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LA CELLULE

RECUEIL

DE CYTOLOGIE ET D'HISTOLOGIE GÉNÉRALE

FONDli PAR

J. B, CARNOY, PROFRSSKUR UH BOI \NiyL'H Hl TiK BIOLOGIE CBLLULAIRF,

PUBLir. PAR

G. GILSON, PROFKSSKUR lîH ZOOLOr.IK HI' D«MRRVOE.OniE ,

A l' Université catholique de Louvain

TOME XXX

icr FASCICULE

I. La spermatogenèse dans les mammifères. — III. Les spermatocytes

leptotènes et amphitènes dans le Taureau,

par Lucien VAN HOOF.

II. Réseau protoplasmique et chondriosomes dans la genèse des myofibrilles,

par P. GAUDISSART.

III. Microsporidies parasites des larves de Simulium (Thelohania varians),

par le D^ Paul DEBAISIEUX.

IV. Cinèses atypiques dans les cellules adipeuses de larves de Pyrrhocoris

apterus L. avec quelques remarques sur le centrosome,

par J. KOWALSKI.

V. Merocystis kathae Dahin. Une Aggregate de Buccinum undatum.

par Charles FOULON.
VI. Études sur les Microsporidies. — II. Glugea danilewskyi L. Pfr. ;

III. Glugea mùlleri L. Pfr..

par Paul DEBAISIEUX.

VII. Les Microsporidies parasites des larves de Simulium. II.

par Paul DEBAISIEUX et Louis GASTALDI.

*zr±3C : S5 £icst.TX<3S.

LIERRE LOUVAIN

Typ. de JOSKPH van IN & (."'. A. UYSTPRUYST, Libraire,
Grand'place, 38. rue de la Monnaie.

I919

LA SPERMATOGÉNÈSE DANS LES MAMniirÉRES.

III. Les spermatocytes leptotènes

et amphitènes dans le Taureau

PAR

Lucien VAN HOOF,

CANDIDAT EN MÉDECINE.

(Alémoire déposé le 7 mars igi3.)

LA SPEEWATOGÉNÈSE DANS LES MAMMIFÈRES

III. Les spermatocytes leptotènes

et amphitènes dans le Taureau

INTRODUCTION.

Dans son travail sur la spermatogénèse du Taureau, ScHOENFELD(igoi)
a émis une h3'pothèse sur le mécanisme de la réduction basée sur des faits
d'observation tout spéciaux qui n'ont été mentionnés que par lui, nous
voulons parler des granulations quaternes des spermatocytes jeunes. On ne
peut accorder qu une valeur relative aux critiques iormulées par les auteurs
postérieurs à Schoenfeld au sujet de cette idée, attendu que ceux-ci n'ont
jamais fait que comparer aux observations faites chez le Taureau celles
qu'ils avaient recueillies dans d'autres mammifères. Il semblait même c]ue
le Taureau méritât, de par cette étude, une place spéciale en dehors du
schéma spermatogénétique assez général des Mammifères et que son
mécanisme réductionnel revêtît une forme quelque peu aberrante. Porté à
croire cependant qu'une observation minutieuse nous ferait retrouver ici
comme ailleurs un processus dont l'unité est beaucoup plus probable que
la diversité, nous avons entrepris d'en décrire les premières étapes. Mettant
en pratique les idées que nous avons développées ailleurs au sujet de la
technique de fixation et de coloration, nous avons tâché de nous procurer
un matériel à l'abri de tout reproche. De petits morceaux de testicule de
Taureau, prélevés aussitôt après l'abattage, ont été fixés dans diverses
solutions, surtout dans celle de Carnoy. Les préparations ont été colorées
à l'hématoxyline ferrique de Heidenhain. Grâce à ce procédé, les noyaux

1 lo^ S^

8 Lucien VAN HOOF

synaptés sont rares; surtout à la périphérie des coupes les jeunes stades
nous ont paru clairs et détaillés. Nous avons fait l'étude des jeunes sper-
matocytes le plus possible dans un seul et même tube séminifère poursuivi
dans une série ininterrompue de préparations.

Nous essayerons dans cette courte notice de décrire aussi exactement
que possible l'évolution des spermatocytes jeunes, d'apporter un nouvel
argument en faveur de la théorie de laccolement longitudinal des chromo-
somes dans les périodes lepto- et amphitène, que nous avons trouvées très
démonstratives dans les testicules de Taureau bien fixés, et de déterminer
par le fait même la signification exacte des granulations quaternes décrites

par SCHOENFELD.

Ce travail a été exécuté au Laboratoire de Cytologie et de Biologie de
l'Institut Carnoy, Université de Louvain, et sous la direction de Monsieur
le Professeur F. A. Janssens. Nous le prions d'agréer nos remercîments
très sincères pour la bienveillance avec laquelle il a mis ses connaissances
et son expérience à notre service.

§ I. Les petites spermatogonies.

Voulant étudier spécialement le premier développement des spermato-
cytes, nous avons remonté à la spermatogonie de second ordre. Ce qui la
caractérise le mieux, c'est l'existence dans son noyau d'éléments filamenteux
à côté de blocs chromatiques irréguliers et en relation avec eux, fig i et 2.
Elle diffère beaucoup des spermatogonies-mères qui renferment dans
leurs noyaux un ou plusieurs nucléoles bien arrondis et qui n'ont, sauf au
moment des cinèses, aucun élément filamenteux nettement chromatique.

Cinèses des petites spermatogonies. Elles co'ïncident avec la période
pachytène des spermatocytes et suivent de près l'expulsion des spermato-
zoïdes. Elles ressemblent beaucoup aux cinèses des grandes spermatogonies,
mais sont de taille réduite. Nos fig. 3, 4, 5 et 6 représentent l'évolution de
la prophase et l'apparition des chromosomes aux dépens des éléments chro-
matiques peu caractérifés de la spermatogonie. On remarquera dans la
FIG. G la fissuration longitudinale de ces chromosomes au moment de la
métaphase; les éléments de la couronne équatoriale sont disposés, tantôt

LES SPERMATOCYTES LEPTOTENES ET AMPHITENES DANS LE TAUREAU g

par deux, tantôt par trois chromosomes clivés convergeant vers le centre
de la figure.

Remarquons en passant que malgré nos recherches nous n'avons pu
mettre en évidence dans ces spermatogonies les '^cristalloïdes- qui, d après
MoNTGOMERY (iQn), devraient caractériser certaines d'entre elles dans
les tubes séminifères de l'homme. Aux mêmes stades et dans les mêmes
préparations nous les trouvons cependant comme un organite constant du
protoplasme sertolien. A moins que ces cristalloïdes de la cellule de Sertoli
et ceux des spermatogonies ne soient microchimiquement distincts, nous
ne pouvons donc pas accuser notre technique.

Quant au nombre de chromosomes mobilisés dans ces cinèses nous
avons fait des recherches aussi précises que la clarté de ces objets le per-
mettent. Dans des coupes de 20 :-i, où les noyaux peuvent se trouver dans
leur entier, nous avons compté quelquefois 20 ou 22 chromosomes, assez
souvent 22, fig. 6, ou 24, jamais plus de 24. Comme d'autre part, et
d'accord avec Schoenfeld, nous en avons compté 12 dans des couronnes
équatoriales d'hétérotypies, nous croyons que le nombre 24 est très proba-
blement le nombre normal de chromosomes du Taureau.

g II. Les spermatocytes croûtelleux.

Après la cinèse des petites spermatogonies, les chromosomes télopha-
siques se trouvent disposés dans le nouveau noyau d'une manière typique.
Comme le montre la fig. 8, les V simples convergent par leurs pointes vers
le centre du noyau très petit. Alors que ces chromosomes n'ont pas encore
perdu leurs formes, on les retrouve peu après dispersés sans ordre, fig. 9.
A partir de ce moment le noyau subit un accroissement progressif et les
gros filaments chromatiques qui l'occupent se mettent à confluer en se dé-
formant, fig. 10 et 11. Certains endroits des chromosomes s'amincissent,
d'autres au contraire s'épaississent ou se rencontrent avec des voisins. Il en
résulte bientôt des masses chromatiques considérables à côté de quelques
éléments isolés ayant encore le caractère filamenteux, fig. 12 et 13, et de
fines travées à peine perceptibles et qui seraient de la linine. Quand les
derniers vestiges de chromosomes ont disparu au profit des blocs chroma-
tiques, on peut considérer les spermatocytes croûtelleux formés, fig. 14.

Cette évolution rapide, dont nos figures donnent une idée plus claire
que toute description, ne correspond en rien à celle que Schoenfeld ex-

lO Lucien VAN HOOF

pose. Pour lui la masse chromatique télophasique se résoud en petits gra-
nules qui confluent ensuite pour former des scutelles surtout périphériques.
Or. nous n'avons jamais trouvé ces éléments granuleux et, à notre avis, le
terme - scutelles - est peu approprié pour désigner des masses colorables
épaisses dont quelques-unes seulement touchent à la membrane nucléaire.
(Cependant dans les spermatocytes croûtelleux du Rat, les blocs chroma-
tiques s'étalent beaucoup plus sous cette membrane et méritent donc l'ap-
pellation de ^ scutelles ^ [Van Hoof, igii]).

§ III. La période leptotène.

Les noyaux des spermatocytes croûtelleux renferment donc des blocs
irréguliers très chromatiques que nous considérons comme des chromo-
plastes, c/zr, suivant les idées de Janssens (igoS) et une sorte de réseau
achromatique difficile à déchiffrer ('), fig. 14. Très rapidement s'annoncent
les transformations de ce noyau en noyau leptotène et il semble qu'elles
suivent le même processus que celui que nous avons décrit dans le Rat et
signalé dans le Chien (Van Hoof, 1912). La fig. 15 donne une idée de la
première étape de constitution des chromosomes leptotènes. L'appareil
achromatique a fait place à des travées en apparence assez solidaires les
unes des autres et sidérophiles. Les chromoplastes, chi\ ont perdu leurs
contours nets, et font corps commun avec de vrais filaments entortillés
bien colorés et que l'on peut même poursuivre à l'intérieur de leur masse.
Ils semblent aussi se dévider et ils perdent progressivement leur opacité.
L'enchylème nucléaire est chargé d'un peu de chromatine diffuse. Plus
tard, dans un noyau légèrement grandi, ces caractères s'accentuent, fig. 16.
L'enchylème nucléaire est très sombre, et on y distingue, outre de minces
filaments encore assez entortillés, des endroits plus obscurs où les chromo-
somes leptotènes n'ont pas encore pu se dévider complètement et qui sont
les vestiges des blocs chromatiques. Seul persiste un gros nucléole (12)
accolé à la membrane du noyau et très sidérophile.

Il ne faut plus alors que de légères modifications pour que nous ayons
le spermatocyte leptotène typique. L'enchylème nucléaire s'éclaircit et les
chromosomes nouvellement formés, bien qu'ils soient encore très tortueux,

(') Comme nous le répéterons plus loin, ces éléments filamenteux achromatiques sont si in-
constants, leurs variations sont tellement soumises au genre de fixation employé, qu'ils nous semblent
être assez souvent des « Artefacts >> dûs à l'action coagulante des réactifs sur renchylème nucléaire,

LES SPERMATOCYTES LEPTOTENES ET AMPHITENES DANS LE TAUREAU II

se caractérisent avec netteté, fig. 17; en quelques endroits de plus en plus
rares ils sont cependant encore embrouillés et il est difficile de les y pour-
suivre sans les confondre avec leurs voisins. Dans la fig. 18 il ne reste plus
qu'un seul de ces vestiges de chromoplastes et les chromosomes sont plus
épais et plus nets et, de même que dans la fig. 19, on remarquera que les
bouts libres des filaments ont une tendance marquée à s'orienter.

Il se fait ainsi que suivant lincidence du rayon visuel les chromosomes
leptoténiens paraissent disposés, tantôt sans ordre aucun, fig. 20 b, 2i,
tantôt suivant l'aspect caractéristique du bouquet, fig. 19, 20 a. Les
chromosomes ont donc changé progressivement d'aspect. Grêles et tortueux
peu auparavant ils se sont épaissis au fur et à mesure que l'enchylème
s'éclaircissait et que les derniers restes des chromoplastes disparaissaient.
On trouve souvent plusieurs nucléoles disposés sans ordre dans le bouquet
et qui n'en sont pas indépendants : ils sont probablement aussi des vestiges
des blocs chromatiques.

Localisation de cette période.

Le faible accroissement du noyau à cette période et aux suivantes
co'incide avec une grande célérité des transformations chromatiques. Paral-
lèlement à celles-ci l'évolution des spermies se poursuit activement. Dés le
début de cette période paraissent les premiers indices de la fissuration
strepsiténique et 1 idiosome des spermies se différencie et donne naissance
au filament axial. Lorsque le bouquet leptotène est achevé, les spermatides
situées au-dessus de ces noyaux forment un capuchon céphalique, et leurs
manchettes ne commencent à se dessiner que quand l'amphitène se carac-
térise avec évidence.

Se préparant à cette période importante, les anses chromatiques des
noyaux leptoténes viennent se ranger plus ou moins parallèlement les unes
aux autres surtout en un pôle du noyau correspondant aux bouts libres des
anses, fig. 20 a, 24, 25, 26, et même aux courbes des anses éloignées de
ce pôle, fig. 22, 23. Remarquons que dans les fig. 25 et 26 quelques
éléments chromatiques ressemblent à des granulations quaternes et ne sont
autre chose que des parties symétriquement épaissies d'anses leptoténes
accouplées : ce sont là les premiers indices de l'amphitène. On peut aussi
rencontrer des cas exceptionnels où les noyaux leptoténes retardataires
accompagnent des amphitènes nets dans des épithéliums plus âgés. Il faut

12 Lucien VAN HOOF

attribuer cela à des juxtapositions des spires de la bande hélicoïdale qui
forme le tube séminifère d'après les idées de Regaud (igoi). Ce cas indique
l'activité intense du travail spermatogénétique à cette période, puisque la
place occupée par elle peut être inférieure à un tour de spire.

■^^ IV. La période amphitène.

Localisation de cette période.

Elle se caractérise avec évidence au même stade où les capuchons
cépha]ic]ues des spermies se détachent et disparaissent, alors que leurs
têtes sont peu colorées et leurs manchettes distinctes. Associés à ces
éléments on trouve encore des spermatocytes I âgés au début du strepsi-
néma, fig. 37, que l'on peut nettement identifier par la présence d'un corps
chromato'ïde.

Dans les noyaux des jeunes spermatocytes, les fins chromosomes ont
déjà commencé à s'accoler au niveau de leurs bouts libres, fig. 25 et 26.
Il résulte de cette modification des anses multiples et ténues occupant un
pôle du noyau et se terminant toutes au pôle opposé par des appariements
où la soudure n'est pas encore complète.

Graduellement les anses se fusionnent suivant toute leur longueur et
les chromosomes doubles ainsi formés se laccourcissent et s'épaississent.
Nous trouvons donc des dualités chromosomiales évidentes et d'un aspect
tout spécial, fig. 27, 28 et 29. Le long des filaments accouplés apparaissent
des granulations arsez considérables. Ces granulations ou épaississements
sont situés symétriquement de filament à filament. Souvent deux couples
de ces granules se rapprochent suivant la longueur d'une paire de filaments
et donnent l'illusion d'une tétrade, d'un granule quaterne compris dans
cette paire. Cette disposition n'existe qu'à condition que lamphiténe soit
achevé, c'est-à-dire que les chromosomes leptotènes qui, appairés, consti-
tuent l'anse amphitène soient très rapprochés l'un de l'autre, pour qu'une
relation puisse physiquement s'établir entre eux.

Le lecteur constatera que certaines des dualités des fig. 27, 28 et 29
(marquées 1) ne remplissent pas cette condition et que par conséquent leurs
deux moitiés longitudinales ont gardé l'aspect du filament leptotène, ténu
et dépourvu d'épaississements.

LES SPERMATOCYTES LEPTOTÈNES ET AMPHITÈNES DANS LE TAUREAU l3

Lorsque la fixation est bonne, cette structure toute spéciale est bien
évidente, fig. 30. Nous nous trouvons donc en présence, non pas de gra-
nules quadrijumeaux enfilés sur un filament, mais de filaments appairés et
portant symétriquement des épaississements. En outre, les chroirosomes
subissent encore des coudures brusques et nombreuses, et entre les groupe-
ments quaternes les parties intermédiaires du chromosome sont très peu
colorables, fig. 31 et 32. Il se peut ainsi qu'à première vue l'observateur
se croie en présence de tétrades nageant librement dans le noyau. Mais en
faisant varier en profondeur la mise au point du microscope on se rend fa-
cilement compte que les granulations quaternes sont rattachées les unes
aux autres pour former par leur ensemble des filaments très réels. On re-
marquera aussi que les épaississements symétriques ne sont pas toujours
régulièrement rapprochés en tétrades; on trouve fréquemment des groupes
de 2, de 6 et de 8 granules. Il se pourrait que par la formation de ces épais-
sissements la chromatine des tronçons chromosomiaux qui retient l'un gra-
nule quaternc à l'autre ait considérablement dimmué au profit de ces der-
niers. Jamais nous n'avons pu individualiser dans le noyau des granules
quadrijumeaux véritablement isolés en grand nombre, puis enfilés sur un
filament unique, suivant le type décrit par Schoenfeld.

Pendant que dans le voisinage les grandes spermatogonies entrent en
cinèse, cette évolution intéressante de l'amphitène s'achève : les filaments
chromatiques deviennent plus réguliers, la trace de l'accolement, c'est-à-dire
le sillon clair longitudinal, s'atténue, fig, 33 et 34, La disposition générale
des chromosomes en anses orientées persiste avec évidence, fig. 34, et les
bouts libres de ces anses regardent la sphère où se trouvent deux petits
centrioles. Ainsi se constituent les noyaux pachytènes à bouquet bien
orienté qui occupent une grande longueur du tube séminifère, fig. 35 et 36,
et le strepsinéma, fig. 37, ne débutera que lors de l'évolution à la période
leptotène d'une nouvelle génération de spermatocytes.

Discussion des résultats.

Le lecteur aura remarqué que dans la description qui précède, nous
n avons pas signalé la présence de synapsis dans les spermatocytes du Tau-
reau. C'est que, en choisissant avec soin les parties périphériques les
mieux fixées de nos préparations, nous avons pu éviter les aspects coagulés
d'observation difficile et que nous avons jugés artificiels dans un mémoire
précédent CVan Hoof, igia). La zone synaptée, observée dans les parties

14 Lucien VAN HOOF

mal fixées, est assez limitée. D'accord avec Swaen et Masquelin (i885)
et ScHOENFELD (iQOi), nous la situons aux environs et pendant la période
amphitène (noyaux à granules quaternes).

De même que Schoenfeld nous admettons que, après la cinèse des
petites spermatogonies, les jeunes spermatocytes forment des éléments
assez semblables aux spermatogonies croùtelleuses. Mais à partir de là nos
idées différent considérablement. Les spermatocytes du type a de Schoen-
feld sont synaptés, et de la masse du coagulum se détachent des filaments
chargés de granulations et reliés aux granules de la surface nucléaire, qui
proviennent de la désagrégation des scutelles périphériques. Dans le sper-
matocyte du type b ces filaments chargés de granules et convergeant vers
la masse synaptique centrale se présentent, tantôt parallèles, tantôt en Y;
dans ce dernier cas - il s'agit d'une fusion de deux filaments voisins •<.

Il nous semble qu'une très mauvaise fixation peut seule avoir fourni
ces images à l'auteur : l'agglutination des chromoplastes au centre du noyau
à une époque encore éloignée du synapsis typique en témoigne. Il se pour-
rait aussi que ces noyaux correspondent déjà à ceux que nous avons
désignés du nom de leptotènes, mais avec coexistence de tassement synap-
tique; ce que fauteur désigne comme filaments de linine se fusionnant
longitudinalement ne serait autre chose (jue de vrais chromosomes évoluant
vers l'accolement de l'amphitène. En dehors des filaments de linine chargés
de granulations chromophiles, l'auteur n'a remarqué à cette période aucun
élément chromosomial. Nous avons observé au contraire au début de la
période auxocytaire l'évolution très caractéristique des filaments chroma-
tiques aux dépens des blocs chromatiques, c|ui, loin de s'agglutiner ou de
se "Synapter '-, se désagrègent individuellement et ne donnent pas naissance
à des granules, mais se dévident en chromosomes. A moins que, comme
nous le (lirons plus loin, Schoenfeld n'ait confondu le leptoténe avec le
pachytène en le plaçant postérieurement aux noyaux à granules quaternes
dans ses fig. 21 à 23, planche II, il n'a donc pas décrit cette période, que
nous avons trouvée cependant claire et facile à mettre en évidence.

Nous ne pouvons admettre comme très réels lesJilcTincnls de linine de
cet auteur; nous croyons volontiers à un défaut dans la fixation ou la colo-
ration, qui lui a fait prendre souvent des chromosomes pour des filaments
achromatiques, de même qu'il a donné une signification plasmatique aux

LES SPERMATOCYTES LEPTOTÈNES ET AMPHITÈNES DANS LE TAUREAU l5

grands nucléoles cependant très sidérophiles des cellules indifférentes. Que
le lecteur ne se persuade cependant pas que nous ne reconnaissons aucun
élément achromatique dans les noyaux des spermatocytes. On peut obser-
ver quelquefois, soit des sortes de réseaux achromatiques où les organites
nucléaires colorables sont suspendus, soit des filaments ténus reliant ces
divers corps entre eux. Leur coloration est difficile, leur étude malaisée,
leur aspect variable selon la méthode de fixation employée; leur évolution
n'amène rien de nouveau, rien de bien intéressant dans les modifications
actives qui transforment la chromatine. Leur faible quantité et leur in-
constance nous engagent à ne pas leur attribuer trop d'importance, d'autant
plus que nous nous demandons encore si la limne n'est pas un produit de
l'action des fixateurs ayant précipité l'enchylème nucléaire.

Les spermatocytes du type c de Schoenfeld sont constitués au centre
par un " réticulum presque indéchiffrable formé par l'entrecroisement et
l'anastomose des filaments centrifuges •' et à la périphérie par des granules
qui, par double division ou par simple juxtaposition, sont devenus quadri-
jumeaux.

Par la disparition des filaments se forme ensuite le spermatocyte du
type d : les granules quadrijumeaux, d'abord périphériques, se déplacent
ensuite vers un pôle du noyau sous l'influence de l'archoplasme. Dans les
cellules du tyoe e, les groupes quaternes se libèrent de la masse synaptique
et se placent en file, leurs centres étant dans la direction les uns des autres.
Un filament d'abord achromatique se dessine entre eux, puis se charge de
chromatine, il en résulte -un spirème fendillé en quatre segments par dou-
ble division longitudinale ". Enfin les granules diminuent et disparaissent
au profit du filament achromatique.

Il semble bien difficile de concilier cette manière de voir avec la nôtre.
Comme nous l'avons dit, Schoenfeld ne mentionne pas les chromosomes
nets de la période leptotène, et leur juxtaposition deux par deux en vue de
l'accolement longitudinal. 11 omet cette période, mais on la retrouve dans
les figures de ses spermatocytes du type b à filaments appairés ou en Y ou
de ses spermatocytes du type _/" qu'il place plus loin. 11 passe immédiate-
ment aux cellules à granules quaternes qui sont, avons-nous dit, des noyaux
amphitènes. La grande divergence de vues qui existe entre Schoenfeld et
nous, réside dans le fait de l'indépendance des groupes quaternes affirmée
par cet auteur, et d'autre part leur relation intime avec le chromosotne lep-

l6 Lucien VAN HOOF

totène en même temps que leui" formation aux dépens de ce dernier que
nous avons défendues.

D'après Schoenfeld le granule quaterne forme le chromosome; d'après
nous le chromosome forme le granule quaterne.

Tout le mécanisme de la genèse du chromosome aux dépens des gra-
nules quadrijumeaux n'est qu'une fragile hypothèse où le synapsis et la
centrotaxie jouent un grand rôle. Le point capital à élucider est la nature
et l'origine du trait d'union, chromatique d'après nous, qui reliera les gra-
nules. D'après Schoenfeld c'est un nouvel élément, un filament achroma-
tique sur lequel ils s'enchaînent; d'après nous le trait d'union est antérieur
aux granules, c'est le chromosome leptotène, donc un filament nettement
chromatique, aux dépens duquel se formeront des épaississements S3'mé-
triques pendant l'accolement longitudinal. Le chromosome qui en résulte
est pour Schoenfeld formé de quatre éléments juxtaposés; pour nous il
constitue une dualité régulièrement granuleuse.

Nous apportons comme arguments en faveur de cette idée nos dessins
et nos observations faits également dans les meilleures conditions que nous
ayons pu réaliser. De plus, nous appelons l'attention du lecteur sur un fait
assez démonstratif que nous fournissent les dessins de Schoenfeld : par la
juxtaposition de gros granules en quadruple rangée il n'obtient dans ses
no}'aux pachytènes qu'un filament bien ténu. D'autre part un spirème com-
posé de quatre filaments juxtaposés peut se montrer sous divers angles et
présenter en projection l'apparence tantôt de deux, tantôt de trois filaments
juxtaposés. Or, de tels aspects n'apparaissent jamais, ni dans les dessins
de Schoenfeld, ni dans les nôtres, ni surtout dans l'objet examiné avec
les meilleures lentilles.

La numération des granules quadrijumeaux ne nous a apporté aucun
éclaircissement nouveau concernant leur signification. Rappelons à ce sujet
que Schoenfeld en a signalé de 38 à /[S. Nous avons fait des recherches à
la chambre claire dans des préparations d'une épaisseur de 20 [a, nous avons
compté les paires de granules et divisé nos résultats par deux et obtenu de
cette façon les chiffres extrêmes de 24 à 40 granulations quadrijumelles, en
moyenne 2g à 3o. Ces nombres n'ont aucun rapport intéressant avec celui
des chromosomes des cinèses somatiques ou de maturation. Il nous montre
simplement que les 12 chromosomes réductionnels de ces noyaux ne peuvent
comporter en moyenne que de 2 à 3 tétrades. Or, nous trouvons rarement

LES SPERMATOCYTES LEPTOTENES ET AMPHITENES DANS LE TAUREAU I7

des chromosomes faits d'une seule tétrade, plus souvent des chromosomes
de quatre granules quaternes et plus.

Quelle est donc la signification des granules quadrijumeaux, ou plus
exactement des épaississements symétriques ?

Au point de vue morphologique ces épaississements établissent fré-
quemment des rapports d'un chromosome à l'autre : ils semblent fréquem-
ment confluer, fig. 28 à 32. Mais nous ne pouvons voir au-delà de l'obser-
vation microscopique, et il se peut que ces relations soient une manifesta-
tion d un processus déchanges importants au point de vue de l'hérédité et
qui resteront peut-être longtemps mystérieux. En même temps que le
pachytène s'accentue, les granules perdent leur netteté et se confondent
avec le reste du chromosome et avec le chromosome accolé, fig. 33 à 35.
Pendant la période pachytène il ne restera que peu de traces de ces épais-
sissements, mais plus tard, quand le strepsinéina sera bien accentué, les
chromosomes produits par cette fissuration seront fréquemment monili-
formes (Schoenfeld, igoi, fig. 25 à 27, planche II) et cela d'une manière
symétrique pour les deux moitiés du chromosome fissuré. Regaud (igio)
a objecté aux figures que Schoenfeld reproduit de cette étape spermato-
génétique le défaut de ne pas suivre dans leur accroissement une progression
parallèle à leur âge : les fig. 21, 22 et 23, planche II, sont notablement plus
petites que la fig. 20, a ; les premières représentent des spermatocytes du
type/, les secondes des cellules du type é*. Remarquons d'autre part que
dans nos figures la progression de taille est faible, mais existe; et que la
série de figures de Schoenfeld correspondrait beaucoup mieux à la nôtre
si les fig. 21, 22, 23 de cet auteur étaient placées avant la fig. 17, comme
spermatocytes » leptotènes«. Faut-il conclure que l'auteur n'a pas tenu un
compte assez scrupuleux de l'âge du tube séminifère où il a relevé ces
figures? Cela se peut, et nous affirmons à cette occasion que nous avons éta-
bli très soigneusement les âges respectifs de nos dessins, de peur de tomber
dans une semblable erreur; et si cette hypothèse est vraie, Schoenfeld
aurait donc représenté des noyaux leptotênes sous le titre de pachytènes
jeunes et les vrais pachytènes à filaments épais, fig. 23 b, planche I,
comme des stades avancés des noyaux à chromosomes antérieurement
ténus et tassés. En corrigeant dans ce sens la série de ses figures, la pro-
gression de croissance devient parfaitement vraisemblable. Une telle
erreur est encore excusable, l'évolution de ces éléments est si rapide que
les spermies du tube séminifère ne sont plus que des jalons très vagues.

j8 Lucien VAN HOOF

Nous avons trouvé que le moyen le plus sûr d'y remédier était de choisir
un tube séminifère s'étendant sur une grande longueur dans la préparation,
et, connaissant ainsi facilement le sens du développement de l'épithélium,
nous sommes sur de la justesse de notre série.

La péi'iode finale de l'amphitène que nos fig. 33 et 34 représentent et
que caractérise l'atténuation des épaississements symétriques au profit des
parties intermédiaires des chromosomes et l'achèvement de la soudure
longitudinale, échappe donc à Schoenfeld, pour qui du spermatocyte à
groupes quadrijumeaux au spermatocyte pachytène synapté il n'y a plus
de transition. Bref, d'après ce qui précède, dans la description de cet
auteur, l'omission de certains types caractéristiques de spermatocytes, des
défauts dans la technique et peut-être une erreur dans la sériation de la
lignée séminale ont été à la base d'une hypothèse que nous ne pouvons
donc admettre.

Enfin, l'accentuation de ces épaississements symétriques dans les sper-
matocytes du Taureau pourrait faire croire que cet animal possède là un
caractère différentiel d'avec les autres mammifères. Rappelons donc en
terminant que Brauer (i§93) (') les a signalés dans VAscai-is, Grégoire
(189g) dans les Lis et que nous les avons observés et dessinés avec assez
bien de netteté dans le Rat (Van Hoof, 1892, fig. 011-21, 011-22, Planche I).
Benda (1906) n'admet pas les granulations en tétrades, même pas chez le
Taureau. Nous nous rangeons certes à cet avis tout en admettant que les
épaississements symétriques et constants peuvent simuler des groupements
quaternes. Ceux-ci sont pour Schoenfeld des organites destinés à devenir
une partie de spirème; pour nous au contraire ils sont un simple accident
chromatique de l'anse lepto-amphitène en évolution.

(') Cité par Schoenfeld.

LES SPERMATOCYTES LEPTOTÈNES ET AMPHITÈNES DANS LE TAUREAU IQ

CONCLUSIONS.

1. Pour ce qui regarde les étapes de la spermatogénèse que nous
venons d'étudier, le Taureau se range dans le schéma probablement général
des Mammifères, tel que nous l'avons exposé précédemment dans le Rat.

2. La plus grande partie de la masse chromosomiale télophasique
des cinèses des sperinatogonies de 2"^"^ ordre s'agglutine pour former les
chromoplastes des spermatocytes croùtelleux. Ces chromoplastes ne se
désagrègent pas en granules, mais des filaments apparaissent dans les blocs
chromatiques comme s'y étant formés et comme partie intégrante de ces
organites, et s'en libérant au début de la période leptotène.

3. Il existe des noyaux amphitènes où les chromosomes minces s'ac-
colent longitudinalement pour iormer les anses pachytènes.

4. Des épaississements chromatiques apparaissent d'une manière
constante et symétriquement de filament à filament sur les chromosomes
appairés des anses amphitènes, simulant parfois des groupes quaternes.

5. Le synapsis n'empâte par les noyaux leptotènes et amphitènes
bien fixés.

BIBLIOGRAPHIE.

1906 Bcnda, C.

1893 Brauer, A.

1899 Grégoire, V

igoS Janssens, F. A.

191 1 Montgomery, Th. H.

1901 Regaud. Cl.

I9I0

»

I90I

Schcenfdd, H.

i885

Swaen et Masquelin

191:4

Van Hoof, L.

191;

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Forschung. in Austr Fischer, Jena.

: Zur Kenntnis der Spermatog. von Ascaris niegalo-
cephala : Arch. f. mikr. Anat., Bd. 42.

; Les cinèses polliniques dans les Liliacées ; La
Cellule, XVI.

.• Évolution des auxocytes mâles du Batrachoseps at-
tcnuatus ; La Cellule, XXH, fasc. 2.

.• Différenciation of the human cells of Sertoli; Biol.
Bulletin, vol. XXI, n" 5.

; Études sur la structure des tubes séminifères et
sur la spermatogénèse chez les Mammifères; Arch.
d'anat. micros., t. IV, fasc. I, II, TII.
Idem; Arch. d'anat. micros., t. XI, fasc. II et III.

; La spermatogénèse chez le Taureau; Arch. de Biol.,
t. XVIII. fasc. L

.• Études sur la spermatogénèse; Arch. de Biol., t. IV.

; La spermatogénèse dans les Mammifères. I. L'évo-
lution de l'élément chromatique dans la spermato-
génèse du Rat; La Cellule, t. XXVII, 2^ fasc.
Idem. II. Le synapsis dans les spermatocytes des
Mammifères; La Cellule, t. XXVII, 2^ fasc.

EXPLICATION DES FIGURES.

Ces dessins ont été exécutés au moyen de la chambre claire de Abbe-Apathy, à
la hauteur de la table de travail. Microscope Koristka, cbject. imin. homog. iji^ semi-
apochr. et ocul. compens. 12.

FIG. 1. Petite spermatogonie déjà assez proche de la cinèse.

FIG. 2. Petite spermatogonie se préparant à la prophase.

FIG. 3 et 4. Idem : les chromosomes qui prendront part à la cinèse se dé-
gagent des masses chromatiques.

FIG. 5. Prophase.

FIG. 6. Idem, schématique. Sauf deux, tous les chromosomes ont été représentés.

FIG. 7. Métaphase à chromosomes clivés.

FIG. 8. Télophase : V simples convergeant par leurs pointes vers le centre
du novau.

FIG. 9. Jeune spermatocyte : les chromosomes télophasiques ont perdu l'ordon-
nance précédente.

FIG. 10. Idem : les chromosomes commencent à se déformer et à confluer.

FIG. 11. Idem.

FIG. 12. Idem : des chromoplastes importants sont déjà formés.

FIG. 13. Idem : les chromoplastes s'achèvent, il n'y a plus que quelque vestiges
de chromosomes. Quelques éléments de linine.

FIG. 14. Jeune spermatocyte croûtelleux. chr = chromoplaste.

FIG. 15. Début de la désagrégation des blocs chromatiques en leurs dérivés
filamenteux : origine du chromosome leptotène. Enclwlème nucléaire légèrement
assombri, chr = chrouioplaste; n = nucléule.

FIG. 16. Achèvement de cette transformation. L'enchylème nucléaire est très
obscur, chr = chromoplaste; n ^= nucléole.

24 Lucien VAN HOOF

FIG. 17. Noyau leptotène à filaments grêles et tortueux, contenant encore des
masses imparfaitement désagrégées. L'enchylème nucléaire est clair, chr = chromo-
plaste.

FIG. 18. Noyau leptotène plus avancé, chr = chromoplaste.

FIG. 19. Fragment de noyau leptotène où s'indique une orientation.

FIG. 20. a) Bouquet leptotène orienté. Quelques anses parallèles.
b) Fragment de noyau leptotène.

FIG. 21. No3-au leptotène. Les bouts libres des anses commencent à s'appairer.

FIG. 22. Des appariements se dessinent aux courbes des anses.

FIG. 23. Idem.

FIG. 24. Bouquet leptotène, appariements en vue de l'accolement amphitène.

FIG. 25. Idem.

FIG. 26. Idem : quelques épaississements symétriques aux bouts libres appairés.

FIG. 27. Spermatocyte amphitène. Des épaississements symétriques apparaissent
sur plusieurs paires de chromosomes où ceux-ci sont le plus rapprochés. Dans
d'autres (b) ils font défaut.

FIG. 28. Fragment de noyau amphitène : « granules quadrijumjeaux ». l, frag-
ment de dualité dont les éléments peu rapprochés sont dépourvus de granulations.

FIG. 29. Idem : les épaississements symétriques font défaut là où les chro-
mosomes sont peu rapprochés.

FIG. 30. Spermatocyte amphitène à filaments granuleux.

FIG. 31. Idem.

FIG. 32. Idem.

FIG. 33. Fragment de noyau amphitène : début de la fusion des filaments
accolés.

FIG. 34. Achèvement de la période amphitène : les épaississements symétri-
ques s'atténuent et les filaments accouplés se soudent.

FIG. 35. Spermatoc3-te pachytène.

FIG. 36. Spermatocyte pachj^tène à un âge plus avancé.

FIG. 37. Début du strepsinéma.

TABLE DES MATIÈRES.

Introduction

§ I. Les petites spermatcii;onies

§ II. Les spermatocytes croùtelleiix

§ in. La période leptoténe.

§ IV. L.i période amphitène

Discussion des résultats .
Conclusions
Bibliographie
Explication des figures

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12

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19

21
23

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Réseau protoplasmique et chondriosoraes
dans la genèse des myofibrilles

PAR

P. GAUDISSART,

CANDIDAT EN MÉDECINE.

Institut Carnoy, Louvain. - Laboratoire du Prof. V. Grégoire.

(Mémoire déposé le iS juin igi3.)

Réseau protoplasmique et chondriosomes

dans la genèse des myofibrilles.

Les auteurs qui ont étudié la genèse des myofibrilles les font provenir
d'une différenciation subie par des éléments plasmatiques. Mais il règne une
assez grande divergence d'interprétation.

On peut, pensons-nous, grouper les opinions en deux catégories.

Pour certains auteurs, ce serait une structure fondamentale du proto-
plasme, soit réticulaire, soit alvéolaire, qui, par l'orientation et la modifi-
cation de ses travées ou de ses lamelles, fournirait les fibrilles musculaires.
Pour Carnoy (84) et Van Gehuchten (86), Heidenhain (gg) et Prenant
(04-11), la structure protoplasmatique qui entrerait ici en jeu serait un
réseau. Pour BUtschli et Schewiakoff (gi), il s'agit au contraire d'un
système alvéolaire. Mais, alors que 'Van Gehuchten et Carnoy décrivent,
même dans la fibre musculaire adulte, la persistance d'un réseau et expli-
quent par là la striation, les autres auteurs que nous venons de citer pensent
que la fibre musculaire ne contient que des fibrilles indépendantes, juxta-
posées, et elles-mêmes striées, ainsi que le décrivent d'ailleurs la majorité
des histologistes modernes.

Une seconde catégorie d'auteurs fait intervenir dans la genèse des
structures musculaires un élément granulaire; mais dans cette interprétation
générale il faut distinguer deux tendances, d'après la conception que les
auteurs se font au sujet des granules qui interviendraient dans la fibrillo-
génèse.

Tandis que Godlewski (02) et Mlodowska (08) ne précisent pas davan-
tage la valeur de ces corpuscules et disent simplement qu'ils se rangent sur
des filaments, comme des perles sur un fil (Mlodowska), d'autres histolo-
gistes au contraire ont attribué à ces corpuscules une valeur mitochondriale
et ont émis des conceptions de plus en plus nettes concernant leur rôle
dans la fibrillogénèse.

3o P- GAUDISSART

Benda (gg) qui, le premier, étudiant les muscles de la queue de la sala-
mandre, mentionne les mitochondries, admet que celles-ci, se déposant sur
des filaments — dont l'auteur n'indique pas l'origine, — forment ainsi les
disques anisotropes des fibrilles.

Meves (07-07-og) va plus loin : sans décrire d'une façon détaillée les
phénomènes, il attribue à l'élément mitochondrial un rôle exclusif dans
la genèse des myofibrilles, comme d'ailleurs dans la genèse de toutes
les structures fibrillaires en général. A. Schockaert (08), sans entrer
non plus dans les détails, adopte, avec des modifications secondaires,
cette manière de voir, et l'applique au myocarde.

Meves n'avait publié aucune figure touchant cette question; c'est
Duesberg (og), qui, en précisant la conception de Meves, s'efforça de la
démontrer. Prenant le myoblaste à ses débuts, il le suit jusqu'à sa différen-
ciation complète. Il décrit les chondriosomes, d'abord isolés et assez courts,
s' allongeant graduellement au fur et à mesure que s'allonge le myoblaste.
Les fibrilles homogènes ainsi formées se différenciei t en fibrilles striées, par
suite d'un ramassement régulier de la substance mitochondriale en certains
points de la fibrille.

Tandis que Leplat (ii) et Luna (i3) se sont rangés à l'interprétation
de Duesberg, Levi (12), au contraire, s'est prononcé contre elle. L'auteur
s'en tient d'ailleurs à des conclusions négatives. Ayant établi que le nombre
des chondriosomes est sensiblement le même dans les cellules embryonnaires
et dans les cellules musculaires adultes, il conclut que ces corpuscules n'ont
pas, dans la fibrillogénèse, le rôle que leur attribue Duesberg.

D'après ce que nous venons de dire, on peut résumer dans les questions
suivantes les points qui, concernant Id. première origine des myo^hnWes,
demandent de nouvelles études : ces éléments proviennent-ils exclusive-
ment d'une structure, soit alvéolaire, soit réticulaire, du protoplasme, comme
le prétendent les auteurs de la première catégorie; ou bien des granules
prennent-ils une part à leur formation, ainsi que l'entendent les autres au-
teurs? Si cette dernière hypothèse est la vraie, quelle est la nature de ces
granules? sont-ils, ou non, mitochondriaux? Enfin ne pourrait-on admettre
dans la première origine des fibrilles musculaires une collaboration de deux
éléments : un élément réticulaire ou alvéolaire et un élément granulaire?
Les recherches que nous avons entreprises sur la genèse des myofi-
brilles nous permettent d'apporter sinon une réponse complète à ces ques-
tions, du moins des éléments de solution que nous croyons nouveaux. Comme

RÉSEAU PROTOPLASMIQUE ET CHONDRIOSOMES 3l

le problème présent est fort débattu, nous avons jugé utile de faire con-
naître nos résultats, concernant \a première orig-ine des myofibrilles, avant
même d'avoir achevé nos recherches sur la différenciation de la fibrille
striée définitive.

C'est à l'inspiration de M. le Professeur Grégoire que nous avons
entrepris ces recherches. Si nos efforts n'ont pas été tout à fait infruc-
tueux, malgré la difficulté de la question, c'est à la savante direction, aux
conseils éclairés de notre dévoué Maître que nous le devons. Aussi tenons-
nous à lui témoigner ici le respectueux hommage de notre profonde gra-
titude.

Méthodes.

Toutes nos observations ont porté sur des embryons de poulet.
Les réactifs employés ont été :
i) le liquide de Regaud IV :

Formol commercial 20 cm"'.
Bichromate de potasse à 3 "/j 80 cm".
Le fixateur, conservée l'abri de la lumière, était remplacé chaque jour
par de la liijueur fraichement préparée, et cela pendant une semaine.
2) Le Benda (formule modifiée de Meves) :
I Ac. chromique i °/o 60 cm'.
> Ac. osmique 2 "/o i^ cm'.
f Ac. acét. glac. 20 gouttes.
La durée de fixation était également de 6 à 7 jours.
Nous avons pris les précautions les plus minutieuses en vue d'assurer
une bonne pénétration du liquide. A cet effet, les embryons enlevés de l'œuf
étaient plongés encore vivants dans du réactif pur ou faiblement dilué.
La membrane amniotique était immédiatement déchirée, et des incisions
étaient pratiquées dans la région dorsale, afin de mettre les myotomes en
contact immédiat avec le liquide.

Les pièces furent ensuite lavées pendant 24 heures, déshydratées, enro-
bées, coupées à 5 ji. Après avoir séjourné 24 heures dans 1 alun à 3 "/ot à
froid après le Benda, à 35° après le Regaud, elles furent plongées
24 heures dans l'hématoxyline de Heidenhain, puis différenciées.

Les deux méthodes nous ayant fourni des résultats également satisfai-

32 p. GAUDISSART

sants, nous avons emprunté nos dessins indifférenament à l'une ou à l'autre
de nos deux séries de préparations.

Nous n'avons d'ailleurs dessiné que des endroits présentant les carac-
tères reconnus d'une bonne fixation - mitochondriale " : noyaux homo-
gènes, chondriosomes non fragmentés.

DESCRIPTION DES PREPARATIONS.

Nous diviserons en stades (') les processus de différenciation, et à cha-
que stade correspondra un dessin. Il va de soi que cette division n'a qu'une
valeur purement descriptive.

Stade I. FiG. i. Méthode de Benda.

Ce dessin représente une portion d'un myotome encore peu diffé-
rencié. On y voit la bande de myoblastes dans toute son épaisseur.

Ce stade est caractérisé par la présence, dans le protoplasme, de deux
éléments figurés :

a) Des chondriosomes, nombreux, courts, nettement colorés, non
encore orientés dans le sens de l'axe de l'embryon. A côté de chondriosomes
plus ou moins flexueux, présentant la forme ordinaire de ces éléments dans
les cellules indifférentes, on en voit d'autres, de lormes très particulières :
certains sont infléchis en L, d'autres en U, d'autres encore en polygone
ouvert. Toutes ces formes sont, en un mot, caractérisées par des coudures
brusques, formant un angle, droit, aigu ou obtus. De plus, les extrémités
libres de ces chondriosomes ne tranchent pas nettement sur le fond du
protoplasme.

bj Par places, on voit se détacher, sur le fond du protoplasme, de petites
plages réticulées; les mailles semblent formées de filaments, et non de la-
melles, car, en maniant la vis micrométriciue, on les voit disparaître instanta-
nément. Des mailles peuvent aussi apparaître isolées. Leur forme est carrée,
triangulaire ou polygonale; les contours en sont bien nets; de leurs angles
partent parfois des filaments qui vont se perdre dans le protoplasme.

A côté des trabécules assez nettement dessinées sur le fond, on en ob-

(I) Nous n'avons pas fondé notre sériation des stades sur les durées d'incubation : nous avons
observé, à ce point de vue, trop de variation. Nous avons plutôt tenu compte de la localisation deç
aspects dans un même embryon.

RÉSEAU PROTOPLASMigUE ET CHONDRIOSOMÈS 33

serve qui sont à peine visibles. Celles qui apparaissent clairement sont d'ail-
leurs elles-mêmes très pâles; leur teinte, jaunâtre, est très différente de la
coloration des chondriosomes, et entre ces derniers éléments et le réseau,
il y a toujours un contraste bien marqué.

Stade II. FiG. 2.

La figure provient de la coupe qui a fourni aussi la fig. 1, mais d'une
partie plus antérieure de l'embryon. Les mailles du réseau, non encore
orientées, sont plus nombreuses, plus grandes et plus visibles qu'au stade I.

Dans la partie moyenne de la figure, entre deux noyaux, on distingue
une anse chondriosomale, à convexité dirigée vers le bas. Des deux extré-
mités de l'anse partent deux filaments qui aboutissent aux deux angles inté-
rieurs d'une maille trapézoïdale à base supérieure. Des deux angles opposés
du trapèze divergent deux filaments qui vont se perdre dans le protoplasme.
La boucle de l'anse présente, du côté opposé, une formation analogue.
Notons que l'élément réticulaire est d'autant plus coloré qu'il est plus proche
des chondriosomes.

A droite et en dessous du noyau de droite, on voit plusieurs mailles
d'une coloration aussi foncée que les chondriosomes. Sur le noyau de
gauche, mais dans un plan supérieur, il y a une formation analogue : trois
travées parallèles très colorées, réunies par de minces travées pâles, per-
pendiculaires aux trois premières. Enfin, en dessous du noyau de droite,
on voit tout un réseau de mailles indépendantes, mais beaucoup plus gran-
des et plus visibles qu'au stade précédent.

Stade III. Fig. 3; même coupe, partie plus antérieure de l'embryon.

La figure représente un myoblaste isolé. Nous n'y avons reproduit
qu'une partie de la structure protoplasmique. On y reconnaît très claire-
ment le réseau des stades précédents, mais une disposition nouvelle appa-
raît ici : les mailles du réseau, plus développées et mieux définies que dans
la FIG. 2, sont maintenant nettement orientées suivant le grand axe du myo
blaste.

Le nombre des chondriosomes isolés, indépendants, est très faible;
d'autre part, les mailles présentent, surtout sur leurs travées longitudinales,
des parties épaisses, allongées, manifestant la réaction caractéristique des
chondriosomes et dont les dimensions ne diffèrent guère de celles des chon-
driosomes du début. L'apparence totale est celle d'un réseau encore peu

34 P- GAUDISSART

colorable sur lequel se trouvent fixés des chondriosomes, la distinction entre
chondriosomes et réseau étant plus ou moins nette suivant les régions. Dans
la partie inférieure de la figure, on voit encore des parties de réseau très
minces et très pâles.

Stade IV. Fig. 4. Embryon plus âgé; fixation : Regaud IV.

L'orientation de toute la structure dans le sens longitudinal des myo-
blastes est maintenant tout à fait nettement accusée. En a, on voit une plage
réticulée, encore irrégulière et dont les travées sont fortement colorables par
les méthodes mitochondriales. Cette plage est très semblable à celles que l'on
observe aux stades précédents, fig. 2, en haut. La portion de structure qui
se trouve en b est fort intéressante. Ce sont des fibrilles, mais reliées en un
réseau, ou mieux, un réseau â longues mailles étirées. En c, les fibrilles sont
plus longues, plus indépendantes bien que rattachées aussi par places les
unes aux autres. Elles portent des renflements étirés, irréguliers, qui retien-
nent l'hématoxyline comme les chondriosomes voisms.

Stade V. Fig. 5; autre coupe d'un même embryon; somite plus
avancé.

La disposition générale ne diff'ère pas notablement de celle du stade
précédent. On y remarque seulement que les fibrilles se dégagent de plus
en plus du réseau et qu'elles sont mieux marquées. Toutefois les aspects
réticulaires sont encore conservés en plusieurs points. Les tractus chroma-
tiques que portent les fibrilles présentent ici aussi une ressemblance frap-
pante avec les chondriosomes.

Stade VI. Fig. 6; même embryon.

On peut maintenant poursuivre de très longues fibrilles, réunies encore
en de très longues mailles. Les tractus chromatiques, de réaction mito-
chondriale, ne sont plus si marqués que précédemment. L ensemble des
fibrilles prend ainsi un aspect plus lisse et plus régulier. Le protoplasme
contient encore des chondriosomes isolés.

Stade VIL F'ig. 7; même embryon.

Le progrès, par rapport au stade VI, consiste en ce que les fibrilles
sont devenues plus indépendantes. En certains endroits, les anciennes con-

RÉSEAU PROTOPLASMIQUE ET CHONDRIOSOMES 35

nexions réticulaires n'apparaissent plus que sous forme d'anastomoses
amincies ou même brisées. Il est cependant impossible de méconnaître que
les fibrilles représentent des parties, devenues prépondérantes, d'un réseau
antérieur.

Dans les stades ultérieurs, les fibrilles sont devenues encore plus nettes.
Nous n'avons pas représenté ces aspects. Nous avons seulement reproduit,
dans la fig. 8, une disposition que l'on observe à un stade assez avancé.
On y trouve des fibrilles extrêmement longues, vivement colorables, mani-
festant déjà, à une extrémité, la formation des disques. Deux choses sont
remarquables : d'abord, les deux fibrilles très distinctes de la partie gauche
de la figure se rejoignent vers la droite en un point à partir duquel nous
n'arrivons à distinguer qu'une fibrille unique; de même, à l'extrémité droite,
la fibrille unique se prolonge par deux fibrilles et par un troisième filament.
Ce sont là, nous parait-il, des restes de l'ancienne structure réticulaire. En
second lieu, la partie gauche de la figure contient un bon nombre de fi-
brilles incolores visiblement reliées, par endroits, en de grandes mailles.
Le protoplasme renferme encore des chondriosomes isolés.

INTERPRÉTATION.

Il sera utile d'énoncer dès le début linterprétation à laquelle nous ont
conduit nos recherches. Nous pensons que les fibrilles musculaires ne pro-
viennent ni exclusivement d'un réseau plasmatique, ni exclusivement de
mitochondries ou d'un autre élément granulaire, mais qu'elles résultent de
la coopération de mitochondries avec une structure réticulaire, différente,
du moins au moment où elle entre en jeu, des mitochondries elles-mêmes.
C'est ce réseau, - dont la valeur et la signification n ont pas à nous occu-
per pour le moment, — qui, en s'orientant, fournit la première ébauche des
fibrilles musculaires; mais, de leur côté, les mitochondries, en se fixant sur
ce réseau, lui apportent certaines substances qui s'y incorporent et contri-
buent au développement des myofibrilles. C'est ce que nous allons établir.

A. Rôle du réseau.

Nous avons déjà vu, dans notre description, que le myoblaste, aux
premiers stades, montre, outre les chondriosomes, des plages réticulaires,
dont les travées, par leur coloration et leur forme, apparaissent bien dis-
tinctes de l'élément mitochondrial, fig. i et 2.

36 P- GAUDISSABT

Nos FiG. 1, 2, 3 nous ont aussi permis d'a.-sister à la transformation
graduelle de ce réseau : on y voit les mailles, d'abord petites, s'agrandir
ensuite, puis s'orienterdans le sens de l'axe du mvoblaste. Les fig. 4, 5. 6. 7,
montrent la progression ultérieure du phénomène; on y voit la structure
réticulaire faire place peu à peu à une structure d'apparence fibrillaire.
Nous voulons dire par là que seules les travées longitudinales, considéra-
blement allongées et épaissies, demeurent nettement visibles.

Quelle est la valeur de ce réseau? Est-il réellement et dès son origine
indépendant des mitochondries ou bien ne résulte-t-il pas plutôt d'une trans-
formation d'éléments mitochondriaux qui, en s'anastomosant et se décolo-
rant, donneraient naissance à une structure réticulaire? Nous reviendrons
plus loin sur cette question, mais dès maintenant nous pouvons dire qu'une
chose nous parait certaine, c'est que le réseau représenté par nos fig. i et 2
ne provient pas d'une transformation qui se produirait, en ce moment, dans
les chondriosomes. Réseau et chondriosomes sont, en effet, à ce stade, deux
choses nettement distinctes jiar leur coloration et leur épaisseur. Nulle
part on ne décèle de transition entre les deux formations, telle que serait
par exemple un réseau formé de chondriosomes devenus plus minces et
moinscolorables. Par conséquent, si le réseau dont nous parlons est d'origine
mitochondriale, c'est à un stade plus précoce, antérieur au stade où nous
sommes, qu'il faudrait rechercher les phénomènes de sa production.

B. Râle des chondriosomes.

Que les chondriosomes, de leur côté, prennent part à la fibrillogénèse,
c'est ce qui nous parait aussi assez clair dans nos préparations. Il nous
semble que les formes manifestées par les chondriosomes au début de la
fibrillogénèse ne peuvent s'interpréter que par des relations qu'ils contrac-
tent avec le réseau plasmatique en train de s'orienter. Dans notre fig. i,
les chondriosomes ne présentent pas les allures typiques de ces éléments
dans les cellules ordinaires, tels qu'on les observe dans la fig. 9 par exem-
ple, empruntée à un tube du corps de Wolff. Les chondriosomes de la
FIG. 1 sont en effet coudés, parfois à deux reprises. Puisque, ainsi que nous
l'avons vu plus haut, la fig. 2 montre deux éléments distincts, réseau et
chondriosomes, et non pas un réseau chondriosomique en voie de décolo-
ration, les formes de la fig. l, qui précèdent immédiatement le stade de la
fig. 2, ne peuvent s'expliquer qu'en admettant que les chondriosomes se

RÉSEAU PROTOPLASMIQUE ET CHONDRIOSOMES Z"]

moulent sur un réseau indépendant d'eux-mêmes. Ajoutons une remarque :
le fait que, dans des préparations analogues, les cellules du corps de Wolff
renferment des chondriosomes typiques prouve que la disposition mitochon-
driale que nous invoquons ici n'est pas due à la fixation.

L'intervention des mitochondries apparaît plus clairement encore aux
stades ultérieurs. Au stade II, fig. 2, en effet, on voit que la substance
mitochondriale a davantage épousé les lignes maîtresses de la structure
fondamentale réticulaire.

Aux stades suivants, fig. 3, 4, 5, en même temps que le nombre des
chondriosomes diminue dans les espaces interfibrillaires, on voit les fibrilles,
de plus en plus définies, devenir aussi plus colorables. Cela parait bien con-
firmer que cette colorabilité leur vient de la substance mitochondriale qui
s'y est déposée.

Nous n'avons pas pu suivre le détail de cette application des chondrio-
somes, sur la structure réticulaire. Disons seulement qu'il nous semble que
le chondriosome, au lieu de s'allonger tout d'une pièce sur le filament, s'y
répand plutôt d'une façon plus ou moins régulière.

Enfin, aux stades ultérieurs, fig. 6 et 7, les fibrilles, nettement colo-
rables, sont très accentuées et vont dès lors subir leur différenciation, stade
que nous avons laissé en dehors de nos recherches.

C'est le moment de revenir à la question de la valeur du réseau primitif
incolore des fig. 1 et 2. On pourrait, à ce sujet, émettre plusieurs hypo-
thèses : ou bien ce réseau provient lui-même d'une transformation des
chondriosomes, qu'il faudrait cependant, ainsi que nous l'avons vu plus haut,
supposer réalisée à un stade très précoce, antérieur à la fig. i; ou bien
il représente une structure fondamentale du protoplasme indifférent, lui
appartenant en tant que tel; ou bien enfin il résulte d'une différenciation
que subit le protoplasme de la cellule myoblastique à l'efiet, précisément,
d'engendrer les fibrilles.

Touchant la première hypothèse, on pourrait rappeler que Meves (io),
tout en attribuant aux chondriosomes la production des fibrilles collagènes,
admet cependant qu'entre le stade : plastosomes isolés, et le stade : fibrilles
collagènes, il doit se trouver un stade de réseau — que l'auteur n'a pas ob-
servé, --- où les chondriosomes, ayant perdu leur colorabilité spécifique, se
sont disposés en réseau, mais sans avoir acquis déjà la colorabilité des fibres
collagènes.

38 P- GAUDISSART

On pourrait adapter cette hypothèse à notre cas, et penser que notre
réseau incolore correspond précisément à ce stade intermédiaire entre mito-
chondries isolées et fibrilles, les chondriosomes continuant d'ailleurs, après
avoir donné naissance au réseau, à lui fournir des matériaux pour son déve-
loppement.

Nous n'avons pas étudié les mitochondries des cellules embryonnaires;
nous ne pouvons donc pas déterminer d'une façon définitive si le réseau
dont nous parlons provient d'une transformation directe du chondriome.
Cette hypothèse nous paraît cependant très peu probable.

Au stade de notre fig. 1, le réseau extramitochondrial est formé de
travées tellement minces et tellement peu apparentes que Ion comprendrait
difficilement qu'il provînt de mitochondries anastomosées. En outre, on ne
voit pas pourquoi un réseau mitochondrial s'amincirait d'abord et devien-
drait incolorable, pour s'épaissir ensuite et devenir à nouveau colorable
par les mêmes méthodes mitochondriales. Il nous semble donc que le réseau
est génétiquement indépendant des mitochondries et appartient au proto-
plasme dans lequel celles-ci sont plongées.

Si cela est vrai, il nous faut choisir entre la seconde et la troisième
des interprétations que nous avons énoncées plus haut, à savoir : le réseau
représente-t-il une structure fondamentale du protoplasme ou provient-il
d'une différenciation fibrillogénétique d'un protoplasme homogène? Le fait
que le réseau n'apparaît qu'en quelques plages serait favorable à cette der-
nière hypothèse, mais, pour trouver dans ce fait un argument décisif, il
faudrait d'abord établir qu'un réseau primitif ne pourrait exister, tout en
demeurant invisible et n'apparaissant qu'au moment des transformations
qui conduisent à la fibrillation. Nous nous trouvons d'ailleurs ici devant le
très difficile problème de l'organisation fondamentale du proto[ilasme. Nous
avions, dans l'espoir de le résoudre pour notre objet, commencé à préparer
du matériel traité par diverses méthodes de fixation. Mais nous n'avons pas
tardé à constater que l'étude comparative que nous voulions entreprendre,
nous aurait retenu fort longtemps et, tout incomplets qu'ils demeurent, nos
résultats nous ont paru valoir d'être publiés, à cause de leur importance
pour la question des chondriosomes. Quoi qu'il en soit en effet du point dont
nous venons de parler et même quoi qu il en soit de notre interprétation plus
générale sur la valeur cytoplasmique et non pas mitochondriale, du réseau
lui-même, nos recherches, en tout cas, établissent un fait nouveau : c'est
que, pour donner naissance aux fibrilles, les mitochondries collaborent avec

RÉSEAU PROTOPLASMIQUE ET CHONDRIOSOMES SQ

un réseau, non entrei'ii parDuESBERG('). La conception decedernier auteur:
•^ chaque mrofibrille n'est qu'un chondriosorn»^ filamenteux modifié'^, bien
que séduisante à première vue, parait, après un examen plus approfondi,
ne pas répondre à la réalité.

Notre interprétation s'écarte donc à la fois de celle qui ne voit dans
la structure musculaire qu'un réseau transformé et de celle qui attribue
tout aux chondriosomes. Les partisans de la première opinion n'ont pas
tenu compte des chondriosomes, — que d'ailleurs les méthodes anciennes
ne mettaient pas en évidence, — mais les parrains de la seconde ont mé-
connu le rôle du réseau. Ce n'est d'ailleurs que graduellement et après de
nombreux tâtonnements que nous sommes arrivé à notre interprétation.

Au début de nos recherches, nous fumes assez longtemps sur le point
de nous ranger complètement à l'avis de Duesberg. Cependant un détail
sur lequel M. le professeur Grégoire appela dès lors notre attention,
semblait demeurer inexpliqué dans l'hypothèse du professeur de Liège,
nous voulons dire la présence de fibrilles incolores, minces, assez peu dis-
tinctes, que nous trouvions, fig. 8, mélangées en assez grand nombre à des
fibrilles bien colorées. Dans l'hypothèse où les myofibrilles proviendraient
de chondriosomes dans lesquels la matière mitochondriale se ramasse en
disques, nous ne comprenions pas quel rôle il fallait accorder à ces fila-
ments minces et incolores. Il ne peut être question d'attribuer cet aspect
à une décoloration accidentelle de fibrilles déjà colorables, car on trouve
les filaments incolores mélangés à des chondriosomes parfaitement colorés,
et d'autre part, le nombre de ces fibrilles, d'abord peu élevé, grandit ensuite,
pour diminuer plus tard au fur et à mesure qu'apparaissent les fibrilles co-
lorables. Notre objection à la thèse de Duesberg nous apparut d'autant
plus sérieuse que l'auteur lui-même dessine ces filaments incolores, fig. i8
et 20, mais sans les mentionner dans sa description, et sans leur donner
place dans son schéma de la page 647, fig. J.

Nous fumes ainsi entraîné à chercher un lien entre ces fibrilles inco-
lores et les fibrilles colorables. Certains aspects nous firent penser que ces
dernières résultent d'une association de fibres incolores, donnant lieu à
une formation naturellement plus colorable, ou bien inversement que la
fibrille colorable, en se dédoublant, donne naissance à des fibrilles plus
minces et peu colorables. Mais ces deux hypothèses ne nous satisfirent

(') Rappelons que Benua admit lui aussi que les mitochondries ne font que collaborer avec des
fibrilles d'une autre origine. Seulement, l'auteur ne tait intervenir les chondriosomes que pour produire
les disques anisotropes.

40 P. GAUDISSART

point. Nous voyions en effet des fibres fort colorables qui, certainement,
ne provenaient pas du groupement de plusieurs fibrilles minces, et d'un
autre côté, au lieu de trouver des images nettes de bipartition, nous ren-
contrions plutôt des aspects de ramification irrégulière ou d'anastomisation.
Ces dernières images nous conduisirent à admettre que les fibrilles naissent
d'une structure réticulaire, elle-même déjàcolorable par place sous les réac-
tifs mitochondriaux, mais demeurant encore incolore dans d'autres portions.
Enfin, remontant plus haut vers l'origine des fibrilles, nous trouvâmes les
aspects des fig. l et 2, nous montrant que le réseau d'où proviennent les
fibrilles est en réalité un réseau de fond, sur lequel se déposent les chon-
driosomes.

Dans notre hypothèse il est facile d'expliquer l'accroissement du
nombre des fibrilles : il résulte, en partie du moins, de ce que de nou-
velles portions de réseau se régularisent et s'orientent.

Levi (12), pour rejeter la participation directe des chondriosomes à la
formation des fibrilles, allègue que le nombre des mitochondries ne dimi-
nue pas pendant la différenciation. Mais cet argument est sans valeur si on
admet que les chondriosomes peuvent se multiplier, au fur et à mesure que
certains d'entre eux servent à la différenciation. D'ailleurs les filaments
colorés de la fig. 22 de l'auteur représentent-ils vraiment des chondriosomes,
ou bien ne sont-ils pas plutôt un stade de la transformation du réseau en
fibrilles (du moins par places)? Il est intéressant de faire remarquer que
Levi a, lui aussi, nettement dessiné des fibrilles incolores fort nombreuses,
et qu'elles semblent bien souvent provenir d'un réseau.

CONCLUSIONS.

Les chondriosomes prennent part à la formation des fibrilles muscu-
laires. Cependant on ne peut pas dire qu'une myofibrille soit un chondrio-
some filamenteux modifié. En effet la toute première production de fibrilles
se réalise aux dépens d'un réseau incolore, qui est, du moins alors, indépen-
dant des chondriosomes. Ceux-ci collaborent avec ce réseau, en se déposant
sur ses travées. Mais ce sont les travées elles-mêmes qui deviennent, en
s'orientant, les fibrilles. Nous n'avons pas pu élucider complètement la si-
gnification de ce réseau : il semble bien avoir une origine indépendante des
mitochondries et représenter une structure du fond protoplasmique, mais
nous devons laisser en suspens la question de savoir si ce réseau plasmatique
appartient à l'organisation fondamentale du protoplasme ou s'il provient
lui-même d'une première étape de la différenciation - fibrillogénétique -,

INDEX BIBLIOGRAPHIQUE.

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culaire striée chez les vertébrés; La Cellule, 4.

EXPLICATION DES FIGURES.

Toutes les figures ont été dessinées, à la hauteur de la platine du microscope, à l'aide
de la chambre claire ^'Abbe. Notre microscope était muni de l'abject, apoch. Zeiss i. ?o, 2 mm.,
de l'oc comp. iS et d'un condensateur holoscopique \\'atson. Nous avons toujours observé
en lumière artificielle.

FIG. 1. Plages réticulées et chondriosonies dans un embryon dont le somite pos-
térieur, dessiné ici, ne présente encore, à sa partie profonde, qu'une rangée de myo-
blastes.

FIG. 2. Id. dans le même embr\'on.

FIG. 3. Myoblaste du somite immédiatement antérieur à ceux des dessins pré-
cédents.

FIG. 4. Trois systèmes fibrillaires appartenant à un des somites postérieurs d'un
embryon, présentant, déjà dans ses parties les plus avancées, quelques fibrilles moni-
I if ormes.

FIG. 5. Quelques systèmes fibrillaires d'une partie plus avancée du même em-
bryon.

FIG. 6. Deux systèmes fibrillaires d'une partie encore plus différenciée du même
embrj/ on .

FIG. 7. Quelques fibrilles plus différenciées du même embr3'on.

FIG. 8, Fibrille musculaire d'un embryon dont les parties les plus différenciées
contiennent des éléments complètement difterenciés. Cette fibrille montre des restes de
la structure réticulaire.

FIG. 9. Tube du corps de Wolff de l'embryon qui a fourni les fig. 4, 5, 6.

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Microsporidies

parasites des larves de Slmuliam

THELOHANIA VARIANS

PAR

le D^ Paul DEBAISIEUX.

Assistant a l'Institut de Zoologie de l'Université de Louvain.

(Mémoire déposé le 2S juin igi3.)

Microsporidies parasites des la ves de Simulium

THELOHANIA VARIANS

INTRODUCTION.

La microsporidie dont nous abordons l'étude fut observée d'abord par
Léger (97) dans les larves aquatiques d'un diptère, le Simitlnini. Il la dé-
crivit sous le nom de Glugea variaiis. Depuis Lutz et Splendore (03-04),
ayant retrouvé la même espèce, ont noté qu'elle diffère des Glugéides; et
se basant sur le fait que le sporonte donne généralement huit spores, ils la
rangèrent dans le genre Thelohania, Sp. indet. Il convient de rendre à cette
microsporidie le nom spécifique qui lui fut, et à juste titre, donné par
Léger. Nous l'appellerons donc Thelohania l'arians.

Cette espèce constitue un excellent matériel de recherches; grâce aux
dimensions relativement considérables et à la grande clarté de certaines
périodes de l'évolution, notamment de la fécondation, elle permet de ré-
soudre plusieurs questions importantes et controversées. Comme on s'en
rendra compte cependant, ce travail est loin d'épuiser toutes les questions
pendantes, et à côté de quelques affirmations nouvelles, il reste beaucoup
de points encore obscurs. La comparaison avec d'autres espèces de mi-
crosporidies, dont nous poursuivons l'étude, permettra, nous l'espérons,
d'élucider encore quelques-unes de ces difficultés. Malgré les lacunes nous
n'hésitons pourtant pas à livrer les résultats acquis; ils pourront servir de
guide à d'autres chercheurs, faciliter leur tâche, ou même, nous l'espérons,
stimuler leur esprit de critique.

48

Paul DEBAISIEUX

Le matériel qui servit à cette étude a été trouvé dans des larves de
Sitnuliiim reptans L. ('); celles-ci furent récoltées en abondance dans un ruis-
seau des environs de Louvain, à la fin de l'hiver. Quelques larves pour cent
seulement étaient infestées; elles se reconnaissent à ce que toute la partie
postérieure du corps est opaque et blanchâtre plus ou moins distendue sui-
vant l'intensité de l'infection; parfois même des masses parasitaires font
hernie à la surface du corps dont elles refoulent la paroi. Les parasites se dé-
veloppent surtout aux dépens du tissu adipeux de l'hôte; ils forment un ou
plusieurs amas denses irréguliers qui se trouvent dans la partie postérieure
de la cavité générale du corps, où ils se moulent sur les divers organes.
Dans ces amas, les individus sont tassés sans aucun ordre; tous les stades,
les plus jeunes et les plus âgés sont entremêlés.

Il existe d'une larve à l'autre de grandes différences dans l'aspect et la
dimension des colonies, dans la dimension des parasites à un même stade
et la fréquence des stades, enfin même dans des détails d'évolution. Nous
avons eu parfois beaucoup de peine à coordonner les variantes et à les rap-
procher d'un même t3pe; nous donnons en appendice la description d'une
infection s'éloignant à tel point du type général que nous supposons qu'elle
est provoquée par un parasite d espèce différente.

Les méthodes employées furent diverses. Nous avons eu recours d'abord
à l'observation sur le vif, et les spores furent soumisec à l'action de réactifs
variés afin de provoquer la dévagination du filament spirale. Le seul pro-
duit qui nous ait donné des résultats à ce point de vue est l'acide chlorhy-
drique très dilué. Les frottis fixés et colorés sont utiles pour l'étude de la
structure des spores, mais ne permettent que des observations fort incom-
plètes de tous les autres stades. L'étude la plus approfondie a été faite sur
des coupes.

Les fixateurs qui ont donné les meilleurs résultats sont les liqueurs de
BouiN et de Zenker; il est bon, afin de permettre la parfaite pénétration
du liquide, de sectionner les larves et même parfois de disséquer les amas
parasitaires. Les meilleures colorations furent obtenues par l'hématoxyline
au fer de Heidenhain; nous avons été très utilement guidé, surtout dans
l'étude des spores, par l'emploi des colorants différentiels, tels que les mé-
langes de Giemsa, de Romanowski et de Borrel.

(') La détermination de l'espèce a été aimablement faite par le docteur Goetgebûhr, il ne
pourra se prononcer avec certitude que lorsqu'il nous aura été possible de lui procurer l'insecte adulte.

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULTUM 49

Multiplication végétative ou agame.

Le cycle complet de révolution du Thelohania parians comprend deux
périodes; la première, végétative ou agame, se termine par la production
d'individus qui subissent la fécondation; durant la seconde période, sexuée,
les individus fécondés se transforment en spores.

Toute la période sexuée, la fécondation et la sporogonie, est très carac-
téristique et de sériation aisée et évidente; par contre la multiplication végé-
tative peut se présenter sous divers aspects et son étude est beaucoup plus
difficile; la tâche est facilitée par le fait que les stades de même aspect
sont présents, parfois exclusivement, parfois en majorité, dans une même
larve, et que souvent des individus à peu près au même stade sont groupés.
Il est ainsi possible d'établir des sériations avec un minimum de lacunes.

En suivant ces données, nous avons établi plusieurs séries qui appar-
tiennent toutes à la période végétative, car toutes se terminent par la pro-
duction d'éléments analogues possédant deux noyaux destinés à se fusion-
ner, c'est-à-dire à subir la fécondation.

Il ne nous fut pas toujours possible de rapprocher ces divers aspects
entre eux en les rattachant à leur stade d'origine; nous discuterons cette
question au cours de la description, en faisant ressortir les points encore
énigmatiques ou douteux.

Premier aspect.

Les parasites les plus jeunes, ou plutôt les plus simples que nous avons
rencontrés dans nos préparations, se présentent sous forme de toute petite
masse protoplasmique, possédant un no3'au en voie de division, fig. 5, 6.
Cette division, pour autant que la petitesse de l'objet permette de s'en
rendre compte, est d'un type amitotique très simple Les divisions nucléaires
se succèdent très rapidement, sans période de repos, et même les deux
noyaux-filles d'une division sont encore intimement accolés que déjà la di-
vision suivante est très avancée, fîg. 9-i2.

Les parasites provenant de ces premières divisions se présentent sous
différentes formes : a) le plus souvent ils sont uni- ou binucléés et perdus
dans la masse énorme de parasites de tout âge. Plus rarement, le cloison-
nement du protoplasme ne suit pas aussi rapidement la division nucléaire,
et l'on peut rencontrer des mérontes à 5 ou 6 noyaux en division, fig. 13.

5o Paul DEBAISIEUX

b) D'autres fois les limites des parasites sont moins nettes, ils se
trouvent disséminés dans le protoplasme de la cellule hôte et l'on trouve à
côté d'eux les noyaux à peine modifiés de ces cellules, fig. 14, 15. Le pro-
toplasme des cellules hôtes parait pouvoir se développer considérablement
et contribuer à former la masse fondamentale au sein de laquelle plongent
les parasites à tous stades.

c) Dans u-: troisième cas, que nous avons rencontré en abondance en
un endroit localisé d'une colonie de parasites, les mérontes présentent une
multiplication assez particulière. Ils se montrent sous forme de petits in-
dividus fort allongés et étroits contenant des éléments chromatiques très
irrégulièrement disposés, tantôt en longue traînée unissant deux amas ter-
minaux plus développés, fig. i7, tantôt en granules et bâtonnets irréguliè-
rement disséminés, fig. 18, tantôt en petits amas isolés, fig. 19-20. Ces
aspects pourraient faire croire à une multipartition simultanée aux dépens
d'une espèce de chromidium, mais nous croyons plutôt à une multiplica-
tion rapide par bipartitions successives, à rapprocher de la multiplication
représentée fig. 13. Le processus est certainement exceptionnel et évolue
très irrégulièrement.

Les parasites à no3'aux doubles accolés peuvent encore se multiplier :
chacun des deux noyaux peut se diviser à son tour, parfois dans le sens lon-
gitudinal, et l'on trouve alors quatre noyaux d'abord unis, fig. 23-24, puis
s'isolant par paires, fig. 27-28, de façon à donner de nouveau des individus
à deux noyaux-filles accolés. (Les fig. 24 à 26 pourraient être considérées
comme étant déjà les premiers stades de fécondation, fig. 57-62.)

Quelle que soit la forme des multiplications végétatives de ce premier
type, elles aboutissent toujours à la formation de parasites possédant un
protoplasme non cloisonné, dans lequel plongent deux noyaux largement
accolés et qui sont les noyaux-filles provenant d'une division inachevée,
fig. 29.

Deuxième aspect.

Dans plusieurs larves infestées nous avons rencontré une multiplication
végétative du parasite à aspect tout différent de celui que nous venons
d'étudier.

Il est certain que l'on se trouve en présence de multiplications végéta-
tives, car l'évolution se termine par la production de parasites à deux

MiCROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 5l

noyaux-filles destinés à se fusionner; au reste cette évolution est essentiel-
lement analogue à celle du premier type et ne parait être qu'une modalité
spéciale du phénomène.

On pourrait se demander si cette forme de multiplication végétative ne
caractérise pas une espèce distincte. De fait, elle ne se rencontre pas avec
les formes précédentes; cependant dans les deux cas d'infection le cycle gé-
néral et bien des stades sont analogues, et les variantes qui les distinguent
ne sont pas assez importantes pour justifier actuellement la création d'une
espèce nouvelle.

Nous parlerons en appendice, p 62, d'une forme d'infection qui pos-
sède des caractères beaucoup plus différents et qui probablement n'est pas
due au Thtlohauia variaus.

Dans le deuxième aspect, qui nous intéresse ici, le parasite libre,
beaucoup plus grand que dans le premier cas étudié, est constitué d'une
masse de protoplasme dans laquelle plongent et se multiplient les noyaux,
FiG. 32-35. Ceux-ci, assez volumineux, se composent d'un réseau irrégulier
supportant des blocs et des grains chromatiques. Nous n'avons pas observé
que dans ce noyau existe un véritable caryosome.

Ces noyaux se multiplient par une amitose fort simple, ils se déve-
loppent, s'allongent et se cloisonnent transversalement. C'est sous cette
forme de deux moitiés intimement accolées que l'on rencontre le plus fré-
quemment les noyaux. C'est également avec cette forme de noyau double
que les individus s'isolent de la plasmodie, soit que des bourgeons se sé-
parent de la masse, soit que la masse totale se segmente. C'est dans ce
dernier cas que l'on rencontre les parasites disposés en rosette à individus
plus ou moins nombreux, fig. 36.

Le stade final de ce second type d'évolution schizogonique est le même
que celui rencontré dans le premier type : un individu possédant dans un
protoplasme unique un volumineux appareil nucléaire formé de deux moi-
tiés intimement accolées.

Les jeunes mérontes que nous venons de décrire dans ces deux pre-
miers aspects, paraissent provenir, en grand nombre du moins, de la libéra-
tion sur place du germe amiboïde d'une spore, mais très probablement
d'une spore non mûre ou d'une variété de spore non durable et dépourvue
de capsule polaire.

1° Nous avons en effet souvent observé des spores, parfois de dimen-

52 Paul DEBAISIEUX

sions normales, fig. 4, parfois volumineuses, fig. 1-3 et 30-31, qui sont très
transparentes et ne fixent pas les colorants de façon aussi stable que les
spores normales. Dans ces spores nous n'avons pas vu de capsule polaire,
mais on y voit une ébauche de division nucléaire, fig. 4, et même deux ou
trois noyaux, fig. i-2 et 31. Le contenu de ces spores ressemble énormé-
ment aux jeunes mérontes, FIG. 4-6 et 31-32.

2° Le fait que des parasites de tous stades sont mêlés, que des mé-
rontes se trouvent au milieu des amas de spores, s'explique facilement par
cette façon de voir.

3"^ Il est peu probable que ce soit une spore durable qui libère son
germe amiboïde dans l'hôte, car nous n'avons jamais pu mettre en évidence
dans l'hôte des spores ayant dévaginé leur filament polaire. Il est vrai que
ce filament est fort difficile à voir, mais on sait que sa dévagination de-
mande un milieu de réaction très spéciale qui probablement ne se rencontre
que dans le tube digestif.

Troisième aspect.

Dans les larves qui montrent également le premier aspect de multipli-
cation végétative, on rencontre, parfois en grande abondance, des individus
à aspect tout particulier et dont l'évolution présente un grand intérêt.

Ces parasites sont uninucléés et plongent dans l'amas des parasites ou
dans le protoplasme de la cellule hôte, fig. 38-39. Le noyau très colorable
est parfois réticulaire granuleux sans structure bien définie, d'autres fois il
présente une sphérule chromatique entourée d'une zone fortement colorable
qui supporte souvent quelques granules. Autour du noyau existe une aire
claire ressemblant à une vacuole, mais qui semble occupée par le proto-
plasme du parasite, fig. 38. Quand ces jeunes individus évoluent, la sphé-
rule centrale du noyau se divise et bientôt chacune de ses moitiés se montre
nettement formée de deux portions chromatiques élémentaires. Entre les
deux amas polaires ainsi formés apparaît une espèce de plaque équatoriale
qui se montre comme un filament colorable, terminé par un petit renfle-
ment à chaque extrémité, fig. 39-40. Le noyau se trouve ainsi divisé en
deux moitiés séparées par une mince cloison; chaque moitié possède deux
granules essentiels. Ce noyau devient plus lâche et se transforme en noyau
double typique, fig. 38-39, 41-42.

Mais des parasites du même type, fig. 43, peuvent évoluer tout
différemment et se diviser par une amitose du type très élevé. Le noyau

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 53

assez dense, montre de nombreux granules et des travées chromatiques,
FiG. 43, 44. Tout le noyau s'étire fortement et les granules se condensent
de plus en plus aux deux pôles, formant deux masses qui s'isolent peu à
peu, FIG. 44-54.

Les deux amas polaires sont d'abord reliés par de nombreuses travées,
elles se réduisent bientôt à deux filaments principaux qui portent en leur
milieu un épaississement chromatique, fig. 47-49. Pendant que se produit
ce que nous pourrions appeler la télophase, on observe souvent que, de
même qu'il y a deux filaments unissants, il existe dans chaque amas polaire
deux masses chromatiques plus ou moins distinctes et individualisées,
fig. 49-52. Nous avons même exceptionnellement observé des aspects ana-
logues à ceux décrits dans le second type d'infection, p. 64, fig. 121-122,
où la division parait donner quatre noyaux-filles, comme si le noyau primi-
tif était déjà divisé. Finalement le protoplasme envahit l'espace libre entre
les deux noyaux-filles et entre eux persiste longtemps un ou deux filaments
unissants, fig. 55-56.

Il nous fut impossible de déterminer avec certitude c]uelle est l'origine
de ces aspects du parasite. La conception la plus simple serait de considé-
rer que les premiers stades sont des individus végétatifs isolés se rattachant
par exemple aux stades de nos fig. 14 et 15. Le polymorphisme que l'on
observe dans cette espèce permettrait cette façon de voir, qui se trouve ap-
puyée du fait que ces stades se rencontrent parfois isolés, parfois groupés
autour des noyaux-hôtes dans des cellules à peine parasitées comme dans
la fig. 14; les amitoses nucléaires sont différentes de celles c}ue l'on ob-
serve généralement dans la multiplication végétative du Thelohania l'ariajis;
elles ne sont cependant pas toutes aussi parfaites que celles de nos dessins
et ne constituent pas un argument décisif contre cette première interpréta-
tion, qui parait la plus logique.

Une seconde hypothèse est cependant possible. Les stades initiaux
de cette évolution seraient des sporoblastes qui ne se développent pas en
spore, mais qui régénéreraient directement des individus végétatifs. Cette
interprétation se base :

1° Sur le fait que les noyaux denses, à sphère centrale ou à granules
et réseau chromatiques ressemblent étonnamment aux noyaux de sporo-
blastes contenus dans le sporonte, fig. 86, 92, et que des noyaux déjà divi-
sés, à quatre granules et plaque transversale, se rencontrent également dans
les sporontes.

54 Paul DEEAISIEUX

La FiG. 37 représente un de ces sporoblastes observés dans le sporonte.

2° Sur le fait que les amitoses de type élevé que nous observons ici
sont analogues aux aspects de division des sporoblastes, fig. 83, 84, 87, 90.

Enfin il est possible que les individus nés de ces amitoses élevées se
transforment en spores, mais il est impossible d'affirmer le fait, car les
nombreuses spores aux premiers stades de leur formation, que l'on rencon-
tre librement dans les amas parasitaires, peuvent fort bien provenir de spo-
rontes prématurément éclatés.

Quelle que soit l'origine de ces derniers aspects des éléments vé-
gétatifs, ils présentent un grand intérêt, parce qu'ils prouvent à l'évidence
que les deux noyaux accolés du stade final de l'évolution végétative,
FIG. 29. 41, 42, sont certainement des noyaux-filles provenant d'une divi-
sion, et ce fait a son importance, car, lors de la fécondation, ce sont ces deux
noyaux qui se fusionnent.

La description que nous venons de donner de la période de multipli-
cation végétative, concorde en partie avec les descriptions généralement
admises. Cette période fut observée chez la plupart des microsporidies et
évolue par divisions amitotiques du noyau et segmentation du proto-
plasme (Stempell, 02, Schruder, og, Hesse, 04, Mercier, og, Swellen-

GREBEL, 12).

Fréquemment les mérontes restent accolés en chapelet, dans d'autres
espèces ils restent unis en plasmodie; enfin le polymorphisme dans une
même espèce, comme c'est le cas ici, fut aussi observé plusieurs fois, no-
tamment par Stempell (04), mais surtout par Fantham et Porter (12) qui
observent des variantes ressemblant beaucoup à plusieurs de celles que
nous observons nous-méme dans le premier aspect. Une multiplication
végétative par bourgeonnement à aspect très particulier fut sommairement
décrite par Dunkerley (12) dans une microsporidie de la mouche domes-
tique.

Dans quelques espèces de microsporidies, le Nosema anomalutn
(Stempell, 04, 10, Awerinzew et Femor, ii), le Myxocystis (Hesse, o5),
on a décrit des formes végétatives très particulières. Elles possèdent un
noyau énorme, ramifié, irrégulier, qui, par bourgeonnement de petits noyaux
secondaires, donnerait les jeunes mérontes. Cette interprétation est re-
poussée par Schuberg (10), Mrazek (10), Schroder (09) et d'autres. Ils
envisagent les grands noyaux comme appartenant aux cellules hypertro-

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 55

phiées de l'hôte et n'admettent pas la production de mérontes à leurs dé-
pens. Dans le type d'infection qui nous occupe, nous avons rencontré de
grands noyaux mêlés aux parasites et appartenant certainement aux cellules
de l'hôte; ils en ont gardé l'aspect et ne sont ni irréguliers ni ramifiés,
FiG. 14, 38. Mais nous rencontrerons de grands noyaux analogues à ceux
décrits par Stempell (04) dans le second type d'infection, dont nous nous
occuperons en appendice. A cet endroit (p. 64) nous discuterons en détail
la signification qu'il convient de leur attribuer.

Multiplication sexuée.
1. Fécondation.

Comme nous venons de le voir, l'aboutissant de la multiplication agame,
quel qu'en soit le type, est toujours un individu à deux noyaux intimement
accolés; ils sont les noyaux-filles provenant de la division d'un même
parent.

Le parasite ainsi constitué grandit, les noyaux subissent quelques mo-
difications et finalement ils se fusionnent; l'individu né de cette autogamie
se transforme en sporonte, puis en sporoblastes.

Nous nous trouvons en présence du stade nommé pansporoblaste par
beaucoup d'auteurs; mais ce terme assez vague prête à confusion, parce
qu'il fut très différemment employé et de plus il n'implique pas l'idée de
fécondation; nous appellerons donc diplocaryon aiitogainiqiie cet individu
binucléé qui sert de point de départ à la multiplication sexuée.

Le diplocaryon autogamique se présente sous forme assez irrégulière,
généralement un peu allongée, suivant le sens d'accolement des deux
noyaux, fig. 57. Le protoplasme est de structure uniforme, à contours peu
distincts, les noyaux sont assez volumineux, contenant un réseau plus ou
moins colorable et un amas chromatique irrégulier. Ils montrent souvent
à l'état d'ébauche une division suivant le grand axe de l'appareil nucléaire
double, FIG. 58-62; l'un des granules est expulsé dans le protoplasme et
disparaît complètement, fig. 62.

Il convient de remarquer la ressemblance des stades 58, 5g, 60 avec
les formes grégariniennes de Pérez [oSa). Nous n'avons malheureusement
pas pu comme lui observer sur le vif la motilité de ces formes.

56 Paul DEBAISIEUX

Les noyaux du diplocaryon sont encore le siège d'un second phéno-
mène; la substance chromatique de chaque noyau, réduite maintenant à
une seule masse centrale, fig. 63, s'étire dans le sens de la largeur du
noyau, c'est-à-dire parallèlement à la surface d'accolement des deux noyaux.
Finalement la masse chromatique allongée se scinde et on trouve dans
chaque noyau deux granules, dont l'un plus petit, fig. 64-67. Ce petit gra-
nule est expulsé du noyau principal, entraînant avec lui une portion du
réseau achromatique, fig. 68-71. Le phénomène se passe simultanément
dans les deux noyaux, et symétriquement; aussi à certain moment trouve-
t-on deux petits noyaux complets enclavés dans l'angle d'accolement des
deux grands, fig. 69-70. Les deux petits noyaux dégénèrent, ils se réduisent
de plus en plus, jusqu'à ne plus être finalement que deux granules chroma-
tiques, qui eux-mêmes disparaissent, fig. 70-71.

Plusieurs interprétations de ces phénomènes sont possibles; elles ne
s'excluent d'ailleurs pas l'une l'autre :

a) Les aspects de la première division, fig. 57 à 62, font suite aux
fig. 23 à 25, où le méronte se multiplie par division longitudinale des
noyaux; aussi peut-on croire que la division de la masse chromatique intra-
nucléaire indique ici l'ébauche d'une nouvelle division; cette division avorte
et l'un des granules est expulsé dans le protoplasme.

La seconde division pourrait être analogue à la première, et avoir la
même signification. Il est d'ailleurs possible que l'une des deux divisions
seulement ait lieu dans chaque diplocaryon; rien en effet ne permet d'affir-
mer qu'elles se succèdent, il eût fallu pour cela suivre l'évolution sur le vif,
ce qui fut impossible.

b) Peut-être la seconde division a-t-elle la valeur d'une réduction
chromatique précédant la fécondation, et peut-on attribuer la même valeur
à la première division.

c) Enfin peut-être les noyaux expulsés ne disparaissent-ils pas com-
plètement dans le protoplasme, mais y réapparaissent-ils plus tard sous
forme de sphérules chromatiques, dont nous reparlerons bientôt.

Nous croyons plus sage de ne pas trancher maintenant ces questions,
et d'attendre que des études ultérieures jettent plus de lumière sur ces phé-
nomènes. Il faut remarquer d'ailleurs que ces aspects, très clairs et très
nombreux dans quelques larves, sont moins marcjués dans d'autres.

Les deux noyaux principaux du diplocaryon autogamique subissent
ensuite les transformations qui conduisent à la période essentielle, à la

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 5"]

fécondation proprement dite. Le gros granule chromatique se fragmente
en masses de plus en plus petites et sa substance paraît diffluer sur le réseau
achromatique du noyau, ftg. 72-74.

Celui-ci, tandis que les granules disparaissent, devient plus apparent;
il est formé de longs filaments, repliés et entortillés sur eux-mêmes, et
disposés plus ou moins radiairement par rapport au centre du noyau,
FiG. 75-77. Souvent on observe de très beaux parallélismes entre des fila-
ments voisins. Il convient de mentionner le fait, mais nous ne saurions en
déterminer l'importance, car dans plusieurs préparations cet aspect est
certainement exagéré par les réactifs.

Quand le réseau nucléaire est formé, la membrane séparant les
deux noyaux disparaît sans laisser trace, les deux noyaux communiquent
largement, et les deux réseaux nucléaires entrent en contact, fig. 78-80.
De nombreux filaments chromatiques vont de l'un à l'autre, et s'entor-
tillent irrégulièrement; il devient impossible de délimiter chaque noyau,
mais il ne semble pas cependant qu'il y ait enchevêtrement complet des
deux réseaux.

Dès lors la fécondation est accomplie, et on se trouve en présence d'un
zygote qui est un véritable sporonte; nous verrons bientôt que, sans qu'il y
ait une période de repos, les divisions sporogoniales se produisent.

Au moment où la fusion des deux noyaux s'achève, parfois m.ême plus
tôt, on voit apparaître dans le protoplasme d'abondants granules chroma-
tiques, FiG. 78-81.

Tous les stades de fécondation proprement dite, fig. 72-80, se ren-
contrent en très grand nombre dans le Thelohania variatis, et ne peuvent en
aucune façon être considérés comme aspect accidentel; dans quelques larves,
chaque champ du microscope embrasse plusieurs de ces aspects.

La fécondation proprement dite, telle que nous venons de la décrire, se
présente sous un aspect tout nouveau; mais dans l'objet que nous étudions
elle se montre avec une clarté remarquable, et la sériation et la localisation
de cette période dans le cycle général sont aisées à établir.

1° Le diplocaryon autogamiiiue et tous les stades de fécondation se
distinguent de tous les autres par leurs dimensions beaucoup plus grandes,
et par leurs noyaux volumineux qui contiennent aux derniers stades un
amas de filaments chromatiques tout à fait typique.

2° La sériation, d'ailleurs évidente par l'enchaînement parfait des

58 Paul DEBAISIEUX

stades, est encore confirmée par l'apparition et le développement dans le
protoplasme des granules chromatiques.

3° La localisation de la fécondation immédiatement avant la sporo-
gonie est certaine par le fait que les granules chromatiques se retrouvent et
se développent considérablement dans le sporonte.

4" La localisation de la fécondation immédiatement après la période
végétative est prouvée par 1 identité du stade initial de l'une et final de
l'autre, et la relation entre ces deux stades permet en même temps de con-
sidérer la fécondation comme une autogamie.

Nous discutons plus loin, à propos du cycle général d'évolution, les
descriptions très différentes données jusqu'à présent pour la fécondation;
mais ici nous voudrions attirer l'attention sur ce fait que plusieurs auteurs
ont décrit, — ou dessiné — un stade binucléé à la fin de la période végéta-
tive (ScHRôDER, oS, Ohmeri, 12, Fantham et Porter, 12, notez surtout la
fig. 45 de ces derniers); mais ils observent qu'une dernière division donne
deux éléments uninucléés isolés.

Peut-être de nouvelles études montreront-elles une caryogamie là où
l'on avait cru à une division.

2. Sporogonie.

a) Fonnatioii des sporoblastes.

Le noyau du sporonte, après la fécondation, ne subit pas de période de
repos. Il s'étire en long et le réseau, très uniformément réparti, ne montrant
plus trace du dédoublement antérieur, remplit la cavité nucléaire, fig. 81.
Quelques granules chromatiques, parfois réduits à deux granules princi-
paux, sont supportés par le réseau.

Le noyau s'étire de plus en plus en longueur, se condense aux deux
extrémités, et la première division sporogoniale s'achève suivant un type
d'amitose assez élevé, fig. 82-84, et fort semblable à celui que nous avons
observé et décrit p. Sa, fig. 43-56, à propos du troisième aspect des multi-
plications végétatives. Par trois divisions nucléaires successives, toutes du
même type, le sporonte donne naissance à 8 noyaux, fig. 87-94; après
chaque division les noyaux traversent une période de repos, ils deviennent
sphériques, et montrent quelquefois un réseau filamenteux et des granules

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 5g

chromatiques, fig. 91. Parfois la condensation nucléaire s'accentue, et la
substance fondamentale du noyau devient plus dense et plus colorable; par-
fois même tous les éléments chromatiques se réduisent à un seul gros gra-
nule, FIG. 92.

Le protoplasme montre durant cette période des particularités intéres-
santes. Au moment de la fusion des deux noyaux de la copula, on observe
qu'il supporte quelques granules chromatiques, fig. 78-79; ceux-ci se déve-
loppent énormément lors de la première division sporogoniale, et se dis-
posent annulairement autour du sporonte, fig. 83-84. Bientôt, dès la
première division sporogoniale apparaît une masse homogène, colorable,
quoicjue irrégulièrement, par les colorants ferriques (généralement décolorée
sur nos dessins, fig. 88 et suivantes). Cette substance envahit tout le spo-
ronte et refoule le protoplasme dans une petite zone autour de chac|ue
noyau de sporoblaste, fig. 91.

Cette substance est en relation avec les granules chromatiques du
sporonte, et nous sommes enclin à lui assigner un rôle dans la formation
des membranes sporales. Nous avons reproduit à dessein, fig. 95-96,
deux sporontes se trouvant côte à côte dans une même préparation,
et ayant subi par conséquent l'action tout à tait identique des réac-
tifs. Dans le premier, les sporoblastes sont dépourvus de membrane
propre, et la substance intercalaire est très chromatique; dans la seconde,
plus avancée, les sporoblastes possèdent leur membrane et sont très chro-
matiques, tandis que la substance intercalaire a perdu sa colorabilité et a
presque complètement disparu. Ces deux aspects donnent l'impression très
nette de la participation de la substance intercalaire à l'édification des mem-
branes sporales. La colorabilité, il est vrai, ne constitue pas un argument
bien fort, car elle est très variable, même dans des sporontes voisins et à
peu près du même âge; mais la dinninution de la masse fondamentale au
moment de l'accroissement des spores et de la formation des membranes,
est plus suggestive.

La formation des sporoblastes telle c]ue nous l'avons observée, évolue
à peu de choses près comme chez le Thelohania giardi d'après Mercier (og)
et la formation des sporoblastes aux dépens du sporonte, par amitoses
successives, est fort généralement observée (Stempell, o2, Schrôder, o8,
Hesse, 04). Ce dernier décrit même -< une sorte de mitose avec stade de
spirème -. Par contre, Pérez (04, o5a) décrit la formation des sporoblastes

6o Paul DEBAISIEUX

par la multipartition simultanée d'un chromidium né de l'éparpillement
des éléments nucléaires du sporonte.

Quant aux éléments chromatiques du protoplasme, ils ont été plusieurs
fois observés (Stempell, 02, Mercier, oSa, 09, Pérez, 04, o5). Ces deux
derniers auteurs les décrivent comme provenant du noyau du sporonte et
Pérez leur attribue un rôle de renforcement des parois sporales.

b) Formation des spores.

L'étude de la formation des spores de microsporidies présente de
grandes difficultés; la forte réfringence de la membrane s'oppose à une
bonne étude sur matériel frais, sa grande imperméabilité s'oppose à l'action
des colorants et surtout à l'action des fixateurs. Aussi la plupart des spores
fixées apparaissent-elles fort mal conservées. De plus, la sériation est diffi-
cile et incertaine.

Léger et Hesse (07) ont décrit la spore de Coccomy xa moroi'i, qui
par le fait qu'elle ne possède qu'une seule capsule polaire paraîtrait se rat-
tacher aux microsporidies, mais la formation se fait absolument comme
pour les myxosporidies. Dans le sporonte (qui ne donnera qu'une seule
spore), se forment cinq noyaux et bientôt quatre cellules. L'une donne la
capsule polaire, deux autres donnent chacune une valve sporale, la qua-
trième, binucléée, donne le germe amibo'ide.

Mercier (o8(3, 09) observe chez le Thelohania giardi la division du
noyau du sporoblaste en 5 noyaux. Ceux-ci, sans qu'intervienne un cloison-
nement, donnent l'un la capsule polaire, deux autres les valves, les deux
derniers le germe amiboïde. Stempell (09-02), dans Nosema bombycis et
Gliigea anomala, décrit une évolution analogue. Sa façon de voir pour No-
sema bombycis (09) vient d'être mise en doute par Ohmori (12), travaillant
la même espèce. Schroder (09), sans être très affirmatif, arrive pour le
Thelohania chœtogastris, aux mêmes conclusions que celles de Stempell.
Fantham et Porter (12) décrivent également cinq noyaux dans la spore et
leur attribuent le même rôle que les auteurs précédents; mais ils observent
d'abord l'inconstar.ce du nombre et des dimensions de ces noyaux, ensuite
ils observent l'existence de la membrane sporale et de la vacuole de la cap-
sule polaire — sans filament spirale — alors que le noyau unique de la
spore ne s'est pas encore divisé. Ces deux faits permettent un certain scep-
ticism.e vis-à-vis de leur interprétation.

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 6l

Nos observations sur la formation des spores de Thelohania varians
furent très laborieuses, et malgré cela elles ont donné iort peu de bons ré-
sultats, et restent très incomplètes; mais elles ne nous permettent aucun
rapprochement avec les schémas d'évolution précédents, et par conséquent
avec le schéma admis pour les myxosporidies; elles se rapprochent par
contre beaucoup des observations de Schuberg (io) sur Pleistophora lon-
gijilis et de celles de Ohmori (12).

Dans les sporoblastes commençant à se transformer on voit un gros
noyau, à structure réticulaire, se porter en un pôle de la masse du proto-
plasme, tandis qu'à 1 autre pôle apparaît une vacuole allongée, fig. 98. La
membrane qui se forme bientôt parait être continue, et rien n'autorise à la
croire formée par un ou deux noyaux valvaires.

Elle est formée probablement par différenciation périphérique du pro-
toplasme du sporoblaste avec participation de la substance fondamentale
qui emplit le sporonte.

A l'intérieur de la membrane, le sporoblaste se rétracte en forme de
poire, le gros bout étant occupé par le no^'au, l'extrémité effilée contenant
la vacuolt-; considérons-la comme antérieure. Cette vacuole supporte anté-
rieurement un granule colorable métachromatique. Nous entendons ce
terme en ce sens que cette substance colorable existe en dehors du noyau
et présente une colorabilité différente de la chromatine nucléaire.

Les colorants de Giemsa et de Romanowski le colorent en rouge, tan-
dis que le noyau est coloré en bleu, fig. 99. Ce granule métachromatique
apparaît souvent dédoublé; en tout cas, restant en rapport avec la vacuole,
il se développe considérablement, fig. lOO-llO.

Une ou plusieurs vacuoles naissent alors dans le protoplasme, assez
irrégulièrement, mais surtout groupées à l'extrémité postérieure, fig. 101-
103. Ces vacuoles se réduisent à une seule, et le noyau toujours unique est
refoulé vers le centre de la spore, fig. 104-110. La masse métachromatique
volumineuse donne de noaibreux fragments c]ui se portent vers l'arrière
fig. 105-109, et entrent probablement en relation avec la grande vacuole
postérieure. Ils masquent parfois tout l'intérieur de la spore. La colorabi-
lité métachromatique disparaît peu à peu; finalement dans la partie posté-
rieure de la spore on devine le filament spirale, fig. 1 12-113.

Le noyau du sporoblaste est resté caché pendant la dernière période
de formation de la spore, masqué par la masse centrale du protoplasme où
il avait été refoulé au début. Dans la spore achevée on trouve une vacuole

10

62 Paul DEEAISIEUX

antérieure avec une masse centrale sphérique fort estompée que l'on pour-
rait prendre pour le noyau. Mais nous sommes tenté de croire qu'en
réalité il reste caché dans le protoplasme ainsi que Schuberg (io) l'a vu
après être parvenu à le colorer parfaitement. La question se pose alors,
de savoir si le noyau reste unique, ou bien s'il se divise comme l'ont ob-
servé Stempell, Mercier, Schrôder.

Nous ne pouvons y répondre, mais cette division n'aurait à nos yeux
que peu d'importance constituant simplement une division végétative pré-
coce, comme nous l'avons vu antérieurement dans les spores non durables.

Nos observations ne nous ont pas montré de noyaux valvaires, et si
l'on veut rapprocher le granule métachromatique d'un noyau capsulogène,
il faut convenir qu'il n'évolue guère comme un noyau. Nous nous rallions
à l'avis de Schuberg (io), qui n'admet pas de véritable capsule polaire bien
limitée, mais seulement un filament spirale, et nous sommes tenté de rap-
procher le mode de formation de ce filament de celui qui fut décrit par
Moroff (io) pour les cnidoblastes de cœlentérés, et par Awerinzew (o8)
chez les myxosporidies. Ils décrivent le filament spirale comme formé par
des chromidies.

Ajoutons enfin que le Thelohania i^arians possède, comme la plupart
des microsporidies, des spores de dimensions très différentes (Auerbach, io,
Hesse, o3, a et b, Schrôder, og, Léger, 97, Dunkerly, 12, Schuberg,
10). — Sauf \'aney et Conte (01), qui ont cru que ces différentes spores
propageaient l'infection les unes dans l'hôte même, les autres dans un nou-
vel individu, on n'a jamais attribué de rôle différent à ces différentes spores
et la question de leur signification, de leur structure peut-être, reste encore
pendante.

APPENDICE.

A. Infection de type différent.

Dans quelques larves de Siintiliuni nous avons trouvé des parasites
différant notablement de ceux que nous venons de décrire.

Nous avons dit plus haut que le Thelohania varians est assez poly-
morphe; à propos du deuxième aspect de multiplication végétative, nous
nous sommes demandé si l'on ne se trouvait pas en présence d'une espèce

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 63

différente. Cette fois nous hésitons encore davantage à ranger sous la même
dénomination les parasites dont nous allons nous occuper, car ils diffèrent
du premier type :

1° Par l'aspect général des colonies;

2° Par la réaction qu'ils provoquent dans les cellules de l'hôte;

3° Par le nombre plus grand des spores nées d'un sporonte, et par la
formation de ces spores, qui, à aucun moment, ne sont noyées dans une
substance amorphe appartenant au sporonte;

4° Enfin par de grandes différences dans la multiplication végétative.

L'aspect extérieur des larves parasitées est identique dans les deux
types d'infection, et les deux types se rencontrent dans les larves récoltées
le même jour et exactement au même endroit; quant à l'aspect général de
la coupe, il diffère. Dans le type cjui nous intéresse ici, les parasites sont
groupés en masses volumineuses et s'y trouvent assez régulièrement ordon-
nés; la colonie est à certains endroits nettement séparée des tissus voisins
par une zone externe densifiée et différenciée, fig. 115, 120. Les stades
jeunes sont situés à la périphérie, chaque individu se trouvant dans une
alvéole de substance hyaline homogène, fig. 115-116, et de la périphérie
vers le centre se dirigent des travées rayonnantes formées de parasites à des
stades de plus en plus avancés. Tout le centre de la masse parasitaire et
l'espace libre entre les travées sont occupés par des spores libres. Enfin à la
périphérie, en dedans de la couche différenciée, il existe de nombreux
noyaux volumineux et irréguliers appartenant aux cellules-hôtes.

On remarquera combien cette description se rapproche de celle que
donne Pérez (o8), malheureusement sans figures, pour le Diiboscqia Legeri;
comme de plus, le Duboscqia est la seule oligosporée qui contienne plus de
huit spores (Pérez en obser\e i6), nous sommes tenté de rapprocher de
ce genre le parasite qui nous intéresse ici.

L'évolution de ce parasite est analogue dans ses grandes lignes à celle
que nous avons décrite pour le premier type d'infection; nous ne pouvons
en approfondir l'étude autant que nous voudrions, parce que nous n'avons
que peu de matériel à notre disposition et que ce matériel est moins favo-
rable que celui du premier type, la fixation étant rendue difficile par l'exis-
tence du tissu homogène dans les alvéoles duquel chaque parasite est isolé.

Les stades jeunes que nous avons rencontrés sont des mérontes assez
volumineux à un seul noyau très simple formé d'une sphérule chromatique
qui plonge dans une vacuole claire. Ces mérontes deviennent bientôt binu-

64 Paul DEBAISIEUX

cléés, et c'est l'aspect sous lequel ils sont le plus fréquents, fig. 114-i 15-116.
Ils prennent à certain moment un aspect caractéristique : la substance
chromatique se développe beaucoup autour des granules nucléaires et forme
deux hémisphères très colorables, séparés par une large fente claire,
FIG. 117-118-119. Nous croyons que cette transformation prépare le diplo-
caryon autogamique, et la fig. 1 19 justifie cette façon de voir.

Le diplocaryon autogamique, fig. i2G, j27, se présente comme celui
que nous avons décrit plus haut, comme un individu à protoplasme inseg-
menté, dans lequel plongent deux no3'aux volumineux et largement accolés.

La formation des sporoblastes se fait par des divisions analogues à
celles que nous avons observées dans le premier type d'infection. Les spo-
roblastes provenant d'un même sporonte, restent groupés en rosette; nous
en avons fréquemment observés plus de 8 par sporonte, mais il nous fut
impossible sur coupes de déterminer exactement leur nombre. Pendant la
sporogonie de nombreux fragments chromatiques occupent la surface des
sporoblastes, fig. 128-129, parfois deux masses latérales rappellent les
noyaux valvaires décrits par Mercier (og), mais nous ne pouvons leui- at-
tribuer cette signification, elles sont trop variables et trop irrégulières.

Parmi les individus évoluant librement, nous avons rencontré des
amitoses analogues à celles décrites pour le premier type, p. 53, et parmi
celles-ci nous avons observé beaucoup de divisions doubles, dont le produit
paraît être quatre noyaux isolés ou plutôt accolés deux à deux, fig. 12 1 125.
La signification de ce phénomène nous échappe.

Nous avons surtout attiré l'attention sur ce parasite encore énigmatique
à cause de l'allure des cellules-hôtes que nous avons rencontrées dans une
des larves infectées.

Elles sont situées, .souvent en grand nombre, à la limite des amas pa-
rasitaires, à l'intérieur de la couche périphérique densifiée. Elles sont hy-
pertrophiées et les noyaux se présentent sous forme de granules, de boudins
ou de blocs très chromatiques, disséminés dans un substratum alvéolaire,
granuleux, à contours très irréguliers, fig. 115-116. De plus, ces noyaux
sont très fréquemment en cinèse, fig. 120. C'est ce dernier fait qui nous
permet de considérer les noyaux en cjuestion comme appartenant à 1 hôte.
En effet, des cinèses comme celle représentée par notre fig. 120 ne peuvent
en aucune façon être considérées comme appartenant à une microsporidie.
Admettant même que les divisions nucléaires du parasite puissent être d'un

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 65

type très élevé, elles n'ont jamais été vues comme cinèses tmssi parfaites
que celles qui nous intéressent; et de plus, le noyau végétatif du parasite
ne se diviserait pas par cinèse, alors que par bourgeonnement il a donné
des parasites qui s'y trouvent encore accolés, fig. 120.

Cette façon de voir concorde avec celle de Schrôder (og), Mrazek ((o)
et ScHUBERG (lo); de même avec celle de Mercier {oSb), qui constate que
des microsporidies provoquent, notamment dans des cellules adipeuses,
l'apparition de cinèses anormales. Par contre, elle est en opposition avec
l'interprétation de Hesse (o3), Pérez (o8) et Stempell (04). Ce dernier
surtout, dans une note plus récente (10). soutient énergiquement sa façon de
voir contre Schrôder et Schuberg, qui l'ont contredite. — Il considère les
grands noyaux hypertrophiés des colonies de Glugea auonmla comme re-
présentant un stade végétatif du parasite, ces noyaux par bourgeonnement
donneraient des sporontes. Awerinzew et Femok (ii) confirment cette fa-
çon de voir et décrivent le détail — au moins étrange — de la transforma-
tion du grand noyau.

En présence d'affirmations contradictoires aussi catégoriques et n'ayant
pas en main le matériel qui fait l'objet principal de la controverse (Glugea
anomala), nous n'osons pas trancher la question. Ce qui est certain, c'est
que dans notre matériel nous avons trouvé, dans les amas parasitaires à
l'intérieur de l'enveloppe densifiée externe, des noyaux hôtes anormaux, et
cette constatation anéantit le principal argument de Stempell (10), qui
considère que les amas de parasites étant isolés du tissu de l'hôte par une
membrane propre, la présence des noyaux hôtes à son intérieur n'est pas
probable.

Nos observations ne prouvent évidemment pas que de grands noyaux
végétatifs ne puissent pas exister et bourgeonner de jeunes individus. Les
premiers stades de multiplication végétative, qui sont très variables, sont
encore incomplètement connus et l'affirmation de Stempell reste possible.

B. Transmission de l'infection.

Les spores traitées par l'acide chlorhydrique très dilué, dévaginent
leur filament spirale, fig. 132-134.

D'après l'hypothèse la plus probable et généralement admise, le même
phénomène se passerait, après ingestion, dans le tube digestif de l'hôte;
là, le germe amiboïde de la spore se libérerait et traverserait la paroi intes-

66 Paul DEBAISIEUX

tinale. [Strickland (ii) a observé chez les larves de S/mi</n/m infestées,
des cicatrices de la paroi intestinale; il les attribue au passage des para-
sites.] D'après beaucoup d'auteurs il y aurait alors multiplication du para-
site dans le sang, avant que les mérontes ne se fixent sur les tissus.

Les expériences que nous avons faites sur la transmission expérimen-
tale de l'infection par le tube digestif, ne nous ont donné jusqu'à présent
aucun résultat; nous comptons les reprendre à la saison prochaine.

Dans deux des larves fortement infestées, et appartenant l'une au pre-
mier type, l'autre au second (appendice), nous avons rencontré dans la ca-
vité générale du corps une grande quantité d'éléments énigmatiques. Ils
rappellent tout à fait ce que Mercier (og) décrit comme mérontes. Voyez
également Pérez (o5), Stempell (og).

Ces corps de dimensions très variables sont sphériques, intensément
et uniformément colorables par le rouge Congo, et possèdent au centre une
sphère très chromatique (hématoxyline) homogène, fig. 135. Ils se ren-
contrent parfois accolés en chapelet, fig. 141, la masse chromatique est
parfois clivée, parfois un peu granuleuse, elle s'étire en fuseau, fig. 138.
Ces éléments se rencontrent libres et sphériques, ou bien hémisphériques
et largement applic]ués contre n'importe quel élément figuré du corps,
FIG. 138. Ils pourraient certes représenter un stade de multiplication du
parasite dans le sang, mais, et ceci nous rend très sceptique quand il s'agit
de considérer ces éléments comme parasitaires, ils sont très inconstants,
très différents de grandeurs, et surtout la masse chromatique qui devrait
être le noyau, est de dimensions très variables, souvent même complètement
absente, fig. 136, 137, 140. Ces éléments donnent l'impression de sphères
colorables, plus ou moins décolorées par l'alun de fer; tantôt l'action du
mordant n'a agi qu'à la périphérie, tantôt elle a pénétré jusqu'au centre.
Ce pourrait être des gouttelettes graisseuses, peut-être le produit de
sécrétion des cellules séricigènes?

Nous espérons que les expériences d'infection expérimentale, si nous
parvenons à les réussir, permettront de trancher cette question avec certi-
tude.

Le cycle général d'évolution.

Le Thelohania l'arians traverse dans l'hôte une période de reproduction
végétative ou agame. Les jeunes individus sont généralement binucléés, la

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM (i']

division du noyau se faisant dans le germe amiboïde avant, ou immédiate-
ment après sa libération Ces noyaux se multiplient par des amitoses et les
noyaux-filles restent longtemps accolés par paires, souvent jusqu'à ce qu'une
nouvelle division forme deux paires aux dépens de la première. Cette pre-
mière période peut se présenter sous différents aspects, mais elle se termine
toujours par la production d'individus qui contiennent deux noyaux accolés
intimement et provenus de la division d'un même parent.

Ce stade prépare la fécondation : après accroissement les deux noyaux-
filles se fusionnent; cette fécondation doit donc être considérée comme une
autogamie (Hartmann, og).

Le zygote résultant de la fécondation est un sporonte; sans période de
repos, des divisions amitotiques du noyau donnent naissance à 8 sporo-
blastes (nombre inconstant). Chaque sporoblaste évolue en spore. La spore
contient un germe amiboïde primitivement mononucléé, mais il est pos-
sible que ce noyau se multiplie déjà dans la spore par une division végéta-
tive précoce. Nous n'avons pas trouvé dans la spore de noyau capsulogène
ni de noyaux valvaires.

La spore propage l'infection d'un individu à un autre, et n'éclate pro-
bablement que dans le tube digestif d'un nouvel hôte. Nos essais d'infec-
tion artificielle étant jusqu'à présent restés sans résultats, nous sommes
forcé de passer sous silence le détail de cette transmission. Mais il semble
que certaines spores non durables propagent l'infection dans l'hôte même,
en libérant leur germe amibo'ide qui recommence le cycle par multiplication
végétative.

Le cycle évolutif peut se résumer en deux mots : multiplication végé-
tative, fécondation par autogamie, sporogonie.

Si l'on essaie de faire cadrer ce schéma d'évolution avec les types déjà
établis pour d'autres microsporidies, on rencontre de sérieuses difficultés.

La description toute récente de Sw^ellengrebel (12) est celle dont
nous nous rapprochons le plus. Il observe des individus correspondant à
ceux de nos fig. 34-35, et possédant plusieurs noyaux-filles appairés. Ces
individus se segmentent et chaque portion de protoplasme contenant une
seule paire de noyaux, se transforme en une spore qui devient uninucléée
par fusion des noyaux. Swellengrebel considère le premier individu
comme pansporoblaste, les seconds comme sporoblastes à deux noyaux-
filles. Nous nous demandons si ce qu'il considère comme sporoblaste n'est

68 Paul DEBAISIEUX

pas un diplocaryon autogamique; l'espèce qu'il étudie, se rangeant parmi
les microsporidies monosporées, chaque diplocaryon ne donnerait qu'une
seule spore. Nos observations concorderaient absolument avec les siennes
ainsi interprétées, la fécondation précède la formation des sporoblastes. —
Une remarque à peu près analogue peut s'appliquer au travail de Chatton
et Krempf (ii) sur Octosporea miiscœ domesticœ.

Mercier (09) observe chez Thelohania giardi une fécondation qui pré-
cède la sporogonie, mais ses observations diffèrent des nôtres et de celles
de SwELLENGREBEL, en ce qu'il croit à une copulation d'isogamètes (Isoho-
logamie ou pœdogamie de Hartmann). L'une et l'autre description sont
peut-être exactes; rien ne s'oppose à ce que dans des espèces fort voisines, à
cycle évolutif analogue, il y ait chez l'une copulation, chez l'autre auto-
gamie, l'autogamie pouvant fort bien être considérée, ainsi que le fait
Hartmann, comme un mode de copulation en régression.

Une curieuse variante du processus fut également décrite par Mercier
(o5), qui observe que chez une 'l'helohaiiia du Talitre 1 accoleinent des ga-
mètes a lieu comme précédemment avant la formation du sporonte; mais
ks divisions sporogoniales agissent directement sur les deux noyaux, et
donnent 16 à 18 ^^ granules chromatiques - dont la fusion deux à deux n'a
lieu que dans les huit sporoblastes.

Stempell (02-04-09) et Fantham et Porter (12) décrivent la féconda-
tion comme ayant lieu par fusion de deux noyaux du germe amiboïde,
échappé de la spore inùre. Schrôder (09) croit à la possibilité d'une évo-
lution analogue.

On pourrait admettre à la rigueur que pour les espèces monosporées,
la fécondation se fait dans chaque spore ou germe amiboïde par autogamie
entre les deux noyaux-filles du noyau unique du sporoblaste. Cette inter-
prétation s'appliquerait également à la description de Epstein (n), mais
interprétation et descriptions demandent à être confirmées. Pour le Thelo-
hania miïllei-i, espèce octosporée étudiée par Stempell (02), nous espérons,
en nous basant sur quelques préparations que nous avons eues à notre dis-
position, nous espérons que nous pourrons bientôt établir le même mode
de fécondation que celui décrit dans ce mémoire pour le Thelohania va-
riaiis.

l'^nfin. d'après Schiwago (og) il y aurait un mode de fécondation tout
spécial pour Pleistophora periplanetœ : de nombreux individus végétatifs se
fusionneraient et leurs noyaux formeraient un chromidium duquel naîtraient

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 69

de nouveaux noyaux fécondés. Cette description ne cadre pas avec les idées
de Perrin (06), de Mercier (o8), de Epstein (ii) et avec des observations
préliminaires que nous avons pu faire nous-méme sur la même espèce.

CONCLUSIONS.

1. La multiplication végétative ou agame se fait suivant différents
types, et aboutit toujours à la production de diplocaryons autogamiques à
deux noyaux-filles largement accolés.

2. La fécondation précède la sporulation et se fait par autogamie.

3. Les sporoblastes naissent par divisions successives amitotiques du
noyau du sporonte.

4. Des spores non durables peuvent très probablement se développer
directement dans l'hôte même.

5. Dans les spores nous n'avons pu observer ni noyaux valvaires ni
noyau capsulogène.

6. Il existe peut-être deux microsporidies différentes parasites des
larves de Simiiliiim.

7. Dans une de ces espèces il existe dans les amas de parasites des
cellules anormales hypertrophiées appartenant à l'hôte et montrant fré-
quemment des divisions par cinèse.

Il

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1908

1907
1903
1904
igo6

IQoSfl

igoSô

igog

1910
1910
igi2

1904

igo5rt

\qo5b

igo8
igo6

190g

igog
igio

Léger et Duboscq
Léger et Hagcnmiillcr

Léger et Hesse

Lutz et Splendore
»
Mercier

Mcroff

Mrazck

Ohiiiori

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EXPLICATION DES FIGURES.

La combinaison optique (Zeiss) employée pour ions nos dessins fut robjectif i,3o,
dist. f. 2 mill. X oculaire i8 (Grossiss. linéaire 225o) avec tirage du tube exagéré à
iSo mm. La projection fut faite au niveau, de la platine par le prisme Nachet. Nous
donnons une échelle de comparaison d'après le micromètre oculaire de Zeiss.

Les dessins liz et i33 seuls furent réduits au i/3.

Abréviation : n. h. = noyau hôte.

PLANCHE I.

Multiplications végétatives.

FIG. 1-3. A l'intérieur d'enveloppes sporales, les noyaux du germe amiboïde
se divisent.

FIG. 4. Spores petites, le noyau semble se diviser; le contenu des spores
ressemble beaucoup au.x mérontes libres de la figure suivante.

FIG. 5. Mérontes libres, uninucléés et après division.

FIG. 6-8. Division des mérontes.

FIG. 9. Deux mérontes encore accolés se divisent.

FIG. 10-12. Les deux noyaux d'un méronte commencent à se diviser avant
que le protoplasme ne se soit divisé

FIG. 13. Forme plasmodiale; plusieurs noyaux en division dans une même
masse protoplasmique.

FIG. 14. Mérontes, souvent doubles, dans le protoplasme d'une cellule hôte .
n. h., deux noyaux appartenant à l'hôte.

FIG. 15. Mérontes éparpillés dans la substance intercalaire des amas parasi-
taires, probablement protoplasme des cellules-hotes.

FIG. 16. Stades végétatifs, rappelant assez bien le contenu sporal, peut-être
immédiatement après leur libération.

76 Paul DKBAISIEUX

FIG. 17-21. Forme allongée des individus végétatifs, à éléments chromatiques
très irréguliers, ou à plusieurs noyaux.

FIG. 22. Méronte à deux noyaux accolés.

FIG. 23n,h. Multiplication végétative dans le sens de la longueur du méronte.

FIG. 24-2 6. Les no\aux se divisent transversalement, ce qui semble indiquer
une multiplication dans le sens de la longueur. Pourraient être déjà les premiers
stades de fécondation. (Voir plus loin.)

FIG. 27. Forme en chapelet, quatre noyaux accolés deux à deux.

FIG. V8. Noyaux largement accolés deux à deux dans une masse protoplas-
mique commune.

P'IG. 29. Stade final de la multiplication végétative; individu à protoplasme
unique à deux noyaux largement accolés; constitue le diplocaryon autogamique.

FIG. 30. Second aspect de la multiplication végétative; spore volumineuse
avec un grand noyau.

FIG. 31. Deux noyaux à l'intérieur de la membrane sporale.

FIG. 32-33. Plasmodie à deux noyaux.

FIG. 34. Plasmodie à deux paires de noyaux.

FIG. j5. Plasmodie à plusieurs no\aux plus ou moins divisés.

FIG. 36. Le protoplasme s'est cloisonné, les segments restent groupés en ro-
sette, chacun contenant un no\au double, ou en voie de cloisonnement.

FIG. 37. Noyau de sporoblaste, observé dans un sporonte complet. (Dessin
de comparaison avec les stades suivants.)

FIG 38-39. Troisième aspect de la multiplication végétative. Individus isolés
dans la masse intercalaire, à noyau dense, ou bien en voie de division avec deu.x
granules à chaque pôle, ou bien déjà divisé, les deux noj'aux-filles étant largement
accolés par paire, n. h., noyau hôte

I'"l(j. 40. Novau en division, deux granules à chaque pôle et espèce de plaque
équatoriale.

FIG. 41-42. Reconstitution de l'individu à deux noyaux largement accolés,
stade final du troisième aspect de multiplication végétative.

FIG. 43. Deux individus isolés analogues à ceux rencontrés en 38 et 3g.

FIG. 44-45. Noyaux denses s'étirant en long, premier stade de division.

FKi. 46-48. Début de l'amitose.

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM ']']

FIG. 49. Les amas polaires se montrent formés de deux masses assez dis-
tinctes; les filaments unissant les deux pôles supportant un granule chromatique.

FIG. 50-53. Divers aspects de la division amitotique.

FIG. 54-56. Tassement au pôle, le protoplasme envahit l'espace libre entre
les deux noyaux-filles.

PLANCHE II.

Fécondation et Sporogonie.

FIG. 57-62. Division dans le sens de la longueur des noj-aux du diplocarj'on
avec expulsion d'un granule chromatique dans le protoplasme.

FI(r. 63. Diplocaryon autogamique.

FIG. 6 4-67. Division dans le sens de la largeur des noyaux du diplocaryon
et isolement dans chaque noyau d'un granule chromatique.

FIG. 68-71. Expulsion de ces granules chromatiques qui forment dans l'angle
d'accolement des deux grands noyaux, deux noyaux plus petits qui dégénèrent.

FKj. 72-74. La masse chromatique des noyaux de la copula difflue, tandis
que le réseau devient de plus en plus apparent.

FIG. 75-77. Les deux noyaux du diplocaryon montrent des filaments chroma-
tiques nets; la membrane (jui sépare les deux noyaux disparaît.

FIG. 78. Les deux noj-aux du diplocarvon communiquent largement; des gra-
nules chromatiques font leur apparition dans le protoplasme.

FIG. 79-80. Les filaments chrcunatiques des deux noyaux s'entortillent plus
ou moins.

FIG. 81. Le zygote montre un noj-au volumineux à filaments uniformément
répartis. Il constitue le sporonte.

FIG. 82. Début de la première division sporoblastique.

FIG. 83-84. Première division sporoblastique; les granules chromatiques du
protoplasme forment un anneau épais autour du sporonte.

FIG. 85-86. Sporonte montrant les deux noyaux issus de la première division
sporoblastique.

FIG. 87. Seconde division sporoblastique.

FIG. 88. Télophase de la seconde division sporoblastique.

FIG. 89. Sporonte à quatre noyaux; la substance intercalaire envahit tout le
sporonte et refoule le protoplasme autour des noyaux.

78 Paul DEBAISIEUX

FIG. 90. Troisième division sporoblnstique; trois noyaux en division seulement
sont représentés.

FIG. 91-92. Divers aspects de sporontes contenant les sporobla,';tes.

FIG. 93-94. Sporontes contenant les S noyaux de sporoblastes.

FIG. 95-96. Deux sporontes voisins contenant, le premier, des sporoblastes sans
membrane propre et une substance intercalaire chromatique, le second, des spores
ayant déjà leur membrane valvaire.

FIG. 97. Sporoblastes dans le sporonte au moment de la transformation en
spores.

FlCi. 98. Jeune spore contenue encore dans le sporonte.

FIG. 99-100. Apparition du granule métachromatique (en noir intense sur le
dessin) au sommet de la vacuole antérieure.

FIG. 101-103. Divers aspects vacuolairc-s de la spore.

FIG. 104. Spore à masse métachrcimatique volumineuse à ranger peut-être
près de la fig. 110.

FIG. 105-109. De nombreux granules et fragments métachiomatiques se portent
vers la partie postérieure de la spore.

FIG. 110. La masse métachromatique est encore assez volumineuse; la partie
postérieure contient probablement le filament spirale non colorable.

Fie;. 111-113. Spores en voie d'achèvement. Ces trois figures, dessinées d'après
des colorations à l'hématoxyline, laissent deviner le filament spirale postérieur invisible
dans les dessins précédents colorés au Gie.msa et au Romanowski (io5-iio).

Second type de parasite.

FIG. 114. Stades jeunes, uni- et liinucléés.

FIG. 115. Id. avec en plus, grands noj'aux hypertrophiés et différenciation de
la zone externe de l'amas parasitaire.

FIC}. 116. Stades jeunes et noyaux hypertrophiés.

PLANCHE III.

FIG. 117-119. Aspect particulier des noyaux doubles accolés, préparant pro-
bablement, FIG. 119, le diplocaryon autogamique.

MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 79

FIG, 120. Grand noyau hôte en cinèse. à côté des parasites à plusieurs stades.
En dehors zone densifiée externe de l'amas parasitaire.

FIG. 121-124. Divers aspects de division des parasites libres.

FIG. 125. Télophase de la division amitotique d'un parasite libre.

FIG. 126. Diplocar}on autogamique.

F'IG. 127. Stade de fécondation.

FIG. 128-129. Sporoblastes provenant d'un même sporonte et réunis en rosette.
(Le nombre des sporoblastes est incomplètement dessiné.)

FIG. 130-131. Spores achevées. (Hématox3line de Heidenh.mn.)

FIG. 132-134. Spores traitées par l'acide chlorhvdrique, ayant dévaginé leur
filament spirale et dessinées sur le vif. Les dessins i32-i33 ont été réduits au i/3.

FIG. 135-141. Divers aspects des éléments énigmatiques rencontrés dans la
cavité générale du corps.

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Giflèses alypiiiues oens les cellules adipeuses

ne larïes ne Pyrriioeorls aplerus L

avec quelques remarques sur le cenliusome

PAR

J. KOWALSKI,

LICENCIÉ-ÈS-SCIENCES,
DOCTEUR EN SCIENCES NATURELLES DE l'uNIVERSITÉ DE LOUVAIN.

(Mémoire déposé le /"' juillet igi3.)

13

8S

avec quelques remarques sur le centrosome.

[.

§ I. INTRODUCTION.

En nous tenant à ce que dit Berlese dans son ouvrage sur les in-
sectes, non rares sont les observations de divisions cinétiques dans les cel-
lules adipeuses des insectes métaboliques. Cette multiplication cellulaire
est surtout active pendant la mue. Nous n'aurions donc pas cru utile de
signaler les observations que nous avons faites dans les cellules adipeuses
en voie de division d'un insecte hétéro-métabolique, Pyrrhocoris apteriis,
si cette division caryocinétique ne présentait certaines particularités qui
nous semblent intéressantes au point de vue cytologique. Presque toutes
les cellules en division, et elles sont très nombreuses, présentent, soit dans
la figure achromatique, soit dans la figure chromatique, une asymétrie plus
ou moins totale, conduisant à la formation de cellules dissemblables, soit
dans la grosseur, soit dans le nombre de leurs noyaux.

Par ce terme d'asymétrie nous entendons toutes les modalités di-
verses qu'on a signalées, ne rentrant pas dans le cadre de la mitose ty-
pique.

On sait que les mitoses anormales peuvent se classer, d'après Hanse-
MANN, en deux groupes principaux, les mitoses asymétriques, incluant la
variété de mitoses dites hyper- et hypochromatiques, et les mitoses pluri-
polaires.

Le caractère différentiel des premières est une distribution très inégale
aux deux cellules-filles de la substance chromatique de la cellule-mère, ainsi
que la formation de cellules-filles de grosseur différente. Une conséquence
de cette distribution inégale des chromosomes aux cellules-filles est la
formation de cellules hyper- et hypochromatiques, c'est-à-dire de cellules

84 J- KOWALSKI

possédant un nombre de chromosomes plus grand ou moins grand que les
cellules normales de même espèce.

Les mitoses pluripolaires ou mitoses anormales du second groupe sont
caractérisées par la présence de plus de deux centres cinétiques dans la cel-
lule, d'où la formation de plusieurs fuseaux cytoplasmiques. Cette variété
de mitoses atypiques peut conduire à la formation de plusieurs cellules-
filles, qui peuvent être d'ailleurs de taille inégale. Ces divisions cellulaires
atypiques se rencontrent dans les tissus pathologiques, tumeurs cancé-
reuses, sarcomes, ostéosarcomes, inflammations, h3^pertrophies d'organes.
On peut aussi les provoquer expérimentalement en faisant agir divers agents
chimiques sur des tissus en voie de néo-formation.

C'est à Galeotti que l'on doit cette observation chez la Salamandre.
Nemec a constaté aussi de tiès intéressantes variations dans la marche nor-
male de la mitose en soumettant les racines de diverses plantes à l'action
du chloral.

§ 2. LITTÉRATURE.

Pour nous en tenir aux auteurs qui ont signalé des variations mito-
siques dans les cellules adipeuses d'insectes, et dont les observations par là
même se rapprochent des nôtres, nous citerons de Sinéty. Chez un phasme
adulte, Lcptynia attenuata, cet auteur a constaté que les cellules adipeuses
étaient susceptibles de se diviser par cinèses. Les figures mitosiques étaient
très abondantes; l'auteur attribue cette pullulation à une réaction provoquée
chez l'insecte par la présence de plusieurs larves parasites d'un insecte dip-
tère, le Thrixion.

A propos de ces divisions mitosiques, l'auteur fait remarquer : i" que
la division se produit sans qu'il y ait retour à l'état embryonnaire, le mou-
vement se localisant autour du noyau, le reste du cytoplasme étant occupé
par des vacuoles graisseuses; 2° que les tronçons du boyau nucléinien à la
prophase se montrent creusés suivant leur axe d'une cavité tubulaire ; ce
serait la première indication de la division longitudinale des chromosomes;
3° à la métaphase, le nombre des chromosomes apparaît bien supérieur à
celui des divisions somatiques ordinaires; ces mitoses étaient donc hyper-
chromaticjues. L'auteur ne signale pas par ailleurs d'autres anomalies dans
les cinèses.

Le second auteur qui a observe des cytodiérèses atypiques dans les
cellules adipeuses d'insectes adultes est Meunier. Cet auteur a constaté

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES 85

chez une Blatte adulte parasitée par une microsporidie des mitoses dans le
tissu adipeux à Bacillus ciieiioti. Ces mitoses, dit cet auteur, sont le plus
souvent asymétriques et multipolaires. Il admet, indépendamment du pre-
mier auteur cité, dont il semble ignorer et le travail et l'opinion, une rela-
tion de cause à effet entre la présence de la microsporidie et l'existence de
ces mitoses dans les cellules à Bacillus cueiwti.

On le voit donc, ces observations se rapportent à des insectes adultes
et secondement à des insectes parasités. Admettre une relation de cause à
effet entre la présence du parasite et l'existence de mitoses atypiques est
donc fort probable; ces auteurs en effet n'ont pas constaté de semblables
divisions dans des insectes de mêmes espèces normaux.

Ces deux auteurs diffèrent cependant en ce que de Sinéty, comme
nous l'avons dit, afiirme que la division se produit sans qu il y ait retour à
l'état embryonnaire. Meunier, au contraire, soutient que " dans les lobes
où la marche du parasite est lente, les cellules à bacilles éloignées du centre
d'infection réagissent; elles perdent leurs caractères différentiels et font re-
tour au type embryonnaire. Cette réaction des tissus de l'hôte vis-à-vis du
parasite détermine l'apparition d'un tissu de néoformation qui rappelle
certaines tumeurs cancéreuses -.

Dans le cas qui nous occupe nous avons longtemps cherché quelle pou-
vait bien être la cause des nombreuses anomalies que présentent le proces-
sus de la division cinétique, et ne trouvant nul parasite dont la présence
eût pu troubler l'ordre rigoureux de la cytodiérèse, nous avions d'abord
pensé à mettre ces désordres cinétiques au compte de l'état physiologique
particulier où se trouvait l'insecte que nous étudions. Cet insecte, en effet,
était une jeune larve de Pyrrhocoris aptcrus, mesurant de 4 à 5 millimètres
de longueur, qui se préparait à muer, comme le témoignait le liquide parfois
très abondant situé entre l'hypoderme et la cuticule, liquide qui par scui
abondance eût déterminé l'exuviation de la vieille cuticule. Les organes
génitaux mâles étaient encore en voie de développement. Or, ce moment
de la mue, comme on le sait, est pour tous les animaux qui présentent ce
phénomène, et en particulier pour les insectes, un moment critique, phy-
sio-pathologique, amenant dans l'organisme des troubles profonds de nutri-
tion. C'est l'instant de la crise de maturité génitale, comme l'a appelé
Ferez, et c'est cet état particulier qui a servi à cet auteur de base pour
étayer sa théorie de la métamorphose (or, la mue ne diffère de la vraie mé-
tamorphose que par un degré de simplification). Cet auteur, on le sait,

86 J KOWALSKI

suppose en cet instant de la métamorphose la production de toxines et de
stimulines par les disques imaginaux, toxines qui amèneraient la destruc-
tion des vieux tissus, stimulines qui hâteraient le développement des his-
toblastes, petits éléments aux dépens desquels doivent se construire les
tissus neufs. La présence de toxines dans l'organisme en ce moment de la
mue expliquerait cet affaiblissement, cette fragilité de l'organisme qui rend
en effet critique ce passage. Elle expliquerait aussi parfaitement ces ano-
malies dans la division cellulaire, puisque expérimentalement on a pu les
provoquer par l'introduction de poisons dans l'organisme.

Metanilkoff n'a-t-il pas du reste, il y a peu de temps, démontré expé-
rimentalement la présence de substances toxiques dans les tissus des larves
sur le point de subir la nymphose?

Du sang prélevé chez une larve de Galteria, à deux ou trois jours de
la métamorphose, et injecté à une larve jeune, détermine chez celle-ci une
sorte de paralysie passagère.

Mais en étudiant de nouveau très attentivement toutes nos coupes,
nous avons fini par découvrir particulièrement dans une, un amas de bac-
téries. Celles-ci étaient, il est vrai, surtout nombreuses en dehors de la
coupe et pouvaient dés lors faire croire à un apport étranger de ces éléments
au moment du montage de la préparation, mais notre attention ayant été
éveillée de ce fait, nous finîmes par en découvrir au sein même des tissus,
tissu sanguin, tissu conjonctif, tissu adipeux; leur nombre était certes bien
moins grand que dans l'amas signalé plus haut; mais il n'y avait pas de
doute à avoir, ces bactéries provenaient de ce lieu d'infection.

L'étendue du champ d'envahissement était cependant très limité, puis-
que, nous le répétons, nous n'avons trouvé ces bactéries que dans deux ou
trois coupes, sur une centaine que comprenait la section transversale de
l'insecte. Nous croyons cependant, que l'infection des toxines sécrétées par
ces bactéries était suffisante pour s'étendre à l'organisme entier, et provo-
quer ces troubles cinétiques que ce travail a pour but de mettre en relief.
Nous signalons aussi la présence d un organisme que nous avons trouvé
implanté dans le tissu conjonctif limitant en dedans le tissu adipeux. Nous
l'avons dessiné fig. 48. C'est sans doute un organisme parasite; nous
n'avons pu préciser sa détermination. Peut-être est-ce encore à lui que nous
devons rapjorter la cause des troubles cinétiques cellulaires?

Tous ces désordres cependant ne sont pas, à notre avis, imputables
à la présence de toxines au sein de l'organisme. Certains trouvent naturel-

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES 87

lement leur raison dans une action mécanique qu'exerçait dans le terri-
toire cellulaire la présence de très nombreuses et très grosses vacuoles
graisseuses. Il y avait hypertrophie du tissu adipeux, fait déjà signalé à
l'époque de la mue.

C'est à ces deux causes que nous rapportons donc les troubles cyto-
diérétiques observés. Les mitoses asymétriques bipolaires trouveraient
plus particulièrement la raison de leur déformation dans une cause méca-
nique : le tait de très nombreuses vacuoles graisseuses. — Les mitoses
asymétriques pluripolaires seraient les seules vraiment pathologiques dues
à l'infection toxique créée dans l'organisme de l'insecte par les bactéries
dont nous venons de parler. Le fait d'avoir observé de ces mitoses pluripo-
laires dans d'autres cellules, telles que les amœbocytes du sang, semble le
démontrer. La localisation extrême des bactéries, et par suite la faible in-
toxication pour l'organisme entier, plaident encore pour admettre que seul
les mitoses asymétriques pluripolaires, assez rares, relèvent bien d'une
cause pathologique.

Les cellules ne retournent jamais à l'état embryonnaire pour se divi-
ser, comme l'a constaté de Sinéty, et cela est vrai, contrairement à ce
qu'affirme Meunier dans son objet d'étude, aussi bien pour les cellules
adipeuses en division, voisines du lieu d'infection, que pour celles qui en
sont éloignées.

§ 3. iMÉTHODE.

L'insecte étudié avait été fixé au Bouin aussitôt sa capture. Pour la
coloration des coupes, nous ne nous sommes servi que de la méthode de
Heidenhain à l'hématoxyline ferrique, avec un colorant plasmatique, le
rouge Bordeaux. Les chromosomes et les éléments chromatiques apparais-
sent bien nets, noirs, sur le reste de la cellule, qui est d'une couleur rouge
vineux.

§ 4. OBSERVATIONS.

I. Corps adipeux.

Chez la larve de Pyrrhocoris, le corps adipeux ne présente ni cellules
à urates, ni cellules à bactéro'ides, mais seulement les cellules adipeuses
proprement dites. On ne peut non plus distinguer les deux sortes de tissu
adipeux que Berlese a signalées dans beaucoup de larves métaboliques : le

88 J. KO"WALSKI

tissu adipeux distal (compris entre l'épiderme et la membrane péritonéale),
et le tissu adipeux proximal (compris entre cette membrane et le tube di-
gestif).

Dans les cellules adipeuses que nous avons eues sous les yeux, on
n'apercevait aucun produit déposé, graisse ou albuminoïdes. La présence
de larges et de très nombreuses vacuoles au sein du cytoplasme indiquait
seule le dépôt d'une grande quantité de graisse durant la vie, graisse que
les manipulations avaient fait disparaître.

Au milieu de ces cellules adipeuses, au voisinage de la couche épider-
mique, se voient de grosses cellules à protoplasme homogène : les Oeiio-
cytes. Nous n'avons jamais observé chez celles-ci de divisions cellulaires.
Les variations que présentent le chromatisme de leur noyau et de leur
protoplasme témoignent chez les cellules d'un intense métabolisme en ce
moment de la mue. Nous nous proposons d'étudier ces cellules dans un
prochain travail.

2. Cellules adipeuses au repos.

Les limites des cellules adipeuses sont parfois difficiles à préciser :
cela tient à la petite couche de cytoplasme que les vacuoles graisseuses ont
refoulé à la périphérie de la cellule et à l'irrégularité de cette même couche
protoplasmique, du fait des compressions inégales qu'elle a subies de la part
des vacuoles adjacentes. De cette couche périphérique de cytoplasme
partent, par une base élargie, formant pied, des traînées de cytoplasme,
plus ou moins larges, ramifiées, aboutissant à la plage cytoplasmique qui
environne le noyau. Cette plage de cytoplasme est très variable, soit dans
sa position dans la cellule, soit dans sa forme, soit dans ses dimensions.
Les vacuoles graisseuses en grossissant réduisent parfois tellement le cyto-
plasme circumnucléaire, qu'il semble ne plus y en avoir autour de ce der-
nier. Le liquide graisseux vient baigner d'un côté ou d'autre la surface
externe du noyau, et la tension superticielle du liquide vacuolaire étant
plus forte que celle de la substance visqueuse du noyau, celui-ci, de rond
qu'il est lorsque le cytoplasme l'environne de toutes parts, fig. l, 2, devient
irrégulier et se creuse de concavités, fig. 3, 4, 5. Sa position dans la cellule
est aussi le fait des vacuoles, et de central il peut occuper une position tout
à fait excentrique, à toucher la membrane cellulaire.

Le nombre des noyaux est variable. Généralement unique, fig. 1, sou-
vent double, fig. 2, 3, nous avons trouvé des cellules en renfermant jusqu'à

CINESES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES >^g

quatre, fig. 4. Nous verrons plus loin comment se constituent les cellules
plurinucléées.

Faisons remarquer dès maintenant la relation de proportionnalité qui
existe entre la masse du noyau et celle du cytoplasme, proportionnalité
mise en évidence par Hertwig et ses élèves et connue sous le nom de
j' Kernplasmarelation -. Les fig. 2, 3, 4, 8. 32, 33, 34, 44 en sont de bons
exemples.

A l'état soit-disant de repos de la cellule, le réseau nucléaire a peu
d'affinité pour les colorants basiques; on y distingue très nettement, à cause
de leur grande affinité pour ces mêmes colorants, plusieurs nucléoles niiclei-
iiiens.

Ils peuvent parfois, mais rarement, être demeurés réfractaires à la co-
loration par suite probablement d une transformation chimique de leur
substance; leur teinte dès lors voisine celle du réseau nucléaire, c'est-à-dire
qu'ils se colorent, comme ce dernier, par le rouge Bordeaux.

Très souvent, le nombre des nucléoles du noyau est compris entre sept
et neuf, fig. 3, 5; ils sont souvent de même grosseur, sphériques, entourés
parfois d'une auréole claire, fig. l. Plus rarement, ce nombre est dépassé
soit par la présence de beaucoup plus petits nucléoles, également colorés en
noir, soit par la présence de nucléoles égaux aux premiers; une fois seule-
ment, nous en avons compté quinze dans une cellule. Ces nucléoles, que
nous appellerons supplémentaires vu le nombre relativement constant des
nucléoles principaux, proviennent-ils de la division de ceux-ci, nous ne sau-
rions le dire positivement; toujours est-il que souvent lorsqu'il y a des
nucléoles supplémentaires, on les trouve à côté d'un gros nucléole; ceci
semblerait indiquer leur origine aux dépens des gros. Comme l'a constaté
MoNTGOMERY daus Ics œufs de différents groupes d'animaux, on peut dire
que le volume total de la masse des nucléoles est sensiblement constant
dans les noyaux des cellules adipeuses que nous avons observées. Nous di-
sons dans les noyaux et non dans les cellules, car celles-ci pouvant renfer-
mer plusieurs noyaux issus de division atypique, la cellule possède de ce
fait plus de nucléoles que les cellules normales à un noyau. Notons que ces
nucléoles sont en nombre moins élevé dans les noyaux des cellules d'autre
espèce, telle que les œnocytes.

Tous les nucléoles sont indépendants du réseau nucléaire, ce qui se
remarque surtout dans l'état de quiescence de la cellule, où leur affinité
pour les colorants basiques les détache bien de la trame du réseau, qui a

14

go

J. KOWALSKI

plus d'affinité pour les colorants acides. Lorsque la cellule se prépare à la
division, cette différence dans l'affinité de ces deux éléments du noyau s'at-
ténue et à un moment il est très difficile de dire ce que sont devenus les
nucléoles.

Un autre fait, qui rend très difficile d'établir le sort des nucléoles au
début de la prophase, est le fait de l'égalité, en forme, en volume, en nom-
bre quelquefois, des nucléoles et d'un certain nombre des chromosomes qui
se forment à la prophase aux dépens du réseau nucléaire, et apparaîtront
sous leur forme définitive à la métaphase. On sait en effet que, d'après
Gross, l'insecte Pyrrhocoris compte 12 chromosomes dans les cellules
sexuelles et 24 dans les cellules somatiques. C'est bien le même nombre
que nous avons retrouvé dans les cellules adipeuses de l'insecte étudié,
mais ces chromosomes sont d'inégale grandeur : on en compte 16 en
forme de bâtonnet, S en forme de petites sphères ('), fig. 11, 12. Or, les
nucléoles sont souvent en même nombre, ont la même forme, même vo-
lume, même coloration que les petits chromosomes. Dans la fig. 9 pou-
vons-nous dire que les masses irrégulières de chromatine que l'on remarque
dans le noyau en prophase sont les nucléoles, dont la substance passe in-
sensiblement dans le réseau pour contribuer à la formation des futurs chro-
mosomes, ou ces masses sont-elles les ébauches de ces chromosomes que
la concentration des trabécules du réseau, puis des filaments nucléiniens
constitue peu à peu? Nous ne saurions le dire.

La FIG. 7 semblerait plaider en faveur de la première hypothèse. Les
ma.sses chromatiques de ce noyau sont irrégulières avec petits prolonge-
ments. De l'une de ces masses, m, se détache très nettement un filament
plus épais, plus colorable, qui ressemble tout à fait à un fragment du ré-

(1) Comme on peut le voir dans ces mêmes figures, un certain nombre des chromosomes
présentent une division longitudinale. Mais nous voulons attirer l'attention sur les chromosomes q. q',
qui simulent des groupes quaternes, particulièrement l'ensemble des éléments q. Le groupe q' n'est
pas réellement un groupe quaterne, car il est composé de deux chromosomes non frères s'entrecroisant
en formant un petit arc de cercle. Cette courbure ne se remarque qu'en suivant l'objet dans son
parcours à l'aide de la vis micrométrique. A première vue il semble qu'on a un groupe quaterne
devant soi. Il en va de même du groupe q; mais ici, c'est un même chromosome sphériq.'.e qui
s'est fendu longitudinalement et dont la partie médiane dans chacune de ces moitiés longitudinales
est excessivement amincie. Nous n'avons donc pas affaire à des groupes quaternes réellement con-
stitués, mais on voit combien facilement serait réalisée dans le groupe q, une vraie tétrade, puisqu'il
suffirait que les parties amincies se brisent transversalement. Nous n'avons cependant pas noté de
vraies tétrades comme plusieurs auteurs en ont signalé dans les cellules somatiques d'espèces va-
riées. Ils les considèrent comme des figures pathologiques. Nous n'avons constaté que des apparences
de tétrades.

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES QI

seau de la eig. 9, d où naissent les chromosomes. Ici, les nucléoles sem-
blent se désintégrer en un filament nucléinien, la substance des nucléoles
fournit un appoint dans la constitution des chromosomes.

(^es cjuelques points notés sur les nucléoles, soit dans les cellules au re-
pos, soit au commiencement de la division cellulaire, nous ont écarté un peu
de notre sujet, mais les nucléoles étant des organites si énigmatiques, il
nous a paru utile de noter ce qu'une étude attentive dans des cellules où
ils apparaissent bien nous a révélé d'intéressant.

3. Cellules adipeuses en division.

Nous abordons maintenant l'étude de la division cellulaire, et pour
mettre un peu d'ordre, nous considérerons d'abord le cas des cinèses asy-
métriques bipolaires, puis celui des cinèses pluripolaires, auquel nous join-
drons l'exposé de diverses particularités relatives au centrosome et un essai
d'explication de cet organe si énigmatique.

a) Cmèses asymétriques bipolaires.

Comme dans la variété il ne peut exister de règle, il nous est impos-
sible de donner un aperça général du processus que suit la cellule pour se
diviser. Mieux que toute description générale, qui ne peut se faire, un re-
gard jeté sur les fig. 16 à 27, et 36 à 43, que nous avons multipliées à cette
fin, dira quelle variété, quelle asymétrie, se présente dans les cellules adi-
peuses que nous étudions. Les figures mêmes ne rendent parfois que très
imparfaitement le degré où est poussée cette irrégularité, car pour la clarté
du dessin, nous avons été forcé soit de ne faire figurer dans nos dessins
qu'un seul plan, soit de ramener à un plan quand cela pouvait se faire des
détails qui se trouvent dans des plans différents. Le détail de chaque figure
sera donné lors de la description de celles-ci, à la fin de ce travail.

Cette asymétrie porte autant sur la partie chromatique que sur la par-
tie achromatique de la figure mitosique. Elle peut être telle que celle-ci
devient méconnaissable.

a) Asymétrie à la métaphase.

Pour mieux faire apprécier au lecteur cette asymétrie, nous avons
dessiné, fig. 15, une plaque équatoriale typique telle que la présente une

92

J. KOWALSKI

division régulière, et fig. 16 à 27, diverses cellules en métaphase. L'irré-
gularité de la figure à ce moment de la division est évidente et très curieuse.
Pour l'expliquer, il faut remonter à l'origine du rapprochement des chro-
mosomes formés, plus haut même, au moment de la concentration du ré-
seau nucléaire à la prophase, et à celui de la disparition de la membrane
nucléaire qui s'effectue à peu près à ce moment. Quand nous disons que la
membrane nucléaire disparait, nous voulons simplement dire que la
surface de séparation des deux liquides visqueux de nature colloïdale, nu-
cléaire et cytoplasmique, s'efface par suite de l'égalité qui s'établit entre les
tensions superficielles de ces deux substances. Il n'y a pas à proprement
parler de membrane nucléaire.

Au moment où s'efface la surface de séparation entre le noyau et le
cytoplasme, et ce moment est assez précoce, fig. 9, puisque l'homogénéisa-
tion des chromosomes est encore peu avancée, le réseau nucléaire
étant au stade appelé « spirème - ('), au moment dis-je de la disparition de
la membrane nucléaire, une fraction de la substance chromatique s'échappe
parfois du noyau et s'engage dans une trainée de cytoplasme qui rayonne
autour du noyau, fig. 9; cette portion chromatique s'isole de la masse prin-
cipale. Mais il peut aussi arriver que la membrane nucléaire disparaisse plus
tard, lorsque l'homogénéisation des chromosomes est plus avancée et que ces
derniers ont pris leur forme définitive. Dans ce cas, ce ou ces chromosomes
en s'engageant, ou mieux entraînés (■), fig. il, 13, dans une traînée de cy-
toplasme, sont soustraits par la présence des vacuoles graisseuses à l'action
dynamique des centres (que ces centres cinétiques soient constitués par les
centrosomes ou non), qui déterminent les deux pôles de la cellule vers les-
quels convergent les chromosomes. Ils vont donc ou bien demeurer en re-
tard sur les autres chromosomes lors du rassemblement de ces derniers à la
platjue cellulaire, fig. 13, 14, ou bien demeurer à l'état d épave au milieu

(') Nous ne désignons par ce terme que le moment où les chromosomes sont encore filamen-
teux et n'ont pas acquis leur concentration définitive. Nous ne prétendons nullement, en employant
ce terme, dire qu'il n'y a qu'un filament continu qui se dégage à la prophase du noyau au repos.
Nous ne l'avons pas plus observé dans cet objet que chez la Salamandre, où nous avons, il y a
quelques années, étudié la formation des chromosomes au.\ dépens du réseau quiescent nucléaire.

(■') Cet entraînement n'est pas dû à l'action mécanique du rasoir, comme on pourrait l'ob-
jecter, qui aurait séparé un ou plusieurs chromosomes de la masse principale formée par ceux-ci.
Cela peut se produire parfois, nous ne le nions pas, mais nous avons constaté maintes fois des
cas où manifestement une semblable cause mécanique ne peut être invoquée pour expliquer l'en-
trainement d'un ou de plusieurs chromosomes, par exemple lorsque ceux-ci sont situés dans un plan
intermédiaire aux plans de coupe, supérieur et inférieur.

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES g3

du cytoplasme, fig. 23, 27. Semblables à des débris qu'un obstacle ou qu'un
remous a entraînés hors du fil de l'eau et qui se décomposent dans une
anfractuosité de la berge, de même, ces chromosomes, hors du courant cel-
lulaire, dégénèrent pendant l'achèvement de la division cellulaire, fig. 41.

D'autres chromosomes peuvent même s'engager dans les vacuoles ren-
fermant le licjuide graisseux; cela peut se produire lorsque les vacuoles très
fortes pressent de trop près le noyau; la vacuole ou mieux le liquide qu'elle
contient fait irruption dans la partie du caryoplasme où gisent les chro-
mosomes, et certains sont entraînés mécaniquement dans les vacuoles grais-
seuses, FIG. 35, 40. Ceux-là sont aussi soustraits à l'action des centres
cinétiques de la cellule. Que vont-ils devenir? Ils dégénèrent au sein de la
petite quantité de cytoplasme qu'ils ont entraînée avec eux lors de l'irrup-
tion du liquide vacuolaire.

Une autre cause peut encore à la métaphase soustraire des chromo-
somes à l'action des deux centres dynamiques de la cellule. C'est l'asymé-
trie de la figure fusoriale cytoplasmique.

Aussi variée que la figure nucléaire est la figure cytoplasmique ou fuso-
riale dans les cellules adipeuses en division. Cette figure est rarement symé-
trique comme dans la fig. 15, où on aperçoit deux sortes de filaments, les
uns épais, les autres minces.

Le plus souvent cette asymétrie est totale, c'est-à-dire qu'il n'existe
plus ni plan, ni axe, ni point de symétrie. Le fuseau se dispose, il est per-
mis de le dire, comme il peut aux dépens des traînées cytoplasmiques que
les vacuoles graisseuses ont laissées dans la cellule. La présence de si nom-
breuses vacuoles graisseuses, matière inerte, a segmenté à la façon des
mailles d'une éponge le cytoplasme de la cellule. L'effet a été de réduire,
de morceler le territoire cytoplasmique de la cellule, de telle sorte que les
filaments du réticuluai ne peuvent s'orienter que difficilement vers les pôles
de la cellule.

Mieux que toute description, qui ne peut embrasser tous les cas, l'in-
spection des figures montrera la variété d'aspect de la figure fusoriale pen-
dant la cinèse. Parfois elle ne peut se former que d'un côté de la plaque
équatoriale, fig. 19, parfois, fig. 17, de part et d'autre de cette plaque ap-
paraît la figure fusoriale, mais l'une et l'autre des moitiés sont dissymé-
triques : tandis qu'une des moitiés a la forme d'un cône à surface concave,
l'autre moitié est au contraire renflée, l'intérieur même du fuseau étant oc-
cupé par une vacuole graisseuse qui en distend les parois.

94

J. KOWALSKI

P) Asymétrie à l'anaphase.

Aucune règle ne préside à l'arrangement des fibres cytoplasmiques fu-
soriales. Qu'advient-il dès lors, pour les chromosomes qui, à la métaphase,
puis à l'anaphase, sont attachés à ces fibres du fuseau? Les chromosomes
guidés par les filaments dans leur ascension polaire seront obligés de se
plier à l'asymétrie de la figure cytoplasmique, fig. 21. De là des figures
comme celles représentées fig. 25. Au lieu de s'avancer vers les pôles de
la cellule en ligne de front, les chromosomes s'acheminent vers eux en
ligne de file. De là, plus tard, à la télophase, la formation de noyaux
ayant subi une sorte de pivotement, tel que celui d'une des cellules de

la FIG. 42.

Si le fuseau, gêné dans sa formation par les vacuoles, ne saisit (') pas
tous les chromosomes à la plaque équatoriale, une partie des chromosomes
demeurant sans guide dans leur ascension polaire demeurent en arrière,
se perdent pour ainsi dire en chemin et dégénèrent, fig. 16, 35. Il peut
arriver aussi que la plaque équatoriale se fractionne, et chaque groupe de
chromosomes s'achemine vers les pôles à sa guise et dans les conditions
particulières que sa position, son volume, la forme de la figure fusoriale
cytoplasmique créent pour chacun, fig. 22, 27, 31, 36.

Il peut arriver enfin, et le cas n'est pas rare, que la plage cytoplas-
mique périnucléaire ayant été si réduite par les vacuoles graisseuses, le fu-
seau n'ait pas eu la place de se former et de se développer, fig. 18. Les
chromosomes-frères réunis à la plaque équatoriale ne peuvent dès lors
s'acheminer vers les pôles où tend à les entraîner à la période anaphasique
le mouvement dynamique bipolarisé de la cellule. Ils dégénèrent alors en
masse, comme le témoigne l'affaiblissement de leur capacité tinctoriale.
La cellule a ici vainement tenté de se multiplier. L'hypertrophie graisseuse
qui a saisi la cellule et semble s'être accrue durant même la période de di-
vision, l'a empêchée d'arriver au terme de son activité cinétique. La cellule
dégénère et meurt privée de sa portion qui règle son métabolisme : le
noyau.

Il pourrait se faire aussi que le noyau revienne au repos sans achever
sa division, comme l'ont constaté les deux frères Hertwig sur des œufs

(I) C'est là une façon de parler en concordance avec le mode courant d'explication que l'on
donne du fuseau achrcmalique. On verra plus loin comment il faut l'entendre quand nous aurons
dit la manière dont nous interprétons les filaments fusoriaux.

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES qS

d"oursins en voie de segmentation, lorsqu'on fait agir sur eux divers agents
chimiques. La masse chromosomique n'a qu'à se vacuoliser pour reconsti-
tuer le réseau nucléaire quiescent. La diminution de leur pouvoir chroma-
tique que l'on constate dans l'amas des chromosomes pourrait s'interpréter
aussi comme l'indice d'un commencement de vacuolisation. Ce phénomène,
au lieu de survenir un peu plus tard, au tassement polaire, comme c'est le
cas des caryodiérèses normales, surviendrait plus tôt dans ce cas-ci et appa-
raîtrait à la métaphase.

•f) Asymétrie à la télophase.

De l'inégalité de volume, de la différence de forme des deux moitiés
de la figure fusoriale, résulte une conséquence importante, c'est que les
masses chromatiques filles, montant vers les pôles, peuvent être très iné-
gales; autrement dit, les cellules-filles reçoivent des quantités très inégales
de chromatine, fig. 35, 38, 40, 4i. L'une sera donc hyperchromatique,
l'autre hypochromatique. A l'état de repos, ces cellules aun^it des noyaux
de dimension très inégale. Si par ailleurs une des masses chromatiques se
fragmente, comme nous l'avons dit, par le fait de la forme du fuseau cyto-
plasmique. on aura finalement des cellules-filles telles que nous en ofl"rent
les FIG. 45, 3. Une des cellules-filles renferme un noyau; l'autre en contient
deux.

La formation de semblables cellules plurinucléées peuvent aussi se for-
mer, nous semble-t-il, du fait de la formation incomplète ou même de l'ab-
sence de formation de la membrane intercellulaire.

La zone où s'effectuera la séparation des cellules-filles est indiquée par
le dépôt sur les filaments connectifs du fuseau d'une substance prenant for-
tement l'hématoxyline. Ce dépôt se manifeste sous l'aspect de petits points
très chromatiques disposés côte à côte comme les fibres elles-mêmes du
fuseau. C'est la - plaque fusoriale -. Elle est ici toujours très étroite. Ces
dépôts en s'épaississant et se fusionnant constituent plus tard un amas très
chromatique, dit - corps intermédiaire de Flemming ^.

Ni la plaque fusoriale, qui n'est en somme que l'ébauche du •■ corps
intermédiaire de Flemming, ni ce dernier organe ne contribuent à la sépa-
ration des cellules-filles. Si, en effet, la séparation dans la région fusoriale
se faisait par délamination de la plaque fusoriale ou du corps intermédiaire,
on devrait trouver les deux parties de ces éléments de part et d'autre de la

g6 J- kov;;alski

fente de séparation. Or, on ne constate jamais cela. La plaque fusoriale,
puis le corpuscule intermédiaire de Flemming restent indivis au milieu de la
fente de séparation qui provient d'un sillon de la surface cellulaire. Ce sil-
lon s'approfondit et lorsqu'il arrive à l'endroit où se trouve la plaque fuso-
riale, ses deux lèvres s'écartent, laissant celle-ci intacte. Les deux cellules
peuvent être depuis longtemps distinctes, séparées, que le corps intermé-
diaire de Flemmimg demeure encore indivis, sur le faisceau restant des
fibres du fuseau, fig. 42, 43, 44, 45. C'est là le dernier lien qui rattache
encore entre elles les deux cellules-filles. Le corps intermédiaire doit plus
tard dégénérer, mais nous ne l'avons pas constaté.

Quel est le rôle de cet organe passager et de la plaque fusoriale? Nous
ne saurions le dire. La place de ce dépôt toujours dans la région équato-
riale de la cellule, son apparition avant l'étranglement du corps cellulaire
semblent indiquer qu'il est en rapport avec la bipartition de ce dernier, mais
dans notre objet la plaque fusoriale ne sert certainement pas directement
à la division du cytoplasme, fig. 42-45.

Cette division est donc simplement le fait d'un étranglement du corps
de la cellule. Si cet étranglement ne se produit pas, la cytodiérèse restera
incomplète : le noyau se sera bien scindé, le cytoplasme restera indivis (');
en un mot, il n'y aura pas multiplicatiou de cellules : on aura une cellule
plurinucléée. Or, cette absence d'étranglement du corps cellulaire arrive
souvent dans notre objet à la télophase, du fait de la présence des vacuoles
graisseuses.

On comprend facilement en effet que ces dernières gênent l'action dy-
namique qui porte en ce moment la cellule à se diviser en deux moitiés ou
mieux en deux parties, car les parties séparées peuvent être fort inégales,
suivant qu'une des cellules-filles a reçu plus ou moins de substance chro-
matique en partage. C'est encore là un exemple de cette relation intime
qui s'établit entre le noyau et le cytoplasme et que Hertwig a mise en lu-
mière.

Nous avons dit que les points d'épaississement qui apparaissent à la
télophase sur les filaments interpolaires du fuseau sont des dépôts de
substance. Ces dépôts se formeraient, comme dit Le Dantec, dans la zone

(') Ce cas a été aussi constaté par Demoor dans les jeunes poils staminaux de Tradescantia
viiginica que l'on soumet à l'action de divers gaz : acide carbonique, ammoniaque, chloroforme,
etc. La division nucléaire s'achève comme dans les conditions normales, mais la division du
plasma ne suit pas. La division cellulaire reste incomplète dans une de ses parties : le plasma.

CiNksES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES 97

calme qui s'établit à la rencontre des deux mouvements tourbillonnaires
nouvellement reconstitués par la reformation de deux noyaux. Ce qui tend
à faire considérer ces points chromatiques comme des dépôts, c'est le fait
que le dépôt ne se forme pas et qu'il n'apparaît pas, par suite, de plaque fu-
soriale, ni de corps intermédiaire de Flemming, lorsque une vacuole grais-
seuse s'est formée dans la région fusoriale. La présence d'une substance
inerte, comme la graisse, rompt les échanges interprotoplasmiques qui
naissent du fait de la reconstitution des deux nouveaux noyaux et le dépôt
résiduel de ces échanges ne peut s'effectuer, fig. 37, 38, 40, 41, 46.

Or, nous avons remarqué que lorsque ce dépôt résiduel, c'est-à-dire la
plaque fusoriale et le corpuscule intermédiaire, ne se forme pas, l'étrangle-
ment du corps cellulaire, du cytoplasme, ne s'effectue pas non plus. La
présence du premier semble conditionner la formation du second.

Enfin la formation de cellules plurinucléées peut encore avoir une autre
origine : la présence de plus de deux centres cinétiques dans une cellule,
c'est-à-dire la présence de plusieurs fuseaux. Ceci nous conduit à parler des
cinèses asymétriques pluripolaires.

b) Cinèses pluripolaires et question du centrosome.

Si les cinèses que nous avons jusqu'à présent examinées sont excessi-
vement nombreuses, celles que nous envisageons maintenant sont relative-
ment plus rares et le plus souvent tri polaires.

Les fig. 20, 22, 28-33 donnent quelques exemples de ces divisions
anormales dans le tissu adipeux. Nous renvoyons le lecteur pour le détail
concernant chacune de ces figures à l'explication des planches qui accom-
pagnent ce travail.

La FIG. 48 représente une cellule migratrice du sang, un amœbocyte
ou leucocyte présentant, lui aussi, une division anormale pluripolaire, mais
la pluripolarité est plus accusée, puisqu'on peut constater dans cette cinèse
un nombre plus considérable de centres d'échanges chromoso-plasmiques,
les uns et les autres manifestés par un petit dépôt centrosomique.

Des détails que nous donnerons avec chaque dessin, des nombreuses
observations que nous avons faites relatives aux centrosomes, tant dans les
cinèses bipolaires que dans les pluripolaires, nous voulons essayer de tirer
quelques conclusions générales à leur sujet et, des conséquences qui en dé-
coulent, tenter une théorie de cet organe cellulaire encore si énigmatique.

15

98

J. KOWALSKI

Par plusieurs points elle se rattache à celle que de nombreux et savants
chercheurs ont déjà bâtie à ce propos; elle n'a donc pas le mérite d'être
entièrement neuve, mais précisément parce qu'elle concorde sur certains
points avec des opinions déjà émises, qu'elle s'appuie sur les faits reconnus
en même temps que sur nos propres observations, nous voulons croire
qu'elle ne sera pas complètement inutile et que, par les idées qu'elle pourra
suggérer, elle contribuera comme toutes celles qui l'ont précédée à jeter un
peu de clarté dans le mécanisme si complexe de la cellule.

a) Faits observés.

Nous rangeons les faits observés par nous sous un certain nombre de
points.

1° Dans les cellules adipeuses, les oenocytes, et généralement toutes
les cellules en division de Pyrrhocoris, les centrosomes, quand ils existent,
sont petits, parfois réduits à un point excessivement ténu, coloré en noii
par l'hématoxyline ferrique.

2° On ne remarque que très rarement un aster bien caractérisé
rayonnant autour des corpuscules polaires, comme Gross les figure dans
les cellules spermatocytaires de ce même insecte, Pyrrhocoris.

Une seule fois nous avons noté un aster bien défini dans le proto-
plasme relativement abondant qui entourait le pôle. Nous devons ajouter
que dans ces mêmes cellules spermatocytaires de l'insecte jeune que nous
avons examiné, nous n'avons pas non plus observé la sphère bien caracté-
risée représentée par Gross dans son travail sur la spermatogénèse chez
Pyrrhocoris apterus. C'est probablement à un insecte parfait que cet auteur
s'est adressé dans son étude. Cette différence dans le développement de
l'aster tiendrait-elle au stade ontogénique des insectes étudiés? Dans les
cellules adipeuses où peu de protoplasme environne le centrosome par suite
du morcellement du cytoplasme par le dépôt graisseux, rien d'étonnant à
ce que l'aster ne se développe pas ou que très peu. Que représente l'aster
en effet, sinon la manifestation visible des échanges invisibles métaboliques
qui se passent entre le centrosome et le protoplasme. Là où celui-ci est ab-
sent, rare, ou dont l'activité est ralentie, affaiblie par une surcharge de
matières inertes, il est tout naturel que ces échanges soient abolis, ou du
moins si peu intenses qu'ils ne se manifestent pas par l'orientation centrée
des filaments cytoplasmiques.

CINESES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES QQ

3° Nous n'avons jamais observé la bipartition d'un centrosome au
commencement de la division cellulaire. Nous n'avons observé les centro-
somes d'une façon certaine qu'à la métaphase, ou du moins à la fin de la
prophase, lorsque le fuseau bien constitué a acquis son maximum de gran-
deur et de netteté, et lorsque les masses chromosoiniques provenant de la
division longitudinale des chromosomes sont nettement polarisées vers les
pôles de la cellule.

4" Les divisions cellulaires normales ont des centrosomes relative-
ment plus gros que les cinèses anormales bipolaires.

5° Le centrosome peut souvent faire défaut dans les cinèses bipolaires
à l'un ou à l'autre des pôles de la cellule, lorsque le cône au sommet duquel
il aurait dû normalement se trouver, est tronqué par une vacuole grais-
seuse.

6° La pluripolarité avec plus de deux centrosomes se manifeste prin-
cipalement dans les cellules hyperchromatiques.

7° Dans les cellules hypochromatiques ou à chromaticité normale
plusieurs fuseaux peuvent exister, mais un certain nombre d'entre eux
peuvent ne pas avoir de centrosomes.

8" La formation des centrosomes semble conditionnée par la grosseur
du cône fusorial y aboutissant, cône qui lui-même est proportionnel à la
masse chromatique, chromosomique, correspondante ('). Maintes fois nous
avons constaté des variations sensibles dans la taille des centrosomes. Aux
plus gros correspondaient des masses chromatiques plus considérables, aux
plus petits, des masses chromosomiques plus faibles. Quand cette masse
est très réduite, constituée par un, deux chromosomes, le fuseau peut bien
exister, mais il n'y a pas de centrosome.

9° La disposition relative des masses chromatiques, leur orientation,
règlent l'orientation des fuseaux, le lieu d apparition des centrosomes, leur
grosseur.

P) Conséquences de ces faits et essai général d'interprétation du centrosome

et de la figure achromatique.

De ces faits nous tirons les conséquences suivantes relatives à la nature
du centrosome et à son origine.

(•) Les figures de Oaleotti (Wilson : The cell ... p. g8) représentant des mitoses pathologiques
dans des cellules cancéreuses de l'homme, montrent aussi ce fait d'une façon frappante.

lOO J- KOWALSKI

Pendant la division cellulaire des relations intimes existent entre la
substance primordiale du noyau, la chromatine ou les éléments qui la
représentent, les chromosomes, d'une part, le fuseau et les centrosomes
d'autre part. Dans la cinèse, la formation des chromosomes s'accompagne
toujours de la production de filaments fusoriaux, c'est-à-dire de l'orientation
conique convergeant vers deux points opposés de la cellule des filaments
du réseau protoplasmique. Les centrosomes, eux, peuvent être ou ne pas
être, c'est-à-dire peuvent ne pas apparaître sous une forme figurée. La figure
fusoriale est donc la manifestation d'un fait universel, primordial au com-
mencement de toute division mitosique. Le centrosome est la manifestation
d'un fait moins répandu, secondaire au début de la cinèse.

Quel est ce fait universel et primordial dont le fuseau est l'expression?
C'est le fait d'un métabolisme intense et polarisé qui se passe entre le noyau
et d'une façon plus précise entre la substance essentielle, base de toute ac-
tivité nucléaire, la chromatine et le cytoplasme. Ce n'est pas un fait nou-
veau dans sa nature, puisque toute la vie végétative de la cellule se résume
en ces mots : échanges réciproques de matière entre le noyau et le cyto-
plasme, mais c'est un fait nouveau dans son mode, dans sa façon d'être,
puisque pendant la vie reproductrice de la cellule, ces cchanges deviennent
bipolarisés de rayonnants qu'ils étaient. La vie de la cellule en ce moment
de son existence se concentre pour ainsi dire, devient plus intense en deux
points opposés, les pôles de la cellule. Cette intensité de vie ou, ce qui re-
vient au même, cette intensité d'échanges nucléo-plasmiques se traduit par
l'orientation fusoriale bipolarisée des filaments du réticulum cytoplasmique.
Il y a deux cônes fusoriaux semblables opposés par leur base, parce cjue
les chromosomes à la métaphase sont scindés longitudinalement et consti-
tuent deux masses chromatiques de volumes égaux, qui ont même activité
métabolique vis-à-vis du cytoplasme environnant. Les échanges molécu-
laires entre les deux masses chromatiques, constituées par les chromosomes
et le cytoplasme, sont de même valeur.

Mais les deux masses chromatiques sont-elles inégales, les échanges
moléculaires chromoso-cytoplasmiques deviennent eux-mêmes d'intensité
inégale, et cette inégalité se traduit à l'œil par une différence de volume des
deux cônes fusoriaux. La masse chromosomique normale se divise-t-elle
par une action mécanique ou par suite de troubles survenus dans le d3'na-
misme cellulaire en plus de deux lots, chacun de ceux-ci deviendra le centre
d'échanges métaboliques et, suivant leur masse, leur position, donnera nais-

CINESES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES lOI

sance à un fuseau achromatique, d'où l'apparition de cinèses à plusieurs
fuseaux diversement orientés, de volume, de taille différents.

En un mot, la figure fusoriale est l'expression morphologique visible
des courants invisibles d'échanges qui se passent entre les chromosomes et le
cytoplasme.

Mais ces échanges ne sont pas unilatéraux. Entre ces deux éléments,
chromosomes et cytoplasme, les échanges sont bicoliatéraux.

La figure astérienne sous sa forme la plus simple (c'est-à-dire conver- .
gence d'un certain nombre de rayons vers un centre commun) est l'expres-
sion morphologique de ce courant métabolique inverse du premier, et allant
du cytoplasme vers la masse chromatique du noyau.

Deux courants s'établissent donc inverses l'un de l'autre et centrés
vers les pôles de la cellule, où ils se rencontrent. Nous devons donc imagi-
ner ces points, ou mieux cette région, comme une région calme où nul mou-
vement tourbillonnaire ne se manifeste. Si donc les échanges de nature
chimique qui se passent entre chromosomes et cytoplasme amènent la for-
mation de dépôts chimiques, ce sera précisément dans ces deux régions
calmes de la cellule qu'ils devront s'effectuer et apparaître. Ces dépôts
chimiques ne sont autres que les éléments figurés dénommés centrosomes
ou corpuscules centraux.

Ces dépôts peuvent revêtir les formes les plus variées ou des formes
simples : un corpuscule uniciue, deux points, plusieurs granulations, un ou
plusieurs bâtonnets; ou des formes complexes : nodule plus ou moins con-
sidérable à structure alvéolaire, système de nodules épais ou réunis par
des branches contournées, ramifiées, etc.; toutes variétés de centrosomes
décrits et figurés par les auteurs dans les cellules animales les plus diverses.
Dans une même cellule en division, les deux dépôts centrosomiques peuvent
être de grosseur différente.

Ces variétés de dépôts sont conditionnées par la forme du fuseau. Il n'y
a là rien que de très naturel puisque la forme, le volume du fuseau dépen-
dent de la nature, de l'intensité, de la direction des échanges nucléo-cyto-
plasmiques; or, ces caractères peuvent être des plus variables d'une cellule
à une autre, d'une espèce de cellule à une autre.

Ces résidus chimiques des échanges chromoso-cytoplasmiques pour-
raient dans notre hypothèse ne pas se produire, soit que la nature des
échanges fût telle qu'elle n'amenât la production d'aucun précipité chi-
mique, soit qu'aussi la production de celui-ci passât inaperçue du fait de son

I02 J- KO^VALSKI

utilisation immédiate par la cellule. Ainsi s'expliqueraient les cas de divi-
sion cellulaire où l'on n'a constaté aucun dépôt centrosomicjue aux som-
mets du fuseau.

Mais le plus souvent il y a au sommet des deux extrémités du fuseau
un dépôt centrosomique Ce résidu des échanges chromoso-plasmiques
n'est pas inerte et ne demeure pas inactif. A son tour il donnera lieu à des
réactions chimiques, qui, comme tout à l'heure, se manifesteront parfois
par l'apparition d'une figure spéciale rayonnante autour du centrosome : la
sphère attractii'e. Cette figure manifesterait donc les courants centrifuges
d'échanges qui s'établissent entre la substance centrosomique et le cyto-
plasme environnant, comme la figure astcrieniie représente les échanges
métaboliques centripètes entre le cytoplasme et le dépôt centrosomique.

Dans les cellules riches en cytoplasme, ces échanges seront plus in-
tenses, la sphère attractive sera bien développée. Dans les cellules pauvres
en cytoplasme, elle le sera moins. Les microsomes qui parfois s'observent
sur les filaments rayonnes de la sphère attractive sont des dépôts analogues
au dépôt centrosomique, du moins quant à leur origine. Leur rôle semble-
rait au contraire nul, à l'inverse de celui du centrosome. L'aspect grossiè-
rement granulé de la substance corticale de la sphère attractive pourrait
aussi fort bien s'interpréter comme un précipité chimique qui s'est formé à
la limite de la zone d'échanges centrifuges du centrosome avec le cyto-
plasme. Cette substance corticale serait constituée par une poussière de
microsomes.

L'idée de considérer les centrosomes comme des dépôts locaux de sub-
stances qui par leur action chimique créent autour d'eux la formation astrale
des filaments cytoplasmiques, a du reste été maintes fois exprimée par plu-
sieurs auteurs, tels que Wilson, Morgan, Carnoy, Bûtschli, etc. Nous la
répétons seulement parce que nous voulons rassembler en un tout homo-
gène quelques-unes des opinions émises sur les divers éléments de la figure
achromatique et montrer que notre manière de comprendre le centrosome
est appuyée de plusieurs côtés par des vues autrefois énoncées et d'an-
ciennes observations.

En quoi consistent ces échanges qui se passent entre le centrosome et
le cytoplasme? Nous inclinerions à les envisager comme des échanges ma-
tériels. La cellule utiliserait la substance centrosomique durant toute la ci-
nèse. Une partie provenant de la décomposition apparaîtrait dans certains
cas sous la forme de dépôts, les microsomes, qui dégénéreraient peu à peu

CmàsES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES Io3

dans le plasma cellulaire. Autrement dit, la substance centrosomique s'use-
rait au fur et à mesure qu'elle serait produite par l'activité chromosomique,
c'est-à-dire lactivité du noyau. La cellule en dépenserait dans la mesure où
le noyau la lui fournit. Si la dépense égale les recettes, la masse centroso-
mique demeure invariable durant toute la cinése.

Si la dépense centrosomique est plus active ou moins active que la
production de cette substance, celle-ci diminuera ou au contraire augmen-
tera de volume, toutes variations que l'on a observées dans la masse du
centrosome au cours de la division cellulaire.

Si l'utilisation du dépôt centrosomique se poursuit après l'instant où
cesse la production, le centrosome disparaîtra après la cytodiérèse sans
qu'il en demeure de traces dans la cellule : le centrosome sera dans ce cas
un organe temporaire.

Si, au contraire, le dépôt continue à s'effectuer après l'instant où cesse
la dépense de la substance centrosomique par la cellule, le centrosome de-
meurera sous une forme figurée pendant le stade de repos : le centrosome
sera alors un organe permanent qui pourrait remplir diverses fonctions
d'ordre cinétique dans la cellule, comme certaines opinions tendent à l'ad-
mettre par exemple dans les cellules ciliées, les spermatozo'ïdes.

Il est un fait qui, dans notre hypothèse, reste à expliquer, c'est la bi-
partition dans certains cas d'un centrosome primitivement unique en deux
autres, qui, s'éloignant l'un de l'autre, viennent occuper les deux pôles de
la cellule au moment de la métaphase.

D'abord, on peut se demander si dans les cas observés il y a bien eu
bipartition. On a vu un centrosome, puis, dans une autre cellule, deux cen-
trosomes côte à côte, on a tiré la conclusion : le premier s'est scindé en
deux, sans montrer le processus de cette scission.

Pour nous, nous expliquerions cette soi-disante bipartition de la façon
suivante.

Dès le commencement de la prophase, par suite des échanges métabo-
liques qui s'effectuent entre la masse chromatique du noyau et le cyto-
plasme, un dépôt se constitue en un point de la cellule, c'est le centrosome.
Mais bientôt la bipolarisation de la cellule apparaît : ce mouvement bipo-
larisé saisit tous les éléments de la cellule, en particulier les chromosomes
qui sont constitués plus ou moins en ce moment en éléments homogènes et
ont commencé à se scinder longitudinalement. La masse nucléinique pri-
mitive du noyau qui a produit, par suite des échanges entre elle et le cyto-

104 "^^ KOWALSKI

plasme, le premier dépôt centrosomique, en se scindant en deux, produira
deux courants d'échanges intraprotoplasmiques. Ces deux courants seront
d'abord presque de même direction et un second dépôt centrosomique se
constituera dans la zone tranquille, où les courants moléculaires d'échanges
inverses l'un de l'autre viendront se rencontrer. Ce second dépôt centroso-
mique sera donc voisin du premier. Mais le mouvement bipolarisé s'accen-
tuant de plus en plqs, ces dépôts centrosomiques avec leur aster s'écarte-
ront progressivement l'un de l'autre, en même temps que les deux masses
chromatiques, constituées du même nombre de chromosomes-frères, se déli-
mitent mieux et s'ordonnent à l'équateur de la cellule dans une orientation
bipolaire. Les centrosomes pourront néanmoins demeurer unis par quel-
ques filaments cytoplasmiques orientés de l'un à l'autre et qui constituent,
dans certains cas, plus tard, les filaments que l'on a appelés bipolaires. Ils
seraient l'expression des actions moléculaires qui se passent entre les deux
dépôts centrosomiques, dont la substance, certes la même chez l'un et
l'autre, peut différer en concentration et en quantité.

En résumé donc, le centrosome d'après notre manière de voir ne serait
/// d'origine cytoplasmiqnc, ni d'origine nucléaire exclusivement. Il pro-
viendrait et du cytoplasme et du noyau et serait un dépôt de substances
chimiques précipitées, mais encore actives et utilisables, produit par l'action
des échanges moléculaires métaboliques, qui ne cessent de se faire pendant
la période reproductrice de la cellule comme pendant sa période végéta-
tive.

Quelle serait la nature de ces substances déposées qui constituent le
centrosome? Ce sont d'abord, avons-nous dit plus haut, des substances en-
core douées d'énergie chimique, utilisables encore pour la cellule. Ce sont
des centres d'échanges métaboliques, échanges qui peuvent être du reste si
faibles qu'ils ne se manifestent pas à la vue par l'orientation des filaments
du réticulum cytoplasmique en une sphère attractive. C'est le cas des cel-
lules adipeuses de Pyrrhocoris comme en général celui des cellules pauvres
en cytoplasme.

Prenant admet que le centrosome est un excès de chromatine que le
métabolisme a créé. N'ayant pu trouver place dans le noyau qui possède
son coefficient normal de cette substance, celle-ci s'est déposée dans le cyto-
plasme.

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES Io5

Nous sommes d'accord avec cet auteur pour admettre l'origine méta-
bolique du centrosome. Nous ne le sommes pas lorsqu'il considère ce dépôt
comme constitué par de la chromatine, car la raison qu'il donne ne peut
s'appliquer à notre cas, c'est-à-dire aux cellules adipeuses de Pyrrhocoris,
pas plus qu'à bien d'autres. Dans notre objet, les centrosomes sont si petits
que la quantité de chromatine est insignifiante. On comprend dès lors avec
peine l'incapacité du noyau à conserver ce léger excès de chromatine. On
ne pourrait jusqu'à un certain point concevoir cette incapacité et l'inapti-
tude du noyau à renfermer un léger excès de chromatine, en sus de la
quantité normale, que si la chromatine était vraiment l'idioplasme ou la
substance servant physiquement de base aux caractères héréditaires. Or
cela n'est pas prouvé et, dans cette question, le cytoplasme semble devoir
être aussi pris en considération.

Le caractère histo-chimique que le centrosome présente de se colorer
avec les mêmes colorants histologiques que la chromatine du noyau n'est
pas non plus, croyons-nous, une raison suffisante pour homologuer la sub-
stance du corpuscule polaire à celle de la partie chromatique du noyau, car
comme le dit Prenant lui-même : t certaines réactions de coloration du
centrosome sont jusqu'à un certain point caractéristiques «.

Certains corps du reste prennent également les colorants de la chro-
matine pendant la cinèse, tels les microsomes, les dépôts d'épaississe-
ment (') qui apparaissent à la télophase sur les filaments interpolaires et
forment ]a. plaque fusoviale, puis le corps intermédiaire de Flemming, après
la coalescence de ces dépôts d'épaississement. Dira-t-on cependant que tous
ces corps sont de la chromatine?

Si les centrosomes ne sont pas de la chromatine, de quelle substance
peuvent-ils être constitués? Il est aussi difficile de le préciser chimique-
ment pour ces éléments qu'il l'est pour tout autre organe de la cellule.

Tout ce que nous pouvons dire, c'est que la substance centrosomique

(') Les centrosomes et ces épaississements auraient ainsi même origine et ne seraii nt que
des résidus des réactions intraprotoplasmiques, mais tandis que les épaississements fusorianx de la
plaque fusoriale seraient inertes, les dépôts centrosomiques seraient actifs. Les premiers, inertes,
s'accroissent à mesure' que le dépôt se poursuit. Les points d'épaississement grossissent et finissent
ainsi par s'unir : c'est le corps intermédiaire de Flemming. Les seconds sont aussi des dépôts chi-
miques, mais actifs, qui se détruisent au fur à mesure de leur production en provoquant de nou-
velles réactions intracytoplasmiques; de là généralement leur grosseur invari.able et le rayonnement
cytoplasmique qui les environne. Nous avons dit plus haut, page io3, comment il faut interpréter
les cas où on observe un accroissement des centrosomes durant la division cellulaire.

16

Io6 J- KO^ATALSKÏ

est un résidu chimique extrêmement actif, peut-être à pouvoir fortement
réducteur comme le suppose Mathews, dont l'action s'étend à toute la cel-
lule et également en tous sens : le rayonnement homogène dont le centro-
some est le centre l'indique. Ces échanges centrosomo-plasmiques sont
d'une autre nature que les échanges chromoso-plasmiques. Ces derniers,
dont provient le centrosome, sont en effet polarisés dans une direction.

Il faut considérer la substance centrosomique comme une substance
iutennédiaire du métabolisme nucléo-cytoplasmique au temps de la divi-
sion et par conséquent spécifique, comme l'est le métabolisme lui-même
dans chaque espèce de cellule. Nous arrivons ainsi à la même conclusion
que Heidenhain, qui par d'autres considérations soutient la spécificité de
la substance des centrosomes.

Un rapprochement s'impose dès lors à l'esprit entre deux éléments de
la cellule : le centro'iome et le nucléole.

Le centrosome serait, pour la cellule, pendant la division un organe
analogue au nucléole, pendant le stade de repos.

D'après H.dcker, en effet, le nucléole doit être considéré comme un
produit de sécrétion ou d'excrétion du noyau, dont la masse serait propor-
tionnelle à l'intensité des échanges métaboliques qui ont lieu entre le noyau
et le plasma cellulaire. La substance nucléolaire serait d'après l'expression
de cet auteur un » Abspaltungsprodukt des Stoffwechsels -, un produit ré-
siduel, un produit intermédiaire du métabolisme, qui, pendant l'activité
végétative de la cellule et du no^'au, se dépose à côté ou sur les filaments
chromatiques du noyau. Pendant le repos ou au commencement de la mi-
tose ce produit est chassé hors du noyau comme une sécrétion, soit sous
une forme dissoute, soit sous la forme figurée.

En précisant cette notion, Montgomery Heidenhain ont montré que
la substance résiduelle nucléolaire était en rapport avec l'accioissement du
noyau. Son rôle serait donc un rôle végétatif. Le rôle au contraire de la
substance résiduelle centrosomique serait un rôle cinétique.

Elle pourrait être cette substance X réclamée par Prenant, spéciale-
ment active, qui expliquerait la cytodiérèse (Traité d' Histologie, t. I,
p. 257). Le centrosome remplacerait pendant la période de division le nu-
cléole, dont le rôle serait limité à la période végétative de la cellule. Il est
curieux en effet de constater que le plus souvent le ou les nucléoles dispa-
raissent au commencement de la division au moment où apparaissent les
centrosomes; et inversement, ceux-ci disparaissent souvent à leur tour, à la
télophase, quand les nucléoles refont leur apparition.

CINESES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES I07

Les centrosomes, comme nous l'avons dit, ne seraient pas les centres
cinétiques primordiaux indispensables à la cellule pour entrer en division,
mais leur présence figurée ou non est indispensable pour l'achèvement
complet de cette division, de même que le nucléole ou, pour préciser, la
substance nucléolaire serait nécessaire au noyau pour achever son complet
développement.

On peut supposer que chez les Métazoaires, ce double rôle, végétatif
et cinétique, aurait été dévolu par division du travail cellulaire, à deux or-
ganes différents : le nucléole et le centrosome, double fonction qui chez
certains Protozoaires, tels que Euglena (Kenten), Amœba (Schaudinn),
Paramœciitm (R. Hertwig), Spirochona gcmniipara (Balbiani), est ac-
complie par un seul organe intranucléaire, - le nucléole-centrosome. - Il y
aurait eu chez les Métazoaires durant la phylogénèse perfectionnement du
mécanisme cellulaire.

Les stades de passage de ce perfectionnement dans le dynamisme cel-
lulaire se retrouveraient dans les Métazoaires, chez qui on a constaté la
formation du centrosome aux dépens du nucléole, par exemple : Ascaris
(Carnoy et Lebrun, Brauer), Thysano{oon Brocchi (Schockaert, Gé-
rard), soit que les centrosomes demeurent dans le noyau, soit qu'ils
soient chassés au dehors au temps de la division cellulaire.

LISTE BIBLIOGRAPHIQUE.

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EXPLICATIOxN DES FIGURES.

Toutes les figures ont été dessinées à la chambre claire à la hauteur de la platine
du microscope. Les grossissements sont indiqués par le grossissement propre de l'objectif
employé : i';o (semi-apochroinatique il 15 de Koritzka à immersion homogène) multi-
plié par le grossissement de l'uculaire compensateur indiqué respectivement à chaque
figure.

FIG. 1. X oc. 4. Cellule adipeuse au repos. Noyau a3'ant très peu pris l'hé-
matoxyline ferrique, sauf les nucléoles qui se détachent fortement en noir sur le
fond rougeàtre du noyau. Certains apparaissent environnés d'une auréole claire.

FIG. 2. X oc. 4. Cellule adipeuse au repos binucléée. Les deux noyaux sont
de taille très inégale Dans le gros no3'au de très nombreux nucléoles, mais tiès
différents de grosseur, tous a\-ant très fortement pris la coloration Fond du noyau
très pâle. Le petit noyau très pâle sans nucléole Petite masse chromatique isolée
dans le cytoplasme.

FIG. 3. X oc. 4. Deux cellules adipeuses au repos, l'une uninucléée, l'autre
binucléée, provenant l'une et l'autre de la division d'une même cellule-mère, mais
dont les chromosomes se sont répartis inégalement aux deux cellules-filles. L'une
est donc hyperchromatique par rapport à l'autre. A remarquer comment s'est faite
la division du territoire cellulaire : elle s'est opérée proportionnellement à la masse
chromatique qui s'acheminait respectivement vers les pôles de la cellule-mère.

FIG. 4. X oc. 4. Une cellule adipeuse quadrinucléée provenant probablement
d'une division pluripolaire. Cellule fortement hyperchromatique. Le volume du cy-
toplasme s'est accru dans les mêmes proportions. Comparer la grandeur de cette
cellule avec celle des cellules fig. 1, 4, toutes dessinées au même grossissement.

FIG. 5. X oc. 4. Novau au repos d'une cellule adipeuse montrant la défor-
mation du noyau par la pression qu'exercent sur lui les vacuoles graisseuses Huit
nucléoles nucléiniens.

FIG. 6. X oc. 4. Noyau montrant la forme sphérique que prend cet organe
cellulaire dans la cellule adipeuse quand les vacuoles graisseuses n'exercent pas di-
rectement leur pression sur lui. Le cytoplasme environne tout entier le noyau. Com-
mencement de la sortie du repos. Concentration du réticulum nucléinien. On distingue
encore deux nucléoles nucléiniens.

ÎI2 J. KOVS^ALSKI

FIG. 7. X oc. 8. Noyau au commencement de la prophase; les nucléoles se
désagrègent : leur substance passe dans les filaments qui par concentration donneront
les chromosomes; particulièrement visible en in. — Remarquer le contour du noyau,
qui, d'arrondi au repos, passe souvent à cet aspect par suite de l'augmentation des
vacuoles graisseuses et la diminution de tension osmotique du suc nucléaire à ce
moment de la prophase. Pas de membrane nucléaire différenciée.

FIG. 8. X oc. 4. Cellule binucléée. Commencement de la prophase. Formation
des chromosomes aux dépens du réseau quiescent. Les deux noj-aux sont au même
stade Les filaments sont fortement chromatiques. A gauche, un point ressemblant
à un centrosome, peu marqué, c {?).

FIG. 9. X oc. 8. Prophase. Formation des chromosomes. Les nucléoles g sem-
blent concourir à la formation des filaments qui donneront à un stade ultérieur les
chromosomes.

Le noyau moins pressé par les vacuoles a conservé sa forme arrondie, mais la
tension osmotique s'égalise entre le suc nucléaire et le suc plasmatique. Quelques
filaments, a, s'engagent dans le C3'toplasme environnant, où ils pourront donner un
chromosome qui se trouvera ainsi séparé des autres plus tard.

FIG. 10. X OC. 8. Cellule hyperchromatique. Prophase. Le noj-au commence
à perdre sa forme arrondie. Cela est surtout \isible à un plan supérieur. On n'aper-
çoit pas de centrosomes.

FIG. 11. y oc 4. Prophase. Chromosomes achevés et montrant, du moins
certains, la division longitudinale. On en compte 16 en forme de bâtonnets droits
ou courbes, et 8 en forme de petites sphères. La limite nucléaire tend à dispa-
raître et un chromosome, de ce fait, est entraîné dans un des prolongements
cytoplasmiques circumnucléaires.

FIG. 12. X oc. 8. Prophase. Chromosomes formés et divisés longitudinalement;
les deux formes de chromosomes s'apen^-oivent; les uns sont en forme de petites
sphères, les autres en forme de petits bâtonnets. Le chromosome isolé semble avoir
été entraîné mécaniquement loin des autres, car il se trouve au plan inférieur de
la coupe

FIG. 13. X oc. 8. Chromosomes achevés. Deux chromosomes aberrants, a, situés
à deux plans différents. Un seul centrosome bien visible.

FIG. 14. X oc. 4. Métaphase. Un chromosome aberrant et plusieurs autres
chromosomes formant un petit lot à part. Figure achromatique tout à fait incomplète
par suite de la grande masse graisseuse. Un centrosome (?) tellement petit qu'il y
a lieu de se demander si on a affaire à un vrai centrosome

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES Il3

FIG. 15. X oc. 4. Métaphase régulière et dans la figure chromatique et dans
la figure achromatique. Deux sortes de filaments dans le fuseau, les uns gros, plus
chromatiques, les autres plus petits, moins achromatiques; deux centrosomes égaux
relativement gros. Pas d'aster bien formé.

FIG. 16. X oc. 4. Métaphase irrégulière, située à côté de celle dessinée à la
FIG. 15. Une partie des chromosomes a de la plaque équatoriale dégénèrent, ils
sont moins chromatiques et, leur activité métabolique cessant, ils ne concourent plus
avec les autres chromosomes à la formation de la figure fusoriale. Les filaments du
fuseau sont ténus. Deux centrosomes, mais beaucoup plus petits que ceux du fuseau
de la FIG. 15. — Le centrosome c' présente cette particularité de n'avoir pas pris
l'hématoxyline : il se présente sous la forme d'une petite sphère réfringente.

FIG. 17. X ôc. 4. Métaphase, asymétrique dans la figure achromatique, le cône
fusorial supérieur est comprimé par les vacuoles graisseuses : sa surface est con-
cave. Le cône fusorial inférieur est au contraire gonflé par une vacuole qui occupe
son intérieur et lui donne presque la forme sphérique. Très belle fibnllation du
fuseau. Deux centrosomes bien marqués intermédiaires comme grosseur entre ceux des
FIG. 15 et 16. — Le centrosome c présente une vague figure astrale autour
de lui.

FIG. 18. X oc. 4. Métaphase. Plaque équatoriale vue de profil. Les cônes
fusoriaux sont incomplets à cause de la présence de vacuoles graisseuses. Celles-ci
ont empêché la formation des dépôts centrosomiques. A remarquer la position très
excentrique de la figure chromatique par raiiport au territoire de la cellule.

FIG. 19. X oc. 4. Métaphase. Figure achromatique asj-métrique : n'existe que
d'un côté de la plaque équatoriale. LIne partie seulement des courants d'échange
chromoso-plasmiques amène la formation du dépôt centrosomique, car une vacuole
graisseuse en interrompt une partie. Aussi voit-on double fibrillation, une convergente
dans un plan supérieur avec le centrosome, l'autre non convergente se terminant
au bord d'une vacuole.

FIG. 20, a, b. X oc. 4. Métaphase dissymétrique. Le dessin ne rend que très
imparfaitement le degré d'as3miétrie de cette division cellulaire; aussi avons-nous
joint au dessin un schéma de cette curieuse métaphase vue en perspective, afin que
le lecteur puisse mieux s'en rendre compte. La masse chromosomique dessine un
cordon sinueux dans des plans différents et chacune des sinuosités crée une ou plu-
sieurs figures fusoriales suivant la grosseur, la disposition des globules graisseux.
Trois centrosomes, d et c", assez voisins l'un de l'autre.

FIG. 21. X oc. 4. Métaphase. Figure achromatique, asymétrique. Le centro-
some c, dans un plan optique supérieur, distant de 7 \x de celui du centrosome c' .
Asymétrie encore par rapport à une ligne cd passant par les deux centrosomes et

17

114

J. KOWALSKI

due aux vacuole vv' qui troublent la régularité des échanges chromosomiques. Le
cours des échanges est détourné de la ligne normale. Les dépôts centrosomiques se
déposeront par conséquent asymétriquement.

FIG. 22. X oc. 4. Métaphase dissymétrique. Plaque équatoriale en deux par-
ties, une grosse ' masse, m, une autre plus grêle, mais plus longue, n, dont la partie
gauche se recourbe en boucle en remontant à un plan supérieur. Les deux masses
chromatiques forment un seul fuseau à Ja partie supérieure terminé par un centro-
some. — Plusieurs petits fuseaux à la partie inférieure sans centrosomes.

FIG. 23. X oc. 4. Métaphase. Diss3-métrie de la ligure achromatique. Un chro-
mosome aberrant, a, au milieu d'un f)eu de cytoplasme.

FIG. 24. X oc. 4. Une des cellules en métaphase, plaque équatoriale vue du
pôle; à remarquer son irrégularité de contour due à la pression qu'exerce tout
autour le liquide des vacuoles.

Cellule, en anaphase ; asymétrie dans la figure achromatique; le cône fusorial
supérieur est régulier, avec filaments gros et d'autres plus minces, terminé par
un centrosome sans aster — le cône fusorial inférieur est incomplet, une vacuole
graisseuse a gêné sa formation et le dépôt centrosomique n'a pu s'effectuer de ce
côté. — Dans les masses chromosomiques, légère fente.

FIG. 25. X oc. 4. Noyau en anaphase. Les chromosomes-frères s'écartent les
uns des autres, mais seulement vers une de leurs extrémités, qui sont par ailleurs
dans des plans relativement éloignés : 9 |j.. Par l'autre extrémité, les chromosomes-
frères sont encore unis dans un plan interuiédiaire à ceux des extrémités. De cette
disposition de la masse chromatique naît une disposition embrouillée des fuseaux.
Un centrosome seulement visible, c, très petit.

FlCi. 26. X oc. 4. Cellule en métaphase. Commencement de l'anaphase. Vue
passant par un plan optique moyen par rapport à l'épaisseur de la coupe, qui est
de 10 [t.. Les deux masses chromosomiciues sœurs forment un x, étant encore unies
par leur milieu. Les deux branches inférieures de l'x plus courtes que les deux branches
supérieures. Un cône de filaments achromaticiues correspond à chaque groupe — le
fuseau inférieur est plus petit que le fuseau supérieur, qui présente un centrosome
excessivement petit, d — un autre centrosome, c, qui n'a pas de symétrique. —
A un plan un peu supérieur un chromosome aberrant, a. — A ce même plan un
certain nombre de chromosomes plus ou moins réunis en une masse homogène et
représentés plus vaguement sur la figure. Ils donnent de petits fuseaux qui se su-
perposent à celui dessiné à droite; ils n'ont pas été dessinés pour ne pas compliquer
la figure.

FIG. 27. X oc. 4. Cellule en métaphase. Plaque équatoriale vue oblique-
ment; aussi le dessin très difficile ne rend que très imparfaitement la réalité. Un

CINESES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES IID

centrosome unique, c; le symétrique n'a pu se former par suite de la présence d'une
vacuole; à un plan inférieur, des chromosomes, a, a', aberrants de la masse principiale,
commencent à dégénérer chromaticité plus faible; une vague striation, témoignage
de leur activité métabolique, s'aperçoit dans le cytoplasme qui entoure les chromo-
somes a'.

FIG. 28. X oc. 4. Cellule hyperchromatique en métaphase. — Vue équatoriale
ressemblant à une vue polaire. Trois centrosomes, c, c", dans un même plan supérieur,
c' dans un plan inférieur distant de 6 [j. du [irécédent. c. c', de même taille, plus
colorés et plus gros que c" — Dans un plan inférieur au fuseau du centrosome c'\
un quatrième fuseau sans centrosome.

FIG. 29. X oc. 4. Cellule hyperchromatique. Métaphase très dissymétrique. Une
grosse partie de la chromatine, m, disposée en amas superposés sur la droite de la
cellule. L'autre partie s'étend vers la gauche en une bande régulière, m'. Cette por-
tion de la masse chromosomique est dans un plan inférieur à celui de la portion
droite et une vacuole, v, interposée au centre même de la cellule. Le fuseau est
de ce fait plus épais dans la partie droite que dans la partie gauche. Une va-
cuole, v', à la partie supérieure empêche même la partie supérieure gauche du fuseau
de se former. Deux centrosomes, c, c\ à ce fuseau. L'extrémité gauche de la bande
chromosomique, ni', développe un petit fuseau spécial, terminé par deux autres cen-
trosomes très petits, c", c'".

FIG. 30. X oc. 4. Cellule hyperchromatique. Métaphase jiluripolaire. Trois cen-
trosomes : c" dans un plan supérieur aux pilans des deux autres; c' dans un plan
inférieur; c dans un plan moyen. La partie nucléaire en V dans un plan bien
supérieur à la partie nucléaire morcelée. Dépôt centrosomique, c', formé par les
deux masses chromatiques qui constituent les branches du V, symétrique par rapport
à elles et plus gros que les dépôts centrosomiques, c' et c, constitués respectivement
par une seule des branches du V.

FIG. 31. X oc. 4. Cellule en métaphase. Ressemblant un peu à la cellule
dessinée fig. 26. Une partie des chromosomes, au nombre de trois, font bande à
part et déterminent chacun pour leur compte de petits fuseaux qui convergent à la
partie inférieure seulement vers un centrosome, c"; vers ce même centrosome con-
vergent les filaments d'un fuseau partant de la branche inférieure droite de l'.x
incomplet que forme toute la masse chromatique Deux autres centrosomes, c, c', —
les trois, très petits.

FIG. 32. X oc. 4. Cellule hyperchromatique en métaphase. Trois masses chro-
mosomiques situées à des plans optiques différents : m à un plan supérieur ; à cette
masse de chromosomes correspondent le centrosome c et le centrosome c'. — m à
un plan un peu inférieur à celui de m; à cette masse correspondent le centrosome
c' et le centrosome c", mais ce dernier pour une portion seulement de la masse m',

Il6 J. KOWALSKI

la portion gauche. — ni" à un plan plus inférieur encore ; à cette troisième masse
correspond un seul centrusome, c". — Le centrosome c', correspondant à la plus
grande masse chromatique, est le plus gros des trois.

FIG. 33. X oc. 4. Cellule hyperchromatique. Métaphase pluripolaire : trois cen-
trosomes : c, c' dans un plan supérieur à c" ; la masse chromatique m dans un
plan supérieur au restant des chromosomes. Figure excessivement asymétrique et
que le dessin ne peut rendre qu'imparfaitement.

FIG. 34. X oc. 4. Cellule hj'perchromatique en métaphase. Les deux masses
chromatiques sont séparées l'une de l'autre; elles doivent représenter respectivement
l'une et l'autre un noj-au. Cette cellule serait une cellule binucléée dont les deux
noyaux se divisent simultanément, mais l'orientation des plaques équatoriales serait
différente pour l'une et l'autre masse chromosomique . celle de droite, m, est vue
de profil; celle de gauche, m', est en vue polaire. Les deux centrosomes, c, c', ne
s'aperçoivent donc que pour la masse m.

FIG. 35. X oc. 4. Anaphase. Figure fusoriale as3'métrique. Masses chromoso-
miques inégales par suite d'une partie des chromosomes qui s'est égarée en route
durant leur ascension vers les pôles. Un seul centrosome, du coté où le fuseau est
achevé.

FIG. 36. X oc. 4. Cellule en métaphase. La plaque équatoriale scindée en
deux parties, chacune possède vers le bas un cône fusorial sans centrosomes; celui
du haut commun aux deux masses chromosomiques de la plaque équatoriale et ter-
miné par un centrosome, c. — A un plan légèrement supérieur, un amas de chro-
mosomes destinés, semble-t-il, à dégénérer; car ils ne paraissent pas participer au
mouvement cinétique.

FIG. 37. X oc. 4. Télophase. Les deux centrosomes, c, c', encore visibles.
Autour de c un petit aster. Les filaments du fuseau interpolaires dérangés de leur
rectitude par un dépôt graisseux qui commence à se former à l'intérieur du fuseau.
Tassements polaires encore homogènes.

FIG. 38. X oc. 4. Télophase plus avancée que la précédente. Les tassements
polaires commencent à se vacuoliser. Les deux masses chromatiques sont de volumes
inégaux. Les filaments interpolaires sont, plus encore que dans la figure précédente,
dérangés de leur course rcctiligne, toujours du fait de la même cause : la présence
d'une vacuole graisseuse qui s'étend jusqu'au tassement polaire de gauche et façonne
par sa pression le noyau en formation. Les centrosomes ont disparu.

FIG. 39. X oc. 4. Télophase. Le tassement polaire m en forme de V, dirigé
suivant l'axe de la cellule; la branche droite est à un plan supérieur à celui de
la branche gauche; celle-ci est fortement vacuolisée et baigne en partie dans une
vacuole ; la branche droite est au contraire encore homogène comme le tassement

CINÈSES ATYPIQUES DANS LES CELLULES ADIPEUSES llj

polaire ni'. Le tassement polaire m doit cette position allongée suivant l'axe de la
cellule à un pivotement pendant l'ascension polaire. Plus de centrosomes. Plus de
traces de fuseau.

FIG. 40. X 00. 4. Télophase dissymétrique, et quant à la forme des deux
tassements polaires et quant à la masse de chromosomes répartie dans chacun des
noyaux. En a, chromosome aberrant environné d'un peu de cytoplasme. Le tasse-
ment polaire en V commence à se vacuoliser. Filaments du fuseau peu visibles.
L'aspect fibrillaire disparaît. Une vacuole graisseuse allongée au milieu des restes
de la ligure achromatique.

FIG. 41. X oc. 4. Télophase. Les masses chromosomiques inégales à chacun
des pôles, d'où formation de deux noyaux inégaux. Commencement de vacuolisation.
Deux chromosomes ou deux masses chromosomiques aberrantes, a, entourées d'une
zone plus claire nettement séparée du protoplasme environnant. Les masses chro-
matiques semblent dégénérer : chromaticité moindre.

FIG. 42. X oc. 4. Télophase. Vacuolisation des tassements polaires qui ont
pivoté et tendent à prendre une position suivant l'axe longitudinal de la cellule.
Le fuseau est réduit à quelques filaments resserrés dans le plan équatorial de la
cellule. Petite plaque fusoriale intercellulaire. La cellule est scindée par un sillon
et un étranglement. Les deux bords du sillon s'écartent l'un de l'autre au niveau
de la plaque fusoriale. formant comme les deux bords d'une boutonnière dont la
plaque fusoriale occupe le centre. — L^n centrosome, c, encore bien visible.

FIG. 43. X oc. 6. Télophase pour montrer l'aspect irrégulier, lobé que peuvent
prendre les no3'aux. \'acuolisation de la masse des chromosomes; dans la cellule
de gauche cette vacuolisation est plus avancée dans la portion de la masse qui se
trouve à un plan inférieur. Les nucléoles nucléiniens ont refait leur apparition, on
en compte neuf, ils sont fortement chromatiques à l'inverse du réseau nucléaire qui
devient acidophile et a pris la coloration rouge-Bordeaux. — La séparation des
deux cellules-filles s'effectue par un sillon dont les deux bords s'écartent de part et
d'autre du « corps intermédiaire de Flemming », qui est ici très volumineux.

FIG 44. X oc. 4. Télophase. La séparation des cellules-filles est complète,
mais elles demeurent encore réunies par le faisceau resserré des fibres fusoriales sur
lesquelles se trouvent le dépôt d'épaississement qui constitue le d corps intermédiaire
de Flemming ». Celui-ci ne participe pas à la séparation des deux cellules, il se trouve
en effet entre les deux cellules-filles déjà complètement séparées et lui-même est in-
divis. Les deux centrosomes encore visibles, c, c'.

F"IG. 45. X "C. 4. Télophase. Formation de deux cellules-filles, dont l'une binu-
cléée, l'autre uninucléée. Commencement de la vacuolisation dans chacun des tasse-
ments chromatiques. Comme dans la figure précédente, la séparation des deux cellules-

Il8 J. KOWALSKI

filles est complète, alors qu'il reste encore entre les deux un pont d'union formé
des restes des fibres fusoriales. Sur celles-ci, entre les deux cellules distinctes, se voient
deux microsomes chromatiques ; dépôts d'épaississement des filaments, qui en gros-
sissant et se réunissant donneront le « corps intermédiaire de Flemming ». A remar-
quer comment s'est faite la séparation des masses cytoplasmiques : proportionnelle-
ment aux masses chromatiques.

VHj. 46. X "c. 4. Télophase asymétrique. — Une des cellules-filles renferme
deux masses chromosomiques; l'autre une seule. Commencement de la vacuolisation
de ces masses. Une vacuole graisseuse occupe le milieu des filaments connectifs et
les dérange de leur parcours. Les centrosomes invisibles. Nulle trace de bipartition
du corps cellulaire. — P'ormation d'une cellule trinucléée

1"IG. 47. X oc 4. Télophase. Vacuolisation des tassements polaires. Quatre masses
chromatiques situées deux par deux en des plans différents; celles de droite, d, d\
dans le plan supérieur, réunies par quelques filaments fusoriaux au milieu desquels
on distingue très vaguement une ébauche de plaque fusoriale; les masses de gauche,
g, g', dans le plan inférieur, réunies entre elles par quelques minces filaments fuso-
riaux et à peine réunies aux masses d, d' ; que cette mince liaison vienne à se
rompre par le fait des vacuoles graisseuses, chacune des masses en se vacuolisant
donnera respectivement un novau. On aura finalement une cellule quadrinucléée
comme celle représentée fig. 4. On ne distingue aucun centrosome.

FIG 48. X oc 12. Amœbocyte en division. Cinèse pluripolaire, cinq centrosomes.
On ne distingue pas d'asters. Masse chromatique très irrégulière, disposée dans des
plans très différents. La disposition de chacune des portions de la masse chroma-
tique règle la formation, la disposition, de la figure achromatique et du centrosome
correspondant.

FIG. 49. X oc. 8. Microorganisme parasite implanté dans la lame conjonctive
interne, /. c. i., bordant le corps adipeux. Il mesure 7 jj- 8 de longueur, 3 fj. 5 de
largeur. Formé de deux parties à peu près de même taille, séparées par une portion
plus claire légèrement concave du côté implanté dans la lame conjonctive. A l'ex-
térieiu'. correspondant à cette zone, un sillon en étranglement. Le bord est plus
clair et comme ponctué. A la partie antérieure, deux petites taches en forme de
boules plus grosses que les points bordants, p. b. Le corps est C(;loré en noir :
on ne distingue aucune structure.

TABLE DES MATIÈRES.

§ I. Introduction

§ 2. Littérature

§ 3. Méthode

§ 4. Observations

1. Corps adipeux

2. Cellules adipeuses au repos

3. Cellules adipeuses en division

a) Cinèses asymétriques bipolaires

a) Asymétrie à la métaphase
|3) Asymétrie à l'anaphase
y) Asymétrie à la télophase

b) Cinèses asymétriques pluripolaires et question du centrosome

a) Faits observés . . . ■ •

(3) Conséquences de ces faits et essai général d'interprétation
du centrosome et de la figure achromatique

§ 5. Bibliographie ......

§ 6. Explication des figures . . . . ■

PAGES
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88
88
91
91
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95

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109
III

PkHU^h<^i.

J-Kowàhi-ù adnat.cfel.

Lith-Be Tollena.ere frère^rux.

J\j3ieseTnazis ùcu±p

Planchf^ 1/

j/shcsJ. nair.df/.

liciiDe ToUenaere rreres iz-rux.

r JDlfù-'êl/iaT^^ . ^ -IIlu

iMerocystis kathœ Dakin

Une Aggrégate de Buccinum undatum

PAR

Charles FOULON

ÉTUDIANT EN MÉDECINE.

Institut de Zoologie, Louvain. - Laboratoire du Prof. Debaisieux.

(Alémoire dcposé le i août igi4.)

18

t

Ce nous est un pieux devoir de rappeler la carrière débutante d'un
de nos meilleurs élèves et la mort glorieuse d'un héroïque soldat.

Charles FOULON travailla pendant plusieurs années en notre
laboratoire; esprit curieux, perspicace et passionné de science, il ne tarda
pas à se distinguer, et ses premières recherches faisaient présager un bel
avenir.

Le i^r août 1914 il fut rappelé par la mobilisation; avant de partir,
il nous confia le manuscrit de cette étude sur le Merocystis; ce travail
échappa heureusement à la sauvage destruction de notre laboratoire privé.
Le 21 juin 191 7, il fut tué par un obus dans l'hôpital de Hoogstade, tandis
qu'il prodiguait ses soins aux blessés. Sa vaillante conduite lui avait valu
la décoration de l'Ordre de Léopold et la Croix de guerre.

Il n'a pas eu la joie de voir paraître sa première œuvre, mais il a
obtenu la gloire qui couronne les braves ; nous gardons le regret d'avoir
perdu un excellent élève, mais nous avons la fierté de savoir qu'il est mort
dans l'héroïsme du devoir.

Paul DEBAISIEUX.

Em.

Merocystis kathae Dakin

UNE AGGRÉGATE DE BUCCINUM UNDATUM

INTRODUCTION.

Le protozoaire dont nous avons entrepris l'étude fut découvert par
Dakin (ii) dans l'organe rénal des Buccins de Port-Erin (1. O. M.), et dé-
terminé par lui comme une coccidie polysporocystidée, qu'il appelle Mero-
cystis kalhœ. Ses observations concernant ce parasite nous ont paru suscep-
tibles d'une interprétation différente; nos recherches nous ont fait relever
une quantité de faits nouveaux tant au point de vue du cycle évolutif qu'au
point de vue cytologique, et nous avons été conduit à attribuer à cette es-
pèce des caractères différents de ceux donnés antérieurement. Il en résulte
que cette espèce acquiert un rang nouveau dans la classification des proto-
zoaires.

Le Merocystis doit être considéré comme une Aggrégate, et comme
telle, son étude offre un intérêt spécial; jusqu'à présent les Aggrégates
n'étaient connues que par des espèces parasites de quelques céphalopodes;
rarement on y trouve des infections pures, ce qm rend l'étude difficile.
Le Alerocystis nous offre à ce point de vue un matériel de choix, et de plus
son étude révèle plusieurs détails qui jettent un peu de lumière sur la signi-
fication de certains éléments de structure et sur le rang systématique des
Aggrégates.

Les Aggrégates sont des parasites à hôtes alternants; dans le buccin, on
trouve tous les stades de reproduction sexuée; la schizogonie y fait complè-
tement défaut. L'hôte intermédiaire dans lequel la reproduction asexuée a
lieu ne put être découvert jusqu'à présent, toutes les recherches faites à
Port-Erin étant restées infructueuses. Si les circonstances le permettent,
elles seront reprises à la saison prochaine.

124 Charles FOULON

Le matériel que nous avons employé fut fixé et coloré de manières di-
verses; les meilleurs résultats furent obtenus par la fixation au liquide de
BouiN et la coloration à l'hématoxyline de Heidenhain, suivie de coloration
au rouge Congo.

Les fixations au Benda, 48 heures ou huit jours, et au sublimé alcool
furent également employées; les colorations à l'hématoxyline de Delafield
diluée, avec mordançage à l'alun de fer et diff^érenciation dans le même
milieu ou dans l'eau acidulée, nous ont donné de bons renseignements sur
la structure du caryosome; les colorants de Giemsa, de Borrel (rouge
Magenta et picro-indigo-carmin), de Mann et de Dobell (14a) (hématéine
alcool) furent employés à titre de contrôle.

Nous avons pu obtenir des buccins infectés grâce à l'amabilité de
M. Chadwick, qui a bien voulu nous envoyer de Port-Erin du matériel
fixé; nous lui adressons ici tous nos remerciements, et nous tenons à remer-
cier spécialement M. le Prof. Debaisieux, qui a mis à notre disposition du
matériel qu'il a récolté sur place et qui nous a aidé et encouragé de ses
conseils.

Dans les pages qui vont suivre, nous exposerons d'abord nos observa-
tions personnelles; elles ont trait à la reproduction sexuée seulement. Nous
envisagerons successivement l'évolution :

i) das macrogamètes ;

2) des microgamétocytes ;

3) de la sporulation.

Chacun de ces chapitres sera suivi de la comparaison de nos résultats
avec ceux des autres auteurs.

Dans une seconde partie, nous discuterons ces observations au point
de vue :

i) du cycle d'évolution ;

2) du rang systématique à attribuer à l'espèce, et à la famille des
Aggrégates.

Nous terminerons, enfin, en résumant brièvement nos conclusions.

Au cours de ce travail, il nous arrivera souvent de toucher à l'une ou à
l'autre question de cytologie; nous en réservons l'étude approfondie pour
un travail ultérieur; cela nous permettra d'appuyer nos conclusions sur des
observations étendues à d'autres genres d' Aggrégates; nous n'avons pas pu
encore réunir tout le matériel désirable pour ce travail.

MEROCYSTIS KATH.î: DAKIN 125

A. OBSERVATIONS PERSONNELLES.

1. Macrogamète.

Les plus jeunes parasites que l'on rencontre dans l'organe excréteur
du buccin sont tous des gamètes. Il parait certain qu'ils proviennent de
mérozoïtes, eux-mêmes le fruit d'une schizogonie qui a lieu, très probable-
ment, dans un hôte intermédiaire. Les mérozoïtes, charriés par le torrent
circulatoire, s'arrêtent dans le rein, où ils évoluent.

Les premiers stades qu'il nous fut possible de reconnaître comme ap-
partenant certainement au parasite, sont des éléments de 12 à 20 i^- de dia-
mètre. Il ne nous fut pas possible de déterminer le sexe de ces parasites
jeunes; ce n'est qu'à la fin de l'accroissement qu'il nous fut donné de le
reconnaître; nous donnerons à propos de la microgamétogonie les caracté-
ristiques qui la distinguent de la macrogamétogonie.

Les jeunes stades, fig. i-3, sont entourés de noyaux hôtes, parfois
nombreux, tassés à la périphérie, parfois hypertrophiés et entourant plus
ou moins le parasite, fig. 5. Celui-ci possède un gros noyau, complètement
rempli de granules et de bâtonnets chromatiques, supportés eux-mêmes
par un substratum légèrement colorable; il contient, entouré d'un zone libre,
un caryosome intensément colorable, fig. 1. Le caryosome est souvent logé
à la périphérie du noyau; dans un cas nous avons trouvé deux granules ca-
ryosomiens logés dans un même noyau, fig. 3. Le protoplasme, compara-
tivement au noyau, est peu développé, fig. 1-5.

La première modification qui apparaît, et qui apparaît très tôt, est la
disposition que prennent les éléments chromatiques du noyau. Ils se logent
à la périphérie, tout contre la membrane nucléaire, fig. 1, 2. En même
temps l'accroissement commence et il affecte beaucoup plus le protoplasme
que le noyau. Pendant toute la période d'accroissement, la chromatine péri-
phérique reste apparente. Ces éléments, observés par Dakin (ii), doivent
sans doute être homologués à ceux que Siedlecki (98) observe dans les
" Coccidies de la Seiche " et à ceux que Moroff (08) décrit chez Y Aggre-
gata legeri comme filaments achromatiques entremêlés d'éléments chroma-
tiques et se disposant à la périphérie du noyau.

126 Charles FOULON

Tandis que l'accroissement progresse on se rend mieux compte de la
structure du protoplasme; elle est réticulo-alvéolaire, visible surtout dans
les préparations colorées à l'hématoxyline. Il est bourré de fins granules
de toutes formes, très réfringents. Au voisinage du noyau, le réseau présente
une disposition plus ou moins radiée; ses travées sont en connexion avec
la périphérie du noyau à contours dentelés,- fig. 6, 9.

Peu à peu le parasite grandit; il atteint un diamètre de loo |j- et le dé-
passe pour atteindre un diamètre maximal de i5o à 200 H-.

Une structure curieuse se voit dans le caryosome; il est formé de deux
assises chromatiques de colorabilités différentes : l'une périphérique, inten-
sément colorable par l'hématoxyline; l'autre interne, moins colorable, fig. 4.
Dans la sphère interne il existe encore un amas chromatique, fig. 5-8,
formé souvent d'un granule central et d'une sphère périphérique, fig. 7.
Enfin, dans bien des cas la partie externe la plus chromatique présente en
un point de la périphérie un orifice en forme d'entonnoir, faisant commu-
niquer les régions centrales avec les parties périphériques, fig. 5, 6, 8. et
souvent aussi une zone externe, faiblement chromatique, englobe tout le
caryosome, fig. 5, 6, 8, 9.

En résumé, le caryosome sous sa forme la plus complexe présente au
centre un élément très chromatique à granule central, entouré à peu de
distance d'une première sphère chromatique. Cette partie centrale plonge
dans un espace plus clair à structure nettement radiée, fig. 7. Les assises
périphériques sont : une épaisse enveloppe très chromatique percée d'un
orifice et entourée elle-même d'une assise moins colorable, fig. 6.

En dehors du caryosome, le noyau contient des éléments chromatiques
plus ou moins filamenteux, chargés de granules; ils sont situés à quelque
distance de la membrane et reliés au caryosome par de très fines travées
disposées radiairement, fig. 5, 7. En dehors de ces éléments, le noyau est
clair et pas colorable.

A la fin de l'accroissement, le noyau est le siège de modifications inté-
ressantes. D'abord l'amas chromatique central du caryosome se désagrège,
fig. 9, 10; en même temps tout le noyau, en dehors des éléments chroma-
tiques, devient uniformément colorable par les colorants protoplasmiques
(rouge Congo), fig. 10, n, etc. Ce fait semble être dû à ce que le contenu
de la sphère interne du caryosome difflue dans le noyau, fig. 8, et est en
harmonie avec ce qui a été décrit par Moroff (08). Cet auteur observe
que la substance centrale du caryosome se dissémine avant la partie péri-

MEROCYSTIS KATH-E DAKIN 127

phérique et il croit même que le passage se fait par de nombreux orifices
de l'enveloppe corticale. Le caryosome se trouve dès lors réduit à la sphère
chromatique intensément colorable; elle est de structure assez homogène
avec de nombreux alvéoles; au centre traînent quelques débris chroma-
tiques, FIG. 10-12.

Les éléments chromatiques du noyau, qui étaient restés groupés près
de la membrane, s'éparpillent un peu, fig. lO, 11, puis se disposent autour
du reliquat caryosomien, fig. 13. Finalement ce dernier reste du caryosome
disparait lui-même; on dirait que sa substance se porte sur les éléments
chromatiques du noyau, venus se disposer autour de lui, fig. 13, 14, et à la
fin de l'accroissement le volumineux noyau du macrogamète possède un
contenu uniformément colorable, très finement granuleux qui donne l'im-
pression d'un coagulum très délicat ; au centre se trouve une sphère
creuse formée de tous les éléments chromatiques, courts filaments entor-
tillés et entremêlés de granules, fig. 14. Toute trace de caryosome a géné-
ralement disparu.

Les observations que nous avons pu faire sur la structure du caryosome
et l'édification des éléments chromatiques qui participeront aux cinèses
ultérieures concordent en bien des points avec les observations d'autres
auteurs.

La formation du caryosome par deux substances de colorabilité diffé-
rente fut souvent observée chez les Aggrégates : Labbé (96), Siedlecki
(98-05-07), Léger et Duboscq (08), Moroff (08) et également chez le Me-
rocysih kathœ par Dakin (ii).

L'origine de ces deux substances est décrite de façon différente suivant
les auteurs. Labbé (96), Siedlecki (07) et Moroff (o3) croient à la différen-
ciation de la zone centrale à l'intérieur du caryosome primitif; par contre,
Léger et Duboscq (08) admettent la pénétration d'un caryosome sidéro-
phile dans' le nucléole de plastine. Il nous parait fort peu probable que
cette description se vérifie dans l'espèce qui nous intéresse; mais nous
n'oserions pas l'affirmer, car notre conviction se base sur l'aspect de très
jeunes stades du caryosome, et la formation de ceux-ci aux dépens du mé-
rozoïte nous fait défaut. De même nous n'osons pas nous prononcer quant
à la nature des diverses assises chromatiques du caryosome. Touchant cette
question, les avis sont également partagés. Labbé [gS) et Siedlecki ad-

128 Charles FOULON

mettent que la couche périphérique est formée de chromatine vraie ou basi-
chromatine, colorable par les colorants basophiles, tandis que la zone in-
terne (oxychromatine) serait à rapprocher de la pyrénine ou de la plastine.

Léger et Duboscq (o8) admettent une constitution à peu près inverse,
et MoROFF (08) est d'un avis en quelque sorte intermédiaire, en ce sens qu'il
n'admet pas de distinction nette entre ces chromatines différentes, qui se
transformeraient l'une dans l'autre.

Nos colorations différentielles, furent trop peu concluantes pour que
nous puissions nous prononcer, et d'autre part nous croyons qu'il est pré-
maturé d'aborder cette discussion aussi longtemps que les rôles respectifs
de ces différents constituants ne seront pas établis et que leur homologie
dans de nombreux objets ne sera pas mise en évidence.

Quant au rôle du caryosome total, il est partiellement mis en évidence
par son évolution dans le macrogamète et par celle que nous décrirons
plus loin, à propos des microgamétocytes. Une partie de sa substance se
porte sur les filaments peu colorables du noyau (filaments achromatiques
ou de plastine de Moroff), éléments qui prendront part aux cinèses. Cette
interprétation concorde assez bien avec ce que Moroff (08) observe chez
Aggregala legeri. Cet auteur croit, sans oser l'affirmer, à la persistance des
éléments chromosomiens; ceux-ci viennent se grouper autour des sphérules
chromatiques et se chargent à leurs dépens de très fins petits granules colo-
rables.

Léger et Duboscq (08) observent un ^ spirème pâle " dès le début de
la désintégration nucléolaire dans le schizonte. 11 devient plus colorable
par absorption de substance nucléolaire dissoute; ensuite, du reliquat du
caryosome il sort un - spirème - très colorable et celui-ci bientôt disparaît,
tandis que le spirème pâle devient beaucoup plus colorable. Cette descrip-
tion, réserves faites pour le second spirème, s'harmoniserait assez bien avec
ce qui s'observe dans le Merocystis kathœ; par contre Dobell (14^) décrit
que le caryosome donne naissance à une quantité de granulations fines qui
forment un amas de petits grains et filaments très fins qui sont des « chro-
mosomes « irréguliers. Disons enfin que Dakin (ii) croit à l'expulsion du
caryosome dans le protoplasme.

Il ressort de nos observations que dans le cas présent l'un des rôles du
caryosome est certainement de servir de réserve chromatique, réserve qui
est répartie aux chromosomes au moment des cinèses. Aussi, malgré les
objections de Léger et Duboscq (08), croyons-nous pouvoir considérer le

MEROCYSTIS KATH^ DAKIN 129

caryosome comme formé de trophochromatine par opposition à l'idiochro-
matine du noj'au; mais nous ne voulons donner à ces termes qu'une signi-
fication restreinte, applicable seulement au rôle fonctionnel des éléments
chromatiques à un moment donné, et non pas le sens absolu qui entraine
le dualisme nucléaire (Schaudinn) ou la signification que leur donne
SiEDLECKi (o5) quand il admet que le caryosome est de la chromatine végé-
tative qui disparaît lors des multiplications sexuées.

2. Microgamétogonie.

On peut distinguer plusieurs périodes lors de la formation des micro-
gamètes :

a) L'accroissement du microgamétocyte.

b) La multiplication nucléaire et la formation des cytomères.

c) L'achèvement et la libération des microgamètes.

a) Accroissement du microgamciocyte.

Comme nous l'avons dit plus haut, les tout jeunes stades ne sont pas
reconnaissables des stades correspondants du macrogamète. Pendant l'ac-
croissement, on voit très souvent des gamètes à caryosome intensément co-
lorable; la structure interne échappe donc, et il n'est pas possible de dire si
au centre de la sphère existe un amas chromatique.

A la fin de l'accroissement, on reconnaît le microgamétocyte. Semblable
au macrogamète, il s'en distingue par l'allure du caryosome. Celui-ci est
constitué simplement de deux couches chromatiques, l'une externe très co-
lorable par l'hématoxyline de Heidenhain, l'autre interne, homogène, moins
colorable, fig. 15; ces deux éléments ne sont pas très nettement limités l'un
par rapport à l'autre, fig. 16. — Après coloration à l'hématoxyline de
Delafield, on observe une colorabilité inverse. Il semble que la zone ex-
terne soit moins colorable, et au début elle n'est pas nettement limitée de
la zone interne moins colorable.

L'évolution du caryosome et du noyau diffère de celle que nous avons
observée dans le macrogamète. La sphère périphérique se contracte, décoiffe
en quelque sorte la sphère interne, fig. 17, 18, et bientôt le caryosome se
présente sous forme d'une sphère assez peu chromatique, avec quelques

19

l3o Charles FOULON

grands alvéoles, à laquelle est accolée une calotte très chromatique, vacuo-
laire, représentant la sphère externe, fig. 19.

L'un (Je ces éléments constituants persiste longtemps : c'est la partie
interne du caryosome ou la sphère la plus homogène à quelques vacuoles;
l'autre difflue dans le noyau. Dès lors le contenu nucléaire, clair jusqu'à
présent, devient uniformément colorable par les colorants protoplasmiques
(rouge Congo) et présente ce même aspect de très fin coagulum déjà ob-
servé pour le macroganiète, fig. 19. Le microgamétocyte reste cependant
facilement reconnaissable grâce à la présence d'un gros caryosome reliquat
de la zone centrale, fig. 2i, 23, 27.

Les éléments chromatiques du noyau, qui jusqu'à présent étaient res-
tés groupés à la périphérie, s'éparpillent dans le noyau, fig. 20, et bientôt
échappent plus ou moins à la vue, n'étant plus apparents que comme de
petits filaments et de petits granules disséminés, fig. 21, 22.

b) Àlultiplicalion nucléaire et /o?'mation des cytomères.

Quand l'accroissement est achevé, les divisions nucléaires s'annoncent
par le fait que le noyau émigie vers la périphérie du parasite et entre en
contact avec elle, fig. 22; il y a même une légère invagination de la mem-
brane du microgamétocyte à l'endroit où le noyau entre en contact avec elle,
et en même temps la lumière entre le noyau et le protoplasme devient
moins nette ou plutôt moins régulière, de nombreux prolongements nuclé-
aires sinsinuant entre les mailles protoplasmiques, fig. 20-22. La cavité
nucléaire persiste cependant et nous n'observons pas la diffusion du caryo-
plasme et des éléments caryosomiens dans le protoplasme, ainsi que
Moroff (o8) le décrit pour Y Aggrcgala legeri. Dans cette espèce, il observe
que le fuseau de division plonge directement dans le protoplasme; il est
vrai que le fait parait être exceptionnel et qu'il ne se retrouve pas dans les
autres espèces d'Aggrégates étudiées par cet auteur.

Le noyau ayant atteint la périphérie, ses éléments chromatiques se
condensent plus ou moins, soit sous la forme de petits filaments assez grêles
et de nombreux fragments granuleux, fig. 21, soit en bandes épaisses sup-
portant les granules chromatiques, fig. 24.

La première division nucléaire est généralement du type multipolaire,
fig. 25, 26, mais nous ne pouvons affirmer que ce type soit constant.

MEROCYSTIS KATH.E DAKIN l3l

FiG. 23. Le noyau s'étire irrégulièrement, chacun de ses pôles entrant en
contact avec la paroi du parasite. Les éléments chromatiques peuvent se
présenter différemment : ou bien ils sont éparpillés en petits éléments
granuleux très nombreux, fig. 23, ou bien ils sont disposés en quelques
filaments tout chargés de granules, fig. 25, 26. Il ne semble pas que ces
deux aspects soient des stades différents d'une division évoluant suivant
un type unique; il paraît plus probable, comme on le verra pour les di-
visions ultérieures, qu'il existe des variantes dans l'aspect des divisions.
Le granule caryosomien peut être expulsé assez tôt dans le protoplasme,
FIG. 25, ou bien il peut être départi à l'un des noyaux-filles, fig. 26, 27.
Les noyaux-filles, après une période de repos qui parait être très courte,
se divisent à nouveau, fig. 28, et bientôt la division du microgamétocyte
en cytomères a lieu. La segmentation du protoplasme, qui conduit à la for-
mation d'un nombre restreint de loges, débute par l'apparition de fentes très
étroites, que l'on devine plutôt qu'on ne les voit au milieu des mailles du
protoplasme, fig. 29. Les loges, d abord polygonales, fig. 30, acquièrent
des contours plus nets et plus arrondis. Il semble que les cytomères soient
d'abord uninucléés, chacun possédant un gros noyau au repos avec bandes
chromatiques peu colorables mais bien distinctes, fig. 30. Ce stade, très
éphémère, est bientôt suivi de multiplications nucléaires à l'intérieur de
chaque cytomère.

Les divisions nucléaires peuvent être d'aspects très variés et, fait cu-
rieux, les différents types se rencontrent dans un même macrogamétocyte.
Les fig. 31, 33, 35 et 37 ont été dessinées d'après les aspects rencontrés
dans un seul microgamétocyte.

Premie?' type. Dans ce mode de caryocinèse, qui est très parfait, il y a
une espèce de prophase; dans le noyau qui s'accole à la paroi du cytomère,
on voit les éléments chromatiques filamenteux éparpillés se disposer
assez régulièrement en bandes épaisses, plus ou moins achromatiques, qui
supportent de très nombreux granules chr( matiques, fig. 31. A l'anaphase
on voit que ces filaments, que l'on serait tenté d'appeler chromosomes,
convergent au pôle vers un point central, fig. 32; il ne nous fut pas possi-
ble cependant de découvrir un centriole. Les filainents sont peu nombreux;
nous ne voulons pas affirmer que leur nombre soit constant, mais plusieurs
fois nous en avons observé six à chaque pôle; il paraît même n'y en avoir
que trois incurvés en anse. Ces filaments très longs montrent nettement
la structure que nous avons décrite plus haut.

i32 Charles FOULON

Tandis qu'à la télophase les éléments chromatiques se tassent aux
pôles, certains filaments restent très longtemps unissants, fig. 34.

Le deuxième type, dérivant du premier, est la division multipolaire,
FIG. 37. Ce type est relativement rare dans les cytomères; dans l'aspect
dessiné, on voit très nettement qu'en un des pôles, situé semble-t-il dans
l'axe de division principale, existent, côte à côte, deux centres de con-
vergence des filaments chromatiques; divergeant de là, les uns se dirigent
au pôle opposé, les autres à des pôles secondaires.

Uti troisième type de division, en apparence beaucoup moins parfait,
consiste dans un simple étirement suivi d'étranglement du noyau, fig. 35.
Celui-ci contient cependant un réseau filamenteux chargé de petits granules
chromatiques.

Dans de rares cas nous avons rencontré des aspects semblables à ceux
de la FIG. 38. Toute la chromatine nucléaire est condensée au centre du
noyau, dont la cavité est légèrement colorable par les colorants protoplas-
miques. Nous ne pouvons déterminer la signification de cet aspect; peut-
être est-ce une télophase, peut-être n'est-ce qu'un aspect anormal, altéré
ou dégénéré.

Les divisions se succèdent rapidement, fig. 39; les noyaux deviennent
très nombreux dans chaque cytomère; parfois, fig. 39, on retrouve dans
le protoplasme de l'un d'eux le reliquat caryosomien du microgamétocyte
primitif.

c) Achèvement et libération des tnicrogamètes.

Les divisions nucléaires cessent; les noyaux sont tous disposés à la
périphérie des cytomères, leurs contours se régularisent, ils deviennent à
peu près sphériques, fig. 40-42. D'abord on aperçoit encore des filaments
entortillés formant un peloton très chromatique; plus tard les noyaux se
condensent et, tout en diminuant de volume, deviennent plus intensément
colorables.

La membrane du microgamétocyte primitif se déchire, les cytomères
libres continuent leur évolution au voisinage l'un de l'autre, fig. 42. La
mise en liberté des microgamètes peut être précoce, fig. 40; cependant elle
ne se fait généralement que quand leur évolution est presque achevée et

MEROCYSTIS KATH.E DAKIN l33

qu'ils sont arrivés à maturité; ils ont alors une forme ovoïde, acuminée à
une extrémité, sont d'aspect homogène et intensément colorables, fig. 43.

La formation des microgamètes par bipartitions successives du noyau
est admise par la plupart des auteurs. Seul Siedlecki (g8) avait cru qu'ils
naissent par recondensation de la chromatine éparpillée dans le proto-
plasme. On a vu combien ces divisions nucléaires sont variées; il est indu-
bitable cependant qu'elles se rattachent à un même type fondamental.
Nous n'avons jamais observé de type aussi parfait que ceux dessinés par
MoROFF (08) et présentant un fuseau achromatique et des centrosomes; cet
auteur note d'ailleurs l'absence de ce type chez Aggregata siedlecki. De ce
que nous n'ayons pas vu de centrosome, il ne résulte d'ailleurs pas qu'il
n'existe pas de centres d'attraction ; il nous parait même que, sous forme
figurée ou non, ils doivent exister. (]ette conviction se base sur l'allure de
certaines cinèses, dans lesquelles on voit les éléments chromatiques conver-
geant parfaitement vers un point, et elle se base aussi sur l'aspect des ci-
nèses multiples. Celles-ci, en effet, sont très probablement du type bipolaire
et elles sont dues à la succession rapide des cinèses, fig. 37 | Dobell (14^)],
ou à la division précoce des centres d'attraction, fig. 25. 26. Nous ne
croyons pas à l'existence, au moins dans l'espèce qui nous intéresse, des
divisions multiples réelles telles que Moroff (08) les décrit pour Aggregata
jacmetti, c'est-à-dire de celles qui montrent plusieurs centres d'attraction
apparaissant simultanément.

3. Sporulation.

Dans l'exposé des phénomènes de sporulation il est bon de distinguer
quatre périodes :

a) La fécondation.

b) La multiplication nucléaire.

c) L'isolement des sporoblastes.

d) La formation des sporozoïtes.

a) La fécondatiofi.

Quand le macrogamète a achevé son accroissement et que le caryo-
some a complètement disparu, fig. 14, le noyau, resté jusqu'à présent au

l34 Charles FOULON

centre du parasite, émigré vers la périphérie; ses contours, comme nous
l'avons déjà observé pour le niicrogamétocyte, sont irréguliers, fig. 44, et
ce noyau ne contient qu'une sphère creuse, chromatique, formée de tous les
filaments nucléaires condensés. Le noyau ne reste pas sphérique, mais
s'allonge considérablement, devient fusiforme, accolé à la membrane par
une de ses extrémités aiguës; il traverse le macrogamète presque de part en
part, FIG. 46, 47.

Des aspects comme ceux de la fig. 45 restent énigmatiques; malgré la
présence d'une sphérule caryosomienne, nous croyons devoir les considérer
comme appartenant à un macrogamète, à cause de l'aspect des éléments
chromatiques qui, en peloton de fins filaments entremêlés de quelques gra-
nules, sont excessivement chromatophiles.

Lorsque le noyau a atteint la périphérie par une de ses extrémités, les
éléments chromatiques qui, d'abord disposés en sphère creuse, se sont plus
ou moins éparpillés, se portent tout près de la membrane. Cette migration
s'accompagne d'une espèce d'étirement, les filaments étant en quelque
sorte traînés dans le noyau, fig. 47. On voit de longs filaments chromati-
ques tantôt presque rectilignes, tantôt brusquement coudés en angle, qui
sortent du peloton chromatique et traversent le no3'au.

Nous croyons, contrairement à l'opinion de Dobell (14^), que cet as-
pect précède la pénétration du microgamète dans le macrogamète, car il
s'observe parfois alors que le noyau n'a pas encore ou a à peine atteint la pé-
riphérie du parasite.

Le noyau fusiforme vient en contact en un point avec la membrane, et
ce contact devient de plus en plus étendu, jusqu'à ce que le noyau s'accole
largement contre elle et redevienne sphérique; il contient le peloton chro-
matique finement filamentaire, et nous avons observé une fois, fig. 48, un
granule chromatique tout contre la membrane; peut-être est-ce le microga-
mète fécondant ou plutôt un reliquat de ce microgamète. Il ne nous est
d'ailleurs pas possible d'établir avec précision le moment de la pénétration
du microgamète, n'ayant pas observé le phénomène; tout ce que nous pou-
vons dire, c'est qu'elle doit avoir lieu entre le moment où le noyau entre en
contact avec la périphérie et la première mitose; les aspects que le Mero-
cy stis offre à ce stade sont trop semblables à ceux que l'on rencontre pen-
dant la fécondation des Coccidies pour qu'il puisse exister le moindre doute
à cet égard.

Nous avons rencontré une seule fois dans le noyau à ce stade un aspect

MEROCYSTIS KATH.E DAKIN

l35

très particulier, mais d'interprétation douteuse. Le noyau du macroga-
tnète, FiG. 46, allongé et presque en contact avec la périphérie, est absolu-
ment libre de tout élément chromatique figuré; mais il possède tout près
de la membrane un petit noyau très nettement limité et contenant, en même
temps que de fins filaments peu chromatiques, des granules également peu
colorables. Cet aspect rappelle étrangement celui que Léger et Duboscq (o8)
ont observé dans la schizogonie des Aggrégates, immédiatement avant les
premières divisions; ces auteurs l'interprètent comme noyau de reconstitu-
tion, c'est-à-dire que dans le noyau accru il y a délimitation d'un petit
noyau qui contient le spirème chromatique et qui seul se divise, tandis que
la plus grande partie du noyau ancien disparait. Il fut impossible d'établir
avec certitude l'homologie du stade qui nous intéresse avec ceux décrits par
Léger et Duboscq, à cause de la rareté des aspects observés et à cause du
manque de stades de transition.

b) Multiplicatioji nucléaire.

Immédiatement après la fécondation, le noyau s'applique largement
contre la membrane du zygote. Le peloton de filaments chromatiques se
détend et les filaments qui s'en échappent sont épais, très chromatiques,
formés de granules agglomérés autour d'un substratum central, fig. 49.
Tout le reste du noyau est de structure uniforme, très finement granuleux,
se colorant par les colorants protoplasmiques.

La première division sporogoniale est généralement multipolaire,
fig. 50, mais nettement différente de celle que nous avons décrite dans la
microgamétogonie, fig. 25, '-6. Les éléments chromatiques ne sont pas
éparpillés dans le noyau, mais condensés; ils sont très intensément colo-
rables et paraissent trapus ; ajoutons qu'il n'y a pas de reliquat caryosomien.
Les divisions ultérieures des noyaux du sporonte sont reconnaissables
des divisions nucléaires de microgamétocyte par ces mêmes caractères : la
colorabilité très forte des éléments chromatiques et leur condensation au
centre du noyau.

Le type de ces divisions parait être moins parfait que celui que nous
avons vu plus haut : la masse chromatique, formée de filaments entortillés
et entremêlés de granules, s'étire, s'étrangle et se divise, fig. 50; parfois la
masse chromatique en division apparaît formée de granules et de bâtonnets

i36 Charles FOULON

plus ou moins orientés, fig. 51. Nous n'avons pas observé de centriole ni
de centres d'attraction ni de fuseau achromatique.

Un grand nombre de divisions du même type se succèdent, et ce jus-
qu'à ce que toute la périphérie du sporonte soit bordée de noyaux,
FIG. 52-55.

c) L'isolement des sporoblastes.

Les noyaux se trouvent régulièrement disposés à la périphérie du spo-
ronte, FIG. 55. L'envahissement du centre doit être assez brusque. Nous
n'avons, en effet, observé que rarement des aspects indiquant le début
du jihénomène, fig. 56; les stades ultérieurs qu'il nous a été donné de
voir, FIG. 57, montrent l'envahissement déjà très avancé; quelques noyaux
se trouvent encore disposés régulièrement près de la membrane.

Quand l'envahissement est complet, le protoplasme se segmente. La
structure finement alvéolaire qu'il a conservée depuis le début de l'évolution
se transforme peu à peu. Certaines travées acquièrent une importance plus
grande par leur longueur et leur netteté; le protoplasme se cloisonne en à
peu près autant de loges qu'il y a de noyaux, fig. 58. Les noyaux sont le
plus souvent disposés dans un angle de ces loges polyédriques et paraissent
être au repos. Peu à peu les contours des loges se dessinent plus nette-
ment, les angles s'arrondissent et les sporoblastes s'individualisent sous la
forme de petites sphères tassées les unes contre les autres et contenues à
l'intérieur du sporonte au nombre de plusieurs centaines, fig. 58.

Il arrive aussi que la réduction du sporonte en sporoblastes se fait
progressivement; des noyaux s'isolent dans une petite plage du proto-
plasme, tandis que d'autres restent pendant quelque temps encore groupés
à plusieurs dans une masse protoplasmique commune, fig. 59.

Quand on examine les sporoblastes isolément, on observe que ce sont
des éléments de i5 à 20 v- de diamètre. Le noyau semble sortir du repos,
il est de structure spongieuse, fig. 60, 61; parfois on en observe en divi-
sion, fig. 63. Sur les préparations fixées au sublimé on voit que le proto-
plasme forme au voisinage du noyau une plage plus dense, homogène,
fig. 61, tandis qu'ailleurs il est largement vacuolisé. Dans les objets fixés
au BouiN ou au Benda, on observe dans le protoplasme une sphérule bien
délimitée, fig. 60, colorable par les colorants protoplasmiques ; elle fixe

MEROCYSTIS KATH.t DAKIN 13/

également l'hématoxyliiie qui disparait par une différenciation poussée assez
loin; souvent alors le centre reste coloré, tandis que la périphérie est diffé-
renciée, FiG. 60, 62. Nous n'avons pas pu établir l'origine de cette curieuse
formation; elle est complètement absente quand les noyaux sont encore
régulièrement disposés à la périphérie du sporocyste, fig. 55; elle appa-
raît lorsque la fragmentation commence, fig. 58, 59. Nous croyons, sans
oser l'affirmer, que chaque sporoblaste ne possède primitivement qu'une
seule de ces sphérules et qu'elles se divisent ultérieurement, fig. 62.
MoROFF (o8) les a observées dans plusieurs Aggrégates de la Seiche; elles
se formeraient par agglomération de granules chromatiques; leur significa-
tion est douteuse.

d) Formation des sporo{oïtes.

La formation des sporozoïtes a lieu soit à l'intérieur de la membrane
du sporonte, soit après éclatement de celle-ci et dissémination des sporo-
blastes.

Le noyau unique s'allonge, s'étire, s'étrangle et se divise en deux
noyaux-filles, fig. 61-65; il paraît garder sa structure spongieuse durant
tout ce processus. Les noyaux-filles restent au nombre de deux dans l'im-
mense majorité des cas; exceptionnellement ils se divisent une seconde fois;
la spore contiendra alors quatre sporozoïtes.

Aux dépens des deux noyaux se forment deux éléments trapus, recour-
bés en demi-cercle, très colorables, de structure spongieuse, fig. 66-69.
A côté d'eux persistent une masse plus ou moins condensée de protoplasme,
les deux sphères protoplasmiques homogènes et des granules réfringents;
la membrane de la spore est plissée, épaisse et réfringente. Nous trouvons-
nous en présence du sporozoïte mûr? et quelle est la part que prend le pro-
toplasme dans sa formation? Nous ne pouvons actuellement répondre à ces
questions, ce qui exigerait l'examen de matériel frais.

Nous n'avons vu le sporozoïte en liberté qu'exceptionnellement et
dans des conditions telles qu'une rupture artificielle de la spore était
évidente. Il faut admettre que la mise en liberté a lieu en dehors du rein
de buccin.

20

l38 Charles FOULON

B. DISCUSSION DES OBSERVATIONS.

1. Le cycle.

D'après la description que nous venons de donner, le cycle évolutif du
Merocystis kathœ peut se résumer comme suit :

La schizogonie est inconnue; elle se passe probablement dans un hôte
intermédiaire. Les mérozoïtes, parvenus dans le tissu de la glande excré-
trice du buccin, se transforment, les uns en macrogamètes, les autres en
microgamétocytes.

Les macrogamètes subissent un énorme accroissement et sont caracté-
risés par un caryosome à forme complexe; sa partie centrale se répand la
première dans le caryoplasme, puis la partie périphérique se disperse égale-
ment ; le plus souvent, le caryosome a complètement disparu à la fin de
l'accroissement.

Le microgamétocyte s'accroit aussi beaucoup; son caryosome est de
structure plus simple; la zone centrale se dévagine de la zone corticale et
cette dernière se disperse dans le cytoplasme; à la fin de l'accroissement, la
zone centrale persiste, au moins en grande partie, dans le noyau. Les pre-
mières divisions du microgamétocyte sont du type multipolaire ; après
production d'un nombre restreint de noyaux, il y a formation de cyto-
mères par cloisonnement du protoplasme; puis, par cinèses de types variés,
il se forme dans chaque cytomère un grand nombre de noyaux, aux dépens
de chacun desquels naitra un microgamète.

La fécondation a lieu par pénétration d'un microgamète dans le ma-
crogamète, et cette fécondation est bientôt suivie de multiplication du noyau
du zygote; les noyaux-filles, très nombreux, se disposent régulièrement à la
périphérie. Chaque noyau s'isole alors avec une petite portion de proto-
plasme et forme un sporoblaste ; à l'intérieur de celui-ci, par division nu-
cléaire, se forment deux sporozoïtes; la spore est formée et prête à être
expulsée.

Cette évolution est notablement différente de celle qui a été décrite
par Dakin (ii). D'après cet auteur, les microgamètes se forment à la péri-
phérie du parasite, fig. 53-56; le zygote se divise en kystes secondaires,
FiG. 30, 39, qui ultérieurement vont donner un amas de spores, fig. 58,
dans lesquelles existe un seul sporozo'ite, fig. 60-62. Il nous paraît évident

MEROCYSTIS KATH.î: DAKIN l3g

que Dakin, tout en observant fort bien des stades isolés, a fait une confusion
essentielle en ce qui concerne leur sériation. Il a considéré comme appar-
tenant au début de la sporogonie les stades de microgamétogonie, et inver-
sement, comme microgamétogonie les stades de formation des spores. Il
nous parait impossible de soutenir sa façon de voir; en effet :

1° On voit nettement les microgamètes mûrs groupés autour de petits
amas protoplasmiques qui correspondent aux cytomères provenus de la
fragmentation de la grande masse protoplasmique primitive (microgaméto-
cyte), FiG. 40-43.

2° On voit nettement les sporoblastes s'individualiser dans la masse
protoplasmique unique (sporonte), fig. 56-58. Il peut y avoir une frag-
mentation partielle du sporonte, ce qui amène la formation exceptionnelle
de quelques amas plurinucléés, fig. 59.

3° Quant à la formation de deux sporozoïtes dans chaque spore, elle
est évidente, fig. 63-69, et il est malaisé de comprendre comment elle a
échappé à Dakin.

Le cycle, tel que nous le concevons, concorde assez bien avec celui que
MoROFF admet pour les Aggregata; mais il (o6d!, o6b) admet que la fécon-
dation n'a lieu qu'après la formation de sporoblastes, qu'il appelle les ma-
crogamètes. Cet auteur, dans son travail d'ensemble (oSj, est d'ailleurs
moins affirmatif sur ce point.

Il nous parait évident que la fécondation a lieu à la fin de l'accroisse-
ment du macrogamète, et cette façon de voir concorde avec celle de
SiEDLECKi (o8) et de Dobell (14^). Cette façon de voir se base sur l'impos-
sibilité qu'il y a à ce que les centaines de sporoblastes soient fécondés iso-
lément, étant donné qu'ils sont renfermés dans une membrane homogène;
et elle se base sur la concordance parfaite des aspects que nous considérons
comme stades de fécondation avec les aspects correspondants si souvent
décrits chez les Coccidies (Debaisieux, iu, ii); d'ailleurs, sans que nous
ayons vu le moment exact de la pénétration du microgaméte dans le macro-
gamète, la succession des stades que nous avons observés est amplement
suffisante pour que nous puissions affirmer qu'ils représentent des proces-
sus de fécondation.

21

140 Charles FOULON

2. Classification.

Se basant sur les caractères établis par lui, Dakin range ce parasite
dans le groupe des Polysporocystidœ; Mcrocystis nov. g.

Si l'on veut situer Merocystis dans la classification des Coccidies don-
née par Léger (ii), il faudrait créer une famille nouvelle à ranger parmi
les Eimeridœ poly^oïca, entre les Barouxidœ et les Caryoti-ophidœ. Cette
famille serait caractérisée par le fait que les nombreuses spores sont di-
zoïques, fait qui a échappé à l'observation de Dakin.

Mais une interprétation toute différente s'impose; il faut considérer le
Merocystis kathœ comme une Aggrégate, et le nom lui-même devra proba-
blement être changé par celui qui fera la revision complète des Aggrégates.

Comme caractères d' Aggrégates le Merocystis présente :

1° Absence de schizogonie à côté de la sporogonie, ce qui entraine la
nécessité d'un habitat différent pour la schizogonie.

2° Évolution caractéristique du caryosome nettement divisé en zones
concentriques. Il est vrai que ce fait a été observé chez le Caryotropha
mesnili (Siedlecki, o5, 07), mais la systématique de ce genre n'est pas en-
core définitivement établie, et, nous basant sur un travail actuellement en
cours au laboratoire de Louvain, nous croj'ons que cette espèce devra éga-
lement être rapprochée, si pas assimilée, aux Aggrégates.

3° Premières cinèses microgamétogoniques et sporogoniques généra-
lement multiples, et cinèses de type très parfait.

4° Remarquons, enfin, les dimensions considérables du parasite, et la
concordance parfaite entre beaucoup d'aspects du Merocystis et ceux des
Aggrégates.

Deux caractères distinguent nettement le Merocystis des Aggrégates
connues jusqu'à présent :

1° La dimension restreinte des microgamètes.

2° Les spores à deux sporozoïtes. Les espèces décrites en possèdent
trois, quatre ou davantage, jusqu'à 24. Rappelons cependant que Mero-
cystis montre parfois des spores anormales à quatre sporozoïtes.

Reste la question de savoir où il convient de ranger les Aggrégates
elles-mêmes.

Schneider (83), Labbé (96), Siedlecki (gS), Laveran (98) et beaucoup
d'auteurs antérieurs les or.t considérées comme des Coccidies; Moroff

MEROCYSTIS KATH.E DAKIN I4I

(06, 08), LÉGER et DuBOSCQ (06-07-08) les envisagent comme des Gréga-
rines. Ils appuient leur façon de voir sur le fait qu'il existe une copula chez
les Aggrégates, qu'elles ont des sporocystes dérivant directement de la co-
pula, qu'elles ont des centrosomes et des fuseaux, et qu'elles possèdent de
volumineux microgamètes.

Une note préliminaire de Dobell (14^) nous annonce qu'il a observé,
comme Siedlecki (08), que les Aggrégates se fécondent par hétérogamie,
et que l'ookyste donne plusieurs sporocystes; il rapproche donc les i'\ggré-
gates des Coccidies.

Cette façon de voir est confirmée par nos observations; nous trouvons
également l'existence d'une hétérogamie très accentuée, nous voyons de
plus la formation de nombreux sporocystes aux dépens du zygote, et aussi
que dans le Alerocystis les microgamètes sont petits et que les fuseaux et
centrosomes font défaut, ce qui d'ailleurs était observé déjà pour d'autres
espèces (Moroff, 08).

Nous n'hésitons donc pas à nous rallier à l'opinion de Dobell et à
rattacher les Aggrégates aux Coccidies.

RESUME ET CONCLUSIONS.

1. Le Merocystis kathœ, parasite de l'organe rénal de Buccinum
undatum, est une Aggrégate; les Aggrégates constituent une famille de
Coccidies.

2. Le macrogamète et le microgamétocyte subissent l'un et l'autre
un accroissement considérable; ils sont caractérisés par leur caryosome,
formé de deux substances différentes.

3. Le caryosome du macrogamète, très complexe, disparaît complète-
ment à la fin de l'accroissement, la zone centrale se dispersant la première
dans le cytoplasme.

4. Le caryosome du microgamétocyte est plus simple et la zone cor-
ticale difflue d'abord dans le cytoplasme, tandis que la zone centrale laisse
un gros reliquat chromatique.

5. Les microgamètes se forment dans des cytomères nés du micro-
gamétocyte.

142 Charles FOULON

6. La fécondation a lieu par la pénétration d'un microgamète dans le
macrogamète, à la fin de l'accroissement.

7. Le zygote donne naissance à de nombreux sporoblastes; les spores
possèdent deux sporozoïtes.

8. Les divisions nucléaires sont de type très élevé, nettement diffé-
rentes dans le sporonte et dans le microgamétocyte.

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EXPLICATIOiN DES PLANCHES.

Les observations ont été faites à l'aide de robjectif apochromatique à immersion
2 mm. de Koritska et des oculaires de Zeiss.

Le grossissement linéaire approximatif est indiqué pour chaque dessin.

La projection à la chambre claire a été faite un peu en dessous de la platine du
microscope.

PLANCHE I.

Gamétogonie.

FIG. 1. Jeune gamonte indifférencié à noyau contenant un gros caryosome
h(3mogène et des corpuscules chromatiques périphériques. Des cellules de l'hôte sont
intimement accolées au parasite. Fixât. Bouin. X looo.

FIG. 2. Jeune gamonte indifférencié accru. Fixât. Bouin. X looo.

FIG. 3. Gamonte indifférencié dont le noyau présente la particularité de con-
tenir deux corps caryosomiens. Fixât. Bouin. X looo.

Macrogamétogonie.

FIG. 4. Macrogamète jeune. Le noyau montre tous les corpuscules chromatiques
situés près de la membrane, et un caryosome à zone périphérique chromatique et
à partie centrale claire renfermant un corps chiomatique Fixât. Bouin. X looo.

FIG. 5. Macrogamète plus avancé. Le carj'osome possède une zone très chro-
matique à quelque distance de la périphérie et un amas chromatique dans la partie
centrale plus claire. Fixât. Bouin. X looo.

FIG. 6. Noyau de macrogamète montrant les mêmes particularités et de plus
l'orifice en entonnoir existant dans la sphère très chromatique du caryosome. Fixât,
sublimé-alcool. X 385.

146 Charles FOULON

FIG. 7. Noyau de macrogamète. Le cai'3-osome montre un corpuscule central
lui-même formé de différentes assises de chromaticité différente ; la zone claire est
traversée de fines travées radiairement disposées. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 8. Noyau de macrogamète. La substance peu chromatique du caryosome
semble diffluer dans le noyau. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 9. Noyau de macrogamète. La cavité nucléaire est uniformément remplie
d'une substance peu colorable dans laquelle plongent les corpuscules chromatiques.
Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 10. Noyau de macrogamète. Les corpuscules chromatiques s'éparpillent
dans tout le noyau ; le caryosome est en dégénérescence et perd sa chromaticité.
Fixât. Bouin. X 385.

F"IG. 11. No3au de macrogamète. Le carjosome est réduit à une sphère
creuse à paroi mince. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 12. Id. Les corpuscules chromatiques se groupent autour du reliquat
car3'osomien. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 13. Noyau de macrogamète. Le caryosome a presque complètement dis-
paru. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 14. Noyau de macrogamète. Le caryosome a disparu; les corpuscules
chromatiques sont groupés en sphère autour de l'emplacement du caryosome; la
cavité est uniformément remplie d'une substance peu colorable; les contours du
noyau sont peu nets; il envoie des prolongements entre les mailles protoplasmiques.
Fixât. Bouin. X 385.

Microgamétogonie.

FIG. 15. No)'au de microgamétocyte. Le caryosome est formé d'une partie
centrale et d'une zone périphérique alvéolaire. F"ixat. Bouin. X 385.

FIG. 16. Noyau de microgamétocjte. La portion périphérique du caryosome se
ramasse en un pôle du caryosome. Fixât, sublimé-alcool. X 385.

FIG. 17. Noyau de microgamétocyte. La portion périphérique du caryosome,
complètement lamassée en lui pôle, coiffe en calotte la partie centrale, qui se libère.
Fixât. Bend.\, X 385.

FIG. 18. Noyau de microgamétocyte. Les deux éléments constituants du ca-
ryosome libérés; la partie périphérique dégénère. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 19. Id. en un stade plus avancé. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 20. Noyau de microgamétocyte. La partie centrale du caryosome seule
persiste ; les corpuscules chromatiques bien formés sont éparpillés dans le n03au,
ne laissant libre qu'une petite zone autour du caryosome. Fixât. Bouin. X 385.

MEROCYSTIS KATH^ DAKIN

147

FIG. 21. Le noyau du microgamétocyte progresse vers la périphérie du pa-
rasite; tout le contenu nucléaire uniformément rempli de corpuscules chromatiques.
Fixât. BouiN. X 385.

FIG. 22. Le noyau du microgamétocyte largement en contact avec la membrane
du parasite; les corpuscules chromatiques en fins granules et bâtonnets se ramassent.
Fixât. BouiN. X 385.

PLANCHE II.

FIG. 23. Première division. Elle est du type bipolaire; le noj'au est largement
en contact avec la membrane en deu.x points; les éléments chromatiques sont épar-
pillés en fins granules et bâtonnets; le reliquat caryosomien persiste sous la forme
d'une sphérule peu chromatique. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 24. Le noyau du microgamétocyte largement en contact avec la mem-
brane; les éléments chromatiques sont condensés sur quelques épais filaments; le
reliquat caryosomien est présent. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 25. Première division. Elle est du t}pe multipolaire; le noyau est lar-
gement en contact avec la membrane en au moins quatre points; les éléments chroma-
tiques sont éparpillés en bâtonnets disposés plus ou moins en filaments; le reliquat
carj'osomien est expulsé dans le protoplasme. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 26. Première division du type multipolaire. Les éléments chromatiques
disposés en filaments granuleux; le reliquat caryosomien persiste dans le noyau.
Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 27. Microgamétocyte à plusieurs noyaux. Le reliquat caryosomien persiste
dans un des noyaux. Fixât, sublimé-alcool. X 5oo,

FIG. 28. Microgamétocyte à plusieurs noyaux en division. Fixât, sublimé-alcool.
X 5oo.

FIG. 29. Microgamétocyte à pilusieurs noyaux. La formation des c5'tomères est
ébauchée par le clivage du protoplasme. Fixât, sublimé-alcool. X 5oo.

FIG. 30. Microgamétocj'te divisé en plusieurs cytomères. Les noyaux, un seul
par cytomère, sont au repios. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 31. Division nucléaire dans les cytomères. Stade de prophase. Fixât.
Bouin. X 1000.

FIG. 32. Id. Stade d'anaphase ; centres d'attraction polaire évidents. Fixât.
Bouin. X 1000.

FIG. 33. Id. Trois anses chromatiques en un pôle. Fixât. Bouin. X 1000.

FIG. 34. Id. Stade de télophase; deux filaments chromatiques unissants per-
sistent. Fixât. Bouin. X 1000.

148 Charles FOULON

FIG. 35. Division nucléaire dans le cytomère. Type plus simple. Fixât. Bouin^
X 1000.

FIG. 36. Id. Stade de télophase. Fixât. Bouin. X 1000.

FIG. 37. Id. Type multipolaire. Fixât. Bouin. X 1000.

FIG. 38. Cytomères à noyau de type énigmatique; repos ou dégénérescence.
Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 39. Microgamétocyte divisé en cytomères et montrant de très nombreuses
divisions nucléaires. Le reliquat caryosomien persiste dans le protoplasme de l'un
des cytomères (^). Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 40. CA'tomères libérés. Les noyaux se condensent; certains s'isolent com-
plètement (^). Fixât, sublimé-alcool. X 5oo.

FIG. 41. Les noyaux se condensent dans les cytomères; quelques-uns s'isolent.
Fixât, sublimé-alcool. X 5oo.

FIG. 42. Idem.

FIG. 43. Microgamètes libres. Fixât, sublimé-alcool. X 5oo.

PLANCHE III.
Sporulation.

FIG. 44. Microgamète dont le noyau se porte vers la périphérie du parasite
en s'allongeant foitement. Éléments chromatiques disposés en sphère, à comparer
avec l'aspect de la fig. 14, auquel cet aspect fait suite. Fixât. Bouin. X 385.

F~IG. 45. Noj-au probablement de macrogamète, à aspect énigmatique. Fixât.
Bouin. X 385.

FIG. 46. Noyau de macrogamète à la période de fécondation. Présente près
de la paroi une formation d'interprétation douteuse. Fixât, sublimé-alcool. X 385,

FIG. 47. Noyau de macrogamète à la période de fécondation. Les éléments
chromatiques disposés en filaments minces, rectilignes, à coudures brusques. Fixât.
Bouin. X 5oo.

FIG. 48. Le noyau [probablement après la pénétration du microgamète (^)]
reprend sa forme sphérique. Les éléments chromatiques se condensent fortement en
un peloton. F'ixat. Bouin. X 385.

FIG. 49. Préparation à la première division du zygote. Les éléments chroma-
tiques, très fortement colorables, sont ramassés en quelques filaments trapus, très
granuleux. Fixât. Bouin. X 385.

MEROCYSTIS KATH^ DAKIN 149

FIG. 50. Première division nucléaire dans le sporonte ; type multipolaire.
Les éléments chromatiques, très colorables, sont condensés en quelques filaments épais,
et n'occupent qu'une faible partie de la cavité nucléaire. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 51. Divisions bipolaires dans le sporonte. Fixât. Bouin. X 385.

FIG. 52. Idem.

FIG. 53. Noyau.x au repos. Éléments chromatiques fortement ramassés. Fixât.
Bouin. X 385.

FIG. 54. Divisions ultérieures. Fixât, sublimé-alcool X 66o.

FIG. 55. Nombreux noyaux dans le sporonte. Ils sont tous situés à la pé-
riphérie, contre la membrane; le protoplasme ne montre aucune tendance à la seg-
mentation. Fixât, sublimé-alcool. X 5oo.

FIG. 56. Les noyaux du sporonte ne se divisent plus; ils commencent à en-
vahir les portions centrales du parasite. Fixât, sublimé-alcool.

FIG. 57. Tout le protoplasme est envahi par des noyaux; quelques-uns sont
encore groupés contre la paroi du sporonte. F'ixat. Benda.

FKi. 58. Les sporoblastes se forment par clivage rapide du protoplasme; une
membrane limite chaque portion uninucléée du protoplasme; dans chaque sporoblaste
apparaît une zone protoplasmique homogène, peu chromatique. Fixât, sublimé-alcool.

FIG. 59. Cas rare où une portion isolée du protoplasme du sporonte contient
plusieurs noyaux et plusieurs plages peu chromatiques. Fixât. Bouin. X i5oo.

FIG. 60. Sporoblaste montrant le noyau unique et la plage peu chromatique
imparfaitement différenciée, le centie restant très coloré. Fixât. Bouin. X i5oo.

FIG. 61. Sporoblaste à noj-au unique et plage peu chromatique. Fixât, su-
blimé-alcool. X i5oo.

FIG. 62. Sporoblaste à no3-au unique et deux plages peu chromatiques Fixât.
Bouin. X i5oo.

FIG. 63. Sporoblaste avec noyau en division. Fixât, sublimé-alcool. X i5oo.

FIG. 64. Sporoblaste à deux noyaux. Fixât. Bouin. X i5oo.

FIG. 65. Idem. Fixât, sublimé-alcool. X i5oo.

FIG. 66. Deux sporozoïtes naissent aux dépens de deux noyaux du sporoblaste.
Fixât, sublimé-alcool. X i5oo.

FIG. 67. Spores avec deux sporozoïtes et deux plages peu chromatiques dans
le reliquat protoplasmique. Fixât, sublimé-alcool. X i5oo.

FIG. 68. Id. Fixât. Bouin. X t5oo.

FIG. 69. Id. Fixât. Bouin. X i5oo.

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Études sur les Microsporidies

II. Glugea danilewskyi L. Pfr.

III. Glugea mûlleri L Pfr.

PAR

Paul DEBAISIEUX,

PROFESSEUR A l'uNIVERSITÉ.

Institut de Zoologie, Louvain.

(Mémoire déposé le i juin igiS.)

23

f

Etudes sur les Microsporidies

MATERIEL.

Il y a quelques mois nous avons décrit \ Eimeria cystis-fellecv, coccidie
parasite de la vésicule biliaire de Tropidoiiotiis natrix (14). Plusieurs des
animaux sacrifiés pour l'étude de ces parasites ont montré l'existence de
petits kystes à microsporidies localisés dans les muscles.

L'étude de ces microsporidies était presque achevée, quand elle se
trouva arrêtée par l'incendie de la ville de Louvain, dans lequel toutes nos
préparations furent anéanties. Les pièces fixées ayant heureusement échap-
pé à la destruction, nous avons repris l'étude. Des difficultés de technique
et la petitesse de l'objet ont rendu le travail assez malaisé; il fut d'autre
part facilité par la comparaison avec un parasite d espèce très voisine.

Le hasard nous fit examiner des kystes musculaires de Gammarits lo-
custa L.; nous y trouvâmes également des microsporidies. Des prépara-
tions microscopiques révélèrent la très grande ressemblance des deux in-
fections tant au point de vue de la réaction de l'hôte qu'au point de vue de
la structure et du cycle des parasites. Beaucoup d'observations faites sur
l'une des espèces furent confirmées par l'étude de l'autre; des points obscurs
dans l'évolution de l'une devinrent plus clairs par l'étude de l'autre. Des
points douteux subsistent cependant encore.

METHODES.

Les deux espèces de microsporidies ont été étudiées par les mêmes
méthodes.

i54

Paul DEBAISIEUX

Les frottis suivis de divers modes de fixation ont donné des résultats
fort peu satisfaisants. Les coupes ont constitué le procédé d'étude le plus
généralement employé; les résultats sont satisfaisants à condition de faire
des coupes très minces; leur épaisseur ne peut pas dépasser 2 \^ ou 2,5 |j..
Pour obtenir des coupes parfaites de cette minceur, il est nécessaire d'isoler
le plus possible les kystes des tissus voisins et, dans le Gammarus, des
productions chitineuses.

Les fixateurs donnent des résultats assez différents suivant leur pou-
voir de pénétration. La tumeur est formée d'un ensemble d'alvéoles clos à
membrane peu perméable; les fixateurs à lacide acétique sont dès lors les
plus favorables. Les solutions de Flemming, de Zenker et surtout de
BouiN (aqueux ou alcoolique suivant Brazil, o5-o6) ont donné de bons ré-
sultats. Le sublimé-alcool, plus énergique, et la solution de Benda, quoique
moins bons, ont été souvent employés, afin de permettre l'application des
colorants incompatibles avec les réactions acides. D'une façon générale, les
aspects que montrent les préparations varient assez bien suivant le fixateur
employé; nous dirions volontiers que c'est un avantage, car leur étude com-
parative conduit à écarter les accidents de préparation et à ne retenir que
les aspects essentiels.

La meilleure coloration est obtenue par l'hématoxyline de Heidenhain.
L'éosine-azur de Giemsa (voie humide) est précieuse comme coloi'ant diffé-
rentiel, surtout dans l'étude des spores; la safranine (procédé de Babès)
donne de bons résultats pour la mise en évidence du filament spirale dans
la capsule polaire.

La coloration n'est jamais tout à fait satisfaisante; il semble, surtout
pour le parasite du Gammarus, que les substances nucléaires aient un fai-
ble pouvoir électif. La différenciation est dès lors fort difficile et toutes les
préparations sont en demi-teinte. Bien d'autres colorants que ceux que
nous venons de citer ont été employés à titre d'essai et n'ont pas donné de
bons résultats.

Dans une première partie nous comptons décrire séparément les deux
espèces étudiées; dans une seconde partie nous discuterons les données qui
ressortent de l'une et de l'autre de ces études, d'abord au point de vue du
cycle d'évolution, ensuite au point de vue de la structure des spores. Enfin
nous envisagerons la question du rang systématique qui convient aux deux
espèces de microsporidies.

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES l55

I. PARTIE DESCRIPTIVE.

A. Qlugea danilewskyi L. Pfr.

Aspect macroscopique.

Le Glugea danilejvskyi, — nous verrons au chapitre consacré à la sys-
tématique pourquoi nous nommons ainsi cette espèce, parasite le Tvopi-
donotiis natrix. L'infection se manifeste par la présence de petits kystes
blanchâtres logés dans les muscles, surtout dans les intercostaux; on les
trouve également dans les spinaux et il semble qu'ils puissent exister aussi
dans les tendons et même dans les ligaments intervertébraux. Les kystes
sont allongés dans le sens des fibres et mesurent de o,5 à 2 mm. de long;
on en trouve une dizaine ou une vingtaine dans les animaux les plus para-
sités.

Aspect microscopique.

Les kystes incisés ou blessés laissent échapper leur contenu en un lait
chanchâtre ; examiné au microscope, ce liquide niontre une infinité de
spores, tantôt presque toutes isolées, tantôt réunies en petits amas de
quatre à trente individus.

En coupe, l'aspect que présentent les tumeurs est très variable.

Dans un premier type, fig. 1, les spores sont réunies en petits amas,
entourés chacun d'une membrane hyaline formant alvéole. Tous ces alvéoles
se pressent les uns contre les autres se déformant mutuellement. Entre eux
se trouvent, très irrégulièrement dispersés et assez rares, des stades jeunes,
eux aussi entourés d'une membrane hyaline. La tumeur est entourée par
du muscle; des fibres musculaires, en tout petits faisceaux et plus ou moins
atrophiées, sont enclavées entre les amas de spores; des travées conjonctives
plus ou moins développées traversent la tumeur; quelques noj'aux muscu-
laires de l'hôte se voient isolés à la périphérie ou dans la tumeur.

Si l'on examine la paroi kystique à un fort grossissement, fig. 4, on
observe à certains endroits la disposition suivante : à la périphérie il y a
du muscle; immédiatement en dessous une espèce de membrane assez chro-

l56 Paul DEBAISIEUX

matique, irrégulière, striée, séparant le muscle d'une zone de protoplasme
sous-jacent; dans ce protoplasme, où traînent peut-être quelques fibres mus-
culaires atrophiées, existent des noyaux-hôtes assez volumineux; enfin au
centre, la tumeur proprement dite, formée d'alvéoles qui renferment les
spores et les éléments jeunes; dans les parois alvéolaires, quelques faisceaux
musculaires. Il semble évident que la membrane, le protoplasme, et en
partie au moins les parois alvéolaires, appartiennent à l'hôte.

Dans un second type de tumeur, fig. 2, on trouve encore les spores
réunies en amas irréguliers entremêlés de quelques rares stades jeunes ; on
ne trouve plus guère de fibres musculaires. Une couche de tissu conjonctif
contenant quelques amas sporaux sépare la tumeur des muscles voisins ;
c'est une assise réactionnelle qui enkyste la tumeur.

Enfin dans un troisième type, fig. 3, toute la tumeur est formée par
un amas compacte de spores mûres tout à fait indépendantes les unes des
autres; parfois quelques petits amas sporaux persistent, surtout à la péri-
phérie où une zone de protoplasme de l'hôte, un peu plus dense, sépare la
masse de la tumeur d'une large assise conjonctive périphérique.

Il est hors de doute que les trois types sont des aspects successifs pré-
sentés par une même tumeur, le premier représentant la tumeur jeune en
voie d'évolution et d'accroissement, le dernier une tumeur âgée, enkystée,
dont le développement est arrêté. C'est sous cet aspect que l'on trouve le
plus souvent la tumeur, au point que pendant longtemps et dans de très
nombreux objets étudiés nous n'avons trouvé que lui. "Vainement nous avons
essayé d'y découvrir des stades jeunes et de comprendre l'évolution du pa-
rasite.

Description des divers stades.

Nous voudrions dans ce chapitre ne donner que la description des
stades successifs sans insister sur leur interprétation. Il est cependant im-
possible de faire abstraction de toute interprétation (ne fût-ce que pour dé-
nommer les divers aspects décrits), mais nous y reviendrons dans le cha-
pitre de synthèse, discutant alors notre façon de voir, faisant ressortir les
points douteux et analysant le pour et le contre des questions hypothé-
tiques.

On peut distinguer :

a) Multiplication nucléaire et formation des plasmodies.

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDI ES l5y

b) Formation des spqroblastes.

c) Formation des spores.

d) Retour aux stades initiaux.

a) Multiplication nucléaire et formation des plasmodies.

Les stades jeunes se rencontrent éparpillés et logés entre les kystes se-
condaires ou kystes sporaux. Parfois ils sont isolés, parfois ils sont groupés
en Ilots formés de vingt à trente parasites à des âges différents, fig. 5.

Les plus jeunes individus sont uninucléés, de dimensions variables,
mesurant 2, 3 ou 4 |ji; le noyau entouré d'une aréole claire apparaît comme
un granule chromatique dont il est impossible, vu sa petite dimension,
d'analyser la structure, fig. 5. Le stade uninucléé est éphémère et rare;
tandis cjue le parasite s accroît, les divisions nucléaires se succèdent sans
repos.

Les divisions, au moins dans le cas le plus fréquent, sont d'un type
assez simple; très souvent, et ce surtout avant une division, le granule nu-
cléaire apparaît formé de deux granules constituants, fig. 5, 16. Dès que
commence l'étirement nucléaire, on observe deux petits amas chromatiques
en chaque pôle; puis un peu plus tard on voit quatre granules réunis, sui-
vant l'axe des pôles, par deux filaments plus ou moins chromatiques,
FIG. 6,7, 10, 11. A la télophase, les filaments unissants s'étant rompus,
chaque noyau-fille est formé par deux granules élémentaires; bientôt il se
divise à nouveau. Dans certaines préparations on se rend compte de l'exis-
tence de deux granules — probablement caryosomiens - qui, dès la pro-
mitose, se portent aux pôles du noyau en division, fig. 18, 19. Dans ce cas
on rencontre parfois, fig. 19, des aspects fusoriaux rappelant ceux décrits
par SwARCZEwsKY (14) dans Glugea (Pleistophora ou Ichthyosporidium)
gigantea. Parfois les noyaux au moment de la division, surtout de la pre-
mière, présentent un aspect un peu différent : les petites masses chroma-
tiques sont moins nettement limitées, plus volumineuses, plus granuleuses;
ces noyaux en division plongent dans une vacuole claire, fig. 7, 8, 9. Cet
aspect est beaucoup plus rare que le précédent. Faut-il lui attribuer une
signification spéciale? Les différences sont parfois si peu marquées, fig. 7,
que nous ne le croyons pas.

A côté de ce mode de multiplication nucléaire caractérisé par le fait
que les noyaux-filles se séparent après chaque division, il en existe un autre,
à première vue différent. Les noyaux-filles ne s'éparpillent pas dans le pro-

l58 Paul DEBAISIEUX

toplasme et restent plus ou moins reliés entre eux; il peut y avoir ainsi
formation de nombreux noyaux, groupés au centre du protoplasme, et plon-
geant dans un espace clair, fig. 12-14. Ce n'est que plus tard que les
noyaux-filles se dispersent dans le protoplasme où ils restent quelque
temps encore unis entre eux, à deux ou à plusieurs, fig. 15. Ce mode de
multiplication nucléaire pourrait être interprété comme une multipartition
simultanée; mais l'aspect des premiers stades, fig. 12, et du stade final,
FIG. 15, dans lequel on voit les noyaux doubles en voie de division bi-
polaire, semble indiquer que l'on se trouve en présence d'une variante
de la division habituelle, les divisions bipolaires se succédant très rapide-
ment.

L'aboutissant de cette première période de l'évolution est un parasite
plasmodial, fig. i6, 17, dont les nombreux noyaux montrent une tendance
au dédoublement et à la division.

La question se pose de savoir si les parasites à ces stades ne peuvent
pas se cloisonner irrégulièrement et donner des plasmodies à nombre res-
treint de noyaux ou même des parasites uninucléés qui recommencent le
cycle. Des aspects comme celui de la fig. 18 plaident en faveur de cette
hypothèse, mais nous devons reconnaitre qu'ils ne sont pas probants.

b) Fo?-maiion des sporoblastes.

Le processus d'évolution habituel de la plasmodie est la résolution en
parasites uninucléés. Dans une plasmodie, à nombre de noyaux indéter-
miné, le phénomène s'annonce par l'apparition autour de chaque noyau
d'une vacuole claire, fig. 20, 21, puis le protoplasme se cloisonne et bien-
tôt toute la plasmodie est réduite en éléments uninucléés indépendants,
fig. 23. Le noyau de chacun de ces éléments est assez volumineux; il est
formé d'un amas irrégulier très chromatique, le plus souvent nettement dé-
doublé; il montre même une ébauche de division et on observe aisément
que chaque amas polaire est formé de deux masses chromatiques élémen-
taires, fig. 22. On pourrait se demander si chacun de ces individus ne se
divise pas encore avant de s'isoler définitivement, fig. 28. Nous ne le
croyons pas; nous basant sur la dimension des noyaux et sur leur aspect
double qu'ils conservent longtemps dans les parasites individualisés, nous
croyons au contraire que l'on a affaire à une véritable ébauche de division
amenant la formation d'une copula autogamique.

Les phénomènes évolutifs qui se passent dans les parasites à ce stade

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES I Sq

sont difficiles à suivre; nous n'avons pu les observer que sur des prépara-
tions fixées au Bouin. Au début de cette période il semble y avoir un ac-
croissement des individus uninucléés ou plutôt à noyau double, fig. 26, 27;
peut-être n'est-il dû qu'à la turgescence provoquée par le fixateur. Les
no3'aux sont peu chromatiques, diffus et contiennent de nombreux granules.

Il est malaisé de se rendre compte de ce qui se passe à chaque stade;
mais souvent on observe des aspects très caractéristiques à noyau allongé
paraissant double et peut-être même cloisonné par une membrane médiane,
FiG. 24. 25; souvent aussi on observe dans le protoplasme accolé au noyau
deux granules chromatiques. D'autres stades sont à grand noyau diffus,
FIG. 26, 27; comparés au stade précédent à noyau plus dense, mais nette-
ment dédoublé, fig. 22, 23, ils indiquent un éparpillement chromatique
par lequel l'ébauche de division disparait. Nous insistons sur ces aspects
parce qu'ils représentent à nos yeux les stades de fécondation ; chaque élé-
ment provenant de la division de la plasmodie serait une copula autoga-
mique. Nous discuterons plus loin cette façon de voir, nous bornant ici à
l'indiquer afin de faciliter et de rendre plus claire la description de l'évolu-
tion ultérieure.

Les copulse autogamiques se ramassent sur elles-mêmes, ne remplis-
sant plus toute la cavité du kyste secondaire et bientôt chacune se divise.
Chaque noyau-fille hérite de deux granules très chromatiques intimement
accolés; à la télophase ils restent longtemps unis entre eux par une ou
deux travées assez colorables, fig. 29, 30, 31. Aux dépens de chaque amas
polaire un noyau se reforme, le protoplasme se divise, fig. 32, 33, et il y a
formation de deux sporoblastes aux dépens de la copula autogamique.

Ce processus est certainement le plus fréquent; nous ne croyons pas
que la copula puisse se transformer directement en sporoblaste ni que deux
divisions successives fassent naître quatre sporoblastes d'une seule copula;
nous n'oserions cependant pas nier le fait.

c) Formation des spores.

Le processus de transformation du sporoblaste en spore est plus aisé
à suivre dans le Glugea miilleri que dans cette espèce-ci, où la ténuité des
spores rend l'observation difficile.

Le sporoblaste s'allonge, et le noyau, assez volumineux, sphérique, se
porte à une des extrémités que nous considérerons comme postérieure,
fig. 34 35, 39. Les premiers phénomènes qui se passent alors sont diffi-

24

l6o Paul DEBAISIEUX

ciles à établir; les aspects sont excessivement variables, fig. 34-38, et il
nous est impossible de les sérier dans les objets étudiés ici. Le processus
devient clair à partir du moment où au-devant du noyau postérieur il existe
dans le protoplasme une traînée de substance plus colorable, fig. 39, 41.
Un granule très colorable apparaît alors à la partie antérieure de la spore,
et autour de lui se forme une vacuole claire, fig. 42. Une vacuole se forme
également à la partie postérieure de la spore et s'aggrandit en même temps
que la vacuole antérieure; il en résulte que le protoplasme se condense à
la partie médiane et périphérique de la spore. Il forme un anneau équa-
torial et un fin trajet tabulaire unit les cavités antérieure et postérieure,
FIG. 42, 43, 44.

Dans la vacuole antérieure on distingue ultérieurement une structure
plus complexe; le granule chromatique est en relation par un filament co-
lorable avec un amas chromatique assez volumineux situé à la partie posté-
rieure de la vacuole, fig. 44-46, 49.

Dans la vacuole postérieure un granule informe représente sans doute
le noyau; quelques travées colorables existent généralement, souvent en
tigelle axiale, fig. 46, 50; nous n'avons pas pu déceler de filament spirale.
Sur matériel frais il ne nous fut pas non plus possible de provoquer la dé-
vagination du filament, mais les essais ne furent pas assez nombreux pour
nous permettre de nier son existence, et il nous fut impossible d'obtenir du
nouveau matériel frais.

Parmi les spores on en observe de dimensions très diverses; en moyenne
elles mesurent 3 à 4 |j. de long, mais il en existe de notablement plus
grandes, de 6 à 7 |j-, fig. 49, 50. Elles sont relativement rares, soit en
majorité dans un kyste secondaire, soit isolées dans un kyste bourré de
spores moyennes. Il existe aussi des spores plus petites que la moyenne;
on peut évidemment parler de macrospores et de microspores, mais il ne
semble pas que ces deux types constituent des catégories distinctes. Il est
probable que les sporoblastes très allongés, fig. 36-38, donneront naissance
à des macrospores.

d) Retour aux stades initiaux.

On rencontre parfois des individus plasmodiaux réunis à plusieurs dans
un même kyste secondaire, fig. 51-53. Il n'est pas possible d'admettre dans
ce cas la résolution d'une plasmodie en éléments uninucléés : nous avons
vu plus haut c]ue celte division protoplasmiquc se lait en une lois, non par

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES l6l

cloisonnements successifs, et seulement quand les divisions nucléaires ont
cessé. Une autre interprétation est très probable et confirmée par l'aspect
représenté par la fig. 51 : lorsque la division sporoblastique est ébauchée,
il arrive que les sporoblastes ne s'isolent pas ou ne se transforment pas en
spores; les divisions nucléaires se succédant, ils se transforment en plas-
modies; entre celles-ci se forment des membranes de kystes secondaires,
FIG. 53, et de la sorte le cycle est régénéré et recommence dans le même
hôte.

Les stades des fig. 50, 5i, 52 font suite à ceux des fig. 29, 30, 31, et
précèdent les aspects initiaux, fig. 5.

B. Qlugea mulleri L. Pfr.

Aspect macroscopique.

Le Glugea mïilleri parasite les muscles de Gammarus locusta L. Il
infecte en abondance et à toute saison les animaux récoltés dans les envi-
rons de Louvain. L'infection se reconnaît aisément à l'examen extérieur de
l'animal vivant : les faisceaux musculaires parasités apparaissent, à travers
la carapace chitineuse plus ou moins transparente, sous forme de filaments
blancs de o,5 à 2 mm. de long; les faisceaux parasités se trouvent surtout
à la partie postérieure du corps; il y en a parfois un seul, parfois une di-
zaine dans un même animal; nous avons toujours observé qu'ils restent in-
dépendants les uns des autres.

Aspect microscopique.

De même que pour l'espèce précédente le contenu de la tumeur
s'échappe dès que celle-ci est sectionnée, et il contient en abondance de
petits amas de spores. Elles sont réunies en nombre très variable, parfois
par quatre seulement, au maximum à une trentaine.

En coupe microscopique l'aspect des tumeurs est assez constant et sem-
blable à l'aspect du type I ou II, décrit plus haut pour le Glugea danilews-
kyi. En général cependiint l'infiltration du tissu musculaire par les para-
sites est plus marcjuée et la limite entre tissu sain et tissu infecté est
vague. Parfois l'analogie entre les infections produites par les deux espèces

j52 Paul DEBAISIEUX

est telle qu'à première vue il est difficile de reconnaître les préparations
provenant de l'une ou de l'autre; ce n'est que par l'analyse des détails qu'on
peut les distinguer.

On a vu que les aspects décrits pour Gliigea danilewskyi correspondent
à des tumeurs d'âge diffèrent et que le type III représente la tumeur en-
kystée. Il est probable que dans le Gamjnarus la tumeur ne vieillit pas au
point de pouvoir s'enkyster, la vie de l'hôte étant trop brève.

Description des divers stades.

a) Multiplication nucléaire et formation des plasmodies.

Les stades jeunes se rencontrent isolés ou en îlots parfois uninucléés,
généralement multinuclées, fig. 54, 59. Dans les divisions nucléaires on
observe que dès que les noyaux-filles atteignent les pôles, et alors qu'ils
sont reliés encore par un filament unissant, ils sont formés de deux gra-
nules, FIG. 54, 60, 61. On observe parfois très nettement l'existence de deux
granules polaires unis entre eux par un mince filament et situés au pôle
bien avant que les éléments chromatiques du noyau soient en anaphase;
ils sont probablement de nature caryosomienne, fig. 55.

Nous n'avons pas observé la multiplication nucléaire par éparpillement
simultané de nombreux noyaux, telle qu'elle apparaît parfois dans le Glu-
gea danilexpskyi, fig. 12-15; par contre on observe des individus à grand
noyau vacuolaire, fig. 56-59, et parfois il existe dans le protoplasme de
nombreuses enclaves granuleuses très chromatiques périnucléaires, fig. 57.
Ces aspects rappellent beaucoup ceux décrits par Swarczewsky (14, fig. 10)
dans le Glugea gigantea. Nous reviendrons plus loin sur leur interpré-
tation.

b) Formation des sporoblastes.

Par segmentation du protoplasme la plasmodie se résout en éléments
simples; les noyaux sont entourés d'une aréole claire et sont dédoublés,
fig. 63-86; plus tard les copulae autogamiques dimiinuent de volume n'oc-
cupant plus toute la cavité du kyste secondaire, fig. 66. Les noyaux sont
nettement dédoublés, mais il est plus rare et plus difficile que dans l'espèce
précédente d'observer le développement nucléaire et le diplocaryon autoga-
mique, fig. 65-67. Coninie nous l'avons déjà fait remarquer, la netteté des
préparations de cette espèce laisse en général à désirer; malgré le grand

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES l63

nombre de préparations faites avec les colorants les plus variés, fort peu
ont montré une différenciation satisfaisante entre noyau et protoplasme.
Guidé par les observations faites sur le Ghigea dauileipskyi, on s'oriente
assez aisément dans l'analyse des aspects observables ici et l'on observe les
mêmes stades que ceux décrits pour la première espèce.

Chaque copula donne naissance à deux sporoblastes. La division nu-
cléaire est très nette : lors de la télophase il existe deux granules distincts
en chaque pôle; ils restent longtemps unis entre eux par deux filaments
plus ou moins colorables, fig. 68-71. Deux noyaux-filles se reforment et le
protoplasme se segmente, fig. 72, 73.

c) Formation des spores.

La formation des spores est plus facile à étudier dans cette espèce que
dans le Gliigea danilejvskyi; il n'y a aucun doute possible que le processus
soit absolument analogue dans les deux espèces. Les spores de Ghigea
miilleri sont jilus grandes que celles de Ghigea danileivskyi; leurs dimen-
sions moyennes sont de 5 à 6 |-^ sur 2 à 3 i-^.

Les sporoblastes prennent une forme ovoïde; le noyau se porte au gros
bout ou extrémité postérieure, tandis qu'à l'extrémité antérieure un granule
chromatique apparaît dans le protoplasme; il est généralement entouré
d'une vacuole, fig. 74-76. Ce granule est colorable en rouge réfringent par
la safranine; par l'éosine-azur il est également coloré en rouge, étant beau-
coup plus électif pour cette teinte que le noyau lui-même. L'origine de ce
granule n'est pas connue et nous ne savons s'il provient du noyau ou pas;
il parait naître clans le protoplasme, mais, comme nous l'avons vu plus haut,
il est possible que les premiers phénomènes d'évolution du sporoblaste
échappent à l'investigation, et par conséquent toute affirmation serait ici
prématurée.

La vacuole antérieure se développe jusqu'à n'être plus séparée de la
membrane sporale que par une très mince couche protoplasmique, qui pro-
bablement disparaît tout à fait ; le granule chromatique augmente de vo-
lume, devient plus irrégulier, fig. 76-78, se transforme alors en haltère;
l'une des masses est appliquée au sommet de la spore, un peu excentri-
quement, et reliée par une tige à l'autre masse qui est au contact du proto-
plasme, fig. 82, 84.

Le noyau, postérieur, se dilate considérablement et finalement toute
l'extrémité obtuse de la spore est occupée par une vaste vacuole séparée la-

164 ^aul DEBAISIEUX

téralement de la membrane sporale par un rnince manchon de protoplasme,
FiG. 76-84. La partie chromatique du noyau, réduite à un grumeau irré-
gulier, se retrouve soit à la partie postérieure de la vacuole, soit latérale-
ment, FIG. 80-83, ou bien le noyau est invisible, se trouvant probablement
caché dans le protoplasme, fig. 84.

Le protoplasme se trouve comprimé entre la vacuole antérieure et la
postérieure, prenant au centre de la spore la forme d'une lentille biconcave;
un canalicule, généralement excentrique, traverse le protoplasme et fait com-
muniquer la chambre antérieure avec la chambre postérieure, fig. 80, 81,
83, 84. Le protoplasme tapisse la vacuole postérieure de la spore et c'est là
qu'apparaît le filament spirale; généralement apparent, il est le mieux mis
en évidence par la coloration à la safranine. Il forme deux à trois tours de
spire, FIG. 80-84, et il semble que l'une de ses extrémités soit en relation
avec le canalicule qui fait communiquer les deux vacuoles. Nous n'avons
pas pu provoquer la dévagination du filament spirale.

Ajoutons que assez souvent on peut observer au centre de la vacuole
postérieure une tigelle axiale, fig. 80, et disons aussi que dans cette espèce,
de même que dans la plupart des microsporidies, les dimensions des spores
sont très variables; il n'est pas possible cependant de séparer par une li-
mite nette les microspores des macrospores.

d) Retour aux stades initiaux.

De même que dans le Gliigea danilejvskyi, on trouve dans cette espèce
des plasmodies réunies dans un même kyste secondaire, fig. 85, 86.

Nous avons dit plus haut que probablement ils dérivent de sporo-
blastes incomplètement séparés et régénèrent par divisions nucléaires répé-
tées les stades initiaux du cycle. Les fig. 85, 86 font donc suite aux
fig. 68, 69.

II DISCUSSION.

Dans la première partie de cette étude nous nous sommes borné à
décrire; il nous reste à motiver et à discuter notre façon de voir en même
temps qu'à la comparci aux résultats acquis par d'autres. Nous envisage-
rons successivement :

A. Le cycle d'évolution et les diverses particularités qu'on y rencontre.

ETUDES SUR LES MICROSPORIDIES

i65

B. Les spores, leur structure et leur formation.

C. Le rang systématique des espèces étudiées ici.

A. Le cycle d'évolution.

Le cycle d'évolution du Gliigea danilejpskyi et du Glugea mulleri, tel
que nous le concevons, peut se résumer dans le schéma suivant :

Il y a deux cycles distincts : l'un suppose le changement d'hôte et les
spores assurent la conservation du germe pendant la période extracorpo-
relle (i-io, i3-i8); l'autre évolue tout entier dans le corps de l'hôte (1-12-1).

l66 Paul DEBAISIEUX

Le premier cycle comprend une période de multiplication végétative
ou de reproduction agame qui se fait par bipartitions successives du noyau
et aboutit à la formation de plasmodies (i-5). Une variante dans le Glugea
danileu'skyi consiste dans l'éparpillement simultané des noyaux-filles
(2', 3', 4'), une autre dans le Glugea miïlleri consiste dans la production de
grands noyaux (2", 3"). Suit une seconde période de reproduction sexuée;
les plasmodies se résolvent en copulae autogamiques (6-9), aux dépens de
chacune naissent deux sporoblastes (10, i3-i5), chaque sporoblaste donne
une spore (i5-i8). La partie du cycle qui consiste dans la transformation
de la spore en individu asexué jeune, nous est inconnue; elle est accom-
pagnée de la désagrégation de l'hôte, qui libère la spore, et de l'ingurgi-
tation de celle-ci par un individu-hôte.

Le second cycle comprend une période du multiplication végétative
analogue à celle du premier cycle (i-5); puis une période de reproduction
sexuée dont la première partie ou "la formation des copulae autogamiques est
également analogue à celle du premier cycle (6-g) et dont la seconde con-
siste dans la régénération de stades végétatifs uninucléés ou plasmodiaux
aux dépens de la copula autogamique, qui en ce cas ne se transforme pas
en sporoblastes (11-12-1).

Ce cycle d'évolution, qui nous parait le plus probable, diffère notable-
ment de ceux qui ont été décrits jusqu'à présent; et cependant nous avons
la conviction que des espèces à évolution très analogue ont déjà été étu-
diées.

1° A considérer le cycle dans son ensemble, nous écartons l'idée d'une
forme végétative se transformant en plasmodie et donnant par différencia-
tion endogène des r, pansporoblastes « et des spores. Cette évolution fut
admise pour Glugea, Duboscquia. Myxocystis par Mrazek (97), Hesse (o5),
AwERiNZEw et Femor (il), Stempell (04), Thélohan (95), Ferez (o5) et
beaucoup d'autres. Mrazek (97) a répudié cette théorie (10). D'après elle,
chacune des tumeurs que nous voyons ne serait qu'un seul parasite plasmo-
dial; on ne pourrait parler d'individualités nouvelles que pour les spores et
lors de leur libération. Cette façon de voir est insoutenable : chaque para-
site végétatif uninucléé ou plasmodial constitue un individu isolé et indé-
pendant des autres, isolés dans un kyste secondaire, à la formation duquel
le tissu-hôte concourt. Chaque tumeur est formée de milliers d'individus
indépendants, provenus de la multiplication d'un individu primitif, et infil-
trant le tissu de l'hôte d'une façon diffuse.

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES itj

2° La multiplication végétative présente de grandes analogies avec
la période correspondante décrite par Swellengrebel (14) pour Glitgea
(Ichthyosporidium), a des analogies avec ce qui fut décrit par Caullery et
Mesnil (o5-o6) pour plusieurs haplosporidies et n'est pas incompatible
avec les descriptions de Fantham et Porter (12) pour Noseina apis.

Elle consiste dans la transformation de petits agamontes uninucléés en
plasmodies qui se résolvent alors en individus uninucléés (à noyau double),
FiG. 5-21 et 54-62. Les multiplications nucléaires se font très généralement
par bipartitions successives; dans Gliigea danileivskyi on retrouve l'épar-
pillement simultané de noyaux-filles, fig. 12-15, et dans Glugea niitlleri la
formation de grands noyaux, fig. 56, 57, 59, l'un et l'autre décrits par

SWARCZEWSKY (14),

3° La fécondation constitue la période la plus discutée du cycle des
microsporidies. Beaucoup d'auteurs n'en parlent pas; d'autres croient à la
fécondation après sortie du germe amiboïde binucléé hors de la spore,
Fantham et Porter (12), Stempell (02, 04, og); d'autres croient à l'hétéro-
gamie avant la formation des sporoblastes, Mercier (og), Swarczewsky (14);
d'autres enfin donnent une description qui permet de croire à l'autogamie
avant la formation des sporoblastes, Swellengrebel (ii), Caullery et
Mesnil (o5-o6).

Sans nier que la fécondation puisse s'achever dans la spore dont le
noyau unique pourrait être formé de deux moitiés — nous ne le nions pas,
mais nous n'y croyons pas ! — il nous paraît certain qu'elle est ébauchée
avant la formation des sporoblastes. Le fait que cette façon de voir cadre
avec ce que nous connaissons de tant d'autres protozoaires, que les indivi-
dus uninucléés s'isolent de la plasmodie et que leur noyau subit des modi-
fications profondes avant de subir une nouvelle division, que cette division
sporogoniale a une allure différente des divisions antérieures, appuie notre
façon de voir.

Dans les espèces étudiées ici, on ne peut admettre une hétérogamie,
premièrement parce que aucun des aspects observés ne la représente, ensuite
parce que la succession des stades, telle qu'elle s'impose, ne laisse pas de
place à une hétérogamie. Le nombre d'individus, résultant de la division
de la plasmodie, paraît égal au nombre de noyaux plasmodiaux, et le
nombre de copulse paraît égal au nombre d'individus provenus de la plas-
modie.

Reste l'autogamie : la description de Swellengrebel (ii) pour le Glu-

25

j58 Paul DEBAISIEUX

gea (Pleistophora) gigantea est, il est vrai, contredite par Swarczewsky (14)
qui étudie le même objet. Il serait difficile et imprudent de partager l'avis
de l'un ou de l'autre de ces auteurs sans avoir les préparations sous les
yeux, surtout qu'on doit regretter de la part de l'un des dessins trop sché-
matiques, et de la part de l'autre des dessins faits, pour les stades en ques-
tion, d'après des préparations imparfaitement fixées. D'autre part, nous
avons décrit un processus d'autogamie dans les Thelohania (i3) et de nou-
velles recherches, Debaisieux et Gastaldi (i5), confirment l'existence de ce
processus, qui est remarquablement net. Quoique les aspects soient moins
clairs dans les Gliigea étudiés ici, nous sommes convaincu qu un proces-
sus analogue y existe.

Le fait qu'il existe un stade à noyau nettement dédoublé ne paraît pas
être discutable, fig. 22-27, 63-67; les raisons que nous venons d'énoncer,
qui conduisent à croire à l'existence à ce moment d'une fécondation, celles
qui empêchent de croire à une hétérogamie, le fait que les noyaux plasmo-
diaux se dédoublent progressivement, et la comparaison avec le processus
établi pour le Thelohania, conduisent à considérer ces aspects de noyaux
dédoublés comme des copulse autogamiques.

Disons encore que Schuberg (10) donne des dessins (n» 43) non in-
terprétés dans le texte qui montrent nettement des diplocarya avant la
sporulation, ce qui conduit à croire qu'un processus analogue à celui admis
ici existe pour le Pleistophora longijïlis.

4° La spoi'Ogonie est annoncée par la formation de deux sporoblastes
aux dépens de la copula autogamique. Swellengrebel (ii) croit qu'il ne se
forme qu'un seul sporoblaste, qui se transforme en spore; Swarczewsky (14)
décrit la division du sporonte en deux ou plusieurs sporoblastes.

Dans les Glugea étudiés ici, il est certain que la copula se divise géné-
ralement, et rien ne fait croire qu'elle se divise plus d'une fois; mais, comme
nous l'avons fait remarquer dans la partie descriptive, si on peut affirmer
que la production de deux sporoblastes est la règle, on ne peut affirmer
qu'elle soit sans exceptions.

La transformation du sporoblaste en spore étant sans relation avec la
discussion du cycle évolutif, elle lera l'objet d'un chapitre spécial,

5° Le retour à la reproduction végétatii'e. On a vu plus haut que les
parasites à noyau double, provenus de la fragmentation des plasmodies,
peuvent, subissant une ou plusieurs divisions nucléaires, ne pas donner des
sporoblastes, mais régénérer le cycle végétatif, fig. 51-53; 85, 86. Nous ne

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES lÔQ

croyons pas que le fait d'auto-infection par des stades de sporogonie ou
par des spores ait déjà été décrit pour les microsporidies. Nous l'avons
adnnis pour le Thelohania varians (i3), où - les jeunes mérontes paraissent
provenir, en grand nombre du moins, de la libération sur place du germe
amiboïde d'une spore, mais très probablement d'une spore non nuire ou
d'une variété de spore non durable et dépourvue de capsule polaire «. Le
fait se confirme et se généralise par de nouvelles recherches sur le même
objet, Debaisieux et Gastaldi (i5). Dans d'autres groupes un retour ana-
logue aux stades végétatifs après la fécondation fut parfois observé, notam-
ment chez les flagellâtes, pour Copromonas subtilis, par Dobell (o8).

a) Une première question qui se pose est de savoir si ce retour à la
multiplication végétative ne se fait pas avant la fécondation; on aurait alors
affaire à une véritable schizogonie donnant des mérozoïtes qui recommencent
le C3^cle ; cette évolution, classique chez les protozoaires, a notamment été
décrite pour Glugca gigantea; mais dans les Ghigea qui nous intéressent
il n'y a rien de semblable; les stades qui régénèrent le cycle, sont à diplo-
caryon ; et il paraît bien dès lors y avoir fécondation au moins ébauchée.

b) Quant aux raisons qui conduisent à admettre ce retour aux stades
végétatifs, elles résident dans l'interprétation des aspects reproduits par les
FiG. 51-53 et 85, 86. Ces aspects ne peuvent pas être interprétés comme un
cloisonnement progressif de plasmodie végétative; car, comme nous l'avons
vu, quand la plasmodie se cloisonne, les noyaux ne sont plus en division et
sont au contraire dans un stade de repos relatif, entourés d'une aréole
claire; de plus le cloisonnement plasmodial n'est pas progressif, mais les
copulae s'isolent simultanément. L'aspect seul des stades observés et des
dessins suffit d'ailleurs à les rapprocher des divisions de copulae en sporo-
blastes.

Un argument théorique pourrait à la rigeur appuyer cette façon de
voir : la transformation des copulse en stades végétatifs explique l'accrois-
sement continu de la tumeur et l'existence d'ilôts épars de parasites jeunes.
Ces îlots épars expliqués par la division d'éléments végétatifs uninucléés
conduiraient à supposer la migration de ces éléments à l'intérieur de la tu-
meur, ce qui est incompatible avec l'existence des kystes secondaires.

j^o Paul DEBAISIEUX

B. Formation des Spores.

La première description de formation des spores fut donnée par
Thélohan (gS). Il observe dans le sporoblaste trois noyaux; lun d'eux
concourt à la formation de la capsule polaire, les deux autres restent dans
le protoplasme et donnent le germe amiboïde.

Cette description devint classique et par la suite les chercheurs ne
firent que la compliquer davantage. Stempell (04) observe quatre noyaux,
deux capsulogènes et deux amiboïdes; Léger et Hesse (07), Mercier
(08, 09), Fantham et Porter {12), Schroder (og) décrivent tous, — avec
des variantes, — cinq noyaux dont deux amiboïdes, deux valvaires et un
capsulogène. Schuberg (10) donne une description toute différente; il
n'existe d'après lui qu'un seul noyau à côté duquel peuvent exister en nom-
bre variable des granules métachromatiques ; le noyau serait logé dans la
zone annulaire du protoplasme. Ohmori (12) confirme plusieurs des obser-
vations de ce dernier auteur, et nous-méme (i3) nous nous sommes déjà
rallié, sur plusieurs points, à sa façon de voir. Enfin Swarczewsky (14)
observe dans le sporoblaste une division équipolaire du noyau semblable à
celle qui a précédé la formation des deux sporoblastes. Le noyau postérieur
formé de deux granules, reste dans la spore; le noyau antérieur, d'abord
formé de deux granules, dégénère; un des fragments qui en dérive, change
de colorabilité et donne le granule chromatique antérieur de la spore.

L'existence d'une zone équatoriale de protoplasme fut fréquemment
dessinée sans être interprétée. Stempell (04) fait observer qu'elle peut
être perforée; Schuberg (10) met le fait bien en lumière; Fantham et
Porter (12) font observer qu'elle est traversée par le filament spirale.

La capsule polaire fut généralement considérée comme un élément
bien défini, à membrane propre. Stempell (04), Fantham et Porter (12)
font observer que le filament spirale se prolonge dans la vacuole posté-
rieure. Schuberg (10) n'admet pas la capsule polaire comme élément dé-
fini; le filament spirale se trouve inclus dans la vacuole postérieure; dans
l'antérieure on observe une tige simple.

Nos observations nous conduisent aux conclusions suivantes :

Le noyau dans le sporoblaste est unique, logé à la partie postérieure;
à ce niveau se développe la vacuole postérieure et le noyau persiste dans
la spore, réduit à un grumeau chromatique. D'après l'interprétation de
Schuberg (10), cette masse chromatique ne serait qu'un granule métachro-

ETUDES SUR LES MICROSPORIDIES I7I

matique; le no3au serait logé dans le protoplasme. Quant à nous, nous
n'avons jamais pu découvrir de noyau dans le protoplasme, même après
l'usage de l'éosine-azur, employée par Schuberg; d'autre part, l'élément
postérieur du sporoblaste, alors que celui-ci est encore bien colorable, a un
aspect si parfaitement nucléaire qu'il nous parait impossible de mécon-
naître sa nature, fig. 34, 35, 39, 74, 75. La transformation de ce noyau
en grumeau chromatique avec formation à sa place d'une vacuole est certes
très énigmatique, mais nous ne voyons pas actuellement d'autre explication
possible des stades observés. La place que le noyau occupe finalement dans
la spore mûre se trouve à un endroit quelconque de la périphérie de la
vacuole postérieure dans laquelle il fait hernie; il peut se trouver à la partie
supérieure de cette vacuole et alors disparaître dans le protoplasme.

Il n'est pas question de noyaux valvaires; il n'existe d'ailleurs pas deux
valves, mais une seule enveloppe sporale. Quant au noyau capsulogène, son
existence est douteuse. Il y a un granule chromatique qui est en relation
avec l'appareil cnidaire. Ce granule, qui apparaît à la partie antérieure de
la spore, est de colorabilité nettement différente de celle du noj^au; mais il
n'est pas impossible qu'il provienne du noyau, soit par expulsion, soit
même par division. La description que Swarczewsky (14) donne de cette
formation, nous paraît en tout cas fort sujette à caution; et nous sommes
très enclin à croire qu'il a pris pour une division post-sporoblastique, ce
qui n'est qu'une division pré-sporoblastique ordinaire.

D'autre part, nous croyons à l'existence dans la spore d'éléments chro-
midiaux, qui concourent à la formation de l'appareil cnidaire. Il existe en
effet dans les spores jeunes de Glugea danileipskyi des traînées chroma-
tiques dans le protoplasme, fig. 39, 4i; la formation du filament spirale
aux dépens de chromidies a été observée sur des objets très favorables —
dans les cnidoblastes de métazoaires — par Moroff (10) et dans les spores
de myxosporidies par Awerinzew (08).

Le protoplasme, qui d'abord occupe tout le sporoblaste jeune, est pro-
gressivement refoulé par le développement des vacuoles antérieures et pos-
térieures ; il est finalement réduit à un mince revêtement de la paroi
sporale et à un disque biconcave au centre de la spore. Un fin canalicule,
généralement excentrique, traverse ce disque [Schuberg (10), Fantham et
Porter (12)].

Uappareil cnidaire. Nous n'employons pas le terme de capsule polaire,
car il n'existe pas de capsule propre; les deux vacuoles et leur contenu font

172

Paul DEBAISIEUX

paitie de cet appareil Dans la vacuole antérieure il existe deux granules
chromatiques, réunis par une mince tigelle; l'un est au contact de la mem-
brane sporale, l'autre au contact du protoplasme. Cette particularité de
même que toutes celles observées jusqu'ici dans la spore, sont communes
aux deux espèces étudiées.

La vacuole postérieure présente un aspect différent, suivant l'espèce
étudiée. Dans le Gliigea mïilleii il existe un filament bien distinct et par-
fois une columelle centrale semblable à celle décrite par Schuberg (10).
Le filament ne paraît pas se prolonger dans la vacuole antérieure; son ex-
trémité fixe se trouverait au bord du canalicule protoplasmique. Dans le
Gliigea danilewskyi on observe parfois la columelle, mais jamais le fila-
ment.

La conception que l'on peut se faire du fonctionnement de l'appareil
cnidaire est évidemment hypothétique; nous croyons qu'il se compose de
deux parties bien distinctes : dans la vacuole antérieure existe un méca-
nisme d'éclatement; dans la vacuole postérieure se trouve le filament spi-
rale, dévaginable en doigt de gant à travers le canalicule protoplasmique.

Avant de terminer ce chapitre, nous voudrions dire un mot des spores
observées par Swarczewsky (14) dans Gluqea gigantea. Les dessins qu'il
en donne ressemblent à s'y méprendre aux aspects que l'on rencontre dans
Gliigea i7iulleri : vacuole antérieure avec granule terminal, relié au proto-
plasme, situé en une zone équatoriale; vacuole postérieure sans filament
spirale. L'auteur rattache cette espèce aux haplosporidies. Nous parlerons
bientôt de la systématique; qu'il nous suffise de dire ici que par ses spores,
le Ghigea gigmitea est étroitement apparenté au Gliigea mulleri.

C. Systématique.

a) L'espèce.

La microsporidie que nous avons trouvée dans les muscles de Tro-
pidonotus natrix est très probablement la même que celle décrite par
Danilewsky (91) dans les muscles de batraciens et de reptiles, où elle pro-
voque des tumeurs fusiformes blanches de i mm. à i,5 mm., dans les-
quelles il y a des spores de 3 à 4 i-i. Pfeiffer [gSb] dénomme le parasite
Glugea danilewsky; Labbé (99) l'appelle Pleistophora danilewsky et le dé-
crit : " Masses plasmiques irrégulières dans les cellules musculaires, for-
mant de petites sphères granulées, ayant jusqu'à i cm. de long. Les plus

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES I 7 J

petites masses plasmiques ont de 3 à 4 i^- de long. Vésicules de 16 à 640 |J-,
à membrane mince, renfermant 8 à 100 spores. S;)ores de 3 à 4 j-"-, pii'i-
formes ou ovalaires, réfringentes. Filament ?-

La microsporidie trouvée dans les muscles de Gammariis lociista L.
paraît être la même que celle décrite dans ce même hôte par Pfeiffer
(g5(3, g5b), dénommée par lui Glugea inii/leri, espèce qui a des sporo-
blastes donnant naissance à un nombre variable de spores. Se basant sur
ce caractère, Labbé (99) dénomme cette espèce Pleislophora miiUeri et
donne comme diagnose : ^ Vésicule sphérique de 10 à 40 t-^ contenant 8 à
32 spores. Spores piriformes avec filament de i5 i-"-, sortant par l'éther ".
Stempell (gi, 92) étudie une microsporidie m\isc\x\3,\xe de Gammarus et
remplace le nom de Pleislophora iniilleri par celui de Thelohania inïdleri,
sous prétexte que dans l'espèce qu'il étudie le nombre de spores est de 8
dans chaque sporoblaste. L'infection, fait-il observer, se caractérise par l'as-
pect blanchâtre de l'hôte infecté. Aucun des stades dessinés par Stempell
ne ressemble à ceux que nous avons observés; nous ne trouvons à ce fait
qu'une seule explication, c'est que cet auteur s'est trouvé en présence d'un
parasite appartenant à un autre genre que celui décrit par Pfeiffer et étu-
dié ici, et qu'il a eu tort de le dénommer mûlleri.

L'identité des deux espèces décrites ici avec des espèces antérieure-
ment connues, détermine les dénominations spécifiques qui doivent leur
être attribuées : danileipskyi et miilleti.

b) Le genre.

Quant à la dénomination générique qui leur convient, elle est plus ma-
laisée à établir. Ce n'est pas qu'il manque de classifications de iTiicrospori-
dies; au contraire, il y en a trop; mais le nombre de genres dont l'évolution
est définitivement établie étant fort resti-eint, les caractères envisagés sont
ou bien sujets à caution ou bien arbitraires, et les classifications sont provi-
soires. Il sera nécessaire d'en refaire une, mais il faut attendre.

Plutôt que de recourir à des classifications, il vaut mieux comparer
directement aux autres espèces connues et aux types génériques établis.

Que les deux espèces étudiées ici appartiennent au même genre est
évident et ne demande pas de commentaires. De plus :

1° Elles appartiennent au même genre que Pleistophora longifilis de
ScHUBERG (10); la structure des spores, leur nombre variable dans chaque
alvéole, l'aspect des stades jeunes et surtout l'aspect général de la tumeur,

ly^ Paul DEBAISIEUX

non décrit par l'auteur, mais rendu nettement par ses photogravures, ne
laissent pas de doute à ce sujet.

2° Elles ressemblent beaucoup, par l'allure générale de l'infection de
même que dans la plupart de leurs stades, au Gliigea gigantea (Pleisto-
phorag.) Svvellengrebel{ii1. Cette espèce, réétudiée par Swarczewsky(i4),
a été différemment décrite par lui; et certains des stades qu'il observe res-
semblent étonnamment à ceux décrits ici; notamment l'allure des plasmo-
dies, les multipartitions simultanées des noyaux, les divisions des sporo-
blastes et enfin les spores. Nous avons discuté plus haut les interprétations
émises concernant l'évolution de cette espèce qui, débaptisée par Swakc-
ZEWSKY, devient Y Ichthyosporidiiim gigaiiteuni et appartient aux haplo-
sporidies.

3° Elles appartiennent indubitablement au même genre que le Glu-
gea anomala (Thél.) décrit comme Nosema a. par Labbé (99). Cette affir-
mation paraîtra erronée si l'on s'en rapporte à l'étude de cette espèce par
Stempell(o4). Nous avons nous-même repris cette étude, dont les résultats
seront publiés sous peu, et ayant le Gliigea anomala sous les yeux, nous
pouvons affirmer que la description aberrante, donnée par Stempell, est
fausse. Cette espèce à une ressemblance telle avec les deux espèces étudiées
ici cju'il n'y a pas de raison de les séparer génériquement.

Nous avons donc l'embarras du choix quant à un nom générique à ap-
pliquer aux deux espèces étudiées ici. Nosema? Pleistophora? Ichthyospo-
ridîum? Gliigea? Gliigea a le droit de primogéniture pour lui; mais il y a
plus : l'analogie qui existe avec le Gliigea anomala, qui est le type du genre
créé par Thélohan (gi), conduit à admettre les deux noms de Gliigea dani-
lewskyi (L. Pfeif.) et de Gliigea mullevi (L. Pfeif.).

c) La famille.

Nous venons de voir que les deux espèces qui nous intéressent ont de
grandes ressemblances avec le Pleistophora gigantea (Ichthyospoi'idium gi-
ganteumj, et que cette espèce est rangée par Swarczewsky (14) parmi les
haplosporidies. On pourrait se demander si les parasites étudiés ici ne
sont pas aussi des haplosporidies; nous croyons au contraire que c'est
y Ichthyosporidiiim qui doit reprendre rang parmi les microsporidies.

Les deux raisons principales données par Swarczewsky pour motiver
la mutation, sont :

1° Qu'il ne voit pas de filament spirale dans la spore. — Nous n'en

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES lyS

voyons pas non plus dans Glugca daniletvskyi à spores analogues à celles
de Iclilhyosporidiiim giganteiim, et cependant toute l'évolution et tous les
aspects de cette espèce sont si semblables à ceux de Glugea miilleri qu'il
n'y a pas moyen de les séparer l'un de l'autre.

2° Qu'il n'observe pas de stades intracellulaires. — Toute l'évolution
se fait cependant comme pour beaucoup d'autres microsporidies dans les
tissus avec modification dans les cellules et hypertrophie des noyaux-
hôtes. Ajoutons que dans le Pleistophora (Ccvlosporidiimi) periplanetœ, que
SwARCzEwsKY range parmi les haplosporidies pour cette même raison,
nous venons de découvrir des stades intracellulaires indubitables (observa-
tions non encore publiées).

La conclusion qui se dégage de cette discussion, forcément un peu
longue, c'est que les parasites musculaires du Tropidouotiis et du Gamma-
rus sont le Glugea daniletvskyi et le Glugea mulleri, deux microsporidies.

26

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.- Reproduction des Grégarines ; Arch. Zool. exp. et

génér., 4^ série, t. 4.
.' Recherches sur les Haplosporidies ; Arch. Zool. exp.

et génér., 4= série, t. 4.
: Ueber die Myxoparasiten der Amphibien u. Reptilien;

Centralbl. Bakt., t. 9, p. g.
.■ Microsporidies parasites des larves de SimuUum; La

Cellule, t. 3o.
: Recherches sur les Coccidies. IV, Eiineria Cystis-felleœ ;

La Cellule, t. 3o.
: Microsporidies parasites des larves de Simiiliiim. II;

La Cellule, t. 3o.

■ Copromonas subtilis; Q. J. M. Se, t. 52, p. yS.

■ Lehrbuch der Protozoenkunde; II. Edit. lena.

; The Morphology and Life-history of Nosema apis;
Ann. trop. Med. Parasit. Liverpool, t. 5, p. i63-ig5.

.• Sur Myxocysiis mrazeki; C. R. Soc. Biol. Paris,
vol. 58.

.• Sporozoa. Dans : Das Tierreich; Berlin- Friedlànder.

; Sur une nouvelle Myxosporidie parasite de la Sar-
dine; C. R. Ac. Se. Paris, t. 145, p. 85.

■ Sur le développement et la structure des spores de

Thclohania giardi; C. R. Ac. Se. Paris, t. 146, p. 33.
.- Contribut. à Tétude de la sexualité chez les myxo-
sporidies et les microsporidies; Ac. Se. Belgique.
Sciences. Mémoires, série II, t. 2.

(i) On voudra bien excuser les lacunes qui pourraient exister dans la bibliographie, la
destruction des ouvrages de fond lors de l'incendie de la Bibliothèque Universitaire et l'impossibilité
de recevoir les travaux parus depuis le mois d'août 1914 en sont la cause

178

Paul DEBAISIEUX

igi2 Minchin : Introduction of the stud_y of the Protozoa ; London,

Arnold,
igio Moroff : Entwickl. der Nesselzellen bei Anemonia; Arch. f.

Zellforsch., t. 4.
1897 Mrazek : Ueber eine neue Sporozoenform ans Limnodrillus ;

Sitz. Ber. der Gesel. f. Wiss. Prag.
iqio 1) : Sporozoenstudien : zur Auffassung der Myxocystiden;

Arch. f. Protist., t. 18.
1Q12 Ohmori : Nosciiia bombycis; Arb. kais. Gesundheitsamt, t. 40,

p. 108.
iQo5 Perc:: : Microsporidies parasites des Crabes d'Arcachon ; Bull.

Stat. Biol. Arcachon, t. 8.
iQoS " .• Sur une (jlugéide nouvelle parasite des Balanus ama-

ryllis; C. R. Soc. Biol. Paris, t. 57, p. i5o.
i8gi Pfciffer : Die Protozoen als Krankheitserreger, 2= édit.

i8g3 n •• Untersuchungen ueber den Krebs, die Zellerkrank-

ungen und die Gewebesbildung der Sporozoen.
i8q5j{ )) ; Die Protozoen als Krankheitserreger. Nachtrage I.

Corresp. Blatter allg. arztl. Verein. Thuringen, n" i.
Idem. lena.

Thelohania chœtogastris ; Arch. f. Protist., t. 14.
Schuberg : Microsporidien aus dem Hoden der Barbe ; Arb. kais.
Gesundheitsamt, t. 33.
Pleistophora miilleri; Zool. Anz , t. 24, p. i5y.
Thdohania miilleri; Zool. Jahrb,, t. 16.
Nosema anomalum ; Arch. f. Protist., t. 4.
Nosema bombycis; Arch. f. Protist., t. 16.
The life-history of Pleistophora gigantea; Parasito-

logy, t. 4.
Ueber den Lebenc3xlus einiger Haplosporidien; Arch.

f. Protist., t. 33.
Recherches sur les M3-.\osporidies; Bull. Se. France

et Belgique, t. 26.
Sur deux protozoaires nouveaux parasites des muscles
de poisson; C. R. Ac. Se. Paris, i8gi.

1895 è

1909

1910

»
Schrôder
Schuberg

1901

Stempell

1902

M

1904

»

1909
1912

Swcllengrebcl

1914

Swarczeivsky

1895

Thélohan

1891

»

EXPLICATION DES FIGURES.

La combinaison optique (Zeiss), employée pour les dessins, est robjectif : i,3o dist.
foc. 1,5 mm. X oculaire compens. iS (grossissement linéaire 3ooo); seuls les dessins
I, 2, 3, faits à l'oculaire 2, sont au grossissement de 333, soit à la réduction au 1/9
de l'échelle. La projection est faite au niveau de la platine par le prisme Nachd;
une échelle de comparaison, établie au micromètre oculaire de Zeiss, se trouve en tête
de la planche L

La légende de chaque dessin est suivie de l'indication de la méthode employée :

B. = Fixateur de Bouin. H. = Hématox5'line de Heidenhain.

Z. =- )) Zenker. g. = Éosine-azur de Giemsa.

F. = » Flemming. Sa. = Safranine de Babès.

S. = Sublimé-alcool.

PLANCHE I.
Glugea danilewskyi L. Pfr.

FIG. 1. Partie de tumeur du type I. Limitée par deux faisceaux musculaires;
des travées conjonctives et de petits faisceaux musculaires atrophiés traversent la
tumeur; les spores et les individus jeunes sont groupés dans des k}stes secondaires. S. H.

FIG. 2. Partie de tumeur du type II Peu d'éléments jeunes; les spores sont
réunies dans des kystes secondaires ; une épaisse couche de tissu conjonctif, dans
lequel sont éparpillés des amas de spores, sépare la tumeur des faisceaux musculaires
voisins. X. H.

FIG. 3. Partie de tumeur du t_vpe III. Les spores forment une masse com-
pacte; une épaisse couche de tissu conjonctif réactionnel dans laquelle traînent des
spores enk3'ste la tumeur. S. G.

FIG. 4. Paroi de la tumeur Les kystes secondaires sont séparés par quelques
fibres musculaires; au voisinage de la tumeur une assise de protoplasme avec un
noyau-hote, puis une membrane irrégulière très chromatique, enfin à la périphérie
le muscle normal. B. H.

l8o Paul DEBAISIEUX

FIG. 5. Amas d'individus jeunes végétatifs au milieu des kystes sporaux. Ils
sont à des stades différents, les uns uninucléés, les autres plasmodiaux. B. H.

FIG. 6. Première et seconde division nucléaire dans des individus végéta-
tifs. S. H.

FIG. 7. Divisions nucléaires d'un aspect plus diffus. S. H.

FIG. 8. Idem.

FIG. 9. Idem

F'IG. 10. Seconde division nucléaire; deux granules polaires unis par deux
filaments légèrement colorables. S. H.

FIG. 11. Divisions nucléaires ultérieures. S. H.

FIG. 12. Divisions nucléaires se succédant rapidement sans que les noyaux-
filles s'isolent complètement. S. H.

FIG. 13. Tous les noyaux-filles non individualisés restent groupés dans un
espace clair au milieu du protoplasme. F. H.

FIG. 14. Idem. Un peu plus avancé. S. H.

FIG. 15. Les noj'aux-filles, sans être complètement séparés, se répandent dans
le protoplasme. S. H.

FIG. 16. Individu végétatif au stade plasmodial. B. H.

FIG. 17. Idem; très nombreux noyaux situés à la périphérie. F. H.

FIG. 18. Plasmodie peut-être en voie de cloisonnement. Les divisions nu-
cléaires montrent l'existence de deux granules polaires réunis entre eux par un
filament peu colorable. B. H.

FIG. 19. Plasmodie; les noyaux sont entourés d'une aréole claire; ils montrent
une ébauche de division qui permet de constater les mêmes particularités que celles
signalées dans la fig. précédente B. H.

FIG. 20. Plasmodie; les noyaux sont entourés d'une aréole claire et pins ou
moins dédoublés. B. H.

FIG. 21. Idem.

FIG. 22. Par résolution de la plasmodie les copulae autogamiques s'indivi-
dualisent dans le kj'ste se, indaire. Les noyaux montrent nettement des ébauches de
division. B. H.

FIG. 23. Idem

ÉTUDES SUR LES MICRO ■^P(1R1 DIES l8l

FIG. 24. Une copula isolée à noyau double. B H

FIG. 25. Idem.

FIG. 20. Cofiulse individualisées dans le kyste secondaire; noyaux parfois à
ébauche de division, parfois assez volumineux, diffus, à limites vagues. B. H.

FIG. 27. Idem.

FIG. 5 8. Idem. Une division nucléaire de t\-pe énigmatique. B. H.

FIG. 29. Copulae dans le k\-ste secondaire. L'une d'elles subit la division

sporoblastique. B. H.

FIG. 30. Copulœ et divisions sporoblastiques à des stades différents B. H.

FIG. 31. Divisions sporoblastiques. S. H.

FIG. 32. Idem plus avancées. B. H.

FIG. 33. Individualisation des sporoblastes. B. H.

FIG. 34. Sporoblastes jeunes; une copula existe probablement encore au mi-
lieu d'eux. B. H.

FIG. 35. Sporoblastes jeunes S. H.

FIG. 36. Sporoblaste jeune; sa dimension fait croire qu'il donnera une grande
spore. Stade énigmatique. B. H.

FIG. 37. Idem.

FIG. 38. Idem.

FIG. 39. Sporoblastes jeunes, première ébauche de la structure des spores. B. H.

FIG. 40. Spores mures. S H.

FIG. 41. Transformation du sporoblaste en spore. B. H.

FIG. 42. Idem.

FIG. 43. Idem.

FIG. 44. Idem. S. H.

FIG. 45. Spore. S. H.

FIG. 46. Idem.

FIG. 47. Idem. B. H.

FIG. 48. Idem. B. H.

FIG. 49. Spore volumineuse en formation. B. H.

FIG. 50. Spore volumineuse. B. H.

l82 Paul DEBAISIEUX

FIG. 51. Retour aux stades végétatifs : formation de plasmodies aux dépens
de la copula. Ce dessin fait suite aux dessins 3o, 3i. F. H.

FIG. 52. Idem. B. H.

FIG. 53. Idem, plus avancé. F. H.

PLANCHE II.
Glugea mùlleri L. Pfr.

FIG. 54. Individus végétatifs jeunes à différents stades d'évolution. B. H.

I'"IG. 55. Premières et secondes divisions nucléaires; existence de granules
polaires. S. H.

FIG. 56. Individu végétatif à grand noyau. B. H.

FKi. 57. Idem. Nombreuses enclaves protoplasmiques périnucléaires. B. H.

FKj. 58. Restauration de deux noyaux après la première division. B. H. Sa.

FIG. 59. Individus végétatifs, noyaux de dimensions variables. B. H. Sa.

FIG. 60. Plasmodie avec divisions nucléaires; deux granules chromatiques en
chaque pôle et filament unissant. S. H.

FIG. 61. Idem.

FIG, 62. Début du cloisonnement de la plasmodie. S. H.

FIG. 63. Idem; ébauche de division nucléaire. B. H.

FIG. 64. Idem.

FIG. 65. Les copulae autogamiques sont individualisées; le dédoublement nu-
cléaire est nettement visible. B. H.

FIG. 66. Idem.

FIG. 67. Idem. L'une des copula montre le début de la division sporo-
blastique. S. H.

FIG. 68. Division sporoblasti(iue. B. H.

FIG. 69. Idem. B. H. Sa.

FIG. 70. Idem. B. H. Sa.

FIG. 71. Idem. Téloi)hase. B. H.

F'IG. 72. Isolement des sporoblastes. B. H.

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES l83

FIG. 73. Sporoblastes isolés, no\-aux vagues. B. H. Sa.

FIG. 74. Formation des spores. Le granule antérieur est coloré en rouge ré-
fringent. B. H. Sa.

FIG. 75. Idem.

FIG 76. Idem.

FIG. 77. Idem Même coloration du granule antérieur. S G.

FIG. 78. Idem. Le granule antérieur franchement rose, le noyau postérieur
à peine rose, tout le reste bleu. S. G.

FIG. 79. Formation de spore. B H. Sa.

FIG. 80. Spore. B. H.

FIG. 81. Spore. B. H. Sa.

FIG. 82. Spore B. H. Sa.

FIG. 83. Spore. B. H. Sa.

FIG. 84. Spore. B. H. Sa.

FIG. 85. Retour aux stades végétatifs; formation de plasmodies aux dépens
des copulse. Ce dessin fait suite aux dessins 68, 69. B, H.

FIG. 86. Idem. S. H.

27

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NJaeob ^'Gu/es-ar

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Les Microsporidies

parasites des larves de Simulium

II

Paul DEBAISIEUX,

et

Louis GASTALDI,

FESSEUR A l'université,

ÉTUDIANT EN MÉDECINE,

LOUVAIN.

MONTEVIDEO (uRUGUAy).

(Mémoire déposé le 2S décembre igiS.)

28

Les Microsporidies parasites des larves de Simulium

II

INTRODUCTION.

La larve de Siiuitliitni parait être un hôte de choix pour les proto-
zoaires parasites; les études qui en furent faites sont relativement nom-
breuses.

Des microsporidies y furent découvertes par Léger (97) et baptisées
par lui Gliigea varians. Elles furent ensuite étudiées à trois reprises par
LuTz et Splendore (o3, 04. 08), qui les désignèrent d'abord comme T/iclo-
hania sp. ind., puis plus tard comme Nosema simiilii, espèce possédant
quatre formes distinctes : a, p, ■,■ et S.

L'un de nous (13) publia également un travail sur ces microsporidies.
Dans cette étude une espèce était décrite à part; les autres, réunies sous la
dénomination de Thélohania varians, étaient considérées provisoirement
comme appartenant à une même espèce. « Nous avons eu parfois, écrivions-
nous alors, beaucoup de peine à coordonner les variantes et à les rapprocher
d'un même type u ^p. 48), et ailleurs : « le cycle général et bien des stades
sont analogues, et les variantes qui les distinguent ne sont pas assez impor-
tantes pour justifier ac/!/e//e/?zt^»/ la création d'une espèce nouvelle- (p. 5i).

Un travail de Strickland (i i) traite succinctement de ces mêmes para-
sites et dans un mémoire ultérieur (i3) il décrit dans les larves de Simulium
américains trois espèces distinctes de microsporidies qu'il appelle Glugea
tnullispora, bracteata etfibrata, plus un parasite énigmatique, qu'il croit être
une grégarine.

Nous n'eûmes malheureusement connaissance du mémoire qu'assez
tardivement, après la publication de notre précédent travail; nous résolû-
mes dès lors de reprendre l'étude de nos préparations en tenant compte des
idées de Strickland. Le travail fut différé de mois en mois, et le 26 août

l88 Paul DEBAISIEUX & Louia GASTALDI

1914, lors de l'incendie de la ville de Louvain, tout notre matériel fut dé-
truit par le feu.

Nous avons récolté de nouveaux matériaux et avons eu la chance d'en
trouver en très grande quantité; leur étude nous a conduits à conclure à
l'existence d'au moins quatre espèces différentes de microsporidies.

Le parasite énigmatique décrit par Strickland fut également retrouvé;
il esta rapprocher du genre Polycaryum (Stempell, o3). Son étude détail-
lée fera l'objet d'une note spéciale.

MATÉRIEL ET MÉTHODES.

La récolte des larves fut faite dans un ruisseau des environs de Louvain
durant tout Ihiver (janvier à mars) et tout l'automne (octobre à décembre)
igi5. Ces larves proviennent de la même localité que celles que nous avons
antérieurement étudiées (i3) ; la détermination de l'adulte, qui fut aimable-
ment faite au Musée de Bruxelles, a conduit à les dénommer Meliisina [Si-
mitlium) maciilata. Meig., mais encore une fois cette détermination n'est
que probable, car, comme le fait remarquer Grûnberg (10), il existe de
nombreuses espèces insuffisamment connues ou douteuses.

Des centaines de larves furent étudiées sur le vivant; et plus de trois
cents individus parasités furent fixés et débités en coupes.

Les fixateurs employés furent le Bouin, le Zenker, le Brasil (picro-
formol-acétique alcoolique), le sublimé-alcool et le Benda. Les trois pre-
miers nous ont donné les meilleurs résultats.

Comme colorants nous avons surtout employé l'hématoxyline au fer de
Heidenhain suivie de coloration protoplasmique au rouge Congo. Le
Borrel, le Delafield et le Giemsa ne furent utilisés que comme procédés
de comparaison.

Le présent travail n'est en somme que le complément d'un mémoire
antérieur; ce fait nous permettra de traiter assez sommairement des ques-
tions déjà approfondies. Par le fait qu'il fut possible de dissocier des espèces,
l'interprétation des stades observés est devenue plus aisée et plus simple;
grâce à l'abondance des matériaux, il est possible de compléter les obser-
vations antérieures; (]uelques-unes doivent être infirmées.

Dans une première partie nous décrirons en détail et séparément les
quatre espèces observées ;

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM I 89

dans un second chapitre nous discuterons leur rang systématique et
justifierons les noms que nous leur attribuons ;

dans un troisième chapitre nous discuterons et analyserons les notions
générales qui ressortent de l'étude particulière.

I. PARTIE DESCRIPTIVE.

I. Thélohania multispora Strick

a) Aspect g en éral .

Les tumeurs sont multiples et régulières. Dans un cas d'infection rela-
tivement jeune, les divers stades d'évolution du parasite sont disposés avec
ordre dans chaque tumeur; les plus jeunes à la périphérie, puis une assise de
sporoblastes réunis par loo ou 200 en amas sphériques enfin au centre des
spores isolées. Dans un autre cas, où l'infection parait cependant plus avan-
cée, on ne rencontre pas de spores libres; même mûres, elles restent groupées
en petits amas; il n'y a pas d'assises distinctes dans la tumeur. L'aspect
général correspond en ce cas à celui représenté par Strickland (i3) dans
sa figure 2, planche 4.

Les noyaux-hôtes, quand ils existent dans la tumeur, sont très rares et
assez volumineux; une couche différenciée en membrane sépare la tumeur
des tissus voisins, fig. 1.

Ce parasite est très rare : nous ne l'avons rencontré que dans deux cas
d'infection.

b) Évolution.

1, Multiplication végétative. On rencontre parfois des parasites uni-
nucléés. Les divisions nucléaires qu'on y observe fig. 2, 3, montrent net-
tement l'existence dans le noyau de deux masses chromatiques distinctes; on
les retrouve à la télophase, séparées lune de l'autre; il existe deux filaments
unissants, qui persistent assez longtemps entre les deux noyaux-filles.

Les stades jeunes se présentent plus souvent sous la forme plasmodiale,
FIG. 1, 4. Dans les noyaux au repos peu chromatiques, il y a souvent de fins
granules réunis deux à deux en haltère; fréquemment il y en a deux situés
aux pôles du noyau; leur présence semble annoncer une division immi-
nente, durant laquelle ils joueront le rôle de corpuscules directeurs. Les
divisions nucléaires dans la plasmodie, fig. 5, sont analogues à celles ob-
servées dans les individus uninucléés.

igo Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

Parfois les divisions nucléaires sont en apparence plus compliquées,
FiG. 6. Dans les noyaux-filles on voit nettement un dédoublement; ils pa-
raissent constituer un véritable diplocaryon; durant la division elle-même,
il semble que deux noyaux se divisent simultanément et parallèlement.
Nous verrons dans d'autres espèces des exemples plus démonstratifs de ce
phénomène, fig. 66 à 77; il doit y être interprété comme division de diplo-
caryon donnant deux diplocarya-fiUes. On peut se demander s'il existe une
différence essentielle entre les divisions nucléaires relativement simples,
FIG. 2, 3, 5, et celles, plus compliquées, qui paraissent doubles. En effet, dans
les premières divisions il existe nettement un dédoublement des deux
noyaux-filles en deux masses chromatiques élémentaires et il y a deux fila-
ments axiaux ; il existe de plus des stades de transition entre les deux types
extrêmes de division, qui parfois paraissent coexister dans une même plas-
rnodie, fig. 5, 6. et enfin dans certaines espèces, notamment dans le Plis-
iopho' cl simitlii, on observe presque toujours, si pas exclusivement, des di-
visions de diplocarya.

2. Formation des i^ygotes. Après un nombre variable de divisions
nucléaires, tous les noyaux de la plasmodie se disposent à la périphérie de
celle-ci et ses contours deviennent irréguliers; un cloisonnement, commen-
çant par la périphérie, isole de petites plages protoplasmiques uninucléées,
FIG. 7. Les noyaux se développent, puisse dédoublent; les deux moitiés
restent accolées, fig. 8, ou se séparent plus ou moins en deux croissants à
sommets convergeant deux à deux, fig. 7, 9. L'examen de nos dessins et
l'étude des préparations montrent qu'il existe bien ici un dédoublement nu-
cléaire et pas un accolement de deux noyaux plasmodiaux (Swarszewsky, 14).
Nous verrons plus loin que ce fait n'est pas toujours aussi clair et que
l'interprétation des préparations peut prêter à discussion. Dans le cas pré-
sent on est conduit à admettre le dédoublement nucléaire, et le diplocaryon,
dont nous allons étudier l'achèvement, est dès lors autogamique au premier
degré (Autogamie psedogamique d'après Hartmann, og).

Le cloisonnement de la plasmodie s'accentue, fig. 9-12; dans le proto-
plasme apparaissent des traînées plus denses d'abord, puis plus colorables,
et bientôt tellement électives pour la coloration à Ihcmatoxyline que la dif-
férentiation est très laborieuse. Les noyaux dédoubles s'accroissent, fig. 10,
les moitiés constituantes restent bien isolées; d'abord très denses, elles se
développent et deviennent nettement filamentaires

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM ICI

Au stade suivant on voit les deux moitiés du diplocaryon se fusionner
en un seul noyau, fig. 13. L'individu à ce stade doit être considéré comme
un zygote à noyau formé de filaments entremêlés.

3. Sporogonie. Les zygotes restent unis en petits amas noyés dans
une masse très chromatophile née par différentiation du protoplasme. Ils
évoluent synchroniquement, mais indépendamment les uns des autres, et
donnent naissance à des sporoblastes. Les divisions nucléaires successives
montrent un aspect tout particulier que nous n'avons rencontré que dans
cette seule espèce, fig. 14. Il existe une figure achromatique très nette, qui
rappelle un fuseau. Elle est généralement formée de quatre filaments, qui
convergent aux pôles, où ils apparaissent un peu plus épais et où existent
parfois deux centres d'attraction fig. 14. Les éléments chromatiques sont
répartis en nombreux granules; leur nombre est difficile à préciser; à la pla-
que équatoriale, il y en a environ huit; lorsqu'ils s'éparpillent durant l'ana-
phase, on en compte jusqu'à dix huit. A. la télophase, fig. 15, les amas
polaires sont formés par les granules chromatiques assez régulièrement
disposés au nombre de huit ou neuf.

A la seconde division nucléaire, le nombre des granules paraît subir
une réduction ; on en compte environ huit à la plaque équatoriale, et jamais
plus de dix durant l'anaphase et la télophase.

Il ne nous fut pas possible d'établir avec certitude quel est le nombre
de spores qui naissent aux dépens de chaque zygote. Il existe certainement
deux divisions nucléaires successives; à en juger par leurs dimensions et par
la dimension des sporoblastes, il en existe très probablement trois; nous ne
croyons pas qu'il en existe davantage; le nombre des sporoblastes dans
chaque amas comparé au nombre de zygotes, justifie cette opinion.

Nous estimons donc qu'il nait 8 spores aux dépens de chaque zygote;
c'est pourcjuoi comme nous le verrons plus loin, cette espèce doit être con-
sidérée comme une Thclohaiiia.

Les sporoblastes provenus de plusieurs sporontes restent accolés et
groupés en amas sphériques, fig. 17. La forte chromaticité de la substance
qui les entoure ne permet pas de suivre leur évolution. Parfois on distingue
un assez gros noyau à l'une de leurs extrémités.

Tandis que les sporoblastes se transforment en spores, la substance
chromatique interstitielle disparaît, employée sans doute à la formation
des membranes sporales. Les spores peuvent s'isoler complètement ou

ig:

Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

rester groupées en amas; leurs dimensions approximatives sont 4 — 5X3|^.
Nous n'avons pas observé de macrospores.

2. Thélohania fibrata Strick

a) Aspect gé?i éra l .

Les tumeurs, uniques ou multiples, sont à contours irréguliers et en-
voient des prolongements de toute forme entre les divers organes de l'hôte.
11 n'existe aucune régularité dans la disposition des divers stades du para-
site ; ils sont complètement entremêlés. Les spores jeunes restent parfois
groupées en petits amas de huit, mais les spores mûres sont indépendantes
les unes des autres et disséminées dans toute la tumeur. Dans les prépara-
tions fixées les spores, spécialement rebelles à 1 action de tous les réactifs,
sont toutes ou presque toutes déformées, incolores, réfringentes; cet aspect
des spores caractérise à première vue les tumeurs formées par cette espèce
et augmente l'apparence de désordre qu'on y observe, fig 19.

Il ne semble pas y avoir de membrane enkystante autour de la tu-
meur; sur préparation, un simple trait, analogue à une limite de cellule
quelconque, la sépare des tissus sains.

Les noyaux-hôtes englobés dans la tumeur sont relativement peu nom-
breux, par comparaison avec leur excessive abondance dans le Plistophora
simula. '- (^es noyaux sont volumineux et généralement analogues à ceux
que nous rencontrerons dans le Th. bracteata fig. 40. Mais parfois ils
présentent un aspect tout spécial fig. ItJ; ils contiennent des chromosomes
formés de disques empilés; dans ce cas particulier, il est aisé d'établir leur
origine avec certitude; ils proviennent des glandes salivaires, mais sont
parfois fortement hypertrophiés et peuvent atteindre 170 ;'.

b) Évolution.

I. Multiplication végétative. Les plasmodies à noyaux simples sont
rares, fig. 20. Les noyaux dans ce cas sont assez grands et montrent un
réseau chromatique diffus; ils se rencontrent rarement en voie de division.
Par contre les individus végétatifs mononucléés ou paucinucléés, fig. 21, 22,
à noyaux doubles, sont très fréquents. Leur forme très variable générale-
ment étirée, fig. 2i, indique la division du protoplasme.

L'origine des noyaux doubles est difficile à établir; certains aspects
conduisent à admettre un dédoublement des noyaux simples fig. 21. 22;

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM IQS

mais d'autres aspects très nombreux font croire à l'accolement de deux
noyaux de la plasmodie, fig. 21''. Dans l'une et l'autre hypothèse, on se
trouve en présence d'une autogamie par pasdogamie ; mais est-elle du pre-
mier degré ou bien, les noyaux plasmodiaux étant peu nombreux, du se-
cond ou du troisième degré? La question nous parait insoluble, tant le rôle
joué par l'interprétation est ici important. On pourrait soutenir l'une ou
l'autre hypothèse; peut-être les deux sont-elles vraies.

Les divisions nucléaires que l'on observe dans les individus végétatifs
sont généralement assez compliquées, fig. 24, 25; elles doivent être inter-
prêtées comme divisions doubles évoluant simultanément dans deux noy-
aux accolés.

2. Formation des {ygoies. Elle est analogue à celle qui existe dans
le Thêlohariia multispora, mais s'en distingue par le fait que les individus
à noyau double ne se transforment que lorsqu'ils sont isolés fig. 26, 27.
Chaque diplocaryon évolue alors individualisé; le zygote est plus volumi-
neux que dans l'espèce précédente.

3. Sporogonie. La première division sporogoniale a lieu suivant un
type beaucoup moins parfait que celui décrit dans le Th. multispora. On
observe une simple condensation aux pôles des filaments nucléaires du zy-
gote, FIG. 29. La seconde division suit immédiatement la première, fig. 30;
parfois on y remarque l'existence de deux granules polaires unis par un
filament achromatique, fig. 31; lors de l'isolement des noyaux-filles, ce fi-
lament persiste assez longtemps, fig. 32. La troisième et dernière division,
FIG. 33, est plus parfaite que celles qui la précèdent, et il existe parfois des
aspects qui rappellent ceux observes dans la premièie espèce étudiée.

Le protoplasme du sporonte jeune est de structure alvéolaire uniforme,
FIG. 29, 30; quand les noyaux-filles s'isolent, il persiste une plage alvéolaire
autour de chacun d'eux, mais les autres portions protoplasmiques du spo-
ronte deviennent plus denses, de structure homogène, fig. 32-34- Dans
nos préparations, ce protoplasme modifié se cartictérise par le fait qu'après
une différentiation convenable il fixe fortement le rouge Congo. Cette par-
ticularité permet de reconnaître aisément les stades de sporogonie des sta-
des végétatifs qui ne fixent que l'hématoxyline.

Le nombre de sporoblastes nés dans chaque sporonte est égal à huit;
il peut exister de légères variations de nombre, il ne s'écarte jamais beau-

29

194

Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

coup de la valeur moyenne de huit. Les sporoblastes s'individualisent par
formation d'une membrane propre autour de chacun d'eux, fig. 35. Il existe
un noyau unique dans chaque sporoblaste; la formation des spores est im-
possible à suivre, l'altération des stades de sporogonie parles réactifs étant
excessive. L'existence de la membrane du sporonte est assez éphémère.
Plus que dans aucune autre espèce la dimension des spores varie, fig.
36, 37; elles mesurent en moyenne 7X3, 5|j-; les macrospores sont très nom-
breuses,

4. Retour aux stades végétatifs. Les sporoblastes peuvent se trans-
former en stades végétatifs, sur place, sans qu'il y ait changement d'hôte.
Les FIG. 38 et 39 représentent des aspects du parasite que l'on rencontre
souvent. L'existence à l'intérieur de la membrane d'une substance amorphe
réagissant aux colorants comme la substance interstitielle des sporontes
indique que les parasites à ce stade dérivent du zygote. D autre part les
individus contenus dans la membrane ne peuvent être des sporoblastes; ils
sont trop grands pour donner des spores ordinaires; ils sont trop nombreux
et à contours trop irréguliers pour donner des macrospores; nous croyons
qu'après libération et par division nucléaire ils régénèrent les stades ini-
tiaux, plasmodiaux ou à noyau double. Cette façon de voir rend compte
de l'irrégularité dans la disposition de tous les stades parasitaires, de leur
mélange à l'intérieur de la tumeur.

3. Thelohania bracteata Strick.

a) Asp ect gén éral .

Les tumeurs sont à contours assez irréguliers. La disposition des di-
vers stades parasitaires à l'intérieur de la tumeur est parfois irrégulière, sans
ordre; d'autres fois il existe au centre une masse compacte de spores isolées.
L'aspect de la préparation rappelle alors celui reproduit par Strickland
(i3) dans son dessin 2, planche 2.

Parfois les spores sont disposées en petits ilôts isolés étoiles, formés
de huit spores. Les spores sont très régulières, subsphériques; elles ne sont
guère déformées par les réactifs et intensément colorables. Il existe des
macrospores peu nombreuses.

Il n'y a pas de véritable membrane enkystante autour de la tumeur.
Les noyaux sont entremêlés aux parasites et se présentent sous deux aspects
assez difiérents. Parfois ils sont relativement nombreux, et par analogie on

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM ig5

peut les identifier comme étant des noyaux de cellules graisseuses, mais
hypertrophiés, pouvant atteindre dix fois le volume normal; dans quelques
préparations où la tumeur est métastatique, il existe de petits amas parasi-
taires à l'intérieur de cellules graisseuses. D'autres fois on voit dans la tu-
meur de très grandes fentes ou des lacunes, remplies de granulations chro-
matiques et de quelques filaments; elles contiennent une ou plusieurs
sphères chromatiques nucléolaires.

La FiG. 40 représente une de ces lacunes choisie parmi les plus petites;
il faut les considérer comme des noyaux-hôtes considérablement hypertro-
phiés et altérés, mais il est difficile de les identifier; ils offrent certaines
analogies avec les noyaux musculaires qui, normalement assez volumineux,
plongent dans une masse de protoplasme très lâche et non différenciée, ac-
colée aux fibrilles musculaires.

b) Évolution.

L'évolution de cette espèce présente de grandes analogies avec celle
des deux espèces précédentes; qu'il nous suffise de noter quelques particu-
larités.

Tous les stades de l'évolution sont beaucoup plus petits que dans le
Th.fibrata.

Les plasmodies végétatives, fig. 41, sont excessivement rares dans nos
préparations; par contre la résolution en diplocarya, fig. 42,43, 46, est
fréquente. Il est possible que les sporontes plurinucléés puissent régénérer
des stades végétatifs comme cela s'observe dans l'espèce précédente; cela
expliquerait l'abondance des aspects représentés fig. 43 et 46.

Quand le zygote est formé par fusion des deux noyaux constituants,
une différentiation protoplasmique analogue à celle déjà observée plus haut,
a lieu; dans cette espèce elle débute par l'apparition de gros granules chro-
matiques périphériques, fig. 48, 49. Les divisions nucléaires sporogoniales
sont très simples, fig. 49-54, et on observe très nettement, à la télophase,
que les noyaux-filles sont formés de deux amas chromatiques élémentaires
et unis par deux filaments achromatiques, fig. 50, 54.

Les sporoblastes naissent au nombre de huit dans chaque sporonte,
fig. 56 57; ils contiennent un noyau unique à côté duquel apparaît un
granule chromatique très net, fig. 57. Les sporoblastes se transforment en
spores; quand elles sont mûres, elles possèdent une membrane épaisse, ré-
sistante; elles sont subsphériques et mesurent 3 -4X2,5 — 3 {y. Leur struc-

igô

Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

ture interne est parfois visible; elles possèdent deux vacuoles terminales
séparées par un disque protoplasmique lenticulaire, fig. 58. Dans la va-
cuole antérieure existent deux granules reliés en haltère par une tigelle;
dans la vacuole postérieure, on devine le filament spirale, qui paraît court,
à un tour de spire.

Il existe des macrospores peu nombreuses, fig. 59, 60.

4. Plistophora simulii L. et Spl.

Cette espèce est très variable. Elle se présente sous différentes formes
bien définies; nous avons été tentés d'établir pour elles des espèces distinc-
tes, mais outre que cette ?» systématisation " à outrance est sans portée au
point de vue de l'étude que nous poursuivons — étude du cycle et étude cyto-
logique, — la subdivision en espèces distinctes parait inopportune. Il existe
en effet entre les formes définies des formes de transition difficiles à ranger
dans l'une ou l'autre catégorie, et les différences entre elles ne portent pas
toujours sur des caractères assez importants pour justifier leur disjonction
spécifique. La différence spécifique étant cependant possible, nous ne vou-
lons pas décrire simultanément toutes les formes; nous en distinguerons
trois principales, faisant abstraction des formes douteuses ou intermédiaires.

LuTZ et Splendore (04, 08) ont décrit deux formes du Nosema simulii
type Plisiophora. Ils les désignent comme forme a et forme ;3. La descrip-
tion qu'ils en donnent ne nous permet pas de les identifier avec certitude à
celles que nous observons; nous désignerons donc ces dernières comme
formes y, 0 et i.

Forme y.

aj Aspect gén éral .

Les tumeurs, uniques ou multiples, sont arrondies, régulières, parfois
lobées, mais à lobes plus ou moins pédoncules et arrondis. A leur intérieur
les divers stades du parasite sont disposés avec une très grande régularité,
FIG. 61 : à la périphérie, des stades jeunes, puis une assise concentrique de
zygotes et de sporontes, puis une assise de sporoblastes et de spores grou-
pées en amas de 20 ou 3o, enfin au centre une accumulation considérable
de spores mûres indépendantes. La figure 3 pi. 2, de Strickland (i3) re-
produit à s'y méprendre l'aspect de la forme étudiée ici. — Dans des cas
de très forte infection on trouve, à côté des tumeurs régulières, des amas
irréguliers de parasites disposés sans ordre et envahissant des tissus divers.

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM ig7

La tumeur est parfois limitée par une membrane bien définie, fig. 63;
d'autres fois par une simple paroi comme dans le Th. fibrata ; d'autres fois
elle n'est pas limitée du tissu sain en général adipeux, fig. 62^. On observe
même quelquefois des spores mûres ou des sporoblastes en petit nombre
à l'intérieur des cellules graisseuses.

Dans toute la masse de la tumeur, mais surtout à la périphérie, existent
des noyaux un peu plus grands que les parasites eux-mêmes; ils sont ex-
cessivement nombreux assez réguliers et à gros nucléole, fig. 61, 63; parfois,
mais rarement, ils sont en cinèse (analogue à la fig. 103). Ces noyaux sont
certainement des noyaux-hôtes (nous reviendrons plus tard sur cette affir-
mation) et très probablement des noyaux de cellules graisseuses.

b) Évolution.

I. Multiplication végétative. Les stades plasmodiaux sont excessive-
ment rares, si tant est qu'ils existent, dans les tumeurs en pleine évolution.

La FIG. 62 représente le seul aspect plasmodial que nous avons ob-
servé dans toutes les préparations des différentes formes de cette espèce; et
c'est celle dont nous avons rencontré le plus grand nombre d'exemplaires.
Cette plasmodie est située à la limite de la tumeur, là où anormalement
du tissu sain est en voie d'envahissement. — La fig. 63*^ représente un
stade assez énigmatique, peut être plasmodial, rencontré dans une tumeur
de forme intermédiaire peu définie.

Tous les autres stades jeunes, et ils existent par milliers à la périphérie
de la tumeur, sont uninucléés; le noyau est presque toujours double, fig.
61, 64, 78. Quelle est l'origine de ces diplocaria? Par l'étude de cette forme
nous n'avons pu nous en faire aucune idée.

Les individus uninucléés à noyau simple se divisent-ils pour donner
deux individus uninucléés? Nous n'en avons pas trouvé la preuve. Des as-
pects comme ceux de la fig. 66^ pourraient le faire croire, mais il est plus
probable qu'ils représentent, vus de côté, une division analogue à celle
de la fig. QQb. Des aspects comme celui de la fig. 65 peuvent représenter
aussi bien un dédoublement du noyau simple qu'une division de ce no3'au
préludant à la division du protoplasme; ils sont d'ailleurs assez vagues.

Les divisions de noyaux doubles sont par contre excessivement fré-
quentes, FIG. 66 — 77. Les deux moitiés se divisent parallèlement et généra-
lement elles sont indépendantes l'une de l'autre; dans chacune il existe un
filament axial — peut-être est-il double; et lors de la télophase il est aisé

ig8 Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

de se rendre comjîte que chaque moitié est formée de deux masses chroma-
tiques élémentaires, fig. 66, 68, 69.

L'aspect de ces divisions est assez variable; très souvent il arrive que
durant l'anaphase il y a torsion à iSo" de l'axe de division, ce qui amène le
croisement des filaments axiaux ou des travées chromatiques, fig. 73—75;
il arrive aussi que les filaments axiaux paraissent se fusionner en leur por-
tion médiane, fig. 72. A la télophase les amas polaires sont formés de diplo-
carya-filles, fig. 75 77, et dès que la membrane nucléaire apparaît, le pro-
toplasme se segmente, fig. 77.

Il est impossible de trancher avec certitude la question de savoir si
chaque diplocarj'on se divise une ou plusieurs fois, suivant le processus
que nous venons de décrire. Étant donné qu'il existe un nombre énorme de
diplocarya et que nous n'observons leur formation que par des divisions de
type double, étant donné que ces divisions elles-mêmes sont nombreuses,
nous sommes conduits à croire à des divisions répétées d'un même di-
plocaryon.

2. Fonnalion du zygote. Un diplocaryon en apparence semblable à
tous les autres, mais généralement situé à quelque distance à l'intérieur
de la tumeur, se transforme en zygote. Le noyau formé de deux masses chro-
matiques très denses possédant peut-être un corpuscule central, fig. 78,
se développe. Tandis qu'il s'accroit, sa structure filamentaire devient de
plus en plus apparente, fig. 79, 80 (Hesse, 04). Les deux moitiés consti-
tuantes, d'abord accolées se fusionnent complètement et le zygote est formé,
fig. 81, 82. Dans le zygote on observe fréquemment des aspects synapti-
ques (Swarczewsky, 14, fig. 26 et 27); n'ayant pu écarter l'idée de la par-
ticipation des réactifs à leur production, nous ne voulons pas insister sur
ces stades.

3. Sporogonie. La première division sporogoniale est annoncée par
le fait que les éléments chromatiques du zygote s'orientent plus ou moins
régulièrement et qu'au milieu d'eux apparaît une travée axiale qui s'étire
prématurément et semble servir de guide aux éléments chromatiques,
fig. 83. Ce ou ces filaments axiaux se reconnaissent aisément dans quelques
préparations spécialement bien différentiées; les filaments décolorés fixent
le rouge Congo et apparaissent très nettement au milieu des éléments chro-
matiques colorés par l'hématoxyline.

En coupe transversale ces derniers rayonnent autour de la travée axiale.

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM IÇÇ

FiG. 84 (dessinée d'après la forme o). Au cours de l'évolution de la mitose,
la travée axiale apparait nettement formée de deux filaments, fig. 85, 86,
souvent ils supportent chacun un granule chromatic}ue, fig. 87.

Les divisions sporogoniales se succèdent en nombre variable, fig.
90, 91 ; il se forme 20 à 3o sporoblastes, puis ceux-ci, plus ou moins groupés
en rosace, fig. 92, 93, se transforment en spores.

Chaque sporoblaste possède un gros noyau, fig. 93; bientôt à côté de
lui apparaît dans le protoplasme un granule légèrement chromatique, fig.
94; son origine nucléaire n'est pas prouvée.

Autour de ce granule, qui s'accroît un peu, naît une grande vacuole que
nous considérons comme antérieure, fig. 95, 96 A ce moment apparaît
une vacuole postérieure, fig. 95, qui entoure parfois un prolongement pro-
toplasmique axial, fig 96. Le protoplasme se condense dans la partie mé-
diane de la spore en un disque biconcave, fig. 97 100; il devient très chro-
matophile. Le granule antérieur se développe en haltère, fig. 99, 100,
donnant probablement un appareil d'éclatement; dans la vacuole postérieure
apparait le filament spirale, fig. 98 — 100 (Schuberg, 10). A part ce détail,
la formation des spores dans le Plistophora simulii concorde absolument
avec celle que nous avons décrite chez le Glugea millleri et chez le
G. danileivskyi (Debaisieux, i5).

Nous ne reviendrons pas ici sur la discussion de ce processus, que nous
avons étudié en détail à propos de ces espèces.

Les spores mesurent en moyenne 6-8X3,5 — 5 ^t-. Il existe des macro-
spores.

La fig. 101 représente un aspect d'interprétation douteuse que nous
envisageons comme étant une régénération, par le sporonte divisé en sporo-
blastes, des stades initiaux à diplocaryon. Si cette interprétation est exacte,
elle conduit à conclure à la formation du diplocaiyon par segmentation
d'un seul noyau primitif.

Forme 0.

a) Aspect général.

Cette forme, dans les cas fréquents où son type est bien défini, se pré-
sente sous un aspect qui permet de la reconnaître à première vue de la
forme y. Là où les tumeurs sont régulières, arrondies, les divers stades du
parasite sont disposés avec ordre, mais pas en zones concentriques régulières.
Les stades jeunes sont groupés en cônes, dont les bases sont appliquées à la

200 Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

paroi de la tumeur. Dans ces cônes les stades les plus jeunes sont périphé-
riques, les plus avancés sont centraux; tout le centre de la tumeur est oc-
cupé par des spores mûres et il existe des traînées de spores qui séparent les
cônes et s'étendent jusqu'à la paroi, fig. 102.

Les stades de diplocaryon sont plus grands que dans la forme précé-
dente et les deux noyaux sont plus diffus, fig. 103—107. Les stades de
formation du zygote et les divisions sporogoniales sont également plus
grands que dans la forme y.

Les noyaux-hôtes, probablement graisseux, sont très nombreux, mais
plus irréguliers et plus volumineux que dans la forme précédente; ils pos-
sèdent très souvent trois et quatre sphérules chromatiques nucléolaires.

Les aspects de cinèse sont assez fréquents, fig. 103.

b) Evolution.

L'évolution générale est analogue à celle de la forme y

Le stade diplocaryon est très fréquent; les noyaux sont plus grands,
moins intensivement colorables et moins compacts que dans la forme pré-
cédente.

Parfois on est conduit à croire que les deux noyaux du diplocaryon
proviennent de la segmentation dun noyau unique, fig. 104—106; voyez
également les fig. ii5 - iig, Debaisieux (i3). Des aspects comme ceux de
la fig. 105 paraissent spécialement probants; dans chaque - demi-noyau **,
il existe un grumeau chromatique et les deux sont plus ou moins reliés l'un
à l'autre par une travée plus colorable. L'examen attentif des préparations
ne permet cependant pas d'affirmer l'exactitude de cette façon devoir; il
existe tant de stades d'interprétation douteuse que l'on est amené à douter;
il existe même des aspects où l'accolement de deux noyaux provenant d'in-
dividus mononucléés paraît probable. Il n'y aurait plus dans ce cas
d'autogamie, à quelque degré que ce soit.

Bref, il nous parait impossible de trancher la question de savoir si le
diplocaryon est toujours autogamique ou non.

La formation des spores aux dépens des sporoblastes, fig. 108 - il4, est
analogue à celle décrite plus haut. Parfois l'existence d'un canalicule excen-
trique unissant la vacuole antérieure à la postérieure est très nette, fig. 1 13.
Il existe des macrospores énormes, fig. 114.

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 20I

Forme =-.

Cette forme, que nous avons rencontrée trois fois, est caractérisée par
le fait que sur le vivant la tumeur, vue au travers du revêtement chitineux
de la larve, est rouge sang, et non pas, comme dans tous les autres cas, blanc
laiteux.

Une de ces tumeurs dilacérée et examinée à frais a montré que la colo-
ration était due à la présence dans les sporontes et même entre les sporo-
blastes d'une quantité de petits granules brun-rouge plus ou moins réfrin-
gents, animés de mouvements browniens.

Les deux autres tumeurs fixées et débitées en coupes ont donné des
préparations absolument semblables à celles du type o.

II. SYSTÉMATIQUE.

a) Genre.

Les microsporidies du Simiilium ont été dénommées Gliigea varions
par LÉGER (97); Strickland (i3) distingue trois espèces et leur conserve le
nom générique de Glugea. Ce nom n'est pas approprié. L'un de nous (i5)
a décrit deux espèces de Glugea caractérisées par la production de deux
sporoblastes aux dépens du zygote, et l'étude de l'espèce type de Glugea
anomala (Debaisieux, 16) révèle la même caractéristique.

LuTZ et Splendore (03,04) désignent ces microsporidies comme Thé-
loliania sp. ind., puis plus tard (08) comme Nosema simulii a, j3, y et S, les
deux premiers étant du type Plistophora, les deux derniers du type Thélo-
hatiia. Encore une fois le nom de Nosema créé par NâcELi (57) pour le
Nosema bombycis, espèce à évolution toute différente, ne convient pas ici ;
par contre les noms génériques de Plistophora (multisporées d'après Henne-
GUY et Thélohan, 92) conviennent parfaitement aux espèces étudiées ici.

b) U espèce.

Un caractère nous fait malheureusement défaut pour faire la compa-
raison des espèces étudiées ici avec celles décrites antérieurement : c'est la
longueur du filament spirale. Malgré des centaines d'essais faits par les
procédés les plus divers, nous n'avons jamais obtenu cette dévagination.
Dans nos recherches antérieures, nous l'avions provoquée une fois par l'éther
probablement dans le 7 hélohatiia Jibrata .

Malgré cette lacune nous croyons pouvoir établir comme suit les noms
spécifiques des espèces :

30

202 Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

I. I.a première espèce étudiée ici correspond indubitablement au
Glugca inultispora Strick. Cette identification est basée sur l'étude des des-
sins de Strickland (i3) ; quant à la diagnose qu'il en donne, elle est fautive,
parce que l'évolution du parasite en question lui était inconnue. Elle doit
être modifiée comme suit :

Zj'gotcs se formant à la périphérie du plasmodium végétatif; ils se dé-
veloppent sans se séparer l'un de l'autre et donnent chacun H sporoblastes
(nombre probable). Tous les sporoblastes se développent côte à côte; les
spores restent groupées en amas considérables. Spores de 4 — 5X3 |j^. Lon-
gueur du filament?

Cette diagnose justifie le nom de Thelohania multispora Strick. Il y a
une opposition qui pourrait paraître étrange entre le mot Thelohania (octo-
sporé) et le qualificatif multispora. Il ne nous semble pas cependant qu'il
y ait lieu de changer le nom spécifique, qui caractérise bien la particularité
de cette espèce.

2 et 3. La seconde espèce étudiée est octosporée, à spores assez gran-
des, à peu près deux fois aussi longues que larges; elle ressemble à la troi-
sième espèce, octosporée aussi, mais à spores plus petites subsphériques.

Deux espèces de microsporidies octosporées furent observées par
Strickland (i3) et par Lutz et Splendore (08). Elles diffèrent l'une de
l'autre par la même particularité que celle que nous observons ici. C'est ce
qui nous autorise à rapprocher notre forme 2 du Glugea Jîbrata Strick. et
notre forme 3 du Glugea bracteata Strick. et de les appeler Thelohania Jî-
brata et Thelohania bracteata.

Les diagnoses données ne correspondent cependant pas parfaitement,
loin de là. Pour le Glugea fibrata, Strickland donne comme suit la mesure
des spores : 6X3,5 \>, et Lutz et Splendore donnent pour le Nosema simu-
la $^ 5_5 5x3— 3,5 \i. Nous trouvons en moyenne 7X3,5 1^. D'autre part la
tumeur telle que la dessine Strickland montre des assises assez régulières,
tandis que nous observons des tumeurs formées de parasites très irrégu-
lièrement entremêlés.

Pour le Glugea bracteata, Strickland donne comme suit la mesure
des spores 3X2,5 i)-, filamicnt environ 18 [x, et Lutz et Splendore donnent
pour le Xoscnn siniulii -,-, 3,5X2,5:^., filament 35|^. Nous trouvons en moy-
enne 3—4X2.5-3 !s filament? La disposition des parasites dans la tumeur
telle que la dessine Strickland est plus régulière que celle que nous obser-
vons en général, et l'aspect qu'il dessire dans la fig. 4, pi. 2, ne fut jamais

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 203

retrouvé par nous. Nous considérons d'ailleurs ce stade de « myxospori-
dium -i comme impossible et croyons à une erreur de la part de l'auteur.

Strictement nous pourrions créer des espèces nouvelles différentes et
de celles de Strickland et de celles de Lutz et Splendore. Mais les études
sur les microsporidies nous ont habitués à rencontrer des variantes de des-
cription, dues et à des différences d'observation, et à des différences de
préparation, et à des variations du parasite lui-même. Aussi nous ne croy-
ons pas à l'existence de six Thélohania parasites du Snniiliiim et nous n'hé-
sitons pas, vu les analogies qui existent entre les descriptions qui en furent
données, à ne reconnaître que deux espèces

Voici les diagnoses que nous établissons suivant nos observations; elles
complètent celles données par d'autres.

Thélohania Jïbraia. Zygote donnant 8 spores; spores moyennes de
7x3,5 (j-; leurs dimensions sont très variables et il existe de nombreuses
macrospores. Tumeur irrégulière; les stades divers sont entremêlés sans
ordre.

Thélohania bracteata. Zygote donnant 8 spores; spores de 3-4X
2,5 - 3 |x; régulièrement subsphériques; peu de macrospores. Tumeur irré-
gulière; les stades divers, généralement entremêlés, sont fortement tassés,
ce qui donne un aspect très dense à la tumeur.

4. Quant à la quatrième espèce étudiée, elle est caractérisée par le
fait que le nombre de spores naissant du diplocaryon est supérieur à 8, elle
appartient dès lors au genre Plisiophora. Elle est à rapprocher de JSosema
simula a et |3 type Plistophora de Lutz et Splendore.

Comme nous l'avons vu plus haut, cette espèce est polymorphe; on y
trouve des variantes qui, si l'on poussait plus loin l'étude systématique, con-
stitueraient peut-être des variétés, peut-être des espèces. Pour les raisons
données plus haut (p. 196), nous ne parlons ici que de formes différentes et
gardons le nom spécifique de simulii créé par Lutz et Splendore et appli-
qué par eux aux formes a et 3 à rapprocher des formes y, l et e observées par
nous.

Le Plistophora simulii est caractérisé par : Zygote donnant plus de
spores, souvent vingt à trente. Spores ovalaires de 6-SX3,5 -5 p-, par-
fois des macrospores; tumeurs assez régulières, les parasites à divers stades
y sont régulièrement répartis. Espèce polymorphe.

31

204 Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

Forme y.

Stades jeunes disposés en assise annulaire à la périphérie de la tumeur;
parmi ces stades jeunes existent de très nombreux diplocarya à noyaux très
denses et très chromatophiles, fig. 64—78; noyaux-hôtes petits et très nom-
breux.

Forme 8.

Stades jeunes disposés en cônes à bases appliquées à la périphérie de
la tumeur; diplocarya à noyau généralement plus diffus; les différents sta-
des d'évolution du parasite généralement plus grands que dans la forme
précédente. Noyaux-hôtes très nombreux, généralement assez grands, à
plusieurs nucléoles.

Forme e.

Analogue à la précédente, tumeur rouge vif sur le vivant.
Comme nous l'avons dit plus haut, la distinction entre les formes n'est
pas toujours aisée; il existe des formes douteuses et intermédiaires.

III. DISCUSSION.

Nous avons exposé ailleurs comment nous croyons qu'il faut concevoir
le cycle évolutif des microsporidies (Debaisieux, i5, texte-fig. i).

Les recherches sur les microsporidies des larves de Simuliitm confir-
ment cette façon de voir ; leur évolution est analogue dans ses grandes lignes
à celle décrite pour les Glugea miilleri et danilewskyi: elle en diffère
cependant, d'une part par l'absence de certains stades, d'autre part par la
netteté plus grande de quelques périodes de l'évolution et par l'existence
d'aspects non observés ailleurs.

Les stades végétatifs à grand noyau unique et les multiplications végé-
tatives par multipartition simultanée (Swakczewsky, 14, Debaisieux, i5)
n'ont pas été observés dans les parasites des larves de Simulium.

Les noyaux-hâtes existent presque toujours à l'intérieur des tumeurs
parasitaires. Ils sont tantôt petits et assez normaux, fig. 61, 103, parfois
énormes, anormaux et hypertrophiés.

La signification de ces noyaux est très discutée. D'après certains au-
teurs (Mrazek, 97; Hesse, o5; Ferez, o5, 08; Stempell, 04, 10; Awerinzew
et Femor, II), ce seraient des noyaux végétatifs de microsporidies; par bour-

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 2o5

geonnement ils donneraient les stades jeunes. D'après d'autres (Korotneff,
62; Mercier, 08; Schrôder, og; Schuberg, 10; Mrazek, 10), ce sont les
noyaux hypertrophiés des cellules-hôtes. Déjà antérieurement nous nous
sommes ralliés à cette façon de voir en nous basant sur le fait que ces noy-
aux se divisent par des cinéses à type de métazoaires (Debaisieux, i3, fig.
120). Notre opinion se confirme par des arguments nouveaux :

1° Dans le Plistophora simulii, on observe des cinèses du type méta-
zoaire, fig. 103.

2° Dans les tumeurs de Thélohaniafibrata, il existe parfois des noyaux
hypertrophiés qui, à cause de leur structure, fig. 19, doivent nécessaire-
ment être considérés comme des noyaux de glande salivaire.

3° Dans le Plistophora simulii, il existe parfois une continuité envahis-
sante entre la tumeur et le tissu adipeux, fig. 62. Il est facile dans ce cas
de constater l'identité des noyaux graisseux et des grands noyaux contenus
dans la tumeur.

4° Dans certains cas d'infection intense par le Plislophofa simulii ou
par le Thélohania bracteata, la tumeur est métastatique et il existe de petits
amas de parasites dans des cellules adipeuses normales.

Les stades de diplocaryon analogues à ceux qui existent ici ont été plu-
sieurs fois décrits chez les microsporidies; Swellengrebel, 12, les considère
comme provenant d'une autogamie au premier degré; Swarczewsky, 14,
étudiant la même espèce, les considère comme formés par accolement de
deux noyaux plasmodiaux, par conséquent comme autogamiques à un degré
plus distant; Hartmann, 09, CAULLERvet Mesnil, o5, les observent chez les
Haplosporidies, mais ne se prononcent pas sur leur origine.

D'après ce que nous avons vu, les diplocarya sont autogamiques au pre-
mier degré chez le Thélohania multispora. Ils sont également autogami-
ques chez les Thélohania fibrata et bracteata, mais il est difficile de dire si
c'est au premier degré, c'est-à-dire si les deux moitiés d'un même noyau
plasmodial restent accolées, ou si c'est au troisième ou quatrième degré,
c'est-à-dire si deux des noyaux plasmodiaux peu nombreux s'accolent; rien
n'empêcherait d'ailleurs que les deux modes d'autogamie coexistent. En ce
qui concerne le Plistophora simulii, nous avons dit plus haut que beaucoup
d'aspects plaident en faveur de l'autogamie au premier degré, et son exis-
tence est très probable; l'existence de l'hétérogamie est cependant possible.

La formation de diplocarya et de zygotes par accolement de deux noy-
aux plasmodiaux a été décrite pour les mycétozoaires par Kr^nzlin, 07, et

2o6 Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

Jahn, o8. Il n'y aurait pas autogamie certaine dans ce cas, parce que la plas-
modie serait formée par fusion de plusieurs plasmodies plus petites. Dans
les microsporidies qui nous intéressent ici, aucun processus de fusion de
plasmodies ne paraît exister; d'ailleurs même pour les mycétozoaires l'exis-
tence de cette évolution paraît douteuse depuis que Jahn, ii, a modifié sa
première façon de voir.

Les divisions de diplocarya sont un phénomène constant dans toutes
les espèces étudiées ici. Il faut considérer comme telles les divisions d'as-
pect très particulier, fig. 66 - 77, dans lesquelles on observe deux divisions
bien distinctes évoluant parallèlement. Elles donnent naissance à deux di-
plocarya-filles, fig. 77-78.

On serait tenté d'attribuer à ces divisions, qui ont lieu avant la forma-
tion du zygote, la signification de divisions rédactionnelles. Les phénomènes
" peut-être réductionnels '- que nous avons antérieurement décrits, Debai-
siEux, i3, p. 56, n'ont jamais été observés dans le présent matériel. Nos
premières préparation ayant été brûlées, nous ne pouvons reprendre leur
étude; mais l'inconstance des aspects dessinés, Debaisieux, i3, fig. 57 — 71,
conduit à leur dénier une importance essentielle.

Le rôle réductionnel des divisions du diplocaryon est également hypo-
thétique, et le fait que les divisions doubles paraissent pouvoir se répéter
plus ou moins souvent ne milite pas en faveur de cette interprétation.

BIBLIOGRAPHIE.

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igo5 CaulUry et Mesiiil

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Debaisieux

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douce ; C. R. Ass. franc. Avanc. Se , 26* sess.
Ueber Pebrine und verwandte Myxosporidien ; Centralbl.
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Ueber Pebiine und verwandte Myxosporidien. Nachtrag;
Ibid., t. 36.

Ueber Pebrine und verwandte Microsporidien; Ibid., t. 46.
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EXPLICATION DES PLANCHES.

Les dessins ont été faits à l'aide de l'objectif apockromatiqne à immersion 2 mm. de
KoRiSTKA et de l'oculaire 18 de Zeiss = X 225o diam La projection à la chambre claire
a été faite un peu en dessous de la platine du microscope. Une échelle rendant compte du
grossissement est reproduite en tête de la première planche.

Les figures 19, 40, 61 et io3, dessinées à l'oculaire 6, sont réduites au [/3, et la
figure 102, dessinée à l'oculaire 2, est réduite au i/g par rapport à cette échelle.

Les dessins sont faits d'après des préparations fixées au BouiN et colorées à l'hématoxyline
de Heidenhain et au rouge Congo. Les exceptions à cette règle sont mentionnées après l'ex-
plication de la figure.

PLANCHE I.

Thélohania multispora.

FIG. 1. Portion périphérique de la tumeur; quelques stades plasmodiaux limi-
tés à gauche par une zone différentiée qui sépare la tumeur du tissu voisin (X).
et en contact à droite avec des amas de sporoblastes.

FIG. 2 — 3. Stades mononucléés avec divisions nucléaires.

FIG. 4 Plasmodie; les noyaux montrent des ébauches de division.

FIG. 5. Plasmodie; noyau en division.

FIG. 6. Plasmodie; les noyaux montrent des divisions doubles, qui représentent
sans doute des divisions de diplocaryon.

FIG. 7. Plasmodie en voie de cloisonnement; certains noyaux se dédoublent
pour former les diplocarya.

FIG. 8. Id en un stade plus avancé.

FIG. 9 — 10. Plasmodie avec diplocarya formés.

FIG. 11. Éparpillement des noyaux des diplocarya.

FIG. 12. Id.; le cloisonnement de la plasmodie est achevé; les diplocarya restent
unis par du protoplasme différencié.

FIG. 13. Zygotes issus d'une même plasmodie et restant réunis.

FIG. 14. Première division sporogoniale des zygotes.

2IO Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

FIG. 15. Télophases de la premièie division sporogoniale

FIG. 16. Télophases de divisions ultérieures.

FIG. 17. Amas de sporoblastes, provenus de plusieurs sporontes issus d'une
même plasmodie.

FIG. 18. Spores mûres; leur structure n'est pas visible.

PLANCHE II.

Thélohania fibrata.

FIG. 19. Portion périphérique de la tumeur; un noyau de glande salivaire y
est englobé. Les divers stades du parasite sont disposés sans ordre dans la tumeur;
les spores sont généralement aplaties et déformées. Dessin réduit au i/3.

FIG. 20. Stade plasmodial à noyaux peu nombreux. Fix. Zenker.

FIG. 21. Individus mononucléés et individus, binucléés au moment de la divi-
sion du protoplasme. La plupart des noyaux sont en diplocaryon ; ceux-ci se forment
peut-être par dédoublement nucléaire, peut être par accolement de deux noyaux (X)-
Fix. Zenker.

FIG. 22. Individus à diplocaryon. Fix. Zenker.

FIG. 23. Division nucléaire; les deux filaments unissant les noyaux-filles sup-
portent un corpuscule chromatique.

FIG. 24. Division de diplocarj'on ; il existe deux granules chromatiques Fix.
Zenker.

FIG. 25. Télophases et reformation de diplocarya-fiUes.

FIG. 26. Id. et stades faisant croire à la formation du diplocaryon par dé-
doublement nucléaire.

FIG. 27. Individus à diplocaryon à moitiés denses et bien distinctes.

FIG. 28. Zygote. Fix. Zenker.

FIG. 29. Première division sporogoniale.

FIG. 30. Secondes divisions sporogoniales.

FIG. 31. Id. Stade plus avancé; existence de deux granules polaires et d'un
filament achromatique médian. Fix. Zenker.

FIG. 32. Id. Télophase. Formation de quatre noyaux dans le sporonte, dans
le protoplasme duquel apparaît la différentiation qui amènera l'isolement des sporo-
blastes. Fix. Zenker.

FIG. 33. Troisièmes divisions sporogoniales.

FIG. 34 Huit sporoblastes formés d'un noyau et d'un peu de protoplasme,
unis les uns aux autres par du protoplasme différentié. — Il n'y a que six sporo-
blastes visibles sur le dessin.

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 211

FIG. 35. Sporoblastes individualisés. Fix. Zenker.

FIG. 36. Spore mûre; sa structure interne n'est pas visible.

FIG. 37. Macrospore. Fix. Zenker.

FIG. 38 39. Individualisation dans le sporonte de grands éléments mononu-
cléés, qui régénéreront probablement les stades végétatifs. Fix. Zenker.

Thélohania bracteata.

FIG. 40. Portion de la tumeur englobant un noyau-hôte hypertrophié, lacu-
naire. Les divers stades du parasite sont disposés sans ordre. Dessin réduit au i/3.

FIG. 41. Plasmodie avec noyaux montrant des ébauches de division.

FIG. 42. Plasmodie avec diplocarya. Début de cloisonnement du protoplasine.

FIG. 43. Isolement des individus à diplocaryon.

FIG. 44. Division nucléaire.

FIG. 45. Division nucléaire double à axes croisés.

FIG. 46. Développement des diplocarya. Fix. Zenker.

FIG. 47. Formation du zygote. Fix. Zenker.

FIG. 48. Zygote. Apparition à la limite du protoplasme de granules de dif-
férentiation.

FIG. 49. Première division sporogoniale. Accentuation de la différentiation
protoplasmique.

FIG. 50-52. Id. Télophase.

FIG. 53. Sporonte à deux noyaux. Fix. Zenker.

FIG. 54. Secondes divisions sporogoniales.

FIG. 55. Sporonte à quatre noyaux. Fix. Zenker.

FIG. 56. Sporonte à huit noyaux. Fix. Zenker.

FIG. 57. Sporoblastes réunis par huit. Chaque sporoblaste possède un gios
noyau et un petit granule chromatique dans le protoplasme.

FIG. 58. Spore mûre. Vacuole antérieure avec formation en haltère, vacuole
postérieure contenant le filament spirale apparemment court.

FIG. 59—60. Macrospores.

PLANCHE III.
Plistophora simulii.

FIG. 61. Portion périphérique de la tumeur. Les différents stades du parasite
sont régulièrement disposés en assises concentriques. Nombreux noyaux- hôtes petits
à gros nucléole et à nombreux granules chromatiques. Dessin réduit au i 3.

212 Paul DEBAISIEUX & Louis GASTALDI

FIG. 62. Individu plasmodial situé à la limite de la tumeur à un endroit où
elle envahit les cellules adipeuses voisines.

FIG. 63. Portion périphérique de la tumeur. On y voit trois noyaux-hôtes
des individus à diplocaryon et un stade énigmatique peut-être plasmodial. Une mem-
brane sépare la tumeur du tissu voisin. Dessiné d'après une tumeur à parasites de
forme intermédiaiie peu définie.

FIG. 64. Individus à noyau en diplocaryon.

FIG. 65. Stade énigmatique : peut-être dédoublement nucléaire pour former le
diplocaryon, peut-être division de diplocaryon.

FIG. 66. Divisions nucléaires. En b, division de diplocaryon, en a, la même
diMsion vue de profil ou bien division simple.

FIG. 67 74. Divers aspects de division de diplocaryon.

FIG. 75 — 77. Télophase et reconstitution de deux diplocarya-fiUes.

FIG. 78. Deux individus à noyau en diplocaryon.

FIG. 79-80. Développement du diplocaryon.

FIG. 81—82. Zygote.

FIG. 83. Ebauche de la première division sporogoniale. Les filaments chro-
matiques sont orientés; au milieu d'eux apparaît une travée médiane achromatique.

FIG. 84. Le même stade que le précédent vu en coupe médiane (ce dessin
est fait d'après la forme o).

FIG. 85 — 86. Première division sporogoniale.

FIG. 87-88. Id. Télophase.

FIG. 89. Sporonte à deux noyaux.

FIG. 90. Divisions sporogoniales ultérieures.

FIG. 91. Divisions sporogoniales à un degré plus avancé encore. Deux aspects
particuliers isolés de la masse des parasites.

FIG. 92—93. Individualisation des sporoblastes.

FlG. 94. Sporoblastes à gros noyau et à granule chromatique logés dans une
vacuole. Fix. sublimé-alcool.

FIG. 95 — 100. Stades successifs de la transformation du sporoblaste en spore.
Fix. Sublimé-alcool.

FIG. 101. Aspect établissant probablement le passage de la sporogonie aux
stades végétatifs à diplocaryon.

Plistophora simulii, forme o.

FIG. 102. Aspect général de la tumeur, les stades jeunes disposés en cône à
base appliquée contre la paroi, et entourés de toutes parts de spores isolées. Dessin
réduit au 1/9.

LES MICROSPORIDIES PARASITES DES LARVES DE SIMULIUM 2l3

FIG. 103. Portion périphéii(]ue de la tumeur montrant de nombreux noyaux-
hôtes assez grands à plusieurs nucléoles. Un de ces noyaux est en cinèse. Dessin
réduit au i/3. Fix. Zenker.

FIG. 104 — lOô. Stades de noyau simple et de diplocarya semblant indiquer
la formation de ces derniers par dédoublement des premiers,

FIG. 107. Divisions de diplocarya.

FIG 108. Deux sporontes à limites peu indiquées; dans l'un quatre noyaux
en division, dans l'autre éléments plus ou moins individualisés dont la disposition
indique la commune origine aux dépens d'un même zygote.

FIG. 109. Sporoblastes à gros noyau et à granule chromatique extranucléaire.
Fix. sublimé-alcool.

FIG. 110 — 118. Transformation de sporoblaste en spore. Fix. sublimé-alcool.

FIG. 113. Spore mûre. Fix. sublimé-alcool.

FIG. 114. Macrospore. Fix. sublimé-alcool.

32

1^1

TABLE DES MATIEKES

P.\GES

Introduction ........

187

Matériel et

Méthodes .......

188

I. Partie descriptive .......

189

I.

Thélohania multispora Strick. ...

189

a) Aspect général ...

189

b) Évolution ......

189

2

Thélohania librata Strick. ....

192

a) Aspect général .....

192

b) Évolution ......

192

3.

Thélohania bracteata Strick. .....

194

a) Aspect général ....

194

b) Évolution ......

iqS

4

Plistophora simulii L. & Spl . . . . .

196

Forme y .

196

a) Aspect général .....

196

b) Évolution ......

197

Forme 8 . . . ■ . .

199

a) Aspect général ....

199

b) Évolution . ....

200

II System

atique .......

201

III Discussion .......

204

Bibliograph

ie .

207

Explication

des planches .....

209

P/àmAe /

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IS

PDebaisieia ad nat clf!

Ùfh.nJù^ .■:^Sff/^ il'/.,.:'

.'■'.•f^i'.V7i3j7.S' Si'u/p.

Planche II

PDebsrsieux c/ L Gislaidi -ad nat n'e'

Litfi H. Jacob "^■G'il/es Brux

FBiesen^sn.'' C\^:i:p-

P/mcfie///.

'xé^Ùyi€^'-^ia^ -^mA.

'.cul. Sz^.et^oJ/iy.

JOi'/i

PDebaisteuK et L.GastaMc ad natdef.

LilhHJacob.'^Qinei-Bfu:.

F Biesemans Sculp.

LA CELLULE

LA CELLULE

RECUEIL

DE CYTOLOGIE ET D'HISTOLOGIE GÉNÉRALE

FONDÉ PAR

J . r> . OAKNOy, PROFESSEUR IJE BOTANlQfK ET I)H lUOLOCIH CHLLULAIRE,

PUBklÉ PAR

O'. VjriijOCjW, PROFESSEUR DE ZOOLOGIE HT o' EMBRYOLOGIE,

A l'Université catholique de Louvain

TOME ZXX

2d FASCICULE

I. Etudes sur les Microsporidies. ^ IV. Glugea anomala Monz.,

par Paul DEBAISIEUX.

II. Coelomycidium simulii, nov. gen.. nov. spec, et remarques

sur l'Amœbidium des larves de Simulium,

par Paul DEBAISIEUX.

III. Notes sur le Myxidium liberkûhni Bûtsch,

par Paul DEBAISIEUX.

IV. Haplosporidium i Minchiniai chitonis Lank ,
Haplosporidium nemertis. nov. sp.. et le groupe des Haplosporidies,

par Paul DEBAISIEUX.
V. Recherches sur la maturation des œufs parthenogenetiques

dans l'Aphis palmae.
par le B™ V. B. de BAEHR.

VI. Observations cytologiques sur le cytoplasme d'un Saprolegnia,

par A. GUILLIERMOND.

VII. La Spermatogenèse et l'Ovogenêse chez le Saccocirrus major,
suivies d'une discussion générale sur le mécanisme de la réduction chromatique,

par le B™ V. B. de BAEHR.

*x-i3K: : -4:0 fx-£»,iLCis.

LIERRE LOUVAIN

Typ de JOSEPH VAN IN & C'^ A. UYSTPRUYST, Libraire,
Granj'place, 3^i. rue de la Monnaie.

1920

Études sur les Microsporidies

IV. Glugea anomala Monz.

PAR

Paul DEBAISIEUX,

PROFESSEUR A LUNIVERSITÉ DE LOUVAIN.

(Mémoire déposé le lo janvier içi6.)

33

F

Etudes sur les Microsporidies, IV.

INTRODUCTION.

Historique. Les microsporidies de l'épinoche (Gaslerosteus acii-
leatiis L.) sont depuis longtemps connues et ont fait couler pas mal d'encre
(Labbé, 99); mais les problèmes que leur étude soulève sont loin d'être ré-
solus et le présent travail n'a la prétention ni de répondre à tous ni de les
solutionner définitivement.

Les tumeurs sous-cutanées de l'épinoche furent découvertes en Belgi-
que par Gluge (38); la nature parasitaire de ces tumeurs ne fut reconnue
que plus tard, et Moniez (87) donne au parasite le nom de Noseina ano-
mala Monz. Le nom générique Nosetna créé par Nëgeli (57) pour une
espèce toute différente (Ohmori, 12), le Nosetna bombycis, ne peut convenir
à l'espèce qui nous intéresse, et Thélohan (91) crée pour elle le genre Glu-
gea, rappelant ainsi l'auteur qui le premier décrivit les tumeurs qu'elle
provoque; il dénomme le parasite Glugea microspora Thél. Gurley (g3)
lui rend son nom spécifique primitif et l'appelle Glugea anomala Monz.
Ce nom est actuellement admis et le parasite des tumeurs de l'épinoche
constitue dès lors l'espèce type du genre Glugea.

Stempell (04) a fait l'étude détaillée de cette espèce; il décrit de nom-
breuses particularités qui cadrent difficilement avec les observations faites
sur l'évolution et la cytologie d'autres microsporidies. La description de
Stempell fut plusieurs fois mise en doute (Schrôder, og, Doflein, og,
Mrazek, 10, Schuberg, 10); cependant dans une note plus récente (10) il
maintient, sans apporter d'observations nouvelles son ancienne façon de
voir; il proteste même, sur un ton auquel nous ne sommes pas habitués
dans les travaux scientifiques, contre ceux qui -^discutent ou interprètent
des faits qu'ils n'ont pas vus eux-mêmes, façon de faire qui ne fait pas
avancer nos connaissances d'un pas! •'

2i8 Paul DEBAISIEUX

Ce qu'il avait vu lui-même avait malheureusement été observé sur du
matériel fixé au sublimé-alcool et au formol à 4 "/„ à action prolongée pen-
dant plusieurs années! C'est sans doute à la défectuosité de son matériel
qu'il faut attribuer ses erreurs et également au fait qu'il a étudié, comme
tumeur en pleine évolution et formant des métastases, un cas qui n'offrait
que des stades en dégénérescence et même en histolyse.

Un travail d'AwERiNZEw et Femor (ii) se rapporte à une période très
limitée du cycle d'évolution; il confirme en somme les idées de Stempell.

Enfin une très longue étude de Weissenberg (i3) réfute la plupart des
vues erronées des précédents auteurs et donne du Glugea aiiomala une des-
cription qui cadre beaucoup mieux avec ce qui est connu des autres micro-
sporidies.

Nos recherches nous ont conduit à confirmer une grande partie des con-
clusions de "Weissenberg; quelques-unes nous paraissent prématurées;
d'autre part, malgré la surabondance des détails qu'il observe, la plupart des
phénomènes cytologiques et le processus de fécondation lui ont échappé.

Le mâî/cTze/ qui servit à cette étude provient d'un ruisseau des envi-
rons de Louvain; parmi les milliers d'épinoches pêchées il n'y en avait
guère que 3 ou 4 7o d'infectées; nous avons pu nous en procurer environ 70.
Une soixantaine de tumeurs furent fixées et soumises à l'examen microsco-
pique; les autres servirent à l'examen sur le vivant et à des essais d'infec-
tion artificielle.

Les méthodes furent variées : les fixateurs de Zenker, de Bouin, la mo-
dification alcoolique de ce dernier conseillée par Brasil (o5), de Benda de
Flemming faible et le sublimé-alcool à chaud furent tour à tour employés.
Les deux premiers nous donnèrent les meilleurs résultats au point de vue
de la conservation des figures cytologiques; le sublimé-alcool, ainsi que nous
l'avons observé pour beaucoup d'autres objets, donne une fixation trop éner-
gique avec coagulations et condensations intranucléaires irrégulières et in-
formes. Dans beaucoup de cas nous nous sommes bien trouvé de fixer les
kystes après en avoir incisé la membrane, ce qui favorise la pénétration des
réactifs; la fixation de kystes intacts est cependant requise pour ne pas
altérer la disposition du contenu.

Comme colorants nous ne citerons que l'hématoxyline de Heiden-
HAiN avec ou sans coloration au rouge Congo.

ÉTUDE SUR LES MICROSPORIDIES, IV 2ig

Un grand nombre d'autres colorations furent essayées ou employées
dans un but spécial; nous les rappellerons au cours du mémoire.

Disons ici que la mise en évidence du filament spirale de la spore fut
obtenue une fois par l'action pendant 24 heures de la glycérine en solution
de 10 à 20 %; le plus grand nombre des filaments furent dévaginés. L'exjié-
rience fut reprise souvent par le même procédé, et bien d'autres réactifs
furent essayés; tous ces nouveaux essais restèrent infructueux.

Ce travail est divisé en deux parties : dans la première, descriptive
surtout, nous ne discuterons qu'occasionnellement l'un ou l'autre point d'im-
portance secondaire, évitant ainsi de l'allourdir par des considérations néces-
sairement un peu longues et pas toujours concluantes. Ces considérations
seront rassemblées dans une seconde partie, de discussion.

A. PARTIE DESCRIPTIVE.
I. Aspect macroscopique.

Les tumeurs se présentent généralement isolées ; parfois il en existe
deux ou trois sur le même individu, mais elles sont indépendantes les unes
des autres. Leur siège est excessivement variable, soit sur une nageoire
paire ou impaire, soit à la paroi de la cavité branchiale, soit à la cornée,
soit sur une partie quelconque de la surface du corps. Nous n'en avons pas
trouvé sur les organes internes. Leur aspect varie, mais en somme assez
peu. Tantôt la tumeur est une sphérule parfaite, blanche, pouvant atteindre
3 millimètres, accolée au corps par une base rétrécie; tantôt elle forme une
protubérance à peine hémisphérique, sans coloration particulière, la pig-
mentation de l'épiderme étant restée intacte; dans quelques cas ces pro-
tubérances sont plus ou moins déprimées et on les diagnostique à pre-
mière vue comme des tumeurs vidées de leur contenu.

Une fois nous avons pu suivre l'évacuation du contenu d'une tumeur
hémisphérique; par une déchirure de la peau le contenu s'écoula et pendant
deux jours des lambeaux blanchâtres flottèrent rattachés aux lèvres de la
plaie; après restauration une petite tumeur sphérique d'un demi-millimètre
siégeait au niveau de la cicatrice; elle disparut après une quinzaine de jours
sans laisser de traces (Thélohan, 92, Braun, g3j.

La forme sphérique peut probablement se détacher en entier du corps
et ne crever que ultérieurement (Thélohan, 90). Enfin, dans un seul cas
nous avons observé une tumeur mùriforine à 6 ou 7 kystes accolés.

220 Paul DFBAISIEUX

A la dissection les tumeurs sphériques se séparent facilement du corps;
quant aux tumeurs plus profondes, après incision de la peau elles appa-
raissent comme les précédentes parfaitement blanches, presque sphériques,
et peuvent être aisément énucléées; on les fait sortir en entier de leur loge.
Il semble dès lors que le kyste entouré de sa membrane soit sans rapport
avec le tissu voisin ; nous verrons cependant plus loin qu'en fait des lam-
beaux du tissu conjonctif sont entraînés avec le kyste, à la membrane du-
quel ils adhèrent.

II. Aspect microscopique.

La tumeur est logée dans le derme entre les faisceaux de cellules con-
jonctives fibrillaires riches en substance connective; des lacunes remplies
de sang avoisinent généralement la paroi du kyste; il existe souvent une
couche de tissu conjonctif à cellules modifiées, en assises concentriques;
l'èpiderme est normal.

Autour des tumeurs en plein développement et nous n'envisagerons
momentanément que celles-là, il existe une membrane continue de 5 à lo i^-
d'épaisseur, qui sépare le kyste du tissu conjonctif voisin, fig. 1, 2, 5. Très
élective [)our la plupart des colorants, cette membrane apparait plus ou
moins hyaline après décoloration ; elle est de structure feuilletée. On la con-
sidère souvent comme appartenant en propre à la tumeur et formée par
elle (Stempell, 04, VVeissenberg, i3); cette façon de voir est loin d'être
prouvée (voir 2'' partie, § II).

Dans la tumeur proprement dite on peut distinguer trois zones ; la pre-
mière — contre la membrane — est bien distincte par rapport à la seconde;
celle ci est sans limites nettes par rapport à la troisième. Les deux dernières
sont schématiquement séparées l'une de l'autre pour la facilité de la des-
cription.

I. Immédiatement sous la membrane existe une assise continue de
protoplasme, fig. 1, 2. Cette zone d'épaisseur variable est nettement limitée
du côté de la membrane; du côté interne, elle se prolonge entre les divers
éléments figurés de la seconde zone. Dans les préparations surcolorées, on
note que les mailles du réseau protoplasmique sont chargées d'une infinité
de fines granulations; elles se décolorent quand la différentiation est con-
duite à point. L'aspect de cette zone est alors uniforme ; cependant dans
quelques préparations le réseau est moins apparent à la périphérie, fig. 1,

ETUDES SUR LES MICROSPORIDIES, IV 221

et parfois aussi l'accumulation des granules colorables s'arrête à quelque
distance de la membrane.

Dans cette zone de protoplasme uniforme existent parfois quelques
enclaves excessivement ténues quelques très petits granules chromatiques
entourés d'une aréole claire, fig. 6, 2" partie i> II.

2. Dans la seconde zone, le protoplasme fondamental contient de très
nombreux noyaux fig. \ — 4. Il n'y a pas de limite réelle entre cette zone
et la précédente, mais elles paraissent être séparées tant les noyaux appa-
raissent nombreux en un même niveau.

A première vue on observe de grands no3''aux ; ils sont tantôt s(ihéri-
ques, à beau réseau chromatique et à un ou plusieurs globules nucléolaires,
FIG. 2, 3; tantôt très irréguliers, presque déchiquetés, en lambeaux allon-
gés, ils paraissent être en dégénérescence, fig. l, 3.

Entre ces gros noyaux en existent une infinité de petits; les uns, situés
surtout du côté de la périphérie, sont isolés; ils plongent dans un espace
clair et sont entourés d'une petite couche protoplasmique distincte du pro-
toplasme fondamental, fig. 1, 2: d'autres sont réunis en plasmodies. Parmi
celles-ci, beaucoup sont fortement allongées, disposées en faisceaux plus
ou moins entortillés, fig. 4; d'autres sont subsphériques. fig. 1.

A la partie interne de la zone moyenne se trouvent de grandes vacuoles,
qui contiennent des individus uninucléés provenus de la fragmentation
des plasmodies et tous les stades de sporulation, fig. 4.

3. Enfin toute la zone centrale du kyste est bourrée de spores mûres.
Elles sont réunies en nombre variable, mais restreint, dans de petits kystes
sporaux tassés les uns contre les autres, séparés seulement par une mince
membrane qui représente probablement le dernier reste des travées du pro-
toplasme fondamental. Au centre de la tumeur, ces membranes elles-mêmes
disparaissent et toutes les spores sans être tassées, ne forment plus qu'un
seul ensemble.

Cette troisième zone constitue la partie de loin la plus volumineuse
de la tumeur; son diamètre est dix fois, vingt fois supérieur à celui des
zones périphériques. Comme nous lavons déjà dit, elle se confond plus ou
moins avec la seconde zone ; on rencontre des kystes sporaux à la périphérie
de la seconde et des prolongements protoplasmiques dans la troisième; il
existe même des ilots d'éléments jeunes, qui paraissent perdus au centre du
kyste.

Nous étudierons d'abord l'évolution des éléments qui sont certainement
parasitaires, puis les grands noyaux hypertrophiés.

222 Paul DEBAÎSIEUX

III. Les stades parasitaires.

a) Multiplications végétatives et formation des plasmodies.

Les plus jeunes éléments parasitaires sont uninucléés, fig. 7; autour
du noyau chromatique il y a généralement un espace clair, puis une petite
zone de protoplasme distinct du protoplasme voisin. Une membrane limi-
tante est parfois difficile à reconnaître, tant ces éléments sont petits; elle
apparaît clairement dans des parasites plus âgés, fig. i3.

Presque toujours ces noyaux sont en voie de division; on y distingue
deux granules plus sombres situés en deux pôles opposés; ils deviennent
de plus en plus nets, apparaissent réunis entre eux par une mince travée;
ils diminuent de volume, tandis que les éléments chromatiques se ramassent
à l'équateur, fig. 8.

Quand la situation polaire des granules et la disposition équatoriale
des éléments chromatiques sont acquises, il semble que les granules soient
doubles et qu'il y ait deux filaments unissants. Le phénomène n'est pas cer-
tain ; il se devine plutôt qu'il ne se voit, mais est rendu probable par l'aspect
de 1 anaphase. Pendant l'anaphase, les éléments chromatiques semblent dit-
fluer sur deux filaments directeurs, fig. 9; arrivés au pôle, ils sont nette-
ment groupés en deux masses distinctes, fig. lO; entre les deux amas po-
laires, deux filaments chromatiques existent; ils supportent parfois un ou
deux granules médians, fig. 10.

A la télophase les deux noyaux-filles se reforment; ils restent longtemps
unis par une travée légèrement colorable et enfin se séparent, fig. ii, 12.

La division, au lieu d'être complète peut n'être que nucléaire et il y a
alors formation de plasmodies. On en rencontre à 2, 4, 5 ... 3j noyaux, fig.
1. 3, 4. Ces plasmodies prennent une forme très allongée ne possédant que
un ou deux noyaux sur un même plan transversal; leur protoplasme est
nettement distinct du protoplasme voisin; parfois une mince zone claire
l'en sépare. Les divisions nucléaires y sont analogues à celles déjà décrites ;
elles se succèdent rapidement et leur grand nombre permet d'étudier aisé-
ment tous les stades, fig. 13— 15. Souvent il y a, comme dans le premier
cas d'ailleurs, des aspects fusoriaux, fig. 3, 13.

Après un certain nombre de divisions nucléaires, variable suivant les
individus, les plasmodies perdent leur forme allongée, se ramassent sur elles-
mêmes, et deviennent globuleuses, fig. 16. Dès lors les noyaux ne se divi-

ÉTUDES SUR LES MICROSPOKIDIES, IV 223

sent plus; ils plongent dans le protoplasme entourés d'une aréole claire; il
est impossible à cause de leur petitesse de suivre les processus qui se pas-
sent en eux, mais très fréquemment ils montrent des aspects de dédouble-
ment, FiG. 16—19. Jamais nous n'avons observé d'aspect qui permette de
croire qu' au lieu d'un dédoublement il existe un accolement de deux
noyaux.

La plasmodie se résout en individus plus simples; par cloisonnement
irrégulier du protoplasme, il se forme des plasmodies paucinucléées, fig.
17—19, puis uninucléées, fig. i9, 20. Les individus binucléés sont très
fréquents, fig. 19. Ici aussi on serait tenté de croire à l'existence de deux
individus conjugués ou tout au moins de deux noyaux-sœurs destinés à se
fusionner. Après de longues et patientes observations, nous avons dû nous
résoudre à conclure qu'il n'en est rien ; les individus binucléés ne sont qu'un
stade transitoire de la résolution des plasmodies en individus uninucléés.

b) Formation des sporoblastes.

Les plasmodies se résolvent en individus uninucléés à noyau double,
FIG. 20, 21; ils sont probablement le siège d'un processus de fécondation;
ultérieurement ils se divisent pour donner deux s[)oroblastes. La significa-
tion qui est attribuée à ces stades du parasite sera discutée plus tard. Nous
considérons comme zygotes formés par un diplocaryon autogamique les
individus provenant de la résolution de la plasmodie et comme sporontes
ces même individus dès qu'ils montrent une ébauche de division en sporo-
blastes.

Les zygotes, Vacuolenzellen de "Weissenberg (i3), plongent en nombre
variable dans la grande vacuole occupée primitivement par la plasmodie,
FIG. 21. Cet espace est nettement limité, mais il est difficile de dire s'il
possède une membrane propre. A suivre sa formation il semble que non.
Quoi qu'il en soit, il existe une quantité d'espaces clos, dans lesquels se dé-
velopperont les spores et que 1 on peut dénommer les kystes secondaires.

Les copulas autogamiques ne possèdent qu'un seul appareil nucléaire,
mais ce noyau apparaît double, et ce très nettement, au point que parfois
les deux constituants sont séparés l'un de l'autre, fig. 20. Comme nous
l'avons dit, aucune observation ne nous permet de croire à l'accolement de
deux noyaux primitivement distincts.

Lorsque ce que nous supposons être un processus de fécondation (2"^
partie, § v) est achevé, nous nous trouvons en présence d'un sporonte dont

34

224 **^"' DEBAISIEUX

le noyau unique se réduit par une mitose unique en deux sporoblastes. Ce
fait est à rapprocher de ce qui s'observe si nettement chez les microspori-
dies des larves de Simulium (Debaisieux et Gastaldi, i5), où une grande
copula, nettementdédoublée, se transforme en un zygote unique, qui aussitôt
se divise par une mitose simple.

La division nucléaire sporoblastique se présente exactement sous le
même aspect que celle décrite dans les plasmodies, fig. 22 -29 : apparition
de deux granules très chromatiques réunis en haltère; mise en place de
ces granules aux pôles et condensation à l'équateur des éléments chromati-
ques, FIG. 22, 23; anaphase suivant deux filaments directeurs, fig. 24, et
enfin à la télophase existence de deux masses chromatiques en chaque pôle
FIG. 25-29.

Une particularité cependant : avant la restauration des deux noyaux-
filles, on voit apparaître dans le protoplasme deux plages plus chromatiques
que l'on peut suivre ultérieurement jusque dans le sporoblaste, fig. 25—27,
29-31.

Par étranglement chaque sporonte donne deux sporoblastes, fig. 29.
Rien n'autorise à croire à la répétition du processus et à la formation de
4 ou de 8 sporoblastes par sporonte (Swarczewsky, 14). Une fois nous
avons vu deux divisions sporoblastiques dans un même sporonte. fig. 27.
Ce cas tout à fait exceptionnel doit être interprêté comnie provenant d'une
copula autogamique double, deux noyaux étant restés anormalement grou-
pés dans une même masse de protoplasme par fragmentation incomplète de
la plasmodie.

c) Formation des spores.

Les spores se forment de la même façon que dans Glugea danilen'skyi
et G. miillcri (Debaisieux, i5), mais les différents stades sont difficiles à
suivre.

Le noyau du sporoblaste, d'abord double à la télophase de la division
sporogoniale, fig. 29, 30, devient simple ultérieurement, fig. 31.

Les enclaves chromatiques du protoplasme qui apparaissent lors de la
division sporogoniale, fig. 25—27, 29—31, pourraient donner naissance au
granule extranucléaire, d'où dériveront les éléments de la vacuole antérieure
de la spore; mais il nous paraît beaucoup plus probable qu'elles doivent
être comparées aux différentiations du protoplasme qui apparaissent dans
les sporontes de Thélohania et de Plisiophura (Debaisieux et Gastaldi, i5)
et qui interviennent dans la formation des enveloppes sporales.

ÉTUDES SUR LES MICROSPOKIDIES, IV 225

Dans les sporoblastes naissent une vacuole antérieure et une posté-
rieure. Le noysiu paraît rester longtemps dans la vacuole postérieure, fig.
33, 35: il est probable que finalement il disparaît dans la zone protoplas-
mique lenticulaire qui existe entre les deux vacuoles, fig. 37, 38.

Dans la spore mùie il existe i) une petite vacuole antérieure, dans la-
quelle se trouvent logés deux granules chromatiques réunis par une mince
travée, 2) une vacuole postérieure plus volumineuse, dans laquelle est en-
roulé le filament spirale, 3) entre les deux un disc[ue biconcave de proto-
plasme, FIG. 37, 38.

ci) Retour aux stades initiaux.

L'hypothèse de la régénération des stades jeunes aux dépens des spo-
rontes sans transformation en spore, — hypothèse que nous avons émise
à propos des microsporidies du Simulium et des Ghigea du Tropidonotus
et du Gammarus (Debaisieux et Gastaldi, i5, Debaisieux, i3, i5) —
trouve dans cet objet un argument nouveau et de grande valeur.

On est frapoé de rencontrer parfois dans les préparations des individus
volumineux, à noyau unique relativement énorme et très dense, fig. 46.
Ces stades sont rares; nous n'en avons guère observé qu'une quinzaine
d'exemples; ils se trouvent dans la zone moyenne de la tumeur, parfois
renfermés dans un kyste secondaire, parfois logés dans le protoplasme fon-
damental ; ils sont toujours nettement distincts, à contours nets, isolés du
tissu voisin. Ces stades sont analogues aux stades végétatifs à grand noyau
et à multiplication simultanée décrits par Swarczewski (14) dans le Glugea
gigjntea, retrouvés par nous dans le Ghigea danilewskyi (14) et également
dans le Plistophora periplanetœ (observations non publiées).

L'origine de ces parasites se rattache indubitablement aux sporontes.
Reprenant l'étude de l'évolution du sporonte, nous voyons en effet qu'ils
ne se transforment pas toujours en deux spores.

On rencontre fréquemment des divisions qui, au lieu de se faire suivant
le grand axe du sporonte, fig. 24, 25, évoluent excentriquement, fig. 39.
Il convient cependant de n'attribuer que peu d'importance à cette diffé-
rence d'allure; quoiqu'elle soit très nette, l'étude des préparations ne nous
permet pas d'écarter l'hypothèse d'une intervention des réactifs dans sa pro-
duction. Mais on rencontre aussi des sporontes dans lesquels les divisions
nucléaires se succèdent sans division du protoplasme, et cela sans qu'il
puisse être question de la production de plusieurs spores, fig. 40—42. Dans

226 Paul DEBAISIEUX

ces cas on se trouve en présence de la formation, aux dépens des sporontes,
de plasmodies analogues à celles que nous avons rencontrées au début
de l'évolution.

On rencontre aussi des sporontes qui se développent énormément avec
ou sans division nucléaire, fig. 43, 44. Enfin il existe des parasites logés
dans le protoplasme fondamental, mais absolument analogues à des spo-
rontes libérés du kyste sporal, fig. 45; leur noyau croit progressivement
jusqu'à atteindre l'aspect de la fig. 46.

Ces observations conduisent à conclure :

1° que le sporonte peut dans le kyste secondaire donner naissance à
des plasmodies et de la sorte régénérer le cycle;

2° que sorti du kyste secondaire le sporonte peut évoluer de même
dans le protoplasme fondamental; ce processus, qui apparaît très probable
par l'étude des préparations, ne pourrait pas être affirmé d'une façon irréfu-
table, si l'on ne connaissait pas les cas intermédiaires du 1°. On pourrait
en effet confondre des sporontes avec des éléments uninucléés jeunes;

3° que le sporonte peut donner naissance à un individu uninucléé à
noyau énorme qui se transforme probablement en plasmodie par multi-
partition simultanée. Nous n'avons pas observé cette transformation, ce qui
s'explique par la rareté des stades en question; mais on peut déduire cette
conclusion avec grande probabilité par ce qui fut observé dans des espèces
voisines (Gliigea gigantea et Glugea danilewskyi).

IV. Les noyaux hypertrophiés et le protoplasme fondamental.

Il existe de grands noyaux très variables, nombreux dans la zone moy-
enne de la tumeur. Ils sont surtout abondants à la limite de la zone externe
et moyenne, mais il y en a également qui sont logés beaucoup plus profon-
dément. Ils plongent directement dans le protoplasme fondamental.

Ils sont d'aspect très variable; tantôt plus ou moins sphériques, petits
ou grands, à réseau chromatique lâche et bien marqué, à un ou plusieurs
globules nucléolaires, fig. 2. 3; tantôt très irréguliers, ils paraissent étirés
et sont presque déchiquetés en lambeaux allongés et entortillés, fig. i, 3. Le
contenu nucléaire est dans ce dernier cas plus dense, finement réticulé, et
il s'y trouve de nombreuses enclaves chromatiques de toutes dimensions;
les limites nucléaires sont parfois fort vagues ; les enclaves se rencontrent
parfois isolées dans le protoplasme fondamental. Le dernier aspect répond
parfaitement à l'image d'un noyau en dégénérescence fig. 3, 48.

ETUDE SUR LES MICROSPORIDIES, IV 227

La dimension de ces noyaux est très variable; ils sont parfois énormes,
ils sont parfois tout petits, de la grandeur même des parasites uninucléés,
dont il est fort malaisé de les distinguer. A ne regarder que ces stades pe-
tits, on pourrait admettre l'origine des noyaux hypertrophiés et des jeunes
éléments parasitaires aux dépens de noyaux primitifs semblables (Awerin-
ZEw, lo, Weissenberg, i3).

Comme l'a établi Weissenberg (i3), en opposition avec Awerinzew
et Femor (io) et Stempell (04), les grands noyaux dégénèrent et n'ont au-
cun rapport avec la formation des sporontes.

Dans quelques préparations, on observe dans le protoplasme de la zone
externe, de très petits granules chromatiques entourés d'une petite vacuole,
FiG 6; ils sont distincts des très nombreuses granulations qui se décolorent
après différentiation convenable. Ils sont souvent au nombre de quatre
réunis deux à deux par un filament à peine perceptible et disposés en croix;
d'autres fois ils sont à deux réunis par un filament unissant; d'autres lois
encore ils sont isolés ou bien ils sont groupés en nombre très variable et irré-
gulièrement disposés. Parfois, mais très rarement, ces amas chromatiques
rappellent par leur disposition et en petit les divisions nucléaires du para-
site FIG. 6.

La signification de ces éléments figurés contenus dans le protoplasme
fondamental reste énigmatique. Nous avons cru longtemps qu'il fallait les
regarder comme donnant naissance aux grands noyaux hypertrophiés, et
même aux noyaux parasitaires proprement dits. Il faudrait en ce cas les
considérer comme des chromidies ; mais les cas de formation chromidiale
des noyaux que nous connaissons ne ressemblent guère à ce que nous voyons
ici; puis d'une part les agglomérats de granules sont si irréguliers et si va-
riables, et d'autre part leur existence est si inconstante qu'il nous parait
impossible d'admettre qu'ils donnent naissance à des noyaux de structure
simple et constante. Si ces granules chromatiques ont un rapport quelcon-
que avec les noyaux des kystes, ils représentent peut-être les derniers sta-
des de leur désagrégation. Cette hypothèse explique et leur variabilité et
leur inconstance.

V. Tumeurs d'aspect différent.

Nous n'avons considéré jusqu'à présent qu'un seul type de tumeur,
celui de la tumeur en voie d'accroissement normal, renfermant les éléments
parasitaires en pleine évolution.

228 Paul DEEAISIEUX

Il nous faut parler maintenant des tumeurs jeunes et des tumeurs en
dégénérescence.

Tumeurs jeunes.

Nous n avons pas eu la chance de découvrir les premiers aspects de
développement de la tumeur. La plus jeune que nous ayons observée me-
sure environ 70 i^, la fig. 53 en reproduit à peu près la moitié. Elle est logée
à côté de deux tumeurs plus grandes mais complètement indépendantes et
le fait qu'elle ne contient que des stades tout jeunes du parasite prouve
qu'elle est au début de sa formation. Elle est plus petite que la jeune
tumeur observée par Weissenberg (i3) et elle en diffère essentiellement.

Cet auteur observe une limite très nette entre la tumeur et le tissu
conjonctif, et il en conclut à la nature plasmodiale de la membrane future;
nous observons au contraire que la limite de la tumeur est vague et que la
membrane. (]ui apparaît déjà très mince, se continue en entier avec des
travées du tissu conjonctif, fig. 53'^.

Weissenberg observe des noyaux végétatifs jeunes (Primârkerne) et
des plasmodies jeunes (Primârschlauche), dont il fait deux éléments nette-
ment différents, quoique dérivant l'un de l'autre, et croit que les plasmo-
dies binucléées pourraient provenir par fusion de deux « Primârschlauche ^
uninucléés; nous observons ces même éléments, irjais ne voyons entre eux
d'autre différence que celle qui distingue deux stades successifs de la mul-
tiplication végétative.

Enfin Weissenberg ne voit pas de noyaux hypertrophiés, mais des tra-
vées plus denses du réseau fondamental chargées de granules chromatiques,
qui dérivent, dit-il, des - Primârkerne « et donneront plus tard des noyaux
hypertrophiés. Nous voyons au contraire des noyaux hypertrophiés nom-
breux, parfaitement formés.

Nous aurons l'occasion de revenir sur ces observations dans la seconde
partie.

Tumeurs en dégénérescence.

Il existe de nombreuses formes de tumeurs à première vue très diffé-
rentes des tumeurs normales. Leur étude comparée montre qu'elles se
rattachent toutes au type habituel, dont elles ne sont que des aspects ré-
gressifs.

La régression de la tumeur peut se faire alors que la membrane en-
kystante est intacte, fig. 48. Dans ce cas les divers stades jeunes du para-

ETUDES SUR LES MICROSPORIDIES, IV 22g

site n'existent plus, ou tout au moins n'apparaissent pas n'étant pas électifs
pour les colorants. 11 existe de petites masses de protoplasme plus ou moins
isolées — des reliquats de plasmodies, — qui sont sans noyaux ou à nom-
breux petits granules; parmi elles il y a de grands noyaux hypertrophiés,
dont le contenu est morcelé en très nombreux granules chromatiques.

Dans d'autres cas la membrane a éclaté (cas de la fig. 47) ou est partiel-
lement résorbée (cas de la fig. 49) et le kyste plus ou moins vidé de son
contenu possède une paroi affaissée, fig. 47. La membrane elle-même,
qui à certaines places est normale, est ailleurs très dilatée, tibrillaire, vague-
ment limitée par rapport au conjonctif voisin ; et tandis que des cellules
conjonctives se rencontrent dans l'épaisseur de la membrane, il y a d'autre
part des faisceaux de fibrilles de la membrane qui se perdent dans le tissu
conjonctif, fig. 47. Enfin dans certaines tumeurs la membrane a complète-
ment disparu et le kyste est limité par une épaisse paroi conjonctive,
FIG. 51.

A l'intérieur de ces tumeurs en régression existent de très nombreuses
cellules conjonctives et des leucocytes, fig. 47, 50, 51 ; le fait que ces élé-
ments appartiennent à Ihôte est démontré par ce que leur noyau se divise
par cinèse de métazoaire, fig. 5i, /. Dans les tumeurs existent encore des
reliquats de noyaux hypertrophiés bien reconnaissables, fig. 50 b, et de
nombreux éléments en dégénérescence, de nature douteuse, produits kysti-
ques ou leucocytes fig. 47, c, 50, a. Il existe encore et surtout des produits
kystiques divers en voie de phagocytose; il est difficile parfois de les
identifier, mais les spores phagocytées se reconnaissent à première vue,
fig. 47, e, 51, e, 52.

Bref, dans ces derniers cas on se trouve en présence de tumeurs éclatées
ou à membrane résorbée; leur contenu est partiellement évacué, partielle-
ment il dégénère sur place; la cavité de la tumeur est envahie par du tissu
conjonctif et par des leucocytes qui phagocytent les éléments kystiques
restés à l'intérieur de la membrane.

B DISCUSSION.

I. Tumeurs en dégénérescence.

Weissenberg (i3) a déjà observé des tumeurs en dégénérescence et con-
state que plusieurs des aspects dessinés par Stempell (04) et interprétés

23o Paul DEBAISIEUX

comme reformation de nouveaux noyaux ne sont en réalité que des aspects
de phagocytose. Nous partageons complètement cette façon de voir et croy-
ons qu'il n'est pas superflu de l'appuyer par la comparaison des dessins
de Stempell et des nôtres.

Stempell (04) décrit des tumeurs dont la membrane enkystante est
résorbée sous l'action du protoplasme intérieur. Il y observe des noyaux
d'aspect très divers, analogues à ceux de nos fig. 50 — 52. Il les considère
tous comme parasitaires. Les noyaux hypertrophiés se désagrégeraient en
granules chromidiaux, puis par recondensation de ces chromidies, fig. 50, a
et 51, a, il y aurait formation de nouveaux noyaux isolés dans une petite
masse protoplasmique ou rcunis dans une plasmodie, fig. 50, b et 51, /'.
Ces nouveaux noyaux s'accroissent, fig. 47, c et 51, c, et de nouveau par
expulsion de petits granules, fig. 47, li et 51, d, donnent des sporoblastes
et des spores. Mais les noyaux c ne disparaissent pas lorsqu'ils produisent
des spores et restent accolés au sporonte, fig. 52, 47, e et 51, e. Ils per-
sistent comme " noyaux végétatifs >•; c'est une des preuves de leur nature
parasitaire. Awerinzew et Femor (11) confirment — assez vaguement
d'ailleurs — la façon de voir de Stempell.

A première vue cette conception parait baroque ; après l'étude de quel-
ques préparations elle devient insoutenable.

Le seul point exact, c est que la membrane enkystante de la tumeur ou
bien se déchire ou bien est résorbée. Il faut ne jamais avoir comparé les
noyaux qui existent dans ces tumeurs avec les noyaux-hôtes voisins pour
nier leur identité; il ne faut pas regarder bien attentivement les aspects de
noyaux grumeleux et granuleux, fig. 47, 50, 51. a, b, d et fig. 35 à 48 de
Stempell, pour y reconnaître des aspects de dégénérescence. L'existence
de noyaux-hôtes à 1 intérieur des tumeurs en dégénérescence est prouvée
par le fait que l'on en rencontre en cinèse, fig. 51, /'. Le rôle phagocy-
taire de ces cellules est évident, fig. 47, 51, d, e, 52, et fig. m à 114 de
Stempell.

II. La membrane.

Autour du kyste, tel qu'il apparaît dans la grande majorité des cas, se
trouve une membrane non cellulaire assez épaisse, fig. 1, 2, 5. Observée
par la plupart des auteurs qui ont étudié cette espèce, elle est regardée par
eux comme dérivée de la tumeur (Stempell, 04, Weissenberg, i3);
« elle semble même représenter l'ectoplasme " (Thélohan, gS); ^ sans nier
toutefois que dans certains cas le tissu conjonctif puisse produire autour

ÉTUDES SUR LES MICROSPORI DIES, IV 23l

de la masse parasitaire une sorte de membrane « (Thélohan, go). Par
contre dans le Glugea stephani, Hagenmûller, gg, observe une membrane
enk3'stante qui résulte d'après lui de la réaction de l'organisme, et Pérez,
o5, note - une mince enveloppe conjonctive réactionnelle appartenant à
l'hôte - autour des kystes de Glugea stempelli.

Deux hypothèses existent donc en ce qui concerne l'origine de la mem-
brane kystique; l'une et l'autre sont soutenables; ni l'une ni l'autre n'est
prouvée, les arguments n'étant pas décisifs.

La formation de la membrane aux dépens de la tumeur s'appuie sur :

1° La colorabilité de la membrane (Stempell, 04); mais Weissen-
BERG constate que la Pikrofuchsine et que la méthode de Calleja colorent
la membrane comme la substance coUagène conjonctive.

Nous observons nous-méme que a) la fuchsine acide et l'orcéine (deux
colorants considérés comme spécifiques) et le bleu de méthylène polychro-
me réagissent exactement de même sur la membrane kystique et sur la
substance connective du tissu conjonctif. b) Le picro-indigo-carmin de
BoRREL donne la même coloration vert-bleu à la membrane et à la sub-
stance connective là où celle-ci est épaissie en gros faisceaux, c) L'héma-
toxyline est énergiquement fixée par la membrane comme par le tissu
conjonctif modifié adjacent à la tumeur, d) Le Giemsa colore tout différem-
ment la membrane et les tissus voisins, quand une rétraction ou une dé-
chirure rend la membrane libre et facilement pénétrable ; mais dans les
mêmes préparations, là où la membrane reste adjacente aux tissus, le colo-
rant réagit comme en c.

2° Le fait que les jeunes tumeurs sont à protoplasme nettement li-
mité sans membrane (Weissenberg, i3). Le fait par lui-même ne prouve
pas grand chose; et d'ailleurs nous constatons dans les tumeurs jeunes,
FiG. 53, que le protoplasme n'est pas nettement limité; qu'il existe une
mince membrane et que par place elle se continue en entier avec les tra-
vées conjonctives.

3° Le fait qu'il existe tout près de la membrane des inclusions réagis-
sant presque comme la membrane elle-même et qui sont sans doute de
même nature (Stempell, 04, Weissenberg, t3). Mais rien ne prouve que
ces inclusions soient produites sur place; elles peuvent naître et naissent
parfois par invagination de la paroi, et dans ce cas leur existence n'est dé-
monstrative ni en un sens ni dans l'autre.

La formation de la membrane aux dépens du tissu de l'hùte s'appuie
sur :

35

232 Paul DEBAISIEUX

1° L'aspect du tissu conjonctif au voisinage de la tumeur, où il ac-
quiert un aspect particulier; les cellules plus petites sont plus tassées les
unes contre les autres; la substance connective est plus colorable dans cette
zone.

2° L'aspect de la membrane, qui est de structure feuilletée; sa limi-
tation par rapport au protoplasme kystique est toujours nette, tandis que
des fibrilles se prolongent dans le tissu conjonctif, fig. 5, 47, 53". Lorsque,
par l'action des réactifs, le kyste se rétracte légèrement, la déchirure se fait
entre le protoplasme kystique et la membrane; cette dernière reste généra-
lement unie au tissu conjonctif.

Bref, l'origine de la membrane kystique chez Glugea anomala n'est pas
établie et il ne nous parait pas probable quelle puisse l'être par l'étude
de cette espèce; cependant nous verrons plus loin que nous considérons les
tumeurs comme formées de cellules-hôtes hypertrophiées et parasitées; la
question de l'origine de la membrane se réduirait donc à savoir si elle est
formée par les cellules-hôtes parasitées ou par les cellules-hôtes saines voi-
sines. Cette façon de poser la question lui enlève presque tout intérêt,

in. Les noyaux hypertrophiés.

a) Leur destinée.

D'après Stempell (04), les noyaux hypertrophiés donneront directe-
ment naissance aux noyaux de sporonte et le protoplasme du sporonte
provient d une partie du noyau végétatif, dont une autre partie reste
intacte. Awerinzew et Femor (ii) confirment et précisent cette façon de
voir. Voyez également Hesse (o5), Ferez (o5, 08), Strickland (i3).

■Weissenberg (i3) établit la fausseté de cette interprétation; nous ne
pouvons que confirmer sa façon de voir, et nous avons dit plus haut à pro-
pos des tumeurs en dégénérescence quelle est l'origine des erreurs d'inter-
prétation de Stempell.

b) Leur origine.

D'après Stempell (04), les noyaux hypertrophiés sont des noyaux vé-
gétatifs du parasite; d'après Awerinzew et Femor (ii), les petits noyaux
de la périphérie de la tumeur donneraient directement les grands noyaux
hypertrophiés; ils pourraient aussi dégénérer et se désagréger; d'après
Weissenberg (i3), les petits noyaux (Primârkerne) donneraient de petits
amas chromatiques très irréguliers, plongeant dans du protoplasme con-

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES, IV 233

dense et soit directement soit en confluant ils donneraient les grands noy-
aux hypertrophiés. D'après tous ces auteurs, les noyaux hypertrophiés
seraient des noyaux végétatifs du parasite lui-même.

Cette interprétation nous paraît fantaisiste.

Nous avons vu qu'il existe des noyaux hypertrophiés de toutes dimen-
sions et que les plus petits se confondent avec les individus uninucléés du
parasite. A en juger uniquement d'après les préparations, il est possible que
les petits noyaux primitifs évoluent les uns pour donner des plasmodies,
des sporontes et des spores, les autres pour donner directement des noyaux
hypertrophiques (Awerinzew). Mais nous ne concevons pas que les noyaux
primitifs se résolvent en grumaux chromatiques informes et que secondai-
rement ils donnent avec du protoplasme condensé des noyaux aussi parfaits
que les noyaux végétatifs (fig. 2, fig. 3 de Weissenberg). Ce que Weissen-
BERG considère comme ébauche des noyaux h3qiertrophiés nous semble être
des produits de désagrégation de ces mêmes noyaux, fig. 2 en bas et à
droite, fig. 3 à droite, fig. ii et 36 de Weissenberg) et c'est le cas de ses
préparations à en juger d'après le peu de détails qu'il observe dans les
noyaux jeunes. Le grand argument de Weissenberg, c'est que dans une tu-
meur de 8o [)■ il ne voit que ces granulations irrégulières; or nous avons dit
plus haut que dans une tumeur de 70 [^ il existe des quantités de noyaux
hypertrophiés parfaitement formés.

Par le seul examen des petits noyaux il serait donc possible de croire
que les noyaux hypertrophiés proviennent par accroissement des noyaux
parasitaires; mais il existe une autre interprétation qui cadre beaucoup
mieux avec ce cjue l'on sait des microsporidies, et à laquelle nous nous ral-
lions s les noyaux hypertrophiés de toutes dimensions seraient des noyaux
provenus d'une (ou peut-être de plusieurs) cellules-hôtes envahies par le
parasite Devenu irrégulier et ramifié, ce noyau se multiplie par étrangle-
ment et bourgeonnement; certains fragments devenus très petits et très
simples ne peuvent être distingués des no3'aux parasitaires, très simples
aussi ; d'autres dégénèrent, d'autres se réduisent de plus en plus et fina-
lement dégénèrent à leur tour.

Ce qui nous fait admettre cette façon de voir c'est que :

ic L'existence de noyaux parasitaires végétatifs n'est démontrée pour
aucune microsporidie, et d'autre part la nature hôte des noyaux hypertro-
phiés est dans bien des cas nettement établie. Korotneff (92) la décrit, en
un mémoire remarquablement concis, chez le Myxosporidium bryioïdes, et
il appuie sa thèse par des dessins très démonstratifs. Mrazek (lo) observe

234 Paul DEBAISIEUX

dans les tumeurs de Myxocystis des noyaux hypertrophiés absolument
semblables à ceux que nous observons ici et établit d'une façon certaine leur
nature lymphocytaire; ce qui donne plus de valeur encore à sa thèse, cest
qu'elle contredit sa façon de voir antérieure (Mrazek, 97). Nous avons nous-
même observé la présence de grands noyaux analogues à ceux que nous
rencontrons ici et provenant incontestablement de l'hôte, dans les tumeurs
à microsporidies des larves de Sinndium (Debaisieux, i3, Debaisieux et
Gastaldi, i5). Dans ces cas les noyaux-hôtes hypertrophiés sont excessi-
vement polymorphes. Cette façon de voir est soutenue également par
Mercier (08), Schrôder (og) et Schuberg (10).

2" Les noyaux hypertrophiés se comportent comme des noyaux anor-
maux; ils sont très polymorphes, dégénèrent dans les tumeurs âgées, et
leur état ne paraît pas être en relation avec le degré de développement de
la tumeur ni avec le développement des parasites.

l'V. Les divisions nucléaires.

Les divisions nucléaires apparaissent toutes semblables, qu'elles ap-
partiennent au cycle de multiplication végétative ou au cycle de la sporo-
gonie.

A la prophase, il existe deux petits granules disposés aux pôles et unis
par une mince travée peu colorable, fig. 8, 22. A en juger d'après certains
aspects spécialement nets de la sporogonie, fig. 23, et par l'évolution
ultérieure de la mitose, chacun de ces granules et la travée unissante sont
de bonne heure dédoublés.

Au moment de l'anaphase les éléments chromatiques se portent aux
pôles, coulent le long des deux travées conductrices, fig. 9, 24, et à la télo-
phase les noyaux-filles, formés de deux masses bien distinctes, restent unis
assez longtemps par les deux filaments chromatiques. Ceux-ci portent sou-
vent un ou deux granules chromatiques intermédiaires, fig. 10, 14, 1.5,
25—27. Il existe souvent des aspects de fuseau, fig. 3, 13, 22, 23, mais il
n'existe pas de différence essentielle entre les mitoses à apparence de fu-
seau et les autres; toutes deux se rencontrent lors des divisions végétatives
et lors des divisions sporogoniales ; la différence d aspect est probablement
due uniquement à l'action plus ou moins parfaite des fixateurs.

Nous avons vainement cherché des divisions doubles, des divisions de
diplocarya, analogues à celles qui existent chez les PUstophora et les Glu-

ÉTUDE SUR LES MICKOSPORIDIES, IV 235

gea du Simiilium (Debaisieux et Gastaldi, i5), et à celles décrites par
SwARCZEWSKY (i5), et reproduites dans ses fig. 3o et y5. Parfois on croirait
voir l'ébauche d'une pareille division fig. 17, mais l'interprétation de cet
aspect est fort douteuse, et la division ne s'achève pas. D'autre part, toutes
les divisions se font sur des noyaux plus ou moins dédoublés (Debaisieux
et Gastaldi, i5), et toutes sont analogues à celles dessinées par Swarc-
zewsky dans ses fig. 3i — 40 et 76 à 7g.

Thélohan (65), le premier, a observé une division sporogoniale chez le
Gliigea anomala; Stemfell (04) ne dessine pas de divisions nucléaires;
Awerinzew et Femor (ii) observent une seule division végétative (sporogo-
niale d'après eux), enfin Weissenberg (i3) observe, sans en remarquer les
détails et sans leur attribuer leur vraie signification, des mitoses végétatives
et une sporogoniale.

Swarczewsky (14) observe, dans des espèces voisines, des divisions
doubles lors de la sporogonie et simples lors des divisions végétatives. Cette
description, qui faciliterait beaucoup l'interprétation, ne se vérifie malheu-
reusement pas dans le Glugea anomala. Nous avons nous-méme (i5) ob-
servé des divisions absolument analogues à celles qui existent ici dans deux
autres espèces de Glugea.

W . Le cycle d'évolution.

Le cycle d'évolution du Glugea anomala est analogue à celui que nous
avons décrit et discuté en détail (i5) pour le G. danilewskyi et le G. viill-
leri ; on rencontre dans l'espèce étudiée ici quelques stades plus clairs et
certaines modalités spéciales.

Nous ne croyons pas à l'existence d un „ myxosporidium - ou d'un
r trophozoïte '• à noyaux bourgeonnants; on a vu plus haut que les noyaux
hypertrophiés sont très probablement des noyaux-hôtes; ils sont en tout
cas sans relation avec le cycle d'évolution du parasite.

La multiplication végétative du parasite se fait par divisions nucléaires
successives et aboutit à la formation de plasmodies; par cloisonnement
elles se résolvent en individus contenant chacun un des noyaux de la plas-
modie. Ce noyau est nettement double et le diplocaryon est autogamique
au premier degré, car il n'}' a pas trace d'accolement de deux noyaux lors
de la résolution de la plasmodie. Le diplocaryon se transforme probable-
ment en un noyau zygotique unique et se divise. Le zygote donne deux
sporoblastes qui se transforment en spores. La formation de deux spores

236 Paul DEBAISIEUX

aux dépens du zygote est caractéristique du genre Glitgea, dont nous étu-
dions ici le type. Des sporontes peuvent se transformer en stades végétatifs
et régénérer le cycle; ce processus constitue un mode de réinfection au
sein même de la tumeur.

Nous avons longuement discuté ailleurs (i5) le détail de la formation
des spores; les observations faites sur cet objet ne font que confirmer notre
façon de voir; nous n'y reviendrons pas.

L'existence d'un processus de fécondation entre le moment de la
résolution des plasmodies et celui de la formation des sporoblastes est
établi par :

1" Le fait que des noyaux nettement doubles, fig. 20, 21, se divisent
par une mitose unique, fig. 22—24;

2° le fait qu'entre les divisions végétatives et la division sporogoniale
il existe une longue période de transformations nucléaires inexplicable si
la dernière division a la même signification et la même valeur que les
premières;

3° la comiparaison avec le Glugea danileivskyi et le Gliigea mulleri et
surtout avec les microsporidies des larves de Siinulimn.

Deux autres hypothèses concernant le moment de la fécondation pour-
raient être soutenues et demandent à être discutées :

1° On pourrait nier tout processus de fécondation; se basant sur le
fait que le dédoublement nucléaire — le diplocaryon — observé, fig. 20, 21,
ressemble à celui cjui existe aux télophases végétatives, fig. 12, et que les
divisions sporogoniales, fig. 22—29, ressemblent aux divisions végétatives,
fig. 13 — 15, on dirait : par multiplication nucléaire naissent des plasmo-
dies; celles-ci se résolvent en individus uninucléés et la succession des di-
visions continuant, chaque individu uninucléé en donne deux qui se trans-
forment en spores (Weissenberg, 13).

Mais il faut remarquer que le stade diplocaryon, fig. 20, 21, ne peut
pas être comparé à une télophase, étant très éloigné de toute division nuclé-
aire; ensuite cette façon de voir ne rend pas compte de la raison d'être de
la longue période que traversent les noyaux entre les dernières divisions
végétatives et la division sporogoniale; et l'on ne comprendrait pas pour-
quoi les divisions végétatives cesseraient dans la plasmodie pour reprendre
une fois encore après isolement des individus-filles. Or, l'étude d'autres
microsporidies montre que c'est précisément à ce moment qu'a lieu la for-
mation de la copula ou du diplocaryon (Swellengrebel, ii, Swarczewsky,
14, Debaisieux, r5, DEBAisiEUxet Gastaldi, i5); voyezégalementCAULLERY

ÉTUDES SUR LES MICROSPORIDIES, IV 237

et Mesnil, o5) ; d'autre part la ressemblance des mitoses végétatives et des
sporogoniales et l'existence du diplocaryon avant la fécondation sont
établies pour d'autres microsporidies (Debaisieux, i5, Debaisieux et
Gastaldi, i5).

2° D'après Swarczewski (14), les divisions végétatives seraient sui-
vies de la formation d'une copula (diplocaryon autogamique d'après Swel-
lengrebel, 12). Il n'y aurait pas formation de zygote, mais une mitose de
maturation (que nous considérons comme sporogoniaie) diviserait la copula
en deux copu las-filles, dont l'une donnerait l'appareil d'éclatement delà spore
et l'autre par fusion de ses deux moitiés donnerait le noyau unique de la
spore mûre ou du germe amibo'i'de.

Remarquons d'abord que les deux noyaux-filles de la division ont
même valeur et donnent certainement chacun un noyau de spore. 11 reste
alors en faveur de l'hypothèse de Swarczewski, que la division nucléaire
parait double et a un aspect réductionnel, et que le noyau de la spore est
double lors delaformation, fig. 30, et ne devient unique qu'un peu plustard,
FiG. 31. Mais toutes les divisions végétatives paraissent doubles et tous les
noyaux-filles en télophase sont doubles, et cela enlève toute valeur aux ar-
guments de Swarczewski. De plus, si l'on considère ce qui se passe lors de
la sporogonie des Thélohania, par exemple, on observe que dans ce genre il
y a trois divisions sporogoniales successives; toutes trois paraissent dou-
bles et les noyaux-filles sont formés de deux masses chromatiques élémen-
taires qui se confondent en un seul noyau à chacune des trois périodes de
repos. Il n'est donc pas question pour le Thélohania de divisions réduc-
tionnelles ni de fécondation dans la spore : chez le Glugea les phénomènes
sont les mêmes, mais au lieu de trois divisions sporogoniales donnant huit
sporoblastes, il n'y a qu'une division sporogoniaie qui donne deux sporo-
blastes.

Ne pouvant admettre aucune de ces deux hypothèses et nous basant sur
les arguments donnés plus haut, nous considérons que les stades qui se pla-
cent entre les divisions végétatives et la division sporogoniaie appartiennent
à un processus de fécondation qui est une autogamie au premier degré.

RÉSUMÉ ET CONCLUSIONS.

i. Le genre G/z/^ea est caractérisé par la formation de deux spores
aux dépens du zygote.

238 Paul DEBAÎSIEUX

2. Le cycle suivant lequel le Glugea aîtotnala évolue dans les tumeurs
du Gastei osteiis débute par une période de multiplication végétative qui
donne des plasmodies; celles-ci se résolvent en diplocarya, qui se transfor-
ment probablement en zygote. Le zygote se divise par une division sporo-
goniale en deux sporoblastes, qui se transforment en spores.

3. La fécondation est autogamique par pœdogamieau premier degré.

4. Des sporontes peuvent se transformer en stades végétatifs et régé-
nérer le cycle.

5. Les noyaux hypertrophiés de la tumeur sont voués à la dégéné-
rescence et proviennent très probablement des no3'aux-hôtes.

ô. L'origine de la membrane kystique soit aux dépens de la tumeur,
soit aux dépens des tissus voisins, est douteuse; mais la tumeur étant très
probablement formée de cellules-hôtes parasitées et hypertrophiées, la
membrane serait en tout cas produite par du tissu-hôte et non par les
parasites.

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EXPLICATION DES FIGURES.

La combinaison optique (Zeiss) employée pour tous nos dessins put Vobjectif i,5 mm. et
l'oculaire i8 (grossissement linéaire 3oooJ. La projection put faite au niveau de la platine du
microscope par le prisme Nachet.

FIG. 1. Partis périphérique du kyste. En dehors de la membrane un globule
rouge. La membrane nettement feuilletée; la zone de protoplasme fondamental est
moins dense à la périphérie. La zone moyenne contient de nombreux noyaux hy-
pertrophiés la plujart irréguliers et des éléments parasitaires jeunes à différents sta-
des d'évolution. Fix. sublimé-alcool.

FIG. 2. Partie périphérique du kyste. En dehors de la membrane un noyau
conjonctif. La membrane est de structure uniforme et la zone de protoplasme fon-
damental régulièrement alvéolaire. La zone moyenne contient de nombreux noj'aux
hypertrophiés sphériques, un seul irrégulier, et des éléments parasitaires jeunes. Vers
le centre de la tumeur, sporoblastes et spores dans des kystes sporaux. Fix. Bouin.

FIG. 3. Partie de la tumeur comprenant les zones externe et moyenne. Un
grand noyau hypertrophié globuleux à trois éléments nucléolaires; d'autres irréguliers
en dégénérescence. Parasites uninucléés et paucinucléés en division. Fix. Zenker.

FIG. 4. Zone moyenne de la tumeur. Parasites uninucléés et plasmodies bou-
dinées montrant de nombreuses divisions nucléaiies. Stades de sporogonie et spores
contenues dans des kj'stes sporaux. Fix. Zenker.

FIG. 5. La membrane kystique. Nettement limitée du protoplasme kystique,
elle est très chromatique à sa partie centrale, tandis qu'elle est moins chromatophile
et de structure feuilletée à sa partie périphérique. Les assises externes se confondent
avec les faisceaux de différentiation conjonctive. Deux noyaux conjonctifs. Fix. Brasil.

FIG. 6. Différents aspects des granules chromatiques qui existent parfois dans
la zone externe de la tumeur. Ces granules sont groupés de façon très variable;
parfois, mais très rarement, ils rappellent en petit les divisions nucléaires des parasites
jeunes. Fix. Brasil.

FIG 7 Parasite uninucléé. Fix. Bouin.

FIG. 8. Aspect de la division nucléaire dans un parasite uninucléé; premier
stade Fix. Zenkek

242 Paul DEBAISIEUX

FIG. 9. Aspect de la division nucléaire dans un parasite uninucléé. Anaphase.
Fix. BouiN.

FIG. 10. Idem. Plus avancé. Fix. Brasil.

FIG. 11—12. Idem. Télophases et isolement des individus-filles. Fix. Zenker.

FIG. 13. Plasmodie boudinée contenant de nombreux noyaux en division.
Fix. BouiN.

FIG. 14 — 15. Idem Anaphases. Fix. Brasil.

FIG. 16. Plasmodie globuleuse, dérivée des précédentes Noyaux au repos.
Fix. Zenker.

FIG. 17 — 18. Idem. Début de cloisonnement du piotoplasme, plusieurs noyaux
sont nettement doubles. Fix. Zenker.

FIG. 19. Idem. Le cloisonnement du protopla.<:me est plus avancé. Fix. Bouin.

FIG. 20. Diplocarya isolés Fix. Bouin.

FIG. 21. Idem. Fix. Brasil.

FIG. 22. Premier aspect de division sporogoniale. Les sporontes sont renfer-
més dans le kyste sporal. Fix. Brasil.

FIG. 23. Idem. Dans l'un des sporontes on voit nettement deux granules di-
recteurs à chaque pôle et deux filaments unissants. Fix sublimé-alcool.

FIG. 24. Divisions sporogoniales; anaphase. Fix. Bouin.

FIG. 25 — 26. Idem; apparition de deux plages chromatiques dans le proto-
plasme. Fix. Bouin.

FIG. 27. Idem. Un sporonte anormal à deux noyaux en division. Fix. Bouin.

FIG. 28. Divisions sporogoniales. Télophase. Fix. Bouin.

FIG. 29. Les deux sporoblastes se séparent. Fix. Bouin.

FIG. 30. Sporoblastes; quelques-uns à noyau encore dédouble. Fix. Bouin.

FIG. 31. Sporoblastes. Plages chromatiques dans le protoplasme. Fix. Bouin.

FIG. 32. Sporoblastes à gros noyau unique. Fix. Brasil.

FIG. 33 — 35. Différents stades de sporogonie. Fix. sublimé-alcool.

FIG. 36 — 37. Spores mûres montrant une vacuole antérieure dans laquelle
existent deux granules chromatiques unis l'un à l'autre; un disque médian de pro-
toplasme; une vacuole postérieure dans laquelle, exceptionnellement, le filament spirale
est visible. Fix. sublimé alcool.

FIG. 38. Spore dont le filament spirale est dévaginé par l'action de la glycérine.

FIG. 39. Divisions nucléaires évoluant excentriquement à l'intérieur de sporon-
tes. Fix. Bouin.

ÉTUDE SUR LES MICROSPORIDIES, IV 2^3

FIG. 40. Sporonte se transformant en plasmodies analogues à celles de la
période végétative. Dans l'un d'eux division normale, dans l'autre deux divisions
nucléaires. Fix. Zenker.

FIG. 41—42. Idem. Plus avancé. Fix. Bouin.

FIG. 43. Sporontes contenus dans le kyste sporal ; l'un deux considérablement
développé. Fix. Bouin.

FIG. 44. Idem. Plusieurs sporontes très développés, l'un d'eux binucléé. Fix.
Bouin.

FIG. 45. Sporontes libres dans le protoplasme fondamental. Leur noyau s'ac-
croît progressivement. Fix. Brasil.

FIG. 46. Idem. Individu énorme à noyau très développé. Fix. Bouin

FIG. 47. Partie de tumeur éclatée, partiellement vidée de son contenu et en-
vahie par du tissu conjonctif et par des leucocytes. Membrane à structure feuilletée
à limite peu nette, c, leucocytes ou éléments kystiques en dégénérescence; d, gra-
nules de dégénérescence ; e, spores phagocytées. Fix. Zenker.

FIG. 48. Partie de tumeur en dégénérescence. La membrane est normale ; un
no3'au hypertrophié à granules très fragmentés; protoplasme fondamental assez colo-
rable, granuleux ; stades parasitaires jeunes, granuleux, peu électifs pour les colorants.
Fix. Bouin.

FIG. 49. Partie de tumeur en dégénérescence, à un stade plus avancé que le
précédent. Membrane conservée seulement à certains endroits de la périphérie. Nom-
breuses spores et amas protoplasmiques granuleux irréguliers. Fix. Bouin.

FIG 50. Partie de tumeur éclatée et envahie par du tissu externe, a, élé-
ments parasitaires en dégénérescence; b, reliquat des grands noyaux hypertrophiés.
Fix. Bouin.

FIG. 51. Partie de tumeur envahie par du tissu externe : a, éléments pa-
rasitaires en dégénérescence; b, noyaux hypertrophiés en dégénérescence ou leucocytes;
c, éléments kystiques en dégénérescence; d, granules; e, spores en phagocytose;
/, cinèse d'un noyau de l'hôte. Fix. Bouin.

FIG. 52. Spores en phagocytose. Le noyau de la cellule phagocytante accolé
aux spores. Fix. Bouin.

FIG. 53. Partie de tumeur jeune représentant à peu près la moitié de la coupe
totale. Il n'existe pas encore de stades de sporogonie; les éléments parasitaires sont
uninucléés ou en plasmodies paucinucléées. La membrane kysti(]ue, à certains en-
droits C), se continue en entier avec les travées du tissu conjonctif.

TABLE DES MATIÈRES.

Introduction

Historique
M atériel
Méthodes .

Partie descriptive

Discussion

I.

II.

III.

IV.

V.

I. Aspect macroscopique .

II. Aspect microscopique

III. Les stades parasitaires .

IV Les noyau,\ hypertrophiés et le

V. Tumeurs d'aspect différent

Tumeurs en dégénérescence
La membrane .
Les noyaux hypertrophiés
Les divisions nucléaires
Le cycle d'évolution

Résumé et conclusions
Bibliographie
Explication des figures

protoplasme fondamental

Pages

217

218

2l8

219

220

222
226
227

22g
23o
232

234

235

237
239
241

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eœlomycidium simuli

NOV, GEN.. NOV. SPEC.
et remarques sur l'Amœbidium des larves de Simulium

PAR

Paul DEBAISIEUX,

PROFESSEUR A L UNIVERSITÉ DE UOUVAIN.

(Mémoire dépose le 2^ décembre i()i(>.)

37

Cœlomycidium simulii

NOV. GEN, NOV. SPEC,
et remarques sur rAmœbidium des larves de Simulium

Dans un travail sur les microsporidies des larves de Simulium (De-
BAisiEUx et Gastaldi, i5i, nous avons signalé que ces larves hébergent le
parasite énigmatique découvert en Amérique par Strickland (l3). L'étude
que nous en avons laite nous conduit à créer pour lui un nouveau genre,
Cœlniuvcidium: elle est loin de satisfaire toute notre curiosité, mais elle a
don.ne, croyons-nous, tous les résultats actuellement accessibles.

Nous avons dit ailleurs i i5l (juelle est la provenance des larves de Si-
mulium (Melusina maculata Meig., détermination probable) et quelles
furent les méthodes employées pour 1 étude de leurs parasites. Nous
n'avons que quelques remarques à ajouter. L'étude du Cœlomycidium de-
mande du matériel abondant, car le plus .souvent chaque larve n'héberge
qu un seul stade mille lois répété du parasite, et elle exige du matériel ré-
colté à toutes les saisons de l'année, car les aspects du parasite \arient
beaucoup d'une saisun à lautre. Pendant prés de trois ans nous avons lait
à la station des Simulium des pèches répétées. La dissection et la fixation
des larves doivent être faites le plus tôt possible après leur récolte car les
parasites dégénèrent rapidement, et il faut immerger la larve dans le fixateur
dès qu'elle est incisée, car la pUii^art des stades parasitaires sont plasmo-
lysés jiar le contact de l'eau.

La plupart de nos dessins sont faits d'après des préparations Hxées à
la liqueur de Bouin et colorées par 1 héniatoxyline de Heidenhain suivie
d'un colorant protoplasmi(]ue; beaucoup d'autres fixateurs et colorants furent
cependant employés. Les stades flagellés, libres dans l'eau, furent Hxés
sur porte-objet par lacide osmique à o,5 "/o, séchés et colorés à l'hémato-
xyline ou au Giemsa Les préparations ainsi obtenues furent soigneusement
contrôlées par l'étude sur le vivant et sur coupes.

25a Paul DEBAISIEUX

I. PARTIE DESCRIPTIVE.

A. Aspect macroscopique et étude sur le vivant.

On trouve des larves de Simuliuiu pentlant jncsque toute l'année. A la
fin de l'hiver et au |iriiitemi*s les individus adultes, ceux qui ont hiverné,
sont assez rares; par contre on trouve sur les feuilles et les tiges immergées
des amas d'œufs de plusieurs centimètres et des jeunes larves de i à 2 mil-
limètres réunies en colonies compactes; pendant l'été et l'automne on en
trouve à tous les stades de développement, les unes toutes jeunes, les autres
transformées en nymphes; pendant l'hiver on trouve des larves complète-
ment développées et des nymphes. Le iait cjue les larves vivent cote à côte
en grand nombre, facilite la transmission de l'intection ; les divers parasites
libérés du corps d'une larve sont immédiatement ingères par une autre.

La larve adulte mesure environ un centimètre de long; la région pos-
térieure est un peu plus grosse que la partie antérieure; ranim.al est légè
rement transparent, de teinte grisâtre. Nous avons dit ailleurs iiJ, i5) ([ue
l'infection par diverses microsporidies se reconnait sur le \ ivant à ce (|ue
une ou plusieurs tumeurs limitées, blanc laiteux, gonflent et déforment la
larve; elles sont plus ou moins visibles par transparence ou bien même for-
ment une hernie franchement blanche à la surface du corps. L. "infection
par le Cœlomycidiiim se reconnait assez facilement à ce que la larve est
uniformément et parfois considérablement dilatée, de teinte brunâtre dans
les cas d'infection jeune, blanc gris dans les cas d'infection avancée ou
d'infection d'hiver.

L'infection par le Cœloiuycidiitni est généralement pure, mais elle
jieut coexister, à tous les stades de développement, avec des tumeurs de
Thélohavia ou de Plistophora.

I. Formes dete.

.\u printemps on trouve parfois dans la cavité générale de la larve des
stades parasitaires mesurant :S à Mi \>. de diamètre, à protoplasme très
transparent et contenant i. -i et jusqu'à 10 noyaux assez grands et bien vi-
sibles. Nous considérons ces stades comme étant de jeunes formes d'été.
Ils peuvent être mêlés à d";iiitres stades du iiarasite.

Depuis la tin du printemps juscju'au début de l'hiver on frouM: exclu-
sivement des formes toutes différentes. Dès axant l'ouverture de la larve
on observe, par transparence et au microscope, des centaines de parasites

CCKLOMVCIDIUM SIMULII XOW GEN., NOW SI'EC. 2DI

passivement mobiles à l'intérieur du corps par suite des contractions de
l'hôte; à l'incision de la larve ces parasites s'échappent soit en amas, i[uand
ils sont encore adhérents aux tissus de l'hôte, soit isolément (juand ils sont
déjà libérés dans les cavités de la larve. Ces parasites sont sphériques de
dimension variable, ils peuvent atteindre et même dépasser loo y- ; ils sont
à protoi.)lasmc Hnement granuleux sans zone périphérique distincte, fig. 9.
Il est à remar(]uer que ces i)arasites abandonnes dans l'eau s'altèrent rajn-
dement; la plasmolyse intervenant ils se morcellent en masses secondaires;
souvent une zone périphérique iri-éi^'ulirre hyaline se forme avant le morcel-
lement du parasite.

A un stade plus avancé chaque parasite contient, à l'intérieur d'une
mer.ibrane à peine visii^le, des milliers de parasites-filles individualisés
riG. 10, qui souvent se meuvent d'une façon saccadée et oscillante. Çjuand
ces gros parasites entrent en contact avec l'eau, la plupart crèvent, soit im-
médiatement soit après (juclques minutes, le contenu est expulsé en une
colonne compacte dans laciuelle on observe un tourmillement rapide, puis
tous les parasites-filles se disséminent dans le liquide ambiant. A peine libé-
rés, ils sont agités de mouvements oscillatoires saccadés, sans changement
de place, dus à des détentes successives d'un Hagellum ; puis bientôt, ([uand
le flagellum est libéré, fig. 28, il y a mouvement de translation rapide.

Parfois les germes tiagellés sont déjà libérés à l'intérieur de la larve et
s'éparpillent dès qu'on incise celle-ci. Parmi les larves abandonnées dans
un cristallisoir, avec de l'eau traiche, quekjues-unes éclatèrent spontané-
ment, laissant échapper un nuage laiteux formé de germes Hagellés.

2. Formes dhiver.

ûj Pendant tout 1 hiver, dès que l'on incise des larves parasitées, il
s'en échappe des centaines de parasites sphériques opaques mesurant i8
à iSo :'■ de diamètre; ils sont très finement granuleux, entourés d une mince
zone hyaline qui n'est pas nettement séparée du centre granuleux, (juel-
ques parasites — parfois beaucoup dans un même liôte - possèdent une
zone périphérique hyaline très épaisse mesurant le quart ou même la moi-
tié du rayon total, et nettement séparée du contenu granuleux dans lequel
existent des corpuscules réfringents, fig. 46, 47. Il existe parfois des amas
de 5 — lo 2o petits parasites de ce type.

hj Un tout autre aspect du parasite ne représente, croyons-nous,
qu'une modification, peut-être dégénérative de la forme précédente.

252 Paul DEBAISIEUX

l^t'S individus les plus simples pusscdcnt au csiitie un amas prcjto-
plasniique compact à corpuscules réfringents, puis une épaisse envelop|)e
transi)arente et périphériciuement une memlnane hyaline leuilletée i ig. 55.
Souvent plusieurs amas piotoplasmiijues isolés sont groupés dans une
même membrane hyaline feuilletée, fig, 56; ces amas peuvent mesurer
i5o;). et ]-»lus encore. Parfois il e.xiste 2 5 20 masses protoplasmicjucs iso-
lées; il semble qu'elles résultent de la fragmentation de la niasse protoplas-
mique primitive, iiarfois les zones transparentes se sont fusionnées et con-
tiennent de nombreu.x amas protoplasmiques. dont cpiehiues-uns, moins bien
limités, semblent se désagréger, fig. 57. 58.

Cet aspect se rencontre isolé, ou bien dans les larves (jui abritent
également la forme précédente ou bien dans les nymphes. C'est la seule
forme parasitaire cjuc iious ayons rencontrée dans les n3'mphes. On trouve
tantôt 40 à Sc) individus de cette tbrrne dans un niéme hôte, tantôt (]uel-
ques individus seulement.

3. Infection mixte.

yuelc]ues larves récoltées vers la mi-décembre étaient infectées en
même temps par des parasites de la forme d'été et par des parasites du
premier type de la forme d'hiver. Ces derniers st)nt petits, groupés à plu-
sieurs et se reconnaissent aisément à leur opacité plus grande. De nom-
breux germes flagellés uninuclécs existent dans ces larves.

B. Étude sur matériel fixé.

Kn règle générale, les centaines de parasites d'une même larve sont
tous exactement au même stade; ils différent entre eux par leurs dimen-
sions, qui \arient du simple au décuple, par le nombre des noyaux, qui varie
proportionnellement, mais tous ces noyaux sont au même stade de leur évo-
lution.

Exceptionnellement l'un ou l'autre parasite se trouve a un stade tout
différent de ses centaines de voisins, et dans quek|ues rares larves la juxta
position de stades différents permet de se rendre compte du passage de l'un
à l'autre.

I. Stades d'ete,

a) Stades jeunes. Des larves récoltées au mois d avril nous ont mon-
tré l'mfection à son premier degré. L'anatomie de la larve est normale; de
grandes quantités de tissu adipeux s'y rencontrent.

CcÈLOMvciniu^r simclii xo\'. gen., nov. spf.c. 253

Les parasites par milliers sont subsphériques ou irréguliers, petits ou
grands (3 à Jo;-"), uiiinucléés ou multinucléés. Fif,. 1. On les rencontre libres
dans la cavité «énérale, et insinués dans tous les interstices cellulaires; ils
attaquent surtout les cellules adipeuses proximales, fig. l, et distales (uri-
(]ues), FIG. 2. Certains parasites sont partiellement enclavés dans la cellule
graisseuse et i)artiellenient libres, i'ig. 1, ce qui conduit à attribuer à la
plasmodie la laculté de se mou\oir, et de se nourrir successn'ement aux
dépens de divers éléments de l'hote.

Le protoplasme d(>s parasites jeunes est finement granuleux et homo-
gène, avec parfois (pudques lins granules colorables; les noyaux, relative-
ment grands, à membianc jieu distincte, contiennent une grosse niasse de
réserve chromatique (caryosoine?) et de fins filaments et granules beaucoup
moins colorables, généralement ramassés en un petit amas intormc. Le
mécanisme des divisions nucléaires est difficile à analyser en détail; les di-
visions sont ceitainement du type bipolaire fig. 1, 7. La fixation et la
coloration de ces stades, comme de beaucoup d'autres, hélas!, sont rarement
parfaites, et le plus souvent on n'observe dans le protoplasme c]ue des gru-
meaux chromatiques informes, à peine entourés d'une aréole claire; cela
nous explique l'opinion de Stkickland (i3i, qui croit à l'existence, pendant
la i-ilus grande partie de la vie du parasite, de - diftusly scattered chromatic
masses -.

Un trou\e [larlois des stades jeunes dans des larves toutes bouirées de
liarasites, arrivés au terme de leur évolution estivale. La fig. 2 est em-
pruntée à une lar\c remplie de parasites transformés déjà en germes uni-
nucléés flagelles, fig. 28; les parasites qui sont logés dans des cellules
adipeuses distales sont caractérisés par leurs petits noyaux; ils présentent
une ressemblance frappante avec les germes uninucléés eux-mêmes^ et nous
\errons plus loin (]u'ils en proviennent probablement.

Les FIG. 5 et 6 sont intc-ressantes parce; qu'elles montrent, d'une part,
l'aspect de noyaux jiarasitaires imparfaitement fixés, et d'autre part, la
grande ressemblance ipii existe entre des parasites jeunes et des cellules de
l'hôte (l'une d'elles, Fir;. 5, est en mitosei. La fig. 4 représente probablement
un tout jeune |)arasite intracellulaire.

l'') Accroissement. Les parasites s'accroissent aux dépens des tissus
de la lar\e; l)ient6t tout le tissu adipeux proximal disparait, le corps est
littéralement bourré et gonflé jiai^ des plasmodies parasitaires; elles sont
comprimc'^es et mnuh'es les unes sui" les autres. Elles sont de dimensions

254 ^^"' DEBAISIEUX

très variables (i5 à loo :- et plus) ; le protoplasme est de structure uniforme,
sans enclaves; les noyaux, très nombreux, sont semblables aux noyaux des
stades jeunes, mais la masse chromatique de réserve est généralement plus
petite au repos, fig. -.1, 14, et irrégulièrement éparpillée dans les noyaux en
division, fig. 12, 13. Durant les divisions on n'obser\e d'autres détails
(|u un ètiromcnt irréguliei' du réseau nucléaire.

(■) Scii'iu cil talion des plasmodies. Les plasmodies se résolvent en une
niultitudi' d'individus ur.inucléés; mais avant que ce fait ne se produise,
les noyaux se modifient. La réserve chromatique disparaît, les filaments
nucléaires sont beaucoup plus nets, mieux individualisés et très chromati-
ques, Fir;. 15, 16; sous cette forme les noyaux se divisent encore, ils s'al-
longent, les filaments constitutifs sont assez irrégulièrement disposés suivant
le grand axe, et il semble (|u'ils cntouifnt en faisceau une travée axiale lé-
gèrement colorablc unissant deux granules directeurs, fig. 17; en coupe
équatoriale on voit les éléments du noyau ra3'onnant autour de cet axe
central. -- Les aspects de noyaux sans masses chromatiques sont fréquents,
mais ceux de noyaux volumineux avec filaments nucléaires très chromati-
ques et liicn individualisés, fig. 15 — 17, sont rares; nous avons cependant
rencontré une lar\e où ils se trouvaient exclusivement et en très grand
nombre.

Le protoplasme se segmente, et il se forme des individus à un seul
gros noyau, fig. 19; ce noyau se divise une dernière lois encore, fig. 20.
et chaque individu en donne deux autres à petit noyau, fig. 20, 21. — 11
semble que cette dernière transformation puisse offrir des variantes, que
tantôt la segmentation du j^rotoplasuie soit progressive isolant des ilôts
plasmodiaux qui à leur tour se cloisonnent, que tantôt la segmentation
n'ait lieu qu'après l'achèvement de la dernière division nucléaire.

d) /■ornialioii des \oospnres. Les individus uninucléés mesurant 3
à 4;j, possèdent un protoplasme homogène, pas de membrane distincte et
un noyau bien colorable, sphériciue, de i à 2 y, fig. 21.

Bientôt apparaît dans le protoplasme un fin filament en rapport avec
un petit granule chromatique juxta-nuclèaire ou intranucléaire ; c'est l'ébau-
che du Hfigellum, iig. 22. Ensuite apparaissent des ccMpuscuIes chromati-
ques, assez irréguliers, sou\'ent allongés, en nombre variable, fig. 23; ils
deviennent plus épais et se moulent souvent en demi-cercle à la périphérie
du protoplasme, fig. 24; tout en s'accroissant, ils se condensent en deux ou

CCELOMVCIDIUM SIMULII NOV. GEN., NOV. SPEC. 255

trois masses volumineuses, fig. 25, et enfin en une seule accolée au noyau,

FIG. 26.

Le germe flagellé est alors complètement évolué; d'après ce que l'on
peut contrôler sur le vivant, le flagellum est uni au noyau à sa base, il
émerge du protoplasme et est enroulé autour de la zoospore en un tour de
spire complet.

La signification du noyau accessoire accolé au noyau est énigmatique.
11 est formé par la réunion des granules chromatiques mitochondriaux,
FIG. 23, et étant donné qu'au cours du développement ceux-ci se disposent
en cordons semi-circulaires périphériques, fig. 24, il est permis de supposer
qu'ils jouent un rôle dans l'édification du flagellum.

(') Zoospores. Généralement les germes flagellés sont libérés déjà à
l'intérieur de la larve, et se répandent en quantité innombrable dans tous
les interstices du corps. La larve éclate alors spontanément.

La zoospore mesure 6 à 8 i^-, fig. 28 (après fixation il y a condensation
du protoplasme!. Dans le protoplasme existe un no3'au piriforme à sommet
— disons antérieur — dirigé vers la périphérie; un noyau accessoire assez
volumineux se trouve à la partie postérieure du noyau. Sur le vivant le
noyau est clair, le noyau accessoire forme une masse un peu plus dense;
après fixation au sublimé-alcool le noyau accessoire est beaucoup plus chro-
matophile (hématoxyline) que le noyau proprement dit; après coloration
au GiEMSA il est bleu sombic, tandis que le noyau proprement dit est rouge
franc. (Les fig. 29—31, 33. 34, 39 reiModuites d'après des préparations co-
lorées au GiEMS.\ sont rendues en ton sur ton; en réalité les préparations
montrent le n(J3'au rouge et le noyau accessoire bleu.) A côté du noyau et
du noyau accessoire existe un amas fie quelques granules réfringents. Le
flagellum est en rapport par sa base avec la partie antérieure du noyau; il
possède un segment intra-protoplasmique et un long segment libre qui
mesure une vingtaine de ;j., fig. 28—32. Le flagellum est d'abord enroulé
autour du corps protoplasmique, il se libère ensuite.

Parmi les zoospores libérées nous avons parfois observé de petits in-
dividus uni- ou paucinucléés, fig. 27. Ce sont évidemment des germes fla-
gellés incomplètement évolués; ils rappellent étrangement et ont semble-t-
il, la même valeur que les parasites jeunes, ftg. 2, dont nous avons parlé
plus haut. Nous croyons que la propagation de l'infection dans l'hôte lui-
même peut se faire par eux.

38

256 . Paul DEBAISIEUX

f) Evolution des loosporcs. Les zoosporcs examinées sous couvre-
objet s'altèrent apiès un quart d'heure; conservées dans l'eau pure elles dé-
génèrent après deux ou trois heures, et des essais de conservation dans de
l'eau continuellement agitée et aérée n'ont pas donné de meilleurs résultats.

Les zoosporcs se transforment en germes ainiboïdes, et ce processus
parait être un phénomène normal. Parmi les zoospores examinées dans
l'eau, on observe constamment des individus amiboïdes; on les observe
déjà dès la libération des zoospores, on les observe plus fréc|uemment
quelques minutes après la mise en liberté, on les retrouve après deux et
trois heures. Parmi ces germes amibo'ïdes les uns possèdent un flagellum
réduit, le corps proprement dit contient le novau, le noyau accessoire
et quelques granules réfringents, une portion du protoplasme est plus
claire avec quelques vacuoles, fig. 33— 35 ; cette portion protoplasmique
est mue de mouvements rapides et saccadés ne rappelant que de loin
des mouvements amibo'ïdes. La fig. 35 reproduit quatre formes successives
prises par un même individu en un espace de temps d'environ 5 secondes.
D'autres germes amiboïdes, à corps mobile, sont terminés antérieurement
par un prolongement court plus épais qu'un flagellum, battant rapidement,
une ou deux fois par seconde, fig. 36, 37. D'autres enfin sont dépourvus de
tout flagellum, fig. 39, 38; cette dernière figure représente quatre aspects
successifs observés en lo secondes sur un même individu.

Comme nous l'avons dit, nous n'avons i)u maintenir les zoospores en
vie Cjue pendant (juelques heures; nous n'a\ons pendant ce temps observé
aucun aspect ([ui permette de supposer iju'd y a copulation entre deux
indi^'idus.

2. Stades d'hiver.

a) Première forme. Plusieurs larves récoltées vers la mi-décembre
montrent une forme d'infection intéressante. Les cavités du corps contien-
nent par endroit des quantités de parasites d'été au stade de la segmenta-
tion plasmodiale; ailleurs, également localisés par place, existent des stades
d'hiver aux premières étapes de leur formation, fig. 40-42, 44, 45. Parmi
ceux-ci on observe des parasites de 8 à i5 \>- de diamètre, ils possèdent un
volumineux noyau de 4 \j.. cjui contient un gros caryosometrès chromatophile
et quelques filaments chromatiques dans le cytoplasme clair. Le proto-
plasme est tantôt clair et homogène, fig. 40, 41, tantôt chargé de petites
enclaves irrégulières colorables, fig. 4i 44, tantôt bourré de grosses en-

CŒLOMYCIDIUM SIMULII NOV. GEN., NOV. SPEC. 267

clavcs intensénient colorables, fig. 44. A coté des parasites uninucléés il
en existe à 2, 3, 5 noyaux, fig. 44, 45. Tous ces parasites sont entourés
d'une enveloppe hyaline assez épaisse; ils sont généralement réunis en petits
amas accolés par l'enveloppe hyaline. (Sur coupes ils n'apparaissent pas
accolés, parce que la membrane d'enxclopjie est presque toujours devenue
invisible dans les milieux éclaircissants, fig. 44. i Dans un même amas on
trouve des individus uni- ou paucinuclécs. et des parasites à protoplasme
chargé de grosses enclaves, de petites enclaves ou sans enclaves, fig. 44.
Dans ces mêmes larves on trouve des parasites volumineux, mesurant une
trentaine de \>, et semblables à ceux que nous allons décrire.

Des centaines de larves infectées récoltées pendant l'hiver contiennent,
soit rares soit en grand nombre, des parasites de grande taille (60 \>- en moy-
enne) à nombreux gros noyaux, à protoplasme riche en enclaves. Le corps
protoplasmique est protégé par une en\'eloppe d'épaisseur variable mesu-
rant souvent le tiers du diamètre total, fig. 47; sur le vivant elle est
parfaitement transparente, sur les coupes elle est généralement déchirée ou
arrachée, peu colorable, fig. 4b; bien apparente avant éclaircissement des
préparations, elle est généralement invisible après, fig. 49 — 51.

Le protoplasme est bourré de grosses enclavesqui, après la fixation au
BouiN, Zenker, Bend.\, sont intensément colorables par la plupart des co-
lorants nucléaires (hématoxyline, safranine, violet de gentiane, carmin,
rouge magenta, etc.), fig. 44. 49, 51, 53. I^eur coloration résiste énergique-
mcnt à la différeiitiation prolongée, elles sont si nombreuses qu'elles
masquent le plus souvent les noyaux du jiarasite. Après fixation au subli-
mé-alcool, ces enclaves sont moins colorables et sont parfois invisibles, fig.
50, 52; on découvre par contre des granules chromatophiles formant une
assise continue près de la membrane, fig. 50.

L'épreuve à l'acide osmicjue donne au parasite entier une teinte brune
assez foncée; mais en écrasant le parasite, on voit que les enclaves ne sont
pas spécialement colorées et qu'elles sont de teinte jaune.

Les noyaux sont semblables à ceux décrits dans les stades d'hiver jeu-
nes; ils se divisent par bipartition, le caryosome étant conserve et fonction-
nant comme nucléo-centrosome, fig. 51. Il est probable que les divisions
sont synchrones dans un même parasite, mais qu'elles se succèdent très
lentement; cette lenteur est un rapport avec la physiologie de la forme
d'hiver qui parait être une forme latente à fonctions végétatives très ralen-
ties. Nous avons examiné nombre de milliers de parasites d'hiver sur des

25s Paul DEBAISIEUX

séries de coupes provenant de plus de cent larves infectées récoltées à des
époques différentes; nous n'a^■ons découvert cju'un seul cas certain de divi-
sion nucléaire, fig. 51. La fig. 52 représente an aspect nucléaire parfois
observé sur des préparations lixées au sublimé-alcool (déplorable fixateur
nucléaire, hélas!) ; peut-être représente-t-elle une prophase et fait-elle soup-
çonner qu'il y a division intranucléaire avec tassement des éléments chro-
matiques à côté du caryosome.

On rencontre parfois dans des larves à infection d'hiver caractérisée,
des parasites uni- ou paucinucléés groupés dans une enveloppe commune.
Ils proviennent probablement de la fragmentation de gros parasites en in-
dividus plus simples, fig. 54.

hj Seconde forme. Nous avons dit en parlant de laspect des para-
sites vivants que certains sont polykystiques, fig. 56-61. Sur préparation
fixée ces parasites présentent un protoplasme clair et des noyaux volumi-
neux analogues aux noyaux de la forme d'hiver, i ig. 57 6i ; parfois les
noyaux présentent anormalement deux caryosomes, fig. 60. Ces individus
sont petits, paucinucléés et tassés à plusieurs dans une capsule commune;
ils paraissent provenir, par morcellement, d'un individu plus volumineux
et être entourés d'une capsule de tissu réactionnel sécrété par les cellules
hôtes.

C. L'Amœbidium des larves de Simulium.

Cette espèce, que nous croyons être celle décrite par Ch.\tton et Rou-
BAUD (og), fut assez fréquemment observée dans le rectum des larves cjue
nous avons étudiées. Le parasite est de forme nénjatoide très grêle et peut
atteindre plusieurs centaines de microns en longueur. Le corps plasmodial
est revêtu d'une membrane résistante qui, à la partie antérieure, sert à la
fixation du parasite, fig. 62, 63. Le protoplasme est complètement homo-
gène; sur les préparations fixées on voit, sauf chez les individus très grêles,
une grande cavité centrale qui se i^olonge sur toute la longueur du parasite;
parfois le parasite est localement dilaté et possède une large cavité cen-
trale. Les noyaux sont très nombreux et disposés irrégulièrement dans
le protoplasme, ils sont volumineux à très gros caryosome chromatique,
fig. 64, et ressemblent étonnamment aux noyaux des stades d'hiver de Cœlo-
mycidium , fig. 45. Nous n'avons pas eu l'occasion d'observer des divisions
nucléaires ni aucun stade d'évolution.

CCKLOMVCIDIUM SIMULII N0\'. GEN., N0\'. SPEC. L'5(J

II. INTERPRÉTATION ET DISCUSSION

Malgré de patientes recherches, la connaissance que nous avons du cycle
évolutif du Cœloniycidium est encore incomplète.

I" L'Évolution des stades d'été, fig. 1—39, aboutit à la production de
germes tlagellés (jue l'on jieut appeler zoospores, en comprenant ce terme
dans le sens large qu'admet Minchin iiil. Les noyaux se multiplient par
bipartition; des cinèscs i probablement deuxl, de tj^pe particulier, dépour-
vues de caryosomc, précèdent immédiatement l'individualisation des zoo-
spores; celles-ci, d'abord flagellées, deviennent ensuite amibo'ides et perdent
le flagellum; aucun phénomène de conjugaison ne peut être observé entre
elles; des zoospores incomplètement difi'érentiées peuvent, semble-t-il, pro-
pager l'infection dans le même hotc, riG. 27, 2.

Les zoospores sont évidemment à rapprocher de celles que l'on len-
contre chez les mycétozoaircs, les phytomj'xidées et les chytridinées. Le fait
que leur formation est précédée de cinèses de type spécial, dans lesquelles
le caryosome a disparu, fut observé dans ces divers groupes (Maire et
Tison, og, et ii; Winge, iJ; Bailly, 12, etc.). Ce rapprochement conduit
à considérer que les zoospores sont vraisemblablement en rapport avec des
phénomènes de fécondation.

Les mycétozoaircs ont des zoospores que Kr.ïnzlin (07), Jahn (08) et
d'autres considèrent comme le résultat d'une fécondation suivie de deux ci-
nèses de maturation; plus tard Jahn ( i i i les considère comme des gamètes
formés après deux cinèses de maturation et destinés à se fusionner; la se-
conde façon de \o\v s'appuie sur des arguments solides et sera sans doute
confirmée dans la suite. La reproduction sexuée des phytomyxidées est en-
core inconnue. Chez les chytridinées on connaît la reproduction sexuée de
quelques espèces seulement (Lœwenthal, o5, Barrett, 12, Kusano, 12,
'Wager, i3, etc.). Dans tous ces cas les zoospores peuvent se reproduire di-
rectement et asexuellement, ou bien sexuellement après copulation; la re-
production asexuée se fait généralement par sporanges peu protégés, tandis
que la reproduction sexuée se fait par des zygotes, puis des sporanges à
membrane épaisse (sporanges durables); les modalités de la copulation sont
très variables : un seul cas retiendra notre attention, c'est celui de YOlpi-
dium vicia' (Kusano, 12). Les zoospores possèdent un long flagellum;
1° elles servent de point de départ à la reproduction agame. Elles devien-

26o Paul DEBAISIEUX

ncnt amiboïdes, perdent leur Hagellum, pénètrent dans une cellule-hote et
s'y accroissent. Les noyaux se multiplient par des divisions qui - resseinble
ainitosis -; lors des dernières divisions - the nucleolus disappears... mitotic
division is quite certain -; le zoosporange reproduit des zoospores; 2" elles
servent de point de départ à la reproduction sexuée, l^eux zoospores se fu-
sionnent; après accroissement de la capsule et épuration nucléaire, les deux
noyaux se fusionnent; le zygote est formé. L'accroissement continue, le
noyau se multiplie par mitoses, les noyaux sont beaucoup plus volumineux
et plus chromatiques que dans le zoosporange agame; le cytoplasme est
compact et contient - larger and smaller globules like oil drops -, une
épaisse membrane le protège; l'aboutissant i)robable de la reproduction
sexuée parait être des zoosporcs. Les dessins donnés par Kusano, plus en-
core que la description, suggèrent un rapprochement étroit entre YOlptdium
vicia: et le Cœlomycidium simulii.

Nous nous bornons à signaler ce rapprochement; l'exemple de ÏOlpi-
dium l'icicc comble dans notre esprit les lacunes cjui existent dans nos ob-
servations. Nos observations nous conduisent à croire que les zoospores
propagent l'infection dans l'hôte primitif, mais malgré des recherches et des
essais répétés nous n'avons pas observé leur c<>i)ulatioii, ni dans l'hôte, ni
en dehors de lui. Il nous est donc impossible d'établir avec précision la
signification complète des zoospores de Cjflonn-ciciitiiii.

2" Les formes d'hiver, iig. 40—61.

a) Elles appartiennent à la même espèce que les formes d'été. En
effet, pendant tout l'été on ne rencontre (ju'une forme, et pendant tout l'hi-
ver on ne rencontre que l'autre; aux saisons de transition certaines larves
renferment les deux formes et l'examen sur le \ivant montre avec évidence
leur parenté. (Jue l'on n'objecte pas la grande différence entre forme d'hi-
ver et forme d'été; nous venons de signaler une différence aussi marquée
chez YOlpidium viciœ, nous la rencontrerons plus loin encore chez le Poly-
Cijriuni. Enlin rappelons simplement cjuc les formes d'été dégénérant au
contact de l'eau, produisent une enveloppe hyaline.

b) L'origine des formes d'hiver n'a pu être observée; elles i)roviennent
très probablement du développement des zoospores.

cj Quant à la destinée des formes d'hiver, la seule chose que nous
sachions, c'est qu'elles peuvent se fragmenter en individus plus simples,
FiG. 54, et probablement produire de la sorte et sur place de nouveaux sta-
des d'hiver uninucléés; ce processus parait être exceptionnel.

CŒLOMVCIDIUM SIML'LU NOV. GEN., NOV. SPEC. 201

Les aspects décrits plus haut comme second type des formes d'hiver
appartiennent probablement à des parasites dégénérés sous l'influence ré-
actionnelle des tissus-hôtes. Ce qui confirme cette façon de voir, c'est que ces
aspects furent trouvés en petit nombre, et à l'exclusion de tous autres, dans
les nymphes. Stkickland (i3) considère que les larves infectées ne subis-
sent jamais la nvmphose, parce que les histoblastes des larves infectées sont
arrêtés dans leur développement, et que par conséquent il n'y a pas de
nymphes infectées. V.u lait les nvmphcs sont infectées, mais elles le sont
par des parasites peu nombreux, et partant peu nocifs, arrêtés dans leur
évolution et même déj^énérés par la réaction des tissus-hôtes.

Nous n'avons observé aucun stade qui indique une transformation des
stades d'hiver en stades d'été, ou qui établisse une transition entre eux. Il
nous parait dès lors peu probable que les premiers se transforment sur
place; il est plus probable qu'au printemps les stades d'hiver évoluent libre-
ment dans l'eau.

3" Les slaJes d' Amœbidiurn rencontrés dans l'intestin des larves de
Simulium font peut-être partie du cycle d'évolution du Cœlomycidium.
Cette hypothèse, qui ne repose sur aucune observation directe et qui paraît
même un peu extraordinaire, est fondée sur les quelques remarques sui-
vantes :

a) Une espèce d Aiuœbidiinn se rencontre sur les larves de Simu/iiiiu,
tl'autres se rencontrent sur les phyllopodes ou dans leur intestin (Ch.atton,
06, a et /', R.\.\BE, 121. \.' Aiua'bidiuiu iuoi!ic{i i L.\bbé, gg) se rencontre éga-
lement sur un cooépode.

Dans les larves de Simiiliiiin on rencontre le Ccvlomvcidiinn, dans les
ph^yllopodes on rencontre les Polycariiini braiichipodianuni et lœve qui ont
une parenté étroite avec le Ca'loinycidiuin, et on y rencontre également le
Cœlosporidiii>n chvdcricola qui ai)partient vraisemblablement à la même
famille (pie les espèces précédentes.

b) Il existe une ressemblance frappante de taille et de structure
entre les novaux d'hiver du Ccvlonn'cidiiiin et les noyaux de ï Ainœbidiinn
du Siiniiliiiii! , rio. 53, 61.

cj On ne connaît de Y Aniabiiliuin qu'un cvcle probablement incom-
plet (Chatton, of), a et b\. UAnuvbidiiini parasiticimi, le seul qui soit plus
ou moins bien connu, forme des kystes à membrane épaisse, dans lesquels
s'accumulent, comme chez Polycar\-m}i, Oelosporidiiim et Bhisliilidiiini,
des réserves décrites comme graisseuses.

262 Paul DEBAISIEUX

dj ITEREZ (o3. '-)5) décrit succinctement le BLnUilidinni p(vdophloriim,
parasite des œufs pondus et des tout jeunes embryons de Daphnia obtusa;
(^HATTON (08) y décrit des zoospores {]ui se libèrent en sortant par un
prolongement en goulot de la membrane parasitaire. Les recherches de
Chatton font nettement apparaître la parenté cjui rattache le Blasliilidiiini
au Cœlouiycidiuin et également aux Ch\'tridinées. Or. une forme externe
enkystée, qui appartient probablement au même parasite, présente des rela-
tions de parenté frappantes avec les kystes à' Ainabidium . Chatton conclut
en disant : - par leur habitat, leur mode de fixation et leur structure in-
time, ces parasites énigmatiques présentent avec les Amcebidiuin d indéni-
ables ressemblances -.

c) Mesnil et Marchoux (97), dans la description ciu'ils donnent de
Ca'losporidhnn cliydencola, disent avoir trouvé sur le même hôte - des ecto-
parasites évoluant tout à fait comme les Anuebidiuiu. 11 est impossible de
dire si cet ectoparasite constitue un cycle particulier de développement de
Ca'lospnn'diuin : mais ce que l'on peut affirmei-, c'est qu'il en est très
voisin -.

/) Ar.EXEiEFE (14I, en étudiant Y Ic/it/ij-osporidiimi ^ûstcrophi/iim, c|ui
est certainement apparenté au Ca'lomycidium, écrit ; - à ce stade, (jn ne
peut manquer d'être frappé de la ressemblance (jue présente cette forma-
tion régulièrement sphériquc avec les kystes ù'Amœbid'.inn pavasiticiim -.

Si l'identité entre le Co'lomvcidiuiu et Y Aniœbidiiiiu se confirme dans
l'avenir, la signification des stades d'hiver du premier deviendrait plus
claire; le parasite aurait un cycle endogène (formes d'été) et un cycle exo-
gène (Amd'bidiuni évoluant comme l'a décrit Chatton, 06 a et b). Les
formes d'hiver seraient les homologues des formes exogènes, mais représen-
teraient un cycle d'hibernation évoluant lentement à l'intérieur clu corps et
à l'abri des conditions extérieures défavorables.

III. SYSTEMATIQUE.

Le Cœlomycidium fut découvert et succinctement décrit par Strickland
(i3), qui nous dit : - I sent prepared spécimens of the parasites to Profes-
sor Calkins, who very kindly replied that they probably belonged to the
order gregarinida. I hâve not, howcver, sufficient stages to be certain of
this, but if this be the case, there are one or two characters which are

CŒLOMYCIDIUM SIMULII NOV. GEN., NOV. SI'EC. 203

not quite in accordaiice witli tliosc usually connected witli gregarinida «.
Strickland a raison de réserver son jugement ; il est inutile d'insister sur
l'impossibilité de ce rapprochement.

Nous allons passer en revue quelques espèces qui paraissent appartenir
à la même famille que le Oeloiiiycidiimi; nous verrons ensuite quelle est
cette famille et quelles sont ses affinités.

a) Espcces j'oisiiics.

Stemi'Ell ioj! est parvenu à écrire trois études sur le genre Polyca-
liiini et à ne donner cjuc des descriptions d'aspects assez incohérents. En
glanant dans son texte et surtout en comparant ses dessins, nous arrivons
à la conviction cjuc Polycaiimn et Cœlomycidiiim sont deux genres à affi-
nités étroites. Il existe deux espèces : le Polycariiiin braiichipodianum, pa-
rasite de Braiichipiis ^Tiibei, caractérisé par des formes discoïdes, à capsule
portant des striations sur la tranche; le PolycariiDU lœpe, parasite de
Daphnia longispina, cjui possède des formes lenticulaires. Ce dernier mon-
tre des stades à épaisse membrane hyaline lamellaire à protoplasme chargé
de - graisse -, (jui disparait par la fixation à l'alcool, qui est colorablc en

- brun et même en noir - par l'acide osmique, qui est très colorable et diffi-
cilement différentiable par l'hématoxyline, et des formes à protoplasme plus
clair à membrane mince; chaque hôte n'héberge généralement qu'un stade
bien déterminé du parasite. Les formes à membrane mince donnent des

- spores - uninucléêes arrondies à une extrémité, très aiguës à l'autre, et
-probablement très mobiles sur le vivant-; d'après la description et les
dessins nous sommes persuadé que ces - spores - sont des germes flagel-
lés. Les individus enkystés - pourraient être des formes d'hiver, les indivi-
dus sporulants des formes d'été -.

Stempell (o3) et Caullerv et Mesnil (o51 rapprochent avec raison
les Polycariiiin de Qvlosporidium chydericola, Mesnil et Marchoux (97).
Cette espèce possède des formes enkystées en boudins de 60 à 100 u, à
membrane épaisse, à gouttelettes graisseuses, à noyaux vacuolaires avec nu-
cléole chromatique; et des formes probablement propagati\es à membrane
mince et sans réserves graisseuses.

Le parasite décrit par Ferez (o3, o5) sous le nom de BlastnlidiiDii p"--
dophtorwn fut rangé déjà par Caullery et Mesnil à côté de Cœlosporidiiim
et de Polvcaryiiin. Chatton (08) y a découveit des zoospores, et la des-
cription qu'il donne de cette espèce établit sa parenté avec Oe/oin]-cidiuiu.

3',)

264

Paul DEBAISIEUX

Caullekv et Mesnil (o5) groupent les espèces précédentes p(.nir en
former la famille des Qelospoj-idiida', et croient pouvoir en rapprocher
toute une série de parasites cju'ils réunissent sous la dénomination générique
de Seriinisporidiiim Pfr. Ces parasites sont trop peu connus pour qu'il soit
opportun d'en discuter les affinités. Les Berlrainia sont dans le même cas.
Leurs aspects plasmodiaux, leurs spores nues ont conduit Caullery et
Mesnil (o5) à supposer une parenté avec les CfflosporiâHdcV. Cette opinion
paraît confirmée par l'examen superficiel de Bertramia cisperospora
Fritsch, que nous avons trouvé dans des Brachionus pola EmrpjG. (forme
aniphicerosj, récoltés dans les étangs de Tcnniercii. L,es hôtes hébergeaient
en même temps deux formes, les unes boudinées à nombreuses spores rap-
pelant les formes d'été de Cœlomycidiiim les autres sphériques à enveloppe
hyaline à granules réfringents, rappelant les formes d'hiver de cette espèce.
Le matériel récolté ne se prêta pas à une étude cytologique. Cependant les
conclusions des études de Konsuloff (12, 14) sur le Bertramia rendent
impossible le rapprochen"ient entre ce genre et d'autres genres connus; mais
les détails que décrit cet auteur sont si particuliers qu'ils demandent con-
firmation avant d'être admis. Bertram (92), quoique n'ayant pas découvert
de zoospores chez les Bertramia, a songé à les rapprocher des Chytridinées.
Le Bertramia biifniiis Kiî^G (07) nous parait être mal dénommé; l'aspect
des spores rappelle d'une façon frappante l'aspect des spores de microspo-
ridies (Debaisieux, i5, i6). Il est vrai que l'auteur n'a pas observé de
filaments spirales, mais le fait n'a rien il'étonnant, étant donné cju'il n'a
eu à sa disposition que du matériel fixé et représenté seulement par un seul
objet.

Chatton et Brodskv, oq (voyez également Pénard, i3\ décrivent un
Spha'rita de VAniirta Umax, ijui par ses stades plasmodiaux, par ses stades
moruliformes et par ses zoospores, a une grande ressemblance et une pa-
renté évidente avec Ci-loinyciditim. Ce parasite doit être rangé avec les
Spharita de Dangeard (86, gS), parmi les Chytridinées olpidiacées.

Les recherches de de Beauchamps (14^! sur l'évolution et les affinités
de Dermocrstidium doivent nous arrêter un instant. Les parasites qu'il
étudie sont groupés en tumeurs à membrane nette dans la peau des tritons.
Ils se multiplient d'abord par bipartitic^ns. puis par divisions nucléaires ré-
pétées ils donnent des plasmodies à membrane distincte. Dans les plasmo-
dies, des germes uninucléés s'individualisent, et libérés dans l'eau ils se
présentent sous forme de zoospores de 2,5 \>- à fiagellum très long. L'auteur
croit avec raison avoir affaire -à peu près sûrement à une Chytridinée - . Il

cu;lomvcidil'm simulii now gen., nov. spec. 265

identifie ce parasite avec le Dcrniocysticiiiini de Perez ( i3l, Léger (14) et
DuNKERLEV (14) ; - il scmblc tout à fait invraisemblable qu'il s'agisse d'un
parasite différent. Il semble plausible que le parasite puisse, suivant les cir-
constances, évoluer de deux façons : en éléments de propagation constitués
par les zoospores nageant dans l'eau, qui transmettraient l'infection d'un
animal à un autre, sans doute directement par voie cutanée; en éléments
de résistance, constitués par des cellules à inclusions, qui seraient éliminés
en masse et resteraient inactifs dans le milieu jusqu'au jour où ils germe-
raient d'une façon inconnue-. Si Id légitimité de cette identification se vé-
rifie, la conclusion est logique et il existerait une parenté certaine entre
Derniocyslidiiiui et (jrlojuycidiuin.

Les recherches de Léger et Duboscq (09) sur le Cliytridiopsis n'au-
torisent pas le rapprochement entre cette espèce et le (ji'loujiycidiiini ; par
contre celles de Trégouboff j iji sur Chytridoidcs conduisent cet auteur à
conclure — un peu prématurément nous semble-t-il — que les particularités
de cette espèce -la rapprochent encore plus des Chytriclinées, et par là
même justifient la situation des Cdirtridiopsides au voisinage de ce groupe. -

La description par Alexeieff (14) d'Ichthyosporidiiiiii i^ûsternplii/iini,
quoique très incomplète et entachée d'h3'pothèses, fait cependant ressortir
de nombreuses caractéristiques (\m rattachent cette espèce au (jrlomyci-
dium .

b) La famille et les affinités.

D'après tout ce que nous venons de voir, les affinités naturelles de
C<i'loinycidiitni et des espèces voisines les rattachent é\idemment aux
Chytridinées.

Caullerv et Mesnil fo5) ont établi la famille des Cddosporidiidœ
(Pîaplosporidies, Sporozoaircs) pour abriter les Cndosporidinm. Polyca-
7-yuni et Blastiilidiuin. Elle devrait comprendre également le Cnlomyci-
diuni, mais certains caractères de ce dernier genre doivent en ce cas se
réfléchir sur les genres voisins. Le principal de ces caractères est l'existence
de zoospores. Nous avons vu que Chatton 108) les a observées chez Blaslit-
liditiin et (jue nous croyons à leur existence chez Polycarynni.

Nous ne croyons pas que l'introduction de ce caractère essentiel exige
un changement de nom pour la famille; cela ne ferait (]ue compliquer les
recherches à venir; mais elle entraine une interprétation nouvelle des affi-
nités de la famille.

266 Paul DEBAISIEUX

CAULLERvet Mesnil (o5, p. iJ5) discuta pyo\)vs âc Ber/i-aiiiia : -l'exis-
tence d'un stade flagelle n'impliquL-rail pas cju'il faille séparer cette espèce
des sporozoaires. - Ils ont en iiarlie raison, puisque nous ne savons pas
quelles sont les aftinités des sporozoaires, si tant est que ce groupement ait
cjuelque cohésion ; mais nous dirions volontiers : l'existence de zoospores
dans la famille des Cœlosporidiida' n'implique pas nécessairement qu'il
faille les séparer des néosporidies; elle se rattache peut-être aux plus primi-
tives, précèdent les Haplosporidiida' : mais elle implique nécessairement un
rapprochement avec les ("hytridinées.

Cette conclusion est en harmonie avec ce que Pavillakd (io) écrit à
propos des AinœbidiiDU. Même sans connaître la possibilité d'un cycle en-
dogène, il écrit : -on ne peut guère les rapprocher que des Chytridinées,
([ui offrent également, nous l'avons vu, d'incontestables affinités avec les
sporozoaires. -

c) Le genre et l'espèce.

Le genre le plus voisin du parasite cjue nous venons de décrire est le
Polycariitm. Il est caractérisé par la capsule disco'ide et sculptée, ou bien
lenticulaire, de ses formes enkystées, et nous possédons d'ailleurs troj) peu
de détails sur l'évolution des Polycaryiim pour oser ranger sous la même
dénomination le parasite du Simitliiim.

Il est donc nécessaire de forger pour ce parasite une dénomination gé-
nérique et spécifique nouvelle, et nous proposons de l'appeler Cœlomvci-
diiim simula.

Si un jour l'identité entre Clu-loniycidiuin et AiU"'bidiuin est confirmée,
la priorité reviendrait évidemment à ce dernier nom, mais il ne semble pas
qu'il soit utilisable, car il se confirmerait alors aussi que YAmivbidium, re-
présente le cycle exogène de parasites dont les cycles endogènes différent
au point qu'il est impossible de grouper les différentes espèce sous une
même dénomination générique; il faudrait distinguer diff"érents genres
ayant tous un stade Amabidiuin.

RESUME.

I. Le Cu'lomycidium siniulii, parasite de la cavité générale des larves
de Siinulium, se présente sous deux formes principales correspondant à deux
périodes du cycle.

CŒLOMVCIDIUM SlMULll NOV. GEN., NOV. SPEC. ZbJ

2. Les forincri d'été mesurent de quel(]ues v. à luo y.. Le piotuplasme
est clair, il n'y a pas de membrane ciik3'stante. Les no3'aux se divisent par
bipartitions; ils possèdent un ,<j,ros granule chromatique (jui se morcelle et
persiste pendant les divisions. Les divisions qui précèdent immédiatement
la sporulation (probablement les deux dernières) diffèrent des autres par le
fait (]ue la réserve chromatique disparue, n"y participe pas.

3. Les formes d'été se résohent en zoospores qui possèdent un long
llagellum en rapport a\ec le noyau et un noyau accessoire. Après quel(]ue
temps de \ie libre, les zoospores deviennent amiboïdes et perdent leur Ha-
gellum.

4. Les formes d'hiver mesurent 18 à 180 y. Le protoplasme est bourré
d'enclaves, parmi lesquelles des gouttelettes d'aspect huileux. Elles sont pro-
tégées ]iar une très épaisse membrane hyaline enkystante. Les noyaux sont
volumineux à gros caryosome sphéri(jue; ils se divisent par bipartitions.
L'évolution de la iorme d hiver ne put être observée.

5. Le cycle d'évolution n'a pu être précisé; la plupart des stades pré-
sentent de grandes ressemblances avec ceux de XOlpidiuiii vicia' Kusano
(12); il semble (jue le cycle se rapproche de celui de cette espèce.

6. Il 3' a de bonnes raisons de croire que les formes Aniirtidiuui qui
vi\ent dans le rectum des larves de Sinuilimu appartiennent au cycle d'évo-
lution du (j'ioniycidiiiiu.

7. Le Gi'loniycidiiini appartient à la famille des (jplospuridiidiv.
Caulleky et Mesnil ioti; il s'y trouve rangé à côté du C'closporidiiiiii ,
PolycaryiDn et Blastu/iditnn. Plusieurs autres espèces doivent être provi-
soirement annexées à cette famille.

8. La famille des Cr/osporidiidiV doit être rattachée aux Chytri-
dinées.

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•

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1913 Wager : The life-historv and cytology of Polyphagus eiiglena; Ann.

of Bot., t. 27.
ior3 Winge : C}'tological studios in the Plasmodiophoracea ; Ark. for Bo-

tanik, t. 12.

40

EXPLICATION DES PLANCHES.

La combinaison optique (Zeiss) employcc pour les dessins fut fonnée de l'objectif imm.

1.5 m.m. et de l'oculaire iS {gross. lin. 3ooo).

Quelques dessins marqués sur les planches de l'indication « i'3 ii sont exécutés à l'aide

de Voculaire 6 {gross. lin. looo). La projection fut faite an niveau de la platine du
microscope par le prisme Nachet.

L'échelle de grossissement en tête de la planche I rend compte de la dimension réelle des
dessins exécutes avec l'oculaire iS.

Ahrévi AXIONS : B. Liqueur fixatrice de Bouin.
Z. » » Zenker.

S. Sublime alcool.

H. Colorant hcmatoxyline de Heidenhain.
D. )) « Delaeield.

PLANCH E I.
Formes d'été.

FIG. 1. Cellule graisseuse pioximale attaquée par plusieurs parasites jeunes
uninucléés ou plasmodiaux. L'une des plasmodies (à gauche, en haut) est partiel-
lement libre, partiellement entrée dans la cellule graisseuse ; une autre (à gauche,
en bas) est complètement libre et possède des noyaux en division. Ce même hôte
contient imiquement, mais en noml)re énorme, des jiarasites au même stade. B. H.

FIG. 2. Cuticule chitineiise et cellules graisseuses distales (uriques) contenant
des parasites jeunes uninucléés on plasmodiaux. Ce même hôte héberge surtout des
païasites beaucoup plus évolués, se résolvant en ;^ùospores. Z. H.

FI(j. 3. Jeune parasite uninucléé en divisi(}n nucléaire. B. H.

FI(j. 4. Probablement un jeune parasite intracellulaire. B. H.

FIG. 5. Cellules de l'hôte, l'une d'elles en cinèse, et parasite. B. H.

274

Paul DEBAISIEUX

FIG. 6. Idem. Les plasmodies parasitaires semblent à première vue avoir
la chromatine disposée en appareil chromidial. Cet aspect, dû à une conservation
imparfaite, représente en réalité des noyaux individualisés, dont plusieurs même sont
en division. B. H.

FIG. 7. Parasites jeunes, avec noyaux en division. B. H.

FIG. 8. Parasite jeune, avec no\aux au repos. B. H.

FIG. 9. Aspect sur le vivant d'un parasite plasmodial, à comparer avec les
aspects fixés des ric. 13 à 18. Dimensions réduites au i/3.

FIG. 10. Aspect sur le vivant d'un parasite se transformant en zoospores, à
comparer avec les aspects fixés des fig. 19 à 26. Portion du parasite sphériquc
réduite au 1/3.

F"IG. 11. Fragment d'un parasite plasmodial à noyaux contenant de voUuni-
neuses enclaves chromatiques. B. H.

FIG. 12. Parasite au même stade. B. H.

FIG. 13. Idem. Le dessin ne représente qu'un segment allant du centre à
la périphérie de la plasmodie. B. H.

FIG. 14. F'ragment de plasmodie avec des noyaux au repos; les éléments
extracar)osomiques sont bien visibles. B. H.

FIG. 15. Idem. Le corps chromatique de réserve disparaît; le réseau chrn-
matique est nettement visible et bien formé. B. H,

FKj. 16. Même stade que le précédent avec divisions nucléaires. B. 11.

FIG. 17. Idem. L'n axe achromatiijue parait former le centre de la figure
mitotique. B. H.

I'"IG. 18. Stade plasmodial avec divisions nucléaires sans réserve chroma-
tique dans les nov^aux; elles appartiennent aux dernières divisions nucléaires. B. H.

FIG. 19. Résolution de la plasmodie en éléments iminucléés; certains de ces
novaux montrent déjà une ébauche de division B, II.

FIG. 20. Même stade plus avancé : plusieurs noyaux en voie de division;
l'un des individus (à droite) possède deux noyaux-filles, résultat de la division.
B. H.

FIG. 21. l'ragment d'un individu réduit en zoosporoblastes B. H.

FIG. 22. Dans le protoplasme des zoosporoblastes apparaît une ébauche de
filament, en ra])port avec le no)au. Z. H.

FIG. 23. De fins granules chromatiques apjiaraissent dans le protoplasme des
zoosporoblastes. B. H.

C(KLOMVCll)lUM SIMULII NON'. GEN., NOV. 5PEC. 270

I-'K;. 24. Les cnclaxos chruinatiqucs deviennent [ilus iniiioiUmtes ; sou\ent m
tigellc boudinée. B M.

FKi. 25. Accentuation du même processus; les enclaves clmnnatiques se ré-
duisent à un ninau accessoire généralement intensément colorable. Z. H.

l'"IG. 26. Zousiiures mûres; contenant un no\-au auquel est accolé le noyau
accessoire. B. H.

l'^IG. 27. Zoospores et individus unis ou paucinucléés (comparez i-ig. 2) sortis
du corps de la larve après éclatement spontané. Les zoospores possèdent ini gros
novau accessoire postérieur assez peu colmable, un noyau piriforme antérieur, en
relation avec le flagellum, et un jietit amas de (Quelques granules réfringents. Les
flagella apparaissent assez courts, parce qu'ils sont sectionnés par le rasoir. 1!. H.

l'IG. 28. Zoospore observée sur le vivant, composée comme indiqué ci dessus

l''IG. 29—31. Zoospores libres, composées comme indiqué ci-dessus Fixât, sur
porte-objet à l'acide osmique, coloration (jIEMSA. Le dessin est reproduit en ton
sur ton ; la préparation montre le no\-au rouge franc, le noyau accessoire bleu
sombre; les granules réfringents sont colorés en bleu, mais facilement décolorables.
(Quelques vacuoles dans le protoplasme.

FIG. 32. Zoospore libre dans l'eau depuis plus d'une heure Acide osmiiiue. H.

FIG. 33. Zoospore se transformant en amibospore. .Acide osmique, Chkmsa.
Coloration réelle comme {tour les fig. 29 — 31. la partie inléricure du protoplasme
très claire, partie supérieure un peu plus colorable.

I-IG. 34. Idem.

l'IG. 35. .Amibospores possédant encore une ébauche de fiagellum. Le dessin
reproduit cjuatrc aspects d'un même individu observé sur le vivant pendant environ
5 secondes.

¥\G. 36 — 37. Idem, .\spect sur le vu-ant, le prolongement inférieur, plus
épais ipi'un flagellum, bat rapidement; la partie supérieure protoplasmique est légè-
rement annboïde.

b"IG. 38. Amibospores. Différents aspects d'un même individu \ivant observé
jicndant S .'i lo secondes.

FIG. 39. Amibospore. .Vcide osmique, Che.msa. Coloration réelle comme pour
les riG. 29—31.

PLANCHE II.
Formes d'hiver.

FK.. 40 — 42. Parasites uninucléés, jeunes formes d'hiver observées dans une

ar\ e

à infection simultanée par des formes d'hiver et d'été (mi-décembre). B. IL

276 Paul DEBAISIEUX

l'Ui. 43. I'"ormes d'hiver jeunes unimu'léées. S. H.

l'I*' 44. l'onnes d'hiver jeunes avec ou sans enchives piiitniil.tsiiiii|iirs. Les

diftéronts individus sont groupés en ]>etit amas, séparés l'un de l'autre par une

membrane hyaline devenue invisible sur la préparatinn éclaircie. l^réparatiMH pro-
venant de la même larve que celle des ik;, 40—42. J!. II.

hl(r. 45. l-'(jrine d'hiver jerme, jiaucinucléée et sans enclaves. Même piépa-
ration (]ue le dessin précédent. B. H.

l'Kj. 46. Deux formes d'hiver observées sur h- \i\ant, entourées d'iuie nnn( c
membrane ]i\aline. Le dessin ne leproduit (pi'uu sei^nient des indi\i'lus entiers, et
est réduit au i/j du grossissement habituel.

l'Ki. 47 }'"orme d'hiver à ép;iisse membrane. Dessin fait d'après le \ivant et
léduit au 1 3.

l'K-i. 48. L'orme d'hiver; dessin réduit au i/j et mDUtr.int l'aspect de la
menibrani' siu' ccaipes colorées dans ce but. S. D.

L'Rj. 49. iMagment d'une plasmodie fc}rn)e tl'hiver. B. II.

l'I(,. 50. Idem. S. H.

Il<'. 51. li'cui, les noyaux sont t'u division. D. H.

i'iCi. 52. Idem. L'allure particulière des nnyaux repiésente pi obableiucnt l.i
préparation à la division. S. H.

L"I<>. 53. L'ragment d'une [ilasmodie forme d'hivei-. Z. H.

l'Ui. 54. l'orme d'hiver se résolvant m plasmcjdies plus simples. Dessin n''-
tluit au i/i. il. PI.

l'Ki. 55 — 58. Diverses formes d'hiver dessinées sur le vivant et représentant
probablement des stades de dégénérescence de la forme sphéri(iue normale. Dessin
réduit au l'5.

L'K/. 59. Idem. S H.

l'K,. 60. Idem. D. H.

FIG. 61. Idem. S. H.

l'iG. 62. Amœbidium intra-intestinal de la lar\e de Simulium. (dupe transver-
sale d'un individu grêle Dessin réduit au i 3. IS. H.

blG. 63. Awabidium. Coupe longitudinale d'un individu rtibuste passant à tra-
vers le i.)oint d'implantation sur la cuticule intestinale. Dessin réduit au i/3. l'>. II.

FIG. 64. Anurhldium. Novau. Vu au niêine grossissement que les tonnes d'hi-
ver de Calomycidium, mg. 45, 53, etc. H. II.

TABLE DES MATIÈRES.

I. Partie descriptive ....

A. Aspect niacroscopii|ue et étuJe sur le vivant

1. Formes d'été

2. Formes d'hiver .

3. Infection mixte .

B. Ktude sur matériel lixé .

1. Stades d'été

2. Stades d'hiver .

C. h'AmiVbiiiimn des larves de Siniuliiiin
II. Interprétation et discussion

III. Systématiijue.

Résumé .....
Bibliographie ....
Explication des planches

25o
25o
25o

231
252
252
252
256

25S
25g

2fj2

266
269

273

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Notes sur le Myxidium liberkiihni Biitscli

PAR

Paul DEBAISIEUX,

PROFESSEUR A L UNIVERSITÉ DE LOUVAIN.

(Mémoire déposé le 2 février igiS.)

u

Notes sur le Myxidium liberkùhni Bùtsch

En recherchant clans le brochet {Esox luciiis L.) les myxosporidies
que cet hôte héberge, nous avons trouvé des parasites des canalicules ré-
naux et des kystes parasitaires dans le tissu du rein. A part Pfeiffer (gi)
qui a cru observer des stades de Myxidium liberkiihtii dans les globules du
sang, on a toujours considéré ce parasite comme exclusivement vésical.
Thélohan (94) nous dit que "les espèces qui habitent les tubes rénaux ne
se trouvent jamais dans la vessie et réciproquement ; le Myxidium liber-
kiiluii par exemple, hôte de la vessie urinaire du brochet, ne se rencontre
jamais dans les uretères ou dans le rein. - Le fait que les parasites rénaux
n'ont jamais été signalés par les nombreux auteurs qui ont étudié cette es-
pèce, permettrait de croire à priori que ce sont des espèces nouvelles; il
serait curieux en effet, que des kystes parasitaires, visibles à l'œil nu, aient
échappé à l'attention des observateurs, d'autant plus nombreux que le
parasitisme par le Myxidium liberki'ihni est donné comme exemple par la
plupart des manuels de pratique protozoologique.

Un examen minutieux montre cependant que ces parasites rénaux ne
sont que des formes spéciales et des stades d'évolution du Myxidium liber-
kiihni ; ils marquent, dans son mode de vie, des particularités non encore
observées chez les myxosporidies et intéressantes au point de vue des rap-
prochements possibles avec d'autres groupes.

Il y a plusieurs années déjà que nous avons observé ces parasites pour
la première fois; afin d'en approfondir l'étude, nous nous sommes efforcé
d'obtenir du matériel en abondance; malheureusement les brochets sont
devenus momentanément si précieux que nous avons eu de la peine à nous
en procurer une dizaine. Ce fut assez pour susciter bien des énigmes, c'est
trop peu pour répondre à la plupart; peut-être pourrons-nous les solution-
ner en des temps meilleurs, quand les brochets seront plus accessibles aux
recherches de laboratoire et que nous aurons pu nous procurer d'autres es-
pèces de myxosporidies, qui serviront de matériel de comparaison.

42

282 Paul DEBAISIEUX

Les brochets examinés furent péchés aux environs de Louvain, dans
la Dyle ou ses affluents, aussi bien en hiver qu'en été; ils mesuraient de 20
à 60 ctm. de long. Sur dix individus examinés, six présentaient dans le
rein des kystes bourrés de parasites. Parmi ces six, cinq avaient des para-
sites dans les canalicules du rein et dans la vessie urinaire; deux portaient
sur les branchies quelques rares tumeurs provoquées par VHennegiiya pso-
rospennica Thél.

L'allure de l'infection vésicale et des parasites qui l'habitent est suf-
fisamment connue par les mémoires spéciaux (Thélohan, g5, Cohn, 96) et
par la plupart des traités, même élémentaires.

L'infection des canalicules rénaux se reconnaît aisément en dilacérant
sur le vivant des fragments de rein et en les examinant au microscope :
on observe alors des spores fusiformes à surface longitudinalcment striée,
à deux capsules polaires terminales et opposées, et l'on observe aussi de
petits parasites plasmodiaux polynucléés irréguliers mesurant 5 à 20 \>-.
L'étude des coupes renseigne plus exactement sur la localisation et la
structure des parasites. Ils sont accumulés dans la lumière des canalicules
rénaux, fig. 2, 3, 4 p, 6, 7, à tous les niveaux et se rencontrent même, mais
exceptionnellement, dans la lumière des capsules de Bowman qui entourent
les glomérules de Malpighi, fig. 3, 4 c, B. Au point de vue de leur structure,
ce sont des plasmodies poly nucléées de dimension et d'aspect variables suivant
le stade, fig. 6, 7; on retrouve en effet dans ces plasmodies toutes les étapes
de formation des spores de myxosporidies polysporées et des spores ache-
vées. Ces parasites diffèrent des Myxidium liberki'ihni qui parasitent la ves-
sie, parce qu'ils sont beaucoup plus petits ; nous ne les avons jamais vus an-
crés aux parois épithéliales, comme. cela s'observe dans la vessie; les noyaux
y sont plus densément accumulés que dans les plasmodies vésicales; les spo-
res sont généralement plus petites et plus trapues. Les fig. 6 et 7 montrent
des spores dans les canalicules. la fig. 9 des spores observées dans la ves-
sie, et ce sont là des exemples à dimensions moyennes; on trouve dans
les canalicules des spores de 11: à 20 |j-, dans la vessie des spores de 18 à
22 jj.. La structure des spores est absolument identique dans les deux cas;
il en est de même des noyaux plasmodiaux et des stades de sporogonie. Si
l'on ajouteàcela que, dansles cas observés, ily avait constamment coexistence
des deux infections, il apparaît clairement que les parasites des canalicules
rénaux appartiennent à la même espèce que les parasites vésicaux; les dif-
férences de dimensions sont dues sans doute à des différences de nutrition.

NOTES SUK LE MYXIDILKM LIBERKÛHNI BUTSCH 283

Les kystes parasitaires du rein se reconnaissent à l'œil nu; ils se trou-
vent dans le tissu rénal, souvent superficiellement; ce sont de petites sphc-
rules blanches ou argentées, grosses parfois d'un millimètre; ils sont souvent
réunis à plusieurs, en petits amas, et ont l'apparence de minuscules bulles
d'air qui seraient introduites dans les tissus; une ou plusieurs dizaines de
kystes, parfois une ou plusieurs centaines, sont éparpillés dans tout le rein;
ils ne forment cependant jamais c]u'une très minime partie de la masse de
l'organe.

Examinés à frais, ces kystes laissent échapper, dès qu'ils sont incises,
des centaines et des milliers de corpuscules de quelques {i. de diamètre; leur
nature ne peut-être reconnue qu'après coloration et sur coupes. Sur coupes
les kystes apparaissent isolés ou groupés; ils mesurent i5o à looo y.. Le
plus petit que nous ayons observé, fig. l, montre une localisation très par-
ticulière, qui paraît être typique; le kyste est logé dans un glornérule de
Malpighi et distend la capsule de Bowman qu'il emplit. Les kystes volu-
mineux, et par conséquent plus âgés, sont plusirréguliers, souvent groupés à
plusieurs et entourés de tissu rénal réactionnel devenu fibrillaire, fig. 2;
c'est cette membrane fibreuse épaisse qui donne au kyste examiné à frais
ses reflets argentés. Toujours les kystes sont en rapport avec les glomérules
de Malpighi; mais un fait difficile à interpréter, c'est qu'un même kyste
peut être en rapport avec deux ou plusieurs glomérules, fig. 4. Il semble
qu'en se développant il refoule les tissus rénaux jusqu'à entrer en contact
avec des glomérules primitivement intacts. On rencontre parfois de vieux
kystes presque complètement vidés de leur contenu, et envahis par du
tissu conjonctif cicatriciel et par des leucocytes.

Chaque kyste contient, outre les individus parasitaires, un ou plusieurs
noyaux considérablement hypertrophiés, fig. l, 2. 4. Ce ne peut être c]ue
le noyau de la cellule-hôte; d'abord unique, il peut probablement se diviser
et donner deux noyaux globuleux, fig. 2, ou bien se développer considéra-
blement et devenir irrégulier à contour peu distinct, fig. 4.

Les parasites eux-mêmes qui remplissent le kyste forment des individus
bien distincts; ils plongent dans une substance fondamentale homogène,
le protoplasme de la cellule-hôte; ils sont tantôt tassés et serrés les uns
contre les autres, tantôt ils sont, à certains endroits du kyste, un peu épar-
pillés et laissent des plages protoplasmiques presque libres, fig. 2. Chaque
individu est sphérique, mesure 3 à 6 i^.; il en est qui ne possèdent qu'un
noyau, d'autres en possèdent trois, quatre et peut-être davantage; il en est
de tout bourrés de granules chromatophiles, d'autres à structure difficile-

284

Paul DEBAISIEUX

ment analysable. Le plus souvent ils possèdent une membrane bien dis-
tincte; dans le protoplasme plus ou moins rétracté se trouvent deux noyaux
à caryosome, et un ou deux noyaux, plus petits et plus irréguliers, sont en
rapport avec la membrane, fig. 5; nous ne sommes pas actuellement à
môme de décrire l'origine et le dévelojipement complet de ces parasites.
Bien des détails ont pu être observés, mais ils ne forment pas un ensemble;
il importe de remarquer cependant que, quelsque soient l'âge et la dimension
du kyste étudié, — nous en avons observé des centaines, mais les tout petits
n'ont pu être découverts, — Tallure générale des parasites qu'ils contiennent
est la même. Une seule fois nous avons observé au centre d'un kyste déjà
volumineux une plasmodie analogue à celle que l'on rencontre dans les ca-
nalicules rénaux, fig. 8.

Les kystes sont en rapport avec les glomérules de Malpighi, et très
fréquemment on observe que des parasites s'échappent en masse ou isolé-
ment dans la capsule de Bowman, fig. 4, c, B. Là on les trouve parfois
côte à côte avec des petites plasmodies parasitaires, et dans certains cas on
a l'impression qu'en se développant ils donnent naissance à ces plasmodies.
D'autres fois les parasites kystiques emplissent complètement la lumière
d'un canalicule rénal et y sont entremêlés de spores et de tous les stades de
sporogonie, isolés et non contenus dans des plasmodies, fig. 6.

La première question qui se pose à propos des parasites kystiques, c'est
de savoir s'ils représentent des stades d'évolution du Myxidiiini liberkiihni.

Ils s'écartent tellement de tous les aspects connus des myxosporidies,
il semble si étrange qu'ils n'aient jamais été observés par ceux qui ont étu-
dié les parasites du brochet et ils sont si différents des stades d'évolution
typique de cette espèce, que l'on serait tenté de les considérer comme un
parasite nouveau. Leur étude attentive conduit cependant à conclure qu'ils
représentent certainement un stade d'évolution du Myxidiiim liberkiïhni.
Les parasites kystiques avec leurs deux noyaux centraux et les noyaux de
membrane, ne peuvent être rangés dans aucun groupe de protozoaires, si
ce n'est celui des myxosporidies; ils n'ont en effet d'analogie qu'avec les
aspects du début de la sporogonie de ce groupe. D'autre part, l'existence —
exceptionnelle il est vrai — au centre des kystes de plasmodies analogues
aux plasmodies des canalicules, fig. 8, l'absence dans le rein ou la vessie
de tout autre stade pouvant apparteniràunemyxosporidie d'espèce autre que
le Myxidium liberkiïhni, le mélange dans les capsules de Bowman de pa-

NOTES SUR LE MYXIDIUM LIBERKIHNI BCTSCU ::85

rasites kystiques et de plasmodies, et surtout l'existence dans les canalicu-
les de parasites kystiques intimement mélangés à tous les stades de sporu-
lation du Myxidium liberkuhni isolés, fig. 6, prouvent à l'évidence que ces
parasites constituent un stade de l'évolution du Myxidium liberkuhni. Ce
stade constitue-t-il une étape nécessaire de l'évolution de ce parasite ou
bien est-ce un stade exceptionnel et accessoire; il faudrait, pour résoudre cette
question, étudier un matériel beaucoup plus abondant que celui qui fut à
notre disposition et provenant de stations différentes; dans les brochets
que nous avons examinés, nous n"avons jamais observé d'infection vésicale
qui ne fut accompagnée d'infection kystique du rein; le contraire n'est pas
vrai, et il existe des kystes rénaux sans infection vésicale, mais ce fait ne
contredit pas la conclusion, car l'infection vésicale peut être guérie, momen-
tanément inexistante ou pas encore établie, alors que l'infection rénale
existe.

Une interprétation donnée plus haut et qui considère les kystes comme
des cellules-hôtes hypertrophiées et parasitées, mérite un mot de commen-
taire. L'existence des noyaux géants n'a pas été jusqu'à présent observée
chez les myxosporidies, et la question se pose de savoir si ces noyaux ap-
partiennent au parasite ou à une cellule-hôte hypertrophiée par le parasi-
tisme. La première interprétation serait inconciliable avec tout ce que l'on
connait des myxosporidies; elle ne rendrait aucun compte ni de l'origine ni
du rôle de ces noyaux et entraînerait une conception toute nouvelle et toute
hypothétique de l'évolution des myxosporidies. La seconde interprétation
cadre parfaitement avec les coimaissances acquises sur les myxosporidies;
elle admet simplement l'existence, à côté des stades libres, de stades intra-
cellulaires. L'hypertrophie des cellules-hôtes parasitées est dans ce cas ab-
solument comparable à celle qui a été plusieurs fois observée dans les cas
de parasitisme par des microsporidies. Nous avons discuté dans d'autres
mémoires, Debaisieux et Gastaldi (i5), Debaisieux (i6) la valeur des noy-
aux géants observés chez les myxosporidies. Le cas observé ici ne fait que
confirmer les conclusions données alors, et ce nouvel exemple constitue un
argument de plus pour affirmer le rôle hypertrophiant des parasites intra-
cellulaires.

Nous nous défendons, faute de matériel et d'objets de comparaison,
de parler des détails d'évolution du Myxidium liberkuhni ; nous ne voulons
donner qu'un bref aperçu de la façon dont nous envisageons les relations

286 Paul DEBAISIEUX

entre les divers aspects observes. L'infection typique est vcsicale ; les plas-
modies amiboïdes remontent dans l'uretère et dans les canalicules rénaux,
jus(|ue dans les capsules de Bowman, où on les rencontre parfois alors même
i]ue le glomcrule est intact, fig. 3. Dans ces canaux le parasite évolue nor-
malement et complètement, mais donne naissance — vu l'exiguité de l'es-
pace et la nutrition moins abondante — à des formes plus petites, fig. 7.
Le parasite peut aussi — nécessairement ou accessoirement — pénétrer
dans des cellules de l'hôte et s'y développer en entraînant une hypertrophie
considérable de la cellule, fig. l, 2. A l'intérieur de la cellule, il n'y a pas
d'évolution complète du parasite; il n'y donne naissance qu'à des individus
à deux gros noyaux et à un ou deux noyaux de membrane, fig. 5. Ces indi-
vidus s'échappent de la cellule-hôte dans la capsule de Bowman, fig. 4, et
dans les canalicules rénaux, où leur évolution progresse suivant un processus
encore indéterminé.

BIBLIOGRAPHIE.

i8g5 CoJiii, L. : Ueber die Myxospoiidien von Esox liicius und Perça flu-

viatilis ; Zool. Jahib., Abt. Anat. und Ontog., t. g.
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Cellule, t. 3o.
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La Cellule, t. 3o.
1891 Pfeijfer, L. : Die Protozoen als Krankheitscrreger ; 2'=édit., Jena, 1S91.

1894 Théltihan. P. : Recherches sur les Myxosporidies ; Bull. Scien. France

et Belgique, t 26.

EXPLICATION DES FIGUREvS.

Les dessins furent faits au prisme de Nachet, projection au niveau de la table. Les
figures 5 (i 9 furent reproduites d'après la combinaison optique Zeiss : ob]. imm.
1.5 mm. X ocul. i8 (gross. lin. 3ooo). Une échelle au bas de la planche rend compte de
la dimension réelle de ces dessins. Les figures 1, 2, 4, dessinées à l'obj. DD X ocul. 6,
sont grossies 33o fois, réduites du 1/9 de l'échelle. La figure 3, dessinée à l'obj. A X ocul. 6,
est grossie 80 fois, et par conséquent réduite au i 37 de l'échelle.

Tous les dessins sont reproduits d'après des coupes à 4 [->. colorées à l'hématoxyline de
Heidenhain.

FIG. 1. K^■ste du rein, relativement petit; il est bourré de parasites indivi-
dualisés et contient au centre un noyau hypertrophié. Le kyste est logé dans le
tissu d'un glomérule de Malpighi et complètement enveloppé par la capsule de
BowMAN. c. B. (DD X 6, gross 33o.)

FIG. 2. Groupe de kystes affleurant à la surface du rein; ils sont envelop-
pés de tissu fibrillaire réactionnel ; dans plusieurs la coupe traverse un ou deux
noyaux hypertrophiés; les parasites sont plus ou moins densément accumulés; dans
deux k3-stes on voit le rapport qu'ils ont avec le glomérule de Malpighi et la cap-
sule de BowMAN [c, B.). Un grand nombre de canalicules rénaux sont diversement
attaqués par la coupe; plusieurs sont remplis de parasites (p). (A X 6. gross. 80.)

FIG. 3. Glomérule de AIai.pighi normal; la capsule de Bow.man se prolonge
par le canalicule rénal. Le canalicule est bourré de parasites (p). Un individu plas-
modial est logé dans la capsule même. (DD X 6, gross, 33o.)

FIG. 4. Kyste rénal de dimension moyenne. 11 est bourré de parasites indi-
vidualisés et contient un très volumineux noj-au de forme irrégulière. Il est en
rapport avec trois glomérules de Malpighi, et les parasites se déversent dans les
capsules de Bowman (c, B.). Dans les canalicules rénaux et même dans une cap-
sule, il y a des parasites plasmodiaux. (DD X 6, gross. 33o.)

FIG. 5. Portion de coupe d'un kyste; les parasites individualisés plongent dans
le protoplasme du kj'ste. (i,5 X 181 gross 3ooo.)

290 Paul DEBAISIEUX

FIG. 6. Parasites dans un canaliculc du rein. On y retrouve des parasites
kystiques et tous les stades de sporogonie non contenus dans une plasmodie.
(i,5 X i8, gross. 3ooo.)

FIG. 7. Parasites contenus dans un canalicule du rein. Ce sont des parasites
plasmodiaux; à leur intérieur on observe jilusieurs stades de sporogonie (i,5 X iS,
gross. 3ooo.)

FIG. 8. Section de coupe d'un kjste ; au milieu des parasites typiques à
deux gros noyaux avec caryosome, il }■ a un gros parasite plasmodial, (i,5 X i8>
gross. 3ooo.)

FIG. 9. Spores contenues dans un parasite plasmodial de la vessie (i,5 X i8»
gross. 3ooo.)

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^Debaj<!ieux ciel

jtà.H.Jacoô Brux.

F BJesemans Sculp.

Hapiosporimuin (IliDGhinia) ciitoDis Laot

Haplosporidium nemerlis, doï. sp.,

et le groupe des Haplosporidies

PAR

Paul DEBAISIEUX,

PROFESSEUR A L UNI VERSITÉ.

INSTITUT DE ZOOLOGIE. — LOUVAIN.

(Mémoire déposé le 20 mai-:, ig20.)

43

Hapiosponûiuni (PliDcliinia) cuitoois LanR., Haplosporiflium nemeriis, Dov.sp.,

et le groupe des Haplosporidies

INTRODUCTION.

Ce que l'on connait du genre Haplosporidium se réduit en somme aux
observations de Caullery et Mesnil (o5) et à celles de Granata ( 14). Caul-
LERY et Mesnil, en un travail très documenté, décrivent cinq espèces; ils
en ébauchent, très judicieusement d'ailleurs, le cycle d'évolution. C^ranata
fait l'étude très détaillée d'une espèce et l'accompagne de nombreux dessins,
parlants comme des schémas; en ce qui concerne le cycle d'évolution, il
semble cependant qu'il laisse dans l'ombre des faits essentiels et qu'il sim-
plifie un peu trop des phénomènes qui, d'après l'étude des matériaux que
nous avons sous les yeux, apparaissent en réalité plus complexes.

Des six espèces d'Haplosporidiitin antérieurement connues, quatre
parasitent les Polychètes et deux les Oligochètes. Nous avons eu l'occasion
de faire l'étude de deux espèces : l'une, indûment appelée Alinchiuia,
parasite un Mollusque; l'autre, nouvelle, parasite un Némertien. L'étude de
ces deux espèces donne des résultats tout à fait concordants ; nous décrirons
simultanément leur évolution et ferons ressortir en un paragraphe final les
traits caractéristiques qui les différencient. Les dessins, tous reproduits
à la même échelle, sont répartis en deux séries : les dessins i à 35 se
rapportent à Y Haplosporidium dii/onis, les dessins 36 à 52 à Y Haplospori-
dium nemertis; nous avons cru bon de reproduire pour chaque espèce les
stades essentiels, mais superHu de répéter deux fois les stades transitionnels;
nous les avons choisis dans l'une ou l'autre espèce suivant qu'ils s'y pré-
sentent plus clairement.

294 ^^"* DEBAISIEUX

MATERIEL, METHODES. SYNONYMIE.

a) Haplosporidium chitonis Lank.

Ray Lankester (gi) a figuré des spores remarquables, à deux longs
appendices, lun antérieur l'autre postérieur, découvertes dans des Chitons;
il les attribue à des Coccidies du genre Klossia et crée l'espèce K. chilonis.
Labbé (gg) découvre dans Acanthochites (Chiton) fascicularis L., de Ros-
coff, de nombreux stades coccidiens et voit les spores de Ray L.ankester
dans des Chitons reçus d'Angleterre. Il fait rentrer ces divers stades dans le
cycle d'évolution d'une même espèce, pour laquelle il crée un genre nouveau :
Miiichinia, espèce chitonis M^» Pixell-Goodrich ( ] 5) retrouve dans le Crcis-
pidochilus cinereiis L., de Plymouth, les spores décrites par Ray Lankester;
elle fait une étude succincte du parasite au cycle duquel elles appartiennent,
n 3' retrouve pas les stades coccidiens observés par Labbé, mais l'identifie
avec Miuchinia chitonis; elle range ce genre parmi les Haplosporidies.

Dans une note préliminaire (ig, a), nous avons fait ressortir qu'il existe
dans les Chitons deux espèces très différentes, à propos desquelles s'est pro-
duit un imbroglio complet. Labbé a confondu sous le nom Miiichinia des
stades Coccidiens (parasites de Acanthochites fascicularis) appartenant à
une espèce voisine des Pseiidoklossia de Léger et Duboscq (i5, 17) et des
stades de sporulation d'Haplosporidie, ceux vus par Ray Lankester (para-
sites probablement de Craspidochilus cinereus). AL^ Pixell-Goodrich a
étudié l'Haplosporidie dont Ray Lankester et Labbé ont vu les spores;
elle la présente sous le nom de Miuchinia. D'après nos recherches, cette
espèce appartient indubitablement au genre Haplosporidium. Il convient
donc de laisser tomber le nom générique Miuchinia et de le remplacer par
Haplosporidium ; aucun des deux n'a la priorité; ils datent l'un et l'autre de
189g (Labbé, gg, et Caullery et Mesnil, gg), mais le nom Minchinia prête
à confusion parce que créé pour une espèce composite, et d'autre part le
nom Haplosporidium, appliqué déjà à une demi-douzaine d'espèces, a
acquis droit de cité dans la littérature.

Nous avons retrouvé en juin igig à Plymouth, à la station dite Rum
Bay, c'est-à-dire à l'endroit signalé par M" Pixell-Goodrich, des Craspido-
chilus ciuerciis; la plupart étaient infectés par l'Haplospori iiuni chitonis.
La description macroscopique de l'infection a été faite avec soin par
M'^ Pixell-Goodrich; comme elle nous avons observé des cas d'infection

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIES 2g5

avancée où la plupart des organes du tortillon intestinal, les glandes géni-
tales, les branchies, les muscles de la sole pédieuse sont littéralement
bourrés de parasites; il est vraiment remarquable qu'un animal infecté à
ce point ne paraisse pas s'en porter plus mal et que des gonades où la masse
des parasites l'emporte de loin sur les éléments nobles, paraissent encore
fonctionnelles. Tous les individus infectés récoltés au mois de juin présen-
taient des parasites à tous les stades d'évolution. M''^ Pixell-Goodrich,
examinant 83 individus infectés, récoltés d'octobre à avril, n'en trouve que
deux, tous deux en octobre, qui présentent des parasites en multiplication.
La conclusion est simple : ré\olution des parasites est arrêtée en hiver.

Les organes de Chitons infectés furent fixés à la solution de Bouin,
débités en coupes de 3 à 5 ;j colorées à l'hématoxyline de Heidenhain et au
rouge Congo. La fixation du tortillon intestinal donne de très mauvais ré-
sultats; dès l'immersion dans le fixateur une sécrétion blanchâtre transsude
par toute la surface du tortillon et forme un revêtement qui, sans doute,
empêche la pénétration du, fixateur; le fait est que les coupes du tortillon
ne montrent que des parasites en très mauvais état de fixation. La fixation
de la sole pédieuse et des branchies donne de bons résultats; quant à celle
des gonades, spécialement des ovaires, elle donne des préparations parfaites.

b) Haplosporidium nemertis, nov. sp.

Nous avons récolté à la même époque, à Pl3'mouth, à la station dite
River Yealm, des exemplaires d'un grand Némertien, le Liueiis bilineatus,
Me Intosch. qui hébergeaient un parasite nouveau. Nous n'avons trouvé
■que six exemplaires de Liiieits, ce ne fut pas faute de peine, mais trois
étaient infectés, et comme ils mesuraient environ cinquante centimètres de
long et que l'infection était forte, nous eûmes du matériel en surabondance.

Quand on dilacère à frais des fragments de Lineiis infecté, on observe
des quantités de spores réfringentes, subsphériques ovalaires, mesurant 6-7 |j-
sur 3-4 ; elles sont fréquemment réunies à une cinquantaine, en petits amas,
entourés d'une mince membrane; aucun détail de structure n'est visible sur
le vivant, parfois on devine l'existence d'un opercule en un pôle.

Un grand nombre de tronçons de Lineiis, appartenant à tous les
niveaux du corps et ne mesurant qu'un demi-centimètre de long, furent fixés
à la solution de Boum, de Benda ou de Schaudinn, débités en coupes de
3 à 5 |j., colorées principalement à l'hématoxyline de Heidenhain. Les trois
fixateurs se montrèrent utiles, mais différemment : le Bouin assure la

2g6 Paul DEBAISIEUX

meilleure conservation totale des parasites et de ses rapports avec les tissus
voisins; le Benda dans les couches superficielles où il a bien pénétré, assure
la meilleure conservation des noyaux du parasite; le Schaudinn, plus bru-
tal, fait ressortir avec clarté des stades un peu fious par les autres fixateurs.
L'étude des préparations permet de suivre facilement l'évolution du para-
site; elle révèle qu'il appartient sans conteste au genre Haplosporidium ;
dans une note préliminaire (ig, b), nous avons proposé de l'appeler Haplos-
poridium nemerlis, nov. sp.

Les parasites à tous stades sont très nombreux dans les hôtes infectés;
ils se trouvent surtout dans le tissu connectit qui sépare le tube digestif de
l'assise interne des muscles longitudinaux et qui forme le feuillet médian
des plissements en crête que l'épithélium intestinal projette dans la lumière
du tube digestif; à bien des endroits, l'abondance des parasites est telle
qu'ils forment une assise continue dans l'axe des replis et entre le tube
digestif et les muscles. Parfois aussi il y a une légère infiltration de para-
sites entre les faisceaux des assises musculaires et dans le tissu sous-cutané.
Dans les trois individus parasités observés, le développement des gonades
était fort entravé ou nul, alors qu'à la même date, dans les individus
indemnes, les œufs et les spermatozoïdes étaient très abondants et proches
de la maturité.

Évolution de Haplosporidium chitonis et de H. nemertis.

a) Mitltiplicalion plasmodiale.

Les plus jeunes stades observés sont sphériques, ne mesurent guère
que 5 ;'■ de diamètre, ont un protoplasme granuleux dense assez colorable
et contiennent deux noyaux accolés, fig. i. 2, 36, 47 (partie clairej. Les
noyaux sont très généralement allongés et franchement accolés suivant leur
grand axe; ils contiennent quekjues travées chromatic|ues peu visibles,
souvent une travée axiale bien marquée et parfois un gros granule chroma-
tique très colorable.

Ce stade est très fréquent; il se rencontre soit dans la lumière d'une
glande, soit dans un espace périviscéral, soit dans une lacune des tissus.
Ces jeunes parasites, tombés dans la lumière glandulaire, peuvent sans
doute être évacués et dégénèrent, ils peuvent également pénétrer dans l'une
ou l'autre cellule, fig l (cellule épithéliale d'un canal ovarique), et ce fait

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIES 297

conduit à leur attribuer des mouvements actifs; ils peuvent enfin, tombés
dans une lacune des tissus, être entraînés par le courant lymphatique et
disséminés par tout l'organisme; c'est ce cjui expliciue que l'on en rencontre,
mélangés aux 13'mphocytes à divers endroits du corps, dans la lacune cen-
trale des filaments branchiaux par exemple.

Notons que Caullery et Mesnil ('o5) ne dessinent que des stades
jeunes binucléés et que Granata note qu'ils sont très abondants ; il a cepen-
dant rencontré quelques stades uninucléés, mais admet qu'ils peuvent repré-
senter des stades binucléés sectionnés par le rasoir.

Les noyaux appairés se divisent synchronicjuement et parallèlement.
Les mitoses, fig. 37, s'observent rarement, et vu leur ténuité nous n'avons
pas étudié le détail de leur évolution. Les noyaux-filles restent appairés.
L'accroissement plasmodial comporte un petit nombre de divisions nuclé-
aires et un accroissement du protojslasme qui fait atteindre au parasite un
diamètre d'une vingtaine de microns au maximum. La plasmodie a, dans
les cavités libres, des contours réguliers; dans les espaces étroits elle se
moule sur les parois qui l'enserrent. Les noyaux ne s'accroissent guère, ils
sont normalement accolés deux à deux, fig. 3, 4, 38, mais le fait n'est pas
tout à fait constant.

b) Prcparûtion à la sporitlalion.

? Nous employons à dessein une expression vague pour désigner cette
période du cycle d'évolution; nous sommes persuadé qu'elle comporte des
processus de fécondation ; nous sommes également persuadé qu'ils n'évo-
luent pas suivant la description de Granata mais malgré de très patientes
observations nous ne pouvons en donner une autre description certaine.
L'abondant matériel que nous possédons ne nous permettant pas de solu-
tionner définitivement la question de la fécondation, nous nous bornerons à
exposer les hypothèses qu'elle suggère, en attendant que l'étude d'autres
Haplospoi idiiim les confirme.

Les noyaux appairés rencontrés dans les plasmodies de la période pré-
cédente s'accroissent, se séparent l'un de l'autre et paraissent pouvoir évoluer
isolément, ftg. 5 ; d'autres fois ils s'accroissent en restant accolés, fig. 7, 38,
et parfois Ion rencontre des aspects qui semblent indiquer la fusion de deux
noyaux appairés, fig. 6, 7; ces aspects sont très rares et pas assez nets pour
être probants.

Le corps plasmodial des parasites s'accroit considérablement à ce

298

Paul DEBAISIfiUX

moment de l'évolution. l,es fig. lO à 17 qui se rapportent à l' H . chitouis ne
reproduisent en moyenne qu'un tiers de la eoupe du parasite; V H . nemer-
lis, de dimensions moindres, a pu être reproduit dans l'entièreté de sa coupe.
Quand le parasite a acquis sa taille maxima, les noyaux ont un aspect très
particulier, fig ii, 40 : relativement peu nombreux, ils sont énormes,
sphériques, contiennent de nombreuses et délicates travées chromatiques
et un gros granule nucléolaire. La travée axiale, qui était généralement si
nette dans les petits noyaux, n'est guère distincte à ce stade; nous croyons
qu'elle existe ou plutôt que ses éléments existent, mais qu'ils se confondent
avec les travées irrégulières qui emplissent le noyau.

La signification de ces noyaux énormes n'a pu être établie avec certi-
tude. Sont-ils le résultat d'un simple accroissement des noyaux appairés
qui ont évolué isolément? C'est possible, mais cela n'explique pas du tout
la raison d'être de l'accroissement. Sont-ils le résultat d'une copulation
autogamique entre les noyaux primitivement accolés et représentent-ils des
noyaux zygotiques? L'hypothèse nous sourit beaucoup, mais nous n'avons
su nous convaincre de son exactitude. On a vu plus haut que les noyaux
appairés présentent parfois dès le début de leur accroissement des aspects
qui font croire à un processus d'autogamie, fig. 6, "V; au cours de leur
accroissement, on observe parfois aussi des aspects qui semblent résulter de
la fusion de deux noyaux, fig. 8, 9; enfin quand ils sont déjà très déve-
loppés, ils sont parfois largement accolés et paraissent devoir se fusionner,
fig. 10, 39. Il résulterait de ces faits que l'autogamie pourrait avoir lieu
pendant toute la période d'accroissement nucléaire, soit entre petits, soit
entre grands noyaux, et cela parait au moins étrange. D'autre part, nous
devons reconnaitre que malgré de patientes recherches, les aspects de la
fig. 7, de la fig. 9, de la fig. 10 n'ont été rencontrés qu'exceptionnellement,
alors que tous les autres aspects ont été rencontrés des centaines et des
centaines de fois. Cependant, en faveur de l'hypothèse de l'autogamie à ce
moment, nous devons signaler combien les aspects observés ici ressemblent
aux stades d'autogamie observés chez les Thelohauia et les Pleistophora
(Debaisieux, i3, Debaisieux et Gastaldi, i5.)

La comparaison avec les Microsporidies (voyez surtout Thelohauia mul-
tispora) s'impose davantage si l'on envisage l'évolution ultérieure des gros
noyaux plasmodiaux : ces noyaux subissent au moins deux cinèses succes-
sives qui ne sont pas séparées par une période d'accroissement, de sorte que
la première est beaucoup" plus grande que la seconde. Si les gros noyaux

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIËS 299

représentaient de fait des zygotes, ces cinèses seraient sporogoniales et nous
serions même tenté de croire qu'il existe une réduction chromatique post-
zygotique semblable à celle qui fut reconnue chez les Aggrégates et les
Grégarines par Dobell et Jameson (i5, 20).

Les gros noyaux, fig. 11, 40, subissent au moins deux cinèses succes-
sives. .La première est annoncée, fig. 12, par un léger allongemeiU du
noyau ; à son intérieur les travées se disposent suivant le grand axe, paral-
lèlement, et forment un faisceau droit. Une travée, elle apparaît souvent
double, mieux marquée que les autres, forme l'axe autour duquel les fila-
ments du réseau nucléaire viennent se grouper ; ce sont les éléments con-
stituants de la travée axiale primitive <]ui redeviennent visibles. Bientôt,
sur ce fuseau apparaissent de nombreux granules chromatiques, fig. 13, 41,
qui se disposent en une espèce de plaque équatoriale; ils se portent aux
pôles, fig. 14, 15, où ils s'accumulent, fig. 16. Le granule nucléolaire se
divise en haltère et une moitié échoit à chaque noyau-fille, fig. 15. Durant
Tanaphase, le fuseau chromatique est formé d'un grand nombre de travées
très grêles, fig. 14, 15 ; lorsque les noyaux-filles s'individualisent, un long
filament connectif, reliquat de la travée axiale, persiste entre eux, fig. 17.
Une période de repos suit la première cinèse, fig. 17, elle ne comporte
guère d'accroissement nucléaire et est suivie d'une .seconde cinèse, plus
petite, mais apparemment du même type que la première, fig. 18, 19, 42.
Enfin, les noyaux-filles semblables en plus petit aux grands noyaux observés
au début de cette période, sont éparpillés dans le protoplasme continu,
fig. 20, 43.

D'après la description de Granata (14), appuyée sur des dessins qui
paraissent très probants, les plasmodies multinucléées de Haplosporidiiiin
limnodrili se résolveraient en individus uiiinucléés qui représentent des
gamètes. Les gamètes s'associeraient deux à deux, les noyaux se fusion-
neraient pour donner le noyau unique du sporoblaste. Nous observons dans
les deux objets étudiés tous les aspects reproduits par Granata, mais nous
en observons beaucoup d'autres, et c'est ce qui nous empêche d'admettre
l'interprétation, cependant si simple, qu'il donne. Nous sommes également
frappé de voir (]ue tous les dessins de Granata qui se rapportent à celte
période du cj'cle, montrent dans le noyau une travée axiale très marquée et
un tassement vers le centre, de la substance chromatique. Ces aspects rap-
pellent beaucoup les aspects de division que nous observons dans nos pré-
parations, mais il semble que les fixateurs alcooliques employés par Gra-
nata aient entraîné des contractions anormales du caryoplasme.

44

300 Paul DEBAISIEUX

Les plasmodies multinucléées, fig. 17, 43, peuvent se résoudre en
individus uninucléés, fig. 20, 21, 43, 44, peut-être peuvent-elles également
se fragmenter plus irrégulièrement et donner de petits individus à deux ou
trois no3'aux, mais en tout cas les noyaux uniques ou doubles continuent à
se diviser, fig. 22, 24, 25, 45, et il y a finalement production, sans copulation
de gamètes, de petites plasmodies à deux noyaux, fig. 26, 27, 46, 47. Ces
petites plasmodies binucléées peuvent sans autre transformation donner les
stades binucléés que nous avons décrits comme parasites jeunes, fig. 1, 2, 36,
et régénérer le cycle. La fig. 47 représente un groupe d'éléments binucléés,
fixés au sublimé-alcool; ils proviennent certainement de la fragmentation
d'une grande plasmodie, les individus peu chromatiques correspondent
indubitablement à de jeunes parasites binucléés. Dans les fig. 25, 26, et
probablement 28, on observe de petits ])arasites binucléés à protoplasme
assez dense et bien limité qui rappellent, à s'y méprendre, les jeunes stades
d'infection.

Le fait que les plasmodies binucléées peuvent évoluer pour régénérer
le cycle, n'exclut pas que ces mêmes stades puissent subir l'autogamie
nucléaire et donner naissance à des sporoblastes. M'"'^ Pixell-Goodrich (i5)
décrit cette fusion nucléaire, fig. 5, et Gran.^ta croit la voir également; sa
fig. 54 — à laquelle s'applique la même remarque que celle faite plus
haut, et qui pour ce fait nous paraît suspecte — reproduit le moment de la
fusion nucléaire. Dans les espèces que nous étudions ici, nous ne sommes
pas parvenu à observer nettement cette fusion. Dans V Haplospoi idium
uciuerlis, nous avons vu un seul aspect qui semble correspondre à une
fusion nucléaire, fig. 48''; dans V Haplosporidium chitonis, on a parfois l'im-
pression qu'il y a fusion, fig. 27, mais pour l'une et lautrc espèce on a
souvent l'impression que des individus uninucléés, fig. 20 ou Ai, 43,
donnent d'emblée naissance à des sporoblastes, fig. 28 ou 49.

En résumé, cette période comporte un grand accroissement des noyaux
plasmodiaux, au moins deux cinèses, la résolution irrégulière de la plas-
modie avec finalement production de sporoblastes uninucléés. Deux hypo-
thèses sont possibles en ce qui concerne la fécondation : ou bien les gros
no3'aux plasmodiaux sont le résultat d'une autogamie, ou bien les noyaux
de sporoblastes sont le résultat de l'autogamie de deux noyaux-filles. Il n'y
a certainement pas copulation de gamètes.

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIES 3o I

c) Formation des spores.

Dès leur formation, les sporoblastes ont un protoplasuie mal limité, à
contours inéguliers, un noyau assez volumineux à tin réseau chargé de
granules chromatiques, au milieu duquel apparaît parfois une travée axiale
à peine distincte. A côté du no3'au, un amas chromatique irrégulier baigne
dans le protoplasme, fig. 27, 28. Les sporoblastes deviennent ovalaires,
une capsule résistante se forme autour d'eux, le no3'au tend à diminuer de
volume, la masse chromatique paranucléaire perd sa chromaticité et se
porte vers un pôle, fig 29; mais en même temps des plages chromatiques,
primitivement au nombre de deux, se forment dans le protoplasme et se
développent jusqu'à confluer, fig, 30 49, 50.

La spore s'achève par épaississement de la membrane et formation
d'un clapet au pôle auquel s'est portée la masse chromatique paranucléaire;
membrane et clapet fixent énergiquement rhématox3-line, fig. 31, 52.
A l'intérieur de la spore, il y a un noyau sphérique régulier, le reliquat de
la masse chromatique paranucléaire sous forme d'une inclusion homogène
au pôle antérieur et du protoplasme abondamment chargé de substances
chromatophiles, fig. 30, 5i.

La spore à' Haplosporidiiiin cliitonis se complique de la formation de
deux longs appendices capsulaires, l'un antérieur excentrique, l'autre pos-
térieur axial; ils se colorent moins vivement que la capsule elle-même sous
l'action de l'hématoxyline, fig. 31, 32.

d) Retour aux stades initiaux et multiplication végétative.

Nous avons dit plus haut que des stades binucléés, provenus par frag-
mentation des grandes plasmodies, fig. 25, 26, 47, peuvent donner naissance
aux petits individus binucléés que nous avons considérés comme parasites
jeunes.

D'autre part, on observe souvent des parasites plasmodiaux à proto-
plasme spécialement dense et colorable, à contours irréguliers, à noyaux
trop petits pour appartenir aux stades qui préparent la sporogonie normale,
ou trop nombreux pour appartenir aux stades de la multiplication plasmo-
diale, fig. 33, 34, 35. bref, des parasites qui paraissent appartenir à une
période de multiplication végétative. Il est souvent malaisé de différencier
nettement ces parasites de ceux décrits antérieurement, car aucun des
caractères cités n'est probant et de nombreux parasites à caractères inter-

3o2 Paul DEBAISIEUX

médiaires se rencontrent. — Certains de ces aspects, fig. 1, 2, correspondent
apparemment à ceux que M'"'^ Pixell-Goodrich considère comme appar-
tenant à la période trophique, à multiplication par plasmotomie; à ces
stades, elle observe du protoplasme dense a contours irréguliers, contenant
de nombreux granules et des noyaux informes ; nous avons observé exacte-
ment les miémes aspects dans des préparations mal fixées. — Notons que
Granata (14) distingue également une' phase schizogonique et une phase
gamogonique, dont - la distinzione è assai poco netta ^, et qu'il croit que la
phase schizogonique se résout en schizontes uninucléés. Nous n'avons pas
observé cette résolution en schizontes et, quoique les aspects observés soient
fort peu démonstratifs, nous nous demandons si les stades végétatifs ne
prolongent pas simplement la période de multiplication plasmodiale sans
qu'apparaissent les phénomènes préparatoires de la sporulation, et s'ils ne
se résolvent pas, eux aussi, en germes binucléés, incapables de donner des
spores par autogamie nucléaire mais capables de se transformer en para-
sites binucléés jeunes et de régénérer le cycle.

e) Dijférences spécifiques.

Haplosporidiinn chitonis de Craspidochilus cinereits a des spores ova-
laires d'environ 10 i^ sur 6, fermées au pôle antérieur par un large clapet^
prolongées par un long appendice antérieur et par un long appendice pos-
térieur, FiG. 31, 32; elles naissent en très grand nombre, au moins une
centaine, aux dépens d'une même plasmodie. A la fin de la période de mul-
tiplication plasmodiale, les parasites contiennent de nombreux noyaux,
FIG. 5; les stades qui préparent la sporulation sont relativement grands,
atteignent jusqu'à 60 |j, et les noyaux sont grands, fig. 10 à 20.

Haplosporidiinn nemertis de Lineus biliueatus a des spores ovalaires
d'environ 7 \>- sur 4, fermées au pôle antérieur par un large clapet, dépour-
vues d'appendices, FIG. 52; elles naissent en nombre restreint, une cin-
quantaine environ, aux dépens d'une même plasmodie, fig. 51. A la fin de
la période de multiplication plasmodiale les parasites contiennent peu de
noyaux, fig. 38; les stades qui préparent la sporulation, sont relativement
plus petits que dans l'espèce précédente; ils ne mesurent guère que 30 \>- et
les noyaux aussi sont plus petits que dans l'espèce précédente, fig. 39 à 42.

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIES 3o3

Les affinités du genre Haplosporidium.

Que les deux espèces étudiées ici appartiennent au même genre que les
cinq Haplosporidium décrits par Caullery et Mesnil (o5), cela ne fait pas
de doute ; en relisant leurs descriptions, on pourrait en déduire la diagnose
suivante : stades jeunes binucléés donnant des plasmodies à 4, 8, 16 petits
noyaux; parfois apparaissent des plasinodies à grands noyaux relativement
peu chromatiques; kystes multisporés, spores petites uninucléées, à paroi
épaisse s'ouvrant en clapet, entourée d'une seconde paroi mince qui, suivant
les espèces, est simple ou différenciée en deux appendices flagelliformes ou
différenciée en un chevelu de flagelles disposés en deux touffes; dans la
spore mûre ou bien au cours de la sporogonie, on observe un corpuscule
accessoire à côté du noyau, au voisinage du clapet. — Caullery et Mesnil
observent également la résolution de plasmodies en individus binucléés qui
ressemblent fort aux individus binucléés jeunes, mais qui représentent pro-
bablement des stades de sporogonie : chaque noyau donnerait, par deux
divisions successives, naissance à quatre sporoblastes (p. 109). — Que les
deux espèces étudiées ici appartiennent au même genre que V Haplospori-
dium limnodrili de Granata (14), cela mérite à peine d'être signalé : un
coup d'œil jeté sur les dessins de cet auteur et sur les nôtres montre l'iden-
tité de tous les stades; leur interprétation et leur sériation seules prêtent à
discussion.

Le genre Haplosporidium doit être rangé à notre avis parmi les Rlicros-
poridies. Caullery et Mesnil n'admettaient pas ce rapprochement et cela
surtout parce que, confiants dans les observations de Stempel (02, 04) et
d'autres, ils croyaient au caractère plurinucléaire des spores de Microspori-
dies; mais les recherches de Schuberg (10), de Ohmori (12) et les nôtres
(i5) ont nettement établi que les spores de Microsporidies ne possèdent
qu'un seul vrai noyau; à ses côtés, dépendamment ou indépendamment de
lui, naît un corpuscule chromatique qui parait être en relation avec la for-
mation de la capsule polaire.

Dès lors la spore des Haplosporidium ressemble bien fort à celle des
Microsporidies; elle en diffère parce qu'elle possède un clapet mobile pro-
bablement en relation avec le corpuscule chromatique, et parfois des appen-
dices externes. D'autre part, si l'on considère les divers stades d'évolution
des Microsporidies, on constate la fréquence des jeunes stades ou des plas-

3o4 Paul DEBAISIEUX

modies à noyaux doubles, la présence d'une travée nucléaire axiale appa-
rente surtout au moment des cinèses, la présence de cinèses spéciales
précédant immédiatement la formation des spores, la transformation de
stades de sporogonie en stades initiaux, bref, d'étroites ressemblances avec
les Haplosporidium. Si les grands noyaux plasmodiaux des Haplosporidiiim ,
FiG. 11. 40, ont la valeur de zygotes, ils établissent évidemment une parenté
très étroite avec les Thelohaiiia, mais nous avons vu que leur interprétation
reste douteuse; il en est d'ailleurs ainsi en ce cjui concerne la sexualité chez
un grand nombre de Microsporidies.

A notre avis, et pour toutes ces raisons, la famille des Haplosporidiidœ
doit être rattachée aux Microsporidies. On pourrait en faire un sous-ordre
distinct, caractérisé surtout et opposé à toutes les autres Microsporidies par
l'absence de la capsule polaire, qui est remplacée par un clapet mobile de
la spore. On pourrait se demander si, phylogéniquement, ce sont des
Microsporidies primitives ou si ce sont des Microsporidies régressées. Les
documents sont insuffisants, et c'est malheureusement trop souvent le cas
cjuand il s'agit de la phylogénie des protozoaires, pour aborder ce problème.

L'ordre des Haplosporidies.

En 1899, Caullery et Mesnil proposent la création d'un ordre nouveau
de sporozoaires, les Haplosporidies. Ils en donnent une étude complète en
igoS et l'opposent aux Microsporidies, aux Myxosporidies, aux Actino-
myxidies. aux Sarcosporidies. Ils y rangent une vingtaine d'espèces, dont la
grande majorité ne sont qu'imparfaitement connues. Depuis, l'ordre des
Haplosporidies a trop souvent servi de refuge aux espèces incomplètement
étudiées qui, faute d'un état civil convenable, ne trouvaient droit de cité
dans aucun autre ordre. Déjà en 1910 Léger et Duboscq considèrent l'ordre
des Haplosporidies comme - un mélange hétérogène de formes d'affinités
douteuses, dont les unes sont peut-être des Amœbiens, mais dont la plupart
semblent se rapprocher des Mycétozoaires ou des Protophytes « ; il est vrai
qu'ils disent ailleurs : - de quelque façon qu'on l'entende, il n'a rien à voir
ni avec les Télosporidies ni avec les Cnidosporidies «.

L'ordre des Haplosporidies comprend trois familles : i) les Haplospo-
ridiidœ, 2) les Bertramiidœ, 3) les Cœlosporidiidœ, plus 4) le précieux
groupe des Incerlœ sedis.

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIES 3o5

i) Nous venons de voir que les Haplosporidiidœ, qui forment d'ail-
leurs la famille la plus typique de l'ordre, doivent, à notre avis, être ratta-
chées aux Microsporidies.

2) Dans la famille des Berlramiidœ il y a deux genres ; Bertramia et
Ichthyosporidium, que Caullery et Mesnil ont - groupés, au moins d'une
façon provisoire,... la connaissance des spores pouvant amener à modifier
ce groupement en faisant sortir les Ichthyosporidium de la famille des
Bertrjmiidœ. - Caullery et Mesnil ne signalent que deux Ichthyospori-
dium : a) /. gastevophihim, (juils ne connaissent que par quelques stades ;
il fut réétudié par .^lexieff (i5) et ses observations, encore très incomplètes
et hésitantes, indiquent que cette espèce doit être rapprochée des Cœlospo-
ridiidœ ; b) /. phymogeues, qu'ils ne connaissent également que par quelques
stades. Or, c'est à cette espèce que Swarczewsky (14) rattache, et avec
raison, à en juger par les dessins, Y Ichthyosporidium giganteum et 1'/. hert-
ivigi. Mais à notre avis (Debaisieux, 16 a), ces trois dernières espèces
doivent être rapprochées des Microsporidies, et il suffit de considérer la
formation des spores d'/. giganteum telle que la reproduit Swarczewsky,
pour s'en convaincre.

Quant aux Bertramia, ils sont vraiment trop imparfaitement connus
pour qu'il soit prudent d'émettre un avis sur leurs affinités (voir détails,
Debaisieux, igi6, b, p. 264,1.

3) A propos de la description d'un genre nouveau, Cœlom)'cidium
situulii, nous avons établi (16, b) qu'il se rattache sans conteste aux divers
genres de la famille des Cœlosporidiida.', mais que d'autre part, il est cer-
tainement une Chytridinée. Il en résulte que toute la famille des Cœlospo-
riJUdw (au moins les genres suffisamment connus pour que l'on puisse
discuter leurs affinités) doit être rattachée aux Chytridinées.

4) Les Iiicertœ sedis devraient, d'après Caullery et Mesnil » peut-
être être rangés dans les Haplosporidies..., ayant certaines affinités avec
eux. - Pour les AletscJinikoviellidœ, Caullery et Mesnil (ig) reconnaissent
eux-mêmes : r- nous ne pouvons souscrire à l'opinion d'AwERiNZEvv c^ue ce
sont des Haplosporidies. "

Et voilà cet ordre bien appauvri ! Que lui resie-t-il? Les Bertramia, mal
connus, et les Incertœ sedis! C'est vraiment trop peu. L'ordre des Haplos-
poridies a rendu de grands services, il fut un bon casier provisoire dans la
classification des protozoaires, mais maintenant que ce casier est presque
vide de tout son contenu, il est bon de lui enlever son étiquette.

BIBLIOGRAPHIE.

1908

Aiverinzeiv

1899 Caullery et Mesml :

1905

1919

I9I3

Debaisieux

igi5

1)

1916 a

1)

1916 b

»

1919 a

II

I919 Ô n

191 5 Debaisieux ei Gastaldi
191 5 Dobell et Jameson

1914

1920

Granata

Jameson

1899

Labbé

1910

Léger et Duboscq

I9I5

»

igi5

»

1912

Ohmori

igiS

Pixell- Goodrich

1891

Ray Lankester

1910

Schnberg

1902

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Ueber Nosema anomalum; A. P. K., t. a.

45

EXPLICATION DES FIGURES.

Objectif Zeiss i,3o dist. foc. i,5 X oculaire iS, grossissement 3ooo. Tous les
dessins, sauf le Sj qui est réduit environ au, tiers, sont faits à la même échelle, pro-
jetés au niveau de la platine du microscope. Une échelle de comparaison, établie au
micromètre oculaire de Zeiss, se trouve sur la planche I.

La légende de chaque dessin est suivie de l'indication du fixateur : Bouin (B),
Benda (Bd), Sublimé-Alcool (S).

Haplosporidium chitonis Lank.

FIG. 1. Parasite jeune à noyau double dans une cellule épithéliale d'un
canaljcule ovarique. B.

FIG. 2. Parasite jeune à noyau double. B.

FIG. 3. Multiplication plasmodiale, stade à six noyaux appairés. B.

FIG. 4. Multiplication plasmodiale, stade à nombreux noyaux. B

FIG. 5 Multiplication plasmodiale, stade à quelques noyaux appairés, d'autres
isolés. B.

FIG. 6. Plasmodie à noyaux appairés, plusieurs paraissent présenter des
phénomènes d'autogamie. B.

FIG. 7. Plasmodie à noyaux appairés, plusieurs paraissent présenter das
phénomènes d'autogamie. B.

FIG. 8. Noyaux plasmodiaux en voie d'accroissement paraissant présenter des
phénomènes d'autogamie. B.

FIG. 9. Noyaux plasmodiaux en voie d'accroissement paraissant présenter des
phénomènes d'autogamie. B.

FIG. 10. Noyaux plasmodiaux de grande taille paraissant présenter des phé-
nomènes d'autogamie. B.

FIG. 11. Plasmodie à grands noyaux isolés au repos. B.

FIG. 12. Préparation à la première cinèse. B

FIG. 13. Première cinèse. B.

FIG. 14. Anaphase de la première cinèse. B.

3 10 Paul DEBAISIEUX

FIG. 15. Anaphase de la première cinèse avec division du nucléole. B.

FIG. 16. Télophase de la première cinèse. B.

FIG. 17. Séparation des .noyaux-filles après la première cinèse et noyaux au
repos. B.

FIG. 18. Deuxième cinèse. B.

FIG. 19. Télophase de la deuxième cinèse. B.

P'IG. 20. Plasmodie après la seconde cinèse montrant une tendance du pro-
toplasme à se segmenter pour former des individus uninucléés. B.

FIG. 21, Individus uninucléés provenant de la segmentation d'une plasmodie. B.

FIG. 22. Individus uninucléés en cinèse. B.

FIG. 23 Individus à deux ou trois no3raux se préparant à la cinèse. B.

FIG. 24. Individus à deux noyaux en télophase. B.

FIG. 25. Plasmodie se résolvant en individus uni- oubinucléés; trois individus
déjà isolés à protoplasme dense représentant sans doute les stades initiaux de la
multiplication plasmodiale. B.

FIG. 26. Plasmodie se résolvant en individus uninucléés dont les noyaux se

divisent; parmi ceux-ci plusieurs à un noyau en division à deux ou à quatre

noyaux régénéreront la période de multiplication plasmodiale, tandis que les autres
donneront sans doute des spores. B.

FIG. 27. Sporoblastes à grand noyau et corpuscule chromatique paranucléaire.
Individus à deux noyaux qui sont peut-être destinés à se fusionner par autogamie. B.

FIG. 28 Sporoblastes avec corpuscule paranucléaire très chiomatique. B.

FIG. 29. Sporoblastes avec corpuscule paranucléaire moins chromatique et se
portant vers un pôle. B.

FIG. £0. Sporoblastes avec membrane en formation et ébauche du clapet;
le corpuscule paranucléaire se trouve repojté au pôle antérieur; deux plages chro-
matiques apparaissent dans le protoplasme. B.

FIG 31. Spore mûre; les appendices tranchés par le frl du rasoir ne sont
qu'incomplètement représentés. B.

FIG. 32. Spore mûre dessinée sur le vivant, d'après M'^ Pixell-Goodrich,
dessin réduit environ au i/3, grossissement looo.

FIG 33 Stade appartenant probablement à une multiplication végétative. B.

FIG. 34. Stade appartenant probablement à une multiplication végétative. B.

FIG. 35. Stade appartenant probablement à une multiplication végétative. B.

LE GROUPE DES HAPLOSPORIDIES 3ll

Haplosporidium nemertis, nov. sp.

FIG. 36. Parasite jeune à deux noyaux accolés. B.

FIG. 37. Parasite jeune à deux paires de noyaux ; dans l'une d'elles les
noyaux sont en cinèse. B.

FIG. 38. Multiplication plasmodiale, noyaux appairés. B.

FIG. 39. Accroissement des noyaux appairés Bd.

FIG. 40. Plasmodie à grands noyaux, isolés, au repos. Bd.

FIG. 41. Première cinèse. Bd.

FIG. 42. Deuxième cinèse. Bd.

FIG. 43. Plasmodie après la deuxième cinèse montrant la segmentation du
protoplasme

FIG. 4 4. Individus uninucléés; travée axiale bien marquée. Bd.

FIG. 45. Individus uni- ou binucléés en cinèse. S.

FIG. 46. Individus binucléés. Bd.

FIG. 47. Individus binucléés; les moins chromatiques correspondent aux jeunes
stades binucléés de la multiplication plasmodiale. S.

F"IG, 48. Individus binucléés; dans l'un d'eux (^) il paraît y avoir autogamie
nucléaire. Bd.

FIG. 49. Sporoblastes à corpuscules paranucléaires très peu colorés disposés
au pôle; des plages chromatiques apparaissent dans le protoplasme. Bd.

FIG. 50. Sporoblastes à plages chromatiques du protoplasme mieux marquées. Bd.

FIG. 51. Sporoblastes plus avancés. Bd.

F'IG. 52. Spores mûres. Bd

TABLE DES MATIÈRES.

Introduction . . . . '

Matériel, méthodes, synonymie ....

a) Haplosporidiiim chitonis Lank. .

b) Haplosporidium nemertis, nov sp.

Évolution de Haplosporidium chitonis et de H nemertis

a) Multiplication plasmodiale

b) Préparation à la sporulation

c) Formation des spores ....

d) Retour au.\ stades initiaux et multiplication végétative

e) Différences spécifiques ....
Les affinités du genre Haplosporidium

L'ordre des Haplosporidies ....

Bibliographie . . • .

Explication des figures .....

r.^GES.

2g 3
294
294
295
296
296
297
3oi
Soi
3o2
•3o3
304
007
309

Pfcinche/

Jeici:sieiix.ad nsl. de.

'Jp.H. Jacob S'uif/ei- Srux.

FJiriC-manj ■^c:,./'

P/wchrIl

Recherches sur la maturation

des œufs parthénogenétiques

DANS L'APHIS PALM^

PAR

le B"" V. B. de BAEHR.

(Mémoire déposé le 2S mars ig-20.)

46

Recherches sur la maturation

des œufs parthénogenétiques

DANS L'APHIS PALMEE

Dans nos travaux de igo8, igog et igio nous avons décrit la formation
des œufs parthénogenétiques dans certaines espèces de pucerons. — Nos
recherches avaient alors principalement en vue d'élucider les relations chro-
matiques entre les deux sexes, et à cet effet il n'était pas absolument néces-
saire d'examiner en détail les stades qui précèdent le grand accroissement
des oocytes, d'autant plus que précisément les formes dont nous nous occu-
pions sont, sous ce rapport, d'une étude fort difficile.

La grande impoitance des phénomènes de parthénogenèse en même
temps que la grande indigence et l'incertitude des données de la littérature
concernant les premiers stades de l'ovogenèse, — stades qui, à notre avis,
doivent fournir la clef d'une interprétation, — nous ont engagé à entrepren-
dre une étude plus détaillée de la formation des chromosomes dans la
prophase maturative des œufs parthénogenétiques. La nécessité des recher-
ches de ce genre nous parut d'autant plus urgente que les travaux de KiiHN
(igo8) sur les œufs parthénogenétiques des Cladocères et de Schleip (igog)
sur ceux des Ostracodes prétendent établir la ressemblance des stades de
maturation dans les œufs normaux avec les stades de maturation dans les
œufs parthénogenétiques.

Quoique les observations de KiiHN et de Schleip ne puissent passer
pour suffisamment précises et détaillées (Grégoire igio), néanmoins les
adversaires de la conjugaison parallèle des chromosomes n'ont pas tardé à
en profiter comme d'un argument irréfutable contre cette hypothèse. Se
fondant sur le fait que les étapes caractéristiques de la prophase de matu-
ration (leptotène, zygotène, pachytène, diplotène ou strepsitène) s'observent
aussi bien dans les œufs qui gardent le nombre normal de chromosomes et

3l8 V. B. de BAEHR

ne forment qu'un polocyte que dans les œufs où le nombre se réduit et qui
expulsent deux globules polaires, ces savants en concluent que ces diverses
images ne peuvent en aucune façon passer pour une expression morpholo-
gique des processus réducteurs. - Wo bleibt da die Théorie? - demandait
GoLDscHMiDT (iQoS) aux partisans de la paraconjugaison après avoir cité
les résultats de KiiHN, et c'est par cette moquerie qu'il termina une de ses
polémiques (cf. 'aussi Kemnitz, igi3).

Quoique les pucerons que nous avons étudiés autrefois ne fussent pas
un objet favorable pour une étude détaillée des premiers stades d'ovogenèse,
néanmoins nous nous sommes décidé à rechercher dans ce groupe même
une forme plus favorable. Nous l'avons trouvée dans une espèce qui chez
nous, à Makowlany (Pologne), se fixe sur les palmiers de serre chaude
( Latania).

Jusqu à présent nous n'avons pas pu déterminer cette espèce. Aussi, à
l'exemple de Miss Stevens, qui nomme les pucerons d'après les plantes
sur lesquelles ils se tiennent, nous donnerons dans notre mémoire à ce pu-
ceron le nom à' Aphis palma'.

Technique

Nous avons employé surtout les embryons enlevés du corps de la mère.
Dans les tubes ovariques nous trouvons non seulement des œufs à 'tous les
stades de maturation, mais aussi des œufs en segmentation.

Pour la fixation nous nous sommes servi des liquides de Flemming
(fort et faible) et de Hermann et aussi du sublimé acétique. Ce sont les
deux preinières solutions qui nous ont donné, comme dans nos recherches
précédentes, les meilleurs résultats.

Pour faciliter la pénétration du fixateur nous écartions généralement la
partie antérieure de l'embryon ou bien nous enlevions aux embryons sous
la loupe les tubes ovariques et nous les placions tout de suite dans le liquide
préparé.

Les coupes, d'une épaisseur de 3-5 i^, furent colorées à l'hématoxyline
ferrique de Heidenhain ou par le procédé safranine-vert lumière. Nous
avons employé avec grand succès la méthode de Schneider au carmin acé-
tique pour l'étude des chromosomes sur matériel frais.

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTIQUES DANS l'aPHIS PALM.î: 3ig

I. Structure des ovaires parthénogenétiques.

Avant d'aborder l'étude de l'évolution chromatique, nous croyons utile
de décrire en quelques mots la structure des ovaires de notre puceron, en
marquant tout de suite que cette description confirme complètement les
résultats de nos travaux précédents (igo8-igio) sur d'autres espèces de
pucerons.

Dans les embryons très jeunes, chez lesquels les tubes ovariques sont
encore réduits à la chambre terminale, c'est-à-dire à l'ovaire proprement dit,
on peut voir sous une mince couche épithéliale la différenciation des cellules
ovariques en des cellules plus grandes — nourricières (vitellines) — et des
cellules plus petites — les oocytes.

Les cellules nourricières, qui ne sont d'ailleurs que des cellules virtuel-
lement sexuelles adaptées à une fonction nutritive, se trouvent dans la partie
supérieure de l'ovaire. Elles possèdent un grand noyau clair avec un nu-
cléole rond entouré de petits granules chromatiques. Les oocytes occupent
la partie intérieure de l'ovaire et contiennent en concordance avec leurs
petites dimensions des noyaux plus petits, fig. l 3.

Le plasma et le noyau des oocytes ne tardent pas à grandir.

Le plus grand des oocytes sort du compartiment terminal, l'épithélium
du tubeovarique se presse entre lui et le compartiment et ainsi se forme la
première chambre ovarique. L'oocyte ainsi isolé demeure attaché à l'ovaire
au moyen d'un cordon plasmatique. Les fig. i-2 montrent des coupes
longitudinaies des tubes parthénogenétiques.

Sur ces dessins et aussi sur la fig. lO, on voit nettement le cordon
plasmatique qui unit le compartiment terminal à l'oocyte, à l'œuf ou plus
tard à l'embryon. La fonction nutritive de ce cordon ne laisse place à aucun
doute. La fig. 3 nous montre une coupe un peu oblique de la partie infé-
rieure de la chambre terminale, et on n y voit que des oocytes.

Dans la chambre ovarique l'oocyte grandit énormément, élimine déjà,
comme l'œut mûr, un seul globule polaire et, avant que la nouvelle chambre
se forme, parcourt généralement les premiers stades du développement em-
bryonnaire. Sa nutrition est assurée non seulement par le cordon nutritif
qui lui amène l'aliment des cellules vitellines, mais aussi par l'organisme
maternel, qui baigne du liquide de son corps la chambre ovarique. Il est
clair que la couche très mince des cellules épithéliales du tube ovarique ne
peut empêcher la pénétration des substances nutritives. — Au fur et à

320 V. B. de BAEHR

mesure que l'embryon se développe un nouvel oocyte sort du compartiment
terminal et de cette façon se forment de nouvelles chambres ovariques.

Sans entrer ici dans une longue discussion au sujet de la structure des
ovaires des pucerons, nous voudrions du moins indiquer brièvement les
différences principales entre nos résultats et ceux des travaux les plus
récents ( i).

D'après Miss Stevens (iqod), l'intérieur de la chambre terminale ne
comprendrait qu'une espèce de cellules, les oocytes. Les dessins de Miss
Stevens nous permettent de supposer que dans le compartiment terminal
l'auteur n'a pas vu les vrais oocytes, mais seulement les grandes cellules
nourricières, qu'elle a prises indûment pour des oocytes.

Dans les travaux de Mordwilko (1907), consacrés à la biologie des pu-
cerons, nous avons trouvé une mention, d'où il résulte que l'auteur admet
l'existence des cellules nourricières, mais seulement dans l'ovaire d'hiver,
c'est-à-dire dans les ovaires des femelles sexuelles; dans le compartiment
terminal des femelles parthénogenétiques l'auteur ne décrit, comme Stevens,
que des oocytes.

Enfin, Tannreuther (1907), contrairement à ses prédécesseurs, distin-
gue dans les ovaires des femelles parthénogenétiques, outre l'épithélium
extérieur du tube ovarique, deux espèces de cellules — les cellules vitellines
et les oocytes. Cela est d'accord avec nos observations. Mais d'autre part
Tannreuther admet que les oocytes proviennent des cellules épithéliales
du tube ovarique et que ce n'est que plus tard qu'ils se réunissent avec le
- nutritive string -. Cela serait bien étonnant, mais l'auteur semble avoir
pris les mitoses des cellules épithéliales pour des cinèses oogoniales.

II. Ovogenèse.

Chez \ Aphis palincv, comme chez les autres espèces de pucerons, nous
n'avons observé la division oogoniale que dans les embryons assez jeunes,
chez lesquels les ovaires commençaient justement à se différencier. Géné-
ralement un grand nombre des oogonies se divisent en même temps (syn-
chroniquement).

(i) Une discussion historique des principales publications sur la structure histologique des
tubes ovariques chez les femelles parthénogenétiques et chez les femelles sexuelles se trouve dans
nos travaux antérieurs (1909 et 1910).

Maturation des œufs parthénogenétioues dans l'aphis palm.e 32I

Les mitoses ne se distinguent par aucun caractère spécial. Le nombre
de chromosomes y est de huit. Dans les jeunes oocytes, qui se trouvent,
comme nous l'avons mentionné plus haut, dans la partie inférieure de
l'ovaire, nous avons constaté des images très nettes du stade leptotène (fig.
4 et 5). Le contenu du noyau consiste ici en filaments chromatiques minces,
qui s'orientent dans des directions différentes et entourent un petit nucléole.

Les filaments chromatiques sont concentrés au milieu du noyau, ce qui
dépend sans doute d'une grande sensibilité de ce stade aux réactifs et de
l'accroissement du volume du noyau. — Quoi qu'il en soit, les filaments
ainsi amassés n'ont pas dans notre objet cette polarisation caractéristique
que nous sommes habitué de voir dans les autres formes.

De ce peloton sortent des bouts libres de filaments — ce qui prouve
que nous avons ici des filaments indépendants et non un seul filament con-
tinu, comme l'admettent encore pour ce stade différents auteurs (par ex.
Haecker, Meves, Buchner. etc.).

Il faut en effet remarquer que la facilité avec laquelle on peut toujours
constater, presque dans chaque noyau, les bouts libres de ces filaments,
exclut la supposition que nous aurions ici à faire avec les segments d'un
seul filament, entamé par le rasoir.

Une observation plus précise démontre parmi ces filaments chromati-
ques des dualismes. Nous sommes en réalité en présence de filaments min-
ces associés deux à deux. On voit cela le plus distinctement dans les points
où, de la masse générale, émerge quelque filament libre : les composants
qui le forment sont nettement séparés sur une certaine distance.

Les dualismes des éléments dans ces noyaux et leurs structures corres-
pondent aux images qui sont connues sous le nom de -la phase leptozygo-
tène- (Grégoire), c'est-à-dire une phase dans laquelle les partisans de la
paraconjugaison de chromosomes ((îrégoire, Schreiner, Janssens, B.IiHR
et autres) et les partisans de la paracopulation de chromosomes (Winiwar-
ter, Bonnevie, Vejdovsky) voient justement un processus de l'association
en paires des chromosomes homologues.

En ce qui concerne la structure même de ces filaments, chacun d'eux,
d'après beaucoup d'auteurs, se composerait d'un filament achromatique le
long duquel seraient placés en une rangée les granules chromatiques — des
chromomères. Les chromomères des composants qui constituent un fila-
ment double se correspondent mutuellement dans leur nombre, leurs di-
mensions et la place qu'ils occupent sur la substance achromatique et
composent ainsi une série bisériale régulière.

322 V. B. de BAEHR

En décrivant ainsi la structure des filaments doubles, les différents
auteurs ne sont pas d'accord sur leur genèse. Les uns (Goldschmidt,
BucHNER, Davis) voient dans la disposition bisériale des chromomères un
argument décisif en faveur de la genèse du duplicisme dans le peloton lep-
totène par un clivage longitudinal d'un filament d'abord muni d'une rangée
unique de chromomères; les autres, comme A. et K. E. Schreiner, expli-
quent la correspondance complète entre les chromomères des composants
qui forment le filament double par la conjugaison parallèle des chromoso-
mes, qu il faut regarder non pas comme une conjugaison des chromosomes
entiers, mais comme une conjugaison des granules homologues — un chro-
momère avec un chromomère (i).

Dans Y Aphis pahnœ, pas plus que dans les autres objets que nous
avons examinés sous ce rapport, nous n'avons pu constater cette différen-
ciation de la substance nucléaire en filaments achromatiques et en granules
chromatiques placés par paires sur les premiers.

D'après nos recherches surtout sur le matériel frais coloré par le carmin
acétique, il est évident que la substance qui forme les filaments est d'une
seule sorte, à savoir, de la chromatine. Les chromomères ne représentent
rien d'autre que des épaississements de différentes formes et de différentes
grandeurs sur les filaments et sont naturellement de même substance que
les filaments.

Les images que nous donnent les auteurs mentionnés plus haut, peu-
vent être expliquées par l'influence des réactifs et aussi par une schématisa-
tion des aspects (Grégoire, igio, Bonnevie, igi3).

En ce qui concerne le nombre des filaments doubles, il est difficile à ce
stade de le déterminer à cause de la longueur considérable des filaments, de
leur concentration et des sinuosités qu'ils décrivent, mais cela n'est pas
nécessaire, parce que nous pouvons avec facilité les compter aux stades sui-
vants quand ces filaments doubles, en se raccourcissant et s'épaississant, se
transforment en des chromosomes diacinétiques typiques. Leur nombre
alors est sans aucun doute quatie, et le nombre des composants qui les for-

(i) GÉRARD (1909) admet chez rorthoptère Stenobothrus biguttulus la conjugaison parallèle non
pas entre filaments leptoténes homologues indépendants, ainsi que divers auteurs l'ont décrit chez
d'autres orthoptères, mais entre deux filaments continus dans lesquels toute la substance chromatique
du noyau se trouve transformée. Pendant l'appariement de ces deux gamomites les granules cor-
respondants prennent place vis-à-vis l'un de l'autre et forment ainsi sur le filament double des
paires de chromoméres.

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTIOUES DANS l'aPHIS PALM.î: 323

ment, huit. C'est ce qui correspond parfaitement au nombre de chromosomes
spermatogoniaux et somatiques.

La FiG. 6 nous montre un noyau dans lequel nous apercevons 4 doubles
chromosomes diacinétiques. Comme nous le voyons, l'union entre les com-
posants de ces chromosomes diacinétiques n'est pas très étroite. Sur la
figure suivante, fig. 7, où nous avons un stade plus avancé, de quatre dou-
bles chromosomes, deux se sont déjà disjoints de leurs composants, qui se
trouvent maintenant à une certaine distance l'un de l'autre, et les deux
autres chromosomes retiennent encore leur structure double, mais celle-ci
ne se manifeste à vrai dire que dans une association très lâche des chro-
mosomes appariés.

.\ un stade ultérieur les noyaux ne montrent plus de chromosomes
doubles, mais seulement des chromosomes simples et alors nous en comptons
naturellement le nombre double (8) — c'est-à-dire le nombre qui correspond
au nombre de chromosomes spermatogoniaux et somatiques.

Les chromosomes se raccourcissent alors, s'arrondissent et montrent
une tendance à se concentrer au milieu du novau, fig. 8. Plus tard les
chromosomes se dégagent de nouveau, s'allongent un peu. et un clivage
longitudinal apparaît, fig. 9.

C'est lorsque le noyau a atteint ce stade que l'oocyte déjà assez grand,
quitte le compartiment terminal et passe dans la première chambre ovari-
que, où bientôt il atteint un volume considérable, fig. 10 — 12.

Pendant cet accroissement le plasma et le noyau augmentent de di-
mension. La structure des chromosomes subit des changements radicaux :
ils allongent de plus en plus, leurs contours deviennent moins lisses, la
chromatine perd peu à peu sa compacité — enfin toute la substance dans
l'intérieur du no3''au prend la forme de filaments pâles et minces ou de
masses granuleuses qui se prêtent difficilement à l'analyse, fig. 12, 13.

Parallèlement avec ces changements dans les chromosomes, il apparaît
au centre du noyau un nucléole arrondi qui grandit et se colore intensé-
ment, fig. 10 — 13.

Quand l'oocyte a atteint une grande dimension, son noyau se dirige
vers la périphérie et de nouveau se forment rapidement des chromosomes
compacts.

Les petites vacuoles qui ont apparu dans le plasma se fusionnent en
des vacuoles grandes et celles-ci à leur tour se réunissent entre elles.

Le noyau probablement, en cédant une partie de sa substance liquide
au protoplasme, diminue de volume et immédiatement entre en mitose.

47

324 '^- ^ '^^ BAEHR

Le fuseau se forme clairement aux dépens du noyau ainsi que cela est
constaté pour beaucoup d'autres objets. A ce stade nous n'avons jamais ob-
servé ni centrosomes ni fibres polaires.

La cinèse polaire ne montre rien d'extraordinaire et nous l'avons déjà
décrite en détail dans nos précédentes publications (igoS - igio) pour beau-
coup de formes (v. notre mémoire igog, pi. 12, fig. 11- 14; pi. i3, fig.
20, 21, 23 — 25, 32; pi. 14, fig. 3g, 41, 42). Nous ne nous 3' arrêtons pas,
nous mentionnerons seulement que les chromosomes s'y divisent suivant la
ligne longitudinale qui a apparu déjà à un stade antérieur, fig. 7.

Après l'élimination d'un seul globule polaire, les chromosomes de la
plaque anaphasique qui reste dans l'œuf se rapprochent, se concentrent et
autour d'eux se forme la membrane. Le noyau, reconstruit de cette manière,
descend au centre de l'œuf. Les chromosomes commencent à perdre leur
compacité, leurs contours deviennent de plus en plus indistincts et le stade
de repos s'établit.

Le globule polaire, qui forme maintenant une masse compacte de chro-
matine fort colorée, se trouve plongé dans le plasma, où il dégénère (v. fig.
i5, 2g de notre publication de igog).

Dès avant la formation du I fuseau de segmentation, on peut voir très
souvent aux deux pôles opposés du noyau les fibrilles astériennes.

Quand le I fuseau de segmentation est formé et de même pendant les
mitoses suivantes, les fibrilles ressortent encore plus nettement.

Les chromosomes des figures de segmentation se comptent facilement
dans les vues polaires : ils sont au nombre de huit.

On y distingue des paires : une paire de grands chromosomes, une paire
de moins grands et deux paires de petits.

En comparant les chromosomes c|ui appartiennent aux cellules de dif-
férentes générations, .on voit que leurs formes et leurs dimensions subissent
des changements, mais la relation entre les différentes dimensions, reste la
même. Nous trouvons toujours les mêmes différences relatives de dimen-
sions entre les trois types de paires. Ce fait nous enseigne qu'à X Apliis
palmœ, comme aux autres pucerons étudiés auparavant par nous et par Miss
Stevens, on peut avec beaucoup de probabilité appliquer l'hypothèse de
MoNTGOMERY (igoi), qui prétend que dans l'œuf fécondé à chaque chromo-
some maternel provenant de. l'reuf correspond un chromosome paternel
morphologiquement égal provenant du spermatozoïde.

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTIQUES DANS l'aPHIS PALM.E 325

III. Examen de la littérature concernant la maturation
des œufs chez les pucerons vivipares.

Blgchmann (1887) fut le premier à étudier les phénomènes de la ma-
turation des œufs chez les pucerons. Il découvrit que les œufs parthénogené-
tiques des femelles vivipares de Forda formicaria et d'une autre espèce non
déterminée qui habite sur ïlpomea rubracoenilea forment seulement un
seul polocyte, tandis que les œufs tlhiver des femelles sexuelles de YAphis
aceris en éliminent deux.

Seize ans plus tard Petrunkewitch (igo3), influencé par les résultats
qu'il avait obtenus en étudiant les œufs parthénogenétiques de l'abeille,
mit en doute, d'après quelques stades seulement qu'il observa dans les
œufs parthénogenétiques du Rhopalosyphum nymphœœ, les données de
Blochmann. Par analogie avec les observations sur les œufs de l'abeille,
Petrunkewitch conclut que dans les œufs parthénogenétiques chez le Rho-
palosyphum nyinphœa' deux globules polaires se forment. Le premier glo-
bule polaire se divise et alors sa moitié intérieure se fusionne avec le second
globule polaire en donnant le - Richtungskopulationskern ". Mais ces obser-
vations superficielles de Petrunkewitch sur le Rhop>ûlosyphum pas plus
que ses recherches sur l'abeille, n'ont trouvé aucune confirmation dans les
travaux des cytologistes plus récents.

Un peu plus tard Stschelkanovzew (1904) a publié un travail sur la
maturation des œufs parthénogenétiques de VAphis roscv. Stschelkanovzew
n'a pas étudié les cellules dans l'ovaire, mais il a suivi les phénomènes de
maturation seulement dans les oocytes qui se trouvent déjà dans la première
chambre ovarique.

D'après la description de l'auteur, rooc3'te, au moment où il vient de
quitter le compartiment terminal, possède un noyau dans lequel on ne peut
pas découvrir même des traces des chromosomes; il existe seulement au
centre du noyau quelques granules chromatiques. Outre ces granules, que
Stschelkanovzew prend pour de petits restes du filament chromatique en
dissolution, on trouve en petite quantité, près de la périphérie de la mem-
brane nucléaire des nucléoles et des granules chromatiques de différentes
dimensions.

Au stade suivant Stschelkanovzew observe qu'au centre du noyau la
chromatine a complètement disparu ; près de la périphérie du noyau, sous
la membrane apparaissent de nombreux petits nucléoles chromatiques.

326 V. B. de BAEHR

Stschelkanovzevv admet que la plupart de ces nucléoles périphériques
se forment de novo au voisinage de la membrane comme de petits granules
et se dirigent vers le centre en grandissant peu à peu. Il compare ces phé-
nomènes au processus de la formation des chromosomes dans le cyste de
Y Actinosphœriuvi décrit par Hertwig. Stschelkanovzew suppose que la
formation de ces nouveaux nucléoles dans la vésicule germinative est en
relation causale avec la vacuolisation du plasma de l'oocyte. Il en résulte
que le noyau reçoit du plasma le matériel destiné à former nouvellement
des chromosomes. Pendant le développement ultérieur les nucléoles s'ap-
prochent de plus en plus du centre du noyau et se réunissent en filaments.
Les filaments eux-mêmes forment à la fin un seul cordon chromatique, qui
enfin se segmente en 14 chromosomes. C'est ce même nombre de chromo-
somes que Stschelkanovzew compte dans la plaque équatoriale de la seule
mitose de maturation qu'il a rencontrée; à la prophase de la première
cinèse de segmentation il en trouve seulement 11 (?), dont trois, à son avis,
sont doubles (i).

Cette description, à vrai dire un peu étrange, est accompagnée de des-
sins peu nombreux et peu convaincants. Il semble bien que Stschel-
kanovzew, travaillant alors au laboratoire de R. Hertwig, a été un peu
trop influencé par les vues théoriques des zoologistes de Munich sur la
chromatine.

En igo5 et igo6, Miss Stevens a publié des observations sur les Aphi-
des. L'auteur ayant cru observer dans les deux sexes nn nombre pair
identique de chromosomes, a été amené à donner pour toute une série de
pucerons une description de la spermatogenèse sous beaucoup de rapports
tout à fait fausse; elle décrit notamment un nombre pair de chromosomes
dans les spermatogonies et, en accord avec cela, des chromosomes tous éga-
lement doubles dans les spermatocytes de I ordre et l'absence de dimor-
phisnie dans les spermatocytes II et dans les spermatozoïdes.

Outre ses recherches sur la spermatogenèse, Stevens a essayé de donner
une description détaillée des processus de maturation dans les œufs parthé-
nogenétiques chez YAphis rosœ, en attachant spécialement beaucoup d'at-
tention aux chromosomes.

C'est une technique imparfaite et une étude insuffisante des stades
importants qui ont conduit l'auteur à ces conclusions erronées. Stevens,

(i) Hewith (rgoô), dans sa publication sur la parthénogenèse des insectes, coirpte chez V Aphis
rosœ 10 chromosomes, ce qui est d'accord avec les observations de Stevens et les nôtres.

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTlÇjUES DANS l'aPHIS l'ALM.E 327

comme nous l'avons déjà mentionné plus haut, tient toutes les cellules qui se
trouvent dans le compartiment final, pour des oocytes. Les oocytes d'après
son interprétation et ses dessins, sont ici généralement au stade de repos
et possèdent de grands noyaux tout à fait transparents sans aucune trace
de chromatine, avec un nucléole rond fort coloré. Quand l'oocyte passe dans
la période d'accroissement, il quitte le compartiment final, le nucléole dis-
parait dans le noyau, et d'emblée les chromosomes définitifs apparaissent.
Pendant toute la période d'accroissement, les chromosomes restent comme
des éléments compacts et intensément colorés.

L'oocyte dans la chambre ovariijue augmente fort de volume, son noyau
s'approche de la périphérie et forme un seul fuseau de maturation.

Stevens souligne que ni dans les œufs qui se développent en femelles
ni dans les ceufs qui donnent des nici/es aucune réduction de la chromatine
n'a lieu.

Nous avons montré déjà en iguS que les cellules du compartiment final
qui possèdent des noyaux clairs et de grands nucléoles et à partir desquelles
Miss Stevens commence la description de l'ovogenèse en les prenant pour
des jeunes oocytes, sont en réalité non des oocytes, mais des cellules nour-
ricières, t|ui naturellement ne passeront jamais dans la chambre ovarique,
mais resteront toujours dans l'ovaire fournissant la nourriture aux oocytes
et aux œufs en développement. La raison la plus probable, à notre avis,
pour laquelle Stevens, en employant l'hématoxyline ferrique de Heiden-
HAiN, a pu dans les noyaux de ces cellules vitellines colorer seulement le
nucléole, a été une différenciation trop forte.

En 1908, igog, igio ont paru nos trois premières publications sur les
pucerons. Notre intention y était surtout de débrouiller le problème de la
détermination du sexe. Déjà dans notre premier travail de igo8 nous som-
mes parvenu à établir, par des figures démonstratives, que, contrairement
aux observations de Stevens, chez YAphis saliceti les noyaux des individus
mâles contiennent un chromosome de moins que les noyaux des individus
femelles (cf 5, 9 6) et qu'en relation avec cela le cours de la première
cinèse de maturation dans la spermatogenèse de cette forme se distingue
par des caractères très spéciaux et inconnus jusqu'alors. Il s'y produit en
effet deux sortes de spermatocytes de deuxième ordre : les plus grands qui
contiennent trois chromosomes, toutes les mitochondries et beaucoup de
protoplasme, et les plus petits, qui ont reçu seulement deux chromosomes,
peu de protoplasme et point de mitochondries. Les grands spermatocytes

328 V. B. de BAEHR

sont seuls capables d'achever leur développement et de fournir des élé-
ments tonctionnels. Les spermatocytes plus petits ne dépassent pas géné-
ralement la prophase de la seconde cinèse, souvent même ils dégénèrent
avant ce stade. Ainsi s'explique très clairement ce phénomène que chez les
pucerons les œufs fécondés se développent toujours exclusivement en
femelles (i).

En ce qui concerne la maturation des œufs parthénogenétiques, nous
avons étudié, outre deux espèces d'Aphides : l'Aphis losœ et VAphis saliceti,
trois espèces de Pemphigines : le Schiioneura lanigera le Schi^oiieiira
it/iu! et le Pemphigiis pirifoniiis.

Dans toutes ces cinq espèces, le cours de l'ovogenèse s'est montré sem-
blable. Et il est inutile de résumer notre description, car celle que nous
venons de faire pour ï Aphis palmœ coïncide essentiellement avec les résul-
tats que nous avons obtenus chez les formes étudiées auparavant, excepté,
comme nous l'avons dit, que nous avons pu maintenant pénétrer dans les
stades délicats de la toute première période de maturation.

Il faut cependant remarquer que, quoique chez toutes les espèces que
nous avons étudiées l'ovogenèse se montre semblable dans ses traits géné-
raux, néanmoins il y a dans les détails certaines différences qui se mani-
festent surtout quand on compare les Pemphigines et les Aphides.

Chez les Aphides, la période d'accroissement des oocytes dans la cham-
bre ovarique dure plus longtemps que chez les Pemphigines et la structure
des chromosomes subit des changements plus radicaux. En même temps
que s'accroit le protoplasme de la cellule, le noyau augmente aussi de
volume : les chromosomes se gonflent, s'allongent, leur chromatine se
disloque.

Chez ï Aphis ivscv, ces processus ne vont pas troji loin, et les chromo-
somes retiennent tout le temps leurs contours, tandis qu'au contraire chez
VAphis saliceti, comme chez l'Aphis palmœ, la dislocation chromatique va
si loin qu'à la fin on n'aperçoit dans le noyau, outre le grand nucléole, que
de faibles traces de la chromatine sous forme de petits granules.

Ee retour de chromosomes à leur état normal avec une structure com-
pacte et des contours lisses s'accomplit brusquement et ne devance que
d'un peu la formation du fuseau de maturation.

(i) En 1908 Morgan a découvert le dimorphisme des spermatozoïdes ch.'z le Phylloxéra
caryxcaulis et il en a do.mé une courte note dans le Proc. Soc. f. E.\per. Biol. a. Med , vol. 5.
Cette note a précédé d'un peu notre publication de la même année sur VAp/iis saliceti.

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTIQUES DANS l'aPHIS PALM.E 32g

Dans les Pemphigines que nous avons étudiées les chromosomes, pen-
dant toute la période d'accroissement, gardent leur individualité et leur
structure se modifie relativement très peu. Chez le Schi[oi!eiirû lanigera et
chez le Sclu'-onciira ulini, les chromosomes ne perdent pas leur forme arron-
die, ils ne font que se gonfler un peu et devenir moins colorables; chez le
Pemphigiis piriformis, il n'y a même pas de changement de ce genre : les
chromosomes restent tout le temps compacts et ne changent ni de forme
ni de dimension.

La découverte chez YAphis saliceti de la différence dans la chromatine
chez les deux sexes nous a fait soulever la question du mécanisme par
lequel ce dimorphisme de la chromatine se réalise.

Chez y Aphis saliceti, une mciuc femelle sexupare possédant 6 chromo-
somes donne naissance aux embr3'ons mâles à 5 chromosomes et aux em-
bryons femelles à 6 chromosomes. Ici donc c'est la cellule gém\.z\& femelle
qui seule, sans intervention de l'élément mâle, doit établir les combinaisons
chromosomiques nécessaires à chacun des deux sexes ( 9 6, cf 5). Il en
résulte que les stades décisifs pour trancher cette question doivent être
cherchés dans l'ovogenèse des œufs masculinipares.

Malheureusement il est bien diflicile de trouver les stades nécessaires
chez Y Aphis saliceti où, comme nous l'avons constaté, les femelles sexupa-
res mettent au monde toujours plus de femelles que de mâles.

A cause de cela, prévoyant sous ce rapport de grandes difficultés, nous
nous sommes borné dans nos travaux de 1908 — 1910 à une indication
théorique concernant les modes par lesquels une réduction si caractéristique
du nombre de chromosomes dans les œufs masculinipares paraissait pou-
voir se réaliser.

Partant de la théorie, pour nous certaine, de la persistance des chro-
mosomes, nous sommes presque forcé d'admettre que l'œuf masculinipare
produit par la femelle sexupare perd son sixième chromosome pendant la
maturation en l'expulsant avec le globule polaire.

Les modes les plus probables de cette, élimination du chromosome
sont, à notre avis, les deux suivants : 1" des six chromosomes, les quatre
somaticjues (autosomcs) et un sexuel (hétérochromosome de l'individu mâle)
se divisent équationnellement, le second chromosome sexuel (partenaire
de l'hétérochromosome) restant indivis, passe tout entier dans le polocyte
d'une manière analogue à ce qui, d après nos observations, a lieu dans les
spermatoc3'tes pour l'hétérochromosome pendant la première cinèse de
maturation.

33o V. B. de BAEHR

2" Les deux chromosomes sexuels (l'hétérochromosome et son parte-
naire) se conjuguent et pendant la mitose de maturation prennent dans la
plaque équatoriale une position telle, que Ihétérochromosome doit absolu-
ment rester dans l'œuf et son partenaire entrer dans le globule polaire, les
quatre autosomes, d'autre part, se divisent équationnellement (v. notre
mémoire de 190g, p. 3i6 et aussi notre schéma de 1910, p. 99).

A l'énoncé de ces deux hypothèses nous avons ajouté les considérations
suivantes (1909, p. 317) : si les recherches futures sont en état de démontrer
que des deux modes que nous venons de dire c'est le premier qui est vrai,
nous pouvons y voir une preuve certaine qu'entre ces deux chromosomes
il existe quelque différence physiologique et que nous pouvons envisager
ces deux chromosomes comme porteurs des facteurs spécifiques qui stimu-
lent le développement de l'organisme dans la direction d'un sexe ou d un
autre. En effet, si on n'admet pas cette diversité spécifique et si on regarde
ces chromosomes comme une paire d'éléments tout à fait identiques, on
n'arrive pas à comprendre, pourquoi de deux chromosomes complètement
identiques l'un se comporte d'une manière et l'autre autrement.

Si c'est le second processus qui est le vrai, nous pouvons encore, comme
dans le premier cas, prendre ces chromosomes pour des déterminants
sexuels, l'un, mâle, l'autre, femelle.

Mais on peut tout aussi bien les regarder comme une paire de chro-
mosomes homologues et identiques, et pendant la cinèse de maturation il
s'agirait simplement d'expulser de l'œuf l'un de ces deux chromosomes
jumeaux n'importe lequel : l'hétérochromosome des cellules du mâle futur
pouvant être aussi bien l'un que l'autre de ces deux chromosomes. 11 fau-
drait alors conclure que les chromosomes en question n'ont aucune tendance
sexuelle spéciale et que la quantité de chromatine détermine seule le sexe :
la présence d'un de ces chromosomes provoquant le développement d'un
mâle et la présence de deux chromosomes amenant le sexe femelle.

Ces conjectures théoriques attendent encore un contrôle cytologique.
11 est vrai que Miss Stevens, dans sa dernière publication sur les pucerons
(1910), est disposée à voir dans l'unique figure de Y Aphis oenotherœ qu'elle
reproduit un argument suffisant pour prétendre que chez cette forme dans
les œufs masculinipares les chromosomes sexuels se conjuguent pendant la
prophase de maturation et se séparent à la métaphase de telle façon qu'un
d'eux passe dans le globule polaire et l'autre reste dans l'œuf — ce qui
correspondrait complètement à notre seconde supposition.

Maturation des œufs parthénogenétiques dans l'aphis palm.e 33i

Morgan (1912), d'autre part, abandonne son interprétation de igog et
décrit pour le Phylloxéra caryœcaulis un processus identique à celui de
notre première supposition : il conclut, après de nouvelles recherches, que
seulement un des deux chromosomes sexuels (auparavant, chez la même
forme, il en comptait 4) se divise, l'autre passant indivis dans le polocyte.

Mais il faut reconnaître que les dessins de Miss Stevens et de Morgan
sont peu convaincants et ne peuvent pas être regardés encore comme de
vraies preuves. D'ailleurs, nous avions nous-méme en igo8, rhez VAphis
saliccti. trouvé un œuf arrivé à la fin de la prophase dans lequel le nombre
de chromosomes était de cinq au lieu de six, que nous observions générale-
ment. Mais, ainsi que nous l'avons dit à plusieurs reprises, nous ne nous
croyons pas autorisé à tirer d'une seule figure une conclusion définitive,
comme le font certains auteurs qui citent nos résultats.

IV. Parthénogenèse et réduction de la chromatine.

Comme on sait -la loi du nombre des globules polaires *• établie par
Weismann et énonçant que -les œufs parthénogenétiques forment it7i glo-
bule polaire et les œufs qui exigent la fécondation en forment deux-, lui a
permis, ainsi qu'à beaucoup d'autres auteurs, de prétendre que c'est seule-
ment pendant la seconde cinèse de maturation que la réduction de la chro-
matine peut avoir lieu.

Les considérations théoriques de Weismann sur la nécessité de consi-
dérer la seconde mitose de maturation comme une mitose réductionnelle,
ont trouvé un apiuii dans les travaux cytologiques de Ruckert (1894),
H/Ecker (1895), voM Rath (i8g5). Me Clung (igoo, igo2, igoS), Gold-
scHMiDT (igoS), Blackman (igo5), Robertson (igo8) et autres.

De plus, les études détaillées de l'ovogenése, dans les formes obliga-
toirement parthénogenétiques, ont établi que dans la plupart de ces êtres
une seule cinèse de maturation se produit et est toujours accompagnée du
nombre diploïdique de chromosomes (Stevens, igoS, Baehr, 1908, KiiHN,
1908, Schleip, 190g, Fries, igog, Kruger, igi3). Il en résulterait que ces
deux faits (unicité du globule polaire et nombre diplo'ïdique de chromoso-
mes) sont en relation causale : si les œufs parthénogenétiques pendant la
maturation ne réduisent pas leur nombre de chromosomes, c'est une con-
séquence naturelle du fait qu'ils ne réalisent que la première mitose de
maturation. Au contraire, dans tous les cas normaux de la maturation des
œufs, la seconde mitose doit être réductionnelle.

48

332 V. B. de BAEHR

Tous ces raisonnements et arguments en faveur de la considération de
la II mitose de maturation comme un processus rcductionnel ne supportent
pas la critique et se butent à des difficultés; et il en est de même de la
conception d'après laquelle les œufs parthénogenétiques pendant la matu-
ration doivent se borner seulement à la première division ( équation nelle)
et retenir le nombre complet (somatique) de chromosomes.

En effet : i) Les travaux cytologiques les plus récents consacrés à
létude de la maturation, ont conduit beaucoup d'auteurs à la conclusion
que ce n'est pas la seconde, mais la première cinèse de maturation cjui re-
présente un processus séparant les chromosomes entiers (Grégoire, 1904-
1910, ScHREiNER, 1904-1908, Baehr, i9oS-igi3).

Il faut remarquer que A. et K. E. Schreiner, quoiqu'ils se prononcent
tout à fait catégoriquement en laveur de la préréduction chez toutes les
formes avec la reproduction bisexuelle typique, admettent cependant pour
les œufs parthénogenétiques une postréduction, qui d'ailleurs généralement
ne parvient pas à se réaliser, la seconde cinèse étant abortive. - Wahrend
das Vorkommen dieser sog. - Postreduktion i^ bei keinem Objekte mit typi-
scher geschlechtiicher Fortpflanzung als unwiderlegbar bewiesen angesehen
werden kann, scheint bei mehreren sich parthenogenetisch entwickelnden
Eiern die l Reifungsteilung eine Aequationsteilung zu sein, wahrend die
gewôhnlich abortive II Teilung die Reduktion bewirkt- (1906, p. 54).

2) Blochmann encore en 1888 a démontré que chez les abeilles les
œufs non fécondés qui se développent en faux-bourdons, de même que les
œufs fécondés qui donnent les femelles, subissent deux cinèses de matura-
tion et forment deux globules polaires. Ces observations, qui furent ensuite
confirmées par Paulcke (189g), Weismann (1900), Petrunkewitsch (1901)
et Nachtsheim (i9l3), se complètent par de très intéressantes observations
de Meves (1907) sur la spermatogenèse des faux-bourdons.

D'après Meves, dans les spermatocytes de cette forme, la première
division de maturation est supprimée ou plutôt se limite à l'expulsion d'un
petit globule protoplasmatique sans que la division du noyau ait lieu. Ce
phénomène s'explique par le fait que les faux-bourdons provenant d'un œuf
non fécondé, mais qui avait subi deux cinèses de maturation, ne possèdent
que le nombre haplo'ïde : aussi pendant la spermatogenèse il n'y a plus
lieu à réduction chromosomique. L'élimination d'un globule protoplasma-
tique a la valeur d'un processus rudimentaire. La seconde division des
spermatocytes donne origine à deux sortes de spermatides : des grands et
des petits, et ces derniers dégénèrent.

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTIQUES DANS l'aPHIS PALM.E 333

Des phénomènes de ce genre ont été observés chez d'autres Hyméno-
ptères, par Meves et Duesberg (1908) chez le Vespa crabro, par Lams
(1908) chez le Camponotits herculaneus L. (i), par Granata (igoS) chez le
Xylocopa violac"a, par Doncaster (191 i) chez le Newoterus lenticiilai-is, et
avec certaines réserves par Armbruster (i9i3) chez YOsaiia cornuta (2).
— Il faut remarquer que chez le Vespa, le Camponotus et le Neiiroterus
tous les spermatides sont de môme grandeur et capables de fonctionner. Il
en résulte que la dégénérescence de la moitié de spermatides qu'on a ob-
servée chez VApis, le Xj'Iocopa, ÏOsmia, doit être interprétée comme
un phénomène secondaire.

Avec les données tjui concernent les Hyménoptères, individus parthé-
nogenétiques, s'harmonisent les recherches de 'Whitney (190g) sur la ma-
turation des œufs chez VHydatina senta. Jusqu'à présent Whitney n'est
pas encore parvenu à compter avec précision le nombre de chromosomes
chez ce rotifère, ni non plus à trouver tous les stades de la maturation.
Néanmoins, il parait presque établi que parmi les œufs qui ont éliminé deux
globules polaires et possèdent un nombre réduit de chromosomes, les uns se
développent parthénogenétiquement et donnent des mâles, d'autres sont
fécondés et se transforment en œufs d hiver qui donneront naissance à des
femelles. D'autre part, les œufs qui, en se développant parthénogenétique-
ment, forment des femelles, expulsent, d'accord avec la loi de Weismann,
un unique polocyte et la réduction des chromosomes n'y a pas lieu.

3) La thèse de Weismann, citée plus haut, est contredite par nos
recherches sur le Bacillus rossii. Dans notre travail publié en 1907, nous
avons démontré que, chez ce phasme, pendant de nombreuses générations,
les œufs parthénogenétiques subissent deux cinèses de maturation et don-
nent naissance exclusivement à des femelles. L'intérêt spécial de cet objet
réside en ce que les chromosomes diacinétiques possèdent, au moment où
ils se mettent au fuseau, une constitution de tétrades et que, d'autre part, les
globules polaires issus des deux cinèses de maturation sont voués à dis-
paraître. Nos études de 1907 sur le Bacillus rossii sont demeurées incom-
plètes, parce que nous nous y sommes borné à l'étude de la période plus

(i) D'après les observations de Schleip (1908). les processus de la maturation des œufs chez
le Formica sangiiinea montrent que, chez les fourmis, en ce qui concerne la réduction chromatique
les relations sont semblables à celles des abeilles.

(2) Armbruster trouve dans la spermatogenèse aussi seulement une division de maturation,
mais il l'interprète comme une division réductionnelle. Les dessins de l'auteur, de même que les
considérations théoriques en faveur de sa thèse, ne sont pas convaincants.

334 ^- ^ ^^ BABHR

avancée de la maturation, mais déjà alors nous voulions reprendre de nou-
veau l'étude de cet objet, surtout en ce qui concerne les stades du début de
l'ovogenèse. ce qui en partie s'est déjà réalisé.

Dans l'appendice de notre travail de 1912, p. 435, nous avons cru déjà
pouvoir dire que chez le Bacillus rossii, contrairement à ce que Henking
(1892) et Petrunkewitsch (igor) ont admis pour d'autres œufs parthéno-
genétiques qui subissent deux cinèses de maturation, on trouve le même
nombre de chromosomes (20) dans les plaques équatoriales des cinèses de
maturation, dans les cellules de segmentation et dans les oogonies. Ce n'est
ciue dans des cellules nourricières ou folliculaires cjue l'on trouve un nombre
différent. A cette information nous sommes maintenant en état d'ajouter
que dans les derniers temps nous sommes parvenu à trouver de très beaux
stades de noyaux leptotènes et pach3^tènes précédant le grand accroissement
des oocytes. Cela est conforme avec notre découverte précédente sur la
présence de chromosomes-tétrades à la fin de la première prophase de ma-
turation; d'autre part, cela soulève certaines difficultés dans l'explication
théorique du mécanisme qui dans notre objet doit empêcher la ré-
duction ( i).

Nous ne nous arrêterons pas ici à ces difficultés parce que nous espérons
finir bientôt notre travail sur le Bacillus et le publier sans tarder. Remar-
quons pourtant cjue notre première hypothèse, d'après laquelle le nombre
de chromosomes, réduit à moitié après deux mitoses, reviendrait au
chiffre normal par une autorégulation qui se manifesterait dans une divi-
sion équationnelle intranucléaire avant la première mitose de segmen-
tation, ne correspond pas à la vérité de la présence de la même quantité
de chromosomes dans les oogonies, dans les oocytes et dans les cellules
de segmentation.

Il sera utile de rappeler ici quelques observations sur les mouches
de galle cjui sont également en désaccord avec les thèses de Weismann.
Chez ces formes, d'après les intéressantes recherches de Schleip (igog)
et Doncaster (1911), qui ne nous paraissent pas cependant tout à

(i) Que la reproduction parihénogenétique Aa Bacillus rossii ne s'accompagne pas d'une
réduction du nombre de chromosome?, cela résulte évidemment du fait que nous même avons cul-
tivé des années entières toujours de nombreuses générations successives de femelles parthénogenétiques
de ce phasmide sans pouvoir constater quelques changements dans les relations chromatiques ni non
plus trouver parmi des centaines d'individus femelles un seul mâle. Ainsi nous n'avons pas ici une
parthénogenèse facultative, mais une télytoquie normale Cela est confirmé par les observations dans
la nature, car les mâles du Bacillus rossii appartiennent aux plus grandes raretés et jusqu'à pré-
sent on en a trouvé seulement deux exemplaires (Kkavss 1897).

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGENÉTIQUES DANS l'aPHIS PALM.E 335

fait définitives, — le nombre normal de chromosomes se maintient dans
les femelles qui se développent parthénogenétiquement à l'aide de deux
procédés différents.

Chez le Rhodites rosœ (ScmleipI les œufs qui donnent naissance à des
femelles, forment deux globules polaires et gardent néanmoins le nombre di-
ploïdique de chromosomes (i); dans \e Neitrolerus lenticularis (Doncaster),
les œufs, au contraire, ne subissent aucune cinèse de maturation. Le noyau
pourvu du nombre somatique de chromosomes, monte, il est vrai, à la
périphérie de l'œuf, mais bientôt il retourne au centre où il donne origine
à la première figure de segmentation.

Ces observations doivent, nous semble-t-il, s'interpréter, de la manière
suivante. Dans le premier cas, l'œuf parthénogenétique, par une sorte de
persistance héréditaire, emploie le mécanisme achromatique des mitoses de
maturation, mais s'en sert pour réaliser deux divisions équationnelles (2).
Dans le second cas, les cinèses de maturation, après avoir, comme il parait,
perdu toute raison d'être, n'ont plus lieu et il n'existe plus qu'une réminis-
cence de leur existence d'autrefois dans le fait du déplacement temporaire
du noyau vers la périphérie de l'oocyte.

11 faut encore souligner que dans aucun de ces deux cas on ne trouve
aux jeunes. stades de l'ovogenèse ni noyaux leptotènes, ni noyaux pachy-
tènes, ni contraction synaptique; en un mot tout se passerait plus simple-
ment que dans le Bacilhis rossii.

Voyons maintenant, si les données recueillies chez VAphis palmœ ne
jettent pas une certaine lumière sur ces observations et ces vues tellement
controversées.

Est-ce que vraiment l'existence des figures tout à fait identiques durant
les stades initiaux de prophase de maturation dans les œufs parthénogené-
tiques et dans les œufs qui exigent la fécondation est tellement fatale à nos
opinions sur le mécanisme de la réduction?

(i) Une ovogenèse de ce genre a été aussi décrite jîar Donxaster (1907) pour les œufs par-
thénogenétiques femelles chez le Nematus ribesii.

Dans sa correction de igcg, Doncaster lui-même met en doute sa première description et
indique les grandes difficultés qui entourent l'étude des chromosomes dans cet objet.

(2) Un cas analogue, où les deux cinèses de maturation fonctionnent comme de simples
mitoses équationnelles, se rencontre d'après les recherches de Federley (igiS) pendant la maturation
des cellules sexuelles mâles dans la première génération des hybrides entre deux espèces de papil-
lons (Pygœra ciirtula X PygiVia anachoreta). Les chromosomes paternels et maternels ne s'y con-
juguent pas, mais, en restant univalents à la première comme à la seconde mitose, ils se divisent
équationnellement.

336 V. B. de BAEHR

Chez \ Aphis palmœ dans les oogonies nous trouvons toujours 8 chro-
mosomes. Ceux-ci, pendant la prophase synaptique après le stade lepto-
zygotène, donnent un nombre réduit (4) de chromosomes diacinétiques.
Ces derniers doivent donc être regardés comme des éléments bivalents,
comme de vrais «gemini". Les branches composantes de chacun de ces
chromosomes diacinétiques doubles, comme nous l'avons vu, proviennent
de deux minces filaments leptotènes étroitement associés et que nous pou-
vons considérer comme deux chromosomes télophasiques de la dernière
cinèse oogoniale modifiés dans leur structure.

D'après nos résultats, dans la spermatogenèse chez l'Ap/iis saliceti les
chromosomes doubles diacinétiques se dissocient pendant la I mitose de
maturation en leurs composants. Cxux-ci se dirigent vers les pôles opposés
du fuseau et forment les noyaux des spermatocytes de II ordre; l'hétéro-
chromosome qui dans les spermatogonies n'avait pas de partenaire et qui
apparaît ici en forme d'un chromosome simple, ne se divise pas, passe tout
entier dans un des spermatocytes de II ordre et devient le lot d'un seul
noyau. De semblables relations doivent être aussi achnises pour les œufs
d'hiver des pucerons cjui exigent la fécondation, avec cette différence qu'ici
l'hétérochromosome dans les oogonies a son partenaire, en sorte que tous
les chromosomes diacinétiques doivent être doubles et se diviser pendant
la I mitose.

l'endant la maturation des œufs parthénogenétiques de \' Aphis palmce,
les chromosomes diacinétiques se décomposent d'eux-mêmes en leurs com-
posants et, parce que le fuseau de maturation ne s'y forme pas, les compo-
sants restent dans le noyau.

Nous y comptons de nouveau 8 chromosomes simples comme aupara-
vant dans les oogonies. Cette décomposition de quatre chromosomes dou-
bles en huit simples peut être comparée à la première cinèse de maturation
dans les cellules sexuelles mâles ou dans les œufs d'hiver où se produit,
comme on le sait, une dissociation semblable des chromosomes qui forment
les - gemini -.

La différence principale consiste seulement en ceci que dans les œufs
parthénogenétiques de notre forme il manque un mécanisme pour trans-
porter dans les directions opposées les chromosomes dissociés et accomplir
la division du corps protoplasmique de la cellule. Après cet acte de disso-
ciation des chromosomes diacinétiques en leurs composants — phénomène
qu'on peut appeler la déconjiigaison des chromosomes homologues —

MATURATION DES ŒUFS PARTHÉNOGEN ÉTIQUES DANS l'aPHIS PALM.E 337

l'oocyte doit être, en ce qui concerne son degré de maturation clironiatique,
considéré comme ooc3'te de second ordre. Il en résulte que la période du
grand accroissement des oocytes dans l'ovogenèse parthénogenétique des
pucerons a lieu à l'intercinèse et que la seule mitose de maturation qui s'y
réalise correspond à la seconde division de maturation (i) et pas à la
première.

Comme nous voyons, le cours de l'ovogenèse chez les générations par-
thénogenétiques de VAphis palmœ est en complet accord avec nos opinions
sur le mécanisme de la réduction, avec les opinions qui acceptent la pseu-
doréduction par paraconjugaison des chromosomes homologues au stade
leptozygotène, la déconjugaison de ces éléments pendant la. pieniière cinèse
de maturation (réductionnelle) et la division en moitiés longitudinales à la
seconde cinèse de maturation (équationnelle) des éléments cjui sont devenus
de nouveau univalents (2). Naturellement il faut a priori s'attendre à ne pas
trouver dans toutes les ovogenèses parthénogenétiques les stades caracté-
ristiques de la vraie prophase S3maptique.

(1) Dans l'ovogenèse des œufs qui exigent la fécondation, la seconde cinèse de maturation
représente la dernière étape des processus de maturation.

(2) Comme nous avons déjà souligné à plusieurs reprises dans nos travaux précédents, les
arguments les plus décisifs en faveur de la préréduction après la paraconjugaison ont été fournis
par nos études de la spermatogenése de VAphis saliccti. Dans cette forme les spermatogonies pos-
sèdent cinq chromosomes presque de la même taille Les trois chromosomes qui apparaissent à la
première prophase de maturation, au lieu de cinq à la dernière télophase goniale, ne sont pas
égaux : quoique tous les trois de la même longueur, deux d'entre eux sont deux fois plus épais
que le troisième et montrent un duplicisme très net.

A la mètaphase 1 les deux chromosomes doubles en forme de deux bâtonnets parallèles, égaux
entre eux, se divisent en leurs composants, le chromosome simple (l'hétérochromosome) ne se divise
pas, mais passe tout entier à un pôle prédestiné A la fin de l'anaphase I lous les chromosomes
montrent une mince fente longitudinale. Dans les spermatocytes de II ordre qui ont reçu l'hétéro-
chromosome, ce dernier ne se distingue plus des autres chromosomes, parce que maintenant tous
les trois éléments sont égaux en ce qui concerne leur longueur et leur épaisseur.

Les spermatocytes de II ordre qui ont reçu l'hétérochromosome sont seuls capables de subir
la seconde division de maturation. La fente longitudinale qui s'observe dans tous les chromosomes
à la prophase II et qui est probablement la même que celle qui avait apparu à l'anaphase de la
1 division, devient maintenant efficace par la séparation dicentrique des moitiés longitudinales. Cela
montre clairement que pour l'ApIns saliceti il est impossible d'admettre une métaconjugaison, par-
ce que dans le cas d'un appariement «end to end» de cinq chromosomes égaux il devrait se former
deux éléments deux fois plus longs que le troisième qui n'avait pas de partenaire. Mais en réalité
rien de pareil ne se vérifie ni à la première prophase, ni à la première mètaphase.

Nous devons rejeter tout aussi nettement pour VAphis saliceti les interprétations de ces adver-
saires de la théorie de l'individualité des chromosomes qui, identifiant le duplicisme des gemini avec
le simple clivage longitudinal des chromosomes somatiques, ne voient pas de différence fondamentale
entre une simple prophase somatique et une prophase synaptique de la cinèse réductionnelle de
maturation.

338 V. B. de BAEHR

Ces stades ayant généralement pour but la réduction de la chromatine,
ils ne peuvent dans les œufs parthénogenétiques qui retiennent pendant la
maturation le nombre normal (diploïdique) de chromosomes, représenter
autre chose qu'une réminiscence phylogenétique, et cela confirme l'opinion
acceptée généralement, que la parthénogenèse est une dérivation du mode
bisexuel de reproduction.

Etant donnée la grande plasticité des processus cytologiques, on peut
s'attendre aussi à voir l'œuf parthénogenétique, pour obtenir un si grand
but que le maintien dans son noyau des deux séries d'éléments équivalents,
adopter différentes voies.

Il peut peu à peu se dégager de la tradition ou tout de suite - brûler
les étapes-. Les oocytes de VAphis palnicv montrent encore à la prophase
de maturation, comme nous l'avons vu, des tendances hétérotypiques bien
nettes, et c'est seulement à la diacinèse, par la dissociation des gemini en
leurs composants (les chromosomes simples), qu'ils retournent à la mitose
somaticiue.

A en juger d'après les travaux de Kuhn (igo8) et de Schleip (igog),
des relations semblables régnent aussi dans les œufs parthénogenétiques
des Cladocères et Ostracodes, quoique les auteurs eux-mêmes, n'ayant pu
compter le nombre de chromosomes dans les différents stades de la pro-
phase maturative, arrivent à des conclusions différentes des nôtres et identi-
fient le duplicisme des éléments au commencement de cette prophase avec
le clivage des chromosomes définitifs qui sépare réellement les moitiés longi-
tudinales.

KiiHN il est vrai mentionne la possibilité pour son objet d'une inter-
prétation analogue à celle que maintenant nous avons établie pour V Aphis

En effet, pourquoi l'un des trois chromosomes dans notre objet ne montrerait-il pas à la
première prophase de maturation une fente longitudinale qui présenterait le même aspect que celle
des deux autres chromosomes et pourquoi à la métaphase, qui suit, resterait-il indivis au lieu de
se diviser, comme le font tous les chromosomes, dans une cinèse somatique?

Nous pouvons ajouter que dans la spermatogenèse de YAphis saliceti, de même que dans l'ovo-
genèse de VAphis palmœ, nous n'avons rien trouvé qui puisse être interprété en faveur du o second
contraction » et du repliement métasyndétique dans le sens de Me Clung et Farmer-Moore.

Une discussion plus détaillée sur le problème de la réduction chromatique se trouve dans
notre publication de 1912 (dans le chapitre « Mécanisme de la réduction ») et dans les autres parties
de nos « Études sur les chromosomes », qui sont déjà préparées pour impression. Le lecteur y
trouvera aussi la riche littérature récente de cette question. Ici ayant en vue surtout les relations
qui régnent dans la parthénogenèse, nous ne pouvions toucher ces questions très intéressantes qu'en
passant.

Maturation des œufs paRthénogenétiques dans l'aphis palm.î: 33g

palmcv, mais il la trouve très peu probable. -^ Eine andere Moglichkeit bleibe
noch : nâmlich die, dass tatsachlich eine Syndese der ursprunglichen acht
Chromosomen angebahnt, jedoch wieder riickgangig gemacht wird; dann
miisste der Liingsspalt der Prophasen sich neu an den wieder getrennten
Chroinosomen bilden. Dieser Gedanke ist jedoch in dem gegebenen Zusam-
menhang nur eine blosse Moglichkeit'.. (Kuhn, igo8, p. Syô.)

Grégoire (igio, p. 38o) faisant la critique des travaux de Kuhn et de
ScHLEiP, insiste sur les lacunes de leurs observations et admet (lue rien
n'empêche d'admettre pour ces objets qu'il s'y forme desgemini en nombre
haploïdique, que ceux-ci persistent jusqu'à la veille de la diacinèse et
qu'alors ils se dissocient en leurs éléments, les chromosomes somatiques.

C'est à une autre catégorie marquée par la disparition déjà complète
des traditions synaptiques qu'appartiennent les Pemphigines, qui se carac-
térisent par une très grande fécondité, surtout \e Pemphigus piriformis, où
les processus de l'ovogenèse se déroulent excessivement vite. Malgré nos
études très minutieuses nous n'avons pas trouvé même de trace de la pro-
phase synaptique(i). De semblables traits, à savoir des traits somatiques,
caractérisent la prophase de maturation des œufs parthénogenétiques de
VArtemia saliiia et du Rhabditis aberrans, des êtres qui, quoique occupant
des places assez éloignées dans l'échelle philogenétique, néanmoins sont
également bien adoptés à la parthénogenèse.

Pries (igog) a étudié comparativement l'ovogenèse des œufs qui exi-
gent la fécondation du Brauchiptis Grubei et celle des œufs parthénogenéti-
que de VArtemia salina. Chez le Branchipiis il trouve toutes les étapes
d'une prophase synaptique (un parallélisme des filaments leptotènes, un
stade du bouquet, un pachytène, etc.) et il est prêt à les interpréter en
faveur de la paraconjugaison; dans l'ovogenèse parthénogenétique de VAr-
temia, au contraire, les filaments minces chromatiques du commencement
de la prophase de maturation, en se raccourcissant peu à peu et en s'épais-
sissant, se transforment directement en chromosomes définitifs de la mitose
maturative et montrent le nombre diploïdique.

D'après une publication récente de KrUger (igi3), dans les œufs par-
thénogenétiques du Rhabditis aberrans, qui forment seulement un globule
polaire, les chromosomes définitifs se forment directement aux dépens des

(i) 11 faut rappeler que spécialement chez cette forme les chromosomes des oocyles, pendant
toute la période d'accroissement, ne perdent pas la compacité de leur substance et, sans subir un
changement quelconque, forment la plaque équatoriale de la mitose de maturation.

49

340 V. B. de BAEHR

filaments chromatiques; de plus, comme l'auteur le souligne spécialement,
pendant toute la période d'accroissement des oocytes jusqu'à la métaphase
de maturation, les éléments ne montrent aucun duplicisme (i).

Beaucoup d'auteurs, surtout Boveri (1890), Korschelt et Heider
(1903), soulignent les grandes difficultés théoriques qui, àleur avis, s'élèvent
dans l'analyse de la parthénogenèse avec une seule mitose de maturation,
si on tient compte du fait qu'ici ce n'est pas l'œuf mùr définitif qui com-
mence le développement embryologique, mais une cellule sexuelle de la
génération plus jeune — l'oocyte de second ordre.

La description de l'ovogenèse parthénogenétique de \ Apliis palinœ et
les interprétations que nous y avons données pour les différents stades
enlèvent, pensons-nous, cette difficulté.

En effet, la seule cinèse de maturation que nous y trouvons ne corres-
pond pas à la première, comme l'admettent même A. et K. E. Schreiner,
mais à la seconde cinèse (la dernière étape dans les processus de matura-
tion) ; la première cinèse (rcductionnelle) qui manque ici a son équivalent
dans la déconjugaison des chromosomes du no3'au diacinétique.

Nous n'avons pas besoin d'accentuer de quelle importance pour la
théorie de l'individualité des chromosomes sont nos résultats sur l'ovogenèse
chez VAphis palmœ et de quelle façon décisive ils s'opposent aux thèses de
ces cytologistes qui homologuent le duplicisme des éléments à la prophase I
avec le simple clivage des chromosomes somatiques en deux moitiés lon-
gitudinales et qui ne veulent pas reconnaître une différence fondamentale
entre les n'jitoses somatiques et celles de maturation (Fick, Meves, Dues-
BERG, FooT et Strobell, Soôs, Kuschakewitsch).

A la fin nous voudrions toucher brièvement une très intéressante
question de la maturation chromatique chez les plantes qui se développent
apogamiquement ; ici aussi à la métaphase nous avons à faire au nombre
diplo'ïdique de chromosomes, ciuoique à la prophase il y ait des préparatifs
hétérotypiques. C'est à Strasburger et à ses élèves que nous devons sur-
tout les recherches dans cette direction.

(i) A noire avis, la contraction des éléments chromatiques en un pôle du noyau dans des
oocytes très jeunes décrite par Krûger sous le nom de « synapsis » révèle seulement en ce moment
une certaine susceptibilité des substances nucléaires envers les réactifs et ne possède pas une plus
grande importance. La réduction numérique des chromosomes constatée dans les spermatocytes se
réalise d'après la supposition de Tauteur par la conjugaison des chromosomes déjà tout à fait for-
més, c'est-à-dire à un stade de la maturation plus avancé que celui où elle a lieu chez les autres
animaux.

MATURATION DES ŒUI-'S l'ARTHENOGENETlnUES DANS LAI'HIS PALM.E J4I

Wikstrœmia iiidica ne montre même pas de traces d'après lesquelles
on pourrait admettre la persistance des tendances synaptiques cjuelconques
(Strasbukger, 190g).

Un type moins pur sous ce rapport est représenté par les Eualchimel-
les apogamcs : ï Anteiiaria alpma ou Taraxacnm, où au commencement
de la prophase se montrent encore des traits hétérotypiques, mais après
il s'y déroule une simple cinèse somatique avec le nombre normal de chro-
mosomes (Strasburger, 1904).

Chez le Marsilia Drinnoiidi enfin nous trouvons une vraie prophase
synaptique avec un nombre haploïdique de chromosomes et ce n'est pas
avant la diacinèse qu'une dissociation des chromosomes, qui étaient réunis
en gemini, s'accomplit.

Au lieu d'une plaque équatoriale réductionnelle avec le nombre haplo-
ïdique-de gemini qu'on voyait en préparation, une plaque somatique typique
se forme avec un nombre diploïdique des chromosomes simples, dont les
moitiés longitudinales, comme dans chaque mitose somatique, passent
d'une façon ordinaire dans les noyaux-filles (Strasburger, 1907).

Un pareil début dans la direction d'une mitose réductionnelle et un
retour ultérieur à une mitose somatique caractérisent aussi le Hoiittuyiiia
cordata (Shibata et P,1iyake|.

Nous voyons ainsi dans l'apogamie des plantes une échelle très nette
dans les degrés de la manifestation des réminiscences synaptiques. Les
Marsilia et Hoiittuynia retiennent le mieux les traditions, et c'est seulement
à la diacinèse que nous observons la disjonction des éléments conjugués et
le retour au nombre somatique de chromosomes.

Le Wikstroemia représente la forme la plus adaptée à l'apogamie; les
chromosomes n'y essayent même pas de se conjuguer. Les Eualchimelles
citées plus haut occupent la place intermédiaire entre ces deux types
extrêmes.

De pareilles relations s'observent aussi, d'après Strasburger, 1910,
chez les Urticacées. Dans Y Elatotesma acuminatiim la cellule-mère du sac
embryonnaire montre des caractères synaptiques jusqu'au noyau pachytène.

Après cela, elle retourne au repos et se divise ensuite équationnelle-
ment. Au contraire, la prophase dans la cellule-mère de V Elatotesma sessile
se caractérise depuis le commencement par les traits somatiques.

M.'^KOWL.^NY p. SiDRA, 28 1710! I9I4.

342

V. B. de BAEHR

Le mémoire présent est une partie de nos -Études sur les chromoso-
mes ", qui était prête pour l'impression au moment où la guerre éclata.

Pendant la guerre tous les dessins et la plupart des préparations ont
disparu. Les figures des planches actuelles ont été faites de nouveau d'après
quelques préparations seulement heureusement sauvées.

A cause des nouveaux dessins nous avons été obligé de faire quelques
changements insignifiants dans le texte.

Les résultats sur l'ovogenèse de YAphis palina', que nous publions
maintenant en français, ont été déjà publiés en polonais dtms les -Annales
de la Société des Amis des Sciences à Vilno, igi5 — igi8^, vol. 6.

Makowlany p. SiDRA, i5 jani'iev 191g.

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1889
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1901

1909 von Winiwartcr, H.,etSainnwnt,G.

EXPLICATION DES FIGURES.

Toutes les figures ont été dessinées au moyen de l'appareil Abbé. Fig. i- ? : Zeiss
apochr. d. f. 2 mm., ap. num. i,jo ou 1,40, oc. comp. 6 ; tondes les autres figures :
le même abject., oc. comp. 12.

FIG. 1. Coupe longitudinale de la chambre terminale parthénogenétique. Fix.
liquide de F"lemming; col. Hématoxyline ferrique.

FIG. 2. Coupe longitudinale de la chambre terminale parthénogenétique. En
haut les no^-aux des cellules nourricières, en bas les noyaux des ovocytes Fleii.
Hém. ferr.

FIG. 3. Coupe longitudinale oblique de la chambre terminale parthénoge-
nétique. On voit seulement les oocytes. Flem. Hém. ferr.

FIG. 4-5. Noyaux des oocytes. Stade lepto-zygotène. Flem. Hém. ferr.

FIG. 6. Noyau de l'oocyte. Stade diacinétique. Quatre doubles chromosomes
_(« gemini o). Flem. Hém. ferr.

FIG. 7. Noyau de l'oocyte. Déconjugaison des chromosomes : deux chromo-
somes encore doubles, quatre déjà simples. Flem. Hém. ferr.

FIG. 8. Noyau de l'oocyte dans la chambre terminale avec des chromosomes
arrondis en nombre somatique. Flem. Hém. ferr

FIG. 9. Noyau de l'oocyte dans la chambre terminale. Dans certains chro-
mosomes on voit la fente longitudinale. Flem, Hém. ferr.

FIG. 10. Oocyte dans la chambre ovarique en accroissement. Flem. Hém. ferr.

FIG. 11. Oocyte dans la chambre ovarique. Période d'accroissement. Certains
chromosomes montrent une fente longitudinale. Flem. Hém. ferr.

FIG. 12. Oocyte dans la chambre ovarique. Période d'accroissement. Les chro-
mosomes perdent la compacité de leur structure. Subi, ac safr.-vert lum.

FIG. 13. Oocyte dans la chambre ovarique. Stade plus avancé Flem. Hém. ferr.

FIG. 14. Cellule de segmentation. Plaque équatoriale. Vue polaire. Flem.
Hém. ferr.

TABLE DES MATIÈRES.

Pages

Introduction ........ 3i7

I. Structure des ovaires parthénogenétiques ..... 3i9

II. Ovogenèse ......... 32o

III. Examen de la littérature concernant la maturation des oeufs chei les pucerons vivipares 325

IV. Parthénogenèse et réduction de la cliromatine ..... 33i

Littérature ........ 343

Explication des figures ....... 35i

Table des matières ....... 353

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7.

U.

de Baehr ad nat. fihot.

Observations cytologiques sur le

cytoplasme d'un Saprolegnla

PAR

A, GUILLIERMOND

{Mémoire déposé le 12 août 1920.

Bl

\

Observations cytologiques sur le

cytoplasme d'un Saprolegnia

I. Introduction.

Le chondriome des champignons, mis en évidence pour la première
fois par nous (i ) en igii dans les asques de Puslnlaria vesicuiosa et retrouvé
ensuite par nous (2) (rgi3 et 14) dans un grand nombre de champignons
appartenant à des groupes variés, a été l'objet d'études de Rudolph (3) (1912),
Janssens, van de Putte et Helsmortel 14) (igii), Lewitsky (5) (igi3),
Madame F. jMoreau (6) (1914), F. Moreau (7) (1914), Beauvekie (8) (1914),

COWDRY (9) (19 18), BeSZNOFF (IO) (1920).

Ces recherches démontrent l'existence dans tous les champignons d'un
chondriome très caractérisé et tout à fait semblable à celui de la cellule
animale et des végétaux supérieurs.

Les recherches de cytologie animale tendent à démontrer que les mito-
chondries sont des organites élaborateurs, aux dépens desquels se forment
divers produits du métabolisme cellulaire (grains de zymogène, graisses,
pigments), et les recherches sur les végétaux supérieurs, en démontrant que
les plastides depuis longtemps connus sont des mitochondries, confirment
ce rôle. Nous avons donc cherché si dans les champignons, le chondriome
exerce un rôle dans l'élaboration des produits de réserve. Aucun fait précis
ne nous a permis de mettre en évidence ce rôle pour le glycogène et les
globules graisseux. Par contre, nous avons été amené à admettre que les
corpuscules métachromatiques, que nous avons été l'un des premiers à faire
connaître dans les champignons, sont élaborés par les mitochondries. Cette
conclusion s'appu3-ait sur le lait que dans les asques de Pustularia vesicuiosa,
les chondriocontes forment sur leur trajet de petites vésicules tout à fait
semblables à celles qui, dans les chondriocontes des racines des Phanéro-
games, sont déterminées par l'apparition d'un grain d'amidon non colorable

358 A. GUILLIERMOND

par les méthodes mitochoiidiialcs au sein du choiidriocontc. La présence
très fréquente de ces vésicules semlilait donc indiquer que le chondriome
jouait un rôle dans l'élaboration des produits de réserve de l'asque. Or, ces
vésicules apparaissent toujours dans les périodes qui correspondent aux
phases actives de l'élaboration des corpuscules métachromatiques et dis-
paraissent ensuite. Comme les corpuscules métachromatiques ne se colorent
pas par les méthodes mitochondriales, l'idée venait donc que les vésicules
étaient représentées par dé" petits corpuscules métachromatiques qui se
déposaient sur le chondrioconte, comme cela se produit pour l'amidon dans
les végétaux supérieurs. Cette idée semblait se vérifier par le fait que dans
les hyphes du pseudoparenchyme tlu périthècc, nous avons remarqué que
i]uel(]ues corpuscules métachromatiques se colorent périphériquement par
les méthodes mitochondriales (PI. II, fig. 34, C M C). Ils offrent donc l'as-
pect de vésicules tout à fait semblables à celles <]ui sont situées sur le trajet
des chondriocontes. A côté de ces corpuscules entourés d'une paroi colo-
rable, la j^lupart apparaissent absolument incolores et ne se distinguent que
par leur réfringence spéciale (C M I). Comme on trouvait une série impres-
sionnante de formes de transition entre les chondriocontes pourvus de
vésicules (VM), les corpuscules métachromati(|ues entourés d'une jxiroi
colorée et les corpuscules absolument incolores nous avions cru pouvoir
conclure que les corpuscules métachromatiques apparaissent au sein des
chondriocontes sous forme de vésicules, qui ensuite se détachent pour émi-
grer dans les vacuoles.

Nos observations ont été vérifiées par Beauvekie et F. Moreau, c]ui,
eux aussi, ont admis l'origine mitochondriale des corpuscules métachroma-
tiques. Enfin, à la même époque, Lewitsky a décrit la formation par un
processus identique des Gclbeii Kôrner des vacuoles de l'oogone des
Pcronosporacées.

Cependant, dans une série de recherches plus récentes (igig-igao),
M. Dangeard (ii), à la suite d'observations des champignons à l'aide de
colorants vitaux, est arrivé à des résultats absolument différents. L'auteur a
constaté que les champignons observés sur le frais ne montrent dans leurs
vacuoles qu'un très petit nombre de corpuscules métachromatiques et que
ce nombre ne correspond pas à la grande quantité de corpuscules que l'on
obtient en colorant après fixation le même champignon. Au moyen de
colorations vitales, M. Dangeard a pu démontrer que les corpuscules méta-
chromatiques sont le plus souvent les produits artificiels de la condensation

OBSERVATIONS CYTOLOGIQUES SUR LE CYTOPLASME D UN SAPROLEGNIA JDQ

SOUS l'inllaencc des colorants vitaux et des fixateurs d'une substance se
trouvant normalement à l'état de solution colloïdale dans la vacuole, la mé-
tachromatinc. L'auteur conclut donc t|ue les corpuscules métachromaticiues
ne peuvent pas avoir l'origine mitochondriale qui leur est attribuée.

Or, en observant par des colorations vitales l'origine des vacuoles dans
les champignons, M. Dangeard a vu qu'elles apparaissent sous forme de
très petites vacuoles, remplies de métachromatine, rondes ou allongées, en
bâtonnets ou en filaments, c'est-à-dire avec les formes caractéristiques des
niitochondrics. M. Dangeard a surtout observé l'origine du système vacuo-
laire dans un Saprolegiiia trouvé sur des cadavres de mouches. Il a constaté
qu'à son origine, ce système vacuolaire présente l'aspect très caractérisé du
chondriome et que cet aspect se retrouve sur les préparations fixées et
colorées par les méthodes mitochondriales. La métachromatine offre selon
lui les mêmes caractères histo-chimiques que les mitochondries. Aussi
l'auteur conclut-il sans plus d'informations que ce qui a été décrit dans la
cellule animale et dans les champignons sous le nom de cliondriome appar-
tient au système vacuolaire rempli de métachromatine et que par consé
quent c'est par erreur (ju'on a admis dans les végétaux supérieurs (]ue les
plastidcs dérivent des mitochondries. Pour i\L Dangeard la métachroma-
tine serait une substance qui se rencontrerait dans les vacuoles de toutes les
cellules et jouerait un rôle très important dans la physiologie cellulaire :
elle agirait à la fois comme osmotine et électivine.

Nous (12) avons combattu cette théorie dès son origine, la sachant inex-
acte, et nous avons montré cju'il n'y a aucune relation histo-chimitjue entre
la métachromatine et la substance mitochondriale. Les mitochondries ne se
colorent vitalement iiu'avec la plus grande difficulté et d'une manière très
lente, et seulement au moyen de colorants spéciaux. Au contraire, la mé-
tachromatine fixe presque instantanément la plupart des colorants vitaux.
Les méthodes mitochondriales ne colorent pas la métachromatine, et les
méthodes qui conviennent le mieux à la différenciation des corpuscules mé-
tachromatiques détruisent le chondriome. Les jeunes vacuoles ne présentent
d'ailleurs pas, dans les champignons (|ue nous avons observés, la forme de
mitochondries, et leur évolution n'est nullement superposable à celle du
chondriome : elles aboutissent très rapidement à la formation de grosses
vacuoles, tandis que le chondriome subsiste dans sa forme primitive jien-
dant toute la vie de la cellule.

par contre, nos observations ultérieures nous ont permis de vérifier les

36o A. GUILLIERMOND

observations de I\I. Dangeard, pour ce qui concerne la mctachromatine et
de démontrer que les corpuscules métachromatiques résultent le plus souvent
d'une condensation, sous l'influence des colorants vitaux et des fixateurs,
d'une substance normalement dissoute dans la vacuole.

L'observation vitale du chondriomc que nous avons pu réaliser récem-
ment dans \ Endoinyces Magiiusii, nous a permis en outre de constater que
la métachromatine se forme directement dans les vacuoles sans le concours
des mitochondries, contrairement à ce (]uc nous avions admis à la suite
d'observations de coupes fixées et colorées. Nous avons pu réaliser, dans
ce champignon, une double coloration vitale du chondriomc et du système
vacuolaire au moyen du violet de Dahlia et du rouge neutre, qui démontre
que le chondriomc et le système vacuolaire sont des formations absolument
indépendantes et que la métachromatine apparaît directement dans les
vacuoles à l'état de solution.

En outre, les vacuoles ne présentent pas plus dans ce champignon que
dans ceux que nous avions observés antérieurement des formes susceptibles
d'être confondues avec les mitochondries. Cependant, dans le Rhi^opus
uigricans, le système vacuolaire à son origine se présente parfois sous forme
de canalicules allongés qui s'anastomosent, puis se gonflent et se fusionnent
pour constituer de grosses vacuoles. La présence de vacuoles en forme de
canalicules allongés s'explique sans doute par la structure spéciale de ce
champignon, dont le thalle est continu et qui est le siège d'une circulation
du cytoplasme dans le sens longitudinal des filaments, pouvant déterminer
la forme allongée des jeunes vacuoles.

On voit donc ([ue AL Dangeard a confondu le système vacuolaire qu'il
a différencié à l'aide de colorants vitaux avec le chondriomc qui lui a passé
complètement inaperçu. S'il est démontré que les corpuscules métachroma-
tiques ne sont pas, comme nous le pensions, d'origine mitochondriale,
l'existence d'un chondriome dans les champignons ne peut être mise en
doute et il est actuellement établi que ce chondriome n'a pas de relation
avec le système vacuolaire.

L'occasion nous a été donnée d'obtenir sur des cadavres de mouches
un Saprolegiiia, qui parait très voisin, sinon identique, de celui qu'a observé
AI. Dangeard. Ce champignon a pu être cultivé sur des cadavres de
mouches pendant plusieurs mois et n'a jamais donné d'autres formes de
reproduction que des zoosporanges. L'absence d'organes sexuels ne nous a
donc pas permis de le déterminer d'une manière plus précise. Ce cham-

OBSERVATIONS CVTOLOGIQUES SUR LE CYTOPLASME d'uN SAPROLEGNIA 36i

pignon constitue un des objets les plus favorables que nous connaissions à
l'étude vitale du chondriome et a permis de faire des observations vitales
beaucoup plus précises que sur Vhudomyces Alagiuisii, dans lequel le chon-
driome ne se distinguait sur le vivant qu'avec la plus grande difficulté et
nécessitait presque toujours pour son étude le concours de la coloration
vitale au violet de Dahlia. Étant donné que c'est l'étude de ce champignon
qui a servi à M. Dangearp à appu3-er sa théorie de la nature du chon-
driome, il nous a donc ]'aiu intéressant de pul>licr ici nos observations sur
ce Saprolegnia.

II. Observations vitales.

Si l'on observe sur le vivant à un fort grossissement les filaments de
ce champignon, on y distingue d'abord un nombre plus ou moins considé-
rable de petits granules très réfringents qui sont les éléments les plus
visibles du cytoplasme (PI. I, Gg). Ces granules, qui se déplacent très rapi-
dement dans les courants cytoplasmiqucs et qui brunissent par l'acide osmi-
que, correspondent aux microsomes décrits par M. Dangeard. La proportion
de ces granules varie beaucoup d'un filament à l'autre, selon l'état du déve-
loppement : on trouve des filaments où ces granules sont très rares, d'autres
où ils sont assez nombreux; dans les extrémités des filaments destinés à se
transformer en zoosporanges, dans les zoosporanges eux-mêmes en forma-
tion et dans les zoospores, ils sont tellement nombreux et tellement serrés
les uns contre les autres qu'ils empêchent de voir les autres éléments du
cytoplasme. Ces granules offrent des dimensions variables ; les plus petits
ont un diamètre inférieur à celui des éléments du chondriome, les plus
gros sont toujours beaucoup plus petits que les noyaux.

Ces éléments nous paraissent être des globules de nature graisseuse
semblables à ceux que nous (i3) avons observés dans les cellules épidermi-
ques de la fleur de Tulipe et de la feuille (ï Iris germanica. Ils semblent
constituer une réserve pour les zoospores. Ils n'ont en tout cas aucun rap-
port avec les éléments décrits sous le nom de mitochondries.

Le système vacuolaire renferme un suc vacuolaire à peu près de la
même réfringente que le cytoplasme, de telle sorte qu'il est fort difficile de
le distinguer sur le vivant ; c'est à peine si, dans les extrémités en voie de
croissance des filaments, on distingue parfois de petites vacuoles que les
mouvements d'ensemble du cytoplasme peuvent déplacer. On aperçoit dans

362 A. GUILLIERMOND

ces vacuoles quelques granulations réfringentes. Les colorations vitales,
dont nous parlerons plus loin, permettent d'observer très distinctement le
système vacuolaire et les granulations contenues dans son intérieur.

Les noyaux sont le plus souvent visibles : ils se présentent sous la forme
de petites vésicules, arrondies ou souvent ellipsoïdes ou fusiformes, à paroi
nette, à contenu h5'alin avec un assez gros nucléole assez réfringent.
(PI. I, N).

Le chondriome est généralement impossible à déceler dans les extré-
mités des filaments destinés à se transformer en zoosporanges, dans les
zoosporanges en formation et dans les zoosporcs, parce qu'il se trouve mas-
qué par l'extrême abondance des granulations graisseuses. Partout ailleurs,
il j^eut être observé. Dans les filaments très jeunes et dans les tubes
résultant de la gemmation des zoospores, il est cependant moins net
qu'ailleurs jiar suite de la densité du cytoplasme et de l'abondance des
granulations graisseuses. Par contre, il apparaît avec la plus grande netteté
dans les jiartiesun peu plusâgées, dans lesquelles les granulations graisseuses
sont moins nombreuses et où le cytoplasme est plus transparent. Le cyto-
plasme s'y présente sous la forme d'une substance hyaline d'aspect homo-
gène, (]ui renferme, en outre des granules graisseux et des noyaux, un chon-
driome presque exclusivement constitué par des chondriocontes de diverses
longueurs; les uns apparaissent comme des bâtonnets courts, mais le plus
grand nombre affectent la forme de longs filaments très minces, onduleux
et orientés le plus souvent dans le sens delà longueur du filament; ciucl-
ques-uns sont ramifiés (PI. I, M). Les mitochondries granuleuses sont ex-
trêmement rares; toutefois, dans les extrémités des filaments, les bâtonnets
et même les mitochondries granuleuses sont plus nombreux, tandis (pic les
chondriocontes allongés sont rares. Les éléments du chondriome sont tou-
jours très faciles à distinguer des granulations graisseuses par leur réfringence
beaucoup moins accusée et par leurs mouvements beaucoup plus lents. Ils
s'observent presqu'aussi nettement que le chondriome des cellules épider-
miques de Tulipe et d' Iris, que nous avons observé dans de précédentes
recherches et auquel ils ressemblent beaucoup.

Une étude attentive montre que le chondriome peut subir des varia-
tions d'aspect, selon les filaments. On trouve des filaments où le chondriome
est presque exclusivement constitué par des chondriocontes très minces et
très allongés (PI. I, fig. ii, 12, 13), et d'autres où il se compose surtout de
chondriocontes épais et peu allongés, de bâtonnets courts et trapus et même

OBSERVATIONS CYTOLOGigUES SUR LE CYTOPLASME d'uN SAPROLEGNIA 363

de mitochondries granuleuses (PI. I, fig. l). Dans certains filaments, les
chondriocontes affectent des formes d'allure cristalline (PI. I, fig. 7 et 16) :
ils sont plus ou moins fusiformes et ressemblent un peu aux amyloplastides
de la racine de Phajiis graiidifoliiis. Enfin, on rencontre des filaments dans
lesquels tous les éléments du chondriome sont transformés en vésicules, de
formes rondes et plus ou moins grosses (PI. I, I'IG. 8 et 18 à 24). Beaucoup
de ces aspects sont dus à une dégénérescence du chondriome ou à des alté-
l'ations dues aux conditions du milieu. C'est ainsi que l'on peut constater
au cours de l'observation vitale des altérations du chondriome qui abou-
lissent à des formes semblables. Les conditions de la préparation, la
pression exercée sur les filaments par la lamelle, déterminent des altéra-
tions du chondriome qui se manifestent d'abord par un gonflement des
chondriocontes, puis par leur segmentation en bâtonnets et par la transfor-
mation des bâtonnets en vésicules rondes qui peuvent grossir jusqu'à
atteindre le volume de noyaux et s'accoler les unes aux autres, déterminant
]iar leur ensemlile des structures alvéolaires artificielles du cytoplasme. Ces
altérations sont absolument semblables à celles que nous avons constatées
dans les cellules épidermiques de la fleur de Tulipe sous l'influence de
milieux hypotoniques et à celles observées par Fauré-Frémiet (14) et
R. et H. LEwis (i5) dans les mitochondries des animaux.

Le réactif iodo-ioduré conserve très bien le chondriome comme dans
la Tulipe et VIris et même le rend plus apparent en donnant à ses éléments
une teinte jaune plus marquée que celle que [)rend le cytoplasme. Ce réac-
tif ne révèle pas de traces de glycogène ; cependant dans les filaments
destinés à se transformer en zoosporanges et dans les zoospores, le réactif
iodo ioduré fait apparaître une grande quantité de petits grains qui prennent
une coloration d'un brun acajou très marquée. Les zoospores sont remplies
de ces petits grains qui pourraient représenter une substance voisine du
glycogène. On sait que le glycogène n'apparait pas dans les autres cham-
pignons sous cette forme, mais à l'état de granulations de dimensions
variables, à contours indécis qui très vite se diffusent dans le cytoplasme
sous forme de grosses plages et pénètrent même dans les vacuoles. On sait
d'autre part que Errera n'a pu obtenir la différenciation du glycogène dans
plusieurs espèces de Sapwlegnia. 11 est facile de constater que les granula-
tions brun acajou que révèle le réactif iodo-ioduré sont toujours situées en
dehors des éléments du chondriome; elles ne paraissent pas se former dans
leur intérieur, mais dans le cytoplasme lui-même.

364 ^- GUILLÏERMOND

Le chonclriome se conserve également dans une solution d'acide osmi-
que à ; il ne réduit pas l'acide osmique et seules les granulations

lOO

graisseuses brunissent. On peut se rendre compte par l'examen de prépara-
tions montées dans une solution d'acide osmique que ces granulations ne
sont jamais en relation avec les éléments du chondriome et ne naissent pas
à leurs dépens. Certaines granulations contenues dans le suc vacuolaire
prennent à la longue en présence de l'acide osmique une teinte légèrement
grise.

Les essais de colorations vitales du chondriome à laide du vert Janus
et du violet de Dahlia ont toujours échoué et il ne nous a pas été possible
d'obtenir de bonnes colorations vitales du chondriome. On sait au contraire
que dans d'autres champignons, le violet de Dahlia nous avait permis de
colorer le chondriome. Il semble que nos échecs soient en partie attribuables
au fait que le chondriome de notre Sapioleffiiici est extrêmement fragile et
que les colorants vitaux qui paraissent avoir sur lui une influence noci\'e
altèrent le chondriome avant de le colorer.

En faisant séjourner le champignon dans de l'eau dans une étuve à
45-5o°, pendant un quart d'heure ou une demi-heure, nous a\ons constaté
que tous les éléments du chondriome se transforment en grosses vésicules
et en traitant ensuite le champignon ainsi altéré par les méthodes mito-
chondriales, on n'obtient pas la différenciation du chondriome. Les mito-
chondries présentent donc à ce point de vue les mêmes caractères que celles
des animaux et des végétaux supérieurs et sont détruites par un séjour
même court à une température de 45-5o" (Policard (iG), R. et H. Lewis,

COWDRY (17), GuILLIERMOND).

Les colorations vitales au rouge neutre, aux bleus de Nil, de crésyl
ou de méthylène nous ont permis de mettre en évidence le système vacuo-
laire qui fixe presque instantanément ces colorants.

Dans les extrémités des filaments, le système vacuolaire apparait
parfois sous forme de petites vacuoles qui se colorent d'une manière diffuse
et prennent avec les colorants bleus une teinte d'un violet rougeâtre pas
très marquée, comme la métachromatine des autres champignons. Mais le
plus souvent, il apparait sous forme de canalicules allongés qui finissent
par s'anastomoser et constituerun fin réticulum avec épaississements nodaux
(PI. II, FiG. 1 à 4, R V). Dans les parties plus âgées, ce réticulum ariive en
se gonflant et par fusion des canalicules cjui le constituent à composer une

OBSERVATIONS CYTOLOGIQUES SUR LE CYTOPLASME d'uN SAPROLEGNIA 365

grande vacuole qui occupe la majeure partie du filament et constitue dans
celui-ci une sorte de long canal (PI. II, fig. 5, et P\. I, fig. 3, CV).
Le cytoplasme est alors réduit à une couche pariétale qui s'amincit de
plus en plus à mesure que le canal s'élargit. Cette couche pariétale
avant de devenir très mince est souvent parcourue par de fins canalicules
qui ensuite se fusionnent avec la vacuole centrale. Pendant toute la durée
de son développement le système vacuolaire offre une substance à l'état de
dissolution qui fixe les colorants vitaux, mais à mesure que les vacuoles
grossissent cette substance devenant de plus en plus étendue se colore d'une
manière de plus en plus pâle. Lorsque le canal vacuolaire est définitive-
ment constitué, le suc vacuolaire ne se colore plus que d'une manière très
faible. C'est dans les régions où le canal vacuolaire a pris son développe-
ment définitif que le cytoplasme pariétal très mince laisse observer avec
le plus de netteté son chondriome. Le système vacuolaire offre donc dans
notre Saprole^uia les mêmes formes que nous avons observées dans
Rhiiopiis nigricûiis, ce cpii s'explique facilement étant donné tju'il possède
aussi un thalle continu. Ce sont les formes canaliculaires initiales de ce
système qui ont attiré l'attention de M. Dangeard, mais ces formes ne
rappellent que d'une manière extrêmement vague un chondriome.

Dans le suc vacuolaire, les colorants vitaux permettent de mettre en
évidence des granulations qui se colorent d'une manière plus intense que
le suc vacuolaire lui-même (PI. I, fig. 3 à 7, 9 et 17, et PI. II, fig. 5). Ces
granulations n'apparaissent ordinairement pas dans les stades tout à fait
initiaux du système vacuolaire et sont surtout abondantes dans les fila-
ments jeunes ou d'âge moyen. Elles sont plus rares ou peuvent faire défaut
dans les filaments âgés. Les unes sont des grains de dimensions variables,
le plus souvent petits, qui se colorent d'une manière intense et très méta-
chromatique; elles ne sont pas visibles sans coloration vitale et semblent
résulter d'une altération partielle de la substance dissoute dans la vacuole
sous l'influence du colorant. Les autres ont également des dimensions varia-
bles, mais atteignent souvent une taille relativement grosse et peuvent
dépasser le diamètre des noyaux; ces granulations se voient sans coloration
et présentent l'aspect de corpuscules d'une réfringence un peu moindre ([ue
celle des globules graisseux : l'acide osmique leur donne une teinte légère-
ment grise. Ces derniers grains se colorent vitalement d'une manière
diffuse et à peine métachromatique. Il est possible que les deux catégories
de granulations ne soient que des états différents d'une même substance.

366 A. GUILLIERMOND

Les granulations cjui se colorent intensivement sont très abondantes
dans les filaments destinés à se transformer en zoosporanges et dans les
zoospores : celles-ci apparaissent criblées de petits grains qui fixent énergi-
quement les colorants vitaux (PI. II, fig, 7). Pendant la germination des
zoospores, ces grains se dissolvent dans les vacuoles qui les contiennent :
celles-ci se dilatent beaucoup en absorbant de l'eau, puis s'introduisent en
s'allongeant sous forme de canalicules dans le tube de germination (PI. II,
FiG. 6). Il est difficile de décider si les vacuoles du tube germinatif dérivent
toutes des vacuoles préformées dans la zoospore ou si, ce qui nous semble
plus vraisemblable, une partie d'entre elles sont des néoformations. Nos
recherches ne nous ont pas permis de résoudre cette question de la persi-
stance des vacuoles.

III. Observations de coupes fixées et colorées.

Il est très facile d'obtenir la différenciation du chondriome par les
méthodes mitochondriales (PI. II, fig. 8 à 32). On peut colorer directement
le mycélium une fois fixé, sans employer la méthode des coupes à la paraf-
fine. Il est facile également d'obtenir des coupes à la paraffine : il suffit
d'inclure la mouche infectée toute entière et de la couper. Les deux procédés
ont leurs avantages et leurs inconvénients. Le premier permet d'obtenir
une vue d'ensemble des filaments, mais donne des images moins nettes du
chondriome; le second permet des superbes différenciations du chondriome,
mais sur des débris 'de filaments coupés en tous sens.

La simple fixation au formol commercial suivie de coloration à
l'hématoxyline ferrique donne d'excellents résultats. On obtient également
de très belles différenciations par les méthodes de Regaud de Benda et
de KuLL.

Ces méthodes ne colorent pas le suc vacuolaire, ni les granulations
intravacuolaires. Les granulations qui se colorent d'une manière diffuse par
les colorants vitaux peuvent prendre cependant une teinte grise par l'héma-
toxyline ferrique et dans quelques cas exceptionnels, un observe également
dans les vacuoles de petites granulations colorées en noir par l'hématoxyline.
Mais en général, les méthodes mitochondriales ne colorent que les mito-
chondries et les noyaux et 1 interprétation des préparations ne jirésente
aucune difficulté. Les méthodes de Benda et de Kull permettent en outre
la différenciation des granulations graisseuses du cytoplasme qui appa-

OBSERVATIONS CYTOLOGIQUES SUR LE CYTOPLASME d'uN SAPROLEGNLX 307

raissent brunies par l'acide osmicjue (PI. II, fig 30 et 32). Par toutes ces
méthodes, les éléments du chondriomc ressortent très distinctement par leur
coloration intense dans le cytoplasme à peine coloré. Leur contour est
tellement net qu'on éprouve parfois certaines difficultés pour distinguer les
chondriocontes de certaines bactéries filamenteuses qui peuvent se trouver
accolées à la membrane du champignon.

Le cytoplasme à peine coloré se distingue mal du système vacuolaire
incolore. Cependant dans les filaments jeunes, où le cytoplasme est plus
dense, les vacuoles apparaissent comme des canalicules incolores séparés
par des fibrilles plus ou moins épaisses du cytoplasme, et on observe une
structure filamenteuse, qui fait suite, lorsque les canalicules se sont anasto-
mosés, à une structure alvéolaire. Ce sont ces aspects qui ont été décrits
et figurés par von Istwanfi (i8) dans des observations cytologiques déjà
anciennes sur les Saprolégniacées. Il est probable que ce sont des aspects
semblables du système vacuolaire qui ont été observés par Matruchot (ig)
dans Morlierella rcticiilata et considérés comme une structure filaire.

Dans certains filaments, le chondriome peut subir certaines variations
que nous avons déjà constatées sur le vivant. C'est ainsi que les chon-
driocontes peuvent se raccourcir, prendre la forme de bâtonnets courts et
trapus ou bien se transformer en fuseaux ( PI. II, fig. 21 à 24). Enfin, dans
quelques cas, les éléments du chondriome apparaissent tous sous forme de
vésicules plus ou moins grosses (PI. II, fig. 25 à 27). Il n'est pas possible
de décider si ces formes sont en relation avec le métabolisme cellulaire ou
représentent simplement des altérations du chondriome.

Il est fort difficile de mettre en évidence le chondriome dans les
zoospores : toutefois il semble que dans les jeunes zoosporanges, les chon-
driocontes se segmentent, de\iennent courts et que c'est sous forme de grains
et de courts bâtonnets que se présente le chondriome des zoospores (PI. II,
FIG. 11).

Le chondriome de notre Saprolegiiia présente une particularité remar-
quable : c'est sa résistance vis-à-vis des fixateurs renfermant de l'acide
acétique ou de l'alcool. C'est ainsi qu'on peut obtenir sa différenciation par
l'hématoxyline ferrique après fixation au picroformol de BouiN ou même
au liquide de Lenhossek, qui en général détruisent les mitochondries,
spécialement celles des autres champignons. Il est vrai que les images
obtenues à l'aide de ces méthodes sont beaucoup moins nettes que celles
que l'on obtient par les méthodes mitochondriales et témoignent dune

368 A. GUILLIERMOND

certaine altération du chondriome. Par contre, laicool absolu détruit le
chondriome. Par leur résistance aux fixateurs, les mitochondries de
Saprulegnia sont donc à rapprocher des chloroplastides et des bâtonnets
de Heidenhain.

Nous avons essayé de colorer le contenu du système vacuolaire à l'aide
des procédés employés pour la différenciation des corpuscules métachro-
maticiues. En colorant le mycélium fixé par l'alcool ou le formol par les
bleus de méthylène ou de crésyl, nous n'avons jamais obtenu la coloration
même diffuse du système vacuolaire qui ai)|iarait toujours incolore. Par
contre, les grains visibles sur le vivant sans coloration prennent avec ces
colorants une teinte bleue extrêmement pâle. On peut en outre mettre en
évidence les petits grains des zoosporanges et des zoosporcs cjui se coloraient
intensivement sur le vivant. Ceux-ci apparaissent fortement colorés en bleu
violacé. L'hématéine ne colore pas ces grains et donne aux premiers une
teinte bleuâtre pâle.

Lorsqu'on traite une préparation fixée \)3.\ le formol et colorée par le

bleu de méthvlcne par une solution aqueuse d'acide sulfurique à

lOO

(réaction I de Arthur Mever), on constate que toutes les granulations des
vacuoles se décolorent. On sait au contraire que les corpuscules métachro-
matiques restent colorés dans les mêmes conditions.

On voit donc qu'aucune de ces granulations n'offrent les réactions
caractéristiques de la substance bien définie à laquelle nous avons donné
le nom de métachromatine. Ces granulations ne se colorent pas intensive-
ment et métachromatiquement par l'hématéine et n'offrent pas la réaction I
de A. Meyer. On peut donc conclure que notre Saprolegiiia ne parait pas
renfermer de métachromatine et que c'est à tort cjue M. Dange.ard a dé-
signé sous ce nom la substance contenue dans les vacuoles de ce cham-
pignon. C'est le seul exemple de champignon que nous connaissions qui
soit entièrement dépourvu de corpuscules métachromatiques.

IV. Conclusions.

Le chondriome des Saprolcgniacées a déjà été entrevu par certains
auteurs. Dès 1904, dans ses recherches sur la métachromatine, Arthur
Meyer (20) s'exprime ainsi au sujet d'un Aciilva : - Les gros filaments
à'Achlya (PI. II, fig. 33) renferment un cytoplasme exclusivement situé à

oëserVations cvtologiques sur le cytoplasme d'un saprolegnia 369

la périphérie, montrant de nombreux noyaux pour la plupart allongés (N),
des gouttelettes graisseuses facilement colorables au Sudan (Gg), des élé-
ments plus faiblement réfringents (L), et des corpuscules ciui se colorent
intensivement par le bleu de méth3'lène (GB). Les éléments incolores et
plus faiblement réfringents sont à peu près de la même dimension et ont
une forme variant de l'ellipse à la circonférence. Ce sont, selon moi, des
leucoplastes. Dans les jeunes hyphes, ils sont fréquemment allongés en
bâtonnets. - A. Meyer montre que les corpuscules colorables par le bleu
de méthylène qu'il désigne sous le nom de grains B ne présentent par
la réaction I et ne sont par conséquent pas formés de métachromatine.
- A coté de ces grains B, dit A. Mever, j'ai trouvé cependant dans des hyphes
un peu âgés et dans les zoospores d'autres grains, qui après coloration par
le bleu de méthylène et traitement par une solution d'acide sulfurique à

restent colorés et qui pourraient être de la volutine.- Ainsi A. Mever

100

constate comme nous la présence de plusieurs catégories de granulations

colorables par le bleu de méthylène et dont les unes ne sont sûrement pas

de la métachromatine et, ce qui est plus intéressant, il décrit la présence

de corpuscules qu'il assimile à des leucoplastes.

Plus tard en igi2, Rudolph observe dans un Achlya des cléments en
forme de filaments, visibles sur le vivant et entremêlés à des granulations
graisseuses; les filaments qui se colorent par la méthode de Benda lui pa-
raissent être à rapprocher des mitochondries.

Nous avons vu au contraire que dans une étude plus récente sur un
Saprolegnia qui parait le même que le nôtre, M. Dangeard (igi6) prétend
avoir coloré vitalement et métachromatiqucment par le bleu de crésyl
le chondriome et admet qu'il représente les formes initiales du système
\acuolaire rempli de métachromatine. M. Dangeard décrit dans ce cham-
pignon, en ilehors des noyaux, i" de petits granules très réfringents, en-
traînés d'une manière très rapide par les courants cytoplasmiques, brunis-
sables par l'aide osmique et qui paraissent se transformer en globules
graisseux plus gros; l'auteur les désigne sous le nom de microsomes;
2"-' un système vacuolaire se présentant dans les jeunes filaments sous forme
de chondriocontes, de mitochondries granuleuses ou de chondriomites,
remplis de métachromatine, ciui ensuite se gonflent, s'anastomosent en
réseau, puis se transforment et se fusionnent en un gros canal vacuolaire.
L'auteur a pu retrouver à l'aide des méthodes mitochondriales les figures

370 A. GUILLIERMOND

mitochondriales qui donnent naissance aux vacuoles. Aussi conclut-il c|ue
ce que l'on a décrit dans la cellule animale et dans les champignons sous le
nom de chondriome appartient au système vacuolaire et qu'il ne peut être
par conséquent (piestion de rattacher les plastides des végétaux chloro-
phylliens aux mitochondries. La coloration des vacuoles par les méthodes
mitochondriales serait due à la métachromatine qui présente les caractères
histo-chimiques attribués aux mitochondries. L'auteur pense également
que les microsomes ont été également pour une part décrits comme des
mitochondries.

Nos observations vérifient celles de A. Meyer et de Rudolth, mais
sont en contradiction formelle avec celles de M. Dangeard, car elles
démontrent que le chondriome et le système vacuolaire sont des formations
absolument indépendantes et constituent deux systèmes superposés. On a
vu en effet que le système vacuolaire se colore vitalement avec la plus
grande facilité, tandis que le chondriome ne fixe pas les colorants vitaux.
Nos observations montrent en outre que le système vacuolaire ne se
colore pas par les méthodes mitochondriales qui donnent de très belles
différenciations du chondriome et qu'enfin les formes filamenteuses initiales
des vacuoles se transforment très rapidement, dès les filaments les plus
jeunes, en vacuoles typiques, tandis que le chondriome persiste avec les
mêmes caractères pendant toute la durée de vie des filaments. Quant aux
microsomes, ils ne peuvent pas non plus être confondus avec les mitochon-
dries par le fait qu'ils ne se colorent pas par les méthodes mitochondriales.

Il semble cependant d'après la lecture de son mémoire que M. Dan-
geard a bien vu sur le vivant sans coloration les mitochondries. Voici en
effet la description qu'il en donne : - Ces éléments se présentent sous
l'aspect de sphères, de bâtonnets ou de longs filaments cylindriques; la
substance qui les constitue est d'apparence homogène et le contour en est
très net. Si l'on examine, par exemple une extrémité de filament, là où la
couche pariétale est épaisse, on voit souvent un grand nombre de sphères
réfringentes disposées sur trois ou quatre assises; en s'éloignant progressive-
ment de cette extrémité, on constate que les éléments sphériques sont
remplacés par d'autres formations de même nature, mais ayant la forme de
bâtonnets ou de longs filaments; parfois tous les éléments en question,
même aux extrémités des filaments ont l'aspect de bâtonnets ; parfois aussi,
surtout lorsque lacôuche pariétaleest mince, la forme filamenteuse domine-;
et plus loin : - Nous avons assisté directement à la transformation de la

OBSERVATIONS CYTOLOGIQUES SUR LE CYTOPLASME d'uN SAPROLEGNIA Sjl

forme de bâtonnet à la forme sphérique probablement sous l'influence des
conditions nouvelles dans lesquelles se trouvait le thalle sous la lamelle-.
Cette description ne laisse guère de doutes sur la nature des éléments
décrits par M. Dangeard et correspond à celle que nous venons de faire
du chondriome. Il est bien probable également que ce sont des mitochon-
driesque M. Dangeard a mises en évidence à l'aide des méthodes mitochon-
driales, puisque le système vacuolaire ne se colore pas avec ces techniques
et que seules les mitochondries et les noyaux apparaissent. - Lorsqu'on
applique au thalle du Saprolegnia, dit M. Dangeard, les méthodes les plus
usitées dans l'étude du chondriome, on arrive à la conviction que les for-
mations que nous venons d'étudier correspondent bien aux mitochondries
et chondriocontes des auteurs. -

L'erreur vient d'une mauvaise interprétation des colorations vitales.
Voici en effet ce que dit M. Dangeard à ce sujet : - En employant des
traces du réactif (bleu de crésyl), on constate que le cytoplasme resté in-
colore continue d'être le siège d'une circulation active des microsomes et
des globules graisseux, même lorsque ces derniers ont un volume supérieur
à celui des mitochondries; par contre le colorant s'accumule rapidement
dans le gros canal vacuolaire central et aussi dans les mitochondries et les
chondriocontes qui prennent une teinte rouge ou violacée; ces formations
renferment donc de la métachromatine dissoute, comme les vacuoles ordi-
naires petites et grandes des Algues et des champignons; cette métachro-
matine, dans le suc vacuolaire du canal central, se condense ordinairement
en gros corpuscules métachromatiques... -. On voit donc clairement cjue
M. Dangeard a confondu ici les canaliculcs vacuolaires des extrémités des
jeunes filaments et ceux que l'on rencontre aussi dans la couche pariétale
du cytoplasme en dehors du canal vacuolaire dans les filaments relati-
vement jeunes, avec les mitochondries. C'est donc ici qu'est l'erreur.
M. Dangeard dominé par une idée préconçue, idée déjà exprimée par lui
dans des études antérieures, que le chondriome correspond aux formes
juvéniles du système vacuolaire, a donc vu le chondriome du Saprolegnia,
sur le vivant sans coloration et à l'aide des méthodes mitochondriales et l'a
confondu avec les canalicules du système vacuolaire qu'il a colorés sur le
vivant. Ce système vacuolaire ne se voit pas en effet sans coloration, tandis
que le chondriome apparaît très distinctement. On peut s'étonner que
M. Dangeard se soit hasardé sans plus d'information dans une théorie
aussi risquée, d'autant plus que tous les auteurs qui ont étudié le chon-

53

372 A. GUILLIERMOND

driome sont d'accord pour admettre qu'il ne se colore vitalement qu'avec la
plus grande difficulté et seulement à l'aide de colorants spéciaux et que le
bleu de crésyl ne le colore jamais.

L'étude que nous venons de faire démontre donc avec la plus grande
évidence l'existence dans le Saprolegnia observé d'un chondriome nettement
caractérisé, semblable à celui de la cellule animale et de la cellule des
végétaux supérieurs, (^e chondriome présente exactement les mômes carac-
tères morphologiques, physiques et microchimiques que celui que nous
avons pu observer sur le vivant dans les cellules épidermiques de la Heur de
Tulipe et de la feuille (X Iris germanica. Il n'en diffère que par une plus
grande résistance vis à vis des fixateurs.

Ce chondriome présente un aspect tellement caractérisé que bien avant
que les mitochondries ne soient connues, dès 1904, A. Meyer l'avait déjà
assimilé aux leucoplastes des végétaux supérieurs.

Ce chondriome est absolument indépendant du système vacuolaire
avec lequel il a été confondu par M. Dangeard et qui cependant n'offre
que de bien vagues ressemblances avec un chondriome. De même que dans
les autres champignons, les colorations par les méthodes mitochondriales
ne différencient dans le Saprolegnia que le chondriome et rendent impos-
sible toute confusion entre les granulations des vacuoles et les mitochon-
dries et si nous avons pu dans certains champignons admettre l'origine
mitochondriale des corpuscules métachromatiques, c'est seulement en raison
de l'aspect vésiculeux que prennent les chondriocontes dans les stades
correspondant à l'élaboration des corpuscules métachromatiques et du fait
que dans quelques cas ces corpuscules peuvent se colorer périphériquement
et prendre l'aspect de vésicules qui paraissent s'être détachées des chon-
driocontes et avoir émigré dans les vacuoles. Mais cette coloration partielle
des corpuscules métachromatiques est très rare et ne se rencontre que dans
quelques cas seulement et l'on peut affirmer que presque toujours le con-
tenu des vacuoles des champignons (métachromatine ou autres substances)
ne se colore pas par les méthodes mitochondriales. M. Dangeard n'est
donc nullement autorisé à prétendre comme il l'a fait (]ue nous avons con-
fondu les corpuscules métachromatiques et le système vacuolaire des cham-
pignons avec les mitochondries. Si nous avons mal interprété l'origine de
la métachromatine, notre interprétation n'atteint nullement les descriptions
que nous avons données et les figures que nous avons représentées du
chondriome dans nos publications antérieures. Toutes nos recherches

OBSERVATIONS CYTOLOGIQUES SUR LE CYTOPLASME d'uN SAPR0LEGNL\ 2y'5

ultérieures ont au contraire montré leur exactitude. C'est M. Dangeard lui-
même qui a confondu le système vacuolaire et les corpuscules métachroma-
tiques avec le chondriome. Nous ajouterons pour terminer cette discussion
que M. Dangeard décrit de la métachromatine là où il n'y en a pas,
puisque le Saprolegnia ne renferme pas cette substance dans ses vacuoles.

Quant aux granulations graisseuses (microsomes de M. Dangeard),
elles représentent des produits du métabolisme cellulaire qui ne peuvent
être confondus avec les mitochondries, puisque les techniques mitochon-
driales ne les colorent pas.

Par contre, l'observation du Saprolegnia ne nous a point permis de con-
stater sa participation à l'élaboration des produits de réserve de la cellule,
mais il est possible que le chondriome, en dehors du rôle élaborateur qui
lui est attribué dans la cellule animale et qui est démontré dans la cellule
des végétaux supérieurs, ait d'autres fonctions qui nous sont encore ignorées.
Il est légitime aussi d'admettre que le chondriome peut contribuer d'une
manière indirecte à l'élaboration de certains produits du métabolisme
cellulaire, en formant des substances intermédiaires qui échappent à nos
moyens d'investigations et il n'est pas impossible que les variations très
nettes de formes que l'on constate dans le chondriome et notamment
l'aspect vésiculeux que prennent les mitochondries dans certains filaments
soient précisément en relation avec des phénomènes de cet ordre (i).

(i) Dans V Endomyccs Magnusii, nous avons \m démontrer (lue le glycogéne ne se forme pas
aux dépens des mitochondries, ce qui parait surprenant étant donné que l'amidon, substance très voisine
est sans exception le produit de l'activité des mitochondries Dans les Floridées, un de nos élèves,
M. Mani.enot a constaté que l'amylodextrine à l'état de solution, qui remplace l'amidon et qui esj
incontestablement le produit de la photosynthèse, ne nait jamais dans les rhodoplastes, mais toujours
dans le cytoplasme lui-même. Cependant, il est certain dans ce dernier cas que les rhodoplastes exercent
un rrjle dans la production de cette amylodextrine, puisqu'ils représentent les organes de la photo-
synthèse (Observations inédites),

INDEX BIBLIOGRAPHIQUE.

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Sciences, i m' i ■

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376 A GUILLIERMOND

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C. R. Soc. Biologie, 1920.
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C. R. Soc. Biologie, 1920.
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und Chemie des Volutins; Bot. Zeitung, 1904.

EXPLICATION DES PLANCHES.

(Toiiies Us figures (ni été dessinées à un grossissement de i^oo et réduits à environ I2~^,
sauf les fig. 2 7, 2S et 2Ç de la planche IL)

PLANCHE I.

FIG. 1. Filament dessiné sur le vivant. M, mitochondrie ; A'^, noyaux; Gg, glo-
bule graisseux. Les éléments du chondriome nnt l'aspect de fuseaux.

FIG. 2. Id. Les chondriocontes sont minces et très allongés.

FIG. 3 à 5. Filaments colorés vitalement par le bleu de crésyl : la colora-
tion ne porte que sur le canal vacuolaire (V) dont le contenu est faiblement coloré et
renferme des corpuscules plus fortement colorés : les uns, C, sont plus intensivement
colorés que les autres, C'-. Le chondriome est vu au-dessus de la vacuole dans
la couche pariétale du cytoplasme et donne l'illusion que ses éléments sont dans
l'intérieur de la vacuole.

FIG. 6 et 7. l'^ilaments in vivo, sans coloiation. Les chondriocontes offrent
des aspects divers : fuseaux, vésicules. C, corpuscules intravacuolaires.

I-'Kj. 8. Id. Les chondriocontes ont l'aspect de fuseaux dilatés et vésiculeux.

FIG. 9. Filament coloré vitalement jtar le bleu de crésyl : le canal vacuo-
laire est faiblement coloré et renferme de nombreux corpuscules, les uns, C, très
colorés, les autres moins colorés, C-. Le chondriome vu dans la couche pariétale
au-dessus de la vacuole donne l'illusiiin d'itre situé dans l'intérieur de la vacuole.

h'IG. 10 et 11. l'ilaments dessinés in vivo, sans coloiation; dans la fig. 10,
les mitochondries ont la forme de fuseaux vésiculeux.

VU'i. 12 à 14. Filaments montés dans une solution d'acide osmique : les
globules graisseux sont brunis par l'acide osmique.

l'IG. 15 ,1 28. l'ilaments in vivo, montrant un chondriome dont les éléments
sont altérés et en \oie de se transformer en grosses vésicules.

J78 A. GUILLIERMOND

PLANCHE II.

FIG. 1 et 2. Filaments jeunes, colorés vitalement par le bleu de crésj-l et
montrant le système vacuolaire en forme de réseau (RV) coloré d'une manière diffuse.
Le chondriome, les no_vaux et les globules graisseux n'ont pas été représentés pour ne
pas compliquer le dessin.

FIG. 3 et 4. Id. Les vacuoles ont la forme de canalicules en voie de
s'anastomoser.

F"IG. 5. Id. à un stade plus avancé : les vacuoles renferment des corjius-
cules plus colorés que le suc vacuolaire.

FK;. 6. Zoospore en voie de germination, montrant son système vacuolaire
en forme de réseau.

]'"I(i. 7. Zoospores à l'état de repos, avec corpuscules colorés par le bleu
de crésyl.

FIG. 8 à 10. Fragments de filaments de coupes fixés et colorés par la
méthode de Regaud.

l"Ki. 11. Zoospore (Méthode de Recoud).

l"l(i. 12 à 20. Filaments fixés et colorés par la méthode de RECArn.

l'^Ki. 21 à 27. Id Le chondriome présente des anomalies : ses éléments se
dilatent, prennent la forme de bâtonnets courts et trapus, de fuseaux et se trans-
forment en vésicules.

FIG. 28 et 29. Filaments fixés et colorés par la méthode de Regaud et
dessinés à un grossissement de 3ooo.

I''I(j. 30 iMlament fixé par la méthode de Benda et coloré jiar l'hématox} line
ferrique : Les globules graisseux, Gg, sont brunis jiar l'acide osmique.

F'IG. 31 et 32. Id. à un grossissement de i5oo

FIG. 33. l-'ragment du c\toplasme d'un Achlya coloré vitalement par le bleu
de méthylène, d'après .Arthur .Mever. L. leucoplaste ; (jg, globules giaisseux;
GB, grains B colorés par le bleu de méthylène; N, no}au.

FIG 34. l'ragment du pseudoparenchj-me du périthèce de Pustidaiia veùculosa
(méthode de Regaud). N, noyau; M, chondrioconte ; V M, chondrioconte pourvu
d'une vésicule ; G .M G, corpuscule métachromatique à écorce colorée par l'hémato-
xyline; C M I, corpuscule métachromatique non coloré.

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La Spermatogenèse et l'Ovogenèse

CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR

SUIVIES D UNE

discussion générale sur le mécanisme de la réduction chromatique

PAR

le B » V. B. de BAEHR.

(Mémoire déposé le lo août ig20.)

B4

La Spermatogenèse et l'Ovogenèse

CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR

SUIVIES d'une

discussion générale sur le mécanisme de la réduction chromatique

Pendant notre séjour, en hiver et au printemps igj2-igi3, à la Station
Zoologique de Villefranche s. M., nous avons profité de l'occasion pour
étendre nos études sur les chromosonnes par des recherches spéciales sur
les Annélides marines.

Parmi les représentants de ce groupe de vers qui se trouvaient à notre
disposition, le Saccocirriis major (archiannélide) nous intéressait d'autant
plus que, d'après la publication de Hempelmann (1912) qui venait de pa-
raître, les relations chromatiques dans cette forme, au cours de la matura-
tion des cellules sexuelles, nous paraissaient très singulières et ne s'accor-
daient pas facilement avec nos opinions actuelles sur les phénomènes
maturatifs.

Nous avons déjà publié l'année dernière (igi3), avec les dessins né-
cessaires à l'appui, tous les résultats essentiels de nos recherches sur la
formation, la maturation et la fécondation des cellules sexuelles chez le
Saccocirnis major. Ici nous voulons donner une description un peu plus dé-
taillée de ces phénomènes, en ajoutant en même temps une discussion gé-
nérale sur le mécanisme de la réduction chromatique.

Qu'il nous soit permis d'exprimer à cette place encore une fois nos sin-
cères remerciements aux chefs de la Station Zoologique à Villefranche, M M.
les Professeurs A. Korotneff et M. Davidoff, et à MM. les Assistants
J. Schneider et H. Mietens pour leur grande amabilité et la vive attention
qu'ils nous ont témoignées en se souciant incessamment de nous procurer en
abondance du matériel toujours frais et en veillant à tout ce qui pouvait
rendre le travail au laboratoire facile et le plus agréable.

382 V. B. de BAEHR

I. TECHNIQUE.

Pour l'étude de la genèse des cellules sexuelles dans le Saccocirnis ma-
jor nous avons employé trois méthodes : celle des coupes, celle des frottis
et celle de Schneider au carmin acétique pour le matériel frais.

Quand il s'agissait de la première méthode, nous débitions le ver en
petits morceaux, pour faciliter la pénétration du liquide fixateur dans le-
quel nous les placions immédiatement. Nous avons employé un très grand
nombre de fixateurs, mais surtout les suivants : le liquide de Flemming
(fort et faible), le liquide de Hermann, le liquide de Hertwig et le sublimé
acétique. Tous ces fixateurs nous ont donné de bons résultats, et il est bien
difficile d'affirmer quel est le meilleur, parce que chacun d'eux présente cer-
tains avantages. L'emploi de différents fixateurs nous a permis d'utiliser les
diverses méthodes de coloration selon le but que nous visions.

Les objets fixés aux liquides de Flemming ou de Hermann, colorés à
l'hématoxyline ferrique de Heidenhain ou à la safranine et surcolorés au
vert lumière, nous ont montré très fidèlement les structures chromatiques.
Nous avons obtenu les mêmes résultats après fixation au liquide de Hertwig
et coloration à la brasiline.

La fixation au liquide de Hertwig ou au sublimé acétique et la colo-
ration au BiONDi-triacide étaient indispensables pour observer les mitochon-
dries et les y Nebenkerne ".

Pour étudier les nucléoles, la triple coloration d'EHRLiCH, après la fixa-
tion au sublimé acétique, s'est montrée préférable à toutes les autres ma-
tières colorantes.

Les coupes ont été faites de 5 à lo \>..

Nous nous adressions très souvent à la méthode des frottis, à titre de
contrôle. Permettant d'observer les cellules et les noyaux tout entiers, elle
nous fournissait des aspects bien clairs, surtout dans la spermatogénèse.
Nous avons traité les frottis par les mêmes différents fixateurs que les ob-
jets destinés aux coupes et nous utilisions les mêmes colorations.

La méthode de Schneider au carmin acétique pour le matériel frais
nous a rendu de grands services. Grâce à elle, nous sommes parvenu en très
peu de temps à établir le nombre diploïdique et haploïdique des chromoso-
mes et à sérier les stades.

Pour les toutes premières phases de l'étape synaptique, où tous les

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 383

fixateurs et l'enrobage en général altèrent la substance et brouillent un peu
les aspects, cette méthode paraît irremplaçable en conservant tout à fait
intacte la structure de minces filaments chromatiques. Il est vrai que le
carmin acétique de Schneider, appliqué sur le matériel frais, augmente un
peu les dimensions des cellules et celles des noyaux, mais nous n'avons pas
trouvé que cela constitue un inconvénient pour l'analyse microscopique.

La comparaison entre diverses cellules au même stade nous a montré
que chez le Saccocirnis major, comme chez les autres formes étudiées par
nous, les volumes des cellules et ceux des noyaux présentent des différences
individuelles qu'accentue encore l'influence plus ou moins considérable des
liquides fixateurs.

En employant l'hématoxyline ferrique il ne faudrait pas oublier que les
dimensions et les épaisseurs des chromosomes dépendent dans une certaine
mesure du degré de différenciation de cette coloration.

Le Saccocirnis major nous a offert le meilleur matériel, tant pour nos
recherches sur la spermatogenèse que pour l'ovogenèse, à la fin du mois
d'avril et pendant le mois de mai.

H. RECHERCHES DE H E MPEL M AN N SUR LA

FORMATION DES CELLULES

SEXUELLES CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR.

Les principaux résultats des recherches de Hempelmann sur la forma-
tion des cellules sexuelles chez le Saccocirnis major peuvent être résumés
ainsi.

L'auteur indique le nombre huit comme nombre somatique et décrit
dans les spermatocytes et les ovocytes le nombre réduit quatre.

Les spermatogonies, qui flottent librement dans le cœlome du mâle,
sont presque toujours groupées par quatre (i). Ce n'est que très rarement
que l'auteur a rencontré des groupes formés de deux ou trois cellules
goniales.

Les quatre spermatogonies, qui flottent généralement en groupe, grandis-
sent un peu, s'arrondissent petit à petit et entrent alors dans leur dernière

(i) Hempelmann n'a pas pu élucider, si des spermatogonies isolées ou des groupes constitués
d'un nombre de cellules plus grand que quatre peuvent accidentellement se séparer de la masse
générale des cellules testiculaires et tomber dans le cœlome, et il laisse cette question en suspens.

384 "^- ^ ^^ BAEHR

cinèse goniale. Leurs chromosomes montrent une forme de bâtonnets courts
et trapus et sont, sans exception, au nombre de huit.

Par la division de ces quatre spermatogonies jointes dans un groupe il se
forme un groupe constitué de huit spermatocytes de I^'' ordre. Les noyaux cy-
taires prennent la forme d'une vésicule et passent au stade de repos.

Après le repos, la chromatine se ramasse en iiii spirème qui prend
place à un pôle du no3'au et forme par ses circonvolutions une -figure de
bouquets-.

Le filament spirématique se tronçonne en huit éléments chromatiques,
c'est-à-dire en un nombre no/-;?!^/ somatique et non pas en un nombre ré-
duit de chromosomes.

Ces huit éléments s'unissent ensuite deux à deux, et dans certains d'eux
une fente longitudinale se fait remarquer, à cause de quoi ces paires pren-
nent la forme de croix, d'anneau, etc. Enfin dans chaque noyau se forment
quatre tétrades chromatiques.

Il faut tout de suite souligner que Hempelmann ne s'arrête pas beau-
coup sur la question de savoir de quelle manière se réalise ici la conjugai-
son des chromosomes, et en faveur de quel mode de réduction chromatique
plaident chez le Saccocimis les processus de maturation des cellules sexuel-
les. Il indique qu'étant données les dimensions très petites de l'objet et
d'énormes difficultés dans l'observation des relations chromatiques, il est
impossible de suivre toutes les phases de ces processus. En établissant l'or-
dre successif des étapes méiotiques, il attribue un grand rôle à la détermina-
tion du nombre de cellules qui forment les différents groupes cellulaires, à
l'estimation des dimensions de ces cellules et de leurs noyaux, et il étudie
très minutieusement la façon dont les cellules sont orientées les unes par
rapport aux autres.

Nous devons nous-même concéder à Hempelmann que les cellules
sexuelles du Saccocimis major sont peu favorables aux études cytologiques
détaillées et que, d'autre part, en recherchant comment des spermatogonies
dérivent les spermatocytes, et de ces derniers les spermatides, il faut bien
tenir co.mpte du nombre et des dimensions des cellules réunies dans tel ou
tel groupe. D'un autre côté, nous sommes forcé d'avouer que dans notre cas
la sériation réelle des stades nous paraît très difficile sans une étude détail-
lée et approfondie des différentes étapes de l'évolution chromatique, et que
même sans cette fine analyse cytologique tout le travail est compromis. En
effet, aussi difficile et pénible que cela puisse être, l'intérêt principal doit

LA SPERMATOGENÈSE ET l'ovOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 385

être surtout concentré sur l'éclaircissement des changements les plus délicats
dans la substance chromatique.

Après cette remarque nous revenons à la- description donnée par
Hempelmann pour la spermatogenèse.

La I^ cinèse de maturation se passe simultanément dans toutes les huit
cellules du même groupe et donne i6 spermatocytes de 11^ ordre. Chacune
des quatre tétrades chromatiques du noyau se divise en deux dyades, qui
prennent part à la construction des noyaux -filles. Les noyaux-filles, avant
de subir la 11'^ cinèse de maturation, entrent en repos en dissolvant peu à
peu leurs éléments chromatiques, c'est-à-dire leurs quatre dyades.

A la fin du stade d'intercinèse la chromatine du noyau apparaît de nou-
veau sous la forme de quatre dyades. Ces dernières, après la disparition de
la membrane nucléaire, se mettent à l'équateur du fuseau et par l'acte de
la seconde mitose se divisent en leurs composants.

Trente-deux spermatides, résultat de la II' division, se rangent en deux
plaques égales disposées l'une au-dessus de l'autre. Ces plaques se séparent
bientôt, et chacune d'elles, formée par i5 spermatides, se transforme en
un faisceau de 16 spermatozoïdes. La transformation des spermatides en
spermatozo'ides se passe de telle manière que la masse principale de la
chrom.atine se ramasse au pôle postérieur du noyau transparent sous la for-
me de trois globules qui se touchent au milieu. Derrière le noyau se forme
une masse moins colorable que la chromatine, notamment le « Mittelstuck",
où un filament axial prend son origine. La spermatide s'allonge de plus en
plus, le " Mittelstiick-' s'étend en arrière et devient très mince. Enfin le
spermatozo'i'de possède une tête trapue qui contient aussi le " Mittelstuck-
et une très longue queue.

En ce qui concerne l'ovogenèse, Hempelmann trouve dans les jeunes
oocytes les processus des changements chromatiques tout à fait identiques
à ceux de la spermatogenèse (la contraction synaptique, le stade de
bouquet).

De même les deux cinèses de maturation dans les œufs se déroulent
comme dans la spermatogenèse et confirment les résultats acc]uis pour les
cellules mâles.

Ainsi, à la fin de la période d'accroissement, l'oocyte, qui a atteint sa di-
mension définitive, commence à se préparer à lexpulsion du polocyte I.
Dans son noyau se forment également, comme dans les spermatocytes,
quatre tétrades chromosomiques.

386 V. B. de BAEHR

La vésicule germinative transparente, enfermant ces quatre tétrades,
se dirige vers la périphérie de l'oocyte, et ici bientôt se forme le premier
fuseau de maturation.

Les tétrades se divisent en donnant huit dyades dont quatre, accom-
pagnées d'une petite quantité de protoplasme, s'éliminent de l'oocyte dans
le I*^'' globule polaire, les cpatre autres restant dans l'oocyte.

Après la I^ cinèse suit la 11^, dans laquelle les quatre dyades se divisent :
l'œuf reçoit quatre éléments simples, et quatre autres passent dans le
polocyte IL

Les observations de Hempelmann sur la pénétration des spermato-
zoïdes dans les oocytes, et sur le sort des œufs après l'expulsion des globu-
les polaires, seront discutées plus loin dans un autre chapitre.

IH. OBSERVATIONS PERSONNELLES.

Disons tout d'abord que nos recherches sur le Saccocirriis major nous
ont donné sur presque tous les points les plus importants des résultats
différents de ceux que Hempelmann a obtenus en étudiant le même objet.

A. Nombre normal de chromosomes.

Le nombre diploïdique de chromosomes chez le Saccocirriis major est
i8, et non pas 8 comme Hempelmann croit l'avoir établi. De nombreuses
numérations dans les différentes générations de cellules nous l'ont démontré
sans aucun doute : la fig. 2, représentant une vue polaire métaphasique
spermatogoniale, et la fig. 69, montrant une vue semblable d'une anaphase
de segmentation, l'indiquent clairement.

Les chromosomes du Saccocirrus major sont caractérisés par des di-
mensions différentes, qui permettent de les classer par paires. La compa-
raison de nombreux noyaux aux différents stades nous permet de conclure
que dans notre objet les chromosomes correspondants ne sont pas toujours
rapprochés, comme cela a été décrit par certains auteurs pour beaucoup
d'objets (Montgomery, 1904, igo6; Stevens, 1908, 1910; Janssens et
Willems, 1908; Strasburger, i9o5; Clemens-MUller, 1909, 1912; et au-
tres), mais, au contraire, que le groupement de ces chromosomes est très
variable.

Dans notre mémoire de 1912, en parlant de l'arrangement des chro-

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 387

mosomes chez les Aphididae, où nous avons trouvé des relations semblables
à celles que montre le Saccocirriis major, nous avons souligné qu'à notre
avis une disposition par paires des chromosomes de même dimension,
telle qu'on l'a observée chez différents animaux et chez différentes plantes,
ne peut pas être regardée comme un phénomène général, mais que néan-
moins, dans le cas où elle est constatée, elle donne un appui à la théorie
des chromosomes jumeaux.

Malgré le nombre égal de chromosomes, existe-t-il une différence mor-
phologique quelconque entre la chromatine des deux sexes? Par suite des
grandes difficultés qui se présentent chez notre objet pour élucider cette
question, nous n'avons pas encore pu en apporter une solution définitive.
En tout cas, si une telle différence se manifeste chez le Saccocirnis major,
elle ne doit pas être très frappante.

B. Spermatogenèse.

1. Cinèses spermatogoniales.

Les cellules spermatogoniales se présentent ou bien immobiles, fixées
encore au testicule, ou bien déjà détachées, flottant librement dans le cœ-
lome et groupées en ilôts bien distincts.

Contrairement à la description de Hempelmann, nous avons pu con-
stater que les îlots spermatogoniaux flottant dans le cœlome montrent des
nombres différents de cellules (par exemp. i6, i2. 8, 4), et ainsi l'affirmation
de l'auteur, à savoir qu'en règle générale la dernière génération spermato-
goniale se détache des testicules seulement en groupes de quatre cellules, et
que chacun de ces groupes nageant dans la cavité cœlomique donne huit
spermatocytes de I^'' ordre, ne correspond pas à la vérité.

Les cinèses spermatogoniales ne montrent aucune particularité et se
déroulent selon le schéma classique.

Les chromosomes dispersés à la fin de la prophase dans toute la cavité
nucléaire, se disposent en un seul plan équatorial et se montrent longitudi-
nalement divisés.

Il en résulte que 18 moitiés longitudinales de part et d'autre de l'équa-
teur se rendent vers les pôles opposés.

La FiG. 1 représente les cellules spermatogoniales dans l'état de repos.

Sur la FiG. 2 nous voyons en vue polaire une métaphase spermatogo-

niale. Les 18 chromosomes se caractérisent par des dimensions différentes

et sont disposés principalement en direction radiale.

55

388 V. B. de BAEHR

La FiG. 3 reproduit le même stade vu de face.

Dans la figure suivante, fig. 4, est dessinée la télophase spermato-
goniale.

2. Cinèses de maturation et spermiogenèse.

Selon nos observations, immédiatement après la dernière division sper-
matogoniale, les cellules sont presque toujours groupées au nombre de i6.
Durant la période d'accroissement, ces groupes de jeunes spermatocytes de
I^'' ordre se divisent par moitié en formant deux ilôts de huit cellules. A la
fin de la période d'accroissement, le groupement en rosette se disloque peu
à peu. Les spermatocytes, qui ont augmenté considérablement de volume,
ne demeurent plus si intimement liés l'un à l'autre. Finalement, à la 1"= mé-
taphase de maturation les spermatocytes se trouvent d'ordinaire associés
par quatre, et non pas par 8, comme le décrit Hempelmann. Par la division
de ces 4 spermatocytes se forme un groupe sphérique de 8 spermatocytes
de 11^ ordre disposés selon la direction radiale.

Ces 8 (non pas 16) spermatocytes de 11^ ordre subissent la seconde di-
vision, qui mène à la formation de 16 spermatides. Groupés en paquet, les
16 spermatides se transforment ensuite en 16 spermatozoïdes. Pour sa for-
mation, le spermatozo'ide prend, outre le noyau de la spermatide, une petite
quantité de plasma cellulaire. Le reste du corps cellulaire avec les autres
formations semblables représente encore pendant un certain temps un
amas de 16 cellules vides sans noyau, dont les parois, comme il paraît,
donnent la substance aux queues des spermatozoïdes. C'est un tel grou-
pement de cellules que nous avons rencontré le plus fréquemment pendant
la spermatogenèse du Saccocirrus major, mais d'autres combinaisons sont
possibles. Une séparation accidentelle d'une ou plusieurs cellules ou, au
contraire, une persistance anormale de l'association entre deux groupes
cellulaires, qui d ordinaire doivent être déjà détachés, peuvent provoquer
le groupement d'un nombre plus petit ou plus grand de cellules. Ainsi,
par exemple, on trouve de temps en temps non seulement sur les frottis,
ce qui pourrait être dû à une cause extérieure, mais encore sur les coupes,
un spermatocyte de I^'' ordre, en train de se diviser, tout à fait isolé, à une
certaine distance des autres (]ui restent rattachés par deux ou par trois.

D'autre part, on rencontre des spermatocytes qui subissent la cinèse I
de maturation en groupes de 8 cellules ou même de plus. L'arrangement le
plus commun des spermatocytes I en division, comme nous l'avons déjà
dit, consiste en deux ilôts de quatre cellules très voisines.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'ovOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 38g

En général nous devons dire que le nombre de cellules qui forment un
amas (ilôt), n'a pour nous qu'une portée secondaire et ne peut pas être pris
comme un critérium de la déterm.ination des stades. Un indice beaucoup
plus sûr, pensons-nous, se présente dans les dimensions des cellules.

Si, comme nous l'avons souligné auparavant, nous avons tâché de baser
notre sériation principalement sur l'état de la chromatine, néanmoins nous
devons ajouter que dans cette tâche la comparaison des dimensions des cel-
lules et de celles des ilôts formés par elles, nous a aidé; en effet, dans notre
objet, non seulement les différentes générations des cellules, mais encore
les phases successives de la période d'accroissement, contrairement aux
autres objets, se distinguent nettement par les dimensions différentes des
cellules et des noyaux. Il y a naturellement des fluctuations individuelles,
mais elles sont insignifiantes, comme nous l'ont montré surtout les prépa-
rations totales.

Passons maintenant à l'analyse des changements chromatiques.

a. Prophase, métaphase et anaphase hétér atypiques.

Après la dernière cinèse spermatogoniale les chromosomes se dislo-
quent, leurs contours deviennent indistincts et bientôt ils ne sont plus
visibles dans le noyau.

Les premiers indices de la formation des éléments chromatiques pour
les divisions de maturation, fig. 5—6, consistent dans la réunion de la
substance chromatique en des filaments minces, nettement distincts — le
stade leptoténe.

En étudiant attentivement ce stade, nous voyons que les minces fila-
ments présentent des extrémités libres, de telle sorte qu'il n'y a pas ici for-
mation d'un unique filament spirématique qui, d'après les observations
même récentes de Goldschmidt, Meves, Duesberg, Kuschakiewitch et
d'autres, se tronçonnerait ultérieurement en segments isolés. Déterminer le
nombre de ces filaments est bien difficile, parce qu'ils sont d'une longueur
considérable et présentent de nombreux replis.

Au stade un peu plus avancé, fig. 7, on voit très bien que les filaments
minces orientent leurs extrémités libres vers le pôle intérieur du noyau et
butent là contre la membrane nucléaire.

Parmi les filaments de cette figure il y en a qui sont déjà groupés deux
à deux. Les partenaires courent parallèlement l'un à côté de l'autre ou
bien ils s'entrelacent mutuellement. A leurs extrémités ils sont plus rap-
prochés qu'aux autres "points de leur trajet.

Sgo V. B. de BAEHR

Au fur et à mesure que les spermatocytes s'accroissent, la formation
des filaments doubles aux dépens des filaments minces et simples se mani-
feste de plus en plus nettement : le rapprochement des filaments jumeaux
qui les constituent devient plus intime, ils sont plus courts, plus épais et
se colorent très intensément.

Finalement il en résulte neuf anses chromatiques épaisses qu'il est fa-
cile de compter — le stade pachyténe. Les anses pachytènes, chez notre
objet, se caractérisent par des dimensions différentes et sont disposées en
une jolie figure de bouquet. Le pôle extérieur du noyau est dépourvu de
chromatine, fig. 8—9.

Par suite du fait que d'après nos observations le nombre normal de
chromosomes chez le Saccocirrus major est i8, il est clair que les anses pa-
chytènes apparaissent ici en nombre réduit. Selon Hempelmann, comme
nous l'avons dit, après le stade de bouquet, le spirème continu se coupe
en un nombre d'éléments égal à celui qu'il y avait dans les spermato-
gonies, c'est-à-dire en un nombre normal, non réduit, de chromosomes.

Il faut souligner que les anses pachytènes montrent encore maintenant
le duplicisme. Ce duplicisme est un peu voilé à cause de l'union de plus
en plus intime des partenaires, mais cependant de-ci et de-là on voit des
places où ces éléments sont séparés sur une certaine distance, et dans ce
cas leur duplicisme ressort très clairement.

Cela prouve que chez le Saccocirrus major, comme chez certaines au-
tres formes décrites par les autres auteurs, dans les anses pachytènes, deux
filaments chromatiques unis en un élément conservent leur indépendance
l'un envers l'autre, et qu'ici il n'y a pas de fusion complète de deux filaments
minces en un filament épais — élément nouveau, commq^le prétendent
BoNNEviE, Vejdovsky, Winiwarter et Sainmont pour leurs objets. D'autre
part, il est fort possible qu'entre les filaments, si étroitement rapprochés,
se produise un échange de substances ou qu'il existe du moins une certaine
influence réciproque.

Nous analyserons cette question plus en détail dans la partie générale
de ce mémoire.

Après le stade de bouquet, les anses pachytènes perdent leur orienta-
tion polaire, se détachent de la membrane nucléaire et se dispersent dans
tout le noyau. Elles sont maintenant moins courbées et bientôt commen-
cent à s'étirer, en s'amincissant de plus en plus; leurs contours deviennent
confus et finalement point analysables, fig. 10 — 12. Ce stade, si caracté-

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 3gi

ristique par le métabolisme intensif de la chromatine, ne dure pas long-
temps chez le Saccocirriis major; il n'a pas une grande importance, cela
ressort déjà du fait que, dans le cours du développement des cellules sexuel-
les mâles de beaucoup d'objets, on ne l'observe pas ou bien il se manifeste
très faiblement (i).

La présence d'un tel stade, contrairement à ce que prétend Soôs (1910,
p. 328), ne peut, à notre avis, servir d'argument contre la continuité des
chromosomes, de même que l'absence dans certains objets d'éléments
chromatiques reconnaissables à l'intercinèse méiotique.

Après ce stade du métabolisme intensif, la chromatine commence de
nouveau à se condenser et peu à peu il se forme des éléments chromatiques
bien distincts. Ces éléments apparaissent appariés présentant maintenant
un aspect de filaments minces, longs, peu colorés et entrelacés. En cer-
tains points les partenaires d'une paire se rapprochent étroitement, dans
d'autres ils se séparent largement — en général, les éléments d'un couple
donné ne sont pas intimement rapprochés, fig. 13-14.

Ce stade nous offre les aspects qui caractérisent le stade stfepsitène.
Il nous parait tout à fait juste d'estimer ces doubles éléments comme tout
à fait identiques avec les anses pachytènes qui, comme nous l'avons vu,
sont formées aussi de deux filaments chromatiques.

La condensation avancée de la chromatine, le raccourcissement progres-
sif des filaments entrelacés et l'apparition dans ces derniers d'une fente
longitudinale conduisent peu à peu à la formation des figures diacinétiques
typiques en forme d'anneaux, de croix, de tétrades-bâtonnets, etc.,
fig. 15-17.

.En colorant le matériel frais avec le carmin acétique de A. Schneider,
nous avons observé souvent que les deux parties constitutives des différen-
tes figures diacinétiques peuvent se séparer l'une de l'autre à une distance
assez considérable et ainsi donner limpression, à un examen superficiel,
d'un nombre plus grand d'éléments qu'il n'y en a en réalité. Sur la fig, 16,
nous voyons cette particularité dans le grand anneau.

Les éléments diacinétiques se raccourcissant davantage se transforment
bientôt en chromosomes définitifs de la première cinèse de maturation.

(i) Ce stade du métabolisme intensif à la prophase 'hétérotypique dans les cellules mâles n'a
été jusqu'à présent constaté d'une façon certaine, outre dans les cellules du Saccocirriis major et
de VAphis saliceti étudiés par nous, que dans la spermatogenese du Notodromus monacha (Ostracoda),
par ScHLEip (1909) et par Schmalz (1912), du Hélix arbustorum, par Soôs (igio). du Hélix pomatia.
par Demoll (1912), de VOncopeltus fasciatus (Hemiptera heteroptera), par Wilson (1912).

392 V. B. de BAEHR

Ces derniers, après la dissolution de la membrane nucléaire, se ran-
gent dans un plan et forment la plaque équatoriale, fig. 18-24.

Il est très important que certains éléments chromatiques gardent en-
core maintenant leur ancienne forme d'anneaux ou de croix, et ainsi nous
permettent de voir que pendant l'anaphase première se réalise la séparation
des parties composantes du chromosome diacinétique, qui sont provenues,
aux stades antérieurs de la prophase, des filaments chromatiques indé-
pendants. Les composants qui se séparent manifestent parfois très net-
tement un clivage longitudinal dont nous avons déjà constaté l'apparition
dans les chromosomes diacinétiques.

D'après la description de Hempelmann, par un tronçonnement du spi-
rème chromatique continu en segments, dont le nombre correspond au
nombre somatique, il se forme 8 chromosomes qui, après s'être appariés
seulement à la fin de la prophase et après clivage longitudinal, donnent ori-
gine à 4 tétrades de la I' cinése de maturation.

Comme nous venons de voir, chez le Saccocirrus major, rien de pareil
ne s'accomplit et en général, à notre avis, jusqu'à présent on n'a pas encore
trouvé un objet, chez lequel on pourrait avec toute certitude constater
une conjugaison si tardive des autosomes. Il est vrai que, sans mentionner
beaucoup d'observations anciennes (Henking, 1891, Korschelt, i8g5), on
a décrit encore dans ces derniers temps de pareils cas; notamment, selon les
observations de Stevens (igo5, 1906) et de Tannreuther (1907), chez les
Aphides, les chromosomes tout à fait développés et mûrs en nombre di-
ploïdique s'apparient seulement à la fin de la diacinèse. — Dehorne (igio,
191 1) a observé une pareille pseudoréduction tardive justement chez les
polychètes : les Sabellaria spinulosa et Lanice conchylega (i).

En ce qui concerne les recherches de Stevens et celles de Tannreu-
ther, nous avons démontré déjà en 1908 que les auteurs en question
avaient non seulement déterminé faussement le nombre des chromosomes
dans les cellules mâles de leurs objets, mais aussi qu'ils n'avaient pas re-
marqué les stades les plus importants de la prophase.

Les données de Dehorne ont été analysées par nous en détail dans

(i) Il faudrait peut-être rappeler que la description d'AGAR (igii) d'une conjugaison des
chromosomes .-mûrs au moment de la formation du fuseau I, dans la spermatogenèse du Lepi-
dosiren paradoxa, n'appartient pas à cette catégorie. C'est un phénomène secondaire, une reconju-
gaison, qui s'accomplit après la dissolution de la membrane nucléaire et qui est précédé d'une
conjugaison parallèle des éléments homologues au stade leptoténe et d'une déconjugaison de ces
éléments à la diacinèse.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'OVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 3g3

notre travail sur YAphis saliceti de igi2 et nous y avons été forcé de rejeter
toutes ces thèses.

b. Intercinèse, Prophasc II , Métaphase II et Anaphase II.

D'après nos observations chez le Saccocirriis major, la I« cinèse de ma-
turation n'est pas suivie d'un vrai stade de repos. Pendant l'intercinèse il
se forme autour des chromosomes une vacuole nucléaire, les chromosomes
ne s'y disloquent guère, mais restent compacts, fig. 25, et bientôt la se-
conde division de maturation commence, fig. 26-28. Cette cinèse est très
simple. Les chromosomes se divisent en moitiés suivant la fente longitu-
dinale qui déjà au stade de la diacinèse se voyait dans les composants de
certains éléments doubles.

Dans le noyau clair de la spermatide, on peut observer encore un cer-
tain temps g chromosomes simples. Après, ces derniers se dissolvent peu
à peu, et le noyau de la spermatide, diminue de plus en plus de volume,

FIG. 29.

c. Spermiogenèse.

En ce qui concerne la transformation de la spermatide en spermato-
zo'ide, il est évident que les trois corps sphériques, que Hempelmann
prend pour la masse principale de la chrornatine nucléaire et qu'il dessine
dans l'intérieur du noyau, nont rien de commun ai'ec la chrornatine,
mais, d'après nos recherches, représentent la substance mitochondriale et
se trouvent à ï intérieur du noyau. Le triacide-BiONDi colore ces corps en
rouge foncé, tandis que la chrornatine par cette méthode devient intensive-
ment verte, fig. 30-31.

Nous avons observé dans la plupart des préparations la structure de
ces corps : ils sont d'ordinaire ronds et homogènes, mais parfois paraissent
en forme de vésicules dont les épaisses parois consistent en une substance
très colorable.

On rencontre souvent une semblable structure dans les formations ap-
pelées -i Nebenkerne " des autres animaux, avec lesquels nos formations
paraissent tout à fait identiques; elles s'en distinguent seulement en ce que
dans le « Nebenkern " ordinaire les mitochondries se concentrent en un,
plus rarement en deux corps tandis que dans notre objet elles se conden-
sent en trois. — Les corps mitochondriaux ne prennent aucune part à la
formation de la tète du sperm.atozoïde, mais ils s'étendent et s'allongent en
couvrant sur une certaine distance le filament axial, fig. 32-34. Après, leur

394 ^- ^ ^® BAEHR

substance mitochondriale se décompose peu à peu en petits granules et
disparaît, fig 35-36. Outre ces trois corps mitochondriaux relativement
assez grands, il 3' a dans les spermatides encore trois petites formations
rondes qui se trouvent aussi en dehors du noyau, mais près de sa mem-
brane, dans les intervalles entre les bords extérieurs des grands corps, com-
me le montre clairement la fig. 3i, qui représente la vue d'en haut sur le
pôle intérieur du noyau. La fig. 30 représente une semblable spermatide
de profil. On voit ici seulement deux grands corps (mitochondriaux) et un
petit.

Sur la nature de la substance qui compose ces petits corpuscules, il
est bien difficile de dire quelque chose de définitif. L'hématoxyline ferrique
Heidenhain les colore naturellement, comme les grands, en noir, mais par
le procédé spécial du triacide-BiONDi nous avons pu obtenir une coloration
différente pour ces deux catégories de formations et montrer que la sub-
stance des petits corpuscules est peut-être voisine de celle des nucléoles.

Après avoir suivi pas à pas la formation des cellules sexuelles mâles,
en commençant par les spermatogonies et en finissant par les spermato-
zoïdes, nous croyons intéressant de revenir sur les dessins de Hempelmann :
nous tâcherons, en les interprétant dans le sens de nos propres observa-
tions, de déterminer cjuelle place ils doivent occuper dans notre sériation
des stades. Malheureusement nous ne trouvons dans le mémoire de Hem-
pelmann dans l'explication des planches aucun indice sur les grossissements
avec lesquels les différents dessins ont été faits et cela rend plus difficile
notre tâche. Néanmoins nous sommes presque tout à tait sur que par
exemple sa fig. 22. qui doit représenter la division de la dernière géné-
ration spermatogoniale, est déjà en vérité la première métaphase de ma-
turation. Il faut souligner ici encore de très fausses données, à notre avis,
qui se trouvent chez Hempelmann dans le texte. Il prétend notamment
que les dimensions de ces cellules (à peine 10 jj^) ne diffèrent que très peu
de celles des spermatogonies attachées encore aux testicules (5-8 (a). D'après
nos observations et nos mensurations, la différence des volumes entre les
spermatocytes mûrs de I^'' ordre et les spermatogonies est énorme. C'est ce
que montre très bien la comparaison de nos fig. 16 et fig. 1.

Puis, en ce qui concerne par exemple les dessins 36 et 3y du mémoire
de Hempelmann, qui doivent représenter les paquets des spermatides, nous
pensons que l'un d'eux, fig. 3/, représente des spermatogonies ou des sper-

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 3g5

matocytes I encore très jeunes au commencement de la période d'accrois-
sement, et l'autre un stade un peu plus avancé de la même période.

La fig. 32 de Hempelmann, dans laquelle l'auteur n'a pu compter que
quatre tétrades, nous permet, malgré les indices évidents d'une mauvaise
fixation et d'une certaine agglutination des chromosomes^ de distinguer plus
de quatre éléments composés.

C. Ovogenèse.

Les processus de la maturation chromatique des cellules sexuelles fe-
melles du Saccocirriis major, si nous mettons de côté le grand accroissement
des oocytes, se déroulent conformément à nos observations sur la sperma-
togenèse.

1. Cinèses oogoniales.

Les cellules oogoniales en état de repos ou ea division ressemblent
beaucoup aux spermatogonies et, comme ces dernières, ne se caractérisent
par rien de particulier.. A l'approche de la division, la membrane nucléaire
se dissout et les chromosomes, au nombre de i8, dispersés auparavant sans
ordre dans le noyau, se rangent maintenant à l'équateur du fuseau dans un
plan et se montrent longitudinalement clivés. Lors de la division, les moi-
tiés longitudinales se séparent et se rendent aux pôles opposés.

Les oogonies subissent leurs divisions en groupes, de telle sorte qu'on
trouve dans la même coupe plusieurs figures caryocinétiques plus ou moins
avancées.

2. Cinèses de maturation.

Dans les jeunes oocytes, comme dans les jeunes spermatocytes, au
début de la prophase hétérotypique, nous trouvons les mêmes stades du
schéma classique : leptotène, leptozygotène, pachytène. Ils offrent de si
grandes ressemblances avec ceux de la spermatogenèse que nous croyons
pouvoir nous dispenser de les exposer à nouveau dans tousdeurs détails.

Les quelques figures de notre mémoire les montrent suffisamment. La
FIG. 39 représente le stade du bouquet mince (leptozygotène), la fig. 40,
le noyau pachytène au stade du bouquet épais. A ce stade il est bien facile
de constater que le nombre des anses est réduit et égal à g. Pour ne pas
obscurcir la figure, nous avons dessiné ici seulement une partie du noyau.

56

3g6 V. B. de BAEHR

Sur la FiG. 41 nous voyons le pachytène déroulé, où les anses se détendent
et subissent une décoloration graduelle ; en même temps apparaît un nu-
cléole arrondi et intensément coloré.

L'état plus accentué de la dislocation des éléments chromatiques et de
l'accroissement du nucléole est reproduit dans la fig. 42, qui montre aussi
une croissance considérable du corps protoplasmique de la cellule.

Pendant la période du grand accroissement, fig. 41 — 49, qui com-
mence déjà au stade de pachytène déroulé et dure assez longtemps, semble-
t-il, les éléments chromatiques, en perdant de plus en plus leur colorabilité,
deviennent indéchiffrables et invisibles. Le noyau et le protoplasme s'ac-
croissent beaucoup, le nucléole augmente de volume et, à la fin de cette
période, montre, après certaines fixations et colorations spécifiques, par ex.
après la solution de Hertwig et le triacide-BiONDi, ou la triple coloration
cI'Ehrlich, une coloration particulière et une structure vacuolisée, fig. 49 (i).
Quand l'oocyte a atteint son maximum de volume, les éléments chro-
matiques apparaissent de nouveau en forme de chromosomes doubles con-
stitués de deux branches nettement individualisées, et en nombre réduit,
à savoir g. Au début ils sont disposés à la périphérie du noyau sous la
membrane, qui commence à se montrer avec un contour irrégulier, ainsi
que l'indique notre fig. 50. Chacun de ces chromosomes est entouré d'une
substance homogène.

Un peu plus tard ces chromosomes diacinétiques, aux contours lisses et
nets, se ramassent au centre de l'oocyte et la membrane nucléaire, qui est
en train de se dissoudre, paraît encore plus festonnée et moins visible.

Des stades analogues à celui de la fig. 50 ne se présentent qu'assez
rarement; ce qui prouve que la condensation de la substance chromatique,
la recoloration des éléments et la dissolution de la membrane s'accomplis-
sent très rapidement en comparaison de la longue période de croissance.

Le grand accroissement de l'oocyte se caractérise aussi par la produc-
tion dans le protoplasme des enclaves vitellines. Ces dernières apparaissent,
au commencement de la période, seulement autour du noyau, tout près de sa
membrane, fig 44-46. Puis, quand leur nonibre augmente, elles se trou-
vent partout, jusqu'à la périphérie de la cellule. Il faut remarquer encore
qu'au moment de la première apparition des enclaves vitellines, la membrane

(i) Si on emploie comme coloration l'hématoxyline de Heidenhain et si on ne différencie
pas assez longtemps, le nucléole paraît généralement homogène et noir durant tout le stade d'ac-
croissement.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'ovOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRKUS MAJOR 397

•

nucléaire montre toujours, après les différentes méthodes de fixation que
nous avons utilisées, des contours très irréguliers, fig. 44—46.

Après la disparition complète de la membrane nucléaire, fig. 51, nous
trouvons au centre de l'oocyte ces g éléments chromatiques composés (tétra-
des) fixés sur un petit grumeau de plasma dense, finement granuleux et
homogène, qui s'est formé par l'agglomération des petites masses de sub-
stance homogène qui entouraient chacun des chromosomes. Ce grumeau
plasmatique avec les chromosomes se dirige vers la périphérie de l'oocyte,
FIG. 52—54.

Il est bien difficile de concevoir comment Hempelmann a pu observer
à ce stade une vésicule germinative claire avec 4 tétrades (sa fig. 56), parce
que, les images chromatiques, qui sont ici d'ailleurs très nettes, mises à part,
le grumeau caryoplasmatique, auquel les chromosomes sont fixés, tranche
bien nettement après toutes les fixations et toutes les colorations sur le mi-
lieu environnant, par la densité et 1 homogénéité de sa structure. L'oocyte
possédait aux stades précédents pendant la période d'accroissement, comme
nous l'avons vu, vraiment une vésicule germinative claire et transparente,
mais alors cette vésicule se trouvait au centre de la cellule et elle était
grande et pourvue encore de la membrane, fig. 42 — 49. Il est très clair que
c'est ce grumeau caryoplasmati^iue qui donne naissance au fuseau, fig.
54-55.

Les deux divisions de maturation se produisent coup sur coup. La
substance achromatique (le fuseau, les sphères, les fibrilles) ressort très
distinctement.

Les éléments chromosomiques au fuseau sont d'habitude, mais pas
toujours, moins serrés l'un contre 1 autre qu'aux stades correspondants dans
les spermatocytes. En général, après la période de croissance, les cinèses
polaires dans les œufs du Saccocirrus major, en ce qui concerne les relations
chromosomiques, ressemblent beaucoup, comme au commencement de la
période méiotique, à celles de la spermatogenèse; nous nous bornons donc
à donner ici seulement quelques dessins intéressants pour illustrer ces phé-
nomènes, fig. 56—61.

Après l'expulsion du polocyte II, le noyau de l'œuf se reconstruit très
vite, fig. 62.

La description détaillée des processus méiotiques dans les cellules
sexuelles du Saccocirrus major, que nous venons de terminer, nous permet
maintenant de rechercher quelle signification nous devons attribuer aux
différents stades et pour quel mode de réduction ils plaident.

398 V. B. de BAEHR

Les minces filaments leptotènes représentent des chromosomes et
sont identiques aux chromosomes univalents de la dernière télophase
goniale.

Pendant le passage du stade leptotène au stade pachytène, l'apparie-
ment latéral des filaments indépendants implique une paraconjugaison
(conjugaison parallèle) des chromosomes homologues -- les anses pachy-
tènes sont bivalentes, la réduction du nombre de chromosomes n"est pas
réelle, mais seulement apparente (pseudoréductionnelle).

Pendant la première cinèse de maturation (hétérotypique), les chromo-
somes conjugués se séparent de nouveau, se dirigent vers les pôles opposés
et passent dans les spermatocytes de 1I« ordre. Par la seconde cinèse (ho-
méotypique), qui est une simple division équationnelle, les moitiés longitu-
dinales des chromosomes univalents se distribuent aux noyaux des sper-
matides.

En vue du fait que notre objet ne permet pas, dans le noyau reconstruit,
après la dernière cinèse goniale, de distinguer les contours des éléments
chromosomiques et de suivre tous les changements qu'ils subissent et qu'à
cause de cela il est impossible de voir la transformation directe des 18 chro-
mosomes télophasiques en un même nombre de filaments leptotènes de la
I« prophase de maturation, on peut nous objecter que c'est seulement une
supposition bien personnelle de voir, aux jeunes stades de la l^ prophase de
maturation, dans les filaments doubles, un rapprochement parallèle de chro-
mosomes homologues et qu'il paraît beaucoup plus simple d'expliquer la
disposition des éléments par une apparition très précoce de la fente longitu-
dinale dans les chromosomes naissants. Les uns y trouveront un clivage
longitudinal de deux chromosomes soudés par l'une de leurs extrémités;
les autres, adversaires de la théorie de l'individuplité des chromosomes,
peuvent aller plus loin et voir dans chaque paire de filaments chromatiques
deux moitiés sœurs d'un seul chromosome, formées tout à fait indépendam-
ment l'une de l'autre aux dépens du réseau nucléaire (i). Conformément
à de pareilles vues, il faudrait naturellement changer aussi l'interprétation
des stades suivants.

A ce sujet nous voulons, en laissant une discussion plus détaillée pour
la partie générale de ce mémoire, remarquer tout de suite, qu'en réalité

(i) La dernière interprétation passe presque sans discussion sur la question de la réduction
numérique des chromosomes et admet seulement une certaine réorganisation de la substance chro-
matique par laquelle, d'une façon inexplicable, les chromosomes apparaissent en un nombre réduit de
moitié.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 3gQ

chez beaucoup d'objets les images observées à certaines phases de la matu-
ration chromatique peuvent être expliquées très différemment selon la
manière de voir de l'auteur, et n'excluent pas les interprétations que nous
venons de mentionner; mais pourtant il ne faut pas oublier que jusqu'à
présent une vraie preuve morphologique n'a encore été fournie dans aucun
animal pour de pareilles interprétations; -- nous rappellerons plus loin l'ar-
gument décisif que nous ont donné nos propres recherches sur Y Aphis sali-
ceti en faveur d'une préréduction après paraconjugaison.

D. Pénétration du spermatozo'ide dans l'oocyte et
fécondation de l'œuf.

Il nous reste maintenant à discuter encore la question de la pénétration
des spermatozoïdes dans les jeunes oocytes et la question du sort des œufs
mûrs et fécondés.

Hempelmann, le premier, en igo6, a fait une très intéressante décou-
verte chez le Saccocirrus major, à savoir que les spermatozoïdes, se trouvant
toujours en grande quantité dans le réceptaculum des femelles, se dirigent
directement dans l'ovaire et pénètrent dans les tout jeunes oocytes.

La même année, indépendamment de Hempelmann, van Gaver et
Stephan ont constaté aussi la pénétration très précoce des spermatozoïdes
dans les oocytes du Saccocirrus. Les observations de ces derniers diffèrent
cependant de celles de Hempelmann en ce qu'ils admettent une polyspermie
et croient que, pendant la période d'accroissement, des spermatozoïdes pénè-
trent à plusieurs reprises dans un même oocyte. De tous les spermatozoïdes
qui ont pénétré dans l'oocyte, un seul, le dernier spermatozoïde, semble-t-
il, deviendrait le pronucleus mâle, tous les autres seraient assimilés par le
protoplasme et favoriseraient ainsi la nutrition des œufs.

Hempelmann, au contraire, établit que dans chaque oocyte il ne pénè-
tre qu'un seul spermatozoïde qui ultérieurement se développe en pronucleus
mâle, destiné à se fusionner avec le noyau de l'œuf.

Sur ce point nous pouvons confirmer les données de Hempelmann.
Les oocytes très jeunes encore (tout de suite après la dissolution des anses
pachytènes dans la vésicule germinative)reçoivent chacun un seul spermium,
FiG. 43, qui jusqu'à la fin de la période de croissance reste sans changement
dans le protoplasme de la cellule et alors commence à se rétracter et chan-
ger de forme, comme le montre la fig. 38.

400

V. B. de BAEHR

Après l'expulsion du second polocyte, la tête du spermium se transforme
en pronucleus mâle, en même temps que les chromosomes de l'œuf recon-
struisent le pronucleus femelle.

Après avoir reçu un seul spermatozoïde, l'oocyte n'est plus capable d'en
recevoir un autre. A toutes les phases de l'accroissement des oocytes, nous
n'avons trouvé toujours dans le plasma qu'une seule tète de spermium
et jamais des aspects qui puissent servir d'indice d'une résorption de la
substance chromatique des spermatozo'ïdes surnuméraires.

Au contraire, nos observations ne sont pas tout à fait en accord avec
les données de Hempelmann au sujet de la fusion des deux pronuclei, c'est-
à-dire de la fécondation réelle.

D'après la description qu'il a donnée dans sa dernière publication
(igi2), les œufs se trouvent presque toujours encore dans l'ovaire quand
les deux pronuclei sont complètement développés. Parfois cependant on
observerait des œufs déjà dans le cœlome, chez lesquels les noyaux seraient
justement en train de se reconstruire (sa fig. 63).

Les deux pronuclei des œufs qui sont passés dans le cœlome resteraient
très longtemps l'un près de l'autre en état de repos et en forme de vésicules.
Seulement très rarement on verrait dans le cœlome du Saccocirnis major
les œufs mûrs qui contiennent un seul très grand noyau - le résultat de la
fusion des pronuclei mâle et femelle.

Contrairement à tout cela, nous avons établi tout à fait sûrement que
dans les cas normaux la fusion des deux pronuclei a lieu encore pendant le
séjour des œufs dans l'ovaire, fig. 63-65 Le noyau de segmentation ainsi
formé paraît très grand, correspondant aux volumineux pronuclei qui se
sont fusionnés. Hempelmann, dans son premier travail (1906), où il était
sous ce rapport plus près de la vérité, a dessiné un tel œuf dans la
fig. ig. Après le passage de l'œuf dans le cœlome, le grand noyau devient
petit : sa membrane se dissout, sa substance chromatique se concentre en
un amas de filaments minces et granuleux, fig. 66-67. Tous les œufs, qui
en un nombre très grand remplissent le cœlome-, possèdent seulement un
noyau relativement assez petit, aux deux pôles duquel on voit souvent les
centrosomes et les fibrilles astériennes.

La thèse de Hempelmann à savoir que les œufs qui flottent dans le
cœlome contiennent généralement encore deux pronuclei non fusionnés, peut
sans doute s'expliquer par ceci que l'auteur, comme le prouve sa fig. 53,
considère d'une part le noyau de segmentation, qui est devenu déjà petit.

LA SPERMATOGENESE ET L OVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 4OI

comme un pronucleus, et d'autre part un corps homogène (une enclave
plasmatique) comme le second pronucleus. De tels corpuscules plasmati-
ques arrondis et homogènes (cf. notre fig. 67) se trouvent parfois en nom-
bre plus grand (2, 3) et s'observent encore pendant les premiers stades de
segmentation dans les différents blastomères. Leur substance n'a rien à
faire avec la chromatine : après coloration au BiONDi-tiiacide, ces forma-
tions se teintent en violet foncé. Nous n'avons pas sui\i leur genèse, mais
nous supposons qu'ils représentent un dérivé de certaines substances nucléo-
laires, qui sont entrées dans le protoplasme après la dissolution de la
membrane du syncaryon.

Comme Hempelmann l'a très bien observé, on ne trouve jamais dans
le cœlome du Saccocirnis major des œufs déjà segmentés.

On peut facilement cependant obtenir leur développement, si on prend
une femelle remplie d'œufs fécondés et si on la dissèque dans l'eau de mer.
L'eau de mer stimule la segmentation et au bout d'environ un quart d'heure
nous trouvions déjà le stade de deu.x blastomères, fig. 68 69-

Il nous reste encore à dire quelques mots sur la dernière publication
de BucHNER (1914) qui vient de paraître. L'auteur ne s'arrête que très peu
sur les relations chromosomiques dans le Saccocirnis; d'ailleurs à en juger
par ses dessins, on peut supposer cju'une fixation défectueuse du matériel
ne lui a pas permis d'en faire une étude plus détaillée.

BuCHNER s'occupe tout spécialement des changements que subit la
longue queue du spermatozo'ide après que la tête de ce dernier a pénétré
dans l'oocyte. .\u début de la période d'accroissement, la queue, dans sa plus
grande partie, se trouve en dehors de l'oocyte et, à cause de sa minceur et de
sa transparence, demeure invisible. Après, la queue commence à se rétracter
et alors sa partie extérieure entre dans le protoplasme de l'oocyte et, en se
tordant, déforme les contours de la cellule à un tel point que parfois les
bourgeons formés sous la poussée des anses de cette queue se détachent
tout à fait. La queue subit une plasmolyse et se décompose en petites gout-
tes qui ne tardent pas à disparaître

Nous avons aussi observé la présence de la queue du spermatozo'ide et
sa dégénérescence dans les oocytes relativement jeunes (p. exempl. les fig.
45-46), mais nous doutons un peu que tous les aspects que nous donne
BucHNER soient tout à fait normaux et si vraiment l'élasticité des replis de
cette queue explique les bourgeonnements que montrent les oocytes dessinés
par BucHNER • — on pourrait songer à des phénomènes pathologiques ou
artificiels.

402 V. B. de BAEHR

A la fin de son mémoire l'auteur proteste vivement contre nos données
de 1913, d'après lesquelles les œufs qui se trouvent dans le cœlome pos-
sèdent généralement déjà un petit syncaryon, et il assure que, d'après ses
recherches, la fusion des pronuclei s'accomplit très rarement dans l'ovaire,
mais qu'au contraire, en examinant des centaines d'œufs dans le cœlome,
il a constaté chez eux les deux pronuclei seulement en train de se recon-
struire. L'auteur ne donne d'ailleurs aucune indication sur la provenance
de son matériel et le moment de la fixation.

Nous devons maintenir, sans aucune modification, notre interpréta-
tion, fondée sur l'examen d'un très grand nombre d'œufs.

IV. DISCUSSION GENERALE.

MÉCANISME DE LA RÉDUCTION.

On sait que c'est V.\N Beneden qui, en i883, dans son travail classique
" Recherches sur la maturation de l'œuf, la fécondation et la division cellu-
laire-, a constaté que les cellules sexuelles mûres de l'Ascaris ne contien-
nent que la moitié du nombre normal des chromosomes et cjue la féconda-
tion rétablit le nombre complet.

Depuis ce temps lattention de la plupart des cytologistes s'est fixée
sur cette question : quand et de quelle façon s'opère dans les cellules
sexuelles cette réduction du nombre de chromosomes, et l'intérêt attaché
à cette question, loin de diminuer, augmente plutôt d'une année à l'autre.
Cela s'explique d'une part par la faveur dont jouit l'opinion qui attribue
aux chromosomes un rôle important comme instrument de la différenciation
ontogénétique et par conséquent de l'hérédité et, d'autre part, par la bril-
lante théorie de lindividualité des chromosomes construite surtout par
BovERi. Nous n'avons pas l'intention de donner ici une revue complète de
la riche littérature sur les iMocessus de la réduction chromatique, mais nous
nous bornerons seulement aux études les plus importantes et nous men-
tionnerons les interprétations les plus intéressantes de ces phénomènes, en
sorte que même le lecteur qui n'a pas spécialement travaillé dans cette
branche de la cytologie, puisse se former une idée claire de l'état actuel de
la question (i).

(i) Une discussion très détaillée du problème de la réduction chromatique se trouve dans
les e.vcellents mémoires de Korschelt et de Heider de 1903, et de Grégoire de 1910. Dans ce dernier.

LA SPERMATOGENÈSE ET LOVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 403

En passant en revue les principales interprétations, nous en ferons la
critique, en nous appuyant spécialement sur les observations que nous
avons faites nous-méme sur les Insectes et les Annélides.

Dans notre description nous suivrons le plan suivant.

A. Réduction sans inlerrention des cinêses de maturation.

1. Réduction prophasique avec la paracopulation des chromosomes.

2. Réduction prophasique avec la métacopulation des chromosomes.

B. Réduction au moyen d'une des cinèses de maturation.

1. Postrédaction sans conjugaison et sans copulation des chromo-
somes.

2. Préréduction avec la conjugaison diacinétique ou métaphasique.

3. Postréduction après la métaconjugaison prophasique.

4. Préréduction après la métaconjugaison prophasique.

5. Préréduction après la paraconjugaison prophasique.

6. Parthénogenèse et préréduction après paraconjugaison.

C. Théorie de la chiasmatypie .

D. Interprétations, pour la réduction numérique, des adversaires de

la théorie de l'indiridualité des chromosomes.

A. Réduction sans intervention des cinèses de maturation.

1. Réduction prophasique avec la paracopulation.

Dans cette façon de voir, la réduction du nombre de chromosomes
s'accomplirait définitivement pendant la première prophase et les deux ci-
nèses de maturation seraient équationnelles. Le fondateur de cette opinion
est BovERi (1887), qui, en étudiant la formation des globules polaires chez
V Ascaris mcgalocephala, a conclu que chacune des tétrades prophasiques,
qui se trouvent ici en nombre haploïdique, se forme par le double clivage
longitudinal d'un chromosome bivalent, qui lui-même serait le résultat
d'une fusion complète de deux chromosomes univalents. Mais déjà en 1904,
BovERi, tenant compte des recherches de différents auteurs sur la conju-

rauteur, après avoir donné d'une façon très claire une classification nette de toutes les recherches
récentes, tâche, à la lumière d'une profonde analyse cytologique, de démontrer l'unité essentielle du
processus méiotique dans les deux régnes Grégoire s'occupe aussi des cas spéciaux et de travaux
incomplets qui ne se rangent pas bien sous les schémas connus, mais ces cas, quoique parfois
bien intéressants, ne peuvent pas être envisagés ici par nous, étant données les limites restreintes
que nous avons posées à notre mémoire.

57

404

V. B. de BAEHR

gaison des chromosomes, changea d'opinion, et maintenant, chez le même
Ascaris, il est prêt à voir dans les processus qui conduisent à la formation
des tétrades diacinétiques, non pas une réduction réelle du nombre des
chromosomes, mais seulement une réduction apparente (pseudoréduction).
La composition des tétrades, de quatre bâtonnets parallèles, s'expliquerait
par la conjugaison latérale de deux chromosomes clivés longitudinalement.

BovERi trouve une confirmation de cette interprétation dans le fait
que, chez une femelle de VAscaris mcgalocephala, il a observé des tétrades
composées non pas comme d'habitude de quatre bâtonnets tout à fait iden-
tiques, mais de deux bâtonnets plus longs et de deux plus courts (i).

Il est évident d'après Boveri, que seuls les éléments de la tétrade qui
se correspondent deux par deux, représentent des moitiés longitudinales
de chromosomes somatiques et que les deux éléments doubles mais de
longueur différente, doivent représenter deux chromosomes associés. Lors-
que les tétrades, au cours des cinèses de maturation, se dissocient en leurs
composants, une des cinèses doit séparer les chromosomes entiers (cinèse
réductionnelle) et l'autre séparer les moitiés longitudinales (cinèse équa-
tionnelle),

A l'heure actuelle il n'y a que peu d'auteurs (Bonnevie, Vejdovsky,
'WiNiwARTER et Sainmont) qui adoptent une interprétation analogue à la
première opinion de Boveri.

Bonnevie (1906) admet pour le mollusque Enteroxenos (eslergreni \d.
copulation parallèle (2) des chromosomes homologues pendant la première
prophase de maturation.

L'espace longitudinal, qui se trouve entre les chromosomes en copula-
tion, s'oblitère au stade pachytène pour réapparaître à la fin de ce stade
dans le noyau diplotène.

Pendant la première métaphase de maturation et de même pendant la
seconde, les chromosomes associés ne se séparent pas, et les éléments bi-
valents, tout en retenant leur duplicisme, subissent de vraies divisions équa-
tionnelles. Les cellules sexuelles mûres reçoivent donc le nombre réduit
de chromosomes bivalents. Ce n'est que pendant les cinèses de segmentation
que se réaliserait la fusion complète des chromosomes. D'après cela, le
processus de la réduction commencé pendant la prophase I, ne s'achève que

(i) Cette différence morphologique des chromosomes dans VAscaris megalocephala a été con-
statée indépendamment par Montgomeky (1904, 1909).

(2) Nous appellerons avec Vejdovsky, «copulation», l'union délinilive de deux chromosomes,
et « conjugaison », l'union temporaire.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 405

dans les cellules embryonnaires de la génération suivante par une fusion
définitive des chromosomes accolés dans un nouvel individu chromosome,
qui représente un mélange du chromosome grand-paternel avec le chromo-
some grand-maternel.

Ce mode de réduction chromatique est admis par Bonnevie non
seulement pour tous les mollusques, mais aussi pour les autres groupes
animaux.

A. et K. E. Schreiner (1907), après avoir étudié le même objet
Enteroxenos, ont critiqué sévèrement non seulement l'interprétation de
Bonnevie, mais même l'exactitude de ses observations. Ils établissent pour
cette forme la paraconjugaison et la préréduction.

Il faut accorder plus d'attention aux intéressants travaux de Vejdovsky
(1907, 1912) sur les Annélides (Enchitraeidœ) et sur les Locustidœ (Decti-
ciis i'erriicïi>0}'iis et Diesti amena marmorata), de Bonnevie (1908, 1911)
sur les Annélides [Nereis limbala, Thalassema mellita, Cerebratiihis lacteiis)
et Alliiim cepa, et de VViniwarter et Sainmont (1909) sur le chat.

Ces auteurs admettent que la réduction définitive du nombre de chro-
mosomes se réalise pendant la première prophase de maturation au moyen
de la copulation parallèle de minces éléments univalents, qui forment ainsi
un iwiipel élément plus épais et bivalent (-^ mixochromosome « de VVini-
warter et Sainmont).

L'appariement des éléments étant ici non pas temporaire, mais défi-
nitif, il en résulte que les deux mitoses de maturation divisent les
mixochromosomes en de vraies moitiés longitudinales et sont, comme les
mitoses somatiques, équationnelles.

L'argument le plus grave en faveur de cette opinion consiste, d'après
ces auteurs, dans le fait que pendant le stade pachytène les éléments biva-
lents — résultant de l'appariement latéral des filaments leptotènes — se
montrent indivis dans les objets étudiés par eux, et ne manifestent aucun
duplicisme; aussi disent-ils qu'il n'y a guère de critérium cjui puisse per-
mettre de prétendre que la fente longitudinale du stade suivant (le stade
diplotène) passe dans le même plan suivant lequel s'est réalisée auparavant
l'association des chromosomes (1).

(i) L'opinion si décidée de Vejdovsky concernant la fusion définitive des chromosomes, est
en relation avec son opinion spéciale sur la structure et la genèse des chromosomes en général.
Aussi trouvons-nous utile de dire ici quelques mots de ce dernier point.

VE.IDOVSKY, en reprenant l'étude de la structure spirale des chromosora?s, que Baranktzky

4o6 V. B. de BAEHR

Etant donné que chez les autres animaux et les autres plantes les dif-
férentsauteurs(GRÉGOTRE : Lilium. Osmunda, A/liiim, Ophryotrocha; Maré-
chal : Sélaciens; Schleip : Plaimria; Baehr : Apliis, Saccocirrus; Bordas :
Sûgitta; MoNTGOMERY : Euschistus, etc.) ont constaté un duplicisme des élé-
ments plus ou inoins net depuis le moment du rapprochement par paires
des filaments leptotènes jusqu'à la métaphase I, où se produit la dissocia-
tion, il est presque nécessaire d'admettre que, même dans le cas, où les
anses pachytènes paraissent indivises, les dualismes n'ont pas disparus,
mais sont seulement voilés à nos yeux par un rapprochement très intime
des composants et par leur entrelacement.

C'est à cause de cela que Grégoire (1904, igo5, 1907, 1910) s'est élevé
vivement contre l'adoption de la paracopulation. Aux spéculations théori-
ques il joint l'argument, qu'après avoir étudié les mêmes objets (Lilium,
Alliitm), où les observateurs précédents ont trouvé les anses pachytènes
indivises, lui et ses élèves, à l'aide d'une meilleure technique, sont parvenus
à constater partout un duplicisme des éléments plus ou moins net.

a décrite le premier (1880), et en se basant sur ses propres observations, arrive aux conclusions
suivantes

Les cljromosomes sont formés de deux composants : un substratum homogène peu colorable
— linine, autour de la surface duquel court un filament chromatique qui se colore très intensive-
ment avec les substances colorantes basiques — le chromonémc. Dans le chromosome mùr qui se
prépare à la division il est difficile de découvrir cette spirale, parce que, à cause du rapproche-
ment étroit des tours de spire, la surface du chromosome paraît formée d'une substance chromatique
homogène.

A la télophase, dans .les chromosomes-filles, les liens intimes entre les deux composants se
relâchent : la spirale chromatique se dégage du substratum achromatique et, en formant des anasto-
moses, donne avec les chromonèmes des autres chromosomes naissance au réseau nucléaire; d'autre
part, la linine des chromosomes se gonfle et, en se dissolvant peu à peu, se transforme en l'en-
chylème, ou suc nucléaire.

Les chromonèmes télophasiques dégagés, comme nous l'avons dit, de la linine, représentent
des ébauches (des germes : « Anlagen ») des chromosomes de la nouvelle génération. Au début ils ne
sont formés que de chromatine, mais ensuite, dès avant la formation du réseau nucléaire, ils se
différencient d'eux-mêmes en un substratum achromatique lininien et en des granules chromatiques
(« chromomères ») dispersés sur ce substratum.

A la prophase les anastomoses disparaissent, le nombre de granules chromatiques disposés le
lonn' des spirales augmente et, à cause du rétrécissement du substratum achromatique, les granules
se rapprochent si étroitement que bientôt ils se touchent l'un l'autre et donnent aux éléments
l'aspect d'un chapelet. L'augmentation de la substance chromatique amène son arrangement spirale
autour de l'axe lininien achromatique, quand ce dernier se raccourcit et s'épaissit.

Les tours de spire extérieurs se rapprochent tellement étroitement que la substance extérieure
du chromosome mùr parait comme une couche chromatique continue et le chromosome lui même
comme formé d'une masse homogène.

Cette structure des chromosomes mûrs permet seule, d'après Vejdovsky, au clivage longitu-
dinal de partager tout à fait précisément la substance maternelle en deux chromosomes-filles. Et

LA SPERMATOGENESE ET L OVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 4O7

En ce qui concerne nos propres observations, dans tous les objets que
nous avons eu l'occasion d'étudier jusqu'à présent et qui appartiennent
aux différents types du règne animal (les vers, les insectes), nous n'avons
nulle part observé dans les noyaux pachytènes des éléments simples (indi-
vis), mais toujours nous constations, si non dans toutes les anses, du moins
dans beaucoup d'elles, un duplicisme plus ou moins marqué se mani-
festant parfois par de petites boutonnières locales ou par une bifurcation
des bouts libres.

Tout cela nous a permis de conclure que dans un même noyau pachy-
tène il ne peut y avoir, entre les anses qui trahissent le dualisme et celles
qui ne le font pas, de différence fondamentale : une fusion définitive des
gamomites ne se réalise dans aucune et les gamomites conservent leur
autonomie.

Il faut encore mentionner que Bonnevie en igo8, ayant dû admettre
l'existence du duplicisme des anses pachytènes, fait découvert et défendu

c'est justement dans ce fait que réside la signification de la structure qui se prépare pour ce but
pendant la prophase-
Une orp^anisation de ce genre est admise pour les chromosomes par Bonnevie (igoS, 1911,
1913) et K. E. Schneider (1910). Ce dernier décrit dans chaque chromosome fille (les noyaux de
la larve de la Salamandre) deux filaments spirales, tandis que Bonnevie. comm'' Vejdovskv, n'ob-
serve dans ses objets qu'une spirale unique.

D'après Vejdovskv, les filaments leptoténes représentent des chromonèmes extérieurs dégagés
du substratum intérieur lininien pendant la dernière télophase goniale. Ces filaments leptoténes ne
sont pas aptes à la division longitudinale et à cause de cela ils s^étirent. perdent leur forme spi-
ralée et s'unissent deux par deux, formant ainsi une nouvelle génération de chromosomes Au mo-
ment de la copulation, les filaments sont formés d'une substance gélatineuse achromatique, dans
laquelle se trouvent disposés en une rangée unique les granules ou segments chromatiques, « chro-
momères « Les filaments possèdent ainsi la structure qui est nécessaire pendant la copulation pour
mélanger leur substance. La fusion des substances lininiennes précède la fusion des chromomères.
Le nombre de chromomères varie même dans les filaments d'une longueur égale, et à cause de
cela on observe souvent que les deux éléments d'une même paire possèdent un nombre différent
de chromomères, ainsi p ex. chez le Decticus verrucivonis les composants de la plus grande paire
peuvent avoir dans l'un des noyaux représentés, l'un S, l'autre 10 chromoméres et dans l'autre
noyau, l'un 6 et l'autre 10 chromoméres. Les chromomères impairs, c'est à dire ceux qui, se trou-
vant dans un élément, n'ont pas de partenaire correspondant dans l'élément-jumeau, forment dans le
mixochromosome des segments plus petits que ceux qui se sont formés par la fusion de deux
chromomères correspondants des composants homologues.

Les segments chromatiques peuvent, en se rapprochant de plus en plus, former dans un
mixochromosom'î mûr une unique spirale chromatique extérieure; cela se voit surtout dans les oocytes
de Diestramena marmorata, et une telle structure, d'après Vejdovskv, exclut complètement la
possibilité d'une séparation ultérieure des copulantsjumeaux pendant les mitoses de maturation et
exige catégoriquement pour ces mitoses l'adoption de divisions longitudinales équationnelles; en
d'autres termes, en principe il n'y aurait pas de différence entre les mitoses somatiques et les
cinèses de maturation.

4o8 V. B. de BAEHR

par les autres auteurs (i), s'efforce néanmoins de montrer que l'on peut
admettre malgré cela que, pendant la première prophase de maturation, il
se réalise une fusion définitive des chromosomes homologues et que les
cinèses de maturation n'impliquent pas un mécanisme réductionnel. Elle
se fonde sur la considération suivante. Si à un stade quelconque le rappro-
chement des deux chromosomes est tellement intime qu'un échange réci-
proque de parties peut se produire entre eux, nous n'avons plus le droit de
dire que les moitiés longitudinales du chromosome bivalent qui se séparent
ensuite, sont identiques avec les chromosomes univalents qui se sont asso-
ciés auparavant. Nous ne savons donc plus, si c'est une complète fusion de
deux chromosomes cjui a eu lieu ou seulement un échange de parties et
nous n'avons pas de possibilité de décider, si c'est pendant la première mi-
tose de maturation ou pendant une des suivantes que se désunissent les
parties qui ont conservé leur autonomie.

Contre cet argument de Bonnevie on peut rappeler une très intéres-
sante description de Montgomery (iqii), de la conjugaison des idiochro-
mosomes dans la spermatogenèse chez VEiischistus. Ici, pendant la période
d'accroissement, les deux idiochromosomes — l'un grand, l'autre petit —
s'associent si intimement que les limites entre eux disparaissent complète-
ment, et dans l'élément bivalent ainsi formé il n'y a aucun indice apparent
de son origine double : même les vacuoles qui se sont formées auparavant
dans chaque idiochromosome se fusionnent maintenant en une seule.

Aux stades de la prophase I plus avancés cet élément bivalent se dé-
compose de nouveau en ses deux composants; de plus ces derniers montrent
les mêmes grandeurs reldlii'es qu'ils avaient avant la conjugaison. Cela nous
prouve que malgré l'apparence d'une complète fusion de leurs substances,
les chromosomes retiennent leur indépendance.

Par analogie nous avons le droit de supposer que pendant la conjugaison
des autosomes, même dans les cas où les leptonèmes très rapprochés pa-
raissent former des anses pachytènes indivises, la fusion définitive des con-
jugants en un élément nouveau — mixochromosome - ne se réalise pas et
que les autosomes, qui en tout cas représentent des éléments non moins
actifs que les idiochromosomes, ne perdent pas leur autonomie.

Il est naturel de songer ici au processus de la conjugaison chez les
cillâtes, avec lequel on peut comparer la paraconjugaison des chromosomes

(i) Selon son nouveau schéma tous les éléments chromatiques après l'appariement synaptique
doivent être indivis.

LA SPERMATOGENESE ET L OVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 40g

homologues, les paternels avec les maternels. Chez ces infusoires pendant
la conjugaison deux individus s'associent tellement intimement que dans
les endroits où ils se touchent les limites de leurs corps disparaissent; il se
fait entre les conjugants un échange de substances qu'on peut étudier sous
le microscope, et après cela ils se séparent. On peut bien admettre qu'un
semblable échange de matières se produit entre les chromosomes qui se
conjuguent, quoiqu'il soit très peu probable que nous puissions le constater
un jour sous le microscope faute d'une technique suffisante.

2. Réduction prophasique avec la métacopulation des chromosomes.

Haecker, après avoir à plusieurs reprises changé d'avis sur les pro-
cessus de la maturation chromatique, a proposé enfin en igiole schéma
suivant de la réduction.

Les chromosomes homologues paternels et niaternels s'accolent par
leurs bouts (« Métasyndesis ^). Cet accolement se réalise sans doute au
commencement de la période d'accroissement des cytes. Les éléments bi-
valents ainsi formés se divisent équationnellement pendant les cinèses de
maturation; il en résulte que chaque chromosome des cellules sexuelles
mures est formé par moitié d'un chromosome paternel et par moitié d'un
chromosome maternel. L'indice morphologique de cette composition se
trouve dans une fente transversale claire, ^ Querkerbc, située au milieu de
chaque élément. Dans l'œuf fécondé (qui possède en réalité le nombre te-
traplo'idique de chromosomes) et dans les cellules du nouvel organisme qui
en provient, les chromosomes retiennent cette ^ Querkerbe -. Ce n'est qu'à
un stade ultérieur, pendant la formation des glandes sexuelles, que s'achève
la fusion complète des métacopulants et que disparaît la fente transversale
{•^ Teleutosyndesis "). Ainsi les chromosomes goniaux doivent être déjà
dépourvus de " Querkerbe - et ne trahir par aucun indice leur origine
double.

Quoique Haecker se soit formé cette conception du mécanisme de la
réduction, surtout en se basant sur ses propres études et celles de ses élèves
sur les Copépodes, néanmoins, étant sceptique en ce qui concerne toutes
les opinions courantes au sujet de cette question, il étend son point de vue
aux autres objets. Qu'une telle généralisation soit inadmissible, c'est ce qui
résulte très clairement de nos études sur la spermatogenèse de VAphis
saliceti. Le seul fait que dans notre objet les spermatogonies contiennent 5
chromosomes de même taille et qu'à la première prophase de maturation

410

V. B. de BAEHR

il se forme à leur place deux chromosomes doubles et un simple, tous de
mcnw loitgiiL'itr démontre suffisamment la faiblesse des raisonnements théo-
riques de Haecker. Puis, nous n'avons jamais observé au milieu des
éléments chromatiques de fente transversale ni dans les mitoses somatiques,
ni dans les mitoses méiotiques (v. la figure de texte p. 439).

Mais même les résultats de Haecker sur les Copépodes ne soutiennent
pas la critique

Premièrement, pour tous ceux qui sont familiers avec la question de
la maturation chromatique, il est évident que seule l'analyse détaillée des
jeunes stades de la prophase hétérotypique est à même de nous donner
une idée claire de la genèse des gemini; or, Haecker ne se base que sur
l'étude de la structure et des allures des chromosomes mûrs pendant les
mitoses de maturation.

En second lieu, Haecker, comme nous l'avons déjà mentionné, n"a pas
observé des fentes claires dans les chromosomes des spermatogonies et des
oogonies; cependant les recherches récentes de Krimmel (igio), sur le
Diaptoinus coeriileiis, les y ont démontrées à ce stade; de plus, le nombre
normal de chromosomes dans les gonies constaté par cet auteur, de même
que par Chambers (1912). pour les Cvclops ainericaniis, Cyclops parciis et
Cyclops brevispinosus, exclut l'idée d'une - métasyndèse - plus précoce des
chromosomes homologues dans les générations plus jeunes des cellules
sexuelles. Il faut ajouter qu'on trouve la fente transversale („Querkerbe'')
décrite par Haecker, non seulement chez les Copépodes, mais aussi, d'après
beaucoup d'auteurs, chez les autres lormes, dans les noyaux somatiques et
sexuels, p. ex. Marcus (1906) chez Y Ascaris caiiis, Delà Valle (1908) chez
la Salamandre, Popoff (1908) chez la Paludina vivipara, Agar (191 i,
1912) chez le Lcpidosireii paradoxa [i], etc. Ces fentes tranversales ne se
trouvent pas toujours au milieu des chromosomes; elles peuvent se placer
plus près d'un bout, p. ex dans les chromosomes diacinêtiques des Cyclops
parcus (9) d après Chambers (1912), dans les cellules somatiques et
sexuelles du Lepidosireii paradoxa d'après Agar (1911, 1912), dans les
cellules somatiques du Trillium d'après Grégoire et Wygaerts (1903). Si
on tient compte du fait que les chromosomes homologues (paternels et
maternels), excepté les idiochromosomes, sont toujours de même taille, il

(i) Chez cette forme la fente transversale se manifeste surtout nettement dans les mitoses
spermatogoniales qui précèdent immédiatement la prophase méiotique, où, d'après Haecker, devrait
s'accomplir déjà la copulation suivante des chromosomes.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRtJS MAJOR 4TI

est évident qu'une - Querkerbe -, qui sépare les parties de différente lon-
gueur, ne peut pas être regardée comme une preuve morphologique de la
métasyndèse accomplie entre les chromosomes homologues.

Dans ces fentes transversales nous devons plutôt voir un indice que
parfois les chromosomes représentent des éléments composés {-' Sammel-
chromosomen " Boveri), résultant de l'association d'un certain nombre de
chromosomes indépendants.

A. et K. E. Schreiner (igo8) ont observé dans les anses pachytènes
plus d'une fente transversale dans le même élément. En ce qui concerne
les fentes transversales dans les anses pachytènes au stade de bouquet, ob-
servées et dessinées par les cytologistes de Munich (Goldschmidt, Popoff,
Wasilieff, Buchner), comme une expression manifeste de la métaconju-
gaison nous en parlerons dans un autre chapitre de ce mémoire.

B. Réduction au moyen d'une des cinèses de maturation.

1. Postréduction sans conjugaison et sans copulation des chromosomes.

Weismann en 1887 a fait la supposition que la réduction des chromo-
somes se produirait d'une manière très simple et résulterait de ce que la
moitié des chromosomes entiers, rassemblés à l'équateur, se dirige vers un
pôle et l'autre moitié vers le pôle opposé. De plus, se fondant sur ses pro-
pres observations et celles de Blochmann (1887), d'après lesquelles les
œufs parthénogenétiques qui ne réduisent pas leur nombre de chromoso-
mes n'expulsent qu'un globule polaire et les œufs qui exigent la fécondation
et subissent la réduction en éliminent deux, il conclut que, seule, la
seconde mitose de maturation peut représenter une division réductionnelle.
Cette conclusion, en partie purement théorique, sur le mécanisme de la
réduction a paru trouver une confirmation dans certains travaux cytologi-
ques. Notamment Petrunkewitsch (1901), chez l'abeille, Goldschmidt
(igoSj, chez le Zuogonus uiiriis, décrivent que la réduction du nombre de
chromosomes s'accomplit pendant la seconde mitose par un partage dicen-
trique des chromosomes somatiques en deux groupes égaux.

Mais aucun de ces cas ne peut être reconnu par nous comme vraiment
établi. Les recherches de Meves (igo3, 1.907), sur la spermatogenèse des
faux bourdons, ont contredit les résultats de Petrunkewitsch sur l'ovoge-
nèse de l'abeille. L'étude par A. et K. E. Schreiner (igo8) et par Gré-
goire (igo8) des préparations du Zoogonus, qui ont servi à Goldschmidt
pour créer son ^ Primiirtypus -, plaide en faveur du schéma hétérotypique.

58

412

V. B. de BAEHR

Les résultats de Wassermann (igi3), acquis récemment sur le même
objet (pseudo-réduction par métasyndèse), contredisent aussi ceux de Gold-

SCHMIDT.

2. Préréductiou après conjugaison diaeinétique ou métaphasique.

Pendant toute la prophase I, ni la conjugaison ni la pseudo-réduction
n'ont lieu, les chromosomes univalents restent en nombre dipldidique. A la
fin de la prophase I ou au commencement de la métaphase, les chromoso-
mes, tout à fait formés et mûrs, se conjuguent, après quoi les conjugants par
l'action de la cinèse I se séparent de nouveau et se dirigent vers les pôles
opposés.

Pendant la seconde cinèse de maturation, les chromosomes, en se di-
visant équationnellement, se décomposent en leurs moitiés longitudinales,
qui se remarquent chez certaines formes déjà à la fin de la prophase I.

Ce type de réduction a été proposé pour la première fois par Henking
(i8gi), pour le Pyrrhocoris apterus, et ensuite très minutieusement dé-
veloppé par KoRSCHELT (iSgS), pour VQphryotrocha puerilis.

Plus récemment cette conjugaison tardive et de courte durée a été
décrite par N. M. Stevens (igoS, igo6) pour les Aphides, par Tannreu-
THER (1907) pour le Melûxaiiliis salicola (aussi un puceron), par Dehorne
(igio, igii) pour le Sabellaria spimtlosa et pour le Lanice couchilega,
par Lawson (igi2) pour les Smilacina, Kniphofia ai Aloe [i).

La forme ronde des chromosomes diacinétiques chez Pyrrhocoris ne
permet à Henking que de parler seulement d'un appariement des éléments
univalents sans pouvoir distinguer la manière de cette association par
paires — accolement ou aboutement.

Toutes ces descriptions d'une conjugaison des autosomes déjà formés
et mûrs doivent être regardées à l'heure actuelle comme réfutées (2). Les
anciennes observations de Henking sur le Pyrrhocoris n'ont pas trouvé de
confirmation dans les travaux de Gross (igo6) et de Wilson (igog), qui
ont étudié le même objet et de même dans toutes les recherches plus ré-
centes sur d'autres punaises.

Grégoire et Deton (igog) et A. et K. E. Schreiner (igog), en étu-
diant les phénomènes de la maturation chromatique dans les cellules

(i) Les données d'AOAR (1911) et de Schellenberg (1911) sur rappariement des chromosomes
diacinétiques univalents ne rentrent pas ici, parce que, d'après les observations des auteurs, il s'agit là
d'une seconde conjugaison qui a été précédée d'une conjugaison normale au début de la prophase
et d'une déconjugaison à un stade ultérieur.

(2) En ce qui concerne les allosomes (idiochromosomes), une conjugaison tardive de ces élé-
ments a été constatée dans beaucoup de formes (Wilson, Stevens).

LA SPERMATOGENÈSE ET l'ovOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR ^l3

sexuelles de Y Ophryotrocha ont obtenu des résultats qui ne sont pas d'ac-
cord avec ceux de Korschelt et qui plaident en faveur de la pseudo-réduc-
tion prophasique par paraconjugaison. Le nombre diploïdique, d'après ces
auteurs, est 8 et non pas 4, comme le prétendait Korschelt.

En ce qui concerne les recherches de Stevens et de Tannreuther
sur les Aphides, nous avons montré déjà dans notre travail de igo8 que les
auteurs cités non seulement ont faussement déterminé le nombre somatique
de chromosomes dans les cellules mâles, mais aussi n'ont pas aperçu des
stades très importants de la première prophase, à cause de quoi ils se sont
fait une idée tout à fait incorrecte du moment de la conjugaison des chro-
mosomes et du moment de la formation des éléments bivalents.

Les travaux de Dehorne, dès leur apparition, ont été soumis par nous
à la critique (1912). Sur l'exemple de V Aphis saliceti qui dans le sexe mâle
se caractérise par un nombre impair de chromosomes (un fait qui a priori
contredit une des plus importantes thèses de Dehorne, notamment celle
du " duplicisme constant des chromosomes "), nous avons démontré toute
l'inexactitude de son interprétation des mitoses somatiques et des mitoses
maturatives.

La description des processus de la maturation chromatique chez le
Saccocii'''us major d'après Hempelmann est tellement particulière et elle
s'harmonise si peu avec nos connaissances sur le mécanisme de la réduction
que cela nous a déterminé à étudier nous-mème cet objet. Nos résultats,
publiés sous une forme concise en 1913 et maintenant plus en détail, établis-
sent la préréduction après la paraconjugaison et ainsi sont d'accord avec
ceux de A. et K. E Schreiner (rgoô, igo6) et ceux de Grégoire et Deton
(1906), qui ont étudié d'autres Annélides marins (Tomopteris, Ophryo-
trocha).

3. Postx'éduction après métaconjugaison prophasique.

Aux termes de sa première formule, ce mode de la réduction chroma-
tique peut être exprimé de la façon suivante.

Aux stades jeunes de la prophase I de maturation, la chromatine nu-
cléaire représente un long filament tortueux. Ce filament se clive longitu-
dinalement et se divise ensuite transversalement en segments, dont le
nombre équivaut seulement à la moitié d\i nombre normal de chromosomes.
Quand ces segments doubles se transforment en chromosomes diacinéti-
ques, on voit que chacun d'eux est coupé au milieu d'une fente transversale,
et ainsi prend l'aspect d'une tétrade

414

V. B. de BAEHR

D'accord avec la théorie de l'individualité des chromosomes qui ne
permet pas d'admettre un changement dans le nombre de chromosomes, la
fente transversale indique la bivalence des éléments et doit correspondre à
la place où deux chromosomes goniaux univalents se sont accolés par leurs
bouts — pseudo-réduction.

La métaphase I sépare dans chaque tétrade les moitiés longitudinales
identiques — et est donc équationnelle.

La métaphase IL par un clivage transversal, dissocie, dans les éléments
bivalents, les chromosomes univalents, qui les ont formés, et est réduc-
tionnelle. Un tel type de réduction décrit par Rûckert (1894) pour les
Copépodes (Crclops strenuiis, Heterocope robiista, Diaptnmus gracilis) par
Haecker (1895) pour les Copépodes (Canthocamptus staphyliuus) et par
voM Rath (1892, 1895) pour les Copépodes (Calanus graci/is, Heterocope
saliens, Euchœta marina, Anomalocera pœtersonii) et beaucoup d'autres,
et pour les Orthoptères (Gryllotcilpa inilgari^), a été nommé par Haecker
T type Weismaiinitn ^, parce qu'il répond bien aux postulats théoriques de
Weismann.

Les descriptions des auteurs cites ont séduit par leur simplicité, ont
joui un certain temps d'une assez grande autorité et joué un rôle important
dans l'évolution de nos idées sur les phénomènes de réduction. Elles ont
pour la première fois introduit dans la cytologie la notion de la pseudo-ré-
duction qui, en présence de tous les chromosomes somatiques, réalise seule-
ment une diminution numérique apparente des chromosomes par l'apparie-
ment des éléments univalejits en groupes bivalents.

En contradiction foncière avec ce ^ type Weismannieii - se trouvent
les observations de beaucoup de cytologistes modernes (Montgomery, Gré-
goire, ScHREiNER, Maréchal, Lerat, Baehr, Davis et autres) i|ui nient
catégoriquement la formation d'un filament chromatitiue unique continu
à n'importe quel stade de la prophase synaptique et qui dans les minces
filaments leptotènes, comme dans les anses pachytènes épaisses, voient des
éléments libres.

Il faut ajouter (jue Haecker lui-même, la même année (iSgS), a re-
noncé à ce type de réduction admis pour le Canthocamptus staphy lin us, et il
a proposé pour le Cyclops brei'icofuis une interprétation nouvelle beaucoup
plus compliquée.

De plus, d'après Lerat (1902, i9o5), dans le Cyclops streniius les pro-
cessus de maturation se déroulent en harmonie avec le schéma hétéro-
homéotypique, avec paraconjugaison et préréduction.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 4l5

En ce qui concerne les recherches de vom Rath sur le Gryllotalpa, les
études plus récentes sur les Orthoptères ont contredit ses résultats, en dé-
montrant en même temps une grande schématisation dans ses jolis dessins.

A l'heure actuelle seulement un petit nombre d'auteurs admettent en-
core la métaconjugaison avec postréduction : Me Clung, Sutton, Ro-
BERTSON, PiNNEY, Blackman. D'après leur plus récente description, au
stade très jeune de la prophase S3'naptique les chromosomes univalents se
métaconjuguent (s'apparient par leurs bouts) et forment un nombre réduit
d'éléments bivalents.

Les éléments bivalents, se clivant longitudinalement, se raccourcissant
et s'épaississant, prennent la forme d'anses épaisses (« loops -). Les compo-
sants univalents de chacune des anses, en variant leur position l'un par
rapport à l'autre, donnent aux chromosomes des aspects divers.

La fente longitudinale peut rester visible dans ces bivalents ou dispa-
raître. En se tordant l'un autour de l'autre, les -^ métaconjugants " transfor-
ment l'anse en une chaîne. S'ils s'unissent par leurs bouts libres, ils for-
ment un anneau; si l'anse se rompt dans l'endroit où les univalents se
touchent, et si ces derniers se disposent parallèlement, il en résulte un
chromosome bivalent en forme de deux bâtonnets parallèles.

Si les composants, longitudinalement clivés, en se séparant par leurs
bouts libres, forment un angle de [80° et sont disposés ainsi l'un sur le pro-
longement de l'autre, nous avons alors une tétrade-bâtonnet (ij.

Par la séparation dans les différentes directions des moitiés longitudi-
nales de deux métaconjugants là où ils se touchent, la - tétrade-bâtonnet "
se transforme en une ^ tétrade-croix -, etc.

Pendant la I^ mitose de maturation, les chromosomes se disposent à
l'équateur et s'unissent avec les fibrilles fusoriales de telle façon que la mé-
taphase I ne sépare pas les chromosomes conjugués, mais divise équation-
nellement les éléments bivalents le long de leur tente longitudinale.

La décomposition des chromosomes bivalents en leurs univalents se
réalise pendant la raétaphase II (la division réductionnelle).

Me Clung (igoo, 1902, igoS), Sutton (1902), Robertson (igo8) et
PiNNEY (1908) ont décrit ce type de postréduction pour les Orthoptères.
Blaokmann (igoS) l'a admis pour la spermatogenèse dans le Scolopendra.

(i) Beaucoup d'auteurs emploient le nom « té rades » comme synonyme des «gemini» pour
désigner en général les chromosomes bivalents hétérotypiques déjà plus ou moins formés, même
si la structure de ces éléments ne montre pas quatre parties.

4l6 V. B. de BAEHR

Comme chez les Orthoptères les tétrades bivalentes montrent chez
les Myriapodes des figures très compliquées et se prêtent difficilement
à l'analyse cytologique. Chez les objets plus favorables sous ce rapport,
comme par ex. chez le Tomopteris (A. et K. E. Schreiner, igo6), VAphis
saliceti, le Saccocin-iis major (Baehr, 1908— 1913), V Eiischistiis (Montgo-
MERY, 191 1), les images de la prophase, métaphase et anaphase I et tous
les stades de \d. première cinèsc II montrent très clairement que les conju-
gants se dissocient à la première cinèse et non pas à la seconde, celle-ci
représentant une vraie division longitudinale des univalents.

Il faut encore ajouter que Morse (igog), Vejdovsky (1912) décrivent
chez les Orthoptères à la I^ prophase non pas un aboutement des chromo-
somes homologues, mais une association latérale.

Les figures encore inédites que nous avons observées nous-même, en
étudiant différentes espèces d'Orthoptères, parlent aussi très nettement en
faveur de la paraconjugaison.

4. Préréduetion après métaconjugaisou prophasique.

D'après les auteurs qui rentrent dans cette catégorie, la période synap-
tique ne montre pas de filaments minces, appariés latéralement, ou, si des
apparences de ce genre existent, elles doivent leur origine à un parallélisme
accidentel ou à un clivage longitudinal homologue de celui des chromoso-
mes somatiques aux prophases diploïdiques. Les chromosomes diacinéti-
ques ou les - gemini • sont le résultat d'une métaconjugaisou réalisée au
commencement de la prophase hétérotypique des chromosomes somatiques
homologues [^ conjugation end to end " Montgomery, - métasyndèse ^
Haecker, " télosynapsis ■- Wilson).

Les gemini prennent des formes différentes selon la position que les
métaconjugants univalents occupent l'un par rapport à l'autre. Si dans les
chromosomes diacinétiques les conjugants se trouvent en association laté-
rale, cela s'explique par un repliement au milieu de l'élément bivalent et
par un rapprochement parallèle des conjugants (-second contraction-, - se-
condary looping ^, „ Faltung ^). Le stade de cette contraction secondaire
s'observe à la fin de la prophase synaptique, c'est-à-dire bien après le stade
où l'apparienient des chromosomes par leurs bouts s'est accompli Ce stade
de repliement, comme il parait, dure très peu de temps et à cause de cela
il a pu rester inaperçu pour la plupart des cytologistes (i).

(i) Beaucoup de métasyndétistes admettent l'existence aux jeunes stades de la prophase hé-
térotypique d'un unique filament chromatique continu. Ce filament ou spirème continu est formé
de chromosomes somatiques enfilés et agglutinés bout à bout. Après il se tronçonne, en un nombre
haploidique de segments bivalents. Chacun de ces segments bivalents se compose de deux chromo-
somes homologues (l'un paternel et l'autre maternel) en association métasynaptique.

LA SPERMATOGENESE ET L OVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 417

Pendant la I^ cinèse de maturation a lieu la séparation des conjugants,
et de cette façon le nombre de chromosomes diminue de moitié — préré-
duction.

Pendant la II"-' mitose s'achève la division longitudinale des chromoso-
mes univalents, qui a déjà été préparée auparavant par la fente longitudi-
nale observée à la prophase I.

L'idée d'une métaconjugaison de ce genre a été introduite dans la cyto-
logie par MoNTGOMERY, qui a nommé ce processus - end to end conjuga-
tion ^. En 19 lo pour la première fois, Montgomery interprète dans ce sens
les phénomènes de maturation des cellules sexuelles mâles dans le Peripatiis
et plus tard, dans toute une série de publications sur la spermatogenèse
(1901 — 1910), il décrit des processus semblables pour les Hémiptères, pour
le Plcthodoji, le Lycosa, le Syrbula et autres. D'après ses observations,
de suite après la dernière division goniale les chromosomes télophasiques
s'accolent bout à bout (dans les éléments en forme d'anneaux il se fait un
accolement par les deux bouts). Au stade postsynaptique (équivalent du
stade diplotène des autres auteurs) chaque conjugant univalent se clive lon-
gitudinalement et de cette manière les tétrades définitives bivalentes se
forment. Pendant la première mitose de maturation les composants des té-
trades — les chromosomes univalents — se dissocient. Les univalents,
pendant la seconde cinèse, se divisent équationnellement.

Il faut rappeler que Montgomery a, le premier, en igoi, tout à fait
clairement formulé l'hypothèse que dans l'œuf fécondé et dans n'importe
quelle cellule somatique à chaque chromosome maternel, qui vient de
l'œuf, correspond un chromosome paternel morphologiquement égal, qui
provient du sperrnatozo'ide et que, à la première prophase méiotique, ne
s'apparient que les chromosomes homologues, maternels et paternels. Cette
hypothèse possède un fort appui dans les formes qui se caractérisent par
des dimensions très différentes de leurs chromosomes — les Orthoptères
(SuTTON, Me Clung), les Hémiptères hétéroptères (Wilson), les Hémip-
tères homoptères (Stevens, Baehr), beaucoup de plantes (Strasburger,
MiYAKE, Clemens-Mûller et autres).

Dans les mitoses somatiques de ces objets les différents types de
grands, de moyens et de petits chromosomes sont toujours représentés par
paires (excepté les formes mâles avec l'hétérochromosome ou avec les idio-
chromosomes). Pendant la première cinèse de maturation les mêmes con-
trastes dans les dimensions se retrouvent, mais les différents types y sont

4i8

V. B. de BAEHR

représentés en nombre singulier. Pour les partisans de la théorie de lindi-
vidualité des chromosomes il en ressort tout à fait naturellement qu'un
appariement des chromosomes de même taille s'y est produit, et à cause
de cela nous avons une apparente diminution de moitié du nombre des
chromosomes.

Un rôle assez important dans la propagation des idées métasyndétiques
a été joué par les recherches de Farmer et Moore.

Dans leurs travaux de igoS et igo5 sur différents animaux et plan-
tes, ces auteurs dévelopiient avec beaucoup de talent la théorie du repliement
et de la „ seconde contraction - avec préréduction. C'est au même résultat
qu'arrive aussi en igo3 Montgomery, dans son travail sur la spermatoge-
nèse des Batraciens, après avoir un peu modifié et approfondi sa première
opinion sur la ,, end to end conjugation ^. Les recherches très détaillées de
H. L. Davis (iqo8) sur la spermatogenèse dans les Orthoptères et les nom-
breuses publications des cytologistes de Munich (Goldschmidt igo6, igo8,
PopoFF igo7, Wasilieff igo/, Buchner igoy) sur la maturation dans di-
vers invertébrés, ont accru le nombre des métasyndétistes préréduc-
tionnistes.

Il faut encore ajouter que ces derniers cytologistes décrivent dans tous
leurs objets une fente transversale au milieu de chaque anse pachytène —
aspect qui, d'après eux, est décisif en faveur de l'aboutement des chromo-
somes.

Parmi les botanistes la théorie de la métaconjugaison a trouvé dans
ces derniers temps beaucoup de paitisans (Mottier igo7, igo8; Gates,
igoS, igii; Digby, igio, igi2, igi4; Fraser et Snell, igii).

De l'avis des métasyndétistes modernes (Farmer, Brunelli, Digby,
Fraser et Snell et autres), leur interprétation aurait reçu maintenant
une confirmation importante dans la découverte, à l'aide d'une technique
microscopique plus perfectionnée, d'un clivage longitudinal de chromoso-
mes télophasiques somatiques, par suite duquel chacun des chromosomes
prophasiques apparaît dès le début comme composé de deux moitiés lon-
gitudinales. Ce duplicisme des chromosomes devient invisible aux stades
plus avancés de la prophase à cause du rapprochement plus intime des
moitiés longitudinales, et il réapparaît à la métaphase.

Constatant ainsi une grande ressemblance entre les images de la pro-
phase somatique et celles de la prophase hétérotypique, les métasyndétistes
ne peuvent admettre qu'un duplicisme si semblable puisse a^oir une signi-

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 41g

fication fondamentalement différente dans ces deux sortes de prophases, et
ils considèrent comme tout à fait prouvé que la fente, qui clive les chromo-
somes en deux moitiés longitudinales à la télophase de la dernière division
goniale, réapparaît à la prophase présynaptique (hétéroty pique). Il en ré-
sulte que le parallélisme et le dualisme des éléments de la I« prophase n'ont
rien de commun avec une paraconjugaison (conjugaison parallèle) des chro-
mosomes.

Dans les cas où, entre la dernière cinèse goniale et la prophase I de
maturation, il n'y a pas de vrai stade de repos, les métasyndétistes assurent
qu'ils sont parvenus à suivre la transformation immédiate des chromosomes
clivés longitudinalement de la dernière télophase goniale en doubles chro-
mosomes hétérotypiques (i).

Les métasyndétistes soulignent que seule leur interprétation de la
période méiotique s'harmonise bien avec ce qu'on observe dans les autres
mitoses d'un même organisme, et dans cette facilité de trouver partout
l'identité et l'harmonie ils voient un grand avantage de leurs opinions.

Cette interprétation métasyndétique des processus de la maturation a
rencontré une forte critique de la part des partisans de la paraconjugaison.
Ainsi Grégoire (1904 igro), qui d'ailleurs admet aussi la préréduc-
tion, nie tout à fait catégoriquement la genèse des gemini au moyen de la
métaconjugaison et du - repliement -. Il reproche à certains métasyndé-
tistes d'attacher trop peu d'attention aux stades qui précédent la formation
des anses pachytènes, stades où, d'après son avis, il y a des preuves irréfu-
tables de la genèse de ces anses aux dépens de deux éléments plus minces
(leptonèmes) par un rapprochement parallèle.

D'autres métasyndétistes ont le tort, d'après lui. de négliger ou de ne
pas étudier suffisamment le stade strepsitène, alors qu'une analyse détail-
lée de ce stade peut nous montrer que les moitiés longitudinales des anses
pachytènes en se séparant, en se tordant l'une autour de l'autre, en se rac-
courcissant et en se clivant, se transforment peu à peu en branches consti-
tutives des chromosomes diacinétiques.

En ce qui concerne la question de l'identification du duplicisme des

(i; GoLuscHMiDT, déjà en 1906. a exprimé la supposition que les images de la prophase hé-
térotypique, qu'on interprète en faveur de la conjugaison parallèle des chromosomes leptoténes,
peuvent être expliquées tout simplement comme une formation des chromosomes qui depuis le com-
mencement de leur différenciation sont déjà doubles à cause du précoce clivage longitudinal. Le
duplicisme est ainsi seulement une expression de la future séparation équationnelle des moitiés
longitudinales.

59

420 V. B. de BAEHR

éléments, aux stades initiaux de la P prophase, avec le clivage longitudinal
des chromosomes télophasiques de la dernière cinèse goniale, Grégoire
admet que les dualismes prépachyténiques représentent non pas des éléments
clivés par une fente longitudinale, mais une association parallèle deux par
deux de minces filaments chromatiques indépendants. L'étude des objets
favorables sous ce rapport (Alliiim) montre que chacun de ces minces
filaments prend son origine dans une partie nucléaire qui correspond com-
plètement à ce qui dans les mitoses somatiques forme, si Ton peut dire
ainsi, le germe d'un chromosome et à cause de cela équivaut à un chro-
mosome univalent somatique (i|

De plus, Grégoire nie en général lexistence du clivage longitudinal
des chromosomes télophasiques, et les images que les auteurs modernes
(Brunelli, Dehorne, Digby, Fraser et Snell, et autres) prennent pour
un tel phénomène, il les explique par une simple '^ alvéolisation ^ des chro-
mosomes qui sont en train de reconstruire le noyau (2). ■

Comme nous lavons dit déjà plus haut, quand nous parlions de la
métacopulation, nos recherches sur la spermatogenèse dans VApliis saliceti
sont en contradiction avec les thèses des métasyndétistes, et cela reste vrai
en ce qui concerne la métaconjugaison avec préréduction que nous discutons
maintenant.

Chez notre forme, après la dernière cinèse spermatogoniale, cinq chro-
mosomes, tous de même dimension, entrent dans le noyau quiescent, et à la
prophase hétérotypique nous trouvons trois éléments, dont deux sont dou-
bles et un simple.

Si on se met au point de vue métasyndétiste, la longueur égale de tous
les éléments de la I^ prophase est inexplicable, de même que le duplicisme
seulement de deux de ces éléments. En effet, si d'une part on admet un
accolement bout à bout des chromosomes homologues, si d'autre part on
regarde le duplicisme des éléments hétérotypiques comme identique à une

(:) A. et K. E. Schreiner ont aussi décrit dans les Tomopteris, Salamandra, Myxine, la
formation des filaments leptotènes présynaptiques en nombre diploidique aux dépens d'anses chro-
mosomiques. Il en est de même de H. Davis (igoS) et Robertson (1908) pour les Orthoptères,
WiLSON {1912) pour les Hémiptères, Bordas (igiS) pour le Sagitta. Il faut aussi mentionner ici
les recherches de Vejdovsky (19)2) sur les Orthoptères. Chez le Desticus (cf) les filaments lepto-
tènes se différencient directement des chromosomes de la dernière cinèse spermatogoniale par un
gonflement et une dislocation de ces derniers.

(2) L'alvèolisation des chromosomes a été décrite pour la première fois, par Grégoire, en
1903 (Trillium), 1906 (Allium), (Grégoire et Wygaekts igoS, Grégoire 1506); elle a été signalée
auparavant par Eismond (1898) dans les chromosomes des cellules de segmentation chez l'Axolotl.

LA SPERMATOGENESE ET LOVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 42I

fente longitudinale de chromosomes somatiques, il semble qu'il en résulte-
rait que les deux chromosomes bivalents doivent être deux fois plus longs
que le troisième (i), et que tous les trois doivent être doubles (2).

D'après les métasyndétistes-préréductionnistes, la P cinèse de matura-
tion, en séparant les chromosomes entiers, diffère fondamentalement de
toutes les autres mitoses malgré une apparente ressemblance, parfois même
très frappante. A notre avis, il est évident que la prophase elle-même de
cette cinèse, qui précisément prépare ce processus réductionnel, doit différer
fondamentalement de toutes les autres prophases qui conduisent seulement
à une division équation nelle des chromosomes. Aussi accordons-nous peu
d'importance à l'argument, si souvent cité par les partisans de la métacon-
jugaison, à savoir qu'au cas où des explications diverses seraient possibles
pour les mêmes images de la I« prophase méiotique, c'est leur interpré-
tation qui posséderait clairement l'avantage en ce qu'elle implique la res-
semblance et le parallélisme entre la prophase hétérotypique et la prophase
somatique dans un même organisme.

En ce qui concerne enfin l'existence constante d'une fente transversale
au milieu des anses pachytènes, décrite par Goldschmidt, Popoff, Wasi-
LiEFF, BucHNER pour différents animaux et interprétée par eux comme une
preuve morphologique d'une union métasyndétique de deux chromosomes
univalents, les recherches d'autres auteurs sur les mêmes objets ou sur des
objets voisins ne l'ont pas vérifiée.

Il faut encore remarquer que Montgomery, un des fondateurs de la
théorie de la métaconjugaison, dans son dernier travail (1911 ), après avoir
réétudié plus fondamentalement la spermatogenèse dans V Euschistus, dé-
crit maintenant pour cette forme la paraconjugaison et renonce tout à fait
catégoriquement et loyalement à son ancienne opinion sur la - end to end
conjugation -.

5. Préréduction après paraconjugaison prophasique.

Après la dernière cinèse goniale, les chromosomes univalents subissent
des changements plus ou moins radicaux et se transforment en minces fila-

(i) Chez VAphis saliceti, on ne trouve rien qui puisse être envisagé comme indice» de la
« contraction secondaire » au sens de Me Clung et Fakmer-Moore.

(2) Aux prophases somatiques, d'après Vhypothèse que nous discutons, les moitiés longitu-
dinales qui résultent de la division des chromosomes à la télophase précédente, se réunissent paral-
lèlement et forment des chromosomes univalents.

422 V. B. de BAEHR

ments chromatiques — les filaments leptotènes ou gamomites — qui, se
rapprochant par paires, se conjuguent latéralement. Nous appelons para-
conjugaison ce mode de conjugaison (i).

Les gamomites, en s'associant intimement et se raccourcissant, forment
des filaments plus épais — anses pachytènes.

Dans la plupart des animaux les filaments leptotènes manifestent une
orientation polaire très caractéristique : ils dirigent leurs deux extrémités
libres vers le même pôle du noyau, butent contre la membrane nucléaire et
prennent ainsi la forme d'anses voûtées laissant le pôle opposé du noyau
libre d'éléments chromatiques (le stade du -^ bouquet mince "). Cette orien-
tation en bouquet persiste plus ou moins longtemps dans les noyaux pa-
chytènes (le stade du ^ bouquet épais -). Après, les anses pachytènes se
séparent de la membrane nucléaire, perdent leur forme en arc et se disper-
sent dans le noyau (- pachytène déroulé - Grégoire).

Dans les végétaux les images claires du bouquet se trouvent beaucoup
plus rarement, ce qui s'explique sans doute par une grande longueur des
éléments et par la contraction synaptique plus forte qu'on observe à ces
stades (Grégoire, igio) (2).

(i) « Zygoténie » Grégoire, « side by side conjugation » Montgomery, « parasyndèse » Haeckek,
« parasynapsis » Wilson.

(2) l'eut-être ne serait-il pas inutile de rappeler que le ramassement des éléments de la pro-
phase I en un peloton dense, qu'on décrit sous le nom de « contraction synaptique » (Grégoire)
ou de « synizesis » (Me Clung), est regardé par certains auteurs (Moore iSgS, Farmer et Moore
igoS, BovERi 1904, Morse 1909, Vejdovsky 1907, 1912, Schi.eip 1909, Jordan 1911, Miyaké igoS,
OvERTON 1906, et autres) comme un phénomène vital tout à fait normal, tandis que les autres cyto-
logistes (Me Clung 1900, 1902, Janssens 1901, iqo5, Meves 1907, Demoll 1912. et autres) voient
dans cette contraction une chose artificielle, résultant d'une sensibilité très forte du noyau à l'égard
des liquides fixateurs à ce stade.

BovERi prête beaucoup d'attention au ramassement synaptique des éléments et y voit un stade
auquel les chromosomes homologues, qui se trouvaient jusque là assez écartés l'un de Fautre, éprou-
vent une attraction réciproque très forte, se cherchent mutuellement et s'apparient.

Grégoire (1907, 1910) admet que même dans les objets où la contraction synaptique serait
en partie naturelle, elle ne peut avoir d'autre signification que celle d'un phénomène accompagnant
les processus de réduction, qui sont la chose essentielle. Cela résulte de ce que, dans certains objets,
où on ne trouve pas le ramassement synaptique, les stades de réduction les plus importants sont,
dans leur évolution, identiques à ceu.\ qui se déroulent dans les objets où se produit un tel ra-
massement.

Beaucoup d'auteurs, par malentendu, appellent faussement cette contraction « synapsis », tandis
que le nom synapsis est donné par Moore (Moore iSci5, Farmer et Moore 1905) pour déterminer
les processus, qui, à la prophase hétérotypique, mènent à la réduction numérique des chromosomes
au moyen de l'association par paires des éléments préméioliques. Wilson, dans son mémoire de
1912. insiste très énergiquement Fur la nécessité de retenir pour le « synapsis n la première signifi-
cation fi.\ée par Moore, et d'accord avec cela il nomme la paraconjugaison « parasynapsis » et la
métaconjugaison « métasynapsis ».

LA SPERMATOGENÈSE ET l'OVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAjOR 423

En ce qui concerne le mode de la réalisation de cette conjugaison laté-
rale, il faut encore souligner certains points. Il y a ici deux types princi-
paux, liés entre eux par des transitions.

Le premier type, très répandu parmi les animaux et parmi les plantes,
se caractérise par les traits suivants. Au commencement tout le réseau
nucléaire se transforme en minces filaments leptotènes, et après seulement
ces éléments, déjà tout à fait bien formés, en se rapprochant par paires,
se conjuguent synchroniquement dans toute leur longueur ou, dans le cas
d'une polarisation des éléments, l'association débute aux extrémités libres
et avance le long des conjugants. Le second type se rencontre seulement
chez les animaux et il diffère du premier par le fait qu'ici les filaments lep-
totènes commencent la conjugaison alors qu'ils ne sont pas encore tout à
fait formés sur toute leur longueur; le rapprochement des éléments qui
vont s'associer débute à un pôle, tandis que le reste du noyau est rempli
encore du réseau nucléaire. Au fur et à mesure que de ce réseau se différen-
cient de nouvelles parties des filaments leptotènes, elles conjuguent et
prolongent ainsi les anses pachytènes qui s'en forment.

Certains auteurs — paraconjuguistes (Strasburger 1904, igo6, Over-
TON igo5, 1909, Rosenberg 1904, 1907, 1909, et autres) établissent surtout
pour les plantes pauvres en chromatine encore un troisième type particulier
avec les •' prochromosomes - (i).

D'après leurs descriptions, les no\'aux cytaires au repos montrent les
prochromo.somes en nombre diploï(li(|ue et même, très souvent, ceux-ci

(i) Le terme i< prochromosomes » a été introduit pur Overton (igo5), pour déterminer dans
les noyaii.x quiescents les corps chromatiques qui, d'après les botanistes Strasburger. Miyakk,
Overton lui-même, Rosenberg, D.wis et autres, représentent des parties de chromosomes qui ne
sont pas entrées dans le réseau nucléaire. L'e.ïistence des « prochromosomes » dans les noyau.x au
repos doit prouver la survivance des chromosomes d'une génératim des noyau.x à l'autre et servi-
rait ainsi de confirmation morphologique de la théorie de l'individualité des chromosomes. De sem-
blables prochromosomes ont été constatés aussi chez certains animaux.

Ainsi Farmer et Moore (içoS) les trouvent chez le Periplaneta americana, Mooke et Embleion
(1906) chez le Triton, et ces derniers auteurs nous disent, p 558 : « and we may say without reserve that
fheir présence at ail stages of rest between the successive premeiotic divisions seems to conclusivcly
prove the permanence of the chromosomes from one cell génération to another ».

n faut pourtant tout de suite remarquer que telle opinion sur le rôle des prochromosomes
ne peut pas avoir une valeur générale et que jusqu'à présent dans la littérature il y a encore une
grande divergence de vues en ce qui concerne la genèse et la signification de ces corpuscules.
Par ex. Grégoire (1907), Tischj.er (1906), Laibach (1907), Mottier (1907, 1909), Gates (igoK),
DiGBY (1904) et autres, qui ont étudié ces formations dans les noyaux somatiques et sexuels des
cellules végétales, les regardent non pas comme des représentants des chromosomes, mais seulement
comme des agglomérations chromatiques, qui déjà, d'après leur nombre inconstant et d'après leurs
dimensions et leurs formes variables, ne peuvent pas correspondre aux chromosomes.

424

V. B. de BAEHR

sont dès le commencement disposés par paires. Ensuite à partir de ces pro-
chromosomes, il se produit peu à peu une transformation du réseau nucléaire
en filaments minces qui sont donc eux aussi disposés par paires dès le
moment de leur différenciation. Les filaments minces (gamomites) ainsi
appariés se rapprochent intimement et donnent des anses pachytènes
(zygomites)

Des phénomènes du même genre sont décrits aussi par Arnold (1909)
dans la spermatogenèse de VHydrophilus piceiis. Après la dernière cinèse
spermatogoniale et la reconstruction du noyau, les chromosomes télophasi-
ques, au lieu de se décomposer en un réseau nucléaire, prennent la forme de
masses chromatiques irrégulières. Ces masses chromosomiques en nombre
diploïdique s'arrangent bientôt en paires, et chacune de ces paires donne
naissance à un geminus. Les gemini montrent naturellement le nombre
haploïdique.

Dans beaucoup d'objets, le duplicisme des anses pachytènes devient
quelque temps indistinct, mais bientôt chaque anse apparait de nouveau
double par la séparation longitudinale des paraconjugants qui la forment
(" dédoublement longitudinal - Grégoire).

Ainsi les éléments bivalents, tant au commencement qu'à la fin du stade
pachytène, montrent toujours un duplicisme net. La fente longitudinale qui
marque ce duplicisme représente la ligne de démarcation entre les conju-
gants-univalents (qui sont en train de se rapprocher ou de se séparer) et
non pas un clivage longitudinal d'éléments univalents.

L'apparition nette du duplicisme (dédoublement longitudinal) est le
début d'un stade pendant lequel les paraconjugants, manifestant une grande
indépendance l'un envers l'autre, s'entrelacent largement et forment de
longs rubans doubles, nommés par Dixgn, à cause de leur ressemblance avec
une tresse ou une chaîne, des anses strepsitènes (" diplotènes " Winiwar-
ter). En suivant l'évolution des éléments strepsitènes depuis le dédouble-
ment longitudinal jusqu'au stade de la diacinèse, on peut observer dans
beaucoup d'objets très distinctement que les gamomites, en s'entrelaçant,
s'épaississant, se raccourcissant et parfois en se clivant longitudinalement,
transforment les anses pachytènes en chromosomes diacinétiques de formes
et de dimensions variées. Nous nous arrêterons ici seulement sur les figures
diacinétiques les plus typiques.

Si les conjugantsse trouvent disposés parallèlement l'un à l'autre, les
chromosomes diacinétiques bivalents (gemini) ont l'air de bâtonnets longi-
tudinalement clivés.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 425

Si les conjugants sont collés par leurs deux bouts et séparés largement
au milieu, il en résulte des anneaux, et si en même temps ils s'entrelacent
réciproquement — des figures en huit ou des chaînes se forment.

Si les conjugants sont agglutinés seulement par un de leurs bouts et que
leurs extrémités libres divergent, nous observons des V ; ces dernières fi-
gures donnent l'impression de bivalents, dans lesquels les univalents se se-
raient unis en syndèse; seule une étude détaillée de leur genèse montre
qu'aux stades précédents c'est une paraconjugaison qui a eu lieu.

Ces figures en V peuvent élargir leur angle jusqu'à iSo°, et alors un
conjugant se trouve en ligne droite sur le prolongement de l'autre.

Les conjugants manifestent parfois déjà à la diacinèse un clivage longi-
tudinal, et cela complique beaucoup la structure des figures. Ainsi, par ex.,
dans le dernier cas que nous venons de discuter, si le clivage longitudinal
des conjugants a eu lieu, le chromosome bivalent se montre constitué de
quatre parties — "la tétrade-bâtonnet -. — Si dans une tétrade-bâtonnet
les chromosomes-filles de chaque conjugant divergent là où les conjugants
se touchent, il se forme une tétrade-croix.

Quand approche le moment de la première métaphase, les chromoso-
mes diacinétiques subissent une condensation graduelle qui, souvent, voile
leur structure compliquée : la fente longitudinale de chacun des conjugants,
de même que la lumière des anneaux, s'oblitèrent, et les chromosomes dé-
finitifs prennent peu à peu l'aspect d'éléments lisses et homogènes. Il arrive
pourtant des cas où les chromosomes hétérotypiques se disposent dans la
plaque équatoriale de la I" mitose en retenant encore leur ancienne forme si
caractéristique de croix, d'anneaux, etc., et grâce à cela on peut constater
que la I<^ cinèse de maturation accomplit la séparation des deux composants
d'un geminus diacinétique. La première mitose de maturation représente
ainsi un processus rédactionnel . Pendant la seconde mitose, les chromoso-
mes univalents se divisent équationnellement.

D'après les parasyndélistes, il faut voir la préparation à cette division
dans la fente longitudinale des conjugants à la diacinèse.

La différence fondamentale entre l'interprétation parasyndétique et
l'interprétation métasyndétique consiste dans la valeur attribuée à la fente
longitudinale de l'anse pachytène. La première interprétation voit dans
cette fente non pas un clivage longitudinal d'un chromosome, mais une
ligne de démarcation de deux chromosomes somatiques, associés latérale-
ment, le vrai clivage des paraconjugants univalents ne se produisant que

426 V. B. de BAEHR

plus tard, à la diacinèse, ou même encore seulement à l'anaphase I. Au
contraire, d'après la seconde interprétation le duplicisme de chaque anse
pachytène représente le vrai clivage le long de deux chromosomes somati-
c|ues aboutés, et par conséquent il est homologue au clivage simple des
chromosomes dans les prophases somatiques. La limite entre les deux chro-
mosomes conjugués, d'après cette interprétation, passe transversalement
au milieu de l'anse pachytène.

Pour les parasyndétistes, comme pour les métasyndétistes, il ne faut
pas attacher grande importance au point de savoir quelle position occupent,
l'un par rapport à l'autre, les conjugants qui forment un geminus aux stades
prépach3'tènes ou aux stades post-pachytènes. Ainsi, par ex., chez le Batra-
choseps, d'après Janssens, qui admet pour cette forme la paraconjugaison, la
transformation du réseau nucléaire en filaments leptotènes commence à un
pôle du noyau, et les filaments naissants sont dès leur apparition joints par
paires dans leurs extrémités (- noyau amphitène - Janssens, igo5). Au tur
et à mesure que la différenciation des autres parties des conjugants aux dé-
pens du reseau nucléaire continue, la formation des anses pachytènes
avance de plus en plus, et enfin le noyau nous montre des images typiques
du stade pachytène.

En ce qui concerne les stades post-pachytènes, d'une part les parasyn-
détistes ne contestent pas que les univalents, qui forment le geminus,
peuvent s'y trouver en association métasyndétique, s'ils restent en contact
par un de leurs bouts et divergent à l'autre extrémité, mais c'est un phéno-
mène ivco^t/tî/re; d'autre part les métasyndétistes décrivent les chromoso-
mes diacinétiques, dans lesquels les conjugants se trouvent en association
parasyndétique, notamment dans les cas où l'anse pachytène se rompt au
niveau de l'aboutement métasyndétique et où les univalents se rapprochent
parallèlement " secondary looping t-.

Ainsi, nous le répétons encore une fois, parce que c'est très important
— et que malheureusement beaucoup de cytologistes ne s'en rendent pas
encore assez compte, — pour les deux interprétations il n'y a pas d'impor-
tance à observer comment les conjugants sont associés aux différents stades
de la prophase synaptique, mais le seul point décisif est la manière dont ils
sont associés dans Y anse pachytène - ^ side to side « ou -^ end to end ».

L'initiateur de la théorie de l'association latérale de deux filaments
minces leptotènes en une anse pachytène et du clivage de cette dernière (au
stade diplotène) le long de la ligne de contact des filaments joints, est

LA SPERMATOGENÈSE ET LOVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 427

WiNiwARTER. C'est lui qui en igoi pour la première fois a proposé cette
interprétation comme la plus probable, pour expliquer l'apparition du nom-
bre réduit de chromosomes à la première prophase de maturation dans
l'ovogenèse chez le lapin et chez l'homme.

WiNiwARTER a étudié dans ses objets l'évolution des chromosomes'
seulement jusqu'au stade dyctié, et par conséquent il a laissé inexpliqué le
sort ultérieur des gémini.

Dans son travail suivant, en collaboration avec Sainmont (Winiwarter
et Sainmont, 1909), sur l'ovogenèse dans le chat, il renonce à sa première
opinion, considérant la conjugaison parallèle comme une association tem-
poraire des univalents, et, suivant en cela Vejdovsky et Bonnevie, il y voit
maintenant une fusion définitive des univalents en un nouvel élément —
le ' mixochromosome " (i).

Le schéma complet de la préréduction après la paraconjugaison dans la
forme que nous venons de donner, nous le devons, d'une part, à Grégoire
(1904) et à Berghs (1904), qui l'ont décrit pour les plantes (Alliitm fistiilo-
siim), et, d'autre part, à A. et K. E. Schreiner (1904, 1906), qui l'ont
donné pour les animaux (Myxine ghitinosa, Tomopteris oniicifoimis).

Après l'apparition des travaux de ces auteurs, toute une série de cyto-
logistes a accepté la même interprétation des processus de maturation pour
d'autres objets. Ainsi parmi les recherches des zoologistes nous devons citer
celles de Maréchal (1904, 1905, 1907) sur les poissons (sélaciens et télé-
ostéens), sur les tuniciers et sur Y Aniphioxus, celles de Lerat (i9o5) sur les
Copépodes (Cyclops sh-enuus), celles de Janssens (igo5) sur les Amphibiens
(Batrachoseps attenuatus), celles de Grégoire et Deton (1906) sur les Poly-

(i) Wassermann (igi3). rappelant que nous avons observé chez Y Aphis saliceti ( O* ) à la
prophase méiotique, à côté de deux « chromosomes », composés chacun de deux bâtonnets parallèles
largement écartés, tin chromosome simple (monosome), lâche d'affaiblir l'appui que nous avons trouvé
dans ce fait en faveur d'une conjugaison parallèle, et à cet effet l'auteur se base sur la constatation,
faite expressément par nous, que parfois à la diacinése le troisième chromosome simple montre un
faible indice d'une fente longitudinale. Cela nous semble être vraiment un malentendu, parce que
tous les parasyndétistes admettent à la diacinése la possibilité d'un clivage des conjugants univa-
lents, et c'est de cela que dérive le nom de » tétrades » qu'on aime à donner aux chromosomes diaci-
nétiques. Les Schreiner ont décrit, même encore avant la diacinése, le clivage dos éléments univa-
lents conjugués. D'ailleurs, Wassekmann cite seulement notre mémoire de igog. Dans cette publication,
comme dans celle de igoS, nous avions pour but d'exposer surtout les relations qui existent entre
le sexe et les chromosomes, et comme l'existence d'une pseudoréduction nous apparaissait avec une
évidence complète, nous ne nous sommes pas arrêté en détail sur le moie de l'apparieraent des
chromosomes homologues. C'est dans le mémoire de igio et surtout dans celui de 1912 que nous
avons abordé à fond cette question, en nous basant sur un plus grand nombre de figures C'est
ce travail qu'aurait dû discuter Wassermann.

GO

428 V. B. de BAEHR

chètes (Ophryotrocha pu erilis), celles de A. et K. E. Schreiner (igo5-igo8)
sur les poissons (Spiiiax niger), sur les Amphibiens (Salamatidra inaculosa),
sur les Polychètes (Ophryotrocha puerilis) , celles de Schleip (igoô, iqoj]
sur les Planaires (Plauaria gonocephala), celles de Baehr (igiS) sur les
Archiannélides (Saccocirrus majorj, et de beaucoup d'autres.

Même pour les insectes, où la métasyndèse, décrite par Montgomery
et confirmée par de nombreuses recherches en Amérique et en Europe,
semblait être tout à fait sûre, on vit paraître ces derniers temps des travaux
qui plaident en faveur d'une préréduction après paraconjugaison ; Baehr
(igoS- igi2) l'admet pour les pucerons [Aphis saliceti), Debaisieux (igog)
pour les Coléoptères (Dytiscits luarqinalis), Montgomery lui-même (191 1)
pour les Hémiptères hétéroptères (Eiischistits) et Wilson (igi2), quoique
avec certaines réserves, aussi pour les Hémiptères hétéroptères (Oncopeltus
fascialus et Liganis bicrucis). Parmi les botanistes le schéma de Grégoire
(igo4— igio)a été accepté par les savants suivants: Rosenberg (igo5 — igog),
Strasburger (igo5 -igog), Miyaké (igo5), Yamanouchi (igoB, igio),
LiTARDiÈRE (igi2), et d'autrcs pour différentes plantes.

6. Parthénogenèse et préréduction après paraconjugaison.

L'obstacle le plus sérieux contre l'adoption et la généralisation du type
parasyndétique de la préréduction se trouvait jusqu'il y a quelque temps
dans les conditions chromosomiques décrites pour la parthénogenèse. Com-
me on sait, il paraissait tout à fait établi que, dans la plupart des formes
parthénogenétiques, les œufs subissent seulement la j7re772/(?re cinèse de ma-
turation et retiennent le nombre complet de chromosomes. Ces faits, d'une
part, étaient utilisés par les partisans de la postréduction comme une con-
firmation éloquente de leur thèse générale; d'autre part les mêmes faits ont
forcé beaucoup de préréductionnistes à faire des concessions. Ainsi, même
A. et K. E. Schreiner, fondateurs de la théorie de la préréduction après
paraconjugaison, chez les animaux, quoiqu'ils attribuent d'une façon tout à
fait catégorique à la I^cinèse de maturation le rôle d'une division réduction-
nelle chez toutes les formes à reproduction sexuelle typique, admettent
néanmoins pour les œufs parthénogenétiques la postréduction et ajoutent
que celle-ci généralement ne parvient pas à se réaliser, la H^ cinèse étant
abortive. -^ Wlihrend das "Vorkommen dieser sog. •' Postreduktion - bei kei-
nem Objekte mit typischer geschlechtlicher Fortpflanzung als unwiderlegbar
bewiesen angesehen werden kann, scheint bei mehreren sich parthenogene-

LA SPERMATOGENESE ET LOVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 429

tisch entwickelnden Eiern die I. Reifungsteilung eine ^quationsteilung zu
sein, wâhreiid die gewohnlichi abortive IL Teilung die Reduktion bewirlit «
(igo6, p. 54).

Une autre difficulté plus grave encore, fournie par la parthénogenèse
contre l'acceptation du schéma parasynaptique, consistait dans le fait qu'à
la prophase de maturation dans les œufs parthénogenétiques, cjui expulsent
seulement un globule polaire et retiennent le nombre somatique de chro-
mosomes, certains auteurs (Kûhn, Cladocem, Schleip, OstracodaJ ont dé-
montré des structures identiques à celles qui caractérisent la prophase
synaptique des œufs qui exigent la fécondation, et qui dans ce dernier cas
s'interprètent en faveur de la paraconjugaison (leptotène, zygotène, pachy-
téne, diplotène ou strepsitène). — Cette ressemblance empêche de regarder
ctes aspects comme une expression morphologique des processus qui mènent
à la réduction de la chronmtine. Les adversaires de l'association parallèle
des chromosomes homologues s'appuient là-dessus pour condamner défini-
tivement cette interprétation (Goldschmidt, igo8, Kemnitz, igiS, "Was-
SERMANN, igi3).

Nos recherches sur l'ovogenèse dans les générations parthénogenétiques
de VApliis palmœ enlèvent toutes ces difficultés. Les structures synaptiques
qu'on y observe à la prophase conduisent vraiment à la formation de gé-
mini caractéristiques, en nombre réduit, mais à la diacinèse ces gémini bi-
valents se décomposent en leurs composants univalents, et par cette sorte
de r déconjugaison - le nombre somatique de chromosomes se rétablit. Puis
vient la période d'accroissement des oocytes, qui est suivie de l'unique cinèse
de maturation, pendant laquelle les univalents se divisent équationnelle-
ment.

La décomposition des chromosomes diacinétiques doubles en un nombre
diplo'ïdique de chromosomes simples peut être comparée à la première
cinèse méiotique dans les cellules sexuelles mâles ou dans les œufs d'hiver,
où se réalise, comme il est établi, une semblable dissociation des chromo-
somes homologues qui forment les gémini. La différence principale consiste
seulement en ceci, que dans les œufs parthénogenétiques de VAphis paUmv
fait défaut le mécanisme pour transporter aux pôles opposés les univalents
dissociés et aussi pour diviser le corps protoplasmique de la cellule; — la
conséquence en est le retour au nombre diplo'ïdique de chromosomes
et la formation pendant l'ovogenèse d'un unique polocyte. Après la décom-
position des chromosomes diacinétiques en leurs composants, c'est-à-dire

•43o V. B. de BAEHR

après l'acte de la déconjugaison des chromosomes homologues, l'oocyte, en
ce qui concerne son degré de maturation chromatique, doit être envisagé
comme un oocyte de second ordre. Il en résulte que la période du grand
accroissement des oocytes dans l'ovogenèse parthénogenétique des pucerons
a lieu à l'intercinèse, et que la seule mitose de maturation qui s'y réalise
correspond à la seconde division de maturation et non pas à la première (i).

Comme nous voyons, le cours de l'ovogenèse dans les générations par-
thénogenétiques de Y Aphis palmœ s'harmonise bien avec nos opinions sur
le mécanisme de la réduction au moyen de la paraconjugaison des chromo-
somes homologues au stade leptotène, de la déconjugaison de ces élém.ents
à la première cinèse de maturation (division réduction nelle) et du clivage
de ces univalents dissociés en moitiés longitudinales à la seconde cinèse
(division équationnelle).

Il faut d'ailleurs s'attendre à ne pas rencontrer dans l'ovogenèse de tous
les œufs parthénogenétiques les stades caractéristiques de la vraie prophase
synaptique. Ces stades, destinés dans les cas normaux à réaliser la réduc-
tion chromatique, ont perdu dans les œufs parthénogenétiques, qui doivent
retenir le nombre normal de chromosomes, toute leur raison d'être et repré-
sentent seulement une réminiscence phylogenétique : cela s'accorde d'ail-
leur avec l'opinion acceptée généralement que la parthénogenèse chez les
animaux est dérivée du mode sexuel de reproduction.

Étant donnée la grande plasticité des processus cytologiques, l'œuf par-
thénogenétique, pour atteindre un si grand but que le maintien dans son
noyau des deux séries d'éléments équivalents, peut, pour ainsi dire, s'enga-
ger dans différentes voies. Il peut petit à petit se délivrer des traditions ou
tout de suite -■ brûler les étapes ". En tout cas théoriquement nous devons
attendre de trouver dans les différents œufs parthénogenétiques des degrés
différents de la survivance des réminiscences synaptiques. Ainsi par ex. les
oocytes de V Aphis palmœ montrent encore à la prophase de maturation des
tendances hétérotypiques bien nettes, et ce n'est qu'à la diacinèse que se
fait par dissociation des gémini en leurs composants le retour à la mitose
somatique. Au contraire, c'est la disparition déjà complète des traditions
synaptiques qu'on observe chez les Pemphigines, en particulier chez le
Pemphigiis piriformis, connu par sa fécondité énorme. Dans ce puceron
les processus de l'ovogenèse se déroulent excessivement vite, et, malgré des

(i) Dans Tovogenèse des œufs qui exigent la fécondation, la seconde cinèse de maturation
représente la dernière étape des processus de maturation.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 43l

études très minutieuses, nous n'avons même pas trouvé trace des aspects
caractéristiques de la propliase syiiaptique.

Beaucoup d'auteurs, surtout Boveri (i8go) et Korschelt et Heider,
(igo3), ont marqué les grandes difficultés théoriques que présentent à leur
avis les cas de parthénogenèse à une seule mitose de maturation, si on tient
compte du fait qu'ici ce n'est pas l'œuf mur définitif qui commence le dé-
veloppement embryologique, mais une cellule sexuelle de la génération cel-
lulaire antérieure — Toocyte de second ordre.

L'interprétation que nous avons donnée des structures observées dans
l'ovogenèse de VAphis palmcv nous semble enlever cette difficulté. En effet,
la seule cinèse de maturation que nous y trouvons ne correspond pas à la
première, mais à la seconde cinèse (la dernière étape dans les processus de
maturation); la première cinèse (réductionnelle), qui manque ici, a son équi-
valent dans la déconjugaison des chromosomes du noyau diacinétique.

Nos lecteurs trouveront une discussion plus complète de cette question
dans notre mémoire » Recherches sur la maturation des œufs parthénoge-
nétiques dans VAphis palmœ •-, qui est prêt pour l'impression (i).

Il faut encore ajouter qu'avec les relations chez V Aphis palmœ shar-
monisent très bien les données de Meves sur la spermatogenèse de
l'abeille {Apis mellifica).

Quoique Meves lui-même, en adversaire militant de la théorie de
l'individualité des chromosomes, nie catégoriquement l'existence d'une dif-
férence quelconque entre les mitoses de maturation et les mitoses somati-
ques, néanmoins ses résultats, à notre avis, étayent solidement à la fois la
théorie de l'individualité des chromosomes et le schéma de réduction admis
par nous — paraconjugaison et préréduction.

Les faux-bourdons, comme on sait, se développent d'œufs non fécondés
qui ont subi deux cinèses de maturation et possèdent à cause de cela seule-
ment la moitié du nombre normal de chromosomes.

Pour nous, qui croyons à l'individualité des chromosomes et admettons
la préréduction, nous ne pouvons vraiment, sans construire des hypothèses
additionnelles, nous représenter pour la spermatogenèse de cette forme la
possibilité d'une cinèse de maturation qui serait homologue de la première
dans les cas normaux, puisqu'elle devrait, d'après notre schéma, être ré-

(i) Les résultats sur Tovogenèse de VAphis palmœ ont été publiés en polonais dans les Annales
de la Société des Amis des Sciences, à Vilno, igiS — igi8, vol. 6 Le mémoire en français se trouve
actuellement à l'impression dans La Cellule, vol. XXX (Note de l'auteur, 25-7-1920.)

432 V. B. de BAEHR

ductionnelle. Et voilà pourquoi, étant donné que le nombre haploïdique
de chromosomes se trouve dans les cellules somatiques et dans les sperma-
togonies, il est superflu que dans les spermatocytes des faux-bourdons le
nombre se réduise. D'autre part, pour nous le mécanisme même de la vraie
division réductionnelle n'est concevable qu'en présence de deux séries de
chromosomes homologues; or, ici, nous n'avons qu'une série de chromoso-
mes univalents qui n'ont pas de partenaires pour se conjuguer et former
des gémini.

Les très intéressantes recherches de notre adversaire Meves, sur la
spermatogenèse dans l'abeille, confirment complètement ces considérations
et conclusions théoriques. La première cinèse de maturation y est suppri-
mée ou plutôt elle se limite, après certains préparatifs, à l'expulsion seule-
ment d'un petit globule protoplasmique, sans que la division du noyau ait
lieu (i).

Dans les générations parthénogenétiques de r^/»Az'5/7a/?«^r, l'œuf, en
changeant juste à temps le mécanisme de la pretuicre mitose de maturation,
empêche la réduction chromatique et par l'acte de la déconjugaison rétablit
le nombre diploïdique de chromosomes. L'œuf parthénogenétique garde
ainsi les relations chromosomiques telles qu'elles ont été créées au commen-
cement du cycle de la reproduction par la fécondation de l'œuf d'hiver et
assure le développement normal des formes parthénogenétiques de généra-
tion en génération.

Dans la spermatogenèse de VApis mellifica la première cinèse de matu-
ration, réductionnelle, n'existe pas pour les noyaux des spermatocytes. Ces
noyaux en subissant seulement la seconde cinèse, équationnelle, garantis-
sent aux spermatozoïdes le nombre haploïdique de chromosomes.

De telle manière, dans les deux cas de parthénogenèse que nous ve-
nons d'analyser, la régulation des relations chromosomiques, si nécessaire
pour sauver la viabilité des cellules sexuelles, se montre liée avec la pre-
mière cinèse de maturation. Cela est tout à fait d'accord avec nos notions
des processus méiotiques et apporte, pour sa part, une confirmation de la
thèse que, dans les conditions normales, c'est la première cinèse de matura-
tion et non pas la seconde qui est une division réductionnelle, prédestinée
à séparer les chromosomes conjugués.

{ij De semblables relations ont été aussi décrites pour les Guêpes et les Fourmis par Meves
et DuESBERG, Lams, Cravata, Doncaster, Armbkustek.

La spermatogenèse et l'ovogenèse chez le saccocirrus major 433

C. La théorie de la chiasmatypie.

Le type de la piéréduction après paraconjugaison a reçu une certaine
modification de la part de Janssens (190g), dans sa théorie de la chiasma-
typie.

D'après Janssens, les principales raisons qui l'ont engagé à reviser son
opinion antérieure (igoS) sur le mécanisme de la réduction et à se remettre
à une étude plus soignée des cinèses méiotiques, ont été les suivantes.

1. Pourceuxqui admettent le schéma hétéro-homéotypique, il est bien
difficile d'assigner une signification aux entrelacements si caractéristiques
et si généraux des conjugants aux stades strepsitènes et diacinétiques. Si
cela ne doit aboutir qu'à séparer deux chromosomes, c'est un mince résul-
tat pour des eff"orts de plusieurs semaines et parfois de plusieurs mois.

2. Une autre énigme qui se dresse devant ces auteurs, c'est la pré-
sence, pendant la maturation, de deux cinèses au lieu d'une seule, ce à quoi
on devrait s'attendre, si l'on admet qu'une seule de ces deux mitoses effectue
la séparation des conjugants. La seconde cinèse parait donc être une super-
fétation. D'autre part, est-ce qu'il ne serait pas plus raisonnable de conclure
que si pendant la période de maturation une cellule sexuelle donne quatre
y tides " et pas deux, c'est que ces derniers doivent avoir chacun quelque
chose de particulier, et que la seconde cinèse prend part, elle aussi, à la
répartition diflerentielle de la substance chromatique.

3. La théorie de la paraconjugaison et de la préréduction donne une
explication intéressante de la loi de Mendel, mais elle reste incomplète,
parce qu'il y a des cas où le nombre de caractères allélomorphiques com-
plètement dissociables dépasse celui des paires de chromosomes distincts.

De longues et minutieuses recherches sur le Batrachoseps atteiuiatus et
sur diverses espèces de tritons ont amené Janssens à la conclusion sui-
vante.

Aux stades strepsitènes et diacinétiques les chromosomes conjugués, en
s'entrelaçant plus ou moins intimement, se pénètrent mutuellement : aux
points de croisement ils se brisent transversalement et les segments, en
s'échangeant, se resoudent en chromosomes nouveaux. Les chromosomes,
qui se séparent pendant la L cinèse méiotique, ne sont plus identiques aux
univalents qui sont entrés en conjugaison. — De plus, dans les amphi-
biens étudiés par Janssens, les paraconjugants univalents qui forment un
bivalent diacinétique sont clivés longitudinalement. Il arrive souvent

434 V. B. de BAEHR

qu'aux points de croisement, la fente transversale coupe dans chaque
partenaire seulement une seule moitié longitudinale, et de cette manière
l'échange des segments et la soudure secondaire se produisent non pas
entre les parties de deux moitiés longitudinales de chaque univalent en-
roulé, mais ces processus sont limités seulement aux parties d'une moitié
longitudinale de chaque conjugant.

Dans les cas où les partenaires échangent entre eux seulement les
segments d'une de leurs moitiés, les deux mitoses de maturation, en ce qui
concerne le même chromosome définitif, sont en partie réductionnelles, en
partie équationnelles. Voilà pourquoi se produisent deux cinèses de matu-
ration et non pas une seule.

De plus, il s'ensuit que quatre spermatozoïdes issus d'une même sper-
matogonie peuvent être dans leur constitution chromatique loiis différents.

Enfin, la théorie de la chiasmatypie, admettant un tel échange des
segments entre les chromosomes conjugués, donne une explication facile de
ces cas mendéliens, où il y a un plus grand nombre de caractères allélo-
morphiques qu'il n'y a de paires de chromosomes homologues.

Sans nous hasarder à discuter les observations de Janssens, qui nous
paraissent bien précises, nous nous permettons cependant de faire quelques
remarques au sujet des raisons théoriques que l'auteur fait valoir contre les
théories actuelles et en faveur de la chiasmatypie.

Comme nous l'avons dit plus haut, Janssens, se basant sur le fait que
la maturation comporte deux cinèses par lesquelles une gonie donne 4
tides (dans l'ovogenèse 3 abortives), trouve insuffisant a priori de se borner
à admettre le dimorphisme de ces derniers, comme le font la plupart des
cytologistes modernes, mais dit qu'on doit s'attendre à trouver un tétra-
morphisme, selon le nombre 4 de cellules tidaires.

Or, chez les formes à hétérochromosomes (les insectes, les vers, les
vertébrés), c'est le dimorphisme morphologique des spermatozoïdes qui
existe - dimorphisme qui est en relation causale avec le dimorphisme des
sexes.

Dans la spermatogenèse des Aphides, où devraient se former aussi deux
sortes de spermatozoïdes, les uns munis, les autres dépourvus de l'hétéro-
chromosome, comme on sait, les petits spermatocytesde 11^ ordre, dépourvus
d hétérochromosome et de mitochondries, dégénèrent avant de donner les
spermatides; seuls les grands spermatocytes de 11^ ordre avec l'hétérochro-
niosome et avec les mitochondries sont capables d'atteindre leur dévelop-

La spermatogenèse et l'ovogenèse chez le saccocirrus major 435

pement définitif et de fournir des éléments fonctionnels qui, en fécondant
les œufs, donnent toujours ;(;/ seul et même sexe, à savoir des femelles.

En d'autres termes, dans les cas où d'une spermatogonie se forment
quatre spermatozoïdes fonctionnels, on distingue morphologiquement deux
sortes de ces éléments (i). Selon les deux classes des spermatozoïdes, lesœufs
fécondés donnent ici l'un ou l'autre sexe. Au contraire, dans les formes où une
spermatogonie produit seulement deux spermatozoïdes fonctionnels, parce
qu'après la I^ cinèse de maturation une sorte de spermatocytes de II'' ordre
dégénère, tous les œufs fécondés donnent toujours le même sexe (cf ). Il en
résulte que des deux cinèses de maturation dans la spermatogenèse une seu-
lement est responsable du dimorphisme et l'autre laisse intacte la constitu-
tion donnée et multiplie seulement équationnellement le nombre de cellules
sexuelles définitives.

Ce que nous avons dit concerne seulement les hétérochromosomes et
les déterminants sexuels, mais par analogie nous pouvons admettre la
même chose pour les autres chromosomes et pour les autres caractères men-
déliens. Tout cela nous oblige à une certaine réserve envers les ^ à priori "
théoriques que Janssens élève contre le dimorphisme et qui lui semblent
exiger le tétramorphisme pour les cellules sexuelles définitives.

D'autre part, comme nous l'avons déjà mentionné, nous sommes d'ac-
cord avec Janssens pour admettre que pendant la prophasc hétérotypique
les composants d'un géminus peuvent s'influencer réciproquement, échanger
leurs substances, et que de cette façon les chromosomes, qui se séparent à
la mitose réductionnelle, ne sont plus tout à fait identiques à ceux qui
sont entrés en conjugaison.

Morgan et ses élèves ont admis, de leur côté, une sorte de chiasmaty-
pie, à vrai dire assez différente de celle qu'a proposée Janssens. Mais
comme l'interprétation de Morgan ne fait guère appel à des constatations
cytologiques et se fonde presque exclusivement sur des raisonnements très
subtils à propos d'expériences mendéliennes, nous ne sommes pas à même
de discuter en ce moment l'intéressante hypothèse de l'éminent professeur
de New-York.

(i) Généralement dans la spermatogenèse le dimorphisme chromosomique commence depuis
la le cinèse de maturation. Il y a pourtant certaines formes, chez lesquelles, pour les hétérochromo-
somes, la le cinèse est équationnelle et la Ile réductionnelle. Naturellement cela ne change rien au
fait même du dimorphisme des cytes.

Gl

436

V. B. de BAEHR

D Interprétation de la réduction numérique par les adversaires
de la théorie de l'individualité des chromosomes.

Pour les cytologistes qui nient l'individualité des chromosomes, la
question de savoir comment pendant la maturation des cellules sexuelles
s'accomplit la réduction du nombre de chromosomes n'existe pas, au moins
dans le sens que nous attribuons à ce problème. D'après leur opinion, les
chromosomes de la dernière cinèse goniale, en se dissolvant en un réseau
nucléaire homogène, perdent, comme dans chaque noyau en repos, leur
individualité. A la prophase hétérotypique qui suit, la chromatine du noyau
s'organise non pas en un nombre normal d'éléments, mais en un nombre
réduit de moitié; — c'est là, dit-on, un fait avec lequel nous devons comp-
ter, mais à l'explication duquel il ne faut pas même penser, parce qu'il est
inexplicable. En d'autres termes, à la I^ prophase de maturation, il n'y a ni
conjugaison, ni copulation de chromosomes homologues, mais formation
d'un spirème hétérotypique qui, d'après son origine et d'après sa significa-
tion, est' identique à n'ir.:portc quel spirème somatique, mais se tron-
çonne en un nombre réduit de segments; de cette façon, la réduction numé-
rique des chromosomes se réalise, dés ce stade, définitivement.

Dans cette interprétation, le duplicismc des éléments de la prophase
hétérotypique est complètement homologue au clivage précoce des chromo-
somes d'un noyau somatique, et il en résulte que la I^ cinèse de maturation
aussi bien que la 11'= séparent non. pas des chromosomes entiers, mais de
vraies moitiés longitudinales.

Les plus sérieux défenseurs de cette interprétation des processus ma-
turatifs sont à l'heure actuelle Fick, Meves et Duesberg.

Nous nous arrêterons ici brièvement sur les arguments dont ils ap-
puient leur thèse générale, qu'en principe il n'y a pas de différence entre
les mitoses de maturation et les mitoses somatiques.

Fick (1907), qui a étudié la transformation du réseau nucléaire en
chromosomes hétérotypiques dans le Tomopteris onisciformis sur les pré-
parations elles-mêmes qui avaient servi à A. et K. E. Schreiner, pour
établir la préréduction après paraconjugaison, a obtenu les résultats sui-
vants. Les aspects, où les parasyndétistes voient une association parallèle
de chromosomes, n'ont pas du tout cette portée. L'analj'se microscopique
lui a montré que le parallélisme des minces filaments chromatiques (lepto-
nèmes) est seulement accidentel ou apparent; qu'il est impossible d'établir

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRKUS MAJOR 437

leur nombre et, ce qui est le plus important, qu'un ruban pachytène („ Chro-
matinbalken ") peut provenir non pas seulement de deux filaments minces,
comme l'exige la paraconjugaison, mais de plusieurs filaments de ce genre.
" Der unbefangene Beobachter wird aus den Praparaten und Bildern, glaube
ich, nur den Eindruck gewinnen konnen, dass sich aus dem chromatischen
Netzgewirr an der Polseite des Kernes auf der Grundlage feinster paralleler
oder miteinander verilochtener Chromatinfâdchen ^gespaltene- sich all-
mahlich verdickende Chromatinbalken anlegen. Freilich ist eine solche
Balkenbildung aus miteinander verschmelzenden Chromatinfibrillen bisher
sonst noch nicht beschrieben. Aber dièse Darstellung ist eine einfache
Beschreibung der unmittelbaren mikroskopisclien Beobachtung, wàhrend
die Darstellung als eine -^ Konjugation vorher selbstàndiger Chroniosomen
nur eine unbeiviesene und wohl einstjveilen unbeiveisbare Annahme ist. —
Yon diesen Chromatinbalken lâsst sich dann spdtcr nachweisen, dass sic
nur in der halben Normalzahl vorhanden sind. - (FicK, 1907, p. 64.)

Les parasyndétistes, par la plume de A. et K. E. Schreiner (igo8)
et Grégoire (igio), n'ont pas laissé sans réponse cette criticjue et ils in-
sistent avec force sur les points suivants.

1. L'origine des filaments leptotènes aux dépens des chromosomes télo-
phasiques de la dernière cinèse goniale peut être considérée pour beaucoup
de formes comme complètement démontrée.

2. La formation de chaque anse pachytène implique la participation
non pas de n'importe quel nombre de filaments, mais toujours de deux
filaments seulement.

L'interprétation de Meves (1907) est un peu différente de celle de
FicK. Meves est d'ailleurs un adversaire tout aussi décidé de la théorie de
l'individualité des chromosomes et partant de toutes les hypothèses con-
cernant leur conjugaison ou leur copulation. Il prétend que tous les aspects
qui sont interprétés par les cytologistes modernes dans le sens de la conju-
gaison ou de la copulation des filaments chromatiques, ne représentent rien
d autre qu'un clivage très précoce des chromosomes, identique à celui des
chromosomes somatiques. D'après Meves, la réduction du nombre de chro-
mosomes à la première prophase de maturation résulte simplement du fait
que le spirème du noyau, ayant la même valeur qu'un spirème somatique,
au lieu de se couper en un nombre normal de chromosomes, se tronçonne
en un nombre égal à la moitié du nombre normal. Chaque élément subit
aussitôt une division longitudinale, qui est même déjà préformée dans le
spirème. Aucune des deux mitoses de maturation ne dissocie des chromo-

438 V. B. de BAEHR

somes entiers, mais toutes les deux séparent des moitiés longitudinales
authentiques. En ce qui concerne la réduction de la quantité de chro-
matine, elle résulte de ce que les deux cinèses de maturation se succèdent
rapidement et sans un vrai stade de repos, si bien que les noyaux n'ont pas
le temps de doubler leur quantité de chromatine. Dans sa dernière publica-
tion sur cette question, Meves (igii) souligne qu'il s'en tient encore à son
ancienne conception de la réduction, c'est-à-dire à une conception indé-
pendante de la théorie de l'individualité des chromosomes et semblable
à celle de O. Hertwig (i8go) et de Brauer (i8g3) (i).

Quoique Meves avoue maintenant qu'on ne peut pas nier la possibilité
de considérer le duplicisme présenté par les chromosomes au début de la l'^ci-
nèse méiotique comme n'étant pas homologue de la fente longitudinale des
chromosomes somatiques et comme indiquant, au contraire, la présence de
deux chromosomes conjugués, néanmoins il reste sceptique à l'égard d une
telle interprétation. ^ Ich gebe sogar zu, dass dies eine intéressante Deu-
tung ist, môchte aber daran festhalten, dass es sich eben um weiter nichts
als um eine Deutung handelt. " Un peu plus loin, finissant son mémoire et
sa discussion sur l'hypothèse de l'individualité et de la conjugaison des
chromosomes, il écrit : - Die Geschlechtszellen bezw. ihre Kerne haben
nach meiner 'Vorstellung (1907), die besondere Eigenschaft ererbt bcim
Eintritt in die "Warlisturnsperiode nur die halbe Zahl von Chromosomen
auszubilden « (Meves, igii, p. 296).

Dans les objets où le nombre de chromosomes somatiques est ^a/r, nous
trouvons à la première prophase de maturation les chromosomes en nom-
bre réduit et tous doubles. A ne considérer que ces aspects, il n'y a rien cjui
permette de trancher entre nous et Meves. Car pour lui, comme pour
nous, dans le cas d'un nombre pair, tous les « chromosomes " doivent, à la
diacinèse, montrer deux branches.

Il y a, outre cela, un autre point où ces deux façons de voir sont d'ac-
cord. En effet, Meves (1908) admet actuellement pour certains objets, au
début de la première prophase, au moment où les chromosomes se dégagent
du réseau, la possibilité de l'apparition de moitiés longitudinales sœurs
tout à fait isolées l'une de l'autre, » wirkliche Fadenpaare ".

Mais le cas de X Aphis saliceti, dans lequel le nombre de chromosomes
des individus mâles est impair, nous a permis, dès la publication du dernier
travail de Meves (igii), de soumettre à une critique, que nous estimons

(i) Les opinions de O. Hektwig et de Brauer sur les phénomènes de maturation des cellules
sexuelles n'ont plus à l'heure actuelle qu'un intérêt historique, et nous ne nous y arrêterons pas.

LA SPERMATOGENÈSE ET l'oVOGENÈSE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 439

utile de rappeler, l'interprétation de l'auteur, en nous basant principale-
ment sur nos recherches de la spermatogenèse dans cet animal. Dans ce
puceron, le sexe mâle se caractérise par un nombre 5 de chromosomes
somatiques, et ceux-ci sont tous presque de même taille. Ce sont ces deux
circonstances qui nous ont fait espérer de trouver ici dans les structures
prophasiques et dans le cours des divisions méiotiques des indications
morphologiques très précieuses au sujet de la solution de la question :
paraconjugaison et préréduction (Grégoire, Schreiner) ou la négation de
tout cela, le duplicisme somatique et une simple dissociation des moitiés
longitudinales authentiques (Meves)?

H

I J K L

Aphis saliceti. A Cellule somatique d'un embryon raàle. Plaque équatoriale — B — L Quelques stades
delà spermatogenèse. — B Spermatogonie. Plaque équatoriale. — G Spermatocyle I. — Prophase l.
Deux gémini et un chromosome simple (hétérochromosome). — D Fin de la prophase L — E Mé-
taphase I. — F, G, H Anaphase 1. — I Seconde cinèse de maturation Fin de la prophase II.
— J Métaphase II. — K, L Anaphase II.

Pour ceux qui admettent la première façon de voir, le nombre imi)air
de chromosomes (5) dans les spermatogonies ne permet pas de s'attendre
à trouver, à la I*^ cinèse méiotiquc. le duplicisme de tous les éléments, mais
seulement le dualisme des deux gémini bivalents; en admettant la seconde
voie, au contraire, il faut prévoir à la prophase I la dualité de t(jus les chro-

440 V. B. de BAEHR

mosomes sans excepliou. Ici les aspects eux-mêmes de la diacinèse suffisent
à trancher, sans compromis possible, entre la conjugaison chromosomique
et le caractère équationnel de la dualité chromosomique diacinétique. Au
contraire, dans les formes pourvues d'un nombre pair de chromosomes so-
matiques, comme nous l'avons dit plus haut, les deux interprétations peu-
vent comporter aux mêmes stades de maturation des dualismes semblables
de tous les éléments et une parfaite ressemblance de structure.

Nous voudrions insister davantage sur ce point, parce que jusqu'à
présent certains cytologistes n'apprécient pas suffisamment, à notre avis,
l'importance de ces considérations théoriques pour la solution du problème
du mécanisme de la réduction.

L'hypothèse de la paraconjugaison et de la préréduction exige que
chez VAphis saliceti les 5 chromosomes somatiqucs, qui, après la dernière
mitose goniale, entrent dans le noyau quiescent, donnent à la première pro-
phase de maturation deux chromosomes doubles bivalents et un simple,
univalent. A la première cinèse, qui représente un processus réductionnel,
se réaliserait seulement la séparation des chromosomes entiers conjugués à
la prophase, et à cause de cela le chromosome simple univalent devrait
rester indivis.

Au contraire, l'interprétation de Meves, qui nie l'individualité des
chromosomes et leur conjugaison, en affirmant que le duplicisme des élé-
ments hétérotypiques est homologue du simple clivage d'une mitose soma-
tique, demande qu'à la première prophase méiotique les chromosomes qui
apparaissent en nombre réduit soient tous divisés longitudinalement et
qu'ils se comportent à la métaphase et à l'anaphase également tous comme
dans n'importe quelle division somatique (i).

"Voyons maintenant comment ces deux interprétations supportent l'exa-
men, et comment les données morphologiques répondent aux exigences
théoriques. Déjà dans notre première publication sur les Aphides en igo8
nous avons démontré que dans la spermatogenèse de VAphis saliceti la pro-

(i) Si nous exprimons par le chiffre i5 toute la masse chromosomique du noyau sperma-
tojjonial. si, en outre, nous tenons compte du fait que tous les cinq chromosomes chez VAphis
saliceti sont presque de la même taille, nous pourrions dire que chaque chromosome spermatogonial
vaut i5 : 5, c'est à-dire 3. Les trois chromosomes qui apparaissent à la Ii= prophase de maturation
au lieu (les cinq de la dernière télophase goniale, doivent, selon l'hypothèse de la paraconjugaison.
présenter la formule suivante : (3-j-3) -|- (3-t-3) -|- 3 ^ i5.

Au contraire, la formule la plus simple et la plus vraisemblable pour Meves devrait être,
pensons-nous, 5 + 5 -j- 5 = i5. c'est-à-dire tous les chromosomes hétérotypiques tout à fait égau.s:
dans leur longueur, leur épaisseur et leur structure (v. notre mémoire de 1912, p. 417).

LA SPERMATOGENKSE ET L OVOGENESE CHEZ LE SACCOCIRRUS MAJOR 44Î

phase synaptique se caractérise par deux chromosomes doubles et un simple
(l'hétérochromosome). Ce dernier ne se divise pas à la métaphase I, mais
passe tout entier à un pôle prédestiné. Il en résulte que, sous ce rapport,
l'hypothèse de la paraconjugaison et de la préréduction s'accorde bien avec
les faits, tandis que la conception de Meves se montre impuissante à les
expliquer.

Dans notre mémoire de 1912, p. 41g, nous avons exprimé à ce propos
les réflexions suivantes : -^ Si la prophase et la métaphase de la première
mitose de maturation, d'après Meves, sont homologues des mêmes stades
dans les cellules somatiques, si les chromosomes en nombre réduit doivent
se comporter comme les chromosomes somatiques en nombre normal, si le
duplicisme des éléments chromosomiques à la première prophase doit être
considéré comme une fente précoce homologue de celle qu'on trouve dans
les prophases somatiques, quand les chromosomes se dégagent du réseau,
si tout cela est vrai, pourquoi un des trois chromosomes dans notre objet
ne montre-t-il pas, à la première prophase de maturation, une fente longitu-
dinale qui présenterait le même aspect que celle des deux autres chromoso-
mes et pourquoi, à la métaphase qui suit, reste-t-il indivis? L'interprétation
de Meves échoue en ce point parce que, en toute hypothèse, Meves doit
accorder à ce petit chromosome la valeur (ï ini chromosome somatique qui
se forme aux dépens du réseau après le stade du repos. Au contraire, si
nous admettons l'hypothèse de la parasyndèse pseudoréductionnelle avec
hétérohoméotypie (Grégoire), c'est-à-dire que la première cinèse de matu-
ration est une division où des chromosomes entiers se distribuent aux
spermatocytes de II<^ ordre, la seconde division étant une simple division
équationnelle qui dissocie les moitiés longitudinales des chromosomes, tout
se trouve en harmonie complète -.

Makowlany, district de Sokolka.
POLOGNE.
Avril 1Q14.

Ayant été forcé par la guerre de retarder si longtemps la publication
du présent mémoire, nous comptions y ajouter un appendice sur tous les
travaux importants cjui ont paru dans ces derniers temps. Depuis 1914 nous
nous sommes trouvé dans des conditions qui rendaient un tel travail tout

44^

V. B. de BAEHR

à fait impossible, et c'est seulement cette année, dans le laboratoire hospi-
talier du Professeur Grégoire, que nous avions espéré accomplir cette tâche.
Les événements très graves qui se déroulent maintenant dans notre pays
nous forcent cependant à abandonner pour le moment le travail commencé
et à quitter Louvain. Nous n'hésitons pas à publier ce mémoire tel qu'il
est, parce que l'étude, quoique incomplète, des publications récentes nous
permet de croire qu'il n'a pas perdu encore son actualité et qu'au contraire
beaucoup de recherches nouvelles confirment nos thèses principales.

Nous profitons de l'occasion pour exprimer notre grande reconnaissance
à Monsieur le Professeur Grégoire pour le cordial accueil qu'il nous a fait
et le vif intérêt qu'il a porté à notre travail, ainsi que pour son souci de
nous donner des indications précieuses et de nous procurer la littérature
nouvelle, si difficile à atteindre dans le temps actuel.

Louvain, Institut de Botanique.
2 S juillet 1Ç20.

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and the Phenomena of Synapsis; Journ.
Exper. Zool,, vol. 5.

. Ueber Reduktionsteilung; Sitzungsber. Koenigl.
Preuss. Akad. Wiss., vol. 18.

: Typische und allotypische Kernteilung; Jahrb,
f. wiss. Bot., vol. 42.

: Histologische Beitrage. VIII. Zeitpunkt der
Bestimmung des Geschlechts, Apogamie, Par-
thenogenesis und Reduktionsteilung. Jena.

; On the Morphology of the Chromosome Group
in B'acliystola maotia ; Biol. Bull., vol. 4.

.• History of the Germ Cells ane'' early Em-
bryologie of certciin Aphids; Zool. Jahrb.,
Anat. Ontog., vol. 24.

; Ueber die Entwicklung des Pollens und der
Tapetenzellen bei Ribes-Hybriden ; Jahrb.
wiss. Bot., vol. 42.

: Ueber die Entwicklung der Sexualorgane bei
einem sterilen Bryonia-Bastard ; Ber. deut.
bot. Gesell. Berlin, vol. 24.

; Recherches sur la maturation de l'œuf, la
fécondation et la division cellulaire; Arch.
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454

V. B. de BÂEHR

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1907

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1909

1912

1901

Vejdovsky, F.

I9II-]

[91 12

))

I9I3

Wassermann, F

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Bedeutung fur die Vererbung. Jena.

Studies on Chromosomes. 1. The Behavior
of the Idiochromosomes in Hemiptera ; Journ.
Exp. Zool., vol. 2.

Studies on Chromosomes. II. The Paired
Microchromosomes, Idiochromosomes and He-
terotropic Chromosomes in Hemiptera ; Journ
Exper. Zool., vol. 2.

Studies on Chromosomes. III. The Sexual
Différences of the Chromosome Groups in
Hemiptera, with some Considérations on the
Détermination and Inheritance of Sex ; Journ.
Exper. Zool., vol. 3

Studies on Chromosomes. IV. The » Acces-
sory I) Chromosome in Syyomasies and l'yrro-
choris with a Comparative Review of the
Types of Sexual Différences of the Chromo-
some Groups; Journ. Exper. Zool., vol. 6.

Studies on Chromosomes. VIII, Observations
on the Maturation Phenomena in certain
Hemiptera and other Forms with Considéra-
tions on Synapsis and Réduction ; Journ.
Exper. Zool., vol. i3.

Recherches sur l'ovogenèse et l'organogenèse
de l'ovaire des Mammifères (Lapin et Hom-
me); Arch. de Biol,, vol. 17.
; Nouvelles recherches sur l'ovogenèse et l'or-
ganogenèse de l'ovaire de Mammifères (Chat);
Arch. de Biol., vol. 24.

Sporogenesis in N ephrodium ; Bot. Gaz , vol. 46

Chromosomes in Osmunda ; Bot. Gaz., vol. 49

EXPLICATION DES FIGURES.

Toutes les figures ont été dessinées à l'aide de l'appareil Ap.bé.

FiG. 43 — 51, riG. 63 — 65, Zeiss apochr. d. f. 2 »«;«., ap. num. \ 3o ou 1,40, oc. comp. 6 ;
toutes les autres figures, les mêmes abject., oc comp. 8.

FIG. 1. Spermatogonie au repos. Flemming. Hémat. ferr

FIG. 2. Spermatogonie en division. Métaphase. Plaque équatoriale observée du
pôle. Flem. Hém. ferr.

FIG. 3. Spermatogonie en division Plaque équatoriale. Vue de face. Flem.
Hém. ferr.

FIG. 4. Spermatogonie en division. Anaphase. Vue de face. Fle.m Hém ferr.

FIG. 5. Spermatocyte de l^ oidre. Début de la prophase synaptique Caimin
acétique de A. Schneider.

FIG. 6. Spermatoc3'te de !■■ ordre. Stade leptotène. Carm. acét. Schn.

FIG. 7. Spermatocyte de \' ordre. Stade leptoz3'gotène Carm acét. Schn.

FIG. 8-9. Spermatocytes de U ordre. Stade pachytène. Carm. acét. Schn.

FIG. 10-11. Spermatocytes de I^ ordre. Stade pachytène déroulé. Carm. acét.
Schn.

FIG. 12. Spermatocyte de P ordre Stade de grand métabolisme. Carm. acét.
Schn.

FIG. 13-14. Spermatocytes de I"" ordre. Après le stade de grand métabolisme.
Stade strepsitène. Flem. Hém. ferr.

FIG. 15-16. Spermatocj'tes de I"" ordre Diacinèse. Carm. acét. Schn.

FIG. 17. Spermatocyte de l^ ordre. Diacinèse. Fle.m. Hém. ferr.

FIG. 18. Spermatocyte de If ordre. Métaphase. Vue de face. Flem Hém. ferr.

FIG. 19. Spermatocyte de I^ ordre. -Métaphase. Vue de face. Hertvvig. Hém. ferr.

FIG. 20-21. Deu.x coupes du même spermatocyte de I^ ordre. Métaphase. V'ue
de face. Hertw. Brasiline.

FIG. 22. Spermatocyte de I^ ordre. Plaque équatoriale. Vue polaire. Hertw
Hém. ferr.

FIG. 23. Spermatocj'te de fr ordre. Anaphase. Hertw. Hém. ferr.

FIG. 24. Spermatocyte de \' ordre. Télophase. Flem Hém. feri .

FIG 25. Spermatide de II^ ordre. Intercinèse Flem Hém. ferr.

FIG. 28-27. Spermatocytes de 11^ ordre Métaphase. Vue de face. Fle.m. Hém.
ferr.

456 V. B. de BAEHR

FIG. 28. Sperniatocyte de II<= ordre. Télophase. Flem. Hém. ferr.

FIG. 29. Spermatide. Flem. Hém. ferr.

FIG. 30-32. Spermiogenèse. Subi. acét. BxoNDi-triacide.

FIG. 33-36. Spermiogenèse. Stades plus avancés. Subi acét. Hém ferr.

FIG. 37. Spermatozoïdes dans le réceptaculum d'une femelle. On voit la struc-
ture double des queues des spermatozoïdes coupées par le i-asoir en tronçons. Subi.
acét Hém. ferr.

FIG. 38. Changements de forme des spermatozoïdes dans les oocytes après la
période d'accroissement de ces derniers Hertw. Hém. ferr. ou Brasil.

FIG. 39. Oocytes de 1' ordre. Stade lepto-z^'gotène. Hertw. Bras.

FIG 40. Oocyte de F ordre. Stade pachytène. Hertw. Bras.

FKj. 41. Oocj'te de Ir ordre. Stade pachytène déroulé. Hertw. Bras.

F'IG. 42-48 Ooc\tes de h orde. Période d'accroissement. Subi. acét. Hém ferr.

FIG. 49. Oocyte de I^ ordre. Période d'accroissement. Nucléole vacuolisé. Subi,
acét. Triple col. d'EHRi.iCH.

FIG. 50. Oocyte de I'' ordre. Fin de la période d'accroissement. Chaque gé-
minus entouré d'un grumeau de caryoplasme Hertw Bras.

FIG. 5t. Oocyte de P ordre. Fin de la période d'accroissement. Chromosomes
au centre de l'oocyte entourés de caryoplasme. PIertw. Bras.

FIG. 52-55. Fin de la I'' prophase polaire. Chromosomes fixés sur un grumeau
caryoplasmatique commun. Hertw. Bras.

FIG 56-j7. Oocj'tes de 1'' ordre. Métaphase I. Hertw. Hém ferr.

FIG. 58. Ooc3'te de I'' ordre. Commencement de l'anaphase I. Subi acét.
Hém. ferr.

FICt. 59. Oocyte de Ils ordre. Prophase. Hertw Hém ferr.

F'IG. 60. Oocyte de II<= rirdre. .Métaphase. Subi. acét. Hém. ferr.

FIG. 61. Télophase II. Subi, acét Hém ferr.

I'"IG. 62. Œuf mûr. Pronucleus femelle reconstruit. Subi. acét. Hém. ferr.

F'IG. 63. Œui mùr. Deux pronuclei. Hertw. Bras

FIG. 64 Œuf mùr (ovaire). Fusionnement des pronuclei Hertw Bras.

FIG. 35. Œ2uf mùr (ovaire). Syncaryon. Subi, acét Hém. ferr.

FIG 68 (Euf mùr (cœlome) S3'ncaryon. Hertw. Bras.

FIG. 67. Œuf mùr cœlome). Formation du premier fuieiu de segmentation

On voit aussi une enclave plasmatique Hertw. Bras.

FIG. 6 3. Piemière cinèse de segmentation. .Métaphase Subi acét. Hém. ferr.

FIG. 69. Ana)>hase d'une cinèse de segmentation. Vue polaire. Subi acét
Hém. ferr.

TABLE DES MATIERES.

Introduction ........

I Technique .......

II Recherches de Hempelm nn s<ir la form.ition des relUiles .se.xuelles chez le Saccocimis
major ....

III. Observations personnelles

A. Nombre normal de chromosomes

B. Spermatouenèse

1. Cinèses spermatogoniales

2. Cinèses de maturation et sperraiogenèse

a. Prophase, métaphase et anaphase liétéroty piques .

b. Intercinèse. prophase II, métaphase II et anaphase II .

c. Spermiogenèse .....

C. Ovogenèse .......

1 . Cinèses oogoniales .....

2. Cinèses de maturation .....

D. Pénétration du spermatozoïde dans l'oocyte et fécondation de l'œuf

IV. Discussion générale . . . . . . .

Mécanisme de la réduction ......

A. Réduction sans intervention des cinèses de maturation

1. Réduction prophasique avec paraconjugaison des chromosomes

2. Réduction prophasique avec métacopulation des chromosomes
B Réduction au moyen d'une des cinèses de maturation

1. Postréduction sans conjugaison et sans copulation des chromosomes

2. Préréduction avec conjugaison diacinétique ou métaphasique

3. Postréduction après métaconjugaison prophasique
4 Préréduction après métaconjugaison prophasique

Préréduction après paraconjugaison prophasique

6. Parthénogenèse et préréduction après paraconjugaison

C. Théorie de la chiasmatypie

D. Interprétations de la réduction numérique par les adversaires de la

l'individualité des chromosomes

Bibliographie ....
Explication des figures .
Table des matières

théorie

Pages
38 1

383
386
386
387
387
388
389
393
393
395
395
395
3gg
402
402
403
403
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411
411
412
4i3
416
421
428
433

436

443
455
457

PLANCHE I.

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PLANCHE II.

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64

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69

K B. Je Baehr ad nal. del.

TABLE DES MATIÈRES DU TOME XXX

I. La spennatogenèse dans les mammifères. — III. Les spermatocytes

leptotènes et amphitènes dans le Taureau, par Llcien Vax Hoof . 5

IL Réseau protoplasmique et chcindriosomes dans la genèse des myofi-

brilles, par P. Gaudissart ...... 27

III. Microsporidies parasites des larves de Simnlium (Thelohania varians),

par le D^ Paul Debaisieux ...... 45

IV. Cinèses atypiques dans les cellules adipeuses de larves de Pyri hocoris

apterus L., avec quelques remarques sur le centrosume, par J, Ko-

walski ......... 81

V. Merocystis kathœ Dahin. Une Aggrégate de Buccinum undatum, par

Charles Foulon. . . . . . . . 121

VI. Etudes sur les Microsjioridies. — II. Glugea danilewskyi L. Pfr.

— III. Glugea miilleri L. Pfr , par Paul Debaisieux . . i5i

VIL Les Microsporidies parasites des larves de Simulium, IL, par Paul

Debaisieux et Louis Gasialdi. . . . . . i85

VIII. Études sur les Microsporidies. — IV. Glugea anomala Monz,, par

Paul Debaisieux. . . . . . . . 2i5

IX. Cœlomycidium simulii, nov. gen., nov. spec, et remarques sur

l'Amœbidium des larves de Simulium. par Paim, Deb.aisieux . 247

X. Notes sur le Myxidium liberkûhni Biitsch, par Paul Debaisieux . 279

XI. Haplospnridium (Minchinia) chitonis Lank., Haplosporidium nemertis.

nov. sp., et le gruupe des Haplosporidies, par Paul Debaisieux . 291

XII. Recherches sur la maturatinn des œufs pai thénogenétiques dans

l'Aphis palmœ. par le B"" V. B. de Baehr. . , . 3i5

XIIL Observations cytologiques sur le cytoplasme d'un Saprulegnia. par

A. Guilliermond. ...... 355

XIV. La Spermatogenèse et l'Ovogenèse chez le Saccocirrus major, suivies
d'une discussion générale sur le mécanisme de la réduction chro-
matique, par le B"" V. B. de Baehr .... 379

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