h>^r-i Foreign Boa?sV CARLSCHOENHOF 144 Trcinout st. • BOSTON. ZEITSCHRIFT FÜR WISSENSCHAFTLICHE MIKROSKOPIE UND FÜR MIKROSKOPISCHE TECHNIK, Unter besonderer Mitwirkung von Prof. Dr. Leop. Dippel Prof. Dr. Max Flesch in Dariiistadt, in Hern, Prof. Dr. Ai'tli. Wicliniann in Utrecht herausgegeben von Dr WILH. JUL. BEHRENS iu Göttiiiueu. BANn II (Jahrgang 1885.J Mit einer lithographirten Tafel und 47 Holzschnitten. BRAÜNSCHWEIG HARALD BRUHN Verlagsbuchhandlung für Naturwissenschaft und IWedicin 1885. 2^ f I n h a 1 1 s V e r z e i c h n i s s. I. Original- Abhandlungen. Seite Behrens, W., Bernsteinlack zum Verscliliesscn mikroskopisclicr Präparate 54 — , — , Ki.öNNE und Mi:r,LEirs beweglicher Objecttiscli 502 — , — , Wixkel's Mikromoterocular mit vertical beweglichem Mikrometer 41 BoUes Lee, A., Notiz, das ScHÄLLiBArji'sche CoUodinm betreffend . . 522 Born, G., und Wieg-er, ('., lieber einen neuen Unterguss 34ß Brass, A., Mittheilungen zur mikroskopischen Technilc 300 Dippel, L., Einige neue Mikroskopformen 37 Eternod, A.. Armoire ä preparations microscopiques 501 — , — , Tour horizontal pour microscopistes 507 Flelschl, E. V., C. Reichekt's neuer beweglicher Objecttisch .... 289 Flemming, W., Berichtigung 57 — , — , Notizen zur Färbetechnik 517 Flesch, M., Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate 464 — , — , Notiz zu Watxev's Doppelfärbung mit Hämatoxylin 353 — , — , Zur Anwendung der MKKKEi.'schen Doppelfärbung mit Indigo und Carmin 349 Uelplce, Th., Notiz ziu- x\nwendung der WEioERT'schen modificirten Hä- matoxylinfarbung auf das periphere Nervensystem 484 Gierke, H., Färberei zu mikroskopischen ZM'ecken 13, 164 Hansen, E. Chr., Einige kritische Bemerkungen zu Dr. Hueppe's Buch ,.Die Methoden der Bacterienforschung" 355 Heller, Zur mikroskopischen Technik 47 Henking, H., Ein einfaches Mikrotommesser 509 Heydenreich, L., Ueber den besten Deckglaskitt 333 Hildebrand, H. E., Ueber ein vereinfachtes Mikrotom von grosser Leistungsfähigkeit 343 Israel, O., Ueber eine Erwärmungsvorrichtung als Ersatz der heizbaren Objettische 459 Lindt, O., Ueber den Nachweis des Phloroglucins 495 IV luhaltsvcrzeicliniss. oeite List, J. H., Mittlicilungcn technischen Inhaltes 514 — , — , Uehcr einen Objecthalter mit Kugelgelenk 341 — . — , Zur Färbetechnik 143 — , — , Zur Verwendung des Anilingriuis . 222 Löwit, 31., Ein heizbarer Objecttisch für starke Vcrgrössernngon . . 43 Martiiiotti, H., Di una modificazione all'apparato di illuniinazione deirAiun; 500 — , — . La picronigrosina nello studio delle alterazioni dci centri ncrvosi 478 Mattirolo, O., Skatol e Carbazol, due nuovi reagenti per le membrane lignificate 354 Moeller, J., Reichekt's Condensor 339 Moliscli, H., Berichtigung 359 Moudino, C, Sull'uso del bicloruro di mercurio nello studio degli organi centrali del sistema nervöse 157 Ost, J., Ueber die Leistungsfähigkeit der Mikrometerschraube .... 295 Paxilsen, E., Färbung von Schleimdrüsen und Becherzellen 520 Pommer, G., Ueber Methoden, welche zum Studium der Ablagerungsver- hältnisse der Knochensalze und zum Nachweise kalkloser Knochen- partien brauchbar sind 151 Sahli, H., Ueber die Anwendung von Boraxmethylenblau für die Unter- suchung des centralen Nervensystems und für den Nachweis von Mikroorganismen, speciell zur bacteriologischen Untersuchung der nervösen Centralorgane 49 — , — , Ueber eine neue Doppelfärbung des centralen Nervensystems . . 1 Schiefferdecker, F., Bemerkungen zu dem Aufsatz von List: Zur Ver- wendung des Anilingrüns 223 — , — , Mittheilung, betreffend das von mir verwandte Anilingrün ... 51 Graf Si)ee, F., Leichtes Verfahren zur Erhaltung linear geordneter, lückenloser Schnittserien mit Hülfe von Schnittbändern .... 7 Spengel, J. W., August Beckek's Schlittenmikrotom 453 Vinassa, E., Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie 309 Weigert, C, Ein neues Tauchmikrotom, besonders für grosse Schnitte . 326 Ueber Schnittserien von Celloidinpräparaten des Ccntralnerven- systems zum Zwecke der Markscheidenfärbung 490 5 II. Referirte Literatur. Abbe, E., Note on the proper definition of the amplifying power of a lens-system 73 — , — , The relation of aperture and power in the microscope. IL Divi- sion of the entirc power of the microscope bctween ocular and objective 70 Alvarez et Tavel, Recherches sur le bacille de Lustgarten 563 Andeer, J., Das Resorcinderivat Phloroglucin 375 IiiLaltsvcrzeicliniss. V Seite Audeer, J., Das Resorciiulerivat Plilorogluciu. Nachtrag 539 Ai'cangeli, (t.. Sopra alcuiic dissoliizioni cai'minicho dcstistiiiatc alla coloritura degli elcmenti istologici 376 Arnold, J.. "Weitere Beobaclitungen über die Tlieilungsvorgänge an den Knoclienmarkzellen und weissen Blutkörpern 244 Assiuaiui, R. , Mikroskopisclie Beobachtung der Wolken-Elemente auf dem Brocken 269 Bale, W. M., Closing glycerine cells 79 Banti. Guido. JNIanuale di tccnica batteriologica 405 Bareg'^-i, Moditicazione aU'allestimento dei proparati microscopici tinti con colori di anilina allo scopo di rendcrne piü perfetta e durevole la conservazione 86 Baiunluiuer, H. , lieber die mikroskopische Beschaffenheit eines Bunt- kupfererzes von Chloride (New-Mexico) 581 Beard, J., On the life-history and deelopment of the genus Myzostoma 231 Becke, F., lieber Zwillingsverwachsungen gesteinbildender Pyroxene und Amphibole 430 Becker, Arthur, Schmelzversuche mit Pyroxenen und Araphibolen und Bemerkungen über Olivinknollen 431 — , — , lieber die Schmelzbarkeit des kohlensauren Kalkes 582 Behrens, W. J., The microscope in botany. A guide for the micro- scopical investigation of vegetable substances 363 Bellonci, J., La terminaison centrale du nerf optique chez les mammi- feres 545 Bergh, R. S., Die Metamorphose von Aulastoma gulo 383 Bieliriuger, .J., Beiträge zur Anatomie und Entwicklungsgeschichte der Trematoden 93 Bizzozero, G, Preparazioue del picrocarmino 539 — , — , Ueber den Bau der geschichteten Pflasterepithelien 543 — , — , Ueber die Mikrophyten der normalen Oberhaut des Menschen . . 248 Bjeloussow, A. K.. Eine neue Methode von Injection anatomischer Prä- parate vermittels kalter Masse 535 Bolle.s Lee, A., Cedernholzöl für Paraftin-Einbettung 536 Born, G., Biologische Untersuchungen I. Ueber den Einfluss der Schwere auf das Froschei • 391 Brunn, A. v., Der WEsxiEK'sche Universalloupeuhalter 229 Buchner, H., Beiträge zur Kenntniss des Neapeler Cholerabacillus und "einiger demselben nahe stehender Spaltpilze 560 Bütschli, O., Einige Bemerkungen über gewisse Organisationsverhältnisse der sogenannten Cilioflagellaten und der Noctiluca 379 ■ — , — , Kleine Beiträge zur Kenntniss einiger mariner Rhizopoden . . . 378 Bumni, E., Der Mikro-Organismus der gonorrhoeischen Schleimhauterkran- kungen, „(lionokokkus-Neisser". Nach Untersuchung beim Weibe und an der Conjunctiva der Neugeborenen 407 Carpenter, AV. B. , Corrcction-adjustment for homogeneous-immcrsion objectives 73 — , — , On the physiology of binocular vision with the microscope ... 72 VI lubaltsverzeicliaiss. Seite Carriere, J., Die Sehorgane der Thiere , verglciclieinl-aiiatomiscli dar- gestellt 379 Certes, A., De l'emploi des matieres colorantes dans l'etude pliysiologiquc et histologique des infusoires vivants ... 539 riiapmaii, A. B., New microtome 78 Collodioii as a tixativc for sections 80 Coriiil et Babes, Les bacteries et leur lole dans ranatomie et l'histo- logie des maladies infectieuses 406 Cox, C. F., Cement for moimting 83 Daday, E. v., Ueber eine Polytlialaniie in dem Kochsalztünipel bei Deva in Siebenbürgen 89 Datlie, E., Beitrag zur Kenntniss der Diabas-Mandelsteine 2(57 Debes, E., Das Reinigen und Präpariren von Diatomaceen-Material . .411 — , — , Die Herstellung von Diatomaceen-Dauerpräparaten 567 Diapbragms for Beck's vertical illuminator 368 Dippel, L., Grundzüge der allgemeinen Mikroskopie 360 Doherty, A. J., On injecting 227 Dödei'leiii, L., Studien an japanesischen Lithistiden 90 Doutrelepont und Seliütz, Ueber Bacillen bei Syphilis 561 Duval, M., De la formation du blastoderme dans l'oeuf d'oiseau . . . 392 Ebner, V, v., Ueber den Unterschied krystallinischer und anderer aniso- troper Structuren 579 Eisner, E., Mikroskopischer Atlas. Ein illustrirtes Sammelwerk zum Ge- brauche für Gesundbeitsbeamte, Apotheker, Droguisten, Kaufleute und gebildete Laien . . . • 270 Emery, C, Untersuchungen über Luciola italica L 104 van Ermengeni, E., Recherches sur le microbe du cholera asiatiquc . 560 Errera, L., Sur l'emploi de l'encre de Chine en microscopie .... 84 Eschericli, Tb., Bacteriologische Untersuchungen über Frauenmilch . . 563 Examining the spectrum of Chlorophyll 421 Fabre-Dujieuguk's ciuTent apparatus 366 Falkenlieini, H., Ueber Sarcine 564 Ferran, J., Ueber die Morphologie des Commabacillus 406 Fenssner, K., Ueber die Prismen zur Polarisation des Lichtes .... 77 Fisclier, A., Ueber den Inhalt der Siebröhren in der unverletzten Pflanze 576 Fisclier, P. M. , Ueber den Bau von Opisthotrema cohleare, nov. gen., nov. spec 93 Flaliault, Cb., Recolte et preparation des Algues en voyage 259 Fleiscbniann, A., Die Bewegung des Fusses der Lamellibranchiaten . . 541 Flescli, 31., Zur Kenntniss der Nervenendigung im quergestreiften Muskel des Menschen 403 Foettinger, A., Recherches sur l'organisation de FHistriobdella homari . 232 Fol, Hermann, Die mikroskopisch-anatomische Technik 523 — , — , Nouvelle methode pour le transvasage de bouillons sterilises et le dosage des germes vivants contenus dans l'eau .... . . 550 — , — , Sur la famille des Tintinnodea 380 Inhaltsverzeichiüss. VII Seite Fraiicotto, P., Descri2)ti()n des differcntcs methodes c'mi)loyees poiir rangcr les coupes et les Diatomees cn series sur Ic port-objet [Suite] . 411) — , — , Inclusion daiis la paraftine 228 — , - , Marqueur tra^:ant uii cercle sur la lamelle pour retrouver facilement im lieu determine d'une preparation 228 ■ — , — , Moyen d'accelerer rinclusioii dans la paraftine h l'aide du vide . 228 Frank, B., lieber die Gummibildung im Holze und deren physiologische Bedeutung 127 Frenze], J., lieber die Mitteldarmdrüse der Crustaceen 98 Friedländer, C, Notiz, die Färbung der Kapselmikrokokken betreffend 556 Friedniann, 31., Ueber eine Moditication der WEiGEKT'schen Färbemethode für die markhaltigen Fasern der Centralorgane 546 Fütterer, G., lieber eine Moditication der Eimi.icii'schen Färbemethode für Tubcrkelbacillen im Gewebe 555 Gärtner, G.. Ueber das elektrische Mikroskop 528 Gaifky, Zur Aetiologie des Abdominaltyphus. Mit einem Anhange: Eine Epidemie von Abdominaltyphus unter den Mannschaften des 3. Brandenburgischen Infanterie-Regiments Nr. 20 im Sommer 1882 115 Garbini, Manuale per la tecnica moderna del microscopio nelle osser- vazioni zoologiche, istologiche cd anatomiche 59 De Giaconji, Nene Färbungsmethode der Syphilisbacillen 562 Giacomini, Nuovo processo di conservazione delle sezioni microscopiche 531 Gibbes, H., On some points in the minute structure of the pancreas . 545 Giltay, K., Inleiding tot het gebruik van den Microscoop 360 Goldin ff-Bird, V. H., On a new microtomo 78 Golgi, Modo di conservare le sezioni di sistema nervoso trattate col me- todo della colorazione nera (bicromato di potassa e nitrato d'argento) 107 Gorono wit.scli, N , Studien über die Entwicklung des Medullarstranges bei Knochenfischen, nebst Beobachtungen über die erste Anlage der Keimblätter und der Chorda bei Salmoniden 238 Gottstein, A., Ueber Entfärbung gefärbter Zellkerne und Mikroorganismen durch Salzlösungen 540 Grenadier, H., Abhandlungen zur vergleichenden Anatomie des Auges . 244 Grey. E., Glycerin in mounting 81 Gruber, A., Studien über Amöben 230 Gruenhagen, A., Ueber ein Endothelial-EIement der Nervenprimitiv- scheide 547 Günther, i\, Ueber die Färbung der Recurrensspirillen in Blutpräparaten 559 Guttmann, P., Ueber Leprabacillen 250 Haller, B., Beiträge zur Kenntniss der Niere der Prosobranchier . . . 385 Hamann, O., Beiträge zur Histologie der Echinodermen. H. 2. Die Ästenden 380 — , — , Eine neue Carminlösnng 87 Hanausek, T. F., Noch ein Wort zur Untersuchung des Knochenmehles auf Steinnusspulver 272 Hansen, Emil Chr., Recherches sur la physiologie et la morphologie des ferments alcooliques. II. Les ascosporcs chez le genre Sac- charomyces 118 VIII InhalLsverzeichniss. Seite Hariner, S. F., Oii a method for the silvei- staining of marine objects . 226 Hatscliek, B,. Entwicklung der Trochophora von Eupomotus uncinatus Phil. [Serpula uncinata] 382 Hauser, G., üeber das Vorkommen von Mikroorganismen im lebenden Gewebe gesunder Thiere 549 — , — , üeberfFäulnissbacterien und deren Beziehung zur Septicämie. Ein Beitrag zur Morphologie der Spaltpilze 554 Haiishofer, K., Beiträge zur mikroskopisch-chemischen Analyse . . . 422 — , — , Mikroskopische Reactionen. A 427 • — , — , Mikroskopische Reactionen. B 578 Heini'icher, E., üeber Eiweissstoffc führende Idioblasten bei einigen Cru- ciferen. Vorläufige Mittheilung 577 Hartwig, O., Ueber das Vorkommen spindeliger Körper im Dotter junger Froscheier 340 van Heurck, H., De l'emploi du styrax et du liquidambar en remplace- ment du bäume de Canada 81 Hilger, C, Beiträge zur Kenntniss des Gastropodenauges 237 Hitchkoek, R.. The preparation of shellac cement 83 Hockin, Ch., On the estimation of aperture in the microscope .... 72 Houssay, F., Recherches sur l'opercule et les glandes du pied des Gaste- ropodes 238 Hueppe, F., Die Methoden der Bactcricu-Forschung 404 • — , — , Ueber die Dauerformen der sogenannten Commabacillen . . . 561 — , — , Untersuchungen über die Zersetzungen der Milch durch Mikro- organismen 110 Hussak, E., Anleitung zur Bestimmung der gesteinbildenden Mineralien 66 Ihl, A., Ueber neue empfindliche Holzstoff- und Cellulose-Reagentien . 259 Igacusclii, Moritzi 3Iinra, Beiträge zur Histologie der Leber. . . . 243 Inostranzeff, A. v., Ueber eine Vergleichungskammer zur mikroskopi- schen Untersuchung undurchsichtiger Mineralien 530 Jijima, J., Untersuchungen über den Bau und die Entwicklungsgeschichte der Süsswasser-Dendrocoelen 93 Johannsen, W., Om Fröhviden og dens Udvikling hos Byg 261 Johne, A., Ueber die Koch'schen Reinculturen und die Cholerabacillen. Erinnerungen aus dem Cholera-Cursus im K. Gesundheitsamte zu Berlin 249 Kaatzer, P., Die Technik der Sputumuntersuchung auf Tuberkelbacillen 109 Kain, C. H., Balsam of Tolu for mounting 82 Kalkowsky, F., Ueber die Polarisationsvcrhultnisse von senkrecht gegen eine optische Axe geschnittenen zweiaxigen Krystallplatten . . 127 — , — , Ueber Olivinzwillinge in Gesteinen • 266 Katsclienko, N., Das menschliche Chorionepithel und dessen Rolle bei der Histogeiiesc der Placenta 543 Kehrer, F. A., Zur Dilierentialdiagnose der verschiedenen Spaltpilzarten 553 Kennel, J., Entwicklungsgeschichte von Peripatus Edwardsii Blanch. und Peripatus torquatus n. sp 94 Klein, ('., Optische Studien am Lcncit 264 Inbaltsverzeichniss. IX Seite Koganei, J., Untersucliuiigen üLer den Bau der Iris des Menschen und der Wirbelthiere 395 Korotueff, A., Zur Histologie der Siplionoplioren 230 Krause, AV\, Die Nervenendigung in den Froschmuskeln 547 -, — , Die Retina 396 — , — , Durchbohrte Objectträger 87 Kreutz, F., Ueber Vesuvlaven von 1881 imd 1883 268 Kultscliizky, L. K., Ueber den Bau der GuAKDRY'schen Körperchen . 544 Kultst'liizky, N., Zur Lehre vom feineren Bau der Speicheldrüsen . . 241 Kiiplt'er, C. Ueber den Axencylinder markhaltigcr Nervenfasern . . . 106 ■ — , — , Zur Gastrulation in den meroblastischen Eiern 394 Lang, A., Die Polykladen des Golfes von Neapel 383 Lebüiicq, H., Un mot sur la technique des coupes en series 371 Lelinumn, O., Ueber eine vereinfachte Construction des Krystallisations- mikroskops 421 List, J. H., Das Cloakenepithel von Scyllium canicula 104 Loew, O., Ueber den mikrochemischen Nachweis von Eiweissstoffen . . 124 Loos, A., Beiträge zur Kenntniss der Trematoden. Distomum palliatum nov. si)ec. und D. reticulatum nov. spec 382 Lustgarten, Die Syphilisbacillen 408 Mann, P., Untersuchungen über die chemische Zusammensetzung einiger Augite aus Phonolithen und verwandten Gesteinen 130 Maurice, Ch., et Scliulgin, Embryogenic de l'Amaroecium proliferum . 90 Mayer, P., Einfache Methode zum Aufkleben mikroskopischer Schnitte 225 Mayer, S., Ueber die blutleeren Gefässe im Schwänze der Batrachier- larven 390 Mays, R., Histophysiologische Untersuchungen über die Verbreitung der Nerven in den Muskeln 242, 401 Meltzer, S. J., und Welch, W. H., Zur Histophysik der rothen Blut- körperchen 544 Meyer, A., Mikrochemische Reaction zum Nachweis der reducirenden Zuckerarten • 577 Michael, A. D., British Oribatidae Vol. 1 95 Mitroi)hanow, P., Ueber die Litercellularlücken und Intercellularbrücken im Epithel 389 Meist Chamber 370 Mojsisovics, A., Edler v. Mojsvär, Leitfaden bei zoologisch-zootomi- schen Präparirübungen. 2. AuH 362 3Iondino, C, Sulla struttura delle fibre nervöse midollate peripheriche . 547 Morpurgo, B.. Ueber die Entwicklung der Arterienwand 397 Müller, \\., Zur näheren Kenntniss der Cytheriden 103 Murray, J. et Renard, A., Les caracteres microscopiques des cendres volcaniques et des poussieres cosmiques et leür röle dans les Sedi- ments de mer profonde 268 Niemiec, J., Recherches morphologiques sur les ventouses dans le regne animal 381 Nissl, üntersuchungsmethoden der Grosshirnrinde 545 X Inhaltsverzeichniss. Seite Noll, F., Eau de Javelle, ein Aufhellungs- und Lösungsmittel für Plasma 575 Nüsislin, ()., Ueber einige neue Urthiere aus dem Herrenwieser See im badischen Schwarzwalde 88 Örley, h., Die Kiemen der Sorpulaceen und ihre morphologische Bedeutung 231 Ognew, J., Zur Frage von der morphologischen Bedeutung des iibrillären Bindegewebes 542 Passet, Ueber Mikroorganismen der eiterigen Zellgewebsentzündmig des Menschen 248 Patten, AV., The dcvelopment of Phryganids, with a in'eliminary note on the development of Blatta germanica 235 Penfield, S. L., Ueber Erwärmungsversuche an Leucit und anderen Mi- neralien 129 Pfltziier, AV., Zur morphologischen Bedeutung des Zellkernes .... 386 Pisenti, Di una moditicazione alla formula del carminio alluminoso . . 37G Plaut, H., Färbungsmethoden zum Nachweise der fäulnissen egenden und pathogenen Mikroorganismen. 2. Aufl 108 Rabl, C, Ueber Zelltheilung 240 Reinhard, C, Spirituslampe mit constantem Niveau 229 Ribbert, Zur Färbung der Pneumoniekokken 556 Rings for throwing the coarsc adjustment out of gcar 3G9 Rössler, R., Die Bildung der Radula bei den ccplialophoren Mollusken 384 Rosenbach, F. J., Mikroorganismen bei den Wundinfectionskrankheitcn des Menschen 248 Rosenbusch, H., Ein Beitrag zur Morphologie des Leucits 431 Russow, E., Ueber die Auskleidung der Intcrcellularen ...... 125 Saefftig-en, A., Zur Organisation der Echinorhynchen 91 Salomonsen, C. J., u. Diroking-Hnhnfeld, ('., Ueber Pseudoinfection bei Fröschen. Ein Beitrag zur Lösung der Jequirityfrage . . . 252 Sandmann, G., Ueber die Verthoilung der motorischen Nervenendapi)arate in den quergestreiften Muskeln der Wirbelthiere 403 Sazei)in, B., Ueber den histologischen Bau und die Vertheilung der ner- vösen Endorgane auf den Fühlern der Myria])oden 233 Schmidt, M., Beiträge zur Kenntniss des Rückenmarkes der Amphibien 389 Schlitz, Ueber das Eindringen von Pfilzsporen in die Atlimungswege und die dadurch bedingten Erkrankungen der Lunge und über den Pilz des Hühnergrindes 256 Schulze, F. E., Ein neues Netz zum Fangen kleiner freischwimmender Thiere 537 — , — , Ueber einen Entwässerungsapparat 537 — , — , Ueber einen Schlammsauger 538 Schien, D. v., Studien über Malaria 249 Selenka, E., Zur Paraffineinbettung 371 (Smith, H. L.), Mounting media of high refractive index 566 (Smith, J. E.), High-angled objectives 75 Smith, Th., Remarks on fluid and gelatinous media for cultivating Micro- organisms, with description of Sai.mon's new culture-tube and demonstration of the process of using it 245 Inhaltsverzeichniss. XI Seite Solla, R. F., Ueber zwei wahrscheinliche mikrochemische Reactionen auf Schwefelcyanalliil 260 Solhis, W. .1.. Oll thc development of Halisarca lobularis 380 Sommer, A., Ueber Macrotoma plumbea 234 Stein, St. V., Eine neue Methode, Hämoglobinkrystalle zu erlialten. Vor- läufige Mittheihmg 398 — , — , Einfache Vorrichtung für das Mikrotom zur Einbettung der Prä- parate 370 Steplienson, J. W., On a cata-dioptric immersion-illuminator .... 366 Stei'iiberg, (4., Methods of cultivating Microorganisms 247 Stölir, Pli., Ueber den Bau der Conjunctiva palpebrarum 397 Strasbiii'ger , Ed., Das botanische Prakticum. Anleitung zum Selbst- studium der mikroskopischen Botanik für Anfänger uml Fortge- sclmttenere 62 Streng. A., Ueber einige mikroskopisch-chemische Eeactionen . . 262, 429 Stricker, S., Ueber das elektrische Licht als Hülfsmittel für den mikro- skopischen Unterricht 528 Tafani, A., L'organe de Corti chez les singes 545 Ticliomiroff, A.. Chemische Studien über die Entwicklung der Insccteneior 385 Tizzoni, Mctodo per dimonstrare la cariocinesi nel tessuto epiteliale . 105 Toison, J., Sur la numeration des elements du sang 398 Trinkler, N., Ueber den Bau der Magenschleimhaut 395 Tschermak, G., Die mikroskopische Beschaffenheit der jMcteoriten er- läutert durch photographische Abbildungen 266, 580 Tscliisch, W. V., Ueber künstliche Bildung von Farbstoff' in NcrvengeAvebe 245 Uffreduzzi, G. B., Sulla pioemia dei vitelli neonati. Studio sperimcntale 251 Uljanin, B., Doliolum 237 Unna, P. G., Zur Färbung der Leprabacillen 557 Vignal, AV., Chambre chaude ä regulateur direct pour le microscope . 364 Virchow, H., Ueber die Einwirkung des Lichtes auf Gemische von chrom- sauren Salzen (resp. Chromsäure), Alkohol und extrahirten orga- nischen Substanzen. Technische Mittheilung 372 — , — , Ueber Zellen des Glaskörpers 544 Vogel, J. , Das Mikroskop und die wissenschaftlichen Methoden der mikroskopischen Untersuchung in ihrer verschiedenen Anwendung 4. Aufl 361 Voigt, W., Ueber Eier- und Samenbildung bei Branchiobdolla .... 383 Voltolini, Ueber ein besonderes Erkennungszeichen der Tuberkelbacillen 555 Ward, R. IL, Au eye-shade for monocular microscopes 76 Weicliselbanm , A., Ueber Tuberkelbacillen im Blute bei allgemeiner acuter Miliartuberculose 109 — , — , Zur Aetiologie der Rotzkrankheit des Menschen 410 AVeigert, C, Eine Verbesserung der Hämatoxylin-Blutlaugensalzmethode für das Centrabiervensystcm 399 Wielowiejski, H. v.. Vorläufige Bemerkungen über die Eizelle . . . 242 — , • — , Zur Kenntniss der Eibildung bei der Feuerwanzc 541 Wigand, Albert, Entstehung und Fermentwirkung der Bacterien. Vor- läufige Mittheilung 109 XII Iiihaltsverzeichniss. Seite Will, L. , Eildungsgescliichte und morpliologisclier Wertli des Eies von Nepa cinerea L. und Notonecta glauca L 541 Wilson, E. B., The mesenterial filaments of tlie Alcyonaria 90 AVitlaczil, E., Entwicklungsgcscbiclite der Apliiden 103 Witt, O. N., Ueber den Polirschiefer von Archangelsk Kurojcdowo im Gouv. Simbirsk 573 Wray's microscope screcn 76 Zacharias, O., Ueber die amöboiden Bewegungen der Spermatozoen von Polyphemus pcdiculus De Gecr 233 Zandei" K., Die frühesten Stadien der Nagelentwicklung und ihre Be- ziehung zu den Digital-Nerven 543 Zawarykin, Tli., Einige die Fettresorption im Dünndarme betreffende Bemerkungen 105 Zkisö's A* variable objective and optical tube-lcngth 75 Zopf, W., Die Pilzthiere oder Schlcimpilze. Nach dem neuesten Stand- punkte bearbeitet 252 Die Spaltpilze. Nach dem neuesten Standpunkte bearbeitet. 3. Aufl. 548 5 Verzeicliiiiss der Herren Mitarbeiter an Band II. Dr. 0. Bachmanii in Plauen i. V. Prof. Dr. med. P. Baumgarten in Königsberg i. P. Dr. W. Behrens in Göttingen. A. BoUes Lee in Villafranca bei Nizza. Prof. Dr. G. Born in Breslau. Dr. A, Brass in Marburg. E. Debes in Leipzig. Prof. Dr. L. Dippel in Darmstadt. Dr. med. L. Edinger in Frankfurt a. M. Prof. Dr. Eternod in Genf. Prof. Dr. E. Fleischl von Marxow in Wien. Prof. Dr. W. Flemming in Kiel. Prof. Dr. M. Flesch in Bern. Dr. Th. Gelpke in Freiburg i. B. Prof. Dr. H. Gierke in Breslau. Dr. E. Giltay in Wageningen, Holland. Dr. H. Griesbach in Basel. Prof. Dr. E. Chr. Hansen in Kopenhagen. Prof. Dr. Heller in Kiel. Dr. H. Henking in Göttingen. Prof. Dr. L. Heydenreich in St. Petersburg. Dr. med. H. E. Hildebrand in Chicago. Dr. 0. Israel in Berlin. H, Jung in Darmstadt. Dr. 0. Lindt in Aarau. Dr. J. H. List in Graz. XIV Verzeichniss der Ilerron Mitarbeiter an Band IL Dr. M. Löwit in Prag. Prosector Dr. G. Martinotti in Turin. Prof. Dr. 0. Mattirolo in Turin. Dr. J. Mittchell-Prudden in New-York. Dr. J. Moeller in Wien-Mariabrunn. Dr. H. Molisch in Wien. Dr. C. Mondino in Turin. Dr. Oppenheimer in Bern. J. Ost in Elsdorf bei Düren. Dr. E. Paulsen in Kiel. Dr. G. Pommer in Graz. Dr. H. Sahli in Bern. Prosector Dr. P. Schiefferdecker in Göttingen, Dr. med. Graf F. Spee in Kiel, Dir, Dr, J, W, Spengel in Bremen. Dr. E. Vinassa in Strassburg i. E, Prof. Dr. C. Weigert in Frankfurt a. M. Prof, Dr. A. Wichniann in Utrecht. Dr. C. Wieger in Strassburg i. E. Dr. 0. E. R. Zimmermann in Chemnitz i. S. Druekfeliler. 70 Z. 4 V. 0. lies Druckfehler st . DurchfeLler. 130 5» 8 „ T' »» Rieden 1' Rieder. 267 8 „ n. „ Dialtasen )» Diatesen. 272 » 5 » 0. 51 Hanansek » Hanansek. 363 M 1 1» u. )t Neu in Aufl. 2 M Neue Aufl. 2, 364 1» 11 » 0. ?t they „ the. 364 )» 12 ?» » »> ijudicions )» injudicions. 364 » 11 V 1t »» as to )» as the. 369 11 27 1) 1» » eine V ine 380 1» 9 » » )' Tintinnodea )» Tintinnodes. 420 1» 20 » ?» Terpentin " Terpertin. Band IL Heft 1. lieber eine neue Doppelfärbung" des centralen Nervensystems. Von Dr. Hermauu Sahli, Privatdocent für innere Medicin in Bern. Hierzu Tafel I. Die bisher angewandten Doppelfjirbimgen des centralen Nerven- systems verfolgten keinen anderen Zweck als den meist auch bei Doppelfärbungen anderer Organe allein angestrebten, Gewebselemente verscliieden zu tingiren, die auch schon bei einfach gefärbten oder unge- färbten Präparaten mehr oder minder sicher durch Form und Structur sich unterscheiden und bei Doppelfärbungen bloss deutlicher oder ele- ganter hervortreten. Es handelte sich also bisher fast immer darum, Achsencylinder, Markscheiden, Ganglienzellen, Kerne, Neuroglia und eventuell ueugebildetes Bindegewebe möglichst different zu färben. Der- gleichen Methoden giebt es nun eine grosse Menge, und ich habe nicht die Absicht, ihre Zahl an dieser Stelle um eine neue zu vermehren. Die Doppelfärbung, über welche ich hier referiren möchte, verfolgt viel- mehr den theoretisch wichtigeren Zweck, neue bisher unbekannte Diffe- renzen scheinbar gleichartiger Gewebselemente zu finden, welche ohne die Hülfsmittel der selectiven Färbung dem Beobachter entgehen und auch bisher entgangen sind. Doppelfärbungen von ähnlichem Gesichts- punkt aus wurden meines Wissens zum ersten Mal von Ehelich bei seineu Untersuchungen über die verschiedenen Arten von weissen Blut- körperchen ausgeführt und haben hier bekanntlich ausserordentlich interessante Resultate ergeben. Ich bin nun in der Lage, hier ein Verfahren anzugeben, mittels dessen es gelingt, in dem scheinbar voll- Zeitschr. f. wiss. Mii^roskopie. II, 1. 1 2 Sahli: Neue Doppelfärbung des centralen Nervensystems. II, 1. ständig identischen Bau der markhaltigeu Nervenfasern des centralen Nervensystems, auffallende, bisher nicht bekannte Unterschiede zu finden. Wenn auch eine Erklärung dieser Unterschiede in Betreff ihrer functio- nellen Bedeutung zur Stunde noch nicht möglich ist, so dürften die- selben doch vielleicht in der Folge ein grösseres Interesse gewinnen und zur Kenntniss des in vielen Beziehungen noch so räthselhaften Baues des centralen Nervensystems etwas beitragen. Wenn ich die Methode nun mittheile, so muss ich bitten, dass Diejenigen, welche sie nachzumachen versuchen, im Fall sie ihnen nicht gleich gelingen sollte, die Schuld nicht der Methode als solcher zur Last legen mögen. Es ist ja dies vielfach auch gegenüber den ausge- zeichneten Tinctionsmethodeu, die Weigert für das centrale Nervensystem angegeben hat, geschehen. Und doch sind diese Methoden ebenso gut wie die meinige ganz zuverlässig, wenn man sie auf wirklich geeignete, d. h. dem Zweck entsprechend gehärtete Präparate anwendet. Wenn die Färbungen nicht gelingen, so liegt es weder an der Methode, noch immer an individueller Ungeschicklichkeit, sondern gewöhnlich an der schlechten Conservirung des untersuchten Stückes Rückenmark oder Hirn. Man plage sich also im Falle des Nichtgeliugens nicht zu lauge mit weiterem Probireu, das nicht zum Ziele führt, sondern man versuche die Methode an einem anderen geeigneteren Präparat. Vielfache Er- fahrungen haben mich nun davon überzeugt, dass die Bedingungen für das Gelingen der WEiGERT'schen Färbungen (der beiden rothen sowohl wie der Hämatoxyliufärbung) genau die gleichen sind wie für die meinige. Wenn sich bei der WEiGERT'schen Färbung die feinsten Fasern nicht deutlich zeigen und bei meiner Methode ausserdem die selective Färbung nicht prägnant ausfällt, so liegt dies meist nur daran, dass in Folge des nicht genau richtigen Härtungsprocesses jene feinsten Fasern zu Grunde gegangen sind und die sich differeut färbenden Substanzen chemisch gelitten haben. Ich will nur bemerken, dass sich das zu Grundegegangeusein der feinsten Fasern in Präparaten, bei welchen ihre Färbung nicht mehr gelingt, daraus erschliessen lässt, dass es Ueber- gaugszustäude der Präparate giebt, bei welchen zwar die gröberen Fasern nach dem WEiGERi'schen Princip noch gut gefärbt, die feinen dagegen unterbrochen und wie sich desaggregirend erscheinen. Eine Consequenz davon ist es, dass wahrscheinlich bei solchen nicht mehr tauglichen Präparaten keine Methode das leisten wird, Avas eine der WEiGERT'schen oder meine Methode nicht leistet. Keine Färbungs- methode wird eben Elemente zur Anschauung bringen, welche nicht mehr intact vorhanden sind. ir, 1. Sahli: Neue Doppelfärbuiig des centralen Nervensystems. 3 Es geht daraus die ausserordentliche Wichtigkeit hervor, welche eine sichere und zuverlässige Härtung für alle diese neueren Färbungs- methoden besitzt. In dieser Beziehung lassen nun die bisherigen Ver- fahren noch sehr viel zu wünschen übrig. Ich habe verschiedene theils alte theils auch neue Härtungen versucht, bin aber schliesslich immer wieder zu der Härtung mit chromsaurem Kali oder mit MüLLEß'scher Lösung zurückgekehrt. Die EELiTZKi'sche Methode, welche Avegen der Schnelligkeit, mit welcher sie härtet, etwas Bestechendes hat, ist, weil sie häufig zur Bildung von Niederschlägen führt, definitiv zu verlassen. Aber auch die Härtung mit MtJLLEK'scher Lösung gelang mir nicht immer wie ich es gewünscht hätte. Die besten Härtungen erhielt icli mit 3- bis 4procentigen Lösungen von chromsaurem Kali ohne Zusatz von Natrum sulfuricum. Es ist aber auch hierbei noch ein dunkler Punkt, denn es kam vor, dass von zwei anscheinend in genau gleicher Weise vorgenommenen Härtungen ganz frischer Präparate die eine voll- ständig misslang, die andere dagegen ganz gut wurde. Es wäre sehr wünschenswerth , ausfindig zu machen , wovon dieses Misslingen ab- hängt. Die von Weigekt aufgestellten Postulate in Betreff der Härtung : Frisches Einlegen, fleissiges Wechseln der Flüssigkeit etc. sind ja offenbar sehr wichtig, allein es scheint mir, dass selbst ihre Erfüllung häufig nicht genügt. Von Härtung der Präparate im Brütofen bin ich ganz zurück- gekommen, da sie mir weniger sicher zu sein scheint. Besitzt mau gut gehärtete Stücke von Hirn oder Rückenmark, wie ich nur diejenigen bezeichne, an welchen die Weigekt- schen Färbungsmethoden mit Leichtigkeit gelingen und das bekannte Gewirr feinster Fasern enthüllen, so verfährt man mit denselben nach meiuer Methode folgendermassen : Die Schnitte werden, da gute Härtung die Voraussetzung ist, am besten ohne Einbettung in Celloidin, von den mit Gummi auf Kork ge- klebten und dann in Alkohol gelegten Stücken angefertigt. Die Stücke sollen wo möglich nicht länger in Alkohol liegen bleiben als zum Fest- werden des Gummi nöthig ist. Doch sind die Präparate noch nach einige Tage langem Aufbewahren in Alkohol brauchbar. Wenn übrigens der Grund, warum sich die Schnitte nicht mehr gut färben, einzig das zu lange Liegen der Präparate in Alkohol ist, so lassen sich die ersteren leicht wieder dadurch herstellen, dass man sie vor der Tinction circa eine Stunde in Sprocentige chromsaure Kalilösung bringt, dann aber vor dem Färben so lange in Wasser auswäscht (ein paar Minuten) bis nicht mehr sichtbare gelbe Strömungen von chromsaurem Kali austreten. Wäscht man zu wenig aus, so bekommt man nachher Farbennieder- 1* 4 Sahli: Neue Doppelfärbung des centralen Nervensystems. II, 1. schlage. Die Färbung gelingt übrigens auch an Celloidinschnitten, mir müssen dieselben sehr schön dünn sein, wenn das Celloidiu nicht stören soll. Noch besser entfernt man dasselbe nach den bekannten Verfahren, wobei aber dann unter umständen auch wieder Nachbeizung mit chrom- saurem Kali nöthig wird. Dicke Celloidinschnitte sind unbrauchbar, weil aus ihnen das Celloidin sich nicht leicht extrahiren lässt und ohne die Extraction nachher die starke Färbung des Celloidins mit Methylen- blau das Farbenbild verdirbt. Man bringt nun die Schnitte, die man nach ihrer Anfertigung nicht mehr als 5 bis 10 Minuten im Wasser liegen lassen darf, für mehrere Stunden in eine concentrirte wässerige Methylenblaulösung *, bis sie tief- dunkelblau gefärbt erscheinen. Sie werden dann leicht in Wasser abgespült, um sie von der noch anhängenden Farbe zu befreien und hierauf bringt man sie ca. 5 Minuten in eine gesättigte wässerige Säurefuchsiulösung. Nach raschem nochmaligem Abspülen in Wasser kommen sie nun wenige Secunden in eine l%o alkoholische Aetzkalilösung und aus ihr sofort in viel Wasser. Hier differenzirt sich rasch das Farbenbild. Die weisse Sub- stanz erscheint dem blossen Auge im ganzen blau bis violett, die graue Substanz dagegen roth. Die mittels Alkohol und Cedernöl aufgehellten und in dickem Cedernölcanadabalsam eingeschlossenen Präparate zeigen bei schwacher Vergrösserung ein sehr überraschendes buntes Bild ver- schieden gefärbter Nervenfasern. Die längsgetroffenen Faserbündel scheinen zum Theil aus rothen, zum Theil aus blauen Fasern zu be- stehen. Auf Querschnitten zeigt sich namentlich bei stärkerer Ver- grösserung, dass die Differenz der Fasern darauf beruht, dass ihre Markscheiden in verschiedener Menge und Vertheilung einerseits die WEiGERT'sche erytrophile, anderseits eine sich mit Methjdenblau färbende Substanz enthalten, die ich in Analogie zur crythrophilen die cyanophile nennen möchte. Man sieht auf quergetroffenen gröberen Fasern die Achsencylinder roth, die Markscheiden in einer bunten Mannigfaltigkeit gefärbt, von welcher die Tafel I einen ungefähren Begriff giebt. Bei den einen Fasern besteht die ganze Markscheide aus cyanophiler Sub- stanz, bei den anderen ganz aus erythrophiler, wieder andere zeigen das Bild der rothen WEiGERx'schen Färbung, noch andere dasselbe ins Blaue übersetzt und endlich wechseln in vielen, ja den meisten Mark- scheiden concentrische Schichten von blau und roth gefärbter Substanz in verschiedener Anordnung. In der grauen Substanz des Rückenmarkes erscheint das GEBLAcn'sche Netz der feinsten Fasern in blauer bis ') Das Methylenblau wurde von Dr. GRi':ni.ER in Leipzig bezogen. II, 1. Sahli: Neue Doppelfärbung des centralen Nervensystems. 5 violetter Färbung auf rothem Grund. Bei genauer Betrachtung erkennt man, dass auch sie sich diiferenziren iu einen rothen Achsencylinder und eine hier im wesentlichen blaue Markscheide. Als sehr inter- essante, farbenprächtige Bilder gebend ist von denjenigen Theilen des centralen Nervensystems, die ich bis jetzt untersucht habe, namentlich auch zu erwähnen die Medulla oblongata in der Gegend der Pyramiden- kreuzung. Wie die bunten Bilder zu Stande kommen, ist sehr leicht zu ver; stehen; sie sind offenbar das Product einer Concurrenz einerseits der Achsencylinderfarbuug mit Säurefuchsin, anderseits der WEiGEEx'schen Säurefuchsinfärbung und einer dieser offenbar analogen Färbung mit Methylenblau, welche letztere ich an anderer Stelle gesondert besprechen werde. Das Resultat ist nun offenbar ein verschiedenes, je nachdem das eine oder das andere Element der Färbungscombination mehr in den Vordergrund tritt imd dies ist wieder abhängig von der Dauer der Farbeinwirkung einerseits und dem Auswaschen anderseits. In diesem Sinne kann es nöthig sein, die Methode im einzelnen Fall je nach der Natur des Präparats etwas zu modificiren, so dass man möglichste Differenzirung und möglichst wenig Mischfarben erhält '. Ein bedauerlicher Uebelstand ist es, dass sich die hier beschriebene Doppelfärbuug nicht immer hält. Ich konnte nicht eruiren, wovon dies abhängig ist, obschon ich viele Versuche in Betreff des Einflusses der verschiedeneu Aufhellungs- und Einschlussmethoden angestellt habe. Cedernholzöl scheint mir mit Rücksicht auf Haltbarkeit das beste Mittel sowohl zum Aufhellen der Schnitte als auch zum Verdünnen des Balsams zu sein. Doch couservirt sich auch damit die Färbung nicht immer. Einige Präparate dagegen haben sich mir nun schon über ein Jahr ziemlich gut gehalten. Ich vermuthe, dass auch die Haltbarkeit von dem bis jetzt so unberechenbaren Element der Härtung abhängt. ') Lässt man den Kalizusatz zum Waschalkohol weg, so erhält man sehr hübsch aussehende Präparate, in denen aber das Element der WEiGEKx'schen Färbung ausfällt, während die Achsencylinder roth und die Markscheiden blau respective als concentrisch geschichtete Ringe blauer Substanz erscheinen. Es beruht dies darauf, dass Säurefuchsin ohne Auswaschung mit Kalialkohol färbt wie Carmin, während das Methylenblau an geeigneten Präparaten die näm- liche Differenzirung wie die WEiGERx'schen Färbungen (nur in Blau) ergiebt, auch wenn man bloss mit Wasser oder Alkohol auswäscht. Es ist zu bemerken, dass bei dieser Art der Doppelfärbung (ohne Kalialkohol) die feinsten Fasern genau ebenso schön hervortreten, wie bei den WEiGERx'schen Färbungen, wäh-. rend bei dem oben besprochenen Verfahren die Differenzirung dieser feinsten Fasern durch das Auftreten von Mischfarben etwas leidet. 6 Sahli: Neue Doppelfärbiing des centralen Nervensystems. II, 1. In Betreff der Bedeutung meiner Färbungsmethode und der Schluss- folgerungen aus den Resultaten der Färbungen erlaube ich mir, hier dasjenige anzuführen, was ich darüber in einem Vortrag im Medicinisch- pharmaceutischen Bezirksverein von Bern gesagt habe : „Ich sehe die Bedeutung meiner Färbung nicht sowohl in der Schönheit und Uebcrsichtlichkeit der erhaltenen Bilder und in der Leichtigkeit, womit sich die durch ihre Färbung oft sehr deutlich charakterisirten Faserstränge verfolgen lassen, als vielmehr zunächst in der Möglichkeit, durch dieselben selbst bei den feinsten Fasern des GEEiiACHSchen Fasernetzes noch zum grossen Theil eine Markscheide nachweisen zu können, worüber die einfachen Färbungen vielfach noch Zweifel übrig lassen. Vor allem aber eröffnet die Methode einen ganz ungeahnten Ein- blick in die Mannigfaltigkeit des Baues der einzelnen Nervenfasern, die bisher meist als wesentlich gleichartige imd nur durch ihre Endapparate charakterisirte Gebilde aufgefasst wurden. Die Mannigfaltigkeit bezieht sich nun allerdings, soviel ich wenigstens bis jetzt sah, nur auf das Verhalten der Markscheiden, die bisher in ihrer Bedeutung sehr wenig gewürdigt wurden. Allein gerade diese Ver- schiedenheit möchte ich als einen Beweis dafür anführen, dass die Mark- scheiden Gebilde von weit höherer Dignität sind, als man bis jetzt immer glaubte. Es hat ja a priori nicht viel Sinn, die Markscheiden, welche viel mehr Raum einnehmen, wie die Achsencylinder, als etwas so Ueber- flüssiges zu betrachten, wie es Physiologen und Pathologen meist ge- than haben. Auch das wohl constatirte Vorkommen von Fuuctions- störungen bei erhaltenem Achsencylinder aber veränderter Markscheide spricht entschieden gegen eine derartige Ansicht. Die über die Func- tion der Markscheiden bisher aufgestellten, bloss zur Verhüllung unserer Unwissenheit dienenden Theorien sind nach ganz elementaren Ueber- legungen völlig haltlos und der sehr rohe, jedenfalls nur cum grano salis richtige Vergleich einer Nervenfaser mit einem Telegraphendraht mag wohl grösstentheils Schuld sein an der geringen Würdigung der Markscheiden. Doppelfärbungen, wie die vorliegende, scheinen mir die Methoden zu sein, die mit gleichzeitiger Berücksichtigung physiologischer und klinischer Thatsachen zur anatomischen Unterscheidung functionell ver- schiedener Nervenfasern noch am ehesten führen dürften. Dabei müssen wir uns aber bewusst sein, dass die Unterscheidung der Nervenfasern in motorische und sensible möglicherweise den Kern der Sache gar nicht trifft und dass das centrale Nervensystem vielleicht nach einem anderen, viel complicirteren Eintheilungsprincip gebaut ist. II, 1. Graf Sp e e : Verf. z. Erhalt, v. Schnittserien m. Hülfe v. Schnittbändern. 7 Von diesem Gesichtspunkte aus gedenke ich meine Untersuchungen über die Vertheilung der verschiedenen Fasern im centralen Nerven- system fortzusetzen. Bis jetzt kann ich an positiven und constanten Thatsachen, constant nicht nur bei verschiedenen Präparaten vom Menschen, sondern auch bei verschiedenen Thierspecies, nur anführen, dass die aus den äussern Keilsträngen in die Ilinterhörner eintretenden Faserbündel einerseits und die Pyramidenkreuzung anderseits reich au cyanophiler Substanz sind. Schon daraus geht hervor, dass die Ein- tlieilung in sensible und motorische Fasern nicht in jeder Beziehung, zunächst nicht in chemischer der Natur entspricht. Periphere Nerven habe ich noch nicht untersucht. Ich behalte mir jedoch dies sowie die weitere Verwerthung der Methode vor. Ich habe noch andere Doppelfärbungen und auch Tripelfärbungen in gleichem Sinne versucht. Sie gaben ähnliche aber viel weniger prägnante Resultate". (Eingegangen am 26. Dec. 1884). Leiclites Yerfahren zur Erhaltung linear g'eordneter, lückenloser Scbnittserien mit Hülfe von Schnittbändern. Von Dr. med. Graf Ferdinand 8pee, Assistenten des physiologischen Instituts der Universität zu Kiel. Wenn man beim Mikrotomiren von Paraffinpräparaten mehrere un- gerollte Schnitte hintereinander herstellt, ohne die Lage derselben durch einen Ibesondern Eingriff zu verändern, so bemerkt man nicht selten, dass jeder neue Schnitt seinen Vorgänger über die Fläche des Messers vor sich herschiebt, um selbst dessen Stelle einzunehmen. Man erhält so bei fortgesetztem Schneiden eine Reihe von Schnitten, die in richtiger Reihenfolge, wie sie geschnitten wurden, hintereinander auf der Messer- fläche liegen. Hebt man eine solche Reihe mit einer daruntergeführten Nadel auf, so zeigt sich manchmal, dass die einzelnen Schnitte mit ihren zusammenstossenden Rändern an einander haften, ähnlich etwa 8 Graf S p e e : Verf. z. Erhalt, v. Schnittserien m. Hülfe v. Schnittbändern. II. 1. wie die Glieder eines Bandwurois aneinander hängen. Man hat also ein durch ßandverklebung mehrerer Schnitte entstandenes Band von Schnitten erhalten. Bisher sind Vorkommnisse wie die genannten als Zufälle beob- achtet worden. Man hatte es nicht in der Hand, mit Sicherheit be- liebig derartige zusammenhängende, geschweige gar grössere Schnitt- reihen, also längere Schnittbänder, anzufertigen. Es leuchtet aber leicht ein, dass letzteres grosse Vortheile bieten würde. Ein Schnittband verhält sich für die Behandlung beim Einlegen wie ein einzelner grösserer Schnitt. Sobald es gelänge nach Willkühr beliebig lange Schnittbäuder sicher herzustellen, wären nicht nur die technischen Schwierigkeiten des mühsamen Ordneus der Schnittserien in der Hauptsache beseitigt, sondern es würde auch der damit verbundene grosse Zeitverlust ge- mieden. Durch zahlreiche Versuche ist es mir nun gelungen, die Bedin- gungen zu ermitteln, die zur Entstehung von Schnittbändern erforder- lich sind und solche in jedem Einzelfalle auf einfache Weise, ohne be- sondere Apparate herzustellen, so dass es mir nun mit grosser Sicher- heit gelingt, Schnittbänder nach Belieben von fast unbegrenzter Länge und durchaus linearem Verlauf, wie ei-" sich für das Einlegen auf den Objectträger am besten erwies, zu erhalten und zwar von jedem Ge- webe, welches sich überhaupt zum Mikrotomiren eignet. Zweck der folgenden Zeilen ist es, das Verfahren, welches ich dazu einschlage, zu allgemeinerer Kenntniss zu bringen. Die Bedingungen seines Gelingens liegen einmal in der Beschaffen- heit der Einbettungsmasse, dann in der Form, die man dem das zu schneidende Object umgebenden Paraffinstücke vor dem Mikrotomiren gegeben hat, endlich in einigen Handgriffen beim Schneiden selbst. Die Einbettungsmasse zunächst besteht aus käuflichem, reinen Paraffin, dessen Schmelzpunkt etwa bei 50'^ C. liegt. Dieses wird in folgender Weise präparirt. Eine beliebige Menge desselben wird in einer offenen Porcellanschale über einer gewöhnlichen Spiritusflamme zunächst geschmolzen und dann weiter erhitzt bis es allmählig, je nach der geringeren oder grössern Quantität des Paraffins schneller oder langsamer (in einer bis sechs Stunden) unter Entwicklung unangenehmer weisser Dämpfe, geringer Reduction seines Volumens und Erhöhung seines Schmelzpunktes um einige Grade), eine braungelbe, dem gelben Wachs oder Honig ähnliche Farbe angenommen hat. II. 1 . Graf S p e e : Verf. z. Erhalt, v. Schnittserien m. Hülfe v. Schnittbändern. 9 Läset man die so erhaltene Masse erkalten, so erscheint sie ganz homogen, ohne jede Luftblase ; ihre Schuittfläehe fühlt sich seifig, fettig an. Dieses ist die von mir definitiv verwandte Einbettnngsmasse. Sie hat die Eigenschaft, dass Schnitte, die beim Mikrotomiren aus ihr gemacht werden, mit ihren aueinanderstossenden Räudern fest und verhältnissmässig leicht bei gewöhnlicher Zimmertemperatur verkleben. Um Präparate darin einzubetten, hat man dieselben Regeln der Entwässerung in absolutem Alkohol, Durchtränkung mit Terpentin u. s.w. wie sie für die Paraffineinbettung überhaupt gelten, zu beachten, und zwar für die in Rede stehenden Zwecke mit ganz besonderer Sorgfalt. Wenn man das von Terpentin durchdrungene Object direct (ohne die Zwischenstufe einer Mischung von Terpentin mit obigem Paraffin 1 : 3) .in die definitive Einbettungsmasse bringt, so wird letztere zu stark terpentinhaltig, was schädlich ist, und muss einmal durch neue ersetzt werden. In letzterer lässt man das Präparat bei einer Temperatur von 60 bis 65" C. je nach der Grösse des Objects eine Viertel- bis sechs Stunden und länger, bis mau sicher annehmen kann, dass es vollständig von derselben durchschmolzen ist. Dann lässt man die Masse mit dem Objecte darin erkalten. Ich benutze als Einbettungsgefäss für kleinere Objecte (Keim- scheiben , Embryonen) mit Vortheil ührschälchen und befördere die Abkühlung nach vollendeter Durchschmelzung dadurch, dass ich die Schalen auf kaltes Wasser stelle. Nach leichtem Amvärmen der Schalenwände kann man später die ganze, das Object enthaltende Paraffinscheibe, ohne Brüche zu riskiren, leicht aus der Schale heraus- hebeln. Das Präparat ist nun schnittßihig. Um ein Schnittband daraus zu schneiden, muss man das überflüssige Paraffin wegschneiden und dabei das zu schneidende Paraffinstück so gestalten, dass die Ränder der zu machenden Schnitte aufeinander passen und eine gradlinige Aneinanderreihung bei der Verkleb ung der Schnitte erfolgen muss. Man erreicht dies dadurch, dass man dem zu mikrotomirenden Paraffinstück durch glattes Beschneiden die Gestalt eines parallelseitigen Prismas giebt, am besten eines solchen, dessen Grundfläche genau ein Recht- eck ist. Das so gestaltete Paraffinstück wird vermittels eines heissen Spatels auf einem Kork festgeschmolzen und im Objecthalter des Mikrotoms so befestigt, dass seine breiten Seiten etwa parallel zur Schneide des Messers (dessen Stellung s. u.) gerichtet sind. Man erreicht dadurch, 10 Graf S p e e : Verf. z. Erhalt, v. Schnittserien m. Hülfe v. Schnittbändern. II, 1 . dass die entstellenden Schnitte mit ihren breiteren Räudern zusammen- stossen, wodurch eine entsprechend grössere Haltbarkeit der Verkle- buug erzielt wird. Im allgemeinen empfiehlt sich , thunlichst wenig Paraffin um das Object herum stehen zu lassen. Eine Schicht von '/j bis 1 '/a mm Dicke an jeder Seite des Objects genügt vollkommen. Je schmäler die Schichte ist, um so näher aneinander kommen natürlich die Gewebsschnitte im Schnittbande zu liegen, um so mehr Schnitte kann man also auf einem begrenzten Räume unterbringen. Zimi Schneiden selbst hat man dem Messe reine zur Schlitten- führung senkrechte Stellung zu geben. Bei Einstellung der Schnittdicke trage man Sorge, dass kein Schnitt dicker als Yioo ™Qi werde, und alle wenigstens annähernd dieselbe Dicke be- kommen. Schnitte von mehr als Yioo m^ rollen leicht; zu grosse Ungleichheit der Schnittdicke unterbricht erfahrungsgemäss leicht die Continuität des Schuittbandes. Am bequemsten und wenigsten zeit- raubend dabei erwies sich mir das (u. a. in den Mikrotomen von Schanze, dessen ich mich meist bediente. Böcker, Zeiss angewandte) Princip der Einstellung des Präparats durch eine senkrecht stehende Schraube. Die Führung des Messers muss ohne Druck der Schwere der Hand, das Durchschneiden des Präparats vollständig und am besten rasch vollzogen werden. Je grösser die Geschwindigkeit des Messers beim Einschneiden ist, desto energischer ist der Stoss, mit welchem der hart an der Messerschärfe liegen gebliebene Rand des zuletzt voll- endeten Schnittes auf den gegenüberstehenden Rand des neu begonnenen Schnittes trifft. Dieser Stoss ermöglicht gerade eine recht innige Ver- klebung der Schnittränder '. Während des Durchschneidens selbst verschiebt der neu entstehende Schnitt um die eigene Breite seine (resp. seinen) Vorgänger auf der Fläche des Messers höher. Am sichersten gelingen Schnittbänder von Präparaten mit kleiner Schnittfläche, etwa bis zu 4 qmm. Doch gelangen mir bei besonders günstigen Geweben solche aus Schnitten von 1 cm Quadratinhalt. ') Die mikroskopische Untersuchung der Verklebungsstellen hat mir keine bestimmten Anhaltspunkte ergeben über das Wesen dieser Verklebung. Die- selbe könnte erzeugt sein durch Verschmelzung der Ränder in Folge der beim Stoss entwickelten Wärme, könnte aber auch einfach durch festes Ineinander- greifen zackiger Unregelmässigkeiten der Schnittränder sich erklären; für eine feste Adhäsion würde dabei die fettige Beschaffenheit der Einbettungsmasse günstig sein. Wo trotz langsamen Einschneidens des Messers doch Bänder er- halten wei'den, ist wohl nur der letztere Factor wirksam. II, 1. Graf S p e e : Verf. z. Erhalt, v. Schnittserien m. Hülfe v. Schnittbändern. 1 1 Fast stets vermochte ich von kleineren Objecten Schnittbänder er- liebliclier Länge (versuchsweise bis über 50 cm bestehend aus 800 bis 1000 Schnitten) zu erhalten. Die Schnitte haften so fest aneinander, dass man noch Schnittbänder von 30 bis 40 cm Länge an einem Ende ganz von ihrer Unterlage aufheben kann, ohne dass sie zer- reissen. Für den praktischen Gebrauch empfiehlt sich, die Bänder nicht länger als 15 bis 20 cm werden zu lassen. Ist es bis zu dieser Länge über den Messerrücken hinaus angewachsen, so durchtrennt man das' Band oberhalb des letztern zwischen zwei Schnitten mit einer feinen Scheere und legt das abgeschnittene Stück vor Wind und Wärme ge- schützt bei Seite, um vorläufig weiter zu schneiden. Damit das Band beim Schneiden nicht über den Rücken der Klinge herabhängt, bringe ich einen wagerecht stehenden Carton hinter letzterem an, über den sich das Band mit etwas Nachhülfe hinschiebt, wenn seine Länge über die Breite der Klinge hinaus zunimmt. Stösst es dabei auf irgend einen Widerstand, so dass es sich, statt sich beim Schneiden glatt vor- zuschieben, in Falten legt (die übrigens meistens nicht schaden), so kann man dieser Unregelmässigkeit leicht dadurch abhelfen, dass man das Band durch einen in der Nähe seines freien Endes untergeführten Spatel hebt und dann gestreckt wieder hinlegt. Beim Einlegen der Bänder auf den Objectträger verfahre ich so : Ich messe mit dem Zirkel Stücke des Schnittbandes von solcher Länge ab, wie sie mir im Verhältniss zum Objectträger passend scheinen. Bei grossen Objectträgern (40 : 75 mm), wie ich sie mir für diese Zwecke habe herstellen lassen, beträgt die Länge eines solchen Stücks 4 bis 5 cm. Es werden deren soviele, parallel der längeren Seite des Object- trägers auf diesen gelegt, als zweckmässig erscheint. Die für das Durchmikroskopiren der Serien bequemste Art der Ordnung, die Stücke so zu legen, dass die Reihenfolge der Schnitte in den Reihen mit gerader Nummer umgekehrt verläuft wie in den Reihen mit ungerader Nummer, hat ihre Schwierigkeiten wegen vielen Mani- pulirens mit den Schnittbändern (man muss die der ungeraden Reihen auf die entgegengesetzte Fläche legen wie die der geraden) und leicht vorkommenden Verwechselungen. Es empfiehlt sich deshalb, in allen Reihen dieselbe Reihenfolge der Schnitte beizubehalten. Behufs Fixirung der Bänder auf dem Objectträger bediente ich mich mit sehr gutem Erfolge der (nach Mittheilung an Professor Hensen) zuerst von Dr. Flögel zur Aufklebung von Schnitten angewandten Gummilösung. Eine musterhaft glatte Ausbreitung der Schnitte erzielt 1 2 Graf S p e e : Verf. z. Erhalt, v. Schnittserien m. Hülfe v. Schnittbändern. II. 1 . man dabei vermittels der durcli Dr, von Nooeden * zu diesem Zwecke angegebeneu Methode der Erwärmung des Objeetträgers. Lückenlose Serien von 300 bis 400 Schnitten (z. B. von einem Embryo) schneide ich nach der beschriebenen Weise (als Bänder) ohne Schwierigkeit in */, bis % Stunden. Zum Aufkleben einer solchen Serie auf den Objectträger brauche ich höchstens 1 bis l'/j Stunde. — Früher brauchte man, um dasselbe zu erreichen, fast einen ganzen Tag! Mit einiger Sorgfalt lässt sich die Ordnung der Schnitte so ele- gant herstellen, dass dieselben wirklich wie die Buchstaben einer Druck- schrift in schnurgeraden Reihen und innerhalb dieser in gleichen Ab- ständen von einander liegen. Dazu kommt noch der Vortheil, dass man durch geschicktes Be- schneiden des Präparats vor dem Mikrotomiren ein sehr dichtes Bei- sammenliegen der Schnitte erzielen und so selbst lange Serien auf rela- tiv wenigen Objectträgern unterbringen kann. Letzteres zu weit zu treiben, empfiehlt sich indessen nicht. Wie viele Schnitte man zweck- mässig auf einen Objectträger zusammenbringt, hängt von ihrer Grösse ab. Von Hühuerkeimscheiben habe ich freilich bis zu 600 Schnitte auf einen Objectträger (35 : 70 mm) zusammengelegt, allein praktischer er- weist es sich, auch von solchen kleinen Präparaten nicht mehr als etwa 300 bis 400 auf einen Objectträger zu bringen, um genügend Platz zum Etikettiren zu behalten. Kiel, den 10. October 1884. Nachtrag. Nach Abschluss vorstehenden Aufsatzes erfuhr ich von Herrn Pro- fessor KoLLMAKN, der sich freundlichst für mein Verfahren interessirte, dass eine der von mir beschriebenen sehr ähnliche Methode von einem italienischen Histologen an der zoologischen Station zu Neapel demon- strirt worden sei. Ich bin indess ausser Stande, Genaueres hierüber mitzutheileu, da mir ein detaillirterer Bericht, nach welchem ich nach- träglich suchte, nicht zugänglich wurde. ») VON NooiiUEx, Arch. f. Anat. u. Physiol., Anat. Abthlg. 1883, p. 247, Anmerk. — Hier ist das ganze Verfahren der Aufklebung und Ausbreitung beschrieben. II, 1. Giei'kc: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 13 Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. Von Professor Dr. Haus Gierke. in Breslau. Wir haben in dem ersten Theile dieser Arbeit ' an der Hand einer thunlichst vollständigen üebersicht der einschlägigen Literatur die ge- ' schichtliche Entwicklung der Färbemethoden kennen gelernt. Wir müssen nunmehr noch einen Blick auf die für diese Technik ver- wandten Stoffe, auf ihre natürlichen Eigenschaften, wie auf ihre Her- stellung und Fabrication werfen. Hieran wird sich dann im weiteren Verlauf der Abhandlung und theilweise auf den zunächst folgenden Ausführungen fassend, die theoretische Betrachtung der Vorgänge beim Färben anschliessen. Ich bin überzeugt, dass die folgenden Notizen Manchem der Leser dieses Aufsatzes Neues bringen werden, denn im allgemeinen ist, wie ich zu bemerken vielfach Grelegenheit hatte, bei den mikroskopischen Forschern die Kenntniss der Naturgeschichte der Stoffe, welche sie als Hülfsmittel ihrer Arbeiten benutzen, keine allzu grosse. Und doch denke ich, ist es für die Männer, welche an der Spitze der modernen Naturforschung stehen, unwürdig, wenn sie von diesen Stoffen, mit denen sie täglich, wenn auch nur als mit technischen Unterstützungsmitteln ihrer Forschungen , zu thun haben, nichts Weiteres wissen als für ihre Arbeiten nothwendig ist. Gerade diese Färbemittel haben der neueren Zoologie und Histologie so unge- mein grosse Dienste geleistet, dass sie es wirklich verdienen, auch an und für sich und nicht nnr in Hinsicht ihrer für die mikroskopische Technik wichtigen Eigenschaften genauer angesehen zu werden. Da nun auch die Bücher und Aufsätze, welche die Färbemethoden behandeln, fast ausnahmslos über die Naturgeschichte der für sie verwandten Stoffe so gut wie ganz hinweggehen oder nur einige höchst dürftige dieselbe betreffende Bemerkungen enthalten, so sei es mir hier gestattet, das Nothwendigste zu bringen , indem ich freilich von manchen Dingen, welche ich als gar zu bekannt voraussetzen darf, absehe^. Da ich über 1) Cfr. diese Zeitschrift Bd. I, 1884 p. 62, 372, 497. ^) Ich benutzte für diesen Zweck ausser einer Reihe von Monographien in den A.nnalen der Chemie und Pharmacie, dem Journal für praktische Chemie 14 Gierke: Färberei zu mikroskoi)ischen Zwecken. II, 1. die Naturgeschichte und Bereitiingsweise des Carmins bereits ausführlich gesprochen habe (Bd. I p. 72 ff.), gehe ich hier nicht weiter auf ihn ein und wende mich zunächst zu den übrigen Tinctionsmitteln orga- nischer Natur. — Das Campecheholz oder Blau holz (Bois de Campeche, Log wo od) und sein krystallinischer Farbstoff, das Hämatoxylin. Dieses Farbholz ist das blutroth aussehende Kernholz des in West- indien und Centralamerica vorkommenden Baumes Haematoxylon cam- pechianum L. aus der Familie der Caesalpineen. Die Qualität des Holzes ist nach den Productionsländern sehr verschieden, und wird das aus Domingo stammende am wenigsten geschätzt,- besser ist das aus Hon- duras, das beste jenes aus der Campechebai. Das Holz ist, wie schon erwähnt, blutroth, aber nur in fi-ischem Zustande, an der Luft wird es zum mindesten an der Oberfläche dunkler braunrotli und allmählig violett bis blau. Auch der aus dem Holz gewonnene krystallinische Stoff ist bräunlich und erlangt seine blaurothe Farbe erst durch die Einwirkung der Luft oder durch Zusatz von Alkalien. Während die färbende Wirkung des Holzes schon seit alter Zeit benutzt wurde, ist der krystallinische Farbstoff aus ihm erst in neuerer Zeit erkannt und dargestellt worden. Er wurde zuerst von Cheveeul näher untersucht. Dieser nannte ihn Hematine oder Hämatin ; ein späterer deutscher Unter- sucher, Eedmann, aber fand diesen Namen uuzweckmässig, weil ja der Farbstoff des Blutes ihn schon führt und wählte Hämatoxylin. Derselbe Forscher und ebenso Hesse berechneten für diesen Stoff die Formel C32H,4 0,2. Aus ihm lässt sich noch ein gefärbter Körper Hämatein, und zwar in seiner Ammoniakverbindung abscheiden. Da er aber für uns kein weiteres Interesse hat, auch noch ziemlich unbekannt ist, so gehe ich nicht weiter auf ihn ein. Aus dem geraspelten Farbholz wird in eigens dazu construirten Kesseln durch Wasserdampf von starkem Druck (etwa 3 Atm.) eine Farbbrühe ausgezogen , welche durch weiteres Eindampfen zu einem Extract umgewandelt wird. Dieser kommt in zwei Formen vor, einmal in syrupartiger Consisteuz und zweitens als eine starre, spröde, pech- und Wagner's JaLresbericlite über die Leistungen der chemischen Technologie das grosse Lehrbuch der Chemie von Guaham-Oito, verschiedene Werke über Waarenkunde. dann Bom.ey, Chemische Technologie der Spinnfasern etc. (Braunschweig 1867 — 1883) (für meine Zwecke entschieden am reichhaltigsten) und Dr. G. Stein, Die Bleicherei, Druckerei, Färkerei und Ajjpretur der baum- wollenen Gewebe (Braunschweig 1884). Die über Anilinfarben handelnden Werke sind bei dem diese betreffenden Abschnitt angegeben. II, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 15 schwarze Masse, die in Kisten versandt wird. Die färbende Kraft dieses festen Extractes, der natürlich in Wasser leicht löslich ist, über- trifft die des Holzes etwa um das Fünffache. Ana dem Extract wird jetzt das krystallinische Hämatoxylin her- gestellt, während CHEVREUii es noch direct aus dem geraspelten Blau- holz bereiten musste, da er den Extract nicht kannte. Aus diesem letzteren werden die Hämatoxylinkrystalle durch Auszug mit Aether gewonnen. Aus 500 g Extract soll man mit 5 Pfund Aether etwa 60 g Hämatoxylin erhalten. Dasselbe kommt je nach dem Wassergehalt in zwei Krystallformen vor. Die eine Form stellt weisse, glänzende dünne Nadeln dar (es sind die wasserreicheren), die anderen, weniger Wasser enthaltenden sind körnig, hellgelb, verschieden gross und von nicht sehr regelmässiger Gestalt. Die Flächen sind vielfach gekrümmt. Sie sollen dem hemiedrisch-rhorabischen System angehören. Die letzteren, deren Krystallform freilich sehr häufig durchaus nicht zu erkennen ist, da sie fast runde Körner bilden, eignen sich meiner Erfahrung nach für die mikroskopische Technik noch mehr als die ersteren, die aber auch voll- kommen brauchbar sind. Das Hämatoxylin jedoch ist entschieden dem auch für unsere Zwecke und zwar besonders viel in England verwandten Extract vorzuziehen. Das erstere löst sich in kaltem Wasser sehr lang- sam und in geringem Grade. Doch gelingt es wohl, eine einprocentige Lösung herzustellen, wenn man einige Tage wartet. Sehr viel leichter löst es sich in kochendem Wasser. Sehr grosse Mengen ferner werden in Alkohol und in Aether gelöst. Die Einwirkung des Lichtes färbt die Lösungen roth, starke alkoholische Lösungen werden dunkelbraun. Zusatz von Säuren, besonders auch Essigsäure, wandelt das Roth oder Braun in Gelb um. Die Alkalien, Ammoniak und Alaun machen aus der gelblichen oder rothen Farbe ein schönes intensives Blau oder Violettblau. Durch Chromsalze wird der Farbstoff schwarz oder grau. Die besten Methoden der histologischen Verwendung des Häma- toxylins wurden schon früher besprochen (besonders Tabelle Nr. 37 und 42 und Text p. 544). Es ist dem hier nichts weiter hinzuzusetzen. Der Krapp und seine Farbstoffe. Der Krapp , Färberröthe (garance, madder) ist eine Pflanze aus der Familie der Rubiaceen imd kommt in vielen Arten vor. Drei derselben werden für die Farbindustrie gebraucht, nämlich Rubia tinctorum in Europa, Rubia peregrina im europäischen und asiatischen Orient und Rubia mungista in Ostindien und Japan. Seit uralten Zeiten im Orient bekannt und gebraucht, kam die Krapppflanze dann auch nach Griechenland und Italien und von dort nach Frankreich und Deutschland. Die Griechen nannten sie 16 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. II, 1. erythrodanon und die Römer varaiitia oder rubia. Man gebrauchte sie zu allen Zeiten in grosser Menge für die Färberei, und wurde sie auch das ganze Mittelalter hindurch angebaut. In der ersten Hälfte unseres Jahrhunderts stieg der Verbrauch der Krappfarben ausserordentlich, und Frankreich allein exportirte für mehr als 20 Milionen Fr, jährlich. In der neuesten Zeit aber ist die ganze Production und die Industrie der Krappfarben durch den gewaltigen Aufschwung der Anilinfarben stark geschädigt worden. Die aus der Krapppflanze gewonnenen Farbstoffe werden heute billiger künstlich dargestellt. Der Farbstoff ist in dem reich entwickelten Wurzelwerk der Krapp- pflauze enthalten. Stengel, Blätter und Blüten sind fast ganz frei davon. Der günstigste Boden für sie ist ein lockeres, warmes und etwas feuchtes Land. Da sich der Farbstoff in der Wurzel der pereunirenden Pflanze von Jahr zu Jahr mehr entwickelt, so lässt mau sie in Europa drei, im Orient sogar sechs Jahre lang stehen, benutzt aber während dieser Zeit die stets wieder ausschlagenden Blätter als Viehfutter. Die geern- teten Wurzeln sollen ein bis zwei Fuss lang und fingerdick sein und inwendig gelb, aussen röthlich aussehen. Sie werden getrocknet, wo- möglich auf einer Darre, in künstlich erwärmtem Raum und in eignen Krappmühlen zu Pulver vermählen. In dieser Form kommt das Product in den Handel. Die verschiedenen Sorten werden nach den Gegenden, in denen sie gewonnen werden, benannt, so giebt es holländischen Krapp, elsässer, schlesischen (Breslauer Röthe) u. s. w. Die Farbstoffe der Krapppflanze sind in den Wurzeln nicht im freien Zustande abgelagert, werden vielmehr durch Zersetzung primär in jenen vorkommender Substanzen gewonnen. Rochleder • isolirte 1851 zuerst ein Glycosid aus den Wurzeln, das er Ruberythrinsäure C2CH28O14 nannte. Es lässt sich durch Behandeln mit Säuren, Fer- menten und Alkalien in Zucker und Alizarin zerlegen. Ein anderes, weniger bekanntes Glycosid, das aber dem eben erwähnten analog ge- staltet zu sein scheint, ergiebt das Purpurin. Entdeckt wurden beide Farbstoffe bereits 1826 von Robiquet und Colin, aber erst viel später konnten sie rein dargestellt werden. Auf die Art und Weise, wie diese Stoffe fabrikmässig gewonnen werden, kaun ich mich hier um so weniger einlassen, als es mehrere und zwar ziemlich complicirte Bereituugs- weisen giebt imd diese Farben für die histologische Technik doch nur untergeordnete Bedeutung haben. — a) Das Alizarin CiiHgOi im ») RocHLEDEu in Annal. d. Cliem. u. Pharm. Bd. XC p. 321, Bd. XCIII p. 205. n, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. 17 reinen Zustande kommt in Form langer, glänzender rother oder roth- gelber Krystallnadeln vor. Es ist in kaltem Wasser fast unlöslich, und selbst siedendes Wasser löst nur 0-031 Procent. Dagegen wird es leicht von Aether, Benzol, Petroleum, Glycerin oder Eisessig gelöst und zwar mit gelber Farbe. Warmer Alkohol löst es ebenfalls gut, kalter wenig, b) Das Purpur in CijHgOj ist im kochenden Wasser mit tiefgelber, ins Rothe spielender Farbe löslich. Ebenso lösen es gelblich Benzol, Aether, Eisessig, Schwefelkohlenstoff und Alkohol ; in coucentrirter Schwefelsäure löst es sich rosenroth. Gleichfalls tiefroth lösen es Sodalösuug, Ammoniak, Kali- oder Natronlauge. Es sublimirt in rothen federförmigen Krystallen oder in bald kürzeren, bald längeren Krystallnadeln. Neuerdings sind die natürlichen aus der Krappwurzel dargestellten Farbstoffe fast ganz durch das künstliche aus Anthracen fabricirte Alizarin verdrängt worden. Die Entdeckung des künstlichen Alizarius war wissenschaftlich von grösstem Interesse und sollte auch auf die Industrie der Farbstoffe von ausserordentlicher Bedeutung werden. Den erstereu Punkt betreffend, so gelang es eben hier zum ersten Mal, einen aus dem Pflanzenreich stammenden Stoff auch synthetisch darzustellen. Im Jahr 1868 war es den Chemikern Geäbe und Liebeemann gelungen, das Alizarin in Anthracen umzuwandeln ; sie bestrebten sich daher auch das Umgekelirte zu erreichen, und nach vieler Mühe gelang es ihnen auch, vermochten sie aus Anthracen Alizarin herzustellen. Im Jahr 1869 wurde in England das erste Patent auf eine künstliche Darstelluugsweise des Alizarins ertheilt. Um die grosse Bedeutung dieser Industrie zu erkennen, brauchen wir nur einige statistische Zahlen zu betrachten. Im Jahr 1880 wurden aus Deutschland allein 5887 Tonnen Alizarinpaste exportirt. Gegenwärtig bestehen 15 grosse Alizarinfabrikeu , welche zusammen 10500 Tonnen im Werth von 30 Millionen Jl/l produciren. Natürlich litt die Krappproduction in dem Verhältniss, in welchem die des künstlichen Alizarin sich hob. So wurden in dem frühereu Eldo rado des Krapps, in dem Departement Vaucluse, 1862 26850 Tonnen desselben gewonnen, 1878 nur noch 500 Tonnen, und der Preis sank von 28 bis 32 M pro 50 kg auf 6 bis 8 AL Das Alizarin kommt in Form von Pasten, die früher 10 und jetzt 20 Procent Trockengehalt besitzen, in den Handel. Es wird in unge- mein grossen Quantitäten für die Färberei verwandt. Alkanna. Die Wurzeln der Alkannapflanze (Alcanna tinctoria = Anchusa tinctoria L.), auch Schminkwurzel, Ochsenzungenwurzel odeT Orcanette genannt, liefern einen carmoisinrothen Farbstoff. Die Pflanze Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 1. 2 lg Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. II, 1. wächst in Griechenland, Cyperu, Italien, Spanien, Südfrankreich mid Ungarn. Die Wurzeln sind dünn, höchstens fingerdick und einige Zoll lang. Sie werden zerschnitten und mit Wasser stark ausgewaschen. Dann wird aus ihnen mittels Alkohol der Farbstoff extrahirt, der dann noch weiter mit Aether behandelt wird, bis dass er als eine harte, spröde, amorphe, glänzende, trockne, dunkelrothe Substanz erkaltet. Dieselbe löst sich nicht in Wasser, dagegen carmoisinroth in Alkohol. In Aether und fetten sowie ätherischen Oeleu wird der Farbstoff auch gelöst. Alkalien lösen ihn^mit blanrother Farbe, Säuren macheu diese Lösungen roth. Viele Metallsalze fällen den Farbstoff aus der alkoholischen Lö- sung; die Farbe dieser Niederschläge ist sehr verschieden. So bewirkt Zinnchlorür einen carmoisinrothen Niederschlag , Quecksilberchlorid einen fleischfarbigen, Bleiessig einen blauen und Eiseusalze einen dunkel- violetten. Nach längerem Kochen der weingeistigen Lösung fällt ein noch in Aether löslicher Körper von dunkelgrüner Farbe aus, das Alkannagrün. Orseille ist ein Präparat, das neben manchen anderen aus einer Flechte Roccellatinctoria ' gewonnen wird. Dieselbekommt besonders vom grünen Vorgebirge und wird deshalb auch als cap-vert bezeichnet. Da ihre Bedeutung für die histologische Technik eine höchst unbedeutende ist, gehe ich auf ihre Naturgeschichte und auf die Eigenschaften der zahl- reichen aus ihr hergestellten Präparate nicht genauer ein und bemerke nur kurz Folgendes : In der Familie der Flechten (Lichenes) sind gewisse Verbindungen sehr verbreitet, welche entweder selbst chromogene sind oder doch durch irgend welche Einwirkung sich derart spalten, dass eins der entstehenden Spaltungsproducte ein Chromogeu ist. Diese letzteren aber sind nicht selten wiederum eine gepaarte und spaltuugs- fähige Verbindung, welche in eiu einfacheres Chromogen und eine Säure zerfallen kann. Derartige gepaarte Chromogene der Lichenarten, die sogenannten Flechtensäuren, zerfallen bei der Behandlung mit Alkalien, vielleicht auch schon durch Kochen in eine einfachere Säure und einen zweiten Körper. Das am meisten vorkommende Spaltungsproduct der ersten Klasse ist die Orsellinsäure, die aber wieder in Orcin und Kohlen- säure zerfällt. Das Orcin nun, ein durch Behandlung mit Ammoniak und Sauerstoff roth werdendes Pigment, ist wohl in den allermeisten Flechtenarten das eigentlich färbende, aber in sehr verschiedenen Ver- ') Ausser Roccella werden auch noch andere Flechten zur Bereitung der Orseille verwandt, wie z. B. Liehen tartaricus, Varlolaria dealbata und Gyro- phora pustulata. IIj !• Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 19 bindungen vorkommende Princip. Von den verscliiedenen in den Flechten vorkommenden Stoffen sind besonderszii nennen Erytliriusäure C4„H..^O.,o, Orsellinsäure C.H^Os, Orsellsäure C32H,4 0,4, Orcin C,4H8 04 + 2 aq lind endlich Orcein C 4 H^ NO«. Eine grosse Anzahl von Farbmaterialien, welche in der verschie- densten Weise bereitet werden, und deren chemische Zusammensetzung zum Theil noch recht unbekannt ist, entstammen diesen Flechten. Orsellsäure und besonders Orcein bilden in den meisten den eigentlichen färbenden Stoff. Hier sei nur die schon erwähnte Orseille und der Lackmus herv^orgehoben. Orseille (engl, archil, italienisch oricello) ' wird in der Form eines rothen oder violetten Teiges (auch wohl als Pulver) in den Handel gebracht. Zu ihrer Bereitung werden die gepulverten Flechten mit Urin vermischt und an einem warmen Ort bei Zutritt der Luft längere Zeit stehen gelassen. Bei der sich einstellenden Gährung tritt die Spaltung der Flechtensäuren ein und es bildet sich aus ihnen durch die Einwir- kung des dem Harn entstammenden Ammoniak und der atmosphärischen Luft Orcein. Der in der Chemie und unter den verschiedensten Verliältnissen so ungemein Jiäufig zum Nachweis der sauren oder alkalischen Reaction gebrauchte Lackmus findet in der histologischen Technik als Tinctions- mittel sehr geringfügige Verwerthung und ist in der That als solches auch ohne Vortheil anderen Farbstoffen gegenüber. .Doch, glaube ich, wird er, wenn die jetzt sehr vernachlässigte Mikrochemie wieder mehr zu Ehren kommen wird, auch für die Zwecke dieser mehr verwandt werden. Uebrigens bleibt hinsichtlich der chemischen Natur dieses Farbstoffes und in Bezug auf den Vorgang seiner Erzeugung noch Manches aufzuhellen. Er wird ganz ähnlich wie Orseille aus der Leca- nora tartarea und anderen Flechten gewonnen. Den verwesenden, mit ammoniakalischen Flüssigkeiten versetzten Stoffen wird Alaun, Pottasche und Kalk zugesetzt. Um eine feste Masse zu erzeugen, wird noch Sand und Kreide hinzugefügt, und so kommt der Lackmus in Würfel- form in den Handel. Doch wird ja auch ein wässeriger Auszug, die Lackmustinctur, benutzt. Der eigentlich rothe Farbstoff der Flechte nimmt durch den Zusatz der Alkalien die für den Lackmus charakteri- stische blauviolette Färbung an, die bekanntlich durch Säuren wieder in die rothe Nuance zurückgeführt werden kann. ') Kaum unterschieden von der Orseille sind die Präparate Orseillecarmin, Persio, die sogenannte Echte Orseille und der Pourpre frangais. 9* 20 Gierke: Färberei zu mikroskopiscLen Zwecken. II, 1. Indigcarmiu. Der wichtigste aller pflanzlichen Farbstoffe, der Indigo, wird in der histologischen Färbeteclmik nicht verwandt; da jedoch ein aus ihm hergestelltes Präparat, der Indigcarmin, verschiedent- lich gebraucht wird, muss ich auch dem Indigo eine ganz kurze Be- sprechung widmen. Er ist kein eiufjicher Körper, sondern ein Gemisch verschiedener Stoffe, das ein künstlich aus einer Reihe von Farbpflanzen hergestelltes Product ist. Vornehmlich sind es die mannigfachen Arten der Gattung Indigofera aus der Familie der Papilionaceen, besonders Indigofera Auil , tinctoria , disperina , argentea , pseudotinctoria etc., welche unseren Farbstoft' liefern. In allen Welttheileu wird eine oder die andere dieser Pflanzen cultivirt und für Indigobereitung benutzt. Zu gleichem Zweck wird noch in Europa (zumal iu Schlesien und Thü- ringen) der Waid (Isatis tinctoria) aus der Familie der Cruciferen ange- baut. Weniger reich an Farbstoff sind Polygonum tinctorum, der Färbe- knöterich, mehrere Neriumarten, Nerium tinctorum und einige Orchideen. Der Saft dieser Pflanzen enthält den Farbstoff. Um ihn zu gewinnen, werden jene in Gruben oder Kufen mit Wasser der Gährung überlassen. Dieselbe wird sehr lebhaft und ist nach 12 bis 15 Stunden beendet. In einigen grossen Gefässen oder Bassins Avird dann die durch die Gährung erhaltene gelbe Flüssigkeit sehr viel gerührt und mit der atmosphärischen Luft in Berührung gebracht. Hierbei scheidet sich der Indigo als eine blaue flockige Masse ab, die sich bei längerem Stehen zu Boden .setzt. Sie wird noch gekocht, ausgepresst imd ge- trocknet. Wenn auch in den verschiedenen Productionsländern die Be- reitungsweise etwas verschieden ist, so bleibt das Princip doch immer dasselbe. Auch die Waldpflanze wird in der Weise bearbeitet. Aus dem so gewonnenen im Handel vorkommenden Indigo wird das Indig- blau C,f, HjoNj 0.2 hergestellt. Dies verflüchtigt sich beim Erhitzen und sublimirt erkaltend in blauen, blättrigen, dem rhombischen System angehörenden Kiystallen. Es ist in Wasser, verdünnten Säuren und Alkalien unlöslich, ebenso im kalten Alkohol, ein wenig löst es sich in heissem Alkohol, und etwas besser in Chloroform und Eisessig. Noch reichlicher wird es von heissem Anilin, Nitrobenzol oder Phenol aufge- nommen. — Der Indigo gehört zu den allerältesten organischen Farb- stoffen. Schon seit mehren tausend Jahren wird er in Indien benutzt. Auch heute hat er seiner vortrefflichen Eigenschaften wegen durch die Anilinfarben nicht verdrängt werden können, denn im ganzen soll jetzt die jährliche Production 8,225,000 kg in einem Werth von 80 Millionen Mark betragen. Die Hälfte dieser Quantität wird in Bengalen ge- wonnen. II, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 21 Indigblau wird ausser von den oben erwähnten Verbindungen auch durch concentrii'te Schwefelsäure gelöst. Dabei bildet sich Indig- Schwefelsäure (Iiidigdisulfosäure , auch Cörulinschwefelsäure genannt) Cio Hg (SO3 H)> N2 0^. Sie ist leicht in Wasser und Alkohol löslich und bildet gern Salze mit den Alkalien. Durch Sättigung der Lösung des Indigo in Schwefelsäure mit kohlensaurem Kali entsteht das indig- schwefelsaure Kali in Form eines schönen blauen Niederschlages. Kurz wird es als Indigcarmiu * bezeichnet und als solcher in den Handel gebracht. Er ist in Wasser löslich, aber unlöslich in Alkohol. Jetzt wird vielfach an Stelle des Kalisalzes das eben so benannte Natronsalz, zu dessen Darstellung Kochsalz oder Soda verwandt wird, für die In- dustrie gebraucht. Die Anilinfarben-. Unter diesem Namen habe ich eine An- zahl von Farben zusammengestellt, welche, wie wir sahen, in neuerer Zeit ebenso wichtig für unsere histologische Färbetechnik wie für die ganze Farbenindustrie geworden sind. Ihrer ausserordentlichen Bedeu- tung wegen muss ich hier, trotzdem diese Abhandlung schon eine allzu grosse Länge erreicht hat, noch etwas näher auf ihre Naturgeschichte und ihre chemischen Eigenschaften eingehen. Ich halte dies für um so nothwendiger, als meiner Erfahrung nach die mikroskopischen Forscher im allgemeinen eine ungemein geringe Kenntuiss derselben besitzen und von den betreffenden Stoffen sehr häufig nicht mehr als die Farbe kennen. Ich bilde mir ein, dass mancher Mediciner oder Naturforscher diese kurze Darstellung derjenigen Farbstoife, denen wir die aller- wichtigsten und interessantesten Entdeckungen der neueren Forschung verdanken, ganz gern sehen wird; besonders da in den Handbüchern der mikroskopischen Technik und in ähnlichen Werken derartige Aus- einandersetzungen nicht zu finden sind ^. Leider zwingen mich die eng 1) Auch lösliches Indigblau oder Sächsischblau genannt. Es wird für die Färberei von Wolle und Seide viel gebraucht. ~) Wenn ich in dieser Arbeit die hier gemeint künstlich dargestellten organischen Farbstoffe Anilinfarben kurzweg genannt habe, so bin ich dem allgeräeinen Gebrauche gefolgt. Unter dieser Bezeichnung sind die in Rede stehenden Farben am bekanntesten. Der Name The er färben würde wohl richtiger sein und alle künstlich dargestellten organischen Farbstoffe, auch die Alizarine umfassen die Bezeichnung. Anilin rührt daher, dass Fritsche bei Zerlegung des Indigo 1840 einen Körper fand, der dem schon bekannten durch trockene Destillation des Indigo erhaltenen Crystallin sehr ähnlich war. ■') Die Literatur, welche ich für obige Darstellung benutzte, setzt sich ausser einigen Abhandlungen und ausser den Prospecten und Preisverzeich- nissen einiger grosser Anilin- und Alizarinfabriken aus folgenden Werken zu- 22 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. ü, 1. ■ gezogenen Grenzen dieser Arbeit, Verhältnisse und manche interessante, diese Farbstoffe betreffenden Thatsachen auszulassen und über ihre chemischen Beziehungen schneller hinwegzueilen als für ein gründliches Verständniss derselben gut ist. Wie aus der unscheinbaren, ja hässlich widerwärtigen, langsam dahin kriechenden Raupe der farbenprächtige, graziös von Blume zu Blume flatternde Schmetterling sich hervorbildet, so entstehen aus dem schwärzlich unschönen, stinkenden Theer die herrlich leuchtenden in allen Nuancen des Regenbogens erglänzenden Anilinfarben. Aus der Nacht wird hier das Licht geboren. Von allen von der Mutter Erde ihren Kindern gewährten Naturproducten kann die Steinkohle als der das neunzehnte Jahrhundert am meisten charakteristische Stoff ange- sehen werden. Er hat mehr als jeder andere dazu beigetragen, ihm das eigenthümliche es allen früheren gegenüberstellende Gepräge zu geben und die moderne Cultar herbeizuführen. Es kann nicht meine Aufgabe sein, dies hier näher auszuführen. Es sei nur auf die Bedeu- tung hingewiesen, welche die Steinkohle für den Verkehr zu Lande und zu Wasser, und für die ganze mit Dampfmaschinen arbeitende Industrie hat, auf die Umgestaltung, welches das abendliche und nächtliche Leben der Städte durch die Gasbeleuchtung gewonnen hat und neben vielen anderen Verwendungsweisen auf die ganz ungemein reichhaltige und stets noch steigende Ausnutzung des aus den Steinkohlen ge- wonnenen Theers. Eine grosse Reihe der verschiedensten und in der mannigfaltigsten Weise zu verwerthenden Stoffe werden jetzt fabrik- mässig in grossen Mengen aus ihm dargestellt und in den Handel ge- bracht. Sie gehören zu den gebräuchlichsten und nützlichsten Sub- stanzen unseres heutigen Lebens. Ich hebe aus der ungemein grossen sammen. G. Tfientus , Die technische Verwerthung des Steinkohlentheers. MiKiiziNSKi, Tbeerfarben, Bolley, Handbuch der chemischen Technologie Bd. V Lief. 3. Die künstlich erzeugten organischen Farbstoffe von Dr. Koi-p, 1874, 4. Lief. (1880), 5. Lief. (1883). Neuere Entwicklung der Tbeerfarbenindastrie I und II von Dr, Rruard Mkyek. Em mehr allgemeinverständliches Werk über diese Farbstoffe ist von Dr. Joskph Bersch, Die Fabrication der Anilin- farbstoffe. Wien 1883 (Aus der in Hartlebens Verlag erscheinenden chemisch- technischen Bibliothek Bd. XLIV). Als das vorzüglichste Buch über unseren Gegenstand, in dem die Geschichte, die Industrie, Statistik und Chemie der Theerfarben in mustergültiger Weise abgehandelt ist, muss Dr. Glstav Sjuli.tz, „Chemie des Steinkohlentheers mit besonderer Berücksichtigung der künst- lichen organischen Farbstoffe". Braunschweig 1882 genannt werden. Demjenigen, welcher sich über die Anilinfarben näher inf'ormiren will, sei es ganz besonders empfohlen. II, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 23 Zahl dieser Theerproducte nur einige hervor, z. B. Ammoniaksalze, Fleckwasser, Benzol, Brenn- und Firniss-Oele, Lacke, Naphthalin. Salicylsäure, Pikrinsäure, Carbolsäure, Pech und vor allen Dingen die Farbstoffe. Es ist noch nicht lange her, dass dem Steinkohlentheer die Achtung gezollt wurde, die ihm heute zu Theil wird. Er wird schon seit dem Beginn unseres Jahrhunderts in grossen Massen erzeugt, aber man wusste lauge Zeit nicht viel mit ihm anzustellen. Man betrachtete ihn sogar als lästiges Nebenproduct der Leuchtgasbereitung und die Gasanstalten waren froh, ihn überhaupt los zu werden. Ganz plötzlich änderte sich dies Verhältniss, als vor ungefähr 25 Jahren die Anilin- farben entdeckt wurden. Der Steinkohlentheer wurde ein höchst ge- schätzter Artikel und schnell stieg sein Preis um das Zehnfache. Um die Bedeutung dieser Dinge durch einige Zahlen klar zu machen, führe ich nur an, dass jetzt jährlich etwa 320 Millionen Tonnen (zu je 20 Centner) Steinkohlen auf der Erde producirt werden. Hiervon werden für die Beleuchtung durch Gas in Europa etwa 12 Millionen Tonnen verbraucht. Bei der Bereitung desselben entstehen ungefähr 12 Millionen Centner Theer jährlich. Und von diesem werden in Europa 5,700,000 Centner für die Darstellung von Farbstoffen verarbeitet. Der Theer ist ein Nebenproduct bei der Bereitung des Leuchtgases und bei der Coaksbereitung. Die Steinkohle wird destillirt ; hierbei ent- weichen Leuchtgas, Ammoniakwasser und Theerdämpfe, Coaks bleibt in der Retorte zurück. Das Leuchtgas wird abgekühlt, gereinigt und in den Gasbehälter oder Gasometer übergeführt, während der sich aus den Dämpfen verdichtende Theer in der Vorlage der Retorte sich ab^ setzt und von hier in die Theercisterne fliesst. Bei den ungeheuren Mengen von Kohle, welche in England und Deutschland jetzt auf Coaks verarbeitet werden, gewinnt auch die hierbei stattfindende Theerberei- tung immer grössere Bedeutung. Auch hierbei handelt es sich um eine trockne Destillation, um den Kohlen die unangenehm riechenden Be- standtheile zu nehmen und zugleich ihren Kohlenstoflfgehalt zu ver- mehren. Aus den Destillationsdämpfen setzt sich in besonderen Appa- raten "der Theer ab. Dieser, eine schwarze, ölige, eigenthihnlicli riechende, dickflüssige Masse, ist ein aus vielen Stoffen zusammenge- setztes Gemenge, in dem aber die Kohlenwasserstoffe die Mehrzahl bilden. Von den ungemein zahlreichen, den Theer zusammensetzenden Substanzen seien hier nur die für die Industrie und namentlich für die Darstellung der Farben wichtigsten aufgeführt. Es sind Paraffin, Benzol, Toluol, Orthoxylol, Metaxylol, Paraxylol, Naphthalin, Anthraccn, Carbol- säure, Orthokreosol, Metakreosol, Parakreosol, Ammoniak, Diese und die 24 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. II, l. vielen anderen weniger wichtigen Stoffe gehören hauptsächlich der Fett- körperreihe und ganz besonders der aromatischen Reihe der Kohlen- wasserstoffe an, einige derselben sind dann aber Säuren oder Basen. Für uns hier sind die Körper der aromatischen Reihe allein von weiterem Interesse, weil aus ihnen die Farbstoffe entstehen. Um die für die Bereitung der Farbstoffe dienenden Substanzen aus dem Theer zu erhalten, wird diesem zunächst das Wasser entzogen, dann wird er destillirt und die verschiedenen Destillate je nach ihrem specifischen Gewicht getrennt aufgefangen. Nach dem Entfernen der basischen und sauren Bestandtheile werden dann durch Sublimation die Kohlenwasserstoffe rein erhalten. Schon durch den Hitzegrad, bei welchem die Destillation vorgenommen wird, trennen sich die Bestand- theile des Theers. Man unterscheidet vier Destillate. 1) Vorlauf (first running) spec. Gew. 0-78 bis 0*85, geht beim Sieden des Theers in die Vorlagen. Er enthält hauptsächlich ammouiak- haltiges Wasser und leichte flüchtige Oele (Benzol und Homologe). Durch Stehen trennen die letzteren von dem ersteren sich leicht. 2) Das leichte Oel (light oil, crude naphtha) spec. Gew. 0'83 bis 0'89, besteht aus Benzol, Phenol, den Kreosolen, Naphthalin und anderen Stoffen. Es wird bei einer Destillation bis zu 210" aufgefangen. So- bald die sich verdichtenden Oeltropfen nicht mehr auf Wasser schwim- men, sondern in ihm untersinken, wird die Vorlage gewechselt und man erhält: 3) Das schwere Oel (heavy od. dead oil, creosote oil). Dies destillirt zwischen 210'^ und 400" und enthält :&unächst noch Naphthalin, dann ausser anderen Kohlenwasserstoffen besonders Anthracenöle. — Der Rückstand der Destillation bildet dann: 4) Das Pech. Aus dem flüchtigen Oel des Vorlaufes, aus den leichten und schweren Oelen werden nun durch wiederholte fractionirte Destillationen, durch besondere Reinigungen und verschiedene andere Processe die für die Farbendarstellung wichtigen Kohlenwasserstoffe in möglichst reinem Zustand gewonnen. Die hierfür nöthigen Apparate haben sich in kurzer Zeit ungemein vervollkommnet. Der ausserordentlichen Wichtigkeit wegen, welche diese Technik fiir die heutige Industrie hat, haben sich eine grosse Reihe der bedeutendsten heutigen Chemiker damit abge- geben, die Methoden der Reingewiunung der für die Fabrication der Farben verwendbaren Kohlenwasserstoffe und ihrer Trennung von ein- ander zu vervollkommnen. Solche der Verarbeitung des rohen Theers dienende Fabriken können , so imscheinbar sie aussehen , als ein II, 1. Giei'ke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 25 Triiimpli der Fortschritte der Wissenschaft und der Technik angesehen werden. Die Production der einzelnen Bestandtheile ist je nach den ver- arbeiteten Kohlen und auch nach den Methoden der Fabrication sehr verschieden gross. Für den aus den rheinischen Gasanstalten gewonnenen Theer stellt sich das Verhältniss der wichtigsten Stoffe wie folgt ' : Gereinigtes Benzol (für Anilin und Fleckwasser) . . 100 Procent. Reines Anthracen 033 „ Reines Naphthalin 200 „ Theeröle 3000 Pech 6000 Ammoniakwasser 2 bis lO'OO „ Die grösste deutsche Theerfabrik 2, welche aus schlesischem und westphälischem Coaks gewonnenen Theer verarbeitet ^ erhält pro 100 kg: 1) Benzol und Toluol 0-80 2) Uebrige wasserhelle üele , 060 3) Carbolsäure 0.20 4) Kreosol 0-30 5) Naphthalin 3-70 6) Aithracen 0-20 7) Schwere Oele 24'00 8) Pech (zu Asphalt und Briquettes) .... 5500 9) Wasser und Verlust 1520 TOO'kg. »• Für uns hier sind nur als für die Darstellung der Farben verwend- bar interessant : Benzol, Toluol, Naphthalin, Anthracen. Aus den beiden ersten werden die eigentlichen Anilinfarben, aus dem Naphthalin eine ebenso wichtige Reihe von Farbstoffen und aus dem letzten das Alizarin und Purpurin gewonnen. Aus dem Benzol selbst werden keine Farben bereitet, wohl aber aus seinen Derivaten. Es ist bekannt, dass im Benzol Cg Hg ein oder mehrere Wasserstoffatome durch andere ersetzt werden können, während die 6 C-Atome diesen Verbindungen stets erhalten bleiben. Es entsteht so die ausserordentlich grosse Reihe der aromatischen Verbindungen, die alle als Derivate des Benzols angesehen werden, da in ihnen allen 1) Schultz 1. c. p. 35. ~) Von RüTGERs in Erker bei Cöpenik. Cfr. Schultz 1. c. p. 96. ^) Derselbe stammt aus den Berliner Gaswerken. Durchschnittlich ver- brauchen diese 216,000 Tonnen Kohlen; hierbei wird 4-8 Procent Theer ge- wonnen. 26 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 11, 1. die 6 C-Atorae, jedes einzelne mit einem Wasserstoffatom oder einem anderen an die Stelle desselben getretenen verbunden sind. So z. B. wird der Wasserstoff tlieilweise sehr leicht durch die Halogene (Chlor, Brom, Jod) und durch die Sulfo- und Nitro-Gruppe ersetzt. Die wichtig- sten einfachen so vom Benzol abgeleiteten Verbindungen sind: Benzol CeHg. Monochlorbenzol CcHjCl. Carbolsäure oder Phenol Cg H5 0 H. Nitrobenzol CeHäNO^ Anilin oder Amidobenzol CßHgNHj. Von den weiteren Producten dieser Verbindungen iuteressirt uns zunächst ein Nitroproduct des Phenol, die Pikrinsäure. Diese hat die Formel Cg Hj (N 03)3 .OH. Es haben sich also drei von den Wasser- stoffiitonien des Phenol durch Untersalpetersäure (N'O.,) ersetzen lassen. Die chemische Bezeichnung der Pikrinsäure ist daher Trinitrophenol. Wenn ja auch dieser glänzend gelbe Stoff allein nicht sehr häufig in der histologischen Färbetechnik verwandt wird, weil er nicht genügend differenzirt, so wird ei' doch gern mit anderen Farbstoffen zusammen, vor allen mit dem Carmin vereinigt als Pikrocarmin gebraucht. Die sonst sich schwer färbenden elastischen Fasern färben sich intensiv durch Pikrinsäure. Diese krystallisirt in gelben Blättern oder Prismen, löst sich in Alkohol und heissem Wasser leicht und in 160 Theilen kalten Wassers. Bei weitem das grösste Interesse hat für uns das Amidobenzol oder Anilin (auch Phenylamin , Krystallin, Kyanol, Benzidam genannt) Cg H;, NH, ^ Löst man Benzol in concentrirter Salpetersäure auf und fügt Wasser hinzu, so fällt nach Verdrängung des einen Atoms Wasser- stoff des Benzols durch das Radical NO^ Nitrobenzol CgHäNO^ her- aus. Dies wird durch verschiedene reducirende Mittel in Amidobenzol verwandelt, indem Wasserstoff im Entstehungszustande die Scheidung ') Das Amidobenzol wurde von Unverdorben 1826 bei der Destillation von Indigo erhalten. Da es gut krystallisirende Salze liefert, nannte er es Krystallin. 18.3-4 entdeckte Rlngk es im Stciiikoblentheer und nannte es Kyanol (von -/udcvsog blau), da es mit Chlorkalklösung eine blaue Färbung an- nimmt. (Von Fkitsche wurde es 1840 bei der Destillation einiger Zersetzungs- Ijroducte des Indigo erhalten. Er nannte sein Product nach der Indigopflanze. Indigofera Anll, Anilin (nila bedeutet im Indischen Blau, anil ist die spanische Bezeichnung für Indigo). Endlich erhielt Zini.v 1842 bei der Reduction des Nitrobenzol mit Schwefelaramonium eine Base, die er Benzidam nannte. Der berühmte Berliner Chemiker Hofma\n wies dann 1843 nach, dass alle diese Producte, als Krystallin, Kyanol, Anilin und Benzidam identisch sind. II, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 27 der alten und die Bildung der neuen Verbindungen bewirkt. C,; H5 N0.,-|- 3 H. giebt Co H, NH, (Anilin) 4- 2 H, 0 (Wasser). Fabrikmassig wird Amidobenzol oder Anilin dargestellt, indem man Nitrobenzol mit Eisen- feilspänen und Essigsäure destillirt. Anilin ist eine farblose, ölartige, das Liclit stark brechende Substanz von 1-024 spec. Gew. (bei 17-5"). Sein Siedepunkt ist ungefähr 184 ^ In der Kälte wird es fest, bei — 8° schmilzt es. An der Luft färbt es sich bald gelb, dann roth und end- lich braun. Es löst sich einigermassen in Wasser und sehr leicht in Chloroform, Aether, Alkohol und Kohlenwasserstoffen. (Es sollen. 31 Theile Wasser bei 12-5" 1 Theil Anilin lösen). Es löst selbst viele Substanzen, z. B. Indigblau, Schwefel, Colophonium, Phosphor, Campher u. a. m. Es wirkt schädlich auf den Organismus und ist als Gift zu betrachten. Für seinen Nachweis in allerkleinster Menge dient eine Auflösung von Chlorkalk, da in dieser eine ganz geringe Quantität von Anilin bereits eine tief purpurviolette Färbung bewirkt. Das Anilin ist neuerdings an und für sich für die mikroskopisclie Technik sehr wichtig geworden, da zum Zweck der Untersuchung mancher Schizomy- ceten einige Farben, wie Fuchsin, Geutianaviolett und andere in Anilin- wasser (d. h. in concentrirter Avässeriger Lösung) aufgelöst werden. Seine ungemein grosse Bedeutung aber, die es zu einem der wichtigsten Stoffe der Neuzeit gemacht hat, liegt in der grossen Fähigkeit be- gründet, allerlei Verbindungen einzugehen, welche herrlich gefärbte Körper sind und sich als echte Farbstoffe verwerthen lassen. Es ist aber zu bemerken, dass die sogenannten Anilinöle des Handels keines- wegs reines Anilin darstellen, sondern, abgesehen von geringen (0'5 bis 1"5 Procent) Verunreinigungen ein Gemenge von Anilin und Toluidin sind. Ja es ist sogar zu sagen, dass nur sehr wenige sogenannte Anilin- farben (schwarze Farben und die Induline) aus dem chemisch reinen Anilin dargestellt werden können, dass aber für die Mehrzahl und vor allen Dingen für die Rosaniline eine Mischung mit Toluidin nothwendig ist. Da diese nun in Hinsicht des quantitativen Verhältnisses etwas verschieden sein kann, und da es ferner drei Toluidine (siehe weiter unten) giebt, so können die Anilinöle in mannigfacher W^eise zusammen- gesetzt sein. Es kommen zwar vier bestimmte Handelsproducte unter dieser Bezeichnung vor, deren Gehalt an Toluidin und Anilin ebenso feststeht wie ihr Schmelzpunkt und ihr specifisches Gewicht, aber jede grosse Fabrik besitzt heute ihre eigenen, nach bestimmten der Anstalt angehörenden Regeln zusammengesetzten Anilinöle. Und gerade in der Verwendung der verschiedenartigsten Mischungen liegt zum grossen Theil der ausserordentliche Fortschritt der Anilinfarben-Industrie der 28 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 11. 1. letzten Jahre begründet ; es wird eben hierdurch eine ungeheuere Mannig- faltigkeit von chemisch ganz gleichen , in ihren Nuancen aber ver- schiedenartigen Farben ermöglicht. Die wirklich zahllosen Marken, welche die Fabriken im Laufe der letzten Jahre in den Handel gebracht haben, entsprechen durchaus nicht alle besonderen chemisch charakteri- sirten Verbindungen, sondern zum grössten Theil nur verschiedenen, oft in sehr geringer Weise von einander abweichenden Nuancen der- selben Farbstoffe, welche durch die Bereituugsweise und besonders durch die Zusammensetzung der verwandten Anilinöle bedingt werden. Ja sogar dieselben Nuancen und die gleich bezeichneten Marken ver- halten sich aus diesem Grunde vielfach recht verschieden. Und diese Unterschiede sind bei der histologischen Tinction sehr bemerkbar und häufig störend, da wie früher schon bemerkt wurde, gleich bezeichnete Farbeupräparate aus verschiedenen Fabriken ganz abweichende Resul- tate ergeben können. Obgleich Anilin keine oder nur eine ganz ausserordentlich schwache alkalische Reaction zeigt (rothes Lackmuspapier wird nicht gebläut, Curcumapapier nicht gebräunt, doch wird der Farbstoff der Dahlia in Grün verwandelt), ist es doch eine starke Base, welche mit Säuren leicht und gern gut krystallisirbare Salze und Doppelsalze von dem Typus der Ammoniaksalze bildet. Besonders wichtig sind das salzsaure Anilin, das salpetersaure und schwefelsaure Anilin. Ausserordentlich gross ist die Substituirbarkeit des Anilins. So wirken z. B. die Halogene Chlor, Brom und Jod sehr energisch auf dasselbe und ersetzen seine Wasser- stoffatome. Auch NHj tritt leicht an Stelle dieser; es entstehen die Nitraniline. Sowohl diese als auch die Substitutionsproducte mit Halo- genen kommen als Ortho- (o), Para- (p) und Meta- (m) Verbindungen vor. Auch Säureradieale imd Alkoholradicale können die Wasserstoff- atome des Anilins ersetzen, es entstehen im ersten Fall die Anilide und im zweiten die Alkoholaniline. Für die Darstellung der Farbstoffe sind nun folgende Verbindungen und Derivate des Anilins von Wichtigkeit: Zunächst sind die Oxydationen zu erwähnen. Bei der Oxydation des Anilins allein, ohne die Gegenwart anderer organischer Stoffe ent- steht das Anilinschwarz oder auch eine blaue Substanz. Allerlei gelind oxydirende Mittel bewirken eine solche Reaction, so chlorsaures Kali, Kupfersalze, Eisen, Chromverbindungen etc. Der Sauerstoff im statu nascendi ist dabei das oxydirende Agens ; er wird von den angewandten Substanzen an das Anilin abgegeben und oxydirt dasselbe zu Wasser und Anilinschwarz. Aehnlich entstehen die Induline, schwarze oder II, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. 29 blauviolette Farbstoffe. Die Constitution dieser Körper ist noch nicht bekannt, doch scheinen sie den später zu beschreibenden Azoverbin- dungen verwandt zu sein. Für das Anilinschwarz sind verschiedene Formeln aufgestellt worden, so von Kayser CjoHioN,, von Goppels- köder CJ4H.20N4 und von v. Deckend C04H, ^NgO.^. Ein ebenfalls durch Oxydation des reinen Anilins erhaltener, in seiner Constitution noch unbekannter Farbstoff ist das Methylenblau. Es ist besonders da- durch charakterisirt, dass es schwefelhaltig ist. Auch diesen Körper möchte man zu den Azoverbindungen stellen. Als Formel wird ange-' geben Cj g H, 9 N4 S H Cl. Wichtiger als die Oxydation des reinen Anilins ist dieselbe bei Gegenwart anderer organischer Substanzen und ganz besonders des Metatoluylendiamins. Verschiedene gelind wirkende Oxydationsmittel, vor allen Dingen die bisher zu viel gebrauchte Arsen- säure, welche die Anilinfabriken so gesundheitsschädlich für die Arbeiter und die Umgegend machte, dann Quecksilbernitrat und einige Chloride geben den uöthigen Sauerstoff her, um das Anilin und dessen homologe Basen zu*oxydiren. Auch bei Behandlung der Auilinöle mit Nitrobenzol übt das im letzteren enthaltene Nitryl die oxydireude Wirkung aus. Je nach dem angewandten Oxydationsmittel und nach der Methode der Darstellung werden verschiedene Farbstoffe gewonnen, welche entweder Rosauilin oder Pararosanilin selbst oder deren Salze sind. So erhält mau durch Oxydation des Anilins mittels der Sauerstoffsalze des Queck- silbers das sogenannte Azalein. Wird Anilin mit salpetersaurem Anilin oder leicht zerlegbaren salpetersauren Metallsalzen behandelt, so ent- steht ein anderes Rosanilin, das Anilein genannt wurde. Werden Chlor, Brom und Jod oder deren Metallverbindungen mit wasserfreiem Anilin erhitzt, so erhält man Fuchsin. Ein anderes Oxydationsproduct eines Gemenges von Toluidin und Anilin ist das für die Histologie und heute auch für die Industrie nicht mehr wichtige Mauvein (oder Mauve, Malven- farbe), das aber als die erste künstlich dargestellte Anilinfarbe aus histo- rischem Interesse erwähnt werden mag. Es entsteht bei Einwirkung des Kaliumbichromat auf Anilinsulfat. Die Wasserstoffatome des Anilins, dann auch des FiOsanilins können durch Radicale von Alkoholeu oder Säuren ersetzt werden. Bei der Einwirkung der Chlor-, Brom- und Jod- verbindungen der Radicale Methyl, Aethyl, Amyl etc. auf Anilin ent- stehen methylirte, aethylirte, amylirte etc. Auiline. Wird Rosanilin mit Methylen oder Aethylen (z, B. Jod-, Chlor-Methyl etc.) behandelt, so werden die Wasserstoffatome desselben durch Methyl- und Aethyl- Reste ersetzt. So entstehen die wichtigen Methylfarben, Methylviolett und Methylgrün. (Ebenso Hofmann's Jodviolett oder Dahlia und Jodgrün). 30 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 11, 1. Werden die Wasserstoifatome des Rosanilius durch Phenyl- (resp. Tolyl-) Gruppen ersetzt, so erhält man Monopheuylrosanilin, Diplienyhosauilin, Tripheuyirosanilin und Tritolylrosanilin. Die Salze dieser Basen bilden eine stattliche Reihe der verschiedensten Nuancen des Anilinblaus. Ebenso wie durch Alkoholradicale können die Wasserstotfatome in den primären und abgeleiteten Anilinen der Amidogruppe auch durch Säure- radicale ersetzt werden. So entstehen aus der Einwirkung des Phthal- säureanhydrid • auf Phenole die sogenannten Phthaleine, welche in der Farbenindustrie eine wichtige PtoUe spielen. Erhitzt man Phthalsäure- anhydrid mit Resorsin 2, so entsteht Fluorescein. Dies ist selbst ein gelber aber nicht häufig gebrauchter Farbstoff, um so wichtiger sind einige seiner Substitutionsproduete. Für uns vor allen ist das eine der- selben, welche bei Einwirkung von Brom auf Fluorescein entsteht, von grösstem Interesse; es ist das Tetrabromfluorescein oder Eosin, ein rother Farbstoff. Ferner sind für uns die Azo- und Diazo- Verbindungen der Benzol- derivate von Wichtigkeit. Die letzteren, weil aus ihnen di^ersteren gebildet werden, und diese, weil sie zum grossen Theil werthvolle Farb- stoffe sind. Die Diazoverbindungen besitzen die zweiwerthige Gruppe — N = N — , welche sich auf der eineiv Seite mit einem Kolilenstoff- atom des Benzolrestes, auf der anderen mit einem Säurerest (dann ent- stehen Salze) oder mit dem Rest einer Base (dann entstehen die Diazo- amidverbindungen) verbinden können. Diazobenzolsalze bilden sich, wenn man salpetrige Säure in eine kalt gehaltene alkoholische Lösung von Anilin einleitet. Die Azoverbindungen enthalten ebenfalls die zwei- werthige Gruppe N.2 (-^ N = N — ). Die unter sich verbundenen N- Atome sind aber in ihnen mit zwei Kohlenstoffatomen zweier aromati- scher Reste verbunden. So wäre die Formel des Azobeuzols Cg Hj N = NCgHg. Kommt die Gruppe Nj zweimal vor, so nennt mau die Verbindung Azo-azoverbindung (auch Tetrazoverbindung). Die Einlei- tung von salpetriger Säure in eine warme alkoholische Lösung von Anilin bewirkt die Entstehung von Amidoazobenzol. i(-\\ PO ■ff ') Phthalsäure CeH4 \^ ^^ co'h ~ CsH(;04 ist ein doppeltkohlensaures Benzol. Es entsteht durch Oxydation von Orthoxylol oder Orthotoluylsäure mit Kaliumpermanganat in alkalischer Lösung. Erhitzt man die Phthalsäure bis etwa 230», so bildet sich Phthalsäureanhydrid (CgH-Oj) und Wasser (H,,0). Beide, die Phthalsäure und sein Anhydrid sind feste krystallinische Körper. ^) Resorcin Cg Hr O2 ist ein Dioxybenzol und wird aus der rohen Benzol- disulfosäure fabrikmässig dargestellt. Es bildet farblose rhombische Krystalle. II, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 31 Dies oder wenigstens seine Salze bilden einen der bekanntesten Anilinfarbstoffe, das Auilingelb. Verschiedene Derivate des Amidoazo- benzols sind in ihren Salzen ebenfalls gelbe oder bräunliche Farbstoffe. Hierher gehört auch das in der mikroskopischen Technik so viel ge- brauchte Bismarck- (oder Phenylen-) Braun. Zu den Azoverbindungen des Benzols wären diejenigen des Dioxy- benzols oder Resorcins zu stellen, da auch von ihnen viele Farbstoffe sind. Freilich sind sie nicht sehr beliebt und in der mikroskopischen Technik ebenfalls nicht verwandt. Nur das Chryseolin oder Tropäolin 0 (gelbroth) wäre zu nennen. Das in unserer Zeit so berühmt gewordene Phenol, bekannter unter dem Namen Carbolsäure, hat auch für uns hier Wichtigkeit, da einige seiner Abkömmlinge Farbstoffe sind. Es ist ein Benzol, in dem ein Wasserstoffatom durch eine Hydroxylgruppe ersetzt ist, also Oxybenzol Cg H5 H 0. Es bildet sich beim Einleiten von salpetriger Säure in eine warme Lösung eines Anilinsalzes. Des Trinitroderivats des Phenol, der Pikrinsäure wurde schon früher Erwähnung gethan. Es giebt aber noch einige andere Nitroderivate, welche in ihren Salzen gelbröthliche und bräunliche Farbstoffe bilden (so Grenat soluble und isopurpursaures Kalium). Oxydirte Phenole (und ebenso oxydirte Kreosole) bilden gelbe Farben, die sogenannten Aurine. Zuletzt muss hier noch eines Kohlenwasserstoffs Erwähnung ge- than werden, dessen Jodamylverbindung einen prachtvollen blauen Farb- stoff bildet. Es ist das Chinolin, eine farblose , stark lichtbrechende Flüssigkeit: ChH-jN. Sein Derivat Chinolinblau (oder Chinolein, franz. Quinoleine), auch Cyanin genannt, entsteht bei der Behandlung eines Gemenges von Chinolin und Jodamyl (Amylchiuolinjodid) mit Alkalien. Eechnen wir zu den besprochenen Anilin- und Aniliu-Toluol- Ver- bindungen noch einige wenige Derivate des gleich näher zu besprechen- den Toluols, die besser vou ihnen nicht getrennt werden, nämlich die Oxydationsproducte des Toluols, Safranin, und Mauvein, so würden wir folgende Hauptgruppen der Anilin- (und Toluol-) Farben im engeren Sinne haben. I. Oxydationsproducte des reinen Anilins (schwarz [grau] und blau). II, Oxydationsproducte des reinen Toluols (braun und violett). III. Oxydationsproducte der Anilin-Toluol-Gemische (roth und gelb). IV. Methylirte und äthylirte Aniline und Rosaniline (violett und grün). V. Phenylirte Rosaniline (blau und grün). VI. Azofarbstoffe (gelb, gelbroth, braun). VII. Nitroderivate des Phenol und Kreosol (gelb, rothbraun bis brann). VIIT. Resorcinazoverbindungen (gelbroth). 32 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 11. 1. IX. Phthaleine (gelb, gelbroth, roth in den verschiedensten Nuancen). X. Oxydirte Phenole und Kreosole (gelbroth). XI. Chinolinblau. Das Toluol C^ H- ' ist durch mehrere seiner Derivate für die Farbenindustrie von Wichtigkeit. Wir müssen es daher ebenfalls hier besprechen. Wir sahen schon soeben, dass die Anwesenheit bestimmter Mengen von Toluidiu in dem Anilin für die Bereitung gewisser Farben nothwendig ist. Dann giebt es auch einige Toluidinfarben wie Toluidin- Blau und -Roth; auch für die Darstellung des Malachitgrüns und be- sonders der Safranine wird es verwandt. Sonst wird es noch für die Fabrication der Benzoesäure gebraucht. Seine weiteren Eigenschaften haben für die histologische Technik kein Interesse, ich kann sie daher hier übergehen. Von seineu Derivaten nenne ich die Nitrotoluole, in denen das Radical NOj WasserstofFatome ersetzt; die Amidotoluole oder Toluidine, die schon oben erwähnt wurden und die Azoverbiudungen des Toluols. Die Toluidine (Monoamidotoluole) sind dem Amidobenzol oder Anilin ganz homolog und haben die Formel C- Hg N. Man unter- scheidet: Orthotoluidin (o Toluidin) C6H4 ß] ^^ Metatolmdin (m Toluidin) CgH^ {Jg| ^^ Paratoluidin (p Toluidin) C„H, {^|| ^^ Das letzte ist das hauptsächlichste Material für die Fabricatiou des Fuchsins. Von sonstigen Derivaten, die für uns Interesse haben, nenne ich noch die Verbindungen mit Sauerstoff und zwar das Oxytoluol (auch Kreosol genannt) C7 Hg 0 und die Dioxytoluole C7H8OJ. Eine Verbin- dung des ersteren kam als Farbstoff unter dem Namen Goldgelb, Victoria- gelb, Anilinorange etc. in den Handel. Das letztere erwähne ich, weil es durch Destilliren der in verschiedenen Flechten besonders in der Orseilleflechte vorkommenden Orsellinsäure Cg Hg O4 erhalten wird, es wird daher auch Orcin genannt. Bei der gleichzeitigen Einwirkung von Luft und Ammoniak auf Orcin entsteht das früher von mir erwähnte Orcein, welches den Hauptbestandtheil des Farbstoffs der Orseillepaste ausmacht. ') Das Toluol wurde 1837 im Harzöle entdeckt, aber zuerst Retinaphtha genannt. Auch aus Drachenblut wurde es dargestellt und Dracyl genannt. Auch der Name Benzoen wurde ihm beibelegt. Toluen und später Toluol wurde es genannt, weil es bei der trocknen Destillation des Tolubalsams ge- wonnen wird. Heute wird es fabrikmässig nur aus dem Theer dargestellt. II, 1. Gierke: Färberei zu miki-oskopischen Zwecken. 33 Das dritte aus dem Steinkohlentheer gewonnene Destillat, das für die Farbeniudustrie die grösste Wichtigkeit hat, ist das Naplitlialiu G, oHs '. Es ist bei gewöhnlicher Temperatur ein fester, farbloser Stoff, der in Blättchen oder monoldinen Tafeln krystallisirt ; bei 80° schmilzt er, bei 217" siedet er. Spec. Gew. bei 15" = 1-1517. Er ist fast unlöslich in Wasser, etwas löslich in Wasser, in denen Akalien ge- löst sind. In Aether löst es sich leicht, in 100 Theilen absolutem Alkohol lösen sich mir 5*29 Theile bei 15". Es giebt eine ausserordentlich grosse Anzahl von Derivaten des Naphthalins. Die Wasserstoffatome können durch die verschiedensten anderen Elemente und Verbindungen ersetzt werden, ausserdem bildet es mit Wasserstoff und Ghlor Addi- tionsproducte, die Hydrüre (Di- bis Dekahydrüre, also Cj q Hg H.^ bis GioHgHio) und Ghloride (so Dichlorid GioHgGl^ und Tetrachlorid C| 0 Hg Gl-). Von den Substitutionsproducteu sind die Halogen- , die Nitro-, Oxy- und Azo-Derivate sehr zahlreich. Ein Salz des Amidoazonaphthalins bildet einen rothen Farbstoff, der früher als Magdalaroth sehr viel gebraucht wurde, jetzt aber durch Eosin fast ganz verdrängt ist. Von allen Derivaten des Naphthalins sind die Naphthole und das Naphthochinon bei weitem die wichtigsten, da sie, und ganz besonders die ersteren, zur Bildung schönster und brauchbarster Farbstoffe Veranlassung geben. Die Naphthole entstehen, indem ein Wasserstoff des Naphthalins CjoHg durch die Hydroxylgruppe ersetzt wird. Es entsteht also Gj o H^ 0 H. Dargestellt wird Naphthol durch Einwirkung von salpetriger Säure auf Naphthylamin G, o H^ N H^ . Wie es aber zwei Naphthylamine giebt, a und ß, so hat man auch das a- und ß-Naphthol, die in ihren Reactiouen und Derivaten sehr von einander abweichen. Als Farbstoffe dienen vor allen Dingen die Azo- verbindungen des ß-Naphthols, in geringerem Maasse des a-Naphthols. Die unter den Namen Bordeaux, Ponceau, Orange oder Tropäolin und Scharlach so ungemein beliebten und in den verschiedensten Nuancen im Handel vorkommenden rothen und rothgelben Farben, welche auch für die mikroskopische Technik eine ausserordentliche Bedeutung haben, sind solche Azonaphthole. Zu ihnen kommen die gelben und blauen Farbstoffe, welche Salze der Dinitronaphthole (und deren Sulfosäuren) und der Nitrosonaphthole (die sogenannten Indophenole) sind. Alle diese wichtigen Naphtholfarben gehören den allerletzten Jahren an. Die ersten von ihnen wurden 1878 dargestellt, die achtziger Jahre haben 1) Es wurde 1820 im Steinkohlentheer entdeckt und von Garden sogleich Naphthalin getauft. Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. II, 1. ■ 3 34 Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. II, 1. noch fortwährend neue in den Handel gebracht. Viel geringere Be- deutung für die Farbenindustrie hat Naphthochinon Cj o Hg 0, , das oxydirte Naphthalin. Dasjenige Derivat, in welchem zwei Atome Wasser- stoff des Naphthochinons durch die Gruppe OH ersetzt werden, also das Dioxynaphthochinon bildet einen als Naphthazarin bekannten rothen Farbstoff. So finden wir, dass die ans Naphthalin hergestellten Farbstoffe nur zwei grössere an einzelnen Farben reiche Gruppen enthalten. Es ist die ganz besonders wichtige I. Reihe der Azofarbstoffe und zwar a) das Amidoazonaphthalin (roth) und b) die Azo-Naphthole a und ß (verschiedene Nuancen des roth) ; dann IL die Reihe der nitrirten Naphthole (blau und gelb), dazu kommt III. ein Derivat des Naphtho- chinons (roth). Endlich ist hier noch das Anthracen zu nennen als das vierte aus dem Steinkohlentheer gewonnene Destillat, welches den bisher er- wähnten anzureihen ist, da neuerdings die ungemein massenhaft ge- brauchten Alizariufarbstoffe aus ihm gewonnen werden. Anthracen C14 H,o wurde 1832 entdeckt, zuerst aber Paranaphthalin genannt. Es scheidet sich aus dem am höchsten siedenden Theil des Steinkohlentheers aus und bildet im krystallisirten Zustand Blättchen oder monokline Tafeln; es schmilzt bei 213*' und siedet bei 360". Es ist blendendweiss mit blauvioletter Fluorescenz. Von allen Substitutions- producten desselben ist der durch seine Oxydation entstandene Körper C, 4 Hg Oo für uns hier von Wichtigkeit. Man nennt ihn Oxanthracen oder neuerdings Anthrachinon. Dies verhält sich also zu Anthracen (Cj4H,o) wie Naphthochinon (CioHgO^) zu Naphtholin (Cm Hg). Aus dem Anthrachinon entstehen durch Einführung von Hydroxylgruppen Oxyauthrachinone und zwar zwei (m und 0) Monoxyanthrachinone C,4 H7 (HO) Oo und eine grosse Reihe von Dioxyanthrachinonen, Ci4 Hß (H0).2 Oo. Von diesen letzteren hat das Alizarin eine ausser- ordentliche Bedeutung für die neue Farbenindustrie gewonnen. Wir sahen schon früher, dass sowohl dieser Farbstoff, wie auch das Parpurin lange Jahrhunderte hindurch aus der Krappwurzel dargestellt wurden. Neuerdings aber hat die viel billigere Fabrication der künstlichen Theer- Alizarine die Krapp-Alizarine und Purpurine fast ganz verdrängt. Im Jahre 1864 wurde das erste künstliche Alizarin, das Pekkin dargestellt hatte — es war eine Tonne Alizariupaste — in den Handel gebracht, 1870 kamen schon 40 und 1873 435 Tonnen in den Handel. Jetzt sind in Europa mehr als 15 grosse Alizarinfabriken (8 allein in Deutsch- land), welche jährlich 10,500 Tonnen Paste im Werthe von 30 Millionen 11, 1. Gierke: Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. 35 Mark produciren. Die mikroskopische Technik aber ist an dieser un- geheuren Steigerung der Production vollkommen unschuldig. Sie weiss mit dem Alizarin aus Anthracen eben so wie mit dem aus der Krapp- wurzel nicht viel für die Tinction anzufangen. Für die Versuche aber der Knochenfärbung der lebenden Thiere (siehe die Tabelle IV No. 51 ff.) wird die Krappwurzel in Anwendung gezogen. Ebensowenig haben sich die übrigen aus dem Anthracen abgeleiteten Farben in der mikro- skopischen Technik einen wichtigen Platz erobern können. Nur das Purpurin wird noch gebraucht, und auch dies sehr wenig. Es ist ejn Trioxyanthrachinou mit der Formel 0,4 H7 (H 0)3 Oo. Andere hierher gehörige Farbstoffe sind die Derivate des Alizarins. Wir haben da die Nitroverbindungen des Alizarins und die Salze der Sulfoverbindungeu derselben als orangegelbe und blaue Farbstoffe. Ein anderes Dioxy- anthrachinon ist der unter dem Namen Chrysazin im Handel vorkom- mende blaue Farbstoff. So kommen noch verschiedene andere gefärbte und färbende Körper dieser Reihe vor, die aber für uns keine Bedeu- tung besitzen. Eine von den genannten Stoffen isolirte Stellung nimmt das Coeru- lein CaoHgOo, ein grüner (in Essigsäure gelöst) oder blauer (in Anilin gelöst) Farbstoff, ein, welcher beim Erhitzen von Gallein mit concen- trirter Schwefelsäure entsteht. Wegen seiner Bedeutungslosigkeit für die mikroskopische Technik können wir hier das aus Phenanthren, einem neben dem Anthracen im Theer vorkommenden Kohlenwasserstoff, abgeleitete Phenanthrensulfein- resorciu übergehen. Wenn wir übrigens hervorgehoben haben, dass in dem Pflanzen- reich die Alizarin- und Purpurin-Farben gebildet werden, so ist es nur gerecht hier hinzuzufügen, dass ein Thier echte Auilinfjirben herstellt. So stolz die Menschen auch auf die Entdeckung und Fabrication der aus Anilin entstehenden Farben sein können, ein unscheinbares und so- gar in seiner Heimat übel beleumundetes Geschöpf hat schon seit ur- alten Zeiten ein flüssiges Anilinroth und Aniliuviolett bereitet. Es ist der Seehase, Aplysia depilans, eine dem Mittelmeer angehörige, sehr grosse und sehr häufig vorkommende Nacktschnecke, welche in den Drüsen ihres Mantels eine Anilinfabrik besitzt. Sie benutzt diese Farbe ähnlich wie die Tintenfische ihre Tinte, um sich einer Verfolgung durch Trübung des imigebenden Wassers zu entziehen. Man soll aus grösseren Exemplaren bis zu 2 g trocknen Farbstoffs gewinnen können. Eine Quantität allerdings, die bei dem massenhaften Vorkommen der Thiere zu einer Ausnutzung desselben verlocken könnte. Für histologische 3* 36 Gierke: Färberei zu raikroskopisclien Zwecken. II, 1. Zwecke habe ich ihn im letzten Winter während eines Aufenthaltes in Neapel nach allen Richtungen hin geprüft, nud habe ihn zwar brauch- bar, aber durchaus nicht concurrenzfähig mit den künstlich hergestellten Anilinfarben gefunden. Sowohl was die Fähigkeit zu differenziren als seine Haltbarkeit angeht, steht er den besten derselben weit nach. Man kann nun im allgemeinen aus den chemischen Eigenschaften der Theerfarben nicht voraussagen, ob sie sich für die mikroskopische Technik eignen oder nicht. Man kann dies nur, insofern sie noch un- bekannt sind, durch Probiren und Experimentiren feststellen. Wohl aber sollte man grade bei dieser Art der Tiuctionsmittel mehr als es bisher der Fall war, die Kenntniss der chemischen Eigenschaften zu Reactionen der schon von den Präparaten aufgenommenen Farbstoffe benutzen. Diese Methode, welche von Weigert schon mit grossem Erfolg für einen bestimmten Zweck in Anwendung gezogen wurde, wird, davon bin ich überzeugt, den zukünftigen Epochen der Tinctionstechnik ihr charakteristisches Gepräge geben. Im grossen und allgemeinen werden von nun an die Fortschritte der mikroskopischen Untersuchungen, soweit sie durch die Tinctionen bedingt werden, nicht mehr von der Auffindung neuer Farbstoffe, sondern von der mikrochemischen Reaction abhängen. (Schluss folgt). II, 1. Kleinere Mittheilungen. 37 Kleinere Mittlieiluno^en. Einige neue Mikroskopformen. Von Prof. Dr, Leop. Dii>pel in Darmstadt. Hierzu 1 Holzschnitt Die weitgehende Bedeutung, welche das hohe Abbildungs- und Defiuitiousvermögen der Objectivsysteme für homogene Immersion, sowie die Verwendung von die volle Objectivöflfnung ausfüllenden, mittels des ÄBBE'schen, oder eines diesem ähnlichen Beleuchtungsapparates her- stellbaren Lichtkegeln für medicinische Zwecke, namentlich für die Be- obachtung der Bacterien erlangt haben, gaben seit dem Erscheinen meiues Handbuches der allgemeinen Mikroskopie Veranlassung zur Herausbildung einiger neuen Mikroskopformen von ausreichender optischer Ausstattung bei nicht zu hohem Preise, über welche einige kurze Mittheilungen nicht unerwünscht sein dürften ^ Zunächst hat Dr. Zeiss in Jena das Stativ Nr. V. a. zum Ueber- legen nebst der gewöhnlichen Beleuchtungsvorrichtung (allseitig beweg- licher Doppelspiegel mit in Schlitten laufenden Cylinderblenden) auch mit dem mit ersterer auswechselbaren AsBE'schen Beleuchtungsapparat versehen und mit den für oben gedachte Zwecke ausreichenden Objectiv- systemen A, D und '/la" homogene Immersion, oder A, E und Yig" homogene Immersion, sowie mit den Ocularen 2 und 4, oder 2, 4 und 5 ausgerüstet und berechnet diese Form mit 548 bis 555 beziehentlich mit 564 bis 571 Mark. Bemerkt möge hierzu nur werden, dass das System- für homogene Immersion soweit ich nach eigener reicher Er- fahrung urtheilen kann, neben seinen sonstigen vorzüglichen Eigen- schaften auch constant in allen abgegebenen Exemplaren die von Dr. Zeiss angegebene numerische Apertur von 1*25 bis 1'30 und dem- *) Beschreibung mit Abbüdungen der entsprechenden Stative werden meine in kürzester Zeit erscheinende „Grundzüge der allgemeinen INIikro- skopie" (Braunschweig, Vieweg und Sohn) bringen. 38 Kleinere Mittheilungen. II, 1. gemäss ein für die Dififerenzirung der Bacterien höchst wichtiges hohes Auflösungsvermögen besitzt. In ähnlicher Weise hat E. Leitz in Wetzlar sein Stativ I. a (mit grober Einstellung durch Zahn und Trieb und ohne drehbaren Objecttisch) mit dem AßBE'schen Beleuchtungsapparat und einem sogenannten Alt- MANN'schen Abendcondensor (halbkuglige Linse mit blauem Glase) ver- sehen und mit den Objectivsystemen 3, 7 und Y12" homogene Immer- sion und den Ocularen 0, I und III ausgestattet. Der Preis beträgt für dieses Instrument 330 Mark. Wird das Stativ I. b. (grobe Einstellung durch Tubusschiebung, ohne Drehung um die optische Achse) mit gleicher Ausstattung (ohne Ocular 0) versehen, so beträgt der Preis 290 Mark. W. II. H. Seibekt (früher Seibert u. Keafet) in AVetzlar geben ihrem Stativ 3 (grobe Einstellung durch Zahn und Trieb und Drehbewegung um die optische Achse) den AsBE'schen Beleuchtungs- apparat sodann die Objective I, III, Va, XII und y, o" homogene Im- mersion nebst den Ocularen 0, I und III (letzteres mit Ocularmikro- meter) bei und es stellt sich der Preis auf 475 Mark. Dr. Haktnack in Potsdam hat für die genannten Zwecke sein Stativ VIII unter der Bezeichnung Villa derart umgeändert, dass er bei feststehendem Objecttische grobe Einstellung durch Zahn und Trieb angebracht und demselben einen „verbesserten achromatischen" (mir zur Zeit nicht näher bekannten), durch Zahn und Trieb senkrecht beweg- lichen Beleuchtungsapparat beigegeben. Mit den Objectivsystemen 4, 7, 8 und Yia" homogene Immersion und 3 Ocularen ausgerüstet, be- trägt der Preis 500 Mark und da Objectiv 8 wohl ganz gut entbehrt werden kann 466 Mark. Auch F. W. ScHiEK in Berlin hat zwei neue Modelle F. A. und H. A. hergestellt, welche Modificationeu seiner, älteren Modelle F. und H. bilden und als „Grosses Bacterienmikroskop" und „Kleines Studenten- Bacterienmikroskop" bezeichnet werden. Das erstere ist zum Ueber- legen eingerichtet und hat grobe Einstellung durch Zahn und Trieb. Der „achromatische" Beleuchtungsapparat mit Scheibenblende ist zur senkrechten Bewegung mittels Zahn und Trieb eingerichtet, und die optische Ausstattung besteht aus den Objecttivsysteraen 1, 4, 7, 8, y,2" homogene Immersion und den Ocularen 0 und 2. Der Preis be- trägt 400 Mark. Das zweite ähnlich gebaute Modell ist gleichfalls zum Ueberlegen eingerichtet und mit grober Einstellung durch Zahn und Trieb versehen. Mit einfachem, durch Trieb höher und tiefer zu stellendem Beleuchtungsapparat, den Objectiigeu 1, 3, 7, y, 3" homo- II, 1. Kleinere Mittheilungen. 39 gene Immersion und den Ocularen 0 und 2 ausgestattet, beträgt der Preis 250 Mark. Das Stativ III von C. Reichebt in Wien mit grober Einstellung durch Tubusschiebung und ohne drehbaren Objecttisch wird für ärztliche Zwecke mit einem au beweglichem zum Vor- und Zurückschlagen be- stimmtem Arme befindlichen, vereinfachten, dem AßBE'schen nachge- bildeten Beleuchtungsapparat mit grosser Oeffuung (Reichert giebt die numerische Apertur zu 1"30 an) versehen und dann für sich zu 120 Mark berechnet. Die Ausstattung mit den Objectiven 3, 7, Yjj" homogene Immersion (numerische Apertur nach Reichert's Angabe 1"24 — 1-30) und den Ocularen II, III und V bedingt einen Preis von 400 Mark. Ein dem Zeiss' sehen Sta- tive V a nachgebildetes Modell von P. Waechter in Berlin („Arbeitsmikroskop für Studi- reude und Aerzte") mit Abbe- schem Beleuchtungsapparate, den Waechter' sehen Objecti- ven Nr. 4 und 7, der Seibert- scheu homogenen Immersion '/is" und 3 Ocularen 1, 2 und 3 wird zu dem Preise von 330 Mark abgegeben. R. Winkel in Göttingen versieht sein kleines Stativ 5 a für Aerzte mit einem mit dem BleudungsschHtten zu wech- selnden Beleuchtungsapparate (No. 2), den Objectiveu 2, 4, 7 und V, 4" homogene Immer- sion ', den Ocularen 1, 2 und 4 und berechnet sich bei die- ser Ausstattung der Preis zu % 421 Mark. 1 Neben diesen Formen 1) Die Systeme fiir homogene Immersion von Winkel, Dr. Hartxack und Seibekt, welche ich bis jetzt näher zu prüfen Gelegenheit hatte, besassen eine numerische Apertur von 1-13 bis 1-15, was ich hier als Ergänzung zu dem Texte der Grundzüge, in welchem die Resultate bezüglich der beiden ersten Optiker noch nicht aufgenommen werden konnten, bemerken musste. 40 Kleinere Mittheilungen. II, 1. deutscher Werkstätten ist in neuester Zeit ein neues Stativ aus der Werkstätte der „Genfer Gesellschaft zur Anfertigung physikalischer In- strumente" hervorgegangen , dessen dem Journal of the Royal Micro- scopical Society in London ^ entnommene und nur mit einzelnen Zu- sätzen versehene Beschreibung und Abbildung wohl für viele unserer Leser von Interesse sein wird. Das Stativ, dessen Ausführung eine vortreffliche sein soll, ähnelt, wie aus der vorstehenden Abbildung ersichtlich ist, in seinem Baue, sowie in seinen Einrichtungen für grobe und feine Einstellung einigermassen dem älteren Modell von Ross und besitzt eine Höhe von 40 cm (16" englisch). Dasselbe hat die Art des Einsatzes der Objectivsysteme, sowie die Einrichtung der Spie- gelarme als Eigenthümlichkeiten. Die ersteren werden namentlich zum Zwecke von Zeitersparniss, sowie leichterer und sicherer Centrirung nicht unmittelbar an den Tubus , sondern in ein Zwischenstück ein- geschraubt, welches in einer Gabel des von der Gesellschaft auch ge- sondert abgebbaren Adapters gleitet und mittels geeigneter Vorrich- tung centrirt und festgestellt wird. Der Spiegel ist in der aus der Zeichnung ersichtlichen Weise an drei gegliederten Armen derart aufgehängt, dass dessen Mittelpunkt einen Bogen beschreibt, dessen Mittelpunkt nahezu da liegt, wo sich das der Beobachtung unterliegende Object befindet, also bei jedem Wechsel der Spiegelstellung ausserhalb der Achse gleiche Entfernung von letzterem behält. Das in einem Messingcylinder gefasste Beleuchtungssystem und ebenso die Cylinder- blendungen passen in einen äusseren, an der Vorderseite des Tisches befindlichen Cyliuder, in welchem sie mittels Zahn und Trieb in senk- rechter Richtung beweglich sind. Der ganze Apparat kann mittels eines excentrischen Zapfens leicht zur Seite gedreht und damit rasch ein Wechsel vorgenommen, oder die volle Tischöffnung frei gemacht werden. lieber Ausstattung und Preis dieses Modelies ist mir nichts Näheres bekannt geworden. Die Einrichtung des Statives sammt des Beleuch- tungsapparates dürfte jedoch wohl den meisten Anforderungen genügen. Nur die unsere gewohnte contineutale Maasse etwas übersteigende Höhe möchte beim Arbeiten in aufrechter Stellung etwas störend wirken. 2) Cfr. Journ. R. Microsc. See. Scr. II vol. IV, 1884, pt. 2 p. 281. II, 1. Kleinere Mittheilunffen. 41 Winkel's Mikrometeroeular mit vertieal beweglichem Mikrometer. Von Wilhelm Behrens in Göttingen. Hierzu 2 Holzschnitte. Die bis jetzt gcbräucblicheu Ocularmikrometer bestanden bekannt- lieb aus runden, in einer Fassung befindlicben, die Tbeilung tragenden Glasplätteben, welcbe man nach Abnehmen der Ocularlinse auf die Blendung des Oculars legte und zwar, um die Einflüsse der doppelten Reflexion auf die Tbeilung zu eliminiren, mit letzterer uach unten. Die Ocularlinse wurde dann soweit eingeschraubt, bis die Theilung für den Beobachter am deutlichsten erschien, d. h. bis sich seinem Auge die Striche möglichst scharf und schwarz darstellten. Der Abstand der Ocularlinse vom Mikrometer richtete sich je nach dem Zustande des beobachtenden Auges ; für ein myopisches Auge ist diese Entfernung geringer als für ein weitsichtiges. Von dieser Construction sind — ab- gesehen von der complicirten des Ocularschraubenmikroraeters, bei dem die Theilung durch Schraubenvorrichtung horizontal durch das Gesichts- feld bewegt werden kann * — nur Gundlach und sein Nachfolger Seibert abgewichen, deren Mikrometeroeular (s. nebenstehende Figur 1) nur bis zur Hälfte in den Mikroskoptubus versenkt wird. Dadurch wird es möglich, das Mikrometer (mm) in einen seit- lichen Schlitz des Oculares — welcher bei ' anderweitigen Beobachtungen durch den Ring r verschlossen wird — hineinzuschieben. Diese Anordnung bietet den zweifellosen Vortheil, ' dass man die Mikrometertheilung mit der Hand auf das Object einstellen kann, während bei den obenerwähnten das Object auf die Thei- lung eingestellt werden muss. Im übrigen ge- schieht auch hier die Einstellung des Auges 1. auf die Theilung durch Verschieben des Ocular- glases 0, welches zu diesem Zwecke unten mit einer federnden Hülse versehen ist? die sich in dem Ocularrohr verschieben lässt. 0 Cfr. DippEL, Handbuch der Mikroskopie Bd. I p. 637—641. 42 Kleinere Mittheilungen. II, 1. Die Grösse der für die verscliiedenen Augen nöthigen Verstellung der Ocularlinse gegen CoUectivglas und Mikrometertheilung behufs Ein- stellung auf letztere kann bis zu etwa 2 mm betragen. Diese Differenz ist zweifellos von einem geringen Eiufluss auf die Vergrösserung über- haupt, wenn auch nicht geleugnet werden kann, dass der Vergrösse- rungsunterschied nur ein sehr kleiner sein wird, und dass er, wenn derselbe Beobachter mit demselben Apparate arbeitet und Messungen anstellt, wobei es sich ja eigentlich nur um Relativzahlen dreht, ganz ausser Acht gelassen werden kann ^ Um dem beregten Uebelstande abzuhelfen, hat R. Winkel in Göt- tingen ein Ocular mit Mikrometervorrichtung construirt, welches ge- stattet, die letztere zu verstellen, ohne dass Ocular- und CoUectivglas ihre gegenseitige Stellung ändern. Dieses neue Mikrometerocular ist in Figur 2 in natürlicher Grösse abgebildet. Es stellt 0 das Ocularglas, c das CoUec- tivglas, üb die Ocularröhre dar. Letztere besteht aus zwei auf einander schraubbaren Stücken h und d ; man kann nach Abschrauben von d *bequem zu dem die Mikrometertlieilung tragenden Plättchen m gelangen, um es zu reinigen, h trägt oben eine Conusführung, in der der Rand a drehbar ist, der seiner- seits abschraubbar das Ocularglas trägt. Das Ocularglas ist aus dem Grunde abschraubbar, damit man es selbst und das Mikrometer von 2. oben reinigen kann. Durch den an dem Ocularrand fixirten Messingcylinder (/, und dem an diesem verschraubbaren Cylinder c, welcher in h schleift, wird ähnlich wie bei den Objectiven mit Correctionsvorrichtung das an e be- festigte Mikrometer gehoben oder gesenkt, jenachdem man den Rand a in rechter oder linker Richtung dreht. Das Heben resp. Senken des Mikrometers wird durch die Schraube /', die in einem entsprechenden Ausschnitt von h läuft, in gewissen Grenzen gehalten. Es mag noch >) Auch für verschiedene Augen ist die Differenz sehr geringe. Verf., dessen Augen massig myop sind, nahm mit einem Ocularmikrometer, bei dem das Ocularglas eingestellt wird, zur Prüfung des oben beregten Einflusses Messungen bei mittelstarken Vergrösserungen mit und ohne Brille vor (die Differenz des Abstandes vom Ocularglas und Theüung betrug dabei fast genau 1 mm); es ergaben sich in den Resultaten keine grösseren Unterschiede als diejenigen, welche durch wechselnde Einstellung überhaupt bedingt sind. II, 1. Kleinere Mittheilungen. 43 erwähnt werden, dass h die Blende darstellt und dass man durch Ab- schrauben des an e befestigten Metallriuges i das Mikrometerplättchen ganz aus dem Ocular entfernen kann. — Der ganze Apparat incl. Mikro- meterplättchen wird mit 18 M. berechnet. Ein heizbarer Objecttiseh für starke Vergrösserungen. Von Dr. M. Löwit. Privatdooent und Assistent am Institute für experimentelle Pathologie der deutsclien Universität in Prag. Hierzu 1 Holzschnitt. Im Verlaufe einer Untersuchung über die verschiedenen Formen der weissen Blutzellen wurde ich dazu geführt, das Verhalten, ihres Zellprotoplasmas gegen erhöhte Temperatur bei starker Vergrösserung zu prüfen. Der mir zur Verfügung stehende heizbare Objecttiseh von Steickeb * erwies sich jedoch für den von mir verfolgten Zweck nicht brauchbar, da sich bei demselben der Uebelstand geltend machte, dass die vom Beleuchtungsapparate gelieferten Strahlenbündel nicht ^um Focus des gerade verwendeten Linsensystems gesammelt werden, viel- mehr zerstreut zu dem Objecto gelangen, das ja um die Höhe der heiz- baren Kammer von dem Tische des Mikroskopes absteht. Dadurch leidet aber die Lichtstärke des Bildes im hohen Grade, ein Umstand, der die Verwendung von stärkeren (Trocken- und Tauch-) Linsen geradezu unmöglich macht. Ganz das Gleiche gilt für die heizbaren Objecttische von Schklabewski ^, von Ranvier ^ und von Senaemont *. Auf meine Veranlassung hat nun C. Rejchekt in Wien einen heizbaren Objecttiseh construirt, der diesem Uebelstande in einfacher und ausgiebiger Weise abhilft. Von dem Gedanken ausgehend, dass auch Anderen die Benützung eines solchen Objecttisches gelegentlich er- wünscht sein könnte, habe ich mich entschlossen, an dieser Stelle eine kurze Mittheilimg über denselben und über seine Verwendbarkeit folgen zu lassen. *) Stkickee, Handbuch der Gewebelehre Bd. I. p. 15 f. 2) ScHKLAREwsKi Arch. f. mlkrosk. Anat. Bd. IV. p. 342 f. 3) Ranvier. Technisch. Lehrb. d. Histologie p. 39. — cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 34. *) DippEL, Grundz. d. allgem. Mikroskopie 1885, p. 291 f. 44 Kleinere Mittlieihingen. n, 1. Wie die beistehende Figur zeigt, lehnt sich der neue Object- tisch in seiner Form vollständig an den Stricker' scheu heizbaren Objecttisch an. In die centrale für den Durchtritt des Lichtes be- stimmte OeiFnung (C) kann nun vermittels eines dem Apparat beige- gebenen Schlüssels ein kleiner aus zwei kleinen Convexlinsen be- stehender Condensor genau eingefügt werden, deren obere au ihrer obereu Fläche plan geschliffen ist. Bei Verwendung desselben liegt das Object nahezu im Brenupunkte des vom Spiegel und den Beleuch- tuugsliusen gelieferten Strahleubündels, und kann selbst mit Oelimmer- sionssystemen bei ausgiebiger Lichtstärke des Bildes durchmustert werden '. Die Heizung der Kammer erfolgt in später noch zu erörteruder Weise mittels erwärmten Wassers, das durch eines der beiden seitlichen, mit Kautschukschläuchen versehenen Rohre {B^ Ij') in die Kammer ein- und durch das andere abfliesst. Die Centrirung des Objecttisches auf dem Mikroskopstative erfolgt in einfacher Weise mit Hilfe der beiden Stellschrauben ÄÄ'. Ueber die Verwendbarkeit dieses heizbaren Objecttisches kann ich Folgendes mittheilen. Derselbe kann für jedes Mikroskop eingerichtet werden. Bei dem von mir benutzten ZEiss'schen Instrumente (mit AnBE'schem Condensor) muss, wenn der in die heizbare Kammer ein- geschraubte Condensor in Anwendung gezogen werden soll, die obere AsBE'sche Condensorliuse abgeschraubt werden. Dadurch" entsteht zwischen der unteren ABSE'schen und der unteren in die heizbare Kammer eingeschraubten Beleuchtungslinse ein nicht unbeträchtlicher Zwischen- raum, der eine allerdings nicht bedeutende Abschwächung der Licht- stärke bedingen muss. Will man auch diesen geringen Uebelstand ') Selbstverständlicli kann der Apparat auch nach Ausschaltung des Con- ensors für schwache Systeme verwendet werden. II, 1. Kleinere Mittheilungen. 45 vermeiden, so braucht man nur die untere ÄBBE'sche Condensorliuse gleichfalls zu entfernen. Der in die Kammer eingefügte Beleuchtungs- apparat gestattet für sich allein schon den grossen Oeffnungswinkel der verwendeten Tauchlinse ausnützen zu können, sodass man bei hinrei- chender Lichtstärke des Bildes arbeiten kann. Die Heizung des Objecttisches geschieht durch ervväi-mtes Wasser, das in der Metallkammer circulirt. Die Regulirung der Temperatur in der Kammer kann in der Weise vorgenommen werden, dass man das zufliessende Wasser nur bis zu dem Grade (oder nur etwas darüber) erwärmt, dem man das zu untersuchende Object aussetzen will. Hierbei muss allerdings stets darauf geachtet werden, dass die Temperatur des erwärmten Wassers sich nicht ändere. Man wird daher sehr oft, wenn man nicht in der Lage ist, einen Thermoregulator einschalten zu können, die mikroskopische Beobachtung in störender Weise unterbrechen müssen, um die Temperatur des Wassers zu reguliren. Mir erscheint ein anderer Vorgang der Erwärmung empfehlens- werther. In einem passenden Gefässe wird Wasser bis zur Siedehitze erwärmt und coustant in langsamem Sieden erhalten. Hierauf lasse ich das heisse Wasser langsam in die Kammer einfliessen. So wie die Temperatur derselben auf 30 — -40° C. gestiegen ist, wird das Abflussrohr vorübergehend geschlossen, und in dasselbe ein enges Glasrohr einge- führt, durch welches das Wasser nur tropfenweise abfliesseu und daher auch nur ebenso langsam zufliessen kann. Es gelingt auf diese Weise durch passende Wahl des Abflussrohres leicht, die Temperatur des Ob- jecttisches auf der gewünschten Höhe zu erhalten, ohne dass es nöthig wäre, der Regulirung des Wärmegrades des für die Heizung verwendeten Wassers irgend welche Aufmerksamkeit zuzuwenden. Es ist mir auf diese Weise gelungen, die Quecksilbersäule des Thermometers durch längere Zeit nahezu constant auf einer bestimmten Höhe zu erhalten. Hierbei ist allerdings zu berücksichtigen, dass die durch die Queck- silbersäule angezeigte Temperatur keinen genauen Maassstab, vielmehr nur einen approximativen Werth für den in der Umgebung des zu unter- suchenden Objectes herrschenden Wärmegrad abgiebt, da die vom Thermometer angezeigte Temperatur bei der langsamen Circulation des erwärmten Wassers in der Kammer hauptsächlich der in der Umgebung der Thermometerkugel herrschenden Temperatur entspricht. Hiervon kann man sich leicht überzeugen, wenn man unter sonst gleichen Be- dingungen in einer Versuchsreihe das erwärmte Wasser durch die in der Nähe der Thermometerkugel befindliche Oefiiiung eiufliessen lässt (Stellung I), während man in einer zweiten Versuchsreihe das erwärmte 46 Kleinere Mittheilungen. II, 1. Wasser durch die von der Thermometerkngel entfernte OefFuung ein- treten lässt (Stellung II). Bei Stellung I stellte sich die Quecksilber- säule in mehreren Versuchen allmählig auf 50" C, bei Stellung II auf 40'' C. ein. Die Temperatur ist unter den gewählten Bedingungen na- türlich an der Einflussöffnung immer höher als an anderen Stellen der Kammer. Stellung I wird daher mit Vortheil dann angewendet werden, wenn die Temperatur des untersuchten Objectes etwas niedriger, Stellung II jedoch dann, wenn die Temperatur des untersuchten Objectes etwas höher als die durch das Thermometer angezeigte sein soll. Handelt es sich nur darum, die Untersuchung bei einer constant bleibenden Tem- peratur auszuführen, so kann man sowohl die Stellung I als II wählen, ich gebe jedoch der letzteren den Vorzug, weil bei der ersteren durch das in der Nähe der Thermometerkugel einströmende warme Wasser leichter Schwankungen der Quecksilbersäule eintreten können, als bei der letz- teren. Handelt es sich jedoch darum, die Temperatur, bei welcher das Object untersucht werden soll, genau zu bestimmen, so wird man zu der bereits erwähnten Methode greifen müssen, die Temperatur des erwärmten Wassers mit Hilfe eines Thermoregulators (bei rascher Circulation innerhalb der Kammer) auf der gewünschten Höhe zu erhalten. Ausser von der Stellung des Objecttisches wird die Temperatur in der Kammer noch abhängig sein von der Schnelligkeit, mit welcher das erwärmte Wasser innerhalb der Kammer strömt. Diese kann mit Hilfe verschieden weiter Abflussröhren leicht regulirt werden. Um diese Regulirung in bequemerer und zuverlässigerer Weise vollführen zu können, als dies mit den verschieden weiten Glasröhren möglich ist, wurde au dem Abflussrohr ein drehbarer Hahn angebracht, durch dessen verschiedene Einstellung die Kammer-Temperatur leicht regulirt werden kann. Auch ein ziemlich rascher Wechsel dieser Temperatur wird mit Hilfe dieser Einrichtung erzielt werden können, die in analoger Weise bereits früher von Max Flesch * für den gleichen Zweck verwendet wurde. Die von M. Flesch empfohlene Vorrichtung für den Zu- und Abfluss des warmen und kalten Wassers kann auch an das Zu- und Abflussrohr des hier beschriebenen heizbaren Objecttisches angefügt werden. ») Flesch, diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 33 ff. n, 1. Kleinere Mittheilungen. 47 Zur mikroskopischen Teclinik. _ ' Von Professor Dr. Heller in Kiel. Durch Eiuführiiug der verbesserten Mikrotome, besonders der Ge- frier-Miki'otome, hat der Unterricht in der Histologie namentlich in der pathologischen Histologie eine bedeutende Umwälzung erfahren. Früher musste die Untersuchung frischer Gewebe, auf welche ja immer für Anfänger das Hauptgewicht zu legen war, an Abstreif- und Zupfpräparaten, an Scheeren- und Rasirmesserschnitten vorgenommen werden ; nur für wichtigere Fälle war es möglich, grössere Uebersichts- Schnitte in genügender Feinheit mit Hilfe des Doppelmessers vorzulegen, da einerseits ein grosser Material- Verbrauch dadurch bedingt war, andererseits zur Handhabung der Doppelmesser etwas geübtere Hände gehörten, als die meisten unserer Studirenden von den Gymnasien mit- zubringen pflegen. Durch die Gefrier-Mikrotome nun ist die Möglichkeit gegeben, 3hne viel grösseren Material- und Zeitaufwand, als sonst zur Anfertigung weniger guter Doppelmesserschnitte gehörte, ein halbes Hundert bessere Schnitte von bedeutenderer Feinheit herzustellen. Solche Schnitte können die Studirenden theils ungefärbt der Untersuchung unterwerfen, theils zu besserer Aufklärung nach Anwendung von Tinctionen. Als ein besonderer Erfolg dieses Fortschrittes ist das sichtlich ge- wachsene Interesse und die intensivere Theiluahme an den histologischen Cursen zu verzeichnen. Zwei Uebelstände machen sich jedoch bei den Gefrier-Mikrotom- Schnitten geltend, welche wohl von den meisten empfunden werden. Vor allem macht sich sehr störend für viele Fälle die Wirkung des Gefrierens auf die rothen Blutkörperchen geltend ; sie erscheinen fast immer vollkommen zerstört. Es ist nun leicht, wo daran gelegen ist, diesen -Uebelstand zu vermeiden, indem man die kleinen Stückchen frischen Gewebes in eine dünne Chromkalilösung legt; es genügt kurze Zeit, bisweilen schon eine Stunde. Man schneidet entweder das un- mittelbar aus dem Chromkali genommene Stückchen, oder nach leichtem Abspülen in Wasser. Die Schnitte kommen dann nach Abspülen mit Wasser in die gleich zu erwähnende Lösung. Die Blutgefässe zeigen sich dann sehr schön mit den wohlerhaltenen rothen Blutkörperchen auch nach dem Gefrieren gefüllt. 48 Kleinere Mittheilungen. II, 1. Ein zweiter Uebelstand macht sich geltend, wenn eine grössere Menge Schnitte für einige Zeit frisch aufbewahrt werden sollen, sei es, dass sie allmählich erst untersucht werden können, sei es, dass sie zur Verwendung in Cursen der Zeiteintheilung halber im voraus angefertigt werden müssen. Es ist dies die in kurzer Zeit massenhaft eintretende Entwicklung niederer Organismen ; sie sind nicht nur äusserst störend für die Beobachtung, sondern sie verderben auch die Schnitte und machen sie namentlich unfähig, Färbungen anzunehmen. Gegen diesen Uebelstand verwende ich nun schon seit längere» Zeit mit sehr günstigem Erfolge Chloralhydrat. Es hat in der Mitte der siebziger Jahre ein belgischer Autor — dessen Name mir leider entfallen ist — auf die starke fäulnisswidrige Eigenschaft des Chloralhydrats aufmerksam gemacht und dasselbe zu Gefässinjectiouen empfohlen, um thierische Leichen frisch zu conserviren. Seitdem ver- wende ich eine 2procentige Chloralhydratlösung zur Herstellung der Gummi arabicum- Lösung und halte sie dadurch von Pilzentwicklung vollkommen frei. Ich setze nun der y4procentigen Kochsalzlösung, in welcher frische thierische Gewebe untersucht werden, 1 Procent Chloralhydrat zu und bewahre in dieser Lösung auch die frischen Gefriermikrotom-Schnitte auf. Es hat dies den Erfolg, dass man wochenlang die Schnitte stehen lassen kann, ohne die geringste Entwicklung von niederen Organismen. Ein nur '/aP^'Ocentiger Chloralhydrat-Zusatz hindert zwar die Entwick- lung der Spaltpilze, nicht aber die der Schimmelpilze. Eine stärkere als 2procentige Lösung wirkt auf viele Gewebe ungünstig. Im ganzen bewahren dadurch die Schnitte auch ihre Färbefähigkeit besonders für Pikrocarmin, allmählich aber wird dieselbe je nach der Gewebsart früher oder später geringer. Ich kann daher Allen, welche solche Schnitte einige Zeit frisch er- halten wollen, den Chloralhydrat-Zusatz empfehlen. HoYER * hat den Zusatz von 1 Procent und mehr Chloralhydrat zu Carminlösungen, um sie haltbarer zu machen, empfohlen; ich kann dieser Empfehlung nur beipflichten. Es wird dadurch die sonst so un- gemein störende Entwicklung niederer Organismen völlig abgehalten. Man kann wochenlang mit demselben Schälchen Pikrocarmin imzählige Schnitte färben, bis die Farbe erschöpft ist. ») HoYER in Biolog. Centralbl. Bd. II, 1882, p. 17. Das Pikrocarmin nach den Angaben von Hoyeu dargestellt, bewährt sich vorzüglich, während wegen Zeitmangel von Handlungen bezogenes angeblich HoYER'sches unbrauchbar war. n, 1. Kleinere Mitthpilungen. 49 lieber die Anwendung von Eoraxmethylenblau für die Unter- suchung des centralen Wervensystems und für den Nachweis von Mikroorganismen, speciell zur bacteriologisehen Untersuchung der nervösen Centralorgane. Von Dr. Hermann Sahli. Privatdocent für iunere Medicin in Bern. Die überrasclienden Bilder, welche ich mittels der in dieser Zeit- schrift ' mitgetheilten Doppelfärbung mit Säurefuchsiu und Methylenblau erhalten habe, veranlasste mich die P"'ärbung mit Methylenblau allein für das centrale Nervensystem zu versuchen, um so mehr, als ich nach den Doppelfärbuugen vermuthen konnte, dass sich mit dieser Farbe durchaus ähnliche Bilder erzeugen lassen wie mit den Weigekt- sclien Methoden. Diese Vermuthung stellte sich denn auch als richtig heraus. Man braucht geeignete Schnitte (von welchen alles gilt was auch für die WEiGEEx'schen oder meine Doppelfärbungen erforderlich ist) nur einige Minuten in eine concentrirte wässerige Lösung von Methylenblau zu legen, und sie dann mit Wasser oder Alkohol auszu- waschen bis zur bekannten Differenzirung , so hat man genau das WEiGERT'sche Bild ins Blaue übersetzt. Dabei fiel mir nur eines auf. Sobald man mit dem Entfärben etwas zu weit giug, war eine Anzahl der Fasern nur noch sehr schwach gefärbt und bei gar zu starkem Aus- waschen erhielt man Bilder, welche sich von der WEiGEKr'schen durch geringere Faserzahl unterschieden. Die auf diese Weise und bei zu schwacher Farbeneinwirkung ausfallenden Fasern sind nach den früher mitgetheilten Kesultaten der Doppelfärbung offenbar diejenigen, welche statt cyanophiler Substanz in grösserer Menge die WEiGERr'sche erythro- phile Substanz enthalten. Und ebenso werden bei mangelhaft ausge- führter WEiGEEx'scher Säurefuchsinfärbung zunächst diejenigen Fasern ausfalle'n, welche überwiegend cyanophile Substanz enthalten. Für die morphologische Untersuchung hat die neuere WEiGERT'sche (Hämatoxy- lin-) Färbung den Vortheil, dass, entsprechend der ausserordentlichen Intensität der Färbung, welche schon auf eine grosse Affinität zwischen den sich färbenden Theilen und der Farbe hinweist, diese chemischen Differenzen zwischen erythrophiler und cyanophiler Substanz praktisch 1) Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 1 ff. Zeitschr. f. wiss. ilikruskopie. II, 1. 50 Kleinere Mittlieilungen. II, 1. vollstäudig wegfallen, d. h. dass die Färbung der Fasern auch wenn man geringere Aufmerksamkeit auf die Entfärbung verwendet, eine gleichmässigere ist, so dass ohne besondere Sorgfalt ebensoviele Fasern intensiv gefärbt erscheinen, wie mau es bei der rothen und der blauen Färbung nur nach sehr vorsichtiger Behandlung sieht. Auf der un- gleichmässigen Färbung der Fasern mit Säurefuchsin und Methylenblau beruht nun die Möglichkeit von Doppelfärbungen wie die in dieser Zeit- schrift mitgetheilte. Und in sofern ist sie eine willkommene That- sache, wenn auch für die morphologischen Untersuchungen, bei welchen man sicher sein will auch nicht die feinste Faser zu übersehen, der WEiGEET'schen Hämatoxylinfärbung der Vorzug zu geben ist. Theoretisch müsste nun allerdings die Doppelfärbung mit Säurefuchsin und Methylenblau dasselbe vollkommene Resultat ergeben, indem die- jenigen Elemente, welche sich nicht mit dem Methylenblau färben, da- für das Säurefuchsin annehmen, allein praktisch steht dieselbe doch in Betreff der Sichtbarmachung aller Fasern der Hämatoxylinfärbung weit nach, weil das bei ihr unvermeidliche Auftreten von Mischfarben und die gleichzeitig vorhandene Achsencylinderfärbung die Erkennung der feinsten Fasern erschwert. Ich versuchte nun, ob sich die färbende Affinität des Methylenblau nicht durch irgend einen Kunstgriff soweit steigern lasse, dass alle Fasern, auch die wesentlich erythrophilen, sich mit Leichtigkeit intensiv blau färben. Es gelang mir eine solche Steigerung der färbenden Kraft des Methylenblaus durch Zusatz von Borax. Am zweckmässigsten fand ich folgende Lösung: Destillirtes Wasser 40-0 Gesättigte wässerige Methylenblaulösung 24*0 öproceutige Boraxlösung 16*0 (Mischen, einen Tag stehen lassen und dann filtriren). Wenn man in diese Flüssigkeit die Schnitte 10 Minuten bis mehrere Stunden (Ueberfärbung ist nicht zu befürchten) einlegt, so werden sie tief schwarzblau gefärbt; man spült nun zunächst die anhängende Farbe ab und wäscht dann bis sich die graue Substanz hell von der tiefblau gefärbten weissen Substanz abhebt in Wasser oder Alkohol aus, ent- wässert, hellt auf mittels Cedernholzöl und legt ein in puren oder mit Cedernholzöl vermischten Balsam. Der Einfluss des Boraxzusatzes wird beim Auswaschen sehr deutlicli, indem die Präparate sich viel lang- samer entfärben als nach Tinction mit blossem Methylenblau. Man er- hält so sehr schöne und den Hämatoxylinpräparaten ebenbürtige Bilder, in welchen die Färbung sämmtlicher feinster Fasern sehr vollkommen II, 1. Kleinere Mittheilungen. 51 ist. Die Gauglienzelien erscheinen blass g-rünlich, deutlich von allen anderen Elementen, namentlich den blau gefärbten Gliakernen zu unter- scheiden. Die Kernfärbung ist eine sehr gute. Die Fasern zeigen genau das Bild wie bei der WEiGEHT'schen Färbung, nur blau. Während nach dem Gesagten die Präparate den Häraatoxylinpräparaten an Schön- heit nichts nachgeben und auch in der Herstellung eher einfacher sind als diese, so haben sie dafür den Nachtheil, dass es mir bis jetzt nicht sicher gelang, sie haltbar zu machen. Ich würde die Methode deshalb gar nicht mitgetheilt haben, wenn sie nicht den Vortheil hätte, ersteris sehr schöne Unterfärbungen mit Fuchsin, Säurefuchsin, Tropäoliu, Pikrin- säure etc., zu ermöglichen, und zweitens gleichzeitig eine exquisite Mikroorganismenfärbung zu sein. Ich habe mittels der hier angegebenen Mischung von Methylenblau und Borax Mikrokokken nach kurzer Einwirkung mit Leichtigkeit färben können, die sich gegen jede der gewöhnlichen Färbungen renitent ver- hielten. Die Färbung fiel selbst besser aus als mit der in neuerer Zeit viel angewandten schwach alkalisch gemachten Methylenblaulösung, wie ich mich durch directe Vergleichsversuche bei schwierigen Objecten überzeugte. Icli möchte daher die Färbung mit Borax-Methylenblau hauptsäch- lich da empfehlen, wo man gleichzeitig die feinste Structur des centralen Nervensystems und einen allfälligen Gehalt desselben an Mikroorganismen untersuchen will. Die Haltbarkeit der Färbung scheint mir, wie die Haltbarkeit der Doppelfärbung, wesentlich abhängig zu sein von der Art der Härtung und es ist zu hoffen, dass von dieser Seite her die Methode sich noch verbessern lässt. Mittheilung, betreffend das von mir verwandte Anilingrün. Von Dr. P. Scbiefferdecker, Prosector in Götlingen. Vor kurzem veröffentlichte ich eine Arbeit über den Bau der Schleimdrüsen '. Ich hatte bei dieser Untersuchung neue Resultate er- halten, hauptsächlich durch die Anwendung eines Anilingrüns, welches ') Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIII. 52 Kleinere Mittheilungen. II, 1. gauz specifiscli färbte. Ich muss sagen, class mich damals diese Färbung einigermaassen überraschte, da ich schon früher einmal denselben Farb- stoff bei denselben Drüsen versucht hatte, ohne, wenigstens soweit ich mich erinnerte, diese Färbung erhalten zu haben. Ich war im Jahre 1876 nämlich gerade mit Versuchen in Bezug auf meine Doppelfärbung, Eosin: Dahlia, Methylviolett beschäftigt, als Herr Prof Merkel von Nürnberg unter einigen anderen Farbstoffen aus der Handlung von Geundhebe und Heetel auch dieses wasserlösliche Anilingrün mit- brachte. Ich fand, dass dasselbe sich für Doppelfärbung mit Eosin ebenso eigene wie die erstgenannten Anilinfarben und veröffentlichte meine Resultate in Band XV des Archiv für mikroskopische Anatomie. Ich hob damals hervor, dass die verschiedenen Thätigkeitszustände der Schleimdrüsen bei Anwendung dieser Doppelfärbung deutlich hervor- träten, ertheilte aber dem Anilingrün keinen Vorzug vor Dahlia oder Methylviolett. Als ich nun 1883 die eigenthümlich specifische Färbung des Anilingrüu fand, die so abweichend war von der durch Dahlia oder Methylviolett herbeigeführten, konnte ich nur annehmen, dass ich die- selbe früher übersehen hätte, und mich hierüber wundern. Nun habe ich aber jetzt eine Beobachtung gemacht, welche mir die Sache erklärt hat, und welche, wie ich glaube, von allgemeinerem Interesse ist. Als ich im Herbst 1883 von Rostock nach Göttingen übersiedelte, nahm ich mir etwas von dem Anilingrün mit, um meine Färbungsversuche fortzu- setzen. Ich machte davon eine Lösung etwa im December 1883, welche ich aber zunächst nicht weiter an den von mir schon untersuchten Schleimdrüsen probirte. Später wandte ich mich dann an Geundheee UND Heetel, um zu erfahren, von wo und unter welcher Bezeichnung dieses Anilingrün zu beziehen sei, fand aber zu meinem Bedauern, dass sich der Farbstoff nicht mehr identificiren Hess. Ich wollte denselben nun dadurch anderen üntersuchern zugänglich macheu, dass ich kleine, aber ausreichende Quantitäten davon an die verschiedenen Universitäten versandte. In Rostock war noch Vorrath, und Herr Prof v. Beunn übersandte mir auf meine Bitte in liebenswürdigster Weise das ge- wünschte Quantum. Bevor ich die Fläschchen mit der Lösung ab- schickte, probirte ich noch einmal, die Färbung damit auszuführen, um des Erfolges sicher zu sein. Zu meinem Erstaunen gelang die Färbung aber nicht in jener specifisehen Weise, sondern ich erhielt nur ein Bild wie es Dahlia oder Methylviolett auch gab. Ich hatte dieselben Drüsen- präparate benutzt, die ich früher bei meiner Arbeit über die Schleim- drüsen verwandt hatte, dieselben waren vollkommen gut erhalten, und doch bekam ich dieses andere Resultat. Ich nahm nun jene Lösung II, 1. Kleinere INIittheilungen. 53 zu Hülfe, welche ich im December 1883, wie oben erwähnt, in Göttingen gemacht hatte , und diese ergab eine Färbung, welche im ganzen noch ziemlich der mit der frischbereiteten Lösung erhaltenen ähnelte, aber doch schon vielfach jene eigenthümlicheu Netze, wenn auch nur schwach hervortreten Hess, welche ich früher erhalten hatte. Der einzige Unter- schied zwischen diesen drei Lösungen, welche so verschiedene Resultate ergaben, war der, dass sie verschieden lange dem Lichte ausgesetzt ge- standen hatten. Jene von mir in Rostock benutzte Lösung von 1876 bis 1883, also etwa sieben Jahre, die zweite etwa ein Jahr, die dritte nur wenige Wochen. Man wird dadurch zu dem Schlüsse genöthigt, dass sich in der Lösung, wahrscheinlich durch Einwirkung des Lichtes, eine Veränderung des Farbstoffs vollzieht, durch welche er jene eigen- thümliche Färbungsfähigkeit für die in den Schleimdrüsen befindlichen Stoffe erhält. So erklärt es sich dann auch leicht, dass ich bei meinen ersten Untersuchungen im Jahre 1876, als ich die frische Lösung ver- wandte, diese specifische Färbungsfähigkeit nicht fand. Ich habe nun versucht, ob man in dem Farbstoffe die eigenthümliche Veränderung vielleicht auch auf anderem Wege hervorrufen könnte, durch Zusatz von Alkalien oder Säuren, oder durch längeres gelindes Erwärmen, aber bis jetzt wenigstens ohne jeden Erfolg; die Färbung bleibt unverändert die der frischen Lösung. Concentrationsverschiedenheiten haben ebenfalls keinen Einfluss. Es bleibt also nichts übrig als die Zeit wirken zu lassen. Es ist ja nun sehr unwahrscheinhch , dass diese eigenthümliche Veränderungsfähigkeit diesem Farbstoffe allein zukomme, und deshalb schien mir eine Mittheilung darüber von allgemeinerem Literesse zu sein, zumal jetzt in einer Zeit, in der so viel mit Anilinfarbstoffen gearbeitet wird und so manches Mal die specifische Auilinfärbung mit zu wichtigen Unterscheidungen benutzt wird. Der Umstand, dass die Umänderung bei dem Anilingrün augenscheinlich so sehr langsam vor sich geht und die Farbe der Lösung direct nicht zu erkennen ist, fordert um so mehr dazu auf, vorsichtig zu sein, da das Beobachten einer derartig sich voll- ziehenden Veränderung um so schwieriger ist. Andererseits beweisen die mitgetheilten Thatsachen aber auch wieder, ein wie feines und scharfes Farbenreagenz wir in den Anilinfarben besitzen und wie wichtig dieselben in Folge dessen für die histologische Untersuchung sind, wenn die nöthige Kenntniss der Fehlerquellen und die nöthige Kritik dem Untersuchenden nicht fehlen. Wenn diese Bedingungen erfüllt werden, so kann man meiner Meinung nach aus Aniliufärbuugen bei histologi- schen Untersuchungen ebenso sichere Schlüsse ziehen wie aus den Er- gebnissen irgend welcher anderer Untersuchungsmethoden. 54 Kleinere Mittheilungen. II, 1. Bernsteinlack zum Verschliessen mikroskopiselier Präparate. Von Wilhelm Behrens in Göttiagen. Vor mehreren Jahren, als ich ziemlich ausgedehnte Untersuchungen über die Haltbarkeit der verschiedenen, zum Verschliessen mikrosko- pischer Präparate in Vorschlag gebrachten Lacke anstellte, wurde meine Aufmerksamkeit ganz zufällig auf die von der Firma Ed. Pfannenschmidt in Danzig in den Handel gebrachten Bernsteinlacke gelenkt. Ich verschaffte mir zunächst eine Quantität einer gewöhnlichen Sorte, die in der Technik verwandt wird, und die, wenn ich nicht irre, aus den zerkleinerten Abfällen des Bernsteins gemacht wird. Sie enthält jeden- falls noch andere Bestandtheile als Bernstein, denn sie hat eine dunkel- olivenbraune Farbe und ist auch in kleinen Gelassen völlig undurch- sichtig, in dünnen Schichten auf Glasplatten nimmt der Lack eine schön bernsteinbraune Farbe an. Er ist ziemlich dünnflüssig, das oder die Lösungsmittel sind mir nicht näher bekannt, jedenfalls nimmt aber, nach dem Gerüche zu urtheilen, Leinöl den ersten Rang unter diesen ein. Später liess ich mir dann von der genannten Fabrik noch zwei andere Proben verschaffen, eine mit J, eine zweite mit 0 bezeichnet, von denen 0 dünnflüssig transparent und (in engeren Gefässen) hell cognacfarbig, während J schwarz mit einem Stich ins Bräunliclie und völlig undurch- sichtig ist. Im Geruch unterscheiden sich diese beiden Sorten von der erstgenannten nicht. Da mir nicht bekannt wurde, dass bereits von anderer Seite der Bernsteinlack für die Zwecke des mikroskopischen Präparators heran- gezogen ist (wenigstens ist bis jetzt nichts darauf Bezügliches publicirt worden), so will ich hier die Resultate meiner Prüfungen kurz erwähnen. Alle von mir zum Verschluss in Aussicht genommenen Lacke prüfte ich präliminarisch erst so , dass ich sie mit Hilfe eines Drehtisches in schmalen, niedrigen Ringen (so wie sie beim mikroskopischen Präparat in Verwendung kommen würden) auf Objectträger auftrug, und diese Ringe in einem Präparatenschranke vor Staub, Sonne und grösseren Temperaturschwankungen geschützt trocknen liess. Ich untersuchte die Ringe täglich zweimal und notirte unter die verschiedenen Lackproben die Zeit, die seit ihrer Herstellung bis zum völligen Trocknen der Ober- fläche verstrichen war. Diese Zeit schwankte zwischen zwei Stunden (Copal-Spiritus-Lack) und drei Monaten (Lack mit II, 1. Kleinere Mittheilnngen. 55 Dammcarharz) ! Nachdem daun die Ringe noch einige Monate unberührt gelegen hatten, versuchte ich mit einem ganz kleinen, ziemlich stumpfen Schraubenzieher Fragmente der Ringe von der gläsernen Unterfläche abzusprengen, um hieraus zu sehen, welche Sorten am besten am Glase hafteten. Ich fand — jedoch mit einigen Ausnahmen — dass diejenigen am wenigsten hafteten, welche zuerst trocken geworden waren. Mit den ganz leicht abspringenden habe ich mich nachher bei der Herstel- lung mikroskopischer Controllpräparate gar nicht abgegeben; es ge- hörten zu diesen mehrere Sorten, die zumal in England als ganz ex- quisite Verschlussmittel empfohlen werden (z. B. white zinc cement) ! Einer der am besten haftenden Lacke war die zuerst erwähnte Sorte Bernsteinlack. Ich machte mit derselben eine Reihe von Coutroll- präparaten. Auf einen ganz reinen * Objectträger wurde mit dem Dreh- tische ein Bernsteinlackring aufgetragen, der bei Anwendung eines runden Deckglases von 18 mm Durchmesser einen äusseren Durchmesser von 20 mm, einen inneren von 16 mm hatte; seine Breite betrug also 2 mm. Nachdem dieser unter einer Glasglocke etwa ^a Stunde lang eingetrocknet war, wurde in seinen Innenraum ein Tropfen Glycerin gebracht, das Object (aus der Pflanzeuhistologie) eingelegt und das Deckglass dergestalt aufgelegt, dass sein Rand genau in die Mitte des noch klebrigen Ringes kam. Es wurde dann sanft auf den klebrigen Lack gedrückt, bis das Glycerin überall an den Lack antrat; sodann wurde sogleich mittels des Drehtisches der Verschlussring von ca. 2 mm Breite aufgetragen, der also einerseits über das Deckglas gritf, ander- seits dem ersten halberstarrten Ringe auflag. Der erste Ring hat einen doppelten Zweck. Erstlich schützt er durch seine Dicke (die man modificiren kann) zarte Präparate vor Zerquetschtwerden durch das Deckglas, welches sich senkt, wenn der Lackverschluss eintrocknet, und zweitens kann man nur mit Hilfe eines solchen Grundirungsringes absolut sicher schliessende Präparate erhalten. Wenn der aus Bern- ') Ein mit einem Leinentuche oder einem Leder ganz blank geputzter Objectträger ist nicht ganz rein. Er ist mit einer ganz dünnen Schicht von sogenanntem, aus der Glashütte stammendem „Hüttenrauch" bedeckt. Taucht man aber den geputzten Objectträger längere Zeit in concentrirte Salpetersäure, und spült dann successive mit destillii'tem Wasser, absolutem Alkohol und Aether ab, dann ist er wirklich ganz rein und enthält auch nicht die geringste Leinwandfaser, mit denen man andernfalls immer einen harten Kampf zu bestehen hat. Vor dem Gebrauch bürstet man den Objectträger, um etwaige Staubpartikelchen zu entfernen, unter gelindem Blasen mit einem stumpfgeschnittenen Zobelpinsel ab. 56 Kleinere Mittheilunsen. II, 1. steinlack bestehende Verschluss eintrocknet (er ist nach Verlauf einer Woche fast völlig hart), so bemerkt man folgende Erscheinung. Nach einigen Stunden wird der ganze Verschluss auf seiner Oberfläche wellig- runzlig, und es hat den Anschein, als ob das Präparat ein recht häss- liches Aeusseres erhalten würde ; allein schon nach einem oder zwei Tagen ist der Lack wieder ganz glatt und schön transparent ge- worden. Ich hatte etwa ein Dutzend Präparate in Glycerin, deren Verschluss aus Bernsteinlack besteht, ausgewählt, um sie auf ihre Haltbarkeit zu prüfen. Sie wurden über eine Woche lang dem heissen Sonnenschein ausgesetzt, sodann lagen sie mehrere Tage hindurch in Wasser von gewöhnlicher Temperatur, endlich wurden sie wiederholt so heftig ge- schüttelt, als es anging, ohne die Objectträger zu zerbrechen : alle diese Procedureu hielten sie aus, ohne dass auch nur eines undicht geworden wäre. Ich glaube, es ist dieses ein guter Beweis für die Verwendbar- keit des Bernsteinlackes zu dem gedachten Zwecke. — Meine zuerst mit Bernsteiulack eingeschlossenen Präparate sind jetzt zwei bis drei Jahre alt. — Die später bezogenen, feineren Sorten, zumal die schwarze, dürften noch mehr zu empfehlen sein ; ich erhielt sie aber erst vor einigen Monaten, konnte daher die Präparate noch nicht lange genug beobachten. Im Anscliluss hieran seien nur noch einige Worte über die anderen hauptsächlich in Gebrauch befindlichen Einschlusslacke gestattet. Es scheint mir, dass ganz im allgemeinen diejenigen die haltbarsten Prä- parate geben, deren Lösungsmittel nicht zu schnell verdunstet. Die- jenigen, welche zu schnell erhärten, deren Lösungsmittel Alkohol, Aether, Benzol oder Chloroform ist, sind die brüchigsten. So vor allem der Copallack (Lösungsmittel Alkohol), der ganz und gar zu ver- werfen ist, sodann der Schellackkitt (Lösungsmittel gleichfalls Alkohol), der mit der Zeit ganz runzlig wird und makroskopische Risse erhält, endlich der weisse Zinklack, white zinc cement (Lö- sungsmittel Benzol). Etwas besser scheint sich die von Geam-Rützou vorgeschlagene Modification des Schellackkittes ' zu halten, der Canada- balsam enthält (Lösungsmittel Alkohol und Aether); jedoch habe ich ihn noch niclit sehr lange Zeit in Gebrauch, enthalte mich in Folge dessen vorläufig eines Urtheils darüber. Dahingegen hat sich bei mir der von Dr. Kaiser in den Handel gebrachte Mikroskopirlack, *) PouLSEN , Botanisk INIikrokemi p. 55 ; Behrens , Hilfsb. z. Ausführ. mikrosk. Unters, p. 191. II, 1. Kleinere Mittheilungen. 57 dessen Lösungsmittel gleichfalls Alkohol ist, recht gut bewährt, wenn ich die Präparate in derselben Weise anfertigte, wie oben beschrieben. Er muss aber eine ganz bestimmte Concentration haben, ist er zu dick- flüssig, so lässt er sich nur sehr ungleich auftragen. Sehr gute Ver- schlusslacke sind zweifellos die in Leinöl und Terpentin gelösten Sorten; sie trocknen zwar bedeutend langsamer, doch sind die gebräuchlichsten nach Ablauf einer Woche trocken. So ist der Asphaltlack zweifel- los eins der besten Einschlussmittel, nur muss man gute Sorten des Handels wählen; schlechte sind unbrauchbar. Ich habe viele Präparate mit dem von C. Rodig (Wandsbeck) gelieferten Asphaltlack herge- stellt; ich kann diesen empfehlen. Die BEALs'sche Goldsize ' da- gegen , eine Composition von Mennige, Umber, Bleiweiss und Ocker, muss ich entschieden verwerfen, ebenso das ähnliche, noch complicirtere Gemisch, welches nach Marsh - von Kitton in Vorschlag gebracht wurde. Den ZiEGLER'schen Kitt, wahrscheinlich eine ähnliche Masse, habe ich noch gar nicht erprobt , ebensowenig wie die von Hagee ^ proponirten Compositionen, welche letzteren es übrigens zu verdienen scheinen , dass Versuche mit ihnen gemacht werden. Es dürfte mir vielleicht in Zukunft möglich sein, über diese wie über andere neuer- lich vorgeschlagene Verschlussmittel an der Hand von Experimenten zu berichten. Berichtigung. Von Prof. Dr. AV. Flemming in Kiel. Eine Hämatoxylinlösung, welche namentlich für Kernfärbungen ganz vorzügliche Dienste thut und dabei sehr haltbar ist: l)'Kryst. Hämatoxylin conc. in Alkohol abs. gelöst, 2) Ammoniakalaun conc. in Wasser, eine Woche am Licht stehen zu lassen, zu tiltriren und mit 25 cc Glycerin und 25 cc Methyl- alkohol zu versetzen — • 0 Frey, Das Mikroskop. 7. Aufl. p. 142 ; Behrens, 1. c. p. 192. 2) Marsh, Microscopical section cutting. 2 ed. Lond. 1882, p. 106. 3) Hager, Das Mikroskop u. seine Anwend. 5. Aufl. p. 71. 58 Kleinere Mittheilungen. II, 1. ist auf Grund eines Versehens in meinem Buch „Zellsubstanz, Kern und Zelltheihmg" , p. 383, als GEENACHEK'sches Hämatoxylin bezeichnet worden. Da diese Benennung seitdem auch von anderen Seiten ge- braucht worden ist, bemerke ich, dass nach späterer Orientirung die Lösung nicht von Gkenachek herrührt, und dass ich ihren Erfinder bisher nicht ermittehi konnte. Sie ist im Heidelberger pathologischen Institut seit lange in Gebrauch und dort vermuthlich von Dr. Pkudden eingeführt worden ; mir wurde die Vorschrift von dort freundlich durch Dr. Peitzner mitgetheilt. II 1. Referate mid Besprechungen. 59 Heferate und Besprecliiiiio'eii. 1. Lehr- und Handbücher. Garbini, Manuale per la tecnica moderna clel microscopio neUe osservazioni zoologiche, istologiche ed anatomiche. [Handbuch der modernen mikro- skopisclien Technik für zoologische, histologi- sche und anatomische Beobachtungen]. Verona 1885. Verf., ein Zögling der Zoologischen Station zu Neapel, stellt in vorliegendem kurzen Handbuche die wichtigsten Anweisungen zusammen nach mündlichen Mittheilungen so geschickter Mikrographen wie Mayee, GriESBEECHT ctc. , uud er übergiebt dieselben seinen Landsleuten zur Benutzung, welche die keineswegs leichte Kunst erlernen wollen, mit dem Mikroskop zu arbeiten und histologische Untersuchungen auszu- führen. Das Buch besitzt einen Mangel, welcher vielen derartigen Publica- tionen eigen ist, nämlich den einer unnöthigen Kürze. Wenn man für gewöhnlich von einem für Anfänger bestimmten Buche spriclit, so ver- steht es sich eigentlich von selbst, dass es äusserst kurz sein muss. Bezüglich dieses, der Technik gewidmeten, ist es ein MissgrifF. Für einen in mikroskopischen Untersuchungen Bewanderten genügen wenige Winke, um auch eine neue Methode zu verstehen und richtig anzuwenden, aber für einen absolut Unerfahrenen müssen auch die unscheinbarsten Eigenthümlichkeiten der Technik genau beschrieben werden, denn ge- rade hier liegt die grösste Schwierigkeit für den Anfänger. Und wenn man kein umfangreiches Buch schreiben will, so ist es immer besser, die schwierigeren Fra9;en oder jene, welche schon ein gewisses Bewandertsein in der Sache erfordern, lieber fortzulassen, und sich nicht zu begnügen 60 Referate und Besprechungen. II, 1. mit wenigen Zeilen über die Facten von äiisserster Wichtigkeit. Der folgende Fall diene zum Beispiel : Auf p. 23 spricht der Verf. von der Prüfling des Mikroskops und schreibt: „Die Güte der Objective stellt sich heraus durch Beobachtung eines Testobjectes, welches gewöhnlich dem Instrumente beigegeben werden soll, Pleurosigma angulatum. Wenn man es bei einer öOOfacheu Vergrösserung bei schiefem Lichte besieht, so muss es, wenn das Instrument gut sein soll, drei Streifensysteme zeigen : Zwei schiefe im entgegengesetzten Sinne, welche von der cen- tralen Rippe ausgehen, ein drittes, zu dieser Rippe perpendiculäres". — Ich hätte es lieber gesehen, wenn der Verf. geschrieben hätte : „Der- jenige, welcher noch ein Anfänger ist, der noch nie ein Mikroskop in der Hand gehabt hat und ein ürtheil zu erhalten wünscht über die Güte des Instrumentes, welches er erworben hat oder erwerben will , der trage es zu Jemandem, der in der Sache erfahren ist, und der in einer viertel Stunde es viel genauer wird prüfen können, als es jenem in zwei Tagen der Anstrengung wird möglich sein". Denn gesetzt auch, dass die von dem Verf. angegebene Prüfungsmethode genügend sei, um über den Werth eines Instrumentes zu urtheilen, so zweifle ich doch sehr, dass ein Anfänger im Stande sei,- sie richtig anzuwenden. Diesem Fehler gegenüber steht ein bemerkenswerthes Verdienst, das der Originalität des Buches. Man bemerkt deutlich, dass der Verf. Alles, was er beschreibt, auch gesehen, probirt und selbst geprüft hat. Sein Buch ist kein Corapilatorium, und von diesem Gesichtspunkte aus kann es auch mit Nutzen von Jenen gelesen werden, welche schon genügende Erfahrung haben, um so mehr, als der Verf. auch die Unterweisungen giebt, welche von den zweifellos über der Materie stehenden Meistern angegeben sind. Zwar sind darunter auch Behauptungen, von denen mau im Ernste nicht weiss, wie der Verf. dazu kommt, wenn er p. 64 Anm. 1 schreibt: „Die Anilinfarben dienen nur zu Augenblicksprä- parationen. Die Doppelfärbungen können als eine Luxussache für die mikroskopische Technik angesehen werden". Ich habe nicht nöthig, Worte zu verlieren um die Falschheit dieser beiden Behauptungen zu zeigen. So sagt er auch p. 139, wo er von der Untersuchung des Rückenmarkes spricht: „Es wird gut sein, das abgeschnittene, zu con- servirende Stück Mark longitudinal zu halbiren, d. h. also, ein Lateral- stück abzutrennen, derart, dass man in den Schnitten nur eine Hälfte des Markes mit einem Theil der anderen Hälfte hat, damit die Erhärtungs- flüssigkeit leichter eindringen kann". — Dieser Rathschlag ist zum mindesten eigenthümlich , er erinnert an die von Feokiep befolgte Methode (erwähnt von Viechow in der Einleitung zu seiner klassi- II, 1. Referate und Besprechungen. Gl sehen „Sectionsteclinik"), um das Rückenmark bei den Obductionen zu prüfen. Wir kommen nun zu einer genaueren Prüfung des Ruches selbst. Es ist in drei Theile geteilt: Utensilien und Reagentien — Manipu- lationen — Herstellung von Präparaten. Im ersten Theile sind zuerst das Mikroskop und die Hilfs- apparate beschrieben ; es ist dieser der unvollständigste Theil, den man bedeutend erweitert wünschen möchte, wenn mau nicht vorzieht, den Leser entweder auf ausgedehntere Abhandlungen oder auf physikalisclre Werke zu verweisen. Darauf werden die hauptsächlichsten Instrumente aufgeführt, es sind mit besonderer Sorgfalt beschrieben und abgebildet der Apparat, um Objecte in Paraffin einzubetteu, das Mikrotom von Thoma, die Schnittstrecker von Ju^a und von Decker. Von den Rea- gentien sind nur die hauptsächlichsten erwähnt. Von den Tiuctions- mitteln sind die Recepte gegeben von dem sauren Boraxcarmin von Grenachee, von Mayer und von Emery, von dem Alauncarmin von Grenacher, dem Carmin von Beale, der Cochenilletinctur von Mayer und dem Pikrocarmin von Ranvier. Bei den Conservirungsmitteln findet sich nichts Erwähnenswerthes. Der zweite Theil handelt von den Manipulationen, erstens von der Fixiruug der Präparate. Von allen Fixiruugsmitteln giebt Verf. dem Sublimat den Vorzug , das er in concentrirter Lösuug anzuwenden räth, indem er es sehr kurze Zeit einwirken lässt und dann sehr sorgfältig mit Wasser auswäscht. Für die viel Chitin enthaltenden Thiere schlägt Verf. das Sublimat in heisser alkoholischer Lösung vor, Aveil diese viel leichter in die Gewebe eindringt. ~ Der Pikrinschwefelsäure räumt Verf. nicht den ihr von anderen Beobachtern beigelegten Vortheil ein. Auch das Kaliumbi- chromat und die Chromsäure lobt er nicht zu sehr, er findet sie dem Sublimat weit nachstehend. (Man versteht die unzulänglichen Resultate, welche Verf. erhielt, als er „ein Stück Rückenmark von 3 bis 4 cmm in eine öprocentige Lösung von Kaliumbichromat" brachte. Wenn man mit dem Kaliumbichromat arbeitet, so muss man sein Hauptaugenmerk dar- auf richten, mit sehr verdünnten Lösungen anzufangen und nur nach und nach zu concentrirteren übergehen, und jedenfalls darf man nur selten bis zu dem Gehalt von 5 Proceut kommen. Das ist einer der ältesten und bestbegründeten Lehrsätze der mikroskopischen Technik! Ref.). — Von den Tinctionsmethoden beschreibt Verf. nur, als Beispiel, die Tinction mit Boraxcarmin, mit Pikrocarmin und mit Cochenille- tinctur. Wenige Worte widmet Verf. der Imprägnation mit Silbernitrat und Goldchlorid, über die Methode, die Präparate durchsichtig zu machen 62 Referate und Besprechungen. II, 1. und über die Dauei'präparate. Wir erwähnen nur den Ratli Cakestkini's, die in Glycerin gelegten Präparate langsam zu erwärmen, um sie schöner und durchsichtiger zu machen. Der Theil, welcher über die Anfer- tigung von Schnitten handelt, und über das üebertragen derselben auf den Objectträger, ist ausgedehnter ; man merkt wohl, woher diese Methoden zum grössten Theile stammen, nämlich aus der Zoologischen Station zu Neapel. Doch finden sich darin keine bemerkeuswerthe Eigenthümlich- keiten oder Modificationen der bereits überall bekannten Methoden. Dies gilt auch über das die lujectioustechnik behandelnde Capitel. Der dritte Theil des Werkes handelt von den speciellen Präparationsme- thoden, in erster Reihe von den verschiedenen Geweben, dann von den Organen, von der Art des Studiums gewisser niederer Thiere und der Embryonen. In Anbetracht der darin obwaltenden Kürze kann dieser Theil als gut bezeichnet werden, — Das Buch wird beschlossen durch einen Anhang, welcher eine Uebersicht der dem Mikroskopiker unent- behrlichen Utensilien umfasst und die Angabe, wo sie erworben werden können, ein Supplement, welches einige Zusätze zu Recepten ' enthält und solche Präparationsmethoden, welche im Texte nicht erwähnt wurden; endlich einige Tafeln, welche die hauptsächlichsten, im Buche beschrie- benen Instrumente abgebildet enthalten. Die Figuren sind nicht sehr elegant, aber ziemlich genau und deutlich. — Trotz der oben gerügten Mängel hat das Buch doch viele Vorzüge, und wir wünschen dem Verf. eine grosse Reihe von Lesern, damit er bald sein Buch in einer neuen Ausgabe vorlegen könne, welche verbessert und beträchtlich erweitert ist, und welche ein praktischer Führer für zoohistologische Unter- suchungen werden kann. G. Martinotti (Torino). Strasburger, Ed., Das botanische Prakticum. Anleitung zum Selbststudium der mikroskopischen Botanik für Anfänger und F o r t g e s c h r i 1 1 n e r e. Jena (Fischer) 1884, 664 pp. 8». m. 182 Holzschn. 12 M. Während bis vor einigen Jahren die speciell für den Botaniker bestimmte mikroskopische Literatur sehr dürftig war, hat die neueste Zeit auch auf diesem Gebiete mehrere Werke entstehen sehen ; diesen ») Verf., welcher die Angabe von Rimifleisch für die Färbung mitHäma- toxylin referirt, wünscht zu wissen, wo sie publicirt sei. Auch Gieuke (cfr. diese Zeitschrift Bd. I, 1884, p. 96) sagt darüber: „ohne Angabe der Zeit der Empfehlung". Es sei mir erlaubt zu bemerken, dass Rindfleisch diese Tinction bekannt gegeben hat (ich weiss zwar nicht, ob zum ersten Male) in seinem klassischen Lehrbuch der pathologischen Gewebelehre. 4. Aufl. (.Leipzig 1875). Vorrede p. X. Ref. II, 1. Referate und Besprechungen. 63 schliesst sicli das oben angekündigte Buch an. — Wenn man einen Blick in unsere botanischen Praktica wirft, wie sie auf jeder Universität be- stehen, so wird man von vornherein sagen können, dass ein Buch wie das vorliegende, wirklich „einem längstgefiihlten Bedürfniss" abzu- helfen im Stande ist. Befinden sieh in einem botanischen Laboratorium viele Praktikanten, so kann die Zeit, die sich der Director desselben oder sein Assistent mit dem Einzelnen befassen können, nur sehr geringe sein, sie wird mehr auf einen flüchtigen Blick ins Mikroskop oder auf eine flüchtige Beredung hinauskommen müssen. Der Praktikant bleibt auch in dem bestgeleiteten Prakticum noch immer ein gut Stück Auto- didakt, in sehr vielen Fällen wird er, wenn er rath- und thatlos vor einer zu beginnenden mikroskopischen Präparation steht, nicht momen- tan den Professor oder den Assistenten fragen können, und er hat in diesem Falle auf gut Glück darauf loszupräpariren. Das STEASBUBGER'sche „Botanische Prakticum" will es sich zur Aufgabe machen, dem Praktikanten ein ihn nicht im Stich lassender Wegweiser bei der Präparation und der Untersuchung von Objecten der Pflanzenhistologie zu sein. Wir wüssten kaum Jemanden unter den lebenden Botanikern zu nennen, der geeigneter und competenter ge- wesen wäre, ein solches Buch zu schreiben, als der Verf. selbst. Aus- gerüstet mit einer Geschicklichkeit im Präpariren, die — wie sich aus seinen zahlreichen recenten Publicationen von den „Gymnospermen und Gnetaceeu" an bis zu den „Neuen Untersuchungen über den Befruch- tungsvorgang bei den Phanerogamen" ergiebt — die grössten Schwierig- keiten zu überwinden versteht, disponirend über eine Erfahrung, die sich durch eine längere Reihe von Jahren erstreckt, als einer der Mit- entdecker der so schwer zu erkennenden feineren Structur der Zellkerne, die uns das letzte Decennium entschleiert hat, war der Verf. von vorn herein dazu berufen, ein Werk, wie das vorliegende, zu schaffen. Man wird nicht von dem Ref. erAvarten können, an dieser Stelle auf ein Paar Seiten einen detaillirten Bericht des Werkes zu entwerfen ; das verbietet sich schon durch die Fülle der in demselben niederge- legten Thatsachen ganz von selbst ; es soll uns vielmehr nur darauf an- kommen, hier im allgemeinen den Gruudplan und die Einrichtung des Buches darzulegen. — Vorher wollen wir nicht unerwähnt lassen, dass — und es ist dieses für ein solches Buch die Hauptsache — der Verf. überall seine Beschreibungen etc. auf selbstständige Untersuchungen stützt: „Fast die sämmtlichen Angaben dieses Buches, ungeachtet sie nur in seltenen Fällen sich auf bisher unbekannte Thatsachen be- ziehen, basiren somit auf Autopsie, und auch die sämmtlichen Holz- 64 Referate und Besprechungen. II. 1. schnitte sind vom Verf. für dieses Buch neu nach der Natur gezeichnet worden". Es ist nicht die Aufgabe des Buches, eingehend mit dem Mikro- skop und den mikroskopischen Apparaten bekannt zu machen, wer diese genau kennen lernen will, hat seine Zuflucht zu diesen speciell ge- widmeten Büchern zu nehmen. Es wird daher in der „Einleitung" nur ganz kurz darauf hingewiesen, wo und für welchen Preis man zweck- entsprechende, d. h. Arbeitsmikroskope erhalten könne, wo man die wichtigsten Utensilien, wie Objectträger u. dgl. bezieht. Die zu ver- wendenden Apparate selbst werden erst dann kurz besprochen, wenn sie der Praktikant zuerst in Anwendung bringt, nnd auch dann nur in einzelnen, möglichst handlichen Formen. Die zu behandelnden Materien hat Verf. in 34 Pensen eiugetheilt, sie setzt voraus, dass der Praktikant mit den wichtigsten Thatsachen der Botanik bekannt geworden sei, wie sie etwa in einem Colleg über allgemeine Pflanzenanatomie vorgetragen werden. Die in jedem Pensum mitgetheilten Sachen sind durch grösseren und kleineren Druck in zwei Kategorien geschieden, die erste für den Anfänger, die letzte für den bereits weiter Vorgeschrittenen. Es ist nothweudig, dass der Anfänger das Buch ni cht nur liest, sondern alles darin Beschriebene durch Autopsie kennen lernt. Um zu zeigen, in welcher Weise etwa der Verf. seine Materie be- handelt, wollen wir das „I. Pensum" kurz skizziren : Verf. macht zuerst an dem ZEiss'schen Stativ VII a mit dem „morphologischen Aufbau" des Instrumentes bekannt, zeigt wie man die Einstellung bewerkstelligt, be- schreibt kurz, wie man sich bei der Beobachtung im allgemeinen zu verhalten habe (grosser Text), erklärt darauf (kleiner Text) ein grosses ZEiss'sches Instrument mit AßBJi'schem Beleuchtungsapparat, und er- wähnt das Arbeiten mit den Immersionssystemen. — Als ausschliess- liches Object, welches im 1. Pensum zu betrachten ist, werden die Stärkekörner gewählt, die einer vorhergehenden Präparation nicht be- dürfen. Den Ausgangspunkt bildet die Stärke der Kartoff'elknolle, die zugleich ein dankbares Object ist, sich im Einstellen eines mikroskopi- schen Präparates zu üben. Es reihen sich daran die Beobachtung der Stärkekörner der Bohnen, von Canna indica, Curcuma lencorrhiza, Maranta arundinacea, Phajus grandifolius, des Weizens, Hafers, der Euphorbien, welche Pflanzen zusammengenommen zugleich einen Beweis für die grosse Formverschiedenheit der Stärkekörner bieten. — Nun werden auf die Amylumkörner die charakteristischen Reagentien ange- wandt, Jodlösungen, um die Blaufärbungen hervorzurufen, Kalilauge, n, 1. Referate und Besprechungen. 65 lim Quellungi^erscheinungen auftreten zu lassen ; es wird auch gesagt, wie man diese Stoffe zu appliciren hat. Der Vorgeschrittenere erhält noch in einem kleingedruckten Abschnitte Anweisung, wie er mit Hülfe von Erwärmung die Stärke unter dem Mikroskop zur Quellung bringt, wobei ihm verschiedene Formen des heizbaren Objecttisches vorgeführt werden, und wie die Stärkekörner sich im polarisirten Lichte verhalten, bei welcher Gelegenheit der mikroskopische Polarisationsapparat und die Art seiner Anwendung beschrieben wird. Mit diesem einen Beispiele müssen wir uns hier begnügen, so lehr- reich es auch an und für sich wäre, ganz kurz die Disposition des reich- haltigen Materiales durchzugehen. — Noch sei hervorgehoben, dass der Verf. überall auf einzelne, concreto Beispiele recurrirt, nie im allge- meinen spricht, und dass er thunlichst solche Pflanzen als Untersuchungs- objecte gewählt hat, die entweder bei uns heimisch sind, oder die in der Mehrzahl der Botanischen Gärten cultivirt werden. Die anschau- liche Art und Weise, wie Verf. dem Leser die einzelnen Objecto vor- führt, das peinliche Achtgeben auf alle etwa auftretenden Nebenum- stände, verrathen den erfahrenen und geschickten Lehrer, und es kann daher die Leetüre dieses Werkes aus mehr als einem Gesichtspunkte denjenigen warm empfohlen werden, die bereits selbständig auf dem Gebiete der Pflanzenhistologie gearbeitet haben ; und auch bei eigenen Untersuchungen wird es der Fachmann häufig nachschlagen können, wenigstens scheut sich der Ref. keinen Augenblick zu gestehen, dass er es in diesem letzteren Sinne bereits mehrfach mit Vortheil benützt hat. Wir wollen noch ein Wort über die Abbildungen sagen. Es dürfte jedem Botaniker bereits aufgefallen sein, dass die Figuren, die von irgend Jemandem herrühren, ein gewisses individuelles Gepräge haben, sie enthalten sozusagen einen Theil des eigenen Ich's, geradeso wie die Handschrift für jedes Individuum charakteristisch ist. Bei einer Ab- bildung, die von Sachs, Dippel, Literssen z. B. gezeichnet ist, ist es schon bei oberflächlicher Besichtigung zu erkennen, von wem die frag- liche Abbildung herrührt ; es gilt dies natürlich nur für Abbildungen der- jenigen Autoren, die es im Zeichnen bis zu einer gewissen Fertigkeit ge- bracht haben, nicht für diejenigen, die ihr Lebelang im Zeichnen Stümper bleiben. Auch die Zeichnungen Steasbueger's besitzen einen äusserst charakteristischen Zug, der, wie es dem Ref. scheint, dadurch um so mehr hervortritt, als der Verf. mit grosser Sorgfalt darüber zu wachen scheint, dass Xylographen und Lithographen seine Bleistiftszeichnungen möglichst facsimile zu reproduciren haben. Es ist nun jedenfalls für das vorliegende Werk von der grössten Bedeutung, dass alle Abbildungen Zeitscbr. f. wiss. Mikroskopie. II, 1. 5 66 Referate und Besprechungen. Ü, 1. darin erstens Originalzeichnungeu sind, und dass sie zweitens eigens für diesen Zweck gezeichnet wurden. Hätte Verf. sich aus Bequemlich- keits- oder anderen Rücksichten dazu bestimmen lassen, die Figuren da, wo sie bereits ähnlich in anderen Werken vorhanden waren, in das seinige aufzunehmen , so würde dadurch nicht nur der individuelle Charakter des Buches wesentlich gestört sein, sondern man würde auch vielerorts das unbehagliche Gefühl haben, dass die Beschreibung und das Bild eigentlich nicht ganz zusammen passen. Wir haben es daher dem Verf. sehr zu danken, dass er sich der grossen Mühe unterzogen hat, alle Abbildungen selbst und fortlaufend bei der Ausarbeitung des Textes zu entwerfen. So klappt alles völlig zusammen. Unser in wenigen Worten ausgedrücktes ürtheil über das Werk ist daher folgendes : Das Buch ist vortrefflich, wir wünschen ihm im Inter- esse unserer Wissenschaft von ganzem Herzen eine weite Verbreitung. Kürzlich hat der Verf. selbständig einen Auszug aus dem be- sprochenen Werke erscheinen lassen, betitelt „das kleine botanische Prakticum", welches ausschliesslich für den ersten Anfänger bestimmt ist. Behrens. Hlissak, E., Anleitung zum Bestimmen der gesteinbilden- den Mineralien. Leipzig (Engelmann) 1885, IV 196 pp. 8" mit 50 Figg. u. ^ Tflu. 5 M. Seit dem Erscheinen der bekannten Werke von Rosenbusch und Zirkel sind über zehn Jahre verflossen. Sie haben dem mikroskopischen Studium der Mineralien und Gesteine viele Jünger hinzugeführt, aber seit dieser Zeit haben sich die Untersuchungsmethoden mehr und mehr vervollkommnet. Der Verf. hat sich nun in dem vorliegenden Werke die dankenswerthe Aufgabe gestellt, in fasslicher und übersichtlicher Weise alle Methoden, welche zur mikroskopischen Bestimmung der ge- steinbildenden Mineralien dienen, zusammenzustellen. Das Buch ist in erster Linie für Studirende bestimmt, demgemäss sind auch manche Capitel etwas kurz gefasst. Die makroskopische Untersuchimg der Mineralien, die doch ebenfalls ein sehr wichtiges Element bei der Ge- steinsbestimmung bilden, tritt ganz in den Hintergrund. — Das Werk zerfällt in zwei Theile 5 in dem ersten werden die „Methoden der Untersuchung" und in dem zweiten „Tafeln zur Bestimmung der Mineralien^^ gegeben. Nach einer kurzen Einleitung behandelt der Verf. die Methoden behufs Herstellung mikroskopischer Präparate. Die Herstellung von GesteinsdünnschlifFen wird ausführ- lich erörtert, zugleich auch angegeben, in welcher Weise poröse und schlackige Gesteine, ferner weiche Massen, sowie isolirte Körner resp. II, 1. Referate und Besprechungen. 67 Saude präparirt werden. Einige Angaben über Schueidemaschiuen, so- wie über die Herstellung orientirter Schnitte wären wohl am Platze ge- wesen. — In einem folgenden Capitel werden sodann die für mineralo- gisch-petrographische Untersuchungen zu verwendenden Mikroskope behandelt. Diese Mikroskope unterscheiden sich durch mancherlei Ein- richtungen von den sonst gebräuchlichen und zwar 1) durch das Vor- handensein eines graduirten, mit Nonius versehenen, horizontal dreh- baren Objeettisches zur Bestimmung der Auslöschungsrichtungen, sowie zu Wiukelmessungen ; 2) zweier Nicol'schen Prismen zur Untersuchung im parallelen polarisirten Lichte, 3) der Condensorlinse zur Untersuchung im convergenten polarisirten Lichte, 4) einer senkrecht zur Hauptaxe geschliffenen Quarzplatte zur Bestimmung schwach doppeltbrecheuder Mineralien, 5) einer senkrecht zur Hauptaxe geschliffenen Kalkspath- platte zu stauroskopischen Untersuchungen (besser dienen zu diesem Zwecke die Calderon's Doppelplatte oder die BREZiNA'sche Calcit- platte), 6) einer Viertelundulationsglimmerlamelle resp. einer DovE'schen Quarzcompensationsplatte oder eines Quarzkeiles zur Bestimmung des Charakters der Doppelbrechung, ferner Apparate behufs Centriruug des Objeettisches, Blende, Mikrometer und andere kleinere Hilfsapparate, die ebenso wie die oben augeführten des Näheren beschrieben werden. Abgebildet werden zwei derartige, von R. Fuess in Berlin, construirte Mikroskope (älteres und neues Modell), doch darf wohl hinzugefügt wer- den, dass die meisten grösseren Firmen gegenwärtig Mikroskope liefern, die speciell zu mineralogisch-petrographischen Untersuchungen dienen. Endlich werden noch die Methoden behufs Bestimmung der Dicke von Mineralblättcheu, der Brechungsexponenten besprochen, sowie auch die heizbaren Objecttische von Max Schultze und VoGELSANfi erwähnt. An diesem Orte hätte wohl auch die von Erhard und Stelzner bei dem Studium der Flüssigkeitseinschlüsse des Topas befolgte Methode genannt werden dürfen. — Nunmehr folgen die optischen Unter- suchungsmethoden, die, wie es die Wichtigkeit des Gegenstandes erheischt, in ausführlicher Weise behandelt werden. Zuerst werden die Erscheinungen, welche die Mineraldurchschnitte im parallelen polarisirten Licht darbieten, besprochen und zwar das Verhalten der isotropen Mineralien sowie der doppeltbrechendeu. Bei den letztgenannten wer- den die Unterscheidungsmerkmale zwischen optisch ein- und zweiaxigen auseinandergesetzt. Die verschiedenen Auslöschungsrichtungen werden durch instructive Zeichnungen erläutert. Bei Anwendung der beiden Nicols, Einschaltung der Condensorlinse und Weglassung des Oculars erhält man convergeutes polarisirtes Licht. Die Interferenzerscheinungeu 5* 68 Referate und Besprechungen. II, 1. sind dieselben, wie in solchen des NöEEEMBEEG'sclien Polarisations- apparates. Die äusserste Grenze, bei welcher man noch Interferenz- bilder erhält, ist 0-05 mm, wodurch die Verwendung eine ziemliche Beschränkung erleidet. Da man in Gesteinsdurchschnitten nur stellen- weise Schnitte senkrecht zur optischen Axe resp. spitzen Bisectrix er- hält, so sind natürlich die meisten Interferenzfiguren unregelmässig ge- staltet. Die richtige Deutung derselben wird durch eine Reihe von Bildern erleichtert. Die Untersuchung der Mineraldurchschnitte im convergenten Licht gestattet auch die Bestimmung des Charakters der Doppelbrechung mit Hilfe der Viertelundulationsglimmerlamelle. In einem weiteren Abschnitte wird das Verhalten der Zwillingskrystalle im polarisirten Licht geschildert. Nachdem die THouLET'sche Methode behufs Bestimmung der Brechungsexponeuten noch kurz berührt wird, schliesst das optische Capitel mit einer Besprechung des Pleochroismus der Krystalle. — Das folgende Capitel behandelt die chemischen Unters u eh ungsmethodeu. Es werden hier vorerst gelegentlich bekannt gewordene mikrochemische Reactionen besprochen, desgleichen die Methoden zur Isoliruug der Mineralien im Dünnschlifi". Daran an- schliessend sind den von Bobicky und H. Behrens vorgeschlagenen Methoden besondere Abschnitte gewidmet. Auf diesem Gebiete darf man für die Zukunft noch wesentliche Fortschritte erhoffen. — Die mechanische Trennung der gesteinbilden den Mineralien findet heutzutage hauptsächlich durch Lösung von hohem specifischen Gewicht statt. Es sind dies 1) die Kaliumquecksilberjodidlösung (sp. G. 3*196), 2) die borowolframsaure Cadmiumlösung (sp. G. 3*6) und 3) die Baryumquecksilberjodidlösung (sp. G. 3*58). Ausführliche Angaben über die Herstellung dieser Lösungen, ihre Verwendbarkeit und die durch sie bedingten Trennuugsmethoden werden gegeben. Nach den eingehenden Untersuchungen von Mann scheint sich die borowolfram- saure Cadmiumlösung am besten zu bewähren. Ausser den genannten Trennungsmethoden giebt es noch solche, welche auf der verschiedenen Angreifbarkeit der Mineralien durch Säuren beruhen. Zu diesem Zweck dienten besonders Salzsäure, unter Umständen Flusssäure. Endlich hat sich unter Umständen auch noch mit Vortheil der Elektromagnet ver- wenden lassen. In dem letzten Capitel des ersten Theils giebt der Verf. als Erläuterungen zu den Tafeln noch nähere Angaben über die morphologischen Verhältnisse, welche die Gesteinsgemengtheile bei der mikroskopischen Untersuchung darbieten. Erörtert werden in demselben zunächst die Art des Vorkommens der gesteinbildenden Mineralien, man findet des Näheren auseinandergesetzt, wie man die Formen der Durch- II, 1. Referate und Besprechungen. 69 schnitte im Dünuscbliffe, die Spaltungsrichtnngen etc. zur Feststellung des Krystallsystems und weiter zur Bestimmung des Minerals benutzen kann. Aucli das Auftreten der Mineralien in Mikrolithenform wird ge- bührend berücksichtigt. Die Structur der gesteinbildeuden Mineralien, die Störungen, welche während der Krystallbildungeu stattfinden und häufig eine unterbrochene Raumerfiilluug zur Folge haben, die Zerquetschung fertig gebildeter Krystalle, alles Vorgänge, die man häufig in ausge- zeichneter Deutlichkeit unter dem Mikroskop verfolgen kann, werden ausführlich besprochen. Nachdem der Verf. sodann noch die mikro- skopischen Einschlüsse, welche aus Gas, Flüssigkeit oder Glas bestehen, sowie die Einschlüsse fremder Mineralien behandelt hat, schliesst das Capitcl mit kurzen Notizen über die Zersetzung, welcher die Gesteins- gemengtheile anheimfallen. Der zweite Theil des Werkes enthält auf 90 Seiten die Tabellen zur Bestimmung der Mineralien. Der Verf. hat hier mit grosser Sorg- falt alle Angaben gesammelt und in übersichtlicher Weise zusammen- gestellt. Die erste Tabelle dient zur Bestimmung des Krystall- systems der gesteiubildenden Mineralien. Es folgen sodann zunächst die Tabellen zur Bestimmung der, selbst in dünnsten Schliffen un- durchsichtigen Mineralien, hieran anschliessend, nach den Krystall- systemen geordnet, die im Dünnschliff durchsichtigen Mineralien, welche letztere bei weitem den grössten Raum beanspruchen. Jede Tabelle giebt in den verschiedenen Rubriken Auskunft über die chemische Zu- sammensetzung bezw. die chemischen Reactioneu, spec. Gew., Farbe, Structur, Einschlüsse, Zersetzung und Vorkommen, während in den An- merkungen die noch besonders charakteristischen Eigenschaften der betr. Mineralien aufgeführt werden. Auf besonderen Tabellen sind ferner noch sehr zweckmässig die Mineral-Aggregate behandelt. Den Beschluss macht ein Verzeichniss , welches die wichtigsten Literaturnachweise enthält. Die Figuren zum zweiten Theil konnten der tabellarischen Form des Textes wegen diesem nicht eingefügt werden und sind des- halb auf 3 Tafeln dem Buche angehängt. Indem Ref. diesem, in würdiger Weise ausgestattetem, trefflichen und nützlichen Werke eine weite Verbreitung wünscht, kann er nicht umhin, auf eine Auslassung hinzuweisen. Die so vielfach als Gesteins- gemengtheile und auch selbstständig gesteinbildeud auftretenden hyalinen Massen sind in den Tabellen ganz kurz „nur des Unterschiedes voti Opal wegen" erwähnt. Falls diese Glasmassen keine Mineralien sein sollen, was sind sie dann? Und gerade in einem Werke über gestein- bildende Mineralien hätte ein Abschnitt über diesen Gegenstand, nament- 70 Referate und Besprechungen. II, 1. lieh die Structurverhältnisse etc. der Basis nicht fehlen dürfen. — Das hässlich Idingende „Schmirgel" dürfte wohl durch das sprachlich richtigere und auch allgemein gebräuchliche „Smirgel" (ajxupt?) zu er- setzen sein. Auf p. 56 und 57 sind einige Durchfehler hinsichtlich der chemischen Formeln stehen geblieben. Prof. Dr. A. Wichmann (Utrecht). 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. Abbe, E., The relation of aperture and power in the mi- croscope. U. Division of the entire power of the microscöpe between ocular and obj ective (Journ. R. Microsc. Soc. ser. 11 vol. lU, pt. 6, p. 790—812). Wie bei früherer Gelegenheit von Prof. Abbe dargelegt wurde, muss bei einem Mikroskop-System, soll seine Apertur ganz ausgenutzt werden, das ganze System ein derartiges Vergrösserungsvermögen be- sitzen, dass die kleinsten Details, welche es noch abzubilden vermag, auch genügend gross auf der Retina auftreten, um von einem Auge mit normaler Sehschärfe noch wahrgenommen zu werden. Wie bekannt, kann aber das totale Vergrösserungsvermögen in verschiedener W^eise zwischen Objectiv und Ocular vertheilt werden. Wenn nun die optischen Systeme absolut fehlerfrei angefertigt werden könnten, dann würde es hinsichtlich der Schärfe der Bilder einerlei sein, in welcher Weise die Total-Brennweite der Systeme zwischen Ocular und Objectiv vertheilt würde. Es ist dies jedoch nicht der Fall ; es sind dadurch auch nicht alle Combinationen für die Bildschärfe gleich günstig. In vorliegender Arbeit stellt Verf. sich die Frage, bei gegebener Apertur die Grenze zwischen rationellen und irrationellen Objectiv- und Ocularcombinationen anzugeben. In erster Linie schliesst Verf. von seinen Betrachtungen natürlich alle diejenigen Un Vollkommenheiten aus, welche durch sorgfältigere Construction hätten vermieden werden können. Zuletzt wird die Frage auf eine experimentelle Prüfung zurückgebracht, und bei dieser Prüfung dienten dem Verf. auch ausschliesslich nur Systeme ersten Ranges. Weiterhin wird die Frage dadurch vereinfacht, dass nur mit den Aber- rationen Rechnung gehalten zu werden braucht, welche ausschliess- lich vom Objectiv und zwar auf der Achse hervorgerufen wer- den ; denn erstens sind diejenigen Aberrationen ausserhalb der Achse, welche auch vom Ocular selbst beeinflusst werden (wie Flachheit des II, 1. Referate und Besprechungen. 71 Bildes, gleichmässige Vergrösserung an verschiedenen Tlieilen des Feldes) für vorliegende Frage von keinem Gewicht ; und zweitens werden den Aberrationen auf der Achse, vom Ocular selbst, praktisch keine neuen hinzugefügt ; die in dem Objectivbilde schon vorhandenen Ab- weichungen werden vom Ocular nur, entsprechend der Totalvergrösse- ruug des definitiven Bildes, vergrössert. Die Grösse der Aberrationen misst Verf. durch die Abmessungen der dadurch im Bilde hervorge- rufenen Zerstreuungskreise. Bezüglich der Grösse dieser Kreise im Bilde thut Prof. Abbe nun weiter dar , dass sie vom Brennpunkte des Objectives stets unter dem nämlichen Winkel (u) gesehen werden, wenn nnr die Entfernung der Bildfläche ein Multiplum der lichten Oeflf- nung des Objectives beträgt. Es lässt sich nun leicht berechnen, in welcher Weise u vom Ocular beeinflusst wird. Nennt man U den Winkel, worunter die Zerstreuungskreise im definitiven Bilde erscheinen, cp die Brennweite des Oculars, A die Entfernung zwischen der hin- teren Brennweite des Objectives und der vorderen des Oculares, dann ist: ^_ A Es lässt sich diese Gleichung anders ausdrücken. Setzt man nämlich ferner f für die Brennweite des Objectives , 1 für die deutliche Sehweite, dann ist die Linearvergrösserung des ganzen Systemes: N = Ax±. f cp 1 A 1 Schreibt man hierfür N = -r X — , dann ist -r der Ausdruck f cp f für die „Eigenvergrösserung" des Objectives, falls dieses für sich A allein als Lupe verwendet wurde: Verf. nennt also — die Ueberver- grösserung („super-amplificatiou") , welche das Objectiv dadurch er- hält, dass es mit dem Ocular zu einem Mikroskop- Systeme combinirt wird. Man ersieht nun, dass n im Verhältniss zur Uebervergrössernng des Oculares zum U wächst. Bezüglich der Grösse des u thut Verf. weiter- dar, dass bei Objectiven von gleicher Apertur, ähnlicher Con- struction und gleicher technischer Vollkommenheit der Werth jenes Winkels immer derselbe und unabhängig von der Brennweite ist. Wenn also für eine bestimmte Apertur u numerisch gegeben wäre, dann liesse sich jetzt ein rationelles Verhältniss zwischen Objetiv und Ocular berechnen. Erstens kennt man die Totalvergrössenmg, welche das Gesammtsystem besitzen muss, um die gegebene Apertur ganz auszu- nutzen; es sei diese = N. Es wird nun vortheilbaft sein, das Ocular 72 Referate und Besprechungen. II, 1. so stark wie möglich zu nehmen; denn je stärker dieses ist, desto schwächer wird das Objectiv und desto grösser kann, ceteris paribus, seine freie Arbeitsdistanz sein. Für ü muss also ein so grosser Werth als möglich genommen werden, das heisst ein Werth, bei welchem die Zerstreuungskreise eben an der Grenze liegen, wobei sie die Bildschärfe zu beeinträchtigen anfangen. Weil nun u und U numerisch gegeben sind, ist — , d. h. die Uebervergrösserung des Oculares und hierdurch Nu , die Eigenvergrösserung des Objectives bekannt. Aus letzterer berechnet sich dann sofort die Brennweite des erforderlichen Objectives. — Obgleich sich nun der Werth des u wegen zu grosser Complication schwerlich berechnen lässt, so ist doch die Frage einer experimentellen Prüfung fähig. Aus den Versuchen des Verf. geht nämlich hervor , dass bei Systemen von grösserer Apertur (die num. Apertur bei Trocken- Systemen nicht kleiner als 0*8, bei Immersionen nicht kleiner als I'IO genommen) der bildverschlechternde Eiufluss der Aberrationen, wenig- stens bei bestimmten Objecten, bemerklich zu werden anfängt, wenn die Uebervergrösserung des Oculares bei Trockensystemen 4, oder bei Immersionen 6 überschreitet. Mit Hülfe dieser Zahlen lässt sich dann, wie wir oben sahen, die Eigenvergrösserung des Objectives, bei mög- lichst grosser Bildschärfe leicht berechnen. Bei Trockensystemeu mit geringerer Apertur steigert sich die zulässige Uebervergrösserung auf von 4 bis 10. — Am Schluss seiner Arbeit verfolgt Verf. die Frage, wie weit in der Praxis von den von ihm angegebenen Zahlen abge- wichen werden könnte, und bemerkt dabei, dass sie mehr oder weniger subjectiv sind, und also vielleicht noch etwas modificirt werden könnten, dass sie jedoch genügend sind, um die gesuchten Grenzen zwischen ra- tionellen und irrationellen Combinatiouen anzudeuten. Dr. JE. GiJiay [Leiden). Hockiil, Ch., On the estimation ofaperture in the micro- scope (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II, vol. IV, 1884, pt. 3 p. 337—347). Enthält hauptsächlich einen ausführlichen Beweis (wie es von Prof. Abbe bewiesen ist), dass n . sinu der Ausdruck für die numerische Apertur ist. Dr. E. Giltay [Leiden). Carpenter, On the physiology of binocular vision with the microsc ope (Journ. R. Microsc. Soc. ser. II, vol. IV, 1884, pt. 3 p. 486—496). II, 1. Keferatc und Bcsprecliungen. 73 Enthält eine Auseinandersetzung der Physiologie des binocuhiren Sehens im allgemeinen und im besonderen eine kurze Besprechung der binoculareu mikroskopischen Beobachtung. Nach der Meinung des Verf. soll beim Mikroskopiren ebenfalls der stereoskopische Effect auf einer Uuähnlichkeit der beiden Netzhautbilder beruhen, welche vom verschiedeneu Standpunkte des ]Mikroskopes bezüglich der verschiedenen Objecttheile hervorgerufen werden würde. Dr. E. Uiltay (Leiden). Abbe, E., Note on the proper definition oft he amplifying power of a lens- System (Journ. R, Microsc. Soc. Ser. II, vol. IV, 1884, pt. 3, p. 348—351). Nach dem altherkömmlichen Ausdruck für die lineare Vergrösse- rung von einem System ist dieselbe abhängig von der Sehweite der be- treffenden Person, und bedarf es also einer willkürlich festgestellten Sehweite, um vergleichbare Werthe zu erhalten. Thatsächlich ist je- doch das Netzhautbild vergrössernde Vermögen von der Sehweite unab- hängig, weil die Grösse des Bildes proportional der Entfernung, worin es auftritt, wächst, so dass die Abmessungen des Netzhautbildes immer dieselben bleiben. Aus diesem Grunde und um der Annahme einer bestimmten Sehweite zu entgehen, schlägt Prof. Abbe vor, die Ver- grösserung zu definiren als die Tangenten des Sehwinkels, worunter ein Object von der Länge Eins im virtuellen Bilde erscheint. Dieser Werth, welcher dem umgekehrten Werth der Brennweite gleich ist, be- trachtet Prof. Abbe als den rationellen Ausdruck für die Vergrösserung oder für „das Vermögen" („power") eines Systemes, weil jeder Beob- achter, bei verschiedenen Systemen, das wahrgenommene Object im Verhältniss zu jenem Ausdruck sieht. Dr. E. Giltny {Leiden). Carpeilter, W. B., Correction-adjustment for homogen- eous-immersion objectives (Encyclopaedia Britanica 9"> ed. vol. XVI, 1883, p. 265 ; cfr. Joiirn. R. Microsc. Soc. ser. II, Vol. IV, 1884, pt. 4 p. 620). Die Frage über die Zweckmässigkeit der von einigen ausländischen Mikroskopikern empfohleneu Correctionsvorrichtung bei den genannten Objectivsystemen wurde bereits in dieser Zeitschrift * vom Ref. erörtert und die Verschiedenheit der Ansichten erwähnt, welche sich unter den Mitgliedern der Royal Microscopical Society in London in dieser Be- ziehung kund gaben. Da es nun für unsere Leser sicher von Interesse sein wird , das Urtheil eines der erfahrensten englischen Forscher kennen zu lernen, so möge denselben die in dem Artikel: „Mikroskop" ') Cfr. diese Zeitsclir. Bd. I, 1884, p. 29 flt'. 74 Referate und Besprechungen. II, 1. der „britanisclien Encyclopädie" niedergelegte Ansicht Dr. W. B. Car- penter's hier unverkürzt und ohne jeden weiteren Commentar zur Kenntniss gebracht werden. Nachdem derselbe dargelegt hat, dass der Mikroskopiker bei dem Gebrauche der Objective für homogene Immersion sicher sein kann, von seineu Objecten eine Anschammg zu gewinnen, wie sie nur die ge- naueste Correction (mittels der Verbesserungsvorrichtuug) der Trocken- objective zu gewähren vermöge, fährt er fort: „Dies ist eine Thatsache von hoher Bedeutung, denn während der Mi- kroskopiker bei Betrachtung eines bekannten Objectes seine Correction des Trockenobjectives für die Deckglasdicke derart vornehmen kann, dass es seine beste Wirkung äussert, ist er in Bezug auf ein unbekanntes Object nicht sicher darüber, welche Ansicht es gewähren sollte und kann durch eine falsch ausgeführte Correction zu einer irrthümlichen Auffassung seiner Structur verleitet werden". „Es ist in der neuesten Zeit hervorgehoben worden, dass die Systeme für homogene Immersion mit Correctionsvorrichtung versehen werden sollten, da der geringste Unterschied in dem Brechungsindex der Immersionsfliüssigkeit oder des Deckglases, der Wechsel des Oculares, sowie die geringste Aenderung der Tubuslänge — mit einem Wort irgend ein umstand, welcher nur die geringsten Abweichungen von den Verhältnissen bedingt, unter denen das Objectiv corrigirt wurde — die Wirkung schädHch beeinflussen müsse. Die Wahrheit dieser Behauptung kann zweifellos sowohl theoretisch als praktisch bewiesen werden, indem die Einführung der Verbesserungseinrichtung einen erfahrenen Beobachter befähigt, in der Veranschaulichung mancher fertigen Präparate einen so hohen Grad der Vollkommenheit zu erreichen, wie ihn Ob- jective mit fester Fassung nicht erreichen lassen. Aber man muss doch die Frage aufwerfen, ob diese Einrichtung in den Händen des praktischen Histo- logen denselben Dienst leisten könnte und ob es der wissenschaftliche Beob- achter nicht vorziehen würde, Objective in Gebrauch zu nehmen, welche der Ver- fertiger, nachdem er die vollkommenste Wirkung erprobt, mit fester Fassimg ver- sehen hat. Die hauptsächUchste Quelle des Irrthumes bei dem Gebrauche liegt in der Dicke des optischen Durchschnittes (?) der Objecto; denn die Lichtstrahlen, welche von der tieferen Ebene ausgehend ein Medium zu durchlaufen haben, welches sich zwischen dieser Ebene und dem Deckglas befindet und dessen Brechungsindex und Zerstreuungsvermögen von denen des Glases und der Immer- sionstlüssigkeit verschieden sind, können nicht zu so scharfer Vereinigung ge- bracht werden, wie diejenigen, welche von der unmittelbar unter dem Deck- glase gelegenen Ebene ausgehen. Das Gegenmittel dürfte hier wohl eher darin zu suchen sein, dass man die Schnitte so dünn als möglich macht, als darin, dass man ein Verfahren verfolgt, welches geeignet erscheint, in anderen als den geschicktesten und erfahrensten Händen eine neue Quelle des Irrthums einzufüh- ren. Jeder der z. B. die Muskelfasern mittels eines Trockensystemes von starker Vergrösserung und grosser Oeffnung beobachtet hat, weiss, dass in deren Aussehen bei der geringsten Aenderung der Einstellung oder der Deckglascorrection eme so grosse Veränderung herbeigeführt wird, dass es unmöglich ist, mit Sicher- 11; 1. Referate und Besprechungen. 75 heit zu sagen, welche Ansicht das beste Bild ihrer Structur vorstellt. Da dies eine Sache der persönlichen Beurtheilung eines jeden Beobachters ist, so erscheint es einleuchtend, dass die grösste Annäherung an das beste Bild wahrscheiidich dann vorhanden ist, -frenn ein Objectiv für homogene Immersion mit fester Fassung auf diejenige Ebene des Präparates eingestellt wird, welche sich un- mittelbar unter dem Deckglase befindet." J)f_ /,. Dippd. (Smith, J. E.,) High-angled objectives (Jouru. R. Microsc. Soc. ser. II. vol. IV, 1884, pt. 3 p. 450). Nach einem in der angezogenen Zeitschrift befindlichen Referate will Dr. J, Edwards Smith, wie er in seinem Werke: „How to sefe with the microscope" p. 104 sich ausdrückt, als Objectivsysteme von grosser Oetfnung alle und jede angesehen wissen, welche ohne Rücksicht auf ihre Brennweite die höchst erreichbare Oeffuung besitzen. Hieran anknüpfend sagt der Ref. des Journ. of the Royal Microscopical Society: „Wenn dies zugegeben wird, dann wird daraus folgen, dass man ein Objectiv von 1" (25 mm etwa) Brennweite mit einem Oeifnungswinkel von 50" (num. Apertur ;= 042), oder ein solches von 2" (50 mm) Brennweite mit einem' Oeffnungswinkel von 25" (num. Apertur = 0'20) als Objcctivsystem von grosser Oeffnung bezeichnet. Und weiter würde man ein System von '/(/' (etwa 4-2 mm) Brennweite mit einem Oeffnungswinkel von 130" (num. Apertur = 0'92), welches vor fünfzehn Jahren als ein solches von grosser Oeffnmig galt, jetzt als ein Glas von massiger OeiFnung ansehen". Die SjiiTH\sche Betrachtungsweise der Oeffnnng widerspricht nach dem gegeuwcärtigen Standpunkte allen Grundsätzen, welche sich aus der Theorie des Mikroskopes und der mikroskopischen Wahr- nehmung ergeben und es mit Rücksicht auf die nutzbare Vergrösserung zum Gesetze machen, bei der Coustruction der Objectivsysteme ein be- stimmtes Verhältniss zwischen Brennweite und numerischer Apertur einzuhalten, während die Rücksicht auf die wiclitige Verbesserung der Abweichimgsfehler und den Objectabstand es bedingt, dass man noch etwas hinter derjenigen numerischen Apertur zurückbleibt, welche ge- mäss jenes Verhältnisses zwischen f und a noch als äusserste Grenze zu- lässig sein würde. Wirklich gebrauchsfähige Objectivsysteme von 1" (25. mm) und von Yg" (4*2 mm) werden in ihren numerisclien Aper- turen, das eine über 0*30 (Oeffnungswinkel = 35*^), das andere in der Form des Trockensystems über 0*85 (Oeffnungswinkel = 116") nicht merklich hinausgehen dürfen. Dr. L. Dippel. Zeiss's A* variable objective and optical tube-length (Journ. R. Microsc. Soc. ser. II vol. IV, 1884, pt. 3 p. 450). Unter dieser üeberschrift bringt die angeführte Zeitschrift eine Zusammenstellung der Erörterungen, welche in dem von dem Ref. ver- 76 Referate und Besprechungen. II, 1. fassten Ilandbiiche der Allgemeinen Mikroskopie auf pp. 247 — 249, 255 — 258 und 329 eine ansführliclie Behandlung erfahren haben, so dass eine Wiedergabe der betreffenden Formeln, Zahleubeispiele und Erläuterungen für unsere Leser wohl kaum von Belang sein dürfte. Dr. L. Dippcl. Ward, R. H., An eye -s ha de for monocular microscopes (Amer. Monthly Microsc. Journ. vol. V, 1884, no. 5 p. 82 ; Jouru. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. IV, 1884, pt. 4, p. 615). Die Form dieser Schutzvorrichtungen, der „"WAKü'sche Augen- schirm", gleicht, wie man aus beistehender Figur sieht, dem in meinem Handbuche der Allgemeinen Miki-oskopie p. 750 beschriebeneu und abgebildeten Augenschirm von C. Reichert. Derselbe wird von einer Hartgummiplatte gebildet, deren Durchmesser etwa 1%" engl. (38 mm) beträgt, und von der aus sich ein etwa Yj" engl. (12 mm) breites Band erstreckt, welches die Mikroskopröhre unterhalb des Oculares federnd umfasst. Die Vortheile dieser Vorrichtung werden darin gesucht, dass dieselbe das Metall weniger beschädigt, als eine solche mit Metallring, dass der federnde Gummiring sich Röhren von verschiedener Dicke anpasst und dass eine einfache ümkehrung das linke Auge zur Beobachtung frei- lässt, während die dunkle Scheibe vor das rechte Auge zu stehen kommt. (Die weiter erwähnten Vortheile beziehen sich auf den älteren an englischen Mikroskopen angebrachten Augeuschirm). Für solche Stative, w^elche ein Aufschieben von oben nicht gestatten, wird der Ring theilweise offen gelassen, so dass er von der Seite her um das Rohr gelegt werden kann. Dr. L. Dippel. Weay's microscope screeu. (Engl. Mechan. vol. XL (1884) p. 180; cfr. Journ. R. Microsc. Soc. ser. II vol. IV (1884) pt. 6 p. 956). Wkay's Augeuschirm sucht die Verschiedene Erhellung der Seh- felder beider Augen und die seiner Ansicht nach daraus entspringenden nachtheiligen Folgen zu umgehen und zu bcAvirken, dass eine stärkere Erhellung des Mikroskop-Sehfeldes ertragen werden könne, als wenn man das eine Auge schliesst oder auf eine dunkele Seheibe blicken lässt. Die Vorrichtung, welche in der beigegebenen Figur von der Rückseite abgebildet ist, besteht aus einer Cartonplatte mit zwei kreisförmigen Oetf- uungen, von denen die eine über die Fassung des Oculares passt, die andere dazu dient, um ein Stück glatten weissen Papieres aufzunehmen, 11,1. Referate und Besprechungen. 77 welches zwischen den beiden elastischen Bändern A A eingeschoben lind je nach der Erhellung des Objectfeldes und seiner eigenen Durch- sichtigkeit mit einem anderen ausgewechselt oder durch meh- rere Lagen verstärkt werden kann. Will man statt der ein- facheren , leicht eigenhändig anzufertigenden eine etwas vollkommene, so kann man einen Schirm aus gefärbtem Glase anwenden, welcher mit- tels eines Spiegels (von unten) beleuchtet und dessen Hellig- keit durch eine Reihe von drehbaren Bleudungen geregelt wird. Dr. L. Dippel. Feussiier, li., Ueber die Prismen zur Polarisation des Lichtes. (Zeitschr. f. lustrumentenk. Bd. IV, 1884, p. 43 — 49). Der Verf., durch Coustructiou neuer Polarisations-Prismen veran- lasst, giebt in seiner Abhandlung zunächst eine übersichtliche Dar- stellung der seither bekannten Constructionsformen mit kritischen Be- merkungen und Literaturangaben. Dann beschreibt er die von ihm construirten „Neuen Polarisatoren" und giebt die dafür geltenden theore- tischen Grundlagen. — Dieselben unterscheiden sich von den seitherigen Polarisationsprismen wesentlich dadurch, dass bei ihnen nur eine dünne Platte eines doppelt brechenden Krystalls zwischen zwei keilförmige Glasstücke eingekittet wird, welche zusammengelegt die Form eines rechtwinkligen Prismas besitzen. Die Brechungsexponenten von Glas und Kitt sollen nahezu gleich sein, die von Glas und Krystall (grosser Exponent) ebenfalls übereinstimmen. Dann muss (unter Voraussetzung vollkommen gleicher Brechungsexponenten obiger Stoffe) : 1) Die Richtung der grössten und kleinsten optischen Elasticitäten .des Krystalls senkrecht auf der Richtung des Schnittes stehen; 2) der Neigungswinkel zwischen den Endflächen und den schiefen Flächen zur Erreichung des Maximums für den Oeffnungswinkel cp = 90» 1 arc 2 cos sem 0) ■ £ = kleinster Exponent des Krystalls,"! .w = grösster „ „ „ „ „ J 3) Die Länge im Verhältniss zur Breite 78 Referate und Besprechungen. II, 1. . , 1 £ . = 1 : cot. — arc . cos ^ sein : 2 w ' 4) Die Winkelweite des Gesichtsfeldes (unter den angegebenen Bedingungen 1 — 3) = 2 arc .sin ( w sin — arc . cos — ) betragen. Die Vorzüge dieser ueuen Coustruction bestehen besonders darin, dass man nur dünne Platten des zu verwendenden Krystalls nöthig hat, was solche Prismen wesentlich wohlfeiler werden lässt, dass man nicht auf Kalkspath beschränkt ist, sondern viele andere doppelt brechende Substanzen (Natronsalpeter) verwenden kanu, dass bei Verwendung ge- eigneter Krystalle (mit möglichst grosser Differenz zwischen £ imd w) der Oetfuungswinkel des Gesichtsfeldes sehr gross ausfällt, dass endlich die Reinigung der Endflächen leicht und gefahrlos geschehen kann. „Ein Natrousalpeterprisma als Analysator mit etwa 6 mm lichter Weite und 13,5 mm Länge leistet vorzügliche Dienste" '. Jung {Darmstadt). 3. Präparationsmethoden im Allgemeinen. Chapmaii, A. B., New microtome (Sci.-Gossip, 1884, p. 137. cfr. Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. IV, 1884, pt. 4 p. 642). Chapman hat ein Mikrotom coustruirt, an welchem der Object- halter folgendermaassen eingerichtet ist: Ein Block aus Mahagoniholz trägt auf seiner Oberfläche zwei aufgekittete parallele Glasplatten ; recht- winklig zu diesen steht in dem Block ein hohler Messingcylinder, und in diesem lässt sich durch eine, auf einem unteren Mahagoniblock auf- ruhende, mit Theilung versehene, Trommel ein eng passender solider Messingpflock auf- und abbewegen. Derselbe trägt auf seinem tisch- artigen oberen Ende das eingebettete Object. Bei Drehung der Trommel um einen Theilstrich wird der Messingpflock um 0*0005 Zoll (—12-7 [x) bewegt. Das Mikrotom lässt sich am Arbeitstisch befestigen. Gricsbach (Basel). (xOldillg'-Bird, C. H., On a new microtome. Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. IV, 1884, pt. 4 p. 523 ; 2 Ügg.). ») Anm. d. Ref- Die Firma Dk. Stekg & Reuter in Homburg vor der Höhe liefert solche Prismen in verschiedener Grösse und mit verschiedenen Krystallplatten. besitzt aber nach brieflicher Mittheilung noch nicht die erwähnten Natronsalpeterkrystalle von genügender Grösse und Reinheit. II, 1. Referate und Besprechungen. 79 Verf. hat ein neues Gefrierhandmikrotom in zweierlei Form con- struirt. Die eine Form arbeitet mit Salz und Eis, die andere mit Aether. Die erste construirt man sich aus einem Cylinder von vulcani- schem Material, dessen Boden ein messingener Schraubendeckel bildet, und der oben durch eine aus dem gleichen Material angefertigte Scheibe geschlossen ist, deren Centrum aber eine Messingplatte (Gefrierplatte) von Ys Zoll im Durchmesser bildet, diese wird im Inneren des Cylinders von einem Messingstab begrenzt. Ein mit einer Glasplatte bedeckter Metalkleckel, den man über das obere Ende des Cylinders schraubt, gestattet durch eine centrale Durchbohrung das Hervorragen der Ge- frierplatte. Die Aussenfläche des Cylinders trägt am oberen Rande eine Schraubenvorrichtung, au welcher der Deckel drehbar ist. Beim Umdrehen desselben schnappt ein federnder Haken in bestimmten Zwischenräumen ein und zwar so, dass bei Drehung von links nach rechts jedes Einschnappen ein Sinken des Deckels um '/tooo ^^11 (z= 25*4 [i) anzeigt; daher hebt sich bei jedem Einschnappen ein auf der Gefrierplatte befestigtes Gewebe auch um Yioco ^oll durch die centrale Durchbohrung und ein alsdann genau ausgeführter Schnitt ist Vi 000 ^oU dick. Durch eine halbe Umdrehung des Deckels kann auch die halbe Dicke des Schnittes erreicht werden. Zur Befestigung der vorher in Gummi präparirten Objecto füllt man den Cylinder mit Eis und Salz und verfährt nach den gewöhnlichen Methoden. — Das mit Aether beschickte Mikrotom unterscheidet sich von ersterem hauptsäch- lich darin, dass der Cylinder eine Zweitheilung erfahren hat ; die untere Hälfte enthält den Aether und steht mit einem Gebläseapparat, der den uöthigen Strahl hervorbringt, in Verbindung, die obere Hälfte ist in der- selben Weise eingerichtet wie bei dem zuerst genannten Apparat. Mr. S\viFT, durch welchen die mechanische Construction der Apparate ausgeführt worden ist, hat noch eine Vorrichtung ersonnen, durch welche ein Theil des Aethers nicht verloren geht, sondern in den Aetherbehälter zurückfliesst. ' Grieshach (Basel). Bale, W. M., Closing glycerine cells. (Journ. R. Microsc. Soc. '-' Ser. II vol. IV, 1884, pt. 3 p. 478). Verf. empfiehlt zum sicheren Verschluss von Glycerin-Zelleu folgende Methode: Man wählt als Zelle Glas oder Ebonit, doch müssen die Zell- ränder auf das sorgfältigste plan geschliffen sein. Die mit Glycerin bis zum Rande erfüllte Zelle wird mit einem Deckgläschen bedeckt, dessen Durchmesser etwas grösser ist als der der Zelle, so dass es also über- all gleichmässig über deren Rand übersteht. Nachdem man sich mit dem Mikroskope überzeugt hat, dass das eingeschlossene Object günstig 80 Referate und Besprechungen. II, 1. gelegen ist, presst man das Deckgläsclieu mit einer Klemmfeder fest auf die Zelle und wäscht alles übergeflossene Glycerin mit einer feinen Spritze ab. Nachdem auch das Wasser mit Löschpapier entfernt wurde, Lässt man den Objectträger einige Augenblicke stehen, bis die Aussen- seite der Zelle ganz trocken ist. Vom Rande des Deckgläschens her wird dann der kleine kreisförmige Raum um die Zelle herum mit zäh- flüssigem Kitt gefüllt. Waren die Ränder der Zelle ganz plan, so dringt Nichts in das Innere und der Verschluss bewährt sich vorzüglich. Grieshach (Basel). Collodion as a fixative for Sectio ns. (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. IV, 1884, pt. 4, p. 654). S. H. Gage, der vor Publication der Schällibaum' sehen Methoden schon mit CoUodium Versuche gemacht bat, empfiehlt Collodium und Nelkenöl getrennt anzuwenden. Die CoUodiumlösung bereite man sich aus 2 g Schiessbaumwolle (wie der Photograph dieselbe verwendet), 54 cc Schwefeläther und 18 cc eines 95procentigen Alkohols. Nach- dem die Schiessbaumwolle völlig gelöst, filtrirt man und übergiesst die Objectträger schnell von einem Ende zum anderen. Die so präparirten (man kann eine Anzahl vorräthig halten) Gläser sind vor Staub zu schützen. Vor dem Gebrauche wird der Objectträger mit einem Kameels- haarpinsel gereinigt und mit einem zweiten Pinsel Nelkenöl auf den collodionisirten Objectträger in dünner Schicht aufgetragen. Die An- ordnung der Schnitte geschieht wie bei der Schellack-Methode. Der Objectträger wird über einer Spirituslampe erwärmt und darauf der Wirkung eines Wärmschrankes ausgesetzt bis das Nelkenöl abtropft. Nach dem Erkalten legt man den Objectträger in ein weithalsiges Ge- fäss mit Terpentinöl, Chloroform, Xylol oder gereinigtem Naphtlia, um das Paraffin zu entfernen. Naphtha empfiehlt sich am besten. Die Ein- bettungsmasse ist schon nach einer halben Stunde entfernt, doch kann der Objectträger, ohne dass Ablösen der Schnitte erfolgt, tagelang in den Lösungsmitteln liegen bleiben. Nachdem der Objectträger vom Naphtha gereinigt, werden die Schnitte durch Uebergiessen mit 95pro- centigem Alkohol gewaschen. Will man Tinction mit Kleikenbekg's Ilämatoxylin oder einem anderen Farbstoff, der 50 oder mehr Procent Alkohol enthält, vornehmen, so kann man die Schnitte direct in das Färbungsmittel übertragen ; enthält dieses aber weniger Alkohol, so lege man dieselben vorher in öOprocentigen Alkohol. Nach hinreichender Tinction wird eingeschlossen, soll hierzu Canadabalsam verwendet wer- den, so müssen die Schnitte nach der Färbung noch durch Alkohol ent- wässert werden. Aufhellen kann man passend mit einem Gemisch von n, 1. Referate und Besprechungen. 81 1 Th. Carbolsäure und 4 Th. Terpentinöl. Den Canatlabalsam stellt man sich am besten her durch Mischen von 25 g des reinen Harzes mit 2 cc Chloroform und 2 cc Olivenöl ; letzteres trägt dazu bei, jedwede Trübung, die in der Collodiumschicht vielleicht entstand, zu entfernen. Grleshach {Basel). Grey, E., Glycerin in mounting. (Amer. monthly Microsc. Journ. vol. V, 1884, No. 7 p. 140). In einer kleinen Notiz weist der Verf. darauf hin, dass man bei Anwendung des Glycerins als Einschlussmittel genau auf seine neutrale Reaction zu achten habe. Am besten und leichtesten ist hierauf zu prüfen, indem man etwas davon auf die Zunge bringt. Hat das Glycerin einen bestimmten Nachgeschmack nach Fettsäuren, so ist es zu verwerfen, da sonst möglicherweise chemische und physikalische Veränderungen in dem eingeschlossenen Objecte vor sich gehen können. Grleshach (Basel). van Heurck, H., De l'emploi du styrax et du liquidambar en remplacement du bäume de Canada. (Bull. Soc. beige de Microsc. t. X, 1884, p. 178). VAN Heukck theilt mit, dass er im Styrax ein treffliches Ersatz- mittel für Canadabalsam behufs Herstellung mikroskopischer Dauer- präparate gefunden habe, Avelches die unangenehmen Eigenschaften des letzteren (Harzigwerden , Abspringen des Deckglases , Auftreten von irisirenden Stellen) nicht zeige, sondern völlig dauernd und unveränder- lich bleibe. Vor dem Gebrauche müsse man aber von dem Styrax die körnige Substanz, die es enthalte, abscheiden. Es geschehe dies durch Auflösung in Chloroform und darauf folgendes Filtriren. Dann lasse er sich ganz in derselben Weise anwenden, wie Canadabalsam. Die Anwendung sei dabei viel leichter; niemals gebe er Anlass zur Ent- stehung von Luftblasen. Ein besonderer Vortheil bei seiner Verwen- dung liege noch darin, dass er mit der Zeit und bei Einwirkung des Lichtes sich nicht färbe, sondern dass die mit ihm hergestellten Prä- parate absolut farblos werden. Bezüglich des früher schon empfohlenen Liquidambar, der den Styrax durch Schönheit, Leichtigkeit des Gebrauchs und höheren Brechungsindex noch übertreffe, der aber leider bisher in Europa nicht zu haben gewesen sei, bemerkt Verf. ferner, dass er durch Dr. Jose Claieac, Chef des Histologischen Laboratoriums am Militär- hospital in Havanna ein Quantum rohen Liquidambars erhalten habe. Der rohe Liquidambar, welcher als eine schmierige , grauliche , dem rohen Styrax sehr ähnliche Masse erscheine und allerlei Holz- und Rindenfragmente eiuschliesse, müsse für den Gebrauch in der Wärme Zeitschr. f. wisg. Mikroskopie. II. 1. 6 82 Referate und Besprechungen. II, 1. (im Sandbad) durch eine Mischung von gleichen Theilen echten Stein- kohlenbenzins und absoluten Alkohols gelöst werden. Dann sei die Lösung zu filtriren und das Lösungsmittel soweit zu verdunsten, dass die Masse leicht spröde werde (wenn das nicht geschehe, erhärte sie bei der späteren Anwendung nicht). Hierauf behandele man die Masse durch dasselbe Lösungsmittel wie vorher und benutze sie in ziemlich dünnflüssigem Zustande. Da die Herstellung kleiner Mengen Liquidam- bars für den mikroskopischen Gebrauch eine sehr missliche Sache sei, habe er die Herren Rousseau in Paris (Societe anonyme de fabrication de produits chimiques pour les sciences et l'indiistrie; ancienne maison Emile Rousseau et ses fils, 42 — 44, rue des Ecoles, Paris) gebeten, sich des Verkaufs des nach seinen Instructionen hergestelFten Styrax und Li- quidambars zu unterziehen. — Die Anwendung des Styrax und Liquidam- bars bei Herstellung von Diatomeeupräparaten geschehe folgendermassen : Man lege die Deckgläschen auf eine grosse Glasplatte und bringe auf jedes von ihnen mittels einer Pipette einen grossen Tropfen destillirten Wassers, auf welchen mau dann möglichst sanft einen Tropfen diato- meenhaltiger Flüssigkeit fallen lasse. Die Diatomeen vertheilen sich in dem Tropfen destillirten Wassers, der je nach Bedürfniss auch sanft gerührt werden kann. Hierauf stülpe man über die Deckgläschen eine Glasglocke und überlasse die Tropfen der spontanen Verdunstung. Ist diese erfolgt, werden die Deckgläschen auf einem Platinblech der Reihe nach bis zum Rothglühen erhitzt und dann wieder auf die Glasplatte gebracht. Hierauf gebe man ihnen einen Tropfen der Styrax- oder Liquidambarlösung und überlasse sie unter der Glasglocke abermals der Verdunstung. Sei nach etwa 24 Stunden das Benzin vollständig verdunstet, werde das Deckgläschen auf den Objectträger gelegt und schwach erwärmt, am besten im Sandbad. Ein leichter Druck treibe schliesslich die Luftblasen, die sich etwa noch darin finden, sammt dem überflüssigen Medium hervor, das nach dem Erstarren beseitigt werde. Dr. 0. E. B. Zimmermann {Chemnitz). Kain, C. H., Balsam of Tolu for mounting (Microsc. Bull. vol, I, 1884, p. 36 ; Journ. R. Microsc. Soc. ser. II vol. IV, 1884, pt. 6 p. 985). Der Tolubalsam wird von C. H. Kain als AufbewahrungSmittel empfohlen, weil sein Brechungsindex desjenigen des Styrax noch über- treffe, und dürften sich Versuche damit wohl empfehlen. Zwar ist der Balsam etwas gefärbt, aber bei Präparaten, bei denen die stark licht- brechenden Medien vorzugsweise in Anwendung kommen, wie Diatomeen und dergl., werden nur so dünne Schichten in Anwendung gebracht, dass II, 1. Referate und Besprechungen. 83 dieser Umstand von keiner erlieblichen Bedeutung ist. Aucli dürfte sich eine gewisse Entfärbung des Balsams wolil ausführen lassen. Zur Ver- wendung wird der Balsam in Aether, Alkohol oder Chloroform (von welchen Mitteln sich das letztere für viele Zwecke wohl am meisten empfehlen dürfte) gelöst und dann sorgfältig filtrirt. Durch leichte Er- wärmung kann das Lösungsmittel verdunstet werden, so dass sich ohne Mühe eine Lösung von beliebigem Concentrationsgrade erhalten lässt. — ■Statt des Tolubalsams kann auch das Benzoe und zwar in auf gleiche Weise bereiteter Lösung verwendet werden , das sich leichter als Styrax aber weniger gut als Tolubalsam bewähren soll. Hier anschliessend möge noch bemerkt werden, dass Kain in Be- zug auf die Verwendung des Kaliumquecksilberjodids zu Vorsicht mahnt. Derselbe betont die Giftigkeit des Präparates und dessen zer- störende Einwirkung auf die zarten Hautstellen : Lippen und dergl. Dann macht er darauf aufmerksam, dass möglicherweise an dem Deck- glase nach aussen eine kleine Menge der Lösung könnte haften bleiben, welche einen Niederschlag von Quecksilber (doch wohl Oxyd) veran- lasse , sich an der Fassung des Objectivsystems ansammele und so leicht Immersionssystemen zum Schaden gereiche. Verf. berichtet, dass er selbst beinahe ein werthvolles System durch diesen Umstand verloren habe. Für den geübten Mikroskopiker fallen nach Ansicht des Ref., welcher seit einigen Jahren das Kalium-Quecksilberjodid so- wohl als Einschlussmittel wie auch für andere Zwecke (als Quellungs- mittel) benutzt hat, derartige Befürchtungen vollständig fort, da der- selbe nach beiden Richtungen hin mit solcher Vorsicht verfahren dürfte, dass weder der eine noch der andere Unfall eintritt. Vorsicht ist aber immer gut und so mag die bittere Erfahrung des Genannten hier Platz finden. Dr. L. Dippel. Cox, C. F., Cement for mounting. (Amer. monthly Microsc. Journ. vol. V, 1884, No. 7 p. 140). Verf. theilt die Composition eines von ihm für Trockenpräparate gebrauchten Einschlusskittes mit ; er mischt einen von C. T. Raynolds & Co. bezogenen Lack mit gewöhnlichem Asphalt bis zur gewünschten Färbung imd Consistenz. Alleinige Anwendung des Lackes scheitert daran, dass er sofort eintrocknet und nach dem Trocknen vielfach springt, was beides nicht geschieht, wenn man ihn mit Asphalt mischt. Griesbach (Basel). Hitchkock, R., The preparationofshellac cement. (Amer. Monthly Microsc. Journ. vol. V, 1884, No. 7, p. 131). Verf., ein eifriger Anhänger des Schellackcementes, präparirte den 6* 84 Referate und Bßsprecliungen. II, 1. Kitt durch Lösen des Schellacks in Alkohol und Decantiren der über- stehenden Flüssigkeit. Doch ist derselbe aber nur klar, wenn eine be- trächtliche Quantität angefertigt und wochenlang unberührt stehen ge- lassen wurde. Neuerdings bedient sich der Verf. einer besseren Methode : Man kauft eine Quantität Schellackfirniss oder macht sie sich selbst durch Lösen des Harzes in Alkohol. Ungefähr 180 g hiervon schüttet mau in eine Flasche, sodass diese zu zwei Drittel gefüllt ist. Darauf giesst man ein Viertel der ganzen Menge Naphtha oder Petroleum- spiritus hinzu, schüttelt kräftig, lässt einige Minuten stehen, schüttelt wieder und wiederholt diese Operation zwei- bis dreimal. Darauf stellt man die Flasche für zwölf Stunden ruhig bei Seite. Nach dieser Zeit findet man das Naphtha auf der Schellacklösung schwimmend und das- selbe enthält in flockigen Massen den ganzen Ueberschuss des Harzes, der sich in kaltem Alkohol allein nicht löste, die unter der Naphtha- Schicht befindliche alkoholische Flüssigkeit aber ist vollständig klar und lässt sich zum grössten Theil mit einer Pipette unter dem Naphtha abziehen. Die so erhaltene Lösimg ist aber für den Gebrauch noch zu dünn und wird auf einem Wasserbad (das Wasser darf nicht zum Kochen kommen) vorsichtig bis zur Syrupconsistenz eingedickt, in eine Flasche gegossen und mit drei Tropfen Ricinusöl versetzt, wodurch die Masse leichter vom Pinsel abfliesst. Es ist zu empfehlen, sich zwei Schellackkittarten vorräthig zu halten; die eine, zur Herstellung von Zellen, etwas zähflüssiger, die andere, als gewöhnlicher Deckglaskitt, etwas dünnflüssiger. Grieshach (Basel). Errera, L., Sur l'emploi de l'encre de Chine en micro- scopie. (Bull. Soc. beige de Microsc. t. X, 1884, p. 478). Viele Objecte, welche man einem genaueren Studium unterwerfen will, nehmen färbende Agentien nicht in sich auf oder geben sie sofort wieder ab. Li diesem Falle ist es vortheilhaft, die umgekehrte Procedur vorzunehmen und anstatt des Objects das das Object umgebende Mittel zu färben. Bei lebenden Wesen freilich lässt sich weder der eine, noch der andere Weg betreten. Einmal nehmen sie färbende Substanz eben- falls nicht oder nur in sehr verdünntem Zustande und sehr vorübergehend in sich auf, und dann wirken gefärbte Mittel meist tödtlich, in jedem Falle aber schädlich auf sie ein. Die Stelle eines gefärbten Mittels, das nicht toxisch wirkt und keine empfindliche Action auf die mikroskopi- schen Wesen, welche man in sie einbringt, ausübt, ist die chinesische Tinte. Dieselbe besteht, wie bekannt, aus Kienruss und einer leicht mit Moschus oder Kampfer parfümirten gummiartigen Substanz. Li AVasser gerührt verleihen die darin suspendirten Kohlepartikelchen der II, 1. Keferate und Besprecliungen. 85 Flüssigkeit eine schöne schwarze Färbung, ohne aber die lebenden Organismen nur irgendwie zu beeinträchtigen. Die Anwendung geschieht in folgender Weise : Man rührt ein wenig gute chinesische Tinte in ein kleines Porzellanschälchen und sucht alle Partikelchen so weit zu zer- reiben, dass die Flüssigkeit unter dem Mikroskop ganz gleichmässige und ausserordentlich kleine Körperchen in lebhafter BKOWN'scher Be- wegung zeigt. Die Farbschicht darf dabei nicht tiefschwarz, sondern muss duukelgrau aussehen. Nun giebt mau einen Tropfen davon auf den Objectträger, legt den zu untersuchenden Organismus auf ein Deckglas und bringt dieses, die Seite, welche das Thier enthält, nach unten ge- wendet, auf den schwarzen Tropfen. Auf diese Weise vermeidet man, dass schwarze Partikelchen zwischen das Deckglas und das zu unter- suchende Object kommen. Das Object erscheint nun ganz ausnahms- weise deutlich auf schwarzem Grunde, so dass alle Details scharf her- vortreten. So Hessen sich lebende Spirogyren, Vaucherien, Infusorien etc. tagelang lebend beobachten. — Für längere Beobachtungen bedient man sich am besten einer feuchten Kammer oder bringt das Präparat, um die Verdunstung zu hindern, in eine mit Wasserdampf gesättigte Atmosphäre. Verf. wendet die von Steasbukgek angegebene feuchte Kammer an, welche aus einem Stück feuchter Pappe besteht, das dem Objectträger aufliegt und in der Mitte einen kreisförmigen Ausschnitt zeigt, über den sich das Deckglas hiuwegzieht, welches auf der inneren Seite mit dem die zu beobachtenden Organismen enthaltenden schwarzen Fllissigkeitstropfeu versehen wird. Auch Dauerpräparate lassen sich mit chinesischer Tinte herstellen. Man ersetzt die durch Wasser her- gestellte Verdünnung nach und nach durch eine Glycerinverdünnung. Dabei hat man sich freilich zu hüten, dass die schwarze Flüssigkeit nicht den Zellrand erreicht, weil dann Strömungen entstehen und infolge der Verdunstung die schwarzen Partikelchen uugleichmässig vertheilt werden würden. — ■ Diese Untersuchungsweise wird besonders beim Studium der Schleimhüllen, welche bei den niederen Organismen so häufig sind, oder auch beim Studium mancher Membranschichten höherer Pflanzen gute Dienste leisten. Die gelatinösen Hüllen vieler Fadenalgen, der Glococapsa, der Zoogloeacolouien etc. heben sich ja kaum vom Wasser ab, und es ist im allgemeinen schwierig, ihre Conturen genau zu er- kennen, wohingegen dies mit Leichtigkeit in Wasser geschieht, das mit chinescher Tinte versehen ist. — Diese Methode lässt sich wahrschein- lich auch fürs Studium der Verdauungsvorgänge bei den Infusorien, der Bewegung der Diatomeen und der mit Cilien begabten Organismen ver- wenden. Dr. 0. E. B. Zimmermann {Chemnitz). 86 Referate und BesiDrechungen. II, 1. Bareggi, M odificazione all' allestimento dei preparati microscopici tinti con colori di auilina allo scopo di renderne piu' perfetta e diirevole la conserva- z i 0 n e. [M o d i f i c a t i o n der Herstellung von mikro- skopischen Präparaten, welche mit Anilinfarben gefärbt sind, um sie besser zu co n serviren]. (Gazetta degli Ospitali, 1884, Nr. 81, p. 645). Um die mit Anilinfarben tingirten mikroskopischen Präparate besser conservirbar zu machen, schlägt Verf. vor, das Deckgläschen zu ver- meiden, d. h. auf das Präparat einen Tropfen von in Chloroform ge- lösten Canadabalsam zu legen und den Balsam langsam trocknen zu lassen. Beim Arbeiten" mit Trockenlinsen oder Wasserimmersions- systemen können diese Präparate ohne irgend welchen Nachtheil be trachtet werden, da sich das Wasser mit dem Balsam nicht mischt. Wenn man aber mit Systemen für homogene Immersion und mit Cedern holzöl (welches den Balsam löst) arbeitet, so ist es nöthig, etwas Acht auf den Gebrauch des Präparats bei der Beobachtung zu geben. Die Methode wurde bereits von Golgi ' für die Conservation der Präparate des Nervensystems vorgeschlagen, welche nach seiner Methode gefärbt sind (schwarze Färbung mit Kaliurabichromat und Silbernitrat) ; sie hat auch hierfür, wie es scheint, gute Resultate ergeben. [Die Frage nach der Conservirung der mit Anilinfarben tingirten mikroskopischen Präpa- rate, zumal da, wo es sich um Mikroorganismen handelt, ist bis jetzt noch nicht gut gelöst worden. Es ist eine von Allen, welche sich mit derartigen Untersuchungen beschäftigt haben, beobachtete Thatsache, dass bisweilen von einer Serie von Präparaten, welche alle nach der- selben Methode hergestellt sind, ein Theil schnell verdirbt, während die übrigen sich eine ziemlich lauge Zeit hindurch halten. Man hat dieses zugeschrieben der Wirkung der mineralischen Säuren , der Wirkung des Nelkenöles, welches angewandt wurde, um die Präparate durch- sichtig zu machen oder um den Balsam zu lösen, der Wirkung des zu einem gleichen Zweck wie der letzte gebrauchten Chloroforms. Es ist zweifellos, dass die mineralischen Säuren die Anilinfarben stark an- greifen, und dass das Nelkenöl die Eigenschaft hat, sie zu lösen, aber es ist gleichfalls eine Thatsache, dass manchmal die mit diesen Substanzen behandelten Präparate sich äusserst gut halten. Ich meinestheils pflege die mit mineralischen Säuren (Salpetersäure von 33 Procent [Ehelich] ; Alkohol mit Salzsäure [Orth] etc.) behandelten Präparate mit grösster ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 107. 11^ 1. Keferate und Besprechungen. 87 Sorgfalt auszuwaschen, sie mit Bergamottöl durchsichtig zu machen, welches die Anilinfarben nicht im geringsten löst, und welches ich dem Xylol ganz bedeutend vorziehe, sie in in Terpentin und Benzin gelösten Daramarharz einzuschliessen (Pfitznek und Flemming) ; ich habe so befriedigende Resultate erhalten, dass ich nicht versucht bin, der von Baeeggi vorgeschlagenen Methode zu folgen. — Ich bemerke noch, dass Baeeggi von Präparaten spricht, welche verdorben waren und welche in Canadabalsam conservirt waren, der entweder in Chloro- form oder in Nelkenöl gelöst war, — Jedenfalls müsste derjenige, welcher den von Baeeggi vorgeschlagenen Kunstgriff praktisch ver- wenden wollte, sich vornehmen, mit homogenen Immersionen zu arbeiten, nicht vermittels des Cedernholzöles (welches den Balsam löst, und wel- ches mit der Zeit nicht nur die Präparate verderben könnte, sondern auch die Objective, da es möglich ist, dass ein Theil des gelösten Bal- sams am Objectiv hängen bleibt etc.), sondern entweder mittels der zu diesem Zweck vorgeschlagenen Salzlösungen oder der Lösung von Chloralhydrat in Glycerin, oder noch besser (nach Fol) vermittels der Lösung von Zinkjodür in Glycerin. — Man könnte zu dem gleichen Zweck auch den von Golgi vorgeschlagenen Weg in Anwendung bringen (Ref.)] G. Mariinotti {Toriiio). Krause, W., Durchbohrte Objectträger (Internat. Monatsschr. f. Anat. u. Histol. Bd. I, 1884, H. 5 p. 353). Um ein in Balsam eingeschlossenes mikroskopisches Präparat um- wenden und von der anderen Seite betrachten zu können, empfiehlt Krause Objectträger, die eine Durchbohrung von z. B. 16 mm Durch- messer besitzen. Der diese durchbohrte Stelle umgebende Glasrand wird ferner in einer Breite von 2 mm von der einen Seite her bis auf eine übrigbleibende Dicke von ca. Ya mra fortgeschliffen und so eine einstufige amphitheatralische Vertiefung gebildet. Ein feines Deckglas von 17 mm Durchmesser wird hineingelegt, das Präparat kommt darauf, wird in Balsam eingeschlossen und mit einem Deckglas von 18 mm be- deckt. Ist letzteres Deckglas grösser als die Vertiefung, so hat man eine feuchte Kammer. Bezugsquelle : Glashändler Oppeemann in Hohen- büchen bei Alfeld. Preis: 25 Stück mit 50 runden Deckgläschen 6 M. Dr. H. HenTxing {Göttingen). Hamann, 0., Eine neue Carminlösung. (Intern. Monatsschr. f. Anat. und Histol. Bd. I H. 5, 1884). Darstellung : 30 g Carmin werden mit 200 g conc. Ammoniak ver- mischt, dann wird tropfenweise Acid. acet. glaciale bis zur Neutralität oder ganz schwach sauren Reaction zugefügt. Nach 2 bis 4 Wochen 88 Referate und Besprechungen. II, 1. ist die filtrirte Flüssigkeit brauchbar. Der dabei erhaltene und in gleicher Weise und mit der gleichen Menge von Ammoniak und Essigsäure be- bandelte Niederschlag ist aber jedesmal vorzuziehen. — Hamann rühmt an dieser „neutralen essigsauren Carminlösung" ihr schnelles Durchfärben, sowie die Eigenschaft, dass nicht leicht Ueberfärbung ein- tritt. Nachträgliche Behandlung mit durch Salzsäure angesäuertem Alkohol ist gestattet ohne gerade nöthig zu sein. — Gleich gute Resul- tate ergab die Färbung nach Behandlung der Objecte mit MüLLEu'scher Flüssigkeit, Chromsäure, Osmiumsäure, Pikrinschwefelsäure. Besonders hervorgehoben wird conc. Sublimatlösuug. — Mit gutem Erfolge ward die Flüssigkeit angewandt bei Protozoen, Medusen, Hydroidpolypen, Echinodermen, Lumbricideu, Gephyreen (bei letzteren drei Gruppen be- sonders für die Gewebe des Nervensystems geeignet), ferner bei Poduren. — W. Krause empfiehlt in einer Anmerkung diese neutrale Carminlösung sehr warm für Retina, Nervensystem und Drüsen von Vertebraten. Dr. H. HenMny (Göttwgen). 4. Präparationsmethoden für specielle Zwecke. A, ProtozoeUf Coeletitei'ateny Würmer, Nnsslin, 0., lieber einige neue Urthiere aus dem Herren- wieser See im badischen Schwarzwalde (Zeitschr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p.. 697—722). NüssLiN giebt in dieser Abhandlung interessante Mittheilungen über den Einfluss von Reagentien auf die Hülle der beschriebenen Urthiere. 1. a) Die chitinartige Hülle von Zonomyxa violacea nov. gen., nov. spec. (p. 699) erfährt kaum eine Veränderung durch concentrirte Säuren und Alkalien, sie wird nicht gefärbt durch Carmin und Hämatoxylin. Jodkalium-Jodlösung und verdünnte Schwefelsäure bewirkt keine Violett- oder Neutralfärbung (Unterschied von der Hülle der Amphitrema, vergl. unten unter 3.), Jod dagegen färbt nach längerer Einwirkung. — Der Farb- stoff in den violetten Vacuolen wird durch sehr verdünnte Säuren oder Alkalien, durch Jod oder Alkohol sofort zerstört (p. 700). — Die sog. „Glanzkörper" (cfr. die Glanzkörper von Pelomyxa *), welche nach Nüsslin *) Greeff, Pelomyxa palustris, ein amöbenartiger Organismus des süssen II, 1. Referate und Besprechungen. 89 vielleicht aus einer eiweissartigeu Substanz bestehen, werden durch Jod stark, erst gelb, dann braun gefärbt. Osmiumäure ruft keine besondere Bräunung, Jod und Schwefelsäure keine Bläuung hervor (p. 701). — Der Kern (?) wird durch einprocentige Essigsäure wider die Regel sehr blass, ftist homogen; Zusatz von Alkohol erzeugt dann starke Contrac- tion und Rückkehr der ursprünglichen Structur. Die Carminfärbung ist nicht so charakteristisch wie bei anderen Kernen (p. 702). b) Die beiden Eigenhüllen der encystirten Zonomyxa (p. 707) verhalten sich verschieden gegen Jod: die äussere körnig-faserige Kapsei tärbt sich nur gelb, die innere homogene dagegen energisch rothbraun (Unterschied von der Hülle der freilebenden Zonomyxa , vergl. oben unter a). 2. Durch Einwirkung von verdünnter Essigsäure auf Epistylis ophrydiiforrais NtissL. wird ein Abheben der fein quergeringelten Cuticula vom Körper hervorgerufen (p. 715). 3. Verdünnte Kalilauge oder Schwefelsäure lockern nach längerer Einwirkung den Zusammenhang von Fremdkörpern mit der Schale von Amphitrema stenostoma NtissL. (p, 719); durch Betasten des Deck- glases mit der Nadel wird sie dann von ihnen befreit. Der chemische Charakter der so frei gewordenen Schale des genannten Rhi- zopoden gleicht nach NtissLiN der der Desmidiaceen (Closte- rium). Bei beiden löst concentrirte Schwefelsäure die Schale auf (die Schalen von Hyalosphenia, Difflugia, Nebela, Lagenophrys etc. bleiben dagegen lange fast unverändert), bei beiden ferner erzeugt Jod in Jod- kalium mit verdünnter Schwefelsäure eine Violett-, Blau- oder Neutral- färbung. Dr. H. Henläng (Göitingcn). Daday, E. V., lieber eine Polythalamie in der Kochsalz- tümpelbeiDevain Siebenbürgen (Zeitschr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p. 465—479). Auf p. 472 macht Verf. Mittheilung über die chemische Zusammen- setzung der Schale dieser Polythalamie, der Entzia tetrastomella Daday. Die Einwirkung von concentrirter Salzsäure, von Kali- oder Natronlauge verändert weder die Grundsubstanz der Schale noch die eingebetteten eckigen, offenbar kieseligen Plättchen, dagegen wurde durch den längere Zeit anhaltenden Eiufluss von bis zum Sieden erhitzter concentrirter Schwefelsäure die Schale nicht allein dünner und biegsamer gemacht, sondern auch eine Trennung der einzelnen Kammern an ihren Scheide- Wassers (Archiv f. mikrosk. Anat. Bd. X, 1874, p. 65); nicht in Bd. 111, 1867, wie in vorliegender Abhandlung fälschlich angegeben. 90 Referate und Besprechungen. II, 1. wänden verursacht. Der Verf. nimmt daher an, dass die Schale eine chitinartige Basis mit reichlicher Einlagerung von Kieselsäure besitzt; ein Zerfallen findet dort statt, wo sich die chitinartige Substanz rein erhalten hat, in den Scheidewänden der Kammern. (Cfr. den Schalen- bau der Difflugien, Pleurophryen und der sandschaligen marinen Mono- und Polythalamien). I)r. H. Henhing {Göttingen). Wilson, E. B., The mesenterial filaments of the Alcyo- naria. (Mittheil. a. d. zool. Stat. Neapel Bd. Y, H. 1, 1884, p. 1—27. 2 Tfl. — Methode p. 3 f.). Folgende Untersuchungsmethode ist die beste: Die Thiere werden durch Eintauchen in eine Mischung von 1 Th, starker Essigsäure und 2 Th. concentrirter wässeriger Sublimatlösung plötzlich getödtet. Nach- dem sie rasch abgewaschen sind, werden sie in eine concentrirte wässerige Sublimatlösung übertragen und verweilen 2 bis 3 Stunden darin. Gut ist, wenn man auch die inneren Höhlungen damit injicirt, wo es angeht. Darauf werden sie in fliessendem Seewasser vollkommen ausgewaschen, dann in destillirtes Wasser und zum Schluss in successiv verstärkten Alkohol gelegt. Eine schwache Lösung von lodine in Alkohol und See- wasser giebt auch gute Resultate, ist aber in seiner Wirkung weniger zuverlässig. — Zum Färben verdient Gkenachek's Alaun- Carmin vor Boraxcarmin, Pikrocarmin und Kleinenbekg's Hämatoxyliu den Vorzug, doch muss man sehr rasch damit färben, da sonst das gallertige Meso- dermgewebe in der wässerigen Färbeflüssigkeit eine Schrumpfung er- leidet. — Entkalkung wurde vorgenommen mit einer sehr schwachen Lösung von Salpeter- oder Salzsäure in 90proceutigera Alkohol, Macera- tion mit Heetwig's Osmium- und Essigsäure-Gemisch. Br. H. Henliing {Göttingen). Döderleili, L. , Studien an japanesischen Lithistiden. (Zeitschr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p. 62—104. [Technisches p. 68 f.]). Um die Skeletttheile der genannten Schwämme zu erkennen, wandte Verf. zum Entfernen der Weichtheile mit gleichem Erfolge Aus- kochen in verdünnter ' Salpetersäure oder Kalilauge an, oder auch Be- handlung mit Eau de Javelle. Die Ansicht, dass verdünnte Kalilauge die kleinen „Fleischnadeln" angriffe, fand Verf. nicht bestätigt. Dr. II. HeuMng {Göttingen). Maurice, Ch. et Schulgiu, Embryogenie de rAmaroecium ') Der Grad der Verdünnung wird nicht angegeben. Ref. 11, 1- Referate und Besprechungen. 91 proliferum (Ann. d. sc. nat. ; Zoologie, 4^ sörie, t. XVII [Technisches p. 5 — 7]). Die Verff. empfehlen die im Folgenden angegebene Conserviriings- raethode und Doppelfärbung von Ascidien-Erabryoneu. Der ganze oder besser der in Stücke zerschnittene Ascidienstock wird in eine bestimmte Menge von frischem Wasser gelegt und mit einem gleichen Quantum kochender Pikrinschwefelsäurc Übergossen. Ungefähr nach einem halben Tage bringt man die Objecte in Alkohol, welcher allmählich durch immer stärkeren ergänzt wird. Sind die Thiere gut ausgezogen, so, kann man sie in Alauncarmin färben und im ganzen einschliessen, oder man schlägt folgenden Weg ein: Die isolirten Eier oder Embryonen werden 15 bis 18 Stunden in Carmin-Borax gefärbt, mit Salzsäure be- handelt, in TOprocentigem Alkohol gut ausgewaschen und nun in eine sehr schwache Lösung von Bleu de Lyon eingelegt. Letzterer Farbstoff ist in TOprocentigem Alkohol gelöst und mit einigen Tropfen Essigsäure vermischt, welche eine intensivere Blaufärbung hervorruft. Die Em- bryonen müssen 15 bis 20 Stunden darin verweilen, und die Flüssigkeit muss öfter angerührt werden, damit eine allseitig gleichmässige Färbung erzielt wird. Sind die Embryonen dunkelblau gefärbt, so nimmt man sie heraus und bettet möglichst rasch in Paraffin ein, dem nach der Angabe von Schülgin ' etwas Ceresin zugefügt ist. Ein längeres Ver- weilen in Alkohol würde nämlich die blaue Farbe herausziehen. Als Aufhellungsmittel wurde Bergamottöl vor Nelkenöl vorgezogen. Durch die beschriebene Doppelfärbung wurden die Kerne überall roth, das Plasma blau tingirt. Besonders hervorgehoben wird noch, dass sich nun die drei Keimblätter des Embryo deutlich von einander unter- scheiden: Das Ektoderm ist tiefer blau als das Endoderm gefärbt; das Mesoderm zeigt die geringste Blaufärbung, da seine Zellen einen sehr grossen (rothgefärbten) Kern besitzen, gegen welchen das blauePlasma zurücktritt. — Erwähnenswerth ist auch, dass durch das Bleu de Lyon der Inhalt der Samenbläschen nicht gefärbt wird und also weiss bleibt, während die Follikelzellen eine sehr intensive Blaufärbung annehmen. Dr. H. HenJiing {Göttin (jen). Saefftigen, A., Zur Organisation der Echinorhyncheu. (Morphol. Jahrb. Bd. X H. 1, 1884, p. 120-163. 3 Tfl.). Die Echinorhvncheu momentan zu tödten und dabei eine Contrac- <) Schulgin, Zur Technik der Histologie (Zool. Anz. Bd. VI, 1883, p. 21 cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 268). 92 Referate und Besprechungen. II, 1. tion des Körpers zu vermeiden , erwies sich als sehr schwierig. So waren Sublimatlösungen, starke Osmiumsäure auch nach Betäubung der Thiere mit Chloroform und Tabaksrauch wenig vortheilhaft. Als brauch- bar erwies sich die Anwendung einer O'lprocentigen Osmiumsäure, in der die Thiere laugsam absterben. Eine anfangs eintretende Contrac- tion wird dabei durch eine nach dem Tode des Thieres erfolgende Aus- dehnung wieder ausgeglichen. Ferner konnte Verf. nach 24stündigem Verweilen der Thiere in genannter Flüssigkeit unter dem Präparir- mikroskop Subcuticula, Ring- und Längsmusculatur von einander trennen, üeberhaupt empfiehlt Verf. für alle musculös differenzirten Organe, wie das Ligament, die Uterusglocke etc. Osmiumsäure von geringen Concentrationsgradeu. — Für die inneren Orgaue empfiehlt es sich, die Thiere aufzuschneiden und in O'Olprocentige Osmiumsäure ' zu legen, und zur Untersuchung nud ferneren Conservirung eine concentrirte Lösung von essigsaurem Kali ' anzuwenden. Man verfährt dabei so, dass man die Osmiumsäure auswäscht, die Gewebe in eine verdünnte Lösung von Kali aceticum bringt, diese an der Lnft verdunsten lässt und alsdann in concentrirte Lösung überführt. — Für die Nerven verdient Chromsäureauwendung vor Osmiumsäure den Vorzug. Für Schnitte ist Färbung mit Boraxcarmin empfehlenswerth, weil die hell bleibenden Nerven sich von den umgebenden roth getärbten Geweben scharf absetzen und leicht verfolgt werden können. Die Darstellung des Nervenverlaufs an Totalpräparaten (in der Körperwand, der Rüssel- scheide, das Geschlechtsganglion nebst abtretenden Nerven) bekommt man am besten nach mehrtägiger Einwirkung von Iprocentiger Ameisen- säure : Das Gewebe quillt stark, wird durchsichtig und lässt die Nerven gut verfolgen. Zur Demoustrirung der Lateralnervenstämme trennt man die Subcuticula von der Körpermusculatur und imprägnirt letztere mit Chlorgold oder Goldchloridnatrium, — Zur Untersuchung der Sub- cuticula ist O'lprocentige Chromsäure vortheilhaft: die Echinorhyn- chen leben noch tagelang darin, bleiben aber gestreckt. Anwendung von Alkohol. Man färbt entweder sofort, oder besser, wäscht erst in fliessendem Wasser aus, lässt Osmiumsäure einwirken und färbt dann mit Boraxcarmin. — Kleixenbeegj's Pikrinschwefelsäure in 1 Th. zu 8 bis 10 Th. Wasser ist von ähnlicher Wirkung wie Chromsäure und namentlich für die Geschlechtsorgane empfehlenswerth. Concen- trirte Lösungen derselben sind unbi'auchbar, da die Thiere sich sehr darin contrahiren. — Zur Färbung der Gewebe ist nur Boraxcarmin •) Angabe der Zeitdauer fehlt. Ref. II, 1. Referate uiul Besprccliungen. 93 nach tagelangem Einwirken anwendbar. Ammoniakalisches Carmin, Gbenacher's Alauncarmin, Hämatoxylin, Brasilin und Anilinfarben sind unzweckmässig. T)r. H. Henldvg {Göüingeri). liieliriuger, J., Beiträge zur Anatomie und Entwicklung s- geschichte der Trematoden. (Arb. a. d. zool.-zoot. Inst, in Würzburg Bd. VII H. 1, 1884, p. 1—26, 1 TU.). Zur frischen Untersuchung der Keinischläuche der in Schnecken lebenden Cercarieu benutzte Verf. mit gutem Erfolge die Blutflüssigkeit der Schnecken selbst (p. 3). Wie derselbe angiebt, können manche Vorgänge, z. B. die Entstehung der accessorischen Membran der Sporo- cysten, nur so ans Licht gestellt werden. Zur Conservirung diente wenig vortheilhaft heisses Wasser, besser Chromsäure, Chromsäure mit Essigsäure, üeberosmiumsäure, Quecksilberchlorid und Pikrinschwefel- säure. Dr. H. Hciiking {Göttingen). Fischer, P. M., lieber den Bau von Opisthotrema co- chleare, nov. gen., nov. spec. (Zeitschr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p. 1—40). Der Verf. rühmt p. 5 als vorzügliches Einbettungsmittel für sein Object, eine Trematode, Kernseife (15 Gewichtstheile in 17-5 Gewichts- theilen 96procentigen Alkohols gelöst). Auf dem Wasserbade bis zu ca. 60"^ C. erwärmt, schmilzt dieselbe und durchdringt bis zu dem in einigen Minuten erfolgenden Erstarren den Körper genügend. Glycerin wurde angewandt bei sofortiger Untersuchung der Schnitte. — Im übrigen Härtung des ganzen Thieres in absolutem Alkohol, Färbung mit Pikrocarmin oder Hämatoxylin oder ammoniakalischem Carmin; Aufhellung in Nelkenöl ; Einschluss in durch Chloroform leichtflüssig gemachten Canadabalsam. Dr. H. Henling {Oöitwgen). Jijim.i, J., Untersuchungen über den Bau und die Ent- wicklungsgeschichte der Süsswasser - Dendro- coelen. (Zeitschr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p. 359 - 456. [Untersuchungsmethode p. 360 f.]). Die von früheren Untersuchern der Planarien ausschliesslich an- gewandte Quetschmethode verwirft der Verf. mit Recht und hält die- selbe für erspriesslich nur bei der Untersuchung des auf Schnitten un- genügend zu beobachtenden Escretionsapparates. Zum Schneiden bereitete Jijima die Planarien in folgender Weise vor: Die ohne Wasser auf einen flachen Teller gebrachten Planarien wurden mit einer fast siedenden, concentrirten, wässerigen Lösung von Quecksilberchlorid Übergossen. (Quecksilberchlorid für histologische 94 Referate und Besprechungen. 11, 1. Zwecke von A. Lang ' empfolileu). Contractioueu der Thiere oder Schrumpfungen an denselben wurden so völlig vermieden. Grosse Thiere Hess Verf. zum Zweck der völligen Härtung eine halbe Stunde in jener Lösung, befreite sie dann durch stundenlanges Einlegen in Wasser und öfteres Wechseln desselben von dem sonst auskrystallisirenden Queck- silberchlorid , Hess sie darauf in schwachem , starkem und absolutem Alkohol mindestens je 48 Stunden liegen und brachte nun die Färbungs- mittel, verdünnte Boraxcarmiulösung (Einwirkungsdauer 3 bis 4 Tage), oder Häraatoxylin oder Safranin mit Erfolg in Anwendung. Mit Goldchlorid hat Verf. schlechte Erfahrungen gemacht und ver- wirft auch für seinen Zweck Chrom-, Osmium- und Pikrinsäure als Härtungsraittel. Eine Conservirung der Planarien für eine Sammlung erzielt man nach JijiMA am zweckmässigsten durch üebei'giessen derselben mit 50- procentiger Salpetersäure, da man die Thiere so in völlig ausgestrecktem Zustande bekommt. Die Untersuchung von Eutwicklungsstadien war insofern erschwert, als in dem frisch gelegten Kokon die Eier eine bedeutende Menge gleich grosser Dotterzellen beigemischt erhalten hatten. Erst bei der Fur- chung klebten viele Dotterzellen dem Ei an, dasselbe kenntlich machend. JijiMA nahm nun eine Trennung der Eier und Dotterzellen folgeuder- massen vor: Auf einem Objectträger wurde der Kokon von seiner Schale befreit und der Inhalt desselben in 2procentiger Essigsäure gleichmässig ausgebreitet. Die jetzt als Pünktchen erkennbaren Eier wurden durch ein Deckglas mit Wachsfüsschen geschützt, die Essigsäure wurde fort- gesaugt, durch TOprocentigen Alkohol, dieser nach einer Stunde durch 90procentigen ersetzt. An dessen Stelle tritt nach zwei Stunden wässe- riges Glycerin (1 : 1), zum Schluss reines Glycerin. — Lackrand. Zum Zweck des Schneidens Erhärtung des Kokoninhaltes in toto, nach Entfernung der Schale. Gutes Erhärtungsmittel hierzu: einpro- centige Chromsäure. Quecksilberchlorid machte die Embryonen spröde. — Einbettung in Paraffin. Br. H. HenJäng {Göttingen). Kenuel, J., Entwicklungsgeschichte von Peripatus Ed- wardsii Blanch. und Peripatus torquatus n. sp. (Arb. a. d. zool.-zoot. Inst. Würzburg Bd. VII, H. 2, 1884, p. 1—222). Die Untersuchung der jungen Embryonen der genannten Arten ^) Lang, Ueber Conservation der Planarien in Zool. Anz. Bd. I, 1878, p. 14. II, 1. Referate und Besprechungen. 95 verursachte dem Verf. aus dem Grunde Schwierigkeiten, weil dieselben mit dem mütterlichen Uterus verwachsen sind und ihre Kleinheit und Empfindlichkeit ein Herauspräparireu iinmöglich macht. Die Embryonen unverletzt zu erhalten, verfuhr Verf. in folgender Weise (p. 114): Die dem chloroformirten Mutterthiere entnommenen und die Embryonen ent- haltenden Uterus-Anschwellungen wurden z. Th. in concentrirte Sublimat- lösung (besonders empfehlenswerth), z. Th. in '/a- bis Iproceutige Os- miumsäure gebracht und mit Alkohol nach und nach gehärtet. Ein gleiches geschah mit den grösseren Embryonen, die aber vorher aus dem frischen Uterus herauspräparirt wurden, — Alkohol allein, Chrom- säure, Pikrinschwefelsäure und Pikrinsäure sind zum Härten nicht an- wendbar, da sie die Objecto verändern. — Die Uterusanschwelluugen wurden mit Terpentin durchsichtig gemacht, orientirt und in toto ge- schnitten, oder es wurde der Embryo herausgenommen und allein ge- schnitten. Dr. H. Henking {Götttngen). B. Arthropoden, Michael, A. D., British Oribatidae Vol. I (Ray Society, London 1884) 8°, 336 pp., 31 pl. Aus dem sorgfältigen und auch äusserlich vorzüglich ausgestatteten Werke interessirt hier besonders Cap. VIII (p. 99 — 109): Collecting and Preservation. Es verdient dasselbe wohl schon aus dem Grunde ein etwas ausführlicheres Referat, weil die vielen darin für eine zweck- mässige Präparation gegebenen Winke gewiss auch bei der Unter- suchung anderer Thierklassen von Nutzen sein können. Unter den Methoden, die kleinen und mühsam zu fangenden Thiere aus Moos, Flechten und Pilzen zu erlangen, bewährte sich dem Verf. als das Zweckmässigste, diese Gegenstände über ausgebreitetem weissen Papier in kleinen Quantitäten zu zerpflücken, wobei darauf zu achten ist, dass die genannten Gewächse nicht zu feucht (weil sonst die Thiere ankleben) noch zu trocken sind (weil sich dann keine darauf befinden). — Um die Sachen zu Haus abzusuchen und auch gleichzeitig die Locali- täten getrennt zu lassen, empfiehlt Verf. eine Anzahl von wasserdichten Büchsen oder Stücke von Wachstaifet, welch letztere mit einem Faden umschnürt werden. Als Signatur bekommt jedes dieser Stücke die ge- naue Bezeichnung der Localität. Man schüttelt alsdann am besten über einer Glasplatte und unter einem Präparirmikroskop ans. — Zum Tödten der Thiere nimmt man nach Michael am besten kochendes Wasser, durch dessen Einwirkung man auch meist die Mundtheile, Legeröhren etc. 96 Referate und Besprechungen. II, 1. in ausgestrecktem Zustande bekommt. Man setzt die Thiere mit einem feinen Pinsel von Kameelhaaren in kleine weisse Porcellanschälclien^ erhitzt das Wasser in einem kleinen halbgefüllten Reagenzgläschen imd giesst es alsdann über die Thiere, welche dadurch augenblicklich ge- tödtet werden. Mit Metallgegeuständen dürfen die sehr zerbrechlichen Thiere nicht berührt werden, sondern mit feinen Pinseln aus Kameel- oder Zobelhaaren, oder in gewissen Fällen mit einem Dachshaar (aus einem Rasirpiusel), welches mit dem dickeren Ende in ein eingespaltenes und dann mit einem Faden umwickeltes Zündholz eingeklemmt ist. I. Um Trocken Präparate herzustellen (zweckmässig zur Con- servirung der natürlichen Textur und Färbung der Rückenfläche), muss man vorher das Wasser möglichst entfernen. Es geschiebt das, indem man die Thiere unter den Recipienten einer Luftpumpe bringt imd zu- gleich eine Schaale mit concentrirter Schwefelsäure oder ein anderes stark wasseranziehendes Mittel mit darunter stellt. II. Für Canadabalsam- oder Glycerinpräparate empfiehlt Verf. ein vorbereitendes Einlegen in ein Gemisch von gewöhnlicher Essigsäure (ordinary acetic acid of commerce) und destillirtem Wasser (1:1 oder 1 : 2). Brauchbar ist auch für Canadabalsampräparate ein Einlegen in verdünnten Methyl- oder Aethylalkohol, für Glycerinein- schluss eine vorläufige Behandlung mit einem Gemisch von gleichen Theilen Glycerin, Methylalkohol und destillirtem Wasser. 1) Canadabalsampräparate (für derbhäutige Nymphen etc. geeignet). Aus der Essigsäure werden die Thiere in Methylalkohol gelegt und mit Hülfe der feinen Pinsel und Haare von anhaftendem Schmutz befreit, wobei besonders auf die Klauen etc. zu achten ist. Zum Schluss werden sie auf einem Objectträger in die gewünschte Lage gebracht, die Beine mit Hülfe der oben genannten Werkzeuge ausge- breitet, der Spiritus durch Nelken- oder Terpentinöl ersetzt und die Thiere durch zwei daneben gelegte Streifen dicken Deckglases geschützt, damit sie selbst und ihre Rückenborsten durch das Deckglas nicht ge- drückt werden. — Sollten die Beine sich nicht ausbreiten lassen wollen, so empfiehlt Verf. folgenden Weg ' : Ein Objectträger wird mit einer dünnen Schicht Balsam überzogen und, sobald dieser klebrig geworden, das Thier mit dem Rücken nach unten daraufgelegt; die Beine werden mit einem Haar solange niedergedrückt, bis sie am Balsam haften bleiben. Von Zeit zu Zeit muss der Rumpf des Thieres (nicht die Beine), um es ') Cfr. auch Journ. R. Microsc. Soc. London Ser. II vol. IV, 1884, pt. 4 p. 635. II, 1. Referate und Besprechungen. 97 vor dem Vertrockueu zu schützen, mit Nelkenöl befeuchtet werden. Schliesslich wird das ganze Thier mit Nelkenöl bedeckt, dadurch all- mählich der Balsam aufgelöst und nun das Thier in beliebiger Lage eingeschlossen, indem das Nelkenöl nach genügender Aufhellung der Thiere durch in Benzin aufgelösten Balsam ersetzt wird. — Häufig aber erseheinen die Thiere schon am nächsten Tage ganz dunkel, wie mit Luft angefüllt. Es hat das nach Michael seinen Grund darin, dass die dünneren Flüssigkeiten, in dem sie sich vorher befanden, rascher in den Balsam einströmen als sie durch Balsam ergänzt werden, wodurch ein mit Benzindämpfen etc. erfüllter Hohlraum im Thierkörper entsteht. Verf. hat in solchen Fällen die Thiere noch einmal eingebettet, indem am besten schon dem Nelkenöl etwas Balsam beigemischt wird. Anwen- dung von etwas Wärme ist dabei vortheilhaft. 2) Glyceriu (für Jugendstadien das beste Einschlussmittel). — Aus der Essigsäure kommen die Objecte in ein Gemisch gleicher Theile von Glyeerin, Methylalkohol und destillirtem Wasser, und er- fahren die nöthige Reinigung und Präparation. Alsdann führt man sie am zweckmässigsten nicht sogleich in reines Glyeerin, sondern vorher erst in ein Gemisch von Glyeerin und 2 bis 5 Procent einer wässerigen Auflösung von Kampfer. Die Thiere werden in einer Zelle einge- schlossen und das Deckglas wird vorsichtig horizontal niedergelegt, damit die Thiere nicht nach einer Seite getrieben werden. Die Präparate werden alsdann an einen trocknen Ort gelegt, nach einigen Tagen wird das unter dem Deckglas hervortretende Glyceriu mit einem feuchten Tuch fortgewischt und das Deckglas mit einem Ring von Goldsize ' umzogen. Ist dieser Ring ganz trocken, so wird er wiederum mit dem nassen Tuche abgewischt und mit einer neuen Schicht Goldsize über- zogen. Damit wird fortgefahren, bis sich kein Glyceriu mehr zeigt. Zum Sehluss wird noch eine Schicht Asphaltlack darübergelegt, welche ca. alle zwei Jahre erneuert werden muss. 3) Glyc eriu gelati ne (besser im heissen Sommer als im Winter anwendbar). — Benutzt wurde Deake's Gelatine ^, mit etwas ') Dar.stellg. d. Goldsize nacli Beai-k: Leinöl 25 Th., Mennige 1 Th., Umbra '/;i Th. werden 3 Stunden gekocht, dann klar abgegossen. Langsam werden gleiche Theile gut zerriebenen Blei weisses und gelben Okers hinein- gerührt, weiter gekocht, dann abgegossen, in einer Flasche aufbewahrt. (Fkev, Das Mikroskop etc. 6. Aufl. p. 142. Behrens, Hilfsbuch z. A. mikr. Unters. 1883, p. 192). «) Zusammensetzung derselben nach Deaxe : 1 Th. Gelatine wird in 2 Th. destillirten Wassers gelöst, dann mit 4 Th. Glyeerin versetzt (Fkey 1. c. p. 135 Behrens, 1. C. p. 181). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie II. 1. 7 98 Referate und Besprechungen. II, 1. Glycerin versetzt. Diese Substanz wird zum Gebrauch in ihrem Gefäss in Wasser von einer Temperatur, bei der sie gerade flüssig wird, ge- setzt und mit einem nach dem Gebrauche stets zu reinigenden Glas- stabe herausgenommen. Vor dem Auflegen wird das Deckglas auf einer heisseu Platte oder in einem Leinentuche zwischen den Fingern erwärmt. Im Ruhestadium lassen sich die Nymphen in der Ijeschriebenen Weise nicht conserviren, da sie zusammenfallen. — Jedes Präparat soll den Namen der Art, das Datum und den Fundort enthalten. — Für kleinere Thiere ist oft ein Zerquetschen mit nachfolgendem Zerzupfen zum Studium des Skeletts sehr zweckmässig. Dr. H. Henhing (Göttivgen). Freuzel, 3., Ueber die Mitteldarmdrüse der Crustaceen. (Mittheil. a. d. Zool. Stat. Neapel Bd. V, II. 9, 1884, p. 50— 99,, 1 Tfl. — Methode p. 51—55). Macerationen der Gewebe mit Ranviek's Alkohol, sehr verdünnter Essigsäure oder Chromsäure ergaben keine Resultate, da ein Zerfall der Zellen leichter eintrat als eine Trennung derselben. — Frische Gewebstheile werden am besten in der Blutflüssigkeit der Thiere oder in einem Gemisch von 1 Th. destillirten Wassers und 1 Th. Mittelmeer- wasser (zusammen einer Salzlösung von l'o bis 2 Procent entsprechend) untersucht. Eine ^procentige Salzlösung ist für die sehr von Salz durchdrungenen Meeresthiere zu schwach und daher unzweckmässig. — Die Conservirung des Drüsenepithels der Leber ist nach Frenzel recht schwierig. Für Dekapoden , Amphipoden und Phronimiden empfiehlt sich 1) besonders eine concentrirte wässerige Sublimatlösung bei einer Einwirkungsdauer von 10 bis 30 Minuten, mit darauf folgendem Aus- waschen und langsamem Ersetzen durch Alkohol (Resultat : Gute Er- haltung der Zellkerne und ihres Fadengerüstes). — Für Isopoden verdient Kleinenberg's Pikrinschwefelsäure vor Sublimat den Vorzug; Dar- stellung: Gesättigte Pikrinsäure, mit etwas Schwefelsäure versetzt, wurde mit der gleichen Menge Wasser verdünnt und 15 bis 20 Minuten einwirken lassen, — 2) Anwendung von Peeenyi's Conservirungsflüssig- keit * (Resultat : Zellgrenzen werden durch Quellung etwas undeutlich. 1) Perenvi, J., Ueber eine neue Erliärtungsfiüssigkeit (Zool. Aiiz. 1S82, No. 119 p. 459—460). — Vorschi'ift : 4 Th. lOprocentige Salpetersäure ~j 3 „ Alkohol Farbe schön violett. 3 „ O'öprocentige Chromsäure J II, 1. Referate und Besprechungen. 99 aber rasches Eindringen und gute Fixirung). — 3) Als zweckmässig er- wies sich folgende Methode: Einlegen des Objectes in PEEENYi'sche Flüssigkeit während einer Zeitdauer von 5 bis 10 Minuten mit darauf- folgendem eben so langen Verweilen in Subliraatlösung. — 4) Anwen- dung von TOprocentigem Alkohol, dem einige Tropfen Jodtinctur zuge- setzt wurden (Resultat: Gute Fixirung der Zellen, Verschwinden der Kernstructur). — 5) Weniger gut aber noch brauchbar ist die directe Behandlung der Drüse mit Alkohol von 70 bis 90 Procent, kalt oder besser warm angewendet (Resultat: Präparate leidlich gut, aber Ver- schwinden der Kernstructur). — Wenig günstig ist 10 bis 30 Minuten lange Einwirkung von Kleinenberg's concentrirter Pikrin-Schwefelsäure für die Leber der Dekapoden (Resultat: Zellgrenzeu undeutlich. Kerne und Kerngerüst leidlich erhalten). Ferner ist ungünstig Iprocentige Chromsäure, Chrom- und Essigsäure, MtrLLEE'sche Flüssigkeit, absoluter Alkohol, auch Osmiumsäure (deutliches Hervortreteu der Zellgrenzeu, Verschwinden der feineren Kern- und Zellstructur). Für die Darmge- webe der Dekapoden wird auch eine gesättigte alkoholische Sublimat- lösung empfohlen. — Nach vollendeter Fixirung Aufbewahren der Ob- jecte in 90procentigem Alkohol, zu dem man langsam von schwachem Alkohol übergegangen war. Absoluter Alkohol, Chloroform, Paraffin, Schneiden, Färben. — Die Schnitte werden nach der FKENZEL'schen Methode ' festgelegt, das Paraffin mit Naphthaöl ^ (auch Benzin anwend- bar) entfernt. Uebergiessen der Schnitte mit starkem Alkohol, dann mit schwachem, Färbung mit der sauren alkoholischen Carminlösung von Gkenachee, oder mit Boraxcarmin oder alkoholischer oder wässeriger Ilämatoxyliulösung (nach Böttcher^) p. 54. Auch eine Doppelfärbung wurde angewandt : Ueberfärben mit der genannten wässerigen Häma- toxylinlösuug, dann Färben mit saurem GREivÄCHER'schen Carmiualkohol (das überschüssige Hämatoxylin wird dabei durch die Säure des Carmin entfernt), Auswaschen mit TOprocentigem Alkohol, Uebergehen zu ab- solutem, Nelkenöl, Balsam *. Eier von Amphibien und Fischen Hess Verf. 4 bis 5 Stunden darin liegen ixnd führte sie dann in TOprocentigen Alkohol über und daraus allmählich in absoluten. ') Diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 113 ff. '') L. c. p. 115; von TmiELFALr. empfohlen. ^) Soll wohl BjiiMKR heissen. Ref. *) Cfr. über das Vorige das Referat im Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. IV. 1884, pt. 4 p. 636. 7* 100 Referate und Besprechungen. II, 1. Dekapoden. 1) Die „fetthaltigen Zellen" (Leberzellen Weber's, Fettzelleu nach Meckkl, Leeeboullet, Feey und Leuckakt) enthalten aus Fett bestehende Secretkugeln, Diese Secretkugeln bräunen sich sofort bei Osmiumsäurezusatz, werden eckig dabei, wie auch bei Anwendung von wässeriger oder alkoholischer Sublimatlosung oder Essigsäure, wobei aber die Tropfen homogen bleiben. Die Secretkugeln lösen sich ohne Rückstand in Aether und Chloroform (Aether wird da- durch braun gefärbt, giebt auf Papier einen Fettfleck, der an der Luft ranzig wird). — Bei Behandlung eines Zupfpräparates mit concentrirter Schwefelsäure werden die Fettzellen trübe (auch durch concentrirte Essigsäure), es treten sclnvarze Granula auf, die farblosen Kugeln wer- den hellgelbbraun und bekommen schwach violett gefärbte Vacuolen, welche wachsen, zusammenfliessen, die ganze Kugel erfüllen. Letztere wird schliesslich aufgelöst. — Jodtinctur färbt die Fettzellen gelbbraun. — Sublimatlösung einem Zupfpräparate zugesetzt, lässt in vielen Zellen zusammengeballte trübe Kügelchen hervortreten, welche immer im oberen Theile der Zellen, über den Fettkugeln, auftreten, und sich in Alkohol absolutus und Fettlösungsmittelu (Chloroform , Naphtha etc.) nicht lösen, aber durch Salz- und Salpetersäure angegriffen werden. — Das Zellprotoplasma (besonders im unteren Theile der Fettzellen gelagert, am besten markirbar durch absoluten- Alkohol oder alkoholi- sche Sublimatlösung, sehr färbbar, p. 67) wird durch Iprocentige Osmiumsäure langsam gebräunt, durch Ranvier's Alkohol nach 3 Stunden bis auf den Kern zerstört ; es quillt durch conc'entrirte Salz- und Schwefel- säure und zerfliesst bald, behält seine Form in starker Essigsäure und Eisessig. In Y4procentiger Kochsalzlösung erhalten sich die Zellen gut, der Saum verschwindet schnell, der Kern wird deutlicher. Salz- lösung von 10 Procent oder Ammoniak zerstört die Zelle sofort. Das feine plasmatische Netzwerk zwischen den Fettkugelu ist am besten nach Conservirung mit wässerigem Sublimat zu sehen. — Mikroche- mische Reactionen bestätigten die von Weber angenommene Leber- zellen-Natur jener Zellen nicht: Salpetersäure, welche etwas salpetrige Säure enthält, ruft an Zupfpräparaten keine charakteristische Färbung hervor, Zucker mit Schwefelsäure keine Rothfärbung. — Der Zellkern (p. 69) zeigt das Netzwerk am besten nach Behandlung mit Sublimat oder Peeenyi's Flüssigkeit, wird durch absoluten Alkohol homogen (zeigt nur das Kernkörperchen). 2) Die sog. Fcrmentz eilen , welche das Epithel der Mittel- darmdrüse mit aufbauen helfen, besitzen im Innern eine grosse mem- branöse meist mit einer braunen körnigen Masse gefüllte Blase. Reagen- n, 1. Referate und Besprecliungen. iQi tieu wirken auf diese Masse folgendermassen ein : Eiuproccntige Ueberosmiumsäure bewirkt keine Bräunung. — Coneontrirte, lOprocentige oder Iprocentige Salzsäure: Quellen erst nach einiger Zeit, schliesslich ein Lösen und Entfärben der Granula jener Massen. — Salzsäure von 0*1 Procent : Rasches Quellen der Zellen, Auflösung der braunen Granula, aber erst spätes Verschwinden der braunen Farbe. — Concentrirte Schwefelsäure löst mid entfärbt die braunen Körnchen bald. — Con- centrirte Salpetersäure zeigte nach 22 Stunden die Körnchen entfärbt, aber nicht gelöst, die Zellen meist zerstört. — Concentrirte Essigsäure bewirkt ein langsames Quellen und Entfärben des Zellinhalts und meist ein Sprengen der Zellen. Bei dünnerer Säure nahm die Wirkung nh. — Ammoniak oder Kalilauge: Starke Quellung der braunen Massen, Lösen der Granula, Entfärbung, Platzen der Zelle. — Kochsalzlösung von 10. Procent: Fermentzellen bleiben ungelöst, schrumpfen stark. Braune Granula unverändert. — Kochsalzlösung von ^/^ Procent: Zer- störung der Zellen binnen kurzem. - Jodtinctur: Gelbbraunfärbung des Plasmas und der Blase (keine Rothfärbung!) — Wässeriges Sublimat: Gerinnung und Trübung des Zellinhaltes, keine Entfärbung. — Alkohol ebenso, aber mit Entfärbung. — Aether oder Chloroform : Lösung des Farbstoffes, keine Lösung der Granula. — Destillirtes Wasser, Glycerin: Aehnliche Wirkung wie bei vorigen. — Farblose Krystallnadeln in den Secretblasen vieler Dekapoden erwiesen sich als T y r o s i n : Sie sind unlöslich in absolutem Alkohol, Aether, verdünnter Essigsäure, schwer löslich in Wasser und concentrirter Essigsäure, leicht löslich in Kali- lauge, wässerigem und alkoholischem Ammoniak und in Salpetersäure, scheiden aus dieser essigsauren und ammoniakalischen Lösung wieder aus beim Verdampfen, schwärzen sich nicht mit Osraiumsäure (also kein krystallisirtes Fett). — Makrochemisch wurde alsdann das Tyrosin in der Mitteldarmdrüse in folgender Weise dargestellt: a) Aramoniakali- sches Drüsenextract lieferte dieselben Krystallformen, b) die Drüse von Maja mit absolutem Alkohol und Aether ausgezogen, Rückstand ca. 18 Stunden mit SOprocentigem Alkohol digerirt, filtrirt. Das einge- dampfte Filtrat ergab dieselben Krystalle. Diese Krystalle nach Scheeber's Methode mit Salpetersäure eingedampft, ergaben, mit etwas Kalilauge versetzt, die für Tyrosin charakteristische orangerothe Fär- bung (cfr. den gleichen Fund von P. Mayer bei einer Caprellide, ferner das Tyrosinvorkommen in dem Pankreassecret der Wirbelthiere). — Der Kern dieser Zellen (p. 78) ist im reifen Zustande völlig homogen, was besonders nach Subiimatbehandhmg auf Schnitten zu sehen ist. — Die Jugendformen dieser Zellen kennzeichnen sich aufgefärbten Schnitten 102 Referate und Besprechungen. II, 1. durch stärkere Färbung. — Verf. beobaclitete, dass, wenn unter dem Mikroskope dem Secrete der Mitteldarmdrüse Ammoniak zugesetzt wird, sich durch ihre Form charakteristische Tripelphosphatkrystalle bildeten (auf einen Gehalt von Phosphor und Magnesium hindeutend). — Koch- salz lässt sich durch Austrocknen nachweisen. — Bei Zusatz von Schwefelsäure bilden sich Krystalle von Calciumsulfat. — Ausziehen der Drüse mit Alkohol und Eindampfen des Extractes ergab mikro- skopische Leucinkrystalle. — Aetherextract lieferte Cholesterinkrystalle (nach der MoLEscHOTT'schen Probe mit Schwefelsäure erkennbar). Isopoden. Untersuchung des Leberepithels im frischen Zustande ist wegen der Empfindlichkeit und Grösse der Zellen schwierig, Con- servirung mit Pikrinschwefelsäure (s. o.) am besten, Ueberosmiumsäure nur bei Land-Isopoden (Oniscus) von Nutzen. — Die Fetttropfen der Leberzellen haben die gleichen Eigenschaften wie bei Dekapoden. — Bei den Schmarotzern Jone und Gyge, ferner bei Idotea hectica und Sphaeroma finden sich ausser den gefärbten Fettkugeln in den Epithel- zellen noch typische Krystalloide von gleicher Farbe (tetragonale Doppel- pyramiden mit einem Mittelkantenwinkel von 135"): Sie werden von organischen und unorganischen Säuren schnell gelöst, quellen z. B. in Essigsäure und in Alkalien. Gegen absoluten Alkohol und kaltes Wasser sind sie sehr resistent, quellen dagegen unter Abruudung in destillirtem Wasser von 60". Jod färbt sie gelbbraun, Hämatoxyliu grauschwarz, I^osin fast gar nicht, Benzin und Aether wirken nicht auf sie ein. — Die jungen Secretzellen der Süsswasser- und Landasseln zeigen kleine Granula, welche Frenzel im Gegensatz zu Webek (1. c. p. 411) nicht für Fermentsecret hält, obgleich sie sich mit Osmiumsäure schnell und stark bräunen. Ueberhaupt ist nach Frenzel Osmiumsäurereaction für Fermentzellen nicht charakteristisch (s. o. Dekapoden). Die Körnchen färben sich aber nicht so schnell und stark wie Fetttröpfchen, nach der Conservirung sind sie mit Wasser nicht extrahirbar, sind resistent gegen Alkohol und Aether, färben sich nicht mit Carmin und Hämatoxylin, wohl aber, frisch wie auch gehärtet, mit Bisraarckbraun. — Diese Zellen sind Jugendstadien der grossen, Fetttröpfchen enthaltenden, Ferment- zellen , wie Uebergänge beweisen. — Nach der Härtung der grossen und kleinen Zellen mit Sublimat tritt im Protoplasma eine Art von Netzwerk hervor, welches an der Basis der Zellen am gröbsten ist und mit Carmin, Hämatoxylin etc. sich begierig färbt. Amphipoden. Die Phronimiden haben an Stelle der Mitteldarm- drüse nur mehrere Aussackungen des Mageudarms. Diese besitzen mit einem langen Härchensaum versehene Epithelzellen. In concentrirter II, 1. Referate und Bespi-echungen. 103 Salzsäure bielteu sich die Härchen lange, ehe sie sich lösten, weniger lange in verdünnter Salzsäure , wobei aber die Membran unter dem Saum erhalten blieb. — In Salpetersäure ' wurde der Saum bald ange- fressen, erschien dann zackig und war nach '/a Stunde verschwunden. — • Einprocentige Chromsäure : Der Saum wird homogen, etwas ange- fressen, ist nach ca. 1 Stunde aufgelöst. — Osmiumsäure ' schwärzt den Saum nur gering, lässt auf einem gewissen Stadium die Härchen scharf hervortreten. — Kleinenberg's Pikrinschwefelsäure : Saum wird homo- gen imd verschwindet bald, die Membran darunter bekommt eine poren- ähnliche Streifung. — Alkalien lösen die ganze Zelle bald. — Halb- verdüuntes Seewasser erhält den Härchensaum gut, in Yjproceutiger Kochsalzlösung wird er bald homogen, gegen lOprocentige Lösung scheint er widerstandsfähig zu sein. — In concentrirter wässeriger Sublimatlösung quillt der Saum blasig auf. — In TOprocentigem und absolutem Alkohol, in alkoholischer Sublimatlösung, imd öprocentigem Kali bichromicum werden die Härchen undeutlich und vom Rande her etwas angefressen, der Saum wird feinkörnig und verschwindet schliess- lich. — Die Fettkugeln in den Zellen schrumpfen besonders durch Essigsäure, runden sich aber wieder ab durch destillirtes Wasser. — Durch Sublimat tritt in den Epithelzellen, wohl als Gerinnungsproduct, ein Klümpchen von kleinen stark lichtbrechenden Granulis auf, resistent gegen Fettlösungsmittel, wenig tingirbar. Dr H Henliing {Göttin geil). Müller, W., Zur näheren Kenntniss der Cytheriden. (Wieg- mann's Archiv f. Naturg., 1884, H. 1 p. 1—17). Die bei männlichen Ostracoden vorhandene sog. „Schleimdrüse^^ Zenker's ist nach Weismann -' von zahlreichen sehr fein quergestreiften Muskeln umgeben. Wie Müllee in einer Anmerkung auf p. 7 mittheilt, verschwindet bei jenen das Chitingerüst als durchsichtiger Cylinder um- gebenden Gebilden die Querstreifung in Folge der Einwirkung von saurem chlorsauren Kali, Avährend sie bei Muskeln deutlicher hervor- tritt. Ferner lässt Hofmann''s Blau in der durchsichtigen Masse zahl- reiche'radiär angeordnete Schläuche hervortreten. Dr. H. Ilenhing (Gatt Inge)/). Witlaczil, E. , Entwicklungsgeschichte der Aphiden. (Zeitschr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p. 560—690. [Untersuchungsmethode p. 563 f.]). 0 Concentrationsgrad nickt angegeben. Ref. 2) Weismann in Zool. Anz. Bd. III, 1880, p. 84. 104 Referate und Besprecliungen. II, 1. Die frühen Entwicklungsstadien sowie einzelne Theile zerzupfter Embryonen von den späteren Stadien behandelte Verf. nach Unter- suchung im frischen Zustande (l'/^procentige Salzlösung, welche aber oft schon Schrumpfnngserscheinungen hervorruft) mit Sprocentiger Salz- säure oder Essigsäure, welche beide etwas dotterauflösend wirken '. Bei späteren Stadien ist diese Methode nicht anwendbar, weil dieselben dadurch dunkel und undurchsichtig werden. Br. IL HenJcing (Göttingen). Emery, €., Untersuchungen überLuciola italica L, (Zeit- schr. f. wissensch. Zool. Bd. XL, 1884, p. 338 — 354. [Unter- suchungsmethode p. 342 ff.]). Um den Sitz der das Leuchten erzeugenden Oxydation zu erforschen^, hat der Verf. die lebenden Thiere in einer Osmiumsäurelösung [keine Procentzahl angegeben] abgetödtet, welche häufig schon die Leucht- platten der noch lebenden und Licht entwickelnden Thiere zu bräunen begann. Die zum Zerzupfen bestimmten Theile wurden aus der Osmium- säurelösung in Wasser gebracht, in dem sie langsam macerirten, durch einen hinzugefügten Thymolkrystall Monate lang vor Verfaulen oder Schimmeln beschützt. (Die in Osmiumsäure getödteten Thiere mit ver- dünntem Glycerin oder schwachem Alkohol zu maceriren ergab keine guten Resultate). Bei der Untersuchung zeigte sich alsdann, dass die Osmiumsäure besonders an der Gabelstelle der letzten, blindendendeu Tracheencapillaren innerhalb der Leuchtplatten, an den Capillareu selbst und in den vor der Gabelung liegenden Tracheenzweiglein reducirt war. Es vermuthet daher Emery dort den Sitz des lichterzeugenden Processes. Eine andere Conservirungsmethode bestand in Einspritzen von Sublimatlösung in den Leib der Thiere und dann folgende Anwendung von Alkohol. Br. H. HenMng (Göttmgen). C. Verfebraten. List, J. H., Das Cloakenepit hei von Scyllium canicula. (Sitzber. d. k. Akad. d. Wissensch. Wien Bd. XC Abth. 3, Juli-Heft 1884, 11 pp. m. 1 Tfl.). Zur Isolirung der Becherzellen erwiesen sich besonders brauchbar ') Cfr. anch Brass, Zur Kenntniss der Eibildung und der ersten Ent- wicklungsstadien der viviparen Aphiden. (Zeitschr. f. d. ges. Naturw. Jahrg. 1883). ^) Cfr. über die zuerst von M. Sciiultze zu diesem Zweck angewandte Ueberosmiunisäure diese Zeitschr. ßd, I p. 406 und 514. II, 1. Referate und Besprechungen. 105 MüLLpm'selie Flüssigkeit und Drittel-Alkohol bei mehrtägiger Einwir- kung. Die in Celloidin eingebetteten und mit dem Mikrotom ge- schnittenen Präparate erhielten nach der von Schiefferdecker ' an- gegebenen Methode eine deutliche Doppelfärbung. Die Schnitte wurden zuerst mit Eosin, dann mit Methylgrüu gefärbt und zeigte es sich, dass die Epithelzellen eine schön rosarothe, die Becherzellen dagegen eine grüne Farbe angenommen liatten. Dr. //. Hcnliing (Göthgen). Zawar.vliiii, Th., Einige die Fettresorption im Dünn dar mfe betreffende Bemerkungen (Arch. f. d. ges. Physiol. v. Pflüger Bd. XXXV, 1884, H. 3, 4 p. 145—157). Für Anfänger empfiehlt Verf. folgende Darstellungsmethode der Präparate der in Fettresorption begriffenen Darraschleimhaut aller Thiere (p. 150): Ein Darmstück wird mit Ueberosmiumsäure behandelt -, in Wasser gewaschen , dann in Spiritus ^ einen Tag gehalten. Ein kleines Darmstück wird zwischen Holhmdermark geschnitten und dabei so gelegt, dass die Zotten der einen Hälfte, die Darraserosa der anderen Hälfte des Hollundermarkcylinders zugekehrt sind. Da die Darmzotten Druck gut aushalten, kann man zweckmässig die beiden Hälften des Hollundermarkcylinders mit einem Faden zusammenbinden, und schützt letztere durch unter die Fäden gelegte Messingstäbchen. Das Messer ist beim Schneiden mit Alkohol zu benetzen. Färbung der Schnitte mit Pikrocarmin. Dr. H. HenJcing {Göttinyen). Tizzoui, Metodo per d im ostrare la cariocinesi nel tessuto epiteliale. [Methode zur Demonstration der Ka- ryokinese im epithelialen Gewebe]. (La fisiopa- tologia de 11' epitelio paviraentoso stratificato studiata nel male perforante plantare. — BuUettino delle scienze mediche di Bologna, ottobre — novembre 1884. p. 259). Zur Demonstration der Karyokinese hat sich Verf. der Methode bedient, welche man gewöhnlich als verwerflich bezeichnet hat, nämlich die Fixirung der pathologischen Gewebe mit MüLLER'scher Flüssig- keit, Erhärtung und Conservirung in gewöhnlichem Alkohol und Tinction mit Alauncarmin. Er behauptet, mit dieser Methode karyokinetische •) P. ScHiEFFERDECKKi!, Zur Keuntniss des Baues der Schleimdrüsen (Arch. f. mikrosk. Anatomie Bd. XXIII H. 3, 1884, p. 382). ^) Wie lange wird nicht angegeben, auch fehlt die Procentangabe. Ref. ^) Procentangabe fehlt. Ref. 106 Keferate imd Sesprechungen. II. 1. Figuren erhalten zu haben, welche bezüglich der Güte ihrer Fixirung, bezüglicli der Schönheit ihrer Bilder nichts zu wünschen übrig lassen, und dass sie keineswegs jenen nachstehen, welche mit den für diese Untersuchungen gewöhnlich empfohlenen Methoden erhalten wer- den. Die Färbung mit Alauucarmin hätte die chromatischen Figuren der in Theilung befindlichen Zellkerne mit derselben Deutlichkeit her- vorgehoben, mit der sie bei der Färbung mit Hämatoxylin und mit Safranin hervortreten, sie sei aber jenen beiden Färbungen noch vor- zuziehen sowohl durch die grössere Beständigkeit der Färbung, als auch durch eine andere wichtige Eigenthümlichkeit. Bei den Färbungen mit Hämatoxylin und mit Safrauin treten die karyokinetischen Figuren mit einer gewissen Leichtigkeit hervor durch eine lebhaftere Färbung der- selben im Vergleich zu der der ruhenden Kerne ; bei der Tinction mit Alauncarmin kommt zu einer Differenz in der Intensität des Colorites auch noch eine Differenz im Farbenton : die ruhenden Kerne besitzen eine violette Farbe, die in Theilung befindlichen stechen durch eine schöne rubinrothe Farbe hervor. Verf. weiss sich für diese Differenz keinen trifftigen Grund anzugeben, eine Differenz, welche wahrscheinlich chemische Modificationen andeuten dürfte, welche im Kern auftreten, während sich die morphologischen Modificationen der Karyokinese voll- ziehen. — Zum Schluss bemerkt Verf., dass er sieh nicht des nach den genauen Angaben Grenachek's hergestellten Alauncarmins bedient habe, sondern dass auf Anregung seines Schülers Pisenti er gewöhnlich zu dem nach Gkenacher's Vorschriften hergestellten Präparat ein wenig Natriumsulfat zugefügt habe, um seine färbende Kraft zu vergrössern. G. Martinotü {Torino). Kuptter, C, Ueber denAxencylinder mark haltiger Nerven- fasern. (Sitzber. d. math.-phys. Kl. d. k. bayr. Acad. d. Wiss., 1883, H. 3 [1884] p. 466- 475). Als Resultat seiner Untersuchungen ergab sich dem Verf. folgender Satz: „Der Axenraum enthält die Nervenfibrilleu, die locker im Nerven- serum flottiren. Ein irgend compacter ,Axencylinder' ist ein Artefact" (p. 475). Zur deutlichen Demonstrirung der Nervenfibrillen im Axencylinder empfiehlt Verf. folgende Methode (p. 470): Der Nerv wird auf Kork fixirt, dann 2 Stunden in '/gprocentige Osmiumsäurelösung gelegt, 2 Stunden mit destillirtem Wasser ausgewaschen, in gesättigte wässerige Säurefuchsinlösung übertragen und 24 bis 28 Stunden darin ge- lassen, zum Schluss 6 bis höchstens 12 Stunden (da sonst Entfärbung eintritt) in Alkohol absol. ausgewaschen, mit Nelkenöl aufgehellt, in 11, 1. Referate und Besprechungen. 107 Paraffin eingebettet, — Die Untersuchung ergab, dass nur die Fibrillen im Axencylinder lebhaft roth tingirt waren, während die Zwischenräume zwischen ihnen farblos erschienen oder bei nicht genügendem Aus- waschen eine hellrosa Farbe behalten hatten. Die Fibrillen sind sus- pendirt in einer eiweisshaltigen gerinnungsfähigen Flüssigkeit, bewahren eine gleichmässige Dicke und treten auf Querschnitten als Pünktchen Iiervor, wälu'end sich keine Spur einer „Axencylinderscheide" zeigt. — Ungünstiger erwies sich die Anwendung von Osmiumsäure, Der Ischia- dicus des Frosches wurde 20 bis 24 Stunden in Iprocentige Osmium- säurclösung gelegt. Es zeigte sich nun , dass , während der innere Contour der Markscheide stets intact blieb, Querschnitte des Axen- cylinders ein sehr w^echselndes Caliber hatten. Letztere waren ferner entweder unbestimmt puuktirt oder ein schmächtiger centraler Faden wurde von einem breiten periaxialen Pvaum umschlossen. Färbungen mit Boraxcarmin und verschiedenen basischen Anilinfarben gelangen gar nicht oder nur unvollkommen. Dr. H. Hcnhing {Göttingen). Golgi, Modo di couservare le sezioni di sistema nervoso trattate col metodo della colorazione nera (biero- mato di potassa e nitrato d'argento). [Ein Mittel, Schnitte des Nervensystems zu conserviren, welche nach der Methode der Schwarzfärbung (Kaliumbichromat und Silbernitrat) behandelt sind]. (Pteferat von: Mondino — Sulla strnttura delle fibre nervöse midollate periferiche, — Arch, per le scienze mediche. Vol. VIII, 1884, p, 53). Man weiss, dass eine der grössten Unannehmlichkeiten dieser Me- thode die bedeutende Schwierigkeit ist, die auf vorUegende Art be- handelten Präparate zu conserviren. Makchi hatte bereits beobachtet, dass bei Anwendung von Kreosot, um die Schnitte durchsichtig zu machen, diese sich viel besser halten. Nun schlägt Golgi einen kleinen Kunstgriff vor, um die Haltbarkeit noch viel beträchtlicher zu machen. Dieser besteht darin, das Deckgläscheu zu vermeiden. Man bringt auf den Schnitt einen Tropfen Dammarlack und lässt ihn in ebener Lage, geschützt vor Staub, trocknen. Golgi hat auch Objectträger von Holz in Anwendung gebracht, welche ein viereckiges Loch in der Mitte hatten, das von unten mit einem Deckgläschen geschlossen wird. Auf dieses bringt man den Schnitt, der mit Dammarlack bedeckt wird. Wenn dann letzterer getrocknet ist, so dreht man das Präparat herum und beobachtet es von der Unterseite, die dem Deckgläschen entspricht. Die Oberseite, auf der sich der Lack befindet, kommt natürlich nicht in 108 Referate und Besprechungen. II, 1. Contact mit dem Mikroskoptiscli, da sie unten in der Durchbolirung des Objectträgers gelegen ist. G. Mürtinotti {Torino). D. liucterien, lieferent: Prof. Dr. med. F. BaiinKjartm in Königsberg i. Fr. Plaut, H., Färbungs-Metboden zum Nachweise der fäul- nisserregenden und pathogenen Mikroorganis- men. 2. Auflage. Leipzig (Voigt), 1885. Wenn wir schon die I.Auflage obigen Werk chens als einen brauch- baren Leitfaden bei bacterioskopischen Untersuchungen empfehlen konnten ', so verdient die vorliegende 2. Auflage desselben eine solche Empfehlung in noch weit höherem Masse. Nicht nur die Form ist eine handlichere und bequemere geworden, sondern auch der Inhalt hat wesentliche Bereicherungen und Verbesserungen erfahren-, die Dar- stellung ist weniger aphoristisch, aber trotzdem nicht weniger präcis gehalten, die kleinen sachlichen Versehen der ersten Auflage sind jetzt ausgemerzt, und der Kritik, welche der Verf. den einzelneu Methoden auf Grund eigner Nachprüfung derselben zu Theil werden lässt, können wir nun fast durchweg unsere Zustimmung geben '^. Ausser der correcten Wiedergabe fast ^ sämmtlicher bewährter Uutersuchungsmethoden auf pathogene und nicht pathogene Mikroorganismen enthält Plaut's Büch- lein auch Resultate eigner noch nicht anderweit publicirter Beobach- tungen, z. B. Angaben über das mikroskopische Verhalten der Bacterien nach Einwirkung diverser Säuren, Alkalien und anderer chemischer Stoffe, sowie der Kochhitze, ferner Mittheilungen von Untersuchungen über die Natur der DuNCKER'scheu Actinomycesarten des Schweine- fleisches nebst Publication eigner Färbemethoden sowohl für diese letzteren , als auch für die gewöhnlichen Actinomycesdrusen, — Wir ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 293. ^) Nur Pi.Ain's Urtlieil über die Nacbtheile des vom Ref angegebenen Färbungsverfahrens der Tuberkel bacillen (siehe p. 18 u. 19 der PLAU'r'schen Anweisung) gegenüber der Efnti.icn'schen Methode, können wir nicht ganz theilen, jedoch ist die Differenz zu unwesentlich, um hier näher erörtert werden zu sollen. Ref. • ") Bei den Färbungsmetboden der Hyphomyceten hätte wohl die von Lichtheim empfohlene Met hylenblaufiirbung der pathogenen Aspergillus- und Mucorarten Erwähnung verdient. II, 1- Referate und Besprechungen. 109 sind überzeng-t, dass sich Plaut's Anleitung- in seiner gegenwärtigen Gestalt zahlreiche Freunde unter Studironden und Aerzten, welche sich mit bacterioskopischen Untersuchungen zu bescliäftigen wünschen, er- werben wird. Wig'aud, Albert, E n t s t e h u n g u n d F e v m e n t \\ i i- k u n g der B a c- terien. Vorläufige Mittheilung. Marburg (Elwert) 1884. Der Verf. ist, entgegen der allgemein herrschenden Anschauung, welche die Bacterieu als niedere pflanzliehe Organismen ansieht, die, gleich den höher entwickelten Pflanzenarten, nur aus ihresgleichen neu entstehen können, der Ansicht, dass die Bacterien aus einer ,.Ana- morphose" des Protoplasmas hervorgehen, und sucht diese Ansicht theils durch experimentelle, theils durch unmittelbare mikroskopische Beob- achtungen zu stützen. Da die erstereu theils keine anderen sind, als solche, welche anderen Untersuchern, bei Anwendung der, anerkannter- masseu keineswegs leichten und einfachen, nöthigen Cautelen gerade die entgegengesetzten Resultate ergeben haben, wie dem Verf., theils, ■wenigstens der gegebenen ganz cursorischen Beschreibung derselben nach, nicht zuverlässig genug erscheinen, die letzteren dagegen, nach der vorhandenen Schilderung derselben, kein sicheres Urtheil über ihre Bedeutung zulassen, so erscheint es dem Ref. geboten, zunächst nicht näher auf den Inhalt der vorläufigen Mittheilung einzugehen, sondern erst die ausführliche, hoffentlich mit ganz genauen Beschreibungen und Abbildungen versehene Abhandlung abzuwarten. Kaatzer, P., Die Technik der Sput umuntersuchu ng auf Tub erkelbacill c n. Wiesbaden (Bergmann) 1884. Verf. giebt in obigem Schriftchen eine wesentlich für praktische Aerzte bestimmte ausführliche Anweisung über Untersuchungen des Sputums auf Tuberkelbacillen nach KocH-EHELiCH'schen Principien. Unter den zum Färben der Tuberkelbacillen geeigneten Farbstoffen giebt er dem G e n t i a n a v i o 1 e 1 1 den Vorzug '. Weichselbauiu, A., Ueber Tuberkelbacillen im Blute bei allgemeiner a c u t e r M i 1 i a r t n b e r c u 1 o s e. (Wiener med. Wochenschr. 1884, No. 12 u. 13). Die Modification des EHELicn'schen Verfahrens zum Nachweise •) Aum. Nach des Ref. vergleichenden Untersuchungen (cfr. diese Zeit- schrift Bd. I, 1884, p. 51 ff.) besitzt jedoch das IMethylviolett als Filrbungs- mittel für Tuberkelbacillen mindestens denselben, wenn nicht einen noch höheren Werth als das Gentianaviolett. XIO Referate und Besprecliungen. II, 1. der Tuberkelbacillen, die Verf. vorschlägt und deren er sich n. a. auch zur FeststeUung seiner in obiger Abhandlung niedergelegten wichtigen Resultate über das Vorkommen von Tuberkelbacillen im Blute bei menschlicher Miliartuberculose bedient hat, ist folgende : Die Deck- gläschenpräparate werden in üblicher Weise in Anilinölwasser-Fuchsin unter Erwärmen getärbt, darauf in Wasser gewaschen und nun unmittel- bar, ohne vorherige Entfärbung in Säure oder Alkohol für eine halbe bis eine Minute in eine gesättigte alkoholische Methylenblaulösung ge- legt, bis sie beim Herausnehmen ganz blau erscheinen. Die ganze Färbungsprocedur ist in 5 bis G Minuten beendet und hat ausser der grösseren Einfachheit noch den Vortheil, dass die bei der Salpetersäure- behandlung sich nicht selten einstellenden sehr störenden FarbstofF- niederschläge vermieden und ein späteres Abblassen der Tuberkelbacillen hintangehalten wird ', Hiieppe, F., Untersuchungen über die Zersetzungen der Milch d u r c h M i k r o o r g a n i s m e n. (Mittheil. a. d . Kaiserl. Gesundheitsamte Bd. II, 1884, p. 309 ft\). Aus dieser ebenso umfangreichen als gehaltvollen und für die Grundfragen der Gährungslehre wichtigen Abhandluug kann an dieser Stelle nur Folgendes hervorgehoben werden : Verf. stellte sich die Auf- gabe, die noch nicht endgültig gelöste Frage nach den Organismen der verschiedenen Zersetzungen, welche die Milch ausserhalb des lebenden Thierkörpers erleidet, auf dem Wege des von Koch in die Technik eingeführten Verfahrens der Reincnltur auf festen durchsichtigen Nähr- medien zur Entscheidung zu bringen. In dieser Hinsicht beschäftigte er sich zunächst mit den Organismen der Milch säure gährung. Wenn man aus Milch, welche in zunehmender Säuerung und dadurch herbeigeführter Gerinnung begriffen ist, mit einer geglühten Platinnadel auf mit Nährgelatine bestrichene Objectträger strichweise impft, so sieht man in den Impfstrichen vom zweiten Tage ab bei Zimmertemperatur feine weisse Pünktchen oder Striche auftreten. Jedes solches Pünkt- chen entspricht einer aus einem einzigen Keime hervorgegangenen Colonie ; die Striche entstehen durch Confluenz solcher Colonien, wie man schon bei 40facher Vergrösserung deutlich erkennt. Mit zuneh- mender Grösse treten in der Art des Wachsthums Diiferenzen zwischen den verschiedenen Colonien der ersten Aussaat auf, welche auf die Gleich- ') Anm. Ref. ist (gleich Fiuedländeh, Fortschr. der Mediciu Bd. II, 1884, No. 9 p. 329) der Meinung, dass es bei Untersuchungen zu rein diagnostischen Zwecken rathsamer sein dürfte, die Entfärbnng durch Säure beizubehalten. II, 1. Referate und Besprechungen. 111 artigkeit b e s t i m m t e r Coloniengruppen zu scbliesseu gestatten. Ganz constant macht sich hierbei eine Organismenspecies bemerklich, deren Colonien, wenn sie ganz isolirt innerlialb der Gelatine liegen, bis zur Grösse eines kleinen Stecknadelknopfes heranwachsen, bei mehr ober- flächlicher Lage sich dagegen, sobald die Colouie die Oberfläche erreicht hat, mehr in die Fläche ausbreiten und die Gestalt und das Aussehen von flachen, weissen porzellanähnlichen glänzenden Knöpfchen annehmen, deren grösste etwa Linsengrösse erreichen. Die Ränder dieser ober- flächlichen Colonien sind nur wenig gezackt, fast glatt. Sind viele Keime der betreftenden Organismen in einem Impfstrich vorhanden, so berühren sie sich beim Auswachsen und es entstehen schmale Streifen mit buchtigen Begrenzungen. In der Nährgelatine machen sich dabei keine abnormen Färbungen kenntlich. Entnimmt man nun unter Con- trole des Präparirmikroskopes mit der Platinnadel eine Spur aus einer der geschilderten Colonien und verimpft sie auf (durch strömende Dämpfe von ca. 100" C.) sterilisirte Milch, so tritt constant bei Rrüt- ofentemperatur Milchsänrebildung mit charakteristischer Coagulation darin ein, und dieselbe specirische Wirkung übt die beschriebene Pilzform auch in ihren weiteren Reinculturen (auf Fleischwasserpepton resp. Milchserumgelatine noch), bis zur 78sten Umzüclitung derselben, aus. Die Individuen dieser auf dem genannten Wege isolirten Organismen der Milchsäuregährung erweisen sich, mit Hülfe der Anilinfärbungen und der Oelimmersion untersucht, als kurze, plumpe Stäbchen von 1— 17 jj, Länge und 0-3— 0*4 jji Dicke; in verschiedenen Zuckerlösungen zeigen sie deutliche endständige Sporenbildung und im hohlen Objectträger im hängenden Tropfen beobachtet erweisen sie sich als bewegungslos. Neben diesen echten Milchsänrebacillen, welche constant in in spontaner Milchsäurebildung begriftener IMilch als die vorherrschenden Mikroor- ganismenfurmen zu erkennen sind, entwickeln sich bei der ersten Aus- saat von säuernder Milch auf Nährgelatine auch noch andere ]\likroor- ganismen, besonders häufig auch ein anfangs ebenso wie der Milchsäure- bacillus wachsender Mikrokokkus ; dieser, sowie die anderen accidentellen Bacterienformen lassen sich aber durcli successive Reinculturen von den Milchsänrebacillen völlig trennen, und erzeugen, auf sterilisirte Milch übertragen, niemals in dieser Milchsäuregährung. — Hinsichtlich des Verhaltens der Milchsäurebacillen gegen Temperaturen ermittelte Verf. bei Versuchen im D'AESoNVAL'schen Thermostaten, dass zwischen 10 und 12" C. die Entwicklungsfähigkeit beginnt, um zwischen 35 " und 42" das Maximum zu erreichen; zwischen 45-3 und 45-5" C. hört die Entwicklung der Milchsänrebacillen und damit auch ihre specifische 112 Refei-ate und Besprechungen. II, 1. Wirksamkeit auf. Ueber die sonstigen Entwicklungs- und Lebensbedin- gungen und physiologisch - chemischen Eigenschaften der Milchsäureba- cillen liat Verf. die eingehensten Untersuchungen angestellt, auf deren Berichterstattung aber hier verzichtet werden muss, nur kurz erwähnt mag werden, dass die Milchsäurebacillen in geringem Grade die Fähig- keit, diastatisch zu wirken, dagegen keine peptonisireuden Eigenschaften besitzen und dass nach den Versuchen des Verf. die Milchsäurebacillen zur Entfaltung ihrer specifischen Thätigkeit unbedingt des Luftsauerstofts, wenn auch nur geringer Mengen desselben, bedürfen. Des Weiteren berücksichtigte Verf. bei seinen Untersuchungen die 0 r g a n i s m e n d e r B u 1 1 e r s ä u r e g ä h r u n g. Wie schon verschiedene frühere Beobachter festgestellt und wie Verf. bestätigt, kann Milch, welche gegen Milchsäurebildung sicher geschützt ist, nachträglich doch gerinnen bei zunächst unveränderter Anfangsreactiou , die später in alkalische Reaction übergeht. In solchen Fällen fand Verf. stets und nur grosse Bacillen, „welche sich unzweifelhaft als Buttersäurebacillen erwiesen". Die Untersuchungen, welche Verf. in Betreff dieser Bacillen augestellt hat, sind wesentlich chemischer Natur, und können des- halb hier nicht zur Sprache gebracht werden. Dagegen bewegen sich die Experimente des Verf. über die Organismen der blauen Milch wieder grossentheils auf bacterioskopischem Boden. Impft man blaue Milch strichförmig in Nährgelatine, so bilden sich in zwei Tagen ganz ähnliche Pünktchen und Striche, wie oben bei Besprechung der Verimpfiing von saurer Milch angegeben. Einzelne dieser Punkte er- scheinen aber nicht rein weiss, sondern haben einen Stich ins Gelbliche, sind bei durchfallendem Lichte dunkler, und in der Umgebung derselben nimmt die Gelatine einen leichten Stich ins Grünliche an. Wenn man die verschiedenen, aus spontaner blauer Milch hervorgehenden Pilzco- lonien auf sicher sterilisirte Milch überträgt, so wird nur die Milch blau, welche mit den beschriebenen gefärbten Colonien geimpft ist. Impft man neue Gelatinestreifen mit Theilen aus diesen Colonien, so treten jetzt nur die farbig werdenden Punkte und Striche auf, die all- mählich fast doppelt so gross werden, Avie die Colonien der Milchsäure- bacillen. Eine Verflüssigung der Gelatine tritt dabei nicht ein, wohl aber erhält die ganze Gelatine eine von Tag zu Tag sich mehr aus- dehnende, rein grüne oder gelblichgrüne, bei Verwendung von Milch- serum als Zusatz, graublaue Farbe. Die Culturen wurden in 133 Um- züchtungen fortgesetzt, ohne eine Veränderung des Aussehens oder der specifischen Wirkung zu erfahren. Bei der mikroskopischen Untersuchung der Gelatinereinculturen, II, 1. Referate und Besprecliungen. 113 erweist sicli der die Milch bläuende Organismus als ein echter Bacillus, der sich durch Theilung und Sporenbildung fortpflanzt und immer be- wegungslos ist. In sterilisirter Milch, welche durch Impfung mit Rein- culturen der Pigmentbacillen gebläut ist, constatirt man nur Formen von Organismen, welche in den Entwicklungskreis dieser Bacillen hin- eingehören ; solche Milch wird nie sauer, sondern im Gegentheil all- mählich alkalisch. Wenn Neelsen * in blauer Milch auch noch andere Mikroorganismenformen, als die den besprochenen Pigmentbacillen zu- gehörigen, auftreten sah, und letzteren ausserdem die Eigenschaft, die Säuregährung einzuleiten, zuschreibt, so beruht dies darauf, dass Neelsen nicht mit Reinculturen, sondern mit Massenculturen arbeitete und statt sterilisirter Milch nicht sterilisirte verwendete und in Folge dessen kein reines Bild der Vorgänge bei dem Blauwerden der Milch erhalten konnte : Neelsen hat es eben nicht allein mit den Pigmentbacillen, sondern auch mit den Milchsäurebacillen und anderen Mikroorganismen und deren Wirkungen zu thun gehabt. Der durch die Pigmentbacillen aus dem Caseiu der Milch gebildete Farbstoff hat an sich ein schiefergraues bis mattblaues Aussehen, erst wenn gleichzeitig Säure vorhanden, wie dies bei dem Blauwerden nicht sterilisirter Milch der Fall ist, wird der Farbstoff, und zwar durch die Säure, in intensives Blau übergefiihrt. Verf. prüfte sodann das Verhalten der Pigmentbacillen zu anderen Nähr- substraten : CoHN'sche Flüssigkeit, Althaeadecoct, Harnstoff-, Asparagin-, Leuciu-, Pepton-, Glycerin-, Zucker -Lösungen, und sterilisirte Kartoftel- scheiben. In den meisten dieser Nährsubstanzen traten unter fortschrei- tender Entwicklung, resp. auch Sporenbildung der specifischen Pigment- bacterien verschiedene Farbenveränderungen (meist grüne) auf; der grüne Farbstoff lässt sich durch Oxydationsmittel in den blauen um- wandeln. Die Angabe von Neelsen, dass die Mittel, in denen die Ba- cillen keine blaue Farbe hervorrufen, ungefärbt bleiben, ist demnach nicht haltbar. Verf. ermittelte nach einer Reihe von Versuchen, dass eine Lösung von: neutralem m i 1 c h s a u r e m Ammoniak 0'5 — 1 Procent saurem phosphorsanrem Knli 0-2 — 0'5 Procent Magnesiumsulphat 0-05 — 0*25 Prooent Calciumchlorid OOl- 0-025 Procent das beste Medium ist zur Entwicklung von blauem Farb- stoff durch die L eb en s t hätigkei t der besprochenen Bacillen. 1) Neelsen, Studien über blaue Milch (Cohk's Beitr. z. Biol. d. Pfl. Bd. III Heft 2, 1880, p. 187). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 1. 8 114 Referate und Besprechungen. II, 1. Ausser den die Milch bläuenden Organismen, untersuchte Verf. noch einige andere pigmentbildende Bacterien hinsichtlicli ihres Ver haltens zu Milch und einigen der anderen oben erwähnten Nährsubstrate und zwar wiederum auf dem Wege, dass er dieselben zunächst in Rein- culturen auf festem durchsichtig-en Nährboden isolirte und sie dann auf die sicher sterilisirten Medien übertrug. Die hier in Betracht kommenden Mikroorganismen waren die „bekannten Bacillen des grünen Eiters", einige der bekannteren pigmentbildenden Mikrokokken, sowie zwei vom Verf. im Wasser vorgefundene Pigmentbacillen , der eine einen grünen, der andere einen violetten bis blauschwarzen Farbstoff producireud. Das Resultat dieser noch nicht in allen Theilen abge- schlossenen Untersuchungen des Verf. war dieses, dass alle diese Pigmeutbacterieu, trotz vielfacher Aehnlichkeiten in einzelnen Phasen ihrer Entwicklung und ihrer Wirkung auf die Nährmedien, doch sowohl hinsichtlich des gesammten Verhaltens ihrer Reinculturen auf und zur Nälirgelatine, als auch durch ihre biologische Gesammtleistung derart von einander verschieden sich erwiesen, dass sie bis auf Weiteres als besondere Species betrachtet werden müssen. lieber die „schleimige Milch" konnte Verf. noch nicht genügende Beobachtungen anstellen ; dagegen experimentirte Verf. mit dem „Kar. toffelbacillus", einen auf Kartoffelscheiben mit grosser Coustanz eigen- thümliche Schleimmassen erzeugenden stäbchenförmigen Microben, welcher im Gegensatz zu den bisher besprochenen Stäbchenbacterien die Nähr- gelatine verflüssigt. Auf sterilisirte Milch wirkt dieser z. Th. ähnlich wie der Buttersäurebacillus, verwandelt aber, was dieser letztere nicht thut, die Rahmschicht in eine schmierige, fadenziehende Masse, welche reichlich von den Kartoffelbacilleu durchsetzt ist, ruft also in der That Schleimbildung aus der Milch hervor. Da jedoch bei der spontanen Verschleimung der Milch die Schleimbildung im Milch s er um auftritt, so kann dieser „Kartoffelbacillus" nicht als der Erzeuger der gewöhn- liclien „schleimigen" Milch angesehen werden. Schliesslich hat der Verf. auch das Oidium lactis, den Milchpilz /Cax' £^o)(r]V, welcher noch vielfach als der Erreger der Milchsäure- gährung betrachtet wird, auf Nährgelatine cultivirt und die Wachs- thumsverhältnisse und chemischen EinAvirkungen desselben darauf, sowie auf und zu verschiedenen anderen Nährstoffen genau festgestellt. Rei.iculturen von Oidium lactis erzeugen auf sterilisirter Milch einen weissen dichten Pilzrasen; die Milch bleibt flüssig, wird nicht sauer, sondern nimmt im Gegentheil eine schwach alkalische Reaction an, so dass also die Auffassung des Oidium lactis als „Milchsäureferment" als II, 1. Referate und Besprechungen. 115 vollkorameu irrig- gekennzeichnet ist. — Inipfnngs-, Injections- und Fütteriingsversucbe mit Reinculturen von Oidiuni lactis bei Thieren blieben erfolglos ; desgleichen vermochte Verf. durch wiederholte Impf- versuche, welche er mit Bezug auf die Anschauung von Grawitz ', wonach das Oidium lactis den Erreger der bekannten 3 Dermatomy- kosen — des Favus, Herpes tonsurans und der Pityriasis versicolor — darstellt, an sich selbst vornahm, keine HautafFectionen zu erzeugen. Oaffky, ZurAetiologie des Abdominaltyphus. Mit einem Anhange: Eine Epidemie von Abdominaltyphus unter den Mannschaften des 3. Brandenburgischen Infanterie-Regiments Nr. 20 im Sommer 18 8 2. (Mittheil. a. d. Kaiserl. Gesundheitsamte Bd. II, 1884, p. 372 ff.) Der Verf. berichtet zunächst über die Resultate der mikroskopischen Untersuchung der Organe von 28 Typlmsleichen auf Mikroorganismen. Sein Untersuchungsverfahren war folgendes : die Schnitte der in absolutem Alkoliol gehärteten Organe verblieben 20 bis 24 Stunden in einer tief- blauen undurchsichtigen Farbflüssigkeit, welche durch Eingiesseu von gesättigter alkoholischer Methylenblaulösung 2 in destillirtes Wasser zu jeder Untersuchung frisch bereitet wurde. Die gefärbten Schnitte wurden in destillirtem Wasser abgespült, in absolutem Alkohol voll- ständig entwässert und nach Aufhellung in Terpentinöl in Canadabalsam untersucht. Zum Aufsuchen der Bacterien-Heerde bediente sich Verf. des Systems AA, und Ocular IV, zur genaueren Untersuchung der homogenen Immersion y,.,, Ocular II (Zeiss) unter Benutzung des ABBE'schen Beleuchtungsapparates. In 26 Fällen unter 28 wurden mit Hülfe dieser Methode in den inneren Organen — Mesenterialdrüsen, Milz, Leber, Nieren — Haufen von Bacillen entdeckt, welche die Kriterien der EBERTH-KocH'schen Typhusstäbchen, welche letzteren Verf. demnach allein als die echten Typhusbacillen ansieht, während er den von Klfbs in der typhösen Darmwand beschriebenen Bacillen- formen die Bedeutung als „Typhusbacillen" abspricht^. Auch bei ') Grawitz in Virchow's Archiv Bd. LXX, p. 546. ^) Methylviolett, Gentianaviolett , Bismarckbraun , Fuchsin, Hämatoxylin eignen sich ebenfalls, wenn auch weniger trefflich, als Farbmittel; durch Er- wärmen der Farblösungen lässt sich die Färbiuigszeit erhel)licli abkürzen. •■') Nach der Meinung des Ref. geschieht dies, zum Thcil wenigstens, mit Unrecht; Klees hat als der Erste in der typhösen Darmwand Bacillen als einen regelmässigen Befund beschrieben, welche sich von den EBERTH-Kocii'schen Stäbchen durch Nichts, als eine etwas grössere Länge unterscheiden, gleich diesen ebenfalls, wie leicht zu constatiren, innerhalb ganz frischer, unzerfallener typhöser 8* 116 Referate und Besprechungen. II, 1. Anwendung des Färbungsverfalirens des Verf. fällt der Farbton der Typhusbacillen oft nicht so intensiv aus, wie bei anderen Bacillen, z. B. Milzbrandbacillen, und die blaugefärbten Präparate blassen nicht selten ziemlich rasch ab ; für Dauerpräparate empfiehlt sich daher im allge- meinen mehr die Bismarckbraunfärbung. Gleichzeitig mit diesen seinen mikroskopischen Untersuchungen, welche den bisher noch ausstehenden Nachweis der Constanz des Vorkommens der als Typhusbacillen bezeichneten Mikroorganismen beim typhösen Process erbrachten', unterzog sich Verf. der Aufgabe d e r Züchtung der Typhusbacillen ausserhalb des Körpers, und es gelang ihm, diese zwar oft in Angriff genommene, aber bisher nicht befriedigend gelöste Aufgabe auf das Vollkommenste zu erledigen. Wiederum war es der von Koch in die Technik eingeführte feste Nähr- boden, welcher zum Ziele verhalf. Verf. verfuhr bei seinen Züchtungs- versuchen folgendermassen : Unter allen, an Koch's bekannte dies- bezügliche Vorschriften sich haltenden Cautelen, wurden kleine Mengen von Blut resp. Gewebssubstanz aus der Typlmsmilz (resp. -leber) — 13 Mal Milz, 1 Mal Leber — in erstarrte, auf sterilisirten Objectträgern ausgebreitete Fleisch wasser-Pepton- Gelatine in Form von Impfstrichen übertragen. Nach der Aussaat wurden die Objectträger in feucht ge- haltenen Glasglocken bei Zimmertemperatur aufbewahrt. Schon nach 24 Stunden zeigten sich in den Impfstrichen leichte, weissliche Trü- bungen , welche nach weiteren 24 Stunden zwar au Intensität zuge- nommen hatten, aber noch auf die Impfstriche localisirt blieben. Auf hohlen Objectträgern in einem Tröpfchen destillirten Wassers untersucht erwiesen sieh die in den Culturen zut Entwicklung gekommenen Organis- men als Stäbchen von exquisiter Beweglichkeit, welche der Form nach den in dem Aussaatmaterial enthaltenen Typhusbacillen ent- sprachen ; nur hinsichtlich der Länge überboten die gezüchteten Formen zuweilen die letzteren, indessen wurde an den längereu Fäden an ge- färbten Deckgläschenpräparaten Zusammensetzung aus kürzeren Gliedern wahrgenommen. Schon am vierten Tage hatten die beschriebenen Infiltrate vorkommen, etc. Diesen Bacillusformcn die Bedeutung von „Typhus- bacillen" «treitig zu machen, Hegt demnach wohl kein stichhaltiger Grund vor. (Man vergl. hierüber des Ref. Auseinandersetzungen in dessen Aufsatz: die pathogenen Schizomyceten. Deutsche Medicinalzeitung 1884 Nr. 6i.) Ref. ') Von den beiden Fällen mit negativem Bacillenbefund in den inneren Organen zeigte der eine die charakteristischen Typhusbacillen reichlich in der Darmwand, der andere gänzlich negative betraf einen bereits abgelaufenen Typhus. II, 1. Referate und Besprechungen. 117 Cultiiren die Hölie ihrer Entwicklung erreicht; eine Ausbreitung über die Impfstriclie fand nach der Tiefe zu gar nicht, au der Oberfläche nur in geringem Grade statt. Eine Verflüssigung der Gelatine trat dabei niemals ein. Zu bemerken ist, dass bisweilen noch durch diese Culturversuche Bacillen nachgewiesen wurden in Fällen, in denen die mikroskopische Untersuchung, anfsmgs wenigstens, im Stich gelassen hatte. ' Auf Schnittflächen von Kartoffeln, deren Oberfläche in einer 5%o Lösung von Sublimat desinficirt nnd die sodann im Dampf- Sterilisirungs-Apparate gekocht waren, wurden nun weiterhin geringe Mengen dieser Gelatinecultureu aufgestrichen. Makroskopisch Hess sich im Laufe der folgenden Tage auf den geimpften Kartoffelflächen keine sehr augenfällige Veränderung wahrnehmen, dagegen zeigte sich, wenn man nach 48 Stunden mit der Platinnadel von der besäten Fläche Theilchen zur mikroskopischen Untersuchung wegnahm, die gesammte Oberfläche auch au den nicht besäten Partien ganz gleichmässig über- wachsen mit zahllosen Mengen der geschilderten Bacillen. Diese Art des Wachsthums auf Kartoffelscheiben ist für die Typhusbacillen ganz charakteristisch. Auf nach Koch's Vorschrift präparirtem coagulirten Hammelblutserum bilden die Typlmsbacillen einen grauweisslichen, etwas durchschimmernden Belag und trüben das im unteren Theile des Gläschens sich ansammelnde Condensationswasser; sie wachsen auf diesem Culturboden nicht zu längeren Scheinfäden aus und besitzen auch etwas geringere Dimensionen als auf der Gelatine. Auf diese oder auf die Kartoffelflächen zurückverimpft, nehmen sie die früheren Charaktere des Wachsthums und der Form wieder an. In Form von Impf stichen mit der Platinnadel in das erstarrte Blutserum übertragen, wachsen die Bacillen ebenfalls lebhaft, aber nur im Bereich der Stiche ; eine Verflüssigung des erstarrten Serum findet dabei niemals statt. Auch in flüssigem sterilisirten Blutserum, im Fleischinfus und in einigen pflanzlichen Nährlösungen (Althaeadecoct, Mohrrübensaft, Kar- toffelsaft etc.) gelang es dem Verf, eine Vegetation von, allerdings nicht so kräftig, wie auf der Nährgelatine imd den gekochten Kartoffel- scheibeu entwickelten, Typhusbacillen zu erzielen. — Nach des Verf. ') Die Fortzüchtung der Objectträgerculturen geschah in mit Nährgelatine versehenen Reagensgläschen; um den Impfstich bildete sich hier in der er- starrten Gelatine eine in der Tiefe auf den Impfstich beschränkt bleibende undurchsichtige Masse aus, welche auf der Oberfläche vom Impfstiche aus sich in Form eines an Intensität allmählig zunehmenden grauweissen Belages bis zum Rande ausbreitete. IIQ Referate uml Besprechungen. II, 1. Untersuchungen bilden die Typhusbacillen schon im lebenden mensch- lichen Körper unzweifelhaft Sporen; auch in den künstlichen Culturen findet Sporeubildung statt, jedoch nicht bei gewöhnlicher Zimmer- temperatur : Zufolge der vom Verf. im D'AßsoNVAL'schen Thermostaten vorgenommenen Prüfungen, scheint 20'' C. die untere, 42'' C. die obere Grenze zu sein, innerhalb deren die Typhusbacillen Sporen zu pro- duciren vermögen. Als die geeignetsten Temperaturen für die Sporen- bildung erweisen sich 30 bis 40'' C. Die Sporen entwickeln sich eud- ständig und zwar fast stets nur an dem einen Ende des Stäbchens. — Aus den Dejectionen sowie aus dem Blute der Typhuskranken ist es bisher nicht gelungen, die Typhusbacillen in Reinculturen zu ge- winnen. Die Thierinfectionsversuche mit den reincultivirten Bacillen (angestellt au 5 Affen, 16 Kaninchen, 13 Meerschweinchen, 7 weissen Ratten, 11 weissen und grauen Hausmäusen, 4 Feldmäusen, 2 Tauben, 1 Huhn, 1 Kalb) sind sämmtlich ohne positives Resultat geblieben. Trotzdem ist Verf. — und zwar nach der Ansicht des Ref. auch mit vollem Recht — der Ansicht, dass die Typhusbacillen nach den über ihr Vorkommen und ihre Verbreitung im Körper, ihre Lebensgeschichte etc. nunmehr bekannten Thatsachen als Erreger'des typhösen Processes zu betrachten sind. — Die im Anhang beschriebene Epidemie von Abdominaltyphus führt Verf. auf Infection seitens des von einer Latrine her mit Typhuskeimen verunreinigten Casernenbrunnens zurück; aller- dings gelang es ihm nicht, in dem Wasser des verdächtigen Brunnens, in dem Latrineninhalt u. s. w. mit Hülfe des Kocn'schen Reincultur- verfahrens Typhusbacillen nachzuweisen. IJ, Ki'ijptiMjamen Haiiseu, Emil Chr., Reche rohes sur la physiologie et la morphologie des ferments alcooliques. II. Les asco- spores chez le genre Saccharomyces. (Resume du Compte- rendu des travaux du Laboratoire de Carlsberg vol. II 2. livr.). Copenhague 1883. Bei sorgfältiger Prüfung der Methoden, welche Pasteur in seinem berühmten Werke „Etudes sur la biere" für das Studium der Arten der Gattung Saccharomyces mitgetheilt hat, fand H. sehr bald, dass dieselben unzureichend seien und niemals zum Ziele führen könnten, da durch sie wohl die für dieses Studium nöthigen Culturen während ihrer Dauer in ausgezeichneter Weise vor der Invasion fremder Organismen geschützt 11, 1. Keferate und Besprechungen. 119 werden, nicht aber die Möglichkeit gegeben ist, dieselben auch mit reinem Materiale zu beginnen. Reines Material für die ins Werk zu setzenden Reinculturen zu ge- winnen, war H's. erste Sorge. Zu diesem Zwecke wendete er zunächst folgendes Verfahren an: Er führte von der Hefe,, von welcher er eine Reincnltur zu machen gedachte, eine kleine Menge in einen zweihalsigen Glaskolben ein, in dem eine bestimmte Menge Wasser abgekocht und wieder abgekühlt worden war, schüttelte behufs gleichmässiger Ver- theilung der Hefezellen im Wasser den Kolben tüchtig durch und ent- nahm dann Proben, um durch Zählung mittels des Hämatimeters die Zahl der in einem Cubikcentimeter der Mischung befindlichen Hefezellen festzustellen. Darauf goss er so viel sterilisirtes Wasser zu, dass auf 1 cc der Mischung 0*5 Zellen kommen mussten. Indem er nun in eine Reihe mit sterilisirter Nährflüssigkeit versehene Glaskolben, in jeden 1 cc der Mischung aussäete, war anzunehmen, dass die Hälfte davon je eine Zelle erhalten werde, von der eine Reincnltur ihren Ausgang nehmen konnte. Das Verfahren gab ganz leidliche Resultate, hatte aber auch manche Nachtheile. Es war niemals die absolute Gewissheit vor- handen, dass der Kolben mit der definitiven Mischung wirklich die Zell- menge enthalte, die der Calcül herausgebracht hatte (es konnte vor- kommen, dass er gar keine enthielt oder aber viel mehr einschloss), da es ja sehr schwer ist, eine gleichmässige Vertheilung der Zellen in dem stark verdünnten Gemisch zu erhalten und die Schwierigkeit um so grösser wird, je kleiner die Zahl der Hefezellen im Verhältniss zu der Wassermenge ist, in der sie sich befinden. Um zeitraubende Ver- dünnungen zu vermeiden , empfiehlt Verf. die Anwendung des Zähl- apparates von Hayem und Nachet, dessen Benutzung zu eben be- sprochenem Zwecke er mittlerweile ausführlicher in Band I unserer Zeitschrift ' auseinandergesetzt hat, weshalb wir heute darüber hinweg- gehen wollen. Am besten ists, regelmässig zwei Zählungen nach der gedachten Methode vorzunehmen. Sobald sie übereinstimmende Resultate geben, wird ein Tropfen, ähnlich dem zur Zählung verwendeten, in einen Kolben mit einer vorher abgewogenen Menge sterilisirten Wassers ge- bracht, und damit ist eine Aussaatflüssigkeit hergestellt, von welcher man wenigstens annähernd die Zahl der Hefezellen kennt, die sie ent- hält. Besät man mit Nährflüssigkeit versehene Kolben mit je einem Tropfen davon, zeigen die Versuchsergebnisse, dass einige derselben immer je eine Zelle erhalten haben. Ob ein Kolben eine oder mehrere ') Cfr. diese Zcitschr. Bd. I, 1884, p. 191 S. 120 Referate und Besprechungen. II, 1. Zellen bei der Aussaat erhalten hat, ergeben die Hefeflecke, die sich im Kolben bilden. Von dem Augenblicke an, wo sich in den besäeten Kolben eine fürs blosse Auge erkennbare Entwicklung merklich macht, beobachtet man leicht, dass in einigen mehrere, in anderen nur je ein Hefefleck auftritt. Diese Flecke erscheinen anfangs in der noch klaren Nährflüssigkeit scharf begranzt und, je nachdem man sie bei auffallendem oder durchgehendem Lichte betrachtet, dunkel oder hell. Dabei schwimmen sie niemals in der Flüssigkeit, sondern hängen immer den Wänden an. Bleiben die Kolben, ohne geschüttelt zu werden, der ge- wöhnlichen Zimmertemperatur ausgesetzt, lässt sich nach einigen Tagen leicht constatiren, ob ihre Zahl wächst oder nicht. Nach und nach werden sie grösser; die Flüssigkeit sättigt sich mit Kohlensäure ; kleine Schauminseln entstehen an der Oberfläche; die Gährung macht sich deutlich bemerklich, und die dadurch hervorgebrachte Bewegtheit und Trübung bereiten der makroskopischen Untersuchung ein Ende. Zur weiteren Verwendung gelangen bloss die Kolben, welche während der Beobachtungsdauer nur einen Hefefleck zeigten, da diese sichere Reinculturen einschliessen, deren jede aus einer Zelle hervorgegangen ist, obwohl gewiss auch manche Kolben mit mehreren Vegetationscentren bei der Aussaat nur eine Zelle erhalten haben mögen, von deren durch Knospung entstandenen Colonien sich infolge einer geringen Erschütte- rung einzelne Zellen abgetrennt haben und zu neuen Vegetationscentren geworden sind. — Die Probe auf die Sicherheit der angegebenen Methode machte Verf. mit dem Saccharomyces apiculatus, einer Hefe, welche durch ihre bestimmte Form und ihre physiologischen Eigenthümlichkeiten gut charakterisirt ist. Zellen dieser Hefe waren im Aussaatwasser mit ge- wöhnlicher Brauereihefe gemischt. Das betreff'ende Aussaatwasser wurde in eine Reihe Kolben mit sterilisirter Bierwürze gesät, und nach Beendi- gung des Versuchs enthielten einige der besäten Kolben nur Zellen, denen der Brauereihefe gleich, andere nur die citronenförmigen Zellen des Saccharomyces apiculatus. Nachdem Verf. in Berlin gesehen hatte, welche Resultate Koch bei seinen bacteriologischen Untersuchungen durch Benutzung solider Substrate (Kartoifeln, Nährgelatine) erzielt, versuchte er ein ähnliches Verfahren bei den Hefeuntersuchungen anzuwenden. Um zu sehen, ob auf diese Art wirklich Reinculturen möglich seien, wählte er wiederum zwei im Mikroskop leicht unterscheidbare Hefearten, nämlich S. apicu- latus und S. cerevisiae und trug sie in ein Gemisch von Gelatine und Bierwürze über, das in einem Wasserbade von 30 35' C. flüssig er- halten wurde. Nach gehörigem Durchschütteln der Mischung, um inner- II, 1. Referate und Besprechungen. 121 halb derselben eine gleiclimässige Vertheilimg der Hefezellen herbeizu- führen, wurde dieselbe auf eine vorher flambirtc Glasplatte ausgegossen und unter eine feuchte Glocke gestellt. Nach 2 bis 3 Tagen traten darauf ganz deutlich kleine grauliche Flecke hervor, und nach 8 Tagen machte sich ein Schimraelrasen breit — der einzige fremde Organismus, der in die Cultur eingedrungen war — , denn ausserdem fanden sich nur Ilefeflecke, von denen ungefähr die Hälfte einer jeden der beiden Hefe- arten angehörte. Nur ein einziger Fleck, also 1"4 Procent der ganzen Zahl schloss beide Hefearten in sich ein, und zwar bildete von demselben, Saccharomyces cerevisiae die obere, S. apiculatus die untere Schicht, was sich daraus erklärt, dass letztere Form die schwächere von beiden ist, was aber zugleich auch für die mikroskopische Untersuchung zur Nothwendigkeit macht, von einem derartigen Hefeflecke nicht nur die oberste, sondern alle Schichten zu untersuchen, da in die untere leicht ein schwächerer Organismus zurückgedrängt sein kann. Dasselbe Resultat gab ein Versuch mit S. apiculatus und einer zu S. Pastorianns gehörigen Form. Im Grossen und Ganzen geht daraus hervor, dass bei dem be- treffenden Verfahren die Hefezellen meist separirt, jede für sich, ausge- säet werden, und dass die Flecke, die sie bilden, fast regelmässig Rein- cultureu darstellen. Störende Ausnahmen werden aber immer vorkommen, und auch das Mikroskop wird im Stiche lassen, wenn die auftretenden Formen wenig charakteristisch sind wie z. B. die grosse Gruppe von Hefeformen mit ovalen und wurstförmigen Zellen. Allerdings wird man weniger leicht in die Lage kommen, Irrthümer zu begehen, wenn die zur Untersuchung bestimmte Art in dem Aussaatgemisch die vor- herrschende ist und wenn man die eine Cultur zum Ausgange einer zweiten, diese zum Ausgange einer dritten etc. nimmt; aber auch diese Methode giebt keine absolute Sicherheit, man operirt ebenfalls immer noch mehr oder weniger mit dem Zufall, und kein Control-Mittel vermag anzuzeigen, ob man schliesslich seinen Zweck erreicht hat oder nicht. Der einzige Weg, durch welchen man die absolute Gewissheit gewinnen kann, ob ein Fleck von einer oder mehreren Zellen gebildet wird, ist die Cultur in einer feuchten Kammer. Diesen Versuch stellte Verf. in folgender Weise an: Eine Schicht Nährgelatine, in welcher einige Hefe- zellen gut vertheilt worden waren, wurde auf einem Deckglase ziemlich dünn ausgebreitet und dieses, die Gelatineschicht nach unten, in eine feuchte Kammer gebracht (alle in Gebrauch kommenden Apparate waren natürlich vorher flambirt worden). Nach der Gerinnung der Gelatine wurden zwei kräftig aussehende Zellen, deren Lage für die Entwicklung getrennter Colonien günstig war, aufgesucht und ihrer Lage nach genau 122 Referate und Besprechungen. II, 1. bezeichnet. Darauf gelangte die Kammer in einen Thermostaten mit einer Wärme von 25" C. Nach einigen Stunden war die Knospuug der Hefe in vollem Gange. Nun Hess sich Schritt für Schritt die Entwick- lung der Hefezellen verfolgen und dabei sicher constatiren, ob die sich nach und nach entwickelnden Colonien aus einer oder mehreren Zellen entstanden waren. Nach 24 Stunden waren die Flecke mit blossen Augen zu erkennen, nach abermals 24 Stunden hatten sie die Grösse eines Stecknadelkopfes erreicht. In diesen letzten Phasen war die Untersuchung leicht und beschränkte sich bloss auf die Controle dar- über, ob sich in der Nachbarschaft der Colonie nicht andere bilden, welche mit den in Beobachtung stehenden fusioniren könnten. Da die Gelatine einen festen Boden bildet, ists auch gleichgültig, wie viel Golouien auf dem Deckglase entstehen, nur vorausgesetzt, dass einige so weit isolirt sind, dass sie sich, ohne mit anderen fusioniren zu müssen, entwickeln können. In einer Flüssigkeit könnte eine derartige Rein- cultur schon um deswillen nicht ausgeführt werden, weil hier die Ver- mischung nicht zu vermeiden wäre. Die für die Zwecke der Hefeunter- suchungen modificirte Methode Koch's bot somit ein völlig sicheres Mittel, Reinculturen zu gewinnen. Traten die beobachteten Hefeflecke deutlich hervor, so wurde von jedem der beiden mittels eines vorher geglühten Platindrahtes einige Zellen weggenommen und in einen .mit sterilisirter Bierwürze versehenen Kolben eingeführt. Bei den Versuchen mit Gelatine tritt eine Gefahr, die Cultur zu verunreinigen nur in dem Momente ein, wo das Deckglas von der feuchten Kammer abgehoben und die Hefezellen in den Kolben eingeführt werden ; aber diese Gefahr ist nicht zu hoch anzuschlagen, wenn man schnell, in einem rein- lichen Räume und bei ruhiger Luft operirt. Das Material für seine Untersuchungen erhielt H. theils aus der Nachbarschaft des Laboratoriums, aus den angrenzenden Gärten, den Bier-Brauereien und Branntwein -Brennereien Kopenhagens, theils von auswärts, theils brachte er es selbst von einer Reise in die Vogesen mit, die er zur Zeit der Weinlese dahin unternommen hatte, um die Gährung des Weines zu stndiren. Um die Hefeproben während der Reise zu conserviren, Hess er dieselben zwischen Fliesspapier eintrocknen oder packte sie zwischen Fliesspapier ohne weiteres in den Koffer, nachdem er nur die Flüssigkeit soviel als möglich ausgedrückt hatte. Auf diese Weise conservirt Hess sich die Hefe auch in Briefcouverts versenden. Um Hefeproben länger zu conserviren, wurde mit gleichem Erfolg auch eine aus gewöhnlicher Bierwürze unter Zusatz von 10 Volumprocent Alkohol und ein«r geringen Menge einer gesättigten Lösung von doppelt- II, 1. Referate und Besprecliungcu . 123 weinsteinsaurem Kali bestehende sterilisirte Flüssigkeit angewendet. Nur durften die Flaschen, da regelmässig eine leichte Gährung eintrat, bloss bis zur H.älfte gefüllt werden. Ein wesentlicher Vorzug dieser Flüssigkeit bestand darin, dass man nicht durch eine starke Gährung belästigt wurde, und dass sich die Flasche nach Einführung der Hefe verkorken liess, ohne dass eine Explosion zu befürchten war. Nach dieser Beziehung hin zeigte sich die erwähnte Conservirungsflüssigkeit vortheilhafter, als Zuckerlösungen, die ebenfalls die Hefe lange zu con- serviren vermögen. Bei dem ersten der angegebenen Conservirungsver-' fahren behielten die Zellen ihre Lebenskraft 20 Monate lang, und möglicherweise giebt es Arten, die sie noch länger bewahren. Junge, lebenskräftige Zellen conservirteu sich überhaupt länger, als ältere und schwächere derselben Art. In keinem Falle starb die Hefe vor Ablauf der ersten 5 Monate ab. Schloss die Hefeprobe mehrere Hefearten ein, und war bei der Conservirung eine Art überwiegend, so blieb sie es auch, wenn davon binnen 2 bis 3 Minuten eine Aussaat in eine Nähr- flüssigkeit gebracht wurde. Später konnte es aber vorkommen, dass andere Hefezellen überwogen, die der ursprünglichen Probe nur in ge- ringer Zahl beigemischt gewesen waren. Der Grund dafür ist darin zu suchen, dass die verschiedenen Hefearten der Austrocknuug in sehr ver- schiedenem Grade widerstehen. In gleicher Weise wie zwischen FHess- papier erhielten sich die Hefezellen auch in der alkoholischen sauren Nährflüssigkeit. Versuche bezüglich der Dauer der Lebensfähigkeit bei verschiedenen Arten und verschiedenen Conserviruugsmethoden kamen noch nicht zur Ausführung. — Die Culturen, um Hefezellen zur Ent- wicklung von Askosporen zu bringen, wurden in folgender Weise vor- genommen: Nachdem die für den Versuch bestimmten Hefezelleu einige Zeit in Bierwürze (ca. 14 Procent Ball ) bei Zimmertemperatur cultivirt worden waren, säte mau ein wenig davon in eine andere Würze der- selben Qualität und cultivirte sie 24 Stunden lang darin bei 26 bis 29" C. Die so erhaltenen Zellen wurden dann auf Gipsblöcke gesät und diese, nachdem sie völlig mit Feuchtigkeit gesättigt waren, was das Glänzend- werden ihrer Oberfläche anzeigte , in einen Thermostaten eingeführt. Hierbei sollte nun zunächst der Einfluss der Temperatur auf Bildung der Hefezellen im allgemeinen und speciell bei den verschiedenen Arten festgestellt werden. Es galt vor allem, für jede der früher erwähnten Reinculturen die Temperaturen zu ermitteln, bei denen die Askosporen- bildung aufhörte , also die Grenztemperaturen zu finden , dann das Temperatur-Optimum zu bestimmen und endlich, um die Curve zu voll- enden, eine genügende Anzahl Mitteltcmperaturen zu beobachten. Um 124 Referate und Besprechungen. II, 1. einen sicheren Ausgangspunkt zu liaben, wurde der Moment gewählt, wo in den Culturen zum ersten Male rudimentäre Bildungen auftraten. Die Sporenreife dazu zu nehmen, wie anfangs beabsichtigt wurde, er- schien niclit opportun, da der Moment der Reife sich nicht sicher be- stimmen lässt und kein Merkmal vorhanden ist, welches sie sicher anzeigt. In gleicher Weise wie auf Gipsblöcken entwickelten die Hefezellen auch auf einer soliden sterilisirten Gelatineschicht Askosporen, sobald diese während der Dauer des Versuchs feucht gehalten wurde. Dabei war es sehr bequem, dieselbe in einer dünnen Lage auf Objeetträgern auszubreiten (es bleibt sich dabei ganz gleich, ob die Gelatine mit einer Nährflüssigkeit gemischt ist oder nicht). Unter einer Glasglocke Hessen sich dann viele solcher Glasplättchen unterbringen, und damit war ein Mittel gegeben, ziemlich leicht und schnell zahlreiche Versuche gleich- zeitig zu machen. Schliesslich bemerkt der Verf. noch, dass er von einigen Arten auch Askosporen bei Cultur in Hefewasser erhielt, sobald er demselben zeitweilig Luft zuführte. Dr. 0. E. B. Zimmermann (Chemnitz). F. Phaneroganien. Loew, 0., Ueber den mikrochemischen Nachweis von Ei- weissstoffen. (Botan. Zeitg. 1884, No. 18). Verf. veröffentlicht die Ergebnisse, zu denen er bei Anwendung von zwei schon bekannten Reagentien auf Eiweissstoffe gelangt ist; dies sind 1) Berliner Blau, 2) Kupfersulfat und Kali (Biuretreaction). Die Berlinerblaureaction , schon von Haetig empfohlen , wurde neuerdings von Zachaeias (Botan. Zeitg. 1883, p. 211) wieder ange- wendet und in folgender Weise ausgeführt. Er legte die Präparate eine Stunde lang in eine Mischung von 1 Vol. wässeriger Blutlaugen- salzlösung (Concentration 1 : 10) und 2 Voll. Essigsäure (1 Vol. Essig- säure vom spec. Gew. 1"063 zu 1 Vol. Wasser). Hierauf decantirte er mit Alkohol von 60 Volumprocent bis die Waschflüssigkeit nicht mehr sauer reagirte und sich auf Zusatz von Ferridchlorid nicht mehr bläute, und brachte endlich die so behandelten Präparate in eine Lösung von Ferridchlorid. Nach dieser Methode wurden Zellkern , Stärkebildner und in geringerem Grade auch Chlorophyllkörner (denen vorher durch absoluten Alkohol der Farbstoff entzogen worden war) blau gefärbt ; das übrige Protoplasma färbte sich nicht. Als besonders geeignet für II, 1. Referate und Besprechungen. 125 diese Untersuchung werden Epidermisstücken der Blätter vor Orchis- arten empfohlen. Bei Spirogyra jedoch führt das beschriebene Verfahren, wie Verf. gefunden liat, nicht zu dem gewünschten Resultate, obwohl der Zell- inhalt dieser Alge reich an Eiweiss ist. Das Ausbleiben der Reaction kann nach der Meinung des Verf. nur auf einem specifischen Auf- bau der betreffenden Eiweissmoleküle beruhen, und deshalb sucht der- selbe nach einer Methode, das Protoplasma von Spirogyra für das Reagens empfänglich zu machen. Das gelingt ihm durch eine vorher- gehende Behandlung mit Kalilauge. Das Verfahren ist folgendes: Entweder bleiben die Algenfäden zu- erst zwölf Stunden in einer Mischung von verdünnter Kalilauge mit gelbem Blutlaugensalz, hierauf mehrere Stunden in einer mit Essigsäure versetzten Lösung desselben Salzes. Nach gründlichem Auswaschen mit wenig Wasser und darauf mit viel GOprocentigem Alkohol werden sie endlich auf einige Zeit in verdünnte Eisenchloridlösung gebracht. Oder die Fäden werden erst 15 Minuten in eine 25procentige Kalilösuug gelegt, dann eine Stunde lang in die angesäuerte Blutlaugen- salzlösung. Nun wird wie vorher gewaschen, das Chlorophyll mit ab- solutem Alkohol ausgezogen und zuletzt durch die verdünnte Ferrid- chloridlösung die Bläuuug des Protoplasmas bewirkt. Nach beiden Methoden färbt sich das gesammte Protoplasma aller Zellen intensiv blau, doch so, dass einzelne Partien heller bleiben als die anderen. Bezüglich der sogenannten B iure t reaction, welche bekanntlich darin besteht, dass der Reihe nach Kupfersulfatlösung mid Kalilauge angewendet werden, hebt Verf. nochmals hervor, was von ihm und BoKOENY entdeckt und bereits an anderer Stelle ' mitgetheilt worden ist, dass nämlich die Rosafärbung auch im Protoplasma ausge- wachsener Zellen eintritt, wenn man die Reagentien in umgekehrter Reihenfolge einwirken lässt (zuerst Kalilauge vom specif. Gew. 1*3.3 fünf Minuten lang, dann verdünnte Lösung von Kupfervitriol). BacJimann {Plauen). Russow, E., üeber die Auskleidung der Intercellularen. (Sitzber. der Dorpater Naturforscherges. Bd. VII 1. Heft, 1884; S.A. 15 pp. 8"). Alle mit Luft erfüllten Intercellularen schizogeuen Ursprungs sind von einer zarten plasmatischen Schicht ausgekleidet, die durch Jod und *) LoEw u. BoKORNv, Die cliemische Kraftquelle im lebenden Protoiolasnia p. 58 Anm. 126 Referate und Besprecliungen. II, 1, Schwefelsäure eine cuticulaälinliclie Bescliaftenheit annimmt, sicli aber von der eigentlichen Cuticula durch ihre Löslichkeit und Färbung unter- scheidet. Dies in Kürze das Resultat der Untersuchungen Russow's. Anhangsweise theilt er einige mikrochemische Beobachtungen mit, derentwegen diese interessante Arbeit auch an dieser Stelle referirt wird. Cellulosemembranenhabeu sehr nngleicheResistenz gegen Schwefelsäure, im allgemeinen sind sie bei Wasserge- wächsen resistenter. Erst nach wiederholter Anwendung von concen- trirter Schwefelsäure lösen sich Stengelquerschnitte von Potamogeton, und ähnlich verhält sich Limosella. Dagegen lösen sich das Schwamm- parenchym und die Pallisadenschicht von Napoleona imperialis (einer Landpflanze), obwohl sie auf Zellstoff reagiren, selbst nach wieder- holtem Zusatz conc. Schwefelsäure nicht. — An Stärkekörnern machte Russow folgende Beobachtungen: .Jedes Stärkekorn aus Alkohol-Material oder aus eingetrocknetem Gewebe zeigt nach Zusatz von Jod und Schwefelsäure eine Plasmahülle, die ebenso wie die Auskleidungen der Intercellularen sich anfänglich gelb färbt, um ins Rothbräunliche überzugehen und schliesslich sich in eine dunkelkörnige Masse zu ver- wandeln (Solanum tuberosum, Phajus Wallichii, Potamogeton). Wendet man fast concentrirte Schwefelsäure an, so findet sehr geringe Quelluug statt, die blauen Körner verblassen bald, die Plasmahülle erscheint wie eine Blase von der Grösse des intacten Kornes. Die stärkeführenden Rindenzellen von Pinus silvestris zeigen ein gelbbraunes Netzwerk, dessen Maschen blaue Körner umschliessen. Verf. möchte aus diesen Beobachtungen schliossen, „dass die Bildung sämmtlicher Stärkekörner innerhalb Plasmasäckchen vor sich geht und dass die platten- oder stabförmigen Stärkebildner nur Speicher von Plasma oder Eiweiss dar- stellen zur Ergänzung der bei der Stärkebildung an Masse abnehmenden Plasmasäckchen" K Bei einer Reihe von Pflanzen (Malaxis monophyllos, Swertia pereunis, Goodyera repens, Monotropa Hypopytis) werden die Stärkekörner durch .Todjodkalium nicht blau, sondern in verschiedenen Nuancen braun gefärbt. Bei Epipogium Gmelini reagiren die Stärke- körner in den verschiedenen Theilen des Rhizoms ungleich auf Jod, theils werden sie gar nicht gefärbt, theils blau bis violett, theils braun bis roth. J. Moeller. 0 Dieselbe Beobachtung habe ich sehr häufig gemacht und nicht nur nach Anwendung von Jod und Schwefelsäure, sondern auch nach Kalibehand- lung, besonders schön im Endosperm des Mais. Der Folgerung Rr.ssow's möchte ich mich aber nicht anschliessen, halte vielmehr dafür, -dass die Plasmahüllen der Stärkekörner einfach die Reste des Zellplasma sind, die gewissermassen als Zwischensuhstanz erhalten bleiben. Ref. II. 1. Referate und Besprccliungen. 127 Frank, 15., Ueber die G u in ni il> i 1 dinig' im Holze und deren physiologische Bedeutung-. (Ber. ütseli. Botan. Gesellseh. Bd. II, 1884, H. 7 p, 321). Dem Zwecke dieser Zeitschrift entsprechend ist nus vorliegender Arbeit nur Folgendes anzuführen. Alle Laubhölzer scheiden bei Verwundung, hervorgebracht durch einen Tangentialschnitt, in den der Wundstelle angrenzenden Zellen eine gelbe bis braune Substanz aus. Dieselbe sammelt sich in den Zellen der IVIarkstrahlen in Form sehr kleiner Körnchen, welche vorwiegend der Zellwand aufsitzen, an, wo-r gegen sie in den Holzzellen und Gefassen Tropfenform annimmt. Sie zeigt bei allen untersuchten Pflanzen die gleichen Reactionen : i n Wasser, selbst in erwärmtem, völlig u n 1 ö s 1 i c h j, q u i 1 1 1 d a r i n a u c h nicht auf, unlöslich in Alkohol, Aether, Schwefelsäure, Kalilauge; wird beim Kochen mit Salpetersäure in Oxalsäure und Schleim- säure übergeführt; speichert, gleich verholzten Zellmembranen, aus Fuchsinlösungen den Farbstoff auf und nimmt mit Phloroglucin und Salzsäure intensiv rothe Färbung an. Durch viertelstündige Digestion mit verdünnter Salzsäure und chlorsaurem Kali wird die Substanz nicht gelöst, überhaupt gestaltlich nicht verändert, aber in einen neuen Körper übergeführt, der in Alkohol leicht löslich ist; erst längeres Ver- weilen in den genannten Flüssigkeiten bringt sie zum völligen Ver- schwinden. — Auf Grund dieser Reactionen glaubt Verf. den Stoflf für eine Gummimodification ansprechen zu müssen, was keineswegs imwahi-- scheinlich ist, aber durch fortgesetzte und womöglich makrochemische Untersuchungen bis zur Evidenz bewiesen werden müsste. Sehr be- merkenswerth ist noch, dass Verf. zu der üeberzeugung gekommen ist, die betreffende gummiähnliche Substanz sei nicht als ein ümwandlungs- product der Zellwand anzusehen, sondern stamme aus dem Inhalte der angrenzenden lebensfähigen Zellen, durch deren Membranen sie diffundire. E. Bachmann {Flauen). G, 3Iin e i 'ff 7of/ isch-Geolof/ isch eti. Beferent: Prof. Dr. Arthur WicJmmnn in Utrecht. Kalliowsky, E., Ueber die Polarisationsverhältnisse von senkrecht gegen eine optische Axe geschnittenen zweiaxigen Kry st allplatten. (Zeitschr. f. Krystallog. u. Mineral. Bd. IX, 1884, p. 48G— 497 u. 1 Tfl.). X28 Referate und Besprecliungen. II, 1 . Platten optisch zweiaxiger Krystalle, die senkrecht gegen eine der optischen Axeu geschnitten sind, müssen der Theorie zufolge unter dem Mikroskope zwischen gekreuzten Nicols bei einer vollen Umdrehung des Objecttisches stets gleichmässig dunkel bleiben. Der Verf. weist nun nach, dass die von der Theorie verlangten Erscheinungen nie zur Be- obachtung gelangen, da die gleichzeitige Erfüllung folgender fünf Be- dingungen verlangt wird : 1) es müssen die Platten völlig planparallel sein, vollkommen glatte Oberfläche haben und aus ganz reiner Substanz bestehen, 2) die Platten müssen absolut senkrecht gegen eine optische Axe, 3) für absolut einfarbiges Licht sein ; 4) das auffallende Licht muss aus absolut parallelen Elementarstrahlen bestehen; 5) das Mikroskop muss absolut felilerfrgt sein. Da die Bedingungen 1 und 2 nur zufällig, ■die unter 3, 4 und 5 dagegen nie erfüllt werden können, so führen Theorie und Praxis zu völlig entgegengesetzten Resultaten. Man findet nämlich vielfach in Dünnschliffen Durchschnitte, die zwischen gekreuzten Nicols bei einer völligen ümdrehimg stets gleichmässig hell bleiben, ohne dass Interferenzfarben auftreten. Betrachtet man den betr. Durch- schnitt unter dem Mikroskop im convergenten Licht, so gewahrt man isochromatische Curven um den Austrittspunkt einer Axe und einen dunkeln Balken oder den letzten allein, falls der Schliff sehr dünn oder die Doppelbrechung eine schwache ist. Dieses Hellbleiben zwischen gekreuzten Nicols beruht auf dem Phänomen der sogenannten inneren conischen Refraction. — Hamilton fand bei der genaueren Untersuchung der Wellenoberfläche optisch zweiaxiger Krystalle, dass dieselbe an den Punkten, wo sie von der Richtung der gleichen Fortpflanzungsgeschwindig- keit beider Strahlen getroffen wird, eine trichterförmige Vertiefung be- sitzt; von einer Tangentialebene an eine optische Axe selbst wird die Wellenoberfläche nicht nur an zwei Punkten berührt, sondern in einer unendlichen Anzahl von Punkten, welche einen kleinen Berührungskreis bilden. Fällt ein Lichtstrahl in der Richtung einer optischen Axe auf eine senkrecht gegen dieselbe geschnittene Platte, so wird er beim Ein- tritt in den Krystall in einen holden Strahlenkegel getheilt, dessen Strahlen an der entgegengesetzten Seite parallel mit dem einfallenden Strahl als hohler Strahleucylinder austreten. Diese Erscheinung nannte Hamilton „innere conische Refraction". Der Verf. zeigt nun zunächst an Platten des dichromsauren Kaliums, auf welche Weise man diese innere conische Refraction studiren kann. Eine Platte dieses Salzes wird mit Wachs an einem Stäbchen und dieses an einem Träger der- artig befestigt, dass die optische Axe sich im Mittelpunkte des Gesichts- feldes befindet. Die Platte wird so hoch über den Objecttisch des II, 1. Referate und Besprechungen. 129 Mikroskopes gehalten , dass man letzteres bequem darunter hinweg- ziehen kann. Statt des unteren Nicols setzt man ein möglichst kleines Diaphragma ein, das uur so wenig in die Hülse eingedrückt wird, dass seine Oberfläche noch über den Tisch des Mikroskopes emporragen kann. Auf das Diaphragma wird ein Blättchen Stanniol mit einem winzigen runden Loche möglichst so gelegt, dass das Loch in die Mitte des Ge- sichtsfeldes des Mikroskopes zu liegen kommt. Man schiebt darauf das Mikroskop unter die Platte von K^Cr^O' und hebt das Diaphragma möglichst hoch bis ganz nahe an die Platte. Der Tubus des Mikroskops wird mit einem schwächeren Objectiv und einem beliebig starken Ocular ausgerüstet; bei einer gewissen Höhe des Focus des Mikroskopes über dem Stanniolblättchen erblickt man nun statt des runden Loches einen hellen Ring. Das Licht dieses Ringes ist polarisirt, wie man sich durch einen auf das Ocular aufgesetzten Nicol überzeugen kann. Es ist von grossem Interesse weiter zu verfolgen, wie der Verf. den Nach- weis führt, dass der Theorie zum Trotz eine Platte gegen eine optische Axe, aus einem Krystall ohne Hauptaxe geschnitten, stets gleich hell ist zwischen gekreuzten Nicols. Die innere conische Refraction wurde noch am Topas, Andalusit, Staurolith, Adular, Diopsid, Epidot und Aragonit studirt. Eine schön ausgeführte Lichtdrucktafel illustrirt die von dem Verf. eingehend geschilderten Verhältnisse, bezüglich welcher auf die Abhandlung selbst verwiesen werden muss. Penfleld, S. L., lieber Erwärmungsversuche an Leucit und anderen Mineralien. (Neues Jahrb. f. Mineralogie etc. Bd. II, 1884, p. 224). Die einander widersprechenden Angaben von C. Klein und Meeian ' veranlassten den Verf., aufs neue Platten von Leucit bei höherer Tem- peratur zu untersuchen. Als Resultat ergab sich, dass sehr dünne Leucitblättchen bereits bei beginnender Rothgluth der Ränder säramtlich isotrop wurden, dagegen gelang es nicht. Plättchen von ca. 1 mm Dicke, selbst bei einer bis zur Rothgluth der ganzen Platte fortgesetzten Er- hitzung isotrop zu machen, vielmehr Hessen dieselben ihre Zwillings- streifung noch deutlich erkennen. Der Verf. vermuthet daher, dass das Eintreten oder Ausbleiben der Isotropie bei Erhitzung in der grösseren oder geringeren Dicke der Platte seine Ursache habe. — Ferner theilt Verf. mit, dass es demselben nicht gelungen sei. Plättchen verschiedener doppelbrechender Granaten isotrop zu macheu. Bezüglich der am Mi- kroklin angestellten Versuche erhielt er dieselben Resultate wie Meeian. 0 Cfr. diese Zeitschrift Bd. I, 1884, p. 468 u. 611. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 1. 130 Referate und Besi)recliiingen, II. 1. Mjinil,P., Untersuchungen über die chemische Zusammen- setzung einiger Augite aus Phonolithen und ver- wandten Gesteinen. (Neues Jahrb. f. Mineralogie Bd. II, 1884, p. 172—205). Für die Zwecke dieser Zeitschrift kann aus der vorstehenden Äb- liandhmg nur die vom Verf. angewandte Trennungsmethode der Augite angeführt werden. Die hierauf hin behandelten Gesteine waren Phono- lithe vom Hohentwiel und von Elfdalen, der Leucitophyr von Rieder, sowie der Hauynophyr von Melfi. Es galt den eigentlich nur in mikro- skopisch kleinen Individuen vorkommenden Augit vollständig zu isoliren und zwar in solchen Quantitcäten , dass das Material auch noch zur chemischen Analyse verwandt werden konnte. Die zur Untersuchung gelangten Gesteine enthielten ausser dem Augit noch die folgenden Mineralien : Nephelin, Hauyn, Leucit, Sanidin, Melilith, Kalkspath, Apatit, Hornblende, Magnesiaglimmer, Melanit, Titanit, Magneteisen und Titan- eisen, von denen der Augit zu trennen war. Das feine Gesteinspulver wurde zunächst eine Zeit lang mit Chlor- wasserstofFsäure digerirt. Dabei wurden Leucit, Nephelin, Hauyn, Apatit, Kalkspath, Melilith und ein Theil des Magneteisens zersetzt resp. auf- gelöst. Das rückständige Pulver ist noch mit Kieselsäureflocken ge- mengt und muss daher mit heissem Wasser ausgewaschen und ge- schlämmt werden, wobei der grösste Theil der Kieselsäure entfernt wird. Das so erhaltene, getrocknete Gesteinspulver wurde hierauf mit einer Kaliumquecksilberjodidlösung vom spec. Gew. 3" 19 übergössen, gleich- massig damit durchgerührt, wobei die Hauptmenge von Sanidin und etwa vorhandene glasige Basis entfernt ward. — Das zu Boden ge- sunkene Pulver bestand jedoch, wie die mikroskopische Untersuchung lehrte, zum grössten Theile aus Augit, verunreinigt durch Sanidin, Magnetit, Titaneisen, Melanit, Hornblende, Magnesiaglimmer und Titanit. Der letztere wurde durch Behandlung des Pulvers mit verdünnter Schwefelsäure zersetzt. Aus dem von Titanit befreiten Pulver wurden sodann mittels eines kräftigen Älagneten die noch mit Magnetiteinschlüssen behafteten Augite herausgezogen. Zur Abscheidung von Hornblende und Magnesiaglimmer, sowie den noch immer vorhandenen geringen Verunreinigungen wurde das Pulver zu wiederholten Malen mit der Lösung des borowolframsauren Cadmium behandelt, welches ein spec. Gew. von 3'28 besass und gerade noch die Sonderung des Augites von Hornblende und Magnesiaglimmer ermöglichte. Bei den Gesteinen von Elfdalen und Melfi erhielt der Verf. auf diese Weise ganz reinen Au- git, in dem von Rieden war noch Melanit und in dem vom Hohentwiel II, 1. Referate und Besprocliungcn. 131 neben Melanit noch ein anderer farbloser Augit vorhanden. Diese Ver- nnreiuig-uugen Hessen sich nnr durch Auslesen unter dem Mikroskop entfernen. Zu diesem Zwecke wurden die Augite portionsweise auf einen Objectträger gleichmässig vertheilt und sodann bei schwacher Vergrösserung mit einer feinen Präparirnadel, an deren Spitze eine Spur von Canadabalsam gebracht war, die einzelnen fremden Körperchen zwischen den Augiten herausgetupft. — Der Phonolith vom Hohentwiel lieferte nach der eben besprochenen Methode eine zu geringe Ausbeute an Augit. Um schneller arbeiten zu können, construirte der Verf. einen sehr zweckmässigen Apparat und zwar in Gestalt eines hufeisenförmigen Elektromagneten, dessen einander zugekehrte Eisenkerne messerschnei- denartig zugeschärft sind. Genau über diesen Schneiden befindet sich eine Bürette, welche mit einem Glashahn versehen ist. Sobald der Strom geschlossen ist, lässt man das mit Wasser vermengte Gesteins- pulver in einem ruhigen Strome aus der Bürette ausfliessen, und bleiben sodann die eisenhaltigen Mineralien an den Schneiden haften. Das an- gewendete Gesteinspulver muss man jedoch vier bis fünf mal derselben Operation unterziehen. Auf diese Weise erhält man durch den Elektro- magneten ein Pulver, welches unter dem Mikroskope ausser dem Augit, noch Hornblende, Melanit, Titanit, Magnetit und etwas mitgerissenen Sanidin erkennen lässt. Zur weiteren Sonderung dienen dann wieder die oben angegebenen Methoden. 132 Neue Literatur. 11. 1. Neue Literatur, 1. Lehr- und Handbücher. Fol, H.. Lehrbuch der vergleichenden mikroskopischen Anatomie mit Einschluss der Histologie und Histogenie 1. Lief. [Mikroskopisch-anatomische Technik] 8" Leipzig (Engelmaun) 1885. 5 M. Garbiui, Manuale per la tecnica moderna del microscopio nelle osservazioni zoologiche, istologiche ed anatomiche [Handbuch der modernen mikro- skopischen Technik für zoologische, histologische und anatomische Beob- achtungen]. Verona 1885. [Cfr. diese Zeitschr. Bd. H, 1885, p. 59]. (liltay, E., Inleiding tot het gebruik van den microscoop [Einführung in den Gebrauch des Mikroskops]. Leiden (Brill). 1885. 254 pp. 8". m. 50 Figg. u. 1 Tabelle. Hussak, E., Anleitung zum Bestimmen der gesteinbildenden ÄlineraUen. Leipzig (Engelmann) 1885. 196 pp. 8'^ m. 50 Figg. u. 4 Tfln. 5 M. [Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 66]. Alarme, W., Lehrbuch der Pharmakognosie des Pflanzen- und Thierreiches. 1. Hälfte 272 pp. 8". Leipzig (Veit & Co.) 1885. 560 M. [Giebt hei jeder Drogue unter der Ueherschrift .,Präparation'' einige, wenngleich sehr dürftige Angaben über die Zurichtung zur mikrosTxopischen Beobachtungl. Parser, J. M., A manual of histology and of histological methods. Dublin 1884, 396 pp. 8«. Strasburger, E., Das kleine botanische Prakticum für Anfänger. Anleitung zum Selbststudium der mikroskopischen Botanik und Einführung in die mikroskopische Technik 285 pp. 8". m. 114 Figg. Jena (Fischer) 1884. 6 M. 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Newe Mikro.skoi)e. 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Man lässt die Schnitte so lauge in Methylgrün, bis dieselben eine dunkelgrüne Farbe angenommen haben, wäscht dann aus und giebt sie in absoluten Alkohol. Eine Ueberfärbung sowohl durch Bismarckbraun als mit Methylgrün thut nichts, da man es in der Hand hat, duroli längeres oder kürzeres Belassen der Schnitte in Alkohol, den Farbstoff auszu- ziehen. Es ist schwer zu sagen, wann die Schnitte aus dem Alkohol genommen werden dürfen , da eigene Hebung dies am besten trifft ; aber sobald die Schnitte schön saftgrün geworden sind, kann man dieselben aus dem Alkohol nehmen und hierauf in das betreffende Auf- hellungsmittcl (Bergamottöl, Xylol etc.) legen. Der Vortheil dieser Tinctionsmethode besteht darin, dass Bismarck- braun mit Methylgrün ein schönes distinct färbendes Saftgrün gibt. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II. 2. 10 146 List: Zur Färbeteclmik. 11, 2. Die Kerne färben sich dun kelsaftgriiii, lieller die Zellsubstanz der Epithelzellen, hellgrün das Bindegewebe. Namentlich iiir die B e c h e r z e 1 1 e n und für die Zellen de r Schleimdrüsen, zu deren Untersuchung ich diese Methode zuerst verwendete, ist diese Tiuction besonders werthvoll, weil sich das Gerüst- werk innerhalb der Zellen schön b r ä u n 1 i c h g r ü n oder dunkel- braun färbt und mit einer Schärfe hervortritt, wie bei keiner der üb- lichen Tinctionsmethoden. Auch Knorpelschnitte geben nach dieser Methode gctarbt sehr instructive Präparate. Für letztere und namentlich für solche Objecte, bei deren Tinctiun mit wässerigen Farbstoff lösungen man Q u e 1 1 u n g s e r s c li e i n u n - gen befürchten muss, kann man vorstehende Methode folgendermaassen modificiren : Die aus Alhohol genommenen Schnitte werden in eine alkoholische Bismarckbr aunlösnn g (15 cc absoluten Alkohol und 5 cc nach WEiGEET'schcr Methode bereitetes Bismarckbraun) gelegt und hier mehrere Minuten bis zu einer Viertelstunde belassen. Hierauf gibt man die Schnitte kurze Zeit in starken Alkohol, um einen Theil des über- schüssigen Farbstoffs auszuziehen und von hier in eine alkoholische Methylgrünlösung (15 cc absoluten Alkohol und 5 cc Methyl- grünlösung (0-5 g auf 100 cc Aqua dest.). Nachdem man die Schnitte einige bis zu 15 Minuten in letzterer Tinctionsflüssigkeit belassen hat, gibt man sie in absoluten Alkohol, lässt den Farbstoff so lange ausziehen bis die saftgrüne Färbung eintritt und gibt sie sodann in das betreffende Aufhellungsmittel. 2. 'Bismarckbraun — Änilivgriin. Diese Doppeltinctionsmethode kann in derselben Weise angewendet werden wie die vorstehende, gibt so ziemlich dieselben Bilder'und bietet auch dieselben Vortheile. .9. Eosin — Mrthiilgrün. CalrkrtjA ' hat bekanntlich zuerst diese beiden Farbstoffe zur Doppeltinction verwendet und zwar, indem er ein Gemisch von 1 Theil Eos in und CO Theile Methylgrün in SOprocentigem warmen Alkohol löste. n ') J. Cvr.nKiu.A , Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik (Morpliol. Jahrb. B.l. III, 1877). II, 2. Lis't: Zur Farbetechnik. 147 Ich färbe getrennt. Ich lege die Schnitte zuerst in eine alko- holische Eosinlösung, die ich mir dadurch bereite, dass ich in einer Sehale zu etwa 15 cc absolutem Alkohol 5 cc wässerige Eosin- lösung (0-5 g auf 100 cc Aqua dest.) gebe. In dieser Eosinlösung lasse ich die Schnitte einige Zeit (mehrere Minuten bis zu einer Viertelstunde), wasche aus und gebe sie in eine Lösung von Methylgrün (0'5 g auf 100 cc Aqua dest.). Mehrere bis zu 5 Minuten genügen, um die Schnitte intensiv zu färben, man wäscht sie aus und gibt sie in absoluten Alkohol. Die Zeit des Verweilens im Alkohol ist für die Schönheit der Präparate maassgebend ; gewöhnlich ist der Zeitpunkt zur Herausnahme der Schnitte gekommen, wann das Eosin durchzuscheinen beginnt. Hierauf gibt man die Schnitte in das Aufhellungsmittel. Diese Methode des Färbens, die mir gelegentlich der Untersuchung des Kloakenepithels verschiedener Selachier sehr schöne Resultate lie- ferte, ist namentlich für Epithelien und Schleimdrüsen sehr zu empfehlen. Die Zellsnbstanz der gewöhnlichen Epithelzellen erscheint schön rosa- roth, die Kerne bläulichgrün. Das Gerüste innerhalb der Becherzellen grün. Die Zellen der Schleimdrüsen färben sich intensiv grün, nament- lich tritt das Gerüstwerk in den Drüsenzellen sehr schön hervor. In Knorpelschnitten färben sich das Perichondrium und die Knorpelzellen schön rosaroth, die Grundsubstanz bläulichgrün. Ueberhaupt geben Drüsen und Knorpel nach dieser Methode gefärbt reizende Uebersichts- präparate. Nur das eine ist zu bedauern — ein Umstand, der bei allen Anilin- farben in Betracht kommt — , dass durch Glycerineinschluss die Präpa- rate abblassen. Sehr gute Resultate, namentlich für Knorpelschnitte, erzielte ich auch durch Verwendung einer a 1 k o h o 1 i s c h e n M e t h y 1 g r ü n 1 ö s u n g. Die Methode ist genau dieselbe, wie ich sie in Nr. 4 angebe. 4. Eosin — Anilin grün. ScHiEFPERDECKER ^ hat zucrst dicsc Doppeltinctionsmethode ange- geben. Ich verwende mit vorzüglichem Erfolge namentlich für Knorpel- und Drüsenschnitte folgende Modification : Man bereitet sich eine alkoholische Eosinlösung (15 cc Alkohol absol. auf 5 cc Eosinlösung) (0*5 g auf 100 cc Aqua dest.). Die ') P. SciiiErFERDECKER , Kleinere histologische Mittheilungen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XV, 1878) 10* 148 List: Zur Färbetechnik. II, 2. aus Alkohol genommenen Schnitte überträj^'t man direct in diese Eosin- lösung. Nachdem man dieselben eine Viertelstunde oder noch Länger in dieser Lösung belassen hat, spült man sie in Alkohol ab und gibt sie in eine alkoholische A n i 1 i n g r ü n 1 ö s u n g (15 cc Alkohol absol. auf 5 cc wässerige Anilingrünlösung (0*5 g auf 100 cc Aqua dest.). Nach einem Belassen der Schnitte bis zu einer Viertelstunde in letzterer Tinc- tionsflüssigkeit überträgt man die Schnitte in absoluten Alkohol. Die Zeit, wie lange man die Schnitte in Alkohol lässt, wird eigene Uebung am besten zu treffen wissen. In der Regel ist der Zeitpunkt zur Heraus- nahme der Schnitte gekommen, wenn die Eosinfärbung durchzuscheinen beginnt. Die Schnitte legt man sodann in das Aufhellungsmittel ( Berga- mottöl, Xylol etc.). 5. Hämatoxylin-Glyccrin - Eosin ^. Diese RENAin'sche Methode der Doppelfärbung liefert etwas moditi- cirt herrliche Präparate. Man nehme RExAuT'sches Hämato xyl in - Glycerin (glycerine-hematoxylique) und bereite sich eine höchst ver- dünnte Hämatoxylin-Glycerinlösung dadurch, dass man auf etwa ein y4 Liter '^ Afjua dc^t. 3 bis 4 Tropfen dieser RENAu'r'schen Hämatoxylin- Glycerinlösung gibt. In diese höchst verdünnte Lösung trägt man die aus Alkohol genommenen Schnitte ein und lüsst sie 24 Stunden darin. Hierauf wäscht man aus und gibt sie in eine alkoholische Eosin- lösung, die wie in No. 4 bereitet wird, lässt die Schnitte einige Minuten bis zu einer Viertelstunde in dieser Lösung, wäscht aus und gibt sie in absoluten Alkohol. Man hat es in der Hand, Abstufungen der Eosin- tinction hervorzubringen, indem man die Schnitte längere oder kürzere Zeit in Alkohol I)elässt. Hierauf überträgt man die Schnitte in d;is Aufhellungsmittel. Diese Methode des Färbens, die ich auch fVülicr gelegentlich meiner Untersuchungen über das Blasenepithel verwendete *) Biipcn war der Erste, welcher mit gewöhnlichem BöiiMi:i;'scheii Hämatoxylin und hierauf mit Eosin tingirtc (Die Doppelfärbung des Ossitica- tionsrandes mit Eosin und Hämatoxylin Verhandl. d. Physikal. Gesellsch. 1877, No. 14; cfr. diese Zeitschr, Bd. I, 1884, p. 504). G. Mautixotti gab in neuester Zeit eine Abänderung des Brscu'schen Verfahrens, indem er eine alkoholische Eosinlösung anwandte (Sulla colorazione doppia coirematossilina e coU'eosina. Gazz. delle Cliniche. Torino, 1883, No. 51 ; cfr. diese Zeitschr. Bd. I. 1884, p. 582). '-) Es ist wohl selbstverständlich, dass man je nach der Anzahl der zu tingirenden Schnitte eine grössere oder kleinere Portion dieses verdünnten Ge- misches verwendet. II, 2. List: Zur Farbetecbnik. I49 (für Isolationspräparate aus '/g Alkohol), liefert die praclitvollsteu Kerii- tinctiouen. Die Kerne färben sich intensiv violett, das übrige Gewebe schön rosaroth. Ueberhanpt ist die in verschiedenen Conceutratiousgraden zu benutzende H ä ni a 1 0 x y 1 i n-G 1 y c e r i u 1 ö s u n g eines der schonend- sten Tinctionsraittel und namentlich für Protoplasmastudien sehr ge- eignet. Epithelien und Knorpelzellen geben die schönsten Belege hierfür. 6". Häma'ojeijliii Glt/ccriii — salpetersaures llosaniUn *. Man belässt die aus Alkohol genommenen Schnitte 24 Stunden in dem höchst verdünnten RENAUT'schen Hämatoxylin-Glycerin (No. 5), wäscht aus und legt dann die Schnitte in eine Lösung von salpeter- saurem Rosanili n. In letzterer Tinctionsflüssigkeit lässt man die- selben bis zu 10 Miiniten, wäscht flüchtig in Wasser aus und entwässert sie in absolutem Alkohol ; von hier überträgt man dieselben in das Anf- hellungsmittel. Schleinidrüsen, Epithelien und Knorpel, nach dieser Methode ge- tarbt, geben reizende Präparate. Namentlich erhält man schöne Kern- tinctionen und eine treffliche Färbung des Gerüstwerkes in den Drüsen- zellen. 7. MetliAjlgriin — salpetersaurcs liosaniUn. Man legt die Schnitte kurze Zeit (bis zu 10 Minuten) in eine ver- dünnte Met h y 1 g r ü n 1 ö s u n g ein (No. 1), wäscht aus und gibt sie hierauf in eine Lösung von s a 1 p e t e r s a u r e m R 0 s a n i 1 i n . Nach einem Belassen bis zu 15 Minuten in letzterer Tinctionsflüssigkeit wäscht man aus, entwässert rasch in absolutem Alkohol und legt die Schnitte in das Aufhellungsmittel. Epithelien, Schleimdrüsen und Knorpel geben herrliche, instructive Präparate. Ich benütze diese Methode der Doppel- färbung namentlich zum Studium des Gerüstwerks in den Zellen der Schleimdrüsen und der Bechei'zellen. Ich habe in No. 1, 2 und o Methoden der Doppelfärbung ange- geben, welche erlauben, mit grosser Raschheit sehr hübsche, instructive ') Es ist dies derselbe Farbstoff, den seiner Zeit v. Edneu zum Nach- weise der elastischen Fasern in der Aorta (Rullkt'k Untersuchungen, 1. Heft, Leipzig 1870) und im Knochengewebe (Sitzungsber. der k. Academie der Wiss. Bd. LXXII, III. Abth. Wien, 1875 p. 102) benützte. 150 List: Zur Färbetechnik. II, 2. Präparate anzufertigen. Kommt es aber auf die Länge der Zeit, die die Herstellung instructiver Präparate erfordert, nicht an, so kann man 1, 2 und 3 folgendermaassen modificiren: Icc. Bismarclcbraun — Methylgrün . Man verwende nach WEiGEK'r'scher Metliode bereitetes B i smarck- braiin und bereite sich eine sehr v erdünnte Bismarckbraunlösung dadurcli, dass man auf 50 cc Aqua dest. 1 cc WEiGER'r'sche Bismarck- braunlösung gibt. In dieser Lösung lässt man die Sclmitte 24 Stunden und giebt sie hierauf in eine sehr verdünnte Methylgrünlösung 5 letztere bereitet man sich, indem man auf 50 cc Aqua dest. 1 cc der in No. 1 angegeben Methylgrünlösung gibt. In dieser Tinctiousflüssigkeit belässt man die Schnitte 24 Stunden. Hierauf gibt mau die Schnitte iu absoluten Alkohol, lässt den Farbstoff so lange ausziehen, bis die saft- grüne Färbung erscheint und legt sie sodann in das Aufhellungsmittel. 2a.. Bismarckbraun — Anilingrün. Wird wie vorstehend augewendet. 3 a. Eosin — Mcthißgrnn. Mau färbe die Schnitte mit alkoholischer Eosinlösung, wie oben angegeben, wäscht aus und gibt dann die Sclmitte in eine verdünnte Methylgrünlösung, die wie in 1 a bereitet wird und lässt die Schnitte 24 Stunden darin; sodann überträgt man dieselben in absoluten Alkohol und lässt den Farbstoff so lange ausziehen, bis die Eosinfärbung er- scheint. Hierauf legt man die Schnitte in das Aufhellungsmittel. Die in 1 a, 2 a und 3 a angeführten Methoden liefern ausgezeichnet schöne Präparate für Schleimdrüsen und Epithelien, für welche Objecte ich sie besonders empfehlen möchte '. SchHesslich bemerke ich, dass alle nach vorstehenden Methoden gefärbten Objecte in Alkohol absol. , MüLLEE'scher Flüssigkeit oder Chrorasäure- gehärtet und in Celloidin eingebettet wurden. Die mit dem Mikrotom hergestellten Schnitte wurden sodann tingirt. ') Sämmtlicbe Anilinfarben mit Ausnahme des Salpetersäuren RosaniUns und Bismarckbrauns bezog icli von der hiesigen Farbhandlung: F. Fink, Herren- gasse; Bismarckbraun von Th. Schuchardt, Görlitz. -) Die mit Mi-r.LEK'scher Flüssigkeit oder Chromsäm-e gehärteten Objecto wurden in Alkohol successive nachgehärtet. II, 2. Po mm er: Methoden z. Studium d. AblagerungsverhäUiiLssc etc. 151 lieber Metliodeii, welche zum Stiuliiiiu der Ablader uiiosvei-liältiiisöe der KuoeJieiiStdze und zuui Nachweise kalkloser Knochenpai'tleii brauclibar sind. Von Dr. GiLstay Poiiimer in Graz. Wie sclion der Titel dieser Isiirzen j\Iittlieiluiig besagt, hat die- selbe nicht die Aufgabe, eine Uebersicht aller derjenigen Methoden zu liefern, welche bisher überhaupt zur Orieutiruug über die Ablagernngs- verhältnisse der Knochensalze und zur Ermittlung kalkfreier Knoclien- substanztheile angewendet worden sind. Ich will hier nur von den hierzu brauchbaren Methoden handeln und werde daher auf diejenigen, durch welche Hkitzmann ', Kassüwitz - u. A. den einen oder den anderen dieser Zwecke zu erreichen glaubten, nicht im Einzelnen ein- gehen, nachdem dieselben ja , wie ich bereits an anderer Stelle ausge- führt habe^', hierzu völlig ungeeignet oder in einem Grade nnverlässlich und mangelhaft sind, dass bei ihrer Anwendung Irrthümer nicht ver- mieden werden können. Unter den Methoden, welche zu den angeführten Zwecken geeignet sind, stehen ihrer Einfachheit und ihrem Alter "• nach voran : Die An- fertigung von Schuften und Schnitten und das Ausbrechen von Knochen- bälkchen aus frischen oder doch nicht macerirten, respective aus in Alkohol conservirten Knochen. Diesen Methoden, bei welchen jedwede *) Heitzmann, Studium am Knochen und Knorpel (Med. Jahrb. 1872, p. 341). - '■') Kassowitz, Die normale 0.ssification etc. (Med. Jahrb. 1879, p. 171 f.). ■') PuMMEH, Ueber die lacunilrc Eesorption in erkrankten Knochen (Sitzber. d. K. Acad. d. Wissensch. Wien Bd. LXXXIII, III. Abth. Jänner 1881. Sep. Abdr. p. 41, 42); Ueber die Osteoklastentheorie (Vniciiow^s Arch. f. patholog. Anat. 13d. XCII, 1883, p. 318, 319). J) Vergl.: Tomes and De Morgan, Observations on the structure and de- velopment of bone (Philos. Transactions of the R. Soc, London 1853. Vol. CXLIII, pt. 1, p. 133); weiters: Vnicnow, Ueber die parenchymatöse Entzündung (Arch. f. path. Anat. Bd. IV, p. 304) ; Volkjiann, Zur Histologie der Caries und Ostitis (Arch. f. klin. Chirurgie Bd. IV, 1863, p. 338, 339) u. A. 152 Pommer: Methoden z. Studium d. Ablagerungsverhältnisse etc. II, 2. Kalkentzielmng viuterbleibt, sind jedoch in ilirer Anwendbarkeit be- stimmte Grenzen gesteckt nnd haften bedeutende Nachtheile an. So sind wir bei der Anwendung der letztgenannten Methode auf spongiöse, und bei der — überdies sehr zeitraubenden — Anfertigung von Schliffen auf compactere Knochentheile beschränkt. Auch haben wir bei diesen beiden Verfahren keine Möglichkeit, die Weichgebilde, welche in und an den Knochen in Betracht kommen, in dem erwünschten Maasse zu erhalten und vor Veränderungen zu be- wahren. Zur Anfertigung von genügend feinen und ausgedehnten Schnitt- präparaten hinwiederum bietet sich unter der angegebenen Bedingung, wenn man von den in höheren Graden osteomalacisch oder rachitisch veränderten Knochen absieht, an den Knochen überhaupt nur in be- schränktem Maasse Gelegenheit dar. Ich musste demnach, wenn ich in die Untersuchung der geringeren Grade der osteomalacischen und rachitischen Knochenveränderung näher eingehen und über die unter normalen Verhältnissen zu beobachtenden kalklosen Knochenappositionen sowie über die Verkalkungsvorgänge an denselben ausgedehntere Erfahrungen sammeln wollte, darauf bedacht sein, ein Untersuchungsvertahreu zu finden, welches den eben ange- führten alten Methoden an Verlässlichkeit gleichkäme, dabei jedoch von den Beschränkungen und Nachtheilen derselben frei wäre. Dies gelang mir in der That, indem ich eine gewisse Eigen- schaft der Müller' sehen Flüssigkeit ausnützte, welche bei der bisheri- gen Verwendung dieser Flüssigkeit zur Kuochenpräparatiou nicht be- achtet oder wenigstens von den betreffenden Autoren * nicht hervorge- hoben wurde. Ausserdem lernte ich durch ausgedehnte, überwiegend an osteo- malacischen und rachitischen Knochen angestellte Versuche sechs Anilinfarbstoffe kennen, welclie noch nach künstlicher Entkalkung der Knochen den Nachweis schon vorher in denselben kalklos gewesener Knochensubstanzpartien mit aller Präcisiou ermöglichen. Ich werde im Folgenden das Hauptsächlichste von diesen ver- schiedenen Methoden mittheilen; hinsichtlich der näheren Modalitäten >) Vcrgl. : RoLLETT, Von den Bindesubstanzen. Cap. II im Handbuche der Lehre von den Geweben, herausgeg, v. S. Strickei;. Leipzig 1871, p. 94; Kutschin, Zur Entwicklung des Knochengewebes (Unters, a. d. Institute f. Physiologie u. Histologie in Graz. Herausg. y. A. Roi.lett, 1. Hft. Leipzig 1870. p. 59). II, 2. Pomraor: Methoden z. Studium d. Ablagerungsverliältnisse etc. 153 derselben inul betreffs der daran und an die Conservirung der bezüg- lichen Präparate sich knüpfenden Versnche und Erfahrungen verweise ich jedoch auf die betreffenden Capitel in meinen demnächst ' erschei- nenden „Untersuchungen über Osteomalacie und Rachitis etc." . AVas nun vor allem die erst gern ei nte Methode anbelangt, so beruht dieselbe auf der Eigenthümlichkeit der MtJLLER'schen Flüssig- keit, dass sie nicht nur, wie bekannt, bei länger währender Einwirkung auf die Knochen diese gut schneidbar macht, sondern auch hierbi'i den Unterschied zwischen den kalkhaltigen und kalklosen Knochensubstanz- partien deutlich und ausgeprägt erhält. Diese wichtige Eigenschaft der MüLLER'schen Flüssigkeit wurzelt augenscheinlich darin, dass die sauren Salze derselben unvollständiger als wie Säuren entkalken. — Werden Knochen bis zu durchgeifender Schnitt- fähigkeit in Säuren belassen, so zeigen sie keine Differenz mehr zwischen den früher schon kalklos gewesenen und den künstlich entkalkten An- theilen. An solchen Präparaten sind die Grenzen zwischen den verkalkten und kalklosen Kuochenpartien und die daselbst und häufig auch inner- halb der ersteren bestehenden Ungleichmässigkeiten der Kalkablagerung nicht zu Studiren. Die Tinction von in Säuren entkalkten Knochen mit Carmin, welches bekanntlich ~ auch an derartigen Präparaten noch die vor der Entkalkung bereits kalkärmer gewesenen Partien durch eine intensivere Färbung auszeichnet, bietet aber zu wenig Sicherheit und hat keine so präcisen Resultate, um ein bestimmtes verlässliches Urtheil über die Verschiedenheiten in der Kalkvertheilung zu ermöglichen. Es entstehen je nach der Intensität der Einwirkung der betreffenden Säure und der Carminlösung sehr variable Bilder, und man hat daher bei diesem Verfahren auch innerhalb der gemeinten Beschränkung stets Täuschungen durch Kunst[n-oducte zu befürchten. — Allen diesen Män- geln und Gefahren, welche die Verwendung von Säuren zur Knochen- präparatiou mit sich bringt, entgeht man, wenn die Knochen durch die Einwirkung der unvollständig entkalkenden sauren Salze der Müller- schen Flüssigkeit schnittfähig gemacht werden. In Knochen, welche durch dieselben bereits gänzlich in feine Schnitte zerlegbar geworden sind, ist noch immer eine so bedeutende Quantität von Knochensalzen vorhanden, dass die kalkhaltigen Partien von den kalklosen sehr auffällig differiren, dass ferner die Grenzen zwischen 1) Im Verlage von F. C. W. Vogel in Leipzig. 2) Vergl. H. FnEv, Das Mikroskop und die mikroskopische Technik. 5. Aufl. (Leipzig 1873) p. 183. 154 Tu mm er: Methoden z. Stiidiiira d. Ablagerimgsverhältnisse etc. IL 2 denselben in allen ihren Einzelheiten deutlich sichtbar sind und auch die innerlialb der erstereu Partien etwa bestehenden örtlichen und graduellen Verschiedenheiten der Kalkvertheiluug in aller Schärfe zu Tage treten. Diese Vortheile verlieren sich, wie ich mich überzeugte, auch dann keineswegs bald und vollständig, wenn die Behandlung der Knochen mit MüLLER'sclier Flüssigkeit über die nothwendige Zeit hinaus fortge- setzt oder ihre Einwirkung durch sehr häufiges Wechseln der Flüssig- keit oder durch Anwendung einer relativ grossen Quantität derselben beträchtlich gefördert wird. Es bietet sich selbst dann noch, wenn in Folge dieser Verhältnisse auch in den verkalkten Knochenpartien die iibrilläre Structur schon mehr und mehr zu Tage tritt, in dem höheren Glänze und in dem starren, sklerosirten Aussehen dieser Partien ein ziemlich auffallendes Kennzeichen gegenüber der kalklosen Knocheusubstauz dar, und selbst die ungleichmässig, körnig-krümelig verkalkten Stellen bleiben hierbei noch lange deutlich erkennbar. Um jedoch die bezeichnete Eigenschaft der MtjLLER'schen Flüssig- keit gan^ ungeschmälert zu verwerthen, empfiehlt es sich nicht, die be- treffenden Knochenstücke mit derselben in der erwähnten Weise weit über den Beginn der brauchbaren Schnittfähigkeit hinaus zu behandeln. Am schönsten tritt der Unterschied zwischen den verkalkten und kalklosen Knochenpartien dann hervor, wenn man die MüLLER'sche Flüssigkeit auf die zu untersuchenden Knochenstücke nicht länger ein- wirken lässt, als bis dieselben mit einem scharfen Rasirmesser eben gut, beiläufig wie hartes Holz, schueidbar geworden sind. Unterbricht man zu dieser Zeit die Einwirkung der MüLLEK'schen Flüssigkeit, so liebt sich in den angefertigten Schnittpräparaten die verkalkte Knocheu- substauz durch ihr homogenes Aussehen auf das Vollständigste von den kalklosen Knochenpartien ab , welch' letztere — bei Beobachtung in schwach lichtbrechenden Medien — die fibrilläre Structur in derselben Weise und Deutlichkeit hervortreten lassen, als wie es au Knochen- präparaten der Fall ist, welche man mittels der salzsäurehaltigen Koch- salzlösung V. Ebxer's unter Vermeidung jeder Quellungserscheinung vollständig entkalkt hat. Derartige, durch die Einwirkung der MüLLEK'schen Flüssigkeit gewonnene Schnittpräparate zeigen die gleiche oder fast gleiche Diffe- renz zwischen dem Aussehen der kalkhaltigen und kalklosen Knochen- partien und lassen homogen verkalkte, kalklose und ungleichmässig körnig-krümelig verkalkte Partien mit der gleichen Sicherheit unter- II, 2. Po mm er: Mctliodfii z. Sduliiiiu d. Alilageriiiigsvciliiiltiiissc etc. 155 scheiden, als Präparate, welche (»liiie jedwede Kalkentziehung herge- stellt sind. Die vorhin erwähnten Beschränkungen und Nachtlieile, welche den Methoden der letzteren Art anhaften, entfallen hingegen bei der Anwendung der MtJLLEK'schen P'lüssigkeit gänzlich. Wie aus dem Gesagten schon hervorgeht, ist der P^rfolg des be- schriebenen Verfahrens durchaus nicht an eine Combination desselben mit der Carmlntinction gebunden. Letztere ist hierbei ganz entbehrlich. Aus einigen Gründen jedoch empfiehlt es sich immerhin, solche Präpa- rate mit Carmin zu tingiren ; so vor allem deshalb, weil bei der An- wendung der Carminfärbung zarte, kleine kalklose Knochensubstanz- theile viel leicliter aufzufinden sind, und weil die Schnitte hierdurch überhaupt sehr an Uebersichtlichkeit gewinnen. — Schliesslich habe ich nun in Kürze über die erwähnten sechs A n i 1 i n t i n c t i 0 n s m e t li 0 d e n zu berichten, welche ich brauchbar fand, um an den Schnitten von künstlich mittels der salzsäurehaltigeu Koch- salzlösung V. Ebnek's entkalkten osteomalacischen und rachitischen und von anderen derartig behandelten Knochen die schon vorher kalklos gewesenen Knochensubstanzpartien präcis und deutlich siclitbar zu machen. Wie ich bereits in meiner Arbeit über lacunäre Resorption - bei- läufig bemerkte, bestehen diese Reactionen darin, dass an solchen ent- kalkten Knochen — im Gegensatze zur Carminwirkung — die schon vorher kalklos gewesenen Partien gänzlich ungefärbt bleiben, während die früher kalkhaltig gewesenen die betreffenden Farbstofte an sich ziehen. Die Farbstoffe, welche diese interessante Erscheinung darbieten sind: das bläuliche (BBB) und das röthliche (RRRRR) Methylviolett, ferner Dahlia (R) und Violett Parme (B), weiters Safranin und Methylgrün (GG). Die genannten Anilinfarben stimmen auch in anderer Beziehung, nämlich in ihrem Verhalten gegen Säuren und Alkalien, unter einander überein, und es war zum Theil gerade diese ihre Uebereinstimmung Veranlassung, dass ich zur Auffindung aller derselben gelangte. Sehr diflerent ist hingegen die färbende Kraft der genannten Farbstoffe, wie sich dies sowohl an den Lösungen derselben als auch an den damit tingirten Präparaten durch die verschiedene Tiefe der Färbung zeigt. •) V. Ebnek, Uebcr den feineren Eau der Knocbcnsubstanz (Sitzber. d. K. Aead. d. Wiss. Wien. Bd. LXXII, 1875, S. A. p. 10). ■') PoMMEu in Sitzber. d. K. Aead. d. Wiss. Wien. lid. LXXMII, 1881; S. A. p. 46). 156 Pommcr: Methoden z. Studium d. Ablagerungsverhältnisse etc. II, 2. Ich verwendete demgemäss die angeführten Tinctiunöinittel iu Lö- sungen von verschiedener Stärke, indem idi, je nach der Natur der Farbstoffe, mit Wasser oder mit Alkohol hergestellte Lösungen von be- stimmtem, beträchtlichen Gehalte mit Wasser in verschiedenem Grade verdünnte. In diesen verdünnten Farbstotflösuugen — für die ich bei den zwei Methylviolett und bei Violett Parme gewöhnlich einen Farb- stoffgehalt von 0-02 pro Mille, bei Dahlia den von 0'04 %q, bei Sa- franin jedoch den von 0-1 und 0'J6 %q und endlich bei Methylgrün den von 0*3 %o und darüber wählte — zeigen die Knocheuschnitte innerhalb von 12 bis 18 Stunden, bei den fünf erst erwähnten Farben, schon eine sehr intensive brillant blau- resp. rothviolette resp. violett- und ziegel- bis hochrothe Färbung ihrer kalkhaltig gewesenen Partien. In Methylgrün nehmen dieselben aber nur eine blasse Färbung an, die auch nach längerer Einwirkung und in stärkeren Lösungen nicht bis zum Dunkelgrün gesteigert werden kann. Bei allen genannten Färbungen zeigen sich die einzelnen Lamellen- systeme nnd Schaltstüeke, welche die kalkhaltig gewesenen Ivnochen- partien zusammensetzen, nicht in ganz gleicher sondern in mehr oder minder verschiedeugradiger Intensität tiugirt. Die bereits vor der künstlichen Entkalkung kalklos gewesenen Knochenpartien contrastiren jedoch gegenüber den gefärbten kalkhaltig gewesenen bei allen diesen Methoden, wie schon gesagt, äusserst scharf und deutlich durch den Mangel jeglicher Färbung, Auch an dicken Schnitten wird an denselben höchstens nur ein schwacher Stich ins Gelb- liche oder Röthliche bemerkbar. Wie ich endlich noch beifügen will, sind sowohl in den gefärbten als in den ungefärbten Knochensubstanzpartien , bei Untersuchung der- selben in den Tinctionsflüssigkeiten selbst oder in anderen schwach licht- brechenden Medien, die Strnctur - Details sehr deutlich und leicht zu verfolgen. Die zelligen Gebilde zeigen durchweg, auch in den unge- färbten Knochentlieilen, eine dunkle gesättigte Tinction, während das Biudesrewebe hingegen der Färbung durch längere Zeit widersteht. II, 2. Mondino: Bicloruro di mercurio ncllo studio dcgli org. centr. 157 Suiruso del bicloruro di mercnrio uello studio deo'li oi'o'ani central i del sistemn nervoso. Nota del Bottore Casiiniro Mondiuo, Iiicaricalo della dirozinne ilel Laboratorio anatomo-patolot;iLO del Rojjio Maiiicomio di Toriiio. Communicata alla R. Accadeniia di Medicina in Torino nella seduta del 2 genuaio 1885. Come e noto, i metodi escogitati dal professorc Golgi per colorire in nero gli elementi del sistema nervoso centrale sono due; iiuo si basa suU'azione successiva dei bicromati e del nitrato d'argento ; l'altro sn qiiella dei bicroraati e del bicloruro di mercnrio: qnest'nltinio veramente non da niia colorazione nera , ma rendendo opachi gli elementi in qnestione li fa apparire neri al microscopio. II primo e quello del quäle si valse il Golgi nelle sne ammirevoli recerclie snlla fine anatomia del cervello e del raidollo spinale e fn questa una vera fortuna di tale im- portantissima reazione perch^ essa, pel trovarsi continnamcnte fra le mani del sno illustre autore, subi tutti i miglioramenti che si potessero desiderare incominciando da quelli concernenti una maggior delicatezza della colorazione fino a quelli che resero possibile la pcrfetta conserva- zione dei preparati. Riguardo al secondo metodo il prof. Golgi volle incaricare me di cercare se e di qnali migliorie fosse suscettibile ed e appunto qnalcho risnltato di (pieste mie ricerche che ho l'onore di pre- sentare stassera aUMllustre Accademia. II prof. Golgi ha descritto ' la reazione al bicloruro di mercurio nei piccoli pezzetti di cervello : (juesti si mettono freschissimi in bicro- mato di potassa (soluzioue acquosa al 2 "/(, oppnre liqnido di Müller) e vi sL lasciano un mese : dopo tale tempo si passano in una sohizione acquosa al 0'5 % di bicloruro di mercurio. Questo licpiido, pei i)rimi giorni, si rinuova ([uotidianameute perch6. viene inquinato dal bicromato che dal pezzo diftbnde : dopo 8 a 10 giorni la reazione e avvenuta. Quando il prof. Golgi dcscrisse questa reazione acceiinava al ftitto che, se essa era meno ricoa e uicii«) elegante di quella al nitrato d'ar- ') G()i,Gi, Di una nuova reazione apparentemente nera dellc cellule nervosa ecc. (Arch. per le scienze mediche. Vol. III fasc. 11). 158 Mondin o: Bicloruro di mcrcurio ncUo studio degli org. ccntr. II, 2. gento, aveva su questa 11 pregio dl dare preparatl perslsteutl. AI giorno d'oggi le mlgliorle apportate dal Golgi alla reazlone coU'argento nou permettono piü dl parLwe dl un tale vantaggio perclie 1 preparatl all'ar- gento sl conservano stupendamentc. ßlraane fra le diie reazlonl iin'altra dlfferenza cul 11 Golgi acccnnava ed e che qiiella al mercurlo si ottiene con tiitta slcurezza segiiendo le norme descritte mentre non sl piio dlre altrettantü dl quella coU'argento. Questo e un vantaggio che ha suU'al- tra la reazlone al mercnrlo 11 quäle e grandlsslmo e pel quäle essa deve avere la preferenza ognlqualvolta sia da applicarsl la reazlone nera allo studio dl un pezzo la cul perdita non sla facilmente riparablle. Ma un altro ve ne ha, siccome vedremo, di non minore importanza ed e che mentre colfargeuto non sl puo ottenere la reazlone che su plccoll pezzl, eol mercurlo Invece la sl lia su pezzi di qualunque dl- menslone. Quando 11 prof. Golgi mi incaricava dello studio di questa reazlone ml dava un cervello dl gatto sul qnale l'aveva praticata con risultato spien dldo. Sebbene la dlfferenza dl volume fra 11 cervello del gatto e quello dell'uomo sla enorme, tuttavia 11 vedere un cervello Intlero su cul sl era appllcata la reazlone mi fece nascere la speranza dl poterla avere anche sul cervello umano e tale speranza non ando delusa: le sezionl che presento all'onorevole Accademia sono sezionl dell'intlero encefalo umano e la reazlone h In esse completa ed elegantisslma. Per ottenere un tale risultato non occorre l'intervento d'altrl reagenti che quelli propostl dal Golgi; sempllcemente occorre varlare 11 tempo della loro appllca- zlone. Ecco le norme cul occorre atteners^l : I cervelll sl pongono freschissiml in bicromato o liquido dlMüLLEK: perö, siccome 11 liquido conservatore Impiegherebbe un tempo grandlsslmo a penetrare per osmosl dalla periferia all'lnterno dell'organo e perclo 11 tessuto centrale potrebbe guastarsl prima d'aver sentlto l'azlone del reagente, cosi h bene dl dare preventivamente una Inlezlone di liquido dl Müller per le carotldl, II miglior metodo dl Inlezlone e dl mettere alcuni litrl dl liquido in un pallone di vetro e, mediante un slfoue, condurlo alla cannula da inle- zlone Impegnata in una delle carotldl mentre l'altra e le vertebrali furono legate. Sl apre allora una giugulare e, al dlsotto dcll'apcrtura, sl porta sul coUo un lacclo clrcolare assal stretto : si colloca 11 pallone a magglore o minore altezza secondo che sl vnol dare magglore o minore pressione II, 2. Mondin o: Biclornro di niorcnn'o nollo studio dcgli org. contr. 159 al li(inido d'iniezioue. Avendo disposto le cose in questo modo noi possinmo saperc se ed in quäle qnantita, passa il reagente attraverso il cervello poich^. lo vediamo nscire dalla giugnlare che e aperta. Intanto otteniarao nna inieziono delicatissima di licjuido conservatore poiche questo per nscire attraversa i capillari e, siccome passa nell'organo con corrente coutinua cosi si ha anche il vantaggio di lavare quest'ultinio dal sangue riraasto nel letto circolatorio. Dopo un certo tempo pero il liquide cessa di passare perch^, per l'indurimento che avviene nel tes- suto , si vanno ostruendo i capillari. A cpiesto niomento , o meglib prima, si toglie il cervello dalla cavita craniana c lo si porta in liquido di Müller. Avendo praticato la descritta iniezione e indifferente lo spogliare o non il cervello dalle meningi. Un cervello cosi preparato dcve restare in bicromato alnieno un paio di mesi, ma una piu lunga perraanenza non nuoce punto alla reazione ; pero quanto piü far lunga questa permanenza altrettanto piü lunga deve essere poi l'immersione in biclornro di mercurio cd altrettanto sara piü ricca ed elegante la reazione che otterremo. I cervelli appena tolti dal bicromato si portano in una soluzione acquosa di biclornro di mercurio al '/v^'o: questa soluzione viene naturalmeute inquinata dal bicromato di potassa che diffonde dai pezzi e, a misura che essa si tinge in giallo, occorre la si rinuovi : nei cer- velli che hanno subito a lungo l'azione del bicromato e che sono appuuto quelli in cui avverra piü bella la reazione nera , potra occorrere di carabiare il biclornro durante qualche mese prima che si cessi dall' avere la colorazione gialla del bicromato. Perö 6 da osservare anzitutto che il biclornro di mercurio costa poco e che poi quello che viene tolto dai pezzi perche inquinato di bicromato puö ancora essere utilizzato per altri pezzi appena tolti dal liquido di Müllee. Del resto, come vedremo oltre, il processo di cui tratto fa verificare tali risparmi neUa successiva confezione dei prepa- rati che, mentre costituisce il processo piü delicato che si possa avere per la colorazione delle sezioni d'interio encefalo, e pure il metodo i)iü economico possibile. Quando il biclornro di mercurio non \iene i)iü inquinato di bicro- mato di potassa lo si mette in qnantita abbondante e non e i)iü ne- cessario rinnovarlo: se tnttavia a lunghi intorvalli lo si vuole cambiare, natnralmente la reazione si otterrä piü delicata. A questo punto si possono lasciare ancora i cervelli per qnindici o venti giorni nel reagente per poi sezionarli : pero, quanto piü a lungo si lasciano, altrettanto meglio si va completando la colorazione. 160 Mondino: Bicloruro di mercurio nello studio degli org. centr. II, 2. Le sezioui di tali cervelli uaturalmente si praticano col microtomo di GuDDEN e, siccome la consistenza che essi assumono e stnpenda- mente addatta per seziouare, cosi non h necessario imbibirli in paraffina ma basta semplicemente incbiderli in essa. Tolto adunque il cervello dal bicloruro lo si lava con un po' d'alcool oude la paraffina possa aderire beue alla superficie; poi, messolo uel microtomo in quella posi- zione che si desidera, vi si versa sopra la sostanza includeute. Siccome questi pezzi non perdono piinto della loro consistenza ne della loro colorazione pel prolungato contatto dell'acqua, cosi, riempiuta di questa la vasca del microtomo, noi possiamo j^oi fare con tutta com- modita le sezioni : mi basti riferire che io ho sezionato im intiero cer- vello praticando quindici o venti sezioni al giorno, per cosi dire, a tempo perduto. In tal modo impiegai circa tre mesi a giungere al fine e la colora- zione nelle ultime sezioni era tanto bella quauto nelle prime : la consi- stenza fii senipre identica. Intauto, meutre con tutti i raetodi in uso le sezioni sono tanto piii proprio alla osservazione quanto piu sono sottlli, qui la cosa cambia : nei cervelli trattati col metodo esposto si ha il prolungamento funzio- nale delle ccllulc colorito in nero, o, diro meglio, reso opaco al pari della cellula dal bicloruro di mercurio che lo ha compenetrato, per lunghissimi tratti e forse, per la massima parte di essi, dalla origine fino alla terminazione od alla emergenza dal cervello ; il potere diretta- mcntc vcdcrc tali prolungamenti e scgiilrne Vimdamcnio nd cervello, vantaggio, culminantc di (juesto metodo che appunto per esso e di gran Innga superiore a tutti quelli noti, sta precisamente nel poterli compreii- dere pel maggior tratto possibile della loro estenzione in una sezione. Siccome i prolungamenti in questione non decorrouo in un piano uni- forme ma descrivono delle curve, dci zig-zag lungo il loro tragitto, cosi, se noi non pratichiamo delle sezioni piuttosto robuste, certamente distr.igge- remo in pih punti la loro continuita e perderemo la possibilita dis eguirli. D'altronde il maggiore spessore delle sezioni clie qiii e necessario non impaccia aftatto Tosservazione perche, essendo rese oi)ache le parti da esaminarsi, esse spiccano sempre mirabilmente nei })ieparati i quali devono cssere resi trasparenti. Praticata una sezione, siccome essa non ha piü da subire che trat- tamenti successivi i quali devono esser fatti sul portaoggetti, la si toglie servendosi addirittura di (luest^ultimo dalla vasca del microtomo. Per tal modo si possono poi numerare direttamente le sezioni neirordine stesso in cui vennero fatte. II, "2. Moiuliuo: Dicloruro di inercurio nolio studio degli org. ceiiti". IGl Ricevuta siil portaoggetti la sezioiic vi si fa passare sopra im leggi- ero getto d'acqua mediante iina pipetta per esportare le particelle di paraffina rimastevi attaccate e qiiindi le diverse sezioni vengono messe sopra nn piano orizzontale. Si liberaiio allora dalTcccesso di acqiia ascingandole delicatamente con uu foglio di carta bibula e quindi si versa al centro di ciascuna lui poco di creosoto piiro, permettendo il geuere di colorazione di usare qnesto reagente senza inconveniente alcuno. In alcune ore il creosoto ha reso trasparentissime le sezioni e cosi all'alccol comune, alcool assoluto e qiiiiidi olio di garofani o di tere- bentina, sostanze tntte assai care, noi abbianio sostitiiito un poco di creo- soto che Costa poclüssimo cd abbiamo risparmiato molto tempo e fatica. Allorquando le sezioni son rese trasparenti dal creosoto si niettono in nn piano inclinato e si lascia sgocciolare via il reagente che, ricevuto in nna capsnla, serve ancora per preparati successivi ; poi, rimessele in piano orizzontale, vi si versa su della gomma dammar nn po' liqnida. La gomma si distende natnralmente secondo il piano orizzontale : ascingandosi pero lascia allo scoperto la supcrficie delle sezioni e, a misura che questo avviene, si agginnge nna piccola qnantita di gomma fin che la sezione resta tntta coperta di qnesta. Noi possiamo segnire una tale pratica, per la qnale si richiede nno Strato di gomma un po' robusto, perche, pel genere speciale di colora- zione, non abbiamo bisogno di forti obbiettivi per lo stndio accnrato dei nostri preparati e cosi risparmiamo l'uso dei copra-oggetti. La gomma essiccandosi acqnistn la dnrezza dcl vetro e basta tenere pei primi giorni al riparo dalla pulvere i preparati: molto presto lo strato superficiale della vernice acquista una consistenza tale che la pulvere non fa pin jjresa e piii tardi, si capisce, i pre])arati possuno poi esserc spolverati mediante nno strufinaccio come quelli chinsi fra due vetri. Cosi sc nui diamu unu sqnardo generale vi vantaggi di cpiosto nietudu vedianio che: A. Essu e il primo pel qnale si pussa avcre la C(»lornzione nera delle cellule nervöse e dei luro i»rolnngamenti funziunali nellu inticrct encefalu e die per conseguenza ci ponga in grndu di segnire diretta- mente questi nltimi nel luro andamentu attraverso al cervello. Non c'e dnbbio che qnesta tecnica soddisli assai piii al rigurismu scientifico e ci motta assai meglio in grado di arrivare a conoscenzc precise sul tantu discusso andamentu delle fibre nel cervello, che non tutti i nietodi finora inutilmente tentati dei promuovere la loro degenera- zione. AI piii c(m questi nltimi sara dato vedere se in qualche direzione corrano nnmerosi prulungamenti funzionali nniti in fasciu (ed anche a Zeitscli . f. wiss. Mikroskopie. II, 2. 11 162 Mondino: ßiclonir.i di merciirio iiello studio degli org. centr. JI, 2. questo pvoposito si potrebbero fare seriissime discnssioni) meutre invece colla nostra tcciiica si piio esaminare fibra per lil»ra e seguinie le anastomosi. B. Cor tntti gli altri metodi per le sezioiii coniplissive del cer- vello noi dobbiamo portare le sczioni iu va^^clie conteiienti il üquido colorante e siccome 6 impossibile disporre di tante vasclie conteiienti questo liquido quaute sezioni si praticano, a meno di possedere mezzi eccezionali, cosi noi dovremo mettere pin sezioni in nna vasca e quindi uon le potremo nnmerare che per grnppi, come nelle vasehe vennero poste; nia non sara possibile nnnierarle uiia per nna nell'ordinc con cui fnrono eseguitc : col nostro metodo per contro un tale risultato lo si ottiene con massima facilitä. C. Cogli altri raetodi e indispensabile che le sezioni sian niolto sottili : ne consegiie che niolto faeilmente e^^sc si frantnmino specie perche devono subire varii trasporti (dal microtorao al liquido colorante,' poi al portaoggetti ecc.) ciascuiio dei quali costituisce un pericolo e poi, essendo molto sottili, quando si scziona un cervello intiero riescono auche molto numerose e quindi niaggiorc spesa per l'allestimento dei preparati, maggior tenipo e maggior fatica dal impiegarsi; col nostio metodo e necessario che le sezioni non siano sottili e quindi riesce minore il loro nuniero ed esse meno deboli ai pericoli : quindi molta sicurezza di non perdere neppur una sezione, poca spesa per allestirle e maggior rapidita a preparare un intiero cervello. D. Da ultimo, meutre con tutti gli altri metodi noi dobbiamo usare le sostanze coloranti, l'alcool comune, Talcool assoluto e Polio di garo- fani 0 di terebentina, qui noi non impieghiaino che un poco di bicloruro di mercurio e di creosoto che costnno pocliissimo e, meutre cogli altri metodi dobbiamo valerci della lastra copra-oggetti perche gli iugrandi- menti piii forti che essi richiedono per lasciar poi vedere poco non per- mettcrebbero lo Strato poderoso di gomnia dammar, qui invece noi la risparmiamo e con questo, oltre al verilicare una considerevole economi;i, evitiamo auche la noia della applicazione di queste lastre cosi grandi, nella quäle c diflicile evitare il poco gradito divertiniento di provarsi a cacciare con grave pericolo del preparato qualche boUa d'aria piii o meno iudiscreta nella scelta della sua sede. Mi parc che, auche a parte tutto questo risparmio di uiatcriali di tenipo e di fatica, a parte la eom- modita di sezionare i)er cosi dire a tenq)o perso i pezzi inclusi nel microtomo senza che essi softVauo mai i)el loro prolungato contatto colfacqua, (juesto metodo, che pel i)rimo ci pcrmette seguire Tanda- luento delle übre nelle sezioni del cervello intiero, costitnisca un pro II. 2. Moiiilino: Bicloruro di mercurio nello studio degli org. centr. 163 gresso iiella teciiica dello studio del sistema nervoso centrale e moriti SU tutti gli altri la preferenza; ma esso ci offre ancora im vaiitaggio grandissimo del qnale io devo dire e che riflette la conservazionc dei cervelli ed 11 loro studio raacroscopico. Cou tutti i nietodi noti i)er la conservazlone dei cervelli si jia in essi iina diminuazione di volurae ; ma, cio che e peggio, la diftereuza di colorazione fra la sostanza bianca e la grigia scompare affatto per cui, se SU di essi possiamo ancora vedere Taspetto esterno del cervello fresco (a parte le dimenzioni), non possiamo pero piü studiare le particolaritä di struttura intima degli emisferi mediante le sezioni macroscopiche. Per lo studio istologico poi tali cervelli non servono piii aftatto giacche non e piü possibile con alcnn mezzo vederne gli elementi. I cervelli preparati col bicloruro di mercurio acquistano un C(dorito grigio pallido che si avvicina in modo affatto particolare a quello del cervello fresco lavato dal suo sangue, e ne conservano in modo esattissimo la forma e le dimenzioni. Se si taglia poi iino di ([uesti cervelli si trova la ditferenza fra le due sostanze piü spiccata che allo stato fresco perche essa si conserva delicata quäle divenne coU'azione del liquido di MtTLLEK. I cervelli si possouo conservare anche colle meningi c queste, quando si voglia, si possono togliere con tntta facilita dopo Tindurimento perche il bicloruro di mercurio non le rende friabili. Adunque noi abbiamo dei cervelli siii quali le minime particolarita di stuttura macroscopica possono essere studiate meglio che a fresco sia per cio che riguarda la forma, Taspetto esterno, che per cio che riguarda Tintiraa costruzione deiremisfero. Questi cervelli possiamo conservarli in bicloruro ; ma se li vogliamo conservare a secco e cosa facile : non abbiamo che a metterli qualche giorno in glicerina , poi toglierli da questa e metterli sopra un piano inclinato per lasciarne sgocciolare via l'eccesso e noi abbiamo cervelli i quali, per la successiva conservazionc, in nulla ditferiscono da quelli preparati col cloruro di zinco. Allorqnando poi vogliamo studiave istologicamente tali cervelli non al)biamo altro a fare che passarli in acqua abbondaute per togliere la glicerina e poi sezionarli colle descritte norme: la colorazione degli elementi, le dette particolaritci di reazione non avranno punto soffcrto qualunque sia il tempo di conservazlone che couta il cervello. 11^ 1(54 Gierkc: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. II, 2. Färberei zu mikroskopischen Zwecken. Von Professor Dr. Hans Oierke. in Hrcslan. (Schlnss). Sehr wielitig für den eben erwälintcn Zweck ist das V'erlialten der Farbstoffe gegen Säuren luid Alkalien. Ebenfalls interessiren den Forselier ganz ausserordentlicli die Lösliclikeitsverliältnisse. Ich füge daher, um eine leichte Orientirung zu ermöglichen, der vorangehenden Besprechung der Theerfarben eine ausführliche Tabelle hinzu, in der ich die wichtigeren Farbstoffe ilirer chemischen Verwandtschaft nach geordnet habe. Die chemischen Bezeichnungen sind den gewöhnlichen Namen oder den Handelsmarken hinzugefügt. Bei den meisten ist die Art der Entstehung angegeben. Ebenso sind die Löslichkeitsverhält- nisse und einige Reactionen angegeben. Wegen der grossen Wichtig- keit dieser habe ich noch eine zweite Tabelle hinzugefügt, in der nnr auf die Löslichkeit und auf die Reactionen bei Behandlung mit Säure und Alkalien Rücksicht genommen ist. Da der Hauptsache nach nur die Farbstoffe wirklich histologisch brauchbar sind, welche sich in Wasser oder Alkohol lösen, so sind nur diese aufgeführt. Einige aller- dings lösen sicli nur in heissem Wasser. Diese Tabelle könnte sehr vervollständigt wei'dcn, indem noch andere Reactionen mit den ge- bränchlichsten Reagentien angegeben werden könnten. Ich habe aber diesellien noch nicht in genügender Weise durchführen können. Bei denjenigen Farben, welche nur \ on einer oder von einigen wenigen Fabriken angefertigt werden, habe ich diese angegeben. Für die praktischen Zwecke der Tabelle aber war es werthlos, die Fabriken zu nennen, in denen die nicht mehr gebräuchlichen und aus dem Handel verschwundenen Farbstoffe hergestellt wurden. Auch wenn es sich um Farben handelt, welche wie Fuclisin in zahlreichen Fabriken angefertigt werden, wären solclie Angaben ohne jeden Wcrtli. Dennoch mache ich noch einmal darauf aufmerksam, dass es bei den meisten Farben wichtig ist, die Herkunft derselben zu kennen, da selbst ganz glcicli bezeichnete Farben, wenn nach verschiedener Methode gewonnen, oder durch geringe Beimisclinngen sehr verscliiedene Eigenschaften und Wirkungen lial)en kitnnen. Viele d<'r zahlreichen Differenzen in (]vn n. 2. Gicrke: Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. 165 Kesultateii der Anilintinction sind gewiss ;iuf diesen Umstand znriickzu- t'iihren. Jedenfalls sollte man sich in unserer Zeit, in der verschiedene Handlungen in Berlin, Leipzig u. s. w. den Handel mit mikroskopischen Tinctionsmitteln als Specialfach betreiben und kleine Quautitäten be- währter Präj)arate überall hin versenden, nur an solche sichere Ge- schäfte wenden, wenn man nicht etwa directe Verbindungen mit den Fabriken hat. Sich sein Material von Anilinfarben für mikroskopische Zwecke aus der ersten besten Drogueu- oder Farbwaaren-Handlnng zu holen, wäre genau eben so weise als wenn man seinen Bedarf an edlen Weinen der Bequemlichkeit halber aus dem nächsten Materialwaaren- Gescliäft beziehen wollte. AhMimingcii in der Tabelle. Der Kürze halber sind in der Tabelle folgende Abkürzungen vor- genommen worden: W. = Wasser, Alk. — Alkohol, lösl. ^^ löslich. Bei der Angabe von Fabriken bedeutet Meist., Luc. und Brün. die be- kannte und höchst bedeutende grosse Fabrik in Höchst a. ^L von Meistee, Lucius und BKtrmNG, Bad. An. und Sod. Fabr. die Badische Anilin- und Sodafabrik in Ludwigshafen a. Rh. und Stuttgart, Binds. u. B. BiNDSCHEDLER uud BuscH in Basel. Die sonst noch angeführten be- deutenden deutschen Fabriken sind Kaj.le u. Co. in Biebrich a. Rh. und die Actiengesellschaft tiir Anilinfarbenfabrication bei Berlin. 166 Gierk(v. Färberei zu mikroskopischen Zwecken. II, 2. o CO Jh CO !^ ?^, 0^ Cw g a js S 3 xydirci aurcs ] Cß es o •S 3 •— < O M Js o D ^-' c» -S bC <^ VM rS O -r. '^ 'S o C/3 CS -43 2? =« rja o ,^ >■ O) ("^ '"l Is o CO «ii ci c3 cco O C ^^ S 03 N o M O S 3 S ;-. S O °5 ^^ o -^ :c« '^ •■r! 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'^ - i2 o IL 2. Gierke: Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. 169 c ^ p^ r* .-> ^ y X ^ ^ ^ ■-"' — !-( c/3 O ä -^ -:f S ?H SP-a' > ~-^ 2 ;'' = o fcjc s ■^ -^ c 1: V? 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ITo -'S ^,15 a s •5 sc P ^ ö j .3 .^ c/v 03 CO a o . >.^ es CO -j^ ^^ '"' 'S c c es o c pq bO c S-t O V) ' • ■ — • ^ o C ci 5; a; •' Ö _ o S O S CS ö P . -O O Q S -5 « o -' >^ p-3 ^ > o ü 3 pq o 3 « Sa .« -3 l-i O C 'S ^ rtfi, d» cn CS S P .3 O _; S c .3 ^ o •- " " CO ES c/l '?^^" a c 2 a1 cC ;^ _— < ^^ t; O CS " 13 tH O eS O 5 -^ 1-3 es o o . 1 «^ r-3 a .5 'S " rt o cß 'S ü bc M ^ ,. bC S S -e -t^ ^ _M N •-' cS r^ :S J ^ O ^ S S -^ r ^ ^-a ^ .;i; a>»^ i- -r- -" ^ ■"2 CO S ^*-' CO " eS ^^ -; ° 1^ I ^ (-=5 .S rt O 1— 1 CO -u -1-2 r^ ^ O ■^ ^ o o a> .— . •-l--=3 eS ^ .^ <1 • ^^ n '- S ö o c CO ja 1 -^ es O . -g rd =: i; c . o - 3 S Cd !•" » CS i, *^ :'r P^«^ CS CO ,-~, Sa? o cS ft ^ o M o CM o 3 o CO o p _. -b "o •— ' -_o s o S 2 ,2. ^ 'S CS J2j ;2 O -4— > O es o O ö o ^ bß es ?o2 ^ es CU es ^ ^■■^ o, r— O =C o ä 5 > 'S it o s «'S 3 bO^ Ö 'S o o s •S O "j; eS "2 ■? ' B P r— S "^ a s s ^ -^ o ■^i N P'> h5 es S ^ ■ ".3 y O a ^ .o CO es o «J Z. P . 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Anmerkungen. 1 .2 1 ■■r} 1 3 p^ Q = -2 ^ c -2 "rt »^ 3 'S , * *~i f/3 cß O 1 g 'n c 'S o C3 CS 'S o «3 o ja "cS 'S a o o 'S H j^ Ol CÄ ^— O CA P a 3 S-i ii 1 2 «= CS CS ^ o O S 'B^ a "=« ?r,a CS bC S 3 o .-3 .2 '-4-H s ja CS .2 'S Cß ja 'S CO c: •i—t Ol O 3 jq o CS N r3 ^ 'S c^; tH o _ >'. ^ = ?g = ^ i 3 S-3 S >■ "^ S . a^ J3.-« O >,• S .. d U) i^ U ■J3 C o Jt > t- O !-, •r' o i- '^ 3 •— .=* .S •-:3 ^ t-^ cß « - =2 o *< So-^ _i, bB !_ ^ •2 S s 5 2^ o <^ ::; j= .2 >• _=* Z -^-^ .a -2 es C5 CO , ; O CS Cß CS sq H P ■/. pq o o o o pq pq^ Q a •1—1 fa'S 2 a sbw OcSO^PmO-iWH ^Q P f=- CO CO 'S JO a ^ c s ■^0:0 S cß o ^ . O :CS 03 • ^ Sä o a > H^ •^ O cß cS C Cß CO o *« -fS 5 a> l> «u •r-l O) 'S S t» O o Form. hkeitsver d Beacti a> CO Ol '3 ,3 S J/3 •ä- ^al? 1^« a _bJO 2 O CS J3 ^ •2 •:■.- ^' < c t— 1 öslic, un O S. 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Gierke: Färberei zu mikroskopischen Zwecken. 179 a> o eä u I Ol ÖD S O *-i ' -1^ ' -3 ff) '^ ^ -r- 'g bß.2 c 3 o CCh CO CO CS C a> c o g « N ö b 2 .2-2 ö'^S, - S-" Ol <1 ^.2 S O cß o S J " • o S- ■r 'S ?^ S S s CO .i3 fco ^ "ö • S S p cöpq g = " N h P 3 ■^ d) c3 ..„ El, N ö o o-S Vi o P > ^ O bc O) W Mm • -I N «'S ä J «.SPS*« « g 2 -^ 9 !- o g O) CO CS 'S b'n^ •^ 's a -ä a M 3 •=> CO r; '-i ^ ,^ «3 3 3 £ N! 3^ b S « 03 S 's:! gK ^ 03 r^ ■ 2 ^ s .S|'^'" S " '- ^ CS o " 03 N ä p > 'r^ ""TS ^ S gpM fitgpl^'ö ^ a O C3 eis 03.i!l a c eM.2 CO 03 ,tj ■O CO bXji-l r3 CJ .1— < ^ -i3 03 :C> es p^:zi 2 oS &: 03 !h 03 *> CO -a CS ■p ,cS Ö ^+-1 (D >a --^ ^ 03 .^ "o 03 -^ j3 gcS o ÖC -^ co_^ S 03 i-H '-' bJO 03 t« P o So ^ bo 03 S 'S ö ■2 03 03 O JJ *s a^ r« • "5 -W rj (1> 05 '"•-•§■? ^^ =:2S,l:s^ .-^ K ^- 03 -:: lO O CO f^x öö oo in o T-l Ol OO o -o r-( TO r^ 03 !-i —2 03 CS t- CO CO 43 CS " 03 o Js 3 Pn a =; 03 _: >•, 03 m 03si;r o S -^ « o 3 ;3 0) w .-3 CS •br^ 3 C3 gj .M .... -^ S a 03 CD 03 CO O «3 ^'^^^. .S 03 a 43 b£ < w "'S s tO K, N<1<1Q p:.2 &ß es o si CO 12* c» < 180 Gierke: Färberei zu mikroskopisclien Zwecken. 11,2. s o bc a> «3 i-rt w I 1=1 Ö O^ CO T! -^ a N ^ o a S = ^ Ö CS '^ -a s a a> o O ö o > P > C «D N O 5-; ,4.^ N S c3 O) Ol s O S !- S c/^ .22 1^ S ^^ C.3 o C :; Ä i^ O ri :: ^ — '-' :2 -? o £^ = - -ij iJ iH J; "tl ^^ cS rt a> rt > > fe r— ja «3 ni o bf W " _g 42 CO fco S . . 0_ c» ni — ' a 2's CK O o 0) 5 c a bc ., « « 3 a — I /ii CS bJD ä s o ^ a es :ffS ;_ d) OD Lh CO -jj cS ü bfl s p o p=3 o • »-I .S a^ es CO |> S --• a s .s •n 'S CS 05 ® cS ü <1J ^ C C o C CS _ ;c; P (D ^ CO .PH !~i s_, ' ^ cc CD CS öc »• bX) 0 g- 2 „ Essigsäure 50,0 g. Der Muskel bleibt darin bis zur nöthigen Färbung der Nerven, also etwa 2 bis 3 Stunden, darauf kommt er in das Gemisch^l b auf einige Stunden. — Der Muskel wird glashell, berusteinfarbig, der Nerv schwarz- braun. Das Nervenmark wird dabei stellenweise etwas alterirt, indem es schmaler wird als normal. Auch der Nervenendbusch wird bei dieser letzteren Methode gefärbt, nicht aber die hypolemmalen Theile des Nerven. Beim Sartorius und den Gastrokuemien kleinerer Frösche z. B. wurden so vorzügliche Bilder erzielt. Dr. H. Henliing {Göttingen). IgacuscM, Moritzi Miiira, Beiträge zur Histologie der Leber. (Virchow's Arch. f. pathol. Anat. Bd. XCVH p. 142). Zur Darstellung eigenthümlicher netzartiger Zeichnungen in der Leber, welche als Nerven-Netze von den Einen, von Anderen als Netze elasti- scher Substanz gedeutet wurden, empfiehlt Miitea eine neue, augeblich schnell und sicher zum Ziele führende Methode der Goldimprägnation : Ganz frische oder einige Tage in MüLLER'scher Flüssigkeit couservirte Leberstückchen werden in eine Traubenzucker-Lösung (lOO'O Hg 0, 20*0 Sacchar. tart., 1*0 Natr. chlorat.) auf 8 bis 12 Stunden, dann in Goldchloridnatriumlösung von 0-5 Procent 12 bis 24 Stunden lang ein- gelegt. Danach kommen die Präparate aufs Neue in die Trauben- zuckerlösung entweder auf 12 bis 48 Stunden bei gewöhnlicher oder (weniger gut) auf 2 bis 3 Stunden in Brütofentemperatur ; wobei sie in dunkelvioletter Farbe reducirt werden. Weitere Behandlung: Gefrier- Mikrotom — Glycerin (oder Kochsalzlösung, oder auch Celloidiu — Nelkenöl). Da normale Leberzellen fast ebenso stark vergoldet werden wie die Geflechte, bildet die fettig degenerirte Leber mit Phosphor ver- gifteter Thiere ein besonders gutes Object, wenn man nach der Prä- paration das Fett durch Alkohol - Aether entfernt. Bei älteren Leber- 16* 244 Referate und Besprechungen. II, 2. stücken soll die Methode so gut oder besser gelingen als bei frischen, vielleicht weil „der Zucker, welcher durch Fermentation in der Leber selbst entstanden ist, begünstigend eingewirkt hätte". Durch dieselbe Methode „mit geringfügiger Modification" gelang auch die Färbung der Gallencapillare normaler wie pathologischer Lebern. FlescJi (Bern). Crreiliicher, H., Abhandlungen zur vergleichenden Ana- tomie des Auges. (S. A. aus Abhandl. der naturforsch. Gesellsch. Halle a. S. Bd. XVI). Gkenacher eröffnet seine Untersuchung über das Augo der Tinten- fische mit einer Zusammenstellung der benutzten Methoden. Zur Här- tung diente neben Pikrinschwefelsäure auf Empfehlung von Lang eine Lösung von Sublimat in jener Säure bis zur Sättigung; sie bewährte sich vorzüglich am Auge von Octopus, Eledone, Sepia, Hess dagegen im Stich bei den pelagischen Formen (Loligo, Ommatostrephes, Rossia). — Mit Vortlieil kam wie bei den früheren Untersuchungen Geenacheb's über das Arthropoden-Auge die Befreiung der Präparate von den natür- lichen Pigmenten zur Anwendung ; am besten an ganzen Stücken der Retina von 2 bis 5 mm Durchmesser, aber auch an Schnitten. Zur Entfärbung diente statt der früher benutzten Salpetersäure Salzsäure (2 bis 3 Theile auf 100 eines Gemenges von 1 Theil Glycerin mit 2 starken (80 "/q) Alkohols). Mehr Uebung verlangt ein anderes Ver- fahren, das die Entfennmg der natürlichen Pigmente in einen Akt mit der Carmintinction verlegen will : man färbt ein Retina-Stück mit Borax- carmiu und legt es danach in die Mischung, wobei das Pigment rascher als das Carmin extrahirt wird. — Zum Einschluss der Schnitte ver- wendet Grenacher Ricinusöl statt der Harze ; dasselbe hat einen etwas niedrigen Brechungsindex (1*49) als letztere und verträgt sich gut mit der von Grenacher benutzten GiESBKECHT'schen Schellack-Klebmcthode. Harzeinschluss verlangt intensivere Färbungen. Flcsch {Bern). Arnold, J., Weitere Beobachtungen über die Theilu ngs- vorgänge an den Knochenmarkzellen und weissen Blutkörpern. (Virchow's Arch. f. pathol. Anat. Bd. XCVII p. 107). Wie" für Blutuntersuchuugen empfiehlt Arnch^d auch für das Knochenmark Methylgrün-Kochsalzlösung 0-6 Procent mit und ohne Zu- satz von Goldchlorid (0-25 Procent) zum Studium der Kerntheilungs- vorgänge. Am besten beschickt man kleine Gläschen mit der Lösung (2 — 3 cc) und schüttelt darin kleine Knochenmarkstückchen bis zu feiner Vertheilung. Flesch {Bern). II, 2. Referate und Besprecliungeii. 245 Tschisch W. T., lieber künstliche Bildung von Farbstoff in Nervengewebe. (Vircbow's Arcb. Bd. XCVII p. 173). Bei der Härtung des Centraluervensystems in EßLiTZKY'scber Flüs- sigkeit bilden sieb, wie das übrigens wobi den meisten Untersucbern be- kannt ist, oft dunkle Klumpen zum Tbeil mit langen Auslaufen, die tief- sebwarzen Ganglienzellen nicbt unäbnlicb sind. (In warmen Wasser lösen sie sieb leicbt, nocb besser in scbwacb mit Salzsäure ange- säuerten Wasser. Ref.). Diese Afterproducte wurden merkwürdiger Weise von verscbiedenen Untersucbern für patbologiscbe Dinge gebalten. Verf. bat sieb der Mübe unterzogen durcb eine sebr ausgedebnte Ver- sucbsreibe nacbzuweisen, dass das „Pigment" erst durcb Bebandlung in ERLiTZKY'scber Flüssigkeit entstebt. Edingcr (Frankfurt a. 31.) E. Bacterien. Referent: Prof. Dr. med. P. Baumgarten in Königsberg i. Pr. Smith, Th., Remarks on fluid and gelatinous media for cultivating Microorganisms, witb descriptiou of Salmon's new culture-tube and demonstratiou of tbe process ofusing it. (Amer. Moutbly Microsc. Journ., vol. V, 1884, no. 10 p. 185). Der Autor, Assistent Prof. Salmon's, setzt in obiger Scbrift zu- näcbst die Unentbelirlicbkeit der Anwendung flüssiger Substrate für Bacterieuculturen neben den von Koch in die Tecbnik eiugefübrteu festen Näbrböden auseinander, und bescbreibt sodann einen von Prof. Salmon construirten und in dessen Laboratorium mit Erfolg gebraucbten Apparat zur Fortzücbtung von Bacterienreinculturen in flüssigen Medien. — Der Culturapparat bestebt aus einem, einem Probirtubus äbnlicben Körper oder Reservoir von etwas dickem Glase, welcber etwa 4 bis 5 Zoll Länge und % Zoll im inneren Durcbmesser besitzt. Ueber das obere Ende des Reservoirs ist ein zweiter, etwa 2^/o Zoll langer Glas- cylinder (die „Mütze") gescboben, dessen innere Oberfläcbe so ge- scbliffen ist, dass er sieb genau der äusseren Oberfläcbe des ersten anpasst. Diese Mütze ziebt sieb nabe der Mitte in eine scbmale Röbre von ca. % Zoll Durcbmesser zusammen. Das dritte Stück (der „Ven- tilator") wird repräsentirt durcb eine U-förmig gebogene Röbre, deren Schenkel etwa 1 Zoll Abstand von einander haben ; der kürzere, ca. lYa Zoll lange Schenkel der Röhre ist durcb ein gcscblitfenes Schalt- röhrchen an dem engen Tbeil der Mütze befestigt; das längere, freie 246 Referate und Besprechungen. U, 2. (ca. 3 Zoll lange) Glied des "Ventilator ist durch einen Ya bis 2 Zoll langen Pfropf von Glaswolle geschlossen. Die Culturflüssigkeit wird in den Körper eingebracht, nachdem die Mütze mit dem an ihr befestigten Ventilator abgenommen ist nnd wird darin sterilisirt ; will man die Culturflüssigkeit verimpfen, so wird nur der Ventilator abgenommen. (Um zu verhindern, dass die Verbindungen der einzelneu Theile des Apparates zu fest aneinander haften, werden dieselben durch etwas mit Sublimat versetzte Vaseline geölt). Die Pipette, welche dazu bestimmt ist, einen Tropfen bacterienhaltigen Fluidums in das Reservoir einzu- führen, besteht aus einem gewöhnlichen Glasröhrchen von 2 bis 3 Zoll Länge und ^/j Zoll Durchmesser, deren eines Ende in eine sehr dünne, beinahe capillare Röhre ausgezogen ist, welche lang genug sein muss, um leicht den Grund des Reservoirs zu erreichen, wenn sie durch die schmale Röhre der Mütze eingeführt wird. Am anderen Ende der Pipette, welches durch einen Gummiballou geschlossen ist, ist ein Propf von Glaswolle enthalten. Die Verimpfung der bacterienhaltigen Culturflüssigkeit resp. die Uebertragung derselben auf ein frisches Culturglas geschieht nun in folgender Weise: Die Pipette wird zuerst gründlich sterilisirt durch Erwärmen über der Flamme bis zur Rothglühhitze (ohne dass jedoch der capillare Theil ins Schmelzen gerathen darf); nach dem Glühen wird die Pipette mit dem Gummiballou nach oben aufgehängt, damit keine Verunreinigung derselben durch Berührung mit schmutzigen Gegen- ständen während des Abkühlens stattfinden kann. Nach vollzogener Abkühlung wird der capillare Theil noch ein bis zwei Mal durch die Flamme gezogen. Nun wird der Ventilator der Culturröhre , deren Bacterien ausgesät werden sollen, nachdem er zuvor durch die Flamme geführt, fortgeuommen und das schmale Ende der Mütze ebenfalls der • Flamme exponirt, dann der Gummiballon leicht comprimirt, die Pipette eingetaucht und einige wenige Tropfen aufgesogen; nach langsamem Herausziehen der Pipette wird die Mütze wiederum der Flamme ausge- setzt und der Ventilator wieder angefügt. Die Mütze des neuen Cultur- tubus, auf welchen die Uebertragung der entnommenen Portion erfolgen soll, wird nun wieder der Flamme unterworfen sowohl vor als auch nach dem Abnehmen des Ventilator, die Pipette eingeführt und ein Tropfen der bacterienhaltigen Flüssigkeit in das sterilisirte Culturfluidum des zweiten Culturtubus fallen gelassen. Nach Entfernung der Pipette wird die enge Röhre der Mütze nochmals durch die Flamme erhitzt und der Ventilator wieder angebracht. Smith rühmt die Einfachheit und Sauberkeit des Apparates und II, 2. Referate und Besprechungen. 247 die Leichtigkeit seiner Handhabung und Nutzanwendung; das zeit- raubende und die Gefahr der Verunreinigung der Cultur mit sich bringende Entfernen von Wattepfropfen und die Anbringung hiftfiltriren- der Materialien sei durch ihn vermieden. Da er leicht zu reinigen und daher immer wieder zu brauchen sei und auch nicht leicht entzwei breche, so seien auch die Kosten des Apparates als geringfügig zu be- zeichnen, Compendiös, wie er sei, nehme er im Thermostaten nur wenig Platz ein und schliesslich seien die Chancen eines Hineiufallens von Keimen aus der Luft während der unter obigen Cautelen vorge- nommenen Lüftung der Apparate praktisch nicht vorhanden, denn es sei noch nicht gesehen worden, dass durch die Uebertragung einer Rein- cultur von einem Apparat- auf den anderen eine unreine Cultur ent- standen sei. Die Hauptsache der Verunreinigung der Culturen liege überhaupt, möglichst staubfreie Zimmer vorausgesetzt, nicht, wie dies schon Brefeld betont habe, in dem Hineingelaugen von Luftkeimen in die Apparate, sondern in Unreinigkeiten von Theilen der Apparate selbst und deshalb sei gerade auf peinlichste Sterilisation aller dieser Theile bei der Verwendung obigen Apparates das Hauptaugenmerk ge- richtet und durch sie vorzüglich das Resultat der dauernden Reiner- haltung der übertragenen Culturen erzielt worden. Stemberg", G., Methods of cultivating Microorganisms. (Amer. Monthly Microsc. Journ., vol. V, 1884, no. 10, p. 183). Der Autor hebt in diesem Artikel die Vorzüge seiner Methode, Mikroorganismen zu cultiviren hervor; die Methode selbst, welche er ausführlich schon vor mehreren Jahren in einem Bericht an die Ver- sammlung americanischer Aerzte zu Cincinnati im Jahre 1881 beschrieben hat, besteht darin, dass die sterilisirte Culturflüssigkeit in kleinen Glas- fläschchen, deren Hals zu einer feinen Capillarröhre ausgezogen ist, aufbewahrt wird. Als Vorzüge rühmt Verf. folgende: 1. Die Leichtig- keit der Herstellung und die Billigkeit der Apparate. — 2. die schnelle und kräftige Entwicklung der in die Culturapparate eingeführten Keime. — 3. Das unbegrenzte Sterilbleiben der (gut sterilisirten) Culturflüssig- keit m den Apparaten. — 4. Die Sicherheit, welche die Apparate gegen Verunreinigungen bei Beschickung derselben mit in ebensolchen Fläsch- chen aufgezogenen Bacterien, mit Blut von lebenden Thieren etc. ge- währen. — 5. Die Möglichkeit, den Inhalt solcher Fläschchen auf die in ihnen entwickelten Mikroorganismen mikroskopisch zu prüfen, ohne die Reinheit der Cultur dadurch im mindesten zu gefährden. — 6. Die Verwendbarkeit dieser Fläschchen zu directer Injection ihres Inhalts bei Infectionsversuchen an lebenden Thieren, indem diese Fläschchen die Stelle der Inj ectionssp ritzen vertreten, 248 Keferate und Besprechungen. II, 2. Rosenbacli, F. J., Mikroorganismen bei den Wundiufec- tionsk rankheiten des Menschen. Wiesbaden (Berg- mann), 1884, 122 pp. m. 5 Tfln. Die Methoden, deren sich der Verf. bei diesen seinen wichtigen, für die Aetiologie der chirurgischen Infectionskraukheiten des Menschen in vieler Hinsicht geradezu grundlegenden Untersuchungen bediente, waren durchaus die von Koch in die bacteriologische Forschung einge- führten. Da die meisten Eiterkokken die Eigenschaft an den Tag legten, den Gelatine- Nährboden rasch zu verflüssigen, so ver- wendete R. in der Folge meist den Agarboden als Züchtungsmittel, welcher von keinem der betreffenden Mikroorganismen liquescirt wurde. Es zeigte sich, dass der Grad der Steifheit dieses Nährbodens, welcher nicht immer gleich ausfällt, das Aussehen der Culturen nicht unerheb- lich beeinflusste, weshalb Culturen, die mit einander verglichen werden sollten, stets in Röhrchen gezüchtet wurden, die mit derselben Portion eines Agarstaudes beschickt waren. — Auf die Resultate der Arbeit einzugehen, muss natürlich au dieser Stelle verzichtet werden. Passet, Ueber Mikroorganismen der eiterigen Zellge- websentzündung des Menschen. (Fortschr. d. Med. Bd. III, 1885, No. 2 u. 3 p. 33, 68). Wie der Titel besagt, beschäftigt sich die Arbeit P.'s (der unter Feübenius in München arbeitete), z. Th. mit demselben Gegenstand, wie die Rosenbach's. Da P. nach derselben exacten Methode bei seinen Untersuchungen verfuhr, wie R., so gelangte er auch , obwohl der grössere Theil seiner Untersuchungen bereits vor dem Erscheinen des RosENBACH'schen Buches gemacht war, im wesentlichen zu den gleichen Ergebnissen, wie jener Forscher. Bizzozero, Ueber die Mikrophyten der normalen Oberhaut des Menschen. (Vikchow's Arcli. Bd. XCVIU, 1885, p. 441 flf.). Die Methoden, welche B. zur Darstellung obiger Mikroorganismen anwendete, waren folgende: Nach Entfettung der Epidermis durch Alkohol und Aether * werden die Epidermisschüppchen entweder A) in öOprocentiger Essigsäure oder lOprocentiger Aetzkalilösuug auf dem Objectträger zum Aufquellen gebracht, dann mit Deckgläschen bedeckt und untersucht (die Essigsäurepräparate können durch Zusetzen eines ') Mehrstündiges Einlegen in absoluten Alkohol, dann einen bis zwei Tage in Aether. darauf wieder in absoluten Alkohol, üi welchem letzteren sich die Epidermis für unbeschränkte Zeit zur Untersuchmig geeignet erhält. n, 2. Referate und Besprechungen. 249 Tropfen Glyceriu an den Rand des Deckgläschens dauernd conservirt werden); oder sie werden B) in, mit Methylenblau leicht gefärbtem Glycerin mit der Nadelspitze verrieben und dann angesehen, oder mau bringt sie C) zunächst in einen kleinen Tropfen öOprocentiger Essig- säure auf ein Deckgläschen, breitet sie nach ca. %stündiger Durch- tränkuug mittels Nadeln daselbst aus, dampft die Essigsäure bei gelinder Erwärmung ab uud führt das Gläschen drei- oder viermal langsam über eine Weingeistflamme (in derselben Weise, wie es Koch * für die Her- stellung von Bacterientrockeupräparaten angegeben), benetzt die ge- trocknete Schicht 10 Minuten bis '/^ Stunde mit einer Lösung irgend eines kernfärbenden Anilinfarbstoft'es -, wäscht letztere dann sorgfältig mit Wasser ab und schliesst das trocken gewordene Präparat in Dam- mar- oder Cauadabalsam ein. V. Sehleu, D., Studien über Malaria. (Fortschr. d. Med. Bd. II 1884, No. 18, p. 585 if.). Verf untersuchte sowohl das Blut Malariakranker, als auch Erde, Wasser und Luft von Malaria orten auf Art und Menge der darin enthaltenen Bacterien und zwar mit Hülfe von Untersuchungsmethoden, welche im wesentlichen auf den Principien der bekannten einschlägigen Verfahren R. Koch's beruhten. Zu den Luftuntersuchungen bediente sich Verf, eines eigens construirten transportablen Apparates, welcher die Methode des Luftwascliens mit der Isolirungscultur auf festem Nähr- boden verbindet. Ueber die Einrichtung imd Gebrauchsweise dieses Apparates, welche durch Abbildungen erläutert sind, muss das Original nachgesehen werden. — Mit den Reinculturen der verschiedenartigen, aus den genannten Materialien gewonnenen Mikroorganismen hat Verf. auch Uebertraguugsversuche auf weisse Ratten vorgenommen, welche jedoch keine sicheren Resultate ergeben haben. Johue, A., Ueber die KocH'schen Reinculturen und die Cholerabacillen. Erinnerungen aus dem Cholera- Cursus im K. Gesundheitsamte zu Berlin. (S. A. aus deutsch. Zeitschr. f. Thiermed. und vergl. Pathol. Bd. XI, 1884). Der bekannte Verf giebt in obigem Scliriftchen eine höchst detailirte und klare Beschreibung über die Anstellung von Bacterieu- Reinculturen nach dem Plane des Kocn'schen Verfahrens der Bacterien- ') Im Original ist irrthümlich Ehelich als der Erfinder dieses Verfahrens genannt. Ref. 2) Am vortheilhaftesten mit Metbylenblaulösmig, weil diese die Epidei^mis- schüppchcn ganz ungefärbt lässt, wodurch die gefärbten Pilze um so greller hervortreten. 250 Referate und Besprechungen. II, 2. Züchtung auf festem durchsichtigen Nährboden mit besonderer Berück- sichtigung der IsoUrung der KocH'schen Kommabacillen aus Cholera- dejectionen und der Ditferenzirbarkeit dieser KocH'scheu Cholerabacillen von anderen ähnlich geformten Mikroorganismen, insbesondere der Finkler-Prior' sehen kommaförmigen Mikroben mittels des genannten Verfahrens. Zu einem Auszug eignen sich selbstverständlich diese Mit- theilungen Johne's nicht, wir müssen uns hier damit begnügen, die sehr zweckmässige Form derselben nochmals hervorzuheben und das Schrift- chen namentlich Denjenigen, welche sich selbstständig mit der Technik des KocH'scheu Reinculturverfahrens und speciell mit der Reiudar- stellung der Kocn'schen Cholerabacillen und deren Unterscheidung von anderen morphologisch ähnlich sich verhaltenden Bacterienarten ver- traut machen wollen, als einen trefflichen Rathgeber angelegentlich zu empfehlen. (iruttmaim, P., lieber Leprabacillen. (Berl. klin. Wochenschr. 1885, No. 6). Ein Fall von Lepra bei einem 12 ',4 jährigen Mädchen gab dem Verf. Gelegenheit, wiederholte eingehende mikroskopische Untersuchun- gen über das Verhalten der Leprabacillen anzustellen. Aus den Resul- taten dieser Untersuchungen heben wir hier Folgendes hervor: Bei In- vestigation der Bacillen im ungefärbten Zustand, bereitet durch Zerreiben kleinster, mit einer Staarnadel dem frisch excidirten Knoten entnomme- nen Partikelchen auf dem Objectträger in einem Tropfen destillirten Wassers, mittels starker Vergrösserung (Oelimmersion Hartnack '/, a, Ocul. 3), constatirte G., in Uebereinstimmung mit Hansen und Neissee, lebhafte Eigeubewegung sowohl an den freiliegenden als auch, wenn auch weit seltener an den in Zellen eingeschlossenen Bacillen. In Be- treff der Färbung der Leprabacillen bestätigte Verf. gleich allen früheren Beobachtern die durch die Untersuchungen von Neissee und von Koch hierüber bekannt gewordenen Erfahrungen; bezüglich der Färbungsdifferenzen zwischen Lepra- und T über kelbacillen verificirte er (soweit er sie controlirt) die Angaben des Ref. ^ über die raschere Färbbarkeit der erstgenannten Mikrobenspecies. Als ein brauchbares differential-diagnostisches Merkmal der Leprabacillen gegenüber den Tuberkelbacillen betont Verf. noch den Umstand, dass seinen Beobach- tungen zufolge, erstgenannte Elemente auf Deckglastrockenpräparaten vielfach innerhalb von Zellen liegen , während letztere daselbst stets frei, d. h. niemals an Zellen gebunden zu finden seien ^. ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 367—371. 2) Anm. Der Verf. bezieht sich hierbei nur auf Trockenpräparate von II, 2. Referate und Besprecliiingeii . 251 Uffreduzzi, G. IJ., Sulla pioemiadeivitelli neonat i. Studio sperimentale. Torino, Vincenzo Bona, 1884. (Arch. per le scienze mediche vol. VIII, 1884, uo. 16 p. 321—342). Obige Schrift enthält die vorläufige Mittheilung über die Resultate einer eingehenden Untersuchung, welche Verf. über die Aetiologie der den Deutschen als Kälberlähme, Fohlenlähme, Lämmerlähme, Gelenk- seuche etc. bekannten Erkrankung, deren Wesen im Jahre 1875 von BoLLixGEK in einer purulenten Omphalophlebitis mit nachfolgender Pyämie resp. Septicaemie erkannt wurde, augestellt hat. Das Ziel der Untersuchung war selbstverständlich darauf gerichtet, specifisch-patho- gene Mikroorganismen in den Producten der genannten Krankheit nach- zuweisen; um dies Ziel zu erreichen ging Verf., der unter Feobenius in München arbeitete, genau in der Weise vor, wie sie von Koch zu diesem Behufe vorgeschrieben worden ist: er untersuchte zunächst die erkrankten Gewebe auf Mikroorganismen mittels der bekannten neuen bacterioskopischen Methoden ; sodann suchte er die gefundenen Mikro- organismen in Reinculturen auf festen Nährsubstraten (Fleischwasser- Pepton-Gelatine, coagiüirtem Blutserum und Kartoffeln) zu isoliren und als dies gelungen, übertrug er schliesslich die isolirten Bacterieu auf verschiedene Thierspecies (durch subcutane Impfung und intraabdomi- nale und intravenöse lujection), um über die pathogeue Wirkung der ersteren Aufschluss zu erhalten. Ueber das Detail der Uutersuchungs- technik und über die biologischen Eigenschaften der gezüchteten Bacterieu wird Verf. in der ausführlichen Arbeit berichten; die Resul- tate seiner Untersuchungen fasst er am Schlüsse der Mittheilung in einigen Sätzen zusammen, von denen wir hier nur hervorheben wollen, dass nach Verf. in dem Eiter von an der eingangs erwähnten Krank- heit leidenden Kälbern sich besondere Formen pathogener Miki'o- organismen * finden, welche, auf verscjiiedeue Thierspecies übertragen, phtMsischen Sputis und Cavernenbelagmassen ; an Trockenpräparaten tubercu- löser Gewebe findet man natürlich die Tuberkelbacillen mehr oder minder häufig ebenfalls in Zellen eüigeschlossen ; gelegentlich dürfte ein Eindringen von Tuberkelbacillen wohl auch in die zelligen Elemente des Bronchialschleims phthisischer Lungen stattfinden. Ref. 1) Anm. Die Besonderheit der Form imd der Wachsthumser- scheinungen auf den Cultm'substraten geht allerdings aus den vorhandenen Beschi'eibimgen nicht hervor; doch werden in dieser Beziehnuug die aus- führlichen MittheUimgen abzuwarten sem. Auffallen muss jedoch, dass nach Verf. verschiedene Formen von ^Mikroorganismen sowohl in dem primären inficirenden Material, als auch in Blut und den Geweben der dm'ch Verimpfimg 252 Referate und Besprechungen. II, 2. bei diesen gleiche oder verwandte pathologische Veränderungen er- zeugen, wie sie bei der sog. Kälberliüime augetroffen werden. SaloiHOiisen, C. J. u. Dii'ckiug-Holmfekl, C, lieber Pseudo- infection bei Fröschen. Ein Beitrag zur Lösuug der Jequirityfrage. (Fortsclir. d. Med. Bd. II, 1884, No. 19; p. 617 S.). Diese für gewisse allgemeine Fragen der pathologischen Mykologie wichtigen und interessanten Untersuchungen wurden gleichfalls streng nach den Voi'schriften des von R. Koch zum experimentellen Studium der lufectionskrankheiten eingeschlagenen Untersuchungsverfahren aus- geführt. Bequemer und in mehreren Beziehungen zweckmässiger als die gewöhnlich (behufs Aussäung der rein zu cultivirenden Mikroorganis- men, Ref.) benutzten Glasplatten haben die Verff. die Anwendung von mit Watteverschluss versehenen conischen Glaskolben gefunden, die nicht mehr Gelatine enthalten, als eben notliwendig, um den verhältniss- mässig grossen Boden mit einer 2 mm hohen Schicht von KocH'scher Nährgelatine zu bedecken. F, Kvyptogamen, Zopf, Dr. W. , Die Pilzthiere oder Schleim pilze. Nach dem neuesten Standpunkte bearbeitet. Breslau 1885. (S.A. aus Encyklopädie der Naturwissenschaften [Trewendt]). 174 pp. m. 52 Fig. 12 M. Da beim Mycetozoenschwärmer Grösse und Lichtbrechungsver- mögen des Kernes relativ gering erscheinen , ist sein Nachweis oft schwierig, besonders wenn der Plasmakörper grosse oder zahlreiche Ingesta enthält. Um letztere zu entfernen, greift man in manchen Fällen vortheilhaft zu der Methode der Sauerstoffeutziehung (s. w. u.). Von Färbuugsmethoden wendet man aufs lebende Object am besten Behand- lung mit sehr verdünnter wässeriger Hämatoxylinlösung au. Durch Er- höhung des Lichtbrechuugsverraögens vermittels Säurezusatzes (Essig- säure, Chromsäure etc.) lässt sich der Kern auch ohne Färbungsmittel nachweisen. Um am Mycetozoenschwärmer die Cilien wahrnehmbar zu machen, bedient man sich fixirender uud gleichzeitig tingirender Rea- dieses Materiales getödteten Tbiere vorkommen ; bisher kannten wir nur Bacterienkrankheiten, die durch je eine einzige Form pathogener Mikro- organismen hervorgerufen werden; eine Ausnahme hiervon scheinen allerdings auch nach den später zu referirenden Untersuchungen von Rosenbach und von Passet gerade die pyämischen mid verwandten Processe zu machen. Ref. II, 2. Referate und Besprechungen. 253 gentien (Jodlösnng, Chromsänre, MEiiKEh'sche Lösiinj? etc.). Auch die Zell- kerne der Amöben sind schwer nacliznweisen. Am leichtesten lassen sie sich noch an möglichst ingesta- und körnchenfreien Individuen beobachten. Auch hier kann bei gewissen Arten zu ihrem Nachweis die schon erwähnte Methode der Sauerstoffentziehung mit Erfolg zur Anwendung gebracht werden. — Darauf, dass im Plasma der Amöben Körperchen enthalten sind, welche bez. ihrer morphologischen und chemischen Beschaffenheit den Charakter von Paramylum tragen, weisen folgende Reactionen hin : durch Jodjodkaliumlösung und Ciilorzinkjodlösung werden sie nicht ge- löst und gar nicht oder nur schwach gelbgrünlich gefärbt ; durch etwa lOprocentige Kalilitsung augenblicklich, durch concentrirtc Schwefel- säure gleichfalls schnell gelöst. — Die Keimung der Sporen lässt sich leicht dadurch erzielen, dass man dieselben in ein passendes, vorher angefeuclitetes Substrat aussäet. Der Erfolg ti'itt in der Regel nach 6 bis 24 Stunden ein. — Um nachzuweisen, dass gewisse Meeresamöben schon bei 35 '^ in einer Minute absterben, wurde (nach Kijhne) in ein Probirglas soviel Wasser gebracht, dass dasselbe eine Thermometercuvette gerade bedeckte und das Gläschen darauf in ein grosses, im Sandbade erhitztes Wasserbad gehängt. Sodann Hess man in das Probirglas einen kleinen von Amöben erfüllten Tropfen fallen, als das Thermometer ge- rade 35 ** anzeigte und sog mit einer Pipette erst dann Wasser aus dem Glase heraus, als das Thermometer nach dem Herausnehmen und Wieder- einsenken abermals auf 35 " gestiegen war. Süsswasseramöben zogen sich bei dieser Temperatur und Zeitdauer nie kugelförmig zusammen und erhielten, unter gewöhnliche Temperaturverhältnisse gebracht, ihr früheres Aussehen und ihre ursprüngliche Bewegungsfähigkeit wieder. — Um die Einwirkung anderer Temperaturen festzustellen, wurden zu- nächst Schälchen mit amöbenhaltigem Schlamm stundenlang in Eis ge- stellt, worauf die Bewegungen sehr träge wurden oder gänzlich er- loschen. Dann liess man Amöben in Wassertropfen schnell einfrieren. Zu diesem Zwecke wurden die Glasplatten auf eine Kältemischung von Eis und Kochsalz gelegt und erst wieder weggenommen, wenn der Tropfen fest gefroren war. Die Amöben, vom Momente des Aufthauens an ohne Deckgläschen beobachtet, zeigten noch ihre gewöhnliche Ge- stalt, doch trat Bewegung nicht wieder ein. — Um die Wirkung der Elektricität auf Amöben und Plasmodien zu erforschen, wurden (eben- falls nach KtTHNE) Süsswasser-Amöben zu vielen in einen Tropfen zwischen zwei auf Glasplatten gekittete dünne Platinbleche gebracht, durch welche man eine Reihe massiger Inductionsschläge gehen liess. Die Amöben zogen sich in Folge dieser Reizungen zur Kugelform zu- 254 Referate und Besprechungen. II, 2. sammeii, begannen aber bald nachher ihre Bewegungen wieder, um sich nach abermaliger Reizung abermals zusammenzuziehen. Bei stärkeren Schlägen platzten die Kugeln und Hessen aus dem Innern ein wurst- förmiges Gerinnsel sammt dem Zellkerne hervorschiessen 5 bei massigen Reizen hörte nach mehrfacher Wiederholung derselben die Bewegung schliesslich auf, und man erhielt eine bewegungslose Kugel, die nach und nach undurchsichtiger und trüber wurde, bis sie endlich einen kugeligen geronnenen Klumpen darstellte. Amöben, die grössere Ingesta aufgenommen hatten, auch nur in schwacher Weise bis zur Zusammeu- ziehung in Kugelform gereizt wurden, stiessen ihre Nahrung wieder aus. — Die in gleicher Weise vorhandene Reizbarkeit und Contractilität der Plasmodien Hess sich durch folgenden Versuch feststellen : Ein auf einer Glasplatte erzogenes Plasmodium hatte einen Ast mit der breiten peri- pherischen Ausbreitung zwischen die Platiubleche getrieben. Es wurde ein Zeitpunkt gewälilt, wo die Bewegung in diesem Aste besonders lebhaft nach der Elektrodenlücke zu strömen begann, und nachdem der Kreis geschlossen war, wurden die Rollen des Apparates allmählich über einander geschoben. Noch vor dem Eintritt des Maximum der Strom- intensität kehrte die Strömung in dem Faden um, während die ge- wiüsteten Ränder sich nach der flachen Ausbreitung zurückzogen und sich hier aUmählich ausglichen. Nach Unterbrechung der Inductionsschläge kehrten die Körnchen alsbald wieder zurück, und das Hin- und Zurück- fliessen wiederholte sich wie vorher. — Das muskelähnHche Verhalten des Plasma der Mycetozoen wurde ferner noch durch folgendes Experi- ment erwiesen. Der Darm des Hydrophilus piceus wurde mit einem Brei gefüllt, den man durch Anrühren von gepulverten, trockenen Plasmodien mit Wasser hergestellt hatte, als kleine Plasmawurst quer über die Elektroden gelegt und im feuchten Räume 24 Stunden belassen. Nach dieser Zeit war der Darm praller angefüllt. Als man nun die Ströme des Inductionsapparates mit beinahe übereinander geschobenen Rollen nur einige Secunden wirken Hess, coutrahirte sich die Wurst gerade wie eine colossale Muskelfaser, sodass sie an Dicke augenscheinlich zunahm und das eine Ende von den Elektroden herunter glitt. Durch Ziehen an den Enden des Schlauchs wurde er wieder in die vorige Lage gebracht und der Apparat wieder in Thätigkeit versetzt. Nun musste ein stärkerer Strom in Anwendung kommen, um die Verkürzung eintreten zu lassen, und diese betrug bei 6 mm Schlauchlänge 2 mm. Jetzt war aber das Plasma nicht mehr reizbar, weil es bereits abgestorben war. — Um die Wirkung schneller Sauerstoff-Entziehung auf die regulativen Zustände der Mycetozoen zu prüfen, genügt es für sehr kleine Formen, die be- IIj 2. Referate und Besprechungen. 255 treffenden Zustände unter Deckglas zu halten, dessen Ränder man mit Provenceröl bestreicht. Soll der Sauerstoff durch Gase (Kohlensäure, Wasserstoff) verdrängt werden, benutzt man am besten die Geisslek- schen oder andere Gaskammern. Im Hinblick auf die Empfindlichkeit vieler Mycetozoen gegen Sauerstoff-Abschluss ist's angezeigt, ein und das- selbe Object nicht zu lange unter Deckglas zu lassen, die Wasserschicht unter demselben möglichst hoch zu halten und, wenn angängig, einige chlorophyllgrüne Algen in den Beobachtungstropfen mit hineinzutragen. Sehr empfindliche Objecte sollte man überhaupt nur im unbedeckten Tropfen beobachten. Bei den angestellten Untersuchungen ergab sich, dass bei Sauerstoffabschluss (wenn der die Schwärmer oder Amöben ent- haltende Tropfen mit einem Deckglas bedeckt und dieses an den Rän- dern mit Provenceröl bestrichen wurde) die Schwärmer beziehungsweise Amöben sich abrundeten und die Ingesta ausstiessen, was zur Folge hatte, dass nunmehr der vorher nicht wahrnehmbare Zellkern deutlich sichtbar wurde. Von den Schwärmern wurde es wahrscheinlich, dass sie sämmtlich bei Sauerstofif-Abschluss die Ingesta fahren lassen (eine Methode, den Zellkern sichtbar zu machen), während sie von den Amöben beibehalten werden können. Um das Sauerstoffbedürfniss der Plasmodien zu zeigen, wurden nach Kühne reife Früchte eines Didymium mit einem Stückchen des Substrats in ein Kölbchen gebracht. Dieses wurde mit ausgekochtem Wasser gefüllt und unter Quecksilber umge- stürzt. Das Präparat stieg nach dem Boden des Glases empor, seine Substanz quoll, entwickelte sich aber nicht zum typischen Plasmodium. Als jedoch einige kleine Luftbläschen in dem Kölbchen emporgestiegen waren, so hatte sich das Plasma bereits nach 5 Stunden über den Boden des Kölbchens netzförmig ausgebreitet und zeigte Bewegungen. In nicht ausgekochtem Wasser fand die Entwicklung ebenso gut wie in der Luft statt. Wird durch eine Gaskammer, in der Plasmodien zur Entwicklung kommen sollen, behufs Vertreibung des Sauerstoffs, Wasser- stoff geleitet, so tritt ein Stillstand in der Entwicklung ein ; an die Luft gelangt, beginnt dieselbe aber nach wenigen Stunden wieder. Bringt man, um die Hygroskopicität der Capillitien der Trichiaceen zu beob- achten, eine Trichia, die draussen im Freien feucht und kalt gestanden, ins trockene, warme Zimmer,"" so sieht man bei schwacher Vergrösserung, wie die zahlreichen Capillitiumröhren die energischsten Dehmings- und Krümmungsbewegungen ausführen. Lässt man sie darauf eine längere Zeit im trockenen Räume stehen, bis sie alle Feuchtigkeit verloren haben und befeuchtet sie dann wieder durch Behauchen oder Be- sprengen, so wiederholt sich jenes Schauspiel. — Dass die Protomonas 256 Referate und Besiirechungen. ü. 2. amyli in stagnireiulen Süssgewässern eine liäulige Erscheiniiug ist, kann leicht durcli folgendes Experiment erwiesen werden. Lässt man beliebige, von genannten Localitäten stammende Algen einige Zeit unter Wasser faulen und fügt dem Infus stärkereiche Pflanzentbeile (frische Kartoffelknollen, Bohnen, Getreidekörner etc.) zu, so findet man nach einer bis zwei Wochen den Organismus in den Zellen dieser Substrate vor, wo er die Amylumkörner aufzuzehren beginnt. Dr. 0. E. U. Zimmermann {Chemnitz). Schütz, lieber das Eindringen von Pilzsporen in die Athmu ngswege und die da durch bedingte nErkran- k u n g e n der Lunge und über den Pilz des Hühner- gr indes. (Mittheil. a. d. Reichsgesundheitsamte Bd. II, 1884, p. 208). In einem bei Berlin gelegenen Orte waren viele Gänse nach kurzer Krankheitsdauer zu Grunde gegangen, ohne dass die ursächlichen Ver- hältnisse des tödtlichen Leidens ermittelt werden konnten. Verf., der davon hörte, bat den Besitzer, ihm das Cadaver einer Gans oder ein noch lebendes Thier zu übersenden, um die Todesursache festzustellen. Die Obduction ergab Pneumonoraycosis als solche. Es galt nun, den Pilz aus den Organen zu züchten, die Art desselben zu ermitteln und ihn in seinen pathogenen Wirkungen zu verfolgen. Um die Art des Pilzes festzustellen, wurde eine kleine Quantität von dem bei der Obduction vorgefundenen Pilzgeflecht mit einem aus- geglühten Platindrahte abgehoben und in ein Fläschchen, das mit sterili- sirtem Brotdecoct versehen war, gebracht. Das Fläschchen wnirde dann mit einem Wattepfropfen verstopft und bei ca. 30 ^ im Brütofen ge- halten. Bald entstand ein Pilzraseu, von dem nach je 24 Stunden ein Theil abgehoben ward und zur Untersuchung kam. Sehr bald liess sich feststellen, dass der Rasen von Aspergillus fumigatus gebildet werde. Zur Lösung des schwierigeren Theiles der Aufgabe, nämlich die bei den Gänsen ermittelte Krankheit auch an gesunden Thieren hervor- zurufen, musste ein doppelter Weg verfolgt werden. Die Obduction hatte nämlich bei einer Gans eine abnorme Verbindung zwischen der in der rechten Lunge gelegenen Höhle und dem Vormagen und gleich- zeitig die Ausbreitung des Pilzmycels in beiden Organen ergeben. Dar- nach konnte der Pilz vom Magen in die Lunge oder umgekehrt ge- wachsen sein. Welches der Infectionsheerd sei, sollte das Experiment entscheiden. Behufs Gewinnung des genügenden Pilzmaterials wurden zehn II, 2. Referate irnd Besprechungen. 257 Kölbcheu mit einem Gemisch von sterilisirter Agur-Agar-Gelatine und Pflaumeudecoct und zwei Kölbcheu mit sterilisirtem Brotdecoct be- schickt und der Inhalt mit Theilen der vorhin erwähnten Aspergilhis- cultur besät. Hierauf wurden die Kölbcheu mit sterilisirten Watte- pfropfen verschlossen und in eine Temperatur von 30" gebracht. In 4 Tagen hatte sich in alleu Kölbcheu auf der Oberfläche des Nähr- substrates ein dicker Pilzrasen gebildet ; nur waren die Pilze auf dem Brotdecoct üppiger gewachsen, als auf dem Gemisch von Agar-Agar- Gelatine mit Pflaumendococt. Die Fütterungsversuche geschahen in folgender Weise : Ein mit einer Aspergilluscultur versehenes Kölbcheu wurde mit Glühkohle so gesprengt, so dass der obere Theil desselben abgehoben werden konnte, während im unteren der zusammenhängende Pilzrasen liegen blieb. Letzterer wurde dann mit eiuem Messer abgehoben und zur Hälfte mit weichem Brote zusammengeknetet, zur Hälfte mit trockenen Hafer- körnern gemischt. Mit dem Brote wurden Tauben, mit den Haferkörnern Gänse gefüttert. Jede Taube erhielt pro Tag sechs bohnengrosse Brot- pillen, die durch den geöffneten Schnabel bis in den Schlund geschoben und von den Thieren leicht verschluckt wurden ; die Haferkörner wurden den Gänsen zum freiwilligen Genüsse vorgesetzt. Inzwischen wurden immer neue Aspergillusculturen herangezogen und verfüttert. Da erst nach 16tägiger Fütterung eine Taube starb und die Obduction eine Erkrankung vom Darmkanal aus nicht nachzuweisen vermochte, wurde zu Inhalationsversuchen geschritten. Hierzu wurden die in den Kölb- cheu gewachsenen Rasen von Aspergillus fumigatus auf Fliesspapier ge- legt, unter einer Glasglocke getrocknet und in ein Glas geschüttet, in dem eine Taube bequem stehen konnte. Nachdem eine solche einge- bracht war, wurde das Glas mehrmals geschüttelt, sodass die zerstäubten Pilzrasen sehr bald grüne Wolken bildeten imd von dem Thiere aspi- rirt werden konuten. Die Taube wurde krank und war am dritten Tage todt. Um den Nachweis zu führen, dass das Leiden durch die aspirirten Sporen von Aspergillus fumigatus herbeigeführt worden war, wurden aus dem Innern der erkrankten Lungeutheile Stückchen mittels geglühter Instrumente herausgeschnitten, auf Brotdecoct in Kölbcheu ausgesät und letztere in den Brütofen gestellt, wo auf dem Brotdecoct sehr bald wie- der der typische Aspergillus fumigatus erschien. Die zur Aussaat nicht benutzten Lungeutheile wurden in Alkohol gehärtet, dann geschnitten und gefärbt. An ihnen fand man bei mikroskopischer Untersuchung die feineren Respirationswege von erstaunlichen Mengen von Pilzfädeu er- füllt. Bei weitereu Versuchen brachte Verf. nur wenig Sporen ins Glas Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie IL 2. 17 258 Eeferate und Besprechungen. II, 2. und liess die Taube nur fünf Minuten darin verweilen. Dadurch er- zielte er, dass das Thier später starb und der Pilz sich von der Lunge aus auch über andere Organe verbreitete. Die Versuche wurden dann an kleinen Vögeln und schliesslich auch an einer Gans mit Erfolg wie- derholt. Aehnliche Versuche wurden auch mit Aspergillus niger und glaucus angestellt. Mit ersterem erhielt Verf. gleiche Resultate, wenn er kleinere Mengen inhaliren liess; letzterer wirkte in der Lunge nur wie jeder andere fremde Körper. Der Hühnergrind, Tinea galli. Zur Reinzüchtung wurden einige von den abgenommenen Schuppen der Kämme zerkleinert und die kleinen Stückchen auf Fleischwasser-Pepton-Gelatine gelegt, die auf vorher ausgeglühten Objectträgern ausgebreitet war. Die Objectträger wurden bei Zimmertemperatur gehalten. Nach 24 Stunden waren aus allen Stücken kurze feine Fäden gewachsen, die schon nach 48 Stunden einen fürs blosse Auge sichtbaren grauen und trüben Hof um die Stücke erkennen Hessen. Daneben befanden sich kleine Rasen von verschiedenen Schimmelpilzen und Mikrokokkencolonien. Da die ersterwähnten Pilz- colonien in allen Fällen nachzuweisen waren, lag die Vermuthung nahe, dass sie das Mycel des Hühnergrindpilzes seien. Um dasselbe rein zu erhalten, wurden mit Hülfe des Präparirmikroskopes solche Theile, in deren Nähe Ansiedelungen anderer Organismen nicht nachzuweisen waren, mit einer ausgeglühten Platinnadel aus den Culturen herausge- nommen und auf neue mit Fleischwasser-Pepton-Gelatine beschickte Objectträger gelegt. Der rein gezüchtete Pilz liess sich auf Kartoffeln, ferner auf Brot, wo er einen dunkelrothen Farbstoff erzeugt, auf Agar- Agar-Gelatine, auf einem Gemisch derselben mit gewöhnlicher Gelatine, auf sterilisirtem Hühnerkoth, auf Hühnerkoth und Brotdecoct, Hühner- koth und Gelatine, Agar-Agar-Gelatine und Pflaumendecoct züchten. Wesentlich wurde das Wachsthum im Brütofen bei 30" beschleunigt. In saurem Pflaumendecoct wuchs der Pilz nicht, in neutralem und alka- lischem sehr wenig. In saurem Pferdemistdecoct zeigte sich eben- falls keine Spur von Wachsthum, in neutralem und alkalischem er- losch das Wachsthum nach 14 Tagen. Auch in flüssiger Fleischwasser- Pepton-Gelatine wächst der Pilz nur in den oberflächlichen, mit der Luft in Berührung stehenden Schichten. Die Impfung gesunder Hühner gelangte in folgender Weise zur Ausführung: Ein Rasen des in der 7. Generation auf Brotdecoct fortgezüchteten Pilzes wurde getrocknet, mit einer Schere in möglichst kleine Stücken geschnitten und davon ein Theil mit Oel, ein zweiter mit Gelatine und ein dritter mit Vaseline IT, 2. Referate und Besprechungen. 259 gemischt. Nach Einreibung- einer oder der anderen dieser Mischungen in die Kämme von Hühnern bez. Halmen wurde stets wieder der Hühnergrind hervorgerufen. Dr. 0. E. JR. Zimmermann {Chemnitz). Fhiliault, eil., Recolte et preparation des Algues en voyage. Montpellier (Cristin) 1885. 10 pp. gr. 8", Nachdem Verf. auseinandergesetzt hat, welche Vegetationsbedin- gungen das Wachsthum der Algen begünstigen, wo man dieselben, so- wohl die Meeresbewohner, als die Süsswasserbewohner, findet, und zu welchen Zwecken mau die Präparatiou vornimmt, wendet er sich der letzteren selbst zu. Die Präparation hat sofort nach Beendigung der Excursion zu geschehen; grosse Arten werden getrocknet, aber nicht in der Sonne, sondern in Zugluft, auch in einer Pflanzenpresse lässt sich das Trocknen vornehmen. Zarte kleine Arten werden sofort auf Papier aus dem Wasser gehoben und auf diesem festtrocknen lassen. — Sollen Algen behufs des mikroskopischen Studiums conservirt werden, so müssen sie in geeignete Flüssigkeiten gebracht werden, welche den Zellinhalt, die Reproductionsorgane etc. möglichst unverändert lassen. Für viele genügt gewöhnlicher Alkohol, während absoluter Alhohol sie meist zu stark erhärtet. Mau kann mehrere unähnliche Arten in dem- selben Glase zusammenbringen. Zu letzterem Zwecke können sie mit starken Stecknadeln auf Papierstückchen befestigt werden. Der Alkohol wird einigemal gewechselt. Meeresalgen werden in concentrirter Pikrin- säurelösuug (in Meerwasser) aufbewahrt, welche augenblicklich erhärtend wirkt. In Ermangelung dieser Conservirnngsflüssigkeiten lässt sich auch Kochsalz anwenden ; man thut die Algen in weithalsige Flaschen, lässt, indem man diese umdreht, dass Wasser gut abtropfen und giebt soviel Salz hinzu, dass die Algen ganz darin eingebettet sind. Diese Methode empfiehlt sich jedoch nur für die robusteren Meeresalgen. Behrens (GöUingcu). G. Fhanerof/anien. Uli, A., Ueber neue empfindliche Holzstoff- und Cellu- lose Reagentien. (Chemiker-Zeitg., 1885, p. 266). Ausser Phloroglucin, dem bekannten Reagenz, färben auch andere Phenole das Lignin in charakteristischer Weise. Alkoholische Orcin- lösuug, mit Salzsäure versetzt, färbt Holz und Holzstoff prachtvoll dunkelroth, Cellulose wird nicht verändert; Resorcin mit Alkohol und Salzsäure färbt blau violett; Resorcin mit Alkohol und 17* 260 Referate und Besprechungen. II, 2. Schwefelsäure (1 Tbeil Alkohol, '/j Theil Schwefelsäure) färbt erwärmt dunkel blau violett, Cellulose wird zwiebelrot h 5 a-Naphthol, Alkohol und Salzsäure färbt Holzstoff grünlich ; a-Naphthol, Al- kohol (1 Theil) und Schwefelsäure (1 Theil) färbt Holzstoff dunkel- grün, Cellulose rothviolett; Pyrogallus säure, Alkohol und Salz- säure färbt erwärmt blaugrün; Carbolsäure, Alkohol und Salz- säure färben gelb grün. ,/. Moclltr. 8olla, ß. F., lieber zwei wahrscheinliche mikrochemische Reactioneu auf S chwefelcyanallül, (Botan. Cen- tralbl. Bd. XX, 1884, p. 342—345). Zur mikrochemischen Erkennung des Senföls werden vom Verf folgende Reactionen empfohlen. 1. Die zu untersuchenden Schnitte lässt man etwa eine Stunde lang in einem Bade von wässeriger Jod- lösung liegen, wäscht sie dann mit Alkohol aus, wobei Kügelchen ver- schiedener Grösse (nach Verf. Schwefelcyanallyl) aus den Zellen aus- treten und fügt zuletzt Eiseuchlorid hinzu ; die Kügelchen nehmen dann eine mehr oder minder intensive röth liehe Färbung an, die besonders deutlich sichtbar wird, weuu mau den üeberschuss des Eisensalzes ent- fernt. — 2. Wenn man die Schnitte einige Zeit in einem Bade von Brechnusstinctur lässt und darauf mit Jodtinctur behandelt, scheiden sich alsbald winzige rothbraune und ausserdem farblose Kügelchen aus, welche letztere vom Verf. für Schwefelcyanallyl gehalten werden ; sie färben sich beim Hinzufügen eines Tropfens Salzsäure hochgelb. Auch das Verhalten gegen vielerlei andere Reagentien ist geprüft wor- den, worüber im Original nachgelesen werden möge. Die Reactionen wurden an den Samen von etwa dreissig Cruciferenarten ausgeführt. Wenn die Schnitte in Olivenöl präparirt wurden, konnte das Sulfocyan- allyl auch in den Zwiebeln von Allium oleraceum und den Blättern von Cochlearia officinaUs nachgewiesen werden. Ref. möchte hierzu dreierlei bemerken. Erstens sind die Senföle keineswegs alle als Allylsulfocyanat aufzufassen ; so ist beispielsweise das in Cochlearia officinalis enthaltene zwar isomer mit jenem, aber von ganz anderer Constitution. Verf. hätte demnach in seiner Publication Reactionen auf Senföle ankündigen müssen. Zweitens kann die Strych- ninreaction zur Erkennung von Senföl nicht dienen, weil durch starken Alkohol, welcher zur Herstellung der Brechnusstinctur verwendet werden muss, das hydrolytische Ferment zerstört wird, das die Umwandlung des myrosinsauren Kalis in Senföl bewirkt. Ebenso verhält sich Salz- säure gegen Myrosiu. Drittens konnte sich Ref. überzeugen, dass mau die schönste Rosafärbung mittels der Eisenchloridreaction und hochgelbe II, 2. Referate und Besprechungen. 261 Färbung mittels der Brechniissreaction erhält, wenn man Schnitte durch die Samen von Amygdalus communis, Corylus Avellana und Pinus pinea, welche notorisch kein Scnf()l enthalten, in der entsprechenden Weise behandelt. Die angegebeneu Methoden können demnach allem Anschein nach zur Erkennung von fetten und vielleicht auch ätherischen Oeleu dienen, nicht aber zum Nachwels des Schwefelcyanallyls im besondern. Bezeichnend ist in dieser Hinsicht auch der Umstand, dass Verf. in den Zwiebeln von AUium sativum und in den Blättern von Cochlearia offici- nalis seine Reactionen blos bei Zusatz von Olivenöl eintreten sah. Ein Stückchen Fichtenholz reagirt auch in gleicher "Weise, wenn man es in einem Tropfen Oliven- oder Sesamöl liegen lässt, bis es sich vollgesogen hat und hierauf daraus angefertigte Schnitte nach dem einen oder anderen Verfahren behandelt. E. Bachmaim {Plauen). Joliauuseu, W., Om Fröhviden og den s Udvikling hos Byg. (Meddel. fra Carlsberg Laborat. Bd. 11, H. 3. Kopeuhagen 1884). [Uebersetzt: Entwicklung und Constitution des E n d 0 s p e r m e s der Gerste. Anatomische Vorstudien über die Frage von den mehligen Körnern. (S. A. aus Zeitschr. f. d. ges. Brauwesen, 1884, 15 pp. 4« m. 3 Ttln.)]. In dieser gründlichen Arbeit theilt der Verf. die Methode mit, durch welche es ihm gelang, einige streitige Fragen aufzuklären. Die eine dieser Fragen betrifft den Inhalt der „Kleberzellen" unserer Ge- treidearten. S. L. Schenk machte zuerst, im Widerspruche mit der herrschenden Anschauung, darauf aufmerksam, dass die Kleberkörner des Weizens kein Protein enthalten können, weil sie sich mit Millon's Reagens nicht färben, auch in verdünnten Säuren und in künstlichem Magensafte unlöslich sind. Legt man Schnitte, welche längere Zeit mit Alkohol behandelt worden waren, in Wasser, so sieht man ein proto- plasmatisches Netz in den Kleberzellen. In den Maschen dieses Netzes liegen jene Körner, welche man gewöhnlich für Kleberkörner hält und von denen Schenk mit Recht behauptete, sie seien es nicht, ohne jedoch ihre Natur bestimmen zu können. Sie lösen sich in Alkohol, färben sich durch Osmiumsäure schwarzbraun, durch Jodlösung langsam gelb, sind also Fett. Wendet man die von Pfefpek zur Untersuchung der Protein- körner angegebene Methode an, so findet man immer nur ein mehr oder weniger regelmässiges Netz ohne Körner. Dennoch enthalten die Kleber- zellen neben Fett und Protoplasma auch Proteinkörner. Schnitte, welche einige Zeit in Chloroform oder Benzol gelegen hatten, lassen nach ihrer Einbettung in Canadabalsam deutlich in einem leichten Netz Körner er- scheinen, die weder Stärke noch Fett, also wohl Proteinkörner sind. 262 Referate und Besprechungen. 11, 2. Dass sie bisher übersehen wurden — die Angaben von Habtig und Schenk beziehen sich auf die Fetttröpfchen — rührt von ihrer geringen Widerstandsfähigkeit her, derzufolge sie in Wasser anschwellen und in dem protoplasmatischen Netze unsichtbar werden. Die zweite Frage betrifft die Ursache der „mehligen" oder „glasigen" Beschaffenheit der Getreidekörner. Nowocki und Gkönliind haben ge- funden, dass diese Verschiedenheit von der zwischen den Stärkekörnern eingeschlossenen Luft herrühre. Bei der gewöhnlichen Präparations- methode kann man das Eindringen von Luft in die Schnitte nicht ver- hindern, wodurch das Urtheil unsicher wird. Johaknsen schlägt daher folgendes Verfahren vor: Nachdem das Korn durchschnitten und die Schnittflächen desselben mit dem Rasirmesser geglättet worden sind, drückt man die Stücke mit der Schnittfläche in eine sehr dicke Mischung von Canadabalsam und Chloroform, wobei man achtet, dass keine Luft- bläschen zwischen Object und Balsam eindringen. Das Präparat wird auf einen Objectträger oder auf ein nicht zu kleines Deckglas gestellt, welches man mit arabischem Gummi auf eine Glasplatte klebt. Nach- dem der Balsam erhärtet ist, nimmt mau von den Stücken mit einer kleinen Feile oder einem Messer so viel weg, dass noch immer eine ziemlich dicke Platte übrig bleibt, deren Oberfläche man mit dem Rasirmesser glättet. Dann wird das Präparat wieder mit Balsam ge- deckt und auf einen Objectträger gebracht. Sobald es trocken ist, löst man den arabischen Gummi in kaltem Wasser und nimmt die Glasplatte weg. So überzeugt man sich in der That, dass die glasigen Körner keine Luftbläschen enthalten, während mau diese im Endosperm mehliger Körner in grossen Massen findet. J. Moeller. S, 3Iiiieralogis€7i-Geolo{/ isches. Referent: Prof. Dr. Arth. Wiclimann in Utrecht. Streng A., lieber einige mikroskopisch-chemische Reac- tionen. (Neues Jahrb. f. Mineral. Bd. I, 1885, p. 21 — 42). In der Einleitung giebt der Verf. zunächst einen kurzen Rückblick über die bisherigen mikrochemischen Methoden, sowie deren Bedeutung für die Petrographie. Hieran schliessen sich einige sehr praktische Rathschläge zur Ausführung der verschiedeneu Operationen an, die z. Th. eine etwas ausführlichere Wiedergabe einer früheren Mittheilung des Verf. enthalten '. Endlich werden die Reactiouen für die ver- «) Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 308. II, 2. Referate und Besprechungen, 263 schiedenen Elemente mitgetheilt, deren wichtigste im Folgenden kurz genannt werden mögen. Prüfung a u f P h 0 s p h 0 r s ä u r e. Die Anwendung der salpeter- sauren Lösung von molybdänsaurem Ammonium um Phosphorsäure nachzuweisen (wichtig für Apatit), war bereits früher vom Verf. vorge- schlagen worden. Da Stelzxek bemerkt hatte, dass lösliche Silicate unter Umständen eine ähnliche Keaction liefern können, war eine er- neute Prüfung erforderlich. Aus den Untersuchungen geht nun hervor, dass bei dem Ausfallen der Phosphorsäure ein Mitfallen der eventuell in Lösung mit vorhandener Kieselsäure stattfindet, während sich bei Anwesenheit des löslichen Silicats allein keine gelben Kryställchen ab- scheiden. Um jeden Irrthum auszuschliesseu, schlägt der Verf. deshalb vor, die Lösung auf dem Objectträger bei massiger Wärme einzudampfen, wodurch die Si 0^ unlöslich wii-d, und dann den Rückstand mit der Molybdänlösung zu behandeln. Prüfung auf Kalium. Zum Nachweis des Kaliums wird das, bereits von Behrens vorgeschlagene Platinchlorid empfohlen , doch muss man sich vor dem Gebrauch überzeugen, dass dasselbe absolut kaliumfrei ist. Prüfung auf Natrium. Verf. bespricht hier nochmals die be- reits früher von demselben beschriebene Reaction ^ Bei Anwesenheit von Natrium scheiden sich bei Zusatz von essigsaurem Uranoxyd zahl- reiche scharf ausgebildete Tetraeder mit Gegentetraedern, sowie Rhom- beudodekaeder ab. Nur unter Bildung dieser Kryställchen ist die Reaction sicher. Es bilden sich nämlich auch bei völliger Abwesenheit von Na kleine Oktaeder, die wahrscheinlich einem basischen Salze angehören. Prüfung auf Lithium. Zur Nachweisung des Lithiums ist bisher die Kieselflorwasserstoffsäure und auch das kohlensaure Kalium vorgeschlagen worden. Verf. erhielt, als er eine Lösung des phosphor- sauren Natriums mit Essigsäure versetzte und diese Lösung einer Lithiumlösung zusetzte, beim Eindampfen mikroskopisch kleine kreis- runde Ausscheidungen, welche bei gekreuzten Nicols das schwarze Kreuz der Sphärolithe in ausgezeichneter Weise zeigten. Prüfung auf Calcium und Strontium. Neben der Schwefel- säure, die seit lange mit Vortheil zum Nachweis des Kaliums ange- wendet wird, empfiehlt der Verf. die concentrirte Lösung von Oxal- säure. Versetzt man einen Tropfen einer verdünnten Lösimg eines ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 307. 264 Referate und Besprechungen. II, 2. Kalksalzes in der Kälte mit Oxalsäure auf einem Objectträger, so ge- wahrt man nach einiger Zeit gut erkennbare Oktaederchen. Da Stron- tiumsalze genau dieselbe Reaction zeigen, so ist dieselbe nur da anzu- wenden, wo die Gegenwart von Strontium ausgeschlossen ist. Um Cal- cium und Strontium nebeneinander zu erkennen, kann man sich ver- dünnter Schwefelsäure bedienen. Neben den monoklinen Kryställchen des Gyps bilden sich die rhombischen des Cölestins. Prüfung auf Baryum. Versetzt man eine verdünnte Lösung von Chlorbaryum in der Wärme mit einem Tropfen Ferrocyankalium- Lösung, so scheiden sich nach dem Verdunsten hellgebliche Rhomboe- derchen von Ferrocyanbaryum-Kalium aus, deren Auslöschung den Dia gonalen der Rhomboederflächen parallel ist. Eine Strontiumlösung giebt mit Ferrocyankalium nur kleine, nicht erkennbare Körnchen. Chlorba- ryumlösung in der Kälte mit Oxalsäure behandelt, liefert kleine nadei- förmige und spiessige, monokline Kryställchen. Prüfung auf Magnesium. Die bereits von Haushofer und Beheens vorgeschlagene Anwendung des Natriumphosphates als Reagens, modificirt der Verf. in folgender Weise: Man fügt dem phosphorsauren Natrium etwas Ammoniak hinzu, die zu untersuchende Lösung versetzt man dagegen mit etwas Salmiak und erwärmt dann die Tropfen beider Lösungen neben einander auf 100". Sodann werden dieselben ver- einigt, und lässt man nun langsam erkalten. Die entstehenden Kryställ- chen des phosphorsauren Ammonium-Magnesiums sind deutlich erkenn- bar. Besonders vortheilhaft ist diese Reaction zum Nachweis des Mag- nesiumgehalts der Dolomite, da neben dem sehr feinkörnigen Kalk- niederschlag die Kryställchen des Magnesiumsalzes deutlich hervortreten. Prüfung auf Aluminium. Zur Nachweisung eines Thonerde- gehaltes bedient man sich des sauren schwefelsauren Kaliums, von dem man ein kleines Körnchen an den Rand eines auf Aluminium zu unter- suchenden Tropfens legt. Während sich dieses Körnchen löst, scheiden sich oft schon am Rande des Tropfens die oktaedrischen Alaunkrystalle ab, die aber nicht isotrop sind. Schärfer und empfindlicher ist das saure schwefelsaure Caesium, da der Caesiumalaun schwerer löslich ist als der Kalialaun. Klein, C, Optische Studien am Leucit. (Nachr. v. d. k. Ge- sellsch. d. Wiss. Göttingen, 1884, p. 421—472 mit 1 Tfl.). Ueber einige der wichtigen Resultate, zu welchen der Verf. bei der Untersuchung des Leucits gelangt ist, wurde bereits berichtet '. Die ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 611. II, 2. Referate und Besprechungen. 265 vorliegende Abbandlimg beschäftigt sich nochmals mit diesem interes- santen Minerale, und werden namentlich die optischen Eigenschaften desselben in erschöpfender Weise behandelt. Das erste Capitel enthält eine kritische Uebersicht der bisher über das Krystallsystem des Leucits handelnden Untersuchungen. Ein zweites ist den optischen Studien gewidmet. Der Verf. beschreibt hier zunächst ein neues Mikroskop, welches nach seinen Angaben von der Firma Voigt und Hochgesang in Göttingen angefertigt worden ist und dessen Beschreibung hier kurz folgen möge : Auf einem schweren Hufeisenfuss erhebt sich das Instrument, dessen Beleuchtungsspiegel, drehbarer Tisch und Mikroskopröhre au einem verticalen Ständer befestigt und mit dem- selben zum Umlegen eingerichtet sind. Der drehbare Tisch ist mit Theilung versehen, die vermöge eines Nonius Minuten ablesen lässt, ferner befindet sich auf diesem Tische eine Schlittenbewegung, welche die verschiedeneu Theile eines Objectes in den Mittelpunkt der Drehung zu bringen gestattet. Die Schlittenbewegungen lassen sich an den mit Trommeln versehenen Köpfen der Schrauben messen , bis O.Ol mm kann direct abgelesen, kleinere Werthe können noch geschätzt werden. Unabhängig von der Bewegung des Tisches ist in letzterem ein Nicol eingefügt, das durch Trieb orientirt, auf- und abgestellt werden kann. Auf demselben findet sich eine Linse fest angeschraubt zur Erzeugung convergirenden Lichtes. — Der Tubus kann völlig geschlossen durch Trieb auf- und abgestellt und mit einer Mikrometerschraube fein ein- gestellt werden. Letztere ist mit Theilung versehen, welche 0.002 mm ablesen lässt. Unten am Tubus werden die Objective angeschraubt und können dieselben vermittels zweier, am Ende des Tubus angebrachter, senkrecht zu einander wirkender Schrauben leicht centrirt werden. Ueber das angeschraubte Objectiv können Quarzplatte, Viertelundulations- glimmerlamelle, Gypsblättchen eingeschoben werden. In der Mitte des Tubus ist eine Triebvorrichtung augebracht, die nach aussen in einen Knopf mündet. Vermittels desselben kann mau im Innern des Tubus eine Vorrichtung orientirt heben und senken und in dieselbe sowohl ein Nicol mit geraden Endflächen, als auch dieselbe Vorrichtung mit Ber- TRAND'schen Linse oder letztere allein einschieben. Nach Einschaltung des Nicols oder der BEKXKAKD'schen Linse kann eine am Tubus zu diesem Zwecke angebrachte OelFnung durch ein Fenster dicht ver- schlossen werden. Statt mit eingeschobenem Nicol zu arbeiten, kann man auch das Nicol auf das Ocular setzen, was der Verf. namentlich bei Untersuchungen mit dem Gypsblättchen empfiehlt. — An diese allge- meine Beschreibung schliessen sich einige Angaben über den zweck- 266 Referate und Besprechungen. II, 2. massigen Gebrauch des Instrumentes und seiner Nebenapparate bei den verschiedenen Untersuchungen an. Hierbei ist noch hervorzuheben, dass- mit Hülfe dieses Mikroskops die Axenbilder besonders gut wahrge- nommen werden können ; auch die stauroskopischen Untersuchungen lassen sich mit besonderer Schärfe ausführen. Mau darf daher wohl füglich behaupten, dass mit diesem Instrumente ein hoher Grad von Vollkommenheit erreicht ist, und dass dasselbe in vieler Hinsicht alle bisherigen Mikroskope hinter sich lässt. Die Untersuchung der verschiedenen Leucite wurde vom Verf. im wesentlichen derart vorgenommen, dass Schnitte nach den scheinbaren Würfel-, Oktaeder-, Rhombendodekaeder- und Ikositetr.'ieder-Flächen an- gefertigt wurden. Aus dem optischen Befunde desselben Hess sich alsdaun der innere Bau der Krystalle ableiten. Es können au diesem Orte nur die Hauptresultate , zu denen Verf. gelangt ist, kurz wiedergegeben werden. Der Leucit ist rhombisch, zeigt jedoch im optischen Befunde eine grosse Annäherung au das tetragonale, im geometrischen Bau eine solche an das reguläre System. Der Aufbau der Krystalle ist im allge- meiueu derart, dass drei sich durchkreuzende Grundindividuen vor- kommen, die entweder gleichmässig oder ungleichmässig entwickelt sein können, von denen aber auch eins zur ausschliesslichen Herrschaft ge- laugt sein kann. Die Grundiudividuen sind verzwillingt nach allen Flächen des scheinbaren Rhombendodekaeders. Da der Leucit bei hoher Temperatur isotrop wird, ferner eiuen regulären Formentypus besitzt, so schliesst der Verf. zugleich auf Grund verschiedener anderer Verhält- nisse, dass dieses Mineral in seinem jetzigen Zustande nicht als eine ursprüngliche Bildung von Theileu niederer Symmetrie zu betrachten ist. Zum Schlüsse werden noch die Beziehungen, welche zwischen dem Leucit und dem Boracit bestehen, des Näheren besprochen. Tscherniak, G., Die mikroskopische Beschaffenheit der Meteoriten. Stuttgart 1884. 2. Lief. 8 photogr. Tflu. Auf den vorliegenden 8 Tafeln sind die Choudrodite dargestellt. Hinsichtlich ihrer Ausführung schliessen sie sich denen der ersten Lie- ferung würdig an. Ein Text ist nicht beigegeben. Kalkowsky, E., Über Olivinzwillinge in Gesteinen (Zeitschr. f. Krystallogr. Bd. X, 1885, p. 17—24 m. Tafl. II). Mit Ausnahme einiger zweifelhafter Vorkommnisse waren bisher bei den als Gesteinsgemengtheil auftretenden Olivinen keinerlei Zwillings- verwachsungen bekannt geworden. Verf. sucht nun den Nachweis zu erbringen, dass in verschiedenen Gesteinen die mikroskopisch kleineu Olivin-Individuen zuweilen nach der Fläche eines Brachydoma ver- II, 2. Keferate und Besprechungen. 267 zwillingt sind, wobei es jedoch einigermaassen auffällig erscheint, dass die Zwillingsgrenzen so unregelmässig verlaufen. Schnitte parallel dem beiden Individuen gemeinschaftlichen Makropinakoid ergeben ein schiefes Kreuz, in welchem die Auslöschungsrichtungen sich unter 60 " schneiden. Besonders verbreitet sind derartige Zwillinge (auch Drillinge kommen vor) in den Nephelin-Basalten von Randen im Hegau und von Spechts- hausen bei Tharandt. Dathe, E., Beitrag zur Kenntniss der Diabas-Mandel- steine. (Jahrb. d. kgl. preuss. geolog. Landesanstalt für 1883. Berlin 1884 p. 410—448). In Betreff einer eigenthümlichen Gesteinsgruppe, der Variolite, macht sich schon seit einiger Zeit eine abweichende Auffassung ver- schiedener Forscher geltend, ob nämlich die in denselben vorkommen- den kugeligen Gebilde (Variolen) ursprüngliche Erstarrungsproducte, wie dies die Ansicht von Zirkel, oder ob es, wie Gümbel will, einge- hüllte und gefrittete Thonschieferbruchstückchen sind, resp. endomorphe Contactgebilde, wofür Rosenbusch dieselben zum Theil hält. — Der Verf. geht nun von dem Gedanken aus, dass, falls die Variolen Pro- ducte einer schnellen Erstarrung sind, auch in den besonders rasch er- starrten Diabas-Mandclsteineu ähnliche Structurverhältnisse sich vor- finden müssen, besonders da beide Gesteinsarten zuweilen geologisch miteinander verknüpft sind. Dieser Gesichtspunkt war bisher bei der Untersuchung der Diabas-Mandelsteine nicht im Auge gehalten worden, anderseits unterliegen diese Gesteine, ihrer porösen Beschaffenheit wegen, leicht einer eingreifenden Zersetzung, weshalb es auch schwer fällt, frisches Material zu erlangen. Es werden nun der Reihe nach einige ausgezeichnete Vorkommnisse beschrieben und zwar von Reins- dorf bei Plauen i. V., Weinberg bei Weischlitz, Höllenthal bei Stehen, Galgenberg zwischen Ober- und Nieder-Planitz, Georgenthal bei Klein- Mochau in Schlesien und vom Gallenberg bei Lobenstein. Von Inter- esse sind zunächst die in einigen dieser Vorkommnisse nachgewiesenen nadeiförmigen imd schilfähnlichen Augitsäulchen, wie sie sonst den Diatesen fehlen. Noch mehr nehmen jedoch die Sphaerolithenbildungen Aufmerksamkeit in Anspruch. Im Zusammenhang mit dieser Mikro- structur steht auch die makroskopische oft wahrnehmbare Kugelabsonde- rung. Der Eiufluss einer Contactwirkung bei der Bildung dieser Sphaerolithe ist ausgeschlossen, sie sind lediglich ein Product der plötz- lichen Abkühlung des Magmas. Die Anwendung dieser Schlussfolge- rungen auf die Entstehung der Variolen behält sich der Verf. für eine folgende Abhandlung vor. 268 Referate und Besprechungen. 11, 2. Kreutzer., üeberVesuvlaven von 1881 und 1883. (Tscher- mak's Mineralog. und petrogr. Mittheil. Bd. VI, 1884, p. 133—150). Hinsichtlich ihrer Zusammensetzung gleichen die obengenannten Laven im allgemeinen denen von 1868 und 1878. Als Gemengtheile wurden erkannt: Leucit, Plagioklas, Oliviu, Augit, Apatit und Magnetit, deren mikroskopische BeschafFeuheit eingehend beschrieben wird. Be- züglich der vier erstgenannten Mineralien werden einige recht inter- essante Details mitgetheilt. Murrsiy, J. et Reiiard, A., Les car acte res microscopiques des cendres volcaiiiques et des poussier es cos- miques et Icur röle dans les Sediments de mer profonde. (Bull, du Musee Royal d'histoire naturelle de Belgique. Tome III, 1884). Zu den bemerkenswerthen Ereignissen des Jahres 1883 sind die Eruptionen des Krakatau und sodann die während des .darauf folgenden Winters auf fast der ganzen Erde beobachteten Dämmerungsersclieinun- gen zu zählen. — In Veranlassung desselben veröffentlichen die Verff. einige vorläufige Mittheilungen über ihre Untersuchungen, welche an den von der Challenger-Expeditiou mitgebrachteu Tiefseebildungen an- gestellt wurden. — In dem ersten Theile der Abhandlung werden die mikroskopischen Verhältnisse der Krakatau-Ascheu geschildert, worüber Renakd bereits früher ' und inzwischen auch Kloos, Oebbeke, Sauek u. A. berichtet haben. Vorherrschend bestehen die genannten Aschen aus kleinen, sehr unregelmässig begrenzten Glassplittern, welche zahl- reiche Dampfporen, vereinzelt Maguetitkörncheu und Mikrolithe ent- halten. Die in isolirten Partikelclien vorkommenden Mineralien sind Plagioklas, Augit, ein rhombischer Pyroxen und Magnetit. — In den Tiefseebildungen des Stillen Oceans wurden von den Verff. Absätze von genau derselben Zusammensetzung aufgefunden. Seinem Ursprünge nach wird dieses Material auf submarine Eruptionen zurückgeführt, theils auf Bimsteine, die in das offene Meer hinaustreiben, dort zer- fallen und allmählich zu Boden sinken. Mit Recht wird noch hervor- gehoben, dass so colossale Quantitäten von Asche, wie Viücane bei einer Eruption zu liefern im Stande .sind, nicht von bereits festem und dann zermahlenem Gestein herrühren können, sondern dass dieselben ihre Entstehung der Zerstäubung des noch flüssigen Magmas verdanken. Mit Rücksicht auf die eigenthümlichen Dämmerungserscheiuungen ') Biül. de l'Acad. roy. de Belgique. VI, 1883, Nr. 11. n, 2. Referate und Besprechungen. 269 beschreiben die Verf. in dem zweiten Theile eigentliüinliclie mikro- skopische Fragmeute aus den Tiefseebikluugen, denen von ihnen ein kosmischer Ursprung zugewiesen wird. Es sind dies sphärische Gebikle (kaum 0*1 mm im Durchmesser), welche äusserlich ans Magneteiseu, im Innern dagegen aus gediegenem Eisen bestehen , welches zum Theil Nickel und Kobalt enthält. In Begleitung dieser Kügelchen treten Chondren auf, welche aus Bronzit bestehen und eine radial-blättrige Structur besitzen. Da derartige Chondren bisher ausschliesslich in Me- teoriten beobachtet worden sind, so wird auch diesen sowie den Eisen- kügelchen ein kosmischer Ursprung zugeschrieben. Die Verff. haben schliesslich atmosphärische Staubtheilchen von verschiedenen Punkten mikroskopisch untersucht, und hebeji ausdrücklich liervor, dass sie in keinem weder die oben erwähnten Chondren, noch Partikelchen, welche mit der Krakatau-Asche identificirt werden könnten, aufgefunden haben. Assinailii, R., M i k ro s k o p i s c h e Beobachtung der Wolken- Elemente auf dem Brocken. (Zeitschr. f. Meteorologie. Bd. II, 1885, p. 41-47). In der vorstehenden Abhandlung handelt es sich um die Entschei- dung der so vielfach veutilirten Frage, ob der Wasserdampf in seiner ersten Condensations-Stufe die Form von Bläschen oder von Wasser- tropfen annimmt. — Mikroskopische Untersuchungen der Wolken-Ele- mente, welche der Verf. im November vorigen Jahres auf dem Brocken anstellte, erwiesen, dass dieselben die Form von Wassertröpfchen besitzen. Die kleinsten dieser Tröpfchen besassen in der oberen Wolkengrenze einen Durchmesser von 0*013 mm; 10 m tiefer am südöstlichen Ab- hänge des Berges betrug ihr Durchmesser 0*02 mm, noch 20 m tiefer 0'03 mm und bei einem weiteren Abstiege von 50 m an der unteren Grenze der Wolken 0*033 mm. Sehr richtig wird bemerkt, dass eine hohle Wasserkugel, welche auf einen ebenen Gegenstand fällt und dort zerplatzt, einen Wasser-Ring liefern muss. Ein solcher Fall wurde je- doch nie beobachtet. Von den ATKiN'schen Condensations - Keimen konnte ebenfalls nicht die geringste Spur wahrgenommen werden. — In einer Nachschrift bespricht der Verf. sodann noch die sogenannte Rauhreifbildung. Die diesbezügliclien Wahrnehmungen wurden am 31, Decbr. vorigen Jahres vorgenommen und zwar auf folgende Weise: Der Verf. Hess ein Mikroskop auf einen Eisklotz anfrieren und befestigte auf dem Objectträger ein feines Härchen eines Flausrockes. Die Brocken- kuppe war zur Zeit in dichte Wolken gehüllt, und trotzdem die Tem- peratur — 10 C. betrug , schlugen die oben beschriebenen Wasser- tröpfchen, die sämmtlich flüssig waren und ziemlich schnell verdunsteten, 270 Referate und Besprecliimgen. II, 2. auf das Glas nieder. Diejenigen Tröpfchen, welche nicht innerhalb 5 bis 10 Secunden verdunstet waren, behielten ihre Gestalt unverändert und erstanden zu einem soliden Eisklümpchen. (Merkwürdiger Weise fand keinerlei Krystallbildung statt!) Nach und nach legte sich Eis- körperchen neben Eiskörperchen, dann aber erfolgte das Wachsthum des Rauhreifes gegen den Wind in Gestalt von Aneinander-Reihung der fallenden Tröpfchen, sodass fadenförmige Gebilde seitwärts von der Haar-Axe her auswuchsen. Es wäre sehr zu wünschen, dass bei einer Wiederholung dieser interessanten Versuche auch eine optische Unter- suchung der sich bildenden Eisklümpchen vorgenommen würde. H. TecJii lisch es. Eisner, E., Mikroskopischer Atlas. Ein illustrirtes Sam- melwerk zum Gebrauche für G e s u n d h e i t s b e a m t e, Apotheker, Droguisten, Kaufleute und gebildete Laien. Halle (Knapp) 1884. Den zahlreichen missglückten Versuchen, mikroskopische Bilder auf photographischem Wege zu reproducireu, schliesst sich der vor- liegende „Mikroskopische Atlas" an — wie es vorweg jedem Sachver- ständigen klar sein musste. Es ist einfach unmöglich, complicirte mikroskopische Präparate in einer optischen Ebene voll und ganz zu er- fassen, und wer von solchen treue Photogramme erwartet, befindet sich in einem verhängnissvollen Irrthum. Zwar könnte man einM^enden, die Bilder einer, die der eingestellten optischen Ebene seien wenigstens naturgetreu. Naturgetreu gewiss, aber dennoch unkenntlich. Wie wir eine vermummte Gestalt, die leibhaftig vor uns steht, darum nicht erkennen müssen, ebenso erkennen wir die uns geläufigen mikroskopischen Bilder in vielen Photogrammen bei aller Anstrengung nicht, weil die mass- gebenden Details durch tiefe Schatten verdeckt sind. Ja bei manchen Bildern kann man nicht einmal unterscheiden, welches Gewebe, welche Zellform sie darstellen sollen, geschweige denn, dass man ihre charakte- ristischen Eigenthümlichkeiten wahrnehmen würde. Wir wollen, um unser hartes ürtheil zu rechtfertigen, die Tafeln durchgehen und nicht etwa alle Fehler hervorheben — dazu müssteu wir ein Buch schreiben — sondern nur die gröbsten. Tafel I stellt in 15 Figuren den Kaffee und seine wichtigsten Surrogate dar. Die Samenhaut der Kaifeebolme (Figur 3) war offenbar zu hoch eingestellt; mau sieht Contureu gestreckter Zellen mit zahl- reichen schwarzen Punkten, aber dass es die charakteristischen Stein- II, 2. Referate und Besprechungen. 271 Zellen sein sollen , könnte man nicht einmal errathen. Noch räthsel- hafter ist Fignr 7, welche Stabzellen aus dem Sacca-Kaffee darstellen soll. In dem Fruchtgehäuse der Kaffeebohne — und das ist Sacca- Kaffee — kommen auch nur annähernd ähnliche Gebilde nicht vor; offenbar ist ein falsches Präparat vorgelegen. Was es aber war, ist schlecliterdings aus dem Bilde nicht zu entziffern. Figur 15 ist ein Durchschnitt durch das Fruchtfleisch der Feige ; wir sehen ein Spiroiden- biindel,zwei augenscheinlich gegliederte Röhren, einige krümelige Massen 5 sollen etwa die letzteren Oxalatdrusen, die Röhren verzweigte Milch- saftschläuche darstellen? - Eine kleine Erholung bietet Tafel II mit den Abbildungen des Theeblattes und einiger zu Fälschungen benutzter Blätter. Zu solchen Darstellungen ist die Photographie sehr geeignet, und deshalb hätten die Blätter aus dem Herbar sorgfältiger ausgewählt werden sollen, nicht so zerknittert wie Figur 3 oder zerrissen wie Figur 4. In den Figuren 11 und 12, den stark vergrösserten Bildern der Blattunterseite könnte ein „gebildeter Laie" wohl auch photogra- phische Aufnahmen des Mondes mit seinen Kratern vermuthen. Der Botaniker erkennt allerdings Stomata, sonst aber nichts, und die für das Theeblatt charakteristischen Steinzellen und Haare werden gänzlich, auch im Texte, ignorirt. Wenn man eine Preisaufgabe stellen würde, Tafel HI, auf welcher in 1.3 Figuren Cacao-Präparate photographirt sind, zu entziffern, wir glauben kaum, dass sie von irgend Jemandem gelöst werden würde. Angesichts dieser Figuren (cfr. Figur 2, 6, 7, 8, 13) müssen wir überhaupt zweifeln, dass Herr Elsnee, der uns als Ver- fasser geschätzter chemisch-pharmaceutischer Schriften bekannt ist, wusste, was in den Bildern gezeigt werden sollte. Er scheint vielmehr aufs Gerathewohl Präparate der betreffenden Objecte eingestellt und exponirt zu haben ; denn trotz aller Unzulänglichkeit der photographischen Reproductionsmethode — besser wä^e es doch zu machen gewesen, wenn ein Fachmann die Präparate mit Rücksicht auf den Zweck ange- fertigt und ihre photographische Aufnahme geleitet hätte. Herr Elsnee ist offenbar kein Mikroskopiker und glaubt, es genüge in den Tubus hineinzublicken um auch schon zu sehen und die Bilder zu verstehen. Den Lesern dieser Zeitschrift braucht nicht weiter auseinander gesetzt zu werden, zu welchen Consequenzen ein solcher Irrthum führt, wenn man sich unter dem Einfluss derselben die Fähigkeit zutraut, einen „Mikroskopischen Atlas" heraus zu geben. — Sind wir einmal zu dieser Erkenntniss gelangt — und wir finden, je weiter wir blättern, immer neue und kräftigere Stützen für dieselbe — so glauben wir das Referat abbrechen zu dürfen, denn wohin sollte eine Kritik ohne einen einzigen 272 Referate und Besprechungen. II, 2. Lichtblick führen, ja, ohne Aussicht auf einen solchen ! Nicht einmal die splendide Ausstattung kann erfreuen, eher stimmt sie traurig. Man bedauert den opferwilligen Verleger, der für ein von Grund aus ver- fehltes Unternehmen diesen Aufwand machte. J. Moeller. Hauausek, T. F., Noch ein Wort zur Untersuchung des Knochenmehles auf Steinnusspulver. (Pharm. Cen- tralh. 1884, No. 28, p. 329). Verf. weist mit Beziehung auf einige in derselben Zeitschrift publicirte Methoden auf die Einfachheit und Sicherheit des mikroskopi- schen Nachweises von Steinnusspulver im Knochenmehle hin. Abge- sehen von den charakteristischen Zellformen ist auch die Cellulose- Reactiou entscheidend. Schwieriger ist die Unterscheidung des Stein- nusspulvers von gepulverten Tahiti-Nüssen und Dattelkernen. J. Moeller. II 2. Neue Literatur. 273 Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Behrens, .T. W.. A complete guide to tlie use of the microscope in botanical research. Translated and edited by A. B. Hervky, assisted by R H. Ward. Boston (Cassino & Co.) 1885. 466 pp. 8" with 13 plts and 153 cuts. 5 «, Chun, C. Katechismus der Miki-oskopie. Leipzig (Weber) 1885. 138 pp. 8" m. 97 Abb. 2 M. Davies. F.. The preparation and mounting of microscopic objects. Edited by J. Mattiif.ws. New ed. London (Allen) 1884. 222 pp. 12» 2 sh 6 d. Hippel, L. , Grundzüge der allgemeinen Mikroskopie. Braunschweig (Vieweg) 1885. XIV u. 524 pp. 8" m. 254 Holzschn. u. 1 Tfl. 10 M., geb. 11 M. 3Iaut<>.i, W. P., Beginnings with the microscope: a working handbook con- taiiüng simple Instructions in the art and method of using the microscope and preparing objects for examination. Boston (1884) 73 pp. 8'\ Vogt, C. und Vung, K.. Lehrbuch der praktischen vergleichenden Anatomie. Braunschweig (Vieweg) 1885. Lieff. 1. 2. 128 pp. m. 52 Figg. ä 2 M. de Vries, II.. Handleiding bij het verwaardigen van microscopische Praepa- ratenuithet Plantenrijk, voor erstbeginnenden [Anleitung zur Anfertigung mikroskopischer Präparate aus dem Pflanzenreich für Anfänger]. Zalt- bommel 1884. X u. 97 pp. 8". 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Neue Mikroskope. Francotte. P., Description d'instruments construits par M. Reicheut de Vienne (Bull. Soc. Beige de Microsc. t. XI, 1885, no. 4 p. 102). Tlionip.son, W. .1. , The microscope for class-room demonstration (Science vol. IV, 1884, p. 540). 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Zur directen Beobachtung unter dem 3IilcrosJcop natür- lich nicht zu gebrauchen ■ — tvie angegeben icird — weil als planconcave Linse wirTcend]. Beck's automatic microtome (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 1 p. 153). Caldwell's automatic microtome (Quart. Journ. Microsc. Sei. new ser. vol. XXIV, 1884, no. 96 p. 648; Amer. Naturalist, vol. XIX, 1885, no, 2 p. 215; Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V. 1885, pt. 1 p. 150). Gray's ether freezing microtome (1. c. vol. IV, 1884, pt. 6 p. 981). Jung's compressoriiun (1. c. vol. V, 1885, pt. 1 p. 136; cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 248). I^ive-cell (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. ü vol. V, 1884, pt. 1 p. 134). II, 2. Neue Literatur. 279 Microscopical turntable (Engl. Median, vol. XL, 1885, p. 394). Sai.mon's culture-tube (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 1 p. 145; cfr. Amer. Monthly Microsc. Journ. vol. V, 1884, p. 185). Thoma's microtome (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 1 p. 153). 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Zur Kernfärbung diente eine verdünnte Methylviolettkochsalzlösung (aus 12 Tropfen der schon er- wähnten Chlornatriumlösung und einem Tropfen der einprocentigen loässerigen Methylviolettlösung). Ein Meiner Tropfen der Flüssigkeit zu dem frischen Blutpräparat gesetzt, genügte schon für eine ausgiebige TinctionJ. Deklmyzen, 31. C, Het Onderzoek van dierlijke Weefsels, voornaemlijk van het Kraakbeen, in het gepolariseerde Licht. [Die Untersuchung thierischer Gewebe, besonders des Knorpels im polarisirteu Lichte]. Leiden 1884, Vni u. 108 pp. 8» med 1 pl, II, 2. Neue Literatur. 283 (Ediiiger, L.), Preparations of thc central nervous System for projcctions (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V. 1885, pt. 1 p. 146; cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 250). Freud. S., Eine neue Methode zum Studium des Faserverlaufs im Central- nervensystem (Arch. f. Anat. u. Physiol. Anat. Abth. 1884, p. 453; cfr. Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 1 p. 159). 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Delafielu ofNew-York, the directions for making the Solution as originally given and as used in this laboratory for several years are as follows: To make 600 cc of the Solution, take 400 cc saturated aqueous Solution of ammonia alum and add to this 4 grms of crystallized hematoxylin dissolved in 25 cc strong alcohol. This at first produces a light violet or some- times a dirty red color, but on exposure to the light in an unstoppered bettle the color deepens and a Ught precipitate forms. After standing for three or four days exposed to the air and light, the Solution is filtered and 100 cc each of glycerin and methyl alcohol are added. The Solution is now allowed to stand until the color is sufficiently dark and is then filtered and kept in a tightly stoppered bottle. This Solution must be considerably diluted with water before using. The amount of dilution depending, as usual, upon the specimen and the end to be obtained". New- York April 18'h 1885. J. Mittchell Prudden. 2. Mich interessirt es zu erfahren, wer hat zuerst Glycerin empfohlen und wann? Frof. Dr. H. Frey. 3. Der Unterzeichnete, mit einer neuen Auflage seines Buches: „Das Mikroskop und tlie mikroskopische Technik" beschäftigt, bittet die Herren Fachgenossen um Mittheilung neuer technischer Methoden und Präparate, die Herren Optiker um Mittheilung ihrer neuesten Kataloge, sowie etwaiger Instru- mente und Hilfsapparate. Zürich. Oberstrass. Prof. Dr. H. Frey. Band IL Heft 3. 0. Reichert's neuer beweg*liclier Objecttiseli. Von Professor Ernst tou rieischl in Wien. Hierzu 2 Holzschnitte. Von den drei Bewegungen, welche seit langer Zeit von den engli- schen Optikern dem Tische des Mikroskopes verliehen werden, ist die eine an den grösseren Stativen deutscher Arbeit ebenfalls seit vielen Jahren angebracht: nämlich die Drehung um die optische Axe. Hin- gegen wendet sich bei uns erst in neuerer Zeit die Aufmerksamkeit der Fabricanten und des Publicums auch den beiden anderen Bewegungen zu, und die Bequemlichkeit wird noch immer nicht allgemein anerkannt, welche darin gelegen ist, dass mittels mechanischer Vorrichtungen das Präparat in der Horizontal-Ebene in zwei auf einander senkrechten Richtungen verschoben werden kann. Der Objecttisch der grossen englischen und americanischen Stative besitzt von vorn herein und ein- für allemal die genannten drei Bewe- gungen — die Deutschen ziehen es im allgemeinen vor, an oder auf dem eigentlichen, um die Central-Axe drehbaren Tische ihrer Mikro- skope nach Bedarf einen Apparat anzubringen , der die beiden anderen Bewegungen ermöglicht. Mit der Anbringung dieser Vorrichtung ist aber bisher regelmässig eine Parallel-Verschiebung der Horizontal-Ebene, in der das Präparat liegt, verbunden gewesen. Es kam eben der gläserne Objectträger auf eine Platte zu liegen, die wie die eigentliche Tisch- platte central durchbohrt war und einige Millimeter über dieser lag. Dieser Umstand war ohne wesentlichen Belang bis zur Zeit der allge- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 3. • 19 290 von Fleischl: C. Reichert's neuer beweglicher Objecttisch. II, 3. meinereu Verwendung des ABBE'schen Condensationsapparates. Da die Beleucbtungseffecte , die mit diesem Apparate erzielt werden , sehr wesentlich von der Entfernung der obersten Fläche des Liusensystemes, aus welchem er besteht, vom Objecte abhängen , konnte es fernerhin nicht mehr gleichgültig sein, ob sich das Object mindestens um die Dicke der Glasplatte, auf der es lag, von der obersten Fläche des ABBE'schen Apparates entfernt befinden musste, oder ob zu der Distanz, die nicht mehr weiter verkleinert werden konnte, auch noch die Entfer- nung zwischen der Oberfläche der eigentlichen Tischplatte und der Oberfläche des darüber befindlichen beweglichen Tisches hinzutrat. — Ich finde nun an dem neuen REicHEKT'schen Objecttisch mit doppelter mechanischer Bew^egung den Umstand besonders wichtig und erwähneuswerth, dass vermöge seiner Construction die Ebene, in welcher der Objectträger mechanisch verschoben wird, eben die Ebene ist in welcher er sonst durch die Hand des Beobachters bewegt wurde; dass, mit anderen Worten das Präparat auf dem eigentlichen Tische des Mikroskopes liegen bleibt und nichts geändert wird als die Art der Einwirkung auf dasselbe. Es wird dadurch der Vortheil der mechani- schen Bewegung gewonnen, ohne dass irgend ein anderer Vortheil einge- büsst würde, speziell: ohne dass von der Ausnutzung des AsBE'schen Beleuchtungs-Apparates irgend etwas verloren würde. Bei Anwendung der REicHEKT'schen Vorrichtung wird nämlich das Objectglas, auf dem das Präparat liegt, von beiden Seiten her von zwei gradlinigen Armen (r, r) ergriffen, die sich an seine kurzen Ränder anlegen ^ Jeder dieser beiden Arme besteht aus zwei übereinander- geschraubten flachen Stücken , die zwischen sich ein Stück einer dünnen Kautschukplatte von entsprechender Grösse fassen, und von solcher Gestalt, dass ein feiner Streifen Kautschuk den inneren Rand des Armes, also jenen Rand, der sich an den Rand des Objectträger s anlegt, um zwei oder drei Zehntel mm überragt. Der Objectträger wird somit nicht von den Metall- Armen selbst, sondern von deren Kautschuk- säumen berührt und erfasst. Von diesen beiden Armen nun wollen wir bei der Beschreibung der neuen Präparat - Führungs - Vorrichtung von C. Reichert ausgehen. Es wurde bereits erwähnt, dass jeder dieser beiden Arme aus zwei flachen Metallstücken besteht. Das obere Metallstück ist nun in der That nichts weiter, als ein Blechstreifen von etwa Yg mm Dicke, 6 mm *) Die Bezeichnung der Buchstaben hat die gleiche Bedeutung für Figur 1 wie füi' Figur 2, — 11,3. von Fleischl: C. Reichert's neuer beweglicher Objecttisch. 291 Breite und 24 mm Länge, von drei Löchern durchbohrt, welche die Schraubenschäfte durchlassen, durch welche die obere Platte auf der unteren befestigt ist. Das untere Stück eines jeden der beiden Arme ist von derselben Gestalt wie das obere, aber aus stärkerem Blech (1 mm); es setzt sich an jenem Ende, welches beim Gebrauch dem Beobachter zugekehrt ist, zunächst in ein kurzes, rechtwinklig aufwärts gebogenes Stück, und dann abermals durch eine Biegung im rechten Winkel , in ein horizontal , quer nach innen , also gegen das ent- sprechende Stück der anderen Seite gekehrtes Stück (t, t) fort, welches eine Länge von etwa 3 cm hat. Jedes dieser Querstücke trägt an seiner Vorderfläche einen kleinen, als Handhabe dienenden Knopf (l, Z), und an seiner hinteren, dem Beobachter zugekehrten Fläche eine seiner ganzen Lauge anliegende Leiste von trapezförmigem Querschnitt. Diese Leiste stösst mit derjenigen Fläche, welche der kurzen Parallel Seite des Trapezes entspricht, an den Querarm und läuft in einer Rinne von analogem Querschnitt, welche den ganzen Körper des sofort zu er- wähnenden Stückes (M) von links nach rechts durchsetzt, gleitend und mit einiger Reibung. Es ist klar, dass diese Einrichtung dem Zwecke dient, die beiden Arme, welche den Objectträger zwischen sich fassen sollen, einander nähern oder von einander entfernen zu können. Das Stück (Ji), welches an seiner Yorderfläche jene querlaufende Nute von schwalbenschwanzförmigem Querschnitte trägt, in der die Führung der beiden Arme sich vollzieht, ist von parallelepip edischer 19* 292 von Fleischl: C. Reichert's neuer beweglicher Objecttisch. II, 3. Gestalt, hat also eine obere und eine untere recbteckige Fläche (8 cm X 2 -5 cm), eine vordere und eine hintere Fläche (8 cm X 7 mm), und eine rechte und eine linke Fläche (7 X 25 mm). Dieser Körper liegt so, dass die beiden grössten Flächen horizontal, und die beiden kleinsten Flächen rechts und links vertical orientirt sind. Ausser der Nute an der vorderen Fläche ist in diesen Körper noch an seiner unteren Fläche eine Nute ebenfalls von schwalbenschwanz- förmigem, aber von viel grösserem Querschnitt eingeschnitten, mittels welcher Nute dieser Körper auf einer Querleiste (N) von einer Seite zur anderen hin- und hergeschoben werden kann, welche auf der oberen Fläche eines unter dem in Rede stehenden Körper liegenden zweiten Körpers von ähnlicher Gestalt und Grösse wie dieser angebracht ist. Die Gleitflächen dieser Querleiste sind aber nicht alle voll, sondern die obere Fläche ist in weitem Umfange von einem Fenster (5*) durch- brochen, das in einen, im Innern dieser Leiste befindlichen Hohlraum führt. Hohlraum und Fenster sind beide von länglicher Gestalt, mit der grössten Dimension der Führungsrichtuug parallel, also quer gestellt. Von aussen ist weder von dem Fenster, noch überhaupt von der Existenz des Hohlraumes etwas zu sehen, da das nach oben gerichtete Fenster von dem auf der Querleiste, die die Höhlung birgt, hin- und herbeweg- lichen Körper bei allen Stellungen desselben ganz bedeckt wird. Dieser Körper kann beim Zerlegen des ganzen Apparates von seiner Führungs- leiste ganz herabgeschoben werden. Dann sieht man von oben durch das Fenster in die Höhlung, die diese Leiste trägt, hinein und bemerkt, dass die ganze Leiste von rechts nach links von einer Stahlstange (R) durchbohrt ist, deren mittlerer Theil frei in der Höhle liegt, und deren Enden beiderseits aus den kurzen Endflächen der Leiste frei heraus- ragen. In dem mittleren Theil der Stange ist auf deren cylindrische Oberfläche ein steiles, aus drei parallelen Drähten bestehendes Schrauben- gewinde (S) geschnitten, und jederseits ist die Stange mit einem vom Gewinde freien Endtbeile so verlagert, dass ihr ein einziger Grad von Freiheit zukommt : Die Drehung um ihre Axe, und dass also die Schie- bung in der Richtung der Axe unter den fünf Graden der Gebundenheit sich befindet. Aus diesem Zustande folgt der Freiheitsgrad eines Messing- klötzchens (/•), welches, von dem gewundenen Theil der Stahlstange durchbohrt, deren Mutter vorstellt, ausserdem aber mit Flächen, die der Gewindaxe parallel laufen, an Wandungsflächen der Höhlung gleitet. Von den 6 Graden der Freiheit ist dem Klotze nur einer gelassen: die Bewegung, deren er fähig ist, bedingt für jeden seiner Punkte eine gradlinige Bahn, die den Bahnen seiner anderen Punkte und zu- II, 3, von Fleischl: C. Reichert's neuer beweglicher Objecttisch. 293 gleich der Drehimgsaxe der Schraube parallel ist. Nun ist den beiden herausragenden Enden der Stahlstange je ein ränderirter Knopf (//, h) aufgesetzt. Ertheilt die rechte oder linke Hand des Beobachters dem ihr bequem liegenden Knopfe eine Drehung, so wird dieselbe auf die Stahlstange übertragen, und bedingt eine gewisse Verschiebung des von dieser durchbohrten Messingklotzes in der Querrichtung. An der oberen Fläche dieses Klotzes ist nun aber der früher beschriebene parallelepipedische Körper durch zwei Schrauben befestigt. Dieser Körper ist somit gezwungen, die Bewegungen des Klotzes mitzumachen, und ist bei seinen Bewegungen durch die ausgiebige Führung an der unter ihm befindlichen Querleiste sehr präcis an die gradlinige Bahn gebun- den. Da nun die beiden Arme, welche das Objectglas sammt dem darauf befindlichen Präparat erfassen, in fester Verbindung mit diesem Körper stehen, so ist ersichtlich, dass die Transversal-Bewegung des Präparates durch Handhabung der Schraubenköpfe 7i, li bewerkstelligt werden kann. Die ausgehöhlte Leiste, längs welcher der Körper in transver- saler Richtung verschoben wird, sitzt nun fest auf einem anderen, gleich- falls parallelepipedischen Körper, von ähnlichen Dimensionen wie der erstere. Doch ragt dieser untere Körper zu beiden Seiten etwas über die Ränder des anderen hervor (P, P) und trägt an diesen seinen schmalen Enden je eine nach abwärts gerichtete Leiste, welche parallel den Seitenrändern des festen Mikroskoptisches verläuft. Dieser Tisch ist nun aber an eben diesen Seitenrändern zugeschärft, und zwar auf Kosten seiner unteren Fläche; das heisst: es fallen seine Seitenränder nicht steilrecht, sondern jederseits von oben und aussen nach unten und innen ab. Dieser scharfe Rand wird von den, nach abwärts gerichteten Leisten, die von dem geschilderten Körper entspringen, umgriffen, wenn der ganze Mechanis- mus vom vorderen Rande des festen Tisches her. diesem aufgeschoben wor- den ist. Von der Mitte des hinteren , dem Beobachter zugewendeten Randes die- ses unteren Körpers ent- 2. springt nun ein horizontal nach hinten gekehrter, etwa 42 mm langer, flacher, gegen 1 cm breiter Stab (P), der an seiner unteren Fläche mit quergestellteu Zähnen be- setzt ist. Wird der Apparat dem Tische aufgeschoben, so dringt dieser Stab in eine seiner Gestalt entsprechende Bohrung ein, welche die Säule 294 von Fleischl: C. Reicherfs neuer bewegliclier Objecttiscli. 11,3. des Mikroskopes unmittelbar über der Tisch-Ebene von vorn nach hinten durchsetzt. Hierbei treffen die Zähne auf der unteren Fläche des Stabes einen quergestellten Trieb {2) an, zwischen dessen Zähne sie sich einzu- passen haben. Dieser Trieb befindet sich in entsprechender Höhe an der Hinterseite der Säule und läuft jederseits in einen Schraubenkopf aus (Ä', Ä'), so dass diese beiden Handscheiben sich in einiger Entfernung hinter den Handscheiben befinden, durch welche die Querverschiebung innerhalb des Apparates selbst regiert wird. Die rückwärtigen Hand- scheiben stehen etwas näher an einander als die vorderen; und die Folge ihrer Drehung ist offenbar — je nach der Richtung derselben — die Vor- oder Rückwärtsschiebung des ganzen Apparates, parallel den Seitenränderu des festen Tisches, die ja dieser Bewegung als Führungs- bahnen dienen. Die sämmtlichen zu Tage liegenden Metalltheile der ganzen Vorrichtung — mit Ausnahme der Handscheiben — sind hoch polirt und schön vernickelt. Die Handscheiben haben das Aussehen, welches Messingtheilen an Mikroskopen gewöhnlich zukommt. Die beiden Bewegungen, die longitudinale sowie die transversale, sind durch so solide Führungen gesichert , dass selbst bei den Linsen- systemen mit geringstem Arbeitsabstande, welche natürlich für Uneben- heiten der Objectführung am empfindlichsten sind, keine Spur einer solchen zu bemerken ist. Mit der Erfüllung dieser Bedingung ist aber der wichtigste und technisch schwierigste Punkt der ganzen Aufgabe erledigt — alle übrigen Bemerkungen können sich nur auf mehr oder minder nebensächliche Dinge beziehen. Eine solche Bemerkung von untergeordneter Wichtigkeit ist die folgende: Wie Alles auf Erden, so muss auch der sehr erhebliche Vortheil, welcher durch diesen neuen Objecttisch erlangt wird, durch irgend ein Opfer erkauft werden. In unserem Falle besteht dieses Opfer in einer geringeren Ausnutzung der Entfernung der Axe des Mikroskopes von der Säule. Durch diese Entfernung ist aber zugleich der Abstand eines Punktes des Objectes von dem Rande des Objectträgers, welcher dem Beschauer zugekehrt ist, gegeben, den dieser Punkt noch haben darf, wenn er bei dieser Orientirung der Glasplatte auf dem Tisch noch in das Gesichtsfeld soll gerückt werden können. Bei der mir vorliegenden Construction (Reichekt's Stativ No. II b) beträgt die durch den Apparat bedingte geringste Entfernung des der Säule zugekehrten Randes des Objectträgers von der Säule selbst : zwei imd ein Viertel cm. Um diesen Betrag wird also in dieser Richtung die Ausnutzung der Grösse des Objecttisches des Mikroskopes vermindert. Der übrig blei- bende Rest dürfte zwar für die allermeisten Fälle ganz bequem aus- II, 3. Ost: Ueber die Leistungsßihigkeit der Älikrometerscliraube. 295 reichen; doch Hesse sich durch geringfügige Aeuderimgen an der Aus- führung des Principes, welches diesem Objecttische zu Grunde hegt, auch der angegebene Betrag noch um ein Weseutliclies vermindern — fällt doch schon in der gegenwärtigen Ausführung die erwähnte Be- schränkung der nutzbaren Tischbreite bei den grösseren Stativen Rei- cheet's (No. I oder la) ausser Betracht. Im Ganzen muss dem geschilderten Hilfs-Apparate ein ansehnlicher Grad von Zweckmässigkeit zuerkannt werden, in Hinsicht sowohl auf die Häufigkeit des Vorkommens, und auf die Bedeutsamkeit der ge- stellten Aufgabe, als auch in Hinsicht auf den Gedanken, welcher der Lösung zu Grunde liegt, und auf die besondere Art seiner Verwirklichung. Da sich zu dieser Zweckmässigkeit der Vorrichtung auch noch eine anerkeunenswerthe Massigkeit des Preises, der für dieselbe verlangt wird, hinzugesellt, so ist der Wunsch und die Vermuthung gerecht- fertigt, dass sich dieses hier beschriebene Hilfswerkzeug binnen Kurzem einer erheblichen Verbreitung zu erfreuen haben möge. Wien, im Juni 1885. Ueber die Leistimo'sfäliio^veit der Mikrometerscliraube, o o Von Jeau Ost in Elsdorf. Betrachtet man vorurtheilslos die beiden Hauptformen der Mikro- tome, deren Typen das OscHAiz'sche und RivEi'sche Mikrotom sind, so wird man zugeben müssen, dass die horizontale Unbeweglichkeit der zu schneidenden Masse bedeutende Vortheile gegenüber dem Verschieben derselben auf einer schiefen Ebene bietet. Zu diesen Vortheilen gehört zunächst die Ausnutzung der ganzen Länge der Messerschneide, ferner erlaubt diese Constructiou ein viel bequemeres nasses Scheiden als dies durch fortwährendes Benetzen des Messers möglich ist, und schliesslich sind bei derselben viel compendiösere und stabilere Constructiouen zur ausgiebigen Neigung der Masse gegen den Horizont möglich. Von diesen Erwägungen ausgehend, gab der Verfasser seiner Zeit bei der Construction seines Mikrotoms, mit dessen Vervollkommnimg er sich mehrere Jahre beschäftigte und das er demnächst in dieser Zeit- 296 Ost: Ueber die Leistimgsfähigkeit der Mikrometerschraube. II, 3. Schrift zu beschreiben gedenkt, der Verschiebung der zu schneidenden Substanz durch die Mikrometerschraube den Vorzug. Selbst als bei einer älteren Construction, bei der die Masse aus einem enganschliessen- den Cylinder durch die Mikrometerschraube herausgedrückt wurde, wie dieses bei dem OscHATz'schen Mikrotom geschieht, sich Unregelmässig- keiten bei dem Heben der Substanz einstellten, setzte Verfasser diese auf Kosten der die Geradführung bezweckenden Vorrichtung und zwei- felte nicht an dem richtigen Gang der Schraube, da ihm bei der be- kannten vielfachen Anwendung derselben zu den feinsten astronomischen Messinstrumenten ein solcher Zweifel wohl nicht kommen konnte. An Stelle der erwähnten Verschiebung wählte Verfasser daher eine andere, die grosse Vorzüge vor jener besitzt. Bei derselben geschieht die Hebung, wie auch eine selbstthätige Senkung bei dem Zurück- drehen der Schraube fast ohne alle gleitende Reibung, wodurch die Mikrometerschraube von unnützem Druck und Abnutzung befreit wird; auch ist der todte Gang der Schraube gänzlich beseitigt. Während Verfasser diese Construction durch den Erfolg bei dem Schneiden prüfte, erschien das 3. Heft von Band I dieser Zeitschrift mit dem Aufsatze des Herrn Dr. M. Gottschau: „Vorzüge und Nach- theile verschiedener Mikrotome und ihrer Hilfsapparate". Die in demselben niedergelegten Ansichten und Gründe für die Unsicherheit der Hebung durch die Schraube konnte Verfasser nicht theilen, er wurde durch folgende Reflexionen und die weiter unten an- geführten Experimente zu dem entgegengesetzten Resultate geführt. Der todte Gang der Schraube kann freilich durch eine Feder leicht beseitigt werden, wenn eine genügend leichte Beweglichkeit für die zu hebenden Theile, wie an des Verfassers Mikrotom, vorhanden ist. Aber auch die Schwierigkeiten eine gute, gleichmässige Mikrometerschraube herzustellen, sind keineswegs so gross oder unüberwindlich, wie man gewöhnlich meint. Um dieses einzusehen, braucht man sich nur zu ver- gegenwärtigen, dass die 8 bis 10 Gänge, die sich in den Backen für feines Gewinde befinden, sich bei dem Schneiden einer Schraubenspindel gegenseitig controUiren, indem der von der Backe geschnittene erste Gang der Spindel auch durch die folgenden Gänge liindurchgehen muss, infolgedessen nur das den sämmtlichen Gängen der Backe Gemeinsame als Gang auf der Spindel stehen bleiben kann, während alles Andere von den scharfen Kanten der Backe weggenommen wird. Es wieder- holt sich dieses so oft, als die Kluppe oder das Schneidzeug eine volle Umdrehung macht. Es werden daher die sehr geringen Ungenauig- keiten, die in der Backe möglich sind, sich stets auf ein der Backen- n, 3. Ost: üeber die Leistungsfähigkeit der Miki'ometerschraube. 297 dicke gleich langes Stück Spindel beschränken. Niemals aber werden sich diese Ungenaiiigkeiten summiren können, so dass, nachdem eine beliebig lange Spindel geschnitten wäre, diese an einem Ende 20 Gänge, an dem anderen dagegen 20'5 Gänge auf das Centimeter hätte. Aus denselben Gründen , aus denen eine grosse Gleichförmigkeit der einzelnen Gänge unter einander folgt, ergiebt sich auch die Unmöglich- keit einer ungleichmässigen Steigung im Verlaufe eines Ganges. Auch diese müsste verschwinden, wenn bei der Umdrehung der Backe die normalen Theile des Ganges Alles wegnehmen, was dieser normalen Steigung nicht entspricht. Kann aber bei der Anfertigung einer Schraubenspindel eine bedeutende üngenauigkeit nicht vorkommen, so folgt daraus auch, dass eine solche Spindel in einer dazu gehörigen, enganschliessenden Mutter gedreht , bei gleichen Theilen einer Um- drehung sich stets um denselben Betrag herausschrauben muss. Es ergiebt sich dieses Resultat aber aus noch allgemeineren Gründen. Die Schraubenlinie entsteht bekanntlich durch ein derartiges Aufwickeln eines rechtwinkligen Dreiecks auf einen Cylinder, dass die eine Kathete parallel zur Achse des Cylinders liegt, die andere dagegen diese unter einem rechten Winkel schneidet. Die erste Kathete bildet dann die gesammte Länge der Schraube. Wird die zweite Kathete durch den Umfang des Cylinders dividirt, so erhält man die Anzahl der Gänge, die die Hypotenuse als Schraubenlinie auf dem Cylinder be- schreibt. Es folgt daraus, dass zwischen der geradlinigen schiefen Ebene und der Schraube kein wesentlicher Unterschied besteht ; und ferner, dass die Schraube durch die gegenseitige Controlle der einzelnen Gänge und durch die gleichzeitige Theilnahme aller Gänge (nicht irgend eines kleinen Abschnittes) auch au den minimalsten Hebungen einer viel grösseren Genauigkeit fähig ist als die geradlinige schiefe Ebene. Wenn man die Anzahl der Berührungspunkte bei dem Schlitten und der schiefen Ebene einerseits, und der Schraube und Schrauben- mutter anderseits vergleicht, so wird man finden, dass auch hier die Schraube das grössere Vertrauen verdient. Die Schraube, mit der Ver- fasser experimentirte, hatte einen Durchmesser von 7 mm oder einen Umfang von 22-2 mm; sie hatte 18*4 Gänge auf das Centimeter und, da die Mutter 20 mm hoch ist, so ergiebt sich daraus die Länge sämmt- licher activer Gänge zu 817 mm. Eine Berührungslinie, die wohl den längsten Schlitten um das Achtfache übertrifft. Obgleich Verfasser von der Richtigkeit der obigen Betrachtungen vollständig überzeugt war, versuchte er es doch, dieselbe durch das Experiment zu beweisen. 298 Ost: üeber die Leistungsfähigkeit der Mikrometerschraube. II, 3. Da eine Beurtheilung der Thätigkeit der Schraube durch den Er- folg bei dem Schneiden nicht möglich ist, weil das Zustandekommen eines Schnittes von mehreren Factoren, nämlich ausser der Hebung durch die Schraube von der Befestigung des Messers, von der Schärfe desselben, von der seitlichen ünbewegliclikeit der Masse, von der gerad- linigen Führung des Messers und einigen anderen abhängig ist, so ver- suchte Verfasser durch die sogleich zu beschreibende Methode die Hebung der Schraube dem Auge direct sichtbar zu machen und be- nutzte dabei mit bestem Erfolge das Mikroskop . Das Mikrotom wurde auf seine hohe Kante gestellt, wodurch die verticale Bewegung der Schraube zu einer horizontalen wurde, dann wurde es auf der Marmorplatte, auf der es stand, die selbst als Fenster- brett unbeweglich war, durch ein Paar Klemmschrauben festgestellt. Ein Messingdraht, der an dem beweglichen Theil des Mikrotoms be- festigt war, führte in bequemer Entfernung einige Millimeter über den Tisch des auf gleicher Marmorplatte aufgestellten Mikroskop es. An das Ende des Drahtes war eine zur feinsten Spitze ausgeschliifene Stahlnadel gelöthet, deren Spitze sich durch das Gesichtsfeld des Mi- kroskopes bewegte, welche Bewegung vermittels eines Ocularglasmikro- meters genau gemessen werden konnte. Nachdem der Apparat so zu- sammengestellt war, wurde die Schraube ganz herunter geschraubt, die Nadelspitze auf 0 des Mikrometers eingestellt, und bei OOfacher Ver- grösserung wurden die Theilstriche, die die Nadel bei einer ganzen Umdrehung der Schraube weiter gerückt war, abgelesen. Die Bewe- gung betrug 534 |jl. Auf diese Weise wurde die Steigung von 25 Gängen der Schraube gemessen, und ergaben sich folgende Zahlen: 7 Gänge zu 543 [ji, 8 zu 534 [i und 10 zu 537 [Jt. Die Schraube wurde bei verschiedenen Gängen auch zurückgedreht, und es ergaben sich für die Hebung und die Senkung fast genau dieselben Werthe. Um auch geringere Theile einer Umdrehung, oder was dasselbe ist, eines Ganges zu prüfen, wurde die Theilscheibe, deren Umfang in 50 Theile getheilt war, jedesmal nur 2 Theilstriche gedreht. Es wurde bei 300facher Vergrösserung beobachtet, jedoch erschien dabei die Spitze der Nadel so breit, dass sie einen ganzen Grad des Mikrometers bedeckte und daher mit grösster Sorgfalt noch feiner ausgeschliifen werden musste. Bei einer solchen Serie von Messungen ergab sich die Hebung 18mal zu 20-8 [x, 4mal zu 19-5 [x und 3mal zu 22-2 [x. Die geringen Abweichungen von dem Mittel um 1*3 |Jt und 1*4 \x sind ganz ohne Bedeutung, da sie bei der Beobachtung selbst der subtilsten Schnitte nicht wahrgenommen werden können. Verfasser erklärt die- 11,3. Ost: Ueber die Leistiingsfäliigkeit der Mikrometerschraube. 299 selben aus Beobaclitimgsfebleru, da sowohl bei dem Einstelleu der Tbeil- seheibe als auch bei dem Ablesen des Mikrometers geringe Fehler unterlaufen konnten. Doch angenommen, diese Abweichungen beständen thatsächlich, so entwerthen sie die Resultate in keiner Weise, da es bei Herstellung von Schnittserien nicht darauf ankommt , dass jeder Schnitt genau so dick als der folgende sei, sondern dass ein Schnitt nicht etwa das Doppelte von einem anderen messe, oder dass nicht durch ungleichmässige Hebung und andere Umstände Schnitte zerreissen und dadurch die Continuität der Serie verloren geht. Das Wesentliche der Sache aber ist: Es konnte niemals beobachtet werd en, dass eine Hebung bei entsprechender, selbst minimal- ster Umdrehung der Schraube gar nicht oder nur halb stattgefunden hätte. Um zu entscheiden, ob bei den allergeringsten Einstellungen, die praktisch nicht mehr gebraucht werden, vielleicht doch ein Ausfallen der Hebung möglich wäre, wurde ein Theilstrich der Scheibe, der, wie sich aus Obigem ergiebt, einer Hebung von 10*4 [x entspricht, in 8 gleiche Theile getheilt, und die Schraube in verschiedenen Höhen um diesen kleinen Kreisbogen weiter bewegt. Es wurde bei ßlOfacher Vergrösserung beobachtet, und konnte jedesmal die geringe Hebung und Senkung von V3 [x mit grösster Sicherheit wahrgenommen werden. Es ist also ein Irrthum, wenn man behauptet, dass die Präcision der Mikrometerschraube nicht über '/güo ^^ reiche. Dass dieses die untere Grenze der mit älteren Schraubenmikrotomeu zu erreichenden Schnittdicke sei, mag zugegeben werden, es liegt dieses aber nicht an der Schraube, sondern an anderen Umständen, wie Mangel seitlicher Stabilität der Schnittmasse u. s. w. Uebrigens hat die von Dr. Gott- schau in dem citirten Aufsatze hervorgehobene Sicherheit in der Hebung um '/looo 1^03, die mit Schlittenmikrotomen bewirkt werden kann, praktisch keine Bedeutung, da es wohl nie gelingen wird. Schnitte von solcher Feinheit herzustellen. Dr. Joseph Moelleb sagt darüber in dieser Zeitschrift Bd. I p. 243: „Diese theoretische Grenze (0-0075 mm) wird in der praktischen Anwendung kaum jemals erreicht werden, weil ja nicht allein die Führung des Objectes, sondern auch die Con- sistenz desselben und die Schärfe des Messers auf die Dicke des Schnittes Einfluss nimmt. Von günstigen Objecten können jedoch Schnitte von 0*02 bis 0'03 mm Dicke hergestellt werden, von einer Feinheit demnach, die allen Anforderungen genügt, in den meisten Fällen gar nicht gewünscht wird". 300 Brass: Mittheilungen zur mikroskopisclien Technik. II, 3. Zum Schluss soll noch bemerkt werden, dass diese Versuche, die ein so zufriedenstellendes Resultat ergaben, mit einer höchst nach- lässig gearbeiteten Schraube angestellt wurden, da das Schrauben- gewinde nicht ausgeschnitten und die Schraubenmutter viel zu weit war und daher ein Schwanken der Schraubeuspindel veranlasste, was viel- leicht auch ein Grund jener geringen Differenzen bei der Hebung sein konnte. Verfasser ist daher der Ansicht, dass eine einigermaassen genau gearbeitete Mikrometerschraube dieselbe Präcision hat wie der Objectschlitten, dass sie aber infolge der viel bequemeren Handhabung und der im Anfang dieser Arbeit angeführten durch sie ermöglichten zweckmässigen Constructionen denselben weit übertrifft. Mittlieiliingen zur mikroskopisclien Teclmik. Von Dr. Arnold Brass in Marburg. Hierzu 3 Holzschnitte. I. Die Einbettungsmethode mit Benzol und das Schneiden leicht zerbrechlicher Objecto. Auf Seite 229, Bd. I dieser Zeitschrift finden wir einen Aufsatz über die Einbettung histologischer Objecte vermittels Chloroform. Es hat nun die Chloroformbehaudlung gar manches für sich, aber auch gar mancherlei Unangenehmes. Ganz abgesehen davon, dass das Chloro- form ein theures Reagenz ist, wirkt es bekanntlich auf den Organismus nicht eben gerade angenehm, sodass man ein langes Präpariren mit demselben gern vermeidet. Ausserdem muss man die Schnitte später noch mit anderen Substanzen behandeln, bevor man sie in Balsam ein- legen kann. Ich wende anstatt der meisten, früher üblichen Präpara- tionsmethoden eine solche an, die alle Vortheile darbietet, welche man zur Zeit erwarten kann ; sie lässt sich leicht ausführen und giebt durch- aus sichere Resultate. Die gefärbten und gehärteten Objecte bringt mau in möglichst II, 3, Brass: Mittheilungen zur mikrosliopisclien Teclinik. 301 concentrirten Alkohol, den man sich selbst am besten dadurch herstellt, dass man den käuflichen sogenannten absoluten Alkohol mit einer hin- reichenden Quantität entwässerten Kupfervitriols versetzt, wodurch auch die letzten Spuren von entziehbarem Wasser aufgesaugt werden. Am sichersten geht man, wenn man die Entwässerung der Präparate mit diesem Alkohol in einem kleinen Stöpselglase vornimmt. Hat der Alkohol lange genug gewirkt, dass man sicher sein kann, dass alles Wasser aus den Schnitten entfernt ist, so giesse ich den Alkohol ab und setze so viel reines Benzol zu, dass die Präparate eben von demselben be- deckt werden. Je weniger Benzol man zusetzt, um so besser ist es, denn um so einfacher ist das folgende Verfahren, welches darin besteht, dass mau jetzt das Gläschen in ein vielleicht 30 Grad warmes Wasser- bad bringt und nur so viel fein geschabtes Paraffin zusetzt, als sich eben bei 30 Grad lösen lässt; hat dies '/g Stunde lang eingewirkt, so bringe ich die Präparate in reines Paraffin, welches eben auf dem Schmelz- punkte ist; ich schmelze ausserdem mit 100 Theilen Paraffin ungefähr 4 bis 6 Theile weisses Wachs zusammen. Am besten komme ich immer mit jenem Paraffin zum Ziele, welches nicht ganz rein ist, sondern wel- ches als unreines Paraffin verkauft wird ; ich lasse die Stücke jahre- lang liegen, dadurch zersetzen sich im Paraffin gewisse Substanzen und die Masse verliert die Eigenschaft, zu krystallisiren. Man kann vielfach in Handlungen solches altes, weniger werthvolles Paraffin be- kommen, jedenfalls versuche man, sich dasselbe zu verschaffen, da es meiner Erfahrung nach die beste Einbettungsmasse ist. In diesem Pa- raffin lasse ich nun die Präparate, wenn dieselben circa erbsengross sind, eine Stunde liegen, entsprechend länger bei grösseren Objecten. Nach Ablauf dieser Zeit bringt man sie heraus und lässt sie auf Glas- platten erstarren 5 man kann nun ganz sicher sein, dass alle Theile des Präparates vollkommen gleichmässig von Paraffin durchsetzt sind, und man vermeidet es, dass durch Krystallisation des Paraffins unnöthige Verzerrungen im Präparate auftreten. Die Objecto lassen sich nach kurzer Zeit ganz vorzüglich schneiden , die Schnitte sind weich und dehnsam, brechen nicht, vorausgesetzt, dass man das Paraffin niemals höher als 50 Grad erwärmt hat, denn höhere Temperaturen machen das Präparat fast jedesmal hart und für das Schneiden unbrauchbar. Die Schnitte werden nun in der bekannten Weise mit Schellacklösung auf- geklebt; ist dies geschehen, so wende ich zur Auflösung des Paraffins nicht, wie bisher üblich, Terpentinöl an, sondern einfach auch Benzol; es ist diese Behandlung mit Benzol so einfach und leicht, dass ein Jeder, der sie einmal probirt hat, stets wieder darauf zuzückkommen wird. Ich 302 Brass: Mittheilungen zur mikroskopisclieii Technik. II, 3. nehme das Präparat, nachdem das Paraffin geschmolzen ist und träufle aus einem Gläschen einige Tropfen Benzol darauf, welche den grössten Theil des Paraffins sofort lösen; dies benutzte Benzol giesse ich mm in das Gläschen zuzück und giesse aus einer zweiten Flasche, deren Kork mit einem seitlichen Einschnitt versehen ist (die also eine Tropfenflasche in der einfachsten Form repräsentirt), tropfenweise so viel vollkommen reines Benzol zu, bis ich überzeugt sein kann, dass alles Paraffin gelöst ist, das überschüssige Benzol giesse ich in die erste Flasche zurück. Jetzt kann man sofort Canadabalsam zusetzen, den ich ebenfalls in Benzol löse, und das Präparat mit dem Deckglas bedecken. Man hat also im ganzen nur verhältuissmässig wenig Präparationsflüssigkeiten nöthig, wodurch die ganze Präparationsmethode selbstverständlich sehr erleichtert wird. Es kommt nun hin und wieder vor, dass ein Object derartig be- schaffen ist, dass seine eineinen Theile nicht fest zusammenhängen, sondern lose neben einander liegen. Bei solchen Objecten kann es auch die beste Einbettungsmethode oft nicht verhindern, dass einzelne Stücke des Präparates verloren gehen dadurch, dass sie ausbröckeln oder bei der Uebertragung der Schnitte ihre Lagerung ändern; namentlich sind es Embryonalgewebe, welche bekanntermaassen oft sehr schwierig zu schneiden sind, wie z. B. die Eizellen vom Frosch und die ersten Ent- wicklungsstadieu derselben. Bei solchen Präparaten benutze ich eine Präparationsmethode, die auch über alle Schwierigkeiten weghilft; die Objecte werden, wie eben besprochen, eingebettet, eingespannt und ge- schnitten, sowie man aber einen Schnitt gemacht hat, pinselt man über die Schnittfläche des Präparates eine dünne Schicht von CoUodium, wie es im Handel käuflich ist, dadurch wird das Präparat mit einer ganz feinen, aber continuirlich zusammenhängenden Haut überkleidet. Man schneidet nun den folgenden Schnitt, der also auf einer Seite die CoUo- diumhaut trägt und bringt das Präparat, dies ist das einzig schwierige bei der ganzen Präparatiousmethode , mit der Collodiumschicht auf den Objectträger; die weitere Behandlung ist vollständig wie oben; man bekommt dabei so vorzügliche Resultate, wie man nur eben wünschen kann, auch die feinsten Details in dem Präparate, wie z. B. quer durch eine Höhle verlaufende Muskelfasern oder in einem Gefäss liegende isolirte Zellen u. s. w. werden an dem Orte zurückgehalten, wo sie lagern, als das Präparat in Paraffin eingebettet wurde. Es sei hier nebenbei noch bemerkt, dass ich alle Objecte meist nur mit Sublimat behandele; ich nehme das zu untersuchende Gewebe lebend aus dem Thiere heraus und bringe dies Präparat sofort in eine 60 bis II, 3. Brass: Mittheilungen zur mikroskopisclien Technik. 303 70 Grad warme concentrirte Sublimatlösiing (S''^)), lasse es je nach der Grösse mehr oder minder lange darin liegen, erbsengrosse Stücke ver- bleiben darin nngefähr 10 Minuten, walinnssgrosse bis zu einer halben Stunde. Nach dieser Zeit kann man sicher sein, dass das Sublimat alle Theile des Gewebes gleichmässig durchdrungen hat ; es kommt nun darauf an, das in die Gewebe eingedrungene Härtungsmittel wieder aus demselben zu entfernen, und muss dies mit grosser Vorsicht geschehen, wenn man nicht später in den mikroskopischen Präparaten jene so äusserst störenden stecknadelartigen Mikrokrystalle des Sublimats wiederfinden will. (Es sei hier bemerkt, dass dieselben nicht kurz nach dem Einlegen des Präparates in Balsam, sondern oft erst nach wochen- und monatelangem Liegen in störender Weise zum Vorschein kommen). Vor allem hüte man sich , das Präparat aus Sublimat in zu verdünnten Alkohol oder gar Wasser zu bringen, die Wirkung desselben ist eine äusserst stierende , was man leicht daran constatiren kann , dass sich bei in toto gehärteten Amphibien, Kröten, Frösclien u. s. w. nach einer solchen Behandlungsweise die Haut in grossen Blasen abhebt. Man bringt am besten das gehärtete Object aus der Sublimatlösung direct in 70- .bis SOprocentigen Alkohol und zwar in möglichst viel desselben ; hierin kann man es einen halben bis einen Tag liegen lassen, legt es dann in 90procentigen, um es schliesslich in absoluten zu übertragen. Je länger man mit Alkohol auswäscht, um so besser werden die Präpa- rate; will man sich überzeugen, ob noch Sublimat im Object vorhanden ist, so nimmt man einen Tropfen des Alkohols, welcher schon längere Zeit über dem Präparate gestanden hat und den man vor der jetzt zu besprechenden Untersuchung zunächst umschütteln muss, lässt diesen Tropfen auf einem reinen Objectträger verdampfen und untersucht unter dem Mikroskope, ob an der Stelle, wo er gelegen, Subliraatkrystalle sichtbar sind ; so lange dies noch der Fall ist, muss mit Auswaschen fortgefahren werden; hat man die Präparate endlich in absolutem Alko- hol liegen, so kann man sie in der allerverschiedensten Weise behandeln. Für die meisten histologischen Untersuchungen genügt ein einfaches Färben der Ohjecte in einem Carminfarbstoff, welcher von allen be- kannten die Präparate am gleichmässigsten färbt und sich am leichtesten ausziehen lässt, es ist das die durch Salzsäure entstehende Carmin- lösung. Da ich oft um das Recept dieses Tinctionsmittels gefragt werde, so will ich es hier gleich mitteilen. Man nimmt einen gehäuften Thee- löffel voll Carmin, bringt denselben in vielleicht 500 g 70procentigen Alkohol und setzt diesem auf je 100 g 15 Tropfen reine Salzsäure zu, bringt dies Gemisch in das Wasserbad und lässt es längere Zeit kochen j 304 Brass: Mittheilungen zur mikroskopischen Technik. II, 3. es kommt darauf au, dass man nach dem Kochen noch einen Ueberschuss von festem Carmin in dem Glase vorfindet; sollte dies nicht der Fall sein, so ist noch Carmin zuzusetzen und abermals zu kochen, bis sich ein Ueberschuss zeigt. Den durch das Kochen verdampften Alkohol ersetzt man durch Zugiessen von 96procentigen. Der Farbstoff wird filtrirt, um dann verbraucht zu werden. Man kann alle Präparate in toto färben, und muss es nur abprobiren, wie lange ein Präparat in den Färbemitteln zu verweilen hat, tagelanges Liegen darin schadet wenig, weil der Farbstoff in TOprocentigem Alkohol gelöst ist. Verhältuissmässig einfach ist das Ausziehen des nicht an das Plasma gebundenen Farbstoffes; ich bringe die Präparate in kleine Mullsäckchen und hänge sie in ein Gefäss mit TOprocentigem Alkohol, sodass das Präparat dicht unter die Oberfläche des letzteren zu liegen kommt ; der Carminfarbstoff wird vollkommen ausgezogen und sinkt, wenn man das Gefäss ruhig stehen lässt, zu Boden, während die obere Schicht des Alkohols ziemlich klar bleibt und so eine grössere Ausnutzung ge- stattet. (Dies Auswaschungsverfahren kann man auch für die aus dem Sublimat kommenden Objecto anwenden, da sich das Sublimat ebenfalls zu Boden setzt; mau kommt so in möglichst kurzer Zeit zum Ziele). Es ist keineswegs nöthig, dass man dem Alkohol, um diese Carmin- färbung zu einer reinen zu machen, noch Salzsäure zusetzt, und dies ist ein wesentlicher Vortheil, denn es werden bei Anwendung von Salz- säure in grossen Objecten die verschieden tief liegenden Schichten verschieden intensiv ausgezogen, wodurch man ungleiche Färbungen erhält, was mit unseren Farbstoffen niemals der Fall sein kann. Ich selbst wende in letzter Zeit nur die eben geschilderte Präpa- rationsmethode an und komme damit in jeder Weise zu dem gewünschten Ziele, sowohl die complicirten Kerntheilungsfiguren, als auch alle Einzel- heiten innerhalb der Zelle werden in klarster Weise sichtbar, besonders wenn man als Einschlussmittel Cauadabalsam oder verdünntes Glycerin benutzt. Das Sublimat hat den entschiedenen Vortheil, dass es alle Theile der Gewebe gleichmässig durchdringt und zum Absterben bringt ; ich finde, dass es von allen Härtungsmitteln dasjenige ist, welches die Structur der einzelnen Zellen am genauesten erhält, was man von anderen Reagentien, wie Ueberosmiumsäure, Chromsäure, Essigsäure u. s. w. nicht behaupten kann. Man muss es sich stets zum Princip machen, niemals Gewebe von längere Zeit todten Thieren zu untersuchen, son- dern entweder die Thiere selbst lebend in heisses Sublimat zu übertragen, wobei der Tod sofort erfolgt, oder man nimmt aus grösseren Thieren, nachdem man dieselben chloroformirt hat, ohne sie abzutödten, das zu II. 3. Brass: Mittheilungen zur mikroskopischen Technik. 305 untersuchende Gewebe heraus und bringt es möglichst schnell in das Sublimatbad hinein. II. Bemerkungen über die Mikrotommesser und ihre Behandlung. Seite 327 ff. Bd. I dieser Zeitschrift giebt Gottschau eine weitere Betrachtung über verschiedene Hülfsapparate der Mikrotome und er- wähnt dabei die Art der Messer, das Abziehen und Behandeln der- selben u. s. w. Es ist gewiss wahr, dass vom Messer das Gelingen des Schneidens abhängt, kann man doch mit mittelmässigen Mikrotomen und gutem Messer Schnitte bekommen, welche man auf den best construirteu Mikrotomen mit weniger gutem Messer nicht erreicht. Darüber, ob es nöthig ist, dass heut zu Tage die Hülfsapparate so äusserst complicirt hergestellt werden, ist an dieser Stelle nicht zu streiten, ich will nur erwähnen, dass die alten LEisER'schen Mikrotome, wie sie zuerst im Leipziger Zoologischen Institute angewandt wurden, ebenso brauchbare Präparate geliefert haben, wie die hoch complicirten JuNö'schen, die in neuerer Zeit Mode geworden sind. Was nun die Messer anlangt, welche ich speciell zum Schneiden gebrauche, so bemerke ich davon, dass das gewöhnlichste Messer, wel- ches ich anwende , wenn es mir nicht darauf ankommt, Serien zu schneiden, ein aus härtestem Stahl gearbeitetes kurzes Messer ist; dasselbe ist vollständig grade, besitzt eine Länge von 14 cm, wovon 6 auf einen im Querschnitt rechteckigen , geraden Stiel fallen, dessen untere Fläche sich in die ebene untere Seite, der eigent- lichen Klinge, fortsetzt. Die Klinge besitzt eine Breite von 20 mm und eine Rückenhöhe von 5 mm, sie ist von oben nach unten schräg und auf der oberen Fläche etwas hohl geschliffen. Beim Gebrauch spanne ich das Messer mit dem Stiel in einen Klemraapparat ein, welcher eine dem Stiel entsprechende Oeffnung besitzt, die in ihrer längsten Achse gegen die Schnittebene um vielleicht 10 Grad geneigt ist. Ich ziehe das Messer selbst ab und gebrauche dazu einen Hülfsapparat, der sehr empfohlen werden kann und durch die beistehende Figur wieder- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 3. 20 306 Brass: Mittheilungen zur mikroskopischen Technik. II, 3. gegeben ist. Ich habe mir aus Eschenholz einen prismatischen Holzstock /^ schneiden lassen von ungefähr 10 cm Länge, welcher einen Querschnitt be- sitzt, wie ihn die Figur angiebt. In diesen Holzstock ist ein Spalt hinein- gesägt, der den Querschnitt des Messers darstellt, so zwar, dass, wenn das Messer m in ihn hineingelegt ist, dasselbe noch einige Millimeter mit der Schärfe nach aussen hervorsieht. Durch zwei 5 cm von einander entfernt stehende Schrauben a wird das Messer in dem Spalt fixirt und gleichzeitig um die nöthige Länge nach aussen hervorgedrängt. Die untere Fläche des Holzstockes entspricht genau der Schuittebene, während die obere Fläche desselben um 30 bis 40 Grad gegen diese geneigt ist, die untere Fläche des Messers bildet mit der Grundfläche des Holzstockes einen Winkel von 10 Grad, Ich schraube nun das Messer so weit nach aussen hervor, dass die Schärfe ungefähr in die Spitze des Winkels fällt, welcher von den beiden Flächen des Holzstockes gebildet wird (man kann dies ziem- lich gut reguliren, wenn man auf die obere Fläche des Messers Carton- streifchenc auflegt und je nach der Dicke des Messers ein bis mehrere), nun befeuchte ich einen Abziehstein (Belgischer Kieselschiefer) 5, der ein sehr gleichmässiges Gefüge haben muss und vor allem niemals von feinen Adern stärker krystallisirter Kieselsäure durchzogen sein darf, und ziehe das Messer zunächst mit der einen und dann mit der anderen Fläche über den Stein hin und zwar immer mit der Schärfe nach vorn. Da- durch gebe ich der Schneide eine ganz feste und gleichmässige Keil- form, wie sie unbedingt für ein Mikrotommesser nöthig ist. Ebenso ge- brauche ich diesen Hülfsapparat, um später das Messer auf den Streich- riemen abzuziehen, wobei es nicht darauf ankommt, dass die Schärfe genau in der Spitze des Winkels liegt. So schleife ich meine Messer schon lange Zeit hindurch und erhalte mit diesen g^^^^^^^^ Messern Präparate, welche allen Anforderungen rX^^^^^^^ entsprechen. Wie Figur 2 zeigt, verläuft die Grund- ß )\^ ^'^''ß^^ liüie der Messerschneide parallel der Schnittfläche 5, der Schnitt s' selbst wird durch die schiefe Ebene abgehoben, es biegt sich das Messer m nicht leicht nach oben um , weil die Schneide einen grösstmöglichen Widerstand entgegensetzt , was nicht der Fall ist, wenn man die Messer gleich- massig keilförmig von dem Rücken der Klinge nach der Schärfe zu schleift. Zum Abziehen verwende ich einen Streichriemen, welcher durch eine Schraube angespannt wird, also keine feste Unterlage besitzt und ich kann absolut nicht finden, dass derselbe die Nachtheile haben soll, welche Gottschau für einen solchen Streichriemen angiebt. Wenn II, 3. Brass: Mittheilungen zur mikroskopischen Technik. 307 man die Schraube fest anzieht und beim Abziehen, wie es der Fall sein muss, stärker mit dem Messerrücken als mit der Schneide drückt, so läuft die Schneide über einen Kreisbogen hin, dessen Radius so gross ist, dass der Bogen beinahe eine grade Linie bildet. Zum Schneiden von Schnittserien verwendet man häufig breitere Messer, um die Schnitte gleich im Zusammenhange auf der Klinge liegen zu lassen, es muss jedoch auch hier bemerkt werden , dass die langen, breiten und schweren Messer durchaus keine Vortheile vor den eben geschilderten kleinen, verhältuissmässig kurzen Messern bieten. Ich stelle beim Schneiden das Messer ungefähr in einem Winkel von 45 Grad gegen die Längsachse des Mikrotoms, nur dann, wenn man unter spitzerem Winkel schneiden wollte, wäre ein längeres Messer am Platz, es hat sich aber eine solche Schiefstellung des Messers bei der heutigen Einbettungsmethode nicht bewährt, schneidet man doch die Schuitt- serien sogar mit senkrecht gegen die Achse des Mikrotoms gerichtetem Messer. III. Die Anfertigung von zusammenhängenden Serienschnitten. Bei kleineu Objecten (Embryonen, niedere Thiere u. s. w.), bei denen es darauf ankommt , Serien zu erhalten , um die Lagerung der einzelnen Gewebsschichteu gegen einander, sowie die der Organe u. s. w, nach Schnitten vermittels des Mikroskopes zu construiren, ist es meist von Vortheil, wenn man Schnittserien anfertigen kann, die zur Her- stellung möglichst wenig Zeit beanspruchen. Es wird in solchen Fällen eine Methode angewandt, welche nicht allgemein bekannt ist und deren Mittheilung Vielen erwünscht sein dürfte, es ist dies das sogenannte Bänderschneiden ^ Bei demselben kommt es darauf an, dass die einzelnen Schnitte vermöge der Adhäsion an einander kleben bleiben, es wird nicht jeder Schnitt von der Klinge des Messers abgenommen, sondern man lässt den ersten Schnitt liegen, wie er liegt, schraubt dann das Object in die Höhe, schneidet den zweiten Schnitt, dann den dritten, vierten u. s. w., es verdrängt dabei jedesmal der folgende Schnitt den vorhergehenden und haftet sich ausserdem so fest au denselben an, dass mau eine band- wurmartige Kette an einander befestigter Schnitte erhält. Um dies nun ausführen zu können, müssen verschiedene Bedingungen erfüllt werden, erstens dürfen die Objecte nicht zu gross sein, nur bis 3, höch- ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 7. 20* €^ 1 o k 3 4 J i^r^ \ f ^ a s'^ o- 308 Brass: Mittheilungen zur mikroskopischen Technik. II, 3. stens 4 mm lang nnd breit, man bettet sie volUständig in Paraffin ein und schneidet das Paraffin im Umkreis des auf dem Mikrotom aufge- klebten Objectes derartig fort, dass das Object immer innerhalb einer kleinen Paraffinsäule steht; dieselbe muss ein rechtwinkliges Prisma bilden, wie dasselbe in Figur 3 bei o in der Aufsicht abgebildet ist. Das Messer h wird senkrecht zur Längs- achse des Mikrotoms gestellt, sodass die Schneide s desselben das Object nur mit derselben Stelle triflft; das Paraffin des Objects muss so geschnitten sein, dass die beiden Flächen 6 und a so- wohl unter sich, als auch zur Messer- schneide parallel gestellt sind; je ge- 3. nauer mau dies auszuführen im Stande ist, um so exacter werden die Schnitte, um so besser kleben sie an einander. Die Seite a wird zunächst von der Messerscharfe berührt, ist der Schnitt gemacht, so liegt die mit h bezeichnete Seite des Objectes noch auf der Schneide s des Messers, der folgende Schnitt trifft nun das Präparat wieder bei a, es klebt dem- entsprechend die hintere Seite des ersten Schnittes mit der Vorderseite des zweiten an einander. Soll das Schneiden gut gelingen , so muss weiterhin das Messer schnell über das Präparat hingezogen werden, man darf also beim Schneiden das Messer nicht langsam durch das Präparat hindurchziehen, sondern man stellt die Schneide dicht vor das Object, zieht rasch durch dasselbe hindurch und bringt das Messer dann eben so schnell in die ursprüngliche Lage zurück. Man kann die auf diese Weise entstehenden Bänder in mehreren Schlingen auf der Messerklinge herumrollen , man nimmt sie dann später im Ganzen fort , legt sie der Länge nach auf einen Bogen glattes, weisses Papier und kann nun von dem Bande so viel Schnitte abschneiden, als man in einer Reihe unter dem Deckglase haben will. Es eignen sich zu solchem Bänderschneiden die von Schanze in Leipzig verfertigten Mikrotome besser als die Jiing- schen, weil hier das Präparat auf derselben Stelle stehen bleibt und nur durch die Schraube in die Höhe gehoben wird, während das Messer immer über dieselbe Fläche gestellt werden kann, also gleichmässig zu schneiden vermag. Bei einiger Geschicklichkeit hält es nicht schwer, in der Secunde zwei Schnitte zu machen ^. •) A n me r k u n g. Die Instrumentenfabrik von W. Holzhauer, Marburg verfertigt Messer und Schleifapparat (verbessert) nach meinen Angaben. II, 3. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 309 Beiträg'e zur pliarmakog'iiostisclieu Mikroskopie. Von Dr. Eugeu Yiuassa in Bern. Hierzu 4 Holzschnitte. Einleitung. Sclion lange machte sich in der pharmaceutischeu Mikroskopie das Bedürfniss geltend, ein Instrument zu besitzen, welches die Her- stellung dünner Längs- und Querschnitte durch Drogen, wie Wurzeln, Hölzer und Rinden, ermöglicht ; bis zur Stunde kennen wir kein Mikrotom, das den Anforderungen nur einigermaassen entspräche. Die meisten der existirenden Apparate sind für mediciuische und zoologische Arbeiten bestimmt, bei welchen man es fast ausschliesslich mit Objecten zu thun hat, welche erst durch Härten, falls sie zu weich, durch Auflösen von Kalk- und Kieselsalzen, falls sie zu hart sind, in geeignete Schnittcon- sistenz gebracht werden müssen. Der Pharmakognost dagegen arbeitet fast ausschliesslich mit Prä- paraten, welche dem Messer einen sehr bedeutenden Widerstand ent- gegen setzen. Die verschiedenen für biologischen Gebrauch bestimmten Mikro- tome sind schon des Ausführlichsten in mehreren Werken ' besprochen und bezüglich ihrer Construction, ihres Werthes, beziehungsweise Un- werthes, von hervorragenden Kritikern behandelt worden, so dass ich mich damit begnügen darf, die hauptsächlichsten Anforderungen, welche der pharmaceutische Mikroskopiker an ein Mikrotom stellt, aufzuzählen. Die wichtigste Aufgabe des zu besprechenden Instrumentes ist unbedingt die Führung des Messers, die wesentlich eine andere sein muss, als diejenige bei medicinischen Präparaten. Bei letzteren fertigt man 1) Fol, Lehrbuch d. vergleichenden mikroskopischen Anatomie, Leipzig, 1884. Journ. R. Microsc. Sog. London 1878-1885. DippEL, Handbuch der allgemeinen Mikroskopie 1883, p. 670 ff. Zeitschr. f. wissensch. Mikroskopie, Bd. I, II, 1884—1885, a. v. 0. Zoolog. Jahresbericht, Jahrg. 1879—1883. 310 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostisclien Mikroskopie. II, 3. Schnitte aus Objecten an, welche ungefähr Paraffinconsistenz besitzen und überall ziemlich gleich dicht sind, indem die weichen Gebilde bis zum Grade der guten Schneidbarkeit gehärtet und die Lücken mit Pa- raffin ausgefüllt werden. Die pflanzenpharmakoguostischen Objecte sind hinsichtlich ihrer inneren Beschaffenheit äusserst verschieden; ich erinnere nur an den Härteunterschied zwischen den Sklerenchymzellen der Cortex Quebracho und dem lockern, weitmaschigen Gewebe des Rhizoma Calami etc ; zu dem sind alle getrockneten Drogen viel härter als Paraffin. Aus dem Gesagten erhellt, dass ein Messerschlitten, welcher frei in einer keilförmigen Rinne läuft, (System Leyser-Rivet *, Thoma-Jung 2 etc.) unbrauchbar ist; denn bei harten Objecten wird der Schlitten aus seiner normalen Lage gehoben, und die Schnitte müssen ungleich aus- fallen. Es wurde nun diesem üebelstande auf verschiedene Art und Weise abzuhelfen gesucht. Die Einen Hessen denselben vermittels einer Schiene in einer Nuthe gehen, wie es bei dem hölzernen Mikrotom von Lehmann in Zürich ^ der Fall ist ; Andere bewegen denselben vermittels einer Schraube, welche durch eine Kurbel gedreht werden kann. (Sup- port-Mikrotom, von Altmann verfertigt von Schanze in Leipzig *) ; BoECKEß 5 endlich lässt ihn auf zwei aufeinander senkrechten, in der Horizontalebene verschiebbaren Schlitten laufen ; die resultireude Be- wegung des Rahmens, in welchen die Schlitten laufen, ist die Diagonale. Bei all den besprocheneu Schlittenführungen, wird das Messer nur auf einer Seite festgeklemmt, während das andere Ende frei bleibt ; da nun aber ein grösserer Widerstand ein auch noch so stark gebautes Messer wenigstens an der Schneidfläche federnd verbiegen wird, so sind alle diese Constructionen für den Pharmakognosten kaum brauchbar. Das BoECKER'che Instrument hat zudem noch den Fehler, dass eine erhebliche Reibung bei dem Gleiten der beiden Schlittenführuugen statt ') Joiim. R. Microsc. Soc. — 1880, p. 334. 0 Journ. R. Microsc. Soc. - 1883, p. 298; 1885, p. 155. Zoolog. Jahresbericht. Jahrg. 1881, p. 27. ViRCHow's Archiv, Bd. LXXXIV, p. 189—91. Zeitschr. f. wissensch. ]\Iiki-oskopie, Bd. I, 1884, p. 340 ff. 3) Befindet sich in der phanaakognostischen Sammlimg der Hochschule in Bern. ^) Fol, Lehrb. d. vergl. Anatomie, p. 128. Joui-n. R. Microsc. Soc. — 1885, p. 547. ^) Zeitschr. für Instrumentenkunde. Jahrg. 1884, Aprilheft p. 125. (Ucber ein neues Mikrotom von Mechaniker Boecker). Zeitschr. f. wissensch. Mikroskopie, Bd. I, 1884, p. 244. II, 3. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 311 findet, durch welche eine schnelle Abnutzung unvermeidlich wird. Dem Uebelstande, dass sich ein Messer beim Schneiden am freien Ende ver- biegen kann, wurde durch die WiNDLEE-FKiTscH'che Klammer * etwas vorgebeugt, allein volle Sicherheit kann auch sie nie gewähren. Aus diesem Grunde hat Boecker ^ seiner Zeit ein anderes Instru- ment coustruirt, bei welchem das Messer an beiden Enden gehalten wird, allein, indem er einen Fehler, das Verbiegen des Messers, ver- meiden will, begeht er einen anderen, nämlich die Anwendung zweier Hebel, welche durch eine Schraube verbunden werden müssen; dass aber diese Hebel sehr leicht aus der Normallage zu heben sind, liegt aut der Haud. Bevor in Deutschland das BoECKEE'sche Mikrotom aufkam, besassen die Engländer bereits seit einiger Zeit Instrumente, bei denen das Messer beiderseits befestigt war. Im Jahre 1879 wurde von Dr. Seiler ^ ein Apparat beschrieben, bei welchem das Messer mittels zweier Arme gehalten wurde. Diese waren wiederum an zwei Schrauben so befestigt, dass die ganze Com- bination ein Parallelogramm vorstellte, dessen dem Messer gegenüber- liegende Seite fehlt. Wurde nun das Messer in der Horizontalebene bewegt, so beschrieb jeder Punkt der Schneide die Diagonale eines Rechtecks. Ein solches Mikrotom eignet sich natürlich nur für sehr weiche Präparate. Der Satteethwhaite and Hants Freezing Section Cutter* lässt das Messer in Schlitzen zweier Längsschienen in der Horizontalen laufen. An beiden Euden des Messers ragen die Hefte desselben weit über die Schienen hervor und werden von Hand den Schlitzen entlang gezogen. Höchst eigenthümlich, jedoch nur fiii' weiche Objecte berechnet, •) Bericlit d. wiss. Jnstr. Berl. Gewerbe-Ausstellg. im Jahre 1879. Journ. R. Microsc. Soc. - 1882, p. 712. Zoolog. Jahresbericht, Bd. I, 1882, p. 24. DippEL, Handb d. allgem. Älikroskopie p. 675. 2) Zoolog. Jahresbericht. Bd. I, 1882, p. 24. DippEL, Handbuch. Boeckees neues Miki'otom, p. 680. Zeitschr. f. wissensch. Mikroskopie Bd. I, 1884, p. 267. Zeitschr. f. Instrimieutenk. Bd. II, 1884, p. 209-12. Journ. R. Microsc. Soc. 1885, p. 893. 3) Journ. R. Microsc. Soc. 1879, p. 328. -•) Zool. Jahresbericht. Jahrg. 1882, p. 24. Journ. R. Mcrosc. Soc. 1882, p. 292. 312 Vinassa: Beiträge zur pharmakogiiostisclaen Mikroskopie. II, 3. sind die im Prinzip sich ähnelnden Mikrotome von Cambrige * und Cladwell '. Bei beiden steht die Schneide des festgeschraubten Messers senkrecht nach oben, während das Object an einem zweiarmigen, einem Wagebalken ähnlichen Hebel, auf und ab bewegt wird. Beim automa- tischen Mikrotom von Cladwell, wird der, dem Object entgegengesetzte Hebel durch ein an einer Kurbel befestigtes Rad mit solcher Schnel- ligkeit in Bewegung gesetzt, dass der Hebel hundertmal per Minute sich hebt und senkt, also 100 Schnitte in dieser Zeit gemacht werden können. Die meisten anderen englischen Mikrotome lassen sich vom Oschatz- schen ableiten, mir wird das Messer an einem zweiarmigen freilaufenden Schlitten oder Rahmen festgeklemmt, wodurch jedoch Gleichheit der Schnitte nicht garantirt wird. Es sei mir noch gestattet eines Instrumentes Erwähnung zu thun, das sich in der hiesigen pharmakognostischen Sammlung befindet und von Staudingee in Giessen angefertigt wurde. Der Schlitten besteht nämlich aus einem schweren, gusseisernen Rahmen, an dessen Unterseite das Messer festgeschraubt ist. Eine ver- schiedene Einstellung des Messers ist hier uumöglich, auch geht der Schlitten nicht in, sondern auf Schienen. Habe ich nun im Vorstehenden die Haupterfordernisse, welche der pharmakognostische Mikroskopiker an den Messerschlitten eines Mikro- toms stellt, etwas näher charakterisirt, so sei es mir gestattet, einige Worte über das Messer und dessen Stellung zum Object bemerken zu dürfen. Messer, welche zum Schneiden von Wurzeln, Hölzern und Rinden verwendet werden, müssen scalpellartig geschliffen sein, jedoch muss der Winkel, den die beiden Flächen mit einander machen, grösser sein, als es für medicinische Zwecke nöthig ist. Die Stellung der Schneide zu dem Objecte muss ausserdem je nach der Consistenz eine verschie- dene sein, für Hölzer ist eine stärkere Neigung gegen das Object nöthig als für weniger feste Präparate. Aus dem nunmehr über Messerschlitten und Messer kurz Gesagten, können wir die Anforderungen an ein pharmakognostisches Mikrotom folgenderraaassen bestimmen : 1) Der Schlitten muss in bestimmt geformter Nuth, welche jede Bewegung ausser der, der Längsaxe parallelen unmöglich macht, leicht hin und her bewegbar sein. ') Journ. R. Microsc. Soc. 1885. p. 551. 2) Jom-ii, R. Microsc. Soc. 1885. p. 151. II, 3. Vinassa: Beiträge zur pbarmakognostischen Mikroskopie. 313 2) Das Messer mnss an beiden Enden festgeklemmt sein, jedoch in jede Lage zum Objecte gestellt werden können. 3) Das Messer muss scalpellartig geschliffen und gegen das Object etwas geneigt sein. Die nöthigen Eigenschaften des Objectschlittens, wie solcher für ein pharmakognostisches Mikrotom passt, ergeben sich aus folgendem: Wie schon von Gottschau ' erwähnt wurde, sind vorzüglich zwei Arten von Hebevorrichtungen im Gebrauche. Die Eine geschieht in verticaler Richtung vermittels einer Mikrometerschrauhe, in der Weise, dass das in einem Cylinder eingeschlossene Präparat über dessen freies Ende gehoben wird. Hierher gehört die grösste Anzahl der englischen Miki-otome, welche in dem Journal of the Royal Microscopical Society, Jahrgang 1879 — 85 besprochen sind, z. B. Seiler -, Fletscher "', Hailes ■*, etc. etc., ferner die von Schiefferdecker, Ranvier ^ und Oschatz ". Jedenfalls sind die cylinderförmigen Objecthalter, in welche das Object eingeschmolzen oder in Hollundermark eingeklemmt wird, zu verwerfen, da ein genaues Fixiren harter Objecte fost unmöglich ist. Bei der anderen Art Mikrotome wird der ganze Objecthalter durch eine Mikrometerschraube vertical gehoben. Derselbe bcAvegt sich mit- tels eines Schwalbenschwanzes in einer senkrechten Nuth und hält das Präparat mittels einer Klammer fest. (System Schanze ', Bulloch in Chigago '^j Beck ^). Bei vielen Instrumenten wird das Object ebenfalls durch eine Zange festgehalten, die Führung des Objectschlittens jedoch geschieht auf schiefer Ebene, und gilt in diesem Falle genau Dasselbe, was früher vom Messerschlitten gesagt wurde ; es ist unbedingt erforderlich, dass er in einer festen Schiene und Nuth laufe. Da aber alsdann eine genaue Verschiebung mit blosser Hand ein Ding der Unmöglichkeit ist, giebt es nur ein Mittel: die Hebung ist durch eine starke Schraube zu ») Gottschau, Mikrotome und ihre Hilfsapparate. Zeitschr. f. wissensch. Mikroskopie, Bd. I. 1884, p. 327 ff. 2) Journ. R. Microsc. Soc. 1879, p. 328. 3) Journ. R. Mcrosc. Soc. 1879, p. 466. *) Journ. R. Microsc. Soc. 1881, p. 696. Zool. Jahresbericlit, Bd. I, 1881, p. 26. ^) DippEL, Handbuch, p. 672. •*) DippEr,, Handbuch, p. 673. ') Journ. R. Mcrosc. Soc. 1885, p. 547. **) Journ. R. Microsc. Soc. 1885, p. 549. ■') Journ. R. Microsc. Soc. 1885, p. 345. 314 Vinassa: Beiträge ziir pharmakognostisclien Älikroskopie. II, 3. bewirken; allein lange Schrauben, mit ganz genau gleichen Schrauben- gängen, sind theuer und sehr schwierig herzustellen. Es ist diese Vorrichtung schon am SpENGEL-RivET'schen Mikrotom versucht worden, allein es scheint mir unpraktisch, einen so wichtigen Bestandtheil des Instrumentes unter dem Messer und Objecthalter anzu bringen. Die Gefahr, dass Abfälle von Schnitten auf die Schraube fallen, ist sehr gross. Dieselben würden ihrer Härte wegen die Schraube bald verderben, was Unregelmässigkeit des Ganges zur Folge hätte. Für pharmakognostische Mikroskopiker scheint im übrigen die Schraubenhebung das beste anwendbare Hilfsmittel zur Führung des Objectschlittens zu sein. Von der Objectzange muss verlangt werden, dass dieselbe kräftig genug gebaut ist und sich um alle drei Achsen drehen lässt. Mit Vorstehendem glaube ich die beiden wichtigsten Bestaudtheile eines für pharmakognostische Zwecke zu construirenden Mikrotoms beleuchtet zu haben, und will nur noch einige Worte über die Ge- sammtheit der Bauart des Instrumentes folgen lassen. Ein Uebelstand, an dem ältere Mikrotome kranken, ist der einer viel zu leichten Construction. Ein Instrument, das sich bei jedem kleinsten Drucke auf dem Tische verschieben lässt, ist jedenfalls für uns absolut unbrauchbar, und es ist unzweckmässig, ein solches auf dem Tische festschrauben zu müssen. Bei den neueren Constructiouen wurde darauf auch gebührend Rücksicht genommen, und es ist der schwere Fuss des BoECKEK'schen Mikrotoms der beste Bestandtheil des ganzen Apparates. Einleuchtend ist, dass auch für die übrigen Theile eine möglichst solide Bauart unbedingt uöthig ist, ohne dass deshalb das Auge durch Schwerfälligkeit beleidigt werden soll. Auf Grund der angeführten Haupterfordernisse, welche an ein gutes, zu pharmakognostischen Zwecken taugliches Mikrotom gestellt werden müssen, ist es mir nun gelungen, ein Instrument coustruiren zu lassen, welches jeden Anforderungen zu entsprechen scheint, und bereits bei Schnitten von 1*8 Dem mit gutem Erfolge von mir benützt worden ist. Beschreibung des Mikrotoms. Die Basis des ganzen Instrumentes bildet ein schwerer, 1 '/g Qcm im Querschnitt messender Rahmen ABCD von 45 cm Länge und einer Breite von 18 cm. 11,3. Vinassa: Beitrage zur pharmakognostiscben Mikroskopie. 315 Die beiden Längsstücke sind in der Mitte und an den Enden durch drei Querbalken verbunden AB, EF und BG. Je an den Ecken, so- wie in -der Mitte der Längsseiten befinden sich sechs Pfeiler von 12 cm Höhe GD, HE, lÄ, MC, LF und KB. AUe diese Theile sind aus einem Stücke gegossen. Auf die Pfeiler werden zwei Schienen der Länge nach aufgeschraubt, Gl und 3IK, welche im Querschnitte gesehen nach innen einen spitz- 1. winkligen Ausschnitt a b c, besitzen; dieser letztere dient zur Auf- nahme des Schlittens. Die eine dieser Rinnen, d ef, g h i, ist 5 bis 7 mm weiter ausgehobelt, als zur Aufnahme des Schlittens eigentlich nöthig wäre; der Zwischenraum wird durch eine Stahleinlage edghi ausgefüllt, welche in drei Zapfen ^, l, m beweglich, an der Schiene 316 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. II, 3. befestigt ist, und durch fünf Schrauben n, o, p, q, r von den Aussen- seiten her mehr oder weniger fast an den Schlitten angedrückt werden kann, wodurch verhütet wird, dass letzterer im Laufe der Zeit nach vielem Gebrauche sich unregelmässig in den Schienen bewege. Ich setze voraus, dass bei jedem Schnitte der Schlitten ganz durchgezogen wird; wäre nun keine Einlage vorhanden, so würden sich die beiden Rinnen ausarbeiten und einen unregelmässigen Gang zur Folge haben, was eine Ungleichheit der Schnitte nach sich ziehen würde. Wie man sieht, wird dieser Uebelstand durch die Einlage völlig gehoben, ja, es werden die Rinnen im Laufe der Zeit stets glatter geschliffen. Der Schlitten NOPQ hat folgende neue Construction aufzuweisen : Er stellt einen Rahmen von 12 cm Länge und 14 cm Breite dar, dessen II, 3. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 317 beide Qiierseiten der Länge nach durchbrochen sind. Diese beiden Schlitze dienen zur Aufnahme der Klemmschrauben, welche nöthig sind, um das Messer fest an die Unterseite des Schlittens zu drücken; hier- durch ist die Möglichkeit gegeben, den AVinkel des Messers zum Object beliebig verändern und je nach der Dicke des Objects stets die ganze Länge der Klinge ausnützen zu können. Zur Unterbringung des Messerheftes wird es nöthig, dass die Unterseite des Schlittens, die Fläche s a ß Y 1*3 cm höher sei, als die Oberseite der Schienen G I und MK] der untere Theil des Schlittens s a ß y welcher in der Nuthe läuft {ah c und d e f), muss schwalbenschwanzartig ge- arbeitet sein. Das Messer (Figur 4), dessen Constructiou nachher zu besprechen ist, wird durch zwei Flügelschrauben, welche durch die Schlitze der Quer- bCHuTTEN 3. balken des Schlittens gehen und an ihrem unteren Ende je eine Haftplatte £ mit entsprechender gegenüberliegenden Schwiele tragen, festgeklemmt. Die Schwiele S verhindert ein allfälliges zu starkes Anziehen und even- tuelles Abbrechen der Haftplatte £, welche stark gerippt, das Messer fest an den Schlitten drückt. Dieses besteht aus dem 7 mm dicken starken Heft, der breiten scalpellartig geschliffenen Klinge, welche behufs Aufnahme der Schneideflüssigkeit, in der Nähe des Rückens eine Rinne E, besitzt und zum Heft ca. 3% gedreht ist, so dass die Schneide etwas tiefer als der Rücken zu stehen kommt. Die Unterseite der Klinge liegt genau um die Dicke der Haftplatte tiefer als das Heft. Ferner befindet sich an dem oberen Theile der Klinge eine Art zweiten Heftes yj , welches wie das erst genannte zur Befestigung des Messers durch die Klemme %• dient, und gleiche Dicke wie jenes besitzt, jedoch 318 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. IT, 3. nur 3 cm lang ist. Das Messer kann nach Lüftung der beiden Flügel- schrauben ^ sehr leicht vom Schlitten entfernt und ohne jegliche Kunst- griffe, wie ein gewöhnliches Rasirmesser abgezogen werden, was mög- lichst häufig geschehen soll, da namentlich Holz- und Steinzellen das Messer stark angreifen. Auf die vier Eckpfeiler des Instrumentstativs Ä I und B Ky C M und D G sind nach aussen Platten angeschraubt, deren innere Seitenflächen mit den Aussenflächen der Pfeiler einen spitzen Winkel bilden. Zwischen ihnen können zwei Coulissen R und jR' hinuntergelassen werden, welche schwalben- schwanzartig eingreifen und durch eine 1 cm dicke Mittelwand S mit einander verbunden sind. Dieselbe dient als Träger des Objectschlittens nebst Hebevor- richtung. Auf der einen (linken) Seite befindet sich eine 5% ansteigende keilförmige Rinne c, auf welche sich der Objectschlitten stützt. Dieser besteht aus einer Platte von 1 cm Dicke, au welcher der Objectträger befestigt ist. Der Objectträger gleicht im Principe etwa dem von Gottschau construirten, nur musste er für pharmakognostische Zwecke etwas abgeändert werden. Selbstredend ist es beim pharmakognostischen Mikrotome auch von Wichtigkeit, die Klammer nach verschiedenen Richtungen drehen zu können, da es sich gewöhnlich um Quer- oder Längsschnitte handelt, welche genau senkrecht oder parallel zur Läugsaxe des Objec- tes geführt werden müssen. Eine grobe Einstellung ist von grossem Vortheil, und es könnte dieselbe folgendermassen angebracht werden. Statt wie es bei der GoTTSCHAu'schen Klam- 4 mer * geschieht, die Axen durch besondere Schrauben mit weit vorragenden Schraubenköpfen festzustellen, Hess ich die Schrauben selbst als Axen fungiren. Die Schraube ^^;, welche erlaubt, die Zange senkrecht in der Parallelebene zur Mittelwand zu bewegen, sitzt in einem schwalbenschwanzartigen Zapfen, der auf- ^^: ') Gottschau in Zeitschr. f. wissenscli. Mikroskopie Bd I, 1884, p. 343. Journ. R. Microsc. Soc. 1885, p. 547. Zool. Jahresber. Jahrg. 1881, Bd I, p. 26. Sitzimgsber. d. med. - phys. Gesellschaft Würzburg, Anat. Abth., Jahrg. 1881, p. 219. II, 3. Vinassa: Beiträge zur pharniokognostischen Mikroskopie. 319 und abwärts 2^/^ cm weit in einer Niitb des Objectschlittens läuft. Wird nun die Scbraube, deren Kopf wie die der übrigen vierfach durch- bohrt ist und mittels eines Stiftes leicht gelüftet und angezogen werden kann, aufgeschraubt, so kann die Zange in der Verticallinie gehoben und gesenkt werden. Beim Zuschrauben presst sie den Zapfen gegen den Objectschlitten, und es wird die Zange fixirt. Diese nimmt zwischen zwei gerippten Platten s und ^' welche durch zwei Schrauben x und y mit einander verbunden sind, das Object auf; die innere Platte ^' ist mit dem Objecthalter fest verbunden, während die äussere ^, grössere Oeffnungen besitzt, als zur Aufnahme der Schrauben dienen müssen; hierdurch wird ermöglicht, dass diese Platte, ^, in jede beliebige Lage zur feststehenden ^' je nach der Form des Objects, durch die Muttern, gestellt werden kann. Die Zange ist ferner so am Schlitten befestigt, dass unmöglich Sclmeideflüssigkeit vom Messer, oder Stückchen von Schnitten zwischen Schlitten und Mittelwand oder Rinne fallen können. Es wurde schon erwähnt, dass eine lange Schraube zur Hebung des Objectschlittens auf schiefer Ebene sehr zweckmässig sei, und es wurde auch bei dem vorliegenden Mikrotom eine solche angewandt. Zum Unterschiede vom SpENGEL-RivET'schen Mikrotom steht die Schraube nicht unter dem Objectschlitten, sondern auf der anderen Seite der Mittel- wand. Die beiden Unterstützungspuukte der Schraube liegen bei C/und V. Dieselbe läuft durch ein Mittelstück, welches mit dem Objectschlitten ver- bunden ist. Zur Führung desselben dienen zwei schwalbenschwanzartige Theile, welche in einem 5 % ansteigenden Schlitze der Mittelwand sich der schiefen Ebene nach durch die Schraube verschieben lassen. Sollte je dieses Mittelstück sich abschleifen, so braucht man nur die Schrauben, durch welche das Stück W am Schlitten befestigt ist, anzuziehen. Sehr schwierig, fast unmöglich ist es, eine vollkommen gleichmässige Schraube zu erhalten; alle besitzen sogenannten todten Gang, und es sind die Schraubengänge nicht in ganz gleichen Abständen imd gleicher Tiefe von einander eingeschnitten. Diese beiden Fehler wurden auf folgende Art corrigirt. Um den todten Gang zu vermeiden, befindet sich zwischen dem Kopfe und der Coulisse eine etwas verengte cylindrische, auf beiden Seiten conisch zu- laufende Stelle , welche genau in ein gespaltenes Lager V passt ; dies letztere kann durch zwei Schrauben X zusammengepresst werden, wodurch der todte Gang gehoben wird. Die Schraube wird durch einen grossen, in 10 Theile getheilten Kopf S gedreht; es entspricht eine Umdrehung durchschnittlich einer Verschiebung des Schlittens um 1 mm auf der 320 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostisclien Mikroskopie. II, 3. schiefen Ebene, oder einer Hebung um 0*05 mm. Eine kleine Feder dient als Einschnapp Vorrichtung , so dass jede Schnittdicke von 0*005 mm dem Ohre angemeldet wird. Wie bemerkt, sitzt die Schraubenmutter an dem Mittelstücke W fest ; sie öffnet sich durch ein Horizontalcharnier [Jt v, welches durch eine Gelenkschraube ^, die am unteren v Theile der Mutter befestigt ist und durch einen Schlitz in den oberen [x eingreift, geschlossen werden kann ; um jegliche Ungleichheit der Hebeschraube auszugleichen , schliessen beide Charniertheile jx, v nicht ganz, sondern werden durch eine Feder tt, welche zwischen dem Kopf der Verschlussschraube und dem oberen Theile liegt, gegen die Hebeschraube gepresst. Diese Verschlussvor- richtung besitzt deshalb auch noch den Vortheil, dass ein allmähliges Abreiben der grossen Schraube in der Mutter für die Genauigkeit des Instrumentes von keinem Schaden ist, da die Feder stets den richtigen Schluss des Charniers besorgt. An ein Verbiegen der 35 cm langen Schraube ist nicht zu denken, da ihr Durchmesser 14 mm beträgt; er wurde auch so gross gewählt, weil eine dicke Schraube leichter zu arbeiten ist als eine dünne. An der Mittelwaud S ist eine 20 cm lange Millimeterscala aufgeschraubt 1"; das Messen findet mittels eines Nonius Z statt, welcher dem Objectschlitten X angeschraubt ist. Durch diesen Nonius kann eine Höheuverschiebung von 0'005 mm gemessen werden. Das eben beschriebene Modell wurde von Herrn Büchi, Optiker in Bern angefertigt, und es ist die Ausführung desselben in sauberer Arbeit gelungen. Eine andere Construction wäre eine Combination meiner neuen Schlittenführung mit der Hebevorrichtung des ScHANZE'schen Mikrotoms. Es hätte dieselbe vor der eben beschriebenen den Vortheil, kürzer ge- baut werden zu können , und da eine bedeutend kleinere Schraube zur Hebung des Objectträgers von Nöthen wäre, billiger zu sein. Ein Nach- theil würde aber sein, dass eine kürzere Schiitteuführung für härtere und zähere Präparate, wie diese in der Pharmakognosie vorkommen, den hierzu nöthigen Schwung beim Schneiden nicht zuliessen. Einbettung. Bereits im Jahre 1881 wurde auf Anrathen des Herrn Prof. Dr. Peerenoud durch Herrn Dr. Bukkhakdt*), jetzigen Director der An- >) BuRKHARDT, Dio Mikrotoniie des frischen GeMrns. (Centrall)l. f. d. med. Wissensch. 1881, No. 29, p. 529—31. Zoolog. Jahresbericht, Band 1, Jahrg. 1881, pag. 33. II, 3. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 321 stalt PKfiFAEGiER bei Neuchätel, der Versuch gemacht, ganze Gehirne in Glyceringelatiue im Vaciium einzubetten, was ihm auch aufs Beste gelang. Einige Einbettungen von Drogen in Gelatine unter der Luftpumpe wurden ebenfalls schon im Jahre 1881 im hiesigen Laboratorium durch Herrn Dr. Ducommun ausgeführt, jedoch nicht weiter verfolgt. Herr Prof. Dr. Peekenoud hatte die Freundlichkeit, mich auf diese Versuche aufmerksam zu machen, und ich benutzte diese Idee, um pharmako- gnostische Präparate im Vacuum einzubetten. Der Gedanke lag nahe, dass Rinden, Wurzeln und Hölzer durch Glycerin erweicht würden. Die Glyceringelatiue hat zudem die gute Eigenschaft, die Zwischenräume, welche mitunter dem anderen Gewebe gegenüber unverhältnissmässig gross sind, wie z. B. bei Rhizoma Caricis, auszufüllen, indem die inter- cellulare Luft entweicht und dm'ch die Mass| ersetzt wird. Es wurden mit mehr als fünfzig verschiedenen Drogen Versuche augestellt. Zur Einbettung benutzte ich ein mit Dampf heizbares, kupfernes Vacuum von fünf Liter Inhalt, das mit einer starken KoEBTiNö'schen Wasserluftpumpe in Verbindung stand. Der Boden des Vacuums wurde mit einer ca. einen Zoll hohen Schicht flüssigen Paraffiues (56 " Schmelz- punkt) belegt, und während der ganzen Zeit, während welcher es im Gebrauche stand, auf 58 — 60 *^ gehalten, damit die Stärke, welche sich fast in allen Drogen findet, nicht verändert werde. In dieses Bad wurden fünf hohe und doch ziemUch weite Blechbüchsen gebracht. Diese ganze Combination ermöglichte, viele Drogen zu gleicher Zeit in verschiedenen Massen einzubetten, denn die Annahme, dass nicht für alle Objecte gleich consistente Einbettungen brauchbar seien. Hegt in der Natur der Sache. Da der Kork der Wurzelrinde keine Masse durchlässt, ist es unbe- dingt nöthig, dieselben an beiden Enden frisch anzuschneiden. Als Einbettung benutzte ich eine der Hektographenmasse ähnliche Mischung, nur wurde die Wassermenge verdoppelt, so dass sich folgendes Verhältniss ergab: Gelatina alba 15*0 g. Aqua Glycerin ^ 100-0 g. Nachdem das Bad einige Zeit erwärmt war, wurde der Druck so regulirt, dass das Manometer im Anfange nicht über 200 mm stieg. Hierdurch wird die Luft, welche sich in den Zellenräumen befindet, langsam ausgetrieben, und ein Ueberschäumen der Masse findet nicht statt. Schäumt jedoch die Masse über, so tritt in Folge des Einfliessens Zeitsclir. 1". wiss. Mikroskopie. 11, 3. 21 322 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. II, 3, der Leimglycerinmasse in das geschmolzene Paraffin Stossen ein. War nunmehr nach Verlauf einiger Stunden die Luft so weit aus den Objecten entfernt, dass kein Schäumen mehr wahrgenommen werden konnte, so wurde der Hahn der Luftpumpe allmählig so weit geöffnet, dass der Zeiger des Manometers auf ca. 720 mm stieg. Ich erreichte dadurch den Zweck, das Wasser aus der Masse möglichst abzudestilliren , und im Verlaufe weniger Stunden war die Consistenz der Gelatine die einer steifen Gallerte. Die Drogen, welche nunmehr der Prüfung unterzogen wurden, ver- hielten sich dem Messer gegenüber, wie zu erwarten stand, sehr ver- schieden. Hygroskopische oder schleimreiche Wurzeln, oder solche, welche sehr grosse Luftkanäle besitzen, so : Radix Althaeae, Liquiritiae, Bulbus Scillae, Rhizoma Caricis oder Graminis, waren zu weich geworden, sie wurden deshalb stets in eine Masse eingebettet, welche nur die Hälfte des vorgeschriebenen Wassers enthielt und lieferten dann, so präparirt, sehr schöne Schnitte. Sehr fibröse Rinden, wie Cortex Chinae, deren lange Bastzellen sich leicht vom Parenchym trennen, wurden noch länger im Vacuum gelassen, und konnten nachher aufs Beste geschnitten werden. Wurzelbildungen, wie die Rhizoma Curcumae, Tubera Salep, Her- modactyli, Radix Saponariae, welche unter gewöhnlichen Umständen ihrer Härte wegen schwer schneidbar sind, lieferten auf diese Weise eingebettet unter dem Mikrotom Serien von schönen Schnitten, deren Fläche 1 bis IY2 Dem betrug. Es genügte, die sämmtlichen Schnitte einige Zeit in lauwarmem Wasser liegen zu lassen, um leicht die letzte Spur Gelatine aus den Zellen zu entfernen und so ausgezeichnete mikroskopische Bilder zu er- halten. Durch diese Art der Einbettung habe ich fast alle Rinden und Wurzeln in einen Zustand versetzen können, welcher dem Mikroskopiker entschiedene Vortheile bietet. Grössere Schwierigkeit verursachte die Einbettung der Hölzer, na- mentlich des dichten Lignum Juniperi und Taxi. Am besten gelang sie, wenn diese Objecte in verdünntes Glycerin (Aqua und Glycerin ää) bei 200 mm etwa vier Stunden im Vacuum gelassen wurden, wobei sich voraussetzen liess, dass fast alle Luft ausgetrieben und diu'ch Glycerin ersetzt war. Hierauf wurden die Objecte 8 bis 14 Tage bei Seite gesetzt und wiederum ins erwärmte Vacuum gebracht bis kein Schäumen mehr er- folgte. War dies zwei- bis dreimal wiederholt, so wurden sie als ganz II, 3. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 323 ordentlich schueidbar erfunden, denn die Schnitte mit Kalilauge behandelt, zeigten ganz gut die Structur, wie Tüpfelzellen, Siebröhren, Treppeu- gefässe etc. Sehr harzreiche Hölzer, wie das Lignum Guajaci, ebenso Farb- hölzer, als Lignum Fernambuci, Campechianum, Sandali etc. wurden erst einige Zeit in Alkohol macerirt, und es wurde derselbe öfters erneuert, bis er sich nicht mehr stark färbte. Hierauf wurden die so präparirten Objecte, wie Lignum Juniperi etc., in Glycerin eingeweicht. Auch hier wurden ganz gute Resultate erzielt. Eine grosse Unannehmlichkeit beim Schneiden boten die dünnen Wurzeln von Rhizoma Caricis, Arnicae, Gramiuis, der verschiedenen Andropogon-Arten, so wie die Stipites Dulcamarae. Es waren zwei Wege möglich. Entweder konnten die imprägnirten Wurzeln in Paraffin eingeschmolzen werden, wie es bei zoologischen Präparaten angeht, oder sie wurden nach der längst bekannten Methode der Festklemmung durch Hollundermark geschnitten. Beide Methoden wurden von mir geprüft, allein ich ziehe die letztere vor, hauptsächlich, wenn man das zu schneidende Object mit etwas Ein- bettungsmasse innig mit dem Hollundermark verbinden kann. In Pa- raffin eingeschmolzene Wurzeln müssen mit einem, mit Xylol oder Ter- pentinöl benetzten Messer geschnitten werden; ist aber eine einzige Stelle des Messers während des Schneidens getrocknet, so rollt sich der Schnitt und ist kaum mehr zu gebrauchen. Wenn man aber mit Gelatine imprägnirte Wurzeln, die zwischen Hollundermark sich befinden, mit einem, wie es gewöhnlich geschieht, mit Alkohol benetzten Messer schneidet, so rollen sich die Schnitte nicht, und können mittels eines Pinsels leicht abgenommen werden; zudem ist diese Methode einfacher und weniger zeitraubend. Von allen geprüften Methoden lieferte die Glyceringelatine -Ein- bettung die besten Resultate. Wenn es auch ein grosser Zeitverlust scheint, dass die Objecte einen Tag im Vacuum verweilen müssen, so muss man nicht vergessen, dass man ganz gut wenigstens 50 ver- schiedene Drogen auf einmal einbetten kann, nur muss dafür Sorge ge- tragen werden, dass diejenigen gleicher Beschaffenheit in eine Büchse zu liegen kommen, und die stark gefärbten für sich behandelt werden; so z. B. wird man selbstverständlich nie Radix Ratanhiae mit Salep zu- sammenbringen. Ausser der eben beschriebenen Methode, wurden aber auch noch alle anderen , von Mediciuern angewandten , empfohlenen Massen geprüft. 21* 324 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. II, 3. Von deu Medicinern ist die am häufigsten gebrauchte Einbettungs- masse ein Paraffin von 45 bis 50 " Schmelzpunkt , es wurde dasselbe daher bei einer Anzahl Drogen angewendet. Allein unter das Messer gebracht, zerbröckelten die Schnitte auch dauu, wenn dasselbe mit Xylol oder Terpenthinöl benetzt war, oder sie rollten sich in einer Art und Weise zusammen, so dass sie grösstentheils unbrauchbar waren. Ein Hauptgrund, alle Methoden, welche auf der Impräguiruug der Wurzeln durch fettartige Substanzen beruhen, für pharmakognostische Zwecke zu verwerfen, ist der Umstand, dass das Messer aufs Heftigste beschädigt wird. Es wurden nämlich ausser Paraffin noch Mischungen desselben mit Vaseline oder mit Paraffinöl in den manigfaltigsten Verhältnissen an- gewendet, jedoch mit stets gleich ungünstigem Erfolge Auch die gewöhnlichen Oele, wie Sesam- oder Olivenöl, mit Talg oder Wachs gemengt, ergaben negative Resultate, so dass wir der eigeu- thümlichen Thatsache begegnen, dass Fette oder fette Oele die Hohl- räume wohl auszufüllen im Stande sind, dieselben aber nicht geschmei- diger oder zur leichteren Schneidbarkeit verwendbar macheu. Hingegen tritt durch die erweichende Wirkung des in die Gewebe eingesogenen Glycerins , ein für das Schneiden äusserst vortheilhafter Zustand ein; auch härtere Zellen, so z. B. der Bast der Chinarinden, werden viel leichter schneidbar. Es besitzt das Glycerin die Eigenschaft, die Ge- webe etwas aufzuquellen, und ertheilt ihnen eine für unsere Zwecke sehr schätzbare Geschmeidigkeit. Eigenthümlicher Weise zeigten Schnitte, welche durch Objecte ge- führt werden, die in Glycerinseife eingebettet waren, nicht die klaren mikroskopischen Bilder der Glycerinlcimpräparate ; wahrscheinlich ist dieses Verhalten auf die Wirkung des in der Seife vorhandenen, freien Alkalis zurückzuführen. Die bei der Einbettung von Drogen gemachten Erfahrungen führten zu einer Eintheilung derselben in vier Abtheilungen: 1) Schleimreiche, hygroskopische, oder solche Objecte, welche grosse Hohlräume besitzen , wurden am besten in gewöhnliche Hekto- graphenmasse von der Vorschrift: Gelatina alba 150 g. Aqua 50-0 „ Glycerin 1000 „ eingebettet. Zu dieser Abtheilung gehören Agaricus, Bulbus Scillae, Radix Althaeae, Liquiritiae, Pimpinellae, Urticae, Rhizoma Calami, Cy- II, 3. Vinassa: Beiträge zur pliarmakognostischea Mikroskopie. 325 nodon Dactylon, Galangae, Graminis, Iridis und die verschiedenen in- dischen Audropogon -Arten etc. 2) In der zweiten Abtheilung sind diejenigen Drogen unterzubringen, bei dene]i es geboten schien , die Masse allmählig zu concentriren ; sie wurden auch zu verschiedenen Zeiten , je nach der Art des Objectes aus dem Vacuum genommen. Sie umfasst die verschiedenen Chinarinden ; Cortex Cascarillae Cinnamoni, Rhamni ; Radix Acouiti, Columbo, Levis- tici, Ratanliiae, Rhei, Saponariae levanticae, Sarsaparillae, Senegae ; Rhi- zoma Curcumae, Galangae, Zedoariae, Zingiberis ; Hermodactyli Tubera, Chinae, Colchici, Salep, Seeale cornutum etc. 3) Zur dritten Abtheilung werden die Hölzer gerechnet, die man, wenn sie fai'bstofflialtig oder harzreich sind, zuerst in Alkohol maceriren lässt, dann, wie bereits beschrieben, in verdünntes Glycerin einbettet. Diese Gruppe besteht aus : Liguum Campechianum, Fernambuci, Gua- jaci, Juniperi, Quassiae, Sandali, Sassafras, Taxi etc. 4) Zur vierten Abtheilung muss man alle Drogen rechnen , welche durch obige Manipulationen nicht in schueidbaren Zustand zu bringen sind, wie Lignum und Cortex Quebracho, die Schale der Cocosnuss , so wie die harten Gefässbiindelstränge vieler Baumfarn. Ich konnte bis jetzt kein Mitttel finden, dieselben schneidbar zu machen. Zum Schlüsse gestatte ich mir, Herrn Prof. Dr. Pereenoud für die grosse Freundlichkeit, mit welcher er mich mit seinem Rathe bei dieser Arbeit unterstützte, so wie Herrn Prof. Dr. Flesch für die mir bereit- willigst zur Verfügung gestellte Literatur meinen aufrichtigsten Dank auszusprechen. Laboratorium der Staatsapothehe Bern. 326 Weigert: Ein neues Tauchmikrotom. II, 3. Ein neues Tanclimikrotom, besonders für a>rosse Sclinitte. Von C. Weigert in Frankfurt a. M. ; Senckenbergisches Institut. Hierzu 2 Holzschnitte. Die gebräuchlichen Mikrotome lassen kaum Etwas zu wünschen übrig, wenn es sich darum handelt, feine Schnitte anzufertigen, die eine gewisse Grösse nicht überschreiten. Dies Maximum dürfte für gewöhn- lich der Durchschnitt einer mensclilichen Varolsbrücke sein. Grössere Schnitte, wenigstens des Centralnervensystems, kann man nicht gut mit den bisher üblichen Mikrotomen herstellen. Es wäre dies nur möglich, wenn man so grosse Stücke mit trockenem Messer schneiden könnte, z. B. nach vorheriger Imbibition mit Paraffin. In diesem Falle wäre aber kaum ein Ausbröckeln der Schnitte namentlich beim Uebertragen vom Messer her zu vermeiden. Man muss daher die Präparate mit durch Spiritus befeuchtete Messer * schneiden. Das scheint a priori mit ge- ') Um das Messer mit Spiritus zu befeuchten, hat man meist Pinsel be- nutzt. Dies hat den Nachtheil, dass man eine Hand immer frei machen und den Schneideact unterbrechen muss. Man hat auch sonderbare, künstliche Messer construirt, die sich selbst mit Spiritus befeuchten. Ich benutze seit 13 Jahren eine Spritzflasche (erwähnt in Gscheidlen's physiol. Methodik 1875), deren langer Schenkel sich doppelt umbiegt und dicht oberhalb des Messers mit einer ausgezogenen Glaskugel endet, während der kurze Schenkel einen Gummi- schlauch trägt. Letzteren halte ich im Munde und blase so den Spiritus auf das Messer, ohne der Hände zu bedürfen. Bei dieser Methode hat man nur öfter ein Ueberschwemmen mit der Flüssigkeit zu gewärtigen. Es kommt dies dann zu Stande, wenn der Spiritus wieder in dem langen Schenkel in die Höhe geblasen werden muss, nachdem der in der Kugel befindliche entleert ist. Ich möchte nun auf einen kleinen Kunstgriff aufmerksam machen, der ein stetiges, sehr langsames, vollkommen in das Belieben des Schneidenden gestelltes Abtropfen ermöglicht. Man braucht nämlich nur an das im Spiritus stehende Ende des langen Schenkels ein Ventü, wie es auch die Chemiker brauchen, anzubringen, welches die Flüssigkeit eintreten, aber nicht zurücklaufen lässt. So bleibt denn der lange Schenkel mit seinen abgebogenon Theilen stets mit Spü-itus gefüllt, und das stossweise Einblasen nach serner Entleerung, welches wesentlich das zeitweise Ueberschwemmen mit Flüssigkeit zu Wege bringt, fällt fort. Es tritt II, 3. Weigert: Ein neues Tauchmikrotom. 327 ringen Schwierigkeiten verbunden. Wenn man die Bahn für das Messer und letzteres selbst lang genug macht, so könnte man glauben, es stehe kein Hinderniss im Wege, auch recht grosse Stücke „ziehend" und nicht „drückend" zu zerlegen. In der Praxis aber stellen sich doch grosse Schwierigkeiten entgegen. Diese bestehen darin, dass es nicht mög- lich ist, ein sehr grosses Messer so mit Spiritus zu befeuchten, das nicht während des Schneidens trockne Stellen entstehen , an denen die Schnitte ankleben. Für resistentere Gewebe, z. B. Leber oder Niere, macht das nun nicht viel aus, aber um solche handelt es sich bei der Frage um die grossen Schnitte nicht, denn für diese Organe genügen viel kleinere. Es ist wesentlich das Centralnervensystem, von dem man nach dessen gehöriger Härtung in MüLLER'scher Flüssigkeit grosse Durchschnitte nöthig hat. Diese zerreissen nun meiner Erfahrung nach immer, wenn man es versucht, sie in der gewöhnlichen Weise mit dem Mikrotom zu machen. Man hat daher schon lange für solche Präparate ein anderes Verfahren eingeschlagen, nämlich das, die Schnitte unter Flüssigkeit in einer Wanne anzufertigen. Auf diesem Princip beruht das berühmte grosse Gudden'scIic Mikrotom. Mit diesem lassen sich aber keine, für die neueren Färbungen genügend feinen Schnitte anfertigen, weil die Messerführung nicht sicher genug ist, um nicht Differenzen von einigen hundertstel Millimetern zu erleiden. Die ge- nügende Sicherheit der Messerführung ist nur möglich, wenn die- selbe nicht durch eine glattgeschliflfene Platte wie beim Gudden- schen Mikrotom bewirkt wird, sondern wenn das Messer eine lineare, feste Bahn hat , wie sie ursprünglich von Rivet erfunden wurde. Der Verfertiger der GuDOEN'schen Instrumente, Katsch in München, hat daher ein Mikrotom construirt, welches diese Messerführuug be- sitzt , aber die Präparate doch in einer Wanne unter Flüssigkeit schneidet. Dies Mikrotom ist so construirt, dass ein Flüssigkeits- becken, ähnlich wie beim GuDDEN'schen Mikrotom vorhanden ist, und dass in der Mitte grade wie bei diesem Instrumente das in einen Cylin- der eingeschmolzene Präparat durch eine Schraube in die Höhe gerückt wird. Nur die Messerführung ist anders. Es befindet sich nämlich neben dem Becken ein Schlitten wie bei den anderen Mikrotomen, die dem RivET'schen in dieser Beziehung nachgebildet sind (dem Brandt- LEisEE'schen, JuNG'schen und ScHANZE'schen). Dieser Schlitten steht ausserhalb der Wanne und das Messer muss daher abgebogen („ge- rne mehr in denselben ein und aus demselben heraus als man durch lang- sames Einblasen ein- und austreten lassen will. 328 Weigert: Ein neues TauchmiBrotom. 11, 3. kröpft") sein, um über den Rand derselben unter den Flüssigkeitsspiegel zu reichen. Wenn schon dadurch das Messer eine namentlich zum Ab- ziehen höchst unzweckm<ässige Form erhält und sehr theuer wird, so ist vor allem die Führung des zu schneidenden Präparates nicht so sicher wie an dem TnoMA'schen oder dem ScHANZE'schen Mikrotom und sie hat die Unannehmlichkeit, dass man jedes Präparat einschmelzen muss und nicht eher ein anderes schneiden kaun bis dieses alte Stück fertig be arbeitet ist, wenn mau nicht die Unbequemlichkeit des Einschmelzens immer von neuem haben will. Es ist ferner hierbei nicht möglich, das Präparat in beliebiger Richtung sicher zu fixiren, um eine bestimmte Schnittebene herauszubekommen. Alle diese Dinge sind nur möglich, wenn das Präparat wie bei den gebräuchlichen neuereu Mikrotomen in einer Klammer steckt, die in allen Axen einzeln drehbar ist '. Es war nun sehr erwünscht, dass das von Herrn Schanze in Leipzig unter meiner Anleitung und nach meinen Vorschlägen (vgl. Virchovt's Archiv Bd. LXXXIV p. 287 ff.) coustruirte, sogenannte ScHANZE'sche Mikrotom nicht wesentlich verändert würde, um ebensowohl zum gewöhnlichen Schneiden als zum Schneiden unter Flüssigkeit verwendet werden zu können. Der nächstliegende Gedanke wäre der, das ganze Instrument in Flüssigkeit zu setzen. Das ist einmal deshalb nicht möglich, weil man nach jedesmaliger Benutzung alle Mikrometerschrauben und alle Bahnen aufs sorgfältigste reinigen lassen müsste. Sodann aber fangen sich die Schnitte in den überall vorspringenden Theilen des Apparats imd sind schwer unverletzt herauszubekommen. Dennoch ist das Pro- blem leicht lösbar, wenn man darauf verziclitet die Schnitte in hori- zontaler Lage der Messerschneide zu machen, sondern in ähnlicher Weise, wie das bei dem His'schen Mikrotome der Fall war, in verticaler Rich- tung die Schnitte anfertigt. Auf diese Idee bin ich durch ein von Malassez construirtes Mikrotom ^ nach Roy gekommen, bei welchem ebenfalls unter Flüssigkeit nach Umkippung des Instrumentes in verti- caler Richtung geschnitten wird. Bei diesem modificirten Roy'schen Mikrotom ist nur eine kleine Blechschüssel nöthig, da das kurze Rasir- messer nur wenig Raum beanspruclit (die Anwendung dieser kurzen und ') Früher benutzte man hierbei die nicht praktischen Kugelgelenke. Die am ScHANZE'schen Mikrotom befindliche Einrichtung ist in der Art construü-t, wie sie zuerst Spengel in Hamburg empfohlen hat. 2) Es ist veröffentlicht worden in den Archives de Physiologie 1884 p. 348. Ich hatte schon vor längerer Zeit Gelegenheit gehabt, dies Instrument zu sehen. II, 3. Weigert: Ein neues Tauchmikrotora. 329 nicht ziehenden, sondern drückenden Klinge ist gerade der Hauptfehler dieses Mikrotoms). Bei der praktischen Ausführung dieses Principes für das ScHANZE'sche Mikrotom musste vor allem darauf Rücksiclit genommen werden , dass die Führung des Messers auch sicher Avar , wenn dasselbe nach Umkippung des Mikrotoms vertical schnitt statt hori- zontal. Aus diesem Grunde konnte die Messerführung nicht in der ge- wöhnlichen Weise stattfinden, weil sonst in der offenen Bahn der Schlitten sich leicht nach der Seite der schweren Messerklinge abbog. Der Messerschlitten läuft deshalb, ganz wie es bei den Präcisionsma- schinen der Mechaniker überhaupt geschieht, in einem sogenannten Schwalbenschwanz und wird auch durch eine Schraubspindel bewegt. Diese letztere ist so steil (ähnlich wie bei der ALTMANN'schen Modifica- tion des „ScHANZE'schen" Mikrotoms, das nur keine Schwalbenschwanz- führuug hat), dass die Bewegung schnell genug erfolgt, um das Mikrotom sogar als Gefriermikrotom benutzen zu können. Die Wanne ist aus Blech hergestellt und konnte verhältnissmässig schmal, musste aber lang genug sein , so dass das Messer freien Spiel- raum hatte, selbst wenn es bis zum äussersten Punkte vorgeschoben war. Sie wurde mit einem Deckel versehen, um den für die Füllung der Wanne nöthigeu Spiritus gegen Verdunstung und Verstäubung ge- schützt immer in dem Gefässe zu lassen, weil das Ein- und Umfüllen sehr lästig ist. Das Mikrotom ist in der Figur 1 so abgebildet, wie man es zum Schneiden ohne Eintauchen benutzt und wie es stehen muss, wenn man die (auf grosse Korkstücke befestigten oder anderweitig fixirten) Stücke in die Klammer passt imd bis zur Herstellung einer geeigneten Schnitt- fläche adjustirt. Will man dann unter Flüssigkeit schneiden, so wird das Mikrotom, welches mit Charnieren auf einer Eisenplatte befestigt ist, um diese Charniere im Ganzen herumgedreht, so dass nunmehr die Fussplatte senkrecht steht. Es war nicht möglich die Wanne so zu stellen, dass gleich beim Umkippen des Mikrotoms das Messer und das Präparat eintaucht, weil die zum Drehen der Klammer bestimmten Schrauben an der Seiten - wand des Blechgefässes anstiessen. Doch konnte ich dem Uebelstande leicht abhelfen, indem ich zunächst die Wanne tiefer stehen Hess und erst wenn das Mikrotom umgekippt ist, nach dem Princip einer Tauchbatterie in die Höhe hob. Herr Schanze, der Mechaniker des Leipziger Pathologischen Institutes, hat das in einer für die Handhabung sehr bequemen Weise aus- geführt, indem er eine einspringende Feder anbrachte, so dass mit Leich- tigkeit das Gefäss gehoben und an der richtigen Stelle von selbst fixirt wird. 330 Weigert: Ein neues Tauclimikrotom. n, 3. Figur 2 stellt das Mikrotom in dieser Position dar. Man sieht da auch, dass die sonst senkrechte hier aber wagerechte Platte des Mikrotoms, welche den Schlitten trägt , auf einen Fortsatz des Wannengestells sich sicher aufstützt und nicht leicht beim Schneiden wackelt. Die so zu sagen edleren Theile des Instrumentes, die Mikrometerschraube, die Bahnen für den Präparaten- und Messerschlitten liegen ausserhalb der Wanne. Man sieht auch in dieser Figur den zweiten Indicator fiir die II, 3. Weigert: Ein neues Tauchmikrotom. 331 Dreh-Scheibe, da der gewöhnlich benutzte nur unvollkommen sicht- bar wäre. Für die Benutzung des Instrumentes ist zunächst zu erwähnen, dass die Wanne soweit mit gewöhnlichem Spiritus gefüllt wird, dass der (M obere Rand des Präparats noch unter dem Flüssigkeitsspiegel liegt. Sodann muss bemerkt werden, dass es sehr unbequem wäre, wenn man aus dem grossen Gefässe die Schnitte herausfischen müsste. Das ist aber auch nicht nöthig. Da dieselben ziemlich senkrecht herunterfallen, so braucht man nur, ehe die Wanne gehoben ist, eine genügend 332 Weigert: Ein neues Tauchmikrotom. II, 3. grosse und tiefe Glasschalc auf den Boden derselben setzen. In diese fallen die Schnitte von selbst hinein, wenn dieselbe etwa senkrecht unter dem Präparate steht. Mau kann dann später nach vorherigem Herniederlassen des Blechgefässes und Zurückklappen des Mikrotoms die Glasschale herausheben und mit Leichtigkeit die Schnitte aus derselben entfernen. Die Schnitte haben die Tendenz, beim Schneiden sich umzubiegen, doch kann dies leicht verhindert werden, indem man durch einen zarten Pinsel von vorn herein den oberen Rand des im Spiritus leicht flottiren- den Schnittes etwas hebt. Nöthig ist dies nicht, denn ein enges Rollen hat überhaupt nicht statt, und die Entfaltung ist demnach auch später leicht möglich. Herr Schanze hat dies auf meine Veranlassung und nach meinen Angaben von ihm construirte Mikrotom bereits in seinen Katalog gebracht, und ich habe mir daher erlaubt, es hier zu beschreiben. Die erste Beschreibung davon ist als kleiner Beitrag zu dem Jubiläum des hochverehrten Professors Hoyek in Warschau in polnischer Sprache er- schienen'. Weil aber die ungeheure Mehrzahl der deutschen Kollegen, gerade wie ich selbst, die polnische Sprache nicht versteht, so dürfte eine nochmalige Publication wohl indicirt gewesen sein. Da ich selbst nach Fertigstellung des Instrumentes nur kurze Zeit noch in Leipzig war, und ich hier noch kein solches erwerben konnte, so habe ich noch nicht so viel damit geschnitten, um sagen zu können, ob nicht hier und da noch Etwas verbessert werden könnte. Nament- lich wird es sich um die Befestigung der grossen Hirnstücke etc. han- deln. Von der Klammerfixirung wird man ihrer Bequemlichkeit halber nicht gern abgehen ^ , aber bei Serienschnitten durch dicke Stücke wird die Befestigung derselben mit Celloidin auf Kork nicht genügen, sondern man muss entweder Celloidinklötze anfertigen, in ähnlicher Weise wie dies von den anderen Empfehlern des Celloidinverfohrens angegeben wurde, oder mau macht, wie Gudden, nach vorhergegangener Celloidinimbibition, eine Einbettung in einen Paraffin m a n t e 1 , der dann auf der von Herrn Schanze den Mikrotomen beigegebenen Metall- platte festgeklebt werden könnte. Gerade in dieser Beziehung habe ich selbst noch keine Erfahrungen sammeln können, da ich nur Stücke zu schneiden brauchte, die etwa Vg ^^^ 1 cm dick waren, wie dies immer ausreichend ist, wenn nicht die Nothwendigkeit vorliegt, lange Serien von Schnitten anzufertigen. ») Gazetta lekarska Nov. 1884. 2) Wollte man das thun, so Hesse sich an die eine Seite der Wanne ein GuDDEN 'scher Einschmelzcy linder mit Schraubenführuug anbrmgcn, bei dem die zu schneidende Fläche dann natürlich senkrecht stehen würde. II, 3. Heydenreich: üeber den besten Deckglaskitt. 333 Ich habe dies Mikrotom namentlich für grosse Schnitte empfohlen. Für kleine Schnitte wird es aber doch einen Vortheil gewähren, wenn bei diesen die Abnahme der Schnitte vom Messer mit Unzuträglichkeiten verbunden ist, also namentlich wenn mau (für Curse) sehr viele Schnitte anfertigt, oder wenn dieselben sehr zart und zerreisslich sind. Bei dem Tauchmikrotom fallen sie ja von selbst in die untergestellte Schale. lieber den besten Deckg'laskitt. Von Dr. L. Heydenreich in St. Petersburg. Ein solcher sollte : 1) absolut dicht sein ; mau sollte nicht nöthig haben jedes Jahr einen neuen Anstrich zu machen , ein drei- bis vier- maliger sollte genügen für immer, 2) ebenso hart sein als das Glas, oder wenn möglich, noch härter, 3) sollte er weder Sprünge bekommen noch abspringen, und so fest haften, dass eher das Glas rund umher zer- springe als er selbst, 4) darf er sich in Wasser, Oel, Glycerin und anderen Flüssigkeiten für homogene Immersion nicht lösen. Dies waren die Gesichtspunkte, welche mich leiteten, trotz der ziemlichen Menge bereits bestehender Kitte noch nach einem neuen zu suchen. Anderseits hatte man schlimme Erfahrungen gemacht, schöne unbezahlbare Sammlungen mikroskopischer Präparate waren bloss des Kittes wegen unbrauchbar geworden (Sammlung von Nervenpräparaten von Jakubowitsch u. a.). Die Industrie besitzt Lacke, welche trotz dicker Schicht ungemein haltbar, ungemein hart sind- Es giebt mit solchen Lacken überzogene Equipagen, die trotz täglicher heftiger Erschütterungen auf dem schlechtesten Pflaster, trotz täglichen Scheuerns mit Wasser und Schmutz, doch nach Jahr und Tag fast ebenso glänzen wie neu, und nirgends auch nur den geringsten Sprung zeigen. Die Blechpfanueu in den Eiweiss- fabriken halten sich über ein Jahr lang blank und ohne Risse, und doch werden sie täglich über viele Stunden einer Temperatur von 100 Grad und mehr ausgesetzt. Es ergiebt sich, dass diese, sowie andere ähu' 334 Heyden reich: üeber den besten Deckglaskitt. II, 3. liehe Lacke alle aus ein paar Harzen bereitet werden , nämlich aus Bernstein oder aus Copal. In der That unter allen Harzen sind Bernstein und einzelne Copalsorten die allerhärtesten. Copallack für sich ist sehr hart und trotzdem noch elastisch, Bernsteinlack ist noch härter, aber nicht elastisch und giebt deshalb leichter Sprünge als ersterer. Eine Mischung beider ist daher, sowie auch aus anderen Ur- sachen am allerentsprechendsten. Für Deckglaskitte soll aber nur die beste, hellste Bernsteinsorte (die undurchsichtigen Stücke enthalten viele mineralische Beimengungen), sowie die härteste Copalsorte (Ostindischer Copal, nach den Wäschereien an der Ostküste Africas auch Zanzibar- Copal genannt) angewendet werden: Zanzibar-Copal wird aus der Erde gegraben, er stellt platte, scheibenförmige Stücke von Erbsen- bis Handgrösse dar, ist farblos, gelb- bis dunkelrothbraun und durchsichtig, die Oberfläche ist warzig, mit Grübchen versehen, die Pockennarben ähneln. Bombay-Copal ist gross- und mittelstückig, rothgelb mit glasigem Bruch und glatter Oberfläche, steht, was Härte und sonstige schätzenswerthe Eigenschaften betrifft, dem Zanzibar-Copal wenig nach, Copal von Sierra-Leone ist kugel- oder tropfenförmig, nussgross. Gabon-Copal ist rundlich gelb, hier und da blutroth getrübt. Die anderen Sorten sind alle weicher. Anderseits ist aber kein Lösungsmittel der Harze so schmiegsam, so schön haftend, so gleichmässig sich auftragend und hernach eine überall egale ganz glatte Schicht bildend als Leinölfirniss, aus reinem, altem abgelagerten Leinöl bereitet. Spiritus, Aether, Chloroform u. a. rasch verdunstende Mittel sind ganz zu verwerfen. Es ist also am zweckmässigsten, die genannten Harze in Leinöl- firniss zu lösen, und zur Beschleunigung der Trockeneigenschaft sowohl, als auch zur Erzieluug der gewünschten, richtigen Consistenz ein ätheri- sches Oel hinzuzusetzen, das beim Eintrocknen keine Falten schlägt, also kein Terpentinöl, 0. caryophyllorum u. a. m., ja wie der Leinöl- firniss selbst. Oleum Lavandulae giebt beim Trocknen keine Falten, sowohl für sich allein auf Glas aufgestrichen, als mit Leinölfu'uiss ver- mischt. Löst man also die Harze in Leinölfirniss bis zur Syrupconsi- stenz, und setzt so lange Ol. Lavandulae hinzu, bis eine flüssige Syrup- consistenz erzielt ist, so dass das Gemisch leicht aus dem Pinsel fliesst und doch dicklich sich aufträgt, so wäre der Kitt fertig. Setzt mau je- doch noch Zinnober hinzu mit etwas Eosin (sog. künstlichen Zinnober), so bekommt der Kitt noch bedeutendere Haftbarkeit am Glase, trocknet aber dafür etwas weniger rasch. In einer Woche ist er soweit trocken, dass der Nagel nur noch Eindrücke nachlässt. Dieses währt monate- II, 3. Hey denr eich: Ueber den besten Deckglaskitt. 335 lang. Nach Jahr und Tag ist der Kitt hart und glänzt wie Glas. Je mehr Lavendelöl zugesetzt wird, desto weniger glänzend wird der Kitt, und um so zerfliessender wird die aufgestrichene Schicht. Mennige an Stelle des Zinnobers angewandt, erzeugt einen noch härteren und rascher austrocknenden Kitt, doch besitzt die Farbe bei weitem nicht das Feuer des Zinnobers. Das die Zusammensetzung. Was nun die Bereitung betrifft, so ist dies gerade der schwierige Punkt, so dass es vortheilhafter ist, die fertigen Lacke zu kaufen und einzudicken, als sie selbst zu bereiten, wie weiter unten erklärt werden soll. Man nehme von dem besten, „hellsten" ' und härtesten, fetten Bernsteinlack und Copallack gleiche Gewichtstheile, menge sie unter- einander, und erhitze sie auf dem Sandbade so lange, bis alles Terpen- tinöl ausgekocht ist, d. h. bei ca. 100 bis 170 Grad. Darauf bleibt die heisse Flüssigkeit lange Zeit ganz ruhig, es steigen keine Blasen auf, bis die Temperatur des Leinöls etwa 316 Grad erreicht hat; dann be- ginnt die Flüssigkeit wieder zu kochen. Doch soweit bringt man es nicht. Sobald alles Terpentinöl abgedampft ist, nimmt man die Schale vom Feuer, lässt etwas erkalten und setzt nun auf 1 Theil der heissen Flüssigheit 72 Theil Oleum Lavandulae hinzu, mischt gehörig und lässt erkalten. Darauf verreibt man mit dem erhaltenen, fetten Lack 20 bis 40 Procent künstlichen Zinnober (Eosin mit Zinnober) auf das aller* sorgfältigste mit einem Reiber auf einer matten Glasplatte, noch besser in einer feinen Reibmaschine wie sie für feine Oelfarben angewandt wird. Sollte hiebei die Consistenz zu dick geworden sein, so setze man soviel Oleum Lavandulae zu, bis die gewünschte Dünnflüssigkeit erreicht ist. Der Lack muss sich leicht und genügend dick aufstreichen lassen. Darauf wird der Deckglaskitt in Malertuben gebracht und aufbewahrt. Zu beachten jedoch ist, dass er mit der Zeit etwas dicklicher wird. So wäre die Zusammensetzung des Kittes etwa folgende: Bernstein 25 Gewichtsth. Copal 25 Leinölfirniss (mit Manganborat, gekochtes) . . 50 „ Ol, Lavandulae 50—60 Künstlicher Zinnober (Eosin oder Zinnober) 40—60 „ Ludwig Makx, der bedeutendste hiesige Lackfabricant, vertreten *) Der hellste Copallack hat etwa Sauternfarbe, Bemsteinlack diejenige von Bockbier oder schwarzem Kaffee. 336 Heydenreich : üeber den besten Deckglaskitt. II, 3. sowohl iu Wien als in Mainz * , hat sich der Mühe unterzogen, das ge- nannte Gemisch nach den Regeln der Lackfabrication zu bereiten, und in Gläsern und Blechdosen verschiedener Grössen in den Handel zu bringen. Man umrandet mit diesem Lacke, will mau sicher schliessende Einbettungen erzielen, am besten so: Mit einem feinen, guten Pinsel wird mittels Drehtisch auf dem „trockenen und reinen" Objectträger ein etwa 3 mm breiter Ring ge- macht, dessen innerer Durchmesser circa 16, dessen äusserer also circa 19 mm beträgt. Dieser Ring darf nur ganz dünn sein, und muss aus- trocknen. Man bereitet sich also am besten einen Vorrath von solchen Objectträgern im voraus. Jetzt zieht man über den trockenen Ring einen zweiten ebenso breiten mit einer eingedickten alkoholischen Schellacklösung (braunen oder weissen Schellackfirniss) ^. Auch hier kann man den käuflichen Lack eindicken und in Tuben bringen. Nach einer oder zwei Minuten bringt mau den Schnitt und den Tropfen wäs- seriger Zusatzflüssigkeit in die Mitte des Ringes, und legt das runde, 18 mm Durchmesser haltende Deckgläschen darauf, leicht die Ränder andrückend. Nach einer bis zwei Stunden ist der Schellacklack trocken ; man überzeugt sich, ob nicht Tropfen herausgepresst wurden und aussen am Rande des Deckglases stehen blieben, trocknet mit Fliesspapier vollkommen ab und macht nun den zweiten Ring mit dem fetten Firniss massig dick. Nach einer bis zwei Wochen folgt ein zweiter, nach einem bis zwei Monaten ein dritter Verschluss, jedesmal mit etwas über die vorhergehenden übergreifenden Räudern. Dann ist das Präparat ganz fertig und braucht höchstens noch einen üeberzug von etwas dünnerem Schellackkitt zu bekommen. Ich besitze zwar Präparate von bloss einem Jahre, die mit diesem Kitt eingeschlossen wurden, kann daher nur von diesem Zeitraum sprechen, glaube aber, dass es unuöthig sein wird, jedes Jahr einen neuen Ring aufzupinseln, wie es Carpenter mit einem Präparat thut, welches bereits 40 Jahre lang gut schliesst und jedesmal mit Goldsize verkittet wird. Balsampräparate sind ohne Unterring mit Schellacklösung einzuschliessen, und hernach mit Bernstein- Copalfirniss definitiv uud bloss einmal zu verkitten. Dicke Schnitte erfordern natür- ') St. Petersburg, Moskowskaja Sastawa, No. 110; Wien, Gaden, No. 79; Mainz, Römer thal, No. 1. 2) Sollte durch das Eindicken ein Theil Schellack als Trübmig ausfallen, 80 kat man nur ein kleüies Korn Campher zuzusetzen. Sofort ist die Lösung wieder klar. Dieser Lack muss etwas dicker sein. U, 3. Heydenreich: lieber den besten Deckglaskitt. 337 lieh einen dickereu Unterriug, wogegen an das Deckglas angetrocknete Bacterien, wie die Balsampräparate gar keinen Unterring benöthigen. — Selbstbereitung des Bernstein firnisses in kleinen Quantitäten (1 bis 2 Pfund), Man kaufe die möglichst hellen Ab- fälle und hellen kleinen Bernsteinstücke. Man werfe sie, massig zer- kleinert, in einen innen glasirteu hohen Topf, der noch fünf- bis zehn- mal soviel fassen kann als Harz hinein gegeben ist. Dieser Topf hat einen Deckel und steht im Sandbad bis an den Rand in einem zweiten höheren und breiteren Topfe, auch mit Deckel. Jetzt feuert man laug- sam und vorsichtig bis alles Harz gelöst ist, weshalb möglichst oft ge- rührt werden soll. Noch lange vor dem vollen Schmelzen entwickeln sich übelriechende, erstickende, feuergefährliche Dämpfe; es ist das ein Zeichen einer theilweisen Zersetzung des Harzes und trägt viel zu der nachherigen vollständigen Lösung im Firniss bei. Nach erfolgtem Schmelzen aber entwickeln sie sich in sehr grossen Mengen, und dann ist es Zeit, das Leinöl zuzugiessen. Dieses (gutes abgestandenes) wurde vorher iu der Nähe bis zum Kochen erhitzt und wird nun in dünnem Strahl parthienweise zum flüssigen Harz (es muss klar und rasch vom hölzernen Spatel ablaufen) zugesetzt bei fortwährendem Umrühren, bis jedesmal die Mischung eine vollkommue geworden ist. Ist so alles Leinöl zugegeben und gut vermischt, so nimmt man den Topf aus dem Sandbad und giesst dessen Inhalt in das erste Gefäss, in dem das Oel erhitzt wurde. Hier wird Alles etwa zwei Stunden lang im gelinden Kocheu erhalten, nachdem vorher allmählich 0*25 Procent Mauganborat (eiseufrei !) zugesetzt wurde. Kleine Proben : von Glasstäben abfliessende, abgekühlte Tropfen müssen fadenziehend sein wie mitteldicker Syrup, sonst wird weiter gekocht ; ausserdem wird abgeschäumt während des Kochens. Nachdem die Mischung hierauf bis auf 60 bis 70 Grad abge- kühlt ist, setzt man soviel Ol. lavandulae hinzu, bis die Consistenz eines flüssigen Syrups, Schmand, erreicht ist (etwa 50 Procent). Durch län- geres, Wochen- bis monatelauges Stehen wird der Lack geklärt. Ebenso wird der Copallack bereitet (braucht weniger Hitze und Lösungsdauer). Dann mischt man beide, zerreibt mit Zinnober und füllt in Tuben. Ein späteres Dickwerden kaun hernach auf der Palette selbst mit Ol. Lavandulae oder gutem Siccatif und Ol. Lavandulae aufgebessert werden. Ein solcher Lack wird aber immer mehr oder weniger dunkel sein. Ganz hellen Lack, etwa xeresfarbig, bekommt man nicht durch Schmelzen der Harze, sondern durch eine Reihe systematischer Auf- lösungen. Doch ist diese Procedur noch umständlicher und in den be- Zeitschr. f, wiss. Mikroskopie 11. 3. OO 338 Heydenreich: üeber den besten Deckglaskitt. II, 3. treffenden Handbüchern nachzusehen *. Im Grossen erleidet natürlich die ganze Procedur entsprechende Abänderungen. Ich entschloss mich schon jetzt, meine Untersuchungen mitzutheilen, da Behrens in Bd. II, p. 54 dieser Zeitschrift den Bernsteinlack als sehr gut und zweckentsprechend hervorhob. ») PöppiNQHAusEN, Lehrb. d. Lackirkunst etc., 187G. — Winkler, E., Lack- und Firnissfabrication etc., 1860. — Thox, VoUständ. Anleit. z. Lackirkunst etc., 1855. — Wot.Kow, Lackindustrie (russisch), St. Petersb., 1882 (kurz und über- sichtlich). — Andres, Die Fabrication d. Lacke etc., 3. Aufl., 1883 (Chemisch- techn. Biblioth. IX. Ueb ersichtlich, kurz und klar). H, 3. Kleinere Mittheilungen. 339 Kleinere Mittheil ung*eu. Reichert's Condensor. Von Dr. J. Mo eller. hl Wien-Mariabrunn. Hierzu 1 Holzschnitt. Seit kurzem coustruirt C. Reichert iu Wien einen Condensor, welclier die Vorzüge des ABBE'schen Beleuchtuugsapparates besitzt, aber compendiöser und einem Stativ mittlerer Grösse leicht zu adap- tiren ist, der die Aussclialtung, also den Uebergang zur gewöhnlichen Beleuchtung und umgekehrt rasch und einfach ermöglicht, endlich um ein Drittel wolfeiler ist. Das Beleuchtungssystem desselben besteht aus zwei oder drei Linsen, nach Art eines Objectivsystems gefasst, mit einer numerischen Apertur = 1-30. Die untere (hintere) FLäche des Systems besitzt einen Falz (c), in welchem ein Schieber (6) horizontal beweglich ist. In eine centrale 19 mm weite Bohrung (e) werden die verschiedenen Blenden (1 — 5) wie bei Abbe eingelegt. Bei centraler Stellung der Blenden schnappt der Schieber ein, deutlich fühlbar, aber nicht so fest, als dass er die zum Zwecke der schiefen Beleuchtung nothwendige Be- wegung wesentlich hemmen würde. Das System ist mittels einer am Schieber angebrachten kleinen Handhabe in einer Hülse des Trägers drehbar. Der horizontale Träger (d) des Condensors dreht sich um eine verticale stählerne Axe, welche in einen hinteren Winkel des Objecttisches eingeschraubt ist. Soll der Condensor benützt werden, so dreht man ihn, nachdem die Cyhnderblenduug des Objecttisches ent- fernt wurde, nach vorn ; ein Ueberschreiten der Centralstellung wird durch einen kleinen Zapfen an der unteren Tischfläche verhindert, und die Fixirung in der centralen Stellung erfolgt durch einen Zapfen im Träger (/"), welcher beim Hinaufschieben des Systems in die Tischebene in eine entsprechende Bohrung des Tisches eingreift. Das geschieht in viel kürzerer Zeit, als mau zum Lesen braucht, nämlich durch zwei unmittelbar auf einander folgende Handgriffe. Will man den Condensor ausschalten, so schiebt mau ihn nach ab- und auswärts; will man ihn ganz entfernen, so zieht man ihn von dem stählernen Träger herab, 22* 340 Ivleinere Mittheilimgen. n, 3. nachdem man die am unteren Ende des letzteren befindliche excentrische Hemmung axial gestellt hat. Der Condensor ist mit vier Blenden und einer sternförmigen Blende zur Dunkelfeld-Beleuchtuug ausgestattet. Der Preis beträgt 35 Mark. II, 3. Kleinere Mittheilungen. 341 Ueber einen Objecthalter mit Kugelgelenk'). Von Dr. Joseph Heinrich List in Graz. Hierzu 2 Holzschnitte. In neuerer Zeit sind mehrere Objecthalter^ beschrieben worden, welche es gestatten, das zwischen den Backen der Klammer gehaltene Object in verschiedene Richtungen des Raumes zu bringen, was nament- lich für Schnitte, die bestimmt orientirt sein müssen, von ausserordent- lichem Vortheil ist. C. Reichert ^ in Wien construirte nun einen mit einem Kugel charnir versehenen Objecthalter, welcher um so mehr Anerkennung verdient , da er bei möglichster Einfachheit alle die Vor- züge verbindet, die man von einer derartigen Construction fordert. Untenstehende Figur 1 stellt den Objecthalter in halber natürlicher Grösse dar. Das Object wird zwischen den beiden Backen a und b der Klammer gehalten. Die Schraube Ä bewegt den Backen a gegen den Backen h^ um das in Paraffin oder in Celloidin eingeschlossene Object zu fixiren. Im Backen b , der aus zwei durch Schrauben zusammengehaltenen Theilen besteht, sitzt nun in einer entsprechenden Höhlung das Kugel- gelenk C (vergl. Figur 2), bestehend aus einem unteren walzenförmigen ') Eine Abbildung des Objecthalters begleitet von einer kurzen Notiz findet sich in : Descriptions d'instruments construits par M. Reichert de Vienne, par M. P. Francotte. (Extrait des BuU. Soc. beige de Microsc, seance du 25 janvier 1885). 2) Cfr. Gottschau, diese Zeitschrift Bd. I, 1884, p. 342 'ff. imd Henking, ebenda Bd. I, 1884, p. 491 ff. 3) C. Reichert. Optisches Institut. Wien. VIII. Bennogasse 26. 342 Kleinere Mittheilungen. 11, 3. massiven Theile (Arm), welcher in ein entsprechendes Loch des Object- schlittens genau hineinpasst und daselbst mit einer Schraube fixirt wird und einem oberen eiue Kugel darstellenden Theile, welcher einer conischen Verjüngung des Armes aufsitzt. Um nun dem Arme, beziehungsweise der Klammer, möglichst Spiel- raum zu gewähren, ist ein grösserer conischer Ausschnitt im Backen h angebracht (Figur 2), welcher gestattet, den Arm beziehungsweise die Klammer bequem in alle Richtungen des Raumes zu bringen. Bei vollständiger Ausnutzung des Kugelgelenkes beschreibt der Arm einen Kegel, dessen Scheitelwinkel ungefähr 50 Grad beträgt. Eine derartige Neigung der Klammer nach allen Richtungen des Raumes genügt wohl weitgehendeu Ansprüchen, zudem man es häufig noch in der Hand hat, durch Zuschneiden des Paraffin- beziehungsweise des Celloidinblockes, dem Objecte selbst schon annähernd die gewünschte Lage zu geben. Die Bewegung geschieht einfach dadurch, dass man den Backen h mit der Hand nach der gewünschten Richtung dreht. Hat man nun das Object in die geforderte Lage gebracht, so fixirt man mit der Schraube 5, welche der bequemeren Handhabung halber mit einem Schlüssel versehen ist, die Kugel. Um mit dem Schneiden beginnen zu können, braucht man die Klammer mit dem Objecte nur in die Höhe des Messers zu bringen, was sehr leicht geschehen kann, indem man den Arm C des Gelenkes mit der am Objectschlitten angebrachten Schraube höher oder tiefer stellt. Damit dem Messer möglichst viel Spielraum bleibt, sind die Backen der Klammer oben gewölbt, so dass bei der Drehung der letzteren um das Kugelgelenk die Backen der Schnittführung nicht hinderlich sind. Den eben beschriebenen Objecthalter benutzte ich bereits über ein Jahr mit dem besten Erfolge im Grazer histologischen Institute, und kann ich denselben nach meinen Erfahrungen als vollkommen ent sprechend bestens empfehlen. — Der Objecthalter selbst ist elegant und solide gebaut, und wird derselbe vernickelt von C. Reichekt für 6 fl. ö. W, geliefert. n, 3. Kleinere Mittheilungen. 343 Ein vereinfachtes Mikrotom von grosser Leistungsfähigkeit. Von Dr. med. Hermann E. Hildebrand, Chicago, Illinois. Hierzu 1 Holzschnitt. Als ich das hier beschriebene Mikrotom zusammenstellte, war es meine Absicht, ein Instrument zu liefern, welches bei sehr geringen Herstellungskosten den besten und theuren Werkzeugen dieser Art an Leistung mindestens gleichkomme. Ein längerer Gebrauch dieses Mikrotoms, hauptsächlich zum Zweck der Erforschung thierischer Gewebe, berechtigt mich zu der Annahme, dass der Zweck erreicht worden ist. Ich kann daher nicht umhin, das Instrument zur Anschaffung zu empfehlen , und gebe im Nachfolgenden eine ziemlich ins Einzelne gellende Beschreibung, wonach jeder Mecha- niker im Stande sein wird, dasselbe anzufertigen. Die Abbildungen wer- den dabei von Nutzen sein. Der eigentliche Körper des Instrumentes besteht aus einem einzigen Gussstück von 12 Zoll (30 cm) Länge und 7 Zoll (18 cm) Breite. Der obere Theil bietet drei Flächen dar, welche als Gleitflächen für den Messerträger und Objectträger dienen, indem der erstere auf der oberen oder horizontalen Fläche, der letztere auf der geneigten, seitlich und tiefer gelegenen Fläche gleitet, und beide gemeinschaftlich die mittlere oder senkrechte Fläche benutzen, um seitliche Abweichun- gen zu vermeiden, während sie sich über ihre bezüglichen Flächen be- wegen. Alle drei Flächen sind mit der Hobelmaschine vollkommen ge- ebnet. Auf dem unteren Theil der geneigten Fläche ist eine Schrauben- mutter angebracht zur Aufnahme einer Mikrometerschraube mit grossem getheilten Kopf. Wenn die Schraube gedreht wird, schiebt sie den Objectträger vor sich her, die ansteigende Fläche hinan, auf diese Weise das Object der Schnittebene des Messers zuführend. Jeder Träger läuft auf drei Elfenbeinknöpfen. Der Messerträger erhält geradlinige Führung auf seiner Gleitfläche durch zwei seitliche Vorsprünge , welche auf die senkrechte Fläche übergreifen; der Objectträger durch zwei seitlich angebrachte, gegen diese Fläche sehende Knöpfe. Die Bewegung ist eine sehr glatte und sichere. Beide Träger können abgenommen und zurückgebracht werden ohne ihre Einstellung zu verlieren. 344 Kleinere Mittheilungen. n, 3. Der Messerträger besteht aus einer flachen Unterlage fürs Messer und einer Klaue, drehbar um eine centrale Schraube und versehen mit einer unteren Furche für die Aufnahme des cylindrischen Messer- stiels. Auf diese Weise ist das Messer seiner Fläche und Läugsaxe nach verstellbar. Der Objectträger besteht aus einem einfachen Holz- block, mit den oben genannten drei unteren und zwei seitlichen Vor- sprüngen versehen. In der Mitte hat er eine einzöllige (25 mm) Oeff- nung mit einer seitlich in diese führende Klemmschraube. Oefters ist eine eigeuthümliche Einstellung des Objects erwünscht, und für diese Fälle dient eine sehr einfache Schraubenklemme mit all- seitiger Beweglichkeit. Im Vordergrunde der Figur ist dieselbe abgebildet. Obgleich nun diese Vorrichtung (mit Ausnahme des unten erwähnten Backens) aus einem Stück gegossen wird, so will ich doch, grösserer Deutlichkeit halber, dieselbe als aus mehreren Theilen be- stehend beschreiben. Ein Schraubenbolzen mit einzölligem (25 mm) viereckigem Kopf, wird mit einer über diesen hinausragenden und an zwei seitlichen Flächen desselben befestigten Blechschleife versehen, zur Aufnahme eines schiebbaren Blockes oder Backens — flach auf der dem Bolzenkopf zugekehrten Seite und rinnenförmig ausgehöhlt nach der Innenseite der Schleife zu. Dieser Backen ist zweimal so lang als breit. Die Anordnung des Objectträgers ist nun wie folgt. Auf der breiten Basis (3V2 X S'/a ^^U = 9 cm) dieses Trägers ist nach links hin ein Block von solcher Dicke aufrecht so befestigt, dass etwa % des Raumes, nach der senkrechten Gleitfläche hin, freibleibt. Dieser II, 3. Kleinere Mittheilungen. 345 aufrechte Block ist seiner Dicke nach durchbohrt, zur Aufnahme des oben erwähnten Bolzens mit seiner Schleife. Zwei Drittel dieser Durch- bohrung ist von der Weite des diagonalen Durchmessers des Bolzen- kopfes, so dass derselbe also in der runden Oeffnung drelibar ist ; der Rest jedoch ist gerade weit genug, um den Bolzen selbst durchzulassen. Wenn jetzt der cylindrische Objecthalter zwischen den Backen und die Schleife eingesetzt und die Daumenschraube des Bolzens ange- zogen wird, so wird er festgehalten, weil die Schraube zwar die Schleife an sich heranzieht nicht aber den Backen , der riegelartig sich vor die runde Oeffnung legt. Da die Axen des Objecthalters und der Schraubenklemme senkrecht zu einander stehen, so ist die Neigung des Objects in jeder Richtung ermöglicht. Beim Gebrauch wird der Objectträger mit Daumen und Zeigefinger der linken Hand gehalten, und zwar mit einem Druck, dessen Richtung abwärts , seitwärts rechts gegen die senkrechte Fläche , und rückwärts gegen die Mikrometerschraube geht. Der Messerträger wird mit Daumen und drei Fingern der rechten Hand umspannt und mit einem Druck nach abwärts und rechts, nach rückwärts gezogen, wo dann das Messer eine Scheibe des Objects abschneidet, deren Dicke die Grösse der Stei- gung des Weges darstellt, den der Objectträger, durch die Drehung der Mikrometerschraube, zurückgelegt hat. Mit demselben Griff hebt man den Messerträger auf, schwemmt die auf der Klinge liegende Scheibe in ein Gefäss mit Alkohol ab, und bringt den Träger auf seine Gleit- tläche zurück. Ich will beispielsweise bemerken, dass drei Mikrotome, die ich nach dem eben beschriebenen Muster habe anfertigen lassen, solche Verhältnisse haben, dass eine volle Umdrehung der Mikrometer- schraube das Object um '/joo Zoll (0*0508 mm) hebt. Aus dem Gesagten ist die grosse Einfachheit des Instrumentes er- sichtlich. Dabei sind die Herstellungskosten äusserst gering. Die drei Gleitflächen sind die einzigen Theile, die genau gearbeitet sein müssen , und die es der Natur ihrer Herstellung nach auch immer sind. Mit Ausnahme der Mikrometerschraube könnte, wenn nöthig, jeder Mi- kroskopiker, der nur einigermaassen mit Holzbearbeitung vertraut ist, sich den Rest des Apparates selbst anfertigen, da sogar durch eine sehr mangelhafte Ausführung der beiden Träger die tadellose Leistung dieses Mikrotoms durchaus nicht beeinträchtigt wird, wie ich mich durch die Erfahrung überzeugt habe, da ich das erste Exemplar selbst anfertigte« 346 Kleinere Mittheilungeu. II, 3. lieber einen neuen Unterguss. Von C. Born und G. Wiearer in Breslau. Aus dem Anatomischen Institute zu Breslau. Der üuterguss zum Aufkleben von Serienschnitten oder zum Zwecke der Färbung von Schnitten auf dem Objectträger ist in der mikro- skopischen Technik bereits unentbehrlich geworden, die für diese Zwecke eingeführten neuen Methoden sind ziemlich zahlreich. Letzterer Umstand beweist schon, dass keine Methode in allen Fällen Anwen- dung finden kann, so vorzüglich sie auch im einzelnen Falle sein mag. Wir erinnern zum Beispiel daran, dass das vorzügliche Klebe- mittel, welches in einer Auflösung von Schellack in Alkohol besteht, nachträglich nicht wieder in Alkohol gebracht werden darf; dass der P. MAYER'sche Albuminunterguss viele Farben in sehr störender Weise annimmt; dass die sonst sehr bewährte ScHÄLLiBAUM'sche Lösung von CoUodium in Nelkenöl nachträglich nicht mit Nelkenöl in Berührung kommen darf etc. etc. Diese Mängel haben uns veranlasst, nach einem Klebemittel zu suchen, welches bei völliger Durchsichtigkeit in den gewöhnlich ge- brauchten Reagentien möglichst unlöslich sei und die auf die Objecto ein- wirkenden Farben nicht annehme. Die postulirten Vorzüge hofften wir in den Pflanzenschleimen vereinigt zu finden, und dieser unserer Er- wartung entsprach vorzüglich ein Präparat, welches uns von Herrn Medicinalassessor Apotheker Maschke in Breslau angegeben wurde: es ist dies der Quittenschleim. Wir machen in Folgendem die Berei- tung des mit diesem Material hergestellten Klebemittels, die Anwendung desselben (bei Paraffineinbettung), die Vorzüge der Methode und die Grenzen ihrer Anwendbarkeit bekannt. Bereitung. Man benütze den gewöhnlichen Quittenschleira der Apotheker, eine dickliche, farblose Flüssigkeit, welcher man eine Spur Carbolsäure zu- setzt, um die sonst rasch eintretende üppige Pilzvegetation zu verhin- dern. Von diesem Quittenschleim werden zwei Volumina mit einem Vo- II, 3. Kleinere Mittlieilungen. 347 lumeu reinem Glyceriu vermischt. Die Mischung wird wohl durchgerührt und das Klebemittel ist fertig. A n w e n d u n g. Das Klebemittel muss nun in dünner Schicht auf dem Objectträger ausgebreitet werden. Ist aber der Objectträger nicht scrupulös gereinigt und entfettet, so wird es nicht leicht sein, eine dünne Scliicht aufzupinseln. Man hilft sich durch eine sehr einfache Vorbehandlung des Objectträgers : derselbe wird eine halbe Stunde vor dem Gebrauch in kaltes Seifen- wasser eingestellt. Nimmt man darauf den Objectträger aus der Seifen- lösung heraus und wischt ihn mit einem reinen Tuche trocken ab , so wird es mit Leichtigkeit gelingen, eine dünne Schicht des Klebemittels aufzutragen. Der Zusatz von Wasser und Glycerin lässt die Schleimschicht nich t eintrocknen, und man kann daher die angefertigten Schnitte mit ihrem Paraffinplättchen mit Müsse auf den so präparirteu Objectträger auf- legen. Ist das Object nicht ausserordentlich empfindlich, so ist sogar Hoch ein geringes Verschieben der Schnitte statthaft, ftills sie nicht so liegen sollten, wie gewünscht wird. Nun wird mit einem reinen Tuche die geringe Quantität Schleim, welche sich am Rande neben den Schnitten ansammelt , abgewischt , damit ein Herumschwimmen der Schnitte vermieden werde; dann kommt der Objectträger in den Trocken- schrank, in welchem er bei 30 bis 40" C. zwanzig Minuten oder länger gelassen wird. Das Paraffin breitet sich bei dieser Temperatur glatt aus und das Wasser verdunstet: die herausgenommenen Objectträger sehen trocken aus. Es wird nun zuerst das Paraffin gelöst; dies geschah bei unseren Arbeiten mit Terpenthin. Darauf kommt der Objectträger in absoluten Alkohol und muss darin eine halbe Stunde lang verweilen. Ks ist sehr wichtig, dass der Alkohol absolut sei, und dass die angegebene Zeit eingehalten werde, und zwar sowohl mit Rücksicht auf das angestrebte Ankleben der Schnitte, als auch auf eine eventuelle nachträgliche Fär- bung der Schnitte auf dem Objectträger : denn einmal muss durch den Alkohol der Schleim gefällt werden, wodurch das Kleben zu Stande kommt, andererseits werden auch im Alkohol das Terpenthin, das Glycerin und die Spur Seife, welche auf dem Objectträger zurückgeblieben sein könnten, ausgezogen. 348 Kleinere Mittheilungen. II, 3. Nach dieser Alkoholbehaudlung sind die Objecte nunmehr festge- klebt und können in den meisten Farben, vorzüglich in allen Anilin- farben nachgefärbt, mit Wasser oder Spiritus ausgewaschen und nach der gebräuchlichen Weise aufgehellt werden, ohne dass sie sich loslösen, und ohne dass der Unterguss auch nur eine Spur Farbe annähme ; mikrosko- pisch lässt sich der Unterguss fast niemals nachweisen. Es ist bei diesen Manipulationen nur Folgendes zu beachten : Die Objectträger dürfen nicht unmittelbar aus reinem Alkohol in eine rein wässerige Färbe- oder Spül-Flüssigkeit übertragen werden, weil der dabei entstehende heftige DifFusionsstrom die Schnitte von dem Objectträger losreissen würde. Man beachte also in solchen Fällen die Vorsichtsmaassregel aus reinem Alkohol zunächst in etwa fünfzig- grädigen Alkohol und darauf erst in die wässerige Flüssigkeit über- zugehen. Dass das Loslösen der Schnitte unter den oben erwähnten Um- ständen lediglich auf dem Effecte eines heftigen Diffusionsstromes beruht, beweist folgendes Experiment : Mau giesse von dem Klebemittel 8 bis 10 Tropfen in ein Uhrglas und füge soviel Pikrocarmin hinzu, dass die dicke Schleimschicht roth gefärbt erscheint. Nun bringe man dieses Uhrglas in eine grössere Schaale mit absolutem Alkohol. Nach zehn Minuten haben sich im Uhrglase rothe Flocken von geronnenem Quittenschleim gebildet. Wer- den nun solche Flocken direct in Wasser übertragen, so drehen sie sich im heftigen Wirbel und verschwinden fast sofort. Werden dieselben da- gegen zunächst in schwachen Spiritus und darauf erst in Wasser gebracht, so bleiben sie fast unbegrenzte Zeit erhalten. Die Vorzüge dieser neuen Klebemethode sind nach dem Gesagten wohl einleuchtend. Es erübrigt noch, darauf aufmerksam zu machen, dass der niedergeschlagene Schleim und somit auch die festgeklebten Objecte sich wieder ablösen in: ammoniakalischeu Flüssigkeiten, also auch in ammoniakalischem Carmin, ferner in Boraxcarmin. II, 3. Kleinere Mittlicilungen. 349 Zur Anwendung der Merkersehen Doppelfärbung mit Indigo und Carmin. Von Dr. Max Flesch in Bern. Gelegentlich einer früheren Notiz ' über die WEiGERT'sche Häma- toxylinfärbung des centralen Nerven-Systemes habe ich auf die werth- volle Ergänzung der mittels jener Methode gewonnenen Bilder durch Parallel-Präparate, die nach dem von Merkel vorgeschlagenen Ver- fahren der Doppelfärbung mit Indigo und Carmin gewonnen werden, hingewiesen. Fortgesetzte Prüfung des Verfahrens an den verschiedensten Geweben veranlasst mich nunmehr, nochmals diese ausgezeichnet sichere und schöne Tinction zu ausgedehnter Verwendung zu empfehlen. Ich habe dieselbe bisher stets nach der von Bayerl - gegebenen Vorschrift benutzt; vielleicht dass für ein oder das andere Object die Mischung beider Farben eine Modification erfahren sollte ; leider fehlte mir zum Experimentiren darüber die Zeit. In Chromsäure oder MüLLER'scher Flüssigkeit mit nachfolgender Alkohol-Behandlung erhärtete Präparate bildeten das Material. Die Alkohol-Behandlung erfolgte meist ohne vor- heriges Auswässern der Objecte im Dunkeln ^ ; man spart hierbei viel Zeit, ohue dass die Tinctionsfähigkeit der Präparate litte; speciell für das Nerven-Systcm kann ich nunmehr auf Grund sehr ausgedehnter Er- fahrungen hervorheben, dass auch die von Weigert als Postulat für das Gelingen seiner Tinctionen beanspruchte anfängliche Braunfärbung der Präparate nie ausbleibt. Der gebrauchte Alkohol kann, nach län- gerem Stehen am Licht, filtrirt und neu verwendet werden, so dass auch der Kosteuaufwand nicht allzugross wird. Meistens habe ich an in Celloidin eingeschlossenen Objecten experimentirt ; aber auch Paraffin- Präparate, die vorher mit Terpentin oder Chloroform durchtränkt waren, nehmen die Färbung an. Das Celloidin färbt sich leider mit dem Prä- parat, ohne dass nachträgliche Entfärbung gelingt; indessen wird die Farbe bei ausreichender Vorsicht (langes Auswässern) allmählich so blass, dass dieser Nachtheil kaum in Betracht kommt. — Der Farbstotf 1) Diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 564. ') Cfr. Referat in dieser Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 289 und Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIII, 1884, p. 30. ^) Vgl. Hans Virchow, Ueber die Einwirkung des Lichtes auf Gemische von chromsauren Salzen etc. (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XIV, 1885, p. 117), 350 Kleinere Mittheiliingen. U, 3. ist bekauntlich eine Mischuug von Lösungen des Carmius (Carrnin 2, Borax 8, Hg 0 130) und Indigcarmins (Indigcarmin und Borax je 8, Ha 0 130) zu gleichen Theilen. Man kann dies Gemisch wochen- lang aufbewahren ; bei sehr langem Stehen bildet sich ein Niederschlag (der sich allerdings bei der späteren Oxalsäure-Behandlung löst und daher unschädlich ist); einen Nachtheii scheint das längere Stehen nur insofern zu haben, als die Carrainwirkuug etwas weniger intensiv wird. Die Färbung erfordert meist viel längere Zeit, als Bayeel an- giebt; ich lasse jetzt die Schnitte immer mindestens 24 Stunden bei Zimmertemperatur, ein bis zwei Stunden im Brütofen in der Lösung, ziehe aber das erstere unbedingt vor. Nach der Tinction extrahirt man in gesättigter Oxalsäure-Lösung etwa % Stunde lang; man hat es be- liebig in der Hand, die Farbe mehr nach blau oder roth abzutönen, je nachdem man die Färbungs- und Extractions-Zeit variirt. Die Präpa- rate vertragen sowohl Glycerin als Balsameinschluss und sind sehr halt- bar ; ich habe bis jetzt selbst an viel dem Licht exponirten Objecten im Laufe eines Jahres keinerlei Abblassen bemerken können. Bis jetzt ist meines Wissens die Methode vor allem angewendet worden auf Präparate des Nerven-Systemes und der Ossificationsgräuze im verknöchernden Knorpel. Ich möchte sie nunmehr vor allem auch hier für die Untersuchung der Drüsen und drüsenhaltiger Organe empfehlen. Im einzelnen werden vielleicht folgende Bemerkungen für die Anwen- dung von Fall zu Fall zweckmässig sein : 1) Präparate des centralen Nerven-Systemes dürfen nicht allzu- lange extrahirt werden. Man läuft sonst Gefahr, eine ausschliessliche Kerntinction zu finden. Bricht man rechtzeitig ab, so ist das Bild hin- gegen namentlich desshalb werthvoll, weil die Kerne der Nerven-Zellen und jene der Glia sich in autfälliger Weise unterscheiden. Ganz eigen- thümlich gestaltete sich das Bild einmal in der Hand einer mit einer Special- Untersuchung beschäftigten Practicantin. Neben der rothen Färbung der Kerne zeigte das Zwischengewebe nicht eine mattgraue Farbe wie gewöhnlich, sondern es waren darin die feineu Nervenfasern und zwar die Axeucylinder selbst, nicht deren erythrophile Hüllen, in- tensiv blau gefärbt. Das Bild der Vertheilung der feinen Fasern war ein so elegantes, dass ich es jedem anderen, nach den Methoden von Fkeud und Weigeet erhaltenen vorziehen würde. Leider ist die Wieder- holung noch nicht gelungen ; es sollen demnächst speciell darauf ge- richtete Versuche wieder aufgenommen werden. 2) Knochen- und Zahuentwicklung. Für die Knochenentwicklung hat Meekel ursprünglich die in Rede stehende Doppelfärbung empfohlen, II, 3. Kleinere Mittheilungen. 351 um ein der bekannten Hämatoxylin-Carmin-Doppelfärbnng Strelzoff's analoges Bild auf einfachere Weise zu erlangen. Bayekl hat das Ver- fahren wieder aufgenommen, um die Eigenschaft der Mischung, resp. des Indigo, mit dem Blutfarbstoff eine grüne Färbung einzugehen, zu ver- werthen. Eine blaue Färbung des Knochens (Merkel) konnte Bayekl nicht erhalten. Ich erhalte dieselbe stets ; vermuthlich ist die von Bayekl vorgeschriebene Tinctionszeit zu kurz ; andererseits blieben bei mir die Knorpelreste meist farblos. Offenbar ist vieles von der Reinheit der benutzten Farbstoffe abhängig. Ich schreibe es der speciellen Sorgfalt des hier deren Bezug vermittelnden Herrn Staats-Apotheker Prof. Per- KENOUD zu, wenn ich bisher nie mit den von ihm bezogenen Farbstoffen Misserfolge hatte ; während allerdings Versuche mit gleichzeitig von anderer Seite bezogeneu Materialien (speciell Carmin) uns im Stiche gelassen haben. Nach allen Erfahrungen kann ich als kaum schwankend in ihrer Wirkung die Merkel' sehe Färbung nicht nur für die endo- chondrale, sondern auch für die periostale Ossification warm empfehlen. Der junge Knochen wird himmelblau, mit einer farblosen (jüngsten) Randschicht, belegt mit dunkelrothen Osteoblasten : die Blutgefässe der Markräume sind grün, das Mark grau mit rothen Kernen. Das ele- ganteste Bild — wichtiger ist es mir allerdings, dass es zugleich ein ausgezeichnet klares ist — zeigt sich an Präparaten der Zalmentvvick- lung. Vom Unterkiefer einige Tage alter Kätzchen habe ich davon die schönsten mir bis jetzt bekannten Präparate zur Ausgabe im mikros- kopischen Curs gewonnen. Dentin und Schmelz sind blaugrün in etwas verschiedenem Ton, die anderen Gewebe der Umgebung in der für die Knochenbildung charakteristischen Weise gefärbt. 3) Magen. Haupt- und Belegzelleu der Fundusdrüsen in nur einem Färbungsact so deutlich zu ditierenziren, wie mittels des MEKKEL'schen Verfahrens, gelingt wohl auf keine andere Weise. Die Hauptzellen bleiben farblos mit rothem Kern, die Belegzellen werden graublau bis dunkelblau tingirt, im Zwischengewebe heben sich besonders schön die glatten Muskeln (himmelblau mit rothen Kernen) hervor. 4) Hypophysis cerri. Neben - Niere. An einer anderen Stelle ' habe ich gezeigt, dass in dem Hirnanhang der Säugetiere zweierlei Zell- ') Tageblatt der 57. Versammlung Deutscher Naturforscher imd Aerzte in Magdeburg p. 195. — Vergl. auch Arch. des sc. physiques et naturelles. Genf Nov.-Dec. 1884, p. 112 und Mittheilungen der naturforschenden Gesellschaft in Bern. 1885. I. Heft. Sitzung vom 17. Januar 1885. (Ausführlicheres bringt die demnächst zu publicirende Dissertation von Stud. med. Lothringek). 352 Kleinere MittheUimgen. 11, 3. formen vereinigt sind, welche sich durch Grössen- und Form-Verhältnisse ähnlich darstellen, wie Haupt- und Belegzellen, Das Resultat der Mekkel- schen Doppelfärbung ist ein gleich günstiges wie bei den Magen- drüsen. Auch in der Nebenniere differenzirt die Methode zwei Zell- formen im Grenzgebiete von Rinde und Mark. 5) Niere. Die Epithelien der Harnkanälchen nehmen eine matt- grünblaue Farbe an, mit deutlicher, rother Kernfärbuug. Das Zwischeu- gewebe zeigt eine schöne rein blaue Tinctiou mit rother Kernfärbung; die Blutgefässe, wo gefüllt, werden grasgrün. — Ich vermuthe, da die benutzten Nierenpräparate (Ziege und Mensch) sehr sorgfältig vor dem Einlegen in Alkohol von Chromsäure befreit waren und dieselben bei anderen Präparaten farblos erschienen, dass die grüne Farbennüance in den Epithelien auf chemischen Umwandlungen des Farbstoffes in den Zellen beruhe. Ausdrücklich betone ich, dass die Celloidinbehandlung — das anhaftende Collodium nimmt eine ähnliche Farbe au — nicht die Schuld an der eigenthümlichen Tinction sein kann ; der Inhalt der Harnkanälchen erscheint an den sehr gut gelungenen Präparaten farb- los; die Schnitte waren nicht durchtränkt, sondern nur eingeschlossen in der Masse. 6) Milchdrüse. Versuche an Präparaten des Euters der Kuh für Curs-Zwecke haben Prof. Gasskr und uns die besprochene Färbung den anderen, welche wir erprobten (Hämatoxylin, Boraxcarmin, Pikro- carmin, Alauncarmin u. s. f.), weitaus vorziehen lassen wegen der aus- gezeichneten Differenzirung zwischen Epithel- und Bindegewebe. Vor- theilhaft erwies sich längeres Liegen der Schnitte in Wasser nach kurzer Extraction in der gesättigten Oxalsäure-Lösung. Bern, den 26. Juli 1885. n, 3. Kleinere Mittheilungen. 353 Notiz zu Watney's Doppelfärbung mit Hämatoxylin. Von Prof. Dr. Max Flescli in ßern. In einer Mittbeilung über Untersucliungsmethoden reproducirt W. Krause * ein von Watney ^ angewendetes Verfahren zu Doppelfärbun- gen mit alleiniger Anwendung von Hämatoxylin als Tinctionsmittel. Man erzielt dieselben durch successive Tinction mit einer starken rothen und einer schwachen blauen Lösung. Die Verschiedenheit beider Lö- sungen hängt wesentlich von deren Gehalt an Alaun, sowohl nach dessen Menge als nach dessen Säuregehalt ab. Intensives Blau erzielt man bei Verwendung frisch präparirten trockenen Alaunes; die rothe Farbe er- scheint, wenn allmählig Säui'e im Alaun frei geworden ist, am besten, wenn die Menge der Alaunlösung kleiner ist als das Dreifache des Blau- holzextractes. Roth färben sich bei jeuer Doppelfärbung Bindegewebe, das Protoplasma der Bindegewebs - Körperchen und der granulirten (Plasma- ?) Zellen, endlich die Gefasswände. Blau färben sich Schleim, fast alle Kerne und die Lymphkörperchen. Eine freundliche Mittheilung von Herr Prof. Dr. Langhans in Bern, zu deren Publication derselbe Erlaubniss gegeben hat, zeigt in- dessen, dass diese Doppeltinction auf einem viel einfacheren Wege ent- steht, wenn man nämlich in gewöhnlicher Weise (mittels der neuerdings von Flemming ^ empfohlenen, von Heidelberg aus eingeführten Dela- FiELü'schen * Hämatoxylinlösung) tingirte und in Canadabalsam einge- schlossene Präparate dem Lichte längere Zeit aussetzt. Vergleichsver- suche von Herrn stud. med. Ebeling haben ergeben, dass au Glycerin- präparaten derselben Objecte gleich lange Belichtung erfolglos bleibt. — Es scheint mithin der Harzeinschluss, besser ein chemischer Vorgang in dem belichteten Harz bei dem Contact mit bestimmten Gewebselementen die geeigneten Bedingungen für die partielle Aenderung der Farben- nüauce eben an jenen Gewebselementen, zu liefern. 1) Krause, W., Untersucliungsmetlioden. 3. Hämatoxylm. (Internat. Ztschr. f. Aiiat. u. Histol. Bd. I, p. 154). 2) Watnev, The minute anatomy of tbe Thymus (Philos. Transact. R. Society. London 1882, vol. III, p. 1075) [citü't nach Krause]. 3) Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 57. ") Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 288. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 3. 23 354 Kleinere Mittheilimgen. II, 3. Skatol e Carbazol, due nuovi reagenti per le membrane ligniflcate *. Nota del Dottore O. Mattirolo. !*•. Assistente dell'Orto Botanico di Torino. Dalla gentilezza del prof. M. Feleti, mi fu concesso sperimentare sopra alciini corpi non ancora adoperati nella microchimica vegetale. I risultati ottenuti e l'azione loro che si dimoströ specifica a riconoscere le membrane ligniflcate mi incoraggiano a proporre ai botanici come succedanei della floroglucina e dell'indol il carbazol e lo skatol 2. Tutti e due questi corpi dauno identiche reazioni ; colorano cioö in violetto-vinoso le membrane ligniflcate. II carhasol h doppiamente raccomaudabile, essende reperibile in commercio ^ ed e quasi assoluta- mente privo di odore; mentre allo skatol h proprio quell'ingratissimo fetore a tutti noto, che costituisce per se stesso un serio ostacolo alle sua estesa applicazione nella microchimica. II carbazol si trova nella parte dell'antracene greggio bollente da 320" a 360" e come prodotto secondario nella fabbricazione dell'anilina dal carbon fossile; lo skatol si ottiene dalle feci umane, 0 per sintesi, come operö il Prof. Fileti*, dalla distillazione secca del nitro cuminato di bario. L'azione colorante deUo skatol sulla coniferina, negata prima da Bajer *, fu dimostrata nel 1883 dal Prof. Fileti, ed ora estendendo gli esperimenti suoi, ho potuto provare al microscopio come non sola- mente abbia la proprietä di colorare in rosso-violetto le membrane cellulari contenenti coniferina, ma come questa sua azione si estenda a 1) V. Memorie deUa R. Accad. delle Scienze di Torino. Ser. II t. XXXVII. Mattieolo : La linea lucida nelle cellule malpighiane degli integumenti seminali. 2) Ho sperimentato sopra ceUule ligniflcate appartenenti a famiglie svaria- tissime e sopra schlerencliimi rinchiusi nei parenchimi. Cosi furono provati i generi Populus, Sorhus, Vitis, Fraxinus, Castanea, Ficus, Berberis, Quer- cus, Pinus, Ahies, Pteris, Helleborus, Tüia, Sambucus, Cyiisus, Acer, Taxus, Solanum, Iresine, Älnus, Gossypium, Begonia, ecc, ecc, 3) 100 grammi si vendono a L. 600 *) M. Fileti, Sintesi dello Skatol. Atti della R. Acc. deUe Scienze di Torino, vol. XVm, 24 giugno 1883. ») Berliner Berichte, XHI, 2340. II, 3. Kleinere Mittheilungen. 355 tutte le membrane lignificate. Questo fatto sta quasi a provare l'idea espressa da Höhnel ' (non sempre provata dai fatti) ; secondo la quäle si ammette la coniferina esistere in tutte le membrane lignificate. L'azione del carbazol sulla lignina, per quanto io mi sappia, finora non veune osservata, o almeno certamente non venne consigliato il suo impiego nella microcbimica. Le sezioni si immergono in una soluzione alcoolica ^ di questi corpi, e quindi depo qualcbe minuto si ritirano e si trasportauo in una goccia di aeido cloridrico nella quäle si osservano. La reazione ba luogo immantinente aumentando ancora di intensitä dopo qualcbe minuto. La colorazione sventuratamente, come quella della floroglucina e dell'indol, ecc, non resiste a luugo ^. Oltre a questi due corpi, ebbi ancora a provare allo stesso scopo, la piridina, la chinolina , e con questi pure ottenui in molti casi la colorazione caratteristica. Perö con questi due reattivi si fanno troppo frequenti le eccezioni e le reazioni stesse avvengono troppo lenta- meute, percbfe si possano con efficacia raccommandare nella pratica, per riconoscere la lignina. Einige kritische Bemerkungen über Dr. Hueppe's Buch, „Die Methoden der Bacterien-Forschung". Von Dr. Emil Chr. Hansen, Vorstand des physiolog. Laboratoriums Carlsberg, Kopenhagen. Der einzige, auf jeden Fall sichere Weg, auf welchem wir die Reincultur irgend eines Mikroorganismus erhalten können, ist der, eine einzige Zelle in einem passenden Nährsubstrat und auf eine solche Weise auszusäen, dass fremde Organismen fern gehalten werden können. Es wird sehr schwierig sein, ausfindig zu machen, wer zuerst diesen an sich so einfachen und doch so fruchtbaren Gedanken ausgesprochen ») üsando il Carbazol, la soluzione deve essere preparata a caldo. *) Beheens, Hilfsb. z. Ausführ, mikrosk. Unters, im bot. Laborat. p. 289. 3) Furono tentati metodi diversi, ma non si riusci che a conservare tem- poraneamente la colorazione. 23* 356 Kleinere Mittheilungen. II, 3. hat. Mehrere Forscher haben in den letzten Jahren sich bemülit, das Problem jeder in seiner Weise zu lösen. Sprünge finden sich nicht in diesem Entwicklungsgänge der Forschung. Vorzügliche Beiträge sind hierdurch nach und nach entstanden, und im Augenblicke können wir ohne Uebertreibung sagen, dass es für den geübten Experimentator nicht länger mit besonderen Schwierigkeiten verbunden ist, eine Rein- cultur darzustellen. Herr Dr. Hueppe giebt in seinem obengenannten Buche eine nicht ganz correcte Darstellung vom Entwicklungsgange der Wissenschaft in diesem Gebiete. Ich werde mir erlauben, einige Missverständnisse zu beleuchten, die von solcher Natur sind, dass der nicht vollständig Sachkundige dadurch leicht auf Irrwege geführt werden kann. Rücksichtlich der Verdünnungsmethode wird p. 92 gesagt: „Mängel haften, wie Hansen trotz seiner trefflichen Ermittelungen un- umwunden zugiebt, aiich dieser Methode an; namentlich ist es nicht sicher, ob die Anzahl Zellen, welche man im Voraus berechnet hat, sich wirklich im Kolben mit der fertigen Infectionsflüssigkeit befindet; es kann sogar vorkommen, dass nicht eine einzige Zelle hineingelangt ist, ferner auch, dass sich mehrere, als man gewünscht hatte, vorfinden". Hiermit ist Dr. Hueppe geneigt, dieser Methode die Sicherheit abzu- sprechen. Dass man dieses im ganzen sagen kann von dem Verfahren, das z. B. von Nägeli angewendet wurde, ist richtig und wurde auch von mir in meiner Abhandlung, „Ueber das Zählen mikroskopischer Gegenstände in der Botanik" ', sowie namentlich in meinen früheren Abhandlungen über Alkoholgährungspilze in Compte-rendu des travaux du laboratoire de Carlsberg 1 88 2—83 - hervorge- hoben. Hätte Dr. Hueppe aber weiter gelesen, so würde er ge- sehen haben, dass ich in meinen Studien über Hefe die angeklagte Verdünnungsmethode einen Schritt weiter geführt habe, und dass ich Kennzeichen angebe, durch welche man die Kolben, die nur je eine Zelle empfangen haben, von denen mit mehreren Zellen unterscheiden kann. Wenn nämlich n lebenskräftige Hefezellen in einen Kolben mit passender Nährflüssigkeit (also z. B. Würze) übertragen werden, und der Kolben dann geschüttelt wird, um die Zellen zu zertheilen, so wer- den sie sich, nachdem die Flüssigkeit zur Ruhe gekommen ist, auf dem Boden lagern und hier n Hefeflecke bilden. Wenn diese eine bestimmte Grösse erreicht haben, können sie mit Leichtigkeit mit dem blossen Auge beobachtet und also gezählt werden. Die Kolben, in denen sich ») Diese Zeitschrift Bd. I, 1884, p. 191. «) Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 118. II, 3. Kleinere Mittheilungen. 357 nur ein Hefenfleck entwickelt, haben nur eine Zelle empfangen. Die nähere Begründung findet sich in meinen genannten Abhandlungen, in der von 1882 p. 212 und in der von 1883 p. 20 u. 21. Es würde gewiss auch in Dr. Hueppe's Buch mehr passend sein, eben diese Originalarbeiten zu citiren, als die nur referi- rende Abhandlung von 1884. Bei directer Probe mit einer Mischung von zwei bekannten Hefen- arten, die leicht von einander zu unterscheiden waren z. B. Saccharomy- ces apiculatus und eine Species der Gruppe Saccharomyces cerevisiae, wurde es constatirt, dass man mittels meiner beschriebenen Methode wirklich Reinculturen erhält. Hierzu kommt, dass man bei Anwendung des von mir in den citirten Abhandlungen ebenfalls beschriebenen quadrirteu Deckglases auch im Stande ist, in der betreffenden Nähr- lösung direct eine einzige Zelle auszusäen. Es muss kurz gesagt gegen Hueppe hervorgehoben werden, dass die Verdünnungsmethode mit den von mir beschriebenen Verbesserungen eine ebenso grosse Sicherheit giebt, als wenn man mit Nährgelatine ar- beitet. Wie allgemein bekannt, wird die Reincultur nach Koch's Methode in der Weise hergestellt, dass eine Portion von den betreffenden Mikro- organismen in fliessende, keimfreie Nährgelatine übergeführt wird. Nachdem die Zellen in dieser Mischung durch Schütteln soweit als möglich gleichmässig vertheilt worden sind, wird das Ganze auf eine horizontale, ebenfalls keimfreie Glasplatte ausgegossen. Diese wird endlich mit einer feuchten Glasgloke zugedeckt und solchergestalt bei passender Temperatur aufbewahrt. Es wird nun angenommen, dass jeder separat gebildete Vegetationsfleck aus einer einzigen Zelle ent- wickelt ist. S. 104 sagt Dr. Hueppe hierüber: „Der Nachweis, dass eine mit blossem Auge und bei schwächerer Vergrösserung (bis zu etwa 80- bis 120fach) sich einheitlich repräsentirende und charakteristisch wachsende Colonie aus einem einzigen Keime hervorgeht, war vor Mit- theilung der Methode sicher gestellt und wurde später treffend von Hansen erbracht". Dieses ist wieder nicht richtig, denn meine Untersuchung zeigte das Gegentheil, nämlich, dass man nach dem beschriebenen Verfahren nicht ausmachen kann, welche Flecke von einer Zelle (also absolute Reinculturen enthaltend) und welche von mehreren Zellen (also möglicherweise nicht Reinculturen enthaltend) gebildet sind. Und ich hob hervor, dass man, um vollständige Gewissheit zu er- 358 Kleinere Mittheiliingen. II, 3. halten, ob ein Vegetationsfleck aus einer oder aus mehreren Zellen gebildet ist, dieCultur in einer feuchten Kammer unternehmen muss. Nur mit dieser Modification giebt Koch's Methode Sicherheit. Ich theilte dann mit, wie ich den Ver- such mit verschiedenen Hefearten ausgeführt habe. Unmittelbar nach dem oben genannten Citate sagt Dr. Hueppe selbst : „Bei einiger Uebung lernt man erkennen, ob eine Colonie einem Keime entstammt, oder ob sie aus einer Vereinigung mehrerer Colonien hervorgegangen ist". Dies steht in Widerspruch mit seinen voraus- gehenden Aeusserungen und zeigt, dass er eigentlich selbst eingesehen hat, dass Koch's Verfahren nicht vollständig sicher ist. Es ist nicht unwahrscheinlich, dass man in der Regel sich die Sache etwas leichter nehmen kann, wenn man mit Bacterien arbeitet. Sie geben jedenfalls, wie es auch von Koch und seinen Schülern mehr- mals hervorgehoben ist, in Gelatineculturen sehr häufig charakteristische makro- und mikroskopische Merkmale. Mit Hefenzellen stellt es sich dagegen etwas anders. So bildeten z. B. die sechs Arten, die in meiner Abhandlung über die Askosporenbildung bei den Saccharomyceten be- schrieben sind , Vegetationsflecke mit demselben Aussehen und ganz ähnlich mit denen, welche von Saccharomyces apiculatus und von Hefe- zellen, verschiedenen Schimmelpilzen zugehörend, entwickelt wurden. Als Culturboden wurde Gelatine mit Bierwürze benutzt. In den meisten Fällen war es auch nicht möglich, mikroskopisch Differenzen zwischen den Zellen der verschiedenen Species zu entdecken. Unter den sechs erstgenannten Arten zeichnete sich nur Saccharomyces cerevisiae I aus durch seine grossen runden und ovalen Zellen, während die Zellen der übrigen fünf Arten einander ganz ähnlich waren und alle als Saccharo- myces Pastorianus Reess bestimmt werden konnten. Wie gewöhnlich, trat Saccharomyces apiculatus auch hier mit seinen citronenförmigen Zellen auf, und einige der Hefenzellen der Schimmelarten unterschieden sich von den übrigen durch ihre verhältnissmässig kleinen runden Zellen, aber wie gesagt, auch hier waren mehrere sonst deutlich difi'erenzirte Species nicht von einander zu unterscheiden. Indem ich den Nährboden wechselte, traten zwar Andeutungen anderer Differenzen zwischen den Arten hervor, aber wie die Sache im AugenbUcke steht, werden wir, wenigstens was die Saccharomyceten anbelangt, dazu genöthigt, die Aufgabe in ihrer ganzen Strenge zu neh- men und dürfen uns nicht mit der leichteren Methode zur Darstellung der Reincultur begnügen. n, 3. Kleinere Mittheilungen. 359 Berichtigung. Von Dr. H. Molisch in Wien. In Bd. II, 1885, H. 2. p. 259 dieser Zeitschrift ist eine Arbeit A. Inii's: „lieber neue empfindliche Holzstoff- und CeUulose-Reagentien" besprochen. Es wird daselbst angegeben, dass nach den Beobachtungen Ihl's neben dem von Wiesner namhaft gemachten Phloroglucin auch noch andere Phenole nämlich Orcin, Resorciu, Naphthol und Pyrogallus- säure den Holzstoff in charakteristischer Weise färben. — Ich erlaube mir zur Richtigstellung zu bemerken, dass Wiesneb schon im Jahre 1878 in seiner „Note über das Verhalten des Phloro- glucins und einiger verwandter Körper zur verholzten Zellmembran" (Sitzber. d. Wiener Acad. 1878) darauf aufmerksam machte, dass die oben genannten Körper die Anwesenheit vom Lignin durch charakteri- stische Färbungen anzeigen. 360 Referate und Besprechungen. II, 3. Referate und Besprecliung'en. 1. Lehr- und Handbücher. Dippel, L., Grundzüge der allgemeinen Mikroskopie. Braunschweig (Vieweg) 1885; 524 pp. 8" m. 245 Holzsch. u. 1 Tfl. 10 M., geb. 11 M. Der allbekannte Verf. des grossen ,Handbuch der allgemeinen Mikroskopie" bietet in den vorliegenden „Grundzügeu" dem Anfänger einen iibersichtliclien Auszug aus jenem grossen Werke, welcher alles Wichtige für den angehenden Mikroskopiker, sowohl vom theoretischen wie vom praktischen Standpunkte aus, in kurzer, gedrängter Form vor- führt. Dementsprechend ist auch die Diction knapper gehalten als im grossen Handbuch. Es ist daher jedem, der auf diesem Gebiete noch nicht vollständig zuhause ist, anzurathen, zuerst die Grundzüge, zumal die theoretischen Capitel derselben zu studiren und erst dann zu dem Handbuche überzugehen. Die Disposition des Stoffes anbelangend, so schliessen sich die Grundzüge enge an das Handbuch an, und können wir daher auf das verweisen, was wir seinerzeit darüber bei Besprechung des Handbuches gesagt haben. Auch die Abbildungen sind fast sämmtlich aus dem Hand- buche herübergenommen, die Illustration, deren Güte bekannt ist, muss eine sehr reiche genannt werden, und der Preis ist für das Gebotene als ein durchaus massiger zu bezeichuen. Sehrens. Cfiltay, E., Inleiding tot het gebruik van den Microscoop [Einführung in den Gebrauch des Mikroskopes]. Leiden (Brill), 1885, 254 pp. 8" m. 50 Figg. u. 1 Tabelle. Wie Verf. in der Vorrede sagt, existirt ausser den Werken von DippEL und von Nägeli und Schwendenee kein Buch, welches irgend ») Besprochen in dieser Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 103. n, 3. Keferate imd Besprecliungen. 361 wie erschöpfend die Lehre von der mikroskopischen Optik vorträgt, während die genannten beiden Werke fiir den Anfänger zu ausführlich sind ^ Das Werk des Verf. soll diese Lücke ausfüllen ; es ist vornehmlich für Studirende der Naturwissenschaften und Medicin geschrieben. Verf. gruppirt den zu behandelnden Stoff in zwei Abschnitte : 1. Gang der Lichtstrahlen. Die Lehre vom Sehen; 2. Das Mikroskop. Theorie der mikroskopischen Beobachtung. Der erste Abschnitt zerfällt in zwei Capitel: Bestimmung des Ganges der Lichtstrahlen durch Medien, welche durch centrirte Kugelflächen an einander grenzen. Das Auge und das Sehen; der zweite behandelt in fünf Capiteln folgende Gegenstände: Das einfache Mikroskop. Das zusammengesetzte Mikroskop. Das Sehen mit dem Mikroskope. Hilfsapparate. Nähere Betrachtung der Abbildung durch das Mikroskop. — Ein näheres Eingehen auf den Inhalt verbietet sich an diesem Orte. Behrens. Vogel, J., Das Mikroskop und die wissenschaftlichen Methoden der mikroskopischen Untersuchung in ihrer verschiedenen Anwendung. 4. Aufl. bearb. v. Zachaeias, Hallibr u. Kalkovsky. Leipzig (Denicke) 1884, 288 pp. 8» m. 114 Holzschn. 6 M. Dieses Buch schliesst sich der stattlichen Reihe jener Productionen an, welche als populäre bezeichnet werden, wenn auch die Verff. meinen, ihr Buch solle „die einigermaassen Vorgebildeten zur Anstellung von ernsten und ziclbewussten Untersuchungen anleiten, und den Weg zu ebenen, der von da aus zur Höhe der streng wissenschaftlichen For- schung führt". Zu diesem Zwecke dürfte aber das Buch kaum zu em- pfehlen sein. — In der „geschichtlichen" Einleitung haben wir uns ge- wundert, gerade die Namen nicht zu finden, die mit der Erfindung des Mikroskopes enge verknüpft sind. Die „Theorie des Mikroskopes" ist wohl so mager ausgefallen wie möglich ; den Verff. scheinen die Arbeiten der letzten acht Jahre gänzlich unbekannt geblieben zu sein. Sehr schön ist das, was sie über das „Zeichnen mikroskopischer Präparate" sagen, allein, wenn man die Abbildungen in dem Buche, zumal die in dem von Hallier bearbeiteten botanischen Theile betrachtet, so kommt man zu dem Schlüsse, dass sie sich selbst ihre Worte etwas mehr hätten zu Herzen nehmen können. Solche Abbildungen fabricirte man vor fünfzig und mehr Jahren, zur Zeit des seUgen Moldenhawek und Meyen, nicht 1) Das Buch von Nägeli und Schwendener, welches die ABBE'sche Miki'o- skoptheorie noch nicht enthält, dürfte nach den Arbeiten des berühmten Jenenser Professors beim Studium der mikroskopischen Optik wohl kaum mehr in Be- tracht kommen. 362 Referate iind Besprechungen. II, 3. im Jahre 1884. Figur 50, Markzellen aus dem Zweig des Berberitzen- strauchs, kann ebensowohl ein Stück Bindfadengeflecht aus einem Fischer- netze darstellen, bei Figur 57 ist es sehr gut, dass im Text angegeben ist, sie sei ein „zarter Schnitt senkrecht gegen die untere Fläche der Blumen- blätter einer Iris geführt". Ob die einigermaassen Vorgeschrittenen an der Hand solcher Abbildungen zur Höhe der streng wissenschaftlichen Forschung geführt werden können, erscheint uns etwas problematisch; durch den Text des Capitels „Mikroskopische Behandlung pflanzlicher Gebilde" werden sie es gewiss nicht. Das Beste in dem Buche ist zweifellos das von Zachakias verfasste Capitel: Mikroskopische Be- handlung thierischer Gebilde. Behrens. Moj sisovics, A., Edler v. Mojsvär, Leitfadenbeizoologisch- zootomischen Präparirübungen. 2. Aufl. Leipzig (Engel- mann) 1885. 259 pp. 8». 127 Holzschn. 8 M. Im vorliegenden Buche dürfen wir, wie ja schon aus dem Titel er- hellt, nur wenige auf mikroskopische Technik bezügliche Angaben er- warten, zumal der Verf. in der Vorrede noch ausdrücklich betont, dass ein Eingehen auf mikroskopische Verhältnisse ausserhalb des Planes der Schrift gelegen habe. Was jedoch von auf mikroskopische Technik be- züglichen Angaben vorhanden ist, möge im Folgenden kurz erwähnt sein. — Der im „Allgemeinen Theile" herrschenden Tendenz, vor allem Anleitung zur Her- und Aufstellung mikroskopischer Dauerpräparate zu geben, entspricht auch der vierte Abschnitt desselben, welcher über „Con- servirungsmethoden" handelt. Von den für den Mikrosk-opiker wichtigen Conservirungsflüssigkeiten werden erwähnt Chromsäure, doppelt chrom- saures Kali, MtTLLER'sche Flüssigkeit, Osmiumsäure, FAEEANT'sche Flüssig- keit sowie deren Modification von Langerhans (Zool. Anz. Bd. II. 1879. p. 575) und die BLANc'sche* Conservirungsflüssigkeit, alle genannten event. mit ihrer Herstellungsweise. Bei den „Würmern" hat die erste'* Vorschrift von Lang* zur Conservirung der Planarien (Zool. Anz. Bd. I. 1878. p. 14) eine Stelle gefunden. — Die uns hier interessirenden An- gaben mehren sich naturgemäss dort, wo der Verf. sein Programm ge- wissermaassen überschreitet, in jenem Gebiete des Thierreichs, wo das Miki-oskop anfängt, an die Stelle des Messers zu treten, nämlich bei den Coelenteraten, und erreichen ihr Maximum bei den Protozoen. — Zum Conserviren von Quallen wird besonders 0-2 bis 1-Oprocentige Osmium- säure (nach v. Heider und F. E. Schulze) empfohlen, während man mit der HBRiwiG'schen Methode, wie sie dort angegeben ist: „Osmium- ») Neu in Aufl. 2. 2) Cfr. diese Zeitsch. Bd. II, H. 3, p. 384, Anm. 1. n, 3. Referate iind Besprechungen. 363 säure und Essigsäure zu gleichen Theilen zu mischen" kaum „schöne Ergebnisse" erzielen dürfte. Zum Anfertigen von Corallenschliffen giebt Verf. die Vorschrift G. v. Koch's (Zool. Anz. Bd. I. 1878. p. 36), und bringt ' die Empfehlung F. C. Noll's in Bezug auf Eau de Javelle zur Entfernung der Weichtheile aus mikroskopischen Präparaten. Die Pro- tozoen finden selbstverständlich nur eine kurze (2 '/g Seiten lange) Be- sprechung. Nach kurzer Angabe, wie man ein lebendes Protozoon längere Zeit unter dem Mikroskope beobachten könne, folgen die Me- thoden von Fr. Meyee, A. Certes*, E. Korschelt', Landsberg* und GißzA Entz zur Conservirung derselben. Gegen die erste Auflage hat die vorliegende zweite, abgesehen von einigen Texterweiterungeu (von denen die hier interessirenden bereits erwähnt sind), eine Anzahl neuer Abbildungen erhalten und bringt unter ihnen in Fig. 16 die Ansicht von Reichert's grossem Präparirmikroskop zur Untersuchung von Gehirnquerschnitten. Dr. H. HenJcing (Göttingen). Behrens, W. J., The Microscope in botany. A guide for the micro- scopical investigation of vegetable substances. Transl. and ed. by Rev. A. B. Heevey, M, A., assisted by R. H. Ward, M. D., F. R. M. S. Boston (Cassino & Co.) 1885. 466 pp. with 13 pl. and 153 cuts. 5 Doli. Die hier zu besprechende englische Ausgabe von dem Werke des Ref. ist eine nicht autorisirte, welche unternommen wurde, trotz- dem von Seiten des Verf. wie des Verlegers Protest gegen dieselbe erhoben wurde, die Abbildungen sind auf mechanischem Wege den Ori- ginalieu der deutschen Ausgabe nachgebildet. Der saubere Uebersetzer ist ein Pastor (reverend) R. H. Hervey, die Theile über Instrumenten- kunde hat ein R. H. Ward — man kann nicht sagen übersetzt, sondern in eine für Americaner mundgerechte Form gebracht, für welche den Namen herzugeben Ref. auf das Entschiedenste protestiren muss. Unsere Kritik kann sich nur auf die englische Uebersetzung be- ziehen, über das Buch selbst steht uns als dessen Verf. ein Urtheil nicht zu. Die Uebersetzungsarbeit von Ehrwürden ist zweifellos eine sehr harmlose, Ehrwürden haben den deutschen Text Wort für Wort ins Englische übertragen, so dass selbst der deutsche Leser bisweilen ein Lächeln nicht unterlassen kann ; wieviel drastischer muss diese Zwittersprache erst auf einen Engländer wirken. Die Einschaltungen sind zumal in den ersten Abschnitten zahlreich, während die letzten ») Neue Aufl. 2. 364 Keferate irnd Besprechungen, H, 3. Abschnitte (Mikroskopische Reagentien, Mikroskopische Untersuchung der Pfianzenstoffe) kaum solche enthalten. — Man hat es für nöthig be- funden, alle modernen americanischen „Stands" abzubilden, auch die Figur einer Lupe, wie mau sie in jedem Uhrmacherladen sieht, findet sich auf p. 102 ; anderer schöner Sachen nicht zu gedenken. Ein Kritiker in der in America erscheinenden „Botanical Gazette" (vol. X, 1885, no, 6 p. 300) sagt über die englische üebersetzuug : „The work of editing has been too thoroughly done : indeed so many have been the interpolations and changes that were it translated, Dr. Behrens would hardly recognize his own book. In some instauces the additions have been valuable; iu others the have been unnecessary, and injudicions in so far as the increase the cost and size of the book without correspondingly increasing its value". Behrens. 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. Vignal, W., Chambre chaude a regulateur direct pour le microscope (Trav. du labor. d'histol. du College de France. Arch. de Physiol. norm, et pathol. t. XVII. no. 5 p. 1). Vignal's neuer heizbarer Objecttisch schliesst sich im ganzen an den RA>rviEK' sehen ' an. Im wesentlichen besteht der Apparat aus zwei miteinander verbundenen Metallkästchen, die so über einander stehen, dass zwischen beiden ein Spalt von 5 mm Höhe bleibt, in welchen von rechts her das Präparat eingeschoben wird. Centrale Oeff- nungen dienen, eine untere der Beleuchtung, eine obere der Annäherung des Objectives an das Präparat. Die Abkühlung des letzteren durch Ableitung auf das Objectiv ist ausgeschlossen, da letzteres selbst von der oberen Abtheilung der Heizkammer umgeben ist; zudem ist der Objectträger auf drei Seiten von der Verbindung beider Kästen um- schlossen ; auch die frei bleibende vierte kurze Seite ist vor Abkühlung geschützt, indem ein Schieber von oben her den frei bleibenden Raum des Spaltes abscliliesst. Die Heizung erfolgt durch eine kleine Gas- flamme, die, von einem Glascylinder umgeben, unter einem links seitlich dem unteren Kasten verbundenen Ansatz-Rohre brennt. Ein d'AasoN- val' scher Thermoregulator ist rechts an dem Wärmekasten angebracht ; ') Cfr. DippEL, Handbuch der allgemeinen Miki-oskopie. 2. Aufl. p. 655, Fig. 465. II, 3. Referate imd Besprecliungen. 365 ist einmal auf eine bestimmte Temperatur eingestellt, so bleibt dieselbe fast unbegrenzt lange auf gleicher Höhe. Fragen wir nach den Vortheilen der neuen Einrichtung, so ist un- verkennbar, dass keine der existirenden in gleich vollkommener Weise auf lange Zeit eine gleichmässige Heizung unter Bedingungen erzielt, welche die Annahme gestatten , dass die Temperatur des Präparates jener der Wärmeeinrichtung, wie sie das Thermometer angiebt, gleich sei. Diesen Vorzügen gegenüber mag es als unwesentlich erscheinen, dass Verschiebungen des Präparates nur in unbequemer Weise vorge- nommen werden können, weil der Objectträger fast ganz von dem Heizkasten umschlossen ist. Es verzichtet dagegen der Apparat auf die Möglichkeit zu schnellem Temperaturwechsel, der allerdings auch nur für ganz specielle Untersuchungen wünschenswerth erscheinen mag. Er Er verzichtet aber auch auf die Anwendung der modernen Beleuchtungs- apparate; dieser Nachtheil ist ein wesentlicher, da wohl Niemand für die Untersuchung lebender Zellen der Vortheile, welche jene Apparate bieten, entbehren mag. Den Vortheil, welchen die Erwärmung des Ob- jectives bietet, gleicht die für dasselbe daraus bei dauernder Erwärmung erwachsende Gefahr einigermaassen aus; es dürfte der Wärmeverlust auf dem Wege der Ableitung durch das Objectiv durch eine Steigung der Thermometertemperatur um etwa 2 bis 3 Grad zu compensiren sein. Andere Nachtheile hat der Apparat mit allen bestehenden gemein; die Befestigung zweier Gasschläuche am Mikroskope u. a. m. So kann wohl die Ki'itik dahin schliessen, dass der Apparat für gewisse Zwecke, wenn es sich nämlich um lange Beobachtungen, die feinere Beleuchtungsvor- richtuugen nicht erfordern, handelt, den Vorzug verdient; dass er da- gegen, wo es sich um genaue Beobachtungen handelt, hinter den Appa- raten von Symons (Journ. of the R. Microsc. Soc. Ser. H. Vol. H, 1882, p. 21—22) und jenem des Ref. (diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 33) zurücksteht. Die Vorrichtung von Löwit (diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 43) imterscheidet sich in nichts wesentlichen von jener des Refe- renten, namentlich nicht in Bezug auf die Heizungseinrichtung. Einen Vortheil bietet sie allerdings, insofern sie an jedes Mikroskop angebracht werden kann. Immerhin dürfte aber die — leider nur nur an Seibert's Instrumenten mögliche — Einpassung des Objecttisches in der vom Ref. angegebenen Form insofern der anderen überlegen sein, als sie nicht wie bei Löwit einen besonderen Aushilfs- (buU's eye) Condensor ver- langt, vielmehr direct die gewöhnliche Beleuchtungsvorrichtung Aebe's, aber auch jede andere Beleuchtungseinrichtung, Polarisator u. s. f. verwendbar macht. Flesch (Bern). 366 Referate und Besprechungen. II, 3. Fabee-Domergue's current-apparatus (Bull. Soc. d'Hist, Nat. de Toulouse t. XVni, 1884, p. 162 ; cfr. Journ. of the R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 3 p. 526). Der genannte Apparat ist mit Rücksicht darauf ersonnen, dass ein dem Einflüsse eines Flüssigkeitsstromes ausgesetztes Präparat von dem Beobachtungsinstrumente weggenommen werden kann, ohne dass die Durchßtrömung unterbrochen zu werden braucht. Derselbe besteht aus einer 4 cm breiten, 15 cm langen, in der Mitte durchbohrten Metall- platte, welche auf den Objecttisch aufgelegt wird. Das eine Ende der Platte ragt 4 cm über den Rand des Objecttisches hervor und trägt in der Ebene des lezteren ein mit Wasser gefülltes Schälchen, das andere ist zweimal rechtwinklig gebogen und trägt auf dem horizontalen Ende etwa 1 cm unterhalb der Tischebene ein zweites Schälchen. Fädenstücke vermitteln die Verbindung zwischen je einem der Schälchen und dem Objecto, so dass die Platte je nach Bedürfniss von dem Tische wegge- nommen werden kann, ohne dass das Beobachtungsobject gestört oder der Flüssigkeitsstrom unterbrochen wird. JDr. L. Dippel. Stephenson, J. W., On a cata-dioptric immersion-illumi- nator (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. U vol. V, 1885, pt. 2 p. 207 ; cfr. pt. 3 p. 523). Da man von Seiten der Londoner Optiker Powell & Lealand die numerische Apertur der Oelimmersion auf 1'50 gesteigert hat, erdachte J. W. Stephenson, von dem Grundsatze ausgehend, dass es bei einer Beleuchtungsvorrichtung mit überschüssiger Oeffhung leichter sei, die für eine bestimmte Objectivöffnung erforderliche Oeffnung des Be- leuchtungskegels zu erlangen, als bei einem solchen, der gerade das biete , was man brauche , einen kata-dioptrischen Beleuchtungsapparat, welcher für einen Objectträger aus Flintglas eine numerische Apertur bis 1-644 für einen solchen aus Crownglas (n = 1-52) bis 1*512 ge- währen kann. Die Vorrichtung, von der Figur 1 eine Ansicht gewährt, besteht aus dem Segmente CDE (Figur 2) einer plan-convexen Crownglas- linse von 2*5 cm Krümmungsradius, 3 cm Durchmesser und 0*5 cm Dicke, welches auf seiner gewölbten äusseren Fläche versilbert ist und eine Länge von 1*4 cm, eine Breite von 1*26 cm besitzt. Dieses Seg- ment ist mit einem rechteckigen Stücke ABEC aus Flintglas mit dem Brechungsindex von 1-652 verkittet, dessen Dicke 0-85 cm beträgt, so dass die mittlere Gesammtdicke der beiden Stücke etwa 1-25 cm er- reicht. Die Bestimmung des Flintglasstückes ist eine zweifache. Zunächst n, 3. Referate und Besprechungen. 367 ermöglicht dasselbe, praktisch nahezu parallele Lichtstrahlen zu ver- wenden und dann sichert es, wie leicht einzusehen, eine in erster Linie in Betracht kommende grössere Oeffnung. Wie aus der Betrachtung der Figur 2 hervorgeht, werden Licht- strahlen, welche in horizontaler Richtung in das Flintglasstück ein treten, an der versilberten Fläche des Segmentes CDE zurückge- ::-v-Jd 2. werfen, und man erhält dadurch Oeffnungen, welche sich in Flintglas von 0'77 bis 1*644 n. Ap. in Crownglas bis zu 1'512 n. Ap. er- strecken. Um kleinere Oeffnungen nutzbar zu machen, wird die ebene Fläche B E des unteren Theiles von ABEC verwendet. Dieselbe erhält zu dem Ende das Segment F (etwas mehr als die Hälfte) einer plancon- vexen Crownglaslinse von etwa 0*64 cm Radius und mit dem Focus in Crownglas etwa 1 mm über der oberen Planfläche des Flintglasstückes und somit an der Oberfläche eines 1 mm dicken Objectträgers. Damit ferner die Lichtstrahlen mittels des Spiegels von unten her (nicht von der Seite) in den Apparat geworfen werden können, wird der freien senkrechten Fläche A B gegenüber und mit einer seiner Katheten parallel zu ihr ein rechtwinkliges Prisma G angebracht. Zur Regulirung der Oeffnung der Beleuchtungskegel sind zwei Reihen von Diaphragmen vorhanden. Die einen für die grösseren nume- rischen Aperturen befinden sich auf einer senkrecht in dem Zwischen- 368 Referate imd Besprechungen. II, 3. räume zwischen AB EG und G angebrachten (in Figur 1 an der Seite der Prismenfassung sichtbaren) Drehscheibe, die anderen für die klei- neren numerischen Aperturen auf einer horizontalen, verschiebbaren (in der Figur 1 links sichtbaren) Platte unterhalb des Segmentes F. Bei der Construction des Apparates sind zwei wichtige Bedingun- gen der Wirkungsfähigkeit wohl beachtet. Zunächst ist für eine möglichst grosse Berührungsfläche zwischen dem optischen Theile desselben und dem Objectträger Sorge getragen. Dann ist der Einfluss, welchen die Dicke des Objectträgers und der Radius der Linse auf die Oeffnung der Beleuchtungskegel äussern, möglichst eingeschränkt. So z. B. schwankt die numerische Apertur bei einer Linse von etwa 7"5 mm Radius und bei Objectträgern von 0'75 bis 1"5 mm Dicke für Flintglas von 1*644 zu 1*620, in Crownglas von 1*512 zu 1*49. Um Objectträger aus Crownglas mit dem Beleuchtuugsapparat zu verbinden, genügt die Immersionsflüssigkeit, welche für das Objectiv benützt wird; für solche aus Flintglas muss dagegen eine Flüssigkeit mit höherem Brechungsindex verwendet werden, s. z. B. reines Cassiaöl für eine numerische Apertur von 1*62, Monobrom -Naphthalin — oder ein ähnliches Medium — für solche von 1*644. Letztere Art von Objectträgern müsste natürlich, da sie zur Zeit keine Handelsartikel bilden, eigens hergestellt werden. Dies würde sich in der Art vollbringen lassen, dass dünne geschnittene und polirte Flintglasplättchen [mittels Schellacks in entsprechenden kreisrunden Oeff'nungen von Objectträgern aus Hartgummi oder Ebenholz] einge- kittet würden. Dr. L. Dippel Diaphragms for Beck's vertical Illuminator (Journ. R. Mi- crosc. Soc. Ser. H vol. V, 1885, pt. 3 p. 522). Da der „Vertical-IUumiuator" auch bei uns hier und da in Gebrauch ist, so mag es für manche Leser nicht ohne Interesse sein, eine neuerdings von den Gebrü- dern Beck in London an demselben angebrachte Verbesserung kennen zu lernen. Genannte Opti- ker versehen nämlich ihren auch in meinem Handbuche der allgemeinen Mikroskopie p. 604 beschriebenen Vertical - Illuminator mit einem vor der Oeffnung befindlichen Diaphragma (s. Figur). Letzteres enthält zwei Oeflfnungeu, von denen die eine schmälere kreisrund ist, die andere die Form eines breiten Halbmondes besitzt und es damit möglich macht, mittels II, 3. Referate und Besprechungen. 369 ihrer Bewegung vor der Seitenöffnuug dem Beleuchtungskegel verschie- dene Formen und verschiedenen Umfang zu geben. Dr, L, Dippel. Rings for throwing the coarse adjustment out of gear. — (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 3 p. 525). Um bei Demonstrationen solcher Objecte, welche die Anwendung starker Objective verlangen , einen unachtsamen Gebrauch der groben Einstellung zu vermeiden, sind von den engli- schen Optikern Vorrichtungen ersonnen worden, welche dieselbe ausser Thätigkeit setzen. R. & J. Beck liefern zu diesem Zwecke die neben- stehend abgebildeten (Figur 1) Ringe. Der eine , schmälere , aufgeschnittene besitzt ein äusseres Schraubengewinde und wird über den geränderten Schraubenkopf geschoben , der andere, breitere hat ein inneres (Mutter-) Ge- j^ winde, welches in dasjenige des ersteren ein- greift. Dieser letztere Ring ist an der äusseren Seite mit einem Kranze versehen, welcher mit dem inneren Umfange des ersten Ringes eine Rinne bildet, die etwas weiter ist als der Schraubenkopf. Hierdurch wird verhindert, dass der ganze Ring sich seitwärts verschieben lässt, während er zugleich lose über den Schraubenkopf passt. Wird nun die grobe Einstellung unachtsam zu bewegen versucht, so bewegt sich der Ring frei, ohne auf den Schraubenkopf zu wirken, und das Object ist vor Beschädigung oder Zerstörung gesichert. Zwei ähnliche Vorrichtungen (Figur 2 und 3) werden seit einigen Jahren von Powell & Lealand angefertigt. Die eine unterscheidet sich von der beschriebenen nur dadurch, dass der aufgeschnittene Ring eine stärkere Wand besitzt, welche dem bei der ersten Form unvermeid- Zeitscbr. f. wiss, Mikroskopie. II, 3. 24 370 Referate und Besprechungen. II, 3. liehen Federn entgegenwirkt (Figur 2). Die andere einfachere und ältere (Figur 3) besteht aus einem breiten Ring mit zwei nach innen vor- springenden kurzen Stiften und einer durch die Ringwand gehenden Schraube. Wird die letztere zurückgedreht, so kann der Ring über den Schraubenknopf gezogen werden, wird sie angezogen, so lässt sich jener nicht seitlich abziehen, dreht sich aber in gleicher Weise, wie oben angegeben. Dr. L. Dippel. Mo ist Chamber (Journ. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 3 p. 526 ; entnommen aus: Bower and VI^'Es's Course of Practical Instruction of Botany). Unter obigem Titel wird über die längst von Steasbukgee, (Stras- BUEaER: Befruchtung und Zelltheihmg, Jena 1878) bekannt gegebene einfache feuchte Kammer aus ungeleimtem Pappdeckel oder Carton be- richtet und dadurch dem Missverständnisse Vorschub geleistet, als seien Bower und Vines die Erfinder dieses zwar einfachen aber höchst zweck- mässigen Hilfsapparates. Dr. L. Dippel. 3. Fräparatiousmethoden im Allgemeinen. Stein, St. von, Einfache Vorrichtung für das Mikrotom zur Einbettung der Präparate. (Centralbl. f. d. med. Wiss. 1884, No. 7, p. 100). Verf. empfiehlt an Stelle der Klemmvorrichtung am Mikrotom ein aus zwei Blechringen bestehendes, oben oftenes Metallkästchen. Der untere, mit Boden versehene Ring ist 10 mm hoch; auf ihn wird der obere (30 mm hoch) aufgeschoben. Am Boden ragen drei 4 mm hohe Schrauben in das Kästchen hinein zum besseren Anhaften der Einbettungs- masse. Beim Gebrauche wird der obere Ring eingeölt, die Einbettungs- masse* bis zum Bedecken der Schrauben eingegossen, dann das Präpa- rat eingelegt und zur Genüge mit Masse Übergossen. Nach dem Er- kalten derselben wird der obere Ring abgenommen. Das Schneiden ge- schieht am besten unter Wasser. Vortheile der besonders für Präparate des Nervensystems empfohlenen Methode 1) das Object erleidet keinen Druck ohne dass man grosse Messer anzuwenden braucht, 2) das Messer erhält sich lange scharf. Bezugsquelle : Schiller & Raumow in Moskau. Flesch (Bern). ») Verf. empfiehlt 1 Th. Gel und 2 Th. Wachs. II, 3. Referate und Besprechungen. 371 Leboucq, H., Un mot sur la technique des coupes en s6ries. (Ann. de la Soc. de Med. de Gand 1884). Während bei den sonst vorzügliclien von Schällibaum * und von GiESBEECHT ^ erfundenen Methoden zum Festkleben von Schnittserieu auf dem Objeetträger es lästig ist, dass die Objectträger nach dem Auf- legen der Schnitte solange erwärmt werden müssen, bis das den Kleb- stoff gelöst haltende Nelkenöl verdunstet ist, hat Leboucq diese beiden Methoden in einer Weise combinirt , dass sofort zum Entfernen des Paraffins und zum Einschliesseu in Balsam geschritten werden kann. — Verf. giebt folgenden Weg au: Der schwach erwärmte Objectträger wird mit Hülfe eines Glasstabes mit einer dünnen Schicht der Gies- BBECHT'schen Schellacklösung, alsdann mit einer zweiten Schiebt der ScHÄLLiBAUM'schen Mischung überzogen. Letztere wird bei sehr kleinen Objecten besser sehr zart, bei grösseren dicker aufgetragen. Alsdann erwärmt Verf. eine Glasscheibe, legt den Objectträger darauf und bringt so das Paraffin zum Schmelzen. Noch während dasselbe flüssig ist, wird es durch üebergiessen mit Terpentinöl oder Benzin entfernt, ohne dass eine Verschiebung der Schnitte zu fürchten sei. Dr. H. HenJcing (Göüingen). Selenka, E., Zur Paraffin einbettung (Zool. Anz. Bd. VIII, 1885, Nr. 199, p. 419). Selenka giebt einen recht einfachen Apparat an, durch welchen ermöglicht wird, kleinen Objecten bei der Einbettung in Paraffin eine bestimmte Lage zu geben. Derselbe besteht aus einer Glasröhre, in deren Wand sich an einer Stelle eine muldenartige Einsenkung befindet. Sie wird ohne Mühe dadurch hervorgerufen, dass man an circumscripter Stelle vor dem Gebläse die Röhre erweicht und durch Verdünnung der Luft innerhalb der Röhre die erweichte Partie nach Innen sich ein- senken lässt (von jedem Glasbläser leicht darstellbar). Beim Gebrauche ») Schällibaum, diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 115. -) GriESBRECHT, W. , Metliode zur Anfertigung von Serien-Präparaten (Mitth. a. d. Zool. Stat. Neapel Bd. III, 1882, p. 184—186). Verf. überzieht die eine Seite eines vorher schwach erwärmten Objectträgers mit einer gut filtrirten Lösimg von weissem Schellack in absolutem Alkohol, indem er einen Glasstab hineintaucht und damit über die Fläche des Objectträgers hinfährt. — Vor dem Gebrauche überstreicht man denselben alsdann mit einer dünnen gleichmässigen Schicht von Nelkenöl unter gelindem Erwärmen. Die trockenen Schnitte werden darauf gelegt imd das Ganze auf einem bis zu 55" C ange- heizten Wasserbade solange erwärmt, als der Geruch nach Nelkenöl anhält, üebergiessen mit Terpentinöl, Canadabalsam. 24* 372 Referate und Besprechungen. 11, 3. wird die Glasröhre durch Einleitung von heissem Wasser auf die Tem- peratur des schmelzenden Paraffins erwärmt; sodann wird in die napf- artige Vertiefung flüssiges Paraffin gebracht und das Object in dasselbe gelegt. Die Lage desselben wird mit der Lupe beobachtet; sobald es die gewünschte Stellung angenommen hat, wird das Paraffin durch Ein- leiten von kaltem Wasser in die Röhre rasch erhärtet. Das Wechseln des heissen und kalten Wassers ist in sehr einfacher Weise ermöglicht, wenn man an das eine Ende des Einbettungsrohres einen vermittels eines T-Stückes sich theilenden Schlauch angebracht hat, dessen eines Ende mit einem Gefäss mit kaltem Wasser, das andere mit warmem Wasser (am besten mit dem Wasser-Behälter des Wärme- ofens) in Verbindung steht. Die Schlauchschenkel müssen durch Quetsch- hähne abschliessbar sein. Das andere Ende des Einbettungsrohres ist mit einem Schlauch armirt, der das Wasser in ein am Boden stehendes Becken abfliessen lässt. — Der Hauptvortheil des Apparates besteht darin, dass man im Stande ist, die Lage des Objectes bei der Einbettung unter der Lupe zu coutroliren. Dr. Oppenheimer (Bern). Yirchow, H., lieber die Einwirkung des Lichtes aufGe- mischevon chromsauren Salzen (r es p. Chromsäure), Alkohol und extrahirten organischen Substanzen. Technische Mittheilung. (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIV, 1885, p. 117—119). Krause, W., Referat über die vorstehende Arbeit (Jahresb. üb. d. Leistungen u. Fortschr. d. ges. Med. v. Vikchow u. HiEscH, 1884, I, p. 41). Es ist eine bekannte Erfahrung, dass Chromsäure-Präparate, welche ohne genügendes Auswässern der Nachbehandlung mit Alkohol unter- zogen waren, wie es scheint wegen der Imprägnation mit einem äusserst feinen Niederschlag von Chromoxyd, gewisse Färbungen ausserordent- lich schwer annehmen. Hans Virchow zeigt nunmehr in dem vorliegen- den Aufsatze, dass man auch ohne vorheriges Auswässern die Präparate der Alkohol-Behandlung aussetzen kann, wenn man nur Sorge trägt, dass dieselben vor dem Licht geschützt bleiben. Der Alkohol färbt sich gelb während der Härtung des Präparates ; die gelbe Flüssigkeit bleibt klar, bis sie dem Lichte ausgesetzt wird; dann entsteht ein Niederschlag, der abfiltrirt werden kann ; wiederholt man die Exposition des Alkohols und das Filtriren mehrmals, so bleibt der Alkohol wieder klar, und kann, soweit die Vermehrung des Wassergehaltes nicht stört, neu verwendet werden. (Auf Ansuchen des Ref. war Prof. v. Nencki in Bern so freund- lich, eine Analyse der Flüssigkeit — an circa 10 Liter — vorzunehmen, n, 3. Referate und Besprechungen. 373 welche neben unbestimmbaren Spuren von gelösten organischen Sub- stanzen Fett und Chromsäure als im Alkohol gelöst nachwies). Man spart bei dieser Behandlung der Objecte die Zeit, welche man gewöhn- lich auf das Auswässern verwendet; dieselbe ist eine sehr erhebliche, wenn es sich um Objecte handelt, die, wie unvermeidlich bei Nerven- präparaten, lange der Chromsäure ausgesetzt waren. Es kommt hierbei ausserdem gerade in Gehirnpräparaten leicht zur Bildung von Rissen und Spalten in dem Gewebe, welche nach Erfahrung des Referenten bei Vermeidung des Auswässerns ausbleiben. Bis jetzt hat Ref. nie eine Tinction der Objecte versagen sehen. Die Dunkel-Behandlung der Präparate in der von Viechow em- pfohlenen Weise ist eine werthvolle Bereicherung der Technik. Vik- CHow gelangte zu dieser Empfehlung durch Versuche, welche von der Erinnerung au die Bildung vou Niederschlägen bei der Verwendung chromsaurer Salze zu photographischen Reproductionen ausgingen. Mit Recht betont V. am Schlüsse des kleinen Aufsatzes, dass „wenn wirk- lich die Erhärtungs- und Färbetechnik in Chemie verwandelt werden soll", „auch physikalische Vorgänge, zumal wo es sich um so hand- greifliche und exact defiuirbare Effecte handelt, nicht unbeachtet bleiben" dürfen. Ref. hat seit Anfang October 1884, nachdem Herr Dr. VrRCHovsr in der anatomischen Section der Magdeburger Naturforscher- Versamm- lung seine Versuche gelegentlich in der Discussion mitgetheilt hatte, das Verfahren in ausgiebiger Weise angewendet, und kann dasselbe aufs Wärmste empfehlen. Dagegen möchte Ref. sich gegen die Auffas- sung Kkause's wenden, welcher, indem er von der ersten Hälfte des hier abgedruckten Schlusssatzes der ViKCHow'schen Arbeit ausgeht, glaubt, dass von diesem Vordersatze „vielleicht später eine neue Aerader mikrochemischen Technik zu datiren sein wird". Man könnte nach K. sehr zufrieden sein, wenn man nur soviel in der chemischen Erkeuntniss der Färbetechnik vorgeschritten wäre, dass man z. B. mit Sicherheit sagen könnte: mit Saffranin färbt sich in den karyokinetischen Figuren eine chemische Substanz, die mit einem bestimmten chemischen Körper, dem Nuclein, identisch ist. Dabei käme es vorläufig gar nicht darauf an, zu wissen, warum sich das Nuclein, welches selbst allerdings ein chemisches Gemenge ist, färbt. Aber sogar diese bescheidene Forderung ist vorläufig fast immer unerfüllbar, und den ersten Versuch zur chemischen Analysirung der Härtungsvor- gänge gemacht zu haben, ist das grosse Verdienst von Hans Viechow. Die ViECHOw'sche Härtungsmethode ist ganz sicher namentlich desshalb besonders hochzustellen, weil sie nicht das Product blinden 374 Referate und Besprechungen. ü, 3. Tasteus, sondern physikalisch begründeter Reflexion ist. Gewiss aber wird H. ViECHOW mit Ref. darin übereinstimmen, dass denn doch wohl die Mehrzahl Derer, welche sich neuerdings mit Färbemethoden abgeben, die KKAusE'schen Sätze als selbstverständlich ihren Bestrebungen zu Grunde gelegt haben. Durch gewisse mikrochemische Reactionen (z. B. Amyloid-Reaction , Glycogen-Reaction) ist die sich färbende Substanz unter Umständen auch mit ausreichender Sicherheit bekannt. Bei der Färbung der amyloid-entarteten Gewebe-Bestandtheile mit Anilinfarben (Kyber Anilin -Violett ; Kurschmaicn Methylgrün) ist das KRAusE'sche Postulat demnach erfüllt. In den meisten Fällen beruht ferner die Tinction, welche wir verwerthen, wahrscheinlich gar nicht auf dem Entstehen chemischer Bindungen, sondern haftet der Farbstoif nur auf rein mechanischem Wege an gewissen Substanzen ; etwa vergleichbar mit der Ausscheidung der Farbstoffe aus Lösungen durch Bildung von Bleiniederschlägen in denselben. Auf chemische Bindungen in den Ge- weben werden wir vorläufig nur da mit Sicherheit schliessen können, wo, wie z. B. bei Tinction mit Lackmus oder Rothkohl die chemische Bindung sich irgendwie sichtbar manifestirt. In vielen Fällen ist das Anhaften des Farbstoffes an gewissen Gewebebestandtheilen gar nicht von letzteren selbst direct abhängig, sondern von deren Imprägnation mit unseren Härtungsmitteln. Die vom Ref. vorgeschlagene Modification der WEiGERx'schen Hämatoxylin-Färbung des Nerveu-Systemes (diese Zeit- schr. Bd. I, 1884, p. 564) kam nach mehreren Fehlversuchen so zu Stande, dass (gemeinsam mit Stud. med. Ebeling) im Reagenzglase Versuche angestellt wurden mit Flüssigkeiten, welche mit Weigert's Hämatoxylinlösung Niederschläge erzeugten. Nachdem wir solche er- mittelt hatten (soweit ich mich erinnere u. a. neben Chromsäure auch Pikrinsäure) wurde versucht, ob etwa ein festeres Anhaften einer dieser Flüssigkeiten an den Hüllen der Nervenfasern als an der Neuroglia u. s. f. stattfinde ; es musste sich dies darin manifestiren, dass eventuell das Hämatoxylin sich reichlicher in jenen Hüllen niederschlug, i. e. diese intensiver gefärbt werden. Weigert selbst bereitet in seiner neuesten Modification die Nerven durch Imprägnation mit Kupferlösuugen vor (Weigert's Aufsatz ist Ref. momentan nicht zugänglich, so dass Ref. die genaue Begründung hier nicht wiedergeben kann). Statt der organischen Farben sind es hier unorganische Substanzen, deren festeres Haften in gewissen Gewebe-Elementen der mikroskopischen Reaction zu Grunde liegt. Wir glauben, dass Herr Dr. Virchow selbst uns gegen Krause beistimmen wird, wenn wir die Aera der mikrochemischen Un- tersuchungsmethoden, welche letzterer mit dem referirten Aufsatze an- II, 3. Referate und Besprechungen. 375 brechen sieht, bedeutend weiter rückwärts datiren; wenn wir vor allem Forschern wie Ehelich und Weigert das ihnen gebührende Verdienst zuerkennen, dass sie seit langem den Härtungs- und Färbungs- Vorgängen auf chemischem Wege näher getreten sind, auf demselben Wege also, der von einer anderen Seite aus in der ViRCHow'schen Dunkelbehand- luug einen wesentlichen und schönen Fortschritt der Technik erzielt hat. Flesch {Bern). Audeer, J., Das Resorcinderivat Phloroglucin. (Centralbl. f. d. med. Wiss., No. 12, 33, pp. 193, 579). I. Das Trioxyhydrobenzol Phloroglucin zeigt gegenüber dem Re- sorcin im wesentlichen gerade die entgegengesetzten Eigenschaften. Es schützt Blut und andere Gewebssäfte vor Gerinnung und erhält sie re- lativ lange flüssig und imzersetzt. Verf. empfiehlt es als gerinnungs- hemmendes Mittel imd als desodorirendes Mittel bei gewissen Gährungen. Als Antisepticum oder gar Autimycoticum ist es völlig unbrauchbar, da sich alle Lösungen in einiger Zeit mit auffallend üppiger Schimmelwu- cherung bedecken. In erster Linie könnte sonach das Phloroglucin seiner gerinnungshemmenden Eigenschaften wegen im Laboratorium nützlich sein. IL Phloroglucin mit Salzsäure gemischt vermag binnen wenigen Stunden Knochen in eine weiche, schuittfähige Masse umzuwandeln, die unter dem Mikroskop die schönsten Zellenanordnungen und -Formationen zeigt. Die Methode ermöglicht, mit dem grossen GuDDEN-KATscn'schen Mikrotom ganze Skelete und Skelettheile mit Ueberzug und Inhalt ab- zutragen und durch ihre schnelle Wirkung unmittelbar nach Operationen Präparate anzufertigen. Elastin und Keratin vermag sie nicht schnitt- fähig zu machen. Der Zusatz von Salzsäure zu der gesättigten wässe- rigen Phloroglucinlösung richtet sich nach der Härte, d. h. dem Phos- phorsäuregehalt der Knochen. Die Salzsäure muss möglichst rein, aber nicht rauchend sein. Für Knochen von Batrachiern empfiehlt Verf. 5 bis 10 Procent, von Cheloniern und Vögeln 10 bis 20 Procent, von Säugethieren 20 bis 40 Procent Salzsäurezusatz. Auch kann man die Erweichung gewöhnlicher Säugethierknochen durch nachträgliche Stei- gerung des Salzsäuregehaltes beschleunigen, bis man durch Palpation die richtige Consistenz für den Mikrotomschnitt ermittelt hat. Die Prä- parate müssen sofort nach der Erweichung bis zur vollständigen Ent- säuerung ausgewässert werden und können dann den gewöhnlichen Erhär- tungsmethoden übergeben werden, lieber die histologische Beschaffenheit der mit den Knochen zusammenhängenden Weichgebilde nach der Prä- paration äussert sich Verf. nicht. Einen Vortheil vor den bekannten Ent- kalkungsmethoden würde die Verwendung des Phloroglucin nur dann 376 Referate und Besprechungen. ü, 3. haben, wenn die schnelle Entkalkung ohne die Zerstörung der dem Knochen anhaftenden Gewebselemente möglich wäre. Auffällig genug wäre dies aber bei der hohen Concentration der anzuwendenden Salz- säurelösung, da ja noch Andeer selbst das Phloroglucin nicht die ge- ringste eiweissgerinnende Eigenschaft besitzen soll. Flescli {Bern). Pisenti, Di una modificazione alla formula del carminio alluminoso. [Ueber eine Modification zur Dar- stellungsweise des Alauncarmius], (Gazzetta degli ospitali. 1885, no. 24). Verf. empfiehlt die folgende Modification zur Darstellung des zu- erst von Geenachee eingeführten Alauncarmius. In 100 cc einer h ei ss gesättigten wässerigen Alaunlösung (100 Th. kochendes Wasser lösen 133 Th. krystallisirten Alaun. Ref.) werden einige Minuten lang 1*5 bis 2 g Carmin kochen gelassen, sodann giebt man 2 g schwefligsaures Natron zu, dieses löst den kleinen Carminrest, welchen die Alaunlösung imgelöst gelassen hatte. Man lässt nochmals fünf Minuten lang kochen und filtrirt heiss. Mau lässt erkalten, und da sich während des Abkühlens eine beträchtliche Menge von Alaunkrystallen absetzt, so ist es gut, dass die Lösung decantirt und in einer anderen Flasche auf- bewahrt wird. Nach dem Verf. färbt dieser Carmin mikroskopische Schnitte in wenigen Minuten, und die Kerne heben sich gegen das zart gefärbte Protoplasma vortrefflich ab. Er kann auch sehr zweckmässig zu Massen- tinctionen von Präparaten für Paraffineinschluss dienen. Mau dürfte mit dieser Methode auch jenes Zerreissen der mit Boraxcarmin tingirten Präparate vermeiden, welches nach Verf. in der Einwirkung des Natrium- borats seinen Grund haben soll. (Sollte es nicht vielmehr dm-ch den Paraffineinschluss bedingt sein? Ref.). Gewöhnlich lässt sich eine Massentinction im Zeitraum von 12 bis 24 Stunden erhalten, jedoch können die Grösse des Präparates und sein histologischer Bau diese Grenzen beträchtlich modificiren. Der in Frage stehende Carmin soll auch den Vortheil haben, sich lange zu halten ohne zu schimmeln, wegen des schwefligsauren Natrons, welches er enthält. 6r. Martinotti (Torino). Arcaiigeli, 0., Sopra alcune dissoluzionicarminiche desti- stinate alla coloritura degli elementi istologici. [Ueber einige Carminlösungen für die Färbung der Gewebselemente] (Processi verb. della Soc, Toscana di scienze nat. Giugno 1885 p. 233—236). II, 3. Referate und Besi)rechungen. 377 Da die verschiedenen in Vorschlag gebrachten Carminlösungen sich bezüglich ihrer Wirkung wie ihrer Wirkungsdauer sehr ungleich ver- halten, will Verf. hier einige von ihm neuerlich hergestellte bekannt macheu. 1. Boraxcarmiu nach Stkasbukgek. Dieses modificirt Verf., indem er an Stelle des Borax Borsäure setzt. Aq. dest 100 g- Acid. bor 4 „ Carmin 0'5 „ werden zusammengegeben, ca. 10 Minuten lang gekocht, etwas er- kalten gelassen, noch warm filtrirt. Es resultirt eine blutrothe Flüssig- keit, die beim Erkalten einen fast gelatinösen Charakter annimmt, beim Schütteln aber wieder flüssig wird. Unter dem Mikroskop ist das Ge- misch zusammengesetzt aus einem wenig gefärbten flüssigen Theil, in dem kugelige rothe Partikelchen vertheilt sind. Die Flüssigkeit besitzt eine bedeutende Tinctionsenergie, Gewebsstücke färben sich sehr schnell in hochrother Farbe, der der Eosintinction nicht unähnlich. Zellkerne (Epidermis von Urginea Scilla, Embryosack von Lilium candidum) färben sich in einigen Stunden, nach 24 Stunden haben sie das Tinc- tionsmaximum erreicht. Auch thierische Elemente färben sich gut. Man kann der Flüssigkeit auch einige Tropfen Glycerin zusetzen, dieses begünstigt aber Schimmelbildung. Wiederholtes Auswaschen mit Wasser verträgt das Tinctiousmittel nicht, man soll Wasser nicht mehr als drei- mal anwenden, sondern in der Folge Alkohol, welcher das Färbemittel fixirt, 2. Alauncarmin mit Borsäure. Die Vorschrift füi' die Her- stellung desselben ist die folgende: Solutio aluminis conc 100 cc Acid bor 2 g. Carmin 0'25 „ Man lässt 10 Minuten lang kochen und erhält eine bei durch- fallendem Lichte violettrothe Flüssigkeit. Für pflanzliche und thierische Gewebe, auch für Zellkerne. Zumal die mit Alkohol diu'chtränkten Ge- webe färben sich schnell, langsamer die wasserhaltigen. 3. Alauncarmin mit Salicylsäure. Derselbe stellt nur eine Modification des vorigen vor, indem die Borsäure durch Salicylsäure ersetzt ist: Sol. alum. conc 100 g. Acid. salicyl 0-25 „ Carmin 0-25 „ 378 Referate und Besprecliungen. II; 3. Wird wie voriges gleichfalls 10 Minuten lang gekocht, Färbung bei durchfallendem Lichte etwas mehr ins Rothe spielend als voriges. Tinctiousvermögen ähnlich dem des vorigen, Farbenton ein wenig leb- hafter. Beide Lösungen haben sich seit Monatsfrist unverändert und ohne Schimmelbildung erhalten. 4. Salicylsäurecarmiu. Ist dem sub. 1 genannten ähnlich, enthält keinen Alaun: Aq. dest 100 g. Aeid. sallcyl 025 „ Carmin 025 „ Man kocht 10 Minuten lang und filtrirt. Soll ein sehr gutes Tinc- tionsmittel sein, auch für Zellkerne. 5. Pikrin säur ecar min. Unterscheidet sich von dem bekannten sog. Pikrocarmin durch das Fehlen des Ammoniaks. Acid. picr. sei. conc 50 cc Carmin . . . .' 0-25 g. werden 10 Minuten kochen gelassen, kalt filtrirt. Die resultirende Flüssigkeit ist dem Pikrocarmin sehr ähnlich. Tinctionszeit 4 bis 8 Stunden. Für thierische Gewebe, für pflanzliche dagegen nicht zu empfehlen. Behrens. 4» Präparationsmethoden für specielle Zwecke. A, Protozoen, Coelenteratefi, EcJiinodernieu. Bütschli, 0., Kleine Beiträge zur Kenntniss einiger ma- riner Rhizopoden. (Morphol. Jahrb., Bd. XI, H. 1, 1885, p. 78 bis 101. 2 Tflu.). Die Schaale der frisch gesammelten Formen wird in einem Gemisch von verdünnter Salpetersäure und Alkohol aufgelöst, dann die Thiere vorsichtig mit ammoniakalischem Carmin gefärbt. Canadabalsam. Zur Entfernung des gelb- bis rothbraunen Pigmentes oder Fettes diente sehr lauge Behaudluug mit absolutem Alkohol oder uoch besser mit Nelkenöl. Die Entfärbung und Kernfarbuug gelingt nicht, wenn das nach der Ent- kalkung zurückbleibende Schaalenhäutchen sehr dick ist. — Zur Ent- färbung des braunen Plasmas von in Alkohol conservirten Formen em- pfiehlt Verf. sehr Chlorwasser. Danach Färbemittel: Alauncarmin, Hä- matoxylin (besonders werthvoU), Safranin. — Sehr gut ist, erst zu schneiden und dann zu färben. Dr. IL Henliinq {Göttingen). n, 3. Referate und Besprechungen. 379 Carriere, J., Die Sehorgane derTbiere, vergleichend-ana- tomisch dargestellt. (München u. Leipzig 1885. 205 pp. 80. 147 Abb., 1 Tfl. 9 Mk.). Vorliegende Abhandlung, welche die Sehorgane durch alle Thier- klassen hindurch verfolgt und eine Darstellung derselben auf Grund ei. gener Untersuchungen des Verf. giebt, enthält auch einige Angaben in Bezug auf Uutersuchungsmethoden : Zur Entfernung des Pigmentes be- nutzte Verf. die GBENACHEu'sche Mischung, bestehend aus 1 TW. Glycerm 2 „ Alkohol von 80 Procent 2 — S'Yo reiner Salzsäure. Hierin verweilen die frischen oder gehärteten Objecto bis zur Farben- änderung des Pigmentes. Abweichend von dem der übrigen Thiere ver- hält sich das Augeupigment der Echinodermen', welches durch Al- kohol vollkommen ausgezogen wird, während es durch Ueberosmium-, Chrom- und Essigsäure keine Veränderung erleidet. — Um den eigen- thümlichen Typus der Amphipodenaugen zu studiren , empfiehlt Verf. als vorzügliches Objeet Gammarus. Die abgeschnittenen noch lebenden Köpfe derselben übertrug Verf. in Chromessigsäure, Chrom- säure oder Alkohol, oder räucherte sie mit Osmiumsäuredämpfen. Di- rectes Einlegen in Osmiumsäure erwies sich als unbrauchbar, da die Augen so zu hart werden und sich nicht schneiden lassen. Färbung mit Pikrocarmin. Eine Vacuolenbildung tritt in den Retinulazellen bei allen Härtungsmitteln ein, ausgenommen Alkohol. — Den Processus falciformis bei Fischen und Vögeln erhält man nuverletzt durch einen Schnitt, welcher, durch die beiden Augenwinkel gehend, das Auge halbirt. Dr. H. Henhing {G-öttingen). Bütschli, 0.^ Einige Bemerkungen über gewisse Organi- satiousverhältnisse der sogenannten Cilioflagel- laten und der Noctilnca (Morphol. Jahrb. Bd. X H. 4, 1885, p. 529—577, 3 Tflu., 4 Holzschn.). Verf. conservirte die Cilioflagellaten mit Pikrinschwefelsäure und bewahrte sie in Alkohol auf (p. 530). Derselbe führt für die Güte dieser Conservirungsart den Umstand an, dass bei den meisten Formen die Geissein ausgezeichnet erhalten waren. — Gleuodinium cinctum Ehrbg. : Die hintere Geissei war nach Einwirkung von Osmiumsäure- dämpfen gut zu beobachten, sie verschwand bei Einwirkung von Ipro- centiger Chromsäure. In der den Körper umziehenden Querfurche trat bei Osmiumpräparaten ein wellig geschläugelter feiner Faden hervor, 0 Cfr. Hamann, diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 380. 380 Referate und Besprechungen. ü, 3. der von keinem Cilienkranz herrührte, sondern sich nach Anwendung von Iprocentiger Chromsäure mit 0-lprocentiger Osmiumsäure als eine geschlängelte Geissei herausstellte. — Das Thier ist von einer dünnen, dem Körper direct aufliegenden Hülle umgeben, welche Cellulosereaction ergiebt (p. 536). ^ Die Cilioflagellaten haben nach Bütschli echte Stigmen, da diese analog den Augeufleckeu der Flagellaten sowohl mit Jod als auch mit concentrirter Schwefelsäure eine schwarzblaue Färbung annehmen. Dr. H. Henlämj (Göttingen). Fol, H. , Sur la famille des T int inu ödes. (Recueil zoologique Suisse I, 1884, p. 27). Fol gebraucht zur Fixirung der von ihm untersuchten Infusorien, da er mit den gewöhnlichen Mitteln wie Osmiumsäure, Essigsäure, Chromsäure, Pikrinschwefelsäure keine geeigneten Resultate erhielt, ein bis jetzt in der Histologie nicht gebrauchtes Reagenz. Er bringt die lebenden Infusorien in eine Lösung von Ferrum sesquichloratum, sodann werden sie mit Alkohol ausgewaschen und mit Gallussäure behandelt. Er erzielte damit eine braune Färbung, die fast nur auf die Kerne be- schränkt war. Die Infusorien die eine leichte Braunfärbung annehmen, bleiben dabei durchsichtig. Die Structur und die feineu Theile wie Cilien bleiben gut erhalten ohne Schrumpfung. Dr. Opi^enheimer (Bern). Sollas, W. J., On the development of Halisarca lobularis. 0. Schmidt. (Quart. Journ. Microsc. Sei. 2 Ser. vol. XXIV, p. 603). SoLLAs härtet die von ihm untersuchten Spongien in schwachen ■ Chromsäurelösungen, welchen etwas Osmiumsäure zugesetzt ist. Weitere Behandlung : Absoluter Alkohol, Nelkenöl, Paraffin. Färbung mit Eosin, dann Hämatoxylin, am besten an den auf den Objectträger mit Gutta- percha (Thkelfall) aufgeklebten Schnitten. FlcscJi (Bern).- Hamanil, 0., Beiträge zur Histologie der Echinodermen- H. 2. Die Asteriden. (126 pp. 7 Tflu., 3 Holzschn. Jena 1885. 9 Mk.). um einerseits eine gute Conserviruug der Seesterne zu erzielen, anderseits die Organe derselben in nicht contrahirtem Zustande zu er- halten, schlug Verf. den Weg ein, dass er die Leibeshöhle der Thiere mit Hülfe einer Einstichcanüle von einem Armende aus mit Iprocen- tiger Chromsäure langsam injicirte. Er bewirkte auf die Weise, dass der Seestern sich mit der Couservirungsflüssigkeit prall anfüllte und dass Füsschen und Kiemenbläschen sich weit ausdehnten. Fürchtet man, innere Organe in ihrer Lagerung zu stören, so empfiehlt Verf. , ein an- deres Armende ganz kurz abzuschneiden und so der Flüssigkeit einen n, 3. Referate und Besprechungen. 381 Ausweg zu eröffnen. Die injicirteu Tbiere werden alsdann in ein Gefass mit der gleichen Conservirungsflüssigkeit gelegt, damit letztere von allen Seiten einwirken kann. — Zum Injiciren benutzte Verf. mit bestem Er- folge Iprocentige Chromsäure, der einige Tropfen 1 procentiger Osmium- säure zugefügt werden können, mit gutem Erfolge auch Kleinenbeeg's Pikrinschwefelsäure. Diese Säuren sind auch deswegen vortheilhaft, weil sie die Seesterne gleichzeitig langsam entkalken und verdienen daher schon aus diesem Grunde den Vorzug vor Sublimat. — Bei An- wendung von kochendem Wasser erhält man zwar auch die Füsscheu und Rückenkiemen im ausgestreckten Zustande ; aber die Conservirungs- flüssigkeiten dringen nur langsam und ungleichmässig in das Körper- innere ein, — Zum Färben benutzte Verf. Ranvier's Pikrocarmin (aus Rai^vier's Laboratorium bezogen, nach H. viel besser als die heimischen Sorten), welches besonders das Nervensystem (Fibrillen) klar darstellte (doch muss die Chromsäure durch Auswaschen gut entfernt sein), ferner neutrales essigsaures Carmin *, BöHMER'sches Hämatoxylin sowie Ehelich's essigsauresHämatoxylin, dem Eosin im foIgendenVerhältnisse zugesetzt war; 100 CG Ehelich's Hämatoxylin 15 cc Iprocentige wässerige Eosinlösung. Zur Färbung von Macerationspräparaten bewährte sich eine essigsaure Methylgrünlösung. — Um die Augen mit ihrem (durch Alkohol extra- hirbaren^) Pigment auf Schnitten darzustellen, empfiehlt Verf. folgenden Weg : das frei präparirte Augenpolster wird in einem Gemisch von Ipro- centiger Osmiumsäure mit 1 procentiger Essigsäure conservirt und in Gummiglycerin oder einem anderen, die Benutzung von Alkohol nicht erheischendem Einschlussmittel eingebettet und geschnitten. Dr. H. Henhing {Göttingen). Niemiec, J., Recherches morphologiques sur lesventouses dans le rfegne animal. Diss. Geneve 1885. 8". 147 pp. 5 Tfln. Aus dieser Arbeit ist erwähnenswerth, dass Verf. Astericus verru- culatus zum Ausstrecken der Ambulacralfüsschen dadurch brachte, dass er das genannte Thier mit Kohlensäure betäubte. Fixirung mit Chrom- säure (keine Procentangabe). Dr. H. HenJcing (Göttinge})). 0 Cfr. Hamann, diese Zeitschr., Bd. II, H. 1, p. 87. 2) Cfr. Carriere, diese Zeitschr., Bd. H, H. 3, p. 379. 382 Referate und Besprecliungen. II, 3. B. Würmer, Mollusken, ArtJiropoden. LOOS, A., Beiträge zur Keiintuiss der Trematoden. Di- stomumpalliatiim nov. spec, und D. reticulatum nov, spec. (Zeitsehr. f. wiss. Zool. Bd. XLI. H. 3, 1885, p. 390—446, 1 Tfl). Da das Körperpareiicliym der erstgenannten Trematode ein äusserst dichtes Gewebe darstellt, so ergab eine Färbung und Aufhellung des ganzen Thieres keine Resultate. Daher Anwendung der Schnittmethode : Die in Alkohol conservirten Thiere wurden vorher mit Pikrocarmin, Alauncarmin, Boraxcarmin, Hämatoxylin oder Methylviolett gefärbt, in Paraffin geschnitten. — Bemerkenswerth ist, dass die von Stieda, Blumbekg, Taschenbeeg, Sommee, Kekbert, Fischee und Lang als Ganglienzellen beschriebenen „grossen kugeligen Zellen" in der Mus- culatur der Saugnäpfe und des Pharynx von Looss für bindegewebige Elemente gehalten werden. Denn während die genannten Zellen sich mit Pikrocarmin oder Boraxcarmin ganz ähnlich wie Ganglienzellen färben, zeigte sich bei Anwendung von Methylviolett, dass das Zell- protoplasma sich in feine Fädchen auflöst, welche mit den Ausläufern der Bindegewebszellen in Verbindung treten. Verf. legte die conser- virten Objecto bis zu 24 Stunden in 2proceutige Salpetersäure, wusch 2 bis 4 Stunden in fliesseudem Wasser aus, legte beliebig lange in die Färbeflüssigkeit (dargestellt, indem eine genügende Menge Methylviolett etwa 20 Minuten in destillirtem Wasser gekocht wird) und zog mit 96procentigem oder absolutem Alkohol aus. Zur richtigen Zeit mit dem Ausziehen aufzuhören, erfordert einige Aufmerksamkeit. — Zur Unter- suchung der Lagenverhältnisse und der Structur des Nervensystems eignen sich am besten dorsoventrale und Flächenschnitte. Dr. H. HenMng (Göttnigen). Hatscliek, B., Entwicklung der Tro chophora von Eupo- motus uncinatus Phil. [Serpula uncinata]. (Arb. a. d. zool. Inst. d. Univ. Wien u. d. zool. Stat. in Triest T. VI, H. 1, 1885, 28 pp. 5 Tfln.). Untersuchuugsmethode p. 3 bis 4: Künstliche Befruchtung von Eiern mehrerer Weibchen mit Avenig Sperma, indem beides in Seewasser in einem Uhrschälchen gemischt wird. Am besten sind solche Eier, die von den unverletzten Würmern aus den Segmentalporen abgelegt wurden. Entwickelung der Eier in Glasgefässen von 0*1 bis 0*2 Liter Inhalt. Gute Durchlüftung des Seewassers. — Um das Object zu orieu- II, 3. Referate und Besprechungen. 383 tireu, brachte Verf. an den Ecken des Deckglases Wachsfüssclien au. Dann kann Deckglas nnd Object verschoben werden, ohne dass letz- teres gedrückt wird. Br. H. Henhing {Göttingen). Voigt, W. , Ueber Eier- und Samenbildnng bei Branchio- bdella (Arb. a. d. zool. Inst, in Würzburg Bd. VII, H. 3, 1885, p. 300—368, 3 Tfln.). Bei Untersuchung des Samens (p. 306 ff.) von Branchiobdella ver fuhr Verf. in der Weise, dass er genannten Wurm durch Wälzen .auf Fliespapier (mit Hülfe eines Pinsels) von anhaftendem Wasser befreite, das Thier auf einen Objectträger brachte und nun mit zwei spitzen Nadeln das Hodensegment anstach. Zog er dann die Nadelspitzen etwas auseinander, so wurde dadurch die Stichöffnuug erweitert, und die in der Leibesflüssigkeit enthaltenen Samenelemente quollen heraus. Verf. fing den Samen mit einem Deckgiäschen auf und untersuchte ihn mit Hülfe einer feuchten Kammer (Objectträger mit Glasring), welche durch angefeuchtetes Filtrirpapier oder einige Algenfaden feucht gehalten wurde. (Ein Wassertropfen entwickelt zu viel Feuchtigkeit, so dass die Wände der Kammer beschlagen). — Zur Verdünnung des Samens diente HühneVeiweiss , Traubenzucker von 1"050 spec. Gewicht und Vspro- centige Kochsalzlösung. Das abgetrocknete Thier wurde darin wie vorher geöffnet. — Zur Conservirung diente eine nur kurze Zeit wäh- rende Einwirkung von ^Aprocentiger Osmiumsäure. Färbemittel : Pikro- carmin und Grenachee's Alauncarmiu, welche unter dem Deckgläschen etwa eine Minute einwirken durften. Ersetzen dieser Flüssigkeit durch Wasser, dann durch Wasser mit Glycerin (1 : 3). Dr. H. HenMng {Göttingen). Bergh, R. S., Die Metamorphose von Aulastoma gulo (Arb. a. d. zool. Inst, in Würzburg Bd. VII, H. 3, 1885, p. 231 bis 291, 4 Tfln.). Verf. empfiehlt (p. 234) zur Beobachtung der lebenden Larven 1 bis 2procentige Kochsalzlösung, in der sie stundenlang leben bleiben. Für momentane Fixirung der Gewebe in frühen Stadien bewährte sich am besten sehr verdünnte Osmiumsäurelösung, für spätere concentrirte Sublimatlösung. Auch Pikrinschwefelsäure vortheilhaft. Färbungsmittel : Pikrocarmin. Dr. U. Henhing {Göttingen). Lang', A., Die Polykladen des Golfes von Neapel. (Fauna und Flora d. Golfes v. Neapel. Mon. XI, 1884. [Methode p. 30—31]). Die Untersuchung des lebenden Thieres ist nach dem Verf. unent- behrlich zum Studium des Wassergefässsystemes, welches anders nicht 384 Referate und Besprechungen. ü, 3. zur Anschauung gebracht werden kann, nützlich zur Erkennung der horizontalen Anordnung der Organe im Thiere. Zum Tödten wurden Sublimatlösungen ' benutzt, auch Uebergiessen der Thiere mit heissem Alkohol (von Kennel empfohlen) erwies sich als brauchbar. — Für die Untersuchung der Augenstellung, Darmverästelungen u. dergl. waren ungefärbte in Kreosot aufgehellte Thiere am empfehleuswerthesten. — Beste Färbemethode: Conservirte Thiere werden 3 bis 14 Tage in Pikrocarmin gelegt, dann wird mit TOprocentigem Alkohol viel Pikrin ausgezogen, und zum Schluss noch je nach Grösse 1 bis 14 Tage in Geenachek's Boraxcarmin gefärbt. Anwendung von durch Salzsäure angesäuertem Alkohol. (Resultat : Distincte Plasmafärbuug durch Pikro- carmin, distiucte Kernfärbung durch Boraxcarmin, geringe zur Erken- nung der Zellgrenzen sehr brauchbare Maceration durch das Pikro- carmin). — MAYEK'sche Cochenille erwies sich nur für Drüsen brauch- bar, war da aber sehr zweckmässig. Auch Essigearmin und BEALE'scher Carmin bei mehrtägiger Einwirkung waren anwendbar. Ueberfärbung mit nachfolgender Entfärbung ergab die besten Resultate. Dr. H. Henking {Göttingen). RÖSSler, R., Die Bildung der Radula bei den cephalo- phoren Mollusken (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XLI H. 3, 1885, p. 447—482. 2 Tfln., 1 Holzschn.). Verf. legte die lebenden Thiere auf '/a Stunde in massig heisse concentrirte Sublimatlösung, präparirte dann den Schlundkopf heraus und behandelte denselben noch Ya Stunde mit Sublimat. Gründliches ») A. Lang, Ueber Conservation der Planarien (Zool. Anz. Bd. I, 1878. P- 14 — 15). — Verf. gab daselbst folgende Methode an : Unversehi-te Exemplare werden in flachen Schalen auf den Rücken gelegt, dann wird das Wasser mit einer Pipette fortgesogen und der Wurm mit einem Gemisch von Aqua destillata 100 Gewichtsth. Chlornatrium 6 — 10 „ Acid. acet. glac 5—8 „ Quecksilberchlorid 3 — 12 ,, (Alaun '/,, „) Übergossen. Er wird dadurch unter Beibehaltung der natürlichen Form ge- tödtet. Nach eüier halben Stmide wird die Mischung mit einer Pipette fort- gesaugt und 70procentiger, nach 2 Stunden 90procentiger, schliesslich absoluter Alkohol angewendet. Zum Härten genügten 2 Tage. — In seinen „Mittheilungen zur mikroskopischen Technik" (das. Bd. II, 1879, p. 45—46) empfiehlt A. Lang neben obiger Lösung noch a) Concentrirte Lösimg von Quecksilberchlorid in Pikrinschwefelsäure mit 5 bis 0 Procent Acid. acet. b) Concentrirte wässerige Lösung von Quecksilberchlorid. IT. 3. Referate und Besprechungen. 385 Auswaschen mit Wasser, Färbimg mit Pikro- oder Boraxcarmin oder auch mit Hämatoxylin. Schneiden. Nach Rössler dringt das Paraffin beim Einbetten nur sehr schwer zwischen die Zähnchen der Radula, und zerreissen die Schnitte daher meist beim Schneiden. Die besten Resul- tate erhielt Verf., wenn er das Object aus absolutem Alkohol in gelbes Steinkohlenbenzol übertrug, langsam Paraffin zusetzte, zuletzt in der Wärme, und schliesslich in reines Paraffin überführte. Nachher Auf- lösen des Paraffin ebenfalls mit gelbem Benzol. Anwendung von Terpentinöl ist zu verwerfen, da die Radula dadurch sehr spröde wird. Dr. H. HenJäng {Göttingen). Haller, B., Beiträge zur Kenntniss der Niere der Proso- branchier (Morpliol. Jahrb. Bd. XI, H. 1, 1885, p. 1—53, 4 Tfln., 2 Holzschu.). Zur Präparation der (rechten) Niere von Fissurella empfiehlt Verf. (p. 4) solche Thiere zu verwenden, welche in nicht zu schwachem Alkohol getödtet sind und einige Tage darin gelegen haben. Bei frischen Thieren lässt sich die Schale nur schwer abheben, und aus dem leicht verletzten Eingeweidesacke quellen alsdann die Eingeweide stark vor. — Nachdem der Eingeweidesack hinter dem Herzbeutel vorsichtig abge- löst ist, wird letzterer von oben geöffnet, der Enddarm an der Ein- und Austrittsstelle am Herzen durchschnitten, das Herz mit den Vorhöfen entfernt und die die Niere von oben deckende Herzbeutelbasis mit etwas Essigsäure aufgehellt. Dr. H. Henking {GöÜingcn). C, Vertehraten, Ticliomiroff, A., Chemische Studien über die Entwicklung der Insecteneier. (Zeitschr. f. physiol. Chemie. Strass- burg 1885, Bd. IX, H. 4/5, p. 518 bis 532). Verf. untersuchte sowohl das Chorion, sowie den Eiinhalt der un. entwickelten Eier von Bombyx mori. Gewicht von 100 überwinternden Eiern 0-0512 — 0-0691 g Wassergehalt derselben 65-82 « o — 64-40 %. Analyse des Chorions : Eier werden mit wenig schwacher Salzsäure (1 : 1000) zerrieben, dann 2 Stunden in grösserer Menge dieser Flüssigkeit auf dem Wasserbade erhitzt. Abgiesseu der Flüssigkeit, Rückstand wird mehrere Stunden in wirksamer Pepsinlösung im Brütofen digerirt, alsdann wieder- holt mit schwacher Salzsäurelösung zerrieben, mehrmals mit 96procen- tigem Alkohol ausgekocht, dann mit Aether und noch mit einem Gemisch von Alkohol und Aether ausgewaschen (Resultat: Dotter ist verschwunden, Schale schwach gelblichweiss und glänzend). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, .3. 25 386 Referate und Besijrechimgen. II, 3. Gewicht der Schale: 8"87 7o des Gesammtgewichts | . 25'97 "/o der Trockensubstanz ( ' ' Die Schale enthält im Mittel: C = 47-27 o/o H = 6-71 „ N == 16-93 „ 0 = 24-72 „ S = 3-67 „ Asche = 0-70 „ Hieraus folgt, dass das Choriou keinCbitin und aucli keine clii- tinartige Substanz ist. — Verf. schlägt den Ausdruck Chorion in vor. Von der Schale des Schlangeneies (abgeschieden vom Leitungsapparat) unterscheidet sich das Chorion von Bombyx (abgeschieden vom Follikel- epithel) durch das Fehlen von Schwefel (S) in ersterer. — Chorionin löst sich leicht in kochender Natron- oder Kalilauge, sich anfangs gelb färbend, ebenfalls fast momentan in kochender concentrirter Salpetersäure, in concentrirter Salzsäure dagegen erst nach 10 bis 15 Minuten, ist auch löslich in kalter Kalilauge. — Die Analyse des Dotters möge in der Ab- handlung selbst nachgesehen werden. Besonders erwähnenswerth ist wohl noch , dass , wie Verf. fand , die Eier während ihrer Entwicklung mehr als 10 Procent ihres Gesammtgewichtes verlieren, und dass die tägliche Gewichtsabnahme der Eier proportional der morphologischen Differenzirung geht. Dr. H. Henking {Göttinyen). Pfitzuer, W., Zur morphologischen Bedeutung des Zell- kernes. (Morphol. Jahrb., Bd. XI, H. 1, 1885, p. 54 bis 77, 1 Tfl). Ruhende Zellen aus dem Hautepithel der Salamanderlarve zeigten an der äusseren und der inneren Plasmamembran eine aus radiär ge- stellten Stäbchen gebildete Zone, besonders an in toto mit 0*25 bis 0*5 procentiger Osmiumsäure gehärteten Thieren. Bei Anwendung von schwächerer Osmiumsäure, Chromsäure, Pikrinsäure, pikrinsaurem Silber mit Pikrinsäure verdünnt, Flemming's Chrom-Essigsäure sowie Chrom- Osmium -Essigsäure, Palladiumchlorid, Platiuchlorid, Platin-Chrom-Os- mium-Essigsäure nach Beass *, Sublimat, Alkohol, traten zwischen diesen Stäbchen noch Verbindungsstücke hervor, die Stäbchen endigen und ver- lieren sich in dem mittleren Maschenwerk (p. 61). Verfasser vermuthet, dass Pikrinsäure im Innern des Kerns, im Achromatin, Quellung hervor- ruft, weil die Chromatinsegmente in mittleren karyokinetischen Stadien ') Cfr. Beass, diese Zeitschr. Bd I, 1884, p. 42 und 47. II. 3. Referate und Besprechungen. 387 oft auffallend sperrig liegen (worauf auch schon Flemähng hingewiesen hatte), dann zeigen Theilungstiguren fei'ner zuweilen noch die intacte innere Membran des Plasmas, die sonst verschwunden zu sein pflegt. — Kali bichromicum oder MtiLLER'sche Flüssigkeit wirkt in der Weise auf Kerne ein, dass das Achromatiu fixirt wird, während sich das Chromatin unter Vacuolenbildung stark verändert oder auflöst. Der Gesammtkern wird gut fixirt und markirt. Durch Anwendung von Osmiumsäure lassen sich dann die karyokinetischen Figuren recht gut demonstriren. — Ganze Thiere mit Chrom- oder Pikrinsäure vorgehärtet, mit Kali bichromicum oder MtTLLER'scher Flüssigkeit uachgehärtet zeigen alle protoplasmatischen und auch chromatischen Structureu deutlich; das Achromatin ist nicht optisch differenzirt. Dasselbe ist der Fall bei Verhärtung mit Osmium- säure und Nachhärtung mit Kali bichromicum. Anders bei Vorhärtung mit Osmiumsäure und Nachhärtung mit MüLLER'scher Flüssigkeit: Pro- toplasmastructuren des Zellleibes sind deutlich, der Kern dagegen ist homogen, matt graubräunlich, mit scharfen Conturen imd einigen stark glänzenden Kügelchen im Innern. Verf. nimmt an, dass in letz- terem Falle das Achromatin durch die Behandhmgsweise undurchsichtig geworden war und die Chromatinstructur verdeckte. Das beweist Färbung mit (GBENACHEE'scher) Hämatoxylinlösung , wodurch die Kerngerüste wieder scharf hervortreten (es geschieht nicht durch Safranin, Alaun- carmin und Boraxcarmin). Gleichzeitig ist aber die Kern- (d. h. Achro- matin-) grenze nicht mehr wahrzunehmen. Jetzt färben auch Safrauiu oder Alauncarmin ausschliesslich die Chromatinsubstanz , sodass Verf. annimmt, durch die Einwirkung der Hämatoxylinlösung sei die durch die MüiiLEE'sche Flüssigkeit hervorgerufene Aenderung des Achromatins wieder rückgängig gemacht, — Das Wirksame in der MtHLLER' sehen Flüssigkeit im Gegensatz zum Kali bichromicum ist hier das in ersterer enthaltene Natriumsulfat, was durch Anwendung einer Iprocentigen Lösung desselben auf Osmiumpräparate bewiesen wurde. Um nachzuweisen, dass die „Kerngruudsubstanz" (wie Verf. auch das Achromatin nennt) auch während der Karyokinese scharf abgegrenzt sei, verfuhr Verf. so: Eine Salamauderlarve kommt lebend in 0-lpro- centige Osmiumsäurelösung, wird nach 1 bis 2 Tagen in Wasser aus- gewaschen und mehrere Tage in MüLLER'sche Flüssigkeit gelegt. Aus- waschen, Aufbewahren in Alkohol. Man kann auch nach der Osmium- säurebehandlung auswaschen und nun in Alkohol aufbewahren und erst später mit MtiLLER'scher Flüssigkeit (nach vorheriger Ueberführung des Objectes in Wasser) behandeln. — Die Kiemenplatten werden alsdann herausgenommen, Kiemenbüschel und Kuorpelleiste abgetrennt und in 25* 388 Referate und Besprechungen. 11, 3 Glycerin oder besser in Wasser untersucht. Die oberflächliche Zelllage wird nun mit einem Zeichenapparat abgezeichnet. Zeichnung der Zell- conturen bei der höchsten Einstellung, die der Kernconturen in der Höhe des grössten Umfanges. Der Zeichnung wird zur Vermeidung von Irrthümern eine Skizze des ganzen Präparates beigefügt. Nun wird das Präparat in die frisch filtrirte, unverdünnte Hämatoxylinlösuiig gelegt, abgespült, die oberste Epithelschicht auf Kernfiguren durchsucht, dann die Zellconturen mit der angefertigten Skizze sorgfältig verglichen und so die schon einmal gezeichneten, nun Kernfiguren enthaltenden Zellen wiedererkannt. — Weniger praktisch ist folgendes Verfahren: Härten der Larven in Osmiumsäure, Auswaschen, Nachhärtung in Alkohol, Her- auslösen eines Kiemenblattes, Abtrennen von Kiemenbüschel und Knorpel- leiste, Zeichnung der Kernfiguren und Zellconturen der oberflächlichsten Zelllage. Uebertragen des Präparates in MüLLER'sche Flüssigkeit oder Iprocentiges Natriumsulfat, wiederholtes Ansehen in Zeiträumen von einigen Tagen. Aufsuchen der gezeichneten Zellen (sehr mühsam !) und abermalige Zeichnung derselben. Die Wirkung von Natriumsulfat resp. MüLLER'scher Flüssigkeit ist ungleich 1) an den einzelnen Theilen des Präparates, 2) nach der Zeit- dauer der Einwirkung. — Ad 2) MüLLER'sche Flüssigkeit wirkt ein bis zu einem Tage : Kernfiguren noch zu erkennen. — Längere Einwirkung : Kerufiguren, oft auch die Kerne, verschwinden, Zellleib deutlich. — 3- bis Stägige Einwirkung : Kern tritt deutlich hervor, ist abweichend geförbt. — Wochenlange Einwirkung des Natriumsulfats : Nicht nm* das Chromatin, sondern auch das Achromatin färbt sich mit Hämatoxylin, Kerufigur daher nicht zu erkennen. — Die Wirkung des Natriumsulfats tritt früher ein im Ruhestadium des Kernes als bei den Theilungsstadien, daher findet man zuweilen in demselben Präparat Totalfärbung der ruhenden Kerne, Diff"erenzirungsfärbung der Anfangs- und Endstadien und reine Chro- matinfärbung der mittleren Stadien vereinigt. — Verf. unterscheidet 1) Kernreagentien (namentlich Säuren): Man sieht nur den Chromatin- bestandtheil, nicht den ganzen Kern. 2) Salze (Kali bichromicum, Müllek- sche Flüssigkeit etc.) : Man sieht den Gesammtkern, innere Struetur des Kernes meist zerstört. „Ueber die Aufzucht* von Salamanderlarven" berichtet Verf. noch 0 Verf. hat schon in emer früheren Abhandlung (W. Pfitzner, die Epi- dermis der Amphibien. Morphol. Jahrb. Bd. VI, 1880, p. 469 ff.) Mittheüungen über die Zucht von Salamandern gemacht, aus denen noch Folgendes hervor- gehoben sein mag: Zur Aufzucht kann man die von den Salamandern im Ter- rai'ium in ein flaches Wassergefäss abgelegten oder die* den EUeitern frisch n, 3. Referate und Besprccliimgen. 389 in einem Anhang, dass die Larven nach ihrer Geburt in einen Brut- apparat für Lachseier (mit stets fliessendem Wasser) gesetzt und täglich einmal mit zerriebener Leber gefüttert werden, Aufbewahrungsort: ein kühler, nicht zu kalter Raum. Man findet dann stets reichliche Zellthei- lungen in einem bestimmten Procentsatz, aber schon ein einmaliges Aus- setzen der Fütterung ist zu bemerken. Die Zeit der Fütterung ist gleich- gültig, Dr. H. HenJcing {Göttingen). Mitrophanow, P., lieber dieintercellularlücken undlnter- cellularbrücken im Epithel (Zeitschr. f. wiss. Zool, Bd. XLL H. 2, 1884, p. 302—309. 4 Holzschn.). Zum Studium der Intercellularbrücken im Epithel eben aus dem Ei geschlüpfter Axolotl liess Verf. auf das frische Gewebe Goldchlorid C/^procentig) einwirken, welches in schwacher (löprocentiger) Ameisen- säure reducirt wurde. Die von ihm angewandte Methode hat Verf. in seiner Abhandlung: lieber die Eudigungsweise der Nerven im Epithel der Kaulquappen * näher mitgetheilt und möge daraus das Folgende hier erwähnt sein: Die abgeschnittene frische Schwanzflosse der Kaul- quappe wurde etwas in destillirtem Wasser gewaschen, dann auf eine Stunde in einem Gemisch von '/jprocentiger Goldchloridlösung mit einem Tropfen Salzsäure in ein Uhrschälchen eingelegt, darauf in destillirtem Wasser gewaschen und in eine Lösung von 1 Th. Ameisensäure mit 6 Th. Wasser übertragen (Resultat: Gute Reduction des Goldes, Auf- hellung des Gewebes ohne zu starke Maceration. Nerven treten hervor, da sie sich stärker violett färben als andere Gewebe). — Verf. bemerkt am letztgenannten Orte (p. 197), dass die Unbeständigkeit in der Wirkung des Goldchlorids nicht von dieser Substanz abhänge, sondern hervorgerufen werde 1) durch Unsauberkeit der Manipulation, 2) durch Verschiedenheit der reducirenden Medien; dieselben sind für verschie- dene Gewebe verschieden, 3) durch Verschiedenheit der Lösungen und der Zeit, während welcher das Object im Reagenz verbleibt. Dr. H. Henking {Göttingen). Schmidt, M., Beiträge zur Kenntniss des Rückenmarkes der Amphibien (Zeitschr. f. Naturw. Bd. LVIII H. 1, 1885, p. 1—45, 2 Tfln.). getödteter Thiere entnommenen Larven verwenden. Wollen dieselben später die Metamorphose vornehmen, kenntlich an den eingeschrumpften Kiemen- büscheln und dem beständigen Verweilen an der Oberfläche des Wassers, so werden sie in ein Bassin gebracht, dessen etwas geneigter Boden nur z. Th. mit Wasser bedeckt ist, Sie köimen so beliebig in das Wasser oder aus ihm herausgehen. 1) Arch f. Anat. und Phys., 1884, H. 3. Phys. Abth. p. 191—202. 1 T 390 Referate und Besprechungen. II. 3. Uiitersuchiingsmethoden p. 2 bis 4. — Von den bisher gebräucli- lichen Härtnngsmethoden des Rückenmarkes (Chromsäure, Sublimat, MfiLLEß'scbe Flüssigkeit, doppeltcbromsaiu'es Kali etc.) erwies sieb bei den Amphibien keine als zweckmässig, am besten noch Sublimat, am schlechtesten Chromsäure. — Gute Resultate erhielt Verf. dagegen mittels folgender einfacher Methode : Die Thiere wurden mit Chloroform oder Aether getödtet, die Wirbelsäure herausgeschnitten und in 70pro- centigen Alkohol gelegt. Nach 2 bis 3 Tagen konnte das Rückenmark aus dem Canale mit Hülfe spitzer Pincetten in Stücken herausgenommen werden. Diese Stücke kamen wieder in TOprocentigen Alkohol, wurden langsam in absoluten übergeführt und darin aufbewahrt. Uebertrageu in Benzol, dann in ein Gemisch von Paraffin und Benzol, schliesslich in reines Paraffin. — Bestes Färbemittel: Alkoholisches Säurecarmin. — Larven kommen zweckmässig nach dem Abtödten wenige Minuten in warmes Sublimat, dann Härtung in Alkohol. Br. H. Heriking {Göttingen). Mayer, S., Ueber die blutleeren Gefässe im Schwänze der Batrachierlarven. (Sitzber. der k. Acad. d. Wiss. Wien. Bd. XCI 3. Abth., Febr. 1885, p. 1). Aus der Arbeit von Mayer sind zwei in technischer Hinsicht in- teressante Angaben zu entnehmen. — Die erste betrifft eine Methode, durch welche lebende Larven in sehr kurzer Zeit zur mikroskopischen Untersuchung unbeweglich gemacht \7erden können, ohne dieselben in gröberer Weise, wie es z. B. bei Curareinjectionen der Fall ist, zu ver- letzen. Sie besteht darin, dass man die Larven zuerst mit mittelstarken Strömen durch Hirn und Rückenmark faradisirt und sie dann in eine Curarelösung bringt: durch die Elektrisirung werden die Thiere in Zeit von einer halben Minute unbeweglich, und diese Unbeweglichkeit erhält sich in der Curarelösung, indem die elektrische Lähmung unmittelbar in die Curarelähmung übergeht. Man kann somit in wenigen Minuten die Larven in den zur mikroskopischen Untersuchung geeigneten Zustand bringen, während bei alleiniger Curarebehandlung dazu wenigstens eine viertel Stunde nöthig ist. (Ref. möchte hierbei an das von englischer Seite empfohlene Narkotisiren der Larven durch Zusatz von Aether zu dem Wasser, in welchem die Thiere schwimmen, erinnern). Die Narkose tritt in kürzester Zeit ein und kann genügend lang ohne Schaden für das Thier fortgesetzt werden (nach den Erfahrungen von Prof. Flesch in dessen mikroskopischen Cursen). Die zweite Angabe betrifft eine sehr einfache Methode, um die Geschwindigkeit des Blutstroms in dem Larveuschwanz zu beeiu- II, 3. Referate und Bosprechungen. 39 1 fliissen. Sie beruht auf der Beobachtung Maybk's, dass durch das Auf- legen des Deckglases (wegen der Benutzung starker Systeme war die Anwendung eines solchen bei der Untersuchung nöthig) der Blut- strom in dem bedeckten Theile der Larve, auch wenn das Deckglas an den Rändern durch Glassplittern gestützt war, aufhörte, dass er aber sich wieder einstellte, sobald unter das Deckglas ein Tropfen Wasser zugesetzt wurde. Mayer führt diese Erscheinungen auf den Druck zu- rück, der in Folge der Capillaradhäsiou zwischen Deckglas und dem höchsten Punkt des Objeetes entsteht. Der Zusatz von Wasser, wodurch das Deckglas vom Objecte entfernt wird, bewirkt nun, dass der Capillar- adhäsionsdruck, je nach der Grösse des zugesetzten Tropfens entweder verringert oder ganz aufgehoben wird. Man hat somit in der Grösse des Wassertropfens ein Mittel, den Blutstrom in der normalen Geschwin- digkeit zu erhalten oder in beliebigem Grade bis zur vollständigen Ruhe zu verlangsamen. Dr. Oppenheimer {Bern). Born, Cr., Biologische Untersuchungen I. Ueber den Ein- fluss der Schwere auf das Froschei. (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIV, p. 475 if.) Born bringt ausführliche Regeln für die Anfertigung von Schnitt- serien aus Froscheiern , welche sich in den ersten Entwicklungsstadien befinden. Durch die Entdeckungen Pflüger's, Roux's und Born's haben derartige Untersuchungen ein besonderes Interesse erlangt ; es galt, die Eier so zu erhärten , dass einerseits die Eisubstauz sich innerhalb der Hüllen nicht verschieben konnte, anderseits die Anfertigung der Schnitte in ganz bestimmten, vorher durch Marken bezeichneten Richtungen ge- lingen musste. Während die Härtung normaler Eier, d. h. solcher, deren Hüllen iu normaler Weise gequollen sind, einfach durch Uebergiessen mit 90" C. warmem Wasser und — nach Entfernung der Hülle — weitere Behandlung mit allmählig verstärktem Alkohol gelingt (Hertwig), so musste Born die Benetzung der Hülle seiner auf Glasplatten haftenden, mit möglichst wenig Wasser befeuchteten Eier möglichst vermeiden. Er tödtet desshalb die Eier durch Uebergiessen mit 90*^ warmem Oel ; dann folgt Härtung in 75-, nach einigen Stunden 80- und später 90gradigem Alkohol. Vorher sind auf den Eiern selbst mit rother oder grüner Leim- farbe mittels eines kleinen Pinsels Marken angebracht, welche später zur Bestimmung der Lage des einzubettenden Eies dienen. Die Ein- bettung selbst erfolgt nach dem von Born wiederholt und auch hier wieder ausführlich beschriebenen Verfahren ; vergl. darüber das Ref. in dieser Zeitschrift Bd. I, 1884, p. 278. (Born's Annahme nicht genü- gender Berücksichtigung seiner Methode ist sicher nicht ganz gerecht- 392 Referate iiml Besprechungen. IL 3. fertigt). Da, auch bei vorsichtigster Härtung, die in der Hülle erhal- tenen Eier brüchig bleiben, während sie nach Ablösung der Hülle sehr leicht in Serien zu zerlegen sind, so überschmilzt Bokn die Schnittfläche vor jedem Schnitt mit Paraffin; ein Verfahren, das, wie Bobn richtig vermuthet, auch schon anderwärts (u. a. in Würzburg von Dr. Gottschau und auf Anregung des Ref. von Dr. Niepeeding *) schon Ver- wendung und Empfehlung gefunden hat. Das Aufkleben der Schnitte erfolgt mit Eiweiss-Glycerin nach Meyer. Die Schnittdicke beträgt zweck- mässig '/30 bis '/40 Dini. — Bezüglich der Angaben Boen's über die Behandlung der Eier während der Entwicklungszeit muss auf das Ori- ginal verwiesen werden. Flesch (Bern). DliVJil, M., De la formation du blastoderme dans l'oeuf d'oiseau (Ann. des sc. nat. , Zoologie, 6" serie, t XVHI, 1885, p. 1). Die Arbeit von Duval enthält in ihrem ersten als Procödes d'^tude bezeichneten Theile eine Reihe technisch wichtiger Angaben, die sich in Folgendem zusammenfassen lassen: Da DüVAL die ersten Stadien der Entwicklung des Embryon, in welchen der Primitivstreif noch nicht vorhanden und somit die Unter- scheidung zwischen Kopf- und Schwanztheil des Embryon kaum möglich ist, untersuchte, so musste er auf ein Mittel sinnen, diese Theile unter- scheidbar zu machen. Er geht dabei von Angaben von Balfour und KöLLiKEE aus, nach welchen der Embryo auf dem Dotter fast immer so liegt, dass er das stumpfe Ende des Eies zur linken, das spitze zur rechten hat, oder mit anderen Worten, dass, wenn das Ei mit seiner Längsaxe quer, die Spitze nach rechts, das stumpfe Ende nach links vor dem Beobachter liegt, der Schwanztheil des Embryo dem Unter- sucher zugekehrt, der Kopftheil von demselben abgewendet ist. Diese Angabe konnte Duval bei der Beobachtung einer grösseren Anzahl von Eiern, bei denen der Primitivstreifen bereits vorhanden war, bestätigen, indem er fand, dass unter 166 Eiern 162mal der Embryo die von Bal- rouK angegebene Lage mit geringer Neigung nach links oder rechts inne hatte, und nur einmal die Lage die entgegengesetzte war. Nach- dem somit die Lage des Embryo auch im frühen Stadium bestimmbar war, so lange der Keim sich noch in der Schale befand, handelte es sich darum, auch an Dottern ohne Schale die Orientirung zu erhalten, d. h. auf dem Dotter Zeichen anzubringen , die nach der Erhärtung 1) Vergl. Festschrift zur dritten Saecularfeier der Alma Julia Maximiliana, gewidmet von der mediciuischeu Facultät Würzburg, Bd. II, p. 169. II, 3. Referate und Besprechungen. 393 sichtbar das Schwanz- und Kopfende zu unterscheiden gestatteten. Zu dem Zwecke wandte Duval folgende Methoden an, die je nach dem Härtungsmittel etwas variirten. Bei Härtung mit Osmium- oder Chromsäure ist das Verfahren folgendes. Einen 5 mm breiten und 50 mm langen Papierstreifen knickt man so ein, dass er ein Dreieck darstellt, und legt diese Figur nach Oeffnung des Eies imd nachdem das bedeckende Eiweiss mit einer Pinzette entfernt ist, auf die höchste Stelle des Dotters, wo sich die Keimscheibe befindet, und zwar so, dass die breite Seite dem Kopf- ende entspricht, also bei der oben angegebenen Lage des Eies dem üntersucher abgekehrt ist. Durch einen leichten Druck mit dem Finger hält mau den Papierstreifen fest, der somit eine Wand eines dreieckigen Troges bildet, dessen Boden die Dotteroberfläche ist. In ihn giest man Osminmsäure, lässt sie einige Zeit wirken, bis der vom Papier begrenzte Theil des Dotters eine schwärzliche Farbe an- nimmt; es wird so die Keimscheibe rasch mit Osmiumsäure gehärtet. Hierauf wird der Dotter ganz vom Eiweiss befreit und dann in Chrom- säure gebracht. In wenigen Tagen hat der Dotter einen gewissen Grad der Härtung erreicht, so dass man die Keimscheibe mit einem Theil des Dotters, entsprechend der dreieckigen schwarzen Figur mit dem Scalpell abtragen kann, ohne dass man eine künstliche Trennung der Keimscheibe von der Nachbarschaft zu befürchten hätte. Das abge- tragene Stück bleibt bis zur vollständigen Härtung in Chromsäure, so- dann wird es mit absolutem Alkohol zur Einbettung in Collodium vor- bereitet. Bei Härtung mit Alkohol ist das Verfahren ein anderes. Nach Oeff- nung des Eies wird an der Stelle der Keimscheibe ein gleicher drei- seitiger Papierstreifen in der entsprechenden Lage fest in das auf dem Dotter aufsitzende Eiweiss gepresst. Durch Aufgiessen von Alkohol wird das vom Papier begrenzte Eiweiss coagulirt und das übrige Eiweiss nach Trennung der Chalagea entfernt, so dass der Dotter ganz von dem- selben frei ist und nur an einer Stelle das geronnene Eiweiss trägt in einer Form, welche die Pole der Keimscheibe zu uuterscheiden gestattet. Die weitere Härtung geschieht in absolutem Alkohol. Das Eiweiss kann mau so abfliessen lassen, dass der Dotter in einer Schaleuhälfte zurückbleibt, die als Behälter für den härtenden Alkohol dienen kann. Nach der nöthigen Fixiruug wird wie oben die Keimscheibe mit Um- gebung den Conturen des haftenden Eierweisses entsprechend abge- tragen und bis zur vollendeten Härtung in Alkohol bewahrt. Ein drittes Verfahren zur Härtung hat Duval mit Erfolg versucht. 394 Referate und Besprecliimgen. II. 3. nämlich die Fixirung durch Kochen. Nachdem durch Osmiumsäure wie oben die Orientirungszeicbnung hervorgerufen ist, wird der Dotter in Chromsäure auf dem Wasserbad zur Gerinnung gebracht. Sodann wird die Keimscheibe ausgeschnitten und mit Alkohol zur CoUodium-Ein- bettung vorbereitet. Der Hauptvortheil dieses einfachen Verfahrens be- ruht in der raschen Ausführbarkeit ; es giebt zudem sehr gute Resultate. Vor allem werden die Erscheinungen der Endosmose, welche bei der Cbrorasäurebehandlung häufig zu nicht der Wirklichkeit entsprechenden Höhlenbildungen Veranlassung geben, gänzlich vermieden, und Duval konnte damit die Frage betreffs der von Kölliker beschriebenen cavitas subgerminalis dahin beantworten , dass dieselbe kein Arte- fact sei. In Betreff der beiden anderen Härtungsverfahren bemerkt Duval, dass sie gleichmässig gute Resultate, die sich gegenseitig ergänzen, geben, imd macht dabei auf die bekannten Mängel, wie schlechte Kernfärbung bei der Osmiumsäure und Schrumpfung im Alkohol auf- merksam. Die Einbettung geschah stets in Collodium. Beim Schneiden wandte Verf. das bereits von ihm und Anderen angegebene Verfahren an, das er als „collodionage des surfaces de section" bezeichnet hat. Es besteht darin, dass vor jedem Schnitt einige Tropfen sehr flüssigen Col- lodiums auf das Object gegossen werden und erst nach dem Trocknen desselben der Schnitt geführt wird, wodurch das Auseinanderfallen des Schnittes verhindert wird. — Das Verfahren zur Färbung und An- fertigung der Schnittserien ist im Ganzen das gewöhnliche; zur Auf- hellung verwendet Verf. Benzin. Dr. Oppenlieimer (Bern). Kupffer, C, Zur Gastrulation in den meroblastischen Eiern. (Arch. für Anatomie und Physiologie, Anat. Abthl. 1884, I, p. 1). KuPFFER giebt eine Methode an zur Härtung von Eiern (K. machte seine Untersuchung an Forelleneiern), welche die karyokinetischen Keru- figuren sehr gut erhält. Sie besteht darin, dass vor der Behandlung der Eier mit Alkohol absolutus dieselben auf vier Stunden in eine Mischung von absolutem Alkohol, Glycerin und Wasser aa eingelegt werden. Auch zur Entfärbung der in toto mit neutralem 2procentigen Ammoniakcarmin gefärbten Präparate gebraucht er eine bis jetzt kaum verwandte Mischung von Salzsäure 0*50, Wasser und Glycerin aa 50*0. Zur Einbettung empfiehlt er ein Gemisch von gewöhnlichem harten und von bei Zimmer- temperatur knetbarem Paraffin (von Merk in Darmstadt beziehbar). 11, 3. Referate und Besprechungen. 395 Das Verhältniss der Mischung bei 15 bis 18« C. ist 1. Th. knet- bares Paraffin auf 2 Th. gewöhnliches. Dr. Oppenheimer {Berti). TriuMer, N., Ueber den Bau der Magenschleimhaut. (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIV, p. 174 ff.) Den vielen, zu Tinctionsversuchen verwendeten Pflanzenfarbstoffen reiht Tbinklee das Chlorophyll an. Er gewinnt es aus den Blättern von Syringa vulgaris durch 24stündige Extraction mit Alkohol, Eindampfen des filtrirteu Auszuges zur Trockne und Auflösung desselben in Wasser. Das Filtrat ist schön dunkelgrün mit einem Stich in's Braune. „Die weitere Behandlung der Präparate war die gewöhnliche" (welche? Ref.). Ueber die Resultate ist nichts angegeben. — Von sonstigen technischen Angaben Tuikklee's sind erwähnenswerth nur noch dieMacerationsflüssig- keiten; er benützt u. a. Chloralhydrat in 4procentiger Lösung, ferner gemischt mit Chromsäure : 1 Vol. (wie gross ? Ref.) Chromsäure 1/50 Pro- cent, 1 Vol. Chloralhydrat 5 Procent, nebst einigen Tropfen Essigsäure ; ausserdem empfiehlt er nach Kutschkin MüLLER'sche Flüssigkeit gemischt mit schwacher Kochsalzlösung. Die ünvoUstäudigkeit der Angaben ist leider nicht geeignet, den betreffenden Methoden Verbreitung zu ver- schaffen. Flescli {Bern). Kogaiiei, J., Untersuchungen über den Bau der Iris des Menschen und der Wirbelthiere. (Arch. f. mikrosk. Anat., Bd. XXV, H. 1., 1885, p. 1 bis 48, 1. Tfl.). Unter den angewandten Erhärtungs-Flüssigkeiteu (concentrirte Subli- matlösung, lOprocentige Salpetersäure, verdünnte Chromsäure ['/40 bis Yao Procentj, MüLLEK'sche Flüssigkeit) giebt Verf. in vieler Beziehung der letzteren den Vorzug. Wegen ihrer stark schrumpfenden Wirkung räth er von einfacher Alkoholanwendung ab, auch Ueberosmiumsäure ist wenig empfehlenswerth, weil die Iris schon von Natur braun gefärbt ist. Gute Schnitte erhält man von der Iris nur nach Einbettung in Celloidin oder Paraffin. Färbung der einzelnen Schnitte mit Hämatoxylin, Beale- schem Carmin, Pikrocarmin, brauchbare Doppelfärbung mit Hämatoxylin und Eosin. — Soll das Pigmeutepithel nicht selbst untersucht werden, so entfernt man das Pigment zweckmässig mechanisch mit einem feinen Pinsel; hierzu eignet sich besonders eine längere Zeit in MüLLEK'scher Flüssigkeit aufbewahrte Iris. Die Pigmentmassen innerhalb der Irissub- stanz werden allerdings so nicht entfernt. Zur Entfärbung des Pig- mentes, welche durch Chlorwasser in 24 Stunden vollkommen erreicht werden würde, darf dieses Mittel nur eine bis einige Stunden angewandt werden (bis das Pigment einen hellbraunen Ton annimmt), da bei längerer 396 Referate und Besprechungen. II, 3, Einwirkimg eine Zerstörung der Gewebe stattfindet. "Wasserstoffsuper- oxyd ergab auch keine besseren Erfolge. — Das Endothel der vorderen Irisfläche kann man ohne Silberbehandlung nach dem Verf. zweckmässig bei der Vogeliris zur Anschauung bringen, welche ein lockeres Gefüge hat und daher ein Abpräpariren des Endothels von seiner Unterlage ge- stattet. — Die Silberbehandlung findet zweckmässig so statt : Ein frischer Bulbus wird mit seinem hinteren Pol auf einer Unterlage befestigt , die Hornhaut vorsichtig ausgeschnitten und nun die freiliegende Iris mit einer Pipette solange mit 0*25 procentiger Silberlösung betröpfelt, bis sie ge- nügend versilbert ist. Alsdann wird die Iris ausgeschnitten und in toto besehen. So ist jede Zerrung der Iris vermieden. Besonders geeignet hierzu ist die Iris der albinotischen Maus, Ratte und Kaninchen. Erstere beiden gestatten wegen ihrer Zartheit auch noch eine nachträgliche Färbung. — Um die hintere Begrenzungshaut der menschlichen Iris frei von Kernen und Pigment darzustellen, giebt Verf. folgenden Weg an. Das hintere Irispigment wird mit einem feinen, ziemlich starren Pinsel so lange abgepinselt, bis das Pigment auch aus den radiären Falten einigermaassen entfernt ist. Dann wird mit einer Lanzettnadel oder dergl. die hintere Fläche vorsichtig abgeschabt und so Theile der Grenzmembran erhalten, welche aus feinen Radiärfasern besteht. Diese Fasern quellen und erblassen in Essigsäure und auch in verdünnter Kalilauge, werden unkennbar und brüchig in 20 procentiger Salpetersäure, halten sich gut und weichen leichter auseinander in 30 procentiger Kalilauge (Kittsub- stanz zwischen ihnen?); die Fasern erhalten sich in Trypsinlösung. Die Grenzmembran nimmt schwer Farbstoffe auf, am besten noch Eosiu, weniger Carmin oder Hämatoxylin. Pikrinsäure und Chlorpalladium färben sie gelb, ähnlich wie Bindegewebsfasern. Dr. H. Henliing {Göttingen). Krause, W., Die Retina. (Internat. Monatsschr. f. Anat. u. Histol. I. Bd. 1884. p. 225). Die Arbeit von Keause enthält eine Anzahl neuer Angaben betreffs Conservirung, Härtung, Färbung und Einbettung der Retina. Zur Con- servirung fand Verf. eine lOprocentige Lösung von Chloralhydi-at sehr geeignet. Er erhielt an Zupfpräparaten der so behandelten Retina aus- gezeichnete Bilder von den feinen Retinatheilen, besonders von der Zu- sammensetzung der -Stäbchen und Zapfenschichten. Die Härtung und Färbung der Retina empfiehlt Keause in situ, d. h. in Verbindung mit Sclera und Choroida vorzunehmen und zwar erstere mit 0-3- bis Ipro- centiger Ueberosmiumsäure oder 0-2procentiger Chromsäure. Zu letzterer verwendet er Carmin-Alaun und Pikrocarmin. Sehr schöne Färbung er- II, 3. Referate und Besprechungen. 397 zielte Verf. durch Eisen- und Vanadin-Chlorid in Verbindung mit 2pro- centiger Gerb- oder Gallussäure. Durch diese Reagentien erhalten die Stäbchen und Zapfeukörner , die inneren Körner und die Kerne der Ganglienzellen eine tiefblaue bis schwarze Farbe, während die übrigen Bestandtheile der Retina ungefärbt bleiben. Nachträglich lassen sich auch diese mit beliebigen Anilinfarben, am besten Säurefuchsin, färben. Beim Schneiden der Retina liegt die Hauptschwierigkeit nach Krause darin, genaue Flächenschnitte zu erhalten, die in ihrer ganzen Ausdeh- nung die gleiche Retinaschichte zur Anschauung bringen. Der Grund dieser Schwierigkeit liegt zunächst in der Kugelgestalt der Retina selbst und zweitens in der meist fehlerhaften Einstellung des Präparats im Mi- krotom. Diese Missstände sucht Krause dadurch zu heben, dass er die Einbettung der Retinastücke auf dem Mikrotomschlitten selbst und zwar unter einem leichten Druck vornimmt. Es wird auf einen im Schlitten eingeklemmten Kork vermittels weichen Wachses eine Scheibe Paraffin befestigt, das durch Zusatz von Vaselin die nöthige Consistenz erhalten hat, sodann wird in dasselbe, nachdem durch einen Mikrotomschnitt eine ebene horizontale Fläche geschaffen ist, ein mehrfach zusammen- gesetztes Staniolblättcheu eingeschmolzen. Auf dieses kommt das mit Paraffin durchtränkte Retinastück und sodann ein zweites Staniolblättcheu, das einen leichten Druck auf die Retina ausüben soll. Das Ganze wird mit Paraffin bedeckt und durch Erwärmen vermittels eines erhitzten Spatels in eine zusammenhängende Masse umgeformt. Krause erzielte auf diese Methode sehr vollkommene Flächeuschnitte der Retina. JDr. Ojjpenlieimer {Bern). Stöhr, Ph., Ueber den Bau der Conjunctiva palpebrarum. Vortrag gehalten in der 5. Sitzung der phys. med. Gesellschaft am 21. Februar 1885, (Aus Sitzungsber. d. phys. med. Ge- sellschaft. Würzburg, 1885, 7 pp. S»). Um die Follikel (BEucH'schen Haufen) in der Bindehaut zur An- schauung zu bringen, benutzte Stöhr mit vorzüglichstem Erfolge eine von ScHMiD angegebene Methode: Man legt das durch die Lidspalte vorgedrängte Auge auf einige Stunden in eine Iprocentige wässerige Salzsäurelösung ; die Follikel treten dann als weisse Punkte und Flecken mit grosser Deutlichkeit hervor. Dr. J, H. List. Morpurg'O, B., Ueber die Entwicklung der Arterienwand. (Sitzb. der k. Acad. d. Wiss. Wien Bd. XC. 3. Abth. October 1884). [S.A. 23 pp. 2 Tfln. — 80 ^}. Untersuchungsmethode : Quer- und Längsschnitte durch das Object, Zerzupfen von dickeren, orientirten Schnitten. — Kleinere Objecte 398 Referate und Besprechungen. II. 3. wurden in eine mit wenigen Tropfen Glycerin versetzte und bis zur Honigconsistenz eingedickte Lösung von Gummi arabicum ' eingebettet, indem das vorher damit impräguirte Präparat in einem Kahne von Hollundermark eintrocknen gelassen wurde. Schneiden mit nicht be- feuchteter Klinge (Resultat: Keine wesentliche Gewebsänderung, abge- sehen von einer gewissen Quellung im Bereiche saftiger Grundsubstan- zen). „Die Controlversuche mittels der gewöhnlichen Masse aus Wachs und Oel" ^ — Beste Färbungsmittel : Hämatoxylin und Aniliublau, auch zu Doppelfärbungen combinirt. Eine alkoholische Lösung von Anilin- blau (Lyonblau) ist nach dem Verf. besser für ausgebildete, eine wässe- rige besser für embryonale Gefässe. Doppelfärbuug mit Carmin und Anilinblau weniger gut. Dr. H. Henhing {Götthigen). Stein, St. YOn, Eine neue Methode, Hämoglobinkrystalle zu erhalten. Vorläufige Mittheiluug. (Centralbl. f. d. med. Wiss., 1884, No. 23 p. 404). Das Blut — frisch, defibrinirt oder aus Gerinnseln ausgepresst — wird in dünner Schicht auf den Objectträger gebracht. Wenn es am Rande einzutrocknen beginnt, wird Canadabalsam aufgetragen und zwar erst am Rande und dann in der Mitte, wobei der mittlere Theil des Bluttropfens nach der Peripherie abgedrängt werden muss , um der Krystallisation Raum zu schaffen. Man kann das Blut auch vor dem theilweisen Verdunsten direct mit Balsam behandeln und mit einem Deckgläschen bedecken. Am besten eignet sich gelber Canadabalsam, der durchsichtige, nicht getrübte Fäden zieht. Zu flüssiger Balsam er- zielt schnellere und bisweilen grössere Krystallbildung, doch sind die Krystalle dann weniger haltbar. Das Präparat bleibt unbedeckt bis der Balsamgeruch verschwunden ist; dann wird der überschüssige Balsam mit einem in Aether, Terpentin- oder Nelkenöl eingetauchten Messer entfernt, das Deckgläschen aufgelegt und mit Asphalt oder Balsam eingeschlossen, um zu starkes Eintrocknen zu verhüten. Die Präparate haben sich seit 1877 gut erhalten. Flesch {Bern). Toison, J., Sur la numeration des elements du saug. (Ex- trait du journ. des sc. med. de Lille, fev. 1885, 4 pp. 8°j. Zur Zählung der weissen Blutkörperchen benutzte der Verf. die Färbemethode; und zwar verwendete er die sogenannten basischen Anilinfarben, worunter ihm Methyl violett 5 B die besten Resultate ') Siehe über diese Methode: Blochmahn, diese Zeitschr. Bd. I. 1884, p. 221—222. ^) Cfr. 1. c. p. 227. II, 3. Refertatc und Besprechungen. 399 lieferte. Nur hält sich dasselbe in Sublim athaltigeu Lösungen (wie die Flüssigkeit A und B von Hayem) schlecht. — Toison benutzte fol- gende färbende Zusatzflüssigkeit: Eau distülee 160 cc Glycerine neutre ä 30 » 30 cc Sulfate de soude pur 8 g Chlorure de sodium pur lg Violet de metbyle 5 B 0-025 g Das Violett wurde in dem mit der Hälfte destillirten Wassers verdünnten Glycerin aufgelöst, die Salze in der anderen Hälfte, dann gemischt und nach dem Erkalten filtrirt. Diese gefärbte Zusatzflüssigkeit wurde mit dem Blute wie bei der gewöhnlichen Methode gemischt und hierauf in eine Zelle oder graduirte feuchte Kammer gegeben. Nach 5 bis 10 Mi- nuten sind die weissen Blutkörperchen tiugirt, nach 20 bis 30 Minuten ist das Maximum der Tinction erreicht : Die weissen Blutkörperchen er- scheinen dann als kleine granulirte violett gefärbte Kugeln, welche sich mit Leichtigkeit von den grünlich erscheinenden rothen Blutkörperchen unterscheiden lassen. Dr. J. H. List. Weigert, C, Eine Verbesserung der Hämatoxylin - Blut- lau gensalzmethode für das Centralnervensystem (Fortschr. d. Med. Bd. HI, 1885, p. 236). Die in Bd. I, 1884, p. 290 dieser Zeitschrift beschriebene Färbungs- methode von Weigekt hat sich ausserordentlich rasch überall einge- bürgert, wie das, wenn man die Vortheile, welche sie allen bekannten Methoden gegenüber bietet, würdigt, auch kaum anders zu erwarten war. Die eine ihrer ünvollkommenheiten, dass sie nur auf durch Chrom- salz schön braun gewordene Stücke anwendbar ist, hat Prof. Flesch verbessert ', eine andere wichtige aber war noch vorhanden. Es gelang nicht so viel Fasern (in der Hirnrinde z. B.) zu färben als mit der ExNEK'schen Osmiummethode dort sichtbar wurden. Weigert hat des- halb solange Verbesserungen anzubringen gesucht, bis die Resultate nicht mehr, nach dem Urtheil geübter Untersucher, hinter den mit Osmium- säure und Ammoniak erhaltenen zurückstanden. Die gewöhnlich als Hämatoxylinfärbuug bezeichnete Methode be- steht in der Anwendung des Thonerdelackes dieses Farbstoffes. Schon mit Benutzung dieser Methode lassen sich die markhaltigen Fasern dar- stellen, wenn die überfärbten Schnitte nachher mit einer alkalischen Lösung von rothem Blutlaugensalz behandelt werden. Viel schöner wurden schon die Bilder, wenn statt des Thonerdelackes der Chromlack ^) Flesch, diese Zeitschr. Bd. 1, 1884, p. 564, 400 Referate und Besprechungen. II. 3- im Präparate erzeugt wurde, wie das bei der in dieser Zeitschrift Bd. I, 1884, p. 290 referirten WEiGEKT'schen Färbung der Fall war. Dies verschiedene tinctionelle Verhalten des Chrom- und des Alaunlackes veranlasste Weigert, noch andere Lacke zu probiren ; er hat mit Blei-, Zinn-, Zink-, Eisen- und Vanadiumlack experimentirt aber einen als besonders bequem und brauchbar befunden, den Kupfer lack. Um recht gleichmässige Durchtränkung der Stücke zu erzeugen, darf man nicht in Kupfer härten, sondern soll das Kupfersalz erst nachträglich auf ein bereits in doppeltchromsaurem Kali gehärtetes Stück wirken lassen. Die ganze Procedur gestaltet sich jetzt folgendermaassen (wört- lich nach Weigert) : „1) Die mit Celloidin in bekannter Weise auf Kork (ohne unter- legtes Fliesspapier, das sich ablösen würde,) aufgeklebten und festge- wordenen Stücke kommen in eine Lösung von neutralen essigsaurem Kupferoxyd (eine gesättigte, filtrirte Lösung dieses Salzes mit gleichem Volumen Wasser verdünnt), und bleiben im Brutofen einen bis zwei Tage in der Lösung. Es macht nichts aus, ob die Stücke noch braun sind oder schon grün geworden sind, wenn sie nur überhaupt einmal gut gebräunt waren. Ja es ist sogar besser, wenn sie vorher längere Zeit in Alkohol gelegen haben, da sich dann nicht so leicht Nieder- schläge au der Oberfläche bilden. Die Stücke sind nach der Kupfer- behandlung grün, der Celloidinmantel ist blaugrün. Sie können nunmehr in SOprocentigem Alkohol aufbewahrt werden. 2) Nach dem Anfertigen der Schnitte werden diese gefärbt. Auch hierin habe ich einige Modificationen zu erwähnen wenn auch das Princip mit dem der früheren übereinstimmt: a) Es war ein Uebelstand, dass die HämatoxyUnlösungeii erst „reifen" mussten. Dieses „Reifen" kommt dadurch zu Stande, dass das Hämatoxylin durch das Ammoniak der Luft in eine dunklere Substanz übergeführt wird. Es ist merkwürdig, dass man diesen Umstand bisher nicht in Rechnung gezogen hat, denn man kann durch Zusatz eines Alkalis in der That momentan die Tinctionsfähigkeit herstellen, wie dieselbe sonst nur dem „abgelagerten" Hämatoxylin zukommt. Es wird wohl ziemlich gleichgültig sein, welches AlkaU man benutzt. Ich selbst habe Lithion carbonicum in Anwendung gezogen und zwar 1 cc einer kalt gesättigten Lösung auf je 100 cc der früher angegebenen Hämato- xylinflüssigkeit. Die letztere nimmt hierdurch einen braunvioletten Ton an und färbt sehr gut. Es kommt in einer solchen, leicht alkalisch ge- machten Lösung auch nicht zur Bildung von Niederschlägen, die sich sonst oft einstellen. II, 3. Referate und Besprechungen. 401 b) lu diese Lösung kommen die Schnitte hinein. Nach vor- heriger Anwendung der Kupferbeize ist die Brütofentemperatiir für die Färbung nicht mehr erforderlich, was gewiss erwünscht ist. Bei der alten Chromhämatoxylinfärbung der markhaltigen Nervenfasern wurde auch durch eine prolongirte Färbung bei Zimmertemperatur nur eine matte Tinction erzielt. Bei Anwendung des Kupferlacks ist dies nicht mehr zu befürchten. Die Länge der Zeit, welche die Schnitte in der Hämatoxylinlösung verweilen müssen, ist variabel. Im allgemeinen gilt die Regel, dass, je länger man färbt, um so sicherer die feinsten Fasern deutlich werden. Für Rückenmarksschnitte genügen 2 Stunden. Bei Hirnschnitten bedarf es 24 Stunden , um sicher die ganz feinen Faser chen der Rinde zu färben. In diesem Falle werden die Fasern des Hirnmarkes aber so dick und dunkel, dass man ihren Verlauf nicht mehr erkennt. Kommt es Einem daher darauf an, gerade die Richtung der letzteren zu erkennen, so muss man kürzere Zeit färben (2 Stunden). Zur Erwärmung der Flüssigkeit wird man nur ausnahms- weise bei Präparaten schreiten müssen, die in Folge ihrer Härtung etc. schwer tingirbar sind. Die Farbe der Fasern ist eine mehr blauschwarze, bei kürzerer Dauer der Hämatoxylineinwirkung eine dunkelblaue. c) Die einmal benutzte Färbflüssigkeit kann nicht wieder zu Nervenfärbungeu benutzt werden , wohl aber in ähnlicher Weise wie Hämatoxylinalaun zur Tinction von Alkoholpräparaten etc. d) Für die Differenzirung muss die früher angegebene Blut- laugensalzboraxmischung mit dem gleichen Volumen Wasser verdünnt werden. Bei sehr difficilen Objecten kann man die Verdünnung noch weiter treiben, wenn man die Diff'erenzirungszeit verlängern will". Edinger {FranJifurt a. M.). Mays, R., Histophysiologische Untersuchungen über die Verbreitung der Nerven in den Muskeln. (Zeitschr. f Biol. Bd. XX p. 449). Das Verfahren, das Mays zur Herstellung der Präparate, an denen er die Nervenverbreitung im Muskel studirte, anwandte, ist im wesent- lichen eine Combination der Osmiumsäuremethode mit der Goldsalzfär- bung. Der Zusatz des Goldsalzes soll die störende Bräunung und Trü- bung der Muskelsubstanz verhindern, die bei der einfachen Osmiumsäure- behandlung mit vorheriger Quellung des Muskels in verdünnter Salzsäure auftritt. Mays' Verfahren an dünnen Muskeln, mit dem er geeignete Präparate erzielte, ist folgendes: Der frische Muskel wird in eine Mischung von 0"5procentiger Goldchloridkaliumlösung (1 Th.), 2pro- centiger Ueberosmiiunsäure (1 Th.) und Wasser (50 Th.) gelegt und Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. II, 3. 26 402 Referate imtl Besprechimgen. II, 3. kommt dann zur Quellung und Aufhellung in ein Gemisch von Glycerin (40 Th.), Wasser (20 Th.) und 25procentiger Salzsäure (1 Th.). Dies Verfahren verhindert an dicken Muskeln nicht die Trübung und Bräunung. Zur vollständigen Vermeidung derselben empfiehlt Mays folgende Methode : der frische Muskel kommt auf 12 Stunden in eine 2procentige Essig- säure, sodann auf 2 bis 3 Stunden in Goldosmiumsäurelösung, (0'5pro- centige Goldchloridkaliumlösung 1*0; 2procentige Osmiumsäure l'O; 2procentige Essigsäure 50*0). Zur Aufhellung die obige Glycerin- mischung. — Mays erreicht mit diesen Verfahren (sie geben beide gleich gute Resultate) eine Färbung der feinen intermusculären Fasern, ohne jedoch dabei die intra- und hypolemmalen Theile derselben kenntlich machen zu können, so dass er hinsichtlich der Frage, ob das gefärbte Stück der Nerven seinen ganzen Verlauf bis zum Eintritt in die Muskel- faser entspricht, oder ob das Ende ungefärbt geblieben ist, auf das charakteristische Bild des Eudbusches angewiesen ist. Wo dieses fehlt, bleibt es unentschieden, ob Mays die Nervenfasern bis an ihr Ende verfolgt hat. Auch die marklosen Fasern, die ohne Zweifel als sensible oder im Auschluss an die Gefässe im Muskel vorkommen, werden durch das Verfahren nicht differenzirt. — In einem Nachtrag giebt Mays eine Methode an, auf die er zufällig während des Druckes der Arbeit ge- kommen war, die auch die DifFerenzirung der intra- und hypolemmalen Theile der Faser ermöglicht. Mays war durch sie in den Stand gesetzt, seine Resultate in Hinsicht der berührten Frage zu controUiren, und er konnte constatiren, dass in der That durch die Goldosmiumsäure-Methode die Nervenfasern bis zu ihrem Ende i. e. bis zum Eintritt in die Muskel- faser gefärbt werden. — Die Methode besteht in Folgendem: Man lasse den Muskel in 0"5procentiger Arsensäure vollkommen aufquellen und bringe ihn auf 20 Minuten in ein frisch bereitetes Ge- misch von GoldcMoridkaliuin 1 % 4-0 Osmiumsäure 2 »/o l'O Arsensäure 0-5 »/o 20-0 Hierauf wird der Muskel abgespült und in einer Iprocentigen Arsensäurelösung auf dem Wasserbad bei 45" während 3 Stunden der Sonne exponirt. Aufhellen in dem Salzsäureglyceringemisch. — An gelungenen Präparaten ist der Nerv in seinem ganzen Verlauf sammt den hypolemmalen Theilen gefärbt. Die Muskelfaser ist meistens leicht bräunlich aber transparent, manchmal ganz ungefärbt. Auch die mark- losen Fasern werden auf diese Weise kenntlich. Br. Oppenhemer (Bern). II) 3. Referate und Besprechungen. 403 Flesch, M., Zur Keuntniss der Nervenendigung im quer- gestreiften Muskel des Menschen. (Mittheil, der Naturforsch. Gesellsch. Bern 1885, Heft 1 p. 1). Aus der Arbeit Flesch's über die Nervenendigung im Muskel ist hinsichtlich der Präparationsmethode Folgendes zu entnehmen. Die Muskeln wurden möglichst früh post mortem (Flesch's Untersuchungs- material bildeten die Augenmuskeln eines Hingerichteten, die 1 V2 Stunde p. m. der Leiche entnommen waren) in O'öproceutige Goldchloridlösung eiugelegt, bis sie strohgelb erschienen, dann in verdünnter Essigsäure oder Ameisensäure dem Lichte exponirt. Nach der Reduction ist der Muskel zur Untersuchung bereit. Für Schnitte kam Härtung in Alkohol und Einbettung zur Anwendung. Flesch wandte Paraffin-Talg-Einbettung, ohne vorherige Durchtränkung mit Terpentin oder Chloroform an. Flesch macht darauf aufmerksam, dass bei der Goldchloridmethode an einem und demselben Schnitt Verschiedenheiten in der Färbung auftreten, die zum kleinen Theil auf ungleichmässiger Durchtränkung des Muskels mit der Goldlösung beruhen, zum grössten Theil auf Structurdifferenzen der Muskelfasern zu beziehen sind. Er unterscheidet Differenzen der Färbung hinsichtlich der Intensität und Qualität. Erstere beruhen nach Flesch auf der histologischen Ungleichwerthigkeit der einzelnen Fasern im Muskel, auf welche Grüzner aufmerksam gemacht hat. Letztere, die darin bestehen, dass die Färbung alle Uebergänge von rosa durch purpurroth und violett ziun reinen Blau zeigt, wobei an den violett und blau gefärbten Stellen dunkle Punkte auf hellem Grunde, au den rothen netzförmig angeordneten dunkle Züge zur Beobachtung kommen, be- zieht Flesch auf verschiedene Stadien des Absterbens. Er sucht dieses Verhalten durch Diffusion der sich mit Gold färbenden Stoffe in die übrige Masse beim Absterben zu erklären und zieht als Analogon das Verhalten des Glykogens heran, das in frischem Präparat in circum- scripter Anhäufung vorhanden, während der Beobachtung in diffuse Vertheilung übergeht. Dr. Oppenheimer (Bern). Saudmanil, G., Ueber die Vertheilung der motorischen Nervenendapparate in den quergestreiften Mus- keln der Wirbelthiere. (Arch. f. Anat. u. Physiol., phys. Abth. H. 3/4. 1885. p. 240). In seiner von der Berliner medicinischen Facultät preisgekrönten Arbeit, „Ueber die Vertheilung der Nervenendapparate etc." giebt Sand- mann ein neues Verfahren zur Isolirung der Primitivmuskelbündel und zur Tinction der Nervenendigungen an. Verf. benutzt zur Isolirung eine Lösung schwefliger Säure in dest. Wasser. Die Muskeln werden in 26* 404 Referate und Besprechungen. II, 3. toto oder, wenn es ihre Grösse erfordert, in Stücke parallel zur Faserung zerlegt, in ein Reagenzglas mit der Säure gelegt und bleiben je nach ihrer Dicke und ihrem Bindegewebsreichthum einen bis acht Tage darin liegen. Sodann werden die Muskeln ausgewaschen und mehrere Male in destillirtem Wasser aufgekocht. Es ist nothweudig, vor jedem Aufkochen, das Wasser erkalten zu lassen oder das heisse durch kaltes zu ersetzen, damit der aus dem Bindegewebe durch die Säure und Hitze gebildete Leim seine Gerinnungsfähigkeit verliert und sich leicht in Wasser löst. Die so behandelten Muskeln zerfallen durch einige Schüttelschläge in ihre auf ihre ganze Länge wohlerhaltenen Primitivbündel. Bei der Tinction, zu welcher Sandmann das erprobte Goldchlorid benutzt, weicht er in sofern von dem gewohnten Verfahren ab, dass er, die all- gemein angenommene Ansicht, dass nur frische Muskelfaser gute Gold- präparate liefere, verlassend, die mit der schwefligen Säure behandelten Muskelfasern der Einwirkung des Goldchlorids aussetzt. Er legt die zerfaserten Muskeln in eine dünne Goldlösung (auf 10 cc Wasser, 1 bis 3 Tropfen einer Iprocentigen Goldchloridlösung) bis sie eine gelbe Färbung angenommen haben. Sodann werden die Mukelfasern nach mehrmaligem Auswaschen in durch Essigsäure angesäuertem Wasser der Siedehitze ausgesetzt , wodurch in wenigen Minuten die Reduction des Goldes ein- tritt. Die Muskelsubstanz nimmt eine rothe bis tiefblaue Färbung an, die Nerven dagegen eine dunklere bis schwarze. Dieser Methode haftet, wie allen Goldtinctionen , als Fehler ein luconstanz in der Färbung an, aber sie gestattet bei ihrer leichten und schnellen Ausführbarkeit, ohne Mühe und Zeitverluste eine grosse Anzahl von Präparaten anzufertigen, worunter sich stets einige gut tingirte finden werden. Besonders günstig erwies sich Sandmann's Methode beim Untersuchen der schwer zu zer- fasernden Säugethiermuskel und ferner beim Studium der degeuerativen Veränderungen der Nervenendenapparate. Dr. Oppenheimer (Bern). 2>. Bacterien, Beferent: Prof. Dr. med. P. Baumgarten in Königsberg i. Pr. Hueppe, F., Die Methoden der Bacterien -Forschung. Wies- baden, (Kreidel) 1885. 5 M 40. Das obige Lehrbuch füllt eine unbestreitbare, gewiss von vielen Seiten lebhaft empfundene Lücke aus : während wir über die Methoden II, 3. Referate und Besprechungen. 405 des Bacteriennachweises durch mikroskopische Untersuchung mehrfaclie treffliche Anleitungen besassen , fehlte es bisher an einem brauciibaren Compendium der Methodik der künstlich enBacterienzüchtung, wie ein solches das Buch H.'s nun in der That darstellt. Ausser den Culturmethoden sind aber auch die mikroskopischen Darstellungsmetho- den, insbesondere die Färbungstechnik der Bacterien eingehend in dem Werkchen berücksichtigt, sowie überhaupt die gesammte Methodologie der modernen Bacterien -Forschung in präciser und doch nahezu er- schöpfender Weise abgehandelt und Anleitung zur Ausführung praktisch- bacteriologischer Arbeit ertheilt worden. Dass H. hierbei vorzugsweise die glänzend bewährte Arbeits- und Untersuchungs-Methode seines Lehrers R. Koch ziu' Geltung bringt, versteht sich von selbst, jedoch sind keineswegs die Anschauungen, Beobachtungen und Methoden an- derer Mykologeu vernachlässigt, dieselben vielmehr nach Verdienst gewürdigt worden. — Der Text ist durch 2 schöne Tafeln in Farben- druck und 31 instructive Holzschnitte* erläutert; die Ausstattung des Buches seitens der Verlagsbuchhandlung vortrefflich, der Preis ein ver- hältnissmässig geringer. — Einer weiteren Empfehlung des Buches be- darf es nach Alledem wohl nicht; alle Diejenigen, welche anfangen, sich selbsttbätig mit bacteriologischen Untersuchungen zu beschäftigen, werden es als einen zuverlässigen, trefflichen Rathgeber schätzen lernen ^. Bauti, Guido, Manuale di tecnica batteriologica. (Dal Giorn. Med. lo Sperimentale. Maggie 1885.) Firenze. (Tip. Ceuniniana). Der Verf. giebt in obiger Schrift 1. eine präcise umd ziemlich er- schöpfende Zusammenstellung aller der mannigfaltigen zum Zwecke der Färbung der verschiedenen pathogenen und nicht pathogenen Bacterien verwandten Methoden, 2. eine auch durch einige Abbildungen der bezüglichen Apparate erläuterte Schilderung des Verfahrens bei der künstlichen Bacterienzüchtung, eine Schilderung, welche im wesent- lichen nach dem Muster der Darstellung dieses Capitels in dem früher erschienenen, oben referirten Compendium Hueppe's gehalten ist. 3. eine kurze Reproduction der bekannten Postulate R. Koch's behufs Nach- weises des mikroparasitären Ursprunges einer Krankheit. 0 Einige derselben, namentlicli die den Sterilisations- und Brut- Apparaten entsprechenden, dürfte es sich wohl zur mehreren Anschaulichkeit empfehlen, in der 2. Auflage in etwas grösserem Massstabe anzulegen. [Ref.]. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 355. 406 Referate und Besprechungen. ü, 3. Cornil et Balbes, Les bacteries et leiire role dans l'anato- mie et l'histologie pathologiqiies des maladies infectieuses. Paris (Felix Alcan) 1885, 666 p. m. 27 pl. lithogr. et 156 grav. s. bois. Das vorliegende Werk widmet einen Theil seines reichen Inhaltes auch der modernen bacterioskopischen Technik mit besonderer Berück- sichtigung der bacteriologischen Methoden Pasteur's und R. Koch's. An Vollständigkeit, üebersichtlichkeit und Correctheit der Darstellung steht jedoch dieser Abschnitt der Arbeit hinter dem eben besprochenen HuEPPE'schen Compeudium zurück. Ferrau, J., lieber die Morphologie des Komma-Bacillus (Zeitschi-, für klin. Med. Bd. IX, 3. u. 4. Heft, p. 361 ff.). Die Methodik, deren sich der Autor bei seinen obigen Unter- suchungen bediente , und mittels welcher er zur Entdeckung der wirk- lichen, bisher unbekannten Entwicklungweise der Kocn'schen Cholera- bacillen gelangt sein will, war folgende: Die Möglichkeit ins Auge fassend, dass die Sporen der Cholera- bacillen bis jetzt nur deshalb nicht entdeckt worden seien, weil bei den seither eingeschlagenen Züchtungsverfahren die Nährkraft des Bodens allzu früh versiegt, resp. weil giftige, nicht rechtzeitig entfernte Zersetzuugsproducte des Nährsubstrates die typische Ent^-icklung der Choleramikroben gestört hätten, fügte F. den Culturen der in mit schwach alkalischer sterilisirter Fleischbrühe versehene Kolben ausge- säten Cholerabacillen, sobald deren Reaction eine saure geworden war, neue neutrale Fleischbrühe oder ein Gemenge von solchen mit Menschen- oder Schweinegalle (10 bis 20 %) hinzu; unmittelbar nach der Einsaat werden die Culturen so lange in den Brutofen bei 37'' C. gebracht, bis sie anfangen sich zu trüben, was, je nach der Menge der Einsaat, nach 4 bis 48 Stunden eintritt; von da ab werden die Culturen bei Zimmer- temperatur (15 bis 25° C.) gehalten und nach 8 bis 10 Tagen kann man, wenn unter der angegebenen Bedingung die erwähnten Zusätze gemacht werden, den eigenthümlichen Entwicklungsprocess der Cholera- spirillen * verfolgen. 1) Die übertragenen Choleraspirillen produciren nacli F. unter den ge- nannten Verhältnissen endogene Sporen, welche sich zu maulbeerartigen „Kör- pern oder Eiern" umgestalten, die mau, falls man Gediüd hat, sein Auge wäh- rend einer Stimde nicht vom Ocular abzuwenden, in den im natürlichen Zustande, d. h. ohne Antrocknung und Fäi'bung mikroskopisch untersuchten Flüssigkeiten einen sehr langen und dünnen Protoplasmafaden ausstossen sieht, dessen zuerst ausgetretenes Stück sich rasch unter den Augen des Be- II, 3. Referate und Besprechungen. 407 Bumm, E., Der Mikro-Organismus der gonorrhoeischen Schleimhaut-Erkrankungen, „Gonokokkus -Neis- ser". Nach Untersuchung beim Weibe und an der Conjunctiva der Neugeborenen. Wiesbaden (Berg- mann) 1885. 164 pp. m. 4 Tfln. Da die bisherigen Angaben über die künstliche Cultur des Gonorrhoekokkus einander noch sehr widersprechen , entschloss sich der Verf., nachdem er an 26 Fällen von Blenorrhoea neonatorum ein- gehende mikroskopische Untersuchungen über das Verhalten der besagten Kokken zum inficirten Gewebe angestellt, die Frage der Reincultur des NEissEB'schen Gonokokkus selbständig zu prüfen. Gleich Fehleisen und BocKHAEDT benutzte B. anfangs als Culturboden Fleischextract und Fleischinfuspeptongelatine von verschiedener Concentration und ver- schiedener Reaction, erreichte aber darauf weder bei Zimmer- noch bei Brüt-Temperatur, trotz reichlichster Aussaat, irgendwie nennenswerthe Wachsthumseffecte. Auch als er, F. Kbause's Beispiel folgend, die Züchtungen auf erstarrtem Hammelblutserum ^ bei 37 bis 39" C. vor- nahm, gelaugte zwar, ausser einigen anderen offenbar accidentellen Mikrobenspecies, eine Diplokokkusart zur Keimung, welche hinsichtlich der Gestalt der Einzelindividuen dem NsissEK'schen Kokkus sehr ähn- lich war, sich aber von diesem durch ihre absolute Nichtinoculirbarkeit auf empfängliche Schleimhäute unterschied. Erst als B. die geimpften Blutserumgläser bei einer Temperatur von 30 bis 34<^ C. hielt und die- selben durch Aufstellung in einem grossen, nicht ganz bis zur Hälfte mit Wasser gefülltem durch eine gut aufgeschliffene Glasplatte gedeckten obachters in eine Spirale umwandelt, Die so gebildeten Spiralen vermehren sich durch Theilung und sind befähigt, wenn man sie auf frische sterilisii'te Fleischbrühe überträgt, den geschilderten Entwicklungscyklus von neuem durchzumachen. Auf Kocu'sche Nährgelatine gebracht, verflüssigen sie die- selbe in ganz ähnlicher Weise, wie es Koch von seinen CholerabacUlen ange- geben hat und erzeugen dort auch dieselben Kommaformen, wie diese. Ref. kann. nicht verhehlen, dass die Methodik des Verf. 's zu dem Verdacht Anlass gibt, dass sich in die Cholerabacillenculturen fremdartige Organismen ein- schmuggelt, deren Entwicklungsformen F. fälschlich für Evolutionsstufen der m-sprünglich vorhandenen echten CholerabacUlen gehalten hat. [Ref.]. 1) Dem Hammel- resp. Rinderblutserum setzte B. in letzter Zeit ver- schieden grosse Mengen von menschlichem Blutserum hinzu, welches diurch Expression aus menschlichen Placenten gewonnen wurde. Das menschliche Serum wird erst hinzugefügt, wenn das Thiersenim starr geworden ist und letzteres nach dem Zusatz nochmals bis zum Gelatiniren erhitzt, die oberste Schicht der Mischung besitzt alsdann einen ziemlich erheblichen Procentsat? au menschlichem Blutserum. 408 Referate und Besprechungen. II, 3. Glasgefäss vor Verdunstimg schützte, erzielte er das erwünschte Re- sultat: von den Impfstrichen aus wachsen unter diesen Verhältnissen die übertragenen Tripperkokken * in grossen weitverzweigten Rasen auf den inoculirten Secretmassen aus oder schieben sich von den Rändern des Secretes als feiner, 1 bis 2 mm breit werdender, dann im Wachs- thum stillstehender Beschlag über die Oberfläche des Nährbodens vor. Leichter und sicherer erhält man letzteren Effect, wenn man bereits nach 24 Stunden von den ersten Impfstrichen eine Uebertragung auf frisches und möglichst weiches Blutserum vornimmt. Die auf diese Weise zu Staude kommenden Gonokokkenreinculturen präsentiren sich als äusserst dünne, makroskopisch oft kaum wahrnehmbare, bei auf- fallendem Licht graugelbliche Belagmassen mit feuchter, glatter Ober- fläche, deren Ränder diffus in die Umgebung übergreifen und das Serum nicht verflüssigen. Das Wachsthum der Reinculturen geht auch im Brütofen nur sehr langsam vor sich, (kaum 1 mm schreiten sie in 24 Stunden vorwärts) ; bei Zimmertemperatur ist die Entwicklung noch weit träger oder sistirt ganz. Die Resultate B.'s über künstliche Züch- tung der Gonorrhoekokken decken sich also der Hauptsache nach mit den einschlägigen von Löffler, Leistikon und F. Keause erhaltenen •, die von ersterem an Stelle des coagulirten Blutserums mit Erfolg ver- wandte Blutserum gelat ine, sowie Agar-Agarlösungen standen B. bei seinen Untersuchungen nicht zu Gebote. — Noch mag Erwähnung finden, dass B. durch Uebertragung seiner reincultivirten Gonorrhoe- kokken auf die gesunde Urethra einer Frau bei dieser typische Gonor- rhoe erzeugte. Lustgarten, Die Syphilisbacillen (Wiener med. Jahrbücher, 1885). [Auch als S.-A. käuflich. Wien (Braumüller) 1885]. Die Methode, mittels deren L, zur Auffindung von bestimmt chara- kterisirten Bacillen in syphilitischen Producten gelangte, ist folgende: a) Schnittpräparate. Härtung des Materials in absolutem Alkohol. Färbung der (möglichst feinen) Schnitte in Ehelich- WEiGERT'scher Gen- tianaviolettlösung 2 12 bis 24 Stunden bei Zimmertemperatur, sodann noch 2 Stunden bei 40" C. im Wärmeschrank. Darauf Abspülung der Schnitte in absolutem Alkohol (mehrere Minuten lang); hiernach Ent- färbung durch folgende Procedur : mau bringt die Schnitte zunächst auf 1) Als Impfmaterial empfieUt sich am meisten, stark kokkenhaltiges Be- eret aus der ersten Zeit des eitrigen Stadium einer gonorrhoeisclien Entzündung zu nehmen. 2) 100 Theile Anilinwasser, 11 Theile concentrirte alkoholische Gentiana- violettlösung. [Ref.]. II, 3. Referate und Besprechungen. 409 etwa 10 Secimclen in eine 1 '/oprocentige wässerige Lösung von Kali hypermanganicum, (wobei ein Niedersclilag von Manganliyperoxyd ent- stellt), sodann unverzüglich für kurze Zeit in eine wässerige Lösung von reiner schwefliger Säure * , (wodurch das Manganhyperoxyd reducirt und in schwefelsaures Mangan verwandelt wird) ; die hierbei stellenweise fast augenblicklich der Farbe beraubten Schnitte werden nun in destillirtem Wasser gewaschen und darauf von neuem in die Lösung von über- mangansaurem Kali übertragen, in welcher sie jetzt und alle folgenden Male nicht länger als 3 bis 4 Secunden verbleiben, aus dieser wiederum in die schweflige Säure u. s. f., bis sie vollständig farblos geworden sind, was in der Regel nach einem 3- bis 4maligem Turnus der Fall ist -; darnach Entwässerung in absolutem Alkohol, Aufhellung in Nelkenöl, Einbettung in Xylolbalsam. Die Schnitte verhalten sich jetzt auch mikroskopisch, abgesehen von den Bacillen (und etwaigen gefärbt gebliebenen Partien der Hornschicht, s. u. Anm.) wie ungefärbte; kör- nige Niederschläge in den Präparaten rühren von ungelöstem Mangan- hyperoxyd her und sind Zeugniss dafür, dass die Behandlung mit schwefliger Säure nicht ausreichend wiederholt wurde. — b) Deck- glaspräparate. Die angetrockneten Schichten brauchen nicht zu dünne zu sein, da die angewandte Entfärbung auch durch dickere Schichten hindurch wirkt. Im übrigen ist das Verfahren das nämliche wie bei den Schnitten, nur wird nicht mit absolutem Alkohol, sondern mit Wasser abgespült, und die Dauer der Einwirkung der einzelnen Acte der Entfärbungsprocedur muss eine kürzere sein. Nach Vollzug der Decolorirung werden die Deckgläschen lufttrocken gemacht und in Canadabalsam angesehen. Nachfärbung des Gewebes mit braunen oder rothen Farbstoffen (wie bei der Tuberkelbacillenfärbung) empfiehlt sich nach L. hier nicht. Ebenso wie die Syphilisbacillen L.'s verhalten sich der genannten Entfärbungsmethode gegenüber die Lepra- und Tuberkel- bacillen; doch werden erstere, im Gegensatze zu den beiden letztge- nannten durch Mineralsäuren schnell entfärbt. Die mit Hülfe der beschriebenen Methode sichtbar gemachten Ba- cillen syphilitischer Krankheitsproducte sehen den Tuberkelbacillen morphologisch sehr ähnlich; doch sind sie häufig mehr oder minder stark gebogen und zuweilen schwach S-förmig gekrümmt; auch zeigen 1) Hergestellt durch Behandeln von metallischem Kupfer mit Schwefelsäure. ^) Sind die Schnitte mit verhornter Epidermis versehen, welche gleich- falls bekanntermassen den Farbstoff sehr stark festhält, so darf man die Ent- färbung nicht bis auf die Spitze treiben, weil sonst leicht die Bacillen den Farbstoff mit verlieren können. 410 • Referate und Besprechungen. II, 3. sie an den Enden ab und zu leicht knopfförmige Anschwellungen, Er- scheinungen, welche bei den Tuberkelbacillen nicht in gleicher Weise vorkommen. In den Bacillen zeigen sich oft helle, ovale, glänzende, zu 2 bis 4 in gleichen Abständen in einem Bacillus enthaltene, niemals endständige Flecke, welche den Farbstoif nicht aufgenommen haben und offenbar den Sporen der Bacillen entsprechen. Die Bacillen finden sich niemals frei im Gewebe, sondern stets innerhalb von Zellen, welche etwas grösser als Lymphkörperchen sind, theils einzeln, theils in Gruppen von 2 bis 8 Exemplaren, iu letzterem Falle entweder unregel- mässig durch einander gelagert oder mehr regelmässig um einander ge- schlungen. Die Zellen werden als Wanderzellen angesprochen. — L. hat in 16 Fällen von syphilitischen Producten, sowohl den primären, als auch der secundären und tertiären Eruptionsperiode, bei acquirirter nicht minder als bei congenitaler Lues seine Syphilisbacillen constant, wenn auch stets nur in recht geringer Menge angetroffen; er hält es hiernach für sehr wahrscheinlich, dass sie die Träger des syphilitischen Virus sind. Weichselbaiim, A., Zur Aetiologie der Rotzkrankheit des Menschen. (Wiener med. Wochenschr. red. von Wittels- HöFER, 1885, No. 21—24). Der Verf. constatirte zunächst durch genaue Untersuchung eines Falles von menschlicher Rotzkrankheit, dass in menschlichen Rotzknoten und Rotzsecreten dieselben Bacillen vorkommen, wie sie, nach Löffler- ScHtJTz's und 0. Israel's Entdeckungen in den Producten des typischen Pferderotzes vorkommen, und als dessen Ursache betrachtet werden müssen. Da die biserigen Angaben über das Verhalten der Rotzbacillen auf künstlichen Cultursubstraten bisher, wie W. mit Recht hervorhebt, nur kurze und fragmentarische waren, hat W. die Gelegenheit benutzt, nach dieser Richtung hin eingehende Untersuchungen anzustellen. Er übertrug zunächst Partikelchen aus den menschlichen Rotzknoten auf Scheiben sterilisirter gekochter Kartoffeln und auf Fleischwasserpepton- gelatine und liess die Culturböden iu Zimmertemperatur. Während hier- bei nach 6 Tagen makroskopisch noch keinerlei Wachsthumserscheinun- gen sichtbar wurden, (mikroskopisch liess sich allerdings schon nach 4 Tagen eine unzweifelhafte Vermehrung der übertragenen Bacillen auf den Kartoffelscheiben nachweisen), geriethen die ausgesäten Bacillen in lebhafte Wucherung, als sie in den D'AjRSONVAii'schen Thermostaten einer Temperatur von 37 bis 38^ C. ausgesetzt wiu'den. Schon nach 48 Stunden hatte sich auf der Kartoffelfläche ein bräunlicher Belag ge- bildet, während in der verflüssigten Gelatine eine fadenziehende, weiss- II, 3. Referate irnd Besprechungen. 411 liehe Substanz entstanden war. Beiderlei Ciüturproducte erwiesen sich als Reinciiltnren der in den Rotzknoten enthaltenen feinen Bacillen. Von diesen ersten Reinciiltnren verimpfte W. dann weiterhin nochmals in verschiedeneu Generationen auf Kartoffeln und Fleischwasserpepton- golatine, ferner aber auch auf Serumgallerte, die sowohl aus Pferdeblut, als auch aus menschlicher Ascitesflüssigkeit bereitet war, auf Fleisch- wasser-Peptonagar (mit und ohne Zusatz von Traubenzucker) und end- lich in Fleischwasserpepton (ohne Gelatine). Auf allen diesen Nähr- siibstraten wuchsen die Rotzbacilleu bei Bruttemperatur üppig und in charakteristischer Weise: auf Kartoffeln stellten sie immer eine kleisterähnliche Masse dar, deren Farbe, anfangs honiggelb, später ein immer dunkleres Braun wurde; auf erstarrtem Blutserum entstanden rundliche, anfangs durchscheinende, später grauweisse Colonien von viscider Beschaffenheit ; auf Agar- Agar entwickelten sich tröpfchenartige, weiche grauweisse Vegetationen; in der verflüssigten Fleischwasser- peptongelatine und in Fleischwasserpepton trat eine die ganze Flüssig- keit in mannigfachen Krümmungen durchsetzende, fadenziehende weiss- Uche Masse auf. Am raschesten wuchsen die Culturen bei 37 bis 38" C. : schon nach 2 bis 3 Tagen waren hier makroskopische Colonien vor- handen, bei Zimmertemperatur trat auf Kartoffeln in der Regel erst nach 2 bis 3 Wochen ein spärlicher bräunlicher, aus Rotzbacilleu be- stehender Auflug, in Fleischwasserpeptongelatine nach eben dieser Zeit eine sehr geringfügige Wucherung auf. Sporen bilden die Rotz- bacilleu nach W.'s Beobachtungen sowohl bei Zimmer- als bei Briit- temperatur, ersterenfalls grössere uud reichlichere. Hinsichtlich der Tinctiousfähigkeit verhalten sich die Rotzbacilleu nach W. wie alle übrigen Bacillen, mit Ausnahme der Lepra- und Tuberkel-Bacillen, nur tiugiren sie sich im allgemeinen, wenigstens mit Methylenblau, etwas schwächer als viele andere Bacterien ; sie stehen also in ihren färberi- scheu Eigenschaften den Typhusbacilleu am nächsten. Durch Ueber- traguug seiner reincultivirteu Rotzbacilleu auf Meerschweinchen, Kanin- chen uud Schafe konnte schliesslich W. wohlcharakterisirten Rotz er- zeugen. — Seine Untersuchungen bestätigten also im wesentlichen die grundlegenden Befunde von Löfflek-Schütz und 0. Iseael, ergänzen und erweitern dieselben aber noch in dankenswerther Weise. M. Botanisches, Delbes, E. , Das Reinigen und Präpariren von Diatoma- ceen-Material. (liedwigia 1885, Heft II. — S. A. 18 pp 8"). 412 Referate und Besprechungen, 11, 3. Die Präparation soll das Material zum Einlegen brauchbar machen und dadurch für die Zwecke der mikroskopischen Beobachtung vorbe- reiten. Um dies zu erreichen, müssen vier Hauptbedingungen erfüllt werden: 1) Aufhellung der Zeichnung der Kieselpanzer durch Zer- störung des Zellinhalts und der organischen Bestandtheile der Zell- wandungen; 2) Beseitigung anhaftender und beigemengter fremder or- ganischer und unorganischer Substanzen; 3) erforderlichen Falles Spal- tung der Frustein insoweit, dass die beiden Hauptplatten vollständig von einander und von dem sie zusammenhaltenden Gürtelbande gelöst werden; 4) Isolirung einzelner Gattungen und Formen aus Diatoma- ceengemengen. In den anzuwendenden Methoden müssen theils che- mische, theils mechanische Manipulationen, sich gegenseitig ergänzend und fördernd, zusammenwirken. Als zweckmässigstes Zerstörungsmittel für organische Substanzen hat sich erfahrungsgemäss das Kochen in concentrirter Salpeter- und Schwefelsäure, unter Umständen auch noch in schwacher Aetzkalilauge bewährt. Dasselbe kann entweder in Por- zellanschalen, sogenannten Abdampfschalen oder in Kochflaschen vorge- nommen werden. Da die Säuredämpfe, die sich beim Kochen entwickeln, der Lunge äusserst nachtheilig sind, lassen sich offene Schalen nicht in geschlossenen, besonderer Abzugsvorrichtungen entbehrenden Räumen anwenden. Verf. benutzt deshalb seit Jahren zu diesem Zwecke mit Vortheil eine Kochflasche mit eingeschliffenem, hohlem Glasstöpsel, in den eine umgekehrte U förmige Glasröhre mit ungleichmässig langen Schenkeln derart eingeschmolzen ist, dass die Oeffnung des längeren Schenkels tiefer als der Boden der Flasche liegt (dergl. Kochflaschen liefert Herr F. 0. R. Götze in Leipzig, Härteistrasse 6, bei Entnahme von 6 Stück das Stück zu 1,75 M.). Dieses äussere längere Abzugs- rohr wird beim Kochen in einen Standcylinder mit ammoniakhaltigem Wasser so geleitet, dass die Röhrenmündung nur wenig (Ya cm) unter die Wasseroberfläche reicht; ausserdem wird das Gefäss aber noch durch einen mit derselben Flüssigkeit genässten, um die eingeführte Röhre herumgelegten Lappen oder Baumwollepfropfen geschlossen. Statt letzterer Vorrichtung kann man auch eine WouLF'sche Flasche an- wenden. Die Beseitigung beigemengter Substanzen lässt sich auf mechanische Weise: durch Schlämmen (Decantiren) und vor allem durch Anwendung einer Siebscala erzielen. Zum Schlämmen benutzt man theils Bechergläser, theils Standcylinder. Um Flüssigkeiten in solchen Fällen abzuziehen, wo es wünschenswerth ist, das Schlämm- gefäss ruhig stehen zu lassen, erweist sich eine Vollpipette mit Gummi- schlauch sehr nützlich. Als Siebe werden entweder weitmaschigere II, 3. Referate und Besprechungen. 413 Drahtsiebe oder engmaschige Seidengazesiebe benutzt (derlei Siebe und Siebringe aus Zinkblech mit und ohne Bezugsmaterial, ebenso wie alle anderen zur Diatomaeeen -Präparation erforderlichen Utensilien liefert E. Thüm in Leipzig, Teichstr. 2, in vorzüglicher Qualität, Seidengaze in allen Nummern auch Egli & SENNHAusERin Leipzig, Jablonowskystr, 1, jedoch nur in Streifen, die durch die ganze Breite des Stoffs laufen). Zur Ausscheidung gröberer Bestandtheile reichen die haltbareren Draht- siebe aus. Von ihnen genügt ein Satz von 3, von den Seidengazesieben ein Satz von 4 bis 5 Nummern, deren feinste (Gaze No. 20 des Handels) 78 Fäden pro Centimeter zählt und trockne Oeffnungen von 0-04 und 0-05 mm hat, die sich bei Benutzung im Wasser infolge des Aufquellens der Fäden bis auf 0-03 mm verengern, sodass auch sehr kleine Formen in dieser Nummer zurückgehalten werden. Nach jedem Gebrauch sind die Siebe aufs sorgfältigste auszuwaschen; auch ist eine Berührung der Gaze mit Aetzkali und Säuren möglichst zu vermeiden. A. Die Präparatiou recenten Materials, besonders wenn es durch geschicktes Sammeln und sachgemässe Vorbehandlung recht frei von fremden Beimengungen erhalten wurde, nimmt die geringste Mühe in Anspruch. Ein 20 bis 40 Minuten langes Kochen in concen- trirter Salpetersäure reicht aus, die geringfügigen organischen Beimen- gungen zu zerstören oder doch so zu verändern, dass ihre Abtrennung auf mechanische Weise leicht erfolgen kann. Bei feinschaligen Formen geht in dieser Zeit auch der Spaltungsprocess vor sich. Derlei Formen spalten schwieriger, oft noch nicht beim nachfolgenden Kochen mit concentrirter Schwefelsäure und müssen dann andere Behandlungsweisen erfahren. In manchen Fällen, wenn die Individuen in Colonien (zu an Stielen sitzenden Bändern, Bogen oder Zickzacklinien) vereinigt sind, ist ein vollständiges Spalten der Frustein nicht einmal erwünscht, da die betreffenden Species in dieser Gestalt gar nicht wieder erkannt werden würden. Dann präparirt man das Material nur theilweise, um ungetheilte Formen ueben den geth eilten einlegen zu können. Zu langes Kochen ist unter allen Umständen zu vermeiden, da durch das- selbe die feinere Structur leidet und zu viel Bruch entsteht. Ist nach circa halbstündigem Kochen mit concentrirter Salpetersäure und nach- folgender 20minutiger Behandlung in englischer Schwefelsäure das Ma- terial noch nicht vollständig von organischen Beimengungen befreit, so muss die fernere Reinigung (nachdem durch Auswaschen mit Wasser möglichst jede Spur von Säure beseitigt worden ist) bei leichten Formen mit Decantiren, bei gröberen und derberen, schwereren daneben auch mit Durchsieben versucht werden. Im ersteren Falle bleiben die leichten 414 Referate und Besprechungen. II, 3. Formen lange im Wasser snspenclirt, während die nicht zerstörten Bei- mengungen in der Regel schneller zu Boden sinken, weshalb durch wiederholtes Abgiessen des suspendirten Materials schon befriedigende Resultate erreicht werden. Bei derberen Formen tritt das Umgekehrte ein, und ist danach das Verfahren zu modificiren. Wird auf diese Weise das Ziel nicht erreicht, so hat es stets guten Erfolg, das Material in einem feinen Gazesiebe, durch das es nicht passiren kann, mit den Spitzen eines feinen langhaarigen Pinsels mit wenig Wasser sanft zu rühren und auf der Gaze sanft zu reiben, da auf diese Weise sich die noch vor- handenen organischen Beimengungen soweit zerkleinern lassen, dass sie bei richtigem Wasserzusatz durch das Sieb geschwemmt werden. Es ha,t dies noch den Vortheil, dass sich dabei gewöhnlich auch die noch ungespaltenen Frustein lösen. Selbstverständlich darf der Präparator nicht versäumen, sich in kurzen Intervallen durch mikroskopische Unter- suchung vom Erfolg der Behandlung zu überzeugen, damit zum Nach- theil des Materials nicht des Guten zu viel geschehe. Vor allem aber hat er sich als goldene Regel vorzuhalten, dass er beim Sieben wie beim Schlämmen nie zu viel Material auf einmal in Behandlung nehme, und dass er besonders beim Schlämmen mit dem Material nie geize. Je verschwenderischer man mit dem Material umgehen kann, desto reiner wird das Uebrigbleibende, und es lassen sich ja mit einer geringen Quantität gut gereinigten Materials Hunderte von tadellosen Präparaten herstellen. Konute auf den bisher angegebenen Wegen noch kein ge- nügendes Resultat gewonnen werden, empfiehlt Verf. als letztes, aber sicher zum Ziele führendes Mittel die Anwendung einer schwachen, je nach der Derbheit und Widerstandsfähigkeit der in Betracht kommen- den Diatomaceenformen, '/iq- bis '/sPi'ocentigen Kalilauge. Zu diesem Behufe wird das vorher gut ausgewässerte Material mit einer 50- bis lOOfachen Menge der geeigneten, vorher filtrirten Kalilösung in einer Abdampfschale oder einem im Sandbade stehenden Becherglas über einer kleinen Spiritusflamme gelindem Kochen ausgesetzt. So lange sich die Lauge trübt, so lange wird Schmutz gelöst, und die Frustein leiden nicht; doch ist es unerlässlich , mit der Pipette fortwährend kleine Proben zu nehmen und sie mikroskopisch zu controliren, um den Kochprocess unterbrechen zu können, wenn alle Schmutzpartikelchen gelöst sind. Nachdem dies geschehen, muss soviel Salz- oder Salpeter- säure zugesetzt werden, bis die Lösung nicht mehr aufbraust, worauf das Material gut ausgewässert und, wie oben beschrieben, weiter be- handelt wird. Verf. räth hierbei dringend die grösste Vorsicht an , da wenige Minuten hinreichend seien , das ganze Material uu- II. 3. Referate und Besprechungen. 415 brauchbar zu machen. Rathsam sei es auch, besonders für Anfänger, möglichst schwache Lauge anzuwenden und lieber das Verfahren mehrere Male zu wiederholen. Um nun auch die mineralischen Bei- mengungen zu trennen, die durch Schlämmen und Sieben nicht be- seitigt werden konnten, nimmt mau ein gewöhnliches, nicht abge- flachtes Uhrglas von 4 bis 5 cm Durchmesser, bringt einige kleine Pipetten von dem Material mit soviel Wasser hinein, dass es bis % ge- füllt wird und lässt es solange stehen, bis Alles abgesetzt ist. Darauf nimmt man es in die Hand und bewegt es in kleinen kreisförmigen Schwenkungen. In dem hierdurch erzeugten Wasserwirbel drängen sich die Diatomaceen nach der Mitte, wo sie als weisses Wirbelwölkchen vom Boden aufsteigen. Bricht man die Bewegung plötzlich ab und neigt das Uhrschälchen auf die Seite, so fliesst das Wölkchen nach dieser hin ab, wo sich nun die ganz reinen Diatomaceen ablagern, während in der Mitte der Schale die schweren Quarzkörnchen und sonstige mineralische Beimengungen in runden Häufchen zurückbleiben. Die Diatomaceen saugt man mit der Pipette auf und deponirt sie in geeigneten Röhren- gläschen, während man den Rückstand beseitigt. Dies Verfahren wird fortgesetzt, bis alles Material rein ist. Nach ein- oder mehrmaligem Auswaschen mit destillirtem Wasser sind die Diatomaceen zum Einlegen fertig. Bis dies erfolgt, werden sie unter Alkohol aufbewahrt. B. Ist das Rohmaterial nicht besonders rein, sondern stark mit unliebsamen Beimengungen vermischt, so muss dem Kochen ein vorbereitendes Verfahren vorausgehen. Ist die Masse trocken und stark mit erdigen Bestandtheilen vermischt, zerbröckelt mau sie und übergiesst sie in einem grösseren Becherglase bis zum Rande desselben mit Wasser. Zerfällt sie rasch, so kann es vor- kommen, dass der grösste Theil der darin enthaltenen Diatomaceen an die Oberfläche des Wassers steigt, um dieselbe in einer zusammen- hängenden Schicht zu bedecken oder sich an der Glaswand am Rande der Wasserfläche abzusetzen. Geschieht dies, so giesst man das auf- gestiegene Material auf ein Filter ab, ergänzt das Wasser, rührt den Schlamm wiederholt um, bis keine Diatomaceen mehr aufsteigen und giesst wieder ab. Das so gewonnene, aus Diatomaceen ohne erhebliche fremde Beimengungen bestehende Material wird schliesslich mit kochen- dem Wasser vom Filter abgeschwemmt und nach dem imter A be- schriebenen Verfahren weiter behandelt. Zerfällt das Rohmaterial im Wasser nicht ohne weiteres, so wird es (eventuell unter Zusatz von etwas Salzsäure) bis zum vollständigen Zerfallen gekocht. Die dabei auf der Oberfläche entstehenden schaumigen Massen werden, ffills sie 416 Referate und Besprechungen. II, 3. bei der Uutersuchuug Diatomaceen enthalten, ebenfalls auf ein Filter abgegossen. Die aufgekochte Masse aber wird durch Schlämmen so behandelt, dass man zuerst in grösseren (alle 15 bis 20 Minuten), dann in allmählich abnehmenden Zeiträumen die suspendirten Diatomaceen abgiesst, bis der Rückstand keinerlei beträchtUche Mengen mehr ent- hält. Sollte die Erlangung zurückgebliebener derberer Formen noch wünschenswerth sein , müssen dieselben durch Aussieben gewonnen werden. Um an Algen festsitzende Diatomaceen zu präpariren, kocht man das Material in Wasser unter Zusatz von Salzsäure (20 bis 30 Pro- cent genügen) und trennt die Diatomaceen nach ihrer Ablösung mittels einer gröberen Siebuummer von den Algenbruchstücken. Mit diesem so gewonnenen „Algenwaschwasser" wird nach A weiter verfahren. Zerfallen die Algen dabei in Gallerte, so sind sie bis zur völligen Zer- störung mit concentrirter Salzsäure zu behandeln. Auf diese letztere Weise lassen sich aus den beiden im Droguenhandel vorkommenden Algenmaterialien „Agar-Agar" und „Helmiuthochorton" prächtige Formen gewinnen. C. Am schwierigsten und mühsamsten von allen recenten Materialien ist der Meeresschlamm, der sogenannte S chlick, zu behan- deln, da derselbe meist quantitativ unergiebig ist, trotzdem aber eine Fülle der schönsten, interessantesten Formen einschliesst. Da Schlick beim Einweichen leicht zerfällt, ist er zunächst nach B zu behandeln, um die aufsteigenden Diatomaceen durch Abgiessen auf ein Filter zu erhalten. Nach vollständigem Zerfallen muss er mit Sieben bearbeitet werden. Vorher empfiehlt sich's, die Masse in einem Topfe 15 Minuten lang in ^/j bis Yaprocentiger Kalilauge linde zu kochen, durch Säuren zu neutralisiren und gut auszusüssen. Es soll damit bezweckt werden, die vorhandenen gröberen Partikelchen wie den ganz feinen Schmutz zu beseitigen. Das Sieben geschieht am besten so, dass man eine massige Menge Material einbringt und dasselbe mit einer nicht zu flachen Schale durch sanftes Auf- und Abwärtsschaukeln so lange bewegt, bis vom Ma- terial nichts mehr durch die Maschen geht. So lange der Rückstand im Sieb keine Diatomaceen enthält, wird er weggeworfen, im anderen Falle aber das in jeder Siebnummer zurückbleibende Material besonders aufbewahrt. Nach Behandlung mit dem letzten Gazesieb wird die lediglich aus feinem Schmutz bestehende durchpassirte Masse beseitigt, da sie selten noch Formen enthält. Sollte dies der Fall sein, wird auch sie aufbewahrt und mit den anderen Sätzen der gleichen Be- handlung unterzogen. Das so erlangte Material wird nun nach A weiter behandelt, aber jeder Satz getrennt, da die grösseren und dickeren n, 3. Referate und Besprechungen. 417 Formen auch mit den gröberen Scbmutzth eilchen gemischt sind und einer energischeren Behandlung unterzogen werden müssen, bei der die feineren zu Grunde gehen würden. Ist das Material so weit präparirt, so enthält es doch noch viele Mineralbestandtheile , vor allem feine Glimmerplättchen, die durch das oben beschriebene Verfahren mittels des Uhrschälchens nicht abzuscheiden sind. Einen vollkommenen Erfolg gab in diesem Falle dem Verf. stets die Anwendung der TnouiiET'schen Lösung (aus der chemischen Fabrik von Teomsdoepp in Erfurt zum Preis von etwa 3 /^ pro Gramm zu beziehen), die concentrirt ein spec. Gewicht von 3' 19 hat. Behufs ihrer Benutzung bringt man in einen kleinen Standcylinder von 1'5 cm Oeffuuug und 7 cm Höhe eine Menge des zu reinigenden Materials, aber nicht mehr als eine Schicht von 1 cm Höhe und zieht das überstehende Wasser mit der Pipette ab. Die THOüLET'sche Lösung selbst hat man vorher durch Wasserzusatz auf die geeignete Schwere (etwa 2*3) gebracht, was sich daraus ersehen lässt, dass ein Stückchen Glimmer (spec. Gewicht nahezu 3) darin auf dem Boden des Glases liegen bleibt oder rasch sinkt, während ein Stückchen Alkali-Glas (spec. Gewicht 2*4 bis 2-6) durch schwenkende Bewegung zum Flottiren kommt, bez. nur sehr langsam untersinkt. Mit ilir füllt man nun den Cylinder bis zum Rande an, und lässt ihn solange bedeckt und vor Staub geschützt stehen, bis eine sichtliche Scheidung der Diatomaceen vom Glimmer und den übrigen Mineralien eingetreten ist, was leicht daran zu erkennen, dass sich die Flüssigkeit rahmartig mit einer weissen Schicht bedeckt und ein deutlicher Bodensatz abgeschieden wird, während die dazwischen stehende Flüssigkeitssäule vollständig klar erscheint. Gut ist's, während der Scheidung das Glas wieder- holt durch leichte Schläge mit der Fingerspitze zu erschüttern, um das Niederfallen zufällig an Diatomaceen haftender Glimmerplätt- chen herbeizuführen. Das schwimmende (aus reinen Diatomaceen bestehende) Material wird mit der Pipette abgezogen, durch Wasser- zusatz gefällt und durch destillirtes Wasser ausgewaschen. Die Lö- sung selbst wird aus den Filtern wieder ausgewaschen, durch Ver- dampfen im Wasserbad concentrirt und immer wieder benutzt. Wegen ihrer starken Giftigkeit * ist beim Gebrauch mit grosser Vorsicht zu verfahren. Die Präparation von fossilem Material erfordert eben- falls die Anwendung sehr' verschiedener Mittel und Methoden. Im all- ') Sie besteht aus Joclkalium-Quecksilberjodid mit einem in dieser Ver- bindung löslichen Ueberschuss an Quecksilberjodid. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie, 11, 3. 27 418 Referate und Besprechungen. n. 3. gemeinen können 4 Typen des Vorkommens fossiler Diatomaceen unter- scliieden werden: 1) Lockere, magere, mehl- oder pulverförmige bis sandige, mehr oder minder mit organischen "und unorganischen Sub- stanzen gemischte Erden, 2) zusammengesiuterte, doch noch zerreibliche stark poröse Massen, 3) thonige Massen, 4) festes Gestein. Die unter Typus 1 fallenden Massen lassen sich wie recente Diatomaceen behan- deln, falls sie nicht kleine ans Diatomaceenschalen znsammengesinterte Klümpchen oder amorphen Kieseiguhr enthalten, in welchem Falle ihre Behandlung mit der des Typus 2 zusammenfallen würde. Hier ist es nöthig, die Massen erst zu zerkleinern, aber in einer Weise, dass die Formen frei gelegt werden, ohne selbst darunter zu leiden. Dies ge- schieht nach dem Verf. in ausgezeichneter Weise durch ein schon von Hakting empfohlenes, aber bisher wenig angewendetes Mittel: Man löst krystallisirtes schwefelsaures Natron bei 35 bis 40 Grad C. in wenig Wasser und begiesst mit dieser concentrirten Lösung das Mate- rial so, dass es von der Flüssigkeit vollständig durchtränkt wird. Nach dem rasch erfolgenden Erkalten beginnt das Salz zu krystallisiren und bringt dadurch das Material zum Zerfallen. Ist's nöthig, das Verfahren zu wiederholen, braucht man nur das Gefäss gelinde über Wasserdampf zu erwärmen, worauf das Glaubersalz im eigenen Krystallwasser schmilzt, um beim Erkalten von neuem zu krystallisiren und den Zerfall weiter zu fördern. Der Process muss in den meisten Fällen öfter wiederholt werden, ehe ein genügendes Resultat erreicht wird. Ist dies erreicht, so wird das Material mit Wasser gut ausgewaschen. Bei Gehalt an Kalk wird es mit Salpeter oder Salzsäure übergössen oder selbst, doch nur kurze Zeit, darin gekocht. Längeres Kochen würde den ohnehin morschen Formen sehr nachtheilig werden. Das soweit vorbereitete Mate- rial wird dann weiter der früher gedachten Behandlung mit Kalilauge unterzogen, gesiebt, geschlämmt und durch Schwenken im Uhrgläschen oder Benutzung der THouLEx'schen Lösung von etwaigen Beimengungen befreit. Die Massen des 3. Typus werden durch das Glaubersalzver- fahren zerkleinert und im Wasser, eventuell unter Kochen, aufgeweicht, bis sie sich schlämmen und sieben lassen. Von den festen Gesteinen des 4. Typus sind nur die einer Präparation fähig, bei denen das die Diatomaceen bindende Medium vorwiegend oder ganz aus kohlensaurem Kalke besteht. Sie werden mit Salz- oder Salpetersäure übergössen und stehen gelassen, bis aller kohlensaurer Kalk gelöst ist. Zu- weilen bleibt nach diesem Verfahren ein ganz reiner Diatomaceen- rückstand übrig, der bloss ausgewaschen zu werden braucht, um zum Einlegen fertig zu sein; meist ist aber noch eine weitere Be- II, 3. Referate und Besprocbungen. 419 handlimg durch Kochen in Säure resp. Kalilauge , sowie Schlämmen u. s. w. uöthig. Von unlöslichem diatomaceenhaltigen Gestein müssen zum Zwecke mikroskopischer Untersuchung Dünnschliffe gemacht werden. Das Spalten der Frustein wurde schon beiläufig erwähnt. Aus dem Kochprocess mit Schwefelsäure gehen noch viele ungespalten hervor. Hier muss zum Reiben mit einem langhaarigen Aquarellpinsel gegriffen werden. Wo durch Spalten die natürliche Gestalt verloren geht, ist es nur theilweise auszuführen oder ganz zu unterlassen, wie bei den Formen, welche keine ebenen Hauptplatten besitzen (Biddulphia, Amphi- tetras, Cerataulus, Isthmia u. a.). Uebrigens lösen sich von vielen mit Säure behandelten Formen die Frustein nach längerem Aufbewahren in reinem Wasser von selbst. Ein leichtes Nachkochen in Säuren und Ab- schlämmen der Güi'telbänder ist dann genügend, das Material zum Ein- legen fertig zu machen. Das Trennen und Absondern verschiedener For- men von einander und aus Gemengen ist auf mechanischem Wege nicht immer leicht, ja zuweilen unmöglich. Der Erfolg wird hauptsächlich durch Erfahrung und Uebuug bedingt. Formen verschiedener Grösse lassen sich, wie schon beschrieben, durch Aussieben trennen, indem man eine Siebnummer anwendet, die die kleineren Formen zurückhält, die grösseren durchlässt. Bei gleich grossen Formen, die aber eine verschiedene Schwere haben, kommt man zuweilen durch Decantiren zum Ziel. Aus trocken eingeweichtem Material steigt häufig nur die eine oder andere Species auf und lässt sich so rein gewinnen ; ebenso sind die beim Aufkochen recenten Materials entstehenden schaumigen Massen nicht selten das Resultat freiwilliger Absonderung einzelner Arten. Ferner setzen sich bei gekochtem Materiale einzelne Arten fester dem Uhrglas an, sodass sie selbst dem Abspülen mit Wasser wider- stehen und nur mit dem Pinsel zu trennen sind, andere wieder haften so wenig, dass man sie wegblasen kann. Auch dieser Umstand giebt Gelegenheit, eine Trennung herbeizuführen, wie sich überhaupt in der Praxis und durch dieselbe schliesslich hundert Wege und Auskunfts- mittel ergeben, zum Ziele zu gelangen. Findet sich freilich ein solches nicht, so bleibt mu- übrig, die begehrungswerthen Formen mit dem Mikroskop herauszusuchen. Die hierzu nöthigen Hilfsmittel und deren Anwendung soll eine spätere Arbeit darlegen. 0. E. IL Zimmermann (Chemnitz). FraiiCOtte, P., Description des differentes methodes employees pour ranger les coupes et les Dia- tome es eu series sur le port-objet [Suite]. (Bull. 27* 420 Referate und Besprechungen. n, 3. Soc. Beige de Microsc. t. X, 1884, p. 137; cfr. Joiirn. R. Microsc. Soc. Ser. II vol. IV, 1884, pt. 6 p. 984) K Die Vorschriften zu dieser Methode lauten folgendermaassen : 1. Mau löse in der Wärme 7 bis 10 g Leim oder Gelatine in 100 g Wasser und filtrire die gelbliche, nach dem Erkalten klare Flüssigkeit. 2. Diese Lösung breite man mittels des Pinsels oder in der Art wie die Collodiumüberzüge hergestellt werden über den Objectträger aus, ordne dann auf dem noch feuchten Ueberzug die Schnitte und lasse vor Staub geschützt trocknen. Um das Trocknen zu beschleunigen, können die Präparate auch auf ein Wasserbad oder in einen Trocken- ofen gebracht und unter einer Temperatur von 45 bis 50° C. erhalten werden. 3. Nach dem Trocknen erwärme man den Objectträger leicht über der Lampe. Das Einbettungsmittel (es ist Paraffin vorausgesetzt) wird dann durch Terpentin entfernt. (Andere Einbettungsmittel müssen ent- sprechend wie bei anderen Methoden behandelt werden. Ref.). 4. Das fertige Präparat wird mit einem mit flüssigem Canadabalsam bestrichenen Deckglase bedeckt. Soll das Präparat in Glycerin aufbewahrt werden, so entfernt man das Terpertin mittels absoluten Alkohols und giebt Glycerin auf das zu verkittende Deckglas. Eine nachträgliche Färbung der Schnitte kann mittels eines in Alkohol löslichen Färbemittels z. B. Hämatoxylin, Eosin, Anilinfarben etc. ausgeführt werden, da dieser weder Leim noch Gela- tine löst. Wollte man ein in Wasser gelöstes Tinctionsmittel anwen- den, so müsste man ein etwas coruplicirteres Verfahren anwenden und die aufgelegten Schnitte vorher in Tauniulösung waschen. — Die Vor- theile dieser Methode vor anderen bekannten Verfahrungsweiseu sucht Feaxcotte in Folgendem: Die Fixinmgsflüssigkeit ist leicht herzu- stellen ; die Schnitte haften stets vollkommen und eine Verschiebung ist nicht zu fürchten ; zum Waschen können Aether, Chloroform und Nelkenöl, als Aufbewahrungsmittel Canadabalsam, Glycerin oder irgend ein an- deres verwendet werden ; Endlich sollen die beim Schneiden sich bilden- den Falten sich ohne Schwierigkeit ausgleichen lassen. Ausser dem Paraffin können auch zum Schneiden Gummi, Eiweiss, Seife, Collodium, Celloidin etc. als Einbettungsmittel in Gebrauch genommen werden. In diesen Fällen werden die Schnitte zuerst in destillirtes Wasser ge- bracht und in noch nassem Zustande auf die Leim- resp. Gelatineschicht gelegt. Um hierbei eine Verzerrung der Gewebe zu vermeiden, darf 1) Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 579. n, 3. Referate und Besprechungen. . 421 die Verdunstimg der Feuchtigkeit nur solange fortgesetzt werden, bis eben das Trocl^enwerden anfängt, und es muss dann mit absolutem Alkohol behandelt werden, welcher, indem er den Leim niederschlägt, ein festes Anhaften zwischen den Schnitten und dem Glase bewirkt. Br. L. Dippel. Examining the spectrum of Chlorophyll (Journ. R. JVIicrosc. Soc. Ser. II vol. V, 1885, pt. 3 p. 527). Das Referat an angezogener Stelle sagt einleitend : Mr. F. 0. Bower und Dr. F. H. Vines (Bower and Vines's Course of Practical Intruction in Botany) empfehlen die folgende als eine geeignete Methode zur spectrosko- pischen Beobachtung einer Chlorophylllösung. Hierauf wird die Beobach- tungsmethode beschrieben, welche von Pringsheim 1874 (Monatsberichte der K. Academie der Wissenschaften in Berlin, October 1874) zuerst und dann später auch von Reinke (Pringsheim's Jahrbücher für wissen- schaftliche Botanik Bd. X, 1876) und mir (Flora 1878) in etwas abge- änderter Form angewendet und in meinem Handbuche der allgemeinen Mikroskopie p. 973 u. 974 beschrieben worden ist. Das Neue, was die Methode der genannten Autoren bringt, ist, dass der (mittels Zahn und Trieb bewegliche) Tubus ganz entfernt, an dessen Stelle die durch Um- wicklung mit schwarzem Papier vom Seitenlicht abgeschlossene Glasröhre gebracht und dieser das Spectral-Ocular unmittelbar aufgesetzt wird. Dem gegenüber möge nur erwähnt sein, dass auch bei Zahn- und Triebbewe- gung die Entfernung des Tubus nicht nothweudig (besser wohl zu ver- meiden) ist und dass für hohe Lösungsschichteu die nothwendige Ver- längerung am oberen Ende mittels Hilfsröhren vorgenommen werden kann. Br. Leopold Bippel. F. MineralogiscJi-GeologiscJies, JReferent: Professor Br. Arthur Wiclimcmn in ütrecJit. Lehmaiin, 0., lieber eine vereinfachte Construction des Krystallisationsmikroskops. (Zeitschr. f. Instrumenteuk. Bd. IV, 1884, p. 369 bis 376). Nachdem der Verf bereits früher unter dem Namen „Krystallisa- tionsmikroskop" ein Instrument beschrieben hat, welches namentlich dazu dient, um Krystallbildungen unter dem Mikroskop bei verschiedenen Temperatur- und Druckverhältnissen zu verfolgen, giebt er in dem vor- stehenden Aufsatze eine nähere Beschreibung dieses compendiösen In- strumentes, welches inzwischen vom Verf. selbst vielfache Verbesserungen erfahren hat. 422 Referate und Besprechungen. II, 3. Der Arbeitstisch, welcher das eigentliche Mikroskop trägt und zu- gleich alle erforderlichen Nebeneinrichtungen enthält, ist aus Eisen an- gefertigt. Der mit dem Mikroskope fest verbundene Objecttisch besteht aus einer grossen viereckigen Platte, ferner dem eigentlichen Tischchen, welches mittels dreier Füsschen lose auf die Drehscheibe eingesetzt ist. Zwischen Tischchen und Drehscheibe bleibt somit ein schmaler Zwischen- raum, welcher den von der Heizflamme aufsteigenden Verbreunungsgaseu den Abzug gestattet. Eine auf sehr zweckmässige Weise angebrachte metallene Kreistheilung gestattet unmittelbare Ablesung. — Die Ver- schiebung des Tubus wird durch Trieb in Schlittenführung an dem in der Vorderkaute des Objecttisches festgeschraubten Fusse des Mikro- skops bewirkt. Das obere Nicol kann durch eine OefFnung des Tubus dicht über dem Objectiv eingeschoben werden und ist durch ein Char- nier beständig mit dem Mikroskop verbunden. Das untere Nicol befindet sich in einem Rohre, welches an einem beweglichen Arme an dem Tisch- gestell befestigt ist. — Zur Beleuchtung der Objecte dient ein Aegand- sclier Gasbrenner, dessen Licht durch einen Spiegel nach oben reflectirt und durch eine Linse concentrirt wird. Zur Erwärmung des zu untersuchenden Präparates dient ein Brenner, der an einem beweglichen Arme befestigt ist. In den Brenner münden zwei Röhren, von welchen die eine Luft, die andere Gas zuführt. Eine abnehmbare Blasvorrichtung, welche von oben auf die Mitte des Object- tisches gerichtet werden kann, dient dazu, eine momentane Abkühlung des Präparates zu erzeugen. Ausser der erforderlichen Gas- und Luft- leitung, ist der Mikroskoptisch auch noch mit Wasserleitangsröhren ver- sehen, welche bestimmt sind durch den Kühlschirm der Objective einen continuirlichen Wasserstrom zu unterhalten. Ferner enthält der Arbeits- tisch vier Blechtröge behufs Aufnahme von Reagentien, Objectträger und anderen Utensilien. Endlich sind noch Vorwärmer angebracht, um gleich- zeitig mehrere Präparate vorgewärmt zur Untersuchung bereit zu halten. — Zum Schluss giebt der Verf. noch eine Reihe von Beispielen, welche die Wichtigkeit der mit diesem Instrumente ausgeführten Untersuchungen darthun. Haushofer, K., Beiträge zur mikroskopisch-chemischen Analyse. (Sitzungsber. der bayr. Acad. d. Wiss. Bd. XV, 1885, p. 206 bis 226). 1. Nachiveis des Wolframs. Die früheren Angaben des Verf. , welche diesen Gegenstand betreffen , werden durch weitere Mit- theilungen ergänzt: n, 3. Referate und Besprechungen. 423 a. Calciiimwoll'ramat. Die fein pulverisirte Substanz wird mit dem 15- bis 20fachen Volumen Salpeter zusammengeschmolzen, wobei man die Erliitzung rasch bis zur schwachen Rothgluth treibt. Die Schmelze wird mit einigen Tropfen Wasser ausgelaugt. Lässt man als- dann einen Tropfen der Lösung auf dem Objectglase mit einer ver- dünnten Lösung von Calciumnitrat zusammentreten, so bildet sich ein Niederschlag vo^jCalciumwolframat , welcher aus kleinen tetragonaleu Kryställcheu (die aber erst bei SOOfacher Vergrösserung zu erkennen sind) und kugeligen Aggregaten besteht. Scharf ist dagegen die Re- action, wenn mau die Ausfüllung in der Siedehitze vornimmt. Die Kry- stalle erscheinen meist als kleine tetragonale Prismen, die zuweilen an den Enden verdickt sind, vorherrschend aber als spindelförmige Gebilde, welche durch Uebergaugsformen mit den kugeligen in Verbindung stehen. Dieses Calciumwolframat hat wahrscheinlich die Zusammensetzung des Scheelits CaWO^ b. Baryumwolframat. Wird dem, auf die oben angegebene Weise gebildeten Alkaliwolframat auf dem Objectglase ein Tropfen verdünnter Lösung von Baryumuitrat hinzugefügt, so bildet sich ein weisser Niederschlag von Baryumwolframat, welcher aus kleinen, farb- losen, glänzenden Krystallen in Gestalt rhombischer Pyramiden und Täfelchen besteht. Diese Krystalle sind nicht selten zwillingsartig mit einander verbunden oder zu Gruppen verwachsen. c. Ammoniumwolframat. Natürliche Wolframverbindungen werden in sehr fein gepulvertem Zustande mit Königswasser behandelt, bis zur Trockniss verdampft und erst mit Wasser, sodann mit Ammoniak ausgelaugt. Lässt man die zuletzt erhaltene Lösung auf dem Object- glase verdunsten, so scheiden sich neben anderen krystallinen Bildungen stets Krystalle eines und desselben Ammoniumwolfraraates aus, welche in farblosen, dünnen Tafeln von rhombischen Umrissen mit einem ebenen, spitzen Winkel von 86 " erscheinen. Die Auslöschungsrichtungen der Tafeln liegen „ungefähr" den Diagonalen parallel. Sehr characteristisch ist das Verhalten dieses Salzes in der Wärme. Durch Erhitzen bis zum schwachen Glühen erhalten sie zahlreiche Sprünge und werden trüb grünlich-blau. Die Molybdate des Calciums und Baryums weisen dieselben Formen auf, wie die entsprechenden Wolframate. Bei Gegenwart der Molyb- dänsäure ist daher nur das Ammoniumwolframat behufs Nachweisung des Wolframs verwendbar. 2. lieber die miliro shopischen Kry st all formen ei- niger Oxalate, lieber die Oxalate des Cerium, Thorium und Yttrium 424 Referate und Besprecliungen. 11, 3. hat der Verf. bereits früher berichtet *. Im Nachfolgenden mögen die Ergebnisse weiterer Untersuchungen über mikrokrystalline Oxalate mit- getheilt werden. a. Baryumoxalat. Bei der Fällung sehr verdünnter neutraler oder schwach alkalischer Lösungen von Baryumsalzen durch Ammonium- oxalat entstehen krystallinische Niederschläge , welche je nach der bei der Fällung herrschenden Temperatur zwei hinsichlUch ihrer Formen wesentlich verschiedenen Salzen angehören. Bei gewöhnlicher Tempe- ratur bilden sich monokline Prismen mit schiefliegenden Endflächen. Ihre Auslöschung in Bezug auf die Verticalaxe beträgt 24 ". Bei der Fällung in der Siedehitze erhält man einen Niederschlag, welcher aus sechseitigen , langgezogenen Lamellen besteht, die wahrscheinlich dem rhombischen System angehören. b. Blei Oxalat. Bei der Fällung verdünnter Lösungen von Blei- salzen durch Oxalsäure bildet sich ein Niederschlag von farblosen Kry- ställchen von ziemlich verschiedenem Habitus. Die Mehrzahl uud die klemsten derselben erscheinen als rectanguläre oder quadratische Täfel- chen. Daneben treten langgestreckte, an den Enden abgeschrägte La- mellen auf, und endlich erscheinen die am vollkommensten entwickelten Krystalle als kurze vierseitige Prismen mit einer zweiflächigen Endigung. Alle diese Formen zeigen bei gekreuzten Nicols parallele Auslöschung. c. Calciumoxalat. Das Salz Ca C'^ 0^ -f- SH^ 0 ist tetragonal und bildet sich vorherrschend durch Fällung sehr verdünnter Lösungen bei gewöhnlicher Zimmertemperatur, am leichtesten aus neutralen oder alkalischen Lösungen. — ■ Das Salz CaC^ 0* + H ^0 ist monoklin, als Pflanzensecret sehr verbreitet und als Mineral (Whewellit) vorkommend. Es bildet sich bei gewöhnlicher Temperatur häufig schon neben dem tetragonalen Salz, bei Gegenwart freier Salzsäure oder überschüssiger Oxalsäure. Ausschliesslich allein bildet es sich bei der Fällung aus kochend heissen Lösungen durch Oxalsäure. — Bezüglich des Verhaltens der Calciiunoxalate in Gegenwart anderer als Oxalate fällbarer Metalle hat der Verf. das Folgende ermittelt: Die Gegenwart von Magnesium übt keinen wahrnehmbaren Einfluss auf die Bildung des Calciumoxalates aus. Baryum und Strontium wirken ebensowenig störend, wenn man die Fällung in der Wärme, in neutraler Lösung aber in einem Ueberschuss von Oxalsäure vornimmt. Dabei wird Baryum garnicht, Strontium nur dann theilweile ausgefällt, wenn dasselbe in grösseren Mengen vorhanden ist. Enthalten Calciumlösungen noch Cerium und 1) Cfr. diese Zeitschr., Bd. I, 1884, p. 465. n, 3. Referate und Besprechungen. 425 Yttrium, so erscheinen bei heisser Fällung die Oxalate derselben in ihren charakteristischen Formen, die von denen des Calciumoxalates leicht zu unterscheiden sind. d. Ceriumoxalat. Der Verf. vermuthet, dass die bei der Siede- hitze ausgefällten Täfelchen, welche neben den charakteristischen La- mellen des Ceriumoxalates entstehen, einem Lanthanoxalat von anderem Wassergehalte angehören. e. Eisenoxyd uloxalat. EisenoxyduUösuugen werden durch Oxalsäure unter Bildung blassgelblichgrüner Prismen oder Täfelchen gefällt, welche dem rhombischen System angehören. f. Cadmiumoxalat. Nicht zu saure Cadmiumlösungen geben mit oxalsaurem Ammon, laugsamer mit Oxalsäure, einen Niederschlag, welcher aus farblosen, monoklinen Krystallen besteht. In einer Schwefel- wasserstotfatmosphäre werden die Krystalle schön gelb und trübe. g. Kobalt- und Nickeloxalat. Salpetersaure Lösungen von Kobalt und Nickel, welche bis fast zur Trockuiss abgedampft sind, geben mit Oxalsäure einen Niederschlag, welcher im üeberschuss von Oxal- säure so gut wie unlöslich ist. Gleichzeitig vorhandenes Eisen bleibt als Oxalat in Lösung und kann durch Filtration entfernt werden. Das Oxalat des Kobalts erscheint aus reinen Lösungen in flachen , rectan- gulären Prismen, aus nickelhaltigen in beiderseits zugespitzten Nädel- chen mit gerader Auslöschung. Das aus reinen Nickellösungen erhaltene Oxalat bildet kleine trapezförmige oder rhombische Schüppchen, ge- wöhnlich aber flache Kügelcheu, deren Formen jedoch erst bei öOOfacher Vergrösserung deutlich zu unterscheiden sind. Bereits wenn das Ver- hältniss von Ni zu Co in einer Lösung wie 1 : 2 ist, erscheinen die Formen des Kobaltoxalates nur noch vereinzelt, bei gleichen Mengenverhältnissen sind lediglich die Formen des Nickeloxalates zu beobachten und erst wenn das Verhältniss von Co zu Ni, wie 3 : 1 wird, erlangen die Formen des Kobaltoxalates die Oberhand. — Nach dem Abgiessen der über- stehenden Flüssigkeit löst sich der Niederschlag in einem Tropfen Am- moniak langsam aber vollständig auf. Reine Kobaltlösungen bleiben dabei völlig klar, bei Gegenwart von Nickel bildet sich ein Niederschlag von Nickelammoniumoxalat, welcher meist aus kugeligen oder flach sphä- roidischen Gebilden besteht. h. Kupfer Oxalat. Lösungen von Kupfersalzen geben mit Oxal- säure einen bläulich - weissen Niederschlag Cu C- 0"* -\- H^O, welcher bei gewöhnlicher Temperatur in kleinen kugeligen und ellipsoidischen Gebilden erscheint, die gewöhnlich Aggregatpolarisation zeigen und stark lichtbrechend sind. Wird die Fällung in der Siedehitze ausgeführt, so 426 Referate und Besprechungen. II, 3. bilden sich nebenden obengenannten Formen kleine, scharf ausgebildete rhombische Kryställchen der Combination cx^P. P. (110). (111). In Schwefelwasserstoff nehmen die Krystalle bald eine braune bis tief schwarze Farbe an. i. Manganoxy duloxalat. Die hinreichend verdünnte Lösung eines Mauganoxydulsalzes liefert mit Oxalsäure einen Niederschlag, welcher aus farblosen, gewöhnlich sternförmig gruppirten Prismen be- steht, die parallele Auslöschung aufweisen. k. Silber Oxalat. Verdünnte Lösungen von Silberuitrat liefern mit Oxalsäure in der Kälte einen Niederschlag, welcher unter dem Mi- kroskop aus kleinen, scharf ausgebildeten Blättchen besteht, die meist hexagonale, bisweilen rhombische Umrisse zeigen. Sie gehören wahr- scheinlich dem rhombischen System an. Die Zusammensetzung dieses Salzes ist Ag C^ 0*, dasselbe ist in Ammoniak löslich. 1. Strontiumoxalat. Lösungen von Strontiumsalzen bilden mit Oxalsäure oder Amraoniumoxalat in der Siedehitze prismatische Kry- stalle, welche vielleicht mit denen des monoklinen Baryumoxalates über- einstimmen. Li der Kälte bilden sich Formen, welche denen des Cal- ciumoxalates völlig gleichen. Das tetragonale Salz entsteht auch oft bei der Fällung in der Siedehitze, namentlich auch wenn ein Gemenge von Calcium- und Strontiumlösung durch Oxalsäure gefällt wird, wobei das Calciumsalz monoklin, das Stroutiumsalz tetragonal ausfällt. m. Zinkoxalat. Neutrale oder schwach saure Lösungen von Zinksalzen geben mit Oxalsäure einen weissen Niederschlag, welcher bei genügender Verdünnung stets krystallisirt ist. Die Kryställchen besitzen einen ausgesprochen rhombischen Habitus und erscheinen meist als niedrige Pj'-ramiden oder Domen von rhombischer Basis, sel- tener als rhombische Täfelchen. Im polarisirten Lichte weisen sie leb- hafte Interferenzfarbeu auf. — Die Reaction ist eine recht scharfe, da sich die eigeuthümlichen Formen neben den Oxalaten der meisten das das Zink vergesellschaftenden Metalle bilden. Bei Gegenwart von Eisen- oxydulsalzen sind Verwechslungen möglich, daher sind die letzteren vor- her in der Lösung zu oxydireu, worauf sie dann nicht mehr durch Oxal- säure gefällt werden. Bei Gegenwart von Cadmium bilden sich aus- schliesslich die Formen des Zinkoxalates. 3. Ueher einen lil einen Filtrirax^parat. An Stelle der von Stkeno kürzlich angegebenen Methode, um bei mikrochemischen Untersuchungen einen Niederschlag von einer Lösung zu trennen, schlägt der Verf die Anwendung des folgenden kleinen Apparates vor: Zwei kurze Glasröhren a und h von 3, höchstens 4 mm lichter Weite, sind II, 3. Referate und Bespi'eclmugen. 427 je an einem Ende senkrecht abgeschliffen und dann in einer horizon- talen Klammer so befestigt, dass sie vertical über einander stehen und die abgeschliffenen Flächen sich eben berühren. Die obere Röhre a ist am oberen Ende trichterförmig erweitert, die untere h besitzt im oberen Drittel eine Ansatzröhre c, welche schräge nach oben gerichtet ist. lieber das freie Ende desselben wird ein Gummischlauch gezogen, der das Absaugen der Luft vermittelt. Das untere Ende der Röhre h wird durch den Stöpsel d verschlossen, wenn filtrirt werden soll. Zwi- schen die abgeschliffenen Enden der Glasröhren bei c wird ein ange- feuchtetes Scheibchen von doppeltem Filtrirpapier gebracht, welches den Rand der Glasröhren um 1 mm überragt und hierauf die abge- schliffenen Enden durch die Klemmschraube s gegeneinander gepresst. Sobald die zu filtri- rende Flüssigkeit in die Röhre a gebracht JIC. ^^^^^ j^ worden ist, saugt man behutsam durch den Gummischlauch die Luft aus &, das Filtrat sammelt sich schnell über d und wird von dort durch Oeffnen des Verschlusses ent- leert. Der Niederschlag befindet sich auf dem oberen Papierscheibchen in einer kreis- förmigen Lage von 3 bis 4 mm Durchmesser und lässt sich leicht auf ein Objectglas übertragen. Hausliofer, K., Mikroskopische Reactionen. (Stzber. d. k. bayr. Acad. d. Wiss. Bd. XIV., 1884, p. 590 bis 604). 1. Baryum. Der Niederschlag des Baryumsulfates ist löslich in concentrirter siedender Schwefelsäure, und scheiden sich beim Erkalten eines Tropfens solcher Lösung auf dem Objectglase Kryställchen in Form rectangulärer Tafeln oder Skelette, welche sich auf diese Formen zurückführen lassen, aus. Die Gestalten des auf dieselbe Weise gebil- deten Strontiumsulfates lassen sich dagegen stets auf eine rhombische Form zurückführen. Ist Strontium neben Baryum vorhanden, so empfiehlt der Verf. die sehr verdünnte salzsaure oder salpetersaure Lösung durch Kaliumchromat zu fällen. Beim allmählichen Zutritt erhält man das Ba- ryumchromat in charakteristischen Krystallformen , während das Stron- tium nicht gefällt wird. Bequemer und schärfer ist die inzwischen von Steeng ^ vorgeschlagene Reaction auf Baryum mittels Ferrocyaukalium. 2. Beryllium. Versetzt man einen Tropfen einer Berylliumsalz- lösung mit Platinchlorid, so scheiden sich tetragonale Tafeln von Be- •) Cfr. tliese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 264. 428 Referate und Besprechimgen. II, 3, rylliumpIatinchloriclBePtCl*' -|- ^H^O aus. Es empfiehlt sich, die Be- rylliumverbindimg mit Natriumcarbonat aiifzuschliessen. 3. Chlor. Die sehr scharfe Reaction mittels Silbernitrat hat für die mikroskopische Untersuchung wenig Werth, da sich das so gebildete , Chlorsilber als amorph erweist. Verf. schlägt nun vor, den weissen Nie- derschlag durch Hinzufügung eines Tropfens Ammoniak in Lösung zu bringen, worauf sich alsdann beim Verdunsten sehr kleine , stark licht- brechende reguläre Kryställchen von Chlorsilber ausscheiden. 4. Chrom. Als Aufschlussmittel für Chromverbindungen wird ein Gemenge, bestehend aus gleichen Theilen von Calciumoxyd, Kalium- sulfat und Kaliumcarbonat vorgeschlagen. Die Schmelzung kann an einem Platindraht in der Oxydationsflamme des Löthrohrs ausgeführt werden. Man löst sodann das Schmelzproduct in einem Tropfen Wasser, säuert mit sehr wenig Salpetersäure an und fügt Silbernitrat hinzu. Bei ge- nügender Verdünnung tritt das Silberchromat in rhombischen Täfelchen mit einem spitzen, ebenen Winkel von 72"* auf Daneben finden sich rectanguläre Täfelchen, Stäbchen und sternförmige Gebilde. Kleinere Krystalle erscheinen oft schwarz und undurchsichtig, sind sie dagegen genügend dünn, so erhalten sie eine hyacinthrothe Farbe. 5. Lithium. Versetzt man eine neutrale, nicht allzusehr verdünnte Lösung eines Lithiumsalzes mit Natriumphosphat, erhitzt dann bis nahe zum Sieden, so scheiden sich Kryställchen des schwer löslichen Lithium- phosphates Li ^ PO* + H^O aus. 6. Magnesium. Behandelt man zersetzbare Magnesiumverbin- dungen mit concentrirter Schwefelsäure, raucht bis fast zur Trockniss ab, zieht alsdann den Rückstand mit etwas Wasser aus und lässt die Lösung auf dem Objectglase im Exsiccator verdunsten, so bilden sich sechsseitige Täfelchen, welche dem Salze H2Mg(S0*)2 angehören. Die- selben sind sehr zerfliesslich und lösen sich nach wenigen Minuten wieder auf Verf beschreibt auch noch andere Magnesiumsulfate, die beim Kochen der zu untersuchenden Substanz mit concentrirter Schwefel- säure erhalten werden. 7. Molybdän. Die zu prüfende Verbindung wird in einem Ge- menge, bestehend aus gleichen Theilen von Kaliumnitrat und Kalium- carbonat aufgeschlossen. Man löst das Schmelzproduct in einem Tropfen Wasser auf dem Objectglase, säuert mit Salpetersäure an und fügt eine sehr kleine Menge von Natriumphosphat hinzu. Bei Anwesenheit von Molybdän bilden sich reguläre Kryställchen des phosphormolybdänsauren Kaliums. 8. Titan. Das Pulver der Probe wird mit der 10- bis 15 fachen II, 3. Referate und Besprecliungen. 429 Menge Fliiorkalium am Platindraht geschmolzen, man erhält eine in der Hitze klare Perle, die beim Erkalten gelblich emailleweiss wird. Man lässt das Schmelzproduct in einem Platinschälchen mit einigen Tropfen Wasser zerfallen, entfernt die Lösung durch Absaugen mittels Filtrir- papier, löst den weissen Rückstand in Flusssäure, verdünnt mit Wasser und setzt in ganz kleinen Partien wässeriges Kali so lange hinzu, bis sich ein bleibender Niederschlag bildet. Derselbe besteht aus Titan- fluorkalium TiK'^F*' -|- H^O, welches monoklin krystallisirt. 9. Vanadium. Man schmilzt die Probe mitder 10- bis 15fachen Menge von Kaliumnitrat vor dem Löthrohr gut zusammen, laugt das Schmelzproduct mit einigen Tropfen Wasser aus, bringt einen Tropfen der Lösung auf das Objectglas und legt in die Mitte desselben ein Kry- ställchen von Salmiak. Es scheiden sich alsdann viele kleine Krystalle von Ammouiummetavanadinat aus. — Die Bildung von rhombischen Kryställchen des Kaliumdivanadinats kann veranlasst werden, wenn man der aus dem Schmelzproduct erhaltenen Lösung etwas Salpetersäure zu- setzt. Aus diesem Kaliumdivanadinat kann ein durch Krystallform und Farbe gut charakterisirtes Thalliumvanadinat erhalten werden, indem man zu der Lösung des ersteren allmählich eine geringe Menge Thallium- sulfatlösung treten lässt. 10. Wolfram. Beim Schmelzen des Wolframits mit Kaliumnitrat erhält man ein durch mangansaures Kalium grün gefärbtes Email, welches in einem Tropfen Wasser leicht löslich ist. Fügt man bei ausreichender Verdünnung eine geringe Menge Chlorcalcium hinzu, so bilden sich te- tragonale Kryställchen des wolframsauren Calciums, die jedoch sehr klein sind und erst bei öOOfacher Vergrösserung erkannt werden können*. Streng, A., Ueber einige mikroskopisch-chemische Reac- tionen. (XXIV. Ber. der Oberh. Ges. f. Natur- u. Heilk. zu Giessen 1885, p. 54 bis 55). Prüfung auf Silber. Silberlösungen geben mit Salzsäure den bekannten käsigen Niederschlag. Im Ueberschuss von Salzsäure in der Wärme ist derselbe jedoch löslich und scheiden sich beim Verdunsten Oktaeder von Chlorsilber aus. Prüfung auf Arsen. Nach der Oxydation mit Salpetersäure wird der Lösung eine ammoniakalische Lösung von Mg SO* und Salmiak zugefügt. Die Reaction ist genau dieselbe wie auf Phosphorsäure. Prüfung auf Antimon. Man dampft einen Tropfen der salz- sauren Lösung des Antimonoxydes zur Trockniss, fügt einen Tropfen 1) Cfr. diese Zeitschr. II, 1885, p. 422. 430 Referate und Besprechungen. 11, 3. Wasser hinzu, in welchem etwas normales weinsaures Baryum suspeu- dirt und sehr wenig Chlorbaryum gelöst ist. Man erwärmt, lässt er- kalten und verdunsten. Bei Anwesenheit von Antimon erhält man rhom- bische Täfelchen, deren Seiten einen Winkel von 128" mit einander bilden. Sie bestehen aus weinsaurem Antimonyl-Baryum. DieReaction ist sehr scharf. Prüfung auf Baryum. Mit Brechweinsteinlösung entstehen in neutralen Baryumlösungen die eben erwähnten rhombischen Täfelchen. Prüfung auf Weinsäure. In einem Gemenge von Chlorba- ryum mit Antimonoxyd in salzsaurer Lösung entstehen mit Weinsäure dieselben rhombischen Täfelchen. Prüfung auf Schwefelsäure. Beim Hinzufügen von Chlor- calcium entstehen Gypskryställchen. — Um bei mikroskopisch - chemischen Untersuchungen einen Nieder- schlag von einer Lösung zu trennen', schlägt der Verf. vor, einen etwa 2 mm breiten und 25 mm langen Streifen Filtrirpapier anzufeuchten und so auf den schief stehenden Objectträger zu legen, dass die Lösung durch Capillarattraction aufgesogen wird. Stellt man dann einen zweiten Objectträger unter das Ende des nach abwärts gebogenen Papierstreifens, so ist in kurzer Zeit die Lösung dm-ch eine Art Heberwirkuug auf den zweiten Objectträger filtrirt, während der Niederschlag auf dem ersten zurückbleibt. Becke, F., Ueber Zwillingsverwachsungen gesteinbil- dender Pyroxene und Amphibole. (Tschekmak's Mi- neral, und petrogr. Mittheil., Bd. VII, 1885, p. 93 bis 107), 1. Bronzitzwillinge. Bereits früher hatte der Verf. vermuthet, dass den stern-, kreuz- und kuieförmigen Verwachsungen von Bronzit- krystallen, welche in Augit-Andesiten vorkommen, eine gesetzmässige Zwillingsbildung zu Grunde liege. In den Andesiten der südlichen Bu- kowina fanden sich neuerdings die Bronzite oft in grosser Schärfe aus- krystallisirt , so dass iln-e Formen aus den Durchschnitten bestimmt werden konnten und desgleichen die gegenseitige Lage der Individuen. Es wurden folgende Zwillingsgesetze abgeleitet: 1) Zwilliugsebene Peso (101) 2) „ V3Pcvo(203) 3) „ % P c^ (403) Von diesen Zwillingsgesetzeu tritt das erstgenannte am häufigsten auf und nimmt dasselbe insofern noch ein besonderes Interesse für sich ») Cfr. diese Zeitschr., Bd. II, 1885, p. 426. II, 3. Referate und Besprechungen. 431 in Anpruch, als es genau dem bei dem monoklinen Augite vorkom- menden Gesetz: Zwillingsebene die Hemipyramide P2 entspricht, wo- durch ein weiterer Beleg für die Analogie der rhombischen und mono- klinen Pyroxene geliefert wird. 2. Angeblich anomale Zwillinge vonAugit und Horn- blende. Der Verf. weist nach, dass die von Cohen beschriebenen Zwillinge von monoklinen Augiten und Hornblende nach coi*2 mit ge- neigter Berührungsebene nur schiefe Schnitte der gewöhnlichen Zwillinge nach ooP oo sind und vermuthet, dass dasselbe auch mit den von Stkeng und Rosenbusch angegebenen Zwillingen, deren Zwillingsebene ein Kliuo- doma oder eine Pyramide sein soll, der Fall ist. Becker, Arthur, Schmelzvers u che mitPyroxenen undAm- phibolen und Bemerkungen über Olivinknollen (Zeitschr. d. dtsch. geol. Gesellsch., Bd. XXXVH, 1885, p. 10 bis 20). Behufs Beantwortung der Frage, ob das Krystallsystem der ver- schiedenen Pyroxene lediglich durch die chemische Zusammensetzung bedingt sei, wurden eine Reihe von Pyroxenen und Amphibolen ge- schmolzen und die laugsam erkalteten Schmelzproducte mikroskopisch untersucht. — Die rhombischen Pyroxene, also Enstatit, Bronzit und Hypersthen lieferten Schmelzproducte, deren Structur wohl verschieden ist von derjenigen der ursprünglichen Mineralien, sonst aber ist bei diesen Neubildungen das rhombische System und die pyroxenische Natur er- halten geblieben. Der Anthophyllit erstarrt auch wieder rhombisch, zeigt aber pyroxenische Spaltbarkeit. Monokline Augite scheiden sich wieder als solche aus dem Schmelzfluss aus, während Hornblenden sich als Augite ausscheiden, wodurch ältere Wahrnehmungen bestätigt werden. Rhodonit, Bustamit, Fowlerit und Babingtonit lieferten krystallinische und pyroxenische Schmelzproducte, doch konnte Verf. nicht mit Sicher- heit feststellen, ob dieselben auch wieder triklin geworden waren. — Es lässt sich aus diesen Untersuchungen der Schluss ziehen, dass ge- schmolzene Hornblenden und Augite stets in demselben System wieder krystallisiren, welchem die ursprünglichen Mineralien angehörten, dass aber die Glieder der Hornblendereihe augitisch werden. — Zum Schlüsse behandelt der Verf. noch die Frage nach der Herkunft der Olivinfels- einschlüsse in den Basalten und sucht seine bereits früher ausgesprochene Ansicht durch weitere Belege zu stützen. Rosenl)USCh, H., Ein Beitrag zur Morphologie desLeucils. (Neues Jahrb. f. Mineral. 1885, II, p. 1 bis 7). 432 Referate und Besprechungen. II, 3. Durch die Untersuchungen von C. Klein ' ist der Nachweis erbracht worden, dass sich der Leucit als regulärer Körper bildete, dass aber sein actueller Zustand dem regulären System nicht mehr entspricht. Während Klein ihn in diesem Zustande zum rhombischen System und gewisse damit nicht in Uebereinstimmung befindende Phänomene zu den optischen Anomalien zählt, nimmt Mallard das monokline, Fouquie und Michel LifevY das trikline System für den actuellen Leucit in Anspruch. Denkt man sich nun einen im starren Aggregatzustande befindlichen Krystall unter solche physikalische Bedingungen versetzt, dass eine mo- leculare Umwandlung sich in demselben vollziehen muss, so wird in dem- selben ein Widerstreit eintreten, denn dem Bestreben der Moleküle, eine den neuen physikalischen Bedingungen entsprechende Molecularorduung anzunehmen, steht der Widerstand der vorhandenen Form entgegen. Der Verf. fasst in Bezug hierauf 3 Möglichkeiten ins Auge : 1. Der Widerstand der starren Form ist unüberwindlich. Innerhalb derselben tritt eine Neuordnung ein und giebt sich der Vorgang nur phy- sikalisch zu erkennen. Ein derartiger Vorgang führt zu starken Span- nungen, wie beim Boracit. 2. Der Widerstand der starren Form wird vollständig besiegt. Es bildet sich ein mehr oder weniger lockeres Aggregat, bei dessen Einzel- individuen formale und physikalische Symmetrie wieder in Einklang stehen, wie dies bei den künstlich in Kalkspath umgewandelten Arago- niten der Fall ist. 3. Die alte starre Form passt sich bis zu einem gewissen Grade der neugebildeten Molecularorduung an. Da die Anpassimg keine voll- ständige ist, so bleiben noch unausgelöste Spannungen zurück, wie dies beim Leucit der Fall wäre. Durch Wiederherstellung der ursprünglichen Entstehungsbedingungen des Leucits versuchte der Verf. sowohl eine physikalische, als eine go- niometrische restitutio in integrum zu erreichen, und diese müsste bei einer Temperatur von 500'' C. zu erzielen sein, da die optische Rück- führung bei einer solchen Temperatur bereits Klein gelungen war. Da es bis jetzt kein Mittel giebt, um bei so hohen Temperaturen Messungen auszuführen, so wurde die Beobachtung namentlich darauf gerichtet, ob die Zwillingsstreifen auf den Krystallflächen des Leucits ausgeglättet würden. Zu diesem Zwecke wurde ein mit deutlichen Zwillingsstreifen ver- sehener Leucitkrystall in einer Platinpincette vor das horinzontal auf- «) Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 611 ; Bd. II, 1885, p. 264. II, 3. Referate und Besprechungen. 433 gestellte Mikroskop gebracht und im reflectirten Lichte einmal so scharf eingestellt, dass die Zwillingslamellen hell waren, die grössere Ausdeh- nung der Fläche dagegen nicht spiegelte, das andere Mal so, dass die Fläche in ihrer grössten Ausdehnung spiegelte, die Lamellen im Schatten lagen. Bei jedem Versuche trat bald nach Beginn der, durch eine sehr kleine BuNSEN'sche Flamme erfolgten Erwärmung, eine Bewegung auf der beobachteten Fläche hervor, die bei ausreichender Temperaturerhöhung zu einer Veränderung der Zahl, der Lage und der Dimensionen der ur- sprünglichen Zwillingslamellen führte. Bei hinreichender Erwärmung verschwanden sämmtliche Lamellen und Flächenknicke, und die Fläche war je nach der ursprünglichen Einstellung im Schatten oder spiegelte in ihrer ganzen Ausdehnung. Aus diesem Versuch lässt sich mit grosser Wahrscheinlichkeit schliessen, dass die einheitlich gewordene Krystall- tläche einer solchen von 202 (211) entspricht. Mit dem Sinken der Temperatur kehrten die Zwilliugslamellen wieder, aber durchaus nicht in der früheren Ausbildung, sondern in anderer Zahl und Vertheilung. Nach mehrfacher Wiederholung des Versuches zerfiel der Krystall in Bruchstücke, vielleicht weil mit solchen wiederholten Umlagerungen eine Erschütterung des Moleculargebäudes verbunden ist. — Der Verf. schliesst, dass die Entwicklung der Lamellen nach oo 0(110) beim Leucit bedingt ist durch die Verschiebung der Krystalltheilchen an den als Gleitflächeu anzusehenden Flächen von ooO. Durch diese Verschiebungen werden Spannungen ausgeglichen, welche durch den bei niedriger Temperatur nothwendig werdenden Uebergang des Leucits zu einer neuen Molecu- larordnung entstehen. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie, n, 3. 28 434 Neue Literatur, 11, 3. Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Bausch, E., Maniinilation of the microscope. Rochester. N. Y. 1885. 96 pp. 12". 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Speugel, Direetor der Naturliistorischen Sammlungen in Bremen. Hierzu 2 Holzschnitte. Es sind ungefähr sechs Jahre vergangen, seit ich (Zoologischer Anzeiger, Bd. II, 1879, No. 44. p. 641 — 648) zum ersten Male ein nach dem Princip des RivET-LEisER'schen Instrumentes construirtes Mikrotom beschrieben habe, an welchem eine um zwei Axen bewegliche und daher eine genaue Einstellung des Objectes gestattende Object- klamnier und eine zur Führung des Objectschlittens dienende Mikro- meterschraube angebracht waren. Ich glaube behaupten zu dürfen, dass mit der Einführung dieser beiden Einrichtungen der erste Schritt gethan worden ist zu der bedeutenden Vervollkommnung, welche die Schlitten- mikrotome seit jener Zeit erhalten haben, und welchen sie es verdanken, dass ihre Anwendung eine fast allgemeine geworden ist. Die besondere Form, welche der mit der Anfertigung meiner Instrumente betraute Me- chaniker denselben gegeben hatte, erwies sich indessen in der Praxis als nicht ganz zweckmässig, und so haben im Laufe der seither ver- flossenen Jahre diese beiden Theile des Mikrotoms, der Objecthalter und die Mikrometerschraube, durch die vereinten Bemühungen verschiedener Theoretiker und Praktiker erhebliche Umgestaltungen erfahren, als deren letztes Resultat man wohl das THOMA-JuNö'sche Mikrotom betrachten darf. Ich selber habe meine Bemühungen, zur Vervollkommnung des Mikro- toms beizutragen, die ganze Zeit hindurch, wenn auch mit Unterbrechungen, fortgesetzt und hatte mich dabei der stets opferfreudigen und sachkundigen Unterstützung des Mechanikers Herrn August Beckek, Meyerstbin Nach- folger, in Göttingen zu erfreuen. Unser Bestreben war nach zwei Seiten Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. II, 4. 30 454 Spengel: August Becker's Schlittenmikrotom. II, 4 gerichtet, nämlich 1. das Instrument für seine Leistungen immer vollkomm n er herzurichten und 2. demselben eine Gestalt zu geben, welche womöglich eine Ermässigung des Preises gestattete. Dem genannten Mechaniker ist es gelungen, beide Bedingungen, die scheinbar nicht gut mit einander zu vereinen waren — denn bisher war jede Ver- besserung des Mikrotoms auch mit einer Erhöhung des Preises verknüpft — , zu erfüllen. Dies Ziel ist durch folgende Mittel erreicht. Es sind dabei, wie sich wohl von selbst versteht, auch ältere Constructionen, die sich als praktisch bewährt haben , aufgenommen , beziehungsweise benutzt worden. Die Gestalt des ganzen Instrumentes ist in den Grundzügen die alte geblieben, welche für das Schlittenmikrotom charakteristisch ist. In dieser Beziehung ist hier nur eine Veränderung zu erwähnen, die das Material betrifft, aus welchem die Gleitbahnen dargestellt sind. Da- für ist starkes Spiegelglas gewählt. Dasselbe verleiht dem Ganzen ein elegantes, sauberes Ansehen, besitzt aber vor allem den Vorzug einer vollkommen glatten, durchaus ebenen und überaus dauerhaften Ober- fläche, auf welcher die Schlitten leicht und sicher hin- und hergleiten, ohnedasses eine s Schmiermittels bedürfte. Die Unterlage der Glasplatten bildet ein gusseisernes Stativ (h Figur 1) von einfacher Form und ausreichendem Gewicht, so dass das Instrument auf dem Tische gut feststeht. Die Schienen (a) bilden mit der Mittelplatte (a') wie bei dem früher beschriebenen Mikrotom einen ziemlich spitzen Winkel (ca. 45 °), wodurch die Führung der Schlitten ungleich sicherer, namentlich die Widerstandsfähigkeit gegen den am höchsten Punkte der Schlitten an- greifenden Seitendruck, dem diese beim Schneiden ausgesetzt sind, wesent- lich grösser wird, als bei geringerer Neigung der Schienen, wie sie auch Jung bei seinen Instrumenten anwendet. Die Festigkeit der Schiitteu- bewegung ist aber ausserdem noch dadurch gesteigert, dass dieselben durch kräftige Federn, welche an der ünterfläche einer an der Mittel- wand angebrachten metallenen Längsrippe (c) schleifen, stark auf die Schienen niedergepresst werden. Von den beiden Schlitten hat der M e s s e r h a 1 1 e r im wesentlichen dieselbe Form, in der sie Herr Becker schon seit mehreren Jahren ge- liefert hat, die indessen noch nicht beschrieben ist. Ihre Eigenthümlichkeit bestehtin einer Vorkehrung zur Correction derMesserstellung. Zu diesem Zwecke ist über der oberen Fläche noch eine Platte (d) an- gebracht, welche die erstere (e) nicht berührt, sondern durch eine kleine Kugel von ihr getrennt ist und um diese vermittels dreier Zugschrauben (/■) nach Bedürfniss geneigt werden kann. Um die Eeibung dieses Schlittens II. 4. Spengel: August Becker's Schlittenmikrotom. 455 auf der Gleitbahn zu vermindern, sind daran nach dem Vorgange JuNa's Elfenb ei nfüs sehen {g) angebracht, und zwar au jeder der beiden Gleitflächen, möglichst nahe den Ecken, vier. Sie erfüllen bei der An- wendung gläserner Schienen ihren Zweck viel vollkommner als bei me- talleneu, da sie die letzteren, wie ihre ungemein rasche Schwärzung zeigt, stark augreifen, und verleihen in der That dem Schlitten einen sehr sanften Gang. Des weiteren bedurfte es einer Ausgleichung des Wider- standes, der durch die Druckfeder eingeführt worden ist, und deshalb 1. sind an den beiden Enden der letzteren zwei kleine, schmale Rollen Qi) angebracht. Doch kommen diese Widerstände bei dem neuen Instrument wenig in Betracht, weil dasselbe mit einer mechanischen P'ührung des Messerschlittens versehen ist. Es wird gewiss Mancher gleich mir die Bemerkung gemacht haben, dass bei der üblichen Führung des Messers aus freier Hand der Druck, den man mit dieser auf den Schlitten aus- übt, in mehr oder minder hohem Grade die Schnittdicke beiiiflusst, so dass man selbst bisweilen einen zweiten Schnitt gewinnen kann, ohne 30* 456 Spengel: August Becker's Schlittenmikrotom. II, 4. das Object inzwischen gehoben zu haben. Dabei spielt ohne Zweifel das Schmiermaterial, das sich unter den Schlitten hineinzieht, eine erhebliche Rolle ; durch den Druck der Hand auf diesen wird es hervorgequetscht und dementsprechend sinkt der Schlitten auf die Gleitbahn herab. Man braucht nur etwas reichlich Oel anzuwenden, um sich hiervon zu über- zeugen. Es erhellt daraus zugleich, dass die Vermeidung der Schmierung durch die Anwendung gläserner Gleitbahnen eine Verbesserung des Mikrotoms bedeutet. Aber auch abgesehen von den schädlichen Wir» kuugen des Schmierraateriales macht sich der Druck der führenden Hand bemerkbar. Um ihn zu beseitigen, ist folgende Einrichtung getroffen. Der Schlitten wird bewegt mittels einer straff ausgespannten Darmseite (i), welche von dem Vorderende desselben — ich bezeichne dasjenige Ende des Mikrotoms, das bei der Benutzung dem Schneidenden zugekehrt ist, als das vordere — entspringend über ein System von vier Rollen (k) läuft und zum Plinterende des Schlittens zurückkehrt. Von diesen vier Rollen, welche an dem gusseisernen Stativ des Instruments angebracht sind, dienen drei, nämlich die vordere obere (Z;*) und die beiden hinteren (k^), nur zur Leitung der Saite, wohingegen die vordere untere (k-) die Bewegung derselben besorgt. Die letztere Rolle ist deshalb grösser als die anderen, hat einen schraubenförmigen Rand und ist mit einer Kurbel (l) versehen, vermittels der sie leicht um ihre Axe gedreht werden kann. Damit sie die Saite sicher mitnimmt, ist diese ein paar Mal um sie herum- geschlungen. Der Apparat ist so einfach, dass es keiner eingehenderen Schil- derung der Art seiner Wirksamkeit bedarf. Doch ist noch eine kleine Complication zu erwähnen, die dem Zwecke dient, der Kurbel bei jeder beliebigen Ausgangsstellung des Schlittens eine für die Hand bequeme Lage zu geben. Es ist deshalb die Saite nicht direct an dem Schlitten selber befestigt, sondern an einem Drahte, der reichlich doppelt so lang ist, wie jener und durch die zu diesem Behufe durchbohrte untere Wand desselben hindurchgeleitet ist. Mit diesem Draht kann nun der Schlitten durch eine Druckschraube (ij) an beliebiger Stelle verbunden werden. Was die Leistungen dieses Führungsmechanismus betrifft, so kann ich, nachdem ich mich desselben seit längerer Zeit bedient habe, versichern, dass die Bewegung des Schlittens eine ungemein sanfte und sichere ist, eine ganz bedeutende Geschwindigkeit des Schneidens, namentlich bei der Herstellung von Schnittbäudern unter Querstellung des Messers, zulässt und für die Hand viel weniger ermüdend ist als die freihändige Führung. Für den Objectschlitten (Figur 2) ist im wesentlichen die zuerst von Jung angewendete, von Dr, Paul Mayer beschriebene Construction II, 4. Spengel: August Becker's Schlittenraikrotom. 457 angenommen, d. b. eine knrze zur Aufnahme des Objects bestimmte metallene Röhre (^) wird mittels einer Druckschraube im Innern zweier Rahmen befestigt, die nach dem Princip der CAEDANi'schen Ringe unter einander, beziehungsweise mit dem Schlitten verbunden sind: der innere Rahmen ist um eine querstehende Axe drehbar, die ihre Lager in dem äusseren Rahmen hat, und dieser dreht sich um eine längsstehende Axe, deren Lager im Schlitten sich befinden. Diese Einrichtung ist gewiss äusserst zweckmässig und hat sich, soviel mir bekannt ist, überall be- währt. Aber die Vorkehrung zur Bewegung und Einstellung des Objectes innerhalb dieses Rahmensystems war schwerfällig und ungenügend, und es sind deshalb auch schon Vorschläge gemacht worden um diesen Uebel- ständen abzuhelfen. Ich brauche nur auf die von Gottschau in dieser Zeitschrift' beschriebene neue Objectklammer hinzuweisen. Man muss bei der JuNG'schen Klammer, um die Stellung des Objectes nach einer Richtung zu corrigiren, zuerst eine Klemmschraube lösen, dann die Ein- stellung aus freier Hand vornehmen und endlich die Klemmschraube wieder anziehen. Das sind also jedesmal drei Manipulationen. Dagegen genügt bei der Construction, welche Herr Beckeb diesem Apparate ge- •) Gottschau, Vorzüge und Nachtheile verschiedener Mikrotome und ihrer Hilfsapparate. (Diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 343 ff.) 458 Spengel: August Becker's Sclilittenraikrotom. II, 4. geben hat, eine einzige, und obendrein höchst einfache und bequeme, nämlich die Drehung einer Schraube. Es sind sogenannte Schrauben ohne Ende zur Anwendung gekommen. An jedem Rahmen ist eine kreis- förmige Scheibe oder vielmehr ein Abschnitt einer solchen (0,0' Figur 2) angebracht, in deren Rand ein Muttergewinde eingeschnitten ist. In jedes dieser Gewinde greift eine kurze, in tangentialer Richtung stehende Schraube (p,2>') ein, welche durch eine Feder ((j,g') angedrückt wird. In- dem man diese Schraube dreht, bewegt man den dazu gehörigen Rahmen um seine Axe; dieser ist aber zugleich in seiner neuen Stellung fixirt. leh habe mit einer so construirten Klammer seit mehreren Monaten ge- arbeitet und mich überzeugt, dass die Sicherheit der Fixirung durchaus nichts zu wünschen übrig lässt. Zur Fortbewegung des Objectschlittens dient eine Mikrometer- schraube (r), die jedoch nicht von der Länge des ganzen Mikrotoms ist, sondern nur 10 cm misst, in dieser Beziehung sich also ganz ebenso verhält, wie diejenige an den JuNG'schen Instrumenten. Sie hat aber nicht wie dort eine bewegliche, durch eine Klemmvorrichtung an einer beliebigen Stelle der Schiene zu fixireude Mutter, soudei"n miht in einem festen Lager (s), das vor der Schiene angebracht ist, so dass ihr Kopf (t) am Vorderende des Mikrotoms vollkommen frei liegt und einen grossen Durchmesser erhalten kann, wie es für die bequeme Handhabung er- forderlich ist. Die Verbindung zwischen dem Vorderende der Schraube und dem Schlitten wird durch einen langen Stahlcylinder hergestellt, der durch den deshalb durchbohrten (u) Schlitten geschoben ist und ver- mittels einer Druckschraube (v) beliebig an diesem befestigt werden kann. Die sonst an dem Schlitten selber angebrachte Achatplatte ist entsprechend au das Vorderende dieses Cylinders verlegt. Man muss also, wenn man schneiden will, zunächst die Mikrometerschraube zurückdrehen, darauf den Cylinder, den man vorher aus seiner Verbindung mit dem Schlitten gelöst hat, bis an ihr Vorderende herausschieben und endlich die er- wähnte Druckschraube anziehen. Es nimmt dann bei der Bewegung der Schraube der Cylinder den Schlitten mit. Es sei schliesslich erwähnt, dass die Schraube eine Trommel (^w) mit einer einfachen Eins chnap p- vorrichtung (x) trägt, durch welche die Umdrehungen hörbar gemacht werden. Dieselbe ist mit fünf verschiedenen Theilungen versehen, für % %5 % Viü "1«^ Vso Umdrehung beziehungsweise V40, %o, Vioo? V200 ^^^^ Viooü ^^ Sclmittdicke. Der Preis dieser Mikrotome ist verschieden je nach der Grösse. Ich kann hier nur erwähnen, dass ein Instrument von mittlerer Länge (2.50 mm), wie es für die meisten Untersuchungen ausreichend sein wird, II. 4. Israel: Ueber eine Erwärmungsvorrichtung. 459 von Herrn August Becker um 95 Mark geliefert wird. Im übrigen miiss ich auf das diesem Hefte beigefügte Preissverzeichniss verweisen, in welchem sowohl grössere als auch kleinere und weniger vollkommen ausgestattete Mikrotome aufgeführt sind. Bremen, November 1885. lieber eine Erwärmuno-svorriclituno' als Ersatz der heizbaren Objecttische. Von Dr. 0. Israel, Privatdocent uud Assistent am pathologischen Institut zu Berlin. Hierzu 3 Holzschnitte. Beschäftigt mit den Vorbereitungen zu einem praktischen Curse der feineren mikroskopischen Technik, der als Einführung in die experi- mentelle Pathologie dienen sollte, sah ich mich im letzten Sommer ge- nöthigt, meine Aufmerksamkeit u. A. der BeschaiFnng einer Anzahl heiz barer Objecttische zuzuwenden. Der hohe Preis der gebräuchlichen Formen (40 bis 45 Mk.) schloss deren Verwendung in der erforderlichen Zahl von vorn herein aus, und nöthigte mich, zu einfacheren Vorrich- tungen meine Zuflucht zu nehmen. So kam ich dazu, einen genügenden Effect schon mit einem primitiven Apparat zu erzielen, den mir das be- kannte Atelier des Herrn Ch. F. Geissler Sohn (Albert Geissler) schon für den Preis von 3 Mk. 50 Pfg. herstellen konnte. So ausreichend die Wirkung dieses einfachen Instrumentes auch war, so Hessen doch manche Unbequemlichkeiten, zumal die Unebenheit einer geblasenen Glasfläche und die Zerbrechlichkeit der zarten Glas- kapsel eine Verbesserung dringend wünschenswerth erscheinen , nachdem das Princip des Apparates sich durchaus bewährt hatte. Die grosse Verschiedenheit in der Form der heizbaren Objecttische, die noch beständig durch neue Empfehlungen vermehrt wird, beweist, dass die Erwärmung der feuchten Kammer, von der die Mikroskopiker so oft Gebrauch machen müssen, eine wahre Cruz ist, und wenn ich auch nicht prätendire, allen Beschwerden mit der neuen Vorrichtung abzuhelfen, so glaube ich doch, in Folgendem eine Beschreibung derselben geben zu sollen, weil sie neben anderen Schwierigkeiten den Haupt- 460 Israel: üeber eine Erwärmungsvorriclitung. II, 4. Übelstand der heizbaren Objecttische, die grosse Stö- rung derBeleii cht iingsverhältnisse ganz und gar beseitigt. Nachdem man die directe Erwärmimg des Metalls durch eine Flamme, wie sie bei dem Objecttisch Max Schultze's erfolgt, und ebenso den elektrischen Strom als Wärmequelle wieder verlassen, bedienen sich die neueren Apparate mit gutem Erfolge der Wasserheizung. Es lag also für eine neue Construction kein Anlass vor, in dieser Beziehung etwas zu ändern. Nur die optischen Verhältnisse sind bei allen heizbaren Ob- jecttischen sehr ungünstige, wenn man sich nicht nach dem Vorgange von Flesch' ein besonderes Mikroskop fiir diesen Zweck herrichten kann ; sonst ist eine erhebliche Erhöhung des Mikroskoptisches unausbleiblich, wodurch die Wirkung der Beleuchtungsvorrichtungen und Blenden schon beeinträchtigt, ja gelegentlich ganz illusorisch gemacht wird, während der Biolog gerade bei der Mehrzahl der für die heizbare Kammer in Betracht kommenden Objecto starker Vergrösserungen bedarf, welche einer guten Beleuchtung nicht entrathen können. Mit einem Schlage wird diese Schwierigkeit beseitigt, wenn man von einem heizbaren Objecttisch absieht und sich einer Erwärmungs- vorrichtung bedient, welche den Objectträger, resp. die feuchte Kammer von oben erwärmt. Um dies zu ermöglichen, muss man den Objectträger dem Verfahren anpassen. Ein solcher ist leicht herzustellen, indem man die Vertiefung des gebräuchlichen hohlgeschlifFenen Objectträgers, oder eine Kammer mit planem Boden, mit einer Nuth von etwa y, „ mm Tiefe und 1 mm Breite umgiebt, welche gestattet, das Deckglas derartig zu versenken, dass seine Oberfläche gerade im Niveau des Objectträgers liegt. Einer derartig hergestellten Kammer lässt sich durch eine auf ihr liegende, nicht gar zu leichte Wärmflasche die erforderliche Temperatur um so leichter mittheilen, als das Glas selbst als Isolation gegen den Mikroskoptisch dient. (Figur 1). Von derselben Wärmequelle wird auch in zweckmässiger Weise die heutzutage meist sehr reichliche Metallftissung der Objectivsysteme mit erwärmt, und so die starke Ableitung der Kammer- temperatur wenigstens etwas herabgesetzt. Die Verschiebbarkeit des Ob- jectträgers ist bei geeigneter Construction der daraufliegenden Wärmflasche in keiner Weise behindert. Nach meiner Zeichnung haben die Firmen L. B^njöche, Gross- b'eerenstrasse 19 und Dr. Müncke, Luisenstrasse 58, beide in Berlin, ge- eignete Erwärmungsvorrichtungen hergestellt, welche allen Ansprüchen ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 35 f. IL 4. Israel: Ueber eine Erwärmimgsvorrichtung. 461 genügen können, auch auf jedem Objecttiscli zu verwenden sind, nur ist es uötbig anzugeben, ob man Objectivsysteme verwenden will, die nach Art der HAKTNACK'schen Linsen gefasst sind, oder solche, wie sie Zeiss eingeführt hat, mit den dickeren Metallfassuugen. Die ersteren lassen bei niedrigerer Wasserwärme leichter die Kammertemperatur erhöhen, weil bei ihnen das Loch für den Durchtritt des Systems ein kleineres sein kann und daher sich ein grösserer Theil des Deckglases selbst erwärmen lässt, als bei den Systemen mit stärkerer Fassung möglich ist. Die Wärmflasche (Figur 2) besteht aus einer flachen, runden, im Centrum durchbohrten, an der Unterfläche plan geschliff'euen, vernickelten O 1. Vergrösserter Durchschnitt des Obj ectträgers und der Heizvorrichtung. 0 Objectträger mit HohlschliiF und versenktem Deckglase. tung, mit Wasser gefüllt. H Heizvorricb- Metallkapsel , in die ein metallenes rechtwinklig gebogenes Zuleitungs- robr das erwärmte Wasser hineinführt, während in der gläsernen, der Metallröhre parallelen Abflussröhre zugleich die Gradtheihmg des Thermo- meters sich befindet, dessen Kugel sich in das Innere der Metallkapsel hineinerstreckt. Um die reguläre Circulation des Wassers zu ermöglichen, hat die Kapsel in ihrem Inneren zwischen Zufluss- imd Abfluss-Oefi"nung eine Scheidewand. — Während also Zu- und Abfluss sich an der vor- deren Seite der Wärmflasche befinden , sind die Seiten derselben voll- kommen frei, sodass der Objectträger, der beiderseits etwa 2 cm unter dem Rande der Kapsel hervorragt, sich leicht (Figur 3) hantiren lässt. 462 Israel: üeber eine Erwärmungsvorrichtung. 11,4. Die beiden , wegen der bequemen Verbindung mit den Gummi- schläuchen, ziemlich langen Röhren werden durch ein kleines Gestell getragen, wozu allenfalls jede beliebige Klemme an einem gewöhnlichen Stativ verwandt werden kann. So einfach dieser Apparat ist, so functionirt er doch vorzüglich, wenn man keine der nothwendigen Vorsichtsmassregeln, die bei der Erwärmung durch Wasser anzuwenden sind, versäumt. Vor allem muss man die Luftblasen aus dem Wasser entfernen, und dann genau die Kammertemperatur bestimmen, da, wie dies auch bei den vorhandenen Objecttischeu niemals zu erreichen ist, die Temperatur der Kammer Heizvorriclitung, V2 d. nat. Gr. H. Wärmflasche, S. Scheidewand innerhalb derselben. — K. Kugel des Thermo- meters. — Z. Zuflussrohr. — A. Abflussrohr. nicht mit derjenigen übereinstimmt, welche das Thermometer anzeigt. Das einfache Verfahren, welches meines Wissens zuerst von Koch (Cohn's Beiträge zur Biologie der Pflanzen, Bd. II p. 284) beschrieben wurde, bietet die bequemste Methode und sollte nie verabsäumt werden. Zur Herstellung des dazu erforderlichen Materials von bestimmtem Schmelzpunkte, bediene ich mich mit Vortheil eines Gemisches von Paraffin und gereinigtem Vase- line (sogenannter Paraffinsalbe), welche sehr leicht eine Substanz mit dem gewünschten Schmelzpunkte herstellen lässt. Versuche mit verschiedenen Exemplaren meiner Heizvorrichtung haben ergeben, dass die Temperatur des Wassers in der Kapsel, wenn man 37 » Kammertemperatur haben will, auf 42» bis 47» regulirt werden muss, je nach dem angewandten Linsensystem, da der Wärmeverlust der Kammer sehr wesentlich durch den Abstand des Objectivsystemes II, 4. Israel: üeber eine Erwärmnngsvorrichtung. 463 bedingt wird, und also die Bestimmung der erforderlichen Wasserwärme für jedes der zu benutzenden Systeme besonders vorgenommen werden muss. Zum Scliluss möchte ich noch auf die im Vergleich mit den heiz- baren Objecttischen sehr erhebliche Wohlfeilheit der kleinen Vorrichtung hinweisen, die von den obengenannten Firmen in guter Ausführung ge- Benutzung auf dem Mikr oskoptiscli. Der in Folge der Versenkung des Deckglases unbehindert verschiebbare Hohl- schliff-Objectträger überragt beiderseits die Kapsel des Apparates, so dass er bequem anziifasseu ist. — (Der Mikroskoptubus ist nach oben gezogen). liefert wird. Für Liebhaber der directen Erwärmung des Metalls, nach dem Vorbilde des Objecttisches von M. Schultze, welche, bei grösserer Bequemlichkeit, für viele Untersuchungen wohl verwendbar ist, wird der Apparat entsprechend hergestellt, ohne dass im Principe desselben eine Aenderuug eintritt. Während für gewöhnlich Objectträger mit dem üb- lichen Hohlschliff dazugegeben werden, fertigen beide Firmen auf Wunsch auch Kammern mit i)lanem Boden an. 464 Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctions-Präparate. II, 4. Bemerkuiig-en zur Kritik der Tinctions-Prä])arate. Von Dr. med. Max Flesch in Bern. Hierzu 2 Holzsctnitte. Die naelifolgenden Ausführungen bilden die Fortsetzimg von Be- trachtungen, welche in der anatomischen Section der 58. Versammlung deutscher Naturforscher und Aerzte zu Strassburg in Verbindung mit der Besprechung einiger Structurverschiedenheiten an den Nervenzellen peripherer Ganglien vorgetragen wurden. Die Kürze der verfügbaren Zeit gestattete nicht, der sich anschliessenden Discussion ^, an welcher die Herren Dr. Pfitzmeb aus Strassburg und Prof. W. His aus Leipzig Antheil nahmen, eine weitere Ausdehnung zu geben. Den Schluss des GiKRKE'schen - Aufsatzes über Färberei zu mikroskopischen Zwecken im 2. Heft des H. Bandes dieser Zeitschrift hatte ich zu jener Zeit noch nicht gelesen ; erst nachträglich erkenne ich, dass ein Theil der damals mitgetheilten Erwägungen, welche den Gegensatz zwischen einer chemi- schen Bindung und einem mechanischen Anhaften der Farbstoffe an den Gewebe-Elementen betrafen, im ganzen mit den von Gierke publi- cirten sich decken und mithin nichts wesentlich Neues bieten. In den nachfolgenden Bemerkungen sollen daher nur einige Punkte berührt werden, welche, soviel mir bekannt, noch nicht in endgültiger Weise zur Sprache gekommen sind. Citate sollen dabei nur angeführt werden, soweit in der GiEBKE'schen Arbeit nicht enthaltene Quellen in Betracht kommen. Auf chemische Einzelheiten einzugehen ist absichtlich ver- mieden, um die an sich vielleicht schon etwas breiten Ausführungen nicht noch weiter auszudehnen. Bei der Beurtheilung des Bildes, welches uns ein gefärbtes — es sei mir gestattet, von der Unterscheidung zwischen Tinction und Im- prägnation zunächst abzusehen — Präparat bei mikroskopischer Be- ') Tagebl. der 58. Versammlung deutscher Naturforscher und Aerzte zu Strassburg im Elsass. 1885 p. 410. ") Gierke, Färberei zu mikroskopischen Zwecken. (Diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 62, 372, 497 «^^Cßd. II, 1885, p. 13, 164). II. 4. Flesch: Bemerkunson zur Kritik dor Tiiictions- Präparate. 465 traclitiiiig zeigt, müssen wir, um Rückschlüsse auf die feinere Structur mul die chemischen Eigenschaften des untersuchten Objectes zu ziehen, sehr verschiedenartigen, bei der Vorbereitung zusammenwirkenden Factoren Rechnung tragen. Die Beschaffenheit des Präparates ist bekanntlich von wesentlichem Einflüsse für das Resultat einer beabsichtigten Tinction, je nachdem die Färbeflüssigkeit auf das lebende, auf das absterbende, auf das todte, i. e. auf das durch die Behandlung bei dem Absterben oder nach dem Tode in seinem chemischen Aufbau veränderte Object wirkt. Viele der gebräuchlichen Färbemittel verhalten sich bekanntlich dem lebenden Orga- nismus gegenüber anders als dem todten. Die Versuche von Brandt ' und Certes -, einzellige Organismen im lebenden Zustande zu tingiren, haben gezeigt, dass zwar gewisse Elementartheilchen der Zellen, Fett- partikel, Cellulose-artige Bestaudtheile u. s. f., den Farbstoff annehmen, dass aber gerade diejenigen Gebilde, welche am abgestorbeneu Präparat chromatophil gefunden werden, die Kerne, ungefärbt bleiben. Die Ver- werthung dieser Färbung kleinster Organismen ist indessen eine äusserst beschränkte. Ihr anschliessen müssen wir die Versuche von Chezonsz- czEWSKi, Heidenhain, Arnold, Thoma, Geelach und Anderen, Indigo dem lebenden Körper einzuverleiben 5 bekanntlich haben dieselben der Darstellung gewisser mit den Saftbahnen in Zusammenhang gebrachter Structuren innerhalb der Gewebe, dem Nachweise der ersten Anfänge der Gallenwege, der Erforschung des feineren Baues der Nierenepithelien grossen Nutzen gebracht. Als mikrochemisches Reagenz oder als speci- fisches Färbemittel bestimmter Structurelemeute ist die Lösung des indigschwefelsauren Natron am lebenden Gewebe unwirksam. Der Farbstoff wird in Gestalt kleinster Theilchen an bestimmten Stellen vor- gefunden, an welchen unter günstigen Verhältnissen in ganz derselben Anordnung kleine Partikelcheu fester Gebilde, Zinnoberkörnchen, Kohle (aus Tusche-Suspension) festgehalten werden. Die Farbstofftröpfchen liegen in den Gewebe-Interstitien und in den Zellen wie Fremdkörper. Man kann sie hier (durch Behandlung mit absolutem Alkohol) fixiren ; imterlassen wir dies, so tritt schon wenige Minuten nach dem Tode ein Diffusionsprocess ein: die Farbe löst sich in der die Gewebe durch- tränkenden Flüssigkeit; diese Lösung wirkt auf die von ihr umspülten und durchsetzten Gebilde nicht anders als das Färbematerial, in welches wir einen vom abgestorbenen Organ entnommenen Schnitt einlegen; ») Gierke's Tabelle No. 109. 241. 2) Ebend. No. 110. 125.. 466 Fies eil : Bemerkimgen zur Kritik der Tinctionspräparate. II, 4. es tritt eine diffuse Tinction, beziehungsweise unter günstigen Umständen Kernfärbung ein. Wir sind nicht einmal berechtigt, in den durch die Indigoeinlagerung gefärbten Stellen ohne weiteres die ausschliesslichen „Saftbahnen" anzunehmen. Wir werden bei der Besprechung der Ein- wirkung von Silberlösungen auf noch lebende Gewebe zu erwähnen haben, dass erstere andere, unabliäugige Wege verfolgen können; wir können keineswegs ausschliessen, dass die Circulatiou der normalen, von Fremdkörpern freien Säfte in anderer Weise erfolge, dass vielleicht auch die gelösten Krystalloid - Substanzen andere Bahnen einschlagen als die Colloiden, Darauf weiter einzugehen, würde das Ziel dieser Bemerkungen und die Zwecke, welche diese Zeitschrift verfolgt, überschreiten. Die ergiebigsten und für die physiologische Erkenntniss der Functionen der Gewebe bedeutungsvollsten Färbungs- Versuche am lebenden Organismus sind die neuerdings von Ehelich- publicirten Experimente über das Verhalten des dem Thierkörper einverleibten Alizarinblau, beziehungs- weise dessen schnellere oder langsamere Reduction zu Alizarinweiss je nach dem Sauerstoffbedürfniss der Gewebe. So weitgehende Schlüsse bezüglich der molecularen Structur der Zellen Ehelich aus seinen Er- gebnissen ziehen konnte, so fallen letztere selbst nicht in das Gebiet der histologischen Forschung ; das Verhalten des Gewebes als ganzes, nicht das seiner Constitution ist in den Bereich der Untersuchung ge- zogen. Die einzige im ausgedehnterem Maasse ausgebeutete Farben- reaction am lebenden Gewebe dürfte die nur für einen speciellen Fall, für die sich bildende Knochensubstanz anwendbare Rothfarbung der Knochen ^ durch Krappfütterung sein ; auch dieses, später nochmals zu berührende Verfahren, gehört nicht zu den eigentlichen histologischen Färbungsmethoden. Der Einführung des Farbstoffes in den lebenden Organismus schliesst sich zunächst an das viel geübte Verfahren, lebensfrische Gewebe in grösseren oder kleineren Stücken der Einwirkung der färbenden Sub- stanzen zu unterwerfen. Die Untersuchung der hierbei in Betracht kommenden Vorgänge können wir am besten an der Hand der Silber- Imprägnation vornehmen. Organe oder Organtheile, die wir der Silber- behandlung unterziehen, legen wir bekanntlich oft so schnell nach der Abtrennung von dem Thierkörper in die Silbernitratlösung, dass sie 0 Cfr. Gierke's Tabelle No. 62-170. 2) Ehri-ich, P., Das SauerstoflF-Bedürfniss des Organismus. Eine farben- analytische Studie. Berlin (Hirschwald) 1885. ') Cfr. Gierkk's Tabelle No. 51—54. II, 4. Fl e seh: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräpai'ate. 467 uocli als lebend angesehen wenlen können. Die Zeit, welche bis zur Einwirkung- der Flüssigkeit abläuft, ist kürzer als die, welche bis zum Annähen eines abgetrennten Körpertheiles — der bekanntlich durch Wiederanlieilen seine Lebensfähigkeit documentirt — vergeht. Ganz intact sind allerdings auch noch so schnell behandelte Präparate nicht immer; beispielsweise erinnere ich an Hensen's ' Angaben über die Darstellung der Cupula terminalis des Gehörorganes , an einen Fall also, der zwar nicht in das Gebiet der Silberbehandlung fällt, jedoch sehr anschaulich demonstrirt, wie schon die einmalige Berührung eines Organes für das Aussehen des mikroskopischen Bildes von Einfluss werden kann. .Jedenfalls kann die Vitalität vieler zur Höllenstein- Imprägnation gelangender Objecto nicht als im Augenblicke der Be- handlung erloschen angesehen werden ; bei der grossen Verdünnung der Lösung (0"1 bis 0*5 Procent) mag der lebende Zustand sogar noch in derselben einige Augenblicke fortdauern. Fest steht jedenfalls, dass Lösungen von der genannten Concentration die Lebensfähigkeit von Mikroorganismen nicht aufzuheben brauchen-. Selbst bei Verwendung des Höllensteinstiftes kommen die zu imprägnirenden Stellen des Präpa- rates nur mit einer Lösung des Silbersalzes in den Gewebesäften in Contact. Die chemischen Vorgänge, welche bei der Erzeugung des Silber- bildes wirksam werden, sind durch die Arbeiten von His, Recklixg- HAUSEX, Schweiggee-Seidl ^ uud vielen Anderen ausführlich behandelt worden. Das im Contact mit den Bestaudtheilen der Gewebe sich bil- dende Chlorsilber beziehungsweise Silberalbuminat wird unter dem Einflüsse des Lichtes geschwärzt. Ein Streit über die wissenschaftliche Brauchbarkeit der nach der Reduction sichtbaren „Silberbilder" besteht nicht mehr. Dagegen sind einige der für die Deutung dieser wie anderer Imprägnationsbilder maassgebenden physikalischen , das Vor- dringen der Silbernitratlösung in den Geweben beherrschenden Ver- hältnisse noch nicht genügend behandelt, so dass es sich vielleicht lohnt, diesen einige Worte zu widmen. An dem mit der Silberlösung imprägnirten Material kann ein nach- ') Hensex, V., Nachtrag zu meinen „Bemerkungen gegen die Cupula ter- minalis (Leipzig)" [Arch. f. Anat. u. Physiol. 1881. Anat. Abth. p. 405]. 2) Von entsprechenden Angaben ist mir eben zur Hand Oppenheimer, Untersuchungen über den Gonokokkus. Heidelberger Dissertation 1884. p. 24. Schwächere als 2procentige Lösimgen konnten die Entwicklungsfähigkeit der Kokken nur auf einige Tage abschwächen. ') Gierke's TabeUen No. 133—173. 468 Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctions-Präparate. II. 4. träglicher Diffiisions-Austausch zwischen mehr oder weniger stark im- bibirten Theilen nur stattfinden, wenn eine Auflösung des Silbers erfolgt. Für die meisten Fälle ist diese Möglichkeit mit dem fast augenblick- lichen Uebergang des gelösten salpetersauren Salzes in einen Verband, welcher unter gewöhnlichen Verhältnissen sich der Auflösung entzieht, abgeschlossen. Dass die Reduction erst nachträglich erfolgt, ist hierbei ganz gleichgiltig. Man kann die mit Silber durchtränkten Präparate Jahre lang ungefärbt aufbewahren, wenn man sie nur im Dunkeln hält. Sobald sie dem Lichte ausgesetzt werden, liefern sie unter dessen Ein- wirkung immer wieder das gleiche Bild. Sind grössere Stücke ver- wendet worden, so erstreckt sich die Action des Liclites nur auf deren oberflächliche Schicht, welche durch die Reduction der in ihr ent- haltenen Silberverbindung undurchsichtig wird. Jede neue Schnittfläche erscheint hell, kann aber, wie dies z. B. Kölliker ^ in seinen Unter- suchungen über das Lungenepithel hervorhebt, noch nach längerer Zeit immer aufs Neue die Reaction zeigen. Der ganze Effect der Silberlösung hängt von deren Eindringen in das Gewebe und von der hier er- folgenden Umwandlung in eine fixirte reducirbare Verbindung ab. Eine spätere Aenderung ist höchstens insofern möglich , als die Sub- stanzen, welche jene Verbindungen enthalten, nachträglich ihren Ort wechseln können, etwa bei der Umwandlung des sogenannten negativen in das positive Silberbild der Hornhaut durch Maceration der gebräunten Membran in salzsäurehaltigem Glycerin oder längere Nachbehandlung mit destillirtem Wasser (Ranvier, vgl. Schwalbe '-^ 5 das erste Ver- fahren stammt, wenn ich nicht irre, von Schweigger-Seidl). Das Eindringen des Silbersalzes erfolgt in Gestalt einer wässerigen Lösung. Diese letztere findet naturgemäss ein Hinderniss an Fett be- ziehungsweise fettähnlichen Substanzen. Die Darstellung der „Silber- kreuze" an markhaltigen Nervenfasern beruht bekanntlich darauf, dass die Lösung nur von den RANviER'schen Einschnürungen aus — an welchen die Markhülle des Axencylinders unterbrochen ist — zu dem sich färbenden Axencylinder gelangen kann. Die Differenzirung der Kittlinien zwischen den Endothelien, das negative Silberbild der Horn- haut, kommen unzweifelhaft in Folge schnellerer Imbibition der inter- cellulären beziehungsweise interfibrillären Kittsubstanzen, nicht wegen *) Kölliker, A., Zur Kenntniss des Baues der Lunge des Menschen (Ver- handl. der phys.-med. Gesellsch. Würzburg. N. F. Bd. XVI, p. 2). 2) Schwalbe, Lehrbuch der Anatomie der Sinnesorgane. Erlangen 1883. p. 157. II, 4. Fl e seh: Bemerkungen zur Kritili der Tinctionspräparate. 469 der Existenz besonderer chemischer Körper au diesen Stellen zii Stande *. Dass dies so ist, beweist uns am schönsten die Verschiedenheit der Silberbilder eines und desselben Gewebes, des Hyalinknorpels ; wir haben es vollständig in der Hand, einige davon beliebig hervorzurufen, indem wir dieselbe Lösung von Silbernitrat auf dasselbe Objcct in ver- schiedener Weise einwirken , oder besser gesagt , in verschiedener Weise in es eindringen lassen. Die beifolgenden Abbildungen, Copien aus einer früheren Special-Untersuchung, sind beide demselben Objec.te entnommen ; Figur 2 ist allerdings bei etwas stärkerer Vergrösserung und nach einer nicht ganz identischen Stelle des Objectes aufgenommen ; für unsere Zwecke können wir indessen, da die histologischen Fragen hier nicht berührt werden sollen, die kleinen, aus der Ungleichheit des Ortes zu erklärenden Eigenthümlichkeiteu dieser Figur ausser Acht lassen. Das erste Bild erhält man, wenn man das als ganzes ab- getragene Hüftgelenk-Ende des Femur vom Frosch mit schwachen Silbernitratlösuugen behandelt; das zweite, wenn man feine Schnitte desselben Objectes ganz frisch mit derselben Solution imprägnirt. In dem ersten Bilde sehen wir den Knorpel von durch Silberniederschläge gebräunten, annähernd parallelen Streifen durchzogen; in dem anderen finden wir eine dilfuse Färbung in der Umgebung der Zellhöhlen in einer mit der Entfernung von der Zelle abnehmenden Intensität. Ein grosser Theil des in Figur 1 von den dunkelen Bändern durchzogenen Ge- bietes erscheint in Figur 2 farblos. Ein Theil des farbigen in Figur 2 die Zellen umgebenden Hofes gehört den nach Figur 1 ungefärbten Streifen au. In Präparaten der ersten Art dringt die Lösung der Haupt- sache nach von der Schnittfläche des abgetrennten Knorpols, in den >) In dieser Hinsicht stimme ich mit Gierke's Ausführungen überein. Bezüglich eines anderen Punktes halte ich eine Einschränkung für nöthig, sofern nämlich Gierke annimmt, dass die Zellkerne den Metallimprägnationen gegenüber sich nicht durch dieselbe Attractionskraft auszeichnen, wie gelösten Farbstoffen. Unter günstigen Umständen kann die Silberimprägnation neben anderen Differenzirungen auch Kernfärbung bewirken. Es sei mir gestattet, m dieser Hinsicht auf in meinen Untersuchungen über den Hyalinknorpel (Würzburg, Stuber's Verlag 1880) mitgetheilte Abbildungen, von welchen eine oben Fig. 1 reproducirt ist, zu verweisen. Wir behandeln bei der Imprägnation meist lebende Gewebe; der lebende Zellkern verhält sich aber gegen gelöste Farbstoffe ebenso abweisend wie gegen die Silberlösung. Um Gieuke's Auf- fassung zu begründen, müsste die Einwirkung der Salze auf abgestorbene Ge- webe mit jener der Farbstoffe verglichen werden. Dabei müsste aber berück- sichtigt werden, dass der Silberniederschlag meist schon erfolgen wird, ehe die Lösung den Kern erreicht. /.eitsclir. f. wiss. Mikroskopie. II, 4. 31 470 Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate. II. 4. anderen von den biosgelegten Zellhölilen ans in die Grimdsnbstanz vor. Die verschiedene Art der Fortleitung der Salzlösung innerhalb des zu imprägnirenden Gewebes verursacht das verschiedene Aussehen der beiden Präparate. In dem ersten Präparate sind es unterschiede in der Dich- tigkeit der Grundsubstanz, welche dem ungleichen Verhalten der ge- färbten und der ungefärbten Streifen zu Grunde liegen. Das beweisen die Angaben von Thin ^ und Reeves -, welche durch einfache Maceration •^'.■!r^-jp»-?>'-.'^ K<^K-^- ^-■■'i' '■■ ■:->, ■ ■" 1. Schnitt aus dem in toto versilberten Gelenkkopf des Oberschenkels des Frosches. Copie nach „Flesch, Untersuchungen über die Grmidsubstanz des hyalinen Knorpels". Würzburg. Stuber. 1880. Tafel I. Figur 2. dasselbe Bild erzeugen konnten. In den Bildern der zweiten Art folgt die Silberlösung gewissen mit der Zelle in Beziehung stehenden, besser imbibitionsfähigen Bestandtheilen der Grundsubstanz. Dass solche in der Umgebung der Zellen vorhanden sind, zeigt sich übrigens auch an Bildern der ersten Art durch etwas dunklere Beschaffenheit der nächsten Nachbarschaft der Knorpelhöhlen. Auf keinen Fall sind die Bänderungen des ersten Bildes auf chemische Differenzen zurückzuführen ; es wäre sonst absolut unersichtlich, warum dieselben nur auf dem einen genannten Wege entstehen. Sollen wir annehmen , dass in der verschwindend kleinen Zeit, welche die Anfertigung des Schnittes erfordert, eine che- mische Umsetzung sich abspielt, welche am ganzen Stück nach meinen Erfahrungen auch nach längerer Zeit nicht erfolgt? Weit besser ist jedenfalls zu verstehen, dass mit der Zerlegung in einzelne Schnitte die 0 TniN, On the structure of hyahne cartilage (Quart. Journ. microsc. Sei. vol. XVI. 1875). 2) Reeves, The matrix of articular cartilage (British med. Journ. 1876. p. 87). II. 4. Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate. 471 Spnnnnngs- und Diclitigkeitsverhältnisse der Snbstcanz der Art alterirt werden, dass fz'üher bestehende Unterschiede aufhören zu existiren. Analoge Betrachtungen lassen sich hinsichtlich der Einwirkung anderer Metallsalze auf lebende oder absterbende thierische Gewebe ausführen. Der Silbermethode am nächsten steht die Imprägnation mit Eisenchlorid; der wesentliche Unterschied besteht darin, dass der Weg, welchen die Lösung passirt hat, nicht durch eine Umänderung der- selben unter dem Einflüsse des Lichtes, sondern durch nachträgliches Aus- .S^-^ 4^-r 2. Aus dem Gelenkkopf des Oberschenkels des Frosches. Sclinittvcrsilberung. Die Zellen sind etwas näher zusammengedrängt dargestellt, als im Präparate. Copie wie Figur 1, ebendaher Tafel III. Figur 2. fällen in Gestalt von Berlinerblau (durch Behandlung mit einer Solution von Ferrocyankalium) veranschaulicht wird. Für die Imprägnation mit Gold- und Osmiumlösungeu compliciren sich die Verhältnisse durch zwei specifische Eigenschaften der benützten Materialien: deren schnell tödtende („fixirende") Wirkung einerseits, deren langsames Ditfundiren anderseits. Die Resultate , welche die Einwirkung der Osmiumsäure auf lebende und auf abgestorbene Gewebe erzielt, sind bekanntlich scharf zu trennen ; allgemein angeführt wird der Gegensatz zwischen der Einwirkung der Osmiumsäure auf bestimmte Zellen der Leuchtorgane von Lampyris splendidula, welche nur am lebenden Objecte zu Stande kommt, einerseits, der gewöhnlichen auch postmortal eintretenden Fär- bung der Fette u. s. f. anderseits. In den meisten Fällen, in welchen Osmiurasäure verwendet wird, liegt die Sache so, dass die unter deren Action getödteten Objecte noch einige Zeit dem Reagenz ausgesetzt bleiben; dementsprechend werden auch die zuerst von der Säure be- netzten, also im lebenden Zustande getroffenen Stellen, die nachträg- lichen postmortalen Einwirkungen zeigen. Noch complicirter gestaltet sich die Goldbehandlung. Die fixirende Wirkung kommt hier niclit so 472 Flesch: Bemerkungen zur KritDv der Tinctionspräparate. II. 4. sehr in Betracht. Viele der Modificationen, welche empfohlen worden sind, behandeln überhaupt nur das absterbende oder nach dem Ab- sterben in Aufquellung begriffene Präparat. Auch wo aber das frische Object „vergoldet" wird, gestaltet sich wegen des langsamen Ein- dringens der Lösung das Präparat höchst ungleichmässig , eben weil die einzelnen Stellen beziehungsweise verschiedene Tiefen in ungleichen Zuständen angetroffen werden. Gerlach *■ hat bereits für die Muskel- fasern darauf hingewiesen, wie sehr für deren mikroskopisches Bild im Goldpräparat das Stadium, in welchem der absterbende Muskel zur Be- handlung kommt, von Einfluss ist. Eine rationelle Verbesserung der Goldmethode wird unter allen Umständen dahin streben müssen, mög- lichst sicher den richtigen Zustand des Präparates vor der Einwirkung des Goldsalzes zu erzeugen. Das Wesen der Goldwirkung ist noch zu wenig bekannt, jedenfalls handelt es sich hier zunächst um die Bildung von Verbindungen des Goldes mit gewissen Bestandtheilen der Gewebe, vermuthlich mit Spaltungsproducten der das lebende Protoplasma con- stituirenden Eiweissstoffe ; in den mit Gold durchtränkten Gewebe- theilen tritt unter dem Einflüsse des Lichtes ein Reductionsprocess ein. Man kann sagen, dass kein Gewebe der zur Goldfärbuug mitwirkenden Bestandtheile ganz entbehrt; überall tritt unter Umständen Reductiou der imbibirten Theile und sonach diffuse Färbung auf. An gelungeneu Präparaten dagegen hat die Goldlösuug differenzirend gewirkt und zwar in doppeltem Sinne: einmal — ich habe gewisse Bilder am hya- linen Knorpel sowie an Kittsubstanzen zwischen Epithelzellen im Auge — durch schnelleres Eindringen der Lösung innerhalb gewisser Bahnen ; das kommt jedoch bei dem langsamen Eindringen der Lösung nur in beschränktem Maasse in Betracht, weil die Präparate längere Zeit durchtränkt und daher auch in schwerer zu durchtränkenden Stellen schliesslich mit der Lösung gesätttigt werden müssen; dann aber diffe- renziren sich die Gewebeelemente durch eine ungleiche Affinität zu dem Goldsalze, derart, dass eine exclusive Färbung gewisser morpho- logisch und physiologisch charakterisirter Theile eintritt. Selbstver- ständlich können wir nicht ausschliessen, dass möglicherweise gerade die leichter imbibirbaren Substanzen auch zugleich am reichsten an dem zum Eingehen der Goldverbindung geeigneten Materien sind. Die Un- gleichheit des Goldbildes eines Objectes je nach der Zeit des Absterbens, in welcher dieses präparirt wurde, kann vielleicht durch eine Ortsver- ') Geri.acii, L., Das Verhältniss der Nerven zu den willkührlichen Muskeln der Wirbelthiere. Leii)zig, VogePs Verlag. 1874. p. 41. II, 4. Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate. 473 änderung der sich färbenden Körper während des Absterbens, oder während des Aufqnellens, welchem die abgestorbenen Theile unterliegen, zurückgeführt werden. Nehmen wir einmal an — uud es besteht kaum eine andere Möglichkeit, da, wie erwähnt, die Goldbehandlung wegen des langsamen Eindringens der Lösung nicht lebende, sondern absterbende Theile betrifft — dass es Spaltungsproducte der lebenden Substanz sind, an welchen das Goldsalz haftet, so bietet die weitere Annahme keine Schwierigkeit, dass die einmal aus ihrem ursprünglichen orga- nischen Verbände ausgeschiedenen Stoffe durch Diffusion oder auch direct durch mechanische Umlagerung in Folge des Aufquellens anderer Gebilde in dem angedeuteten Sinne ihren Ort wechseln können. Direct spricht dafür, dass manche der differenten Goldbilder — ich denke an den Querschnitt der willkührlichen Muskeln — in einem Wechselverhält- niss stehen, welches recht wohl mit dem negativen und positiven Silber- bild der Hornhaut verglichen werden kann. Parallelen für eine solche Auffassung bieten die Vorgänge bei der Jod-Reaction auf Glykogen u, a. m.; es möge mir gestattet sein, fiir die weitere Ausführung dieser Verhältnisse auf frühere Erörterungen in einem Beitrage zur Histologie der quergestreiften Muskeln (Mittheilungen der Naturforschenden Ge- sellschaft in Bern, 1884. 1. Heft p. 16 — 20) zu verweisen. Die vorstehenden Betrachtungen lassen sich dahin zusammenfassen, dass die verschiedenartigen , bei der Metallimprägnation zu Stande kommenden Bilder zu erklären sind theils aus dem physiologischen Zustande des üntersuchungsmateriales (sowohl nach der Intensität der im Momente der Reaction ablaufenden vitalen Oxydationsprocesse, als auch nach den während des Absterbens verlaufenden Zersetzungen), theils aus verschiedenen chemischen Affinitäten zu den einzelnen Gewebe- bestandtheilen ; theils endlich aus Differenzen in der physikalischen Beschaffenheit (Dichtigkeit beziehungsweise verschiedene Imbibitions- fähigkeit). Das zuletztgenannte Moment wird vor allem für die Beur- theihmg der Silberbilder in Betracht kommen ; ausdrücklich sei jedoch betont, dass auch für die Silberliisung, z. B. bei der Untersuchung in Verkalkung begriffener Knorpel, nebenbei auch chemische Zersetzungen anderer Art (Bildung von Silberoxyd in alkalisch reagirenden Geweben) mitspielen können. Für die langsam wirkende Goldmethode sind haupt- sächlich das Stadium des Absterbens und die ungleiche Affinität des Salzes zu den Spaltungsproducten der lebenden Gewebe bedeutungsvoll. Es würde bald gelingen, den Klagen über die Unzuverlässigkeit des Verfahrens, welche fast jeden Untersucher veranlasst, modificirte Goldmethoden zu em- pfehlen, ein Ende zu machen, wenn es gelänge, sichere Methoden zu finden, 474 Flescli: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate. II, 4. um in jedem Falle und für die ganze Ausdelmung jedes einzelnen Präpa- rates dasselbe Stadium der mit dem Absterben verbundenen chemischen Veränderungen zu fixiren, Tliatsäclilich wird dies ja bei allen jenen Mo- dificatiouen, welche der Imprägnation eine Vorbehandlung mit Citroneu-, Essig-, Ameisen-, Oxal-, arseniger Säure u. s. f. vorausschicken, durch Beibehalten eines möglichst gleichmässigen Quelluugszustandes des Ob- jectes erstrebt, ebenso da, wo die Vergoldung am fertigen Schnitt des frischen Präparates (Cybulsky*), oder am feinzerzupften Object ausgeführt wird. Am rationellsten erscheint in diesem Sinne das FuEüD'sche Ver- fahren der Nerventinction, welches, unter Verzicht auf die Behandlung des frischen, am gehärteten Präparate so schöne Erfolge erzielt. Die bisherigen Ausführungen haben sich nur mit dem Verhalten frischer und absterbender Objecte gegen Metallsalze beschäftigt. Natür- lich müssen dieselben Gesichtspunkte auch bei der Beurtheihmg der durch organische Farbstoffe erzielten Tinctionsbilder mitsprechen. Doch liegt thatsächlich die Sache für diese anders, weil es in den seltensten Fällen möglich sein wird, deren Lösungen auf ihrem Wege innerhalb der Gewebe rechtzeitig iu uu löslicher Form gleich dem Silber- niederschlag zu fixiren, weil ferner Umsetzungen, durch welche, ähnlich wie bei Metallimpräguationen , durch grössere Affinität ausgezeichnete Gewebselemente sich nachträglich differenzireu , nicht oder doch nur selten vorkommen ^. Färbungen mittels löslicher organischer Stoffe werden sonach meist nur in ihrer difterenzirenden Wirkung auf abge- storbene Gewebe zur Beurtheihmg kommen ; sie entstehen iu denselben auf doppeltem Wege: durch chemische Bindung des Farbsto^es an einzelne Bestandtheile beziehungsweise Spaltungsproducte der Gewebe oder durch Oberfiächenattraction, d. h. durch Haften der Farbe ohne eigentliche chemische Bindung. Die Zahl der Tinctioueu, welche auf dem Entstehen neuer che- mischer Verbindungen zwischen Farbstott' und histologischen Bestand- theilen der Organe beruhen, ist keine sehr grosse. Neben den, nur auf lebende beziehungsweise absterbende Gewebe sich beziehenden Vor- 0 Gierke's Tabelle No. 298. 2) Gierke's Tabelle No. 299 (auch Arcliiv f. Anatomie und Physiologie. Anat. Abth. 1884. p. 453). Vielleicht das einzige mikroskopisch zu controlirende Beispiel für eine solche nachträgliche Umsetzung bietet die, in dem vorliegenden Bande dieser Zeitschrift von mir publicirte Beobachtung von Lakghans übei- eine Diflferenzirung roth und blau gefärbter Gewebselemente in Hämatoxylin- präparaten, wenn diese in Canadabalsam-Einschluss dem Lichte ausgesetzt werden. Ich gestehe, dass ich nicht wagen kann, mich weit genug zu einem Erklärungsversuch auf chemisches Gebiet zu wagen. II, 4. Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate. 475 gäng-cn bei den Metallimprägnationei], deren wir bereits gedacht haben, sind nur wenige unter den in der Histologie der Thiere gebräuchlichen Farbeproceduren, welche auf die Werthigkeit chemischer Reactionen An- spruch erheben dürfen. Es gehören hierher die Färbung der amyloiden Substanzen durch LEONHAKDi'sche Tinte, Safranin, Jodviolett, Methyl- grün, Methylviolett; ferner der Nachweis des Hämoglobin durch die von Meekel ' eingeführte, von Bayekl verwerthete Behandlung mit Borax-Carmin, Borax-Indigo und Oxalsäure; ferner Meekel's Färbung der Speichelröhrchen durch Pyrogallussäure in Folge des in den Epi- thelien dort enthaltenen Kalkes. Wenn wir noch die unter ganz anderen Verhältnissen — durch Bindung des Krappfarbstoffes an die Erden des sich entwickelnden Knochens — im lebenden Körper auftretende Roth- färbung, ferner der Jod-Reaction auf Glykogen, der Jod- und der com- binirten Jod-Scliwefelsäu2'e-Reaction auf amyloide Substanz, endlich der Bildung von Berliner Blau aus eisenhaltigen Pigmenten gedenken, so dürften die wichtigen „Farbenreactionen", welche als unzweifelhaft auf chemischen Wechselwirkungen beruhend zum Nachweise bestimmt charakterisirter Verbindungen in den Geweben dienen, erschöpft sein. Indessen lassen sich noch einige Tinctionen anführen, welche, obgleich die Färbung durch das den Farbstoff lösende Medium selbst wieder leicht extrahirt werden kann, obgleich sie mithin nicht einmal den ächten Färbungen durch Oberfiächen-Attractiou an Haltbarkeit gleich kommen, dennoch auf chemischen Einwirkungen beruhen. In erster Linie gehört hierher die Differenzirung rother (Zellsubstanz) und blauer (Kern) Fär- bungen aus neutraler Lakmuslösung, rother und grüner aus dem Roth- kohlfarbstoff (nur am frischen Präparat sicher und nicht haltbar 2.) Dann aber rechne ich hierher die specifische Färbung der Belegzellen in den Fundusdrüsen des Magens, der Becherzellen in den Schleimhautepithelien durch Anilinfarben, die graublaue Färbung der Schleimdrüsen-Acini durch Jodgrün ; hier glaube ich namentlich wegen der Veränderung der Farben- nüance nicht die einfache Oberflächen-AttraCtiou gelten lassen zu dürfen; allerdings muss auch die eventuell anzunehmende chemische Verbindung als leicht löslich in Alkohol oder Wasser erscheinen. Endlich gehört vermuthlich hierher ein Theil der von Ehelich ^ beschriebenen und namentlich in der Histologie der grossen Haussäugethiere leicht zu *) Nicht NoRKis mid Shakespeake wie Gierke, wahrscheinlich Bayerl folgend unter No. 306 seiner Tabelle schreibt, während er früher — No. 216 — Merkel's Priorität richtig citirt hat. -) Giierke's Tabelle No. 60 und 277. 3) Gierke's Tabelle No. 102, 47G FI e seh: Bemerkungen zur Kritik der Tinctioiispräparate. IT, 4. beobachtenden Färbungen der Körnchen in Bindegewebszellen u. s. f., vielleicht auch die Färbungen des von Waldeyeb ^ und Ranvier be- handelten Keratohyaliu (Eleidin). Die letztgenaunten Tinctionen führen uns indessen bereits in das Gebiet der auf Oberflächen-Attraction zurüclczuführenden Färbungs- processe. In dem, im Eingange dieser Mittheilung erwähnten Vortrage hatte ich dies Anhaften der Farben an Gewebebestandtheilen, ohne chemische Verbindung mit denselben, parallelisirt mit der Ausfällung der Pflanzenfarbstoffe aus Extracten auf Grund deren Anhafteus an frisch erzeugten Bleiuiederschlägen. Da indessen Giekke mit Heranziehung anderer Beispiele diesen Gesichtspunkt ausführlich behandelt, da der- selbe auch die vorherige Imprägnation der Präparate mit „Beizen" hin- länglich besprochen hat, so sei es mir mir noch gestattet, hier einige einschränkende Cautelen, welche bei der Kritik derartiger Präparate zu beachten sind, zu berühren. Es ist zunächst von Fall zu Fall der Mög- lichkeit Rechnung zu tragen, dass eine „unächte" Färbung gleichwohl auf einer chemischen Verbindung respcctive auf chemischen Umsetzungen zwischen dem Farbstoff und etwa einen Theil der Kerusubstanzeu be- ruht. Ist die hypothetische Verbindung leicht löslich und von gleicher oder sehr ähnlicher Farbe wie die färbende Substanz, so ist die Unter- scheidung kaum möglich. Selbst der Einwand, dass man ja die Färbung und Entfärbung mehrmals wiederholen kann, ist nicht absolut durch- schlagend ; nehmen wir an, dass die zur Bindung der Farbe fähige Sub- stanz in grosser Menge vorhanden, jeweils nur in einer dünnen ober- flächlichen Schicht die Farbe annimmt, so ist auch eine wiederholte Färbung und Entfärbung auf dem Wege chemischer Bindung oder Um- setzung möglich. Thatsächlich scheint es aber gerade bei den hier in erster Linie zu betrachtenden Kernfärbungen so zu liegen, dass eine sich färbende Materie des Kernsaftes in leicht beweglicher Gestalt in dem Kerne vorhanden ist und je nach Umständen, über die Masse des Kernes diffus vertheilt, oder in die Chromatinfäden einverleibt ge- funden wird. Es bedarf hier keiner weiteren Ausführung, dass es zum Theil von unserer Vorbehaudkmg abhängt, ob wir den Kern homogen gefärbt finden oder ob wir deutliche „Kernfiguren" autreffen. Ebenso ist es bekannt, dass der tiugirbare Kernsaft in betimmten Phasen der Thei- lung seine Tinctionsfähigkeit verliert, und zwar liegt es nahe, anzu- nehmen, „dass die tiugirbare Substanz des Kernsaftes zur Ernährung des ') Cfr. Jahresb. für die Fortschr. der Anat. und Physiol. 1882. p. 242. II, 4. Flesch: Bemerkungen zur Kritik der Tinctionspräparate. 477 Kernfadens beigetragen hat" (Steasbukger *). Gewissermaassen ist die- selbe für den Histologeu die Beize, welche die Tinctionskraft der Kern- fäden gegenüber den Gerüsten des ruhenden Kernes erhöht. Um die vorstehenden Betrachtungen zu vervollständigen, müsste noch die Einwirkung des Härtungsprocesses, d. h. die Summe der phy- sikalischen und chemischen Vorgänge, welche bei der Vorbereitung der Gewebe ablaufen, Erörterung finden. Hierbei könnte man indessen un- möglich schon jetzt etwas Zusammenhängendes gestalten. Zahllosß Einzelheiten sind bekannt ; es sind aber nur Einzelheiten, oft recht ent- legener Natur und doch von mächtigem Eiufluss ; ich erinnere nur an H. ViRCHow's Mittheilung über den Eiutluss des Lichtes auf den Ablauf der Chromsäurehärtuug. Wohl wissen wir bereits, wie wir zum Zwecke der Erzielung bestimmter Tinctiouen vorgehen müssen 5 die Begründung steht indessen für die meisten Fälle noch aus. Wir haben hier versucht, die Beschaffenheit der Organe be- züglich ihrer Vitalität zum Ausgangspunkt zu nehmen, um einige der am mikroskopischen Präparat unter der Einwirkung verschiedener Tinctionsmittel wahrnehmbaren Differenzen zu erklären. Es liegt daher ausserhalb des Bereiches dieser Bemerkungen, etwa vorhandene Be- ziehungen zu einer chemischen Gruppirung der Farbstoffe zu discutiren. Ueberdies existireu zur Zeit noch verhältnissmässig wenig brauchbare Ergebnisse nach diesem Gesichtspunkte vorgenommener Untersuchungen. Vielleicht könnten hier Einzeluntersuchungen nach Art der von Auer- bach über die Wirkung verschiedener chemischer Agentien auf das Blut vorgenommenen die werthvollsten Aufschlüsse liefern. Der Zweck der vorstehenden Erörterungen war ausschliesslich der, die Bedeutung eines physikalischen Charakters — der ungleichen Imbibitiousfähigkeit der Gewebe und ihrer Elemente — sowie den Eiufluss der Constitu- tions-Aenderungen während des Absterbens auf die Imbibitionsfähigkeit der organischen Materie zur Besprechung zu bringen. Bern, den 21. October 1885. 1) Stkasbukger, Die Controversen der indirecten Kerntheüung. Bonn 1884. p. 8. (Abdruck aus Scuultze's ArcMv). 478 Martinotti: La picronigrosina. II, 4. La picronigrosina nello studio delle alterazioni dei centri nervosi. Nota del Dottore Gr. Martinotti Libero Doceiite di Anatomia Patologica in Toriuo. I brillaiiti risultati forniti dall'iiitroduzioue dei colori di aniliua nelia tecnica microscopica generale hanno da qualcbe tempo indotto gli isto- logi a tentarne l'applieazioue in una delle piü ardue parti della tecnica, voglio dire nello studio del sistema nervoso centrale. — L'azzurro di anilina, l'eosina, la fucsina acida e l'alcalina, la dalia, la saffranina, i colori neri e nero-azzurri di aniliua furouo successivamente messi alla prova ed in parte lodati fuori misura, in parte negletti forse soverchia- mente. — In generale si deve ritenere che i colori di anilina non mostrano direttameute un'affinitä particolare per i varii componenti dei centri ner- vosi, come la mostrano per altri elemeuti, ad es. per i nuclei dei tessuti, per certe forme di scbizomiceti, per alcune granulazioui del sangue ecc. £ cosi che la fucsina acida e l'alcaliua portate semplicemente in coutatto di sezioni del sistema nervoso coloriscono indifferentemeute tutte le parti con lievi gradazioni di tinte e non presentano quella affinita particolare che rende cosi preziosi il carminio, il cloruro di oro ed altri reagenti. Invece se alla colorazione coUa fucsina acida od alcalina si fanno seguire altre operazioni particolari (metodi del Weigebt) le stesse sostanze si fissano specialmente su determinate parti dei centri nervosi ed acqui- stano con cio un alto valore per lo studioso. — Un solo colore di anilina farebbe eccezione a questa regola generale, al dire di parecchi istologi inglesi. Questo colore, che si vende in lugbil- terra col nome di ÄniUne-Uue-hlaclc, avrebbe un valore veramente ecce- zionale per lo studio del sistema nervoso centrale, tanto in condizioni normali quanto in stato patologico, valore di gran lunga superiore a quello di tutti gli altri metodi finora conosciuti K Confesso francamente che io 1) II lettore che desideri di farsi mi idea degli elogi che fanno a questo colore gli anatomici inglesi puö leggere quanto scrive il Bevan Lewis (The human brain. Histological and coarse methods of research, London 1882) alle p. 123, 126—127, 129, 135 ed in altri punti. — Mi basti citare le parole che egli scrive a. p. 135: „ . . . we may be certain, that sections of medulla IT, 4. Martin otti: La picronigrosina. 479 nou ho potiito convincermi di tutte qiieste buone qualitä. Le preparazioni che ho ottemito, hiugi dal mostrare un differeuziamento caratteristico e dall'essere di gran hmga superiori a quelle ottenute col carmiuio, ne erano invece assai inferiori. Non escliido perö che le materie coloranti che io ho aviito fra le mani, quantimque attinte alle migliori fonti, non fossero identiche affiitto a quelle impiegate dagli istologi inglesi. La stessa cosa sembra sia capitata al Gierke ^, ed e uoto del resto che i colori di anilina venduti collo stesso nome da fabbriche diflferenti, danno talvolta risultati assai diversi quando vengono applicati alla tecnica istologica. — Anche la uigrosina e stata raccomandata per lo studio dei centri nervosi, ed io, occupandomi dell'anatomia patologica di queste parti e volendo mettere alla prova i differenti metodi proposti per lo studio delle raedesime, ho fatto delle preparazioni anche coUa nigrosina. Ma neanche questa sostanza, adoperata nel modo finora proposto, mi ha dato i risul- tati che mi aspettavo. — Siccome perö nello sperimentare questi varii metodi io non mi limi- tavo ad applicarli seguendo scrupolosamente le norme date da coloro che li avevano proposti, ma cercavo pure di modificarli per renderli piii ac- conci allo scopo che mi ero prefisso, cosi ho finito col trovare che si puö usare la nigrosina nello studio delle alterazioni dei centri nervosi se- guendo una via che, per quanto mi consta, nou h stata finora additata da uessuno e che mi sembra presenti vantaggi tali da meritare che siano fatti conoscere agli studiosi. — Ecco dunque il metodo che seguo. Prima di tutto io adopero la nigrosina non sola, ma accoppiata all'acido picrico in soluzioue alcoolica satura. La nigrosina non e troppo facilmente solubile nell'alcool onde,per preparare lasoluzione, e conveniente di porre entro una boccetta dei cristalli di acido picrico e della nigro- sina in abbondanza, di versarvi sopra dell'alcool rettificato (non asso- luto), agitando di tempo in tempo la boccetta finche l'alcool si sia satu- rato delle due sostanze. Si ottiene cosi un liquido di un intenso colore di oliva. Occorrendo di adoperarlo, lo si decanta versandolo adagio : al fondo della boccetta rimangono l'acido picrico e la nigrosina indisciolti. Si aggiunge altro alcool e cosi si ha sempre in pronto la soluzioue colo- rante, la quäle non si guasta coU'andare del tempo come fanno trojipo facilmente molti altri liquidi coloranti usati nella tecnica microscopica. — and cord properly stained by a niline blue-black are tlie most beautiful pre- parations of these regions we can by our present methods possess ; . . . " *) Cfr. questo stesso Giornale, a. p. 379 del vol. I, 1884. 480 Martinotti: La picronigrosina. II, 4. Le sezioni microscöpiche dei centri nervosi, ottenute nel modo iisimle, cioe mediante l'iudurimeuto nei bicromati e l'azione successiva dell'alcool (non importa se le parti banuo soggiornato anclie per anni in quest'ultimo reagente), impreguate ancora, ae lo si desidera, di celloidina, sono por- tate dall'alcool direttamente nella soluzione coloraute, senza frapporre lavatura di sorta. Nella detta soluzione possouo stare quanto si vuole, cioe possono bastare diie o tre ore, mentre non e di danno alcuno il soggiorno nel liqiüdo anche per pin di 48 ore. Poi si decanta la solu- zione e la si sostituisce cou alcool rettificato, il quäle porta via l'eccesso di materia colorante che e depositata suUe sezioni. Notisi perö che que- sta lavatura superficiale coll'alcool non e indispensabile ; cioe si puo pas- sare senz'altro all'atto piü importante, al differenziameuto della tinta. — Le sezioni, allorche sono tolte dal baguo coloraute, appaiono intensameute colorite in azzurro diflfuso a tutte quante le parti, si che macroscopicamente nou e possibile distinguere la sostanza bianca. dalla grigia. Se ora si portano queste sezioni, cosi iutensamente e diffusamente colorate, in uua miscela di alcool e acido formico, composta di due parti (in voIume) del primo e di una parte (pure in volume) del secondo, si scorge che i preparati abbandonauo al liquido in cui sono immersi parte della so- stanza colorante di cui sono imbevuti, si che a poco a poco riesce distinta all'occhio la differenza fra la sostanza grigia e la bianca. Allorche questa distinzione e proprio spiccata, la quäl cosa avviene abbastanza rapida- mente, si trattano i preparati con alcool rettificato, poi con alcool asso- luto, si reudono trasparenti coU'essenza di bergamotto e si chiudono nel balsamo del Cauadj\ sciolto nello xilolo. Se allora si esaminauo al microscopio si scorge che il difl'erenziamento notato ad occhio nudo e ancora piü preciso e spiccato all'esame micro- scopico. I cilinder-axis e le cellule nervöse sono coloriti in azzurro intenso, ed i prolungaraenti che queste ultimo presentano si possono seguire per uu tratto assai lungo molto piü comodamente che non con altri raetodi, per es. colla ordinaria colorazione per mezzo del carminio. In azzurro cupo appa- iono pure tiute le pareti dei vasi sanguigni, mentre il tessuto connettivo e la neuroglia sono colorati in azzurro meno carico. I nuclei della neuroglia e dei leucociti presentano uu colore azzuro poco pronunciato. Le guaine di mielina sono invece tinte in giallo verdognolo intenso. Le fibre nervöse quindi, viste in sezione trasversale, appaiono come punti intensameute coloriti in azzurro, contornati da un'area di colorito giallo spiccatissimo ; mentre, osservandole di fianco, si scorge distintamente uua linea azzurra, rappresentante il cilinder-axis, posta frammezzo a due liuee giallastre parallele fra di loro, che rappresentano la guaina di mielina. II. 4. Martinotti: La iiicronigrosiiia. 481 Queste differeuze di colorito, queste gradazioni di tinte rendono il metodo assai utile aiiclie uello studio dei tessuti normali, pei quali si puo dire che esso vale per lo meno quanto una buona colorazioue col car- miuio ammoniacale, colla difFerenza che meutre quest' ultima riesce abba- stauza difficilmente, la colorazioue colla picrouigrosina non fallisce neanche nei vecchi preparati che souo, si puo dire, refrattari ad ogni metodo di colorazioue. — Ma dove spicca veramente il valore del metodo e uello studio delle alterazioni patologiche dei centri nervosi, iu ispecie di quelle raggruppate col titolo piii o meno acconcio di sclerosi. Ad es. nelle de- generazioni secondarie del midollo spinale i preparati ottenuti con questo metodo souo quanto mai dimostrativi. Gia ad occhio nudo si scorge distintamente la posizione e l'estensione del fascio degenerato, il quäle appare sotto forma di una macchia azzurra, meutre il resto della sostauza biancasimostra di colorito giallo o giallo verdognolo. All'esame microscopico poi i limiti della lesione sono ancora piü mauifesti. In luogo del fascio degenerato si scorge il tessuto conuettivo tiuto in azzurro inteuso, meutre le rare fibre nervöse integre (tibre apparteneuti al fascio cerebellare diretto?) colla loro guaina midoUare colorata in giallo inteuso spiccano distintamente sul foudo azzurro su cui si trovano. Si puo quindi con estrema facilitä stabilire l'estensione del processo degeuerativo e ricono- scere 11 numero delle fibre rimaste immuni. Ne si creda che questa sia cosa da poco. Chi e pratico di questi studii sa che iu certi casi puo riescire abbastauza difticile il pronunziarsi sullassenza o sulla presenza di un processo degeuerativo nei cordoni di sostauza biauca del midollo spinale e piü ancora di stabilire i limiti del processo morboso. E tanto vero questo che osservatori di valore indiscutibile, servendosi dei metodi usuali, furono condotti a negare l'esisteuza di degenerazioui secondarie nei midollo spinale, meutre queste in realtä esistevauo. Ed e per questa ed altre ragioni che lo Schieffeedecker ^ aveva raccomaudato la colo- razioue col bleu di auilina, stata poi praticata anche da altri istologi appunto per studiare la topografia delle degenerazioui secondarie del midollo spinale. Jo ho fatto dei preparati di confronto fra i due metodi e credo di poter affermare senza esitanza che la colorazioue colla picro- nigrosina, nei modo che io ho indicato, e di grau lunga superiore all'altra. Qualche volta, come si- sa, il processo degeuerativo secoudario si propaga dai cordoni di sostauza bianca, cioe dai fasci piramidali, alle coloune di sostauza grigia. Or bene anche uello studio delle alterazioni della sostanza grigia il metodo che io propongo merita di essere racco- *) SciiiEFFERDECKEK, Uebor Regeneration, Degeneration und Arcliitectnr des Rückenmarks. (Vmciiow's Archiv. Bd. LXVII, 1876, p. 5G6). 482 Martinotti: La picronigrosina. II, 4. mandato. La dove la sostanza grigia e normale le giiaiue di mielina che rivestono le fibre nervöse maggiori, essendo tinte in giallo danno alla sostanza grigia im aspetto particolare. La nenroglia ed i cilinder- axis piü piccoli costituiscono un fondo azzurro pallido su cui spiccano, tinti in azzurro piii intenso, le celhile nervöse ed i cilinder-axis piü voluminosi. Su questo fondo azzurro si scorgono ancora delle chiazze giallastre formate dalle guaiue di mielina che rivestono le fibre di mez- zana grandezza, le quali essendo disposte a gruppi ed insieme intrecciate ofFrono appunto 1' aspetto di chiazze giallastre. Dove invece si hanno delle fibre nervöse molto voluminöse, come ad es. verso le radici anteriori, quivi la guaina midoUare spicca distintamente sul cilinder-axis. Ora nei casi in cui una parte di quel fino reticolo di fibre nervöse va per- duta in causa del processo patologico, scompaiouo anche le chiazze giallastre e non rimane piü che il colorito azzurro sbiadito della nenro- glia. — Le alterazioni poi delle cellule nervöse e dei loro prolunga- menti appaiono evidentissime con questo metodo di colorazione. Ma queste ragioni non souo le sole che facciano raccomandare il metodo di cui ho parlato : piü importante ancora e la facilitä. coUa quäle si puo applicarlo e la certezza della sua riescita. Nessuno oserebbe contestare l'utilita dei metodi proposti recentemente per lo studio dei centri nervosi, ed i buoni risultati che essi sono in grado di dare. Ma a voler essere imparziali bisogna convenire altresi che per la massima parte non sono di troppo facile applicazione. Certo, quando si piglia il midollo spinale di un animale appena ucciso e lo si pone subito nei reagenti adatti, si sorveglia l'indurimento ed appena ottenutolo in grado sufficiente si praticano coi procedimenti piü acconci le sezioni micro- scopiche, le reazioni riescono benissimo ed e ridicolo parlare di diffi- colta tecniche. Ma quando si ha fra le mani un esemplare di midollo alterato dal processo patologico, piü alterato ancora dal disfacimento cadaverico, talvolta conservato alla meglio in un Laboratorio da anni ed anni, allora la cosa cambia di molto. Solo chi si h messo alla prova con esemplari di questo genere sa le difficoltä che ci sono per ottenere delle buone sezioni microscopiche. Peggio ancora va la cosa quando si tratti di portare queste sezioni ottenute con tanto stento e cosi fra- gili dall'alcool nell'acqua, da questa nella soluzione colorante, poi di lavarle, di disidratarle, di renderle trasparenti e di chiuderle, se si riesce a tanto, nei liquido conservatore. In qualcuno dei metodi pro- posti ultimamente le sezioni devono passare per lo meno in cinque o sei capsule, da un bagno acido in uno alcalino, da una soluzione colo- rante in un'altra: devono talvolta stare nei bagno colorante per ore ed II. 4. Martin 0 tti: La picronigrosina. 483 ore a temperatura discretameute elevata, cosicche pocbe riescono a resisterc e rimangoiio integre dopo operazioni cosi laboriose. II metodo che io propongo nou presenta questi inconvenienti perche le sezioui, dall'alcool in cui si trovano, sono fatte passare, alla tem- peratura ordinaria, sempre in soluzioni alcooliche le qiiali non le gua- stano menomamentc. ün altro vantaggio del metodo sta nella possibilita di colorire le sezioni senza spogliarle della celloidina di cui sono imbevute. L'intror dnzione della celloidina nella tecnica microscopica e stato un vero pro- gresso per lo studio delle alterazioni dei centri nervosi. Quei tali esemplari di cui poco fa ho parlato , che im tempo con tanta difficolta si poteva'j.io sezionarc, imbevuti per bene di celloidina si possono attual- mente ridurre in sezioni abbastanza buone, in cui insorama gli ele- menti morfologici sono teuuti assieme dalla celloidina che li penetra. Ma ima proprieta meno buona della celloidina e quella di tingersi ab- bastanza intensamente con certe sostanze coloranti e specialmente con molti colori di anilina, fatto che era giä stato notato dallo Schieffee- decker * allorche appuuto aveva proposto questa sostanza come mezzo di inclusione. In questi casi e giuocoforza spogliare affatto la prepara- zione della celloidina, cioe rinimziare ad uno dei principali vantaggi di questa sostanza. — Col metodo che io propongo tale bisogno non si presenta. La celloidina, quando le sezioni sono tolte dal bagno colo- rante, appare bensi intensamente colorita in azzurro, ma cede rapida- mente questo colore alla miscela di acido formico ed alcool ed appare poi perfettamente scolorita all'esame microscopico. Dopo tutto quello che ho detto intorno al metodo che propongo non vorrei che alcuno si immagiuasse che io volessi presentarlo come il migliore dei metodi per lo studio delle alterazioni dei centri nervosi, superiore a tutti gli altri e capace di sostituirli. — E ben altro il mio intendimeuto. Io sono persuaso che ogni metodo ha il suo valore particolare, che tutti, quando e possibile, devono essere messi alla prova se si vuole stndiare a fondo una questione, e che nessun metodo, per quanto eccellente, puö da solo risolvere le innumerevoli questioni che ancora esistono in questo intricato campo dell'anatomia patologica. GiA. in altro luogo "^ io ho levato la voce per aflfermare la necessitä che *) ScHiEFEEEDECKEE, Ucber dlc Verwendimg des Celloidins in der ana- tomischen Technik. 1. Die Einbettung. (Arch. f. Anat. u. Physiol., Anat. Abth. 1882, p. 198). 2) FuiEDLÄNDER c Martinotti, Tccuica microscopica. Torino 1885, p. 255- 484 Gclpke: Notiz zur Weigert'scLen Hämatoxylinfärbiing. II. 4. I'istologo sia innanzi tutto sperimentatore al pari del fisico e del clii- mico e uon semplice automa obbligato ad iina via prefissa. — E precisa- mente perche ardiio e il cammiuo a ciii alludo, difficile il passo e molte- plici le difficoltä che si possouo presentare, ho creduto opportiino di far coiioscere im metodo che, senza pretendere di essere al disopra degli altri 0 di sostitiiirli in tutto, puö , insieme cogli altri, venir speri- mentato con profitto per risolvere l'iiitricato ed altrettaiito interessante problema delle alterazioui patologiche dei ceutri uervosi. Notiz zur Anwendung' der Weig'ert' seilen modificirten Hämatoxjlin-Färbnng* auf das perij)liere Nervensystem. Von Dr. Theodor Grelpke, Erster Assistent au der opüthalmologischen Klinik zu Freilnirg i. B. Wohl keins von den zahlreichen, im Laufe der letzten Jahre auf den mikroskopischen Färbemarkt gebrachten Tinctionsverfahren hat sich eine so schnelle und verbreitete Beachtung und Anerkennung zu verschaffen vermocht, als die von Weigert angegebene Nervenfärbung mit Hämatoxylin '. Es dürfte zweifelsohne heute wenig pathologische Anatomen, Histologen und Mikroskopiker überhaupt geben, die sich nicht mit ihr vertraut gemacht und aus ihr einen grossen Nutzen für die Erkenntniss der physiologischen und pathologischen Verhältnisse des centralen Nerrvensystems gezogen hätten. Von sachkundiger, er- fahrener Seite wurden bereits mehrfach die unleugbaren Vorzüge der Methode hervorgehoben-. Es hiesse daher „Eulen nach Athen tragen", wollte ich diesen Raum zu demselben Zweck benutzen. Ich möchte nur in Kürze meine Erfahrungen, die ich bei der Behandlung speciell peripherer Nerven und Sinnesnerven nach der obigen Methode gemacht habe, einem grösseren Leserkreis unterbreiten, in der Hoffnung, dass dieselben vielleicht dem einen oder anderen Untersucher nicht ganz unwillkommen sein dürften. ») Fortschr. d. Med. Bd. II, 1884, p. 190, Bd. III, 1885. p. 236. ') Flesch, Zur WEiGERT'scheu Hämatoxylinfärbung des centralen Nerven- systems (diese Zeitsclir. Bd. I, 1884, p. 564). Gleeke, Färberei zu mikrosko- pischen Zwecken (1. c. Bd. I, 1884, p. 547). II 4. Gelpke: Notiz zur Wcigert'sclien Häraatoxylin-Färbung. 485 Seit dorn Ersclieiiien clor modificirten Ilämatoxylinfärbnng von Wkigeet ', die gegenüber der früiieren Methode wesentliclie Verein- fachungen nnd für den minder Geübten bedeutende Erleichterungen brachte, habe ich die Methode zu wiederholtem Male — und ich kann sagen meistens mit Glück — angewandt. Nachdem ich die technischen Schwierigkeiten an Rückenmark- und Hirnschnitten überwunden hatte, benutzte ich die Färbung an dem speciell mir zu Gebote stehenden und nächstliegenden Untersuchungsmaterial, Nervus opticus, Chiasma, tractus und versuchte dann auch periphere Nerven nach derselben Methode zu tingiren. Was zunächst die Methodik selbst betrifft, nach der ich vorging, so hielt ich mich streng an die von Weigert gegebenen Vorschriften. In der Regel standen mir l^räparate, die bereits Monate lang in Müller- scher Flüssigkeit gelegen hatten, und die mir Herr Hofrath Professor Dr. Manz in loyaler, dankenswerthester Weise zur Untersuchung über- liess, zur Verfügung. Es wird dadurch die weitere Procedur bekanntlich vereinfacht. Hatten die Präparate jedoch längere Zeit bereits in Alkohol zugebracht, so führte ich dieselben direct in MüLLER'sche Flüssigkeit über und Hess sie darin, unter häufiger Erneuerung der Flüssigkeit, so- lange, bis sie eine intensiv gelblich-braune Farbe angenommen hatten. Auf diese Weise wurden diese Objecto zur weiteren Behandlung ebenso gnt tauglich , wie die gleich in MüLLER'scher Flüssigkeit gehärt(>ten Präparate. Das erste, was mit diesen so präparirten Objecten weiter geschah, war eine oberflächliche Abspülung derselben mit Wasser zur Entfernung der Chromsalze, die sich bekanntlich mehr oder minder auf der Oberfläche der Präparate abscheiden. (Hierin weiche ich aller- dings etwas von der WEiGER'r'schen Methode, nach welcher die Präpa- rate vor der Färbung nicht mit Wasser in Berührung kommen sollen, ab). Die Objecto wurden dann in Spiritus gebracht, bis sie keinen Farb- stoff mehr an denselben abgaben, und dann für einen bis zwei Tage — je nach ihrer Grösse — • in absoluten Alkoliol, um dieselben so für die Celloidiueinbettung tauglich zu machen. Ich ziehe die letztere Ein- bettungsmethode entschieden anderen Methoden vor. Denn sie ist ein- mal sehr wenig zeitraubend , hat ferner den Vortheil , dass sie die Structur der Gewebe (z. B. der Blutkörperchen) sehr wenig alterirt und ferner sich sehr gut dem betreffenden Object adaptirt, was das Ein- dringen in dasselbe und den schliesslichen Härtegrad betrifft. Schliesslich gewährt sie noch den Nutzen, dass sie bei der geringen Löslichkeit des 0 Cfr. 1. c. Zeitsctn. f. wiss. Mil1 0,84 an o CO 1. pierre du Levaut. Cette derniere substance possede un grain d'une finesse remarquable ; eile doune un poli parfait aux objets et permet de coufectionner des conpes extremement fines (tigg. 2, 3). 2. 3. Les autres details du mecanisme sont suffisamment comprehen- sibles en examiuant nos dessins. L'horizontalite de la meule donne une tres grande facilite dans le travail d'executiou des coupes; car on peut suivre ä chaque instant les progr^s de l'operation. Pour humecter la meule, on se sert d'une pis- sette de laboratoire ordinaire, ou bien d'un vase qui laisse tomber de II. 4. Kleinere Mittheilungen. 509 l'eau goutte ;i goutte. L'^coulcmeiit des liquides employes (l'eaii, al- cool etc.), se fait par l'iutermediaire d'iin plat en zing, miini d'im tuyau d'ecoiileinent. Ce plat a l'immeuse avautage de recueillir les coupes quaud alles s'ecliappeut de la meiüe. En outre il empeclie l'eau, ou tout autre liquide, qui est projetee par la rotatiou d'eclabousser l'ope- rateur. Ein einfaches Mikrotommesser. Von Dr. H. Henking in Göttiiigeii. Hierzu 1 Holzschnitt. Im Folgenden möchte ich mit einigen Worten ein Mikrotommesser beschreiben, welches ich seit einem Jahre in Gebrauch habe. — Die meisten Mikrotommesser, die ohne besondere Klammer festgcschroben werden, haben im Stiele einen Schlitz mit einem seitlichen Eingange zur Aufnahme der Klemmschraube. Zunächst habe ich das Stielstück hinter diesem Eingange als unwesentlich fortfallen lassen, sodass der Stiel meines Messers einer zweizinkingen Gabel gleicht (siehe beistehende Figur A). Das Messer ist nicht gebogen, sondern Stiel- und Klingen- rücken bilden eine gerade Linie. Da aber selbst bei bedeutender Schrägstellung eines geraden Messers doch nur ein beschränktes Stück der Schneide in Function tritt und da anderseits der zu schneidende Gegenstand in dei Regel keinen bedeutenden Umfang besitzt, so habe ich eine Verkürzung der Klinge bis auf wenig über 5 cm eintreten lassen. Denn mit der Spitze einer langen Klinge zu schneiden, ist deshalb wenig empfehlenswerth, weil letztere mehr oder weniger stark federt. Im übrigen habe ich lie Klinge ähnlich gestaltet, wie sie sich bei den sehr brauchbaren JuNCr'schen Messern findet, d. h. mit dickem, 6 bis 7 mm starkem Rücken, bei einer Breite von etwa 28 mm, mit etwas hohl geschliffener oberer und planer unterer Fläche. Ausser- dem aber weicht die Stielebene von der unteren Ebene der Klinge in der Weise ab , dass bei Einspaunung des Messers der Rücken etwa 2*/, mm höher steht als die Schneide (B), Es ist dies eine Ein- stellung, wie sie bei den JuNa'schen Mikrotomen mit Hülfe eines be- sonderen Messerhalters erreicht wird, — Dass der Rücken hölier steht als 510 Kleinere Mittheilungen. II. 4. die Schneide, hat mehrere Vortheile. Erstens wird dadurch vermieden, dass das Object etwa durch das darüber hingleitende Messer gedrückt wird; ferner erhält man bei dieser Stellung besonders leicht und gut Bänderschnitte. Geringe Aenderungen in der Neigung der Klinge habe ich dadurcli erreicht, dass A 7--^ I ich unter die hintere und über die vordere Gabel- zinke des Stieles , oder auch in der anderen Dia- gonale, je einen Streifen festen Cartonpapieres legte. Als einen weiteren Vor- zug des Messers glaube ich bezeichnen zu dürfen, dass mau auch bei Serienschnit- ten durch successive Ver- stellung des Messers die ganze Klinge ausnutzen kann. Zu dem Zwecke lasse ich den Stiel von gleicher Länge mit der Klinge sein. Es kann alsdann das Messer beliebig verschoben und an jeder Stelle vom Ende des Stiels bis zur Klinge hin vermittels der Klemm- schraube befestigt werden. Der Eir chnitt des Stieles reicht nämlich bis unmittel- bar an die Klinge. — Damit nun aber das Messer auch wirklich noch unmittelbar an der Klinge eingespannt werden kann, muss dasselbe als Unterlage eine einfache Messingplatte bekommen, welche ausser einem Einschnitt zu Durchlassen der Klemm- schraube noch eine eingefeilte Vertiefung zur Aufnahme des Anfangs- stückes der Messerklinge besitzt (C). Pie beschriebenen kurzen Messer halte ich auch deswegen für prak- A Messer von oben. — B Projection des hoch- kant gestellten Messers, die Abweichung von Klingenebene und Griffebene zeigend. — C Unterlage des Messers. — Natürl. Gr. II, 4. Kleinere Mittheilungen. 511 tisch, weil man dieselben bei einiger Sorgfalt leicht selbst schärfen kann, was bei einer längeren Klinge immerhin seine bedeutenden Schwierigkeiten hat. Ich habe mir zu dem Zwecke von einem Drechsler einen Holzgriff drehen und diesen mit zwei Vertiefungen zur Aufnahme des Stieles und einer Schraube zu dessen Fixirung versehen lassen. Es ist dann nicht so schwer auf einem Arcausasstein das Messer zu schärfen und ihm auf einem guten Streichriemen einen feinen Schnitt zu geben, während man bei längeren Klingen immer von Handwerkern abhängig ist, ja dieselben zum Schleifen wohl gar au die Bezugsquelle zu senden genöthigt ist. — Derai'tige kurze Messer bieten in ihrer Herstellung viel geringere Schwierigkeiten als grössere und können daher von jeder guten mecha- nischen Werkstätte geliefert werden. Die meinigen habe ich in der mechanischen Anstalt der Herren Mahkt und Hökning in Göttingen anfertigen lassen, welche das Stück mit 2"75 Mark berechnen. — Be- merken will icli noch, dass es wünschenswerth ist, wenn die obere Fläche der Klinge gut polirt wird. Armoire ä preparations mieroseopiques. Par Auguste Eternod, Proft'ssour d'Histologie normale Ii l'Universite de Gencve. Avcc 2 gravures sur bois. Nous donuons ici la description d'un meuble ä tiroirs que nous avons fait coustruire pour le Laboratoire d'Histologie normale de Ge- ncve; comme ce meuble presente quelques dispositions commodes, nous avons pense que cette description pourrait interesser quelqu'un. Notre armoire est destinee k classer des coUections etendues, telles qu'on les trouve surtout dans les laboratoires universitaires ou chez des specialistes micrographes. Ses tiroirs peuvent contenir environ 7000 preparations du format anglais. II suffit de jeter un coup d'oeil sur notre dessin pour comprendre la disposition de notre meuble. II se compose d'une armoire renferment une double rangee ^e tiroirs destines ä contenir les preparations mieroseopiques, et de trois grands tiroirs, 512 Kleinere Mittheilungen. II. 4 occupant hi partie inferieure du meuble et servaut ä renfermer des accessoires de la collection, tels que catalogue, dessins, etc. (fig. 1). Quant aux tiroirs ä pröparations microscopiques, ils preseutent im arrangement particulier, en ce qni concerne l'alignement des preparations microscopiques et la maniere de fixer les etiquettes pour le classement general. — Des listes en bois mince divisent chaque tiroir en quatre compartiments allonges (C) ; ces listes outre qu'elles maintiennent les preparations alignees sont destinees ä empeclier specialement qu'elles ne glissent et se cofondent, quand on ouvre et ferme les tiroirs. Chaque compartiment presente un foud noir coupe par une bände blanche, afin de retrouver plus commodement chaque preparation. En effet, uos pre- parations, etaut etiquettees directement sur le verre, au moyen d'un dia- mant, la lecture se fait plus facilement sur un fond noir, tandis que l'objet prepare ^'apergoit mieux sur un fond blanc. Nous considerons l'etiquettage au diamant comme etant tr^s pratique pour des preparations II. 4. Kleinere MittheilunEcen. 513 de longiie diiree 5 car les etiquettes ordinaires se decoUent souvent ä la longue, ce qiü risque d'amener des confusions regrettables. Les etiquettes des tiroirs peiivent etre changees ä volonte avec la plus grande facilite (Z), E.). On les ecrif siir du papier Bristol ou de carte de visite et on les glisse daus une rainure du bois preparee a, cet effet. Cela permet uu classement rapide et des remaniements aises dans l'ordre de la Classification. La profondeur des tiroirs est calcul^e pour permettre d'y placer des preparations en cellule. Ajoutons que les portes et leur fermeture sont calculees pour prendre le moins de place possible, et que le tiroirs sont Supportes E\ Tissu / \^ epithelial.^ 0,45 2. par de petites traverses en bois encastrees daus les planches des a-cotes et non pas seulement coUes ou cloues. Les preparations etalees sur des tiroirs sont d'un maniement tres commode, particulierement dans les demonstrations destinees h l'en- seignemeut; pour les transporter daus un auditore, il suffit de sortir le tiroir entier. On retrouve egalement chaque preparation d'un coup d'oeil, ce qui n'est pas toiijours le cas avec les boites ordinaires. II y a un grand avantage a ce que les preparations soient posees de plat au point de vue de leur bonne conservation. 514 Kleinere Mittheilungen. II, 4. Mittheilungen technischen Inhaltes. Von Di\ Joseph Heinrich List in Graz. I. Zur Verwendung des Drittel- {Ranvier' sehen) Alkohols. Bei Untersuchung des Blasenepithels und mannigfacher anderer Epithelien der Wirbelthiere habe ich D r i 1 1 e 1 - A 1 k o h o l ziemlich häufig verwendet und einige Vor- und Nachtheile gefunden, welche ich nach- folgend mittheile. Für Isolation geschichteter Pflasterepithelieu leistet Drittel-Alkohol nach 24 stündiger bis zu mehrtägiger Einwirkung Treffliches, und wüsste ich (neben lOprocentiger Chlornatriumlösung) kein Isolatiousmittel, das in ebenso kurzer Zeit so brauchbar wäre. Die so isolirten Zellen ge- statten sehr leicht die Tinction mit den verschiedensten Färbemitteln, ein Umstand, der nicht zu unterschätzen ist. Ich habe früher den in Rede stehenden Alkohol nach Ranvier's Vorgang auch zur Isolation der Be- cherzellen angewendet, bin aber zur Ueberzeugung gekommen , dass derselbe oft trügerische Nachwirkungen, namentlich Quelluugsprocesse, nach sich zieht, weshalb er zur Isolation von Drüsenzellen nur mit Vor- sicht zu gebrauchen ist und man mit mehr Vortheil MtiLLEE'sche Flüssig- keit oder Osmiumsäure verwendet, um morphologische Verhältnisse zu studiren '. Ich bemerke, dass es bei mehrtägiger Verwendung des Drittel- Alkohols angezeigt ist, denselben zu wechseln, um Fäulnisserscheinungen zu verhüten. //. üeher Methoden, ivelche zum Studium der Structur von Drüsenzellen geeignet sind. 1. Chromsäure. Am meisten verwendete ich Chromsäure und zwar zur Isolation Härtung bis zu 8 Tagen in 0.1 procentiger Lösung. Um Schnitte her- 1) Ich habe schon gelegentlich erwähnt, dass man an mit Drittel-Alkohol isolirten Epithel- und Becherzellen die Nucleoli als glänzende Körperchen her- vortreten sieht und bei nachfolgender Tinction mit salpetei'saurem Rosanilin oder dem verdünnten RENAUT'schen Hämatoxyhn-Glycerin den EmER'schen Körnchenkreis um den Nucleolus deutlich wahrnehmen kann. (List: Ueber Becherzellen im Blasenepithel des Frosches, Sitzber. der K. Acad. d. Wiss. Wien. Bd. LXXXIX. Abth. 3, 1884.) II. 4. Kleinere Mittheilungen. 515 zustellen, kenne ich kein besseres und die Verhältnisse treuer conser- virendes Härtungsmittel als '/j- oder Yö procentige Lösung. Den grössten Theil meiner Befunde gewann ich an Schnitten, die auf folgende Weise hergestellt wurden : Härtimg bis zu 3 Tagen in '/^ procentiger Chromsäure, hierauf mehrtägiges Auswaschen, dann allmählige Härtung in Alkohol bis zur Entwässerung, Einbettung in Celloidin und Färbung der in schwachem (40procentigem) Alkohol gelegenen Schnitte mit den betreffenden Anilin- farben ' (Bismarckbraun nach Weigert, salpetersaures Rosanilin) und dem verdünnten RENAUT'schen Hämatoxylin - Glycerin. Auch die a. a. 0. besprochenen Doppeltinctionen wandte ich mit Erfolg an. An auf solche Weise hergestellten Schnitten ist die Structur in den Drüsenzellen (Becherzellen sowohl als Schleimdrüsenzellen) sehr schön erhalten, und wüsste ich kein Reagens, welches in dieser Beziehung mit Chromsäure gleichzustellen wäre. Namentlich gelingt nach guter Aus- wässernng die Tinction der Filarmasse recht gut, ein Vorzug, der ihre Brauchbarkeit nur noch erhöht. 2. MüLi-ER'sche Flüssigkeit. Mehrwöchentliche Härtung gestattet sehr leicht nachfolgende Iso- lation ; nach 24 bis 48 stündigem Auswaschen färbe ich die isolirten Elemente, die in Wasser untersucht werden, mit verschiedenen Anilin- farben [Methylgrün (Iprocentiges) , Anilingrün (Iprocentiges) oder sal- petersaurem Rosanilin], wodurch die Filarmasse sehr scharf hervortritt ; allerdings färben sie bei Glyceriueinschluss in kurzer Zeit wieder ans. Um Schnitte herzustellen, benutzte ich mehrtägige bis mehrwöchent- liche Härtung in MüLLEB'scher Flüssigkeit, hierauf (nach Auswässerung) allmählige Nachhärtung in Alkohol. Einschluss in Celloidin und Färbung der Schnitte mit den oben (sub 1) angeführten Farbstoffen. Nach meinen Erfahrungen conservirt MtjLLEB'sche Flüssigkeit trefflich das Gerüstwerk in den Becherzellen und Schleimdrüseuzellen ^. 1) Cfr. diese Zeitschr. Bd. II. 1885. p. 145 ff. 2) Ich möchte mir anschliessend eine Bemerkung zu machen erlauben über das verschiedene Verhalten des Kernes der Becherzellen bei der Tinction nach Härtung in Chromsäure oder MüLLEß'scher Flüssigkeit. Nach Härtung in Chromsäure färbt sich der Kern gewöhnlich nur sehr schwach oder gar nicht und verhält sich in jeder Beziehung ähnlich der Zellmembran; nach Härtung in MüLi-ER'scher Flüssigkeit stimmt der Kern in seinem Tinctionsverhalten mit den Kernen der gewöhnlichen Epithelzellen überein. 5 IG Kleinere Mittheilungen. II, 4. 3. Osmiumsäure. Osmiurasäiire verwendete ich immer entweder in 0"5procentiger oder einprocentiger Lösimg. Kleine Gewebstücke gab ich durch 12 bis 24 Stunden in einprocentige oder 24 bis 48 Stunden in 0*5 procentige Lösung. Nach längerem (3 bis 4tägigem) Auswaschen lassen sich die Drüsenzellen durch Zerzupfen in destillirtem Wasser oder verdünntem Glycerin ('/, Vol. Glycerin, % ^^o^- Aqua dest.) ziemlich leicht isoliren. Das Gerüstwerk tritt sehr schön und scharf hervor und ist trefflich con- servirt. Von Tinctionsmitteln verwendete ich Hämatoxylin oder das ver- dünnte RENAUT'sche Hämatoxylin-Glycerin. Ich habe Osmiumsäure ziem- lich häufig angewendet und durch gleichzeitige Controlversuche an frischen Objecten gefunden, dass sie die Structuren sehr treu erhält. 4. Flemmikg's Gemisch'. Dieses Gemisch verwendete ich nach Flemminc^'s Empfehlung haupt- sächlich zur Aufsuchung von karyokinetischen Figuren in den Rpithelien, fand aber, dass dasselbe auch die Structuren in den Drüsenzellen gut conservirt. Allerdings schien mir, als ob hier und dort geringe Schrum- pfungserscheinungen in den Maschen der Filarmasse auftreten würden. Auch gelingt nachträgliche Färbung der P'ilarmasse mit verschiedenen Anilinfarben. Um Schnitte herzustellen, verfuhr ich in der Weise, dass ich die Gewebsstücke bis zu 24 Stunden (Maximum) in dem Gemische liess, hierauf durch mehrere Tage auswässerte und in Alkohol bis zur Entwässerung nachhärtete. Einschluss in Celloidin, hierauf Tinction der Schnitte. 5. Alkohol. Auch starken (70- bis 90procentigen) Alkohol verwendete ich, aller- dings in beschränktem Maasse. Nach meinen Erfahrungen conservirt er Structuren recht gut, und gelingt namentlich nachfolgende Tinction sehr leicht. *) Flemming, W., Mittheilimgen zur Färbetechnik. (Diese Zeitschr., Bd. I, 1884, p. 349.) n. 4. Kleinere Mittheilungen. 517 Notizen zur Färbetechnik. Von W. Flemming in Kiel. Nachträgliche Tinction vo n Prä parate nnachHEiDE n- hain's Methode. Das sehr hübsche und bequeme, von Heidenhain kürzlich bekannt gegebene Verfahren ' wird sich wohl schon viele Freunde erworben haben ; mir leistet es sehr gute Dienste. Ich habe aber schon bei den ersten Versuchen gefunden, dass sich solche Präparate nebenbei nach- träglich ohne Mühe mit guten Kerutinctionen versehen lassen und dadurch an Schönheit und Demonstrationswerth bedeutend gewinnen; ich theile dies hier mit, da aus Heidenhain's Aufsatz nicht hervorgeht, ob er selbst den Versuch bereits gemacht hat-, und da ich auch von anderen Seiten bisher nichts der Art angegeben finde. — Gleich bei den ersten Proben die ich im Winter vorigen Jahres anstellte, zeigten sich Alauncarmin (nach Geenacher) und Hämatoxylin (nach Delaeield^ oder Böhmek) als so gute Kernfärbemittel für HEiDENHAiN'sche Präparate, dass ich von Versuchen mit anderen abgesehen habe. Kerne, und auch Kern- theilungen (soweit letztere bei der Vorbehandlung mit Alkohol kenntlich erhalten sind), treten nach solcher Färbung weit besser hervor, als an den bloss geschwärzten Präparaten ; und da man mit beiden Mitteln die Tinction am ganzen Stück vor dem Einbetten und Schneiden vornehmen kann, so hat man ausser der unbedeutenden Zeitverlängerung nicht mehr Umstände damit, als bei dem ursprünglichen Verfahren Heidenhain's. ») Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIV, H. 3, 1884, p. 4G8: Färbung der Stücke in toto in wässeriger Häraatoxylinlösung auf 8 bis 10 Stunden, weiter Einlegen in einprocentiges Kalibichromat auf ebenso lange; Waschung in Wasser, Einbringen in Alkohol, Einschmelzung zum Schnitt. ■ — Ich .schneide diese Präparate vielfach auch feucht unter Alkohol und montire in Glycerin, um Schi'umpfungen beim Durchschmelzcn zu entgehen. Sie sind von den meisten Geweben völlig hart genug, um auch so die feinsten Schnitte zu geben. 2) Nach der soeben erschienenen Arbeit Dogiel's über BowMAK'sche Drüsen (Arch. f. mikrosk. Anat. 1885, Bd. XXVI H. 1, 2. November), die ausHr.iDENHAiN's Institut kommt, muss ich annehmen, dass dieser Versuch dort nicht gemacht ist ; denn auch Dogiel scheint nicht daraufgekommen zu sein, die HEioENHAiN'schen Präparate noch nachträglich zu färben, und es erklärt sich so, dass ihm die Mucinzellen in den Drüsen entgangen sind, welche Paui.sen mit Hülfe der hier und unten angegebenen Tinctionen gefunden hat (siehe im P' olgenden, p. 520 >. •') Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 288. Zeitsclir. f. wiss. Mikroskuiiie. 11, I. 34 518 • Kleinere Mittheilungen. II. 4. Die geschwärzten Stücke, die möglichst klein zu nehmen sind, kommen nach dem Waschen mit Wasser sofort auf einen bis zwei Tage in die Farbe und dann vor dem Schneiden auf einige Stunden bis länger zur Nachhärtung in absoluten Alkohol. An solchen mit Hämatoxylin gefärbten Schnitten von Mucin- drüsen fand ich auch eine sehr schöne und demonstrative Violett- färbung der Mucinzellen, welche von Paulsen seitdem näher studirt und verwerthet worden ist (vergl. die folgende Mittheilung). Die Hämatoxylinfärbung von Schleimdrüsen, die ja länger bekannt ist und von mir schon seit 15 Jahren zur Demonstration benutzt wird, ge- lingt ja auch bei anderer Vorbehandlung (z. B. Alkohol, Chromsalze), differeuzirt aber die Drüsen an HEiDENHAiN'schen Präparaten besonders gchön. Es sei noch bemerkt, dass für das Gelingen der nachträglichen Färbung die Schwärzung nicht zu stark sein soll , worüber man sich leicht durch einen vorgängigen Probeschnitt unterrichten kann. Eventuell lässt sich, wie kürzlich schon Giekke mitgetheilt hat ', eine Ueber- schwärzung durch längeres Liegenlassen in Kaliumbichromat wieder ver- mindern. Kerntinctionen an Osmiumsäurepräparaten. Man be- gegnet vielfach der Meinung, dass Objecte, die in reiner Osmiumsäure gehärtet sind, einer guten Tinction und besonders Kerntiuction nicht mehr zugänglich seien 2. Ich gebe deshalb diese Notiz auf die Gefahr hin. Manchem etwas schon Bekanntes zu melden. Vor längerer Zeit"* habe ich mitgetheilt, dass Osmiumpräparate, wenn sie mit Kalium- bichromat nachbehandelt sind, bei voller Bewahrung ihres sonstigen Charakters sehr gute Kernfärbungen mit Hämatoxylin gestatten. Die Färbung kann mit BöHMER'scher oder DELAriELü'scher Tinctur egeschheu, entweder längere Zeit (einen Tag) in verdünnter, oder nur stundenlang in stärkerer Lösung. Es ist jedoch auch die Nachbehandlung ') Diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 218, Anm. ■^) Vergl. z. B. bei H. Fol, Lehrbuch d. vergl. mikrosk. Anat. Lief. 1, p. 174, Abs. 5, und den dort citirten Vorschlag von Malassez, das Osmium deshalb erst nach der Tinction anzuwenden. — Die von Ranvieu u. A. (so Stirung) vielbenutzte Färbung von Osmiumpräparaten mit Pikrocarmin giebt ja in der That nur sehr blasse Tiuctiouen, und nicht viel anders ist es mit ammoniakalischem Carmin, das u. A. Max Schultze und Rudneff, sowie F. E. Schulze schon vor 1870 auf Osmiumpräparate angewandt haben. 3) Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XIII, 1877, p. 826, Anmerkung, und die dort gegebenen Plguren. Auch die scharfe Färbimg der Mucindrüsen bei diesem Verfahren habe ich dort schon dargestellt (a. a. 0. Taf. L Fig. 4). II. 4 Kleinere Mittheilungen. 519 mit Kaliumbicliromat dafür nicht erforderlich, wenn nur die Osmiiim- präparate bis zur Färbung nicht allzu lange in Alkohol aufbewahrt und nachgedunkelt sind; am besten färbt man sie vor dem Einbringen in Alkohol. — Ebenso gute Kerntinctionen bekomme ich au Osmiiim- präparateu mit Alauncarmin, gleichfalls ohne Zwischenbehandlung mit Chromsalz , bei einer •/._, bis 1 tägigen Färbung. — Die Osmium- säure wende ich in wässeriger Lösung von 2 oder 1 Procent, nicht als Dampf an, und lasse die Härtung darin im Dunkeln etwa 6 Stunden dauern. Die gefärbten Schnitte von solchen Präparaten sind z. B. für Retina die schönsten Demonstrationsobjecte, die ich kenne, da sie mit der Erhaltung der feinsten Structur, wie sie an diesem Object nur Osmiumsäure leistet , und mit der Duukelung der Aussenglieder der Sehzellen eine gute Kernfärbung vereinigen und dabei dauerhaft in Glycerin montirt werden können, welches hier für die Verdeutlichung der Structur ja dem Lack oder Balsam vorzuziehen ist. Demonstration von Becherzellen durch Färbung an Osmium- und Osmiumgemisch-Präparaten. Vor 11 Jahren fand ich zufällig, dass der Inhalt der Becherzellen des Darmepithels u. a. Epithelien an Osmiumpräparaten eine tief blaue oder violette Separatfärbung bekommt, wenn man mit Ilämatoxylin färbt. Eine damals von Dr. Hokcziczka (Prag) unternommene Verfolgung der Sache ge- langte nicht zum Abschluss ; ich habe die seitdem viel von mir benutzte Reaction dann erst kürzlich an anderem Orte notirt '. Wie Paulsen kürzlich gefunden hat (vergl. folgende Mittheilung), ist sie nicht nur für die Diagnose von Becherzellen, sondern noch für andere Zwecke von Werth. — • Seitdem fand ich eine anderes, fast noch besseres Mittel zur Verdeutlichung des Becherinhalts in der Behandlung mit Osmium- gemischen - und nachfolgender Gentiana- oder Safraninfärbuug : der Inhalt der Becher wird dabei schön blau bezw. rothbraun, in solcher Intensität, dass sie schon bei ganz schwacher Vergrösserung auf's Schärfste hervorstechen. Kiel, den 14. Nov. 1885. 1) Studien über die Regeneration der Gewebe. (Arcb. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIV, 1884, p. 396.) 2) Cfr. diese ZcitscLr. P.d. I, 1884, p. 349. 34^ 520 Kleinere Mittheil imgen. ]I. 4. Färbung von Schleimdrüsen und Beeherzellen. Von E. Paxilsen in Kiel. Die Frage in Betreff des Baues der Schleimdrüsen ist durch die Resultate, welche Schieffekdeckeb ' mit seinen Doppelfärbungsmethoden erreichte, in ein neues Stadium getreten. An zusammengesetzten Schleim- drüsen der Mundhöhle der Säugethiere erhielt er nach Härtung in starkem Alkohol und Färbung mit Eosin-Anilingrün sehr verschiedene Bilder des Epithels innerhalb desselben Drüsenschlauches, welche da- durch namentlich ausgezeichnet waren, dass in einigen derselben sich ein mehr oder weniger entwickeltes Netzwerk in einer schwächer tin- girten Zwischensubstanz stark färben liess. Mir ist es durch andere Fixirungs- und Färbemethoden gleichfalls gelungen, das Maschenwerk von Schleimdrüsen (Zungenschleimdrüsen und Submaxillaris des Kalbes) intensiv zu färben. Ich habe dies durch das DELAFiELD'sche Hämatroxylin erreicht, an Präparaten, die in eiuprocentiger Osmiumsäure oder in FLEMMiNG'schem Osmiomgemisch fixirt und einige Tage in Alkohol nach- gehärtet waren, sowie au Alkoholpräparaten, welche ich nach der Hei- DENHAiN'schem Methode behandelte. Am meisten kann ich die Osmium- säure empfehlen. Mit dem FLEMMiNCx'schen Osmiumgeraisch erhielt ich für diese Zwecke weniger gute Resultate. Uebrigens war meine Lösung nicht genau nach der Formel zusammengesetzt. Um eine starke Tinction zu erhalten, müssen die Schnitte in einer verdünnten Lösung der Farbe mindesten 12 bis 15 Stunden liegen; in der unverdünnten Lösung er- reicht man dasselbe in ca. '/, Stunde. Auf diese Weise bekommt man ausser der Kernfärbung eine sehr scharfe Tinction des weitmaschigen Reticulum des Epithels der Schleim- drüsen, während eine homogene Zwischen Substanz glas- hell und ungefärbt bleibt. Die Intensität der Farbe ist nicht überall die gleiche, sondern an manchen Zellgruppen eine geringere als an anderen, auch bleiben an manchen Drüsenschläuchen einzelne oder alle Epithelien ungefärbt. Da an Eiweissdrüseu sich nur die Kerne, nicht aber das engmaschige Reticulum des Epithels bei diesen Methoden färbte, bekommt man sehr schöne Demonstrationspräparate dieser beiden •) ScHiEFFEEDECKEB, Zur Keuntniss des Baues der Schleimdrüsen (Arch. f. mikrosk. Auat. Bd. XXUI H. 3, 1884). II. 4. Kleinere Mitthcilunsren. 521 Drüsenarten, wenn man von Zungengriind solche Schnitte tingirt, an denen mucöse und seröse Drüsen neben einander liegen. Ferner habe ich mit Hülfe der Hämatoxylinfärbiing mit eiuprocentiger Osminmsäure und nach Heidenhain's Methode behandelter Präparate an den BowMAN'schen Drüsen mehrerer Säugethiere nachweisen können, dass ihr Epithel die charakterischen Eigenschaften des Epithels jener beiden Arten von Zungeudrüseu in sich vereinigt, indem neben einander im Drüsen- schlauche beide Arten von Zellen und ausserdem noch eine dritte mit centraler Schleimzone vorkommen'. Es gelingt dies sowohl durch Fär- bung ganzer Stücke, wie der einzelnen Schnitte, durch schnelle und durch langsame Tiugirung. Immer aber habe ich ausschliesslich pro- gressive, niemals regressive Färbung angewendet. Eine Blaufärbung der Schleimmassen, die sich vielfach in ausgebuchteten Theilen der Tubuli und Ausführungsgänge finden und die freie Fläche des E^pithels über- ziehen, erhält man in gleicher Weise durch Hämatoxylinfärbung von Osmium-, Osmiumgemisch und HEiDENHAiN'schen Präparaten. Auch die Becherzellen, welche in der Naseuschleimhaut in grosser Menge vorkommen, werden bei solcher Behandlung stark blau oder blauviolett getärbt, wie Flejiming dies bereits für Becherzellen festgestellt hat -. Bei Osmiumgemisch — und ganz besonders bei HEiDENHAiN'scheu Präpa- raten — trat in der schwächer tingirten Grundsubstauz des Becherinhalts häufig ein intensiv gefärbtes Netzwei-k hervor. Von der unteren Muschel des Pferdes, wo die Becherzelleu sehr dicht standen, besitze ich Präpa- rate, welche sehr schön zeigen, wie Fäden aus diesem Maschenwerk des Bechers heraustreten, sich auf der freien Epithelfläche ausbreiten und zu einer zusammenhängenden Schicht verschmelzen. An der oberen Muschel einer Ziege fand ich fast jede Epithelzelle in eine Becherzelle umgewandelt, so dass die mucosa mit einer breiten violetten Borde ver- sehen war. lieber derselben lag dann noch eine breite Schicht ebenso gefärbten Schleims. Kiel, den 14. November 1885. ') Näheres s. meine Arbeit „lieber den Bau der Nasendrüsen, besonders der BowMAN'schen Drüsen". (Areli. f. mikrosk. Anat., 1885, Bd. XXVI H. 2). ■^) Cfr. vorige Mittheilung, diese Zeitschr. Bd. IL 1885. p. 517. 522 Kleinere Mittheilungen. II, 4. Notiz, das Sehällibaum'sohe Collodium betrefPend. Von Arthur Bolles Lee in Villafranca bei Nizza. In Bd. II, 1885, p. 371 dieser Zeitsclirift finde ich angegeben, dass bei der ScHÄLLiBAUM'sclien Aufklebemethode es nothwendig sei, die Objectträger nach dem Auflegen der Schnitte so lange zu erwärmen, bis das den Klebstoff gelöst haltende Nelkenöl verdunstet ist. Dieselbe Angabe ist mir auch wohl an anderen Orten begegnet. Es ist dieses ein sehr interessanter Irrthum, aber nur ein Irrthum. Den ScHÄLLiBAUM'schen ünterguss braucht man nämlich gar nicht bis zur Ver- dunstung des Nelkenöls zu erwärmen, sondern nur bis zu dem Punkte, wo das Oel zu Tropfen zusammengeflossen ist. Dazu bedarf man eines Wasserbades oder dergl, nicht; es genügt, die Objectträger einige Secunden oder höchstens eine halbe Minute über die Flamme einer Spiritus- oder Bunsen'schen Gaslampe hin und her zu bewegen (wie mir zuerst von M. Bedot gezeigt wurde). Das Verfahren ist ebenso sicher wie bequem. II. 4. Rc3teriitc iiiul Bussprccbungen. 523 Referate und Besprecliiing'en. 1. Lehr- und Handbücher. Fol, Herinaim, Die mikroskopisch-anatomische Technik. [Zugleich 1. Lief, von Fol's: Lelirbiich der vergleichenden mikroskopischen Anatomie mit Einschluss der vergleichenden Histologie und Histogenie]. Leipzig (Engelmann) 1884, 208 pp. 8" m. 84 Figg. 5 M. Wenn auch eine nicht geringe Zahl von grösseren und kleineren Handbüchern der histologischen Technik dem Gebrauche des Morphologen zu Gebote steht, so kann dennoch behauptet werden, dass durch die Ausgabe des vorliegenden Handbuches einem dringenden Bedürfniss genügt worden ist. Theorie und Praxis haben im Laufe der letzten zehn Jahre die weitgehendsten Umgestaltungen erfahren. Die Fort- schritte der Optik haben das Handwerkzeug des Biologen verbessert und mit Hilfsapparaten versehen , deren Leistungen in den älteren Apparaten ohne Vorbild sind. Die Anwendung chemischer Erfahrungen, die Benutzung zahlreicher neuer Verbindungen bei den mannigfaltigsten Manipulationen haben sichere, nicht leicht fehlschlagende Methoden gelehrt, wo früher Ausprobiren von Fall zu Fall, persönliche Uebung und Glück maassgebend waren. Die Probleme, deren Erforschung jetzt durch die entwicklungsgeschichtliche Methode der morphologischen Forschung vorgezeichnet sind, stellen ganz andere Anforderungen an den Arbeitenden als noch vor kurzer Zeit. Eine erfreuliche Thatsache ist es, dass der Apparat des Mikroskopikers diesen Anforderungen fortdauernd nachkommt. Unmöglich aber war es , durch einfache Einreihung der neuen Errungenschaften in ältere, für die Erforschung anderer Ziele mit den unvollkommenen Mitteln der früheren Zeit ver- fasste Lehrbücher , die nöthige Umgestaltung der letzteren zu be- wirken. Es kann nicht geleugnet werden, dass manche der existirenden Grundrisse u. s. f. in den von Zeit zu Zeit erscheinenden Neu-Ausgaben 524 Referate und Besprechungen. II, 4. clurcli jedesmalige Umarbeitung sich bemühen, auf der Höhe der Zeit zu bleiben ; der angehende Mikroskopiker wird hoifentlich noch lange in dem bekannten FREi'scheu Lehrbuch die erste Anregung und Ausbil- dung an der Hand gut gewählter Schul-Objecte finden. Alle aber, welche das Mikroskop zu selbstständiger Arbeit benutzen, werden Fol für des- sen vorzügliche, allen Anforderungen des jetzigen Standes der Forschung gerecht werdende Darstellung der mikroskopischen Untersuchungsmetho- den Dank wissen. In verhältnissmässig engem Rahmen bringt dieselbe ein ungemein reiches Material mit eingehender Berücksichtigung der Bedürfnisse der vergleichenden Histologie und Embryologie; selbst der Bacterien-Forschung ist ein besonderes Capitel gewidmet. Neben den eigentlichen Untersuchungsmethoden finden wir ein der Abbildung mikro- skopischer Präparate gewidmetes Capitel als besonderen Vortheil des Buches. — Fol's Werk ist bei W. Engelmann in Leizig erschienen. Die Ausstattimg zeigt die bekannten Vorzüge der von jenem Verleger edirten Werke: Klarer, scharfer Druck, schöne Holzschnitte, treffliche Ausnützung des Raumes durch Verwendung verschiedener Schriftarten, massiger Preis. Leider fehlen auch die bekannten Nachtheile nicht ganz, 68 stört (wenn auch weniger als bei anderen Werken desselben Verlegers) vielfach das Durchscheinen des Textes die Schönheit der Holz- schnitte. Die Heftuug ist ganz ungenügend ; dieser Nachtheil ist doppelt lästig bei einem, längere Zeit ungebunden zu benützenden — und im speciellen Fall sicher von jedem Besitzer viel zu benützenden — Liefe- rungswerk. Nicht weniger erfreulich, als die Besprechung des Buches als Ganzes, ist die Analyse des Inhaltes. Von einer Kritik im einzelnen sehen wir ab. Wenn wir hier und da eine Special-Angabe vermissen, so dürfen wir nicht verkennen, dass bei der Auswahl aus einem so viel- gliederigen Stoff unmöglich jedem subjectiven Wunsche Rechnung ge- tragen sein kann. (Einen Wunsch nur, dass in der 2. Auflage ein Special-Inhaltsverzeichniss das Nachschlagen erleichtern möge, möchten wir nicht unterdrücken.) Das Buch bildet, da Fol neben einer grossen Literaturkenntniss eine ganz ausserordentlich ausgedehnte eigene Er- fahrung besitzt, eine Fundgrube neuer oder wenig bekannter Vorschriften. Wir versuchen, in den folgenden Auszügen der einzelnen €apitel das Wichtigste davon anzudeuten. Der erste Abschnitt „Seciren und Präpariren" bringt Abbildungen der Präparirinstrumente (darunter einen anscheinend sehr zweckmässigen Lupeuhalter der Genfer Werkstätte (Societe pour la construction d'in- struments de physique, chemin Gourgas Plainpalais, Geneve) und ein II. 4. Referate und Besprechungen. 525 nach Fojb's Wünsclien geformtes Präparirmikroskop) ferner Vorschriften über das Abtöten der Thiere (Einschläfern von Seesternen und Medusen in mit Kohlensäure gesättigtem Wasser) und über vorläufige Präparatiou (Wachsschalen, in welchen eingeschmolzene Schrotkörner das Wachs am Boden halten; Präpariren unter Chromalaun in 5 — 10 procentiger Lösung). Ein II, Abschnitt behandelt das Injectionsverfahren. Fol benützt neben der Spritze einen eigens construirten Injectionstisch zu Injectionen bei constantem Druck. Zwei Quecksilber - Druckflaschen, welche mit einander communiciren, sind unter dem Tisch angebracht und werden abwechselnd mittels einer Kurbel gehoben. Das zu injicirende Object mitsammt der die Injcctionsflüssigkeit enthaltenden Masse befindet sich in einem in den Tisch eingelassenen, von unten durch Gasheizung er- wärmten Wasserbad , so dass der Tisch selbst ganz frei bleibt, während Druck und Temperatur leicht zu reguliren sind. Von den mitgetheilten Vorschriften für Injectionsmassen heben wir hervor die „Metagelatine- Massen". (Die Leimlösung wird durch längeres Sieden mit etwas Ammo- niak verflüssigt, kaltflüssig injicirt und später bei der Härtung der Präparate in Alkohol oder Chromsäure wieder zum Gerinnen gebracht.) Die Carmin-Leimmasse bereitet Fol sehr einfach durch Einlegen von Gelatineblättern in Carminlösung (späteres Neutralisiren durch Essig- säure, Auswaschen; die Tafeln werden dann trocken aufbewahrt). Braune und schwarze Leimmassen werden dargestellt durch Mischen von Silbernitrat-Lösung (30 : 100) mit kochsalzhaltiger Gelatine (14 Na Cl, 200 H^ 0,50 Gelatine), Auspressen der erkalteten Masse durch ein Mullnetz, und Nachbehandlung mit einem Gemisch von oxalsaurem Kali (kaltgesättigte Lösung 300 cc) mit schwefelsaurem Eisenoxydul (kalt- gesättigte Lösung 100 cc). Purpurrothe Injectionsmasse gewinnt man durch Behandeln der eben genannten Chlorsilber-Gelatine mit einer Mischung von : IL 0 300 voll., alkoholische Lösung von Hydrochinon (1 : 20) 82 voll., wässerige Lösung von kohlensaurem Ammoniak 60 voll. Der III , das Mikroskop behandelnde, Abschnitt enthält u. a, eine Abbildung des Reisemikroskopes der Genfer Werkstätte. Relativ ausführlicher, als in den entsprechenden älteren Werken , sind den jetzigen Anforderungen entsprechend die Ditfractionserscheinungen be- handelt. Vielleicht hätte hier das AßBE'sche stereoskopische Ocular Platz finden sollen; dagegen sind sowohl der AßBE'sche Beleuchtungs- apparat als auch Spectral- und Polarisations-Apparat in neuester Form dargestellt (u. a. der Analysator des Polarisators bereits statt mit dem ^i2(^ Referate und Besprechungen. II, 4. NicoL'schen mit einem, soviel Ref. bekannt, erst in neuester Zeit coustruirten, dreitheiligen Prisma mit grossem GesicLtsfeld). In dem IV., das Abbildiings-Verfahren behandelnden Abschnitt, finden wir Mikrometrie, Zeichnen mit der Camera, Mikrophotographie und Modelliren behandelt. Den grössten Theil der Ausführungen bildet die mikrophotographische Technik. Fol verlangt für einen grösseren Apparat, dass das Object auf einem besonderen Stativ stehe. Die Camera selbst ist an einem Charnier so befestigt, dass man nach genauer Einstellung in mittlerer Lage ihr leicht geneigte Stellungen zu wieder- holten Aufnahmen geben kann, deren Ergebnisse stereoskopische Bilder sind. Carminpräparate werden bei Beleuchtung mit rothem Licht (durch Einschaltung einer mit Blut-Gelatine überzogenen Glasplatte) auf- genommen. Zur Reproduction wird das Meisenbach' sehe Hochdruck- verfahren, welches den Abdruck im Text gleich Holzschnitten ermöglicht, vorgeschlagen; gerade für diejenigen Objecte, welche zur Zeit noch am meisten auf photographischem Wege abgebildet werden — Mikro- organismen und Diatomaceen-Structuren — dürfte dasselbe indessen, weil es die Schattirungen und Linien in Punkte zerlegt, nicht brauchbar sein. — Von den mitgetheilten Methoden der Reconstruction besteht eine in einer Modification des BoEN'schen Verfahrens, indem die Wachs- tafeln durch Transparentseife oder Pappscheiben ersetzt werden; eine andere geht in der Weise vor, dass auf passend eingetheilteu Glastafeln die Couturen, bezw. Dimensionen der in den Präparaten enthaltenen Organe nach successiven Querschnitten angetragen und die Profil- ansichten bezw. sagittalen Durchschnittsbilder construirt werden. Gerade dieser Abschnitt kann übrigens besonders zu specieller Leetüre wegen zahlreicher Details empfohlen werden. Der V. Abschnitt behandelt die Untersuchung lebender Objecte, ferner das Fixiren und Erhärten derselben. Zu erwähnen haben wir hier einige Abänderungen der Gemische von Osmiumsäure, Chromsäure und Essigsäure. In der von Ref. eingeführten „Chromosmiumsäure" verwendet Fol die Osmiumsäure nur in der halben Menge (Osmium- säure 1 % 5 [statt 10] voll, auf 25 voll, einprocentiger Chromsäure, 65 [statt 60] H, 0) in Flemming's Chrora-Osmium-Essigsäure-Mischung gebraucht er Osmiumsäure 1 % 2 [statt 10] Chromsäure 25, Essigsäure 5, H.2 0 68 [statt 60] voll. Zur Fixirung von Wimper- und Pseudo- podienbildungen und zur Härtung kleiner Seethiere dient mit Vortheil Eisenperchlorid (schon einmal zu anderen Zwecken von Polaillon 1866 eingeführt; vgl. Giebke's Tabelle in dieser Zeitschrift No. 202); die englische Tinctur wird mit 5-10 voll. 70 procentigen Alkohols verdünnt II. 4. Referate luul Besprccluuigen. 527 verwendet. Ausgewaschen wird mit öOprocentigem Alkohol, dem etwas Oxalsäure zugesetzt ist. Vielfach üblich, aber soweit Ref. bekannt nir- gends publicirt, ist die Aufbewahrung des absoluten Alkohol mit einem Zusatz von gebranntem Kalke oder Kupfersulfat. In dem VI. Abschnitt „Herstellung mikroskopischer Präparate" finden wir das Mikrotom, die Einbettungs- Schneide- und Einschlussniethode be- handelt.— Erwähnt sei daraus zuerst ein Auf klebeverfahreu für Schnitte aus Gummi- und Seifen- (und Celloidin Ref.) Einbettung: Man bestreicht den Objectträger mit einer Mischung von 5 cc. einer Lösung von 4 g Gelatine in 20 cc. Eisessig (auf dem Wasserbad unter mehrmaligem Schütteln hergestellt) 70 cc. Alkohol von 70 Procent und 1 — 2 cc. öprocentiger Chromalaunlösung; nach einigen Stunden geht die auf- getragene Schicht in einen unlöslichen Zustand über, quillt indessen unter Wasser noch genügend, um Schnitte heften zu lassen. Das Ordnen der Schnitte geschieht sonach unter Wasser. Schnitte sehr brüchiger Paraffin-Präparate rettet Fol durch vorheriges Auftragen einer dünnen Collodiumschicht auf die Schnittfläehe. — Für die Celloidinlösung schreibt er das Verhältniss von 1 Theil Trockensubstanz auf 6 voll. Alkohol absolutus, in welchem die erstere zunächst auf- quellen, zu 9 voll, später zuzufügenden wasserfreien Aethers vor. — - Neben dem Zerzupfen empfiehlt er das allen Schülern Max Schultze's geläufige Zertrümmern brüchiger Objecte (Osmiumpräparate) zur Isolation der Formelemente. — Zum Schneiden aus freier Hand oder mit dem Cylinder-Mikrotom werden brauchbare Rasirmesser mit Klingen zum Einsetzen von Lecoultre (Sentier, Kanton Waad, Schweiz) geliefert. — Specielle Behandlung findet das Putzen der Objectträger. Vorgeschrieben wird hier vorläufiges Einlegen der Objectträger in eine Lösung von 30 cc. Schwefelsäure, 30 g Kali bichromic. in 400 cc Wasser. Das VII. Capitel „die mikrochemische Untersuchung der Gewebe" behandelt neben den eigentlichen chemischen Manipulationen die Tinc- tions- und Imprägnations-Technik, Neu ist hier die Empfehlung des Farbstoffes der schwarzen Johannisbeere uuter den Namen „Ribesin". Die Häute der ausgedrückten Beeren werden mit lOprocentiger Alaun- lösung ausgekocht ; die filtrirte Flüssigkeit ist ein exquisites Kernfärbe* mittel, besonders gut für Alkohol, weniger für Chromsäuvepräparate. Es reiht sich den Farbstoffen an, welche bei ihrer Einwirkung auf den Zellkern eine schwach alkalische Reaction desselben, bezw. der sich färbenden Substanz anzeigen. Man kann es combiniren mit Eosin. — Eosin und Hämatoxylin combinirt Fol nach der Vorschrift Rei^aut's. Den Schluss des Buches bildet ein Anhang, enthaltend eine kurze 528 Referate und Besprechungen. TT. 4. Recapitnlatioii des Ganges, welcher bei der Anfertiguns; von Gewebe- präparaten einzuhalten ist, ferner eine Anleitung zur Anfertigung von Mikroben-Präparaten, einschliesslich der Cultur- und Impfmethoden. Auch auf diesem Gebiet hat Fol eigenartige Manipulationen ausgebildet ; wir erwähnen einen eigenthümlichen Verschluss der Culturgefässe, eine Aussaat- Canüle und Aussaatmethode, verweisen jedoch bezüglich der Details auf das Original. Soviel über den Inhalt des Buches. Das Mitgetheilte zeigt jeden- falls, dass in demselben ein Werk vorliegt, dessen Zustandekommen nur von Seiten eines, auf allen Gebieten der Technik durch eigene Erfahrung weit bewanderten Autors möglich war. Möge ihm der ge- bührende Erfolg zu Theil werden. Flesch (Bern). 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. Stricker, S., lieber das elektrische Licht als Hülfs mittel für den mikr o sk op i seh en Unterr i cht. (Wiener med. Jahrb., Jahrg. 1883, p. 463). Gärtner, G., lieber das elektrische Mikroskop (Ebenda, 1884, p. 217). Nachdem Stricker durch die Installation eines Gasmotors und einer Dynamomaschine in die Lage gekommen war, das elektrische Licht zu Projectiouszwecken in ausgiebigstem Maasse zu verwerthen, hat derselbe durch ausgedehnte Versuche die nöthigen Apparate in neue Formen gebracht, über welche sein Assistent Dr. Gärtner in dem zweiten der citirten Aufsätze berichtet. Einen wesentlichen Theil der Vorrichtung bildet der Belenchtungsapparat, eine elektrische Lampe von in maximo 2500 Normalkerzen, welche von einem Assistenten mit der Hand regulirt wird. Eigenartig ist an der Lampe die Vorrichtung zum Halten der Kohlen. Die Kohlenträger sind federnde Zangen , mittels derselben ist ein rasches Auswechseln der Kohlen, vor allem aber auch eine von der gewöhnlichen abweichende Einstellung derselben möglich. Das intensivste Licht einer elektrischen Lampe strahlt von der krater- förmigen Vertiefung aus , welche am Ende der positiven Kohle beim Glühen entsteht. Bei genau übereinauderstehenden Kohlen fällt dasselbe nach unten. Stellt man dagegen die negative Kohle so, dass ihre Spitze ein wenig (etwa 1*5 mm) vor das Centrum der positiven fällt, so ent- steht der Krater in der positiven so, dass er nach vorn und unten sieht. II, 4. Referate und Besprechungen. 529 Durch Neigung der ganzen Lampe um 30 bis -10" zur Verticalen kann man nun erreichen, dass dieser schräg stehende Krater ganz nach vorn sieht, dass also das Maximum des Lichtes auf den ßeleuchtungsapparat parallel der optischen Axe des Mikroskopes projicirt wird. Die Lampe kann in toto durch Schrauben gehoben und gesenkt werden, ferner vor und rückwärts (zur Auswahl der besten Liclitiuteusität für verschiedene Objective) und seitwärts (zur Centrirung) bewegt werden. Bei Benützung- schwacher Objective wird die vorher centrirte Lampe der Beleuchtungs linse näher zu stellen sein als bei starken Vergrösseruugen. Die Lampe steht in einem grossen Holzkasten (statt des DuBosc/schen Metallkasten) mit Ventilationslöchern, seitlichen Thüren und kleineu Fenstern aus blauem Glas zur Beobachtung der Kohlenspitzen. Das Ganze ist auf einem auf Rollen laufenden Tische befestigt. — Der zweite Bestandtheil der Vorrichtung dient dem Sammeln des Lichtes. Durch Versuche wurde festgestellt, dass, ganz entgegen dem gewöhnlich geübten Verfahren, schwache Linsen bessere Effecte ergeben als starke. La dem Apparate des Wiener pathologischen Institutes befinden sich jetzt — statt 4 Linsen in der DuBosq'schen Lampe — 2 planconvexe Linsen, die ihre gekrümmten Flächen einander zukehren (Durchmesser der Linsen 16 cm Krümmungs- radius 39 cm Brennweite des Systems 15 cm). Die Kohlenspitzen stehen bei starken Vergrösseruugen 27 cm von der hinteren Linsenfläche, das Object 31 cm von der vorderen Linsenfläche entfernt. An die Linsen schliesst sich unmittelbar eine von planparallelen Glasplatten vorn und hinten abgeschlossene Mikroskopröhre von ca. 30 cm Länge an. Diese wird durch geeignet angebrachte Tubulaturen mit Wasser gefüllt , zum Zwecke der Absorption eines Theiles der Wärmestrahlen. Control-Ver- suche mit Alaunlösungen haben gezeigt, dass dieselben keinen Vortheil bieten. Eine weitere Abschwächung der Wärmestrahlung, die sich immer noch, trotz der Länge der Wassersäule als nöthig erweist, kann durch die Stellung der Lampe zu der Sammellinse, Einschaltung von Blendungen zwischen Lampe und Sammellinse bei schwachen, zwischen der vorderen Endplatte der Wasserröhre und der Objectplatte bei starken Ver- grösserungeu (bis Trocken - System VIII) ermöglicht werden ; letztere (am besten eine Blendung von 15 mm Durchm.) werden auch bei An- wendung von Immersionslinsen verwendet , obwohl bei diesen , wegen der Ableitung der Wärme auf die Fassung des Objectives die Gefahr einer Ueberhitzung des Präparates kaum in Betracht kommt. — Die Objectplatte trägt das Object fixirt mittels einer gabelförmigen Klemme, deren beide Branchen durch ein Elfenbeinzwischenstück isolirt sind, und daher zugleich als Leitung bei Reizversuchen dienen. — Die Objective 530 Referate und Besprechungen. II 4 sind durch Verschiebung mit freier Hand, Trieb- und Mikrometerschraube beweglich. Sie werden jedes einzehi in kurze Röhren eingeschraubt, welche in einer zweiten Röhre verschiebbar sind und mitsammt den Ob- jectiven ausgewechselt werden. Es können selbst die stärksten Immersions- linsen Bilder von ausreichender Lichtstärke liefern. Wesentliche Be- dingungen sind vollkommene Aplanasie und genau centrirte Einstellung. Es ist nöthig, die Systeme speciell für ihre Anwendbarkeit zu Projections- zwecken zu prüfen. Die stärkste zur Anwendung gekommene Linse war Seibekt's Wasserimmersion X, mittels deren bei einem Schirm-Abstand von 435 cm eine 8000 malige Vergrösserung erzielt wurde. — Als ProjectionsHäche dient eine 1*5 m im Dm. haltende Platte aus feinstem Gyps in eisernem Rahmen. ■ — Die Präparate sind zweckmässig möglichst intensiv und in grell contrastirenden Farben zu tingiren. Die Leistungsfähigkeit des Projectionsmikroskopes illustrirt u. a. die Angabe, dass rothe Blutkörperchen als 6 cm im Dm. haltende Schei- ben erscheinen, dass das gesammte, über 300 Köpfe zählende Audito- rium (die fern sitzenden Zuhörer mit Benutzung von Operngläsern) bequem die amöboiden Bewegungen der weissen Blutkörperchen verfolgen kann. Nur einige ganz kleine Objecte (gewisse Mikroben) lassen sich nicht objectiv darstellen. Für manche Zwecke, z. B. Beobachtung des schla- genden Herzens von Hühnerembryonen kann das gewöhnliche Mikro- skop mit dem Wasserreservoir u. s. f. ersetzt werden durch eine Vor- richtung , deren Hauptbestandtheil zwei Reflexionsprismen bilden zur Projection horizontaler Objecte, ferner durch ein gewöhnliches Sciop- tikon. — Wir sehen davon ab, die Einzelheiten der Handhabung des Apparates aufzuführen. Erwähnt sei nur, dass die Anordnung des ganzen Apparates so getroffen ist, dass derselbe in einem von 24 SwAN'schen Glühlampen erhellten Auditorium verwendet wird. Durch Drehung eines Schlüssels kann in jedem Augenblicke der die Glühlampen speisende Strom in den Projectionsapparat geleitet und so in einem Griff das Auditorium verdunkelt und das Projectionsbild vorgeführt werden. — Es genügt, um den in dem besprochenen, von PlOssl in Wien verfer- tigten Apparat erreichten Fortschritt zu würdigen, wenn w^ir anführen, dass früher Haktnack's System IV die stärkste zur Objectiv-Demon- stration verwendete Linse war, während jetzt nach Stkicker fast kein Object sich der Projection entzieht. Flescli {Bern). Inostranzeif, A. V., lieber eine Vergleichungskammer zur mikroskopischen Untersuchung undurchsichtiger Mineralien. (Neues Jahrb. f. Miner. 1885, Bd. II, p. 94—96), Eine Reibe, unter dem Mikroskope undurchsichtig erscheinender IL 4. Keferate und Besprechungen. 531 Mineralien hat sich bisher der Erkennung entzogen. Im wesentlichen sind nur Glanz und Farbe als Unterscheidungsmerkmale zu verwenden, und da diese auf subjectiven Empfindungen beruhen, so schlägt der "Verf. eine Methode vor, welche gestattet, bekannte Mineralien direct mit den zu bestimmenden zu vergleichen. In der zu diesem Zwecke construirteu Vergleichungskammer (s. die beistehende Figur) sieht man die Bilder zweier nebeneinander gestellter Mikroskope in einem Ge- sichtsfelde vereinigt. — In den äusseren Winkeln der Kammer befinden sich zwei Reflexionsprismen, welche dazu dienen, die aus den Mikroskopeu kommen- den Strahlen unter einem rechten Winkel abzulenken. In der Mitte der Kammer, unter dem Ocular, befinden sich zwei andere Prismen, welche die empfangenen Bilder nach oben werfen. - Diese Vergleichungskammer wird nun auf zwei neben einander stehende Mikro- skope gesetzt, deren Oculare man vorher entfernt hat. Man erhält als- dann in dem Ocular der Kammer ein kreisförmiges Gesichtsfeld, welches durch einen feinen Streifen in zwei Hälften getheilt ist, wovon jede einem der beiden Mikroskope angehört. Bei völliger Idendität beider Objecte sind auch Glanz und Farbe beider Bilder völlig übereinstimmend, so dass das Gesichtsfeld gleichförmig erscheint. Findet dagegen irgend welche Differenz zwischen den beiden Objecten statt, so erscheint sofort die Grenzlinie und tritt der Unterschied beider Hälften deutlich hervor. Wichmann (Utrecht). 3. Präparationsmetlioden im Allgemeinen. Giacomiiii, Nu ovo processodi conservazionedelle sezioni microscopiche [Neues Verfahren, mikroskopische Schnitte zu conserviren]. (Gazzetta delle Cliniche, Vol. XXH, Nov. 1885.) 532 Referate und Besprechungen. II, 4. Die Methode, welche der Verf. gefunden hat, entfernt sich so sehr von den gebräuchlichen Verfahren der mikroskopischen Technik, dass wir es nöthig finden, au diesem Orte eine eingehende Beschreibung derselben zu liefern, damit sie zur Kenntniss aller Anatomen gelange und von ihnen augewendet werden könne. Angenommen, man wolle Schnitte durch das Gehirn conserviren, welche mit Carmin, Pikrocarmin, Hämatoxylin oder irgend welchen an- deren Stoffen gefärbt sein können. Man wähle soviele Glasplatten aus als Schnitte vorhanden sind, welche man conserviren will : diese Platten müssen von ganz glattem Glase sein, polirte Ränder haben imd Grössen aufweisen, welche die der Präparatiouen, die sie erhalten sollen, ein wenig übertreffen. Man beginnt mit einer sorgfältigen Reinigung der- selben, welche auf dem gebräuchlichen Wege bewerkstelligt wird (con- centrirte Mineralsäuren, Alkohol, Aether oder Benzin etc.). Dann reibt man die das Präparat tragensollende Seite mit einem Wildleder ab, bis nach dem Darauthauchen die condensirten Wasserdämpfe sofort wie- der verschwinden. Zur Ausführung dieser Operation benützt man passend ein Behältniss wie es bei den Photographen im Gebrauch ist um die Glasplatten zu reinigen. Jedenfalls muss man vermeiden, die Oberfläche des Glases mit den Fingern zu berühren. Schliesslich streut man über die Platte ein Wenig Talkpulver, das man durch längeres Reiben über dieselbe verbreitet, und entfernt es durch einen weichen Pinsel, Man geht nun zum „Collodiouiren" (collodionatura) über, d.h. man bringt auf die so gereinigte Oberfläche der Glasplatte eine dünne Schicht von Collodium des Handels , welches , wenn es zu dick sein sollte, durch ein Gemisch von Alkohol und Aether zu gleichen Theilen verdünnt werden kann. Um eine gleichraässige Schicht zu erhalten, fasst man die Platte mit zwei Fingern der linken Hand an einer ihrer Ecken an, man giesst das Collodium auf und neigt die Platte leicht nach allen Richtungen , damit das Collodium sich an allen Stellen gleichmässig verbreiten kann, endlich neigt man das Glas stärker und lässt den Ueberschuss des Collodiums in ein Sammelglas abfliessen. Die so coUodio- nirten Platten werden auf eine horizontale Ebene gelegt und dort genügend lange Zeit belassen, bis der Alkohol und der Aether genügend verflüch- tigt sind, was man daran erkennt, dass man mit dem Nagel die Collodium- lage an den Stellen drückt, wo sie recht dick ist. Wenn dann das Col- lodium einen Eindruck des Nagels behält, kann man zu dem zweiten Stadium der Operation schreiten, nämlich zum Ausbreiten der Gelatine- scliicht. Schon vor dem Collodiouiren der Glasphitten muss man eine was- II. 4. Referate und Respreclmngen. 533 serige Gelatinelösnng liprstelleii, und zwar eine 8- bis lOproceiitige. Diejenige Qualität der Gelatine, welche dem Verf. die besten Resultate geliefert hat, ist die, welche unter dem Namen marca d'oro in den Handel kommt. Man wägt die Gelatine ab, schneidet sie in Stücke und lässt sie eine Stunde hindurcli aufquellen in der Hälfte des destillir- ten Wassers, welches dazu dienen soll sie zu lösen, später erwärmt man sie langsam im Wasserbade, indem man allmählig die andere Hälfte des destillirten Wassers zusetzt, bis man eine vollständige Lösung erhalten hat, welche dann heiss durch einen geeigneten Apparat filtrirt wird (PLANTAMOUK'sclier Trichter). Es ist nicht rathsam, der Gelatine Carbol- säure oder andere antiseptische Substanzen zuzufügen, Aveil diese be- kanntlich dieselben physisch verändern. — Diese Gelatinelösung wird auf der Temperatur von 50 bis 55° in einer im Wasserbade erwärmten Kufe gehalten. In diese Kufe werden die nach der oben angegebenen Weise präparirten Glasplatten gebracht, indem man darauf Acht hat, die Seite, welche die Collodiumschicht trägt, nach oben zu legen. Nach und nach wird die Verbindung zwischen dem Collodium nnd der Gelatine innig, es ist dann Zeit, (d. h. wenn sich auf der Oberfläche des Collodiums keine Streifen u. dcrgl. mehr zeigen) in das Bad den mikroskopischen Schnitt zu bringen, welcher bis dahin in destillirtem Wasser gelegen haben nniss, nicht in Alkohol oder einer anderen Flüssigkeit. Mittels eines feinen Pinsels legt man den Schnitt auf der Glasplatte zurecht, dann nimmt man letztere aus der Kufe, indem man Acht darauf giebt, sie ganz horizontal zu lialten, damit das Präparat nicht fortgleite oder sich überhaupt bewege, schliesslich aber neigt man das Glas ein wenig, so dass der Ueberschuss von Gelatine an einer Seite abfliessen kann. Die so weit vorgeschrittene Platte wird dann, vor Staub geschützt, auf eine . ganz horizontale Ebene gelegt. Bei allen diesen Manipulationen ist es absolut nöthig, sich davor zu hüten, dass man die Oberfläche des Präparat-Glases mit den Fingern oder mit harten Instrumenten berühre. Wenn der Schnitt zart und die Gelatineschicht nicht sehr dick ist, so genügen 12 bis 18 Stunden zum vollständigen Trocknen. Sollte jedoch der Schnitt hierbei nicht ganz von der Gelatine bedeckt bleiben, so ist es angemessen, eine zweite Schicht zuzufügen, indem man über das Präparat eine auf 50° erwärmte Gelatinelösung giesst , und die Platte entsprechend neigt, damit die gesammte Oberfläche davon bedeckt werde. Nachdem man dann den Ueberschuss von Gelatine hat abfliessen lassen, legt man die Platte zum Trocknen hin, wie soeben beschrieben. Das Trocknen kann als vollendet angesehen werden, wenn das Präparat sich völlig durchsichtig zeigt, und die Oberfläclie der Gelatine so resistent Zcitsclii'. f. wiss. Mikroskopie. II, i. 35 534 lloferate und IJosprecbunüen. II. 4. geworden ist, dass sie keinen Naf^eldnick melir annimmt. Es ist besser, lieber nocli einige Stunden zn warten, als das letzte Stadium der Operation zu übereilen, näralicli sogleich zum zweiten Collodioniren überzugehen. Ferner ist es sehr nützlich, mit gewöhnlicher Tinte alle wünschenswerthen Angaben auf die Gelatineschicht zu schreilien ; die- selben werden so später von der zweiten Collodiumschicht bedeckt, welche darüber kommt und sind auf diese AVeiso unauslöschlich. Doi- zweite CoUodiumüberzug wird sehr einfach hergestellt, indem man über die getrocknete Gelatine Collodium giesst, dasselbe gleichmässig ül)er die ganze Platte ausbreitet und dafür Sorge trägt, dass die zweite Collodiumschicht ungefähr von derselben Dicke ist wie die erste. Nach Trocknen des CoUodiuras trennt man die dünne Schicht von Gelatine und Collodium, welche das Präi)arat einschliesst, von der tragenden Glasplatte. Zu diesem Zwecke schneidet man mit einem starken Messer die Collodium-Gelatineschicht etwa 1 cm vom Kande des Glases ein und trennt dann mit einem Scalpell mit dünner Klinge vom Glase die das Präparat enthaltende Schicht. Wenn das Glas ganz rein und die erste Collodiumschicht mit Sorgfalt hergestellt war, so gelingt dieser Act sehr leicht. Die abgezogene Collodium-Gelatineschicht rollt sich gern zusammen, es ist daher gut sie ungerollt zu ei'halten, indem man sie einem gewissen Drucke aussetzt, z. B. indem man sie in ein ziemlich dickes Buch legt. In dieselbe Gelatineschicht kann man viele Schnitte einlegen (dem Verf. gelang es, bis zu 200 Schnitte der VAKOLi'schen Brücke einzu- schliessen) wenn man besondere Cautelen anwendet. Die Versuche des Verf. erstreckten sich besonders auf das Central- nervensystem. Er hat gefunden, dass für diese Methode diejenigen Prä- parate wenig brauchbar sind, welche lange Zeit in Alkohol gelegen haben, weil die so erhaltenen Schnitte sich weniger leicht mit Gelatine durchtränken. Dahingegen sind diejenigen Präparate viel geeigneter, welche , nachdem sie mit MüLLER'scher Flüssigkeit behandelt waren, in eine Lösung von Quecksilberchlorid getaucht wurden, um die Schwarz- tlirbung der nervösen Elemente zu erhalten (Golgi). Die Vortheile dieser Methode bestehen in der Leichtigkeit, mit welcher auch die zartesten und zerbrechlichsten Schnitte unbegrenzt lange conservirt werden können, z. B. die eines ganzen menschlichen (lehirnes, ferner in der Durchsichtigkeit, welche auch die etwas dickeren Schnitte erhalten, wie ja nothwendigerweise die zieralicli grossen, von einem so delicaten Organe, wie es das Centralnervensystem ist, ge- machten sein müssen. Natürlich ist das mikroskopische Studium dieser II. 4. Referate und I5es})rechiingoii. 535 Präparate iiiolit so ergiebig wie das derjenigen Schnitte, welche nach den bekannten Methoden eingeschlossen sind, aber l»ei schwächeren Ver- grösscrungen lässt sich der Verlauf und die Lagerung der nervösen Fasern äusserst gut verfolgen. Bei den vorher mit Quecksilberchlorid behandelten Präparaten sind die Bilder sehr deutlich. — Dahingegen hat die ^Methode einen unzweifelhaften Werth beim sogenannten topo- graphischen Studium der nervösen Centren. A'erf. betont mit Recht, dass eine Serie von grossen Schnitten des Centralnervensystems bis jetzt ein Luxusgegenstand war, welchen nur wenige Histologen sich erlauben konnten, entweder wegen der Schwierigkeit der Ausfuhrung, oder noch mehr wegen der erheblichen Ausgaben für die grossen Objektträger und Deckgläschen, oder endlich wegen der thatsächliclien Unmöglichkeit, eine Sammlung dieser Art unterzubringen oder zu transportircn. Mit der vom Verf. vorgetragenen Methode kann jeder Arzt auf seinem Studirtische, in seinen Bücliern oder in einem passenden Album eine Serie von Schnitten der wichtigeren Gehirnregionen besitzen und in Wirklichkeit vor sich haben, nicht ein melir oder miuder treu gezeichne- tes Bild von so wichtigen und so schwer zu studirenden Theilen. Der Lehrer ferner wird im Stande sein, eine grosse Serie von Präparaten zu sammeln, welclie wenig Raum erfordern, durch die Hände der Zu- hörer gehen können und sehr demonstrativ sind. [Dank der Zuvorkommenheit meines verehrten J^ehrers konnte icli die Methode auch für pathologische l'räparate der nervösen Centren (secundäre Degenerationen etc.) anwenden ; icli kann hinzufügen, dass auch für diese Fälle die Methode sehr gute Resultate giebt. Ref.]. Die einzige Unannehmlichkeit besteht in den Unreinheiten, welche die Gelatine des Handels stets besitzt und welche im l'räparate bleibt, auch wenn man die Vorsicht hatte die Lösung mehrmals zu fdtriren und sie mit Eiweiss zu reinigen. Diese Unreinheiten hindern aber die mikroskopische Untersuchung nicht. Verf. schliesst seine interessante Mittheilung mit dem bescheidenen Wnnsclie, dass seine Methode nicht, wie es gewöhulicli der Fall zu sein l)flegt, übertriebene Wichtigkeit erlange, sondern dass sie zu Nutz und Frommen der Wissenscliaft und der Studirenden angewandt und ver- vollkommnet werden möge. G. Martinotti (Toriiio). BjeloiiSSOW, A. K., Eine neue Metliode von Injection ana- tomischer Präparate vermittels kalter Masse. (Arch. f. Anat. u. Physiol. Anat. Abth., Jahrg. 1885, H. ,5/0, p. 379). Die von Bjeloussow empfohlene Injectionsmasse wird hergestellt aus einer Mischung einer Lösung des Gummi arabicum, von der Cousistenz 35* 53 G Referate und Besprechungen. II. 4. eines dicken Byrup, und einer gesättigten Borax-Lösung. Bei dem Zu- satz der dünnflüssigen Borax- Lihsung zu dem Gummischleim — es soll hierbei 1 Gewichtstli. Borax auf 2 Th. Gummi verwendet werden — entsteht aus dem letzteren eine gelatiiieartige, opalisirende, ziemlich durchsichtige, in Wasser fast unlösliche Masse, welclie sich ohne zu zer- fallen von der Wand des Gefässes ablöst. Diese Masse wird unter all- mähligem Zusatz von destillirtem Wasser mit diesem zerrieben, dann wiederholt, nöthigenfalls mit nochmaligem Wasserziisatz durch feine Leinwand gepresst , bis sie flüssig ohne suspendirte Gelatine ist ; bei Zusatz von Aethylalkoliol im Reagenzglas muss sie nunmehr unter Auf- quellen auf das doppelte Volum vollständig gerinnen. In diesem Falle ist die Flüssigkeit brauchbar und kann nach Verreiben mit Farbstoff (Carmin für Capillar-Injectionen ; auszusehliessen sind nur Kobalt und Cadmiumfarben) verwendet werden. Bei nachträglichem Einlegen der Päparate in Alkohol gerinnt die Masse wegen ihres Aufquellens unter praller Füllung der Gefässe. Die Injection geschieht mit der Spritze oder mit Druckapparaten ; am einfachsten unter den letzteren ist das gewöhn- liche RicHARDsoN'sche Gebläse. In erster Linie ist diese Injection für makroskopisch-anatomische Zwecke bestimmt. Indessen empfiehlt sie der Erfinder auch zur Injection feiner Gefässe, z. B. der Sinnesorgane von Amphibien ; ferner können Wundernetze, feinste Hirnarterien, Lymphscheiden der Arterien u. a. m. mittels derselben dargestellt werden. Besonders geeignet erscheint sie für Lymphgefiissinjectionen, namentlich auch mittels des Pjinstich-Ver- fahrens. Die Vortheile, welche ihr von Bjeloussow zugeschrieben werden, sind: leichte Herstellung, Billigkeit, Verwendbarkeit in jedem Augen- blicke. Die Injectionen können unterbrochen, falls mehre Systeme gefüllt werden sollen, auf mehrere Tage vertheilt werden. Die injicirte Masse kann durch verdünnte Essigsäure jederzeit schnell aufgelöst werden. Glycerinbehandlung macht die Präparate vollkommen durchsichtig. Aus den iiijicirten Gefässen quillt sie beim Anschneiden nicht heraus. Die Präparate lassen sich in Spiritus gut conserviren. Bei Kaltblütern kann die Injection am lebenden Thier geschehen. Wenn auch, soweit aus den Angaben B.telottssow's zu entnehmen, für die nachträgliche Behandlung mittels feinerer histologischer Methoden die Präparate wegen der un- vermeidlichen Alkohol- Erhärtung nicht geeignet zu sein scheinen, so lassen doch speciell für die Darstellung von Gefässbahnen sich jedenfiills schöne Resultate erwarten. Flesch {Bern). Bolles Lee, A., Cedernholzöl für Paraffin -Einbettung (Zool. Anz. Bd. VIH, 1885, No. 205, p. 5G.3). II, 4. Referate und Besprechungen. 537 BoLLEs Lee verwendet statt Chloroform Cedernöl bei der Vor- bereitung zur Pnrnflin-Einbettung- bestimmter Objecte. Aus dem Oel bringt er die Präparate entweder direct in Parafliu, oder in ein Gemisch von Paraffin mit Oel ; danach genügt ein kurzes Paraffinbad. Der Ilaupt- vortheil der Methode soll darin liegen , dass die Präparate nie brüchig oder überhart werden. Referent hat bei einer Probe kein gutes Re- sultat gehabt. Vielleicht hängt dies von der Qualität des Oeles ab. Flesch {Bern). ■ Schulze, F. E., U e b e r einen E n t w ä s s e r u u g s a p p a r a t (Sitzber. Gesellsch. naturf. Freunde, Berlin 1885, No. 9. p. 175—177). Um Objecte mühelos und ohne Schrumpfung aus specifisch schwereren in specifisch leichtere Flüssigkeiten überzuführen (z. B. aus Wasser in Alkohol absohitns) empfiehlt Verf. folgenden Apparat: Ein breites Glas- rohr ist an einem Ende hutkrempenartig nach aussen gebogen, am anderen Ende durch eine mit Leim angeklebte Papierraembran verschlossen. Dieser Glascylinder wird in ein grösseres mit absolutem Alkohol gefülltes Glasgefäss derart hineingehängt, dass die Membran sich unten befindet, während der vorstehende Rand sich dem Rande des grösseren Glas- gefässes genau auflegt. Das Object wird in wenig der wässerigen oder schwach alkoholischen Flüssigkeit in den Cylinder gefüllt, und nun tritt, wie bei einem Dialysator, ein allmählicher Ausgleich der beiden Flüssig- keiten durch die Membran ein. Die Schnelligkeit des Ausgleiches hängt ab 1) Von dem Mengenunterschiede beider Flüssigkeiten, 2) Von ihrer Niveaudistanz, 3) Von der Durchlässigkeit der Membran. Verf. benutzte meist sehr dünnes Briefpapier, sog. „Postverdruss". Um die Diffusion recht gleichmässig zu machen, steckte derselbe zwei verschieden weite derartig hergerichtete Cylinder in einander und füllte in den geringen Zwischenraum zwischen ihnen schwachen Alkohol. Zum Schluss Einwirkung von reinem absoluten Alkohol auf das Object. Einleitung der Entwässerung etwa am Morgen, Uebergang zum Senkverfahren (z. B. in Chloroform) am Abend desselben oder am Morgen des folgenden Tages. Infusorien , z. B. Spirostomum ambiguum , sind so prall in Canadabalsam überzuführen. Dr. H. HenMng (Göttingen). Schulze, F. E., Ein neues Netz zum Fangen kleiner frei schwimmenderThiere (Sitzber. Gesellsch. naturf. Freunde, Berlin 1885, No. 9, p. 178—179). Da die zarten Thierchen beim Fange mit einem gewöhnlichen Tüll- netze leicht dadurch eine Beschädigung erfahren, dass sich das Netz beim Herausziehen ans dem Wasser in Falten legt, welche dann zum Zwecke des Abspülens der Thiere auseinander gezogen werden müssen, 538 Referate und Besprechungen. II, 4- so cmpfielilt Verf., das Netz am Ende mit einer etwa 10 cm weiten Halbkugel von Pferdehaartiieh (dem gewölinliclien Kaffeetricliter- materiale) zu versehen. Der Rand der Halbkugel ist an einem schmalen Blechreifen befestigt und bekommt innen angenäht die ebenfalls 10 cm weite untere Oeffnung des Tüllnetzes. Die Halbkugel lässt sich um- stülpen und springt dann in ihre Lage zurück. — Dieselbe kann zum Abnehmen eingerichtet werden, indem das Tüllnetz seinen besonderen Blechreifen bekommt, über den derjenige der Halbkugel fortgeschoben wird. Befestigung beider durch eine Art Bajonettschluss, indem zwei vorstehende Knöpfe des inneren in zwei seitlich ausbiegende Ausschnitte des äusseren Blechringes eingreifen. Man kann dann gleich im Wasser aus der abgehobenen Halbkugel die Thiere in ein für sie bestimmtes Gefäss gleiten lassen. — Bezugsquelle : Oldenburg, Diener im Zool. Inst., Berlin, Opernplatz, Universitätsgebäude. Dr. IL HenMng (Göttingen). Schulze, F. E., lieber einen Schlammsauger (Sitzber. Gesellsch. naturf. Freunde, Berlin 1885, No. 0, p. 179—180). Derselbe besteht aus einem 80 bis 40 cm langen , fingerdicken Glasrohre, welches an einem Ende durch Erweichen des Glasrandes eine ganz geringe Einengung erfahren hat, am anderen Ende etwas ausgezogen und mit einem vorspringenden Rande versehen ist, über den ein Gänsefederkieldicker Gummischlauch gezogen wird. Dieser Schlamm- sauger wird etwa an einem Spazierstoke befestigt. Dazu dient eine 8, aus Messingdraht von 3 mm Dicke gefertigt und mit Oesen von 10 mm im Lichten, welche durch Einbiegen der 8 rechtwinklig zu einander gestellt werden. Durch die eine Oese wird ein anderer Messingring von 8 mm im Lichten gezogen und dieser andererseits durch einen starken Kautschuk- ring von 12 mm Lichtung und 8 mm Stärke an dem Stocke in der Weise befestigt, dass der Kautschukring in zwei Touren darum gelegt wird. Nun liängt die 8 frei herab, mit der einen Oese nach unten und aussen in horizontaler Lage. Jetzt wird der Gummischlauch durch die untere horizontale, dann durch die obere verticale Oese der 8 gezogen. Die Glaspipettc muss dicht unter der ersteren herabhängen. Sodann wird dieselbe durch den mit der linken Hand gefassten und horizontal ausge- streckten Stock über die gewünschte Stelle des Wassers geführt, durch massiges Anziehen des langen Schlauches mittels der rechten Hand dieser gechlossen, die Pipette zu dem Gegenstande hinabgesenkt, der Gumraischlauch locker gelassen (das Wasser steigt in die Pipette), Gummischlauch durch festes Anziehen geschlossen, Pipette so über ein Glasgefäss geführt, Gummischlauch gelockert (das Wasser strömt II, 4. Referate und Besprechungen. 539 aus). — ]>('zui;s(iuellc : (»ujenisukg, Diener im zuul. luslitute, Berlin, Opernpl.-itz, Uiiiversitätsgebiiude. Dr. IL Hmkiiig (Göltinycn). liizzozero, (li., Preparazioue d el pier o carmiuo [Herstellung des Pikrocarmius]. (Riferito in Bokdoni-Uffkedduzzi, I microparassiti, Torino 1885, p. 97). BizzozEEO stellt einen trefflichen Pikrocarmin auf folgende Weise her: In einem jNIörser werden 0"50 g reines Carmin in 3 cc Ammoniak und öO cc destillirtem Wasser gelöst. In einem anderen Mörser bereitet man eine andere Lösung von 0"50 g Pikrinsäure in 50 g Wasser. Man giesst die Pikrinsäurelösupg langsam und unter beständigem Umrühren in die erste Lösung, und verdampft dann im Wasserbade, bis man auch nicht den schwächsten Ammoniakgeruch mehr wahrnimmt. Gew^öhnlich ist die Flüssigkeit in diesem Zeitpunkte auf die Hälfte ihres früheren Volumens reducirt (50 cc) ; man lässt nun erkalten und fügt sofort \c, des Volumens (10 cc) reinen Alkohol zu. Man bewahrt in einer sorg- fältig verschlossenen Flasche auf. Es ist nicht nöthig, vor dem Gebrauch zu liltriren. G. Marünotti {Torino). Aiuleer, J., Das Resorcinderivat Phlorog lucin. Nachtrag. (Internat. Monatsschr. f. Anat. u. Histol. Bd. I p. 350 — 353). Der in dieser Zeitschrift ' referirte Aufsatz findet sich 1. c. er- weitert durch einen dritten Abschiütt. — Die mit Phloroglucin-Salz- säure erweichten Olgecte sind später zu härten durch eine der bekannten Methoden. Da hierbei manche Injectiousmassen leicht verflüssigt werden, so empfiehlt Andeek, wenn Gefässstudien beabsichtigt sind, an Stelte der Injection des Gefässlumen Imprägnation der Gefässwände mit Mineral-Farben. Mau injicirt zuerst ein Rhodansalz (Ferro- bezw. Ferrid- cyankalium, Kaliumsulfocyauat), danach Chloreisen und erhält so nach Andeeb sehr prägnante Bilder aus den haltbaren und jede Nachbehand- lung vertragenden Präparaten. Flescli {Bern). 4. Präparationsmethoden für specielle Zwecke. A, Zoolof/isches. Certes, A. , De l'emploi des matieres colorantes dans l'etude physiologique et histologiqne des infu- soires vivants (Comptes rend. et mem. de la Soc. de Biol., avril 1884), 7 pp. 8». ') Cfr. diese Zeitsclir. Ed. II, 1885, p. 375. 540 Referate und Besprechungen. 11, 4. Schon im Jahre 1881 haben K. Ükandt, M. L. F. Heni^eguy und der Verf. über die Möglichkeit, lebende einzellige Organismen zu färben, berichtet. Verf. theilt in vorliegendem Aufsatze weitere Beobachtungen in dieser Richtung mit. Damit das Leben der Infusorien etc. möglichst wenig geschädigt werde , müssen die zu verwendenden Farbstoffe in dem gleichen (filtrirteu) Süss- oder Salzwasser gelöst werden, in dem die Thiere leben. Ein etwa entstehender Niederschlag wird abfiltrirt. Je nach der specifischen Empfindlichkeit der Infusorien verwendet man Lösungen von etwa 1 : 10,000 bis 1 : 100,000 und darunter, — - Dalilia- violett, Violett BBBBB, Chrysoidiu, Nigrosin, Methylenblau, Jodgrüu färben den Kern lebender Infusorien in verschiedenem Grade, während bleu de quinoleine und Bismarckbraun versagen. — Sehr verdünnte wässerige Lösungen von Dahlia No. 170 und vert acide JEE de PoiimiER, sowie Malachitgrün ans Berlin färben den Kern vieler Ciliaten und Flagellaten, während Metliylblau aus Berlin (ein bleu de diphenylamine) auch in stärkereu Lösungen (1 bis 9 auf 1000) nicht färbt, anderseits aber auch die Infusorien am Weiterleben und Sich- entwickelu nicht verhindert. Aehnlich wie letzteres verhalten sich bleu BBSE und bleu coton C 3 B de Poikeiek. Dahlia und Malachitgrün färben sehr deutlich, weniger gut vert acide (ist auch pernitiöser für die Thiere). Aber nicht nur nahe stehende Arten, sondern auch die- selben Thiere zeigen zu verschiedeneu Zeiten ein von der Vertheilung der Chroniatinsubstanz abhängiges verschiedenes Verhalten gegen den Farbstoft'. Malachitgrün fäi'bt die Doppelkerne von Stylonychia mytilus, ferner die Arten von Oxytrichcs und Litonotus tief smaragdgrün, schwächer den Kern von Paramaecium aurelia, während bei conjugirt habenden Paramaecien die Färbung diffus wird. Sehr stark färben sich mit jedem Farbstoffe die Nahrungsvacuolen (vacuoles stomacales), indem der Farbstoff durch die stark gefärbten ernährenden Bestandtheile, d. s. Vegetabilien oder todte Thiere, in sie übertragen wird. Besonders empfehlenswerth ist hier das bleu de diphe- nylamine und bleu BBSE und C 3 B de Püikeiek. Letztere tödten auch in starken Lösungen (4 und 9 zu 1000) die Infusorien nicht, während Bacterien rasch darin sterben. Die Vacuolen vom Paramae- cium waren zuerst tief blau, gingen dann über zu violett, dann zu rosa, um sich schliesslich fast ganz zu entfärben (Entfärbung tritt auch ein mit Alkali !) Die contractile Vacuole färbt sich niemals, was Verf als einen Beweis dafür ansieht, dass sie kein wasserführe]ides, sondern eher ein excretorisches Organ sei. Die genannten drei Farbstoffe führen schliesslich zum Tode der Thiere, indem dieselben zuerst paralytisch. IT. 4. Referate und Besprechungen. 541 schliesslich hydr) Cfr. diese Zeitschr. Bd. II. 1885, p. 411. 37' 568 Referate und Besin-eclauigen. II. 4. Styrax und Li q u i dambar , welche die Vortheile des Oanndabaisam bieten, nämlich ziemlich rasch erhärten, aber in ihrer optischen Wirkung bedeutend höher stehen und sehr klare und relativ leicht lösbare Strnctui- bilder vermitteln. Beide werden, nach der Instruction des Dr. van Heueck präparirt ', sowohl trocken als gelöst von der Societe anonyme de fabrication de produits chimiques, ancienne maison Emile RoussEAr et fils, 42 et 44 des Ecoles, Paris offerirt. F^ine von den erwähnten Firmen bezogene Glasbüchse enthielt 60 g Styrax und kostete 2-50 frcs. Die Masse war freilich noch nicht völlig von dem das vollständige Aus- trocknen hindernden Styracin befreit und musste vor der Verwendung erst durch Behandlung mit Petroleumäther resp. mit Petroleum-Benzin, welche das Styracin, aber nicht den Styrax, lösen, gereinigt werden. Von dem Styrax stellt man sich nun eine ziemlich dünne Lösung her. 0 bschon die Chloroforralösung wie die von van Heueck empfohlene halb- alkoholische Lösung für die gewöhnlichen Präparate durcliaus genügen, fand Verf. doch andere Lösungen in gewissen Fällen geeigneter. Fir empfiehlt daher das Harz in gutem Benzin (nicht Petroleum-Benzin), Benzol, Toluol oder Xylol zu lösen und dann durch Papier zu filtriren oder die klare Flüssigkeit von etwa bei längerem Stehen sich bildenden Absätzen behutsam abzuziehen. Das Liquidambar verhält sich ähnlich und ist in gleicher Weise zu behandeln. Neuerdings hat Professor H. L. Smith in Geneva N. Y. neue Einschliissmittel entdeckt oder er- funden , welche einen noch weit höheren Brechungsindex aufweisen sollen; aber sie werden bis jetzt als Geheimniss behandelt und haben des- lialb eine allgemeinere Anwendung noch nicht gefunden. Der von Kain empfohlene Tolubalsam ^ besitzt keinen höheren Wertli als der Canada- balsara. Letzterer kann bei sehr starkschaligen, hohlen oder gebogenen Dia- tomeen-Formen zur Zeit immer noch nicht entbehrt werden, da in diesen Fällen stärkere Einschlussschichten angewendet werden müssen und dann die dunkle Färbung des Styrax wie des Liquidambar stört. Um den Balsam von den schwer trocknenden flüchtigen Oelen zu befreien, erhitzt man die rohe (noch nicht gelöste) Masse in einer Abdampfschale im Wasser- bad unter häutigem Umrühren so lange (bis 24 Stdn.), bis er spröde und brüchig wird, um ihn dann mit den gleichen Mitteln, die man bei oben erwähnten Harzen anwendet, wieder zu lösen. Am besten lassen sich die erwähnten (ziemlich dünnflüssigen) Einschlussmittel in Gläschen mit eingeschlifltener und oben durch Gummihütchen abgeschlossener Pipette ^ ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 81. ■') Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 82. ^) Diese Gläsclieu wie alle Werkzeuge und Hilfsmittel zum Sammeln und n, 4 Referate und ßesi)rccluingcn. 509 aiifbewaliren, da diese Gläsclu'ii den Vortlicil eines staub- und luftdicliten Verschlusses mit der Bequemlichkeit eines siclieren Tropfnpparates ver- binden. — Will man die Diatomeen in grösserer Zahl unter einem Deekglase zur Präparation bringen, so liebt man mit einer Pipette von dem (nach dem früher dargelegten Verfahren) wohl gereinigten und in einem Röhrengläschen unter Alkohol aufbewahrten Materiale eine kleine Menge heraus, Ijisst dieselbe in ein anderes gut gereinigtes Gläschen tropfen, wäscht sie aus (durch wiederholtes Erneuern und Wiederabr ziehen des Wassers mittels der Pipette) und füllt schliesslich das Gläs- chen fast bis zum Rande mit destillirtem Wasser. Dann werden die gut gereinigten Deckgläschen mittels blossen Anhauchens auf einer auf dunklem Untergrunde liegenden Glas- oder auf einer Hartgummiplatte befestigt. Xunmehr schüttelt man den Inhalt des Gläschens leicht, bis das Material, im Wasser gut vertheilt, leicht flottirt und bringt mittels der Pipette einen oder mehrere Tropfen davon auf das Deckgläschen, indem man dabei beachtet, dass die Flüssigkeit die ganze Fläche des Gläschens bis zum Rande vollständig und halblinsenförmig ausfüllt. Die in der Flüssigkeit gleichmässig vertheilten Diatomeen schlagen sich gleichmässig nieder und vertheilen sich bei absoluter Ruhe auch gleich- mässig über das Gläschen. Sind alle Deckgläser mit Tropfen versehen, so lässt man diese an Ort und Stelle unter einer Glasglocke langsam auf- trocknen. Je ungestörter und ruhiger dies geschieht, desto gleich- massiger erfolgt die Vertlieiluug. In tadellosen Präparaten dürfen die Schalen nicht zu dick aufgetragen erscheinen, sondern müssen durch solche Zwischenräume getrennt auf dem Deckglas liegen, dass die ein- zelnen Individien deutlich erkennbar sind und einander nicht verdecken. Um dies zu erreichen, darf nicht zu viel Material ins Gläschen gebracht werden, oder es muss bei voraussichtlicher Ueberfüllung die Menge des- selben vermindert werden. Die trockenen Deckgläschen werden nun unter dem Mikroskope zunächst auf gröbere Verunreinigungen unter- sucht und dann, mit einem Tropfen der Einschlussflüssigkeit beschickt, wieder unter die Glocke gebracht, bis die Lösung die Consistenz eines sehr zähflüssigen Syrups gewonnen hat, worauf das Deckgläschen auf- gelegt wird (ohne besonderen Druck). Eine ganz gelinde Erwärmung bewerkstelligt die gleichmässige Vertheilung des Einschlussharzes und den Austritt der Luftblasen (bei Chloroformlösung ist ein Eintrocknen der Lösung nicht nöthig). Bei einiger Uebung bringt man es leicht Präpariren der Diatomeen (neuerdings auch vollständig gebrauchsfertiger Styrax) sind in vorzüglicher Qualität von E. Tiium in Leipzig, Teichstr. 2, zu beziehen. 570 Referate und Besprecliimgen. H, i. tLiliin, die Menge der Einschlussflüssigkeit so zu bemessen, dass keine Spnr davon unter dem Rande hervortritt und das Präparat ohne vor- heriges Putzen von Anfang an vollkommen sauber erscheint. Die so hergestellten Präparate werden nun in horizontaler Lage mit nach unten gekehrtem Deckglase aufbewahrt, damit etwa abgelöste Formen sich dui'ch ihr eigenes Gewicht wieder in den gleichen optischen Hori- zont mit den anderen lagern. (Verf. benützt dazu einen mit Seiten- löchern versehenen Blechkasten von 26*5 X 78 cm, in den eine Anzahl aus schwacher Pappe geschnittene Rahmen eiugepasst sind, welche die Präparate schichtweise aufnehmen. Jede Lage umfasst zehn Stück eng- lischen Formates und sind die Rahmen so eingerichtet, dass die Deck- gläschen weder von der Seite noch von unten berührt werden). Das so oft empfohlene Glühen der Deckgläschen ist für gewöhnlich überflüssig ; ja es wirkt mitunter schädlich, da die Schalen durch das Erhitzen leicht Risse bekommen. Nur bei der Herstellung von Testobjecten sehr zarter Structur wird es nothwendig, um die Schalen so dicht an die Glas- fläche haftend zu machen, dass keine Luftschicht dazwischen kommt. In diesem Falle kommen etwaige Sprünge auch nicht sonderlich in Be- tracht, falls nur die Structur gut erhalten bleibt. Das Erhitzen darf über einer lebhaften Spiritusflamme nur kurze Zeit und nur bis zur Rothgluth auf einer Silber- oder Platiua-Platte vorgenommen werden. Dabei hat man sich vorzusehen, dass Glas und Platte nicht zusammen- schmelzen, weil dadurch beide unbrauchbar werden. Um Diatomeen trocken einzulegen, versieht mau den Objectträger zuvor mit einer Lackzelle in Gestalt eines Ringes und von der Grösse des aufzu- lagernden Deckglases, wofür sich am besten eine consistente alkoholische Schellacklösung empfiehlt. Vor der Benutzung müssen die Ringe gut austrocknen, damit sie später nicht etwa durch nachträgliche Aus- dunstung das Präparat verderben. Sind sie völlig trocken, so legt man das Deckgläschen mit den Diatomeen mittels Pincette auf den Ring und fahrt mit einem heissen Glas- oder Metallstückchen vorsichtig und sanft über den Rand desselben, bis die Deckplatte fest an die Ringoberfläche angeschmolzen ist. Dabei hat man besonders darauf zu achten, dass keine offene Stelle bleibt, wodurch später der Abschlusslack (wozu KAisER'scher Maskeulack empfohlen wird) eindringen könnte. — Weit schwieriger sind natürlich gelegte Präparate herzustellen und ist dabei die Benutzung eines Präparirmikroskops nicht zu umgehen. Zunächst muss man das Material mit den auszusuchenden Formen in der früher beschriebenen Weise auf grössere Deckgläser bringen und diese, sorg- fältig vor Staub geschützt, aufbewahren. Finden sich die gewünschten II, 4 Referate und Besprecliiingen. 571 Formen nnr spärlich, so tliut man gut, erst eine Anznlil Platten unter dem Präparir-Mikrüskop abzusuchen und die gefundenen Formen auf einem besonderen Deckglas zu sammeln, ehe mit dem Legen begonnen wird. Zu diesem Zwecke befestigt man beide Deckgläser, das abzu- suchende A und das zum Sammeln bestimmte B, durch blosses An- hauchen auf einem Objectträger dicht neben einander. Das Aussuchen selbst geschieht unter 30- bis GOfacher Vergrösseruug mittels eines 15 bis 20 cm langen, dünnen Stäbchens, an dessen einem ein wenig zuge- spitzten Ende eine sehr spitze Borste befestigt ist. Am besten eignen sich dazu die Augenwimpern des Schweines oder die Borsten vom Vorder- theil des Igels. Die auf Platte A befindlichen Formen haften bei der geringsten Berührung an der Borste und können leicht an der Ober- fläche von B abgestreift werden. Der Uebersichtlichkeit wegen legt man auf B die Schalen nahe zusammen und möglichst so wie sie ge- braucht werden, z. B. gewölbte Formen mit der convexen Seite nach unten. Zur Abhaltung des hierbei durch das Athmen entstehenden Luft- zugs lässt sich mit Vortheil ein handgrosses Stück Carton benutzen, das links und rechts durchbohrt und mit einem Stück Bindfaden durchzogen ist. Nimmt man den Bindfaden zwischen die Zähne, so legt sich der Carton vor Mund und Nase, und das Präparat kann nicht melir vom Hauche getroffen werden. Grössere, namentlich mit gebogenen Flächen versehene Formen springen leicht von der Borste oder Sammelplatte ab und gehen dann verloren. Dies zu verhindern, bringt man zuvor einen Tropfen Petroleum (der zum Zwecke dünnster Vertheilung stark mit Benzin oder Petroleum äther versetzt ist) auf die Platte, der sich sofort ausbreitet und eine äusserst dünne Schicht bildet, au der die Diato- meen leicht haften ; auch die Borste kann man damit in geringem Grade feucht halten. Von der Platte wird die feuchte Schicht, sobald sie ihren Zweck erfüllt hat, durch vorsichtiges, langsames Erwärmen wieder verdampft, worauf sich die Schalen leicht abheben lassen. Um die aus- gesuchten Diatomaceen zu montiren, macht sich ein Klebemittel zur Be- festigung derselben auf's Deckglas nöthig, damit sie auf der ihnen an- gewiesenen Stelle auch verharren und sich durch das Eiuschlussmittel oder durch gelegentliche Erschütterungen nicht ablösen. Dabei muss be- achtet werden, dass die Befestigungsmasse vom Einschlussmittel nicht gelöst wird und sich beide optisch homogen verbinden. Diese Ansprüche erfüllt am besten der Schellack. Zu diesem Behufe löst man gebleichten oder hellblonden rohen Schellack in viel Aether und filtrirt die Lösung gut durch mit Aether ausgelaugte Knochenkohle, nöthigenfalls wieder- holt, bis sie, in einem Tropfen auf einem erwärmten Objectträger zum 572 Referate und Besprechungen. II, 4. raschen Eintrocknen gebracht, auch fiir's bewaffnete Ange eine voll- ständig klare, homogene Schicht bildet. Sollte sich dies durch Filtriren nicht erreichen lassen (woran dann die Qualität der Knochenkohle Schuld ist), so lässt man die Lösung längere Zeit — unter Umständen wochenlang — ^ stehen, bis die kleineu ungelösten Partikelchen zu Boden gesunken sind^ worauf dann die vollständig geklärte Flüssigkeit vor- sichtig abgezogen oder abgegossen wird. Die weiteren Operationen be- stehen darin, dass man auf das Deckgläschen (J, auf welches die Dia- tomeen endgiltig gelegt werden sollen, mit Hülfe der Pipette oder eines Glasstäbchens einen Tropfen Scliellacklösung fallen lässt, der sich rasch ausbreitet und sofort erhärtet. Nun werden die Deckplatten B und C auf einem Objectträger neben einander befestigt. Ein Tröpfchen der oben erwähnten Petroleumlösung auf C gebracht, hält den Schellack feucht, ohne ihn zu verändern. Darauf erfolgt die Uebertragung der Formen von ]> auf (\ wobei beachtet werden muss, dass sie genau in die Mitte des Deckgläschens zu liegen kommen. Die Diatomeen haften auf der feucliten Fläche leicht und lassen sich ohne Schwierigkeit in die rechte Lage bringen, wenn diese nicht gleich anfangs getroffen sein sollte. Nach Fertigstellung des Arrangements bedeckt man das Gläs- chen zur Abhaltung von Staub mit einem kleinen Uhrschälchen und er- wärmt es über einer Spiritusflamme soweit, dass die Petroleumschicht langsam verdampft und die Diatomeenschaleu durch Schmelzen des Schellacks angekittet werden , wobei mit grösster Vorsicht (dass der Schellack nicht verbrennt) verfahren werden muss. Nunmehr wird das Einschlussharz in der früher angegebenen Weise aufgetragen und unter staubdichtem Verschluss der Verdunstung bis zu völliger Erhärtung überlassen. Das Einschlussharz darf natürlicli nur in solchen Medien gelöst sein, welche den Schellack weder lösen noch verändern (Benzin, Benzol, Toluol , Xylol), also nicht in Alkohol oder Chloroform. Bei robusteren Formen muss es zum Schutze jener stets etwas dicker aufge- tragen werden. Nach völligem Erhärten des Einschlussmittels wird das Deckgläschen auf den Objectträger gebracht, der vorher ebenfalls ein Tröpfchen Einschlussfiüssigkeit erhalten hat, und dann wird es leicht und möglichst gleichraässig aufgedrückt, sodass die Einschlussflüssigkeit an der Seite heraustritt, von wo sie mit einem durch Chloroform ange- feuchteten reinen Pinsel auf dem Drelitisch in säuberlichster Art weg- genommen werden kann. Bis zum bald erfolgenden vollständigen Aus- trocknen muss das Präparat abermals gut verwalirt werden. Gegen das Verschieben oder Zerbrechen gelegter Formen gewähren die ring- förmigen Zellen aus Glas oder Zinnfolie, wie sie Stender und Thum in IT, 4. Referate und Besprechungen. 573 LQ\\r/Äg liefern, grosse Sicliorheit. Dieselben werden vor dem Legen der Diatomeen mit Schelhick aufs Deckglas gekittet. Das Auflegen des Objectträgers kann auch hier nur erst stattfinden, wenn die die Zelle vollständig erfüllende Einschlusslösung völlig ausgetrocknet ist. Zur Herstellung von Trockenpräparaten lässt sich der Schellack aus optischen Gründen nicht als Heftmittel verwenden. Für sehr zarte und glatte Formen benutzt man dann eine durch rectificirten Alkohol und destil- lirtes Wasser sehr stark verdünnte Lösung ganz reinen, säurefreien Glycerins, der man für derbere und gebogene Formen eine ganz ge- ringe Menge gut geklärten Gummiarabicums zusetzt. Beim Austrocknen ist aber hier die grösste Vorsicht anzuwenden, damit im letzteren Falle eine Bräunuiig des Klebemittels verhütet werde. Hat man robustere und zartere Formen gemischt zu legen, so werden zunächst die ersteren und dann die letzteren aufgebracht, da letztere leicht KlebeÜeckc er- halten, durch die zartere Structuren an Schärfe verlieren oder völlig unsichtbar werden. Der Einschluss erfolgt ähnlich wie bei Massenprä- paraten. — Wie die frühere Arbeit über das Sammeln und Reinigen der Diatomeen wird auch die vorliegende allen Diatomeenfreunden äusserst willkommen sein. 0. E. B. Zimmermann (Chcmniü). Witt, 0. N., Ueber den Polirschiefer von Archangelsk Kurojedowo im Gouv. Simbirsk. (Sapiski der Russischen mineral. Gesellsch., Bd. XXH, 1885.) Der Verf giebt als Einleitung zu seiner sehr werthvoUen Arbeit Rechenschaft über die „Vorbereitung des Materials für die mikroskopische Untersuchung", die einen schätzenswerthen Beitrag zur Präparations-Techuik fossilen Diatomeen-Materials bildet, — Das rohe Material wurde in Form von bohnengrossen Stücken mit ver- dünnter Salzsäure Übergossen und damit auf dem Wasserbade erwärmt. Dabei ging nur sehr wenig Kalk und Eisen in Lösung, es fand in Folge dessen eine Lockerung des Zusammenhangs statt, welche den nachfol- genden Operationen zu Gute kam. Die Säure wurde abgegossen und das zurückbleibende Material mit destillirtem Wasser durch Decantation vollkommen ausgewaschen. Es wurde nun mit einer ziemlich concen- trirten, etwa zwanzigprocentigen Lösung von reinem kohlensauren Natron Übergossen und mit dieser Lösung längere Zeit, etwa 6 bis 8 Stunden gekocht. Dabei zerfielen die grösseren Stücke fast vollständig in ein weiches, zartes Mehl, welches durch Decantation aufs Neue mit destillirtem Wasser ausgewaschen wurde. Dieses Mehl wurde nun mit concentrirter Salzsäure ausgezogen, wobei neue Mengen von Kalk und Eisen in Lösung gingen. Alsdann behandelte es Verf (nach vorherigem 574 Referate und Besprecliungen. II, 4. Wegwaschen der Salzsäure) mit stärkster kocliencler Salpetersäure unter Zusatz von etwas chromsaurera Kali. Dabei wurde der grösste Theil der in dem Mergel enthaltenen organischen Substanz zerstört. Es folgte nun eine Behandlung, deren Zweck die Zersetzung des vorhandenen Thones ist. Dieselbe besteht in einer sehr kräftigen Einwirkung von concentrirter Schwefelsäure. Wenn die Operation gut gelingen soll, so / sind gewisse Vorsichtsmaassregeln zu beachten. Nach der Behandlung mit Salpetersäure wird höchst sorgföltig ausgewaschen und alsdann der Gesanimtrückstand auf einem kleinen Papierfilter gesammelt. Wenn dasselbe vollständig abgetropft ist, so bringt man es auf einen zusammen- gefalteten Bogen Filtrirpapier und saugt so den Niederschlag möglichst trocken, ohne ihn indessen irgendwie zu drücken. Man öffnet dann das Filter und trägt, mittels eines Platinspatels, die ganze Masse in reine, höchst concentrirte Schwefelsäure ein, welche man zu diesem Zwecke in eine halbkugelige Porzellan- oder Platinschale gebracht hat. Man bedeckt nun mit einem Uhrglase und bringt die Schwefelsäure zum Sieden. Gewöhnlich färbt dieselbe sich durch etwas organische Substanz, Papier- fasern u. dgl. schwarz; man setzt daher etwas Salpeter bis zum Weiss - werden des Gemisches zu. Das Sieden mit Schwefelsäure wird wenigstens eine Stunde lang fortgesetzt. Dabei zerfällt säramtlicher Thon fast voll- ständig. Nach dem Erkalten der Schale giesst man den Inhalt derselben vorsichtig und unter Umrühren in reines destillirtes Wasser. Die ge- sammte Kieselsubstanz setzt sich innerhalb zwei bis drei Stunden zu Boden und kann durch Decantation vollständig ausgewaschen werden. Der so erhaltene feine, schneeweisse, im Lichte flimmernde Nieder- schlag wird nun unter dem Mikroskop betrachtet. Enthält derselbe noch Thon oder unlösliche Zersetzungsproducte desselben — man erkennt dieselben an ihrer Form und Uudurchsichtigkeit — so müssen dieselben durch sehr vorsichtige Behandlung mit verdünnter Natronlauge und nachhcriges Abschlemmen entfernt werden. Bei gut gelungenen Operatio- nen ist dies indessen kaum nöthig, und man kann alsbald die letzte endgültige Behandlung vornehmen. Man lässt die ganze Masse in einem Becherglase sich vollkommen absetzen und giesst das überstehende Wasser so vollständig als möglich ab. Den Niederschlag übergiesst mau mit stärkstem Ammoniak, rührt einmal um, bedeckt mit einem Uhrglase und lässt 24 Stunden stehen. Dann füllt mau das Glas mit destillirtem Wasser voll auf und wäscht durch Decantation, indem man jedesmal zwei Stun- den von einer Waschung zur anderen wartet. Die ersten Waschwässer sind milchig getrübt, sie enthalten äusserst fein vertheilte amorphe Kieselsäure, die sich erst nach tagelangem Stehen zu Boden setzt. Die II, 4. Referate und Besprechungen. 575 Waschungen müssen so hinge fortgesetzt werden, bis nach zwei Stunden das überstehende Wasser vollkommen hell und klar ist. Der dann im Glase verbleibende Rückstand besteht aus reinen Kieselorganismen, welche in wohlverschlossenen Flaschen unter verdünntem Alkohol zum Gebrauch aufbewahrt werden. — - Die wissenschaftliche Begründung dieser Ammoniakbehandlung muss darin gesucht werden, dass das der Kieselsäure gegenüber ganz wirkungslose Ammoniak die letzten Reste der an der Kieselsäure innig haftenden Säuren entfernt. Dabei gewinnen die feinen Theilchen der amorphen Kieselsäure die Fähigkeit der soge- nannten Molecularbewegung wieder, eine Bewegung, welche bekanntlich durch die Gegenwart von Säuren und besonders Schwefelsäure sofort aufgehoben wird. Mit Hülfe dieser Bewegung halten sich diese feinsten Theilchen in der umgebenden Flüssigkeit schwebend, während die weit grösseren Kieselorgauismem an der Molecularbewegung nicht theilneh- men, sondern zwischen den Theilchen der amorphen Kieselsäure zu Boden sinken. Nur auf diese Weise gelingt die Entfernung dieser feineu Kieseltheilchen, welche in ungenügend gereinigtem Material die Orga- nismen bedecken, ihre Zeichnung undeutlich machen und zu mannig- fachen Irrungen und Täuschungen Veranlassung geben würden. — Durch diese, allerdings ziemlich umständliche und nicht immer gleich gut ge- lingende Vorbereitung erhält man völlig reines, zur Beobachtung der feinsten Details geeignetes Material. E. Dehes {Leipzig). D, JPhanerogaiiieii. NoU, F., Kau de Javelle, ein Aufhellungs- und Lösungs- mittel für Plasma, (Botan. Centralblatt Bd. XXI, 1885, p. 377—380). Das Eau de Javelle, welches in jeder Apotheke um geringen Preis zu erhalten ist, wurde 1882 vom Vater des Verf. zunächst zur Anwen- dung in der thierischen Histologie empfohlen, eignet sich aber nicht weniger für pflanzliche Gewebe. — Der wirksame Bestandtheil der alka- lisch reagirenden Flüssigkeit besteht in einem unterchlorigsauren Alkali. Das im Handel beziehbare Präparat, das durch eine Umsetzung von Chlorkalk mit kohlensaurem Natron gewonnen wird, ist nicht chemisch reines unterchlorigsaures Natron. Tiefgreifend ist die P]inwirkung des Eau de Javelle auf das Plasma; es hängt aber der Grad der Einwirkung ab von der Conservirung des Pflanzenmaterials. Frisches Material? 576 Referate und ßesprecbungen. IL 4. durch Abkochen getödtetes, in Glycerin, in Cbromsäure, iu Pikrinsäure oder in MüLLER'scher Flüssigkeit aufbewahrtes, wird durch das Eau de Javelle zwar auch wesentlich aufgehellt, doch ist die Zerstörung und Lösung des Plasmas keine vollständige; eine solche tritt aber bei Ver- wendung von in Alkohol conservirten Pflanzentheileu ein, sodass dem Alkohol eine ganz specifische Veränderung der Piasmatheile zugeschrieben werden muss. Die Zerstörung des Plasmas erfolgt an Schnitten durch sehr plasmareiches Gewebe in kurzer Zeit (3 bis 4 Minuten für dünne 10 bis 15 Minuten für dicke Schnitte) unter Entwicklung kleiner Gas- bläsclicn, die, wie sich Noll überzeugte, Stickstoff sind. Die Aufhellung hat womöglich unterm Deckglas zu erfolgen, da so die Ausscheidung von Körnchen kohlensauren Kalkes in der Hauptsache hintau gehalten wird, während an freier Luft immer grössere Mengen solches gebildet werden. Uebrigens ist dieser Niederschlag durch Auswaschen der Schnitte in verdünnter Essigsäure leicht zu entfernen und bei Präpa- raten, welche zum Einlegen bestimmt sind, auch zur Neutralisation etwaiger, nach dem Auswaschen in Wasser zurückgebliebener alkalischer Theilo nothwendig. Das Eau de Javelle ist stark oxydirender Natur, wirkt sonach auf verkorkte Membranen ähnlich wie das ScHULZE'sche Macerationsgemisch. Zur Untersuchung von Polleukörnern, Sporen etc. ist es daher weniger geeignet, da die Exine meist zerstört wird, bevor Aufhellung des Inhalts erfolgt. Stärkekörner sollen iu Eau de Javelle wie in Kali quellen, doch erst nach längerer Zeit. Fette Oele entfärben sich und werden verseift. Das Reagenz hat als unterchlorigsaures Salz im Dunkeln und gut verkorkt aufbewahrt zu werden. Die Einwirkung desselben auf Plasraatheile bleibt aber, ob die Anwendung im Sonnen- lichte oder im Dunkeln stattfindet, wesentlich die gleiche. Ref. hat das Eau de Javelle bereits mehrfsich zu benützen Gelegen- heit gehabt und kaini es als ein ausgezeichnetes Aufhellungsmittel be- zeichnen. Noll wird sich, durch die Bekanntmachung dieses Reagenz, den Dank der Histologen verdienen. Bei Untersuchung von Farn- embryonen erzielte ich die herrlichsten Präi)arate, während mit Kali- lauge viel schwieriger solche zu eireiciieu sind. Die Operatiouen mit dem Eau de Javelle sind auch weit einfacher und resultirt aus dessen Anwendung nicht unbedeutender Zeitgewinn. Studien über Vegetations- punkte oder solche embryologischer Natur werden nun mit weit ge- ringeren Schwierigkeiten zu kämpfen haben als vordem. lleinricher* Fischer, A., Ueber den Inhalt der Siebröhren in der un- verletzten Pflanze. (Ber. Deutsch. Botan. Gesellsch. Bd. III, 1885, p. 230—2.39). II. 4. Iicforato und Besprechimgcu. 577 Verf. li;it CS bereits in einer früheren Arbeit ' walirseheinlich ge- macht, dass wir die Anordnung des Siebröhrensaftes, in abgeschnittenen Pflanzentheileu, als ein Kunstproduct aulfassen resp. die SiebriUiren als zum Tlieil entleert ansehen müssen. Seine Versuche dies, dnrcli Ein- legen ganzer, möglichst unverletzter Pflanzen in Alkohol, zu erweisen, erfüllten nicht den Zweck, da auch bei solchem Vorgehen der Sieb- röhreninhalt in Form der sogenannten Schlauchköpfe auftrat. Er wandte desshalb ein neues Verfahren an, das darauf beruht, dass ganze unver- letzte Pflanzen auf 2 bis 5 Minuten in kochendes Wasser untergetaucht werden. So gewonnenes Material zeigt die Siebröhren ganz und gleieh- mässig mit dem sofort geronnenen Inhalt erfüllt. Verf. schliesst daraus, dass die Anordnung des Inhalts in der Form von Schlauchköpfen in der Tluit ein Kunstproduct sei, das im Falle als ganze Pflanzen in Alkohol gelegt werden, durch Contraction des Inhaltes und unnatürliche Strö- mungen des ungleichmässig einwirkenden Gerinnungsmittels zu erklären sei. Das abgebrühte Material kann zum Zwecke bequemeren Arbeitens nachträglich in Stücke zerschnitten und in Alkohol eingelegt werden, da dadurch eine Aenderung in der Anordnung des Inhaltes nicht be- wirkt wird. Ilelnricher. Meyer, A., Mikrochemische Pt e a c t i o n zum Nachweis der reducir enden Zuckerarten. (Ber. Deutsch. Botan. Gc- sellsch. Bd. III, 1885, p. 332). Verf. empfiehlt folgendes Verfahren : „Man stellt 2 bis 4 Zelllagen dicke Schnitte der zu untersuchenden Pflanzentheile her, legt sie kurze Zeit in eine gesättigte Lösung von Kupfersulfat, schwenkt sie schnell einmal in Wasser ab und bringt sie sofort in eine siedende Lösung von 10 g Seignettesalz und 10 g Aetzkali in 10 g Wasser. Nach einigen Secunden ist in allen Zellen, welche reducirenden Zucker enthalten, ein Niederschlag von Kupferoxydul entstanden, während die anderen Zellen vollkommen farblos bleiben". — Der von Sachs empfohlenen Methode und der Anwendung FEHLiNCx'scher Lösung gegenüber soll bei diesem Verfahren einerseits die störende Bildung von Kupferoxyd beseitigt, anderseits ein genauer Aufschluss über die Vertheilung des Zuckers im Gewebe möglich sein. Heinricher . Heiuricher, E., Ueber Ei weiss Stoffe führende Idioblasten bei einigen C r u c i f e r e n. Vorläufige M i 1 1 h e i 1 n n g. (Ber. Deutsch. Botan. Gesellsch. Bd. II, 1881, p. 463— 4GG). ') Fischer, Untersuchungen über das Siebröhrensystem der Cucurbitaceen. Berlin. 1884. 578 Referate und Besprechungen. II, 4. Der Verf. entdeckte in den Blättern, in Stengel und Wurzel der Brassiceae ein bisher unbekanntes histologisches Element; verstreut im Parenchym vorkommende Zellen, die sowohl ihrem Inhalt, als häufig auch der Form nach den Idioblasten (Sachs) beizuzählen sind. Verf. empfiehlt, da dieselben leicht übersehen werden, die Anwendung des MiLLON'schen Reagenz. Sie erscheinen nach Behandlung der Schnitte mit diesem carmin- bis ziegelroth gefärbt," da ihr Inhalt wesentlich aus Eiweissstoffen besteht. Audi das Pikrocarmin ver- mag die Idioblasten zu tingiren, während Aufhellung der Schnitte allein oft kaum die Idioblasten erkennen lassen wird. Wie leicht diese Idio- blasten ohne Anwendung geeigneter Reagentien zu übersehen sind, er- liellt am besten daraus, dass in den erst kürzlich erschienenen „Beiträgen zur vergleichenden Anatomie des Laubstengels der Cruciferen" ' der Eiweiss-Idioblasten keine Erwähnung geschieht, obgleich sie, wie Ref. a. a. 0. ausführlicher mittheilen wird, den meisten Cruciferen zuzu- kommen scheinen. Ileinrichrr. E, 3Iineralo(/ iseh-Geolof/ i'sches, Referent: Professor Dr. Arthur Wiclimami in Utrecht. Hausliofer, K., Mikroskopische Reactionen. Braunschweig, (Vieweg) l^.'Sö, VII u. 162 pp. 8", mit !37 Illustr. Die Methoden, welche darauf abzielen, die Gegenwart gewisser Stoffe durch krystallinische Verbindungen unter dem Mikroskop nach- zuweisen, haben für raineralogische und petrographische Zwecke bereits seit Jahren eine ausgedehnte Anwendung gefunden. Es unterliegt jedoch keinem Zweifel, dass auch dem Chemiker im allgemeinen die Aus- führung derartiger Reactionen von grossem Nutzen sein muss, besonders da, wo es sich um den Nachweis äusserst geringer Mengen von Stoffen handelt. — Der Verf., welcher als äusserst reger Mitarbeiter auf diesem Gebiete bekannt ist, hat sich der Mühe unterzogen, alle bekannten und brauchbaren mikroskopischen Reactionen zusammenzustellen, und durch eigene neuere Mittheilungen zu einem geordneten Ganzen zu verschmelzen. In der Einleitung findet sich eine ausführliche Auseinandersetzung über die zweckmässigsteAusfühnmg der verschiedenen Operationen, namentlich in Bezug auf die Behandlung der zu untersuchenden Stoffe, das Ein- dampfen der Lösungen und die Behandlung der Niederschläge behufs >) E Dexxeut in „Forschungen aus dem botan. Garten zu Marburg". Marburg 1885. II, 4. Referate und Besi^rechungen. 579 Erlaugun;^ gut krystallisirter Producte. Die Keuutuiss des Mikroskops, sowie der mikroskopischen Untersiichiingsraethoden wird als bekannt vorausgesetzt, resp. auf die bekannten grösseren Lehrbücher verwiesen. Der specielle Theil behandelt die verschiedenen Verbindungen , und zwar sind dieselben in alphabetischer Reihenfolge der sie zusammen- setzenden Elemente aufgeführt. Ausser Wasserstoff und Brom fehlen nur diejenigen der ganz seltenen Elemente, wie Erbium, Gallium, Indium, Iridium etc. unter der Rubrik „Kohlenstoff" sind zugleich Salze cha- rakteristischer Verbindungen der wichtigsten 'organischen Säuren zur Darstellung gelangt. Weitaus die meisten der besprochenen Verbindungen sind durch trefflich ausgeführte mikroskopische Bilder illustrirt. Ein Inhaltsverzeichniss fehlt. Dasselbe ist zwar in Folge der Anordnung des Stoffes nicht nothwendig, würde aber doch in vielen Fällen gute Dienste leisten können. Das vorliegende Werk kann Allen, die sich mit chemischen Untersuchungen beschäftigen, nur auf das Wärmste empfohlen werden. El)uer, Y. T. , Ueber den Unterschied krysta 11 inischer und anderer anisotroper Structuren. (Sitzber. d. K. Acad. d. Wiss., Wien 18ö5, Bd. XCI. 3. Abth. p. 34— 4ö.) Ausgehend von einem Satze Zimmekmann's, „dass die, die Anisotropie bewirkende krystallinische Structur der organischen Substanzen durch Spannung hervorgerufen wird", wendet sich der Verf. gegen den, seiner Ansicht nach, noch vielfach üblichen Sprachgebrauch anisotrop und krystallinisch als gleichbedeutend zu betrachten. Mit vollem Recht wird dabei betont, dass die Doppelbrechung an sich nicht charakteristisch für krystallinische Substanzen ist und anderseits eine krystallinische Beschaffenheit auch ohne Doppelbrechung möglich ist — ■ ein Satz, der billigerweise längst allgemein bekannt hätte sein müssen. — In ein- gehender Weise werden sodann die Verhältnisse der optischen Elasticitäts- flächen der Krystalle, sowie die der anisotropen nicht krystallinischen Medien betrachtet und die gewonnenen Resultate kurz zusammengefasst. Die Frage, inwiefern die über die Anisotropie organischer Substanzen bekannten Thatsachen zu dem Schlüsse berechtigen in demselben Sym- metrieverhältnisse, wie in Krystallen anzunehmen, bezeichnet der Verf. wenigstens was die Doppelbrechung anbelangt, als eine offene, da seiner Meinung nach jene Substanzen nur im parallelen polarisirten Lichte untersucht werden können, was heutzutage nur noch bedingungsweise zutreffend erscheint. Viel mehr beweisend sind die vom Verf. auch ge- bührend hervorgehobenen Unterschiede, nämlich, dass den organischen Körpern Krystallform, Spaltbarkeit und eine stöchiometrische Zusammen- setzung völlig abgeilt. Den Schlnss der Abhandlung bildet eine Tabelle, 580 Referate und Besprechungen. II. 4. in welcher die optisclieii Eigenschaften der amorphen und krystallinischen Substanzen übersichtlich zusammengestellt werden. Tschei'lUJlk, G., Die mikroskopische Beschaffenheit der i\leteoriten erläutert durch photographische Ab- bildungen. Die Aufnahmen von J. Gkimm in Offenburg. (3. Lief. m. 9 photogr. Tfln.). Stuttgart (Schweizerbart) 1885. Mit der vorliegenden Lieferung ist das bereits mehrfach kurz be- sprochene >yerk ' zum Abschluss gelaugt. Auf den beigegebenen Tafeln sind zunächst wieder Chondrite dargestellt, die ihrer grossen Ver- breitung unter den Meteoriten , sowie ihrer eigenartigen Structurver- hältnisse wegen eine besonders eingehende Berücksichtigung verdienten. Sodann folgen Darstellungen aus der Gruppe der Grahamite, Sidero- phyre, Mesosiderite und Pallasite. Die Meteoreisen wurden nicht be- rücksichtigt, jedoch ist bereits vom Verleger ein diese Massen in äim- licher Weise behandelndes Werk angekündigt. Die vom Verf. am Schlüsse zusammengestellten Resultate, welche sich im wesentlichen aus den mikroskopischen Untersuchungen ergeben haben, sind die folgenden : In den verschiedenen die Meteoriten zu- sammensetzenden Mineralien kommen Glaseinschlüsse in grösster Häufig- keit vor, ganz besonders reich daran ist der Olivin, Darapfporen er- scheinen selten , während Flüssigkeitseinschlüsse vollständig fehlen. Letzgenannte Thatsache liefert den Beweis, dass bei der Bildung der Meteoriten die Mitwirkung des Wassers ausgeschlossen war , demzu- folge auch wasserhaltige Silicate fehlen. Nur in dem kohligen Meteo- riten von Orgueuil wurden wasserhaltige Verbindungen nachgewiesen. Zuwaclisschichten, wie sie sich häufig an den Augiten und Plagioklasen der Eruptivgesteine wahrnehmen lassen, wurden nie beobachtet. Eine besondere Eigenthümlichkeit der Meteoriten sind die Chondren, welche nirgends in tellurischen Gesteinen auftreten. Zur Bildung dieser Gebilde sind nicht nur Olivin und Bronzit, sondern auch die übrigen Gemeng- theile mit Ausnahme des Magnetkieses befähigt. Der Verf. betrachtet die Chondren nicht als eine den Magnesiasilicaten eigenthümliche Er- starrungsform innerhalb der compacten Gesteinsmasse , sondern als rasch erstarrte Tropfen , wofür manche Structurverhältnisse sprechen. Sehr charakteristisch für die Meteoriten ist die überall nuter dem Mikroskop wahrnehmbare Durchklüftung der Silicate, in- dem die verschiedenen Individuen von unzähligen, feinen Sprüngen durchsetzt erscheinen. Diese Zersprengung in kleinste Splitterchen be- 1) Cfr. diese Zeitschrift Bd. I, 1884. p. 4G7. Bd. 11, 1885, p. 2GG. 11. 4. Referate und Besprechungen. 581 ruht walir.scheinlicli auf raschen Temperaturveränderungen. Für die vulcanische Bildung der Meteoriten spricht die melir oder minder deutliche klastische Structur, eine Anzahl besitzt selbst ein vollständig tiiffartiges Ansehen. Häufig zeigen sich secmidäre Imprägnationen in der Grundmasse, auch Verglasung von Plagioklas und Olivin konnte beobachtet werden. Diese und ähnliche Erscheinungen deuten auf eine nachträgliche Erhitzung der Silicatmassen hin. Endlich kann auch die dunkle Rinde der Meteorsteine als eine besondere Eigenthümlichkeit betrachtet werden, die zugleich eine oberflächliche Erhitzung der einzelnen Exemplare beweist. — Aus den angeführten Eigenschaften geht hervor, dass die Meteoriten einen Habitus zur Schau tragen, der ein von tellu- rischen Gesteinen wesentlich verschiedener ist, so dass selbst bei quanti- tativ gleicher mineralogischer Zusammensetzung eine Verwechslung aus- geschlossen erscheint. — Dem Verf. kann man nur Dank wissen für die Herausgabe dieses Werkes, welches einen bedeutsamen Fortschritt in der Meteoritenknnde bezeichnet. Baumliaiier, H., Ueber die mikroskopiche Beschaffenheit eines Buntkupfer erzes von Chloride [New-Mexico] (Zeitschr. f. Krystallogr. Bd. X, 1885, p. 447—450, Taf. XHI Fig. 6—9). Während Ixosteanzepf mit Hülfe einer Vergleichungskammer die undurchsichtigen Mineralien mikroskopisch zu bestimmen sucht ', trachtet Baumhauee darnach, diesen Körpern, neben der Beobachtung im auffallenden Licht, noch durch Anätzen der Schliifflächen zu Leibe zu gehen. Die erhaltenen Aetzfiguren sind entweder direct im auf- fallenden oder von denselben angefertigten Abgüssen im durchfallenden Lichte zu studiren. — Als ersten Versuch in dieser Richtung berichtet der Verf. über die Untersuchung eines derben Buntkupfererzes. Durch Anätzen der Schliiffläche mittels Salpetersäure ergab sich, dass das Buntknpfererz nicht allein krystallinisch ist, sondern sich selbst aus verschieden orientirten Individuen aufbaut, welche in unregelmässigen Flächen zusammenstossen. Sodann treten Einschlüsse von bleigrauem Kupferglanz auf, die ebenfalls als aus verschiedenen Individuen zu- sammengesetzt sich ergeben, wie dies aus der Beschaifenheit und An- ordnung der Aetzeindrücke hervorgeht. Ausser diesen erscheint noch ein Mineral, welches in mancher Beziehung an Bleiglanz erinnert, dessen Natur sich ebensowenig sicher feststellen liess, wie die des in kleinen Partien selten auftretenden Kupferkieses. Weitere Versuche müssen 0 Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885. p. .530. Zoitsolir. f. wi-;s. Mikrnskopio. II. 4. 38 582 Referate und Besprecbungen. II. 4. lehren, inwieweit sicli die Beschaffenheit der Actzeindrücke zur Dia- gnosticirung undurchsichtiger Mineralien verwenden lässt; jedenfalls beweist die vorstehende Mittheilung, wie unumgänglich nothwendig es ist, derartige Körper vor der Ausführung einer chemischen Analyse mikroskopisch auf ihre Reinheit nnd Homogenität zu prüfen. Becker, Arthur, Ueber die Schmelzbarkeit des kohlen- sauren Kalkes. (Tschermak's mineral. und petrograph. Mittheil., Bd. VII, 1885, p. 122 bis 145). Die berühmten Versuche von James Hall werden vom Verf. einer eingehenden Kritik unterworfen, und stellt es sich bei dieser Gelegen- heit heraus, dass der Nachweis wirklicher Schmelzung des Calciumcar- bonates durch Hall nirgends erbracht worden ist. Wo eine Schmelzung wirklich constatirt ist, ergiebt sich, dass ein Zusammenschmelzen des kausticirten Kalkes mit der Porcellanröhre stattgefunden hatte. — Neue Versuche wurden vom Verf. selbst angestellt. Eine Schmelzung des kohlensauren Kalkes gelang demselben ebensowenig, wie anderen For- schern, dagegen glückte es ihm nach mehreren vergeblichen Versuchen, durch Erhitzung das reine gefällte Calciumcarbonat in einer Platin- hülse im Porcellanröhre unter Rothgluth in eine theilweise compacte krystallinische Kalksteinmasse zu verändern. Unter dem Mikroskop hatten die Körnchen einen Dnrchmesser von 0'042 bis 0*09 mm, während die Individuen des zur Darstellung desselben verwendeten Pulvers nur einen Durchmesser von 0*003 bis 0*005 mm besassen. Da es manche Marmorarten giebt, deren Kalkspath-Individuen eine solche Grösse nicht erreichen , so ist demzufolge die Möglichkeit erwiesen durch Hitzeein- wirkung Marmor herzustellen. 11, 4. Nene Literatiir. 58,'j Nene Tiitevatur 1. Lehr- und Handbücher. Bizzozer«, G., etFirket, Ch., Manuel de microscopie cliiiiquc, mici'oscopic legale, chimie clinique . technique bacterioscojjique. 2e. ed. frang. 557 pp. 8". av. 103 grav. et 7 i}lchs. Paris (Carre) et Bruxelles (Manceaux) 1885. 15 fr. Friedliiiider, C. e Martinotti, G., La tecnica raicroscopica applicata alla clinica ed aH'aiiatomia patologica. Traduz. italiana suU'ult. ediz. teilesca. 296 pp. 8" con G6 figg. ed 1 tav. Toriiio (Unione tipogr.-editr.) 1885. 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Fragekasten. 601 Frag^ekasten. lieber Bereitimg, Anwendung und damit erzielte Resultate, sowie Publicatiousort der neuerdings vielfach citirteu Hämatoxylinlösung von Ehelich möchte ich gern Auskunft bekommen. Arthur Bolles Lee. 602 Autoren-Register. Autoren-Kesister. Abbe 70, 73. Alvarez 563. Aly 282. Anclcer 375, 539. Assmann 269. Arcangeli 376. Arnold 244. Babes 406. Bale 79. Banti 405. Bareggi 86. Baumhauer 581. Beard 231. Becke 430. Becker 431, 582. Behrens 41, 54, 363, 502. Bollonci 545. Bergh 383. Bilu'inger 93. Bizzozero 248, 282, 539, 543. Bjeloussow 535. Bolles Lee 522, 536. Born 346, 391. Brass 300. Brunn v. 229. Buchner 560. BütschH 378. 379. Bumm 407 j^ Carpenter 72. 73. Carriere 238. -379. Certes 539. Chapman 78. Clifton 134. Cornil 406. Cox 83. Daday 89. Dathe 267. Debes 411, 567. Dippel 37, 360. Dircking- Holmfeld 252. Döderlln 90. Doherty 227. Doutrelepont 561. Diival 392. Eberth 282. Ebner 579. Eisner 270. Emery 104. Ermengem van 560. Errera 84. Escherich 563. Eternod 507, 511. Falkenheim 564. Ferran 406. Feussner 77. Fischer 93, 576. Flahault 259. Fleischl v. 289. Fleischmann 541. Flemming 57, 517. Flesch 349, 353, 403, 464. Foettinger 232. Fol 380, 523, 550. Francotte 228, 419. Frank 127. Frenzel 98. Friedlilnder 556. P'riedmann 546. Fütterer 555. Cxärtner 528. Gaffky 115. Gage 80. Garbini 59. Gelpke 484. Giacomi de 562. Giacomini 531. Gibbes 545. Gierke 13, 164. Giltay 360. Golding-Bird 78. Golgi 107. Goronowitsch 283. Autoren-Register. 603 Grottstein 549. Gray 81. Grciiacher 244. Gruber 230. Gruenliagen 547. Gimther 559. Guttmanu 250. Hall er 385. Hallier 361. Hamann 87, 38). Hanausek 272. Hansen 118, 355. Harmer 226. ITatschek 382. Hauser 549. 554. Hausbofer 422, 427, 578. Heinricher 577. Heller 47. Henking 509. Hertwig 240. Hervey 363. Henrck van 81. Heydenreich 333. HUdebrand 343. Hilger 237. Hitchcock 83. Hockin 72. Houssay 238. Hucppe 110, 355, 404, 561. Hnssack üß. Igacnsclii 243. Ihl 259, 359. Inostranzeff 530. Israel 459. Janney 134. Jickeli 138. Jijima 93. Joliannsen 261. Johne 249. Kaatzer 109. Kain 82. Kalkowsky 127, 266, 361. Katschenko 543. Kehr er 553. Kennel 94. Klein 264. ^ Koganei 395. Korotneff 230. Krause 87, 140, 372, 396, 547. Kreutz 268. Kiütschizky 241, 544. Kupffer 106. 394. Lang 383, 384. Leboucq 371. Lehmann 421. Libbey 137. Lindt 495. List 104, 145, 222, 223, 341, 514. Loew 124. Löwit 43. Loos 382. Lustgarten 408. Mann 130. Martinotti 478, 500. Mattirolo 354. Maurice 90. Mayer 225, 390. Mays 242, 401. Meltzer 544. Merkel 349. Meyer 577. Michael 95. Mitrophanow 389. Mittchell - Prudden 288. Moeller 339. Mojsisovicz 362. Molisch 359. Mondino 157, 547. Morpurgo 397. Müller 103. » Murray 268. Niemiec 381. Nissl 545. Noll 575 Nüsslin 88. Oerley 231. Ognew 542. Ost 295. Passet 248. Patten 235. Paulsen 520. Pentield 129. Pfitzner 386, 388. Pisenti 376. Plaut 108.^ Pommer 151. Rabl-Rückhard 239, 240. Reinhard 229. Renard 268. Ribbcrt 556. Rössler 384. . Rosenbach 248. Rosenbusch 431. Russow 125. Saefftigen 91. Sahli L 49. Salomonsen 252. Sandmann 403. Saunders 278. Sazepin 243. Sclüefferdecker 51, 2^3. 604 Autoren - Register. Scliinidt 3öy. Schütz 256, 561. Schulgin 90. Schulze 537, 538. Sehlen v. 249. Selenka 371. Smith 75, 245, 566. Solla 260. SoUas 380. Sommer 234. Spee, Graf 7. Spengel 453. Stein 370, 398. Stephenson 366. Sternberg 247. Stöhr 397. Strasburger 62. Streng 262, 429. Stricker 528. "^Fafani 545. Tavel 563. Tichomirofl 385. Tizzoui 105. Toison 398. Trinkler 395.. Tscherraak 266, 580. Tschisch 245. Uffreduzzi 257. Uljanin 237. Unna 557. Vignal 364. Vinassa 309. Virchow 372, 543. Vogel 361. Voigt 383. Voltoliui 555. Ward 76, 363. Watney 353. Weichselbaum 109. 410. Weigert 326, 399, 490. Welch 544. Wieger 346. Wielowiejski v. 242, 541. Wiesner 359. Wigand 109. Wül 541. Wilson 90. Witlaczil 103. Witt 573. Zacharias 233, 361. Zander 543. Zawarykin 105. Zopf 252, 548. Sach - Register. 605 Sach-Register. Abbe's Condensor 500. Abdominaltyphus 115. Ablagcrungsverbältnisse der Knocbeii- salze 151. Aethyldipbenylamin 17. Aetbyl-Eosiu 174. Alauncarmin mit Borsäure von Arcan- geli 377. Salicylsäure von Arcangeli 377. — von Pisenti 376. Alcyonarien, Behandhnig 90. Aldebydgrün 170. Algen, Präparation 259. — , Sammeln 259. Alizarin 16, 179. AUzarinblau 179. Alizarinorange 179. Alkaliblau 171, 182. Alkaligrün 171, 183. Alkanna 17. Alkohol für Drüsenzellen 514. Alkoholblau 170. Alkoholgährungspilze 118. alkoholische Methylgrünlösung 146. alkoholische Eosinlösung 147. Alluminium 264. Amaroecium 90. Amidoazonaphthalin 176. Amidobenzol 26. Ammoniumwolframat 423. Amöben 230, 253. Amphibien 389. Amphibole 430, 431. Amphictenidae 226. Amphipoden 102, 379. Amphitrema 89. Anilein 167. Anilin 26. Anilinblau 30, 170, 182. — , wasserlösliches 171. Aniline-blue-black 478. Anilinfarben 21. Anilinfarben, Einfluss des Lichtes auf dieselben 51. — , Herstellimg der 24. — zur Tinction mikroskopischer Prä- parate 86. Anilingelb 171. Anilingrün 51, 146, 147, 150, 222, 223. — , Einfluss des Lichtes auf das 222, 223. Anilinorange 168. Anilinroth 167, 181. Anilinschwarz 166. AniUntinctionen von entkalkten Knochen 155. Anisolroth 177. Anthracen 34. Anthrapurpurin 180. Antimon 429. Aphiden 103. Appendicularia 226. Arcangeli's Alauncarmin mit Borsäure 377. Salzsäure 377. ■ — Boraxcarmin 377. — Carminlösungen 376. — Pikrinsäurecarmin 378. — Salicylsäurecarmin 378. Arsen 429. Arterienwand 397. Aschen, vulcanische 268. Ascidien-Embryonen, Conservirung 91. — , Tinction 91. Asphaltlack 57. — von Rodig 57. Asteriden 380. Asteriscus 381. Aufhellungsmittel für Plasma 575. Aufkleben miki'oskopischer Schnitte 80, 225, 346. Auge 244, 379. Augenschirm 76. — von Ward 76. Wray 76. 606 Sach-Register. Augit 130. 431. Aulastoma gulo 383. Aureosiii 173. Aurin 175. Axencylinder lOG. Azalein 167, 168. Azodiphenyiblau 166. Pactcrien 108, 404, 548. Bactcrienculturen 245, 247, 405. Bänderschnitte 307. Bareggi's Methode, mikroskopische Prä- parate herzustellen 86. Baryum 264, 427, 430. Baryumoxalat 424. Baryumwolframat 423. Batrachicrlarven 390. Beale's Goldsize 57. Becherzellen 146, 519, 520. Becker's Mikrotom 453. — Objectschlitten 456. Beck's Schutzvorrichtung - für Objec- tivc 369. — Verticalilluminator 368. Behandlung der Mikrotommesser 305. Bengalin 166. Bengal Rosa 175. Benzaurin 175. Benzidam 26. Benzol 25. — , Einbettungsmethode 300. Berlinerblaureaction 124. Bernsteinlirniss 337. Berstcinlack 54. 335. Beryllium 427. Bestimmen gcsteinsbildender Minera- lien 66. beweglicher Objecttisch von Klönne und Müller 502. Reichert 289. von Schmidt und Haensch 503. Biebricher Scharlach 177, 182. Bindegewebe, fibrilläres 542. binoculäres Sehen 73. Bismarckbraun 145. 146, 150, 172, 183. Bismarckbraun-Anilingrün 146, 150. Bismarckbraun-Mcthylgrün 145, 150. Biuretreaction 125. Bizzozero's Pikrocarmin 539. Blacklay-Blue 166. Blastoderm 392. Blatta germanica 235. Blauer Bacterienfarbstoff, Culturlösung 113. Blauholz 14. Bleioxalat 424. Bleu de Lyon 170. — de nuit 170. — noir 166. — soluble 171, 182. Bleu vert extra 170. Blutkörperchen 398. — , rothe 47, 544. — , weisse 244. Boraxcarmin von Arcangeli 377. Boraxmethylenblau 49. — , Herstellung des 50. — zur üntersuchimg von Mikroorga- nismen 49. Bordeaux G. 178. — R. 178, 181. Branchiobdella 383. Brass' Einbettungsmethode 300. Brechnusstinctur 260. Bronzitzwillinge 430. Bumm's Hammelblutserum 407. — Rinderblutserum 407. Buntkupfererz 581. Buttersäuregährung, Organismen der 112. C admiumoxalat 425. Calcium 263. Calciumoxalat 424. Calciumwolframat 423. Callianira 227. Campecheholz 14. Carbazol 354. Carbolsäure 260. Carminlösung von Carter 228. Delafield 288. — — Hamann 87. Mayer 225. Carminlösungen von Arcangeli 376. Carter's Carminlösung 228. Cedernholzöl zur Paraffiueiubettung 536. Celloidin zum Einbetten 137. Celloidinpräparate des Centralnerven- systems 490. Cellulosemembranen, Verhalten gegen Schwefelsäure 126. Cellulosereaction 259, 359. Centralnervensystem 399, 478,490,546. — , Boraxmcthylenblau zur Untersu- chung des 49. — , Doppelfärbung von Sahli 1. — , Sublimat zur Untersuchung des 157. Cercarien. Keimschläuche 93. Cerise 168, 173. Ceriumoxaiat 425. Cephalophoren 384. Chapman's Mikrotom 78. chinesische Tusche für mikroskopische Präparate 84. Chinizarin 180. Chinolinblau 176, 182. Chinolinjodcyanin 176. Chitinhülle von Zonomyxa 88. Chlor 428. Sach-Register. 607 Chloralhyilrat 48. — als Conserviriingsflüssigkeit 48. Chloranilinviolett 169. Chloroi^hyllspectrum 421. Cholerabacillen 406. 560, 561. — , Reiiicultureii 249. Chondrosia 226. Chorda bei Salmoniden 238. Chorionepithel 543. Chrom 428. Chromameisensäure von Rabl 240. Chromsilure für Driisenzellen 514. • — , Lichtwirknng auf die 372. chromsauro Salze, Lichtwirkung auf 372. Chrysaminsäure 180, 182. Chrysanilin 168. Chrysarin 180. Cbryseolin 173. Chrysoidin 171, 182. Chrysoin 173. Chrysolin 173. Chrysotoluidin 168. Cilioflagellaten 379. Cloakenepithel von Scyllium 104. Coccin 175. Coccinin 181. Cörulein 180, 182. Collodioniren von Glasplatten 532. Collodium von Schilllibaum 522. — zum Aufkleben von Schnitten 80. Comatula 231. Commabacillen 406, 560, 561. Condensor von Koristka 500. Reichert 339. Conjunctiva palpebrarum 397. ConservirungsÜüssigkeit von Perenyi 98. Conservirungsverfahren von Giacomini 531. Copallack 56,« 335. Corallin 167. — , gelbes 175, 182. — , rothes 175. 181. Correctionsvorrichtung für homogene Immersion 73. Corti'sches Organ 545. Cox's Einschlusslack 83. Crocein 177, 181. Croceinscharlach 177. Culturapparat von Smith 245. Ciüturgelatine 245. Culturlösung für blaue Milchbacterien 113. Culturmethoden für Mikroorganismen von Fol 550. Cultur von Bacterien 245, 247. Saccharomyceten 119. Typhusbacillen 116. Cyanin 176. Cyanosin, spirituslösliches 175. Cyprinoiden 544. Cytheriden 103. Dahlia 169, 183. Dauerpräparate von üiatomaceen 567. Deckglaskitt von Hcydcnreich 333. Dekapoden 100. Delafield's Carminlösung 288. Dcndrocoelen 93. Diabas -Mandelsteine 267. Diamidoazobenzol, salzsaures 171. Diaphragma 368. Diatomaceen 573. — , Einschlussmittcl 566. 567. — ■ fossile, Präparation 417. — Ordnen im Präparat 420. — , recente, Präparation 413. Diatomaccendauerpräparatc 567. Diatomaceenmaterial, Präpariren 111. — , Reinigen 411. Diatomaceenpräparate mit Styrax und Liquidambar 82. Dichloreosin 173. Dijodfluorescoin 175. Dinitronaphtliol 178. Dioxyanthrachinon 179. Dioxynaphthochinon 1 78. Dioxytriphenylcarbinol 175. Diphenylaminblau 171, 182. Distomum palliatum 382. — reticulatuni 382. Doherty's Injcctionsflüssigkeiten 227. Doliolum 237. Doppeltinction 145, — von Merkel 349. Watney 353. Dotter der Froscheicr 240. Drittelalkohol von Rauvior 514. Drogen, Einbettung 320. Drüsenzellen 514. Dünndarm 105. durchbohrte Objectträger 87. rLau de Javelle 575, Echinodermen 379, 380. Echiuorhynchen, Tödtung 91. — , Behandlung 91. Echtgelb 172, 182. Echtroth 177, 181. Eier der Insecten 385. — meroblastische 394. • — von Ncpa 541. — — Notonecta 541. Planarien 94. Pyrrhocoris 541. Einbetten in Celloidin 137. — von Drogen 320. Präparaten 370. Einbettungsmasse für Drogen 321, 324. CdOS Sach-Register. Einbettungsmasse für Schnittbänder 8. Einbettungsmethode mit Benzol 300. Einbettungsmittel für Ophiotrema 93. Einüuss des Lichtes auf Anilinfarb- stoflfe 51. Einschliessen in Glycerin 81. — — Liquidambar 81. — — Styrax 81. Tolubalsam 82. _ Einschlussmittel für Diatomacen 566, 567. — ■ mit hohem Brechungsindex 566. Einschnappvorrichtung 458. Eisenchlorid 260. Eisenoxyduloxalat 425. Eiweissstofle 124. Eizelle 242. Election 196. elective Färbung 196. elektrisches Licht für Mikroskopie 528. elektrisches Mikroskop von Gärtner 528. Embryonen von Aphiden 104. Peripatus 94. Endosperm der Gerste 261. Entwässerungsapparat von Schulze 537. Entzia, Verhalten gegen Reagentien 89. Eosin 146, 147, 148, 150, 174, 181. — alkoholisches 147, 174. • — wasserlösliches 174. Eosin-Anilingrüu 147. Eosine bleunätre 174. Eosin-Methylgrün 146. 150. Epidermis von Anneliden 226. — — Brachiopoden 227. Epithel 105, 389. Epistylis 89. Eternod's Präparatenschrank 511. — Schleifapparat 507. Eupomotus uncinatus 382. Erhärtungsflüssigkeit von Perenyi 98. Erwärmungsversuche an Mineralien 129. Erythrin 174. Erythrinkalium 174. Erythrobenzin 167. Erythrosin 181. Erythrosine 174. F'abre-Domergue's Zuflussapparat 366. Färbeflüssigkeit von Toison .399. Färbemethoden 145. Färberröthe 15. Fäulnissbacterien 554. Feinblau 170. Fermentzellen von Dekapoden 100. Fettzellen von Dekapoden 100. Feuchte Kammer von Strasburger 370. Feuerwanze 541. ßbrilläres Bindegewebe 542. Filtrirapparat von Haushofer 426. Fissurella 385. Flavopiu-purin 180. Flemmins's Gemisch für Drüsenzellen 564. ^ Fluorescein 173. Fohlenlähme 251. Fol 's Culturmethoden für Mikroorga- nismen 550. Forelleneier 394. Frauenmilch, bacteriologische Unter- suchung 563. Friedmann's Modification der Weigert- schen Hämatoxyüntinction 546. Froscheier 240, 391. Fuchsin 167, 168, 181. Führung des Messers für Schnittbän- der 10. Fütterer's Methode, Tuberkelbacillen zu färben 555. Fundusdrüsen 351. Fuss der Lamellibranchiaten 541. Fussdrüsen der Gastropoden 238. (:fährungspilze 118. Gärtner's elektrisches jVlikroskop 528. Gallein 175. Gastropoden, Augen 237. — Fussdrüsen 238. Gefässe, blutleere 390. Gefriermikrotom 47. — von Golding-Bird 78. Gelatineculturen 245. Gelenkseuche 251. Gerbstoffe 499. geschichtete Pflasterepithelieu 543. Geschlechtsorgane von Echinorhynchen 92. Giacomini's Conservirungsverfahren 531. Giesbrecht's Methode Serienschnitte festzukleben 371. Glaskörper 544. Glasplatten, Collodioniren 532. Glenodiniura cinctum 379. Glycerin zum Einschliessen 81. Glyceringelatine von Deane 97. Glycerinzellen, Verschluss 79. Gold 185. Goldanilin 168. Goldgelb 173. Golding-Bird's JVIikrotom 78. Goldorange 172. Goldsize 57. — Zusammensetzung 97. Gonokokkus 407. Gonorrhoe-Mikroorganismen 407. Grandry'sche Körperchen 544. (jrcnachcr's Mischung 379. Sacli-Register. (U): Grenat soluble 173. Grosshirnrinde 545. GrüniHÜver 170. Grünstichblau 170. Gummi, mikrochemische Reactionen 127. Gummibilduns: 127. Hämatoxylin 14. Hamatoxylin-Bhitlaugensalzmethode von "Weigert 3'J9. Hämatoxylinfärbung von Watncy 353. — von Weigert 484, 546. Hämatoxylin-GIyccrin 148. Hämatoxylin-Glycerin-Eosin 148. Hämatoxylin-Glycerin-salpetersaures Rosanilin 149. Hämatoxylinlösung 57, 288. — nach Delaticld 57, 288. Hilmoglobinkrystalle 398. Halisarca lobularis 380. Haman's Carminlösung 87. Hammelblutserum von Bumm 407. Harmalin 167. Haushofer's Filtrirapparat 426. •• Heidenhein's Tinctionsmethode 517. 520. heizbarer Objecttisch für starke Ver- grösserungen 43. von Israel 459. — — von Löwit 43, 565. — — von Vignal 364 Helianthin 172. Heliostat, Surrogat für 1.34. Henking's Mikrotommesser 509. Heydenreich's Deckglaskitt 333. Hildebrand's Mikrotom 343. Histriobdella homari 232. Hitchcock's Schcllackkitt 83. Hofmann's Violett 169, 183. Holzstoff 354, 496. Holzstoffreaction 259, 359. homogene Immersion, Correctionsvor- richtung 73. Hornblende 431. Hortensia 175. Hühnergrind 256. Hussack's mineralogisches Mikroskop 67. Hydroidpolypen 226. Hypophysis cerri 351. Idioblasten 577. Immersion, homogene, Correctionsvor- richtnng 73. Immersionsilluminator , katadioptri- scher, von Stephenson 366. Indigblau 20. Indigcarmin 20. 21. Indigo 20. — artificiel 166. — -Carminfärbung 349. Indij:sch\vefclsäure 21. Indophenol 178. Indulin 182. Induline 166, 183. Infusoi-ien, Tinction der 138, 539. — , Tödtcn der 138. Injection, kalte 535. Injectionsflüssigkeiton von Doherty227. Inostranzeft's Vergleichungskammer 530. Insecteneier 385. Intercellularbrücken 389. Intercellulare, Auskleidung 125. Intercellnlarlücken 389. Iris 395. Isopodcn 102. Isopurpurin 180. isopurp ursaures Ammoniak 173. — Kalium 173. Israel's heizbarer Objecttisch 459. Jaune anglais 173. — d'or 178. Jequirity 252. Jodgrüii 169, 183. Jodlösung 260. Jodtinctur .60. Jodviolett 169. Kälbcvlähme 251. Kaiserroth 175. Kaiser's Mikroskopirlack 56. Kalium 263. Kaliumbichromat 107. Kaliumquecksilberjodid, Vorsichts- maassregeln beim Gebrauch 83. kalklose löiochenpartien 151. Kalle's Scharlach 175. kalte Injection 535. Kammer, feuclite, von Strasburger 370. Kapselmikrokokkon 556. Karyokinese 105. katadioptrischer Immersionsilluminator von Stephenson 366. Keimblätter bei Salmoniden 238. Keimschläuche von Cercarien 93. Kerngrundsubstanz 387. Kerntinctionen 282. — an Osmiumsäurepräparaten 518. Kleberzellen 261. Klein's mineralogisches Mikroskop 265. Klönne und Müller's beweglicher Ob- jecttisch 502. Knochenentwicklung 350. Knochenfische, Eier 226. 610 Sach-Rcgister. Knochenfische, Mednllarstrang 238. Knochenmarkzellen 244. Knochenmehl 272. Ivnochenpartien, kalklose 151. Knochensalze, Ablagerungsverhältnisse 151. Kobaltoxalat 425. Koch's Reinculturen von Cholerabacillen 249. Körperchen, Grandry'sche 544. kohlensaurer Kalk, Schmelzb;irkeit 582. Koristka's Condensor 500. Krapp 15. Kreosol 172. Krystalle, zweiaxige, Polarisationsver- hältnisse 127. KrystaUin 26. Krystallisationsmikroskop v, Lehmann 421. Kupferoxalat 425. Kyanol 26. Lackmus 19. Lämmer lähme 251. Lamellibranchiaten 541. Leber 243. Leberepithel von Isopoden 102. Leberzellen von Dekapoden 100. Leboncq's Methode, Serienschnitte fest- zukleben 371. Lehmann's Krystallisationsmikroskop 421. Leistungsfähigkeit der Mikrometer- schraube 295. Leprabacillen 250, 557. Leuchtorgane 104. Leucit 264, 431. ■ — , p]rwärmungsversuche 129. Licht. Einfluss des auf Anilinfarbstofie 51. — •, elektrisches für Mikroskopie 528. Lichtblau 170. Lichtgrün 170. Lichtwirkung auf chromsaure Salze 372. Chromsäure 372. Lightfoot's blue black 166. Lignin 354, 359, 496. Lindt's Phloroglucinreaction 497. Linsen, Messen der Krümmung 134. Liquidambar zum Ehischliessen 81, 568. Lithistiden, Behandlung 90. Lithium 263, 428. Lösungsmittel für Plasma 575. Löwit's heizbarer Objecttisch 43. 365. Loxosoma 227. Luciola 104. Lustgarten'scher Bacillus 563. Lutecienne 175. jMacrotoma plumbea 234. Magdalaroth 176, 181. Magensclüeimhaut 395. Magenta 167. Magnesium 264, 428. Malachitgrün 182. Malaria 249. Manchesterbraun 172. Manchestergelb 178. Mandarin 176. Manganoxyduloxalat 426. Markscheidenfärbung 490. Martiusgelb 178, 182. Mauvein 167, 183. Mayer's Carminlösung 225. Mays' Flüssigkeiten zum Studium von Muskeln 242, 243. Mednllarstrang der Knochenfische 238. Medusen 226. Meeresschlamm. Präparation 416. Membran, verholzte 354. Merkel's Doppelfärbung 349. Messerführung für Schnittbänder 10. Messerstellung für Schnittbänder 10. Metallimprägnationen 219. Meteoriten 266. 580. Methylanilinviolett 169. Methyldiphenylaminblau 171. 182. Methylenblau 166, 182. Methylenviolett 169. Methylgrün 145, 146, 149. 1.50, 182. Methylgrünlösung, alkoholische 146. Methylgrün - salpetersaures Rosanilin 149. Methyl violett 183. mikrochemischer Nachweis von Eiweiss- stoffen 124. Mikrometerocular von Winkel 41. Mikrometerschraube, Leistungsfähig- keit der 295. Mikroorganismen Boraxmcthylenblau zur Untersuchung der 49. — in Milch 110. Mikroskop, elektrisches von Gärtner 528. — , Hussack's mineralogisches 67. — , mineralogisches von Klein 265. Mikroskopformen, neue 37. Mikroskopie, pharinakognostische 309. Mikrosko2)irlack von Kaiser 56. Mikrotom 310. — für grosse Schnitte 326. — von Becker 453. Chapman 78. Gokling-Bird 78. ■ Hildebrand 343. Spengel 453. — — Vinassa 314. — — Weigert 326. Mikrotommesser, Behandlung der .305. Sach-Reffister. (•)11 Mikrotommessor von Henkiiig 509. — — Vinassa 318. Milch, Mikroorganismen 110. Milchdrüse 352. INIilchsänregährnng, Organismen der 110. Miliartnbercnlose 109. Milinorange 173. Mineralien, Erwärmnngsversuche 129. — nndurchsichtige 530. mineralogisches Mkroskop von Hnssack 67. Klein 265. Mitteldarmdrüse von Crnstaceen 98. Molybdän 428. Moii ophenylrosanilinsnlfosänre 171. motorische Nervenapparate 403. Mncinzellen 518. Müller'sche Flüssigkeit 152. für Drüsenzellen 514. Mycetozoen 252. Myriapoden, Fühler 233. Myxomyceten 252. Myzostoma 231. ^ achtgrün 169. Nagelentwicklnng 543. Naphthalin 33. Naphthalingelb 178. Naphthalinroth 176. Naphthazarin 178, 182. Naphthol 33. 176. Naphtholalkohol 260. Naphtholblan 178. Naphtholgelb S. 178. Naphtholorange 176. Natrinm 263. Neben -Niere 351. Nepa cinerea 541. Nerven von Echinorhynchen 92. Nervenapparate, motorische 403. Nervenendigungen im Muskel 403. Nervenfasern, Bau der 6. — periphere 547. Nervenprimitivscheide 547. Nervensystem 245, 350. • — , peripheres 484. — , Tinction 107. Netz zum Fangen kleiner Thiere von Schulze 537. Nicholsonblau 171. Nickeloxalat 425. Niere 3.52. 385. Nigranilin 166. Nigrosin 166, 183. Nitroalizarin 179. Noctikua 379. Noir de Colin 166. Nopalin 175. Notonecta glauca 541. Oberhaut 248. Objecte, zerbrechliche, Schneiden der 300. Objecthaltcr mit Kugelgelenk 341. — von Reichert .341. Objectiv 70, 75. Objectschlitten von Becker 456. Spengel 456. Objecttisch, beweglicher, von Klönnc und Müller 502. Reichert 289. Schmidt u. Haensch 502. ' — , heizbarer von Israel 459. — — — Löwit 43. 365. — . Vignal 3G4. Objectträger, durchbohrte 87. — , Reinigen der 55. Ocidarmikrometer. bewegliches 41. — von Seibert 41. Olivinzwillinge 266. Opalblau 170. Ophiotrema 93. — , Einbettung 93. Orange I 176. 181. — li. 182. de Poirricr 175. — III 172. — lY. 171, 182. OrcinUisung 259. Oribatiden 95. — , Canadabalsampräparatc 96. — , Fang 95. — , Glycerinprilparate 96. 97. — , Trockenpräparate 96. Orseille 18, 19. - Orseillin 177. Osmium 186. Osmiumsäure 186. — für Drüsenzellen 514. Osmüimsäurepräparate . Becherzellen 519. — , Kerntinctionen 518. Ostnicoden 103. Oxalate 423. Oxybenzol 172. Paeonin 175. Palatinorange 168. Palladium i87. Palladiumchlorid 187. Palladiumchlorür 187. Pankreas 545. Paraffin für Schnittbänder 8. Paraffineinbettung 228, 536. — nach Francotte 228. Selenka 37 1 . Para Rosanilin 168. Pariser Grün 171. Pariser Violett 169. (31-2 Sacli-Register. Parme 170. Peüicellina 227. Pentamethyltriamidotolyldiphenylcar- binol 169. Pentamethyltriamidotriiilienylcarbinol 169. Perenyi'sclie Erhärtuiigsflüssigkeit 198. Peripatus. Embryonen, Untersuchung der 94. peripheres Nervensystem 484, 547. Peritonäura von Anneliden 226. — — Brachiopoden 227. Pflasterepithelien, geschichtete 543. pharmakognostische Mikroskopie 309. Phenicienne 172. Phenolblau 178. Phenylamin 26. PhenylenbLau 172. Pbenylenbraun 183. Phloroglucin 375. 539. — , Nachweis 495. Phloxine 175. Phonolith 130. Phosphorsäure 263. Phryganidae 235. Phthaleine 173. Phthalsäure 30. Pikrinsäure 26, 172, 182. Pikrinsäurecarmin von Arcangeli 378. Pikrocarmin von Bizzozero 539. pikrocyaninsaures Kalium 173. Pikronigrosin 478. Pilz des Hühnergrindes 256, 258. Pilzsporen. Eindringen in Athmungs- organe 256. Pilzthiere 252. Pioemie 251. Pisenti's Alauncarmin 376. Planarien 93, 384. — -Conservirung 94. — -Härtung 94. — Schneiden der 93. Plasma, Lösungsmittel 575. Plasmahülle 126. Pneumoniekokken 556. Polarisationsprismen von Feussner 77. Polarisationsverhältnisse zweiaxiger Krystalle 127. Polirschiefer 573. Polykladen 383. Polyphemus pcdiculus 233. — , Spermatozoon 233. Ponceau 181. — GGG. 177. — H. 177. — RR. 177. — RRR. 177. Powell & Lealand's Schutzvorrichtung für Objective 369. Präparate. Verschliessen der 54. Präparatenschrank von Eternod 511. Primerose ä Talcool 174. — sokible 174. Primula 169, 183. Prismen zur Lichtpolarisation 77. Prosobranchier 385. Prüfung auf Alluminium 264. — — Baryum 264. Calcium 263. Kalium 263. Lithium 263. Magnesium 264. Natrium 263. Posphorsäure 263. Strontium 263. Purpurin 17, 180. Pyrogallussäure 260. Pyrosine B. 174. — J. 175. Pyroxene 430, 431. Pyrrhocoris 541. Quecksilberchlorid 157. — zum Studium des Centralncrven- systems 157. Quinoleino 176. Quitteiischleim zum Aufkleben von Schnittserien 346. Rabl's Chromameisonsäure 240. Eadula 384. Ranvier's Drittelalkohol 514. Rauvarienne 177. Realgar 567. Recurrensspirillcn 559. reducircnde Zuckerarten, mikrochemi- sche Rcaction 577. Reichert's beweglicher Objecttisch 289. ■ — Condensor 339. — Objectbalter 341. Reinculturen von Cholerabacillcn 249. Reinigen der Objcctträger 55. Resorcin 30, 173. Resorcinblau 178. Resorcinlösung 259. Retina 140. 396. Rhizopoden 88, 378. Rinderblutserum von Bumm 407. Roccellin 177. Rodig's Asphaltlack 57. Rosanilin 167, 168. ^. salpetcrsaures 149; 168. — , salzsaures 168. Rosanilinmonochlorhydrat 168. Rosanilinnitrat 168. Rosanilinsulfosäure 168. Rose B ä l'eau 174. Rosein 167. Rothblau 170. rothe Blutki'irporchen 544. Sach-Registcr. 613 Rothstich blau 170. Rotzkrankheit 410. Rouge fran^ais 176. Rubeosin 173. Rubklin 177. Rubin 167, 168. Rückenmark 389. 8äuregelb 172. Säureviolett 169, 183. Safrangelb 178. Safranin 167, 181. Safrosin 175, 181. Sagitta 226. Sahli's Doppelfärbung des Centralner- vensystems 1. Salamanderzucht 388. Salmoniden. Chorda 238. ^. Keimblätter 238. salpetersaures Rosanilin 149. Salicylsäurecarmin von Arcangeli 378. salzsaures Diamidoazobenzol 171. Sarcine 564. Schällibaum'sches Collodium 522. Scharlach 3 B. 177. Schellackkitt 56. — von Hitchcock 83. Schlammsauger von Schulze 538. Schleifapparat von Eternod 507. Schleimdrüsen 146, 241. 520. — der Ostracoden 103. Schleimpilze 252. Schlick, Präparation 416. Schmelzbarkeit des kohlensauren Kal- kes 582. Schneiden zerbrechlicher Objecte 300. Schnittbänder 7. Schnitte. Aufkleben der 80, 225. Schnittserien 7. — Aufkleben der 346. — des Centralnervensystem 490. Schrank für Präparate von Eternod 511. Schulze's Entwässerungsapparat 537. — Netz zum Fangen kleiner Thiere 537. — Schlammsauger 538. Schutzvorrichtung für Objective von Beck 369. von Powell v. Lealand 369. Schwefel-Arsenik 567. Schwefelcyanallyl 260. Schwefelsäure 430. — , Verhalten gegen Cellulosemem- branen 126. Scyllium 104. Seesterne 380, 381. Seethiere, Silberfärbung 226. Sehen, binoculäres 73. Sehnerv 545. Sehorgane 379. Selenka's Methode der Paraflineinbet- tung 371. Senföle 260. Septicämie 554. Serienschnitte 307. — , Festkleben 371. — — nach Leboucq 371. Giesbrecht 371. Serpula uncinata 382. Serpulaceen 231. — Kiemen 231. Siebröhreu 576. Silber 184, 429. Silberfärbung von Seethieren 226. Silbernitrat 107. Silberoxalat 426. Siphonophoren 230. — Fangfäden 230. Skatol 354. Smith's Culturapparat 245. Solferino 167. Spectrum des Chlorophylls 421. Speicheldrüsen 241. Speugel's neues Mikrotom 453. — Objectschlitten 456. Spirituslampe mit constantem Niveau 229. Spirogyra 125. Sputumuntersuchung 109. Steiniuisspulver 272. Stellung des Messers für Schnittbän- der 10. Stephenson's katadioptrischer Immer- sionsüluminator 366. Sternberg's Culturmethoden 247. Strasbm-ger's feuchte Kammer 370. Strontium 263. Strontiumoxalat 426. Styrax zum EinschUessen 81, 568. Sublimat 157. — zum Studium des Centralnerven- systems 157. Subcuticula von Echinorhynchen 92. SyphiUsbacillen 408, 561, 562, 563. — , Deckglaspräparate 409. ■ — , Schnittpräpaiate 408. Tauchmikrotom von Weigert 326. Tetrabromfluorescein 174. Tetrajodfluorescein 181. Theerfarben 21. Thenea 226. Tinction, Theorie der 187, 468. Tinctionsmethoden 13, 145, 164. Tintinnodea 380. Titan 428. Toison's Färbeflüssigkeit 399. Tolubalsam zum Einschliessen 82. Toluidinblau 170, 182. 614 Sach-Registcr. Toluol 32. Tomopteris 22^3. TubeikelbacUleii 109, 250, 555. — Tinction von Fütterer 555. Tusche, chinesische für mikroskopische Präparate 84. Trematoden 93, 382. Trichter zur Paraffineinbettung 228. Trimethylrosanilinmonojodmethylat 169. Trioxyanthrachinon 180. Triton 282. Trochophora 382. TropäoUn 00. 171, 173, 182. — 000. 176, 101, 182. — D. 172. — R. 173. Typhusbacillen, Züchtung der 116. Ueberosmiumsäure 186. Uhrglas, feststehendes 278. undurchsichtige Mineralien 530. Universallupenhalter von Westien 229. Vanadin 429. Vanillin 496. Vergleichungskammer von Inostranzeff 530. Vergrösserungsvermögen 73. verholzte Membranen 354. Verimpfung von Bacterien 246. Verschliessen der Präparate 54. — von Glycerinzellen 79. Verschlusslacke 54. Vert de Methylaniline 170. — lumiere 170. — de Paris 171. — d'üsebe 170. Veridin 171. Verticalilluminator von Beck 368. Vesuvin 172. Vesuvlaven 268. Victoriagelb 173. Victoriaorange 173. Vignal's heizbarer Objecttisch 364. Vinassa's Mikrotom 314. • — Mikrotommesser 318. Violanilin Nigrosin 166. Violet imperial 170. Violett 169. — 5B. 1K3. Violettblau 170. Viridin 183. Vogeleier 392. Ward's Augenschirm 76. wasserlösliches Anilinblau 171. Watney's Doppelfärbung 353. Weigert's IIämatoxylinfärbung484, 546. — Tauchmikrotom iür grosse Schnitte 326. — verbesserte Hämatoxylin-Blutlau- gensalzmethode 399. Weinsäure 430. weisse Blutkörperchen 244. weisser Zinklack 56. Westien s Universallupenhalter 229. white zinc cement 56. Winkel's Mikrometerocular 41. Wolfram 422, 429. Wolken elemente, mikroskopische Be- obachtung 269. Wray's Augenscnii'm 76. Wundinfectionskrankheiten 248. Xilidinponceau 177. Xylophilin 496. Zahnentwicklung 350. Zellgewebsentzündung 248. Zellkern 386. Zerbrechliche Objecto, Schneiden 300. Ziegler'scher Kitt 57. Zinklack 56. Zinkoxalat 426. Zonomyxa, Chitinhülle, Verhalten gegen Reagentien 88. Zucht von Salamandra 388. Zuckerarten, reducirende, mikroche- mische Reaction 577. Zuflussapparat von Fabre-Domergue 366. zweiaxige Krystalle. Polarisationsver- hältnisse 127. Zeitschrift f. wiss.Mikrosk. 3d. ff. . Taf.L '■"■-h. ^ j';