äquatorialplatte sind die Chromosomen der 
Eizelle der Fig. 78. Hier scheinen tatsächlich sieben Chromo- 
somen vorzuliegen. 

Die sechs Elemente der Fig. 79 sind gerade in die Äquatorial- 
ebene eingerückt. Es scheint aber, dass dieses Bild noch nicht 
der eigentlichen Metaphase entspricht, sondern dass die Chromo- 
somen noch näher zusammenrücken, bevor sie in die Tochter- 
elemente zerlegt werden. Dafür lassen sich zahlreiche Bilder der 
ersten Reifungsteilung anführen. Sie entsprechen der Fig. 80; 
bis auf eines, das noch abseits liegt, sind hier alle Chromosomen 
dicht zusammengedrängt. Da diese Stadien keinen Aufschluss 
über die Anzahl und die Form der Chromatinelemente geben, ist 
nur eines derselben abgebildet worden. 


124 F. Wassermann: 


So zeigen also sämtliche vorgeführten Metaphasenbilder der 
I. Reifungsteilung, dass sechs, höchstens sieben, also bivalente 
Chromosomen in die Äquatorialplatte eingestellt werden. Damit 
befinden wir uns im Gegensatz zu Goldschmidt, aber in voller 
Übereinstimmung mit Gregoire (09), welcher die Präparate 
Goldscehmidtsin einer unserer Darstellung völlig entsprechenden 
Weise auch unter Wiedergabe der ihnen gleichfalls anhaftenden 
Unzulänglichkeiten abbildet. Übrigens enthält auch eine Figur 
Goldschmidts (05), nämlich die 16. der Taf. 56, nur sieben 
Chromosomen. 

Auch hinsichtlich der Form der Doppelelemente decken sich 
unsere Befunde ganz mit den von Gregoire erhobenen. Auch 
wir haben dicke Doppelstäbe und U-förmige Elemente, sowie 
Ringfiguren konstatieren können, und auch die Fortsätze fehlen 
an einigen unserer Chromosomen nicht, die bei Gregoire an- 
scheinend an mit Eisenhämatoxylin gefärbten Präparaten dem 
Ansatz der Spindelfasern entsprechen. Auch unsere Figuren 
machen es höchst wahrscheinlich, dass sich die Doppelelemente 
mit ihrer Längslichtung in die Äquatorialebene einstellen, wobei 
ihre beiden Schenkel in Superposition zueinander stehen. 

Was die Spindelfasern und die Zentrosomen betrifit, so treten 
diese Bildungen bei unseren Objekten lange nicht so deutlich 
hervor, wie es nach den Abbildungen Goldschmidts zu er- 
warten .gewesen wäre. Aber auch Gregoire hat sowohl die 
Spindelfasern als auch das Zentrosom, wenn er sie überhaupt 
gezeichnet hat, nur angedeutet. Das Zentrosom erscheint auch 
in unseren Präparaten, wenn sie stark genug mit Eisenhämatoxylin 
gefärbt sind, hier und da als strichförmiges Gebilde (Fig. 30); 
manchmal gehen die Spindelfasern von einem ansehnlichen kugel- 
förmigen Zentrosom aus, in dem wir einmal (Fig. 75) ein Zentriol 
wahrzunehmen glaubten. Oft aber waren die Spindel und das 
Zentrosom überhaupt kaum zu sehen, so dass von ihrer Dar- 
stellung Abstand genommen wurde. Der Ansatz der Spindelfasern 
war niemals deutlich wahrzunehmen. 

Der Spermafaden erfährt zu Beginn der Reifungsteilung 
Veränderungen. Anscheinend durch Konzentration, aber auch 
durch Aufquellung seiner Masse entsteht zunächst ein stabförmiges 
Gebilde (Fig. 75), dann aber ein ansehnlicher ovoider oder keulen- 
förmiger (Fig. 76) Spermakern. In der Regel ist das Protoplasma 


3 Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 125 


in seiner Umgebung aufgehellt. Eine Strahlenfigur konnte in 
seiner Umgebung nie beobachtet werden. Goldschmidt bildet 
einmal eine solche ab. Im übrigen decken sich unsere, den Sperma- 
kern betreffenden Beobachtungen mit jenen der Voruntersucher und 
den entsprechenden Befunden bei Fasciola hepatica (Schubmann 
[05], Schellenberg [11]), Brachycoelium (v. Kemnitz [13]) 
und Dicerocoelium (Goldschmidt [08]). Auch darin stimmen 
wir mit den Voruntersuchern überein, dass die deutoplasmatischen 
Substanzen, wenn sie auch an Färbbarkeit sehr eingebüsst haben, 
sich bis zu den Reifungsteilungen im Ei erhalten. 


3. Die II. Reifungsteilung. 


Von den Stadien der II. Reifungsteilung, die zur Beobachtung 
gekommen sind, geben wir nur das klarste Metaphasenbild wieder 
(Fig. 81). Hier liegen in der Äquatorialebene des Eies sechs 
stabförmige Chromosomen eng beieinander. Einige von ihnen 
zeigen einen deutlichen Längsspalt. Der Spermakern beginnt 
nun, wie dies auch von den Voruntersuchern beschrieben wurde, 
seine Uhromosomen zu entwickeln. Bei Gregoire (0V) finden 
sich in den Fig. 25—29, Taf. II, Darstellungen der „Inter- 
kinese“ und der Metaphase und Anaphase II. Auch sie beweisen, 
wie das von uns beigebrachte Stadium, dass in die Äquatorial- 
platte die haploide Anzahl längsgespaltener Uhromosomen zu 
liegen kommen und dass die Trennung in die Tochterelemente 
durch diesen Längsspalt erfolgt (Fig 81). Gerade das Metaphasen- 
stadium ist in unserem Fall von Bedeutung, weil man nach Gold- 
schmidts (05, 08) Darstellung hier die Normalzahl der Chromo- 
somen müsste feststellen können; die Elemente würden dann 
ungeteilt in zwei Gruppen zu den beiden Polen auseinander 
weichen und es wäre bei einer äquationellen ersten Reifungs- 
teilung die zweite diejenige, welche die Reduktion nach dem 
Primärtypus besorgt. Dem ist aber sicher nicht so. Auch unter 
den Figuren, die Goldschmidt als Belege für seine An- 
schauung beibrachte (05, Fig. 18—24, 09, Fig. 1, 3 und 4), 
befindet sich kein Metaphasenstadium, bei welchem zehn oder 
zwölf Chromatinteile einwandfrei festzustellen wären. Gold- 
schmidt (05) sagt: „Während sich nun die Spindelfigur zur 
zweiten Richtungsteilung umbildet, liegen die zehn Chromosomen 
nahe dem Zentrum des Eies unregelmässig durcheinander ge- 


126 F. Wassermann: 


würfelt.“ In den Fig. 18, 20 und 24, auf die er sich dabei aus- 
drücklich bezieht, dürfte aber niemand, selbst wenn er alle vor- 
liegenden Chromatinteile als selbständige Chromosomen rechnen 
wollte, mit Sicherheit zehn oder zwölf Elemente zählen können. 
In der Fig. 18 von Goldschmidt (05) z. B. liegen in der Spindel 
sieben oder acht Chromatinteile und sicher nicht zehn. Wenn 
man aber nach der vielfältigen, durch die Metaphasenbilder der 
Zellteilung immer wieder bestätigten Erfahrung die in der Fig. 18 
am weitesten links gelegenen Stäbchenpaare für längsgespaltene 
einheitliche Chromosomen hält, wie solche von Gregoire (08) 
und uns in der Metaphase II tatsächlich gefunden worden sind, 
dann sind auch in dieser Eizelle nur fünf oder sechs Chromo- 
somen und nicht die diploide Anzahl derselben vorhanden. Des- 
gleichen kann man in der Fig. 23 Goldschmidts durchaus nicht 
mehr als sieben Chromatinteile erkennen. 

So kommen wir also auch hier zu dem Schluss, dass der 
Primärtypus nicht existiert. Sowohl die frühe Oogenese, als auch 
die Prophase zur ersten Reifungsteilung, ferner die Bilder der 
beiden Reifungsteilungen selbst bekunden übereinstimmend, dass 
von einem Reduktionsmodus, wie ihn Goldschmidt hier be- 
schrieben hat, nicht die Rede sein kann. Demgegenüber bedeutet 
es nichts, dass in der Literatur gelegentlich berichtet wird, es 
seien ausnahmsweise einmal mehr Chromosomen als es der redu- 
zierten Anzahl entsprechen würde, in der Prophase oder Meta- 
phase der ersten Reifungsteilung beobachtet worden (zum Beispiel 
Moszkowsky bei Ascaris megalocephala bivalens, zitiert nach 
Korschelt und Heider [02, S. 564], Sväabenik [09] bei 
Gordius tolosanus, zitiert nach Vejdovsky [12]). Es scheint 
eben, wie v. Kemnitz (13) gelegentlich der Besprechung des 
„Primärtypus“ meint, „als ob unter bestimmten Verhältnissen 
Anomalien in der Chromosomensyndese auftreten, deren Ausdruck 
ein Verhalten gemäss dem ‚Primärtypus‘ ist“. Angesichts der 
wiederholt erwähnten Befunde Schellenbergs bei Fasciola 
hepatica ist ja mit der Möglichkeit zu rechnen, dass auch bei 
Trematoden derartige Störungen in der Eientwicklung vorkommen. 
So interessant solche Erscheinungen an und für sich sind, so 
haben sie doch keine Bedeutung für die Frage nach der Existenz 
des Primärtypus, der nach der Auffassung Goldschmidts als 
der phylogenetisch älteste Modus der Reduktion für Zoogonus 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 127 


charakteristisch sein sollte, und an den sich daher als an einen 
vorher unbekannten „Typus“ weittragende theoretische Folgerungen 
knüpfen liessen. Dass dieser „Primärtypus“ bei Zoogonus mirus 
nicht existiert, das ist über jeden Zweifel sichergestellt. 


b) Allgemeiner Teil. 


1. DieFrage nach der Kontinuität der Chromosomen. 


Sind die Chromosomen nicht nur taktische Formationen von 
wechselnder Zusammensetzung, die bei jedem Teilungsmanöver 
neugebildet werden (Fick [06]), sondern vielmehr qualitativ von- 
einander verschiedene Individuen, Organe des Kernes gewisser- 
massen, deren jedes in der Geschlechtszelle eine bestimmte, für 
die Vererbungsvorgänge höchst wichtige Aufgabe bei der Be- 
fruchtung zu erfüllen hat, dann ist zu erwarten, dass sie in der 
Ruhepause zwischen zwei Mitosen und insbesondere zwischen der 
letzten Urgeschlechtszellenteilung und der ersten Reifungsteilung 
nicht völlig aufgelöst werden, wie es oft der Augenschein ver- 
muten lässt, sondern dass sie sich wenigstens in ihrem wesentlichen 
Teil während des ganzen Intwicklungsganges der Geschlechtszelle 
erhalten. Die Chromosomenkontinuität ist zwar keine absolut 
notwendige Voraussetzung für die Theorie der Chromosomen- 
individualität, denn es wäre denkbar, dass die das Wesen des ein- 
zelnen Chromosoms bestimmenden Substanzen auch nach vorüber- 
gehender Zerstreuung im Kernraum sich wieder in immer der- 
sleben Gruppierung zusammenfinden können (Rückert[92]); aber 
diese Vorstellung erscheint so wenig erweisbar, dass mit dem 
Verzicht auf die Chromosomenkontinuität die Annahme einer 
Individualität des Chromosoms nichts als eine bestenfalls mit den 
Tatsachen nicht in Widerspruch stehende Hypothese sein könnte, 
während der Nachweis der Kontinuität die Individualität sehr 
wahrscheinlich machen müsste. Über den gegenwärtigen Stand 
dieser Frage hat zuletzt Lubosch (12) berichtet. 

Für unseren Fall lässt sich die Frage nach der Kontinuität 
der Chromosomen folgendermassen formulieren: Überdauern die 
zuletzt in die Bukettform übergeführten bivalenten Schleifen der 
OÖozyten die Hauptwachstumsperiode des Keimbläschens, um dann 
in der Prophase der ersten Reifungsteilung in ihrem Wesen un- 
verändert wieder zu erscheinen, oder stellen die Reifungsteilungs- 


128 F. Wassermann: 


Uhromosomen ganz neue, mit den Bukettschleifen in keiner Be- 
ziehung stehende Chromatinverbände dar? 

Tatsache ist, dass die Bukettschleifen in dem Ruhegerüst 
der wachsenden Oozyte verschwinden und dass während der 
ganzen Wachstumsperiode (Fig. 55—60) individuelle Chromosomen 
nicht unterschieden werden können, bis sie kurz vor der Reifungs- 
teilung in Gestalt langer Doppelfüden wieder in Erscheinung 
treten. Für die Kontinuität der Chromosomen lassen sich also 
Beobachtungen nicht anführen. Auch ein indirekter Beweis für 
die Erhaltung der Chromosomen kann nicht erbracht werden, da 
die Doppelfäden der Prophase weder in ihrer Form noch in ihrer 
Grösse, noch hinsichtlich des Ortes ihrer Entstehung auf die 
Bukettschleifen bezogen werden können. 

Andererseits muss aber hervorgehoben werden, dass das 
Keimbläschen während der ganzen Hauptwachstumsperiode so 
reich an Chromatinstrukturen ist, dass sich die den Chromosomen 
entsprechenden Bezirke des Liningerüstes ganz gut unter ihm 
nur verbergen können. Von einer „Zerstäubung“ des Kerninhaltes, 
wie sie z. B. von Jörgensen (10) für manche Keimbläschen des 
Proteus beschrieben worden ist, kann hier niemals die Rede sein, und 
nur solche Fälle, bei denen das Keimbläschen wirklich einen völlig 
strukturlosen Zustand durchmacht, können doch, falls sie auch bei 
Anwendung der feinsten Untersuchungsmethoden bestehen bleiben 
sollten, gegen die Annahme einer Chromosomenkontinuität angeführt 
werden. Fälle wie der unsrige sind niemals in diesem Sinne zu ver- 
werten; bei ihnen gewährleistet das dauernde Erhalten bleiben des 
Kerngerüstes die Möglichkeit einer Chromosomenkontinuität. 

Wenn aber hier ein Fortbestehen der Chromosomen ge- 
geben ist, dann kann natürlich nur der achromatische Teil der- 
selben dafür in Betracht kommen („Achromatinhypothese“ von 
Häcker, 08); denn die färbbare Substanz verlässt ganz sicher 
die Bukettschleifen, vermehrt sich dann entsprechend dem Kern- 
wachstum, wobei sie über das ganze Kerngerüst in mehr oder 
minder dichten Ansammlungen zerstreut ist, wird schliesslich zum 
allergrössten Teil am Ende der Hauptwachstumsperiode aus dem 
Kern wieder eliminiert, bis schliesslich anscheinend der im Kern 
verbleibende Chromatinrest auf einzelne Hauptstrassen, welche 
der achromatischen Grundlage der Chromosomen nach Häckers 
Vorstellung entsprechen würden, wieder zusammenfliesst. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 129 


Vielleicht ist es erlaubt, diese Vorgänge mit der von 
Rückert (92) geschilderten Entwicklung der Chromosomen des 
Selachierkeimbläschens zu vergleichen. Rückert konnte zeigen, 
dass diese Chromosomen während der ganzen Wachstumsperiode 
erhalten bleiben und dabei ganz beträchtliche Veränderungen 
ihres Volumens erleiden. In der ersten Periode der Entwicklung, 
während welcher das Ei seine maximale Grösse erreicht, nehmen 
die Chromosomen so grosse Mengen färbbarer Substanz auf, dass 
sie auf das Vielfache des Ausgangsvolumens heranwachsen; während 
sie vorher einen Rauminhalt von 2 Kubikmikra besessen haben, 
erlangen sie schliesslich einen solchen von etwa 15 700 Kubikmikra. 
In der zweiten, von der Erlangung der Maximalgrösse bis zur 
Auflösung des Keimbläschens gerechneten Entwicklungsperiode 
verlieren die Chromosomen von der färbbaren Substanz wieder 
so viel, dass ihr Volumen auf etwa 3 Kubikmikra heruntergeht. 
Nun liegt die Vorstellung nahe, es könnte auch in unserem Fall 
die Aufnahme und Abgabe von Chromatin nicht, wie es zunächst 
scheint, unabhängig von den Chromosomen vor sich gehen, sondern 
möchte gleichmässig in den verschiedenen je einem Chromosom 
entsprechenden Bezirken des Kerngerüstes erfolgen. Man könnte 
sich denken, dass im Falle des Selachiereies die besondere Struktur 
der Chromosomen, die ja von Rückert ganz genau beschrieben 
worden ist („Lampen-Bürstenform“), die Möglichkeit schafft, an 
die vorhandenen Chromosomen das aufzunehmende Chromatin 
anzulagern, während in unserem Fall das Uhromosomengerüst, 
das vielleicht als Netz von veränderlicher Maschenweite aufzufassen 
ist, erst entfaltet werden muss, bis es für die Einlagerung so 
grosser Mengen Chromatins Oberfläche und Rauminhalt genug 
bietet. Dann wären die Vorgänge im Prinzip nicht voneinander 
verschieden; immer wären es die Chromosomen, die der Aufnahme 
und Abgabe von Chromatin unterliegen, und die scheinbare Auf- 
lösung der Chromosomen in unserem Falle würde nur der Aus- 
druck einer weitgehenden Auflockerung derselben sein, welche 
eben bei Chromosomen, die einer geeigneten Struktur entbehren, 
erfolgen muss, damit sie ihrer Funktion für den Chromatin- 
stoffwechsel nachkommen können. Derartige Vorstellungen sind 
sicher nichts weniger als neu, und es könnten, wenn dies nicht 
zu weit führen würde, ähnliche Deduktionen aus der Literatur 


in beträchtlicher Zahl angeführt werden; wir wollten indessen 
Archiv f.mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 9 


130 F. Wassermann: 


durch die angestellte Überlegung lediglich zum Ausdruck bringen, 
dass wir unseren Fall nicht gegen die Annahme einer Chromo- 
somenkontinuität verwertet wissen möchten, wenngleich wir für 
dieselbe keine Beweise zu erbringen vermochten. 


2. Das Reduktionsproblem. 


(Gregoire (09) hat gefunden, dass auch die Reifungsteilungen 
des Zoogonus mirus dem hetero-homeotypischen Schema der 
Reduktion entsprechen, in welchem er den für das Pflanzen- und 
Tierreich allgemein gültigen, einzigen Reduktionsmodus_ sieht. 
Nach dieser Vorstellung entspricht jeder Schenkel des definitiven 
Chromosoms der ersten Reifungsteilung, welches als Doppel- 
stäbchen oder in U- und V-Form oder als Achter- und Ringfigur 
auftreten kann, je einem ursprünglichen Ghromosom. Zwei der- 
selben haben eben durch Parallelvereinigung ein solches Doppel- 
element gebildet. Da sich die definitiven Chromosomen mit der 
zwischen den Schenkeln befindlichen Lichtung in die Äquatorial- 
ebene der ersten Reifungsteilung einstellen, so trennt diese ganze 
Chromosomen voneinander, während in der zweiten Reifungsteilung 
jedes der zurückbleibenden Einzelchromosomen äquationell geteilt 
wird. Das hetero-homeotypische Schema bedeutet also einen 
pseudo- und präreduktionellen Modus der Reifungsteilungen. Bei 
blosser Retrachtung der von uns gefundenen Formen der definitiven 
Reifungsteilungs-Chromosomen könnte die Theorie Gregoires 
zunächst auch hier anwendbar erscheinen. Aber es ergibt sich 
sofort ein Bedenken, wenn wir uns an die Entstehung der Doppel- 
elemente in der frühen Oogenese erinnern. Die numerische 
Reduktion erfolgt ja bei Zoogonus nicht, wie Gr&goire gemeint 
hat, durch Parasyndese, sondern auf dem Weg der Metasyndese. 
Unter diesen Umständen aber geht es nicht an, die parallel ge- 
lagerten Schenkel der Reifungsteilungs- 
Chromosomen ohne weiteres mit den ur- 
sprünglichen Einzelindividuen zu identi- 
fizieren. Es könnte sich ebensogut um einen 
durch das Doppelelement gelegten Längs- 
spalt handeln. Den Unterschied zwischen 
einer solchen Auffassung und der Gr&goires veranschaulichen die 
nebenstehenden Textfig. 42 und 43. Es ist aber wiederholt ver- 
sucht worden, die Reifungsteilungen nach dem präreduktionellen 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 131 


Typus zu interpretieren, auch wenn, wie in unserem Fall, eine 
endweise erfolgte Vereinigung der Chromosomen angenommen 
werden musste. So hat v. Kemnitz (13) für Brachycoelium 
salamandrae angegeben, dass die hintereinander gekoppelten 
Komponenten der Doppelchromosomen durch Zusammenklappen 
(„Faltungstheorie“ von Montgomery [U3, 04, 05] und Farmer 
und Moore [04, 05]) schliesslich in eine parallele Lage zueinander 
kommen, ja sich überkreuzen. Je nachdem hierbei die End- 
vereinigung erhalten bleibt oder sich löst, kommen die V- und 
U-förmigen Elemente oder Doppelstäbe und Zopffiguren zustande. 
v. Kemnitz glaubt, dass die Annahme dieser Faltungstheorie 
den (Gregensatz zwischen Parasyndese und Metasyndese aus der 
Welt schaffe. Wir haben zu dieser Anschauung bereits (siehe 
S. 85) Stellung genommen. Die Faltung der Chromosomen wird 
aber nach v. Kemnitz durch das Bukettstadium herbeigeführt; 
darin liegt seiner Ansicht nach die Bedeutung des Bukettstadiums. 

Wenn die Theorie der Chromosomenfaltung. den Tatsachen 
entsprechen würde, dann liesse sich das hetero - homeotypische 
Reduktionsschema auch auf einen Fall wie den unserigen an- 
wenden. Der Entwicklungsgang der definitiven Chromosomen kann 
allein hierüber entscheiden. 

Wir haben gesehen, dass in der Prophase zur ersten Reifungs- 
teilung lange Doppelfäden entstehen, die in ihrer Form den Bukett- 
schleifen durchaus nicht gleichen. Sie sind gerade so wie bei 
Fasciola hepatica und Brachycoelium salamandrae zur Zeit, ihrer 
Entstehung gerade gestreckt oder doch nur schwach gebogen. 
Wer die Anschauung vertritt, dass in der frühen Oogenese eine 
Parallelkonjugation stattgefunden hat, wird jedem der beiden Fäden 
den Wert eines ursprünglichen Chromosoms beilegen!); für uns 
aber, die wir die metasyndetische Entstehung der Doppelchromo- 
somen hier für erwiesen halten, kann die Lichtung der frühen 
Prophasen-Elemente nur einen Längsspalt im Sinne der gewöhn- 
lichen Prophase bedeuten.?) Wir stellen uns vor, dass in den 


') Die früher (S. 54) erwähnte Annahme einer Parasyndese mit 
Mixochromosomenbildung bedingt natürlich eine andere Bewertung; dies kann 
aber hier ausser Betracht bleiben. 

®) Die weitere Möglichkeit, dass je ein Faden einem Schenkel der 
Bukettschleife entsprechen würde, kann nicht ernstlich in Betracht ge- 
zogen werden und wir können auch nicht glauben, dass v. Kemnitz den 
Zusammenhang zwischen der Abbiegung der Bukettschleifen und der Faltung 
9* 


132 F. Wassermann: 


Keimbläschen ein Kern gegeben ist, welcher statt der diploiden 
Chromosomenzahl nunmehr die haploide Anzahl von Elementen 
in der Prophase der I. Reifungsteilung herausbildet und dass 
der Weg, auf dem dies geschieht, nicht im geringsten von dem 
bei der gewöhnlichen Mitose befolgten abweicht; dabei ist es 
interessant zu beobachten, dass der Längsspalt der Chromosomen 
gelegentlich gleich bei ihrer Entstehung hervortreten kann, d. h., 
dass die Chromosomenhälften als selbständige, zunächst relativ 
weit voneinander entfernte Fäden angelegt werden können (Fig. 69). 
Das beweist, wie recht Meves (08, S. 618) hat, wenn er bei 
seinen gegen die Parallelkonjugation gerichteten Auseinander- 
setzungen betont, dass es ganz belanglos ist, ob die Chromosomen 
in der Prophase zunächst nur als Doppelreihen von CUhromatin- 
körnchen erscheinen oder ob sogleich eine weitgehende Selbständig- 
keit der Schwesterfäden eintritt, „so dass von vornherein wirkliche 
Fadenpaare vorhanden sind“. 

Das Prophasen-Chromosom kann also zunächst keinen anderen 
Bau haben als den durch die Formel en ausgedrückten. Wenn eine 
Faltung eintritt, dann kann sie erst nach der Herausdifferenzierung 
der Doppelfäden erfolgen. Dieser Umstand scheint uns aber die 
Anschauung v. Kemnitz’s, dass die Faltung eine Funktion des 
Buketts sei, hinfällig zu machen. Wäre dem wirklich so, dann 
müssten die Chromosomen der Prophase doch bereits „gefaltet“ 
in Erscheinung treten (dass man die Duplizität der Fäden nicht 
für den Ausdruck einer vollzogenen Faltung betrachten kann, 
wurde schon bemerkt — siehe die Anmerkung auf S. 131). Nun 
handelt es sich also darum, ob die beobachteten Bilder Anhalts- 
punkte ergeben, aus denen wir eine Faltung zu erschliessen be- 
rechtigt wären. Wir müssen sagen, dass das nicht der Fall ist. 
Nur ein einziger Doppelfaden in Fig. 70 erscheint wirklich ge- 
faltet. Die anderen haben einen mehrfach gebogenen Verlauf; 
zwei von den langen Doppelfäden sind sogar deutlich gekrümmt 
und eines der beiden kurzen Doppelelemente ist in der Mitte 
scharf abgeknickt, aber ob diese Formen bloss zufällige Er- 
der definitiven Chromosomen so verstanden wissen möchte, denn in vielen 
Fällen und auch bei einzelnen Elementen von Brachycoelium sieht man schon 
an den Bukettschleifen eine deutliche Längslichtung; wenn daher die Pro- 
phasen-Chromosomen überhaupt auf jene bezogen werden dürfen, was die 


Annahme einer Kontinuität der Chromosomen zur Voraussetzung hat, dann 
tritt eben der Längsspalt der Bukettschleifen in der Prophase wieder hervor. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 135 


scheinungen oder, wie es die Annahme der Faltung postulieren 
muss, der Ausdruck für einen gesetzmässigen Vorgang sind, das 
muss dahingestellt bleiben. Von den Elementen des in Fig. 69 
wiedergegebenen Keimbläschens ist ein langer Doppelfaden haken- 
förmig gekrümmt. Von den beiden kurzen Elementen kommt 
zum mindesten das eine der definitiven Form bereits sehr nahe. 
Es besteht aus zwei relativ dicken sich überkreuzenden Stäben 
und stellt ganz und gar das kleinere und plumpere Abbild eines 
langen Doppelfadens dar. Von einer Faltung ist weder bei ihm 
noch bei dem anderen kurzen Element irgend etwas zu sehen; 
sie haben beide einen ganz geraden Verlauf. Zu der Annahme 
aber, dass sich ein langer Doppelfaden umgebogen hätte bis zur 
Parallellagerung seiner beiden Schenkel, dass die Duplizität sich 
dabei verloren hätte und eine Dehiszenz an der Abbiegungsstelle 
aufgetreten wäre, so dass also die in Rede stehenden kurzen 
Elemente bereits als das Resultat der Faltung betrachtet werden 
müssten — zu dieser Annahme liegt auch nicht die geringste 
Berechtigung vor. Freilich bemerken wir manchmal, dass wie in 
Fig. 66 die Anlage eines Chromosoms V-förmig gekrümmt ist; 
aber diese und ähnliche Beobachtungen in den späteren Prophasen- 
stadien müssten doch mit Regelmässigkeit erhoben werden können, 
wenn die Faltung wirklich die Grundlage für das Zustande- 
kommen der qualitativen Uhromosomenreduktion wäre. Unsere 
Bilder lassen höchstens erkennen, dass ein oder das andere 
Element eine Faltung erfahren kann, aber für die Faltung als 
typischen Entwicklungsprozess der Chromosomen spricht gar 
nichts. v. Kemnitz (13), der sich so entschieden auf den Stand- 
punkt der Faltungstheorie stellt, geht auf die Schwierigkeiten, 
die dem Nachweis der sich vollziehenden Faltung entgegenstehen, 
nicht ein. Seiner Meinung nach spricht vor allem die U- und 
V-Form der definitiven Chromosomen für eine stattgehabte Faltung 
und es ist richtig, dass diese Form durch die fragliche Annahme 
eine befriedigende Erklärung finden würde. Aber man darf nicht 
vergessen, dass Bonnevie (09) ebensolche V-Formen bei den 
Furchungsmitosen von Nereis limbata beobachtet hat und ein end- 
weise stattfindendes Verkleben der beiden Längshälften eines 
Metaphasenchromosoms also sehr wohl vorkommen kann. 

So kommen wir zu dem Schluss, dass man nicht entscheiden 
kann, ob die Längslichtung der definitiven Chromosomen einen 


134 F. Wassermann: 


Spalt zwischen zwei ursprünglich selbständigen Elementen dar- 
stellt, welche Vorstellung eben die „Faltung“ zur Voraussetzung 
hätte, oder ob sie der Duplizität der frühen Prophasen-Doppel- 
fäden und also dem Metaphasenspalt der somatischen Mitose 
entspricht. 

Damit ist gesagt, dass wir uns nicht für berechtigt halten, 
das hetero-homeotypische Reduktionsschema auf die Reifungs- 
teilungen des Zoogonus mirus zu übertragen. Wenn es auch 
nicht geradezu unmöglich ist, dass es hier Geltung hat, so sind 
wir doch nicht in der Lage, irgend einen Beweis für seine Geltung 
beizubringen. So lässt sich also der reduktionelle Charakter der 
ersten Reifungsteilung nicht wahrscheinlich machen Was aber 
die zweite Reifungsteilung betrifft, so erweisen unsere eigenen 
Beobachtungen (Fig. 81) wie auch die Gregoires (09), dass 
hier die Chromosomen durch einen deutlichen Längsspalt in die 
Tochterelemente zerlegt werden. Die zweite Reifungsteilung kann 
demnach nur äquationell sein. Es ergibt sich also, dass wir bei 
Zoogonus, welcher nach Goldsehmidts Anschauung einen bei- 
spiellos klaren Reduktionsmodus besitzen sollte, die Frage nach 
dem Vorkommen einer echten Weismannschen Chromosomen- 
reduktion offen lassen müssen, wenn wir die vorgefundenen Teilungs- 
stadien nicht einer bestimmten theoretischen Vorstellung anpassen 
wollen. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 135 


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die Rolle der Nukleolarsubstanz und die Erscheinungen der Dotter- 
bildung. Ergebn. d. Anat. u. Entwicklungsgesch., Bd. 11. 

Derselbe, 1912: Über den gegenwärtigen Stand der Lehre von der Eireifung. 
Referat. Verhandl. d. Anat. Ges. auf der 26. Vers. in München. Er- 
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Allium cepa und Vicia faba. Sonderabdruck aus Svensk. Bot. Tids- 
krift, Bd. 4, H.3. 

Derselbe, 1913: Das Karyotin im Ruhekern und sein Verhalten bei der 
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Mar&chal,J. et de Saedeleer, 1910: Le premier developpement de 
l’ovocyte I chez les Rajides.. La Üellule, T. 26. 

Meves, F., 1907: Die Spermatozytenteilungen bei der Honigbiene (Apis 
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Derselbe, 1908: Es gibt keine parallele Konjugation der Chromosomen. 
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Derselbe, 1910: Über Strukturen in den Zellen des embryonalen Stützgewebes, 
sowie über die Entstehung der Bindegewebsfibrillen, insbesondere der- 
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and its general significance. Biol. Bull., Vol. 4. 

Derselbe, 1904: Some observations and considerations upon the Maturation 
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Derselbe, 1905: The spermatogenesis of Syrbula and Lycose ete. Proc. of 
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138 F. Wassermann: 


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Kl: NrI®. 

Dieselben, 1908b: Gibt es eine parallele Konjugation der Chromosomen ? 
Erwiderung an die Herren Fick, Goldschmidt und Meves. 
Vidensk.-Selsk. Skrifters I. Math.-Naturw. Kl., Nr. 4. 

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Sobotta, J., 1895: Die Reifung und Befruchtung des Eies der Maus. 
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Stevens, N.M., 1905: Further Studies on the ovogenesis of Sagitta. Zool. 
Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontog., Bd. 21. 

Strasburger, E., 1904: Die Apogamie der Eualchimillen und allgemeine 
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Bd. 41. 

Vejdovsky, F., 1912: Zum Problem der Vererbungsträger. Prag. Verl. 
der k. böhm. Ges. d. Wissensch. 

Wassermann, F. 1911: Über die Eireifung bei Zoogonus mirus Lss. 
Sitz.-Ber. d. Ges. f. Morph. u. Phys., München. 

Derselbe, 1912: Zur Eireifung von Zoogonus mirus, ein Beitrag zur Synapsis- 
frage. Verh. d. Anat. Ges., 26. Vers. in München. 

Wilke, G., 1907: Die Spermatogenese von Hydrometra lacustris L. Jenaische 
Zeitschr. f. Naturw., Bd. 42. 

v. Winiwarter, H., 1900: Recherches sur l’ovogenese et l’organogenese 
de l’ovaire des Mammiteres (Lapin et Homme). Arch. Biol., Vol. 17. 

v. Winiwarteret Sainmont, 1909: Nouvelles Recherches sur l’ovog&nese 
et l’organogenese de l’ovaire des Mammiferes (chat.). 

Zacharias, O., 1912: Zur Cytologie des Eies von Ascaris megalocephala. 
Anat. Anz., Bd. 42, Nr. 15. 


Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 139 


Erklärung der Abbildungen auf Tafel I-IV. 


Sämtliche Figuren wurden mit Zeiss Apochromat 15 mm n. A. 1,5 und 
Komp.-Ok. 8 mit Hilfe des Abbeschen Zeichenapparates bei Projektion auf 


ce 
Fig. 2. 
kip, 3. 
Fig. 4. 
Nigsh, 
Fig. 6. 
Mio. 


Fig. 12. 
Fig. 13, 
Fig. 15, 
Fig. 17. 
Fig. 18. 
Fig. 19, 


Fig. 21, 


Arbeitstischhöhe entworfen. 


Polansicht der Äquatorialplatte einer somatischen Mitose, 12 Chromo- 
somen. 

Äquatorialplatte einer Embryonalzellenmitose, 12 Chromosomen. 
Metaphase einer Embryonalzellenmitose, 12 Chromosomen. 
Prophase einer Embryonalzellenmitose. 12 Chromatinschleifen. 
Äquatorialplatte einer Embryonalzellenmitose, 11 Chromosomen. 
Metaphase einer Embryonalzellenmitose, 13 Chromosomen. 

8, 9. Äquatorialplatten von Embryonalzellenmitosen, 14 (?) Chromo- 
somen. 

Äquatorialplatte einer Embryonalzellenmitose, 14 Chromosomen. 
Übersichtsbild eines Schnittes durch das Ovarium des Zoogonus. 
1. Oogonienruhekerne, 2. Oozyte der ersten Entwicklungsperiode, 
3. Oozyten der zweiten Entwicklungsperiode, 4. aus dem Ovarium 
austretende Eizelle, 5. deutoplasmatische Einschlüsse. 
Oogonienruhekern. 

14. Prophasen von Oogonienmitosen. 
16. Metaphasen von Oogonienmitosen. 

Telophase einer Oogonienmitose. 

Jüngster Vozytenkern. 

20. Oozytenkerne mit einzelnen chromatischen Ansammlungen im 
Kernnetz. 

22. Oozytenkerne, Herausdifferenzierung der Chromosomen. 


Fig. 23—29. Oozytenkerne mit der Normalzahl der Chromosomen. Die 


Figuren illustrieren den Prozess der Chromosomenverkettung. 
Kontinuierlicher Knäuel mit primären Querkerben. 
Kontinuierlicher Knäuel, einseitig zusammengeschoben. 
Kontinuierlicher Knäuel, durch sekundäre Kerben in sechs hinter- 
einandergelegene Segmente abgeteilt. 


Fig. 33—37. Fortschreitende Segmentierungen des Knäuels. 


Fig. 38, 


39. Polare Orientierung der Knäuelsegmente. 


Fig. 40—44a. Bukettstadien in der Profilansicht. 


Fig. 44b 


Fig. 45. 
Fig. 46. 


Fig. 46a. 


. Grösster Durchmesser eines Oozytenkerns am Anfang der Haupt- 
wachstumsperiode aus demselben Ovarium wie das Bukett der Fig. 44. 
Bukettstadium vom Schleifenpol aus gesehen. 

Auflösung der PBukettschleifen bei noch bestehender polarer 
Orientierung. 

Grösster Durchmesser eines Oozytenkerns aus der Hauptwachstums- 
periode, welcher demselben Ovarium wie das Bukett der Fig. 46 
angehört. 


140 F. Wassermann: Die Oogenese des Zoogonus mirus Lss. 


Fig 


46b. Grösster Durchmesser eines Oozytenkerns aus der Hauptwachstums- 
periode, welcher demselben Ovarium angehört wie die Knäuel- 
segmentierungsstadien der Fig. 33 und 34. 


g. 47. Oozytenkern:; die Bukettschleifen sind bis auf eine einzige, welche 


sich noch in polarer Orientierung befindet, aufgelöst. 


g. 48—54. Oozytenkerne. Beispiele für das gelegentliche Vorkommen von 


synapsisähnlichen Bildern in einzelnen Ovarien des Zoogonus. 


. 55—-60. Oozyten der Hauptwachstumsperiode. D. — Deutoplasmatische 


Einschlüsse. Die Fig. 59 ist nach einem mit der Bendaschen 
Methode gefärbten Präparat, die übrigen nach mit Eisenhämatoxylin 
behandelten Präparaten gezeichnet. 


. 61. A. = Oozyte am Ende der Hauptwachstumsperiode, B. = eine das 


Ovarium verlassende Eizelle. 


. 62. Aus dem Ovarium austretende Oozyte in der Höhe der den Kern 


komprimierenden Vakuole getroffen. 


ie. 63. Aufsicht auf eine das Ovarium verlassende Eizelle, plastisch ge- 


zeichnet. 
64. Querschnitt durch eine solche Zelle. 


.65. Ei im Anfangsteil des Uterus. H. — Hüllzellen, D. = Deuto- 


plasmatische Einschlüsse, S. = Spermafaden. 


g. 66-70. Stadien der Herausdifferenzierung der Chromosomen in der 


Prophase der ersten Reifungsteilung. A. — Hüllzellen, D. = Deuto- 
plasmatische Einschlüsse, S. = Spermafaden. 


&. 71. Prophase der ersten Reifungsteilung mit der reduzierten Anzahl von 


definitiven Chromosomen. H. = Hüllzellen, D. =- Deutoplasmatische 
Einschlüsse. 


g. 72. Pathologische Prophase der ersten Reifungsteilung mit einer 


‚grösseren Anzahl von Uhromatinteilen als der reduzierten. 


g. 73. Bildung eines „Innenkernes“ während der Prophase der ersten 


Reifungsteilung bei verzögertem Ablauf derselben. 


Fig. 74. Polyspermes Ei, Metaphase der ersten Reifungsteilung. S. = 
Spermafäden. 

Fig. 75. Totalpräparat der ersten Reifungsteilung, 6 Chromosomen. S. — 
Spermakern, C. — Centrosom, H. — Hüllzellen. 

Fig. 76-80. Erste Reifungsteilung, 6—7 Chromosomen. H. — Hüllzellen, 
D. = Deutoplasmatische Einschlüsse, S. = Spermakern, 

Fig. 81. Metaphase der. zweiten Reifungsteilung, 6 Chromosomen. 8. = 


Spermakern, seine Chromosomen entwickelnd, ©. — Üentrosom, 
H. — Hiüllzellen, R. — Richtungskörper. 


141 


Die Entwicklung von Forelleneiern nach Befruchtung 
mit radiumbestrahlten Samenfäden. 
Von 
Karl Oppermann. 


Hierzu Tafel V—VII und 10 Textfiguren. 


Unter den zahlreichen biologischen Experimenten der letzten 
Jahre, die dazu dienen sollen, neue Einblicke in das Problem der 
Vererbung zu gewähren, haben die von O. Hertwig im Jahre 
1909 begonnenen Radiumversuche eine besondere Bedeutung. 
Bisher sind eine grössere Reihe von Arbeiten dieses Autors 
(1909, 1910, 1911, 1912), wie auch von Günther Hertwig 
(1911, 1912, 1913) und Paula Hertwig (1911) erschienen. 
Experimentell ist allen diesen Untersuchungen gemeinsam, dass 
Keimzellen, Eier oder Samenfäden oder ganz junge, embryonale 
Entwicklungsstadien in verschiedensten Stärkegraden den Radium- 
strahlen ausgesetzt werden. Die Wirkungen dieser Behandlung 
machen sich in mannigfachster Weise bemerkbar. Es wird im 
Laufe der Darstellung häufig auf die Ergebnisse der Arbeiten 
O0. und G. Hertwigs Bezug zu nehmen sein, so dass an dieser 
Stelle auf eine spezielle Ausführung verzichtet werden kann. 

Die grösste Reihe von Versuchen wurde an den Keimen 
des Frosches, Rana fusca, von O. und G. Hertwig ausgeführt; 
ferner bestrahlte G. Hertwig (1911) Samenfäden des Seeigels 
und untersuchte die ersten Furchungsstadien genauer. Von 
P. Hertwig wurden die Ergebnisse der Bestrahlungsversuche, 
die an Eiern von Ascaris megalocephala vorgenommen wurden, 
beschrieben. 

Zur weiteren Bestätigung der interessanten Ergebnisse und 
der an diese geknüpften theoretischen Erörterungen schien es 
geboten, Vertreter anderer Tiergruppen zu ergänzenden Unter- 
suchungen heranzuziehen. Es wurden die Keime der Bachforelle, 
Salmo fario, gewählt. Ein wesentlich verschiedenes Objekt stellt 
das Fischei insofern dar, als es sich hier um einen ganz anderen 
Typus handelt, als ihn die Amphibien zeigen. Bekanntlich haben 
die Teleostier meroblastische Eier. 


142 Karl Oppermann: 


Material und Methode. 


Gegen Ende der Monate November und Dezember 1911 
erhielt ich von der Forellenzuchtanstalt von ©. Arens Nachfg., 
Cleysingen bei Ellrich a. H., je drei Paar laichreifer Forellen. 
Die Fische waren in bestem, brauchbarem Zustande, so dass für 
alle Versuche reichliches, frisches, ganz einwandfreies Material 
vorhanden war. 

OÖ. und G. Hertwig haben ihre Experimente in vier ver- 
schiedenen Versuchsanordnungen vorgenommen. 

In der ersten Serie wurden befruchtete Froscheier auf dem 
Zweizellenstadium mit Radium bestrahlt (A-Serie). Dann nur 
Samenfäden, mit denen normale Eier befruchtet wurden (B-Serie). 
Dagegen wurden in der C-Serie Eier bestrahlt und dann mit 
normalem Sperma besamt. Die letzte Serie (D-Serie) umfasste 
diejenigen Versuche, in denen Samen und Eier vor ihrer Ver- 
bindung miteinander bestrahlt wurden. 

In den Forellenversuchen wurden lediglich die Samenfäden 
bestrahlt, also entsprechend der B-Serie Hertwigs. Die nicht 
unbeträchtliche Grösse der Eier und eine fehlende Differenzierung 
im vegetativen und animalen Pol macht diese zu weiteren Experi- 
menten wenig geeignet. 

/ur Bestrahlung des Samens standen mir zwei Radium- 
und ein, Mesothoriumpräparat zur Verfügung. Die Radiumpräpa- 
rate waren die gleichen, die schon O. und G. Hertwig zu den 
entsprechenden Versuchen beim Frosch benutzten. Es soll die 
von ihnen angewendete Benennung beibehalten werden. Radium I: 
7,5 me, Radium II: 5.3 mg. Das Mesothoriumpräparat, in der 
Darstellung mit Mth bezeichnet, entsprach der Wirkung von 
55 mg Radiumbromid. 

Es wurden zwei Reihen von Versuchen ausgeführt. Einmal 
vom 1. bis 5. Dezember (18 Versuche) und dann vom 28. bis 
31. Dezember (21 Versuche). Die zweite Serie enthielt eine 
Wiederholung fast aller Experimente der ersten, nur wenige 
andere Bestrahlungszeiten wurden hinzugefügt. Gänzlich neu 
waren die Bestrahlungen mit Mesothorium. Die erste Serie 
betrachtete ich lediglich als Vorversuch, um mich mit dem Objekt 
vertraut zu machen. Die zweite Versuchsreihe lieferte ein der- 
artig reiches Material, dass es überflüssig erschien, in der folgenden 
Darstellung auf die Ergebnisse der ersteren Rücksicht zu nehmen. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 143 


In den wesentlichen Resultaten stimmen beide Versuchsserien 
völlig überein. 

Zu jeder Bestrahlung wurde frisch abgestrichener Samen 
verwendet; zwei bis drei kleine Tröpfchen davon wurden auf 
einen hohlgeschliffenen Objektträger gebracht. Auf einem 4 mm 
hohen Glasring lag, die Strahlungsöffnung dem Samen zugewendet, 
das radioaktive Präparat. Stets wurden Kontrollbefruchtungen 
mit normalem Samen ausgeführt. Um ein Eintrocknen zu ver- 
hüten, wurde der Samen in feuchter Kammer aufgehoben. Die 
Versuchsanordnung ist die gleiche, wie sie auch von OÖ. Hertwig 
angewandt wurde. 

In der ersten Versuchsserie versagten in einigen Fällen die 
Befruchtungen völlig, in anderen kam nur ein sehr geringer Teil 
der besamten Eier zur Entwicklung. Dieser negative Ausfall 
machte es erforderlich, auf die Besamungsmethode grösste Sorg- 
falt zu verwenden. Bekanntlich beträgt die Dauer der Bewegungs- 
fähigkeit der Forellenspermien nicht mehr als 30—40 Sekunden. 
Im unverdünnten Zustande unbeweglich, beginnt nach Zusatz 
einer passenden Flüssigkeit tumultartig die Bewegung, um eben 
nach dieser kurzen Zeit völlig zu erlöschen. Schon bei normalem 
Samen, der 24 Stunden steht. scheinen die Spermien durch ge- 
wöhnliches Leitungswasser nicht mehr allgemein zu so intensiver 
Bewegung, wie es bei ganz frischen Samenfäden der Fall ist, 
angeregt werden zu können. Bedeutend günstiger wirkt ein 
Zusatz von der weiblichen Leibeshöhlenflüssigkeit, die beim Ab- 
streichen der Eier mit austritt. Die gleiche günstige Wirkung 
dieser Flüssigkeit konnte auch für das Ergebnis der Befruchtungen 
beobachtet werden. In allen Fällen, in denen während der Be- 
samung von Eiern mit bestrahlten Spermien ein geringer Zusatz 
von Leitungswasser oder schwacher Kochsalzlösung gemacht wurde, 
war die Zahl der zur Entwicklung gekommenen Eier häufig nur 
sehr gering. 

Trotzdem nur eine äusserst geringe Menge des Radium- 
samens für eine Befruchtung von jedesmal 30—40 Eiern vor- 
handen war, so konnten mit Hilfe der eben angeführten Methode 
fast alle Eier zur Entwicklung angeregt werden, falls nicht, wie 
in der späteren Darlegung gezeigt werden soll, das Experiment 
an sich eine Ausnahme bedingte. Von den 18 Versuchen ist nur 
einer ergebnislos verlaufen; aber auch in diesem Falle nur darum, 


144 Karl Oppermann: 


weil zur Befruchtung Eier benutzt wurden, die schon 2 Stunden 
gestanden hatten und etwas trocken geworden waren. Der Ver- 
such wurde aber, schon ehe der negative Verlauf erkannt werden 
konnte, wiederholt und hatte dann den gewünschten Erfolg. Bei 
Kontrollbefruchtungen, für die viel Samen zur Verfügung stand, 
war es natürlich nicht so notwendig, auf das Vorhandensein einer 
reichlichen Menge der Leibeshöhlenflüssigkeit zu achten. Nach 
der Befruchtung wurden die Eier in fliessendes Wasser gebracht. 
Eine grössere Zahl von nummerierten Drahtkörbehen war in vier 
srösseren Zinkkästen aufgehängt. In diese Gefässe hinein wurde 
je ein scharfer Wasserstrahl geleitet. Die ganze Finrichtung 
erwies sich als sehr zweckmässig. Fast alle Kontrolltiere kamen 
zum Ausschlüpfen und konnten noch lange Zeit am Leben er- 
halten werden. 

Die Temperatur des Wassers, bei der sich die Entwicklung 
vollzog, betrug durchschnittlich 11° C. Bis zum Ausschlüpfen 
der Kontrollen vergingen im allgemeinen 55—60 Tage. 

Die Fixierung der Keimscheiben, resp. Embryonen, geschah 
nach der von H.Virchow-Kopsch angegebenen Methode. Nach 
einer Vorfixierung in Chrom-Essigsäure wurden die Keimlinge in 
(0,75 °/o) Kochsalzlösung auspräpariert, dann in Pikrin-Sublimat- 
Eisessig fixiert, in üblicher Weise durch die Alkoholstufen dann 
in Chloroform gebracht und in Paraffin eingebettet. Es war 
zweckmässig, zur leichteren Orientierung beim Einbetten alle 
kleineren Objekte mit Eosin vorzufärben. Für eine geringe 
Anzahl kam auch die Flemmingsche Fixierungsmethode zur 
Anwendung. 

Die Objekte wurden in 75proz. Alkohol aufgehoben, zum 
Teil auch in Cedernöl. 

Die Dicke der Paraffinschnitte betrug 5 «. Ungefähr 50 Keim- 
scheiben und Embryonen sind in Schnittserien zerlegt worden. 

Gefärbt wurden die Präparate mit Boraxkarmin, Hämalaun 
(nach Meyer) oder nach der Heidenhain-Methode. 

Alle Zeichnungen wurden mit Hilfe des Abbe&schen Zeichen- 
apparates angefertigt. Die Abbildungen der Totalobjekte wurden 
in uneigennützigster Weise von Herrn Zeichenlehrer Leben 
hergestellt. Die Schnittbilder zeichnete ich selbst. 

Die folgende Darstellung gliedert sich in zwei Hauptteile. 
Der erste Teil enthält eine Beschreibung des Verlaufes der 


Die Entwicklung von Forelleneiern ete. 145 


einzelnen Versuche. Die Experimente unterschieden sich von- 
einander durch die Dauer der Bestrahlung der Samenfäden. 
Versuche, in deren Ergebnissen keine wesentlichen Abweichungen 
auftraten, werden in einem gemeinsamen Kapitel besprochen. So 
liessen sich folgende sechs Gruppen bilden. 


1 Min. Mth 


ine I 5 Min. Rı | 7 Min. Ro 

Gruppe II Is Std. Rı | la Std. Ra i 6 Min. Mth 
Gruppe III 1 Std. Rı 2 Std. Rı 3 Std. Re /a Std. Mth 
ee IV 8 Std. Rı 8 Std. Re 

Gruppe V | 1a Std. R» 2 Std. Mth 
Gruppe VI 19 Std. Rı 19 Std. R: NIE. H 


Der zweite Teil enthält zunächst einige Erörterungen über 
Wesen und Bedeutung der Versuche. In den folgenden Kapiteln 
wird dann auf einzelne spezielle Erscheinungen eingegangen 
werden. Der Schlussteil enthält einen Vergleich der Resultate, 
die sich durch Bestrahlung der Keimprodukte der Forelle und 
des Frosches ergaben. 


Gruppe I. 


Bestrahlung des Samens während 5 Minuten mit Rı 
(Versuch), 7 Minuten mit Rz (Versuch DH), 1 Minute 
mit Mth (Versuch II). 


Drei Versuche, die bezeichnet seien als I, II, III, in deren 
Verlauf keine wesentlichen Verschiedenheiten auftraten, sollen in 
diesem Kapitel besprochen werden. Die Bestrahlungen des Samens 
wurden vorgenommen am 28. Dezember von 9 Uhr 21 Min. bis 
9 Uhr 26 Min. mit Rı (Versuch I), von 9 Uhr 21 Min. bis 9 Uhr 
28 Min. mit Rz (Versuch II), am 29. Dezember von 9 Uhr bis 
9 Uhr 1 Min. mit Mth (Versuch III). Drei Portionen von zu- 
sammen ungefähr 150 Eiern wurden mit den in allen Fällen noch 
nach der Bestrahlung gut beweglichen Spermien befruchtet. Mit 
ganz wenigen Ausnahmen trat bei allen Eiern eine Entwicklung ein. 

Die Gleichmässigkeit des Verlaufes der Versuche I, II, III 
kennzeichnete sich zunächst dadurch, dass diese die einzigen Ver- 


suche blieben, in denen ein gewisser Prozentsatz völlig normaler 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 10 


146 Karl Oppermann: 


Embryonen zum Ausschlüpfen kam. In dem fixierten Material 
waren von 120 Keimlingen 50 wahrscheinlich ganz ungeschädigt. 
Die übrigen waren verschieden stark pathologisch. In Fig. 2, 5, 6 
(Taf. V) sind Exemplare abgebildet, die den stärksten Grad der 
Schädigung zeigen, der in dieser (Gruppe je zu beobachten war. 

Untersuchungen. die an Furchungsstadien vorgenommen 
wurden, liessen keine von der Norm abweichenden Verhältnisse 
erkennen. 

Die frühesten, deutlich sichtbaren Entwicklunghemmnisse 
fanden sich bei dreizehn Tage alten Embryonen. Bei den Kontrollen 
war in allen Fällen das Dotterloch schon geschlossen. Zwei der 
vier fixierten Objekte standen auf dem Entwicklungsstadium der 
Kontrolle, während bei den beiden anderen die Umwachsung des 
Dotters noch nicht ganz vollendet war. Es sind dies also nur 
Unterschiede, die auf eine langsamere Entwicklung der Radium- 
tiere schliessen lassen. 

Am 13. Januar, also fünfzehn Tage nach der Befruchtung, 
wiesen einzelne Embryonen ziemlich erhebliche pathologische 
Störungen auf. Es wurden fixiert: aus Versuch I: 2 Embryonen 
(I normal), Versuch IL: 3 (1 normal), Versuch Ill: 4 (3 normal). 

Als Typus dieser Serie kann der in Fig. 1 (Taf. V) ab- 
gebildete Keimling gelten. Am meisten auffällig erschien die 
Bildung. des Kopfes. Während dieser bei normalen Verhältnissen 
eine starke Wölbung zeigt, fast halbkugelföürmig dem Dotter auf- 
“liegt, ist er hier mehr als flache Platte entwickelt; er erhebt 
sich nur wenig über die Dotterhaut. Diese anormale Beschaften- 
heit des Kopfes lässt auf eine geringe Ausbildung von Gehirn- 
und Sinnesorganen schliessen. So ist auch die Kopfpartie, an 
der die Augen liegen sollten, nur durch eine ganz schwache, un- 
differenzierte Vorwölbung zu erkennen, während bei der Kontrolle 
schon deutlich eine Linse vom Augenbecher zu unterscheiden ist. 
Die Hemisphären des Mittelhirnes bilden nur sehr schmale Lappen. 
Das Körperende macht eine scharfe, nach links gehende Knickung. 
Während bei normalen, gleichalterigen Stadien der Rumpf in eine 
„Schwanzknospe“ ausgeht, verdickt erscheint, zeichnet sich hier 
diese Partie durch eine Zellenarmut aus; der Körper endet in 
einer stumpfen Spitze. Es ist dies eine häufige Erscheinung, die 
mit grösserer Deutlichkeit an etwas älteren Stadien auftritt, 
Fig. 2 (20 Tage), Fig. 5 (18 Tage). 


- 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 147 


Einen Tag jünger als der eben beschriebene Embryo sind 
zwei, deren Abbildungen in Fig. 3 und 4 (Taf. V) vorliegen. Diese 
sind hervorgegangen aus Versuch III, in dem der Samen 1 Minute 
mit dem Mesothoriumpräparat bestrahlt wurde. 

Schon die Betrachtung des einen Totalobjektes Fig. 3 (V) 
bei schwacher Vergrösserung lehrte, dass es sich um eine ziem- 
lich stark geschädigte Form handelte. Beide weisen eigentüm- 
liche Einzelheiten auf. 

Fig. 4 zeigt eine Doppelbildung. Auf die Organisation des 
kleinen, als Anhang erscheinenden Embryos soll etwas genauer 
eingegangen werden. Zwei Schnitte (Taf. VI, 2 und 1) veran- 
schaulichen seinen inneren Bau. Die Abbildung des Schnittes, 
der durch die Körpermitte geht (Fig. 1), zeigt die beiden Ur- 
nierengänge und die Coelomsäcke; hier nur andeutungsweise, auf 
anderen Schnitten jedoch deutlich hervortretend, den Darm, der 
kein Lumen besitzt. Gering. aber immerhin noch deutlich aus- 
gebildet, erscheint das Rückenmark. Ein Zentralkanal fehlt. Die 
ganze Partie zwischen dem Medullarrohr einerseits, den Urnieren- 
gängen andererseits, ist von stark degeneriertem Gewebe erfüllt. 
Der Zusammenhang der Zellen ist gelöst. Die Kerne erscheinen 
bei der Färbung mit Boraxkarmin meist als intensiv rotleuchtende, 
homogene Körnchen. Die Wolffschen Gänge und der Darm, 
wie der zwischen diesen gelegene Teil zeigt in zytologischer Hin- 
sicht fast normale Beschaffenheit. Die zerfallenen Zellen finden 
sich nur vorwiegend in der Region des Rückenmarkes wie auch 
der Muskelplatten. 

Der zweite Schnitt (Fig. 2, Taf. VI) ist der Kopfgegend ent- 
nommen. Dorsalwärts liegt das Rückenmark, nur geringe Zerfalls- 
erscheinungen zeigend. Darunter finden sich zwei, als Gehör- 
bläschen zu deutende Gebilde ; sie nehmen also eine völlig ver- 
schobene Lage ein. Bemerkenswert sind noch die im Bilde etwas 
stark nach rechts verlagerten Perikardialräume. Weiter rostral- 
wärts gehende Schnitte zeigen immer mehr zunehmend starken 
Zerfall des Zentralnervensystems. 

Die Verhältnisse, die der Hauptembryo zeigt, sind weniger 
wichtig. Eigentümlich war nur das Vorhandensein einer doppelten 
Chorda. 

Der zweite, mit diesem eben besprochenen gleichzeitig kon- 


servierte Embryo (Fig. 3, Taf. V) stimmte mit dem ersteren be- 
10* 


148 Karl Oppermann: 


züglich der Grösse ungefähr überein. Beide waren nur wenig 
kleiner als die Kontrolle, im ganzen etwas schwächlicher ent- 
wickelt. Auf die anormale Bildung des Kopfes ist noch etwas 
näher einzugehen. Er liegt breit dem Dotter auf als fast ebene 
Fläche und zieht sich vorn in eine etwas gebogene Spitze aus. 
Die verschiedenen Gehirnpartien sind nicht genauer zu bestimmen. 
Augen fehlen völlig. Am Totalobjekt deutlich wahrnehmbar ist 
eine tiefe Furche, die allmählich kaudalwärts sich verbreiternd, 
den Kopf in der Mittellinie durchsetzt. Die Betrachtung der 
Schnittserie lehrte, dass in dieser Region eine Spaltbildung vor- 
liest, die sicli aber nur über einen relativ kurzen Bezirk aus- 
dehnte. (80 Schnitte zu je 5 «, für das ganze Objekt konnten 
516 Schnitte gezählt werden.) Sie beginnt in der Region der 
Gehörbläschen und verläuft nach dem Schwanzende zu. Die Zellen 
der vorderen Gehirnabschnitte sind zum grössten Teil schon ab- 
gestorben. Aber schon Schnitte, die durch die Gehörbläschen 
gehen, zeigen die Gewebe fast frei von zerfallenen Zellen. So 
sind auf der Abb. 14. Taf. VI, nur noch in einem kleinen Teil des 
tückenmarks die gleichmässig intensiv gefärbten Chromatinmassen 
zugrunde gegangener Zellkerne vorhanden. Dieselbe Figur zeigt 
ferner den noch ungeteilten Kiemendarm, während das Zentral- 
nervensystem sich schon in zwei Teile gegliedert hat. Auffällig 
erscheint die stark gewundene Chorda. Es ist zu erkennen, wie sie 
teilweise in das Rückenmark eindringt. Ein derartig anormaler 
Verlauf des Achsenorgans zählt aber nur zu den Ausnahmefällen. 
Liegt keine Spaltbildungsform vor, so ist die Chorda immer, auch 
bei stärker geschädigten Embryonen, in sehr günstiger Weise ent- 
wickelt. Auch die übrigen Rumpfpartien zeigten, besonders im 
Rückenmark und den Muskelplatten, stellenweise ziemlich starken 
Zerfall. Die Organisation des eigentümlich gestalteten Körper- 
endes war nicht sicher zu erkennen. Der Embryo lag etwas 
gekrümmt, so dass nur noch Schrägschnitte durch den Schwanz- 
teil erhalten werden konnten, die die ohnehin schon schwierigen 
Verhältnisse völlig unübersichtlich machten. Wahrscheinlich lag 
aber auch hier eine Doppelbildung vor, nur dass der Anhangs- 
embryo noch kümmerlicher ausgebildet war als im vorher be- 
schriebenen Falle. 

Je älter die Embryonen werden, um so deutlicher tritt der 
für diese Gruppe charakteristische Schädigungsgrad hervor. Zwei 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 149 


15 und ein 20 Tage altes Stadium sind in den Fig. 5, 6 und 2, 
Taf. V, dargestellt; und zwar sind die ersteren aus Versuch III 
(1 Min. Mth),. der letztere aus Versuch I (5 Min. Rı). hervor- 
gegangen. Für beide ist bemerkenswert die geringe Körperlänge, 
wie unmittelbar durch einen Vergleich mit Fig. 1 (15 Tage alt) 
hervorgeht. Beide zeigen eine sehr geringe Entwicklung der 
Gehirnhemisphären. Der Ventrikel des Rautenhirnes ist klein. 
Ebenso sind Mittel- und Vorderhirn nur sehr schwach ausgebildet. 
Augenanlagen können gar nicht wahrgenommen werden. Normal 
gestaltet scheinen die Gehörbläschen zu sein. Auf das spitz zu- 
laufende hintere Körperende wurde schon an früherer Stelle hin- 
gedeutet. 

Fig. 6 stellt ein Exemplar vor, das in deutlicher Weise eine 
typische Verlagerung des Vorder- und Mittelhirnes zeigt. Während 
das Rautenhirn noch ganz normale Gestalt und Lage hat, ist das 
Mittel- und Vorderhirn ganz an die rechte Seite verschoben, und 
zwar so, dass es nicht mehr senkrecht auf der Dotter- 
oberfläche steht, sondern schräg gegen dieselbe ge- 
neigt ist. Derartige Verlagerungen kehren in ver- 
schiedenen Ausbildungsgraden häufig wieder. Augen 
sind auch bei diesem Objekt nicht vorhanden; daher 
auch wieder die charakteristische Kopfform. Die 
übrige Organisation wies keine besonders bemerkens- 
werten Verhältnisse auf. 

Es ist nun nicht immer der Fall, dass bei Fie.1. 
Embryonen, die eine deutliche Schädigung beobachten 
lassen, die Körperlänge geringer ist. Embryo 9 gilt dafür als 
Beispiel. Dieser zeigt eine normale Länge, trotzdem hier bei 
natürlicher Lage Vorder- und Mittelhirn in bedeutender Weise im 
Wachstum gehemmt sind. Die Augen fehlen auch in diesem Falle. 

Die ältesten, näher untersuchten Stadien dieser Versuchs- 
reihe sind in Fig. 7, S und 10, Taf. V, abgebildet. Sie sind 32, 
31 und 33 Tage alt. Charakteristisch ist für diese drei Embryonen, 
die alle aus Versuch I und II hervorgegangen sind, die Lage des 
Schwanzes. Bei jüngeren Stadien konnte häufig, wie schon vorher 
erwähnt, beobachtet werden, dass der Schwanz, statt in die 
„Schwanzknospe“ auszugehen, in einer stumpfen Spitze endigte. 
Dies liess erwarten, dass das Längenwachstum ein sehr be- 
schränktes sein würde, dass die neu gebildeten Gewebe sich durch 


© 


150 Karl Oppermann: 


Zellenarmut auszeichnen würden. So zeigen auch bei diesen 
älteren Objekten die Ursegmente von der Umbiegungsstelle an 
nur kleine, dünne, wenig scharf begrenzte Formen. Dagegen 
sind bei Embryo 10 (Taf. V) die Muskelplatten vorhanden, die 
bei den beiden anderen nicht beobachtet werden konnten. Es 
ist also in diesen Fällen nicht die Biegung des Körpers an sich 
ein das Atrophieren des Rumpfendes bedingendes Moment. 

Was die übrige Organisation des Körpers anbetrifft, so 
stellt Embryo 10 (Taf. V) eine gut entwickelte Form dar. Die 
noch auftretenden pathologischen Erscheinungen sind nur gering- 
fügig. In Fig. 2, Taf. VII, ist ein Schnitt durch die vordere Kopf- 
region dieses Objektes abgebildet. Wegen der starken Windungen 
des Körpers war es nicht immer möglich, genau senkrechte 
Schnittebenen zu erhalten. Deutlich vorhanden ist beiderseits 
ein wohlentwickeltes Auge. Der Augenbecher zeigt schon die 
Differenzierung der Pigmentschicht. Merkwürdig erscheint die 
Bildung einer doppelten Linse des bildlich rechten Sehorgans. 
Während die innere Linse vom Epithel schon losgelöst, die zellige 
Struktur nicht mehr erkennen lässt, sitzt die äussere, etwas 
kleinere, dem Ektoderm fest an. An der Berührungsstelle sind 
die Zellen des Epithels sehr klein. In zytologischer Hinsicht 
stehen beide Linsen auf gleichem Stadium. Rechts ist auch ein 
Anschnitt des Gehörorgans zu sehen, mit deutlichen Anlagen der 
Bogengänge. Wie schon dieser Schnitt verhältnismässig sehr 
geringe Abweichungen von normalen Zuständen erkennen lässt, 
so zeigen dies in noch höherem Maße die Schnitte, die durch 
die im allgemeinen weniger stark geschädigten Partien gehen. 
Auch Blutkörperchen sind sehr zahlreich vorhanden. Im Zusammen- 
hang mit der Einrollung des Rumpfes steht wahrscheinlich die 
eigentümliche Ausbildung des Flossensaumes, wie durch Fig. 14, 
Taf. VI, veranschaulicht wird. Dieser läuft nicht dorsal und 
ventral um den Körper herum, sondern der ventrale Abschnitt 
hat seine natürliche Lage aufgegeben und ist an der Basis mit 
dem dorsalen Saum verschmolzen. Die gleiche Abbildung zeigt 
auch noch die etwas stärkere Ausbildung der Muskelplatten auf 
der konvexen Körperseite. 

Bedeutend ungünstiger sind die Embryonen 7, 5, 10, Taf. \V, 
entwickelt. Sie waren 32 und 33 Tage alt. Auffällig erscheint 
zunächst die stark aufgetriebene dünne Decke des Nachhirnes. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 151 


Augen sind nur als winzige, unregelmässig gestaltete Pigment- 
flecke erkennbar. Immer sind Brustflossen und der Flossensaum 
angelegt. Diese Embryonen zeigen einen Schädigungsgrad, der 
in dieser Kultur sehr häufig beobachtet werden konnte. 


Gruppe II. 


Bestrahlung des Samens während 30 Min. mit Rı 
(Versuch IV), 33 Min. mit Ra (Versuch V), 5 Min. mit 
Mth (Versuch V]). 

Die Experimente wurden an folgenden Tagen ausgeführt: 
Versuch IV am 28. Dezember von 9 Uhr 35 Min. bis 10 Uhr 
8 Min. mit Rı; Versuch V am 28. Dezember von 9 Uhr 35 Min. 
bis 10 Uhr 8 Min. mit Rs; Versuch VI am 29. Dezember von 
9 Uhr 6 Min. bis 9 Uhr 11 Min. mit Mth. In allen Fällen waren 
die Spermien nach der Bestrahlung gut beweglich. Befruchtet 
wurden mit diesem Samen ungefähr 100 Eier in drei Portionen. 
37 Furchungs- resp. Embryonalstadien wurden fixiert. Für die 
ersten Entwicklungsvorgänge konnten keine anormalen Verhältnisse 
festgestellt werden. Unmittelbar nachdem aber das Gastrulations- 
stadium erreicht war, am 13. Tage nach der Befruchtung, begann 
in allen drei Kulturen eine Sterbeperiode. Am 22. Tage waren 
sämtliche Eier zugrunde gegangen. Die abgestorbenen Eier werden 
undurchsichtig, weiss; der Dotter ist geronnen. Immerhin ist 
nicht in allen Fällen die Entwicklung mit Beginn der Gastrulation 
beendet, sondern häufig gehen noch deutliche Embryobildungen 
hervor, wie Fig. 11—17, Taf. V, zeigen. Der Unterschied gegen- 
über den aus Versuch I, II, III hervorgegangenen Objekten ist 
sehr deutlich. Niemals wird auch hier nur das ungünstigste 
Stadium der Versuche der ersten Abteilung erreicht, wie ein Ver- 
gleich veranschaulicht. 

In Fig. 15 ist der älteste aus dieser Abteilung fixierte 
Embryo abgebildet. Die Untersuchung dieses, wie auch aller 
anderen totalen Tiere bei schwacher Vergrösserung, liess keine 
Organdifferenzierung erkennen. Hin und wieder treten hintere 
Spaltbildungen auf (Fig. 13, 14). 

Zu näherer mikroskopischer Untersuchung wurde Embryo 15 
(19 Tage alt) in Schnitte zerlegt. Auffallend ist die starke Ver- 
breiterung des ganzen Körpers. Das Gehirn, soweit es erkennbar, 
nimmt an der Verbreiterung nicht teil, sondern liegt als schmales 


152 Karl Oppermann: 


Rohr unsymmetrisch, im Bilde rechtsseitig verschoben. Die 
vorderen Hirnpartien sind ganz zerstört, Grenzen sind nicht zu 
erkennen, aber bereits in der Region der Gehörbläschen hat es 
eine festgefügte Form. Die wiedergegebene Abbildung Taf. VI, 
Fig. 10, zeigt einen Schnitt durch das eine Gehörorgan; das rechte 
ist nicht ausgebildet. Der Schnitt zeigt zunächst die starke Ver- 
breiterung des Körpers. Die beiden Perikardialräume sind auf- 
fallend weit voneinander getrennt. Der Darm ist in zwei gut 
entwickelte Teile getrennt. Im vordersten Abschnitte des Kiemen- 
darmes sind beide Darmhälften vereinigt. Alle übrigen Organe 
blieben ungeteilt. Im Zentralkanal wie auch im Rückenmark 
und den rechts davon gelegenen (Geweben finden sich abgestorbene 
Zellmassen. Zwischen deutlichen, mit allen Einzelheiten erkenn- 
baren Zellkernen liegen diese schon öfters erwähnten, zu kugeligen 
Körpern zusammengeballten Chromatinmassen. Von der übrigen 
Organisation wäre noch die wohlausgebildete, schon ziemlich stark 
vakuolisierte Chorda zu erwähnen. Je weiter kaudalwärts liegende 
Schnitte betrachtet werden, um so stärker zerfallen sind Rücken- 
mark und Muskelplatten, während der Darm ein relativ gutes 
Aussehen hat, dessen einer Teil sogar ein Lumen erhält. 


Gruppe III. 


Bestrahlung des Samens während 60 Min. mit Rı 
(Versuch. Vin, 2,8td. mit.Rı (Versuch, VII) 3.564 sms 
Ra (Versuch IX), '/s Std. mit Mth (Versuch \X). 

Da die im vorigen Kapitel beschriebenen Versuche schon 
einen recht ungünstigen Verlauf nahmen, so liess sich erwarten, 
dass bei noch intensiveren Bestrahlungen entsprechend nochı 
stärkere Entwicklungshemmnisse auftreten würden. Dies geschah 
auch. Es wurden nunmehr folgende Strahlungszeiten gewählt: 
Versuch VII: 1 Std. Rı (30. Dezember, 9 Uhr 57 Min. bis 10 Uhr 
57 Min.), Versuch VIII: 2 Std. Rı (30. Dezember, 11—1 Uhr), 
Versuch IX: 3 Std. R» (30. Dezember, 9 Uhr 57 Min. bis 12 Uhr 
57 Min.), Versuch X: !/s Std. Mth (29. Dezember, 9 Uhr 19 Min. 
bis 9 Uhr 49 Min.). Immer war der bestrahlte Samen sehr eut 
beweglich. Befruchtet wurden zusammen ungefähr 100 Eier. 

Soweit jüngere Furchungsstadien untersucht wurden, zeigten 
diese normale Verhältnisse. Erst die Gastrulation bedeutete den 
kritischen Wendepunkt. Am 13. Tage nach der Befruchtung, 


Die Entwicklung von Forelleneiern ete. 153 


genau wie in den im vorigen Kapitel beschriebenen Versuchen, 
setzte auch in diesen Kulturen eine Sterbeperiode ein, die sich 
auf 5 Tage ausdehnte. Dann waren alle Eier abgestorben. 

Anlagen von embryoähnlichen Gebilden konnten in einigen 
Fällen, aber nur aus Versuch VII (1 Std.), erkannt werden. Es 
waren dies winzige Zellkomplexe von stabförmiger (Fig. 19) oder 
birnenförmiger (Fig. 18) Gestalt. 

Das aus Versuch VIII, IX und X konservierte Material liess 
nicht einmal das eben beschriebene Stadium der Entwicklung er- 
kennen; was vielleicht in einigen Fällen überhaupt von embryonaler 
Anlage vorhanden war, bestand in einem formlosen, buckelförmigen 
Haufen von Zellen. 

Durch die Bestrahlungszeiten der letzten drei Versuche 
wurden also für die Entwicklung der Eier die denkbar un- 
günstigsten Verhältnisse geschaffen, denn in keinem Falle kam 
eine deutliche Embryobildung zustande. Interessant ist, dass 
auch hier nicht ein einziges Ei vor dem 13. Tage nach der Be- 
fruchtung abstarb, so dass wir wohl berechtigt sind, anzunehmen, 
dass mit der Gastrulation die Krise eintrat. 

Bezüglich des Beginns der Gastrulation in den Kontroll- 
kulturen sei erwähnt, dass die ersten Knopfbildungen am 9. oder 
10. Tage nach der Befruchtung beobachtet werden konnten. 
Während nun zu erwarten stand, dass bei noch stärkerer Be- 
strahlung der Samenfäden nicht einmal mehr das Gastrulations- 
stadium erreicht werden würde, so sollte doch der Verlauf des 
Versuches zu einem anderen Resultat führen. 


Gruppe IV. 
Bestrahlung des Samens während S Std. mit Rı 
(Versuch XD, 8 Std. mit Ra (Versuch XM. 

Am 29. Dezember wurden zwei Versuche vorgenommen. 
Einmal wurde Samen von 9 Uhr 6 Min. bis 5 Uhr 6 Min., also 
8 Std. mit Rı (Versuch XI), das andere Mal die gleiche Zeit mit 
Re (Versuch XII) bestrahlt. Mit dem gut beweglichen Radium- 
samen wurden zwei Portionen Eier von je ungefähr 30 Stück 
befruchtet. Auch der Verlauf dieser beiden Versuche zeichnete 
sich dadurch aus, dass innerhalb eines Zeitraumes von S Tagen, 
vom 135. bis zum 21. Tage, sämtliche Eier abstarben. Es liessen 
sich aber, trotzdem die Spermien erheblich längere Zeit den Radium- 


154 Karl Oppermann: 


strahlen ausgesetzt worden waren als in den Versuchen VIII—\, 
wieder deutlich entwickelte Embryonen züchten, wie Fig. 20—23 
zeigen; sie kommen fast den aus Versuch IV—VI (Fig. 11—17) 
erzielten Exemplaren gleich. Die Abb. 2 und 3 veranschaulichen 
zwei 19 Tage alte Objekte. Allerdings waren sie wahrscheinlich 
zur Zeit der Konservierung schon abgestorben, aber immerhin 
konnte deutlich ein Nachhirn und Ohrenbläschen erkannt werden. 
Der vordere Kopfteil war sehr flach und scheinbar schon ziemlich 
stark in Zerfall übergegangen. Aber gut entwickelt war das 
Schwanzende, das sich schon vom Dotter loszulösen begann. 
Ein jüngeres Stadium, das auch zu mikroskopischer Unter- 
suchung in Schnitte zerlegt wurde, ist in Fig. 20 abgebildet. Es 
war 19 Tage alt. Während die Betrachtung bei schwacher Ver- 
grösserung irgendwelche Organdifferenzierung nicht erkennen liess, 
zeigte die Untersuchung der Schnittserie ein Medullarrohr, Chorda, 
Darm, Muskel und Seitenplatten. Aus dem Verbande gelöste 
Zellen mit pyknotisch gewordenen Kernen finden sich vorwiegend 
im Bereich der vorderen Hirnpartien, aber auclı das Rückenmark 
sowie die Muskelplatten sind nicht frei davon. Bemerkenswert 
ist die Lageveränderung des Gehirnes. In seinem vordersten 
Teil liegt es fast ganz mit der Seitenfläche dem Dotter auf, und 
erst allmählich kehrt es in seine natürliche Lage zurück. Fig. S, 
Taf. VI, veranschaulicht diese Verhältnisse. Es nimmt das Rücken- 
mark nicht die senkrechte Richtung zur Dotteroberfläche ein, 
sondern liegt nach rechts geneigt. Dieser veränderten Stellung 
und der Lage des Embryo in einer Ausbuchtung des Dotters ist 
es zuzuschreiben, dass nun auch der Kiemendarm auf der im Bilde 
rechten Seite keinen Anschluss an die Epidermis mehr gewinnen 
kann. Im übrigen zeigt uns der Schnitt, der gerade durch den 
Anfangsteil der Chorda geht, das gut gebildete Rückenmark, das 
noch keinen Zentralkanal besitzt, mit wenigen zerfallenen Zellen. 
Die gleichen Bestrahlungszeiten mit denselben Präparaten 
wurden auch in der ersten Versuchsserie (Anfang Dezember) ge- 
wählt. In einigen Fällen entwickelten sich wieder auffallend gut 
gebildete Tiere. Eins davon ist in Fig. 23 abgebildet worden. 
Von der interessanten inneren Organisation wird an anderer Stelle 
gesprochen werden. Hier genügt festzustellen, dass ein Alter von 
23 Tagen erreicht wurde, und dass sie eine nicht unbeträchtliche 
Grösse hatten. Der Zerfall der Gewebe war nicht wesentlich. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 155 


Gruppe V. 


Bestrahlung des Samens während zwei Stunden 
mit!Mth. (Versuch X). 

Für diesen Versuch, in dem der Samen am 30. Dezember 
von 11 bis 1 Uhr bestrahlt wurde, ist das Auftreten von Spalt- 
bildungserscheinungen äusserst charakteristisch. Während schon 
in vorigen Kapiteln gelegentlich, aber immer nur bei ganz gering 
entwickelten Exemplaren, auf eine (abelung des hinteren Rumpf- 
endes hingewiesen werden konnte, tritt hier, in mindestens zwei 
Drittel aller beobachteten Fälle, auch an relativ sehr weit fort- 
geschrittenen Stadien, diese Missbildung auf. Wegen des allge- 
meinen Interesses, das die dorsale Spaltbildung als Spina bifida 
bekannte Erscheinung hat, soll in einem späteren Kapitel speziell 
darauf näher eingegangen werden. In diesem Zusammenhang 
genügt es, das sehr häufige Auftreten dieses Missbildungstypus 
zu konstatieren. 


Im auffälligen Gegensatz steht dieser Versuch zu den in 
den drei vorigen Kapiteln beschriebenen durch das Ausbleiben 
einer Sterbeperiode, trotz der noch intensiveren Bestrahlung der 
Samenfäden. 


Es wird die Gastrulation, die ja immer das kritische Stadium 
darstellte, von allen Eiern gut überstanden. Die Lebensdauer ist 
wieder erheblich länger. Am 31. Januar, 33 Tage nach der be- 
fruchtung, konnten noch durchaus wachstumsfähige Embryonen 
fixiert werden. 

Gehen wir zur speziellen Darstellung über. 

Die bestrahlten Spermien, mit denen ungefähr fünfzig Eier 
befruchtet wurden, waren ausserordentlich gut beweglich. Die 
ersten Furchungen vollzogen sich in normaler Weise. Eine Anzahl 
untersuchter zwei- und viergeteilter Keimscheiben liess eine ganz 
gleichmässige Beschaffenheit der Blastomeren erkennen. 


Die Ausbildung der Organe der gebildeten Embryonen zeigte 
ungefähr das gleiche Bild, wie es schon für Versuch I, II, II 
angegeben wurde. Vorwiegend äussern sich die Schädigungen in 
einem defekten Zustande des Gehirnes, und zwar, da es sich um 
geringere Störungsgrade handelt, weniger in Zerfall der Zellen 
des Gewebes, als vielmehr um Verlagerungserscheinungen des 
Medullarrohres. Bei älteren Stadien, die nach dem 25. Tage nach 


156 Karl Oppermann: 


der Befruchtung fixiert wurden, machte sich in stärkerem Maße 
ein Zerfall, speziell des Zentralnervensystems, bemerkbar. 

In Fig. 24—45 sind eine Anzahl von Embryonen dieses 
Versuches abgebildet. Diese weisen alle verschiedene Grade 
von Spaltbildungen auf. In Fig. 43—45 sind drei Objekte dar- 
gestellt, deren Rumpf ganz einheitlich gestaltet ist. Der Vergleich 
mit der Kontrolle (Fig. 42) zeigt, dass der Grössenunterschied 
nicht sehr erheblich ist. Sie waren 19 Tage (Fig. 44 und 45) 
und 21 Tage (Fig. 43) alt. Bezüglich. der Differenzierung des 
Gehirnes standen sie der Kontrolle noch bedeutend nach. Vorder- 
und Mittelhirn sind stark verlagert, so dass ihr wirklicher Verlauf 
in den Flächenbildern nicht zur Geltung gebracht werden konnte. 
Die Augen waren in einigen Fällen gut angelegt, wie die Abbildung 
des Schnittes 3, Taf. VI, zeigt. Das Nachhirn erscheint nur als 
schmaler Spalt. Häufiger ging der Kopf vorn wieder in eine 
Spitze aus. Es hat dies dann auch hier seinen Grund in der 
sehr geringen Ausbildung der Augen. Häufig wird nur ein Auge 
angelegt (Fig. 12, Taf. VI). Bei jüngeren Stadien schien das 
Gehörbläschen ganz normal entwickelt, während es bei älteren 
bläschenförmig aufgetrieben ist (Fig. 36. Taf. V, 27 Tage alt). Die 
übrigen Organisationsverhältnisse boten bei den Embryonen, deren 
Rumpf nicht geteilt war, wenig von der Norm abweichende 
Verhältnisse. 

Auch in dieser Gruppe vollzieht sich die, Entwicklung der 
Radiumembryonen etwas langsamer, als die der normalen Tiere. 
In welcher Weise sich diese Wachstumsverzögerung geltend macht, 
soll an dem Beispiel eines vierzehntägigen Embryos gezeigt werden. 
Es ist nicht ganz unwichtig, das Entwicklungsstadium dieses 
Objektes genau festzulegen, weil an diesem an späterer Stelle 
noch einige interessante Verhältnisse von Kerngrösse und Zahl 
der Kerne gegeben werden. Diese Beziehungen sind von dem 
Entwicklungsstadium in ausserordentlich hohem Maße abhängig. 
Zum Vergleich soll das Organisationsstadium der Augen, des 
Gehörbläschens, des Herzens und des Coeloms dienen. 

In der Körpergrösse stimmen die Versuchstiere (Taf. V, 
Fig. 33—37) mit der einen Tag älteren Kontrolle ungefähr 
überein. Das Auge des Radiumembryos stand noch auf dem 
Bläschenstadium. Eine Einstülpung der äusseren Wand wie auch 
die Anlage der Linse war noch nicht erfolgt. Das Herz ist noch 


—ı 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 15 


nicht vorhanden. Die Goelomsäcke beginnen sich gerade zu ent- 
wickeln. Auf fast genau dem gleichen Stadium befand sich die 
einen Tag jüngere Kontrolle (13 Tage); sicherlich war diese aber 
nicht weiter entwickelt als der Radiumembryo. Demgegenüber 
zeigte ein fünfzehn Tage altes, normales Tier etwa folgende 
Organisation: Die Augen haben Becherform angenommen; eine 
Linse ist vorhanden. Das Herz ist deutlich ausgebildet. Das 
Coelom hat einen Perikardialraum abgegliedert. 


Bestrahlung des Samens während 19 Stunden mit Ra 
(Versuch XIV) oder Rı (Versuch XV). 

In diesen letzten Experimenten wurde frischer Samen vom 
30. Dezember 2 Uhr 45 Min. bis zum 31. Dezember 9 Uhr 55 Min. 
mit Rı, eine zweite Portion die gleiche Zeit mit Rs bestrahlt, 
also 19 Stunden. Nach der Bestrahlung liess sich in beiden Fällen 
keine Beweglichkeit der Spermien mehr feststellen. Trotzdem 
wurde in beiden Versuchen die Besamung von ungefähr 40 Eiern 
ausgeführt. Diese Massnahme war sehr zweckmässig, denn 
überraschenderweise kam ein beträchtlicher Teil der Eier zur 
Entwicklung. Es konnten ausserordentlich weit differenzierte 
Embryonen gezüchtet werden, die ein Alter bis zu 52 Tagen 
erreichten, während die Kontrollen im allgemeinen am 60. Tage 
nach der Befruchtung ausschlüpften. Allerdings ist zu berück- 
sichtigen, dass die Entwicklung der Radiumembryonen etwas 
verlangsamt ist, so dass das Organisationsstadium dieser ältesten 
Embryonen nicht das gleiche war, wie es ein Kontrolltier von 
entsprechendem Alter zeigte. 

Der positive Verlauf dieser beiden Versuche macht es wahr- 
scheinlich, dass nach der Bestrahlung doch noch eine Beweglich- 
keit der Samenfäden, wenn auch vielleicht nur in geringem Maße, 
bestanden haben muss. Bei der ohnehin äusserst geringen Lebens- 
dauer der Forellenspermien (30 Sek.) und der hier durch die 
starke Bestrahlung sicherlich sehr geschwächten Lebenstätigkeit 
war eine Täuschung leicht möglich. 

Der Kontrollsamen zeigte, auch nachdem er 19 Stunden in 
der feuchten Kammer gestanden hatte, eine normale Beschaffen- 
heit. Dagegen war die Entwicklung der Kontrollkulturen nicht 
so günstig wie in den anderen Fällen, denn, obwohl das embryo- 
nale Wachstum in ganz normaler Weise vor sich ging, so starben 


158 Karl Oppermann: 


doch eine verhältnismässig grosse Zahl der Tiere unmittelbar vor 
dem Ausschlüpfen ab. Es scheint somit nicht ausgeschlossen, 
dass dieses ungünstigere Ergebnis auf das lange Stehen des 
Samens zurückzuführen ist. 

Die Resultate von Versuch XIV und XV stehen in auf- 
fallendem Gegensatz zu allen bisher beschriebenen Fällen. Kommt 
überhaupt eine Embryobildung zustande, so ist diese von fast 
völlig normaler Beschaffenheit. Nie treten Spina bifida-Bildungen 
auf oder derartige Erscheinungen, wie sie für die ersten drei 
Versuche beschrieben wurden. Immerhin sind auch noch Ver- 
such XIV und XV in den Ergebnissen deutlich voneinander zu 
unterscheiden, wie schon aus folgendem, rein statistischem Ver- 
gleich hervorgeht. Es enthielt Versuch XIV (19 Std. Re) 39 Eier, 
von denen 21 Embryonen lieferten, während in Versuch XV (19 Std. 
Rı) das Verhältnis von 34 Eiern zu 10 Embryonen bestand. Die 
Zahlen bekommen mehr Bedeutung, wenn der Ausbildungsgrad 
der Objekte in Betracht gezogen wird. Da zeigte sich, dass aus 
Versuch XIV wohl die grössere Zahl, im allgemeinen aber weniger 
gut gebildete Tiere, aus Versuch XV weniger, aber besser ent- 
wickelte Embryonen hervorgegangen waren. 

Wenden wir uns zunächst einer kurzen Betrachtung von 
Versuch XIV zu. 17 Exemplare wurden fixiert und zwar am 
30., 31., 33., 36., 37., 39., 47. und 51. Tage nach der Befruchtung. 
Noch später vorgenommene Fixationen ergaben nur schon völlig 
abgestorbenes Material. Zehn der konservierten Embryonen zeigten 
bei schwacher Vergrösserung, als Totalobjekt betrachtet, auch 
nicht die geringste Spur einer anormalen Entwicklung. Nur be- 
züglich der Grösse bleiben sie deutlich wahrnehmbar hinter der 
Kontrolle zurück, während sie, untereinander verglichen, nur 
wenig verschieden sind. Sieben andere sind schwach pathologisch. 
Dies zeigt sich besonders in einer ziemlich starken seitlichen 
Zusammendrückung des Kopfes. Mittel- und Vorderhirn sind 
geringer ausgebildet, etwas verlagert. Augen sind bei einigen 
nur als unregelmässig pigmentierte Flecken zu erkennen. Die 
Körpergrösse erscheint aber gegenüber den wohl gebildeten Tieren 
des gleichen Versuches nicht reduziert. 

Aus Versuch XV (19 Std. Rı) wurden sechs Embryonen 
fixiert. Diese waren jedoch alle, bis auf einen, völlig normal; 
der Grössenunterschied gegenüber der Kontrolle war wieder vor- 


Die Entwicklung von Forolleneiern etc. 159 


handen. Konserviert wurden die Objekte am 30., 33., 44. Tage 
nach der Befruchtung. Taf. V, Fig. 46, zeigt die Differenz der 
(Grösse zwischen Versuchstier und Kontrolle (44 Tage alt). Bei 
jüngeren Exemplaren ist der Unterschied nicht so erheblich. 
Was die Organisation dieses Exemplares anbetrifft, so waren 
normale pigmentierte Augen vorhanden mit Linsenbildung. Das 
Gehirn entsprach ganz der Norm. Deutlich sichtbar sind die 
Brustflossen wie auch der Fiossensaum. 

Trotzdem also bei äusserlicher Betrachtung der Objekte gar 
keine Veränderungen in morphologischer Hinsicht wahrzunehmen 
waren, kamen diese Tiere doch nicht zum Ausschlüpfen. Es 
konnte daher erwartet werden, dass das Studium der Schnittserie 
noch Schädigungen in irgend welcher Form würde erkennen 
lassen. Dies war auch der Fall. Vier Embryonen wurden in 
Schnitte zerlegt und zeigten übereinstimmend pathologische Ver- 
änderungen im Vorder- oder Mittelhirn. Die Augenbecher wiesen, 
besonders an der Eintrittsstelle des Nervus opticus, in erheblichem 
Maße lose Zellenmassen auf (Abb. 3, Taf. VID). Die zugrunde 
gegangenen Zellen hatten wieder das charakteristische Gepräge. 
Die Kerne waren pyknotisch geworden. Eine Struktur war nicht 
mehr vorhanden, sondern sie stellten homogene, sich intensiv 
färbende Gebilde dar. Wie der wiedergegebene Schnitt zeigt, 
ist der Zusammenhang fast sämtlicher Zellen der Retina aufge- 
hoben. Die Pigmentschicht ist wohl erhalten. Es muss aber 
betont werden, dass dieser Schnitt nur ein Bild von den stärksten 
Störungen gibt, die sich in diesem Embryo vorfanden. Alle 
übrigen Organe waren in völlig normaler Weise angelegt und 
frei von zerfallenen Zellen. Zum Vergleich ist in Fig. 1, Taf. VII, 
ein etwas jüngeres Kontrollstadium abgebildet. Der Grössen- 
unterschied ist deutlich. 

Der eben beschriebene Störungsgrad war typisch für Ver- 
such XV. Alle untersuchten Objekte zeigten ein annähernd 
gleiches Aussehen. Aus Versuch XIV dagegen, in dem der Samen 
also auch 19 Stunden, aber mit Re bestrahlt worden war, gingen, 
wie schon vorher näher beschrieben wurde, neben fast völlig 
normalen Embryonen doch noch eine gewisse Zahl etwas stärker 
geschädigter Formen hervor. 

Der Verlauf von Versuch XV liess erwarten, dass eine neun- 
zehnstündige Bestrahlung des Samens mi* dem stärkeren Radium- 


160 Karl Oppermann: 


präparat fast die äusserste Grenze darstellt, für die überhaupt 
noch ein positives Ergebnis der Experimente zu erzielen ist. 


Bestrahlung des Samens während 24 Std. mit Rs, 
alle, 3, A arstdlgm it 'Mithh: 

Nach 24stündiger Bestrahlung mit Rı oder R., oder nach 
2!/2-, 3-, 4-, 5stündiger Bestrahlung mit Mth konnte keine 
Beweglichkeit der Spermien mehr wahrgenommen werden. Stets 
wurde auch in diesen Fällen die Besamung von Eiern vorge- 
nommen, aber eine Entwicklung kam nie zustande. 


Das Gesetz der Kurvenbildung. 


Neben den Missbildungserscheinungen mannigfachster Art, 
die als Folge der Bestrahlung der Samenfäden auftraten, erregt 
vor allem unsere Aufmerksamkeit die merkwürdige Tatsache, dass 
bei sehr starker Einwirkung der Strahlen die Versuche wieder 
einen auffallend günstigeren Verlauf nahmen. 

Zuerst haben OÖ. und G. Hertwig bei ihren Radiumver- 
suchen diese auffälligen Erscheinungen beobachtet. Wurden 
Samenfäden (B-Serie) oder unbefruchtete Eier (D-Serie) von Rana 
fusca sehr lange bestrahlt (12 Stunden) und dann zur Besamung 
normaler Eier verwendet, resp. Eier mit normalen Spermien be- 
samt, so konnten sehr viel besser entwickelte Larven gezüchtet 
werden als bei Wahl kürzerer Bestrahlungszeiten, während eine 
nur geringe Einwirkung des Radiumbromids bereits zum Teil 
recht erhebliche Schädigungen bedingte. 

Es besteht also das proportionale Verhältnis zwischen 
Bestrahlungsdauer der Keime und den daraus resultierenden 
Störungsgraden der Embryonen nur, solange die den Spermien 
zugeführte Strahlenmenge ein gewisses Maß nicht überschreitet. 
Wird die Bestrahlung über diesen Wert hinaus verstärkt, so 
kehrt sich das Verhältnis um, d. h. es wird jetzt die Entwicklung 
um so günstiger, je intensiver die Einwirkung des Radiumbromids 
ist. In anschaulicher Weise stellten O. und G. Hertwig diese 
Verhältnisse durch Kurven dar. Es gibt jede Kurve die Resul- 
tate der Versuche für ein bestimmtes Radiumpräparat. Welches 
die inneren Gründe sind, die zu diesen eigentümlichen Beziehungen 
führen, in denen die Ergebnisse der schwachen, mittleren und 
starken Bestrahlungsversuche zueinander stehen, gibt G. Hert- 


Die Entwicklung von Forelleneiern ete. 161 


wie (1911) auch im Sinne 0. Hertwigs folgendermaßen: 
„Bei ganz kurzer Dauer, 5 Minuten langer Bestrahlung, ist die 
Schädigung noch so unbedeutend, dass der hadiumkern gegen- 
über dem normalen Kern in nur geringem Grade störend ein- 
zuwirken vermag. Bei '/4- bis '/sstündiger Bestrahlung ist die 
Schädigung grösser, der Radiumkern hat aber noch die Fähigkeit, 
sich zu vermehren. Er beeinflusst daher das Entwicklungsprodukt 
schon auf früheren Stadien. Bei langer Bestrahlung ist die 
Schädigung des bestrahlten Kernes noch grösser, da sie ja pro- 
portional der Strahlenmenge wächst (0. Hertwig). Der Radium- 
kern kann sich jetzt aber nur noch langsam vermehren, der 
normale andere Kern wächst rascher, die normale Kernsubstanz 
überwiegt daher das Radiumcehromatin, die Entwicklung wird 
daher jetzt besser verlaufen. Endlich, im extremen Fall, ist der 
Radiumkern ganz degeneriert; er hat die Fähigkeit, zu wachsen 
und sich zu teilen, verloren, er nimmt an der Entwicklung gar 
nicht mehr teil; diese verläuft daher, weil nur vom normalen 
Halbkern abhängig, ganz normal (Parthenogenese).“ 

(sehen wir dazu über, zu untersuchen, inwiefern die für 
die Froschversuche gegebenen Erklärungen und Darstellungen 
auch für die Resultate unserer Versuche gelten. 

Wie aus der Beschreibung im ersten Kapitel ohne weiteres 
hervorgeht, könnte auch bei unserem Objekt für jede der drei 
Versuchsserien, entsprechend den drei verschiedenen radioaktiven 
Präparaten, die verwendet wurden, ein Kurvenbild aufgestellt 
werden. Auch hier würde durch die kurze, mittlere, lange Be- 
strahlung und dem sich daraus ergebenden Entwicklungsgrad der 
Embryonen der aufsteigende Teil, das Gebiet des Maximums und 
der fallende Abschnitt der Kurve festgeleet werden. Es lässt 
sich aber auch die Darstellung vereinfachen und die drei Kurven- 
bilder zu einem einzigen zusammenfassen. Um eine derartige 
Zusammenfassung zu ermöglichen, ist es zunächst notwendig, 
unabhängig zu werden von der verschiedenen Stärke der zur 
Anwendung gekommenen Präparate. Dieses gelingt, wenn lediglich 
die in den einzelnen Versuchen angewendeten Energiemengen, 
unabhängig von der Zeit, berücksichtigt werden. Es soll daher 
die von 1 mg in einer Minute ausgestrahlte Energiemenge mit e 
bezeichnet werden. Wir betrachten also nur das Produkt aus 


der Zeit und der Stärke des zur Anwendung gekommenen Radium- 
Archiv f.mikr. Anat. Bd.83. Abt. Il. 11 


162 Karl Oppermann: 


präparates in Effekteinheiten. Auf diese Weise lassen sich alle 
ausgeführten Versuche nach wachsenden Werten von e in eine 
Reihe bringen. Durch eine leichte Umrechnung kann dann 


folgende Tabelle gewonnen werden. 


7 Min. R» 


ae 5 Min. Rı 1 Min. Mth 
pp 375 e 371 e 556 
Be !/a Std. Rı I, Std. Ra 6 Min. Mth 
pP 225 e 159 e 330 e 
REN ei: 2 Std. R: 3 Std. R: | !% Std. Mth 
pp 450 e 900 e 954 e 1650 e 
8 Std. Rı 8 Std. R: 
GERD AN 3600 e 2544 e 
Re: 14 Std. R: 2 Std. Mth 
pP 4452 e 6600 e 
_ | wsea.Rı | 19 sta. Rs | 
Sun 8550 e 6042 e | 


Es ist verständlich, dass diese Einführung der Grösse e nur 
vorgenommen werden konnte unter der Voraussetzung, dass es 
gleichgültig ist, ob man in einem Fall kurze Bestrahlung mit 
starkem Präparate, oder im anderen Falle eine lange Bestrahlung 
mit schwachem Präparate ausführt, wenn in beiden Fällen eine 
gleiche Strahlenmenge zur Anwendung kommen soll. Besteht 
diese Voraussetzung zu Recht, so muss mit Berücksichtigung des 
Gesichtspunktes, nach dem die Gruppierung der Versuche ur- 
sprünglich vorgenommen wurde, in jeder Abteilung eine geringere 
Strahlenmenge zugeführt worden sein, als in der darauf folgenden. 
Da zeigt sich nun in der Gruppe V und VI eine Unstimmigkeit. 
Wie aus der Beschreibung im ersten Teil hervorgeht, sind aus 
Versuch XIII (2 Std. Mth. 6600 e) sicher stärker missbildete 
Embryonen hervorgegangen als aus Versuch XV (19 Std. Rs, 
6042 e). trotzdem bei diesen starken Bestrahlungen das Verhältnis 
hätte umgekehrt sein müssen. Es verlief Versuch XV (6042 e) 
so, als ob noch erheblich mehr Energie zugeführt worden wäre 
als in Versuch XIII (6600 e). Dieser Widerspruch wird durch 
Berücksichtigung der verschiedenen Zeitdauer der Bestrahlung 
gelöst. Es ist bereits früher darauf hingewiesen worden, dass 
schon ein längeres Stehen (24 Std.) der Spermien in feuchter 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 165 


Kammer eine Verminderung der Lebensfähigkeit bedingt. So 
setzen also Spermien, die lange Zeit mit schwachen Präparaten 
bestrahlt werden, den schädigenden Strahlen weniger Widerstand 
entgegen, werden also stärker beeinflusst als solche, denen gleiche 
Energiemenge in erheblich kürzerer Zeit zugeführt wird. Nach 
der vorher angeführten Hypothese Hertwigs entspricht der 
stärkeren Schädigung des bestrahlten Kernes eine bessere Ent- 
wicklung des Embryos, nachdem das Maximum der Schädigung 
einmal überschritten ist. Daher erklärt es sich, dass in Ver- 
such XV mit 6042 e (24 Std.) ein grösserer Effekt erzielt wurde 
als in Versuch XIII mit 6600 e in 2 Stunden. 

Es sind aber noch folgende Umstände zu berücksichtigen. 
Schon eine 2'/sstündige Bestrahlung mit Mth genügte, um alle 
Spermien völlig abzutöten, also durch Anwendung von 8250 e. 
Andererseits verlief der Versuch XIV, 19 Std. Rı, noch positiv, 
also bei 8550 e. Es ergibt sich daher ein Widerspruch gegen die 
vorher gegebenen Frörterungen. Da schon eine in 2!/» Stunden 
zugeführte Strahlenmenge von 8250 e auf die Samenfäden absolut 
tötend einwirkt, so müsste dies mit noch viel höherer Sicherheit 
bei 8550 e, die in 19 Stunden zugeführt werden, zu erzielen 
sein. Dies trat aber nicht ein. Nun lieferte aber bereits Ver- 
such XV (19 Std. Re, 6042 e) zum Teil Embryonen, die von 
gleichgutem Organisationsgrade waren wie die des Versuchs XIV 
(19 Std. Rı, 8550 e). Demnach kann also folgendes gesagt 
werden: in Versuch XV (19 Std. Re, 6042 e) war ein gewisser 
Prozentsatz der Spermien schon völlig abgetötet, da ja nur relativ 
wenige Embryonen zur Entwicklung kamen, ein anderer Teil so 
stark geschädigt, dass scheinbar ganz normal gebildete Tiere 
heranwachsen konnten, der Rest war weniger geschädigt, so dass 
ein etwas höherer Missbildungsgrad resultierte. Hingegen waren 
im Parallelversuch (19 Std. Rı, 8550 e) der grösste Teil der 
Samenfäden abgetötet, und dann nur noch so stark geschädigte 
vorhanden, dass eine normale Entwicklung der Keimlinge statt- 
finden konnte. 

Diese Betrachtung zeigt, in wieviel höherem Maße eine 
Ungleichmässigkeit der Versuchsergebnisse eintritt, wenn Samen- 
fäden mit schwachen Präparaten bestrahlt werden. Aus diesen 
Tatsachen konnten die beiden Sätze erhalten werden, dass einmal 


bei langen Bestrahlungszeiten auch die Zeit an sich als Schädigungs- 
ale 


164 Karl Oppermann: 


faktor in Betracht gezogen werden muss; zweitens, dass starke 
radioaktive Präparate eine gleichmässigere Schädigung hervor- 
rufen. Mit Berücksichtigung dieser beiden Sätze lassen sich alle 
vorher erwähnten Schwierigkeiten beseitigen, die unter Einführung 
der Grösse e dem Gesetze der Kurvenbildung entgegenstanden. 

Nach diesen Erörterungen wird es leicht verständlich sein, 
wie das Kurvenbild in unserem Falle gestaltet sein muss. Aus 
der Darstellung im ersten Teile geht hervor, dass in bestimmten 
Kulturen am 13. Tage nach der Befruchtung eine Sterbeperiode 
eintrat. Es liess sich also schon durch eine rein statistische 
Methode feststellen, dass sich gewisse Kulturen vor anderen durch 
einen bedeutend stärkeren Schädigungsgrad auszeichneten. Um 
in übersichtlicher Weise zu zeigen, wie sich zahlenmässig das 
Absterben auf die einzelnen Tage verteilt, sei im folgenden eine 
Tabelle wiedergegeben, aus welcher der scharfe Gegensatz der 
Versuche mit und ohne Sterbeperiode ausserordentlich deutlich 
hervorgeht. Gleichzeitig sind auch in der Tabelle alle fixierten 
hadiumobjekte eingetragen. 

So liess sich also zeigen, dass durch eine Bestrahlung während 
einer halben Stunde mit Rı oder Re, 1,2 Std. Rı, 3 Std. Rs, 
Ss Std. Rı oder Re, 6 Min. !/. Std. Mth ein starker Schädigungs- 
grad erreicht wird. Es entspricht dies also folgenden Energie- 
einheiten: 159e, 225e, 450e, 900e, 954e, 3600e, 2544e, 330e, 
1650e. Stärkere oder schwächere Bestrahlungen führten in allen 
Fällen zu günstigen Resultaten. Die Untersuchung des fixierten 
Materials half nun weiter den Bezirk von 159e bis 3600e zu 
begrenzen. Deutlich war der Unterschied der Gruppe II und 
IV, III gegenüber. In Gruppe III liess sich Versuch VII von 
VII—X abgliedern, die den ungünstigsten Verlauf von allen 
Experimenten hatten. Ausführlich sind diese Verhältnisse im 
ersten Kapitel behandelt. Es kann demnach gesagt werden, 
dass die embryonale Entwicklung dann am ungünstigsten verläuft, 
wenn die Samenfäden, die zur Befruchtung normaler Eier ver- 
wendet wurden, mit 900 bis 1650 Energieeinheiten bestrahlt 
werden. Demnach ist das Kurvenbild festgelegt. Als Abszissen- 
werte des Koordinatensystems werden die Energieeinheiten gewählt. 
zu Ordinatenwerten der jeder Strahlenmenge entsprechende durch- 
schnittliche Entwicklungsgrad der Embryonen, wie im ersten Teil 
genauer charakterisiert worden ist. In dem absteigenden Teil 


28. X11.|29. XIT.|30. xIL[a1. XIe| 1.1. | 21 |3 AT er. 1. | 7020128. 07:00 0 a to ern seen | 41 st stımı | wsıjor or jan on sc lern| on |2on |onn 
u = | 
5 Min. R.I. 2 3° 2: 3. SE 5 = 
® x 3+ 
1 
I h | = 
7Min. Rn | 2- 3. See | BE 10. 
I. ; | 
| 
_— : 
5 Std. Mth 2 
IT 
1 Std. R.I. 1r 27 47 57 27 1t 24 1+ 2+ {er 
IV % 3. ir 3: 3. A, 
air 1; | 
33 Min. R. II. 3 2 Ds | a el Say Bir 2+ 
V x 1t 2+ 
; f 
6 Min. Mth 5 35 ia | br au 2 1r = ae 
VI i i 1) 
'/s Std. Mth — le re | Dr 14 2+ 
vu = 3 ie T- 
s N 
| 
3 Std. R.II. ® 2- 2 = sr || ur || 2 ler ie 
| | 
VII. | se en 
E | 
2 Std. R.L. 2. 3: | 2: A 1t st 7+ | 2+ | 2+ | »+ n 1+ 1+ 
IX. x 3: + : 
fs 1 | | 
19 Std. R.I. 
z x 
Embryonen fixiert nach 
|| dem 33. Tag, 
19 Std. R.If. || 
xt. % 
1 T I = © 
2 Std. Mth 1. | ie te Ele || 25 |mElor IE 225 | Be Br 3- 
XI. z 
\ — 
1 Min. Mth 3- 2 i+ | 3. B% 4. 36 8 e 3. 3. 2. 
XII. x + 
1Std.oRuT ea au a el a I BI er | || 2 
| > 3. Be || 3 3 D* 
7 
XIV. n e 
7 I 
8 Std. R.T. | | Du an 2+ | 14 | 14.|°4+ | 2+ 4. | 3+ 
XV. > ü 1+ 
| 
8 Sta. R. II. | 2. 2+ | 5+ | 8+ | 2+ 3- 2. 
XVL. 2 Ar 3- 


Zeichenerklärung: 


x = Tag der Befruchtung. 


- = Fixierte Objekte. 


7 = Abgestorbene Objekte. 


ee 


IATuN 
AL AR ANTRENE 


Bye Kr 
tn ne DT ei 
u) 
Dr. { 


— 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 165 


ändert sich der Verlauf der Kurve, je nachdem die Bestrahlung 
mit starken oder schwachen Präparaten vorgenommen wird. Für 
unsere Versuche, in denen Präparate verwendet wurden, die einer 
Stärke von 5,3; 7,5; 55 mg reinem Radiumbromid entsprachen, 
ist der Kurvenverlauf in der Weise gestaltet, wie Textfig. 2 zeigt. 

Der abweichende Verlauf macht sich von dem Punkte an 
geltend, von dem an die Zeit als Schädigungsfaktor mit in Betracht 
gezogen werden muss. Die Kurve fällt schneller für die Versuche, 
in denen Rı oder R> verwendet wurde. Andererseits ist sie für 
diese beiden Serien länger. Die grössere Ausdehnung hängt eben 
mit der grösseren Ungleichmässigkeit der Versuchsergebnisse 
zusammen, die sich durch Benutzung schwächerer Präparate 
ergeben. 


Parthenogenetische Forellenembryonen. 


Das im vorigen Kapitel gegebene Kurvenbild zeigt einen un- 
symmetrischen Bau. Die Kurve erreicht sehr schnell ihr Maximum, 
um dann allmählich wieder zu fallen. Es ist dies der Ausdruck 
dafür, dass bereits die geringe Energiemenge von 37e genügt, 
um beträchtliche Schädigungen der Embryonen zu bewirken. 
Schon eine Strahlenmenge von 900—1650e rief die stärksten 
Störungen hervor; mit Beginn der Gastrulation starben alle ab. 
Es kommt keine Organdifferenzierung mehr zustande. Von dem 
Punkte der Maximalschädigung ist noch die relativ sehr grosse 
Energiemenge von ungefähr 7000e erforderlich, um Embryonen 
entstehen zu lassen, die ein Alter bis zu 52 Tagen erreichen und 
ganz normales Aussehen zeigen. 

Diese Betrachtungen legen es nahe, anzunehmen, dass die 
inneren Vorgänge, die sich abspielen und einerseits bei den 
schwachen, andererseits bei den starken Bestrahlungsversuchen 
zu Embryobildung führen, wesentlich verschieden voneinander 
sein müssen. Die Erklärung, die OÖ. und G. Hertwig für ent- 
sprechende Erscheinungen, wie sie bei den Froschexperimenten 
auftraten, geben, ist bereits im vorigen Kapitel angeführt worden. 
Es handelt sich demnach vorwiegend um eine Schädigung des 
Spermakernes. Der Kern ist ausserordentlich empfindlich gegen 
radioaktive Strahlen, so dass schon eine Einwirkung während 
einer Minute auf die Samenfäden für die spätere embryonale 
Entwicklung die schwersten Störungen hervorruft. Ohne dass 


Karl Oppermann: 


9008 


Isle 


25350 


Gosic 6600e 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 167 


wahrscheinlich bei diesen schwächsten Versuchen die Verschmelzung 
von Ei und Spermakern wie auch die ersten Teilungsvorgänge 
anormal verlaufen, treten in der späteren Entwicklung die 
stärksten pathologischen Erscheinungen auf. Sind hingegen den 
Samenfäden grössere Strahlenmengen zugeführt worden, so ver- 
liert der Kern mit stärkerer Bestrahlung immer mehr zunehmend 
die Fähigkeit, zu wachsen und an den Zellteilungsprozessen in 
normaler Weise teilzunehmen. Im extremsten Falle wird er an 
der ganzen Entwicklung überhaupt keinen Anteil mehr nehmen. 
Er kann somit seinen schädigenden Einfluss nicht mehr geltend 
machen. Es kommt eine rein mütterliche Entwicklung zustande. 
Und dies sind dann die Fälle, in denen trotz intensivster Be- 
strahlung der Samenfäden so gute Embryonen gebildet wurden. 

Die völlige Übereinstimmung der Bestrahlungsversuche, die 
an Frosch- und Forellenkeimen ausgeführt wurden, erlaubt es, 
für die Fälle, in denen O. und G. Hertwig eine parthenogene- 
tische Entwicklung annehmen, auch für unser Objekt diesen Ent- 
wicklungsmodus zu vermuten. Handelt es sich wirklich um eine 
reine Parthenogenese, so entbehren auch die somatischen Zellen 
des väterlichen Chromatinanteiles: die Zellkerne sind haploid. 
Nun soll aber die Kerngrösse von dem Gehalte an Chromatin 
abhängig sein. Es müssten demnach die hier in Betracht kommenden 
Kerne, da sie nur halbe Chromatinmasse besitzen, auch eine 
geringere Grösse haben. Von diesen Überlegungen ausgehend 
wurden eine Reihe von Kernmessungen vorgenommen. Es wurden 
die Kerne der parthenogenetischen Tiere verglichen mit denen 
normaler Kontrolltiere. Als Beispiele sollen die Resultate der 
Messungen gegeben werden, die ein l4tägiges und ein 33 tägiges 
Objekt zeigten. Das Objekt vom 14. Tage nach der Befruchtung 
ist in Taf. V, Fig. 38, abgebildet. Sein Entwicklungsstadium ist 
schon genauer im ersten Teil beschrieben worden. Hier soll nur 
noch einmal hervorgehoben werden, dass dieser Embryo sicherlich, 
wenn auch nur wenig, weiter entwickelt war, als die einen Tag 
jüngere Kontrolle, bei weitem aber natürlich nicht das Stadium 
eines einen Tag älteren Normaltieres erreicht hatte. Die patho- 
logischen Erscheinungen waren nur von geringem Grade. Zunächst 
sollen die Verhältnisse der Anzahl der Kerne von Versuchstier 
zu der einen Tag jüngeren Kontrolle und der einen Tag älteren 
Kontrolle gegeben werden, wie es sich auf dem Querschnitt durch 


168 Karl Oppermann: 


das Rückenmark in gleicher Körpergegend vorfand. Wie folgende 
Umrisszeichnungen zeigen, ist der Flächeninhalt der drei Rücken- 
marksquerschnitte ungefähr gleich. Diese sind in allen Fällen 
der Region der Gehörbläschen entnommen. 


1. 2, g. 


Fig. 3. Vergr.: 220fach. 


Abbildung 1 bezieht sich auf die jüngere Kontrolle, Ab- 
bildung 2 auf den Radiumembryo, Abbildung 3 auf die ältere 
Kontrolle. Es betrug nun die Zahl der Kerne in den angegebenen 


S] 


u 


I k 
ne OAEES Cr 


Fig. 4. Vergr.: 920 fach. 


1 
) 


Querschnitten für 1 143, für 2 321, für 3 277. Daraus geht 
hervor, dass die Zahl der Kerne der parthenogenetischen Form | 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 169 


ungefähr doppelt so gross ist wie die des gleichweit entwickelten 
Kontrollstadiums, und dass sie auch noch grösser ist als die der 
einen Tag älteren Kontrolle. Wie sich das Zahlenverhältnis für 
die normale Entwicklung ändert, zeigt der Vergleich der unter 
1 und 3 aufgeführten Grössen. Wie sich die Kerngrössen zu- 
einander verhalten, erläutern folgende Umrisszeichnungen. 


1. 2 ° 
© 
> VO 
a ce = 
, 

Wie vorher, beziehen sich die unter 1 angegebenen Zeichnungen 
auf das jüngere Kontrollstadium, 2 auf das Versuchstier, 3 auf 
die einen Tag ältere normale Form. Die Messungen sind an 
Kernen ausgeführt, die sich auf Schnitten fanden, die durch gleiche 
Körperregionen gingen. Es ist also der Unterschied der Kern- 
grösse des parthenogenetischen Tieres ein ganz bedeutender gegen- 
über den normalen Objekten. Die gleiche Differenz ergibt sich 


auch für Kerne, die dem Kiemendarm angehören, wenngleich die 
Unterschiede nicht so erheblich sind. 


ae & Bes, 


Fig. 6. Vergr.: 920fach. 


Fig. 5. 


Dann seien noch die Resultate von Messungen wiedergegeben, 
die an einem älteren, ungefähr 33 Tage alten Stadium vorgenommen 
wurden. Es war dies ein Exemplar, das äusserlich betrachtet 
ganz normal gestaltet schien. Die Messungen beziehen sich auf 
Kerne des Rückenmarks, wiederum gleicher Körperregion ent- 
nommen. 


170 Karl Oppermann: 


Zum Schlusse werden noch eine grössere Zahl von Kernen 
der roten Blutkörperchen abgebildet, die auch in gleicher Weise 
den Unterschied von Normaltier und parthenogenetischer Larve 
erkennen lassen. 


08 08 ® 


Oo 


Sole SER og 


or 


nn Embryo. Parthenog. Embryo. 
Fig.7. Vergr.: 920fach. 


Spina bifida. 


In den beiden folgenden Kapiteln sollen die durch die Be- 
strahlungsversuche bedingten pathologischen Veränderungen näher 
betrachtet werden. 

Es ist schon hervorgehoben worden, dass als häufige und 
charakteristische Erscheinungen Spinae bifidae auftraten. Unter 
dem Namen der Spina bifida ist in der Literatur eine Gruppe 
von Missbildungen der Wirbeltiere bekannt, deren gemeinsames 
Merkmal in einer mehr oder minder weitgehenden dorsalen Spalt- 
bildung des Körpers liegt. In einer Darstellung von Missbildungs- 
erscheinungen bei Fischen gibt zuerst Lereboullet auch eine 
Beschreibung von solchen, die ein einfaches Kopf- und Schwanz- 
ende und doppelten Rumpf aufwiesen. Für derartig entwickelte 
Tiere führte Dellacher, der auch eine Untersuchung an Schnitt- 
serien lieferte, die Benennung „Mesodidymi“ ein. Als „Kata- 
didymi“ werden von ihm solche bezeichnet, bei denen auch das 
Schwanzende geteilt ist. Zu diesen älteren, grundlegenden Arbeiten, 
unter denen noch die von Rauber zu erwähnen wäre, treten aus 
neuerer Zeit die Angaben über zwei Spaltbilder von Kopsch hinzu. 

Alle aus den DBestrahlungsversuchen hervorgegangenen 
Embryonen mit Spaltbildung des Rumpfes gehören in die Gruppe 
der Mesodidymi und Katadidymi Vellachers. Es ist bemerkens- 
wert, dass kein Anadidymus zu beobachten war, während gerade 
in normalen Kulturen dieser Missbildungstypus weitaus häufiger 
auftritt als die vorher erwähnten. Man wird deshalb nicht fehl- 


290009 Se Er 


Die Entwicklung von Forelleneiern ete. E7ı 


gehen, wenn man diese Tatsache mit der besonderen Art der 
Schädigung, die durch die Radiumbestrahlung des Samens bewirkt 
wird, in Zusammenhang bringt. 

Die grösste Zahl der Spinae bifidae ist hervorgegangen 
aus Versuch XIII (2 Std. Mth). Bei zwei Drittel aller fixierten 
Embryonen dieses Versuches zeigten sich Längsspaltungen des 
hinteren Körperabschnittes. 

In den Versuchen I, II, III (5 Min. Rı, Re, 1 Min. Mth), 
in denen ja auch schon erheblich stark geschädigte Embryonen 
vorkamen, konnte auch nicht eine von den hier in Rede stehenden 
Missbildungsformen beobachtet werden. In den Versuchen IV, 
V, VIU traten auch derartige Erscheinungen auf, allerdings, wie 
es dem Schädigungsgrad dieser Versuche entsprach, an sehr schwach 
entwickelten Individuen (Taf. V, Fig. 13, 14, 17, 2, 3, 7). 

Die im folgenden zu besprechenden, aus einer grösseren Zahl 
von Spinae bifidae ausgewählten Objekte sollen je nach dem 
(Grade der Spaltbildung betrachtet, in drei Gruppen geteilt werden: 

1. Solche, bei denen die Trennung der Körperhälften sich 
unmittelbar in der Region der Gehörbläschen vollzieht. 
Diejenigen, die eine Längstrennung des Rumpfes erst 
von der Körpermitte an aufweisen. 

3. Den geringsten Spaltungsgrad zeigende Embryonen, bei 
denen nur das letzte Körperende in zwei Teile gespalten 
ist. 

Für die erste Gruppe in Betracht kommende Typen sind in 

Fig. 1—8, Taf. V, abgebildet. Schon äusserlich tritt bei allen die 
sehr tiefgehende Spaltung deutlich sichtbar auf. Sie haben häufig 
die Gestait eines Hufeisens. Je einem Aste entspricht eine 
Körperhälfte. Die Körperenden erscheinen bei den älteren Stadien 
wieder mehr einander genähert. Die Kopfbildung ist nie sehr 
deutlich wahrnehmbar. Verhältnismässig am schärfsten ist sie 
wohl noch bei dem in Fig. 29 abgebildeten Embryo ausgeprägt, 
trotzdem auch an diesem, bei Betrachtung des Totalobjektes, 
Gehirndifferenzierungen und Augen nicht zu erkennen waren. In 
der Besprechung einzelner Fälle soll mit dem letzterwähnten 
begonnen werden. Er wurde am siebzehnten Tage nach der 
Befruchtung konserviert und sah noch durchaus wachstumsfähig 
aus. Die Körperenden waren schon vom Dotter losgelöst und 
zeigten normale Beschaffenheit. Alle Organe sind doppelt ange- 


[86] 


172 Karl Oppermann: 


legt, Rückenmark, Chorda, Darm. Die Trennung des Darmes 
vollzieht sich zuerst und zwar schon in der Region des Kiemen- 
darmes. Die Teilungsstelle liegt etwas im Schnitt rechtsseitig 
verschoben. Ziemlich kompliziert gestaltet sich der Verlauf des 
Gehirnes, bevor die Trennung in zwei Hälften vollzogen ist. 
Schon in den vordersten Kopfpartien weist das Zentralnerven- 
system insofern eine anormale Beschaffenheit auf, als es ganz 
nach rechts verschoben erscheint, in völlig gleicher Weise wie 
es für ein anderes Objekt in Fig. 9, Taf. VI, dargestellt ist. In 
der Region des Mittelhirns treten nun am dorsalen Rande zunächst 
nach links, dann unmittelbar danach nach rechts sich lagernd, 
Faltenbildungen auf als Ausstülpungen vom Ventrikel, wie es 
ganz ähnlich für ein anderes Objekt, Taf. VI, Fig. 16, gilt. Diese 
Falten haben einen Hohlraum, und je mehr sie sich lateralwärts 
ausdehnen, um so mehr verkürzt sich von der unteren, dem 
Entoderm zugewandten Seite beginnend, der normal gelegene 
Abschnitt des Rückenmarkes, so dass unmittelbar vor der Teilungs- 
stelle das Gehirn wie ein sehr breit gedrücktes Rohr erscheint, 
dessen Zentralkanal aber eine Ausdehnung einnimmt, die um 90° 
gegen die Norm verschoben ist, also horizontal liegt. 

In der Region der (ehörbläschen sind, wie die wieder- 
gegebene Abb. 17, Taf. VI, des Schnittes zeigt, alle unpaaren 
Organe doppelt vorhanden. Jedes Medullarrohr hat einen Zentral- 
kanal. Jederseits liegt ein normales Gehörbläschen. Chorda und 
Darm sind auf der rechten Seite bedeutend geringer entwickelt. 
Diese nur schwach ausgebildete Chorda nimmt einen unregel- 
mässigen Verlauf und verschwindet bald. Auf der linken Seite 
ist deutlich ein Herz vorhanden, dessen letztes Ende noch auf 
dem abgebildeten Schnitte zu sehen ist. Für den anderen Teil 
konnte die Anlage eines Herzens nicht nachgewiesen werden. 
Über die beiden Rumpfhälften hinweg zieht sich eine dünne 
Epidermis von nicht immer ganz gleichmässiger Stärke. In dem 
die Körperenden überbrückenden Teil ist sie mit baumastartig 
verzweigten Wucherungen besetzt. Solche Wucherungen bei Spalt- 
bildungen sind nicht mit der Radiumbestrahlung in Beziehung zu 
setzen, denn schon bei Vellacher finden sich gleiche Bildungen 
wiedergegeben. 

Das Studium der mittleren und hinteren Körperpartie lehrt, 
dass beide Hälften gleich stark entwickelt sind. Die Chorda ist 


— 
se) 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. l 


im rechten Teile nur in einem kleinen Bezirk angelegt. Das 
Zentralnervensystem nimmt im weiteren Verlauf ein andere Lage 
ein und zwar so, dass es mit der medialen Seite dem Dotter 
aufliegt. Bemerkenswert sind Zellhaufen, die wie Spinalganglien 
der medialen Wand anliegen (Abb. 17, Taf. VI). Diese Zellhaufen 
finden sich auch dann noch wieder, wenn das Medullarrohr von 
der normalen in die oben beschriebene Lage übergegangen ist, 
und kommt dann so als längsverlaufender Streifen zwischen Dotter 
und Rückenmark zu liegen. 

Beide Körperenden sind vom Dotter abgehoben. Genau 
vom gleichen Typus sind Embryonen, die in Taf. V, Fig. 28, 30, 
31, abgebildet sind und sämtlich etwas älter waren (19, 20, 22 
Tage). Ein Unterschied liegt nur in der schon am Totalobjekt 
deutlich auftretenden Ungleichmässigkeit der Körperhälften (Fig. 25 
26..28.430,..31). 

Während in den bisher erwähnten Fällen das Stadium des 
Dotterlochschlusses schon erreicht war, sollen im folgenden noch 
kurz einige jüngere Exemplare beschrieben werden. 

Taf. V, Abb. 27, zeigt einen Embryo, der am gleichen Tage 
und aus gleicher Kultur konserviert wurde wie die in Fig. 33, 
38 wiedergegebenen (Kontrolle Fig. 39, Taf. V). 

Von einer Kopfbildung konnte weder am Totalobjekt, noch 
an der Schnittserie etwas wahrgenommen werden. Eine Um- 
wachsung des Dotters hatte stattgefunden; sie war noch nicht 
ganz vollendet. Beide Körperhälften sind nur sehr gering aus- 
gebildet. 

Eine Sonderung des Randringmaterials in zwei Teile ist 
vorhanden; ob es sich aber dabei um eine Differenzierung in 


RR 


Fig. 8. 


Muskelplatten und Rückenmark handelt, ist nicht sicher zu ent- 
scheiden. Darm, Wolffsche Gänge, Chorda sind nicht nach- 


174 Karl Oppermann: 


weisbar. Wie erheblich aber dennoch der Unterschied an Masse 
der Schwanzknospe gegenüber dem Umwachsungsrand ist, können 
folgende Umrisszeichnungen erläutern; diese stellen in der Serie 
einen Schnitt 1, 5, 15, 22, 29 dar. 

Stadien vom elften Tage sind in Fig. 24 und 25 abgebildet. 
Auf die innere Organisation soll nicht weiter eingegangen werden. 

Die zweite Gruppe von Spaltbildungen, bei denen also die 
Teilung der unpaaren Organe in eine linke und rechte Hälfte 
erst in der Mitte des Rumpfes erfolgt, umfasst in einer Auswahl 
die Objekte 32—36. Im allgemeinen erreichen die Embryonen 
dieser Gruppe ein weiter entwickeltes Organisationsstadium als 
die der vorigen Abteilung. Sie haben eine bedeutendere Körper- 
grösse. Die Bildung der Augen und des (Grehirnes ist mehr der 
Norm entsprechend. 

Von den bisher betrachteten Formen stellen die Embryonen 
33 und 34 auch insofern abweichende Verhältnisse dar, als das 
hintere Körperende wieder verwachsen ist, also zwei Mesodidymi 
nach der Bezeichnung Oellachers. Bei Embryo 33 ist das 
Körperende noch nicht abgehoben. Die Umwachsung des Dotters 
ist gerade vollendet (Kontrolle Fig. 39). Die beiden Schwanz- 
knospen haben sich wieder vereinigt, aber ein weiteres einheitliches 
Längenwachstum hat noch nicht stattgefunden. Am weitesten 
kranialwärts reicht die getrennte 
Anlage des Darmes. Die Chorda 
findet sich nur auf einer Körper- 
hälfte entwickelt. Vor der 
Trennungsstelle des Rücken- 
markes rückt sie etwas nach der 
n (bildlich) Iinken Seite und wird 


Rückenmark 


a durch einen schmalen Fortsatz 

des Medullarrohres seitlich be- 

Darm grenzt. Es kann auch zu einer 
Fig. 9 völligen Umfassung des Chorda- 


stranges dadurch kommen, dass, 
wie nebenstehender Umriss zeigt, auch das Entoderm einen der- 
artigen Ausläufer bildet, der mit dem des Rückenmarkes in 
direkte Verbindung tritt. Es ist aber eine solche Umfassung 
immer nur auf kleine Körperbezirke beschränkt. Unmittelbar 
nach der Trennung des Entoderms tritt auch die Spaltung des 


“ 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 175 


Rückenmarkes ein (acht Schnitte ä 5 «). Der wiedergegebene 
Schnitt zeigt die nur einseitige Ausbildung der Kupfferschen 
Blase (Fig. 6, Taf. VI). Es findet sich noch auf der linken, 
stärker entwickelten Hälfte ein unmittelbar vor der Kupfferschen 
Blase auftretender, im Querschnitt kreisrunder Zellkomplex. Dieser 
dürfte wohl den von Kopsch als „regenerierte Muskelplatten“ 
bezeichneten Bildungen entsprechen. An dem Parallelobjekt 
(Taf. V, 38, Schnitt Taf. VI, 7) konnte die gleiche Erscheinung 
festgestellt werden. 

Ein weiteres Entwicklungsstadium des eben besprochenen 
Objektes würde Embryo Taf. V, Fig. 534, darstellen. Dieser wurde 
fixiert am 18. Januar, war also 19 Tage alt, während der vorige 
aus derselben Kultur am 13. Januar konserviert wurde. Die 
wiedervereinigten Schwanzknospen haben ein Längenwachstum 
begonnen. Das Körperende ist schon vom Dotter gelöst. Die 
inneren Organisationsverhältnisse werden durch vier Abbildungen 
illustriert (Taf. VI, Fig. 12, 16, 15, 11), auf deren Erklärung an 
entsprechenden Stellen eingegangen wird. Auch hier teilt sich 
zunächst der Darm schon unmittelbar hinter der Region der 
(ehörbläschen. Die Chorda ist auch hier nur auf einer Seite 
vorhanden. Der Beginn zur Trennung des Rückenmarkes erfolgt 
erst ungefähr in der Mitte des Rumpfes. Eigentümlich sind die 
Einschlüsse von losen Zellen im Dotter. Diese Zellen tragen ganz 
den Charakter der Zellen des intermediären Gewebes. In jeder 
Hältte ist ein Rückenmark, ein Darmrohr, ein Wolffscher Gang, 
eine Muskelplatte und die intermediäre Zellschicht sehr deutlich 
entwickelt (Taf. VI, Fig. 11). Das hintere Körperende zeigt wieder 
das unpaare Nervenrohr, die medianen Wände sind nicht mehr 
zu erkennen. 

Die Ausbildung völlig symmetrischer Körperhälften zeigt 
Fig. 35, Taf. V. Hier ist auch die Chorda rechts und links gleich 
stark entwickelt. Dies gilt in gleicher Weise von den übrigen 
Organen, Darm und Zentralnervensystem. Interessant ist der 
Trennungsvorgang des Darmes. Das letzte Ende des Herzschlauches 
wird scheinbar von einer genau in der Symmetrieebene auf- 
tretenden hügelartigen Vorwölbung des Dotters in zwei nicht 
ganz gleiche Teile gespalten. Der Kiemendarm, der sich median- 
wärts zusammenzieht, wird durch diesen Dotterhügel eingeschnürt, 
wie es die Skizze zeigt, und dies stellt den Beginn zur völligen 


176 Karl Oppermann: 


Spaltung in zwei Teile dar. Die Trennung der Organe vollzieht 
sich in der Reihenfolge, kaudalwärts fortschreitend: Darm, Chorda, 
Rückenmark. 

Einer kurzen Erläuterung bedarf noch Embryo 36, Taf. V. 
Er war 27 Tage alt und stellt somit das älteste untersuchte 
Stadium der Spaltbildungen dar. 
Trügken mark Auch in diesem Falle handelt es 
sich um eine echte Spaltbildung. 
Ne Jeder Teil repräsentiert eine 
Körperhälfte, nur der Grössen- 
unterschied, wie er ja auch schon 
(oem hei Vertretern der in der ersten 
| Gruppe besprochenen Objekte auf- 

Doetter 


trat, ist hier sehr bedeutend. Den- 
BIN: 


noch enthält diese kleinere Partie 
Rückenmark, Muskelplatten, einen Wolffschen Gang und ein 
Darmrohr. 

Die zur dritten Gruppe Taf. V, 37, 38, 40, 41 zusammen- 
gefassten Objekte zeigen den geringsten Grad der Spaltung. 
Nur das letzte Ende des Körpers ist in zwei Teile zerlegt. In 
der Grösse stimmen sie fast mit denen überein, die keine Spaltung 
zeigen. Es soll nur auf Embryo 2 etwas näher eingegangen 
werden. Die Organisationsverhältnisse werden durch drei Schnitt- 
bilder erläutert (Taf. VI, 18. 5. 7). An dieser Stelle interessiert 
nur Abb. 7. Dieser Schnitt ging durch die Körpergegend, in der 
die Teilung noch nicht ganz vollendet war. Es gliedert sich die 
(bildlich) rechte Muskel- und Seitenplatte und ein kleinerer Teil 
des Rückenmarkes ab. Eine Kupffersche Blase sowie Chorda 
ist nur links vorhanden. 

Eine besondere Stellung unter den bisher beschriebenen 
Spaltbildungen nehmen zwei Radiumtiere ein, von denen das eine 
Taf. V, Fig. 23, abgebildet ist. Bei beiden Objekten war die 
eine Körperhälfte gar nicht vorhanden (Taf. VII, 4 und 7). 

Embryo 23, Taf. V, liess, als Totalobjekt betrachtet, wenig 
auffällige Merkmale erkennen. Nur zeigte sich eine tiefe Furche, 
die den Körper durchzog. Die mikroskopische Untersuchung lehrte, 
dass ein wohl entwickeltes Gehirn vorhanden war, nur nahm es 
nicht seine normale Lage ein, sondern lag, wie Fig. 5, Taf. VII. 
zeigt, um fast 90° nach rechts gegen die natürliche Stellung ge- 


I 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 1NW 


dreht, so dass nun auch die Augenbläschen nicht rechts und 
links, sondern dorsal und ventral angelegt waren. Das Entoderm 
ist mehr nach links gerückt und nimmt insofern eine der Norm 
mehr entsprechende Lage ein, als es, wie naturgemäss, senkrecht 
zur Richtung des Rückenmarkes liegt. 

Das interessante Moment ist nun, dass das Rückenmark 
spätestens in der Region des Gehörbläschens seine normale Rich- 
tung angenommen hat, also eine Drehung um 90° nach links 
vollzieht; das Entoderm dagegen behält seine ursprüngliche Lage 
bei; es findet sich also dann nicht ventral, sondern seitlich vom 
Rückenmark und fehlt demnach völlig auf der anderen Seite; 
desgleichen sind auch Mesoderm, Chorda und Gehörbläschen nur 
auf der einen Seite vorhanden. Schnitt 7, Taf. VII, geht durch 
die Mitte des Körpers. Rückenmark, Muskelplatten, Chorda, Darm, 
intermediäre Zellmasse, Wolffscher Gang und Coelom sind deut- 
lich vorhanden und ganz normal gebildet. Die Epidermis legt 
sich nicht unmittelbar den Organen an, sondern verläuft so, als 
ob auch die fehlende Rumpfhälfte vorhanden wäre. Die Schnitte 
durch das letzte Körperende gehen nicht mehr genau senkrecht, 
dadurch werden dort die Verhältnisse etwas unübersichtlich. 

Wie schon am Anfang erwähnt, fanden sich noch bei einem 
zweiten Objekt genau die gleichen Organisationsverhältnisse. 

Fig. 6, Taf. VI, zeigt wieder die fast horizontale Lagerung 
der vorderen Gehirnpartien; es wird nur das nach der Oberfläche 
zu gelegene Auge gebildet. Das Entoderm liegt genähert dem 
basalen Ende des Medullarrohres, wieder annähernd senkrecht 
zur Richtung des Gehirns. Nun vollzieht sich wieder genau der 
gleiche Prozess wie im vorher beschriebenen Falle. Das Zentral- 
nervensystem hat wiederum in der Region der Gehörbläschen 
seine normale Lage eingenommen, während das Entoderm rechts 
liegen blieb. Fig. 4, Taf. VII, zeigt, dass auch hier nur ein Gehör- 
organ vorhanden ist; die Chorda ist ganz normal; rechts davon 
liegt das meso- und entodermale Gewebe. Lose, unregelmässig 
gelagert, fanden sich Zellen in dem Raum zwischen dem Dotter 
und dem Rumpf. Auch hier liegt die Epidermis nicht unmittel- 
bar dem Körper an, sondern umschliesst links einen Hohlraum. 
Auf der linken Seite ist der Coelomsack sichtbar. Mehr kaudal- 
wärts gelegene Schnitte lieferten Bilder, die den für den vorigen 


Fall beschriebenen völlig gleichen. 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 12 


178 Karl Oppermann: 


Die völlige Übereinstimmung dieser beiden eben beschriebenen 
Fälle lässt vermuten, dass wir es hier mit einem ganz bestimmten 
Entwicklungsmodus zu tun haben. Es ist indessen nicht zu ent- 
scheiden, ob aus der eigentümlichen Lage des Gehirnes zum 
Entoderm die Ausbildung von nur einer Körperhälfte erfolgt, 
oder ob wegen des Vorhandenseins von nur einer Rumpfseite das 
Gehirn seine normale Lage völlig aufgibt. 


Schädigungen der Organisation der Embryonen, 
hervorgerufen durch Bestrahlung der zur Befruch- 
tung normaler Eier verwendeten Spermien. 


Es bleibt nun noch übrig, zu zeigen, in welcher Weise sich 
die Folgen des experimentellen Eingriffs in den einzelnen Organ- 
systemen geltend machen. 

Somit sollen im folgenden die Resultate der mikroskopischen 
Untersuchung wiedergegeben werden, die sich auf die Beschaffen- 
heit des Zentralnervensystems, der Sinnesorgane, Muskelplatten, 
Chorda, Darm, Nierensystem beziehen. 

Will man eine Gruppierung nach den Schädigungsgraden 
vornehmen, wie sie sich im Gehirn vorfanden, so wären zu unter- 
scheiden diejenigen Fälle, bei denen sich die Störungen vorwiegend 
in einer Lageveränderung zeigen, von solchen, bei denen neben 
dieser auch noch grosse Massen zugrunde gegangener Zellen in 
den Geweben zu finden sind. 

Der zuerst charakterisierte Typus stellt den schwächeren 
Schädigungsgrad dar, der vor allem für Versuch I (5 Min. Rı), 
II (7 Min. Re), III (1 Min. Mth) und Versuch XIII (2 Std. Mth) 
kennzeichnend war. 

Bereits in der Darstellung des Verlaufes der Versuche wurde 
häufig darauf hingewiesen, dass schon bei Betrachtung der Objekte 
mit Lupenvergrösserung eine laterale Verschiebung von Vorder- 
und Mittelhirn zu beobachten war, während das Nachhirn seine 
normale Lage beibehielt. Diese Verhältnisse erläutern z. B. deut- 
lich die Flächenbilder Fig. 33, 34, 35, Taf. V, oder 6 I, während 
bei vielen anderen Objekten, die im wesentlichen die gleichen 
Bildungen zeigen, erst durch das Studium der Schnittserie eine 
genaue Erkenntnis möglich war. 

Im allgemeinen bestehen die schwächeren Grade der Ver- 
lagerungserscheinungen darin, dass ein dorsaler Abschnitt des 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 179 


Medullarrohres gegen den normal gerichteten ventralen um einen 
mehr oder minder erheblichen Winkel geneigt erscheint (Fig. 18, 
Taf. VI). Dabei kann als weitere Komplikation eintreten, dass 
das Gehirn ganz an eine Seitenfläche des Körpers zu liegen 
kommt (Taf. VI, Fig. 16). Das Extrem wird durch eine Drehung 
des ganzen Medullarrohres dargestellt (Taf. VII, Fig. 5 und 6). 
Mit dieser Lage des Gehirnes ist immer eine eigentümliche 
Organisation des Körpers verbunden (Hemiembryones laterales). 

Welcher Typus aber auch vorliegen möge, immer hat das 
Zentralnervensystem in der Region der Gehörbläschen seine völlig 
normale Lage wieder eingenommen. 

Einige spezielle Betrachtungen sollen die Verhältnisse näher 
erläutern. Fig. 33, Taf. V, zeigt einen Embryo, dessen Vorder- 
und Mittelhirn an die Seite gerückt ist, das Auge liegt rein 
dorsal. Die wirkliche Organisation wird aber ohne weiteres durch 
die beiden wiedergegebenen Schnittbilder klar, Taf. VI, Fig. 18 
und 5. Der erste Schnitt (Fig. 15) zeigt die Region vor den 
Augenbläschen. Der unterste Abschnitt des Gehirnrohres steht 
normal, während der übrige Teil gegen den ersteren um fast 90° 
geneigt erscheint. Der zweite abgebildete Schnitt (Fig. 5) geht 
durch das linke Augenbläschen (am Objekt also rechts), während 
das andere nicht entwickelt ist. Die Gesamtrichtung des Gehirn- 
bläschens ist schon etwas mehr der Norm entsprechend, aber 
immerhin ist die Neigung noch so stark, dass der obere Rand 
des Augenbläschens (die Einstülpung des vorderen Randes ist 
noch nicht erfolgt) mit der dorsalen Begrenzungstläche des Nerven- 
rohres fast in gleicher Höhe zu liegen kommt. Die entodermale 
Keimschicht liegt ganz normal. Schnitte, die durch die Gehör- 
bläschen gehen, zeigen in jeder Beziehung völlig normale Be- 
schaffenheit. 

Ein älteres Stadium repräsentiert Embryo Taf. V, Fig. 34. 
Im Abschnitt über die Spina bifida ist von diesem Exemplar 
schon ausführlicher die Rede gewesen. Es wurde fixiert am 
19. Tage nach der Befruchtung. Auch in diesem Falle zeigt das 
Flächenbild, wie unmittelbar kranialwärts vom Gehörorgan das 
Gehirn eine scharfe Biegung nach rechts macht und sich dann 
über die ganze Kopffläche ausbreitet. Drei Abbildungen erläutern 
die Verhältnisse, Taf. VI, Fig. 12, 15, 16. Während zwischen den 


beiden Hörbläschen das Rückenmark noch seine normale Stellung 
12% 


180 Karl Oppermann: 


inne hat, beginnt es mehr nach dem Kopfe zu sich nach links zu 
drehen (Fig. 15), so dass, jemehr es an Ausdehnung zunimmt, 
der Zentralkanal fast horizontal gerichtet ist. Am rechten Ende 
beginnt nun senkrecht zu dieser Richtung, jetzt also normal 
gerichtet, sich eine Faltung bemerkbar zu machen, so dass Schnitte, 
die durch die vordere Partie des Mittelhirnes gehen, Bilder liefern, 
wie sie in Fig. 16 dargestellt sind. In der Region der Augen- 
bläschen ist dann der horizontal gerichtete Teil völlig geschwunden, 
und hat jetzt das Hirnbläschen eine fast normale Richtung, nur 
liegt es ganz nach rechts gerückt. Das Auge ist lediglich auf 
der linken Seite entwickelt. 

Um nun noch den leichtesten Grad des hier in Rede stehenden 
Missbildungstypus des Gehirnes kennen zu lernen, sei auf Ver- 
hältnisse verwiesen, wie sie beim Embryo Taf. V, Fig. 45, auf- 
traten. Dieser sah äusserlich gut gestaltet aus, nur waren Mittel- 
und Vorderhirn am Totalobjekt nicht deutlich analysierbar. Die 
Untersuchung der Schnittserie lehrte, dass auch hier wieder sich 
ein oberer Abschnitt gegen einen unteren, normal gerichteten 
geneigt hatte. Dass hier nur ein geringerer Störungsgrad vor- 
lag, äusserte sich auch darin, dass in diesem Falle beide Augen- 
anlagen zur Entwicklung kamen (Fig. 3, Taf. VI). 

Die zweite Gruppe von Verlagerungserscheinungen des Ge- 
hirnes zeigt das Vorder- und Mittelhirn, mit der Gesamtseiten- 
wand der Dotteroberfläche zugewendet liegend. Es bildet also 
dieser Missbildungstypus einen Gegensatz zu dem vorher be- 
sprochenen dadurch, dass nun auch der basale Gehirnabschnitt 
seine normale Lage aufgegeben hat (Taf. VII, Fig. 5 und 6). In 
diesen Fällen kommen Embryonen zur Entwicklung, bei denen 
die eine Körperhälfte überhaupt nicht angelegt wird. Erwähnt 
sei noch einmal, dass auch für diese Verlagerungsverhältnisse ım 
Gebiete des Gehörorgans normale Richtungszustände zu finden 
sind (Fig. 4, Taf. VII). 

Von dem vorherbeschriebenen Typus zu diesem letzteren 
finden sich auch Übergangsstadien. Als ein derartiges käme die 
Organisation des Embryo 20, Taf. V, in Betracht. Abb. 8, Taf. VI, 
zeigt, dass das Medullarrohr in seiner ganzen Höhe gedreht 
erscheint, dass das Entoderm seine normale Lage senkrecht zum 
Hauptdurchmesser des Nervenrohres beibehält. Der Kiemendarm 
erreicht daher auf der (bildlich) rechten Seite nicht mehr das 


Die Entwicklung von Forelleneiern etec. 181 


Ektoderm: es könnte also auch dort nicht mehr zur Bildung der 
Kiemenspalten kommen. Schon in der mittleren Rumpfpartie ist 
die Organisation dieses Embryos normal. 

Aus diesen Betrachtungen geht also auch hervor, dass die 
eigentümlichen Lageverhältnisse des Gehirnes zweier Embryonen 
(Taf. VII, Fig. 5 und 6) nur als das Extrem eines durch viele 
Übergangsstufen verbundenen Missbildungstypus aufgefasst werden 
können. Wie auch immer das Zustandekommen solcher Hemi- 
embryones laterales gedacht werden möge, so besteht die Tatsache, 
dass mit einer wie oben beschriebenen Lage des (Gehirnes und 
Entoderms die Ausbildung der einen Körperhälfte unterbleibt. 

Alle bisher beschriebenen Fälle wurden zu der Kategorie 
der leichteren Schädigungen des Zentralnervensystems zusammen- 
gefasst. 

Diesen gegenüber stehen die in den Gruppen II, III, IV 
beobachteten Erscheinungen. Das nervöse Gewebe ist schon 
ziemlich stark in Zerfall übergegangen, und zwar finden sich 
derartige Zerfallserscheinungen schon bei jüngeren Stadien (Fig. 15, 
Taf. V). Abb. 10, Taf. VI, zeigt den Zentralkanal angefüllt von 
zugrunde gegangenen Zellen. Entweder sind die Zellen schon 
völlig zerfallen oder es ist noch der Kern in der Form eines 
homogen färbbaren, meist kugelförmigen Körperchens erhalten. 
Auch innerhalb des Gewebes liegen die abgestorbenen Zellen. 
Die gleiche Abbildung zeigt auch, wie vorwiegend das Nervenrohr 
von dem Zerfall betroffen wird; dann folgen die Muskelplatten. 
Fast völlig gut erhalten bleiben immer Darm, die Wolffschen 
Gänge und die Chorda. 

In unmittelbarem Zusammenhange mit der Ausbildung des 
(rehirnes steht die der Augen. Es kann das Entwicklungsstadium 
der Augen geradezu als Gradmesser für den allgemeinen Zustand 
des betreffenden Embryos angesprochen werden. Zeigt das Gehirn 
schon schwere Störungen, (Versuch IV), so werden Augen über- 
haupt nicht mehr angelegt. Beruhte die Schädigung nur in einer 
(rehirnverlagerung, so konnte eine Augenbildung vor sich gehen. 
Fig. 3, Taf. VI, lässt erkennen, dass trotz der Biegung des oberen 
Hirnabschnittes beide Augen schon mit einer Linse versehen vor- 
handen sind. Bei stärkerer Krümmung wird nur ein Auge ge- 
bildet (Taf. VI, Fig. 5), und zwar immer das der Krümmung 
entgegengesetzte (Fig. 12, Taf. VI). Eine Linse wird immer nur 


182 Karl Oppermann: 


dann gebildet, wenn die äussere Wand des Augenbläschens die 
Epidermis erreicht. Ein typisches Beispiel für diese Verhältnisse 
bietet Fig. 5, Taf. VII. Eine Linse hat nur das Auge, das un- 
mittelbar der Epidermis anlag. Das andere ist auf einem gering 
entwickelten Bläschenstadium stehen geblieben. Man sieht noch 
die beiden Lamellen. Von einer Linsenanlage ist nichts zu 
bemerken. 

Bedeutend günstiger ist die Entwicklung der Gehörbläschen. 
Angelegt werden sie immer, auch bei den stark geschädigten 
Objekten. Fast stets erhalten sie auch ein Lumen. Unterschiede 
machen sich immer erst mit dem Beginn der Bildung der Bogen- 
gänge bemerkbar. Diese kommt nur selten bei den schwach 
geschädigten Exemplaren über die Anlage von geringen Vor- 
wölbungen der Innenwand des Bläschens hinaus. Das Gehör- 
bläschen bleibt stets frei von zerfallenen Zellen, während der 
Augenbecher immer, auch bei den bestentwickelten näher unter- 
suchten Embryonen, wenigstens an der Eintrittsstelle des N. opticus, 
ziemlich erheblich in Zerfall übergegangen ist. Fig. 3, Taf. VII, 
veranschaulicht diese Verhältnisse. Fig. 1 zeigt das Kontroll- 
stadium. Deutlich wahrnehmbar ist das Uhiasma opticum, während 
auf dem anderen Schnitte nur wenige Nervenfibrillen des N. opticus 
vorhanden sind. Im Gegensatz dazu scheint die Innervierung 
des Gehörorgans weitaus mehr der Norm entsprechend zu sein. 

Nächst dem Zentralnervensystem und den Sinnesorganen 
zeigte das Muskelsystem die stärksten Schädigungen. Bei etwas 
stärker geschädigten Formen macht sich schon auf frühen Stadien 
Zerfall der Gewebe in ziemlich erheblichem Maße bemerkbar. 
Zum grossen Teil werden die Zellen in den Hohlraum zwischen 
Muskelplatten und Epidermis ausgestossen. Bei Embryonen, die 
ein entsprechendes Alter erreichen, kommt es zur Bildung von 
Muskelfasern. Häufig sind diese ganz normal gestaltet, geradlinig 
verlaufende Bündel, die sich an den Segmentenden trichterförmig 
in die einzelnen Fasern auflösen. In der Mehrzahl der unter- 
suchten Fälle jedoch waren die Muskelbündel nur sehr dünn, 
weniger zahlreich und verliefen unregelmässig geschlängelt. 

In den übrigen Geweben fanden sich nur wenig abweichende 
Verhältnisse. 

Sofern es sich nicht um Spaltbildungen handelte, zeichnete 
sich die Chorda, auch bei stärker geschädigten Tieren, durch gute 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 183 


Beschaffenheit von den vorher besprochenen Organen aus. War 
bei den Spaltbildungen jedoch die Chorda in erheblich ungleiche 
Teile zerlegt, so nahm der schwächere immer einen sehr unregel- 
mässigen, gewundenen Verlauf, bohrte sich häufig in den Dotter, 
in einem Fall auch in das Nervenrohr (Fig. 13, Taf. VI) ein. Sie 
war nur sehr kurz. 

Vom Darm und den Urnierengängen ist nur wenig zu be- 
richten. Sie stellen immer die am günstigsten entwickelten 
Organe dar. 


Vergleich der Versuchsergebnisse mit ähnlichen 
Experimenten O. und G. Hertwigs. 


Wie schon mehrfach im Verlauf der Darstellung zu ersehen 
war, stimmen die bei den Forellenversuchen gemachten Be- 
obachtungen in allen wesentlichen Punkten völlig überein mit 
denen, die OÖ. und G. Hertwig bei den entsprechenden Frosch- 
experimenten feststellen konnten. 

Vor allem wird das Gesetz der Kurvenbildung neu bestätigt. 
Bei beiden Objekten wird schon durch eine relativ sehr geringe 
Energie der Sperma- resp. Eikern derartig geschädigt, dass die 
Lebensdauer der sich bildenden Embryonen nur wenige Tage be- 
trägt. Wird der Samen, mit dem normale Eier befruchtet werden, 
sehr intensiv bestrahlt, so kommt es zur Entwicklung partheno- 
genetischer Larven, die sich sehr lange Zeit züchten liessen (bis 
zu 52 Tagen bei der Forelle). Dass es sich in diesen Fällen 
wirklich um Tiere handelt, die von nur einem Elterntier abstammen, 
konnte indirekt durch die Resultate der Kernmessungen bewiesen 
werden. Auch G. Hertwig gibt in seiner neuesten Arbeit 1913 
Kernzeichnungen normaler und parthenogenetischer Froschlarven 
wieder, aus denen in deutlichster Weise der Grössenunterschied 
ersichtlich wird. 

In einen gewissen Gegensatz zu den Frosch- und Forellen- 
versuchen treten die Experimente, die G. Hertwig an Seeigeln 
ausführte, insofern, als bei diesen trotz stärkster Bestrahlung der 
Samenfäden die Entwicklung nicht wieder einen besseren Verlauf 
nimmt. G. Hertwig, der auch bei diesem Objekte erste Furchungs- 
phasen untersuchte, fand, dass eine Verschmelzung der beiden 
Vorkerne nicht unmittelbar, spätestens aber auf dem Zwei- oder 
Vierzellenstadium vor sich ging. Daher konnte auch noch der 


154 Karl Oppermann: 


Radiumkern seine vergiftende Wirkung in beträchtlichem Maße 
zur Geltung bringen. Alle Larven starben nach 48 Stunden. 
Die Resultate der Forellenversuche hingegen sind die gleichen, 
wie sie auch für die Radiumfroschexperimente gefunden wurden. 
Es wird auch für unseren Fall anzunehmen sein, dass, wie es 
G. Hertwig bei seinen Untersuchungen (1911) aussprach, wahr- 
scheinlich eine völlige Elimination des Radiumchromatins erfolgt, 
wenn die Samenfäden in stärkstmöglicher Weise bestrahlt werden. 
Was die pathologischen Veränderungen als solche anbetrifft, so 
kann auch bezüglich dieses Punktes völlige Übereinstimmung 
zwischen beiden Objekten konstatiert werden. Als stärkerer 
Schädigungsgrad sind bei Frosch und Forelle Spina bifida-Bildungen 
sehr häufig, die nach OÖ. Hertwig durch unvollkommenen Urmund- 
schluss entstehen. Die Differenzierung der beiden Randringhälften 
ist nicht immer ganz gleichmässig. So kommt es häufig zur 
Ausbildung völlig unsymmetrischer Körper. 

Dass sich die Schädigungen, die an den einzelnen Organen 
beobachtet werden können, hauptsächlich auf das zentrale Nerven- 
system, die Augen, die Muskelplatten beziehen, steht auch im 
Einklang mit den Ergebnissen der Experimente anderer Autoren, 
die den Einfluss der Radiumstrahlen auf die Entwicklung der 
Organe untersuchten. 


Zusammenfassung. 

1. Für die Einwirkung der Radiumstrablen auf die Spermien 
der Forelle gilt das Gesetz der Kurvenbildung, wie es zu- 
erst von O. und G. Hertwig für die Radiumversuche an 
den Keimen von Rana esculenta gefunden wurde. 

a) Bestrahlungen der Samenfäden während 5 Min. mit Rı 
(= .187,5/e),:.7 - Min B2,287,2e),;,.'1;.Min.. Mih 76353 
bedingen, wenn sie zur Befruchtung normaler Eier ver- 
wendet werden, schwache Schädigung des Entwicklungs- 
produktes. 

b) Alle Versuche, in denen Spermien '/» Std. mit Rı 
(— 225.e),. "2Std. mh B2.(— 159.e), 5 Min Mih 273 e 


118td. Rı,.(=:! 4508), 2 ‚Std. Ri: (= 900); ‚3, Side 
(= 954 e), !/e Std. Mth (= 2750e), 8 Std. Rı (= 3600), 
8 Std. Re (= 2544e) bestrahlt wurden, sind durch das 


Auftreten einer Sterbeperiode gekennzeichnet, die 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 185 


immer am 13. Tage nach der Befruchtung beginnt und 

sich ungefähr über 9 Tage erstreckt. 

«@) Wird der Samen eine Stunde Rı (= 450e), 2 Std. 
Rı (= 900e) oder 3 Std. Re (= 954e) bestrahlt, so 
können gar keine oder nur äusserst geringe Ansätze 
zur Embryobildung beobachtet werden. 

£) In allen übrigen Fällen, also bei Bestrahlung während 
!/s. Std. Rı (= 223e), "/a Std. Ra (= 159e), 5 Min. 
Mth (= 275e), 8 Std. Rı (3600 e), 8 Std. Re (— 2544 e) 
kommt eine deutliche Embryobildung zustande. 

c) Bei zweistündiger Bestrahlung des Samens mit Mth 
(= 6600e) lassen sich die Kulturen bis zum 31. Tage 
nach der Befruchtung züchten. 

d) Wird Samen 19 Stunden mit Re (6042 e) oder Rı (7980 e) 
bestrahlt, so entstehen fast normal entwickelte Embryonen, 
die bis zu 52 Tage alt werden. 


. Durch das lange Stehen des Samens an sich (19 Std.), tritt 


eine Herabsetzung der Widerstandsfähigkeit der Spermien 
gegen die Strahlen des Radiumbromids ein, so dass durch 
eine Bestrahlung während 19 Std. mit Ra (also nur 6042 e) 
die Spermien in höherem Maße geschädigt werden als durch 
zweistündige Bestrahlung mit Mth (6600 e). 


. Die aus denjenigen Bestrahlungsversuchen hervorgegangenen 


Embryonen, bei denen die Samenfäden 2 Std. mit Mth 

(= 6600e), 19 Std. mit Re (= 6042e) oder Rı (7980), 

sind als parthenogenetisch entwickelte Tiere zu betrachten. 

a) Sie sind kleiner als das gleiche Kontrollstadium. 

b) Sie besitzen eine deutlich wahrnehmbare, geringere Kern- 
grösse als gleichweit entwickelte normale Keimlinge. 


. Als schwächerer Missbildungstypus treten Spina  bifida- 


Bildungen auf. 

a) Die Spaltung erstreckt sich entweder bis in die Region 
der Grehörbläschen oder bis zur Mitte des Rumpfes oder 
betrifft nur das hintere Körperende. 

b) Die Ausbildung der Körperhälften ist in den seltensten 
Fällen spiegelbildlich gleich. 

c) Stets waren Rückenmark, Darm, intermediäre Zellmasse 
von der Teilung betroffen. 

d) Die Chorda ist meist nur einseitig entwickelt. 


186 Karl Oppermann: 


e) Die Kupffersche Blase war stets nur auf einer Seite 
vorhanden. 

f) Die Spaltung der Organe findet fast immer statt in der 
Reihenfolge (kaudalwärts fortschreitend): Darmblatt, 
Chorda, Rückenmark. 

5. Zwei Fälle konnten beobachtet werden, in denen die eine 
Körperhälfte überhaupt nicht angelegt wurde, so dass nur 
ein Gehörbläschen, eine Muskelplatte, ein Woltffscher Gang, 
wie auch Rückenmark, Darm, Chorda, in der Einzahl vor- 
handen waren. 

6. Die durch die Radiumbestrahlung des zur Befruchtung nor- 
maler Eier verwendeten Samens hervorgerufenen Schädigungen 
der embryonalen Organisation äussern sich vorwiegend im 
Rückenmark, den Augen und den Muskelplatten. 

a) Geringere Schädigung lediglich durch Verlagerungs- 
erscheinungen im Gehirn. 

b) Stärkere Schädigung durch Zerfall der Gewebe. Die 
Zellkerne ballen sich zu kleinen, sich intensiv färbenden 
homogenen Kugeln zusammen. 

. Die Resultate der Bestrahlungsversuche an Forellenspermien 
stehen in völligem Einklang mit den von O.und G. Hertwig 
an den entsprechenden Froschversuchen erzielten Resultaten. 
Zum Schlusse fühle ich mich verpflichtet, für die freundliche 

Unterstützung und die gütigen Ratschläge, die mir bei der Aus- 

führung vorliegender Untersuchungen durch Herrn Geheimen 

Medizinalrat Prof. Dr. OÖ. Hertwig sowie durch Herrn Prof. 

Poll gewährt wurden, meinen besten Dank auszusprechen. 


ni 


Literaturverzeichnis. 


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nation sans amphimixie et la parthenogendse traumatique. Arch. de 
zool. Exp., Tome 6, Nr. 2, 1910. 

2. Boveri, Th.: Ergebnisse über die Konstitution der chromatischen 
Substanz des Zellkernes. Jena 1904. 

3. Fischel, Alfred: Über den gegenwärtigen Stand der experimentellen 
Teratologie. Verhandl. d. deutsch. path. Ges., Bd. V. 

4. Herbst, C.: Vererbungsstudien. IV. und VI. Arch. f. Entw.-Mech., 
Bd. 22, 1906 und Bd. 27, 1909. 


10. 


il. 


13. 


14. 


21. 


22. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 187 


Hertwig, G.: Radiumbestrahlung unbefruchteter Froscheier und ihre 
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Anat., Bd. 77, Abt. II, 1911. 

Derselbe: Das Schicksal des mit Radium bestrahlten Spermachromatins 
im Seeigelei. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 79, Abt. II, 1912. 


. Derselbe: Parthenogenesis bei Wirbeltieren, hervorgerufen durch art- 


fremden radiumbestrahlten Samen. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 81, Abt. II, 
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1892. 

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Derselbe: Neue Untersuchungen über die Wirkung der Radiumstrahlung 
auf die Entwicklung tierischer Eier. Mitteilung vom 28. Juli 1910. 
Sitzungsber. d. Kgl. Preuss. Akad. d. Wiss., XXXIX, 1910. 

Hertwig, O.: Die Radiumkrankheit tierischer Keimzellen. Bonn, 
Fr. Cohen, 1911. 

Derselbe: Mesothoriumversuche an tierischen Keimzellen, ein experimen- 
teller Beweis für die Idioplasmanatur der Kernsubstanzen. Mitteilung 
vom 6. Juli 1911. Sitzungsber. d. Kgl. Preuss. Akad. d. Wiss., XL, 1911. 
Derselbe: Veränderung der idioplasmatischen Beschaffenheit der Samen- 
fäden durch physikalische und chemische Eingriffe. Sitzungsber. d. Kgl. 
Preuss. Akad. d. Wiss., XXXI, 1912. 

Hertwig, Paula: Durch Radiumbestrahlung hervorgerufene Ver- 
änderung in den Kernteilungsfiguren der Eier von Ascaris megalocephala. 
Arch. f. mikr. Anat., Bd. 77, Abt. II, 1911. 


. Kopsch, Fr.: Experimentelle Untersuchungen über den Keimhautrand 


der Salmoniden. Verhandl. d. Anat. Ges., 1896. 


Derselbe: Entwicklung der äusseren Form der Forellenembryonen. Arch. 
f. mikr. Anat., Bd. 51, 1898. 


. Derselbe: Die Organisation der Hemididymi und Anadidymi der Knochen- 


fische und ihre Bedeutung für die Theorien über Bildung und Wachstum 
des Knochenfischembryo. Monatsschr. f. Anat. u. Phys., Bd. 16, H.10, 1899. 


. Derselbe: Untersuchungen über Gastrulation und Embryobildung bei den 


Chordaten. Leipzig 1904. 


. Lereboullet: Recherches sur les monstruosites du Brochet. Ann, 


des Sc. nat., Tome 20, 1863. 

Oellacher, T.: Terata mesodidyma von Salmo salvelinus. Sitzungsber. 
d. Wiener Akad., Math.-naturw. Kl., Bd. 68, 1873. 

Rauber, A.: Formbildung und Formstörung in der Entwicklung der 
Wirbeltiere. Morph. Jahrb., Bd. 5, 1879. 

Ziegler, H. E.: Entwicklungsgeschichte der niederen Wirbeltiere. 


Karl Oppermann: 


Erklärung der Abbildungen auf Tafel V—VII 


Zeichenerklärung: 


Ch = Chorda. J — intermediäre Zellmasse. 
Coe — Coelom. KB = Kupffersche Blase. 

D = Darm. A = Augenlinse. 

G —= Gehörorgan. R — Rückenmark. 

H=— Herz. Wog —= Wolffscher Gang. 


Die in Taf. V—VII abgebildeten Embryonen sind alle in Sfacher Vergrösserung 
gezeichnet, mit Ausnahme der Fig. 15 und 19 (20fache Vergrösserung). 


= 
Q 


F 


er 


io. 20 — 


Fig. 46. 
Fig 

el, 8): 
Fig. 4. 


8. 


L 


Tafelov. 


ig. 1—10. Versuch I, II, II. 


Fig. 1: 15 Tage alt, Versuch I. Fig. 2: 20 Tage alt, Versuch II. 
Fig. 3: 14 Tage alt, Versuch Ill. Fig. 4: 14 Tage alt, Versuch III. 
Fig. 5: 18 Tage alt, Versuch I. Fig. 6: 18 Tage alt, Versuch Ill. 
Fig. 7: 32 Tage alt, Versuch II. Fig. 8: 31 Tage alt, Versuch 1. 
Fig. 9: 20 Tage alt, Versuch I. Fig. 10: 33 Tage alt, Versuch I. 
17.5 Versuch@ßVieV, VE 

Fig. 11: 18 Tage alt, Versuch IV. Fig. 12: 18 Tage alt, Versuch IV. 


er 
Q 


.13: 14 Tage alt, Versuch V. Fig. 14: 14 Tage alt, Versuch VI. 
g.15:19 Tage alt, Versuch VI. Fig. 16: 18 Tage alt, Versuch IV. 
Fig. 17: 14 Tage alt, Versuch IV. 


\ 


I 
de 
Q 
[er 


ie. 18 und 19. Versuch VII. 


Fig. 18: 14 Tage alt. Fig 19: 13 Tage alt. 


23. Versuch XI, XII. 


Fig. 20: 16 Tage alt, Versuch XI. Fig. 21: 14 Tage alt, Versuch X1. 
Fig. 22: 19 Tage alt, Versuch XII. Fig. 23: 23 Tage alt. 


ig. 24—45. Versuch XI. 


Bio, 24: 11 Tage alt. "Pie: 25: 11 Tageralt. Fie/26 71a Tagen 
Fig. 27: 14 Tage alt. Fig. 28: 19 Tage alt. Fig. 29: 17 Tage alt. 
Fig. 30: 20 Tage alt. Fig. 31: 22 Tage alt. Fig. 32: 13 Tage alt. 
Fig. 33: 14 Tage alt. Fig. 34: 19 Tage alt. Fig. 35: 17 Tage alt. 
Fig. 36: 27 Tage alt. Fig. 37: 11 Tage alt. Fig. 38: 14 Tage alt. 
Fig. 39: 15 Tage alt (Kontrolle). Fig. 40: 18 Tage alt. Fig. 41: 
19 Tage alt. Fig. 42: 19 Tage alt (Kontrolle). Fig. 43: 21 Tage 
alt. Fig. 44: 20 Tage alt. Fig. 45: 20 Tage alt. 

Versuch XV. 44 Tage alt, mit Kontrolle. 


Tafel V1. 


1 und 2. Zwei Schnitte durch den Nebenembryo des in Taf. V, 4 ab- 


gebildeten Tieres. 146fache Vergrösserung. 

Augengegend von Embryo 45, Taf. V. 82fache Vergrösserung. 
Schnitt durch die in Taf. V, 35 abgebildete Spina bifida. 82fache 
Vergrösserung. 


ou 


-] 


9: 


sw 


= 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 159 


Schnitt durch die vordere Kopfpartie des in Fig. 33, Taf. V ab- 
gebildeten Embryos. 103fache Vergrösserung. 

Schnitt durch das Körperende des gleichen Objektes. 103fache 
Vergrösserung. 

Schnitt durch das Körperende von Embryo 38, Taf. V. 103fache 
Vergrösserung. 

Querschnitt durch den in Taf. V, 20 abgebildeten Embryo. 82fache 
Vergrösserung. 

Schnitt durch die Augengegend von Embryo 29. 82fache Ver- 
grösserung. 

Schnitt durch die Gegend des Gehörorgans von Embryo 15, Taf. V. 
S2fache Vergrösserung. 

Querschnitt durch die mittlere Rumpfpartie von Embryo 34, Taf. V. 
S2fache Vergrösserung. 

Querschnitt durch den Kopf des gleichen Objektes. 82fache Ver- 
grösserung. 

Schnitt durch den Kopf des in Fig. 3, Taf. V abgebildeten Embryos. 
82fache Vergrösserung. 

Querschnitt durch die Schwanzgegend des in 10, Taf. V abgebildeten 
Tieres. S2fache Vergrösserung. 

Querschnitt durch den Kopf von Embryo 34, Taf. 1. 

Querschnitt etwas weiter rostralwärts wie Fig. 15. Beide 82 fache 
Vergrösserung. 

Schnitt durch die in Taf. V, 29 abgebildete Spina bifida. 82 fache 
Vergrösserung. 

Querschnitt durch die vordere Koptpartie von Embryo 33, Taf. V. 
103fache Vergrösserung. 


Tafel VII. 
Querschnitt durch die Augengegend eines Kontrolltieres; 33 Tage 
alt. S2fache Vergrösserung. 
Augengegend des in Taf. V, 10 abgebildeten Embryos. 
Augengegend eines parthenogenetischen Embryos; Alter: 33 Tage. 
Fig. 2 und 3 in 82facher Vergrösserung. 
Querschnitt durch die Gegend des Gehörorgans. 
Schnitt durch die Augengegend von Embryo 23, Taf. V. 
Schnitt durch die Augengegend des gleichen Objektes wie Fig. 4. 
Fig. 4 und 6 beziehen sich auf ein ganz ähnliches Objekt, wie es 
in Fig. 23, Taf. V dargestellt ist. 
Schnitt durch die mittlere Körperpartie von Embryo 23 (wie Fig. 5). 
Fig. 4—7 in 82facher Vergrösserung. 


ei 


Aus dem Biologischen Institut der Universität Berlin. 


Über die 
Spermio- und Oogenese der Sclerostomum- 
Arten des Pferdes unter besonderer Berück- 
sichtigung der Heterochromosomenforschung. 


Von 
Kurt Kühtz. 


Hierzu Tafel VIII—X und 8 Textfiguren. 


Einleitung. 

Die zahlreichen Arbeiten, die seit der Mitte des vorigen 
Jahrhunderts auf dem (Gebiete der Entwicklungsgeschichte der 
Nematoden erschienen sind und die durch die Erforschung der 
feinsten chromatischen Details bei den in der Entstehung be- 
griffenen Geschlechtszellen so überaus interessante Resultate von 
grösster Tragweite gezeitigt haben, lassen eine abermalige Bear- 
beitung der Spermio- und Oogenese eines Nematoden a priori 
vielleicht als wenig lohnend und Erfolg versprechend erscheinen. 

Dajedoch der bei weitem grösste Teil der Autoren sein Interesse 
dem durch die erfolgreichen Untersuchungen van Benedens, 
0. Hertwigs und Boveris geradezu zu einem klassischen 
Untersuchungsobjekt gewordenen Ascaris megalocephala zugewandt 
hat, so rief nicht allein der Mangel an weiterem Vergleichungs- 
material als besonders die epochemachende Entdeckung eines so- 
genannten Geschlechts- oder Heterochromosoms bei Arthropoden 
durch Me. Clung, Montgomery und Wilson und die Beob- 
achtungen Boveris und seiner Schüler, dass gleiche oder ähn- 
liche Verhältnisse auch bei Nematoden vorlägen, zu einer er- 
neuten Bearbeitung der Spermio- und Oogenese an anderen 
Nematoden unter besonderer Berücksichtigung dieses neuen Ge- 
sichtspunktes. 

Durch Herrn Geheimrat OÖ. Hertwig wurde ich auf die 
gerade erschienene Arbeit Gulicks aus dem Würzburger Zoo- 


logischen Institut aufmerksam gemacht, dem es als ersten ge- 
Archiv f. mikr. Annt. Bd.S3. Abt. II. 13 


192 Kurt Kühtz: 


lungen war, den vollständigen Kreislauf eines Geschlechtschromo- 
soms bei einigen Nematoden lückenlos festzustellen. 

Es sei mir vergönnt, an dieser Stelle Herrn Geheimrat 
Hertwig sowie Herın Professor Dr. R. Krause für die mannig- 
fachen Anregungen und das stete Interesse, das sie meiner Arbeit 
jederzeit in liebenswürdigster Weise entgegenbrachten, meinen auf- 
richtigsten Dank auszudrücken. 

Dem berechtigten Gedanken Herrn Geheimrat Hertwigs 
folgend, dass die so bemerkenswerte Arbeit Gulicks einer 
möglichst baldigen Nachuntersuchung bedürfe, prüfte ich zuerst 
einen Teil derselben auf ihre Richtigkeit, und zwar wählte ich 
aus dem von Gulick benutzten Material Strongylus paradoxus. da 
dieser Parasit jederzeit reichlich in Schweinelungen anzutreffen ist. 

Ich will hier nur ganz kurz bemerken, dass sich meine 
Untersuchungen hauptsächlich auf die Spermiogenese beschränkten 
und dass ich insoweit die Angaben Gulicks sowohl hinsichtlich 
der Chromosomenzahl als auch betreffs der ungleichen ersten 
Reifeteilung nur bestätigen kann. 

Da ich jedoch das Material wegen der grossen Kleinheit 
der Chromosomen keineswegs für das geeignetste bei der Er- 
forschung so feiner Details hielt, wandte ich meine Aufmerksam- 
keit bald den im Pferdedarm schmarotzenden Sclerostomiden zu. 

Bevor ich jedoch in medias res gehe, möchte ich nicht 
versäumen, Herrn Professor Dr. Poll, der mich auf diese hin- 
sichtlich der Spermio- und Oogenese überhaupt noch nicht unter- 
suchte Nematodengattung aufmerksam machte, für diesen freund- 
lichen Hinweis meinen besten Dank zu sagen. 


Das Material. 


Wie schon oben erwähnt, wählte ich für meine Unter- 
suchungen die in geschlechtsreifem Zustand im Coecum und Colon 
des Pferdes und Esels schmarotzenden Selerostomiden. Da die 
einzelnen Spezies jedoch nur zeitweilig im Darm anzutreffen sind, 
so dehnte ich meine Beobachtungen über ein ganzes Jahr aus. 

Auf eine historische Zusammenstellung der Arbeiten, die 
uns über das Vorkommen und die Morphologie dieser Familie 
unterrichten, kann ich Verzicht leisten, denn wir besitzen durch 
die Dissertation Pöppels schon einen bis zum Jahre 1897 
reichenden, umfassenden Literaturnachweis. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 193 


Ich kann mich daher auf die letzten 15 Jahre beschränken 
und werde nur kurz frühere Arbeiten streifen, um die zahlreichen 
Synonyma, mit denen unsere Parasiten belegt worden sind, zur 
allgemeinen Orientierung hervorzuheben. 

Während von älteren Autoren wie Mehlis, Dujardin, 
Anton Schneider und Zürn nur zwei Spezies, nämlich Strongylus 
s. Sclerostomum (armatum) equinum und tetracanthum, morpho- 
logisch eingehend beschrieben worden sind, die sich schon rein 
äusserlich durch ihre Grösse unterscheiden lassen sollten, hat 
Ende der neunziger Jahre des vorigen Jahrhunderts eine weitere 
Aufspaltung der Arten stattgefunden. 

Pöppel war 1897 der erste, der erkannte, dass Sclerosto- 
mum armatum (Rud.) keine einheitliche Spezies darstelle und 
teilte sie, indem er auf den alten Namen Strongylus wieder zurück- 
griff, in Strongylus armatus und Strongylus negleetus nov. spec. 

Looss, der seine Untersuchungen 1900 in Ägypten an- 
stellte, spaltete von Sclerostomum armatum (Rud.) abermals eine 
neue Spezies, Sclerostomum edentatum, ab. Er wählte als Gattungs- 
namen wieder Sclerostomum, verwarf aber ausserdem die von 
Pöppel gegebene Speziesbenennung mit folgender Begründung: 
„Es erhellt nun bereits aus den Grössenverhältnissen der beiden 
Arten ohne weiteres, dass die letztere, die von Pöppel als nov. 
spec. betrachtet wurde, dem Strongylus armatus Rudolphis ent- 
spricht, denn dieser sollnach Rudolphi selbst 2—3 Zoll messen; 
diese Form also hätte den alten Namen Rudolphis zu behalten, 
wenn dieser seinerseits nicht wieder zugunsten des noch älteren 
equinum zu fallen hätte.“ Pöppels armatus dagegen entspricht 
den Proles Rudolphis und erhält die neue Speziesbezeichnung 
Sclerostomum vulgare. Von diesen drei Arten trennte Looss 
ferner Sclerostomum tetracanthum völlig ab und verweist diese 
Spezies wegen der andersartigen Mundkapselbildung in die von 
Molin aufgestellte Familie der Oyathostomiden. Nach seinen 
Angaben lässt sich Cyathostomum tetracanthum mindestens wieder 
in acht Spezies, vielleicht teilweise auch nur Varietäten teilen. 
Seine Beobachtungen sind jedoch, wie gesagt, in Ägypten ge- 
macht und bedürfen für Deutschland noch einer näheren Prüfung. 

Zu gleicher Zeit werden durch die eingehenden Unter- 
suchungen von Haase, Olt und Sticker die komplizierten 
biologischen Verhältnisse der Sclerostomiden — ihr periodisches 

13* 


194 Kurt Kühtz: 


Auftreten in den (rekrösarterien als Larven und als geschlechts- 
reife Tiere im Darm — aufgedeckt und Sticker ist es auch, 
der 1901 wiederum neue Speziesnamen gibt; und zwar unter- 
scheidet er in einer Abhandlung Sclerostomum armatum majus 
und minus, die er einmal als Arten, einmal als Varietäten be- 
zeichnet, während er über Strongylus neglectus Pöp. kein Urteil 
zu fällen wagt. Eine gleiche Einteilung in majus und minus 
lässt er Sclerostomum tetracanthum widerfahren. In einer anderen 
Arbeit, die gleichfalls 1901 erschien und die sich den Unter- 
suchungen von Looss anlehnt, gibt Sticker abermals neue 
Namen, indem er unterscheidet Selerostomum edentatum, biden- 
tatum und quadridentatum, entsprechend den drei Spezies Looss'. 

1910 schliesslich bestätigt ©. Martin das Vorkommen von 
Sclerostomum edendatum Looss in Hamburg und führt noch eine 
reichliche Literatur auf, aus der mehr oder minder klar hervor- 
geht, dass Sclerostomum edentatum auch anderwärts in Deutschland 
beobachtet worden ist. 

Ich lasse nun der Übersicht halber nochmals die in der 
Literatur vorkommenden Synonyma folgen (siehe S. 195). 

Um eine vollständige Zusammenstellung der bislang bekannt 
gewordenen Sclerostomiden zu geben, seien hier ausser der schon 
Rudolphi bekannten Spezies dentatus aus dem Schwein noch zwei 
weitere Spezies erwähnt, nämlich Sclerostomum apiostomum 
Willach und Sclerostomum robustum Giles, die jedoch beide 
insofern für uns weniger Interesse haben, da sie weder von anderen 
Forschern noch von mir je in Deutschland beobachtet worden sind. 

Selerostomum apiostomum fand Willach 1891 bei einem 
Makak:; die Spezies soll durch die birnenförmige Mundkapsel leicht 
kenntlich sein. 

Sclerostomum robustum dagegen soll in der Grösse zwischen 
Sclerostomum armatum und tetracathum stehen und wurde 1892 
von Giles in Kalkutta bei Mauleseln beobachtet. Die Spezies 
ist charakterisiert durch „three powerful exactly similiar teeth“, 
welche befestigt sind „in a sor of sheat-like pocket of tlıe 
pharyngeal wall... . They are probable capable of being protruded*“. 

Sticker gibt am Ende seiner Arbeit an, dass man die 
geschlechtsreifen Würmer vom Dezember bis Juli im Darm des 
Pferdes fände, wobei sich freilich die Angabe betrefis des Juli 
nur auf eine einzige Beobachtung stütze. 


195 


Uber die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 


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| 


TOST Iydjopuy snyeune snjkduorgg 


08LT oa snumbo snpkduorgg 


—_— 


196 Kurt Kühtz: 


Ich kann seine Statistik im grossen und ganzen bestätigen, 
wenn ich nur Sclerostomum equinum Looss und vulgare Looss 
berücksichtige, obwohl ich auch hier schon am 21. November 
Pärchen in copula fand. Selerostomum edentatum Looss konnte 
ich dagegen wie Martin auch in anderen Monaten beobachten. 
Es ist somit höchst auffällig, dass Sticker, obgleich er bei 
Aufstellung seiner Statistik den Unterschied zwischen equinum 
und edentatum noch nicht kannte, von August bis Dezember 
„keine Darmwürmer“ dieser Gattung beobachtet haben will. 

Da ich die drei grösseren hier in Deutschland vorkommenden 
Arten zur Bearbeitung meines Themas heranzog und nicht einmal 
betrefis der Zellgrösse so durchgreifende Unterschiede fand, die 
eine getrennte Besprechung lohnend erscheinen liessen, so werde 
ich im Verlauf der Arbeit allgemein nur von Selerostomum reden 
und nur an denjenigen Stellen, wo sich Arteigentümlichkeiten 
offenbaren, die Speziesbezeichnungen nach Looss hervorheben. 


Die Behandlung des Materials. 


Die Behandlung des Materials stösst auf mancherlei Schwierig- 
keiten, und ich sehe mich daher gezwungen, etwas genauer darauf 
einzugehen, als es sonst üblich ist. 

Von frisch geschlachteten Pferden wurde das Coecum und 
Colon rasch geöffnet und die an der Darmwand festgesaugten 
Sclerostomiden vorsichtig abgezogen. Bleibt der Darm erst 
längere Zeit liegen und kühlt ab, so lassen die Würmer selbst 
los und werden dann im Darminhalt schwimmend gefunden. 
Hierauf macht schon Olt aufmerksam, und es zeigt dies, wie 
empfindlich diese Parasiten auf Temperaturschwankungen reagieren. 
Stärkere Abkühlungen rufen nicht allein Schrumpfungen der zarten 
(seschlechtsorgane hervor, sondern führen sogar zu Unregel- 
mässigkeiten bei der Befruchtung der Eier, die ich später noch 
eingehend zu schildern haben werde. 

Da ich das Material nicht an Ort und Stelle fixieren konnte, 
verwandte ich mit bestem Erfolge ein Thermophor, das mit dem 
warmen, flüssigen Darminhalt gefüllt wurde. Hierin lebten die 
Parasiten, im Thermostaten auf 35° gehalten, bis zu 2 Tagen. 
Nach dieser Zeit gehen sie wahrscheinlich an Nahrungsmangel 
zugrunde, denn der sonst von aufgesogenem Blut rot gefärbte 
Darm erscheint hellgelb und völlig leer. 


Über die Spermio- und Oogenese der Scelerostomum-Arten etc. 197 


Die von Pöppel angegebene Methode, die Würmer in 
0,75proz. Kochsalzlösung bei Zimmertemperatur zu halten, er- 
scheint mir nicht empfehlenswert, da sie zu wenig den natürlichen 
Lebensbedingungen der Parasiten entspricht. 

Da die Cuticula sehr dick ist, so muss sie unter allen Um- 
ständen entfernt werden und zwar gleich von Anfang an, da das 
Material nach der Fixation brüchig wird. Die von Gulick an- 
gewandte Methode, die (renitalorgane vermittels einer kleinen 
Kautschukwalze herauszupressen, versagt hier jedoch besonders 
bei Sclerostomum edentatum und equinum gänzlich. Denn der 
Darm und die Genitalorgane sind. durch ein dichtes, wenngleich 
feines Mesenterialgewebe mit dem Hautmuskelschlauch innig ver- 
bunden und lösen sich selbst bei wiederholtem Walzen nur teil- 
weise ab; auch halte ich die Manipulation im allgemeinen nicht 
für ganz einwandfrei, denn die zarten (reschlechtsorgane müssen 
hierbei zweifellos stark beschädigt werden. 

Ich steckte daher die Würmer mit je einem Igelstachel 
durch Kopf und Schwanz auf Wachsplatten fest, ohne Kochsalz- 
lösung oder dergleichen hinzuzusetzen. Erstere ist jedenfalls 
ungeeignet, denn ich konnte häufig das Platzen befruchtungs- 
reifer Eier unter dem Mikroskop beobachten. Waren die Würmer 
auigesteckt und dabei zugleich etwas gestreckt worden, so stach 
ich vorsichtig mit einem besonders feinen Skalpell — ich benutzte 
hierzu ein Augenoperationsmesser nach Gräfe — in die Cuticula 
hinein und zwar dicht neben einer der durchschimmernden Seiten- 
linien. Es erwies sich als praktisch, vom Kopf aus gegen den 
Schwanz hin unter möglichst horizontaler Haltung der Messer- 
scheide zu schlitzen und es gelang dann nach einiger Übung ge- 
wöhnlich den ganzen Outieular- und Hautmuskelschlauch in einem 
Zuge zu öffnen. War dies geschehen, so wurde der eine Rand 
des Schlauches mit einem Igelstachel in der Mitte festgeheftet, 
der Darm am Hinterende durchschnitten und nun mit den daran- 
hängenden Geschlechtsorganen über den freien Rand vermittels 
flachgehaltenen Skalpells hinübergeschoben. Sodann wurde der 
Hautmuskelschlauch in Höhe des Ösophagus durchtrennt, so dass 
nach der Fixation vermittels der Mundkapsel eine Spezies- 
bestimmung leicht erfolgen konnte. Beim Weibchen hat man 
noch die Vagina zu durchschneiden, doch dauert die ganze 
Operation kaum eine Minute. Der Darm bleibt während der 


198 Kurt Kühtz: 


ganzen weiteren Behandlung erhalten und dient zugleich als 
Stütze der sehr feinen Geschlechtsröhren. Wie schon aus Zürns 
Figuren zu ersehen, ist die Hodenröhre und ihr Ausführungsgang 
ein gewundener Schlauch und verläuft so, dass ihr blindes Ende 
in die Nähe des Ductus ejaculatorius zu liegen kommt. 

Meine Untersuchungen stellte ich teils an lebendem Material, 
teils an Ausstrichen, die in Osmiumsäuredämpfen fixiert wurden, 
zum grössten Teil aber an Schnittpräparaten an. 

Als Fixationsflüssigkeiten wurden hierzu gebraucht: Zenker 
und Flemming!) sowie Carnoy, Pikrinsublimateisessig, Helly 
(Müllersche Flüssigkeit 50 cem + 2!/z g Sublimat heiss zu- 
gesetzt + 5 ccm Formalin 40proz.) und Bouin (75 T. conz. 
wässerige Pikrinsäure, 20 T. 40 proz. Formalin und 5 T. Eisessig). 
Erstere beiden besonders für die Untersuchung der Chromatin- 
veränderungen in den Mitosen der Männchen; bei reifen Eiern 
versagten jedoch beide ihren Dienst, denn diese enthalten einer- 
seits zu viele sich durch Osmiumsäure stark färbende Bestand- 
teile, andererseits werden die winzigen Mitosen bei der Bildung 
der Richtungskörper durch das Sublimat verklumpt und lassen 
keine distinkte Färbung zu. Ich möchte hier besonders auf die 
Bouinsche Flüssigkeit aufmerksam machen, mit der ich bei den 
so schwer zu fixierenden Eiern vorzügliche Resultate erzielte. 

Die weitere Behandlung des Materials verlief nach der ge- 
wöhnlichen, genügend bekannten Methode, indem die Objekte 
durch die Alkoholstufen über Chloroform, Chloroform-Paraffin (aa.) 
in Paraffin gebracht wurden. In Chloroform-Paraffin wurden die 
Objekte über Nacht bei 35° gelassen, während ich das heisse 
Paraffin von 58° nicht länger als 2 Stunden einwirken liess. 

Von Färbemethoden kam Heidenhain, Safranin, Böhmers 
Hämatoxylin und Hämalaun sowie an Ausstrichen Gliemsa- 
und May-Grünwald-Lösungen mit Erfolg zur Anwendung. 
Die besten Ergebnisse erzielte ich aber vor allen Dingen bei nach 
Bouin fixiertem Material mit der Gramschen Färbung, ?) die 


!) Flemming: 15 Teile 1proz. Chromsäure, 4 Teile 2proz. Osmium- 
säure, 1 Teil Eisessig. 

?) Zur Gramschen Färbung benutzt man 2 Lösungen: 

a) 1 gr Gentianaviolett aufgelöst in 40 cem 95"/o Alkohol + 5 cem 
Anilin und aufgefüllt mit aq. d. auf 300 ccm. 

b) 1 gr Jod aufgelöst in 2 gr Jodkaliumlösung, aufgefüllt mit ag. d. 
auf 300 ccm. 

Die Schnitte werden horizontal liegend 1 Minute mit a gefärbt, kurz 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 199 


nach meiner Meinung noch viel zu wenig bei Uhromatinunter- 
suchungen in Mitosen angewandt wird. Es wundert mich dies 
um so mehr, als Flemming selbst schon gesagt hat: „Gentiana- 
violett gibt bei ganz derselben Anwendung wie Safranin an 
Chromsäurepräparaten fast noch schönere und schärfere Kern- 
tinktionen wie dies“. Jedenfalls ist die Färbung auch bei Pikrin- 
säurepräparaten schärfer als die Heidenhainsche und bringt 
eine bedeutende Zeitersparnis mit sich, wenngleich ich bei 
Flemming-Material die Farbe etwas länger einwirken lassen 
musste. 


Die Rhachisbildung bei Männchen und Weibchen. 


Bevor ich zur Besprechung der eigentlichen Spermio- und 
Oogenese übergehe, werde ich vorerst die Befestigungs- und 
Ernährungsstätte der Geschlechtszellen, die Rhachis, schildern. 
Die Ausbildung derselben ist jedoch beim Männchen und Weibchen 
so verschieden, dass ich sie getrennt darstellen werde, obwohl 
ich mich in manchen Punkten dabei wiederholen muss. 


a) Die männliche Rhachis. 


Ein Querschnitt durch die Hodenröhre kurz hinter ihrem 
blinden Ende zeigt im Zentrum eine unregelmässig polygonale 
Figur, von der zwei bis vier feine Stränge peripher ausstrahlen. 
Es ist die Rhachis mit ihren Hauptlamellen, die sich ihrerseits 
dichotom verzweigen. Ich werde auch bei Querschnitten, dem 
Beispiele Hertwigs folgend, von Lamellen anstatt von Ästen 
sprechen. weil letzterer Ausdruck leicht zu falschen Vorstellungen 
Anlass gibt. 

Bei der Frage nach dem Ursprung der Rhachis bin ich 
leider ebensowenig wie Schneider und A. Mayer zu einem 
positiven Resultat gekommen; doch fand ich die von Schneider 
zuerst betonte Erscheinung — dass nämlich die Rhachis ver- 
schieden weit zum blinden Ende der Geschlechtsröhre vordringt 
und dies wiederum mit der Entwicklung der Geschlechtszellen 
selbst in ursächlichem Zusammenhang steht — auch bei Sclerosto- 
mum bestätigt. So zeigte sich z. B. bei einem Serienquerschnitt 


mit aq. d. abgespült, 1 Minute mit b gefärbt, dann 15 Sekunden differenziert 
in 95°o Alkohol, 5 Sekunden in abs. Alkohol, dann in Xylol. 


200 Kurt Koıhtrze 


durch den Hoden die Rhachis schon nach ungefähr 15 « in ihrer 
typischen Gestalt (Taf. VIII, Fig. 1), während sie bei anderen 
Schnitten erst nach etwa 40-—-70 u nachweisbar war. 

Zugleich richtete ich mein Augenmerk auf die an Ascaris 
megalocephala beobachteten Rhachiskerne, konnte jedoch anfangs 
trotz sorgfältiger Durchsicht der Schnittserien keinen einzigen 
derartigen Körper entdecken, bis ich zuletzt auf ein Männchen 
stiess, dessen Rhachis mehrere Kerne aufwies, die in gewissen 
unregelmässigen Abständen aufeinander folgten (Taf. VIII, Fig. 13). 
(serade dieses sporadische Auftreten besagter Kerne liess mich 
auf den von A. Mayer abgewiesenen Gedanken zurückkommen, 
dass nämlich die Rhachis nichts anderes als eine Verlängerung 
des im Hodenende vorhandenen Syneytiums darstellt, in die hin 
und wieder Geschlechtskerne hineinwachsen, welche wir dann als 
Rhachiskerne ansprechen. Denn halten wir die Rhachis für ein 
selbständig sich entwickelndes, zelliges Organ, so liesse sich der 
Mangel der Kerne durch nichts erklären. 

Der innerste Teil der Rhachis (Taf. VIII, Fig. 1) hebt sich 
hell von der durch Eisenhämatoxylin geschwärzten peripheren 
oder Randschicht ab; und schon hier macht es besonders an der 
einen Hauptlamelle den Eindruck, als ob die zentrale Plasma- 
masse bestrebt ist, in die Verzweigungen einzudringen und diese 
von innen her aufzuspalten. 

Und tatsächlich ist dies der weitere Entwicklungsverlauf. 
In Fig. 2 hat die noch kaum gefärbte zentrale Plasmamasse 
schon alle Hauptlamellen erfüllt. 

Nach den Untersuchungen van Benedens und Julins an 
Ascaris megalocephala findet eine weitere Verzweigung der 
primären und sekundären Äste nicht mehr statt und auch bei 
Sclerostomum lässt sich an Querschnitten durch diesen Hodenteil 
nichts Gegenteiliges erkennen. Hertwig kommt dagegen bei 
Ascaris megalocephala zu einem anderen Resultat, denn er sagt 
ausdrücklich: „Nach ihrer Kante zu lösst sich die Lamelle in 
feine Fäden auf, an denen die einzelnen Zellen festsitzen“. 

Da ich nun bei leicht geschrumpftem Material zwischen 
den Kernen ein zartes Netzwerk nachweisen konnte, so möchte 
ich schon aus diesem Grunde auch bei Scelerostomum einer weiteren 
Verästelung das Wort reden; ich muss mir jedoch vorbehalten, 
erst später darauf zurückzukommen. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 201 


Ein Längsschnitt durch diese Hodengegend weist scheinbar 
mehrere Rhachiden auf; es handelt sich hierbei aber nur um die 
getroffenen Lamellen der zentralen Rhachissäule und hat nichts 
mit der von van Beneden und Julin bei Ascaris megaloce- 
phala beschriebenen und hernach von O. Hertwig bestätigten 
Aufteilung der Rhachis in mehrere selbständige Rhachiden zu 
tun. Auch die von Eberth bei Strongylus striatus und commu- 
tatus beobachtete Ausbildung, die ich bei meinen Vorunter- 
suchungen auch bei Strongylus paradoxus feststellen konnte — 
bei der sich nämlich die gesamte Rhachissäule abflacht, einrollt 
und dann teilt — und die Schneider auch bei Sclerostomum 
armatum vermutete, fand ich nicht bestätigt. Die Rhachis hat 
eben mit Schneider gesprochen „in den verschiedenen Gattungen 
und Spezies eine äusserst verschiedene Gestalt“. 

Wie Pöppel zu der Äusserung kommt: „Das Verhalten 
der Rhachis. ... stimme genau mit der von Augstein bei 
Strongylus filaria überein“ — es findet hier gleichfalls die eben 
geschilderte Einrollung der Rhachis statt — ist mir vollkommen 
unverständlich. Überdies spricht Pöppel von einer „dunklen, 
bandförmigen Rhachis“, während die Entwicklung von Anfang 
an gerade dem entgegengesetzten Ziele, nämlich der Ausbildung 
einer sehr umfangreichen, zylindrischen Rhachissäule, zustrebt. 

Die zentrale, jetzt schon leicht färbbare, noch homogen 
erscheinende Plasmamasse schwillt weiter an, die Kreuzfigur der 
Rhachis wird immer undeutlicher (Taf. VIII, Fig. 3), bis sie zu- 
letzt einem Kreise Platz macht (Taf. VIII, Fig. 4). 

An dieser Stelle kann ich jetzt auch meine obige Behaup- 
tung näher begründen. Von der Peripherie des besagten Kreises, 
der ja, wie wir oben gesehen, nichts anderes darstellt als die in 
ihm aufgegangenen primären und sekundären Rhachislamellen, 
sieht man nach allen Seiten hin Fäden ausstrahlen, d. h. die 
sekundären Rhachislamellen haben sich ihrerseits weiter ver- 
zweigt und schliesslich ein feines netzartiges Geflecht ergeben, 
das die einzelnen Geschlechtszellen umhüllt und stellenweise bis 
zum äussersten Rand der Keimsäule zu verfolgen ist. Es scheint 
mir durch diese Anordnung höchst wahrscheinlich gemacht, dass 
der Rhachis ausser ihrer gewöhnlichen Funktion eine weitere 
Aufgabe zufällt, nämlich die, das Protoplasma des Syneytiums 
auf die Ursamenkerne zu verteilen. 


202 Kurt Kühtz: 


Hand in Hand mit der Aufspaltung der sekundären Lamellen 
ist eine weitere Veränderung im Rhachisstamm vor sich gegangen. 
Der, wie erwähnt, anfänglich homogene Rhachisstamm hat zwar 


noch nicht seine grösste Dicke erreicht — sein Durchmesser ist 
jetzt etwa 43 «u, während der der Hodenröhre nicht mehr als 
93 u beträgt — lässt aber jetzt schon im Querschnitt zwei 


konzentrische Ringe unterscheiden, die durch ein faseriges, mehr 
oder weniger radiär angeordnetes Protoplasma miteinander in 
Verbindung stehen (Taf. VIII, Fig. 4). Ein eben solches Plasma 
erfüllt auch den inneren Ring. Es ist dies das erste Anzeichen 
für die allmähliehe Auflösung der Rhachis. 

Dieser Prozess schreitet vom Zentrum aus fort, und es 
schwindet daher zuerst der innere Ring, an dessen Stelle ein 
äusserst lockeres Faserwerk tritt, in dem oft mit Eisenhämatoxylin 
färbbare Körnchen liegen, die besonders aber in der peripheren 
Randschicht des Rhachisstammes angehäuft sind und in diesem 
Falle höchst wahrscheinlich auf die Reste tertiärer Verzweigungen 
derselben zurückzuführen sind (Taf. VIII, Fig. 5). 

Ob es sich hier um die von Schneider und Pöppel er- 
wähnten Körnchen handelt, vermag ich nicht zu sagen, da keiner 
von beiden eine nähere Beschreibung oder wohl gar Zeichnung 
liefert. Jedenfalls glaube ich kaum, dass Schneider bei seinen 
mehr oder weniger groben Untersuchungsmethoden diese feinen 
Partikelchen erkannt hat. 

Bald hernach fällt auch der äussere Ring demselben Auf- 
lösungsprozess anheim und die Reste der tertiären Verzweigung 
sind noch weiter zurückgebildet (Taf. VIII, Fig. 6). Es ist dies 
etwa kurz vor der Stelle, wo die Spermiogonien beginnen, sich 
zur Reifeteilung vorzubereiten. Die Rhachis hat hiermit Ihren 
grössten Umfang erreicht, denn ihr Durchmesser beträgt jetzt 
etwa 5l « zu 116 « Hodendurchmesser. 

Es ist dies eine Ausdehnung, der sich aus der gesamten 
Literatur kein ebenbürtiger Fall zur Seite stellen lässt. Weder 
Munk, noch Leuckart, noch van Beneden haben bei ihren 
Forschungen an anderen Nematoden eine ähnliche enorme Rhachis- 
ausbildung angetroffen. Schneider allein ist diese schon bei 
unserem Parasiten aufgefallen, da er sie schon durch die ge- 
schlossene Hodenröhre leuchten sah; er hat sie aber keiner ein- 
gehenderen Untersuchung unterzogen. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 203 


Der Rhachisstamm stellt jetzt gewissermassen einen Zylinder 
dar, in den vereinzelte zarte Fasern hineinragen und dessen Mantel 
von einer ziemlich dünnen Schicht gebildet wird, die der Sitz 
oben besagter Körnchen ist. Der Stamm, somit seiner Festigkeit 
beraubt, vermag nicht länger dem Druck der ihn umgebenden 
und durch die äussere Hodenwand am weiteren Wachstum be- 
schränkten Geschlechtszellen zu widerstehen; er wird zusammen- 
gedrückt und legt sich ausserdem noch in longitudinale Windungen, 
wodurch die bei Längsschnitten auftretende Schlangenlinie ihre 
Erklärung findet (Taf. VIIL, Fig. 7). Die zusammengepresste Rand- 
schicht der Rhachis weist anfangs noch ein verengertes Lumen 
zwischen sich auf, aber bald ist auch dieses verschwunden und 
nur die immer noch sichtbaren Randschichtkörnchen zwischen 
den jetzt in die erste Reifeteilung eintretenden Geschlechtszellen 
deuten noch auf die aufgelöste Rhachis hin. Auf die Körnchen 
werde ich übrigens später noch einmal zurückkommen. 


b) Die weibliche Rhachis. 


Ein wesentlich anderes Bild bietet der Entwicklungsvorgang der 
weiblichen Rhachis. Sie ist bei weitem nicht so kompliziert und stark 
in den einzelnen Regionen aufgebaut, doch ist dies gerade nicht ver- 
wunderlich, denn wir finden dieselbe Erscheinung mit Ausnahme von 
Ascaris megalocephala, wo die weibliche Rhachis die männliche bei 
weitem an Dicke übertrifft, auch bei allen anderen Nematoden, und es 
ist so vielleicht zu verstehen, dass Pöppel sie in seiner Abhandlung 
über Strongylus armatus gar nicht seiner Aufmerksamkeit würdigte. 

Anfangs tritt sie uns in der gleichen (Gestalt wie beim 
Männchen entgegen; sie beginnt meist kurz hinter der Schneider- 
schen Terminalzelle, zeigt einen helleren Zentralteil, den Rhachis- 
stamm, mit vier oder mehreren peripheriewärts ausstrahlenden 
Lamellen, die sich ihrerseits nochmals teilen, d. h. die Verhältnisse 
liegen gerade so wie beim Männchen. 

Diese Gestalt bleibt nun aber beim Weibchen während der 
ganzen Keimzone erhalten und die einzige merkliche Veränderung 
besteht nur darin, dass die periphere Randschicht des Rhachis- 
stammes stärker wird und letzterer von Strecke zu Strecke leichte 
Anschwellungen aufweist. 

In diesen Rhachisverdickungen gelang es mir in vereinzelten 
Fällen Kerne festzustellen. Wir haben dergleichen Kerne schon 


204 Kurt Kühtz: 


in der männlichen Rhachis kennen gelernt, und ich möchte daher 
hier nur noch darauf aufmerksam machen, dass zwischen den 
von A. Mayer an Ascaris beschriebenen und den von mir be- 
obachteten Kernen ein recht beträchtlicher Unterschied besteht. 

Fand Mayer bei einem Rhachisquerschnitt sowohl in der 
Keimzone wie in der Wachstumszone von Zeit zu Zeit zwei bis 
drei relativ kleine Kerne, so traf ich diese in der Keimzone und 
Wachstumszone stets einzeln und von sehr verschiedener Grösse. 
Dieselbe konnte unter derjenigen der umliegenden Geschlechts- 
kerne zurückbleiben oder bis zur Grösse somatischer Zellkerne 
anschwellen. Ich habe zwei extreme Fälle in den Fig. 50 und 51, 
Taf. IX wiedergegeben ; beide Kerne berühren von innen die Rhachis- 
randschicht, während jedoch der kleinere mehr die kugelige Form 
beibehalten hat, erscheint der grössere ellipsoid und weist einen 
deutlichen bläschenförmigen Nukleolus im lockeren Kerngerüst auf. 

Bevor ich nun in der Besprechung der normalen Rhachis 
fortfahre, möchte ich noch auf eine individuelle Verschiedenheit 
hinweisen, die hin und wieder recht beträchtlich ist. Einen 
solchen abweichenden Entwicklungsverlauf habe ich in den Fig. 8, 
9 und Fig. 11 (Taf. VIII) wiedergegeben. 

Unmittelbar im Anschluss an die Endzelle der Ovarialröhre 
machte sich auf einem Längsschnitte im Syneytium schon ein 
breiterer, hellerer Streifen mit einigen kleineren Kernen bemerkbar 
(Fig. 8), der sich in einem Querschnitt (Fig. 9) etwa mit Fig. 2 
der männlichen Rhachisentwicklung vergleichen liesse. Ja, die 
Ähnlichkeit blieb sogar in den weiteren Stadien erhalten, indem 
es zur Abrundung der kreuzförmigen Querschnittsfigur kam und 
dadurch ein Zustand etwa Fig. 4 vergleichbar erreicht wurde 
(Biel). 

Der Hauptunterschied zwischen der abnormen und der 
normalen Entwicklung bestand also hauptsächlich darin, dass es 
zur Bildung eines bedeutend stärkeren, aber undeutlich begrenzten 
Rhachisstammes kam, an dem von weiteren Verzweigungen keine 
Spur zu sehen war. 

Hiermit war etwa die Stelle erreicht, wo die anheftenden 
Geschlechtszellen in die Wachstumszone eintreten. Die nun 
folgenden Stadien stimmten mit den als Regel zu bezeichnenden 
wieder überein. Zum Vergleiche diene noch Taf. VI, Fig. 10, 
die dem Beginn der Wachstumszone entnommen ist. 


Über die Spermio- und Oogenese der Selerostomum-Arten etc. 205 


Wodurch jene abnorme Ausbildung veranlasst wurde, lässt 
sich nicht mit Bestimmtheit entscheiden. Auffällig war jedenfalls 
die verhältnismässig kurze Keimzone, und ich glaube allein aus 
diesem Grunde, dass es sich hierbei um das schon von Schneider 
beschriebene Aufhören der Geschlechtstätigkeit nach einer be- 
stimmten Dauer der Reife handelt. Hierfür spricht vor allen 
Dingen noch, dass die Rhachis, wie ich oben hervorhob, in diesem 
Falle tatsächlich bis an die Terminalzelle reichte, was ja Schneider 
gerade als Charakteristikum für jenen Zustand bezeichnet. Man 
müsste freilich annehmen, dass die Rhachis selbst in ihrem 
Wachstum fortfuhr und dadurch bis an ihr äusserstes Ende diesen 
verhältnismässig bedeutenden Umfang erreichte. 

Ich fahre nun mit der Besprechung der normalen, weiteren 
Entwicklung fort. Die Rhachisverzweigungen, die in Fig. 10 noch 
schwach zu erkennen waren, sind vollkommen geschwunden. Der 
Rhachisstamm weist eine immerhin noch deutliche Randschicht 
auf (Taf. VIII, Fig. 12), sein Inneres ist von einem netzartigen 
Protoplasma erfüllt, das jedoch anderer Art ist, als wir es beim 
Männchen kennen gelernt haben. Eine radiäre Anordnung der 
Fasern wird hier völlig vermisst; sonst aber schreitet der Auf- 
lösungsprozess — denn nichts anderes als diesen haben wir vor 
uns — gleichfalls vom Zentrum aus fort. Die Rhachis nimmt 
zwar noch um weniges an Umfang zu, aber schon etwa in der 
Mitte der Wachstumszone hat sie ihre grösste Ausdehnung 
erreicht; ihr Durchmesser ist hier durchschnittlich 14 «, während 
der der Eiröhre 55 « beträgt. 


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Von nun ab wird sie allmählich, aber stetig dünner 
(Textfig. A und B, S. 235), während ihr Inneres häufig überhaupt 
nicht mehr nachweisbar ist. 


206 Kurt Kühtz: 


Schliesslich verliert die Rhachis ihre zylindrische Gestalt 
und zerfällt in zahlreiche, mehr oder minder dicke Fasern, die 
noch eine Zeitlang zwischen den Geschlechtszellen der Eiröhre 
zu sehen sind (Textfig. C, S. 238). Es ist dies etwa die Stelle, 
wo die weiblichen Geschlechtsprodukte in den Eileiter eintreten, 
um auf dieser Wanderung noch den Reifeprozess durchzumachen. 

Die weibliche Rhachis erweist sich also als bedeutend ein- 
facher in ihrer Ausbildung und verschwindet auch bis auf die 
letzten Spuren in einem früheren Entwicklungsstadium der sie 
umgebenden Geschlechtszellen, als wir es bei der männlichen 
Rhachis feststellen konnten. 

Am Ende dieser Rhachisbesprechung sei es mir vergönnt, 
noch kurz auf eine Eigentümlichkeit hinzuweisen, die mir beim 
Studium der Literatur auffiel. Bei den meisten bisher eingehend 
untersuchten Strongyliden konnte beim Männchen die Abflachung 
und Einrollung der Rhachis beobachtet werden. Vielleicht stellt 
sich diese Eigentümlichkeit bei weiteren Prüfungen als ein neues 
Charakteristikum dieser Familie heraus, und es wäre somit indirekt 
ein neuer Beweggrund gefunden, die von mir untersuchten Parasiten 
in die Familie der Sclerostomiden zu stellen und den von Pöppel 
wieder aufgenommenen Namen Strongylus zu verwerfen. Ich 
werde im Laufe der Arbeit auf ein vielleicht noch eigentümlicheres 
Charakteristikum der Sclerostomiden zu sprechen kommen, das sie 
von allen bislang untersuchten Nematodenarten trennt. 


Die Entwicklung der männlichen Geschlechts- 
produkte. 


a) Die Keimzone. 


Ein Längsschnitt durch das blinde Ende der Hodenröhre 
bietet im grossen und ganzen das gleiche Bild, das bisher von 
allen anderen untersuchten Nematoden beschrieben worden ist. 

Den Abschluss bildet eine umfangreiche Zelle mit grossem, 
bald ellipsoidisch, bald wurstförmigem Kern, der einen bläschen- 
förmigen, glänzenden Nukleolus aufweist. Von Strubell ist diese 
Zelle bei Heterodera schachtii schon mit Recht als ein Analogon 
der Schneiderschen Terminalzelle bezeichnet worden. 

An diese Zellen schliessen sich nun zahlreiche kuglige Kerne 
an, die in einer plasmatischen Grundmasse ruhen und somit das 
schon mehrfach beschriebene Syncytium darstellen. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 207 


Unter den vielen Autoren, die sich mit der Erforschung der 
Chromatinverhältnisse in den Geschlechtszellen der Nematoden 
beschäftigt haben, hat nur ein geringer Teil den ungünstigen 
Verhältnissen in den Spermio- und Oogonien ihre Aufmerksamkeit 
geschenkt und unter diesen sind es wiederum O. Hertwig, 
Brauer, Struckmann und Gulick, die an verschiedenen 
Objekten hervorheben, dass sich die frühesten Spermiogonienkerne 
im Stadium der Ruhe befänden oder dass sich ihr Chromatin 
entweder als sehr feine zahlreiche Körnchen oder auch als ein 
unregelmässiges Retikulum darstelle. 

Ich habe „derartige Ruhestadien“ auch bei Sclerostomum 
beobachten können, wie am besten ein Vergleich der Struck- 
mannschen Fig. 1, Taf. X und meiner Fig. 14, Taf. VIII erhellt. 
Ich bin jedoch der Ansicht, dass diesen Spermiogonienkernen die 
Bezeichnung „Ruhe“ zweckmässiger abzusprechen ist; denn unter 
einem ruhenden Kern verstehe ich vielmehr einen solchen, bei 
dem entweder das Chromatin überhaupt nicht oder als ein 
kompakter Haufen, als Chromatinnukleolus, sichtbar zu machen ist. 

Doch welcher Bezeichnung man auch zustimmen mag, 
jedenfalls findet man von Anfang an „ruhende Kerne“ mit 
Teilungsstadien vermischt, und es scheint mir auch diese Anordnung 
schon dafür zu sprechen, dass wir die Stadien der „ruhenden 
Kerne“ als den Beginn der Prophasen ansehen müssen. 

Die feineren Vorgänge bei der Spermiogonienteilung sind ausser- 
ordentlich schwer zu erkennen, denn die Kerne sind im Verhältnis 
zu der sich ausbildenden Chromosomenzahl recht klein. Immerhin 
vermochte ich an den äussersten, grösseren Ursamenkernen einige 
regelmässig auftretende Chromatinveränderungen festzustellen. 

In den, wie schon erwähnt, kugligen Kernen findet man 
das gesamte Chromatin in Brocken von unregelmässiger Gestalt 
und etwas differenter Grösse stets peripher gelegen, gewisser- 
massen der Kernmembran von innen angeklebt. Dieser Eindruck 
wird besonders durch den Mangel oder genauer gesagt durch das 
kaum sichtbar zu machende Liningerüst hervorgerufen. Bei den 
meisten Fixations- und Färbmethoden ist es überhaupt nicht nach- 
weisbar, nur an Flemming - Material, das mit Eisenhämatoxylin- 
Eosin gefärbt worden war, sowie an Bouin-Material bei Gram- 
scher Färbung zeigte sich ein feiner blasser, achromatischer Faden, 


auf dem die Chromatinbrocken ruhten. 
Archiv f.mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 14 


208 Kurt Kühtz: 


Dieses Stadium wäre also den besagten „ruhenden Kernen“ 
gleichzusetzen. Als ein weiterer Beweisgrund meiner obigen 
Behauptung wäre jedoch noch hervorzuheben, dass die Anzahl 
der vorhandenen Chromatinbrocken annähernd derfür Selerostomum 
typischen Chromosomenzahl gleichkommt. 

Die Chromatinbrocken strecken sich nun ein wenig und 
werden zu kurzen, dicken Chromatinstäbchen (Taf. VII, Fig. 15), 
die ihrerseits bald in bedeutend zartere, etwas geschlängelte 
Fäden übergehen (Fig. 16 und 17), wodurch das von Struckmann 
und anderen beschriebene Stadium erreicht wird; es scheint das- 
selbe jedoch nur zu Beginn der Hodenröhre vorzukommen und bei 
den späteren Kernteilungen der Keimzone unterdrückt zu werden. 

Hiermit haben die Chromosomen — denn als solche müssen 
wir sie von jetzt ab zweifellos bezeichnen — ihre grösste Länge, 
aber nicht ihre endgültige Gestalt erreicht; vielmehr werden 
nun die gleichen Entwicklungsphasen, aber in entgegengesetzter 
Richtung, durchlaufen. 

Dieser Vorgang erscheint im Grunde genommen zwecklos, 
liesse sich jedoch vielleicht erklären, wenn wir unser Stadium 
mit den feinen, geschlängelten Chromosomen dem Spiremstadium 
der typischen Kernteilungen gleichsetzen, wobei es in unserem 
Falle nicht zur Ausbildung eines einheitlichen Fadens kommt, 
sondern dieser von Anfang an in Teilstücken auftritt. 

Die Chromatinfäden, die infolge ihrer Länge nicht mehr 
ausschliesslich peripher gelagert sind, sondern auch teilweise 
durch das Kerninnere hindurchziehen, werden jetzt zu gebogenen, 
schliesslich geraden Stäbchen (Fig. 18) und beginnen sich einer- 
seits wieder zu verkürzen und zu verdicken, andererseits macht 
sich auch eine Anordnung nach einem bestimmten Prinzip 
bemerkbar, indem sie sich allmählich einander ihrer Längsachse 
parallel zu lagern suchen (Taf. VIIL, Fig. 19). Zu gleicher Zeit 
macht sich eine seichte mediane Querfurche bemerkbar, die auf 
die bevorstehende Teilung hinweist. 

Eine Kernmembran konnte ich bei diesem Stadium nicht 
mehr nachweisen, vielmehr lagen die Chromosomen in einem 
helleren Hof des gemeinsamen Zellplasmas. Es ist jedoch wohl 
möglich, dass die Kernmembran erst später oder sogar früher 
verschwindet, denn da sie niemals recht deutlich hervortritt, so 
ist eine Täuschung wohl denkbar. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 209 


Haben die Chromosomen sich so weit verkürzt, dass sie 
nur noch aus zwei dicht aneinander liegenden Kügelchen bestehen, 
einem Biskuit vergleichbar, so haben sie sich auch schon in einer 
Äquatorialplatte angeordnet, die bei einer Polansicht elf Chromo- 
somen aufweist (Taf. VIII, Fig. 20). 

Die stark verkürzten Chromosomen konnte ich nur in 
wenigen Fällen deutlich beobachten, und es ist dies vielleicht 
ein Stadium, das sehr schnell durchlaufen wird. Die Form der 
weit häufiger vorkommenden Spindeln liess jedoch von vornherein 
eine derartige Verkürzung der Chromosomen vermuten. Fällt 
nämlich die Spindelachse mit der Schnittebene zusammen, so 
sieht man eine zierliche, wenig gestreckte Spindel, deren Spindel- 
fäden bei Safraninfärbung schwach rot tingiert sind, bei der 
Gramschen Färbung aber besonders an Flemming - Material 
sehr gut hervortreten und an den Polen winzige Centrosomen auf- 
weisen. Im Äquator dagegen findet man eine stark gefärbte, 
scheinbar kompakte Platte, die häufig einen feinen Längsspalt 
zeigt, d. h. in diesem Falle sieht man zwei übereinander liegende 
Scheiben. Jede Scheibe aber ist nichts anderes als die Summe 
der eben gebildeten Tochterchromosomen. 

In wenigen Fällen konnte ich jedoch auch an diesen Spindeln 
die Stellung der Chromosomen in der Äquatorialplatte beobachten, 
letztere war dann aber stets beim Mikrotomieren zerteilt und 
dadurch übersichtlicher geworden (Taf. VIIL, Fig. 21 a—c). 

Aus vorangegangener Schilderung ist ersichtlich, dass die 
einzige Möglichkeit der Chromosomenzählung in den Prophasen 
oder in den Metaphasen bei Polansicht liegt; es schliesst sich 
also Sclerostomum ganz den bei Ascaris canis, Strongylus filaria 
und neuerdings von Mulsow bei Ancyracanthus eystidicola be- 
schriebenen Verhältnissen an. 

Nun aber nochmals zurück zur Chromosomenzahl selbst. Wie 
gesagt, werden in den Spermiogonien elf Chromosomen gebildet, und 
es ist daher bei Begücksichtigung der Verhältnisse, die wir später 
beim Weibchen kennen lernen werden, von vornherein zu vermuten, 
dass es in der Teilzone zu einer Heterokinese kommen wird, da 
eins der elf Chromosomen ein Monosom ım Sinne Montgomerys 
oder ein Idiochromosom nach der Wilsonschen Bezeichnung ist. 

Gulick, der bei Heterakis vesicularis ähnliche Verhältnisse 
aufdeckte, indem er neun Chromosomen beobachtete, sagt hierzu: 

14* 


210 Kurt Kühtz: 


„Es wäre theoretisch zu erwarten, dass eins von diesen Chromo- 
somen sich von den acht anderen als unpaares Heterochromosoma 
oder Idiochromosoma erkennbar unterscheide, und es ist nicht 
unmöglich, dass wir es in dem grössten Chromosoma der Äquatorial- 
platte zu erkennen haben; aber ich halte es für gewagt, geringen 
(srössenunterschieden bei so kleinen Chromosomen viel Bedeutung 
zuzuschreiben“. 

Ich stimme dieser Äusserung vollkommen bei und möchte 
nur noch hervorheben, dass mir bei Sclerostomum in diesen 
Stadien auch nicht der geringste Grössenunterschied aufgefallen 
ist, immerhin beschränken sich meine Beobachtungen nur auf 
eine kleine Zahl genügend klarer Bilder. 

Ich möchte nun noch eines Kernbestandteiles Erwähnung 
tun, der von allen Forschern stets beschrieben worden ist, nämlich 
des Nukleolus. Wenn man sich obiger Schilderung erinnert, so 
wird man leicht einsehen, dass ein Nukleolus unter der Zahl der 
stark, wenn auch nicht gleichgefärbten Uhromatinbrocken nur 
etwa durch bedeutendere Grösse auffallen könnte. Dies ist jedoch 
nur in beschränktem Maße der Fall. Glücklicherweise kommt 
hier ein anderer Umstand zu Hilfe, nämlich die verschieden 
grosse Affinität der Körnchen, die Farbstoffe festzuhalten. Bei 
allen Schnitten, die nach Heidenhain, Gram oder mit Safranin 
gefärbt wurden, liessen sich durch im Grunde genommen zu 
langes Entfärben ein oder zwei, selten sogar drei Körnchen 
herausdifferenzieren, die bei gewöhnlicher Färbung von den 
übrigen Chromatinbrocken nicht zu unterscheiden waren. Das 
eine derselben zeigte eine wenig gestreckte, stäbchenförmige 
(Gestalt, das andere stets kuglige (Taf. VIII, Fig. 22). 

Obwohl ich es für gewagt halte, so winzigen gestaltlichen 
Verschiedenheiten einen allzu grossen Wert beizulegen, so wäre 
es immerhin denkbar, dass wir schon hier in dem gestreckteren 
Körper das oben erwähnte Heterochromosom vor Augen haben; 
doch werde ich hierauf erst in späteren Entwicklungsstadien zu 
sprechen kommen. 

Vergleicht man (Querschnitte durch die Keimzone betrefts 
der Anzahl und Verteilung der Mitosen, so stellen sich dabei 
individuelle Verschiedenheiten heraus. Es ist keineswegs selten, 
dass man bei Schnittserien durch die Keimzone aufeinander 
folgende Bilder erhält, in denen unter ca. 400—500 Spermiogonien- 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 211 


kernen auch nicht eine Meta- oder Anaphase zu sehen ist; in 
anderen Schnittserien dagegen ist das Verhältnis etwa wie 10 zu 
4—500. Vielleicht lässt sich hieraus ein periodischer Entwick- 
lungsverlauf schliessen, wie er ja in der Spermiogenese des öfteren 
beobachtet worden ist. 

Bevor ich nun in der weiteren Besprechung der Chromatin- 
umwandlungen fortfahre, sei noch kurz der sogenannten Zwischen- 
körperchen gedacht, die in der Keimzone festzustellen waren. 

O0. Hertwig, der als erster die wahre Bedeutung der viel 
umstrittenen Gebilde aufdeckte, fand sie bei Ascaris megalocephala 
in der Keimzone zwischen den Spermiogonienkernen verstreut und 
konnte sie einwandfrei durch eine Reihe von Zwischenstadien als 
degenerierte Kerne identifizieren. Es sind seitdem an den ver- 
schiedensten Objekten die gleichen Körper wiedergefunden worden, 
nur mit dem Unterschied, dass sie teils in anderen Zonen, teils 
in anderer Anordnung angetroffen wurden. 

Die von mir bei Sclerostomum beobachteten schliessen sich 
am besten den von Schleip bei Rhabdonema nigrovenosum be- 
schriebenen an, indem auch hier die Zwischenkörperchen stets 
an der Peripherie der Hodenröhre auftreten und kompakte, stark 
färbbare Klumpen darstellen (vgl. Taf. VIII, Fig. 2). 

Kehren wir aber jetzt wieder zu den Spermiogonienkernen 
zurück. Den oben geschilderten Umwandlungsprozess muss die 
Deszendenz der Ursamenkerne mehrmals durchlaufen, das lässt 
sich ohne weiteres einerseits aus der Anzahl der Kerne am Ende 
der Keimzone, andererseits aus den überall sporadisch auftretenden 
Mitosen schliessen. Wieviel der Teilungen etwa vorliegen, und 
was der Grund des schliesslichen Aufhörens derselben ist, dafür 
lassen sich keinerlei Anhaltspunkte finden; die Frage ist auch, 
soweit mir bekannt, von keinem Forscher berührt worden. 


b) Die Wachstumszone. 


Beim Eintritt in die Wachstumszone hat der Kern seine 
geringste kuglige Grösse, und zwar ist er etwa halb so gross wie 
zu Anfang der Keimzone, was am deutlichsten aus den beiden 
Übersichtsbildern Fig. 1 und 2 zu ersehen ist. Es lagern hier 
auf einem (Querschnitt etwa acht bis neun Kerne auf einem 
Radius, das ist die höchste Zahl, die je erreicht wird. 


212 Kurt Kühtz: 


Eine strenge Grenze zwischen Keim- und Wachstumszone 
existiert allerdings nicht und die einzige wegen ihrer schlechten 
Sichtbarkeit aber gleichfalls nicht durchgreifende Erscheinung ist 
das Auftreten von Zellgrenzen zwischen den Kernen. 

Ich habe eingangs bei Besprechung der Rhachis schon darauf 
hingewiesen, dass die feinsten Rhachisverzweigungen die Aufteilung 
des Syneytiums übernehmen, da diese aber in ihren Uranlagen 
nur an leicht geschrumpftem Material zu sehen sind, so büssen 
sie als Prognose für die Wachstumszone bedeutend an Wert ein. 
Zwischen den Maschen dieses Netzwerkes liegt im gegebenen 
Falle je ein Kern, dessen umhüllendes Plasma sich meist zurück- 
gezogen hat, dicht dem Rhachisnetz anliegt und letzteres dadurch 
deutlicher hervorhebt. 

Erst von hier ab können wir also von Geschlechtszellen 
reden, in deren Kernen wir zahlreiche Chromatinbröckchen finden 
und ausserdem einen grösseren runden und einen schwach ge- 
streckten Körper, d. h. das erste Nukleolusstadium Gulicks 
(DagovıH Rie 23): 

In der Wachstumszone hat Gulick bei Heterakis vesicularis 
drei typische Stadien unterschieden. Inwieweit ich ähnliche Ver- 
hältnisse auch bei Sclerostomum fand, werden wir im weiteren 
Verlauf der Darstellung sehen, zuerst möge hier die diesbezügliche 
Stelle Gulicks folgen: „Zwischen der letzten Spermatogonien- 
teilung und dem Zeitpunkt, in dem die Tetraden deutlich zum 
Vorschein kommen, sind drei Hauptstadien zu unterscheiden, 
nämlich 1. ein erstes Nukleolusstadium, 2. ein Spiremstadium und 
3. ein zweites Nukleolusstadium. Die Bezeichnung Nukleolusstadiunı 
ist hier rein deskriptiv. Wir werden sehen, dass der „Nukleolus“ 
im dritten Stadium und vermutlich im ersten eigentlich ein kompakt 
bleibendes Chromosoma, ein „Chromosomnukleolus“, ist.“ 

Wir haben also in den oben beschriebenen Kernen zweifellos 
das erste Nukleolusstadium Gulicks vor uns, wobei der etwas 
gestrecktere' Chromatinkörper dem „Uhromosomnukleolus“ ent- 
sprechen dürfte. 

Eine weitere Gegenüberstellung meiner Bilder mit denjenigen 
Gulicks scheitert jedoch daran, dass das Charakteristikum, 
nämlich das Auftreten, Verschwinden und abermalige Auftauchen 
eines Nukleolus, bei Sclerostomum nicht vorhanden ist. Auch hier 
können wir in der weiteren Entwicklung drei oder sogar vier 


Uber die Spermio- und Oogenese der Scelerostomum-Arten etc. 213 


Phasen unterscheiden, aber stets werden wir in ihnen mehr oder 
minder deutlich eins bis zwei Nukleolen finden; die Stadien gehen 
zwar alle ohne scharfe Grenzen ineinander über, zeigen jedoch 
im Höhepunkt ihrer Ausbildung stark in die Augen fallende 
Unterschiede. 

Die dem ersten Stadium folgende Phase ist durch die all- 
gemeine Gestaltveränderung des Kernes gekennzeichnet. Derselbe 
nimmt eine ovale Form an und lagert sich stets so, dass seine 
Hauptachse mit den Transversalachsen der Hodenröhre zusammen- 
fällt. Seine Ohromatinbröckchen treten dicht an die Kernmembran, 
wodurch letztere fast unsichtbar wird und ausserdem tingieren 
sie sich nicht mehr scharf, sondern beginnen klumpig zu werden. 
Hierdurch treten die beiden Nukleolen in den Hintergrund, lassen 
sich aber meist noch nachweisen. Bei gut gelungener Gramscher 
oder Safraninfärbung sieht man zwischen den Chromatinbrocken 
einen feinen achromatischen Faden verlaufen, so dass der ganze 
Kerninhalt einer Perlschnur ähnelt, wie dies Tretjakoff auch 
für Ascaris megalocephala beschrieben hat und dadurch vielleicht 
andeutungsweise an das Spiremstadium Gulicks erinnert 
(Taf. VII, Fig. 24). 

Es folgt nun eine weitere Verklumpung des Chromatins, 
das jetzt einen mehr kompakten Eindruck macht und sich zu 
einem zackigen, unregelmässigen Gebilde verwandelt, wodurch die 
ovale Gestalt des Kernes unterdrückt wird. Denn die Kern- 
membran, die, wie oben erwähnt, mit dem Chromatin in engen 
Kontakt trat, ist verschwunden oder besser gesagt unsichtbar 
geworden, indem sie den Chromatinbröckchen dicht aufliegt 
(Taf. VIII, Fig. 25 a— ce). 

Wir haben somit zweifellos das von Brauer, Tretjakoff, 
Mulsow und anderen stets beschriebene Synapsisstadium vor 
uns, freilich mit dem auffälligen Unterschied einer nicht nach- 
weisbaren Kernmembran. 

Diese Zone der Hodenröhre lässt sich von allen am schwersten 
darstellen, denn wenn z. B. bei angewandter Gramscher Färbung 
die übrigen Stadien längst zu weit differenziert sind, so ist besagte 
Zone noch stark überfärbt und fällt bei einer Durchsicht der 
Schnittserien zuerst ins Auge. Fährt man aber mit der Differen- 
zierung weiter fort, so verschwindet das Kernbild, ohne je deutliche 
Konturen gezeigt zu haben. 


214 Kurt Kühtz: 


Ich möchte hier ein weiteres, wiederum hauptsächlich durch 
die äussere Kerngestalt gekennzeichnetes Stadium einschalten, das 
ich „gestrecktes Knäuelstadium“ nennen werde, um durch eine 
Bezeichnung wie „Spindelstadium“ nicht zu Verwechselungen Anlass 
zu geben. Es ist durch folgende Eigentümlichkeiten charakterisiert. 

Aus dem Chromatinklumpen entwickelt sich mit der Zeit 
wieder ein ovaler Kern, der aber bald zu einem langgestreckten 
Körper ausgezogen wird und etwa drei- bis viermal so lang als 
dick ist. Die Kernmembran ist währenddessen wieder sichtbar 
geworden und die dieht unter ihr liegenden Chromatinbrocken, 
die durch einen achromatischen Faden verbunden sind, wie wir 
dies nun schon mehrfach kennen gelernt haben, wölben sich ins 
ytoplasma vor, so dass der ganze Kern gleichsam mit kleinen 
Warzen versehen ist (Fig. 26). 

Von diesem „gestreckten Knänelstadium“, wie ich es eben 
geschildert habe, gibt es zwar mannigfache Abweichungen, indem 
die Pole einerseits gerundet sein können, andererseits die sonst 
in der Mitte gelegene breiteste Kernstelle nach einem Pol gerückt 
oder sogar verschwunden ist, so dass der Kern wurstförmig wird, 
stets aber finden wir das Chromatin in Bröckchen verteilt und 
unter diesen einen grösseren kugligen und einen mehr oder 
weniger gestreckten Körper, d. h. stets Gebilde, die wir mit 
gleichem Recht wie im „ersten Nukleolusstadium“ als „Nukleolen“ 
bezeichnen können (Taf. VIII, Fig. 26 a—ı). 

Der Übergang aus diesem Stadium in das sogenannte „zweite 
Nukleolus-“ oder letzte Stadium der Wachstumszone ist auch 
bei Selerostomum ein ganz allmählicher und nimmt überhaupt 
den grössten Teil derselben in Anspruch. Wie schon hervorgehoben, 
verliert ja für mich die Bezeichnung „erstes und zweites Nukleolus- 
stadium“ vollkommen an charakterisierendem Wert, da ich auch 
in den Zwischenstadien die Nukleoli beobachten konnte, immerhin 
mag diese Benennung entsprechend der Gulickschen gestattet 
sein, wenn man nicht den allgemeineren Begriffen: Anfangs-, 
Spirem-, Synapsis-, gestrecktes Knäuel- und Endstadium der 
Wachstumszone den Vorzug geben möchte. 

Indem der Kern allmählich wächst und seine ovale Gestalt 
wiedergewinnt, gehen am Chromatin und seinem Gerüstwerk nur 
insofern Veränderungen vor sich, als das Gesamtbild klarer und 
deutlicher wird (Taf. VIIL, Fig. 27. und 28a—c). 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten ete. 215 


Hand in Hand mit der Kernvergrösserung findet ein Wachs- 
tum des Cytoplasmas statt. Es liegen bei einem Querschnitt durch 
diese Zone nur noch vier bis fünf Kerne auf einem Radius der 
Hodenröhre und die Peripherie derselben zeigt languettenartige 
Einbuchtungen (vgl. Fig. 4). Eine jede Languette entspricht der 
Zellgrenze des unter ihr liegenden Kernes. Ebenso treten neben 
den oben beschriebenen tertiären Rhachislamellen kleine Spalten 
auf, die nach und nach grösser werden und zwischen sich feine 
Stiele erkennen lassen, mit denen die Spermiogonien der Rhachis- 
säule aufsitzen. 

Sobald sich die Zahl der auf einem Radius liegenden 
Spermiogonienkerne bis auf drei vermindert hat, lassen sich 
häufig schon dünne Stiele bis zu den an der Peripherie lagernden 
Kernen nachweisen nnd wir haben dann die schon mehrfach be- 
schriebenen keulenförmigen Spermiogonienzellen vor uns (Taf. VIII, 
Fig. 5). 

Indem nun die Kerne weiter anschwellen und sich allmählich 
wieder der Kugelform nähern (Taf. VIII, Fig. 29), werden einer- 
seits die Keulenenden dicker und massiger, andererseits verkürzt 
sich der Keulenstiel, so dass die (Geschlechtszellen schliesslich 
fast rechteckig sind und der Rhachis mit breiter Basis aufsitzen 
(Taf. VIII, Fig. 6 und 7). 

Hiermit ist aber die Stelle erreicht, wo, wie wir oben 
gesehen haben, die Rhachissäule zusammengedrückt wird, d.h. 
die Grenze zwischen Wachstums- und Reifezone, und wir müssen 
von nun ab die Geschlechtszellen als Spermiocyten bezeichnen 
und die folgenden Chromatinveränderungen ihrer Kerne als 
Prophasen für die erste Reifeteilung ansprechen. 

Werfen wir nun kurz einen Blick auf das Verhalten der 
Kerne in der Wachstumszone zurück, so können wir das Zurück- 
treten eines vollkommenen Ruhestadiums in derselben sowie das 
stete Vorhandensein eines kugeligen und eines mehr oder minder 
stabförmigen Nukleolus als charakteristisch für Sclerostomum 
hervorheben. Ob man aber in dem stabförmigen Körper einen 
„Uhromosomnukleolus“, wie Gulick sagt, oder das „Hetero- 
chromosom* zu erblicken hat, wie dies Mulsow bei ähnlichen 
Verhältnissen für Ancyracanthus eystidicola behauptet, ist zwar 
sehr wahrscheinlich, lässt sich jedoch, wie die weitere Entwicklung 
zeigen wird, nicht strikte beweisen. 


216 Kurt Kühtz: 


c) Die Reifezone. 


An den jungen Spermiocyten machen sich bald weitere 
Veränderungen bemerkbar, indem sie einerseits durch den gegen- 
seitigen Druck eine polygonale Gestalt annehmen, andererseits 
gehen an den Chromatinbrocken der Kerne die gleichen Vorgänge 
von statten, wie wir sie an denjenigen der Keimzone kennen 
gelernt haben. Auch jetzt entstehen erst wieder feinere, längere 
Chromosomen, die sich durch ihr zackiges Aussehen und ihre 
Windungen auszeichnen (Taf. VIII, Fig. 30 und 31a und b): 
bevor es jedoch zur typischen Tetradenbildung kommt, können 
wir mit Schleip sagen, „machen die Chromosomen oftenbar 
recht merkwürdige Gestaltsveränderungen durch, doch sind alle 
diese CUhromosomenformen bekanntlich schon oft gefunden und 
beschrieben worden“. 

Ich kann mich daher kurz fassen ; die fadenförmigen Chromo- 
somen werden allmählich kompakter, verlieren ihr zackiges Aus- 
sehen und sind mehr oder minder stark gebogen (Taf. VII, 
Fig. 31). In diesem Stadium stimmen sie mit den von Struck- 
mann (Fig. 23 und 24) abgebildeten überein, ich möchte aber 
besonders betonen, dass die übrigen Zwischenstadien — nämlich 
die Ausbildung eines Doppelfadens und dessen spätere Teilung -—- 
bei unserem Objekt zum Fortfall kommen; somit kann ich ım 
Gegensatz zu Struckmanns unsicherer Äusserung mit aller 
Bestimmtheit sagen, dass ein kontinuierlicher chromatischer Faden 
bei Sclerostomum niemals anzutreffen ist. 

Die langen, gebogenen Chromosomen strecken sich jetzt 
etwas und nur ihre Enden weisen noch eine Zeitlang eine schärfere 
Krümmung auf; zugleich bemerken wir in der Mitte der Chromo- 
somen das Auftreten eines Querspaltes sowie bei günstiger Lagerung 
auch einen Längsspalt, mit anderen Worten, wir haben typische 
Tetraden vor uns (Taf. VIII, Fig. 32a und b). 

In der Art der Tetradenbildung weichen somit meine Be- 
obachtungen von denjenigen Struckmanns bedeutend ab. 
Während Struckmann für Strongylus filaria angibt, dass zwei 
der gebogenen Chromosomen miteinander in Verbindung treten 
und „die Tendenz zeigen, sich parallel zu lagern“ und nun an 
jedem Faden eine Querteilung auftritt, „die jedoch nicht zu Ende 
geführt wird“, habe ich für Scelerostomum die Überzeugung ge- 
wonnen, dass die anfangs einheitlichen Chromosomen erst durch 


Über die Spermio- und Oogenese der Selerostomum-Arten etc. 217 


Quer- und Längsspaltung in die Tetradenform übergehen. Die 
Konjugation der Chromosomen muss also schon in der Anlage 
vollzogen sein, und meine Beobachtungen würden sich somit 
etwa den Brauerschen für Ascaris megalocephala anschliessen. 

Sobald die Tetradenform deutlich zur Ausbildung gelangt 
ist, wobei sich die Chromosomen etwas verkürzt haben und auch 
ihre Endenkrümmung verschwunden ist, macht sich unter ihnen 
eine Anordnung nach einem bestimmten Prinzip bemerkbar. Von 
den sechs ausgebildeten Chromosomengruppen finden wir nämlich 
entweder je drei einander parallel gerichtete, die als Ganzes auf- 
gefasst, gegeneinander um 90° gedreht sind oder aber es stehen 
sogar fünf Gruppen einander parallel, während nur die sechste 
eine abweichende Stellung einnimmt (Taf. VIII, Fig. 32a und b). 

Wird auch häufig diese Anordnung nicht völlig erreicht, so 
sehen wir doch meist vier Chromosomengruppen einander parallel 
gerichtet. Schon auf diesem Stadium waren ziemlich deutliche 
Grössenunterschiede zwischen den chromatischen Elementen zu 
erkennen. So ist z. B. in Fig. 35a das untere chromatische 
Element bedeutend dünner und kürzer. Bei den zwei rechts und 
links im Kern liegenden, die gleichfalls dünner erscheinen, muss 
dagegen unbedingt die Lage berücksichtigt werden, denn decken 
sich die Teilstücke einer Tetrade im Bilde, so muss sie selbst- 
verständlich schlanker erscheinen, als wenn dieselben neben- 
einander wahrgenommen werden. Immerhin bleibt die rechte 
Chromosomengruppe auch etwas an Länge zurück, und da ich 
ähnliche Abweichungen hin und wieder fand, möchte ich doch 
an der so oft betonten mathematischen Genauigkeit der Chromo- 
somenbildung berechtigte Zweifel hegen; denn diesen Grössen- 
differenzen der beiden seitlichen Chromosomengruppen eine tiefere 
Bedeutung beizulegen, halte ich für verfehlt. 

Während der bekannten, jetzt einsetzenden Verkürzung und 
Verklumpung der Tetraden verlassen sie die Kernmembran, die 
hiermit zugleich verschwindet und ordnen sich zur Spindel. Auf 
das Verschwinden des Längsspaltes in den Tetraden ist schon 
von mehreren Seiten aufmerksam gemacht worden, doch kann 
ich der Struckmannschen Annahme, „dass das Verschwinden 
des Längsspaltes während des Teilungsvorganges jedenfalls der 
auf die plastischen Chromatinmassen einwirkenden Zugkraft der 
Spindelfasern zuzuschreiben ist“, nur schwer beistimmen, denn 


218 Kurt Kühtz: 


der Spalt kann längst verschwunden sein, bevor auch nur eine 
Spur von Spindelfasern nachzuweisen ist, oft sogar schon vor der 
Auflösung der Kernmembran. 

In der Spindel, deren Pole von winzig kleinen Centrosomen 
eingenommen werden, die bei der Gramschen Färbung graublau 
bis violett, mit Safranin schwach rosa tingiert werden, stehen 
die Chromosomen so, dass ihre Längsachsen mit denen der Spindel- 
fasern zusammenfallen, ihre Anordnung zueinander lässt sich 
jedoch nur in Polansichten erkennen (Taf. VII, Fig. 33 a—d). 

In diesen Fällen sehen wir meist fünf in einem Kreise an- 
geordnete Körnchen, Tetradenquerschnitte, die bei nicht zu weit 
differenzierter Gramscher Färbung herzförmig erscheinen, was 
wohl auf den verschwommenen Spalt zweier nebeneinander liegender 
Chromosomen zurückzuführen ist. In dem Zentrum des Kreises 
steht dann jedesmal ein bedeutend feineres Chromosom in Form 
eines kleineren Körnchens (Fig. 53a). 

Diese Anordnung ist schon von Schleip, Struckmann, 
Gulick und Mulsow geschildert worden, d. h. überall da, wo 
in der ersten Reifeteilung sechs Chromosomengruppen vorhanden 
waren, und ich möchte ihr wegen der charakteristischen Form 
die Bezeichnung „Rosettenstadium“ beilegen. 

Neben diesem typischen „Rosettenstadium“ kommt, wenn 
auch bei weitem nicht so häufig, eine andere Stellung vor, etwa 
den fünf Augen eines Würfels entsprechend, wobei ein sechstes, 
kleineres Auge ausserhalb der Karreefigur anzutreften ist (Fig. 33 c); 
weicht jedoch die Anordnung von der Rosettenform ab, so sind 
mancherlei Stellungsdifferenzen aufzufinden, die meist durch kleine 
Verschiebungen der Chromosomgruppen untereinander hervor- 
gerufen werden. 

Sowohl aus der ungeraden Chromosomenzahl der Ursamen- 
kerne als auch aus dem Grössenunterschied der sechs Spermio- 
cytenchromosomen lässt sich, wie schon angedeutet, in einer der 
beiden Reifeteilungen eine Heterokinese im Sinne Gutherz’ 
erwarten, d.h. die Erscheinung, dass in der Mitose ein Ohromosom, 
nämlich das Mono- oder Heterochromosom, statt in zwei nach 
verschiedenen Polen auseinanderweichende Teile zu zerfallen, 
ungeteilt dem einen Pol zuwandert, wobei es sich meist langsamer 
bewegt und hinter den übrigen Teilstücken der Chromosomen 
zurückbleibt. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 219 


Und in der Tat findet man auch bei Sclerostomum der- 
artige Vorgänge, aber bei weitem nicht in dem Maße, dass man 
sie als typische Stadien, die von allen Spermiocyten in der ersten 
Reifeteilung durchlaufen werden müssen, ansprechen dürfte. Ich 
habe verschiedentlich Stadien angetroffen, bei denen die Tochter- 
platten erst so wenig voneinander gerückt waren, dass man ein 
zurückbleibendes Chromosom zweifellos hätte sehen müssen und 
trotzdem war ein solches auch nicht einmal andeutungsweise vor- 
handen (Taf. IX, Fig. 34 a—c). 

Wir müssen also entweder annehmen, dass die verlangsamte 
Bewegung bei Geschlechtschromosomen kein allgemeiner, typischer 
Vorgang ist oder aber wir müssen für den Mangel dieser Er- 
scheinung in unserem Falle eine andere Erklärung finden; ich 
kann diese jedoch erst abgeben, wenn wir den weiteren Verlauf 
und die zweite Reifeteilung kennen gelernt haben. 

Durch die erste Reifeteilung werden also die fünf Tetraden 
in zehn Dyaden zerlegt, während das Monosom sich höchst wahr- 
scheinlich ungeteilt einer der beiden Tochterplatten anschliesst. 
Wir haben somit zwei Arten von Tochterplatten zu unterscheiden, 
nämlich erstens eine solche mit fünf aus je zwei Chromosomen 
bestehenden Chromosomengruppen und zweitens eine solche mit 
gleichfalls fünf Chromosomengruppen + einem Monosom. Die 
Erkenntnis dieser Tatsache wird aber durch den Umstand erschwert 
oder sogar unmöglich gemacht, dass die Teilstücke der Tetraden 
sich während ihrer Wanderung zum Pol dichter aneinanderschliessen 
und somit bei der Polansicht eine kompakte Scheibe darstellen, 
deren Rand schwach languettiert erscheint — wobei jede Languette 
einem Chromosom entsprechen dürfte — und deren Zentrum 
häufig eine hellere Stelle aufweist. Wenn letztere durch den 
Mangel des Monosoms verursacht würde, so könnte man hieraus 
sowie aus der Zahl der Languetten auf die Chromosomenzahl der 
jungen Spermiocyten zweiter Ordnung schliessen, doch liegen die 
Verhältnisse meist nicht so klar, wie man aus obiger Schilderung 
vermuten könnte, so lassen z. B. beide Erscheinungen in einem 
Bilde vereinigt an Klarheit oft zu wünschen übrig (Taf. IX, 
Fig. 35 a—d). 

In diesem Stadium verharren die jungen Spermiocyten 
zweiter Ordnung, ohne eine Kernmembran gebildet zu haben, nur 
kurze Zeit, und es wäre noch hervorzuheben, dass man bei Längs- 


220 Kurt Künhtz: 


schnitten manchmal auf der einen Seite des Hodenschlauches 
Spermiocyten zweiter Ordnung findet, während auf der anderen 
Seite bedeutend jüngere Stadien lagern. Diese Erscheinung erklärt 
sich aus dem schon oben geschilderten geschlängelten Verlauf 
der zusammengedrückten Rhachis, die häufig noch in der ersten 
Reifeteilung zwischen den Geschlechtszellen nachzuweisen ist, wie 
dies Schneider auch schon bei Filaria papillosa beobachtet hat. 

Aus diesem Grunde ist es auch keineswegs schwer, unter 
Berücksichtigung unserer Beobachtung bei der Rhachisausbildung. 
das Auftreten zahlreicher, kleiner Körnchen zwischen den Ge- 
schlechtszellen zu deuten, die oft den Anschein von Centrosomen 
erwecken können. Es handelt sich hierbei sicherlich nur um die 
letzten Reste der tertiären Rhachisverzweigungen, welche die 
schon früher betonte starke Affinität zu Kernfarbstoffen beibehalten 
haben, wenngleich sie teils schon bis auf (Centrosomengrösse 
reduziert worden sind. 

Aus den Tochterplatten der Spermiocyten erster Ordnung 
gehen schliesslich wieder Spindeln hervor, die sich von denen der 
ersten Reifeteilung allein durch ihre Grösse unterscheiden, selbst- 
verständlich abgesehen davon, dass ein Teil sechs, der andere 
Teil fünf Chromosomengruppen aufweist, wie ich dies ja schon in 
obiger Schilderung angegeben habe. Es liegen also auch bei der 
zweiten Reifeteilung die Chromosomengruppen mit ihrer Längsachse 
in der Richtung der Spindelfasern und zeigen in der Mitte eine 
Einschnürung, die auf eine abermalige (merteilung hindeutet 
(Taf. IX, Fig. 36 a—e). 

Wir müssen uns daher fragen: Was für Veränderungen 
haben die bei der ersten Reifeteilung auseinander weichenden, 
nebeneinander liegenden Teilstücke der Dyaden durchgemacht, 
damit sie in der zweiten Reifeteilung wieder als langgestreckte 
Chromosomen mit angedeuteter Querteilung auftreten können ? 

Ich habe diese Umwandlungen leider nicht beobachtet, kann 
aber unter Berücksichtigung der Verhältnisse, die wir später bei 
der Ausstossung der Richtungskörper kennen lernen werden, einen 
homologen Vorgang auch bei der Reifeteilung der männlichen 
(eschlechtszellen annehmen, besonders da ja auch Struckmann 
schon bei Strongylus filaria gleiche Vorgänge aufgedeckt hat. 

Nach seinen Beobachtungen spaltet sich die Dyade schon in 
der Anaphase der ersten Reifeteilung dem anfangs angedeuteten 


m, De 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 221 


Längsspalt entsprechend auf; „oft ist der Spalt zwar nur als zwei 
Zipfel erkennbar. Die Hälften der Dyaden weichen nun am einen 
Ende weiter voneinander und indem sie sich verkürzen, liegen 
sie nicht mehr mit dem Längsspalt aneinander, sondern sind 
hintereinander geordnet“. 

Ebenso müssen sich die Umwandlungen auch bei Sclerostomum 
abspielen, denn gesetzt den Fall, die Dyaden wanderten unter 
einer Drehung von 90° in die Äquatorialplatte der zweiten 
Reifungsspindel, wie dies schon mehrfach beobachtet worden ist, 
so könnten die Chromosomen unmöglich fast die gleiche Länge 
wie die der ersten Reifeteilung aufweisen. 

Liesse sich somit die Form und Stellung der Chromosomen 
in befriedigender Weise erklären, so stossen wir in den Anaphasen 
der zweiten Reifeteilung abermals auf wider Erwarten vorkommende 
Verhältnisse; denn wir finden absolut die gleichen Bilder wie 
bei der ersten Reifeteilung, auch hier hin und wieder deutlich 
das Zurückbleiben eines Chromosoms. Obwohl also diesmal eine 
Teilung sämtlicher Chromosomen in gleicher Weise stattfinden 
sollte, doch eine verschiedenartige Bewegung und zwar in dem 
Maße, dass die von Gutherz betonte „sozusagen physiologische 
Breite der Abweichung“ bei weitem überschritten war, und wir 
mit Recht von einer Heterokinese sprechen dürfen. 

Wir müssen dementsprechend entweder annehmen, dass die 
Teilung eines Monosoms an und für sich schwerer und langsamer 
von statten geht oder aber unsere obige Behauptung, dass einer 
heterotypischen Bewegung in der Mitose keine Chromosomen- 
differenz zugrunde zu liegen braucht, von neuem bekräftigen. 

Die andere Erklärung, auf welche ich oben schon andeutungs- 
weise aufmerksam machte, wäre folgende: Berücksichtigen wir 
unsere Beobachtungen bei der ersten und zweiten Reifeteilung, 
in der sich beide Male vereinzelte Heterokinesen auffinden liessen, 
so könnte man, wenn man der heterotypischen Bewegung der 
Uhromosomen grossen Wert beimisst, annehmen, dass die Teilung 
des betrefis seines Querspaltes ja stets gleich gelagerten Monosoms 
sowohl in der ersten wie in der zweiten Reifeteilung stattfinden 
könnte. Hierdurch würde sich einerseits der Mangel eines gleich- 
mässig verteilten fünf- und sechsgliedrigen „Rosettenstadiums“ 
in der zweiten Reifeteilung erklären lassen, andererseits liesse 
sich dieser Vermutung aber auch die Tatsache zur Seite stellen, 


222 Kurt Kühtz: 


dass bei einigen Tieren die Heterokinese in der ersten, bei anderen 
in der zweiten Reifungsteilung auftritt. Jedenfalls würde ja auch 
bei wechselndem Vorkommen der „ungleichen“ Teilung stets der 
gleiche Schlusseftekt erzielt werden. 

Ein Grund für dieses unregelmässige, scheinbar beliebige 
Verhalten des Monosoms liesse sich freilich nur schwer angeben, 
es sei denn, dass derselbe in der abweichenden Stellung des 
kleinen Chromosoms im Rosettenstadium läge. Denn das eine 
steht ja fest, tritt bei Sclerostomum eine heterotypische Bewegung 
auf, so zeigt sich das zurückbleibende Uhromosom im Gegensatz 
zu Heterakis vesicularis stets in der Mitte, niemals dagegen an 
der Seite! Die Frage nach der Reduktion des Chromatins, bei 
der die meisten Forscher im Grunde genommen nicht über Ver- 
mutungen hinausgekommen sind, findet bei der von uns ange- 
wandten Hertwigschen Terminologie in sich selbst ihre Lösung, 
da die Reduktion des Uhromatins nur mit der Reduktion der 
Chromosomenzahl, d. h. in der zweiten Reifeteilung. erfolgen kann. 


d) Der Umbildungsprozess der Spermatiden in das 
befruchtungsfähige Spermium. 

Die aus der zweiten Reifeteilung hervorgegangenen Chromo- 
somen liegen wieder dicht aneinander, gerade so, wie wir es schon 
nach der ersten Reifeteilung beobachten konnten; sie sind von 
nun ab nicht mehr zählbar, sondern stellen je nach der Aufsicht 
des Beobachters einen einheitlichen Chromatinklumpen von bald 
dreieckiger, bald fünfeckiger Gestalt dar. Dieser Klumpen oder 
Kern, der von keiner Membran umgeben ist, rundet sich all- 
mählich ab, wird dadurch kleiner und liegt noch eine längere 
Zeit im Zentrum einer polygonalen Zelle, die wir als Spermatide 
zu bezeichnen haben (Taf. IX, Fig. 37 a—f). 

Scheben, der als erster den Ausdruck „Kern“ für die 
CUhromatinansammlung der Spermatiden rügt, kommt zu dem 
Schluss: „‚Kern‘ nenne ich beim Spermatid die chromatischen 
Elemente — Kernvakuole, für die chromatischen Elemente behalte 
ich die Bezeichnung ‚Chromosoma' bei.“ 

Dieser Ansicht schliesst sich auch Struckmann an, da 
auch er bei Strongylus filaria das Uhromatin der Spermatide von 
einem „homogenen Hof“ umgeben findet. Ich kehre jedoch zu 
der alten, wenn auch ungenauen Bezeichnung zurück und ver- 


Über die Spermio- und Oogenese der Selerostomum-Arten ete. 223 


stehe unter „Kern“ der Spermatide nur das Chromatin, da ich 
dasselbe zwar in einer etwas helleren Plasmazone sah, die aber 
keineswegs scharf abgegrenzt war. 

Die weiteren Veränderungen an der jungen Spermatide 
führen nun nicht, wie man vielleicht annehmen könnte, in gerader 
Richtung ihrem Endziele der typischen, kugeligen Spermatozoen- 
form der Nematoden zu, sondern zu einer grossen Reihe teils 
ganz extremer Entwicklungsstadien, bevor das reife, befruchtungs- 
fähige Spermium ausgebildet wird. { 

Diese merkwürdige und in ihrem Resultat noch nicht völlig 
aufgedeckte Erscheinung ist von anderen Nematoden her schon 
lange bekannt und von Leuckart in seinem Werke „Menschliche 
Parasiten“ hervorgehoben worden. 

„Bei der Mehrzahl der Nematoden“, schreibt Leuckart, 
„erliegen diese Samenkörper noch einer nachträglichen Meta- 
morphose. Sie ist bei den einzelnen Arten mehrfach verschieden 
und läuft in der Regel erst in den Geschlechtsorganen des weib- 
lichen Tieres ab. Bei den Strongyliden nimmt das Samenkörperchen 
durch Streckung des Protoplasmas eine bald birnenförmige, bald 
auch schirmförmige oder zylindrische Gestalt an... Der Kern 
liegt dann nicht selten in Stäbchenform an dem einen Ende des 
Samenkörpers.“ 

Bei der Metamorphose des Sclerostomidenspermiums lassen 
sich nun zwei Hauptstadien unterscheiden, nämlich: 1. in der 
Vesicula seminalis des Männchens die Ausbildung langgestreckter 
Spermatiden, die ich als „Ejakulationsstadien“ bezeichnen möchte, 
und 2. im Uterus die Umbildung des Ejakulationsstadiums in 
das kugelige „Befruchtungsstadium“ oder reife Spermatozoon. 


1. Die Ausbildung der Ejakulationsform. 


Der kuglige Kern der Spermatide beginnt nach einer 
längeren Ruhepause nach der Zellperipherie zu wandern, bevor 
er jedoch dieselbe erreicht hat, tritt eine Streckung der Sper- 
matide ein und zwar in einer der Kernbewegung entgegengesetzten 
Richtung (Taf. IX, Fig. 35 a und b). Hierdurch wird aus der 
polygonalen Samenzelle ein kurzer, wurstförmiger Körper, an 
dem man eine heteropole Hauptachse unterscheiden kann, deren 


einer Pol vom Kern eingenommen wird. 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.S3. Abt. II. 15 


224 Kurt Kühtz: 


Während nun der Kern in gleicher Richtung weiter der 
Zellperipherie zustrebt, geht seine Gestalt in eine ovale, schliess- 
lich zuckerhutförmige über (Taf. IX, Fig. 39 a und b). Das Cyto- 
plasma, das ihn bislang umlagerte, ist bis auf eine feine, dünne 
Randschicht reduziert und liegt zum grössten Teil als breiter, 
plumper Anhang hinter ihm. 

Es ist leicht verständlich, dass man bei weiterer Streckung 
des Plasmas die folgenden Stadien nicht mehr an Schnittpräparaten 
verfolgen kann; ich machte daher von frisch geöffneten Hoden 
Ausstriche und fixierte diese in Osmiumsäuredämpfen 1—2 Minuten. 
Derartig gewonnene Präparate färbte ich meist mit Giemsa- 
Lösung, May-Grünwald-Lösung oder auch Böhmers Häma- 
toxylin. 

Diese Ausstriche ergaben stets sehr instruktive Bilder, 
die jedoch teils so weit von den Schnittpräparaten abwichen, 
dass ich bei der Besprechung dieser Methode noch einen Augen- 
blick verweilen muss. 

Am auffälligsten war jedenfalls der Grössenunterschied ; so 
zeigten z. B. junge Spermatiden, deren Durchmesser an Schnitt- 
präparaten nie mehr al$ 4 u betrug, eine Grösse von 6 bis 10 u. 
In gleichem Maße erschien aber auch das Chromatin umfang- 
reicher und vor allen Dingen nicht so kompakt. Die Kerne der 
jungen Spermatiden liessen bei der Giemsa-Färbung stets ein 
sehr feines, ziemlich lockeres Knäuel erkennen, das ich bis in das 
zuckerhutförmige Kernstadium verfolgen konnte; erst von hier 
ab erschien der Kern, indem er allmählich an Tinktionsfähigkeit 
verlor, homogen und unterschied sich betreffs seiner Grösse kaum 
von den Kernen der Schnittpräparate (Taf. IX, Fig. 40—42). 

In Anbetracht dieser differenten Chromatinbilder machte ich 
auch von den Reifeteilungen Ausstriche, die gleichfalls wesent- 
liche Abweichungen darboten. Ich gebe aus diesen Präparaten 
eine Mitose wieder (Taf. IX, Fig. 43), einerseits zum Vergleich 
mit meinen übrigen Figuren, andererseits aber, um auf die grosse 
Ähnlichkeit mit den von Gulick für Heterakis vesicularis ab- 
gebildeten Verhältnissen hinzuweisen, die aus meinen Schnitt- 
präparaten niemals hervorgegangen wäre. 

Es ist mancherlei für und wider die Ausstrichpräparate 
gesprochen worden, und ich habe teils selbst die Überzeugung 
gewonnen, dass manche Verhältnisse, wie z. B. die Lagerung der 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 225 


Chromosomen, sicherlich künstlich verändert werden; immerhin 
glaube ich aber, dass sie neben Schnittpräparaten gut zu ver- 
wenden sind. Vielleicht würden durch Ausstriche manche Meinungs- 
verschiedenheiten, die im Grunde auf eine etwas andere Behand- 
lungsmethode des Materials zurückzuführen sind, aus dem Wege 
geräumt werden, denn das eine geht doch aus obigem klar her- 
vor: Unsere Objekte büssen durch die Fixationsmethoden und 
besonders durch die weitere Behandlung viel an Realität ein. 

Wir hatten die Spermatiden bis zur zuckerhutförmigen 
Kernbildung kennen gelernt, betrachten wir nun die weiteren 
Verhältnisse an Ausstrichen. 

Die Spermatide, die wir jetzt schon mit Recht als wurm- 
förmig bezeichnen können, streckt sich immer mehr und geht 
dadurch aus ihrer anfangs plumpen Gestalt in eine schlanke, 
meist gewundene Form über. Die den vorn zugespitzten, hinten 
sich allmählich wieder abrundenden Kern umhüllende Plasma- 
schicht ist so fein geworden und liegt dem Kern so dicht auf, 
dass sie nicht mehr wahrnehmbar ist. Unmittelbar hinter dem 
Kern, den wir dem Kopf des Wirbeltierspermiums gleichsetzen 
können, findet sich eine seichte Einbuchtung des — wie ich stets 
sagen werde — „wurmförmigen Plasmaanhanges“, wodurch der 
Kopf noch mehr hervortritt (Taf. IX, Fig. 44 a—d). 

Der wurmförmige Anhang hat an Färbbarkeit stark ver- 
loren und streckt sich etwa acht- bis zehnmal so lang als der 
Kopf nach hinten; er hat eine warzige Oberfläche und zeigt am 
Hinterende eine keulenförmige Verdickung. 

In diesem Protoplasma-Anhang konnte ich häufig bei den. 
verschiedensten Färbmethoden Körperchen feststellen, von denen 
am konstantesten ein sichel- oder kappenförmiges im ange- 
schwollenen Hinterende war. 

Bei der Heidenhainschen Färbung erschienen oft zahl- 
reiche, wenn auch schwach tingierte Körnchen, die im ganzen 
Plasma-Anhang verteilt waren (Taf. IX, Fig. 45 a—c), während 
bei einem Sclerostomum vulgare sowohl Safranin wie Gentiana- 
violett an den ersten Umwandlungsstadien einen stark gefärbten, 
stabförmigen Körper zu erkennen gab, der aus dem Kern hervor- 
ging und am hinteren Ende allmählich in die Plasmafärbung über- 
ging (Taf. IX, Fig. 46 a—d). 


15* 


226 Kurt Kühtz: 


Es legt dies die Vermutung nahe, dass ein Teil des Chro- 
matins in den wurmförmigen Anhang einwandert, was ohne 
Schaden für die Chromatinmasse geschehen könnte, da, wie wir 
des weiteren sehen werden, der Anhang nicht wie der Schwanz 
des Wirbeltierspermiums beim Eintritt ins Ei verloren geht. 

Bei einem nach May-Grünwald gefärbten Ausstrich 
zeigte auch der Kern zwei differente Zonen. Der grössere Teil 
des Kopfes erschien blass rosa, während kurz vor dem Plasma- 
Anhang eine dunkler gefärbte Partie lagerte (Taf. IX, Fig. 47). 
Ich glaube dieser Differenz keine weitere Bedeutung zusprechen 
zu dürfen und möchte auch von vornherein die Annahme, es 
könne sich hier vielleicht um ein Uentrosom entsprechend dem 
Wirbeltierspermium handeln, zurückweisen. Denn einerseits ging 
aus der Grösse des besagten Körpers die untrennbare Zugehörig- 
keit zum Kern zu klar hervor, andererseits wäre es doch höchst 
merkwürdig, wenn gerade an dieser Stelle das Centrosom auf- 
treten sollte, wo es sonst während der ganzen Spermiogenese 
wegen seiner minimalen Grösse nur wenig auffiel. 

Mit dieser lang wurmförmigen Gestalt ist das Ende der 
Spermatidenentwicklung im Hoden, d.h. das „Ejakulationsstadium*, 
erreicht, das in ungeheuren Mengen wirr durcheinander geschlungen 
die Vesicula seminalis des Männchens erfüllt, bereit in die weib- 
lichen Geschlechtsorgane übergeführt zu werden. 

Da ich bei allen drei Arten, die ich untersuchte, diese so 
eigentümliche Form wiederfand, verdient sie wohl als besonders 
wichtiges und auffälliges Merkmal der Selerostomiden - Familie 
hervorgehoben zu werden. 


32. Die Ausbildung der Befruchtungstorm. 


Öffnet man ein Weibchen von Sclerostomum, so findet man 
im untersten Teil des Uterus das gleiche Bild wie in der 
Vesiceula seminalis,. das Pöppel mit folgenden Worten beschreibt: 

„Die sowohl in der Samenblase wie im Endteil der weib- 
lichen Genitalröhre vorhandenen männlichen Geschlechtsprodukte 
weichen ebenfalls von der sonst bei Strongyliden gewöhnlichen 
Form erheblich ab und ähneln den von Leuckart bei Oxyuris 
ambigua abgebildeten. Man kann an diesen Spermatozoen deutlich 
einen Kopf und einen schwanzartigen Anhang unterscheiden. Von 
der Gesamtlänge von 36,8 « kommen auf den kugligen, einen 


Uber die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 227 


blassen Kern enthaltenden Kopf 2,4 u. Der Schwanzanhang erreicht 
an seiner breitesten Stelle (etwas über der halben Länge) eine 
Breite von 1,5 « und lässt manchmal eine leichte Querstreifung 
erkennen.“ 

Ein Blick auf Pöppels Taf. I, Fig. 13c genügt, um zu 
erkennen, dass er den beobachteten Spermien eine falsche Deutung 
gegeben hat. Wahrscheinlich verleitet durch die Leuckartschen 
Angaben bei Oxyuris hält Pöppel das keulenförmige Ende des 
Plasmaanhanges für den Kopf. „Der blasse Kern“ entspricht 
augenscheinlich dem von mir oben beschriebenen sichel- oder 
kappenförmigen Körper, während die „leichte Querstreifung“ den 
Körnchen im ganzen Protoplasmaanhang oder seiner warzigen 
Oberfläche gleichwertig sein dürfte. 

Immerhin ist es ja höchst auffällig und unverständlich, dass 
Pöppel der sich nach den meisten Methoden stark färbende 
Kern nicht aufgefallen ist. Vielleicht liesse sich dieser Mangel 
dadurch erklären, dass Pöppel, der ja der Spermio- und Oogenese 
überhaupt nur geringes Interesse entgegengebracht hat, die Reifung 
der Spermatiden an Präparaten studiert hat, die für andere Zwecke 
angefertigt waren und die Kernverhältnisse nur schlecht hervor- 
treten liessen. 

Die ejakulierte Spermamasse hat, wie schon gesagt, eine 
abermalige und zwar reziproke Entwicklung durchzumachen. Folgt 
man dem Uterus aufwärts, so sieht man, wie sich das Spermaknäuel 
allmählich entwirrt, indem sich jede Spermatide mit ihrem kugligen 
Ende an die Wand des Uterus anheftet und den Kopf in das 
Lumen desselben vorstreckt. Dabei sind schliesslich die einzelnen 
Spermatiden so genau einander parallel gerichtet und besetzten 
das gesamte Uterusepithel so dicht, dass ich sie anfangs für Zotten, 
entsprechend den bei Ascaris megalocephala beschriebenen, hielt, 
bis ich aus dem weiteren Entwicklungsverlauf den wahren Tat- 
bestand erkannte (Taf. IX, Fig. 48). 

Legte schon die Ausbildung der schlanken Ejakulationsform 
den Gedanken einer leichten Beweglichkeit nahe, so liess mich 
diese zweifellos eine aktive Bewegung voraussetzende Wanderung 
der Spermatiden im Uterus nicht mehr an meiner Vermutung 
zweifeln. 

Ich untersuchte daher in der von Strubell für Heterodera 
Schachtii angegebenen Weise die der Vesicula seminalis oder auch 


228 Kurt Kühtz: 


dem unteren Uterusteil entnommenen Spermamassen in einer 
/sproz. NaCl-Lösung, aber leider ohne Erfolg. Auch der Zusatz 
weiblicher Leibeshöhlenflüssigkeit zum Spermium brachte mich 
meinem Ziele nicht näher. Da Strubell die Spermatozoen bis 
zu 2 Stunden lebend erhalten konnte, so musste der Grund meines 
Misserfolges in den verschiedenen Lebensbedingungen der beiden 
Entoparasiten liegen. Die Sclerostomiden bedürfen eben einer 
Temperatur, die der eines Pferdes entspricht, welcher Umstand 
für Heterodera fortfällt. 

Um diesen Bedingungen nach Möglichkeit gerecht zu werden, 
bediente ich mich des „hängenden Tropfens“ nach Art der 
Bakteriologen und beobachtete das Spermium auf einem heizbaren 
Objekttisch, der stets auf 35—40° gehalten wurde. Der hohl- 
geschliffene Objektträger mit Vaselinring sowie das Deckgläschen 
wurden schon vorher auf 35° erwärmt, sodann ein gerade in 
copula befindliches Männchen geöffnet und, um ein vorzeitiges 
Eintrocknen zu verhindern, unter beständigem Behauchen die 
Geschlechtsprodukte aus der Vesicula seminalis auf das Deckglas 
übertragen und dieses schnell dem Vaselinring aufgedrückt. 

Bei dieser Versuchsanordnung konnte ich denn auch an 
einzeln liegenden Spermatiden eine zitternde Bewegung des ganzen 
langgestreckten Körpers wahrnehmen, durch die allmählich die 
Spermatide fortbewegt wurde. Dass es sich hier um irgend 
welche Strömungserscheinungen gehandelt hat, die durch Ver- 
dunstung hervorgerufen sein könnten, lässt sich nicht annehmen, 
da ich beim Öffnen der kleinen „feuchten Kammer“ auch am 
folgenden Tage die Spermamassen noch in ihrer serösen Flüssig- 
keit vorfand. 

Trotz alledem erscheint mir die beobachtete Bewegung für 
die oben geschilderte Wanderung der Spermatiden nicht ausreichend 
zu sein und ich halte es daher nicht für ausgeschlossen, dass 
unter den normalen Lebensbedingungen den Spermatiden eine 
grössere Beweglichkeit eigen ist. 

Die an die Uteruswand angehefteten Spermatiden werden 
nun je weiter man den Uterus nach oben verfolgt wieder kürzer 
und zwar so gleichmässig, dass sie sich in ihrer Gesamtheit stets 
auf dem gleichen Entwicklungsstadium befinden. Ich habe diese 
Vorgänge, die sonst keine wesentlichen Veränderungen am Kern 
oder Plasmaanhang hervorrufen, in Fig. 49a—e, Taf. IX, wieder- 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten ete.. 229 


gegeben, die aus einem Ausstrich herrühren. Das kuglige Ende 
des wurmförmigen Anhangs tritt zuletzt etwas stärker hervor 
und in diese Blase. den Rest des Protoplasmas, das jetzt seine 
Färbbarkeit völlig verloren hat, wird der immer noch gestreckte 
Kern hineingezogen, so dass sich das befruchtungsreife Spermatozoon 
als eine Kugel darstellt, in deren Innerem ein länglicher Stab, 
der Kern, liegt. 

Es ist somit die Vermutung O. Meyers, dass „der Hof“, 
welcher den Spermakern von Sclerostomum tetracanthum umgibt, 
aus „achromatischer Substanz des Plasmas gebildet werde“, durchaus 
richtig. Bei den meisten Fixationsmethoden nimmt das Kernplasma 
freilich eine ellipsoide Gestalt an und so ist auch von O. Meyer 
das Sperma von Strongylus tetrancanthus beschrieben worden. 

Hiermit sind also die Entwicklungsvorgänge der männlichen 
(Geschlechtszelle abgeschlossen, und ich werde erst bei Besprechung 
der Eibefruchtung auf die weiteren Schicksale des Spermas 
zurückkommen. 


e) Allgemeine Erörterungen die Umbildung und 
Maße der Spermatiden betreffend. 


Bevor ich jedoch zur Oogenese übergehe, halte ich es für 
gerechtfertigt, dieser so hochinteressanten Spermatidenentwicklung 
noch ein paar Worte im allgemeinen zu widmen. 

So ist zuerst die Frage zu erledigen: Wie schildert Pöppel 
diese seltsamen Vorgänge in seiner Arbeit über Strongylus 
armatus? Zweitens: Was für eine Bedeutung hat die Ausbildung 
der langgestreckten Spermaform, wenn sie nicht ein Mittel zur 
leichteren Befruchtung darstellt? Und drittens: Sind die kugligen 
Formen wirklich die befruchtenden oder vielleicht degenerierte 
Spermatozoen ? 

Die erste Frage ist leicht zu beantworten. Von den ganzen 
Entwicklungsvorgängen im Uterus finden wir bei Pöppel kein 
Wort und die einzige Stelle, die vielleicht auf eine ähnliche 
Beobachtung hinweisen könnte, sei im folgenden wiedergegeben: 
„In der hier beschriebenen Form — es handelt sich um die schon 
oben zitierte Schilderung — präsentieren sich die dem lebenden 
oder eben getöteten Wurm entnommenen Spermatozoen jedoch 
nicht immer. Daneben findet man oft solche, bei denen sich der 
Schwanz ösenartig an das Köpfchen anlegt und nur weniges über 


230 Kurt Kühtz: 


letzteres hinausragt (Fig. 13c). Seltener lassen sich Formen auf- 
finden, bei denen das völlig zusammengerollte Samenelement wie 
der Embryo im Ei in einer äusserst feinen, glashellen, struktur- 
losen Hülle liegt (Fig. 13a). Dass diese verschiedenen Gestalten 
jedoch ausgebildete und normale Entwicklungszustände repräsen- 
tieren, wage ich nicht zu behaupten.“ 

Sowohl aus dieser Schilderung wie aus den Fig. 13a und c, 
Taf. I, geht mit Sicherheit hervor, ‚dass Pöppel entweder 
Kunstprodukte beobachtete, die er wegen ihrer kugligen Form 
auf das typische Nematodenspermium zurückzuführen suchte und 
deshalb erwähnt oder aber Stadien vor Augen hatte, bei denen 
der Kern schon fast ganz in den blasigen Anhang eingezogen 
war und sich letzterem seitlich angelegt hatte, wie man dies hin 
und wieder findet. Wie wenig Realität er seinen eigenen Beob- 
achtungen zutraut, das beweist zur Genüge der letztzitierte Satz. 

Die richtige Antwort auf die zweite Frage zu finden, ist 
dagegen schwierig und ohne hypothetische Voraussetzungen kaum 
zu erbringen. 

Struckmann, der bei Strongylus filaria nicht minder 
komplizierte Entwicklungsvorgänge antraf, durch die sich in der 
Vesicula seminalis die Spermatide nach Ausstossung zweier 
Plasmakörper in eine langgestreckte, birnförmige Gestalt ver- 
wandelt, hat nur die Plasmaveränderung in Betracht gezogen und 
kommt daher zu dem scheinbar berechtigten Schluss, dass es sich 
nur um die Erzielung einer Spermaform handelt, „der man dem 
Bau nach eine grössere Beweglichkeit zumuten darf, als der 
bedeutend grösseren und plumperen Form der Vorstadien“. 

Dass die schlanke Form nicht unbedingt leichte Beweglichkeit 
verbürgt, haben wir oben schon erfahren. Ich glaube daher, dass 
die Beweglichkeit der Spermatiden erst an zweiter Stelle Berück- 
sichtigung finden darf, der Hauptzweck jener Ausbildung dagegen 
auf einer anderen Seite zu suchen ist. 

Die keulenförmige Anschwellung des Plasmaanhanges sowie 
die nachher beobachtete Anheftung vermittels desselben bestimmten 
mich zu der Annahme, dass die — wie ihre weitere Umwandlung 
andeutet — zweifellos noch nicht voll entwickelten Spermien im 
Uterus einem längeren Reifeprozess unterliegen und hierfür die 
zweckmässigste Gestalt zur Ausbildung gelangt, die nicht nur ver- 
einzelten Spermatiden, sondern der ganzen Masse einen sicheren 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten ete. 231 


Platz im Uterus verbürgt. Im Gegensatz zu Strongylus filaria 
wird aber bei Sclerostomum der Plasmakörper zur weiteren Er- 
nährung verbraucht und dabei in seiner Gesamtheit bei Bildung 
der schlanken Form, die nebenher eine leichtere Übertragung in 
die weiblichen Geschlechtsorgane gestattet, beibehalten. 

Da nun das Spermaknäuel das Ende des Uterus gleichsam 
verstopft und einerseits den Austritt schon befruchteter Eier ver- 
hindert, andererseits aber der Gefahr unterliegt, in toto hinaus- 
gedrängt zu werden, so ordnen sich die Spermatiden in bekannter 
Weise. Hierdurch wird sowohl die günstigste Platzausnutzung 
erzielt als auch im Zentrum des Uterus eine freie Passage für 
die Eier geschaffen. 

Sollte man ausser der blossen Anheftung mit dem Hinter- 
ende auch eine Ernährung von der Uteruswand aus vermuten, 
so liesse sich hiergegen einwenden, dass man weder in anderen 
Klassen des Tierreiches noch bei Nematoden eine solche Be- 
festigungsweise beobachtet hat, vielmehr finden wir gerade, dass 
sich die Ascarisspermien mit dem Kopf an die Zotten der 
Uteruswand anlegen, freilich abgesehen von der Scheben schen 
Behauptung, dass der Kern bei Ascaris dem Hinterende des 
Spermas entspricht. Zieht man aber in Erwägung, dass das 
UÜterusepithel bei Sclerostomum der Zotten, somit der Zufluchts- 
stätte der Spermatozoen, völlig ermangelt, so ist es wohl denkbar, 
dass sich die Spermatozoen in diesem Falle mit der breitesten 
Partie ihres Körpers, d. h. mit dem Hinterende und nicht mit 
dem spitzen Kopf, anheften werden; eine Befestigung mit der 
gesamten seitlichen Länge des Körpers kommt nicht in Betracht, da 
sie eine weit grössere Uterusfläche zur Voraussetzung haben müsste. 

Die dritte aufgeworfene Frage lässt sich in befriedigender 
Weise von mehreren Gesichtspunkten aus entscheiden. 

Für die kuglige Form als Befruchtungsstadium spricht a priori 
die Beobachtung an anderen Nematoden. bei denen ja mit Aus- 
nahme von Oxyuris ambigua immer nur kuglige oder ellipsoide, 
mindestens dieser (restalt sehr ähnliche Spermatozoen gefunden 
worden sind. Ausserdem befinden sich aber die Eier, die an 
den noch wurmförmigen Spermien vorbeipassieren, stets in vor- 
geschrittenen Teilungsstadien, während die ungeteilten Eier im 
obersten Uterusabschnitt nur auf kuglige Spermatozoen stossen. 
(ranz hinfällig wird aber obige Annahme durch das Experiment. 


232 Kurt Kühtz: 


Untersucht man einen frisch herauspräparierten. Uterus wie 
das Sperma bei der gleichen, oben geschilderten Versuchsanordnung 
auf dem heizbaren Objekttisch, so lässt sich an dem Abheben der 
Eihülle vom Eiplasma erkennen, dass die in den Uterus eintretenden 
Eier sehr bald befruchtet werden müssen. 

Einen solchen Befruchtungsvorgang habe ich trotz zahlreicher 
Versuche zwar nur einmal beobachten können, was sich vielleicht 
aus folgendem erklären lässt. Da der Uterus besonders an der 
Mündung des Eileiters sehr dieckwandig ist und somit für starke 
Vergrösserungen undurchsichtig, so sah ich mich gezwungen, den- 
selben vorher aufzuschlitzen. Dabei trat der grösste Teil der 
Eier heraus und es vermischten sich sämtliche Stadien befruchteter 
und unbefruchteter Eier untereinander. Findet also die Befruchtung 
schon im Anfangsabschnitt des Uterus statt, d. h. bald nach dem 
Eintritt des Eies, so wird es sehr schwer sein, eins dieser wenigen 
Eier — denn normalerweise treten sie einzeln hintereinander in 
den Uterus ein — unter der Masse der übrigen herauszufinden. 
Ausserdem kommt noch hinzu, dass das Ei selbst mit seinem 
Dotter das eindringende Spermium verdeckt. Dieses ist nämlich 
in frischem Zustand hyalin und man erkennt meist nur einen 
schwach bläulichen, langgestreckten Kern. 

Der von mir beobachtete Befruchtungsakt spielte sich im 
Anfangsteil des Uterus ab, letzterer war in diesem Fall nicht 
aufgeschlitzt worden und, da er nur wenig Eier enthielt, leidlich 
durchsichtig. Das Ei zeigte eine etwas vom Plasma abgehobene 
Hülle. In dem dadurch entstandenen Zwischenraum befand sich ein 
Körper, der halbkuglig über das Eisplasma hervorragte, während 
ein pseudopodienartiger Fortsatz schwach im Eisplasma sichtbar 
war. Allmählich drang nun dieser Körper amöboid weiter in das 
Innere des Eies vor, während der sehr grosse, blasige Eikern 
auf der entgegengesetzten Seite des Eies ruhte. Der Sperma- 
körper, denn nur um einen solchen konnte es sich hier handeln, 
der anfangs in seiner amöboiden Gestalt eine ziemliche Fläche 
einnahm, rückte bis fast ins Eizentrum vor, wurde unter be- 
deutender Volumenverminderung kuglig, dabei kompakter und 
somit zugleich sichtbarer; in seinem Innern zeigte er punkt- 
förmige Elemente, vielleicht Chromosomen, die ja auch Mulsow 
neuerdings am lebenden Spermium von Ancyracanthus cystidicola 
beobachten konnte. Währenddessen rückte der Eikern, indem er 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 233 


selbst etwas kleiner wurde und einen bläschenförmigen Körper 
aufwies, etwas gegen das Zentrum vor, kam jedoch dann bald 
zur Ruhe. 

Der ganze Vorgang spielte sich in einem Zeitraum einer 
3/, Stunde ab; weitere Veränderungen konnte ich trotz 2stündiger 
Beobachtung nicht mehr bemerken. 

Wenngleich es mir also nur einmal geglückt ist, den Be- 
fruchtungsvorgang zu verfolgen, so ist es doch so gut wie bewiesen, 
dass eben die kugligen Spermatozoen keine degenerierten Formen, 
sondern die reifen, befruchtenden sind, während die wurmförmige 
(Gestalt nur ein Übergangsstadium darstellt. 

Ich möchte nun am Schluss der Spermiogenese noch auf 
folgende Beobachtung zu sprechen kommen. Es sind im Uterus, 
wie wir gesehen haben, stets sämtliche Entwicklungsstadien lücken- 
los anzutreffen, die, da man doch in beiden Uteri die gleichen 
Verhältnisse vorfindet, eine ungeheure Spermaquantität voraus- 
setzen, welche der in der Vesicula seminalis nicht äquivalent zu 
sein scheint. Es ist daher durchaus unwahrscheinlich, dass die 
gesamte Spermamasse einem einzigen Ejakulat entsprechen sollte, 
und man muss wohl annehmen, dass entweder jedes Weibchen 
von mehreren Männchen nacheinander aufgesucht wird oder aber 
ein Männchen verweilt längere Zeit in Kopulation und die Sperma- 
masse rührt von mehreren Ejakulationen her. 

Ich halte letztere Annahme für die wahrscheinlichere, obwohl 
ich keinen strikten Beweis hierfür erbringen kann. Trifft man 
nämlich überhaupt Männchen, so befinden sie sich so gut wie 
immer in Kopulation und haften durch eine bräunliche Kitt- 
substanz fest der weiblichen Vulva an, wie ich dies oben schon 
erwähnt habe. 

Es wäre also wohl denkbar, dass die Pärchen längere 
Zeit, vielleicht einige Wochen, in copula verharren, und dass, 
sobald die Vesicula seminalis des Männchens durch Zuwachs 
wieder gefüllt ist, eine Ejakulation stattfindet. Für eine solche 
Periodizität haben wir ja in dem Entwicklungsverlauf mancherlei 
Anzeichen gefunden. In der Pause zwischen zwei Ejakulationen 
könnte nun ein Teil des im Uterus befindlichen Spermas seine 
weitere Entwicklung durchgemacht haben, und es liesse sich so 
die ganze Reihenfolge sowie die (uantität der Spermatozoen 
erklären. 


234 Köurit Keuchrtze 


Der Einwand, dass dem Weibchen hierdurch die Möglichkeit 
geraubt würde, seine Geschlechtsprodukte abzusetzen und neue 
Eier in den Uterus eintreten zu lassen, ist insofern nicht allzu 
schwerwiegend, da ja die Kopulationszeit immerhin nur von be- 
schränkter Dauer ist, die Kapazität des Uterus dagegen so 
beträchtlich, dass er schon einer grossen Eimenge Raum gewähren 
könnte. 

Dass jedoch ein Weibchen von mehreren Männchen auf- 
gesucht werden sollte, will mir schon wegen der festen Verbindung 
der beiden nicht sehr einleuchtend erscheinen, obgleich sich hier- 
durch wieder die geringe Anzahl der männlichen Individuen ver- 
stehen liesse. Experimentell diese Verhältnisse zu klären, scheint 
mir so gut wie ausgeschlossen. 

Ich glaube hiermit die bei der Spermiogenese von mir in 
Betracht gezogenen Fragen genügend klar gelegt zu haben und 
gehe nun zur Besprechung der Eientwicklung über. 


Die Entwicklung der weiblichen Geschlechtsprodukte. 


a) Die Keimzone. 


Wie bei allen anderen untersuchten Nematoden ähnelt das 
blinde Ende der: Eiröhre von Sclerostomum dem des Hodens so 
sehr, dass ich auf die obige Schilderung verweisen kann, nur 
kleine und nicht leicht in die Augen fallende Differenzen mögen 
hier noch Erwähnung finden. So wäre zuerst hervorzuheben, dass 
die Ureier durchschnittlich etwas grösser sind und besonders bei 
der Böhmerschen Hämatoxylinfärbung den achromatischen Faden, 
auf dem die chromatischen Brocken perlschnurartig liegen, deut- 
licher zeigen als die Ursamenkerne. 

Die weiteren Entwicklungsphasen verlaufen dagegen in der 
gleichen Weise, nur mit dem Unterschiede, dass sich beim Weibchen 
aus dem verstreuten Chromatin zwölf kurze stäbchenförmige 
Chromosomen ausbilden (Taf. IX, Fig. 52). 

Ich kann hierfür jedoch absolut keine einwandfreien Bilder 
bringen, denn da diese Stäbchen schon auf dem frühesten Ent- 
wicklungsstadium einen mehr oder minder deutlichen (Querspalt 
aufweisen, so wird hierdurch die Sicherheit des Zählens sehr 
beeinträchtigt. Sobald nämlich eins der peripher stehenden Stäbchen 
nicht senkrecht, sondern schräg zur Schnittebene steht, lässt es 


Uber die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 235 


sich nicht mehr entscheiden. ob man zwei dicht nebeneinander 
stehende Chromosomen oder nur die beiden Teile ein und des- 
selben Chromosoms vor sich hat. 


Eine Äquatorialplatte in der Polansicht, in der ich beim 
Männchen am besten die Zahl der Chromosomen feststellen konnte, 
fand ich leider kein einziges Mal, obwohl ich 12 Weibchen mikro- 
tomierte, d. h. gegen 24 Keimzonen studierte. 


Zieht man aber die weiter unten noch zu besprechenden 
Beobachtungen bei der Bildung der Richtungskörper zu Hilfe, so 
erscheint mir die Bestimmung zu zwölf Chromosomen vermittels 
eines Analogieschlusses nicht für allzu gewagt. 


Nähert man sich dem Ende der Keimzone, so trifft man 
auf das erste leichte Unterscheidungsmerkmal zwischen Hoden 
und Ovarium. Fanden wir dort bei einem Querschnitt etwa 
acht bis zehn Kerne auf einem Radius, so sind es hier höchstens 
vier bis fünf (vgl. Taf. VIII, Fig.9 und 10); die Ovarialröhre ist 
dementsprechend bedeutend dünner, was mit der feineren Rhachis- 
bildung zusammenhängt, andererseits ist die Keimzone beim 
Weibchen aber auch länger als beim Männchen. 


Im Eierstock konnte ich auch wieder die Zwischenkörperchen 
auffinden und zwar nicht nur wie beim Männchen peripher, sondern 
überall zwischen den Oogonienkernen verteilt, überdies in den 
verschiedensten Entwicklungsphasen, wie wir sie schon durch 
O0. Hertwig kennen gelernt haben. Freilich ist der Vorgang 
bei Sclerostomum insofern etwas anders, als es noch zur Bildung 
einer Kernmembran kommt, aber von Anfang an bleibt der Kern 
hinter der Grösse auch der gerade gebildeten Tochterkerne zurück. 
Überdies erscheinen die Chromosomen verschwommen und das 
gesamte Caryoplasma färbt sich mit Böhmers Hämatoxylin 
schwach violett (Taf. IX, Fig. 53). Aus diesen Bildern allein liesse 
sich eine Caryolyse noch nicht erraten; sie wird erst durch die 
folgenden Stadien erkennbar (Fig. 53 b—d). 

Die Chromatinbrocken verlieren immer mehr ihre Kontur, 
stossen aneinander und bilden nach und nach einen mehr oder 
minder zackigen Uhromatinklumpen, der sich in einem weiteren 
Stadium abrundet und schliesslich zu einer Vakuole wird. 


In dieser Form findet man die Körperchen bis weit in die 
Wachstumszone hinein und Struckmann bildet sie auch von 


236 Kurt Kihtze 


Strongylus filaria in seiner Textfigur D ab, ohne sie in seiner 
Arbeit zu erwähnen. 

Eine scharfe Grenze lässt sich zwischen Keim- und Wachstums- 
zone wiederum nicht ziehen. Denn da nach Flemming das Ende 
der Teilung mit der Auflösung des Tochterknäuels zusammenfällt, 
so müsste man die Keimzone bis kurz vor Beginn des Oviduktes 
rechnen, was aber, wie die weitere Entwicklung zeigen wird, wider- 
sinnig erscheint. 

b) Die Wachstumszone. 

Haben die Ureier, wie oben erwähnt, ihre letzte Teilung 
durchgemacht, so tritt im Kern ein feines lockeres Gerüst auf, 
in dem hie und da Chromatinbrocken, die früheren Chromosomen, 
ruhen (Taf. IX, Fig. 54). 

Erfüllte das Kerngerüst bisher das ganze Kernlumen, so 
zieht es sich jetzt zusammen, das Uhromatin verteilt sich auf 
ihm und es stellt sich nun als ein dichtes färbbares Fadengewirr 
dar, das meist an die Peripherie des Kernes gerückt ist, manch- 
mal jedoch auch im Zentrum angetroffen wird (Taf. IX, Fig. 55). 
Wir haben also hier ein typisches dichtes Spiremstadium vor uns, 
das bei seiner weiteren Entwicklung den Eindruck macht, als 
solle es zu einer neuen Teilung des Kernes kommen. | 

Der bisher zackige Faden verdickt sich allmählich, wird 
homogen färbbar und wandelt sich schliesslich in ein lockeres 
Spiremstadium um (Taf. IX, Fig. 56). 

Hiermit ist aber auch zugleich der Höhepunkt der Ent- 
wicklung erreicht; der Faden wird jetzt von Zeit zu Zeit wieder 
dünner und minder färbbar, während sich an den Zwischenstellen 
das Chromatin zu Punkten, nie aber zu Stäbchen anhäuft 
(Taf. IX, Fig. 57), so dass schliesslich ein Stadium erreicht wird, 
das dem in Fig. 54 dargestellten recht ähnlich sieht, nur dass hier 
der Faden stets glatt erscheint und niemals das zackige, ungleich 
tingierbare Aussehen erhält wie in obiger Figur. 

Diese Chromatinbrocken verschmelzen jetzt miteinander und 
bald zeichnen sich ein oder zwei durch besondere Grösse vor den 
anderen aus. Die Fäden werden immer schwächer und sobald 
sämtliches Chromatin zu einem grossen, ovoiden Nukleolus ver- 
schmolzen ist, lässt sich von dem Fadengerüst so gut wie nichts 
mehr nachweisen (Taf. VII, Fig. 11— 12, Textfig. A, S. 205, Text- 
figur B und (, S. 238). 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. Ba7 


Dieser Zustand wird kurz vor der Ablösung der Geschlechts- 
zellen von der Rhachis erreicht; der Nukleolus wird durch Eisen- 
hämatoxylin stark geschwärzt, während die Färbung mit Böhmer - 
schem Hämatoxylin bei weitem nicht so intensiv ist als bei in 
Teilung begriffenem Chromatin. 

Mit dieser Chromatinverschmelzung Hand in Hand geht 
eine wichtige Veränderung der Kerngestalt vor sich. Bis zum 
lockeren Spiremstadium und dessen ersten Auflösungsphasen hatte 
der Kern stets die gleiche Grösse und Kugelform. Mit dem 
Augenblick aber, wo sich die eine Chromatinansammlung durch 
ihre Masse auszeichnet, nimmt der Kern die Gestalt eines Ellip- 
soides an, dessen Hauptachse mit dem Radius der Ovarialröhre 
zusammenfällt, gerade so wie wir es schon beim Männchen 
kennen gelernt haben. 

Ich habe bisher nur die Veränderungen am Kern berück- 
sichtigt und werde jetzt die cytoplasmatischen Vorgänge im 
Zusammenhang besprechen. Ich habe oben kurz darauf hin- 
gewiesen, dass sich etwa in der Mitte der Oogonienteilungen 
die ersten Zellgrenzen im Syneytium bemerkbar machen, ein 
Vorgang, den ich, wie bei der Rhachisbesprechung erwähnt, den 
tertiären Verzweigungen derselben zuspreche. Das Cytoplasma 
ist hier ausserordentlich gering und wird auch nur um weniges 
vermehrt, bis die Zellen in die Wachstumszone eintreten. 

Hier gelingt es zum erstenmal besonders an den medial 
gelegenen (reschlechtszellen eine kegelförmige Gestalt zu kon- 
statieren, deren Spitze nach der Rhachis hinweist, während der 
Kern an der Kegelbasis liegt. Je mehr nun die Zelle wächst, 
desto deutlicher wird die konische Form, bis schliesslich je ein 
Kegel von der zentralen Rhachis bis zur Ovarialwandung reicht 
(Textfig. A, S. 205) 

Erschien das Uytoplasma bislang homogen. so machen sich 
jetzt an konserviertem und mit Böhmers Hämatoxylin gefärbtem 
Material hellere und dunklere Flecke bemerkbar, die auf eine 
vakuolenförmige Dotteransammlung im lebenden Zustande hin- 
deuten. Dieses fleckige Aussehen nimmt mit der Vermehrung 
des Cytoplasmas an Deutlichkeit zu und bald treten zwischen den 
helleren Flecken überall zerstreut im Plasma kleine, von Anfang 
an stark mit Böhmers Hämatoxylin tingierbare Körnchen auf, 
deren Färbbarkeit sogar die des Chromatinnukleolus übertrifft 


238 Ronnie aRSuch ze 


(Textfig. B). Die Geschlechtszellen haben sich von der Rhachis 
losgelöst — obwohl diese noch eine längere Zeit zwischen den 
Zellen zu verfolgen ist — und haben zugleich ihre Kegelform 
eingebüsst. Sie sind jetzt abgeflacht, scheibenförmig geworden 


und häufig bedeckt eine Basisecke die der nebenliegenden Zelle, 
so dass die jungen Eier etwa eine Stellung wie die Flügel eines 
Ventilators haben (Textfig. ©). 


Die weitere Entwicklung besteht jetzt nur noch in einem 
allgemeinen Grösserwerden der gesamten Teile, wobei besonders 
die stark färbbaren Körnchen im Cytoplasma in die Augen fallen. 


Über die Spermio- und Oogenese der Selerostomum-Arten etc. 239 


Es sind ähnliche Gebilde von den verschiedensten Autoren 
in derselben Entwicklungsstufe des Eies beschrieben worden, stets 
aber auch unter einer anderen Bezeichnung. 

Schneider, der diese Verhältnisse an lebenden und konser- 
vierten, aber ungefärbten Ascariseiern studierte, spricht von dem 
Erscheinen grosser, heller Leeithinkügelchen, die bei der Bildung 
der Richtungskörper verschwinden. Dieselben tebilde beschreibt 
van Beneden von Ascaris als „corpuscules refringents“, enthält 
sich aber sonst einer Äusserung über ihre chemische Beschaffenheit. 

Durch H. Marcus werden wir bei Ascaris canis über 
ähnliche Gebilde unterrichtet, die er für Glykogen anspricht und 
durch Jodreaktion nachweist: „In der Rhachis fand ich kein 
Glykogen; in der Ovocyte dagegen reichliche, mahagonibraune 
Kugeln in unregelmässiger Verteilung. Der Kern blieb stets, 
wie auch Barfurth betont, glykogenfrei. Die Glykogenauf- 
speicherung hat ihr Maximum erreicht, wenn die Ovocyte sich 
von der Rhachis lostrennt ...... Jetzt soll die Zelle auch die 
grösste Energie leisten, denn die Befruchtung, die Reifeteilungen 
und das Schalenbilden stehen ihr bevor.“ 

Bei Strongylus filaria schliesslich äussert sich Struckmann 
folgendermassen: „Bemerkenswert an ihnen (Geschlechtszellen) ist 
ausser der Dotterbildung das Auftreten von kleinen und grösseren 
Eiweisstropfen, die mit der Grössenzunahme der Oogonien heran- 
wachsen und die auch bei anderen Nematoden beschrieben werden 
(Ziegler, Schneider). Beide Bestandteile, Dotter wie Ei- 
weisstropfen, scheinen den Oogonien auf dem Wege der Rhachis 
zugeführt zu werden, doch konnte ich ihren Entstehungsort nicht 
feststellen.“ An einer späteren Stelle sagt Struckmann: „Ein 
anderer Vorgang, der sich in der Reifeperiode vollzieht und der 
schon von anderen Autoren beobachtet wurde, betrifft die oben 
erwähnten Eiweisstropfen. Dieselben lagen bisher im Innern des 
Eies in der Nähe des Keimbläschens. Sie wandern jetzt aber 
zur Peripherie und indem sie miteinander verschmelzen, nimmt 
ihre Zahl immer mehr ab. So gelangen sie an die Oberfläche, 
wo sie ausfliessen und die innerhalb der Eihaut gelegene, das Ei 
einhüllende Flüssigkeit bilden.“ 

Alle Autoren stimmen also darin überein, dass es sich beı 
diesen Körnchen um Nährstoffansammlungen handelt, die mit der 


Schalenbildung des befruchteten Eies verschwinden und somit 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.&3. Abt. II. 16 


240 Kurt Kühtz: 


höchstwahrscheinlich bei dem Aufbau der Schale Verwendung 
finden. Ich schliesse mich dieser Auffassung um so fester an, 
als ich schon vor Kenntnis der Analogiefälle zu derselben Über- 
zeugung gekommen war (vgl. Textfig. D und E, S. 241, F und G, 
S. 244 und H, S. 245. 

Was nun die chemische Seite der fraglichen Körperchen 
anbelangt, so halte ich die Schneidersche Anschauung für 
falsch. Denn da Leeithin bekanntlich in Alkohol löslich ist, so 
müsste sich an Schnittpräparaten, die doch reichlich mit allen 
Alkoholstufen in Berührung kommen, auch keine Spur von diesen 
Körnchen nachweisen lassen. 

Auch der Marcusschen Vermutung kann ich nicht bei- 
stimmen. Ich habe sowohl an frischem wie an Alkohol-Material die 
charakteristischen Glykogenproben vollzogen, aber jedesmal mit 
negativem Erfolg, so dass wenigstens bei Sclerostomum von 
Glykogen nicht die Rede sein kann. 

Struckmann, dem die Arbeit Marcus’ wohl unbekannt 
war, hat mit der Bezeichnung „Eiweisskugeln“ ein sehr vorsichtiges 
Urteil gefällt, gegen das sich nichts einwenden lässt, denn bei 
unserer noch so mangelhaften Kenntnis über die Zusammensetzung 
mikroskopischer Körper können wir heute noch keinen besseren 
Schluss ziehen. 

c) Die Reifezone. 

Ich komme jetzt auf die weiteren Veränderungserscheinungen 
der chromatischen Substanz zurück und damit zugleich auf die 
wichtigste Entwicklungsphase, die Teilzone oder die Bildung der 
Richtungskörper. 

Wir hatten die Betrachtung des Kerns an der Stelle abge- 
brochen, wo die Eizelle losgelöst von der Rhachis als Oocyte in 
den Ovidukt und somit in die Reifezone eintritt. Ich folge dem 
Beispiele van Benedens, indem ich zwei Perioden unterscheide. 
Die erste Periode reicht bis zum Eindringen des Spermiums, die 
zweite von hier bis zur Vereinigung der väterlichen und mütter- 
lichen Chromatinmassen. 

Van Beneden charakterisiert die erste Periode mit den 
Worten: „Au moment otı il se detache du rhachis ovarien l’oeuf n’est 
pas encore apte a recevoir le zoosperme“. Und in der Tat sehen 
wir bis zur Aufnahme des Spermas noch erhebliche Veränderungen 
an dem weiblichen Kern oder Keimbläschen vor sich gehen. 


Über die Spermio- und Oogenese der Selerostomum-Arten ete. 241 


1. Die erste Periode der Reifung. 

Der kompakte, ovoide Chromatinnukleolus wird kugelig, 
dabei etwas kleiner und nimmt ein mehr spongiöses Aussehen 
an, zugleich erscheint im Karyoplasma wieder ein äusserst feines 
Netz aus achromatischer Substanz (Textfig. D). In demselben 
Maße wie dieses Netz an Affinität für Farbstoffe gewinnt, wird 
der Chromatinnukleolus kleiner und blasser und es gelingt auf 
diesem Stadium keineswegs selten, deren zwei im achromatischen 
Kerngerüst festzustellen (Textfig. E). 


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EAN] Fig. E. 
Be Chr. el. = Chromatinelemente. 
ar Kg. = Kerngerüst. 
Fig. D. Nue. = Nucleolus. 


Bei nach der Gramschen Methode gefärbtem Material er- 
wies sich das Netz aus äusserst feinen Fibrillen zusammengesetzt, 
auf denen zahllose, nur bei den stärksten Vergrösserungen er- 
kennbare Körnchen lagerten, welche die eigentlich färbbare Sub- 
stanz des Netzes darstellten. Zerstreut im Netz fand ich in 
diesem Stadium auch grössere Chromatinkörnchen, von denen 
meist sogar zwei dieht aneinander lagen. Es waren die ersten 
Anlagen der sich jetzt neu bildenden Chromosomen (Taf. IX, 
Fig. 58). 

In diesem Stadium gelangen die Eier in den Uterus, stossen 
hier auf die schon oben geschilderten Massen reifer Spermatozoen 
und werden befruchtet. 

Bevor ich jedoch zur zweiten Periode übergehe, muss ich 
noch einiger gestaltlicher Veränderungen am Eisplasma Erwähnung 
tun. Es sei hier zuerst die Schilderung Pöppels wiedergegeben: 
„Allmählich von der Rhachis sich loslösend, gelangen die Eier in 

16* 


242 Kurt Kühtz-: 


den Ovidukt, in dem sie infolge ihres gegenseitigen Druckes die 
verschiedenste Gestalt annehmen und durch die vielen in ihrem 
Innern auftretenden Dotterkörnchen schliesslich undurchsichtig 
werden. Weiter unten reihen sich dieselben geldrollenähnlich 
wie die roten Blutkörperchen der Wirbeltiere hintereinander, bis 
sie sich in der Schalendrüse, einem Abschnitte des Oviduktes, mit 
einer Schale umgeben.“ Es folgt hier erst noch die nähere Be- 
schreibung des Oviduktes: „Das Epithel wird allmählich mächtiger, 
engt das Lumen ein, sendet zottenförmige Fortsätze in dasselbe 
vor, ordnet sich sogar wie bei anderen Nematoden zu einer 
Doppelschieht und sondert alsdann das zur Eischale benutzte 
Sekret ab. Erstere gelangt erst im Uterus zu ihrer definitiven 
Ausbildung, nachdem die Eier einen sackartig erweiterten. mit 
langen Epithelzellen ausgekleideten Abschnitt der Geschlechts- 
röhre passiert haben, das Receptaculum seminis, das stets Samen- 
elemente in grosser Zahl enthält und die Befruchtung vermittelt, 
die bei vollkommener Ausbildung der Schale unmöglich wäre.“ 

Ist schon der Ausdruck „geldrollenähnlich“ recht gewagt, 
denn die Eier erscheinen hier gerade so breit wie lang, so 
erweckt die weitere Beschreibung völlig den Eindruck, als habe 
Pöppel niemals besagten Teil des Genitalschlauches vor Augen 
gehabt. 

Obwohl die Aufklärung der epithelialen Verhältnisse des 
Genitalorgans meiner Arbeit ganz fern lag, richtete ich jetzt 
meine Aufmerksamkeit darauf, um die angebliche „Schalendrüse“ 
zu entdecken. Dass sich das Lumen des Oviduktes einengt, 
besteht vollkommen zu Recht; von den „zottenförmigen Fort- 
sätzen, die in dasselbe hineingeschickt werden oder von einer 
Doppelschicht“, konnte ich im Ovidukt aber auch keine Andeutung 
vorfinden, wohl aber eine auffallende, fast wörtliche Überein- 
stimmung mit der Augsteinschen Arbeit über Strongylus filaria. 
Somit wird auch die Behauptung, dass im Ovidukt oder der Schalen- 
drüse „Sekrete für die Schalenbildung abgesondert würden“, 
hinfällig. 

Was nun die Bezeichnung des Receptaculum seminis an- 
belangt, so halte ich diesen Ausdruck bei Sclerostomum für 
unpassend. Freilich zeichnet sich die Stelle des Uterus. wo der 
Ovidukt einmündet, durch lange Epithelzellen aus, aber gerade 
eine FEinschnürung gegen den folgenden Uterusteil, und sei sie 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten ete. 243 


auch noch so leicht, die den Ausdruck „sackartige Erweiterung“ 
rechtfertigen könnte, wird vermisst. Besagter Abschnitt ist weit 
eher einer Handglocke ähnlich, wobei der Eileiter dem Glocken- 
stiel, der Anfangsteil des Uterus dagegen der Glocke selbst 
gleichzusetzen wäre. Ich werde daher statt von einem Recepta- 
culum seminis nur von einem „Anfangsteil des Uterus“ sprechen. 

Der Schilderung Pöppels kann ich noch hinzufügen, dass 
die Eier in dem Augenblick, wo sie den engen Ovidukt verlassen 
und in den weiten Anfangsteil des Uterus eintreten, ovoide 
(sestalt annehmen und bald hernach im lebenden Zustand ein 
feines Häutchen aufweisen, welches das Ei umgibt, aber zwischen 
sich und dem Eiplasma einen mehr oder weniger weiten Spalt- 
raum lässt. 

Diese Hülle, die, wie wir oben schon gehört haben, nicht 
dem Sekret einer Schalendrüse, sondern den Reservestoffen im 
Eiplasma, die jetzt verschwinden, ihren Ursprung verdankt, tritt 
also erst im Uterus hervor und zwar nach der Befruchtung. Da 
die Membran jedoch an konserviertem Material fast nie deutlich 
zu sehen war, sondern dem Eiplasma wieder dicht auflag und 
sich nur an wenigen Stellen durch Falten bemerkbar machte, 
habe ich in meinen Zeichnungen von der Darstellung derselben 
Abstand genommen, mit wenigen Ausnahmen, wo der Raum 
zwischen Eiplasma und Membran sehr gross war und letztere, 
mit Böhmers Hämatoxylin gefärbt, scharfe Konturen aufwies. 


2. Die zweite Periode der Reifung. 

Ich komme nun zur Besprechung der zweiten Reifeperiode. 
Aus den klumpigen Chromosomen differenzieren sich jetzt sehr 
schnell sechs deutliche, zierliche Tetraden, wie wir sie schon in 
den Prophasen zur ersten Reifeteilung der Spermiocyten kennen 
gelernt haben (Taf. IX, Fig. 59). Diese Tetraden zeigen bald das 
Bestreben, sich an einer Stelle des Keimbläschens zu versammeln, 
wodurch sie oft quer übereinander zu liegen kommen. Auf diesem 
Stadium ist noch ein Nukleolus durch die Gramsche Färbung 
darstellbar, wenn auch nur verschwommen und blass, während 
das Liningerüst besonders das Böhmersche Hämatoxylin sehr 
lebhaft aufnimmt und dadurch den Nukleolus verdeckt (Textfig. F). 

Haben sich die Tetraden an dem einen Pol des meist ovoiden 
Keimbläschens zusammengestellt, so reisst plötzlich die Membran 


244 Kurt Kühtz: 


desselben und die Chromosomen schlüpfen hinaus in das Oytoplasma 
(Textfig. G), wo sie bald von einer kugligen, hellen Zone um- 
geben sind. Dieser Vorgang wird zwar selbst in neueren Arbeiten 
über Nematoden nicht beschrieben, geht jedoch aus manchen 


Fig. G. 


Fig. F. Chr. = Chromosomen. 
Li. — Liniengerüst. Li. = Liniengerüst. 


Abbildungen mit ziemlicher Sicherheit hervor; ich möchte hier 
nur auf die Fig. 83, 84, 855 der Struckmannschen Arbeit sowie 
auf die Schilderung und Abbildung OÖ. Meyers für Strongylus 
tetracanthus verweisen. 

Was wird nun aber aus der achromatischen Substanz des 
Keimbläschens? In dem Augenblick, wo das gesamte Chromatin 
austrat, schrumpft sie zusammen, anfangs noch ovoide Gestalt 
beibehaltend, bald aber wird der Rest unter bedeutender Ver- 
kleinerung kuglig und liegt noch eine kurze Zeit im Ei sichtbar. 
Bevor jedoch das Ei noch eine stärkere Membran abscheidet, 
muss diese achromatische Substanz aus dem Ei austreten, denn 
man sieht neben den Eiern im Uterus zahlreiche Körper von 
vollkommen gleicher Grösse und Färbbarkeit liegen. Das Austreten 
dieser Körper selbst habe ich leider nie beobachten können und 
vermute daher, dass der Vorgang äusserst schnell vor sich geht. 

Die Tetraden haben währenddessen in ilrem kugligen 
hellen Bläschen schon die typische Anordnung erfahren, die wir 
stets bei der Teilung beobachten können, nämlich so, dass ihre 
Längsachse in die der Spindelfasern fällt, die sich jetzt allmählich 
herausdifferenzieren. In dieser Form rücken sie nun nach irgend 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten ete. 245 


einer Stelle der Eiperipherie (Textfig. H), so dass man eigentlich 
nicht von einer Richtungsspindel, sondern nur von einer „Richtungs- 
kugel“ ohne Gentrosomen sprechen darf. 

Meine Beobachtungen stehen somit in einem gewissen 
Gegensatz zu der Angabe 0. Meyers für Strongylus tetracanthus, 
wonach die Spindelfasern an den Polen 
entweder in einer Spitze zusammen- Bavk: ED 
laufen oder in einer breiten Platte de a 
endigen sollen. Dass ein Pol des Eies 
bei der Bildung der Richtungskörper 
bevorzugt wird, wie dies von H. E. 
Ziegler, v. Erlanger, Struckmann 
und Gulick beschrieben worden ist, 
konnte ich bei Sclerostomum nicht 
beobachten, ja, ich möchte sogar be- 
haupten, mehr Richtungsspindeln in 
der Mitte der Breitseite des Eies ge- Fig. H. 
sehen zu haben, als an anderen Stellen. Rsvk. = Reservekörper. 
Struckmann sagt hierzu folgendes: a ar ee 
„Was den Ort der Ausscheidung Sp. m En u 
der Richtungskörper anbelangt, so 
ist dieser im allgemeinen verschieden, je nachdem man es mit 
jungen oder alten Würmern zu tun hat. Bei jungen Tieren ist 
der Ovidukt, wie schon oben erwähnt wurde, so eng, dass die 
Eier nur dadurch, dass sie eine langgestreckte Gestalt annehmen, 
hindurchgleiten können. Da sie schon vorher Eiform angenommen . 
hatten, so werden sie naturgemäss mit einem Pol voran in den 
Eileiter eintreten und dieser Pol bietet dann den hier vorhandenen 
Spermatozoen die nächste und beste Gelegenheit, sich der Eiober- 
fläche anzulegen, so dass der später sich entwickelnde männliche 
Vorkern in der Nähe eines Pols gelegen ist. Bei diesen Eiern 
findet die Richtungskörperbildung 'meist an dem entgegengesetzten 
Pol statt, worauf der entstehende weibliche Vorkern dem in der 
Entwicklung voranschreitenden männlichen ungefähr gegenüber 
liegt. Diese Beobachtung stimmt überein mit den Untersuchungen 
von R. v. Erlanger, der dieselbe Tatsache für Rhabditis 
dolichuris und von H. E. Ziegler, der sie für Diplogaster 
longicauda feststellte. Es scheint sogar, dass die Spindel, falls 
sie während ihrer tangentialen Lage noch in der Mitte der Ei- 


246 Kurt Kühtz: 


peripherie gelegen war, beim Übergang in die radiäre Lage gleich- 
zeitig eine Bewegung nach dem Pol hin macht“. 

Ich will diese Beobachtung nicht anfechten, sondern möchte 
nur den Unterschied daraus erklären, dass bei Sclerostomum eine 
Prädestination eines Poles zur Befruchtung schon aus dem Grunde 
nicht bestehen kann, weil ja hier die Befruchtung im Uterus vor 
sich geht, in welchem die Eier in jeglicher Lage mit dem Sperma 
in Berührung kommen können. 

Die Chromosomen, die anfangs mit ihrer Längsachse parallel 
der Eimembran lagen (Taf. IX, Fig. 60), machen jetzt eine Drehung 
um 90°, so dass der eine Pol der Kugel dicht unter die Hülle zu 
liegen kommt (Taf. IX, Fig. 61). Auf diesem Stadium sind die 
Tetraden bei weitem nicht mehr so deutlich zu erkennen, doch 
fand ich bei einem Sclerostomum equinum solche, die alle übrigen 
an Zierlichkeit und Länge übertrafen (Fig. 62). 

Häufig beobachtet man, dass von den sechs Tetraden ein 
oder zwei hinter der Grösse der übrigen zurückbleiben (Taf. IX, 
Fig. 63). Aber gerade diese Variabilität an Eiern ein und des- 
selben Weibchens zeigt nach meiner Meinung zur Genüge, dass 
man bei der Längenbeurteilung chromatischer Elemente nur mit 
der grössten Vorsicht zu Werke gehen und ihren Grössendifferenzen 
nur sehr beschränktes (Grewicht beimessen darf. Selbst das 
heterotypische Verhalten eines Chromosoms ist nicht unbedingt 
für die Existenz eines Heterochromosoms anzusprechen, denn ich 
konnte das Zurückbleiben eines Chromosoms in der Anaphase 
‚auch bei der Richtungskörperbildung in vereinzelten Fällen 
beobachten (Taf. IX, Fig. 64). 

Sobald die Chromosomen aus der ziemlich langwährenden 
Metaphase in die Anaphase eintreten, macht sich ihre Zu- 
sammensetzung aus vier Teilstücken wieder stärker bemerkbar: 
denn noch während der Wanderung nach den Polen spalten sich 
die Teilstücke jeder Dyade wie die Schenkel eines Winkels 
auseinander, dessen Scheitelpunkt das nach den Spindelpolen zu 
gelegene Ende der Chromosomen ist. Es geht dies nicht allein 
aus Fig. 65, sondern auch aus den zwei Polansichten der Fig. 66 
und 67, Taf. IX, hervor. Die Polansicht 67 stellt ein etwas 
späteres Stadium dar, indem hier die Dyaden schon fast einen 
gestreckten Winkel bilden, wenn ich obigen Vergleich weiter 
anwenden darf. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 247 


Es ist dies also der Vorgang, den ich, gestützt auf andere 
Beobachtungen, schon bei der ersten Reifeteilung der männlichen 
Geschlechtszellen als sicher vorkommend beschrieben habe. 

In der Anaphase hat die kuglige Teilungsfigur mehr eine 
tonnenförmige Gestalt angenommen und zwischen den Teilstücken 
der Tetrade sieht man noch feine Spindelfasern verlaufen, wie 
dies ja mehrfach beschrieben worden ist (Taf. IX, Fig. 68). 

Der der Eimembran zu gelegene Teil ist derselben jetzt so 
nahe gerückt, dass er sie vor sich herschiebt und eine kleine 
buckelartige Erhebung dabei bildet. In diesem Augenblick tritt 
zwischen den beiden Dyadengruppen eine äusserst zarte, kaum 
sichtbare Membran auf und die Bildung des ersten Richtungs- 
körpers ist vollzogen. 

Unmittelbar an die Ausstossung des ersten Richtungskörpers 
schliesst sich die des zweiten an. Ja, der Vorgang scheint sogar 
so schnell zu verlaufen, dass es zu Rotationserscheinungen des 
Cytoplasmas, wiesie durch van Beneden bei Ascaris megalocephala 
und durch Struckmann bei Strongylus filaria bekannt geworden 
sind, nicht mehr kommt. Vielmehr konnte ich mit wenigen 
Ausnahmen bei allen Eiern, welche die beiden Richtungskörper 
gebildet hatten, diese ziemlich dicht nebeneinander und mit kaum 
sichtbaren Plasmamengen versehen, beobachten. 

Der Verlauf der zweiten Richtungskörperbildung ist analog 
dem der ersten. Die Uhromosomen erscheinen um ein (Greringes 
dünner und zugleich kürzer, eine wahrscheinlich Hand in Hand 
gehende Metamorphose. Jede der sechs Dyaden weist wieder den 
hier bei Sclerostomum so überaus typischen Querspalt auf; die 
Anordnung in der Spindel ist die gleiche, wie wir sie schon oben 
kennen gelernt haben (Taf. IX, Fig. 69). In der Anaphase ver- 
missen wir selbstverständlich die winklige Aufspaltung, denn die 
Tetraden sind ja jetzt schon in ihre vier Stücke aufgeteilt, und 
die Gestalt der Chromosomen ist daher im zweiten Richtungs- 
körper auch nur punktförmig oder genauer gesagt schwach spindel- 
förmig, wie dies aus Fig. 69 hervorgeht. Verursachte die Bildung 
des ersten Richtungskörpers eine Ausbuchtung der Eimembran, 
so wird für den zweiten Richtungskörper durch das entgegengesetzte 
Prinzip, nämlich durch Einbuchtung des Eiplasmas, Platz geschaffen 
(Taf. IX, Fig. 70). Diese Figur ist noch aus einem anderen 
Punkte sehr interessant, denn man sieht hier, dass die völlig 


248 Kurt Kühtz: 


zwecklos erscheinende, aber theoretisch verlangte Teilung des 
ersten Richtungskörpers vonstatten gegangen ist und dass wir in 
dem ehemaligen ersten Richtungskörper jetzt tatsächlich zwölf 
Chromosomen zählen können, die in Gestalt denen des zweiten 
Richtungskörpers vollkommen gleichen. 

Ist die zweite Reifeteilung vollzogen, so umgibt sich die im 
Plasma zurückgebliebene Chromosomengruppe sehr bald mit einer 
Membran (Fig. 71). Dabei verschmilzt sie anfangs zu einem 
grösseren Klumpen, der aber bald in zahlreiche Körnchen aufgelöst 
wird. Diese verbreiten sich auf dem gleichzeitig wieder 
erscheinenden achromatischen Gerüst und lassen schliesslich einige 
grösser bleibende Körper unterscheiden, die sich ihrerseits aus 
zwei, seltener auch drei Brocken zusammensetzen (Fig. 72 und 74). 
Da nun gegen sechs derartige Chromatinansammlungen vorhanden 
sind, die entfernt an klumpige Chromosomen mit einer Querfurche 
erinnern, so lässt sich die Vermutung, dass es sich hier um die 
bei der Richtungskörperbildung zurückgebliebenen sechs Chromo- 
somenteilstücke oder um die neuentstandenen Chromosomen des 
weiblichen Vorkernes handelt, nicht von der Hand weisen. Aus 
dem weiteren Entwicklungsverlauf werden wir jedoch ersehen, 
dass sich diese Behauptung nicht aufrecht erhalten lässt oder 
nur, wenn wir sie dahin einschränken, dass die Chromosomen des 
weiblichen Vorkernes nicht direkt aus jenen Chromatinklumpen 
entstehen. 

Vorerst muss ich jedoch noch einmal einige Stadien zurück- 
greifen, um die Frage nach dem Verbleib des Spermakernes zu 
beantworten. Wir verliessen ihn in dem Augenblick, wo er ins 
Ei eingedrungen war und fast während der ganzen zweiten Reife- 
periode des Eies ist an ihm keine merkliche Veränderung zu 
beobachten. Meist bleibt er in der Nähe der Eimembran liegen 
und zeigt bei nach Gram gefärbtem Material stets das stark 
gefärbte Chromatinstäbchen in einem helleren Hof, der gegen 
das Eiplasma nicht scharf begrenzt erscheint. 

Die ersten Veränderungen am Spermatozoon, die mit der 
Bildung des zweiten Richtungskörpers beginnen, bestehen darin, 
dass der gestreckte Kern seitliche Protuberanzen aufweist und 
damit für immer seine stabförmige Gestalt verliert (Fig. 71). 
Zugleich wird die Abgrenzung des „hellen Hofes“ gegen das 
Cytoplasma schärfer, wir können wieder von einer Kernmembran 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 249 


und somit auch von einem männlichen Vorkern sprechen. Der 
anfangs noch kompakte Chromatinkörper schwillt nun samt der 
ihn umgebenden Membran etwa auf die doppelte Grösse an und 
zugleich löst er sich in mehrere grössere und kleinere punkt- 
förmige Körper auf, die in einem achromatischen Kerngerüst 
ruhen (Taf. IX, Fig. 72); somit hat er dasjenige Stadium erreicht, 
das wir soeben vom weiblichen Vorkern kennen gelernt haben. 

Da der weitere Entwicklungsverlauf in beiden Kernen der 
gleiche ist, so kann ich von nun ab die Besprechung gemein- 
sam führen. 

Beide Vorkerne haben währenddessen ihre Stellung nur 
wenig oder gar nicht verändert, so dass man häufig an den ent- 
gegengesetzten Eipolen völlig gleiche Kerne beobachten kann. 

Es kommen aber auch abweichende Stellungen vor, indem 
z. B. der Spermakern dicht neben dem Richtungskörper und so- 
mit neben dem späteren weiblichen Vorkern liegt oder auch in 
seiner Entwicklung hinter dem letzteren zurückbleibt, wie dies 
Taf. IX und X, Fig. 73—75, zeigt. 

Während ihrer weiteren Umwandlung rücken nun beide 
Kerne gegen das Eizentrum vor und es ist dann auch aus ihrer 
Lagerung zu den Richtungskörpern bei Gramscher Färbung 
nicht mehr zu erraten, welcher von beiden der männliche oder 
weibliche Vorkern ist; denn das so häufig erwähnte Erkennungs- 
zeichen des männlichen Vorkernes, das Uentrosom, habe ich bei 
besagter Färbung auf diesem Stadium niemals nachweisen können. 
Besser glückte dies mit Böhmers Hämatoxylin; das jüngste 
Stadium, das mir mit deutlicher Centrosomenstrahlung häufig zu 
Gesicht kam, ist in Taf. X, Fig. 76 wiedergegeben. 

Um so erstaunlicher war daher für mich eine Angabe in 
der 1895 erschienenen, schon mehrfach herangezogenen Arbeit 
O.Meyers, die ich hier etwas eingehender besprechen will. 

Zur Erforschung der Üentrosomenverhältnisse beim männ- 
lichen und weiblichen Vorkern untersuchte O. Meyer Strongylus 
tetracanthus und hebt hervor, dass er bei diesem Objekt das 
Centrosom und seine Strahlung am männlichen Kern bald nach 
seinem Eindringen in das Ei besonders gut beobachten konnte. 

Unter Strongylus tetracanthus verstand OÖ. Meyer, dem 
Stande der damaligen Forschung entsprechend, alle kleineren 
Formen der Selerostomiden und somit hatte er unter seinem 


250 Kurt Kauhtrz: 


Material wahrscheinlich auch Scelerostomum vulgare und kleinere 
Individuen von Sclerostomum edentatum, d. h. sicherlich teilweise 
die gleichen Spezies, die ich untersucht habe. 

Unsere so abweichenden Beobachtungen lassen sich nach 
meiner Meinung nur auf die Verschiedenheit der Fixationstlüssig- 
keiten zurückführen oder auf die der Färbmethoden, die OÖ. Meyer 
leider nicht angibt. Meyer wählte zur Fixierung die Perenyische 
Flüssigkeit, die, wie er selbst angibt, „das Chromatin allerdings 
nicht besonders gut konserviert und vor allen Dingen dessen 
Färbbarkeit zu beeinträchtigen scheint“ und die gerade aus 
diesem Grunde für mich nicht in Betracht kam, da ich ja auf 
jene Faktoren mein Hauptaugenmerk richtete. 

Da es immerhin möglich ist, dass sich ein Centrosom am 
Spermatozoon bei anderer Färbung und Konservierung früher nach- 
weisen lässt, so erscheint es mir zweckmässig, zuerst in kurzen 
Worten die Beobachtungen ©. Meyers wiederzugeben, da ich 
sowieso auf einige Punkte noch näher eingehen muss. 

Das früheste Stadium, in welchem der ellipsoide Spermakern 
ein kleines, polständiges Uentrosom mit zarter Strablung auf- 
weist, fällt nach OÖ. Meyer mit der Bildung des ersten Richtungs- 
körpers zusammen. Der „achromatische Hof“ wird mit der Bildung 
des zweiten Richtungskörpers vom Eiplasma resorbiert und gleich- 
zeitig treten Centrosom und Strahlung deutlicher hervor. Ist der 
zweite Richtungskörper ausgestossen, so teilt sich das Uentrosom, 
zeigt jedoch an der Durchschnürungsstelle noch eine starke Brücke 
achromatischer Fasern. Sind beide Teilstücke schliesslich getrennt 
und das eine von ihnen an den entgegengesetzten Spermapol 
gewandert, so bildet der bisher kompakte Spermakern „eine 
Vakuole* um sich, ist aber auch jetzt noch an den Strahlen- 
systemen kenntlich, die dem weiblichen Kern abgehen. „Das 
Verhalten der beiden Gentrosomen bei der Annäherung der Kerne 
stellt sich in der Mehrzahl der Fälle so dar, dass immer das eine 
zunächst dem Eikern zustrebt. Das „führende“ legt sich an den 
Eikern, es kommt zum vollen Kontakt der beiden Kerne und 
gleichzeitig vollzieht sich eine Drehung derartig, dass schliesslich 
die Verbindungslinie der Uentrosomen in die Längsachse des Eies 
eingestellt ist, während die der Kerne senkrecht darauf steht... 
worauf dann sofort die Auflösung ohne vorhergehende Ver- 
schmelzung der Kernvakuolen folgt“. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten ete. 251 


O. Meyer schliesst sich also der zuerst von van Beneden 
aufgestellten Behauptung an, dass: „une conjugaison des deux 
pronuclö&us en un noyau embryonnaire morphologiquement unique 
ne se produit pas“, der die ältere, konträre Anschauung Hertwigs 
gegenübersteht. 

Betreffs des zeitlichen Ineinandergreifens der Vorkern- und 
Richtungskörperbildung sowie der gegenseitigen Vorkernstellung 
und Centrosomenlagerung stimmen demnach unsere Beobachtungen, 
wie man aus den beigegebenen Taf. IX, und Taf. X, Fig. 71, 72 
und Fig. 76 und 77 ersehen kann, im grossen und ganzen überein, 
abgesehen von dem ersten Auftreten der Chromatinveränderungen, 
die OÖ. Meyer selbstverständlich entgehen mussten. Was jedoch 
die Bildung der ersten Furchungsspindel anbelangt, bin ich zu 
einem stark abweichenden Resultat gekommen; ich glaube ent- 
schieden, dass O. Meyer, gestützt auf die damals noch neuen, 
umfangreichen Arbeiten von van Beneden, Carnoy und 
Th. Boveri, die bei Sclerostomum vorliegenden Verhältnisse zu 
einseitig betrachtet hat. 

Bekanntlich hat die Auffassung van Benedens eine grosse 
Anhängerschaft gefunden und Th. Boveri äusserte sich 1888 
sogar dahin, dass diese Meinung, da sie auch in anderen Tier- 
klassen Geltung hat, „wohl den Wert eines allgemeinen Gesetzes 
beanspruchen darf“. An einer späteren Stelle seiner Arbeit schränkt 
er diesen Satz freilich wie folgt ein: „Es scheint, dass verschiedene 
Weibchen hinsichtlich der Vereinigungsart der Geschlechtskerne 
ihrer Eier sich verschieden verhalten, dass bei manchen fast 
ausschliesslich eine Vereinigung der Kerne erst in der Spindel, 
bei anderen schon im Zustand des Bläschens mit chromatischem 
Gerüst vorkommt“. 

Alles in allem sind die fraglichen Vorgänge bei unserem 
Objekt sehr schwer zu verfolgen und können leicht zu einer 
Täuschung Anlass geben, besonders wenn die Darstellung des 
Chromatins wie bei OÖ. Meyer zu wünschen übrig lässt. 

Da nämlich die Eier, wie ich schon andeutete, periodisch zu 
mehreren hintereinander in den Uterus eintreten, so ist es klar, 
dass sich alle, sagen wir einer Periode angehörigen Eier, ungefähr 
auf dem gleichen Stadium befinden werden. Zugleich folgt aber 
auch hieraus, dass zwischen der ersten und der nun folgenden 
„Periode“ ein Sprung, eine Lücke in der Entwicklungsreihe vor- 


252 Kurt Kühtz: 


handen sein muss. Man findet daher im Anfangsteil des Uterus — 
wo diese Verhältnisse am deutlichsten hervortreten — Eier, welche 
die beiden Vorkerne nebeneinander aufweisen und dicht darauf 
solche, die schon die erste Furchungsteilung durchgemacht haben 
oder wenigstens die Furchungsspindel zeigen. 

Steht daher nicht eine grosse Anzahl verschiedener Üteri 
zur Verfügung, so ist es leicht möglich, dass das Zwischenstadium, 
der „Furchungskern“, vermisst wird und man somit zu dem 
falschen Schluss kommt, dass die karyokinetische Figur mit ihren 
Chromosomen unmittelbar aus den getrennten Vorkernen her- 
vorgeht. 

Wie steht es nun aber überhaupt mit der Chromosomen- 
ausbildung für die erste Furchungsmitose ? 

Haben die Vorkerne das eingangs beschriebene Stadium mit 
den wenigen grossen und den zahlreichen kleinen Chromatin- 
brocken erreicht, so berühren sie sich meist, ihre Membran ver- 
schwindet an der Kontaktstelle und es wird daher vorübergehend 
ein Kern in Form eines Biskuits hergestellt (Taf. X, Fig. 79), der 
dann in eine grosse, ovale, schliesslich kuglige Gestalt übergeht. 

In diesem Kern, der entsprechend seines Ursprunges ein 
grösseres Uhromatinquantum enthält, bilden sich aus den zahl- 
reichen kleinen Körnchen anfangs unregelmässige, zackige 
CUhromatinfäden, die sich allmählich in zierliche, schleifenförmige 
Chromosomen umwandeln, während die dicken Chromatinklumpen 
schliesslich verschwunden sind (Fig. 50). 

Dieser Umbildungsprozess kann jedoch von diesem als typisch 
zu bezeichnenden Modus beträchtlich abweichen. Liegt der 
Spermakern, wie oben bemerkt, in der Nähe des Eikernes, so 
schreitet letzterer gewöhnlich in. der Entwicklung voran und es 
findet eine Vereinigung der beiden Vorkerne statt, wenn der 
männliche noch bei weitem hinter der Grösse des weiblichen 
zurücksteht (Taf. X, Fig. 81). 

Andererseits scheint die Vereinigung der Kerne auch ver- 
zögert werden zu können und entstehen dann schon in den Vor- 
kernen deutlich geschlängelte Chromosomen (Fig. 82). Ich fand 
derartige Verhältnisse meist bei Scelerostomum edentatum und ich 
muss gestehen, dass ich sie anfangs für einen Beweis der Richtigkeit 
der van Benedenschen Auffassung hielt, da ich überdies erste 
Furchungsspindeln fand (Fig. S6), in denen die Chromosomen in 


Über die Spermio- und Oogenese der Scelerostemum-Arten ete. 253 


zwei Gruppen getrennt voneinander lagen und mir somit ihren 
verschiedenen Ursprung anzudeuten schienen. Später fand ich 
jedoch in dem gleichen Objekt Zwischenstadien (Fig. 83), die 
sowohl die halbverschmolzenen Vorkerne, als auch die schon an- 
gelegten geschlängelten Chromosomen zeigten, wodurch die beiden 
Kriterien, die für die Meinung van Benedens sprachen, wieder 
bedeutend an Beweiskraft verloren. 

Ich komme daher im Gegensatz zu OÖ. Meyer zu dem 
Schluss, dass bei den Sclerostomiden fast stets ein Furchungskern 
ausgebildet wird, während der van Benedensche Bildungsmodus 
nur für wenige Fälle und zwar bei Sclerostomum edentatum 
wahrscheinlich gemacht wird. 

Da die erste Furchungsspindel das Endresultat der Ge- 
schlechtszellenvereinigung darstellt, so möchte ich, bevor ich auf 
den feineren Bau derselben eingehe. vorerst noch einiger Be- 
fruchtungsanomalien Erwähnung tun, von denen ich schon zu 
Beginn meiner Arbeit andeutungsweise sprach. 

Haben die lebenden Parasiten starke Temperaturerniedrigung 
erlitten, so findet man im Uterus kein einziges normales Be- 
fruchtungsstadium. Einerseits sucht man nach Richtungskörpern 
vergeblich, andererseits lassen sich in jedem Ei drei bis vier 
blasige Kerne auffinden, deren Ursprung auf eine Polyspermie 
zurückzuführen ist (Taf. X, Fig. 54). 

Diese Anomalie liesse sich nach meiner Meinung in be- 
friedigender Weise erklären, wenn wir annehmen, dass nur die 
vom Eiplasma abgehobene Hülle und sei sie anfangs auch noch 
so fein, eine undurchdringliche Wand für die Spermatozoen bilde, 
nicht aber die mit dem Eiplasma in Kontakt stehende. 

Da nun bei Abkühlung des lebenden Materials eine Schrumpfung 
der gesamten Teile eintritt, so liesse sich wohl denken, dass eine 
noch zarte, gerade abgelöste Eimembran sekundär mit dem 
Eiplasma in Verbindung tritt und somit eine Polyspermie er- 
möglicht wird. 

Dass es trotz Polyspermie noch zur Spindelbildung kommen 
kann, zeigen die Fig. 85a, b, c, d, Taf. X, die einer Schnittserie 
entlehnt sind. Es sind hier zwei vollständige Spindeln ausgebildet 
und ausserdem liegen noch mehrere kernähnliche Körper im 
Eiplasma, die teils zu Grunde gegangenen Spermakernen, teils 
dem zur Kugel gewordenen Liningerüst des Keimbläschens ent- 


254 Kurt Kühtz: 


sprechen dürften. Welche Chromatinbestandteile bei der Bildung 
der zweiten Spindel zur Verwendung gekommen sind, lässt sich 
selbstverständlich nicht angeben, hervorheben möchte ich aber 
noch, dass von Richtungskörpern nichts zu sehen war, somit also 
möglicherweise weibliche Chromatinbestandteile auch an der 
zweiten Spindel beteiligt sein könnten. 

In den normalen Furchungsspindeln lassen sich von nun ab 
auch mit Gentianaviolett und Jodjodkalium punktförmige Centriolen, 
wenn auch ohne Strahlung, kenntlich machen, letztere wird sogar 
merkwürdigerweise durch zahlreiche um den Hauptkern angeordnete 
und ebenso stark färbbare Körnchen ersetzt (Taf. X, Fig. 36— 88). 
Ich halte diese Beobachtung, dass an der Plasmastrahlung grosser 
Uentrosomen auch noch dem Zentralkörper ähnliche Gebilde 
beteiligt sind, für um so interessanter, als sie noch nicht 
beschrieben, was sicherlich auf das Übergehen der Gramschen 
Färbmethode zurückzuführen ist. 

Die AÄquatorialplatte der Furchungsspindel wird aus den 
kurzen, schwach winklig geknickten Chromosomen gebildet 
(Taf. X, Fig. 87), von denen wir entsprechend unserer obigen 
Angabe bei Polansicht elf oder zwölf finden müssten, je nachdem 
ein männliches oder weibliches Individuum aus dem befruchteten 
Ei hervorgehen soll. Ich habe absichtlich in den letzten Seiten 
von einer Präzisierung der Chromosomenzahl Abstand genommen, 
da sie bei einer solchen Zahl überdies gebogener Chromosomen 
an Schnittpräparaten zur Unmöglichkeit wird. Meine Versuche, 
die fraglichen Stadien an Totalpräparaten zu studieren, scheiterten 
jedoch trotz mannigfacher Abänderung der Färbmethoden an der 
starken Tinktionsfähigkeit des Eiplasmas, wodurch die Chromo- 
somen stets verdeckt wurden. 

In den Anaphasen rücken die beiden Tochterplatten als 
einheitliches Ganzes gegen die Pole (Taf. X, Fig. 85), umgeben 
sich noch während der Durchschnürung des Eiplasmas mit einer 
Kernmembran und lösen sich in zahlreiche Chromatinbrocken auf 
(Taf. X, Fig. 59), um bei erneuter Teilung abermals die bekannten 
Entwicklungsstufen zu durchlaufen. 

Was nun die Richtung der Teilungsebenen anbelangt, so 
können hierbei alle möglichen Variationen vorkommen. Meistens 
fällt freilich die Spindelachse, entsprechend der zweiten Hert- 
wigschen Regel, die Richtung der Kernspindel betreffend, in die 


Über die Spermio- und Oogencse der Sclerostomum-Arten etc, 255 


Hauptachse des ellipsoiden Eies (Taf. X, Fig. 75). Sie kann sich 
aber auch in die Nebenachse desselben. einstellen (Fig. 88) oder 
mit der Hauptachse einen Winkel von 45° bilden (Fig. 86), d.h. 
ein Zwischenstadium zu den beiden erstgenannten Fällen. 

Da die gleichen Verhältnisse auch in den einzelnen Blastomeren 
obwalten, so lassen sich hieraus die beigegebenen Fig. 90—92 mit 
Leichtigkeit erklären. 

Ist das Ei durch weitere Teilung bis zum Morulastadium 
fortgeschritten, so finden wir es im vaginalen Ende des Uterus 
oder wohl gar in der Vagina. Hierbei gehen die Eier von 
Sclerostomum edentatum in ihrer Entwicklung weiter als diejenigen 
von Sclerostomum equinum; so stammt Fig. 93 aus der Vagina 
der letzteren Spezies, während Fig. 94 ein Ei aus dem Uterus 
von Sclerostomum edentatum vorstellt. 

In diesem Entwicklungsstadium verlassen die Eier die 
weiblichen Geschlechtsorgane und gelangen mit den Exkrementen 
des Pferdes ins Freie, um hier zu Rhabditisformen zu werden 
und dann z. B. mit dem Weidefutter von einem anderen Pferde 
wieder aufgenommen zu werden, wie wir es aus den eingangs 
erwähnten Arbeiten erfahren haben. 


Zusammenfassung. 


Stellen wir am Schluss unserer Untersuchung die gefundenen 
Resultate zusammen, so wäre als charakteristisch für die Selero- 
stomiden hervorzuhebsn: 

1. Die starke Rhachisbildung beim Männchen, die mit ihren 

Resten bis tief in die Reifezone reicht. 

2. Die bedeutend schwächere Rhachis beim Weibchen, die 
schon vor Beginn der Reifezone völlig verschwindet. 
Elf Chromosomen in den Spermiogonienkernen. 

Zwölf Chromosomen in den Oogonienkernen. 

Fünf Tetraden und ein Monosom in den Spermiocyten, 
was zu einer ungleichen Teilung in der ersten oder zweiten 
Reifeteilung führt. 

6. Sechs gleichwertige Tetraden bei der Richtungskörper- 
bildung und zugleich die Ausstossung eines achromatischen 
Restkörpers des Keimbläschens. 

7. Die Ausbildung einer langgestreckten Ejakulationssperma- 
form 

Archiy f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 3 


OU 


256 Kurt Kühtz: 


5. Die Rückbildung desselben im Uterus zum kugligen Be- 
fruchtungsspermium. 

9. Die Bildung eines Furchungskernes, der aus den ver- 
schmelzenden Vorkernen hervorgeht und in vereinzelten 
Fällen die Bildung einer Furchungsspindel ohne vorherige 
Vereinigung der Vorkerne. 

10. Die Eier verlassen im Morulastadium den mütterlichen 
Körper. 

11. Die einzigartige männliche Rhachisbildung sowie die 
Spermatidenumbildung rechtfertigen die früher schon aus 
anderen Ursachen vorgenommene Abtrennung unserer 
Parasiten von den Strongyliden. 


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Ascaris megalocephala. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 65, 1909. 

Willach, P.: Sclerostomum armatum und tetracanthum. Zeitschr. f. wiss. 
u. prakt. Tierheilk., Bd. 17, 1891. 

Derselbe: Ibid., S. 340, Sclerostomum apiostomum. 

Zacharias, O.: Neue Untersuchungen über die Kopulation der Geschlechts- 
produkte und der Befruchtungsvorgänge bei Ascaris megalocephala. 
Arch. f. mikr. Anat., Bd. 30, 1887. 

Ziegler, H. E.: Untersuchungen über die ersten Entwicklungsvorgänge 
der Nematoden. Zeitschr. f. wiss. Zool., Bd. 60, 1895. 

Zürn: Tierische Parasiten, 1872. 


260 Kurt Kühtz: 
Erklärung der Abbildungen auf Tafel VII—X. 


Die Fig. 1—6 und 8—13 sowie Textfig.. A—H wurden in halber 
Objekttischhöhe, Fig. 77—100 in Objekttischhöhe mit dem Zeichenapparat 
nach Oberhäuser und einer Himmlerschen homogenen Öl-Immersion 
2 mm bei einer Tubuslänge von 170 mm skizziert ‘und dabei eine Ver- 
grösserung von 1140 und 900 erreicht. (Fig. 1-6 und S—13 sowie Text- 
figur B—H wurden später auf °/ı verkleinert.) 

Die Fig. 7, 51, 76 wurden gleichfalls mit dem Zeichenapparat nach 
OÖberhäuser angelegt, jedoch Fig. 7 und 51 in halber Objekttischhöhe 
mit Himmlerschem Objektiv 7 und Fig. 76 mit !/ıs homogener Öl-Immersion 
von Leitz (als Zeichentisch diente der Standtisch des Mikroskops); die 
Vergrösserung betrug hierbei 500 und 1400. (Fig. 7 wurde auf ®/ı verkleinert.) 

Die übrigen Figuren wurden sämtlich in Objekttischhöhe mit dem 
grossen Abbeschen Zeichenapparat angefertigt unter Benutzung einer !'e 
homogenen Öl-Immersion von Leitz und einem Kompensationsokular 8 von 
Zeiss bei einer Tubuslänge von 160 mm. Die Vergrösserung beträgt 1650. 


Tafel VIII. 

Fig. 1, 4—7, 13 --21, 30: Fixation Flemming, gefärbt mit Heidenhain- 

Eosin oder Safranin-Licehtgrün. Fig. 2: Fixation Zenker, gefärbt mit 

Böhmers Hämatoxylin. Fig. 3, 10, 22—29, 31—33: Fixation Bouin, 

gefärbt mit Böhmers Hämatoxylin oder Gram. Fig. 8, 9, 11, 12: Fixation 

Helly, gefärbt mit Böhmers Hämatoxylin. 

Fig. 1. Querschnitt durch die Keimzone der Hodenröhre; im Zentrum der 
Rhachisstamm mit seinen primären und sekundären Rhachislamellen. 
Im umgebenden Syncytium Spermiogonienkerne in verschiedenen 
Entwicklungsstadien. 

Fig. 2. Querschnitt durch das Ende der Keimzone. Die primären und 
sekundären Rhachislamellen sind von einem homogenen Plasma 
aufgefüllt. Neben Spermiogonienkernen peripher drei Zwischen- 
körper (Zwk.). 

Fig. 3. Querschnitt durch den oberen Teil der Wachstumszone. Die Rhachis 
ist stark geschwollen und lässt die primären Rhachislamellen nur 
noch undeutlich erkennen. Die Spermiogonienkerne sind oval ge- 
worden. 

Fig. 4. Querschnitt durch die Mitte der Wachstumszone. Der Rhachis- 
stamm hat die primären Lamellen eingezogen und ist vollkommen 
abgerundet. Im Zentrum zeigt er einen dichten Ring, während 
das übrige Plasma radiäre Fasern aufweist. Von der Peripherie 
des Rhachisstammes lassen sich tertiäre usw. Verzweigungen bis 
zur Hodenperipherie zwischen den Spermiogonien nachweisen. 

Fig. 5. Querschnitt durch einen älteren Teil der Wachstumszone. Der 
zentrale Rhachisring ist schon aufgelöst, das übrige Plasma schon 
sehr locker mit vereinzelten gefärbten Körnchen, die besonders 
an der peripheren Randschicht des Rhachisstammes hervortreten. 
Die Spermiogonien deutlich keulenförmig. 


File. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


9 


10. 


iu 


12. 


13: 


. 14. 


19. 


20: 


. 21a—c. Seitenansicht von Spermiogonienspindeln mit kompakter und 


. 22. 


Über die Spermio- und Oogenese der Selerostomum-Arten ete. 261 


Querschnitt durch das Ende der Wachstumszone. Der Rhachis- 
stamm zeigt nur noch Spuren eines radiären faserigen Plasmas. 
Die Keulenform der Spermiogonien tritt schärfer hervor. 
Längsschnitt durch den Beginn der Reifezone. Der Rhachisstamm 
zusammengedrückt und in Falten gelegt. Die jungen Spermiocyten 
etwas verkürzt. 

Längsschnitt durch das blinde Ende einer Övarialröhre mit 
Schneiderscher Terminalzelle (Sch. Termz.) mit Kern (K.) und 
bläschenförmigem Nukleolus (Nuk.). Zentral ein heller Rhachis- 
streifen mit vereinzelten kleineren Kernen. 

Querschnitt kurz hinter dem blinden Ende der Övarialröhre des- 
selben Tieres wie Fig. 8. Stark entwickelter Rhachisteil ohne 
Abgrenzungsschicht gegen das Plasma des umgebenden Syneytiums. 
Querschnitt durch den Anfang der Wachstumszone der weiblichen 
Ovarialröhre. Der Rhachisstamm rund mit starker Grenzschicht 
und peripher ausstrahlenden Verzweigungen. 

Querschnitt durch einen etwasälteren Teil der weiblichen Wachstums- 
zone. Die Rhachisverzweigungen rückgebildet. Die Oogonienkerne 
oval. 

Querschnitt durch den mittleren Teil der Wachstumszone. Die 
Randschicht der Rhachis stark reduziert; im Zentrum der Rhachis 
ein lockeres Fasernetz. Die Zellgrenzen der Oogonien treten auf, 
das Chromatin ihrer Kerne sammelt sich zu grösseren Klumpen. 
Querschnitt durch die männliche Rhachis der Keimzone mit zwei 
Rhachiskernen. 

Spermiogonienkern mit Chromätinbrocken von unregelmässiger 
Gestalt. 


Spermiogonienkern, Chromatin kurze Stäbchen. 


und 17. Spermiogonienkerne mit geschlängelten Chromatinfäden. 


Spermiogonienkern, dessen Chromatinfäden nur noch gebogen oder 
schon gerade geworden sind. 

Spermiogonienkern ohne Membran mit stark verkürzten Chromatin- 
stäbchen, die einen Querspalt aufweisen und eine Parallellagerung 
andeuten. 

Spermiogonienkern bei Polansicht mit elf Chromosomen. 


geteilter Äquatorialplatte und einzelnen Chromosomen einer zer- 
schnittenen Äquatorialplatte, um die Stellung der Chromosomen zu 
veranschaulichen. 

Spermiogonienkern weit differenziert mit drei Nukleolen, davon 
einer stäbchenförmig. 

Eine iosgerissene Spermiogonienzelle aus dem Beginn der Wachstums- 
zone (I. Nukleolusstadium). 

Spiremstadium, Kern oval mit undeutlicher Membran, das Chromatin 
beginnt zu verklumpen, dazwischen ein achromatischer Faden, 
ausserdem zwei grössere Brocken (Nukleoli). 


262 


Fig. 


Kenn aRtnihumzee 


25a—c. Synapsisstadien vor der Mitte der Wachstumszone; bei a 
und b Membran nicht nachweisbar. Das Chromatin weiter ver- 
klumpt. c Deutlicherwerden des Gesamtbildes. 


. 26a—i. Langgestreckte Knäuelstadien aus der Mitte der Wachstumszone. 
. 27. sSpermiogonienstadium aus dem Ende der Wachstumszone. 


28a—c. Spermiogonienkerne aus dem Ende der Wachstumszone. 


. 29. Übergang zum kugligen Spermiocytenstadium. 
g. 30a und b. Junge Spermiocyten erster Ordnung; das Chromatin faden- 


förmig. 


. 3la und b. Junge Spermiocyten erster Ordnung; die Chromatinfäden 


werden deutlicher und lassen bei b schon teils eine Zusammen- 
setzung aus mehreren Chromosomen erkennen. 


. 32a und b. Spermiocyten erster Ordnung vor der Spindelbildung; 


Tetraden schon deutlich zum Teil einander parallel gestellt. 


. 33a—c. Polansichten der ersten Reifeteilung (Rosettenstadium); das 


Monosom fällt durch seine Kleinheit auf. d Spindel von der 
Seitenansicht. 


Tafel IX. 


.38, 39, 45, 46: Fixation Flemming, gefärbt mit Safranin- Lichtgrün. 
.45: Heidenhain. Fig. 34—37, 48, 56—71: Fixation Bouin, gefärbt 


mit Böhmers Hämatoxylin, Gentianaviolett-Orange G, meist 
Gram. 


. 40-44, 47, 49: Ausstriche! Fixation Osmiumsäuredämpfe, gefärbt nach 


Giemsa oder May-Grünwald. 


. 3£a—c. Anaphasen der ersten Reifeteilung mit und ohne heterotypischer 


Bewegung eines Chromosoms. 


.35a—d. Tochterplatten von der Polansicht. 
. 36a—e. Zweite Reifeteilung, a und ce Polansichten mit sechs und fünf 


Chromosomen; e Heterokinese. 


. 37 a—f. Zweite Reifeteilung, von c ab Polansichten der Tochterplatten. 
.38a und b. Junge Spermatiden mit kugligem Kern; bei b schon 


exzentrisch lagernd. 


. 39. Streckung der Spermatide, b Kern zuckerhutförmig. 
. 40-42. Die gleichen Stadien an Ausstrichpräparaten gewonnen; in 


ihrer ganzen Gestalt grösser, der Kern lockerer, ein Fadenknäuel 
bildend. 


. 43. Spermiocyte erster Ordnung (Ausstrichpräparat). 
. 44a—d. Ausbildung der Ejakulationsstadien; das Hinterende keulen- 


förmig angeschwollen, die Oberfläche des Plasmaanhanges warzig. 


. 45a—c. Spermatiden im kugligen Hinterende kappenförmiger Körper, 


im Plasmaanhang zahlreiche stark gefärbte Körnchen. 


. 46a—d. Spermatidenumbildung von Sclerostomum vulgare; ein Teil des 


Chromatins wandert in den Plasmaanhang. 


. 47. Spermatide gefärbt nach May-Grünwald mit kappenförmigem 


Körper im Hinterende und dunkler gefärbtem Kernteil vor dem 
Übergang in den Plasmaanhang. 


ig. 50. 


Fig. 
Fig. 
Fig. 
Fig. 
Fig. 
Fig. 
Fig. 


Fig. 
Fig. 


Fig. 
Fig. 


Fig. 


Fig. 
Fig. 


Fig. 


Fig. 
Fig. 


Fig. 


Fig. 
Fig. 


. 48. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 263 


Querschnitt durch die Uteruswand (Uw.) mit Kern (K.) und an- 
heftenden Spermatiden (Sp.). 


. 49a—e. Umwandlungsformen aus dem Uterus. e befruchtungsfähiges 


Spermium, gefärbt nach Giemsa. 


Längsschnitt durch die weibliche Rhachis der Keimzone mit grossem 
Rhachiskern (Rhk.); im umgebenden Syncytium ein Zwischenkörper 
(ZwK.). 

Längsschnitt durch die weibliche Rhachis (Beginn der Wachstums- 
zone) mit Rhachiskern. 


Oogonienkern, das Chromatin in Brocken auf einem achromatischen 
Faden verteilt. 


53a—d. Vier Zwischenkörper in verschiedenen Stadien der Rück- 


54. 


bildung. 
Oogonienkern aus dem Anfang der Wachstumszone; das Chromatin 
auf einem Faden verteilt. 
Oogonienkern aus der Wachstumszone, dichtes Knäuelstadium. 
Oogonienkern aus der Wachstumszone, lockeres Knäuelstadium. 
ÖOogonienkern aus der Wachstumszone; das Chromatin zieht sich 
auf dem Faden an einigen Punkten zusammen. 

und 59. Zwei isolierte Kerne bei stärkerer Vergrösserung. welche 
die chromatischen Elemente deutlich als Tetraden erkennen lassen. 
Eine kuglige Richtungsspindel an der Eiperipherie; die undeut- 
lichen Tetraden der Membran noch parallel gerichtet. 
Kuglige Richtungsspindel, die Tetraden senkrecht zur Eimembran. 
Richtungsspindel von Sclerostomum equinum bei halber Polansicht 
mit sehr schlanken Tetraden. 
Richtungskörper mit zwei kleineren Tetraden. 
Anaphase bei der ersten Richtungskörperbildung mit heterotypischer 
Bewegung einer Chromosomengruppe. 
Anaphase bei der ersten Richtungskörperbildung mit Aufspaltung 
der Dyaden. 
Anaphase bei der ersten Richtungskörperbildung, Polansicht. 
Anaphase bei der ersten Richtungskörperbildung bei schräger Pol- 
ansicht, die Dyaden schon ganz aufgespalten. 
Anaphase der ersten Richtungskörperbildung, Seitenansicht, Tonnen- 
form. 
Zweite Richtungsspindel (II Sp.) und erster Richtungskörper (I Rk.). 
Ei mit erstem und zweitem Richtungskörper und männlichem und 
weiblichem Vorkern. 


Ei mit Richtungskörper und dem gerade entstehenden männlichen 
und weiblichen Vorkern. 
Späteres Entwicklungsstadium der Vorkerne. 


Richtungsspindel (Rsp.) und Spermakern (Sp.) dicht nebeneinander. 


264 Kurt .Kühtz: 


Tafel X. 


Fig. 74—83, 86—94: Fixation Bouin, gefärbt nach Gram oder Böhmers 
Hämatoxylin. Fig. 84 und 85: Fixation Helly, gefärbt mit Böhmers 
Hämatoxylin. 

Fig. 74 und 75. Ungleich entwickelte Vorkerne (Vk.), zur Seite Richtungs- 

körper (Rk.). 

Fig. 76. Die beiden Vorkerne (Vk.) dicht nebeneinander, der männliche mit 
zwei Öentrosomen mit Plasmastrahlung. 

Fig. 77. Die Vorkerne rücken übereinander. 

Fig. 78. Erste Furchungsspindel mit Rest der Kernmembran (Km.). 

Fig. 79. Die beiden Vorkerne halb verschmolzen, im Innern das Uhromatin 
in zahlreichen Pünktchen, noch keine Chromosomen erkennbar. 

Fig. 80. Furchungskern mit geschlängelten Chromosomen. 

Fig. 81. Vereinigung zweier ungleicher Vorkerne. 

Fig. 82. Zwei Vorkerne, die beide schon deutlich geschlängelte Chromosomen 
aufweisen. 

Fig. 83. Vereinigung zweier Vorkerne, die beide schon Uhromosomen aus- 
gebildet haben. 

Fig. 84. Polyspermie bei einem abgekühlten Ei. 

Fig. 85a—d. Schnittserie durch ein Ei, das trotz Polyspermie Spindeln 
ausgebildet hat. 

Fig. 86. Erste Furchungsspindel, Centrosom (C©.) mit Nebenkörnchen (Nk.). 

Fig. 87. Erste Furchungsspindel von der Polansicht, Centrosom mit Neben- 
körnchen (Nk). 

Fig. 83. Anaphase der ersten Furchungsspindel. 

Fig. 89. Durchschnürung des Eiplasmas; jeder Blastomerenkern schon von 
einer Membran umgeben, das Chromatin wieder in Bröckchen 
verteilt. 

Fig. 90—92. Eier, die eine verschiedene Stellung der ersten Teilebene auf- 
weisen. 

Fig. 93. Ei aus der Vagina eines Sclerostomum equinum. 

Fig. 94. Ei aus dem Uterus eines Sclerostomum edentatum. 


Über die Spermio- und Oogenese der Sclerostomum-Arten etc. 265 


Erklärung der Textfiguren. 


Fig. A—C: Fixation Helly, gefärbt mit Böhmers Hämatoxylin. 
Fig. D—--H: Fixation Bouin, gefärbt mit Böhmers Hämatoxylin. 

Textfig. A (S. 205). Querschnitt durch einen etwas älteren Teil der Wachs- 
tumszone der Ovarialröhre. Die Rhachis hat ihre grösste Ausdehnung 
überschritten. Das Plasma der umliegenden Oogonienzellen nimmt 
durch Dotteraufspeicherung blasiges Aussehen an. Das Chromatin 
der grösser gewordenen Kerne hat sich auf wenige Reste an einer 
Stelle zusammengezogen. 

Textfig. B (S. 238). Querschnitt durch den unteren Teil der Wachstumszone. 
Die Rhachis weiter reduziert. Im Plasma der Oogonien treten stark 
färbbare Körnchen auf, die einen Vorrat für die zu bildende Ei- 
hülle darstellen. Der Chromatinklumpen zeigt unregelmässige 
Gestalt. 

Textfig. © (5. 238). Querschnitt durch das Ende der Ovarialröhre. Die 
Rhachis in einzelne Fasern aufgelöst. Die Oogonien zeigen im 
Plasma weitere Vermehrung der Vorratsstoffe zur Eihüllenbildung. 
Der Chromatinklumpen wird lockerer. 

Textfig. D und E (5.241). Zwei Eier aus dem Eileiter, E kurz vor Eintritt 
in den Uterus mit Chromatinelementen (Chr. el.) im Kerngerüst 
(Kg.) und zwei Nukleolen (Nue.). 

Textfig. F und G (S. 244). Zwei Eier aus dem oberen Uterusteil, das Linin- 
gerüst (Li.) des Kernes durcb Böhmers Hämatoxylin stark 
gefärbt. Bei G verlassen die Tetraden (Chr.) gerade das Kern- 
gerüst und wandern ins Eiplasma. 

Textfig. H (S. 245). Frisch befruchtetes Ei; zeigt noch den Rest der zur 
Eihüllenbildung aufgespeicherten Reservekörper (Rsvk.), am Rand 
die Richtungsspindel (Rsp.) bei schräger Aufsicht, das Spermium 
(Sp.) und das zusammengeschrumpfte Liningerüst (Li.). 


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267 


Aus dem Anat.-Biologischen Institut zu Berlin und der Zoologischen Station 
zu Neapel. 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen durch 
chemische Stoffe. 


Von 
Günther und Paula Hertwig. 


Hierzu Tafel XI, XII und 6 Textfiguren. 


Inhalt Seite 
riet he. ee age et lat he ar MR 2 ers. Se elueer 25 
ABsperimenteller. Teil. u... 2.1... w 268 

I. Bastardierungsexperimente an den hie. von Arena Sole 
mit chemisch vorbehandeltem Samen von Rana fusca . . . 268 

I. Versuche an den Samenfäden von Rana esculenta mit Chloral- 
hydrat, Nikotin und Strychhin . ...... 277 

III. Versuche an den Samenfäden von Gobius jozo air Methylen- 
blaurund. Methylerun n.e0 . 2.0, ö 278 


IV. Versuche an den Samenfäden von Saeln ne Chlosall 
hydrat, Strychnin, Nikotin, Methylgrün, Kristallviolett und 


Meihylenblam.. yasni) Sa nl is une 282 
B. Zytologische ma über das Schicksal des durch 
Methylenblau geschädigten Spermachromatins im Seeigeleii . . 290 
KRRNTSEHTENIEN" Teile, urn Van ee 296 
Die verschieden grosse Resistenz des Sperma gegen chemische 
Mittel: 
a) bei Vertretern von verschiedenen Spezies. . .. 2... 295 
b) bei verschiedenen Tieren derselben Spezies ....... 299 
c) der einzelnen Samenfäden desselben Tieres ....... 299 
Selektion der methylenblaufesten Spermien bei den 15—18 stün- 
digen: Seeigelexperimenten "N. a U EIERN 300 
Einleitung. 


In zwei Mitteilungen an die Akademie der Wissenschaften 
hat OÖ. Hertwig über Keimesschädigungen berichtet, die er 
durch Behandlung von Samenfäden von Rana fusca durch eine 
Anzahl von chemischen Mitteln, wie Methylenblau, Chloralhydrat 
und Strychnin, erzielt hat. Genau so wie durch Bestrahlung 
der Spermatozoen mit Radium konnten auch durch schwache 


wässerige Lösungen der genannten Chemikalien, die auf die 
Archiv f.mikr Anat. Bd.83. Abt. II. 18 


268 Günther und Paula Hertwig: 


Samenflüssigkeit einige Zeit einwirkten, die Samenfäden in ihrer 
Konstitution derart verändert werden, dass die mit ihnen be- 
fruchteten, gesunden Eier eine abnorme Entwicklung einschlugen. 
Die auf diesem Wege erzielten missbildeten Embryonen glichen 
in vieler Hinsicht den parthenogenetischen Larven, die durch 
intensive Radiumbestrahlung der Samenfäden gewonnen wurden. 
Daher sprach O. Hertwig die Vermutung aus, dass auch die 
Larven in seinen chemischen Versuchen zum Teil auf partheno- 
genetischer Grundlage sich entwickelt hätten. Der Zweck unserer 
Arbeit ist es nun, für diese Annahme durch geeignete Experimente 
den Beweis zu erbringen, dann aber auch die von OÖ. Hertwig 
an Amphibien begonnenen Untersuchungen auf andere Tierklassen 
auszudehnen und an geeigneten Objekten das Schicksal des durch 
chemische Eingriffe veränderten Spermachromatins während der 
Entwicklung mikroskopisch zu verfolgen. 

Über unsere Experimente wollen wir in drei Abschnitten 
berichten. Im ersten Teil wird durch Kombination von Bastar- 
dierung und Behandlung der Samenfäden mit chemischen Agentien 
der Nachweis geführt werden, dass die Entwicklung von Eiern, 
die mit artfremdem, chemisch geschädigtem Sperma besamt 
wurden, tatsächlich zu einer parthenogenetischen wird. Im zweiten 
Teil werden wir analoge Experimente an Vertretern der Klasse der 
Fische und Echinodermen beschreiben und schliesslich an dritter 
Stelle das Verhalten des chemisch geschädigten Spermachromatins 
an mikroskopischen Schnitten durch Seeigeleier verfolgen. 

Die Versuche an Fischen und Seeigeln wurden in den 
Monaten März und April an der Zoologischen Station in Neapel 
ausgeführt, wo wir durch das preussische Kultusministerium einen 
Arbeitsplatz erhalten hatten. Wir ergreifen gerne die Gelegenheit, 
dem Leiter der Zoologischen Station, Herrn Prof. R. Dohrn, 
für die liebenswürdige Aufnahme und die mannigfaltige Unter- 
stützung bei unseren Arbeiten unseren besten Dank auszusprechen. 


Experimenteller Teil. 

I. Bastardierungsexperimente an den Eiern von Rana 
esculenta mit chemisch vorbehandeltem Samen von 
Rana fusca. 

In seiner Arbeit „Parthenogenesis bei Wirbeltieren, hervor- 
gerufen durch artfremden, radiumbestrahlten Samen“ hat Günther 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen ete. 269 


Hertwig den Nachweis geführt, dass bei einer Reihe von 
Bastardierungsexperimenten, bei denen das Kreuzungsprodukt 
infolge der disharmonischen Idioplasmaverbindung stets auf dem 
Blastulastadium abstirbt, das Entwicklungsresultat erheblich besser 
ausfällt, wenn die artfremden Samenfäden vor der Vereinigung 
mit dem Ei für einige Zeit der Einwirkung von Radiumstrahlen 
ausgesetzt wurden. Die Erklärung für dieses auffällige Resultat 
wurde in der durch die Radiumbestrahlung herabgesetzten oder 
ganz aufgehobenen Vermehrungsfähigkeit des väterlichen Chro- 
matins erblickt, durch die eine disharmonische Verbindung des 
mütterlichen und väterlichen Chromatins mit ihren für die Ent- 
wicklung so schädlichen Folgen verhindert wird. Die Entwicklung 
des mit artfremdem, radiumbestrahltem Sperma besamten Eies ist 
als eine parthenogenetische zu bezeichnen, da allein der Eikern 
sich vermehrt und den Kernapparat des Embryos bildet. Die 
Richtigkeit dieser Anschauung konnte einmal von G. Hertwig 
dadurch nachgewiesen werden, dass er durch Messungen die haploide 
Natur der Kerne bei seinen Versuchstieren feststellte: ferner er- 
gaben die mikroskopischen Untersuchungen von P. Hertwig am 
Froschei, von Oppermann bei der Forelle und von G. Hertwig 
am Seeigelei mit aller Deutlichkeit die Vermehrungsunfähigkeit 
des intensiv radiumbestrahlten Samenkerns und seine Ausschaltung 
während der ersten Teilungen des Eies. Inzwischen ist auch 
noch bei einigen anderen Bastardkombinationen, die gleichfalls 
normalerweise auf dem Blastulastadium absterben, das zuerst am 
Frosch und an der Kröte ausgeführte Experiment mit demselben 
Erfolg angestellt worden, so von OÖ. Hertwig bei Triton X 
Salamander, sowie von uns bei einer Fischkreuzung Crenilabrus 2 
X Gobius g, ein Versuch, über den wir demnächst in diesem 
Archiv berichten werden. 

Die Bastardverbindungen, bei denen das Zeugungsprodukt 
auf dem Blastulastadium abstirbt, lassen sich nun, wie aus dem 
soeben Gesagten hervorgeht, umgekehrt auch zur Entscheidung 
der Frage benutzen, ob eine Behandlung der Samenfäden mit 
chemischen oder physikalischen Agentien zu einer Schädigung 
ihrer Kernsubstanz geführt hat. Ergibt sich bei dem Experiment, 
dass die Entwicklung nunmehr über das Blastulastadium hinaus 
zur Embryobildung fortschreitet, so ist damit der Beweis erbracht, 


dass die Kernsubstanz des Samenfadens durch die Vorbehandlung 
15* 


270 Günther und Paula Hertwig: 


tatsächlich geschädigt ist und in ihrer Vermehrungsfähigkeit 
gelitten hat. 

Zu unseren Experimenten benutzten wir die schon von 
G. Hertwig bei seinen Radiumexperimenten verwandte Bastard- 
kombination Rana esculenta@ X Rana fuscag; von Chemikalien 
liessen wir Strychninum nitricum, Chloralhydrat und Methylenblau 
auf die Samenfäden einwirken; unter diesen drei chemischen 
Mitteln erwies sich in der angewandten Konzentration das erste 
als unwirksam, während die beiden anderen positive Resultate 
ergaben. Zu jedem Experiment wurde ein Hoden in einigen 
Tropfen 0,3 proz. Kochsalzlösung möglichst fein zerzupft und die 
so gewonnene konzentrierte Samenmilch dann mit dem gleichen 
Teil der chemischen Lösung versetzt und gründlich durcheinander- 
gerührt. Nach einem bestimmten Zeitintervall wurde dann 
dieses Gemisch in der zur Befruchtung geeigneten Verdünnung 
mit 0,3proz. Kochsalzlösung zur Besamung der Eier verwandt. 


a) Versuche mit Strychnin. 

Am 16. Mai wurde der noch von Spermatozoen strotzende 
Hoden eines seit März in einem kühlen Raum aufbewahrten 
Männchens von Rana fusca in 0,3 proz. Kochsalzlösung zerzupft 
und dann die Samenmilch mit dem gleichen Teil einer 0,75 proz. 
Strychninum-nitricum-Lösung mit 0,3 °/o Kochsalzzusatz gut ver- 
rührt. Nach 1!/ı Stunden wurde dies Gemisch, in dem die 
Samenfäden noch lebhaft beweglich waren, zur Befruchtung von 
etwa 60 Stück Eier von Rana esculenta benutzt. Die gute Be- 
schaffenheit des Eimaterials wurde gleichzeitig durch eine Normal- 
befruchtung festgestellt. Drei Stunden nach der Besamung begann 
in dem Strychninversuch die Teilung der Eier, die bei der Hälfte 
zur normalen Zwei- und später Vierteilung führte, während sich 
die andere Hälfte mehr oder minder stark unregelmässig infolge 
von Polyspermie furchte. Wie ja schon aus den Experimenten von 
Pflüger und Born bei derselben Kreuzung hervorgeht, und 
wie wir durch unsere Versuche erneut bestätigen können, ist 
das Verhältnis, in dem sich die Eier von Rana esculenta mit dem 
Samen von Rana fusca monosperm befruchten lassen, je nach 
dem Eimaterial und der Konzentration des Samens ein sehr 
wechselndes. So kann es vorkommen, dass fast alle Eier mehr- 
fach befruchtet werden, während ein andermal die Samenfäden 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 271 


bei einer grossen Anzahl von Eiern überhaupt nicht in das Ei- 
innere zu dringen vermögen und dann die von Born zuerst be- 
schriebene „Eindellung* der Eier hervorrufen. In unserem 
Strychninversuch unterblieb die Eindellung ganz, da kein Ei 
unbefruchtet war. 

Zwei Tage nach der Befruchtung gastrulierten die mit art- 
gleichem Samen befruchteten Kontrolleier in normaler Weise, 
während die Eier des Strychninversuches das Blastulastadium 
nicht überschritten hatten; nur bei vier Stück hatte sich eine 
Art Riesendotterpfropf gebildet, eine Erscheinung. die man jedoch 
auch bei normaler Kreuzung ohne Strychninbehandlung des Samens 
beobachten kann, wie schon G. Hertwig in seiner Arbeit (1912) 
beschrieben hat und wie wir durch Kontrollversuche bestätigen 
können. Am nächsten Tage waren sämtliche Eier des Strychnin- 
versuches abgestorben, ohne sich weiter entwickelt zu haben. Im 
Gegensatz zu OÖ. Hertwigs Versuchen mit 0,25 proz. Strychnin- 
lösung, die er '/—2 Stunden auf die Samenfäden von Rana 
fusca einwirken liess und durch die er starke Missbildungen 
hervorrufen konnte, haben wir also in unseren Bastardierungs- 
versuchen trotz einer dreimal so starken Strychninlösung keine 
Schädigung der Samenfäden feststellen können, die zu einer 
Vermehrungsunfähigkeit oder -beschränkung ihres Chromatins 
führte. 

b) Versuche mit Chloralhydrat. 

Günstiger verlief in dieser Hinsicht ein Versuch mit Chloral- 
hydrat, den wir am 20. Mai anstellten, während ein anderer Ver- 
such am 16. Mai ebenfalls ergebnislos geblieben war. 

Am 16. Mai benutzten wir eine Samenflüssigkeit, die zur 
Hälfte mit einer 0,5proz. Lösung von Chloralhydrat vermischt 
worden und eine halbe Stunde in dieser Mischung geblieben 
war. Sämtliche 25 Eier, die mit dieser Flüssigkeit besamt und 
monosperm befruchtet worden waren, starben auf dem Blastula- 
stadium ab. 

Am 20. Mai wiederholten wir den Versuch mit einer schwächer 
konzentrierten Chloralhydratlösung von 0,25°o. Von der mit 
dieser Lösung zu gleichen Teilen versetzten Samenflüssigkeit 
benutzten wir eine Portion nach einer viertel Stunde, eine andere 
nach einer Stunde zur Kreuzbefruchtung. Diesmal war das Ver-. 
hältnis der regelmässig zwei- und viergeteilten, also monosperm 


272 Günther und Paula Hertwig: 


befruchteten Eier ein ganz besonders günstiges, da von je 
40 Eiern sich nur etwa drei bis vier Stück unregelmässig furchten 
und nur ganz vereinzelte unbefruchtete die Dellenbildung zeigten. 
Die Eier der ersten Portion, die nach einer viertel Stunde Chloral- 
hydrateinwirkung befruchtet worden waren, entwickelten sich nicht 
über das Blastulastadium hinaus. Dagegen boten die Eier der 
zweiten Portion am 23. Mai folgendes Bild dar: Bei einem Ei 
hatte sich ebenso wie bei den mit artgleichem Samen befruchteten 
Kontrolleiern die Nervenplatte gebildet. Vier andere Eier besassen 
einen engen Dotterpfropf, bei zehn weiteren Stück hatte die 
(rastrulation zur Bildung eines Riesendotterpfropfes geführt. Der 
Rest von zehn Eiern war auf dem Blastulastadium stehen ge- 
blieben und am nächsten Tag zerfallen. Am 24. Mai war bei 
zwei Eiern das Nervenrohr fast geschlossen, die anderen Eier 
hatten sich zu mehr oder minder gut ausgebildeten Spinae bifidae 
entwickelt, von denen ein Teil konserviert wurde. Sie boten das- 
selbe Bild dar, wie die von OÖ. und G. Hertwig in ihren Studien 
über die Radiumkrankheit beschriebenen und abgebildeten Spinae 
bifidae, so dass auf ihre nähere Beschreibung hier verzichtet 
werden kann. 

Im Laufe der nächsten Tage starben in dem Chloralhydrat- 
versuch noch vier Stück ab, so dass am 27. Mai nur noch vier 
Embryonen lebten, von denen drei am 27. Mai, der letzte am 
folgenden Tage konserviert wurden. Drei von ihnen sind mit 
einer gleichaltrigen Kontrollarve auf Fig. 1—4 (Taf. XI) ab- 
gebildet. Sie sind sämtlich in der Entwicklung stark zurück- 
geblieben, besonders der Schwanz ist ganz verkümmert; bei dem 
einen Embryo ist die Schwanzanlage, wie man deutlich auf der 
Abbildung (Fig. 2) erkennt, verdoppelt. Dieser schlechten äusseren 
Entwicklung entspricht auch die innere Differenzierung der Organe, 
wie die mikroskopische Untersuchung ergab. Die Augenanlage 
war oft verkümmert, die Ventrikelhöhlen stark erweitert und 
mit zerfallenen Zellhaufen in ihrem Innern angefüllt. An der 
Epidermis konnten auch wieder, wie bei den radiumkranken 
Larven von OÖ. Hertwig, zottige Exkreszenzen festgestellt werden. 

Vergleichen wir das Ergebnis dieses Versuches mit den er- 
heblich günstigeren Entwicklungsresultaten. die G. Hertwig 
durch Radiumbestrahlung der Samenfäden von Rana fusca an 
den Eiern von Rana esculenta erhielt, sowie mit den sogleich 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 273 


zu besprechenden gleichfalls erheblich besseren Erfolgen unserer 
Methylenblauversuche, so ergibt sich ohne weiteres, dass von einer 
völligen Ausschaltung des Spermachromatins infolge der Vernichtung 
seiner Vermehrungsfähigkeit durch das Chloralhydrat keine Rede 
sein kann. Selbst bei den am besten entwickelten Embryonen 
müssen wir eine gewisse, wenn auch durch das Chloralhydrat 
beeinträchtigte Mitbeteiligung des Spermachromatins an der Ent- 
wicklung und dadurch verursachte Schädigung des Embryos an- 
nehmen. Denn die rein parthenogenetische Entwicklung bei Rana 
esculenta verläuft, wie G. Hertwig gezeigt hat, viel normaler. 
Immerhin geht aus unserem Versuch mit aller Deutlichkeit 
hervor, dass durch Chloralhydrat eine Schädigung der Kern- 
substanz des Samenfadens von Rana fusca ohne Beeinträchtigung 
seiner Beweglichkeit erzielt werden kann; dieselbe war aber bei 
unseren Experimenten offenbar viel geringer als bei O. Hertwig, 
der in seinen Versuchen mit gleich starken Chloralhydratlösungen 
12 Tage alte parthenogenetische Rana fusca-Larven erzielte. 
Auch ist bei unseren Experimenten der geringe Prozentsatz von 
Samenfäden auffallend, bei denen eine Veränderung der Kern- 
substanz durch das Chloralhydrat erfolgte; denn in dem mit 
positivem Ausfall angestellten Experiment starb ja fast die Hälfte 
der Eier als Blastulae ab; nur etwa 60°/o gastrulierten und bei 
diesen war wieder die Entwicklung eine sehr verschieden gute, 
indem ein Teil stark missbildete Spinae bifidae, ein anderer 
Teil normaler ausgestaltete Embryonen lieferte. Es ist dies ein 
deutliches Zeichen, dass die Schädigung der überhaupt durch 
das Chloralhydrat beeinflussten Spermatozoen eine verschieden 
starke war. Auf die Erklärung dieser Verhältnisse werden wir 
jedoch erst ausführlich am Schlusse unserer Arbeit eingehen. 


c) Versuche mit Methylenblau (Zinkchloriddoppelsalz). 

Die günstigsten Entwicklungsresultate erhielten wir in einem 
Bastardierungsexperiment, bei dem wir den Samen von Rana fusca 
mit einer 0,05 proz. Methylenblaulösung im Verhältnis 1:1 ver- 
mischten und eine halbe Stunde einwirken liessen. Diesen Ver- 
such stellten wir am 16. Mai an. 3 Stunden nach der Besamung 
waren 30 Eier von Rana esculenta normal zweigeteilt, andere 
20 Stück dagegen mehr oder minder unregelmässig gefurcht. 
Am 18. Mai war bei 22 Eiern ein ganz enger Urmund zu be- 


274 Günther und Paula Hertwig: 


obachten, bei weiteren vier Stück war der Blastoporus noch nicht 
so weit geschlossen, andere vier Eier besassen einen Riesendotter- 
pfropf, während der Rest noch auf dem Blastulastadium verharrte. 
Am 19. Mai waren Eier, die zur Kontrolle mit unbehandeltem 
Rana fusca-Samen bastardiert worden waren, sämtlich als Blastulae 
zerfallen, während im Methylenblauexperiment 22 von normalen 
nicht zu unterscheidende Embryonen mit Kopf- und Schwanzhöcker, 
ferner weitere acht teils schwache, teils stärkere Missbildungen 
mit Spina bifida vorhanden waren. Die Anzahl dieser Embryonen 
entsprach also genau der Zahl der normal zweigeteilten Eier. 

Aber auch von den anderen Eiern, die sich beim Beginn 
der Teilung unregelmässig gefurcht und am Tage vorher noch 
nicht gastruliert hatten, waren gewisse Abschnitte noch am Leben 
geblieben, während andere Eipartien weisslich verfärbt und im 
Zerfall begriffen waren. Schnitte durch diese Eier ergaben als 
Bestätigung der am lebenden Objekt gemachten Beobachtung, 
dass neben zerfallenen nekrotischen Partien, in denen keine Kerne 
zu erkennen waren, sich noch lebende Bezirke nachweisen liessen, 
die in einzelne Zellen mit gut färbbaren Kernen zerlegt waren. 


Wenn diese sich noch weiter differenziert hatten, so entstanden 


Fig. 1. 


Teilbildungen, in manchen Fällen sogar gut ausgebildete Hemi- 
embryones laterales; ein Schnitt durch einen solchen ist in 
Textfig. 1 abgebildet. Links ist ein halbes Nervenrohr, eine 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 275 


Chorda und ein Mesodermsegment angelegt, während die rechte 
Hälfte von einer kernlosen nekrotischen Masse gebildet wird. 
Die Erklärung für derartige Teilbildungen ist nach den Unter- 
suchungen von Brachet und Herlant an polyspermen Frosch- 
eiern nicht schwer zu geben. Sie stammen von den unregel- 
mässig geteilten polyspermen Eiern ab. Die Bezirke des Eies, 
die nur durch Methylenblau geschädigtes Spermachromatin bei 
der Furchung zuerteilt bekommen haben, sind frühzeitig zer- 
fallen, dagegen sind die Teile des Eies, in denen sich der Eikern 
nach mehr oder minder frühzeitiger Ausschaltung des mit ihm 
kopulierten Spermakernes vermehrt hat, lebens- und differen- 
zierungsfähig geblieben. 

Während die Teilbildungen sämtlich im Laufe des folgenden 
Tages abstarben, soweit sie nicht konserviert worden waren, ent- 
wickelten sich die anderen, aus den monosperm befruchteten Eiern 
hervorgegangenen Embryonen zunächst völlig normal weiter; erst 
am 26. Mai, am 10. Tage ihrer Entwicklung, machten sich Unter- 
schiede gegenüber normalen, gleichaltrigen Kontrollarven geltend. 
Denn während diese die Hüllen bereits verlassen hatten und im 
Wasser herumschwammen, war von den Methylenblaularven nur 
ein Teil aus den Hüllen herausgeschlüpft und lag unbeweglich 
auf dem Boden des Gefässes. Auf Berühren mit einer Nadel 
führten sie nur schwach zuckende Bewegungen aus. Von den 
normalen Larven unterschieden sie sich ferner durch einen be- 
deutend kürzeren Schwanz sowie durch das Auftreten von Bauch- 
wassersucht, die in den nächsten Tagen noch erheblich an Stärke 
zunahm. Infolgedessen machte sich nunmehr auch eine allmählich 
immer mehr zunehmende Tendenz zum Absterben bemerkbar, so 
dass im Laufe der nächsten 6 Tage alle Versuchstiere konserviert 
werden mussten. Drei von den ältesten Larven des Methylen- 
blauversuches sind mit einer gleichalten Kontrolle in Fig. 5—8 
(Taf. XT) bei Sfacher Vergrösserung abgebildet. Sie wurden am 
31. Mai konserviert, haben also ein Alter von 15 Tagen erreicht. 
An den Abbildungen erkennt man wieder sehr gut die bedeutende 
Hemmung des Längenwachstums der parthenogenetischen Larven 
des Methylenblauexperimentes, während ihr Entwicklungsgrad, wie 
man schon äusserlich an der Umwachsung der Kiemen erkennt, 
von den normalen Kontrolltieren nicht erheblich differiert. Auch 
die mikroskopische Untersuchung an Schnitten ergab eine Über- 


276 Günther und Paula Hertwig: 


einstimmung mit den Befunden an den parthenogenetischen Frosch- 
larven und Kröten der Radiumexperimente, nämlich eine bedeutende 
(rössenabnahme sämtlicher Organe bei annähernd gleichem Diffe- 
renzierungsgrad im Vergleich zu den Kontrolltieren. 

Zum Schlusse seien noch die Resultate von Kernmessungen 
mitgeteilt, die nach dem Vorbilde und der Methode von G. und 
0. Hertwig an den Methylenblau- und gleichaltrigen Kontroll- 
larven vorgenommen wurden. Sie ergeben, dass die Larven des 
Methylenblauversuches haploide oder thelykaryotische Kerne be- 
sitzen. Es wurden die Ganglienzellkerne des Rückenmarks in 
der Gegend hinter den Ohrbläschen bei 1000 facher Vergrösserung 
gemessen. Wir geben die Resultate in Tabellenform, wobei die 
Bezeichnungen Methyl. = Tier des Methylenblauversuches, Co. — 
Tier des Kontrollversuches bedeuten. Die mit den Nummern I], 
II, III bezeichneten Tiere des Methylenblau- und des Kontroll- 
versuches wurden immer, um einen genauen Vergleich zu er- 
möglichen, in gleicher Weise fixiert, mit Paraffin durchtränkt, 
geschnitten und gefärbt. Alle Tiere hatten ein Alter von 15 Tagen 
erreicht. 


Tabelle I. 


Ganglienzellkerne des Rückenmarks. 
(Vergrösserung 1000 fach.) 


Methyl. oder Co. | Mittlerer Radius r re | ne 

Methyl. I 0,35 0,123 0,043 
Co. I 0,47 0,22 0,104 
Methyl. II 0,36 0,13 0,047 
Methyl. IIa 0,36 0,13 0,047 
Co. II 0,47 0,22 0,104 
Methyl. III 0,38 0,144 0,055 
Methyl. IIIa 0,39 0,15 0,058 
Co. III 0,48 0,23 0,11 


Die Messungen ergeben in Übereinstimmung mit den Be- 
funden an parthenogenetischen Krötenlarven, dass die Volumina 
der Ganglienkerne der Larven des Methylenblauexperimentes zu 
denen normaler Kontrolltiere sich wie 1:2 verhalten. Um die 
bedeutenden Grössenunterschiede zu veranschaulichen, sind in 
den Textfig. 2 und 3 einige Ganglienzellkerne bei 1000facher 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 277 
Vergrösserung von dem in Fig. 7 (Taf. XI) abgebildeten Versuchs- 
embryo und der Kontrollarve Fig. 8, Taf. XI zum Vergleich 
wiedergegeben. 


er 


Nach dem Ergebnis der Kernmessungen kann es keinem 
Zweifel unterliegen, dass sich die Larven des Methylenblau- 
versuches nach Ausschaltung des Samenkernes auf partheno- 
genetischer Basis entwickelt haben. Wir besitzen also im Methylen- 
blau ein Mittel, das in geeigneter Konzentration auf die Samenfäden 
vor der Befruchtung angewendet, genau so wie die Radium- und 
Röntgenstrahlen imstande ist, die Kernsubstanz des Spermatozoons, 
ohne seine Beweglichkeit merklich zu beeinflussen, so zu schädigen, 
dass dieselbe völlig vermehrungsunfähig wird. 


II. Versuche an den Samenfäden vonRana esculenta 
mit Chloralhydrat, Nikotin und Strycehnin. 


Im folgenden seien die Resultate von Versuchen besprochen, 
die wir an den Spermien von Rana esculenta mit drei chemischen 
Mitteln angestellt haben. Da dieselben sämtlich zu keinerlei 
Schädigung der Kernsubstanzen der Samenfäden geführt haben, 
so genügt eine kurze Schilderung der Versuche. 

Zu unseren Versuchen mit Chloralhydrat benutzten wir das 
eine Mal eine O,5proz., das andere Mal eine 0,25proz. Lösung, 
die wir mit der gleichen Menge konzentrierter Samenmilch gut 
vermischten. Nach je 2stündiger Einwirkung des Chloralhydrats 
auf die Samenflüssigkeit befruchteten wir mit derselben eine 
grössere Anzahl Eier von Rana esculenta. In beiden Versuchen 
nahm jedoch die Entwicklung der Eier einen völlig normalen 
Verlauf, ganz im Gegensatz zu den Versuchen von OÖ. Hertwig, 
der bei Rana fusca mit gleich stark konzentratierter Chloral- 


278 Günther und Paula Hertwig: 


hydratlösung sogar schon nach nur !/sstündiger Einwirkung auf 
die Samenfäden eine stark pathologische Entwicklung der Eier 
erzielte. 

Bei den Versuchen mit Nikotin brachten wir eine 0,25 proz. 
und eine 0,15proz. Lösung in Anwendung, die im Verhältnis von 
1:1 der Samenmilch zugesetzt 1 Stunde lang auf sie einwirkte. 
Trotzdem selbst die schwächere der beiden Lösungen noch intensiv 
nach Nikotin roch, behielten die Samenfäden ihre Beweglichkeit 
und liessen sich gut zur Befruchtung verwenden. Die Entwick- 
lung der Eier verlief völlig normal, ein Zeichen, dass der Samen- 
kern durch das Nikotin nicht affiziert wurde. 

Mit Strychnin machten wir drei Versuche. In einem Ver- 
such liessen wir eine 0,15proz., in einem anderen eine 0,3 proz. 
Lösung von Strychninum nitricum je 1 Stunde auf die in gleichen 
Teilen zugesetzte Samenmilch von Rana esculenta einwirken. 
In einem dritten Experiment kam eine 0,3proz. Lösung während 
17 Stunden zur Anwendung. Selbst durch diese lange Berührung 
mit der Strychninlösung wurde die Beweglichkeit der Spermien 
nicht merklich herabgesetzt. In allen drei Experimenten verlief 
jedoch die Entwicklung der Eier, die mit dem mit Strychnin 
behandelten Samen befruchtet worden waren, völlig normal. Es 
sei daran erinnert, dass OÖ. Hertwig bei Rana fusca durch eine 
0.25 proz. Strychninlösung, die er auf die Samenfäden eine halbe 
und 2 Stunden einwirken liess, in einem Falle eine stark gestörte 
Entwicklung (Spinae bifidae) erzielte, während allerdings ein 
identischer Versuch an einem anderen Tage ein erheblich besseres 
Entwicklungsresultat ergab. 


III. Versuche an den Samenfäden von Gobius j0zo 
mit Methylenblau und Methylgrün. 


Die Entwicklung von Fischeiern suchten wir zu beeinflussen, 
indem wir sie mit Samen befruchteten, den wir der Einwirkung 
von Methylenblau und Methylgrün ausgesetzt hatten. Zu diesem 
Zweck stellten wir zwei verschiedene Experimente an. — In beiden 
Fällen benutzten wir den Samen von Gobius jozo, den wir durch 
Absaugen aus dem zerzupften Hoden gewannen und im Uhr- 
schälchen mit der gleichen Quantität der chemischen Lösungen 
gut verrührten. Hierbei wurde beachtet, dass grössere Gewebs- 
brocken, deren Durchtränkung Schwierigkeiten machen könnte, 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 279 


nicht in die Lösungen kamen. Wir glauben annehmen zu dürfen, 
dass alle zur Befruchtung gelangenden Spermien gleichmässig 
der Einwirkung des chemischen Stoffes ausgesetzt gewesen sind. 
In den Uhrschälchen, die gut verdeckt in der feuchten Kammer 
aufgehoben wurden, blieben die Spermien, bis wir in ihrer Beweg- 
lichkeit infolge der Wirkung der chemischen Stoffe eine starke 
Abnahme konstatieren konnten. Während der mit etwas See- 
wasser versetzte Kontrollsamen noch nach. 3 Stunden lebhaft 
beweglich war, befanden sich in den chemischen Lösungen schon 
nach 1 Stunde eine grosse Anzahl starrer Spermien, und auch 
die Beweglichkeit der Überlebenden hatte stark gelitten. Um 
noch ein gutes Befruchtungsresultat zu erzielen, liessen wir daher 
den Samen nicht über 1 Stunde in den Lösungen. 

Im ersten Versuch behandelten wir den Gobiussamen mit 
Methylgrün in O,lproz. Lösung (Zucht C) und mit 0,1 und 
0,02proz. Methylenblau (Zucht A und B). Nach 1 Stunde wurden 
vier Eiportionen von Gobius jozo befruchtet, drei mit chemisch 
behandeltem Samen, eine mit normalem Sperma zur Kontrolle. 
In allen vier Zuchten erzielten wir ein gutes Befruchtungsresultat; 
ebenso erfolgte die zweite Teilung überall nach 1 Stunde 20 Min. 
ohne Verzögerung. Die Eier, die mit Methylgrünsamen befruchtet 
worden waren, entwickelten sich auch ferner normal. Wir er- 
hielten aus ihnen nach 13 Tagen langgestreckte Embryonen mit 
pigmentierten Augen und pulsierendem Herzen, die sich nicht 
von der Kontrolle unterschieden. Dieser gute Entwicklungsverlauf 
bewies uns, dass sich der Spermakern normal an der Entwick- 
lung beteiligt hatte. 

Hingegen gelang es uns, das Spermachromatin durch 
Methylenblau zu schädigen, wie die Entwicklungsstörungen der 
Zuchten A und B zeigten. Hierbei ist zu bemerken, dass, ob- 
gleich Methylenblau von etwas verschiedener Konzentration auf 
A und B eingewirkt hatte, kein grosser Unterschied zwischen 
den beiden Zuchten bestand. B entwickelte sich nur um ein 
weniges besser wie A. 

Das Versuchsresultat war folgendes: Schon nach 2 Tagen 
waren in A und B die meisten Embryonen stark in der Ent- 
wicklung hinter den Kontrollen zurückgeblieben. Während in der 
Kontrolle fast nur Embryonen mit Kopf und Schwanzhöcker waren, 
bei denen sich die Augenblase zu differenzieren begann, fanden 


280 Günther und Paula Hertwig: 


wir in den „Methylenblauzuchten“ zahlreiche Missbildungen und 
Spinae bifidae vor. Nur wenige Embryonen zeigten Kopf und 
Schwanzhöcker, und auch von diesen waren die meisten kürzer 
als die Kontrolle, Am 5. Tage nach der Befruchtung waren in 
A und B neben schon abgestorbenen Missbildungen eine grosse 
Anzahl mehr oder weniger stark pathologischer Embryonen, die 
zum Teil schon Zerfallerscheinungen zeigten, zu finden. Wir 
konservierten einen. Teil in Pikrinessigsublimat. Fig. 9 und 10, 
Taf. XI, zeigen Photographien dieser Embryonen. 

Ein Beispiel für sehr schlecht entwickelte aber noch lebende 
Larven sehen wir in Fig. 9 abgebildet. Der Embryo ist vom 
Dotter nur wenig abgesetzt. Von irgend welcher Organbildung 
ist nichts zu erkennen. — Etwas besser entwickelt sind andere 
Embryonen, z. B. der in Fig. 10 dargestellte. Dieser Embryo ist 
fast doppelt so lang, Kopf und Schwanz heben sich deutlich ab. 
Doch ist auch er weit in der Entwicklung zurück, wie uns ein 
Vergleich mit der gleich alten Kontrolle (Fig. 11) zeigt. Bei 
Fig. 10 sind noch keine Augen zu erkennen, der Schwanz ist 
kurz und abgestutzt, der Flossensaum undeutlich und trübe. 
Jede Pigmentbildung fehlt noch. Die Kontrolle dagegen ist be- 
deutend länger, zeichnet sich durch grosse Durchsichtigkeit der 
Gewebe aus und zeigt grosse Augen mit schöner Pigmentierung. 
Der Schwanz ist langgestreckt mit gut ausgebildetem Flossen- 
saum und zahlreichen Pigmentzellen. Auch konnten wir am 
lebenden Objekt die beginnende Herzpulsation konstatieren. 

Unter den Methylenblauembryonen fanden wir neben vielen 
Missbildungen auch einige vor, und zwar in Zucht B in grösserer 
Zahl als wie in Zucht A, die sich nicht von der Kontrolle unter- 
schieden. Diese entwickelten sich auch ferner normal und standen 
am 13. Tage dicht vorm Ausschlüpfen, während nach Ablauf der- 
selben Zeit alle Missbildungen zerfallen waren. 

Das Resultat dieses Versuches lässt sich dahin zusammen- 
fassen, dass wir durch einstündige Behandlung des Gobiussperma 
mit 0,1 proz. Methylgrün keine Schädigung der männlichen Keim- 
zellen hervorrufen konnten, jedoch durch Behandlung des Samens 
mit Methylenblau die Entwicklung der damit befruchteten Eier 
intensiv beeinflussten. — Auffallend ist nur die sehr ungleich- 
mässige Ausbildung der Methylenblauembryonen; neben Larven, 
die kaum über die ersten Stadien der Embryobildung hinaus- 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen ete. 281 


gekommen sind (Fig. 9 und 10), fanden sich vereinzelte normale 
oder fast normale Embryonen vor. Dieses Resultat lässt sich 
nur erklären, wenn wir annehmen, dass neben vielen mehr oder 
weniger stark geschädigten Spermien noch ganz gesunde die 
Befruchtung vollzogen haben. — Eine weitere Möglichkeit, das 
Auftreten der gut entwickelten Embryonen zu erklären, besteht 
in der Annahme einer parthenogenetischen Entwicklung derselben. 
Die Entstehung solcher parthenogenetischer Embryonen wäre so 
zu erklären, dass einzelne Samenfäden so stark durch die 
Methylenblaueinwirkung geschädigt wurden, dass sie zwar durch 
ihr Eindringen das Ei zur Entwicklung anregten, ihr Chromatin 
sich aber nicht mehr an dieser beteiligte. Es würde dann ein 
analoger Fall zu den parthenogenetischen Amphibienlarven O. und 
G. Hertwigs, zu den Fischembryonen Oppermanns und den 
parthenogenetischen, im ersten Teil unserer Arbeit beschriebenen 
Larven von Rana esculenta aus dem Methylenblauversuch vorliegen. 
Dieser Annahme entspricht aber nicht das Aussehen der Embryonen, 
denn sie zeigen nicht den parthenogenetischen Typus. Alle bisher 
gezüchteten parthenogenetischen Larven mit haploidem Kernapparat 
sind kleine lebensschwache Individuen, die ein gewisses Larven- 
stadium nicht überschreiten. So die Amphibienlarven OÖ. und 
G. Hertwigs, die Forellenlarven Öppermanns und zahlreiche 
von uns durch die Radiumbestrahlung der Samenfäden gezüchtete 
parthenogenetische Gobius- und Crenilabrusembryonen, über die 
wir demnächst berichten werden. Die besprochenen Methylenblau- 
larven sind aber ebenso gut ausgebildet wie die Kontrollen, es 
ist daher die Vermutung, die normalen Embryonen der Zuchten A 
und B seien durch Parthenogenese entstanden, von der Hand zu 
weisen. / Weit eher liegt bei den erkrankten Embryonen Partheno- 
genese oder wenigstens Ansatz dazu vor, die Frage ist aber nicht 
näher von uns untersucht worden. — 

Im allgemeinen Teil wird noch weiter über die hier berührte 
Frage einer ungleichmässigen Wirkung des Methylenblaues auf die 
Spermatozoen gesprochen werden. 

Wie schon anfangs erwähnt, suchten wir noch in einem 
anderen Versuch Gobiussperma durch Methylenblau zu schädigen. 
In diesem Experiment behandelten wir den Samen von Gobius 
Jozo in der oben angegebenen Weise dreiviertel Stunde mit 
0,1proz. Methylenblau und befruchteten damit die Eier von Creni- 

© 


282 Günther und Paula Hertwig: 


labrus pavo. Die von uns zum erstenmal vorgenommene Kreuzung 
Crenilabrus pavo ? X Gobius jozo d führt zu einer Entwicklung, 
die nicht über das Blastulastadium hinausgeht. Wir hofften nun, 
durch die Befruchtung mit Methylenblausamen die Entwicklung 
weiter zu bringen, analog den im ersten Teil beschriebenen Frosch- 
experimenten und den Frosch X Kröte-Versuchen G. Hertwigs. 

Wir wurden aber in unseren Annahmen getäuscht. Sämt- 
liche Eier starben, wie es bei dieser Bastardierung die Regel 
ist, auf dem Blastulastadium ab. Schon aus diesem Resultat 
konnten wir den Schluss ziehen, dass der Gobiussamen durch 
das Methylenblau in diesem Versuch nicht geschädigt wurde. 
Dasselbe bewies uns die Untersuchung zweigeteilter Eier, die 
wir in Zenker fixiert, 8 « dick geschnitten und nach Cajal 
gefärbt hatten. Diese Eier zeigten alle normale Spindeln mit 
zahlreichen gut ausgebildeten Chromosomen. Verklumptes oder 
bei der Mitose nachhinkendes Chromatin, das bei einer Schädigung 
des Spermakernes sicher vorhanden wäre, war nicht zu finden. 

Es steht also das Resultat dieses Versuches im Gegensatz 
zu dem ersten Experiment mit Gobiussamen. Im ersten Falle 
fand eine Schädigung statt, im zweiten Falle nicht. Auf die 
Erklärung dieser sich widersprechenden Ergebnisse wird im all- 
gemeinen Teil noch näher eingegangen werden. 


VI. Versuche an den Samenfäden von Seeigeln mit 
Chloralhydrat, Strychnin, Nikotin, Methylgrün, 
Kristallviolett und Methylenblau. 

Die Wirkung auf die Samenfäden von Seeigeln untersuchten 
wir bei einer grösseren Anzahl von chemischen Substanzen. Wir 
benutzten zu unseren Versuchen: a 

1. Methylenblau in der Form des Zinkchloriddoppelsalzes 
in verschiedenen Konzentrationen, deren stärkste 1proz. und deren 
schwächste 0,02proz. war; 

2. Methylgrün in 0,1- und 0,02 proz. Lösungen ; 

3. Kristallviolett in konzentrierter Lösung und zur Hälfte 
verdünnt. 

Ferner wurde die Einwirkung von Chloralhydrat in 0,2 proz. 
Lösung, von Strychnin in Lösungen von 0,75°/o und 0,37 °/o und 
von 0,25 proz. Nikotin untersucht. — Sämtliche Substanzen waren 
im Seewasser gelöst worden. — Zu den Experimenten verwendeten 


Beeinflussung der mämnlichen Keimzellen etc. 283 


wir die Geschlechtsprodukte von Sphaerechinus granularis und 
besonders die von Stronglyocentrotus lividus. 

Der Einfluss chemischer Agentien auf die Geschlechts- 
produkte von Seeigeln ist schon früher einmal von 0. und 
R. Hertwig untersucht worden. Die Arbeit behandelt jedoch 
in erster Linie die Wirkung chemischer Stoffe auf die Eier vor 
und nach der Befruchtung, weniger ausführlich die Beeinflussung 
des Spermas. Besonders wurde meistens die Entwicklung der 
Zuchten nicht über das zweite Teilungsstadium hinaus verfolgt. 
Im allgemeinen stimmen unsere Befunde mit den kurzen Angaben 
OÖ. und R. Hertwigs- überein, nur in bezug auf die Nikotin- 
wirkung differieren unsere Beobachtungen. 

Meistens verlieren die Spermien in den chemischen Lösungen 
rascher ihre Beweglichkeit als wie der mit gleichem Quantum 
Seewasser verdünnte Kontrollsamen. Doch verhielten sich die 
einzelnen chemischen Stoffe verschieden in ihrer Wirkung auf 
die Beweglichkeit der Spermien. So gelang es uns häufig in 
unseren Chloralhydrat-, Methylgrün- und Methylenblaulösungen 
einen Teil der Spermien bis zu 18 Stunden lebend zu erhalten. 
Im 0,75- und 0,37 proz. Strychnin hingegen waren schon nach 
5'/s Stunden alle Samenfäden abgestorben. — Eine anregende 
Wirkung auf die Beweglichkeit der Spermien übte das Nikotin 
aus. Samenfäden, die in 0,25 prozentige Nikotinlösung gebracht 
wurden, bewegten sich in dieser tumultuarisch. Sobald aber die 
Spermien aus der Nikotinlösung in reines Seewasser gelangten, 
liess diese gesteigerte Beweglichkeit äusserst rasch nach und ging 
bald in Starrheit über. Nikotin wirkte also als Stimulans auf 
die Spermien ; sobald der Reiz aber durch Verdünnung der Lösung 
mit Meerwasser aufhörte, trat Unbeweglichkeit ein. Wir erhielten 
aus diesem Grunde auch mit dem Nikotinsamen stets eine sehr 
schlechte Befruchtung, nur 10—15 °/o der Eier entwickelten sich. 
In der Nikotinlösung selbst hielt die lebhafte Bewegung über 
2 Stunden an, liess dann allmählich nach und ging schliesslich 
in Starrheit über. 

Ö.und R. Hertwig, die auch die Reaktion der Spermien 
auf Nikotinlösungen untersuchten, erwähnen diese Beobachtungeı. 
nicht. Sie konstatieren zwar auch im Nikotin die „lebhafteste 
tumultuarische Bewegung“, sprechen aber nicht von einer Herab- 


setzung der Bewegungsenergie beim Übertragen in reines See- 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 19 


284 Günther und Paula Hertwig: 


wasser. Ja, sie erhielten im Gegensatz zu unseren Versuchen 
ein gutes Befruchtungsresultat. Da die Angabe über die Konzen- 
tration der Nikotinlösung in der besprochenen Arbeit nicht genau 
ist, handelt es sich wahrscheinlich um eine sehr viel schwächere 
Lösung, durch die die Spermatozoen nicht so intensiv in ihrem 
Bewegungsvermögen beeinflusst wurden. 

Die Versuchsanordnung bei unseren chemischen Experimenten 
war folgende: Aus dem herauspräparierten Hoden wurde in eine 
Pipette bis zu einer bestimmten Marke Samenflüssigkeit gesaugt 
und in einem Uhrschälchen mit der chemischen Lösung gut ver- 
mischt. Es kamen auf drei Teile Samen ein Teil chemische 
Lösung. Durch dieses konstante Verhältnis wurde uns ein Ver- 
gleich der verschiedenen Experimente ermöglicht. Die Uhrschälchen 
hoben wir mit einer Kontrolle in der feuchten Kammer auf und 
zwar bis zu 18 Stunden. 

Nach Ablauf der gewünschten Einwirkungsdauer, wurde, 
häufig mehrmals aus derselben Mischung, ein kleines Quantum 
Sperma entnommen, mit frischem Seewasser verdünnt und zur 
Befruchtung der bereitstehenden Eier verwandt. Ehe wir jedoch 
die Besamung vornahmen, überzeugten wir uns unter dem 
Mikroskop von der Beweglichkeit der Spermien. In manchen 
Fällen war diese so schwach, dass wir nur einen sehr geringen 
Prozentsatz befruchteter Eier erwarten durften. In solchen Fällen 
reeten wir die Spermien zu einer kräftigeren Bewegung durch 
Zusatz von einigen Tropfen 5proz. Alkohols mit gutem Erfolg 
an. Wir glaubten uns dieses Mittels unbedenklich bedienen zu 
können, da durch die Versuche O. Hertwigs nachgewiesen 
wurde, dass 5proz. Alkohol nicht schädigend auf die Spermien 
von Rana fusca einwirkt. Auch wurde in solchen Fällen stets 
zu dem Sperma für die Kontrollbefruchtung die gleiche Quantität 
Alkohol hinzugesetzt. Diese Kontrollen entwickelten sich durch- 
aus normal. 

Es stellte sich nun bei unseren Versuchen heraus, dass weder 
Methylerün und Kristallviolett, noch Chloralhydrat, Strychnin 
oder Nikotin, Schädigungen des Chromatins der nach dem Ein- 
wirken der chemischen Lösungen noch befruchtungsfähigen Spermien 
hervorriefen. Es konnte zwar, besonders nach längerem Verweilen 
in den genannten Lösungen, eine grössere Anzahl starrer Spermien 
festgestellt werden, die auch im frischen Seewasser ihre Beweg- 


r 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 285 


lichkeit nicht wiedererlangten. Die noch befruchtenden Samen- 
fäden aber veranlassten keine Entwicklungsstörungen, einerlei 
wie lange und in welcher Konzentration die Agentien auf sie 
eingewirkt hatten. Ein Verweilen von !/s, 1, 2, 5 oder 16 Stunden 
in den verschieden starken Lösungen konnte keine Änderung in 
der Entwicklung der mit diesen Samenfäden befruchteten Eier 
hervorrufen. Die ersten Teilungen erfolgten regelmässig und 
gleichzeitig mit denen der Kontrolleier, und die Kulturen ent- 
wickelten sich zu normalen Plutei. 

Wir kommen nun zur Besprechung unserer Versuche über die 
Wirkung des Methylenblaues, das im Gegensatz zu den anderen 
von uns untersuchten chemischen Stoffen einen schädigenden 
Einfluss auf das Chromatin von Seeigelspermien hatte. Wir be- 
nutzten zu diesen Experimenten in erster Linie die Spermatozoen 
von Stronglyocentrotus lividus, manchmal aber auch die von 
Sphaerechinus granularis. Die Samenfäden beider Arten reagierten 
im allgemeinen gleichartig auf das Methylenblau ; wo Unterschiede 
auftreten, wird es besonders erwähnt werden. 

Seeigel sind wohl nicht das günstigste Objekt, um Ent- 
wicklungsstörungen zu beobachten. Der Pluteus ist noch ein 
sehr junges larvales Stadium und es ist durchaus nicht gesagt, 
dass sich leichte Schädigungen nicht erst durch spätere Ent- 
wicklungsstörungen bemerkbar machen könnten. 

Wenn also im folgenden von nicht schädigender Wirkung 
des Methylenblaus die Rede ist, heisst das nur, dass Anomalien 
bis zur Bildung des Pluteus nicht zu erkennen waren; ob solche 
noch später aufgetreten wären, muss dahingestellt bleiben. 

Es sei gleich von Anfang an bemerkt, dass der Ausfall 
der Versuche ein sehr ungleichmässiger war. So gelang es uns 
meistens, durch 2stündige Methylenblaubehandlung Entwicklungs- 
störungen in den mit diesem Sperma befruchteten Eiern hervor- 
zurufen. In einem anderen Versuch hingegen verlief die Ent- 
wicklung trotz 2stündiger Methylenblaubehandlung von gleicher 
Konzentration bei einer grossen Anzahl von Eiern normal. — 
Ferner war die Entwicklung in jeder einzelnen Zucht eine sehr 
ungleichmässige. Stets waren in sich schlecht entwickelnden 
Kulturen einige bessere, meist auch einige normale oder fast 
normale Larven zu finden, und ebenso in Zuchten mit gutem 


Entwicklungsresultat eine, wenn auch nicht grosse, Anzahl von 
19% 


286 Günther und Paula Hertwig: 


Stereoblastulae und Stereogastrulae. In diesem Punkte besteht 
ein Unterschied zwischen den Entwicklungsschädigungen, die durch 
Radiumbestrahlung des Spermas hatten hervorgerufen werden 
können. Wie OÖ. Hertwig beschrieben hat, und wie es ferner 
von G. Hertwig durch zytologische Untersuchungen näher aus- 
geführt wurde, sind bei Radiumschädigung alle Eier nahezu gleich- 
mässig von Entwicklungsstörungen ergriffen. 

Trotz dieses ungleichmässigen Ausfalls der Experimente 
liessen sich folgende Resultate klar erkennen: Bei einer Be- 
handlung der Spermatozoen mit Methylenblau (von 1—0,1°/o) 
von weniger als 2 Stunden zeigte sich fast nie eine Einwirkung 
der chemischen Substanz. Verblieben die Spermatozoen jedoch 
2 Stunden in den Lösungen, machten sich starke Entwicklungs- 
störungen bemerkbar. So verlief ein Versuch vom 12. April wie 
folgt. Nach 2stündiger Behandlung des Samens mit 1proz. 
Methylenblau wurde um 3 Uhr 15 Minuten befruchtet. Nahezu 
alle Eier hoben nach Samenzusatz gleich die Membran ab. Um 
6 Uhr 25 Minuten waren fast alle Eier der Kontrolle, die kurz 
darauf befruchtet worden waren, viergeteilt, hingegen waren 
die Eier des Methylenblauexperiments zur selben Zeit noch 
grösstenteils zweigeteilt, vereinzelte nur viergeteilt und eine etwas 
grössere Anzahl dreigeteilt. Am 135. waren in der Kontrolle zahl- 
reiche normale Blastulae mit beginnender Gastrulation vorhanden, 
während in der Methylenblauzucht viele Stereoblastulae mit be- 
 ginnendem Zerfall den Boden bedeckten und nur vereinzelte 
Stereoblastulae noch an der Oberfläche flottierten. Am 14. war 
bereits alles bis auf wenige trübe Larven zerfallen, während sich 
in der Kontrolle nur helle normale Gastrulae befanden. 

Die Verzögerung und die Störung der ersten Teilungen war 
manchmal eine recht erhebliche. So zeigten uns z. B. in einem 
Versuch vom 13. April (3stündige Einwirkung einer 0,1proz. 
Methylenblaulösung) die Eier nach 2 Stunden folgendes Ent- 
wicklungsbild: Während die Kontrolle normal zweigeteilt war, 
befand sich erst die kleinere Hälfte der Eier des Methylenblau- 
versuches in der ersten Teilung, der Rest liess noch den bläschen- 
förmigen Kern erkennen, bei einigen Eiern war Knospenfurchung 
aufgetreten. Nach 4 Stunden — die Kontrolle war vier- und 
achtgeteilt — waren in den Methylenblauzuchten nur wenige 
Eier viergeteilt, etwa 50°/o noch zweigeteilt, die anderen zum 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 287 


grossen Teil noch immer ungefurcht und einige in drei Blasto- 
meren zerfallen. Diese dreigeteilten Eier unterschieden sich von 
den durch Polyspermie entstehenden Simultandreiern durch die 
ungleiche Grösse ihrer Furchungszellen. Sie waren aus einer 
grossen und zwei kleineren Blastomeren zusammengesetzt und 
durch verzögerte Furchung der einen Zelle des zweigeteilten Eies 
entstanden. — Am nächsten Tage waren auch in dieser Zucht nur 
Stereoblastulae zu finden. 

Dieses typische Erkrankungsbild, Verzögerung und Unregel- 
mässigkeit der Teilungen, Bildung von Stereoblastulae und Stereo- 
gastrulae mit folgendem Zerfall, erhielten wir fast immer nach 
Behandlung des Samens mit Methylenblau während 2, 3, 5!/s, 6 
und auch 8 Stunden. Allerdings fanden wir häufig, besonders 
nach 6—Sstündiger Einwirkung eine nicht unbeträchtliche Zahl 
normaler oder wenigstens fast normaler Larven in den Kulturen. 

In der Hoffnung, eine noch intensivere Schädigung des 
Spermachromatins hervorzurufen und dadurch vielleicht partheno- 
genetische Larven zu erzielen, liessen wir die Spermien auch für 
16—18 Stunden in den Lösungen. Häufig waren nach dieser 
Zeit alle Spermien abgestorben. Dieses Absterben war zwar 
nicht immer auf die Methylenblauwirkung zurückzuführen, da 
nicht selten auch der ebenso lange aufgehobene Kontrollsamen 
vollkommen bewegungslos war. Der Samen verschiedener Tiere 
erwies sich als ungleich empfindlich gegen das Aufheben. In 
anderen Fällen war jedoch der Kontrollsamen noch gut be- 
weglich und nur der Methylenblausamen war abgestorben, ein 
Resultat, das sicher von der Methylenblauwirkung herrührt. In 
15 Fällen fanden wir aber neben vielen starren Samenfäden noch 
eine grössere Anzahl gut beweglicher Spermien vor, so dass wir 
noch ein gutes Befruchtungsresultat, manchmal mit Hilfe von 
Alkoholzusatz, erzielten. 

Wir konnten auch bei diesen Versuchen stets eine Ver- 
zögerung von etwa einer halben Stunde bei den ersten Teilungen 
wahrnehmen. Wir beobachteten aber keine Knospenfurchung und 
nur ganz vereinzelt pathologisch geteilte Eier. Die weitere 
Entwicklung der Zuchten verlief, im Gegensatz zu den kurzen 
Methylenblauversuchen, bei den meisten Eiern normal. Neben 
einigen zerfallenen Eiern, Stereogastrulae, trüben Prismen und 
Plutei fanden wir in 13 Versuchen die bei weitem grössere An- 


288 Günther und Paula Hertwig: 


zahl der Eier zu normalen Plutei entwickelt, so dass sich die 
Methylenblauzuchten kaum von den Kontrollen unterschieden. 

Wir glaubten zuerst annehmen zu müssen, dass die ganz 
und fast normalen Plutei durch Parthenogenese entstanden wären. 
Wir hielten das Spermachromatin durch die lang anhaltende 
Methylenblauwirkung für so stark geschädigt, dass es bei der 
Entwicklung vollkommen ausgeschaltet wurde; die Verzögerung 
bei der ersten Teilung schien uns einen derartigen Vorgang zu 
bestätigen. 

Zweifel an der Richtigkeit unserer Annahmen erhoben sich, 
als wir die Plutei näher untersuchten. Sie zeigten in bezug auf 
Grösse und Ausbildung keinen Unterschied von den normalen 
Plutei. Auch stellten wir die gleiche Grösse ihrer Kerne durch 
Messungen fest. Es lagen also sicherlich keine haploiden, partheno- 
genetischen Larven vor. Die normale Grösse der Kerne könnte 
man nur durch Monasterbildung erklären; es schien uns aber 
unwahrscheinlich, dass Monaster in einer so grossen Anzahl von 
Eiern regelmässig gebildet würden. — Ferner sprach gegen 
die parthenogenetische Entstehung der Umstand, dass es durch 
Radiumbestrahlung nicht gelungen war, bei Seeigeln das väter- 
liche Chromatin von der Entwicklung ganz auszuschalten. Stets 
verschmolz, wie G. Hertwig zeigte, das Radiumchromatin mit 
den mütterlichen Kernen, anders wie bei Frosch und Fischen, 
wo die Ausschaltung eine viel vollkommenere war. — Die Hypo- 
these einer parthenogenetischen Entwicklung wurde aber noch 
unwahrscheinlicher, als wir auf Schnitten durch zwei- und ungeteilte 
Eier dieser Serien kein ausgeschaltetes Spermachromatin entdecken 
konnten. Die Eier zeigten entweder normale ruhende Kerne oder 
Mitosen mit schätzungsweiser normaler Chromosomenzahl. 

Diese Überlegungen zwangen uns zu der Annahme, dass 
die Samenfäden, welche die sich normal entwickelnden Eier be- 
fruchteten, durch 16—18stündige Methylenblaubehandlung nicht 
geschädigt wurden. Da aber diese Annahme nicht recht mit der 
bei den Versuchen mit kürzerer Einwirkungsdauer konstatierten 
Schädigung im Einklang stand, stellten wir noch einen Versuch an 
zur definitiven Entscheidung der Frage: liegt Ausschaltung des 
Spermachromatins oder gar keine Schädigung vor? 

Wir bestrahlten einen Teil des Spermas, das sich 16 Stunden 
in einer 0,2proz. Methylenblaulösung befunden hatte, auch noch 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 289 


eine halbe Stunde mit Mesothorium. Während sich die mit 
Methylenblausperma befruchteten Eier zum grössten Teil gut ent- 
wickelten, waren in der Zucht, die mit dem bestrahlten Samen 
befruchtet war, schon am nächsten Tage nur Zerfall und Stereo- 
blastulae vorhanden und einen Tag später war alles abgestorben. 


Dieser Versuch entschied also zu Gunsten der Annahme, 
dass das väterliche Chromatin durch die vorhergehende Methylen- 
blaubehandlung nicht zur Ausschaltung gebracht worden war; 
denn wäre dies der Fall gewesen, so hätte die Bestrahlung mit 
Mesothorium selbstverständlich keinen Eintluss auf die Entwick- 
lung der Eier mehr haben können. 


Wie schon anfangs bemerkt, fielen die Versuche nicht 
immer gleichmässig aus. Unter 15 Versuchen mit langer Methylen- 
blaubehandlung von Stronglyocentrotussamen ergaben zwei, dass 
die Eier sich nicht über die Gastrula hinaus entwickelten. 
Sphaerechinussamen wurde nur in vier Versuchen langer Methylen- 
blauwirkung ausgesetzt, die Eier entwickelten sich bis zur Blastula 
normal, gastrulierten dann aber zum grössten Teil nicht und 
lieferten nur wenige Prismen. Immerhin verlief auch beim 
Sphaerechinus die Entwicklung bei etwa 5stündiger Methylenblau- 
behandlung weit schlechter als wie nach 16—1Sstündiger Ein- 
wirkung. 

Die aus den oben ausgeführten Versuchen über Methylen- 
blauwirkung auf Seeigelsamen gewonnenen Resultate lassen sich 
dahin zusammenfassen: 


1. Methylenblaulösungen können schädigend auf das Sperma- 
chromatin wirken, wie die Entwicklungsstörungen in den 
mit Methylenblausamen befruchteten Zuchten zeigen. 

2. Nicht alle zur Befruchtung gelangenden Spermien sind 
gleich schwer geschädigt. 


3. Nach 4+—5stündiger Methylenblaubehandlung ist die Ent- 
wicklung bei der grössten Anzahl der Eier gestört. Unter 
2 Stunden ist keine Schädigung festzustellen, ebenso 
sind die Spermien, die nach 15—1Sstündiger Methylen- 
blaubehandlung noch zur Befruchtung gelangen, zum 
grössten Teil nicht geschädigt. — 


Eine Erklärung für dieses sonderbare Verhalten der Spermien 
werden wir im allgemeinen Teil zu geben versuchen. 


290 Günther und Paula Hertwig: 


B. Zytologische Untersuchungen über das 
Schicksal des durch Methylenblau geschädigten 
Spermachromatins in Seeigeleiern. 


Es erschien uns wünschenswert, die aus den Experimenten 
gewonnenen Resultate noch durch eingehendere zytologische 
Untersuchung des Materials zu bestätigen. Zu diesem Zweck 
konservierten wir Eier von Stronglyocentrotus während der ersten 
Entwicklungsstadien mit Pikrin-Essigsäure. Die Eier wurden in 
Paraffin eingebettet, in 10 « dicke Schnitte zerlegt und nach 
Heidenhain mit Eisenalaun-Hämatoxylin gefärbt. 

Die cytologischen Untersuchungen stimmen in ihrem Er- 
gebnis mit den Resultaten der Versuche überein. Präparate von 
Eiern, die den vorher beschriebenen 2—3stündigen Methylenblau- 
versuchen angehören, zeigen uns stark veränderte Kernfiguren. 
Zwei Stunden nach der Befruchtung fixierte Eier besitzen noch 
zum grossen Teil bläschenförmige, runde oder auch etwas gestreckte 
Kerne, an deren Enden Strahlungen auftreten. In diesen Kernen 
sind öfters grössere Nukleolen und Chromatinklumpen, die wohl auf 
die pathologische Natur des väterlichen Chromatins hindeuten, 
wahrzunehmen. Das Vorhandensein von nur einem Kern in den un- 
geteilten Eiern beweist uns, dass das Spermachromatin noch mit 
dem Eikern zu einem einheitlichen Gebilde verschmolzen ist. — 
In anderen Eiern derselben Präparate sind bereits Teilungsfiguren 
zu sehen. Meistens liegt dann, wie es die Fig. 1—3 und 5 (Taf. XII) 
zeigen, ein kompakter, intensiv sich färbender Chromatinklumpen 
neben den Chromosomen. Wir haben es hier sicher mit dem 
geschädigten Spermakern zu tun; denn die Zahl der Chromo- 
somen in diesen Mitosen beträgt nicht mehr als die haploide 
Zahl, wie durch Zählungen schätzungsweise festgestellt wurde. 
Besonders deutlich ist die reduzierte Chromosomenzahl auf Fig. 5 
zu erkennen, die eine Aufsicht auf den Mutterstern in einer zur 
Schnittebene schräg gestellten Spindel zeigt. 

Die mütterlichen Chromosomen bleiben aber nicht unbe- 
rührt von dem Einfluss des Spermachromatins. Häufig sind sie 
etwas verklumpt, auch werden sie öfters aus ihrer normalen 
Lage abgedrängt, wie uns Fig. 3 zeigt. Neben schon nahe am 
Pol liegenden Uhromosomen sehen wir andere, die sich noch 
nahe der Äquatorialebene der Spindel befinden. — Folgestadien 
derartiger Mitosen haben wir wohl in den Textfig. 4 und 5 und 


291 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 


in Fig. 6 (Taf. XII) zu erblicken. Derartige zweigeteilte Eier 
treffen wir bereits in dem nach 2 Stunden fixierten Material an, 
in grösserer Anzahl aber erst 3 Stunden nach der Befruchtung. 


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Fig. 4. 


Wir sehen auf den genannten Figuren zweigeteilte Eier, 
die in jeder Blastomere einen bläschenförmigen Kern enthalten, 
der häufig schon die Vorbereitung zur Vierteilung durch das 


Fig. 5. 


Auftreten von Strahlungsfiguren erkennen lässt. Die beiden Kerne 
sind aber noch untereinander durch eine mehr oder weniger 
breite Brücke verbunden, die am breiteren Ende noch dieselbe 


292 Günther und Paula Hertwig: 


Struktur wie der Kern zeigt, dann aber in eine mehr strangförmige 
Bildung mit intensiv sich färbenden verklumpten Chromatinbrocken 
übergeht. 

Es unterliegt keinem Zweifel, dass diese Fortsätze unter 
dem Einfluss der Methylenblaubehandlung entstanden sind; denn 
in keiner Kontrolle sahen wir ähnliche Figuren. Sie bestehen 
wahrscheinlich zum grössten Teil aus dem in die Länge ge- 
zogenen und etwas aufgelockerten Spermakern. Daneben tragen 
Reste der achromatischen Figur und wohl auch noch in Mit- 
leidenschaft gezogene mütterliche Chromosomen zur Bildung 
der Fortsätze bei. Dies wird besonders da der Fall sein, wo die 
Brücke zwischen den beiden Kernen ziemlich breit ist, wie etwa 
in Textfig. 5. — In der Teilungsebene, wo die Fortsätze beider 
Kerne verjüngt aneinanderstossen, ist in den meisten Eiern ein 
kompakter kleiner Körper zu erkennen (Textfig.4, 5 und Fig. 6—8), 
der wohl identisch mit dem Flemmingschen Zwischenkörper ist. 
Ein derartiges Gebilde ist auch von Boveri öfters abgebildet 
worden; auch fanden wir es in unseren Kontrollpräparaten, wenn 
auch weder so häufig noch so deutlich. Da dieser Flemmingsche 
Zwischenkörper wahrscheinlich aus Resten der achromatischen 
Substanz gebildet wird, so ist es ganz gut möglich, dass er in 
den Methylenblaueiern länger erhalten bleibt, da die achromatische 
Figur überhaupt von den pathologischen Vorgängen stark beein- 
flusst wird, wie uns die Fortsatzbildung der Kerne zeigt. Es ist 
jedenfalls von Interesse, dass sich dieser Körper stets an der 
Berührungsstelle beider Fortsätze befindet. Auch wo diese, wie 
in Textfig. 4, wohl von der Plasmateilung beeinflusst, weit von der 
Mittellinie des Eies abgedrängt sind, ist der Zwischenkörper mit- 
gerückt und befindet sich wieder an der Berührungsstelle. 

Bei einigen Eiern ist der Fortsatz nur in der einen 
Blastomere entwickelt (Fig. 7 und 8). Der Umstand, dass das 
Methylenblauchromatin nur in der einen Eihälfte liegt, äussert sich 
in einem ungleichen Entwicklungstempo der beiden Blastomeren. 
So sehen wir auf der einen Seite noch den bläschenförmigen, 
etwas gestreckten Kern mit seinen beiden Strahlungen und einem 
Fortsatz, der bis zur Teilungsebene reicht und an dessen Ende 
wieder der Zwischenkörper liegt. In der anderen Eihälfte ist 
in Fig. 7 bereits eine Spindel mit Chromosomen, in Fig. 8 sogar 
schon die Bildung zweier Tochterkerne zu erkennen. Solche 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 293 


Eier würden sich bald in eine grosse und zwei kleinere Blastomeren 
teilen, Bildungen, deren Auftreten wir vorlin erwähnten. 

Auf Präparaten, die 3'/s Stunden nach der Befruchtung fixiert 
wurden, hat die Zahl der zwei- und dreigeteilten Eier zugenommen, 
andere sind viergeteilt und zeigen bläschenförmige Kerne, von 
denen ein oder manchmal auch zwei Paar durch Fortsätze verbunden 
sind. Daneben sind aber noch eine Anzahl ungeteilter Eier vor- 
handen, deren Kernverhältnisse in Fig. 4 und Textfig. 6 abgebildet 


ee 


Fig. 6. 


sind. Wir sehen (Fig. 4) einen sehr in die Länge gezogenen 
stäbchenförmigen Kern mit Strahlungen an seinen beiden Enden. 
Häufig ist eine eigentliche Kernmembran nicht mehr vorhanden. 
Diese Kerne sind wohl in Vorbereitung zur Amitose begriffen. 
Amitosenähnliche Bilder wie sie uns Textfig. 6 darstellt, treffen 
wir in denselben Präparaten häufiger an. Es hat hier augen- 
scheinlich eine Durchschnürung der langgestreckten Kerne ohne 
vorhergehende Chromosomenbildung stattgefunden. Die stark 
pathologische Natur dieser Eier zeigt sich auch darin, dass die 
Plasmateilung noch nicht auftrat, trotzdem an den Kernen bereits 
die Strahlung zur nächsten Teilung zu erkennen ist. — Von 
solchen Eiern ist zu erwarten, dass sie sehr früh absterben und 
zerfallen. 

Schon vorher wurde erwähnt, dass bei der Untersuchung 
von Eiern der 16—18stündigen Methylenblauversuche keine patho- 
logischen Kernfiguren gefunden wurden. Wir hielten es trotzdem 
für wünschenswert, diese Beobachtung durch eine eingehende 
Untersuchung sicher zu stellen und fixierten daher von einem 


294 Günther und Paula Hertwig: 


Versuch (17 Stunden Methylenblauwirkung in 0,1proz. Lösung 
auf den Samen) Eier in Zeitintervallen von 15 Minuten. Eben- 
falls wurden Kontrolleier eingelegt, um durch den Vergleich einen 
Einblick in die Ursachen zu erhalten, durch welche die bei den 
Methylenblauversuchen von langer Dauer stets zu beobachtende 
Verzögerung entsteht. 

Die zuerst fixierten Eier, sowohl im Methylenblauversuch wie 
in der Kontrolle, zeigen, eine viertel Stunde nach der Befruchtung, 
die beiden Vorkerne verschmolzen. Doch finden wir in beiden 
Präparaten noch Eier, in denen der Samenkern den Eikern erst 
berührt oder sogar noch in einiger Entfernung liegt. 15 Minuten 
später ist die Verschmelzung in beiden Eiportionen eine voll- 
kommene, an einzelnen Kernen treten bereits Strahlungen auf. 
Dreiviertel Stunden nach der Befruchtung hat sich das Bild 
wenig geändert, nur die Strahlungen sind etwas deutlicher ge- 
worden und die Kerne haben sich zum grossen Teil mehr in die 
Länge gestreckt. Auf demselben Stadium treffen wir auch noch 
die Methylenblaueier 15 Minuten später an, während zu der 
gleichen Zeit in den meisten Kontrolleiern die Karyokinese be- 
sonnen hat. Von diesem Zeitpunkt an bleibt die Verzögerung 
deutlich. So sehen wir eine viertel Stunde später die meisten 
Kontrolleier zweigeteilt mit ruhenden Kernen, daneben zahlreiche 
Mitosen und nur ein geringer Prozentsatz lässt noch den rubenden 
Kern im ungeteilten Ei erkennen. In dem Methylenblauversuch 
hingegen zeigen noch immer die meisten Eier ovale Kerne, nur 
ein Drittel fertig gebildete Spindeln. Nach 1'/s Stunde sind die 
Kontrolleier nahezu alle zweigeteilt, während wir noch nach 
1?/a Stunde im Methylenblauversuch zahlreiche Mitosen und sogar 
noch einige ruhende Kerne in ungeteilten Eiern sehen. 

Diese Verzögerung ist aber auch der einzige unterscheidende 
Punkt. Pathologische Kernfiguren fanden wir nicht oder nur ganz 
vereinzelt vor. Wir können daher unser Resultat, dass die nach 
langer Methylenblauwirkung noch zur Befruchtung gelangenden 
Spermien nicht geschädigt sind, durch die zytologische Unter- 
suchung als bestätigt betrachten. — Über die Ursachen der 
verzögerten Teilung, die anfangs einen so grossen Unterschied 
zwischen Versuchs- und Kontrollkulturen bildet, ohne jedoch 
einen Einfluss auf die spätere Entwicklung auszuüben, wird im 
allgemeinen Teil noch gesprochen werden. 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 295 


Teilungsstörungen von Seeigeleiern mit darauf folgendem 
abnormem Entwicklungsverlauf haben bereits öfters den Gegen- 
stand zytologischer Untersuchungen gebildet. Die pathologische 
Entwicklung wurde auf die verschiedenartigste Weise hervor- 
gerufen: durch Bastardierung der Seeigeleier mit artfremdem 
Sperma von Loeb, Kupelwieser und Baltzer, durch Be- 
strahlung der Samenfäden mit Radium von G. Hertwig, ferner 
durch Behandlung von Echinideneiern mit hypertonischen Lösungen 
von Gray und Konopacki oder durch Kältewirkung von Janina 
Bury. Bei einem Vergleich dieser Arbeiten tritt eine grosse Ähnlich- 
keit der pathologischen Kernfiguren zutage, so verschiedenartig die 
Ursache zur Entwicklungsstörung auch gewesen sein mag. 

Die grösste Analogie mit unseren Methylenblauversuchen 
weist G. Hertwigs Arbeit über das Schicksal des mit Radium 
bestrahlten Spermachromatins im Seeigelei auf, handelt es sich 
doch in beiden Arbeiten um eine alleinige Schädigung des väter- 
lichen Chromatins. So sind z. B. die Fig. 2—8 G. Hertwigs 
ohne weiteres mit den Fig. 1—3 unserer Arbeit vergleichbar; nur 
liegt häufig der durch Radium geschädigte Samenkern in etwas 
grösserer Entfernung von den mütterlichen Chromosomen, ein 
Umstand, der wohl auf eine intensivere Schädigung durch das 
Radium hindeutet. Doch finden wir auch andere Bilder (Fig. 6—8) 
vor, wo das Spermachromatin wie in unseren Abbildungen in 
unmittelbarer Nähe der mütterlichen Chromosomen liegt, und sein 
Einfluss auf dieselben wie bei Fig. 3 unverkennbar ist. 

Der Tatsache gemäss, dass das Radiumchromatin wegen 
seiner isolierten Lage häufig keinen störenden Einfluss auf die 
erste Teilung ausübt, finden wir den Spermakern noch häufig 
unverändert oder nur wenig aufgelockert im zweigeteilten Ei 
(Fig. 10, 11), Bilder, die bei unseren Methylenblauversuchen fehlen. 
Dagegen kann man aus der Ähnlichkeit der Abbildung 13 mit 
unseren Fig. 6—8 auf eine gleiche Entstehungsweise schliessen. 
Auch bei G. Hertwig sehen wir ein zweigeteiltes Ei mit Spindeln 
für die nächste Teilung, die noch durch Stränge „von kompaktem 
COhromatin, einzelnen Chromatinkörnern und Chromosomen ver- 
bunden sind“. — Ferner finden sich auch in der Radiumarbeit 
Kerne in Vorbereitung zur Amitose und amitosenähnliche Bilder 
(Fig. 21—24) vor, Figuren, die ganz unseren Abbildungen (Fig. 4 
und 6) entsprechen. 


296 Günther und Paula Hertwig: 


Da bereits G. Hertwig in seiner Arbeit den Vergleich 
mit den Arbeiten von Herbst, Boveri und Baltzer gezogen 
hat, soll hier nur noch auf die Berührungspunkte mit den Arbeiten 
von Gray, Konopacki und J. Bury hingewiesen werden. 

Die in diesen Arbeiten durch Kälteeinwirkung auf unbe- 
fruchtete und befruchtete Seeigeleier oder durch den Einfluss 
von hypertonischen Lösungen auf befruchtete Echinideneier her- 
vorgerufene Schädigung des Chromatins äussert sich häufig 
während der ersten Teilung durch mangelhafte Uhromosomen- 
ausbildung, ebenso wie in unserer Arbeit das Spermachromatin 
durch die Methylenblaubehandlung die Fähigkeit, Chromosomen 
zu bilden, verloren hat. So finden wir je nach dem Grade der 
Schädigung Mitosen mit stark angeschwollenen Chromosomen 
(Bury, Fig. 31—35) oder mit Chromatinklumpen (Gray, 
Fig. 15— 23), deren Entstehung der Autor durch Verklumpung 
mehrerer Chromosomen erklärt. Diese Erkrankung eines Teils 
des Chromatins führt zu Kernfiguren, die man nach Haecker 
als Pseudoamitose bezeichnen kann, wie sie Bury in Fig. 55a—c 
und Konopacki in Fig. 31—36 darstellen, Abbildungen, die 
unserer Fig. 6 und den Textfig. 4—-6 im höchsten Grade ähnlich sind. 

Ferner finden wir in den genannten Arbeiten Abbildungen 
von typischen Amitosen. (Gray, Fig. 49, Bury, Fig. 12—13). 
In diesen Fällen liegt eine Erkrankung des gesamten Kern- 
materials vor, die bei Konopacki und Gray durch direkte 
Beeinflussung der ganzen Chromatinmenge, bei Bury und in 
den Methylenblauversuchen nur mittelst Schädigung der einen 
Kernkomponente und Vergiftung des gesunden Uhromatins durch 
die erkrankte Kernmasse hervorgerufen wurde. — Die Folge 
dieser Erkrankung ist die Unfähigkeit, Chromosomen zu bilden; 
die Kernteilung kann daher nur durch Amitose erfolgen. 
Charakteristisch für alle in diesen Arbeiten gegebenen Ab- 
bildungen ist auch die starke Vergrösserung der Kernvolumina, 
die mit der verzögerten Teilung zusammenhängt und auch zu 
einer Vermehrung der Nukleolarsubstanz in den Kernen führt. 


C. Allgemeiner Teil. 
Durch unsere Untersuchungen an den Vertretern verschiedener 
Tierspezies haben wir in Bestätigung der Resultate von O. Hertwig 
an Rana fusca feststellen können, dass die Kernsubstanz der reifen 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 297 


Samenfäden durch verschiedene chemische Stoffe geschädigt werden 
kann, ohne dass die Spermatozoen ihre Beweglichkeit und ihre 
Fähigkeit, in das Ei einzudringen, dabei verlieren. Diese Schädigung 
der Kernsubstanz kann in manchen Fällen eine so grosse sein, 
dass das Spermachromatin im Ei nicht mehr Chromosomen bilden 
kann, vielmehr völlig vermehrungsunfähig geworden ist. In diesem 
Falle gestaltet sich die Entwicklung der Eier, wie unsere Bastar- 
dierungsexperimente am Frosch ergeben haben, zu einer partheno- 
genetischen, da ja nur der Eikern durch seine Teilungen den 
Kernapparat des Embryos liefert. Geringere Schädigung der 
Kernsubstanz der Samenfäden durch Chemikalien hebt ihre Ver- 
mehrungsfähigkeit nicht auf; da jedoch das chemisch veränderte 
väterliche Chromatin auf alle Embryonalzellen verteilt wird, führt 
diese Schädigung schon auf frühen Entwicklungsstadien zum Ab- 
sterben des Embryos, der dabei allerlei Missbildungen, wie 
namentlich Spina bifida, aufweist. 

Es lassen sich somit durch chemisch geschädigte Samenfäden 
dieselben Missbildungen erzielen, wie sie.Hertwigdurch Radium- 
bestrahlung der männlichen Keimzellen erhielt. Dies Resultat ist 
für den Fall, dass der Samenkern maximal geschädigt ist, nicht 
überraschend ; denn es ist ja bei der auf parthenogenetischer 
Grundlage verlaufenden Entwicklung des Eies ganz gleichgültig, 
ob das Chromatin des Spermakopfes durch chemische oder physi- 
kalische Mittel vermehrungsunfähig geworden ist. Die Störungen 
in der Entwicklung dieser Eier, wie Bauchwassersucht und zwerg- 
hafter Wuchs, lassen sich, wie G. Hertwig wahrscheinlich gemacht 
hat, auf die haploide Beschaffenheit des Kernapparates zurückführen. 

Auffallender ist dagegen die Übereinstimmung der Resultate 
auch in Versuchen, bei denen das Spermachromatin weniger stark 
geschädigt und infolgedessen noch an der Bildung des Kern- 
apparates sich beteiligt. Trotzdem die ursprünglichen Schädigungen, 
die der Samenkern einmal durch die chemische Behandlung. das 
andere Mal durch die Radiumbestrahlung erlitten hat, sicher nicht 
die gleichen sind, und durch die Verbindung mit Methylenblau 
oder mit Chloralhydrat ganz andere chemische Veränderungen 
als durch das Radium erzielt werden, so stimmen die Missbildungen, 
welche die mit diesen chemisch oder physikalisch geschädigten 
Spermatozoen befruchteten Eier zeigen, doch ausserordentlich 
untereinander überein. 


298 Günther und Paula Hertwig: 


Zum besseren Verständnis dieser Erscheinung müssen wir 
uns vergegenwärtigen, dass die heaktionsmöglichkeiten eines 
Organismus gegen Schädlichkeiten aller Art nur ganz begrenzte 
sind, und dass es ganz bestimmte Typen von Missbildungen gibt, 
die durch Eingriffe verschiedenster Art an dem Embryo auftreten. 
So lässt sich die Spina bifida beim Frosch nicht nur durch Be- 
fruchtung normaler Eier mit krankem Sperma, sondern auch durch 
Mehrfachbefruchtung oder durch Einwirken von Kochsalzlösung 
auf die Eier nach der Befruchtung erzielen. Ein anderes Beispiel 
für diese soeben besprochene Erscheinung haben wir ferner im 
zytologischen Teil unserer Arbeit kennen gelernt, wo gezeigt wurde, 
dass genau die gleichen Bilder amitotischer und pseudoamitotischer 
Kernteilung, wie sie durch Behandlung befruchteter Seeigeleier mit 
hypertonischen Lösungen oder mit auf 0° abgekühltem Meerwasser, 
auch durch Befruchtung normaier Eier in gewöhnlichem Seewasser 
mit Sperma, das 2 Stunden mit Methylenblau vorbehandelt oder 
12 Stunden mit Radium bestrahlt war, erzielt werden konnten. 

Ergibt sich somit, wenn wir die Einwirkung der chemisch 
oder physikalisch geschädigten Samenfäden auf gesunde Eier 
studieren, eine weitgehende Übereinstimmung zwischen den 
chemischen und den Radiumexperimenten, so treten andererseits 
auffallende Unterschiede zwischen den beiden genannten Arten 
von Versuchen zutage, sobald wir das Verhalten der Sperma- 
tozoen den chemischen oder dem physikalischen Agens gegenüber 
betrachten. Denn während bei allen bisher untersuchten Tier- 
arten sämtliche Samenfäden durch das Radium proportional der 
Intensität der Bestrahlung in zunehmendem Maße geschädigt 
werden, vermissen wir diese gleichmässige Wirkung bei den 
chemischen Versuchen völlig. Unsere Experimente haben vielmehr 
ergeben, dass die einzelnen Samenfäden eine verschieden grosse 
Resistenz oder, wie wir auch sagen können, eine ungleiche Emp- 
findlichkeit gegen die chemischen Stoffe besitzen. Hierbei können 
wir folgende Fälle unterscheiden : 

1. Die Samenfäden von verschiedenen Tierarten zeigen in 
ihrer Empfindlichkeit gegenüber demselben chemischen Stoffe er- 
hebliche Unterschiede. So kann z. B. durch Chloralhydrat und 
Strychnin die Kernsubstanz der Froschspermatozoen geschädigt 
werden, während beim Seeigel eine derartige Beeinflussung selbst 
bei höher konzentrierten Lösungen ausbleibt. 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 299 


2. Auch bei Verwendung der Samenflüssigkeit von zwei 
verschiedenen Männchen, die der gleichen Art angehören, ergeben 
sich oft Differenzen in der Empfindlichkeit gegenüber dem gleichen 
chemischen Mittel. Besonders beweisend sind hierfür die Ver- 
suche, die von uns mit Strychnin bei Rana fusca ausgeführt 
wurden, und die sämtlich ein negatives Resultat ergaben, während 
0. Hertwig in zwei Versuchen an Rana fusca eine starke 
Schädigung des Spermachromatins durch das Strychnin konstatieren 
konnte. Zu demselben Ergebnis führten ferner die im zweiten 
Teil unserer Arbeit erwähnten Experimente an Gobiussamen mit 
Methylenblau, wo in zwei Fällen eine starke Veränderung des 
Spermachromatins festgestellt wurde, einmal dagegen das chemische 
Mittel völlig versagte. 

3. Eine verschieden grosse Empfindlichkeit gegen das gleiche 
chemische Mittel lässt sich schliesslich auch bei den einzelnen 
Samenfäden, die aus dem gleichen Hoden desselben Tieres 
stammen, nachweisen. Sehr oft haben wir nämlich in unseren 
Experimenten beobachten können, dass, während die überwiegende 
Mehrzahl der Eier, die mit chemisch vorbehandeltem Sperma 
befruchtet waren, sich pathologisch entwickelte, ein anderer Teil 
normale Embryonen lieferte, so z. B. bei den Methylenblauver- 
suchen mit Gobiussamen, bei den Bastardierungsversuchen beim 
Frosch mit Benutzung von Chloralhydrat und den zweistündigen 
Methylenblauexperimenten am Seeigel. Auch O. Hertwig hat 
ähnliche Beobachtungen gemacht, hält es aber, da er in seinen 
Versuchen die Froschhoden direkt in der Methylenblaulösung 
zerzupft hat, für möglich, dass einzelne Spermatozoen, die im 
Inneren grösserer Gewebsstücke lagen, gar nicht mit dem Methylen- 
blau in Berührung gekommen sind. Diese Erklärungsmöglichkeit 
lässt sich aber bei unserer Versuchsanordnung, bei der nur die 
aus dem fein zerzupften Hoden abgesaugte Samenmilch zur Ver- 
wendung kam, ausschliessen. 

Auf Grund dieser Ergebnisse sind wir nunmehr auch in 
der Lage, für ein Versuchsresultat, das uns anfangs ganz unver- 
ständlich schien, die Erklärung zu geben. Wir haben im speziellen 
Teil unserer Arbeit berichtet, dass durch zweistündige Behandlung 
der Samenflüssigkeit vom Seeigel mit Methylenblau eine deutliche 
Schädigung der meisten Spermien erzielt werden konnte, die 


eine stark pathologische Entwicklung der mit ihnen befruchteten 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 20 


300 Günther und Paula Hertwig: 


Eier zur Folge hatte. Als wir jedoch das Methylenblau 16 bis 
18 Stunden auf die Samenflüssigkeit einwirken liessen, gestaltete 
sich das Resultat, wie wir in 15 Versuchen an zehn verschiedenen 
Tieren feststellen konnten, ganz anders. Die Eier entwickelten 
sich nämlich ganz normal zu Plutei und die zytologische Unter- 
suchung ergab, dass der Spermakern sich normalerweise an der 
Chromosomenbildung beteiligte, so dass keine Parthenogenese, wie 
wir anfänglich vermuteten, vorlag. 

Man könnte zunächst daran denken, dass wir gerade zu 
den Versuchen mit langer Einwirkungszeit Samenfäden von Tieren 
benutzt hätten, die sämtlich gegen das Methylenblau unempfindlich 
waren, entsprechend den soeben sub 2 angeführten Beispielen. 
Wäre es aber nicht ein höchst sonderbarer Zufall gewesen, dass 
wir gerade in den 15 Experimenten mit langer Einwirkungszeit 
Tiere mit methylenblaufesten Spermien benutzt hätten, während 
wir bei unseren zweistündigen Versuchen nur einmal unter zehn 
Fällen keine Einwirkung des Methylenblau konstatieren konnten ? 
Ein solches Zusammentreffen erscheint uns sehr unwahrscheinlich 
und wir glauben durch die folgende Annahme das Versuchsergebnis 
besser erklären zu können: 

Infolge der 18stündigen Methylenblaueinwirkung sind alle 
Samenfäden, deren Kern durch das Methylenblau geschädigt ist, 
abgestorben; nur diejenigen Spermatozoen, deren Kernsubstanz 
gegen das Methylenblau unempfindlich ist, bleiben am Leben und 
befruchten die Eier, die sich infolgedessen normal entwickeln. 
Es hat also durch die lange Methylenblaubehandlung 
eine Selektion der methylenblaufesten Samenfäden 
stattgefunden. 

Dass Samenfäden, deren Kernapparat intensiv geschädigt ist, 
schliesslich auch bewegungslos und zur Befruchtung untauglich 
werden, das haben uns die Radium- und Methylenblauexperimente 
an Rana fusca gelehrt, bei denen stets die zum Versuch be- 
nutzten Spermatozoen viel früher abstarben als der Kontroll- 
samen. Besonders schön zeigt aber der folgende Versuch, über 
den O. Hertwig berichtet, dass nicht etwa die direkte Wirkung 
des chemischen Stoffes auf den Bewegungsapparat, sondern viel- 
mehr die durch das chemische Mittel bewirkte Veränderung des 
Kernes die Geisselbewegung des Spermatozoons zum Stillstand 
bringt: In zwei Experimenten wurde die Samenmilch von zwei 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen ete. 301 


verschiedenen Froschmännchen zu gleichen Teilen mit einer 
0,25 proz. Strychninlösung versetzt. Nach je 2 Stunden wurde 
mit einem Teil der so bereiteten Mischungen eine Portion Eier 
befruchtet. Im ersten Versuch nahm die Entwicklung der Eier 
einen sehr gestörten Verlauf, in den anderen dagegen verlief sie 
bei den meisten Eiern normal. In dem ersten Fall waren also 
die Samenfäden des einen Männchens durch das Strychnin stark 
geschädigt, im zweiten dagegen die Samenfäden des anderen 
meist unverändert geblieben. Entsprechend dieser verschieden 
grossen Empfindlichkeit der Kernsubstanz der Samenfäden gegen 
das Strychnin kam die Bewegung der Spermatozoen in dem 
ersten Samengemisch schon nach 5'/e Stunden zum Stillstand, 
während sie in der zweiten Samenmischung noch über 24 Stunden 
anhielt. 

Sehen wir es hiernach als erwiesen an, dass Samenfäden, 
deren Kernsubstanz durch äussere Eingriffe geschädigt ist, rascher 
absterben als solche mit intaktem Kernapparat, so ist die Selektion 
der methylenblaufesten Spermatozoen bei unseren 18stündigen 
Methylenblauversuchen nicht mehr wunderbar und erklärt aufs 
beste unsere Versuchsresultate. Sind natürlich gar keine oder 
nur ganz vereinzelte methylenblaufeste Spermatozoen in einem 
Samengemisch vorhanden, so sind nach 18 Stunden alle Samen- 
fäden abgestorben, wie wir es auch einige Male beobachtet haben. 
Beträgt dagegen der Prozentsatz der methylenblaufesten Samen- 
fäden auch nur wenige Prozente, so werden bei der grossen 
Anzahl der zu einem Experiment benutzten Samenfäden stets 
noch genügend nach 18 Stunden am Leben sein, um die Be- 
fruchtung vollziehen zu können. Tatsächlich haben wir ja bei 
unseren Experimenten beobachten können, dass stets bei den 
langen Methylenblauversuchen eine grosse Anzahl Samenfäden 
abgestorben und nur ein geringer Bruchteil beweglich geblieben 
war und die Befruchtung vollzog. 

Schliesslich sei noch mit einigen Worten auf die Beobachtung 
eingegangen, dass bei den Eiern, die durch den 15 Stunden lang 
mit Methylenblau vorbehandelten Samen befruchtet waren, die erste 
Teilung stets gegenüber gleichzeitig befruchteten Kontrolleiern 
erheblich verzögert war. Man könnte wohl daran denken, dass 
die lange Berührung mit dem Methylenblau doch nicht ganz ohne 


Einfluss selbst auf die der Wirkung schwer zugänglichen „methylen- 
20* 


302 Günther und Paula Hertwig: 


blaufesten“ Spermatozoen geblieben ist. Möglich ist aber auch, 
dass für diese Erscheinung die Selektion gewisser Samenfäden 
verantwortlich gemacht werden kann, die neben ihrer Methylen- 
blaufestigkeit zugleich auch noch die Eigenschaft besitzen, dass 
unter ihrem Einfluss das Ei sich langsamer teilt. Wenn wir bei 
einer normalen Befruchtung von Seeigeleiern ihre Teilungszeit 
beobachten, so werden wir stets konstatieren können, dass die 
Zweiteilung nicht bei allen Eiern simultan erfolgt, sondern dass, 
obgleich die Samenfäden fast gleichzeitig in die Eier eingedrungen 
sind, das eine Ei sich rascher, das andere langsamer teilt. Sicher 
ist nın für das Furchungstempo die Beschaffenheit des Eies von 
grosser Bedeutung, aber auch das Spermatozoon ist nicht ganz 
ohne Einfluss, wie einmal die Bastardierungsversuche von New- 
man, vor allem aber die Versuche mit Seeigelsamen, der durch 
Radium oder Methylenblau geschädigt war, deutlich gezeigt haben. 
Es ist also wohl möglich, dass bei unseren langen Methylenblau- 
versuchen gerade diejenigen Spermatozoen, die normalerweise auf 
die Eiteilung verzögernd einwirken, sich gegen die Methylenblau- 
wirkung resistent erwiesen haben. So wäre es z. B. denkbar, 
dass die besondere Beschaffenheit der Schutzhülle, die den Sperma- 
kopf der methylenblaufesten Samenfäden gegen die Giftwirkung 
schützt, gleichzeitig auch das Aufquellen des Spermakopfes im 
Eiplasma und seine Umwandlung in den Spermakern verzögert 
und somit zu der verspäteten Teilung des Eies beiträgt. Jedoch 
können wir hierüber vorläufig nur Vermutungen äussern, zumal 
wir ja auch noch nicht einmal sicher wissen, ob die Giftfestigkeit 
einzelner Spermatozoen auf einer besonderen Beschaffenheit der 
ihren Kopfteil umgebenden Rindensubstanz beruht, oder auf eine 
chemisch bedingte verschiedene Affinität ihrer Kernsubstanz zum 
Gift zurückzuführen ist. In Anbetracht der von uns sicher- 
gestellten Tatsache, dass nicht nur die Samenfäden verschiedener 
Tierarten, sondern auch diejenigen, die von dem gleichen Tier 
stammen, Resistenzunterschiede aufweisen, scheint uns allerdings 
die erste Alternative den Vorzug zu verdienen. 

Jedoch werden erst weitere systematische Versuche mit 
einer grösseren Anzahl chemischer Substanzen diese Frage ent- 
scheiden, wie denn unsere Experimente überhaupt erst einen 
Anfang in der Erforschung dieses neuen, von O. Hertwig uns 
erschlossenen Forschungsgebietes bedeuten. O. Hertwig ist es 


Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 303 


gewesen, der als erster in seinen Methylenblauversuchen am 
Froschsamen den Nachweis geführt hat, dass die Kernsubstanz 
der Spermatozoen durch chemische Mittel geschädigt werden 
kann, ohne dass ihre Befruchtungsfähigkeit dadurch aufgehoben 
wird, und dass sich auf diesem Wege Entwicklungsstörungen 
künstlich hervorrufen lassen. Frühere Versuche von Herbst in 
gleicher Richtung müssen, besonders nach den Ergebnissen unserer 
Arbeit, als nicht einwandfrei bezeichnet werden. Herbst ver- 
suchte durch Süsswasser und Natronlauge die Seeigelspermatozoen 
zu schädigen. Er behandelte die Samenflüssigkeit mit den ge- 
nannten Mitteln, bis nur noch ein kleiner Teil der Spermatozoen 
beweglich war und führte sodann die Befruchtung aus. Nach 
den Resultaten unserer Arbeit müssen wir es aber im höchsten 
Grade als zweifelhaft bezeichnen, ob in diesen Experimenten von 
Herbst wirklich die Kernsubstanz der wenigen überlebenden 
Samenfäden, worauf es doch allein ankommt, geschädigt ist, ob 
nicht vielmehr auch hier eine Selektion der besser geschützten 
Spermatozoen im Spiele ist. 

Ergeben sich hier schon Schwierigkeiten in der Deutung 
der Experimente mit ihren relativ einfachen Verhältnissen, so 
wachsen dieselben noch erheblich, sobald wir uns nicht darauf 
beschränken, den Einfluss konzentrierter chemischer Mittel auf 
die reifen Samenfäden während einer relativ kurzen Einwirkungs- 
zeit zu erforschen, sondern uns die Frage vorlegen, ob nicht 
auch durch chemische Stoffe in ganz kleinen Dosen, die längere 
Zeit auf die Spermatozoen wirken, eine Schädigung ihrer Kern- 
substanz bei erhaltener Befruchtungsfähigkeit erzielt werden kann. 
Auch müsste untersucht werden, ob nicht die sich entwickelnden 
Samenzellen leichter durch Chemikalien beeinflussbar sind, als 
die ausgereiften Spermatozoen. Besonderer Wert wäre schliesslich 
auch darauf zu legen, nicht nur grobe Störungen des Entwick- 
lungsprozesses auf diesem Wege zu erzielen, sondern auch feinere 
Entwicklungsanomalien an geeignetem Material festzustellen. Trotz 
der Wichtigkeit dieser Fragen und ihrer grossen praktischen 
Bedeutung für die modernen Bestrebungen der Rassenhygiene 
fehlt es aber auch hier noch fast ganz an einwandfreien Ver- 
suchen. Erwähnenswert sind hier höchstens die erst kürzlich ver- 
öffentlichten Versuche des Amerikaners Stockhard, der männ- 
liche Meerschweinchen mit Alkohol behandelte und einen deutlichen 


304 Günther und Paula Hertwig: 


Effekt. des Giftes auf die Nachkommenschaft der alkoholisierten 
Böcke mit normalen weiblichen Tieren feststellen zu können 
glaubte. Aber auch diese Versuche sind nur an einem kleinen 
Tiermaterial ausgeführt, auch sind die Entwicklungsstörungen 
bei der Nachkommenschaft noch nicht genauer untersucht worden. 


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Beeinflussung der männlichen Keimzellen etc. 305 


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The Journ. of Experim. Zool., Vol. 8, 1910. 

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Pflüger, E.: Die Bastardzeugung bei den Batrachiern. Pflügers Arch. 
f. d. ges. Phys., Bd. XXIX, 1882. 

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the influence of alcohol on the germ cells and the developing embryos 
of Mammals. Arch. f. Entw.-Mech., Bd. 35. 


Erklärung der Abbildungen auf Tafel XI und XI. 


Tafel XI. 


Die Herstellung der Abbildungen erfolgte so, dass von den Embryonen 
mikrophotographische Aufnahmen angefertigt und auf den Kopien derselben 
noch die feineren Details mit Tusche und Bleistift eingezeichnet wurden. 

Die Fig. 1—8 sind Smal, die Fig. 9—11 sind 50mal vergrössert. 

Die in den Fig. 1—3 abgebildeten Embryonen stammen von Eiern von 
Rana esculenta ab, die mit Samen von Rana fusca befruchtet wurden, der 
zuvor 1 Stunde der Wirkung einer 0,25proz. Chloralhydratlösung ausgesetzt 
worden war. 

Die in den Fig. 5—”7 abgebildeten Embryonen haben sich aus Rana 
esculenta-Eiern entwickelt, die mit Sperma von Rana fusca befruchtet worden 
waren. Der Froschsamen war vor Verwendung zur Befruchtung mit 0,05 proz. 
Methylenblaulösung eine halbe Stunde behandelt worden. 

Auf den Fig. 4 und 8 sind zwei normale Rana esculenta-Larven als 
Kontrolle photographiert. 


Fig. 1 und 2. Zwei 7 Tage alte Froschlarven aus dem Chloralhydratversuch. 
Fig. 3. 8 Tage alte Froschlarve aus dem Chloralhydratversuch. 
Fig. 4 8 Tage alte normale Froschlarve. 


306 Günther und Paula Hertwig: Beeinflussung ete. 


Fig. 6 und 7. Zwei 15 Tage alte parthenogenetische Rana esculenta- 
Embryonen aus dem Methylenblauversuch. 
Fig. 8. 15 Tage alter normaler Froschembryo. 


Die Fig. 9—11 stellen Fischembryonen (Gobius jozo) dar. 

Fig. 9 und 10. Zwei 5 Tage alte Gobiusembryonen, welche sich aus Eiern 
entwickelten, die mit Sperma von Gobius jozo befruchtet wurden. 
Die Samenflüssigkeit hatte sich vor der Besamung 1 Stunde in 
einer O,1proz. Methylenblaulösung befunden. 

Fig. 11. 5 Tage alter normaler Embryo von Gobius jozo. 


Tafel XII. 

Sämtliche Figuren sind bei Zeiss homog. Immersion "2, Tubus- 
länge 160, Okular 3 in der Höhe des Objekttisches gezeichnet. Alle Figuren 
stellen Schnittbilder durch Seeigeleier (Stronglyocentrotus lividus) dar, die 
sämtlich mit Samen befruchtet sind, der durch Methylenblaubehandlung ge- 
schädigt wurde. 


Die Fig. 1 und 7 stammen von Eiern, die mit Samen befruchtet sind, der 
> Stunden mit einer 1proz. Methylenblaulösung behandelt wurde. 

Fig. 1. 1 Stunde 55 Minuten nach der Befruchtung. 

Fig. 7. 3 Stunden 15 Minuten nach der Befruchtung. Auf ®/ı verkleinert. 


Die Eier Fig. 2, 6 und 8 wurden mit Samen befruchtet, der 3 Stunden mit 
einer 0,5 proz. Methylenblaulösung behandelt wurde. 
Fig. 2, 6 und 8. 2 Stunden nach der Befruchtung. Fig. 6 und 8 auf ?/ı ver- 
kleinert. 


Die Fig. 3—5 stellen Eier dar, die mit Samen befruchtet wurden, der 
2 Stunden mit O,1proz. Methylenblaulösung behandelt wurde. 
Fig. 3. 2 Stunden 20 Minuten nach der Befruchtung. 
4. 3 Stunden 25 Minuten nach der Befruchtung. 
Fig. 5. 3 Stunden 10 Minuten nach der Befruchtung. 


Aus dem Anatomisch-biologischen Institut der Universität Berlin. 


Die Entwicklung von Forelleneiern nach Befruchtung 
mit radiumbestrahlten Samenfäden. 
11. Teil. 


Das Verhalten des Radiumchromatins während der ersten 
Teilungsstadien. 


Von 
Dr. Karl Oppermann. 


Hierzu Tafel XIII und 2 Textfiguren. 


Im ersten Teil der unter gleichem Haupttitel veröffentlichten 
Arbeit ist in ausführlicher Weise der Entwicklungsgang von Forellen- 
embryonen beschrieben worden, die hervorgingen aus normalen 
Eiern, zu deren Befruchtung mehr oder minder stark radium- 
bestrahlte Samenfäden benutzt worden waren. Es konnte gezeigt 
werden, dass auch für das Teleosteerei das zuerst von OÖ. Hertwig 
für die Ergebnisse der Radiumversuche an Froschkeimen auf- 
gestellte Gesetz der Kurvenbildung gilt. 

Wie bei den Experimenten mit Amphibiensamenfäden, so 
liess sich auch für den Knochenfisch feststellen, dass durch eine 
intensive Bestrahlung der Spermien (23 Stunden mit 7,5 oder 
5,5 mg Radiumbromid) die Entwicklung der Embryonen einen 
fast der Norm entsprechenden Verlauf nahm; Forellenkulturen 
derartiger Versuche konnten 40—50 Tage am Leben erhalten 
werden. Dagegen ergab sich bei der Wahl erheblich kürzerer 
Bestrahlungszeiten mit gleichem Präparat (3 Stunden), dass nicht 
einmal mehr das Gastrulationsstadium überstanden wurde; viel- 
mehr waren mit dem 14. Tage nach der Befruchtung alle Eier 
abgestorben. Geringe Bestrahlung (5 Minuten) der Spermien hatte 
auch nur relativ unbedeutende Schädigungen des Entwicklungs- 
produktes zur Folge. 

Eine Erklärung für die eigentümliche Erscheinung bei den 
entsprechenden Versuchen an ‚Froschkeimen, dass nämlich im 
Falle einer sehr starken Bestrahlung der Samenfäden die jungen 
Larven wieder eine verhältnismässig gute Organisation zeigen, 


308 Karl Oppermann: 


gibt OÖ. Hertwig durch die Annahme, dass der in das Ei ein- 
dringende Spermakern sich überhaupt nicht mehr in normaler 
Weise an den Kernteilungsvorgängen beteilige, dass ihm nur noch 
die Rolle des Entwicklungserregers zukomme. Dies heisst aber 
nichts anderes, als dass es sich um Fälle von künstlicher Partheno- 
genese handelt. 

Der tatsächliche Beweis für diese Annahme O. Hertwigs 
ist von Paula Hertwig (1913) erbracht worden. In Frosch- 
eiern, die ursprünglich mit stark bestrahlten Samenfäden be- 
fruchtet wurden, konnte auf dem Zwei- und Vierzellenstadium 
der degenerierte Spermakern stets in völlig isolierter Lage von 
den Zellkernen gefunden werden. 

Es schien von grossem Interesse, zu untersuchen, ob die 
entsprechenden Erscheinungen am Forellenei sich auch auf die 
gleichen ursächlichen Zusammenhänge, wie sie bei Rana fusca 
gefunden wurden, zurückführen liessen. Es war zu erwarten, 
dass die Beobachtungen im wesentlichen zu gleichen Angaben 
führen würden. Dank eines reichen Materiales war es möglich, 
das Schicksal des radiumbestrahlten Spermiums von dem Zeit- 
punkte kurz nach seinem Eintritt in das Ei bis zum vollendeten 
Vierzellenstadium der Keimscheibe, das ungefähr in der 14. Stunde 
nach der Befruchtung vorlag, zu verfolgen, und so den gesamten 
Ablauf der Erscheinungen an einer fast lückenlosen Reihe von 
Stadien darzulegen, von dem im wesentlichen am Froschei nur das 
Schlussresultat vorlag. 

Die vorliegenden Untersuchungen sind, wie die im ersten 
Teile veröffentlichten, im Anatomisch-biologischen Institut der 
Universität Berlin ausgeführt worden. Ich möchte mir an dieser 
Stelle erlauben, Herrn Geh. Med.-Rat Prof. Dr. O0. Hertwig 
und Herrn Prof. Dr. Poll für die gütige Unterstützung, die mir 
bei der Ausführung dieser Arbeit zuteil wurde, meinen ergebensten 
Dank auszusprechen. 


Material und Methode. 


Das Material, vier Paar laichreifer Forellen, erhielt ich wieder 
in bestem Zustande von der Forellenzuchtanstalt von C. Arens 
Nachf. in Cleysingen bei Ellrich a. Harz. 

Die Bestrahlungen der Samenfäden wurden mit den gleichen 
Radium- und Mesothoriumpräparaten ausgeführt, die mir auch 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 309 


schon für die früheren Versuche durch die Güte des Herrn Geh. 
Med.-Rat Prof. Dr. OÖ. Hertwig zur Verfügung standen. Die 
Radiumpräparate enthielten 7,5 resp. 5,5 mg Radiumbromid, 
während das Mesothoriumpräparat einer Stärke von 55 mg Radium - 
bromid entsprach. 

Die Versuchsmethode war wieder genau die gleiche, wie 
sie in der früheren Arbeit beschrieben wurde, so dass hier auf 
eine genauere Darstellung verzichtet werden kann. 

Die Präparation der Keimscheiben wurde nach der von 
Kopsch-Virchow angegebenen Methode ausgeführt. Fixiert 
wurde mit Pikrin-Sublimat-Eisessig und Zenkerscher Flüssigkeit. 

Die Keimscheiben wurden fast stets in Flachschnitte zerlegt 
und zwar betrug die Schnittdicke 10—15 u. 

Zur Färbung der Präparate liessen sich mit sehr gutem 
Erfolg frisch bereitete Lösungen von Alaun-Karmin verwenden, 
sowie auch Hämalaun nach Meyer. | 

Die Zeichnungen wurden mit Hilfe des Abbeschen Zeichen- 
apparates angefertigt. 


Allgemeiner Verlauf der Versuche. 


Ehe die Darlegung der Spezialuntersuchung gegeben werden 
soll, muss zunächst kurz auf den allgemeinen Verlauf der Ent- 
wicklung der Versuchseier eingegangen werden. 

Die früheren Untersuchungen erlaubten schon bei einer Be- 
strahlung der Spermien während 2 Stunden mit dem Mesothorium 
präparat eine sehr beträchtliche Schädigung der Samenfäden 
nachzuweisen. Dies hatte zur Folge, dass die Entwicklung der 
mit solchen Spermien befruchteten Eier einen sehr günstigen 
Verlauf nahm. Die Embryonen erreichten ein Alter von 40 bis 
50 Tagen; sie unterschieden sich zum Teil lediglich durch ihre 
geringere Grösse von den Kontrolltieren. Die Kerne erwiesen 
sich als haploid. Es war also zu erwarten, dass die ersten Ent- 
wicklungsstadien der Eier, die mit 2 Stunden lang bestrahltem 
Samen befruchtet waren, für unsere Untersuchung ein günstiges 
Material liefern würden, um feststellen zu können, in welcher 
abgeänderten Form sich bei dieser Versuchsanordnung die ersten 
Kernteilungsprozesse vollziehen. 

Es wurden daher in der ersten Versuchsserie am 4. De- 
zember 1912 folgende Bestrahlungszeiten gewählt: 


310 Karl Oppermann: 


Versuch I 7 h. 29 Min. bis 9h. 29 Min. Mesothor (55 mg). 
„. HI 9h.43 Min. bis 11h. 43 Min. Mesothor (55 mg). 
II 12h. — Min. bis 2h. 4 Min. Mesothor (55 mg). 
„ IV 7h.25 Min. bis 10h. 20 Min. Radium I (7,5 mg). 

In Versuch IV wurde den Samenfäden eine bedeutend 
geringere Strahlenmenge zugeführt. Die früheren Versuche hatten 
gelehrt, dass bei einer derartigen Bestrahlung die embryonale 
Entwicklung nicht über das Stadium der Gastrula fortging. Es 
sollte auch das Verhalten des schwächer bestrahlten Spermakernes 
auf den ersten Teilungsstadien beobachtet werden. 

Nach der Bestrahlung waren die Samenfäden in allen Fällen 
gut beweglich. 

Zu jedem Versuche wurden ungefähr 30 — 40 Eier verwendet. 
Wie aus den späteren Beobachtungen hervorging, war das Be- 
fruchtungsergebnis im allgemeinen gut, mit Ausnahme des Ver- 
suches I, in dem sich höchstens 50°/o der vorhandenen Eier 
entwickelt hatten. Kontrollbefruchtungen wurden stets ausgeführt. 

Von 2 Stunden nach der Befruchtung an wurden in reichlicher 
Folge Keimscheiben nach der oben angegebenen Methode fixiert 
und zwar gleichzeitig aus derselben Kultur immer mindestens 
zwei Stück. Die Fixationen wurden bis zur 14. Stunde nach der 
Besamung fortgesetzt; die ältesten Kontrolleier zeigten dann schon 
Achtteilung. 

Die übrigen Eier wurden in fliessendem Wasser zur Weiter- 
entwicklung belassen. Es bestätigten sich im wesentlichen die 
schon früher erhaltenen Ergebnisse. Die Eier des Versuches IV 
starben zuerst ab, so dass 14 Tage nach Beginn des Versuches 
kein Ei mehr am Leben war. Aus den anderen Kulturen ent- 
wickelten sich zum Teil normal aussehende Embryonen, die nur 
durch den Grössenunterschied gegenüber den Kontrolltieren auf- 
fielen, zum Teil aber auch schon makroskopisch erkennbar patho- 
logische Exemplare. Am 23. Tage wurde dieser Versuch beendet. 

Die zweite Reihe von Experimenten wurde am S. Januar 1913 
vorgenommen. 

Da nach einer zweistündigen Bestrahlung die Samenfäden 
nach Zusatz von Wasser eine anscheinend noch normale Beweg- 
lichkeit zeigten, so wurden jetzt etwas längere Bestrahlungszeiten 
gewählt. Daneben wurden auch noch sehr lange Bestrahlungen mit 
den schwachen Radiumpräparaten (7,5 und 5,3 mg) vorgenommen. 


” 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. >11 


Versuch V 7°? bis 10°? Mesothor. 
Versuch VI 10° bis 2° Mesothor. 
Versuch VII Mittw. 2°° bis Donnerstag 9% Rı = 18 Std. 50 Min. 


Versuch VIEL 5229; h 9% Ra —= 18 Std. 50 Min. 
Versuch IX Freitag 11!! bis Sonnabend 101! Rı = 23 Std. 
Versuch X r Ede} R 104 Rau 23, 88d: 


Auch aus dieser Serie wurde eine grosse Anzahl von Stadien 
bis zur 14. Stunde nach der Besamung fixiert. 

Der spätere Entwicklungsverlauf gestaltete sich leider in- 
sofern ungünstig, als durch irgendwelche Einwirkungen, vom 
14. Tage an, sowohl die Kontroll- wie auch die Versuchskeimlinge 
rapide abzusterben begannen. Ob eine einmalige, mehrere Stunden 
andauernde Störung in der Wasserzuleitung, oder irgend welche 
Infektion das Absterben bedingte, konnte nicht festgestellt werden. 
Für die hier speziell in Betracht kommenden Untersuchungen 
war diese Störung jedoch ohne die geringste Bedeutung. 


Spezieller Teil. 


Die ersten Entwicklungsvorgänge in normalen Eiern nach 
Befruchtung mit radiumbestrahlten Samenfäden stimmen völlig 
mit den unter normalen Bedingungen erhaltenen Stadien überein. 
Das Spermium dringt in das Ei ein. Der Spermakopf wandelt 
sich allmählich zum Spermakern um. Er ist zunächst noch klein, 
kugelförmig und besitzt einen Durchmesser von 6 «. 2 Stunden 
nach der Befruchtung ist das Zentrosoma noch ungeteilt, es zeigt 
aber schon eine nicht unbeträchtliche Strahlung. In einiger 
Entfernung findet sich der fast gleichgrosse, etwas gelappte Eikern. 
In 4 Stunden alten Keimscheiben war Ei und Samenkern stets 
in seitlicher Aneinanderlagerung zu finden. Beide Kerne sind zu 
relativ bedeutender Grösse herangewachsen. Es beträgt der 
gesamte Querdurchmesser beider Kerne ungefähr 24 «, während 
jeder durchschnittlich eine Höhe von 20 « hat. Die Grösse beider 
Kerne ist kaum verschieden. Strukturdifferenzen sind zunächst 
nicht erkennbar, so dass auf diesem Stadium eine Unterscheidung 
von Ei und Samenkern nicht mit Sicherheit möglich ist. An 
6 Stunden alten Objekten hat sich das Bild erheblich geändert. 
Noch immer liegt das Kopulationsstadium der beiden Kerne vor. 
Sie haben noch an Grösse etwas zugenommen. Mit völliger 
Sicherheit lässt sich aber jetzt erkennen, dass es sich nicht um 


>12 Karl Oppermann: 


ein einheitliches Verschmelzungsprodukt handelt. Der Kopulations- 
kern zeigt sich deutlich aus zwei verschiedenen Teilen zusammen- 
gesetzt. Das Uhromatin des einen Halbkernes ist gleichmässig 
gefärbt und zeigt netzartige Verteilung. Im anderen Teile dagegen 
befindet sich das Chromatin vorwiegend in zentraler Lage des 
bläschenförmigen Kernes, ist kompakter und hat intensiv Farbstoff 
aufgenommen (Fig. 1). An einzelnen Objekten ist auch zu sehen, 
dass der Halbkern, derjenige, dessen Struktur gleichförmig ist, 

den anderen an Grösse etwas übertrifft und sich 

bogenförmig um diesen herumlegt (vergl. Text- 
h figur 1). Die weitere Entwicklungsgeschichte 
| lehrt nun, dass niemals ein einheitlicher Furchungs- 

kern zustande kommt, sondern es beginnt nun 

jeder Teil für sich Chromosomen zu bilden, so 

7:950 dass in der ersten Mitose eine strenge Sonderung 

des väterlichen und mütterlichen Kernanteiles 
vorliegt. 

Es wird sich nun die Frage erheben, in welcher Weise unter 
normalen Verhältnissen die Bildung der ersten Furchungs- 
spindel aus dem Kopulationskern erfolgt. 

Die Reifung und Befruchtung des Forelleneies ist schon 
mehrfach Gegenstand der Bearbeitung gewesen. Von den vor- 
handenen Untersuchungen kommt hier nur die von Behrens 
(1898) als die neueste in Betracht, in der auch die früheren 
Autoren weitgehendst zum Vergleich herangezogen worden sind. 
Auch Behrens konnte feststellen, dass sich die beiden Vor- 
kerne aneinanderlegen und zu gewissen Zeitpunkten Verschieden- 
heiten der Grösse und Struktur zeigen. Dann heisst es aber bei 
ihm: „Die Verschiedenheit der Kernstruktur der Vorkerne dürfte 
jedoch nicht etwa für den einen oder den anderen Kern charak- 
teristisch sein. Wahrscheinlich handelt es sich nur um Alters- 
differenzen, da ja gewöhnlich der eine oder der andere Kern, 
meist wohl der Spermakern, in der Entwicklung etwas voraus ist.“ 
Es ist also zunächst bemerkenswert, dass schon unter normalen 
Verhältnissen ein Kopulationskern beobachtet worden ist, der aus 
zwei Teilen besteht, die sich durch Struktur und Grösse von- 
einander unterscheiden können. Es soll dann allerdings ein ein- 
heitlicher Verschmelzungskern gebildet werden. Jedoch ist sich 
der Autor seiner Sache nicht ganz sicher. Es heisst: „Die Vorkerne 


Fig. 1. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 313 


verschmelzen anscheinend immer vor der Bildung der ersten 
Furchungsspindel zu einem ruhenden Kern“. Es wird dann noch 
ein ziemlich weit fortgeschrittenes Stadium des ersten Kern- 
teilungsvorganges abgebildet; die Chromosomen liegen alle in 
gleichmässiger Verteilung zur Äquatorialplatte angeordnet. 
Behrens, wie auch schon früher Blanc, haben die Entstehung 
der ersten Furchungsspindel aus dem Verschmelzungskern nicht 
beobachten können. Es scheinen aber gerade diese Zwischenstadien, 
die sich relativ schnell weiter entwickeln, von wesentlicher Be- 
deutung zu sein. Ein derartiges frühes Kernteilungsbild, in dem 
die Entfernung der Strahlungszentren voneinander erst 30 u beträgt, 
zeigt nämlich die väterlichen und mütterlichen Chromatinmassen 
wie zwei Halbkugeln gebildet, die deutlich durch eine helle Linie 
voneinander getrennt sind. In einer zweiten Kontrollkeimscheibe, 
die gleichzeitig mit der eben beschriebenen fixiert wurde und auch 
aus gleicher Kultur stammte, war die Spindelfigur in etwas weiterer 
Ausbildung. Der Längsdurchmesser betrug jetzt 40 «. Auch hier 
war die Gruppierung des Chromatins in zwei Teile vorhanden, und 
diese zeigten einen verschiedenen Grad der Differenzierung. In der 
einen Hälfte hatte bereits eine stärkere Auflockerung stattgefunden, 
es waren schon teilweise einzelne Ohromatinschleifen zur Ausbildung 
gekommen, während in der anderen Partie das Chromatin noch 
kompakter war. In diesen frühesten Mitosebildungen ist also 
eine Sonderung in männliche und weibliche Kernbestandteile 
vorhanden, dagegen verschwindet der Unterschied bereits an 
Objekten, die eine halbe Stunde älter sind. Beträgt die Spindel- 
länge 58 «, so liegen die Chromosomen völlig gleichmässig in 
einer Äquatorialplatte angeordnet. 

Was die Frage des Kopulationskernes anbetrifft, so soll jedoch 
nach allen bisherigen Untersuchungen stets ein einheitlicher Ver- 
schmelzungskern gebildet werden. Allerdings weichen die An- 
gaben, wann die Bildung vor sich gehen soll, stark voneinander 
ab. Kupffer behauptet, dass von der 3. bis zur 10. Stunde in 
allen der von ihm untersuchten Eier nur ein Kern vorhanden 
gewesen sei. Nach Blanc soll 9'/s Stunden nach der Besamung 
ein einheitlicher Verschmelzungskern entstanden sein. Dann 
schreibt Behrens: „Wenn ich nun auch die direkte Verschmelzung 
der Vorkerne nicht habe verfolgen können, wie Blanc, so habe 
ich doch den Furchungskern selbst beobachtet, und da weichen 


314 Karl Oppermann: 


nun meine Beobachtungen von denjenigen Blancs wieder erheblich 
ab.“ Es ist also bezüglich der Frage der Beschaffenheit des 
Furchungskernes durchaus noch kein einheitliches Resultat erzielt. 
Nach Beobachtungen, die gelegentlich an einzelnen Kontrollstadien 
gemacht wurden, konnte ein Verschmelzungskern nicht gefunden 
werden. 

Den Angaben, dass ein einheitlicher Verschmelzungskern 
beim normalen Teilungsvorgang gebildet werden soll, stehen ausser- 
dem noch die Beobachtungen gegenüber, dass in den Versuchs- 
keimscheiben ein einheitlicher Kopulationskern sicherlich nicht 
gebildet wird; je näher der Zeitpunkt der Teilung des Kernes 
rückt, mit um so grösserer Deutlichkeit lässt sich seine Zusammen- 
setzung aus zwei heterogenen Substanzen erkennen (Fig. 1). Diese 
Struktureigentümlichkeiten sind für die beiden Kerne charakte- 
ristisch. Das Chromatin des männlichen Vorkernes ist nicht gleich- 
mässig verteilt, sondern es ist mehr in der Mitte lokalisiert und 
intensiver gefärbt; dies sind Zustände, die 6 Stunden nach der 
Befruchtung stets gefunden wurden. In der 7., bei der zweiten 
Versuchsserie in der 8. Stunde, liegt dann eine Spindelfigur vor. 
Die Spindellänge beträgt zunächst 38 u, steigt aber in kurzer 
Zeit, innerhalb 1 Stunde, auf 87 «. Während nun der weibliche 
Halbkern in anscheinend ganz normaler Weise zur Bildung der 
Chromosomen schreitet, ballt sich die chromatische Substanz 
des männlichen Kernes zu einem homogen gefärbten Klumpen 
zu sammen. Fig. 2 und 3 veranschaulichen solche Stadien. In 
Textfig. 2, a—d sind von vier verschiedenen Objekten diese 

Chromatinballen der ersten Mitose auf 
ar db £ d e Umrisszeichnungen wieder gegeben. 
RUE 6 » 2 Der Volumeninhalt ist in allen Fällen 

ungefähr der gleiche. Interessant 

1:8%0 war das Vorkommen eines Tetrasters. 

Fig. 2. Auch in diesem Falle liegt der Rest 

des Spermakernes als dunkel ge- 

färbte Masse in der Mitte der Spindel. Aber wie die Umriss- 

zeichnung e zeigt, ist sein Volumen bedeutend grösser. Es handelt 

sich offenbar um einen Fall von Dispermie, in dem sich der 

Chromatinanteil beider Spermien zu einer einheitlichen, homogen 

gefärbten Masse vereinigt hat. Es war dies das einzige poly- 
sperme Ei, das beobachtet wurde. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 315 


Ein weiteres Stadium der ersten Mitose ist in Fig. 4 ab- 
gebildet. Die Chromosomen rücken auf die Centrosomen zu und 
haben sich in völlig normaler Weise angeordnet, aber die Zahl 
der Chromosomen ist nur gering. Der Rest des Spermakernes 
liegt noch genau in der Mitte der Spindel. Seine Form hat sich 
verändert. Dem herrschenden Zug folgend hat er sich in der 
Hauptrichtung der Kernteilungsfigur gestreckt. 

Die normalen weiblichen Chromosomen werden bläschenförmig 
und wandeln sich zu einem Ruhekern um. Unterdes hat auch 
die Zellwandbildung begonnen, so dass nun das fertige Zwei- 
zellenstadium vorliegt. Die beiden Zellkerne sind zunächst noch 
durch eine ausserordentlich feine, aber scharf gefärbte Linie, 
dem vereinigten Rest der Spindelfasern, verbunden (Fig.5). Diese 
Verbindungslinie ist in der Mitte, genau auf der neuen Zellwand, 
verdickt. Diese Verdickung, die die Form eines bläschens hat, 
das in der Richtung der Verbindungslinie gestreckt ist, stellt den 
Spermarestkern vor. Seine Länge beträgt fast konstant 8 «. Die 
Struktur ist bei verschiedenen Objekten nicht immer gleichmässig, 
entweder ist sie körnig, oder in einem hellen Hof liegt das 
Chromatin als kompaktes Gebilde (Fig. 6). Auf etwas älteren 
Stadien ist der Kern anscheinend wahllos in eine der beiden 
Blastomeren eingerückt. Dies beruht darauf, dass der Spindel- 
faserstrang, der noch die beiden Kerne verband, durchgerissen 
ist. Der Spermakern folgt nun dem Zug der Spindelfasern und 
bewegt sich auf den einen Zellkern zu. Die beiden Kerne 
schreiten nun wiederum zur Teilung. Fig. 7 und 8 veranschau- 
lichen das Entwicklungsstadium zweier gleichzeitig und aus 
gleicher Kultur fixierter Objekte. In Fig. 8 ist bei stärkerer Ver- 
grösserung nur die eine Mitose abgebildet. Fig. 7 gibt bei 
schwächerer Vergrösserung beide Spindeln der anderen Keim- 
scheibe wieder. Diese Abbildungen zeigen auch, in wie gleich- 
mässiger Weise sich die Bildungsvorgänge bei verschiedenen 
Objekten vollziehen. Bemerkt sei noch, dass bei beiden Keim- 
scheiben sowohl die Längsrichtung der Spindel wie auch der 
Spermakern auf einem Schnitt zu finden waren. Daher konnten 
auch stets die von einem Üentrosoma nach dem Spermarestkern 
hingehenden Strahlungen beobachtet werden. Das Spermachromatin 
erscheint als homogen gefärbter Körper, dessen Länge 10 u be- 


trägt, ohne dass bei dieser Angabe die feinen Ausläufer berück- 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 21 


316 Karl Oppermann: 


sichtigt wären. Diese beiden Keimscheiben, wie auch noch einige 
andere waren zur Zählung der Chromosomen sehr geeignet. Die 
Schnitte (15 «) trafen die Spindeln immer genau in der Längs- 
richtung. Während in normalen Teilungsfiguren eine Bestimmung 
der Zahl der Chromosomen wohl unmöglich ist, konnte in einigen 
Fällen bei den Versuchsobjekten die Zahl mit einem hohen Grade 
von Wahrscheinlichkeit auf 12 festgesetzt werden. Wenn es auch 
nicht immer möglich war genaue Zahlenangaben zu machen, so 
war häufig nur daran gelegen, festzustellen, dass sich tatsächlich 
diese ganzen Wachstumsprozesse in Zellen vollziehen, deren Kerne 
eine erheblich verringerte, etwa die halbe Chromosomenzahl ent- 
hielten. Auch Messungen des Durchmessers der Äquatorialplatte 
zeigen immer einen deutlichen Grössenunterschied zwischen 
Kontroll- und Versuchsobjekten. 

Die zweigeteilten Keimscheiben des Versuches IV liessen 
keine von den normalen Verhältnissen abweichenden Beschaffen- 
heiten erkennen. Auch hier zeigte sich der zu einem feinen 
Strang zusammengeballte Rest der Spindelfasern, aber irgend 
welche Bildungen, die als ausgeschiedener Spermachromatin zu 
deuten wären, konnten nicht beobachtet werden. 


Das Vierzellenstadium. 


Je länger der Restkern sich in einer der Blastomeren be- 
findet, um so häufiger zeigen sich Stadien, die darauf hinzudeuten 
scheinen, dass die in der ersten Furchungsspindel ausgeschiedene 
chromatische Substanz des bestrahlten Spermiums durchaus nicht 
immer als tote Masse aufzufassen ist. Es konnte beobachtet 
werden, dass in einigen Fällen der spindelförmige Spermakern 
sich wieder abrundet, an Volumen zunimmt und dass die kom- 
pakte Chromatinmasse eine körnige Struktur annimmt. Diese 
Umwandlungen scheinen in dem Sinne gedeutet werden zu müssen, 
dass es sich in diesen betreffenden Fällen tatsächlich um eine 
Rekonstruktion des Kernes handelt. Ein derartiges Gebilde, das 
in mehr oder minder vollkommener Form wieder die Gestalt 
eines Kernes zeigt, findet sich dann stets in unmittelbarer Nähe 
eines Zellkernes und zeigt die Tendenz, mit diesem zu ver- 
schmelzen. Andererseits kann der Spermakern sein früher ge- 
schildertes Aussehen nicht verändert haben und sich noch in 
beträchtlicher Entfernung von den Zellkernen befinden. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 3,7 


Es ist also das Verhalten des Spermakernes auf dem Vier- 
zellenstadium durchaus nicht einheitlich, wenngleich (also mit 
Ausnahme von Versuch IV) zunächst nur von den Versuchen die 
Rede sein soll, in denen die Samenfäden sehr stark bestrahlt 
wurden. 

In Abb. 10 finden sich die vier Kerne auf dem Quer- 
schnitt durch die gefurchte Keimscheibe. In einer Blastomere 
liegt in grösserer Entfernung vom Zellkern der spindelförmig 
gestaltete, homogen gefärbte Rest des Spermakernes, dessen 
Längsdurchmesser auf den Zellkern zu gerichtet ist. Bei einem 
anderen Objekte war die Entfernung zwischen Zell- und Spermakern 
nicht so erheblich, der letztere war wieder homogen gefärbt, 
aber die Spindelform trat nicht mehr so deutlich zutage; be- 
sonders auffällig war eine tiefe Einschnürung in der Mitte, die 
wie auch das ganze sonstige Aussehen auf einen Zerfall hinzu- 
deuten schien. 

Eine andere Gruppe umfasst solche Objekte, bei denen der 
Spermarestkern Strukturdifferenzierungen erkennen lässt. Die 
eine Keimscheibe zeigte deutlich die vier Zellkerne, von denen 
sich drei völlig glichen. Dem vierten Zellkern lag ein zylinde- 
risches Körperchen an, dessen Längsdurchmesser ebenso gross war 
wie der des Zellkernes, an einem Ende zeigte dieses Gebilde 
eine bläschenförmige Auflockerung, während das andere Ende 
noch gleichmässig gefärbt, strukturlos war (Fig. 11). 

Noch interessanter ist ein zweiter Fall. Auf Umrisszeich- 
nungen sind alle vier Kerne wiedergegeben (Fig. 12). Drei stimmen 
in Struktur und Grösse völlig überein, der vierte ist verändert. 
Unschwer ist zu erkennen, dass dieser aus zwei Teilen besteht. 
Der Hauptkern hat einen seitlichen Fortsatz, an dessen Ende ein 
ovaler, etwas dunkler gefärbter, körniger Körper sich befindet. 
Es ist ohne Zweifel, dass dieser Körper als der Spermarestkern 
zu deuten ist, und es erscheint ebenfalls wohl sicher, dass er in 
diesem Stadium nicht als ein Degenerationsprodukt aufzufassen 
ist, sondern im Gegenteil, dass es sich hier um einen rekon- 
struierten Kern handelt. 

Eine besondere Besprechung erfordern noch die Vierzellen- 
stadien des schwachen Bestrahlungsversuches (Versuch IV). Sind 
ruhende Kerne vorhanden, so sind Unterschiede gegenüber den 


normalen Objekten mit Sicherheit nicht festzustellen. In Mitosen 
21* 


318 Karl Oppermann: 


dagegen zeigen sich häufig Unregelmässigkeiten. In der Telophase 
hat es häufig den Anschein, als ob in der einen Hälfte des Dyasters 
die Zahl der Chromosomen grösser ist alsin der anderen. Interessant 
ist, dass einmal eine Spindel gefunden wurde, in der abseits von 
der AÄquatorialplatte eine Gruppe abgesplitterter Chromosomen 
zu finden war, und zwar in folgenden Grössenverhältnissen (Fig.9): 
Die Länge der Spindel 40 «, Durchmesser der Äquatorialplatte: 
12 is, Entfernung der abgesplitterten Uhromosomengruppe: 8 u, 
Durchmesser derselben 4 u. 


Zusammenfassung und Folgerungen. 


Auch diese Untersuchungen beweisen von neuem die Richtig- 
keit der Annahme, dass vorwiegend das Chromatin der Keimzellen 
von den Radiumstrahlen beeinflusst wird. Am ruhenden Spermakern 
konnten noch keine Strukturveränderungen wahrgenommen werden. 
Sobald jedoch die Kernteilung beginnt, sobald die Umwandlungs- 
prozesse der Kernsubstanz ihren Anfang nehmen, wird die total 
veränderte Struktur des Chromatins des Samenfadens sichtbar. 
Es konnte gezeigt werden, dass das Spermium in das Ei ein- 
dringt, dort von einem winzig kleinen Kern von 6 « Durch- 
messer zu einem ovalen Bläschen von beträchtlicher Grösse heran- 
wächst, das einen Längs- und Querdurchmesser von 20 resp. 12 « 
besitzt. Immer findet eine Kopulation des männlichen und weib- 
lichen Vorkernes statt. Erst wenn ungefähr 4 Stunden seit der 
Befruchtung verflossen sind, treten die charakteristischen Ver- 
änderungen im Chromatin des väterlichen Kernes auf. Ein ein- 
heitlicher Verschmelzungskern konnte nie beobachtet werden. 
Ist die ursprüngliche Bestrahlung der Samenfäden intensiv genug 
gewesen, so wird das zu einer homogen gefärbten Masse zu- 
sammengeballte Chromatin des männlichen Kernes in der ersten 
Mitose eliminiert. Während des weiteren Entwicklungsverlaufes 
zeigt das ausgeschiedene Radiumchromatin nicht bei allen Objekten 
ein gleiches Verhalten. Die auftretenden Differenzen sind lediglich 
bedingt durch den verschiedenen Schädigungsgrad der Spermien. 
Einmal konnten solche Fälle beobachtet werden, in denen noch 
auf dem Vierzellenstadium das in der ersten Furchungsspindel 
ausgeschiedene Chromatin als strukturloser, spindelförmiger Körper 
sich in völlig isolierter Lage von den Zellkernen befand. Aus 
dieser Tatsache kann der Schluss gezogen werden, dass bei hin- 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. a 


reichend starker Bestrahlung der Samenfäden sich der gesamte 
Bildungsprozess des Embryos ohne Anteilnahme des väterlichen 
Chromatins vollzieht. Es ist dies so zu verstehen, dass der 
Entwicklungsreiz durch das eingedrungene Spermium gegeben 
wird, dass nun aber das frühzeitig ausgeschiedene Radıum- 
chromatin als absolut toter Körper in eine der Zellen zu liegen 
kommt und später auf irgend eine Weise völlig verschwindet. 
Ein derartiger Entwicklungsmodus wird in denjenigen Fällen 
vorliegen, welche, wie in der früheren Arbeit näher beschrieben 
wurde, zur Entwicklung solcher Embryonen führten, die ein Alter 
von 40—50 Tagen erreichten und sich lediglich durch geringere 
Grösse von den Kontrolltieren unterschieden. Durch das Spermium 
ist der Kernteilungsprozess ausgelöst worden; aber das geschädigte 
Chromatin kann seine vergiftende Wirkung nicht zur Geltung 
bringen. Es ist ersichtlich, dass eine solche Art der Entwicklung 
nicht als Parthenogenese im strengen Sinne bezeichnet werden darf. 

Die Ausschaltung des durch die Radiumbestrahlung ge- 
schädigten Chromatins braucht nun aber keine dauernde zu sein. 
Es konnte gezeigt werden, dass auf dem Vierzellenstadium eine 
Rekonstruktion des Spermakernes erfolgen kann, der dann mit 
einem der Zellkerne verschmikt. Ein derartiger neugebildeter 
Spermakern stellt einen relativ grossen Körper von elliptischer 
Form dar, der etwas dunkler als die übrigen Zellkerne gefärbt 
ist und eine deutliche körnige Struktur zeigt. Es ist nicht ge- 
lungen, zu beobachten, in welcher Weise sich dieser Kern bei 
den weiteren Teilungsvorgängen verhält. Wie dem aber auch 
sein mag, es genügt zunächst die Tatsache festzustellen, dass 
auf dem Vierzellenstadium ein Wiedereingreifen des einmal aus- 
geschiedenen Chromatins in den Kernteilungsvorgang stattfinden 
kann. Es ist erklärlich, dass jede erneute Teilnahme des Radium- 
chromatins am Wachstum des Keimes nur von schädigendem 
Einfluss sein wird. Nun war es ja auch tatsächlich möglich, 
festzustellen, dass als Resultat der hier in Betracht kommenden 
Bestrahlungsversuche neben annähernd normalen, zum Teil ziemlich 
stark pathologische Embryonen auftraten. Eine Erklärung für die 
verschiedene Ausbildung der Forellenkeimlinge wird also durch 
die Untersuchung der Vierzellenstadien geliefert. Findet eine 
Verschmelzung des rekonstruierten Spermakernes mit einem der 
Zellkerne statt, so werden die Abkömmlinge dieser Zelle ge- 


320 Karl Oppermann: 


schädigt sein und stärker missbildete Formen hervorgehen lassen. 
Je später aber diese Wiedervereinigung geschieht, um so weniger 
Zellen unterliegen den störenden Einwirkungen des bestrahlten 
Uhromatins und um so mehr wird eine der Norm angenäherte 
Entwicklung stattfinden. 

Was die Ergebnisse des Versuches IV anbelangt, so sind 
Deutungen wegen eines weniger reichlichen Materials nur in 
wenig ausführlicher Form zu geben. Es gehört dieser Versuch 
zu jener Gruppe von Experimenten. in denen die Entwicklung 
nur bis zum Gastrulationsstadium verläuft. Hier konnten nur 
insofern von der Norm abweichende Verhältnisse gefunden werden, 
als in den Mitosen der viergeteilten Keimscheibe Unregelmässig- 
keiten auftreten. Jedenfalls beteiligt sich der Spermakern zu- 
nächst noch an den Kernteilungen und verteilt sich auch noch 
anscheinend auf alle Blastomeren. 

Es ist schon vorher einmal erwähnt worden, dass, soweit 
die bisherigen Erfahrungen reichen, bei diesen Versuchen an den 
Keimen der Forelle von einer echten parthenogenetischen Ent- 
wicklung in keinem Falle gesprochen werden kann, denn es 
kommt stets zu einer Kopulation des männlichen und weiblichen 
Vorkernes. Was sonst an tatsächlichen Beobachtungen vorliegt, 
zeigt, dass lediglich die chromatische Substanz des radium- 
bestrahlten Spermiums von der Entwicklung in mehr oder minder 
vollkommener Form ausgeschaltet wird. Welches aber auch die 
Bedeutung sein mag, die die übrigen Kernbestandteile für die 
Organisation des sich bildenden Embryos haben mögen, es ist 
der Beweis erbracht worden, dass für den Grad der Schädigung 
lediglich die Frage entscheidend ist, ob das in der ersten Mitose 
ausgeschiedene Chromatin an der späteren Entwicklung wieder 
teilgenommen hat oder nicht. 

Obgleich zunächst ein Kopulationskern gebildet wird, so 
sind doch die Störungen in der Lagerung der weiblichen Chromo- 
somen in der ersten Spindelfigur so geringfügig, dass Kerne 
entstehen, die sich in völlig normaler Weise weiter vermehren 
können. Dies ist aber nur dadurch möglich, dass ein einheit- 
licher Verschmelzungskern nicht gebildet wird, sondern dass der 
männliche und weibliche Kern in scharfer Trennung voneinander 
zur Chromosomenbildung schreitet. Einmal wäre es nun möglich, 
dass infolge des experimentellen Eingriffes der Befruchtungs- 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 321 


prozess in anderer Weise verläuft als es unter normalen Be- 
dingungen der Fall ist, da nach den bisher vorliegenden Unter- 
suchungen ein einheitlicher Verschmelzungskern zustande kommen 
soll. Wenn man dagegen das Verhalten des bestrahlten Sperma- 
kernes während der ersten Stunden nach der Befruchtung in 
Betracht zieht, sowie auch die Tatsache, dass die Kontrollkulturen 
in ganz jungen Stadien der ersten Mitose eine Sonderung der 
Chromosomen in zwei Komponenten zeigten, so ist es sehr 
wahrscheinlich, dass auch unter normalen Verhältnissen ein Aus- 
tausch der männlichen und weiblichen Chromatinbestandteile im 
Kopulationskern unterbleibt. 


Vergleich mit den entsprechenden Untersuchungen 
von G. Hertwig und P. Hertwig. 


Es bleibt nun noch die Frage zu erledigen, in welcher Weise 
sich die Resultate, die durch das Studium der ersten Teilungs- 
stadien der Forellenkeimscheibe gewonnen wurden, mit den Er- 
gebnissen, die Günther Hertwig (1912) durch entsprechende 
Untersuchungen am Seeigel und Paula Hertwig (1915) an 
den Eiern des Frosches erzielten, vereinigen lassen. G. Hertwig 
bestrahlte Seeigelspermien bis zu 23 Stunden mit dem starken 
Mesothoriumpräparat (55 mg). Eine Verschmelzung der Vorkerne 
fand nicht statt, die erste Teilung vollzog sich lediglich unter 
dem Einfluss des weiblichen Kernes. Aber spätestens auf dem 
/weizellenstadium trat dann die Kopulation der Kerne ein. Es 
könnte ein Vergleich der Abb. 6 bei G. Hertwig und der hier 
unter 2 dargestellten den Anschein erwecken, als handele es sich 
um analoge Verhältnisse. Dies trifft aber nicht zu. Fig. 6 ist nur 
ein Spezialfall der unter 1 abgebildeten Stadien, die in folgender 
Weise erklärt werden: „Der Spermakern, der zu dieser Zeit unter 
normalen Verhältnissen zu einem einheitlichen Furchungskern ver- 
schmolzen sein sollte, liegt noch als kompakte, schwarz gefärbte 
Masse abseits.“ In unseren Untersuchungen dagegen stellte eine 
derartige intensiv gefärbte Masse stets den Rest eines Spermakernes 
vor, der in der ersten Mitose eliminiert wurde. Erst dieser Restkörper 
kann die Fähigkeit erlangen, sich zu einem neuen Kern wieder um- 
zubilden, um dann mit einem der Zellkerne zu verschmelzen. 

Die Ergebnisse der Untersuchungen beim Frosch und Seeigel 
stimmen darin überein, dass bei beiden Objekten dem Spermium 


322 Karl Oppermann: 


nur die Rolle des Entwicklungserregers zukommt. P. Hertwig 
schreibt: „Nicht anders wie der Anstich mit einer feinen Nadel in 
Bataillons Versuchen wirkt hier das Eindringen des Samenfadens.“ 
Die Samenfäden des Frosches sind so stark geschädigt, dass sie noch 
im viergeteilten Ei in völlig isolierter Lage von den Zellkernen 
liegen. Dies lässt den Schluss auf eine absolute Elimination aus 
dem ganzen Entwicklungsgange zu. Liegt nun also bei den Ver- 
suchen an den Keimen des Frosches eine parthenogenetische 
Entwicklung vor, so kann dies nach den bisher vorliegenden 
Untersuchungen für die Forelle nicht gelten. Das Endziel ist 
jedoch in beiden Fällen das gleiche, es bilden sich Embryonen, 
die sich von Kontrolltieren im wesentlichen nur durch geringere 
(Grösse auszeichnen. 


Literaturverzeichnis. 

Behrens, C©.: Die Reifung und Befruchtung des Forelleneies. Merkel- 
Bonnet, Anat. Hefte, X, 1898. 

Blanc, H.: Etude sur la f&condation de l’oeuf de la truite. Zoologische 
Abhandlungen. August Weissmann zu seinem 60. Geburtstage 
gewidmet von der naturf. Ges. zu Freiburg i. B., 1899. 

Boehm, A.: Die Befruchtung des Forelleneies. Sitzungsber. d. Ges. f. 
Morph. u. Phys. in München, 189. 

Hertwig, G.: Das Schicksal des mit Radium bestrahlten Spermachromatins 
im Seeigelei. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 79, Abt. II, 1912. 

Derselbe: Parthenogenesis bei Wirbeltieren, hervorgerufen durch artfremden 
radiumbestrahlten Samen. Arch. f. mikr. Anat.. Bd. 81, Abt. II, 1913. 

Hertwig, O.: Die Radiumstrahlung in ihrer Wirkung auf die Entwicklung 
tierischer Eier. Mitteilung vom 15. Juli 1909. Sitzungsber. d. Königl. 
Preuss. Akad. d. Wiss., XI, 1910. 

Derselbe: Neue Untersuchungen über die Wirkung auf die Entwicklung 
tierischer Eier. Mitteilung vom 28. Juli 1910. Sitzungsber. d. König]. 
Preuss. Akad. d. Wiss., XXXIX, 1910. 

Derselbe: Die Radiumkrankheit tierischer Keimzellen. Bonn, Fr. Cohen, 1911. 

“ Derselbe: Mesothoriumversuche an tierischen Keimzellen, ein experimenteller 
Beweis für die Idioplasmanatur der Kernsubstanzen. Mitteilung vom 
6. Juli 1911. Sitzungsber. d. König. Preuss. Akad. d. Wiss., XL, 1911. 

Derselbe: Disharmonische Idioplasmaverbindungen und ihre Folgen. Scientia, 
Bd. 12, Jahrg. 6, 1911. 

Hertwig, Paula: Durch Radiumbestrahlung hervorgerufene Veränderungen 
in den Kernteilungsfiguren der Eier von Ascaris megalocephala. Arch. 
f. mikr. Anat., Bd. 77, Abt. II, 1911. 


Die Entwicklung von Forelleneiern etc. 323 


Hertwig, Paula: Das Verhalten des mit Radium bestrahlten Sperma- 
chromatins im Froschei. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 81, Abt. II, 1913. 
Kupffer, C.: Die Befruchtung des Forelleneies. Bayerische Fischerei- 
zeitung, 1886. 

Oppermann, K.: Die Entwicklung von Forelleneiern nach Befruchtung 
mit radiumbestrahlten Samenfäden. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 85, 
Abt. II, 1913. 


Fig. 
Fig. 
Fig. 


Fig. 
Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 
Fig. 


Erklärung der Abbildungen auf Tafel XII. 


It 


Kopulationskern, 6 Stunden nach der Befruchtung. (Vergr. 1: 840.) 


2—4. Erste Furchungsspindel auf verschiedenen Stadien. 


[S11 


Zweizellenstadium mit Ruhekernen. Auf der Zellwand das aus- 
geschiedene Spermachromatin. 

Das Spermachromatin ist in eine Zelle gerückt. 

Übergang zum Vierkernstadium. Beide Mitosen, neben der einen 
Furchungsspindel das Radiumchromatin. (Vergr. 1: 250.) 

Objekt, das gleichzeitig mit dem in Fig. 7 dargestellten fixiert 
wurde, auch aus gleicher Kultur. Die eine Mitose bei stärkerer 
Vergrösserung. (Vergr. 1: 350.) 

Eine Mitose aus einer viergeteilten Keimscheibe. Das Ei wurde 
mit Samen befruchtet, der 3 Stunden intensiv mit Radium bestrahlt 
worden war. 

Viergeteiltes Ei. In einer der Blastomeren liegt das Sperma- 
chromatin in völlig isolierter Lage. 

Einer der vier Zellkerne mit angelagertem Spermachromatin. 

Die vier Kerne einer Keimscheibe. Der eine mit dem zum Kern 
rekonstruierten Radiumchromatin. (Vergr. 1:950.) 


Aus dem Anatomisch-biologischen Institut der Berliner Universität. 


Die Samenbildung bei den Enten. 


Von 
Karl Schöneberg. 


Hierzu Tafel XIV — XVII. 


Einleitung. 

Seitdem die Bedeutung der Keimzellen als Träger der Erb- 
masse für die Vererbungslehre erkannt war, hat das Studium 
ihres Baues und ihrer Geschichte ein immer grösseres Interesse 
gewonnen. Neben der experimentellen Erblichkeitsforschung 
entstand als neuer Zweig der Vererbungslehre die Erbeytologie, 
die in den letzten Jahrzehnten wesentlich zu dem Aufschwung 
der Erbbiologie und zu der Lösung ihrer Aufgaben beigetragen 
hat. Das einzige Mittel, erfolgreich die Erscheinungen der Ver- 
erbung erklären zu können, ist das Zusammenarbeiten physio- 
logischer und morphologischer Untersuchung, wie es besonders 
bei dem Problem der Geschlechtsbestimmung in der neuesten 
Zeit zu überraschenden Ergebnissen geführt hat. Leider ist dieses 
Ideal, das Handinhandgehen beider Forschungsrichtungen, noch 
selten erfüllt. Entweder fehlt der cytologischen Keimzellforschung 
die Ergänzung durch das Experiment oder bei biologischen Ver- 
suchen ist die zelluläre Untersuchung der Gonaden vernach- 
lässigt worden. 

Häufig sind Vögel das Material experimenteller Vererbungs- 
studien gewesen, wie z. B. die bekannten Versuche Davenports. 
Batesons und Punetts mit Hühnern zeigen. Weniger Be- 
achtung haben die Vögel dagegen in der Erbeytologie gefunden. 
Nur eine geringe Anzahl von Arbeiten beschäftigen sich mit dem 
Studium der männlichen Keimdrüse der Vögel und diese wenigen 
in der Literatur vorliegenden Untersuchungen lassen alle den Teil 
der Samenbildung vermissen, der für ein genaues Studium der- 
selben unbedingt erforderlich ist und jeder näheren cytologischen 
Betrachtung voranzugehen hat: die topographische Histologie. 
Nur durch die Aneinanderreihung der verschiedenen Stadien des 


+ 


Die Samenbildung bei den Enten. 325 


Samenbildungsprozesses ist es möglich, eine sichere Grundlage 
für die Kenntnis der cytologischen Vorgänge zu gewinnen. 
Bemerkenswerte Ergänzungen zur neueren Bastarälehre 
haben die Versuche Polls mit Enten gebracht. Seine eytologischen 
Studien als Vervollständigung des Experiments geben Aufschluss 
über den interessanten Bau der männlichen Keimdrüsen bei 
Entenmischlingen, die je nach der systematischen Zusammen- 
gehörigkeit der reinartlichen Eltern eine verschieden weit vor- 
geschrittene Entwicklungsstufe in ihrem Samenbildungsgewebe 
zeigen. Es war somit eine naheliegende Aufgabe, auch die Samen- 
bildung der Entenstammformen zu untersuchen und miteinander 
zu vergleichen. Das Studium der Spermiogenese verschiedener 
Arten bietet ferner die Möglichkeit, auf die verwandtschaftliche 
Stellungder betreffenden Tierformen zueinander schliessen zu lassen. 


Material und Methoden. 


Als Material für die Arbeit dienten zum Teil bereits ein- 
gebettete Entenhoden, die mir Herr Prof Poll in liebenswürdigster 
Weise zur Verfügung stellte, zum Teil wurden die Testikel frisch 
seziert. Die Tiere erhielt ich durch das liebenswürdige Ent- 
gegenkommen Herrn Prof. Hecks und Herrn Dr. Heinroths, 
denen ich an dieser Stelle meinen verbindlichsten Dank aussprechen 
möchte, aus dem Berliner Zoologischen Garten. Zur Untersuchung 
gelangten die männlichen Keimdrüsen von Vertretern aller Gruppen 
der Anatiden, von den Anatinen der Stockerpel, Anas boschas L, 
/Zwergerpel, Anas boschas L. var. nana, Hauserpel, Anas boschas L. 
var. dom. und Pfeiferpel, Mareca penelope L., von den Fuligulinen 
der Tafelerpel, Aythya ferina L., von den Plectopterinen der 
Brauterpel, Lampronessa sponsa L., und der Türkenerpel, Cairina 
moschata L. 

Die aus den getöteten Tieren herauspräparierten frischen 
Testikel ‘wurden in kleine Stücke zerlegt, um so ein besseres 
Eindringen der Fixierungsflüssigkeit zu ermöglichen. Es wurden 
angewandt die Gemische von Carnoy, Flemming 4 Teile 
Osmiumsäure, 15 Teile Chromsäure, 1 Teil Eisessig, Tellyesniczky 
100 Teile 3proz. Kaliumbichromatlösung, 5 Teile Eisessig und 
Zenker. 

Die Objekte wurden in der Carnoyschen Flüssigkeit 
20 Minuten gelassen und dann sofort in Chloroform gebracht. 


326 Karl Schöneberg: 


Die übrigen Flüssigkeiten mussten mindestens 24 Stunden ein- 
wirken. Nach der Fixierung wurden die Stückchen 24 Stunden 
in fliessendem Wasser ausgewaschen, um dann nach der Ent- 
wässerung in den steigenden Alkoholstufen und Jodierung der 
Zenkerpräparate durch Alkohol-Chloroform und Chloroform in 
Paraffin eingebettet zu werden. Von den Objekten wurden nun 
Schnitte von 5—10 «u Dicke angefertigt und auf den Objektträgern 
aufgeklebt. Gefärbt wurden die Präparate hauptsächlich nach 
Heidenhains Methode mit Eisenhämatoxylin nach vorheriger 
Beizung mit Eisenalaun, die mit Flemmingscher Flüssigkeit 
fixierten Schnitte nach vorangegangener Bleichung mit Wasser- 
stoffsuperoxyd. Gute Resultate ergab die Nachfärbung der 
Zenker-Präparate mit Pikroindigokarmin-Magentarot nach vor- 
heriger Färbung mit Eisenhämatoxylin. Die mit Tellyesniczky- 
scher Flüssigkeit behandelten Präparate wurden auch der Doppel- 
färbung Hämalaun-Safranin unterworfen, wie sie Regaud in 
seiner Arbeit angibt. Bei den Objekten, die mit dem Flemming- 
schen Gemisch fixiert waren, wurde ferner die Flemmingsche 
Dreifachfärbung mit Safranin-Gentianaviolett-Orange G und die 
Doppelfärbung Safranin-Lichtgrün angewandt, die den Vorteil hat, 
die bei Heidenhains Methode häufig eintretende Verklumpung 
der Chromosomen zu verhindern. 


Materialübersicht. 
1 Anas boschas var. nana Zenker 
2. Cairina moschata Carnoy, Flemming 
3. 357 Mareca penelope fixiert am 4.6. 09 Fl ZI 
4. 339 Lampronessa sponsa n 0 A... 
5. 362 Anas boschas var. dom. 1 294102097822 
6.892: © 8 a, 2a LOB 
7. 430 Aythya ferina a „., 14.5.0202 
5. 704 Anas boschas r -. 20.0.2 Ebel 
3000.12, j 3. 5.20 
10.712. “ at ip 2 ANTSER LO 
11. 720 Lampronessa sponsa a „.) 13.5. 12XR LICH 
12. 721 Anas boschas 5 „13.9. 12-BJSC ZIEE 
13. 730 Cairina moschata Pa a WENN: 2 
14. 748 27: 231 EIS CE 


> Dr] 2 2] 


Die Samenbildung bei den Enten. 327 


Anatomie und Histologie der Entenhoden. 


Die männlichen Keimdrüsen der Enten weisen ebenso wie 
die aller übrigen Vögel einen beträchtlichen Grössenunterschied 
zwischen Winterruhe und Brunstzeit auf. Bald nach der Mauser- 
zeit beginnt der auf seine Minimalgrösse gesunkene Testikel all- 
mählich wieder an Grösse zuzunehmen, um dann zu Beginn des 
Frühjahrs plötzlich anzuschwellen und zur Brunstperiode im April- 
Mai sein maximales Volumen zu erreichen. Bereits einige Wochen 
später setzt die Mauser ein, und der Umfang des Hodens nimmt 
wieder ab. Was die Grössenverhältnisse der männlichen Keimdrüsen 
anbetrifft, so wurde Ende Februar noch eine Länge von 14 mm 
gemessen, Mitte Mai das Maximum von 5l mm. Doch sind diese 
Zahlen keineswegs als feststehende Regel anzusehen, da sie von den 
Individuen, der Lebenslage und der Witterung abhängig sind. Noch 
grösseren Schwankungen sind sie bei Hausenten unterworfen. Durch 
die günstigen Lebensbedingungen wird die Brunstzeit bedeutend ver- 
längert, und die Keimdrüsen erreichen oft kolossale Dimensionen, 
wie Disselhorst und Menel durch Messungen festgestellt haben. 

Die Samenkanälchen werden von einer ziemlich derben 
Albuginea umschlossen, die ebenso wie das ganze Hodenparenchym 
von vielen Blutgefässen durchzogen ist. Interstitielles Bindegewebe, 
welches im Hodengewebe der Sänger in starker Ausdehnung 
zwischen den Tubuli auftritt, fehlt nahezu vollständig. Die ein- 
zelnen Samenkanälchen, die von einer dünnen Tunica propria, 
der kleine längliche Kerne eingelagert sind, umgeben sind, be- 
rühren einander direkt. Auf dieser Membran ruht nach innen 
das Keimlager. Dieses stellt auch bei den Enten ein Syncytium 
dar, in dem die samenbildenden Elemente eingebettet sind. Wie 
in den Keimdrüsen der übrigen Tiere lassen sich hier ebenfalls 
zwei Reihen von Zellgenerationen unterscheiden, die den nutri- 
tativen Teil darstellenden Sertolielemente und die eigentlichen 
samenbildenden Zellen als generativen Zweig. Der Reihenfolge 
nach liegen die verschiedenen Stadien der Keimzellenmetamor- 
phose übereinander geschichtet. Die unterste Lage bilden die 
Spermiogonien, die oberste die Spermiden, dazwischen liegen 
Spermiocyten und Präspermiden. Das Samenbildungsepithel nimmt 
nahezu das ganze Innere des Röhrchens ein und lässt nur in der 
Mitte ein kleines von einer Flüssigkeit erfülltes Lumen als Aus- 
gangsweg für die fertigen Spermien frei. 


328 Karl Schöneberg: 


Bei mikroskopischer Betrachtung des Hodenparenchyms er- 
kennt man, dass sich die Tubuli in den verschiedensten Entwick- 
lungsstufen des Samenbildungsprozesses befinden. Selbst die ein- 
zelnen Kanälchen bieten in ihrem samenbereitenden Keimlager 
einen wechselnden Anblick dar. Bald hat das Epithel eine be- 
trächtliche Höhe, wenn Spermiden die obersten Schichten bilden, 
bald zeigt es sich auffallend niedrig, wenn die werdenden Spermien 
sich zu Büscheln vereinigt haben und zwischen die Spermiocyten 
eingedrungen sind. So grenzen oft in demselben Tubulus zeitlich 
weit auseinanderliegende Stadien ohne Übergang in schmalen 
Sektoren aneinander, während sich z. B. bei den Fringilliden der 
ganze Testikel in derselben Entwicklungsphase befindet. In der 
Regel umfassen die Stadien mehr als eine Fascikulation, da man 
gewöhnlich zwei oder noch mehr Büschel auf derselben Entwick- 
lungsstufe nebeneinander liegen sieht. 


Topographische Histologie. 

Diese verschiedenen Stadienbilder desSamenbildungsprozesses 
zu ordnen, uns mit der Anordnung der Zellformen im Keimlager 
bekannt zu machen, ist die Aufgabe der topographischen Histo- 
logie, die aus schon erwähnten Gründen den ersten Teil dieser 
Arbeit bilden muss. Darauf erst folgt die Cytologie der Samen- 
bildung, welche die cytologischen Wandlungen der aufeinander- 
folgenden Generationen und der einzelnen Zellen näher zu be- 
trachten hat. Dieser Teil gliedert sich wieder in die Oytogenese 
und Spermiohistogenese. Während jene sich mit der Metamor- 
phose der samenbildenden Elemente beschäftigt, untersucht diese 
die histologischen Umwandlungen der Spermiden zu den fertigen 
Spermien. 

Wie Regaud zuerst in seiner Untersuchung über die 
Spermiogenese der Ratte genauer gezeigt hat, spielt sich der 
Samenbildungsprozess in einer Schraubenlinie ab, die um den 
Tubulus herumläuft. Um nun eine richtige Aufstellung der Stadien- 
bilder der Samenbildungswelle zu erlangen, ist es nötig, genau 
quergetroffene Stellen aufzusuchen, die wegen des spiraligen Ver- 
laufs der Spermiogenese und der stark gewundenen Kanälchen 
nicht gerade häufig sind. Die wechselnde Höhe, die verschiedene 
Dauer der einzelnen Stadien erhöhen die Schwierigkeiten, die 
quergetroffenen Stellen als solche zu erkennen. Würde sich die 


[2] 


Die Samenbildung bei den Enten. 329 


Samenbildung in einer Ebene abspielen, so genügte das Aufsuchen 
quergeschnittener Tubuli, so aber sind diese keineswegs zuver- 
lässig. Vielmehr können auch ebensogut schief oder längs ge- 
schnittene Röhrchen brauchbare Stellen zur Aufstellung der 
Generationsfolge liefern. Im allgemeinen sind die niedrigeren 
Schnitte den höheren der betreffenden Stelle vorzuziehen, doch 
erst ein Vergleich der Zellschichten der betreffenden Stelle mit- 
einander und mit anderen aufgefundenen Stadienbildern lässt er- 
kennen, ob der Schnitt für die topographische Histologie zu 
verwerten ist. | 

Regaud und danach Kirillow stellen in ihren Arbeiten 
zwölf Stadien auf, die zu einem Zyklus zusammengefasst werden. 
Um einen besseren Vergleich mit den Säugern zu ermöglichen, 
sind auch in dieser Untersuchung die von Regaud festgelegten 
Hauptpunkte beibehalten worden. Indes sind zur Erleichterung 
der späteren cytologischen Betrachtung noch einige Zwischen- 
stadien eingeschaltet worden. Massgebend für die Anordnung 
der verschiedenen Phasen ist am zweckmässigsten die Spermio- 
histogenese und nicht, wie van Hoof es getan hat, der Ent- 
wicklungsgang der Spermiocyten, da die Umbildung der Spermiden 
ein viel sicheres Anordnen ermöglicht als die schwierigen Kern- 
metamorphosen der Spermiocyten. Nach dieser Art lassen sich die 
einzelnen Stadien entsprechend den einzelnen Entwicklungsstufen 
der Spermien leicht lückenlos zu einem Zyklus aneinanderreihen. 

Als Ausgangspunkt für den Samenbildungsprozess soll, wie 
bei Regaud, der Augenblick dienen, in dem eine Generation 
reifer Spermien soeben das Samenepithel verlassen hat und eine 
neue im Begriff ist, sich aus den Spermiden zu entwickeln. 
Weitere besonders hervortretende Punkte sind die während des 
Zyklus auftretenden Teilungen der Spermiogonien, Spermiocyten 
und Präspermiden. Zunächst ist die topographische Histologie 
bei der Gattung Anas untersucht worden und dann vergleichsweise 
bei den übrigen Vertretern der Enten-Gattungen. Die den Samen- 
bildungsprozess veranschaulichenden Zeichnungen sind keine 
Schemata, sondern entsprechen wirklichen Objekten. 


Stadium 1 (Fig. 1). 


Im 1. Stadium ist die Oberfläche des Epithels nahezu 
spermienfrei, da eine Generation fertiger Spermien eben das 


330 Karl Schöneberg: 


Keimlager verlassen hat. Nur ab und zu sieht man noch ver- 
einzelte zurückgebliebene Samenfäden zwischen oder über den 
Spermiden liegen. Aus der Häufigkeit und der Breite, in der 
dieses Stadium auftritt, lässt sich schliessen, dass es verhältnis- 
mässig lange währt. Es reicht von der Ausstossung der reifen 
Spermien bis zur Verdichtung des Chromatins in den Spermiden- 
kernen. Safranophile Restkörperchen, wie sie bei der Ratte den 
ersten Stadien der Samenbildung ein so charakteristisches Aus- 
sehen geben, fehlen hier vollständig. Die oberste Schicht des 
Keimepithels bilden die in vier bis fünf Reihen gelagerten 
Spermiden. Häufig sind durch die hinausgeschleuderten Spermien 
einige an das Lumen grenzende Spermiden mitgerissen worden 
und liegen dann losgelöst über dem Epithel. Die dicht gelegenen 
abgerundeten polyedrischen Spermiden enthalten einen kugeligen 
Kern. In dem hellen Kernsaft sind nur wenige Chromatinbrocken 
sichtbar, von denen dünne Fäden zu der deutlich erkennbaren 
Kernmembran laufen. 

Unter den Spermiden liegt in einer oder mehreren Reihen 
eine Generation Spermiocyten. Ihre Kerne befinden sich im 
Stadium der Synapsis, die ganze Chromatinmasse ist an einer 
Seite des Kernes zu einem dichten Knäuel zusammengeballt, aus 
dem nur vereinzelte dünne Fäden herausragen. In dem rundlichen 
Zellkörper liegt in der Nähe des Kernes das Idiozom. 

Zwischen den Spermiocyten fällt der oft dunkel gefärbte 
Sertolikern durch seine unregelmässige Gestalt und den grossen 
Nucleolus, neben dem noch einige kleinere Brocken vorhanden 
sind, auf. Zuweilen sind noch die Reste der vom Sertolikern 
ausgehenden Fibrillen des syncytialen Plasmas, die während der 
Fascikulation hervorgetreten sind, zwischen den Spermiden 
sichtbar. 

Zu unterst folgen schliesslich die wandständig gelagerten 
Spermiogonien, die nicht selten zwei Lagen bilden. Wie die 
Spermiden, so zeichnen sich auch die Spermiogonien durch die 
Chromatinarmut ihrer hellen blasigen Kerne aus. Nur wenige 
grössere Brocken machen den ganzen Chromatingehalt aus. Dünne, 
kaum sichtbare Lininfäden, die von diesen Brocken ausgehen, 
durchziehen den Kernraum. Der deutlich von dem umgebenden 
syncytialen Plasma abgegrenzte Zellkörper enthält das kugelige 
Idiozom. 


Die Samenbildung bei den Enten. 331 


Stadium 2 (Fig. 2). 

Im 2. Stadium hat die histologische Umwandlung der 
Spermiden begonnen. In den bis dahin chromatinarmen Kernen 
haben sich starke Chromatinmassen besonders an der Peripherie 
abgesetzt. Durch wenige dünne Fäden sind sie mit einem meist 
zentral gelegenen Brocken verbunden. Finige Kerne zeigen 
bereits eine längliche Gestalt, während der Zellkörper gewöhnlich 
noch rundlich erscheint. Zuweilen sieht man auch hier noch über 
den Spermiden vereinzelte zurückgebliebene Spermien der letzten 
Generation. 

Die Spermiocyten und die Spermiogonien haben keinerlei 
sichtbare Änderungen erfahren. Jene zeigen Kerne, deren 
Chromatinsubstanz wie im vorigen Stadium auf einer Kernseite 
zusammengezogen ist. Diese besitzen ihre hellen chromatin- 
armen Kerne. 


Stadium 2a (Fig. 3). 


Während bisher die Mehrzahl der Spermidenkerne die kugelige 
Gestalt beibehalten hatten, beginnen sie nunmehr fast ausnahmslos 
ihre Form zu verändern, indem sie sich in die Länge strecken. 
Aus diesem Grunde ist man berechtigt, die Spermien von jetzt 
an als Prospermien zu bezeichnen. Das Chromatin hat sich in- 
zwischen weiter kondensiert, hinten und vorn vom Kern sind 
deutlich helle Bläschen sichtbar. Am hinteren Bläschen ist zugleich 
die von einem Üentrosom ausgebildete Geissel erkennbar. Eine 
bestimmte Orientierung zeigen die Kerne dagegen noch nicht. 
Mit dem Kern hat auch das Cytoplasma eine längliche Gestalt 
angenommen. 

In den Spermiocyten spielen sich während dieses Stadiums 
ebenfalls wichtige Vorgänge ab; ihre Kerne sind im Begriff, die 
Phase der Synapsis zu verlassen. Die teilweise noch einseitig 
gelagerte Chromatinsubstanz beginnt sich aufzulockern; dicke 
Fäden, die von dem Knäuel ausgehen, durchziehen den Kern- 
raum. Der Zellkörper hingegen hat sich nicht verändert. 

Im Gegensatz zu den oberen Schichten des Samenepithels 
deutet nichts auf eine gleich lebhafte Tätigkeit in dem unteren 
Keimlager der Spermiogonien hin; höchstens weisen ihre Kerne 
eine geringe Grössenzunahme auf. Im Zellplasma fällt häufig 


das in der Nähe des Kernes gelegene Idiozom auf. 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 22 


332 Karl Schöneberg: 


Zwischen den Spermiocyten eingebettet liegt der Sertoli- 
kern in mannigfach gestalteter Form. Die Fibrillen des Sertoli- 
plasmas sind völlig verschwunden. 


Stadium 3 (Fig. 4). 

Das Chromatin der Prospermienkerne, die länger geworden 
sind, zieht sich allmählich spiralig in die Länge. Mit der Streckung 
der Kerne ist auch eine weitere Dehnung des Zelleibes verbunden. 
Die Prospermien liegen jetzt nicht mehr regellos im Epithel, 
sondern zeigen bereits das Bestreben, sich in bestimmter Weise 
zu Büscheln anzuordnen. Das Vorderende wendet sich membran- 
wärts dem zwischen den Spermiocyten gelegenen Sertolikern zu, 
während die Geissel gegen das Lumen gerichtet ist. 

In den Spermiocytenkernen ist die Aufknäuelung der Chro- 
matinmasse nahezu vollendet. Zwar liegen die dicken Fäden zum 
Teil noch auf einer Kernseite etwas zusammengeballt, doch durch- 
ziehen sie zum grössten Teil auch schon die übrige Kernhälfte. 
Häufig sind sie von grösseren Ohromatinbrocken unterbrochen. 
Im unveränderten Zellkörper sind zuweilen das Idiozom und die 
aus ihm herausgewanderten Centrosomen sichtbar. 

Die Spermiogonien zeigen indes im Vergleich zum vorigen 
Stadium keinen sichtbaren Fortschritt in ihrem Entwicklungs- 
gang. Unverändert liegen ihre hellen, chromatinarmen Kerne in 
ihrem Cytoplasma, in dem das Idiozom scharf hervortritt. 


Stadium 3a (Fig. D). 

In diesem Stadium tritt die Fascikelbildung schärfer her- 
vor. Das Aussehen der Prospermien selbst hat sich dagegen 
wenig verändert. Nur ihre Länge hat etwas zugenommen. 

Die Kerne der Spermiocytengeneration haben jetzt die Auf- 
knäuelung ihrer Chromatinfäden vollendet: Die Fäden bilden 
ein lockeres Netz, dem mehrere gröbere Chromatinbrocken ein- 
gelagert sind. Der ziemlich grosse Zellkörper weist keine Struktur- 
änderung auf. 

In den Schichten der Spermiogonien zeigt sich noch keine 
Spur irgendeiner Veränderung. In den Kernen lässt sich keine 
Zunahme an Chromatinsubstanz wahrnehmen. 

Unter den Spermiocyten tritt der noch indifferente, unregel- 
mässig geformte Sertolikern hervor. 


Die Samenbildung bei den Enten. 309 


Stadium 4 (Fie. 6). 

Deutlich erkennbar ist in diesem Stadium die eigentümliche, 
regelmässige Anordnung der Prospermien zu der für die Enten 
charakteristischen Fascikelform. Während die oberen Prospermien 
senkrecht zur Röhrchenwand stehen, liegen die unteren parallel 
zu ihr und bilden so die Basis des Faseikulationskegels. Befanden 
sich die Prospermien bisher über den Schichten der samenbildenden 
Zellen, so beginnen sie nun, die unter ihnen liegenden Spermio- 
cyten auseinander zu drängen, um zwischen sie einzudringen 
und sich dem Sertolikern zu nähern. In den Prospermienkernen 
hat sich die Chromatinmasse noch weiter spiralig ausgezogen. 
Klar tritt das hintere Bläschen, das kleiner geworden ist, hervor. 
Um einen richtigen Begriff von der grossen Anzahl der einen 
Fascikel bildenden Prospermien zu bekommen, sind in der Figur 
auch die nicht in der Ebene des Gesichtsfeldes gelegenen Pro- 
spermien, die noch zu dem Büschel gehören, gezeichnet. Die in 
der Zeichnung über dem rechten Büschel gelegenen, degenerierten 
Spermien können wegen ihres bedeutend fortgeschrittenen Stadiums 
nicht dem Fascikel angehören, sondern sind offenbar von um- 
liegenden Stellen dorthin getrieben worden. 


Wenig verändert haben sich die Spermiocyten. In ihren 
Kernen sind die Fäden des lockeren Knäuels etwas dünner 
geworden. Neben einigen grösseren Chromatinbrocken sind mehrere, 
meist peripher gelagerte Körnchen vorhanden. 


Gar nicht gewechselt hat das Aussehen der Spermiogonien, 
derer Kerne noch immer eine spärliche Chromatinmenge enthalten. 


Trotzdem die Fascikelbildung schon begonnen hat, deutet 
im syneytialen Sertoliplasma noch keine Strukturveränderung auf 
seine spätere Tätigkeit hin. 


Stadium 5 (Fig. 7). 


Die Chromatinmasse der Prospermienkerne ist kompakter 
und länger geworden, so dass jetzt mit Deutlichkeit der stabförmige 
Oharakter des späteren Spermienkopfes hervortritt. Die unteren 
Prospermien haben sich mehr aufgerichtet und wenden ihre Spitze 
dem ihnen entgegengerichteten Sertolikern zu, dessen Längsachse 
nunmehr senkrecht zur Tunica popria steht. Das Sertoliplasma 


hingegen zeigt noch keine fibrillären Differenzierungen. 
22* 


[3% 
> 
> 


Karl Schöneberg: 


Die Spermiocytenkerne besitzen in diesem Stadium eine 
geringe Chromatinmenge. In dem dünnfädigen Netz des Kern- 
raumes sind nur wenige grössere Brocken sichtbar. 

Die Spermiogonien zeigen noch dasselbe Bild wie im vorigen 
Stadium. 

Stadium 6 (Fig. 3). 


Die Prospermien nehmen mehr und mehr das Aussehen 
fertiger Spermien an. Ihre Kerne kann man bereits als Kopf 
bezeichnen. Die kompakte Chromatinmasse, die die Gestalt eines 
vorn zugespitzten, mehrfach geknickten Stabes angenommen hat, 
erfüllt nahezu den ganzen Kernraum. 

Die Kernmembran der Spermiocyten schliesst ein lockeres 
Netz dünnfädiger Lininfasern ein, denen mehrere kleine und 
grössere Chromatinpartikelchen aufgelagert sind. Umgeben wird 
der Kern von einem rundlichen, von dunklerem Plasma erfüllten 
Zellkörper, in dem das Idiozom und die Öentrosomen eingebettet sind. 

Wandständig liegen noch immer untätig die Spermiogonien, 
deren Kerne sich nicht verändert haben. 


Stadium 7 (Fig. 9). 


Die Prospermien haben ihre endgültige Länge erreicht, 
doch weisen zahlreiche Unebenheiten und Windungen der stab- 
förmigen Chromatinmasse darauf hin, dass ihre Entwicklung noch 
nicht abgeschlossen ist. Je schmaler der Chromatinstab durch 
die Längenausdehnung wird, je kleiner wird auch das hintere 
Bläschen, an dem deutlich die Geisselwurzel zu unterscheiden ist. 
Gut erkennbar ist auch der die Prospermienkerne umgebende, 
langgestreckte Zellkörper. Die unteren Prospermien haben sich 
nahezu aufgerichtet, während die obersten, in der Mittelachse 
des Büschels liegenden tiefer hineingedrungen sind, so dass jene 
nunmehr die Spitze des umgekehrten Fascikelkegels bilden. Der 
zwischen den Spermiocyten gelegene Sertolikern deutet durch 
seinen häufig dunkelgefärbten Kernsaft auf eine erhöhte Tätigkeit 
hin. Die eine Seite des Kernes, die durch die syneytialen 
Fibrillen hervorgezogen ist, ist den Prospermien zugekehrt. 

Die Schichten der Samenbildungszellen, der Spermiocyten 
und der Spermiogonien, zeigen dagegen nur geringfügige Ver- 
änderungen. 


Die Samenbildung bei den Enten. 335 


Die ganze Chromatinmasse der Spermiocytenkerne besteht 
aus etlichen Brocken, zwischen denen dünne Fäden das Kerninnere 
durchziehen. Um die Kerne hebt sich das rundliche, dunkle 
Cytoplasma von dem umgebenden Syneytium ab. Ähnlich be- 
schränkt sich in den Kernen der Spermiogonien der Chromatin- 
bestand auf einige grössere und kleinere Brocken, die durch 
dünne Fäden miteinander in Verbindung stehen. Im Zellkörper 
tritt scharf das runde Idiozom hervor. 


Stadium 7a (Fig. 10). 


Die Oberfläche der Prospermien, die man von nun an als 
Spermien bezeichnen kann, ist vollkommen glatt. Nur einige 
eckige Biegungen weisen auf ihre Unfertigkeit hin. 

Die Spermiocytenkerne besitzen zwar noch ein Netz aus 
dünnen Fäden, aber die Chromatinbrocken haben sich bereits 
vermehrt. Die Spermiogonien haben etwas an Grösse zugenommen. 
Ihre Chromatinmasse ist ebenfalls reichlicher geworden, da sowonl 
in der Mitte, als auch am Rande des Kernes die Chromatin- 
körnchen zahlreicher geworden sind. 


Stadium 8 (Fig. 11). 

Wenn auch die Fascikulation noch nicht vollendet ist, so haben 
doch die Spermien ihre morphologische Ausbildung beendet und 
ihre endgültige Gestalt erreicht. Die langen stabförmigen Köpfe 
sind von dem in der Form ihnen angepassten vorn zugespitzten 
Zellkörpev umschlossen. Am hinteren Ende des Kernes tritt 
häufig die Geisselwurzel hervor, während das hintere Bläschen 
nicht mehr sichtbar ist. 

In den Spermiocytenkernen haben sich die Fäden reichlich 
mit Chromatin beladen und bilden nun dicke, stark färbbare 
Schleifen, die häufig von grösseren Chromatinbrocken unterbrochen 
werden. Der Zellkörper enthält das Idiozom und die zu den 
Polen wandernden Üentrosomen. 

Im Keimlager der Spermiogonien setzt während dieses 
Stadiums plötzlich eine lebhafte Tätigkeit ein, die einer neuen 
Reihe von Samenbildungszellen den Ursprung gibt. Die Spermio- 
gonien, die in den vorhergehenden Stadien keinerlei Anzeichen 
einer nahen Teilung gaben, sind in eine Mitose eingetreten, aus 
der eine neue Generation von Spermiocyten hervorgeht. Erst 


336 Karl Schöneberg: 


kurz vor der Teilung zeigen sich in den Kernen Vorbereitungen 
dazu. Sie werden blasig aufgetrieben und an ihrer Oberfläche 
werden reichliche Chromatinmassen angesammelt. Dicht aneinander- 
gedrängt liegen die Teilungsfiguren der Spermiogonien, die sich 
durch die Breite, die niedrige Polhöhe und den Chromatinreichtum 
ihrer Äquatorialplatten auszeichnen. 

Zwischen den Spermiocyten liegt der oft dunkle Sertolikern, 
seine Längsachse den Spermien zugewendet. Im Sertoliplasma 
treten zuweilen die Fibrillen deutlicher hervor. 


Stadium 9 (Fig. 12). 

Die Fascikulation, die jetzt das für Anas typische Bild zeigt, 
hat nunmehr ihren Höhepunkt erreicht. Die Spermienbüschel 
sind weit ins Epithel bis zur untersten Lage der Spermiocyten 
eingedrungen. Die Spitze des Büschels berührt beinahe den ihnen 
entgegenrückenden Sertolikern, in dessen Umgebung Körnchen 
auftreten. Trotzdem die Spermien fertig ausgebildet sind, umgibt 
sie noch das langgestreckte Zellplasma. 

In diesem Stadium sind zwei (renerationen von Spermiocyten 
vorhanden. Die älteren Spermiocyten zeigen dicke Schleifen, die 
an einigen Stellen unterbrochen sind. Mehrere grössere Chromatin- 
brocken sind den Fäden angelagert. Die jüngere Spermiocyten- 
generation besitzt Kerne, die denen der Spermiogonien ausser- 
ordentlich ähnlich sind und nur durch ihre Grösse von diesen zu 
unterscheiden sind. Zentral sind ein oder mehrere grössere 
Chromatinbrocken gelegen, von denen dünne Fäden ausgehen. 

Zwischen ihnen liegen die nicht in Teilung eingetretenen 
Spermiogonien mit ihren charakteristischen hellen Kernen. 


Stadium 10 (Fig. 13). 

Die reifen Samenfäden haben die Fascikel aufgegeben und 
zum Teil bereits das Epithel verlassen. Zur selben Zeit beginnen 
die Spermiocyten der alten Generation sich zu teilen, um in 
Präspermiden überzugehen. Ihre Mitosen besitzen nicht derartig 
chromatinreiche und niedrige Spindeln, wie die der Spermiogonien. 
Die jungen Spermiocyten besitzen Kerne, in denen sich das 
Chromatin erheblich vermehrt und auf einer Seite zusammen- 
geballt hat. Sie befinden sich im Stadium der dichten Synapsis. 

An der Wand liegen die Spermiogonien, deren Kerne sich 
nicht von denen des vorigen Stadiums unterscheiden. 


Die Samenbildung bei den Enten. 337 


Stadium 11 (Fig. 14). 

Die Präspermiden haben nur eine überraschend kurze Lebens- 
dauer. Sie teilen sich sofort wieder, um so Ersatz für die das 
Epithel verlassenden Spermien zu schaffen. Häufig folgt die 
zweite Reifeteilung so schnell der ersten, dass man beide un- 
mittelbar nebeneinander findet. Die Spindel der Präspermiden- 
teilung zeichnet sich durch ihre Höhe und Schmalheit aus. 
Zwischen ihnen liegen schon junge Spermiden. Über ihnen 
befinden sich die reifen Spermien, die das Epithel soeben verlassen 
haben und noch stellenweise die früheren Fascikel andeuten. 

In den Kernen der Spermiocyten hat sich die ganze 
Ohromatinmasse auf einer Hälfte zu einem dichten Knäuel zu- 
sammengezogen. 

Die Sertolikerne, die wieder in der untersten Lage der 
Spermiocyten liegen, zeigen eine rundliche oder längliche Gestalt. 
Ihr Kernsaft ist zuweilen noch dunkelgefärbt. 

Die Spermiogonien hingegen lassen keine Veränderung im 
Kernraum erkennen. 

Stadium 11a (Fig. 15). 

Die reifen Spermien liegen jetzt fast in einer Reihe über 
dem Epithel. Teilweise sind sie noch von ihrem Zellkörper um- 
geben, in dem deutlich die runden Idiozome hervortreten. Im 
Samenepithel bildet nun die neuentstandene Spermidengeneration 
die obersten Schichten. Auf der rechten Seite der Zeichnung 
sind einige Präspermiden, die in ihrer Entwicklung zurück- 
geblieben sind und sich durch den grösseren Kern von den 
Spermiden unterscheiden lassen. Diese enthalten in ihrem 
polyedrischen Oytoplasma einen kugeligen hellen Kern mit nur 
wenigen Chromatinbrocken. 

Die Kerne der Spermiocytengeneration zeigen keinen sicht- 
baren Fortschritt in ihrer Entwicklung. Die ganze chromatische 
Substanz liegt in der einen Kernhälfte angehäuft. Zwischen ihnen 
liegt der häufig abgerundete ruhende Sertolikern. Ganz über- 
raschend schnell haben sich die Spermiogonien zu einer aber- 
maligen Teilung angeschickt. Auch hier beginnt die Vorbereitung 
dazu unmittelbar vorher. Die Teilungsfiguren gleichen vollkommer. 
denen des 8. Stadiums. Die Mitosen haben jedoch diesmal keine 
neue Spermiocytengeneration zur Folge, sondern sie dienten nur 
der Vermehrung, da aus ihnen wieder Spermiogonien hervorgehen. 


338 Karl Schöneberg: 


Stadium 12 (Fig. 16). 


Im letzten Stadium liegt die Generation der reifen Spermien 
über dem Epithel, im Begriff, sich vollends vom Zellkörper zu 
trennen und in das distale Ende des Samenröhrchens zu gelangen. 
Das als Restkörper zurückbleibende Cytoplasma mit dem Idiozom 
verschwindet bald danach über dem Epithel, so dass wir nun- 
mehr wieder das Bild des 1. Stadiums haben, in dem die Spermiden 
mit ihren charakteristischen Kernen die oberste Lage des Keim- 
epithels bilden. 

Die Spermiocyten befinden sich noch im Stadium der dichten 
Synapsis. In dem auf der Seite des Chromatinnetzes liegenden 
Zellplasma ist nicht selten das Idiozom sichtbar. 

Die vermehrten Spermiogonien zeigen nach der Teilung wieder 
ihre typischen hellen Kerne mit den wenigen Chromatinbrocken. 


Vergleich mit den übrigen Entengattungen. 


Untersucht man die topographische Histologie der anderen 
Entengruppen, so zeigt sich, dass die einzelnen Stadien des 
Samenbildungsprozesses mit denen von Anas völlig überein- 
stimmen. Nur bei der Anordnung der Spermien in den Fascikeln 
treten geringe Unterschiede in der Form der Spermienbüschel 
auf. Je nachdem die Samenfäden alle nahezu parallel zueinander 
gelagert sind oder die seitlichen sich nicht vollständig aufrichten, 
lassen sich Fascikelkegel mit breiter und schmaler Basis unter- 
scheiden. Bei Anas bilden die Spermien in der Regel einen 
kleinen Winkel miteinander, während sie bei Oairina (Fig. 17) 
sich mehr auseinander spreizen. Im Samenepithel von Lampronessa 
sind die Spermien in ähnlicher Weise wie bei Anas, zum Teil 
noch ausgesprochener, in schmalen Büscheln angeordnet (Fig. 20). 
Bemerkenswert ist, dass Cairina und Lampronessa, die systematisch 
zu derselben Gruppe der Anatiden, den Plectropterinen gehören, 
am meisten in der Form ihrer Büschelbildung auseinanderweichen. 
Die Fascikel von Aythya sind nicht vorwiegend nach einem Typus 
gebaut. Man findet sowohl Formen, in denen die Spermien sich 
in gleicher Weise wie bei Cairina auseinander spreizen, als auch 
solche, die an Anas und Lampronessa erinnern (Fig. 18 und 19). 

Was die Zahl der zu einem Büschel vereinigten Spermien 
bei den verschiedenen Enten anbetrifft, so lässt sich ein Unter- 
schied nicht feststellen, da sie selbst bei ein und derselben Art 


Die Samenbildung bei den Enten. 339 


je nach Zeit und Alter ausserordentlich schwanken. Zuweilen 
finden sich auch Fascikulationen, in denen einige Samenfäden in 
ihrer Entwicklung gegenüber den anderen zurückgeblieben sind, 
wie das rechte Spermienbüschel von Fig. 17 zeigt. 


Vergleich mit den Säugern. 


Vergleicht man den Samenbildungsprozess der Enten mit 
dem der Säuger, von denen beim Pferd, beim Stier und bei der 
Ratte auch die topographische Histologie berücksichtigt ist, so 
zeigen sich wesentliche Unterschiede. Bei den Enten bilden die 
Spermiogonien ein dichtes Lager an der Wand, so dass alle 
übrigen Zellen von hier verdrängt sind, während sie bei den 
Säugern nur vereinzelt zwischen den wandständigen Spermiocyten 
liegen. Die Spermiocyten der Enten durchlaufen den Zyklus 
mindestens anderthalbmal, während sie bei den Säugern sicher 
während zweier Zyklen existieren. Die Sertolikerne, die bei der 
Ratte fast immer an der Membran liegen, sind bei den Enten 
zwischen den Spermiocyten eingebettet. Infolgedessen dringen 
auch die Spermienbüschel nicht so tief ins Epithel wie bei 
der Ratte. 

Cytologie. 
l. Cytogenese. 
Sertolielemente. 


Übereinstimmend mit den Samenepithelien anderer Tiere 
finden sich in denen der Enten Kernelemente im Plasmasyneytium 
eingebettet, die von keinen fest abgegrenzten Plasmabezirken um- 
geben werden und als Sertolielemente bezeichnet werden. In der 
Regel lassen sich die Sertolikerne leicht von den übrigen Kernen 
unterscheiden. Kenntlich sind sie sofort an ihrer unregelmässigen 
Gestalt, die besonders zur Brunstzeit sehr variabel ist und sich 
den stark vermehrten samenbildenden Zellen anpassen muss. 
Nicht selten sieht man daher zu dieser Zeit Sertolikerne so dicht 
anderen Kernelementen anliegen, dass sie den Anschein erwecken, 
als ob beide aus einem gemeinsamen Mutterkerne entstanden sind. 
Diese Erscheinung beruht jedoch nur auf der Plastizität des 
Sertolikernes, der zwischen den Samenbildungszellen eingezwängt 
ist. Sind die Zellen weniger dicht zusammengedrängt, so nimmt 
er eine nahezu kugelige Form an, wie sie besonders bei Lampro- 
nessa beobachtet ist. In diesen Fällen ähnelt er sehr den 


340 Karl Schöneberg: 


Spermiogonienkernen und lässt eine gemeinsame Herkunft als 
wahrscheinlich annehmen. Oft weisen die Sertolielemente Ein- 
schnürungen und Einbuchtungen auf, als wenn sie sich amitotisch 
teilen wollten. 

Das von einer deutlichen Membran umschlossene Kerninnere 
enthält gewöhnlich ein, seltener zwei oder drei grosse Kern- 
körperchen, die sich mit Safranin leuchtend rot färben. Von 
diesem Nucleolus, der von einem unregelmässig gestalteten Hof 
umgeben ist, durchziehen dünne, schwach färbbare Fäden den 
Kern. Zuweilen bemerkt man ausser dem grossen Brocken noch 
einige kleine centrosomenähnliche Körnchen. Während der Faseci- 
kulation zeigt der Sertolikern häufig einen dunkelgefärbten Kern- 
saft, als ob irgend eine Substanz durch die Membran diffundiere. 
In seiner Umgebung werden grössere und kleinere Körnchen im 
syncytialen Plasma von der Wand bis zu den Spermienköpfen 
sichtbar. Zugleich nimmt das Plasmasyneytium eine fibrilläre 
Struktur an. Die Spermienköpfe nähern sich dem Sertolikern, 
der dabei eine längliche Gestalt annimmt. Die Sertolikerne liegen 
zur Brunstzeit bei den Enten nicht an der Wand, sondern aus 
dem dichten Keimlager der Spermiogonien sind sie zwischen die 
Spermiocyten gedrängt worden. Ihre Ortsveränderung ist nur 
eine geringe. In den Fascikulationsstadien richten sie sich auf 
und nähern sich etwas den Spermien, die schmale Seite des 
länglichen Kernes parallel zur Wand. 


Spermiogonien. 

Die unterste Schicht des Samenbildungsepithels wird von 
den Spermiogonien eingenommen. In einer oder mehreren 
Reihen eng nebeneinander gelegen, bilden sie ein dichtes wand- 
ständiges Lager, so dass alle anderen Zellen von der Membran 
ab ins Innere des Tubulus hineingedrängt werden. 

Von all den übrigen im Hoden befindlichen Zellformationen 
ändern sie am wenigsten ihr Aussehen. Zwei Spermiogonientypen, 
die Regaud bei der Ratte beschreibt, die Spermiogonien mit 
staubförmigen Kernen, „a noyaux poussiereux“ und mit Krusten- 
förmigen Kernen „a noyaux croütelleux“ gibt es bei den Enten 
nicht. Vielmehr zeigen die Spermiogonien fast während des 
ganzen Zyklus Kerne von kugeliger oder ellipsoider Gestalt mit 
spärlichem Chromatingehalt; in dem hellen, kaum färbbaren Kern- 


Die Samenbildung bei den Enten. 34l 


raum sind gewöhnlich mehrere gröbere chromatische Brocken 
sichtbar, die durch feine anastomosierende Lininfäden miteinander 
und mit der Kernmembran verbunden sind. Peripherisch sind 
oft noch zahlreichere kleinere Körnchen gelegen. Nicht selten 
sind die Spermiogonienkerne in ähnlicher Weise wie die Sertoli- 
elemente eingebuchtet oder eingeschnürt. In seltenen Fällen 
findet man sogar neben einem normalen Spermiogonienkern eine 
kleine Kernform, die anscheinend von dem grossen abgeschnürt ist. 

Erst kurz vor den Mitosen, deren zwei während des Zyklus 
existieren, treten sichtbare Veränderungen im Innern des Kernes 
auf. Die erste Teilung im Lebenslaufe der Spermiogonien findet 
während der letzten Stadien der Spermiohistogenese statt. Es 
geht aus ihr keine differente Zellgeneration hervor, sondern sie 
dient augenscheinlich der Vermehrung derselben Zellelemente. 
Zunächst tritt im Kern eine Volumenvergrösserung und eine 
Vermehrung der Chromatinsubstanz, besonders der an der Kern- 
wand gelegenen Körnchen ein. Der Kern wird blasig aufgetrieben 
und nimmt meist eine ausgesprochen ellipsoide Gestalt an. Die 
Chromatinmassen vereinigen sich zu Uhromosomen, die an die 
Kernoberfläche gerückt, als gebogene Stäbchen von verschiedener 
Länge in der Prophase zu finden sind. Zuweilen stösst man auf 
Kerne, deren Chromosomen stark verklumpt sind und offenbar 
als Degenerationserscheinungen gedeutet werden müssen, nicht 
als Kunstprodukte, da sie neben tadellos erhaltenen Zellen vor- 
kommen (Fig. 40). 

Nach Auflösung der Kernmembran und Bildung der Spindel- 
fasern ordnen sich die Chromosomen zur Äquatorialplatte an, die 
für die Spermiogonien ein ganz typisches Aussehen besitzt. Vom 
Pol aus gesehen bietet die Äquatorialplatte gewöhnlich den An- 
blick einer homogenen, durch Eisenhämatoxylin stark färbbaren 
Grundmasse, aus der die darin eingebetteten Chromosomen über 
den Rand hervorragen (Fig. 42). Von der Seite aus betrachtet 
fällt die Spindel im allgemeinen durch ihre Breite und ihre ge- 
ringe Centrosomendistanz auf. Auch wenn die Äquatorialplatten 
durchsichtiger sind, was häufig der Fall ist, kann eine Zählung 
der Chromosomen wegen der dichten Lage derselben und der 
zahlreichen Verbindungsfäden nur eine annähernde sein. In den 
meisten Fällen ist sie aber völlig ausgeschlossen. Die günstigsten 
Bilder bieten die Spermiogonienplatten von Lampromessa, in denen 


342 Karl Schöneberg: 


die Chromosomen deutlicher gesondert hervortreten. Erschwerend 
für die Zählung ist ferner das Auftreten bläschenförmiger, nicht 
chromatischer Körnchen während des Teilungsvorganges. Besonders 
gut sind diese wieder bei Lampromessa zu beobachten. Vielleicht 
sind sie bei der Karyokinese nicht ganz unbeteiligt, da sie häufig 
paarweise angeordnet sind und zuweilen mit der Spindel in Ver- 
bindung zu stehen scheinen (Fig. 48). Die Anzahl der Chromo- 
somen beläuft sich ungefähr auf 16. Das gilt in bemerkenswerter 
Weise für alle untersuchten Formen. Die Grösse der Äquatorial- 
platten schwankt in nicht geringem Grade. Ebenso unbeständig 
ist ihre Lage zur Tubuluswand. Die Ebene der Platte kann 
parallel, senkrecht oder geneigt zu ihr stehen. 

Zu Beginn der Anaphase sind häufig nachschleppende Chromo- 
somen zu beobachten, die mit Teilen ihres Leibes aus dem Gros 
der Tochterchromosomen hervorragend, den zurückgelegten Weg 
kennzeichnen. Haben die Ühromosomen die Centrosomen erreicht, 
so beginnt alsbald der Zellkörper sich zu teilen. Die Tochter- 
sterne, die von oben betrachtet das Aussehen kleiner Teilungs- 
platten haben, sind noch lange durch Fasern miteinander ver- 
bunden. Nach der Einschnürung des Uytoplasmas sieht man oft 
an der Berührungsstelle das Flemmingsche Zwischenkörperchen, 
von dem die Reste der Spindelfasern nach den Polen hin diver- 
gieren. 

Die Chromatinmasse der Tochterkerne beginnt sich nun 
allmählich aufzulockern, währenddessen sich eine Kernmembran 
bildet. Zunächst hat der Kern eine nierenförmige Gestalt. Baid 
jedoch nimmt er eine kugelige Form an. Die dicken Chromatin- 
fäden werden allmählich dünner und nicht lange nach der Mitose 
haben die jungen Kerne wieder ihre normale Grösse erreicht 
und zeigen dann ihr typisches chromatinarmes Aussehen, wie es 
eingangs geschildert wurde. Zuweilen begegnet man kleinen 
dunkelgefärbten Spermiogonienkernen, die wahrscheinlich anor- 
male Erscheinungen darstellen (Fig. 53). 

So bleibt der Kern während des ersten Stadiums unver- 
ändert im Keimlager, um erst kurz vor der während des 
5. Stadiums stattfindenden zweiten Teilung Vorbereitungen zu dieser 
Mitose zu treffen. Diese gehen in der gleichen Weise vor sich 
wie bei der vorherigen. Auch dieser Teilungsvorgang bietet 
genau dieselben Bilder wie der im 12. Stadium. Prophasen so- 


Die Samenbildung bei den Enten. 343 


wohl als auch Metaphasen und Telophasen beider Spermiogonien- 
mitosen lassen sich nicht voneinander unterscheiden. In der- 
selben Art rücken die Ühromosomen der 2. Teilung zu den Polen, 
wo sich ebenso kleine nierenförmige Kerne bilden. Doch sind 
diese keine Spermiogonien mehr, sondern junge Spermiocyten. 

Was den Zellkörper der Spermiogonien anbetrifft, so lässt 
sich meist deutlich um den Kern ein bestimmter Plasmabezirk, 
der sich gegen das umgebende syneytiale Plasma durch eine 
dünne Membran abgrenzt, erkennen. Entsprechend dem Kern 
besitzt der Zelleib, der ausser diesem noch das Idiozom um- 
schliesst, eine kugelige oder längliche Gestalt. 


Spermiocyten. 


Die aus der letzten Spermiogonienteilung hervorgegangene 
Zellform sind die Spermiocyten, deren Kerne im Gegensatz zu 
denen der Spermiogonien den verschiedensten für die Uytologie 
wichtigen Veränderungen unterliegen. Nur ganz im Anfang ihres 
Entwicklungsganges liegen sie an der Wand des Röhrchens. Bald 
aber werden sie von den Spermiogonien ins Innere gedrängt und 
befinden sich dann nur noch ausnahmsweise in wandständiger Lage. 

Der Lebenslauf der Spermiocyten gleicht zunächst völlig 
dem der Spermiogonien; die kleinen nierenförmigen Kerne der 
jungen Spermiocyten, in denen häufig noch Spindelreste sichtbar 
sind, runden sich ab. Die Chromatinmassen verschwinden bis auf 
einige gröbere Brocken, von denen dünne Fäden ausgehen; sie 
haben das Aussehen eines typischen Spermiogonienkernes. Wie 
oft sie in dieser Gestalt den Zyklus durchlaufen, lässt sich daher 
bei der Übereinstimmung der Spermiogoniengenerationen unter- 
einander einerseits und mit den Anfangsstadien der jungen 
Spermiocyten andererseits natürlich nicht bestimmen. 

Deutlich kenntlich als Spermiocyten werden sie erst, 
wenn sie beginnen, sich ihrer endgültigen Grösse zu nähern. Sie 
besitzen dann zwar noch einen spermiogonienähnlichen Kern, der 
sich aber durch seine Grösse und kugelige Gestalt von jenen 
unterscheidet. Die chromatische Substanz besteht aus wenigen 
meist zentral gelegenen Brocken, von denen einige ausserordent- 
lich feine Fäden den Kern durchziehen. Bald jedoch beginnt sich 
die Chromatinmasse zu vermehren, die Körnchen werden zahl- 
reicher und die eine Kernhälfte erscheint dunkelgefärbt. Auch 


344 Karl Schöneberg: 


die Fäden vergrössern ihre Anzahl und sind mit vielen kleinen 
sphärischen Körperchen beladen. Eine immer weiter fortschreitende 
Kondensierung kleiner Chromatinpartikelchen und einseitiger Zu- 
sammenballung des ganzen Gerüstwerkes führt zum Stadium der 
Synapsis. 

Diese tritt deutlich in zwei Erscheinungsformen auf. In 
dem zusammengezogenen Klumpen ist zunächst ein dünnfädiges 
Gerüst, zwischen dem kleinere und grössere Chromatinbrocken 
dicht gelagert sind, gut sichtbar. Vereinzelte feine Fäden ragen 
aus der Masse heraus oder laufen zur gegenüberliegenden Seite 
des Kernes, wo sie sich mit einem Fusspunkte festzuheften 
scheinen. Nicht selten liegen dabei zwei dünne Fäden dicht 
nebeneinander. Allmählich verschwinden die einzelnen Brocken 
und legen sich den Fäden an. In dem einseitig gelegenen Knäuel 
verlaufen dicke Fäden, von denen einige zur anderen Kernseite 
ziehen. Häufig bemerkt man zwei Fäden, die dicht nebeneinander 
liegen und deren Enden verknüpft sind oder solche, die um- 
einander geschlungen sind. Oft gewähren die heraustretenden 
Fäden daher ein rosenkranzartiges Aussehen oder zeigen durch 
direkte Aufspaltung eine Doppelnatur. Unwahrscheinlich ist die 
Annahme Loisels, dass eine direkte Teilung der Chromatin- 
massen während der Synapsis stattfindet. Die Bilder, die er als 
solche deutet, sind zwei synaptische Kerne, die lediglich durch 
die opponierte Lage ihrer Chromatinknäuel einen derartigen An- 
schein erwecken. Eine Kernmembran ist während des ganzen 
Synapsisstadiums zu beobachten. 

Schwierig zu entscheiden ist die Frage, ob die Synapsis 
eine natürliche Erscheinung der Spermiocytenkerne oder eine 
Folge der Fixation ist. Wenn sie auch den Anschein eines Kunst- 
produktes macht und vielleicht auch ist, so bleibt sie doch ein 
charakteristischesStadium der Spermiocytenlaufbahn. Die Retraktion 
des Chromatins ist in Präparaten aller angewandten Fixations- 
flüssigkeiten sichtbar, wenn auch nicht immer in gleicher Stärke. 
In dem mit dem Flemmingschen Gemisch fixierten Material 
tritt sie sowohl am Rande als auch in der Mitte des Schnittes in 
gleicher Dichte auf. Hingegen findet sie sich nicht in einem in 
derselben Flüssigkeit fixierten Stückchen vom Rattentestikel. 
Während der Synapsis liegt der Kern exzentrisch in seinem 
Cytoplasma. Auf derselben Seite wie die zusammengeballten 


Die Samenbildung bei den Enten. 345 


CUhromatinmassen liegt auch das dunkle Zellplasma. In diesem 
sind häufig das Idiozom und die aus ihm herausgetretenen Centro- 
somen sichtbar. Wenn auch die „Centrotaxie“ die Regel bildet, 
so können die Centrosomen und das Idiozom zuweilen auf der 
entgegengesetzten Kernseite liegen. Das meist kugelige Idiozom, 
das von einem helleren Plasmabezirk umgeben ist, erscheint nicht 
selten eingeschnürt. 

Im dritten Stadium des Zyklus beginnen die dickfädigen 
Knäuel, die ungefähr dem amphitänen Stadium van Hoofs ent- 
sprechen dürften, sich zu lockern. Zahlreichere Fäden durch- 
ziehen den Kernraum und bilden das „Bukett-Stadium“, in dem 
die einseitig gelagerte Uhromatinmasse nur noch gering ist. Bald 
ist auch diese kleine Ansammlung verschwunden und der Spermio- 
eytenkern bietet nunmehr den Anblick eines lockeren dickfädigen 
Netzes dar, dessen Mittelpunkt zuweilen ein grösserer Chromatin- 
brocken bildet. Dieser entspricht offenbar dem von Regaud 
bei der Ratte beschriebenen Lenhossekschen Körper. Eine 
Grössenzunahme des Kernes, der nunmehr wieder zentral im 
Zellkörper liegt, findet während dieser ganzen Entwicklung der 
Spermiocyten nicht statt, da sie schon in den spermiogonien- 
ähnlichen Formen zu ihrer definitiven Grösse heranwachsen. 

Das lockere Knäuel, in dem oft der Doppelcharakter der 
Fäden sichtbar ist, wird allmählich chromatinärmer, die Fäden 
werden dünner und schliesslich ist nur noch ein feines Netz vor- 
handen, in dem ein grösserer Brocken und mehrere kleinere 
Körnchen sichtbar sind. Erst nach und nach werden die Fäden 
wieder chromatinreicher. Die Körnchen werden erheblich ver- 
mehrt, dann treten wieder dicke Fäden auf, die in langen Schleifen 
den Kern durchziehen. Die Spermiocyten sind in das „Spirem- 
stadium“ eingetreten. Deutlich tritt häufig noch der grosse 
Chromatinbrocken hervor. Bald zerfällt das kontinuierliche Knäuel 
in einzelne Stücke; diese werden kürzer und dicker, bis endlich 
der Kern ungefähr acht ring- oder &förmige kurze Schleifen 
enthält. Der Spermiocytenkern bereitet sich zu seiner Teilung 
vor. Durch weitere Verkürzung der Enden kommt es zur Bildung 
der Tetraden, die sich nach der Auflösung der Kernmembran zur 
Äquatorialplatte anordnen. Bevor die Membran aufgelöst ist, lassen 
sich manchmal in der Prophase Kerne beobachten, in denen die 
Tetraden an zwei Seiten des Kernes zusammengeballt sind. 


346 Karl Schöneberg: 


Die Teilungsspindel der Spermiocyten lässt sich immer von 
der der Spermiogonien aufs deutlichste unterscheiden. Im allge- 
meinen sind die Äquatorialplatten nicht so breit und die Ent- 
fernung der Centrosomen ist grösser als bei den Spermiogonien. 
Wenn auch die Spermiocytenplatte in seltenen Fällen eine un- 
gewöhnliche Breite erreichen kann, so lässt sie sich doch nie- 
mals vom Centrosom aus gesehen mit der Spermiogonienmitose 
verwechseln. Deutlich tritt hier die scharf abgesetzte Gestalt 
der Chromosomen hervor, die zwar häufig durch die Färbung 
mit Eisenhämatoxylin verklumpt sind, zuweilen aber doch erkenn- 
bar in der reduzierten Anzahl, ungefähr acht, vorhanden sind. Ihre 
Gestalt und Grösse variiert sehr. Nicht selten besitzen sie noch 
Ringform, oft bilden sie zu Tetraden vereinigte Gruppen oder 
kurze gedrungene Stäbchen. Ausser besonders grossen Chromo- 
somen fallen häufig kleine staubförmige Chromatinkörnchen in 
der Platte oder der Spindel auf. In manchen Teilungsfiguren ist 
eine abseits von der Platte liegende Tetrade zu beobachten. 

Nicht selten finden sich anormal gebaute Spindeln. Neben 
den schon erwähnten ungewöhnlich breiten Äquatorialplatten finden 
sich auch mehrpolige Spindeln oder ausser der Hauptspindel eine 
kleine Nebenspindel, die eine ungleichmässige Verteilung des 
Chromatins bewirkt. Dem Zuge der Spindelfasern entsprechend, 
trennen sich die gepaarten Chromosomen offenbar quer und 
wandern zu den Polen, nicht in gleicher Geschwindigkeit, sondern 
in der Regel bemerkt man nachschleppende Chromosomen. Ge- 
wöhnlich zeigen sie während des Auseinanderrückens eine bohnen- 
förmige Gestalt. Zuweilen lässt sich erkennen, dass sie sich aus 
zwei Teilen zusammensetzen. In der Telophase mancher Zellen 
lässt sich ebenfalls die Anzahl acht nachweisen. An den Polen 
sammeln sich die Chromosomen zu Klumpen, die noch durch 
Spindelfasern miteinander verbunden sind. Die Einschnürung des 
Zellkörpers und die Bildung der Kernmembran vollendet dann 
die erste Reifeteilung, die auch als heterotypische bezeichnet 
wird. Veränderungen am Öytoplasma lassen sich im letzten Teile 
der Spermiocytenentwicklung kaum bemerken. In der Regel ist 
es ziemlich dunkel gefärbt, nur während der Mitose erscheint der 
Zellraum meist heller. Neben dem Kern ist oft das kugelige 
Idiozom sichtbar. Bisweilen kann man auch die zu den Polen 
wandernden Uentrosomen beobachten. Bei den Teilungsvorgängen 


Die Samenbildung bei den Enten. 347 


liegt es ausserhalb der Spindel, ohne die geringsten Andeutungen 
einer Einschnürung zu zeigen. Von abseits liegenden Chromo- 
somen unterscheidet es sich durch seine Färbung. Färbt man 
nämlich die Schnitte mit Hämalaun-Safranin, so färbt sich die 
chromatische Substanz mit Safranin leuchtend rot, während sich 
das Idiozom mit Hämalaun violett färbt. 


Präspermiden. 

Die aus den Spermiocytenteilungen hervorgegangenen Tochter- 
zellen sind die Präspermiden, auch Spermiocyten zweiter 
Ordnung oder von Ebnersche Zellen genannt. Sie sind durch 
eine ausserordentlich kurze Lebensdauer ausgezeichnet. In der 
Regel kann man ihre Mitosen bereits dicht neben den Spermio- 
cytenteilungen finden. Sobald sich in den Spermiocytentelophasen 
die Kernmembran gebildet hat, beginnt sich die am Üentrosom 
gelagerte Chromatinmasse in dem jungen Präspermidenkern zu 
verteilen. Zunächst durchziehen nur einige Fäden den Kern, 
so dass ähnliche Bilder wie bei der Spermiocytensynapsis entstehen. 
Dann verschwindet die chromatische Substanz, bis sie nur aus 
einigen gröberen Brocken besteht, von denen dünne Fäden auslaufen. 
Die Kerne unterscheiden sich nur durch die geringere Grösse von 
dem entsprechenden Stadium der Spermiocytengeneration. Darauf 
beginnen sich im Kern die Chromosomen herauszudifferenzieren. 
Erst werden die Brocken grösser und zahlreicher, dann erscheinen 
Stäbchen, die sich bisweilen in ähnlicher Weise wie in den Spermio- 
cytenprophasen auf einer Kernseite zusammenballen. 

Nunmehr ordnen sieh die Chromosomen nach Auflösung der 
Kernmembran zur Äquatorialplatte der zweiten Reifeteilung oder 
homöotypischen Mitose. Die Teilungsfigur ist leicht durch ihre 
Kleinheit und ihre Chromatinarmut von den anderen zu unter- 
scheiden. Der Abstand der Centrosomen der Spindel ist im 
Verhältnis zur Breite der Platte höher als bei den übrigen 
Mitosen. Vom Centrosom aus betrachtet, zeigen sich die Chromo- 
somen weniger verklumpt. Oft lassen sich mit Sicherheit acht 
Chromosomen erkennen, die durch dünne Fäden miteinander ver- 
bunden sind. Wie bei den Spermiocytenteilungen lassen sich auch 
hier mehrpolige Spindeln beobachten (Fig. 150). 

Die Chromosomen spalten sich augenscheinlich der Länge 


nach, um nach den Polen zu wandern. Nach der Trennung der 
Archiv f.mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 23 


348 Karl Schöneberg: 


gepaarten Chromosomen nehmen sie eine nahezu kugelige Gestalt 
an. Eine nochmalige Reduktion der Chromosomen, wie z.B. 
Guyer annimmt, ist unwahrscheinlich. Zwar lassen sich Telo- 
phasen beobachten, in denen nur vier Chromosomen, in der einen 
Hälfte zuweilen fünf sichtbar sind. Bei näherer Betrachtung zeigt 
sich aber gewöhnlich, dass diese sich aus zwei Teilen zusammen- 
setzen. Nicht selten sind auch hier nachschleppende oder abseits 
liegende Chromosomen vorhanden. Bei den Üentrosomen ange- 
kommen, verliert sich bald die Form der Chromosomen. Beide 
Chromatinmassen stehen noch durch die Spindelfasern miteinander 
in Verbindung, die auch noch nach der Teilung des Cytoplasmas 
sichtbar sind. 

Im Zellkörper treten kaum wesentliche Veränderungen auf. 
Das Cytoplasma ist dicht und dunkel färbbar, während der Teilung 
ist es wieder hell. In zwei nebeneinander liegenden Zellen, die 
aus einer Spermiocyte hervorgegangen sind, kann man noch lange 
nach der Teilung Reste der Spindelfasern sehen. In dem Be- 
rührungspunkte beider Zellen, in dem die Fasern durch die 
Teilung des Zellkörpers zusammengeschnürt sind, ist das 
Flemmingsche Zwischenkörperchen zu beobachten. Selbst wenn 
der Kern schon chromatinarm erscheint, zeigen sich noch Reste 
der Teilungsspindel und des Zwischenkörperchens in Form einer 
kleinen Spindel. Dieses tritt auch während der Einschnürung 
des Zellkörpers der Präspermiden auf. Im Zelleib ist häufig das 
Idiozom zu erkennen. Bei der Präspermidenmitose ist es zuweilen 
neben der Spindel sichtbar, ohne dass eine Teilung desselben 
beobachtet werden konnte. Im Zellplasma ist noch nach der 
Auflösung des Kernchromatins der Pol der Spermiocytenteilungs- 
spindel sichtbar, indem von ihm ein oder zwei stärkere färbbare 
Fäden ausstrahlen. So wie die Spindelreste ist auch diese Er- 
scheinung fast während der ganzen Lebensdauer der Präspermiden 
ein Beweis für ihren schnellen Entwicklungsgang. 


Spermiden. 

Aus der zweiten Reifeteilung sind die Spermiden, die 
letzte Generation des Samenbildungsprozesses, entstanden. In 
ähnlicher Weise wie bei den Präspermiden zeigt der kleine Kern 
nach Bildung der Kernmembran ein Aussehen, das an die Synapsis 
erinnert, indem die Chromatinmasse in einer Kernhälfte angehäuft 


Die Samenbildung bei den Enten. 349 


ist und nur einige Fäden herausragen. Bald wird der Kern etwas 
grösser und chromatinärmer. Zunächst durchziehen noch dickere 
Fäden den Kernraum, dann verschwinden auch diese. Der ganze 
CUhromatinbestand des Spermidenkerns setzt sich nunmehr aus 
wenigen Brocken, die durch dünne Fäden verbunden sind, zusammen. 
In dieser typischen Gestalt bilden sie in vier bis fünf Reihen 
gelagert in den letzten und ersten Stadien des Zyklus die oberste 
Schicht des Samenepithels und geben diesem das charakteristische 
Aussehen. Der Zellkörper ist rundlich, bei dichter Lage auch 
polyedrisch. In dem dunklen Zellplasma ist das bläschenförmige 
Idiozom sichtbar. Bisweilen sind noch von der Teilung her die 
von den Centrosomen ausgehenden Plasmafäden vorhanden, die 
dann den Anschein erwecken, als ob die Geisselbildung bereits 
begonnen hat. Durch ihre Kleinheit sind die Spermiden leicht 
von den übrigen Zellelementen zu unterscheiden. In manchen 
Tubuli findet man neben normal gestalteten Spermiden solche, 
die nahezu doppelt so gross sind. Offenbar gehen diese Riesen- 
formen aus den vorhin erwähnten anormalen Mitosen hervor. 


2. Spermiohistogenese. 

Um ihre Aufgabe, das Ei zu befruchten und die väterliche 
Erbmasse zu übertragen, erfüllen zu können, müssen die Spermiden 
nun jene Umwandlungen durchmachen, die ihnen die für eine 
aktive Bewegung geeignete Organisation verleiht. Diese histo- 
logischen Veränderungen, die die Ausbildung fertiger Spermien 
aus den Spermiden zum Ziele haben, bilden den Teil der Samen- 
bildung, den man als Spermiohistogenese bezeichnet. 

Die erste Veränderung, die man in den Spermidenkernen 
im 2. Stadium wahrnimmt, ist eine deutliche Vermehrung der 
Chromatinsubstanz. Besonders an der Peripherie des Kernes treten 
erhebliche Chromatinmassen auf, von denen Fäden zu einem 
zentral gelegenen Brocken laufen. Der Zellkörper besitzt zuweilen 
schon eine längliche Form. Im Cytoplasma tritt häufig das 
Idiozom hervor. In den nächsten Stadien beginnt der bis dahin 
kugelige Kern eine längliche birnenförmige Gestalt anzunehmen. 
Durch eine Einbuchtung erhält er dann ein mehr nieren- 
förmiges Aussehen. An dieser Einbuchtung hat sich nahezu die 
ganze Chromatinmasse zu einem grossen Brocken konzentriert, 


während der übrige Kernraum fast völlig frei von chromatischer 
23* 


350 Karl Schöneberg: 


Substanz ist und nur von einigen Fäden durchzogen wird. Das 
Uhromatin zieht sich allmählich als kurzer Stab in den schmaleren 
Kernteil, der später zum vorderen Ende des Spermienkopfes wird, 
indes ein kleinerer Teil auch die Seiten der breiteren Hälfte 
bedeckt. Zu gleicher Zeit umwächst die Chromatinmasse ring- 
förmig den Umfang des Kernes. Dadurch entsteht der Einbuchtung 
gegenüber eine zweite, so dass der Kern nunmehr eine 8förmige 
(Gestalt besitzt und in eine hintere und eine vordere Hälfte zer- 
fällt. Inzwischen hat sich am hinteren Teil in dem gleichfalls 
verlängerten Zellkörper die Geisselwurzel gebildet. Dentlich lässt 
sich erkennen, dass sie ihren Ursprung von einem Üentrosom 
nimmt. Zuweilen erscheint es, als ob durch den hinteren Kern- 
raum ein dünner Faden nach diesem Punkte läuft. In ihrer 
jetzigen Gestalt kann man die Zellen bereits als Prospermien 
bezeichnen. 

Während die Kerne nun anfangen, eine bestimmte Orientierung 
zu zeigen, verlängert sich die vordere Hälfte weiter und wird 
dabei schmaler, die hintere dagegen vergrössert sich nicht und 
ist fast völlig von Chromatin entblösst, so dass sie einen bläschen- 
artigen Charakter erhält. Bei fortschreitender Verlängerung 
der vorderen Kernhälfte zieht sich die Chromatinmasse spiralig 
in die Länge. Einbuchtungen der Kernmembran bezeichnen die 
verschiedenen Stufen dieser Spiralwindungen. Am vorderen Ende 
ist gewöhnlich ein helles Bläschen wahrzunehmen; ebenso besitzen 
die anderen abgeteilten Kernräume einen hellen Kernsaft. Das 
hintere Bläschen, das einem Chromatinbrocken anliegt, ist hin- 
gegen bedeutend kleiner geworden. Ihm liegt jetzt auch das 
Uentrosom mit der Geisselwurzel an. Die chromatinfreien Teile 
des Kernes werden von feinen Fäden durchzogen. Das in Fig. 194 
abgebildete Prospermium zeigt anormal aufgeblasene Kernab- 
schnitte. Je weiter sich der Kern in die Länge streckt, je 
schmaler wird er. Die Chromatinmasse folgt dieser Längsaus- 
dehnung, lässt aber immer noch helle Kernräume frei. Von der 
vorderen Spitze der Chromatinspiralen sieht man nicht selten 
einen langen dünnen Faden entspringen, dessen Ende etwas ver- 
dickt erscheint. An diesem Achsenfaden, der offenbar den ganzen 
Prospermienkopf durchzieht und vielleicht auch mit der Geissel 
in Zusammenhang steht, gleitet das langsamer folgende Chromatin 
entlang. 


Die Samenbildung bei den Enten. 351 


Bald ist die Längsstreckung des Kernes soweit vorgeschritten, 
dass nahezu der ganze schmale Kernraum von der Chromatinmasse 
erfüllt wird. Diese erscheint nunmehr als homogener Stab, der 
zwar noch Knicke und Vorsprünge aufweist, aber doch schon die 
zukünftige Gestalt des Spermienkopfes erkennen lässt. Am 
vorderen Ende ist sie meist umgebogen; am hinteren Bläschen, 
das ausserordentlich klein geworden ist, hat sich die Geissel 
weiter entwickelt. Wenn der Kern endlich seine definitive Länge 
und Breite erreicht hat, so werden die Biegungen des Chromatin- 
stabes geringer. Der freie Kernraum verschwindet mehr und 
mehr. Am hinteren Ende des Kopfes, das stecknadelkopfartig 
verdickt ist, lässt sich noch das winzig kleine hintere Bläschen 
erkennen. 

Allmählich verschwinden die Knicke und die Unebenheiten 
der Oberfläche vollständig und der ganze Kernraum ist mit der 
Chromatinsubstanz ausgefüllt. Zur Zeit der tiefsten Fascikulation 
hat der Spermienkopf bereits eine völlig glatte Oberfläche. Ge- 
wöhnlich ist der stabförmige vorn zugespitzte Kopf etwas gewellt. 
Das hintere Bläschen und die knopfförmige Verdickung sind nicht 
mehr sichtbar. Der Schwanzfaden ist ebenfalls vollkommen aus- 
gebildet. An dem homogenen Kopf ist von einer spiraligen 
Drehung der Uhromatinmasse meist nichts mehr zu bemerken. 
Nur in einigen mit Carnoy scher Flüssigkeit fixierten Präparaten 
zeigten die Spermien eine vielleicht durch Quellung verursachte 
Streifung und deuteten so auf die spiralige Struktur hin (Fig. 227). 
Diese komplizierte Entwicklung der Chromatinmenge ist für die 
Funktion des Spermiums äusserst wichtig und zweckmässig, da 
die drehende Bewegung, die neben der stabförmigen zugespitzten 
Gestalt das Eindringen in das Ei erleichtert, nur durch den 
spiraligen Aufbau des Kopfes ermöglicht wird. Am hinteren Ende 
des fertigen Spermiums ist meist der lange Schwanzfaden mit 
seiner etwas kräftigeren Geisselwurzel sichtbar. 

Die Umwandlungen des Zellkörpers entsprechen denen des 
Kernes; er passt sich der jeweiligen Form des Kernes an. Je 
länger dieser wird, je mehr streckt sich auch das Cytoplasma. 
Der fertige Samenfaden wird so von einem Plasmaleib umgeben, 
der, wie der Kopf, vorn zugespitzt und hinten breiter ist. Das 
Zellplasma umhüllt den Samenfaden, bis dieser das Epithel ver- 
lässt. Vielfach wird aber der Zellkörper schon früher teilweise 


352 Karl Schöneberg: 


aufgelöst. Am längsten bleibt das hintere Ende vom Plasma um- 
schlossen, das dann wie eine Kappe darüber sitzt. Beim Loslösen 
vom Epithel wird der Zellkörper vollends abgestreift und nur an 
der Geisselwurzel sind noch Plasmareste zu beobachten. Das 
Idiozom liegt während dieser ganzen Zeit an irgend einer Stelle 
des Plasmas neben dem Kern in seiner charakteristischen bläschen- 
artigen Form. Ein Einfluss auf die Längsstreckung des Kernes 
oder eine konstante Lage des Idiozoms konnte nicht festgestellt 
werden. Wenn die reifen Spermien das Samenepithel verlassen 
haben, bilden sie mit dem Cytoplasma Restkörper, die jedoch 
bereits im 1. Stadium spurlos verschwunden sind. Jedenfalls sind 
sie in die abführenden Kanäle getrieben oder vom Epithel resor- 
biert worden. Safranophile Restkörperchen, wie sie bei der Ratte 
vorkommen, fehlen bei den Enten. 


Atypische Spermien (Fig. 229—238). 

Auf jedem Schnitte durch einen Brunsthoden finden sich 
neben normal gestalteten Spermien solche, die sich durch eine 
ungewöhnliche Form auszeichnen. Vereinzelt treten atypische 
Spermien in den meisten Tubuli auf. In einigen Röhrchen finden 
sie sich jedoch auch in grösserer Anzahl vor. Ein beobachtetes 
Kanälchen enthielt sogar nur anormale Spermien. Ein derartig 
zahlreiches Vorkommen ist in einem Brunsthoden als pathologisch 
anzusehen. Neben den Degenerationserscheinungen an normal 
grossen Samenfäden, wie sie in der Vorsamenbildung als Regel 
auftreten und daher dort näher beschrieben werden sollen, finden 
sich noch mehrköpfige Spermien und Riesenformen. Die mehr- 
köpfigen Samenfäden besitzen keinen stabförmigen Charakter, 
sondern sind vielmehr kugelig geblieben und liegen in einem 
gemeinsamen länglichen oder mehr abgerundeten dunklen Zell- 
körper. In ihnen sind auch meist mehrere Geisselwurzeln zu be- 
obachten. Unter den Riesenspermien lassen sich zwei Typen unter- 
scheiden. Die einen besitzen einen völlig normal gebauten Kopf. 
so dass sie sich nur durch ihre oft ungeheuere Grösse von den 
übrigen unterscheiden. Eine regelrechte Dimorphie der Spermien, 
wie sie Guyer bei der Taube beobachtet hat, je nachdem vier 
oder fünf Chromosomen in die Spermiden eingewandert sind, 
konnte nicht festgestellt werden. Die Riesenspermien treten viel- 
mehr nur vereinzelt auf. Die andere Art von übergrossen Samen- 


Die Samenbildung bei den Enten. 353 


fäden besitzt einen anormal gestalteten Kopf. Gewöhnlich ist das 
Mittelstück kugelig verdickt oder der ganze Kopf ungewöhnlich 
breit. Die Riesenspermien entstehen aus jenen Riesenspermiden, 
die, wie auch Broman annimmt, jedenfalls aus mehrpoligen 
Spindeln hervorgehen. Unwahrscheinlich ist die Annahme von 
Smith, dass sie sich aus Zellen entwickeln, die die zweite Reife- 
teilung nicht durchgemacht haben, also direkt aus Präspermiden. 
Eine Verschmelzung mehrerer Spermiden konnte nicht beobachtet 
werden. Die mehrköpfigen Spermien entstehen aus mehrkernigen 
Spermiden, die offenbar aus Mitosen mit ungleichmässig verteiltem 
Chromatin und ohne nachherige Zellteilung hervorgegangen sind, 
ebenso wie sich die degenerierten Spermien vielleicht in ähnlicher 
Weise erklären lassen. 


Anormale Idiozome (Fig. 239— 250). 

Erwähnt sei noch das Vorkommen eines ungewöhnlich grossen 
Idiozoms in dem Samenepithel eines Testikels von Lampronessa. 
In den Spermiogonien tritt es als grosse stark färbbare Kugel 
an irgendeiner Stelle des Cytoplasmas auf. Ist der Kern ein- 
gebuchtet, so liegt es zuweilen in dem Einschnitt dicht an der 
Kernmembran. Nicht selten erscheint das Plasma in seiner Um- 
gebung etwas heller. Während der Spermiogonienmitosen löst es 
sich augenscheinlich auf und verteilt sich in die beiden Tochter- 
zellen. Besondere Eigentümlichkeiten zeigt das Idiozom während 
der Spermiocytenlaufbahn. Der Rand ist stark dunkel gefärbt, 
während die Mitte heller ist. Zur Zeit der Synapsis liegt es in 
der Regel auf derselben Seite wie die zusammengeballte Chro- 
matinmasse. Im Innern des Idiozoms sind während dieses Stadiums 
häufig dunklere Linien sichtbar. Nicht selten erscheint das sonst 
kugelige Idiozom in die Länge gestreckt und durch dünne Fäden 
mit der Kernmembran verbunden. In seiner Umgebung kann 
man zuweilen mehrere kleine Körnchen beobachten, die offenbar 
die aus dem Idiozom gewanderten Centrosomen darstellen. In 
manchen Zellen treten auch im Cytoplasma mehrere stärker 
färbbare Substanzen ein. Die Spermiocyten, deren Kerne ein 
lockeres Chromatinknäuel besitzen, lassen ebenfalls ein längliches 
Idiozom erkennen. Während der zweiten Reifeteilung erscheint 
das Idiozom als homogener ovaler Körper. Es liegt gewöhnlich 
ausserhalb der Spindel, entweder in derselben Höhe wie die 


354 Karl Schöneberg: 


Äquatorialplatte oder in einer Zellhälfte in der Nähe eines Poles. 
In der Regel ist von einer Teilung des Idiozoms nichts zu be- 
merken. Nur selten zeigt es eine Einschnürung, als ob es sich 
teilen wollte. Von den Chromosomen lässt es sich auch hier leicht 
unterscheiden, wenn man die Färbung mit Hämalaun-Safranin 
anwendet. Es färbt sich dann mit Hämalaun blass-violett und 
nicht mit Safranin rot wie die chromatische Substanz. In den 
Präspermiden und Spermiden zeigt es keine Besonderheiten. Die 
Mitte des bläschenförmigen Idiozoms erscheint meist heller als 
der Rand. In der Nähe des Kerns gelegen, lässt es bisweilen 
eine Verbindung mit diesem erkennen. Um das Idiozom erscheint 
in der Regel wieder eine hellere Plasmazone. Enthält die Zelle 
einen Doppelkern, so liegt es gewöhnlich in gleichem Abstand 
von beiden Kernen. Zur Zeit der histologischen Umwandlung der 
Spermiden und Spermien ist seine bläschenförmige Gestalt an 
beliebiger Stelle im Cytoplasma sichtbar. Selbst bei fertig aus- 
gebildeten Samenfäden lässt es sich noch in dem langgestreckten 
Zellkörper beobachten, um erst nach dem Verlassen des Spermiums 
mit dem Plasma als Restkörper zurückgelassen zu werden, 

Da sich ein derartig grosses Idiozom nur in dem einen 
untersuchten Hoden vorfand und die Tubuli verhältnismässig viel 
degenerierte Samenfäden enthielten, ist die ganze Erscheinung 
dieses ungewöhnlich grossen Idiozoms als anormal anzusehen. 


Über die Veränderung des Hodens bei der 
Vorsamenbildung und der Mauser. 


Da der Bau des Winterhodens reinartliger Enten in Polls 
fünfter Mischlingsstudie beschrieben worden ist, so war es von 
Interesse, auch die Erscheinungen, die sich während der Über- 
gangsperiode von der Winterruhe bis zur vollkommenen Samen- 
bildung abspielen, näher zu untersuchen. Um den Kreis des 
Entwicklungsganges zu schliessen, war es von gleicher Bedeutung, 
die Veränderung im Hodengewebe nach der Brunstzeit während 
der Mauser festzustellen. 

Als Material für die Vorsamenbildung dienten die Testikel 
frisch getöter Stockerpel. Die Hoden wurden in gleicher Weise 
wie bei der normalen Samenbildung fixiert und weiterbehandelt. 
Zur Untersuchung des Mauserhodens gelangten Testikelstückchen, 
die Herr Prof. Poll bereits eingebettet hatte und mir in liebens- 


Die Samenbildung bei den Enten. 355 


würdigster Weise zur Verfügung stellte. Da die Samenbildung 
der verschiedenen Enten nahezu in derselben Art verläuft, so war 
es nicht nötig, ein und dieselbe Form zu untersuchen, sondern 
es wurden verschiedene Formen herangezogen. Die einzelnen 
Objekte sollen nicht nach dem Zeitpunkt ihrer Fixierung betrachtet 
werden, sondern nach der Entwicklungsstufe ihres Samenepithels. 


Materialübersicht. 
Vorsamenbildung. 
1. 695 Anas boschas fixiert am 6. 2. 1912 C. Fl. T. Z. 
22696..%5 k id EIERN IIOFEHELNTY.Z 
30099. ,Ht, N A 202. TIRCDEL NZ 
4.699: 1%, e Mi 320 IIESFEARL TIZ; 
TUN +5 3 x 0 DRSNIITOFCHELERZ: 
SU) ge j ® AN DSIHRLITDTCHERNEMNZ, 
TEN TA US Dee % S ER LOOLEH PERUTN Z; 
Mauser. 
1. 345 Anas boschas fixiert am 7. 6. 1909 Fl. Z. 
2A he 5 34423 +6:,1909Ell 
BSAT 0, h \ 2729: ,6.,1909 EL 
4. 5348 Mareca penelope „ »%209,,6:,1909, 1. 
Vorsamenbildung. 


Ungefähr in der Mitte des Februars beginnt in den männ- 
lichen Keimdrüsen plötzlich eine lebhaftere Tätigkeit einzusetzen. 
Die Zellelemente des Samenepithels vermehren sich stark und 
bedingen ein Ausdehnen der Tubuli und somit ein Anwachsen 
des ganzen Hodenvolumens. Dieser Beginn der Vorbereitungen 
für die eigentliche Samenbildung ist jedoch nicht genau festzulegen, 
da das Alter des Tieres, besonders aber der Einfluss des Wetters, 
eine nicht unwesentliche Verschiebung herbeiführen kann. Nicht 
selten erfolgen in schon weiter fortgeschrittenen Keimdrüsen 
Stillstände oder sogar Rückschläge infolge ungünstiger Witterung 
oder Lebenslage. 


Stadium 1 (Erpel 695, Fig. 251). 


Der Hoden eines am 6. Februar getöteten Erpels bietet im 
Querschnitt seiner Tubuli noch im wesentlichen den Anblick, den 
Poll für den normalen Winterhoden beschrieben hat. Die kleinen, 


356 Karl Schöneberg: 


wenig gewundenen Röhrchen enthalten nur eine geringe Anzahl 
von Zellelementen. Wandständig liegen die länglichen Archi- 
spermioeyten (Poll), deren Längsachse in der Regel senkrecht 
zur Tunica propria steht. Zwischen ihnen liegen vereinzelt die 
Präspermiogonien, deren Kerne sich durch ihre helle kugelige 
Gestalt und ihre Grösse leicht von den Archispermiocyten unter- 
scheiden lassen. Die Chromatinmasse der Präspermiogonien Ist 
nur gering; sie besteht aus einigen gröberen Brocken und zahl- 
reichen staubförmigen Körnchen. Während sich die Zellkörper 
- der Archispermiocyten schwer voneinander abtrennen lassen, kann 
man den Plasmabezirk, der den Präspermiogonien zugehört, 
deutlich erkennen. Im Cytoplasma ist zuweilen deutlich ein 
dunkles sphärisches Körperchen mit einem helleren Plasmahof 
zu beobachten. Nach dem Lumen zu liegen nur spärlich die 
Präspermiocyten in ibren beiden Modifikationen. Ihre Kerne 
zeigen entweder ein lockeres Ohromatinknäuel oder eine einseitig 
zusammengeballte Chromatinmasse wie in der Synapsis der Samen- 
bildung. In der Nähe des scharf abgesetzten Lumens oder in 
der Lichtung selbst liegen häufig degenerierende Zellen. Während 
Loisel beim Sperling nur direkte Kernteilung beobachtet hat, 
treten bei den Enten neben den amitotischen Einschnürungen 
der Präspermiogonien vereinzelte Mitosen auf, wie sie auch Poll 
bereits im Winterhoden gefunden hat. Ihre Lage im Epithel ist 
sehr verschieden. Da die Wand gewöhnlich vollständig von den 
Archispermiocyten eingenommen wird, liegen sie meist mehr nach 
dem Lumen. In ihrer Form ähneln sie denen der Spermiogonien; 
wie bei diesen zeichnen sie sich durch Chromatinreichtum, ihre 
Breite und geringen Öentrosomenabstand aus. Zuweilen degenerieren 
die Zellen gerade im Teilungsstadium. Telophasen sind nur 
selten zu beobachten. Die einzelnen Samenröhrchen sind noch 
durch faseriges Bindegewebe mit zahlreichen verschieden gestalteten 
Kernen voneinander getrennt. 


Stadium 2 (Erpel 696, Fig. 252). 
Der Testikel eines Erpels, der einige Tage später, am 
9. Februar getötet wurde, zeigt bereits ein etwas fortgeschritteneres 
Stadium. Die Tubuli sind zwar noch wenig gewunden, so dass 
man viele quergetroffene Röhrchen antrifft, aber sie haben schon 
an Volumen zugenommen. Besonders auffällig im Hodengewebe 


Die Samenbildung bei den Enten. 357 


ist das Verschwinden des interstitiellen Bindegewebes, das nahezu 
vollständig von den sich ausdehnenden Kanälchen verdrängt ist. 
In der Regel stossen diese direkt aneinander und nur in den 
/wischenräumen, die von drei Tubuli eingeschlossen werden, sind 
noch zahlreichere Kerne angehäuft. Das Samenepithel hingegen 
zeigt noch keine wesentliche Weiterentwicklung. Die Arten der 
Zellelemente haben sich nicht vermehrt. Im allgemeinen haben 
die grösseren Präspermiogonien an Zahl zugenommen auf Kosten 
der kleinen Archispermiocyten, die sich verringert haben. Sonst 
aber zeigen die Präspermiogonien noch dasselbe Aussehen, nur 
ist ihr Volumen oft vergrössert. Nicht selten sieht man amitotische 
Kerneinschnürungen und vielleicht infolge davon Doppelkerne im 
Zellkörper der Präspermiogonien. Etwas häufiger sind auch ihre 
Mitosen geworden, die nicht selten zu mehreren in Gruppen zu- 
sammenliegen. Bisweilen lassen sich auch Telophasen beobachten, 
die ebenfalls an die der typischen Spermiogonien erinnern. Da 
noch genug Platz vorhanden ist, können die Teilungen sowohl an 
der Wand als auch am Lumen liegen. In den oberen Schichten 
sind die zwar noch vereinzelten, aber schon in grösserer Anzahl 
vorhandenen Präspermiocyten verstreut. Zu Mitosen der Prä- 
spermiocyten kommt es noch nicht, da ihre Kerne über das 
Stadium des lockeren Knäuels nicht hinausgehen. An der Wand 
trifft man vereinzelte Kerne, die sich durch die fibrilläre Struktur 
des umgebenden Plasmas als den Sertolikernen entsprechende 
Elemente kennzeichnen. 

In dem scharf abgesetzten Lumen finden sich häufig los- 
gelöste degenerierte Zellen, meist Präspermiocyten, deren kugeliges 
Plasma dicht ist und dunkel gefärbt. Degenerationsprodukte 
lassen sich auch im Samenepithel selbst beobachten. Besonders 
interessante Bilder bieten die während der Mitose zugrunde 
gehenden Zellen. Die Chromosomen verklumpen stark und nehmen 
zuweilen eine kugelige Gestalt an. Degenerierende Prophasen zeigen 
ebenfalls eine starke Verklumpung des Chromatins (Fig. 260— 264). 


Stadium 3 (Erpel 698, Fig. 265). 

Eine weit lebhaftere Tätigkeit beginnt das Samenepithel 
Ende Februar zu entwickeln. Die Tubuli eines am 20. Februar 
fixierten Hodens, der eine Länge von 14 mm hatte, enthielten 
zum Teil eine bedeutend grössere Anzahl von Samenbildungszellen. 


358 Karl Schöneberg: 


Einige Samenröhrchen stehen zwar noch auf dem vorigen Stadium, 
die meisten aber zeigen doch einen Fortschritt. Die Archi- 
spermiocyten haben sich wesentlich verringert und sind nur noch 
vereinzelt sichtbar. An ihre Stelle sind mehr und mehr die 
Präspermiogonien getreten, die jetzt nahezu das ganze wand- 
ständige Lager einnehmen. Nur noch vereinzelte Sertolielemente 
liegen ausser den wenigen Archispermiocyten zwischen ihnen. 
Da die Entwicklung in äusserst seltenen Fällen schon bis zu den 
Prospermien geht, kann man die Präspermiogonien teilweise 
bereits als Spermiogonien, die Präspermiocyten als Spermiocyten 
bezeichnen. Die amitotischon Einschnürungen sind seltener ge- 
worden, indes sich die Mitosen der Spermiogonien vermehrt 
haben. Diese sind gewöhnlich von den übrigen Zellen an die 
Wand gedrängt. Durch das häufigere Auftreten von Teilungen 
haben die Spermiogonien nicht mehr die Zeit, so abnorm grosse 
Dimensionen, wie sie im vorigen Stadium zuweilen vorkamen, 
anzunehmen. 

Neben diesen Spermiogonienmitosen treten nunmehr auch 
die mitotischen Teilungen der Spermiocyten und der Präspermiden 
hinzu. Häufiger bemerkt man jetzt Spermiocyten, die sich weiter 
als vorher entwickeln. Einzelne schreiten sogar zur Teilung, 
wenn auch die grössere Hälfte schon vorher degeneriert. Noch 
seltener lassen sich Präspermiden oder sogar deren Mitosen 
beobachten. Die Teilungsfiguren der Spermiocyten und Präsper- 
miden gleichen vollkommen den entsprechenden Mitosen der 
fertigen Samenbildung. Ganz wenige Zellen erreichen das Stadium 
der Spermiden. In ganz seltenen Fällen vermögen diese sich in 
Prospermien umzuwandeln, die dann durchweg Degenerations- 
erscheinungen zeigen. Zu fertig ausgebildeten Spermien kommt 
es überhaupt nicht. 

Das zuweilen noch scharf abgesetzte Lumen ist oft von 
zahlreichen losgelösten Zellelementen in den verschiedensten 
Stadien erfüllt. Trotzdem noch keine Samenfäden vorhanden sind, 
kann man doch schon in der Umgebung der Sertolielemente an 
einigen Stellen bereits die charakteristischen Sekretkügelchen im 
Plasmasyneytium beobachten, wie sie während der normalen 
Samenbildung in den Fascikulationsstadien auftreten. Da sie keine 
Samenfäden zu ernähren hat, kommt dieser Sekretion vielleicht 
hier eine andere unbekannte Bedeutung als dort zu. 


Die Samenbildung bei den Enten. 359 


So nähert sich im grossen und ganzen der Anblick schon 
dem der eigentlichen Spermiogenese, besonders durch die starke 
Vermehrung der Synapsisstadien. Alle Zellgenerationen der 
Brunstperiode sind bereits im Samenepithel, wenn auch zum Teil 
nur spärlich, vertreten. 


Stadium 4 (Erpel 701, Fig. 266). 


Ein unmittelbar darauffolgendes Stadium zeigt uns das Keim- 
epithel eines am 5. März getöteten Erpels. Die Hodenlänge betrug 
23 mm. Die Mehrzahl der Tubuli stehen auf derselben Entwick- 
lungsstufe wie die des vorigen Testikels. Sie sind noch völlig 
frei von ausgebildeten Spermien. Während sich aber dort nur 
ganz spärliche Prospermien vorfanden, treten hier in einigen 
Röhrchen bereits mehrere fertige Samenfäden auf. Zu Fascikeln 
vereinigen sie sich noch nicht, sondern sie liegen nur vereinzelt 
im Samenepithel verstreut. Ihr Kopf zeigt auch keine normale 
Gestalt, sondern weist immer Degenerationserscheinungen auf. 
In der Regel ist der hintere Teil des Kopfes kugelig aufgetrieben 
und das vordere Ende anormal dünn. Zuweilen ist der Kopf um- 
gebogen oder sogar spiralig zusammengerollt. Nicht selten ist 
er auch in seiner ganzen Ausdehnung ungewöhnlich breit. In 
der Regel kommt es hingegen noch gar nicht zur Ausbildung von 
Spermien, sondern die Bildungszellen gehen meist auf früheren 
Stadien zugrunde. Häufig sieht man daher ihre Degenerations- 
produkte im Epithel oder im Lumen liegen. Das Keimepithel 
ist nicht mehr so scharf gegen das Lumen abgegrenzt. Die Zell- 
elemente sind dieselben wie bei der normalen Kernbildung. Nur 
durch die geringe Höhe, die durch die kleinere Anzahl der Zellen 
bedingt ist, und das Fehlen der Spermien unterscheidet sich 
dieses Samenepithel von dem der Brunstzeit. Die Archispermio- 
cyten sind gänzlich verschwunden und haben den Spermiogonien 
Platz gemacht, die nunmehr die ganze unterste Schicht ein- 
nehmen. Auch die Sertolikerne sind von ihnen ins Innere ge- 
drängt worden. Der obere Teil des Bildungsgewebes wird aus- 
schliesslich von den übrigen Zellgenerationen, den Spermiocyten, 
den Präspermiden und den Spermiden eingenommen. Die Spermio- 
cyten bilden jedoch nur eins bis zwei Reihen, die Spermiden ge- 
wöhnlich nur eine Lage. 


360 Karl Schöneberg: 


Stadium 5 (Erpel 699, Fig. 267). 

Das nächste Stadium findet sich in einem Hoden, der schon 
am 20. Februar fixiert wurde, also bedeutend früher als der vor- 
her betrachtete und am selben Tage wie der das dritte Stadium 
zeigende. Dieser Befund beweist mithin ganz deutlich, dass das 
Fortschreiten der Samenbildung nicht allein von der Zeit ab- 
hängig ist, sondern auch von anderen individuellen und äusseren 
Umständen. Trotzdem die Entwicklung weitergegangen ist, hat 
sich die Länge des Testikels nicht vergrössert, sogar noch eine 
Kleinigkeit gegen das vorige Stadium verringert; sie betrug 
22 mm; im vorigen dagegen 23 mm. Man darf also von der 
Länge des Hodens nicht ohne weiteres auf das Stadium schliessen, 
da auch das Volumen des Testikels individuell verschieden ist, 
hauptsächlich jedenfalls vom Alter abhängig ist. 

Die grössere Hälfte der Tubuli ist noch frei von Spermien, 
zeigt also noch keine Weiterbildung. Der Samenbildungsprozess 
hält in der Regel bei den Spermiocyten an, in manchen Fällen 
geht er bis zu den Präspermiden und Spermiden. Einige Samen- 
kanälchen zeigen hingegen schon wesentliche Fortschritte; sie 
weisen mitunter zahlreiche fertig ausgebildete Spermien auf. 
Viele zeigen zwar noch Degenerationserscheinungen, aber es 
treten doch auch völlig normal gestaltete auf. Meist sind sie 
nur vereinzelt vorhanden. Dort, wo mehrere zusammenliegen, 
zeigen sie bereits die Tendenz, sich zu Büscheln anzuordnen. 

Die Zahl der übrigen Zellen hat sich erheblich vermehrt 
und das Epithel ist dadurch etwas höher geworden. Mitosen der 
verschiedenen Elemente treten jetzt häufiger auf. Die Spermio- 
gonienteilungen liegen nur noch an der Wand des Tubulus. Die 
Sertolikerne sind durch die starke Vermehrung der Spermiogonien 
gänzlich von der Membran verdrängt. 


Stadium 6 (Erpel 700 und 703, Fig. 268). 

Den letzten Schritt zur fertigen Samenbildung zeigen die 
Hoden eines am 1. und eines am 13. März getöteten Erpels. 
Der am 1. fixierte Testikel hatte eine Länge von 34 mm, war 
also weit grösser als der vorhin betrachtete vom 5. März. Der 
am 13. März eingelegte Hoden hatte hingegen nur eine Länge 
von 25 mm, war mithin nur wenig grösser als der vom 5. März. 
Trotzdem ist sein Samenepithel erheblich weiter entwickelt. Fast 


Die Samenbildung bei den Enten. 361 


alle Tubuli enthalten nunmehr vollkommen reife Samenfäden. 
Sehr wenige enthalten überhaupt keine, einige nur vereinzelte. 
In den Röhrchen des am 15. März fixierten Hodens zeigen noch 
viele Spermien Degenerationserscheinungen, während diese in 
dem vom 1. März wesentlich geringer sind. Manche Tubuli ent- 
halten schon so zahlreiche Spermien wie zur Brunstzeit. Fascikel 
sind dann überall deutlich ausgeprägt. In dem Lumen, das nicht 
mehr scharf umgrenzt ist, sieht man zuweilen Gruppen fertiger 
Spermien schwimmen, die sicher schon befruchtungsfähig sind. 

Mit den Spermien haben sich auch die Zellelemente der 
anderen Generationen vermehrt. Überhaupt bietet das Samen- 
epithel an einigen Stellen denselben Anblick wie zur Zeit der 
höchsten Brunst. Die Kanälchen sind durch die Vermehrung der 
Zellen mächtig ausgedehnt worden und aus diesem Grunde stark 
gewunden, weshalb nur noch selten quergeschnittene Röhrchen 
angetroffen werden. Das interstitielle Bindegewebe ist vollständig 
verschwunden. 

In der zweiten Hälfte des März ist dann bereits die Brunst- 
periode des Wilderpels eingetreten. Der Hoden eines am 25 März 
getöteten Erpels hatte eine Länge von 43 mm; der Prozess hatte 
jetzt den Höhepunkt seiner Entwicklung erreicht. 


Mauserhoden. 


Mit dem Ablauf der Brunsterscheinungen beginnt auch die 
Tätigkeit des Samenepithels nachzulassen. Der Eintritt der Mauser- 
periode ist je nach der Art und der individuellen Veranlagung 
verschieden. Während z. B. der Stockerpel bereits Anfang Juni 
sein Schmuckkleid abwirft, beginnt der Türkenerpel erst Ende 
Juli zu mausern. Ein am 27. Juli getöteter Cairina-Erpel, der 
anfıng, sein Prachtkleid abzulegen, zeigte in seinem Hodengewebe 
noch keinerlei sichtbare Veränderungen. Das Samenepithel er- 
scheint noch in voller Tätigkeit. Zahlreiche Spermien werden 
gebildet und Degenerationserscheinungen kommen nicht in un- 
gewöhnlicher Anzahl vor. Weit stärker noch wird die Brunst- 
periode beim Hauserpel verlängert. Infolge der günstigen Lebens- 
bedingungen tritt hier die Mauser erst im Herbst ein. Die ersten 
Anzeichen des Nachlassens der Tätigkeit machen sich im Keim- 
epithel durch das Auftreten zahlreicher anormal gestalteter 
Spermien bemerkbar. 


362 Karl Schöneberg: 


Stadium 1 (Erpel 345, Fig. 278). 

In dem Samenbildungsgewebe eines am 7. Juni fixierten 
Testikels treten bereits viele degenerierte Samenfäden auf. Oft 
sieht man mehrere nebeneinander liegende gut ausgebildete Fascikel, 
die nur normal gebaute Spermien enthalten. Dann wieder bemerkt 
man solche, die sich teilweise oder gänzlich aus degenerierten 
Samenfäden zusammensetzen. In vielen Tubuli herrscht so noch 
volle Samenbildung, während in anderen funktionsfähige Spermien 
kaum mehr vorhanden sind. Die Degenerationszeichen machen 
sich auch hier durch eine anormale Form der Spermienköpfe 
bemerkbar. Diese erscheinen ungewöhnlich breit oder hinten 
kugelig aufgetrieben. Nicht selten sind sie zusammengerollt oder 
gekrümmt. Bisweilen findet man derartig degenerierte Samen- 
fäden tief ins Epithel hineingezogen, um dort offenbar resorbiert 
zu werden. 

In den Zellelementen selber lassen sich noch keine wesent- 
lichen Veränderungen nachweisen. Meist ist die Anzahl der Zellen 
und ihrer Teilungen fast ebenso zahlreich wie zur Brunstzeit. 
An der Wand liegen noch dichtgedrängt die Spermiogonien. 


Stadium 2 (Erpel 348, Fig. 279). 

Ein anderes Bild zeigt sich bereits 3 Wochen später in den 
Samenröhrchen eines am 29. Juni getöteten Pfeiferpels. Die reifen 
Spermien sind nahezu vollständig verschwunden. Nur spärliche 
Reste sind noch vorhanden, besonders in den ableitenden Wegen 
des Nebenhodens. Neue Samenfäden werden jetzt nicht mehr 
gebildet. Höchstens findet man hier und da anormal gestaltete 
Prospermien in einigen Kanälchen. Meist degenerieren die Zellen 
indes bereits als Spermiden oder in einem noch früheren Stadium. 
Die Zahl der Zellen hat bedeutend abgenommen und das Samen- 
epithel ist daher niedriger geworden. Trotzdem sind aber noch 
alle Zellgenerationen der Samenbildung vertreten. Die Spermio- 
gonien liegen nicht mehr so gedrängt in den untersten Schichten 
des Keimlagers. Zwischen ihnen sind schon vereinzelt die kleinen 
länglichen Kerne der Archispermiocyten sichtbar. Die Sertoli- 
elemente rücken allmählich ebenfalls wieder an die Wand, wo 
jetzt Platz genug für sie vorhanden ist. Die Mitosen sämtlicher 
Zellformen sind zwar noch zu beobachten, sind aber bedeutend 
seltener geworden. Mit der Anzahl der Zellen hat sich auch 


Die Samenbildung bei den Enten. 365 


der Durchmesser der Tubuli verkleinert. Da die Kanälchen nicht 
mehr so stark gewunden sind, begegnet man jetzt wieder häufiger 
Querschnitten. Die einzelnen Röhrchen stossen zwar noch un- 
mittelbar aneinander, doch sieht man bereits in den Zwischen- 
räumen dreier zusammenstossender Kanälchen Kerne des inter- 
stitiellen Bindegewebes angesammelt. 


Stadium 3 (Erpel 347, Fig. 280). 

In dem Testikel eines am 25. Juni getöteten Stockerpels 
sind die Querschnitte der Samenschläuche wesentlich kleiner. Das 
interstitielle Bindegewebe ist stark vermehrt und beginnt bereits 
sich zwischen die einzelnen Tubuli einzuschieben. Besonders an 
der Tunica albuginea trennt es schon fast alle Röhrchen von- 
einander, während es in der Mitte des Hodenquerschnittes weniger 
ausgedehnt ist und zum Teil noch gänzlich fehlt. 

Die Anzahl der Zellelemente ist stark reduziert. In der 
Nähe des Lumens, das jetzt scharf gegen das Samenepithel ab- 
gegrenzt ist, liegen nur sehr wenige Zellen. An der Wand be- 
finden sich zahlreiche Spermiogonien und zwischen ihnen in 
geringer Anzahl die Archispermiocyten und Sertolielemente. Die 
Entwicklung geht bis zu den Spermiden, doch sind diese bereits 
ausserordentlich selten und zeigen gewöhnlich Degenerations- 
erscheinungen, die sich durch starke Verklumpung der Chromatin- 
masse und Verdichtung des Zellplasmas kenntlich macht. Häufig 
liegen derartige Degenerationsprodukte losgelöst im Lumen. In 
der Regel aber gehen die Zellen bereits als Spermiocyten zu- 
srunde. Diese liegen gleichfalls nur vereinzelt im Epithel ver- 
streut. Meist sieht man sie im Stadium der Synapsis oder des 
lockeren Knäuels. Teilungsfiguren sind zwar noch vorhanden, 
sind jedoch sehr selten geworden. Zuweilen findet man wie bei 
der Vorsamenbildung degenerierende Mitosen. Zur Ausbildung 
fertiger Spermien kommt es nicht mehr. Alle Tubuli sind frei 
von Samenfäden und Prospermien. Nur in den Kanälen des 
Nebenhodens sind noch manchmal die letzten Reste der Spermien- 
generation sichtbar. 


Stadium 4 (Erpel 346, Fig. 281). 
Der Hoden eines am 23. Juni getöteten Erpels hat fast das 


Stadium der Winterruhe erreicht. Starkes interstitielles Binde- 
Archiv f. mikr. Anat. Bd.83. Abt. II. 24 


364 Karl Schöneberg: 


gewebe mit zahlreichen verschieden geformten Kernen trennt die 
einzelnen Tubuli voneinander. Der Durchmesser der Röhrchen, 
die besonders in der Mitte des Querschnittes nur wenig gewunden 
sind, hat sein Minimum nahezu erreicht. Das ganze Bild des 
Samenepithels erinnert an die ersten Stadien der Vorsamen- 
bildung. Das die Innenwand des Kanälchens auskleidende Keim- 
epithel ist ausserordentlich niedrig. Es enthält fast nur die 
wandständigen Spermiogonien und die zahlreicher gewordenen 
Archispermiocyten. Die kleinen Zellelemente wiegen jetzt vor. 
Da Platz vorhanden ist, sind die Spermiogonien, die man jetzt 
wieder als Präspermiogonien bezeichnen muss, zum Teil nach 
dem Lumen hingerückt. Lumenwärts liegen auch die Spermio- 
cyten oder vielmehr Präspermiocyten, die jedoch nur spärlich in 
der Synapsisform oder als lockeres Knäuel vorhanden sind. Alle 
übrigen Zellen fehlen völlig. Abgelöste, zugrunde gegangene 
Zellprodukte sind häufig in dem Lumen zu beobachten. 

Diese histologischen Befunde über den Bau des Mauserhodens 
stehen im Widerspruch mit den Beobachtungen Chappeliers 
über Paarungen der Enten ausserhalb der Brunstperiode. Da 
keine reifen Samenfäden gebildet werden, lässt sich diese eigen- 
artige Erscheinung, die doch völlig zwecklos ist, mit den histo- 
logischen Ergebnissen nicht in Einklang bringen und erklären. 


Schluss. 


Während eines Jahres nimmt die Tätigkeit des Entenhodens 
einen wellenförmigen Verlauf. Den Höhepunkt seiner Funktion 
erreicht der Testikel zur Brunstzeit, während er im Winter 
dagegen kaum eine merkliche Tätigkeit entfaltet. Die starke 
Volumenvergrösserung, die im Frühjahr oft recht plötzlich ein- 
setzt, wird durch die Vermehrung der samenbildenden Elemente 
bedingt. Neben dem Anschwellen der Hodengrösse geht eine 
fortschreitende Entwicklung in den Generationen der Samen- 
bildungszellen einher, oft von ungünstigen Lebensbedingungen 
aufgehalten. Im März und Mai hat dann der Hoden das 
Maximum seines Volumens und seiner inneren Tätigkeit erreicht. 
Die für den Winterhoden charakteristischen Archispermiocyten 
verschwinden während der Vorsamenbildung und wandeln sich 
offenbar einesteils in Spermiogonien, anderenteils in Sertoli- 
elemente um. Bemerkenswert ist auch das Verschwinden des 


Die Samenbildung bei den Enten. 365 


interstitiellen Bindegewebes, das nach und nach vollständig von 
den sich ausdehnenden Samenröhrchen verdrängt wird. Bei Be- 
ginn der Mauser verringert sich das Volumen des Hodens wieder. 
Die Archispermiocyten und das interstitielle Bindegewebe er- 
scheinen von neuem, während die samenbereitenden Zellen mehr 
und mehr reduziert werden. Die Tubuli, deren Querschnitte 
kleiner geworden sind, strecken sich wieder. Dieselbe Erscheinung, 
wie sie Tandler und Gross beim Maulwurfshoden beobachtet 
haben, zeigt sich also auch hier bei den Enten. Ein Maximum 
des Hodenvolumens bat ein Minimum des interstitiellen Binde- 
gewebes zur Folge, während umgekehrt im Winter der kleinsten 
Hodengrösse eine maximale Ausdehnung des Zwischengewebes 
entspricht. 

Die Arbeit wurde vom Winter 1911/12 bis Sommer 1913- 
im Anatomisch-biologischen Institut zu Berlin angefertigt. Herrn 
Geheimrat Prof. Dr. Hertwig spreche ich für das Interesse, das 
er meiner Arbeit entgegengebracht hat, meinen verbindlichsten 
Dank aus. Zu besonderem Danke bin ich Herrn Prof. Dr. Poll 
verpflichtet; sowohl für die liebenswürdige Überlassung seines 
Materials als auch für die vielen Ratschläge möchte ich ihm 
meinen besten Dank aussprechen. 


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24* 


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Erklärung der Abbildungen auf Tafel XIV—XVI. 


Die Figuren von Taf. XIV sind mit 840facher Vergrösserung, von Taf. XV 
und XVI mit 1280 facher (Fig. 25 mit 840 facher) Vergrösserung und Taf. XVII 
mit 540facher (Fig. 273 mit 840 facher) Vergrösserung gezeichnet. 


Tafel XIV. 
Fig. 1—20. Stadien der topographischen Histologie. 


1—35. Stadium 1, 2 und 2a. 
Fig. 4-6. Stadium 3, 3a und 4. 
7—9. Stadium 5, 6 und 7. 
Fig. 10 und 11. Stadium 7a und 8. 
Fig. 12 und 13. Stadium 9 und 10. 
Fig. 14—16. Stadium 11, 11a und 12. 


Fig. 17—20. Fascikulation der übrigen Enten. 
Fig. 17. Cairina. 
Fig. 18 und 19. Aythya. 
Fig. 20. Lampronessa. 

Tafel XV. 
Sertolikerne. 

Fig. 23. Sertolikern von Lampronessa. 
Fig. 25. Sekretion von Plasmafäden des Sertolisyneytiums. 
Fig. 26. Sertolikern von Cairina. 
Fig. 29. Sertolikern in Berührung mit einem Spermiogonienkern. 
Fig. 27. Einschnürung des Sertolikernes. 


Spermiogonien. 
Fig. 30. Spermiogonien in der Ruhe. 
Fig. 31—39. Prophasen. 
Fig. 40. Degenerierende Prophase. 
Fig. 41. Spermiogonienplatte von der Seite gesehen. 
Fig. 42 und 43. Spermiogonienplatten von den Polen betrachtet. 
Fig. 44—49. Telophasen. 
Fig. 50—52. Junge Spermiogonie. 
Fig. 55. Degenerierende junge Spermiogonie. 
Fig. 54. Ruhende Spermiogonie vor der zweiten Teilung. 


Fig. 122. Anormal breite Spermiocytenplatte. 

Fig. 123. Anormal breite Spermiocytenplatte. 

Fig. 124. Nebenspindel. 

Fig. 125. Mehrpolige Spindel. 

Fig. 126—134. Telophasen. 

Fig. 135 und 136. Telophasen. 

Fig. 137. Präspermide in Synapsisform. 

Fig. 138 und 139. Verschwinden des Chromatins. 

Fig. 141—144. Prophasen der Präspermiden. 

Fig. 145. Anormale Prophasen der Präspermiden. 

Fig. 146. Präspermidenplatte von den Polen. 

Fig. 147 und 148. Präspermidenplatten von den Polen. 
Tafel XVI. 

Fig. 149. Präspermidenplatte von der Seite. 

Fig. 150—158. Telophasen. 

Fig. 159 und 160. Synapsis der Spermiden. 

Fig. 161 und 162. Verschwinden des Chromatins. 

Fig. 163—166. Chromatinarme Spermiden. 

Fig. 167—169. Kondensierung des Chromatins. 

Fig. 170. Riesenspermide. 

Fig. 171—182. Umbildung der Spermiden zu Prospermien. 

Fig. 183—195. Die Längsstreckung der Prospermien. 

Fig. 198—212. Weiterbildung der Prospermien zu homogenen Stäben. 


55. 
56. 


Karl Schöneberg: 


Einschnürung der Spermiogonien. 
Abschnürung. 


57—63. Prophasen der zweiten Teilung. 


64. 
65. 


Äquatorialplatten der zweiten Teilung von der Seite. 
Äquatorialplatten der zweiten Teilung von den Polen. 


66—69. Platten von den Polen. 
70—74. Telophasen der zweiten Teilung. 
75—77. Junge Spermiocyten. 


78. 
79. 


Spermiogonienähnliche Spermiocyte. 
Ausbildung der Synapsis. 


80—86. Dünnfädige Synapsis. 


87, 
91 


89 und 9%. Bukettstadien. 
und 92. Aufknäuelung. 


93—95. Dickfädige Knäuel. 


96 
98. 
99. 


und 97. Dünnfädige Knäuel. 
Chromatinarme Spermiocyte. 
Vermehrung der Chromatinsubstanz. 


. 100— 102. Spiremstadium. 
. 103—110. Prophasen. 
„4; 
. 112— 117. Spermiocytenplatten von den Polen. 
g. 118—121. Spermiocytenplatten von der ‚Seite. 


Anormale Prophase. 


Fig. 213—226. Ausbildung der Prospermien zu fertigen Spermien. 
Fig. 227. Reifung der Spermien. 
Fig. 228. Fertiges Spermium. 

Atypische Spermien. 
Fig. 229 und 233. Mehrköpfige Spermien. 
Fig. 230. Normales Spermium. 
Fig. 232. Degeneriertes Spermium. 
Fig. 234—238. Riesenspermium. 

Anormales Idiozom. 
Fig. 239 und 240. In den Spermiogonien. 
Fig. 241. Während der Spermiogonienmitose. 
Fig. 242—245. In der Synapsis. 
Fig. 246. Im lockeren Knäuel. 
Fig. 247 und 248. In den Spermiocytenmitosen. 
Fig. 249. In einer doppelkernigen Spermide. 
Fig. 250. In fertigen Spermien. 

Vorsamenbildung. 
Fig. 253—257. Prophase, Metaphase und Telophase der Präspermiogonien. 
Fig. 258. Einschnürung der Präspermiogonien. 
Fig. 259. Doppelkernige Präspermiogonie. 
Fig. 260. Degenerierende Präspermiogonienprophase. 
Fig. 261. Degenerierende Präspermiocytensynapsis. 
Fig. 262. Degenerierender lockerer Knäuel der Präspermiocyten. 
Fig. 263 und 264. Degenerierende Präspermiogonienplatte. 
Fig. 269—271. Degenerierende Prospermien. 
Fig. 273. Sezernierender Sertolikern. 
Fig. 272, 274—277. Degenerierende Spermien. 

Tafel XVII. 
Fig. 251— 277. Vorsamenbildung. 

Fig. 251. 1. Stadium (Erpel 69). 
Fig. 252. 2. Stadium (Erpel 696). 
Fig. 265. 3. Stadium (Erpel 698). 
Fig. 266. 4. Stadium (Erpel 701). 
Fig. 267. 5. Stadium (Erpel 699). 
Fig. 268. 6. Stadium (Erpel 700). 

Fig. 278—281. Mauser. 
Fig. 278. 1. Stadium. 
Fig. 279. 2. Stadium. 
Fig. 280. 3. Stadium. 
Fig. 281. 4. Stadium. 


Die Samenbildung bei den Enten. 369 


370 


Literarisch-kritische Rundschau. 
Mathematics and Mitosis. By Prof. Marcus Hartog. From the 
Biological Institute of University College, Cork. Mit 7 Textfiguren. 

There is nothing more harmful to the progress of science 
than the parcelling of its area into a series of watertight compart- 
ments, each labelled "a distinet science“, of which the doors are 
too often rusted up and immoveable. The reception of my own 
work on the cell-field has illustrated this evil. The reasoning 
therein was difficult to the biologist who has forgotten his elem- 
entary mathematics and physics: the physieists (to whom the work 
should appeal on many grounds) have no knowledge of ceytology; 
and, accustomed as they are to arrange for themselves the actual 
conditions of experiment, can hardly realise in what bonds we 
biologists labour, who must needs base our conclusions on the 
logical, quasi-historical synthesis of collecetions of fixed specimens 
into an inferred series of changes. On these grounds we most 
heartily welcome Dr. Geigel’s visit to our little domain of 
cytology ') and hope that he may continue his interest in our doings. 

Yet we cannot accept his reasoning as convineing, because 
his store of biological facts has been inadequate for his precise 
calceulations.. Huxley once said that mathematics is like a mill: 
the quality of the grist depends largely on that of the corn that 
is poured into the hopper. But, even before going into the facts, 
there are some important criticism, of method. Geigel has attempted 
to obtain the accuracy of an equation. In such complex case 
equations are quite out of the question: usually all that we can 
arrıve at is the statement that one factor is a ”function‘ of 
another, ”direct“ or ”inverse‘‘, as the case may be. Moreover 
Geigel’s precise equation is arrived at for a field about a single 
centre whereas the cell-field is essentially dicentric.e Thirdly, 
as I have shown, on the assumption of a centred action, we must 
assume that the chromosomes are of high ”permeability‘“ to the 
force; and his equations ignore this fact. What would be thought 
of an equation dealing with gravity in which account was taken 


!) Richard Geigel: Zur Mechanik der Kernteilung und der Be- 
fruchtung. Arch. f. mikr. Anat., Bd. LXXX, 1912, II. Abt. 


Literarisch-kritische Rundschau. an 


of the mass of the larger body only, in a field of more than 
one "heavy body‘? Or what would be the value of a diagram of 
the electrostatic field between two charged conductors at opposite 
ends of a lecture-table covered with apparatus of all kinds, if no 
account were taken of the presence of these heterogeneous para- 
phernalia, and of the lecture-table itself. 

Finally I may betray a weakness of our kind; and that is 
a panic fear of mathematic expressions, and in particular of those 
that contain the symbols ”d“, ”A“ & and the long ”|“. The 
school-mathematics that most of us have, alas! forgotten, never 
reached as far as the infinitesimal caleulus. It was only when, 
with the kind aid of a mathematical friend, I conquered my fears, 
that I was able to ascertain the meaning of Dr. Geigel’s 
equations and their bearing on the subject; and that after all 
the ”d’s" ”A’s“, & ”Ps‘“-did not, matter. 


I. 


We have just noted that the cell-field is dicentric, and that 
Geigel’s equations only deal with a force acting about a single 
centre. It might be thought by the uninitiated that this would 
vitiate his equations, and therefore his general conclusion. The 
equation goes, no doubt; but the general conclusion can be shown 
to hold also for a two-centred field that the chromosomes should 
advance, as Geigel supposes, with the axial ones in advance, 
and the peripheral ones lagging behind. This is susceptible 
of a very simple geometrical demonstration, for forces acting 
about centres, and obeying the Newtonian law: i.e. decreasing in 
intensity as the distance increases. We may suppose the space 
around either centre divided up by closed curves into a series 
of zones such that the attractive force is identical at every point 
of any given zone; of course the force is more intense in any 
given zone than on the zones outside it, and less than on the 
zones within and nearer the centre. Such zones we may call 
zones of equal attractive level, or to use the common technical term 
”equipotential zones“. In Figures 1, 2 will be seen the distribution 
of the equipotential zones in a field about two centres: whether 
they be unlike (Figure 1) or like (Figure 2), in either case the 
equator is neutral. It is obvious that on any transverse plane at 
right angles to the axis uniting the centres, a point nearer the 


u Literarisch-kritische Rundschau. 


axis lies in a zone at higher level of attractive force than one 
further from the axis; and consequently the attraction is greater 
the nearer we approach the axis. In other words it follows that 
the attraction or acceleration is greater on the axial chromosomes 
than on the peripheral ones, and that therefore the axial ones 


Fig. 1. 


should lead, the peripheral ones lag, on any hypothesis of centred 
forces; and that this is true whether the field be heteropolar or 
homopolar. Thus, without use of the caleulus we have obtained 
the same general result as Greigel, and that in a much more 
accurate form, since there is no attempt at impossible or uncertain 


Fig. 2. 


equalities; and an unjustifiable precision of statement is one of 
the worst forms of inaccuracy. 

We have now to consider whether the axial chromosomes do 
actually lead, as they should or theory, or lag, as Geigel 
supposes; we admit that if they lag, all theories of centred forces 


Literarisch-kritische Rundschau. 323 


must be abandoned. But if on the contrary the axial chromosomes 
lead during the discession to the poles while the peripheral ones 
lag, we may report, like the ecclesiastical censor in his report 
to the licenser of books, ”nihil obstat“. We therefore turn to 
the facts of cytology. When there are enough chromosomes 
present for some to lie axial to the others the axial ones do 
actually lead during discession, as demanded by theory 
(Figures 3, 4, 5). When the number is limited, so that all lie 


ie: Fig. 3. 


on the periphery, equidistant from the axis, they move onalevel, 
constituting a crown-like figure. Now the microscopist rarely 
draws a simple reproduction of what he sees in the optical plane 
of distincet vision at one single focus: he involuntarily aims at a 
perspective representation that will convey to his public the 


Fig. 4. 


impression of what he has synthetised from the observations 
obtained at successive planes by the use of the fine adjustment. 
Geigel’s!) Figures 2 and 3 of anaphases, which we reproduce 
here as Figures 6 and 7 represent such perspective diagrams, 
showing a crown of chromosomes all equidistant from the axis, 
which drawn in perspective, as shown by the lighter shading 
of the chromosomes on the far side, has the semblance of a curve 
with its concavity towards the nearer pole. It is this convention- 
Y‘) His Fig. 1 representing a late prophase with a symmetrical crown 


of chromosomes lateral to the ”Hermann’s spindle‘“‘ is rather fantastic than 
schematic. 


374 Literarisch-kritische Rundschau. 


alisation of the figures shown to Geigel by his cytological friend 
that have misled him; and neither the mathematician, who 
accepted what was presented to him, nor the eytologist, who was 
probably content to accept the equation as it stood as a final 
settlement of the matter by an expert whose judgment it would 
have been presumptuous to doubt, can be held blameworthy, but 
rather both must be excused for their good faith: Geigel’s in 
the diagrams, the eytologist’s in the equations. 

My own preparations are enough to show the "”lead“ of 
the axial chromosomes; but Iam a very poor draftsman. I there- 
fore reproduce copies of figures by Strasburger') and 
Vejdowsky?). 

Such figures are scarce in literature for two reasons: 
1. Cytologists naturally prefer such figures as are clear to decipher, 
and demonstrative for their purpose: and hence, as far as possible 
have illustrated the process of discession from cells with but a 
limited number of chromosomes, which consequently form a 
peripheral crown on the spindle. (In passing I may note that 
these show often each chromosome gliding along a single thread 
passing continuously from pole to pole along the curved line of 
force. In such cases there can be no question of ”pull“ or 
"push ‘‘: there are neither ” Zug-“ nor ” Druckfasern “?). The 
frequent separation of the centrosomes during the actual process 
of mitosis demands neither pull nor push, when once we have 


') Über den Teilungsvorgang der Zellkerne ete. Arch. mikr. Anat,, 
XXI (1882). 

?) Neue Untersuchungen über Reifung und Befruchtung, 1907, Fig. 123. 

3) The suggestion that some or all of the spindle-fibres exercise a 
push rests on two grounds. The first is the recession of the centrosomes 
during mitokinesis, which may be explained on other grounds; cytoplasmic 
traction, and the mutual repulsion in virtue of their like electric and osmotie 
charges, as we have seen: the second ground is the occasional observation 
that some of the achromatin threads of the spindle may be irregularly bent, 
or zigzag. This phenomenon is, I am convinced, due to the occasional failure 
of the threads to follow in their contraction the enormous contraction of 
the more solid peripheral parts of the cytoplasm in the processes of fixing, 
dehydration, and clearing..... We need badly a quantitative study of the 
shrinkage of histological specimens during the customary preparations. Even 
so careful an investigator as C. F.Meek in his measurements of chromo- 
somes and of spindles has this vital point inadequately investigated. 
(Quart. J. Mier. Sc., July 1913.) 


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Literarisch-kritische Rundschau. 375 


realised that they are the seats of like "charges in respect of 
electrieity and of osmosis.) 

” Anaphases “ — the stages of the discession of the chromo- 
somes from the equator — are relatively rare in our specimens 
in proportion to other stages of mitokinesis; and among, anaphases, 
the later stages are themselves rare. On the centred force 
hypotheses this scareity of these stages in our preparations is 
easy of explanation. For the attraction on the chromosome is 
a direct function of its proximity to the centrosome; and con- 
sequently its speed of translation should increase until it comes 
into actual contact therewith. Now in the case of intermittent 
observations of consecutive phases the chance of observation of 
a given phase is an inverse function of the speed which that 
phase oceupies. Thus, other things being equal, if as I write I look 
out of window occasionally for a moment, I am much more likely 
to see a slow cart than a swift automobile. When I first 
consulted that great electrician the late Professor W. E. Ayrton, 
about the interpretation of the cellfield, he suggested that the 
centred force hypothesis would be supported by any evidence 
that the chromosomes speeded up as they approached the centro- 
somes. I went away sorrowing, for I could not see how evidence 
on this point was to be obtained from our fixed specimens. It 
was not till long after that I saw that the scarcity of anaphases, 
and the still greater scareity of late anaphases, supplied just the 
very evidence desiderated. 

We are entitled to say that Geigel’s paper instead of 
refuting the centred-force hypotheses has, if anything, advanced 
their title to support. 

I. 

Geigel’s second thesis deals with the formation of the 
attractive eminence formed on the oosphere on the approach of 
the sperm. This grows out vertically underneath the sperm, and 
has the form of a mound with doubly curved sides, concave at 
the flanks, but with the tip rounded of into a blunted cone, like 
the top of a sugar-loaf. Geigel argues that if the formation be 
due to loss of surface-tension of the skin-layer of the oosphere 
induced by the approach of the sperm, the outline of the curve 
should be a simple convex curve. Geigel has assumed a direct 
physical effect, instead of a physiological response. 


376 Literarisch-kritische Rundschau. 


Now physiological response is not proportional to the physical 
value of the stimulus, but according to the Fechner-Weber 
statement (which is probably a simplification of the facts) it 
increases arithmetically as the stimulus increases geometrically. 
Moreover Geigel ignores altogether the consideration of the 
”threshold value“ (Schwellenwert) of a stimulus, below 
which minimum no response is evoked: ”de minimis non curat 
lex ‘“ viventium. According to (reigel the blunt elongated finger- 
shaped pseudopods of many Lobose Rhizopods are impossible: it 
does seem such a pity that Geigel’s interest in biological questions 
has not so far induced him to study them for himself. We feel 
this regret again, when he discusses the chemiotaxy of the sperms, 
in ignorance of the researches of H.S. Jennings,'!) who has 
shown so conclusively that most if not all cases of chemiotaxy 
are better expressed in terms of negative preferential avoidance 
than of positive preferential approach. Thus Paramecium 
moving in water rich in ÜO2 swim about indifferently so long as 
it is in this favoured region, but as soon as it passes away 
from it, it stops, reverses, turns and change sits direction of 
progress. As the sperms spread evenly in the medium we must 
suppose that they avoid one another. There is no need to postulate 
with Geigel a new physical force at work in the approach of 
the sperm to the oosphere, and the formation of the receptive 
hillock on the latter. 
Conclusions. 

(1) Geigel’s contention that in a field of centred force 
the axial chromosomes in discession should lead while 
the peripheral ones lag is correct. 

(2) This characterises the behaviour of actual chromosomes 
during anaphase. 

(3) His belief that this is not the case in the living cell 
is contrary to observed facts, and is based on an inadequate 
knowledge of the subject, and reliance on misleading 
diagrammatised figures. 

(4) The scareity of anaphases in fixed specimens is probably 
due to the speeding up of the chromosomes as they 
approach the poles: — it is a fact that tells in favour 
of centred-force hypotheses. 


1) Contributions to the study of Behavior in the Lower Organisms. 


Literarisch-kritische Rundschau. 311 

(5) Where the achromatie spindle contains only as many 
threads as there are chromosomes it is impossible to 
invoke ”"pull“ or ”push“, and the motion of the chromo- 
somes must be due to centred force acting along the 
lines of the spindle fibres. 

(6) The zigzag irregularities sometimes found in the spindle 
fibres, and often ascribed to "push‘ along them, is probably 
an artefact due to irregularity of contraction during 
histological preparation. 

(7) Geigel in his discussion on fertilisation has omitted to 
take into account the differences between physiological 
and purely physical response, as illustrated by the facts 
of the ”threshold“ minimum stimulus, and by the 
Fechner-Weber law. 

(S) In the interests of biology it is most desirable that 
competent physieists should study and discuss biological 
theories and hypotheses. 


Description of Figures. 


. 1. Distribution of equipotential zones (dotted) in an axial section of 


a homogeneous field about two equal centres of opposite sign: the 
continuous lines are the lines of force (after J. J. Thomson). 


g. 2. Distribution of equipotential zones in an axial section of a homo- 


geneous field about two centres of like sign. 


. 3 and 4. Anaphases in endosperm after Strasburger (Arch. m. A., 


t. 23); Fig. 3 Galanthus nivalis (t. 23, Figs. 52, 53); Fig. 4 
Lilium croceum (t. 23, Figs. 41, 42). 


'. 5. Anaphase in first maturation spindle of Rhynchelnis pallida, 


after Vejdowsky. 


. 6 and 7. Reproductions of Geigel’s Fig. 2, 3; perspective views of 


a two simple crowns of daughter chromosomes in anaphase, those 
on the far side being indicated by the lighter shading. 


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