“nn. nn | er ae, 
VTLETTTLET T $ hun 
. ii (\ 
tet 


7% 
rer 
er yr 
“ern dde .e. 
„erinnere unse ne 
TE 
„er nee. 
r N “en re 
RE BE DE EUREN P% 

N . 

a De Ze 


* 

nee 

a Ä E . 4 * vos + 
0 + s » e * 9 * Et, 
PA) * . s “or + * 

ve... H OHNE) ” - 
rn ons CR DR DE DR rn Ka 


. 
. 


“nr. 
rn “ch 
+ - NIIT 
“res rn 
seen 
tet et 
DEE EEE 
“hen 
urn“ 


“ [Z 

ee 

“arte N 
EHEN 
RE LT 


weinen, "ir 
..n . \ 


* 


“oe % 
“u.n.r% 
lt TEN, 
ERLERNEN 
use EN 


. van“ 
” ET 
in EEE. RAN 
EN ! 

need 


TE 
ee e 
NN 


. 


vs 
wenn. 
Sc 


» . 
„en an 
we 


De 
4 + “ 

Tor oe 
vr nn 


% » 


.'. 


I ” ‘ I» ” ' nr 


ee 


+ 

F A ” .. 

a 
EX 


.. 
BIER nen, L n s Den 
EN \ H ? 
nun 

van“ 


a ER 
a 
EEK UM 
wet 


“.. - 
Hr TIEF 
“ern 


n 
EN 
“en arny 


„wen nn 
“use 
HE 

“. “u.“ 

TIL T, 

“er ne „u... 


“rin. 
nee nnd“ ns 
“ihnen nn ee 


" „re. i 
entre “unse nen“ 
ei rer 


eek 


RR ; 
ASUS TE 
ET, 


ARCHIV 


für 


Mikroskopische Anatomie 


I. Abteilung 


für vergleichende und experimentelle 
Histologie und Entwicklungsgeschichte 


ll. Abteilung 
für Zeugungs- und Vererbungslehre 


herausgegeben 
von 


O. Hertwig und W. von Waldeyer-Hartz 


in Berlin 


Dreiundneunzigster Band 
I. Abteilung 
Mit 12 Tafeln und 25 Textfiguren 


BONN 
Verlag von Friedrich Cohen 
1920 


SUR Abteilung ae 
Br Erstes Heft. Kr ERKENNEN NE 
en Ausgegeben am 16. Mail 1910. | 


11. Die a a Agrio- 
* Von. E; Ballowitz, Münster i. W. Hierzu 


und 4 Texttiguren BEE LEEREN FREE 


vi 


Zweites und drittes Heft. 


ei a Korsch. Von Hans 
eim. ‚Aus dem Zoologischen. ‚Institut München, ii) 
AM und 3 Taglelten., TREE ERBE DR RELT, 


Viertes Heit. GE RR. ie 
Ausgegeben am 28, Februar 1920. NE RE 


g der Keimzellen des Grottenolmes (iotsus angui- 
IS). . Teil. Die Spermatogenese. Von »H.-Stiewe .- 
ipzig, Hierzu. an VI=XH und 16 Textfiguren 141 


Br Se 
ae 
Tees 


ee AT re a ET 


u a 2 m a He 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 


II. Die Spermien der Agrioniden. 
Von 


E. Ballowitz in Münster i. W. 


Hierzu Tafel I und 4 Textfiguren. 


Dem ersten Teil!) meiner Studien über den feineren Bau der 
Samenkörper der Libellen, welcher die Aeschniden behandelte, lasse 
ich jetzt den zweiten Teil, der die Agrioniden zum Gegenstande 
hat, folgen. 

Aus dieser Libellen-Familie berücksichtigte ich vorwiegend die 
beiden bei uns vorkommenden schön gefärbten Arten der Gattung 
Calopteryx, nämlich C. splendens Harr. und C. virgo L., von denen 
mir sehr zahlreiche frisch gefangene, lebende Exemplare zur Ver- 
fügung standen. Hauptsächlich untersuchte ich die reifen Spermien 
aus dem Hoden der Männchen, gelegentlich auch diejenigen des 
Receptaculums der Weibchen. Alle Tiere wurden erst kurz vor 
der Präparation getötet. | 

Zum Vergleich zog ich noch mehrere Spezies der artenreichen 
Gattung Agrion heran, von denen aber nur Agrion elegans Linden, 
A. speziosum Sharp und A. pulchellum Linden bestimmt wurden. 

Von Lestes viridis Linden gelangten nur im Herbst 1915 einige 
Exemplare in meine Hände. 

Die Samenkörper der beiden Arten von Calopteryx, welche ich 
zunächst beschreiben will, lassen sich kaum voneinander unter- 


1) E. Ballowitz, Ueber die Samenkörper der Libellen. I. Die Sper- 
mien und Spermiozeugmen der Aeschniden. Mit Taf. I und II und 8 Text- 


figuren. Archiv für mikroskopische Anatomie Bd. 90, Abteilung II, 1918. 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 1 


2 E. Ballowitz: 


scheiden; bei C. virgo L. sind sie nur eine Spur größer. Ihre Struktur 
ist bei beiden wesentlich anders als bei den Aeschniden, welche ich 
im ersten Teil dieser Abhandlungen beschrieben habe }). 

Zwar sind sie, wie diejenigen der Aeschniden, auch nur klein, 
Ihre Länge beträgt bei C. splendens Harr., an dem nicht gerade 
gestreckten, noch mit den Einbiegungen versehenen Körper ge- 
messen, 0,045—0,053 mm, wobei 0,01—0,013 mm auf den Kopf 
und 0,035 —0,045 mm auf die Geißel entfallen. In Fig. 1 b der Tafel ist 
ein Samenkörper von Calopteryx splendens Harr. in dem gleichen 
Größenverhältnis dargestellt, wie die Abbildungen der Tafeln in 
meinen älteren Abhandlungen über Insektenspermien ?). In Fig. 1a 
der Tafel ist derselbe Körper nach der Zeißschen homogenen Im- 
mersion 1,5 mm, Apert 1,30, Kompensations-Okular Nr. 12 etwa 3 mal 
so groß gezeichnet. Die Fig. 8—17 und 22—25 sind in etwas klei- 
nerem Maßstabe, als letztere, ausgeführt. 

Der wesentliche Unterschied liegt darin, daß die Calopteryx- 
Spermien einen auffällig spiraligen Aufbau besitzen, während bei 
den Aeschniden die Geißelfasern parallel nebeneinander liegen, 
worauf ich in meiner vorläufigen Mitteilung ?2) schon hingewiesen 
habe. Spiralig strukturierte Samenkörper sind bei den Insekten 
selten. Ich fand sie bis jetzt nur bei Panorpa ?) auf, allerdings von 
anderer Zusammensetzung als bei den Agrioniden. 

Dazu kommt, daß auch die Insertionsverhältnisse der Geißel 
am Kopf, dort, wo die Zentriolen (Zentralkörper) zu suchen sind, 
bemerkenswerte Eigentümlichkeiten aufweisen, so daß die Spermien 
der Agrioniden ein besonderes Interesse beanspruchen können. 

Kopf und Geißel, die beiden Hauptteile, aus denen sich der 
Samenkörper von Calopteryx zusammensetzt, sind spiralig gedreht. 
Am wenigsten fällt die spiralige Drehung an dem kleinen Kopfe 


2) Vgl. E. Ballowitz, Untersuchungen über die Struktur der 
Spermatozoen, zugleich ein Beitrag zur Lehre vom feineren Bau der kon- 
traktilen Elemente. Die Spermatozoen der Insekten. I. Coleopteren. Ztschr. 
f. wissensch. Zoologie, Bd. 50, 1890.— Derselbe, Die Doppelsperma- 
tozoen der Dytisciden. Ztschr. f. wissensch. Zoologie Bd. 60. 

3) E. Ballowitz, Spermiozeugmen bei Libellen. Mit 13 Text- 
figuren. Biologisches Zentralblatt, Bd. XXXVI, Nr. 5, 20. Mai 1916. 

4) E. Ballowitz, Ueber eigenartige, spiralig strukturierte Spermien 
mit apyrenem und eupyrenem Kopf bei Insekten. Arch. f. Zellforsch. 
Bd. XII, 1914. 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 3 


auf, der nur 1?/,flache Windungen zeigt (Fig. 1—5 der Tafel). Diese 
sind aber nur am ganz frischen Präparat stets vorhanden. Erweicht 
der Kopf durch Mazeration, so wird er oft geradlinig. Auch in 
Trockenpräparaten erscheint der Kopf meist geradegestreckt. 

Am vorderen Kopfende läßt sich ein kurzes, vergängliches, 
sich meist blaß färbendes Spitzenstück nachweisen (Fig. 1, 6, 7, 8, 
10, 17, 23 der Tafel). Wo sich dieses an den Kopf ansetzt, ist oft 
ein kleines, dunkel tingibles Pünktchen sichtbar. Vor dem letzteren 
kann an frischen Präparaten bei stärkster Vergrößerung noch eine 
kleine dunkle Stelle erkennbar werden. In den Mazerationen bleibt 
vom Spitzenstück oft nur eine kurze, feine, borstenartige Spitze 
übrig, die aber auch verschwinden kann. (Fig. 14, 16, 24 und 25 
der Tafel.) 

Der hintere Rand des Kopfes ist scharf abgesetzt und sieht 
etwas dunkler aus, besonders an mit Anilinfarben z. B. Gentiana- 
violett und Rosanilin, gefärbten Präparaten. Löst sich der Kopf 
auf, so tritt am hinteren Kopfrand bisweilen ein schmaler Ring 
sehr deutlich hervor, wie ich das öfter in mit Gentianaviolett ge- 
färbten Deckglastrockenpräparaten sah. Fig. 29 und 30 der Tafel 
sind nach solchen Präparaten gezeichnet und lassen den Ring außer- 
ordentlich scharf und deutlich erkennen. Es unterliegt wohl keinem 
Zweifel, daß der Ring der hinteren dunkleren Begrenzung des 
Kopfes entspricht. Ob er zu dem Kopfe selbst gehört, oder dem 
letzteren ursprünglich fremd und ihm nur fest angelagert ist, läßt 
sich schwer entscheiden. Ich werde darauf noch zurückkommen. 

An der Geißel konnte ich eine sehr eigenartige Struktur nachweisen. 

Zunächst ist auch sie spiralig eingebogen und läßt gewöhnlich 
im frischen Zustande 4—5 Windungen erkennen (Fig. I der Tafel), 
die breiter sind als die des Kopfes; die letzte ist gewöhnlich am 
breitesten. Es können aber noch mehr und kleinere Windungen vor- 
handen sein, auch kann sich die Geißel, besonders in Deckglas-Trocken- 
präparaten, mehr gerade strecken. Dies hängt jedenfalls mit den 
Kontraktions- bzw. Erschlaffungszuständen des Organes zusammen. 
Ich habe die Spermien des öfteren in lebhaftester Bewegung ge- 
sehen, die mich an diejenige der Singvögelspermien !) erinnerte. 

I) E. Ballowitz, Untersuchungen über die Struktur der Sper- 
matozoen, zugleich ein Beitrag zur Lehre vom Bau der kontraktilen Ele- 


mente. I. Teil. Die Spermatozoen der Vögel. Arch. f. mikroskopische Ana- 
tomie Bd. 32, 1888. 


7% 


E. Ballowitze 


\ \ 


A N e 


Sie äußerte sich in einer Iehnaft zitternd 


| 
\ 


rer 
rail 


rennen. 


Textfig. 1. } h Texttig. 2 


Wenn die Bewegung sich mehr verlangsamt, sieht | man 
Schlagen des hinteren Geißelendes. 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 5 


Die Calopteryx-Spermien sind für Mazeration sehr geeignet, 
da sie in Kochsalzlösungen unter dem Deckglas leicht zerfallen. 
Bei ihrer Kleinheit und da es leicht gelingt, zahlreiche Körper in 
von Verunreinigungen freien Präparaten zu erhalten, werden die 
Zerfallbilder sehr klar und übersichtlich, vgl. Fig. 10—17 der Tafel 
und die Textfig. 1—4. 


Zunächst löst sich 
von der Geißel in gan- 
zer Ausdehnung eine N. 
Spiralfaser ab (vgl. N 
eV undr1lxder / 
Tafel), welche sich \ / 
dunkel färbt und we- N 
sentlich dünner ist als 
der zurückbleibende \ / 
Geißelrest, welchen S [ 

letzteren ich als \ | 
Stammfaser bezeich- | 
nen will. Durch genaue RETL 
Einstellung ist leicht rt uf 
festzustellen (vgl. Fig. NS ARE 
10 und 11 der Tafel), | 
daß die Faser in der 
Tat spiralig um die 
Geißel herumgeht und 
nicht etwa in Windun- 
gen einseitig an der 
Geißel herabläuft, wie 
essonst allgemeiner bei 
Insektenspermien der 
Fall ist und bei Coleop- 
teren!) von mir be- 
schrieben wurde. Man 
erhält den Eindruck, 
daß nach Ablösung Textiig. 3, 
der Spiralfaser an der Stammfaser eine spiralige Furche erscheint, 
in welcher die Spiralfaser gelegen hat. In den Fig. 10, 


y1.c. 


6 2. BE Baldpwitze 


11 und 12 der Tafel tritt diese Spiralfurche der Stammfaser in der 
Zeichnung vielleicht etwas zu deutlich hervor. Auch in nicht zu 
stark mit Gentianaviolett gefärbten, in Canadabalsam eingeschlos- 
senen Deckglastrockenpräparaten, welche längere Zeit gelegen haben, 
ist die Spiralfaser deutlich und dunkler gefärbt, wie Fig. 17 der Tafel 
illustriert. Der übrige Teil der Geißel wird in diesen Trockenprä- 
paraten ganz hell, schwach tingiert, saumartig, so daß es aussieht, als 
ob ein heller Saum an der dunklen Spiralfaser herabliefe. Diese 
Trockenpräparate können daher zu Trugschlüssen Veranlassung 
geben und sind für die Beurtei- 
2 lung nicht maßgebend, in ihnen 
haben durch den Eintrocknungs- 
prozeß die feineren Reliefver- 
hältnisse gelitten. Hierüber kön- 
nen nur frische, mit Anilinfarben 
gut tingierte, feucht liegende 
Mazerationen bei stärkster Ver- 
größerung und genauester Ein- 
stellung sicheren Aufschluß ge- 
ben. Nach solchen Präparaten 
\ sind die Fig. 10. und 11 der Tafel 
gezeichnet, welche die spiralige 
Umwicklung auf das bestimm- 
teste beweisen. 

Präparate, in denen nur der 
R hintere Teil der Geißel in die 
\ beiden Fasern zerlegt ist, zeigen, 
{a | daß die Spiralfaser etwas länger 
IN ist, als die Stammfaser und 
\ allein das letzte feine Ende der 
\  Geißel bildet (Fig. 11 der Tafel); 
| ein eigentliches, scharf abgesetz- 
. tes Endstück ist aber bei Calop- 

Textfig. 4. teryx nicht vorhanden. 


Etwas schwerer, als die Spiralfaser, oft aber auch gleichzeitig 
mit ihr, trennen sich noch zwei feine Fädchen von der Geißel ab, 
die gleichmäßig dünn, aber feiner sind und sich auch ein wenig 
schwächer färben, als die Spiralfaser. Fig. 13—16 der Tafel und 
Textfig. 1—4. 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 7 


Ein oder beide Fädchen können dabei bald der Spiralfaser, 
bald der Stammfaser auf kleinere oder größere Strecken anhaften; 
Fig. 12 und 13 der Tafel und Textfig. 2. Bisweilen sieht es auch aus, 
als ob die Spiralfaser in 3 Fasern zerfiele, wenn die beiden Fädchen 
im Zusammenhang mit der ersteren geblieben sind. Vgl. Fig. 12 
der Tafel und Textfig. 1. Derartige Bilder haben mich seinerzeit 
veranlaßt, in meiner vorläufigen Mitteilung !) zu sagen, daß die 
Spiralfaser in 3 Fasern zerfiele. Nach Untersuchungen, besonders 
an Calopteryx virgo L., bin ich aber zu der Ueberzeugung gekommen, 
daß die beiden Fibrillen mehr selbständig sind und nicht lediglich 
durch Zerfall der Spiralfaser entstehen. Sie erinnern mich an zwei 
ähnlich selbständige, isoliert zur Ablösung kommende Fibrillen, 
welche ich früher ?2) an den Spermien des Wasserkäfers Hydrophilus 
beschrieben habe. 

Damit nicht genug, läßt sich auch an der Stammfaser noch 
ein weiterer Zerfall hervorrufen. Diese bleibt nach Ablösung der 
Spiralfaser und der beiden Fibrillen noch ziemlich dick und wird 
nach hinten allmählich dünner. An ihrer Oberfläche zeigt sie eine 
spiralige Drehung, so daß sie mich an einen sogenannten Ziegenheiner 
Stock erinnert. Sie zerlegt sich nun bei weiterem Fortschreiten 
der Mazeration in zwei gleichdicke Teilfasern, welche allem Anschein 
nach spiralig umeinander gedreht sind. Die Zerspaltung erfolgt 
am leichtesten und öftesten an dem hinteren Ende (Fig. 12 und 13 
der Tafel), kann sich aber auch auf die ganze Länge der Geißel 
erstrecken. Das letztere ist der Fall in den Textfig. 1—4. 

Alsdann trifft man an Stelle der Geißel fünf in ganzer Ausdeh- 
nung getrennte, nur vorne, dicht hinter dem Kopfe, noch zusammen- 
hängende Fasern an. Zwei davon sind am dicksten und gleichlang, 
das sind die beiden Hälften der Stammfaser, die übrigen bilden 
die Spiralfaser und die beiden Fibrillen, von denen die letzteren die 
dünnsten sind. Nicht selten stellte ich diesen Zerfall auch an völlig 
isolierten Geißeln, von welchen der Kopf abgefallen war, fest. Wie 
Fig. 15 der. Tafel und Textfig. 4 vorführen, sind die Fasern alsdann 
nur noch ganz vorne vereinigt. Die Spiralfaser und die beiden 
Fibrillen erscheinen dicht hinter dem vorderen Ende der Geißel 
besonders fest angeheftet. 


1 


ne 
LT 


8 E. Ballowitz: 


Nur sehr wenige Male habe ich noch einen weiteren Zerfall 
und zwar die Ablösung eines feinsten Fäserchens von der Spiral- 
faser oder einer der Fibrillen sicher wahrnehmen können, wie es 
in Fig. 14 der Tafel und Textfig. 1 zu sehen ist. Es wollte mir im 
übrigen bis jetzt nicht gelingen, trotz aller Bemühungen, noch 
eine weitere Zusammensetzung der Fasern zur Darstellung zu bringen. 
Nur an den noch relativ dicken Hälften der Stammfaser sah. ich 
nach langer Mazerationsdauer feine, hintereinander aufgereihte 
Körnchen, ähnlich, wie es an manchen Teilfasern bei Hydrophilus !) 
früher von mir abgebildet worden ist. 

Die Untersuchung hat also ergeben, daß die Geißel bei Calop- 
teryx sich aus 5 zum Teil differenten Fasern zusammensetzt, die 
in eigenartiger Weise spiralig umeinander gedreht sind. Spiralige 
Strukturen sind bei den Insektenspermien selten und bis jetzt nur, 
wie oben bereits erwähnt, bei Panorpa von mir beobachtet und be- 
schrieben worden ?). 

Wie in der Einleitung erwähnt, bieten die Insertionsverhält- 
nisse der Geißel am Kopf bei Calopteryx sehr bemerkenswerte 
Besonderheiten dar. 

Schon bei Untersuchung des ganz lebensfrischen Objektes 
mit stärkster Immersionsvergrößerung lassen sich ohne jede Färbung 
an dieser Stelle Einzelheiten wahrnehmen. 

Dicht hinter dem Kopf fällt alsdann ein heller glänzender 
punktartiger Fleck auf, der unscharf von der Nachbarschaft abge- 
grenzt ist. Fig. 1,2 und 3 der Tafel. Nach vorne stößt er an den 
hinteren Kopfrand. Dieser erscheint als dunkler Querschatten 
und wird bei gewisser mittlerer Einstellung jederseits zu einem 
dunklen Pünktchen, wie ich vermute, dem Querschnittsbild des 
oben beschriebenen Ringes am hinteren Kopfrande. Auch hinten 
wird der helle Punkt durch einen dunklen Querschatten abgegrenzt, 
der aber meist nicht so deutlich ist, als der vordere, bei gewisser 
mittlerer Einstellung aber auch in zwei seitliche Pünktchen über- 
gehen kann. Fig. 5, 19, 20 und 21 der Tafel. 

Färbt man mit Osmiumsäuredämpfen fixierte Spermien stark 
mit Gentianaviolett, so tingiert sich alles gleichmäßig intensiv, 


N 

2) Vgl. E. Ballowitz, Ueber eigenartige, spiralig strukturierte 
Spermien mit apyrenem und eupyrenem Kopf bei Insekten. Arch. f. Zell- 
forsch. Bd. XII, Heft I, 1914. 


077 Et a 
IR ee 
Sn 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 9 


und die Einzelheiten verschwinden. Auch in stark gefärbten Ma- 
zerationen wird die Gegend hinter dem Kopfe gleichmäßig dunkel. 
Läßt man aber die mit Gentianaviolett tingierten Spermien einige 
Tage unter dem Deckglase feucht liegen, wobei es gleichgültig ist, 
ob sie zuvor mit Osmiumsäuredämpfen fixiert waren oder nicht, 
so entfärbt sich der Kopf und wird ganz hell. Hinter dem Kopfe 
tritt dann eine kurze, schwach gefärbte Strecke hervor, welche sich 
von dem hellen Kopf und der intensiv tingierten Geißel scharf ab- 
hebt. Fig. 4 der Tafel. Die helle punktartige Stelle kann dabei noch 
mehr oder weniger sichtbar bleiben (Fig. 2 und 3 der Tafel) oder auch 
optisch verschwinden (Fig. 4 der Tafel). Von dem hellen Kopfe wird 
sie durch einen schwachen dunklen Querstreifen abgegrenzt, der 
seitlich in zwei dunkle Pünktchen übergehen kann. Auch von der 
dunklen Geißel setzt sich die Stelle durch einen querstreifartigen, 
scharfen vorderen Rand der Geißel ab. Das gleiche erkennt man, 
wenn sich der Kopf von der Geißel ablöst, was nicht selten ist und 
vor der hellen Strecke erfolgt. Die Fig. 18 und 19 der Tafel stellen die 
vorderen Enden isolierter Geißeln aus solchen Präparaten dar. 
Man erkennt an ihnen sehr deutlich eine kurze, helle, stiftartige 
Strecke, welche in der angegebenen Weise vorn und hinten begrenzt 
ist. Wenn der vordere dunkle Streifen dem oben beschriebenen 
Ringe entspricht, so bleibt der letztere mithin an der Geißel sitzen 
und stellt demnach wohl etwas Besonderes, dem Kopfe nicht Zuge- 
höriges dar. Auch an mit Gentianaviolett tingierten Deckelas- 
trockenpräparaten, welche längere Zeit in Canadabalsam gelegen 
hatten und etwas verblaßt waren, tritt die helle, verbindungsstück- 
artige Strecke oft sehr deutlich hervor. 

In Präparaten, welche, sei es mit oder ohne Fixierung durch 
Osmiumsäuredämpfe, mit Gentianaviolett gefärbt waren und längere 
Zeit (mehrere Wochen) unter dem Deckglase feucht gelegen hatten, 
bot diese Stelle oft noch ein anderes Aussehen dar. Sie erschien als- 


_ dann als kugeliger oder halbkugeliger, jedenfalls gegen den Kopf 


hin konvex vorspringender Körper, der ein wenig heller gefärbt 
war als die Geißel, sich aber deutlich von dem ganz .verblaßten 
hellen Kopfe abgrenzen ließ. Fig. 6, 7 und 9 der Tafel. Der Mitte 
der Konvexität saß dann ein intensiv gefärbtes, rundliches Körn- 
chen auf, das scharf hervortrat. Bei stärkerer Verblassung konnte 
dieses Körnchen auch nur allein intensiv gefärbt sichtbar sein, 
während der konvexe Körper verblaßt war. Fig. 8 der Tafel. Sehr 


10 E. Ballowitz: 


instruktiv wurden auch Präparate, wie sie in Fig. 20 und 21 der Tafel 
dargestellt sind, und ich sie in mit Gentianaviolett gefärbten Koch- 
salzmazerationen einige Male erhielt. Beide Figuren zeigen an den 
isolierten vorderen Geißelenden, von welchen der Kopf abgefallen 
ist, den konvexen Körper mit dem intensiv gefärbten Körnchen 
auf demselben. Zu beiden Seiten ragen gleich kurzen Fortsätzen bei 
mittlerer Einstellung zwei Pünktchen vor, welche ich mit dem etwas 
gequollenen, oben erwähnten Ringe in Zusammenhang bringen 
möchte. 

Man sieht, das Aussehen dieser Stelle ist in den Präparaten 
je nach der Behandlung verschieden. Damit nicht genug, kann sie sich 
noch in anderer Weise präsentieren, wie die Fig. 12, 24 und 25 der 
Tafel zeigen. 

In mit Gentianaviolett gefärbten Mazerationen fand ich nämlich, 
des öfteren, daß an dem hinteren Ende des abgelösten Kopfes ein 
halbkugeliger, blaßer, als der Kopf, tingierter Körper fest ansaß, 
der frei nach hinten vorragte. Lag die Geißel, von: welcher der 
Kopf sich abgelöst hatte, noch in der Nähe des Kopfes, so, zeigte 
sie an ihrem vorderen Ende eine deutliche Konkavität, in welche 
der rundliche Körper des isolierten Kopfes hineinpaßte. Fig. 12 
der Tafel. Bei näherem Hinsehen ließen viele isolierte Geißeln der 
Mazeration die gleiche Konkavität erkennen. Fig. 15 der Tafel. 
Andererseits fand ich einige Male, daß sich der ganze verbindungs- 
stückartige Abschnitt nicht allein vom Kopfe, sondern auch von 
der Stammfaser der Geißel abgelöst hatte, während nur noch die 
dünnen Fasern damit im Zusammenhang geblieben waren. In 
Fig. 12 hat sich die Stammfaser von dem Kopfe abgetrennt, während 
die Spiralfaser an ihm noch festsitzt und zwar neben dem erwähnten 
halbkugeligen, deutlich hervortretenden Körper. 

An isolierten, vom Kopf befreiten Geißeln, an welchen der 
oben beschriebene helle Fleck noch deutlich war, inserierte die los- 
gelöste Spiralfaser dicht hinter dem letzteren. 

Alle diese Befunde weisen auf eine Selbständigkeit und be- 
sondere Struktur dieses hinter dem Kopfe gelegenen Abschnittes 
hin. Es dürfte daher die Annahme gerechtfertigt sein, in ihnen eine 
Art Verbindungsstück zu sehen, in welchem auch die Centriolen 
bzw. ihre Derivate zu suchen sind. Für die letztere Annahme spre- 
chen auch Befunde, welche ich in Deckglastrockenpräparaten von 
wahrscheinlich noch nicht ganz ausgereiften Spermien von Calop- 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 11 


teryx (und auch Agrion) erhielt und welche in den Figuren 22, 23 
und 26—28 der Tafel dargestellt sind. Ich traf hier sehr häufig am 
Ende der Stammfaser und im Zusammenhang mit der dunkler 
gefärbten Spiralfaser ein intensiv tingibles, großes Endknöpfchen, 
welches wohl als Centriol zu deuten ist. In den Fig. 26—28 ist der 
noch unreife Kopf völlig aufgelöst, so daß die Geißel von ihm isoliert 
ist. Man erkennt das große Endknöpfchen, welches als schmales 
Quersegment erscheint. Die Spiralfaser inseriert seitlich an ihm, 
wie auch in den Fig. 22 und 23 ersichtlich, in welchen der dunkel 
gefärbte Kopf noch erhalten ist. 

Die Deutung der obigen Befunde ist bei der Mannigfaltigkeit 
der Bilder schwierig. Ich vermute, daß die am feuchten Präparat 
auffällige helle Stelle hinter dem Kopfe dem konvexen Körper 
entspricht und ein Centriol darstellt. Ein Centriol ist wahrschein- 
lich auch das oben beschriebene dunkle Pünktchen an der Vorder- 
fläche des konvexen Körpers. Das Nähere können nur eingehende 
spermiogenetische Untersuchungen aufklären. 

Dieser ganze Abschnitt hinter dem Kopfe mit den beschriebenen 
Einzelheiten hat Aehnlichkeit mit einem „Verbindungsstück‘“. 
Er ist kürzer als der entsprechende Abschnitt, den ich bei den Aesch- 
niden aufgefunden und beschrieben habe. Bei den letzteren waren 
die obigen Einzelheiten aber nicht nachweisbar. Daß es an den 
Spermien der Insekten bisher nicht gelungen war, etwas dem Ver- 
bindungsstück ähnliches und Zentralkörper an den reifen Spermien 
aufzufinden, ist im ersten Teil dieser Abhandlungen schon betont 
worden. Nur G. Retzius hat (l. c.) bei verschiedenen Insekten 
Gebilde angetroffen, welche ‚als Zentralkörper aufzufassen sein 
dürften.“ Ich hebe nochmals hervor, daß ich die Bezeichnung ‚‚Ver- 
bindungsstück‘ an den Spermien der Libellen nur auf Grund der 
äußeren Aehnlichkeit gewählt habe, womit aber nicht gesagt sein 
soll, daß dieser Abschnitt auch dem Verbindungsstück etwa der 
"Säugerspermien entspricht, darüber können nur eingehende ver- 
gleichende spermiogenetische Studien Aufschluß geben. 

G. Retzius?) ist auch der einzige Forscher, welcher die 
Samenkörper der Libellen mit starken Systemen genauer unter- 
sucht hat. Auf Tafel XXI des XIV. Bandes seiner „Biologischen 
Untersuchungen‘ bildet er in den Fig. I—5 Spermien von einer 
„kleinen Libellula‘“ ab, die aber jedenfalls irgendeiner Agrionart 

1) Biol. Unters. N. F. Bd. XIV (2), 1909. 


12 E. Ballowitz: 


entnommen sind. Darin werden dargestellt das Spitzenstück des 
Kopfes und die beiden Hauptfasern der Geißel, von denen die eine 
sich spiralig um die andere herumlegt und auch allein das hintere 
Ende der Geißel bildet. Am Ansatz des Schwanzes am Kopfe fand 
der Autor ‚einen sich dunkler färbenden Ring, der sogar die Andeu- 
tung zu einem Doppelring zeigt‘. Weiter in diese Strukturen ein- 
zudringen, ist Retzius nicht gelungen. 

Mit den Calopteryx-Spermien haben die Samenkörper der von 
mir untersuchten Arten der Gattung Agrion große Aehnlichkeit, 
nur sind sie noch mehr spiralig gedreht. Fig. 31 zeigt ein Spermium 
von Agrion elegans Linden nach Fixierung mit Osmiumdämpfen. 
Der Kopf weist 21,—3 sehr deutliche spiralige Windungen auf 
und besitzt ein kurzes blasses Spitzenstück, an dessen Basis sich, 
besonders bei schwacher Färbung mit Gentianaviolett, ein dunkles 
Pünktchen wahrnehmen läßt. Auch die Geißel ist in mehreren 
Spiralwindungen gedreht, kann sich aber auch gerade strecken; 
letzteres tritt besonders ein, wenn sich die Spiralfaser abgelöst hat. 
An dem sich fein zuschärfenden Geißelende läßt sich ein deutlich 
abgesetztes, auch durch Färbung unterscheidbares Endstück nicht 
erkennen, obwohl das letzte Ende der Geißel auch hier ausschließlich 
von der Spiralfaser gebildet wird. Nur an noch nicht ganz reifen 
Samenkörpern aus dem Hoden erschien das Ende schärfer abge- 
grenzt. 

Im übrigen ist die Struktur der Geißel die gleiche, wie bei 
Calopteryx: Spiralfaser, die beiden Fädchen und die Teilfasern der 
Stammfaser waren durch Mazeration darzustellen, wenn auch nicht 
‚so leicht und vollständig, wie bei Calopteryx. 


An der Stammfaser ist nach Ablösung der Spiralfaser die spiralige 


Furchung deutlich zu erkennen. Fig. 32 der Tafel. 

Nur an der Grenze zwischen Geißel und Kopf besteht ein Unter- 
schied darin, daß hier die oben von mir beschriebenen Einzelheiten 
nicht deutlich hervortreten. Nur bei ganz blasser Färbung der frischen 
Samenkörper mit Gentianaviolett färbt sich dicht hinter dem Kopf 
ein schmaler dunkler Querstreifen. Wahrscheinlich liegen auch 
hier ähnliche Verhältnisse, wie bei Calopteryx vor, doch habe ich 
diese‘ Gegend bei Agrion einer eingehenden Untersuchung nicht 
mehr unterziehen können. An den isolierten Geißeln nicht ganz 
reifer Spermien aus dem Hoden fällt ein intensiv färbbarer End- 
knopf auf. 


Een 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 13 


Von den obigen abweichend gestaltet fand ich die Spermien 
der Gattung Lestes, von welchen ich Lestes viridis Linden unter- 
suchte. Die Abweichung besteht hauptsächlich darin, daß die 
spiralige Struktur, die für Calopteryx und Agrion so charakteristisch 
ist, hier kaum angedeutet erscheint. Insbesondere ist der Kopf 
gerade und spitzt sich nach vorne etwas zu, um in einem bisweilen 
leicht knöpfchenartig verdickten kurzen Spitzenstück zu endigen. 
Auch hier ist am Grunde des Spitzenstückes ein dunkles Körnchen 
nachzuweisen. Die Geißel, welche 3—4 mal so lang als der Kopf 
ist, zerfällt leicht in zwei ungleich dicke Fasern, von denen die 
dünneren sich etwas dunkler mit Gentianaviolett färbt und in 
einigen lang ausgezogenen Windungen an der anderen Faser herab- 
läuft. Das äußerste Ende, welches sich, besonders an noch nicht 
ganz reifen Spermien, endstückartig absetzt, wird von der etwas 
längeren dünnen Faser allein gebildet. So komplizierte Strukturen 
wie bei Calopteryx konnten an der Vereinigungsstelle der Geißel 
mit dem Kopf von mir nicht erkannt werden; nur erschien das 
vorderste Ende der Geißel, besonders an noch nicht ganz reifen 
Körpern, mit einer endknopfartigen Verdickung versehen. Die 
Geißel ließ sich noch weiter in bis 4 Fasern zerlegen. Diese Befunde 
stimmen mit den Angaben und Abbildungen überein, welche G. 
Retzius a..a. O. von der von ihm untersuchten Spezies Lestes 
sponsa veröffentlicht hat. 


Tafelerklärung. 
Alle Figuren der Tafel (außer Fig. Ib), sind nach der Zeiß’schen homo- 

genen Immersion 1,5 mm, Apochr. 1,30, Komp.-Ok. 12, zum Teil in ziemlich 

demselben Größenverhältnis, wie die Figuren des ersten Teiles dieser Ab- 

handlung gezeichnet; nur die Fig. 8—17 und 22—25 sind etwas kleiner 

dargestellt. 

Fig. 1. Ganzes Spermium von Calopteryx splendens Linden frisch ohne 
Färbung’ in physiologischer Kochsalzlösung. 

Fig. 2—9. Spermienköpfe mit vorderem Geißelende; Fig. 2—7 von Ca- 
lopteryx splendens Linden, Fig. 8 u. 9 von Calopteryx virgo L. 
In Fig. 2—5 und 9 ist das Spitzenstück vom Kopfe abgefallen. 
Fig. 2—5 physiologische Kochsalzlösung. Gentianaviolett. Fig. 
6—9 aus Präparaten, welche nach Fixierung mit Osmiumsäure- 
dämpfen und nach Färbung mit Gentianaviolett längere Zeit feucht 
unter dem Deckglase gelegen hatten. 


14 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


Fig. 


E. Ballowitz: 


10—16. Aus Kochsalzmazerationen unter dem Deckglas nach Färbung 
mit Gentianaviolett. Zerfallbilder der Geißel. In Fig. 10 und 11 
hat sich die Spiralfaser von der Stammfaser abgelöst. In Fig. 12 
ist die isolierte Stammfaser am Kopfe abgebrochen und an ihrem 
Ende in ihre beiden Teilfasern zerlegt; ihr vorderes Ende erscheint 
deutlich ausgehöhlt. Mit dem Kopfe, an dessen hinterem Ende 
ein halbkugeliger Körper vorragt, hängt eine dünnere Faser (Spiral- 
faser) noch zusammen, von der sich hinten eine feine Faser ab- 
gelöst hat. In den Fig. 13, 14 und 16 sind Spiral- und Stammfaser 
völlig voneinander getrennt, außerdem aber noch 2 feinere Fäden 
abgelöst, von denen der eine in Fig. 17 in der unteren Hälfte in 
zwei gespalten ist. In Fig. 13 ist auch die Stammfaser in ihre beiden 
Teilhälften zerfallen. In Fig. 11—13 ist das Spitzenstück vom 
Kopfe abgelöst. In Fig. 14 und 16 ist davon nur noch ein Rest er- 
halten. In Fig. 15 ist die isolierte Geißel in die Stammfaser, Spiral- 
faser und die beiden gleichdünnen Fäden zerfallen, welche nur 
noch ganz vorne zusammenhängen. Fig. 10 von Calopteryx virgo 
L., Fig. 11—16 von Calopteryx splendens Linden. 


17. Ganzes Spermium von Calopteryx virgo L. aus einem mit Osmium- 
säure fixierten und, mit Gentianaviolett gefärbten Deckglastrocken- 
präparat, welches längere Zeit gelegen hatte. Von der Geißel ist 
nur noch die Spiralfaser dunkler gefärbt. 


18—21. Vordere Geißelenden von Calopteryx splendens Linden. Fig. 18 
und 19 nach Fixierung mit Osmiumsäuredämpfen und Färbung mit 
Gentianaviolett. Fig. 20 und 21 aus Kochsalzmazerationen nach 
Färbung mit Gentianaviolett. 


22 und 23. Spermienköpfe und vordere Geißelenden von Calopteryx 
splendens Linden, aus mit Gentianaviolett gefärbten Deckglas- 
trockenpräparaten. 


24. Der Kopf hat sich von dem vorderen Geißelende gelöst, so daß 
man am hinteren Ende den halbkugeligen Körper vorragen sieht; 
am vorderen Geißelende ist die Höhlung zur Aufnahme des halb- 
kugeligen Körpers deutlich. Calopteryx splendens Linden. 


25. Isolierter Spermienkopf von Calopteryx splendens Lindem, an 
dessen hinterem Ende der halbkugelige Körper sichtbar ist. Vom 
Spitzenstück nur noch ein Rest vorhanden. Wie Fig. 24 aus 
einem mit Gentianaviolett gefärbten Mazerationspräparat. 


26—28. Vordere Geißelenden noch nicht ausgereifter Spermien von 
Calopteryx splendens Linden. Nur die Spiralfaser ist dunkler ge- 
färbt und in Fig. 27 allein erhalten. Aus mit Gentianaviolett 
gefärbten Deckglastrockenpräparaten. 


29 und 30. Zwei Spermiumköpfe mit vorderem Geißelteil von Calop- 


teryx splendens Linden. Die Köpfe sind stark gequollen. An ihrem 
hinteren Rand erscheint ein intensiv gefärbter schmaler Ring. Aus 


Fig. 31. 


Fig. 32. 


Ueber die Samenkörper der Libellen. 15 


einem mit Gentianaviolett gefärbten Deckglastrockenpräparat, 
welches zwei Jahre gelegen hatte. 

Ganzes Spermium von Agrion elegans Linden. Physiologische 
Kochsalzlösung, Gentianaviolett. 

Vorderes Geißelende von Agrion elegans Linden. Die Spiralfaser 


hat sich von der Stammfaser abgelöst, so daß die spiralige Um- 
wicklung sehr deutlich ist. Kochsalzmazeration, Gentianaviolett. 


SR SR 


= oe aa] 


Aus dem Zoologischen Institut München. 


’ 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen 
über die Geschlechtsbestimmung bei Dinophilus 
apatris Korsch. 

Von 


Hans Nachtsheim. 


Hierzu Tafel II—V und 5 Textfiguren. 


Inhalt, 
Seite 
BE N NE a N ra 18 
Imeapezreiken..Keil: 
1. Herkunft des Materials, Zuchtmethoden, Technik ,. 233 
2. Das Männchen von Dinophilus apatris .... ... 30 
3. Das Weibchen von Dinophilus apatris. . ..... 37 
Zytologische Untersuchungen: 
4. Die Spermatogenese . . . . sl 
5. Die Ovogenese bis zur Differenzierung der Eier N AR 
6. Die Differenzierung der Eier, Besamung, Reifungs- 
sahimsen und’ Befruchtung: N Wr A 97 
7. Die ersten Furchungsteilungen BRENNER 
Experimentelle Untersuchungen: 
8. Das Geschlechtsverhältnis in den Normalkulturen . , 71 
9. Lebensgeschichte einzelner Weibchen ... . RTL 
10. Das Geschlechtsverhältnis in den Kältekulturen 94 
11. Das Geschlechtsverhältnis in den Wärmekulturen . 99 
12. Das Verhalten unbegattet gebliebener Weibchen . . 106 


ur Allsemeiner Teil: 
l. Der Modus der Geschlechtsbestimmung bei Dinophilus I11 
2. Die verwandtschaftlichen Beziehungen der Gattung Dino- 


philus im Lichte der vorstehenden Untersuchungen . . . 123 
IV. Schluß: Zusammenfassung der Resultate .„ 128 
V. Literaturverzeichnis N es, ES 
NIS e rel Ar umge el N ei, 187 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 2 


18 Hans Nachtsheim: 


Einleitung. 


Wie die Honigbiene von jeher das Schulbeispiel syngamer Ge- 
schlechtsbestimmung gewesen ist, so ist das klassische Beispiel pro- 
gamer Geschlechtsbestimmung Dinophilus. Im Jahre 1882 beschrieb 
Korschelt einen im Seewasseraquarium des Freiburger Zoo- 
logischen Instituts aufgefundenen Dinophilus — da die Heimat des 
Tieres unbekannt war, nannte er ihn Dinophilus apatris —, der einen 
ganz auffallenden Geschlechtsdimorphismus besitzt !). Bereits die 
Eier, die die Weibchen erzeugen, sind geschlechtlich differenziert. 
Die ‚weiblichen‘ Eier (0,111 mm in der Länge, 0,092 mm in der 
Dicke) sind wesentlich größer als die dotterarmen „männlichen“ 
Eier (0,042 mm in der Länge, 0,034 mm in der Dicke). Die Männchen, 
die sich aus den kleinen Eiern entwickeln, sind außerordentlich 
rudimentäre Wesen und haben nur eine kurze Lebensdauer. Wäh- 
rend die Weibchen eine Länge von 1,2 mm erreichen können, wachsen 
die Männchen überhaupt nicht. Ihr Darmtraktus ist vollständig 
rückgebildet, auch die Augen fehlen ihnen. Das einzige Organ, 
das voll entwickelt ist, ist der Geschlechtsapparat, Hoden und 
Penis. 

Der erste, der die Bildung der weiblichen und männlichen Eier 
von Dinophilus apatris verfolgte, war v. Malsen (1906). Die Be- 
fruchtung hat nach v. Malsen keinen Einfluß auf die Geschlechts- 
bestimmung. Schon die noch im Mutterleib befindliche Ovozyte 
gibt sich durch ihre Größe als weiblich oder männlich zu erkennen. 


1) Uebrigens gilt Korschelt nicht ganz mit Recht als der Entdecker 
des Geschlechtsdimorphismus bei Dinophilus. Dieser war — wie auch die 
Existenz zweier Sorten von Eiern — schon vorher Metschnikoff(1881) 
bekannt, der in seinen „Untersuchungen über Orthonectiden‘“ die ‚Auf- 
merksamkeit der künftigen Forscher‘ auf Dinophilus und seinen ausgespro- 
chenen sexuellen Dimorphismus gelenkt hat. Korschelt ist allerdings 
dieser Hinweis, wie er in seiner zusammenfassenden Darstellung (1837) aus- 
drücklich betont, erst nach Veröffentlichung seiner ersten Arbeit bekannt 
geworden. Auffällig ist, daß Metschnikoff, der nach einer bereits 
15 Jahre friiher (1866) getanen Aeußerung in Neapel oft Gelegenheit ge- 
funden hat, Dinophilus zu untersuchen, seine zumal für die damalige 
Zeit wichtige und interessante Entdeckung nur so nebenbei bekannt ge- 
geben hat. 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 19 


Die weiblichen und männlichen Ovozyten entstehen durch Verschmel- 
zung einer Anzahl Ovogonien, und zwar ist zur Entstehung eines 
weiblichen Eies wahrscheinlich eine größere Zahl von Ovogonien 
notwendig als zur Entstehung eines männlichen Eies. Die Zahl der 
Männcheneier verhielt sich in den Kulturen v. Malsens zu der 
Zahl der Weibcheneier wie I zu 2,4. Durch niedrige und hohe Tem- 
peraturen gelang es ihm, das Geschlechtsverhältnis zu verändern. 
In der Kälte beobachtete er eine Zunahme der relativen Zahl der 
weiblichen Geburten ($:9 = 1:3,5), in der Wärme stieg umge- 
kehrt die Zahl der männlichen Geburten ($:Q9 = 1:1,7). 

Ungefähr zur gleichen Zeit wie v. Malsen veröffentlichte 
Conklin (1906) einige Beobachtungen über die Geschlechts- 
differenzierung bei Dinophilus. Seine kurzen Angaben decken sich 
im wesentlichen mit denen v. Malsens, ergänzen sie sodann aber 
auch in einigen Punkten. Zell- und Kerngröße sowie Zell- und Kern- 
struktur aller Ovogonien sind gleich. Auch in Zahl und Größe ihrer 
Chromosomen (ungefähr 20) läßt sich kein Unterschied erkennen. 
Nach Ablauf der Ovogonienteilungen, und nachdem jede Zelle unge- 
fähr das Doppelte ihrer ursprünglichen Größe erreicht hat, beginnt 
die Verschmelzungsperiode. Ungefähr 25—30 Ovozyten sind not- 
wendig zur Bildung eines Weibcheneies, eine geringere Zahl liefert 
ein Männchenei. In jedem Ei bleibt ein Kern übrig, die andern 
werden aufgelöst. Die Reifungsteilungen verlaufen in Weibchen- 
und Männcheneiern in gleicher Weise. Alle Eier bilden zwei Rich- 
tungskörper. In der ersten Reifungsspindel zählt man 10 Chromo- 
somen, also die haploide Zahl. Hinsichtlich ihrer Größe ist weder 
in den weiblichen noch in den männlichen Eiern ein Unterschied 
zwischen den einzelnen Elementen nachweisbar. 

In ein neues Stadium trat das Problem der Geschlechtsbestim- 
mung bei Dinophilus durch die Untersuchungen von Shearer 
(1911, 1912). Bei Dinophilus gyrociliatus — eine mit Dinophilus 
apatris sehr nahe verwandte, wahrscheinlich sogar mit ihm iden- 
tische Spezies — werden nach Shearer die Weibchen bereits 
innerhalb des Kokons von den Männchen begattet, es findet also 
reine Inzucht statt. Die Männchen verlassen in der Regel die 
Kokons überhaupt nicht, sie gehen bald nach dem Ausschlüpfen 
der Weibchen zugrunde. Die von den jungen Weibchen bei der 
Begattung empfangenen Spermien liegen anfangs als dichter Ballen 


neben dem Ovar, das zunächst nur aus verhältnismäßig we- 
2* 


20 Hans Nachtsheim: 


nigen Ovogonien besteht. Sehr bald löst sich das Spermienpaket 
auf, die Samenfäden verteilen sich im ganzen Ovar und treten in 
nähere Beziehungen zu den Kernen der Ovogonien, d. h. jeder Ovo- 
gonienkern vereinigt sich mit einem in die Ovogonie eingedrungenen 
Spermakopf, jedoch findet keine Durchmischung der verschiede- 
nen Kernsubstanzen statt, beide bewahren ihre Individualität. 
Jeder Kern besteht nach der ‚Befruchtung‘ aus zwei Teilen, ‚each 
with its own nuclear wall, surrounded by one main nuclear membrane‘. 
Alle Spermatozoen, die nicht in Verbindung mit einem Ovogonien- 
kern treten, gehen zugrunde. Die Ovogonien vermehren sich nun- 
mehr rapide, alle Teilungen aber sind amitotisch. Jeder Kernbestand- 
teil, der mütterliche wie der väterliche, schnürt sich in gleicher Weise 
durch, so daß die Tochterzellen immer wieder die beiden Kernkompo- 
nenten erhalten. Neben der amitotischen Vermehrung erfolgen auch 
Verschmelzungen von Ovogonien. Hat die Ovogonie durch Auf- 
nahme anderer Ovogonien eine gewisse Größe erreicht, so findet die 
letzte Ovogonienteilung statt, durch die die Zellen zu Ovozyten erster 
Ordnung werden. Diese Teilung unterscheidet sich sehr wesentlich 
von den vorhergehenden. Auch sie ist zwar amitotisch, aber es wird 
dieses Mal nur der mütterliche Bestandteil des Kernes durchgeschnürt, 
der väterliche gelangt ungeteilt in die eine Tochterzelle. Die letzte 
Ovogonienteilung führt also zur Bildung von zwei verschieden- 
wertigen Ovozyten. Während die eine Ovozyte neben der Hälfte 
der mütterlichen Kernsubstanzen noch das gesamte väterliche Chro- 
matin empfängt, erhält die andere nur die Hälfte der mütterlichen 
Kernkomponente. Die Ovozyten mit beiden Kernsubstanzen 
liefern die großen Weibcheneier, die Ovozyten mitnur mütter- 
iicher Kernsubstanz die kleinen Männcheneier. Alle Ovogonien, 
in denen die ungleiche Kernteilung unterbleibt, degenerieren oder 
werden von den Ovozyten aufgenommen und resorbiert. Die letzte 
Ovogonienteilung ist geschlechtsbestimmend. Zwar 
werden alle Ovogonien befruchtet, aber nur die Weibcheneier erhal- 
ten Derivate vom Spermatozoon, die Männcheneier sind ‚‚unbe- 
fruchtet‘, sie entwickeln sich „parthenogenetisch“. Im Weibchen- 
ei bleibt der Kerndualismus auch weiterhin bestehen, erst vor den 
Reifungsteilungen durchmischen sich die mütterlichen und väter- 
lichen Substanzen und ergeben einen einheitlichen Kern. In Weib- 
chen- wie Männcheneiern fand Shearer in der Metaphase der 
ersten Reifungsteilung 20 Chromosomen, die diploide Zahl. Alle 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 21 


Eier bilden zwei Richtungskörper, der erste teilt sich nach der Ab- 
schnürung nochmals. In den Furchungsmitosen der Weibchen- und 
Männcheneier zählte Shearer wieder 20 Chromosomen. 

Während nach den früheren Untersuchungen die Geschlechts- 
bestimmung progam erfolgte, hätten wird also nach Shearer 
Dinophilus als einen besonderen Fall syngamer Geschlechtsbestim- 
mung zu betrachten. Befruchtung oder Nichtbefruchtung soll auch 
hier — wie bei der Honigbiene — über das Geschlecht entscheiden. 
Erhält die Ovozyte bei der letzten Ovogonienteilung den Abkömm- 
ling des Spermienkopfes, so wächst sie zu einem großen Weibchenei 
heran, erhält sie nur mütterliche Kernsubstanzen, so wird ein kleines 
dotterarmes Männchenei daraus. Die Verhältnisse würden also 
Aehnlichkeit mit denen aufweisen, die für die Rotatorien, wenigstens 
einen Teil von ihnen, charakteristisch sind. Auch hier regt die Be- 
fruchtung das Ei zu stärkerem Wachstum an. Aus dem Ei, das, 
wenn es unbefruchtet geblieben wäre, sich zu einem Männchen ent- 
wickelt hätte, entsteht unter dem Einfluß des Spermiums ein großes 
Dauerei, das immer ein Weibchen liefert. Diese Aehnlichkeit wäre 
insofern noch sehr bemerkenswert, als Dinophilus von mancher 
Seite — so auch von Shearer — in nächste Verwandtschaft mit 
den Rotatorien gebracht wird. Auch die rudimentäre Beschaffen- 
heit der Männchen ist ein Charakteristikum der Rotatorien sowohl 
wie des Dinophilus. Aber wenn auch zweifellos sehr vieles für eine 
nähere Verwandtschaft des Dinophilus mit den Rotatorien spricht — 
wir werden weiter unten auf die systematische Stellung des Dinophilus 
noch zu sprechen kommen —, so sind doch die Fortpflanzungs- 
‚erscheinungen, wenn wir die Darstellung Shearers gelten lassen, 
in sehr wesentlichen Punkten ganz anders als bei den Rotatorien. 
Es widerspricht allen bisherigen Erfahrungen über Fortpflanzung 
und Befruchtung, daß bereits Ovogonien befruchtet werden können, 
daß sie sich amitotisch vermehren, daß die letzte Ovogonienteilung 
atypisch ist usw. Auch die Angaben Shearers über den Rei- 
fungsprozeß der Eier sind sehr merkwürdig. Obwohl der Kern des 
Weibcheneies befruchtet ist, der Kern des Männcheneies nicht, 
sollen doch die Reifungsteilungen in beiden Eiern ganz in der gleichen 
Weise verlaufen, alle sollen mit der diploiden Chromosomenzahl 
in die Reifung eintreten, zwei Richtungskörper bilden und mit der 
diploiden Chromosomenzahl aus der Reifung hervorgehen. So ab- 
sonderliche Angaben wie die Shearers dürfen. nicht anders als 


22 Hans Nachtsheim: 


mit der größten Skepsis aufgenommen werden, und diese Skepsis 
steigert sich noch, wenn man seine Abbildungen betrachtet und mit 
der vielfach unklaren Darstellung vergleicht. Vergeblich sucht man 
z. B. nach Abbildungen, die als Beweis für eine amitotische Ver- 
mehrung der Ovogonien dienen können. Man wird auch nicht da- 
von überzeugt, daß die „männlichen Vorkerne‘ in den Ovogonien- 
kernen mit dem Sperma in genetischem Zusammenhang stehen; die 
Abbildungen, die Shearer gibt, legen vielmehr die Vermutung 
nahe, daß es lediglich komplizierte Nukleolarverhältnisse sind, die 
Shearer zur Beschreibung ‚‚mütterlicher“ und ‚‚väterlicher‘ 
Kernbestandteile veranlaßt haben. Man gewinnt also den Eindruck, 
daß Shearer seine Befunde gänzlich falsch gedeutet hat. 

Daß Shearers Darstellung der Geschlechtsbestimmung bei 
Dinophilus in der Tat auf nichts anderem beruht als auf einer voll- 
kommen falschen Deutung seiner Befunde, beweisen auch die kurzen 
Mitteilungen deBeauchamps (1910, 1912). Schon vor Shea- 
rer hatte dieser den Versuch gemacht, die Eier von Dinophilus par- 
thenogenetisch zur Entwicklung zu bringen, was ihm auch gelang. 
Er tötete in den Kokons die Männcheneier ab, erhielt so lediglich 
Weibchen, die unbegattet blieben, und ließ diese dann Eier legen. 
Sie erzeugten ebenso wie die begatteten Weibchen beide Sorten von 
Eiern, große und kleine, und aus den großen Eiern entstanden Weib- 
chen, aus den kleinen Männchen. Wäre der von Shearer beschrie- 
bene Modus der Geschlechtsbestimmung richtig, so Könnte ein un- 
begattet gebliebenes Dinophilus-Weibchen nur kleine Eier produzieren 
und hätte — ebenso wie die unbegattet gebliebene Bienenkönigin — 
eine ausschließlich männliche Nachkommenschaft. Hier aber zeigte, 
sich, daß die Befruchtung bei Dinophilus keinen Einfluß auf das 
Geschlecht hat. Veranlaßt durch die Veröffentlichungen Shea- 
rers hat de Beauchamp seine Experimente wiederholt und 
erweitert und kam zu den gleichen Resultaten. Dinophilus dauernd 
parthenogenetisch zu züchten, ist zwar nicht möglich — nur ein sehr 
geringer Prozentsatz der parthenogenetisch sich entwickelnden Eier 
führt zu normalen Individuen, und bei parthenogenetischer Weiter- 
zucht verringert sich dieser Prozentsatz von Generation zu Genera- 
tion —, aber jedenfalls erzeugen die unbegatteten Weibchen immer 
Weibchen- un d Männcheneier, und zwar in dem gleichen Verhältnis ' 
wie die begatteten. Auch deBeauchamp weist darauf hin, 
daß der ‚‚weibliche“ und der „männliche“ Vorkern Shearers 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 23 


nur verschiedene Nukleolenformen sind, die sich in den Keimzellen 
der unbegattet gebliebenen Weibchen ebenso finden wie in denen der 
begatteten. 

Durch diese Experimente und Beobachtungen de Beau- 
champs ist also die Unrichtigkeit der Angaben Shearers 
bewiesen. Trotzdem blieb manches noch unsicher und unklar. Da 
aber Dinophilus zweifellos einen von der Norm abweichenden Modus 
der Geschlechtsbestimmung besitzt und aus diesem Grunde beson- 
deres Interesse beanspruchen darf, so erschien eine erneute eingehende 
Untersuchung der mit der Geschlechtsbestimmung zusammen- 
hängenden Fragen sehr erwünscht. Die folgenden Untersuchungen 
dieser Art wurden bereits vor einer Reihe von Jahren begonnen, 
haben aber, wie so viele wissenschaftliche Arbeiten, durch den Krieg 
eine jähe und lange Unterbrechung erfahren. Als der Krieg ausbrach, 
waren die zytologischen Untersuchungen im großen und ganzen ab- 
geschlossen, die experimentellen aber standen gerade auf dem Höhe- 
punkt. Jetzt, da ich nach 4%, Jahren die Arbeit wieder aufnehmen 
kann, sind die Kulturen natürlich längst ausgestorben, und es fehlt 
vorläufig die Möglichkeit, vom Meere frisches Material in genügen- 
der Menge zu bekommen. So ist der experimentelle Teil leider nicht 
das geworden, was er werden sollte. Wenn ich ihn gleichwohl zusam- 
men mit den übrigen Untersuchungen veröffentliche, so geschieht 
‘es deshalb, weil ich glaube, aus meinen bisherigen Experimenten doch 
schon definitive Schlüsse ziehen zu können. Hoffentlich ist die Zeit 
nicht mehr fern, wo ein Aufenthalt am Meere den weiteren Ausbau 
der experimentellen Seite gestattet. 


Spezieller Teil. 


I. #Herkanft. des. Materials). :Zuchtmetho.den, 
Technik: 


Die erste Materialsendung erhielt ich von der Zoologischen Sta- 
tion in Triest. Die Tiere wollten aber nicht recht gedeihen, die Kultur 
ging mehr und mehr zurück und starb schließlich aus. Glücklicher- 
weise hatte ich aber unterdessen eine andere reiche Dinophilus- 
Quelle entdeckt: In einem großen Seewasserballon unseres Instituts, 
der als Reservoir für das früher in jedem Semester von der Adria 
bezogene Seewasser diente, fand sich eine prachtvolle Dinophilus- 
Kultur. Das Wasser wimmelte nur so von Dinophilus-Weibchen. 


24 ‘ Hans Nachtsheim:, 


Ich verteilte den ganzen Inhalt des Ballons auf eine Reihe Einmach- 
gläser mittlerer Größe, und alle Kulturen entwickelten sich vorzüg- 
lich. Nach kurzer Zeit säumte den Rand des Wasserspiegels in allen 
Gläsern ein mehrere Millimeter breiter weißer Streifen ein, bestehend 
aus Hunderten von Gelegen der Dinophilus-Weibchen — sie bevor- 
zugen den sogenannten Randwinkel; schon v. Malsen (1906) be- 
obachtete diese Vorliebe der Tiere, ihre Eier am äußersten Wasser- 
rande abzusetzen !) -—, und auch die Oberfläche war häufig dicht 
bedeckt mit Kokons. So war an Material kein Mangel. Die Fort- 
pflanzungstätigkeit blieb allerdings nicht dauernd so rege. Ohne 
daß die Kulturbedingungen wechselten, gingen die Kulturen zeit- 
weise sehr stark zurück, einige gingen ohne ersichtlichen Grund 


ganz ein, eine Beobachtung, die v. Malsenund Shearer gleich- 


falls gemacht haben. Immerhin waren bei Kriegsausbruch, mehr 
als ein Jahr nach Ansetzung der Kulturen, mehrere noch sehr indi- 
viduenreich, | ; Be) 

Die größte Mehrzahl der untersuchten und zu den Experimenten 
benutzten Tiere stammte aus diesen Kulturen. Außerdem habe ich 
noch in den Aquarien der Zoologischen Stationen in Triest und Ro- 
vigno Dinophilus gesammelt sowie in den Seewasseraquarien des 
Zoologischen Instituts in Freiburg. Alle Tiere erwiesen sich als einer 
Spezies angehörig, als Dinophilus apatris. Das Seewasser des Frei- 
burger Zoologischen Instituts, in dem ich Dinophilus fand, stammte 
ebenso wie das des Münchener Instituts aus der Adria, d.h. also, alle 
mir zur Verfügung stehenden Tiere waren von dort. Der bei Triest 
vorkommende Dinophilus ist von Stiasny (1910) als besondere 
Form, als Dinophilus apatris forma tergestina, beschrieben worden. 
Von dem Dinophilus apatris Korschelts unterscheidet sich die 
Triester Form durch die Art der Bewimperung des Kopfes. 
Während jener am Kopf zwei geschlossene Wimperringe besitzt, 
einen unmittelbar vor, den zweiten nahe hinter den Augen, sind bei 
der Triester Form nach Stiasnys Untersuchungen die beiden 


1) Da die Kulturen nur hin und wieder durchlüftet wurden, könnte 
man vermuten, daß Sauerstoffmangel die Weibchen an die Oberfläche des 
Wassers getrieben hat. Diese Vermutung ist indessen hinfällig, da die Tiere 
vom ersten Tage der Kultur an die Vorliebe für den Randwinkel zur Ablage 
ihrer Kokons zeigten. Mir ist es wahrscheinlich, daß die mechanischen Be- 
dingungen, die im Randwinkel herrschen, die Ablage der Eier erleichtern, 
und daß darauf die ‚Vorliebe‘ der Weibchen zurückzuführen ist (vgl. 
S. 40). 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 25 


ersten Wimperringe im Gegensatz zu den sechs Wimperringen des 
Rumpfes diskontinuierlich; sie sind auf der Dorsalseite unterbrochen. 


Bei allen von mir untersuchten Tieren waren die beiden Wimperringe 


des Kopfes so gestaltet, wiees Stiasn y angibt. Stiasn y meint, 
entweder habe Korschelt die Gestaltung der Wimperringe am 
Kopfe der ihm vorliegenden Form nicht genau genug beobachtet, 
oder der Triester Dinophilus sei eine besondere, dem Dinophilus 
apatris sehr nahe stehende Form. Stiasny hat sich in Anbetracht 
„der sonst so sorgfältigen Beobachtungsweises Korschelts“, 
wie gesagt, für die zweite Alternative entschieden. Ohne die zweifel- 
los vortreffliche Beobachtungsgabe Korschelts in Zweifel zie- 
hen zu wollen, möchte ich in diesem Falle doch eher an einen Beob- 
achtungsfehler glauben. Nicht nur bei Dinophilus apatris sind näm- 
lich die beiden ersten Wimperringe so gestaltet, wie es Stiasny 
beschreibt, sondern auch bei den nächst verwandten Formen Dino- 
. philus gyrociliatus und Dinophilus conklini. Mit Recht macht Ne. 
son (1907) auf die Schwierigkeit aufmerksam, den Verlauf der 
Wimperringe und die Anordnung der Cilien genau festzustellen. 
Wie naheliegend die irrige Beobachtung ist, beweist am besten 
die Tatsache, daß auch Dinophilus gyrociliatus und Dinophilus 
conklini zunächst falsch abgebildet wurden. Der Entdecker des 
Dinophilus gyrociliatus, ©. Schmidt (1857), geht auf die Ge- 
 stalt der „Flimmergürtel‘“ nicht näher ein; auch aus seiner Abbildung 
ist nicht ersichtlich, wie er sie gesehen hat. E. Meyer aber, der im 
ersten Teil seiner „Studien über den Körperbau der Anneliden‘“ 
(1887) ein Organisationsbild eines Weibchens von Dinophilus gyro- 
ciliatus gibt, zeichnet kontinuierliche Kopfwimperringe. Nelson 
(1904, 1907), der Dinophilus conklini beschrieben hat, bildete eben- 
falls in seiner ersten Arbeit die Kopfwimperringe falsch ab, was er 
in seiner zweiten Arbeit eigens bemerkt und berichtigt. 

Was die Verwandtschaft des Dinophilus apatris mit dem von 
Shearer zu seinen Untersuchungen benutzten Dinophilus gyrocilia- 
tus anbetrifft, so stehen sich beide Arten jedenfalls sehr nahe, ja es 
sind sich eigentlich alle neueren Untersucher darin einig, daß die bei- 
den Spezies sehr wahrscheinlich identisch sind. Dinophilus gyro- 
ciliatus wurde im Jahre 1857 von ©. Schmidt im alten Hafen 
von Neapel entdeckt und ist seither dort von verschiedenen Forschern 
studiert worden. In der letzten Zeit soll er allerdings dort verschwun- 
den sein. Shearer (1912) teilt mit, er habe ‚in den letzten 10 


26 Hans Nachtsheim: 


Jahren‘ im ‚‚Porto Vecchia‘ vergeblich nach ihm gesucht. Er führt 
das Verschwinden des Dinophilus auf die große Ausdehnung des Hafens 
und die dauernde Verunreinigung des Seewassers zurück (? — N.). 
Shearer sammelte sein Material bei Plymouth. Nach der syste- 
matischen Tabelle, die Nelson (1907) für die Gattung Dinophilus 
aufgestellt hat, sollen sich die beiden Arten besonders durch die Form 
des Kopfes unterscheiden. Während bei Dinophilus gyrociliatus der 
Kopf schmäler sein soll als das erste Rumpfsegment, soll er bei Dino- 
philus apatris breiter sein als irgend eines der Rumpfsegmente. 
Meiner Ansicht nach ist gar kein Unterschied vorhanden, wenn man 
gleich alte Tiere miteinander vergleicht. Das junge, eben aus- 
geschlüpfte Weibchen von Dinophilus gyrociliatus ist ebenso keu- - 
lenförmig gestaltet (Kopf dicker als die Rumpfsegmente) wie das von 
Dinophilus apatris (vgl. die Textfigur 4 in der Arbeit Shearers 
mit meiner Figur 1 auf Tafel II). Wächst das Weibchen heran und 
wird geschlechtsreif, so nimmt der Darm an Umfang zu, durch die 
Eier wird der Körper ebenfalls aufgetrieben, so daß die Gestalt des 
Weibchens schließlich mehr spindel- als keulenförmig ist, wenigstens 
dann, wenn sich das Tier in Bewegung befindet und der sehr kon- 
traktile Kopfabschnitt ausgestreckt ist; bei Dinophilus apatris ist das 
ebenso der Fall wie bei Dinophilus gyrociliatus (vgl. meine Figur 3 
auf Tafel II mit der Textfigur 1 der Arbeit Shearers), Wenn 
beide Arten identisch sind, so muß die Spezies Dinophilus gyrocilia- * 
tus heißen. Ich habe, obwohl ich von der Identität der beiden For- 
men überzeugt bin, doch die Bezeichnung Dinophilus apatris gewählt, 
weil sich die Frage endgültig erst durch einen direkten Ver- 
gleich der beiden Formen entscheiden läßt, der bisher nicht erfolgt 
ist, und weil überdies der Name apatris gerade im Zusammenhang 
mit der Geschlechtsbestimmungsfrage der bekanntere ist. Ob auch 
Dinophilus conklini mit den genannten synonym ist, wie Shearer 
vermutet, mag dahingestellt bleiben. Im übrigen werden wir noch 
im allgemeinen Teil auf die Systematik der Gattung Dinophilus zu 
sprechen kommen. 
Die Massenkulturen wurden, wie gesagt, in mittelgroßen Ein- 
machgläsern gehalten. Schon v. Malsen hebt die große Emp- 
findlichkeit’ der Tiere gegen Licht hervor; sie suchten stets die dun- 
kelste Stelle ihres Behälters auf. Auch ich machte diese Beobachtung 
und hielt die Kulturen deshalb in der Regel im Halbdunkel. Bringt 
man dann eine Kultur ins Helle, so sammeln sich die Tiere auf der 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 27 


dem Licht abgewandten Seite, und man kann leicht die heraus- 
fangen, die man braucht. Alle acht Tage etwa wurden die Kulturen 
einige Stunden durchlüftet, doch geschah das nicht regelmäßig mit 
allen Kulturen. Notwendig war die Durchlüftung offenbar 
nicht. Gefüttert wurden die Tiere in derselben Weise, wieesv. Mal- 
sen tat, mit Muschelfleisch. Fußmuskulatur von Anodonta wurde 
in kleine Stücke zerschnitten, diese wurden mit Seewasser durch- 
tränkt und auf die Gläser verteilt. An den faulenden Stückchen 
war immer ein reges Gewimmel, und der Darm der Tiere war reich- 
lich mit Bakterienmassen gefüllt. Dinophilus liebt überhaupt fau- 
lende Substanzen, daher auch seine Vorliebe für das schmutzige 
Hafenwasser. Zeitweise fütterte ich die Tiere auch mit dem han- 
delsüblichen Fischfutter, mit Piscidin, Fray Bentos oder ähnlichem. 
Auch dieses nahmen sie, wenn es aufgeweicht und angefault war, 
sehr gern. 

Zu seinen Wärme- und Kälteversuchen benutzte v. Malsen 
8 cm hohe rechteckige Gläser, deren Oeffnung der Größe eines Ob- 
jektträgers entsprach. Wurde das bis zum Rande mit Wasser ge- 
füllte Gefäß vermittels dicken Vaselines durch einen Objektträger 
fest verschlossen, so konnte das Glas auf die Seite unter das Mikro- 
skop gelegt werden, um die an den Wänden abgelegten Eier ‚mit leid- 
licher Genauigkeit‘ zu zählen. Auch ich verwandte anfangs zu mei- 
nen Temperaturversuchen ähnliche Gläser. Es stellte sich aber 
bald heraus, daß die Zählungen viel zu ungenau sind, um einwand- 
freie Resultate zu liefern. Abgesehen davon, daß Massenkulturen 
überhaupt wenig geeignet sind, um eventuelle Veränderungen des 
Geschlechtsverhältnisses infolge Temperaturwechsels zu beobachten, 
ist es auch bei der durch v. Malsen angegebenen Methode garnicht 
möglich, die Zahl der Männcheneier auch nur annähernd richtig 
festzustellen. „Um die männlichen sicher erkennen zu können‘, 
sagt v. Malsen selbst, „ist es unbedingt notwendig, das Gelege 
nach allen Seiten hin zu drehen. Da nämlich die weiblichen Eier 
durch die darüber liegenden durchsichtigen, männlichen hindurch- 
scheinen, werden letztere leicht übersehen.‘ Ist es nicht möglich, 
die Kokons zu drehen — durch das Loslösen und Drehen der Kokons 
leiden sehr leicht die Eier bzw. Embryonen —, so muß man sie 
wenigstens mit hinreichend starker Vergrößerung durchmustern 
können. Aus allen diesen Gründen ging ich sehr bald dazu über, die 
Tiere einzeln zu züchten. Auch v. Malsen machte Versuche, ein- 


28 Hans Nachtsheim: 


zelne Weibchen in Uhrschälchen zu züchten, erzielte aber, wie er 
sagt, ‚‚mit solchen Einzelkulturen keine Erfolge. Die Tiere starben 
stets sehr bald. Aus diesem Grunde ist es mir leider auch nicht mög- 
lich, die Zahl der von einem Weibchen in einer bestimmten Zeit und 
in den verschiedenen Temperaturen abgelegten Eier genau anzu- 
geben.“ Es ist mir nicht recht verständlich, daß die Versuche 
v.Malsens so gänzlich negativ ausgefallen sind. Der Wert seiner 
Experimente wird durch diesen Verzicht auf Einzelkulturen jeden- 
falls stark beeinträchtigt. Ich selbst habe meine experimentellen 
Untersuchungen größtenteils an Einzelkulturen durchgeführt und 
kann nicht sagen, daß sich mir besondere Schwierigkeiten in den 
Weg gestellt hätten. Man kann die Tiere in ganz wenig Wasser hal- 
ten. Das einzige, was man verhindern muß, ist das Ueberhand- 
nehmen von Bakterien und Pilzen. Ich habe deshalb in den Einzel- 
kulturen das Wasser jeden dritten Tag gewechselt, wenigstens in 
den bei Zimmertemperatur gehaltenen Kulturen. In den Kälte- 
kulturen ist der Wasserwechsel nicht so oft notwendig. Nur die 
Wärmekulturen machen wirkliche Schwierigkeiten. Hier muß man 
das Wasser täglich wechseln, und selbst dann ist die übermäßige 
Vermehrung der Bakterien und Pilze oft kaum hintanzuhalten. 
Dazu kommt noch, daß die Tiere unter der hohen Temperatur sehr 
leiden und leicht absterben. Bei Zimmertemperatur und in der Kälte 


indessen habe ich Weibchen monatelang in Einzelkultur gezüchtet, 


vom Ausschlüpfen aus dem Kokon bis zur Ablage des letzten Ko- 
kons und zum schließlichen Alterstod, und habe auf diese Weise 
mehrere aufeinanderfolgende Generationen verfolgt. Als Kultur- 
gefäße wurden keine Uhrschälchen genommen, sondern sogenannte 
Boveri-Schalen, Glasschalen mit geschliffenem Boden, unten 31%, cm, 
am oberen Rande 7% cm im Durchmesser und 2 cm hoch. Der obere 
Rand war ebenfalls geschliffen, durch eine aufgeschliffene zweite 
Schale oder eine Glasplatte wurde die Schale bedeckt. Da die Scha- 
en nur wenig Wasser enthielten, konnten die Kulturen unter dem 
Mikroskop rasch durchsucht und auch auf dem Boden abgesetzte 


Kokons — meist wurden sie auch in diesen Einzelkulturen im 
Randwinkel angebracht — mit starker Vergrößerung durchmustert 
werden. 


Es bleibt 'noch übrig, einiges über die bei den zytologischen 


Untersuchungen angewandte Technik zu sagen. Von Fixierungs- 
flüssigkeiten wurden probiert Sublimat-Eisessig, Gilsons Gemisch 


ae 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 29 


in der Modifikation von Petrunkewitsch, Pikrinessigsäure, Bouins 


Gemisch sowie Flemmings Gemisch in verschiedenen Modifikationen. 
Die besten Resultate lieferten Sublimat-Eisessig sowie Petrunke- 
witschs Gemisch. Bei Fixierung mit den Flemmingschen Gemischen 
ließen sich die mit Dotter beladenen Weibcheneier meist schlecht 
schneiden; sie zeigten die Tendenz zu zerreißen und zu. zerbröckeln. 
Am wenigsten geeignet erwies sich Pikrinessigsäure. Die gleiche Er- 
fahrung machten Nelson und Shearer. v. Malsen hingegen 
gibt an, mit Pikrinessigsäure gute Resultate erzielt zu haben. Seine 
Abbildungen freilich sprechen nicht für eine befriedigende Fixierung 
seines Materials. 

Die 5 u dicken Schnitte wurden gefärbt mit Heidenhains Eisen- 
hämatoxylin und Eosin. Dabei erwies es sich als zweckmäßig, statt 
mit Eisenalaun mit salzsaurem 70%igem Alkohol zu differenzieren. 
Bei Eisenalaun-Differenzierung blieben die Dotterschollen in den 
Weibcheneiern vollständig schwarz, was häufig beim Studium der 
Kernstrukturen sehr hinderlich war. Bei Salzsäurealkohol-Differen- 
zierung hingegen gaben die Dotterschollen den Farbstoff sehr rasch 
ab, während die Kernsubstanzen sich langsamer enttärbten. Als Kon- 
 trollfärbungen und zum speziellen Studium der Nukleolenverhältnisse 
wurden benutzt: Safranin-Lichtgrün, Delafields Hämatoxylin- 
Eosin, Ehrlichs Hämatoxylin-Eosin, die Zimmermannsche ( Jod- 
grün-Fuchsin), die Obstsche (Boraxkarmin total — Methylgrün) 
Nukleolenfärbung sowie das sogenannte Triacidgemisch, die Ehrlich- 
Biondi-Heidenhainsche Farblösung. Neben der Untersuchung von 
Schnittpräparaten war auch das Studium von Totalpräparaten sehr 
erfolgreich. An mit Boraxkarmin gefärbten Totalpräparaten konnte 
die ganze Eireifung sehr gut verfolgt werden. Auch gleichzeitige 
Fixierung und Färbung der Tiere und Kokons mit Schneiders Essig- 
säurekarmin führte zu befriedigenden Resultaten. Bei der Herstel- 
lung der Totalpräparate wurde eine ebenso einfache wie zweckmäßige 
Methode angewandt. Ließ man ein Deckgläschen auf die an der 
Wasseroberfläche in großer Zahl schwimmenden Kokons fallen, 
so hafteten diese am Deckgläschen, und meist blieb beim Abheben 
auch eine größere Zahl der zwischen den Kokons umherkriechenden 
Weibchen daran hängen. Auf diese Weise konnte auch reiches Ma- 
terial zur Feststellung des Geschlechtsverhältnisses in den Massen- 
kulturen gewonnen werden. 


30 Hans Nachtsheim: 


2. Das Männchen von Dinophilus apatris. 


Die Männchen von Dinophilus apatris (Tafel II Fig. 1 und 2) 
sind, wie schon Korschelt (1882) beschrieben hat, mikrosko- 
pisch kleine, außerordentlich rudimentäre Wesen von infusorien- 
artigem Aussehen. Während die Weibchen bis zum geschlechts- 
reiten Zustand ungefähr das Fünffache ihrer ursprünglichen Größe 
erreichen — die geschlechtsreifen Weibchen sind durchschnittlich 
1%, mm lang —, wachsen die Männchen überhaupt nicht, sie werden 
nicht größer, als die kleinen Eier sind, aus denen sie sich entwickeln, 
deren Längsdurchmesser nur etwa !/,,; mm beträgt. Solange die 
Männchen noch von der Eihülle umschlossen sind, haben sie eine 
annähernd rundliche Gestalt. Wenn die Eihülle durchbrochen ist, 
nehmen sie eine mehr gestreckte Form an, doch bleiben sie zeit ihres 
Lebens sehr metabolisch. Das Hinterende ist etwas breiter als’ das 
Vorderende, in der Mitte ist eine schwache Einschnürung bemerkbar. 
Bauchseite und Vorderende der Männchen sind bewimpert. Die Be- 
wimperung der Bauchseite wird gebildet durch zahlreiche kurze, 
gleichmäßig verteilte Zilien, die Wimpern am Vorderende haben 
verschiedene Größe und sind größtenteils länger und kräftiger als die 
der Bauchseite. Die kräftigsten Wimpern sind in der Form eines 
Ringes angecrdnet, der wohl dem ersten Kopfwimperringe des Weib- 
chens entspricht und ebenso wie dieser diskontinuierlich ist; beide 
sind auf der Dorsalseite unterbrochen (Fig. 2 und 3). Ist schon die 
genaue Feststellung der Anordnung der Wimpern beim Weibchen 
schwierig, so erst recht bei dem viel kleineren, glashellen Männchen. 
Bisher ist der Wimperring des Männchens immer als einfacher, voll- 
ständig geschlossener Ring beschrieben worden. Er ist indessen, 
wie gesagt, auch hier unterbrochen. Beim Weibchen liegen die En- 
den des ‚Ringes“ auf der Dorsalseite zwischen den Augen, beim 
Männchen, das keine Augen besitzt, hat der Wimperring die Form 
einer in der ersten Windung abgebrochenen Spirale. Aehnlich wie 
beim Weibchen steht auch beim Männchen vor dem ersten Wimper- 
ring noch eine Anzahl teils kleiner, teils längerer Wimpern, doch 
fehlen die für das Weibchen charakteristischen Tasthaare. Die Zahl 
der Wimpern am Vorderende des Männchens variiert übrigens augen- 
scheinlich, denn bisweilen erscheint die ganze Partie vor dem Wim- 
perring mit Cilien besetzt; die gleiche Beobachtung machte Shearer. 

Die innere Anatomie des Dinophilus-Männchens ist sehr einfach. 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 31 


Der Darmkanal fehlt vollständig, ebenso fehlen die Augen und son- 
stigen Sinnesorgane. Auch Exkretionsorgane sind nicht bekannt. 
Das Männchen ist eigentlich nichts weiter als ein muskulöser Sack 
mit Geschlechtsapparat. Der Bau des Geschlechtsapparates ist bei 
der Kleinheit und Durchsichtigkeit des Tierchens nicht leicht zu er- 
mitteln. Beim lebenden Tier sieht man in der Mitte eine große, glas- 
helle Blase, die den Hoden darstellt, richtiger die Hoden, denn 
wenn man das Tier etwas preßt, erkennt man zwei ovale oder boh- 
nenförmige Gebilde, die den größten Teil des Leibes einnehmen, 
oben zusammenstoßen und mit Spermien dicht gefüllt sind. Bisher 
ist der Hoden meist als unpaares Organ beschrieben worden, zuerst 
von Metschnikoff (1881), der „im Innern nur ein einziges 
stark auffallendes Organ, einen geräumigen Hodensack“ gesehen hat. 
Korschelt (1832) hat den Hoden nicht erkannt; das, was er als 
„helle Bläschen (Mutterzellen der Spermatozoen ?)‘“ bezeichnet, hat, 
wie wir gleich sehen werden, mit dem Hoden nichts zu tun. Ueber- 
dies enthält der Hoden des voll entwickelten Männchens nur fertige 
Spermatozoen, keine Spermatozyten oder gar Spermatogonien. R e- 
piachoff (1886) machte die gleiche Beobachtung wie Metsch- 
nikoff und bildet den Hoden auch als einheitliches, rundliches 
Organ ab. Am genauesten hat Prowazek (1900) die Ana- 
tomie des Männchens studiert, aber auch er beschreibt den Hoden 
als unpaares Gebilde und gibt eine entsprechende Abbildung. N el- 
son (1907), der überhaupt nur ein einziges männliches Individuum 
beobachtete, lehnt sich in seiner Beschreibung und Abbildung ganz 
anKorscheltan. Shearer (1912) ist der erste, der die männ- 
liche Keimdrüse als paariges Organ erkannt hat. Allerdings sind die 
von ihm als Hoden dargestellten Teile, wenn ich sie mit meinen Beob- 
achtungen vergleiche, in seinen Abbildungen viel zu klein gezeichnet. 
Wie umfangreich die Hoden sind, ist am besten aus Schnitten durch 
Männchen oder männliche Embryonen ersichtlich (Fig. 6—11 Ta- 
fel III). Sie füllen den größten Teil des Körperinnern aus. Eine 
scharfe Trennung der beiden Hoden ist an den Schnitten nicht fest- 
stellbar. Offenbar ist die Wand der Hodensäcke außerordentlich 
fein und dünn. Auch beim lebenden Tier schmiegen sich die beiden 
Hoden dicht aneinander, und nur nach schwachem Druck tritt jeder 
als scharf umgrenztes Gebilde deutlich hervor. So ist es verständ- 
lich, daß sie meist als unpaar beobachtet wurden. 

Deutlicher als die Keimdrüse läßt sich der Penis erkennen 


32 Hans Nachtsheim: 


(Fig. 2). Er ist ein konischer, muskulöser Körper, der in einer Tasche 
am Hinterende liegt, einer Einstülpung der Körperwand. Durch einen 
feinen Kanal, durch den der Penis vorgeschoben zu werden vermag, 
öffnet sich die Tasche nach außen. Betrachtet man den Penis des 
lebenden Tieres bei stärkster Vergrößerung, so hat man den Eindruck, 
als sei er kanelliert oder gerillt. Schon Repiachoff hat diese 
Struktur bemerkt und dargestellt, auch die späteren Untersucher 
beobachteten sie. Wie zuerst Prowazek fand, handelt es sich 
indessen nicht um eine Oberflächenstruktur, sondern die scheinbare 
Kanellierung ist zurückzuführen auf stäbchenförmige Einlagerungen 
im Penis. Auf Schnitten (Fig. 8—10) lassen sich diese Elemente, 
die wahrscheinlich von fester Konsistenz sind und zur Versteifung 
des Penis dienen, am besten nachweisen. Was die Verbindung des 
Penis mit dem Hoden anbetrifft, so ist diese außerordentlich schwer 
nachzuweisen. Nach Korschelt ist der Penis in seiner Längs- 
achse von einem Kanal durchbohrt, der sich nach dem Leibesraum 
zu erweitert, wie er aber weiter verläuft, konnte Korschelt 
nicht mit Bestimmtheit erkennen. Daß der Penis hohl ist, sah ich 
ebenfalls — am lebenden Tier besser als am konservierten und auf 
Schnitten —, aber ich suchte vergeblich nach der Verlängerung des 
Kanales nach dem Leibesraum, die ja irgendwie von den Hoden her 
zu dem Begattungsglied führen müßte. Eine Leibeshöhle, in 
die die Samenfäden hineinfallen könnten, ist nicht vorhanden. Nach 
meiner Ansicht ist der Penis an seiner Basis nicht von einem Kanal 
durchbrochen. Ich glaube indessen bemerkt zu haben (Fig. 2), daß 
von den Hoden her feine Kanäle in die Tasche oder Penisscheide 
führen. Die Verhältnisse sind aber, wie nochmals betont sei, bei der 
Kleinheit des Objektes und der Zartheit der Gewebe so außerordent- 
lich schwer mit Sicherheit zu beobachten, daß möglicherweise auch 
eine Täuschung vorliegt. Neben dem Penis glaubt Prowazek 
zwei Anhangsdrüsen erkannt zu haben. Auch ich sah hin und wieder 
an der gleichen Stelle Gebilde, die ich als Drüsen ansprechen möchte. 
Weiterhin beschreibt Prowazek ‚eine eigenartige zahnartige 
Bildung‘‘ am Vorderende des Männchens, die er für einen Haftappa- 
rat hält. Dieser soll bei der Begattung eine Rolle spielen. Ich konnte 
nichts Derartiges erkennen. Auch bei Zusatz von Neutralrot, durch 
das die terminalen Haftbildungen gefärbt werden sollen, vermochte 
ich sie nicht wahrzunehmen. Ich wüßte auch nicht, wie ein solcher 
Haftapparat bei der Begattung, die ich weiter unten beschreiben 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 33 


werde, funktionieren sollte. Hingegen entdeckte ich einen anderen 
Haftapparat, vermittels dessen sich das Männchen bei der Begattung 
am Weibchen festhält. Ich bemerkte ihn erst, als ich die Begattung 
beobachtete (Fig. 1), konnte ihn dann aber auch bei anderen, nicht 
kopulierenden Männchen feststellen. Er besteht aus zwei flachen 
Sauggruben am verbreiterten Hinterende rechts und links vom Penis 
(Fig. 1 und 2). Beim nicht kopulierenden Tier sieht man sie nur bei 
günstiger Lage des Männchens, zudem treten sie nicht so deutlich 
hervor, wie wenn sie bei der Begattung durch Muskelkontraktionen 
vertieft werden. 

Es bleibt schließlich noch ein Gebilde zu besprechen, das im 
Vorderteile liegt (Fig. 1 und 2), und dessen Bedeutung nicht ganz 
klar ist. Es hat in der Regel ungefähr die Form eines gleichseitigen 
Dreiecks, dessen eine Spitze nach hinten gerichtet ist, jedoch kann es 
auch fast rund sein, wie es Korschelt zeichnet, oder es kann 
sogar in zwei Portionen getrennt sein, wie es Prowazek abgebil- 
det hat. Das Gebilde setzt sich zusammen aus zahlreichen stark 
lichtbrechenden Körnchen, die sich mit Neutralrot nicht färben. 
In mit Eisenhämatoxylin gefärbten Schnittpräparaten (Fig. 8—10) 
haben sie ein sehr charakteristisches Aussehen: sie stellen unregel- 
mäßig gestaltete, scharf konturierte Körnchen mit hellem Inneren 
dar. Korschelt hat das Gebilde als ‚helle Bläschen‘ beschrie- 
ben und brachte diese, wie bereits erwähnt, fälschlicherweise mit den 
Spermatozoen in Verbindung. Shearer spricht von einer „kör- 
nigen Dottermasse“, die sich im Innern des Männchens findet, und 
welche ihm während seiner kurzen Lebensdauer zur Nahrung dienen 
soll. Es scheint, daß er damit diese Konkretionen meint. Daß sie 
Reservestoffe darstellen, halte auch ich für sehr wahrscheinlich, 
eine Annahme, für die mir vor allem auch die Aehnlichkeit der Körn- 
chen mit ebenfalls stark lichtbrechenden Konkretionen in den Ma- 
gen- und Darmzellen der Weibchen zu sprechen scheint. So ist viel- 
leicht das Gebilde als das letzte Ueberbleibsel des Darmtraktus zu be- 
trachten. 

Es ist von Interesse, den Geschlechtsapparat des Männchens 
von. Dinophilus apatris mit dem einer Dinophilus-Spezies zu ver- 
gleichen, bei welcher das Männchen nicht rudimentär ist. Die 
Gattung Dinophilus besteht nämlich aus zwei Gruppen, von denen 
nur für die eine der Geschlechtsdimorphismus charakteristisch ist, 


während in der anderen Gruppe Weibchen und Männchen sich in der 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 3 


if 


I a a u 


34 Hans Nachtsheim: 


Größe nicht unterscheiden. Zu dieser Gruppe gehört z. B. der im 
Weißen Meer vorkommende Dinophilus, dessen Bau und Entwick- 
lung Schi mkewitsch (1895) untersucht hat. Ich gebe in Text- 
figur 1 eine schematische Abbildung des männlichen Geschlechts- 
apparates dieser Form nach Schimkewitsch wieder. Von den 
Hoden, die zwei lange, unter dem Darmkanal verlaufende Schläuche 
darstellen, ist nur der hintere Teil der Hodenhöhle (Hh) mit dem un- 
paaren Verbindungsstück (V) eingezeichnet. Mit dem Penis (P) haben 
die Hoden keine direkte 
Verbindung. Das Sperma 
gelangt von den Hoden 
in die Samenblasen (Sb), 
die, wie Har mer (1889) 
als erster bei Dinophilus 
taeniatus, einer ebenfalls 
nicht dimorphen Art, er- 
kannt hat, die Segmental- 
organe des fünften Seg- 
ments darstellen. Von den 
Samenblasen führen Ka- 


Textfigur 1. näle in die Penisscheide, 


Schema der männlichen Geschlechtsorgane des Dino- j B 
philus vom Weißen Meere. Hh Hodenhöhle, V un- und von hier gelangt das 
paares Verbindungsstück der Hoden, Sb Samen- 


blasen, D Drüsen der Penisscheide, P Penis, Pt Pro- Sperma ın den hohlen 


tractores und Rt Retractores der Penisscheide. (Nach : EN] H 
Schimkewitsch). Penis (P) hinein, der aus 


gestülpt werden kann. 


 Seitlich sitzen an der Penisscheide zwei Gruppen von Drüsen (D). 


Paarige Muskelstränge, Protractores (Pt) und Retractores (Rt), die 
von der Körperwand entspringen, dienen zur Bewegung der Penis- 
scheide. 
Nehmen wir an, daß das Männchen von Dinophilus apatris 
von einer Form mit ähnlich gebautem Geschlechtsapparat abstammt, 
so ist auch dieses Organsystem des apatris-Männchens als weitgehend 
rückgebildet zu betrachten. Mit der Größe des Gesamtindividuums 
mußten auch die Hoden reduziert werden, wenn auch ihre Reduktion 
nicht im gleichen Verhältnis wie die Körperreduktion erfolgte; beim 
apatris-Männchen füllen sie das Tier ja fast vollständig aus. Die Sa- 
menblasen sind ebenso wie die übrigen Segmentalorgane verschwun- 


den. Als ihre Reste möchte ich die Ausführungsgänge ansehen, die 
beim apatris-Männchen das Sperma direkt von den Hoden in die. 


a 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 35 


Penisscheide leiten. Der Bau des Penis des apatris-Männchens 
scheint ganz ähnlich zu sein wie bei der vonSchimkewitsch 
beschriebenen Form. Die äußere Schicht des Penis ist bei der Form 
aus dem Weißen Meere aus langen, der Längsachse des Penis parallel 
verlaufenden Zellen zusammengesetzt, die „stäbchenförmige Abla- 
gerungen“ enthalten, dieselben Bildungen, die wir auch beim apatris- 
Männchen gefunden haben. Die innere Wand des Penis ist mit drü- 
sigem Epithel ausgekleidet. Ob dies auch beim apatris-Männchen 
der Fall ist, vermag ich nicht zu sagen, halte es aber sehr wohl für 
möglich. Die Kleinheit des Objektes, das von vielen Infusorien an 
Größe weit übertroffen wird, gestattet eben nicht eine so detaillierte 
Untersuchung der Verhältnisse wie bei der Form aus dem Weißen 
Meere. Die Herausbeförderung der Spermien bei der Begattung kann 
bei beiden Formen in ähnlicher Weise erfolgen. Durch die Kontrak- 
tion der Muskulatur der Samenblasen bzw. der Leibesmuskulatur 
wird das Sperma aus den Samenblasen bzw. aus den Hoden in die 
Ausführungsgänge getrieben, gelangt in die Penisscheide, füllt den 
hohlen Penis und wird dann vermittels dieses in das Weibchen be- 
fördert. Wäre die Verbindung der Hoden mit dem Penis bei Dino- 
philus apatris so, wie Korschelt vermutet, so müßte der Vorgang 
hier in ganz anderer Weise vor sich gehen als bei der SpeziesSchim- 
kewitschs. Die Drüsen der Penisscheide scheinen bei Dinophilus 
apatris ebenfalls vorhanden zu sein, wenn auch in stark rückgebil- 
detem Zustande. Ebenso sind wahrscheinlich die Penisscheiden- 
muskeln vorhanden. So läßt der Bau des Geschlechtsapparates 
des rudimentären Dinophilus-Männchens immerhin noch manche 
Anklänge an seine ursprüngliche Gestalt erkennen. 

_ Ueber die Lebensweise des Männchens von Dinophilus apatris 
ist nicht viel zu sagen, da seine Lebenszeit ja nur von ganz kurzer 
Dauer ist. Die längste Zeit, die Korschelt ein Männchen am 
Leben erhielt, betrug 10 Tage. In meinen Einzelkulturen bei Zimmer- 
temperatur lebten die Männchen ungefähr 8—10 Tage, doch fand ich 
zwei Männchen noch am 20. Tage nach dem Ausschlüpfen der Weib- 
chen lebend im Kokon, am 21. waren sie abgestorben. Niedere 
Temperaturen verlängern die Lebensdauer der Männchen ebenso 
wie die der Weibchen. Nach Shearer verläßt das Männchen ge- 
wöhnlich den Kokon überhaupt nicht, die Begattung erfolgt kurz 
vor dem Ausschlüpfen der Weibchen innerhalb des Kokons. Das ist 


in der Tat der Fall. Das Weibchen wird durch den Bruder begattet, 
3 * 


36 Hans Nachtsheim: 


der sich mit ihm im gleichen Kokon entwickelt hat, Inzucht ist die 
Regel. 

Den Vorgang der Begattung zeigt Fig. 1 auf Tafel II. Sind Weib- 
chen und Männchen im Kokon voll entwickelt, so sieht man sie sich 
vermittels ihrer Bewimperung in ihren Eihüllen lebhaft bewegen. 
Sie rotieren dauernd um sich selbst, das U-förmig in der Eihülle 
liegende Weibchen sucht sich zu strecken, auch das zunächst rund- 
liche Männchen dehnt seine Eihülle, und so werden schließlich von 
beiden die Eihüllen gesprengt, und beide können sich in dem Kokon 
frei bewegen. Auf Fig. 1 sind die zerrissenen Eihüllen noch innerhalb 
des Kokons sichtbar. Während das Weibchen gleich weitere Versuche 
macht, auch die Gallerte zu zerreißen und vollständig frei zu werden, 
macht sich das Männchen an das Weibchen heran, setzt sich ihm 
in der Gegend des vorletzten Segmentes seitlich an, indem es sich mit 
den Haftgruben festhält, und nimmt die Begattung vor. Man sieht, 
wie es unter heftigen Kontraktionen des ganzen Körpers seinen 
Penis durch die Körperwand des Weibchens hindurchstößt — wobei 
wahrscheinlich die stäbchenförmigen Einlagerungen im Penis die 
Hauptaufgabe haben —, um dann die Samenfäden in die Leibes- 
höhle des Weibchens übertreten zu lassen. Durch die lebhaften Be- 
wegungen des Weibchens zerreißt die gallertige Hülle, und das Weib- 
chen verläßt den Kokon. . Ist die Begattung, die etwa eine Minute 
in Anspruch nimmt, noch nicht beendet, so wird das anhaftende 
Männchen mit aus dem Kokon herausgetragen, löst sich dann aber 
sehr bald von dem Weibchen. In dem in Fig. 1 abgebildeten Falle 
schlüpfte das Männchen nach der Begattung wieder in den Kokon 
und wurde in diesem 9 Tage lang lebend beobachtet. Das Zurück- 
schwimmen in den Kokon war wohl eine zufällige Erscheinung; 
allerdings beobachtete Shearer einen ähnlichen Fall. Meist blei- 
ben die Männchen im Kokon, bisweilen findet man sie unmittelbar 
neben dem Kokon oder doch in seiner nächsten Nähe liegend. Immer 
aber sind die Lebensäußerungen der Männchen, sobald sie die Be- 
gattung hinter sich haben, sehr gering. Sie bewegen sich kaum noch 
von der Stelle, und nur an den gelegentlichen Kontraktionen und den 
Bewegungen ihrer Wimpern erkennt man, daß sie noch leben. Ob 
ein Männchen mehrere Weibchen begatten kann, habe ich ‚nicht be- 
obachtet, doch muß dies wohl der Fall sein, da die Weibchen in der 
Ueberzahl vorhanden sind. h 

Auch bei Dinophilus taeniatus durchbohrt nach der Beobach- 


Si 
r 
d 

. 

} 

ö 

g 

j 
- 


ii 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 27 


tung Harmers (1889) bei der Begattung das Männchen mit sei- 
nem Penis die Haut des Weibchens, Schimkewitsch, der 
selbst die Begattung nicht beobachtet hat, bezweifelt die Richtig- 
keit dieser Angabe und glaubt, daß die eigentliche Begattung ver- 
mittels der Geschlechtsöffnung geschieht. Nun ist es allerdings bei 
Dinophilus taeniatus, bei dem das Ovar einen wesentlich kompli- 
zierteren Bau aufweist als bei Dinophilus apatris, nicht ohne weiteres 
verständlich, wie das Sperma an Ort und Stelle gelangt. Für Dino- 
philus apatris glaube ich mit Bestimmtheit sagen zu können, daß die 
Begattung nicht unter Benutzung der Geschlechtsöffnung vor sich 
geht; wenigstens nicht vor sich gehen muß. Eine ähnliche Art der 
Begattung ist ja auch bei vielen Rotatorien üblich. Auch hier wurde 
wiederholt bestritten, daß die Begattung durch die Körperwand 
von Erfolg sei, doch kann heute kein Zweifel mehr darüber bestehen, 
daß dieser Begattungsmodus bei vielen Gattungen der normale ist !). 


3. Das Weibchen von Dinophilus apatris. 


Ueber den Bau des Weibchens von Dinophilus apatris (Tafel II 
Fig. 3) begnüge ich mich mit einigen kurzen, speziell auf den Ge- 
schlechtsapparat bezüglichen Bemerkungen, da einmal die Weib- 
chen durch Korschelt (1882) und die späteren Beobachter ein- 
gehend beschrieben worden sind, und zudem ich selbst genaue Unter- 
suchungen nicht vorgenommen habe. Einiges über die Form des 
eben ausgeschlüpften und des geschlechtsreifen Weibchens sowie 
über die Gestaltung der Kopfwimperringe habe ich bereits weiter 
oben gesagt. Die Unterschiede, die hier zwischen Dinophilus apatris 
und Dinophilus gyrociliatus bestehen sollen, existieren meiner An- 
sicht nach nicht. Ein weiterer Unterschied soll der sein, daß Dino- 
philus gyrociliatus einen Analwimpering besitzt, Dinophilus 
apatris nicht (Nelson 1907). Auch bei Dinophilus gyro- 
ciliatus ist indessen nach Shearer (1912) dieser Wimperring 
„much reduced‘, und ebenso sagt Nelson (1907) von Dinophilus 


1) Die rudimentären Männchen der Rotatorien weisen auch in ihrer 
Organisation manche Aehnlichkeit mit den Dinophilus-Männchen auf. Man 
vergleiche z. B. die Beschreibung des Männchens von Lacinularia socialis 
von Hamburger (1907) mit unserer Darstellung des Dinophilus-Männ- 
chens. Weiteres über die verwandtschaftlichen Beziehungen des Dinophilus 
zu den Rotatorien im allgemeinen Teil. 


38 Hans Nachtsheim: 


conklini, daß der Wimperring kaum diesen Namen verdient. Soweit 
meine Beobachtungen reichen, kann von einem Fehlen des Anal- 
wimperringes (des neunten Wimperringes) bei Dinophilus apatris 
nicht die Rede sein, doch ist er hier wie dort rückgebildet. Kor- 
schelt spricht zwar nur von acht Wimperringen, zeichnet aber 
auch am Schwanzanhang eine Anzahl Wimpern ein. Die Zahl der 
Wimpern scheint zu variieren. Schließlich sollen Dinophilus gyro- 
ciliatus und conklini vorne am Kopf außer einer Anzahl kurzer 
. Wimpern zwei lange Sinneshaare (Tasthaare) besitzen, Dinophilus 
apatris vier. Meine Individuen wiesen allerdings, soviel ich sah, 
vier Tasthaare (zwei Paare) auf (Fig. 1, 3 und 4), aber es wäre doch 
noch eine genauere Untersuchung notwendig, um festzustellen, ob 
nicht auch dieses Merkmal der Variation unterworfen ist. 

Beim eben ausgeschlüpften Weibchen, dessen Länge etwa 4 mm 
beträgt, ist im Leben vom Ovar kaum etwas zu sehen. Erst wenn 
das Weibchen heranwächst und auch die Eizellen größer werden, 
werden diese sichtbar. Das Ovar, das unpaar ist — bei den nicht 
dimorphen Dinophilus-Arten ist es paarig —, liegt in der Nische 
zwischen Magen und Enddarm auf der ventralen Seite. Je nach der 
Temperatur vergehen 10—20 Tage vom Tage des Ausschlüpfens 
bis zur Absetzung des ersten Kokons. In dieser Zeit wächst das Weib- 
chen’auf etwa I mm heran. Auch nach der Ablage des ersten Kokons 
wächst es noch und erreicht ungefähr I „mm Länge, bisweilen noch 
mehr. Weibchen, die zur Ablage reife Eier enthalten, sind schon makro- 
skopisch kenntlich. Die großen, dotterreichen, in der Aufsicht weiß- 
lichen Weibcheneier nehmen einen großen Raum im Tier ein und 
drängen Magen und Darm ganz zur Seite. Die Eier in dem in Fig. 3 
abgebildeten Weibchen haben ihre endgültige Größe noch nicht 
erreicht. Immer entwickeln sich neben den großen Eiern auch kleine. 
Männcheneier. Sie füllen die Zwischenräume zwischen den Weib- 
cheneiern aus, oft werden sie in die Weibcheneier geradezu hinein- 
gepreßt. In der Regel enthalten die Kokons nur wenige Eier, 2—3 
Weibcheneier und 1—2 Männcheneier. Kokons mit 5 Weibchen- und 
4 Männcheneiern, wie der in Fig. 5 abgebildete, sind selten; genaue 
Angaben über das Verhältnis der Männcheneier zu den Weibchen- 
eiern werden im experimentellen Teil gegeben. Reifen zahlreiche 
Weibcheneier zu gleicher Zeit — die höchste beobachtete Zahl waren 
außer 8 Männcheneiern 15 Weibcheneier in einem Kokon! —, so 
erscheint das Weibchen gänzlich deformiert; der Körper ist stark 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 39 


aufgetrieben, die Eier beschweren das Tier so, daß es sich kaum zu 
bewegen vermag. 

Den Vorgang der Eiablage illustriert Fig. 4. Das Weibchen hat 
2 Weibcheneier und 1 Männchenei abgesetzt und ist gerade im Be- 
griffe, den Kokon um die Eier abzuscheiden. Das Hinterende des 
Tieres sieht man von der rechten Seite, im übrigen liegt das Tier in 
Rückenansicht. Die Absicht des Weibchens, Eier abzusetzen, er- 
kennt man an seinem Verhalten. Es schwimmt nicht wie gewöhnlich 
im Wasser lebhaft umher, sondern verharrt an einer Stelle, dauernd 
laufen peristaltische Wellen über das ganze Tier hin, durch die die 
Eier, die in ihrer Form sehr veränderlich sind, langsam nach hinten 
gepreßt werden, bis sie schließlich aus der an der Ventralseite lie- 
genden Geschlechtsöffnung herauskommen. Da die Geschlechts- 
öffnung sehr eng ist und sich nicht bis auf den Durchmesser der Weib- 
cheneier, zu erweitern vermag, müssen diese, wie Korschelt 
sagt, „in einem ganz dünnen Strahl‘ austreten, und selbst die in 
der Mitte der Eier liegenden, als heller Fleck sichtbaren Keimbläs- 
chen oder richtiger ersten Reifungsspindeln — denn zur Zeit der 
Ablage der Eier sind, wie wir nachher sehen werden, immer die Keim- 
bläschen schon aufgelöst und die Spindeln bereits gebildet — wer- 
den deformiert. Sobald die Eier ausgetreten sind, nehmen sie eine 
ovale Form an, die weiblichen wenigstens; die männlichen besitzen an- 
nähernd Kugelform. Die genaue Lage der weiblichen Geschlechtsöfi- 
nung ist nicht leicht zu ermitteln. Schon Korschelt hebt die Schwie- 
rigkeit hervor, sie überhaupt nachzuweisen. ‚Die Geschlechtsöff- 
nung schließt sich unmittelbar,‘‘ so sagt er, „nachdem die Eier ab- 
gelegt worden sind, und weder am lebenden Tier noch am Präparat 
konnte ich eine Spur von ihr entdecken.“ Auch ich suchte lange 
Zeit am lebenden Tier wie an Präparaten vergeblich nach der Ge- 
schlechtsöffnung, bis ich schließlich ebenfalls die Eiablage beobach- 
ten konnte. Nach meiner Beobachtung liegt sie etwas weiter vorne, 
als Korschelt sie einzeichnet. Sie liegt, soviel ich sehen konnte, 
vor dem Analwimperring, d. h. zwischen dem 8. und dem 9. Wim- 
perring auf der Ventralseite des letzten Segmentes. 

Nach Schimkewitsch sind bei dem Dinophilus aus dem 
Weißen Meere die Eileiter paarig und münden rechts und links 
vom After in seiner nächsten Nähe. Er vermutet, daß auch bei 
Dinophilus apatris zwei Geschlechtsöffnungen vorhanden sind, und 
daß der von Korschelt beobachtete Austritt der Eier aus einer 


40 Hans Nachtsheim: 


unpaaren Oeffnung an der Bauchseite vor dem After eine künst- 
liche Erscheinung war, vielleicht zurückzuführen auf einen Druck, 
der auf das Tier ausgeübt wurde, so daß ein Riß entstand. Die ge- 
naue Beschreibung des Vorganges, die Karschelt gibt, schließt 
indessen meines Erachtens eine solche Annahme von vornherein 
aus. Es ist aber auch sehr wohl möglich, daß Schimkewitschs 
Form eine paarige Geschlechtsöffnung hat, während sie bei unserer 
Form in der Tat unpaar ist; in der Gruppe der monomorphen Dino- 
philus-Arten ist auch das Ovar — von eincr Ausnahms, Dinophilus 
gigas, abgesehen — paarig und viel komplizierter gebaut als in der 
Gruppe der dimorphen Arten. 

Ueber die Entstehung des Kokons gibt Shearer fötbende 
Beschreibung. Das zur Ablage der Eier bereite Weibchen zieht sich 
zu einer runden Masse zusammen und scheidet aus den großen 
Schleimzellen der ‚Cuticula‘‘, die in besonders großer Zahl in der 
Gegend der Wimperringe liegen, Schleim in Menge aus, so daß es 
von einer dicken Schleimschicht vollständig eingehüllt wird. Hierauf 
läßt das Weibchen die Eier austreten und kriecht aus dem Schleim, 
der erhärtet, heraus, die Eier darin zurücklassend. Nach meinen 
Beobachtungen geht die Bildung des Kokons etwas anders vor sich. 
Das Material für den Kokon wird allerdings von den zahlreich vor- 
handenen Schleimdrüsen der Haut geliefert. Die Angabe Kor- 
schelts, daß die gallertige Masse schon v or der Ablage der Eier 
vorhanden sei, beruht auf einem Irrtum. Sowie die Eier austreten, 
sieht man, wie von den Schleimdrüsen an den Wimperringen her das 
Sekret die Eier umfließt und, offenbar infolge der Berührung mit dem 
Wasser, alsbald erhärtet. Der Kokon erhält dadurch seine endgültige 
Form, und das Weibchen kriecht davon. Sobald die Eier abgesetzt 
sind, hebt sich um jedes Ei, wahrscheinlich auch als eine Folge der 
Berührung mit dem Wasser (Osmose), eine Membran ab (Fig. 5), 
die Dotterhaut. Die Richtungskörper liegen später in dem Raum 
zwischen dieser Membran und dem Ei (Fig. 5). 

Die Vorliebe der Weibchen, ihre Kokons im Randwinkel abzu- 
setzen, wurde bereits betont. Diese Vorliebe hat, wie mir. scheint, 
mechanische Ursachen. Die Beobachtung lehrt, daß das Weibchen 
die Eier unter großen Anstrengungen absetzt. Kriecht es nun im 
Randwinkel in die Höhe, so quetscht es sich gewissermaßen in die 
ganz feine Wasserschicht hinein, auf seinen Körper wird allseitig 
ein Druck ausgeübt, und das erleichtert offenbar das Zurückschieben 
‚und Auspressen der Eier. 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 41 


Zytologische Untersuchungen. 


4. Die Spermatogenese. 


Ueber die Entwicklung des rudimentären Dinophilus-Männ- 
chens ist bisher nur sehr wenig bekannt. Korschelt (1882) und 
Prowazek (1900) machen einige kurze Angaben darüber, letz- 
terer stellt in seinem Aufsatz eine ausführliche Arbeit in Aussicht, 
die aber leider nicht erschienen ist. Prowazek macht die inter- 
essante Mitteilung, daß von den durch die erste Furchungsteilung 
des Männcheneies entstehenden beiden ungleichen Zellen die große 
nur die Gonaden und die mesodermalen Bestandteile bildet, wäh- 
rend im Weibchenei aus der großen Blastomere mesodermale wie auch 
. ekto- und entodermale Elemente hervorgehen (vgl. auch Nelson 
1904). Ueber die Richtigkeit dieser Angabe vermag ich nichts aus- 
zusagen, da ich die Entwicklung der Gonaden erst von einem späte- 
ren Zeitpunkte ab verfolgt habe. Eine genaue Untersuchung der Ent- 
wicklung des rudimentären Männchens wäre jedenfalls eine sehr 
interessante, wenn auch freilich nicht leichte Aufgabe. Die Entwick- 
lungsdauer der Männchen beträgt bei Zimmertemperatur — ebenso 
wie die der Weibchen — etwa 7 Tage. 

Schon auf einem sehr frühen Stadium der Embryogenese fin- 
det man auf Schnitten durch männliche Embryonen zahlreiche 
junge Geschlechtszellen, die den größten Teil des Leibesinnern aus- 
füllen (Fig. 6 auf Tafel III). Der Hoden ist paarig, doch liegen die 
beiden Hodensäcke, wie schon gesagt, so eng aneinander, daß die 
Grenze zwischen den beiden auf Schnitten kaum zu konstatieren 
ist, zumal da die Wände der Hodensäcke nicht von einem Epithel 
gebildet werden, sondern nur aus einer äußerst feinen Membran 
bestehen. Auch bei der von Schimkewitsch (1895) unter- 
suchten Form aus dem Weißen Meere, also einer Dinophilus-Art 
mit nicht-rudimentären Männchen und wohlentwickelten Hoden, 
besteht übrigens die Hodenwand größtenteils nur aus einer Mem- 
brana propria. Die Kerne der jungen Geschlechtszellen unterschei- 
den sich von denen der somatischen Zellen durch ihre relative Größe 
und vor allem durch ihre viel stärkere Färbbarkeit. Während ba- 
sische Farbstoffe von den Kernen der Somazellen kaum angenommen 
werden, treten die Spermatogonienkerne nach einer solchen Färbung 
immer sehr deutlich hervor. Nicht nur auf Schnitten, sondern auch 
an z. B. mit Boraxkarmin gefärbten Totalpräparaten heben sich die 


42 Hans Nachtsheim: 


Hoden durch ihre kräftige Färbung bei jungen und älteren Embryo- 
nen sehr scharf ab. Bei Vitalfärbung mit Neutralrot hingegen bleiben 
die Hoden gänzlich ungefärbt, es färben sich jedoch sehr intensiv 
Granula verschiedener Größe in den Somazellen. Die Spermatogo- 
nienkerne enthalten ein feines Spirem, das den ganzen Kern durch- 
zieht. Ein Nukleolus scheint nicht vorhanden zu sein, wenigstens 
nicht regelmäßig. Die Kerne liegen in fein granuliertem Zytoplasma, 
die Zellgrenzen sind meist undeutlich. Die Zellen befinden sich in 
reger Vermehrung, man beobachtet sehr häufig. Mitosen, und zwar 
erfolgen die Teilungen in einzelnen Komplexen synchron (Fig. 6). 
Die Kleinheit und große Zahl der Elemente erlaubt nicht eine sichere 
Feststellung der Chromosomenzahl, immerhin läßt sich mit einiger 
Gewißheit sagen, daß es mehr als 10 sind. 

In etwas älteren Embryonen findet man in ‘den Kernen der 
Geschlechtszellen die synaptischen Phänomene (Fig. 7), aus den 
Spermatogonien sind Spermatozyten erster Ordnung geworden. 
Wenn auch die Zellen zu klein sind, um Einzelheiten der im Kern 
um diese Zeit sich abspielenden Vorgänge zu ermitteln, so kann 
doch die Existenz einer Synapsis einwandfrei beobachtet werden. 
Die chromatischen Fäden oder Schleifen zeigen eine unipolare An- 
ordnung, die einzelnen Fäden lassen sich in dem Bukett deutlich 
erkennen. Daß sich die Fäden zu einem dichten Klumpen oder Knäuel 
zusammenballen und das bilden, was man im engeren Sinne als 
Synapsis bezeichnet, beobachtete ich in der Spermatogenese nie, 
ganz im Gegensatz zur Ovogenese, für die die Bildung eines dichten 
chromatischen Knäuels nach dem Bukettstadium ein Charakteristi- 
kum ist. Sämtliche Hodenzellen weisen die synaptischen Phänomene 
gleichzeitig auf. Nachdem die unipolare Anordnung der Chromatin- 
schleifen sich aufgelöst hat, folgen sehr bald die Reifungsteilungen 
(Fig. 8 und 9). Auch deren Verlauf genauer zu verfolgen, gestattet 
die Kleinheit des Objektes nicht. Die Teilungen gehen wieder in 
einzelnen Komplexen synchron vor sich. Bei dem in Fig. 8 darge- 
stellten Embryo hat die Mehrzahl der Geschlechtszellen die Sperma- 
tozytenteilungen bereits hinter sich, auf der rechten Seite laufen 
sie — wahrscheinlich handelt es sich um die zweite Reifungsteilung — 
gerade ab. Von den Spermatogonienmitosen unterscheidet sich die 
Spermatozytenteilung durch die geringere Zahl der Chromosomen, 
doch sind die einzelnen Chromosomen, die in die Reifungsteilungen 
eintreten, größer als in den Spermatogonien. In Aequatorialplatten, 


TE RER SERTEET BEN 
u 75 Eon “ a a Dr ar ee 2 ” en pe A f b BR 


Su 


b., 
f 
b: 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 43 


die mit der Fläche im Schnitt liegen (Fig. 8), zählt man etwa 10 


Chromosomen. Das ist, wie Eireifung und Embryonalentwicklung . 


lehren, die haploide Chromosomenzahl. Es findet also vor den Rei- 
tungsteilungen eine Pseudoreduktion statt. Verschiedenheiten in 
der Größe der einzelnen Chromosomen sind, soweit sich das feststellen 
läßt, nicht vorhanden. Alle Elemente besitzen Kugelform. Die Größe 
der Kerne wird durch die Spermatozytenteilungen beträchtlich re- 
duziett. 

Nach Ablauf der Reifungsteilungen ballt sich das Chromatin 
mehr und mehr zusammen (Fig. 9 und 10), streckt sich dann in die 
Länge und wird zu einem spindelförmigen Körper, dem Kopf des 
Spermatozoons. Das Plasma wird größtenteils abgestoßen und wahr- 
scheinlich resorbiert. So wandeln sich die Spermatiden in die reifen 
Samenfäden um, die aus dem spindelförmigen Kopf und einem kur- 
zen Schwanzfaden bestehen. Die Hoden des voll entwickelten 


 Männchens (Fig. 11) enthalten nur fertige Spermatozoen, die dicht 


gedrängt beieinander liegen. Fig. Il ist nach einem Männchen ge- 
zeichnet, das allein noch im Kokon lag, die Weibchen hatten ihn be- 
reits verlassen. Offenbar hatte das Männchen die Begattung schon 
ausgeführt. Dafür spricht einerseits die verhältnismäßig geringe 
Zahl von Spermatozoen, die sich noch in den Hoden befinden, und 
dann liegt neben dem Männchen eine Anzahl Samenfäden, die wahr- 
scheinlich noch von der Begattung herrühren. 

Zwingt uns auch die Ungunst des Objektes, uns mit diesen kur- 
zen Feststellungen über die Spermatogenese zu begnügen, so lassen 
die Beobachtungen doch wenigstens den Schluß zu, daß die Spermato- 
genese in normaler Weise verläuft; nichts weist auf Besonderheiten 
hin. Alle Spermatiden und Spermatozoen scheinen gleich beschaffen 
zu sein, nichts spricht dafür, daß etwa zwei Sorten von Sperma- 
tozoen gebildet werden, die für die Geschlechtsbestimmung von ver- 
schiedener Bedeutung sein könnten. 


5. Die Ovogenese bis zur Differenzierung der Eier. 


Bei einem weiblichen Embryo, der kurz vor Beendigung seiner 
Entwicklung steht, ist das unpaare Ovar noch in sehr unentwickel- 
tem Zustande. Es liegt in der Nische zwischen Magen und Enddarm 
auf der ventralen Seite und besteht aus einer in der Form eines Drei- 
ecks angeordneten, verhältnismäßig geringen Zahl sehr kleiner Zellen. 


ee 


value 
Eee 
er 


But 


= . Si 0 

A a Ta te a N 7 
2 ee A Re 1 Bat, 
DE a ET 


a ER i' 
En Fe 


re 


= 7 


44 Hans Nachtsheim: 


Eingehüllt wird das Ovar von einem peritonealen Ueberzug, einer 
außerordentlich feinen Membran. Nur hie und da läßt sich einmal 
eine Epithelzelle mit kleinem Kern in der Hülle nachweisen. v. Ma l- 
sen (1906), der die Membran ebenfalls beobachtete, hält sie für das 
Darmfaserblatt. Diese Annahme ist zurückzuführen auf die merk- 
würdige ‚Anschauung, die sich v. Malsen über die Entstehung 
der Urgeschlechtszellen gebildet hat. v. Malsen glaubt beobachtet 
zu haben, daß sich Zellen aus der Darmwand loslösen, aktiv in den 
Raum unterhalb des Nahrungskanales zwischen Magen und Darm 
auswandern und zu Ureizellen werden. Durch die Ansammlung der 
Ureizellen soll das Darmfaserblatt vom Darmepithel abgehoben 
werden und so eine Hülle um das Ovar bilden. v. Malsen stützt 
seine Anschauung auf Angaben von Korschelt, der in seiner 
ersten Arbeit (1882) allerdings der’Meinung Ausdruck gegeben hatte, 
die Eier entstünden aus dem Epithel des Darmkanals. v. Mal- 
sen hat aber ganz übersehen, daß Korschelt seine Angaben 
später (1887) berichtigt — v. Malsen scheint diese Arbeit Kor- 
schelts entgangen zu sein; er erwähnt sie weder im Text noch im 
Literaturverzeichnis — und erklärt hat, er würde heute auf eine 
solche Vermutung kaum mehr kommen. Von einer Entstehung der 
Urgeschlechtszellen aus der Darmwand kann gar keine Rede sein. 


Wie diese schon von sehr frühem Zeitpunkte scharf abgegrenzt ist, . 


so auch das Ovar. Die Beobachtungen v. Malsens scheinen 
mir auf schlechte Fixierung seines Materials zurückzuführen zu sein. 
Aus welchem embryonalen Material die Gonade hervorgeht, hat 
Nelson in seiner Arbeit über die frühe Entwicklung des Dinophi- 
lus (1904) nachgewiesen; sie entstammt dem vierten Quadranten (D), 
genauer der linken hinteren Zelle des vierten Quartetts, der Zelle 
4d, der Urzelle des Mesoblasts, die auf dem 29-Zellen-Stadium ge- 
bildet wird. Die Gonade leitet sich somit aus der gleichen Zelle her 
wie bei den Polychäten. i 

Im Gegensatz zu dem männlichen Embryo ist bei einem weib- 
lichen Embryo, der kurz vor dem Abschluß seiner Entwicklung steht, 
die Zahl der Keimzellen, wie gesagt, sehr gering. In einem einheit- 
lichen Zytoplasma — Zellgrenzen sind keine zu erkennen — liegt 
eine Anzahl kleiner Kerne mit feinem chromatischem Netzwerk und 
großem Nukleolus (Fig. 12). Mitosen findet man selten, sie scheinen 
sehr rasch abzulaufen. Wie in der Spermatogenese erfolgen auch hier 
die Teilungen in einzelnen Bezirken gleichzeitig, und zwar verläuft 


ER 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 45 


die Teilung derart synchron, daß sich alle Mitosen auf dem gleichen 
Stadium befinden, in Fig. 12 beginnt gerade die Anaphase. 

Das Ovar des eben ausgeschlüpften Weibchens sieht ganz ähn- 
lich aus (Fig. 13), nur hat sich die Zahl der Ovogonien bereits ver- 
mehrt. Auch jetzt gehen noch weitere Teilungen vor sich. v. Mal- 
sen (1906) gibt an, daß er auch mit seinen stärksten Vergrößerungen 
niemals Teilungsfiguren beobachten konnte. Auch Shearer 
(1912) sah keine Mitosen, ja er sah bei einem eben ausgeschlüpften 
Weibchen nicht einmal die Kerne der Ovogonien! Er beschreibt 
das Ovar auf diesem Stadium als ‚eine vollständig Klare, homogene 
Masse von Zytoplasma, mit gleichmäßig verteilten Granulis“. Durch 
Wachstum dieser Granula sollen die Ovogonien bzw. die Ovogonien- 
kerne zustande kommen! Indem immer weitere Granula heranwach- 
sen und zu Ovogonienkernen werden, füllt sich nach Shearer 
das ganze Ovar mit Ovogonien, die sich dann weiterhin amitotisch 
vermehren. Es ist wohl überflüssig, diese Shearersche Darstel- 
lung der Entstehung und Vermehrung der Ovogonien einer weiteren 
Diskussion zu unterziehen. Daß weder Shearer noch v. Mal- 
sen Mitosen beobachten konnten, ist mir gänzlich unverständlich. 
Sind auch die Spindeln klein und Mitosen selten, so ist doch keine 
sehr eingehende. Untersuchung notwendig, um sie aufzufinden. 
Nelson (1907), dessen Arbeit freilich einen wesentlich sorgfälti- 
geren Eindruck macht als die v. Malsens und die Shearers, 
hat bei Dinophilus conklini ebenfalls Zonen sich teilender Ovogonien 
gefunden. 

Die Begattung der Weibchen erfolgt, wie wir gesehen haben, in 
der Regel kurz vor dem Ausschlüpfen innerhalb des Kokons. In 
fast jedem jungen Weibchen findet man denn auch das bei der Be- 
gattung empfangene Sperma, das in der Leibeshöhle liegt, in der 
Form eines mächtigen Ballens. Durch eine schleimige Masse, die 
wahrscheinlich das Produkt der neben der Penisscheide des Männ- 
chens liegenden Drüsen darstellt, werden die Spermien zusammen- 
gehalten. Da die Köpfe der Spermien sich mit basischen Farbstoffen 
intensiv färben, erkennt man sie besonders gut an Totalpräparaten 
von jungen Weibchen. Das durch die Begattung in die Leibeshöhle 
gelangte Spermienpaket wird neben den jugendlichen weiblichen 
Geschlechtszellen abgelagert. Zunächst bleiben die Spermien in 
dem Paket beisammen. Die jungen Ovogonien üben noch keine An- 
ziehungskraft auf die Samenfäden aus, diese liegen ohne bestimmte 


46 Hans Nachtsheim: 


Orientierung in dem Paket (Fig. 14). Häufig sind zwei Spermien- 
pakete vorhanden, von denen dann das eine rechts, das andere links 
vom Ovar liegt (Fig. 15). Ich vermute, daß jedes Paket einer Füllung 
des hohlen Penis und einer Ejakulation entspricht. Während v. Mal- 
sen „niemals in den Weibchen Spermatozoen entdeckte“, hat 
Shearer das erste Verhalten der Samenfäden im begatteten 
Weibchen richtig beobachtet, ist indessen mit der Deutung seiner 
weiteren Befunde wieder vollständig auf Abwege geraten. Ehe wir 
uns aber mit dem weiteren Schicksal der Samenfäden beschäftigen, 
wollen wir sehen, was aus den Ovogonien wird. 

Je älter das Weibchen wird, desto mehr wachsen die Ovogo- 
nien heran (Fig. 14—17), der Charakter der Zellen wie der Kerne 
bleibt der gleiche. Mitosen werden seltener, auch geht die Vermeh- 
rung nicht mehr zonenweise vor sich, sondern es sind immer nur 
einzelne Zellen, die sich teilen (Fig. 15—17). Zellgrenzen sind nicht 
sichtbar, das ganze Ovar ist ein Synzytium, bestehend aus fein gra- 
nuliertem Zytoplasma, in dem die Kerne liegen. Nur wenn sich ein 
Kern teilt, grenzt sich das umgebende Zytoplasma schärfer ab, es 
tritt eine Art Zellmembran auf, die aber nachher wieder verschwin- 
det. Die Fasern der Spindeln sind sehr scharf ausgeprägt, eine Plasma- 
strahlung vermochte ich nicht zu entdecken, ebensowenig Zentro- 
somen und Zentriolen. Je älter die Ovogonien werden, desto mehr ver- 
dichtet sich das chromatische Netzwerk auf.einer Seite des Kernes 
und ballt sich zusammen. Jeder Kern enthält einen großen Nukleo- 
lus, der von einem hellen Hof umgeben wird, d. h. das Retikulum 
legt sich dem Nukleolus nicht unmittelbar an, sondern umhüllt ihn 
in einem gewissen Abstand. Ob dieser helle Hof um den Nukleolus 
ein Kunstprodukt darstellt oder nicht, mag dahingestellt bleiben. 

Auf dem in Fig. 18 wiedergegebenen Stadium bietet das. Ovar 
gegenüber den vorhergehenden Stadien ein sehr verändertes Bild. 
Zunächst fällt auf, daß sehr deutliche Zellgrenzen vorhanden sind, 
jede Zelle ist von der benachbarten durch eine Membran scharf ge- 
schieden. Kern und Plasma haben an Größe weiterhin zugenommen. 
Mitosen findet man von nun an keine mehr, die Ovogonien sind zu 
Ovozyten erster Ordnung geworden. An den Kernen wird dies da- 
- durch kenntlich, daß die synaptischen Phänomene auftreten. Die 
Chromatinschleifen ordnen sich unipolar an. Das Bukettstadium 
ist indessen in den Ovozyten (Fig. 18) bei weitem nicht so regelmäßig 
geformt wie in den Spermatozyten (Fig. 7). Während hier die ein- 


Elch Freien. re a ar ul a za ed 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 47 


zelnen Schleifen gleichmäßig gegen den einen Pol hin konvergieren, 
gehen sie in den Ovozyten wirr durcheinander und zeigen die Tendenz, 
sich zusammenzuballen und einen dichten Knäuel zu bilden, es 
resultiert eine typische Synapsis. Die Zusammenballung geht soweit, 
daß wir schließlich (Fig. 19) einen unregelmäßig geformten, nukleolus- 
artigen Körper erhalten, einen ‚„Chromatinnukleolus‘‘, wie er auch 
bei vielen anderen Objekten gebildet wird (siehe Buchner 1918); ich 
will ihn im folgenden, um Verwechslungen mit dem echten Nukleolus 
von vornherein auszuschließen, als Karyosphäre bezeichnen !). 
Von dem echten Plastinnukleolus unterscheidet sich die Karyosphäre 


durch Größe, Form und Färbbarkeit. An Größe übertrifft der Nu- 


kleolus die Karyosphäre beträchtlich. Die Oberfläche des Nukleolus 
ist immer glatt, meist ist er kugelrund, bisweilen erscheint er etwas 
abgeplattet oder oval. Die Karyosphäre hingegen ist selten ganz 
rund, häufig ist sie etwas in die Länge gezogen, zu Beginn ihrer Ent- 
stehung ist ihre Oberfläche vielfach runzelig und zackig. Mit zuneh- 
mendem Alter verliert der Nukleolus seine starke‘ Färbbarkeit. 
Während er in den Ovogonien bei Eisenhämatoxylinfärbung auch bei 
starker Differenzierung (mag diese mit Eisenalaun oder mit salz- 
saurem Alkohol erfolgen) intensiv schwarz bleibt, ist er in den Ovo- 


‚zyten nach dem Bukettstadium meist blaß gefärbt, in seinem Innern 


sind häufig eine oder mehrere Vakuolen sichtbar. Die Karyosphäre 
ist bei Eisenhämatoxylinfärbung tiefschwarz. In den Ovogonien 
verbinden sich die Chromosomen während der Mitose und in schwä- 
cherem Maße das chromatische Retikulum in den Ruhekernen mit 
basischen (z. B. Safranin), der Nukleolus mit saueren Farben (z. B. 
Lichtgrün); allerdings ist zu bemerken, daß gerade für das Safranin, 


- wie auch bei anderen Objekten vielfach, auch der Nukleolus beson- 


dere Vorliebe zeigt. In den jugendlichen Ovozyten zeigen Chromo- 
somen und Nukleolarsubstanzen das gleiche färberische Verhalten 
wie in den Ovogonien. Nach dem von Jörgensen (1913) for- 
mulierten ‚Gesetz der umgekehrten Reaktionsweise der Kerıkom- 
ponenten im wachsenden Ei“ färben sich nach dem Bukettstadium 


die Chromosomen oxychromatisch, die Nukleolarsubstanzen basi- 


1) Karyosphären definiert Brüel (1915) als „‚Klumpen aus dichtge- 
drängten oder verknäuelten Chromosomen, nur in Geschlechtszellen gefun- 
den“. Der Ausdruck stammt von Blackman (1903), der ähnliche nu- 
kleolusartige Zusammenballungen des Chromatins in den Spermatozyten 
von Scolopendra beschrieben hat. 


48 Hans Nachtsheim: 


chromatisch. Diese Regel hat auch für Dinophilus Geltung. Der 
Umschlag in der färberischen Reaktion der Kernsubstanzen tritt 
aber hier nicht gleich nach den synaptischen Phänomenen auf, son- 
dern erst nach der nunmehr einsetzenden Verschmelzungsperiode; 
wir werden später auf diesen Umschlag noch zu sprechen kommen. 
Mit dem Ablauf der synaptischen Phänomene und der Bildung der 
Karyosphären ist die erste, nicht sehr umfangreiche Wachstums- 
periode der Ovozyten beendet. 

Die Verschmelzungsperiode stellt die zweite Wachstumsperiode 
der Ovozyten dar. Sie beginnt gleich nach Zusammenballung des 
Chromatins zur Karyosphäre (Fig. 19). Zwischen zwei benachbarten 
Zellen löst sich die Membran auf, so daß eine Zelle mit zwei Kernen 
entsteht. Die beiden ursprünglichen Zellen unterscheiden sich in 
nichts voneinander. Auch nach Auflösung der Zellmembran läßt 
sich zuerst nicht sagen, welcher von den beiden Kernen der Dege- 
neration verfällt. Diese setzt aber immer bei dem einen der beiden 
Kerne sehr bald ein, und man findet in den in der Verschmelzungs- 
periode stehenden Ovozyten die verschiedensten Degenerations- 
stadien solcher aufgenommenen Kerne (Fig. 19—22). Zuerst schwin- 
det die Kernmembran (Fig. 20). Dadurch gelangen Nukleolus und 
Karyosphäre ins Zytoplasma, wo auch sie langsam ihrer Auflösung 
entgegengehen (Fig. 21 und 22). Ehe die letzten Reste des „‚gefresse- 
nen‘‘ Kernes verschwunden sind, kann schon wieder eine neue Zelle 
aufgenommen werden (Fig. 19 und 22), der dann das gleiche Schicksal 
widerfährt. So wächst die Ovozyte auf Kosten ihrer Nachbarzellen. 
Eine Dominanz bestimmt gearteter Ovozyten über andere ist dabei, 
wie nochmals betont sei, niemals zu konstatieren. Ich hebe das be- 
sonders gegenüber den Angaben v. Malsens hervor, nach dessen 
Beobachtungen zu Beginn der Verschmelzungsperiode zwar auch 
die Zellen ‚‚nicht den geringsten erkennbaren Unterschied‘ zeigen; 
um die bereits durch Verschmelzung herangewachsene kugelförmige 
„Ovogonie‘ aber soll sich ein Mantel kleiner ‚‚Nährzellen‘‘ sammeln, 
die dann ebenfalls gefressen werden. Eine derartige Differenzierung 
in Ei- und Nährzellen habe ich nie beobachten können. Der untere 
Teil der Figur 19 gibt genau das Bild wieder, das der Teil des Ovars 
bietet, welcher sich in der Verschmelzungsperiode befindet. Alle 
in einer Region liegenden Zellen sind ungefähr gleich groß und ent- 
halten entweder zwei Kerne oder einen und die Reste eines zweiten, 
von kleinen Nährzellen aber kann nicht die Rede sein, bei weiterer 


2 ra ei a a 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 49 


Verschmelzung sind es immer wieder annähernd gleich große Zellen, 
die verschmelzen. 

Eine weitere Frage ist nun die, ob die Zellverschmelzungen auch 
von Kernverschmelzungen begleitet sind. v. Malsen bejaht diese 
Frage und gibt einige Bilder, die die Kernverschmelzungen beweisen 
sollen. Schon Oschmann (1914), der selbst umfangreiche Zell- 
und Kernverschmelzungen bei Tubifex beschrieben hat, hebt hervor, 
daß die Beweisführung v. Malsens nicht überzeugend ist. Ich 
pflichte dem völlig bei. Allerdings habe ich anfangs selbst geglaubt, 
daß auch bei Dinophilus Kernverschmelzungen vorkommen, und 
habe dem in meiner 1914 erschienenen Mitteilung Ausdruck gegeben. 
Je mehr ich aber die vermeintlichen Beweise geprüft habe, desto 
mehr bin ich schwankend geworden, und heute muß ich sagen, daß 
ich die Existenz von Kernverschmelzungen in der Ovogenese von 
Dinophilus für sehr unwahrscheinlich halte. Wenn zwei Kerne nach 


"Auflösung der Zellmembran sich aneinanderlegen und gegenseitig 


abplatten, was man oft beobachten kann (Fig. 19 und 22), so 
ist das noch kein Beweis für eine nachfolgende Kernverschmelzung. 
Langgestreckte oder in der Mitte eingeschnürte Nukleolen (Fig. 22 
und 26) sind ebensowenig ein Beweis für vorausgegangene Kernver- 
schmelzung; sie sind es um so wehiger, als die Nukleolen auch vor 
der vermeintlichen Verschmelzung schon langgestreckt sein können 
(Fig. 22), und als andererseits auch dann, wenn die Ovozyten die 
Verschmelzungsperiode bereits hinter sich haben (Fig. 26), solche 
Nukleolenformen keine Seltenheit sind. Ueberdies kommen Kerne 
mit zw ei Nukleolen nicht vor, ein Stadium, das doch die Verschmel- 
zung der Nukleolen einleiten müßte, es sei denn, man wollte an- 
nehmen, daß die Verschmelzung der Kerne auch die sofortige Ver- 
schmelzung der Nukleolen zur Folge hätte; dafür wäre aber wohl 
wieder ein flüssiger Aggregatzustand der Nukleolen Voraussetzung, 


. wogegen mannigfache Beobachtungen sprechen. Das Vorhanden- 


sein von zwei Karyosphären in einem Kern (Fig. 19) beweist nicht 
eine stattgehabte Verschmelzung, die Karyosphären können sich 
durch Knospung vermehren und tun dies, wie wir sehen werden, 
auf späteren Stadien sogar regelmäßig. Bilder, wie sie Osch- 
mann für Tubifex gibt, und die in der Tat Kernverschmelzung 
beweisen, fand ich bei Dinophilus niemals. Die Verschmelzungs- 
prozesse bei Dinophilus haben große Aehnlichkeit mit den entspre- 


chenden Vorgängen in der Ovogenese vieler Cölenteraten, wie sie 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. Il. Es 


50 Hans Nachtsheim: 


vonDoflein (1896), Trin ci (1906) u. a. beschrieben worden sind. 
Auch hier erfolgen wohl Verschmelzungen gleichartiger Zellen 
— die Zellen sind nicht zu Ei- und Nährzellen prädestiniert — in 
ausgedehntem Maße, Kern verschmelzungen aber kommen nie- 
mals vor. Ob eine Zelle frißt oder gefressen wird, hängt wahrschein- 
lich hier wie dort lediglich von dem ee ab, in dem 
sie. sich gerade befindet. 

Am Ende der Verschmelzungsperiode (Fig. 23) hat jede Ovozyte 
ungefähr das Drei-, Vierfache der Größe erreicht, die sie zu Anfang 
hatte. Daraus kann indessen nicht’geschlossen werden, daß sie aus 
etwa 3—4 .Ovozyten hervorgegangen ist. Ich möchte die Zahl der 
Zellen, die sich zu einer definitiven Ovozyte vereinigen, als weit 
größer annehmen. „Es ist leider unmöglich“, sagt v. Malsen 
vollständig mit Recht, ‚eine auch nur annähernd genaue Zahl an- 
zugeben, weil die zuerst vereinigten Nährzellen schon in voller Auf- 
lösung begriffen und nicht mehr einzeln unterscheidbar sind, wäh- 
rend noch immer neue in den Verschmelzungsprozeß mit einbezogen 
werden.“ Worauf ich hier mit besonderem Nachdruck hinweisen 
muß, ist die Tatsache, daß amEnde derVerschmelzungs- 


periode ‚die Differenzierung in werblichesund, 


männliche Eiernoch nichterfolgt ist. Conklin 
(1906) gibt an, daß 25—30 Zellen notwendig seien zur Bildung eines 
Weibcheneies, eine viel geringere Zahl aber sei erforderlich zur Bil- 
dung eines Männcheneies. Ich habe mich immer und immer wieder 
gefragt, wie Conklin das festgestellt haben will. Conklin 
beruft sich auf R. Hertwig (1905). A. a. ©. hat Hertwig die 
Resultate v. Malsens vorläufig mitgeteilt. Er sagt allerdings, 
daß die Zahl der zu einem weiblichen Ei verschmelzenden Zellen 
viel größer sei als beim männlichen Ei, über die wirkliche Zahl 
der in dem einen wie in dem anderen Falle verschmelzenden Keim- 


zellen macht er indessen ebensowenig eine Angabe wie v. Malsen.. 


Daß mehr als zwei Zellen verschmelzen, läßt sich mit Gewißheit 
sagen; neben zwei intakten Kernen kann die Zelle ja noch die Reste 
eines dritten enthalten, vielleicht lassen sich hin und wieder sogar 
noch Spuren eines vierten nachweisen. Aber wer will sagen, wie viele 
Kerne schon aufgelöst sind, wenn keine Spuren mehr von ihnen da 
sind? Aus der Volumvergrößerung der Ovozyten während der Ver- 
schmelzungsperiode die Zahl der verschmelzenden Zellen berechnen 
zu wollen, halte ich für eine zu unsichere Methode. 


a 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 51 


Zu Ende der Verschmelzungsperiode (Fig. 23) lockert sich der 
Zusammenhang der Eizellen; sie schließen nicht mehr lückenlos 
aneinander, sich gegenseitig abplattend, sondern runden sich mehr 
und mehr ab. Alle Eier aber sind, soweit sich das beurteilen läßt, 
gleich groß und auch sonst nicht irgendwie morphologisch different. 
Ebenso wie Hertwig vertreten auch v. MalsenundConklin 
die Ansicht, daß:zur Bildung eines Weibcheneies mehr Zellen not- 
wendig sind als zur Bildung eines Männcheneies,. Diese Ansicht ist 
gewiß sehr einleuchtend, wenn man die enormen Größenunterschiede 
zwischen den fertigen Weibchen- und Männcheneiern ins Auge faßt, 
beweisen läßt sich aber ihre Richtigkeit nicht, ja das Fehlen 
morphologischer Differenzen zwischen den einzelnen Ovozyten nach 
Beendigung des Verschmelzungsprozesses spricht eher gegen diese 
Annahme als dafür. 

Zu Beginn der Verschmelzungsperiode besitzt jede Ovozyte 
eine Karyosphäre, in der das gesamte Chromatin konzentriert ist 
(Fig. 19 oben). Ich erwähnte schon, daß man in etwas älteren Ovo- 
zyten, in denen die Resorption gefressener Zellen und Kerne in vollem 
Gange ist, hin und wieder zwei Karyosphären findet (Fig. 19 unten). 
Je mehr sich die Verschmelzungsperiode ihrem Ende nähert, desto 
häufiger werden Kerne mit zwei Karyosphären, bis schließlich ihre 
Zahl überwiegt (Fig. 23). Diese Vermehrung ist zurückzuführen 
auf Durchschnürungen und Knospungen der ursprünglichen Karyo- 
sphären (Fig. 19 unten und Fig. 24). Eine multiple Vermehrung er- 
folgt indessen nie. Noch in anderer Hinsicht ändert sich das Verhal- 
ten der Karyosphären gegen Ende der Verschmelzungsperiode. 
Während sie anfangs (Fig. 19—22) getrennt vom Nukleolus liegen, 
in der Regel sogar gerade auf der gegenüberliegenden Seite des Ker- 
nes, schmiegen sie sich später dem Nukleolus dicht an (Fig. 23), 
und wenn der Kern zwei Karyosphären enthält, liegen sie meist an 
entgegengesetzten Polen (Fig. 23 und 25). 

Es bleibt uns noch das Schicksal der Spermatozoen während der 
zuletzt beschriebenen Entwicklung des Ovars zu betrachten. Wir 
haben die Spermien verlassen, als sie sich im eben ausgeschlüpften 
Weibchen in der Form von ein oder zwei Paketen neben den Ovogo- 
nien abgelagert hatten (Fig. 14 und 15). Hier bleiben sie gänzlich 
inaktiv liegen, bis die Ovogonien zu Ovozyten geworden sind. Erst 
wenn in den Ovozyten die synaptischen Phänomene vorüber sind, 


lösen sich die Spermienpakete auf. Die Samenfäden dringen nun in 
4* 


52 Hans Nachtsheim: 


das Ovar ein, man findet sie überall zwischen den wachsenden Ovo- 
zyten (Fig. 19 und 23). Niemals habe ich indessen beobachtet, daß 
auf diesen Stadien schon eine Besamung der Ovozyten erfolgt. Ein 
chemotaktischer Reiz scheint von den Eizellen direkt noch nicht auf 
die Samenzellen auszugehen. Das Anhaften der Spermien an den 
Zellwänden ist wohl lediglich eine physikalische Erscheinung. Wenn 
sich nach Beendigung der Verschmelzungsperiode der Verband 
der Eizellen lockert, so wird es den Spermatozoen leicht, zwischen 
die Zellen einzudringen, und es liegt denn auch auf späteren Stadien 
fast an jeder Ovozyte wenigstens ein Spermium, so daß jedes Ei im 
rechten Augenblick besamt werden kann. 

Wie ist nın aber Shearer auf seine phantastischen Ideen 
betreffend Besamung der Ovogonien, Kerndualismus, amitotische 
Teilung der Ovogonien, geschlechtsbestimmende letzte Ovogonien- 
teilung usw. gekommen? Vergleichen wir unsere mit seinen Beob- 
achtungen, so stellen wir zunächst fest, daß Shearer weder die 
Ovogonienmitosen noch die synaptischen Phänomene in den jungen 
Ovozyten gesehen hat. Seine ebenfalls sehr merkwürdigen Anschau- 
ungen über die Entstehung der ersten Ovogonien haben wir bereits 
zurückgewiesen. Daß er nach Mitosen gesucht hat, ohne solche zu 
finden, ist mir, wie gesagt, unverständlich. Und wie so oft das ver- 
gebliche Suchen nach Mitosen zu der Annahme amitotischer Vermeh- 
rung der Zellen geführt hat — daß eine Vermehrung stattfindet, ist 
meist ja evident —, so hat auch Shearer sich verleiten lassen, 
nach Amitosen zu suchen und — findet auch solche. Er findet ami- 
totische Vermehrung der ,‚Ovogonien‘ in der Verschmelzungs- 
periode, Zwei aneinanderliegende Kerne in einer Zelle betrachtet 
er als das Resultat einer Amitose, ein langgestreckter oder in der Mitte 
eingeschnürter Nukleolus weist auf den Beginn einer solchen hin usw., 
kurz das, was v. Malsen als Beweis einer Kernverschmel- 
zung ansieht, ist für Shearer der Beweis für eine direkte Kern- 
teilung! Dieselben Einwände, die wir gegen v. Malsen gel- 
tend gemacht haben, gelten natürlich auch in diesem Falle. Und 
selbst wenn Shearer den Beweis erbracht hätte, daß eine amito- 
tische Vermehrung der Kerne existiert, so müßte er doch auch noch 
weiter zeigen, daß die beiden Tochterkerne auf zwei Zellen verteilt 
werden und nicht etwa der eine degeneriert. Ich pflichte Boveri 
(1914), der in seiner Arbeit über die Entstehung maligner Tumoren 
die Frage des Vorkommens von Amitosen in normalen Geweben 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 53 


einer ausführlichen Besprechung unterzogen hat und dabei auch auf 
die Angaben Shearers hinweist, voll und ganz bei, wenn er zu dem 
Schluß kommt: ‚Alle Angaben über amitotische Kernteilung mit 
 darauffolgender Protoplasmateilung sind mit der größten Skepsis 
aufzunehmen; soweit sie sich auf normales Geschehen beziehen, 
beruhen die meisten nach meiner Ueberzeugung auf Irrtum.‘ Uebri- 
gens scheint Shearer sich selbst über den Verlauf des Prozesses 
nicht im klaren zu sein, denn er gibt an, daß neben den amitotischen 
Kernteilungen auch Zell- und Kernverschmelzungen 
vorkommen, ‘die beiden Prozesse sollen ‚Hand in Hand‘ gehen. 
Wie er aber beide Vorgänge im Präparat einwandfrei auseinander- 
halten kann, sagt er nicht. Sollen etwa die Kerne sich nur teilen, um 
gleich darauf wieder zu verschmelzen ? 

Die Spermienpakete in den eben ausgeschlüpften Weibchen 
hat auch Shearer gesehen, auch daß sie sich später auflösen 
und die Samenfäden sich im Ovar verteilen, bemerkte er. Hier aber 
beginnen wieder die Irrwege Shearers. Die Spermien sollen 
in die ,„‚Ovogonien‘ eindringen und sich mit den Kernen vereinigen. 
Eine Durchmischung der mütterlichen und väterlichen Kernsubstan- 
zen soll indessen nicht stattfinden, sie werden nur von einer gemein- 
samen Hülle umschlossen. Ebenso wie die „Ovogonien‘kerne, d.h. 
mit diesen, sollen sich auch die Spermakerne amitotisch teilen, nur 
bei der letzten „‚Ovogonien‘“teilung soll die Teilung des Spermakernes 
unterbleiben, er soll ungeteilt in die eine Ovozyte geraten, während 
die andere nur mütterliche Kernsubstanzen erhält. Aus dieser soll 
ein kleines Männchenei, aus jener ein großes Weibchenei entstehen. 
Und was sind die vermeintlichen Köpfe der Spermatozoen in den 
„Ovogonien‘“? Nichts anderes als die Karyosphären, deren Ent- 
stehung aus den zusammengeballten Chromatinfäden nach der 
Synapsis Shearer nicht erkannt hat, und so kommt er wieder 
auf diese sonderbare Idee der ‚‚Befruchtung‘‘ junger ‚„Ovogonien‘. 
Ist diese Idee wenigstens auf richtige, wenn auch falsch gedeutete 
Befunde aufgebaut, so fragt man sich doch vergeblich, welche Beob- 
achtungen ihn zu der Annahme einer ungleichen letzten ‚„‚Ovogonien“- 
teilung berechtigen. Seine Abbildungen können nicht im entfern- 
testen auch nur als die Spur eines Beweises für seine Ansicht betrach- 
tet werden, hier hat Shearer vielmehr seiner Phantasie vollkom- 
men frei die Zügel schießen lassen. Die Ovozyten unterscheiden sich 
am Ende der Verschmelzungsperiode, wie immer wieder betont sei, 


54 Hans Nachtsheim: 


morphologisch überhaupt nicht, weder in der Form und Größe ihres 
Plasmaleibes noch in der Form und Größe ihrer Kerne. Aber auch 
dann, wenn eine Differenzierung der Eier in männliche und weibliche 


bereits erfolgt ist, sind die Kerne in allen Eiern gleich gebaut, der 


Kern eines Männcheneies (Fig. 31) ist nur eine Miniaturausgabe des 
Kernes eines Weibcheneies (Fig. 30. Wenn Shearer zwischen 
diesen beiden Kernen einen Gegensatz zu erblicken vermag, so kann 
man ihm den Vorwurf nicht ersparen, daß er seine Beobachtungen 
seiner Theorie angepaßt hat, wie man denn überhaupt aus der gan- 
zen Arbeit den Eindruck gewinnt, daß die Theorie der Geschlechts- 
bestimmung, die er für Dinophilus aufgestellt hat, das Primäre war, 
und daß er unter dem Zwange einer vorgefaßten Meinung manches 
zu sehen glaubte, was in Wirklichkeit gar nicht vorhanden ist. 


E Wie sehr Shearer in seiner vorgefaßten 
BE Meinung befangen war, beleuchtet am besten die 
ER Tatsache, daß er die wahre Natur seiner ‚„„Sperma- 
Be kerne‘“ oder ‚männlichen Vorkerne‘‘, der Karyo- 
15 . sphären, nicht erkannt hat, obwohl er selbst auf ihre 

& große Aehnlichkeit mit Gebilden hinweist, die als 

& für die Ovogenese zahlreicher Spezies charakteri- 


stisch schon des öfteren beschrieben worden sind. 
Textfigur 2 Shearer weist auf die vorzüglichen Abbil- 


inukleoiusd von dungen von Obst (1899) und van Bambeke 


Peach Obst = (1898) hin. Ich füge dem noch die ausgezeichnete 

Arbeit Jörgensens (1913) bei, der ebenfalls 
zahlreiche vortreffliche Abbildungen gibt und auch die Literatur 
ausführlich bespricht. Die genannten Autoren haben in den wachsen- 
den Eiern verschiedener Mollusken und Spinnen zwei (oder sogar 


drei) verschiedene Sorten von Nukleolarsubstanzen gefunden. Die 


beiden Sorten, die sich in erster Linie durch ihr färberisches Verhal- 
ten unterscheiden, sind bei ihrem Auftreten völlig unabhängig von- 
einander, können sich aber, veranlaßt durch mechanische oder che- 
motaktische Reize, aneinanderlagern und Körper bilden, die man 
mit einem nicht sehr glücklichen Namen als ‚Amphinukleolen‘ be- 
zeichnet hat. Diese ‚Amphinukleolen‘“ erinnern in der Tat auf- 
fallend an die Nukleolen mit angelagerten Karyosphären in den Ovo- 
zyten von Dinophilus. In Textfigur 2 gebe ich nach Obst den 
Keimfleck (‚‚Amphinukleolus‘) einer Ovozyte von Epeira diademata 


EEE = 


I u 


en 


A 


Be 


eh re 


“2 
% 
1 
i 
i 
4 


 Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 55 


wieder; man vergleiche diese mit der in Textfigur 3 reproduzierten 
| Abbildung Shearers und mit meiner Fig. 23 oder 25, die Aehn- 
lichkeit ist frappant. Die Aehnlichkeit erstreckt sich auch auf die 
verschiedene Färbbarkeit der beiden, den ‚Amphinukleolus‘ zu- 
sammensetzenden Komponenten. Obst färbte mit Boraxkarmin 
e in toto und mit Solidgrün oder Methylgrün im Schnitt. Dabei erwies 
sich die eine Komponente als erythrophil, die andere als zyanophil. 


Bei dem in Textfig. 2 abgebildeten 
‘Nukleolus färbte sich der ‚„Haupt- 
keimfleck‘‘ rot, die beiden den Po- 
len aufsitzenden Kappen färbten 
sich blau, doch kann, wenn die zya- 
nophile Substanz an Masse über- 
wiegt, auch eine umgekehrte La- 
gerung der beiden Komponenten 
erfolgen. Jörgensen benutzte 
die Zimmermannsche Jodgrün- 
Fuchsin-Methode und erzielte eben- 
falls sehr distinkte Doppelfär- 
bungen der „Amphinukleolen“. Ich 
wandte, sowohl die Obstsche wie 
auch die Zimmermannsche Nuk- 
‚leolenfärbung sowie noch meh- 
rere andere Färbungen an und 
erhielt dieselben Resultate wie 


Textfigur 3. 


Ovozyte von Dinophilus gyrociliatus 
mit langgestrecktem Nukleolus und zwei 
Karyosphären, nach Snearer Ovogonie 
mit weiblichen und männlichen Kern- 
bestandteilen in Amitose. (Nach Shearer.) 


schon de Beauchamp (1912) mit der Mannschen Färbung: die 
großen Plastinnukleolen, denen ich mit deBeauchamp trophische 
Funktionen zusprechen möchte, färbten sich mit saueren, die kleinen 
anhaftenden Karyosphären, entsprechend ihrer chromosomalen 
Entstehung, mit basischen Farbstoffen. 


u re 


Trotz ihrer Aehnlichkeit möchte ich indessen nicht behaupten, 
daß die „Amphinukleolen“ der Mollusken und Spinnen und die Nu- 
kleolen + Karyosphären des Dinophilus gleichwertige Gebilde sind. 


| Die Genese der Gebilde scheint nämlich nicht die gleiche zu sein. 
| _ Bei Dinophilus kann, glaube ich, gar kein Zweifel darüber bestehen, 
daß die Karyosphären nichts anderes sind als die nukleolenartig zu- 
sammengeballte Substanz der Chromosomen. Obst hält es zwar 
auch für möglich, daß zwischen der zyanophilen Substanz und dem 


Chromatin Beziehungen existieren, 


Jörgensen hingegen be- 


56 Hans Nachtsheim: 


streitet einen morphologischen Zusammenhang der Nukleolen mit 
den Chromosomen ganz entschieden. Wir kommen damit auf die 
Frage der Existenz ‚‚echter Chromatinnukleolen‘ überhaupt. Die 
Möglichkeit einer nukleolaren Entstehung der Chromosomen und um- 
gekehrt einer chromosomalen Entstehung der Nukleolen ist ebenso 


oft bestritten worden, wie sie behauptet worden ist. M. E. ist diese - 


verschiedene Auffassung der - Beziehungen der Nukleolen zu den 
Chromosomen in ersterLinie darauf zurückzuführen, daß die heterogen- 
sten Dinge als Nukleolen bezeichnet worden sind. Brüel unter- 
scheidet vier Klassen ‚‚nukleolusartiger Bildungen‘“ in seiner Zusam- 
menfassung (1915): 1. Karyosphären. Diese sind, wie gesagt, 
lediglich Klumpen aus zusammengeballten Chromosomen, 2. Chr o- 
matinnukleolen. Mit diesem Namen bezeichnet Brüel 
im speziellen die ‚Ruhe‘stadien mancher Heterochromosomen. 
Auch diese verdienen den Namen ‚‚Nukleolen“ nicht. 3. Eigen t- 
liche Nukleolen oder Plasmosomen, oxychromatisch oder 
achromatisch. 4& Pseudochromatische Nukleolen, 
Chromoplasten oder Karyosomen, mit den vorhergehen- 
den durch Uebergänge verbunden, auch Substan- 
zen umfassend, die heterogener Natur sein mögen, nicht.stets Nukleo- 
lengestalt tragend. Sieht man davon ab, daß Brüel in der letzten 
Klasse wahrscheinlich einige Bildungen unterbringt, die nicht dazu 


gehören, so kann man die beiden letzten Klassen als echte Nu-, 
kleolen zusammenfassen. Die Form des Gebildes genügt jeden- -_ 


falls_ ebensowenig, .um ihm die Bezeichnung Nukleolus beizulegen, 
wie das färberische Verhalten. Wenn ein ‚„Nukleolus‘ 
sich basichromatisch färbt, so ist damit ein genetischer Zusammen- 
hang mit den Chromosomen noch nicht erwiesen. Wie sehr das fär- 
berische Verhalten wechseln kann, geht aus den Untersuchungen 
Jörgensens (1913) hervor. Wir haben sein ‚Gesetz der umge- 
kehrten Reaktionsweise der Kernkomponenten im wachsenden Ei“ 
bereits zitiert. Darnach sind nach dem Bukettstadium die Chromo- 
somen oxy-, die Nukleolarsubstanzen basichromatisch. Auch für 
Dinophilus gilt diese Regel — wir wollen es vermeiden, ehe ihre All- 
gemeingültigkeit bewiesen ist, von einem ‚‚Gesetz‘‘ zu sprechen —, 
nur tritt, wie gesagt, der Umschlag erst später, nach der Differen- 
zierung der Eier, auf. Worauf es uns hier vor allem ankommt, ist 
zu zeigen, daß die färberische Reaktion kein untrügliches Zeichen 
für die Deszendenz des betreffenden Gebildes ist. Der ‚„Chromatin- 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 51. 


nukleolus‘ oder, wie wir ihn genannt haben, die Karyosphäre in den 
Ovozyten des Dinophilus ist nicht deshalb ein Abkömmling der Chro- 
mosomen, weil er bzw. sie sich ebenso färbt wie diese, sondern weil man 
seine Entstehung aus den Chromosomen direkt verfolgen kann. Für 
derartige „‚Nukleolen‘ sollte man diesen Namen überhaupt nicht ver- 
- wenden. Handelt es sich in den beiden Komponenten der ‚Amphi- 
nukleolen‘ bei Mollusken und Spinnen um echte Nukleolarsubstan- 
zen, so sind sie dem Nukleolus + Karyosphäre bei Dinophilusnichi 
gleichwertig, es besteht nur eine äußere Aehnlichkeit zwischen den 
beiden Gebilden. Vielleicht sind es aber in beiden Fällen gleiche 
Faktoren, die diese äußere Aehnlichkeit hervorrufen; rein mecha- 
nische oder auch chemotaktische Reize mögen hier wie dort Ursache 
des Aneinanderlagerns der beiden Substanzen sein. Geht die Ver- 
einigung von Chromosomen bzw. Karyosphäre und Nukleolus noch 
weiter als bei Dinophilus, so kann ein morphologisch vollkommen 
einheitlich erscheinendes Gebilde entstehen. Auf diese Weise 
bildet sich m. E. der für die Keimbläschen der Trematodeneier 
so charakteristische große „‚Nukleolus“. Die Chromosomen ent- 
stehen aus diesem ‚‚Nukleolus‘ nicht, indem Nukleolarsubstanz in 
Chromosomensubstanz übergeht, sondern der zusammengesetzte 
„Nukleolus‘‘ löst sich schließlich wieder in seine Bestandteile auf, 
zerfällt wieder in die Chromosomen einerseits und die Nukleolar- 
substanz andererseits. Im übrigen sei, was die Beziehungen zwischen 
Chromosomen und Nukleolen anbetrifft, auf die ausführliche Be- 
handlung der Frage bei Buchner (1918) hingewiesen, dessen Stand- 
punkt ich völlig teile. 

Die Zusammenballung des Chromatins in der Karyosphäre 
während der Verschmelzungsperiode scheint mir auf eine vollständige 
Inaktivität der chromosomalen Substanz während dieser Periode 
hinzuweisen. Sobald die Verschmelzungsperiode zu Ende ist, hört 
auch diese Inaktivität der Chromosomen auf, die Karyosphären 
lockern sich mehr und mehr auf (Fig. 26), es differenzieren sich die 
Chromosomen als Tetraden heraus (Fig. 27). Doch das ist das Sta- 
dium, auf dem auch die Scheidung in weibliche und männliche Eier 
vor sich geht, von der im nächsten Kapitel die Rede sein soll. 


6. Differenzierung der Eier, Besamung, Eireifung und Befruchtung. 


An die Verschmelzungsperiode schließt sich die dritte Wachs- 
tumsperiode des Eies an. Das Wachstum ist während dieser Periode 


58 Hans Nachtsheim: 


weitaus am intensivsten, wenigstens für die eine Sorte von Eiern, 
die Weibcheneier. Das Ei vergrößert sich nicht mehr durch Auf- 
nahme geformter Substanzen, sondern die Ernährung erfolgt durch 
die Gewebe, nur hie und da wird noch einmal eine junge Ovozyte 
gefressen. Dabei ist nun sehr bald zu konstatieren, daß nicht alle 
Zellen gleich rasch wachsen, sondern eine kleinere Zahl bleibt hinter 
der Mehrzahl an Größe zurück, es beginnen sich morpho- 
logisch die Weibchen- und die Männcheneier 


zu scheiden. Es liegt nahe anzunehmen, daß die Männchen- 


eier das Produkt kümmerlicher Existenzbedingungen sind, daß sie 
der Ernährungsstrom nicht in dem Maße erreicht hat wie die Weib- 
cheneier. ‚In bezug auf die Ausnützung des im Ovar vorhandenen 
Raumes durch die Ovozyten‘, so sagt v. Mäalsen, „zeigt sich als 


fast ausnahmslose Regel, daß die Mitte des Hohlraumes von den 


großen weiblichen Eiern eingenommen wird, während die kleinen 
männlichen an der Peripherie oder in den äußersten Ecken Platz zu 
finden pflegen.‘“ Die Beobachtung v. Malsens ist richtig, wenn 
man die bereits zur Ablage reifen Weibchen- und Männcheneier 
betrachtet. Die kleinen Männcheneier müssen die Lücken füllen, 
die ihnen die weiblichen Eier lassen, sie werden an den Rand oder in 
die Ecken gedrückt (Tafel IV Fig. 34), ja die großen Weibcheneier 
nehmen den Raum oft derart in Anspruch, daß sie die Männcheneier 
fast vollständig umgreifen (Fig. 35). Das ist aber immer erst auf 


diesen späten Stadien der Fall, wenn die Eier schon vollständig locker 


in der Leibeshöhle liegen. Wenn sich die Eier zu differenzieren be- 
ginnen, ist von einer besonderen Lagerung dieser oder jener Sorte 
von Eiern im Ovar nicht das geringste zu bemerken. Man vermag nur 
zu konstatieren, daß zwei Sorten von Eiern gebildet werden, 
und daß sie in bestimmtem Verhältnis — worüber bei 
Besprechung der experimentellen Untersuchungen Genaueres gesagt 
wird — gebildet werden, nach sichtbaren Ursachen 
hierfür sucht man vergeblich. 

Auch die Besamung ist ohne Einfluß auf die Differenzierung 
der Eier, sie erfolgt immer erst nach der Differenzierung (Fig. 33). 
In morphologisch noch indifferenten Eiern fand ich niemals Sper- 
mien. — Uebrigens wird die Unabhängigkeit der Eidifferenzierung von 
der Befruchtung ja auch durch das im experimentellen Teil zu be- 


sprechende Verhalten unbegattet gebliebener Weibchen erwiesen. — 
Die phantastischen Angaben Shearers über Besamung von ‚„Ovo-. 


" a 2 j en ciz ze a cn 
Ba ET a ei Laut Lem Im Del m nn Di de Be nn 2 ulm 2 02 U De nnd 


a en u Be 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 59 


gonien‘“, amitotische Vermehrung der Ei- und Spermakerne usw. 
sind damit jedenfalls erledigt. Immerhin erfolgt die Besamung der 
Dinophiluseier zu einem verhältnismäßig frühen Zeitpunkte, wäh- 
rend der letzten Wachstumsperiode und vor der Reservestoff- 
bildung des Eies. Die beiden in Fig. 33 abgebildeten Eier (Weibchen- 
und Männchenei) sind in die dritte Wachstumsperiode eingetreten, 
das Weibchenei hat sich schon stark vergrößert, in ihm beginnt ge- 
rade die Dotterbildung, beide Eier aber haben ihre definitive Größe 
bei weitem noch nicht erreicht, beide indessen sind schon besamt. 


‚Die Köpfe der eingedrungenen Spermien haben zwar noch ihre 


spindelförmige Gestalt, aber sie sind doch schon stark aufgequollc:: 
und haben um sich einen hellen Hof gebildet. 

Die Besamung kann bekanntlich bei den verschiedenen Organis- 
men zu sehr verschiedener Zeit erfolgen, bald findet sie vor, bald 
während der Eireifung, bald nach derselben statt. Eine derart frühe 
Besamung der Ovozyten wie bei Dinophilus ist indessen selten. Bis- 
her sind erst zwei ähnliche Fälle beschrieben worden: die frühzeitige 
Besamung der Eizellen bei Otomesostoma auditivum, einem alloiocö- 
len Turbellar, nach den Untersuchungen v. Hofstens (1909, 
1911) und die Besamung der jugendlichen Ovozyte bei dem Archia- 
nelliden Saccocirrus, die Buchner (1914) untersucht hat. In bei- 
den Fällen dringen die Samenfäden in die jungen, noch nicht heran- 
gewachsenen Ovozyten ein, jedoch immer erst dann, wenn die synap- 
tischen Phänomene vorüber sind, wenn das Bukett aufgelöst ist und 
einem Chromatinretikulum Platz gemacht hat. Bei Dinophilus lie- 
gen die Verhältnisse insofern etwas anders, als hier auf das Bukett- 
stadium und die Synapsis noch die Verschmelzungsperiode folgt, 
in der das Chromatin in den Karyosphären konzentriert ist. Wenn 
die Verschmelzungsperiode beendet ist und die letzte Wachstums- 
periode beginnt, tritt auch das in den Karyosphären inaktivierte 
Chromatin wieder in Funktion. Die Karyosphären lockern sich auf 
(Fig. 26), und es gehen aus ihnen — ein ähnliches Verhalten zeigen 
nach Blackman (1903) die Karyosphären in der Spermato- 
genese von Scolopendra — die Tetraden hervor (Fig. 27), anfangs 
kleine rundliche Gebilde, die aber bald aufquellen, sich in die Läng: 
strecken und dann meist deutlich ihre Doppelnatur erkennen lassen 
(Fig. 28). Ihre Zahl läßt sich ohne Schwierigkeit auf 10 ermitteln, 
eine Zahl, die der haploiden Chromosomenzahl entspricht. In dem 
in Fig. 28 abgebildeten Zustande — es ist das Stadium, auf dem sich 


60 Hans Nachtsheim: 


zum erstenmal die zukünftigen Weibcheneier durch das stärkere 
Wachstum ihres Plasmaleibes von den Männcheneiern unterscheiden 
lassen — verweilen die Tetraden nur kurze Zeit. Sie beginnen sich 
aufzulockern (Fig. 29). Während dieser Auflockerung sehen wir die 
Samenfäden in die Eier eindringen. Es ist also noch nicht wie bei 
Otomesostoma und Saccocirrus ein gleichmäßiges Chromatinretikulum 
im Kern vorhanden. Aber dieser Unterschied ist wohl darauf zurück- 
zuführen, daß die Ovogenese bei Dinophilus komplizierter verläuft 
als die der beiden genannten Formen, im wesentlichen ist der Zeit- 
punkt der Besamung hier wie dort der gleiche. 

In diesem Stadium tritt nun auch der bereits erwähnte Um- 
schlag in der färberischen Reaktion der beiden Kernbestandteile, 
Nukleolus und Chromatinsubstanzen, ein. Wir hatten ausgeführt, 
daß sich bis zum Ende der Verschmelzungsperiode der Nukleolus 
mit saueren, die Chromosomen bzw. Karyosphären mit basischen 
Farben tingieren. Nur das Safranin macht insofern eine Ausnahme, 
als der Nukleolus auch zu ihm die meiste Zeit über starke Affinität 
zeigt. In Kernen auf dem Stadium der Fig. 27, 28 färben sich sowohl 
die Tetraden wie auch der Nukleolus mit Safranin außerordentlich 
intensiv. Auch bei Eisenhämatoxylinfärbung bleiben Tetraden und 
Nukleolus selbst bei starker Differenzierung — letzterer im Gegensatz 
zu den vorhergehenden Stadien — intensiv schwarz. Diese gestei- 
gerte Färbbarkeit deutet wohl auf eine starke Aktivität der beiden 
Kernbestandteile hin. Mit der Auflockerung der Tetraden erfolgt 
der Umschlag in der färberischen Reaktion. Während die Chromo- 
somen vom Stadium der Fig. 30 ab sauer reagieren, färben sich der 
Nukleolus oder die Nukleolen — neben dem großen Hauptnukleolus 
treten im wachsenden Ei (sowohl im Weibchen- wie im Männchen- 
ei) meist einer oder mehrere kleinere Nukleolen auf — nunmehr mit 
basischen Farbstoffen. Das späte Eintreten des Umschlages in der 
färberischen Reaktion der beiden Kernbestandteile in der Ovogenese 
von Dinophilus im Vergleich zu den von Jörgensen untersuch- 
ten Objekten ist jedenfalls auch in der Kompliziertheit des Eibildungs- 
prozesses bei dieser Spezies begründet. 

Ueber die Bildung der Reservesubstanzen der Eier habe ich keine 
Untersuchungen mit besonderen Färbungen angestellt; gerade im 
Hinblick auf den verschiedenen Bau der extranukleären Bestandteile 
der Weibchen- und Männcheneier erscheinen indessen derartige 
Untersuchungen als sehr wünschenswert. 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 61 


Das Plasma der Ovozyten am Ausgang der Verschmelzungs- 
periode ist gleichmäßig fein granuliert (Fig. 23). Auch in den jüng- 
sten Eiern, die sich schon als männlich oder weiblich unterscheiden 
lassen, ist kein Unterschied in der Zusammensetzung des Plasmas 
zu bemerken; nur zeigt eben das Plasma des Weibcheneies ein we- 
sentlich rascheres Wachstum als das des Männcheneies. Der Größen- 
unterschied der beiden Eiersorten ist schon recht beträchtlich, wenn 
im Weibchenei die Dotterbildung beginnt (Fig. 33 auf Tafel IV). 
Bei Saccoeirrus treten nach Buchner (1914) die ersten Dotter- 
partikelchen rings um den Kern auf. Bei Dinophilus ist das nicht 
der Fall, die ersten kleinen Dotterkügelchen erscheinen im ganzen 
Plasma des Weibcheneies verteilt. Im übrigen verläuft der Prozeß 
aber ganz ähnlich wie bei Saccocirrus. Hier wie dort liegen die klein- 
sten Granula in Flüssigkeitsbläschen, die sie, langsam heranwachsend, 
später fast vollständig ausfüllen. Während die zuerst aufgetretenen 
Dotterkügelchen größer und größer werden, erscheinen immer wieder 
neue kleine und kleinste Dotterpartikelchen, und so tritt das Plasma 
mehr und mehr zurück, während sich das ganze Weibchenei mit 
Dotterkugeln verschiedener Größe füllt (Fig. 34). — Die beiden 
Fig. 33 und 34 sind nach Eisenhämatoxylinpräparaten gezeichnet, 
die mit Eisenalaun differenziert wurden; bei Salzsäurealkohol-Diffe- 
renzierung (Fig. 35 und folg.) entfärbt sich der Dotter sehr rasch. 
— Im Männchenei setzt die Dotterbildung später ein; in dem in 
Fig, 33 wiedergegebenen Männchenei z.B. hatsie noch nicht begonnen. 
Es wird auch bei weitem nicht in dem Umfange Dotter gebildet 
wie im Weibchenei, sodann ist die Tingierbarkeit der Dotterkugeln 
wesentlich geringer. Im Männchenei, in dem die Dotterbildung be- 
endet ist, und das seine definitive Größe erreicht hat (Fig. 34), über- 
wiegt immer das Plasma ganz im Gegensatz zum Weibchenei die 
Dottersubstanzen an Masse beträchtlich. 

Die Tetraden lockern sich während der Dotterbildung weiterhin 
auf (Fig. 30 und 31 sowie 33). Dabei ist häufig zu beobachten, daß 
die Chromosomenpaare zopfartig umeinandergewickelt sind. Die 
Auflockerung geht schließlich so weit, daß sich die einzelnen Tetra- 
den nicht mehr unterscheiden lassen. In fertigen Weibchen- und 
Männcheneiern durchzieht ein feines Retikulum den ganzen Kern 
(Fig. 32 und Fig. 34 Weibchenei), in dem außer einem großen Nukleo- 
lus meist einer oder mehrere kleine liegen. Die Veränderungen im 
Kern gehen ebenso wie die im Plasma im Männchenei in der Regel 


62 Hans Nachtsheim: 


langsamer vor sich als im Weibchenei, im übrigen aber ist, von der 
Größe abgesehen, kein Unterschied zwischen den beiden Kernen zu 
bemerken (Fig. 34). 

Ehe die Eier abgelegt werden, bildet sich in allen die erste Rei- 
fungsspindel aus. Hier geht meist das Männchenei dem Weibchenei 
etwas voran. So ist in Fig. 35 im Männchenei die erste Richtungs- 
spindel bereits voll. ausgebildet, die Chromosomen sind in der in 
der Schnittfläche liegenden Aequatorialplatte angeordnet, im Weib- 
chenei hingegen ist das Keimbläschen erst im Begriffe, sich aufzu- 
lösen. In den Ovogonienmitosen habe ich vergeblich nach Plasma- 
‚strahlungen und Zentren gesucht, die Reifungsteilungen sind von 
kräftigen und ausgedehnten Plasmastrahlungen begleitet, ebenso 
sind Zentrosomen nachweisbar und bei geeigneter Färbung auch die 
Zentriolen in ihnen. Woher die Zentren stammen, ob sie unsichtbar 
vorhanden waren, ob sie aus Kern oder Plasma herrühren, oder ob 
sie de novo entstehen, vermag ich nicht zu sagen. Fig. 35 erweckt 
den Eindruck, als ob das große Zentrosom eben aus dem Kern aus- 
trete. Soviel aber ist sicher, daß es die E i zentrosomen sind, die wäh- 
rend der Reifungsteilungen funktionieren; das Zentrosom des Sper- 
makernes ist auf diesem Stadium noch vollkommen inaktiv. Wahr- 
scheinlich ist ursprünglich nur ein Eizentrosom vorhanden, das sich 
in Fig. 35 offenbar -gerade geteilt hat. Das eine Tochterzentrosom 
schickt sich gerade an, auf die gegenüberliegende Seite des Kernes. 
zu wandern, während das andere bereits seine Wirksamkeit zu ent- 
falten beginnt. Auffällig ist der Unterschied in der Größe der beiden 
Zentrosomen. Dieser bleibt auch fernerhin bestehen; das kleinere 
Zentrosom ist jenes, das beim Wandern der Spindel nach der Ablage 
des Eies an die Peripherie zu liegen kommt. Aehnliche Größen- 
differenzen der Eizentrosomen wurden von Goldschmidt (1905) 

und Gille (1914) bei Trematoden (Zoogonus, Gyrodactylus) und von 
' Breßlau (1904) bei Turbellarien (Mesostomum) beobachtet. 

Die Tetraden sind in dem Weibchenei der Fig. 35 dabei, sich 
wieder zu verdichten, die Kernmembran wird unter dem Einfluß des 
Zentrosoms gerade aufgelöst. Auch die Nukleolen verfallen mit 
Beginn der Reifungsteilungen der Auflösung, doch kann der Haupt- 
nukleolus im Männchen- wie im Weibchenei ins Plasma übertreten 
und hier noch eine zeitlang als sogenannter „Metanukleolus‘‘ — wie 
nach Obst (1899) bei Limax und nach Wheeler (1895, 1897) 
und Kostanecki (1898) bei Myzostoma — persistieren, um dann 


a nn a 2 u FB 


Bu; ME, Wwe 
ERTL SER ı 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 63 


resorbiert zu werden. In frühen Stadien bietet er leicht zu Verwechs- 
lungen mit dem eingedrungenen Spermatozoon Anlaß, das sich 
inzwischen in den männlichen Pronukleus umgewandelt und den 
Charakter eines Kernes mit großem Nukleolus angenommen hat 


(Fig. 35). Lage, Größe und Färbbarkeit lassen indessen meist doch eine 


sichere Entscheidung darüber zu, ob es sich um den männlichen Vor- 
kern oder den Metanukleolus handelt. Der Metanukleolus liegt na- 
türlich zunächst in der Nähe der Reifungsspindel, also im Zentrum 
des Eies, während der männliche Vorkern auf diesem Stadium meist 
noch am Rande liegt (Fig. 35). In den Männcheneiern ist allerdings 
infolge ihrer Kleinheit dieses Merkmal meist nicht sehr deutlich 
(Fig. 37). Was die Größe angeht, so übertrifft der männliche Vorkern 
den Metanukleolus bald ganz beträchtlich, und hinsichtlich der Färb- 
barkeit der beiden Gebilde ist zu sagen, daß der degenerierende 
Nukleolus diese fast vollständig eingebüßt hat, während der Nukleo- 
lus des männlichen Vorkernes sich mit saueren Farbstoffen tingiert; 


von den Chromosomen läßt sich im männlichen Pronukleus zunächst 


färberisch nichts nachweisen. Ueberdies sei noch bemerkt, daß der Vor- 
kern eine deutliche Membran besitzt, der Metanukleolus hingegen ist 
von einem hellen Hof umgeben, eine Membran aber, die diesen gegen 
das Plasma abgrenzt, fehlt. Auffällig ist, daß auf dem in Fig. 35 im 
Weibchenei abgebildeten Stadium der Metanukleolus schon außer- 
halb des Kernes liegt, während doch die Kernmembran noch fast voll- 
ständig erhalten ist. Bei Limax und Myzostoma wird der Nukleolus 
erst durch die Auflösung der Kernmembran frei und gelangt so ins 
Plasma. Ob der Nukleolus in den Eiern von Dinophilus tatsächlich 
vor Auflösung der Kernmembran aktiv durch diese hindurchschlüpft, 
oder ob die in Fig. 35 wiedergegebenen Verhältnisse eine zufällige 
Erscheinung darstellen, vermag ich nicht zu sagen, da mir weitere 
Präparate von diesem Stadium nicht zu Gesicht gekommen sind. 
Jedenfalls aber ist die extranukleäre Lage des Nukleolus in dem in 
Fig. 35 gezeichneten Präparat kein Kunstprodukt, was man .von 
den in v. Malsens Fig. 7 und 9 reproduzierten Verhältnissen 
sagen muß, die auf schlechte Fixierung und schlechte Schnitte hin- 
weisen. v. Malsen gibt selbst zu, daß es ihm ‚nahezu unmöglich“ 


. war, „fertige Ovozyten oder abgelegte Eier in wirklich tadellose 


Schnitte zu zerlegen‘. 
Die fertige erste Reifungsspindel in den noch nicht abgelegten 


Eiern zeigen die Fig. 36 und 37. Die Zahl der Chromosomen bzw. 


64 Hans Nachtsheim: 


der Tetraden festzustellen, ist antangs nicht leicht, da die Spindel zu- 
erst sehr schmal ist und die Chromosomen sehr dicht beisammen lie- 
gen. Die Beobachtungen an älteren Eiern erlauben indessen, die Zahl 
der in die erste Reifungsteilung eintretenden Tetraden mit Sicherheit 
auf 10 zu bestimmen. Im Stadium der Metaphase verharrt das Ei 
— das weibliche wie das männliche — bis zur Ablage, und zwar 
bleibt die Spindel immer im Zentrum liegen. Eier, deren Reifungs- 
spindel sich im Stadium der Metaphase befindet, können anscheinend 
noch längere Zeit im Körperinnern zurückbehalten werden, wenig- 
stens findet man Weibchen mit Eiern und erster Reifungsspindel 
sehr häufig. Um so merkwürdiger ist es, daß v. Malsen nur „ein 
einziges Mal in einem Ovarialei eine Richtungsspindel fand“. 

Sobald die Eier abgelegt sind, nimmt die Reifung ihren Fort- 
gang. Die Reifungsspindel rückt zunächst an die Oberfläche des Eies 
(Fig. 38). Dabei verbreitert sie sich etwas, die Tetraden rücken 
weiter auseinander und können leichter gezählt werden. Es sind 10, 
jede Tetrade hat die Form einer Doppelkugel. Die gegen die Periphe- 
rie zu liegende Strahlung wird während der Wanderung der Spindel 
an die Eioberfläche rückgebildet, ebenso verschwindet das äußere, 
kleinere Zentrosom. Ob es mit in den ersten Richtungskörper hinein- . 
gerät, wie z. B. bei Gyrodactylus (Gille 1914), ließ sich nicht 
nachweisen, da es eben vorher unsichtbar wird. Erst wenn die Spin- 
del an der Peripherie angelangt ist, werden die Tetraden halbiert. 
Im Stadium der späten Anaphase (Fig. 39 und 40) läßt sich die Zahl 
der Chromosomen mit Leichtigkeit ermitteln. Zehn Chromosomen 
(Dyaden) kommen in den ersten Richtungskörper, zehn bleiben im 
Ei. Die Chromosomen sind — in der Anaphase ebenso wie bereits 
vorher in der Metaphase — auf der Peripherie eines Kreises angeord- 
net, Größenunterschiede zwischen den einzelnen Elementen fehlen. 
Der Richtungskörper schnürt sich als kleine Plasmaknospe mit den 
Chromosomen vom Ei ab (Fig. 40), wobei die Spindelfasern zusammen- 
gedrückt werden und so einen Ring um eine schmale Plasmabrücke 
bilden, die die letzte Verbindung des Richtungskörpers mit dem 
Ei darstellt. Auch diese Verbindung schwindet schließlich, der Rich- 
tungskörper liegt dann auf dem Ei, zwischen diesem und der (in den 
Fig. der Tafeln IV und V nicht eingezeichneten) Dotterhaut. 

Die im Ei zurückbleibenden Chromosomen ordnen sich nicht 
gleich in der Aequatorialplatte der zweiten Reifungsspindel an, 
sondern zwischen beide Teilungen ist ein, wenn auch nur kurzes, 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 65 


Ruhestadium eingeschoben. Die Bildung eines einheitlichen Kernes 
unterbleibt jedoch. Indem die Chromosomen aufquellen, etwas aus- 
einanderrücken und einen hellen Hof um sich bilden, der durch eine 
Membran vom Plasma getrennt wird, entstehen so viele kleine Kern- 
chen, Karyomeriten, wie Chromosomen vorhanden sind, also 10 
(Fig. 41), ein Vorgang, wie er bei Trematoden und Turbellarien 
häufig beschrieben worden ist. Die Karyomeriten wachsen heran, 
die einen rascher, die andern langsamer, wandern ein wenig von der 
Eioberfläche gegen das Zentrum des Eies zu, behalten aber wie vor- 
her die Chromosomen ihre kranzförmige Anordnung bei. Eine Ver- 
schmelzung einzelner Karyomeriten, wie man sie nach der Reifung 
gelegentlich beobachtet, findet zwischen den beiden Reifungsteilungen 
nicht statt. Der Spermakern hat inzwischen seine Umwandlung in 
den männlichen Vorkern beendet und liegt als großer einheitlicher 
Kern ungefähr im Zentrum des Eies (Fig. 41). Er enthält mehrere 
Nukleolen, nach und nach wird ein feines achromatisches Kernnetz 
sichtbar. Umgeben ist der männliche Pronukleus von einer Plasma- 
strahlung, die mit dem Fortschreiten des Reifungsprozesses an Deut- 
lichkeit und Umfang zunimmt. 

Das Ruhestadium zwischen erster und zweiter Reifungsteilung 
ist nur von kurzer Dauer. Die Karyomeriten werden bald wieder 
aufgelöst und bilden sich wieder in Chromosomen um, eine neue 
Spindel entsteht, von deren beiden Polen wieder deutliche Strah- 
lungen ausgehen (Tafel V Fig. 46). Das größere, im Ei zurückge- 
bliebene Zentrosom hat sich also anscheinend wieder geteilt. Leider 
sind die Einzelheiten des Verhaltens der Zentrosomen sehr schwer 
zu ermitteln, da während der Mitosen ein deutlich gegen das Zyto- 
plasma abgesetztes Zentroplasma nicht vorhanden ist und die Zen- 
triolen bei ihrer Kleinheit meist nur in überfärbten Eisenhämatoxy- 
linpräparaten sichtbar sind. Die zweite Reifungsspindel, die wie die 
erste anfangs gegen die Mitte des Eies zu liegt, rückt wieder an die 
Oberfläche, auf den ersten Richtungskörper zu. Die 10 Dyaden, die 
wieder auf der Peripherie eines Kreises liegen, teilen sich, und es 
wird nunmehr in ganz ähnlicher Weise wie bei der ersten Reifungs- 
teilung der zweite Richtungskörper abgeschnürt, der dann unmittel- 
bar neben dem ersten liegt (Fig. 42 und 47). Der erste Richtungs- 
körper teilt sich kurz nach Abschnürung des zweiten nochmals (Fig. 
43, 44 und 48), der Inhalt beider wird aber sehr bald völlig achro- 


matisch. 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 5 


66 Hans Nachtsheim: 


Die im Ei zurückbleibenden 10 Chromosomen quellen wieder 
wie nach der ersten Reifungsteilung auf, rücken auseinander und bil- 
den 10 Karyomeriten (Fig. 42 und 43; in beiden Fig. sind nicht alle 
Karyomeriten auf dem Schnitt getroffen). Es sei übrigens darauf 
hingewiesen, daß wir auch hier wieder ein Beispiel für ‚‚nukleolus- 
artige Bildungen‘‘ haben, die nichts mit echten Nukleolen zu tun 
haben. Ebenso ist es bei den Trematoden und Turbellarien mit der 
Karyomeritenbildung. Zu sagen, die Chromosomen wandeln sich hier 
in Nukleolen um, ist ebenso falsch wie die umgekehrte Behauptung, 
daß die Chromosomen aus Nukleolen hervorgehen. Das Aussehen 
der Chromosomen, die Lage jedes einzelnen innerhalb eines eigenen 
Kernchens täuscht lediglich ‚„‚Nukleolen‘ vor. Anders in dem einheit- 
lichen männlichen Vorkern. Hier sind einer oder mehrere echte 
Plastinnukleolen neben einem beim weiteren Wachstum des Kernes 
immer deutlicher werdenden, zunächst achromatischen Retikulum 
vorhanden (Fig. 42 und folg.). Die zuerst gleich großen (Fig. 47) 
Karyomeriten wachsen sehr rasch, jedoch verschieden schnell. Viel- 
leicht ist dieses verschiedene Wachstum der Karyomeriten lediglich 
auf ihre Lage zurückzuführen. Es zeigt sich nämlich, daß in der Regel 
die in der Mitte liegenden Karyomeriten, die durch die andern in 
ihrem Wachstum behindert werden, klein bleiben (Fig. 43 und 44). 
Ab und zu können anscheinend auch einzelne Karyomeriten mitein- 
ander verschmelzen, doch kommen derartige Verschmelzungen 
wohl nicht häufig vor, denn in der großen Mehrzahl der Fälle ver- 
mindert sich die Zahl der Karyomeriten des weiblichen Pronukleus 
bis zur Vereinigung mit dem männlichen Pronukleus nicht. 

Der männliche Vorkern erwartet die Karyomeriten des weib- 
lichen im Zentrum des Eies. In Fig. 43 haben sie ihre Wanderung 
ins Eiinnere begonnen, die Fig. 44 und 48 zeigen die Vereinigung. 
Der männliche Pronukleus entfaltet in der letzten Periode vor der 
Vereinigung noch ein starkes Wachstum und ist immer wesentlich 
srößer als selbst die größten Karyomeriten, daher auch nach der 
Kopulation der Pronuklei immer noch leicht zu erkennen. Niemals 
zerfällt auch er in Karyomeriten, und dadurch unterscheidet sich 
Dinophilus von den genannten Turbellarien und Trematoden. Ob 
eine Verschmelzung der Vorkerne bzw. des männlichen. mit den 
Karyomeriten des weiblichen stattfindet, vermag ich nicht anzu- 
geben, da mir leider Uebergänge zur ersten Furchungsspindel fehlen. 
Ich halte indessen eine Verschmelzung für sehr unwahrscheinlich, 


l 


re, 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 67 


da ich die Kopulation der Pronuklei ohne Verschmelzung vielfach 
beobachten konnte. 

Die Angaben Shearers über die Eireifung bei Dinophilus 
mit unseren Beobachtungen zu vergleichen, erachte ich bei der Lücken- 
haftigkeit und Unklarheit, die die Shearersche Darstellung kenn- 
zeichnen, für überflüssig. Nur auf einen Punkt sei hier hingewiesen. 
Einen männlichen Vorkern kann Shearerin den reifenden Eiern 
natürlich nicht brauchen, nicht in dem schon vor der Reifung ,‚,‚be- 
fruchteten‘‘ Weibchenei und erst recht nicht in dem ‚‚unbefruchte- 
ten‘‘ Männchenei. Nun wäre es aber mehr als sonderbar, wenn ihm, 
speziell in den dotterarmen Männchen- 
eiern — Shearer hatin die Männ- 
cheneier viel zu viel Dotter eingezeich- 
net bzw. einzeichnen lassen —, der 
Spermakern bzw. der männliche Vor- 
kern entgangen wäre, und er ist ihm 
auch tatsächlich nicht entgangen. In 
drei reifenden Männcheneiern, in seinen 
Fig. 38, 39 und 45 — ich gebe die eine 
in Textfig. 4 wieder —, hat er ihn ab- 
gebildet und als — „‚problematic body“ 7 

} £ 2 ü Textfigur 4. 
bezeichnet! Ob-es:sich in dem einen 1. „chenei von Sr 
oder anderen Falle nicht um den männ- ee eigen BicH- 
lichen Vorkern, sondern um den Meta- ae ee 
nukleolus handelt, könnte mit Sicher- 
heit natürlich nur ein genaues Studium der Präparate erwei- 
sen, immerhin glaube ich aus den oben angeführten Grün- 
den annehmen zu dürfen, daß es sich in den Abbildungen 
Shearers tatsächlich um männliche Vorkerne handelt. Was 
speziell die in Textfig. 4 reproduzierte Abbildung anbelangt, so kann 
hier die wahre Natur des ‚problematic body‘ schon deshalb nicht 
zweifelhaft sein, weil Shearer selbst den Beginn der Plasma- 
strahlung eingezeichnet hat (ohne ein Wort darüber zu sagen!), die 
natürlich um den Metanukleolus nie auftritt. Shearer hat aber 
auch die Kopulation der Pronuklei im Männchenei dargestellt, 
wie unsere Textfig.5(s.n.S., Shearers Fig. 43) zeigt. Diese demon- 
striert sogar ganz vorzüglich den Unterschied zwischen dem männ- 


* 
Der 
... 


- lichen Vorkern und den Karyomeriten des weiblichen. Den männlichen 


Vorkern durchzieht ein feines Retikulum, das den Karyomeriten 
5* 


68 Hans Nachtsheim: 


fehlt. Daß Shearer immer zwei Chromosomen in einem Karyo- 
meriten vereinigt zeichnet, hat wohl seine Ursache in einem Beobach- 
tungsfehler. Ganz unverständlich ist die Erklärung, die Shearer 
zu seiner Fig. 43 (unsere Textfig. 5) gibt: „Männchenei mit Anaphase 
der zweiten Reifungsteilung.‘“ Er wußte also überhaupt nicht, was 
er vor sich hatte. Im Weibchenei soll der „‚problematic body“ feh- 
len. Die Vereinigung der Vorkerne hat Shearer aber auch hier 
gesehen, denn in seiner Fig. 36 z. B. kann es sich in den großen Ker- 
nen der beiden Weibcheneier wohl nur um die männlichen Pronuklei 
handeln. Daß Shearer seine Präparate so ganz und gar miß- 

deutet hat, ist um so unverständ- 


ses AR licher, als Nelson in seiner ersten 
ee tan E x A E h 
ee, \ Arbeit (1904) bereits zwei ganz richtige 


L \ Skizzen von der Eireifung und Befruch- 
2 tung bei Dinophilus gegeben und bei- 
\ Wertigkeit der verschiedenen Teile voll- 
\ ständig richtig erkannt hat. 

Am Schlusse unserer Darstellung 
der Eireifung und Befruchtung bei Di- 
nophilus sei nochmals ausdrücklich be- 
tont, daß im Weibchen- und im Männ- 
chenei — auch die Abbildungen demon- 


»yo>»,*s as 
S Gare " Pia 5 


Textfigur 5. 


Männchenei von Dinophilus gyro- 


ciliatus, Kopulation der Pronuklei, strieren das ja zur Genüge — die ge- 
nach Shearer ‚„Anaphase der zwei- ee R 
ten Reifungsteilung‘‘. samten Prozesse völlig in der gleichen 


(Nach Shearer). i h k 
Weise verlaufen, nur ist das Männchen- 


ei in der Entwicklung meistens ein wenig zurück. 


7. Die ersten Furchungsteilungen. 


Ehe wir den Verlauf der ersten Furchungsteilungen in Weibchen- 
und Männchenei schildern, sei noch die Frage der Herkunft der Tei- 
lungszentren der ersten Furchungsspindel einer Besprechung unter- 
zogen. Schon in meiner Bienenarbeit (1913) bin ich der Ansicht 
Kostaneckis (1906) entgegengetreten, daß ‚im befruchteten 
Eisämtlicher Metazoen die Zentriolen der ersten Furchungs- 
spindel die direkten Abkömmlinge des vom Spermatozoon eingeführ- 
ten Zentriols sind.‘“ Die von dieser Regel statuierten Ausnahmen 


sollen sich nach Kostanecki bei genauerer Prüfung als unhalt- 


bar erweisen. Schon damals lagen indessen genug Beobachtungen 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 69 


vor, die die Richtigkeit dieser zuerst von Bo veri (1887) vertrete- 
nen Ansicht Kostaneckis sehr in Frage stellten, auch meine 
Beobachtungen am Bienenei sprachen dagegen, und inzwischen hat 
sich ihre Zahl noch beträchtlich vergrößert. Man kann heute sagen, 
daß zwar in sehr vielen Fällen die Teilungszentren der ersten Fur- 
chungsspindel vom Spermatozoon stammen, eine Regel oder gar 
einGesetz, wieBoveriursprünglich meinte, ist das aber durch- 
aus nicht. Boveri (1915), der, wie er ausdrücklich betont, in der 
Frage der Herkunft der Furchungszentren niemals einen so ex- 
klusiven Standpunkt eingenommen hat wie Kostanecki, erachtet 
durch meine Untersuchungen — mehr als ich es selbst getan hatte 
— den Beweis für erbracht, daß auch die Furchungszentren des 
befruchteten Bieneneies — für die des unbefruchteten 
bleibt ja gar keine andere Möglichkeit — dem Ei entstammen. Ob 
dabei die alten Eizentrosomen erhalten bleiben — ähnlich wie nach 
den schönen Untersuchungen von Müller-Cal& (1913) im par- 
thenogenetischen Ei von Cypris, wo die Zentrosomen des Ovozyten- 
kernes während der Reifungsteilungen abseits liegen, um nachher, 
bei der ersten Furchungsteilung, wieder in Tätigkeit zu treten —, 
oder ob das Ei vollständig neue Zentrosomen bildet, ist eine Frage 
für sich. Ein sehr schönes Beispiel für Erhaltenbleiben des Ei- 
zentrosoms ist nach den Untersuchungen von Gille (1914) 
Gyrodactylus. Im besamten Ei dieses Trematoden ist weder ein 
Spermazentrosom noch eine Spermastrahlung vorhanden, und es 
läßt sich einwandfrei zeigen, daß die Zentrosomen der ersten Fur- 
chungsspindel aus dem großen Eizentrosom ihren Ursprung nehmen. 
Es ist nun aber noch ein dritter Fall denkbar: das eine der beiden 
Furchungszentren kann vom Spermatozoon, dasandere 
vom Ei stammen. Soistesnach Conklins Angaben (1901, 1902) 
bei Crepidula. Und aus Dispermieexperimenten Schaxels (1913) 
mit Aricia erschließt Boveri (1915), daß bei diesem Wurm eben- 
falls jeder Gamet ein Zytozentrum zur Zygote beisteuert. 

Auch bei Dinophilus ist meiner Ansicht nach dieser letzte Fall 
gegeben. Den lückenlosen Beweis vermag ich zwar infolge der Un- 
gunst des Objektes nicht zu erbringen, aber ich glaube doch immer- 
hin auf Grund meiner Beobachtungen als das Wahrscheinlichste be- 
zeichnen zu dürfen, daß Ei und Spermatozoon je ein Zentrosom für 
die erste Furchungsspindel liefern. Wir haben ausgeführt, daß zu 
Beginn der Eireifung, wenn sich der Kern auflöst, zwei Zentren von 


70 Hans Nachtsheim: 


ungleicher Größe an ihm auftreten (Fig. 35). Diese beiden Zentren, 
die wahrscheinlich kurz vorher aus einem entstehen, nehmen die Pole 
der ersten Reifungsspindel ein, das große den Ei-, das kleine den 
Richtungskörperpol. Die zweite Reifungsspindel ist wieder ebenso 
gebaut wie die erste, wieder bleibt das größere Zentrosom im Ei, und 
dieses wandert nun, umgeben von einer kräftigen Strahlung, zusam- 
men mit den Karyomeriten des weiblichen Vorkernes dem männ- 
lichen Vorkerne entgegen. Da das Zentroplasma, wie ich schon sagte, 
während der Reifungsteilungen nicht scharf gegen das Zytoplasma 
abgesetzt ist, lassen sich die Zentren allerdings nicht immer leicht 
nachweisen, vorhanden aber sind wenigstens die Zentriolen immer. 
Das Zytozentrum des Spermakernes ist während der Reifung des 
Eies ebenfalls aktiv geworden, und wenn die Vorkerne kopulieren 
(Fig. 44), tritt das Spermazentrosom — ich vermag die Präparate 
nicht anders zu deuten — an den einen, das Eizentrosom an den 
anderen Spindelpol. Die Zentriolen beider Pole sind gleich gebaut 
— in Fig. 44 wie in Fig. 45 haben sich beide schon verdoppelt —, 
ausgeprägte Zentrosomen fehlen, die Strahlungen aber, die von 
beiden Zentren ausgehen, sind in der Größe deutlich verschieden. 
Diese Verschiedenheit ist nicht etwa ein Zufall oder auf die Schnitt- 
. führung zurückzuführen, sondern sie tritt ganz konstant in der 
ersten Furchungsspindel auf. Ich möchte annehmen, daß sie in einer 
verschieden starken Kraftentfaltung der Zentren ihre Ursache hat. 
Nun ist schon vor der Kopulation der Pronuklei festzustellen, daß 
die vom Eizentrum ausgehende Strahlung stärker ist als die des 


Spermazentrums, und so ist es sehr wahrscheinlich, daß die größere - 


Strahlung der ersten Furchungsspindel ebenfalls vom Eizentrosom, 
die kleinere aber vom Spermazentrosom ausgeht. 

Diese „Heterozentrie“ (Goldschmidt 1905) ist noch in 
anderer Hinsicht von wesentlicher Bedeutung. Ebenso wie bei Zoo- 
eonus (Goldschmidt 1905) ist sie die Ursache der inäqualen 
Teilung des Dinophilus-Eies. Obwohl die beiden Dinophilus-Eier, 
Weibchen- und Männchenei, vom Kern abgesehen so ganz verschie- 
den gebaut sind, obwohl das eine außerordentlich dotterreich ist, 
das andere sehr dotterarm, fast dotterfrei, furchen sich doch beide 
in ganz der gleichen Weise: beide werden durch die erste Furchungs- 
teilung in zwei sehr ungleiche Hälften zerlegt (Fig. 49 und 51), und 
das, obwohl im Weibchen- wie im Männchenei die Dottersubstanzen 
ganz gleichmäßig im ganzen Ei verteilt sind. Die totale inäquale 


ca re 


ee A 


an u ua aa 


DIE dm in a an Ic: 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 71 


Teilung ist hier also lediglich auf die heterodynamischen Zentren 
zurückzuführen. 

Im übrigen haben wir über die ersten Furchungsteilungen nur 
noch wenig zu sagen. In den Aequatorialplatten der Furchungs- 
mitosen (Fig. 45) bietet die Feststellung der Chromosomenzahl 
Schwierigkeiten. Unschwer aber kann die Zahl bestimmt werden, 
wenn die Tochterchromosomen an die Pole gewandert sind und sich 
aus ihnen ebensoviele Karyomeriten gebildet haben (Fig. 50): immer 
sind 20 Karyomeriten — anfangs wenigstens — vorhanden, 20 ist 
die somatische Chromosomenzahl. Die Karyomeriten wachsen 
heran, verschmelzen teilweise (Fig. 49 und 51), doch habe ich auch 
während der Furchung nie einheitliche Kerne gefunden. Ein Unter- 
schied im Verhalten der väterlichen und mütterlichen Chromosomen 
bzw. Karyomeriten ist während der Furchung nicht vorhanden. 
Bei der Zelldurchschnürung kommen durch Zusammenziehung der 
Spindelfasern ähnliche Ringbildungen zustande (Fig. 51) wie schon 
bei Abschnürung der Richtungskörper. Diese werden übrigens im 
Laufe der Furchung früher oder später von einer der Blastomeren 
aufgenommen (Fig. 51) und resorbiert. 

Bei der zweiten Furchungsteilung ist die größere Blastomere 
der kleineren immer etwas voraus (Fig. 52). Dieselbe Beobachtung 
machte auch Nelson (1904) bei Dinophilus conklini, während 
Korschelt (1882), Schimkewitsch (1895) und Prowa- 
zek (1900) auffälligerweise das Umgekehrte gefunden haben. 


Experimentelle Untersuchungen. 
8. Das Geschlechtsverhältnis in den Normalkulturen. 


Alle Untersucher, die sich bisher mit Dinophilus experimentell 
beschäftigt haben, fanden in ihren Kulturen ein bestimmtes Ge- 
schlechtsverhältnis, d. h. Männchen- und. Weibcheneier traten in 
sanz bestimmten Zahlenverhältnissen auf. Dieses Geschlechts- 
verhältnis ist nun aber bei den verschiedenen Untersuchern durchaus 
nicht immer das gleiche. ‚Die Zahl der Männchen“, sagt Kor- 
schelt (1882), ‚verhält sich, den abgelegten Eiern nach zu ur- 
teilen, zu der der Weibchen wie 1:2. Es finden sich immer un- 
gefähr doppelt so viel weibliche als männliche Eier in jeder Kapsel.“ 
In Prowazeks (1900) Kulturen scheint das Verhältnis der 
Männchen zu den Weibchen wesentlich günstiger für die Männchen 


12 Hans Nachtsheim: 


gewesen zu sein; wenn er auch bestimmte Angaben nicht macht, 
so glaube ich das doch aus seinen Worten schließen zu Können: 
„Oft werden mehrere Eier zu einer Gruppe vereinigt auf abge- 
storbenen Meersalatfetzen abgelegt, meist sind aber nur zwei — 
ein männliches und ein weibliches Ei — in zweckmäßiger Weise 
miteinander verbunden.‘‘ Das dGeschlechtsverhältnis wäre alse 
ungefähr wie 1:1. Nelson (1904) zählte in 50 Kokons 214 Eier, 
und zwar 79 Männcheneier und 135 Weibcheneier. Das entspricht 
einem Geschlechtsverhältnis von 1 &: 1,71 22. v. Malsen (1906) 
hinwiederum gibt die Zahl der Weibchen in seinen ‚„‚Normalkulturen‘‘, 
d. h. in seinen Kulturen bei Zimmertemperatur (19° C), als be- 
trächtlich höher an. Er zählte in 202 Gelegen insgesamt 1140 Eier, 
und zwar 327 Männcheneier und 813 Weibcheneier, Geschlechts- 
verhältnis also: 1 & :2,4 229. Ausführlichere Angaben über das 
Verhältnis der Männchen- zu den Weibcheneiern macht Shearer 
(1912). Er wandte seine besondere Aufmerksamkeit der Frage zu, 
ob sich das Geschlechtsverhältnis im Verlaufe eines Jahres ändert. 
10 Kokons, die er im Frühjahr durchmusterte, enthielten 76 Eier, 
20 Männchen- und 56 Weibcheneier, Geschlechtsverhältnis also: 
15 :2,8 99. Im Sommer enthielten 10 Kokons 79 Eier, 22 Männchen- 
und 57 Weibcheneier, Geschlechtsverhältnis also: 1 & : 2,59 92. 
Im Herbst fand er in 10 Kokons 78 Eier, 23 Männchen- und 55 
Weibcheneier, Geschlechtsverhältnis also: 1 & : 2,39 22. Im Winter 
fand er in 10 Kokons 61 Eier, 18 Männchen- und 43 Weibcheneier, 
Geschlechtsverhältnis also: 1 & : 2,39 22. Die Schwankungen des. 
Geschlechtsverhältnisses im Laufe des Jahres sind somit kaum nen- 
nenswert, und es wären die Unterschiede wohl noch geringer, wenn 
Shearer eine größere Zahl von Kokons untersucht hätte. ‚The 
two kinds of eggs, male and female‘, so sagt er, „are laid together 
in a fairly constant ratio of a little more than two female eggs to 
one male, and this ratio does not appreciably change during the 
different seasons oi the year.“ Nach Shearers Angaben war 
das Geschlechtsverkältnis in seinen Kulturen im Durchschnitt: 
2 DS: 

Der Uebersichtlichkeit halber stellen wir die Resultate der 
einzelnen Untersucher hier nochmals zusammen. Das Geschlechts- 
verhältnis war nach den Untersuchungen von: 

Frowazek a NEN | 
Nelson a al 


nn. Ri 


EEE 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 73 


Körsecheikt Hd: NO 
v. Malsen ER DAR. 

Shearet EN 
Vergleichen wir damit unsere eigenen Beobachtungen über das 
Geschlechtsverhältnis in Normalkulturen, und zwar werden wir, 
um einen exakten Vergleich mit den obigen Angaben zu ermöglichen, 
im folgenden zunächst nur die Ergebnisse an Massenkulturen an- 
geben. Die Beobachtungen über das Verhältnis der Männcheneier 
zu den Weibcheneiern bei einzelnen Weibchen enthält das 
nächste Kapitel. Die Normalkulturen wurden dauernd bei „Zimmer- 
temperatur‘ gehalten, d. h. die Temperatur ihrer Umgebung be- 
trug ständig, im Sommer wie im Winter, etwa 18° C. Geringe 
Schwankungen kamen vor, doch sank die Temperatur nicht unter 


.16° und stieg nicht über 20% im Sommer wurden die Kulturen 


in entsprechend kühlen Räumen untergebracht. Die Art und Weise, 
wie das Geschlechtsverhältnis in den Massenkulturen ermittelı 
wurde, habe ich bereits angegeben. Es wurde dabei die Tendenz 
der Weibchen ausgenutzt, ihre Eier am Wasserspiegel abzusetzen. 
Läßt man auf den Wasserspiegel, an dem zahlreiche Kokons schwim- 
men, ein Deckgläschen fallen, so haften die Kokens an diesem, 
man kann sie mit ihm abheben, fixieren, färben und dann die Total- 
präparate mit starker Vergrößerung genau durchmustern. Im 
Gegensatz zu der völlig unzureichenden Methode v. Malsens 
{vgl S. 27) läßt sich auf diese Weise das Geschlechtsverhältnis 
auch in den Massenkulturen vollkommen exakt feststellen. Ueber- 
dies bietet die Methode den Vorteil, daß man eventuelle Verschic- 
bungen des Geschlechtsverhältnisses in einer Kultur oder Ver- 
schiedenheiten in verschiedenen Kulturen im Präparat festhalten 
und jederzeit nachprüfen und demonstrieren Kann. 

Am 6. Juni wurde einer Normalkultur, die etwa 8 Tage vor- 
her angesetzt worden war, und deren Inhalt dem großen Seewasser- 
ballon des Münchener Zoologischen Instituts entstammte, eine 
größere Anzahl Kokons auf die oben beschriebene Weise entnommen. 
Die zahlreichen Weibchen hatten in den 8 Tagen bereits eine sehr 
große Zahl von Kokons abgesetzt. Von den fixierten Kokons ent- 
hielten 100 Kokons insgesamt 206 Eier bzw. Embryonen. Im ein- 
zelnen verteilten sich diese 206 Individuen auf die 100 Kokons 
folgendermaßen. Es enthielten: 


74 Hans Nachtsheim: 


84 Kokons . 2..1d +19 = 84dd + 84 99 
LE; en DL 4 2208 
DI? ;S ER BT ER Be 5 29 
UN Kokons u... Ser ee 7 ERNST 
Das Geschlechtsverhältnis war in dieser Kultur also: 
Be le Sl 


Dieses Resultat ist für die Männchen, wenn wir es mit den Resul- 
taten der früh ren Untersucher vergleichen, sehr günstig. Die Zahl 
der Männchen ist nur wenig geringer als die der Weibchen, eine 
Beobachtung, die bisher nur Prowazek in seinen Kulturen 
machen konnte. 

Nach 8 Tagen wurde der gleichen Kultur abermals eine größere 
Anzahl Kokons entnommen. 100 Kokons wiesen insgesamt 205 
Eier bzw. Embryonen auf, und zwar enthielten: 


90. Kokons un... aA U IN 
Ds BR 1 Ve en ea ee 2 
er ER IR ee + 399 
AR mag +2 39 7.2 00 
100 Kokons ER . = 98 dd + 107 29 


Das Geschlechtsverhältnis war dieses Mal: 
er OR 

also noch ein wenig günstiger tür die Männchen. Der Unterschied 
ist indessen so minimal, daß er kaum ins Gewicht fällt. Auch ferner- 
. hin konnten in dieser Kultur nennenswerte Verschiebungen des 
Geschlechtsverhältnisses nicht konstatiert werden, die Zahl der Weib- 
chen überwog die Zahl der Männchen immer nur um ein geringes. 

Aus einer anderen Normalkultur, deren Inhalt ebenfalls dem 
großen Seewasserballon entstammte, wurden am 9. Juni, 10 Tage 
nach dem Ansetzen der Kultur, zahlreiche Kokons fixiert. In 
100 Kokons fanden sich insgesamt 237 Eier bzw. Embryonen, und 
zwar enthielten: 


64 Kokons .1d& +1% = 64 dd + 64 29 
echt LE #299 —- 2794 4 54090 
30. 288 +29 = 69884 68 
DERKIn, I (ee — 2 29 
2 are 
a ‚18 +39 = 2d8+ 6% 
WOARKOokanst.T 12 Ss ee — 103 dd + 134 22 


Lö u a an 


ee ı Die ee a 


j 
3 
! 
4 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 75 


Das Geschlechtsverhältnis ist mithin: 
EHER 1,8: 

Im Vergleich mit der vorhergehenden Kultur ist ein etwas stärkeres 
Ueberwiegen der Weibchen zu konstatieren, doch sind die Unter- 
schiede gering. Ebensowenig wie bei der vorhergehenden Kultur 
konnte bei dieser eine Aenderung des Geschlechtsverhältnisses 
im Laufe der Zeit festgestellt werden, und ganz ähnlich verhielten 
sich die sämtlichen Normalkulturen, die sich von dem Seewasser- 
ballon des Münchener Instituts herleiteten. Niemals beobachtete 
ich in diesen Kulturen ein so starkes Ueberwiegen der weiblichen 
Geburten wie Korschelt, v. Malsen- ünd Shearer 
in den ihrigen. Meine Resultate an diesen Kulturen stehen zwischen 
denen von Prowazek und Nelson. 


Zu einem anderen Ergebnis aber führten die Untersuchungen, 
die an Material ausgeführt wurden, das nicht aus dem Münchener 
Seewasserballon stammte. Mitte Juni setzte ich in Freiburg eine 
Kultur an, deren Weibchen ich einem mittelgroßen Seewasser- 
aquarium des dortigen Zoologischen Instituts entnommen hatte. 
Ebenso wie das Wasser aus dem Münchener Seewasserballon war 
auch der Inhalt des Freiburger Aquariums wahrscheinlich aus der 
Adria (Rovigno bzw. Triest; siehe auch Kapitel I über die Herkunft 
des Materials). Die Kultur entwickelte sich in kurzer Zeit sehr gut, 
und am 6. Juli fixierte ich eine größere Anzahl Kokons. In 100 
Kokons zählte ich insgesamt 298 Eier bzw. Embryonen, und zwar 
enthielten: 


44 Kokons 1.d EN N BR Role 
Bu; re ON Br u 24,00 
RE DO 7 99 
6 „ een 2 rt, 1809 
Bes le a DE RI 
3 ” 22.58 4:2 0 I. 6.29 
IR A: 292 = Re 
Be, a 1 00 020 
acy, ‚2984449 = Aga+ 88 
2; ‚398 +49 = 686 +, 899 
I, ER RENT RA re RE 161) m EEE IE N 
ERS EN ANERN 499 
En ER 9189 99 


76 Hans Nachtsheim: 


Das Geschlechtsverhältnis war also in dieser Kultur: 
ER I A EE 

Das bedeutet gegenüber meinen bisher besprochenen Kulturen 
ein stärkeres Ueberwiegen der weiblichen Individuen, hier 1,73, 
dort 1,09—1,3 auf 1 Männchen. Auch in dieser Kultur ist zwar die 
relative Zahl der weiblichen Geburten nicht so groß wie in den Kul- 
turen Korschelts,. v.Malsens: und Shearers, “aber 
das Resultat steht dieses Mal zwischen denen von Nelson und 
Korschelt. Wenn man berücksichtigt, daß Korschelt 
das Geschlechtsverhältnis nicht an einer größeren Zahl von Ko- 
kons berechnet, sondern ungefähr angegeben und wahr- 
scheinlich dabei die relative Zahl der Männcheneier etwas unter- 
schätzt hat, so kann man wohl sagen, daß das Geschlechtsverhält- 
nis in meiner Freiburger Kultur ungefähr das gleiche war wie in 
den Kulturen Korschelts und Nelsons. Auch in der Frei- 
burger Kultur blieb das Geschlechtsverhältnis konstant. 

Noch mehr als der Unterschied im Geschlechtsverhältnis fällt 
aber die Differenz in der Gesamtzahl der Eier in 100 Kokons in 
den Münchener Kulturen einerseits und der Freiburger Kultur 
andererseits in die Augen. Während dort 100 Kokons insgesamt 
206 bzw. 205 bzw. 237 Individuen aufwiesen, fanden sich hier in 
100 Kokons 298 Individuen, d. h. also in dem einen Falle kamen 
2,05—2,37 Eier auf einen Kokon, in dem anderen Falle 2,98. Aus 
den vorliegenden Angaben der früheren Untersucher läßt sich er- 
sehen, daß ebenso wie das Geschlechtsverhältnis auch die Größe 
der Gelege in den verschiedenen Kulturen sehr verschieden war. 
Korschelt gibt an: „Die Zahl der in einer Kapsel befindlichen 
Eier ist sehr verschieden, meist sind nur zwei weibliche und ein 
männliches Ei in ihr vorhanden, doch fand ich auch solche Kapseln, 
die bis zu 8 großen und mehrere kleine Eier enthielten“. Prowa- 
zeks Bemerkung, daß ‚‚meist nur zwei — ein männliches und ein 
weibliches Ei — in zweckmäßiger Weise miteinander verbunden 
sind“, habe ich bereits erwähnt. Nach Nelson kommen 3—7 
Eier auf einen Kokon. v. Malsen äußert sich folgendermaßen: 
„Gelege von 5—6 Eiern bilden die Regel. Häufig finden sich solche 
mit einem männlichen und zwei weiblichen Eiern. Gelege mit 10 
bis 14 Eiern kommen öfter vor. Es ist also in der Größe der Gelege 
schon von Natur aus eine große Variationsbreite vorhanden. Das 
Verhältnis der Geschlechter im einzelnen Gelege ist geringen Schwan- 


a Se ne ee 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 77 


kungen unterworfen, im allgemeinen aber ziemlich konstant.“ 
In Shearers Kulturen zeigten die Weibchen die Tendenz zur 
Bildung sehr großer Kokons. Er beobachtete wiederholt Kokons mit 
14 Eiern, nie hingegen solche mit weniger als 3 Eiern. In der fol- 
genden Tabelle sind die Resultate sämtlicher Untersucher zusammen- 
gestellt. 


Geschlechts- Durchschnittliche Größe 
verhältnis der Kokons 
Prowazek d&:9=T:1 | Il & +1 2 Eler 
Delle. 9— 1 51,17: 0,998 99200; 
(München) 820910 EEENT 2-20, 
| BD 123 LOS TITEL ODE TB 
aa 9 elta de b2T7 or, 
Dachtsherneg. 2.91.7173 1,0938 71,829 =2,98.,, 
(Freiburg) | 
BKouSschett ee ].,2 Te PA RER a 
v.Malsen 879 — 1.224 98 46288 24,02, 20 = 5,64%, 
Shearer | 
Frühjahr ee 28 2 8 Tr; 
Sommer ROLE I2IT IA DIENEN 
Herbst RO BO ZI SD, ONE), 
Winter EIN ZII N SAN E39 EEE, 


Geschlechtsverhältnis und Größe der Gelege bei Dinophilus 
sind also, wenn wir die Beobachtungen der bisherigen Untersucher 
vergleichen, verhältnismäßig weitgehenden Schwankungen unter- 
worfen. Während in Prowazeks Kulturen Männchen und 
Weibchen in ungefähr gleicher Zahl vorhanden waren und ein 
Kokon in der Regel nur 2 Eier, ein männliches und ein weibliches, 
enthielt, fand Shearer im Sommer auf 1 Männchen 2,59 Weib- 
chen und in einem -Kokon durchschnittlich 7,9 Eier. Zwischen 
diesen beiden Extremen sind alle Uebergänge vorhanden. Es scheint, 
daß zwischen Geschlechtsverhältnis und Kokongröße eine gewisse 
Korrelation besteht, wie auch aus der Tabelle ersichtlich ist, indem 
mit der relativen Zahl der Weibchen auch die Größe -der Kokons 
zunimmt. Nur die Beobachtungen Nelsons machen davon 
eine Ausnahme; trotz der verhältnismäßig geringen Zahl von Weib- 
chen in seinen Kulturen (1,71 auf 1 Männchen) ist die durchschnitt- 


78 Hans Nachtsheim: 


liche Größe der Kokons (4,28 Eier) viel beträchtlicher als in 
meiner Freiburger Kultur. 

Es erhebt sich nun die Frage, welches die Ursachen für dieses 
ganz verschiedene Geschlechtsverhältnis und die verschiedene 
Kokongröße in den verschiedenen Kulturen sind. Man könnte 
zunächst an äußere Faktoren denken und Ernährung, Temperatur, 
Beleuchtung usw. dafür verantwortlich machen, zumal da ja nach 
den weiter unten noch ausführlicher zu besprechenden Untersu- 
chungen v. Malsens Dinophilus auf Temperaturwechsel z. B. 
mit einem sehr deutlichen Wechsel des Geschlechtsverhältnisses 
reagieren soll. Daß indessen Dinophilus in den Kulturen der ver- 
schiedenen Untersucher unter sehr verschiedenen Bedingungen 
gelebt hat, ist wenig wahrscheinlich. Ich selbst habe die Tiere 
in meinen Massenkulturen ebenso gefüttert wie v. Malsen die 
seinigen, habe sie in derselben Temperatur und unter ähnlichen 
Beleuchtungsverhältnissen gehalten, und was meine Münchener 
und Freiburger Kulturen im besonderen anbetrifft, so kann ich 
mit Bestimmtheit sagen, daß diese sich unter ganz den gleichen 
äußeren Bedingungen befunden haben wie jene. Aeußere Faktoren 
können also nicht maßgebend sein, und die bisherigen Resultate 
weisen denn auch meines Erachtens mit aller Deutlichkeit darauf 
hin, daß es innere Faktoren sind, die das Geschlechtsverhältnis 
und die Kokongröße bei Dinophilus bestimmen. Geschlechts- 
verhältnis und Kokongröße sind ererbte Eigenschaften, 
und wit 'könmen..beiDinophilus.verschredene 
Rassen unterscheiden, beidenen Geschlechts 
verhältnis Yund»> Kokongröße  konstange mer 
schieden sind. Wenn auch diese beiden Eigenschaften in 
jeder Rasse eine gewisse Variation zeigen, in der einen Rasse vielleicht 
eine größere Variationsbreite haben als in der anderen, so hat doch 
in jeder Rasse jede Eigenschaft ihren bestimmten Mittelwert, und 
eben diese Mittelwerte sind verschieden. Ob neben dieseninneren 
Faktoren äußere Faktoren Geschlechtsverhältnis und Kokon- 
größe mehr oder weniger zu modifizieren vermögen, ist eine zweite 
Frage. In den folgenden Kapiteln soll diesen Fragen weiter nach- 
gegangen werden. Da aber wirklich eindeutige Resultate nicht an 
Massenkulturen erzielt werden können, wurden die weiteren Unter- 
suchungen lediglich an Einzelkulturen durchgeführt. Freilich muß 
hier — wie schon in der Einleitung — nochmals darauf hingewiesen 


Zytologische und experim:ntelle Untersuchungen usw. 79 


werden, daß infolge des Krieges die Experimente abgebrochen 
werden mußten, als sie auf dem Höhepunkte standen, und infolge- 
dessen nicht in dem Umfange durchgeführt werden konnten, wie 
es ursprünglich geplant war, und wie es auch wünschenswert ge- 
wesen wäre. Die endgültige Beantwortung mancher Spezialfragen 
muß zukünftigen Untersuchungen vorbehalten bleiben. 


9. Lebensgeschichte einzelner Weibchen. 


Im folgenden soll die Lebensgeschichte einzelner Weibchen 
dargestellt werden, die unter normalen Verhältnissen lebten, d. h. 
unter ähnlichen Bedingungen wie die Tiere in den Massenkulturen, 
wenigstens was Temperatur und Beleuchtungsverhältnisse an- 
belangt. Hinsichtlich ihrer Ernährung ist zu bemerken, daß die 
Weibchen in den Einzelkulturen zwar dasselbe Futter erhielten wie 
die Weibchen in den Massenkulturen, aber insofern besser gestellt 
waren als diese, als sie dauernd Ueberfluß an Nahrung hatten. 
In jeder Kıltur befand sich ständig ein kleines Stückchen faulendes 
Muschelfleisch, die Weibchen hatten keine Konkurrenten beim 
Nahrungserwerb, und man fand sie denn auch meistens auf den 
Muschelfleischstückchen herumkriechend. Häufig setzten sie auch 
dort ihre Kokons ab, ein Verhalten, das freilich nicht zweckmäßig 
war, da diese Kokons in der Regel bald von Bakterien und Pilzen 
überwuchert wurden, so daß die Embryonen abstarben. Ein Unter- 
schied, der als Differenz in den äußeren Bedingungen zwischen 
Einzel- und Massenkulturen betrachtet werden könnte, besteht 
noch darin, daß in den Einzelkulturen das Wasser, um ein Ueber- 
handnehmen der Bakterien und Pilze zu verhindern, ungefähr alle 
drei Tage gewechselt wurde, während die Massenkulturen nur hin 
und wieder oder überhaupt nicht durchlüftet wurden. Sobald ein 
Weibchen in Einzelkultur einen Kokon abgesetzt hatte, wurde es 
in eine andere Schale gebracht und der Kokon für sich weiter be- 
obachtet. Im übrigen sei, was die Kulturführung anbetrifft, auf 
das Kapitel verwiesen, in dem die Zuchtmethoden bereits dar- 
gestellt wurden (Seite 26 ff.). 


Es folgt zunächst die Lebensgeschichte einiger Weibchen, die 
aus dem Seewasserballon des Münchener Instituts stammten. 


80 


D 


Bl 


12, 
13. 
14. 
21. 


Hans Nachtsheim: 


Weibchen A!). 


. Mai. Einer bereits längere Zeit beobachteten Massenkultur, 
deren Geschlechtsverhältnis durchschnittlich war: $:2 = 


1 :1,3, wird ein Kokon mit zwei Weibcheneiern und einem 
Männchenei (es handelte sich, genauer gesprochen, bereits um 
Embryonen) entnommen und in Einzelkultur gebracht. 


. Mai. Die beiden Weibchen schlüpfen aus, wahrscheinlich nach 


vorheriger Begattung durch das Männchen. Dieses verläßt 
nach den Weibchen ebenfalls den Kokon, geht aber dann bald 
zugrunde. 


. Mai. Die beiden Weibchen werden isoliert, die Lebensgeschichte 


des zweiten Weibchens (Weibchen B) wird weiter unten wieder- 
gegeben. 


.„ Mai. Weibchen A setzt seinen ersten Kokon ab: 


1. Kokon:1d + 2 99 
2) 2 „ l ° + 3 28 
x ee 
„ =. ’ 1 6) ee 2 
Juni 5 ; 383 + 499 
a 
TR, 6 dd + 4 29, außerdem 2 lose Weibchen- 
eier ohne Gallerthülle, 
Juli. DEE. 1d +529%2 
Ge IQ 
a ORREN 2 99 
I RR 19 
” 12,00% 2 dd + 3 29, außerdem 2 lose Weibchen- 
eier ohne Gallerthülle. 
; ERSRLEER 2 d3 + 19. außerdem 3 lose Männchen- 
eier und 7 Weibcheneier ohne 
Gallerthülle. 
6, 14,0; 159 
n N et 
2: KON: 8 dd + 15 2% 
R Das Weibchen ist abgestorben. 


1) Die Bezeichnung der Weibcheu mit fortlaufenden Buchstaben wurde 


der Uebersichtlichkeit halber gewählt; sie bedeutet nicht, daß die Weibchen 
auch in dieser Reihenfolge gezüchtet wurden. Die Gesamtzahl der einzeln 
gezüchteten Weibchen und Kokons beläuft sich auf über 200. 


ii Eu DO 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. sl 


Das Weibchen lebte, vom Tage des Ausschlüpfens aus dem 
Kokon an gerechnet, 81 Tage und erzeugte in dieser Zeit 16 Kokons 
mit 30 Männchen- und 51 Weibcheneiern. Außerdem setzte es 3 
Männchen- und 11 Weibcheneier einzeln, d. h. ohne Kokon, ab. Die 
Gesamtzahl der Eier, die das Weibchen hervorbrachte, beträgt somit 
95, und zwar kamen auf 33 Männcheneier 62 Weibcheneier, Ge- 
schlechtsverhältnis also: 

IHRE NER 

Gegenüber der Massen-Stammkultur, deren Geschlechtsver- 
hältnis, wie gesagt, $:Q = 1:1,3 war, bedeutet das ein An- 
wachsen der relativen Zahl der Weibchen, Teilweise ist diese Zunahme 
der weiblichen Geburten sicher nur eine scheinbare. Mit dem Aelter- 
werden setzte das Weibchen eine zunehmende Zahl von Eiern ohne 
Kokonkülle ab. Es ist das eine bei älteren Weibchen des öfteren 
zu beobachtende Erscheinung. Offenbar funktionieren die Schleim- 
drüsen, die das Material für den Kokon liefern, bei den alten Weib- 
chen bisweilen nicht mehr in der richtigen Weise, so daß die Ab- 
scheidung der Gallerthülle um die Eier unterbleibt. Uebrigens gehen 
diese Eier, die schädlichen Einflüssen der Außenwelt viel mehr 
ausgesetzt sind als solche in normalen Kokons, in der Regel Fald 
zugrunde. Während man nun die losen Weibcheneier in den Einzel- 
kulturen unschwer findet, übersieht man die Männcheneier infolge 
ihrer Kleinheit außerordentlich leicht; es kommt hinzu, daß diese 
besonders rasch zerfallen, wenn sie Einflüssen ihrer Umgebung 
erliegen. Und so ist anzunehmen, daß das Weibchen A außer den 
11 losen Weibcheneiern mehr als 3 lose Männcheneier abgesetzt 
hat, daß die weiteren aber der Beobachtung entgangen sind. Be- 
rechnen wir das Geschlechtsverhältnis der in den 16 Kokons ab- 
gelegten Eier, so kommen wir zu einer für die Männchen günstigeren 
Zahl, es verhält sich dann: j 

DEE AET: 

Im Vergleich mit dem Geschlechtsverhältnis in der Massen- 
stammkultur bedeutet das immer noch ein, wenn auch nicht sehr 
bedeutendes, Plus an Weibchen. Eine geringe Zunahme der rela- 
tiven Zahl der weiblichen Geburten gegenüber der Massenstamm- 
kultur ist, wie bereits hier betont sei, in den Einzelkulturen nicht 
selten zu beobachten, und diese Zunahme führe ich zurück auf die 
wesentlich besseren Ernährungsverhältnisse in den Einzelkulturen. 


Diese scheinen mir den wichtigsten Unterschied in den äußeren 
Arch. f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 6 


32 Hans Nachtsheim: 


Bedingungen der Massen- und der Einzelkulturen darzustellen. Wäh- 
rend in den großen Einmachgläsern, in denen die Massenkulturer 
gehalten wurden, die Weibchen immer auf den Boden des Gefäßes 
herabkriechen mußten, um reichliche Nahrung zu finden — hier 
lagen ständig einige Stückchen Muschelfleisch, die Kokons aber 
setzten die Weibchen ja mit Vorliebe am Wasserspiegel und im 
Randwinkel ab —, enthielt die Einzelkultur so wenig Wasser, daß 
das Weilchen schon aus diesem Grunde immer in der Nähe der 
Nahrungsquelle blieb, wo es überdies keine Konkurrenten hatte. 
Es ist ja ohne weiteres einleuchtend, daß ein gut ernährtes Weibchen 
eher imstande ist, eine große Zahl der reich mit Reservestoffen 
beladenen Eier zu erzeugen als ein weniger gut ernährtes Weibchen. 
Wir werden weiter unten die Bedeutung der Ernährung tür das 
Geschlechtsverhältnis noch besprechen. 

Noch auffälliger aber als die meist doch nur geringe Zunahme 
der relativen Zahl der Weibcheneier in den Einzelkulturen ist die 
Größenzunahme der Gelege. In den Münchener Massenkulturen 
enthielt ein Kokon durchschnittlich 2,05—2,37 Eier (und zwar 
0,95—1,03 Männchen- und 1,07—1,34 Weibcheneier). Ein Kokon 
des aus der gleichen Quelle stammenden Weibchens A wies hin- 
gegen durchschnittlich 5,06 Eier (1,87 Männchen- und 3,19 Weib- 
cheneier) auf! Das bedeutet also, daß die Kokons in der Einzel- 
kultur weit mehr als doppelt so groß waren wie in der Massenkultur! 
Die Zunahme der Kokongröße ist ein Charakteristikum sämtlicher 
einzeln gezüchteter Weibchen. Auch sie führe ich auf die bessere 
Ernährung der Einzelweibchen zurück. Infolge der reichlichen 
Zufuhr von Nährsubstanzen entwickeln sich die Keimzellen im Ovar 
viel rascher, es gelangt vor allem eine größere Zahl von Eiern gleich- 
zeitig zur Reife als unter schlechteren Ernährungsverhältnissen, und 
so vergrößert sich auch die Zahl der zu gleicher Zeit zur Ablage 
reifen Eier, es kommen größere Kokons zustande. Uebrigens pro- 
duzierte Weibchen A den größten Kokon, der überhaupt jemals 
beobachtet wurde; sein letzter (16.) Kokon enthielt 8 Männchen- 
und 15 Weibzheneier! Ein Kokon (15.) enthielt nur Männcheneier (3), 
ebenfalls eine gıoße Seltenheit. Kokons mit nur Weibcheneiern 
kommen öfters vor; Weibchen A erzeugte 4 Kokons mit nur Weib- 
cheneiern (9.—11. und 14. Kokon). 

Zur Lebensgeschichte des Weibchens A sei noch bemerkt, 
daß es seinen ersten Kokon am 13. Tage nach dem Ausschlüpfen, 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 83 


den letzten am 68. Tage absetzte. Die Individuen des ersten Kokons 
brauchten 7 Tage zur Entwicklung, die Kokons 2—4 wurden als 
Kältekultur: weitergezüchtet (siehe weiter unten Weibchen N, 
O und P). Die Embryonen der letzten Kokons starben alle im 
Laufe der Entwicklung ab. Auch dies ist eine Erscheinung, die 
man bei älteren Weibchen des öfteren feststellen kann. Offenbar 
gehen ab und zu, wenn die Weibchen eine gewisse Anzahl Kokons 
erzeugt haben, die Spermatozoen zu Ende. Da eine Begattung der 
geschlechtsreifen Weibchen nicht mehr erfolgt, müssen die weiteren 
Eier unbesamt abgesetzt werden. Unbefruchtete Eier aber beginnen 
zwar eine parthenogenetische Entwicklung, die aus ihnen entstehen- 
den Embryonen sind jedoch immer anormal und sterben früher oder 
später ab (siehe Kapitel 12). 


WeibchenB. 
4. Mai. Aus Massenkultur (1 3 :1,3 22) wird ein Kokon mit 
einem Männchenei und zwei Weibcheneiern isoliert. 
Mai. Ausschlüpten der Weibchen. 


16. ,, Die beiden Weibchen werden. isoliert (Lebensgeschichte 
des Weibchens A siehe oben). 


20. Mai. Weibchen B setzt seinen ersten Kokon ab: 


l. Kokon:1d + 399 
aus... 2adet 2 90 
9. Juni 3 1& +299 
N RE 4 nr 3d8& +399 
3. Juli 5) x 3dd + 799 
4. DEPRENE Id +3992 
le 7 i 3dd + 2 299 
12: S 8 788 + 3 29 
BR, ee RAT; © 
2 Brei 10. ; 18 + 329, außerdem 1 Weibchenei 
ohne Gallerthülle. 
1620,20; Das Weibchen ist abgestorben. 


Das Weibchen, eine Schwester des Weibchens A, lebte vom 
Tage des Ausschlüpfens an 70 Tage, war also etwas kurzlebiger 
als die Schwester. Es erzeugte 10 Kokons mit 23 Männchen- und 
29 Weibcheneiern, außerdem I Weibchenei ohne Kokon. Der erste 


6* 


34 Hans Nachtsheim: 


Kokon wurde am 13. Tage nach dem Ausschlüpfen, der letzte am 
68. Tage abgesetzt, d. h. die 10 Kokons mit 52 (+ 1) Eiern wurden 
innerhalb der gleichen Zeit hervorgebracht wie die 16 Kokons mit 
81 (+ 14) Eiern des Weibchens A. Weibchen B war also auch weniger 
produktiv als die Schwester. Das Geschlechtsverhältnis der Eier 
des Weibchens B war: 
ION 20 

Weibchen B erzeugte somit nicht nur absolut, sondern auch relativ 
weniger Weibcheneier als Weibchen A; das Geschlechtsverhältnis 
seiner Eier entspricht ungefähr dem der Massenstammkultur. Hin- 
sichtlich der Kokongröße verhielt es sich indessen ganz ähnlich 
wie Weibchen A, ja die durchschnittliche Eizahl seiner Kokons ist 
sogar noch etwas größer: 5,3 Eier (und zwar 2,3 Männchen- und 


3 Weibcheneier). Bemerkenswert ist der 7. Kokon, der 7 Männchen- 


und 3 Weibcheneier enthielt, eine selten große Zahl von Männchen- 
eiern. 


Weibcherc. 


Dieses Weibchen stammte ebenfalls aus einer Massenkultur, 
die sich von dem Seewasserballon des Münchener Instituts her- 
leitete, wurde aber zu einer anderen Jahreszeit gezüchtet als die 
Weibchen A und B. Die äußeren Bedingungen, unter denen das 
Weibchen gehalten wurde, waren ganz die gleichen wie bei Weib- 
chen A und B. | 
9. Januar. Aus einer Massenkultur wird ein bereits geschlechts- 

| reifes Weibchen isoliert. 


12 1. Kokon: 2 09 

16: 8% N RE ON RR. Ireie: 

RR SER Da 2 90 

FERNE FE A Pd 3 708 

30,03 De 2 29 

SLaaR, Da Pe en 

Ar Februanaı tl. n4,; 2 dd + 3 299 

Gina, ON, II OO 

192%, Re Be, 08 

EL SLOT: 3&3 + 3 99, die Gallerthülle um diesen 


Kokon fehlte fast voll- 
ständig. 


Bu 2 


in SE EN 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 85 


20. Februar 11. Kokon: 3 dd + 3 99, außerdem 2 Weibcheneier 
ohne Gallerthülle. 

PN RER ERRTR 18 

ASAke kann - Weibchen abgestorben. 


Das Weibchen wurde 51 Tage lang beobachtet und produzierte 
in dieser Zeit 12 Kokons mit 19 Männchen- und 30 Weibcheneiern, 
außerdem 2 Weibcheneier ohne Gallerthülle, Geschlechtsverhältnis 
also bei Berücksichtigung aller beobachteten Eier: 

oe OuSM 508. 
Die durchschnittliche Größe der Kokons betrug 4,08 Eier (1,58 
Männchen- und 2,5 Weibcheneier). Die jungen Weibchen schlüpften 
9—11 Tage nach Ablage der Kokons aus, die Embryonen der letzten 
Kokons starben ab. Mehrere Kokons enthielten nur Weibcheneier. 
Das Geschlechtsverhältnis der Eier des Weibchens C war ähnlich 
wie beim Weibchen A, die Kokongröße war etwas geringer. 


Weitere in Einzelkultur gezüchtete und aus dem Seewasser- 
ballon stammende Weibchen gaben ganz ähnliche Resultate, das 
Geschlechtsverhältnis war gegenüber der Massenstammkultur 
durchschnittlich etwas zugunsten der Weibchen verschoben, die 
Kokongröße übertraf die in den Massenkulturen immer beträchtlich. 
Nur ein einziges Mal beobachtete ich ein aus der gleichen Quelle 
stammendes Weibchen, dessen Eier ein wesentlich anderes Ge- 
schlechtsverhältnis zeigten. Seine Lebensgeschichte ist im fol- 
genden wiedergegeben. 


Weibchen D. 


12. Juni. Aus Massenkultur (1 $ : 1,3 29) wird ein junges Weib- 
chen isoliert. 


I 


18.2; 5; I Kokon: 1.8 .+.2:92 
19ar3;; ER Fr. + 229 
air ">, Bars 13 . +4992 
21 2 dd + 6 929 
RA BER Id +492 
Ba 0.5, 1d +3%99 
E5.5%%,; 1 Se De 5 00 
BR 8, ae 90 
A SEE De 283 + 6 29 


86 Hans Nachtsheim: 


2. Juli. 10. Kokon: 18 +5 29 
3. 0er Weibchen abgestorben. 


4. 

Das Weibchen erzeugte 10 Kokons mit 15 Männchen- und 43 
Weibcheneiern, Geschlechtsverhältnis also: 

212386: 
Die Kokongröße betrug durchschnittlich 5,8 Eier (1,5 Männchen- 
und 4,3 Weibcheneier). Auffällig ist, in wie kurzer Zeit das Weib- 
chen die 10 durchweg sehr grcßen Kokons hervorbrachte: in der 
Zeit vom 18. Juni bis 2. Juli, also innerhalb von 14 Tagen 58 Eier, 
darunter 43 Weibcheneier! Entwicklungsdauer der jungen Weib- 
chen 8—10 Tage. 

Worauf ist nun das von den übrigen Kulturen gleichen Ur- 
sprungs gänzlich abweichende Geschlechtsverhältnis dieses Weib- 
chens bzw. seiner Eier zurückzuführen ? Die äußeren Bedingungen, 
unter denen das Weibchen gehalten wurde, unterschieden sich nicht 
im geringsten von denen der bisher besprochenen Einzelkulturen. 
Aeußere Faktoren können also wohl kaum für dieses starke Ueber- 
wiegen der Weibcheneier verantwortlich gemacht werden, und es 
lag nahe, daran zu denken, daß dieses Weibchen einer anderen 
Rasse angehörte, einer Rasse mit konstant höherem Prozentsatz 
an Weibchen als die größte Mehrzahl der Tiere in den Münchener 
Kulturen. Das ist in der Tat der Fall, wie die Beobachtung der 
Nachkommen des Weibchens D zeigte. Die Eier der Nachkommen, 
welche unter gleichen Bedingungen wie die Mutter standen, wiesen 
ein ganz ähnliches Geschlechtsverhältnis auf. Ich lasse die Lebens- 
geschichte einer Tochter des Weibchens D folgen. 


Weibchen E. 


21. Juni. Der 4. Kokon des Weibchens D, enthaltend 2 Männchen- 
und 6 Weibcheneier, wird isoliert. 
1. Juli. Sämtliche Weibchen schlüpfen aus. 


De Ein Weibchen wird isoliert. 
10.985; Kokon:1d + 2299 
1302, R 1d& +499 
192 ,,; a 1d +2%929 


Ir in 292 


1. 
2 
3: 
19, IE DIRSCHRI Mole, 
5, 
CAR BE 4 09 


Zytclogische und experimentelle Untersuchungen usw. 87 


19. Juli. 7. Kokon:1d +5 92 
Alu: °,; DICH, Id +599 
22. SRBeR 4 99 
Me, UUTEER ; 3dd +5 98. 


Die 10 Kokons des Weibchens E enthielten 11 Männchen- und 

37 Weibcheneier, Geschlechtsverhältnis also: 
le Br Werte 07 

Die Kokongröße betrug durchschnittlich 4,8 Eier (1,1 Männchen- 
und 3,7 Weibcheneier). Während die relative Zahl der Weibchen- 
eier dieses Weibchens sogar noch beträchtlich größer ist als bei 
der Mutter, ist die durchschnittliche Größe der Kokons geringer. 
Auch dieses Weibchen erzeugte die 10 Kokons in sehr kurzer Zeit, 
in 15 Tagen. 

Die folgenden Weibchen rühren aus dem Freiburger Seewasser- 
aquarium her, d. h. aus der Massen-Stammkultur, deren Geschlechts- 
verhältnis war: 2 = 1 :-1,73. 


WeibchenF. 


20. Januar. Der Freiburger Massenkultur werden mehrere Weib- 
chen entnommen und isoliert. 


DORT ,, Weibchen F setzt seinen ersten Kokon ab: 
l. Kokon: 2 909 
DIN. 2 2 Id +3929 
HRS 3, 3 5; 1d +52%9 
1. Februar. 4; ,, 2,99 
DENN, Ben, Id +4929 
er, 498 
BE DR 2000 
10. >27; 8 si 1d + 299 
Bar, 9 n 1d +29%9 
ZA >. Weibchen abgestorben. 


Innerhalb von 17 Tägen setzte das Weibchen 9 Kokons ab 
mit 12 Männchen- und 26 Weibcheneiern, Geschlechtsverhältnis 
also: 

er 1: 22,17. 
Die Kokongröße betrug durchschnittlich 4,22 Eier (1,33 Männchen- 
und 2,89 Weibcheneier). Die jungen Weibchen schlüpften durch- 


88 Hans Nachtsheim: 


schnittlich nach 13 Tagen aus, die Embryonen der letzten Kokons 
entwickelten sich anormal und starben ab. 


Weibchen G. 


20. Januar. Der Freiburger Massenkultur werden mehrere Weib- 
chen entnommen und isoliert. 


28: Weibchen G setzt seinen ersten Kokon ab: 
l. Kokon: 2 3& + 2 29 
alar ta DRS a 
1. Februar. 3 e ld + 3799 
DS, Au; 1& + 41922 
SH SEN: 3dd +5 29 
I. m ee a 
8. 2) 7 „ 2 3d Br 22 
EU EI 18 +4929 
Da), 9. 1a 22300 
19.03, Weibchen abgestorben. 


Innerhalb von 14 Tagen setzte das Weibchen 9 Kokons ab 
mit 15 Männchen- und 30 Be Geschlechtsverhältnis also: 
le 
Die KnkausröBe betrug en 5 Eier (1,67 Männchen- und 
3,33 Weibcheneier). Die Entwicklungsdauer der Weibchen war 
durchschnittlich 14 Tage. 


Weibchen H. 


4. Mai. Kokon mit 1 Männchen- und 1 Weibchenei (bzw. Em- 
bryonen) aus der Freiburger Massenkultur wird isoliert. 


VRR Weibchen und Männchen schlüpfen aus. 

DI 1. Kokon: 3 29, außerdem 2 Weibcheneier 
ohne Gallerthülle, 

DT. 12.) a 399 

ARYHI 7 32208, 3dd +:522 

RR a 

14; :,,, Des 8 dd + 10 29, außerdem 1 Weibchenei 
ohne Gallerthülle. 

19.03, De 1d + 12 

16... .,, Mans, ee SE) 

RB Bun, 1 2 


ZU. Weibchen abgestorben. 


ee a Zee 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 89 


Weibchen H produzierte 8 Kokons mit 17 Männchen- und 29 
Weibcheneiern, außerdem 3 Weibcheneier ohne Kokon, bei Be- 
rücksichtigung aller beobachteten Eier Geschlechtsverhältnis also: 

d:2 = 1:1,88, 

Die Kokongröße betrug 5,75 Eier (2,12 Männchen- und 3,63 Weib- 
cheneier). Auffällig ist die lange Zeitdauer, die zur Produktion der 
8 Kokons notwendig war. Erst 20 Tage nach dem Ausschlüpfen 
setzte das Weibchen seinen ersten Kokon ab, 72 Tage nach dem 
Ausschlüpfen seinen letzten, die 8 Kokons also innerhalb von 52 
Tagen. Da die Embryonen sämtlicher Kokons sich anormal ent- 
wickelten und alle im Laufe der Entwicklung abstarben, kann als 
sicher gelten, daß das Weibchen unbegattet geblieben ist und in- 
folgedessen alle Eier unbefruchtet zur Entwicklung kamen. Die 
langsame Eierproduktion sowie die mangelhafte Kokonbildung 
sprechen ebenfalls für das Unbegattetsein des Weibchens' (siehe 
weiter unten Kapitel 12). 


Weibchen !. 


4. Mai. Kokon mit 1 Männchen- und I Weibchenei (bzw. Embryo- 
nen) aus der Freiburger Massenkultur wird isoliert. 

YERSER Um %1 Uhr nachmittags schlüpft das Weibchen aus. 
In diesem Augenblick wird es von dem Männchen, das 
ihm seitlich am vorletzten Segment ansitzt, begattet 
(siehe Tafel II Figur I). So wird das Männchen mit aus 
dem Kokon herausgetragen. Nach etwa einer Minute 
ist die Begattung beendet, das Männchen schlüpft 
wieder in den Kokon (siehe Seite 36). 

er Das Männchen ist innerhalb des Kokons abgestorben 
(am vorhergehenden Tage lebte es noch). 


18, .,; l. Kokon:1&$ + 299 


2 ae DR Fr& 1,9 

DANS, SEEN Id +2299 

De Ass 1d +3299 

DAR JUNE 27 9% ..7,,; ) 2 29 

N Ba 5 Weibcheneier ohne Gallerthülle. 
193. ;, 6. Kokon: 192 


15. „ re 
16. >, Weibchen abgestorben. 


90 Hans Nachtsheim: 


Außer 7 Kokons mit 7 Männchen- und 15 Weibcheneiern er- 
zeugte Weibchen I noch 5 Weibcheneier ohne Kokon. Da anzu- 
nehmen ist, daß außer diesen 5 Weibcheneiern auch lose Männchen- 
eier abgesetzt wurden, die aber der Beobachtung entgangen sind, 
werden bei Berechnung des Geschlechtsverhältnisses die 5 einzelnen 
Weibcheneier außer acht gelassen. Für die 7 Kokons ist das Ge- 
schlechtsverhältnis: 

ee es A 
Der erste Kokon wurde 11 Tage nach dem Ausschlüpfen des Weib- 
chens abgelegt, die 7 Kokons wurden innerhalb von 28 Tagen her- 
vorgebracht. Durchschnittliche Kokongröße 3,14 Eier (1 Männchenei 
und 2,14 Weibcheneier). Entwicklungsdauer der Weibchen durch- 
schnittlich 12 Tage. 


Weibchen<K. 


4. Mai. Kokon mit 1 Männchenei und 2 Weibcheneiern (bzw. 
Embryonen) aus der Freiburger Massenkultur wird 
isoliert. 


0. Die beiden Weibchen schlüpfen aus, das Männchen 
bleibt im Kokon, die beiden Weibchen werden isoliert. 
16. ® Das Männchen ist innerhalb des Kokons abgestorben. 
863% Weibchen K setzt seinen ersten Kokon ab: 
1. Kokon:1& + 392 
Or, 2 Ye 2d8 + 392 N 
ee DER Id +39 
DER AN, 1d +3%92%9 
AN. 9. 2 dd + 4929 
ze 6 \% 19 
Bu, 1. S% 18 + 4299, außerdem I Weibchenei 
ohne Gallerthülle. 
15 SEN 3dd + 399 


a U er ae 2 dd + 2 29 
u 10:35; 18 + 2 99, außerdem I Männchenei 
ohne Gallerthülle. 


RE EB 
1a. .1.19,.20°,,0 Nana oo 
„ 13. ”„ 2 3 Hr 2 SS 
RE ME ee 


a Weibchen abgestorben. 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 9] 


Weibchen K lebte 79 Tage, am 12. Tage nach dem Ausschlüpfen 
setzte es seinen ersten Kokon ab, im ganzen erzeugte es innerhalb 
von 64 Tagen 14 Kokons mit 24 Männchen- und 38 Weibcheneiern, 
außerdem I Männchen- und I Weibchenei ohne Kokon, Geschlechts- 
verhältnis: 

Pt a N 
Kokongröße: 4,43 Eier (1,71 Männchen- und 2,72 Weibcheneier). 
Bei Weibchen K war im Gegensatz zu den vorhergehenden Weib- 
chen die relative Zahl der Weibcheneier etwas geringer als in der 
Massen-Stammkultur (1 $ : 1,73 98). 

Um besser einen Vergleich zu ermöglichen, seien die an den 
beiden bzw. drei Rassen erzielten Resultate im folgenden nochmals 
tabellarisch zusammengestellt. 


Münchener Rasse. 


Geschlechtsverhältnis | Durchschnittliche Kokongröße 


I. Massenkultuen... | 


100 Kokons ar KEN 0 I HL 22 =,2.06 Eier 
dto. da: 9 =.1.51,09.0,98 3. 21,07 22°= 12,03, ,, 
dto. er Eh N BIENEN ko LE SE 7 Mu 

Summe: el LIT NIT SE Fe SZ, 16, 


Il. Einzelkulturen. 
:1,7 | 1,8735 + 3,19 2% = 5,06 Eier 


Weibchen A. a] 
„ B. 16) : Q =1: 1,26 2,3 dsHt 3 Na Ze 9,3 „ 
2 &: FERN EIER E20, PETER: ,; 
Summe: de: 9 159.1.92 FAZ I E82, 
Ill. Einzelkulturen (2. Rasse). | 
Weibchen D. 2972 8 Ind 29 Br Eier 
$ P. ER Or RE 
Summe: ls Baer a, 


Frergmwunen Rasse 
Geschlechtsverhältnis |; Durchschnittliche Kokongröße 


I. Massenkultur. | 
100 Kokons 1,0988 + 1,89 2% = 2,98 Eier 
il. Einzelkulturen. 


Cu 
+40 
I 
— 
I 
wo 


Weibchen F. RS fl | 1,33 dd + 2,89 992 = 4,22 Eier 
Br G. RR N ODE 3,8820 = 5 5 
“ H. 308 21213030 3,73}; 
3 1. O3 la 1.021400 = 3,14 -, 
K. & 29221771,561.1,71 88-212. 290 = 443, 
Summe: Dee ELITE 332 95, 


y 


02 Hans Nachtsheim: 


Ein Vergleich der Einzelkulturen mit den Massenkulturen der 
entsprechenden Rassen ergibt, daß bei beiden Rassen durch die 
Einzelzucht der Weibchen erstens der Prozentsatz der Weibcheneier 
erhöht wird und zweitens die Kokongröße zunimmt. Während die 
Zunahme der Kokongröße in allen Fällen zu beobachten und meist 
sehr beträchtlich ist, ist die Verschiebung des Geschlechtsverhält- 
nisses zugunsten der Weibchen weniger bedeutend und fehlt bei 
einzelnen Weibchen vollständig. Beides, Verschiebung des Ge- 
schlechtsverhältnisses und Zunahme der Kokongröße, führe ich, 


wie schon gesagt, auf die besseren Ernährungsverhältnisse zurück, 


unter denen die Einzelweibchen lebten. Die Beobachtungen an 
Massenkulturen haben uns zu dem Ergebnis geführt, daß Geschlechts- 
verhältnis und Kokongröße ererbte Eigenschaften sind. Obwohl 
die Beobachtungen an Einzelkulturen bisher infolge der äußeren 
Verhältnisse nicht in dem gewünschten Umfange haben durchge- 
führt werden können, dürfen sie doch als eine Bestätigung dieses 
Resultates betrachtet werden. Das Resultat wird durch die Beob- 
achtungen an Einzelkulturen insofern noch erweitert, als wir nun- 
mehr sagen können, Geschlechtsverhältnis und Kokongröße werden 
durch — in den verschiedenen Rassen verschiedene — Erbfaktoren 
bedingt, doch wird die Erscheinungsform der Eigenschaften durch 
äußere Faktoren beeinflußt, de gemotypisch gleichen 
Weibchen sind. phänotypisch verschieden, je nachdem 
ob sie in Einzelkultur oder Massenkultur, d. h. unter sehr guten 
oder unter weniger guten Ernährungsverhältnissen, gezüchtet werden, 
gute Ernährungsverhältnisse verschieben Geschlechtsverhältnis und 
Kokongröße nach der Plusseite.e Genotypisch verschie- 
dene Weibchen verhalten sich auch unter gleich guten Ernäh- 
rungsverhältnissen verschieden, d.h. die für de Massen- 
kulturen der verschiedenen Rassen charakteristischen Unter- 
schiede bleiben auch in den Einzelkulturen bestehen, auch in 
den Einzelkulturen der Freiburger Rasse ist der Prozentsatz der 
Weibcheneier höher (1 & :1,95 29) und die Kokongröße größer 
(5,1 Eier) als in den Einzelkulturen der Münchener Rasse (l & : 1,55 
QQ2 und 4,82 Eier). Die zweite Münchener Rasse, die in den Ein- 
zelkulturen isoliert wurde, und welche sich durch besonders hohen 
Prozentsatz an Weibcheneiern (1 & : 3,11 292) und besondere Kokon- 
größe (5,3 Eier) auszeichnete, trat in den Massenkulturen kaum in 
Erscheinung. Infolge der relativ geringen Zahl der Männchen blie- 


ee et 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 03 


ben sehr viele Weibchen dieser Rasse unbegattet — bei allen Rassen 
begatten in der Regel die Männchen eines Kokons die Weibchen 
des gleichen Kokons, also ihre Schwestern — und brachten infolge- 
dessen keine lebensfähige Nachkommenschaft hervor. Weibchen E 
z. B. produzierte drei Kokons, die ausschließlich Weibcheneier ent- 
hielten, insgesamt 10. Auch wenn diese drei Kokons nicht in Einzel- 
kultur gezüchtet worden wären, so wären die IO aus diesen Eiern 
hervorgehenden Weibchen sehr wahrscheinlich unbegattet ge- 
blieben, da eben die Männchen in den Kokons fehlten. Vielleicht 
spielen auch noch andere Gründe bei Unterdrückung der zweiten 
Münchener Rasse durch die erste eine Rolle. Ein weiteres Merkmal 
der zweiten Münchener Rasse ist die Schnelligkeit, mit der die Weib- 
chen ihre Kokons produzierten. Diese hohe Fortpflanzungsge- 
schwindigkeit geht indessen auf Kosten der Lebensdauer. Die 
Weibchen der zweiten Münchener Rasse alterten viel rascher als 
die der anderen Münchener Rasse und auch als die der Freiburger 
Rasse, für welch letztere umgekehrt eine langsame Fortpflanzungs- 
geschwindigkeit charakteristisch ist. 

Hier sei noch einiges über die Lebensdauer des Dinophilus im 
allgemeinen gesagt. Das Dinophilus-Männchen ist, entsprechend 


seiner rudimentären Gesamtorganisation, sehr kurzlebig. Der Ver- 


dauungstraktur fehlt ihm, es nimmt während seines Lebens keine 
Nahrung zu sich, und so sind schon aus diesem Grunde seiner Lebens- 
dauer ziemlich enge Grenzen gezogen. 8—10 Tage kann man als 
die durchschnittliche Lebenszeit der Dinophilus-Männchen bezeich- 
nen. Immerhin beobachtete ich auch Männchen, die die doppelte 
Lebensdauer, 20 Tage, erreichten. Die Lebensdauer der Weibchen 
ist wesentlich länger. Sie schwankt, wie gesagt, bei den verschie- 
denen Rassen, doch können 2—3 Monate als mittlere Lebensdauer 
betrachtet werden. Während dieser Lebenszeit bringt das Weib- 
chen etwa 10—12 Kokons hervor, deren Zusammensetzung und 
Größe nach den Rassen und den Ernährungsverhältnissen wechselt 
und auch, wie wir gesehen haben, innerhalb der Rasse individuellen 
Schwankungen unterworfen ist. Die Höchstzahl von Kokons, die 
ich bei einem Weibchen beobachten konnte, betrug 16 (Weibchen A) 
mit 30 Männchen- und 51 Weibcheneiern. Außerdem brachte das 
Weibchen noch 3 Männchen- und 11 Weibcheneier ohne Kokon 
hervor, erzeugte also insgesamt nicht weniger als 95 Eier. Nach 
Produktion dieser zahlreichen Nachkommenschaft war sein Ge- 


94 Hans Nachtsheim: 


schlechtsapparat offensichtlich erschöpft. Es lebte nach Ablage des 
letzten Kokons noch 13 Tage, machte aber in seinem ganzen Ver- 
halten und in seinem Aeußeren, den Eindruck, daß seine Lebens- 
energie aufgebraucht war. Die Bewegungen des Weibchens ver- 
langsamten sich mehr und mehr, wurden unregelmäßig, das Wimper- 
kleid erschien abgenutzt, schließlich stellte das Weibchen die Nah- 
rungsaufnahme ein und verfiel dem Alterstode. Ein ähnliches Ver- 
halten zeigten alle Weibchen nach längerer Lebensdauer. 

Das wichtigste Resultat unserer bisherigen Untersuchungen 
läßt sich dakin zusammenfassen, daß es in erster Linie innere 
Faktoren sind, die das Geschlechtsverhältnis bei .Dinopkilus be- 
stimmen, doch kann es durch äu Bere Faktoren, wie die Ernährung. 
modifiziert werden. Immerhin ist die Verschiebung des Geschlechts- 
verhältnisses nur gering. In weitgehendem Maße macht v. Mal- 
sen (1906) äußere Faktoren für die Geschlechtsbestimmung bei 
Dinophilus verantwortlich. In den Normalkulturen bei Zimmer- 
temperatur (19° C) fand er ein Geschlechtsverhältnis von I 8: 
2,4 29. In der Kälte (13° C) nimmt nach seinen Beobachtungen 
die relative Zahl der weiblichen Geburten bedeutend zu: 1 : 3,5 ?2. 
Umgekehrt soll in der Wärme (26° C) die Zahl der männlichen 
Geburten steigen: 1 & : 1,7 29. Das wäre eine wesentlich stärkere 
Verschiebung des Geschlechtsverhältnisses, als sie in meinen Kul- 
turen durch die verschiedene Ernährung erfolgte. Ehe wir indessen 
in eine Kritik der Experimente v. Malsens eintreten, wollen 
wir eine Darstellung unserer eigenen Temperaturexperimente geben. 


10. Das Geschlechtsverhältnis in den Kältekulturen. 


Die Kältekulturen bieten keine besonderen Schwierigkeiten. 
Von der Temperatur abgesehen befanden sich die Weibchen in 
den Kältekulturen unter ganz den gleichen Bedingungen wie in 
den Normalkulturen. Die meisten Kältekulturen wurden als Einzel- 
kulturen geführt. Jedes Weibchen kam mit einer geringen Menge 
Wasser in eine Boveri-Schale (siehe Seite 28), dazu wurde ein Stück- 
chen Muschelfleisch gegeben, das Weibchen hatte immer Ueber- 
fuß an Nahrung. Die Schalen wurden in großen Glasaquarien 
untergebracht, die ständig von fließendem Wasser umspült wurden. 
Auf dies Weise konnte die Temperatur in den Kältekulturen dauernd 
auf 9—11 °C gehalten werden, nur in den heißen Sommermonaten 


En fr EP 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 95 


stieg sie in den Mittagsstunden um 1—2 °. Die Beleuchtungsverhält- 
nisse waren bei den Kältekulturen ähnlich wie bei den Normalkulturen. 
die Kulturen befanden sich im Halbdunkel. 


Weibchen L. 


22. Januar. Junges Weibchen aus der Freiburger Massenkultur 
(1&:1,73 29) wird isoliert und zunächst in 15°, danr 
(nach einigen Tagen) in 9° C gebracht. 


4. Februar. 1. Kokuon: Id + 2 929 
2, ang, Id +3929 
a, 3. 2 dd + 2 99 
16 Ban, 2.88 7. 2,220 
20. ; Den 3.8&:+ 3 22 
BANDS: Bail, le, +3,22 
Il. März. Eh 2 dd + 422 
SEEN BAER, 13 '+499 
8. Dre tın 285 3'822 
Llesx ;, EU. AR 
TERN er, 1: 210 

RE Weibchen abgestorben. 


Das Weibchen wurde 64 Tage beobachtet und erzeugte inner- 
halb von 45 Tagen 11 Kokens mit 16 Männchen- und 32 Weibcheneiern. 

Geschlechtsverhältnis: $: 9 = 1:2. 

Kokongröße: 4 36 Eier (1,45 Männchen- und 2,91 Weibcheneier). 

Das Geschlechtsverhältnis der Eier des Weibchens L ist ganz 
das gleiche wie das der Eier des Weibchens G, welches derselben 
Rasse angehörte und ungefähr zur gleichen Zeit und unter den 
gleichen Bedingungen (von der Temperatur natürlich abgesehen) 
gezüchtet wurde. Die Temperatur übte nicht den geringsten Ein- 
fluß auf das Geschlechtsverhältnis aus. Was die Kokongröße an- 
betrifft, so ist diese zwar bei Weibchen L etwas geringer als bei 
den in Zimmertemperatur gehaltenen Einzelweibchen der Frei- 
burger Rasse (5,1 Eier), aber sie ist doch wie in allen Einzelkulturen 
beträchtlich größer als in den Massenkulturen (2,98 Eier). Nach 
v. Malsen soll sowehl in Kälte- wie in Wärmekulturen die 
Kokongröße abnehmen, und zwar in letzteren stärker als in ersteren 
(Zimmerkultur: 5,6, Kältekultur: 42, Wärmekultur: 3,6 Eier pro 
Gelege). 


96 Hans Nachtsheim: 


Weibchen M. 
14. Januar. Junges Weibchen wird einer bereits längere Zeit in 
‘ der Kälte (9° C) befindlichen Kultur entnommen, 
die aus der Freiburger Massenkultur herrührte, und 
isoliert (9 2). ° 


13:4Eebruar.. 1...Koken! 2,89 + 7.22 
2 FREE T. 3 dd + 6 29 
DER; BI 2d8 +6 29 
20.2 AL, 19 
AS AREER Dr 283 + 799 
DAN, y, Ds Er ae N 
OR Tun 1% +49292 
5. März. BIS Re 858 + 7299 
ST er 488 4528 
195 Weibchen abgestorben. 


Das Weibchen wurde 57 Tage beobachtet und erzeugte inner- 
halb von 22 Tagen 9 Kokons mit 23 Männchen- und 44 Weibcheneiern. 
Geschlechtsverhältns3& 70 7 1: 5,91: 

Kokongröße: 7,44 Eier (2,55 Männchen- und 4,89 Weib- 
cheneier). 

Das Geschlechtsverhältnis der Eier des Weibchers M ist ganz 
ähnlich dem der Eier des vorhergehenden Weibchens, von einem 
Einfluß der Temperatur ist auch hier nichts zu bemerken. Die 
Kokongröße ist bei diesem Weibchen ganz auffallend groß, weder 
in den Normal- noch in den Wärmekulturen wurde jemals ein Weib- 
chen mit auch nur annähernder Kokongröße beobachtet. Auch 
in dieser Hinsicht kann ich also die Angaben v. Malsens nicht 
bestätigen. Im Vergleich mit Weibchen L fällt weiterhin die große 
Produktivität und die rasche Fortpflanzungsgeschwindigkeit des 
Weibchens M auf. Dieses brachte in 22 Tagen 67 Eier, jenes in 
45 Tagen 48 Eier hervor. 


WeibchenN. 


23. Mai. Der 3. Kokon des Weibchens A der Münchener Rasse, 
enthaltend 1 Männchenei und 2 Weibcheneier, wird 
isoliert und in 11 °C gebracht. 

7. Juni. Das eine Weibchen ist ausgeschlüpft, das andere ist 
aus unbekannten Gründen kurz vor dem Ausschlüp- 
fen abgestorben, das Männchen bleibt im Kokon. 


u u rn nt = ea m re 


ENT, VE Rn 


a u 1 


a rö 
Er 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 97 
12. Juni. Das Männchen ist innerhalb des Kokons abgestorben, 
3° Juli: l. Kokon: 2 99 
Desee 2,6 en 2,20 
= ER DS, 2 dd + 299 
BR, AN; 2 338 + 4 28, außerdem I Weibchenei 
ohne Gallerthülle. 
19.7.,-,5 Sr en a 2 
EN ER DSH, | En Zu En, 
8234, Ze ",; 18 + 1% außerdem 1 Weibchenei 
ohne Gallerthülle, 
> 3 Weibcheneier ohne Gallerthülle. 
5 4 Weibcheneier ohne Gallerthülle. 


1. August. Infolge Kriegsausbruches muß die Kultur aufgegeben 
werden. 


Weibchen N brauchte in einer Temperatur von 11° C 15 Tage 
zur Entwicklung. Es wurde nach dem Ausschlüpfen 54 Tage beob- 
achtet. Am 26. Tage nach dem Ausschlüpfen setzte es seinen ersten 
Kokon ab, der nur Weibcheneier (2) enthielt. Im ganzen erzeugte 
es 7 Kokons mit 10 Männchen- und 16 Weibcheneiern. Außerdem 
wurden noch 9 Weibcheneier ohne Kokon beobachtet. Wahrschein- 
lich wurden gleichzeitig mit diesen losen Weibcheneiern auch Männ- 
cheneier abgesetzt, die aber der Beobachtung entgangen sind. Bei 
Berechnung des Geschlechtsverhältnisses bleiben deshalb die freien 
Weibcheneier unberücksichtigt. 
Geschlechtsverhältnis:4:Q = 1:1,6. 

Kokongröße: 3,71 Eier (1,43 Männchen- und 2,28 Weib- 
cheneier). 

Auch hier entspricht das Geschlechtsverhältnis der Eier dem 
Geschlechtsverhältnis in den Einzelkulturen bei Zimmertempera- 
tur (1 $&:1,55 99), ein Einfluß der Temperatur fehlt gänzlich. 
Die Kokongröße ist wieder etwas geringer äls in den Einzelkulturen 
bei Zimmertemperatur (4,82 Eier). 


Weibchen O und. 


Zwei Schwestern des Weibchens N, die dem am 21. Mai ab- 
gelegten 2. Kokon des Weibchens A, enthaltend I Männchenei und 


Arch. f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 7 


98 Hans Nachtshleim: 


5 Weibcheneier, entstammten, sich ebenfalls in 11 0 C entwickelter 
und am gleichen Tage ausschlüpften wie Weibchen N (7. Juni; 
sie brauchten ‚also 17 Tage zur Entwicklung), blieben sehr wahr- 
scheinlich unbegattet, ihr Verhalten entsprach ganz dem unbegattet 
gebliebener Weibchen. Erst am 54. Tage nach dem Ausschlüpfen. 
am 31. Juli, setzten die beiden Weibchen ihre ersten Kokons ab. 
Der Kokon des Weibchens O enthielt 5 Männchen- und 8 Weibchen- 
eier, der Kokon des Weibchens P 7 Männchen- und 13 Weibcheneier,, 
beide auffallend große Kokons. Leider machte der am 1. August 
ausbrechende Krieg den Beobachtungen ein Ende. Für die Eier 
des Weibchens O wäre.das Geschlechtsverhältnis: 4:2 =1:1,6, für 
die des Weibchens. P: J ::Q2 = 1: 1,86. ‘Da es sich indessen im 
beiden Fällen nur um einen Kokon handelt, läßt sich dieses Resul- 
tat kaum verwerten. 


Meine sonstigen Beobachtungen über das Verhalten der Weib- 
chen in der Kälte stimmen mit denen v. Malsens überein. Die 
allgemeine Lebensenergie der Tiere wird stark herabgesetzt. Die 
natürliche Lebhaftigkeit der Weibchen sinkt, sie werden viel lang- 
samer, träger in ihren Bewegungen. Die Entwicklung wird ver- 


zögert, die ausgeschlüpften Weibchen wachsen langsamer, sie werden. 


später geschlechtsreif und pflanzen sich weniger rasch fort als in 
höheren Temperaturen. Auf die Geschlechtsbestim- 
mung. aber.ist-die. Kälte ohnesjeden Foamtanr 
Die folgende Tabelle gibt nochmals einen Ueberblick über die Kälte- 
kulturen, die Resultate der Normalkulturen sind zum Vergleich 
beigefügt. 


Münchener Rasse, 


Geschlechtsverhältnis | Durchschnittliche Kokongröße 


A. Kulturen bei Zimmertemperatur,(18° Ö). a 
I. Massenkulturen 8:21: 119:5.0,99:3:: + 1,1029 = 216/PFier 
Il. Einzelkulturen d4.:2-=\l 21,55:).1,92 383 +.2,9:, 20 48 

B. Kältekulturen (10 °C). 

Einzelkulturen. 


Weibchen N. 8:9 = T'7T,6:.1 353 38 FB 72 IHTT Eier 
BE ©: ar Ole = 
» I 22.0 SP 280 Be 


Er 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 99 


Freiburgen.Vasse, 


Geschlechtsverhältnis Durchschnittliche Kokongröße 
A. Kulturen bei Zimmertemperatur (18° C).| 


. 1. Massenkultur 3:2=1:1,731} 1,0983 1,89 22 = 2,98 Eier 
11. Einzelkulturen g:2=1:1,95|1718989-+3,32 99 =51. „ 


B. Kältekulturen (10° ©. 
Einzelkulturen. 
Weibchen L. G :2 :| 145334 2,91 22 = 4,36 Eier 
M. 1,91 | 2,55 934 4,89 92 = 7,44 


v0 vs 
I 
[ne 


2} 


11. Das Geschlechtsverhältnis in den Wärmekulturen. 


Dinophilus in höheren Temperaturen zu züchten, bereitet 
manche Schwierigkeiten. Insbesondere ist es fast unmöglich, Weib- 
chen längere Zeit bei hoher Temperatur in Einzelkultur zu halten. 
Auch v. Malsen gibt an, daß seine Wärmekulturen stets von 
kurzer Dauer waren. ‚‚In den Uhrschälchen starben die Tiere in 
der Regel schon nach drei bis vier Tagen. Nur in größeren Gefäßen 
gelang es mir, zwei Kulturen längere Zeit zu erhalten.‘“ Die eine 
der beiden Kulturen — es handelt sich um Massenkulturen — 
lebte 22, die andere 24 Tage. Ein Uebelstand, gegen den sich kaum 
mit Erfolg ankämpfen läßt, ist das Ueberhandnehmen von Bak- 
terien und Pilzen in den Wärmekulturen. Mit dem Futter für die 
Weibchen, dem faulenden Muschelfleisch, schafft man gleichzeitig 
den Bakterien und Pilzen den besten Nährboden, und schon nach 
wenigen Tagen überwuchern diese in der Regel alles, und wenn 
nicht die Weibchen selbst so fallen ihnen doch meistens deren Kokons 
zum Opfer, die vollständig verpilzen. Man kann das Ueberhand- 
nehmen der Pilze dadurch eindämmen, daß man Kulturgefäße und 
Wasser möglichst oft wechselt, aber bei der Schnelligkeit, mit der 
sich die Pilze in der Wärme vermehren, läßt sich das Uebel auch so 
nicht vollständig beseitigen. In Einzelkulturen, d. h. bei Ver- 
wendung von Schalen mit nur ganz wenig Wasser, kommt als wei- 
terer Uebelstand hinzu, daß sich die Konzentration des Wassers 
durch Verdunsten rasch ändert. Aber selbst wenn es gelingt, alle 
diese schädigenden äußeren Einflüsse von den Weibchen fern zu 
halten, so ist das Gelingen der Experimente doch dadurch sehr in 
Frage gestellt, daß die Weibchen selbst in der hohen Temperatur 
nicht nur viel empfindlicher gegen Schädigungen von außen werden, 

T* 


100 Hans Nachtsheim: 


sondern häufig auch aus inneren Ursachen pathologisch werden und 
absterben. Die hohe Temperatur äußert sich zunächst darin, daß 
die Lebhaftigkeit der Tiere stark zunimmt, sie schwimmen unruhig 
und unstet umher. Ihre Entwicklung geht viel rascher vor sich, 
die Fortpflanzungsgeschwindigkeit steigt. Die hohe Temperatur 
hat indessen nicht nur diese einfache Beschleunigung der sämt- 
lichen Lebensfunktionen der Tiere zur Folge, sie wirkt sehr bald 
schädigend auf den Organismus ein. „Eine äußerst auffallende 
Folgeerscheinung der Wärme“, schreibt v. Malsen, ‚war das 
häufige Vorkommen von Weibchen, deren ganzer Leib vom After 
bis zum Schlund so sehr mit Eiern angefüllt war, daß der Kopf des 
Tieres nur mehr als ganz kleines Pünktchen gegenüber dem un- 
geheuer angeschwollenen Leibe erschien, der Darm aber bis zur 
Unsichtbarkeit zusammengepreßt war. Diese Tiere reagierten 
zwar noch durch schwache Regungen auf Berührungen mit der 
Präpariernadel, waren im übrigen aber unfähig, sich zu bewegen 
und gingen bald ein.“ Ich selbst machte ganz die gleiche Beobach- 
tung. Es ist kaum möglich, ein Weibchen in der Wärme so lange 
lebensfähig zu halten, bis es eines natürlichen Alterstodes stirbt. 
Ich hoffe indessen, wenn mir eine Fortführung meiner experimen- 
tellen Untersuchungen möglich ist, auch die Resultate der Wärme- 
experimente noch auf eine breitere Basis stellen zu können, als 
ich es bisher konnte. Ich begnüge mich hier mit der Mitteilung 
der Resultate zweier Wärmekulturen. A 

Es sei noch bemerkt, daß die Wärmekulturen im Thermostaten, 
ebenso wie die v. Malsens, bei durchschnittlich 25 0 C geführt 
wurden. Von den Normal- und den Kältekulturen unterschieden 
sich die Wärmekulturen noch insofern, als sie im Dunkeln (die 
andern im Halbdunkel) gehalten wurden. Auf die Fortpflanzung 
der Tiere haben indessen die verschiedenen Beleuchtungsverhält- 
nisse, wie eigens angestellte Experimente ergaben, keinen Einfluß, 
bei Zimmertemperatur verhielten sich die Weibchen in völliger 
Dunkelheit ebenso normal wie im Halbdunkel. 


WeibchenR, 
5. März, Junges Weibchen aus der Freiburger Massenkultur 
(1 & : 1,73 22) wird isoliert und zunächst in 19, dann 
(nach einigen Tagen) in 21° und schließlich in 25 0 C 
gebracht. 


2 a A Re 

= „ f " 

ae Na Bee 
. ’ RN 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 101 
10. März. 1. Kokon:1& + 2 29 
12, 2. 4 ar 20 
LI:N SR 3dd + 2299 
FE», EN; 1d& +499 
10°, Be, 
Br PR Weibchen abgestorben. 


Weibchen R wurde 13 Tage beobachtet und erzeugte innerhalb 
von 7 Tagen 5 Kokons mit 9 Männchen- und 12 Weibcheneiern. 


Geschlechtsverhältnis:$ :Q = 1: 1,33. 
Kokongröße: 4,2 Eier (1,38 Männchen- und 2,4 Weibchen- 
eier). | 

Das Weibchen gehörte zur Freiburger Rasse, deren Geschlechts- 
verhältnis in den Einzelkulturen war: 1 $:1,95 22 und in den 
Massenkulturen: 1 & : 1,73 29. Hier wäre also in der Wärme in 
der Tat eine, wenn auch nur schwache, Verschiebung des Geschlechts- 
verhältnisses zugunsten der Männcheneier eingetreten. Die Ver- 
schiebung ist indessen nur einescheinbare. Wäre das Weibchen 
nicht nach Ablage seines 5. Kokons den schädigenden Einflüssen 
der hohen Temperatur zum Opfer gefallen, so wäre das Geschlechts- 
verhältnis wahrscheinlich ein ganz ähnliches gewesen wie in den 
Einzelkulturen bei Zimmertemperatur und in der Kälte. Dieersten 
Kokons eines in hoher Temperatur gezüchteten Weibchens ent- 
halten nämlich häufig eine größere Zahl von Männcheneiern als 
gewöhnlich. Die Wärme läßt anscheinend die Männcheneier im 
jungen Weibchen rascher zur Reife kommen als die Weibcheneier. 
Später gleicht sich dann aber das Geschlechtsverhältnis wieder aus, 
d. h. die späteren Kokons enthalten eine verhältnismäßig größere 
Zahl von Weibcheneiern. Die folgende Wärmekultur illustriert dies. 

Um das frühzeitige Absterben der Weibchen nach Möglichkeit 
zu vermeiden, wurden mehrere Weibchen (12) in eines der auf 
Seite 27 beschriebenen 8 cm hohen rechteckigen Gläser gebracht, 
dieses mit Wasser ganz gefüllt und die Oeffnung durch eine Glas- 
platte vermittels Vaselines dicht verschlossen. Das Geschlechts- 
verhältnis wurde dann in der Weise festgestellt, daß das Glas unter 
das Mikroskop gelegt und die an den Wänden befestigten Kokons 
durchmustert wurden. Es ist dies die Kulturmethode, die v. Mal- 
sen bei seinen Experimenten anwandte. Ich selbst machte nur 
ganz selten davon Gebrauch, denn eine wirklich exakte Feststellung 


102 


des 


10. 


23. 


30. 


Hans Nachtsheim: 


Geschlechtsverhältnisses ist auf diese Weise nicht möglich; 
man übersieht sehr leicht Männcheneier. 


Juni. 


12 geschlechtsreife Weibchen werden der Freiburger 
Massenkultur entnommen und in den Thermostaten 
in 23.0, später 25°C "gebracht. 

Die Weibchen haben eine größere Anzahl Kokons ab- 
gesetzt, Geschlechtsverhältnis wie in der Massenkultur 
bei Zimmertemperatur (l 3: 1,73 @2). Die Weibchen 
werden aus der Kultur entfernt. 

Zahlreiche junge Weibchen sind ausgeschlüpit, sie 
haben höchstens 7 Tage zu ihrer Entwicklung ge- 
braucht. 

Die jungen Weibchen haben zahlreiche Kokons ab- 
gesetzt. 61 Kokons enthalten 162 Eier, und zwar: 


24 Kokons: Id +2 99 = 24 dd148 99 


6... I 0: 
2a a 6 27 
a el ee 
SD er DE 
61..Kokons: nu 2... aaa re 
Geschlechtsverhältnis: A201, 
Kokongröße: 2,65 Eier (0,9 Männchen- 


und 1,75 Weibcheneier). 


15 weitere Kokons enthalten 32 Eier, und zwar: 


5 Kokons: RO — 5.0 
EEE eye FL ee 
en ot N 
ee 
1 2) 2 22 Im 2 22 
15-Kokons... u... = UI 28 9 
Geschlechtsverhältnis: ds 222,98, 
Kokongröße: 2,13 Eier (0,6 Männchen- 


und 1,53 Weibcheneier). 


ER 
u 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 103 


Die in den ersten 7 Tagen nach dem Ausschlüpfen der jungen 
Weibchen abgesetzten Kokons wiesen somit wesentlich mehr Männ- 
-cheneier auf als die in der nächsten Woche erzeugten. Betrachtet 
man die in den 14 Tagen abgesetzten Kokons in ihrer Gesamtheit, 
so ergibt sich ein Geschlechtsverhältnis von: 

205 11:.2,03: 

Dieses Geschlechtsverhältnis entspricht ungefähr dem der Eier 
‚des der gleichen Rasse angehörenden, in Zimmertemperatur gezüch- 
teten Weibchens G und des in der Kälte gezüchteten Weibchens L 
na: 2 99), SEiwe, Verschtebnmeondes,Geschlte,.chts- 
zer hältnisses-hatralso in den. Wärme eben so- 
wenig stattgefunden: wie in dem Kälte. v..Maäl- 
sen gibt an, daß in der Kälte die Zahl der männlichen Geburten 
steigt. Wenn wir das Geschlechtsverhältnis in dieser Wärmekultur 
mit dem der Freiburger Massenkultur (1 3:1,73 29) oder dem 
‚der gesamten Einzelkulturen bei Zimmertemperatur (1 3: 1,95 2%) 
vergleichen, so ließe sich eher noch ein Steigen der Zahl der weib- 
lichen Geburten daraus entnehmen. Da indessen die bei dieser Kul- 
tur ausnahmsweise angewandte Methode zur Feststellung des Ge- 
schlechtsverhältnisses leicht zu einer etwas geringeren Zahl von 
Männcheneiern führt, als in Wirklichkeit vorhanden sind, ist auf 
diese geringe Differenz kein Wert zu legen. 

Die durchschnittliche Kokongröße sämtlicher Kokons der Wär- 
mekultur beträgt 2, 55 Eier.(0,84 Männchen- und 1,71 Weibchen- 
eier). Das bedeutet allerdings ein Sinken der Kokongröße gegenüber 
der Massenkultur (2, 98 Eier) und erst recht gegenüber den Einzel- 
kulturen bei Zimmertemperatur (5,1 Eier). Es ist aber dieses Sinken 
der Kokongröße wohl weniger auf Rechnung der erhöhten Tem- 
peratur als vielmehr auf die in dieser Wärmekultur ebenso wie in 
der Massenkultur schlechteren Ernährungsverhältnisse zu setzen. 
Daß unter günstigen Ernährungsverhältnissen auch bei hoher Tem- 
peratur große Kokons erzeugt werden, zeigt ja Weibchen R, dessen 
Kokons durchschnittlich 4,2 Eier enthielten. 

Wie sind nun aber die hiervon gänzlich abweichenden Resul- 
tate vv. Malsens zu erklären? Man könnte zunächst daran 
denken, daß v. Malsens Rasse, die, nach Geschlechtsverhältnis 
und Kokongröße in den Normalkulturen zu urteilen, vielleicht mit 
meiner zweiten Münchener Rasse identisch sein könnte, äußeren 
Bedingungen gegenüber stärker reagierte als die anderen Rassen. 


"104 Hans Nachtsheim: 


‘Die Möglichkeit, hierdurch die Unterschiede in unseren Ergebnissen 
zu erklären, muß zugegeben werden. Für wahrscheinlich halte ich 
indessen diese Annahme nicht. Ich habe bereits im ersten Kapitel 
(Seite 27 f.) ausgeführt, daß die Art und Weise der Kulturführung 
und die Methode, die v. Malsen zur Feststellung des Geschlechts- 
verhältnisses anwandte, gänzlich ungenügend sind. Auch im üb- 
rigen läßt sich gegen die Experimente mancher Einwand erheben. 
So willv. Malsen mit Tabelle 4 die Zunahme der relativen Zahl 
der weiblichen Geburten mit dem Sinken der Temperatur beweisen. 
Die Zuverlässigkeit der Methoden vorausgesetzt würde aber die Ta- 
belle beim Sinken der Temperatur von 18° auf 12,5° allerdings eine 
außerordentlich starke Zunahme der Weibcheneier innerhalb von 
3 Wochen (7. September: 1 d:2 29, 28. September: 1 &:4,3 29), 
dann indessen, bei weiterem Sinken der Temperatur auf 9°, innerhalb 
von 12 Tagen wieder eine starke Abnahme der Weibcheneier 
(10. Oktober: 1 $:3,4 22) demonstrieren. In der einen Wärme- 
kultur (Tabelle 5) fand v. Malsen ein Geschlechtsverhältnis von 
1 &:1,3 92, in der anderen (Tabelle 6) von 1 $:2,1 29. Wenn man 
die beiden Kulturen zusammennimmt, wieesv. Malsen (Tabelle 7) 
tut, erhält man ein Geschlechtsverhältnis von I $: 1,7 29, und das 
bedeutet allerdings den Normalkulturen gegenüber (1 $:2,4 22) 
eine Verschiebung zugunsten der Männchen. In Wirklichkeit aber 
ist, wieder die Zuverlässigkeit der Methoden vorausgesetzt, die Ver- 
schiebung nur in der einen Wärmekultur eingetreten; 2,1 Weib- 
chen auf 1 Männchen statt 2,4 Weibchen kann kaum als Verschiebung 
des Geschlechtsverhältnisses bezeichnet werden. 

Uebrigens schränkt v. Malsen seine Resultate selbst insofern 
ein, als er sagt: „Der Einfluß der Temperatur auf Geschlechtsver- 
hältnis und Geschlechtstätigkeit ist am bedeutendsten während 
der ersten drei bis vier Tage ihrer Einwirkung. Im Laufe länger 
dauernder Kulturen scheint der Organismus allmählich wieder ins 
Gleichgewicht zu kommen.“ Das stimmt ganz mit meinen Be- 
obachtungen überein. Falls sich überhaupt ein Einfluß der Tem- 
peratur zeigt, ist dieser nur vorübergehend und Folge einer ver- 
schiedenen Beeinflussung der Männchen- und Weibcheneier. Daß 
sich auch in den ‚am längsten dauernden Kulturen immer noch 
ein merkbarer Unterschied gegen normale Verhältnisse‘ zeigt, wie 
v. Malsen angibt, widerspricht meinen Erfahrungen. 

Nach v. Malsens weiteren Darlegungen beeinflußt aber die 


b; " 
ar 


nn ı Zde an a ie a 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 105 


Temperatur überhaupt gar nicht direkt das Geschlecht, sondern 
es ist nach seiner Ansicht die in den verschiedenen Temperaturen 
verschiedene Ernährung, die als geschlechtsbestimmender 
Faktor wirkt. In der Wärme steigert sich die Geschlechtstätigkeit 
der Weibchen. Die Umwandlung der gefressenen Nahrung in Nähr- 
saft wird zwar in der Wärme ebenfalls beschleunigt, aber, so schließt 
v. Malsen, nicht in demselben Grade, und so können den sich 
rapide vermehrenden Ovogonien nicht so viele Nährstoffe zugeführt 
werden, wie sie zu ihrem Heranwachsen brauchen. Die Ovogonien 
werden daher „nicht alle schnell genug die Verschmelzungsgröße 
erreichen können. Es wird immer nur eine kleine Anzahl zu gleicher 
Zeit zur Verschmelzung bereit sein. Es treten deshalb häufiger 
als sonst nur wenige Ovogonien zu einer Ovocyte zusammen und wir 
erhalten öfter als normal ein kleines männliches Ei, anstatt eines 
großen, dotterreichen weiblichen Eies.‘“ Umgekehrt soll es in der 
Kälte sein. ‚‚Iniolge der allgemein herabgeminderten Geschlechts- 
tätigkeit geht die Teilung der Primordialzellen langsamer vor sich, 
es treten nur verhältnismäßig wenig Eikeime in das Ovarium über. 
Für ihr Heranwachsen ist reichlich Nahrung vorhanden. Da auch 
die Eiablage nur mit großen Pausen vonstatten geht, haben viele 
Ovogonien Zeit, zu einer Ovocyte zu verschmelzen. Es werden also 
vorzugsweise große weibliche Eier gebildet.‘ 

Um die Richtigkeit seiner Schlüsse zu erweisen, führt v. Mal- 
sen dann noch die Ergebnisse zweier Hungerkulturen an. Denn 
wenn es die verschiedenen Ernährungsverhältnisse sind, die in den 
verschiedenen Temperaturen das Geschlecht bestimmen, so müssen 
bei gleicher Temperatur und verschiedener Ernährung 
ähnliche Resultate sich erzielen lassen wie mit den verschie- 
denen Temperaturen bei gleicher Ernährung. v. Malsen 
kam in der Tat zu diesem Ergebnis. Hunger bei normaler Tempe- 
ratur wirkte ebenso wie erhöhte Temperatur bei normaler Ernäh- 


rung, d. h. bei normaler Temperatur hungernde Weibchen erzeugten 


verhältnismäßig wenig Weibchen (1 3:1,7 22). Und Hunger bei 
niederer Temperatur wirkte ebenso wie normale Temperatur bei 
normaler Ernährung, Hunger paralysiert die Kältewirkung, d. h. 
in der Kälte hungernde Weibchen erzeugten nicht mehr Weibchen 
als normal (i 8:2,5 29). v. Malsen kommt infolgedessen zu 
dem Endergebnis: „Das Geschlecht der Nachkommen hängt in 
erster Linie ab von der Nahrungsaufnahme der sich bildenden Ovo- 


106 Hans Nachtsheim: 


cyten im mütterlichen Leibe. Die Nahrungsaufnahme aber kann 
günstig oder ungünstig durch die äußere Temperatur beeinflußt 
werden.‘ 

Nun habe ich selbst ja auch die Ernährung als einen Faktor 
erkannt, der modifizierend auf das Geschlechtsverhältnis des Di- 
nophilus einwirken kann. Die Nahrungsaufnahme hat aber nach 
meinen Untersuchungen bei weitem nicht die Bedeutung, die v.Mal- 
sen ihr zuschreibt, und überdies geht nach meiner Ansicht die 
Beeinflussung des Geschlechtsverhältnisses ganz anders vor sich, 
als v. Malsen essich vorstellt. Seine Erklärung kann schon des- 
halb nicht richtig sein, weil die von ihm gemachten Voraussetzungen 
betreffend die Eibildung nicht zutreffend sind. Wie ich selbst mir 
die Wirkung äußerer Faktoren auf das Geschlechtsverhältnis der 
Eier bei Dinophilus vorstelle, darüber Weiteres im allgemeinen Teil. 


12. Das Verhalten unbegattet gebliebener Weibchen. 


In den vorhergehenden Kapiteln haben wir wiederholt von Weib- 
chen gesprochen, die sehr wahrscheinlich unbegattet geblieben sind, 
trotzdem aber Männchen- und Weibcheneier hervorbrachten (Weib- 
chen H, © und P). Um sicher unbegattete Weibchen zu bekommen 
und deren weiteres Verhalten studieren zu können, wurden Kokons, 
die ausschließlich Weibcheneier enthielten, isoliert und aus diesen 
Eiern Weibchen gezüchtet. Ich lasse die Lebensgeschichte einiger 
dieser Weibchen folgen. 


Weibchen S. 


4. Mai. Aus Münchener Massenkultur (1 3: 1,3 22) wird Ko- 
kon mit nur einem Weibchenei isoliert. 

11,0%; Das Weibchen schlüpft aus. 

DIS l. Kokon: 295 +1% 

20: 2 ” 2 929 

7. Juni. 3. 7 1,2 

10.9:;; 4. “5 Id +1% 

30,7%, 5 he 2 d8 +2 29% 

3. ul; Weibchen abgestorben. 


14 Tage nach dem Ausschlüpfen setzte Weibchen S seinen 
ersten Kokon ab, innerhalb von 37 Tagen erzeugte es 5 Kokons 
mit 5 Männchen- und 7 Weibcheneiern. 


Rt 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 107 


Geschlechtsverhältnis: en 

Kokongröße: 2,4 Eier (1 Männchenei und 1,4 Weib- 

cheneier). 

Das Geschlechtsverhältnis entspricht ungefähr dem der übrigen 
Einzelkulturen dieser Rasse (1 $:1,55 9), die Kokongröße ist 
wesentlich geringer (in den übrigen Einzelkulturen: 4,82 Eier), 
doch ist sie größer als in den Massenkulturen (2,16 Eier). Alle aus 
den Eiern des Weibchens S hervorgehenden Embryonen starben 
im Laufe der Entwicklung ab. 


Weibchen TT. 


13.2: Juni. Aus einer Massenkultur der Freiburger Rasse (1 &: 
1,73 22) wird ein Kokon isoliert, der nur ein Weib- 
chenei (bzw. Embryo) enthält. 


DOM: Das Weibchen schlüpft aus. 
3. Juli 1. Kokon: 3.20 
1b, PN RR role 
18,5, 3 A 2393+4 992 
EIS KENN, 4. N 2 99 
AUS 3. > 12 
2 EEE 6 is 1$ +3299 
SER, 7 5 3d4+3 99 
BASRER 8. ns 3 29 
22, 9: 5 8 dd +6 29 
TE ID HE 00 
Sl. ;, IE .. 5.909 
I. August. Die Kultur muß wegen Kriegsausbruches aufgegeben 
werden. 


13 Tage nach dem Ausschlüpfen setzte Weibchen T seinen 
ersten Kokon ab, innerhalb von 29 Tagen erzeugte es II Kokons 
mit 20 Männchen- und 40 Weibcheneiern. 


Geschlechtsverhältnis: &:2 = 1:2. 
Kokongröße: 5,46 Eier (1,82 Männchen- und 3,64 
Weibcheneier). 


Das Geschlechtsverhältnis entspricht ungefähr dem der, übrigen 
Einzelkulturen dieser Rasse (1 &: 1,95 29), ebenso die Kokongröße 
(in den übrigen Einzelkulturen: 5,1 Eier). Alle aus den Eiern des 


108 Hans Nachtsheim: 


Weibchens T hervorgehenden Embryonen starben im Laufe der 
Entwicklung ab. 


Weibchen U. 


13. Juni. Aus einer Massenkultur der Freiburger Rasse (1 & : 
1,73 22) wird ein Kokon isoliert, der nur ein Weib- 
chenei (bzw. Embryo) enthält. 


2er Das Weibchen schlüpft aus. 
6. Juli. l. Kokon: 209 
Don, 2 s | RD 
1 RRNES 3 N a 
19.04 4. ie 2 929 
1752 Ö: . 1% +12 
19.555 6 : 1& +229 
AU 7 % 3 99 
ER 8. 5 3dd +2 99 
DIT, g. N 438 +3 99 
SYREES 10. RN Mr a 
l. August. Die Kultur muß wegen Kriegsausbruches aufgegeben 
werden. 


15 Tage nach dem Ausschlüpfen setzte Weibchen U seinen 
ersten Kokon ab, innerhalb von 26 Tagen erzeugte es 10 Kokons 
mit 11 Männchen- und 20 Weibcheneiern. 

Geschlechtsverhältnis: &:2 = 1: 1,82. 

Kokongröße: 3,1 Eier (1,1 Männchen- und 2 Weib- 

cheneier). 


Das Geschlechtsverhältnis entspricht wieder ungefähr dem der 
übrigen Einzelkulturen dieser Rasse (1 $&:1,95 29), die Kokon- 
größe ist geringer (in den übrigen Einzelkulturen: 5,1 Eier), doch ist 
sie größer als in der Massenkultur (2,98 Eier). Auch die aus den 
Eiern des Weibchens U hervorgehenden Embryonen starben sämtlich 
im Laufe der Entwicklung ab. 


Weibchen VW. 


4. Mai. Aus Münchener Massenkultur (1 $: 1,3 22) wird Ko- 
kon mit nur einem Weibchenembryo isoliert. 
DAR Das Weibchen schlüpft aus. 


Ber Da DEF, © SE NET 7 ERETENS HERE: 


lc ee De Dee 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 109 


28. Mai. Das Weibchen ist abgestorben, fast ohne gewachsen 
zu sein. 

Weibchen V starb am 23. Tage nach dem Ausschlüpfen, ohne 
seine Geschlechtsreife erlangt zu haben. Das langsame Wachstum 
ist eine bei unbegattet gebliebenen Weibchen sehr häufig zu beobach- 
tende Erscheinung. 

Wie bei manchen anderen Tieren (siehe z. BB Klatt 1913, 
Nachtsheim 1915), so besteht auch bei Dinophilus die Be- 


| gattung offenbar nicht lediglich in der Uebertragung von Sperma 


auf das Weibchen. Die Begattung übt auf das ganze Tier einen 
Einfluß aus. Ob dieser Einfluß von den Spermien direkt ausgeht, 
oder ob mit dem Sperma irgendwelche Stoffe übertragen werden, 


die wachstumsfördernd wirken, muß dahingestellt bleiben. Jeden- 


falls wächst, wie gesagt, das unbegattet gebliebene Weibchen in 
der Regel viel langsamer als das begattete und wird infolgedessen 
später geschlechtsreif als dieses. Zwei sehr wahrscheinlich unbe- 
gattet gebliebene Weibchen, die dem 2. Kokon des Weibchens A 
der Münchener Rasse mit 1 Männchenei und 5 Weibcheneiern ent- 
stammten, setzten beide erst am 54. Tage nach dem Ausschlüpfen 


“ihre ersten Kokons ab, die beide sehr groß waren; der Kokon des 


einen Weibchens enthielt 7 Männchen- und 13 Weibcheneier, 
der des anderen 5 Männchen- und 8 Weibcheneier. Die weitere Be- 
obachtung der beiden Weibchen machte leider der Ausbruch des 
Krieges unmöglich. Häufig ist es schwer, das jungfräuliche Weib- 
chen überhaupt zur Geschlechtsreife zu bringen, es ist viel hinfälliger 
als das begattete und geht oft vorzeitig zugrunde. Hat das Weib- 
chen die Geschlechtsreife erreicht, so werden Männchen- und Weib- 
cheneier in normalen Verhältnissen abgesetzt, auf die Geschlechts- 
bestimmung ist die Begattung ohne Einfluß. Oefters geht indessen 
die Kokonbildung nicht in der normalen Weise vor sich, es werden 


\ Eier ohne Gallerthülle abgesetzt (Weibchen H), eine Erscheinung, 


die bei normal begatteten Weibchen bisweilen in vorgerücktem 
Alter zu beobachten ist. 

Die unbesamt abgesetzten Eier beginnen sich fast alle par- 
thenogenetisch zu entwickeln, schon sehr bald aber schlägt die Ent- 
wicklung anormale Bahnen ein, die früher oder später zum Absterben 
der Embryonen führen. Schon die Furchung ist meist pathologisch. 
Der Zusammenhalt der einzelnen Blastomeren erscheint gelockert, 
diese zeigen häufig die Tendenz auseinanderzufallen. Bereits auf 


110 Hans Nacehtsheim:; 


diesem Stadium gehen viele zugrunde. Bisweilen entstehen aber 
auch fast voll entwickelte Individuen, die indessen ebenfalls alle 
mehr oder weniger pathologisch sind. Ich beobachtete die sonder- 
barsten Monstra, so Tiere mit zwei Köpfen (vier Augen); diese Dop- 
pelbildung hat offenbar auch ihre Ursache in dem gelockerten Zu- 
sammenhalt der Teile des parthenogenetischen Embryos. Obwoht 
diese Individuen im Kokon rotierten, waren sie doch nicht imstande, 
die Kokonhülle zu durchbrechen, sie starben alle innerhalb des 
Kokons ab. Junge lebensfähige Weibchen erhielt ich niemals aus 
unbefruchteten Eiern. 

In der Einleitung war bereits von den Untersuchungen 
de Beauchamps (1910, 1912) die Rede, der ebenfalls Dinophilus. 
parthenogenetisch züchtete und durch seine Beobachtungen den 
Beweis für die Haltlosigkeit der Shearerschen Anschauungen 
über die Geschlechtsbestimmung bei Dinophilus erbrachte. 
de Beauchamp erhielt jungfräuliche Weibchen dadurch, dab er 
in den Kokons die Männcheneier abtötete und nur die Weibchen- 
eier sich entwickeln ließ. Seine Beobachtungen über das Verhalten 
der unbegatteten Weibchen stimmen im wesentlichen mit meinen 
Beobachtungen überein, doch war de Beauchamp insofern ° 
erfolgreicher bei seinen Versuchen, als er aus unbefruchteten Weib- 
cheneiern junge Weibchen zu züchten vermochte, die sich wieder 
parthenogenetisch vermehrten, und auf diese Weise konnte er 
mehrere parthenogenetische Generationen beobachten. Die par- 
thenogenetische Fortpflanzung hat indessen mannigfache Mißbil- 
dungen im Gefolge, die schließlich, spätestens nach drei bis vier 
Generationen, zum Aussterben der parthenogenetischen Linien 
führen. Eine häufige Mißbildung ist nach dd Beauchamp 
die Vermehrung der Augenzahl, eine Beobachtung, die mit meinen 
übereinstimmt. Die Geschlechtsorgane der parthenogenetischen Tiere 
kommen vielfach nicht zur Entwicklung oder degenerieren nach- 
träglich, die Entwicklung verzögert sich und sistiert schließlich 
ganz. 

Es scheint, daß verschiedene Rassen von Dinophilus sich hin- 
sichtlich der Fähigkeit zu parthenogenetischer Entwicklung ver- 
schieden verhalten. Seine ersten Untersuchungen (1910) führte 
de Beauchamp an Tieren aus, die aus dem Aquarium der Z00- 
logischen Station in Roscoff stammten. An dieser Rasse wurden 
die obigen Beobachtungen gemacht. Zu seinen späteren Experi- 


Zytolcgische und experimentelle Untersuchungen usw. 111 


menten (1912) benutzte er Material aus der Zoologischen Station 
in Monaco. Aus den unbefruchteten Eiern dieser letzteren Rasse 
erhielt er nur in ein oder zwei Fällen lebensfähige Individuen. Wäh- 
rend er auf Grund seiner ersten Beobachtungen glaubte annehmen 
zu sollen, die Parthenogenese spiele im Lebenszyklus des Dino- 
philus eine normale Rolle, sieht er sich durch seine weiteren Be- 
obachtungen gezwungen, diese Ansicht wieder aufzugeben. Nach 
natürlicher Parthenogenese bei Dinophilus überhaupt zu suchen, 
wurde de Beauchamp wohl durch die Verwandtschaft des 
Dinophilus mit den Rotatorien veranlaßt. Bei den sich parthe- 
nogenetisch fortpflanzenden Rotatorien liegen aber doch ganz andere 
biologische Verhältnisse vor, aus denen sich die Existenz der Par- 
thenogenese erklärt (siehe den allgemeinen Teil). Daß Dinophilus 
sich in der freien Natur nur zweigeschlechtlich fortpflanzt, kann 
heute als sicher gelten. 


Allgemeiner Teil. 
1. Der Modus der Geschlechtsbestimmung bei Dinophilus. 


Hinsichtlich des Zeitpunktes, in dem das Geschlecht eines 
Organismus endgültig bestimmt wird, ergeben sich drei Möglich- 
keiten ). Die Geschlechtsbestimmung kann vor der Befruch- 
tung (progam) erfolgen, sie kann mit der Befruchtung (syngam) 
stattfinden, und sie kann schließlich erst nach der Befruchtung 
(epigam oder metagam), im Laufe der Embryonalentwicklung, vor 
sich gehen. Der heutige Stand unserer Kenntnisse über die ge- 
schlechtsbestimmenden Ursachen erlaubt uns zu sagen, daß bei der 
großen Mehrzahl der Organismen das Geschlecht des jungen Tieres 
mit dem Moment der Befruchtung definitiv fest- 
gelegt ist, die syngame Geschlechtsbestimmung 
stars der normaler Geschtechtsvererbumg's- 
modus zu betrachten. Wir wissen heute, daß bei den 
meisten Tieren die Keimzellen bereits eine bestimmte geschlecht- 
liche Tendenz besitzen, und daß bei der Befruchtung das Geschlecht 
durch das Zusammentreffen und Zusammenwirken bestimmter Chro- 
mosomen, der Geschlechtschromosomen, festgelegt wird. Das eine 


1) Wenigstens bei den Tieren. Bei den Pflanzen mit Generations- 
wechsel liegen die Verhältnisse etwas komplizierter. - 


112 Hans Nachtsheim: 


Geschlecht ist heterogametisch, es bildet zwei Sorten von Keim- 
zellen, männchenbestimmende und weibchenbestimmende, während 
die Keimzellen des anderen Geschlechtes, des homogametischen, 
sämtlich die gleiche Tendenz haben. Der Mechanismus der Ge- 
schlechtsvererbung ist ein alternativer, er erinnert an die Rück- 
kreuzung eines F,-Bastardes mit dem rezessiven P,-Individuum, 
d. h. an die Kreuzung eines Heterozygoten mit einem Homozygoten. 
Ob das männliche oder das weibliche Geschlecht das heterogame- 
tische ist, ist. im: Prinzip. gleichgältig.... »Lafsachlrch 
scheint die Heterogametie des männlichen Geschlechtes die 
Regel zu sein, nur für eine Gruppe ist bisher eine Heterogametie 
des weiblichen Geschlechtes mit Sicherheit nachgewiesen worden, 
für die Schmetterlinge (Seiler 1914, Doncaster 1914). Bei 
Heterogametie des männlichen Geschlechtes hat das Männchen 
in der Regel ein Minus an Chromatinsubstanz im Vergleich zum 
Weibchen, es hat z. B. nur ein Geschlechts- oder X-Chromosom, 
während für das Weibchen der Besitz von zwei X charakteri- 
stisch ist. Jedes Ei erhält dann ein X, die eine Hälfte der Sper- 
matozoen erhält ebenfalls eines, die andere Hälfte aber keines. 
Treffen bei der Befruchtung zwei X zusammen, so entsteht ein Weib- 
chen, bleibt das X des Eies ohne Partner, so geht ein Männchen aus 
dem Ei hervor. Bei Heterogametie des weiblichen Geschlechtes ist 
es umgekehrt, zwei X ergeben ein Männchen, ein X ein Weibchen !). 

Im allgemeinen pflegt man bei Existenz zweier hinsichtlich 
ihres Chromosomenbestandes verschiedener Sorten von Eiern, 
männchenbestimmender und weibchenbestimmender, von pro- 
gamer Geschlechtsbestimmung zu sprechen. Haecker (1912) 
geht sogar noch weiter und nennt auch bei Vorhandensein zweier 
Sorten von Spermatozoen die Geschlechtsbestimmung pr o- 
gam. Diese bezeichnet er als arrheno-progame, jene 
als thelyo-progame Bestimmung. In Anbetracht der prin- 
zipiellen Gleichheit der beiden Fälle erscheint es mir jeden- 
falls höchst unzweckmäßig, einmal von progamer, im anderen 
Falle von syngamer Bestimmung zu sprechen, und was die An- 
wendung der Bezeichnung progam oder syngam anbetrifft, so 


!) Inwieweit diese hier als grob quantitative Bestimmung vor- 
getragene Anschauung auch eine qualitative ist, und inwieweit sie 
sich mit einer mendelistischen Auffassung der Geschlechts- 
bestimmung in Einklang bringen läßt, lassen wir unerörtert. 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 113 


hat bereits Correns (Correns-Goldschmidt 1913) 
darauf hingewiesen, daß die Geschlechtsbestimmung progam 
und syngam zugleich ist;ernenntsie diploprogam. 
Meines Erachtens sollte man aber die Bezeichnung progam auf 
die Fälle beschränken, in denen das Geschlecht bereits im wach- 
senden Ei oder noch früher, jedenfalls aber vor der 
Reifung, unabhängig vom Cäromosomenbestand, festgelegt 
wird. Da die definitive Bestimmung des Geschlechtes des 
zukünftigen Tieres beim Geschlechtschromosomentypus mit der 
Befruchtung erfolgt, so sind wohl die Bezeichnungen arrheno- 
syngame Bestimmung bei männlicher Heterogametie und 
thelyo-syngame Bestimmung bei weiblicher Heterogametie 
am meisten angebracht. 

Als eine Modifikation des Geschlechtschromosomentypus ist der 
von R. Hertwig (1912) als Hymenopterentypus bezeichnete 
Modus der Geschlechtsbestimmung zu betrachten, der sich bei Hy- 
menopteren und Rotatorien — bei letzteren jedoch nicht allgemein, 
wie wir sehen werden — findet. Auch hier erfolgt die Geschlechts- 
bestimmung syngam, Befruchtung oder Nichtbeiruchtung ent- 
scheidet über das Geschlecht. Die Männchen der Hymeno- 
pteren und Rotatorien entstehen aus unbefruchteten Eiern, die eine 
Reduktion ihrer Chromosomenzahl — der Autosomen wie der Ge- 
schlechtschromosomen — erfahren haben, sie sind infolgedessen 
haploide, azygote Organismen (siehe Armbruster, Nachts- 
heim und Roemer 1917, Hartmann 1918), die niemals 
heterozygot sein, also auch niemals zwei Sorten geschlechtsbestim- 
mender Spermatozoen bilden können. Durch die Einführung der 
parthenogenetischen Entstehung der Hymenopteren- und Rota- 
torienmännchen — die eingeschlechtliche Fortpflanzung ist sicher 
sekundär aus der zweigeschlechtlichen entstanden — ist aus dem 
wahrscheinlich ursprünglich heterogametischen Männchen ein homo- 
gametisches geworden — ich habe das bereits an anderer Stelle 
näher ausgeführt (Nachtsheim 1913) —, die männchenbe- 
stimmenden Spermatozoen sind infolge der haploiden Partheno- 
genese eliminiert, alle Spermatozoen sind weibchenbestimmend. Je- 
des befruchtete Ei muß also beim Hymenopterentypus ein Weib- 
chen ergeben. Außerdem entstehen Weibchen noch, wenn ein Ei 
sich parthenogenetisch entwickelt, aber die für das weibliche Ge- 

Arch. f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. Il. 8 


114 H'anseNarchieschreiint: 


schlecht charakteristische Chromosomengarnitur beibehält, bei dip- 
loider Parthenogenese also. 

Der Geschlechtsvererbungsmodus durch Geschlechtschromoso- 
men schließt nicht aus, daß das syngam bestimmte Geschlecht 
nachträglich, epigam, durch äußere Einflüsse (Parasitismus z. B.) 
modiiiziert werden kann. In allen Fällen konstant 
progamer oder epigamer Geschlechtsbestimmung handeit es sich 
wohlum sekundäre Verhältnisse, die in biologischen Besonder- 
heiten der betreffenden Formen ihre Ursache haben. 


Als Beispiel ausgesprochen metagamer Geschlechtsbestimmung ; 


— übrigens bisher der einzige sichere Fall einer solchen — sei 
Bonellia genannt. Nach den schönen Untersuchungen Baltzers 
(1914) enthält das befruchtete Ei dieser Gephyree beide Ge- 
schlechtstendenzen, es ist ebenso zur Bildung eines Männchens wie 
eines Weibchens befähigt. Selbst die junge Larve ist geschlechtlich 
noch indifferent, und erst im Laufe der weiteren Entwicklung lassen 
äußere Faktoren die eine Tendenz über die andere domi- 
nant werden. Bonellia besitzt ebenso wie Dinophilus einen stark 
ausgeprägten Geschlechtsdimorphismus, und wie dieser Geschlechts- 
dimorphismus zweifellos einen sekundär erworbenen Zustand dar- 
stellt, so auch der Modus der Geschlechtsbestimmung. Die von dem 


gewöhnlichen Modus so stark abweichenden Verhältnisse faßt Balt- 


zer als eine Anpassung. auf. „Sie sind das Produkt der 


besonderen biologischen Eigentümlichkeiten der Spezies Bonellia, 


ihres Geschlechtsdimorphismus und, was damit zusammenhängt, des 
Parasitismus des Männchens. Sie sind infolgedessen auch nur für 
Bonellia gültig und können in keiner Weise verallgemeinert werden.‘ 
Wie der besondere Modus der Geschlechtsbestimmung bei Bonellia 
phylogenetisch entstanden zu denken ist, wie er insbesondere von 
dem normalen Modus abgeleitet werden kann, ist eine Frage, auf die 
einzugehen wir uns versagen wollen, zumal da die zytologischen 
Verhältnisse noch unerforscht sind. 

Gewissermaßen das Gegenstück zu Bonellia, das andere Extrem, 
stellt Dinophilus mit seiner ausgesprochen progamen Geschlechts- 
bestimmung dar. Wir wollen versuchen, diesen Fall nunmehr auf 
Grund unserer Untersuchungen etwas genauer zu analysieren. 

Die zytologischen Untersuchungen hatten uns im Gegensatz 
zu Shearer (1912) zu dem Resultat geführt, daß die Differen- 
zierung der Eier in weibliche und männliche von Besamung und 


Er Pi ten 


” f\ DEWEVIeRN 5 
27. 


£ 


=. 


EEE OTERZERBERERERNEE u 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 15 


Befruchtung sowohl wie auch von der Eireifung gänzlich unabhängig 
ist. Andererseits aber hat sich auch kein Grund zu der Annahme 
Conklins (1906) und v. Malsens (1906) ergeben, daß die 
Differenzierung ihre Ursache in der Verschmelzung einer verschie- 
den großen Zahl junger Ovozyten zu einer definitiven Eizelle hat. 
Wieviele Ovozyten während der Verschmelzungsperiode zu 
einem Ei verschmelzen, läßt sich nicht feststellen, Tatsache aber 
ist, daß zu Ende der Verschmelzungsperiode alle Ovozyten gleich 
groß sind, und daraus läßt sich im Gegensatz zu Conklin und 
v.Malsen der Schluß ziehen, daß jedes Ei, sei es Weibchen- oder 
Männchenei, aus einer gleich großen Zahl von jungen Ovozyten her- 
vorgeht, daß jedenfalls prinzipielle Unterschiede in dieser Hinsicht 
zwischen den einzelnen Eizellen nicht bestehen. Wenn es lediglich 
die Zahl der verschmelzenden Ovozyten wäre, die über das Geschlecht 
bei Dinophilus entscheidet, so sollte man erwarten, daß gelegentlich 
auch Uebergänge zwischen den beiden Sorten von Eiern vorkommen. 
Man sollte diese um so mehr erwarten, als in der Tat die Größen- 
schwankungen der Eier recht beträchtlich sind. v. Malsen gibt 
folgende Maße als Extreme an: 


Größte Weibcheneier: Länge 140 u, Dicke 100 u 
Kleinste Weibcheneier: N SORT A 66 u 
Größte Männcheneier: IN 46: u, 55, Sara 
Kleinste Männcheneier: a SI 20 


„Im Laufe meiner Untersuchungen“, so sagt er, ‚fand ich 
mehrfach Eier, die eine mittlere Größe zwischen beiden Arten hatten, 
auch diese waren jedoch stets sicher als weibliche Eier anzusprechen.‘ 
Ich kann diese Angaben v. Malsens bestätigen. Die Größe der 
Eier, speziell der weiblichen, wechselt sehr, immer aber sind auch 
die kleinsten Weibcheneier noch wesentlich größer als die größten 
Männcheneier, niemals habe ich Uebergangsformen gefunden, bei 


- denen man sich über das Geschlecht irgendwie im Zweifel sein 


könnte. 

Die Differenzierung der Eier kommt zuerst zu Beginn der 
dritten Wachstumsperiode zum Ausdruck, ehe die Bildung der 
Reservesubstanzen beginnt. Die einen Eier wachsen sehr rasch heran, 
sie werden zu den großen Weibcheneiern, die anderen bleiben im 


Wachstum stark zurück, aus ihnen gehen die kleinen Männcheneier 


hervor. Daß infolge günstigerer Lage im Ovar ein Teil der Eier zu 
g*+ 


116 Hans Nachtsheim: 


Weibcheneiern wird, wie v. Malsen meint, daß die Männchen- 
eier also das Produkt kümmerlicher Existenzbedingungen sind, 
stimmt nicht. Von einer besonderen Lagerung der einen der beiden 
Sorten von Eiern im Ovar ist nichts zu bemerken. Nach allen mrinen 
Beobachtungen können es nur innere Faktoren sein, die 
das Geschlecht der wachsenden Ovozyte bestimmen. Vor allem weist 
wohl die Tatsache, daß das Verhältnis der beiden Eisorten zuein- 
ander in verschiedenen Rassen zwar verschieden, in ein und der- 
selben Rasse aber auch unter verschiedenen äußeren Bedingungen 
annähernd konstant ist, zur Genüge darauf hin, wo die geschlechts- 
bestimmenden Ursachen zu suchen sind. Es ist de Konsti- 
tution.der Zelle, die sie zu einer männlichen: bzw. einer 
weiblichen Eizelle macht. Bei der geschlechtlichen Differenzierung 
der Eier im Ovar des Dinophilus handelt es sich um das gleiche 
Problem wie bei der Differenzierung der Geschlechtszellen in einer 
Zwitterdrüse in Samenfäden und Eier, wie bei der Differenzierung 
der Zellen in einem Organ überhaupt. Damit aber sind wir bei der 
Grundfrage der ganzen Entwicklungsmechanik angelangt, beim De- 
terminationsproblem. Wir haben nicht die Absicht, dieses große 
komplexe Problem, das erst im Anfang seiner experimentellen Be- 
handlung steht, hier aufzurollen. Von den eigentlichen Ursachen 
der Gestaltungsvorgänge, den determinierenden Fak- 
toren Rouxs, wissen wir heute noch so gut wie nichts. Daß 
außere Faktoren, die realisierenden Faktowen 
Rouxs, im Entwicklungsgeschehen auslösend wirken kön- 
nen, ist gewiß, aber sie bestimmen nicht die Art des Geschehens. 
Dies ist. Sache der inneren formativen Reize Herbst 
1901). Daß die Bedeutung dieser inneren Faktoren außer- 
ordentlich groß ist, ist ebenfalls gewiß, wie aber ihre Wirksamkeit 
im einzelnen ist, muß die zukünftige Forschung lehren. 

Noch einige Worte darüber, inwieweit bei Dinophilus reali- 
sierende, außerhalb des Organismus gelegene Faktoren das 
durch determinierende Faktoren bestimmte Geschlechts- 
verhältnis zu modifizieren vermögen. In der Ernährung 
haben wir einen Faktor kennen gelernt, der das Geschlechtsver- 
hältnis in gewisser Weise beeinflußt. Daß aber die Ernährung für 
die Geschlechtsbestimmung des Dinophilus die Bedeutung 'hat, die 
ihr v. Malsen zuschreibt, davon kann gar keine Rede sein. Es 
ist immer nur eine schwache Verschiebung des Geschlechtsverhält- 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 117 


nisses, die durch verschiedene Ernährung erreicht wird. Bei guter 
Ernährung nimmt die relative Zahl der Weibcheneier etwas zu, bei 
schlechter Ernährung die relative Zahl der Männcheneier. Aber 
auch bei dieser schwachen Wirkung der Ernährung handelt es sich 
nicht um einen Eingriff in. den Mechanismus der Ge- 
sentechtsbestimmung, "eswist »lediglieh”" das - "G e- 
schlechtsverhältnis, das modifiziert wird. In einer sehr 
treffenden Kritik hat Morgan (1909) das v. Malsen bereits 
entgegengehalten. Das Geschlecht wird nicht bestimmt durch 
die Ernährung der Mutter, sondern was sich aus den Temperatur- 
und Hungerexperimenten entnehmen läßt, ist lediglich, daß ein gut 
ernährtes Weibchen mehr Weibcheneier zu produzieren imstande 
ist als eines, das hungert. Es findet bei schlechter Ernährung nicht 
etwa eine Umwandlung der Weibcheneier in Männcheneier 
statt (und umgekehrt bei guter Ernährung), sondern unter schlechten 
Ernährungsverhältnissen bleibt eine Anzahl Weibcheneier in der 
Entwicklung zurück, weil eben das hungernde Weibchen ihnen nicht 
die Stoffe in genügender Menge zuzuführen vermag, die sie zu ihrem 
im Vergleich zum Männchenei immensen Wachstum benötigen. Das 
„normale‘‘ Geschlechtsverhältnis kommt also nur bei guter Ernäh- 
rung zum Ausdruck; nur dann werden alle Weibcheneier reichlich 
versorgt und können ihre Entwicklung ebenso vollenden wie die 
anspruchsloseren Männcheneier. 

Daß tatsächlich der Einfluß äußerer Faktoren auf die Ge- 
schlechtsbestimmung nur ein scheinbarer ist, beweisen auch sehr 
schön meine Experimente mit erhöhter Temperatur. In der Wärme 
entwickeln sich die Männcheneier rascher als die Weibcheneier. 
Infolgedessen ist das Geschlechtsverhältnis in den ersten Kokons 
eines Weibchens in der Wärme zugunsten der Männcheneier ver- 
schoben. Die späteren Kokons enthalten aber dafür eine um so 


größere Zahl Weibcheneier, und wenn man das Geschlechtsverhält- 


nis sämtlicher Eier der in der Wärme gezüchteten Weibchen 
betrachtet, so ist kein Unterschied gegenüber in normaler Tempe- 
ratur gezüchteten Weibchen vorhanden. 

Was hätte es auch, so muß man sich doch fragen, für Dino- 
philus für einen Zweck, wenn äußere Faktoren das Geschlecht so 
leicht beeinflussen könnten, wie v. Malsen annimmt? Bei Ro- 
tatorien, bei Cladoceren, Aphiden, Blatt- und Gallwespen, Tieren 
mit zyklischer Fortpflanzungsweise (Heterogonie), hat man äußeren 


118 Hans Nachtsheim: 


Faktoren, wie Temperatur, Ernährung, chemischer Zusammensetzung 
des Mediums, vielfach eine Rolle bei der Geschlechtsbestimmung 
zuerkannt. Es hat sich dann aber herausgestellt, daß sie nicht eigent- 
lich geschlechtsbestimmend wirken, sondern daß sie in mehr oder 
weniger hohem Maße den Ablauf des Fortpflanzungs- 
zyklus beeinflussen, daß sie bis zu einem gewissen Grade den 
Uebergang von der parthenogenetischen Fort 
pilanzume zur. zweieeschLechtlicheneumarune 
gekehrt regeln. Die Zweckmäßigkeit dessen leuchtet ohne weiteres 
ein. Selbst hier aber hat sich ergeben, daß den äußeren Faktoren 
nicht eine so große Bedeutung zukommt, wie man ursprünglich 
glaubte; es sind in erster Linie innere, ererbte Faktoren, die den 
Ausschlag geben. Dinophilus indessen besitzt keine zyklische Fort- 
pflanzung, er vermehrt sich rein zweigeschlechtlich. Das ganze Jalır 
lebt er in sich ziemlich gleichbleibenden Verhältnissen, im Meere, 
er läuft nicht wie die Rotatorien und Cladoceren des süßen Wassers 
Gefahr, daß sein Medium im Sommer eintrocknet oder im Winter 
gefriert. Wozu also bei Dinophilus eine Aenderung des Geschlechtes 
durch äußere Faktoren ? 

Bei der Verwandtschaft des Dinophilus mit den Rotatorien ist 
es von besonderem Interesse, ihre Fortpflanzungsverhältnisse mit 
denen des Dinophilus zu vergleichen. Die Existenzbedingungen 
sind nicht bei allen Rotatorien die gleichen. Die einen leben im Meere, 
haben also dasselbe konstante Medium wie Dinophilus, die an- 
deren im Süßwasser, und auch hier sind die Lebensverhältnisse 
für die verschiedenen Formen, je nach der Größe der Wasseran- 
sammlung, die sie bewohnen, sehr verschieden. Entsprechend der 
Lebensweise ist auch die Fortpflanzung der Rotatorien sehr mannig- 
faltig. Die im Meere lebenden Seisoniden pflanzen sich rein zweige- 
schlechtlich fort, ähnlich wie Dinophilus. Den im Süßwasser le- 
benden Bdelloiden fehlen die Männchen vollständig, sie vermehren 
sich. rein parthenogenetisch. Wenn das Wasser, in dem sie leben, 


eintrocknet — und sie bevorzugen als ‚„Erdrotatorien‘‘ minimale 
Wasseransammlungen, wie Moospolster, Flechtenkrusten, Daclı- 
rinnen usw. —, so trocknen sie mit ein, um nach einem Regenguß, 


bei der Wiederkehr günstiger Verhältnisse also, zu neuem Leben zu 
erwachen. Die größte Mehrzahl aller Rädertiere des süßen Wassers 
aber gehört in die Gruppe der heterogonen Rotatorien, die sich bald 
zwei-, bald eingeschlechtlich fortpflanzen. Meist gibt es nur par- 


er N 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 119 


thenogenetisch sich vermehrende Weibchen, zu gewissen Zeiten aber 
treten Männchen auf, und wenn die parthenogenetischen Weibchen, 
die diese Männchen liefern, begattet werden, produzieren sie die 
befruchteten und dickschaligen Dauereier, vermittels deren sie, 
‚denen selbst die Fähigkeit des Wiederauflebens nach dem Eintrock- 
nen fehlt, die Art in ungünstigen Zeiten erhalten. 

Was nun den Modus der Geschlechtsbestimmung bei den Ro- 
tatorien anbetrifft, so sind wir leider darüber bisher in mancher 
Hinsicht noch sehr unvollständig unterrichtet. Gerade bei den Sei- 
soniden, deren Lebens- und Fortpflanzungsweise am meisten mit 
der des Dinophilus übereinstimmt, fehlen uns noch genauere Unter- 
suchungen). Es scheint aber, daß Dinophilus und Seisoniden auch 
hinsichtlich des Modus der Geschlechtsbestimmung übereinstim- 
men, wenn auch den Seisoniden der für die übrigen Rotatorien so 
charakteristische und ihnen mit Dinophilus gemeinsame Geschlechts- 
dimorphismus fehlt. Plate (1887) sagt mit Bezug auf Para- 
seison: „Die auf einem Haufen liegenden Eier sind nicht alle gleichen 
Geschlechts, sondern zwischen der überwiegenden Zahl weiblicher 
Eier findet man dann und wann ein männliches. Da ich manchmal 
nur ein weibliches Individuum um einen solchen Brutplatz und 
überhaupt auf der betreffenden Nebalia antraf, so folgt hieraus, 
daß dasselbe Tier Eier von verschiedenem Geschlecht zu legen ver- 
mag; es verdient dies deshalb Beachtung, weil bei den Süßwasser- 
rotatorien ein Individuum nur Eier von einem Geschlecht, ent- 
weder nur männliche oder nur weibliche, erzeugt.‘‘ Die Erzeugung 
zweier Sorten von Eiern durch ein Weibchen ist den Seisoniden 
also wieder mit Dinophilus gemeinsam. 

Von den heterogonen Rädertieren sagten wir bereits, daß bei 
ihnen die Geschlechtsbestimmung syngam erfolgt, und zwar nach 
dem sogenannten Hymenopterentypus. Die Männchen entstehen 
immer aus unbefruchteten Eiern und sind haploide Organismen. 
“ Die Weibchen sind immer diploid und entstehen entweder aus be- 
fruchteten Eiern oder aus unbefruchteten, die aber ihre Chromo- 
somenzahl nicht reduziert haben. Bei den heterogonen Rotatorien 
sehen wir jedoch — und ähnliche, wenn auch im einzelnen besondere 
Verhältnisse finden wir bei den ebenfalls heterogonen Cladoceren, 
Aphiden, Blatt- und Gallwespen —, daß die ursprünglich rein syn- 


!) Die Untersuchungen Illgens (1914, 1916) bringen nichts Neues 
von wesentlicher Bedeutung. 


120 Hans. Nach.tshe im: 


game Geschlechtsbestimmung teilweise zu einer progamen geworden 
ist, sie ist in der Tat progam und syngam zugleich. Ob nämlich aus 
einem unbefruchteten Rotatorienei ein Männchen oder ein Weib- 
chen wird, das hängt zwar in letzter Linie davon ab, ob dieses Ei 
eine Reduktion seiner Chromosomenzahl erfährt oder nicht, dies 
aber ist bereits im unreifen Ei unabänderlich festgelegt. Die hetero- 
gonen Rädertiere bilden wie Dinophilus große dotterreiche und kleine 
dotterarme Eier. Jedes Weibchen aber bringt im Gegensatz zu 
Dinophilus entweder nur große Weibcheneier oder nur kleine Männ- 
cheneier hervor. Morphologische Differenzen bestehen, soweit wir 
bis heute wissen, zwischen den weibchenerzeugenden und den männ- 
chenerzeugenden Weibchen nicht; auch ihr Chromosomenbestand 
zeigt keine Unterschiede. Wann die Entscheidung darüber, ob ein 
Weibchen zu einem ‚Weibchenerzeuger‘ oder einem ‚Männchen- 
erzeuger‘‘ wird, fällt, wissen wir nicht. Generationenlang können 
nur Weibchenerzeuger auftreten und sich rein parthenogenetisch 
fortpflanzen. Schließlich aber erscheinen auch Männchenerzeuger 
und leiten die zweigeschlechtliche Fortpflanzung ein. Wie bei Cla- 
doceren und Aphiden ist auch hier de Hauptursache der 
Sexualitätsänderung -ein innerer erblicher Rhythmus, 
der durch äußere Einflüsse bald in höherem, bald in geringerem 
Maße modifiziert zu werden vermag. Ist einmal darüber entschieden, 
daß ein Weibchen zu einem ‚„Männchenerzeuger‘‘ wird, so ist da- 
durch festgelegt, daß es nur „„Männcheneier‘ bildet, d. h. kleine Eier, 
deren Chromosomenzahl reduziert wird; der Eireitung wird also 
ein bestimmter Verlauf vorgeschrieben. Das Geschlecht des 
zukünftigen Tieres aber wird dadurch noch nicht definitiv 
festgelegt. Bleibt das Weibchen unbegattet, so bringt es aller- 
dings nur Männchen hervor, wird es aber begattet, so werden seine 
‚„Männcheneier‘‘ befruchtet, und das ist für sie der Anstoß, noch- 
mals in eine Wachstumsperiode einzutreten, zu großen dotter- 
reichen ‚Dauereiern‘‘ mit dicker Schale heranzuwachsen, aus denen 
ausschließlich Weibchen hervorgehen. So ist durch die Begattung 
aus dem  ,„Männchenerzeuger‘ ein weibchenerzeugendes Weibchen 
geworden, die Befruchtung hat die ‚„Männcheneier‘ in weibliche 
Eier umgestimmt. Die Eier der parthenogenetischen Weibchenerzeuger 
vermögen sich nur parthenogenetisch zu entwickeln, sie sind be- 
fruchtungsunfähig. 

Wird das Erscheinen der Männchenerzeuger gänzlich unter- 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 121 


drückt, so erhalten wir eine Fortpflanzungsweise, wie sie für die 
Bdelloiden charakteristisch ist, es gibt nur noch parthenogenetisch 
sich vermehrende Weibchen. 

Parthenogenese und Heterogonie sind Anpassungen an beson- 
dere Lebensverhältnisse, sie sind aus der rein zweigeschlechtlichen 
Fortpflanzung hervorgegangen. Lange (1913), dem wir eine vor- 
zügliche zusammenfassende Darstellung der Fortpflanzungsverhält- 
nisse der Rädertiere verdanken, hat das Stadium, auf dem sich die 
Rotatorien befinden, sehr treffend als „Brogmessive' Par- 
thenogenese‘ bezeichnet. Er betrachtet die sekundäre Par- 
thenogenese als den „ökonomischen Endzustand, dem die Entwick- 
lung der Rädertierfortpflanzung zustrebt‘‘. Bei den Bdelloiden ist 
dieser Endzustand erreicht. Hier ist die Geschlechtsbestimmung 
zu einer rein progamen geworden, es gibt nur noch befruchtungs- 
unfähige Weibcheneier. Bei den heterogonen Rotatorien erfolgt die 
Geschlechtsbestimmung syngam, nach dem Hymenopterentypus, 
doch ist der Hymenopterentypus in der oben geschilderten Weise 
weiterhin modifiziert worden, so daß die syngame Geschlechtsbe- 
stimmung bereits teilweise zu einer progamen geworden ist. 
Die Seisoniden haben als im Meere unter gleichmäßigen Verhält- 
nissen lebende Formen die ursprüngliche Fortpflanzungsweise bei- 
behalten; es fehlen Parthenogenese und Heterogonie. Der Modus 
der Geschlechtsbestimmung scheint aber auch bei ihnen nicht der 
ursprüngliche (syngam durch Geschlechtschromosomen) geblieben 
zu sein, die Geschlechtsbestimmung ist wie bei Dinophilus zu einer 
progamen geworden, progam aber in ganz anderer Weise als bei den 
heterogonen oder rein parthenogenetisch sich vermehrenden Formen. 

Wie können wir aber den Modus der Geschlechtsbestimmung 
bei Dinophilus, der sich in gleicher Weise, soweit wir bis heute 
wissen, außer bei den Seisoniden noch bei einer Milbe, Pediculopsis 
graminum, auch eine Form mit rudimentären Männchen (E. Reu- 
ter 1907), findet, von dem normalen Modus ableiten ? 

Der Geschlechtsdimorphismus von Dinophilus apatris und der 
verwandten Arten ist eine sekundäre Erscheinung, wir müssen 
Dinophilus apatris von einer Form ableiten, die diesen Dimorphis- 
mus noch nicht besessen hat). Und tatsächlich weisen auch nicht 


!) Bei den Arten mit nicht rudimentären Männchen müssen alle Eier 
gleichermaßen mit Reservesubstanzen versehen werden. Beim Rudimentär- 
werden der Männchen werden die Reservestoffe für die Männcheneier über- 


122 Hans Nachtsheim: 


alle Spezies der Gattung Dinophilus diesen Dimorphismus auf, 
Der von Schimkewitsch (1895) aus dem Weißen Meere 
beschriebene Dinophilus gehört z. B. zu diesen letzteren, sodann 
der wahrscheinlich mit dieser Form identische Dinophilus vorti- 
coides, den ©. Schmidt (1848) bei den Färöer entdeckte und 
van Beneden (1851, 1861) von der belgischen Küste beschrieb, 
und Dinophilus taeniatus, den Harmer (1889) und Shearer 
(1906) bei Plymouth fanden !). Bei diesen Arten sind Männchen 
und Weibchen, von den Geschlechtsorganen natürlich abgesehen, 
gleich gestaltet, und auch die Eier, aus denen sich Männchen und 


Weibchen entwickeln, sind morphologisch nicht verschieden. Es- 


fragt sich nun, nach welchem Modus bei diesen monomorphen Arten 
die Geschlechtsbestimmung vor sich geht. Das Fehlen zweier mor- 
phologisch unterscheidbaren Sorten von Eiern beweist ja noch nicht, 
daß die Geschlechtsbestimmung hier nicht progam erfölgt. Für 
wahrscheinlich halte ich indessen eine progame Bestim- 
mung bei den monomorphen Spezies nicht. Diese dürfte vielmehr 
erst zugleich mit der Reduktion des männlichen Geschlechtes eir- 
geführt worden sein. Besitzen aber die monomorphen Dinophilus- 
Arten den für die meisten Tiere charakteristischen und als ‚normal‘ 
betrachteten alternativen Mechanismus der Geschlechtsvererbung 
vermittels Geschlechtschromosomen, so ist die weitere Frage, wel- 
ches Geschlecht das heterogametische ist. Die Chromosomenver- 
hältnisse der monomorphen Dinophilus-Arten sind bisher nicht unter- 
sucht worden, aber das Fehlen jeglicher Zahlen- und Größendit- 
ferenzen zwischen den Chromosomen bei Dinophilus apatris läßt 
derartige Untersuchungen als nicht sehr aussichtsreich erscheinen; 
es ist nicht wahrscheinlich, daß bei den anderen Vertretern der Gat- 
tung morphologisch nachweisbare Geschlechtschromosomen vor- 


flüssig und können zur Bildung weiterer Weibcheneier verwandt werden. 
Es wäre interessant, einmal die Nachkommenschaft eines Weibchens einer 
nicht dimorphen Dinophilus-Spezies mit der eines Weibchens von Dinophilus 
apatris zu vergleichen. Wahrscheinlich vermag letzteres eine größere Zahl 
von Nachkommen zu produzieren als ienes, und darin liegt der Vorteil des 
Dimorphismus für die Art (vgl. indessen S. 125). Die einzige Lebensaufgabe 
der Dinophilus-Männchen, die Begattung der Weibchen, erfüllt ja das ru- 
dimentäre Männchen ebenso wie das voll entwickelte. 

!) Eine Zusammenstellung sämtlicher bisher beschriebener monomorpher 
und dimorpher Dinophilus-Arten und ihres Vorkommens. gibt Nelson 
(1907). 


| 
& 
— 
3 
3 


Be 


Bi 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 123 


handen sind. Da die Zytologie versagt, könnten uns Vererbungs- 
experimente Aufschluß geben. Diese aber fehlen vorläufig, und so 
sind wir bisher auf Vermutungen angewiesen. Am nächsten liegt es, 
eine Heterogametie des weiblichen Geschlechtes anzunehmen. Es 
könnten bei den monomorphen Arten durch die Reifung männchen- 
und weibchenbestimmende Eier gebildet werden, die Geschlechts- 
bestimmung wäre dann thelyo-syngam. Die Differenzierung in 
„weibliche“ und ‚„‚männliche‘‘ Ovozyten bei einzelnen Arten müßte 
dann zu einem richtenden Einfluß auf den Ablauf der Reifungs- 
teilungen führen, indem eine große weibliche Ovozyte ihren Chro- 
mosomenbestand immer in der Weise reduziert, daß sie auch hin- 
sichtlich dieses Chromosomenbestandes zu einem weibchenbestim- 
menden Ei wird, während andererseits die kleine männliche Ovozyte 
durch die Reifung immer einen männchenbestimmenden Chromo- 
somenbestand erhält. Die Geschlechtsbestimmung wäre dann bei 
den dimorphen Dinophilus-Arten ähnlich wie bei den heterogonen 
Rotatorien progam und syngam zugleich. Wir könn- 
ten aber auch von einer -Heterogametie des männlichen Ge- 
schlechtes ausgehen. Die Entwicklung zweier Sorten von Eiern 
könnte eine selektive Befruchtung im Gefolge haben, indem die 
männchenbestimmenden Spermatozoen nur in die kleinen, die 
weibchenbestimmenden nur in die großen Eier eindringen. Oder 
aber: die Spermatozoen sind zwar in männchen- und weibchen- 
bestimmende geschieden, haben aber alle de Potenz zur Her- 
vorbringung beider Geschlechter in sich, und je nach den Ver- 
hältnissen, die sie im Ei antreffen, kann ihr ursprünglicher Charak- 
ter umgestimmt werden. Doch wir verlieren uns damit ins Ge- 
biet der reinen Spekulation. Vielleicht vermögen wir durch spätere 
Untersuchungen einmal einen Boden zu gewinnen, auf dem sich 
weitere Betrachtungen anstellen lassen. 


2. Die verwandtschaftlichen Beziehungen der Gattung Dinophilus im 
Lichte der vorstehenden Untersuchungen. 


Die Stellung der Gattung Dinophilus im System ist eine viel- 
umstrittene Frage. An den verschiedensten Stellen hat man sie 


unterzubringen versucht, bei den Turbellarien, den Nemertinen, 


bei den Anneliden, den Rotatorien, den Archianneliden. Es ist 
nicht meine Absicht, an dieser Stelle in eine ausführliche Besprechung 


124 Hans Nachtsheim: 


der für und wider die verschiedenen Ansichten sich ergebenden 
Tatsachen einzutreten. Es soll hier nur kurz dargelegt werden, 
‚inwieweit die vorstehenden Untersuchungen einen Beitrag zur Frage 
der systematischen Stellung des Dinophilus liefern können. 

Die zuerst von Metschnikoff (1866) geäußerte, von ihm 
allerdings mehr glücklich geahnte denn als zutreffend erwiesene An- 
sicht, daß Dinophilus als ‚eine stationär gewordene Annelidenlarve“ 
zu betrachten ist oder, wie Lang (1884) sagt, als ‚eine Anneliden- 
larve ohne Borsten und mit Geschlechtsorganen‘, hat zweifellos 
am meisten für sich. Ich stelle hier einige der Merkmale, die Dino- 
philus als sehr nahe mit den Anneliden verwandt und speziell als 
larvales Annelid kennzeichnen, zusammen. 

Die erste Entwicklung des Dinophilus, wie der Furchungs- 
modus, die Anlage der Keimblätter, zeigt weitgehendste Aehnlichkeit 
mit der Polychätenentwicklung. Der zweite präorale Kopfwimper- 
ring entspricht nach Nelson (1904) dem präoralen Wimper- 
kranz, dem Prototroch, und der Analwimperring vielleicht dem 
Paratroch der Trochophora. Die erste Anlage des Gehirns erscheint 
an der gleichen Stelle wie die Scheitelplatte der Trochophora. Im 
übrigen aber hat Dinophilus durch Wachstum in die Länge und 
Ausbildung der Metamerie das Trochophorastadium überschritten; 
er hat ungefähr das Stadium der polytrochen Annelidenlarven er- 
reicht, ist auf diesem Stadium stehen geblieben und geschlechts- 
reif geworden. 

Es sind besonders die Larven der zur Familie der Euniciden 
gehörigen Anneliden, mit denen Dinophilus große Aehnlichkeit hat. 
Schon Metschnikoff (1866) hat darauf hingewiesen. So sollen 
die Larven von Lysidice den jungen Dinophilus-Weibchen so ähnlich 
sein, „daß sie nur durch die Anwesenheit der bei ersteren stark 
entwickelten Kiefer voneinander unterschieden werden können“. 
Korschelt (1893) hebt die Uebereinstimmung des Dinophilus 
mit der Larve von Ophryotrocha und anderen polytrochen Larven 
hervor. ‚Die Beschaffenheit des präoralen Teiles, die Körperglie- 
derung, die Art und Weise der Bewimperung, der unpaare geglie- 
derte Cirrus, die dorsale Lage des Afters zeigt eine große Ueberein- 
stimmung.‘ Ich kann diese Angaben auf Grund eigener Beobach- 
tungen vollauf bestätigen. In einzelnen meiner Dinophilus-Kulturen 
kam vorübergehend auch Ophryotrocha vor. Die Aehnlichkeit der 
jungen Larve, sowohl im ganzen Habitus wie auch in den einzelnen 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 25 


Organen, mit dem Dinophilus-Weibchen ist in der Tat überraschend. 
Auch die von Korschelt hier nicht genannten Organe sind bei 
Dinophilus und den polytrochen Larven fast gleich gebaut. Die 
Nephridien des Dinophilus sind nach den Untersuchungen Shea- 
rers (1906) nach dem primitiven Solenozytentypus gebaut; es 
sind gegen die Leibeshöhle geschlossene Kanäle mit Wimperflammen. 
Auch das Nervensystem ist sehr primitiv. Daß das Gehirn an der 
gleichen Stelle wie die Scheitelplatte der Trochophora entsteht, 
wurde bereits erwähnt. Das Bauchmark liegt noch größtenteils 
im Ektoderm, es ist nach dem Strickleitertypus gebaut, doch sind 
die beiden Längsstränge noch sehr weit voneinander entfernt. Die 
erste, präorale Kommissur ist wahrscheinlich auf den Nervenring der 
Trochophora zurückzuführen. Auch der Darmtraktus stimmt im 
wesentlichen mit dem der Anneliden überein. Der für Dinophilus 
so charakteristische, ventral vom Schlund gelegene Rüssel findet 
sich in ähnlicher Ausbildung bei vielen Eunieiden. Die Geschlechts- 
organe fehlen natürlich den Larven der Euniciden noch, und von 
denen der geschlechtsreifen Tiere unterscheiden sich die Geschlechts- 
organe von Dinophilus apatris insofern, als ihnen die Metamerie 
fehlt. Indessen dürfen nicht die Geschlechtsorgane von Dinophilus 
apatris zum Vergleich herangezogen werden, da offensichtlich in 
der Gattung Dinophilus eine allmähliche Reduktion dieses Organes 
auch im weiblichen Geschlecht erfolgt und bei Dinophilus apatris 
am weitesten fortgeschritten ist. Bei den monomorphen Dinophilus- 
Spezies, die ja die phylogenetisch ältere Form darstellen, sind die 
Ovarien paarig. Sie liegen als zwei lange Säcke ventral vom Darm 
und vereinigen sich am hinteren Ende; jedes Ovar besteht aus zwei 
hintereinander liegenden Kammern, zeigt also wenigstens den Be- 
ginn einer Metamerie. Nach Schimkewitsch (1895) ent- 
stehen die Ovarien aus den paarigen Mesodermstreifen und sind 
nach E. Meyer (1901) homolog dem Peritoneum und dem Cölom 
der Anneliden. Bei dem von Weldon (1886) beschriebenen, 
ebenfalls zu den monomorphen Spezies gehörenden Dinophilus gigas 
macht sich bereits eine starke Reduktion der paarigen Ovarien 
bemerkbar, die bei den dimorphen Formen so weit fortgeschritten 
ist, daß nur noch das hintere Ende der beiden Ovarien als unpaares 
Gebilde übrig geblieben ist. Es erscheint mir übrigens sehr wohl 
möglich, daß die Reduktion des Ovars und die Rückbildung des 
männlichen Geschlechtes Hand in Hand gegangen sind oder viel- 


126 Hans Nachtsheim: 


mehr, daß das eine eine Folge des anderen war. Es wäre dann durch 
das Rudimentärwerden der Männchen nicht, wie wir es in der An- 
merkung auf Seite 122 als wahrscheinlich hingestellt hatten, eine 
_ Erhöhung der ursprünglichen Nachkommenzahl erfolgt und darin 
die Zweckmäßigkeit des Dimorphismus für die Art zu suchen, son- 
dern die durch die Reduktion herabgesetzte Leistungsfähigkeit des 
Ovars würde durch die Verkleinerung und Vereinfachung eines 
Teiles der Eier kompensiert und so wenigstens eine Verminderung 
der Nachkommenzahl vermieden. 
Dinophilus ist also, um es nochmals zu sagen, eine ge- 
schlechtsreif gewordene polytroche/Polyceha 
tenlarve. Ein Vergleich der Organisation des Dinophilus mit 
der einer anderen Gruppe deckt jedoch ebenfalls verwandtschaft- 
liche Beziehungen auf und vermag so weiteres Licht zu werfen auf 
die Verwandtschaft dieser Gruppe mit den Polychäten bzw. Anne- 
liden. Es sind dies die Rotatorien. Die Frage nach der Stellung 
der Rotatorien ist noch sehr umstritten. Lang (1884) betrachtet 
die Rotatorien ‚als das letzte Glied einer Reihe, die aus gegliederten 
Stammformen der Anneliden dadurch hervorgegangen sind, daß 
die Tiere immer frühzeitiger, gleichsam schon auf dem Larvensta- 
dium, geschlechtsreif wurden‘. Die Rotatorien würden also hiernach 
in einem ganz ähnlichen Verhältnis zu den Anneiiden stehen wie 
Dinophilus. Viele der larvalen Merkmale des Dinophilus finden wir 
auch tatsächlich bei den Rotatorien wieder. Das Nervensystem, 
die Segmentalorgane, der Darmtraktus zeigen in beiden Gruppen 
manche Aehnlichkeiten. Der gegliederte, mit Spinndrüsen versehene 
ventrale Schwanzanhang des Dinophilus dürfte dem ebenfalls ge- 
gliederten und mit Klebdrüsen ausgestatteten ventralen Fuße der 
Rotatorien homolog sein. Die auffallendste Aehnlichkeit der beiden 
Gruppen aber liegt wohl in dem schon oft erwähnten sexuellen Di- 
morphismus. Es fragt sich nun, ob dieser als ein Merkmal mit phy- 
logenetischer Bedeutung angesehen werden kann. Korschelt 
und Heider (1890) verneinen diese Frage. ‚Aus der Tatsache‘, 
so sagen sie, „‚daß bei Dinophilus ein höchst auffälliger Geschlechts- 
dimorphismus vorkommt, insofern die Männchen weit kleiner und 
niedriger organisiert sind als die Weibchen, des Darmes, der Augen 
und segmentalen Wimperkränze entbehren (Korschelt), hat 
man ebenfalls auf Beziehungen der Gattung Dinophilus zu den Ro- 
tatorien geschlossen, doch scheinen diese Schlüsse nicht berechtigt, 


2} 

3 4 

vd 

le si er ee re 1 ee et Dt ee ee ee ee u 


REED IN 5 AS 


ee 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 127 


wenn man sieht, wie bei einigen Arten (D. apatris bzw. D. gyroci- 
liatus) der erwähnte Geschlechtsdimorphismus auftritt, während 
bei ganz ähnlich gestalteten Spezies wie D. vorticoides, gigas und 
taeniatus (nach O. Schmidt, Weldon und Harmer) die 
Männchen ganz wie die Weibchen gestaltet sind, abgesehen von den 
eigentlichen Geschlechtscharakteren.‘“ Auch das Vorkommen von 
stark ausgeprägtem sexuellem Dimorphismus in anderen Gruppen 
des Tierreiches (Copepoden, Cirripedien, Isopoden, Milben) scheint 
manchen gegen die Berechtigung zu sprechen, diesem Merkmal phy- 


_ logenetische Bedeutung beizulegen. Nun ist es ja gewiß richtig, 


daß der Geschlechtsdimorphismus des Dinophilus apatris sich erst 
innerhalb der Gattung entwickelt hat, und wenn er das 


einzige Merkmal wäre, das Dinophilus mit den Rotatorien 


gemeinsam ist, so könnte man allerdings nicht mehr als einen Fall 
konvergenter Entwicklung darin sehen. Da aber de Gesamt- 
organisation des Dinophilus auf eine nähere Verwandtschaft 
mit den Rotatorien hinweist, so dürfen wir in dem sexuellen Di- 
morphismus beider Gruppen jedenfalls eine Bekräftigung der Rich- 
tigkeit unserer Anschauungen sehen. . Es scheint in der Tat in diesem 
Verwandtschaftskreise eine starke Tendenz zum Rudi- 
mentärwerden des männlichen Geschlechtes 
zu bestehen. Außer Dinophilus und den Rotatorien nenne ich noch 
die ebenfalls den Anneliden sehr nahestehende Bonellia und das 
von den Polychäten abzuleitende, in Anpassung an seine parasi- 
tische Lebensweise aber stark umgewandelte Myzostoma. Bei 
allen diesen Formen ist der Dimorphismus für sich entstanden, 
in Anpassung an besondere, bei den verschiedenen Formen ver- 
schiedene Lebensverhältnisse. Vertretern der betreffenden Gruppen, 
die nicht unter diesen besonderen Verhältnissen leben, fehlt in 
der Regel dieser Dimorphismus, de Tendenz dazu aber ist, 


wie gesagt, meines Erachtens für diesen ganzen Kreis charakteri- 


stisch. Es wäre in dieser Hinsicht besonders interessant, die Sexual- 
verhältnisse der Seisoniden genauer kennen zu lernen. Der sexuelle 
Dimorphismus fehlt ihnen, die Eier aber sollen in männliche und 
weibliche differenziert sein. Ist dies eine Vorstufe zu jenem? Auch 
eine genaue Untersuchung der monomorphen Dinophilus-Arten dürfte 
unsere Kenntnisse über den Geschlechtsdimorphismus und seine 
Entstehung noch erweitern. 

Vergleichen wir Rotatorien und Dinophilus mit den Anneliden, 


128 Hans Nachtsheim: 


so kommen wir zu dem Resultat, daß die verwandtschaftlichen 
Beziehungen des Dinophilus zu letzteren jedenfalls wesentlich inni- 
gere sind als die der Rotatorien. Zu diesen aber steht auch Dino- 
philus in naher Beziehung, und so nimmt er eine vermittelnde Stel- 
lung zwischen Rotatorien und Anneliden ein. Der heutige Zustand 
des Dinophilus ist, worauf bereits Nelson (1904, 1907) mit 
guten Gründen hingewiesen hat, zweifellos nicht als primitiv zu 
betrachten; Dinophilus stellt eine im Laufe der Phylogenie rück- 
gebildete und dadurch den Vorfahren ähnlicher gewordene Form 


dar. Wie es in dieser Hinsicht mit den Rotatorien steht, ob sie, 


wie Lang (1884) meint, neotene Formen sind, oder ob sie von den 
primitiven Stammformen der Anneliden aus ihre heutige Organi- 
sation direkt erreicht haben, ist ungewiß. Mir scheint manches 
mehr zugunsten der letzten Ansicht zu sprechen. Aus einer gemein- 
samen Wurzel haben sich dann Rotatorien und Anneliden ent- 
wickelt, diese aber haben eine höhere Entwicklung genommen als 
jene. Dinophilus hat in seiner Phylogenie diese höhere Entwick- 
lung mitgemacht — was aus seiner Ontogenie erschlossen werden 
kann —, ist aber dann zu einem niedereren Zustand zurückgekehrt 
und so den ihm verwandten Rotatorien wieder ähnlicher geworden. 


Schluß. 


Zusammenfassung der Resultate, 


Zum Schlusse seien die wichtigsten Resultate der vorliegenden 
Untersuchungen nochmals kurz zusammengestellt: 

Das Männchen von Dinophilus apatris ist ein außerordentlich 
rudimentäres Wesen, es ist nichts weiter als ein muskulöser Sack 
mit Geschlechtsapparat. Dieser besteht in der Hauptsache aus einem 
Paar Hoden und dem Penis, die zusammen fast das ganze Leibes- 
innere ausfüllen. Im Vergleich zu dem Geschlechtsapparat nicht- 
dimorpher Dinophilus-Spezies ist indessen auch dieses Organsystem 
bei Dinophilus apatris stark rückgebildet. 

Die Spermatogenese bei Dinophilus apatris bietet nichts Be- 
sonderes. Ihre Untersuchung wird erschwert durch die Kleinheit 
des Objektes. Es wird, soweit ersichtlich, eine Sorte von Sperma- 
tozoen gebildet, alle mit 10 Chromosomen, der haploiden Zahl. Das 
voll entwickelte Männchen enthält nur fertige Spermatozoen. 


nn hauen u une 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 129 


Die Begattung der Weibchen von Dinophilus apatris erfolgt 
kurz vor dem Ausschlüpfen der Weibchen durch die Männchen des 
gleichen Kokons. Inzucht ist also die Regel. Die Männchen ver- 
lassen meist den Kokon überhaupt nicht und gehen nach 5—10 Tagen, 
spätestens nach 3 Wochen zugrunde. 

Die von den Weibchen bei der Begattung empfangenen Sper- 
mien — das Männchen stößt seinen Penis durch die Körperwand des 
Weibchens hindurch und befördert die Spermien so in dessen Leibes- 
höhle — werden in der Form von einem oder zwei Paketen neben dem 
Ovar abgelagert und verharren zunächst in diesem Zustande. 

Das Ovar des eben ausgeschlüpften Weibchens besteht aus re- 
lativ wenigen, sehr kleinen Ovogonien, die sich durch normale Mi- 
tosen vermehren. Den Uebergang der Ovogonien in Ovozyten erster 
Ordnung erkennt man an dem Auftreten der synaptischen Phäno- 
mene. 

Die Ovozyten machen drei Wachstumsperioden durch. Durch 
die erste Wachstumsperiode, während der im Kern die synaptischen 
Phänomene ablaufen, erreicht die Ovozyte die Verschmelzungs- 
größe. Das Chromatin des Kernes ballt sich nach der Synapsis immer 
mehr zusammen und bildet einen nukleolusartigen Körper, eine 
Karyosphäre. 

Die zweite Wachstumsperiode der Ovozyten besteht in einer aus- 
giebigen Verschmelzung von Ovozyten. Es verschmelzen immer 
gleichwertige Zellen, sie sind nicht in Ei- und Nährzellen differenziert. 
Der Kern der einen der beiden verschmolzenen Zellen wird resor- 
biert, Kernverschmelzungen kommen nicht vor. Noch ehe der Kern 
der einen Zelle ganz aufgelöst ist, können weitere Zellverschmel- 
zungen erfolgen. Wie groß aber die Zahl der während der zweiten 
Wachstumsperiode zu einem Ei zusammentretenden Ovozyten ins- 
gesamt ist, läßt sich nicht feststellen. Am Ende der zweiten Wachs- 


‚tumsperiode hat jede Ovozyte ungefähr die drei- bis vierfache Größe, 


die sie zu Anfang dieser Periode hatte. Eine Differenzie- 
une der Kiersmeroße-weibliche und. kleine 
mauınliche ertolgetzdurch die ‘Verschmelzung 


_ der Ovozyten nicht, am Ende der Verschmel- 


Zumesperıode'simdratkesEver gleich £r.o%. 
Während der beiden ersten Wachstumsperioden der Ovozyten 
lösen sich die Spermienpakete auf, die Spermatozoen dringen in das 


Arch. f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. Il. ) 


130 Hans Nachtsheim: 


Ovar und zwischen die Ovozyten ein, doch findet. eine Besamung 
noch nicht statt. Diese erfolgt erst während der dritten Wachs- 
tumsperiode der Ovozyten, vor der Bildung der Reservestoffe 
des Eies, also zu einem sehr frühen Zeitpunkte, aber nach der 
Differenzierung der Eier in männliche und weibliche. Die Be- 
fruchtung bzw. Besamung ist also ohne,Ein- 
fluß auf die Geschlechtsbestimmun:sg. 

Die Bildung zweier Sorten von Eiern während der dritten Wachs- 
tumsperiode macht sich zunächst in einem stärkeren Wachstum 
gewisser Eier bemerkbar, sodann wird in diesen letzteren Eiern 
intensiv Dotter gebildet, sie werden zu ‚„„Weibcheneiern‘. Das Wachs- 
tum der anderen Eier während der dritten Wachstumsperiode ist 
nur schwach, auch wird nur wenig Dotter in ihnen erzeugt, sie werden 
zu „Männcheneiern‘“. 

Die Kerne der beiden Sorten von Eiern unterscheiden sich nur 
durch ihre Größe. Die Karyosphären, in denen während der Verschmel- 
zungsperiode das gesamte Chromatin in inaktivem Zustande kon- 
zentriert war, lockern sich mit Beginn der dritten Wachstumsperiode 
auf, es gehen aus ihnen 10 Tetraden hervor, die sich ebenfalls auf- 
lockern und schließlich ein gleichmäßiges Retikulum bilden. 

Daß zur Bildung eines Weibcheneies mehr Ovozyten notwen- 
dig sind als zur Bildung eines Männcheneies, ist eine unbewiesene 
und unbeweisbare Annahme früherer Autoren. Die Tatsache, daß 
alle Ovozyten zu Ende der Verschmelzungsperiode gleich groß sind, 
spricht gegen die Richtigkeit dieser Annahme. Eine ungünstige 
Lage der Männcheneier im Ovar kann auch nicht Ursache ihrer 
Entstehung sein. Kurz: Eine morphologisch erkenn- 
barellirsache tür die Dififerenzierunerden 2er 
in weibliche undmännlichein bestimmtemVer- 
Martnıist zent. voll standrg, 

Ehe die Eier abgelegt werden, bildet sich die erste Reifungs- 
spindel in ihnen aus, doch bleibt die Mitose auf dem Stadium der 
Metaphase stehen. Erst nach der Ablage nimmt die Reifung ihren 
Fortgang. In allen Eiern verlaufen Reifung und Befruchtung ganz 
in der gleichen Weise. 10 Tetraden treten in die erste Reifungs- 
teilung ein, zwei Richtungskörper werden abgeschnürt, 10 Chromo- 
somen bleiben im Ei. Nach der ersten und ebenso nach der zweiten 
Reifungsteilung bilden die im Ei zurückbleibenden Chromosomen 
keinen einheitlichen Kern, sondern es gehen aus den 10 Chromo- 


PER EU SE ee 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 131 


somen ebensoviele Karyomeriten hervor, die dann bei der Furchungs- 
teilung wieder die Chromosomen liefern. Der männliche Vorkern 
zerfällt nicht in Karyomeriten. Die Kopulation des männlichen 
Vorkernes mit den Karyomeriten des weiblichen erfolgt im Zentrum 
des Eies. 

Die beiden während der Eireifung die Pole der Spindel einneh- 


menden Teilungszentren haben verschiedene Größe; das Zentrosom 


des Eipoles ist immer größer als das des Richtungskörperpoles. Von 
den beiden Teilungszentren der ersten Furchungsspindel stammt 
sehr wahrscheinlich eines vom Ei, das andere vom Spermium. Auch 
für die erste Furchungsspindel ist eine Heterozentrie charakteristisch ; 
das größere Zentrosom ist das Ei-,:das kleinere das Spermazentrosom. 
Diese Heterozentrie der beiden Furchungszentren hat die inäquale 
Teilung der Weibchen- wie Männcheneier zur Folge. 

Die erste Furchungsspindel enthält 20 Chromosomen, die diploide 
Zahl. Größendifferenzen sind weder während der Reifungsteilungen 
noch während der Furchung vorhanden. 


Die wesentlichsten Ergebnisse der experimentellen Untersu- 
chungen sind folgende: 

Es lassen sich bei Dinophilus mehrere Rassen unterscheiden, 
die hinsichtlich Geschlechtsverhältnisses und Kokongröße verschie- 
den sind. Bei manchen Rassen sind Männchen und Weibchen in 
der gleichen oder fast der gleichen Zahl vorhanden, bei anderen 
überwiegen die Weibchen in mehr oder weniger starkem Maße. 
Es können bis zu drei Weibchen auf ein Männchen kommen. 
Für die Kokongröße kann als Regel gelten, daß sie mit der relativen 
Zahl der Weibcheneier zunimmt. Bei Rassen mit annähernd gleich 
vielen Männchet und Weibchen enthält ein Kokon meist nur zwei 
Eier, ein Männchen- und ein Weibchenei, bei Rassen mit einem 
starken Ueberschuß an Weibchen enthält er sieben und mehr Eier 
durchschnittlich. Immerhin ist die Kokongröße eine Eigenschaft, 
die ziemlich beträchtlichen Schwankungen unterworfen ist. Bei 
guter Ernährung nimmt die Kokongröße zu. 

Das Geschlechtsverhältnis bei Dinophilus 
Bsrralsonerme ar onmeren, ererbtien Faktoren 
Bew tenmde Eigenscheatt» „Aeceubere "Faktoren 
vermösen das Geschlechtsverhältnis. nur in 


ganz geringem Maße zu modifizieren. Kälte hat 


132 Hans Nachtsheim: 


gar keinen Einfluß auf das Geschlechtsverhältnis. Wärme beein- 
flußt es insofern, als bei erhöhter Temperatur die Männcheneier 
rascher ablagereif werden als die Weibcheneier. Infolgedessen ent- 
halten die ersten Kokons eines in der Wärme gezüchteten Weib- 
chens mehr Männcheneier als gewöhnlich. Dieses Mißverhältnis 
gleicht sich aber später wieder aus, indem die weiteren Kokons 
um so mehr Weibcheneier enthalten. Schlechte Ernährung bzw. 
Hunger hat eine Verschiebung des Geschlechtsverhältnisses zugun- 
sten der Männchen zur Folge. Dies ist darauf zurückzuführen, daß 
hungernde Weibchen den in Entwicklung begriffenen Weibchen- 
eiern nicht so viele Nährstoffe zuzuführen vermögen, wie sie zur 
Vollendung der Entwicklung notwendig haben. Die anspruchs- 
losen Männcheneier vermögen sich auch bei schwacher Ernährung 
zu entwickeln, und so Kommen sie in verhältnismäßig größerer Zahl 
zur Ablage als die Weibcheneier. 

Weibchen, die unbegattet bleiben, lassen hinsichtlich des Ge- 
schlechtsverhältnisses ihrer Nachkommen und hinsichtlich ihrer 
Kokongröße keine Unterschiede gegenüber den begatteten Weib- 
chen erkennen. Im übrigen aber beeinflußt die Begattung den weib- 
lichen Organismus in hohem Maße. Unbegattete Weibchen wachsen 
langsamer als begattete und werden infolgedessen später geschlechts- 
reif. Häufig erreichen sie ihre Geschlechtsreife überhaupt nicht, 
sondern sterben vorzeitig ab; sie sind viel hinfälliger als begattete 
Weibchen. Die Gelege der unbegattet gebliebenen Weibchen sind 
oft unvollkommen; es fehlt die Gallerthülle um die Eier. Unbefruch- 
tete Eier, Männchen- wie Weibcheneier, beginnen zwar eine par- 
thenogenetische Entwicklung, diese wird aber bald pathologisch, 
und die Embryonen sterben alle früher oder später ab. Bisweilen 
entstehen merkwürdige Monstra aus den unbefruchteten Eiern, 
lebensfähige junge Tiere wurden jedoch niemals beobachtet. Par- 
thenogenese spielt im normalen Lebenszyklus des Dinophilus keine 
Rolle. 

Die rudimentären Männchen des Dinophilus leben nur wenige 
Tage, die Weibchen erreichen unter normalen Verhältnissen ein 
Alter von 2—3 Monaten. Sie bringen in dieser Zeit ungefähr 10 bis 
12 Kokons, bisweilen 16, hervor, die eine je nach der Rasse verschie- 
dene Zahl von Eiern enthalten; überdies zeigt die Kokongröße 
starke individuelle Schwankungen und wird, wie schon gesagt, 
durch äußere Faktoren beeinflußt. Die Entwicklungsdauer ist auch 


ER AY A 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 133 


nach Rassen etwas verschieden. Im Durchschnitt beansprucht die 
Embryonalentwicklung 8—-10 Tage. 


Die theoretischen Betrachtungen führten zu folgenden Schluß- 
folgerungen 

Die sigeschlechtsbestim mung »ertolgt.vbei 
Dainophilus apatris -progamy,';dası Geschlecht 
Betchereitscin, der, wachsenden‘, Ovozyte Test- 
ekeomw die, Ovozyten:-haben "einer;mamnliche 
BDacn Serie, weibliche "Konstitweion:. ES.sin.d 
innere formative Reize, die die Zelle entwe- 
der zweinermännlichen.oderreiner: weiblichen 
machen. uner ihre 'Natwr.wermöogenswir bisher 
keinernaheren Angaben zumachen. 

Der Modus der Geschkechtsbestimmung.des 
DPemopıhslus apatrishistnsekundär. erworben, 
DBaszwar olerchzeitre- mit. de mätür.diese "Art 
Grardaktreristischen.Geschkechtsdimörp.hismus: 
Die dimorphen Dinophilus-Spezies stam- 
men von monomorphen.Arten.äb. :Veber die 
Aeneon di. Weetssen der... Geschlechtsbestimmüung 
beiden monomorphen Spezieskönnen wir vor- 
läufig nur Vermutungen äußern. 

Dinophilus ist als ein neotenes Annelid zu betrachten, das aber 
auch manche verwandtschaftliche Beziehungen zu den Rotatorien 
erkennen läßt. | 


Literaturverzeichnis. 


Arm:bruster,c.L+ Nacheskeim HM WIRo EM er ;:-Tn5..1917, 
Die Hymenopteren als Studienobjekt azygoter Vererbungserschei- 
nungen. Experimentum crucis theoriae Mendelianae. Zeitschr. f. 
indukt. Abst. und Vererbungsl., Bd. 17. 

Baltzer, F., 1914, Die Bestimmung des Geschlechts nebst einer Ana- 
Iyse des Geschlechtsdimorphismus bei Bonellia. Mitt. aus d. Zool. 
Stat. zu Neapel, Bd. 22. 

Bambeke, Ch. var, 1898, Recherches sur l’ovocyte du Pholcus pha- 
langoides. Arch. de Biol., T. 15. 

Beauchamp, P. de, 1910, Sur l’existence et les conditions de la par- 
thenogenese chez Dinophilus. Comptes rend. de l’Acad. des Sc., T. 150. 


134 Hans Nachtsheim: 


Derselbe, 1912, Contribution a l’etude experimentale de la sexualite 
chez Dinophilus. Comptes rend. de Acad. des Sc., T. 154. 

Beneden, P. J. van, 185l, Notice sur un nouveau Nemertien de la 
cöte d’Ostende. Bull. de Ara R. de Belg., T. 18. 

Derselbe, 1861, Recherches sur la faune littorale de Belgique. Mem. 
de "Acad. Ri deBels,’T: 82. 

Blackman, M. W., 1903, The spermatogenesis of the Myriapods. 11. 
On the chromatin in the spermatocytes of Scolopendra heros. Biol. 
Bull., Vol. 5. 

Boveri, Th., 1887, Ueber den Anteil des Spermatozoon an der Teilung 
des Eies. Sitzungsber. d. Ges. f. Morph. und Physiol. in München, 
Bd. 3. 

Derselbe, 1914, Zur Frage der Entstehung maligner Tumoren. Jena. 

Derselbe, 1915, Ueber die Entstehung der Eugsterschen Zwitter- 
bienen. Arch. f. Entwicklungsmech. d. Org., Bd. 41. 

Bresslau, E., 1904, Beiträge zur Entwicklungsgeschichte der Turbel- 
larien. I. Die Entwicklung der Rhabdocölen und Alloiocölen. Zeit- 
schr. f. wiss. Zool., Bd. 76. 

Brüel, L. 1915, Zelle und Zellteilung. Handwörterb. d. Naturw., 
Bd. 10. 

Buchner, P., 1914, Die Besamung der jugendlichen Ovozyte und die 
Berichtung bei Saccoeirrus. Arch. f. Zellforsch., Bd. 12. 

Derselbe, 1918, Vergleichende Eistudien. I. Die akz:ssorischen Kerne 
des Hytmnoptereneies. Arch. f. mikr. Anat., Bd. 91, Abt. II. 

Conklin, E. G., 1901, Centrosome and sphere in the maturation, ferti- 
lization and cleavage of Crepidula. Anat. Anz., Bd. 19. 

Derseibe, 1902, Karyokinesis and cytokinesis in the maturation, 
fertilization and cleavage of Crepidula and other Gasteropoda. Journ. 
of the Acad. of Nat. Sc. of Philadelphia, Vol. 12. 

Derselbe, 1906, Sex differentiation in Dinophilus. Science, N. S. 
Vol. 24. 

Correns, C. und Goldschmidt, R., 1913, Die Vererbung und 
Bestimmung des Geschlechtes. Berlin. 

Doflein, F., 1896, Die Eibildung bei Tubularia. Zeitschr. f. wiss. 
Zool., Bd. 62. 

Doncaster, L., 1914, Chromosomes, heredity, and sex: A review 
of the present state of the evidence with regard to the material basis 
of hereditary transmission and sex-determination. Quart. Journ. of 
micr. Sc., N. S. Vol. 59. 

Gille, K., 1914, Untersuchungen über die Eireifung, Befruchtung und 
Zellteilung von Gyrodactylus elegans v. Nordmann. Arch. f. Zell- 
forsch., Bd. 12. 

Goldschmidt, R., 1905, Eireifung, Befruchtung und Embryonal- 
entwicklung des Zoogonus mirus. Lss. Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. 
und Ont., Bd. 21. 

Haecker, V. 1912, Allgemeine Vererbungslehre. 2. Aufl. Braun- 
schweig. 


.. 
ni 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 135 


Hamburger, Clara, 1907, Das Männchen von Lacinularia socialis 
Ehrbg. Zeitschr. f. wiss. Zool., Bd. 86. 

Harmer, S. F., 1889, On a new species of Dinophilus. Proc. of the 
Cambridge Phil. Soc., Vol. 6. 

Derselbe, 1889, Notes on the anatomy of Dinophilus. Journ. of Mar. 
Biol. Ass. of the Unit. Kingd., Vol. 1. 

Hartmann, M., 1918, Theoretische Bedeutung und Terminologie der 
Vererbungserscheinungen bei haploiden Organismen (Chlamydomonas, 
Phycomyces, Honigbiene). Zeitschr. f. indukt. Abst. u. Vererbungsl., 
Bd. 20. 

Herbst, C., 1901, Formative Reize in der tierischen Ontogenese. Leipzig. 

Hertwig, R. 1%5, Ueber das Problem der sexuellen Differenzie- 
rung. Verhandl. d. Deutschen Zooi. Ges., 15. Jahresvers. 

Derselbe, 1912,- Ueber den derzeitigen Stand des Sexualitäts- 
problems nebst eignen Untersuchungen. Biol. Centralbl., Bd. 32. 

Hofsten, N. v., 1909, Ueber die frühzeitige Besamung der Eizellen 
bei Otomesostoma auditivum (Forel und du Plessis). Zugleich ein 
Beitrag zur Kenntnis der Turbellarienspermien. Zool. Anz., Bd. 34. 

Derselbe, 1911, Noch ein Wort über die frühzeitige Besamung der 
Eizellen bei Otomesostoma auditivum. Zool. Anz., Bd. 37. 

Illgen, H., 1914, Zur Kenntnis der Spermatogenese und Biologie bei 
Seison grubei Claus. Zool. Anz., Bd. 44. 

Derselbe, 1916, Zur Kenntnis der Biologie und Anatomie der para- 
sitischen Rotatorienfamilie der Seisoniden. Zool. Anz., Bd. 47. 
Jöürgensen, M., 1913, Zellenstudien. I. Morphologische Beiträge 

zum Problem des Eiwachstums. Arch. f. Zellforsch., Bd. 10. 

Kiatt, B. 1913, Experim.ntelle Untersuchungen über die Beziehungen 
zwischen Kopulation und Eiablage beim Schwammspinner. Biol. 
Centralbl., Bd. 33. 

Korschelt, E. 1882, Ueber Bau und Entwicklung des Dinophilus 
apatris. Zeitschr. f. wiss. Zool., Bd. 37. 

Derselbe, 1837, Die Gattung Dinophilus und der bei inr auftretende 
Geschlechtsdimorphismus. Eine kritische Zusammenfassung neuerer 
und älterer Forschungsergebnisse. Zool. Jahrb., Abt. f. Syst., Geogr. 
u. Biol., Bd. 2. 

Derselbe, 1893, Ueber. Ophryotrocha puerilis Clap.-Metschn. und 
die polytrochen Larven eines anderen Anneliden (Harpochaeta cin- 
gulata nov. gen., nov. spec.). Zeitschr. f. wiss. Zocl., Bd. 57. 

Korschelt, E.u. Heider, K., 1890, Lehrbuch der vergleichenden 
Entwicklungsgeschichte der wirbellosen Tiere. Spezieller Teil. Jena. 

Kostanecki, K., 1898, Die Befruchtung des Eies von Myzostoma 
glabrum. Arch. f. mikr. Anat. u. Entwicklungsgesch., Bd. 51. 

Derseibe, 1906, Ueber die Herkunft der Teilungszentren der ersten 
Furchungsspindel im befruchteten Ei. Arch. f. mikr. Anat. u. Ent- 
wicklungsgesch., Bd. 68. 

Lang, A. 1884, Die Polycladen. Fauna u. Flora d. Golfes v. Neapel, 
Bd. 11. 


136 Hans Nachtsheim: 


Lange, A. 1913, Unsere gegenwärtige Kenntnis von den Fortpflan- 
zungsverhältnissen der Rädertiere. Kritisches Sammelreferat. Intern. 
Rev. d. ges. Hydrobiol. u. Hydrogr., Bd. 6. 

Malsen, H.v., 1906, Geschlechtsbestimmende Einflüsse und Eibildung 
des Dinophilus apatris. Arch. f. mikr. Anat. u. Entwicklungsgesch., 
Bd. 69. 

Metschnikoff, E., 1866, Apsilus lentiformis, ein Rädertier. Zeitschr. 
f. wiss. Zool., Bd. 16. 

Derselbe, 1881, Untersuchungen über Orthonectiden. Zeitschr. f. 
wiss. Zool., Bd. 35. 

Meyer, E., 1887, Studien über den Körperbau der Anneliden. Mitt. 
aus d. Zool. Stat. zu Neapel, Bd. 7. 

Derselbe, 1901, Studien über den Körperbau der Anneliden. V. Das 
Mesoderm der Ringelwürmer. Mitt. aus d. Zool. Stat. zu Neapel, Bd. 14. 

Morgan, T. H., i909, A biological and cytological study cf sex de- 
termination in Phylioxerans and Aphids. Journ. of exper. Zool., Vol. 7. 

Müiler-Cale&, C. 1913, Ueber die Entwicklung von Cypris incon- 
gruens. Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ont., Bd. 36. 

Nachtsheim, H., 1913, Cytologische Studien über die Geschlechts- 
vestimmung bei der Honigbiene (Apis mellifica L.). Arch. f. Zellforsch., 
Bad. 11. A 

Derselbe, 1914, Das Problem der Geschlechtsbestimmung bei Dino- 
philus. Ber. d. Naturforsch. Ges. zu Freiburg i. Br., Bd. 21. 

Derselbe, 1915, Entstehen auch aus befruchteten Bieneneiern Droh- 
nen? Eine Kritik der Anschauungen O. Dickels über die Geschlechts- 
bestimmüng bei den Hymenopteren, insbesondere bei der Honigbiene. 
Biol. Centralbl., Bd. 33. 

Nelson, 'J. A., 1904, The early development of Dinophilus: A study 
in cell-lineage. Proc. of the Acad. of Nat. Sc. of Philadelphia, Vol. 56. 

Derselbe, 1907, The morphology of Dinophilus Conklini n. sp. Proc. 
of the Acad. of Nat. Sc. of Philadelphia, Vol. 59. 

Obst, P., 1899, Untersuchung“n über das Verhalten der Nukleolen bei 
der Eibildung einiger Mollusken und Arachnoiden. Zeitschr. f. wiss. 
Zool., Bd. 66. 

Oscehmann, A., 1914, Beitrag zum Studium der Zellverschmelzung 
und der zellulären Erscheinungen. I. Teil: Die Ovogenese von Tu- 
bifex (Ilyedrilus) bavaricus. Arch. f. Zellforsch., Bd. 12. 

Plate, L., 1887, Ueber einige ektoparasitische Rotatorien des Golfs von 
Neapel. Mitt. aus d. Zcol. Stat. zu Neapel, Bd. 7. 

Prowazek, S., 1900, Zur Entwickelungsgeschichte des Wurmes Dino- 
philus apatris. Naturw. Wochenschr., Bd. 15. 

Repiachoff, W., 1886, Zur Anatomie und Entwicklurgsgeschichte 
des Dinophilus gyrociliatus O. Schmidt. Zapiski Nowcross. Obschestwa 
Estes., T. 10. (Russisch). 

Reuter, E., 1907, Ueber die Eibildung bei der Milbe Pediculopsis 
graminum (E. Reut.). Zugleich ein Beitrag zur Frage der Geschlechts- 
bestimmung. Festschr. f. Palmen, Bd. 1, Helsingfors. 


ee 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 137 


Roux, W., 1905, Die Entwicklungsmechanik, ein neuer Zweig der bio- 
logischen Wissenschaft. Vortr. u. Aufs. über Entwickelungsmech. 
d. Org., Heft 1. 

Schaxel, J., 1913, Versuch einer cytologischen Analysis der Ent- 
wicklungsvorgänge. Ii. Die abnerme Furchung von Aricia fcetida 
Clap. Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ont., Bd. 35. 

Schimkewitsch, W., 1895, Zur Kenntnis des Baues und der Ent- 
wicklung des Dinophilus vom Weißen Meere. Zeitschr. f. wiss. Zool., 
Bd. 59. 

Schleip, W., 1912, Geschlechtsbestimmende Ursachen im Tierreich. 
Ergebn. u. Fortschr. d. Zo9l., Bd. 3. 

Schmidt, O., 1848, Neue Beiträge zur Naturgeschichte der Würmer, 
gesammelt auf einer Reise nach den Färöern. Jena. 

Derselbe, 1857, Zur Kenntnis der Turbellaria rhabdocoela und einiger 
anderer Würmer des Mittelmeeres. Sitzungsber. d. K. Akad. d. Wiss. 
in Wien, math. naturw. Kl., Bd. 23. 

Seiler, J., 1914, Das Verhalten der Geschlechtschromosomen bei Lepi- 
dopteren. Nebst einem Beitrag zur Kenntnis der Eireifung, Samen- 
reifung und Befruchtung. Arch. i. Zellforsch., Bd. 13. 

Shearer, C. 1906, On the structure of the nephridia of Dinophilus. 
Quart. Journ. of micr. Sc., N. S. Vol. 50. 

Derselbe, 1911, The problem of sex-determination in Dinophilus 
gyrociliatus. Journ. cf the Mar. Biol. Asscc., Vel. 9. 

Derselbe, 1912, The problem of sex determination in Dinophilus 
gyrociliatus. Part. I. The sexual cycle. Quort. Jeurn. of micr. Sc., 
INN2S,2.V 01.97. ? 

Stiasny, G., 1910, Dinophilus apatris ferma tergestina. Zool. Anz., 
Bd. 35. 

Trinci, G., 1906, Studii sull’ oocite dei Celenterati durante il periodo 
di creseita. Arch. di Anat. e di Embr., Vol. 5. 

Weldon, W.F.R., 1886, On Dinophilus gigas. Quart. Journ. of mier. 
SC... N.,S."Vol. 27. 

Wheeler, W.M., 1895, The behavior of the centrosomes in the fertilized 
egg of Myzostoma glabrum, Leuckart. Journ. of Morph., Vol. 10. 

Derselbe, 1897, The maturation, fecondation and early cleavage 
of Myzostoma glabrum Leuckart. Arch. de Biol., Vol. 15. 


Erklärung der Abbildungen. 


Die Figuren der Tafeln III—V wurden unter Benutzung des Abbeschen 
Zeichenapparates bei Projektion auf Objekttischhöhe tınd bei 160 mm Tubus- 
länge entworfen. 


Arch. f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 


138 Hans Nachtsheim: 


Tartel- IE 
Alle Figuren der Tafel I! sind nach dem lebenden Objekt gezeichnet. 


Fig. 1. Weibchen und Männchen von Dinophilus apatris während der 
Begattung. Das Weibchen hat den Kokon aufgerissen und ist im 
Begriffe, ihn zu verlassen. Vergrößerung: ca. 300fach. 

. Männchen von Dinophilus apatris. Vergrößerung: ca. 1900fach. 

. Geschlechtsreifes Weibchen von Dinophilus apatris. Vergrößerung: 
ca. 110fach. 

Fig. 4. Weibchen von Dinophilus apatris während der Eiablage. Im Kokon, 
der eben gebildet wird, zwei Weibcheneier und ein Männchenei. 
Vergrößerung: ca. 75fach. 

Fig. 5. Kokon von Dinophilus apatris mit fünf Weibchen- und zwei Männ- 
cheneiern. Bei einzelnen Eiern sind die Richtungskörper sichtbar. 
Vergrößerung: ca. 120fach: 


DD 


Fig. 
Fig. 


w 


Tasten ammE 


Alle Figuren der Tafel I!I wurden mit Zeiß’ Apochromat-Immersion 

2mm und Kompensationsokular 12 gezeichnet. 

Fig. 6. Querschnitt durch einen männlichen Embryo von Dinophilus. 
Oben die „lichtbrechenden Körnchen“, in der Mitte der Hoden. 
Hoden mit Spermatogonien, zum Teil in Teilung. 

Fig. 7. Schräger Querschnitt durch einen männlichen Embrye. Hoden 
mit Synapsis-Stadien. 

Fig. 8. Längsschnitt durch einen männlichen Embryo. Hoden mit Sper- 
matozytenteilungen und Spermatiden, unten der Penis. % 

Fig. 9. Längsschnitt durch einen männlichen Embryo. Hoden mit jungen 
Spermatiden. 

Fig. 10. Längsschnitt durch einen männlichen Embryo. Hoden mit älteren 
Spermatiden, Umwandlung der Spermatiden in die Spermatozoen. 

Fig. 11. Querschnitt durch ein Männchen von Dinophilus. Der Hoden 

enthält nur fertige Spermatozoen. Das Männchen lag noch im 

Kokon, das Weibchen, das sich in dem gleichen Kokon entwickelt 

hatte, war bereits ausgeschlüpft. Die Begattung hat wahrschein- 

lich im Kokon stattgefunden, neben dem Männchen liegen einige 

Spermatozoen. 

Fig. 12. Geschlechtszellen eines weiblichen Embrycs von Dinophilus. Ovo- 

gonien und Ovogonienmitosen. 

Fig. 13. Geschlechtszellen eines eben ausgeschlüpften Weibchens. Ovo- 
gonien und Ovogonienmitosen. 

Fig. 14. Spermienpaket in einem eben ausgeschlüpften Weibchen neben 
dem Ovar. 

Fig. 15. Ovar eines jungen Weibchens mit Ovogonien und Ovogonienmitose 
scwie zwei Spermapaketen rechts und links. 

Fig. 16 und 17. Ovogonien und Ovogonienmitosen. 

Fig. 18. Junge Ovozyten mit Synapsis-Stadien. 


DI en u et tl aa en 


ee! » 
> 7% ac £, Be 


aa Te at dan Sl u nu cz 
- ’ i “ x 
’ 


euer. Fe a a ET NT De Bar | 


% 


Zytologische und experimentelle Untersuchungen usw. 139 


Fig. 19. Heranwachsen der Ovozyten, Verschmelzungsperiode, zwischen den 
Ovozyten einzelne Spermatozoen. 

Fig. 20. Ovozyte mit intaktem und degenerierendem Kern. 

Fig, 21. dto., weiter vorgeschrittenes Stadium der Degeneration. 

Fig. 22. Ovozyte mit zwei Kernen und letztem Rest eines gefressenen Kernes. 

Fig. 23. Die Ovozyten nach der Verschmelzungsperiode, zwischen ihnen 
Spermatozoen. 

Fig. 24. Ovozytenkern mit knospender Karyosphäre. 

Fig. 25. dto. mit zwei Karyosphären. 

Fig. 26. dto., Beginn der Auflockerung der Karyosphären. 

Fig. 27. dto., Herausdifferenzierung der biskuitförmigen Tetraden. 

Fig. 28. dto. (Männchenei), Aufquellen der Tetraden. 

Fig. 29. dto. (Weibchenei), Auflockerung der Tetraden. 

Fig. 30. dto. (Weibchenei), Diakinese. 

Fig. 31. dto. (Männchenei), dto. 

Fig. 32. dto. (Weibchenei) mit Retikulum. 


TarkelaulV. 


Alle Figuren der Tafel IV wurden mit Zeiß’ Apochromat-Immersion 

2 mm und außer Fig. 34 mit Kompensationsokular 12, Fig. 34 mit Kompen- 

sationsokular 6 gezeichnet. Bei der Reproduktion wurden sämtliche Figuren 

auf 24 verkleinert. 

Fig. 33. Weibchen- und Männchenei im Ovar, Dotterbildung, in jedem Ei 
das Spermatozcon. 

Fig. 34. Querschnitt durch ein Weibchen mit Weibchen- und Männchenei. 

Fig. 35. Weibchen- und Männchenei im Ovar. Im Weibchenei Ausbildung 
der ersten Reifungsspindel, neben dem Kern mit den beiden Zentro- 
somen der ausgetretene Nukleolus, am Rande des Eies der männ- 
liche Vorkern. Im Männchenei Aequatorialplatte der ersten Rei- 
fungsspindel, daneben der männliche Vorkern. 

Fig. 36. Weibchenei im Ovar, erste Reifungsspindel (Metaphase) im Zen- 
trum des Eies, darüber die Ueberreste des Nukleolus. 

Fig. 37. Männchenei im Ovar, erste Reifungsspindel (Metaphase) im Zentrum 
des Eies, daneben die Ueberreste des Nukleolus und der männliche 
Vorkern. : 

Fig. 38. Männchenei nach der Ablage, die erste Reifungsspindel wandert 
an die Eioberfläche, im Innern der männliche Vorkern. 

Fig. 39. Männchenei, erste Reifungsspindel in Anaphase, im Innern der 
männliche Vorkern. 

Fig. 40. Weibchenei nach der Ablage, Abschnürung des ersten Richtungs- 
körpers, im Innern der männliche Vorkern. 

Fig. 41. Weibchenei, Karyomeritenbildung nach der ersten Reifungsteilung, 
am Rande der erste Richtungskörper, im Innern der männliche 
Vorkern. 

Fig. 42. Weibchenei, Karyomeritenbildung nach der zweiten Reifungs- 

teilung, am Rande die beiden Richtungskörper, im Innern der 

männliche Vorkern. 


u 


140 Hans Nachtsheim: Zytolog. u. experiment. Untersuchungen. 


ae EV. 


Alle Figuren der Tafel V wurden mit Zeiß’ Apochromat-Immersion 
2 mm und Kompensatiensokular 12 gezeichnet. 


Fig. 43. Weibchenei, die Karyomeriten des weiblichen Vorkernes und der - 


männliche Vorkern vor der Kopulation, am Rande die beiden Rich- 
tungskörper, von denen der erste sich zu teilen beginnt. 

Fig. 44. Weibchenei, Kopulation der Vorkerne, am Rande die beiden Rich- 
tungskörper, der erste in Teilung. 

Fig. 45. Weibchenei, erste Furchungsteilung, Metaphase. 

Fig. 46. Männchenei, zweite Reifungsteilung, beginnende Anaphase, am 
Rande der erste Richtungskörper, im Innern der männliche Vor- 
kern. 

Fig. 47. Männchenei, die Karyomeriten des weiblichen Vorkernes und der 
männliche Vorkern vor der Kopulation, am Rande die beiden 
Richtungskörper. 

Fig. 48. Männchenei, Kopulation der Vorkerne, am Rande die beiden Rich- 
tungskörper, der erste in Teilung. 

Fig. 49. Männchenei, zwei Blastemeren. 

Fig. 50. Weibchenei, erste Furchungsteilung, Telophase. 

Fig. 5l. Weibchenei, erste Furchungsteilung, Zelldurchschnürung mit 
Ringbildung, in der kleineren Blastomere ein Richtungskörper. 

Fig. 52. Weibchenei, zwei Blastomeren, Beginn der zweiten Furchungs- 
teilung, in der größeren Blastomere Metaphase, in der kleineren 
Prophase. 


141 


Die Entwicklung der Keimzellen des Grottenolmes. 
(Proteus anguineus.) 


I. Teil. 


Die Spermatocytogenese. 


\ 


«Untersuchungen, ausgeführt mit Unterstützung aus der Samsonstiftung 
der Bayerischen Akademie der Wissenschaften in München.) 


von 


H. Stieve, Leipzig. 


Hierzu Tafel VI—-XII und 16 Textfiguren, 


Inhaltsübersicht. 

Seite 
Einleitung . . . EINEN IE ER FEN RT RU hu lege a ARTE ARE u 
Material und Technik. RER FE EERIEE CERENNEER ARE DE PSSOR RN Il N) 
Der mikroskopische Bau des Diodehs, RR SPEER ME ER NEN Ir) 
PIERSHERMAIBEeYLORENESE 74... DE SE SE TO 
I. Die Spermatogonien . . RE SE Nr ER RENT 
a) Die großen Spermatogonien TR ER RE ET EN EL ee STE 
In Bier Kleinen Spermatogoniene 7.7... 7.7 Da er NTTT 
11. Die Spermatocyten 2 PER EI ee N 12. Te FIR 
a) Die Wachstumsperiode ER UeR RES NE era etaerälcı DET 
b) Die Prophasen der ersten Befanßsteilung DESETSS ANNE er a ERE 
L.: Der. dünne; tichtüngsiose, Krrauel u. ER 8188 
2. ‚Der Polar: geriehteter Knauel. 3 7 N ENTE IH 
3. Die: seitlichen Ausläamierkuer ee an TOT 
4. Der dicke, richtungslose Knäuel . . . .- 198 

5. Die Längsspaltung des Fadens und die Teilung; in Terneelle 
Chromosomen . . . N Eee, 20 
6. Die Pseudoreduktion en. Tetradenbildung RAR 201 
EN Bie\erste: Ressungstetuneene rn ee NEN s. -206 
BVZSPHeEH Braspermatidene Se EN RI RT 2TI 
Mans zweite, Reitungstellule rs www es. 2 er 072217 


Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. Il. 10 


me mr nen 57 et Kr ng SE zz. BR - en Be ER al NEN 


142 EEISTI EINE 


VI. Zusammenfassung 
Allgemeiner Teil 
I. Die Spermatogonien 
a) Die großen Spermatogonien. 
b) Die kleinen Spermatogonien 
ll. Die Spermatocyten h 
Ill. Die Frage der Paralleikondeaton 2 
a) Die Befunde von A. und K. E. Schrenieh 
b) Die Befunde von v. Winiwarter und Sainmont 
c) Theoretische Bedenken gegen die Paralleikonsugation. 
d) Die Befunde Rabls 
e) Die mutmaßliche Bedeutung er olaken Or 
IV. Die Tetradenbildung durch endweise Konjugation 
a) Aehnliche Befunde an anderen Objekten . 
b) Aehnliche Befunde bei Degenerationsvorgängen 
V. Die anderen Theorien über die Reduktion 
a) Die Faltungstheorie 
b) Die Amphimetasyndese 
c) Die grundsätzlichen Ühkerschicde sten marallier Bra 


endweiser. Konjugabion.\. a. N 7 nr SE ee 

VI. Die erste ;Reitüngsteiling. 7 288.7 0 Ba ee 
VIl. Die Präspermatiden . . RE SA A 
a) Die Ausbildung der Kae ART ER THE. 

b) Andere Mitteilungen über Dreh RENTE 

1:- Bei, Säugetieren: und Vögeln "7-7... 2 

2: Bei, Amphibien... a au er er ee ge 

3: Bei: wirbellosen "Tieren u. 7.7 2 ars RE 

ey Zusammienfassung MU. E  ar e eR 
VIII. Das Reduktionsproblem . . . RER a 
IX. Die Frage der ee eahtrinn. rat, 6 
x, Die zweite .Reifungsteilung........ Mir ae ea ee Be 
X%TySchlüßbemerkurngen ac un anne ee Dr EIN Tu ren 
Erwähnte ' Arbeiten... 1,02. N a EN U 
Erklärung‘ der Abbildünger#m2... 1... ua ee re 


Einleitung. 


Noch kaum ein halbes Jahrhundert ist verflossen, seitdem 
unsere Vorstellungen über die Reifung der Geschlechtszellen und 
die Befruchtung des Eies durch die bahnbrechenden Untersuchungen 
hauptsächlich der deutschen Forschung tatsächliche Grundlagen 
erhalten haben und dadurch aus dem Bereiche der reinen Speku- 
lation gerissen wurden.. Die tiefgreifenden Veränderungen, welche 
die chromatische Substanz der Kerne währcnd der erwähnten 
Vorgänge durchmacht, waren es, die das Augenmerk der Unter- 


ne las nn BE TE a alla a De ad an ad ni Di a ae nn 


se a Sr a ne 


Et 


DE TIEREN EN 


I ae 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 143 


sucher zunächst auf sich ziehen mußten und in rascher Aufeinander- 
folge erschienen die Arbeiten, welche das Verhalten der Chromo- 
somen während der Reifung der Keimzellen bei den verschiedensten 
Tier- und Pflanzenarten schilderten. Allein trotz der großen Zahl 
der bis auf den heutigen Tag über diesen Gegenstand erschienenen 
und immer noch neu erscheinenden Untersuchungen Konnte gerade 
in der Frage nach der Bedeutung der Chromosomen noch keine 
Einigung erzielt werden, im Geg.nteil, je mehr Arten des Tier- 
und Pflanzenreiches in den Bereich unserer Kenntnis einbezogen 
wurden, desto verwickelter erschienen die Verhältnisse, denn fast 
mit jeder neuen Arbeit wurden auch neue Befunde mitgeteilt, die 
sich mit den bisher bekannten nicht oder nur sehr schwer in Ein- 
klang bring.n ließen. 

So widersprechend nun aber die ven den einzelnen Forschern 
mitgeteilten Ergebnisse auch sein mögen, in der einen grundlegenden, 
zuerst von van Beneden (1883) ermittelten Tatsache stimmen 
alle überein, daß nämlich in den reifen, befruchtungsfähigen Ge- 
schlechtszellen die Zahl der Chromosomen auf die Hälfte der für 
die betreffende Art vorhandenen Normalzahl herabgesetzt wird 
und sich erst durch den Vorging der Befruchtung wieder als Folge 
der Vereinigung des Ei und Samenkernes zur Normalzahl ergänzt. 

Ueber die Art und Weise aber, auf welche diese Reduktion 
vor der Befruchtung erfolgt, bestehen auch heute noch in der Haupt- 
sache zwei grundverschiedene Anschauı ngen. Ein Teil der Forscher, 
unter ihnen besonders ©. Hertwig und R. Fick erblickt in 
den Chromosom:n keine ‚Individuen‘, sonde:n nur ganz vorüber- 
sehende Bildungen der chromatischen Substanz, welche während 
der Kernteilungen einzig und allein aus „taktischen Gründen“ 
auftreten und während der Kernruhe stets im Gerüste des Kernes 
aufgelöst werden, verschwinden, um bei der neuen Mitose wieder 
von neuem zu entstehen. Sie vermuten in der Reduktion in erster 
Linie ein Mittel zur Halbierung der Gesamtmasse des Chro- 
matins, die nach der Anschauung O0. Hertwigs (1915 u. a. a. O.) 
und Platmers (1885, 1889) dadurch zustande kommt, dal 
zwischen den beiden Reifungsteilungen das Ruhestadium ausfällt, 
aus welchhm Grunde das Chromatin keine Gelegenheit hat, seine 
Masse durch neues Wachstum auf die der betreffenden Art zu- 
kommende Normalmenge zu ergänzen. Ganz abgesehen aber davon, 


daß der Ausfall des Ruhestadiums bisher lediglich für die weiblichen 
10* 


144 H. Stieve: 


Keimzellen mit Sicherheit erwiesen ist, über die Samenzellen 
liegen eine ganze Reihe von Beobachtungen vor, welche ein, wenn 
auch nur zu kurzes Ruhestadium zwischen den beiden Reifungs- 
teilungen beschreiben, würde durch den von OÖ. Hertwig an- 
genommenen Vorgang wie das schon Boveri (1892) einge- 
wendet hat, einzig und allein die Halbierung der Masse nicht 
aber die gleichzeitige Halbierung der Chromosomen zahl erklärt. 

In offenkundigem Gegensatz zu dieser Anschauung steht die 
Ansicht einer ganzen Reihe von anderen Untersuchern, die in den 
Chromosomen selbständige Individuen erblicken, welche ihre Indi- 
vidualität auch während der Kernruhe bewahren und in dieser 
Zeit nur scheinbar verschwinden, das heißt lediglich mit unseren 
Untersuchungsmitteln nicht nachzuweisen sind. Die Anhänger 
dieser Richtung erblicken in der Reduktion ein Mittel um die Ver- 
doppelung der Chromosomenzahl, die ohne sie bei jeder Befruchtung 
erfolgen müßte, zu verhindern. 

Eine erhöhte Bedeutung erhielt die ganze Frage, als durch 
die Entdeckung der Mendelschen Regel das Verhalten verschiedener, 
allerdings meist nur unwichtiger, die Farbe oder äußere Form be- 
treffender Eigenschaften bei der Vererbung erklärt wurde und 
es sich im Anschluß daran zeigen ließ, daß eben diese Erscheinungen 
in den Vorgängen der Reduktion ihre restlose Erklärung finden. 
Hatten schon vorher eine Reihe der namhaftesten Forscher, unter 
ihnen besonders Weismann die Chromosomen als ausschließ- 
liche Träger der Vererbung betrachtet, so fand diese Anschauung 
in der Mendelschen Regel eine wesentliche Stütze. Allerdings 
führten die tiefgreifenden nachweisbaren Veränderungen, welche 
die Kernstrukturen während der Reifung der Geschlechtszellen 
im Gegensatz zum Protoplasma erfahren wohl zeitweise im Zu- 
sammenhang mit der Tatsache, daß die Gesamtmenge des Chroma- 
tins in beiden Keimzellen gleich groß, die des Protoplasmas aber 
sehr verschieden ist, zu einer starken Ueberschätzung der Rolle, 
die den Kernen bei der Vererbung zukommt. Erst die Untersuchungen 
der allerneuesten Zeit haben gelehrt, daß auch das Plasma eine 
wichtige Rolle beim Befruchtungsvorgang spielt und diese Beo- 
bachtungen lassen es auch wahrscheinlich erscheinen, daß zahlreiche, 
- vielleicht sogar die allerwichtigsten Eigenschaften nicht durch 
den Kern, sondern durch das Plasma und zwar besonders durch 
das der Eizelle auf die Nachkommen üb:rtragen werden. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 145 


Wie dem aber auch sei, ob nun die Chromosomen wichtige oder 
unwichtige Eigenschaften übertragen, ob sie die ausschließlichen 
oder nur teilweisen Träger der Vererbung sind, jedenfalls steht 
und fällt die Frage danach, ob sie überhaupt irgendwie als Träger 
der Vererbung in Betracht kommen mit ihrer Individualität. Ist 
es doch ganz klar, daß eine bestimmte Erscheinung nur dann von 
. einem einzelnen Formelement als solchem durch die Reihe der 
Generationen getragen werden kann, wenn dieses Gebilde selbst, 
in diesem Falle das einzelne Chromosoma, während der ganzen 
Zeit erhalten bleibt. 

Bekanntlich war es ja Rab| (1886), der zuerst die Theorie 
der Chromosomenindividualität aufstellte, seine Annahme wurde 
von Boveri (1888) weiter ausgebaut, durch äußerst eingehende 
und genaue Untersuchungen gefördert und erhielt erst dadurch 
die hohe Bedeutung die ihr heute zukommt. Eine sehr wesentliche 
Stütze bekam die Theorie durch die Untersuchungen Rückerts 
(1892), welcher bei Selachiern zeigen konnte, daß die Chromosomen 
während der ganzen Entwicklung des Keimbläschens trotz der 
mannigfaltigsten Veränderungen, die ihre äußere Form in dieser 
Zeit durchmacht, als selbständige, stets voneinander abgrenzbare 
Individuen erhalten bleiben, daß also die Gebilde, deren Zahl durch 
die Reifungsteilungen halbiert wird, die nämlichen sind, welche 
‚ aus der letzten Oogonienteilung hervorgingen. Rückert be- 
wies demnach die Kontinuität der Chromosomen während der Ei- 
entwicklung und diese bildet eine Vorbedingung für die Rabl-Boveri- 
sche Individualitätstheorie. Denn es ist einleuchtend, daß in erster 
Linie der Nachweis erbracht werden mußte, daß die Chromosomen 
während der ganzen Ei- und Samenreife selbständig erhalten bleiben, 
war er unmöglich, so hatte auch die Untersuchung der weit schwie- 
- rigeren Frage, ob die Chromosomen das Ruhestadium des Kernes 
überdauern, keinen Sinn mehr, denn wie sollten irgendwelche Eigen- 
schaften durch Gebilde auf die Nachkommen übertragen werden, 
die zwar während des ganzen Lebens erhalten bleiben, aber kurz 
vor der Befruchtung, gerade dann, wenn die fragliche Fähigkeit 
so recht in Erscheinung treten müßte sich vollkommen auflösen, 
um erst später wieder neu zu erstehen? 

Der Nachweis der Chromosomen !n Ruhekernen ist bis heute 
noch nicht geglückt, ihre Individualität bildet auch jetzt noch 
eine unbewiesene nnahme, die allerdings sehr viel Wahrschein- 


146 H. Stiew.e: 


lichkeit für sich hat. Dagegen kann die Kontinuität während der 


Ei- und wahrscheinlich auch der Samen ntwicklung wenigstens 
für ein: ganze Anzahl von Arten als sicher bewiesen gelten, für 
andere erscheint sie äußerst wahrscheinlich, umsomehr, nachdem 
ich durch ausgedehnte Versuche am Haushuhne (1918 a) zeigen 
konnte, daß alle Oocyten, in deren Kernen die Chromosomen mehr 
oder weniger zerfallen, beziehungsweise ganz verschwunden 
sind, nichts anderes darstellen, als Follikel im ersten Stadium der 
Rückbildung. Diese kann durch äußere, ungünstige Verhältnisse 
bedingt sein, sie kann aber auch einen physiologischen Vorgang 
darstellen denn in allen Ovarien finden sich bei allen Tierarten, 
soweit sich dies bis jetzt übersehen läßt, zu jeder Jahreszeit, bald 
vereinzelt, bald in größerer Menge atretische Follikel, bei denen 
die Rückbildung durch Zerfall des Chromatins eingeleitet wird 
(Stieve 1918c). Das Verschwinden der Chromosomen bedeutet 
also stets den Untergang der betreffenden Zelle und es ist 


deshalb nicht angängig, derartige Rückbildungsvorgänge einzig 


und allein auf Grund der Tatsache, daß sie sich innerhalb der Ovarien 
nıchweisen lassen in den normalen Entwicklungsgang der Keim- 


zellen einzureihen, wie dies leider bisher schon oft geschehen ist. 


Bekanntlich haben ja Carnoy und Lebrun (1897—1903) 
auf Grund ihrer am Urodelenei ausgeführten Beobachtungen in 
erster Linie die Lehre von der Kontinuität der Chromosomen be- 
kämpft. Lubosch (1902) hat ihre Untersuchungen nachge- 
prüft und zum Teil bestätigt, zum Teil widerlegt. Das Ergebnis 
seiner Arbeit war nämlich folgendes: Wir haben zwei Arten von 
Chromosomen zu unterscheiden, solche an denen sich die Conti- 
nuität einwandfrei nachweisen läßt, und solche die während der 
Eientwicklung mehrmals aufgelöst, zum Teil auch in Nucleolen 


umgewandelt werden und schließlich wieder vollkommen neu ent- - 


stehen. Durch diesen versuchten Ausgleich der entgegengesetzten 
Befunde hatte die Lehre von der Kontinuität der Chromosomen 
scheinbar ihren letzten Stoß erhalten, da durch ihn ja wahrscheinlich 
gemacht wurde, daß es rein dem Spiel des Zufalls unterworfen sei, 
ob wirklich ein Chromosoma während der ganzen Eientwicklung 
erhalten bleibe oder nicht. Aber ganz abgesehen davon, daß die 
betreffenden Untersuchungen durch die gründlichen Arbeiten von 
Born (1892, 1894) schon früher, später durch dievon Janssens 
(1904) widerlegt wurden, haben weder Carnoy und Lebrun 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 147 


noch auch Lubosch die Rückbildungsvorgänge in den Ovarien, 
die sicherlich bei den Amphibien eine besonders große Rolle spielen 
auch nur im geringsten berücksichtigt. Schon aus diesem Grunde 
können ihre Untersuchungen heute nicht die geringste Beweiskraft 
mehr besitzen, solange sie nicht von diesem neuen Gesichtspunkt 
aus nachgeprüft wurden. Lubosch legt zwar später (1913) 
Gewicht darauf, daß er seine Beobachtungen nur an frisch gefangenen 
Tritonen ausgeführt habe, er prüfte sie sogar später nochmals nach, 


“hat aber auch dabei diephysiologischen Rückbildungsvorgänge 


in keiner Weise berücksichtigt, weshalb auch seinen letzten Unter- 
suchungen keine höhere Bedeutung zukommt als seinen früheren. 

‚Nach allem Vorhergesagten erschien es wohl eine dankens- 
werte Aufgabe, die Eientwicklung der Urodelen von neuen Ge- 
sichtspunkten aus einer eingehenden Prüfung zu unterziehen, und 
zwar mußte der Olm (Proteus anguineus Laur.) wegen der, Größe 
seiner Zellelemente offenbar ein sehr geeignetes Objekt für solche 
Arbeiten bieten. Bei der hohen Wertschätzung, die dieses Tier 
sonst von seiten der Histologen wegen seiner im ganzen Tierreiche 
einzig dastehenden Größe der Zellelemente genießt, nicht umsonst 
wird es häufig als histologisches Schatzkästlein bezeichnet, und 
bei der großen Aufmerksamkeit, die seinen Lebensgewohnheiten im 
übrigen von den Biologen zugewendet wird, erscheint es geradezu 


‘erstaunlich, daß gerade seine Keimzellen bisher noch kaum be- 


achtet wurden. Die Spermatogenese ist noch völlig unbekannt, 
nur eine kurze Mitteilung Heidenhains (1900) beschäftigt sich 
mit den Zentralkapseln und Pseudochromosomen in den Samen- 
zellen, ohne die Entwicklungsvorgänge im einzelnen zu beobachten. 
Dagegen war die Eientwicklung schon zweimal Gegenstand wissen- 
schaftlicher Untersuchungen. 

Die erste Arbeit stammt von V. Schmidt (1904), sie wurde 
aber, wie der Verfasser selbst angibt, an vollkommen unzureichendem 
Material ausgeführt, über dessen Herkunft keine näheren Angaben 
gemacht werden. Infolgedessen kann den zum Teil recht auf- 
fallenden Ergebnissen der sehr eingehenden Beobachtungen keiner- 
lei höhere Bedeutung beigemessen werden, sie haben nur gezeigt, 
daß sich gerade in den durch ihre hervorragende Größe ausge- 
zeichneten Keimzellen des Olmes die Entwicklungsvorgänge nicht 
in so übersichtlicher und leicht verständlicher Form abspielen, wie 
man sie ursprünglich wohl erwartet hatte. 


148 HaStnrevie: 


In der richtigen Erkenntnis der Unvollständigkeit der be- 
treffenden Arbeit hat es Jörgensen (1910) unternommen, 
die Untersuchungen von V. Schmidt nachzuprüfen. Auch 
er ging jedoch bei der Auswahl des Materials mit der gleichen Un- 
vorsichtigkeit zuwege, wie sein Vorgänger, er untersuchte nur 
5 Weibchen, die er nach langem Warten unmittelbar aus Adelsberg 
erhielt. Drei weitere Weibchen mußten, da sie offenbar als Folge 
längerer Gefangenschaft oder ungünstiger äußerer Bedingungen, 


denen sie vor der Erbeutung ausgesetzt waren, allerschwerste Rück- 


bildungsvorgänge an den Ovarien zeigten, von den Untersuchungen 
ausgeschlossen werden. Allein auch von den ersten fünf Tieren 
konnte Jörgensen nicht mit Sicherheit sagen, wie linge sie 
vor der Konservierung unter unnatürlichen Bedingungen gelebt 
hatten. Auf jeden Fall war eine geraume Zeit seit ihrem Fang ver- 
strichen bis sie in seine Hände gelangten und er hatte es wohl in 
erster Linie dem Zufall zu verdinken, wenn er in ihren Ovarien 
nicht so schwere Rückbildungsvorgänge antraf, als sein Vorgänger. 
Immerhin aber waren die vorgefundenen Bilder merkwürdig genug; 
und bereiteten Jörgensen selbst schweres Kopfzerbrechen. 
Durch weitausschweifende Erörterungen suchte er die Lücken, 
die in der Unvollständigkeit des Materials gelegen waren, auszu- 
füllen, war er doch von der Kontinuität der Chromosomen überzeugt 


und konnte sie an seinen Präparaten nicht nachweisen. Er beging 


deshalb eine Petitio principii, wie ihm schen oft genug vorgeworfen 
wurde, indem er folgerte: Weil die Chromosomen die Träger der 
Vererbung sind, deshalb müssen sie selbständige, kontinuierliche 
Gebilde sein, die ihre Individualität während der ganzen Eient- 
wicklung bewahren. Wenn sie also eine Zeitlang für uns nicht nach- 
weisbar sind, dann ist ihr Verschwinden nur ein scheinbares, in der 
Unzulänglichkeit unserer Untersuchungsmethoden begründetes. 
Da jedoch die Annahme, daß die Chromosomen tatsächlich die 
Träger der Vererbung sind, noch nicht bewiesen ist, so dürfen wir 
auf sie keinesfalls irgendwelche Theorien aufbauen, im Gegenteil, 
wir wollen ja aus dem Verhalten der Chromosomen während der 
Reifung der Geschlechtszellen Anhaltspunkte für die ihnen zu- 
kommenden Eigenschaften gewinnen. Denn wie schon erwähnt, 
ist die Kontinuität der Chromosomen die Vorbedingung für die 
Möglichkeit einer Uebertragung von Eigenschaften durch sie. 
Wohl das wichtigste Ergebnis, das die Untersuchungen Jör- 


RB} 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 149 


gensens gezeitigt hatten war der Nachweis, daß tatsächlich 
einige der Kernformen, die V.Schmidt in die normale Oogenese 
einreihte, nichts anderes sind als Rückbildungsformen, wahrschein- 
lich verursacht durch die schädigenden Einflüsse des Gefangen- 
lebens. Ein solcher Einfluß war bis dahin so gut wie unbekannt 
oder wenigstens unbeachtet geblieben, auch Jörgensen maß 
ihm keine höhere Bedeutung bei. Und doch hätten ihm die Er- 
gebnisse seiner Untersuchungen einen Fingerzeig geben müssen, 
wie ungeheuer cmpfindliche Gebilde die Keimzellen sind, und zwar 
sind es in erster Linie die Strukturen des Kernes, also die Chromo- 
somen, die durch scheinbar unbedeutinde Veränderungen im äußeren 
Leben des Individuums in der tiefgreifendsten Weise verändert 
werden. Hier lag der Weg offen, die Frage nach der Kontinuität 
der Chromosomen von einem vollkommen neuen Gesichtspunkt an- 
zugehen und wie meine Beobachtungen an Hühnern (1913, 1818 a) 
und an Dohlen gezeigt haben und weitere Untersuchungen sicher 
noch zeigen werden, auch zu lösen. 

Die eingehende Untersuchung der Entwicklung der Keimzellen 
des Olmes erschien also eine viel Erfolg versprechende, dankens- 
werte Aufgabe, sie führte in bezug auf die Spermatogenese auf 
vollkommen unerforschtes Gebiet. Jedoch auch eine neue Bear- 
beitung der Oogenese unter Berücksichtigung der erwähnten Ge- 
sichtspunkte erschien wünschenswert, denn wenn hier die Verhält- 
nisse auch sicher nicht ganz einfach lagen, so mußte doch nachge- 
sehen werden, inwiefern die merkwürdigen, von Jörgensen 
beschriebenen Formen natürlichen Bildern entsprechen oder ledig- 
lich Rückbildungsvorgänge darstellen, welche sich aus physiolo- 
gischen oder pathologischen Gründen, zum Teil als Folge der ver- 
änderten äußeren Bedingungen an den Ovarien abspielen. 

Die erste Anregung zu diesen Untersuchungen erhielt ich durch 
meinen hochverehrten Lehrer, Herrn Geheimrat Rückert in München, 
dem ich auch an dieser Stelle für seinen erfahrenen Rat meinen 
verbindlichsten Dank ausspreche. Desgleichen bin ich der Kgl. Bayr. 
Akademie der Wissenschaften in München zu Dank verpflichtet, 
die mir einen . namhaften Betrag aus der Samsonsstiftung zur 
Förderung meiner Untersuchungen zur Verfügung stellte. 

Ursprünglich hatte ich nur die Absicht, die Eientwicklung 
des Olmes zu bearbeiten, ich entschloß mich aber bald, zuerst mein 
Augenmerk der Samenentwicklung zuzuwenden, da ich sie an meinem 


150 HaOS’EIe Ve: 


Material lückenlos verfolgen konnte und da sich aus ihr wichtige 
Rückschlüsse auf die Oogenese ziehen lassen. Zudem ist die Samen- 
entwicklung. ja noch nicht bearbeitet. Meine Untersuchungen 
begannen im Frühjahr 1914 und wurden durch den Krieg häufig 
auf Jahre unterbrochen. Die Ergebnisse der Untersuchungen 


über die Spermatocytogenese habe ich in einer vorläufigen Mitteilung 


(1918 b) kurz mitgeteilt. 


Material und Technik. 


Alle diesen Untersuchungen zugrunde liegenden Olme be- 


schaffte ich mir selbst während eines längeren Aufenthaltes in 


Adelsberg im Frühjahr 1914, beziehungsweise, ich ließ sie mir an 
Ort und Stelle durch einen Olmjäger besorgen, nachdem ich mich 
überzeugt hatte, daß der betreffende Mann mir wirklich nur freilebende 
und nicht längere Zeit gefangen gehaltene Tiere verschaffte). Be- 
sonderen Wert legte ich auch darauf, daß die Olme unmittelbar 
von ihren natürlichen Aufenthaltsorten stammten und nicht vor 
der Gefangennahme an irgendeinem Grottenwinkel abgeschlossen 
oder durch Hochwasser an Plätze versprengt waren, welche ihnen 
nicht die zu ständigem Gedeihen notwendigen Bedingungen boten. 
Meine Beobachtungen, die ich dabei über das Freileben und die 
Art der Fortpflanzung des Olmes ausführen konnte, habe ich an 
anderer Stelle mitgeteilt (1919), weshalb ich hier nicht mehr näher 
auf sie einzugehen brauche. Im Gegensatz zu Kammerer 
(1912), halte ich aber die Oviparität, nicht die Viviparität für die 
gewöhnliche Art der Fortpflanzung des Olmes. 

Im ganzen erhielt ich 27 männliche Olme, deren Hoden aus- 
nahmslos in Schnittserien zerlegt und untersucht wurden. Bei 22 
von ihnen befanden sich die Keimdrüsen im Ruhezustand, bei den 
5 übrigen waren alle Entwicklungsstadien bis zu reifen Spermato- 
zoen vorhanden. Auffällig war dab:i der große Unterschied im 
Entwicklungszustand der Hoden der einzelnen Tiere, der fast den 
Eindruck erweckte, als ob die Fortpflanzung des Olmes nicht an 
eine bestimmte Jahreszeit gebunden sei. In den unterirdischen 


') Ein Exemplar, das lange Zeit in Gefangenschaft gehalten war er- 
hielt ich durch die liebenswürdige Vermittlung des bekannten Münchner 
Serpetolog:n H. Sellmayr, dem ich auch an dieser Stelle m>inen verbind- 
lichsten Dank aussprechen möchte. 


ON: 


N 


a, Re] ut a 
a Be 


Wi il et 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 15! 


Höhlen herrschen ja jahraus, jahrein die nämlichen Bedingungen, 
so daß einer solchen Annahme nichts im Wege steht. Die Versuche 
Kammerers, welche eine gewisse Periodizität der Brunstperiode 
für den Olm zeigen, beziehen sich nur auf Befunde an gefangenen 
Tieren und besitzen deshalb keine Beweiskraft. Bei der Mehrzahl 
der von mir untersuchten Proteen befand sich, wie eben erwähnt, 
der Hoden vollkommen im Ruhezustand, bei vieren zeigte er mehr 
oder weniger weit fortgeschrittene Entwicklung, bei einem befand 
er sich auf der Höhe der Geschlechtstätigkeit, bei ihm konnte ich 
auch massenhaft Spermatozoen in den ableitenden Samengängen 
nachweisen. Einige der Tiere hatten die Brunstperiode kürzere 
oder längere Zeit hinter sich, bei ihnen bildete sich der Ruhezustand 


wieder aus, bei einzelnen fanden sich noch reife Spermatozoen, 


jedoch keine Spermatocytenteilungen. 
Das bearbeitete Material ist ein verhältnismäßig kleines und 


erfüllt vor allem nicht die Bedingung, die ich sonst als erste Grund- 


lage für jede Untersuchung einer Ei- oder Samenentwicklung auf- 
gestellt hate, daß sie nämlich die Verhältnisse während eines ganzen 
Jahres berücksichtigt. Wenn ich trotzdem schon jetzt zur Ver- 
öffentlichung meiner Untersuchungsergebnisse schreite, so bewegen 
mich dazu zwei Gründe: Erstens lassen sich die gewonnenen Bilder 
lückenlos, ohne Hilfshypothesen an einander reihen, die ganze 
Spermatogenese liegt klar vor, auch fand ich alle Stadien bei mehreren 
Individuen in größerer Anzahl, so daß ich sicher sein kann, nicht 
durch irgendwelche individuellen Verschiedenheiten oder Zufällig- 
keiten getäuscht worden zu sein. Zweitens wird es bei den jetzigen 
unruhigen Zeiten doch für lange Jahre hinaus unmöglich sein, frisch 
gefangene Olme zu bekommen. Aber auch die früher besteherden 
günstigen Friedensverhältnisse vorausgesetzt, ist es nicht sicher, 
ob es jemals gelingen wird ein ganzes Jahr hindurch regelmäßig 
frisch gefangene Olme zu erhalten, ja man kann nicht einmal wissen, 
ob hier selbst jahrelang fortgesetzte Bemühungen zu dem gewünsch- 
ten Ergebnis führen. Bekanntlich hatte ja Schreibers 
(1801—1819) zwei Jahre lang jeden Monat angeblich frisch ge- 


 fangene -Olme aus Adelsberg erhalten, unter diesen befand sich 


jedoch niemals ein vollkommen geschlechtsreifes Weibchen, über 
die Männchen werden keine näheren Angaben gemacht. Es bleibt 


also immerhin fraglich, ob ein zahlenmäßig größeres Material auch 
noch günstigere Objekte liefert, als sie mir während meines immerhin 


EEE EEE 


152 H. Stieve: 


recht langen Aufenthaltes in Adelsberg ein glücklicher Zufall in 
die Hände spielte. 

Auf Grund der an zahlreichen Objekten gesammelten Er- 
fahrungen müssen wir wohl sagen, daß trotz der ungeheuren Ver- 
besserung, welche die histologische Technik gerade in den letzten 
Jahrzehnten erfahren ha!, doch kein Fixierungsmittel allen An- 
forderungen entspricht d. h. die Gewebe genau in der Art und 
Weise erhält und ihren Bau für unsere Untersuchungen zugänglich 
macht, wie sie im Leben waren. Aus diesem Grunde ist es unbe- 
dingt notwendig, bei jeder Untersuchung, die sich mit der feineren 
Struktur der Zellen beschäftigt, mehrere, in ihrer Wirkung möglichst 
verschiedene Konservierungsmittel zu verwenden und die mit 
ihnen gewonnenen Ergebnisse zu vergleichen. Denn nur so wird 
es gelingen, Fixierungsartefakte wenigstens mit einiger Sicherheit 
von normalen Bildungen zu sondern. Ein schwerer Fehler ist es 
dagegen, wenn man, wie dies leider häufig genug geschehen ist, 
für die Untersuchung von Kernstrukturen nur ein einziges Kon- 
servierungsmittel anwendet, noch dazu eines von der Art des Flem- 
 mingschen Gemisches, über dessen Brauchbarkeit bekanntlich 
die Ansichten sehr stark auseinander gehen. Bei einem solchen 
Vorgehen vermag man nie festzustellen, ob eine Zellform, besonders 
wenn es sich bei ihr um ein etwas außergewöhnliches Bild handelt, 
tatsächlich den im Leben vorhandenen Verhältnissen entspricht 
oder lediglich ein Kunsterzeugnis ist. Finden sich dagegen die 
nämlichen Bilder bei Anwendung der verschiedensten Konser- 
vierungsmittel, die teils mehr quellende, teils mehr schrumpfende 
Wirkung besitzen, dann läßt sich wohl mit ziemlicher Sicherheit 
annehmen, daß wir es mit tatsächlich vorhandenen Bildungen zu 
tun haben, besonders wenn sie in gleicher Weise durch verschieden 
wirkende Agentien erhalten werden. 

Als hauptsächlichste Fixierungsmittel kamen in Anwendung: 

l. konzentrierte wässerige Sublimatlösung, mit einem Zusatz 
von 5% Eisessig. Mit diesem Gemisch erzielte ich durchwegs die 
besten Ergebnisse; es dringt rasch und sehr tief ein, Kern und Pro- 
toplasma werden gleich gut ‘erhalten, auch lassen sich bei vor- 
sichtiger Ueberführung in stärkeren Alkohol und gründlicher Jo- 
dierung im Stück, alle Schrumpfungsvorgänge vermeiden. Weiter- 
hin können die meisten Färbungen an den so behandelten Stücken 
gut ausgeführt werden. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 153 


2. Konzentrierte alkoholische Sublimatlösung. Sie erzeugt 
stärkere Schrumpfungen als die vorige, besonders im Protoplasma, 
liefert aber im großen und ganzen sehr brauchbare Bilder und eignet 
sich besonders gut zur Darstellung der Kernstruktu‘en. 

3. Carnoy’sches Gemisch. (Alkohol 60%, Chloroform 30%, 
Eisessig 10%) lieferte ebenfalls recht brauchbare Ergebnisse, be- 
sonders was die Kernstruktur anbelangt. Das Plasma erscheint 
dagegen meist schlecht erhalten, häufig stark zerrissen, die Sphäre 
kaum darstellbar. 

4. Pikrinsäure-Sublimat in dem von Rabl angegebenen 
gegenseitigen Mengenverhältnis. Es fixiert im allgemeinen gut, 
sowohl Kern als auch Plasmastrukturen, erschwert jedoch eine 
ganze Reihe von Färbungen, bzw. macht sie unmöglich, so besonders 
die Dreifachfärbung nach Flemming und dienach Ehrlich- 
Biondi-Heidenhain. Da das Gemisch außerdem nicht 
die geringsten Vorzüge vor den unter 1—3 aufgeführten bietet, 
so läßt es sich leicht entbehren, besonders da die Weiterbehandlung 
der Schnitte bis zur unbedingt notwendigen völligen Entfernung 
der Pikrinsäure oft sehr lange Zeit in Anspruch nimmt. 

Bei allen den obengenannten Flüssigkeiten wurden die guten 
Ergebnisse nur bei kalter Anwendung erzielt, wenn also das Fi- 
xierungsmittel Zimmertemperatur besaß. Bei heißer Anwendung, 
also bei Temparaturen von 25--50 Grad und darüber, wie sie ja 
bei Warmblütern oft recht schöne Erfolge zeitigt, waren die Er- 
gebnisse durchweg wesentlich schlechter. Dies erklärt sich wohl 
daraus, daß die Gewebe des Olmes besonders wasserreich sind und 
deshalb durch die plötzliche Verbringung in heiße Flüssigkeiten 
zu stark irritiert werden, die Wasserabgabe ist eine sehr beträcht- 
liche und wahrscheinlich ungleichmäßige und dadurch erklären 
sich die mit diesem Verfahren erzeugten schweren Zerreißungen 
und Schrumpfungen. 

Weiterhin kam in Anwendung: 5. das Flemmingsche Gemisch, 
stark oder schwach, entweder bei Zimmerwärme oder aber bei einer 
Temperatur von 50 Grad. Die Ergebnisse die ich damit erzielte, 
waren durchweg schlecht. Gut fixiert erschienen lediglich die 
Kerne des Bindegewebes, auch der jüngsten Spermatogonien, außer; 
dem die reifen Spermatozoen. Bei jedem mit diesem Gemisch 
konserviertem größeren Gewebsstück lassen sich jedoch drei Zonen 
unterscheiden, eine äußerste von etwa % mm Dicke, in der jegliche 


154 H. Stieve: 


feinere Zellstruktur zerstört ist, die Spermatogonien scheinen in 
einem homogenen Syncytium zusammenzuliegen, ebenso die Sper- 
matocyten, ihre Kerne sind bläschenförmig, der Inhalt erscheint 
homogen, nur vereinzelte Chromatinbrocken oder während der 
Mitose die Chromosomen heben sich klar und scharf, fast wie Bak- 
terien von der übrigen Masse ab. Die nächst tiefere Schicht ist meist 
besser erhalten und zeigt größtenteils ganz ähnliche Verhältnisse 
wie bei Anwendung geeigneter Fixierungsflüssigkeiten, ihre Dicke 
ist verschieden, sie beträgt meist auch nur ein bis zwei Millimeter. 
Auf sie folgt dann wieder eine ganz schlecht erhaltene Schicht, 
deren Mächtigkeit sich nach der Größe der Gewebsstücke 
richtet. 

Offenbar wirkt in der oberflächlichsten Lage die Osmiumsäure 
zu heftig ein und es kommt deshalb zu einer vollkommenen Zer- 
störung aller feineren Gewebstrukturen. Auf diese Tatsache hat 
schon Flemming selbst (1895) aufmerksam gemacht, er zeigte 
„daß nämlich an damit (mit Chromosmium-Essigsäure) fixierten 
Stücken die Kerne in der Peripherie ein ganz anderes Aussehen haben, 
als im Inneren, in dem sie an ersterer Stelle nur die Nucleolen, an 
letzterer nur die Chromatingerüste deutlich zeigen“. Er führt diese 
Wirkung der Osmiumsäure auf feinste Ausfällungen zurück, welche 
das Chromatingerüst verdecken sollen und lehnt die schon von 
Rawitz (1895b) geäußerte Ansicht, es handle sich um eine 
vollständige Zerstörung der Kernstruktur, mit der Begründung 
ab, daß sich auch in den oberflächlichsten Schichten das Kerngerüst 
häufig noch darstellen lasse, so besonders bei Anwendung von Eisen- 
haematoxylin, nur nicht in der gleichen Deutlichkeit wie in den 
tieferen Schichten. Flemming‘ hält das Chromatingerüst 
der jüngsten Spermatogonien im Gegensatz zu demjenigen der 
Spermatocyten oder der Bindegewebszellen für zu zart, als daß es 
sich vermittels der Osmiumsäure darstellen ließe, glaubt vielmehr, 
daß es durch feinste, gleichmäßige Ausfällungen im Kernsaft ver- 
deckt wird. Eine solche Verdeckung wäre aber wohl nur rein mecha- 
nisch denkbar und das ist nach meiner Ansicht unmöglich, denn 
auf Schnitten müßten dann an einzelnen Stellen stets noch die 
Chromatin und Lininfäden zum Vorschein kommen. Außerdem lassen 
sich aber in den oberflächlichsten Schichten der Präparate die Kern- 
strukturen auch mittels der Eisenhaematoxylinmethode nicht 
sichtbar machen, sie sind vielmehr trotz ihrer an gut fixierten Stellen 


A 
% 
h 

N. 
4 

Zt. 
F 
$ 

A 
ve 

R. 
IR 

” 

% 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 155 


erkennbaren Stärke und Deutlichkeit vollkommen verschwunden 
und es liegt deshalb wohl der Gedanke nahe, daß es sich bei den 
vorgefundenen Bildern um eine chemische Zerstörung aller feineren 
Strukturen handelt, der nur die gröberen Klumpen und Brocken, 
gleichgültig ob dies nun Chromosomen, Nucleolen oder sonstige 
Einschlüsse im Kern und Protoplasma sind, widerstehen. 

Wie dem aber auch sei, wir müssen mit dieser Wirkung der 
Chromosmiümessigsäure rechnen und müssen sie aus diesem Grunde 
im. Gegensatz zu Jörgensen als ungeeignet zum 
Stadium ter. Teineren’ Kernstrukturen‘‘b.e- 
zeichnen. Damit soll jedoch keineswegs bestritten werden, 
daß. sie zu anderen Zwecken recht gute Dienste leisten kann, so 
besonders zur Anschaulichmachung der Fettsubstanzen und der 
Granula, wo sie durch kein anderes Mittel in geeigneter Weise er- 
setzt werden kann. Auch wenn es sich um die Feststellung der 
Zahl der Chromatinelemente während der Mitose handelt, ist sie 
recht gut zu verwerten, da sie alle anderen störenden Kernstruk- 
turen entfernt und lediglich die Chromosomen, kleiner als bei sonstigen 
Fixierungsmethoden, dafür aber um so schärfer von der Umgebung 
abgesetzt, zur Anschauung bringt. Aber nur in diesen beiden Fällen 
will ich ihrer Verwendung das Wort reden, im übrigen können alle 
an flemmingfixierten Präparaten gewonnenen Ergebnisse nur dann 
verwertet werden, wenn sie mit den an anders konservierten Orgenen 
erhob-nen Befunden übereinstimmen. 

Ebenso schlechte Erfahrungen machte ich mit allen anderen 
Fixierungsmitteln, die gleichfalls Osmiumsäure, gleichgültig in 
welcher Konzentration enthielten. Sie zeigten durchwegs die nämlichen 
Fehler wie das Flemmingsche Gemisch ohne irgendwelche Vorzüge 
zu bieten. Leidlichen Erhaltungszustand, der immerhin eine Ver- 
wertung zu diesen Untersuchungen zuließ, zeigten dagegen die 


- Hoden einiger Olme, die nach Eröffnung der Bauchhöhle ohne 


Herausnahme der Organe ganz in 96% Alkohol fixiert wurden. 
Sie boten ähnliche Bilder, wie die mit Carnoyschem Gemisch be- 
handelten Gewebsstücke. 

Die Weiterbehandlung nach der Fixierung war die gewöhnliche, 
die zur Darstellung der Fettmassen osmierten Stücke wurden der 
Anweisung Starkes (1895) entsprechend längere Zeit, bis zu 
48 Stunden in ganz schwachem Alkohol belassen und erst dann in 
höherprozentigen überführt. Die Einbettung erfolgte in Paraffin 


156 MH. Sti.eVve: 


von 52 Grad Schmelzpunkt und in vereinzelten Fällen zu Kontroll- 
zwecken in Celloidin, um festzustellen ob die bei der Paraffinein- 
bettung nötige Erwärmung sich irgendwie störend geltend machte. 
Da ein solcher Einfluß jedoch nicht festgestellt werden konnte, kam 
die Celloidineinbettung wegen der größeren Umständlichkeit nur 
selten zur Anwendung. Die Stücke wurden in Schnittserien von 
5—15u Dicke zerlegt und mittels Wassers aufgeklebt. Dabei ent- 
standen allerdings häufig leichte Zerreißungen, bedingt durch die 
ungleichmäßige Ausdehnung des Paraffins auf der Oberfläche des 
leicht erwärmten Wassers. Dieser Uebelstand kann durch gewöhn- 
liches Anheften der Schnitte mittels Eiweiß-Glycerins vermieden 
werden, er bietet jedoch keinerlei Nachteile bei der mikroskopischen 
Untersuchung, wo hingegen bei der Andrückungsmethode häufiger 
Falten und Unebenheiten entstehen, welche die Beobachtung nicht 
unwesentlich stören, ja sogar stellenweise unmöglich machen. 

Von Färbungen kam die Stückfärbung mit Boraxkarmin zur 
Anwendung, die sehr gute Ergebnisse lieferte, dann die Heiden- 
hainsche Eisenhämatoxylinmethode, mit der gleichfalls sehr klare 
und schöne Bilder erzielt wurden, sie bedurfte jedoch auch hier 
wegen der ihr anhaftenden Mängel der ständigen Nachprüfung 
an anders behandelten Objekten. 

Prächtige und besonders klare Bilder lieferte auch hier wieder 
die Dreifachfärbung nach Flemming, die in folgender Weise 
zur Anwendung gebracht wurde. Die Stücke wurden in Sublimat- 
eisessig fixiert und gründlich jodiert. Die Schnitte wurden in der 
gewöhnlichen Weise in Wasser überführt und kamen dann für 24 
Stunden in eine Safranin-Anilinlösung nach Babes. Durch An- 
wendung dieses Gemisches an Stelle der 1% Lösung in 50% Alkohol, 
wie Winiwarter und Sainmont (1912) sie vorschlagen, 
werden die in der Art des verweudeten Safranins begründeten 
Schwierigkeiten größtenteils ausgeschaltet. Nach kurzem Ab- 
spülen in Wasser kommen nun die Schnitte abermals für 24 Stunden 
in eine 1% wässerige Lösung von Gentianaviolett, werden hierauf 
in destilliertem Wasser mehrmals abgespült und gelangen dann 
für 15—30 Minuten in eine konzentrierte Lösung von Orange G. 
Hierauf erfolgt Abspülen in 50% Alkohol und dann Ueberführen 
in absoluten Alkohol, dem auf 100 ccm ein Tropfen einer 1% Salz- 
säurelösung zugesetzt ist. In’ ihm bleiben die Schnitte bis keine 
kräftigen Farbwolken mehr auftreten. Hierauf erfolgt die Ueber- 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 157 


führung in reinen absoluten Alkohol, der mehrmals rasch hinter- 
einander gewechselt werden muß, um alle etwa noch vorhandene 
Säure zu entfernen, dann in eine Mischung von’ gleichen Teilen 
Alkohol und Nelkenöl, in der die unter dem Mikroskop zu beob- 
achtende Differenzierung erfolgt. Schließlich Uebertragung in reines 


Nelkenöl, Xylol und Einbetten in vollkommen säurefreien Balsam. 


Im großen und ganzen erfolgt die Färbung ähnlich, wie sie Wini- 
warter und Sainmont (1912) angeben, nur mit einigen 


“ Abänderungen. Sie ist ziemlich umständlich, jedoch nicht schwer 


Rn WERE ah Vap e D AR ER pe 
Pr BTL 7 ER 
RAN, 


auszuführen und liefert bei gutem Gelingen sehr schöne Bilder. 
Dann besitzt sie noch den Vorteil, daß sie eigentlich nicht völlig 
mißglücken kann, die gezeitigten Ergebnisse sind vielmehr stets 
so, daß alle Kernstrukturen klar und deutlich zutage treten, nur 
überwiegt bald mehr das Safranin, bald das Gentianaviolett und 
dementsprechend erscheinen die Chromosomen bei gutem Ausfall 
der Färbung, leuchtend rot, sonst violett. Was die Haltbarkeit 
betrifft, so kann ich mir ein abschließendes Urteil immer noch’nicht 
erlauben, Präparate die vor nunmehr 18 Monaten angefertigt wurden, 
zeigen die Farben noch in der ursprünglichen Frische, es scheint aber, 
daß bei längerer Aufbewahrung,‘ besonders wenn die Präparate 
stark dem Licht ausgesetzt waren und besonders dann, wenn nicht 
ganz einwandfreies: Xylol oder Balsam verwendet wurde, doch ein 
Abblassen erfolgt. Dies darf jedoch kein Grund sein, die sonst so 
schöne und brauchbare Färbung, deren Ergebnisse aus Tafel 1 zu 
ersehen sind, als ungeeignet zu bezeichnen. 

Wie schon erwähnt, wendete ich die Methode stets nach Fi- 
xierung mit Sublimateisessig an, ohne die Präparate, wie diese 
Winiwarter und Sainmont vorschreiben, noch in Chrom- 
osmium-Essigsäure zu bringen. Ein schlechterer Ausfall gegen- 
über Flemming-fixierten Stücken Konnte dabei nicht festgestellt 
werden, im Gegenteil, so wurde die schädliche Einwirkung der 
Osmiumsäure, die sich selbst noch nach vorheriger anderweitiger 
Fixierung geltend macht,‘ selbstverständlich ausgeschaltet. 

Außerdem kamen noch zahlreiche Doppelfärbungen zur An- 
wendung, so besonders mit Safranin-Lichtgrün, dann die ver- 
schiedensten progressiven und regressiven Kernfärbemethoden und 
schließlich zur Darstellung der Nucleolen, noch die Dreifächfärbung 


‚nach Ehrlich-Biondi-Heidenhain. Sie lieferten durchwegs klare und 


schöne Bilder, was wohl in der beträchtlichen Größe der einzelnen 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 11 


158 H. Stieve: 


Zellelemente seine Begründung hat, die alle Unterschiede deutlich 
hervortreten läßt. 

In dieser Hinsicht rechtfertigte der Olm also alle Hoffnungen, 
die ich in ihn gesetzt hatte, denn er übertrifft an Klarheit der Zell- 
bilder wohl jedes andere Objekt. Die Größe der einzelnen Elemente, 
besonders im Hoden, ist ja nicht sehr viel beträchtlicher als bei 
Salamandra maculosa, jedoch wird die Uebersichtlichkeit wesent- 
lich erhöht durch die geringe Zahl von Chromosomen. Diese beträgt 
nämlich nur 18, im Gegensatz zu 24 beim Feuersalamander (Meves 
1897). Allerdings stößt die Feststellung dieser Zahl oft auf recht er- 
hebliche Schwierigkeiten, die gerade in der beträchtlichen Größe 
der Zellen und Chromosomen begründet sind. Nur in Ausnahme- 
fällen, d. h. bei der Polansicht der Spindel in der Aequatorialplatte, 
liegen alle Chromosomen auf einem Schnitt von 10—15 u Dicke 
vereinigt und lassen so eine einwandfreie Zählung ohne weiteres 
zu. Meist mußte aber, da die Untersuchung dickerer Schnitte aus 
rein technischen Gründen nicht gut durchführbar war und die 
Chromatingebilde einer Zelle deshalb fast stets auf mehrere Schnitte 
verteilt lagen, zur Ermittlung der Zahl das Rekonstruktionsver- 
fahren angewendet werden. Es wurden von der nämlichen Zelle 3—6, 
häufig auch noch mehr Skizzen, in verschiedenen Einstellungs- 
ebenen auf Pauspapier angefertigt. Durch Aufeinanderlegen dieser 
Zeichnungen gelang es dann meistens die gewünschte Klarheit 
zu erhalten und nur selten blieben undeutliche oder zweifelhafte 
Stellen übrig, welche die Beurteilung erschwerten. 

In einem Punkte aber zeichnet sich der Olmhoden grundlegend 
vor allen anderen ähnlichen, wenigstens mir bekannten Objekten 
aus, nämlich in der Klarheit der Aufeinanderfolge der einzelnen 
Entwicklungsstadien. Im reifen- Hoden finden sich nämlich im 
einen Pol noch Spermatogonien, zum Teil in Teilung begriffen, im 
entgegengesetzten Pol aber reife Spermatozoen. Dazwischen liegen 
nun in den Ampullen und Cysten alle Uebergänge, welche die beiden 
Stadien miteinander verbinden und zwar in der Reihenfolge, wie 
sich die Spermatogenese abspielt. Man braucht daher nur den 
Hoden in der Richtung der „Entwicklungswelle‘ von einem Pol zum 
anderen unter dem Mikroskop zu verschieben und sieht so die 
ganze Spermatogenese sich abwickeln. Irgendwelche Zweifel 
über die Seriation der Bilder können nicht aufkommen, ab- 
gesehen vielleicht von den Stadien, welche zwischen den beiden 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 159 


Reifungsteilungen liegen, da sich hier die Vorgänge sehr rasch ab- 
spielen. Als Folge davon liegen hier nicht so viele Zellen vom gleichen 
Bau beieinander als in den übrigen Hodenpartien, in denen meist 
alle in einer Samenampulle vereinigten Gebilde sich im gleichen 
Entwicklungszustand befinden. Es können deshalb hier vielleicht 
manchmal leichte Bedenken über die Reihenfolge der Vorgänge 
auftauchen. Bei einiger Aufmerksamkeit und Erfahrung lassen 
sich jedoch auch an diesen Stellen Fehler leicht vermeiden und man 
kann deshalb ruhig sagen, daß der Olmhoden ein Objekt ist, an 
dem sich die Vorgänge der Spermatogenese in chronologischer 
Anordnung beobachten lassen, ähnlich wie vielleicht die letzten 
Vorgänge der Oogenese in den Eileitern mancher Tiere. Welch 
ungeheure Vorzüge gerade diese Tatsache bietet weiß jeder, der 
sich mit dem Studium der Samen- oder Eientwicklung irgendeiner 
Tierart eingehender beschäftigt hat. 


Der mikroskopische Bau des Hodens. 


Die Hoden der meisten untersuchten Olme befanden sich im 
Ruhezustand und unterschieden sich weder makroskopisch noch auch 
in Hinsicht auf den histologischen Bau wesentlich voneinander. Sie 
stellen 20—40 mm lange, etwa Imm dicke, fadenförmige, gelblich-weiße 
Gebilde dar, die beiderseits in der Bauchhöhle den kranialen Partien 
der Niere aufliegen. Eine Segmentierung oder sonstige Gliederung 
ist an ihnen nicht vorhanden, nur in ganz vereinzelten Fällen findet 
sich vor dem kranialen oder hinter dem kaudalen Pol noch ein 
kleiner 2—3 mm langer akzessorischer‘ Hoden, als Zeichen der ur- 
sprünglich metameren Anlage des Organes, der mit dem Haupt- 
hoden durch einen dünnen Bindegewebsstrang vereint ‚ist. 

Auf Schnitten ergibt sich folgendes Bild: Durch das ganze 
„Organ verläuft in der Längsrichtung eine kräftige Arterie, einge- 
bettet in lockeres Bindegewebe. Aus diesem setzt sich auch das 
ganze Interstitium des Hodens zusammen, seine einzelnen Elemente 
sind größtenteils lange, spindelförmige Zellen mit verhältnismäßig 
kleinem Kern, der sich in seiner Form dem umgebenden Gewebe 
anpaßt. Er erscheint bald längsoval, bald mehr drei- oder viereckig, 
in seltenen Fällen kreisrund. Das Bindegewebe ist sehr reich an 
Kapillaren und Lymphspalten, es umschließt das eigentliche Hoden- 


parenchym. Dieses besteht aus ovalen Ampullen. die mit ihrer 
11* 


160 H. Stieve: 


Längsachse senkrecht zur Längsachse des Hodens stehen, in ihnen 
finden sich die Spermatogonien nebst den zugehörigen Follikel- 
zellen. Auf die Einzelheiten im Bau der Spermatogonien werde 
ich erst später zu sprechen kommen, meist sind es große Gebilde 
von 25—35 u Durchmesser mit großem, kugelförmigen Kern, sehr 
häufig zeigen sie mehr oder weniger deutliche Anzeichen des Zer- 
falles. An einzelnen Stellen finden sich unter ihnen auch stets 
Bilder von Zellteilungen und zwar handelt es sich dabei ausschließlich 
um indirekte Mitosen. ! 
Die Follikelzellen sind in ihrer Form und in bezug auf die Färb- 
barkeit den Elementen des Bindegewebes ähnlich, der Protoplasma- 
leib ist meist sehr klein, zeigt netzige Struktur und bei Sublimat- 
eisessig-Fixierung Keinerlei Einlagerungen. Bei Flemmingfixierung 


findet man in ihnen fast stets vereinzelte größere oder ganze Haufen 


von kleineren Körnchen, die durch die Osmiumsäure geschwärzt 
sind, also Fett oder fettähnliche Substanzen darstellen. Der Kern 
ist groß, bald längsoval, bald mehr halbmondförmig oder dreieckig 
gestaltet. Die Follikelzellen passen sich in ihrer Form ganz dem 
umliegenden Gewebe an und schmiegen sich den einzelnen Sperma- 
togonien, die sie umkleiden eng an, drängen sich auch wohl an ver- 
schiedenen Stellen zwischen zwei sehr naheliegenden Samenzellen 
und nehmen dabei die verschiedensten Gestalten an. Der Kern 
zeigt sehr deutliches Chromatingerüst, klaren Kernsaft und keinerlei 
Einlagerungen von Nucleolen oder ähnlichen Gebilden. Er ist in 
Hinsicht auf seine Struktur nicht von den Kernen der jüngsten 
Spermatogonien zu unterscheiden und es gelingt auch nicht festzu- 
stellen ob beide einer einzigen Gewebsart entstammen. Diese Frage 
ließe sich nur an embryonalem Material entscheiden. Jeder Sper- 
matogonie sind drei bis vier Follikelzellen angelagert. 

Wie schon erwähnt, finden sich unter den Spermatogonien 
stets einzelne, welche sich mitotisch teilen. Direkte Teilungen 
konnte ich nirgends beobachten, dagegen zahlreiche Spermatogonien 
mit gelappten, seltener ring- und hantelförmig gestalteten Kernen. 
Diese tragen meistens mehr ‚oder weniger deutliche Zeichen des 
Zerfalles an sich. Ich halte deshalb alle diese Zellbilder im Gegen- 
satz zu Meves für regressive Formen, will jedoch hier nicht 
näher auf sie eingehen, da ich erst in einer späteren Arbeit die physio- 
logischen Rückbildungsvorgänge, die sich im Olmhoden nachweisen 
lassen, ausführlich schildern will. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 161 


Der Ausfall, der durch dieses ständige Zugrundegehen von 
Spermatogonien erzeugt wird, ist offenbar ein sehr kleiner, da der 
ganze Vorgang der Rückbildung sehr lange Zeit beansprucht und 
sich wohl über Monate, vielleicht über Jahre erstreckt. Er wird 
ausgeglichen durch die dauernd stattfindende Vermehrung, welche 
ihren Ausdruck findet in den in jedem Hoden vorhandenen Bildern 
der indirekten Zellteilung. Diese finden sich nur sehr vereinzelt 
im ganzen Organ zerstreut und betreffen niemals alle in einer Am- 
pulle liegenden Spermatogonien, geschweige denn ganze Bezirke 
des Hodens. 

Eine Massenvermehrung der Spermatogonien erfolgt erst, wenn 
die eigentliche Geschlechtsperiode beginnt. Bis dahin wird jede 
Spermatogonie von mehreren Follikelzellen umgeben. Nunmehr 
findet man jedoch alle Spermatogonien eines Hodenabschnittes 
in Teilung begriffen und mehrere Elemente im gleichen Stadium 
der Mitose zu einer Cyste vereinigt gemeinsam von Follikelzellen _ 
umgeben. Der Inhalt einer Cyste stammt also stets von einer einzigen 
Spermatogonie ab, ihre Vermehrung geht sozusagen rythmisch 
vor sich. Sie beginnt gewöhnlich am kranialen Pole des Hodens, 
wie dies auch Meves (1897) und Nußbaum (1906) für ihre 
Objekte nachweisen konnten, schreitet von da aus über das ganze 
Organ fort und hat eine sehr beträchtliche Volumszunahme zur 
Folge, da sich die einzelnen Ampullen sehr beträchtlich erweitern 
und besonders verlängern. Die Follikelzellen nehmen an der Ver- 
mehrung nicht oder nur in ganz geringem Maße teil. Sie entfernen 
sich während der Vergrößerung der Cysten mit ihren Kernen mehr 
und mehr voneinander, während ihr Plasmaleib sich abplattet und 
stark in die Breite gezogen wird. So schließen sie lange Zeit hin- 
durch alle Cysten einer Ampulle vollkommen gegeneinander ab. 
Die Wand dieser letzteren besteht aus einer ziemlich dicken, äußerst 


blutgefäßreichen Bindegewebshülle, welche sie vom Stroma des 


Hodens deutlich abgrenzt. Diese Ampullen, oder besser gesagt 
Samensäckchen, bilden die eigentlichen Einheiten, aus denen sich 
jeder Hoden zusammensetzt. Sie liegen radiär gestellt, mit ihrer 
etwas breiteren Basis gegen die Oberfläche des Organes zu und 
ziehen sich gegen das bindegewebige Septum, in welchem die Haupt- 
arterie verläuft, spitz aus, um schließlich in einen Ausführungsgang 
auszumünden. Dieser selbst ist von einfachem Zylinderepithel 
ausgekleidet. Jede Ampulle besitzt ihren besonderen Ausführungs- 


162 H. Stieve: 


gang, von denen sich mehrere wieder zu sekundären Langen Veı- 
einigen. Die bindegewebige Hülle der Ampulle setzt sich unmittelbar 
in die Membrana propria der Ausführungsgänge fort. 


Durch die Massenvermehrung der Spermatogonien erfährt 
jede Spermatocyste eine sehr beträchtliche Vergrößerung, als deren 
Folge dann auch die ganzen Samensäckchen wesentlich erweitert 
werden. Die Cysten behalten dabei ihre kugelige Form stets mehr 
oder weniger deutlich, sie verschieben sich jedoch in ihrer gegenseiti- 
gen Lage nach der Stelle des geringsten Druckes, also der Oberfläche 
des Hodens zu. Als Folge dieses Vorgangs werden die Ampullen 
in radiärer Richtung sehr beträchtlich erweitert, viel stärker als 
in querer Richtung. Sie verlieren dabei ihre ursprüngliche ovale 
Gestalt und stellen schließlich radiär gestellte, lange kegelförmige 
Gebilde mit peripherer Basis und zentraler in den Ausführungsgang 
mündender Spitze dar. Auf ihrer Verlängerung beruht in erster 
Linie die wesentliche Verdickung, die der Hoden in der Brunst er- 
leidet. In den zentralsten Teilen der Samensäckchen, unmittelbar 
über der Einmündung in den Ausführungsgang finden sich stets, 
unabhängig vom Zustand des übrigen Ampulleninhaltes noch einige 
kleine Nester von großenteils in Degeneration begriffenen Sper- 
matogonien, umgeben von ihren Follikelzellen, die Restspermatogonien 
Nußbaums. Sonst ist zu Beginn der Brunst die ganze Ampulle 
ausgefüllt von Gruppen sich teilender Spermatogonien und von 
Spermatocyten (Abb. 1). 


Ob die Follikelzellen während dieses Vorganges gleichfalls 
eine Vermehrung erfahren oder nicht, vermag ich nicht mit Sicherheit 
anzugeben. Mitosen konnte ich nur ganz ausnahmsweise in ihnen 
nachweisen. Jedenfalls, wenn überhaupt eine solche Vermehrung, 
wie sie Nußbaum an seinen Präparaten feststellte, regelmäßig 
stattfindet, dann hält sie auf keinen Fall mit der der Spermatogonien 
gleichen Schritt, sondern bleibt weit hinter ihr zurück. Denn am 
Ende der Vermehrungsperiode enthält eine Cyste etwa 64 oder 
128 Spermatocyten, die von nur 4—6 Follikelzellen umgeben sind. 
Ein Kanal, der schließlich den reifen Spermatozoen als Ausführungs- 
gang dient, läßt sich innerhalb der Ampulle nicht nachweisen. 
Weite Lymphspalten zwischen den Cysten, die besonders während 
der Vermehrungsperiode deutlich erkennbar sind, zeigen jedoch 
den Weg, auf dem schließlich der Austritt erfolgt (Abb. 1). 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 163 


Auch das umgebende Bindegewebe erfährt in dieser Zeit der 
lebhaften Teilungen eine Veränderung, es wird durch die Vergröße- 
rung der Ampullen beträchtlich gedehnt. Dabei erweitern sich 
seine Lymphspalten und Blutgefäße sehr stark und sind deshalb 
deutlich darstellbar. Die ganze Oberfläche des Hodens ist nun von 
einem dichten, prall gefüllten Kapillarnetz überzogen, das sich in 
die Bindegewebssepten hinein fortsetzt. Die Zellen des Bindege- 
webes, welche den Ampullen unmittelbar anliegen, behalten während 
der ganzen Vermehrungsperiode ihr oben geschildertes Aussehen 
bei. Dagegen verändern sich die Follikelzellen in Hinsicht auf ihre 
Größe und ihren Bau ganz wesentlich. Ursprünglich zeigen sie 
zwar noch spindelförmige Gestalt und länglichen, über die Konvexität 
der Cyste gekrümmten Kern mit deutlich darstellbarem Liningerüst, 
an dessen Kreuzungstellen sich das Chromatin in groben Klumpen 
angehäuft hat. Der Protoplasmaleib ist oft ganz oder teilweise 
gefüllt mit kleinen, durch Osmiumsäure geschwärzten Granulis. 

Wenn die eigentliche Vermehrungsperiode der Samenzellen 
beendet ist, dann hat auch der Hoden seine endgültige Größe erlangt, 
entsprechend der häuptsächlich in radiärer Richtung erfolgenden 
Vergrößerung der Samenampullen hat er zwar wenig an Länge, 
wohl aber sehr erheblich an Dicke zugenommen, sein Durchmesser 
beträgt jetzt 5—6 mm, an einzelnen Stellen noch mehr. An der 
der hinteren Bauchwand zugekehrten Seite stülpt sich das Binde- 
gewebe hilusartig in den Hoden ein, hier befindet sich auch die 
Eintrittsstelle der Arterie und die Austrittsstelle der Samenkanälchen, 
es entsteht dadurch eine längsverlaufende, deutlich erkennbare 
Kerbe, die dem ganzen Gebilde ein dattelkernähnliches Aussehen 
verleiht. Der Inhalt der Ampullen besteht nunmehr aus Spermato- 
eyten, welche die Veränderungen der Spermatocytogenese und 
Spermatohistogenese zu durchlaufen haben. Das Bindegewebe 
der Septen hat sich nicht mehr verändert, es zeigt nur eine ganz un- 
geheure Menge von weiten Blutgefäßen, die strotzend gefüllt die 
Ampullen von allen Seiten umspülen und offenbar das zum Wachs- 
tum und zur Ernährung der Spermatocyten notwendige Material 
liefern. Innerhalb der Ampullen finden sich niemals Blutgefäße, 
sondern nur weite Lymphspalten. 

Jede Ampulle ist von einer einfachen, zusammenhängenden 
Schicht: von Bindegewebszellen umgeben. Diese haben langge- 
streckten, platten Kern und spindeligen Protoplasmaleib, sie liegen 


154 | H. Stieve: ns 


anfangs ziemlich dicht beieinander. Während der Erweiterung: der 
Ampulle rücken sie dann mehr und mehr auseinander und werden 
dabei immer stärker platt gedrückt, bis schließlich unmittelbar 
vor der Ausstoßung der Spermatozoen das ganze Samensäckchen 
nur von einer äußerst dünnen Schicht platter Zellen umgeben ist, 
die man zum Unterschied von den Follikelzellen, Ampullenzellen 
nennen kann. Im Verlaufe der Spermatogenese wird der anfänglich 
recht geringe Unterschied im Bau zwischen diesen beiden immer 
deutlicher, am sinnfälligsten ist er gegen das Ende der Samenent- 
wicklung (Abb. 2). Alsdann liegen die ursprünglich aus einer 
Cyste hervorgegangenen Spermatozoen zu einem Bündel vereinigt 
zwischen den Cystenzellen. Diese haben eine wesentliche Volums- 
vermehrung erfahren, die in erster Linie ihr Plasma, jedoch auch 
den Kern betrifft. Er erscheint jetzt bläschenförmig, rund oder 
oval, bald auch unregelmäßig höckerig, ja sogar gelappt oder gezackt, 
besitzt eine deutliche Membran und sehr deutliches Chromatin- 
gerüst vom gleichen Bau wie früher, der Kernsaft ist klar, Nucleolen 
sind nicht nachweisbar. Bei Dreifachfärbung nach Flemming 
erscheinen die Kernstrukturen violett. Weit erheblicher als die 
Veränderungen, welche sich am Kern geltend machen, sind diejenigen, 
die am Plasmaleib der Cystenzellen in Erscheinung treten. An 
ihnen fällt zunächst auf, daß keinerlei Grenzen zwischen den innerhalb 
einer Ampulle liegenden Cystenzellen mehr erkennbar sind, diese 
stellen vielmehr für jedes Samensäckchen ein einziges großes Syncy- 
tium dar, das die Gruppen von Spermatocyten oder Spermatozoen 
allseitig umgibt. Das Protoplasma zeigt sehr deutlich darstellbare 
netzige Struktur, die Maschen des Netzes sind sehr weit, seine Fäden 
bald dicker bald dünner, oft auf weite Strecken und über den Bezirk 
mehrerer Kerne zu verfolgen. Sie erscheinen bei Dreifachfärbung 
leuchtend gelb (Abb. 2). Die oben beschriebenen Einlagerungen 
osmierter Granula füllen jetzt nie mehr so wie früher den ganzen 
Leib der Cystenzellen aus, sondern finden sich nur noch an wenigen 
Stellen zu größeren oder kleineren Gruppen vereint, meistens ziemlich 
unmittelbar an der Oberfläche der Ampullen gelegen. 

Offenbar erfolgt die Ernährung der Spermien durch Vermitte- 
lung der Cystenzellen, wie auch häufig aus der typischen Lagerung 
der Spermatozoenbündel zu einzelnen von ihnen hervorgeht, die 
mit den Köpfen gegen die Cystenzellenkerne zu gelegen sind, eine Er- 
scheinung auf die schon Nußbaum aufmerksam gemacht hat. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 165 


Dieser Tatsache sind wohl auch die großen Veränderungen zuzu- 
schreiben, welche die Cystenzellen durchlaufen. Die Nahrungsstoffe 
selbst stammen aus den weiten, großen Blutgefäßen, welche die 
Ampullen allenthalben umspülen. Ob die erwähnten Granula aber 
Nahrungstoffe oder Abscheidungsprodukte sind, läßt sich nicht 
entscheiden, wahrscheinlich ist allerdings das letztere, wie auch 
aus den folgenden Beschreibungen hervorgeht. 

Nach Ausstoßung der Spermatozoen bieten die Ampullen 
nämlich ein völlig verändertes Bild. Die Entleerung der Spermien 
erfolgt wohl durch aktive Bewegung, durch sie werden zunächst 
die Fäden der Cystenzellen zerrissen und so der Weg zu den Aus- 
führungsgängen frei gemacht. Wahrscheinlich werden alle in einer 
Ampulle enthaltenen Samenpakete auf einmal oder doch kurz 
nacheinander abgegeben, die dadurch hervorgerufene Volumsver- 
ringerung ist also eine recht beträchtliche. Dementsprechend zeigt 
die Ampulle jetzt auf dem Schnitt auch ein völlig verändertes Aussehen 
(Abb. 3). Das umgebende Bindegewebe ist sehr locker und reich 
an weiten Lymphspalten, die Ampullenzellen dicker und kürzer, 
nicht mehr so platt gedrückt wie früher. Die Blutgefäße sind größten- 
teils wieder eng und enthalten dementsprechend nurmehr weniger 
Blut. Die Ampullen selbst sind geschrumpft, sie umgeben das ganze 
Säckchen als lockeres Netz, ihre einzelnen Elemente zeigen zunächst 
noch denselben Bau wie früher, kleinen, platten Kern und kleinen 
Protoplasmaleib. In ihm treten jetzt vereinzelte Granula auf, die 
während der starken Erweiterung der Samensäckchen und der 
dadurch bedingten Abplattung seiner Umhüllung nicht nachweisbar 
waren (Abb. 5). In der Folgezeit schrumpfen die Ampullenzellen 
dann rasch zusammen und verändern dabei ihre Gestalt, bis sie 
wieder die gewöhnliche Form der Bindegewebszellen besitzen, d. h. 
sich ganz dem ihrer Ausbreitung zur Verfügung stehenden Raum 


anpassen. 


Der Kern der Cystenzellen behält zwar zunächst den gleichen 
Bau wie früher bei und zeigt keinerlei Abänderung in bezug auf 
seine Gestalt, dagegen bietet der Protoplasmaleib ein völlig anderes 
Aussehen. Die Maschen des Netzwerkes sind zerrissen und liegen 
als kurze, unregelmäßige Fäden oder körnige Gebilde im Proto- 


plasma zerstreut. Später erfahren diese Reste des Netzwerkes 


einen vollkommenen körnigen Zerfall und dann erscheint der Zelleib 
von feinen, zum Teil ziemlich großen Granulis ausgefüllt, welche 


Bar Bra Pine ae 1 


166 H. Stieve: 


sich bei Dreifachfärbung nach Flemming, ebenso wie früher 
das Netzwerk selbst leuchtend gelb darstellen. Sehr deutlich treten 
jetzt wieder die Grenzen der einzelnen Zellen hervor, sie erscheinen 
fast plötzlich unmittelbar nach der Ausstoßung der Spermatozoen. 
Bei Fixationen mit Sublimateisessig (Abb. 3 und 4) ist der Zelleib 
mehr oder weniger vollgepfropft mit einer körnigen, krümeligen 
Masse, deren einzelne Brocken recht erhebliche Größe besitzen, 
ja selbst die der Kerne übertreffen können. Dazwischen finden 
sich vereinzelte Vakuolen und Hohlräume, deren Zahl um so mehr 
zunimmt, je stärker sich die Zelle in der Folgezeit verkleinert. Meist 
liegen auch jetzt noch ganz vereinzelte Spermatozoen in den Leibern 
der Cystenzellen (Abb. 3), sie sind mehr oder weniger knäuelförmig 
zusammengerollt und werden in der Folgezeit langsam resorbiert. 
Zuerst verschwindet der Schwanz, dann verliert der Kopf seine 
Färbbarkeit, er rollt sich mehr und mehr zusammen und bildet 
schließlich nurmehr einen kleinen, blassen Fadenknäuel, um endlich 
ganz aufgelöst zu werden. 

Bei Osmiumsäurefixierung bieten die Ampullen bis zur Aus- 
stoßung der Spermatozoen das nämliche Bild wie bei anderen Kon- 
servierungsmethoden, Granula finden sich nur, wieschon erwähnt, 
ganz vereinzelt, meist in kleinen Gruppen in der Nähe der Cysten- 
kerne oder im Bindegewebe der Septen. Nadh erfolgter Abgabe 
der Samenpakete ändert sich jedoch auch dies Bild in kurzer Zeit. 
Das Bindegewebe selbst wechselt zwar sein Aussehen nicht wesent- 
lich, in ihm finden sich auch jetzt nur ganz vereinzelte osmierte 
Granula (Fetttröpfchen ?) eingelagert, dagegen erscheint der Inhalt 
der sich rückbildenden Cysten geradezu von osmierten Körnern 
überfüllt. Die ganzen Protoplasmaleiber der Cystenzellen sind 
vollgepfropft mit größeren und kleineren derartigen Granulis, sie 
können sehr beträchtliche Ausdehnung erlangen und einen Durch- 
messer von 40—60 u besitzen, doch schwankt ihre Größe sehr be- 
trächtlich, es finden sich auch ganz kleine Tröpfchen, die gerade 
an der Grenze der Darstellbarkeit liegen. Offenbar kommt bei 
anderen Fixierungsmethoden nur ein Teil von ihnen zur Dar- 
stellung und läßt deshalb die gelben Granula und die Vakuolen- 
bildung erscheinen. Mit zunehmender Rückbildung nimmt ihre 
Masse progressiv und im indirekten Verhältnis zum Volumen 
der Ampulle zu, die einzelnen Tröpfchen fließen zusammen und 
oft besteht dann der ganze Inhalt einer Cyste fast ausschließlich 


„u Jana 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 167 


aus osmierten Körnern, zwischen denen nurmehr ganz vereinzelte 
Kerne zu erkennen sind. Aus dem Verhalten der Osmiumsäure 
gegenüber dürfen wir wohl schließen, daß die betreffenden Körner 
Fett oder fettähnliche Substanzen sind. Die Rückbildung der 
Ampullen verläuft also unter dem Bilde der fettigen Degeneration, 
sie schreitet von der Oberfläche des Hodens nach der Tiefe zu fort. 
Auf dem Grunde, d. h. in demjenigen Teil der Säckchen, der am 
zentralsten gelegen ist, finden sich aber stets einige Restspermatogo- 
nien, die das nämliche Bild zeigen, wie in den Ruhehoden, unter 
ihnen liegen auch immer vereinzelte Kernteilungsfiguren. 

Der regressive Prozeß in den peripheren Teilen der Ampullen 
schreitet mehr und mehr fort, er betrifft bald, wie sich auf Schnitten, 
auf denen die Fettmassen nicht zur Darstellung gebracht sind, deut- 
lich erkennen läßt (Abb. 3, 4), nicht nur die Protoplasmaleiber der 
Cystenzellen, sondern bei einzelnen von ihnen auch den Kern. Dieser 
verliert nach und nach seine Färbbarkeit, sein Gerüst wird undeut- 
lich und besitzt bald keinerlei Affinität mehr zu spezifischen Kern- 
farben. Bei Dreifachfärbung nach Flemming erscheinen solche 
Kerne jetzt ebenso wie die Granula leuchtend gelb (Abb. 3), sie 
setzen sich noch deutlich von der Umgebung ab, denn ihre äußere 
Form ist mehr oder weniger vollkommen erhalten geblieben, nur 
zeigen sie wachsähnliches Aussehen. Häufig finden sich auch jetzt 
noch zugrundegehende Spermatozoen. Nach und nach verschwin- 
den auch noch diese Kernleichen, alle Cystenzellen zerfallen, das 
Fett wird resorbiert und schließlich zeigt die ganze Ampulle wieder 
in Form, Größe und Aussehen das nämliche Bild wie vor Beginn 
der Geschlechtsperiode. Der Hoden hat nun wieder seinen Ruhe- 
zustand erlangt und besitzt in allen seinen Teilen das früher be- 
schriebene, für diesen Zustand bezeichnende Aussehen. 

Gleich nach der Ausstoßung der Spermatozoen und noch 
während der ganzen Rückbildungszeit bis zum Ruhezustand erinnert 


die Ampulle sowohl makroskopisch, wo sie leuchtend gelb erscheint, 


als auch im mikroskopischen Bild lebhaft an ein Corpus luteum, 
eine Tatsache auf die gleichfalls schon Nußbaum (1906) auf- 
merksam gemacht hat. Diese morphologische Aehnlichkeit berech- 
tigt jedoch nicht dazu bei so verschiedenen Gebilden ohne weiteres 
Rückschlüsse auf eine gleiche oder ähnliche Funktion zu ziehen. 
Solche wären nur erlaubt, wenn die beiden in Frage stehenden Ge- 
bilde durch mechanische Inanspruchnahme entstehen würden. Denn 


TED ar 


168 H. Stieve: 


nur in diesem Falle ist ein Rückschluß aus dem Bau auf die Funk- 
tion eines Organes erlaubt. 

Die Befunde welche ich an zwei der gefangenen Tiere erheben 
konnte, leider ist das Material ja gerade für diese Untersuchungen 
sehr klein, lassen jedoch erkennen, daß der Hoden sich nicht immer 


bis auf den Ruhezustand zurückbilden muß, daß vielmehr in ver- _ 


einzelten Fällen eine erneute Vermehrungsperiode beginnen kann, 
noch bevor die Rückbildung der Ampullen ganz vollendet ist. Man 
findet dann Samensäck- 
chen, in deren Grund eine 
starke Vermehrung der 
Spermatogonien statt hat, 
in deren Peripherie sich 
aber noch Rückbildungs- 
vorgänge abspielen. Manch- 
mal liegen auch zwischen 
den mit. Granulis vollge- 
pfropften Cystenzellen ver- 
einzelte Spermatogonien, 
die sich teilen aber unter 
den ungewöhnlichen Lage- 
rungs- und Ernährungsver- 
hältnissen nicht zur nor- 
malen Entwicklung kom- 
men. Es tritt dann eine 
Verschmelzung der Kerne 
bei mehreren von ihnen 
ein, die zur Entstehung 
wahrer Zellriesen von 60 
bis 80 jasogar 100u Durch- 
messer führen kann, (Text- 
abbildung 1.) Derartige Bildungen erinnern oft entfernt an junge 
Oocyten, sie haben jedoch mit diesen Gebilden nicht das Geringste 
gemein, wie ihre Entstehung durch Verschmelzung mehrerer Sper- 
matocytenkerne beweist. Ihre Lebensdauer ist auch keine lange, 
bald verfallen sie dem Untergange und werden mit dem übrigen 
Inhalt der Ampulle zurückgebildet. 

Dies sind kurz beschrieben die Vorgänge, welche sich im Hoden 
des Olmes während, vor und nach der Fortpflanzungszeit abspielen, 


Textabb. 1. Vergr. Zeiß Horm. Im. 2mm 
Comp. Oc. 8. 


N NN RE NE ARE 


a ne Ya ie Re 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 169 


soweit sie sich an meinem Material beobachten lassen. Der Olm- 
hoden besitzt also gleich dem anderer Urodelen keine Kanälchen, 
sondern Ampullen oder besser gesagt Samensäckchen, in denen die 
einzelnen Cysten gelegen sind. Was die angewendete Nomenklatur 
betrifft, so habe ich mich vollkommen an Nußbaum (1906) 
angeschlossen, da die von ihm geprägten Ausdrücke die Verhältnisse 
am klarsten treffen. Besonders die Bezeichnung Restspermato- 
gonien für die wenigen am Grunde einer Amyulle stets noch auf- 
findbaren Samenzellen verdient weitere Anwendung, als dies bisher 
geschehen ist. An Stelle der Bezeichnung Ampulle habe ich meistens 
den Ausdruck Samensäckchen angewendet. 

Was die Follikelzellen betrifft, so werde ich auf sie in dieser 
Arbeit nicht mehr zurückkommen. Ueber ihre Herkunft kann ich 
keine sicheren Angaben machen, mir erscheint jedoch ihre Ent- 
stehung aus dem ursprünglichen Keimepithel wahrscheinlicher als 
die Annahme, daß sie umgewandelte Bindegewebszellen darstellen. 
Sie umgeben die Cysten und schließen sie vollständig gegeneinander 
ab, genau so wie anfangs die einzelnen Spermatogonien. Wenn 
Levy angibt (1915), daß bei der Vergrößerung der Spermatocysten 
die Cystenzellen so weit auseinander gedrängt werden, daß ihr 
gegenseitiger Zusammenhang verloren geht, so kann ich dies für 
Proteus nicht bestätigen. Mit den Zwischenzellen im Hoden höherer 
Tiere lassen sie sich nicht vergleichen, eher noch mit den sertolischen 
Zellen. Am meisten erinnern sie, sowohl in bezug auf ihren Bau, 
als besonders in Hinsicht auf ihr Verhalten nach der Ausstoßung 
der Spermatozoen an die Follikelzellen in den Ovarien höherer 
Tiere. Wie diese bilden sie nach der Entfernung der eigentlichen 
Keimdrüsenprodukte einen sehr fettreichen Körper, der makrosko- 
pisch gelblich erscheint und sich rasch zurückbildet. Allerdings 
findet bei den Follikelzellen im Hoden nach Ausstoßung der Sper- 
matozoenbündel keine Vermehrung statt, wie bei den Follikelzellen 
in den Ovarien, im Gegenteil von diesem Augenblick an beginnt 
ihre Degeneration, die zur völligen Rückbildung der Ampulle führt. 
Ueber die Vermehrung der Follikelzellen konnte ich an meinen 
Präparaten auch keinen sicheren Aufschluß erhalten. 


170 H. Stieve: 


Die Spermatocytogenese. 


Diegroßen Spermatogonien. 


Bei der Mehrzahl der untersuchten Tiere befand sich der Hoden 
im Ruhezustand, wie schon sein makroskopisches Aussehen deut- 
lich erkennen ließ. Die vorgefundenen mikroskopischen Bilder 
waren dabei fast ganz gleich, ob nun die Hoden von ganz kleinen 
13 cm langen oder völlig ausgewachsenen 20—26 cm langen Tieren 
untersucht wurden. Offenbar haben Olme von 13 cm Gesamtlänge, 
mit die kleinsten die in meinen Besitz gelangten, ihre embryonale 
Entwicklung schon zum größten Teil hinter sich. Bei einem Tier, 
das zeitlebens einen larvenähnlichen Zustand bewahrt, ist es ja 
überhaupt schwer zu sagen, wann die eigentliche Entwicklungs- 
periode abgeschlossen ist und die Wachstumsperiode beginnt. Bei 
allen von mir untersuchten männlichen Olmen waren nach dem Zustand 
der Keimdrüsen zu schließen, die Entwicklungsvorgänge jedenfalls 
schon beendet. 

Der Ruhehoden besteht aus lockerem bindegewebigen Stroma, 
dessen Bau schon geschildert wurde, in ihm liegen die Ampullen 
und in diesen die Spermatocysten, gebildet von je einer einzigen 
Spermatogonie nebst mehreren Follikelzellen. In den tieferen Teilen 
des Hodens finden sich, bei jüngeren Tieren häufiger als bei älteren, 
die kleinsten Formen der Spermatogonien ganz vereinzelt und 
unregelmäßig verteilt im Stroma liegend. Meist schmiegen sie sich 
in ihrer Form der umgebenden Bindegewebslücke an und erscheinen 
deshalb spindelförmig, der Protoplasmaleib ist lang und sehr schmal, 
kaum 1—2 u breit, er zeigt feinste netzige Struktur, keinerlei Ein- 
lagerungen, die Sphäre und der Zentralkörper sind meist nicht 
auffindbar. Der Kern dieser kleinsten Spermatogonien besitzt eine 
Größe von etwa 10—15 u und übertrifft hierin die Kerne des Binde- 
gewebes nicht sehr wesentlich. Der Kernsaft ist klar, unstrukturiert 
und durchsetzt von einem sehr deutlichen Netzwerk, bestehend aus 
feinen Lininfäden !). An ihren Ueberkreuzungsstellen ist das Chromatin 
in groben, unregelmäßig geformten Klumpen und Brocken ange- 


1) Im Folgenden sind stets alle Substanzen im Kerninnern, welche 
sich mit sauren Farbstoffen tingieren als Linin bezeichnet. Genauer ein- 
gehen werde ich auf diesen Punkt erst bei der Beschreibung der Eient- 
wicklung. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 171 


sammelt. Die Kernmembran ist deutlich, Nucleolen finden sich bei 


' diesen kleinsten Formen (Abb. 7) niemals. Der Chromatinreichtum 


der Kerne erscheint sehr verschieden, je nach der angewendeten 
Fixierung und Färbung, er ist offenbar jedoch auch individuellen 
Schwankungen unterworfen. 

Bei anderrn, gleichfalls einzeln im Bindegewebe liegenden 
Spermatogonien ist der Bau etwas von dem eben geschilderten 


verschieden (Abb. 8). Der Kern erscheint hier rund, bläschen- 


förmig und zeigt im Inneren ähnliche Struktur wie bei den zuletzt 
geschilderten Formen. Meistens ist der Chromatinreichtum jedoch 
ein sehr beträchtlicher, so daß die einzelnen an den Kreuzungsstellen 
liegenden Brocken große, oft langgestreckte Klumpen bilden. Das 
Liningerüst ist deutlich erkennbar, ebenso die Kernmembran, 
Nucleolen finden sich auch hier niemals. Der Kerndurchmesser 
beträgt etwa 12 u. Wesentlich größer ist im Verhältnis der Proto- 
plasmaleib, er zeigt gleichfalls feine netzige Struktur, die Zone ist 
in ihm meist deutlich erkennbar, sie liegt als halbmondförmiges, fein 
gekörntes und scharf vom übrigen Plasma abgesetztes Gebilde dem 
Kerne an, in ihrer Mitte befindet sich das Centriol. Eine Zonen- 
membran oder Kapsel ist nicht darstellbar. 

Die beiden eben geschilderten Zellarten lassen sich bei genügend 
langem Suchen in fast allen Hoden nachweisen, jedoch nur äußerst 
selten und niemals in größerer Menge beieinanderliegend. Sie unter- 
scheiden sich deutlich von den Elementen des Bindegewebes. Da 
sich von ihnen alle Uebergänge bis zu der gewöhnlichen Form der 
Spermatogonien, die ja wesentlich größer sind, auffinden lassen, 
halte ich diese Zellen für die kleinsten Formen der Spermatogonien, 
eine Annahme zu der die Uebereinstimmung im Bau wohl berechtigt. 
Möglich wäre es allerdings auch, daß wir in ihnen die Zwischenzellen 
des Olmhodens zu erblicken haben, sonst lassen sich keinerlei Ge- 


- bilde nachweisen, welche mit diesen verglichen werden können. Be- 


sonders die zweite, in Abbildung 8 wiedergegebene Form ließe viel- 
leicht eine solche Annahme zu. Sicher entscheiden läßt sich jedoch 
diese Frage nicht. Falls aber die Zwischenzellen der Keimdrüsen 
höherer Tiere wirklich die hervorragende Bedeutung besitzen, die 
ihnen jetzt häufig als endokriner Drüse zugeschrieben wird, dann 
müßten wir auch bei Urodelen und niedrigen Tieren, bei denen die 
Geschlechtsunterschiede doch meist sehr deutlich ausgeprägt sind, 
bestimmt mit der Anwesenheit einer solchen Drüse rechnen und es 


172 H. Stieve: 


erschiene dann wohl möglich, daß die eben beschriebenen Gebilde 
Zwischenzellen darstellen. Für wahrscheinlich halte ich jedoch eine 
solche Annahme nicht. | | 

Nur ganz selten liegen die kleinsten Spermatogonien in Gruppen 
beieinander und bieten dann Bilder wie sie Abbildung 9 wiedergibt. In 
diesem Falle zeigen. die Kerne sehr mannigfaltige Formen, bald 
erscheinen sie rund, bald längsoval, bald dreieckig oder spindel- 


förmig. Stets ist der Kernsaft klar, die Kernmembran gut darstell- 
bar, das Kerngerüst besteht aus groben Lininfäden, ebenso erscheinen _ 


die Chromatinklumpen groß und grob, mit rauher höckeriger Ober- 


fläche. Das Protoplasma zeigt netzigen Bau, eine Sphäre ist nicht 


darstellbar. Allerdings habe ich wie auch bei den ganzen folgenden 
Untersuchungen diese Frage nur nebensächlich behandelt und stets 
das Hauptaugenmerk auf das Verhalten der Kernstrukturen gerichtet. 
Das Verhalten der Sphäre ist ja in der denkbar gründlichsten Weise 
von Meves (1897) bei der Spermatogenese von Salamandra 


maculosa beschrieben worden und ich werde es im folgenden nur 


erwähnen soweit es besondere Bedeutung für die Veränderungen 
der Kernbilder besitzt. Bei der Auswahl der Zellen, die den Abbil- 


dungen dieser Arbeit zugrundeliegen war auch niemals der Um- 
stand maßgebend, ob die Sphäre auf dem betreffenden Schnitt 


zu erkennen war, sondern lediglich der Zustand der Kerne. 

Was bei den gruppenweise beieinanderliegenden kleinen Sperma- 
togonien besonders auffällt, ist die Undeutlichkeit aller Zellgrenzen. 
Die Protoplasmaleiber gehen ohne gut erkennbare Absetzung in- 
einander über, die ganze Gruppe scheint also in diesem Zustand 
ein Syncytium zu bilden. Gegen das Bindegewebe zu ist die Ab- 
grenzung deutlicher, hier erscheint die netzige Struktur des Proto- 
plasma dichter als in den anderen Teilen des Zelleibs. Follikelzellen 
sind jetzt noch nicht vorhanden. Diese entstehen vielmehr erst 
später, entweder aus den Zellen des umgebenden Bindegewebes 
oder aber es entwickelt sich nur ein Teil dieser kleinsten Zellen zu 
wirklichen Spermatogonien, während sich ein anderer Teil zu Follikel- 
zellen umgestaltet. . Diese letztere Annahme hat sehr viel Wahr- 
 scheinlichkeit für sich, entscheiden läßt sie sich jedoch an meinem 
Material nicht, da ich keinerlei beweisende Bilder auffinden konnte. 
In diesem Zustand lassen die Spermatogonien sich gleich gut durch 
jede Art der Fixierung darstellen, auch bei Verwendung von Osmium- 
säure erscheint das Kerngerüst scharf und deutlich. Dieser Umstand 


are 


in; BE 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 173 


kann entweder in der Derbheit und Mächtigkeit der Chromatin- 
brocken und Lininfäden begründet sein oder auch darin, daß sich 
die betreffenden Zellen ausschließlich in den tieferen Lagen des 
Hodens vorfinden, also in den Schichten, die von der schädigenden 
Wirkung der Osmiumsäure mehr oder weniger verschont bleiben. 

Die Spermatogonien wachsen dann zu ihrer endgültigen Größe 
heran, sie zeigen während dieser Zeit den nämlichen cben geschilder- 
ten Bau (Abb. 10, 12, 13). Das Netzwerk im Kern erscheint, je 
nach der angewendeten Fixierung und Färbung bald feiner, bald 
gröber, auch zeigen die Chromatinklumpen verschiedene Größe. 
Im allgemeinen kann man aber sagen — dies ist auch deutlich bei 
einem Vergleich der Abbildung 10, 12, 13 zu erkennen — daß mit 
zunehmender Kerngröße sich auch die Chromatinklumpen, wenn 
zwar nur wenig vergrößern, an Zahl jedoch nicht vermehren, wäh- 
rend die Lininstränge nicht an Dicke zunehmen, also in größeren 
Zellen relativ dünner erscheinen. 

Nucleolen finden sich in den Spermatogonien nur ausnahms- 
weise. Sie können zwar durch die Heidenhainsche Hämato- 
xylinmethode vorgetäuscht werden, indem hier öfter ein kreisrunder 
Farbklecks mit glatter Oberfläche erkennbar ist (Abb. 12). Da 
diese Erscheinung jedoch ausschließlich bei dieser Färbung zu beob- 
achten ist, so müssen wir in ihr wohl eines der vielen Artefakte, 
welches die Heidenhainsche Methode liefert erblicken. Wir 
werden derartigen Kunsterzeugnissen im Verlaufe der Spermato- 
genese noch öfters begegnen. Sie beruhen stets darauf, daß mehrere 
kleine dicht beieinanderliegende feine Gebilde durch reichliche 
Anlagerung von Hämatoxylinniederschlägen zu einem einzigen 
großen, unstrukturierten, meist glattrandigen Klecks vereinigt wer- 
den. Mittels der Flemming-Färbung oder der Dreifachfärbung nach 
Ehrlich-Biondi-Heidenhain lassen sich derartige Fehler leicht ver- 


meiden, und durch sie sind Nucleolen in den Spermatogonien nur 


ganz ausnahmsweise nachweisbar. 

In diesem Falle (Abb. 11) sind sie meist in größerer Anzahl 
vorhanden, als kreisrunde scharf von der Umgebung abgesetzte 
Gebilde, mit ganz glatter Oberfläche. Sie sind von einem hellen, 
schmalen Hof umgeben, der keinerlei Struktur zeigt. Das Kern- 
gerüst unterscheidet sich in solchen Zellen meist auch von 
der gewöhnlich auffindbaren Form, es besteht nämlich aus dicken 


Balkenzügen, die sich häufig untereinander überkreuzen, zahlreiche 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 12 


174 H. Stieve: 


spindelige Verdickungen zeigen aber keine stärkere Chromatin- 
ansammlungen: an den Kreuzungspunkten erkennen lassen. Offen- 


bar haben wir in diesen Zellen irgendwelche außergewöhnlichen 


Formen zu erblicken, vielleicht handelt es sich um Rückbildungs- 
vorgänge, vielleicht auch um die sehr frühzeitige Ausbildung eines 
Monospirems, die mit Auftreten von Nucleolen einherginge. Bei 
der großen Seltenheit dieser Zellbilder konnte ich mir kein abschließen- 
des Urteil über sie bilden. 

Während des normalen Wachstums der Spermatogonien ver- 
größert sich gleichzeitig und gleichmäßig mit dem Kern der Proto- 
plasmaleib, auch er verändert jedoch seinen Bau nicht. Nur bilden 
sich die Zellgrenzen deutlich aus, was wohl auch darin seine Be 
gründung haben kann, daß sich nunmehr stets die umschließenden 
Follikelzellen nachweisen lassen. Jede Spermatogonie ist dann 
von zwei bis vier, seltener mehr, Cystenzellen umgeben. Nach Be- 
endigung des Wachstums besitzt der Kern der Spermatogonien, 
der nunmehr stets kugelrund mit deutlich darstellbarer Membran 
erscheint (Abb. 13) einen Durchmesser von 20—22 u, der Zelleib 
einen solchen von etwa 30 u. In Ausnahmefällen kann der Plasma- 
leib einen größeren Durchmesser, bis zu 40 u aufweisen, es handelt 
sich dann wohl meist um Zellen die unmittelbar vor der Teilung 
stehen. 

Spermatogonien von der eben beschriebenen Form und Größe 
finden sich in allen Ruhehoden in größerer Menge, ebenso auch 
als Restspermatogonien in den tiefsten Teilen der Samensäckchen 
während der Fortpflanzungsperiode. Sie zeigen den geschilderten 
Bau jedoch nur bei geeigneter Fixierung mit Flüssigkeiten, die keiner- 
lei Osmiumsäure enthalten. Bei Flemmingfixierung bieten die 
Spermatogonien ein ganz anderes Bild. In den obersten Schichten 
des Hodens zeigt dann der Kern ganz gleichmäßig homogenes Aus- 
sehen, er färbt sich bei der Heidenhainschen Hämatoxylinmethode 
gleichmäßig hellgrau, nur ganz vereinzelte Chromatinbrocken nehmen 
die Farbe an und liegen als grobe, bald unregelmäßig längliche, 
bald runde Gebilde mit scharfer, glatter Oberfläche im homogenen 
Kernsaft. Bei Safranin-Lichtgrünfärbung erscheint der Kern solcher 


Zellen ganz gleichmäßig hellgrün, die in ihm liegenden Klumpen 


leuchtend rot, bei Dreifachfärbung aber braungelblich, die Klumpen 
violett. Wenn sich das Monospirem zu bilden beginnt so erkennt 
man auch bei Kernen, die mit Osmiumsäure fixiert sind meist die 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 175 


Struktur besser, sie erscheint von einem feinen, undeutlichen Ge- 
rinnsel gebildet und an zahlreichen Stellen, je nach der Ausbildung 
des betreffenden Stadiums, findet sich das Chromatin in längs- 
gestreckten Klumpen angeordnet. Häufig finden sich auch hier 
einige größere nucleolenartige Gebilde, die jedoch durch das fär- 
berische Verhalten zweifellos ihre Chromatinnatur beweisen 
(Abb. 14, 15). 

An einwandfrei fixierten Kernen läßt sich erkennen, daß die 
Ausbildung des Monospirems in der gewöhnlichen Art und Weise 
erfolgt. Das bis dahin in Klumpen an den Kreuzungsstellen ange- 
häufte Chromatin verteilt sich auf die Fäden des Gerüstes und 
erfährt dann eine Vermehrung. Die Verteilung erfolgt im ganzen 
Kern gleichmäßig, Nucleolen sind jetzt nie mehr vorhanden, ihr 
Verschwinden konnte nicht beobachtet werden, offenbar werden 
sie während des Wachstums der Spermatogonie resorbiert oder 
sonst auf irgendeine Art und Weise entfernt. Die Verteilung des 
Chromatins auf die Lininfäden erfolgt zunächst in der Art, daß 
die an den Kreuzungsstellen liegenden Brocken zerfließen und 
sich zu länglichen, wurstförmigen Gebilden umgestalten. Ihre 
Ausdehnung erfolgt also stets nur in einer Richtung, nicht auf 
die drei oder mehr Fadenstücke, die sich an einem Punkt vereinen. 
Der Kern bietet dann das Bild wie es Abbildung 16 wiedergibt, 
ein sehr deutliches, feines Gerüst, dessen Fäden als Folge des ange- 
lagerten Chromatins stellenweise sehr stark verdickt erscheinen. 
Erst wenn dieser Vorgang beendet ist, tritt eine Vermehrung des 
Chromatins ein, wahrscheinlich durch Aufnahme von Substanzen 


aus dem Kernsaft und als Folge davon verbinden sich die einzelnen 


Chromatinstücke dem Verlaufe der Lininfäden folgend, bis es zur 
Ausbildung eines einzigen, vielfach geschlungenen und gewundenen 
Fadens kommt, der den Kern mit seinen Windungen in allen Rich- 


‚tungen gleichmäßig, aber völlig regellos durchsetzt. Am schönsten 


kommt dieses Verhalten jetzt bei Flemmingfixierung zum Ausdruck 
(Abb. 13). | 

Häufig kann man beobachten, daß die Zone jetzt als halbmond- 
förmiges Gebilde von körnigem Bau, ohne sehr scharfe Abgrenzung 
gegen das übrige Protoplasma dem Kerne anliegt. Im allgemeinen hat 
zu dieser Zeit schon eine Zweiteilung des Centriols stattgefunden, 
die beiden Tochtercentriolen liegen nahe beieinander, die Strahlen- 


figur beginnt sich auszubilden und zwar hauptsächlich die Rand-- 
12# 


176 H. Stieve: 


strahlen, während die Spinde! noch nicht deutlich zu erkennen ist 
(Abb. 21). In Zellen, bei denen die Sphäre auf dem Schnitt getroffen 
ist, läßt sich jetzt auch häufig erkennen, daß die Anordnung des 
Spirems doch keine so völlig richtungslose ist, wie es bei jeder anderen 
Schnittrichtung den Anschein hat, sondern der Faden windet sich 
im großen und ganzen einer bestimmten Richtung folgend durch 
den Kern, indem nämlich die meisten seiner Turen gegen die Sphäre 
zu verlaufen. Die einzelnen Teile des Spirems sind untereinander 
durch feine Lininbrücken verbunden, die Ueberreste des ursprüng- 
lichen Kerngerüstes, offenbar alle diejeniger seiner Teile, auf die 
sich kein Chromatin angesammelt hat. Ein Längsspalt ist zu dieser 
Zeit niemals nachweisbar. 

Im allgemeinen erscheint der Faden glatt und in allen seinen 
Abschnitten gleichmäßig dick. Manchmal aber, besonders bei 
Kernen, welche nach der Heidenhainschen Eisenhämatoxylin- 
methode behandelt und sehr lange differenziert wurden, er- 
scheint das ganze Spirem aus einer großen Anzahl von quergestellten 
Stäbchen oder Scheiben zu bestehen, die sich geldrollenartig anein- 
anderlegen. Auch hier ist die Entscheidung schwer, ob es sich um 
natürliche Vorgänge oder beginnende Rückbildungserscheinungen 
oder aber um Fixierungsprodukte handelt. Wie groß die Unter- 
schiede bei ungefähr gleichgroßen, verschieden fixierten Zellen des- 
selben Individuums sein können mögen die Abbildungen 19, 20 
und 21 zeigen. Der Kern welcher Abbildung 19 zugrundeliegt, 
ist mit Flemmingschem Gemisch fixiert, der Kern von Ab- 
bildung 20 mit Carnoyschem Gemisch und der von Abbildung 21 
mit Sublimateisessig, alle drei sind gleich dick geschnitten (10 u) 
und in der nämlichen Weise mit der Hämatoxylinmethode nach 
Heidenhain gefärbt. Der Unterschied ist hervorstechend, ins- 
besondere fällt die äußerst geringe Dicke des Fadens bei Abbil- 
dung 19 auf. Da dieser jedoch nicht nur dünner, sondern auch 
wesentlich länger erscheint, als in den beiden anderen Fällen, so 
liegt doch der Gedanken nahe, daß das Spirem gleich nach seinem 
Entstehen länger ist und erst später eine Verkürzung und Ver- 
dickung erfährt mit der dann die Orientierung und geordnete Lage- 
rung in der Verlaufsrichtung Hand in Hand geht. 

Die Kernmembran ist während der ganzen Ausbildung des 
Monospirems noch deutlich erhalten, wird aber in der Folgezeit 
immer dünner und dünner. Noch bevor sie jedoch vollkommen 


En 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 177 


verschwindet, zerfällt der Faden in seine einzelnen Segmente. Ihre 
Zahl läßt sich mit Hilfe des Rekonstruktionsverfahrens nicht allzu- 


schwer ermitteln, sie beträgt 18 (Abb. 22, 23). In ganz seltenen 


Fällen zählte ich nur 17, ausnahmsweise 19 Chromosomen, als Nor- 
malzahl muß ich aber 18 annehmen, da sie am weitaus häufigsten, 
sicher unter 10 Fällen 9 mal aufgefunden wurde. Die einzelnen 
Chromosomen sind untereinander von gleicher Dicke, wie ja auch 
der Faden einer Zelle in allen seinen Abschnitten gleich dick war, 
in bezug auf ihre Länge und Form sind sie jedoch sehr verschieden, 
bald stellen sie nur ganz kurze Stäbchen, bald lange, gekrümmte 
oder mehrfach gebogene Fäden dar. Die nämlichen Formen von 
Chromosomen lassen sich in allen Fällen nachweisen. Bis zum 
Zerfall der Kernmembran sind sie stets noch durch die oben erwähn- 
ten Lininbrücken miteinander verbunden. Die Zentralkörper sind 
inzwischen weiter auseinandergerückt, die Strahlung ist deutlicher 
geworden. Bei Flemming-Fixierung ist jetzt meist ein deutlicher 
Längsspalt an jedem einzelnen Chromosoma zu erkennen, der mittels 
keiner anderen Konservierungsmethode zur Darstellung gebracht 
werden kann. 

Unmittelbar nach dem Zerfall des Spirems verschwindet die 
Kernmembran und mit ihr auch die Lininbrücken, welche die Chro- 


“mosomen miteinander verbanden. Der Zerfall erfolgt regelmäßig 


zuerst an der Stelle, welche der Sphäre zunächst gelagert ist und 
breitet sich von da aus über den ganzen Kern aus. Die Chro- 
matinschleifen liegen dann in der ganzen Zelle zerstreut und es 
gelingt jetzt leicht die einzelnen Gebilde zu isolieren und durch 
Rekonstruktion ihre Zahl festzustellen (Abb. 24). Dieser Zustand 
der Verteilung in der ganzen Zelle dauert jedoch nicht lange, offen- 
bar heiten sich nach Verschwinden der Kernmembran die Spindel- 
fasern sehr rasch an die Chromosomen an und bewirken ihre Orien- 


‚tierung. Zuerst liegen dann die Centriolen noch ziemlich nahe bei- 


einander in der einen Hälfte der Zelle, ihnen gegenüber in der anderen 
Hälfte der Zelle dicht zusammengedrängt die Chromosomen. Sehr 
schön sind in diesem Zustand meist die Strahlen darstellbar und 
zwar ebensowohl die Spindel- als auch die Randstrahlen. Von jedem 
Centriol geht eine deutliche sternförmige Strahlenfigur nach allen 
Seiten aus (Abb. 25). Das übrige Protoplasma, soweit es nicht unter 
dem Einfluß dieser Strahlen steht, zeigt feine netzige Struktur, 
die einzelnen Faden des Netzwerkes erscheinen aus allerfeinsten 


1785 HASTE ver: 


Körnerreihen zusammengesetzt. Bei Flemmingfixierung lassen die 
Chromosomen auch in diesem Zustand einen sehr deutlichen Längs- 
spalt erkennen. 

Während nun die Zentralkörper nach den beiden Polen der 
Zelle auseinanderrücken, lagern sich die Chromosomen, dem Zug 
der Spindelfaser folgend, zwischen sie und ordnen sich zur Aequa- 
torialplatte an. Sie erfahren während dieses Vorganges noch eine 
geringe Verkürzung und Verdickung, gleichzeitig wird der Längs- 
spalt wesentlich breiter und ist jetzt mit jeder Fixierungs- und 
Färbungsmethode gut darstellbar (Abb. 26). Wie jedoch die 
große Seltenheit. derartiger Kermbalder deu 
lichbeweist,dauertdieserZustandnuräußerst 
kurze: Zeit, .offenbar-Tindet.sorornt mach des 
Einstellunginder Aequatorialplatte ein Aus- 
einanderrücken.derbeiden Spalthälften statt 
(Abb. 27), die dann in geringem Abstand voneinander längere Zeit 
liegen bleiben, ohne sich auf die beiden Pole zu verteilen. Diese 
Beobachtung ist für die Feststellung der Zahlenverhältnisse von 
allergrößter Wichtigkeit. Zellen mit getrennten Chromosomen- 
hälften in der eben geschilderten Anordnung finden sich fast in 
allen Hoden in größerer Anzahl. In diesem Zustand sind auch die 
Chromosomen am übersichtlichsten gelagert und es gelingt jetzt 
auf günstigen Schnitten meist leicht, sehr häufig auch ohne Zuhilfe- 
nahme des zeitraubenden Rekonstruktionsverfahrens die Zahl der 
Einzelelemente festzustellen; sie beträgt nun stets, d. h. wenn keinerlei 
zweifelhafte Stellen mehr vorhanden sind, 36, wie ja nicht anders 
zu erwarten stand (Abb. 28, 29, 30). Auch jetzt läßt sich deutlich 
erkennen, daß die Dicke aller Chromosomen einer Zelle meist ganz 
gleich ist, die Länge und Form ist dagegen sehr verschieden. Wieder 
finden sich ganz kurze stäbchenförmige, ja sogar punktartige Ge- 
bilde und längere, die meistens hufeisenförmig gekrümmt sind. 
Die beiden Schenkel dieser letzteren können verschieden lang oder 
gleich lang sein. Auch jetzt lassen sich in allen Zellen die nämlichen 
Formen nachweisen. 

Meist liegen die Chromosomen in der Aequatorialplatte in 
der Mitte der Zelle und lassen um sich einen größeren freien Proto- 
plasmaraum. Sie zeigen dabei stets die Anordnung, daß die ge- 
bogenen unter ihnen mit der Konvexität der Krümmung gegen 
die Kernmitte, mit den freien Enden aber gegen die Peripherie zu 


F 
ö 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 179 


sehen. Die größeren hufeisenförmigen Chromosomen liegen meist 
mehr am Rande der Figur, die kleineren zwischen ihnen und in 
der Mitte. Die Strahlenfigur nimmt auch nur den mittleren Teil 
der Zelle ein, die Centriolen liegen ziemlich weit von der Oberfläche 
entfernt, die Randstrahlen sind nunmehr nicht mehr stark aus- 
gebildet. Der außerhalb der Spindel befindliche Teil des Proto- 
plasma zeigt die oben beschriebene, netzige Struktur. Auf Schnitten 
senkrecht zur Aequatorialplatte zeigt die Spindel die Form einer 
Raute (Abb. 26, 27). 

Die Chromosomen rücken nun nach den beiden Zellpolen aus- 
einander und nähern sich dabei den Centriolen, sie behalten während 
dieses Vorganges im großen und ganzen die gleiche Lage wie in 
der Aequatorialplatte bei, die gekrümmten liegen mit der Konvexität 
gegen das Centriol zu, die stäbchenförmigen mit dem freien Ende, 
die ganz kurzen zeigen keinerlei bezeichnende Lagerung. Am deut- 
lichsten kommt dieses Verhalten wieder in der Polansicht zur An- 
schauung (Abb. 34), wo sich deutlich die sternförmige Lagerung 
der Chromosomen mit den freien Enden gegen die Peripherie zu 
zeigt. Das Polfeld ist jetzt meist schön zu erkennen. Die Spindel- 
fasern verbinden noch die Chromosomen der beiden Tochtersterne 
miteinander und verlaufen dabei fast vollkommen gerade und 
parallel zueinander (Abb. 33). 

Während nun die ganze Zelle längsovale Form annimmt, er- 
fahren die Spindelfasern noch eine wesentliche Verlängerung. Da- 
durch werden die beiden Tochtersterne auseinandergedrängt und 
gelangen so näher an die Oberfläche der Zelle als vordem. Die 
Zentralkörper gehen bei dieser Bewegung mit. Die Spindelfasern 
verlaufen nunmehr auch nicht mehr gerade, sondern in wellen- 
förmigen Linien, später zeigen sie deutlich und deutlicher einen 
Zerfall in einzelne feinste Körnchen und ähneln dadurch in ihrem 


.Bau den feinen Fäden, welche das außerhalb der Strahlenfigur 


gelegene Protoplasma netzig durchsetzen. Die ganze Zelle beginnt 
sich in der Mitte einzuschnüren. Gleichzeitig mit den zuletzt be- 
schriebenen Vorgängen rücken die Chromosomen eines jeden Tochter- 
sternes, die bis dahin übersichtlich und deutlich getrennt voneinander . 
gelegen sind, zusammen und legen sich aneinander. Dieses Zu- 
sammenrücken ist so erheblich, daß jeder Tochterkern nurmehr 
einen dicken Chromatinklumpen darstellt, der kaum mehr eine 
Struktur erkennen läßt, nur die Enden der Chromosomen ragen 


180 H. Stieve: 


in radiärer Richtung vor (Abb. 35, 36). Bei geeigneter Schnitt- 
richtung ist das Polfeld als muldenförmige Delle in diesem Chromo- 
somenklumpen zu erkennen (Abb. 35). 

Dieser Zustand dauert jedoch nicht lange, während sich die 
Tochterzellen vollkommen voneinander abschnüren, rücken auch 


die Chromosomen wieder auseinander (Abb. 37). Sie erscheinen’ 


jetzt dünner, ihre Oberfläche ist nicht mehr glatt, sondern gezackt 
und höckerig und zwischen den einzelnen Chromosomen spannen 
sich feine Lininbrücken aus. Auf sie verteilt sich nach und nach 
das Chromatin, bis die einzelnen Chromosomen nicht mehr deutlich 
zu erkennen sind (Abb. 38). Die Kernmembran bildet sich, und 
schließlich kommt es zur Ausbildung eines Kernes vom gleichen 
Bau wie vor Beginn der Teilung, mit homogenem Kernsaft und 
feinem Liningerüst, auf dem das Chromatin in groben Brocken 
verteilt ist. Zur Ausbildung ringförmiger oder anderer außer- 
gewöhnlicher Kernformen kommt es während oder unmittelbar nach 
der Mitose niemals. Bei der Abschnürung der beiden Tochterzellen 
voneinander bildet sich meist ein kleiner Zwischenkörper (Abb. 37), 
er zeigt im Verhältnis zur Zellgröße sehr geringe Ausdehnung und 
nur wenige Fasern, meist 6—10 laufen in ihm zusammen. Während 
der Abschnürung geben die Tochterkerne auch ihre periphere Lage 
auf und rücken in die Mitte der Tochterzelle, so daß sie in jeder 
jungen Spermatogonie wieder fast ganz zentral gelagert erscheinen. 

Zellteilungen von der eben beschriebenen Art finden sich, wie 
schon erwähnt, in den Hoden aller untersuchten Olme ohne jede 
Ausnahme. ‚Sie betreffen stets nur einzelne, besonders große Sperma- 
togonien; das Endergebnis dieser Mitosen sind stets wieder Sperma- 
togonien. Diese Teilungen erfüllen offenbar den Zweck, den Hoden 
stets auf seiner gleichen Größe zu erhalten, also den Bestand an 
Spermatogonien während des ganzen Jahres zu ergänzen. Man 
könnte sie deshalb wohl als Ergänzungsteilungen bezeichnen. In 
allen Hoden findet nämlich dauernd ein Untergang von Spermato- 
gonien statt, der mit dem Zerfall des Kernes beginnt und mit der 
völligen fettigen Entartung der ganzen Zelle endet. In vielen Ruhe- 
hoden betrifft diese Degeneration die große Mehrzahl aller vor- 
handenen Spermatogonien, man findet in ihnen häufig Ampullen, 
in denen fast alle Samenzellen mehr oder weniger deutliche Zerfalls- 
erscheinungen aufweisen. Der Untergang geht aber nur äußerst 
langsam von statten, so daß der durch ihn gesetzte Defekt mittels 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 181 


einer verhältnismäßig geringen Vermehrung ausgeglichen werden 
kann. Auf die beim Zerfall der Spermatogonien beobachteten 
Erscheinungen werde ich erst in einer späteren Arbeit eingehen. 
Offenbar befinden sich die in den Spermatocysten liegenden 
Spermatogonien niemals in einem vollkommenen Ruhezustand, 
sondern sie scheinen sich stets, wenn auch nur äußerst langsam, 
zu vergrößern. Haben sie dann eine gewisse Maximalgröße erlangt, 
so erfolgt bei günstiger Lagerung und unter vorteilhaften Ernährungs- 
bedingungen eine Teilung in 2 Tochterspermatogonien. Sind die 
Bedingungen jedoch ungünstig gelagert, dann verfällt die betreffende 
Spermatogonie der Degeneration. Ein wirkliches Ruhestadium 
scheint es also bei den Spermatogonien nicht zu geben, es sei denn, 
daß die'kleinsten, einzeln oder in Gruppen im Bindegewebe liegen- 
den Zellen einen solcher Zustand darstellen. 
Im vorigen wurden die Teilungsvorgänge wie sie sich an den 
Spermatogonien der Ruhehoden abspielen, beschrieben. Diese zeich- 
nen sick stets durch die beträchtliche Größe, besonders des Proto- 
plasmaleibes aus, der einen Durchmesser von 34 bis zu 40 u besitzen 
kann. Mit Recht bezeichnet sie Me ves (1897) als „große Sperma- 
togonien“. Am auffälligsten tritt diese ihre Eigenschaft während 
des Muttersternes zutage, hier ist der Zelleib stets in jeder Richtung 
noch um einige Mykra größer, als früher im Zustand des Mono- 
spirems, während der Prophase der Teilungen erfolgt also zweifellos 
noch ein ziemlich beträchtliches Wachstum der Zelle. 


Die -Klernen. SpermatoeonTen. 


Zu Beginn der Geschlechtsperiode setzt dann eine allgemeine 
Vermehrung der Spermatogonien eines Hodens ein, mehrere Tei- 
lungen erfolgen rasch nacheinander, ihr Endergebnis sind schließlich 
die Spermatocyten. Die Vermehrung geht, mit Ausnahme der 
Restspermatogonien, von allen Spermatogonien einer Ampulle aus, 
welche nicht in Rückbildung begriffen sind. Sie teillensich ganz 
gleichmäßig mehrmals unmittelbar hintereinander und in- 
folgedessen befinden sich alle in einer Cyste vereinigten Zellen stets 
auf dem gleichen Zustand der Mitose. Dieser Umstand allein läßt 
es in Zusammenhang mit der Tatsache, daß alle Spermatogonien 


gemeinsamen Ursprungs von einer gemeinsamen Hülle, den Follikel- 


zellen ihrer Mutterspermatogonie, umgeben sind, äußerst wahr- 


182 HN Stevie: 


scheinlich erscheinen, daß alle diese in einer Cyste vereinigten kleinen 
Spermatogonien von einer einzigen großen Spermatogonie ab- 
stammen. In den Gruppen der Restspermatogonien, ebenso wie im 
Ruhehoden, ist ja jede einzelne große Spermatogonie durch ihre 
Follikelzellen deutlich von der Umgebung eeruzt und stellt 
demnach eine besondere Cyste dar. 

Wie viele derartiger Teilungen zu Beginn der Vermehrungs- 
periode aufeinander folgen, läßt sich mit ziemlicher Sicherheit 
feststellen. Jedenfalls läßt sich die Zahl der schließlich in jeder 
Cyste enthaltenen Zellen mit größter Genauigkeit ermitteln, allerdings 
erst dann, wenn die reifen Spermatozoen in Bündeln beieinander 
liegen, so wie es Abbildung 2 darstellt. Auf Querschnitten durch 
die Köpfe eines solchen Pakets — die Abbildung gibt einen Längs- 
schnitt wieder — erblickt man jeden Samenfaden als einzelnen, 
gut isolierbaren Punkt, die Gesamtmenge läßt sich mittels des 
Projektionsapparates oder Zeichenprismas leicht auszählen. Das 
Ergebnis von 20 derartigen Untersuchungen ist folgendes: 480, 
237, 241, 482, 233, 472, 489, 477, 239, 503, 498, 237, 473, 494, 479, 
485, 483, 240, 243, 278. Es läßt also zunächst nur ganz verschiedene 
Zahlenwerte erkennen. Diese können jedoch in zwei Gruppen 
gesondert werden, nämlich in höhere und niedrigere Werte, eine 
Tatsache, die sich auch im mikroskopischen Bild erkennen läßt, 
wo man 2 Arten von Spermatozoenbündel unterscheiden kann, 
größere und kleinere. Nach diesem Gesichtspunkt zusammen- 
gestellt sind die Zahlenwerte der kleineren Bündel 237, 241, 233, 239, 
237, 240, 243; die der größeren Bündel 480, 482, 472, 489, 477, 
303, 498, 473, 494, 479, 485, 483, 478. 

Die Gesamtzahl der kleinen Bündel unter den 20 untersuchten 
beträgt 7, die der großen 13, demnach sind die letzteren in ungefähr 
der doppelten Menge vorhanden, wie gleichfalls jedes Schnittbild 
durch einen reifen Hoden erkennen läßt. Vergleichen wir nun die 
Werte der einzelnen Cysten zueinander, so ergibt sich für die kleineren: 
als niedrigste Zahl 233, als höchste 243, im Durchschnitt 238; und für 
die größeren: als niedrigste Zahl 472, als höchste 503, im Durch- 
schnitt 484. 

In den großen Cysten sind also durchwegs fast 
genau doppelt. so, viele Spermatozoenrenn- 
halten, als in den kleinen. Aus dieser Tatsache allein 
darf man mit ziemlicher Sicherheit schließen, daß sich die Zellen 


f- 2 r j 
Br 3 TRETEN un ABER RE. VERREN 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 183 


der großen Cysten einmal öfter geteilt haben, als die der kleinen, 


jedoch noch nicht, wie viele Teilungen im ganzen stattgefunden 


haben. Da jedoch alle Gebilde einer Cyste von einer einzigen Sper- 
matogonie abstammen, so muß, falls der Teilungsrythmus wirklich 
vollkommen gleich für alle war, d. h. jede Spermatocyte einer Cyste 
aus einer gleichen Anzahl von Mitosen hervorgegangen ist, die 
Gesamtzahl der jeweils vereinigten Spermatocyten eine Potenz von 
2 sein, also nach der ersten Teilung gleich 2, nach der zweiten Teilung 
gleich 4, nach der dritten gleich 8 usw. Nach der achten Teilung 
betrüge sie gleich 2° = 256 und nach der neunten gleich 2° = 512, 

Diese beiden letzteren Werte liegen ganz nahe bei den von 
mir ermittelten Zahlen. Berücksichtigt man nun die äußerst ge- 
ringen Unterschiede, die ich bei der Zählung feststellen konnte, 
die Schwankung beträgt für die kleinen Cysten 10, für die großen 
31 und außerdem noch den Umstand, daß während der Spermato- 
cytogenese und Spermatohistogenese in fast jeder Cyste noch 
einige Samenzellen physiologischerweise zugrunde gehen, dann 
kann man wohl schließen, daß jede Spermatide in den kleinen 
Cysten aus 8, in den großen Cysten aber aus 9 Teilungen hervor- 
gegangen ist. | 

Von diesen entfallen 2, nämlich die beiden letzten, auf die 
beiden Reifungsteilungen, alle übrigen auf die Spermatogonien- 
teilungen. Die Zählungen wurden ja an Spermien vorgenommen, 
Zahlenermittlungen während und gleich nach der Beendigung der 
Spermatogonienteilungen, wie se Gurwitsch (1911) ausführte, 
sind nur mittels des Rekonstruktionsverfahrens möglich und er- 
fordern sehr viel Zeit. Ich führte sie nicht aus, da sie besser und 
leichter durch die einfachen und sicheren Zählungen der Spermato- 
zoen ersetzt werden können. Allerdings muß dabei der physio- 
logische Ausfall mit in Betracht gezogen werden. 

Unter Berücksichtigung aller dieser Verhältnisse dürfen wir 
dann den Schluß ziehen, daß jede Spermatocyte aus 6 oder 7 Sper- 
matogonienteilungen während der eigentlichen Geschlechtsperiode 
hervorgegangen ist. (Wieviel Teilungen großer Spermatogonien 
während des ganzen Lebens vorhergegangen sind, läßt sich natürlich 
nicht ermitteln.) Gestützt wird diese Annahme 

l. duıch die Tatsache, daß alle im Inneren einer Cyste ge- 
legenen Zellen von einer Mutterzelle abstammen, 

2. daß alle Zellen einer Cyste sich gleichmäßig teilen und 


184 H. Stieve: 


3. daß die Zahlenverhältnisse sehr nahe an den berechneten 
Werten liegen und stets geringer sind als diese, also mit dem physio- 
logischen Ausfall erklärt werden können. 

Im großen und ganzen vollziehen sich alle diese Teilungen in 
genau der nämlichen Art und Weise, wie bei den einzelnen Mitosen 
im Ruhehoden, nur bildet sich nach der Telophase kein vollkommener 
Ruhekern aus, es tritt keine Verteilung des Chromatins auf die 
Lininfäden ein, vielmehr entwickelt sich sofort nach dem Auftreten 
der Kernmembran, also in einem Zustand der Zellen, wie in Ab- 
bildung 38 dargestellt, schon wieder das Monospirem der nächsten 
Mitose, indem sich die noch gut erkennbaren Chromosomen wieder 
zu einem lockeren Knäuel anordnen. Dementsprechend finden 
sich während der ganzen Vermehrungsperiode in den Cysten selbst 
keine Ruhespermatogonien. Diesem äußerst raschen, ja man kann 
sagen überstürzten Aufeinanderfolgen der Teilungen mag es auch 
zuzuschreiben sein, daß die Spermatogonien während zweier Mitosen 
nicht mehr auf ihre ursprüngliche Größe heranwachsen, sie werden 
vielmehr mit jeder Teilung kleiner und kleiner, ihre Größe ist also 
indirekt proportional zur Menge. 

Diese zweifellose Herabsetzung der Größe betrifft jedoch in 
erster Linie das Prostoplasma. Der Kern wächst wenigstens während 
der ersten Vermehrungsteilungen stets noch auf seine ursprüngliche 
Größe heran, seine Chromatinmasse scheint bei jeder Mitose die 
nämliche zu sein, wohingegen der Plasmaleib sich zusehends ver- 
kleinert. Die Kernplasmarelation verschiebt sich also zugunsten 
des Kernes. Am deutlichsten kommt dieses Verhältnis wieder bei 
der Polansicht der Aequatorialplatte zur Geltung, da hier das Chro- 
matin in verhältnismäßig konzentrierter, scharf abgegrenzter Form 
sehr übersichtlich verteilt ist. Hier findet sich während der späteren 
Mitosen kein freier, die Chromosomen umgebender Plasmasaum, 
das Chromatin nimmt vielmehr beinahe den ganzen Raum der 
Zelle ein (Abb. 31, 32). Daß es sich dabei nicht um individuelle 
Verschiedenheiten, sondern um tatsächliche, in den Verhältnissen 
begründete Gegensätze handelt, lehren am besten diejenigen Hoden, 
deren einer Teil sich noch im Ruhezustand befindet, während im 
anderen die Vermehrungsperiode schon begonnen hat. So zeigt 
Abbildung 31 eine kleine Spermatogonie im Vermehrungsstadium 
aus dem gleichen Hoden wie die in Abbildung 28 wiedergegebene 
große Spermatogonie; desgleichen stammen die in Abbildung 32 


M- 
AH: 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 185 


und 29 wiedergegebenen Spermatogonien aus dem Hoden ein und 
desselben Tieres. Da wie schon erwähnt während der Vermehrungs- 
teilungen häufig kein völliger Ruhezustand des Kernes zu beobachten 
ist, so muß die Vermehrung des Chromatins Hand in Hand mit 
den Teilungsvorgängen gehen. In welchem Abschnitt der Mitose 
sie stattfindet, läßt sich wegen der äußerst verschiedenen Formen 
welche das Chromatin zeigt und vor allem wegen seiner äußerst 
verschiedenen Konzentration nicht nachweisen. Daß aber während 
der Teilungsvorgänge selbst, besonders in der Prophase, eine Ver- 
größerung einzelner Abschnitte der Zelle noch stattfindet, läßt 


sich durch Messungen ohne weiteres beweisen. 


Erst gegen Ende der Vermehrungsperiode nimmt auch der 
Kern an Größe ab, diese Verringerung betrifft in erster Linie das 
Linin und den Kernsaft, aber nicht so sehr das Chromatin. Dem- 
entsprechend erscheinen nach Beendigung der Teilungen die Kerne 
der jüngsten Spermatocyten zwar klein, aber äußerst chromatin- 
reich (Abb. 39 und 40), ein Umstand, der besonders während der 
Telophasen der letzten Spermatogonienteilungen sehr deutlich zur 
Geltung kommt. 


Die Spermatocyten. 


Die Wachstirmsp,eri.o.d;e. 


Gleich nach der Abschnürung der Tochterzellen und dem 
Auftreten der Kernmembran besitzen die jüngsten Spermato- 
cyten einen Durchmesser von 17 bis allerhöchstens 19 u, der Kern einen 


solchen von 15—16 u. Er ist also verhältnismäßig sehr groß und 


nur von einem ganz schmalen Protoplasmasaum umgeben. Dieser 
zeigt netzige Struktur, die Zone ist schwer darstellbar, sie ist meist 
kreisrund und von einer feinen Kapsel umgeben, der Zentralkörper 
ist stets deutlich zu erkennen. Der Kern zeigt sehr derbes und 
plumpes Chromatingerüst, das durch dicke Balken mit unregel- 
mäßiger, höckeriger oder gezackter Oberfläche gebildet wird. Meist 
sind die Balken von ziemlich gleicher Dicke, aber sehr verschiedener 
Länge, sie gehen unmittelbar aus den Chromosomen der Telophasen 
hervor und sind untereinander durch feine Lininfäden verbunden. 
In Kernen, die nach der Heidenhainschen Hämatoxylinmethode 
behandelt sind, finden sich hie und da nucleolenartige Gebilde 
(Abb. 39), kleine schwarze Klexe, die im Kerngerüst zu liegen schei- 


186 H. Stieve: 


nen. Da sie in diesem Stadium bei keiner anderen Färbungsweise 
nachweisbar sind, stellen sie offenbar wieder Kunsterzeugnisse dar. 

Die jüngsten Spermatocyten liegen in den stark erweiterten 
Cysten äußerst dicht beieinander, unmittelbar nach der Beendigung 
der Vermehrungsperiode findet sich unter ihnen meist eine geringe 
Zahl von zugrundegehenden Zellen. Die Degeneration leitet sich 
mit dem Zerfall des Chromatins ein, der gewöhnlich mit dem Verlust 
der Aufnahmefähigkeit für spezifische Kernfarbstoffe Hand in 
Hand geht. Auch beim Olm werden also die jüngsten Spermato- 
cyten von einer Degenerationswelle heimgesucht, offenbar als Folge 
der veränderten Kernplasmarelation, welche ein Zugrundegehen 
zahlreicher Zellen bewirkt, bevor das Mißverhältnis zwischen Kern 
und Plasma wieder ausgeglichen ist. 

In der Folgezeit wachsen die jungen Spermatocyten ziemlich 
rasch zu beträchtlicher Größe heran und zwar betrifft dieses Wachs- 
tum sowohl den Kern als das Protoplasma, das letztere aber in 
etwas stärkerem Maße, so daß zu Ende der eigentlichen Wachstums- 
periode das anfängliche Mißverhältnis in der Kernplasmarelation 
wieder beseitigt ist. So große Protoplasmaleiber, wie sie bei Sperma- 
togonien aufgefunden werden, besitzen die Spermatocyten jedoch 
niemals. Ihr Kern hat dann einen Durchmesser von 20—22 u, 
der Leib einen solchen von 24—25 u. Diese Größe behalten sie 
lange Zeit bei und erst gegen Ende der Prophasen der ersten Reifungs- 
teilungen, unmittelbar vor dem Eintritt der Chromosomen in die 
Aequatorialplatte, erlangen auch die Spermatocyten sehr beträcht- 
liche Größe; auch bei ihnen werden demnach, ebenso wie bei den 
Spermatogonien, Hand in Hand mit den Vorbereitungen zur Teilung 
größere Protoplasmamengen angehäutt. 

Während des Wachstums selbst spielen sich auch am Kern 
der Spermatocyten wichtige Veränderungen ab. Niemals kommt 
es bei ihnen zur Ausbildung richtiger Ruhekerne. Die groben Chro- 
matinbalken strecken sich in die Länge, werden feiner und feiner 
und bestehen bald nurmehr aus ganz dünnen Strängen, welche 
den Kern in allen Richtungen durchsetzen und sich dabei häufig 
überkreuzen. Sie bilden schließlich eine Art von Gerüst, das nur 
aus schwach färbbaren Fäden besteht, die an vielen Stellen spindel- 
und knopfförmig verdickt sind und nur hier die spezifischen Kern- 
farbstoffe wirklich gut aufnehmen, in den Zwischenbrücken aber 
blasser erscheinen. Die einzelnen Verdickungen sind von ganz 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 187 


verschiedener Größe, meist nur sehr klein, eben noch sichtbar und 
nur in größeren Zwischenräumen erblickt man gröbere Klumpen, 
die den Faden wesentlich an Dicke übertreffen (Abb. 42). Der 
Kern ist jetzt vollkommen durchsetzt von einem dichten Netzwerk, 
dessen einzelne Fäden den geschilderten perlschnurähnlichen Bau 
zeigen, nur sind die einzelnen Körner eben nicht von gleicher Aus- 
dehnung, zwischen je 2 größeren befinden sich vielmehr 2—5, manch- 
mal auch mehr kleinere. Ueberkreuzungen der Fäden (oder des 
Fadens?) finden sich stets an den Stellen der größeren Chromatin- 
klumpen, es läßt sich aber niemals mit Sicherheit entscheiden, ob 
es sich um ein Netzwerk, bestehend aus vielen Einzelfäden, handelt 
oder nur um einen einzigen, vielfach gewundenen feinen Faden, 
der sich wegen des engen, für seine Ausbreitung zur Verfügung 
stehenden Raumes oftmals selbst überschneidet. Es gelingt näm- 
lich jederzeit nicht allzuschwer, den Faden über lange Strecken 
hin ohne jede Unterbrechung zu verfolgen. Gabelungen kommen 
nie zur Beobachtung, sondern nur echte Ueberkreuzungen. Von 
Lininbrücken kann in diesem Zustand nicht gesprochen werden. 
Alle Teile des Kerngerüstes bestehen aus Basichromatin, nur nehmen 


‚die einzelnen Abschnitte den Farbstoff nicht mit der gleichen In- 


tensität auf und erscheinen deshalb gekörnt. 

Während der zuletzt beschriebenen Vorgänge treten im Innern 
des Kernes auch stets einige Nukleolen auf, häufig nur ein einziger, 
manchmal aber auch bis zu dreien. Sie zeigen in bezug auf ihre 
Lage keine Besonderheiten, bald finden sie sich mehr in der Mitte, 
bald unmittelbar unter der Oberfläche gelegen, sie sind kreisrund 
und sehr scharf von der Umgebung abgesetzt, jedoch ohne Hof. 
Bei Safranin-Lichtgrünfärbung erscheinen: sie leuchtend rot, bei 
Dreifachfärbung nach Flemming violett. Es handelt sich also um 
Chromatinnucleolen. Ihr erstes Auftreten fällt in die Zeit der Aus- 
bildung des feinen Netzwerkes, von da ab nehmen sie an Größe 
parallel mit dem Kernwachstum zu, im Höchstfalle erreichen sie 
einen Durchmesser von 3—4 u und verschwinden mit der Aus- 
bildung des Monospirems meist wieder vollkommen. 

Alle die eben beschriebenen Veränderungen am Bau des Kernes 
wickeln sich sehr rasch nacheinander ab, Stadien, welche die Telo- 
phasen der letzten Spermatogonienteilungen mit den zuletzt ge- 
schilderten Formen verbinden, sind nur verhältnismäßig selten. 
Meist zeigen sie ein Aussehen, wie es Abbildung 41 wiedergibt; sie 


188 -- H. Stieve: 


erinnern in ihrem Bau also entfernt an die Ruhekerne anderer 
Zellen. Der. klare Kernsaft ist durchsetzt von dicken Chromatin- 
zügen, die sich häufig überkreuzen. An diesen Stellen färben sie 
sich stärker, auch erscheinen sie hier meist nicht unbeträchtlich 
verdickt. Mit der zunehmenden Länge des Fadens, die mit einer 
wesentlichen Querschnittverringerung einhergeht, bildet sich dann 
rasch das in Abbildung 43 wiedergegebene Stadium aus. Das frühere 
Mißverhältnis in der Kernplasmarelation ist, wie schon erwähnt, 
jetzt wieder ausgeglichen, der Kern besitzt etwa 22 u Durchmesser, 
die ganze Zelle 25 „u, selten mehr. Auf Grund dieser Tatsache ge- 
hören Rückbildungsvorgänge in der Folgezeit zu den Seltenheiten, 
die Spermatocyten haben ihre innere Depression überwunden. Die 
eigentliche Wachstumsperiode ist damit beendet. Der Kern zeigt 
nunmehr stets kugelrunde Form. Die ganze Zelle schmiegt sich 
im allgemeinen den umliegenden Gebilden an, wodurch sie ver- 
schiedenes Aussehen zeigt; sie besitzt in der überwiegenden Mehr- 
zahl der Fälle jedoch kegelförmige Gestalt, indem der Protoplasma- 
saum nach einer Seite hin spitzig, auf dem Schnitt dreieckig er- 
scheinend ausgezogen ist, während er im übrigen den Kern gleich- 
mäßig umgibt (Abb. 47—51). An der Stelle der stärksten Proto- 
plasmaansammlung findet sich nunmehr stets das deutlich zwei- 
gespaltene Centriol, umgeben von einer schmalen, schwer darstell- 
baren Sphäre. Nur selten gelingt es, die äußerst dünne Sphären- 
membran anschaulich zu machen. Zentralkapseln, wie sie Heiden- 
hain (1900) beschreibt, und fädige in Zusammenhang mit der Sphäre 
stehende Gebilde im Protoplasma konnte ich nur in ganz vereinzelten 
Fällen nachweisen, allerdings habe ich diesen Bildungen, wie dem 
Bau des Plasma überhaupt, keine höhere Aufmerksamkeit zu- 
gewendet. Bei den eben beschriebenen Spermatocyten zeigt das 
Plasma feinen netzigen Bau und außer der Sphäre keine Einlage- 
rungen. 


Die Prophasen der ersten Reifungsteilung. 


Der dünne, richtungslose Knäuel. 


War es während der ganzen Wachstumsperiode nur schwer 
zu entscheiden, ob die Kernstruktur ein echtes Netzwerk war oder 
nicht, so vollziehen sich jetzt Veränderungen, welche jeden Zweifel 
über den Bau des Kerngerüstes verschwinden lassen. Es entwickelt 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). _ 189 


sich nämlich ein einziger feiner, kontinuierlicher Faden, der den 
ganzen Kern in zahlreichen Windungen gleichmäßig durchsetzt. 
Ueberkreuzungen sind jetzt nicht zu beobachten, die einzelnen Teile 
des Spirems berühren sich nicht, die Windungen zeigen keinerlei 
Regel in ihrem Verlauf und stehen untereinander nicht durch Linin- 
brücken in Verbindung. Der Kernsatt ist ganz klar und läßt keine 
Struktur erkennen. Der Faden ist an vielen Stellen leicht spindelig 
verdickt und zeigt dadurch häufig eierstabähnliches Aussehen, seine 
Oberfläche ist glatt. Die einzelnen Körner des Netzwerkes sind 
also jetzt miteinander verschmolzen und haben dabei etwas an 
Größe zugenommen. Als Folge davon färben sich nunmehr alle 
Teile des Fadens gleichmäßig, der einzige Unterschied besteht in 
der verschiedenen Dicke. Niemals liegen zwei Abschnitte des Spirems 
auf längere Strecken hin parallel zueinander, kürzere Parallel- 
lagerungen einzelner Teile kommen bei dem äußerst mannigfaltigen 
Verlauf des Gebildes haufig vor, sie bedeuten jedoch stets nur 
zufällige Lagebeziehungen, denen keinerlei Bedeutung bei- 
zumessen ist. In seltenen Fällen sind auch jetzt noch Nucleolen vom 
oben beschriebenen Bau nachzuweisen, sie gehen jedoch in der 
Folgezeit rasch im Kernsaft unter (Abb. 45). Die Entstehung dieses 
Monospirems geht offenbar so von statten, daß der das Netzwerk 
bildende Faden sich in seinen einzelnen Abschnitten an den Kreu- 
zungsstellen voneinander entfernt. So muß sich aus dem Netz- 
werk unmittelbar ein kontinuierlicher Knäuel entwickeln, der zu- 
nächst den nämlichen Bau wie dieses besitzt. Sehr bald tritt aber 
‚die Verschmelzung der einzelnen Körner ein. 
NachderBeendigungdesWachstumskommt 
Bmeden :Ssper matoeyren>des Olmesalsor. zur 
Ausbildung eines Monospirems. Dieses läßt sich 
nicht unmittelbar von den Chromosomen der letzten Oogonien- 
teilung äbleiten, da das eben beschriebene netzförmige Kernstadium 
dazwischen liegt. Alle Vorgänge spielen sich jedoch unmittelbar 
hintereinander ab, so daß von einem Ruhestadium der Spermato- 
cyten sicher nicht gesprochen werden kann. Die Kontinuität des 
Chromatins bleibt während der ganzen Zeit gewahrt, es hat lediglich 
die verschiedensten Umgestaltungen erfahren, welche wohl in der 
Größenzunahme des Kernes und in der beträchtlichen Verlängerung 
und  Verschmälerung der Teile des Kerngerüstes begründet sind. 


Während des Wachstums selbst ist die rein fädige Struktur nicht 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. I. 13 


190 H. Stieve: 


so deutlich zu erkennen, es gibt vielmehr Stadien, welche die Ent- 
scheidung, ob Netz oder Faden, schwer fallen lassen, sobald die 
Spermatocyten jedoch ihre endgültige Größe erlangt haben, kann 
über die Struktur der chromatischen Substanz kein Zweifel mehr 
bestehen, sie bildet jetzt einen dünnen richtungslosen 
Knäuel. 

Bekanntlich bezeichnet Hertwig dasganze Stadium der Sperma- 
tocyten von der letzten Spermatogonienteilung bis zur ersten Rei- 
fungsteilung als Wachstumsperiode. Schon in meiner vorläufigen 
Mitteilung über diese Untersuchungen (1918b) habe ich darauf 
hingewiesen, daß sich dieses Wachstumsstadium in zwei Unter- 
abteilungen zerlegen läßt, eine erste eigentliche Wachstumsperiode, 
in welcher tatsächlich eine Vergrößerung der Zelle erfolgt und in 
eine zweite Periode, in welcher keine wesentliche Größenzunahme 
mehr statt hat, in der sich aber wichtige Veränderungen an der 
chromatischen Substanz abspielen. Beide gehen ohne scharfe Grenze 
ineinander über, doch ist die erste Periode vor der Ausbildung des 
dünnen richtungslosen Knäuels stets beendet. 


Diert pokar ser schteoter Rn au 


Zunächst spielen sich nun wieder solche Veränderungen an 
der chromatischen Substanz ab, die nur die Struktur, nicht aber 
ihre Lagebeziehungen betreffen. Der bis dahin vollkommen kom- 
pakte Faden wird wieder dünner und feiner und scheint schließlich 
wieder nurmehr aus einer Reihe feinster Körnchen zu bestehen, 
die untereinander von sehr verschiedener Größe sind und nur durch 
ganz schwache, die sauren Chromatinfarbstoffe eben annehmende 
Brücken in Verbindung stehen. Die Stellen der früheren spindel- 
förmigen Auftreibungen des Fadens sind durch gröbere Klumpen 
gekennzeichnet, zwischen ihnen liegen 3--4 oder auch mehr wesent- 
lich kleinere Körnchen, oft an der Grenze der Sichtbarkeit. Der 
ganze Faden bietet jetzt wieder das Bild einer Perlenkette (Abb. 46). 
Er ähnelt in seinem Bau also wieder den Teilen des früheren Netz- 
werkes, nur sind die Verbindungsbrücken zwischen den einzelnen 
Körnern jetzt noch feiner als dort. Dieses Verhalten kommt bei 
allen Färbemethoden zum Ausdruck, die Gesamtmasse des Chro- 
matins erscheint gegen früher oft etwas verringert (Abb. 45, 46), 
sie erfährt in der Folgezeit eine wesentliche Konzentration, die 
eine Vermehrung vortäuschen kann. 


‘Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 191 


Die Konzentration geht in der Art und Weise vor sich, daß 
die einzelnen Körner näher aneinanderrücken und stellenweise 
miteinander verschmelzen. Sobald sich diese Veränderungen geltend 
machen, kann man auch Umgestaltungen in dem Lagebeziehungen 
des Fadens beobachten, jedoch zunächst nur an Zellen, bei denen 
die Sphäre im Schnitt liegt, die also parallel zur Achse des Kegels 
getroffen sind. Bei ihnen bemerkt man, wie die einzelnen Schlingen 
des Fadens in dem dem Zentralkörper gegenüberliegenden Teil des 
Kernes ihre Richtungslosigkeit verlieren und nunmehr parallel 
zueinander, senkrecht zur Oberfläche des Kernes in der Richtung 
auf die Sphäre zu verlaufen. Diese selbst stellt ein kleines, schwer 
darstellbares, scharf gegen das übrige Plasma abgesetztes kugeliges 
Gebilde dar, in welchem die beiden Centriolen liegen. Diese zeigen 
meist punktförmige, selten etwas längliche Gestalt, ihr gegenseitiges 
Lageverhältnis ist kein konstantes, eine Linie, welche die beiden 
Gebilde miteinander verbindet, trifft in ihrer Verlängerung den 
Kern bald unmittelbar, bald schneidet sıe ihn tangential, bald 
trifft sie ihn überhaupt nicht. Die einzelnen Schleifen des Fadens 
gelangen in der Polseite bis an die deutlich erhaltene Kernmembran, 
biegen an ihr spitzwinkelig um, verlaufen in den Kern zurück und 
geben bald ihren gerichteten Lauf wieder auf, um in dem allgemeinen 
Wirrwarr zu verschwinden (Abb. 47). Freie Enden sind auch hier 
nicht zu beobachten, die beschriebene Orientierung der Turen geht 
ohne jeglichen Zerfall des Fadens, nur durch die Konzentration 
seiner Teile vor sich. Als Folge dieses Vorganges erscheinen die 
orientierten Abschnitte des Fadens meist dicker als die ungeordneten. 
In Ausnahmefällen kommen auch jetzt noch vereinzelte Nucleolen 
zur Beobachtung (Abb. 47). 

Durch welche Kräfte die Ordnung der Chromatinmassen be- 
wirkt wird, läßt sich nicht mit voller Sicherheit entscheiden. Man 
kann keinerlei Lininbrücken erkennen, unter deren Zug sie erfolgt, 
‚sie steht aber ganz offenbar in innerer Abhängigkeit von der Sphäre, 
wie ja der Umstand beweist, daß sie stets ihren Anfang in dem 
diesem Gebilde zunächst liegenden Teil des Kernes nimmt, auch 
‘ der Verlauf der Turen des Fadens, wenn die Ordnung des Kernes 
eine vollkommene ist, deutet auf solche Beziehungen hin. Irgend- 
welche Fasern jedoch, welche von den Centriolen zum Kern ziehen, 
sind niemals zu erkennen, ebensowenig zeigt die Kernmembran 


irgendwelche Lücken, die den fraglichen Fasern zum Durchtritt 
13* 


192 H. Stieve: 


dienen können. Es handelt sich hier also um äußerst feine gegen- 
seitige Wechselbeziehungen, die vielleicht rein chemischer Art sind 
und deshalb morphologisch nur in ihren Folgeerscheinungen mittels 
unserer Untersuchungsmethoden nachgewiesen werden Können. 

Die Orientierung des Fadens schreitet in der gleichen Weise, 
wie sie begonnen hat, fort und breitet sich über einen immer größer: 
werdenden Bezirk des Kernes aus, gleichzeitig erfährt der Faden 


selbst eine Verkürzung und Verdickung, ohne dabei jedoch sein. 


perlschnurartiges Aussehen zu verlieren; es findet eben eine Kon- 
zentration des Chromatins und Verschmelzung‘ mehrerer kleiner 
Klumpen zu einem größeren statt. Dadurch werden auch die Ver- 
schiedenheiten in der Größe der einzelnen den Faden zusammen- 
setzenden Körner 2usgeglichen. Deutlich kann man nunmehr 
erkennen (Abb. 48), wie die einzelnen Turen gegen die der Sphäre, 
gegenüberliegende Seite des Kernes zu verlaufen, hier scharf 
umbiegen, in den Kern zurückkehren und schließlich wieder 
im wirren Teil des Knäuels verschwinden. An der Grenze bei- 
der Abschnitte liegen die Fadenschlingen jetzt besonders. dicht, 
sie überschneiden sich häufig, ohne sich jedoch auch hier jemals 
zu berühren. Wie schon erwähnt, geht diese Orientierung mit 
einer Umlagerung der einzelnen Bestandteile des Fadens Hand 
in Hand, eine Tatsache, die sich sehr schön beobachten läßt und 
unter anderem auch in der Erscheinung zum Ausdruck kommt, daß 
die in der Polseite des Kernes gelegenen Teile des Fadens, an welchen 
sich die Orientierung schon vollzogen hat, etwas dicker erscheinen 
als diejenigen Abschnitte, welche noch in der gleichen Weise wie 
früher vielfach gewunden in der Gegenpolhälfte gelegen sind. Erst 
nach vollkommen durchgeführter Orientierung zeig, der Faden 
wieder in allen seinen Teilen gleichen Bau. 

Die Veränderungen in der Struktur des Kernes nehmen nun 
ihren Fortgang, indem das Spirem sich weiterhin verkürzt und 
verdickt. Stets behält es dabei seine Zusammensetzung aus ein- 
zelnen Körnern bei und alle Veränderungen in der Form und Lage 
des Fadens sind in letzter Linie nur durch die gegenseitige Ver- 
schiebung und Formveränderungen dieser Einzelelemente bedingt. 
Sie erscheinen bald nicht mehr als Körner, sondern als kurze Stäb- 
chen, deren Längsachse quer zur Verlaufsrichtung des Fadens 
gestellt ist, die beiden Enden jedes Stäbchens ragen also frei in, 
den Kernsaft. . Sie sind untereinander von verschiedener Größe 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenelmes (Proteus anguineus). 193 


in der Mitte leicht spindelförmig verdickt und an diesen Stellen 
häufig mit den Nachbarkörnern verklebt. Dadurch wird manchmal 
das Bild eines zentralen Achsenfadens hervorgerufen und es läßt 
sich nicht entscheiden, ob dies ein Kunstprodukt der Färbung 
oder die Folgeerscheinung einer tatsächlichen Verschmelzung der 
einzelnen Chromatinelemente ist. Am längsten erscheinen die 
Stäbchen zumeist in denjenigen Abschnitten des Spirems, welche 
in der Polseite des Kernes gelegen sind, während sich in den übrigen 
Teilen der frühere perlschnurähnliche Bau noch länger erhält. 

Die Orientierung des Fadens schreitet stetig, allerdings nach 
der großen Anzahl der vorgefundenen gleichen Stadien zu schließen 
sehr langsam fort, bald erscheint er in den größeren Abschnitten 
des Kernes geordriet (Abb. 49). Man erkennt jetzt schon deutlich, 
daß nicht alle Fadenturen quer durch den ganzen Kern verlaufen. 
Die Mehrzahl von ihnen geht zwar aus dem noch ungeordneten 
Teil des Knäuels hervor, zieht dann der Krümmung der Kern- 
oberfläche im großen und ganzen folgend bis zu der Stelle der Mem- 
bran, welche der Sphäre gegenüberliegt und biegt dort scharf um, 
um wieder parallel zur Kernoberfläche zum entgegengesetzten Teil 
des Kernes zurückzuverlaufen und sich dort im ungeordneten Ab- 
schnitt bald der Beobachtung zu entziehen. Manchmal kehrt eine 
Tur jedoch schon in der Polhälfte des Kernes in mehr oder weniger 
flachem Bogen wieder um und verläuft zur Sphärenseite zurück. 
An solchen Stellen gelingt es schon jetzt leicht, den Faden über 
große Abschnitte hin fortlaufend zu verfolgen. Hier wie an allen 
Stellen zeigt es sich dabei deutlich, daß die Kontinuität des Knäuels 
nirgends unterbrochen ist, es handelt sich vielmehr um ein in sich 
geschlossenes, kontinuierliches Spirem. 

Die anfangs nur in der Polseite des Kernes beobachteten Ver- 
änderungen an der chromatischen Substanz greifen schließlich auf 
-alle Abschnitte über. Dabei erfährt der Faden, soweit eine solche 
“ Bezeichnung bei dem- veränderten Baue jetzt überhaupt noch an- 
gewendet werden darf, weiterhin eine wesentliche Verkürzung und 
auch als Folge der Umwandlung der Körner in quergestellte Stäb- 
chen eine nicht unbeträchtliche Verbreiterung. Offenbar verschmel- 
zen auch häufig mehrere hintereinander gelegene Körner mit- 
einander und bedingen dadurch die Verdichtung des Chromatins, 
als deren Folge die Verkürzung des Fadens zu beobachten ist. Hand 
in Hand mit diesen Vorgängen gewinnt der Kern in allen seinen 


194 H. Stieve: 


Teilen wesentlich an :Uebersichtlichkeit (Abb. 50, 51). Jetzt ist 
an geeignet gelagerten. Kernen sehr gut die Regelmäßigkeit im Ver- 
lauf des Spirems zu erkennen. Alle Turen des Fadens zeigen nämlich 
eine Verlaufsrichtung mehr oder weniger parallel zur. Oberfläche des 
Kernes gegen diejenige Stelle der Membran zu, welche der Sphäre 
gegenüberliegt. Hier biegen sie nach wie vor scharf um und ver- 
laufen in den Kern zurück. Bis etwa zu seiner Mitte liegen sie im 
großen und ganzen parallel, und ändern erst von hier ab ihre Rich- 
tung, indem sie in weitem Bogen, manchmal leicht geschlängelt 
und häufig unterhalb der ganzen Kernmembran gewissermaßen 
hinkriechend umbiegen, um dann wieder die Richtung gegen die 
Sphäre hin aufzunehmen. Auch jetzt sind nirgends freie Endigungen 
zu beobachten, an keiner Stelle im Kerne, auch nicht an 
der der Sphäre gegenüberliegenden Seite, wo 
die scharfe Umbiegung erfolgt. 

Der lockere richtungslose Knäuel ist nunmehr in den polar- 
gerichteten Knäuel umgewandelt, der ganze Vorgang 
vollzog sich ohne eine Lösung des Zusammenhanges, einzig und allein 
durch die gegenseitige Verschiebung und Verschmelzung, wahr- 
scheinlich auch Nebeneinanderlagerung der kleinen, den lockeren 
Knäuel ursprünglich zusammensetzenden Körncken. Im großen 
und ganzen verlaufen die Turen des Fadens in der Polhälfte des 
Kernes jetzt anscheinend parallel zueinander, d. h. alle in der Rich- 
tung gegen das Centriol zu. Denken wir uns an die der Sphäre 
zunächst liegende Stelle der Kernoberfläche eine Tangentialebene 
angelegt, so verlaufen alle Turen des Fadens in Ebenen, welche 
auf diese Tangentialebene senkrecht stehen und sich gegenseitig 
in der Mittelsenkrechten zu ihr schneiden. Sie ziehen in Wirk- 
lichkeit nicht vollkommen parallel zueinander, sondern parallel 
zur Kernoberfläche der Richtung der Meridiane folgend, was 


am deutlichsten in der Nähe der Sphäre zur Geltung kommt, 


am wenigsten in der Gegenpolseite, wo die Schleifen in großen 
Bogen verlaufen und dabei die bestimmte Richtung etwas verlieren. 
Wenn man daher einen Kern in diesem Stadium von der Gegenpol- 
seite aus zu Gesicht bekommt, so kann man, besonders wenn es 
sich nır um einen kalottenförmigen Anschnitt handelt, häufig von 
der Orientierung nichts bemerken (Abb. 52). 

Ein ganz anderes Bild dagegen bietet ein Schnitt durch einen 
solchen Kern in der Nähe der Sphäre parallel zu der Tangential- 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 199 


ebene, die an den dem Centriol zunächst gelegenen Punkt der Ober- 
fläche angelegt wurde (Abb. 55). Durch ihn werden die hier fast 
parallel verlaufenden Fadenturen durchweg fast quer getroffen und 
erscheinen deshalb im Schnitt als Punkte oder als leicht oval ge- 
tormte Gebilde, die deutlich voneinander isoliert und meist recht 
übersichtlich angeordnet sind. Nunmehr gelingt es auch, die Zahl 
der Schleifenturen festzustellen, ähnlich wie es auf dem Querschnitt 
eines Kabels möglick ist, die einzelnen Fäden, welche ihn zusammen- 
setzen, zu zählen. Bei schwacher Vergrößerung erscheint das Bild 
meist ganz klar und übersichtlich, versucht man jedoch bei stärkerer 
Vergrößerung die einzelnen Fadenquerschnitte zu isolieren, so stößt 
man sehr bald auf Schwierigkeiten. Nur die wenigsten Turen 
verlaufen nämlich genau senkrecht zur Schnittrichtung, sind also 
wirklich quer getroffen, die überwiegend große M:hrzahl ist schräg 
getroffen und oft liegt gerade der Bogen einer Schleife in der Schnitt- 
ebene. Eine geringe Verstellung mit der Mikrometerschraube ver- 
ändert das ganze Bild. Nur bei Verwendung ganz dünner Schnitte 
und unter Benützung relativ schwacher Vergrößerungen gelang es, 
die Zahl mit der wünschenswerten Genauigkeit zu ermitteln. Mit 
Hilfe des Zeichenapparates wurden die Querschnittsbilder von 
56 Zellen abgezeichnet und während der Anfertigung der Skizzen 
die Mikrometerschraube nicht bewegt. Das dabei gewonnene Zahlen- 
ergebnis war folgendes: in 46 Fällen 36 Querschnitte, je 2mal 35 
und 34, Amal 33. In 2 Fällen blieben unklare Stellen im Bilde übrig. 
Als Durchschnitt ergab sich also für die überwiegend große Mehr- 
zahl der Fälle die Zahl 36, also die doppelte Normalzahl der Chromo- 
somen. 
Da wir es bei den besprochenen Kernen mit einem kontinuier- 
lichen Faden zu tun haben, der in kreisähnlichen Turen verläuft, 
so muß jede einzelne Schlinge zweimal getroffen werden, nach 
. dem Gesetz, daß eine Gerade einen Kreis stets an 2 Punkten schnei- 


BEER [ 6 
det. Demnach sind im Kern jetzt also 18 Fadenturen vor- 


handen oder mit anderen Worten: Im lockeren polar- 
Serichteten Knawelentspricht die Anzahl:.der 
Fadenturen der. Normalzahl: der Chromo- 
somen. 

Ebenso aber, wie die Chromosomen untereinander von ganz 
verschiedener Größe sind, so zeigen auch die Fadenturen. ganz 


196 H. Stieve: 


verschiedene Länge, sie berühren zwar alle die Kernmembran an der 
dem Centriol gegenüberliegenden Stelle, mit ihrem flachen Bogen 
erreichen sie jedoch, nur zum geringsten Teil die entgegengesetzte 
Seite der Kernmembran, zum Teil gelangen sie nur bis zur Kern- 
mitte. Zwischen diesen beiden extremen Größen finden sich alle 
Uebergangsformen, wie auch aus den betreffenden Abbildungen 
(50—58) deutlich zu erkennen ist. 

Dieser lockere, polargerichtete Knäuel stellt einen Zustand 
des Kernes der Spermatocyte dar, der schon bei den verschieden- 
sten Objekten beobachtet wurde, ja erscheint ein konstantes Stadium 
in der Spermato- und Oogenese zu sein. Bisher wurde er meist 
mit dem Namen ‚‚Bukettstadium‘ belegt. Diese Bezeichnung ist 
jedoch, wie. ich schon früher auseinandergesetzt habe, nicht gut 
gewählt. Sie geht nämlich, ganz abgesehen davon, daß ein Blumen- 
bukett niemals auch nur annähernd so aussieht wie ein Kern in 
diesem Zustand, von der irrigen Anschauung aus, daß an dem 
Zustandekommen dieses Bildes kein kontinuierlicher Faden beteiligt 
ist, sondern einzelne, bogenförmig verlaufende Chromosomen, die 
mit ihren freien Enden gegen die Sphäre zu gerichtet sind. Wie 
ich aber schon öfters betont habe, gibt es in diesem Zustand keine 
freien Enden, schon die Entstehungsweise des ganzen Bildes, die 
sich beim Olm in so besonders schöner Weise beobachten läßt, macht 
dies klar. Aber selbst wenn wir das Zustandekommen der Orientie- 
rung nicht kennen würden, so fiele es trotzdem nicht schwer, am 
vollausgebildeten pelargerichteten Knräuel die Kontinuität des 
Fadens nachzuweisen. Es ist richtig, die Schlir gen biegen in der 
Polhälfte des Kernes sehr scharf, fast spitzwinkelig um, im Gegen- 
satz zur gegenüberliegenden Seite, wo die Richtungsänderung in 
weitem Bogen ganz allmählich eıfolgt. Die Knickungsstelle mag 
auch die Grenze zwischen je 2 Chromosomen andeuten, ein Spalt 
jedoch oder eine sonstige deutliche Unterbrechung der Fadens läßt 
sich nicht nachweisen. Dies kann ohne weiteres schon häufig an 
dicken Schnitten beobachtet werden, wie sie der Abbildung AT—5l 
zugrunde liegen, noch besser aber an günstig geführten dünnen 
Schnitten, wie solche in Abbildung 53 und 54 wiedergegeben sind. 
Hier liegen jeweils nur wenige Fadenturen in der Schnittebene 
und man kann dabei ganz deutlich erkennen, daß von einer Unter- 
brechung des Fadens gar nicht die Rede sein kann. Die Chromo- 
somenzahl kommt demnach lediglich in der Anzahl der Schleifen 


2 u Sr a Er ana 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). . 197 


turen zum Ausdruck, nicht aber in einem Zerfall in einzelne ge- 
trennte Abschnitte. 


Die .seitlichen Ausläufer. 


Diese polare Orientierung bleibt ziemlich lange erhalten, ohne 
daß sich irgendwelche Veränderungen in der Lage des Fadens be- 
obachten lassen. Dagegen erleidet die chromatische Substanz in 
Bezug auf ihren Bau auch weiterhin tiefgreifende Umgestaltungen. 
Die Zusammensetzung des Spirems aus einzelnen quergestellten 
Stäbchen wird klarer und klarer, die, Stäbchen verlängern sich nach 
den Seiten (Abb. 53 und 56). Wenn dieses Wachstum stärkeren Um- 


fang angenommen hat, dann erscheinen sie nie mehr gleichmäßig 


dick, sondern deutlich spindelförmig, indem der dickste, zentrale 
Abschnitt den eigentlichen Faden bildet, während die beiden häufig 
leicht geschlungen und gewunden frei in den Kernsaft ragenden 
Enden wesentlich dünner sind. Unwillkürlich erinnert der Bau der 


. chromatischen Substanz jetzt an die in der Ovogenese so häufig 


aufgefundenen, zuerst von Rückert (1892) eingehend beschriebenen 
und als Lampenzylinderputzer-Formen bezeichneten Zustände der 
Chromosomen, nur mit dem Unterschiede, daß in den Keimbläschen 
der Eier eine zentrale Körnerreihe nicht nachgewiesen werden kann, 
während sie bei den Spermatocyten des Olmes sehr deutlich aus- 


gebildet ist. 


Die seitlichen Ausläufer werden nach und nach immer dünner 
und länger, der Unterschied gegenüber den zentralen Körnern tritt 
dadurch immer deutlicher zutage (Abb. 57, 58). Das Spirem zeigt 
jetzt wieder, wie vor der polaren Orientierung, perlschnurartigen 
Bau, nur gehen von den ‚‚Perlen‘“ seitliche Ausläufer in den Kern- 
saft. Am schönsten zeigen sich diese Bilder bei der Heidenhainschen 
Eisenhämatoxylinmethode, durch typische Kernfärbemittel kommen 
sie nicht so deutlich zum Ausdruck, da das Chromatin in diesem 
Zustand offenbar eine geringere Affinität für spezifische Kernfarb- 
stoffe ‚besitzt, es färbt sich schlechter und zwar in erster Linie die 
seitlichen Ausläufer, die stets wesentlich blasser erscheinen, als 
die zentrale Körnerreihe. Auch diese Eigenschaft haben die hier 
beschriebenen Kernformen mit den Lampenzylinderputzer-Formen 
gemeinsam, es vollziehen sich offenbar an der chromatischen Sub- 
stanz tiefgreifende chemische Veränderungen, welche Umgestaltungen 


198 H. Stieve: 


in der Zusammensetzung und damit der Reaktionsfähigkeit zur 
Folge haben. Die schlechtere Färbbärkeit ist jedoch auch hier 
niemals durch eine Auflösung oder ein völliges Verschwinden des 
chromatischen Knäuels bedingt. 


Der dicke, richtungslose -Knauel. 


Die seitlichen Ausläufer bleiben nicht lange erhalten, sie ver- 
schwinden vielmehr bald wieder, offenbar schmelzen sie ab und 
werden im Kernsaft resorbiert. Die Einleitung dieses Vorganges 
stellt ihre schlechtere Färbbarkeit dar, die sich sehr bıld auch bei 
der Eisenhämatoxylinmethode deutlich geltend macht, hier er- 
scheint dann die zentrale Körnerreihe schwarz, die seitlichen Aus- 
läufer aber hellgrau, ihre Konturen sind häufig undeutlich. Mit 
dem Abschmelzen der seitlichen Ausläufer treten feine Lininbrücken 
auf, welche die einzelnen Abschnitte des Fadens miteinander ver- 
binden und gleichzeitig geht die polare Orientierung verloren (Abb. 
59). Wenn auch die ursprüngliche Verlaufsrichtung zwar im großen 
und ganzen zunächst noch zu erkennen ist, so ziehen doch die Turen 
des Fadens jetzt wieder ziemlich regellos durch den ganzen Kern, 
sie durchsetzen ihn in großen Windungen, die sich gewöhnlich über 
die ganze Kerndicke erstrecken, Schlängelungen und feinere Win- 
dungen sind jetzt kaum mehr zu erkennen. Durch die Uebersicht- 
lichkeit des Kernbildes und vor allem durch die größere Dicke der 
Körnchen unterscheidet sich dieses Stadium ohne weiteres vom 
dünnen richtungslosen Knäuel. Das Chromatin ist jetzt eben wesent- 
lich mehr konzentriert, alles Trophochromatin ist abgegeben, die 
Windungen des Fadens sind deshalb vielmehr gestreckt. Man kann 
diesen Zustand als dicken, richtungslosen Knäuel 
bezeichnen. Auch jetzt noch zeigt es sich klar, daß der Knäuel 
ein kontinuierlicher ist, daß also noch kein Zerfall in einzelne Chromo- 
somen stattgefunden hat, denn niemals gelingt es auch jetzt, trotz 
der großen Uebersichtlichkeit des Bildes, freie Enden nachzuweisen. 

Die Flemmingfixierung kann auch bei den zuletzt beschriebenen 
Kernformen zu recht erheblichen Täuschungen führen. Der dünne 
richtungslose Knäuel wird in den oberflächlichsten Schichten meist 
vollkommen zerstört, die Kerne erscheinen dann gleichermaßen 
homogen. Mit der zunehmenden Konzentration des Chromatins 
wächst auch seine Widerstandskraft gegenüber der Osmiumsäure, 
im Stadium des polargerichteten Knäuels sind deshalb die Kern- 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 199 


strukturen meist auch in den oberflächlichsten Schichten des Hodens 
noch leidlich erhalten. Besonders schädigend wirkt jedoch der 
Einfluß der Flemmingfixierung auf diejenigen Kerne, bei denen 
das Chromatin unter dem Einfluß chemischer Umsetzungen ver- 
ringerte Färbbarkeit zeigt. Hier finden sich dann häufig bis in 
tiefere Schichten des Hodens Zellen, in denen auch mittels der 
Eisenhämatoxylinmethode keinerlei Spuren einer Struktur nach- 
weisbar sind, vielmehr erscheinen die Kerne grau, homogen, das 
Chromatin ist also durch die Osmiumsäure mehr oder weniger 
zerstört. Im Stadium des dicken richtungslosen Knäuels dagegen 
ist die Konzentration der chromatischen Substanz eine so starke, 
daß sie allenthalben den Einflüssen der Fixierung trotzt und bis 
in die oberflächlichsten Schichten meist leidlich erhalten bleibt. 


Was die als Synapsis bezeichnete Zellform betrifft, so konnte 
ich sie beim Olm in ganz seltenen Fällen nachweisen, sie betraf zumeist 
Zellen im Zustand des dünnen richtungslosen Knäuels, manchmal 
auch solche mit deutlich ausgebildeter polarer Orientierung. Da 
ich die Synapsis für eine regressive Zellform, für den Ausdruck 
der beginnenden Degeneration halte, welche niemals in den normalen 
Entwicklungsgang der Spermatocyte eingereiht werden darf, so 
werde ich auf sie erst in einer späteren Mitteilung, welche die Rück- 
bildungsvorgänge im Olmhoden behandelt, ausführlich zu sprechen 
kommen. 


Während der zuletzt beschriebenen Vorgänge haben die Sperma- 
tocyten weder ihre Größe noch auch ihre äußere Form verändert, 
ihr Kern besitzt noch immer einen Durchmesser von 20—22 u, 
die ganze Zelle einen solchen von 24—26 u. Dabei ist jedoch zu 
berücksichtigen, daß zwei Spermatocyten, welche das nämliche 
Kernbild zeigen und in ein und demselben Hoden, ja sogar in einer 
Cyste beieinander liegen, sehr beträchtliche Größenunterschiede 
aufweisen können, im Höchstfall solche von 3—4 u. Scheinbar 
unterliegen beim Olme die Zellelemente besonders starken indivi- 
duellen Schwankungen in Hinsicht auf ihre Größe, ein Umstand, 
der jedoch in Anbetracht der klaren, durch die Lage im Hoden 
gekennzeichneten Orientierung und Seriierung der einzelnen Stadien 
in keiner Weise störend wirkt. 


200 H. Stieve: 


Die Längsspaltung des Fadewsund'die Feriune 
in einzelne Chromosomen. 


Unmittelbar nachdem der Faden die polare Orientierung aut- 
gegeben hat, spaltet er sich der Länge nach in zwei Tochterfaden. 
Der Vorgang beginnt gleichzeitig an verschiedenen Abschnitten des 
Spirems, man bemerkt zuerst an einzelnen Stellen nadelösenförmige, 
längsgestellte Lücken, die sich dann zu längeren Spalten erweitern. 
Sehr bald ist die Spaltung in allen Abschnitten vollendet, die beiden 
Spalthälften rücken jedoch zunächst noch nicht auseinander,  son- 
dern bleiben parallel nebeneinander liegen, oft auf kurze Strecken 
‚wieder ganz dicht nebeneinander verlaufend, so daß hier der Längs- 
spalt nicht zu erkennen ist. In Hinsicht auf ihren Bau gleichen 
die Tochterfäden ganz dem Mutterfaden, aus dem sie entstanden, | 
sind, sie zeigen feinste Körnung, perlschnurartiges Aussehen. Die 
einzelnen Körner sind untereinander vun ziemlich gleicher Größe, 
nur an ganz vereinzelten Stellen finden sich etwas stärkere Aul- 
treibungen und Verdickungen (Abb. 60). 

Unmittelbar nach dieser Längsspaltung und noch bevor sie 
ganz durchgeführt ist, tritt auch eine Querteilung des Spirems in 
einzelne Segmente, die Chromosomen ein. Zunächst ist sie nur | 
daran zu erkennen, daß freie Enden in dem bis dahin kontinuier- | 
lichen Knäuel auftreten, ein mehr oder weniger breiter Querspalt 
trennt an verschiedenen Stellen den Zusammenhang des Fadens. 
Die Anzahl der Chromosomen läßt sich jedoch noch richt bestimmen, 
die einzelnen Teilstücke des Fadens sind von zu verschiedener Länge 
und dabei sehr stark gewunden, bald lassen sie sich durch den ganzen 
Kern hindurch verfolgen, biegen an der Oberfläche angekommen 4 
um. und verlaufen im Bogen wieder noch ein gutes Stück in den 
Kern zurück, bis der nächste Querspalt zu erkennen ist, der ihr 
Ende anzeigt. Bald wieder sind sie nur kurz und scheinen kaum 
die Länge eines halben Kerndurchmessers zu besitzen. In Hinsicht \ 
auf ihre Lagerung zeigen sie keinerlei Regel, sie überkreuzen sic 


| 
| 
| 


auch häufig, ohne sich jedoch jemals zu berühren und es ist deshalb S 
ein vergebliches Bemühen, auch mit Hilfe des Rekonstruktions- e 
verfahrens, in diesem Zustand ihre Zahl bestimmen zu wollen, so 3 
wichtig eine solche Feststellung auch vom.theoretischen Gesichts- 5 


punkt aus wäre. Deutlich läßt sich auch jetzt noch erkennen, daß ; 
die einzelnen Chromosomenpaare nicht vollkommen isoliert im & 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 201. 


Kernsaft liegen, sondern untereinander durch allerfeinste, häufig 
an der Grenze des Sichtbaren liegende Lininbrücken verbunden 
sind. Diese sind ja seit dem Abschmelzen. der seitlichen Ausläufer 
und dem Verschwinden der polaren Orientierung stets vorhanden. 
und verbinden die einzelnen Abschnitte des kontinuierlichen Knäuels 
und nach seinem Zerfall die einzelnen Chromosomen miteinander. 
In der Folgezeit werden sie deutlich und deutlicher, sie verschwinden 
erst wieder nach der Auflösung der Kernmembran und dem Ein- 
tritt der Chromosomen in die Spindel der ersten Reifungsteilung. 
Unter ihrem Zug vollzieht sich wohl in der Hauptsache die Ver- 
lagerung der Chromosomen gegeneinander, die in der nächsten 
Zeit beobachtet werden kann. 


Die Pseudoreduktion durch Tetradenbildung. 


Zuerst erfolgt nun eine Verkürzung der einzelnen Chromo- 
somenpaare, die mit einer Verdickung Hand in Hand gebt, es findet 
also abermals eine Konzentration des Chromatins statt, beziehungs- 
weise der Vorgang, welcher während der ganzen Entwicklung der 
Spermatocyten am kontinuierlichen Faden zu beobachten war, 
setzt sich auch jetzt nach dem Zerfall an den einzelnen längsgespal- 
tenen Chromosomen fort. Bald erscheinen sie wesentlich dicker, 
zeigen auch häufig, besonders an Stellen, an denen sie ihre Verlaufs- 
richtung ändern, plumpe, knopfförmige Auftreibungen (AFb..6t}). 
Auch jetzt gelingt aber die Feststellung der Zahlenverhältnisse 
noch nicht, da die einzelnen Gebilde noch immer zu unregelmäßigen 
Verlauf zeigen und an Größe zu verschieden sind. Bald erblickt 
man leicht hackenförmig gebogene, bald U- oder S-förmig ver- 
laufende Paare, bald solche, die auf large Strecken hin wellenförmig 
getogen, ja selbst korkzieherartig gewunden erscheinen. Stets 
führen dabei die beiden Spalthälften alle Biegungen und Windungen 
gemeinsam aus, sie liegen im großen und ganzen genau parallel, 
kaum %—1 u voneinander entfernt, und nähern sich von Zeit zu 
Zeit bis zur Berührung. Ob dabei eine Ueberkreuzung der beiden 
Hälften erfolgt, läßt sich in diesem Stadium noch nicht feststellen. 
Das Protoplasma zeigt nach wie vor den nämlichen netzigen Bau, 
das Centriol ist gespalten und liegt in der kleinen, meist kreisrunden 
Sphäre, die Sphärenmembran läßt sich. hie und da deutlich darstellen. 

Uebersichtlich erscheinen die Kernbilder jetzt wieder tei 
Flemmingfixierung, wo das Chromatin geschrumpft und der Kern- 


202 H. Stieve: 


saft homogen erscheint, da die Lininbrücken fast ganz zerstört 
sind (Abb. 62, 63). Hier kann man jetzt häufig an den Chromosomen 
stachel- und dornförmige seitliche Auswüchse erkennen, die bei 
anderen Fixierungsarten nicht in Erscheinung treten, also gleich- 
falls wohl eine Folge der Osmiumsäurewirkung und der durch sie 
erzeugten ungleichmäßigen Schrumpfung des Chromatins sind. Jetzt 
färben sich die Chromosomen sehr deutlich und intensiv mit allen 
Kernfarbstoffen, besonders schön sind die mit der Dreifachfärbung 
erzielten Bilder, während die Eisenhämatoxylinmethode die eben 
beschriebenen Stadien nicht so klar zur Anschauung bringt. Die 
Niederschläge setzen sich nämlich oft hartnäckig zwischen den 
Chromosomenpaaren fest (Abb. 64); diese erscheinen dann als 
breites, plumpes Band, während an anderen Stellen der feine Bau 
der Chromosomen deutlich zutage tritt. Setzt man aber die Differen- 
zierung länger fort, dann entfärben sich die ursprünglich gut dar- 
gestellten Paare vollkommen und dann erst kommt an den zuerst 
bandförmig erscheinenden Abschnitten die Doppelstruktur der 
Fadengebilde zur Geltung. Es sind dies Fehlerquellen, die in der 
Natur des Verfahrens begründet sind und der künstlichen Nıu:kleolen- 
erzeugung an die Seite gestellt werden können, die ja leider die Ver- 
wendbarkeit der sonst so vorzüglichen Methode etwas einschränken. 

Durch die fortschreitende Konzentration des Chromatins ge- 
winnt das Kernbild mehr und mehr an Uebersichtlichkeit. Die 
Chromosomenpaare werden weiterhin kürzer und dicker, bald er- 
kennt man deutlich, daß die beiden Spalthälften nicht mehr neben- 
einander liegen, sondern umeinander gewunden sind, sich dabei 
mehrfach überschneidend, sie können sich zwei-, drei- und mehrmals 
überkreuzen, wodurch die bekannten Bilder entstehen. Ebenso wie 
die Länge, so ist auch die Form der einzelnen Paare noch immer 
sehr verschieden, häufig erscheinen sie hufeisenförmig get ogen, 
die beiden Schenkel dieser Schleife liegen auf lange Strecken hin 
parallel, so daß hier vier Einzelfaden nebeneinander zu liegen scheinen. 
Mit der zunehmenden Uebersichtlichkeit des Kernbildes tritt auch 
mehr und mehr eine Erscheinung zutage, die sich bis dahin nicht 
deutlich beobachten ließ. Während nämlich im allgemeinen die 
Chromosomenpaare vollkommen regellos im Kern zu liegen scheinen, 
also keinerlei gegenseitiges Abhängigkeitsverhältnis zeigen, erblickt 
man nunmehr häufig auch Paare, deren Längsachse unmittelbar 
ineinander übergeht, und die nur durch einen schwachen Querspalt 


20% 3 10. Me er 


re nA u a 


re A Er "a > 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 203 


voneinander getrennt sind. Dieser kann so gering sein, daß es oft 
schwer fällt, seine Anwesenheit überhaupt festzustellen und gerade 
dieser Umstand macht die Ermittlung der Chromosomenzahl auch‘ 
jetzt noch äußerst schwierig. Am klarsten liegen die Verhältnisse jetzt 
wieder in mit Flemmingscher Flüssigkeit fixierten Kernen, in denen 
lediglich die Chromosomen dargestellt sind und infolge der starken 


 Schrumpfung ihrer Substanz die Abstände zwischen den einzelnen 


Fadenpaaren größer und deutlicher erscheinen als sie es tatsächlich 
sind. Mit Hilfe des Rekonstruktionsverfahrens gelang es mir bei 
einer ganzen Reihe derartiger Kerne (Abb. 62, 65), die Zahl der 
Chromosomenpaare zu ermitteln; sie beträgt 18, ist also 
gleich der Normalzahl der-Chromosomen. Bei 
anders konservierten Kernen gelingt die Feststellung der Zahl nur 
in Ausnahmefällen, gewöhnlich bleiben hier einige unklare Stellen 
zurück, bei denen sich nicht mit Bestimmtheit entscheiden läßt, ob 
es sich um ein einziges oder zwei durch Querspalt getrennte Einzel- 
paare handelt. Die an 20 mit Sublimateisessig fixierten Zellen 
gewonnenen Ergebnisse sind folgende: Sınal, also fast in der Hälfte 
der Fälle waren 9 Paare vorhanden, 5mal 18 Paare, in den übrigen 
Fällen fanden sich je Imal 17, 15, 12, je 2mal 11 und 10 Paare. 
Die aufgefundenen Zahlen bewegen sich also durchweg zwischen 
der Normalzahl der Chromosomen 18 und ihre Hälfte 9. Die Er- 
klärung für dieses auf den ersten Blick recht merkwürdige Verhalten 
ist leicht zu geben, wenn man die weiteren Vorgänge im Kerne 
berücksichtigt, ich komme daher erst weiter unten auf sie zu'sprechen. 

Das Chromatin erfährt weiterhin eine noch stärkere Kon- 
zentration, die Chromosomen verkürzen und verdicken sich noch 
beträchtlich. Durch diesen Vorgang wird auch die Zahl der gegen- 
seitigen Ueberkreuzungen und Verschlingungen verringert, die Paare 
sind bald auch nicht mehr so stark gewunden, sondern erfahren eine 
mehr oder weniger große Streckung. Gleichzeitig legen sich je 
zwei Chromosomenpaare mit ihren Enden aneinander und ver- 
schmelzen vollkommen miteinander, so daß es bald nicht mehr ge- 
lingt, den ursprünglich trennenden Querspalt nachzuweisen. Diese 
Vereinigung war ja vom Beginn der Teilung des Fadens an vor- 
bereitet, denn man findet stets in allen Kernen nach dem Zerfall 
des dicken Knäuels Chromosomenpaare, welche mit ihren Enden 
mehr oder weniger nahe aneinander liegen und so ihre Zusammen- 
gehörigkeit kennzeichnen. An vielen Stellen ist diese allerdings 


204 H. Stieve: 


nicht so deutlich ausgeprägt, da häufig die beiden zusammengehören- 
den Paare unter einem Winkel aneinanderstoßen; manchmal finden 
sich auch einzelliegende Chromosomenpaare, welche keinerlei Zu- 
gehörigkeit zu anderen Paaren erkennen lassen. Offenbar findet 
die endweise Vereinigung von je zwei Paaren nicht bei allen Ele- 
menten eines Kernes gleichzeitig statt und diesem Umstand sind 
die Unterschiede in den oben angeführten Ergebnissen meiner 
Zählungen zuzuschreiben. 


Ursprünglich sind in jedem Kern 18 Chromosomenpaare vor- 
handen. Von ihnen vereinigen ‘sich je 2 miteinander, das End- 
ergebnis, durch das die Pseudoreduktion bewirkt wird, sind also 
9 Chromosomengruppen. Wie schon erwähnt erfolgt diese Kon- 
jugation bei den einzelnen Gebilden eines Kernes zu verschiedenen 
Zeiten und das Ergebnis einer Zählung wird verschieden ausfallen, 
je nachdem wieviel Paare sich schon vereinigt haben. Im günstigsten 
Fall, besonders bei Flemmingfixierung, kann man alle Paare ge- 
trennt voneinander darstellen, bei anderen Konservierungsmethoden 
gelingt selbst in sehr übersichtlichen Kernen, also solchen, in denen 
die Konzentration des Chromatins eine beträchtliche ist, niemals 
die Isolierung aller Gebilde und dementsprechend finden sich 
hier häufiger 9 Chromosomengruppen als 18 und sehr häufig Zahlen, 
die zwischen den beiden liegen, da eben einige Chromosomenpaare 
schon verschmolzen sind, andere aber nicht. Nach vollzogener 
Vereinigung weist aber zunächst keine Erscheinung mehr auf den 
Vorgang selbst hin. Die einzelnen Chromosomen sind untereinander 
an Länge äußerst verschieden (Abb. 65, 66), sie können in dieser 
Hinsicht um das 3—-4fache differieren, die Größe bietet uns also 
keinerlei Anhaltspunkt für die vollzogene Vereinigung. Häufig ver- 
schmelzen auch nicht gleich lange Paare mitein“nder, sondern es 
kann fast als Regel bezeichnet werden, daß sich besonders lange 
Gebilde mit besonders kurzen vereinigen; dadurch erfolgt ein 
gewisser Größena.isgleich, als dessen Folge die Chromosomengruppen 
nicht mehr so stark in bezug auf ihre Länge voneinander verschieden 
sind, als die einzelnen Paare. Allerdings finden sich bis zum Eintritt 
der Chromosomen in die Spindel der ersten Reifungsteilung manch- 
mal auch noch einzelliegende Paare, die sich stets durch ihre geringe 
Größe auszeichnen und zu Unterschieden in den Ergebnissen der 


ee ee ea” 


a a 


ee 


ENG 


Zählung führen können. Es kann eben die Vereinigung der Chromo- . 


2 
| 

» 
A 
% 
% 

> 

y 
3 
a 
) 


eu 
- 


a Denn u DE 2 Kiez pain a) a 


BEN 


et a an 


Ar 


7 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 205 


somen erst sehr spät, selbst erst in der Prophase der ersten Reifungs- 
teilung erfolgen. 

Durch die endweise Konjugation von 2 Chromosomenpaaren 
kommt es zur Ausbildung von echten Vierergrunpen, also Gebilden, 
die aus 4 einzelnen Chromatinelementen zusammengesetzt sind. 
Ueber ihre Entstehung kann beim Olm kein Zweifel bestehen, 
Sstesertolgt durch emdweise, Vereintgung je 
zweier längsgespaltener Chromosomen. 

Wenn sich die Konjugation an allen oder wenigstens der über- 
wiegend großen Mehrzahl der Chromosomenpaare vollzogen hat, 
dann liegen die Verhältnisse in den Kernen, auch als Folge der 
immer stärker werdenden Konzentration des Chromatins, wesentlich 
klarer und die Feststellung der Zahlenverhältnisse gelingt jetzt 
mit der wünschenswertesten Sicherheit. Am frühesten ist sie wieder 
bei Flemmingfixierung möglich; Abbildung 67 zeigt einen derartigen 
Kern, die Lininbrücken sind nicht erhalten, die Chromosomen zeigen 
unregelmäßige Oberfläche, als Wirkung der Fixierung. Es sind 
9 Tetraden vorhanden, aber nur an einer einzigen von ihnen (rechts 
im Bilde) ist ein deutiicher Querspalt zu erkennen. Bei mehreren 
ist die Verschmelzungsstelle durch eine zum Teil sehr scharfe, winke- 
lige Knickung gekennzeichnet, eine Erscheinung, die später zur 
Regel wird, die man aber sehr häufig schon jetzt beobachten kann. 
Eine Tetrade (links oben) zeichnet sich durch besondere Kürze aus. 

Die Verkürzung und Verdickung der Chromosomen, also die 
Konzentration des Chromatins schreitet weiterhin gleichmäßig fort. 
Gleichzeitig lösen sich die gegenseitigen Verschlingungen der Spalt- 
hälften, sie liegen jetzt, wenn es sich um sehr kurze Gebilde handelt, 
entweder parallel oder sich einmal überkreuzend beieinander, die 
längeren bilden noch die bekannten 8- und X-förmigen Figuren. 
Dabei ist die endweise Vereinigung der beiden zu einer Tetrade 


. gehörigen Paare so fest geworden, daß ein Querspalt nie mehr 


nachzuweisen ist, die Pseudoreduktion ist jetzt also beendet. Wenn 
man die Entstehung nicht beobachtet, sondern lediglich die jetzt 
beschriebenen Formen zu Gesicht bekommen hätte, dann könnte 
man jetzt jede Tetrade für ein einziges längsgespaltenes Chromosoma 
halten, dessen Spalthälften sich umeinander schlingen. Wie schon 
erwähnt finden sich aber auch jetzt noch manchmal einzelne Paare, 
bei denen die Vereinigung unterblieben ist. Abbildung 68 stellt 


einen solchen Fall dar, die Zelle ist aus drei Schnitten rekonstruiert, 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 14 


206 i H. Stieve: 


die im ersten Schnitt liegenden Elemente sind ausgezeichnet, die 
andern als Schatten angedeutet. Im ganzen waren 10 Chroimatin- 
gebilde vorhanden, zweifellos gehören jedoch die beiden kleinen, 
in der Abbildurg zu unterst gelegenen, zu einer einzigen Tetrade, 
obwohl sie noch ziemlich weit voneinander entfernt liegen. Nur 
durch die Richtung ihrer Längsachse deuten sie ihre Zusammen- 
gehörigkeit an. 

Zellen wie die eben beschriebenen finden sich in großer Anzahl 
als Beleg dafür, daß die Chromosomen in diesem Zustand ziemlich 
lange verweilen, bevor sie in die erste Reifungsteilung eintreten. 
Ich habe die Zahlenverhältnisse bei einer ganzen Reihe derartiger 
Zellen festgestellt, meistens, d. h. unter 3 Fällen 2mal, sind 9, sonst 
10 Chromosomengruppen vorhanden. Im letzteren Falle konnten 
aber last immer 2 von ihnen, so wie jetzt eben geschildert wurde, 
auf Grund ihrer geringen Größe und der besonderen Lage als zu- 
sammengehörig gekennzeichnet werden. Die Zahl der Tetraden 
können wir, wie nach ihrer Entstehungsweise ja ganz selbstverständ- 
lich ist, auf 9, also gleich der Hälfte der Normalchromosomenzahl 
festsetze::. 

Untereinander sind die einzelnen Tetraden auch jetzt noch 
durch Lininbrücken verbund‘r, die an Dicke ständig zunehmen 
und dadurch an Deutlichkeit gewinnen. Bald erkennt man, daß 
auch sie leicht gekörnt erscheinen, ja sogar perlschnurartigen Bau 
zeigen können. Sie setzen allenthalben an den Chromosomen an und 
bewirken offenbar die gegenseitigen Lageveränderungen dieser Ge- 
bilde. Ob sie durch ihren Zug auch die endweise Vereinigung der 
Chromosomenpaare bedingen oder ob für diesen Vorgang andere 
Kräfte, die vielleicht in den Chromosomen selbst gelegen, sich 
unserer Beobachtung entziehen, verantwortlich zu machen sind, 
läßt sich nicht feststellen. Die Kernmembran ist in diesem Zeit- 
punkt noch deutlich darstellbar, am Protoplasma und seinen Ein- 
schlüssen haben sich keinerlei Veränderungen vollzogen. Der von 
0. Hertwig als Wachstumsperiode bezeichnete Abschnitt der 
Spermatocytenentwicklung ist, mit diesen Stadium abgeschlossen, 
es beginnt nunmehr die erste Reifungsteilung. 


Die erste Reifungsteilung. 


Der Kern besitzt jetzt einen Durchmesser von 22—24 u, die 
ganze Zelle einen solchen von 26—30 u, die Größenzunahme seit 


; 
| 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 207 


der Ausbildurg des dünnen richtungslosen Knäuels ist also eine 
ganz unbedeutende, falls überhaupt von einer solchen gesprochen 
werden kann. Zweifellos findet aber während der Prophasen 
der ersten Reifungsteilung noch eine Vermehrung des Protsplasma 
und damit eine Vergrößerung der ganzen Spermatocyte statt. Denn 
während unmittelbar nach dem Verschwinden der Kernmembran 
der Durchmesser der ganzen Zelle 30 « kaum übersteigt, so beträgt 
er in den Metaphasen und Anaphasen bis zu 40 « und darüber. 
Eine geringe Vergrößerung des Gesamtdurchmessers mag wohl 
dadurch bedingt sein, daß der kegelförmige Protoplasmazipfel, in 
welchem die Sphäre gelegen ist, zu Beginn der eigentlichen Mitose 
eingezogen wird, die Zelle besitzt dann wieder kugelige oder längs- 
ovale Form. Eine so beträchtliche Größenzunahme, wie sie jedoch 
während der Mitose zu beobachten ist, kai:n durch die Einziehung 
des Protoplasmas allein nicht erklärt werden, sie muß demnach 
auf einem tatsächlichen Zellwackstum beruhen, das sich während 
der Vorgänge im Zellinneren, Hand in Hand mit diesen, abspielt 
und so die entsprechende Kernplasmarelation bei den Tochterzellen 
bewirkt. Den nämlichen Vorgang konnte ich ja schon bei der Tei- 
lung der Spermatogonien im Ruhehoden beobachten, während er 
bei den massenhaften Spermatogonienteilungen zu Beginn der 
Geschlechtsperiode nicht so deutlich zu erkennen ist, ein Umstand, 
der wohl in erster Linie aie starke Verkleinerung der Spermatogonien 
während dieses Zeitabschnittes erklärt. 

Das erste Zeichen der beginnenden Teilung ist das Verschwinden 
der Kernmembran. Sie wiıd dünner und dünner, zerfällt schließ- 
lich wieder zuerst an der der Sphäre zunächst liegenden Stelle und 
kurze Zeit darauf vollständig. Mit ihr verschwinden auch die Linin- 
fäden, welche bis dahin die einzelnen Tetraden untereinander ver- 
bunden hatten, und als Folge davon werden die Tetraden in der 
ganzen Zelle verteilt (Abb. 69, 70). Dabei kann man häufig be- 
obachten, daß sich in der Mitte des Plasmaleibes eine größere Anzahl 
vor ihnen, meist 3—5, zusammenballen und so zur Bildung stern- 
förmiger Figuren, ähnlich wie in den Telophasen der Teilungen 
führen. Ob es sich dabei stets um ganz natürliche Bilder oder um 
Fixierungsprodukte bzw. mehr oder weniger krankhafte Erschei- 
nungen nandelt, läßt sich nicht mit voller Sicherheit entscheiden, 
ich glaube jedoch, daß wir es mit normalen Verhältnissen zu tun 
haben. Bis zur Auflösung der Kernmembran regelt das Liningerüst 

14* 


208 H. Stieve: 


die Lageverhältnisse der Tetraden, nach seinem Verschwinden aber 
unterliegen sie offenbar keinem richtenden Einfluß mehr, solange 
bis sich die Spindelfasern an ihnen ansetzen und durch ihren Zug 
die gegenseitige Lage bestimmen. In dem kurzen, zwischen den 
beiden Perioden liegenden Abschnitt kommt es nun offenbar häufig 
zu außergewöhnlichen Lageverhältnissen, die von irgendwelchen 
uns noch unbekannten Verhältnissen abhängig sind. jedenfalls 
können wir in dieser Zeit keinerlei Bildungen beobachten, welche 
irgendeinen lagebestimmenden. Einfluß auf die Tetraden ausüben. 
Die nämlichen. Vorgänge lassen sich übrigens auch bei.den Spermato- 
gonienteilungen beobachten, nur nicht in gleich schöner Ausbildung 
wie hier. Das Protoplasma zeigt während dieser Zeit netzigen Bau, 
die einzelnen Fasern des Netzes lassen deutlich eine Zusammen- 
setzung aus feinen Körnern erkennen. Die Centriolen liegen nahe 
beieinander, die Sphärenmembran ist verschwunden, einzelne Spindel- 
fasern sind zu erkennen, sehr deutlich sichtbar sind. die Randstrahlen. 
In der Folgezeit rücken die Centriolen rasch auseinander, die 
Strahlung wird deutlicher (Abb. 71), am schönsten: darstellbar sind 
aber die Randstrahlen, während die eigentlichen Spindelfasern 
kaum zu erkennen sind. Während der Zelleib nun die oben erwähnte 
Vergrößerung erfährt, werden die Tetraden in der einen Hälfte 
der Zelle zusammengedrängt, die Centriolen liegen zuerst in der 
Mitte und rücken dann, gleichzeitig sich voneinander entfernend, 
in die andere Hälfte der Zelle. Nunmehr heiten sich die Strahlen 
an den chromatischen Gebilden an und unter ihrem Zug geht die 
folgende Verlagerung vor sich (Abb. 72). Ä 
Mit dem weiteren Auseinanderrücken gelangen die Coiriolan 
an die beiden Zellpole, durch den Zug der Fasern werden die Te- 
traden zwischen sie gelagert und in den Mutterstern eingeordnet. 
Bis zu diesem Zeitpunkt sind aber auch noch wichtige Verände- 
rungen an den Chromosomen selbst vorgegangen, deren Beschreibung 
uns zunächst obliegt. Das Chromatin hat sich weiterhin konzentriert, 
gleichzeitig sind die gegenseitigen Ueberkreuzungen der beiden Spalt- 
hälften der Chromosomen aufgehoben, die beiden Längshälften 
liegen nunmehr stets parallel zueinander. Hand in Hand damit wird 
die winkelige Knickung an der Vereinigungsstelle der Chromosomen- 
paare, die schon vorher in vielen Fällen mehr oder weniger deutlich 
ausgebildet war (Abb. 70), stärker und stärker, bis schließlich der 
Winkel 60° und darunter beträgt (Abb. 71, 73, 74). Bei günstiger 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 209 


Lagerung und entsprechender Fixierung und Färbung kann man 
jetzt neuerdings den Querspalt in den Tetraden erkennen (Abb. 70. 
74). Natürlich kommt diese Winkelstellung nur dann voll zur 
Gelturg, wenn die Ebene des Winkels mit der Schnittebene zu- 
sammenfällt. Die Erscheinung ist um so undeutlicher zu sehen, 
je kleiner der Winkel ist, den die beiden Ebenen miteinander bilden, 
und kommt überhaupt nicht zur Anschauung, wenn die Winkel- 
ebene senkrecht auf die Schnittebene steht. 

Hat die Konzentration des Chromatins ihren Höhepunkt er- 
reicht, dann ist jegliche Ueberkreuzung und Verschlingung der 
Chromosomenlängshälften verschwunden, diese liegen vollkommen 
parallel zueirander. Das Bild, welches eine Tetrade in diesem Zu- 
stand bietet, ist vollkommen abhängig von der Schnittrichtung. 
Liegt die Winkelebene in der Schnittebene, dann kommt die Knik- 
kung und mit ihr der Querspalt deutlich zur Anschauung, das Bild 
ist also schematisiert, so wie es die beifolgende Textabbildung 2 


EEE 
& > EREEER 
Textabb. 2. Textabb. 3. 


darstellt (Abb. 71). Steht aber die. Winkelebene senkrecht zur 
Schnittebene, dann erscheint die Tetrade als geradegestrecktes 
Gebilde, der Querspalt ist nicht oder nur undeutlich zu erkennen, 
umso deutlicher aber der Längsspalt und es bietet sich dann ein 
Bild, wie es Textabbildung 3 wiedergibt (Abb. 72 Mitte). Meist 
kann man jetzt auch erkennen, daß an der Stelle der endweisen 
Vereinigung der beiden Chromasomen bzw. ihrer Spalthälften eine 
leichte Verdickung auftritt (Abb. 72). Zumeist nehmen jedoch die 
Tetraden eine Lage ein, die ein Mittelding zwischen den beiden 
eben beschriebenen Extremen bildet, es kommt dann sowohl -die 
Knickung als auch der Längsspalt zur Anschauung, dieser letztere 
allerdings nur unvollkommen (Abb. 74). 

Jetzt können wir also an jeder Tetrade einen Querspalt unter- 
scheiden, der die Vereinigungsstelle der beiden Chromosomen kenn- 
zeichnet und «inen Längsspalt, welcher die Längshälften jedes 
Chromosoma voneinander trennt und für je zwei konjugierte Chromo- 
somenpaare in einer Ebene liegt. Zunächst erscheint der Querspalt 


210 H. Stieve: 


sehr klein und schmal, der Längsspalt aber sehr lang und deutlich. 
Das Einrücken der Vierergruppen in den Aequator der ersten Rich- 
tungsspindel erfolgt nun stets in der Art und Weise, daß sich der 
Längsspalt in die Aequatorialebene einstellt, der Querspalt aber 
senkrecht zu ihr, also in der Richtung der Spindelfasern. In der a 
Seitenansicht der Spindel ist dabei von der winkeligen Knickung b 
der Tetraden nichts zu beobachten (Abb. 72), sie kommt nur in der 
Polansicht zur Geltung (Abb. 73—77). Hier zeigt es sich deutlich, 

daß eine Gesetzmäßigkeit in bezug aui die Lage besteht, die wir 
schon von somatischen Mitosen her kennen, indem nämlich die 
Spitze des Tetradenwinkels stets zentralwärts, gegen die Symmetrie- 
achse der Spindel zu gewendet ist, die beiden Schenkel aber, also 

die freien Enden der Tetraden gegen die Zelloberfläche. Die Deut- 
lichkeit, in der sich diese Vorgänge zeigen, ist im großen und ganzen 
unabhängig von der Konservierungsart, sie kommen jedoch am 
schönsten in allen Einzelheiten bei Flemmingfixierung zur Geltung. 
Fast niemals bieten jetzt aber zwei Tetraden in einer Zelle das 
nämliche Bild. Denn ganz abgesehen von der verschiedenen Größe 

ist auch ihr Entwicklungszustand. ein ganz verschiedener. 

In der ersten Reifungsteilung werden dann die beiden durch 
Längsspaltung entstandenen Hälften einer Tetrade voneinander 
getrennt, während die endweise vereinigten Teile beeinänder bleiben, 
also auf die gleiche Tochterzelle gelangen. Während dieses Vorganges 
verändern die Vierergruppen ihre Form sehr beträcl:tlich. Allem 
Anschein nach setzen die Spindelfasern, durch deren Zug die Tren- 
nung erfolgt, Ir:diglich an den zentralen, vereinigten Enden der 
Chromosomen an und ziehen diese zunächst auseinander. Als Folge 
dieses Vorganges wird der Längsspalt in den Vierergruppen ver- 
kürzt, der Querspalt aber verlängert und es entstehen so Kreuz- 
und rautenförmige Bilder, die besonders schön in der Seitenansicht 
der Spindel zu beobachten sind (Abb. 81 Mitte). Bei bestimmter 
Seitenansicht (Abb. 79 rechts und links), d. h. wenn die Spalten 
nicht in der Schnittebene liegen, bieten die Vierergruppen jetzt 
T-förmige Bilder, der Querstrich des T wird dabei durch die aus- 
einandergezogenen konjugierten Enden der Chromosomen gebildet. 
Auf Schnitten, welche die Spindel in der Polansicht zeigen, kommt 
die Form der Tetraden jetzt nur mehr an ganz günstigen Stellen 
richtig zur Geltung, es macht sich dabei der Umstand unangenehm 
bemerkbar, daß niemals alle -Vierergruppen in einer Ebene liegen, 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 211 


‚sondern stets ganz verschieden von den Polen der Zelle entfernt 
sind. Das Schnittbild ist daher ein ganz anderes, je nachdem in 
welcher Höhe es die Tetrade trifft. 


Textakbildung 4 gibt eine Vierergruppe in diesem Zustand in 
stark vergrößertem Maße schematisch wieder. Bei einem Schnitt 
durch diese in der Richtung a—b kommt die Winkelknickung zur 
Geltung, die Tetrade erscheint, wie es 
Abbildung 5 wiedergibt, in zwei getrenn- 
ten Stücken. Ein Schnitt in der Rich- 

“ tung c—d wird ein Bild liefern, wie es 

Abbildung 6 wiedergibt, auf dem deut- 

lich zum Ausdruck kommt, daß der Quer- 

schnitt jeder Chromosomenhälfte längs- Textabb. 4. 

oval, fast rechteckig ist. Von der Knickung 

ist in diesem Tetradenteil nichts mehr zu bemerken. Es kann aber 
auch der Fall eintreten, der durch die Linie e—f angedeutet ist, daß 
nämlich die Tetrade schief in der Schnittebene liegt, dann zeigt sie ein 


IN U 1:89 


Textabb. 5. Textabb. 6. Textabb. 7. 


Bild, wie es Abbildung 7 darstellt, es erscheinen drei getrennt vonein- 
anderliegende Chromatinbrocken. Die eben geschilderten Verhält- 
nisse erklären es, daß ein Schnitt senkrecht zur Symmetrieachse der 
Spindel der ersten Reifungsteilung nur unübersichtliche Bilder 
liefert (Abb. 73--77). Die Tetraden zeigen die verschiedensten 
Lagen, meist finden sich nur vereinzelte Chromatinklumpen in 
. mehr oder weniger großer Anzahl, deren Zusammengehörigkeit 
sich nicht mehr feststellen läßt, da bei der dichten Lagerung der 
- Vierergruppen das Rekonstruktionsverfahren versagt. Schrägschnitte 
durch die Spindel zeigen zwar die Form einzelner Tetraden recht 
deutlich (Abb. 78), geben jedoch keinen sicheren Aufschluß über 
ihre Zahl. Dagegen gelingt es sehr leicht bei genau in der Richtung 
der Symmetrieachse geschnittenen Zellen durch Rekonstruktion 
die Zahl der Chromatinelemente, die nach wie vor 9 beträgt, fest- 
zustellen. In ganz vereinzelten Fällen findet man aber auch jetzt 
noch 10 Chromatingruppen, stets liegt dann ein besonders kleines 


212 H..Stseve:.., 


Gebilde noch außerhalb der Spindel (Abb. 78, 79). Ob es sich dabei 
um abnorme Zustände oder um eine sehr stark verspätete Kon- 
jugation einzelner Chromesomen handelt, vermag ich nicht zu 
entscheiden. | 

Während des weiteren Ablaufes der Mitose gewinnen die Kern- 
bilder wieder an Uebersichtlichkeit (Abb. 80 ff.). Die Spalthälften 
der Tetraden rücken weiter auseinander, dauernd erfolgt dabei 
aber der Zug der Spindelfasern nur an den beider konjugierten 
Enden der Chromosomen und nur diese nähern sich zunächst den 
Polen und ziehen selbstverständlich die übrigen Teile nach Sich. 
Dadurch verändern die Vierergruppen ihre Gestalt fortdauernd. 
Der ursprüngliche Längsspalt wird kürzer und kürzer und in gleichem 
Maße verlängert sich der Querspalt. Schließlich liegen die anfangs 
endweise vereinigten Spalthälften je zweier Chromosomen voll- 


u a Zu En 


d 
Textabb. 8. 


ii. 
AN 


9 h 


kommen parallel und berühren sich nur an einem freien Ende. 
Dadurch kommt es zur Ausbildung von ring- oder besser gesagt 
ösenförmigen Figuren (Abb. 82, 83). Sehr deutlich tritt dabei die 
Tatsache in Erscheinung, daß die beiden konjugierten Chromosomen- 
paare ungleich lang sind, denn bei dem endgültigen Auseinander- 
rücken bleibt die eine Seite der Oese meist !änger zusammenhängen 
als die andere (Abb. 82). 

Der ganze etwas verwickelte Vorgang läßt sich am besten an 
Hand von schematischen Zeichnungen erörtern, wie sie Textapbil- 
dung 8 wiedergibt. a zeigt zwei etwa gleich große längsgespaltene 
Chromosomen vor der endweisen Aneinanderlagerung, die beiden 
Spalthälften sind jeweils mehrfach umeinander geschlungen. b läßt 
die winkelige Stellung nach vollzogener Vereinigung erkennen, gleich- 
zeitig die hochgradige Konzentration des Chromatins. c zeigt den 
Zustand beim Eintritt in die Aequatorialplatte und zwar die obere 
Skizze, wie auch in den folgenden Bildern, jeweils in der Seiten- 


re 
7 Ki r 
Pi 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 213 


ansicht der Spindel, die untere in der Polansicht. In der ersteren 
ist die Parallelstellung der Spalthälften und der deutliche Längs- 
spalt, im Gegensatz zu dem kleinen kaum angedeuteten Querspalt 
zu erkennen, in der letzteren lediglich die winkelige Knickung, 
welche den Ort des Querspaltes angibt. d zeigt den Beginn des 
Auseinanderrückens, die Bildung einer rautenförmigen Figur, in 
Polansicht ist das Bild ähnlich wie bei c. e und f geben den weiteren 
Verlauf des Vorganges wieder, die Verlagerung der vier Einzelteile 
der Tetrade, welche eine weitere Verlängerung des Quer- und 
Verkürzung des Längsspaltes bis zu dessen völligem Verschwin- 
den zur Folge hat. g zeigt eine ösenförmige Figur, welche die ver- 
schiedene Länge der konjugierten -Chromosomen zur Anschauung 
bringt, die rechts gelegenen längeren Spalthälften liegen noch auf 
eine größere Strecke hin parallel, während die links gelegeren kürze- 
ren sich nur noch mit den Enden berühren. h zeigt die vollzogene 
Trennung. 

Die beiden auf die Tochterzellen auseinanderrückenden Längs- 
hälften der Tetraden stellen nunmehr stets U-förmige Gebilde dar, 
welche aus 2 nunmehr parallel gelagerten Spalthälften der beiden 
endweise vereinigten Chromosomen bestehen. Dabei vollzieht sich 


die Teilung an allen Vierergruppen einer Zelle niemals vollkommen 


synchron, sondern die größeren benötigen für diesen Vorgang längere 
Zeit als die kleineren. Dementsprechend sieht man in den Metaphasen 
der ersten Reifungsteilung stets Bilder, wie sie Abbildung 83 und 84 
wiedergeben, in denen nur noch vereinzelte Tetraden zusammen- 
hängen und ösenförmige Figuren bilden, während im übrigen die 
Verteilung der Chromosomen schon vollzogen ist. 


Im Verlaufe der ersten Reifungsteilung wickeln sich also zwei 
Vorgänge gleichzeitig nebeneinander ab, nämlich 


l. die Trennung der durch Längsspalt geschiedenen Längs- 
hälften jeder Vierergruppe und ihre Verteilung auf die Tochter- 
zellen und 


2. die Parallellagerung der beiden vorher endweise ver- 
einigten Teile jeder Längshälfte. 


Dabei sind die beiden Teile der Vierergruppe, welche auf die 
beiden Tochterzellen gelangen, vollkommen gleichwertig und gleich- 
groß, sie sind ja durch Halbierung zweier Chromosomen entstanden. 
Dagegen sind die beiden Querhälften, die früher nur endweise ver- 


214 H. Stieve: 


einigt, sich während der Diakinese nebeneinander legen, in Bezug 
auf ihre Länge verschieden. 


An jedem Pol der Spermatocyte befinden sich jetzt also 9 huf- 
eisenförmige Chromatingebilde, deren jedes aus zwei stäbchen- 
förmigen Einzelelementen besteht, die mit eirem Ende aneinander- 
gelagert sind. Diese Vereinigurgsstelle ist gegen das Centriol zu 
gerichtet, während die freien Enden gegen die Peripherie sehen. 
Häufig ist an den Chromosomen jetzt die Andeutung eines sekundären 
Längsspaltes zu erkennen. Die endweise Vereinigung bleibt jedoch 
nicht lange bestehen, bald ist zwischen den beiden Tei’en der Quer- 
spalt, der bei Flemmingfixierung niemals vollkommen verschwindet, 
wieder deutlich zu erkennen und es befinden sich dann im Tochter- 
stern 18 Einzelchromosomen, die alle in der Art von Radspeichen 
angeordnet sind. Ihre Zählung gelingt jetzt meist unschwer, da 
sie jedoch ziemlich dicht beieinander liegen, so ist es nicht möglich 
auf eirem Bilde alle klar zur Darstellung zu Eringen, denn einige 
verdecken sich immer gegenseitig (Abb. 85). 


Bald jedoch rücken die Chromosomen in den Tochtersternen. 


dicht aneinander, so daß die Uebersichtlichkeit des Bildes verloren 
geht, das gegenseitige Lageverhältnis bleibt jedoch erhalten (Abb. 86). 


Es erscheinen dann sternförmige Bilder, wie sie Abbildung 87 dar- 


stellt. Dieses Zusammenrücken erhält sich längere Zeit, während 
dessen erfolgt die Abschnü:ung der beiden Tochterzellen voneinander. 
Dabei kommt es zur Ausbildung eines sehr deutlichen Zwischen- 
körperchens, die Chromatinklumpen, die vorher ganz dicht an der 
Oberfläche gelegen sind, rücken nun wieder mehr zentralwärts und 
kommen so in die Mitte der Tochterzellen zu liegen (Abb. 87). Nun- 
mehr rücken die Chromosomen wieder auseinander, gleichzeitig 
erfolet eine Auflockerung des Chromatins, so daß die einzelnen 
Chrumosomen länger und dünner erscheinen. Ihre Oberfläche ist 
rzuh und zeigt vereinzelte zackige und höckerige Vorsprünge, zwi- 
schen ihnen spannen sich feine Lininbrücken aus, sonst ist die Lage- 
rung im großen und ganzen noch dieselbe wie vor der Verklumpung 
(Abb. 88, 89). Das Zentriol verändert nunmehr seine Lage, oft 
tritt schon jetzt seine Spaltung ein. Der Zwischenkörper ist sehr 
deutlich darstellbar und zeigt in Zellen, die mittels der Eisen- 
hämatoxylinmethode gefärbt sind öfters lanzettähnliche Form, 
indem vom eigentlichen Zwischenkörper feine, lange Spitzen in die 


a 


& 
. 
er. 
® 
a 


a 


DES 
# 
2 
x 
E 
a 
: 
4 
a 
> 


Dre ne a 
u nn ul "T 


Te ut kn de 


. 


E2 


EEE SEHE EEE BEE BEER DIENEN LE HEREIN UBER 


% 


ui 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 215 


beiden Tochterzellen ragen. Es sind dies offenbar die Reste der 
Spindelfasern, welche mit Farbniederschlägen bedeckt sind. 


Die Praespermatiden. 


Während die Auflockerung des Chromatins fortschreitet, ver- 
lagern sich die Chromosomen unter dem Zug der Lininfasern etwas 
gegeneinander, die kürzeren von ihnen kommen mehr in die Mitte 
des Kernes zu liegen, die längeren aber an die Randpartien, sie 
zeigen jetzt häufig hufeisenförmige Gestalt, haben also eine Krüm- 
mung erfahren. In diesem Falle liegen meistens die freien Enden 
gegen die Kernoberfläche zu, die Krümmung aber gegen die Kern- 
mitte. Nur in seltenen Fällen kann man das umgekehrte Lagever- 
hältnis beobachten (Abb. 90). Bei geeigneter Schnittrichtung, welche 
die Kerne in der Polansicht darstelit, gelingt es auch jetzt noch 
häufig die einzelnen Chromosomen zu isolieren und ihre Zahl nach- 
zuprüfen. Abbildung 91 zeigt einen derartigen besonders günstig 
gelagerten Kern, an welchem deutlich die 18 durch Lininbrücken 
verbundenen Chromosomen zu erkennen sind. Sie erscheinen hier 
sehr kurz und dick, da sie alle fast senkrecht zur Schnittebene 
liegen und deshalb in starker Verkürzung wiedergegeben sind. Bei 
einem Vergleich mit der Seitenansicht des Kernes in diesem Zu- 
stand (Abb. 89) wird dieses Verhalten sofort klar. 

Während sich die vollständige Abschnürung der beiden Tochter- 
zellen vollendet, wird die Kernmembran gebildet. Das Proto- 
plasma zeigt nach wie vor den gleichen, netzigen Bau, das Centriol 
hat sich nunmehr stets in jeder Tochterzelle geteilt, eine Sphäre 
ist meist nicht darstellbar, nur in ganz seltenen Fällen findet man 
Bilder wie sie Abbildung 92 wiedergibt, eine umschriebene, gegen 
das übrige Protoplasma nicht ganz scharf abgesetzte Zone, die aus 


‚feinen Körnchen besteht und sich dem Kern halbmondförmig anlegt. 


Die Chromosomen strecken sich noch mehr in die Länge und er- 
fahren eine weitere Auflockerung. 

Später erfolgt dann eine Verteilung des Chromatins auf die 
Lininfäden, durch diesen Vorgang entziehen sich die einzelnen 
Chromosomen nach und nach der Beobachtung (Abb. 92, 93). An- 
fangs sind sie noch als größere, unregelmäßige Klumpen zu erkennen, 
dann aber verteilt sich auch das Chromatin dieser Gebilde noch in 
feinen Klumpen auf die Fäden und es kommt zur Ausbildung rich- 


216 H. Stieve: 


tiger Ruhekerne (Abb. 94). Diese zeigen deutliche Membran, im 
Inneren klaren Kernsaft und sehr deutliches Liningerüst, dem 
das Chromatin in einzelnen groben Brocken angelagert ist. Größere 
Chromatinanhäufungen, Nukleolen oder sonstige besondere Kern- 
einschlüsse finden sich niemals. Meistens sind jedoch auch in diesen 
Ruhekernen die Lagestellen der einzelnen Chromosomen angedeutet, 
da die Chromatinklumpen meist in umschriebenen Gruppen beiein- 
ander liegen (Abb. 94). Nur äußerst selten kann man Kerne be- 
obachten, die fast ganz gleichmäßigen Bau zeigen, in denen also 
jeder Nachweis der früheren Einzelchromosomen so gut wie un- 
möglich ist (Abb. 95). Doch auch hier deutet immer die noch etwas 
dichtere Lagerung der Chromatinklumpen an einzelnen Stellen an, 
daß es sich nicht um ein ganz gleichmäßig gebautes Gebilde handelt, 
sondern nur um eine bestimmte Vereinigung der Chromosomen. 

Die ganzen Präspermatiden zeigen in diesem Zustand die man- 
nigfaltigsten Formen, auf welche auch hier der von den Nachbar- 
organen ausgeübte Druck den hauptsächlichsten Einfluß besitzt. 
Häufig sind sie kugelrund, häufig aber auch länglich oder kegel- 
fömig, wie die Spermatocyten nach der Wachstumsperiode. Der 
Kern ist stets kugelrund. Die Sphäre ist von den oben erwähnten 
wenigen Ausnahmen abgesehen nicht darstellbar, die beiden Cen- 
triolen scheinen unmittelbar im Protoplasma zu liegen, ihre Um- 
gebung unterscheidet sich in keiner Weise von den übrigen Ab- 
schnitten des Zelleibes. Die beiden Centriolen zeigen fast durchwegs 
kreisrunde, punktförmige Gestalt und keinerlei Besonderheiten in 
bezug auf ihr gegenseitiges Lageverhältnis. Falls der den Kern 
umgebende Plasmasaum allenthalben gleich breit ist, so liegen die 
Centriolen wechselnd, bald näher dem Kern, bald näher der Zell- 
oberfläche, falls jedoch das Plasma an einer Stelle etwas ausgezogen 
erscheint, dann finden sie sich stets in diesem Bezirk. 

Der Durchmesser des Kernes der Präspermatiden beträgt 18.bis 
20 u, der der ganzen Zelle 22—25 u, gegebenenfalls an einzelnen 
Stellen etwas mehr, je nach der Form des betreffenden Gebildes. 
Ganz abgesehen vom Bau des Kernes schließt, wie ich gleich hier 
bemerken möchte, schon einzig und allein die topographische Lage 
dieser Zellen im Hoden zwischen den beiden Reifungsteilungen eine 
Verwechslung mit irgendwelchen Formen der Spermatocyten voll- 
kommen aus, von den Spermatiden unterscheidet sie neben anderen 
Merkmalen die im Vergleich mit diesen recht beträchtliche Größe. 


> 
x 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 217 


Die zweite Reifungsteilung. 


Der Ruhezustand der Präspermatiden, falls von einer wirklichen 
Ruhe überhaupt gesprochen werden kann, dauert nur äußerst Kurz, 
unmittelbar nach der Verteilung auf die Lininfäden sammeit sich 
das Chromatin wieder in den bestimmten Bezirken an, und auf dem 
umgekehrten Wege wie sie ehedem der Beobachtung entschwunden 
sind, erscheinen die Chromosomen jetzt wieder, zunächst als grobe 
Klumpen mit höckeriger Oberfläche, die sich dann bald zu langen 
Fäden umgestalten. (Abb. 96, 97). Die Lininbrücken sind deutlich 
zu erkennen, die Kernmembran bleibt in der gleichen Weise erhalten. 
Nach ganz kurzer Zeit, wie die geringe Zahl der Zellen vom be- 
schriebenen Bau beweist, zeigen die Präspermatiden danr wieder 
das nämliche Bild, wie unmittelbar nach Beendigung der ersten 
Reifungsteilung, nämlich großen, blasigen Kein, in dem die Chro- 
mosomen entweder als lange, U-fürmig gebogene Gebilde an der 
Peripherie oder als kurze Stäbchen in der Mitte liegen. Unter- 
einander sind sie von sehr verschiedener Größe, ihre Zahl läßt sich 
wegen der dichten Lagerung noch nicht mit Sicherheit ermitteln, 
sie beträgt jedoch wie nach dem Verschwinden der Kernmembran 
deutlich zu erkennen ist 18, ist also wieder gleich der Normalzahl 
der Chromosomen. In bezug auf die Zahl hat also während der 
Kernrekonstruktion der Präspermatiden keine Veränderung statt- 
gefunden. Auch in bezug auf die Lage bieten die Chromosomen 
jetzt das nämliche Bild wie vorher, an der Kernoberfläche finden sich 
meist winkelig gebogene Schleifen, mit der Konvexität nach innen, 
den freien Enden nach außen gerichtet (besonders Abb. 99). Sie 
entstehen unmittelbar aus dem Gerüst des Kernes, ohne Ausbil- 
dung eines Monospirems. Direkt beweisen läßt sich jedoch bei 
der großen Anzahl von Einzelelementen und dem dadurch bedingten 
Bau des Kernes die Kontinuität der Chromosomen nicht, obwohl 
an ihrem Bestehen, wie schon die gleiche Zahl, gleiche Größe und 
ebenso die gleiche Lage und die Art des Verschwindens und Wieder- 
erscheinens beweist, nicht der geringste Zweifel bestehen kann. 
Während der Kernrekonstruktion hat eben nur eine Auflockerung 
derjenigen Substanz stattgefunden, die wir als Chromatin darstellen 
und bezeichnen, ähnlich wie wir sie in den Endstadien des polar- 
gerichteten Knäuels beobachten können und noch schöner in den 
mit reichlichem Nahrungsdotter beladenen Eiern vieler Tiere, wo 


218 H. Stieve: 


auch im Stadium der höchsten Ausbildung der Lampenzylinder- 
putzerformen oft eine genaue Abgrenzung der Chromosomen ge- 
geneinander lange Zeit hindurch nicht gut möglich ist und die In- 
dividualität dieser Gebilde erst wieder nach dem Abschmelzen der 
seitlichen Ausläufer deutlich zutage tritt. 

Unmittelbar nach der vollendeten Konzentration des Chro- 
matins auf die Einzelchromosomen zerfällt die Kernmembran, die 
Lininbrücken verschwinden und die Chromosomen verteilen sich 
im ganzen Leib der Präspermatide. In diesem Zustand gelingt 
die Feststellung ihrer Zahl sehr leicht, am besten wieder aus den schon 
oft erörterten Gründen nach Flemmingfixierung (Abb. 100, 101). 
Sie beträgt wie schon erwähnt 13. Die beträchtlichen Unterschiede 
in der Länge und Form treten auch hier wieder deutlich zutage, 
es lassen sich jedoch auch noch einige Besonderheiten in Hinsicht 
auf die gegenseitige Lagerung feststellen, die nun zunächst bespro- 
chen werder sollen. An allen Zellen ir diesem Entwicklungs- 
zustand kann man nämlich deutlich erkennen, daß die Chromosomen 
paarweise angeordnet sind, das heißt, daß ebenso wie in den Te- 
lophasen der ersten Reifungsteilung je zwei von ihnen durch ihre 
Lage deutlich ihre Zusammengehörigkeit und für den, der die vor- 
hergehende Entwicklung kennt auch ihre Entstehung aus einer 
Tetrade dartuen. 

Meist liegen die beiden Chromosomen mehr oder weniger pa- 
rallel zueinander, der gegenseitige Abstand ist verschieden, zum 
Teil sicherlich auch durch die Fixierung und die durch sie bedingte 
Schrumpfung beeinflußt, er beträgt %—2 Chromosomenbreiten. 
Häufig kommen dabei als Folge der leichten Krümmung der beiden 
Teilhälften Ueberkreuzungen vor, wodurch x-förmige Figuren ent- 
stehen. Diese unterscheiden sich jedoch grundlegend von den 
ähnlichen Gebilden vor der ersten Reifungsteilung dadurch, daß 
dort die beiden aus einem Chromosoma entstehenden Teilhälften 
sich an den Kreuzungsstellen berühren und stets gleich lang sind, 
hier aber liegen die meist ungleichgroßen Einzelchromosomen, die 
ja nicht durch Längsspaltung eines Gebildes, sondern durch Lage- 
veränderung zweier ehemals nur endweise vereinigter Stücke ent- 
standen sind, stets vollkommen isoliert, eine Berührung kommt nie- 
mals vor. Die zum Teil recht erheblichen Unterschiede in der Länge 
der beiden zueinandergehörigen Chromosomen treten bei dieser La- 
gerung sehr deutlich zutage. 


, ETAGE BETEN, een - 


CMTRENE 


a A 


Mn a er a I ech 20 Sana a Sn a ey 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes BE ee 219 


In Ausnahmefällen, d. h. meistens dann, wenn Bi eine der 
beiden Chromosomen oder alle beide sehr kurz sind, kann aber auch 
jetzt noch eine Lagerung hintereinander beobachtet werden, also 
in der gleichen Anordnung wie in der Vierergruppe selbst unmittel- 


-bar nach ihrer Entstehung. Offenbar handelt es sich hierbei um 


rein mechanische Verhältnisse, bei denen die Größe und Form der 
Gebilde die hauptsächlichste Rolle spielt. Abbildung 100 und 101 
zeigen derartige mit Flemming fixierte Zellen, die aus je zwei Schnitten 


rekonstruiert sind. Textabbildung 9 gibt rein schematisch die La- 


gerung von Abbildung 100 wieder, die Chromosomen sind fortlau- 
fende nummeriert und je zwei aufeinanderfolgende Zahlen be- 
zeichnen die beiden Einzelindividuen eines Paares. Von den 9 
Paaren liegen die beiden zusammengehörigen Chromosomen stets 


Textabb. 9. Textabb. 10. 
Schema zu Abb. Nr. 100 Tafel XII. Schema zu Abb. 101 Tafel XII. 


nebeneinander, nur Nr. 9 und 10 schräg hintereinander. In der 
Skizze erscheint es merkwürdig, daß Chromosoma Nr. 17 zu Nr. 18 
und nicht zu Nr. 16 gerechnet wird, dies hat jedoch seinen Grund 
darin, daß Nr. 17 in weitem Bogen in die Tiefe verläuft und obwohl 
es sich im Schnittbild mit Nr. 16 kreuzt doch viel weiter von diesem 
entfernt liegt als von Nr. 18. Dagegen erscheint im Schnitt selbst 
die Zusammengehörigkeit von Nr. 15 und 16 unzweifelhaft. 

Der in Abbildung 101 wiedergegebene Kern liegt in den obersten 
Schichten des Hodens, die Folgen der Flemmingfixierung sind an 
ihm besonders deutlich zu_erkennen. Dementsprechend sind die 
Chromosomen stark geschrumpft, was in diesem Fall wieder die 


 Uebersichtlichkeit des Bildes sehr erhöht. Textabbildung Nr. 10 


gibt das Schema wieder, die Chromosomen sind in der gleichen Weise 
wie bei Textabbildung 9 fortlaufend nummeriert. Auch hier liegen 
die beiden Einzelindividuen jeden Paares nebeneinander und nur 


220 H. Stieve 


Nr. 1.und.2 hintereinander, dabei ist Nr. 1 ein auffallend kleines 
Gebilde !). buord 

In Kernen die mit anderen Flüssigkeiten konserviert wurden, 
ist die Uebersichtlichkeit unmittelbar nach dem Verschwinden der 
Kernmembran noch keine so große. Abbildung 102 zeigt eine mit 
Sublimateisessig fixierte Zelle, bei der von der Kernmembran selbst 
keine Spur mehr. zu erkennen ist, dagegen sind die Lininbrücken 
noch vorhanden. Deutlich macht sich ein. Unterschied im Bau 
der ursprünglichen Kernregien gegenüber der: Plasmazone geltend, 
obwohl gewisse . Zerfallserscheinungen an den. Lininbrücken nicht 
zu verkennen sind. Auch hier merkt. man ganz augenfällig die paar- 
weise Anordnung der Chromosomen, ein ‘besonders klares Bild 
findet sich in der Mitte. des Kernes, wo sich die beiden Einzelgebilde 
fast zu berühren scheinen. Die Chromosomen sind im großen und 
ganzen gerade gestreckt, nur drei zeigen deutlich hufeisenförmige 
Gestalt. 

Die zweite Reifungsteilung unterscheidet sich also von vorn- 
herein grundlegend von der ersten und auch von allen Sperma- 
togonienteilungen und somatischen Mitosen dadurch, daß die Chro- 
mosomen ohne Zwischenschaltung eines kontinuierlichen Fadens 
isoliert im Kerne entstehen und zwar, soweit sich dies bei der großen 
Anzahl der vorhandenen Einzelelemente mit Sicherheit beurteilen 
läßt, in der nämlichen Lage und Anordnung die sie ehemals einnah- 
men. Es findet ja auch bei den Präspermatiden keine Ruhekern- 
bildung in dem Sinn statt wie sonst zwischen zwei Teilungen, daß 
jegliche Spur der Chromosomen verwischt ist, diese bleiben viel- 
mehr fast stets noch mehr oder weniger deutlich nachweisbar. Dem- 
entsprechend vollzieht sich auch ihr Wiedererscheinen äußerst 
rasch. Zweifellos sind die Chromosomen der zweiten Reifungstei- 
lung in jeder Beziehung die nämlichen Gebilde wie in den Telophasen 
der ersten Teilung und wir dürfen wohl auch annehmen, daß die 
nämlichen Chromosomenhälften, welche sich durch die Konjugation 
in den Tetraden vereinigt lem, jetzt noch paarweise Ban, 
liegen. 


t) Die ungleiche Größe und Lagerung der Chremosomen in Ab- 
bildung 100 und 101 (Textabbildung 9 und 10) ist durch die verschie- 
dene Schnittrichtung bedingt, welche die beiden Zellen in ganz verschie- 
dener Ansicht darstellt. 


recht zur Symmetrieachse der Spindel liegt. 


N ROTE OR ESCHE TORENTS, 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 221 


Nach dem Verschwinden der Kernmembran bleibt die Ver- 
teilung der Chromosomen in der ganzen Zelle nicht lange bestehen, 
sie rücken vielmehr bald wieder auf einen kleinen Raum in der 
Mitte der Präspermatide zusammen, geleitet vom Zug der Spindel- 
fasern. Vorher schon erfolgte das Auseinanderrücken der beiden 
Centriolen auf die beiden Pole. Während dieses Vorganges erfährt 
das Chromatin abermals eine Konzentration, die Chromosomen 
verkürzen und verdicken sich wieder in der oft beschriebenen Weise, 
es tritt an. ihnen. jedoch kein Längsspalt auf, 
niemals, mittels keiner Konservierungs- oder 
Bärbeme£ethode ist ein solcher jetztinoich.fte'st- 
zustellen. Wie auch die weiteren Vorgänge deutlich zeigen, 
unterbleibt in der zweiten Teilung die Längsspaltung der Chromo- 
somen. 

Die Kernbilder sind nunmehr so über- 
sichtlich geworden, daß Feststellungen der 
Zahl und der Lage häufig sogar in einem ein- 
zigen günstig gelegenen Schnitt gelingen, be- 
sonders dann wenn die Schnittrichtung senk- 


Sehr schön kommt jetzt stets die paarige 
Anordnung zur Geltung. Abbildung 103 zeigt 
eine Präspermatide in diesem Stadium, das Textabb. 11. 
Schema ist in Textabbildung 11 wiedergege- Schema zu Abb. 103 
ben, in ihm sind wieder die Chromosomen in Tafel XI1. 
der oben beschriebenen Weise fortlaufend 
numeriert. Auch hier liegen die Einzelindividuen jedes Paares 
parallel nebeneinander nur Nr. Il und 12 hintereinander, die beiden 
Gebilde Nr. 7 und 8 zeigen auch eine gewisse Besonderheit in ihrer An- 
ordnung, ihre Zusammengehörigkeit, die im Schema nicht so deutlich 
zum Ausdruck kommt ist im Schnitt zweifellos zu erkennen, sie 
ergibt sich auch aus der Zusammengehörigkeit der übrigen Chro- 
mosomen die alle zu Paaren vereinigt sind, so daß nur die beiden 
erwähnten übrig bleiben. 

Noch klarer liegen die Verhältnisse in der in Abbildung 104 


E. wiedergegebenen Aequatorialplatte, die einem 15 u dicken Schnitt 


entstammt in dem alle Chromosomen lagen. Das Schema gibt 

Textabbildung 12 wieder. Die Einzelgebilde der neun Paare liegen 

durchweg parallel, nur Nr. 13 und 14 hintereinander. Wie in der 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 13 


222 H. Stireve: 


vorigen Zelle (Abb. 102), so finden sich auch hier drei hufeisenför- 
mige Chromosomen (7, 10, 15), welche die typische Einstellung in 
der Aequatorialplatte zeigen. Ihre ‚Schwesterchromosomen‘ sind 
durchwegs viel kürzer und liegen jeweils an der Konvexität gegen 
das Innere des Kernes zu. Wie in diesen beiden Zellen, so finden sich 
überhaupt in jeder Pıäspermatide vor der zweiten Reifungsteilung 
drei hufeisenförmige Chromosomen. 

Nicht ganz so übersichtlich, weil sich die Chromosomen be- 
sonders in der rechten Seite der Abbildung zum Teil gegenseitig 
überdecken, liegen die Verhältnisse in der Zelle, die in Abbildung 105 
wiedergegeben ist. Textabbildung 13 stellt das Schema dar und 
zeigt eine der möglichen Kombinationen. Vollkommen kiar ist hier 
die Zusammengehörigkeit nur bei einigen Paaren. Infolge der dichten 


Rextabb 12% Textabb. 13. 
Schema zu Abb. 194 Tafel XIl. Schema zu Abb. 105 Tafel XII. 


Lagerung sind bei allen übrigen auch andere Kombinationen möglich, 
sie alle aufzuzählen halte ich für überflüssig, da es ja an Hand der 
Skizze leicht ist sie sich auszudenken. 

Noch unübersichtlicher werden die Bilder in der Folgezeit, wo 
die Chromosomen in der Aequatorialplatte mehr und mehr gegen 
die Mitte der Zellen zusammenrücken. Sie liegen nun häufig so eng, 
daß es nicht mehr gelingt die Einzelgebilde zu isolieren, meistens 
befinden sich 2, häufig aber 4 und noch mehr in einem Klumpen ver- 
einigt. Wendet man, um klarere Verhältnisse zu schaffen, jetzt 
aber dünnere Schnitte an, so findet man in ihnen häufig 20, ja noch 
mehr einzelne Chromatinstücke, als Folge davon, daß ein hufeisen- 
förmiges Chromosom zweigeteilt ist und die Verbindungsbrücke 
in einem anderen Schnitte liegt. Das Rekonstruktionsverfahren 
klärt über diese Täuschung sofort auf. An übersichtlichen Stellen 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 223 


läßt sich auch jetzt noch die typische Parallellagerung nachweisen. 
Jedoch ist der trennende Spalt später in der Polansicht niemals 
mehr zu erkennen, dagegen umso deutlicher bei schief und besonders 
senkrecht in der Symmetrieachse getroffenen Spindeln (Abb.108, 109). 

Das Einrücken der Chromosomenpaare in den Aequator der 
zweiten Reifungsteilung erfolgt stets in der Art, daß der ein Chro- 
mosomenpaar trennende Spalt sich in der Aequatorebene einstellt. 
Bei Parallellagerung liegen demnach die Chromosomen parallel zur 
Aequatorebene, in den seltenen Fällen der Hintereinanderlagerung 
aber senkrecht zu ihr. Die letztere Erscheinung findet man in jeder 
Zelle höchstens einmal (Abb. 110 Mitte). Der Gesamtdurchmesser 
der Präspermatiden beträgt jetzt etwa 23—25 u, bei ihnen hat also 
während der Prophase der Teilung, wenn überhaupt, so eine im Ver- 
hältnis zur ersten Reifungsteilung nur ganz geringe Größenzunahme 
stattgefunden, die Verschiedenheiten gegenüber den Ruhepräsper- 
matiden liegen im Bereich der individ&ellen Schwankungen. 

Bei der Teilung selbst werden dann die beiden Einzelindivi- 
duen jedes Chromosomenpaares voneinander getrennt, auf jede Toch- 
terzelle gelangen demnach nur 9 Chromosomen, also die Hälfte der 
Normalzahl. Beim Auseinanderrücken wird jedes Chromosoma so 
gestellt, daß seine Längsachse, die ursprünglich ja senkrecht zum 
Verlaufe der Spindelfasern stand, diesen parallel gelagert wird, es 
erfolgt also eine Drehung um 90 Grad. Diese unterbleibt selbst- 
verständlich bei denjenigen Chromosomen, welche ursprünglich 
hintereinander lagen, also schon in der entsprechenden Richtung 
eingestellt waren. Auch die hufeisenförmigen Gebilde erfahren eine 
geringe Drehung, so daß die Konvexität der Krümmung gegen den 
Pol zu sieht (Abb. 111, 112, 114). Zählungen stoßen jetzt auf keinerlei 
Schwierigkeiten mehr, man muß sich nur hüten gekrümmte, ange- 
schnittene Chromosomen für Einzelgebilde zu halten. Meist rücken 
alle Chromosomen ziemlich gleichmäßig auf jeden Tochterkern und 
nur selten, wenn eine Zelle durch den Druck der Nachbarorgane 
stark deformiert und infolgedessen sehr lang gestreckt ist, tritt ein 
Fall ein, wie ihn Abbildung 112 darstellt, daß die Chromosomen 
über alle Abschnitte der Spindel verteilt sind. Die Centriolen ent- 
fernen sich während dieser Vorgänge noch beträchtlich weiter von- 
einander, soweit, daß sie häufig unmittelbar unter die Oberfläche 
der Tochterzellen zu liegen kommen. Dementsprechend liegen auch 


die Chromosomen schließlich stark exzentrisch, zuerst locker in der 
15% 


224 | H. Stiewve: 


gewöhnlichen Anordnung in radiärer Stellung, die wieder. besonders 
schön in der Polansicht zu erkennen ist (Abb. 113, 114). Bald aber 
legen sie sich eng aneinander (Abb. 115). 

Bei der Abschnürung der Tochterzellen kommt es zunächst zur 
Ausbildung von drei ‘oder vier kleinen, sehr deutlichen Zwischen- 
körpern, die später zu einem einzigen verschmelzen. Die Aneinander- 
lagerung der Chromosomen wird inniger und inniger, bald findet sich 
in jeder Spermatide nur ein sternförmiger Chromatinklumpen, an 
welchen nur die freien in den Kern vorragenden Enden zu erkennen 
sind und sonst keinerlei Einzelheiten (Abb. 117). Aber auch diese 
Formen können noch verwischt werden, in den jüngsten Spermatiden 
sieht man nicht selten den Kern-nur durch einen einzigen großen, 
dicken Chromatinklumpen mit fast ganz glatter Oberfläche dar- 
gestellt, arı dem sich keinerlei Einzelheiten erkennen lassen (Abb. 118). 
Es läßt sich aber dabei wieder nicht entscheiden, ob diese starke Zu- 
sammenziehung, man ist fast versucht von einer Verschmelzung zu 
sprechen, vollkommen natürlich ist oder lediglich ein Erzeugnis der 
Fixierung darstellt, sie findet sich wieder am stärksten an Präparaten, 
die mit irgendwelchen Essigsäuregemischen konserviert wurden und 
nicht so stark nach reiner Sublimat- oder Flemmingfixierung. Wäh- 
rend der Verklumpung rücken die Chromatinmassen aus ihrer pe- 
ripheren Lage wieder in die Zellmitte. Wenn der Klumpen sich löst 
und das Bild wieder übersichtlich wird, dann erscheinen die Chromo- 
somen durch Lininbrücken verbunden, als dünnere, häufio etwas 
gekrümmte Schleifen mit rauher Oberfläche, die im großen und 
ganzen noch die nämliche Lagerung wie früher zeigen (Abb. 119). 
Bald aber verteilt sich das Chromatin auf die Lininfäden und es 
gelingt dann nicht mehr ein einzelnes Chromosoma abzugrenzen 
(Abb. 120, 121). Die jungen Spermatiden sind jetzt meist Kreisrund, 
ihr Durchmesser beträgt 18—20 u, das Protoplasma zeigt feine, 
netzige Struktur mit Faden von bekanntem körnigen Bau. Das 
Centriol ist einfach, sehr klein und deshalb nicht }eicht darzustellen. 
Eine Sphäre konnte ich jetzt nie mehr beobachten. Die nunmehr 
wieder ganz zentral gelegene Chromatinmasse hat einen Durchmesser 
von 8 u bis allerhöchstens 10 u, eine Kernmembran ist an ihr noch nicht 
zu erkennen. Diese bildet sich erst sehr spät aus, wenn die Vertei- 
lung des Chromatins auf die Lininfäden schon ziemlich weit fortge- 
schritten ist (Abb. 122, 123). Während aber die junge Spermatide 
als ganzes nicht mehr wächst, sondern zunächst nur mehr ihre 


ee ne Se  är ih n 


ap DT a ie ana ar Zee 


On u 


DE RER 


4 


a en are 


ar A 


a4 


ee w le En ia De Bub: a a rn =: 


va nd Sl 2 Heinen. Ze natur a ar a nie al nat Zu 1 af ZI Zee 


en 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 225 


äußere Gestalt verändert, erfährt der Kern zuerst eine gewisse 
Größenzunahme auf Kosten des Protoplasmaleibes. Er wird größer 
und größer und erlangt schließlich einen Durchmesser von 13—14 y, 
während die Zellgröße die gleiche bleibt, das Gerüst in ikm wird 
lockerer und feiner, gleichzeitig entstehen im homogenen Kernsaft 
meist zwei oder drei Nukleolen. 

Schließlich besitzt die Spermatide kugelrunde oder leicht 
längsovale Gestalt, das Protoplasma zeigt den gewöhnlichen Bau 
in ihm liegt das feine Centriol ohne erkennbare Sphäre. Der große, 
blasige Kern zeigt deutliche Membran, ganz klaren, homogenen 
Kernsaft und ist durchsetzt von einem äußerst feinen und zarten 
Netzwerk, an dessen Faden sich allenthalben feinste Chromatin- 
klümpchen finden, etwas gröbere zumeist an den Kreuzungsstellen. 
Im Kernsaft, meist unmittelbar unterhalb der Membran liegen 
die Nucleolen, zwei, höchstens drei kugelrunde Gebilde mit glatter 
Oberfläche, nur an ihrer der Membran angelagerten Seite etwas 
abgeplattet. Ihr Durchmesser beträgt 1—2% u, meist zeichnet 
sich einer von ihnen durch seine besondere Größe aus. Sie nehmen 
Kernfarbstoffe intensiv auf und erscheinen bei Dreifachfärbung 
nach Flemming violett, wie auch die kleinen Chromatinkörnchen 
am Netzwerk, bei Safranin-Lichtgrünfärbung aber leuchtend rot. 
Der Gesamtdurchmesser der Zelle beträgt jetzt 18—20 u, der des 
Kernes 12—14 u. 

Damit ist die Spermatocytogenese beendet, es folgt nun die 
Spermatohistogenese, d. h. die Umwandlung der Spermatide in 
den reifen Samenfaden, die jedoch hier nicht mehr beschrieben 
werden solı. 


Zusammenfassung. 


Im vorhergehenden habe ich die Vorgänge der Entwicklung 
der Samenzellen von Proteus anguineus so eingehend als möglich 
beschrieben und meine Angaben durch eine möglichst große An- 
zahl von Zeichnungen belegt. Ich halte ein solches Verfahren, trotz- 


- dem sich dabei Wiederholungen nicht vermeiden lassen, auch wenn 


es stellenweise etwas langweilig erscheinen mag, auf scheinbar ganz 
nebensächliche Dinge mit der größten Genauigkeit einzugehen, für 
unbedingt notwendig. Wenn wir wirklich jemals einen klaren Ein- 
blick in die verwickelten Vorgänge der Keimzellenentwicklung be- 


226 H. Stieve: 


kommen sollen, die tatsächlichen ‚Vorgänge in ihrem Geschehen zu 
beobachten wird uns wohl immer versagt bleiben, 'so ist dies nur 
möglich, wenn wir eine möglichst große Anzahl der uns zur Ver- 
fügung stehenden Einzelbilder aneinanderreihen, so daß ihre un- 
mittelbare Aufeinanderfolge zweifellos erscheint. Nicht angängig 
aber ist es, aus der Gonade eines beliebigen Tieres eine kleine An- 
zahl von „möglichst charakteristischen Stadien‘ herauszuholen 
und diese nach eigenem Gutdünken und auf Grund von Analogie- 
schlüssen mit anderen gut bekannten Objekten aneinanderzureihen, 
die wesentlichen Lücken in der Beobachtung aber durch zügellose 
Spekulationen zu überbrücken. Wir dürfen wohl annehmen, daß 
sich die einzelnen Stadien der Entwicklung bei jeder Tier- und 
Pflanzenart in mehr oder weniger der gleichen Weise wiederholen, 
die Anfangs- und Endstadien sind uns ja im großen und ganzen 
bekaınt, unklar ist aber bis heute noch meist die Frage: wie ent- 
stehen alle vorgefundenen Einzelbilder der Entwicklung und wie 
folgen sie tatsächlich aufeinander? Gerade dieser letztere Punkt 
macht bei der Spermatogenese noch größere Schwierigkeiten als 
bei der Oogenese, wo die zunehmende Ansammlung des Dotters 
und die durch sie begründete Vergrößerung des Eies wenigstens in 
der zweiten Hälfte der Entwicklung allzugroße Fehler in der Seria- 
tion ausschließt. Anders bei den Samenzellen, wo die Größenunter- 
schiede während der ganzen Entwicklung keine sehr beträchtlichen 
sind, fast stets im Bereiche der individuellen Schwankungen liegen 
und deshalb eine weitgehende Vermengung und Vertauschung der 
einzelnen Bilder zulassen. Gerade aus diesem Grunde aber macht 
sich die klare, im Bau des Hodens ausgedrückte Seriation beim 
Olm besonders angenehm geltend. ; 

Kurz zusammengefaßt läßt sich bei ihm die Samenentwicklung 
folgendermaßen darstellen: Im Hoden des noch nicht geschlechts- 
reifen Tieres oder des geschlechtsreifen Tieres außerhalb der Fort- 
pflanzungszeit lassen sich in der Hauptsache große Spermato- 
gonien nachweisen. Diese befinden sich niemals in völligem Ruhe- 
zustand, sondern wachsen stets, wenn auch sehr langsam, weiter. 
Haben sie eine gewisse Größe erreicht, dann verfallen sie entweder 
der Degeneration oder sie teilen sich auf indirektem Wege in zwei 
Tochterspermatogonien, die ihrerseits wieder den gleichen Ent- 
wicklungsgang durchlaufen. Wie oft sich dieser Vorgang wiederholt, 
läßt sich nicht entscheiden. Zu Beginn der Fortpflanzungsperiode 


EEE RENTE PEN 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 227 


teilen sich die Spermatogonien mehrmals, aller Wahrscheinlichkeit 
nach 6 oder 7 mal hintereinander, in der Zwischenzeit während 
dieser Teilungen wächst anfangs nur der Kern auf seine ursprüng- 
liche Größe heran, während die Plasmamenge fortschreitend ver- 
mindert wird. Während der letzten Teilungen nimmt auch der Kern 
an, Größe ab, niemals jedoch im gleichen Verhältnis wie das Plasma. 
Das Endergebnis dieser Vermehrungsteilungen sind die Sperma- 
tocyten, Zellen mit relativ sehr großem Kern. In ihnen zeigt das 
Chromatin zunächst netzartige Anordnung, es kommt jedoch sehr 
bald zur Ausbildung eines Monospirems, das in seinem Verlauf 
keinerlei Regel zeigt (das Leptotän Winiwarters), das ich als dünnen 
richtungslosen Knäuel bezeichne. Er durchsetzt den ganzen Kern 
mit zahlreichen unregelmäßigen Windungen, mit seiner vollstän- 
digen Ausbildung ist die eigentliche Wachstumsperiode der Sper- 
‘matocyte beendet. In der Folgezeit konzentriert sich das Chro- 
matin, der ungeordnete Knäuel erfährt eine wesentliche Verkür- 
zung und Verdickung und ordnet sich gleichzeitig polar an, indem 
alle seine Schleifen gegen diejenige Stelle der Kernmembran zu 
verlaufen, welche der Sphäre gegenüberliegt. Während dieser Zeit 
bleibt die Kontinuität des Chromatinfadens erhalten, es erfolgt 
kein Zerfall in einzelne Chromosomen, ihre Zahl kommt aber in der 
Anzahl der Schleifenturen zum Ausdruck, die stets gleich der Chro- 
mosomennormalzahl ist. Ich bezeichne diesen Zustand als polarge- 
richteten Knäuel. Eine Parallellagerung und Verschmelzung ein- 
zelner Abschnitte des Knäuels (Parallelkonjugation) vor, während 
oder nach der polaren Orientierung tritt nicht ein, ebensowenig 
kommt es physiologischerweise jemals zu einer Zusammenziehung 
des Chromatins nach der Mitte oder der einen Seite des Kernes zu. 

Die Orientierung beginnt stets in der Polseite des Kernes und 
breitet sich von da über sein ganzes Inneres aus. Sobald sie voll- 
kommen ist treten neue Veränderungen am Knäuel auf, der wäh- 
rend des ganzen Vorganges stets eine Zusammensetzung aus feinen 
Körnern zeigt. Von diesen gehen nun zarte seitliche Ausläufer in 
den Kernsaft (angedeutete Bildung der Lampenzylinderputzer- 
formen), die nach kurzer Zeit wieder abschmelzen. Mit ihrem Ver- 
schwinden treten feine Lininbrücken zwischen den einzelnen Teilen 
des Knäuels auf, dessen Orientierung gleichzeitig verloren geht. 
Dieser dicke, ungeordnete Knäuel spaltet sich nun der Länge nach 
und zerfällt unmittelbar darauf durch Querteilung in einzelne Ele- : 


228 H:StieVve: 


mente, 18 an der Zahl, von denen jedes als Folge der Längsspaltung 
aus zwei gleich langen, parallel gelagerten Hälften besteht, die sich 
in der Folgezeit vielfach umeinander winden, sich verkürzen und 


verdicken. Gleichzeitig legen sich je zwei längsgespaltene Chromo- 


somen endweise aneinander und führen so zur Bildung richtiger 
Vierergruppen. Diese ordnen sich in der Aequatorebene der ersten 
Reifungsteilung an, während dieses Vorganges geht die Umschlingung 
der beiden durch die Längsspaltung entstandenen Teilhälften der 
Chromosomen, als Folge der fortschreitenden Konzentrationen des. 
Chromatins in eine Parallellagerung über, der Längsspalt kommt 
in die Aequatorebene zu liegen, es erfolgt eine Trennung der beiden 
nunmehr parallel gelagerten Teile jeder Tetrade und ihre Verteilung 
auf die Tochterzellen. Während dieses Vorganges bleiben die end- 
weise vereinigten Teile aneinander geheftet, verändern aber ihr 
gegenseitiges Lageverhältnis, indem sie an der Vereinigungsstelle 
geknickt werden und schließlich parallel zueinander liegen. 


In den Präspermatiden kommt es zur Ausbildung eines voll- 
kommenen Kernes mit Membran, Gerüst und Undeutlichwerden 
der Chromosomen. Dieser Zustand bleibt jedoch nicht lange be- 
stehen, denn sofort nach Ausbildung des Kernes erfolgt die Rekon- 
struktion der Chromosomen und zwar unmittelbar, ohne Zwischen- 
schaltung eines Monospirems. Sie liegen nach Verschwinden der 
Kernmembran wieder paarweise beieinander, wie dies ihrer Zu- 
sammengehörigkeit nach der ersten Reifungsteilung entspricht. Ihre 
Zahl beträgt nach wie vor 18, ist also gleich der Normalzahl. In 
der zweiten Teilung erfolgt dann die Verteilung der Chromosomen 
auf die beiden Spermatiden, indem die meist ungleich großen Ein- 
zelgebilde jeden Paares auf die beiden Tochterzellen auseinander- 
rücken. Auf diese Weise gelangen in jede Spermatide neun Chro- 
mosomen, also die Hälfte der Normalzahl. 


Die erste Teilung erfolgt also ungefähr nach der Art einer Sper- 
matogonienteilung, sie ist eine Aequationsteilung, auf jede Präsper- 
matide gelangt die Normalzahl der Chromosomen, die zweite Teilung 
ist die heterotypische Reduktionsteilung, durch welche die Herab- 
setzung der Chromosomenzahl auf die Hälfte der Norm bewirkt 
wird. Teilen wir also die Samenentwicklung des Olmes, wie das nun 
einmal so üblich ist in einzelne Stadien ein, dann lassen sich fol- 
gende Abschnitte unterscheiden: 


Ser Ser ee 


PREIS ST SER 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 229 


I. Große Spermatogonien des Ruhehodens. 


De 


u fr 


EEE EN UN ORTE TORI ERDE TUR PO { 


1. Kleine Spermatogonien der Vermehrungsperiode. 
III. Spermatocyten. 


a) Wachstumsperiode. 
Netzartige Verteilung des Chromatins. 
b) Prophase der ersten Reifungsteilung. 
1. 
= 
3 


dünner richtungsloser Knäuel. 

polar gerichteter Knäuel. 

Bildung und Rückbildung der seitlichen Aus- 
läufer. 


4. dicker richtungsloser Knäuel. 
5, 
6 
7 


Längsspaltung des Knäuels. 


. Zerfall des Knäuels in einzelne Chromosomen. 
. Pseudoreduktion durch endweise Vereinigung 


je zweier längsgespaltener Chromosomen. 


F | c) Erste Reifungsteilung. 
IV. Präspermatiden. 
a) Ausbildung des Kernes. 
| 1. Ausbildung der Membran. 
3 | 2. 
b) Prophase der zweiten Reifungsteilung. 
“ 1. 


Verteilung des Chromatins auf das Liningerüst. 


Konzentration des Chromatins auf die Chro- 
mosomen. 

Verschwinden der Kernmembran und der 
Lininbrücken. 


. Einordnung der Chromosomen in die Aequa- 


torialplatte. 


c) Zweite Reifungsteilung. 
V. Spermatiden. 
Hierauf folgt die Ausbildung der Spermatozoen. 


Was die in dieser Einteilung angewandte Bezeichnung be- 
trifft, so komme ich auf sie in den einzelnen Abschnitten der fol- 
genden Erörterungen zu sprechen. Bekanntlich unterscheidet Wal- 
deyer drei Hauptabschnitte der Samenentwicklung, nämlich die 
Spermatophylogenese, die Spermatocytogenese und die Spermato- 
histogenese, eine Einteilung, die sich auch für den Olm voll und 
ganz anwenden läßt. Die hier mitgeteilten Beobachtungen be- 


Da za Me ee a BE Se ee 8 ee ee 


r 
7 

Ä 

“N 

fe, 

\ 

. 

> 

a 

ur 

f 


Dan? 


N Eee = 
Fe A u 


Dr DR 


r 
Den 


230 H. Stieve: 


schäftigen sich in der Hauptsache mit dem zweiten Abschnitt, der 
Spermatocytogenese. Nach Hertwig läßt sich diese wieder in drei 
Unterabschnitte zerlegen nämlich: 


1. Das Vermehrungsstadium oder das Stadium der Sperma- 


togonien. 

2. Das Wachstumsstadium oder das Stadium der Spermato- 

cyten bis zur ersten Reifungsteilung und 

3. Das Reifestadium oder das Stadium der Präspermatiden 

bis zur zweiten Reifungsteilung und das Stadium der Sper- 
matiden nach diesen. 

Wie ich aber schon in meiner vorläufigen Mitteilung (1918) 
auseinandergesetzt habe, läßt sich das zweite Stadium der Hertwig- 
schen Einteilung, so wie dies auch hier geschehen ist, in zwei Unter- 
abteilungen zerlegen. Die Wachstumsperiode der Spermatocyte ist 
nämlich bis zum Beginn der Ausbildung des dünnen richtungslosen 
Knäuels, des Monospirems der somatischen und Spermatogonien- 
teilungen beendet. Bis zu diesem Zeitpunkt vergrößert s’ch die 
junge Spermatocyte bei ziemlich gleichbleibenden Kernstrukturen 
von einem Kerndurchmesser von 14—16 u und einem Gesamtdurch- 
messer von 18—20 u auf einen Kerndurchmesser von 21—23 u 


und einem Gesamtdurchmesser von 28—32 u. Nach dieser Zeit ist 


das Wachstum nurmehr ein ganz unbedeutendes und erst nach dem 
Verschwinden der Kernmembran, also in den spätesten Prophasen 
der ersten Reifungsteilung läßt sich wieder eine stärkere Volums- 
zunahme beobachten. Es ist daher wohl richtiger, die Wachstums- 
periode mit dem oben angegebenen Zeitpunkt zu begrenzen, alle 
weiteren Veränderungen aber, welche sich an den Spermatocyten 
abspielen der Prophase der ersten Reifungsteilung zuzurechnen, 
welche mit der Ausbildung des dünnen richtungslosen Knäuels 
beginnt, pflegt man ja auch sonst die Ausbildung des Monospirems 
stets der Prophase einer Teilung zuzurechnen. 


Allgemeiner Teil. 


Die großen Spermatogonien. 


Unter den Spermatogonien haben wir zwei Formen zu unter- 
scheiden, die nicht so sehr durch ihren anatomischen Bau, als durch 
ihr physiologisches Verhalten voneinander verschieden sind, näm- 
lich die Spermatogonien des Ruhehodens und die Spermato- 


re TE ie ; 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 231 


gonien zu Beginn der Fortpflanzungszeit. Rein äußerlich besteht 
der Unterschied zwischen beiden in der Größe, indem die ersteren 
fast durchwegs größer, die letzteren kleiner sind, weshalb Meves 
(1897) die einen als große, die andern als kleine Spermatogonien be- 
zeichnet. Dagegen ist nichts einzuwenden, denn besonders der Pro- 
toplasmaleib der Spermatogonien des Ruhehodens zeigt meist viel 
beträchtlichere Ausdehnung, auch ist hier der Kern größer als in 
der Vermehrungsperiode, besonders wenn wir die Verhältnisse gegen 
ihr Ende zu im Auge behalten. Ein wesentlicher Unterschied be- 
steht auch in der Kernplasmarelation, diese verschiebt sich bei den 
kleinen Spermatogonien sehr wesentlich zugunsten des Kernes. 
King (1907) unterscheidet primäre und sekundäre Sperma- 
togonien, wogegen gleichfalls keinerlei Bedenken bestehen könne:t. 
Dagegen ist es unzutreffend wie Regaud (1899) dies tut, Sper- 
matogonies A noyaux pouciereux und Spermatogonies A noyaux 
eroütelleux gegenüberzusteller, da ja ein tatsächlicher Unterschied 
im Bau des Kernes der beiden Former nicht besteht. Bei der raschen 
Aufeinanderfolge der Teilungen während der Vermehrungsperiode 
kommt es zwar bei den kleinen Spermatogonien nur ganz ausnahms- 
weise zur Ausbildung wirklicher Ruhekerne mit deutlich netziger 
Struktur und völliger Verteilung des Chromatins. Dieses läßt viel- 
mehr stets mehr oder weniger deutliche fadenförmige Bildungen er- 
kennen, die Chromosomen der Thelophasen gehen also ziemlich 
unmittelbar in die Prophasen der nächsten Teilungen über, allein 
die Unterschiede sind nicht derartig tiefgreifend und vor allem 
nicht so konstant, daß sie zur Grundlage einer Einteilung genommen 
werden können. Im allgemeinen war es in der letzten Zeit wohl 
üblich, die kleinen, sich rasch teilenden Formen kurzwegs Sperma- 
togonien zu nennen, während die großen Formen des Ruhehodens 
mit den verschiedensten Bezeichnungen belegt wurden, so Stamm- 
zellen (Benda 1886—1906), Cellules inditferentes (Schön- 
feld 1900—1901), Archispermiocyten (Waldeyer 1906) und 
Archispermatocyten (Levy 1915). Die beiden letzteren Bezeich- 
nungen halte ich für verwirrend, da es sich in diesem Fall ja nicht 
um Spermatocyten, sondern um Spermatogonien handelt. Besser 
wäre daher wohl die Bezeichnung Archispermiogonien bzw. Archi- 
spermatogonien. Eine gute deutsche Bezeichnung ist die Benennung 
Ursamenzellen, allerdings hat La Valettie St. George 
diesen Ausdruck auch auf die kleinen Spermatogonien angewendet 


z $ 
N 


232 H. Stieve: 


und dadurch eine gewisse Unklarheit geschaffen. Meiner Ansicht 
nach dürfte daher die Bezeichnung ER EDEN oder große 
Spermatogonien die beste sein. 

Wie schon erwähnt, besteht ja der Unterschied zwischen beiden 
Arten in erster Linie in der Größe. Auch bei den Archispermato- 
gonien ist der Kern stets kugelrund, jede Lappung oder sonstige 
außergewöhnliche Form bedeutet das erste Anzeichen der begin- 
nenden Degeneration. Genauer eingehen will ich hierauf erst bei 
Besprechung der Rückbildungsvorgänge. Die Teiiungen der großen 
Spermatogonien vollziehen sich in der gewohnten Weise, sie dienen 
einzig und allein dazu um den durch die Rückbildungsvorgänge 
erzeugten Ausfall zu ersetzen und so auch den Ruhehoden stets 
auf der gleichen Größe zu erhalten. Man kann sie deshalb als Er- 
eänzungsteilungen bezeichnen und sie so den Vermehrungsteilungen 
der kleinen Spermatogonien gegenüberstelien. Die Chromosomen 
zeigen stets die nämlichen Formen und es fällt nicht schwer die 
einzelnen von ihnen zu isolieren und besondere Arten zu unter- 
scheiden, so wie dies Meves (1911) bei Salamandra maculosa 
ausgeführt hat. Auf die beträchtliche Größenzunahme der Zellen 
während der späten Prophase der Teilungen habe ich schon hin- 
gewiesen, Ste 


2 Die kleinen Spermatogonien. 


Die Teilungen der kleinen Spermatogonien gehen in der näm- 
lichen Art und Weise vor sich, nur folgen sie sehr rasch nacheinander, 
so daß zwischen zwei Mitosen kein völliger Ruhekern ausgebildet 
wird. Aus dieser Tatsache allein geht schon hervor, daß die jedes- 
malige Vergrößerung der Tochterzellen Hand in Hand mit den 
Veränderungen am Kern und Plasma gehen muß und sich nicht 
zeitlich von ihnen getrennt abspielt. Pluripolare Mitosen oder in- 
direkte Teilungen kommen physiologischerweise beim Olm nicht 
vor. Meine Beobachtungen stimmen hierin mit denen von Mc 
Gregor, (1899) King (1907) und Levy (1915) überein. 
Die in einer Cyste vereinigten Spermatogonien bzw. Spermatocyten 
stammen stets von einer einzigen Arckispermatogonie ab und zeigen 
immer ziemlich genau den nämlichen Entwicklungszustand. Diese 
monophyletische Entstehung jeder Cyste kommt schon während 
der Spermatogonienteilungen sehr deutlich zum Ausdruck. Diese 


DCrT 


a Müge ge niet TEIE a ne nn 2m Pyze) a Eu 7 EEE a a Eike "= er a 


ET FERETENEEUNE DER 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 233 


gehen gleichmäßig, gewissermaßen rhythmisch an allen Elementen 


einer Cyste vor sich, denn stets finden sich alle in einer Cyste ver- 
einigten Zellen im gleichen Zustand der Mitose. Geringe Unter- 
schiede lassen sich zwar beobachten, diese besitzen jedoch keine 
große Bedeutung. Es kann sein, daß eine Anzahl von Spermato- 
gonien schon Tochtersternvildungen zeigen, während die Mehrzahl 
der Schwesterzellen sich im Stadium des Muttersternes befinden. 
Dabei handelt es sich aber nur um ganz geringgradige Differenzen 
und nur ganz ausnahmsweise kommen größere Unterschiede vor, 
so gehört die Anwesenheit von ruhenden Spermatogonien in sich 
teilenden Nestern zu den allergrößten Seltenheiten. Die Zusammen- 
gehörigkeit aller Gebilde einer Cyste kommt auch manchmal darin 
zum Ausdruck, daß sie alle gleichzeitig der Degeneration verfallen. 
Im Gegensatz zu Gurwitsch (1911) konnte ich aber auch 
Nester auffinden in denen einzelne Elemente zugrunde gingen, 
während die Mehrzahl normales Aussehen zeigten, besonders findet 


‚sich ein solches Verhalten nach den Reifungsteilungen, wo die De- 


generation einzelner Spermatiden fast Regel ist, also deutlich anzeigt, 
daß trotz der durch die Lage und die gemeinsame Umhüllung deut- 
lich gekennzeichneten Zusammengehörigkeit die Individualität der 
einzelnen Zellen gewahrt wird. 


Am deutlichsten und schönsten ist der Synchronismus der 
Reifungsvorgänge an allen Elementen einer Cyste in den Abschnitten 
der Entwicklung zu beobachten, die verhältnismäßig lange Zeit 
beanspruchen, also besonders während der polaren Orientierung des 
Knäuels und später während der Spermatohistogenese. Hier be- 
finden sich alle Zellen nicht nur einer Cyste, sondern auch einer 
ganzen Ampulle im genau gleichen Zustand der Entwicklung. Da- 
gegen werden die Abweichungen um so.größer, je rascher sich die 
Vorgänge abwickeln, also während der Spermatogonienteilungen 
und besonders während der Reifungsteilungen, die sich allem An- 
schein nach sehr rasch nacheinander folgen. Hier findet man dem- 
entsprechend häufiger Zellen, welche in ihrem Entwicklungszustand 
von dem für die betreffende Cyste zutreffenden Stadium mehr 
oder weniger weit abweichen. Im großen und ganzen sind wir aber 
trotzdem wohl berechtigt anzunehmen, daß die Entwicklung aller 
Gebilde einer Cyste synchron verläuft und darin einen weiteren 
Beweis dafür zu erblicken, daß alle in einen Neste vereinigten 


234 A Stiev.e: 


Spermatiden aus einer gleichen Zahl von Spermatogonienteilungen | 


hervorgegangen sind. 

Zu ganz ähnlichen Anschauungen gelangte Gurwitsch 
(1911) auf Grund seiner Untersuchungen an Hoden von Salamandra, 
Triton und Amblystoma. Er betrachtet gleichfalls die streng mono- 
phyletische Entstehung jedes Spermatocytennestes als vollkommen 
sichergestellt. Durch sehr mühsame, während der Mitosen selbst 
ausgeführte Zählungen ermittelte er, daß während der ersten Rei- 
fungsteilungen gewöhnlich ad maximum 120 Zellen in einer Cyste 
enthalten sind, eine Zahl, welche 128 = 27 äußerst nahe kommt. 
Er schließt daraus, daß die erste Reifungsteilung ‚in der Regel in 
die 7. Generation der spermatogonialen Zellen fällt“ und erklärt 
die gefundenen niedereren Zahlenwerte damit, daß vereinzelte Zellen 
bei der einen oder anderen Mitose übergangen werden können. 
Die Möglichkeit des Zugrundegehens einzelner Elemente, die ich 
zur Erklärung der Zahlenverhältnisse in Betracht gezogen habe, be- 
streitet Gurwitsch wie schon erwähnt vollkommen. 


Abgesehen von den .drei gezählten Nestern mit heterotypi- 


scher Teilung wurden von Gurwitsch noch 6 Bündel reifender 
Spermien gezählt, ‚‚die stets die Zahl > 480 und < 512 = 2° er- 
geben‘. Von dem Vorhandensein zweier Arten von Spermien- 
bündeln, größerer und kleinerer erwähnt er nichts, es scheint dies 
also eine Erscheinung zu sein, welche dem Olm allein eigentümlich 
ist. Im übrigen stimmen die Ergebnisse der Gurwitsch’schen 
Untersuchungen in der erfreulichsten Weise mit den hier mitge- 
teilten überein, so daß wir wohl berechtigt sind die Zahl der Sper- 
matogonienvermehrungsteilungen für die Urodelen auf 7, bzw. 6 
festzusetzen. Die Normalzahl ist 7, doch kann eine Teilung unter- 
bleiben, ein Fall der scheinbar häufig bei vereinzelten Arten aus 
unbekannten Gründen auftritt und so zu Schwankungen in den 
Zahlenverhältnissen führt. 

Unterbleibt aber bei allen Gebilden einer Cyste eine Teilung, 
dann veranlaßt dieser Umstand die Bildung der kleinen Sperma- 
tozoenbündel. Da in diesem Falle aber die gefundenen Zahlen auch 
nicht genau der berechneten Größe von 256 — 2° entspricht, so 
müssen wir, falls wir nicht unsere Zuflucht zu den Rückbildungs- 
vorgängen nehmen wollen, vermuten, daß einzelne Spermmatocyten 
in diesem Falle aus nur 5 Spermatogonienteilungen hervorgegangen 
sind. 


ig 


Ar Earl 


gun 


ER ÄN, 
ee a 


kn. ER 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 235 


Was für Umstände die verschiedene Zahl der Teilungen ver- 
anlassen und im Einzelfall zur Beendigung der Spermatogonien- 
teilungen führen, können wir nicht wissen, es sind dies Vorgänge, 
in die uns bisher noch jeglicher Einblick fehlt, und es erscheint 
wohl verfrüht, jetzt schon irgendwelche Spekulationen an sie an- 
zuknüpfen. Jedenfalls aber führt die verschiedene Zahl von Tei- 
lungen nicht zur Bildung morphologisch verschiedener Spermato- 
cyten und Spermien, denn es lassen sich nicht die geringsten Un- 
terschiede zwischen den Elementen der großen und kleinen Cysten 
auffinden. Wir dürfen jedoch als sicher annehmen, daß auch alle 
diese Vorgänge durch bestimmte Naturgesetze geregelt werden, 
denn sonst könnte sich nicht die große Uebereinstimmung, nicht 
nur bei den verschiedenen Individuen einer Art, sondern auch bei 
allen Urodelen nachweisen lassen. 


Die Spermatocyten. 


Das Endergebnis der Spermatogonienteilungen sind schließlich 
die Spermatocyten, deren Entwicklungsgang ja den Hauptgegen- 
stand dieser Untersuchung bildet. Er unterscheidet sich in der 
ersten Zeit nur wenig von dem somatischer Zellen, es kommt zur 
Ausbildung eines chromatischen Netzwerkes, Kern und Zelle wachsen 
zu einer bestimmten Größe heran, bis die ursprünglich ungünstige 
Kernplasmarelation wieder ausgeglichen ist. Allerdings zeigt schon 
dieses Netzwerk der jüngsten Spermatocyten eine Besonderheit, es 
besteht aller Wahrscheinlichkeit nach aus einem einzigen Faden von 
perlschnurartigem Bau. Diese Zusammensetzung aus einzelnen 
kleinen Gebilden, die sich in ihrer äußeren Form in der Folge sehr 
wesentlich verändern, bald körnchen- bald stäbchenförmig er- 
scheinen, bald deutlich voneinander getrennt liegen, bald wieder 
sich näher zusammenschließen, behält der Faden bis zu seinem 
Zerfall in die einzelnen Chromosomen und selbst nach ihm für längere 
Zeit bei, bis als Folge der stärkeren Konzentration des Chromatins 
sich die Einzelheiten verwischen. Hand in Hand mit der Verän- 
derung in der Form der einzelnen Fadenkörner geht eine Verkür- 
zung und Verlagerung des Spirems im Kerne, die zu den verschie- 
densten Bildern führt. 

Wie bei den meisten Teilungen entwickelt sich aus dem Netz- 
werk des Spermatocytenkernes zunächst ein Monospirem, das deut- 
liche Zusammensetzung aus einzelnen Chromatinkörnern zeigt. In 


236 H. Stieve: 


erster Linie durch die gegenseitige Lageveränderung der Körner 
verkürzt und verdickt sich dieser Faden dann und ordnet sich zum 
polar gerichteten Knäuel, dem Bukettstadium der früheren Autoren 
an. In diesem Zustand ist die Konzentration des Chromatins eine 
verhältnismäßig sehr starke und schon hier macht sich die Zusam- 
mensetzung des Fadens aus einzelnen Chromosomen geltend. Denn 
obwohl noch kein Zerfall stattfindet, so entspricht doch die An- 
zahl der Schleifenturen hier stets der Normalzahl der Chromo- 


somen. Nunmehr erfolgt die Abgabe des Trophochromatins in der 


bekannten Art und Weise durch Bildung seitlicher Ausläufer, die 
rasch. nach ihrem Entstehen abschmelzen. Unmittelbar danach 
geht die polare Orientierung verloren, sie hatte offenbar den Zweck 
die einzelnen Substanzen in den Chromosomen in bestimmter Weise 
zu ordnen. Der dicke richtungslose Knäuel zeigt nunmehr wieder 
perlschnurartigen Bau, die einzelnen, ihn zusammensetzenden Körner 
sind jedoch wesentlich größer, als die des dünnen richtungslosen 
Knäuels. Durch Längsspaltung entstehen sodann: zwei Tochter- 
fäden, die dementsprechend auch perlschnurartigen Bau. zeigen, 
nur sind die einzelnen, sie bildenden Körner wesentlich kleiner als 
im dicken Knäuel, sie entsprechen in ihrer Größe ziemlich genau 


denen des dünnen richtungslosen Knäuels. Wäre die Seriierung 


der Stadien bei unserem Objekt nicht so klar vorgezeichnet, so 
könnte man diesen Doppelfaden wegen des Baues seiner Einzel- 
elemente hinter den dünnen richtungslosen Knäueln einschalten 
und so auf den Gedanken einer Parallelkonjugation kommen. Bei 
der klaren, übersichtlichen Anordnung der Bilder, welche die Ent- 
stehung der Spaltung deutlich genug beweist, ist eine solche An- 
nahme jedoch unmöglich. Es kommt zu keiner Paral- 
relkonjugation der "einzelnen Abschn seresdes 
dünnen richtungslosen Knäuels, der Doppel- 
faden entsteht vielmehr zweifellos durch Längs- 
spaltungdesdickenrichtungslosen Knäuels. Dem- 
nach unterscheidet. sich die Prophase. derrersten 
Reifungsteilung bis zur Ausbildung der Tetraden 
einzig und allein durch die Zwischenschaltung 
des polar gerichteten Knäuelsunddie äußeren 
Veränderungen, welche sich anihm vollziehen 
vonder Prophaseeiner Spermatogonienteilung 
odereiner beliebigen somatischen Mitose. 


DR 


EN ER ET ee 


EEE 40D TE a N an 


Pr 
x 


EN RT TE 
Ra 


- Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 237 


Die Frage der Parallelkonjugation. 
Die Befunde von A. und K.E. Schreiner. 


Durch die obige Feststellung erscheinen die Vorgänge der Sper- 
matocytenreifung einfach und klar. Meine Beobachtungen stehen 


‚jedoch im Gegensatz zu einer ganzen Reihe der früher ermittelten 


Befunde an anderen Objekten, auf die ich zunächst, soweit sie 
für einen Vergleich in Frage kommen, eingehen will. Die ausführ- 
lichste Arbeit über die Spermatogenese eines urodelen Amphi- 
biums (Salamandra maculosa) verdanken wir. Meves (1897). 
Er beschäftigt sich jedoch in der Hauptsache mit den Veränderungen 
der Sphäre, weshalb seine Ausführungen hier weniger in Betracht 
kommen. In seiner Beurteilung der Reifungsteilungen schließt er 
sich im großen und ganzen der Anschauung Flemmings (1887) 
an, ebenso wie die große Anzahl von Untersuchern, welche gleich- 
falls Amphibienhoden als Ausgangspunkt ihrer Studien wählten, 
so Hermann (1888) Mc Gregor (1899) Eisen (1900) 
Benda (1893 u. a. a. O.), Janssens (1901, 1905) Kings- 
burry (1902) Janssens und Dumez (1903) und Andere. 
In offenkundigem Gegensatz zu ihren Mitteilungen stehen die Be- 
obachtungen, welche A. urd K. E. Schreiner (1906) an der 


 Spermatogenese von Salamandra maculosa machten. 


Sie beobachteten nach der letzten Spermatogonienteilung die 
Bildung eines Netzwerkes, das aus einzelnen, sehr langen Chromo- 
somen besteht. Die weiteren Entwicklungsvorgänge lassen sich 
nur schwer beobachten ‚‚und wenn wir nicht mit den entsprechenden 
Prozessen von Tomopteris bekannt gewesen wären, hätten wir kaum 
‚die Bilder auf die Art gedeutet‘. Ein derartiger Schluß ist stets 
sehr gewagt und auch in diesem Falle unrichtig, denn aus den Bil- 
dern, welche das Ehepaar Schreiner seinen Arbeiten beigibt 
(Abb. 4,5,1. c.) läßt sich erkennen, daß es sich niemals um einzelne 
Chromosomen hand«lIn kann, sondern ‚lediglich um die Aus- 
bildung eines Netzwerkes in der gleichen Weise wie beim Olm 
(Abb. 42, 43). Die Entstehung eines Monospirems wurde vom Ehe- 
paar Schreiner nicht beobachtet, vielmehr gehen die Chro- 
matinbügel der letzten Spermatogonienthelophase ohne ihre gegen- 
seitige Orientierung zu verlieren unmittelbar in die dünnen Schlingen 
der Spermatocyten über. Die freien Enden der Chromosomen liegen 


Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. _ 16 


238 H. Stieve: 


im Polfeld der Zelle und treten dort infolge einer Kondensation, 
die sich an ihnen vollzieht, bald als begrenzte Fäden hervor, während 
sie im Gegenpol einen ‚lockeren, wirren Knäuel darstellen. Nun- 
mehr nähern sich je zwei der dünnen Fadenenden einander und 
je zwei Chromosomen konjugieren. Sowohl vor, wie nach der Kon- 
jugation endigen die Chromosomen frei innerhalb des Kernes. 
Schließlich sind 12 bivalente Schlingen, die halbe Normalzahl vor- 
handen 

Die ganze obige Beschreibung krankt zunächst daran, daß sie 
sich größtenteils nicht auf direkte Beobachtungen, sondern in der 
Hauptsache auf Analogieschlüsse mit dem Tomopteristyp stellt. 
Aus den Abbildungen selbst ist weder eine deutliche Parallellagerung, 
noch auch eine Konjugation der Chromosomen zu erkennen. Der 
Vorgang der sich abspielt, ist vielmehr zweifellos der gleiche wie 
der, den ich beim Olm ermittelt habe. Die mit der polaren Orien- 
tierung einhergehende, bzw. sie verursachende Verdichtung der 
Fadenteile im Polabschnitt des Kernes hält das Ehepaar Schrei- 


ner für Parallelkonjugation, dagegen wurde die eigentliche Längs- 


spaltung übersehen, wohl auch gar nicht nach ihr gesucht, da sie 
ja auch im Tomopteristyp nicht vorkommt. Dementsprechend 
wird dann ein Stadium, wie es etwa meiner Abbildung 66 entpricht, 
einfach an das in Abbildung 49 wiedergegebene angereiht, der ganze 
zwischenliegende Zeitraum aber durch die Phantasie überbrückt. 
Wie groß die Unterschiede in den einzelnen vom Ehepaar Schrei- 
ner wiedergegebenen ‚Stadien‘ aber sind, lehrt ohne weiteres 
ein Blick auf ihre Abbildungen. 

Wie verhält es sich nun aber mit der Samenentwicklung bei 
Tomopteris selbst? Bei ihm tritt (1906 e) eine Auflockerung der 
Chromosomen in den jungen Spermatocyten bis zum völligen Ver- 
schwinden ihrer Grenzen ein. Während dieser Zeit wandert der 
Zentralkörper an den entgegengesetzten Pol der Zelle und von 
dieser Seite aus beginnt nun innerhalb des Kernes von neuem die 
Kondensation des Chromatins. Wie diese im einzelnen vor sich 
geht, läßt sich nicht genau beobachten. ‚Nicht selten haben wir 
indessen Bilder gesehen, die uns den Eindruck gegeben haben, 
daß das Chromatin der lockeren Schlingen sich zuerst zu einem 
unregelmäßig aufgebauten, stark gewundenen und gefalteten Bande 
sammelt, aus dem wieder die deutlich begrenzten dünnen Fäden 
hervorgehen.“ Der Vorgang scheint sich also auch hier, so glaube 


N 


. 
N 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 239 


ich wenigstens den eben erwähnten Satz verstehen zu müssen, 
auch die beigefügte Abbildung (181. c.) läßt ein solches Verhalten 
erkennen, unter Bildung eines Monospirems abzuwickeln. Kurze 
Zeit darauf sind wieder einzelne Chromosomen vorhanden, die 
bogenförmig als lange Schleifen den ganzen Kern durchsetzen und 
mit ihren freien Enden gegen den Pol der Zelle zu gerichtet sind. 
Diese Enden nehmen nun bald parallelen Verlauf an und vereinigen 
sich zu je zwei miteinander, bilden also Doppelfäden, die sich stärker 
färben und aus diesem Grunde auch dicker erscheinen als die beiden 
Einzelfäden. Wenn sich die Vereinigung über den ganzen Kern aus- 
gebreitet hat, so ist schließlich nur die halbe Normalzahl der Chro- 
mosomenschlingen vorhanden. Irgendwelche Abbildungen, welche 
diese Zahlenangaben belegen, werden leider nicht beigegeben. Nach 
einiger Zeit spalten sich die Konjugierten Chromosomen wieder der 
Länge nach und bilden dann die bekannten verschlungenen Chro- 
mosomenpaare. 


Textabb. 14. N Textabb. 15. 


Auch bei Tomopteris dürfte, soweit sich dies aus den Schrei- 
nerschen Abbildungen erkennen läßt, der Vorgang der Reifung 
der nämliche sein wie bei Proteus. Zweifellos richtig ist es, daß die 
Schlingen des polargerichteten Knäuels besonders in der Polhälfte 
des Kernes parallel zueinander gelagert sind, darin besteht ja eben 
das Bezeichnende dieses Zustandes. Auch sind die Einzelteile des 
Fadens in diesem Abschnitt etwas dicker, als im Gegenpolteil, da ja die 
Orientierung mit der Konzentration des Chromatins einhergeht, 
beziehungsweise durch sie bedingt wird. Diese besondere Lagerung 
führt jedoch niemals zu einer Verschmelzung von zwei Fadenab- 
schnitten. Das Ehepaar Schreiner bringt keine Bilder, welche 
die Parallelkonjugation zahlenmäßig beweisen, dagegen füge 
ich hier noch zwei Textabbildungen bei, (14 und 15) welche be- 
weisen, daß die Verdickung der parallelen Fadenteile durch Kon- 


zentration und nicht durch Konjugation bedingt wird.‘ Textab- 
Tas 


240 H. Stieve: 


bildung 14 stellt einen Querschnitt senkrecht zum Fadenverlauf 
durch den Polteil eines Kernes im Anfangsstadium der Orientie- 
rung dar, so wie es Abbildung 48 wiedergibt, Textabbildung 15 
nach vollkommen durchgeführter Orientierung, so wie sie Abbil- 
dung 51 darstellt. Beide Figuren sind mit dem Zeichenapparat 
entworfen und in ihnen ohne Eintragung von Einzelheiten nur 
die Querschnitte der einzelnen Fadenteile genau in natürlicher 
Größe wiedergegeben. Der Unterschied ist einleuchtend, jeder 
Faden in Textabbildung 15 hat gut die doppelte Querschnitts- 
fläche als in Abbildung 14, wie leicht könnte man diese Tatsache 


mit der Parallelkonjugation erklären, wenn nicht die Zahlen- 


 verhältnisse dagegen sprächen. In beiden Fällen sind es nämlich 
36 Fadenquerschnitte, die Anzahl der Turen ist demnach immer 
gleich 18, also gleich der Normalzahl der Chromosomen. 

Die ganze Beschreibung der Tomopterisspermatogenese wie sie 
das Ehepaar Schreiner gibt, ist wenig ausführlich und in 
keiner Hinsicht überzeugend. Zudem werden die geschilderten Ver- 
hältnisse nicht durch entsprechende Abkildungen belegt. Die Autoren 
selbst (1908 b) messen nun zwar Abbildungen, die nach cytologi- 
schen Präparaten mit starken Vergrößerungen gezeichnet sind, 
keinen besonderen Wert bei, dürften in dieser Anschauung aller- 
dings ziemlich vereinzelt dastehen. Jedenfalls aber müssen Ab- 
bildungen, falls sie als Beleg für irgend welche Befunde verwendet 
werden auch wirklich überzeugend sein, und das kann man von 
den Schreinerschen Zeichnungen nicht behaupten. Sie scheinen 
zwar meist die Parallellagerung einzelner kleiner Fadenab- 
schnitte darzutun, niemals aber beweisen sie die erfolgte nume- 
rische Reduktion. 

Eine scharfe Kritik verdient aber vor allem das weitere Vor- 


gehen des Ehepaars Schreiner, das zum Beweis der Rich- | 


tigkeit des Tomopteristyp eine ganze Reihe anderer Objekte, ich 
erwähne nur den oben besprochenen Feuersalamander (1906 a—1908) 
untersucht, sich bei ihnen aber nicht auf eine genaue Feststellung 
der gesamten Vorgänge der Gonocytogenese einläßt, sondern sich 


EEE EN . : ar Pe 2a, a nad ann as 32 Ze 
ET ET er Eee 2 >, 


SEE 


damit begnügt, einzelne Stadien aufzusuchen, welche dem Tomop- 3 


teristyp zu entsprechen scheinen und aus ihnen dann Schlüsse auf 
die Parallelität auch der nicht beobachteten Vorgänge zu ziehen. 
Es liegt auf der Hand, daß ein solches Verfahren unzulänglich ist, 
bei seiner weitesten Anwendung wäre ja fürderhin jede Unter- 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 241 


suchung einer Geschlechtszellenentwicklung überflüssig, sobald 
festgestellt wäre, daß die Kerne der jüngsten Spermatocyten und 
die der Spermatiden bei beiden Arten den nämlichen Bau zeigten. 

Auf die Unvollständigkeit der Untersuchungen von Herrn und 
Frau Schreiner und vor allem auf die Unrichtigkeit ihrer 
Schlußfolgerungen ist schon des öfteren hingewiesen worden, 'so 
vor allem von Meves (1907, 1908), welcher sehr deutlich dartut, 
daß die vermeintliche Parallelkonjugation nichts anderes ist, als 


‚der Ausdruck eines sehr frühzeitig auftretenden Längsspaltes in 


den Chromosomen. Er weist auch darauf hin, daß es vollkommen 
unmöglich ist, ganz besonders bei Salamandra maculosa die Chro- 
mosomen des ‚„Bukettstadiums‘‘ unmittelbar auf diejenigen der 
Telophasen der letzten Spermatogonienteilungen zurückzuführen. 
Es bildet sich vielmehr ein Ruhekern in den jungen Spermato- 
cyten aus, dessen Gerüst sich aus groben rundlichen oder eckigen 
Chromatinklumpen und einem Lininfadenwerk zusammensetzt. Beim 
Uebergang in die Wachstumsperiode verteilt sich dann das Chro- 
matin auf die Lininstränge und es entsteht so ein außerordentlich 
dichtes Chromatingerüst, ‚das sich aus unregelmäßig geformten 
Knoten und dünneren Balken zusammensetzt“. Dieses Gerüst 


. erhält kurz darauf ein gleichmäßiges Aussehen, die Knoten ver- 


schwinden, gleichzeitig beginnen in der Polseite des Kernes die 
einzelnen Balken sich polar zu orientieren. Der Vorgang ist also 
auch hier fast genau der nämliche wie in den Spermatocyten des 
Olmes, allerdings kommt es nicht zur Ausbildung eines so klaren 
Monospirems. 

Auch Janssens (1901) schildert den Vorgang in der glei- 
chen Weise, er beobachtet an den orientierten Teilen des Fadens 
einen Längsspalt, den auch er als Beweis für cie erfolgte Parallel- 
konjugaticn zweier Fadenabschnitte auslegt. Im Gegensatz dazu 
weist Meves sehr richtig darauf hin, daß die äußerst dichte und 
verwirrte Lage der Fadenteile in diesem Stadium eine Parallel- 
konjugation schon aus rein mechanischen Gründen ausschließt 
und daß die Dualität dieser orientierten Fadenteile nur eine schein- 
bare ist, bedingt durch eine zweireihige Anordnung der Chromatin- 
körner. Zu dem nämlichen Ergebnis gelangt auch Fick (1907), 
der sich nach eingehender Untersuchung der Schreinerschen 
Tomopterispräparate folgendermaßen äußert: „Der unbefangene 
Beobachter wird aus den Präparaten und Bildern glaube ich nur den 


242 H. Stieve: 


Eindruck gewinnen können, daß sich aus dem chromatischen Netz- 
gewirr an der Polseite des Kernes auf der Grundlage feinster pa- 
ralleler oder untereinander verflochtener Chro matinfäden gespaltene, 
sich allmählich verdickende Chromatinbalken anlegen.‘ 

Auch Levy (1915) findet in den Kernen der jüngsten Sper- 
matocyten von Rana esculenta ein Reticulum, dem feinste Chro- 
matinkörner angelagert sind. Auch er läßt die Frage offen, ob es 
sich dabei um ein echtes Netzwerk oder nur um Ueberschneidung 
einzelner Fäden handelt, die Möglichkeit eines einzigen Fadens 
bespricht er nicht. Auf diesen Bau der jüngsten Spermatocyten 
hat übrigens schon Flemming (1887) aufmerksam gemacht, 
der gleichfalls die Frage nach der Natur dieses Netzwerks offen 
läßt. Meines Erachtens wird sie sich, so lange uns nicht neue Un- 
tersuchungsmethoden zur Verfügung stehen auch nicht mit Sicher- 
heit entscheiden lassen. Bei Rana werden nach Levy die Fäden 
allmählich schärfer und deshalb besser unterscheidbar, sie nähern 
sich einander, so daß sie ‚in gewissen mittleren Strecken ihres Ver- 
laufes‘‘ parallel zueinander gelagert erscheinen. Zu einer Vereini- 
gung dieser parallelen Fäden kommt es dagegen nie, sie ordnen ‚sich 
vielmehr zum ‚„Bukettstadium‘‘ an, das allerdings nach den Schil- 
derungen und Abbildungen Levys ganz anders aussieht als ge- 
wöhnlich, das Chromatin zieht sich zusammen, es tritt also Syn- 
apsis ein, nach der die Chromosomen dicker und immer noch paar- 
weise mit den Enden vereinigt erscheinen, während ihres ganzen 
Verlaufes liegen sie aber deutlich getrennt voneinander. Levy 
bezeichnet diesen Zustand als Amphimetasyndese, er stellt im 
Grunde genommen einen der Parallelkonjugation zum mindesten 
sehr ähnlichen, wenn nicht gleichwertigen Vorgang dar, nur ver- 
schmelzen die beiden konjugierten Fadenteile ausschließlich mit 
ihren Enden und bleiben im übrigen getrennt voneinander. Was 
die Lev ysche Arbeit betrifft, so enthält sie leider nur eine recht 
kurze Schilderung der betreffenden Vorgänge, die auch aus den in 
äußerst spärlicher Anzahl beigegebenen Abbildungen nicht in über- 
zeugender Weise zu erkennen sind. 

Im Gegensatz dazu stehen die äußerst eingehenden, durch eine 
große Zahl von Abbildungen und genaueste Beschreibung be- 
legten Untersuchungen von Champy (1913). Er weist zunächst 


auf die ungeheure Schwierigkeit der richtigen Seriation der ein- - 


zelnen Bilder im Hoden der anuren Amphibien hin. Im großen 


IR 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 243 


und ganzen vollzieht sich aber bei allen untersuchten Amphibien- 
arten, Anuren als auch Urodelen die erste Entwicklung der Sper-’ 
matocyten auf folgende Weise: Aus dem Ruhekern der Sperma- 
tocyten entwickelt sich zunächst ein feines Monospirem: „Il ap- 
parait dans le noyau un filament tres "in (stade leptotene). Le fi- 
lament s’oriente en un bouquet (stade du bouquet leptotene) puis 
a un stade dit amphitene, on observe vers un pöle du noyau un 
filament epais (tandis que dans le reste du noyau le filament est 
encore mince). Bientöt on a un bouquet constitue d’un filament 
entierement £pais (stade pachytene). Le bouquet pachytene. se 
dedouble alors chaque filament devenent double par fissuration 
longitudinale: c’est le stade diplotene. Les filamentes se tordent 
ensuite de diverses manieres en se raccoursissent.‘“ Aus dieser Be- 
schreibung geht klar hervor, daß die Erscheinungen fast bis in 
alle Einzelheiten die nämlichen sind, wie die von mir beim Olm be- 
obachteten. Diese Feststellung hat besonderen Wert, da die Unter- 
suchungen Champys wirklich äußerst gründlich und genau 
sind, sie erstrecken sich über einen Zeitraum von 10 Jahren und 
erfassen eine ganze Reihe von Amphibienarten. Auch Champy 
verlegt also das Diplotene hinter den dicken Knäuel und nicht 
wie die meisten Autoren hinter den dünnen Knäuel, also vor das 
„Bukettstadium‘“. Zu einer solchen falschen Seriierung kann lediglich 
das gleiche Aussehen einzelner Abschnitte des dünnen Fadens und 
der beiden Spalthälften des Doppelfadens verleiten, die angenom- 
mene Verschmelzung der beiden Teile wird dann meistens in die 
Synapsis verlegt, die ja alle Kernstrukturen mehr oder weniger 
vollkommen verdeckt, also der Phantasie weitesten Spielraum 
läßt und deshalb die Möglichkeit bietet, die heterogensten Bilder 
miteinander zu verbinden. Einzig und allein aus diesem Grunde 
halten wohl eine Reihe von Forschern mit einer solchen Zähigkeit 
gerade an dieser Zellform fest, über deren Bedeutung nach den Un- 
tersuchungen der letzten Jahre (Meves und andere) kaum mehr 
ein Zweifel bestehen kann. Die Synapsis ist eben eine anormale 
Zellform, das unnatürliche ihrer Erscheinung kann durch die ver- 
schiedenen Fixierungsmittel ausgelöst, bzw. wesentlich verstärkt 
werden, sie darf aber niemals in den normalen Entwicklungsgang 
eingereiht werden. | 


244 H. Stieve: 


Die Befunde vonv. Winiwarterund Sainmont. 


Mit Hilfe der Synapsis erklären auch v. Winiwaıter und 
Sainmont die Vorgänge, welche sie bei der Reifung der Ei- 
zellen feststellen konnten (1900, 1909). Die beiden Belgier stellen 
zuerst in den Kernen der jüngsten Ocyten eine feine Zerstäubung 
des Chromatins fest, indem sie wie ich schon früher (1918 c) nach- 
gewiesen habe, offenkundig in Rückbildung begriffene Kerne in die 
normale Oogenese einreihen. Nach ‚dem Wiedererscheinen des 
Chromatins‘‘ zeigt der Kern feine, netzige Struktur, später ent- 
wickelt sich ein dünner kontinuierlicher Knäuel, der sehr lange be- 
stehen bleibt. Die Fadenschlingen wenden sich nunmehr gegen 
den Pol der Zelle zu und legen sich gleichzeitig paarweise parallel 
zueinander. In der folgenden Synapsis konjugieren dann die beiden 
jeweils parallel gelagerten Fadenpaare und dadurch entsteht das 
Stadium des dicken Knäuels in welchem die Anzahl der Chromatin- 
elemente auf die Hälfte reduziert ist. Als Beweis für die Richtig- 
keit seiner Seriierung bringt v. Winiwarter die Feststel- 
lung, daß sich in jüngeren Ovarien manchmal zahlreiche doppel- 
 fädige Kerne nachweisen lassen, während keine dickfädigen auf- 

findbar sind, das erstere Stadium müsse also das jüngere sein. Dieser 


Beweis ist aber nicht stichhaltig, denn bei der großen Gleichmäßig- 


keit mit welcher sich die Entwicklung im ganzen Ovar abspielt, 
ist es leicht möglich, daß in manchen Zeitabschnitten sich die Längs- 
spaltung schon an allen dickfädigen Kernen vollzogen hat, daß 
diese also nicht mehr auffindbar sind. Daß dies gerade bei einigen der 
jüngeren untersuchten Tiere der Fall ist mag Zufall sein. Als zweiten 
Beweis bringen die beiden Belgier Zahlenangaben. In der gleichen 
Art und Weise wie ich es oben ausgeführt habe, erinitteln sie an 
Querschnitten durch die parallel gelagerten Teile des Fadens die 
Anzahl der Querschnitte durch die einzelnen Turen und stellen 
dabei beim dicken Faden 36-42 Schnitte (Abb. 48, 49, 1. c.), beim 
dünnen aber 74, also fast die doppelte Anzahl fest (Abk. 47 1 ce). 

Ganz abgesehen nun davon, daß diese letztere Abbildung nicht 
ganz klar und keineswegs überzeugend ist, — man gewinnt vielmehr 


häufig den Eindruck, so besonders im linken unteren Abschnitt x 


der Zelle, daß ein geschlängelter Fadenteil häufiger, drei bis fünf- 
mal getroffen ist, bzw. in der Schnittebene liegt und daß knötchen- 


förmige Verdickungen an ihm die Querschnitte vortäuschen, — 


Bu . 


= 


nd a En En En ae Zn du Biel u an a a a a a al Ta ER ze En TS 5 
’ bene 3 al Fa ee a a de . R 


VEEBE EHRD FERBEZERTE 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 245 


fällt auch die Größe der Zellen auf. Das nach Angabe der Autoren 
jüngere Stadium mit den 72 Querschnitten ist nämlich mehr als 
doppelt so groß als jedes der beiden angeblich späteren Stadien 
mit 36—42 Querschnitten. Wenn auch bei der Katze die Größe 


der Zellen sicherlich starken individuellen Schwankungen unter- 


liegt, so erscheint es doch ausgeschlossen, daß die beiden, bzw. alle 
drei Bilder in der Reihenfolge aufeinander folgen, wie v. Wini- 
warter und Sainmont dies annehmen. Es fällt vielmehr 
bei der ganzen Arbeit auf, daß die dickfädigen, also angeblich älteren 
Stadien durchwegs viel kleiner sind als die doppelfädigen, angeblich 


jüngeren. Aus dieser Tatsache allein müßte man eigentlich den 


Schluß ziehen, daß die Bilder in der betreffenden Arbeit falsch 
aneinander gereiht sind, Abb. 48 und 49 (1. c.) sind frühere Stadien 
als Abb. 47 (1. c.). Damit ist die Sachlage geklärt, die früheren Bilder 
entsprechen dem polargerichteten Knäuel an dem sich nach Ver- 
schwinden der Orientierung die Teilung vollzieht, Abbildung 47 
stellt, falls in der betreffenden Zelle tatsächlich 72 Querschnitte 
vorhanden sind, was aus der Abbildung nicht hervorgeht, die voll- 
zogene Längsspaltung dar, nach der die Anzahl der Fadenquer- 
schnitte selbstverständlich verdoppelt ist. 

Diese Zahlenverhältnisse stimmen allerdings nicht mit den 
in den Oogonien gefundenen überein, allein hier stoßen v. Wini- 
warter und Sainmont überhaupt auf die größten Schwie- 
rigkeiten. Sie stellen nämlich die ganz einzigartige Erscheinung 
fest (1909), daß ‚Chez le chat comme chez le lapin (v. Wini- 
warter 1906) le nombre somatique et ovogonial ne correspond 
pas a celui de l’oeuf ä maturite“. Beim Kaninchen konnten näm- 
lich in den Oogonien ungefähr 42 Chromosomen, in den Reifungs- 
teilungen aber nur 10—12 festgestellt werden, bei der Katze dage- 
gen in den Oogonien und Oocyten 36, in den Reifungsteilungen aber 
auch nur 10—12. Verschiedenheiten in der Chromosomenzahl zwi- 
schen somatischen Mitosen und denjenigen der Geschlechtszellen 
sind ja schon festgestellt worden, noch niemals aber ein Unterschied 
in der Zahl bei den Oogonien und: Reifungsteilungen. Wenn die 
Zahlenangaben von v. Winiwarter und Sainmont stim- 
men würden, dann hätten wir es beim Kaninchen sowohl als auch 
bei der Katze mit einer doppelten Reduktion der Chromosomen 
auf ungefähr ein Viertel der Normalzahl zu tun. Zieht man daraus 
die weiteren Folgerungen, dann enthält jede reife Geschlechts- 


ET er 


246 H. Stieve: 


zelle nur ein Viertel der Normalzahl, die befruchtete Eizelle aber 
nur die Hälfte und wenn die Zahl nicht durch irgendeinen geheim- 
nisvollen Vorgang sich immer wieder von selbst ergänzt, dann müßte, 
selbst bei nur kurzer Fortdauer dieses Prozesses über mehrere Ge- 


nerationen die Chromosomenzahl gleich Eins sein. Das ist unmöglich. 


Die Chromosomenzahlen beim Kaninchen und bei der Katze be- 
dürfen also unbedingt einer Nachprüfung und erst dann können die 
Befunde v. Winiwarters una Sainmonts.in den Rahmen 
einer Erörterung über die Reduktion eingezogen werden. Soviel 
ich aus den Abbildungen der beiden Belgier erkenne, wurde die 
Feststellung der Zahlen bei der Katze in der Polansicht der Spindel 
bei Oogonienteilungen vorgenommen (Abb. 11—141.c.). In diesem 
Zustande sind aber die beiden Spalthälften der Chromosomen fast 
stets schon getrennt, es handelt sich um die nämlichen Bilder, wie 
ich sie beim Olm vorfand (Abb. 28—32) und dementsprechend 
haben wir hier nicht mehr die Normalzahl, sondern die doppelte 
Zahl der Chromosomen vor uns. Von diesem Gesichtspunkt aus 
betrachtet, lassen sich die Vorgänge der Reifung der Keimzellen bei 
der Katze ohne jede Zwangshypothese und gewaltsame Seriierung 
erklären, die Chromosomenzahl beträgt 18—20 und nicht 36—42, 
im Stadium des dicken Fadens ist die Normalzahl der Turen vor- 
handen, die später durch Längsspaltung verdoppelt und schließlich 
durch die Pseudoreduktion und Reduktion auf die Hälfte herab- 
gesetzt wird. Das Eine können wir aber schon jetzt mit Sicherheit 
sagen, daß in den Stadien, welche von v. Winiwarter und 
Sainmont als Beweis für die Parallelkonjugation anführen, 
eine Reduktion noch gar nicht stattgefunden hat. Denn die re- 
duzierte Chromosomenzahl beträgt für die Katze nach Angaben 
der beiden Belgier selbst 10—12, im fraglichen Stadium sind. aber 
noch 18-20 Schleifen, also die Normalzahl vorhanden, die dann 
durch Längsspaltung verdoppelt wird. Die eigentliche Reduktion 
aber haben die beiden Belgier gar nicht beobachtet. 

Ich glaube im Vorhergehenden nachgewiesen zu haben, daß 
die beiden Hypothesen, welche eine Parallelkonjugation beweisen 
sollen, wie sie einerseits das Ehepaar Schreiner für Tomop- 
teris, andererseits v. Winiwarter und Sainmont für 
Säugetiere aufgestellt haben, auf unrichtige Beobachtungen gestützt 
sind. Der Irrtum beruht einerseits in der falschen Deutung des 
frühzeitig als Ausdruck der später erfolgenden Teilung auftretenden 


IRRE 


ni Fer 2 


RE ERS 


N NE AN 
er { 


f} Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 247 


Längsspaltes im Sinne einer parallelen Vereinigung zweier einzelner 
Chromosomen (Schreiner), andererseits in der falschen Se- 
riation der Bilder bei unsicheren Zahlenverhältnissen, indem das 
Doppelfadenstadium wegen seiner entfernten Aehnlichkeit im Bau 
der Einzelelemente unmittelbar hinter das Dünnfadenstadium ge- 
reiht und die spätere Lücke in der Beobachtungsreihe durch 
die Synapsis ausgefüllt wird. Es kann hier nicht meine Aufgabe 
sein alle Arbeiten, welche die Parallelkonjugation schildern, in ähnlich : 
. ausführlicher Weise zu besprechen, die eben geltend gemachten 
Einwände treffen in der einen oder anderen Form auf jede von ihnen 
zu, weshalb es überflüssig erscheint hier auf Einzelheiten einzu- 
gehen. Ganz abgesehen aber davon, daß a:le die Untersuchungen, 
welche eine Parallelkonjugation der Chromosomen beweisen wollen, 
auf falscher Seriation der Bilder oder sonstiger unrichtiger Deu- 
tung der Bilder fußen, lassen sich auch noch andere Tatsachen 
aufführen, welche gegen eine solche Art der Reduktion sprechen. 


Bheorettsche,Bedenken-gegen'.dte 
Parallelkonjugation. 


Da die Parasyndese die Herabsetzung der Normalzahl der 
Chromosomen auf. die Hälfte bewirken soll, so muß sie, da eine 
solche Reduktion ausschließlich bei der Reifung der Keimzellen 
stattfindet, ein Vorgang sein, der auch einzig und allein diesen 
Gebilden zukommt, und alle Erscheinungen welche mit ihr in un- 
mittelbarem Zusammenhang stehen, so vor allem die Parallel- 
lagerung der einzelnen Abschnitte des lockeren Knäuels, bzw. der 
in diesem Sinne gedeutete Längsspalt an den Chromosomen dürften 
sich nur in den reifenden Geschlechtszellen finden. Dem ist jedoch 
nicht so. Wie schon Flemming in seinen grundlegenden Ar- 
beiten über die Kernteilung gezeigt hat (1887 und 91), tritt der 
Längsspalt in den Chromosomen bei sich teilenden Epithel und Bin- 
degewebszellen der Salamanderlarve ‚in einem viel früheren Sta- 
dium als viele Untersucher anzunehmen scheinen‘ auf, nämlich 
unmittelbar nach der Ausbildung des Monospirems. „Man kann 
in diesen ihren ersten Stadien und überhaupt weiter bis zur Mut- 
tersternform ja eigentlich nicht wörtlich von einer Spaltung reden, 
da es in den Chromosomen außer den zwei Chromatinkörnerreihen 
jetzt wie vor der Spaltung ein achromatisches Lininsubstrat gibt, 


248 H. Stieve: 


das... . die beiden Chromatinreihen zusammenhält.‘“ Auf diese 
Tatsache weist gleichfalls Meves 1907 hin, und Heidenhain 
gibt (1907, Seite 151) an, daß er im Epithel der Kiemenblätter von 
Salamandra in den Tochterzellen bei einer Teilung, also noch we- 
sentlich früher als Flemming die Chromosomen schon vor 
ihrem Eintreten in den Ruhekern deutlich längs- 
gespalten erkannt hat, wobei jede der Spalthälften aus nur einer 
Serie „Pfitzschnersche Kugeln‘ bestand. Es kann alse 
indenChromosomeneinLängsspalt auftreten, 
“ohne daßb,uünbedinet ein" Ausermanderrnceken 
der berden-Spalthälften nachfofgeen mub ra 
mit dieser Tatsache lassen sich die Befunde vonv. Winiwarter 
und Sainmont (1900, 1912), Janssens (1901, 1905) und 
Dumez (1908) erklären, ebenso alle jene, welche gleichfalls eine 


Parallelkonjugation der Chromosomen aus den nämlichen Gründen 


beweisen sollen, so die Arbeiten von Schönfeld (1901), Ma- 
rechatl. (1907), Tretjakoftf' (1904): Bonnievie. (1905 
1906), Lerrat.: (11905), "Ste viens'(1905),. Marcus 221908 
1908), A: und 'KE. Schreiner. (1906 u a.’a 0) Grezare 
(1909, 1910) und andere. 


Schließlich mag noch erwähnt werden, daß der Längsspalt 


der Chromosomen vielleicht auch durch besondere Lichtreflexe und 
Spiegelungen vorgetäuscht werden kann, ohne überhaupt vorhanden 
zu sein, eine Tatsache, auf die Levy aufmerksam macht, der 
ich allerdings keine allzu hohe Bedeutung beimessen kann, da ja 


in den fraglichen Entwicklungsabschnitten die Chromosomen meist 


aus vielen einzelnen Körnern zusammengesetzt erscheinen, also keine 
spiegelnde, glatte Oberfläche besitzen, die das Zustandekommen der- 
artiger Reflexe ermöglicht. 

Als Gegenbeweis gegen die Parallelkonjugation wird auch häufig 
die Tatsache angeführt, daß auch an Monosomen häufig Erschei- 
nungen beobachtet werden können (von Baehr 1909und Buch- 
ner 1909), welche stark an die bei der Parallelkonjugation ge- 
fundenen Bilder erinnern und schließlich vor allem der Umstand, 
daß Kühn (1908) in jungen Oocyten von sich parthenogenetisch 
entwickelnden Eiern, bei denen also keine Reduktion stattfindet, 
Stadien nachweisen konnte, ‚‚die ohne Zweifel an die Bilder er- 


innern, die A. und K. E. Schreiner für Tomopteris geben und. 


aus bestimmten Gründen als parallele Konjugation deuten“. Das 


re a ee 


LEERE: 


ERS N 3... een Kr Brchealh ira rkiken RE 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 249 


Für und Wider dieser Anschauung ist schon häufig genug erörtert 
worden, in letzterer Zeit besonders von Wassermann (1914) 
und anderen, so daß ich hier nicht nochmals darauf einzugehen 
brauche. 


Die Befunde Rabls. 


Eine besondere Stellung zu der Frage nehmen noch die Beob- 
achtungen ein, die Rab| (1915) in seinem Nachruf auf Van 
Beneden, über die Eireifung von Askaris megalocephala bivalens 
mitteilt. Auch er beobachtet die Parallelkonjugation der Chromo- 
somen in der Synapsis, nur zeigt diese ganz besondere Formen, indem 
nämlich die Chromatinmasse des Kernes sich nicht auf einen, son- 
dern auf zwei Klumpen zusammenzieht, deren jeder einem kon- 
jugierten Chromosomenpaar entsprechen soll. Wenn die Zusammen- 
ziehung sich löst, so liegen in der Zelle wieder vier Einzelchromo- 
somen, genau wie vor der Synapsis, von denen jedes in der Folge- 
zeit eine Längsspaltung in zwei Tochterhälften erfährt. „Es haben 
sich also die in der sog. Synapsis konjugierten homologen Chromo- 
somen wieder voneinander getrennt. Diese Trennung ist nicht 
etwa als eine Längsspaltung der zwei chromatischen Platten des 
Keimbläschens aufzufassen; vielmehr ist sie von einer Längsspal- 
tung, wie sie die Chromosomen einer typischen Mitose erfahren, sehr 
wesentlich verschieden.‘ Leider ist die ganze Schilderung der Vor- 


gänge, im Gegensatz zu den sonstigen Gewohnheiten Rablsnur. 


sehr kurz und wenig eingehend, immerhin geht deutlich aus ihr 
hervor, daß Rab| die Synapsis keinesfalls als ein Mittel auffaßt, 
um die Zahl der Chromoso men zu reduzieren, wie dieser Vorgang 
sich abspielt, werden wir weiter unten noch besprechen, sondern 
lediglich als die nahe und nur sehr kurzdauernde Vereinigung je 
zweier homologer Chromosomen zum Zwecke des gegenseitigen Sub- 
stanzenatistausches. Wir dürfen aber wohl annehmen, daß auch 
bei Askaris diese „Pseudosynapsis“ kein normales Stadium ist, ihre 
Ausschaltung aus dem Entwicklungsgang der Oocyte macht ja 
nicht die geringsten Schwierigkeiten, da die Kernbilder vor und 
nach ihr in jeder Hinsicht vollkommen identisch sind, der eigent- 
liche Entwicklungsgang also in keiner Weise beeinflußt wird. 


8 
K 


% 
4 
Al 

w 


ki 
. 
[ 


* 
eh 


Een 


Se 


a 


ee .< = . 


ZZ, 
= 


250 H. Stieve: 


Die mutmaßliche Bedeutung der 'polaren 
Orientierung. 


Ich glaube im Vorhergehenden gezeigt zu haben, daß die Hy- - 


pothese der Parallelkonjugation einer eingehenden Kritik nicht 
standhalten kann, und wir dürfen deshalb wohl annehmen, daß die 
frühe Entwicklung der Gonocyten, wie die große Aehnlichkeit der 
Bilder ja zeigt, sich in ihren Grundzügen ebenso oder wenigstens 
ähnlich abwickelt wie beim Olm. Es kommt zur Ausbildung eines 
kontinuierlichen Knäuels, der sich konzentriert, polar anordnet, 
zahlreiche Substanzen abgibt und schließlich der Länge nach spaltet. 
Die Vorgänge sind im großen und ganzen, wie ich es schon des 
“ öfteren betont habe, die nämlichen, wie die, welche sich in der Pro- 
phase der Spermato: onienteilungen und der somatischen Mitosen 
abspielen, einzig und allein die polare Orientierung und die Sub- 
stanzabgabe unterscheidet die erste Reifungsteilung von diesen. 
Welche Aufgabe fällt nun gerade diesen beiden Vorgängen zu, wir 
müssen doch annehmen, daß keine der Erscheinungen, gie wir bei 
der Reifung der Gonocyten beobachten, nutzlos ist oder auch nur 
irgend einem anderen Zweck dient, als der Vorbereitung auf die 
Reifungsteilung und schließlich auf die Vereinigung mit der gegen- 
geschlechtlichen Zelle? 

Offenbar werden während der polaren Orientierung die in den 
Chromosomen enthaltenen Erbanlagen, das Idiochromatin, schon 
unter dem Einfluß der Sphäre in bestimmter Weise angeordnet, für 
die Teilung vorbereitet, während gleichzeitig alle überflüssigen Sub- 
stanzen, das Trophochromatin, abgegeben werden. Denn wenn 
wir auch, wie ich schon des öfteren betont habe, den Kern nicht 
als ausschließlichen Träger der Vererbung betrachten dürfen, da 
sicherlich dem Plasma und zwar besonders den als Mikrosomen 
oder Plastosomen bezeichneten Teilen eine ganz hervorragende Rolle 
bei der Uebertragung elterlicher Eigenschaften auf die Nachkommen 
zukommt, so können wir doch nicht jede Uebertragung durch den 
Kern, bzw. durch die Chromosomen ausschließen. 

Die Umlagerung der einzelnen Elemente in den Chromosomen 
läßt sich ja unmittelbar beobachten, die Körner des dünnen Knäuels 
verändern ja nicht nur ihre Form, sondern auch ihre gegenseitige 
Lage in erheblichem Maße, dabei erfährt die ganze Substanz des 
Spirems eine Auflockerung, sie verliert an innerer Festigkeit und 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 251 


mangels jeglicher Lininbrücken, die ja in dieser Zeit vollkommen 
fehlen, auch an gegenseitigem Halt. Aus diesem Grunde geraten 
die Chromosomen schon jetzt, noch während, des Bestehens der 
Kernmembran in ein Abhängigkeitsverhältnis von den Centriolen, 
deren Einfluß sich in der polaren Orientierung deutlich genug gel- 
tend macht. Er ist am stärksten im Polteil des, Kernes, am we- 
nigsten deutlich aber in den Abschnitten, die am weitesten von der 
Sphäre entfernt gelegen sind. Wenn dann die einzelnen Körner 
ihre endgültige, für die Reifungsteilungen günstigste Lagerung in den 
Chromatinschlingen angenommen haben, dann gehen die weiteren 
Veränderungen vor sich, nämlich die Bildung der seitlichen Aus- 
läufer, die kurz nach ihrem Auftreten wieder abschmelzen und 
spurlos im Kernsaft aufgelöst werden. Offenbar handelt es sich auch 
bei diesem Vorgang um eine Konzentration des Chromatins, alle 
überflüssigen Substanzen, die während des Wachstums der Sperma- 
tocyte tätig waren, also das Trophochromatin „werden abgegeben, 
nach ihrem Verschwinden besteht der nunmehr wesentlich sub- 
stanzärmere Knäuel ausschließlich aus Idiochromatin, also aus der 
Substanz, die wir als Träger der durch die Chromosomen vererb- 
baren Eigenschaften ketrachten. Mit dem Abschmelzen der seit- 
lichen Ausläufer treten aber wieder Lininbrücken auf, die während 
der ganzen Zeit von der Bildung des dünnen bis zur Entstehung des 
dicken Knäuels nicht nachweisbar waren. So tiefgreifende Um- 
lagerungen, wie sie während der Ausbildung des polargerichteten 
Knäuels sowohl in Hinsicht auf die Lage, als auch die Struktur 
des Spirems zu beobachten waren, wären ja ganz unmöglich, wenn 
auch nur die geringste Verbindung und Festigung der einzelnen 
Chromatinabschnitte untereinander bestände. Sobald solche Ein- 
richtungen wieder erkennbar werden, d. h. mit dem Auftreten der 
Lininbrücken macht sich auch ihr Einfluß auf die Lagerung der 
Chromatinteile wieder geltend und tritt gegenüber dem Einfluß 
der Sphäre in den Vordergrund. Infolge dessen verschwindet jetzt 
mehr und mehr die polare Orientierung. 

Während aller dieser Vorgänge bleibt stets die Kernmembran 
gut darstellbar und als lückenloses Gebilde erhalten. Eine Abgabe 
von chromatischen Substanzen während der polaren Orientierung 
aus dem Kern in das Plasma konnte ich niemals beobachten, wenn- 
gleich es wahrscheinlich erscheint, daß die beim Abschmelzen der 
seitlichen Ausläufer in das Enchylem gelangenden Teile des Tro- 


252 H. Stieve: 


phochromatins nicht im Kern selbst verbleiben, sondern auf irgend- 
eine Art und Weise ausgestoßen werden. Offenbar erfolgt ihr Durch- 
tritt durch die Kernmembran jedoch in einer Form, die sich mor- 
phologisch nicht darstellen läßt, es gelingt aber auch nicht im Plasma 
selbst, in der Umgebung der Sphäre oder an anderen Stellen irgend- 
welche chromtische Substanzen zu einer beliebigen Zeit der Samen- 
entwicklung nachzuweisen. Auch eine Massenzunahme der Mi- 
tochondrien und Anhäufung um die Sphäre, wie sie im Stadium 
der polaren Orientierung häufig beschrieben wird, konnte nicht 
beobachtet werden, dagegen manchmal das Auftreten von „Pseu- 
dochromosomen‘ in ihrer Umgebung, wie sie vn Heidenhain 
(1900) beschrieben worden sind, allerdings nur bei Anwendung der 
Hämatoxylinmethode. Die fraglichen Gebilde ließen sich niemals 
mit typischen Kernfärbemitteln zur Anschauung bringen und es 
ist deshalb wohl unrichtig auf sie lediglich wegen ihrer Aehnlich- 
‚keit in ihrer äußeren Form die Bezeichnung ‚‚Pseudochromosomen“ 
anzuwenden, es handelt sich wohl eher um Mitochondrien oder 
ähnliche Plasmaeinschlüsse. Jörgensen beobachtete in Oocyten 
von Proteus im Stadium des polargerichteten Knäuels unmittelbar 
den Chromatinaustritt aus dem Kern, ganze Abschnitte der ‚Chro- 
matinschleifen ließen sich direkt in das Plasma verfolgen und waren 
in späteren Stadien im Plasma losgelöst aufzufinden, auch von 
anderer Seite sind ähnliche Beobachtungen, nur nicht durch so 
klare Bilder belegt mitgeteilt, so besonders von Buchner (1909, 
1910). Dieser äußert allerdings in letzterer Zeit (1918) auf Grund 
seiner ausführlichen 'Beobachtungen an Insekteneiern selbst Zweifel 
an der Möglichkeit eines unmittelbaren Chromatinübertrittes von 
dem Kern in das Plasma. Da sich in den Spermatocyten des Olmes 
wie schon erwähnt, keine ähnlichen Bilder nachweisen lassen, so 
will ich es auch unterlassen, hier näher auf die erwähnten Befunde 
einzugehen, sondern ihre Besprechung auf die Beschreibung der 
Oogenese verschieben. 

Bis zum Verschwinden der polaren Orientierung, ja noch über 
diesen Zeitpunkt hinaus bis zur Beendigung der Längsspaltung 
bleibt der Faden als kontinwierliches Gebilde erhalten, ein Zerfall 
in einzelne Chromosomen wie er besonders von Anhängern der 
Parallelkonjugation beschrieben wird, findet auch während der po- D 
laren Orientierung nicht statt, nur deutet die starke Umbiegung 
in der Gegend der Polseite die Stellen an, an denen später, wenigstens 


tar 


ENTER EEE 


CRUISER Er 


rn 
nt 


3 
% 
j 
2 
: 
3 
E 
; 
ö 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 253 


: aller Wahrscheinlichkeit nach die Querteilung erfolgt. RabI hat 


ja (1886) zuerst darauf hingewiesen, daß die Chromatinschleifen vor 
«der Längsteilung mit der Konvexität ihrer Krümmung gegen das 
Polfeld zu angeordnet sind und daß von diesem Punkt aus die Spal- 
tung beginnt. Hätte nun vor oder während der polaren Orien-, 
tierung schon ein Zerfall des Knäuels in einzelne Schleifen statt- 
zefunden, dann hätten wir in diesem Zustand wieder eine Besonder- 
heit der ersten Reifungsteilung zu erblicken, da ja dann dieLagerung 
gerade umgekehrt wäre als in somatischen Mitosen. Angedeutet 
ist eine solche Lagerung ja zweifellos auch beim Erhaltenbleiben 


„der Kontinuität des Fadens. Allein bis zur Teilung selbst gehen 


noch viele Umlagerungen an den Chromosomen vor sich und in der 
Mitose zeigen sie schließlich doch ihre typische Lagerung zu den 
Zentralkörpern in der gleichen Weise wie bei den Spermatogonien- 
teilurigen.. Einige Forscher nehmen ja allerdings eine Umlagerung 
«des Polfeldes an, so besonders wieder das Ehepaar Schreiner. 
Sie schildern sogar eine Wanderung der Centriolen von einem Pol 


der Zelle zum anderen, während der die Chromosomen die nämliche 


Lagerung wie in den Tochtersternen der letzten Spermatogonien- 
teilungen beibehalten. Allein diese Schilderung stützt sich wieder 
auf die Annahme, daß die Chromosomen des polargerichteten Knäuels 
sich unmittelbar von denjenigen der letzten Spermatogonientei- 
lungen herleiten lassen, eine Anschauung, die, wie schon von vielen 
Seiten bewiesen wurde, wegen des eingeschobenen. netzförmigen 
Stadiums unhaltbar ist, und zweitens auch auf die gleichfalls un- 
richtige Feststellung, daß in den fraglichen Stadien schon einzelne 
Chromosomen vorhanden sind. 


Die Tetradenbildung durch endweise Konjugation. 


Selrn liche  Beitndesamäanderen Objekten: 


Unmittelbar nach vollzogener Längsspaltung des Fadens, bzw. 
dann, wenn die beiden Spalthälften, deren Bildung wohl in ein 
wesentlich früheres Entwicklungsstadium zurück verlegt werden 
kann, deutlich voneinander abgerückt sind, ohne dabei ihr gegen- 


‚seitiges Abhängigkeitsverhältnis aufzugeben, erfolgt die Querteilung 


‚des Fadens, sein Zerfall in die einzelnen Chromosomen, deren jedes 
entsprechend der Längsspaltung des Fadens selbst wieder aus zwei 


gleich langen Hälften besteht. Die Zahl der Chromatinelemente 
Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 17 


254 H.Stievwe: 


ist gleich der Normalzahl der Chromosomen und schon diese 
Tatsache allein. schließt*‘eine -vorheraegan- 
generParalletkonjugation aus 

Diese längsgespaltenen Chromosomen erfahren in der Folgezeit 
eine sehr wesentliche Verdickung und Verkürzung, ihre Spalt- 
hälften schlingen sich in der bekannten Art und Weise umeinander, 
gleichzeitig legen sich je zwei Paare mit den Enden aneinander, 
verschmelzen und bilden so Vierergruppen, die dann in der halben 
Normalzahl vorhanden sind. Alle diese Vorgänge spielen sich sehr 
rasch nacheinander ab und sind schon aus diesem Grunde schwerer 
zu beobachten als die früheren, zudem erscheint das Kernbild wegen 
der großen Anzahl der in ihm enthaltenen ziemlich richtungslos 
liegenden Einzelelemente auch nicht mehr so übersichtlich. Die 
endweise Vereinigung erfolgt nicht bei allen Paaren gleichzeitig, 
sie kann sich vielmehr in einzelnen Fällen sehr stark, bis zum Eintritt 
in die Teilungsspindel verzögern und gerade diese Bilder beweisen am 
deutlichsten, daß die Entstehung der Tetraden so vor sich geht, wie 
ich es hier beschrieben habe. 

Wie bei jeder indirekten Kernteilung, so erfolgt also auch in 
der Prophase der ersten Spermatogonienteilung ein Zerfall des Mo- 
nospirems in die Normaizahl der Chromosomen. 
Ein solcher Vorgang ist in der Spermatogenese verhältnismäßig 
selten beobachtet worden, zuerst wohl von Calkins (1895) bei 
Lumbricus. Dort treten in den Spermatocyten erster Ordnung 32 
längsgespaltene Chromosomen auf, die sich paarweise zur Bildung 
von 16 Tetraden vereinigen. Ganz ähnliche Verhältnisse schildert 
allerdings schon früher (1891) Henking bei Pyrrhocoris. Weit 
häufiger kam dies Verhalten in der Oogenese zur Beobachtung, Wo 
die Untersuchung und Zählung ja wesentlich dadurch erleichtert 
wird, daß die Konjugation der Chromosomen erst viel später, nach 
der Aus- und Rückbildung der Lampenzylinderputzerformen erfolgt. 
So beschrieb sie Rückert (1892) bei Selachiern und wies sehr 
deutlich nach, daß es sich um eine Längsspaltung der Chromosomen 
handelt, der Begriff der Parallelkonjugation war ja zu dieser Zeit 
überhaupt noch nicht bekannt. Es bedeutet deshalb eine völlige 
Verkennung der Tatsachen, wenn Levy (1915) meint, die Para- 
syndese sei durch die fragliche Arbeit vorbereitet worden, denn er 
übersieht dabei vollkommen die Zahlenverhältnise und gerade 
diese sind es, welche in den fraglichen Stadien den Ausschlag geben. 


ia hi 


& 
& 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 255 


Beim Vorhandensein der Normalzahl längsgespaltener Chromosomen 
kann eben von einer Parallelkonjugation, durch die ja die Reduktion 
bedingt werden soll schlechterdings nicht die Rede sein. Die näm- 
lichen paarweise verschlungenen Chromosomenfäden beobachtete 


auch Fick (1892) im Axolottlei und äußerte wohl als erster den ° 


Gedanken, daß ein solches Gebilde nicht durch ‚unvollständige 
Teilung eines ursprünglichen Keimbläschenchromosoms‘, sondern 
durch „unvollständige Vereinigung von zwei verschiedenen solchen 
zu einem neuen Individuum‘ entstanden sei. Wenn die Paarlinge 
dann später verschmelzen, würde eine wahre Zahlenreduktion ge- 
geben sein. Er gibt aber selbst zu, daß diese Annahme nur wenig 
Wahrscheinlichkeit für sich hat. 

Der erste, der die Parasyndese ausführlich beschrieb und zur 
Erklärung der Reduktion heranzog, war v. Winiwarter (1900) 
auf Grund seiner Untersuchungen am Kaninchenei. Allerdings 
hatte er für seine Beobachtungen ein denkbar ungünstiges Objekt 
ausgesucht, denn bei Säugetieren wickeln sich wie bei allen Warm- 
blütern ja die Vorgänge der Zellteilungen besonders rasch ab, so 
daß, ganz abgesehen von der geringen Größe der fraglichen Elemente, 
Zählungen äußerst schwierig sind. Dies geht auch deutlich genug 
aus der schon oben erwähnten Tatsache hervor, daß v. Wini- 
warter ganz außergewöhnliche Zahlenverhältnisse vorfand, näm- 
lich eine Reduktion der Chromosomen nicht auf die Hälfte, sondern 
auf ein Viertel der Normalzahl. Schon dieser Umstand allein nimmt 
seinen Untersuchungen, so schöne Ergebnisse sie in anderer Beziehung 
gezeitigt haben, jeglichen Wert für die Entscheidung der Reduktions- 
frage, bei ihr handelt es sich nun einmal um einen der wenigen Fälle, 
wo wir die Biologie auf mathematische Grundlagen stellen können 
und müssen, und deshalb kann sie auch nur unter Hinzuziehung der 
Ergebnisse sicherer Zählungen an Hand von einwandfreien Prä- 
paraten geklärt werden. 

Der Anschauung v. Winiwarters schlossen sich später 
Janssens und Gre&goire und mit ihnen die ganze Löwener 
Schule an, dann vor allem auch das Ehepaar Schreiner. Alle 
diese belegen ihre Angaben entweder überhaupt nicht durch sichere 
Zählungen, oder begehen, falls wirklich zahlenmäßige Feststellungen 
gemacht wurden, den Fehler, die ausgebildeten Tetraden nach voll- 
zogener Pseudoreduktion den Chromosomen der Oogonien- der Sper- 


matogonienteilungen gegenüberzustellen. In diesem Falle ist die 
17* 


256 H. Stieve: 


Zahl der Chromatinelemente selbstverständlich reduziert, ohne daß 
dadurch ihre Entstehung geklärt wäre, Fast stets werden dann die 
beiden endweisen vereinigten Hälften, da der Querspalt nicht zu 
erkennen ist, für ein einziges Chromosom erklärt und so die An- 
nahme der Parasyndese gestützt. 

Im Gegensatz dazu stehen aber eine ganze Reihe von Mittei- 
lungen, welche die Bildung der Tetraden in ganz gleicher oder we- 
nigstens sehr ähnlicher Weise beobachten konnten, ‘wie ich sie bei 


Proteus festgestellt habe, einige dieser Befunde will ich zum Belege 


hier anführen. Dabei ergeben sich nicht unerhebliche Unterschiede 
für die Spermatogenese und Oogenese, die jedoch nicht so sehr auf 
der Verschiedenheit der Reifungsteilungen selbst beruhen, als auf 
der Schnelligkeit mit der sich die einzelnen Phasen der Entwicklung 
abspielen. 

In der Prophase der ersten Reifungsteilung nimmt bei der Sper- 
matogenese die polare Orientierung des Knäuels die längste Zeit 
in Anspruch, wie sich aus dem gegenseitigen Mengenverhältnis der 
vorgefundenen Bilder ohne weiteres schließen läßt. Nach dem Ver- 
schwinden der Orientierung und der Ausbildung des dicken richtungs- 
losen Knäuels geht die Entwicklung rasch vonstatten, einzig und 
allein die starkeKonzentration des Chromatins und das Einrücken der 
Tetraden in die Aequatorialplatte nimmt noch längere Zeit in An- 
spruch. Beide Reifungsteilungen spielen sich an einer sehr großen 
Zahl von Einzelzellen innerhalb des Hodens ab und sind dement- 
sprechend in der Spermatogenese meist gut beschrieben, ebenso wie 
das lange dauernde Stadium der polaren Orientierung, wohingegen 
die Vorgänge der Segmentierung des Fadens, die Konjugation der 
Chromosomen und die Ausbildung der Tetraden wegen der geringen 
Zahl der Bilder, die sich von diesen Stadien als Zeichen ihrer kurzen 
Dauer nachweisen lassen, meist kaum beobachtet wurden. 

Anders bei der Eireifung, besonders der meroblastisch sich 
‚teilenden, mit reichlichem Nahrungsdotter beladenen Eier. Hier 
spielen sich die Vorgänge im Anfang der Entwicklung verhältnis- 
mäßig rasch ab und meist nur während der embryonalen Ausbildung 
des Eierstockes, also während eines kurzen, scharf umschriebenen 
Zeitabschnittes. Im Ovar des ausgewachsenen Tieres finden sich, 
besonders bei Säugern und Sauropsiden fast nur mehr Oocyten vom 
Stadium des dicken, richtungslosen Knäuels an. Ihre Entwicklung 
schreitet jedoch nur sehr langsam fort und erstreckt sich über Mo- 


ER 


u a 5 ut r e 
EN EEE EEE ern ee 


5 4 A 1 u 


or Me: 


echt 


a BP ran Ba En De en z 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 257 


nate, jasogar über Jahre. Dagegen spielen sich die Reifungsteilungen 
meist sehr rasch nacheinander und häufig erst nach der Ausstoßung 
des Eies aus dem Ovar ab, also nur an einzelnen Zellen. Dement- 
sprechend ist in der Ovogenese meistens die Wachstumsperiode 
sehr ausführlich untersucht, wohingegen die Anfangsstadien der 
ersten Teilung, die beiden Reifungsteilungen selbst und mit ihnen die 
Konjugation und Reduktion der Chromosomen gewöhnlich nur un- 
vollständig, in’ weit auseinanderliegenden Bildern beobachtet wer- 
den können. 

In den Grundzügen spielt sich aber die Entwicklung der beiden 
Arten von Geschlechtszellen, — zu dieser Annahme sind wir in 
Anbetracht der bisher bekannten Tatsachen sicherlich berechtigt — 


bei allen Tier- und Pflanzenarten in genau der gleichen Art und 


Weise ab, und es ist deshalb wohl angängig und unserer Erkenntnis 
sicherlich nur förderlich, wenn wir die Vorgänge bei den beiden Ge- 
schlechtern gegenüberstellen und die’ Lücken auf der einen Seite 
durch entsprechende Ergänzungen an Hand der Beobachtungen 
am anderen Geschlecht ausfüllen. 

In einem Punkte stimmen zunächst die überwiegende Mehrzahl 
aller Untersucher überein, nämlich in der Feststellung, daß schon 
in die Spindel der ersten Reifungsteilung nur die halbe’ Normal- 
zahl von Chromosomengruppen eintritt. Jede dieser Gruppen muß 
nun aus zwei einzelnen Chromosomen bestehen, falls wir nicht ein- 
fach annehmen wollen, wie dies ja von mancher Seite geschieht 
(NM emers, «Mick, 0. Hertwig), daß in der Prophase der 
ersten Reifungsteilung der Gonaden überhaupt nur die reduzierte 


' Zahl der Chromosomen gebildet wird. Diese Anschauung stützt 


sich auf die völlige Negierung der Chromosomenindividualität, 
Beristaheor schon ahleinsdeshaälb"intcht.izu 
Datten, „werl pa.bern einer ganzen. .Resh eivon 
genaü untersuchten Objekten nachgewiesen 
ist dasrin denszeitenden Geschlechtszellen 
nach" dem »Zzerfalt des Knäuels zunächst.die 
Normalzahl von längsgespaltenen Chromoso- 
men vorhandenist, so bei Selachiern (Rückert 189), 
Lumbricus (Calkins 1895), Ophryotrocha puerilis (Korschelt 
1895), Coläus monedula (Stieve 1918) und anderen Objekten, 
besonders auch nach den letzten Untersuchungen von Rab| (1915) 
bei Askaris megalocephala bivalens, wo die einfache Anordnung 


258; H. Stieve: 


und die große Uebersichtlichkeit der Zellbilder jeden Irrtum aus- 
schließen, außerdem nach den hier mitgeteilten Befunden in ar 
Samenentwicklung des Olmes. 

Gerade diese eben erwähnten Fälle sind es, die uns Aufschluß 
über die Entstehung der Vierergruppen geben müssen, denn sie 
können in erster Linie zeigen, wie die Vereinigung je zweier längs- 
gespaltener Chromosomen erfolgt, sie beweisen zunächst auch, 
daß die Längsspaltung im allgemeinen der primäre, die Konjugation 
aber der sekundäre, sich wesentlich später abwickelnde Vorgang 
ist. Wenn in einer Gonocyte vor der ersten Reifungsteilung die 
Normalzahl gespaltener Chromosomen nachweisbar ist, dann kann 
sich die Konjugation auf zwei verschiedene Arten abspielen, näm- 
lich erstens, indem sich je zwei der längsgespaltenen Chromo- 
somen . nebeneinanderlegen, so daß es zur Bildung von Vierer- 
gruppen käme, die, aus vier nebeneinanderliegenden Chromosomen- 
hälften bestehen. Oder aber je zwei Paare vereinigen sich end- 
weise, wodurch Tetraden mit einem Längs- und Querspalt ent- 
stehen. Beide Anschauungen haben bekanntlich ihre Anhänger, 
das merkwürdige ist nur, daß auch die meisten Verfechter der pa- 
rallelen Vereinigung an den Tetraden einen Querspalt auffanden, 
für dessen Entstehung keine Erklärung beigebracht werden kann. 
Für die Entstehung der Tetraden durch endweise Vereinigung je 
zweier längsgespaltener Chromosomen treten in erster Linie ein: 
Rückert (189, 189) vom Rath (189, 189%) Haecker 
(1895), Popoff (1908), Goldschmidt (1908). Sie schil- 
dern den Vorgang im Anschluß an die Untersuchungen von Rük- 
kert am Cyklopsei in der Art, daß aus dem Knäuel die halbe Zahl 
längsgespaltener Chromatinelemente hervorgeht, an denen ein Quer- 
spalt deutlich anzeigt, daß je zwei Chromosomen in der gleichen 
Weise wie ursprünglich im Knäuel vereinigt bleiben, ein Vorgang, 
den Wassermann (1914) iür Zoogonus mirus gleichfalls nach- 
gewiesen hat. Die Trennung der konjugierten Chromosomen ist 


schon vor und während der ersten Reifungsteilung durch die An- 


wesenheit des Querspaltes angedeutet, sie erfolgt jedoch erst in der 
zweiten Reifungsteilung. 

In diesen Fällen erfolgt also die Konjugation während der 
Ausbildung des kontinuierlichen Knäuels. Bei allen den Objekten 


aber, bei welchen in den Keimzellen zunächst die Normalzahl längs- 


. gespaltener Chromosomen vorhanden ist, findet die Konjugation 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 259 


erst später statt, manchmal bei vereinzelten Gebilden sogar erst 
dann, wenn die Mehrzahl der Tetraden schon in der Spindel an- 
geordnet ist, ja bei einzelnen von ihnen wenn ihre Spalthälften schon 
auseinanderzuweichen beginnen. Ob diese Vereinigung nach einer 


bestimmten Regel erfolgt und nach welcher können wir nicht an- 


geben. Rab! meint zwar, daß jeweils homologe väterliche und 
mütterliche Chromosomen konjugieren, da bei Askaris die beiden 
durch Querspalt getrennten Chromosomen stets gleich groß sind. Beim 
Olm trifft dies sicher nicht zu, die beiden Hälften zeigen hier ge- 
wöhnlich recht verschiedene Länge und wenn wir berechtigt sind 
aus der gleichen Größe einen Schluß auf die Homologie zu ziehen, 
so müssen wir hier annehmen, daß die konjugierten Gebilde nicht 
homolog sind. 

In genau der gleichen Weise wie hier für den Olm geschildert 
wurde, vollzieht sich die Tetradenbildung auch in der Eireifung 
von Ophryotrocha puerilis nach den Untersuchungen von Kor- 
schelt (1895). Die Chromosomennormalzahl beträgt bei diesen 
Anneliden 4, sie ist also sehr gering und erleichtert dadurch trotz 
der geringen Größe der Zellen die Beobachtung. In den jungen 
Oocyten zerfällt der Kernfaden in 4 lange, längsgespaltene Schleifen, 
die sich später verkürzen, zu je zweien endweise aneinanderlegen und 
so zur Bildung richtiger Stäbchentetraden führen. Die Reifungs- 
teilungen wickeln sich dann allerdings anders ab, als ich hier be- 
schrieben habe, indem in der ersten die beiden konjugierten Chro- 
mosomen wieder getrennt werden, in der zweiten aber die Spalt- 
hälften jedes Stäbchens auseinanderrücken. Eine solche Möglich- 
keit des Verlaufs der Teilungen ist ja bei den Vierergruppen theo- 
retisch stets gegeben, es ist jedoch schwer bei einem Objekt wie 
das von Korschelt untersuchte, wo die Chromosomen eine 
sehr erhebliche Verkürzung fast kis auf Punktform erfahren, zu 
unterscheiden, in welcher Richtung die Trennung erfolgt. Ich will 
jedoch auf diese Frage hier zunächst nicht näher eingehen. 

Bekanntlich hat das Ehepaar Schreiner (1906d) es ver- 


sucht die äußerst ausführlichen und überzeugenden Schilderungen _ 


Korschelts zu widerlegen. Die betreffende Arbeit fußt wieder 
ganz auf der Tomopterisuntersuchung. In ihr wird zunächst fest- 
zustellen versucht, daß die-Normalzahl der Chromosomen 8 und 
nicht 4 sei, es handelt sich dabei um Zählungen von Aequatorial- 
platten, die wohl zum nämlichen irrtümlichen Ergebnis geführt 


260 H. Stieve: 


haben wie bei v. Winiwarter und Sainmont. Da aber 
gar nicht angegeben wird, ob in den reifen Geschlechtszellen 4, oder 
wie dies nach den Korscheltschen Untersuchungen wohl 
sicher anzunehmen ist nur 2 Chromosomen vorhanden sind, se 
kommen die Schreinerschen Beobachtungen für die Beur- 
teilung der Reduktionsfrage überhaupt nicht in Betracht. 

Ganz ähnliche Vorgänge schildern auch Foot und Stro- 
bell (1913) bei der Bildung der Kreuztetraden, in denen wir 
sicher die nämlichen, durch endweise Vereinigung zweier längsge- 
spaltener Stäbchen entstandenen Gebilde zu erblicken haben, wenn- 
gleich die beiden Autoren selbst sich die Entstehungsweise etwas 
anders vorstellen. | 


Aehnliche Befunde bei Degenerationsvorgängen. 


Nun sind aber die Tetraden auch keine Bildungen, welche 
ausschließlich den reifenden Geschlechtszellen eigentümlich sind, 
sie lassen sich vielmehr auch bei anderen Teilungen beobachten, 
hier allerdings fast immer nur in Zellen, die offenkundig Zeichen 
der Rückbildung ansich tragen. So konnte Flemming Tetraden 
in den Spindeln pluripolarer Mitosen der Ursamenzellen des Sala- 
manderhodens auffinden, seine Befunde wurden später am gleichen 
Objekt durch Nicolas (1892) bestätigt, desgleichen durch 
Paulmier (1899) bei Anasa tristis und durch Levy (1915). 
bei Rana; der letztere fand sie in zweifellos degenerierenden 


Ursamenzellen. Hertwig konnte sie künstlich durch Strychnin- 4 


einwirkung auf Eier während des Furchungsstadiums erzeugen, 
Haecker (1908) und Schiller (1908/09) bei Cyklops durch 

Beeinflussung der trächtigen Weibchen mittels Narcotieis. Alle 
diese Fälle beziehen sich aber auf Elemente der Keimdrüsen und 
wir dürfen deshalb wohl annehmen, daß durch die teils künstlich 
infolge äußerer Schädigungen erzeugten, teils in der Gonade selbst 
gelegenen Krankheitsvorgänge außergewöhnliche Verhältnisse ge- 


schaffen wurden, welche das frühzeitige bzw. unzeitgemäße Auf- 


- treten der Tetraden zur Folge hatten. Die Fähigkeit zur Tetraden-. 
bildung wohnt eben allen Keimzellen inne und kann durch physio- 
logische oder pathologische Bedingungen ausgelöst werden, sehen 
wir ja auch beim Zerfall somatischer Zellen häufig Kernbilder auf- 


treten, welche große Aechnlichkeit mit den Prophasen der Mitosen = 


besitzen. Desgleichen haben wir in den pluripolaren Teilungen S x 


= 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 261 


sicherlich krankhafte Bilder zu erblicken, und es ist gerade hier 
recht gut möglich, daß durch den abnormen Zug der Spindelfasern 
nach verschiedener Richtung hin ein Zerreisen der durch den Krank- 
heitsprozeß geschädigten Chromosomen erfolgt, das dann zur Ent- 
stehung der fraglichen Erscheinungen führt. 

Aber nicht nur in Gonadenzellen, welche sich rückbilden oder 
sonstwie außergewöhnliche Verhältnisse zeigen, auch in somatischen 
Zellen wurden schon tetradenähnliche Bildungen beschrieben, so 
von Hartmann (1910) bei Trichonymphiden, von Della 
Valle (1907) in Körperzellen von Salamandra, Popoff (1908) 
in Leberzellen von Paludina, Marcus (1908) in der Thymus und 
anderen. In allen den fraglichen Fällen handelt es sich jedoch nur 
um mehr oder weniger tetradenähnliche Gebilde, die lediglich 
ein oder das andere Chromatinelement betreffen, niemals aber um 
deutliche, bei allen Chromosomen einer Zelle schön ausgebildete 
Vierergruppenbildung. Aller Wahrscheinlichkeit nach haben wir 
es hier mit zufälligen, durch Schnittrichtung bedingten Lageverhält- 
nissen zu tun, oder was wahrscheinlicher ist, mit krankhaften Vor- 
gängen, die nichts anderes bedeuten, als den beginnenden Zerfall 
der Zelle. Dieser Ansicht sind auch die meisten der eben genannten 
Untersucher, denen wir die Kenntnis der betreffenden Formen 
in somatischen Zellen verdanken. 

Es lag nun nahe in der gleichen Weise, wie es von anderer 
Seite für die Parasyndese geschah, aus der Tatsache des Vorkom- 
mens solcher, den reifenden Oocyten und Spermatocyten eigen- 
tümlichen Bildungen in anderen, besonders zugrundegehenden Zellen 
die Schlußfolgerung zu ziehen, daß es sich bei der Vierergruppen- 
bildung stets um krankhafte Formen handle, denen keinerlei Be- 
deutung für die normale Entwicklung zukomme. In diesem Sinne 


‚äußern sich vor allem Maceus,. Berka, Vvialleund Popmotf. 


Ihre Ausführungen lassen sich jedoch durch zwei Tatsachen wider- 
legen. 
Die Ausbildung der Tetraden in den reifenden Geschlechts- 
zellen läßt- sich nämlich bei günstigen Objekten sehr deutlich be- 
obachten, sie ist ja doch nichts anderes als der Schlußstein zu 
einer Reihe von Entwicklungsvorgängen, an deren physiologischem 
Geschehen kein Zweifel bestehen kann, da sie sich an einer großen 
Anzahl von Zellen einwandfrei beobachten lassen und mit logischer 
Folgerichtigkeit zu den betreffenden Bildungen hinleiten. Auch 


CH EEE 
ae FE Kris 


Br $ RR 
A en 


262 H. Stieve: 


läßt sich die normale Weiterentwicklung des Prozesses während 
der ersten Reifungsteilung deutlich verfolgen; sie beweist klar genug 
daß es sich bei den Vierergruppen in den reifenden Keimzellen um 
progressive, physiologische Bildungen handelt, nicht aber um re- 
gressive, pathologische, welche den Untergang der Zellen zur Folge 
haben. | 

Dagegen lassen die in anderen Zellen aufgefundenen Tetra- 
den, ganz abgesehen davon, daß es sich bei ihnen ja meist nur um 
vereinzelte, den Vierergruppen ähnliche Gebilde handelt, niemals 
irgendwelche Zweifel darüber bestehen, daß sie tatsächlich nichts 
anderes sind, als der Ausdruck krankhafter Vorgänge, die über 
kurz oder lang zum endgültigen Zerfall der Chromssomen und damit 
zum Untergang der ganzen Zelle führen. Und wie auch Levy 
ganz richtig bemerkt, besteht keinerlei Grund, einen physiologischen 
Vorgang wegen seiner entfernten Aehnlichkeit mit manchen Stadien 
krankhafter Prozesse gleichfalls als pathologisch hinzustellen, 

Die Tetraden sind also physiologische Bildungen, die durch 
endweise Aneinanderlagerungen je zweier längsgespaltener Chromo- 
somen entstehen. Von diesem Gesichtspunkt aus betrachtet kann 
auch über das Endergebnis der beiden Reifungsteilungen kein 
Zweifel mehr bestehen, auf jede der reifenden Geschlechtszellen 
mit der reduzierten Chromosomenzahl kommt eines der vier Teile 
einer Vierergruppe und da ja je zwei von diesen durch Längsspaltung 
aus einem Chromosoma hervorgegangen sind, so müssen auch je 
zwei der Spermatiden bzw. der betreffenden Bildungen der Eizelle 
einander gleichwertig sein. Einen anderen Modus der Verteilung 
nach einwandfreier Beobachtung der Stäbchentetraden beschreibt 
nur Matschek (1909, 1910); er nimmt eine nochmalige ‚Längs- 
spaltung der Tetradenlängshälften an, da sich an ihnen zu gewissen 
Zeiten ein sekundärer Längsspalt erkennen läßt. In diesem Falle 
wäre aber die endweise Vereinigung, die ja durch den deutlichen 
Querspalt bewiesen wird, vollkommen zwecklos und beide Teilungen 
wären homoeotypisch, Aequationsteilungen. Offenbar handelt es 
sich bei den fraglichen Untersuchungen um eine unrichtige Deutung 
des sekundären Längsspaltes, der entweder vorgetäuscht sein kann 
(Levy 1915) oder aber, was wahrscheinlicher ist, nur der Aus- 
druck einer jedem Chromosoma innewohnenden Eigenschaft ist, die 
sich in der Neigung zur doppelreihigen Anordnung der Einzel- 
elemente geltend macht. In diesem Falle bedeutet sie aber gewisser- 


RICH NEAR E38. 


£ 
Er; 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). | 263 


maßen nur eine phylogenetische Reminiszenz, die zu keiner wirk- 
lichen Trennung der sekundären Längshälften führt. Wie vor jeder 
Teilung, so würde sich auch in diesem Falle vor der zweiten Reifungs- 
teilung eine Längsspaltung der Chromosomen vorbereiten; die Spalt- 
hälften entfernen sich jedoch nicht voneinander, sondern es erfolgt 
nur die Trennung der beiden Tetradenhälften an der Stelle des 
Querspaltes, also der früheren endweisen Vereinigung. 


Die anderen Theorien über die Reduktion. 


Dres Paltunesthe orte 


Im schroffsten Gegensatz zu den eben geschilderten Tatsachen 
steht die Anschauung derjenigen Autoren, welche die Vierergruppen 
sich durch sekundäre Längsspaltungen zweier vorher parallel ver- 
einigter Chromosomen bilden läßt. Sie erklärt zunächst die Ent- 
stehung der reduzierten Zahl der Chromatinelemente durch die 
Parallelkonjugation, eine Anschauung, die sich, wie schon gesagt, 
nur dann vertreten läßt, wenn die Zählung, was ja meistens geschieht, 
erst an den vollausgebildeten Tetraden nach der Pseudoreduktion 
vorgenommen wird. In diesem Zustand erhöht zwar die starke 
Konzentration des Chromatins die Uebersichtlichkeit des Zellbildes 
und erleichtert die zahlenmäßige Feststellung dadurch ganz wesent- 
lich; allein gerade da ist der Querspalt und mit ihm-die wahre Zu- 
sammensetzung der Tetraden meist am stärksten verdeckt. In 
der ersten Reifungsteilung weichen nach der betreffenden An- 
schauung die beiden konjugierten Chromosomen wieder auseinander, 
es ist die eigentliche Reduktionsteilung, während in der zweiten 
Teilung eine gewöhnliche Längsspaltung erfolgt, sie spielt sich 
also ganz in der Art einer gewöhn!ichen Mitose ab, jedoch ar der 
halben Normalzahl der Chromosomen. 

Mit der Parallelkonjugation legen also ihre Verfechter in ie 
Reifung der Keimzellen einen vollkommen neuen, sonst nirgends zu 
beobachtenden Vorgang, dessen Zweck in der innigen Aneinander- 
lagerung zweier homologer Chromosomen und dem dabei erfolgenden 
Austausch elterlichen Substanzen und Eigenschaften bestehen soll. Im 
Gegensatz dazu stellt dieendweise Vereinigung eine Erscheinung dar, 
die wir in mehr oder weniger deutlicher Ausbildung im Stadium des 
Monospirems auch bei den somatischen Mitosen zahlreicher Objekte 
beobachten können, die sich bei der Reifung der Keimzellen nur in 


264 H. Stieve: 


besonderer Weise abwickelt und die sinngemäße Verteilung der 
Chromosomen bei der Reduktion auf die reifen Geschlechtszellen ver- 
bürgt. Die Unterschiede zwischen beiden Vorgängen sind, wie 
schon von mehreren Seiten betont wurde, grundlegender Art; die 
Verschiedenheit in der Anschauung beruht in letzter Linie darauf, 
daß die Anhänger der Parallelkonjugation den in der Reifung der 
Geschlechtszellen in der Prophase der ersten Teilung, wie bei jeder 
Mitose auftretenden Längsspalt für den Ausdruck der Vereinigung 
zweier Einzelelemente halten. 

Trotz dieser scharfen Gegensätze ist in der letzten Zeit von 
verschiedenen Seiten der Versuch gemacht worden, die beiden 
Anschauungen durch Aufstellung einer dritten Theorie zu über- 
brücken. Kompromisse führen nie zu etwas Gutem, am allerwenig- 
sten in der Wissenschaft, wenn sie zwei entgegengesetzte Anschau- 
ungen in Einklang bringen sollen. So hat auch hier der Versuch 


einer Vereinigung der endweisen mit der Parallelkonjugation in 


keiner Weise klärend gewirkt, sondern nur sehr deutlich gezeigt, 
daß diejenigen, welche einen solchen Versuch machen, sich über 
die Vorgänge der Reifung und vor allem ihre theoretische Bedeu- 
tung nicht ins Klare gekommen sind. Die Verfechter dieser Ar- 
schauung, so besonders Montgomery (1903/05) sowie Far- 
mer und Moore (1904, 1905) nehmen an, daß die bivalenten 
Chromosomen sich unmittelbar von den ‚„Bukettschleifen‘‘ herleiten 
lassen, indem die anfänglich endweise vereinigten Chromosomen an 
der Verschmelzungsstelle abgeknickt und dadurch einander ge- 
nähert werden. Diese ursprüngliche Näherung geht schließlich 
in eine Paralleilagerung und gegenseitige Verschlingung über, wobei 
die „‚Abbiegung an der ursprünglichen Vereinigungsstelle‘“ so stark 
sein Kann, daß Kier schließlich ein Durchbrechen erfolgt und dadurch 
erscheinen die beiden Chromosomen schließlich parallel gelagert und 
lassen die ursprüngliche Entstehungsweise nicht mehr erkennen. 
Man bezeichnet diesen Vorgang als Faltung oder nach Gregoire 
(1909) Repliement. 


Die Amphymetasyndese. 


Fast die nämlichen Verhältnisse nimmt Levy an, er läßt 
die Chromosomen im Bukettstadium sich mit ihren beiden Enden 


aneinanderlegen, auch im übrigen sich einander nähern, so daß auf 


REF 


ee 


ou = 
IERRIEN 


ET een 


re 


i 
vr 


a? 1 ca u nr Sud Zn ie a Bu le at ne ne 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 265 


kürzere oder längere Strecken eine Parallelität der beiden Teile 
entsteht. „Eine parallele Konjugation dagegen, zumal mit Fusion, 
aus der ein Pachynema entsteht, das sich später durch Längsspaltung 
teilt und zur Amphitäne führt, muß ich mit Fick, Gold- 


schmidt, Meves, Champ y entschieden bestreiten, da 


ich dafür keine Anhaltspunkte finde.‘“ Diese ‚„Amphimetasyndese‘ 


Levys stellt aber im Grunde genommen prinzipiell den nämlichen 


Vorgang dar, wie ihn die Faltungstheorie annimmt, nur unter einem 
anderen Namen und beide sind im Prinzip ein und dasselbe, wie 
die Parallelkonjugation, nur daß bei ihnen keine so innige Vereini- 
gung der beiden Hälften erfolgt wie dort. Alle diese Erklärungen 
laufen eben nur darauf hinaus, die bekannten z9pf- und Ser-förmigen, 
in der halben Normalzahl vorhandenen Chromatinfigurenalsneben- 


einander.gelagerte Einzelehromosomen zu schil- 


dern, während sie in Wirklichkeit je zwei hintereinander 
Praserter Tanesgespaltene,. aber) stark" Mer- 
kürzte Chromosomen darstellen. Bei einer Anschauung, 


wie sie von Kemnitz (1903), Levy und andere vertreten, 
ließen sich die Gegensätze zwischen endweiser und paralleler Ver- 


einigung überbrücken, beide Autoren haben jedoch die Bildung 


der Stäbchentetraden, wie sie unter anderem auch hier beschrieben 


wurde, nicht richtig studiert. Selbst Gre&egoire gibt in seinem 
ausführlichen Referat (1910) über die Teilung der Geschlechtszellen 
ein falsches Schema von der endweisen Konjugation und beschreibt 
den Vorgang wie folgt: Das Spirem spaltet sich zunächst der Länge 
nach !) ‚‚mais ce ne sont pas les deux moities resultant de ce clivage, 
qui vont devenier les deux branches diacinetiques Fig. 43 f. Celles 
ei ont une autre origine: le spireme dedoubl& ne tarde pas a se seg- 
menter transversalement en n/2 trongons Fig. 43 e, formes chacun de 
deux chromosomes somatiques aboutes; en m&me temps ces troncons 
se replient en forme d’anses plus ou moins orientees par rapport au 
centre du noyau (second contraction); puis le repliement s’accentuant, 
les deux branches de chaque anse — c’est & dire les deux chromosomes 
somatiques aboutes —, se rabbattent l’une sur l’autre, du moins 
generalement, arrivant A 6tre paralleles ou m&me Aa s’entrelacer Fig. 431 
et deviennent ainsi les deux branches des gemini diacinetiques. Pen- 

ent ce temps la fente longitudinale peut s’obliterer plus ou moins; 


1) 1. c. Seite 249. 


6: 


m 


265 H28: 1 &We: 


souvent elle s’oblitere completement Fig. 43 eetf; de plus, une fente 
transversale se produit generalement au point oüles deux chromo- 
somes somatiques sont aboutes, c’est-A-dire au sommet de l’anse 
repliee Fig. 43 f.“ 

Das was also von Gr&goire als Metasyndese beschrieben 
wird, ist nichts anderes, als eine etwas modifizierte Faltungstheorie, 
nur haben die beiden endweise vereinigten und schließlich neben- 
einander gelagerten Chromosomen anfangs eine Längsspaltung er- 
fahren, die dann später wieder verschwindet. Der gleichen Anschau- 
ung schließt sich auch Levy an, der das Schema von Gregoire 
wiedergibt (Textabbildung 13 1. c.) und den Vorgang folgender- 
maßen beschreibt: ‚Der Spiremfaden kontrahiert sich, in ihm 
tritt manchmal prophasisch ein wiederverschwindender Längsspalt 
auf, die Kontraktion geht weiter (e) und führt zur Bildung von 
zweiarmigen Chromosomengruppen ... . Im allgemeinen wird aber 
von den Metasyndetikern der Vorgang in folgender Weise erklärt: 
Während oder schon vor dem Bukettstadium verkleben je 2 Chromo- 
somen an ihren Enden (end to end, Telosynapsis Montgomery). 


Durch einen Querspalt oder durch Faltung (repliement) entstehen. 


die Chromosomen ä deux branches.‘‘ Die Reifungsteilungen voll- 
Do 


ziehen sich dann so, daß die erste reduktionell, heterotypisch, die 


zweite äquationel, homöotypisch erfolgt; ein grundlegender Unter- 
schied zwischen ‘der parallelen Konjugation und endweisen Kon- 
jugation bestünde also wirklich nicht, wie dies jaauch Gregoire 
annimmt. 


Die grundsätzlichen Unterschiede zwischen 
paralleler und endweiser Konjugation. 


Im allgemeinen sollte man doch denken, daß man eine An- 
schauung, bevor man sie zu widerlegen sucht, gründlich studiert 
und vollkommen über sie ins Klare kommt, dies ist jedoch in bezug 
auf die Metasyndese weder von Gr&goire noch von Levy 
geschehen. Der grundlegende Unterschied zwischen den beiden 
Auflassungen besteht, wie ich schon des öfteren betont habe, 
nicht so sehr in der verschiedenen Auslegung der Vorgänge, die 
sich während der polaren Orientierung des Knäuels abwickeln, 
sondern in erster Linie in der verschiedenen Deutung 
dies. Längsspaltes,. der. reduzrer ben. IC hVanker, 
somengruppen. Ister der Ausdruck der parallelen Lagerung 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 267 


zweier verschiedener Chromosomen, dann ist die erste Teilung in 
jedem Fall reduktionell, heterotypisch und die zweite, die dann eine 
Längsspaltung der beiden Chromosomen voraussetzt, homöotypisch, 
äquationell, obwohl sie sich nur an der halben Chromosomenzahl 
vollzieht. Ist der Längsspalt dagegen, wie es die endweise Vereinigung 
der Chromosomen fordert, der Ausdruck einer Längsspaltung, einer 
richtigen Teilung, ähnlich der, wie sie bei jeder Mitose zu beobachten 
ist, dann verläuft die erste Teilung, falls nicht drvon Korschelt 
geschilderte Fall eintritt, homöotypisch, äquationell, die 
zweite aber ist die heterotypische Reduktionsteilung, die an der 
Stelle des Querspaltes, des Vereinigungsortes der beiden Chromo- 
somen erfolgt. Darin besteht also der grundlegende Unterschied 
in den beiden Auffassungen, deı sich durch keinerlei Hilfshypothesen 
oder Kompromisse, wie sie die Faltungstheorie und die Amphymeta- 
syndese darstellen, überbrücken läßt. 


Textabb. 16. 


Um alle Zweifel zu beheben, habe ich in beifolgender Text- 
abbildung Nr. 16 die beiden Vorgänge rein schematisch dargestellt. 
16a zeigt eine Gonocyte am Ende der Wachstumsperiode, in ihr 
sind 4 Chromosomen vorhanden, von denen je 2 gleich lang sind, 
also nach der Anschauung mancher Untersucher als homolog be- 
zeichnet werden können. Die verschiedenen Chromosomen sind 
durch verschiedene ‚Arten der Zeichnung wiedergegeben, so daß 
sie sich in Abbildung 16b und 16c, trotz der Veränderung in der 
äußeren Form, wiedererkennen lassen. 16 b zeigt nun die Chromo- 
somengruppen unmittelbar vor der ersten Reifungsteilung in einer 
Anordnung, wie sie sich bei der Parallelkonjugation, bei der Faltungs- 
theorie und bei der Amphimetasyndese ergeben muß. Je 2 gleich- 
lange Chromosomen bilden eine Gruppe und liegen zueinander 
parallel, die Teilung erfolgt im Längsspalt, trennt also einfach die 


268 St HeWe: 


konjugierten Chromosomen. wieder voneinander. Abbildung 16c 


dagegen gibt den Bau der Tetraden wieder, wie er aus einer end- 
weisen Vereinigung der Chromosomen resultiert. Der Unterschied 
ist in den vorhergehenden Ausführungen deutlich genug auseinander- 
gesetzt worden und geht auch klar aus dem Schema hervor. Die 
endweise Konjugation ermöglicht dabei eine Vereinigung nicht nur 
gleichlanger Chromosomen, die man vielleicht als homolog bezeichnen 
kann, sondern auch salcher von ungleicher Länge, alsa wahrschein- 
lich heterologer Gebilde. Auch hier besteht jede Tetrade aus 2 Chro- 
mosomen, die jedoch zum Unterschied vom ersten Fall hinterein- 
ander gelagert sind. Die erste Teilung erfolgt auch hier in der Rich- 
tung des Längsspaltes und halbiert jedes einzelne Chromosoma 
während erst durch die zweite Teilung die Trennung der konjugierten 
Chromosomen in der Richtung des Querspaltes erfolgt. 

Die Annahme der Parallelkonjugation setzt außerdem voraus, 
daß in jeder reifenden Gonocyte je 2 Chromosomen gleich lang 
sind, denn nur solche können ja parasyndetisch miteinander ver- 
bunden werden. Ein solches Verhalten ist jedoch bisher keineswegs 
bewiesen, ja die Untersuchungen Rabls am Askarisei zeigen 
sogar recht deutlich, daß alle in einer Zelle vorhandenen Chro mo- 


somen von verschiedener Länge sein können; die Unterschiede sind 


zum Teil recht beträchtlich, wiewohl man fraglos 2 längere und 
2 kürzere Chromosomen unterscheiden kann. Obwohl aber Rab 
selbst zugibt, dab häufig ein einzelnes Chromosoma ganz besonders 
lang ist und keinen gleich großen Partner besitzt, so nimmt er 
doch an, daß die beiden längeren und kürzeren Chromosomen jeweils 
einander homolog sind. Seine Hypothese stützt sich also ausschließ- 
lich auf theoretische Erörterungen und „nicht auf morphologische 
Befunde. 

Die Anwesenheit des Querspaltes in den Tetraden allein, die 
auch bei einer ganzen Reihe von Objekten, bei denen nach Ansicht 
der Untersucher eine Parallelkonjugation stattfindet, sehr deutlich 
zu erkennen ist, so 2. B. bei Askaris canis (Marcus 1906), oder 
die scharfe Knickung, welche die beiden Längshälften der Tetraden 
an der ursprünglichen Vereinigungsstelle in den Telophasen der 
ersten Teilung bei fast allen Lebewesen, Tieren sowohl als auch 
Pflanzen, erfahren, weisen deutlich genug darauf hin, daß an dieser 
Stelle eine Durchtrennung in der zweiten Teilung erfolgt. Da wir 
aber nicht dazu berechtigt sind, für sie eine Querhalbierung der 


_ VEREER EESSIRER, 


DENE 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 269 


ganzen Chromosomen anzunehmen, denn eine solche bedeutete 
einen Vorgang, der zu stark im Widerspruch stände mit allem, 
was wir bisher über den Mechanismus der Teilungen wissen, so 
bleibt keine andere Deutung übrig, als die‘ der Trennung ursprünglich 
endweise konjugierter Chromosomen, und nur durch sie können 
auch diejenigen Fälle erklärt werder, bei denen in den jungen Gono- 
eyten die Normalzahl der Chromosomen als längsgespaltene Gebilde 
vorhanden sind, oder sollen wir hier gleichfalls eine Parallelkon- 
jugation annehmen? Wie ließe sich dann die durch den Längsspalt 
bedingte Verdoppelung der Einzelelemente erklären? Im Gegensatz 
dazu läßt sich der an den Chromosomenhälften in der Telophase 
der ersten Teilung häufig erkennbare sekundäre Längsspalt leicht 
in der Weise deuten, wie ich es oben getan, in welchem Falle es 
keineswegs an ähnlichen Beispielen bei körperlichen Mitosen fehlt. 


Die erste Reifungsteilung. 


In der ersten Teilung erfolgt eine Trennung der Chromosomen- 
längshälften, während die endweise vereinigten Tetraden, also die 
miteinander verschmolzenen Hälften zweier konjugierter Chromo- 
somen vereinigt bleiben. Sie verändern jedoch ihr gegenseitiges 
Lageverhältris und erscheinen schließlich im Tochterstern nicht 
mehr hintereinander, sondern parailel gelagert. Diese Umgruppie- 
rung ist wohl in erster Linie eine Folge des Zuges der Spindelfasern, 
die sich nur an den konjugierten Enden der Chromosomen anheften 
und an dieser Stelle die beiden Längshälften auseinanderziehen. 
Dadurch entstehen die bekannten rauten- und ösenförmigen Figuren, 
die ja in der Gonocytogenese des Tier- und Pflanzenreiches schon 
bei sehr zahlreichen Objekten beschrieben, aber meist anders ge- 
deutet wurden. Es erübrigt sich, hier nochmals auf alle diese Be- 
funde einzugehen, ihre Beurteilung ergibt sich aus dem im vorigen 
Abschnitt Gesagten. 

Die erste Reifungsteilung ist also eine Aequationsteilung. Nach 
der ganzen Entstehung der Vierergruppen stand ja ein solches 
Verhalten zu erwarten. Allerdings hätte auch .die Möglichkeit 
bestanden, daß jeweils die beiden zu einer Tetrade vereinigten 
Chromosomen in der ersten Reifungsteilung wieder getrennt würden. 
In diesem Falle wäre die erste Teilung eine -Reduktionsteilung in 
der Art, wie dies Korschelt (1895) für Ophryotrocha schildert, 

Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 18 


270 H. Stieve: 


außerdem Henking (1891) für die Eibildung der Feuerwanze, 
Paulmier (1898/99) und Montgomery (1898/99) für 
Anasa und Euchistus. In allen diesen Fällen besteht jedoch die 
Möglichkeit, daß die weitgehenden Umgestaltungen, welche die 
Tetraden infolge der starken Konzentration des Chromatins und 
später unter dem Einfluß des Zuges der Spindelfaser erleiden, zu 
Täuschungen geführt haben. Die Form der Vierergruppen ver- 
ändert sich ja während des Auseinanderrückens der Chromosomen 
in der Art, daß der ursprüngliche Längsspalt sich verkürzt, der 
Querspalt sich aber verlängert, bis schließlich in bezug auf die 
Länge zwischen beiden das umgekehrte Verhältnis wie ehedem 
besteht., Werden nun diese Umgestaltungen selbst nicht beobachtet, 
sondern nur ihr Endergebnis, so kann die Anschauung entstehen, 
welche die eben genannten Forscher vertreten. Besonders für 
Anasa tristis scheint mir nach den Abbildungen, die Paulmier 
(1899) gibt, die Möglichkeit einer solchen Täuschung gegeben. 
Beim Olm kann die Möglichkeit einer Reduktion in der ersten 
Teilung schon ganz allein auf Grund der Art und Weise, wie die 
Tetraden in den Aequator der ersten Teilung eintreten, mit völliger 
Sicherheit ausgeschlossen werden. 

Bei der Diakinese zeigt sich wieder sehr deutlich die ungleiche 
Größe der beiden konjugierten Chromosomen, indem die beiden 
Hälften jeder Tetrade zu ganz verschiedenen Zeitpunkten aus- 
einanderweichen. Auch dieser Vorgang wurde schon häufig beschrie- 
ben, so besonders auch im Pflanzenreiche bei Lilium speciosum 
von Gregoire (1899), bei Lilium Martagon von Stras- 
burger (1900), vom gleichen Forscher auch bei einer Reihe 
anderer Objekte, im Tierreich auch besonders in der Spermatogenese 
der Amphibien. Meist wurde von den betreffenden Forschern der 
Teilungsvorgang jedoch anders gedeutet; sie erblickten in der ersten 
Teilung eine Trennung der beiden früher parallel konjugierten 
Chromosomen, die durch den Zug der Spindelfasern stark abgeknickt 
werden. 

Bei Proteus erfahren die konjugierten Chromosomenhälften 
der Präspermatiden eine Trennung an der Stelle des früheren Quer- 
spaltes und liegen dann isoliert paarweise nebeneinander, wobei 


ihre ungleiche Größe deutlich zur Anschauung kommt und sicher 


beweist, daß es sich um keine Längss paltung eines einzelnen Chromo- 


soma handeln kann. Manchmal lassen sich jetzt an ihnen die An- 


x 
Re 
; 
“ 
€ 
: 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 271 


deutungen eines Längsspaltes erkennen. Die Chromosomen sind - 


in der Normalzahl vorhanden und aus dieser Feststellung geht im 
Zusammenhang mit der Tatsache, daß die nebeneinander gelagerten 
Gebilde ungleich groß sind, deutlich genug hervor, daß die erste 
Teilung eine homöotypische Aequationsteilung ist. 


Die Präspermatiden. 


Auskildung der Kerne. 


Nach einem anfänglichen Zusammenrücken, das wohl unter 
dem Einfluß des Centriol erfolgt, weichen dann die Chromosomen 
wieder auseinander und erscheinen nunmehr durch Lininbrücken 
verbunden, eine Kermembran bildet sich, das Chromatin verteilt 
sich und so kommt es zur Ausbildung der Präspermatidenkerne. 
Sie zeigen einen Bau, wie wir ihn sonst in den Ruhekernen der 


Zellen finden, allerdings ist die Lage der einzelnen Chromosomen \ 


meistens durch eine dichtere Anhäufung der Chromatinklumpen 
gekennzeichnet. Ob wir allerdings berechtigt sind, hier von einem 
tatsächlichen Ruhezustand zu sprechen, mag noch entschieden 
werden. Wir können ja im Leben jeder Zelle verschiedene Ab- 
schnitte und Funktionen unterscheiden. Gleich nach der Entstehung 
aus der Mutterzelle, gleichgültig ob diese nun durch direkte oder 
indirekte Mitose erfolgt, verteilt sich bei jeder somatischen Zelle 
das Chromatin in bestimmter Weise im Kerne, Protoplasma und 
Kern wachsen heran, bis beide die ihnen zukommende Größe er- 
langt haben. Dann teilen sie sich wieder oder aber sie verharren 
in dem erlangten Zustand längere Zeit und erfüllen inzwischen 
diejenigen Funktionen, zu denen sie auf Grund ihrer physiologischen 
Eigenart befähigt sind, so lange, bis sie sich wieder in zwei Tochter- 
individuen teilen oder zugrunde gehen. Dabei verändert der Kern 
seinen Bau wenig oder gar nicht mehr, wohingegen das Protoplasma 
tätig ist, es sondert spezifische Substanzen ab, die teils wieder 
besondere physiologische Funktionen übernehmen,| teils aber auch 
als Exkrete ausgeschieden werden. Den Zustand des Kernes nun, 
der zwischen zwei Teilungen oder zwischen der letzten Teilung 
und dem Zelltod gelegen ist, bezeichnet man im allgemeinen als 
den Ruhezustand, wohl weil während seines Bestehens sich keine 
wesentlichen anatomischen Veränderungen an ihm abspielen. Die 
spezifische Tätigkeit der Zelle findet ja gewöhnlich keinen sinn- 
18* 


272 Alwis H. Stieve: 


fälligen Ausdruck in Veränderungen der: Kernstruktur, sondern nur 
in der des Plasmas. Die Bezeichnung Ruhe bezieht sich demnach 
nur auf die nicht nachweisbaren Veränderungen im anatomischen 
Bau des Kernes, in eigentlicher vollkommener Ruhe befindet sich 
ja die lebende Zelle niemals, abgesehen vielleicht von einzelligen 
Wesen im Zustande der Encystierung. 

In ihrem äußeren Bau gleichen nun die Kerne der Präsperma- 
tiden fast vollkommen denjenigen solcher Ruhezellen und trotzdem 
sind wir bei ihnen wohl kaum berechtigt, von eigentlichen Ruhe- 
kernen zu sprechen, da der fragliche Zustand keine Bildung von 
längerer Dauer, sondern lediglich eine kurze Phase des fortlaufenden 
Entwicklungsganges darstellt, die unmittelbar nach ihrer Ausbildung 
kontinuierlich in die nächste Phase übergeht; es erfolgt ja sofort 
die erneute Rekonstruktion der Chromosomen. Die Telophase 
der ersten. Reitungsteilung geht also kon 
tinuiVerlLich-in.die Prophase derizwertrer ner 
fungsteilung über und während dieser fort- 
laufenden’ Entwicklung „nimmt der werten 
einem gewissen Zeitpunkt das nämliche Aus- 
sehen an, wieesdie Ruhekerne anderer 2 225 
bieten. Nur in diesem Sınne dürften wır 3159 
von RuhekernenderPräspermatidensprechen. 


Andere Mitteilungen über die Präspermatidenruhekerne. 


Bei Säugetieren und Vögeln 


Ihr Vorkommen zwischen den beiden Reifungsteilungen ist 
vom theoretischen Standpunkt aus betrachtet von allerhöchster 
Bedeutung und trotzdem wird ihnen von seiten der meisten Unter- 
sucher nicht die geringste Beachtung geschenkt, ja eine ganze An- 
zahl von Forschern bestreitet das Vorkommen der Ruhekerne in 
den Präspermatiden vollkommen. Daß dazu aber keinerlei Berechti- 
gung besteht, will ich im folgenden in Anbetracht der hohen Be- 
deutung, die diesem Gegenstand zukommt und mit Rücksichtnahme 
auf die unverdient geringe Beachtung, die er erfahren hat, etwas 
ausführlicher darlegen. 

Der erste, der die Ruhekerne der Präspermatiden beschrieben 
hat, st von Ebner. Schon in seiner ersten Arbeit über die 
Spermatogenese der Ratte (1871) weist er nach, daß die Spermato- 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes_(Proteus anguineus). 273 


cyten oder wie er sich ausdrückt Henleschen Zellen zwei Teilungen 
rasch nacheinander durchmachen;, zwischen. beiden tritt eine Re- 


'konstruktion des Kernes ein. Diese Erscheinung hält von Ebner 


für ganz selbstverständlich und betont sie deshalb auch nicht stärker, 
da ja die eigentlichen Vorgänge der Reifungsteilungen damals noch 
unbekannt waren und es also ganz einleuchtend erschien, daß auch 
nach der ersten Mitose der ‚„Henleschen Zellen‘ wie nach jeder 
anderen Mitose eine . Rekonstruktion des Kernes erfolgte. Auch 
in seiner späteren Abhandlung (1888) weist von Ebner auf 
die nämlichen Elemente hin und giht wieder Abbildungen von ihnen 
(Abb. 10h, 23 1. c.). 

„Nach genauer Prüfung des sehr schwierigen Gegenstandes‘' 
am nämlichen Objekt schloß sich dann von Lenhosscek 
(1898) der Ebnerschen Auffassung an, daß die Spermatocyten sich 
zweimal nacheinander teilen.. ‚‚Der überzeugendste Beweis für ihre 
Richtigkeit liegt für mich in.der Tatsache, daß man in der Nähe 
dieser Mitosen, namentlich der großen, oft auch eingesprengt zwischen 
ihnen eine spermatidenähnliche, ziemlich große besondere Zellform 
findet mit vollkommen ruhendem Kern (im Original 
nicht gesperrt gedruckt), die man auf keine andere Weise erklären 
kann, als indem man annimmt, daß sie die ruhende Zwischenform 
darstellt zwischen erster und zweiter, zwischen großer und kleiner 
Mitose.‘“ Lenhoss&k meint auch, man müsse diese Gebilde, 
wie es. ja später durch Waldeyer tatsächlich geschah, als 
Spermatocyten zweiter Ordnung bezeichnen, zieht es aber vor 
sie, „da sie sich schon mehr dem Spermatidentypus anschließen‘ 
nach ihrem Entdecker ‚von Ebnersche Zellen“ zu nennen. 
Unter dieser Bezeichnung tauchen die Ruhekerne der Präsperma- . 
tiden in der Folgezeit da und dort in der Literatur auf, auch Wal- 
d.eyer (1906) erwähnt sie in seinem zusammenfassenden Referat, 


desgleichen Schönfeld (1900/01), der die nämlichen Gebilde 


im. Hoden von Bos taurus gefunden hatte. Regaud (1901) 
konnte die fraglichen Gebilde gleichfalls in großer Anzahl im Hoden 
der Ratte nachweisen, so daß über ihr Vorhandensein bei dieser 
Tierart, da es von drei Seiten (Ebner, Lenhossek, Re- 


gau.d) bestätigt ist, wohl kein Zweifel bestehen kann. Weiterhin 
‚beschreibt sie Kirillow (1912) beim Pferd; er macht allerdings 


nur sehr kurze Angaben darüber, aus denen jedoch ganz deutlich 


zu ersehen ist, daß es sich um Ausbildung eines Ruhestadiums 


274 H. Stieve: 


handelt. Die meisten anderen Arbeiten, welche die Spermatogenese 
der Säugetiere behandeln, beschäftigen sich in erster Linie mit 
anderen Fragen und widmen deshalb der Feststellung der Prä- 
spermatidenruhekerne keinerlei Aufmerksamkeit. Doch konnte sie 
Benda {1902a) in der Spermatogenese von Monotremen zweifellos 
nachweisen, er gibt auch Abbildungen von ihnen und folgende 
Beschreibung: „Der Kern geht aber in ein völliges Ruhestadium 
über und erhält einen Nucleolus und unregelmäßige Chromatin- 
brocken‘“. Auch bei Marsupialiern fand Benda die nämlichen 
Gebilde. „Besonders ist das eingeschaltete Ruhestadium der Spermio- 
eyten zweiter Ordnung (Ebnersche Zellen, Präspermatiden) auf 
das beste ausgeprägt.‘ Desgleichen beschreibt sie Jordan (1912) 
im Hoden des Opossum (Didelphys virginiana). 

Bei den verschiedensten Entenarten weist Schöneberg 
(1913) die Ausbildung von Ruhekernen in den Präspermatiden nach, 
die durch ihre außerordentlich kurze Lebensdauer ausgezeichnet 
sind. Weitere Mitteilungen über Vögel konnte ich in der Literatur 
nicht finden, doch konnte ich selbst die fraglichen Formen im Hoden 
der Dohle (Coläus monedula) gleichfails erkennen. Ueber Reptilien 
fehlen diesbezügliche Mitteilungen, was wahrscheinlich darin seine 
Begründung hat, daß ihre Spermatogenese wie die der Sauropsiden 
überhaupt wohl hauptsächlich wegen der geringen Größe der Zell- 
elemente nur äußerst selten zum Ausgangspunkt wissenschaftlicher 
Untersuchungen gemacht wird. Anders verhält es sich mit den 
Amphibien und bei ihnen finden sich dementsprechend auch zahl- 
reiche Angaben über die fraglichen Zellen. 


Bei Amphibien. 


Meves (1897) fand in der Spermatogenese von Salamandra 
maculosa, daß sich die zweite Reifungsteilung unmittelbar an die 
erste anschließt, ohne daß ein eigentliches Ruhestadium des Kernes 
durchlaufen wird; er gibt aber in Abbildung 71 (l. c.) ein Stadium 
der Präspermatiden wieder, bei welchem in 2 nebeneinanderliegenden 
Zellen die Kerne vollkommen ausgebildet sind. Allerdings sind in 
ihnen die durch Lininbrücken verbundenen Chromosomen deutlich 
als Einzelgebilde zu erkennen. Dagegen weist Janssens (1901) 
das fragliche Stadium bei Triton nach, allerdings nicht bei allen 
untersuchten Individuen in gleicher Ausbildung, sondern bei den 


$: 
4 
3 
4 
} 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 275 


einzelnen Tieren ist das Undeutlichwerden der Chromosomen stärker, 
bei anderen weniger stark zu erkennen. Nach Ansicht des Autors 
ist die stärkere oder schwächere Ausbildung der von Ebner- 
schen Zellen bedingt durch die Schnelligkeit, mit der die beiden 
Reifungsteilungen aufeinander folgen und diese wieder steht in 
unmittelbarer Abhängigkeit von der Jahreszeit. Im Sommer näm- 
lich, wenn sich die beiden Mitosen sehr rasch nacheinander abwickeln, 
bildet sich kein eigentlicher Ruhekern aus, im Anfang des Früh- 
jahrs dagegen, wo die Entwicklungsvorgänge wesentlich langsamer 
vor sich gehen, kommt es stets zur Ausbildung richtiger Präsperma- 
tidenruhekerne, in welchen die Verteilung des Chromatins auf die 
Lininfäden eine so vollkommene ist, daß jeder Nachweis einzelner 
Chromosomen unmöglich wird. Beim Wiedererscheinen zeigen die 
Chromosomen dann die nämlichen Formen und Lageverhältnisse, 
wie nach den Telophasen der ersten Teilung, als deutlichen Beweis 
ihrer Kontinuität während der Zeit ihres Undeutlichwerdens. 

Champy (1913) äußert sich über die fragliche Zellforna 
wie folgt: „La premiere division de maturation peut &tre ou ne pas 
etre suivi d’un intervalle de repos intercinetique plus ou moins 
marque. L’existence et la longueur de ce repos sont contingentes. 
Non seulement, on observe d’espece ä espece des variations & cet 
egard, mais on voit aussi des variations individuelles.“ Er bestätigt 
auch die Angaben von Janssens, daß das Ruhestadium im 
Vorfrühling besser zur Ausbildung kommt und länger dauert als 
im Sommer. Die Chromosomen der Telophasen der ersten Reifungs- 
teilung verteilen sich im Kern, der Kernsaft färbt sich dunkler. 
Bei Salamandra und Triton kommt es jedoch zu keinem völligen 
Verschwinden der Chromosomen (mit Meves gegen Jans- 
sens), diese erfahren vielmehr bald wieder eine Verdichtung ihrer 
Substanz und rücken in die zweite Teilung ein, wo ihre Trennung 
in einem Längsspalt erfolgt, der schon vor der Ausbildung der 
Ruhekerne sichtbar war. 

Anders bei den Anuren (Bombinator, Alytes, Rana); hier tritt 
eine völlige Verteilung des Chromatins auf die Lininfäden ein, ja 
es treten sogar in einzelnen Fällen Nucleolen auf, so daß das Bild 
des Ruhekernes ein vollkommenes ist. Beim Beginn der zweiten 
Reifungsteilung erfolgt die Rekonstruktion der Chromosomen häufig 
nicht unmittelbar, sondern es bildet sich zunächst ein feiner kon- 
tinuierlicher, meist längsgespaltener Faden aus, der manchmal eine 


nn m Zr te an ser 4 Hm es 


276 sschk Stieve: 


Orientierung gegen die Sphäre, ähnlich. wie im ‚„‚Bukettstadium‘ 
zeigt. In den meisten Fällen ist der Längsspalt an. ihm von der 
Zeit des Entstehens an zu erkennen. Im Gegensatz dazu bestreitet 
Levy (1915) die Ausbildung eines Ruhekernes bei Präspermatiden 
auf Grund seiner Untersuchungen an Rana esculenta und meint, 
Champy habe ganz junge Spermatocyten mit den fraglichen 
Gebilden verwechselt. Desgleichen betont King (1907) ausdrück- 
lich, daß bei Bufo lentiginosus kein Ruhestadium zwischen die 
beiden Reifungsteilungen eingeschoben ist. 

Beim Olm besteht, wie schon erwähnt, kein Zweifel über .das 
Vorhandensein von Präspermatidenruhekernen; sie liegen in größeren 
und kleineren Gruppen zwischen den Gruppen der beiden Reifungs- 
teilungen, meist mit ihnen in einer Ampulle vereinigt. Ausnahmsweise 
kann man auch in einer Cyste mit zweiten Reifungsteilungen noch 
einen oder den andern Kern im fraglichen Stadium vorfinden. Schon 
die topographische Lage im Hoden schließt hier also eine Verwechs- 
lung mit jungen Spermatocyten erster Ordnung aus, von den jüng- 
sten Spermatiden unterscheidet sie gleichfalls die Lage und außerdem 
der recht bedeutende Größenunterschied der Kerne. 


Bei wirbellosen Tieren. 


Ueber die Spermatogenese der Fische finden sich keine An- 
gaben in der Literatur), dagegen geht aus einer ganzen Anzahl der 
Arbeiten über die Samenentwicklung der Evertebraten gleichfalls 
mit Deutlichkeit hervor, daß auch hier in einzelnen Fällen die 
Chromosomen der Telophasen der ersten Reifungsteilung nicht 
unmittelbar, sondern erst nach Einschaltung eines ruhekernähn- 
lichen Stadiums in die zweite Teilung eintreten. So ist z. B. bei 
Grylius domesticus nach den Angaben von Gutherz (1907) 
das interkinetische Ruhestadium vorhanden, allerdings sind hier 
die Chromosomen trotz der gut entwickelten Kernmembran immer 
noch deutlich als Einzelindividuen zu erkennen, es kommt also 
nicht zur Bildung eines Kernreticulums und deshalb bezeichnet 
Baumgartner (1904) diesen Zustand recht treffend als ‚‚Semi- 
resting Stage“. Auch Buchner (1909) findet in der Spermato- 
genese von Orthopteren das fragliche Ruhestadium. Die Chromo- 
somen lösen sich hier im Präspermatidenkern zu einem richtigen 


‘) Mit Ausnahme der weiter unten erwähnten Arbeit über Myxine. 


Kir. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 277 


Reticulum ‚auf, in. dem man allerdings leicht die dicken Einzel- 
chromosomen, ja sogar ihren Längsspalt erkennen kann. Auch 
hier dauert aber der fragliche Zustand nicht lang an, die seitlichen 
‚Ausläufer werden bald wieder eingezogen und dadurch die völlige 
Rekonstruktion der Chromosomen bewirkt. Ganz ähnliche Ver- 
hältnisse schildert das Ehepaar Schreiner (1908 b) bei Myxine. 

Auch Meves (1907) stellt in der Spermiogenese der Honig- 
biene ein derartiges Ruhestadium zwischen den beiden Reifungs- 
teilungen fest: „Der Kern ist meist etwas länglich, mit abgerundeten 
oder zugespitzten Enden, seine Kontur häufig eingebuchtet. Die 
Chromosomen, welche sich an einer Stelle des Kerninnern zu einem 
Komplex vereinigt hatten, scheinen in eine Art Gerüst übergegangen 
zu sein.‘ Meves nimmt aber an, daß trotzdem die Doppelkugeln, 
welche die Chromosomen darstellen, während dieses Stadiums ihre 
Individualität bewahren, eine Auffassung, die sich mit seiner son- 
stigen Anschauung über die Kontinuität der Chromosomen nicht 
recht in Einklang bringen läßt. Weiterhin weist Arnold (1909) 
das Stadium bei Planaria nach. 

Im Gegensatz dazu stehen aber die Mitteilungen einiger anderer 
Forscher, welche das Bestehen des fraglichen Ruhestadiums bei 
den von ihnen untersuchten Objekten aufs bestimmteste bestreiten, 
so besonders Rapp&port (1917), welcher die Spermatogenese 
von Süßwassertricladen untersuchte, und Schleip (1907) auf 
Grund seiner Studien an Planarien. Für diese letztere Tierart gehen 
also die Ansichten wieder auseinander (Schleip-Arnold) und 
immer tritt dabei die Meinung hervor, die betreffenden Zellformen 
seien nichts anderes als junge Spermatocyten erster Ordnung, die 
wegen der Aehnlichkeit in. Größe und Form zu Verwechslung führen 
könnten. Gegen diese Annahmen, die besonders von Rappe- 
port, Schleip und Levy geäußert werden, können aber 


. die Befunde bei Proteus, wo eine solche Verwechslung ausges<hlossen 


ist, angeführt werden, und. vor allem die Mitteilungen von Meves 
über Apis mellifica, wo die besondere Form der Zellen und in erster 
Linie die Anwesenheit der in der ersten Reifungsteilung ausgestoßenen 
Knospen eine solche Verwechslung vollkommen unmöglich macht, 


Zusammenfassung. 


Diese Zusammenstellung, die nur einige Beispiele herausgreift, 
ein Eingehen auf die gesamte diesbezügliche Literatur würde zu 


278 M..Stieve: 


weit führen, zeigt nun folgendes: Bei den Säugetieren ist die Aus- 
bildung eines Präspermatidenruhekernes Regel, alle Untersucher, 
die sich überhaupt mit der Frage beschäftigt haben, bestätigen ihr 
Vorkommen und zwar bei den verschiedensten Arten, so daß über die 
Allgemeingültigkeit des Vorhandenseins wohl kein Zweifel bestehen 
kann. Das nämliche dürfen wir wohl auch für die Vögel annehmen, 
wo die Angaben Schönebergs und meine Untersuchungen 
vollkommen übereinstimmen. Die Anwesenheit bei zwei so ent- 
fernten Arten (Ente und Dohle) läßt wohl auch hier den nämlichen 
Schluß zu wie bei Säugetieren, zumal er durch keinerlei andere 
Befunde widerlegt ist. Für die Reptilien fehlt es an entsprechenden 
Beobachtungen, ebenso für die Fische. 

Bei den Amphibien ist das Stadium für die meisten Arten 
zweifellos nachgewiesen, nur für wenige wird seine Existenz be- 
stritten. Dies mag damit zusammenhängen, daß, wie die Mit- 
teilungen von Janssens und Champy über die ver- 
schieden lange Dauer in den einzelnen Jahreszeiten zeigen, der 
Nachweis der interkinetischen Ruhekerne hier vielfach vom Zufall 
abhängig ist. Die meisten Untersuchungen über die Reifungs- 
teilungen der Amphibien werden ja an Sommerhoden ausgeführt, 
in denen die massenhaft vorhandenen Mitosen die Arbeit erleichtern. 
Aber gerade in ihnen dauert der fragliche Zustand nur sehr kurz 
und kann deshalb leicht übersehen werden bzw. er fehlt tatsächlich 
in dem einen oder anderen Einzelfall, da ja keineswegs alle Formen, 
welche der Kern der reifenden Geschlechtszelle während seiner 


Entwicklung durchläuft, in jeder Gonade gleichzeitig vorhanden 


sein müssen. Es gelingt vielmehr häufig erst nach Durchmusterung 
der Präparate von sehr zahlreichen Individuen das eine oder andere 
fehlende Stadium aufzufinden. Schon aus diesem Grunde ist es 
unbedingt notwendig, Untersuchungen über die Gonocytogenese 
nicht nur an einigen wenigen in einer bestimmten Jahreszeit er- 
beuteten Tieren auszuführen. In diesem Sinne sind wohl die An- 
gaben von Meves bei Salamandra und besonders diejenigen von 
Champy und King zu erklären. Ganz ähnliche Verhältnisse 
dürften wohl auch bei den Evertebraten vorliegen, wiewohl hier 
die äußerst gründliche Bearbeitung, welche die Spermatogenese 
einzelner Species erfahren hat, die Möglichkeit des Fehlens der 
„Ebnerschen Zellen‘‘ wahrscheinlicher erscheinen läßt. In vielen 
Fällen mag es hier sicherlich stets, so wie in den Sommerhoden der 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 279 


Amphibien, nur zur ganz flüchtigen Ausbildung einer Kernmembran 
kommen, innerhalb derer die Chromosomen keinerlei Veränderungen 
erfahren. 

Aus der obigen Zusammenstellung ergibt sich ja ohne weiteres, 
daß das interkinetische Ruhestadium in der Spermatogenese um so 
länger dauert und umso voliständiger ausgebildet ist, je höher die 
betreffende Art in der Tierreihe steht. Bei den Evertebraten ist 
es nur sehr kurz, es findet keine oder eine nur ganz unbedeutende 
Verteilung des Chromatins auf das Kerngerüst statt, bei Amphibien 
dauert es je nach der Jahreszeit länger oder kürzer und entsprechend 
seiner Dauer ist die Chromatinverteilung eine mehr oder weniger 
vollkommene, bei Vögeln oder Säugetieren kommt es stets zur völligen 
Ausbildung richtiger Ruhekerne. In der.Oogenese ist etwas Aehn- 
liches bisher noch nicht beschrieben, hier treten die Chromosomen 
vielmehr stets unmittelbar aus der Telophase der ersten in die 
Prophase der zweiten Reifungsteilung ein. In diesem Punkte be- 
steht also ein grundlegender Unterschied zwischen der Entwicklung 


der Ei- und Samenzellen, auf den aber merkwürdigerweise noch 


von keiner Seite hingewiesen worden ist. Allerdings spielen sich 
ja die Reifungsteilungen an den Eiern der höheren Tiere sehr rasch 
nacheinander ab, und zwar bei den Warmblütern erst nach der 
Loslösung aus dem Ovar, wodurch die Beobachtung sehr wesentlich 
erschwert ist. Dies mag es auch erklären, daß sich in der Literatur 
nirgends eine lückenlose Beschreibung der Reifungsvorgänge des 
Säugetier- oder Vogeleies findet, es handelt sich vielmehr stets 
um die Aneinanderreihung von Einzelbildern, die mehr oder weniger 
entfernt liegende Stadien darstellen, wobei die Zwischenräume durch 
Analogieschlüsse auf Grund der an niederen Tieren gewonnenen 
Erfahrungen ausgefüllt werden. Diese sind allerdings derartig ge- 
festigt und erstrecken sich zum Teil auf die unmittelbare Beobach- 
tung der Vorgänge am lebenden Ei, so daß an ihrer Richtigkeit 
kein Zweifel bestehen kann. 

Im Gegensatz dazu sind wir in der Spermatogenese niemals 
in der Lage, die Vorgänge direkt zu beobachten, sondern stets auf 
die Zusammenstellung der in Schnittbildern fixierter Hoden ge- 
fundenen Stadien angewiesen, und dieser Umstand mag mit zur 
Erklärung der Tatsache beitragen, daß die interkinetischen Kerne 
von einigen Forschern für Spermatocyten erster Ordnung gehalten 
werden. Wie dem aber auch sei, für einzelne Tierspezies, so be- 


280 H..StLeve: 


sonders Säugetiere, Vögel und zahlreiche Amphibien kann an der 
Existenz des interkinetischen Präspermatidenruhekernes kein Zweifel 
bestehen. 


Das Reduktionsproblem. 


In der neuesten Auflage seiner Entwicklungsgeschichte (1915) 
äußertsich Oskar Hertwig über die Ursachen der Reduktion 
folgendermaßen: „Der Reifungsprozeß besteht nun darin, daß die 
in einer Vierergruppe vereinigten Chromosomen auf 4 Zellen verteilt 
werden, von denen jede ein Chromosom erhält. Es geschieht dies 
durch zwei Zellteilungen, die sich unmittelbar aufeinander folgen, 
ohne daß der Kern in den bläschenförmigen Zustand der Ruhe 
übergeht und ohne daß dabei eine erneute Spaltung der schon im 
Keimbläschen vorbereiteten Chromosomen eintritt.“ Schon B o- 
veri und Rückert. haben darauf hingewiesen, daß durch 
eine solche Annahme nur die Herabsetzung der Chromatinmasse, 
nicht aber der Chromosomen zahl erklärt wird. Die Halbierung 
‚der Chromatinmenge bedarf aber gar keiner besonderen Erklärung, 
ist sie doch ein Vorgang, den wir bei jeder somatischen Mitose be- 
obachten können, wo in jede Tochterzelle zunächst nur die Hälfte 
der in der Mutterzelle vorhandenen Chromatinmenge gelangt. Ganz 
abgesehen davon ist aber de Hertwigsche Erklärung der 
Reduktion für die Samenzellen unzutreffend, denn sie berück- 
sichtigt nicht die Tatsache, daß, wie ich eben an Hand der Literatur 
und auf Grund meiner eigenen Untersuchungen nachgewiesen habe, 
tatsächlich bei einer ganzen Reihe von Tieren die Präspermatiden 
zwischen den beiden Reifungsteilungen. den bläschenförmigen Zu- 
stand des Kernes herstellen, sie läßt sich also nur auf die Eireifung 
anwenden. Bei der überaus großen Aehnlichkeit, welche die Reifungs- 
vorgänge der Keimzellen in den beiden Geschlechtern zeigen und 
bei der hohen biologischen Bedeutung, welche diesen Vorgängen 
zukommt, müssen wir aber wohl annehmen, daß für die Ei- und 
Samenentwicklung trotz einiger unbedeutender äußer'ichen Unter- 
schiede die Reifungsvorgänge selbst, also auch Jie Ursachen, welche 
die Chromatinreduktion bedingen, die nämlichen sind. Daraus 
ergeben sich nun zwei Folgerungen: 

1. Die Hertwigsche Erklärung der Reduktion kann, da 
sie für die Samenentwicklung nicht zutrifft, auch für die Eientwick- 
lung keine Anwendung finden und 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 281 


2. das interkinetische Ruhestadium der Präspermatiden in der 
Samenentwicklung stellt einen Vorgang dar, der auf die Reduktion 
selbst ohne jeden Einfluß ist. 

Auf den ersten Blick mag es wohl den Anschein haben, als 
ob in diesen beiden Sätzen ein gewisser Widerspruch liege, dem ist 
jedoch nicht so. Was zunächst die Reduktion als solche betrifft, 
so ist sie ein Vorgang, der seine Begründung in der ganzen Physio- 
logie der Geschlechtszelle hat und nicht in der Tatsache der raschen 
Aufeinanderfolge der Teilungen ohne zwischengeschobenes Ruhe- 
stadium. Er bewirkt die Halbierung der Chromosomenzahl, - die 
dann nur durck die Befruchtung wieder auf die Normalzahl ergänzt 
werden kann, eine Halbierung der Chromatinmenge tritt ja, wie 
schon erwähnt, bei jeder Mitose ein und jede Zelle besitzt die Fähig- 
keit, die Chromatinmenge wieder auf das ihr zukommende Maß 
zu ergänzen. Aus welchen inneren Gründen sich aber die Vorgänge 
der Reduktion gerade in der bekannten Art und Weise abwickeln, 
wissen wir nicht, wir können es auch nicht vermuten, es ist eben 
eine Eigenschaft, die den Geschlechtszellen innewohnt, daß sie in 
zwei rasch aufeinander folgenden Teilunger, die beide nicht un- 
wesentlich von der Art der gewöhnlichen Mitosen abweichen, ihre 
Chromosomenzahl auf die Hälfte reduzieren. Ebensowenig kennen 
wir ja auch die Ursache dafür, warum im heranwachsenden ÖOrganis- 
mus von 2 Zellen, die aus einer Mutterzelle hervorgegangen sind, 
sich jede in ganz anderer Richtung entwickelt und ‚schließlich in 
ihren Nachkommen nickt nur verschiedene Funktionen, sondern 
auch ganz verschiedenen morphologischen Bau zeigt. 

Andererseits sehen wir bei den rasch aufeinanderfolgenden 
Spermatogorienteilungen zuBeginn der Fortpflanzungsperiode gleich- 
falls die Telophasen einer Teilung unmittelbar in die Prophasen 
der nächsten übergehen, ohne daß sich in der Zwischenzeit ein 
deutliches Kernruhestadium ausbildet. Auch hier fehlt also das 
interkinetische Ruhestadium mehr oder weniger vollkommen, und 
trotzdem findet hier keine Reduktion der Chromosomenzahl, son- 
dern nur während der letzten derartigen Mitosen eine ganz geringe 
Verminderung der Chromatinmenge statt, die sich dann während 
der Wachstumsperiode der Spermatocyten wieder auf die Norm 
ergänzt. Geradeso könnte ja auch zwischen und während der beiden 
Reifungsteilungen eine Ergänzung der Chromatinmenge auf den 
der betreffenden Art eigentümlichen Stand erfolgen, trotz ihrer 


282 H. Stieve: 


raschen Aufeinanderfolge, wenn die Geschlechtszellen eben dazu 
befähigt wären. Aber gerade in dieser besonderen Eigenschaft der 
Keimzellen liegt ja die Eigentümlichkeit des Reifungsvorganges und 
man wäre viel eher dazu berechtigt zu sagen: weil in der zweiten 
Teilung die numerische Reduktion erfolgt, darum ist eine Ergänzung 
der Chromatinmenge auf den Normalstand in der Interkinese über- 
flüssig bzw. unmöglich. Die Hertwigsche Anschauung gibt 
übrigens auch keine Erklärung für die Reduktion als solche, sie 
schiebt die Erklärung lediglich um eine Etappe hinaus, denn wir 
fragen sofort, warum bleibt eben dann die interkinetische Chromatin- 
vermehrung und die erneute Spaltung der Chromosomen aus. Die 
Ursache für die Reduktion läge dann nicht in den Reifungs- 
teilungen selbst, sondern in den Stadien nach ihnen, denn da erfolgt 
ja die Ergänzung der Chromatinmenge auf die Norm. 

Eine große Anzahl von Untersuchern, denen auch ich mich 
auf Grund der hier mitgeteilten Befunde anschließen muß, sehen 
ja in der ersten Reifungsteilung eine Aequationsteilung, die ganz 
ähnlich verläuft wie eine somatische Mitose, nur bleiben je 2 end- 
weise konjugierte Chromosomenhälften beieinander liegen. Welchen 
Zweck haben aber alle die verwickelten Vorbereitungen auf diesen 
Vorgang, die sich in ihrer Art und Dauer so wesentlich von den 
Prophasen körperlicher Mitosen unterscheiden, wenn die Reduktion 
einfach, wie. dies  Hertwig, Brauer, Meyes,.Biek 
und andere annehmen, dadurch zustandekommt, daß die im Kern 
vorhandene Chromatinmasse sich in der Prophase der ersten Rei- 
fungsteilung in der halben Zahl von ‚Taktischen Verbänden‘ zu- 
sammenfindet? Zu einem solchen Vorgang bedürfte es wirklich 
nicht der verwickelten Vorbereitungen, -er könnte sich im gleichen 
Rahmen wie jede körperliche Teilung abwickeln. Wie Meves 
(1907) ganz richtig betont, handelt es sich ja bei der Chromatin- 
reduktion um 2 vollkommen, auch zeitlich voneinander getrennte 
Vorgänge: Herabsetzung der Chromosomenzahl und der Chromatin- 
masse. Die erstere wird im Beginn der ersten Reifungsteilung 
vollzogen, wohingegen die Herabsetzung der Masse durch die beiden 
Reifungsteilungen erfoigt. Dem ersten der beiden Sätze, daß es 


sich um zwei getrennte Prozesse handelt, vermag ich ganz bei- 


zustimmen, besonders deshalb, weil die Herabsetzung der Masse 


des Chromatins für die Reduktion überhaupt ohne jede höhere 


Bedeutung ist. Schwankungen sehr beträchtlicher Art in der Chro- 


IE ET Fa 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 283 


matinmenge werden ja häufig genug in allen Körperzellen beob- 
achtet, sie können durch die verschiedensten äußeren Umstände, 
so besonders die bessere und schlechtere Ernährung, bedingt sein, 
treten ja auch während der letzten Spermatogonienteilungen deut- 
lich zutage. Dagegen halte ich den zweiten Mevesschen Satz 
für unzutreffend, denn die Halbierung der Chromosomenzahl erfolgt 
nicht schon im Beginn der ersten Teilung, denn dort ist ja noch 
die Normalzahl der Chromosomen vorhanden, sondern erst durch 
die zweite Teilung, welche sich als echte Reduktionsteilung an der 
Normalzahl der Chromosomen vollzieht und ihre Halbierung bewirkt. 


Die Frage der Chromosomenindividualität. 


Was meinen zweiten Leitsatz betrifft, daß die Einschiebung 
des interkinetischen Ruhestadiums der Präspermatidenkerne ohne 
jeden Einfluß auf den Ablauf der Entwicklung, besonders der Re- 
duktion als solcher ist, so muß ich bei seiner Erörterung auf die 
Frage der Individualität der Chromosomen zu sprechen kommen. 
Zunächst ist es wohl ganz klar und bedarf eigentlich keiner besonderen 
Erwähnung, daß ein Stadium wie das eben besprochene, das in die 
Reihe des einen von zwei, im übrigen sich vollkommen in gleicher 
Weise abspielenden und zu gleichen Endergebnissen führenden 
Entwicklungsvorgängen eingeschaltet ist, für den sinngemäßen Ab- 
lauf dieser Vorgänge ohne jede Bedeutung sein muß. Aus dieser 
Tatsache allein ergibt sich schon notwendigerweise die Folgerung, 
daß die Chromosomen, welche in die zweite Reifungsteilung ein- 
treten, die nämlichen Gebilde und, wenn wir uns so ausdrücken 
wollen, Individuen sein müssen, die aus den Telophasen der ersten 
Reifungsteilung hervorgegangen sind, selbst wenn wir sie in den 
Ruhekernen, einzig und allein als Folge der mangelhaften uns zur 
Verfügung stehenden Untersuchungsmethoden nicht unmittelbar 
anschaulich machen können. Rein morphologisch können wir die 
Kontinuität zwar nicht beweisen, sondern nur äußerst wahrschein- 
lich machen, denn in beiden Zeitpunkten stimmen die Chromosomen 
sowohl in Hinsicht auf ihre Zahl und Form, als auch auf die Lage- 
rung vollkommen überein, es müssen also wohl auch die nämlichen 
Gebilde sein. 

' Diejenigen Autoren freilich, welche jegliche Individualität der 
Chromosomen bestreiten, können auch hier wieder sagen, daß die 


284 H. Stieve: 


Präspermatiden die Fähigkeit haben, die fraglichen taktischen Ver- 
bände in der gleichen Anordnung, Zahl und Form wieder zu bilden 
und ihnen gleichzeitig auch die Eigenschaft einzuverleiben, den 
unterbrochenen Entwicklungsgang in sinngemäßer Weise fort- 
zusetzen. Dies wäre die letzte Folgerung, welche sich für die Ver- 
neinung der Chromosomenindividualität ergäbe, sie würde aller- 
dings ein sehr hohes Maß von besonderen Fähigkeiten in den ganzen 
Kern verlegen. Merkwürdigerweise schrecken aber die Vertreter 
der fraglichen Anschauung vor einer solchen Durchführung ihrer 
Theorie bis zu den letzten Folgerungen zurück. iR 

Wie schon erwähnt hat ja Meves (1907) die Spermatocyten- 
teilungen der Honigbiene in äußerst eingehender und genauer Weise 
untersucht und ist dabei über das fragliche Stadium zu folgendem 
Ergebnis gelangt: Nach der ersten Reifungsteilung, die allerdings 
in besonderer Weise verläuft, was jedoch für die schwebende Frage 
ohne Bedeutung ist, vereinigen sich die Chromosomen an einer 
Stelle des Kerninnern zu einem „Komplex“, sie ‚‚scheinen in eine 
Art von Gerüst übergegangen zu sein‘. Wie aus den beigegebenen 
Abbildungen (41 und 42, Tafel 23 1. c.) deutlich zu erkennen ist, 
läßt sich in diesem Gerüst beim besten Willen kein Chromatin- 
einzelgebilde, das ein Chromosom darstellen könnte, nachweisen, 
es handelt sich also um die Ausbildung eines vollkommenen Ruhe- 
kernes. Sein Verhalten in der Prophase der zweiten Mitose wird 
nun wie folgt beschrieben: ‚Der Chromatinkomplex liegt zunächst 
neben der Halbspindel. Er zerlegt sich in unregelmäßig gespaltene 
Partikel, welche sich ihrerseits, soviel ich sehen kann, direkt zu den 
Doppelkugeln umwandeln, welche gegen Ende der Reifungsteilungen 
in die Bildung des Komplexes eingegangen waren. Demnach darf 
angenommen werden, was sich auf Grund der vorliegenden Bilder 
bezweifeln ließe, daß die Doppelkugeln zwischen 
den. beiden Reitungstelungenvihre Iwdswı. 
dualität bewahren“ (im Original nicht gesperrt gedruckt). 

In diesem Falle sollen alss die Chromosomen während der 
Ausbildung des Kerngerüstes erhalten bleiben; Meves tritt hier 
selbst für die Individualität der Chromosomen, allerdings nur in 
diesem einen besondern Fall ein. Nur gebraucht er statt der üblichen 
Bezeichnungen die Ausdrücke ‚„Doppelkugeln‘“ und ‚Komplex im 
Kerninnern‘‘, was ja an der Tatsache an sich nicht das geringste 
ändert. Dieser Ausnahmefall, der Meves zum Abweichen von 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 285 


seiner sonst so scharf verfochtenen Anschauung nötigt, zeigt deut- 
lich genug, auf wie unsicheren Grundlagen die ganze Hypothese 
der „taktischen Verbände‘ ruht, denn eigentlich könnte man auch 
hier der Präspermatide die nämliche Fähigkeit zur Ausbildung einer 
bestimmten Anzahl von Chromosomen zuschreiben, wie jeder anderen 
Zelle. Allein hier liegen die Verhältnisse zu klar, wie auch bei Proteus 
und den anderen Objekten kann eben kein Zweifel darüber be- 
stehen, daß die Chromosomen vor und nach dem Präspermatiden- 
ruhestadium die nämlichen Individuen sind, besonders da die Vor- 
gänge in der Eireifung, bei der ja keine Unterbrechung der Entwick- 
lung erfolgt, beweisen, daß dieses Stadium keine so hohe Bedeutung 
besitzen kann, wie sie die völlige Wiederauflösung und Neubildung 
der Chromosomen darstellen würde. Wenn eine solche erfolgte, 
dann wären ja alle die Grundlagen, welche durch die entsprechende 
Anordnung der Chromosomen für die zweite Reifungsteilung ge- 
schaffen sind, hinfällig, ja die ganze erste Teilung an sich überflüssig, 
denn wenn der Kern der Präspermatiden überhaupt die Fähigkeit 
besitzt, aus seiner strukturlosen bzw. keinerlei Chromosomen be- 
sitzenden Masse die für den normalen Ablauf der zweiten Teilung 
notwendigen Formationen in entsprechender Anordnung zu schaffen, 
dann wäre die erste Teilung überhaupt ohne jede Bedeutung, da 
ihre Erfolge ja in dem Ruhestadium durch die völlige Auflösung 
der Chromosomen zerstört würden. 

Diejenigen Autoren, welche die Individualität der Chromo- 
somen bestreiten, legen ja, was bisher merkwürdigerweise noch 
kaum betont wurde, dem Kerne viel höhere und verwickeltere 
Fähigkeiten zu als die Anhänger der Individualitätstheorie. Ueberall 
in der organischen Natur sehen wir bei der Vermehrung zwei Tochter- 
gebilde aus einem Muttergebilde hervorgehen und überall erkennen 
wir die Kontinuität der strukturierten Masse. Der häufig heran- 
gezogene Vergleich mit der Entstehung von Kristallen trifft für den 
Kern, wie ja schon des öfteren betont wurde, nicht zu, denn wir 
kennen keine Substanz, bei der eine bestimmte Anzahl von Kristallen 
in einer Flüssigkeitsmenge aufgelöst, nach einiger Zeit wieder in 
der gleichen Anzahl, Größe und gegenseitigen Lage auskristallisiert 
wird. Dieser Fall wäre höchstens dann denkbar, wenn von jedem 
der ersten Kristalle noch ein kleiner Rest übrig geblieben wäre, 
auf den dann die erneute Kristallisation erfolgt, aber auch durch 
diesen Vorgang könnten die Größenverhältnisse nicht erklärt werden 

Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. Il. 19 


Vo NER ER ER N ET 8 


VOR e TER NIT, 
v7 


286 H. Stieve: 
Die fraglichen Reste wären aber dann die Chromosomenindividuen, 
auf die sich vor der Teilung, das Chromatin konzentriert. Auch 
die bekannte Manövrierhypothese trifft für die Chromosomen nicht 
zu, denn auch bei ihr ist es immer ein bestimmtes Etwas, die Stäbe 
der Regimenter, welche die Bildung einer gleichen Anzahl von 


Formationen veranlaßt. Wäre der Vergleich mit Truppenverbänden 
richtig, dann müßten sich aus einer bestimmten Anzahl von Soldaten 


überhaupt stets nur eine bestimmte Anzahl von Formationen bilden 
lassen; daß dies nicht der Fall ist, hat dieser Krieg deutlich genug 
bewiesen; wie oft war nach einem Gefecht die Zahl der Formationen 
und ihre Stärke ganz anders als vorher und es ist auch nicht wahr- 
scheinlich, daß nach dem jetztigen Zerfall der Armee bei ihrer hoffent- 
lich in Bälde erfolgenden Neubildung genau die gleiche Anzahl von 
Formationen entstehen wird wie vorher. Da man sich aber bei der 
Frage der Chromosomenindividualität einmal in Gleichnissen zu 
bewegen pflegt, so sei es hier gestattet, einen weiteren Vergleich 
anzufügen, der allerdings ebenso wie die beiden anderen stark hinkt, 


aber vielleicht doch geeignet ist, die Verhältnisse in den Ruhekernen 


unserem Verständnis näherzubringen. 

Denken wir uns ein Gewächshaus, zu welchem uns der Zutritt 
verwehrt ist, in welches wir also nur von außen her Einblick haben. 
Während des Winters erkennen wir in ihm eine bestimmte Anzahl, 
sagen wir 10 Baumstämme, die alle einem einzigen Wurzelstock 
angehören und ganz verschiedene Größe besitzen. Kahl und blattlos 
stehen sie da, weshalb uns ihre Zählung leicht gelingt. Zu Beginn 
des Frühjahrs sprossen nun ‚aus den Stämmen nach allen Seiten 
Zweige, an ihnen bilden sich Blätter, das Laubwerk verflicht sich 
untereinander und mit dem der Nachbarbäume, so entsteht ein 
ganz dichtes Gebüsch, in dem die Stämme, da sie durch Blätter 
verdeckt sind, verschwinden. Blicken wir nunmehr in das Treibhaus, 
so sehen wir nur noch eine grüne Hecke, es gelingt uns aber nicht, 
festzustellen, aus wieviel Stämmen sie gebildet ist, der Eintritt in 
das Haus, der uns Klarheit verschaffen würde, ist ja verwehrt. 
Im Herbste nun fallen die Blätter ab und wieder stehen 10 Baum- 
stämme, die einem Wurzelstock angehören, isoliert und kahl da; 
die Feststellung der Zahl gelingt nunmehr leicht und wir erkennen 
wieder, daß die Größenverhältnisse die gleichen geblieben sind, 
wieim Frühjahr vor dem Ausschlagen der Blätter. Jeder unbefangene 
Beobachter wird nun sofort sagen, es sind die gleichen Stämme, 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 287 


die wir im Frühjahr und Herbst gesehen haben, selbst wenn wir 
sie im Sommer, als sie durch Laub verdeckt waren, nicht nachweisen 
konnten. Denkbar wäre es allerdings auch, und eine solche Annahme 
kann um so eher gemacht werden, je weniger wir die biologischen 
Verhältnisse der betreffenden Pflanzenart kennen, daß während 
des Sommers die ursprünglich vorhandenen Stämme zugrunde 
gingen und an ihrer Stelle 10 neue aus dem Wurzelstock empor- 
wuchsen, welche nicht nur in Hinsicht auf die Zahl, sondern auch 
auf das gegenseitige Größenverhältnis und die Stellung zueinander 
den alten vollkommen gleichen. Wenn wir dann diesen Vorgang 
während vieler Jahre in genau der gleichen Weise beobachten 
können, dann dürfen wir schließen: der Wurzelstock der betreffenden 
Pilanze hat die Fähigkeit, alle Jahre Stämme von bestimmter 
Größe zu bilden, die auch alle Jahre im Sommer wieder zugrunde 
sehen und dann wieder neu gebildet werden, jedes Jahr in der gleichen 
Weise, ein Vorgang, der uns allerdings durch das dichte Laubwerk 
verdeckt wird. Solange uns ein Eintritt in das Gewächshaus während 
des Sommers und damit ein genaues Studium der sich unter dem 


Schutz der gebildeten Blätter vollziehenden Vorgänge versagt ist, 


vermögen wir nie mit Sicherheit zu entscheiden, welche von den 
beiden Möglichkeiten stattfindet, die Stammeserhaltungsmöglichkeit 
oder die Stammesneubildungsmöglichkeit. Welche von beiden mehr 
Wahrscheinlichkeit für sich hat, brauche ich wohl nicht auseinander- 
zusetzen. 

Aehnliche Verhältnisse sehen wir in der Zelle; hier gelingt der 
Nachweis der Chromosomen leicht während der Mitose, im zwischen- 
liegenden Ruhestadium dagegen können wir die chromatischen 
Einzelgebilde nicht erkennen, da sie hier durch andere Kernstruk- 
turen verdeckt sind. Dies ist jedoch nur die Folge der Unzulänglich- 
keit unserer Untersuchungsmethoden, die uns nicht gestatten, in den 
Bau der ruhenden Zelle einzudringen, aber auch nicht dazu berechtigen, 
der Zelle Eigenschaften zuzuschreiben, die nirgends im Tier- und 
Pflanzenreich auch nur im entferntesten ähnliche Vorgänge auf- 
weisen. Viel einfacher und wegen der zahlreichen uns bekannten 
ähnlichen Vorgänge auch viel wahrscheinlicher ist dagegen die 
Annahme, daß die Chromosomen auch während des Ruhestadiums 
der Kerne erhalten bleiben, nur in einer für uns nicht nachweisbaren 
Form. Zur logischen Forderung wird dieser Schluß dann, wenn 


wir wie bei der Spermatogenese in eine kontinuierliche Entwicklungs- 
19* 


288 H. Stieve: 


reihe, deren Ablauf sich bei analogen Objekten, den Eizellen, ohne 
Unterbrechung verfolgen läßt, ein solches Ruhestadium einge- 
schoben finden, durch das die normale Abwicklung der Vorgänge 
nur für unsere Beobachtung unterbrochen, sonst aber in keiner 
Weise irgendwie beeinträchtigt wird. In solchen Fällen machen 
ja auch die schärfsten Gegner der Individualitätshypothese eine 
Ausnahme, weil sie eben dazu gezwungen sind, denn anderenfalls 
könnten sie keine irgendwie annehmbare Erklärung für diese Vor- 
gänge finden bzw. sie müßten der reifenden Geschlechtszelle zuviel 
verschiedene geheimnisvolle Eigenschaften zuschreiben. 

Das hauptsächlichste Hindernis für die allgemeine Anerkennung 
der Individualitätshypothese ist ja immer noch die althergebrachte 
Anschauung, welche den Begriff der Chromosomen untrennbar 
mit derjenigen Substanz verkettet, von der sie zunächst ihren 
Namen erhalten haben und die sich in bestimmten Zeiten auf sie 
konzentriert, sie dabei unserer Beobachtung besonders schön zu- 
gänglich macht, nämlich mit dem Chromatin. Diese Substanz 
selbst hat aber mit dem eigentlichen Chromosomen individuum 
so gut wie nichts zu tun, in ihr dürfen wir auch nicht die fragliche 
Erbmasse erblicken. Wir müssen vielmehr daran festhalten, daß 
wir in den Chromosomen Gebilde zu erblicken haben, die wir, solange 
uns keine besseren Untersuchungsmittel zur Verfügung stehen, eben 
nur unter besonderen Verhältnissen anschaulich machen Können. 
Dies ist jedoch kein Grund, ihre Existenz während der Kernstadien, 
in denen wir sie nicht unmittelbar anschaulich machen können, 
zu leugnen, geradesowenig wie wir die Existenz eines in Zedernholzöl 
gelegten Glasstabes leugnen können, nur aus dem Grunde, weil wir 
ihn nicht sehen. Schon Boveri hat sich in diesem Sinne ge- 
äußert (1901): „Was von dem Chromosom als selbständigem Ge- 
bilde übrig bleibt, ist für die Hypothese an und für sich gleichgültig. 
Es mag unser hypothetisches Individuum z. B. die färbbare Sub- 
stanz völlig verlieren und sich erst bei der nächsten’ Teilung wieder 
mit ilır beladen. Ja es mag in gewissen Zellen nur ein mit unseren 
Mitteln gar nicht nachweisbares Teilchen von unserem Chromosom 
übrig bleiben, um als Bildungszentrum zur Entstehung der neuen 
Chromosomschleife Anlaß zu geben.“ 

Im Gegensatz dazu ist allerdings Fick (1905) der Ansicht, 
daß ‚man ein Ding, was sich vollständig umwandelt und für das 
Mikroskop eventuell unnachweisbar werdend verschwindet, auch 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 289 


wenn es später wieder ‚in der alten Gestalt auftaucht‘, nicht für 
ein ‚selbständiges Lebewesen‘ einem Proto- oder gar Metazoon 
vergleichbar halten kann“. In der konsequenten Durchführung 
dieser Ansicht wäre also die Individualität eines Lebewesens an 
dessen mikroskopische Nachweisbarkeit gebunden, eine Folgerung, 
mit der Fick selbst sicherlich nicht einverstanden ist. Können 
wir doch eine ganze Reihe von Lebewesen, so die Erreger des Fleck- 
typhus, der Pocken und anderer Infektionskrankheiten auch heute 
mit den besten optischen Hilfsmitteln noch nicht nachweisen, und 
doch kann an ihrer Existenz kein Zweifel bestehen, da wir sie ja 
aus ihren Folgeerscheinungen, den Krankheiten die sie hervor- 
rufen, deutlich genug kennen. Und warum sollten sich die Chromo- 
somen nicht in den Ruhekernen auf die Größe eines solchen Filter- 
passers, die weit unterhalb der mikroskopischen Nachweisbarkeit 
gelegen ist, zurückbilden? Wie wir aus den Ergebnissen der bis- 
herigen Untersuchungen ja deutlich genug wissen, unterliegen die 
Chromosomen in Hinsicht auf ihr Volumen ganz ungeheuren Schwan- 
kungen, ich erinnere nur an die Lampenzylinderputzer-Formen, die 
sich schließlich zu ganz dünnen feinen Faden umbilden und dabei 
nach den Berechnungen Rückerts ihren Inhalt von 7850 Kubik- 
mykra auf 1% Kubikmykra verringern. Und warum soll diese Ver 
minderung der Masse sich nicht nach unten hin, über die Grenze 
des mikroskopisch Nachweisbaren fortsetzen ? 

Daß die Chromosomen selbst nicht das geringste zur Bildung 
der Ruhekerne beitragen und von einer ganzen Reihe von Kern- 
strukturen vollkommen unabhängig sind, beweisen uns deutlich 
Erscheinungen, auf die zuerst Blochmann (1886) und in 
allerneuester Zeit Buchner (1918) in einer äußerst gründlichen 
Arbeit aufmerksam gemacht hat. Es handelt sich um die Tropho- 
nuclei des Hymenoptereneies. Sie entstehen ohne direkte Anteil- 
nahme des Eies im Plasma der Zelle, wahrscheinlich aus anfangs 
„nackt im Plasma liegenden Chromatingranulis“. Um sie herum 
bildet sich Kernsaft, Membran und Kerngerüst, sie selbst werden 
die Nucleolen des Trophonucleus. Dieser gleicht im Bau ganz dem 
Eikern, enthält jedoch keine Chromosomen. Sonst 
wiederholen die akzessorischen Kerne die Arteigentümlichkeiten 
des betreffenden Eies stets auf das genaueste. Sie besitzen sogar 
die Fähigkeit zu wachsen und sich durch Knospung oder direkte 
Teilung zu vermehren. „Zu indirekten Teilungen sind sie wohl 


290 H. Stieve: 


wegen des Mangels an Chromosomen nicht befähigt.‘“ Ihr Bestand 
ist auch kein dauernder, sie gehen vielmehr gegen Ende der Ei- 


wachstumsperiode ausnahmslos zugrunde. Wie Buchner ganz. 


richtig betont, sind es also nicht die Chromosomen, welche das 
Kernbild bedingen, sondern andere Substanzen, der Kernsaft, 
das Chromatin und das Linin. Diese drei Dinge sind also schon 
allein befähigt einen Kern zu formieren, der sogar eine ganze Reihe 
der dem Nucleus zukommenden physiologischen Verrichtungen 
übernehmen kann und nur nicht imstande ist, sich indirekt zu 


teilen und aus diesem Grunde auch nicht zu längerer Lebensdauer 


befähigt sein kann. Wären die Chromosomen wirklich nur „tak- 
tische Formationen‘, so müßten die Trophonuclei, die sich ja im 
mikroskopischen Bild nur durch ihre Größe, sonst aber in keiner 
Weise vom Ruhekern des Eies unterscheiden, auch die Fähigkeit 
besitzen, im gegebenen Fall die fraglichen taktischen Formationen 
in der für die betreffenden Spezies bezeichnenden Normalzahl zu 
bilden. Denn warum sollte gerade diese Eigenschaft bei der im 
übrigen völligen Uebereinstimmung im Bau und in der chemischen 
Zusammensetzung, soweit wir diese mittels der Färbereaktionen 
erkennen, fehlen ? 


Weil aber die Chromosomen aller Wahrscheinlichkeit nach 


Individuen sind, die ihrerseits nur wieder aus Chromosomen ent- 
stehen können, darum ist ihr Erscheinen in den Trophonuklei aus- 
geschlossen und eben die Tatsache des Fehlens der Chromosomen 
in den akzessorischen Kernen der Hymenopteren bildet eine weitere 
Stütze für die Individualitätslehre. In älteren Trophonuklei, welche 
unmittelbar vor dem Zerfall stehen, kann es zwar hie und da zu 
Vorgängen kommen, die ganz entfernt an mitosenähnliche Bilder 


erinnern. Es „bilden sich unter Umständen recht chromosomen- 


ähnliche, scharf abgesetzte Balken oder Stäbchen, die Kernkontur 
kann Zipfel treiben und das Liningerüst in diesen einen etwas strahlen- 
den Eindruck machen‘. Allein dies alles sind Vorgänge, die wir 
bei der Degeneration jeder Zelle beobachten können, äußert sich 


der beginnende Zelltod doch stets entweder in einer Zerstäubung‘ 


oder in einer mehr oder weniger deutlichen Verklumpung des Chroma- 
tins, die aber mit der Chromosomenbildung im Beginn einer Mitose 
nicht das geringste zu tun hat. Von dem eben erwähnten Stand- 
punkt aus erscheint es auch unrichtig, in der Prophase einer Mitose 
von einer Chromosomenbildung zu reden, es handelt sich viel- 


18 ä R 
si re 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 291 
j 


“mehr nur um ein Wiedererkennbarwerden der frag- 


lichen Gebilde für unsere Untersuchungsmethoden, das sicher zum 


größten Teil lediglich eine Folge der Konzentration der als Chromatin 


bezeichneten Substanz ist. 


Die zweite Reifungsteilung. 


Ueber die zweite Reifungsteilung kann ich mich nach allem 
Vorhergesagten kurz fassen. Sie vollzieht sich als echte Reduktions- 
teilung, also heterotypisch, und zwar werden die ursprünglich end- 
weise vereinigten, in den Telophasen der ersten Reifungsteilung 
aber nebeneinander gelagerten Spalthälften zweier Chromosomen 
auf zwei Spermatiden verteilt. Durch die Tetradenbildung selbst 
war ja diese Verteilung schon vorbereitet worden. Aus dem inter- 
kinetischen Ruhestadium der Präspermatiden geht die Normalzahl 
der Chromosomen in gleicher Anordnung und Verteilung wie in 
den Telophasen der ersten Teilung hervor, an der Identität der 
Gebilde kann wohl kein Zweifel bestehen. Sehr deutlich ist jetzt 
die ungleiche Größe der konjugierten Chromosomen ersichtlich, 
indem die beiden Gebilde, welche nebeneinander liegen und durch 
die Mitose auf zwei verschiedene Hälften verteilt werden, oft sehr 
beträchtlich in ihrer Länge differieren. 

‘ Wie schon öfters betont wurde hat eben bei der Tetraden- 


bildung eine Konjugation ungleicher Chromosomen stattgefunden 


und, wenn wir in der Größe einen gewissen Ausdruck der im Chromo- 
soma enthaltenen Erbanlagen erblicken dürfen — ob wir dazu 
berechtigt sind oder nicht läßt sich nicht entscheiden —, dann 
dürfen wir auch schließen, daß die beiden konjugierten Chromosomen 
heterologe Gebilde sind. Diese Beobachtung steht im Gegensatz 
zu den an einigen anderen Objekten erhobenen Befunden, wo stets 
nur eine Konjugation gleich langer, also wahrscheinlich homologer 
Chromosomen stattfindet. Die Parallelkonjugation setzt ja eine 
solche gleiche Größe der vereinigten Chromatinfäden ohne weiteres 
voraus. Unter anderen vertritt auch Rabl (1915) auf Grund 
seiner Untersuchung an Ascaris megalocephala bivalens, die im 
übrigen mit dem hier Mitgeteilten vollkommen übereinstimmen, 
die Ansicht, daß jeweils gleichlange Chromosomen endweise kon- 
jugieren, was allerdings wundernehmen muß, da er kurz vorher 
auseinandersetzt, daß meist ein Chromosoma sich vor allen übrigen 
durch ganz besondere Länge auszeichnet. Rab1 beschreibt zuerst 


292 H. Stieve: 


eine Art von Parallelkonjugation, während derer ein Austausch 
von Erbsubstanzen statthaben soll. Sie findet ganz im Anfang 
der Eireifung statt und führt zur Bilaung einer Synapsis-ähn- 
lichen Zellform, aus der nach ganz kurzem Bestehen wieder 
die Chromosomennormalzahl hervorgeht. Meine Zweifel, ob es 
sich dabei um normale oder pathologische Bilder handelt, habe 
ich schon oben geäußert. Die 4 Chromosomen spalten sich dann 
nach Auflösung der Parallelkonjugation der Länge nach und 
bilden durch endweise Aneinanderlagerung typische Stäbchen- 
tetraden, deren Einzelelemente dann auf die 4 Spermatiden verteilt 
werden. Dabei nimmt Rabl| an, daß durch die zweite Reifungs- 
teilung die väterlichen und mütterlichen Chromosomen getrennt 
werden, ebenso die väterlichen und mütterlichen Plasmaeinschlüsse, 
so daß sich nur rein weibliche und rein männliche Spermatozoen, 
rein weibliche und rein männliche Eier bilden. Er rechnet dann 
mit der Möglichkeit, daß die männlichen Eier nur von männlichen 
Spermatozoen, die weiblichen dagegen nur von weiblichen be- 
fruchtet werden können und versucht auf diese Weise die Ent- 
stehung der Geschlechter zu erklären. Seine Annabme hat aller- 
dings nur sehr wenig Wahrscheinlichkeit für sich, denn wie sollte 
bei einer derartig scharfen Trennung der elterlichen Eigenschaften 
nach Geschlechtern in den Keimzellen der F I-Generation die 


Uebertragung väterlicher Eigenschaften auf weibliche Individuen - 


der F II-Generation und umgekehrt erklärt werden? Allerdings 
weist ja RabI besonders darauf hin, wie ja auch in erster Linie 
die Untersuchungen von Held (1915) beweisen, daß die Ver- 
erbung nicht ausschließlich durch den Kern, sondern auch teilweise 
durch das Protoplasma stattfindet, wenn es aber wirklich zur Bil- 
dung rein männlicher und rein weiblicher Geschlechtszellen kommt, 
wie dies der Rablschen Anschauung entspricht und aus seinem 
Schema deutlich genug hervorgeht, dann sind in diesen auch nur 
gleichgeschlechtliche Protoplasmateile vorhanden. Im anderen Falle, 
wenn die geschlechtliche Verteilung nur auf die Chromosomen zu- 
träfe, wären die Keimzellen doch nur ‚‚zwitterige Gebilde‘ und 
auch eine Verteilung der Chromosomen nach Geschlechtern wäre 
dann überflüssig. 

Nehmen wir nun den einfachsten Fall dr Mendelschen 
Vererbung an, z. B. den von Lang mitgeteilten, daß ein ge- 
bändertes Schneckenmännchen mit einem einfarbigen Weibchen 


R 
Ki u 
y 

2 
® 
5 
E 
ei) 
u 
% 


24 us 


Dis Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 293 


gepaart wird, dann bilden sich in den Keimdrüsen der F I-Generation 
männliche Eier und männliche Samenzellen, welche alle den Faktor 
gebändert enthalten müssen, da er ja vom Männchen stammt, 
und weibliche Eier und weibliche Samenzellen, welche andererseits 
durchwegs den Faktor einfarbig enthalten müssen, da er eben vom 
Weibchen abstammt. Da nun die männlichen Eier nur von männ- 
lichen Samenfäden befruchtet werden und nur zur Bildung männ- 
licher Individuen führen können und umgekehrt, so müßten in 
der F II-Generation alle Männchen gebändert, alle Weibchen aber 
einfarbig sein. Wenn dann, wie dies der Wahrscheinlichkeitsrech- 
nung und den Tatsachen entspricht, Männchen und Weibchen in 
gleicher Anzahl vorhanden sind, dann wären nur rezessive gebänderte 
Männchen und dominante einfarbige Weibchen vorhanden. Dies 
entspricht jedoch nicht den Tatsachen, denn ganz abgesehen davon, 
daß das Zahlenverhältnis in der F II-Generation für die beiden Eigen- 
schaften 1:3 und nicht 1 :-1 ist, findet bei keiner der beiden Eigen- 
schaften eine geschlechtsbegrenzte Vererbung statt. Die Rabl- 
sche Anschauung setzt aber unbedingt eine solche Vererbung voraus 
oder sie muß, wie schon dieses einfache Beispiel beweist, ihre Zuflucht 
zu Hilfshypothesen nehmen, nämlich zur Synapsis, in der der Aus- 
tausch väterlicher und mütterlicher Substanzen erfolgt. Sobald 
aber ein solcher stattgefunden hat, können -die Chromosomen und 
mit ihnen auch die sie enthaltenden Geschlechtszellen nicht mehr 
als rein männlich oder weiblich bezeichnet werden. Alle diese Er- 
örterungen führen jedoch zu sehr ins Reich der reinen Spekulationen 
und entbehren größtenteils noch der sicherern morphologischen 
Grundlagen, weshalb ich hier nicht mehr näher auf sie eingehen will. 

Beim Eintritt in die Aequatorialplatte der zweiten Reifungs- 
teilung zeigen die Dyaden insoferne eine gewisse Verschiedenheit 
des Aussehens, als die längeren unter ihnen nebeneinander, die 
kürzeren aber hintereinander liegen. Allerdings läßt sich das letztere 
Verhalten -in vielen Fällen nur schwer beweisen, nämlich dann, 
wenn beide Dyadenhälften fast punktförmige Gebilde darstellen. 
Eines der beiden Chromosomen zeigt ja bei der Hintereinander- 
lagerung stets kugelfürmige oder wenigstens fast kugelförmige 
Gestalt. Besitzt eine der Hälften Hufeisenform, dann lagert die 
andere stets gegenüber der Konvexität der Krümmung; insofern 
läßt sich also in dem gegenseitigen Lageverhältnis der Chromosomen 


‚eine Gesetzmäßigkeit erkennen, die jedoch kaum von höherer theo- 


294 H. Stieve: 


retischer Bedeutung sein kann, sondern wohl mehr durch äußere 
Momente bedingt ist, indem sie die möglichst leichte und sichere Ver- 
teilung auf die Spermatiden gewährleistet. 

Bei der Verteilung selbst waltet offenbar noch eine andere 
Gesetzmäßigkeit, deren Ursachen ich jedoch gleichfalls nicht er- 
gründen konnte. Da nämlich jede Dyade mit ganz geringen Aus- 
nahmen aus 2 an Größe oft sehr verschiedenen Chromosomen be- 
steht, so könnte, falls die Verteilung auf die Tochterzellen voll- 
kommen regellos erfolgt, der Fall eintreten, daß sich in der einen 
Spermatide alle großen, in der anderen alle kleinen Chromosomen 
vereinigen. Dies tritt jedoch niemals ein, denn wenn sich auch in 
den Chromatinmassen je zweier aus einer Mutterzelle hervorge- 
gangenen Spermatiden gewisse Unterschiede erkennen lassen, sie 
müssen ja auftreten, denn es sind z. B. in jeder Spermatide 3 U- 
förmig gebogene Stäbchen vorhanden, von denen 2 auf die eine, 
1 auf die andere Tochterzelle gelangt, so ist doch die Gesamtchroma- 
tinmenge in allen Spermatiden gleich oder wenigstens fast gleich, 
zum mindesten legt die gleiche Kerngröße eine solche Annahme 
sehr nahe. Denn es ist nicht wahrscheinlich, obwohl es schließlich 
auch denkbar wäre, daß eine anfänglich vorhandene Verschieden- 
heit in der Menge der chromatischen Substanz durch entsprechendes 
ungleiches Wachstum wieder ausgeglichen würde. D:mnach muß 
wohl ein gewisser Plan bei der Verteilung der Chromosomen ob- 
walten, der das Zustandekommen zu großer Unterschiede verhindert. 

In der Telophase rücken die Chromosomen wieder zusammen 
und zwar sehr stark, so daß jeder Tochterkern für kurze Zeit nur 
von einem einzigen verhältnismäßig kleinen Chromatinklumpen 
gebildet wird. Wir haben diese Erscheinung schon in den Spermato- 
gonienteilungen und dann auch in der ersten Reifungsteilung be- 
obachtet, sie nimmt von den großen Spermatogonien bis zu den 
Spermatiden progressiv an Stärke zu. Bei der verhältnismäßig 
sroßen Gleichmäßigkeit der Bilder, welche die verschiedensten 
Fixierungs- und Färbemethoden ergeben, erscheint es nicht wahr- 
scheinlich, daß es sich dabei um ein Kunstprodukt handelt. Ich 
stelle mir vielmehr den Vorgang folgendermaßen vor: In der Telo- 
phase muß ein Augenblick kommen, in dem die Gewalt der Spindel- 
faserti, die bis dahin die Orientierung der Chromosomen bewirkt 
haben, erlischt. Da in diesem Zeitpunkt aber noch kein Kerngerüst, 


keine Lininbrücken vorhanden sind, welche die gegenseitige Lage e 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 205 


der Chromosomen bestimmen, so unterliegen diese für kurze Zeit 
keinem richtenden Einfluß und folgen deshalb dem Zug der Ober- 
flächenattraktion, d. h. sie ballen sich zusammen. Während dieses 
Zeitpunkts bilden sich dann die Lininbrücken, unter deren Zug 


„und Druck das Auseinanderrücken der Chromosomen vor sich geht. 


im Zeitpunkt der Verklumpung lassen sich ja auch keine richtenden 
Spindelfasern mehr nachweisen. Allerdings erklärt diese Annahme 
noch nicht die Tatsache der progressiven Verstärkung der Erschei- 
nung während der Entwicklung. 

Den umgekehrten Vorgang sehen wir ja auch häufig in. der 
Prophase der Teilungen, wo nach dem Verschwinden der Kern- 
membran und dem Zerfall der Lininbrücken gleichfalls eine mehr 
oder weniger starke Zusammenballung der Chromosomen erfolgt, 
bis unter dem Einfluß der sich an ihnen anheftenden Spindeltasern 
ihre neue Orientierung bewirkt wird. Andererseits erkennen wir 
auch während der polaren Orientierung des Knäuels, wo sich zweifel- 
los der richtende Einfluß der Sphäre geltend macht, keincrlei Linin- 
brücken im Kern; mit ihrem Auftreten verschwindet unter dem 
Einfluß ihres Zuges die polare Orientierung wieder. Es scheint 
also ein gewisses Wechseiverhältnis zwischen Lininbrücken und 
Spindelfasern zu bestehen, beide bedingen das Lageverhältnis der 
Chromatinkomplexe und lösen sich in dieser Eigenschatt gegen- 
seitig ab. 

Die Kerne der Spermatiden bilden sich dann wieder in der. 
gewohnten Weise aus und erfahren während dieser Zeit eine nicht 
unbedeutende Größenzunahme auf Kosten ihres Protoplasmaleibes. 


Schlußbemerkungen. 


In kurzen Sätzen lassen sich die Ergebnisse der vorliegenden 
Untersuchungen über die Spermatogenese des Olmes folgender- 
maßen zusammenfassen: 


1. Die großen Spermatogorien befinden sich niemals im Ruhe- 


 stadiun, sondern wachsen stetig langsam weiter. Haben sie ihre 


endgültige Größe erlangt, so teilen sie sich auf indirektem 
Wege oder sie gehen zugrunde. 


2. Direkte Teilungen der Spermatogonien kommen physiologi- 
scherweise nicht vor. 


296 H.,Stiev.e: 


3. Zu Beginn der Geschlechtsperiode teilen sich die Spermato- 
gonien 6- oder 7mal sehr rasch nacheinander, das Endergebnis 
dieser Teilungen sind die Spermatocyten. 

4, In den jungen Spermatocyten bildet sich ein netzähnliches 
Chromatingerüst aus; aus diesem entsteht zu Ende der Wachstums- 
° periode ein kontinuierlicher Knäuel. 

5. Dieser erfährt eine polare Orientierung, während deren 
Ausbildung und Bestehen die Kontinuität des Knäuels gewahrt 
bleibt, es findet auch kein unmittelbar zu beobachtender Austritt 
von Substanzen irgendwelcher Art aus dem Kern in das Plasma 
statt, dagegen erfolgt unter Bildung seitlicher Ausläufer die Abgabe 
von Chromatin in den Kernsaft. 

6. Die polare Orientierung erfolgt unter dem Einfluß der Sphäre, 
durch gegenseitige Lageveränderung der Einzelteile des Fadens 
und durch Konzentration des Chromatins. 

7. Nach dem Abschmelzen der seitlichen Ausläufer und dem 
Verschwinden der polaren Orientierung spaltet sich der Faden der 
Länge nach und teilt sich darauf in die Normalzahl von 18 Einzel- 
chromosomen. 

8. Von den 18 längsgespaltenen Einzelchromosomen konjugieren 
je 2 endweise miteinander, so daß es zur Bildung von 9 Stäbchen- 
tetraden kommt. Die Reduktion erfolgt also nach dem Schema 
_ wobei - und je ein längsgespaltenes Chromosoma darstellt. 

9. Die Kontinuität der Chromosomen wird in den Spermatiden 
nicht unterbrochen, es ist jedoch wegen des zwischengeschobenen 
Spiremstadiums nicht möglich, die Chromosomen der ersten Reifungs- 
teilung unmittelbar auf die Chromosomen der Telophasen der letzten 
Spermatogonienteilungen zurückzuführen. 

10. Die erste Reifungsteilung ist homöotypisch, äquationell. 

ll. In den Präspermatiden kommt es zur Ausbildung eines 
Ruhekernes. 

12. Die zweite Reifungsteilung ist heterotypisch, reduktionell. 


Leipzig, im Februar 1919. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 297 


Erwähnte Arbeiten. 


Arnold, G. 1908. The nucleolus and microchromosomes in the sper- 
matogenesis of hydrophilus piceus. Arch. f. Zellforsch. Bd. 2. 

Derselbe. 1909. The porphase in the ovigenesis and the sperma- 
togenesis of Planaria lactea. O. F.M. (Dendrocoeleum lacteum. Frenst). 
Arch. f. Zellforsch. Bd. 3. 

Baehr, W.B.von. 1908. Ueber die Bildung der Sexualzellen bei Aphi- 
didae. Zool. Anz. Bd. 33. 

Derselbe. 1909. Die Oogenese bei einigen viviparen Aphiden und die 
Spermatogenese von Aphis saliceti. Arch. f. Zellforsch. Bd. 3. 

Benda, C. 1886. Ueber die Spermatogenese der Säugetiere. Arch. 
f. Anat. und Physiol. 

Derselbe. 1893. Zellstrukturen und Zellteilungen des Salamander- 

hodens. Verhandl. d. Anat. Ges. 

Derselbe. 1906 a. Die Spermiogenese der Monotremen. Semon. Zoolo- 
gische Forschungsreisen in Australien und dem Malayischen Archipel 
Bd. 3. 

Derselbe. 1906 b. Die Spermiogenese der Marsupialier. Ebenda. 

Beneden, E., van. 1883. Recherches sur la maturation de l’oeuf 
et la fecondation et la division cellulaire. Gand. 

Blochmann, F. 1886a. Ue”er die Reifung der Eier bei Ameisen und 
Wespen. Festschrift der naturh.-med. Ver. zu Heidelberg zur Feier 
des 500 jährigen Bestehens d. Rupertus-Carola Heidelberg. 

Derselbe. 1886b. Ueber die Eireifung bei Insekten. Biologisches 
Zentralblatt. Bd. 6. 

Bonnevie, K. 1905. Das Verhalten des Chromatins in den Keimzellen 
von Enteroxenos Oestergreni. Anat. Anz. Bd. 26. 

Derselbe. 1906. Untersuchungen über Keimzellen. Beobachtungen 
an den Keimzellen von Enteroxenos Oestergreni. Jenaische Zeitschr. 
f. Naturwissensch. Bd. 41. 

Born, G. 189. Die Reifung des Amphibieneies und die Befruchtung 
unreifer Eier bei Triton taeniatus. Anat. Anz. Bd. 7. 

Derselbe. 1894 Die Struktur des Keimbläschens im Ovarialei von 
Triton taeniatus. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 43. 

Boveri, Th. 1892. Befruchtung. In Merkel und Bonnets Ergebnisse 
der Anatomie und Entwicklungsgeschichte. 

Derselbe. 1883. Zellstudien.' Il. Die Befruchtung und Teilung des 
Eies von Askaris megalocephala. Jena. 

Derselbe.. 1901. Merogonie (G. Delage) und Ephobogenesis (B. Rawitz) 
neue Namen für eine alte Sache. Anat. Anz. Bd. 19. 

Buchner, P. 1909. Das akzessorische Chromosom in Spermatogenese 
und Ovogenese der Orthopteren. Arch. f. Zellforsch. Bd. 3. 

Derselbe. 1910. Ueber die Beziehungen zwischen Centriol und Bu- 
kettstadium. Ebenda Bd. 5. 


ne EG Dana ae nn 1b LEHE Base SEE 


298 H. Stieve 


Derselbe. 1918. Vergleichende Eistudien. I. Die akzessorischen Kerne 
des Hymenoptereneies. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 91. 

Calkins, M.G. 1895. The Spermatogenesis of Lumbricus. Journ. of 
Morph. Bd. 11. 

Carnoy, J. W. et Lebrun, H. 1897—1903. La Cytodierese de 
l’oeuf. La Cellule. 

Champy, Ch. 1913. La Spermatogenese des Batrachiens. Arch. Zool. 
experimentel Bd. 52. 

Della Valle, P. 1907. Osservazioni di tetradi in cellule somatiche. 
Contributo alla conoscensa della tetradi. Atti d. R. Acad. sc. fis. e 
mat. di Napoli Bd. 23. 

Ebner, V.,von. 1871. Untersuchungen über den Bau der Samen- 
kanälchen und die Entwicklung der Spermatozoiden. Pallets Unter- 
suchungen aus dem Institut für Histologie und Physiologie in Graz. 

Derselbe. 1888 Zur Spermatogenese bei den Säugetieren. Arch. f. 
mikr. Anat. Bd. 31. 

Eisen, G. A. 1900 a. Spermatogenesis in Batrachoseps. Biol. Bull. 
Bd. ol: 

Derselbe. 1900 b. Spermatogenesis in Batrachoseps. Journ. of Mor- 
phol. Bd. 17. 

Farmer, B. J. and Moore, J. 1895. On the essential similarities 


Existing between the heterotyp divisions in animals and plants. Anat. 


Anz. Bd. 11. 

Fick, R. 1903. Ueber die Reifung und Befruchtung ur Axolottleies. 
Fescnk‘ f. wiss. Zool. Bd. 16. 

Derselbe. 1905. Betrachtungen über die Chromosomen, ihre Indivi- 
dualität, Reduktion und Vererbung. Arch. f.. Anat. und Entwicklungs- 
gesch. Suppl. 

Derselbe. 1907. Vererbungsfragen, Reduktion und Chromosomen- 
hypothesen, Bastardregeln. Ergebnisse d. Anat. u. Entwicklungsgesch. 
Bd.16, 

Derselbe. 1908. Zur Konjugation der Chromosomen. Arch. f. Zell- 
forsch. Bd. 1. | 

Flemming, W. 1887. Neue Beiträge zur Kenntnis der Zelle. I. Arch. 
f. mikr. Anat. Bd. 29. 

Derselbe. 1888. Die Spermatogenese bei Salamandra maculosa. Ebenda 
Bd. 30. 


Derselbe. 1891. Neue "Beiträge zur Kenntnis der Zelle II. Ebenda 


Bd. 33. 

Derselbe. 1895. Ueber die Wirkung von Chromosmium-Essigsäure 
auf Zellkerne. Ebenda Bd. 45. 

Foot, K. and Strobell, P. Ch. 1902. The Spermatocoa of Allo- 
lobophora foetida. Americ. Journ. Bd. 1. 

Dieselben. 1907. A Study of chromosomes in the spermatogenesis 
of Anasa tristis.. Ibidem Bd. 7. 

Dieselben.. 1913. A Study of chromosomes and chromatin nucleoli 
in Euschistus crassus. Arch. f. Zellforsch. Bd. 9. 


En 


ER RE SERLE 


a a an pe a ER Ne Br a an TEE Tu ARE RER RN ERGEE BE TER SFR End Re ng 
DR ET RER NT HREFNE NER NEN NR REN N 
x SER UA OT W a i f IE UEN E 

ar IT ERRIN. ., , > 


E, 


. Goldschmidt, R. 1902. Untersuchung über die Eireifung, Befruch- 
4 tung und Zellteilung bei Polystomum integerim:m. Zeitschr. f. wiss. 
| Zool. Bd. 71. 

| Derselbe. 1908a. Ist eine parallele Chromosomenkonjugation be- 
wiesen? Arch. f. Zellforsch. Bd. 1. 

Derselbe. 1908 b. Die Chromatinreifung der Geschlechtszellen des 
Zoogonus mirus Lss und der Primärtypus der Reduktion. Ebenda 

Bd. MH. 


Gregoire, V. 1904 La reductiom numerique des chromosomes et 
les cineses de maturation. La Cellule Bd. 21. 

Derselbe. 1905. Les rösultats acquis sur les cineses de maturation 
dans les deux regnes. Ebenda Bd. 22. } 

Derselbe. 1910. Les cineses de maturation dans les deux regnes II. 
L’unite essentielle du processus meiotique. Ebenda Bd. 26. 

Gurwitsch, A. 1911. Untersuchungen über den zeitlichen Faktor 
der Zellteilungen II. Mitteilung über das Wesen und das Vorkommen 
der Determination der Zellteilung. Arch. f. Entw. Mech. Bd. 32. 

’Gutherz, S. 1906. Zur Kenntnis der Heterochromosomen. Arch. ?. 
mikr. Anat. Bd. 60. 

Derselbe. 1911. Ueber den gegenwärtigen Stand der Heterochromo- 
somenforschung. Sitzungsber. d. Ges. naturforsch. Freunde Berlin. 

Haecker, V. 1892. Die Eibildung bei Cycolps und Canthocampus. 
Zool. Jahrb. Bd. 5. 

Derselbe. 1895. Ueber die Selbständigkeit der väterlichen und mütter- 
lichen Kernsubstanz während der Embryonalentwicklung von Cyclops 
brevicornis. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 44. 

Derselbe. 1900. Mitosen im Gefolge amitosenähnlicher Vorgänge. 
Anat. Anz. Bd. 17. ° 

Derselbe. 1908. Ueber die Vierergruppen der Copepoden unter na- 
türlichen und künstlichen Bedingungen. Verhandl. d. Zool. Ges. 

Hartmann, M. 1910. Untersuchungen über Bau und Entwicklung der 
Trichonymphiden (Trichonympha Hertwigi n. sp.). Festschr f. Richard 

Hertwig Bd. I. 

Held, H. 1917. Untersuchungen über den Vorgang der Befruchtung 1. 
5 Der Anteil des Protoplasmas an der Befruchtung von Askaris mega- 
\.  locephala. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 89. 

Heidenhain, M. 1900. Ueber die Zentralkapseln und Pseudochro- 
mosomen in den Samenzellen von Proteus. Anat. Anz. Bd. 18. 
Derselbe. 1907. Plasma und Zelle. In Bardelebens Handbuch der 

Anatomie des Menschen. Jena. 

Henking, H. 1890—1891. Untersuchungen über die ersten Entwick- 
lungsvorgänge in den Eiern der Insekten. I. Pieris. II. Pyrrhocoris 
(Spermatogenese und Oogenese). Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. 49 und 51. 

Hermann, F. 1889. Beiträge zur Histologie des Hodens. Arch. f. 

_  mikr. Anat. Bd. 34. 


tischen Spindel. Ebenda Bd. 37. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 299 


Derselbe. 1891. Beiträge zur Lehre der Entstehung der Karyokine- 


ei 


ö 


an 
5 
| 
| 


Fe U I A 


ET TREE WIN Z F 


Sr ee en ee Dean Yo men hen item 


300 H. Stieve: 


Hertwig, ©. 1890. Vergleich der Ei- und Samenbildung bei Nema- 
toden. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 36. 

Derselbe. 1915. Lehrbuch der Entwicklungsgeschichte des Menschen 
und der Wirbeltiere. 11. Auflage Jena. 

Janssens, F.A. 1901. La Spermatogenese chez le Triton. La Cellule 
Bd. 19. 


Derselbe. 1902. Die Spermatogenese bei den Tritonen nebst einigen 


Bemerkungen über die Analogie zwischen chemischer und physika- 
lischer Tätigkeit in der Zelle. Anat. Anz. Bd. 21. 

Derselbe. 1905. L’evolution des auxocytes mäles du Batrachoseps 
attenuatus. La Cellule Bd. 21. 

Derselbe et Dumez, R. 1903. L’element nucleinien pendant 
les cineses de maturation des spermatocytes chez Batrachoseps attenua- 
tus et Pletodon cinereus. Ebenda Bd. 20. 

Jordan, E. 0. 1912. The spermatogenesis of the Opossum (Didelphys 
virginiana) with special reference to the accessory chromosomes and 
the Chondriosomes. Arch. f. Zellforsch. Bd. 7. 

Jörgensen. 1910. Zur Entwicklungsgeschichte des Eierstockeies von 
Proteus anguineus. Festschr. f. R. Hertwig Bd. I. 

Kammerer, P. 1912. Experimente über Fortpflanzung, Farbe, Augen 
und Körperreduktion bei Proteus anguineus Laur. Arch. f. Entwick- 
lungsmech. Bd. 33. 

Kemnitz, G. von. Eibildung, Eireifung, Samenreifung und Befruchtung 
von Brachycoelium salamandrae (Brachycoelium crassicolle. Rud.). 
Arch. f. Zellforsch. Bd. 10. 

King, H. D. 1907. The spermatogenesis of bufo lentiginosus. Americ. 
Journ. of Anat. Bd. 7. 

Kingsbury, B. F. 1902. The spermatogenesis of Desmognathus 
fuscus. Americ. Journ. of Anat. Bd. 1. 

Kirillow, S. 1912. Die Spermiogenese beim Pferde I. Arch. f. mikr. 
Anat. Bd. 79. 

Korschelt, E. 1895. Ueber Kernteilung, Eireifung und Befruchtung 
bei Ophryotrocha puerilis. Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. 40. 

Derselbe und Heider. 1903-1909. Lehrbuch der vergleichenden 
Entwicklungsgeschichte der wirbellosen Tiere. Jena. 

Kühn, A. 1908. Die Entwicklung der Keimzellen in den parthenoge- 
netischen Generationen der Cladoceren Daphnia pulex De,Geer und 
Polyphemus pediculus De Geer. Arch. f. Zellforsch. Bd. I.. 

Lenhoss&ek, M. von. 1898. Untersuchungen über die Spermato- 
genese. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 51. 

Levy, F. 1914. Studien zur Zeugungslehre III. Kurze Bemerkungen 
über die Chromatinverhältnisse in der Spermatogenese, Ovogenese 
und Befruchtung des Distomum sp. (Distomum turgitum Brandes ?) 
Arch. i. mikr. Anat. Bd. 84. 

Derselbe. 1915. Studien zur Zeugungslehre IV. Ueber die Chromatin- 
verhältnisse in der Spermatocytogenese von Rana esculenta. Ebenda 
Bd. 86. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus), 391 


Lerat;, P. 1905. Les phenomenes de maturation dans l’ovogenese et 
la spermatogenese du Cycolps strenuus. La Cellule Bd. 22. 

Lubosch, W. 1902. Ueber die Nucleolarsubstanz des reifenden Tri- 
toneneies nebst Betrachtungen über das Wesen der Eireifung. Jenaische 
Zeitschr. f. Naturwissensch. 

Derselbe. 1913. Ueber die Eireifung der Metazoen. Ergebnisse der 
Anatomie und Entwicklungsgeschichte Bd. 21. Wiesbaden 1914. 
Mc. Gregor, I. H. 1899. The Spermatogenesis of Amphiuma. Journ. 

of Morph. Bd. 15. 
Marcus, H. 1906. Ei und Samenreife bei Askaris canis. Arch. f. mikr. 


Anat. Bd. 68. 
Derselbe. 1908. Beiträge zur Kenntnis der Gymnophionen. Ebenda 
Bd. 71. 


Mare&chal, J. 1907. Sur l’ovogenese de Selaciens et de quelques 
autres Chordates. La Cellule Bd. 24. 

Matscheck, H. 1909. Zur Kenntnis der Eireifung und Eiablage bei 
Copepoden. Zool. Anz. Bd. 34. 

Derselbe. 1910. Zur Kenntnis der Eireifung und Eiablage bei Cope- 
poden. Arch. f. Zellforsch. Bd. 5. 

Meves, F. 1897. Ueber die Entwicklung‘der männlichen Geschlechts- 
zellen von Salamandra maculosa. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 48. 

Derselbe. 1907. Die Spermatocytenteilungen bei der Honigbiene (Apis 
mellifica) nebst Bemerkungen über Chromatinreduktion. Ebenda Bd. 70. 

Derselbe. 1908. Es gibt keine parallele Konjugation der Chromosomen. 
Arch. f. Zellforsch. Bd. 1. 

Derselbe. 1911. Chromosomenlängen bei Salamandra, nebst Bemer- 
kungen zur Individualitätstheorie der Chromosomen. Arch. f. mikr. 
Anat. Bd. 77. £ 

Derselbe und Duesberg. 1908. Die Spermatocytenteilungen bei 
der Hornisse. Ebenda Bd. 71. 

Montgomery. 1898. The Spermatogenesis up to the formation of 
the spermatid. Zool. Jahrb. Bd. 12. 

Derselbe. 1899. Chromatinreduction in the Hemiptera. Zool. Anz. 
Bd. 22. 

Montgomery, T. H. 1903. The heterotypic maturation mitosis in 
Amphibia and its general significance. Biol. Bull. Bd. 4 (und a.a.0.). 

Nicolas. 1892 a. Les spermatogonies chez la salamandre d’hiver. Contes 
R. de la- Soc. de Biol. Paris. 

Derselbe, 1892b. Les Spheres attractictives et le fusau achroma- 
tique dans le testicule adulte, dans la glande genitale et le rein 
embryonnaire de la salamandre. Ebenda. 

Nußbaum, M. 1906. Ueber den Einfluß der Jahreszeit, des Alters 
und der Ernährung auf die Form der Hoden und Hodenzellen der Ba- 
trachier. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 68. 

Paulmier, F.C. 1898. Chromatinreduction in the Hemiptera. Anat. 
Anz. Bd. 14. 

Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 20 


| 
| 
| 


302 H. Stieve: 


Derselbe. 1899. The spermatogenesis of Anasa tristis. Journ. of Morph. 
Bd. 15. Suppl. 

Platner. 1885. Ueber die Spermatogenese bei den Pulmonaten. Arch. 
f. mikr. Anat. Bd. 25. 

Derselbe. 1889. Beiträge zur Kenntnis der Zelle und ihrer Teilungs- 
erscheinungen. V. Samenbildung und Zellteilung im Hoden der Schmet- 
terlinge. Ebenda Bd. 33. 

Popoff, M. 1908. Ueber das Vorhandensein von Tetradenchromosomen 
in den Leberzellen von Paludina vivipara. Bioi. Zentralblatt Bd. 28 

Rabl, C. 1885. Ueber Zellteilungen. Morph. Jahrb. Bd. 18. 

Derselbe. 1915. Eduard var Beneden und der gegenwärtige Stand 
der wichtigsten von ihm behandelten Probleme. Arch. f. mikr. Anat. 
Bd. 88. 

Rappe&port, T. 1917. Zur Spermatogenese der Süßwasser-Trieladen. 
Arch. f. Zellforsch. Bd. 14. 

Rath, O. von. 1892. Zur Kenntnis der Spermatogenese von Grylio- 
talpa vulgaris. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 40. 

Derselbe. 1893. Beiträge zur Kenntnis der Spermatogenese von Sa- 
lamandra maculata. Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. 57. 

Derselbe. 1895. Neue Beiträge zur Frage der Chromatinreduktion in 
der Samen- und Eireife. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 46. 

Rawitz. 1895a. Centrosoma und Attraktionssphäre in der runenden 
Zelle des Salamanderhodens. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 44. 

Derselbe. 1895b. Ueber den Einfluß der Osmiumsäure auf’ die Er- 
haltung der Kernstrukturen. Anat. Anz. Bd. 10. 

R egau d, Cl. 1899. Sur la morphologie de la cellule de sertoli et sur 
son rüle dans la Spermatogenese des Mammiferes. C. R. Ass. d. Anat. 
Paris. a. a0. 

Derselbe. 1901. Etudes sur la strukture des tubes s&miniferes et sur 
la spermatogenese chez les Mammiferes. Arch. d’Anat. micr. Bd. 4. 

Rückert, J. 1892. Zur Entwicklungsgeschichte des Ovarialeies bei 
Selachiern. Anat. Anz. Bd. 7. 

Derselbe. 1893. Zur Eireifung bei Copepoden. Anat. Hefte Bd. 4. 

Derselbe. 1894. Die Chromatinreduktion bei der Reifung der Sexual- 
zellen. Ergeb. d. Anat. u. Entwicklungsgesch. Bd. 3. 

Derselbe. 1896. Nochmals zur Reduktionsfrage. Arch. f. mikr. Anat. 
Bd. 47. 

Schiller, J. 1908. Ueber künstliche Hervorrufung von Vierergruppen 
bei Cyklöps. Zool. Anz. Bd. 32. 

Derselbe. 1909. Ueber künstliche Erzeugung ‚‚primitiver‘‘ Kerntei- 
lungsformen bei Cyklops. Arch. f. Entwicklungsmech. Bd. 27. 
Schleip, W. 1907. Die Samenreifung bei den Planarien. Zool. Jahrb. 

Bd. 24. 

Schmidt, V. 1904. Studien über Ovogenese I. Die Wachstumsperiode 
der Eier von Proteus anguineus. Anat. Hefte Bd. 27. 

Schöneberg, K. 1913. Die Samenbildung bei den Enten. Arch. 
f. mikr. Anat. Bd. 83. 


Re as Er 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 303 


Schoenfeld, H. 1900. La Spermatogenese chez le Taureau. Bibl, 
Anat. Bd. 17. 

Derselbe. 1901. La Spermatogenese chez le Taureau. Communication 
preliminaire. Arch. de Biol. Bd. 18. 

Derselbe. 1901. La Spermatogenese chez le Taureau et chez les Mam- 
 miferes en generale. Ibidem. 

Schreibers,C. von. 1801. A Historical and Anatomical description 
of a doubtful Amphibious Animal of Germany called by Laurenti 
Proteus anguinus. Philosophical Transactions of the Royal Society 
of London Part. II. 

Derselbe. 1819. Proteus anguinus. Viennae. 

Derselbe. 1819. Journal de Phys. Bd. 88. 

Schreiner, A. und K. E. 1904. Die Reifungsteilungen bei den Wir- 
beltieren. Anat. Anz. Bd. 24. 

Dieselben. 1905. Ueber die Entwicklung der männlichen Geschlechts- 
zellen von Myxine glutinosa. Arch. de Biol. Bd. 21. 

Dieselben. 1906 a. Neue Studien über die Chromatinreifungen der Ge- 
schlechtszellen. II. Die Reifung der männlichen Geschlechtszellen von 
Salamandra maculosa (Laur), Spinax niger (Borap) und Myxine glu- 
tinosa (L). Arch. de Biol. Bd. 22. 

Dieselben. 1906b. Entwicklung der männlichen Geschlechtszellen 
von Myxine glutinosa. Arch. f. Zellforsch. Bd. 1. 

Dieselben. 1906c. Die Chromatinreifung der Geschlechtszellen. Die 
Reifung der Geschlechtszellen von Ophryotrocha puerilis. Arch. de 
Biol. Bd. 22. 

Dieselben. 1906d. Neue Studien usw. III. Die Reifung der Geschlechts- 
zellen von Ophryotrocha puerilis.- Anat. Anz. Bd. 29. 

Dieselben. 1906e. Neue Studien über die Chromatinreifung der Ge- 
schlechtszellen. I. Die Reifung der männlichen Geschlechtszellen von To- 
mopteris Onisciformis. Arch. de Biol. Bd. 22. 

Dieselben. 1907. Neue Studien usw. IV. Die Reifung der Geschlechts- 
zellen von Enteroxenos Oestergreni Bonn. Vid selsk Skr. 

Dieselben. 1908a. Gibt es eine parallele Konjugation der Chromo- 
somen? Vid. selsk. Skr. 

Dieselben. 1908b. Zur Spermienbildung der Myxinoiden. (Ueber die 
Entwicklung der männlichen Geschlechtszellen von Mxyine gluti- 
nosa). Arch. f. Zellforsch. Bd. 1. 

Starke, J. 1895. Ueber Fettgranula und eine neue Eigenschaft des 
Osmium tetraoxydes. Du Bois-Reymonds. Arch. f. Physiol. 

Stevens. 1905. Studies in Spermatogenesis. I. With a special reference 
to the ‚„Accessory chromosome‘“. Carnegie Inst. Publ. u. a. a. O. 

Stieve, H. 1913. Zur Oogenese des Haushuhnes. Sitzungsberichte 
der Ges. f. Morphol. u. Physiol. München. 

Derselbe. 1918a. Ueber experimentell, durch veränderte äußere Be- 
dingungen hervorgerufene Rückbildungsvorgänge am Eierstock des 
Haushuhnes (Gallus domesticus). Arch. f. Entwicklungsmech. Bd. 44. 


ee ET N SE EEE ST RT N ER da Sa 
ANunREE a Eee nee nk DEE a ac 
\ x iv 


304 H. Stieve: 


Derselbe. 1918 b. Die Spermatogenese des Grottenolmes. Anat. Anz. 
Baal. 

Derselbe. 1918 c. Die Entwicklung der Eierstockeies der Dohle (Co- 
laeus monedula). Ein Beitrag zur Frage nach den physiologischer- 
weise im Ovar stattfindenden Riückbildungsvorgängen. Arch. f, 
mikr. Anat. Bd. 92. 

Derselbe. 1919. Anatomische Untersuchungen über die Fortpflanzung 
des Grottenolmes (Proteus anguineus Laur.). Anat. Hefte Bd. 56. 

Strasburger. 1900. Ueber Reduktionsteilung, Spindelbildung, Zen- 
trosomen und Cilienbildung im Pflanzenreich. Jena. 

Tretjakoff, D. 1904. Die Spermatogenese bei Askaris megaloce- 
phala. Arch. f. mikr. Anat. Bd. 55. 

Vejdowsky. 1907. Neue Untersuchungen über die Reifung und Be- 
fruchtung. Prag. 

Derselbe. 1912. Zum Problem der Vererbungsträger. Prag. (Kgl. 
Böhm. Gesellsch. der Wissensch.) 

Waldeyer, W. 1906. Die Geschlechtszellen. In Oskar Hertwigs Hand- 
buch der Entwicklungsgeschichte der Wirbeltiere. 

Wassermann, F. 1913. Die Oogenese von Zoogonus mirus. Lss.‘ 
Arch. f. mikr. Anat. Bd. 83. 

Winiwarter, H., von. 1899. Le corpuscule intermediaire et le 
nombre des chromosomes du lapin. Arch. de Biol. Bd. 16. 7 

Derselbe. 1900. Recherches sur l’ovogenese et l’organogenese de l’ovair 
des mammiferes (Lapin et Homme). Ibidem Bd. 17. 

Derselbeund Sainmont. 1909. Nouvelles Recherches sur l’ovogenese 
et l’organogenese de l’ovaire des Mammiferes (Chat) Chapitre IV. 
Ibidem Bd. 24. 

Dieselben. 1912. Nouvelles recherches etc. (Extrait des Archives de 
Biol. t. 24 1908—09) Liege. 


4 


-. 
oe 


Erklärung der Abbildungen. 


Abb. 1—6 wurden von Frl. Berta Neresheimer in München hergestellt, 
alle übrigen Abbildungen von mir selbst. Die Schnittdicke der den Abbil- 
dungen zugrunde liegenden Präparate betrug, soweit nicht ausdrücklich 
anderes bemerkt, 10 x». 

Vergrößerung Abb. 1—6 Leitz Objektiv 5, Okular 0, Tubuslänge 160 mm, 
Zeichentisch in der Höhe des Objekttisches. 

Abb. 7—125 Vergrößerung Zeiß homogene Immersion 2 mm. Num. 
Apertur. 1,30, Compens. Okular 8, Zeichentisch 4 cm höher als der Objekt- 
tisch. Alle Zeichnungen wurden mit dem Abbeschen Zeichenapparat ent- 


worfen. 


ee er tr 


Tafel VI. 


1. Längsschnitt durch eine Samenampulle während der Vermehrungs- 
periode. In ihrem Inneren mehrere Cysten, zwischen diesen weite Lymph- 


te 


a NEE ao 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 305 


spalten. Alle Spermatogonien einer Cyste im gleichen Stadium der Mitose. 
Im Grunde der Ampulle Restspermatogonien. Granula in den Cysten- 
zellen. Fix. Flemming, Dreifachfärbung nach Flemming. 

2. Querschnitt durch die oberflächlichen Teile einer Ampulle unmittel- 
bar vor der Ausstoßung der Spermatozoen. Weites umgebendes Blutgefäß- 
netz. Spermatozoenbündel in typischer Lagerung zu den Cystenzellen, 
deren Leib von Fadenstrukturen durchsetzt ist. Ampullenzellen ganz 
plattgedrückt. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

3. Querschnitt durch eine Ampulle kurze Zeit nach Ausstoßung der 
Spermatozoen. Cystenzellen deutlich gegen einander abgegrenzt, in ihrem 
Inneren an einzelnen Stellen noch zusammengerollte Spermatozoen. Der 
Leib der Cystenzellen mit Granulis erfüllt, an vereinzelten Stellen zugrunde 
gehende Zellen mit gelb gefärbten Kernleichen. Fix. Subl. Eisessig, Drei- 
fachfärbung nach Fiemming. 

4. Querschnitt durch eine Ampulle längere Zeit nach Ausstoßung der 
Spermatozoen. Cystenzellen wie bei Abbildung 3, ihr Protoplasma zum 
Teil vakuolisiert. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

5. Querschnitt durch eine Samenampulie kurze Zeit nach Ausstoßung 


‚der Spermatozoen. Die Cystenzellen mit osmierten Granulis mehr oder 


weniger stark gefüllt, auch in den Ampullenzellen zahlreiche Granula. Einige 
Kerne der Cystenzellen in fettiger Degernation begriffen. Fix. Flemming, 
Dreifachfärbung nach Flemming. 

6. Querschnitt durch eine Ampulle längere Zeit nach Ausstoßung der 
Spermatozoen. Alle Cystenzellen mit osmierten Granulis vollgepfropft, 
so daß keine Einzelheiten mehr zu erkennen sind. In den Amput'lenzelles 
nur spärliche osmierte Granula. Fix. Flemming, Dreifachfärbung nach 
Flemming. 


Tafel VI. 


7. Einzeln in den Lücken des Bindegewebes liegende Zelle, sehr schmaler 
Protoplasmaleib, . feines Chromatingerüst. Fix. Subl. Eisessig, Dreifach 
färbung nach Flemming. 

8. Einzelliegende Zelle mit sehr chromatinreichem Kern, großem Piro- 


- toplasmaleib, halbmondförmiger Sphäre und deutlich erkennbarem Cen- 


triol. Fix. Subl. Eisessig. Hämatoxylin Heidenhain. 

9. Gruppe von Spermatogonien oder indifferenten Zellen. Zellgrenzen 
nicht deutlich erkennbar. Fix. Subl. Eisessig. Hämatoxylin Heidenhain. 

10. Große Spermatogonien, Centriol deutlich erkennbar, Zone nicht 
darstellbar. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

ll. Große Spermatogonie aus einem Ruhehoden mit echten Nukleolen. 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Ehrlich-Biondi-Haidenhein. 

12. Restspermatogonie aus einem Hoden im Höhepunkt der Geschlechts- 
tätigkeit. Im sehr chromatinreichen Kern ein Chromatinnucleolus. Fix. 
Subl. Eisessig. Haematoxylin Heidenhain. 

13. Große Spermatogonie eines Ruhehodens mit auffallend großem 
Protoplasmaleib. Fix. Subl. Eisessig. Safranin-Lichtgrün. 


= = NEN BEE SE n ROTE ET Rn 


Ba 


r- 


306 "I Stier le: 


14. Große Spermatogonie in einem Ruhehoden 1, mm von der Ober- 
fläche des Organes entfernt gelegen. Kern von osmierten Gerinnseln aus- 
gefüllt. Nur einige größere Chromatinbrocken erkennbar. Fix. Flemming, 
Dreifachfärbung nach Flemming. ö 

15. Große Spermatogonie aus dem nämlichen Hoden wie 14, I mm von 
der Oberfläche des Organes entfernt. Beginn der Spirembildung, 2 große 

“ Chromatinklumpen. Fix. Flemming, Dreifachfärbung nach Flemming, 

16. Große Spermatogonie aus einem Ruhehoden, Verteilung des Chro- 
matins auf das Kerngerüst, das als Folge der Osmiumsäurewirkung etwas 
undeutlich erscheint. Fix. Flemming, Dreifachfärbung nach Flemming. 


17—38. Spermatogonien. 
17—30. Große Spermatogonien. 


17. Weitere Bildung des Spirems, Chromatinvermehrung, Verschwin- 
den des Liningerüstes. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flem- 
ming. i 

18. Ausgebildetes Spirem, das Liningerüst des Kernes nicht erkennbar. 
Die körnige Zone legt sich dem Kern halbmondförmig an. Centrio! nicht 
dargestellt. Die Zelle liegt gut | mm von der Oberfiäche des Organes 
entfernt. Fix. Flemming, Hämatoxylin Heidenhain. 

19. Ausgebildetes Monospirem, die Zelle liegt unmittelbar unter der 
Oberfläche des Hodens. Der sehr lange Faden erscheint äußerst dünn, 
sonst keinerlei Kernstruktur erkennbar. Die Zelle entstammt dem nämlichcen 
Hoden wie die in Abbildung 20 und 21 wiedergegebenen. Fix. Flemming 
Hämatoxylin Heidenhain. 

20. Monospirem, nur der Kern ausgezeichnet, Größe des Protoplasma- 
leibes angedeutet. Der Faden scheint aus einzelnen, quergestellien Stäb- 
chen oder Scheiben zu bestehen (Folge der Fixierung?). Fix. Carnoy, 
Hämatoxylin Heidenhain. 

21. Monospirem. Der Faden zeigt eine gewisse Orientierung gegen 
das Polfeld zu. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

22. Zerfall des Spirem in 18 einzelne Chromosomen. Im Plasma Strah- 
lung angedeutet, Centriolnicht dargestellt. (Rekonstruiert aus 2 Schnitten.) 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

23. Zerfall des Spirems in die Chromosomen. Aus 3 Schnitten rekon- 
struiert und etwas schematisiert. Fix. Flemming, Safranin. 

24. Verteilung der Chromosomen in der ganzen Zelle, Kernmembran 
zerfallen, Chromosomenzahl 18, Centriol nicht gezeichnet, Stiahlenfigur 
angedeutet. (Rekonstruiert aus 3 Schnitten.) Fix. Subl. Eisessig, Drei- 
fachfärbung nach Flemming. 


Tafel VIH. 


25. Prophase der Teilung, Zusammenziehung der Chromosomen, Centriol 
und Strahlenfigur deutlich erkennbar. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin 
Heidenhain. 

26. Spindel in der Seitenansicht, Längsspalt der Chromosomen deutlich 
erkennbar. Fix. Subl. konzentriert, Dreifachfärbung nach Flemming, 


Zee 


FE re ee 


r>t] 


a 


urn 


=: 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus) 307 


27. Aequatorialplatte in der Seitenansicht, die beiden Spalthälften der 
Chromosomen voneinander abgerückt. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin 
Heidenhain. 

28. Aequatorialplatte in Polansicht aus dem noch ruhenden Teil eines 
Hodens zu Beginn der Fortpflanzungszeit, 36 Chromosomen, rekonstruiert 
aus 2 Schnitten. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

29, Aequatorialplatte in Polansicht, 36 Chromosomen, die sich zum Teil 
gegenseitig überdecken. Rekonstruiert aus 2 Schnitten. Fix. Flemming, 
Hämatoxylin Heidenhain. 

30. Aequatorialplatte in Polansicht. Alle Chromosomen in einem 15 u. 
dicken Schnitt, 36 an der Zahl, zum Teil sich verdeckend. Fix. Flemming, 
Dreifachfärbung nach Flemming. (Die verschiedene Dicke der Chromosomen 
in Abbildung 28, 29 und 30 beruht zum Teil sicherlich auf dem Einfluß der 
verschiedenen Fixierungsmittel.) 

31. Kleine Spermatogonie aus dem nämlichen Hoden wie Abbildung 23. 
Aequatorialpiatte in Polansicht, 36 Chromosomen, rekonstruiert aus 2 
Schnitten. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

32. Kleine Spermatogonie, Aequatorialplatte in Polansicht aus dem 
nämlichen Hoden wie Abbildung 29, rekonstruiert aus 2 Schnitten. Fix. 
Flemming, Hämatoxylin Heidenhain. 

33. Große Spermatogonie eines Ruhehodens in Diakinese, Chromosomen 
locker gelagert. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

34. Tochterstern einer kleinen Spermatogonie in Polansicht vor dem 
Zusammenrücken der Chromosomen. Fix. Flemming, Hämatoxylin Hei- 
denhain. z 

35. Große Spermatogonie, Tochtersterne in Seitenansicht. Zusammen- 
rücken der Chromosomen, Polfeld gut erkennbar. Fix. Subl. Eisessig, Drei- 
fachfärbung nach Flemming. 

36. Große Spermatogonie, Tochterstern in Polansicht, starkes Zu- 
sammenrücken der Chromosomen. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung 
nach Flemming. 

37. Auflockerung der Chromosomen, zentrale Lagerung des Kernes, 
Abschnürung der Tochterzellen, Zwischenkörperbildung. Fix. Subl. Eis- 
essig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

38. Ausbildung der Tochterkerne, Verteilung des Chromatins auf die 
Lininfäden. Fix. Carnoy, Hämatoxylin Heidenhain. 


Tafel IX. 


39. Jüngste Spermatocyte, Chromatin in dicken Balken gelagert, Chro- 
matinnucleolus. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 


40—68. Spermatocyten. 


40. Jüngste Spermatocyte wie Abb. 39. Fix. Subl. Eisessig, Dreifach- 
färbung nach Flemming. 

41. Etwas ältere Spermatocyte aus den tiefen Schichten des Hodens. 
Fix. Flemming, Safranin Lichtgrün. 


\r DD Zelte 2 REN [4 a REN 

s EUR, Ki NR er “ 
308 HStieye: 3 
Fr 
42. Feines, chromatisches Netzwerk, Chromatinnucleolus. Fix. Subl. y 


Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. | 
43. Spermatocyte gegen Ende der Wachstumsperiode, zeigt den näm- 
ichen Bau wie Abbildung 42. Chromatin läßt anscheinend netzigen Bau 
erkennen, das ganze Kerngerüst besteht ausschließlich aus Basichromatin, 
ein chromatischer Nucleolus, keine Lininfäden. Fix. Subl. Eisessig, Sa- 
| franin Lichtgrün. 
a 44. Spermatocyte nach Beendigung der Wachstumsperiode mit schöner 
Ausbildung des dünnen, richtungslosen Knäuels. Großer Chromatinnu- 
cleolus. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 
45. Wie 44. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 


46. Dünner, richtungsioser Knäuel, zeigt sehr deutlich die Zusammen- 
R setzung des Fadens aus einzelnen Körnern. Fix. Subl. Eisessig, Dreifach- 
färbung nach Flemming. 

47. Beginn der polaren Orientierung. Ein basichromatischer Nückoh‘ 
Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 
ei 48. Fortschreitende Orientierung des Fadens. Die Grenze zwischen 

orientiertem und nicht orientiertem Kernteil kommt sehr deutlich zur Gel- 
tung. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 
49. Fortschreitende Orientierung, zeigt deutlich den Unterschied im 
Bau des Fadens im orientierten und nicht orientierten Teil des Kernes. 
Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 
50. Vollendete polare Orientierung. Der ganze Faden besteht aus 
kleinen quergestellten Stäbchen. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Hei- 
\ denhain. 
51. Polargerichteter Knäuel zeigt besonders schön die verschiedene 
Länge der einzelnen Schlingen. Fix. Subl. Eisessig, Be Hei- 
Rt HM. denhain. 
52. Polargerichteter Knäuel von der Gegenpolseite aus gesehen. Die po- 
1 lare Orientierung kommt hier nicht zur Geltung. Beginn der Ausbildung 
der seitlichen Ausläufer. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 
53. Polargerichteter Knäuel, 5. dicker Schnitt, läßt deutlich die Kon- 
tinuität des Fadens erkennen. Plasmaleib nur angedeutet. Fix. Subl. 
" Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

54. Wie 53 5. dicker Schnitt. Fix. Flemming (tiefste Schicht), Hä- 
matoxylin Heidenhain. RE 

55. Polargerichteter Knäuel, Schnitt durch die Polseite des Kernes, 
senkrecht zur Verlaufsrichtung der Fadenturen. 36 Fadenquerschnitte. 
Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

56. Polargerichteter Knäuel, läßt sehr deutlich die Kontinuität des 
Fadens und seine Zusammensetzung aus einzelnen quergestellten StaDEnen 
erkennen. Fix. Subl. Eisessig, Haematoxylin Heidenhain. 

57. Bildung der seitlichen Ausläufer. Die zentrale Verdickung der 
Stäbchen ist deutlich zu -erkennen. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin 
Heidenhain. 


A a 
ER 0 Seele. 
el a En 


u Dry Ziel ka 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 309 


58. Stärkste Ausbildung der seitlichen Ausläufer, perischnurartiger 


Bau des noch vollkommen polar orientierten Fadens. Fix. Subl. Eisessig, 


Hämatoxylin Heidenhain. 

59. Dicker, richtungsloser Knäuel, die seitlichen Ausläufer abgeschmolzen, 
Orientierung nicht mehr zu erkennen, perlschnurartiger Bau des Fadens, 
deutliche Lininbrücken. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 


' Tafel X. 


60. Längsspaltung des Fadens und Zerfall in einzelne Chromosomen. 
Die Lininbrücken nicht deutlich dargestellt. Fix. Flemming stark, tiefste 
Schicht des Hodens, Hämatoxylin Heidenhain. 

61. Konzentration des Chromatins, Verkürzung und Verdickung der 
Chromosomen. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 


62. Spermatocyte nach der Teilung des Fadens in einzelne Chromo- 


somen, von denen 18 nachweisbar sind. Lininbrücken schlecht erkennbar. 
Rekonstruiert aus 3 Schnitten. Fix. Flemming, Hämatoxylin Heidenhain. 

63. Stärkere Konzentration des Chromatins. Oberfläche der Chromo- 
somen wohl als Folge der Fixierung rauh. Fix. Flemming, Dreifachfärbung 
nach Flemming. 

64. Stadium wie Abbildung 63, schlecht differenziert. Die parallel- 
liegenden Chromosomenspalthälften zum Teil durch Farbniederschläge ver- 
bunden, so daß unklare Bilder entstehen. Fix. Subl. Eisessig, Haematoxylin 
Heidenhain. 3 

65. 18 einzelliegende, längsgespaltene Chromosomen, die zum Teil deut- 
lich ihre paarweise Zusammengehörigkeit erkennen lassen. Rekonstruiert 
aus 3 Schnitten. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

66. 18 einzelliegende, längsgespaltene Chromosomen. Rekonstruiert aus 
3 Schnitten. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

67. Vollendete Konjugation der Chromosomen, 9 ausgebildete Vierer- 
gruppen, nur bei einer von ihnen ist der Querspalt noch zu erkennen (rechts 
oben). Mehrere erscheinen an der Vereinigungsstelle winkelig geknickt. Rekon- 
struiert aus 3 Schnitten. Fix. Flemming, Dreifachfärbung nach Flemming. 

"68. Kern unmittelbar vor der ersten Reifungsteilung. Rekonstruiert 
aus 2 Schnitten, nur der oberste Schnitt ausgezeichnet, die in ihm enthaltenen 


- Chromosomen verdecken die anderen zum Teil. 10 Chromatingebilde, die 


2 kleinen unten in der Zelle gelegenen gehören offenbar zu einer Tetrade. 
Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

69. Spermatocyte ‘unmittelbar nach dem Verschwinden der Kern- 
membran, ein Teil der Tetraden in der Mitte der Zelle zusammengerückt. 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

70. Prophase der ersten Reifungsteilung, gleich nach dem Verschwinden 
der Kernmembran, läßt besonders schön die winkelige Knickung der Te- 


_ traden an der Vereinigungsstelle der Chromosomen erkennen. Fix. Flemming, 


oberflächlichste Schicht. Dreifachfärbung nach Flemming. 

71. Prophase der ersten Reifungsteilung, winkelige Knickung der Te- 
£raden, Centriolen auseinanderrückend, deutliche Strahlenfigur. Fix. Subl. 
Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

Archiv f. mikr. Anat. Bd. 93. Abt. II. 


ü 2 sg 
u ee a 


% 


S Pr . F. 
A Dr A Te En dur Ar ai. Bm Die en MT ir 7 a u un GW RE > 


u nn 


gun 


310 H. Stieve: 


72. Seitenansicht der Spindel, Einordnung der Vierergruppen im Aequa- 
tor. Unten typische Form der Tetraden, oben hat das Auseinanderrücken 
der Längshälften schon begonnen, hier zeigen die Tetraden schon T-Form. 
Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain, Schnittdicke 15 u. 


73—85. Erste Reifungsteilung. 


73. Aequatorialplatte in der Polansicht. Oberflächlichste Schicht des 
Hodens. Fix. Flemming, Hämatoxylin Heidenhain. 

74. Erste Reifungsteilung vor dem Einrücken aller Tetraden in die 
Aequatorialplatte, Polansicht der Spindel. Rechts winkelig geknickte Te- 
trade. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

75. Aequatorialplatte in Polansicht, läßt den Spalt in den Chromosomen 
„deutlich erkennen. Fix. Carnoy, Hämatoxylin Heidenhain. 

76. Aequatorialplatte in Polansicht. Schnittdicke 51. 25 einzelliegende 
Chromatinklumpen, als Folge der Schnittrichtung, durch die die einzelnen 
Chromosomen mehrmals getroffen sind. Die verbindenden Chromatin- 
brücken liegen in anderen Schnitten. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung 
nach Flemming. Ä 

77. Aequatorialplatte in Polansicht wie Abbildung 76. Fix. Flemming, 
Dreifachfärbung nach Flemming. 


Tafel XI. 


78. Schnitt durch eine Spindel der ersten Reifungsteilung schräg zur 
Symmetrieachse. Ein kleiner Chromatinklumpen liegt noch außerhalb der 
Spindel, sonst sind alle Tetraden schon an die Spindelfasern angeheftet 
und zeigen die typischen Formen. ‚Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung 
nach Flemming. 

79. Spindel in Seitenansicht. Rekonstruiert aus 3 Schnitten, 9 Tetraden. 
Fix. Flemming, tiefe Schicht des Hodens, Hämatoxylin Heidenhain. 

80. Spindel in Seitenansicht. Die sehr starke Schrumpfung der chro- 
matischen Substanz läßt die Zusammensetzung der Tetraden. aus 4 ein- 
zelnen Chromatingebilden besonders deutlich hervortreten. Fix. Flemming, 
oberflächlichste Schicht, Hämatoxylin Heidenhain. 

81. Spindel in Seitenansicht. Die in der Mitte der Zelle liegende Vierer- 
gruppe zeigt Rautenform, zu beiden Seiten T-förmige Tetraden. Fix. Subl. 
Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. { 

82. Diakinese, die Tetraden zeigen Oesenform. Die blaß gezeichneten 
unter ihnen, die in der Mitte gelegen sind, lassen deutlich die ungleiche 
Länge der beiden konjugierten Chromosomen erkennen. Fix. Subl. Eisessig, 
Dreifachfärbung nach Flemming. 

83. Letztes Stadium der Diakenise, nur noch eine Tetrade Ösenförmig, 
im übrigen die Trennung vollzogen, Chromosomen auf die Tochtersterne 
verteilt. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

84. Tochtersternbildung in Seitenansicht. An jedem Pol liegen 18 
einzelne Chromatingebilde, die sich jedoch zum Teil gegenseitig decken. 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 311 


85. Etwas weiter vorgerücktes Stadium der Tochtersternbildung, Chro- 
mosomen liegen locker, an jedem Pol 18 Chromatingebilde paarweise par- 
allel gelagert. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming, 

86. Zusammenrücken der Chromosomen im Tochterstern. Schnitt- 
dicke öy. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

87. Abschnürung der Präspermatiden, Zwischenkörperbildung. Die Chro- 
mosomen rücken in die Mitte der Tochterzellen, noch eng aneinander ge- 
lagert. Fix. Subi. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 


88-100. Präspermatiden. 


88. Auflockerung der Chromosomen, die noch typische Lagerung gegen 
das Polfeld zu zeigen. Zwischenkörper durch Färbung etwas entstellt, 
Centriolen gut erkennbar. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 


89. Stadium, ähnlich wie Abbildung 88, sehr lockere Lagerung der 
Chromosomen, in der oberen Zelle das Centriol erkennbar. Fix. Subl. Eis- 
essig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

90. Vollzogene Abschnürung der Präspermatiden. Beginn der Aus- 
bildung der Kernmembran, Auflockerung der Chromosomen. Fix. Sub!. 
Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

91. Präspermatide im gleichen Stadium wie 90 in Polansicht. 18 Chro- 
mosomen in typischer Lagerung. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Hei- 
denhain. 

92. Präspermatide unmittelbar nach Ausbildung der Kernmembran. 
Chromosomen .deutlich erkennbar, jedoch nicht mehr gut gegeneinander 
abgegrenzt. Centriol gespalten, Zone körnig. Fix. Subl. Eisessig, Häma- 
toxylin Heidenhain. 

93. Beginn der Chromatinverteilung auf die Lininfäden. Chromosomen 
als grobe, längliche Klumpen erkennbar. Centriol gespalten, Zone nicht er- 
kennbar. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

94. Fortschreitende Verteilung des Chromatins, die einzelnen Chro- 
mosomen noch als abgrenzbare Körnerhaufen erkennbar. Fix. Subl. Eis- 
essig, Hämatoxylin Heidenhain. 

95. Vollkommene Ausbildung des Präspermatidenkernes. Die Bezirke 
der einzelnen Chromosomen kaum abgrenzbar, nur in der Mitte des Gesichts- 
feldes deuten einige dichtere Haufen von Chromatinklumpen die Lage 
einzelner Chromosomen an. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach 
Flemming. 

96. Beginn der Concentration des Chromatins auf die Chromosomen. 
Centriolen gespalten, Chromosomen nicht darstellbar. Fix. Subl. Eisessig, 
Hämatoxylin Heidenhain. 


Tafel X. 


97. Fortschreitende Concentration des Chromatins auf die Chromo- 
somen, die nunmehr wieder deutlich als Einzelindividuen zu erkennen 
sind. Deutliche Lininbrücken, Kernmembran beginnt zu schwinden. Fix. 
Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 


312 ’ H. Stieve: 


98. Das Chromatin ist wieder vollkommen auf die Chromosomen con- 
zentriert, ulese zeigen dem namuichen Bau wie vor ihrem Undeutlichwerden. 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

99. Chromosomen in typischer Lagerung mit freien Enden gegen die 
Oberfläche des Kernes zu. Fix. Flemming, oberflächlichste Schicht, Drei- 
fachfärbung nach Flemming. 

100. Verschwinden der Kernmembran, Chromosomen in der ganzen 
Zelle verteilt, deutliche paarweise Anordnung. (Rekonstruiert aus 2 
Schnitten.) Fix. Flemming, oberilächlichste Schicht, Dreifachfärbung 
nach Flemming. (Schema in Textabb. 9, S. 219.) 


101—121. Zweite Reifungsteilung. 

101. Stadium wie Abbildung 94, Chromosomen unter dem Einfluß der: 
Fixierung sehr stark geschrumpft, zeigen deutliche paarweise Zusammen- 
gehörigkeit. (Rekonstruiert aus 2 Schnitten.) Fix. Flemming, oberfläch- 
lichste Schicht, Dreifachfärbung nach Flemming. (Schema Textabb. 10, 
S. 219.) 

102. Präspermatide gleich nach dem Zerfall der Kernmembran, die 
Lininfäden, welche die Chromosomen miteinander verbinden, sind noch er- 
halten. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

103. Verkürzung und Verdickung der Chromosomen (18 an der Zahl), 
Zusammenrücken in der Mitte der Zeile. Fix. Subl.. konzentriert, Hä- 
matoxylin Heidenhain. (Schema in Textabb. 11, S. 221.) 

104. Aequatorialplatte in Polansicht, deutliche paarweise Lagerung 
der 18 Chromosomen. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 
(Schema in Textabb. 12, S. 222.) 

105. Aequatorialplatte in Polansicht, 18 Chromosomen deutlich er- 
kennbar, gegenseitige Lagerung jedoch nicht so klar wie in’ Abbildung 104. 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach er (Schema in Text- 
abD.13,.,9..222.) | 

106. Zusammenrücken der Chromosomen in der Aequatorialplatte, 
durch ihre dichte Lagerung verliert das Zellbild an Uebersichtlichkeit. 
Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

107. Aequatorialplatte in Polansicht, unmittelbar vor der Diakinese. 
Der Spalt, welcher die beiden Chromosomen eines Paares trennt, ist in dieser 
Ansicht nicht zu erkennen, da die beiden Gebilde ieden Paares im Schnitt 
übereinander liegen. Fix. Carnoy, Hämatoxylin Heidenhain. 

108. Spindel in schräger Richtung zur Symmetrieachse geschnitten, 
läßt deutlich die paarweise Lagerung der Chromosomen erkennen. Schnitt- 
dicke 151. Fix. Subl. Eisessig, Safranin. 

109. Spindel in Seitenansicht, 18 Chromosomen zu 9 Paaren vereinigt. 
Lagerung der Chromosomen mit der Längsachse senkrecht zum Verlauf der 
Spindelfasern, nur in der Mitte ein Paar endweise aneinander gelegt, parallel 
zu ihnen. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

110. Beginnende Diakinese, Schnittdicke 5, Chromosomen zum 
Teil zerschnitten, daher ihre Zahl nicht genau feststellbar. Die Trennung 
der Chromosomen im linken Abschnitt der Zelle noch nicht beendet. Fix. 
Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 


ER ae DR AT AN Eh DZ A En 3 ir vr 
BEREITEN BERNER NEE LINE RS An 
TER RE EN aETRE AR ‚ r 

I 5 le h 


Die Entwicklung d. Keimzellen d. Grottenolmes (Proteus anguineus). 313 


111. Vollzogene Diakinese, Zelle schräg getroffen, Teile der am oberen 
Pol liegenden Chromosomen finden sich auf dem nächsten Schnitt. An 
jedem Pol 9 Chromosomen, ganz unten rechts ein hufeisenförmiges. Fix. 
Subl. Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

- 112. Diakinese, die Chromosomen auf alle Abschnitte der Spindel ver- 
teilt. Fix. Flemming, Dreifachfärbung nach Flemming. 

.113. Tochtersterne in Seitenansicht, Schnittdicke 15 u, keine genaue 
Feststellung der Chromosomenzahl möglich, da sich die Einzelgebilde zu 
stark überlagern. Am unteren Pot 9 Chromosomen erkennbar. Fix. Subl. 
Eisessig, Dreifachfärbung nach Flemming. 

114. Tochterstern in Polansicht. Deutlich 9 Chromosomen erkennbar, 
2 davon hufeisenförmig, eines links, sehr klein. Fix. Subl. Eisessig, Dreifach- 
färbung nach Flemming. 

115. Zusammenrücken der Chromosomen in typischer Lagerung. Cen- 
triol deutlich sichtbar. Fix. Subl. Eisessig, Hämatoxylin Heidenhain. 

116. Starkes Zusammenrücken der Chromosomen, Polfeld gut erkennbar. 
Zwischenkörperbildung, Abschnürung der Tochterzellen. Fix. Subl. Eis- 
essig, Hämatoxylin Heidenhain. 

117. Vollzogene Abschnürung der Tochterzellen, Zwischenkörperbil- 
dung, starkes Zusammenrücken der Chromosomen. Fix. Subl. Eisessig, 
Hämatoxylin Heidenhain. 

118. Allerstärkstes Zusammenrücken der, Chromosomen. In. beiden 
Tochterkernen keinerlei Einzelheiten mehr erkennbar. Fix. Subl. Eisessig, 
Hämatoxylin Heidenhain. 


119. Auflockerung der Tochterkerne, die einzelnen Chromosomen wieder 


erkennbar, Auftreten der Lininbrücken. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfär- 
bung nach Flemming. 


120— 125. Spermatiden. 


120. Verteilung des Chromatins auf die Lininfäden. Fix. Subl. Eisessig, 
Dreifachfärbung nach Flemming. i 

121. Etwas weiter in der Ausbildung fortgeschritten als 120, jedoch 
noch keine Kernmembran zu erkennen. Fix. Subl. Eisessig, Dreifach- 
färbung nach Flemming. 

122. Ausbildung der Kernmembran, weitere Verteilung des Chromatins. 
Fix. Subl. Eisessig, Safranin. 

123. Ausbildung der Kernmembran. Fix. Subl. Eisessig, Dreifachfär- 
bung nach Flemming. 

124. Kernvergrößerung, stärkere Verteilung des Chromatins auf die 
Lininfäden, beginnende Nukleolenbildung. Fix. Subl. Eisessig, Dreifach- 
färbung nach Flemming. 

125. Fertige Spermatide am Ende der Spermatocytogenese. Fix. Subl. 
Eisessig, Haematoxylin Heidenhain. 


’ 


De A, 
h 


E Dit 
Me m 7. 


a 


IM. 


Frankhurt 


Taf u 


k 2-5 gez. 


Archiv £ mikroskop. Anatomie Bd. \C/7 Abt.I 


Eingels Aig.1, Schönberg Fig 


Archiv £mikroskop. Änatomie Bd. ACHT Abt. 


BEREER 


A 


Wermere Winter "rankfurr st, 


skop. ZInatomie Ba. VCHT, Abt.I. 


zmukro 


Archiv f. 


‚Winter Frankfurt UT 


Werneru 


RN 
N 
& 
g 

RI 
2 
SZ 


Nad 


f 5 Sad, 


„ 
* 


%” 


Tat. VW. 


Nachtsaeim del 


| 
1 


‚Archiv £mikroskop Anatomie bad. XCH Abt.1l. 


B.Nereshebner ger. 


= 
ö 
23 
2 
7 
[3 
1 
Q 
{rm 
a 
) 
BI 
ce 
3 
= 
© 
c 
x 
3 
> 
ee 
2 
ce 
< 
£ 
= 
= 


RN 


Archiv f. mikroskop. Anatomie. Bd. XCIII Abt. II. 


i K N, | 
H y u 
} navi? ON 


1 
i 


Archiv f. mikroskop. Anatomie. Bd. XCIIT Abt. II. 


K,stieve g8% 


Lith, Anst. v. Werner u. Winter, Frankfurt a. M. 


ENTE 


KALK 
en 


h) 
LBIF urn 
DR F 


’ i Wir sch 


E 
” > W 
Ze 3 
“ 
‘ « i 
f * 
Ya N 
5 “ 
u i* 
r ji 
\ 4 ) 
j ' ’ 
« 5 
‘ 
h 
x Er 
. . .ı 
Hl 
r ” 
. wur 
n 
“ 
Er 
% f 
2 8 
, . 
fl 
Y 
D 
N 
D 
5 
r I 
« 
Mu 
DW 
7 
y r” ! 
“ 
B *- 
. 
” ’ ., 
’ - R 
’ f 
0 
ei 
i { 
‘ 
“ F 
ü 
% 
i 
4 
’ 
r 
eu 
N 
Er A j 
i 
. ’ 
4 N ms} 
ei 
* 
‘ 
» 
» . 
i 
\ 
# 
a » 
D) 1 
Bi 
I 
NA 


Archiv f. mikroskop. Anatomie. Bd. XCIIT Abt. IT. 


H.Stieve gez. Lith. Anst. v. Werner u. Winter, Frankfurt a. M. 


Archiv f. mikroskop. Anatomie. Bd. XCIII Abt. I]. 


H.Stieve JBZ. 


Taf. X. 


Lith. Anst. v. Werner u. Winter, Frankfurt a. M. 


Archiv f. mikroskop. Anatomie. Bd. XCIIT Abt. II. 


Lith. Anst. v. Werner u. Winter, Frankfurt a. M. 


H.Stieve 922 


Archiv f. mikroskop. Anatomie. Bd. XCIIT Abt. II. Taf. XI. 


H.Stieve 022. Lith, Anst. v. Werner u. Winter, Frankfurt a. M. 


ı 


”“ 

I 

x 
bi 


B, 


nr 
BAR 
Pad: 


> MN il 


) WHSE 02673 


wu 
8 
Ns 


“en 


var 
eo 


IR 


* 
e 


ER # 


* 


U: Z 
A “ dm 
ATI “era ee 
U ER EN 6 

& am naeh 


KR 3 


er 


erre 


* 
Yen 


5 FELHEILHEN 
De ae ee ie a “„"ouhn äh 
re 5 Pa’ 
ie wart 
& 


Re ne & 
ns Er tr 


} “ 
ER 
NE 
\ an 
FIT FE 
rt 


% 
re 


DRS 


EBENEN . 
« VE EEE BEREIT N 
AN EEE 
EHEIEHEIENE N 
LICHT % 
eu 
ee 
5" 
; 


#,% 
e „* 4 


” 
+56 

RR 

> 


u 
» en N % 
LOHN 
DK 
5 


x 

..4 

>r 
ws 


“> 

BT 

” “= 

SEE U 
r 
see 


»,% 


y 


ur 


“6 
FR 


er 


.* 
ir 
e 2, 


iR ee 


> 
5 


L> 
‚€ 
5] 


» 
2%, 


. | u 
ELTERN 
x 


+ 
er 
Se 


. 
we 


+ 


y 


46); 


#. 


u 


® ” 

’ . Yo AR 
> 4 J % “no % 
1? “ aa DE } 

e Pas af d K) EEK RR 


”s 


RN 
nF ME » 
RE DEE Di 
DEE e 
RT & 
= 


HN 
ie 


» » 
yoy: 


# 2 at 
I EHE 
on a 
KW EEE 
ER EL 
er . 


* 
Me 


rn 
EcH 


REN 
REICHE HEN 
on 


.. 


- 


+ 


0) 


v