Centralblatt Für Bakteriologie, Parasitenkunde Und Infektionskrankheiten. 1. Abt. ORIGINALE. Band 87.1922

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12. (fcENTRALBLATT

^- fflr

Bakteriologie, Parasitenkunde
und Infektionskrankheiten

In Verbindung mit

Prof. Dr. R. Abel, Prof. Dr. R. Pfeiffer

Oeh. Obenned.-Rat in Jena Oeh. Med.-Rat in Breslau

Prof. Dr. M. Braun, Prof. Dr. E. Gildemeister,

Oeh. Reg.-Rat in Konigsberg Ober-Reg.-Rat, Berlin-Lichterfelde-W.

herausgegeben von

Prof. Dr. O. Uhlworm und President Dr. A. Weber

Oeh. Reg.-Rat in Bamberg

in Dresden

Brste Abteilung. 87. Band

Medizinisch-hygienische Bakteriologie
und tierische Parasitenkunde

Originate

Mit 128 Abbildungen im Text und 4 Tafeln

Jena

Verlag von Gustav Fischer .
1922

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CtntralH. f. Bab. etc. I. JUit Originals. Bd. 87. Heft I.

Ausgegeben am 1. September 1921.

Nachdruck verboten.

Beitrage zur Systematic der Mikroorganismen.

Zur Systematik der Bacteria bipolaria.

Bakterien der HSmorrhagischen Septikamie im weiteren Sinne.

[Aus dem staatlichen Serotherapeutischen Institut in Wien (Vorstand:
Hofrat Prof. Dr. Paltanf) nnd der KrAlschen Sammlnng (Vorstand:

Prof. Dr. E. Pribram).]

Von Dr. med. vet. S. Plasq] (Zagreb), und Prof. Dr. med. E. Pribram

(Wien).

Mit 1 Tafel.

I. Zur Morphologle der Bacteria mnltoseptica (Bakterien der
h&morrhaglschen Septikftmie im engeren Sinne).

(Von Dr. S. Plasaj, Zagreb.)

AnlABlich der systematischen Untersuchung der Eulturen der KrAl-
schen Sammlung fiel es auf, daB viele der als Bakterien der hAmor-
rhagischen SeptikAmie eingesendeten StArnme Eigenbewegung zeigten.
Es kamen im ganzen 20 StAmme in Betracht, von welchen 7 beweglich,
13 nnbeweglicb waren. Dies gab AnlaB zu einer system atischen Unter¬
suchung alter StAmme mit Hilfe der Zettnowschen Geifieldarstellung.
Kleiner technischer Vorteile wegen wurde die angewendete Methode in
einer eigenen Mitteilung ausftihrlicher wiedergegeben, so daB bier der
Hinweis auf diese Mitteilung genflgen moge. Ueber die Herkunft der
Eulturen, ihre sonstigen sp&ter zu besprechenden Eigenschafteu, ihre
Eigenbewegung, die Art der BegeiBelung, gibt eine Tabelle AufschluB,
die an spAterer Stelle Platz finden soli. Wie aus derselben hervorgeht,
zeigte es sich, daB nur bei 6 untersuchten Eulturen keine Geifieln ge-
funden werden konnten, wAhrend von den tlbrigen StAmmen 7, trotzdem
sie keine Eigenbewegung zeigten, doch einzelne Individuen enthielten,
die GeiBeln trugen, ebenso die 7 StSmme mit Eigenbewegung. Diese
zu der gelAufigen Annahme, daB die Bakterien dieser Gruppe un-
begeifielt seien, ganz im Widerspruch stehende Tatsache forderte zu
einem eingehenden Studium der kulturellen Eigenschaften der unter¬
suchten StAmme, gleichzeitig auch zu einem sorgfAltigen Studium der
Literatur auf.

Hueppe 1 ) hat zuerst (1886) die Bakterien der hSmorrhagischen
SeptikAmie zn einer Gruppe zusammengefaBt; nach ihm haben sich

1) Hueppe, F., Ueber die Wildseuche und ihre Bedeutung fiir die National-
okouomie una Hygiene. (Berlin, klin. Wochensc.hr. 1886. Nov.)

Ente Abt. Ori*. Bd. 87. Heft 1.

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Centralbl. f. Bakt. etc. L Abt. Originals. Bd. 87. Heft 1.

Davaine 1 ), Pasteur 1 ), Koch 1 ), Gaffky 1 ), Perroncito 2 3 ) Tous-
saint 1 ), Ki11*), Loeffler 1 ), Schtitz 1 ) and Bollinger 1 ) mit den
Erregern der Kaninchenseptikfimie, Geflfigelcholera, Schweine- und
Rinderseuche befafit, dann haben besonders Ligniferes 1 ) und Voges 1 )
sich mit diesen Bakterien beschfiftigt. In den meisten Lehr- und Hand-
bflchern wird die Unbeweglichkeit und die Geifiellosigkeit der in Rede
stehenden Mikroorganismen als ein Kriterium angegeben. Vorsichtige
Autoren vermeiden aber jede allgemeine Angabe fiber das Vorhanden-
sein oder Fehlen von Geifieln bei der Charakterisierung der Gruppe und
sprechen nur von fehlender Eigenbewegung, so Hutyra (Handb. von
Kolle u. Wassermann, 2. Aufl. Bd. 6. 1913. S. 64; Lehmann,
Bakteriologische Diagnostik, 5. Aufl. 1912. S. 277 u. 360), wohl deshalb,
weil in der Literatur nur selten eine Angabe darfiber vorliegt, dafi GeiBel-
prfiparate angefertigt worden seien [Kar Iinski 8 ), Pfaff 4 )|. Uebrigens
fehlt es in der Literatur auch nicht an Angaben fiber bewegliche Formen
der Gruppe, so daB Lehmann, 1. c., unter dem Schlagworte „Eigen-
bewegung 14 ausdrficklich erwfihnt: „ ... fehlt allermeist. Es sind aber
auch bewegliche, polar begeifielte Stfimme von einzelnen Forschern be-
schrieben. 44 Hier sei nur erwfihnt: das B. phasianidarum mobile
Enders 5 ) (keine Angaben fiber GeiBeldarstellung), der bewegliche Erreger
einer Kanarienvogelseuche von Rieck 6 ) und insbesondere das Bakterium
einer Lammseuche (Lammziekte) von Spreull 7 ), das in alien anderen
Eigenschaften mit den fibrigen Bakterien dieser Gruppe fibereinstimmte,
aber deutlich Beweglichkeit zeigte. (Im Ref. keine Angabe fiber Geifiel-
darstellung.)

Bei 8 Kulturen der Sammlung fanden sich, obwohl sie meist (mit
Ausnahme der Kanarienvogelseuche von ZeiB und dem B. pneumo¬
niae caviarum Strada und Traina) bei der Beobachtung im hohlen
Objekttrfiger unbeweglich zu sein schienen, einzelne Bakterien mit deut¬
lich entwickelter GeiBel. Diese GeiBel ist stets extrapolar, aber doch
nahe dem Pol, also peripolar angesetzt, was von Wichtigkeit scheint, da
bisher nur polar begeifielte, 1-geifielige Bakterien bekannt sind. Wie
oben erwfihnt, fanden wir in Lehmanns Bakteriologischer Diagnostik
die allgemeine Angabe, es seien auch bewegliche, polar begeifielte
Stfimme von einzelnen Forschern beschrieben worden; da wir nicht fest-
stellen konnten, auf welche Arbeiten sich diese Angabe bezieht, lfifit
sich nicht sagen, inwiefern diese Befunde mit unseren fibereinstimmen.
Es sei noch besonders darauf aufmerksam gemacht, dafi stets die weit-
aus grdfite Zahl der Bakterien in einem Gesichtsfelde unbegeifielt ist,
und nur einzelne geifieltragende zu sehen sind. Unter den hier er-
wfihnten Kulturen ist, wie nicht unerwfihnt bleiben soil, auch ein Er¬
reger einer Kanarienvogelseuche, den Pfaff, wenn die Kultur mit der
von ihm beschriebenen identisch ist, unbeweglich und geifiellos gefunden
hat. Allerdings erwfihnt Lehmann, 1. c., einen beweglichen Erreger

1) Zit. bei Hutyra, F., Septicaemia haemorrhagica. (Ibid. Bd. 6. S. 64.)

2) Zit. bei Kitt, Th. Septikamie der Vogel (Huhnercho 1 era). (Handb. d. pathog.
Mikroorg. 2. Aufl. Bd. 6. 1913. 8. 37.)

3) Kar Iinski, Centralbl. f. Bakt. Bd. 7. 1890. 8. 335; Zeitschr. f. Hyg. Bd. 38.
1898. S. 373.

4) Pfaff, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 38. 1905. 8. 28t.

5) Enders, Berlin, tierarztl. Wochenschr. 1902. Nr. 23; Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Ref. Bd. 34. 1902. 8. 384.

6) Rieck, Deutsche Zeitschr. f. Tiermed. Bd. 18. 1889. S. 69.

7) Spreull, Journ. of compar. Pathol, and Ther. Vol. 21. 1908. No. 43.

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Plasaj u. Pribram, Beitrage zur Bystematik der Mikroorganiamen.

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einer Kanarienvogelseuche von Pfaff, zitiert aber die Arbeit, in welcher
der geiBellose Erreger beschrieben ist. — 3 der untersuchten Kultnren
zeigten aufier 1-geifieligen auch einzelne 2-, sogar 3-geiBelige Bakterien,
bei 2 Stfimmen konnten sogar bis zn 6 GeiBeln gezahlt werden. Diese
Kultnren mit 1 bis 3 und 1 bis 5 GeiBeln zeigten durcbweg deutliche
Beweglichkeit einzelner Individuen im hohlen Objekttrager. Eine der
untersuchten Kulturen, welche lebhafte Eigenbewegung zeigte und poly-
trich begeiBelt war (B. bubalisepticura Aujeszky) wurde aus-
geschieden, weil sie auch sonst offenbar nicht hierher gehdrte — sie ist
oben nicht mitgezahlt. Durch Zwischenschaltung von Kontrollen mit
geiBeltragenden Kulturen wurde die Handhabung der Geifieldarstellung
immer wieder flberprflft. Untersucht wurden folgende Stamme, das Er-
gebnis der Untersuchung wird nebenstehend angefOhrt:

1) Bakterien aus Vogelseuchen:

B. gallin arum Klein 1 2 )

„ e. Kanarienvogelnekrose Binder 3 )

„ phasianicida Klein 3 )

„ e. Truthahnseuche Magnusson 4 5 )

. e. Kanarienvogelseuche Pfaff 6 )

, * e. „ Zeifl*)

„ cholerae gallinarum Ficker
n „ Piorkowaki

„ avicida (Coccobakt.) „

„ cholerae gallinarum Wurzburg

2) Bakterien aus Bchweineseuchen:

B. sui septic urn Sanfelice
» * Wurzburg

Aujeszky

2) Bakterien aus Kaninchen- und Meerschweinchenseuchen

unbegeiBelt

1 GeiBel
dgl.

1—3 GeiBeln
dgl.

1-5 „

unbegeiBelt
1 GeiBel
dgl.

B. cuniculicida Aujeszky
„ septicaem. haemorrh. aus einem
K&ninchenabszeB Zei6 fi )

* pneumoniae caviarum Strada-
et Trains 7 )

„ cavisepticum Busson 8 9 )

4) Bakterien aus Pferden:

B. equisepticum Aujeszky
[„ pneumoniae equi Poels®)]

5) Bakterien aus Rinderseuchen:

B. e. Rinderseuche Billings 10 )

(„ bu balisepticum Aujeszky)

1 Geifiel

1—3 GeiBeln

1 GeiBel
1—3 GeiBeln

1 GeiBel
unbegeiBelt

1—5 GeiBeln
zahlr. Geifi.

geziichtet in:
London
Wien
London
Malm5
Prag
Giefien
Berlin

Wurzburg

Modena

Wurzburg

Budapest

Budapest

GieBen

Pavia

Wien

Budapest

Rotterdam

Nebraska

Budapest

(Die in Klammern stehenden Kulturen haben sich als nicht zur
Gruppe der Bakterien der hSmorrhagischen Septikamie gehbrig erwiesen,

1) Klein, E., Centralbl. f. Bakt. Bd. 5. 1899. 8. 689; Journ. of Pathol, and
Bacterid. Vol. 2. 1893. p. 214; Centralbl. Bakt. Abt. I. Ref. Bd. 16. 1894. S. 839.

2) Binder, L., Ueber die infektiose Nekrose der Kanarienvogel. (Wien, tierarztl.
Monatsschr. Bd. 1. 1914. 8. 337.

3) Klein, E., Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 34. 1902. 8. 76.

4) Magnnsson, Laut Mitteilung wahrscheinlich identisch mit dem B. e. Kanarien-
seache von n wick. (Zeitschr. f. Infektionskrankh. d. Haustiere. Bd. 55. 1908. 8. 33.)

5) Pfaff, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 38. 1905. S. 275.

6) ZeiB, Arch. f. Hyg. Bd. 82. 1914. H. 1.

7) Stradaet Trains, Lo periment. Vol. 54. 1900; Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Orig. Bd. 28. 1900. 8. 635.

8) Busson, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 86. 1921. S. 101.

9) Poels , Transl. of Rep. ou pleuro-pn. of calves. London 1890.

10) Billings, From D. Salmons latest Hog cholera and swine-plague two
distinct diseases. (The Nebraska Farm. 1897; zit. bei Karlin ski, Zeitschr. f. Hyg. 1- e.
— Preiss, Aetiologische Studien iiber Schweinopest und Schweineseptikamie. Buda¬
pest 1897.

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CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Origin&le. Bd. 87. Heft 1.

was spfiter begrflndet werden soli.) Die Mikrophotographien zeigen die
Verteilung der GeiBeln und ihre Stellung.

Was bedeutet dieser Befund von geiBeltragenden Bakterien? Sind
es Anpassnngserscheinungen bei lange Zeit fortgezflchteten Kulturen,
sind es in gewissen Eutwicklungsstadien auftretende Formen, sind sie
konstant Oder inkonstant? In der Literatur linden wir wohl eine An-
gabe von Zierler (zit. bei Lehmann) fiber den B. implex us Zimmer-
mann, welcher nach Lehmanns Aussage 1895 sicher nnbeweglich ge-
wesen war, wfihrend 1912 Beweglichkeit festgestellt werden konnte.
Leider fehlt jede Angabe darflber, ob GeiBeln gesucht und gefnnden
wurden; das erscheint nach unseren Befunden um so wichtiger, als
scheinbar ganz unbewegliche Kulturen auch geiBeltragende Individuen
beherbergen kfinnen. Spreull gibt ausdrficklich an, daB die von ihm
gezfichteten Stamme, unmittelbar aus dem Tierkdrper entnommen, be-
weglich waren. Es kann auf Grund der fibrigen von Spreull an-
gegebenen Eigenschaften keinem Zweifel unterliegen, daB seine Kulturen
in die Grnppe der Bacteria multoseptica gehdren, mit denen sie
in alien anderen Eigenschaften gut fibereinstimmen. Noch wichtiger
erscheint in dieser Frage eine Arbeit von Karlin ski, welcher eigens
hierauf gerichtete Untersuchungen angestellt hat. Dieser Autor gibt an,
in 3-jfihriger Untersuchung mehrerer hundert Kulturen von B. sui-
septicum (geifiellos) und B. suipestiferum (geiBeltragend) niemals
GeiBelbildung bei einem frfiher unbegeifielten Stamme gesehen zu haben
und nie Verlust der GeiBeln beweglicher Stfimme, auch dann nicht,
wenn die Kulturen ihre Virulenz vollkommen verloren hatten. Der Autor
spricht sich ffir die absolute Konstanz dieser Eigenschaften aus. Die
GeiBelprfiparate wurden von Karlitiski mit Hilfe der Loefflerschen
Methode ausgefflhrt, ein Umstand, der erwfihnt werden mag, nicht, weil
dadurch seine Befunde irgendwie beeintrfichtigt werden kfinnten, wohl
aber deshalb, weil es immerhin moglich wfire, daB die Darstellung ein-
zelner, sehr schwer darstellbarer GeiBeln, wie sie in unseren Prfiparaten
zu sehen sind, vielleicht doch nur mit der zweifellos schfirferen Zett-
nowschen Methode gelingt. Czaplewski hat sich in der Diskussion
fiber unseren Vortrag auf der Tagung der Freien Vereinigung Ifir Mikro-
biologie dahin gefiuBert, daB der von uns erhobene Befund vielleicht in-
sofern von prinzipieller Wichtigkeit sein konne, als es sich hier um
die Darstellung von geiBeltragenden Schwirmformen der Bakterien
handeln dfirfte. Die Frage ist nicht von der Hand zu weisen, weil doch
die Zahl der geiBeltragenden Bakterien einer Kultur auffallend gering
ist und die Darstellung meist nur in (sehr) jungen Kulturen gelingt —
was freilich von der GeiBeldarstellung fiberhaupt gilt. Die Deutung ist
zunfichst eine Hypothese.

II. Zur Biologie der Bacteria multoseptica.

A. Serologische Untersuchungen (Komplementbind;ung).

(Von Dr. S. Plasaj.)

Nach der morphologischen Untersuchung, die eine Mehrzahl der in
Untersuchung genommenen Stamme als begeiBelt ergeben hat, war es
angezeigt, zu ermitteln, ob eine artspeziiische, serologische Beziehung
zwischen den geifiellosen und begeifielten Stammen besteht, wodurch ein
Beweis erbracht werden kdnnte fiber die Zugehfirigkeit Oder Nicht-

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Plasaj u. Pribram, Beitrage zur Systematik der Mikroorganiamen.

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zugehorigkeit der einen zu den anderen, besonders der morphologisch
sebr weit voneinander stehenden St&mme, der geifiellosen zu den poly-
trichen StSmmen. Da bei Bact. septicaemiae haemorrhagicae
die komplementbindenden AntikOrper als artspezifisch nachgewiesen
wurden, so habe ich dazu den Komplementbindungsversuch verwendet.

Als Grundlage filr die Ausfflhrung der Untersuchnngen dienten mir
die Versuchsergebnisse Matsudas 1 ), der fflr die St&mme der Geflflgel-
cholera, der Kaninchenseptik&mie, der K&lberpnenmonie und der Schweine-
seuche die komplementbindenden Substanzen in mit w&sserigen Ex-
trakten prSpariertem Kaninchenserum nachwies. Matsuda zeigte, daB
eine Unterscbeidung dieser Angehorigen der Art untereinander, wenn
man mit schwach wirksamem Serum arbeitet, mdglicb ist, denn jedes
Serum der genannten Stamme gab mit dem Extrakte, mit Hilfe dessen
es erzeugt wurde, eine weitergehende Komplementbindung als mit den
heterologen Extrakten. Solche schwach wirksame Sera wurden durch
nur 2malige intravenOse Injektion von 0,5 ccm Extrakt gewonnen, w&hrend
stirkere Sera nach 3 oder 4 Injektionen zu starke, die Resultate trfibende
Gruppenreaktionen gaben. Die einzelnen Stamme ein und derselben
Varietat zeigten untereinander fast keine Unterschiede, also z. B. ein
Serum, durch den Extrakt des Stammes Schweineseuche A erzeugt,
gibt auch mit dem Extrakte des Stammes Schweineseuche B beinahe
dasselbe Resultat wie mit dem Extrakte Schweineseuche A und um-
gekehrt.

Zu diesen Versuchen Matsudas wurden die Bakterienextrakte in
folgender Weise hergestellt:

Massenkulturen von Bakterien auf Kolleschen Schalen werden nach 24 Std. mit
destill. Wasser abgeschwemmt. Je nach der Wachstamsstarke der Kolturen wurden
10—12 ccm Wasaer pro Schale verwendet. Man erhalt auf diese Weise eine triibe,
milchige Aufschwemmung, die man, gut gegen Licht gescbiitzt, bei Zimmertemperatur
in einem Schiittelapparat 2 Tage lang schiitteln lfiBt. Hierauf karbolisiert man die
Aufschwemmung (0,5 Proz.), zentrifugiert bis zur Klarung und sterilisiert 3 Std. bei
44° C.

Das hamolysierende Serum wurde von Kaninchen, die mit Hammelblutkdrperchen
vorbehandelt wurden, gewonnen.

Beim Versuch wurde 0,1 ccm Extrakt mit einer bestimmten Menge Serum in
Glasrbhrchen gemischt und als Komplement frisches Meerschweinchenserum in einer
Verdunnung von 1:10 zugesetzt. Dann wurden alle Rohrchen fur 1 Std. in den Brut-
schrank gestellt. Hierauf wurde hamolysierendes Serum in der doppelt komplett
ldsenden Dosis sowie 1 ccm einer 5-proz. Hammelblutkbrperchenaufscnwemmung zu-
geeetzt. Jedes Beagens betrug 1 ccm an Volumen, so dafi jedes Rohrchen 5 ccm
enthielt.

Nach dieser Methode stellte ich auch fur meine Versuche die wasserigen Ex¬
trakte 2 3 * * * * — 8 ) her, doch mit dem Unterschiede, daB ich nicht die Kolleschen Schalen,
sondern Flaschen beniitzte und sie nicht mit einer Oeee, sondern mit Bouillonauf-
schwemmung beimpfte, und zwar so, daB ich eine Agar rohrchen kultur mit 2—3 ccm

1) Matsuda, T., Studien uber das Komplementbindungsph&nomen bei hSmor-
rhagischer Septik&mie. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. bo. p. 383.)

2) Wassermann, A., und Citron, J., Zur Frage der Bildung der bakteriellen
Angriffsstoffe im lebenden Organismus. (Dtsch. med. Wochenschr. 1905. S. 1101.) —

3) Citron, J., Die Immunisierung gegen Schweineseuche mit Hilfe von Bakterien-

extrakten. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. 52. 1906. S. 238.) — 4) Citron, J., und Piitz, R.,
Ueber die Immunisierung gegen Hiihnercholera, Wild- und Schweineseuche mit Bak-

terienextrakten. (Ibid. Bd. 56. 1907. S. 144.) — 5) Citron, J., Ueber die Immuni-

sierung mit Exsudaten und Bakterienextrakten. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig.
Bd. 40. 1906. S. 153.) — 6) Ders., Die Methoden der Immunodiagnostik und Immun-

therapie. 3. Aufl. Leipzig. — 7) Kraus-Levaditi, Technik und Methodik der Im-

munitatsarbeit. — 8) Kolle-Wassermann, Handb. d. pathog. Mikroorganiamen.
2. AufL 1913.

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und Infektionskrankheiten

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Medizinisch-hygienische Bakteriologie
und tierische Parasitenkunde

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Ausgegeben am 1. September 1921.

Naohdmak verboten.

Beitrage zur Systematik der Mikroorganismen.

Zur Systematik der Bacteria bipolaria.

Bakterien der HSmorrhagischen Septikamie 1m weiteren Sinne.

[Aus dem staatlichen Serotherapeutischen Institut in Wien (Vorstand:
Hofrat Prof. Dr. Paltauf) und der Krfilschen Sammlang (Vorstand:

Prof. Dr. E. P fib ram).]

Von Dr. med. vet. S. Plasaj (Zagreb), und Prof. Dr. med. E. Pftbram

(Wien).

Mit 1 TafeL

I. Zur Morphologic der Bacteria multoseptlca (Bakterien der
hSmorrhagischen Septlk&mie lm engeren Sinne).

(Von Dr. S. Plasaj, Zagreb.)

Anlfifilich der systematischen Untersuchung der Eulturen der Krfil-
schen Sammlung fiel es auf, dafi viele der als Bakterien der hfimor-
rhagischen Septikfimie eingesendeten Stfimme Eigenbewegung zeigten.
Es kamen im ganzen 20 Stfimme in Betracht, von welchen 7 beweglich,
13 unbeweglich waren. Dies gab Anlafi zu einer systematischen Unter¬
suchung alter Stfimme mit Hilfe der Zettnowschen GeiBeldarstellung.
Kleiner technischer Vorteile wegen wurde die angewendete Methode in
einer eigenen Mitteilung ausfiihrlicher wiedergegeben, so dafi hier der
Hinweis auf diese Mitteilung genflgen moge. Ueber dio Herkunft der
Eulturen, ihre sonstigen spfiter zu besprechenden Eigenschaften, ihre
Eigenbewegung, die Art der Begeifielung, gibt eine Tabelle Aufschlufi,
die an spfiterer Stelle Platz finden soli. Wie aus derselben hervorgeht,
zeigte es sich, dafi nur bei 6 untersuchten Eulturen keine Geifieln ge-
funden werden konnten, wfihrend von den tibrigen Stfimmen 7, trotzdem
sie keine Eigenbewegung zeigten, doch einzelne Individuen enthielten,
die Geifieln trugen, ebenso die 7 Stfimme mit Eigenbewegung. Diese
zu der gel&ufigen Annahme, dafi die Bakterien dieser Gruppe un-
begeifielt seien, ganz im Widerspruch stehende Tatsache forderte zu
einem eingehenden Studium der kulturellen Eigenschaften der unter¬
suchten Stfimme, gleicbzeitig auch zu einem sorgffiltigen Studium der
Literatur auf.

Hueppe 1 ) hat zuerst (1886) die Bakterien der hfimorrhagischen
Septikfimie zu einer Gruppe zusammengefafit; nach ihm haben sich

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dkonomie un<

jppe,
a Hyt

F., Ueber die Wildseuche und ihre Bedeutung fur die Nutional-

ygiene.
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Davaine 1 ), Pasteur 1 ), Koch 1 ), Gaffky 1 ), Perroncito 2 ) Tous-
saint 1 ), Kitt 2 ), Loeffler 1 ), Schtitz 1 ) und Bollinger 1 ) mit den
Erregern der Kaninchenseptikfimie, Geflfigelcholera, Schweine- und
Rinderseuche befafit, dann haben besonders Ligni&res 1 ) und Voges 1 )
sich mit diesen Bakterien beschfiftigt. In den meisten Lehr- und Hand-
bttchern wird die Unbeweglichkeit und die GeiBellosigkeit der in Rede
stehenden Mikroorganismen als ein Kriterium angegeben. Vorsichtige
Autoren vermeiden aber jede allgemeine Angabe iiber das Vorhanden-
sein Oder Fehlen von GeiBeln bei der Charakterisierung der Gruppe und
sprechen nur von fehlender Eigenbewegung, so Hutyra (Handb. von
Kolle u. Wasserraann, 2. Aufl. Bd. 6. 1913. S. 64; Lehmann,
Bakteriologische Diagnostik, 5. Aufl. 1912. S. 277 u. 360), wohl deshalb,
weil in der Literatur nur selten eine Angabe darfiber vorliegt, daB Geifiel-
prfiparate angefertigt worden seien [Karlinski 8 ), Pfaff 4 )). Debrigens
fehlt es in der Literatur auch nicht an Angaben Aber bewegliche Formen
der Gruppe, so daB Lehmann, 1. c., unter dem Schlagworte „Eigen-
bewegung u ausdrficklich erwfihnt: „ ... fehlt allermeist. Es sind aber
auch bewegliche, polar begeiBelte Stfimme von einzelnen Forschern be-
schrieben. tt Hier sei nur erwfihnt: das B. phasianidarum mobile
Enders 5 ) (keine Angaben fiber GeiBeldarstellung), der bewegliche Erreger
einer Kanarienvogelseuche von Rieck 6 ) und insbesondere das Bakterium
einer Lammseuche (Lammziekte) von Spreull 7 ), das in alien anderen
Eigenschaften mit den Qbrigen Bakterien dieser Gruppe fibereinstimmte,
aber deutlich Beweglichkeit zeigte. (Im Ref. keine Angabe fiber GeiBel¬
darstellung.)

Bei 8 Kulturen der Sammlung fanden sich, obwohl sie meist (mit
Ausnahme der Kanarienvogelseuche von ZeiB und dem B. pneumo¬
niae caviarum Strada und Traina) bei der Beobachtung im hohlen
Objekttrfiger unbeweglich zu sein schienen, einzelne Bakterien mit deut¬
lich entwickelter GeiBel. Diese GeiBel ist stets extrapolar, aber doch
nahe dem Pol, also peripolar angesetzt, was von Wichtigkeit scheint, da
bisher nur polar begeiBelte, 1-geiBelige Bakterien bekannt sind. Wie
oben erwfihnt, fanden wir in Lehmanns Bakteriologischer Diagnostik
die allgemeine Angabe, es seien auch bewegliche, polar begeiBelte
Stfimme von einzelnen Forschern beschrieben worden; da wir nicht fest-
stellen konnten, auf welche Arbeiten sich diese Angabe bezieht, lfiBt
sich nicht sagen, inwiefern diese Befunde mit unseren fibereinstimmen.
Es sei noch besonders darauf aufmerksam gemacht, daB stets die weit-
aus groBte Zahl der Bakterien in einem Gesichtsfelde unbegeiBelt ist,
und nur einzelne geiBeltragende zu sehen sind. Unter den hier er-
wfihnten Kulturen ist, wie nicht unerwfihnt bleiben soli, auch ein Er¬
reger einer Kanarienvogelseuche, den Pfaff, wenn die Kultur mit der
von ihm beschriebenen identisch ist, unbeweglich und geifiellos gefunden
hat. Allerdings erwfihnt Lehmann, 1. c., einen beweglichen Erreger

1) Zit. bei Hutyra, F., Septicaemia haemorrhagica. (Ibid. Bd. 6. S. 64.)

2) Zit. bei Kitt, Th. Septikamie der Vogel (Huhnercholera). (Haudb. d. pathog.
Mikroorg. 2. Aufl. Bd. 6. 1913. 8. 37.)

3) Karlinski, Centralbl. f. Bakt. Bd. 7. 1890. S. 335; Zeitschr. f. Hyg. Bd. 3S.
1898. S. 373.

4) Pfaff, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 38. 1905. S. 281.

5) Enders, Berlin, tierarztl. Wochenschr. 1902. Nr. 23; Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Ref. Bd. 34. 1902. S. 384.

6) Rieck, Deutsche Zeitschr. f. Tiermed. Bd. 18. 1889. S. 69.

7) Spreull, Journ. of compar. Pathol, and Ther. Vol. 21. 1908. No. 43.

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* • ^UNIVERSIT

Plasaj a. Pribram, Beitrage zur Syetematik der Mikroorganismeo.

3

einer Kanarienvogelseuche von Pfaff, zitiert aber die Arbeit, in welcher
der geifiellose Erreger beschrieben ist. — 3 der nntersnchten Kulturen
zeigten aufier 1-geiBeligen auch einzelne 2-, sogar 3-geiBelige Bakterien,
bei 2 St&mmen konnten sogar bis zu 6 Geifieln gez&hlt werden. Diese
Kulturen mit 1 bis 3 und 1 bis 5 Geifieln zeigten durcbweg deutliche
Beweglichkeit einzelner Individuen im hohlen Objekttr&ger. Eine der
untersuchten Kulturen, welche lebhafte Eigenbewegung zeigte und poly-
trich begeifielt war (B. bubalisepticum Aujeszky) wurde aus-
geschieden, weil sie auch sonst offenbar nicht hierher gehdrte — sie ist
oben nicht mitgez&hlt. Durch Zwischenschaltung von Kontrollen mit
geifieltragenden Kulturen wurde die Handhabung der Geifieldarstellung
immer wieder QberprQft. Untersucht wurden folgende Stfimme, das Er-
gebnis der Untersuchung wird nebenstehend angeffihrt:

1) Bakterien aas Vogelseuchen:

B. gal tin arum Klein 1 ) unbegeiflelt

„ e. Kanarienvogelnekrose Binder 2 ) „

„ phasianicida Klein 3 ) *

„ e. Truthahnseuche Magnusson 4 ) „

„ e. Kanarienvogelseuche Pfaff 6 ) 1 Geifiel

p ‘ e. „ Zeifi 6 ) dgl.

„ cholerae gallinarum Ficker „

„ „ „ Piorkowski 1—3 Geifieln

„ avicida (Coccobakt.) „ dgl.

w cholerae gallinarum Wurzburg 1—5 „

2) Bakterien aus Bchweineseuchen:

B. suisepticum Hanfelice unbegeifielt

„ „ Wurzburg 1 Geifiel

„ * Aujeszky dgl.

2) Bakterien aus Kaninchen- und Meerschweinchenseuchen:

B. cuniculicida Aujeszky 1 Geifiel

„'septic&em. haemorrh. aus einem

Kaninchenabszefi Zeifi 6 ) 1—3 Geifieln

9 pneumoniae caviarum 8trada-

et Trains 7 ) 1 Geifiel

9 cavisepticum Busson 8 ) 1—3 Geifieln

4) Bakterien aus Pferden:

B. equisepticum Aujeszky 1 Geifiel

[„ pneumoniae equi Poels 9 )] unbegeifielt

5) Bakterien aus Binderseuchen:

B. e. Rinderseuche Billings 10 ) 1—5 Geifieln

(p bubalisepticum Aujeszky) zahlr. Geifi.

gezuchtet in:
London
Wien
London
Malmb

Prag

GieUen

Berlin

Wurzburg

Modena

Wurzburg

Budapest

Budapest

Giefien

Pavia

Wien

Budapest

Rotterdam

Nebraska

Budapest

(Die in Klammern stehenden Kulturen haben sich als nicht zur
Grnppe der Bakterien der hSmorrhagischen Septik&mie gehfirig erwiesen,

1) Klein, E., Centralbl. f. Bakt. Bd. 5. 1899. 8. 689; Journ. of Pathol, and
Bacteriol. VoL 2. 1893. p. 214; Centralbl. Bakt. Abt. I. Ref. Bd. 16. 1894. S. 839.

2) Binder, L., Ueber die infektiose Nekrose der Kanarienvogel. (Wien, tierarztl.
Monatsscbr. Bd. 1. 1914. 8. 337.

3) Klein, E., Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 34. 1902. 8. 76.

4) Magnusson, Laut Mitteilung wahrscheinlich identisch mit dem B. e. Kanarien-
b eache von Zwick. (Zeitschr. f. Infektionskrankh. d. Haustiere. Bd. 55. 1908. 8. 33.)

5) Pfaff, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 38. 1905. 8. 275.

6) Zeifi, Arch. f. Hyg. Bd. 82. 1914. H. 1.

7) Btrada et Trains, Lo periment. Vol. 54. 1900; Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Orig. Bd. 28. 1900. 8. 635.

8) Busson, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 86. 1921. 8. 101.

9) Poels , Transl. of Rep. on pleuro-pn. of calves. London 1890.

10) Billings, From D. Salmons latest Hog cholera and swine-plague two
distinct diseases. (The Nebraska Farm. 1897; zit. bei Karlinski, Zeitschr. f. Hyg. 1. c.
— Pr eisB, Aetiologische Studien iiber Schweinepest und Schweineseptikamie. Buda¬
pest 1897.

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CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

was spfiter begrtlndet warden soil.) Die Mikrophotographien zeigen die
Verteilung der Geifieln und ibre Stellung.

Was bedeutet dieser Befund von geifieltragenden Bakterien? Sind
es Anpassungserscheinungen bei lange Zeit fortgezflchteten Kultnren,
sind es in gewissen Eutwicklungsstadien anftretende Formen, sind sie
konstant Oder inkonstant? In der Literatur finden wir wohl eine An-
gabe von Z i e r 1 e r (zit. bei L e h m a n n) fiber den B. i m p 1 e x u s Zimmer-
mann, welcher nach Lehmanns Aussage 1895 sicber unbeweglich ge-
wesen war, wfihrend 1912 Beweglichkeit festgestellt werden konnte.
Leider fehlt jede Angabe darfiber, ob Geifieln gesucht und gefunden
wurden; das erscheint nach unseren Befunden um so wichtiger, als
scbeinbar ganz unbewegliche Kulturen auch geifieltragende Individuen
beherbergen kfinnen. Spreull gibt ausdrficklich an, dafi die von ihm
gezfichteten Stfimme, unmittelbar aus dem Tierk5rper entnommen, be-
weglich waren. Es kann auf Grund der fibrigen von Spreull an-
gegebenen Eigenschaften keinem Zweifel unterliegen, dafi seine Kulturen
in die Gruppe der Bacteria multoseptica gehoren, mit denen sie
in alien anderen Eigenschaften gut fibereinstimmen. Noch wichtiger
erscheint in dieser Frage eine Arbeit von Karlitiski, welcher eigens
hierauf gerichtete Untersuchungen angestellt hat. Dieser Autor gibt an,
in 3-jfihriger Untersuchung mehrerer hundert Kulturen von B. sui-
septicum (geifiellos) und B. suipestiferum (geifieltragend) niemals
Geifielbildung bei einem frfiher unbegeifielten Stamme gesehen zu haben
und nie Verlust der Geifieln beweglicher Stfimme, auch dann nicht,
wenn die Kulturen ihre Virulenz vollkommen verloren hatten. Der Autor
spricht sich ffir die absolute Konstanz dieser Eigenschaften aus. Die
Geifielprfiparate wurden von Karlifiski mit Hilfe der Loefflerschen
Methode ausgeffihrt, ein Umstand, der erwahnt werden mag, nicht, weil
dadurch seine Befunde irgendwie beeintrfichtigt werden kfinnten, wohl
aber deshalb, weil es immerhin moglich wfire, dafi die Darstellung ein-
zelner, sehr schwer darstellbarer Geifieln, wie sie in unseren Prfiparaten
zu sehen sind, vielleicht doch nur mit der zweifellos schfirferen Zett-
nowschen Methode gelingt. Czaplewski hat sich in der Diskussion
fiber unseren Vortrag auf der Tagung der Freien Vereinigung ffir Mikro-
biologie dahin gefiufiert, dafi der von uns erhobene Befund vielleicht in-
sofern von prinzipieller Wichtigkeit sein konne, als es sich hier um
die Darstellung von geifieltragenden Schwfirmformen der Bakterien
handeln dfirfte. Die Frage ist nicht von der Hand zu weisen, weil doch
die Zahl der geifieltragenden Bakterien einer Kultur auffallend gering
ist und die Darstellung meist nur in (sehr) jungen Kulturen gelingt —
was freilich von der Geifieldarstellung tiberhaupt gilt. Die Deutung ist
zunfichst eine Hypothese.

II. Zur Biologle der Bacteria multoseptica.

A. Serologische Untersuchungen (Komplementbindiung).

(Von Dr. S. Plasaj.)

Nach der morphologischen Untersuchung, die eine Mehrzahl der in
Untersuchung genommenen Stfimme als begeifielt ergeben hat, war es
angezeigt, zu ermitteln, ob eine artspezifische, serologische Beziehung
zwischen den geifiellosen und begeifielten Stfimmen besteht, wodurch ein
Beweis erbracht werden konnte fiber die Zugehfirigkeit Oder Nicht-

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Plasaj u. Pribram, Beitr&ge zur Systematik der Mikroorganismen.

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zugehSrigkeit der einen zu den anderen, besonders der morphologisch
sebr weit voneinander stehenden Stfimrae, der geiBellosen zu den poly-
trichen StSmmen. Da bei Bact. septicaeraiae haemorrbagicae
die komplementbindenden AntikOrper als artspezifisch nachgewiesen
wurden, so habe ich dazu den Komplementbindungsversuch verwendet.

Als Grundlage fflr die Ausfflhrung der Untersuchungen dienten mir
die Versnchsergebnisse Matsudas 1 ), der fdr die Stamme der Geflflgel-
cholera, der KaninchenseptikSmie, der Kaiberpneumonie und der Schweine-
seuche die komplementbindenden Substanzen in mit wfisserigen Ex-
trakten prapariertem Kaninchenserum nachwies. Matsu da zeigte, daB
eine Unterscheidung dieser AngehSrigen der Art untereinander, wenn
man mit schwacb wirksamem Serum arbeitet, mOglich ist t denn jedes
Serum der genannten Stamme gab mit dem Extrakte, mit Hilfe dessen
es erzeugt wurde, eine weitergehende Komplementbindung als mit den
heterologen Extrakten. Solche schwach wirksame Sera wurden durch
nur 2malige intravendse Injektion von 0,5 ccm Extrakt gewonnen, wahrend
stirkere Sera nach 3 oder 4 Injektionen zu starke, die Resultate trflbende
Oruppenreaktionen gaben. Die einzelnen Stamme ein und derselben
Varietat zeigten untereinander fast keine Unterschiede, also z. B. ein
Serum, durch den Extrakt des Stammes Schweineseuche A erzeugt,
gibt auch mit dem Extrakte des Stammes Schweineseuche B beinahe
dasselbe Resultat wie mit dem Extrakte Schweineseuche A und um-
gekehrt.

Zu diesen Versuchen Matsudas wurden die Bakterienextrakte in
folgender Weise hergestellt:

Maseenkulturen von Bakterien auf Kolleschen Schalen werden nach 24 Std. mit
destill. Wasser abgeschwemmt. Je nach der Wachstumsstarke der Kulturen wurden
10—12 ccm Wasser pro Schale verwendet. Man erhalt auf diese Weise eine triibe,
milchige Aufschwemmung, die man, gut gegen Licht geschiitzt, bei Zimmertemperatur
in einem Schuttelapparat 2 Tage lang schiitteln lafit. Hierauf karbolisiert man die
Anfschwemmung (0,5 Proz.), zentrifugiert bis zur Klarung und sterilisiert 3 Std. bei
44° C.

Das hamolysierende Serum wurde von Eaninchen, die mit Hammelblutkdrperchen
vorbehandelt wurden, gewonnen.

Beim Versuch wurde 0,1 ccm Extrakt mit einer bestimmten Menge Serum in
Glasr5hrchen gemischt und als Komplement frisches Meerschweinchenserum in einer
Verdunnung von 1:10 zugesetzt. Dann wurden alle Rohrchen fur 1 Std. in den Brut-
schrank gestellt. Hierauf wurde hamolysierendes Serum in der doppelt komplett
Idsenden Doeis sowie 1 ccm einer 5-proz. Hammelblutkbrperchenaufschwemmung zu¬
gesetzt. Jedes Beagens betrug 1 ccm an Volumen, so daB jedes Rohrchen 5 ccm
enthielt.

Nach dieser Methods stellte ich auch fur meine Versuche die wasserigen Ex¬
trakte 2 3 * * * * — 8 ) her, doch mit dem Unterschiede, daB ich nicht die Kolleschen Schalen,
Modern Flaschen benutzte und sie nicht mit einer Oeee, sondern mit Bouillonauf-
Bchwemmung beimpfte, und zwar so, daB ich eine Agarrohrchenkultur mit 2—3 ccm

1) Matsuda, T., Studien iiber das Komplementbindungsphanomen bei hamor-
rhagischer Septikamie. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. do. p. 383.)

2) Wassermann, A., und Citron, J., Zur Frage der Bildung der bakteriellen
Aognffsstoffe im lebenden Organismus. (Dtsch. med. Wochenschr. 1905. S. 1101.) —

3) Citron, J., Die Immunisierung gegen Schweineseuche mit Hilfe von Bakterien-

extrakten. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. 52. 1906. S. 238.) — 4) Citron, J., und Piitz, R.,
Ueber die Immunisierung gegen Hiihnercholera, Wild- und Schweineseuche mit Bak-

terienextrakten. (Ibid. Ed. 56. 1907. S. 144.) — 5) Citron, J., Ueber die Immuni¬

sierung mit Exsudaten und Bakterienextrakten. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig.
Bd. 40. 1906. 8. 153.) — 6) Ders., Die Methoden der Immunodiagnostik und Immun-
therapie. 3. Aufl. Leipzig. — 7) Kraus-Levaditi, Technik una Methodik der Im-

munitatsarbeit. — 8) Kolle-WaBsermann, Handb. d. pathog. Mikroorganismen.

2. AufL 1913.

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CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 87. Heft 1.

Bouillon aufBchwemmte und dann mit dieeer Bouillonaufschwemmung die 11 X28 cm
grofte Agaroberflache in flachen Agarfiaschen beimpfte. Die 24-stund. Agarkulturen
wurden mit destill. Wasser (20 ccm pro Flasche) abgeschwemmt, die Abschwemmungen
in die Flascbchen abpipettiert, auf 2 Tage mit notwendigen Unterbrechungen in einen
schnell arbeitenden Schiittelapparat gestellt und zentrifugiert Die gelben Extrakte
wurden dann noch in gewohnlicher Weise durch 3 Std. bei 44° C erwarmt, mit 0,5-proz.
Karboleaure versetztr und zum Schlusse die ISterilitat auf Agar und in Bouillon ge-
pruft, wobei sich zeigte, daB nach 48 Std. in alien Extrakten die zuriickgebliebeneu
Bakterien nicht abgetotet wurden. Als dann die Extrakte noch einmal durch 3 Std.
bei 44° C erwarmt wurden, jetzt also bei Anwesenheit des Phenols, waren die Probe-
rohrchen (Beobachtung: 5 Tage bei 37°) steril.

Zuerst wurden 5 Kaninchen immunisiert.

Kaninchen 1 mit Extrakt des B. einer Kan arien vogeleeuche Pfaff.
4. und 16. Aug. 1919 je 0,5 ccm Extrakt. Das Befinden des Tieres war nach den In-
jektionen normal.

Kaninchen 2 mit Extrakt des B. bubalisepticum (von Aujeszky):
4. Aug. 1919 0.5 ccm Extrakt, 5. Aug. tot.

Sektionsbefund: Triibung der Brusthdhlenflussigkeit, Injektion der Mesenterial-
gefafle. Keine Tracheitis!

Mikroskopisch wurden im Blute keine Bakterien gefunden. Ein mit Herzblut
beimpfter Agar blieb steril. Eine mit Herzblut geimpfte Maus blieb am Leben. Hdchst-
wahrscheinlich ist die Todesursache der Toxin wirkung des Extraktes zuzuschreiben.
Das Kaninchen war iiberhaupt sehr schwach und mager.

Kaninchen 3 mit Extrakt des B. cavisepticum (Busson): 16. Aug. 0,5 ccm
Extrakt. Nach 12 Std. Futteraufnahme vermindert, der Blick traurig, Cornea trub,
das Tier etwas somnolent. Ohrmuscheln kalt. Nach 2 Tag. hat sich aer Zustand ge-
bessert, nach 3 Tag. wurde das Tier wieder normal. — 23. Aug. 0,5 ccm Extrakt.

Kaninchen 4 mit Extrakt des B. bubalisepticum (von Aujeszky): 16. Aug.
1919 0,5 ccm Extrakt. — Am nachsten Morgen war das Tier sehr somnolent, mit fast
vollig sistierter Futteraufnahme. Blick traurig; Cornea glanzlos, Ohrmuscheln kalt.
Es lag wie im Halbschlummer mit sehr eingesunkenem Bauch und abduzierten
Knien. Durchfall. Nach 2 Tag. Zustand etwas besser, nach 3 gut, bis auf die Futter¬
aufnahme. Am 20. Aug. schon fast normal. — 23. Aug. 0,5 ccm Extrakt.

Kaninchen 5 mit Extrakt des B. cholerae gallinarum (aus Wurzburg).
16. Aug. 1919 0,5 ccm Extrakt — Der Zustand nach aer Injektion beinahe wie beim
Kaninchen 4, nur ohne abduzierte Kniestellung und ohne Durchfall. Am 20. Aug.
schon fast normal. — 23. Aug. 1919 0,5 ccm Extrakt.

Kaninchen 6 mit Extrakt des B. suicida (aus Wurzburg). 16. Aug. 1919
0,5 ccm Extrakt. Zustand nach der Injektion wie bei Kaninchen 3, etwas besser. Am
19. Aug. schon fast ganz normal, am 20. Aug. ganz normal. 23. Aug. 1919 0,5 ccm
Extrakt. — JO Tage nach der 2. Injektion wurde dem Kaninchen ca. 8 ccm Blut ent-
nommen. Mit jedem einzelnen der aus dem Blute gewonnenen Sera wurden die ersten
Komplementbindungsversuche angestellt, und zwar nach der von Matsuda angegebenen
Methode, aber mit kleinerer Gesamtmenge der Reagentien. Es wurden von jedem Rea-
gens nur die Halfte (0,5 ccm) genommen, so dafi die Gesamtmenge 2,5 ccm betrug.

Die Ergebnisse der Vorversuche zeigten, dafi, falls wir mit dem in
Matsudas Versuchen verwendeten hfimolytischen System operieren
wollen, wir unsere Antigene wegen der Antigenhemmung erst in einer
Verdtinnung von 1:160, bzw., weil ftlr gewohnlich halbe unterhemmende
als Gebrauchsdosis empfohlen wird, in einer Verdtinnung von 1:320
verwenden konnen.

Es wurden deshalb weitere Versuche mit ausgewerteten Antigenen
vorgenommen, wobei sich zeigte, dafi es zu einer Komplementbindung
weder zwischen dem homologen noch anderen Antigenen kam.

Als Ursache, dafi keine Komplementbindung nachzuweisen war,
wurde die zu geringe Wirksamkeit der Sera angenommen und die Ka¬
ninchen wurden weiter injiziert. Jedes Kaninchen erhielt in Intervallen
von 3—4 Tag. weitere 5 Injektionen 0,5 ccm Extrakt intravenbs. Diese
Injektionen vertrugen alle Kaninchen gut, ohne sichtbare Reaktion.
Zugleich wurden noch 4 Kaninchen immunisiert, und zwar:

Kaninchen 7 mit Extrakt des B. cholerae gallinarum (von Ficker):
2. Okt. 1919 1,0 ccm Extrakt. Am nachsten Tage die Futteraufnahme vermindert.

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Pl&sftj u. Pribram, Beitriige zur Systematik der Mikroorganiemen. 7

Hauttemperatur herabgeeetzt (Ohren kalt). 9. Okt. 1919 1,0 ccm Extrakt. 15. Okt.
1,0 ccm Extrakt.

Kaninchen 8 mit Extrakt einer Kanarien vogelnekrose, Binder. Wie
bei Kaninchen 7.

Kaninchen 9 mit Extrakt der Pastenrella pneumoniae equi (aue Rotter¬
dam). Wie bei Kaninchen 7.

Kaninchen 10 mit Extrakt dee B. gallinarum, Klein. Wie bei Kanin¬
chen 7.

10 Tage nach der letzten Injektion wurden von alien 9 Kaninchen
Sera steril gewonnen und karbolfrei im Eisschrank aufbewahrt. Diese
Sera dienten zu den weiteren Versuchen. Die Ergebnisse des ersten
Versuches, Snicida-Serum mit eigenem, homologem Antigen, bzw. mit
Antigenen, mit welchen die iibrigen 8 Kaninchen pr&pariert wurden,
zeigten, dafi das Serum mit homologem Antigen eine Komplementbindung
gibt, aber auf ganz eigenttimliche Weise, indem es zu einer kompletten
Bindung erst in der VerdQnnung 1:40 kam, wShrend die ROhrchen mit
mehr Serum nur inkomplette, bzw. keine Bindung aufwiesen. In &hn-
licher Weise bestand eine schwache Bindung auch im analogen ROhr¬
chen der Antigenreihen B. cholerae gallinarum (Wurzburg) und
B. gallinarum, Klein. Interessantes zeigte auch die Serumkontrolle
ohne Antigen und ohne Immunb&molysin, die nicht, wie erwartet wurde,
nngeldst blieb, sondern H&molyse zeigte. Das Ergebnis dieser Kontrolle
beweist, dafi das Serum H&molysine enth&lt, und es wurde angenommen,
dafi die Erscheinung der inkompletten bzw. fehlenden Bindung in den
VerdQnnungen 1:10 und 1:20 einer h&molysierenden Komponente des
Serums zuzuschreiben ist, und dafi man mit einem Serum mit solchem
h&molytischen System, in welchem nur der Blutambozeptor ausgewertet
wird, nicht arbeiten kann.

Wie sich die anderen Sera im Komplementbindnngsversuche unter
solchen Bedingungen verhielten, zeigte uns ein Versuch, in welchem
jedes Serum mit homologem Antigen zusammengebracht wurde.

3 Sera: B. einer Kanarienvogelseuche, Pfaff; B. cavisepticum
und Pastenrella pneumoniae equi mit ihren Antigenen zusam¬
mengebracht, riefen fiberhaupt keine (sichtbare) Komplementbindung
hervor, w&hrend sich bei anderen Seren dieselbe h&molysierende Wir-
kung manifestiert hat wie beim Suicida-Serum. Die betreffenden
Serum-Komplement-Kontrollen wurden auch ohne hfimolysierendes Im-
munserum gelOst.

Um zu erfahren, wie grofi ungeffihr diese hfimolytische Komponente
der Sera sei, wurde ein Versuch angestellt, jedes Serum auf seine h&mo¬
lysierende Wirkung in fallenden Men gen mit Komplement und Blut
zusammenzubringen. In den Versuch wurde zugleich ein Normalserum
aufgenommen. Alle Sera riefen in der VerdQnnung von 1:4 und 2 Sera
(WQrzburger GeflQgelcbolera und Schweineseuche) sogar in der Ver¬
dQnnung von 1:16 eine vollst&ndige H&molyse hervor, bei 2 davon
(Cavisepticum und WQrzburger GeflGgelcholera) war noch eine Ver¬
dQnnung von 1:128 von Einflufi. Das Normalserum zeigte keine ab-
weichende Stellung, was beweist, dafi die Annahme, die H&molysine seien
heterogenetiscb, etwa durch Extraktinjektionen entstanden, nicht berech-
tigt ist. Dieser Versuch beweist, dafi die im Serum enthaltenen H&mo¬
lysine das verwendete h&molytische System zu beeinflussen imstande
sind, und dafi sie die eigentfimlichen Resultate im Hauptversuche mit
Schweineseucheserum und anderen verursacht haben.

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Centralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Durch eine Anzahl von Versuchen suchte ich dieser hamolysierenden
Wirkung der Sera auszuweichen, aber keiner ftthrte zum gewQnschten
Ziele, solange ich mit 2-facher (oder kleinerer) komplett ISsender Menge
des Blutambozeptors arbeitete. Die Resultate worden gOnstiger, als ich
mich entschloB, ein hamolysierendes System zu verwenden, in welchem
der Ambozeptor in starkem Ueberschusse vorhanden war, so daB die
Hamolysine der Kaninchensera Qberhaupt nicht in Betracht kommen
kdnnen. Das Bestreben war also, den Ambozeptor im Ueberschusse
nnd vom Aktivserum (Komplement) die kleinste zur Hamolyse not-
wendige Menge zu nehmen. Die Grundlage fiir die nach diesem Prin-
zipe fortgesetzten Untersuchungen boten mir die Arbeiten Kaups 1 ),
der die Beziehungen zwischen Komplement und Ambozeptor einer ein-
gehenden Kritik experimentell and mathematisch • theoretisch unter-
zogen hat.

(Vom Komplementbedarf bei gleicher Erythrozv ton menge und steigenden Ambo-
zeptormengen heifit ea bei Kaup, daB fiir die vollstandige Losung derselben Erythro¬
zy ten menge [0,5 ccm einer 5-proz. Blutkorperchenaufschwemmung] der Komplement¬
bedarf bei Verwendung der einrachen Ambozeptormenge wesentlich noher ist ale bei Ver-
wendung der 2- und 3-fachen Menge. GroBere Ambozeptoriiberschiisse von der 4-fachen
bis zur 20-fachen Menge vermindern den Komplementbedarf nicht merklich. Die Ge-
schwindigkeit der Lyse wachst mit steigenden Ambozeptoriiberschussen, bedeutendere
Unterschiede treten jedoch nur bis zur 4- bis 6-fachen Menge hervor.)

Es wurde also ein hochwertiger Ambozeptor (mit einem Titer yon
1:5000 bei 10 Proz. Aktivserum) verwendet. Zur Komplementaus-
wertung und zu alien anderen Versuchen wurde dieser Ambozeptor in
der Verdfinnnng 1:1000 verwendet.

Die Komplementauswertung gelang in Anwesenheit aller Antigene
nach Vz Std. mit 3,0 Proz. Diese Komplementmenge wurde zu einem
Versuche, in welchem alle 9 Sera auf die komplementbindenden Anti-
kSrper geprfift wurden, verwendet. Der Versuch zeigte, daB bei 7 Sera
die Komplementbindung eingetreten ist, wahrend die Reiben des B. einer
Kanarienvogelseuche Pfaff und der Pasteurella pneumoniae
equi keine Komplementbindung zeigen. Die Bindung ist gleich im
1. Rdhrchen (Verdfinnung 1:10) ganz ausgepragt, die hamolysierende
Wirkung der Sera ist nicht zum Ausdruck gekommen, weil die ganze
prazis abgemessene kleinste Komplementmenge beim Zusammentreten
des AntikOrpers mit dem Antigen verbraucht wurde 2 ).

Die Sera, welche keine Komplementbindung gegeben haben, wurden
nicht weiter verwendet, wahrend jedes von den anderen 7, positive Re-
aktion zeigenden Sera far die Komplementbindungsversuche auch mit
anderen Antigenen verwendet wurde.

Die serologischen Ergebnisse waren folgende: Bubalisepticum-
Serum mit homologem (Bubalisepticum-) Extrakt gab Komplement¬
bindung, wahrend die Reaktion mit 6 heterologen Extrakten negativ
ausfiel. Auch die 6 anderen untersuchten Sera, und zwar Cavisepti-
cum, Wttrzburger GeflQgelcholera und Suisepticum, GeflQgelcholera
Stamm Ficker, Kanarienvogelseuche Binder und B. gallinarum
Klein gaben eine Komplementbindung nur mit eigenen, homologen

1) Kaup, J., Kritik der Methodik der Wassermannschen Reaktion und neue
Vorschlage fiir die quantitative Messung der Komplementbindung. Munchen u. Berlin

2 ) Mit Rucksicht auf die derzeitigen Einscbrankungen wurde auf die tabellarische
Wiedergabe der Vereuchsanordnung verzichtet.

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Plasaj a. Pribram, Beitrage zur Systematik der Mikroorganismen. 9

Extrakten, wahrend sie sich zu deu heterologen Extrakten negativ ver-
hielten.

Die serologischen Ergebnisse mit Komplementbindungsversuchen
bestfitigen die Versuchsergebnisse Matsudas, der in den Geflflgel-
cholera- und Schweineseuchenseren die komplementbindenden AntikQrper
nacbwies. Abweichend von Matsudas Resultaten sind die meinen
insofern, als ich eine Gruppenreaktion, obzwar die Sera von mehrmals
injizierten Kaninchen stammten, nicht bekommen konnte.

Wegen des Ausbleibens einer Gruppenreaktion konnte ich nicht
zeigen, ob die zur Untersuchung ausgewahlten Stfimme serologisch eine
Verwandtschaft haben, speziell aber konnte ich serologische Unter-
suchungen mit der Komplementbindungsmethode im Hinblick auf die
Begeifielung nicht aufnehmen, denn keines der Sera hatte aufier stamm-
spezifisch mit eigenem Extrakt irgendwie mit anderen Extrakten reagiert.
Es ist also auf diesem Wege nicht gelungen, zu zeigen, ob
zwischen den „GeiBellosen“ n&here Beziehungen bestehen,
als zwischen ihnen und den Geifieltragenden. Aus dem
serologischen Verhalten (Komplementbindung) konnen wir vorderhand
nnr schliefien, dafi z. B. die untersuchten Geflttgelcholera-
st&mme auch serologisch nicht identisch sind.

B. Biochemische Untersuchungen.
Von Dr. S. Plasaj und Prof. Dr. E. Pribram.

Die biochemische Untersuchung der B. multoseptica erstreckte
sich auf Gasbildung aus Zucker, Indolbildung und Milchgerinnung. Die
Angaben in der Literatur gehen derart durcheinander, dafi es von Vorteil
sein wird, zuerst die Literatur angaben zu verzeichnen. urn sie dann mit
unseren Resultaten zu vergleichen. Fflr unsere systematische Unter¬
suchung kam es vor allem darauf an, zu sehen, inwieweit die einzelnen
biochemischen Eigenschaften untereinander und inwieweit sie mit dem
Befunde von Geifieln parallel gin gen.

1 ) Gasbildung aus Kohlehydraten. Die Baurebildung aus Traubeuzucker und
Milchzucker wird in der Regel als sehr stark angegeben, Gasbildung fand Karlin ski 1 )
in einigen Kulturen. Bei unseren systematischen Untersuchungen (vgl. Tab.), fallt es
auf, daB von den unbegeiBelten Kulturen nur eine einzige, B. suisepticum Sanfelice,
aus Zucker Gas zu bilden imstande war, wahrend von aen 1-geiBeligen 5 Gas bildeten,
3 kein Gas, von den mehr als 1-geiBeligen Stammen bildeten 5 Gas, 1 nicht. Hier
scheint also der gleichzeitige Mangel an GeiBeln und Fermentbildung einigermaBen
parallel zu gehen. DaB die hier untersuchten IStamme von Schweineseuchen alle 3 Gas-
bildner waren, ist wohl ein Zufall, in der Literatur finden wir Angaben iiber Schweine-
seuchekulturen, welche kein Gas aus Zucker zu bilden imstande waren (vg. beispiels-
weise Lehmann, 1. c. 8. 278).

2) Indolbildung. In der Regel finden wir in der Literatur die Angabe, daB die
hierher gehorigen Bakterien kraftige Indolbildner seien, Karlinski 1 ) fand keine In¬
dolbildung, Ligniferes 8 ) fand sie bei der Hiihnercholera, nicht aber bei Wild- und
Rinderseuchen. Wir fanden unter den unbegeiBelten Btammen 2 Indolbildner (B. pneu¬
moniae equi Poels, das aus spater zu besprechenden Griinden nicht recht in diese
Gruppe hineinpafit, und das auch gasbildende B. suisepticum Sanfelice). Von den
1 -geiBeligen Stammen bilden nur 2 von 8 Kulturen kein Indol, bei beiden fehlt auch
die Gasbildung aus Traubenzucker (B. e. Kanarienvogelseuche Pfaff und B. pneu¬
moniae caviarum Strada et Trains), von den mehrgeiBeligen Kulturen bildeten
3 kein Indol, die eine, B. cholerae gallinarum, auch kein Gas, die anderen wiirden

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Centraibl. f. Baku etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

eher mit Ligniferes Angabe ubereinstimmen. Wir finden also hier im aJIgemeinen
unter den Angeh5rigen der Gruppe die nicht Indoi bildenden Stamme auffallend haufig
unter den unbegeiSelten; alle nicht Indoi bildenden St&mme, mit Ausnahme zweier,
B. cavisepticum und B. einer Rinderseuche, bilden auch kein Gas aus Trauben¬
zucker, immerhin ein weitgehender Parallel is mu s, der darauf hindeutet, dafi in dieser
Gruppe bei begeiflelten Stammen der fermentative Eiweiflabbau bis zum Indoi fast
ebenso leicht erfolgt als der fermentative Kohlehydratabbau bis zur Kohlensaure. Von
der Provenienz der Kulturen ist die Indolbildung augenscheinlich unabhangig (nicht
Indoi bildender Huhnercholerastamm) im Gegeosatz zu Ligniferes Angabe.

3) Milchgerinnung: Die Angaben in der Literatur sind verschieden; Ligni&res 1 )
negiert die Mflchkoagulation, Wunschheim 2 3 ) findet sie ebenso wie Gaftky 8 ) und
Lehmann 8 ). Bei unseren unbegeifielten Stammen war wiederum nur bei einem ein-
zigen Milchgerinnung vorhanden, und zwar beim B. suisepticum Sanfelice, das, wie
erwahnt, auch Gas aus Traubenzucker und Indoi bildete, also in seinen fermentativen
und biochemischeo Eigenschaften einen anderen Charakter zeigt, als nach Analogic der
ubrigen atrichen Stamme zu erwarten ware. Unter den 1-geifieligen Stammen finden
wir 4mal keine Milchgerinnung, 2 dieser Stamme bilden auch kein Gas und kein Indoi
(B. der Kanarienvogelseuche Pfaff und B. pneumoniae caviarum), verhalten rich
also darin so wie die atrichen, von den 2 anderen bildet der eine auch kein Gas. Von
den mehrgeifleligen bringt einer die Milch nicht zur Gerinnung, er bildet auch kein
Indoi (B. cavUept. Busson). Wir sehen also auch hier eine gewisse Uebereinstim-
mung mit anderen fermentativen Eigenschaften. Hier sei erwahnt, dafi die Angabe,
das B. suisepticum koaguliere die Milch nicht, fur keinen unserer Stamme, die alle
Milch zur Gerinnung bringen, zutrifft. Uebrigens erwahnt Lehmann (1. c. S. 278)
2 frisch geziichtete Stamme von Schweineseuche, welche beide Milch koagulierten, und
einen von Frank el eingesendeten, der ebenfalls Milch koagulierte, dagegen 1 Stamm
der Wiirzburger Sammlung und einen anderen von Loeffler (Berlin), die Milch
alkalisch machten. Auch 1 Stamm von Honl (Prag) verhielt sich ebenso.

Lehmann gibt auf S. 360 seiner Bakteriologischen Diagnostik.
5. Aufl. 1912. eine Nebeneinanderstellung der Eigenschaften von B. cho-
lerae snum and B. saicida: der erstere soil kein Gas bilden, der
letztere wohl, weder der eine noch der andere soli Milch zur Gerinnnng
bringen, nur das B. chol. suum soil Traubenzucker bis zur Gasbil-
dung vergSren, das B. chol. suum ist peritrich begeifielt, das B. sui-
cida nicht beweglich. Wenn wir diese Nebeneinanderstellung mit
unserer Literaturebersicht und unseren Untersuchungen vergleichen,
konnen wir keine rechte Uebereinstimmung finden, nicht einmal mit den
Angaben Lehmanns selbst fiber die von ihm untersuchten Kulturen.
Wir kfinnen eine so scharfe Einteilung nicht gelten lassen und dfirfen
unsere Diagnose nicht auf eine einzelne mehr oder weniger charakte-
ristische Eigenschaft stfitzen, sondern mfissen vielmehr unser System
etwas elastischer gestalten, unsere Nomenklatur etwas freier wfihlen.
Dies soil das nfichste Kapitel behandeln.

III. Stellang der Bacteria mnltoseptica lm System der Bak-
terien and ihre Einteilung; Stellung der Bacteria bipolarla

im System und Nomenklatur.

Von Prof. Dr. E. Pribram und Dr. S. Plasaj.

Die Resultate der voranstehenden Untersuchungen wurden in neben-
stehender tabellarischer Uebersicht zusammengefafit, aus der wir auf
den ersten Blick erkennen konnen, daB die untersuchten Kulturen eine
kontinuierliche Reihe bilden, in welcher von geiBellosen, unbeweglichen,

1) 1. c.

2) Zit. nach Lehmann, Atlafi u. GruDdriB d. Bakteriol. Milnchen. 1912. S. 282.

3) Gaffky, Mitt. d. Kais. Ges.-Amts. I. 1881. 50.

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Piasaj u. Pribram, Beitrage zur Systematik der Mikroorganismen.

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keine fermentativen Eigenschaften aufweisenden St&mmen bis za den
mehrgeifieligen mit Gasbildung aus Zucker, Indolbildung aus Eiweifi
und Milchkoagulation aufweisenden alle mdglicben Ueberg&nge vertreten
sind. Bei einer grOBeren Zahl untersuchter Kulturen wtirden sich
zweifellos noch andere Typen finden, durch welche sich die Reihe noch
vervollstandigen lieBe. Es fragt sich nun, inwieweit wir berechtigt sind,
diese untersuchten Kulturen zu einer Gruppe zusammenzufassen und
in welcher Weise wir den den extremen Vertretern zukommenden Ver-
schiedenheiten dabei Rechnung tragen mflssen. Dabei dflrfen wir nicht
fibersehen, daB auch die untereinander gleiche Eigenschaften aufweisen¬
den Kulturen (etwa die ersten 4 der Reihe) durchaus nicht miteinander
identisch sind, etwa in der Weise, wie dies bei aus verschiedenen Ty-
phusepidemien geziicbteten Erregern der Fall ist, daB sie vielmehr, wie
aus den Untersnchungen mit der Komplementbindungsmethode hervor-
geht, untereinander keine Artspezifitat erkennen lassen. Da andere
Antoren mit Hilfe der genannten Methode bei den von ihnen unter¬
suchten Kulturen eine solche feststellen konnten, mflssen wir diese
Differenz darauf zurfickfflhren, daB die von jenen gezflchteten Stamme,
die aus einer Epidemic stammten, Oder doch wenigstens aus zu ver¬
schiedenen zeitlich und r&umlich nicht sehr voneinander entfernten Epi-
demien, untereinander identisch waren im Gegensatz zu unseren Kul¬
turen, die zu verschiedenen Zeiten, es dflrfte sich urn Zeitdifferenzen
von 10—20 Jahren, vielleicht noch mehr, handeln, und in den verschie-
densten Gegenden der Welt (vgl. die Tabelle) gezflchtet worden sind.
Da es aber zweckmSBig erscheint, durch einen gemeinsamen Namen die
ganze Gruppe zusammenzufassen, haben wir in Anlehnung an die bis-
herige Namengebnng (Bacterium multocida) den Namen Bacteria
multoseptica gew&hlt. Zu dieser Gruppe gehdren demnach kleine,
ovoide, bipolar f&rbbare Kurzstabchen, welche als Erreger hBmorrhagi-
seber Septikamien bei den verschiedensten Tierarten auftreten, unbe-
geiBelt (atrich) Oder 1-geiBelig (monotrich) Oder sparlich begeifielt (1—3,
selten bis 5 GeiBeln) (oligotrich) sind, wobei die Zahl der begeiBelten
Individuen einer Kultur meist sehr gering ist, die GeiBeln, wenn vor-
handen, extrapolar angesetzt sind. Wir kdnnen 3 Typen der B. multo¬
septica unterscheiden:

1) Typus a. Bisher keine GeiBeln nachgewiesen, keine Gasbildung
aus Tranbenzucker, keine Milchgerinnung, keine Indolbildung (4 der
untersuchten Stamme, die vielleicht zutallig, alle aus Vogelseuchen
stammen: Hflhner-, Kanarienvogel-, Fasan-, Truthahnseuchen).

2) Typus /?. Einzelne Individuen einer Kultur (Reinkultur) tragen
1 GeiBel (peripolar), andere 1—3 GeiBeln. Keine Milchgerinnung. Diese
Gruppe zeigt alle Uebergange vom Typus a zum nachstfolgenden. Durch
den Mangel an Milchgerinnung und die immerhin vorhandene Fahigkeit,
GeiBeln zu bilden, nahert sich dieser Typus der Gruppe des B. para¬
typhi B mit seinen nahe verwandten Vertretern B. cholerae suum,
B. typhi murium, Rattenbakterium Danysz. Eine der in die Tabelle
aufgenommenen Kulturen, B. cavisepticum, das der Autor, Bus-
son 1 ), mit Recht ebensogut in die Gruppe des B. paratyphi B als
in die Gruppe der hier beschriebenen Bakterien einzureihen geneigt ist,
ist ein typisches Uebergangsglied, das in der GeiBelbildung (1—3) den
anderen zweifellos hberlegen, durch die Fahigkeit der Gasbildung ans

1) Erscheint demnachst im Centralbl. f. Bakt.

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Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Traubenzacker, den Mangel an Indolbildnug und Milchgerinnung kaum
mehr von einem Vertreter der Paratypbusgruppe zu unterscheiden ist,
und doch durch seine Herkunft aus einer Meerschweinchenseuche, seiner
bipolaren F&rbbarkeit — auf diesen Punkt wollen wir spater noch zu-
rflckkommen — sowie seine verhaitnismafiig sparliche BegeiBelung den
B. multoseptica auch recht nahe steht. Wir finden in dieser Pceihe
eine Kultur, B. einer Kanarienvogelseuche, welche sich einzig und allein
durch das Vorbandensein einer GeiBel — nicht einmal durch Beweglich-
keit — vom Typus o unterscheidet, eine andere, die eiugeifielig ist und
Indol bildet, eine 3. die eingeiBelig, aber ganz unbeweglich ist und so-
wohl Gas aus Zucker als Indol bildet.

3) Typus t- Einzelne Individuen einer Kultur tragen 1, andere
Kuituren 1—3, einige sogar bis 5 GeiBeln. Milchgerinnung. Durch
diese Eigenschaften nahern sich die Vertreter dieses Typus der Gruppe
des B. coli. Auch in dieser wurden wiederholt tierpathogene Stamme
beschrieben, so das B. mustelicida Heim 1 ), das B. der Marseiller
Schweineseuche von Jobert und Richet 2 ) ein Bakterium einer spon-
tanen Kaninchenseptikamie von Ebertb und Mandry 3 ). Wir kSnnten
die Kuituren mit Milchgerinnung, Gasbildung aus Traubenzucker, Indol-
bildung dieses Typus ebensogut in die Coligruppe einreihen, wenn nicht
der Mangel an Beweglichkeit, die auBerordentlich sparliche GeiBelbildung,
die bipolare Farbbarkeit, vor allem aber die Herkunft aus Tierseuchen
doch eine Beziehung zu der in Rede stehenden Gruppe herstellen wfirde.
Wir fanden sogar bei einer der hierher gehorigen Kuituren, B. sui-
septicum Sanfelice trotz wiederholter Untersuchung keine GeiBeln —
sollen wir es deshalb von den nahestehenden eingeifieligen B. equi-
septicum Auj., B. chol. gall. Ficker, B. suicida Lehmann, B. sui-
septicum Auj. trennen? Es ware ebensowenig berechtigt, jedem
dieser untereinander recht nahe stehenden Typen einen eigenen Namen
geben zu wollen (ein Verfahren, das Castellani 4 5 ) in der Coli-Gruppe
durchgefiihrt hat), als wie dies bisher von den meisten Autoren gescbah,
achtlos an den zweifellos doch recht bedeutenden Unterschieden der
extremen Vertreter der Gruppe vorbeizugehen. Die Grenzen sind nicht
scharf, darauf muB die Nomenklatur Rflcksicht nehmen. Wir kSnnten
etwa, dem Rechnung tragend, den Typus /?: Typus paratyphi-simi-
lis, den Typus y: Typus coli-similis nennen. Die Analogie geht
noch weiter. Epstein 6 ) hat namlich in einer Arbeit aniafilich des
Auftretons von bipolar farbbaren Stabchen bei Grippe (Spengler) 6 )
zeigen kOnnen, daB die (von Epstein gefundenen) Stabchen aus ver-
schiedenen Zuckerarten Gas bildeten und daB sie Milch koagulierten.
Diese Polstabchen wtirden also unserem Typus y (coli-similis) ent-
sprechen. Epstein fand nun auch bei geeigneter Vorbehandlung Pol-
farbung bei B. coli, B. typhi, B. paratyphi B, B. dysenteriae,
also bei einer groBen Zahl gramnegativer Bakterien. Dadurch nahert
sich die Gruppe der B. multoseptica auch in diesem Punkte der

1) Frosch, in Zeitschr. f. Hyg. Bd. 9. S. 74.

2) Jobert und Richet, Centralbl. f. Bakt. Abt I. Bd. 4. 1888. S. 270 Ref.;
Compt. reDd. de l’Acad. d. sc. de Paris. T. 106. 1888. p. 1096.

3) Eberth und Mandry, Fortschr. d. Med. 1890. Nr. 14.

4) Castellani et Chalmers, Ann. de l’Inst. Pasteur. T. 35. 1920. p. 600.

5) Epstein, Ueber den Spenglerschen Colistabchenbefund bei Grippe. (Wien,
med. Wocnenschr. 1919. Nr. 37.)

6) Spengler, Mitt. a. d. Inst. Dr. C. Spenglers in Davos. Bd. 1. 1919. H. 1.

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Plasaj u. Pribram, Beitrage zur Systematik der Mikroorganismen. 13

Grappe des B. coli, ebenso wie der des B. paratyphi B mehr, als
dies bisher der Fall gewesen war.

Wir haben bisher die den Gruppen des B. paratyphi B and
B. coli nahestehenden monotrichen and oligotrichen Vertreter der Grappe
B. multoseptica besprochen and ihre Stellung im System gekenn-
zeichnet, wir mdssen nun auch die Stellung der ganzen Gruppe, ins-
besondere mit Beriicksichtigung der atrichen Vertreter, des Typus a
charakterisieren, Ein atricher, bipolar fSrbbarer Erreger einer hamor-
rhagischen Septikamie, ohne Gasbildung aus Zucker, ohne Indolbildung
and ohne Milchgerinnang ist das menschenpathogene B. pestis. Es
steht also dem Typus unserer Gruppe auBerordentlich nahe, unterscheidet
sich von ihm (abgesehen von der Pathogenitat fflr Menschen) durch sein
typisches Wachstum bei 30°, die typische Art der Kolonienbildang auf
festen NahrbSden. Dem B. pestis noch naherstehend als die B. multo¬
septica (Typus o) ist das B. pseudotuberculosis rodentium,
nach Albrecht 1 ) besser B. pseudopestis genannt. Es ist morpho-
logisch und kulturell vom B. pestis oft nur schwer zu unterscheiden
and wie dieses * auch pathogen fflr Ratten und Mause. Es steht in
mancher Beziehung dem B. multosepticum noch naher, wie Plasaj 2 )
gezeigt hat, vor allem durch die bei manchen Stammen vorkommende
monotriche GeiBelbildung, durch die zuweilen vorkommende Indolbildung
usf. Wir verweisen in dieser Hinsicht auf Plasajs gleichzeitig er-
scheinende Arbeit. Dieses Bakterium verursacht, wie Albrecht ge¬
zeigt hat, bei Versuchstieren (Meerschweinchen, Mausen, Kaninchen,
Ratten und Katzen) eine typische, pathologisch histologisch der Pest,
nicht der Tuberkulose, vergleichbare Septikamie. Wegen der ahnlichen
Eigenschaften des B. pestis, der B. pseudopestis und der B. multo¬
septica fassen wir diese Gruppen zweckmaBig zu einer hbheren Ord-
nung zusammen, die wir mit RQcksicht auf die eigenartigen Krankheiten,
als deren Erreger sie auftreten, Bacteria haemorrhagica nennen
wollen (oder mit RQcksicht auf die bipolare Farbbarkeit, Bacteria
bipolaria), Bakterien der hamorrhagischen Septikamie im weiteren
Sinne.

Wir haben eingangs 2 Kulturen Erwahnung getan, die wir in die
Tabelle der Bacteria multoseptica nicht aufgenommen haben, weil
sie wohl in andere Gruppen gehdren. Die eine dieser Kulturen, ein
als B. bubalisepticum bezeichnetes, polytrich begeiBeltes Bakterium
ist zweifellos wegen der dichten BegeiBelung in eine andere Gruppe zu
verweisen; die andere, das B. pneumoniae equi, vom Autor Pa¬
steur el la genannt, ein geifielloses Bakterium, das wohl Indol, aber
kein Gas bildet, und Milch nicht zur Gerinnung bringt, mufi trotz dieser
Uebereinstimmung mit den Bacteria multoseptica, mit denen es
auch die bipolare Farbbarkeit und die Fahigkeit, im TierkQrper hQmor-
rhagisch-septische Erscheinungen hervorzurufen, gemeinsam hat, aus
einem anderen Grunde aus dieser Gruppe ausgeschieden werden. Es
wachst namlich nur kflmmerlich auf eiweiBfreien Nahrbdden, auf eiweiB-
haltigen Qppiger, aber mit zartem Rasen, Qhnlich wie Streptokokken.
Es gehflrt in eine Gruppe mit der von Fiocca 3 ) als Strepto¬
coccus einer Katzenseuche beschriebenen Kultur, die ebenfalls weder

1) Albrecht, Wien. klin. Wochenechr. 1910. S. 27.

2) Plasaj, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 86. 1921. 8. 468.

3) Fiocca, Centralbl. f. Bakt. Bd. 11. 1892. 8. 406.

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14 CentralbL f. B&kt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

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UeberaichtBtabelle der Bacteria multoseptica.

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Centralblatt fur Bakteriologie Abt. I. Chig. Bd. 87.

S. Plasaj u. E. Pribram , Hiimorrhagische Septikiimit.

Fig. 3.

Fig. 4. Fig. 5.

- Or i g i na l from ---

Verlag von Gustav Fischer in .leijittJl VERSITY OF CALIFORNIA

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Plaaaj u. Pribram, Beitrage ear Systematik dear Mikroorganiemen. 15

Milch koaguliert noch Zucker verg&rt, bipolar f&rbbar ist, bei Injektion
in den Tierkdrper die Erscheinungen der h&morrhagischen Septikflmie
hervorrnft Ungezwungen reihen sich an diese 2 Vertreter tierpatho-
gener Senchenerreger die in neuester Zeit bei Grippepneumonien von
Cori und Trawinski 1 ) (1918), von Coronini und Pries el 2 ) (1918)
nnd von Hundeshagen 3 ) 1919) gezfichteten influenzaShnlichen, nicht
hamoglobinophilen, aber albuminopbilen Kurzstabchen mit Streptokokken-
charakter. Sie sind, wie ans der Literatur hervorgeht, Erreger hSmor-
rhagischer Pneumonien (Tierversuch), zeigen keine Gasbildung in Trauben-
zucker. Wir schlagen fflr diese ganze Gruppe den Namen Bacteria
albuminophila vor.

Zusammenfassung.

Wir nnterscbeiden:

Tr Eo

Ordnung: Bacteria haemorrhagica (s. bipolaria).

Gruppen: B. pestie,

B. pseudopestis (pseudotub. rodentium),

B. parapestis Fornet,

B. multoseptica: Typus a (keine Geifieln, keine Gasbildung aus Trauben-
zucker, keine Indolbildung, keine Milchkoagulation).

Typus p (1 Geifiel oder auch 1—3 Geifieln, keine Milchgerinnung, bei einigen
Stammen kommen Gasbildung auB Zucker, bei anderen Indolbildung vor.
pus y (1 Geifiel, unbegeifielt oder auch 1—3 oder 1—5 Geifieln, Milch-
coagulation, meist auch Gasbildung aus Traubenzucker und Indolbildung).

Typus p leitet hiniiber zu den aer polvtrich begeifielten Gruppe B. para¬
typhi B angehorigen Kulturen: B. cholerae suum, B. typni murium,
Battenb. Danyez , zu welchen auch das in der Tabelle verzeicnnete B. cavi-
septicum Busson gerechnet werden kann. — Typus y leitet hiniiber zu den
der peritrich begeifielten Gruppe B. coli angehdrenden Kulturen: B. muste-
licida Heim, B. der Marseiller 8chweineseuche Jobert et Bietsch, und
*B. der 6pontanen Kaninchenseptikamie Eberth und Mandry.

Ordnung: B. albuminophila.

Gruppen: B. felis (Strept. der Katzenseuche Fiocca), B. pneumoniae equi
(Fasteurella pn. equi Poels).

Bakterien aus Grippepneumonien („ gramnegative Streptokokken* Cori und
Trawinski, Coronini und Priesel, Hundeshagen).

Ordnung: B. haemoglobinophila.

Gruppen: B. influenzae Pfeiffer,

B. tuBsis convulsivae Bordet,

B. aegyptiacum Lehmann u. Neumann (Koch-Weeks).

Die nebenstehende Uebersichtstabelle erlfiutert den Zusammenhang
der einzelnen Gruppen der Bacteria haemorrhagica.

Erklarung der mikrophotographiBchen Tafeln:

Fig. 1. B. equisepticum Aujeszky, eine peripolare Geifiel.

Fig. 2. B. cholerae gallinarum Ficker, eine Geifiel.

Fig. 3. B. Buicida Wurzburg, eine Geifiel, an einer Stelle vielleicht zwei Geifieln.
Fig. 4. B. 8uisepticum Aujeszky, eine Geifiel.

Fig. 5. B. (Coccobacterium) avicida Piorkowaki, ein Individuum mit zwei
Geifieln.

(Zeifi-Apochromat, Oelimmersion NA. 1,30, Brennweite 2 mm; Vergr. ca. 1000-fach.)

1) Cori und Trawinski, Wien. klin. Wochenschr. 1918. Nr. 47.

2) Coronini und Priesel, Wien. med. Wochenschr. 1919. Nr. 35.

3) Hundeshagen, Med. Klinik. 1919. Nr. 41.

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 1.

Naehdruck verboten.

Ueber die Analyse der Agglutination bei Typhuskranken.

[Aus dem Hygienischen Institut der deutschen Universit&t in Prag.]

Von Prof. Dr. Hans Rotky.

Die serologiscben Untersuchungen von Krankenseren bewegten sich
bisher fast ausschliefilich in der Richtung, dafi nur auf die Titerhdhe
Riicksicht genommen wurde, und zwar in dem Sinne, dafi man fflr jeden
Bakterienstamm, der als Infektionserreger in Betracht kam, die Normal-
agglutinine des Menschenserums feststellte und jenen Wert, der die
Titerwerte der Normalagglutinine betr&chtlich Qberstieg, als spezifisch
angesehen hat. So ist uns bekannt, dafi zur Zeit der Entdeckung der
Gruberschen Reaktion fflr Typhus bereits den Werten von 1:20 eine
spezifische Bedeutnng beigemessen wurde, bis man durch weitere Unter¬
suchungen schliefilicb zu immer hflheren Werten gelangte (heute 1:75).

Erst das Studium der Flecktyphusreaktion brachte einen Wandel, da-
hingehend, dafi sich die Notwendigkeit ergab, auch dem Aussehen der Ag¬
glutinine eine Bedeutung beizumessen. Es zeigte sich hier n&mlich,
dafi Kaninchenimmunsera X 19 sich ganz anders verhalten wie mensch-
liche Fleckfiebersera. Bei ersteren erfolgte die Agglutination in lockeren,
groben Flocken, die, rasch an dem Boden der Eprouvette abgesetzt,
leicht zerschflttelt werden konnten. Bei den Fleckfieberseren hingegen
trat dieselbe in feinsten FlOckchen, die sich langsam zu Boden setzten,
in Erscheinung.

Es gelang nun E. Weil und A. Felix, durch ihre Versuche diesen
beiden verschiedenartigen Agglutinationsformen 2 verschiedenartige Ag¬
glutinine im Serum sowie 2 verschiedenartige Agglutinogene bei den
X-St&mmen zugrunde zu legen (0- und H-Agglutinine). In weiteren
Untersuchungen konnten sie fernerhin nachweisen, das genau die n&m-
lichen Erscheinungen in der Typhus- und Paratyphusgruppe zutage treten.

Auch dort fanden sich in den Bakterien 2 verschiedenartige Re-
zeptoren und korrespondierend in den Immunseren 2 verschiedenartige
Agglutinine. Nach den charakteristischen Eigenschaften der beiden Re-
zeptoren, die sich darin fiufiern, dafi die einen Temperaturen von 100°
nicht widerstehen, die anderen hingegen kochbestflndig sind, warden die
ersteren als labile, die letzteren als stabile Rezeptoren bezeichnet. Die
den stabilen Rezeptoren entsprechenden Agglutinine, welche die Bak¬
terien in kleinen Flocken ausf&llen, wurden als kleinflockende, die den
labilen Rezeptoren entsprechenden als grofiflockende Agglutinine be¬
zeichnet.

Die genaue Analyse dieses Doppeltypus der Rezeptoren und Ag¬
glutinine bei der Typhus-Paratyphusgruppe wurde von E. Weil und
A. Felix 1 ) an kiinstlich erzielten Immunseren vorgenommen. Dort
findet sich auch die Frage aufgeworfen, ob analoge Verhfiltnisse, wie
hier, auch bei den Immunseren, die bei natflrlicher lnfektion entstehen,
vorhanden sind. Es wfirde insbesondere die in dieser Hinsicht vor-.
genommene serologische Untersuchung der Paratyphusgruppe zu einem

1) Weil, E., u. Felix, A., Zeitsehr. f. Imraunitatef. Bd. 29. 1920. H. 1/2.

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Rotky, Ueber die Analyse der Agglutination bei Typhuskranken.

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praktisch verwertbaren Ergebnis ffihren, da es, falls die bei ktinstlich
erzielten Immunseren feststehenden Tatsachen auch bei der nattirlichen
Infektion Gflltigkeit haben, gelingen mflBte, die Hauptagglutinine, die,
wie gesagt, sich grobflockig charakterisieren, von den kleinflockigen Mit-
agglutininen zn unterscheiden.

Leider standen uns Paratyphen in genligender Zahl nicht zur Ver-
fflgung und wir haben deshalb zun&chst an einer groBeren Serie von
Typhusfallen diese Frage einer genaueren Untersuchung unterzogen.

Die Einzelheiten der Versuche gestalteten. sich in folgender Weise:
H. Sachs hat gezeigt, daB dnrch Erhitzen auf 80° die H-Rezeptoren
der X-Stfimrae zerstbrt werden, wShrend die O-Rezeptoren erhalten
bleiben. Weil ond Felix haben durch Erhitzen auf 100° eine voll-
st&ndige Zerstbrung der H-Rezeptoren bei vollkommenem Intaktbleiben
der O-Rezeptoren erzielen kbnnen und, wie eingangs erwShnt, konnten
analoge Verb&ltnisse auch fQr die Typhus-Paratyphusgruppe konstatiert
werden.

Es war uns nun die Moglichkeit geboten, durch Erhitzen der Typhus-
kulturen auf 100° die Wirkung der labilen Rezeptoren auszuschalten,
so daB auf diesem Wege die reine Wirkung der kleinflockenden Agglu-
tinine des Typhusserums hatte nachgewiesen werden kbnnen. Da jedoch
bei den Typhusbazillen die Erhitzung den Eintritt der Agglutination
verzbgert, so wurde ein anderer Weg eingeschlagen. Bien und Sonn-
tag war es gelungen, das erste brauchbare Fleckfieberdiagnostikum her-
zustellen, und zwar auf dem Wege, daB die X-St&mme mit Alkohol be-
handelt wurden. Weil und Felix konnten nun den Nachweis er-
bringen, daB durch den Alkohol einerseits die H-Rezeptoren zerstbrt,
die O-Rezeptoren anderseits konserviert werden. Dieses Verfahren der
Alkoholbehandlung von Bien und Sonntag wurde mit gleichem Effekte
wie beim Fleckfieber auch bei der Typhusgruppe angewendet, so daB
in den mit Alkohol behandelten Typhusbazillen nur die stabilen Rezep¬
toren in Wirkung traten. Wir haben nun statt der Erhitzung die mit
Alkohol behandelten Typhusbazillen zu unseren Versuchen verwendet.

Zu diesem Behufe wurde je eine friscbe Typhuskultur in 5 ccm
Alkohol aufgeschwemmt, diese Emulsion nach 24-stiind. Stehen bei
Zimmertemperatur zentrifugiert und das Bazillensediment nach vor-
sichtigem Entfernen des Alkohols in l 1 /* ccm physiol. Kochsalzlbsung
anfgenommen.

Durch Untersuchungen von Weil und Felix wurde weiterhin
klargelegt, daB serologisch Typhusbazillen von dem typischen Gfirtner-
Stamm ausschlieBlich durch die Verschiedenheit der labilen Rezeptoren
differenzierbar sind, daB jedoch die stabilen Hauptrezeptoren von Typhus-
und GSrtner-Bazillen vollkommen identisch sind. Dadurch war uns
der Weg gezeigt, zum Nachweis der kleinflockenden Agglutinine des
Typhusserums den GUrtner heranzuziehen. Durch Versuche von
Gruschka wurde weiter festgestellt, daB der Hiihnertyphus, dessen
serologische Verwandtschaft mit dem Typhus schon frflher erwiesen war,
sich durch eine Gemeinsamkeit der stabilen Hauptrezeptoren mit Typhus
und Gartner auszeichnet, wShrend labile Rezeptoren diesen St&mmen
flberhaupt fehlen. Dadurch war uns ein weiteres Testobjekt zur Priifung
der kleinflockenden Agglutinine des Typhusserums in die Hand gegeben.

Unsere Versuchsanordnung gestaltete sich nun so, daB wir eine An-
zahl von Typhusseren gleichzeitig mit Typhus, Alkoholtyphus (Alkohol-
bakterien), Hflhnertyphus und GSrtner untersuchten. Wir wollten

Erst* Abt^Orig. Bd. ^7.

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AfU. o I .

Goi >gle

Heft 1.

2

Original from

UNIVERSITY OF CALIFORNIA

18

CentralbL f. Bakt etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 1

nun zunkchst prflfen, wie sich nichttyphose Menschen gegenflber Typhus,
Alkoholtyphus, Hfihnertyphus und Gartner verhielten, und haben
10 Faile, die in folgender Tabelle zusammengestellt sind, nach dieser
Richtung hin untersucht.

Tabelle I.

Fall

Typhus

TyphuB-

Ancohol

Gartner

Huhnertyphus

I.

1:25

+ +

1:25

+ + +

1:25

_

1:25

_

Pneumonie (Fieber)

1:50

+

1:50

+ +

1:50

—

1:50

—

1:100

_

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

II.

1:25

_

1:25

_

1:25

—

1:25

—

Grippe (Fieber)

1:50

—

1:50

—

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

III.

1:25

_

1:25

+

1:25

—

1:25

—

Grippe (Fieber)

1:50

—

1:50

1:60

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

1:200

—

1:200

—

1:200

—

IV.

1:25

1:25

...

1:25

+

1:25

+

Normal

1:50

—

1:50

—

1:50

1:50

1:100

_

1:100

—

1:100

-’

1:100

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

V.

1:25

+ +

1:25

+ +

1:25

—

1:25

—

Normal

1:50

1:50

—

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

1:200

—

1:200

—

VI.

1:25

_

1:25

_

1:25

—

1:25

—

Normal

1:60

—

1:50

—

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

1:200

—

1:200

—

VII.

1:25

+ +

1:25

+

1:25

+ +

1:25

—

Normal

1:50

1:50

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

1:200

—

1:200

—

1:200

—

VIII.

1:25

+

1:25

+

1:25

_

1:25

_

Normal

1:50

1:50

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

1:300

—

IX.

1:25

+ +

1:25

+

1:25

+ +

1:25

+ +

Normal

1:50

—

1:50

—

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

—

1:200

1:200

—

X.

1:25

+

1:25

+ +

1:25

_

1:25

—

Normal

1:50

1:50

1:50

—

1:50

—

1:100

—

1: 100

—

1:100

—

1:100

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

1:200

—

Wir entnehmen daraus zunachst die bekannte Tatsache, dafi Nicht-
typhuskranke Normalagglutinine gegen Typhusbazillen in niedrigen Kon-
zentrationen, wie z. B. 1:25, aufweisen und sehen das unter den von
uns untersuchten 10 Fallen 6mal auftreten. Bei einer Konzentration
von 1:50 sind mit einer Ausnahme, wo bei einer Pneumonie eine
schwacbe Reaktion bei 1:50 auftritt, samtliche negativ. Alkoholtyphus

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Rotky, Ueber die Analyse der Agglutination bei Typhuskranken.

19

Tabelle II.

Fall

i

Typhus-

Alkohol

Hflhnertyphus

Gartner

I. 5. Woche

1:25

_

1:25

+ +

1:25

1:25

+ + +

1:50

+ + +

1:50

—

1:50

—

1:50

+ +jb

1:100

+ +

1:100

—

1:100

—

1:100

1:200

+ +

1:200

—

1:200

—

1:200

___

1:500

+ +

1:500

—

1:500

—

1:500

_

1:1000

+ +

1:1000

—

1:1000

—

1:1000

1:2000

+

1:2000

—

1:2000

_

1:2000

_

1:5000

1:5000

—

1:5000

_

1:5000

_

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

II. 6. Woche

1:25

—

1:25

+ + +

1:25

+ + +

1:25

+++

1:50

+ +

1:50

1:50

+

1:50

+ + ±

1:100

+ +

1:100

—

1:100

1:100

1:200

+ +

1:200

—

1:200

—

1:200

_

1:500

+

1:500

—

1:500

_

1:500

__

1:1000

1:1000

—

1:1000

_

1:1000

-

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

_

1:2000

-

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

_

1 : 10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

III. 6. Woche

1:25

—

1:25

_

1:25

+ + +

1:25

++±

1:50

+ +

1:50

—

1:50

+ +

1:50

+

1:100

+ +

1:100

—

1:100

1:100

1:200

+

1:200

_

1:200

_

1:200

1:500

1:500

—

1:500

—

1:500

_

1:1000

—

1:1000

—

1:1000

_

1:1000

_

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

_

1:2000

_

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

_

1:5000

-

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

IV. 14 Tage

1:25

—

1:25

_

1:25

±

1:25

+

1:50

+ +

1:50

—

1:50

1:50

1:100

+ +

1: 100

—

1:100

—

1:100

_

1:200

+

1:200

—

1:200

—

1:200

_

1:500

+

1:500

—

1:500

—

1:500

_

1:1000

—

1:1000

—

1:1000

_

1:1000

_

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

___

1:5000

—

1:5000

—

1:6000

—

1:5000

_

1 :10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

V. 12 Tage

1:25

—

1:25

_

1:25

+ + +

1:25

+++

1:50

+ +

1:50

—

1:50

+ + ±

1:50

+++

1:100

+ +

1:100

—

1:100

+ +

1:100

+

1:200

+ +

1:200

—

1:200

1:200

1:500

+ +

1:500

—

1:500

—

1:500

_

1:1000

+ +

1:1000

—

1:1000

—

1:1000

_

1:2000

+ +

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

—

1:5000

+ +

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

_

1:10000

+

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

VI. 14 Tage

1:25

—

1:25

+

1:25

+ + +

1:25

+++

1:50

+ +

1:50

—

l: 50

+ +

1:50

+++

1:100

+

1:100

—

1:100

+

1:100

++

1:200

+

1:200

—

1:200

1:200

1 r 500

—

1 : 600

—

1:500

_

1:500

_

1 :1000

—

1:1000

—

1:1000

_

1:1000

_

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

_

1:2000

.

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

_

1:5000

_

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

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2 *

Original from

UNIVERSITY OF CALIFORNIA

20

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 1.

Fall

Typhus-

AJkohol

HGhnertyphuB

Gartner

Vn. 13 Tage

1:25

_

1:25 4”

1:25

4“ 4-

1:25

+ + +

1:50

+ +

1:50 —

1:50

++

1:50

4-4-4-

1:100

+ +

1:100 —

1 :100

+±

1:100

+

1:200

+ +

1:200 —

1:200

—

1:200

—

1:500

+ +

1:500 —

1 :500

—

1:500

—

1:1000

+ +

1:1000 —

1 :1000

—

1:1000

—

1:2000

1:2000 —

1:2000

—

1:2000

—

1:5000

—

1:5000 —

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

—

1:10000 —

1:10000

—

1:10000

—

IX. 22 Tage

1:25

+ + +

1:25 —

1:25

+

1:25

+

1:50

4-4-4*

1:50 —

1:50

—

1:50

±

1:100

+++

1:100 —

1:100

—

1:100

—

1:200

4" 4”

1:200 —

1:200

—

1:200

—

1:500

+

1:500 —

1:500

—

1:500

—

1:1000

4-

1:1000 —

1:1000

—

1:1000

—

1:2000

+

1:2000 —

1:2000

—

1:2000

—

1 :5000

dt

1:5000 —

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

1:10000 —

1:10000

■

1:10000

—

XHI. 14 Tage

1:25

++

1:25 —

1:25

+++

1:25

++

1:50

++

1:50 —

1:50

++

1:50

+

1:100

++

1:100 —

1: 100

—

1:100

—

1:200

+

1:200 —

1:200

—

1:200

—

1:500

±

1:500 —

1:500

—

1:500

—

1:1000

1:1000 —

1:1000

—

1:1000

—

1:2000

—

1:2000 —

1:2000

—

1:2000

—

1:5000

_

1:5000 —

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

—

1:10000 —

1:10000

—

1 :10000

—

XV. 3. Woehe

1:25

+++

1:25 —

1:25

4-4-

1:25

_

1:50

++

1:50 —

1:50

4-

1:50

—

1:100

++

1:100 —

1:100

—

1:100

—

1:200

++

1:200 —

1:200

—

1:200

—

1:500

+

1:600 —

1:500

—

1:500

—

1:1000

1:1000 —

1:1000

—

1:1000

—

1:2000

_

1:2000 —

1:2000

—

1:2000

—

1:5000

—

1:5000 —

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

—

1:10000 -

1:10000

—

1:10000

—

XVII. 14 Tage

1:25

+ 4* 4-

1:25 —

1:25

+

1:25

4-4-

1:50

+++

1:50 —

1:50

—

1:50

—

1:100

++

1:100 —

1:100

—

1:100

—

1:200

1:200 —

1:200

—

1:200

—

1:500

—

1:500 —

1:500

—

1:500

—

1:1000

—

1:1000 —

1:1000

—

1:1000

—

1:2000

—

1:2000 —

1:2000

—

1:2000

—

1:5000

—

1:5000 —

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

—

1;10000 —

1:10000

—

1:10000

—

verhalt sich genau so wie der unveranderte Typhus, was darauf hinweist,
dafi die normalen Agglutinine gegen Typhusbazillen wohl in den aller-
meisten Fallen zu den kleinfiockenden Agglutininen gehOren. Auch
Gartner und Hflhnertyphus weisen vereinzelt in der Verdflnnung von
1:25 Agglutination auf, die jedoch schwacher und nicht so haufig auf-
tritt, was besagt, dafi diese beiden Stamme den Normalagglutininen
gegentiber geringere Empfindlichkeit besitzen. — Nach diesen Unter-
suchungen kann wohl mit grofier Wahrscheinlichkeit behauptet werden.

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

Rotky, Ueber die Analyse der Agglutination bei Typhuskranken. 21

dafi eine im Verlaufe eines Typhus auftretende deutliche Reaktion von
1:50 eiue spezifische Bedeutung besitzt.

Die nun zur Untersuchung gelangten 20 Typhen stammten aus ver-
schiedenen Zeitabschnitten der Erkrankung und einige konnten mehr-
mals untersucht werden. Die untersuchten F&lle lassen sich in 3 Gruppen
zusammenfassen, und zwar:

Gruppe 1 mit niedrigem, kleinflockendem Titer, Gruppe 2 mit hdher
kleinflockendem Titer, Gruppe 3 die mehrmals untersuchten FSlle. Zur
Gruppe 1 gehbren 11 F&lle, die anbei wiedergegeben sind.

Bei diesen F&llen treten einige raerkwQrdige Erscheinungen zutage.
Zun&chst zeigen 3 F&lle (Fall 3, 5, 9) mit dem unver&nderten Typhus
hohe Agglutinationswerte, w&hrend dieselben mit dem Alkoholtyphus
entweder gar keine oder mit dem Hflhnertyphus und G&rtner nur
eine geringe Reaktion aufweisen, was darauf hinweist, dafi die hohe
Agglutination des Typhus auf die grobflockenden Agglutinine zurflck-
zuffihren ist. Eine Erklfiruug fflr die fehlende Agglutination des Al-

Tabelle III.

Fall

Typhus-

Alkohol

Hiihnertyphus

Gartner

VIII. 3 Wochen

1:25

_

1:25

1:25

+ +

1:25

+ + +

1:50

+ +

1:50

—

1:50

+

1:50

+ + +

1:100

+ +

1:100

—

1:100

+

1:100

+ + +

1:200

+ +

1:200

—

1:200

—

1:200

+

1:500

+ +

1:500

—

1:500

—

1:500

+

1:1000

+ +

1:1000

—

1:1000

—

1:1000

1:2000

+

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

_

1:5000

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

_

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

— ;

1:10000

—

XU. 4 Wochen

1:25

+ + +

1:25

+

1:25

++

1:25

+ + +

1:50

+ + +

1:50

+

1:50

++

1:50

+ + +

1:100

+ + +

1:100

+

1:100

+

1:100

+

1:200

+ + +

1:200

+

1:200

1:200

1

1:500

+ +

1:500

+

1:500

—

1:500

—

1

1:1000

+

1:1000

+

1:1000

—

1:1000

—

1:2000

1:2000

—

1:2000

—

1:2000

—

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

XIV. 3 Wochen

1:25

+ + +

1:25

+ +

1:25

++

1:25

+ + +

1:50

+++

1:50

+ +

1:50

+++

1:50

+++

1:100

+ + +

1:100

+ +

1:100

+++

1:100

+ + +

1:200

+ +

1:200

+

1:200

++

1:200

+ + +

1:500

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1:500

+

1:500

+

1:500

+ +

1:1000

+

1:1000

1:1000

1:1000

+

1:2000

±

1:2000

1:2000

—

1:2000

1:5000

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

_

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

XVI. 3 Wochen

1: 25

+

1:25

dt

1:25

+

1:25

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1:50

+ +

1:50

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1:50

++

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1:100

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1:100

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1:100

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1:100

+ +

1:200

+ + +

1:200

—

1:200

1:200

1:500

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1:500

—

1:500

—

1:500

—

1 :1000

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1:1000

—

1:1000

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1:1000

—

1:2000

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1:2000

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1:2000

—

1:2000

—

1:5000

+

1:5000

—

1:5000

—

1:5000

—

1:10000

1:10000

—

1:10000

—

1:10000

—

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22

Centralbl. f. B&kt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 1.

koholtyphus ist wohl damit zu geben, daB Alkohol docb schadigend auf
die Agglutination einzuwirken scbeint. Die kleinflockenden Agglutinine
reichen in 2 dieser Falle bis auf 50 bzw. 100. Bei den flbrigen Fallen
ist, wie aus der Tabelle hervorgeht, der Typhustiter niedrig, Hflhner-
typhus und Gartner weisen jedenfalls keine hoben Werte auf, reichen
aber zumeist doch in den Bereicb der Spezifitat.

Die Gruppe 2 umfaBt 4 Falle (Tabelle III), bei denen durchweg
der Typhustiter ein hoher ist und bei denen wir auch ein starkes, bzw.
starkeres Auftreten der kleinflockenden Agglutination wahrnebmen. Be-
merkenswert ist, daB samtliche dieser Falle einem spateren Zeitpunkt
der Typhuserkrankung angehdren.

Tabelle IV.

Fall XI

. Beginn

Hohe

Rekonvaleszenz

Titer

Typhus

(901)

Typhus-

Alkohol

Hiihner-

typhus

<D

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CD

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jTyphus-
| Alkohol ,

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j typhus

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(901)

Typhus-

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typhus

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1:25

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—

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1:1000

—

—

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1:2000

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—

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—

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—

Fall XVIII. 2. Woche

6. Woche

Titer

Typhus

(901)

Typhus-

Alkohol

Hiihner-

typhus

Gartner

Tvphus

(901)

Typhus-

Alkohol

Hiihner-

typhus

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1:25

_

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1:1000

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1:2000

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1:10000

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—

—

—

Fall XIX. 3. Woche

6. Woche

Titer

Typhus

( 901 )

Typhus-;

Alkohol

■

Hiihner-

typhus

G artner

Typhus

( 901 )

Typhu8-

AlKohol

Hiihner-

typhus

Gartner

1:25

+ + +

+ + +

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+ + +

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+++

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1:50

4- 4* 4*

4* 4* 4*

4-4*4-

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4-4*4-

1:100

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1:200

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4- 4-

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1:10000

—

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—

—

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Bernblum, Vergleiehende Untersuchungen der von Ziehl-Neelsen etc. 23

Von den scbliefilich der 3. Gruppe angehfirigen, also Afters unter-
suchten FSllen (Tabelle IV) ist besonders bei Fall XI ein deutliches
Ansteigen nicht nur der grobflockenden, sondern auch der kleinflockenden
Agglutinine ersichtlich. Die restlichen F&lle weisen in spSteren Krank-
heitsterminen ein stfirkeres Auftreten der kleinflockenden Agglutinine auf.

Zusammenfassung.

Es ergibt sich mithin aus diesen Untersuchungen, daB es, ebenso
wie bei den kflnstlich erzeugten Immunseren, auch bei der natflrlichen
Infektion der Typhus zu einem Auftreten von groB- und kleinflockenden
Agglutininen kommt, daB in voller Uebereinstimmung mit ersteren auch
hier die kleinflockenden Agglutinine meist in einer wesentlich niedrigeren
Konzentration auftreten als die grobflockenden, und es hat den Anschein,
daB erstere sich im weiteren Verlaufe der Erkrankung in stSrkerem
MaBe ausbilden. Praktische Vorteile aus dieser Methode werden sich
ergeben, bis wir die MSglichkeit haben werden, Paratyphus nach dieser
Richtung hin zu untersuchen, denn es steht anzunehmen, worauf auch
schon Weil und Felix hingewiesen haben, daB aus dem Aussehen der
Agglutination bei den Paratyphen die Hauptagglutinine von den Mit-
agglutininen zu trennen sein werden, was in diagnostischer Hinsicht
dann wertvoll sein wird, wenn sich die Erkrankung in einem vor-
geschrittenen Stadium befindet, in welchem wir die Erreger nicht mehr
zuchten kAnnen.

Nachdruck verboien.

Yergleichende Untersnclmngen der von Ziehl-Neelsen,
Gasis-Telemann, Kronberger, Unna-Pappenheim
nnd Konrich angegehenen Farbemethoden zum Nach-
weis von Tuberkelbazillen.

[Aus der III. medizin. Klinik der Universit&t Berlin (Direktor:
Geheimrat Prof. Goldscheider).]

Von Dr. Wilhelm Bernblum.

Trotzdem eine grABere Anzahl von Methoden zur Darstellung des
Tuberkelbazillus angegeben ist, hat bisher nur die altbew&hrte Methode
nach Ziehl-Neelsen die erste Stelle eingenommen. Ich habe es auf
Anregung des Herrn Dr. Herzfeld im folgenden unternommen, eine
Reihe von Methoden, die zum Teil neueren Ursprungs sind, mit der
Zieh 1-Neel sen schen F&rbung auf ihre praktische Verwertbarkeit hin
zu vergleichen.

Diese Methoden sind:

1) Die nach Gasis mit der Modifikation von Telemann, 2) die

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24

Centralbl. f. Baku etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1,

nach Eronberger, 3) die nach Unna und Pappenheim und 4) die
Methode nach Eon rich.

Die Ausffihrung dieser Methoden ist folgende:

1) Die Farbung nach Ziehl-Neeleen:

Man farbt mit unverdiinntem Karbolfuchsin fiber der Flamme bis zur Dampf-
entwicklung, entfarbt in 3-proz. Salzsaure&lkohol und farbt mit 1-proz. wasseriger Me-
thylenblauidsung nach. Wasserspfilung.

2) Farbung nach Gasis-Telemann:

Man farbt mit unverdiinntem Karbolfuchsin uber der Flamme bis zur Dampf-
entwicklung, entf&rbt mit einem Aikali-Alkoholgemisch (1 Teil 30-proz. Kalilauge, 3 Teile
60-proz. Alkohol). Nachfarbung 2—3 Sek. mit einer Methylenblaulosung, die foigender-
maflen hergestellt wird: 1 g kristallis. Methylenbiau, 10 ccm absol. Alkohol) l / 2 ccm
Salzsaure, §0 ccm Aqua destillata. Wasserspulung.

3) Farbung nach Kronberger:

Man farbt mit unverdiinntem Karbolfuchsin gelinde fiber der Flamme bis zur
ersten schwacheu Dampfbildung. Entfarbung durch 15-proz. Salpetersaure. Abspfiien
mit 60-proz. Alkohol. Aufgiefien von offiz. Jodtinktur, aie mit dem 4-fachen Volumen
60-proz. Alkohol verdfinnt ist. Starker Wasserstrahl.

4) Farbung nach Unna-Pappenheim:

Farbung in bis zum Sieden erhitzten Karbolfuchsin. Ablaufenlassen des fiber-
schussigen Karbolfuchsins. Ohne Abwaschung Entfarbung und Gegenfarbung durch
3—5mmiges Eintauchen und langsames Abfliefienlassen der Farblosung, die auf folgende
Weise bereitet wird: In 100 Teiten absol. Alkohols wird 1 Teil Korallin und dann mit
Methylenbiau bis zur vollstandigen Sattigung hinzugefugt; diese Losung wird mit
20 Teilen Glyzerin versetzt. Kurze Wasserspiuung.

5) Farbung nach Konrich:

Farben */, bis 2 Min. in heiOem Karbolfuchsin. Kraftig Abspfiien mit Wasser.
Entfarben mit 10-proz. Natriumsulfitlosung bis zur volligen Entfarbung. Abspfiien mit
Wasser. Nachfarben l /< bis X L Min. mit wasseriger Malachitgrfinlosung (gesattigte
wasserige Malachitgrfinlosung 50 + 100 Wasser).

Als phthisisches Material ist menschliches Sputum verwandt worden.
Zu den Untersuchungen wurden fiber 400 Prfiparate angefertigt und
durchgesehen. In der am SchluB befindlichen Tabelle sind 15 Sputa
ausgewfihlt worden, die zur Demonstration der Untersuchungsergebnisse
beitragen sollen; sie decken sich vollkommen mit den bei den fibrigen
Sputa gefundenen Ergebnissen.

Von den ffir die Tabelle ausgewahlten Sputa sind ffir jede der 5 Fftrbe-
methoden 2 Prfiparate angefertigt worden.

Bei jedem Prfiparat wurden 25 Gesichtsfelder durchgesehen und die
darin befindlichen Tuberkelbazillen ausgezfihlt.

Auf Grund dieser Untersuchungen soil festgestellt werden, welche
dieser 5 Methoden ffir den Arzt am bequemsten, einfachsten und schnell-
sten ausffihrbar ist und zu den besten Resultaten fflhrt.

Was die Technik der Farbung nach Ziehl-Neelsen anbetrifft,
so ist sie einfach und kann in wenigen Minuten ausgeffihrt werden.

Das mikroskopische Bild in den nach Ziehl-Neelsen geffirbten
Prfiparaten ist ein sehr klares: die rotgeffirbten Tuberkelbazillen heben
sich deutlich von dem blauen Untergrund und den Mischbakterien ab.

Es kann zusammenfassend gesagt werden, daB die Ziehl-Neelsen-
Ffirbung nicht mit Unrecht die Methode zur Darstellung der Tuberkel¬
bazillen ist, die bisher allenthalben angewandt wird. Es mfiBte daher
eine andere Methode deutliche Vorteile bieten gegenfiber der von Ziehl-
Neelsen, wollte sie letztere verdrfingen.

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Beroblum, Vergleichende Untereuchungen der von Ziehl-Neelsen etc. 25

Farbung nach Gasis-Telemann:

Mit dieser Farbemethode kann man recbt klare Bilder erhalten: die
rotgef&rbten Stabchen heben sich gut von dem grflnlich-blauen Unter-
grunde ab, in den Fallen von Mischinfektion ist eine Verwechslung aus-
geschlossen. Es stimmt also in diesem Punkte die Ziehl-Neelsen-
sche Methode mit der von Gasis-Telemann empfohlenen (lberein.
Es ist jedoch nicht zn leugnen, daB die Gasis-Telemannsche F9.r-
bung gewisse Schwierigkeiten in der Ausfiihrung bietet, and daB sicb
sich infolgedessen Fehler einstellen kOnnen, die einen Verlust von Tu¬
berkelbazillen bedingen: Zur Entfarbnng bedarf man eines zusammen-
gestellten Alkali-Alkoholgemisches, das haufiger ernenert werden muB,
um seinen Zweck zu erftillen. Wahrend man bei der Ziehl-Neel sen-
scben Methode mit der iiblichen MethylenblaulSsung nachffirbt, benStigt
man hier eines zusammengesetzten Farbstoffes. Bei meinen Vergleichs-
praparaten habe ich niemals beobachten kbnnen, daB in den Fallen, wo
Ziehl-Neelsen negativ war, die Gasis-Telemannsche Farbung
Bazillen sichtbar machte.

Farbung nach Kronberger:

Diese scheint mir in ihrer Brauchbarkeit am wenigsten von alien
hier in Frage stehenden Methoden imstande zu sein, der Methode Ziehl-
Neelsen auch nur an die Seite gestellt zu werden. Die Tabelle zeigt
uns, daB in einigen Praparaten (1 und 12), wo nach den anderen Me¬
thoden Tuberkelbazillen gefunden wurden, nach Kronberger keine
nachgewiesen werden konnten. Anch in fast alien anderen Praparaten
bleibt die Zahl der gefundenen Tuberkelbazillen nach Kronberger
hinter der nach den anderen Farbemethoden vorhandenen wesentlich
zur tick.

Die Technik ist ebenfalls weniger vorteilhaft als nach Ziehl-Neel¬
sen, da eine doppelte Entfarbung, zuerst in 15-proz. Salpetersaure,
dann in 60-proz. Alkohol vorgenommen wird.

Im mikroskopischen Bilde vermissen wir bei Kronberger jeden
Kontrast: Tuberkelbazillen rot, die Umgebung gelb-rbtlich. Es ist ohne
weiteres klar, daB das Auffinden der Tuberkelbazillen hierdurch sehr
erschwert ist.

Farbung nach Unna-Pappenheim:

Das mikroskopische Bild zeigt einen guten Kontrast der rot ge-
farbten Tuberkelbazillen gegen die blaue Umgebung. Ein Blick auf die
Tabelle zeigt uns jedoch, daB die Zahl der nach Unna-Pappenheim
gefundenen Bazillen bei alien Praparaten, mit Ausnahme des Prkpa-
rates 2, zum Teil sogar wesentlich hinter der nach Ziehl-Neelsen
gefundenen Bazillen zurttckbleibt. Dieser Grund dflrfte allein schon
genilgen, nicht die altbewahrte Methode Ziehl-Neelsen zugunsten
der Farbung nach Unna-Pappenheim zu verlassen.

Nun kommen wir zu der Methode, die es durchaus wagen darf, mit
der Methode Ziehl-Neelsen den Kampf um den Vorrang aufzunehmen,
zur Methode Konrich.

K on rich selbst sagt, daB seine Methode aus dem Wunsche ent-
standen ist, den Alkohol moglichst auszuschalten, wegen seines hohen
Preises und um ihn an anderer Stelle, wo notwendiger, zu verwerten.

Der Methode Konrich und Ziehl-Neelsen gemeinsara ist die
erste Farbung mit Karbolfuchsin.

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26

Centralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Die Entf&rbung vollzieht sich bei K on rich (lurch Reduktion des
Fuchsins vermittels einer 10-proz. NatriumsulfitlSsung. Diese Entfkrbung
hat auBer der Ersparnis des Alkohols noch den Vorteil, daB das Natrium-
sulfit auch bei sehr langer Einwirkung, selbst von 24 Std. an die Tu-
berkelbazillen nicht herankommt.

Ein kleiner Nachteil der Entfarbung ist der, daB die Natriumsulfit-
ldsung durch Aufnahme von 0 aus der Luft in einigen Tagen in Sulfat
fibergeht und so an reduzierender Kraft verliert; die EntfSrbungskraft
der 10-proz. Losung dauert 8—10 Tage. Es ist jedoch eine sehr geringe
Mtthe, besonders bei der leichten Loslichkeit des Salzes, sich die Losung
hfiufiger frisch herzustellen. Das Gelingen der Praparate wird fibrigens
nicht beeinfluBt, wenn zur EntfSrbung st&rkere Losungen verwandt
werden.

Zur Nachffirbung mit Malachitgriin an Stelle des Methylenblau sagt
Konrich: „Dies geschieht aus 2 Griinden, einmal weil unser Auge
den Farbengegensatz rot-griin am besten und leichtesten sieht, und
zweitens, weil das Malachitgriin zur Darstellung von Bakterien vermfige
seiner geringen Ffirbekraft weniger geeignet und deswegen bisher dazu
auch nicht verwendet worden ist. Denn es farbt durchgehends zu
schwach. Das ist aber in Auswurfspr&paraten gerade nfltzlich, weil
aufier den dunkelgefarbten, ganz scharf umgrenzten Tuberkelbazillen
alles andere, auch die fibrigen Bakterien, nur leicht, gewissermaBen ver-
waschen grfln gefarbt sein sollen.“

Die Durchsicht von fiber 400 Prfiparaten IfiBt mich die von Kon¬
rich selbst erwfihnten Vorzfige seiner Methode durchaus bestatigen.
Das Auge empfindet es direkt als eine Erholung. wenn es aus dem
Kontrast rot-blau heraus in das rot-grfine mikroskopische Bild schaut.
Der Farbengegensatz rot-grfin strengt das Auge selbst bei kfinstlicher
Beleuchtung fast gar nicht an. Dieser Vorteil muB unseres Erachtens
sehr hoch bewertet werden. Haben wir z. B. ein Prfiparat vor uns mit
sehr vereinzelten Bazillen, die nicht gleich in den ersten Gesichtsfeldern
gefunden werden, so tritt bei dem Kontrast rot-blau eine schnellere Er-

Tabelle.

Sputum

Nr.

Ziehl-
N eelsen

Gasis-

Telemann

Kron-
* berger

Unna-Pappen-

heim

Konrich

Praparat

Praparat

Praparat

Praparat

Praparat

i

ii

i

II

i

ii

i

ii

i

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32

4

28

2

17

22

_

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6

17

12

32

23

36

9

15

13

42

34

7

96

88

92

82

90

—

26

—

—

102

8

55

70

—

—

36

50

44

56

140

162

9

47

102

92

76

82

—

36

42

199

186

10

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

11

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

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1

—

2

5

3

—

7

9

13

—

27

—

37

—

—

12

7

16

41

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—

—

—

—

—

—

—

—

—

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19

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Qrigiral from,

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Fieiifer u. Robitschek, Neues Tuberkelbazillenanreicherungsverfahren etc. 27

mfldung des Auges auf Kosten des genaaen Ergebnisses der Unter-
suchung ein.

Unter den Prfiparaten befinden sich solche, die in geradezu be-
stechender Weise ftlr die Methode Konrich sprechen. Derartige Prfl-
parate erleichtern durch den doppelten Gegensatz, den der Farbe:
Tuberkelbazillen rot, alles flbrige grfln, und zweitens den des Umrisses:
Tuberkelbazillen scharf umgrenzt, alles flbrige verwaschen, das Durch-
mnstern der PrSparate und das Herausfinden besonders vereinzelter
Bazillen ganz wesentlich.

Die Tabelle zeigt, daB nach der Methode Konrich bei fast alien
Prflparaten mehr Tuberkelbazillen gefunden wurden als nach den anderen
Methoden.

Aus diesen Vorteilen der Methode Konrich heraus verdient sie es
wohl, der Methode Ziehl-Neelsen ebenbflrtig an die Seite gestellt,
wenn nicht ihr vorgezogen zu werden.

Nachdruck verboten.

Ein neues TuberkelbazillenanreiclieningsYerfaliren mit

Mastkemulsion,

[Aus der I. medizinischen Abteilung des Krankenhauses Wieden, in
Wien (Vorstand: Primfirarzt, Regierungsrat Prof. Dr. M. Sternberg).]

Von Dr. Robert Pfeiffer, unter Mitarbeit von Dr. Walter Robitschek.

Der Methoden zum Anreichern von Tuberkelbazillen gibt es bis
heute eine Menge, von denen aber keine so recht das gehalten hat, was
sie versprach. Die Mehrzahl der Methoden ist uuverlflBlich, d. h. sie
fflrdert in vielen Fallen, bei denen man Tuberkelbazillen in Se- und
Exkreten gem&B der klinischen Beobachtung des Falles erwarten wflrde,
nicht eher Oder h&ufiger Bazillenbefunde zutage als die gewohnliche Aus-
strichmethode, Oder aber es ist die Methode umstflndlich und bedarf
einer eigenen Apparatur, so daB sie diese Begleitmomente hinderten,
allgemein angewandt zu werden. Drittens, und nicht zuletzt, sind in der
Jetztzeit viele Reagenzien so teuer oder schlecht, daB bei manchen der
Erfolg der Methode aus diesen Grflnden zweifelhaft wird. Das letztere
gilt z. B. von der bis vor wenigen Jahren flberall Qblichen Antiformin-
methode, die vor dem Krieg auch fast immer gute Resultate lieferte,
jetzt aber infolge minderer Qualitat des Pr&parates, das einem h&ufig
zur Verfflgung steht, und infolge Verbrauchs von Alkohol ziemlich
teuer und unverl&Blich wurde. Deshalb suchten wir nach einer Methode,
die erstens in jedem kleineren Handlaboratorium ausgefflhrt werden
kann, die relativ wenig umstandlich ist und die, wie wir glauben, gute,
nach unserer unten angefflhrten Uebersicht die bisher besten Werte in
bezug auf Anreicherung darbietet.

Wenn wir vorernt die bisher gebrauchlichsten und geiibten Methoden der An¬
reicherung von Tuberkelbazillen kurz erwiihnen und zugleich nach ihrer Wertigkeit
kritiach beleuchten wollen, so verdienen die Methoden der AntiforminaufschlieOung von
Uhlenhuth und Xylander und die Fallungsmethode mit Eisenchlorid von

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28

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. BcL 87. Heft 1.

I) it thorn und Schultz nach unseren Erfahrungen vorden vielen anderen Methoden
bei weitem den Vorzug.

Als 2. bei uns immer mitvergiichene Methode heben wir die Eisenchloridfaliungs-
methode nach Ditthorn und Schultz hervor, die wir, da die Originalmethode
zwecke raacheren Ableitena eigene Metallsiebplatten, Quarzfilter und Saugpumpen vor-
schreibt, fiir unsere Zwecke etwas modifizierten.

Von anderen Methoden seien kurz erwahnt die von Eller man n und Erlandsen,
die das durch Autolyse homogenisierte Sputum mit Natronlauge kochen, zentrifugieren
und im Zentrifugat nach Bazillen suchen. Diese Methode bedient eich gleichzeitig
mehrerer Kunstgriffe, die zur moglichsten Ausbeute an Tuberkeibazillen fiihrt: 1) ver-
wendet sie das Digestions- rasp. Autolysationsverfahren, das vorwiegend von Spengler,
Jousset, Philipp, Jochmann inauguriert wurde, mit Hilfe dessen die orga¬
nischen Substanzen durch fermentative Vorgange aufgelost und der Homogenisierung
des Sputums leichte Bahnen gewiesen werden; 2) werden durch das Kochen mit Laugen
die Fette verseift und gelost und auch dadurch einfachere physikalisch-chemische Be-
dingungen fiir die Apposition der Tuberkeibazillen geschaffen, und 3) wirkt das Kochen
an sich als Homogen isierungsprozeB, welche Methode vorwiegend von Dahmeu und
von Hem pel ausgefuhrt wird.

Als Fallungs-, resp. Appositionsmethode ware auch der von Lange und
Nitzsche Erwahnung zu tun, die sich des Ligroins als fettldsenden Mittels bedient.
Ebenso bedient sich Bernhardt des Ligroins. In die gleiche Gruppe diirfte die
Methode von Hammerl und von Loeffler gehoren, der ebenfalls erst durch Anti-
formin und Kochen aufschliefit, dann durch Ohloroformzusatz das fallende Moment er-
reichen will.

Diese Methoden, deren Aufzahlang keineswegs den Anspruch auf Vollstandigkeit
erhebt, lassen sich im grofien und ganzen auf 3 Methoden reduzieren, die alle wieder
darauf hinauslaufen, die organischen Substanzen, die weniger widerstandsfahig sind
als der Tuberkelbazillus, zu vernichten, ohne den Bazillus selbst soweit zu schadigen,
dafi er gar zu viel von seiner spezifischen, distinkten Farbbarkeit einbuBt. Das ge-
schieht 1) durch Warmemethode; 2) durch Laugen- resp. Alkalimethoden und 3) durch
fermentative Einwirkung auf organische Substanzen, wo die Tuberkeibazillen als
die relativ meistresistente Masse am wenigston geschadigt sind. Endlich zeigen die
Methoden Kombinationen der verschiedenen Vertahren. Was nun die kritische Unter-
orduung der verschiedenen Methoden unter den hier in Frage stehenden Punkt der
Veruichtung alles Organischen bei relativ gutem Bewahren des Tuberkelbazillus an-
langt, so ist wohl der Autolysatmethode der Vorrang zu geben. Aber der Nachteil
der Methode ist der, dafi es 1) sehr lange dauert, bis wirklich die ganze Masse des
Untersuchungsmateriales geniigend gut homogenisiert ist, und daB man 2) gezwungen
ist, mit widerlich faulen oder stinkendem Zeug zu arbeiten.

Die Methode des Aufschliefiens durch Alkalien hat den Nachteil, daB die
Tuberkeibazillen, sofern die Lauge nur etwas konzentrierter ist und langer einwirkt
— und die raeisten Methoden brauchen Zeit — an ihrer Farbbarkeit groBe EinbuBe
erleiden. Man sieht dann haufig in solchen Praparaten stabchenformige Gebilde, die
infolge der geringen Tinktion unscharf begrenzt sind und nicht als Bazillen anerkannt
werden konnen. Diesem Uebelstand sucht z. B. Miihlhauser durch eine Modifi-
kation der Methode Eller man n und Erlandsen zu begegnen, indem er nur
schwache Lauge nimmt (0,2 Proz.), nur kurze Zeit dieselbe einwirken laBt und rasch
mit Essigsaure neutralisiert.

Die realtiv beste Methode ist somit die Warmemethode, die wir
auch zur Homogenisierung bei unserer Mastixmethode anwandten. Um
nun zu unserer Methode zu kommen, sei vorerst das Technische der-
selben erwahnt.

Wir homogenisieren durch Erwarmen und Verdflnnen bloB mit
Wasser. Dabei ist als kleiner Kunstgriff folgendes von Bedeutung: Die
meisten Autoren geben an, daB man das Sputum mit einem Glasstab
ofters umrflhren muB. Dies geniigt offensichtlich nicht. Wir gehen
dabei so vor, daB wir das Sputum, das mit der 3-fachen Menge Wassers
verdunnt ist, in einen Erlenmeyer-Kolben bringen, am Wasserbad
erhitzen und wiederholt fest umschiitteln. Dadurch braucht man nicht
so lange zu kochen, zerstort daher die Tuberkeibazillen immerhin weniger
und bekommt viel eher eine gleichformige, milckigweifie, homogene
Flussigkeit, als beim bloBen Umruhren. Als Fallungs-, resp. Apposi-

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Pfeiffer u. Robitschek, Neues Tuberkelbazillenaareicherungsverfahren etc. 29

tioosmittel verwenden wir eine verdflnnte, in Wasser eingeblasene Mastix-
losung, wie sie bei Kolloidreaktionen, beispielsweise des Liquors cerebro-
spinalis, gebraucht wird. Diese Losung wird, flhnlich den Vorschriften
Emanuels (Berlin, klin. Wochenschr. 1915. Nr. 30) hergestellt, wobei
es keineswegs auf die feinen Unterschiede des rascheren Einblasens der
Mastixlbsung ins Wasser, oder des tropfenweisens Eintragens derselben
ins Wasser, wie die ausschlaggebenden Versuche Sachs (Berlin, klin.
Wochenschr. 1916. Nr. 25) fflr die Ausflockung von kolloidalen Korpern
durch Salzlosungen zeigten, ankommt, sondern wir setzen Mastixlosung
zu, am einen ganz fein verteilten gleichmaBig in die homogenisierte
Flttssigkeit sich ausbreitenden, flockenformigen Niederschlag zu erzeugen,
an dessen Partikelchen die Bazillen sich apponieren sollen, um dann
beim Ausschleudern in der Bodenschicht aufgefunden werden zu konnen.
Die Mastixstam m lb sun g ist eine 10-proz., in absolutem oder stark
konzentriertem Alkohol hergestellte Losung, die einige Stunden nach der
Auflosung filtritrt wird und unbegrenzt haltbar ist. Die Mastixge-
brauchsldsung wird hergestellt, indem man 0,5 ccm StammlSsung
mit 4,5 ccm absol. Alkohol verdtinnt und in 20 ccm destill. Wasser
einbl&st. Es ist am vorteilhaftesten, das Einblasen aus einer mafiig-
weiten Pipette in einen kleinen Kochkolben, in dem die 20 ccm H s O
sich befinden, unter gleichmSBigem ZuflieBen zu vollfflhren, doch sind
keineswegs, wie bereits erwflhnt, besondere VorsichtsmaBregeln einzu-
halten. Auch ist diese rfltlich-milchigweiBe Flflssigkeit ohne weiteres
2—3 Wochen haltbar und braucht nicht jedesmal frisch hergestellt zu
werden. Dies ist die ganze Vorbereitung und das einzige Reagenz
unserer Methode. Dieselbe gestaltet sich also folgenderweise:

Wir uehmen ca. 50 ccm Sputum, verreiben es mit der 3-fachen
Menge destill. Wassers, setzen dieses Gemisch in einem Erlenmeyer-
Eolben auf Wasserbad und erhitzen es unter fortwflhrendem Schfltteln
und Umrflhren bis fast zur vollstflndigen Homogenisierung. Dies braucht
ungefflhr V* Std. Dann nehmen wir 8 ccm Sputum wassergemisch,
setzen 2 ccm unserer Mastixgebrauchsldsung zu, und zwar machen wir
dies in einer graduierten Sedimentiereprouvette, stellen dieselbe flber den
Tag in den Brutschrank und lassen langsam absetzen. Nach ungef&hr
24 Std. zentrifugieren wir. Aus dem Zentrifugatbodensatz streichen wir
gewohnlich 3 Objekttrflger, und zwar einen aus der obersten Trennungs-
schicht, die zwischen dem flflssigen Anteil des Eprouvetteninhaltes und
der festen Schicht besteht. Der Niederschlag bildet namlich eine weiBe,
krumelige Masse, in der die Bakterien zu finden sind. Manchmal sind
sie ganz zu oberst an der Sedimentierschicht, manchmal ganz am
Boden. Zuweilen, jedoch sehr selten, in den mittleren Anteilen der
festen Masse. Deshalb machen wir auch aus den verschiedenen Tiefen
des Sedimentrflckstandes verschiedene Pr&parate. Gewbhnlich findet
man am leichtesten und sichersten im tiefsten Bodensatz die Bazillen, wes-
halb wir auch immer zuerst dieses PrSparat durchmustern. Woran es
liegt, daB die Apposition der Tuberkelbazillen sich so verschieden verhalt,
konnten wir nicht eindeutig erklaren, gehQrt auch gar nicht zum Thema
unserer Abhandlung.

Die Methode ist, was frflher erw&hnt wurde, sowohl hinsichtlich der
Behelfe, deren sie sich bedient, wie der Manipulationen, die sie not-
wendig hat, und zuletzt bezflglich der Reagentien, die man aufzuwenden
hat, recht einfach. Zeitraubend insofern, als sie nicht gleich, in Fallen,
wo man ein Resultat erwartet, dasselbe zutage fordert. Aber bei

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30

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Tuberkulose, einer eminent cbronischen Erkrankung, kommt es ja in
den seltensten Fallen vor, dad man das Ergebnis einer bakteriologischen
Untersuchung sofort notig hat. Man kann das Verfahren zwar auch
abklirzen, indem man nach Zusatz von Mastixlosung zu dem homogeni-
sierten Sputum das Gemisch langsam in der Zentrifuge durch 1 / t bis
s / 4 Std. ausschleudert. Jedoch scheinen uns die Resultate nicht so sicher
und ergebnisreich, wie bei der „natOrlichen tt Sedimentierung. Das scheint
mit ein Grund, vielleicht der Hauptgrund, zu sein, warum unsere Me-
thode uns bessere Resultate ergeben hat, als die anderen FSllungs-
raethoden. Die Bazillen haben augenscheinlich bessere Gelegenheit, an
diese kleinsten korpuskularen Elemente sich anzugliedern, eine Art
Agglutination um dieses Partikelchen von Mastix zu bilden, das wahr-
scheinlich eine Art Attraktionszentrum fflr die Bazillen ist. Dadurch
wird bei dem nachtrSglichen Zentrifugieren die Ausbeute an positivem
Bodensatz reicher und leichter auffindbar, wie unsere unten dargestellten
Vergleichswerte dies zeigen. Wenn wir aber gleich nach Zusatz von
Mastixlosung zentrifugieren, so werden die Bazillen mit den der Zentri-
fugalkraft folgenden korpuskularen Elementen einfach dort, wo sie in
die Flugbahn solch feinster Teilchen hineingeraten, an das spitze Ende
der Eprouvette getrieben und linden lange nicht so leicht und reichlich
den Weg an den Bodensatz der Eprouvette. Ein Zweites, warum der
Ertrag der Ausfailung durch MastixlSsung reicher ist, als bei den
tlbrigen FSllungsverfahrungen liegt vielleicht an der Mastixldsung selbst.
Sie ist ja eine so fein verteilte, dafi es vielleicht daran gelegen sein
mag, dafi sie eher die Bazillen zur Ffillung und Anreicherung bringen
kann.

Etwas, was wir noch zugunsten unserer Methode anfQbren wollen
und was man hauptsfichlich bei der Antiforminmethode als Uebelstand
kennen zu lernen Gelegenheit hat, ist, dafi der Aufstrich des PrSparates
beira FSrben und EntfSrben absolut hfi.lt. Durch Verdunsten des Alko-
hols beim Trocknen des Ausstriches klebt das PrSparat durch Mastix
fest, welches Mastix, wenn es im Ueberschufi vorhanden ist, beim Ent¬
fSrben mit Alkohol gSnzlich entfernt wird. Man hat es keineswegs n&tig,
wie etwa beim Antiformin, oft jedoch auch beim gewbhnlich mit Wasser
homogenisiertem Serum Klebemittel auf den ObjekttrSger zu streichen,
die die FSrbbarkeit des PrSparates nur beeintr&chtigen.

Wir geben nun in tabellarischer Uebersicht Vergleichsresultate
unserer Methode mit anderen Anreicherungsverfahren und gewdhnlichen
AusstrichprSparaten kurz wieder. Wir haben bei unseren Durchmuste-
rungen der PrSparate in jedem einzelnen ausgezShlten PrSparat 100 Ge-
sichtsfelder genauest durchgemustert, haben uns das Ergebnis Shnlich
wie es Czaplewski getan hat, als einen Bruch aufnotiert, in dessen
Zahler 2 Zahlen sind, von denen die eine die kleinste gefundene Zahl
an Bakterien, die andere die Maximalzahl der Bazillen in einem Ge-
sichtsfeld ausdriickt. So bedeutet 0—5, dafi in einem Gesichtsfeld des
PrSparates von 100 durchmusterten Gesichtsfeldern als grofite Zahl der
in einem Gesichtsfeld gefundenen Bazillen 5, jedoch Gesichtsfelder ohne
jeglichen Bazillus sich ebenfalls vorfanden. Das besagt die Zahl 0. Das
Zeichen 00 heifit, dafi wir in einem solchen PrSparate maximal in einem
Gesichtsfelde so viele Bazillen vorfanden, dafi wir sie nicht zShlen
konnten. Der Nenner zeigt die Anzahl der Gesichtsfelder. In der
2. Teilkolonne unserer Tabelle linden wir wieder Bruche, in denen der
Zahler die Summe der in 100 genau ausgezahlten Gesichtsfeldern auf-

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Pfeiffer a. Robitschek, NeueeTaberkelbazilienanreicherangsverfahren etc. 31

gefundenen Bazillen anzeigt, der Nenner wieder die Zahl der Gesichts¬
felder. Die 3. Teilkolonne zeigt eine einfache Zahl, den Index der
negativen Gesichtsfelder. Und darauf legen wir eigentlich unser Haupt-
angenmerk.

Es ist klar, dafi der Wert einer Methode zur Anffindung von Ba¬
zillen nm so hdher anzuschlagen ist, je weniger Gesichtsfelder sich
finden, in denen tiberhaupt keine Bazillen zu finden sind. Denn nicht
darauf kommt es an, ob im Gesichtsfeld 5 Oder 8 Oder mehr Bazillen
sind, sondern der Fall wird zu einem bazillenpositiven durch die An-

Tabelle I.

Name

Ausstrich

| Mastix

i

Geaichte-

feld

100

Geeichts-
f elder

negativ

Gesichts-

feld

100

Gesichta-

felder

negativ

Nr.

H. J.

0

0

100

0—5

66

60

1

1

100

1

100

E. Z.

0-16

103

41

6—16

301

9

2

1

100

1

100

8. G.

0-1

4

96

0—3

13

93

3

1

100

1

100

A. J.

0

0

100

0-1

3

97

4

1

100

1

Ioo

E. K.

0-8

70

76

0—14

203

26

5

1

100

1

100

J. 8.

0-1

1

99

0-8

27

91

6

1

100

1

100

R. M.

0

0

100

0-5

30

84

7

1

100

1

100

E. F.

0—14

513

5

0

0

100

8

1

100

1

100

B. V.

0—14

521

3

2-46

1265

0

9

1

100

1

100

0. R.

0—11

227

14

4—oo

oo

0

10

1

100

i

loo

T. 8.

0-20

145

63

0-32

114

68

11

1

100

1

100

P. F.

0-7

83

63

0-11

172

26

12

1

100

1

100

T. S.

0—22

510

9

0-13

345

8

13

1

10O

1

100

0. M.

0—3

140

40

11—50

2610

0

14

nr

100

1

100

8. R.

0—7

43

72

0-3

24

81

15

1

100

1

100

K. Z.

0—9

56

67

0-16

492

2

16

1

100

1

100

T. B.

0-7

135

53

0-10

145

27

17

1

100

1

ioo

Vergleichsergebnisse zwiechen gewohnlichem Ausstrich und Anreicherung mit
Mas til.

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32

Centr&lbl. L Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

wesenheit anch nur eines sicheren und eindeutigen St&bchens gekenn-
zeichnet; und wenn wir nun unter 10 durcbsuchten Gesichtsfeldern bei
der einen Metbode 3 positive Gesichtsfelder mit zusammen 25 Bazillen
haben, bei der anderen Methode jedoch 5 positive Gesichtsfelder mit
vielleicht nur 15—20 Bazillen, so gebtthrt der 2. Methode entschieden
der Vorrang. Denn es wird viel weniger oft ein PrSparat als negativ
aus der Hand gelegt werden, bei dem weniger negative Gesichtsfelder
zu linden sind. Man durchmustert bei einem Praparat einige Gesichts¬
felder, wenn man gerade nicht besonders sorgfaltig sucht, und legt es,
sofern sich keine Bazillen gefunden haben, als negativ beiseite. Sind
also bei einem Ausstrich 20 Proz. positive Gesichtsfelder, so heifit das,
daB man unter 5 durchsuchten lmal auf einen positiven Befund kommt.

Die Tabelle (S. 31) zeigt nun vorstehende Gegenflberstellung.

Aus Raumersparnisgrtinden kfinnen die urspriinglich geplanten
6 Tabellen nicht wiedergegeben werden, aus denen die Ueberlegenheit
der Mastixfailmethode gegeniiber der Eisenchlorid- und sonstigen Homo-
genisierungsverfahren hervorgehobeu wflrde. Als zusammenfassender
Beweis seien folgende Zahlen noch kurz angefiihrt. Bei 3000 genauest
durchmusterten Gesichtsfeldern ergab der Ausstrich 978 (32,6 Proz.)
positive, das Mastix 1618 (53,9 Proz.) positive. Noch weit Qberlegener
zeigen sich aber die negativen Resultate. Da stehen 2022 (67,4 Proz.)
negative Gesichtsfelder des gewohnlichen Ausstriches 1382 (46,1 Proz.)
negative bei der Mastixmethode gegeniiber.

Zusammenfassend ergibt sich also, daB unsere Methode der An-
reicherung durch Hitzehomogenisierung und darauf folgende F&llung
durch Mastixlosung bessere Resultate ergibt als die bisher gebrauch-
lichen. Sie ist relativ einfach, bedarf keiner speziellen Apparatur und
arbeitet mit billigen nnd derzeit ttberall erh&ltlichen Reagentien.

Literatiur.

Bernhardt, Deutach. med. Wochenschr. 1909. 8. 1428. — Dahmen, Munchen.
med. Wochenschr. 1891. H. 42. — Ditthorn u. Schultz, Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Orig. Bd. 79. S. 166. — Eller man n u. Er land sen, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 61. S. 219.
— Hammerl, Munchen. med. Wochenschr. 1909. S. 1955. — Haserodt, Hyg.
Rundsch. 1909. S. 699. — Hempl, Inaug.-Dissert. Leipzig 1902. Ref. — Koslow,
Berlin, klin. Wochenschr. 1910. S. 1181. — Lange u. Nitsche, Deutsch. med. Wochen-
schrift. 1909. S. 435. — Loeffler, Ebenda. 1910. S. 1987. — Lorenz, Berlin, klin.
Wochenschr. 1911. S. 118. — Uhlenhuth u. Xylander, Arb. a. d. Kais. Gesh.*
Amt. Bd. 32. 1909. S. 158; Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Ref. Beil. Bd. 42. S. 62.

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Feinmann, Die Flecktyphusepidemie in Riga in den Jahren 1918—1920. 33

Nachdruck verboten.

Die Flecktyphusepidemie in Riga in den Jahren 1918—1920.

[Aq 8 der Infektions-Abteilung des I. Stadtkrankenhauses zo Riga
in Lettland (Oberarzt Dr. E. Rosenthal).]

Von Dr. S. Feinmann.

Die Flecktyphusepidemie wurde nach Riga aus Rufiland eingeschleppt,
nahm daselbst recht groBe Dimensionen an, und ungef&hr 12,5 Proz. der
gesamten BevOlkerung (25000 Personen) waren Opfer dieser Krankheit.
Aus dieser Zahl waren 2329 Personen Patienten unserer Abteilung.
Unsere ersten Pat. waren FlQchtlinge aus RuBland. Bald aber hatten
sich bei uns neue Epidemieherde gebildet, z. B. die Quarantine selbst,
dann die Gefingnisse, die wihrend der Bolschevikenherrschaft uberfiillt
waren; ferner die Armenbauser, Konzentrationslager fflr Kriegsgefangene.
Ein Teil der BevOlkerung hatte mehr als die andeien von der Epidemie
zu leiden, so z. B. Aerzte, Schwestern, W&rterinnen und alle, die mit
Kranken in engere Berflhrung kommen muBten. Unter unseren 2329
Fallen hatten wir 9 Aerzte (f 2), 24 Schwestern (f 2), 86 W&rterinnen
und Knechte (f 10); also 5 Proz. der gesammten Krankenzahl.

Die Jahreszeit hatte verhiltnismiBig wenig EinfluB auf die Dimen¬
sionen der Epidemie, dagegen viel mehr die Bolschevikenherrschaft,
wihrend der die Krankenzahl besonders hoch war, und zwar scheinbar
unabhingig von der Jahreszeit und dem Geschlecht. Unter unseren
Pat. war die Zahl der Manner nur wenig grfiBer als die der Fr&uen
(1210: 1119).

Dagegen hatte das Alter scheinbar gewissen EinfluB, indem die
Seuche unter 15—30-jihr. Leuten besonders stark auftrat, wogegen die
Zahl der fleckfieberkranken Kinder, besonders vor ihrem 5. Lebens-
jahre, verhaltnismiBig klein war; jedoch blieb kein Lebensalter ganz
von der Krankheit verschont. In 3 Fallen baben wir Wiederholung der
Krankheit beobachtet:

Der 1. Fall betraf eine 41 Jahre alte Frau, die 1889 fleckfieberkrank gewesen
war. (1m Archive wurde ihre Krankengeschichte vorgef unden.) Die 2 n ache ten Fa lie
betrafeu Personen, die vor 1 resp. l*/ s Jahren Flecktyphus durchgemacht hatten und
jetzt zum 2. Mai daran erkrankten.

Diese F&lle verliefen verhaitnismaBig leicht, ohne jegliche Kom
plikationen.

In 3 Fallen konnten wir eine Dauer des Inkubationsstadiums von 12 Tagen fest-
stellen.

Die Krankheit begann gewohnlich mit Kopf-, VVaden-, Gliederschmerzen, Appetit-
losigkeit, Temperaturerhohung und Schlaflowigkeit. Der Zustand verschlimmerte sich
allmahlich una am 3.-4. Tage suchten die Pat. gewohnlich das Bett auf. Am 5. Tage
begann gewbhnlich die Eruption, mit deren Eracheinung die quiilenden Kopfachmerzen
meiat achwanden. Spater kam oft grode Somnolenz oder Bewulitloaigkeit, Delirium
hinzn. Die Temperatur blieb die gunze Zeit erhoht. der Puls beschleunigt, spater
weich; Zunge trocken, belegt, die Conjunctivae injiziert. Mitte oder Ende der 2. Woche
begann eine beechleunigte Lysis — und in 2—3 Tagen wurde die Temperatur normal,
die Rekonvaleezenz trat ein.

£nt« Abt. Orig. Bd. 87.

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Heft 1.

3

Qrifinal frem

UNIVERSITY OF CALIFORNIA

34

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 1.

Die typische Temperaturkurve war ahnlich der Abdominaliskurve unter Wegbleiben
des amphibolen Stadiums. Die Temperatur etieg alimahlich, aber schnell, und schon
im Laufe der ersteo 3 Tage erreichte sie ihre Kulmination. Dann begann eine Continua,
die kiirzer als beim Abdominalis war und mit einer schnellen Lysis von 2—3 Tagen
eudete. Selten (nur in 2 Proz.) war eine Kurve, die in den Lehrbuchern als typisch
beschrieben wird, d. b. einen Anfang mit Scbiittelfrost und plotzlichem Temperatur-
anstieg und Ende mit einem kritischen Abfail und Scbweifl hatte. In typiscben Fallen
(1431) steilte sicb eine erhdhte Temperatur fur 13—17 Tage ein; in 5D2 Fallen fur
13 Tage, 109 14 Tage, 133 15 Tage, 69 16 Tage und in 428 Fallen fur 17 Tage. In
einigen, meist leichteren Fallen, wurde die Temperatur oft normal schon vor 13 Tagen;
in 2 Fallen am 7. Tage, 5 am 8., 15 am 9., 33 am 10., 56 am 11., 36 am 12. Tage.
In einzelnen Fallen wurde sie aucb etwas spater normal, nach dem 17. Tage; in 72 Fallen
am 18. Tage, 52 am 19., 28 am 20. Tage. Nicht immer war die Temperatur so typisch.
In 6 Fallen saben wir am 6.-7. Tage und einmal auch am 4. Tage einen plbtzlichen
Temperaturabfall, dann stieg die Temperatur alimahlich wiederan, wurde eine Continua
und fing dann wieder an langsam abzufallen. Oft sahen wir ein betrachtliches Tem-
peraturansteigen kurz vor dem Tode. Wahrend der Rekonvaleszenz, besonders in den
ersten Tagen, war die Temperatur oft subnormal, 35—36°. Oft dauerte dieser Zustand
7—8 Tage. Spater beobachteten wir aucb geringe Temperaturanstiege, 37,2—37,5 °. Das
Exanthem pflegte zwischen dem 4, und 6., meist am 5. Krankheitstage zu erscheinen.
Sehr sparlich am Anfang, wurde es reicblicb wahrend der nachsten 24—48 Std., be-
deckte oft den ganzen Korper, beginnend an Brust und Abdomen, mit Ausnahme der
Handflacbe und Sohlen, die immer frei von jeglicber Eruption blieben. In einzelnen
Fallen war das Exanthem recht sparlich und blaflte bald ab, in anderen reichlich und
war wahrend der ganzen Fieberperiode sichtbar. Einzelne der Roseolae wandelten
sich spater in Petechiae um. In einzelnen schweren, meist todlich endenden Fallen
waren die Petechiae sehr zahlreich und bedeckten den ganzen Kbrper (7 Proz.). Mehrere
Fleckfieberfalle verliefen ohne Exanthem. Wir konnten vom Anfang an die Krankheit
von 2 Pflegerinnen aus der Flecktyphusabteilung beobachten, deren Blut in beiden
Fallen eine positive Weil-Felix-Keaktion gab. Die Krankeit dauerte 13 Tage und
verlief ohne Exanthem. Zweifellos handelte es sich um Falle von Typhus exanthematic.
sine exanthemate. Abschuppung der Haut wahrend der Rekonvaleszenz war sehr oft
zu beobachten. Das Nervensystem hatte immer mehr oder weniger unter den Wir-
kungen der Fleckfiebertoxine zu leiden: in 80 Proz. der Autopsien wurde Encephalitis
festgestellt (Dr. Adelheim). Der Beginn der Krankheit wurde gekennzeichnet durch
Schwache, starke Kopfschmerzen, deren Intensitat bis zur Eruption anstieg, dann aber
meist abnahm oder ganzlich verschwand; durch Wadenschmerzen (in 25 Proz.). Unter
den Initialsymptomen war die 3—4 Nachte andauernde Schlaflosigkeit eins der qual-
vollsten. In der 2. Woche der Krankheit trat oft in den giinstig verlaufenden Fallen
ausgesprochene Apathie und Somnolenz, die bis zum Abliebern dauerte, ein. Auch
in schweren Fallen war das Bewufltsein wahrend des Anfangs der Krankheit klar 9
spater, in der 2. Woche, meist getriibt. Vdllige Besinnungslosigkeit beobachteten wir
in 20 Proz. unserer Falle. Oft waren die Pat. sehr unruhig und phantasierten. Be¬
sonders stark war das Delirium bei Alkoholikern, bei denen ausgesprochene Anfalle
von Delirium tremens, besonders in der Nacht, vorkamen. Wahrend der Rekonvaleszenz
klagten die Pat. oft uber vollige Amnesie betreffs der Vorkommnisse der letzten Krank-
heitszeit. Voriibergehende Gedachtnisschwache wahrend der Genesung war bei vielen
Pat. zu beobachten; desgleichen neuralgische Schmerzen an den Beinen, Fufien, Fingern.
Eine Pat. wurde nach dem Fleckfieber blind infolge Atrophie der Nn. optici. In
2 Fallen traten echte Psychosen nach der Krankeit auf. In vielen Fallen wurde bald
wieder verschwindende Schwerhorigkeit beobachtet, und zwar seltener im Beginn der
Krankheit, haufiger aber wahrend der Rekonvaleszenz. Otitis med. acuta mit Perforation
des Trommelfelles wurde registriert in 1,5 Proz. der Falle. Conjunctivitis palpebrarum
et bulbi oculi wurde in der Mehrzahl der Falle (75 Proz.) beobachtet.

In den ersten Tagen der Krankheit war der Puls meist beschleunigt, entsprechend
der Temperaturhohe. Unverhaltnismafiige Beschleunigung des Pulses gegeniiber der
Fieberhohe (Kreuzung der Puls- und Temperaturkurve) in schweren Fallen war ein
Zeichen der Verschlimmerung des Zustandes und war auch meist vor dem Tode zu
beobachten, seltener auch kurz vor der ganzlichen Abfieberung. In vielen F&llen be¬
obachteten wir einen unverhaltnismafiig langsamen Puls bei hoher Temperatur. In der
2. Woche wurde der Puls meist kleiner und schwacher, in schweren Fallen arhythmisch,
kaum zahlbar; auch trat Herzschwache mit Cyanose des Gesichtes und der Extremi-
taten ein. Oft blieb der Puls auch in den ersten Tagen der Rekonvaleszenz sehr labil,
und die geringste Anstrengung oder Aufregung rief Pulsbeschleunigung hervor; in
anderen Fallen dagegen war eine Bradykarcfie (40—56 in der Minute) zu beobachten.

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Feinmann, Die Flecktyphusepidemie in Riga in den Jahren 1918—1920. 35

Venenthrombose (besonders der Cruralvenen) war eine haufige Komplikation, Endo¬
carditis eine eehr seltene (0,5 Proz.).

Palpatorische Milzvergrbflerung beobachteten wir in 25 Proz., und zwar meist in
der 1. Woche.

Vor der Abfieberung trat zuweilen Nasenblutung ein ; sie war in einzelnen Fallen
recht intensiv. Bronchitis trat in 4 Proz. auf. Pneumonia, Bronchopneumonia, meist
in den unteren Lappen, war eine seltene Komplikation (2,9 Proz.). Sie trat in der
2. Woche der Krankneit auf, ofters aber wahrend der Rekonvaleezenz. Noch seltener
war Pleuritis exsudativa (0,5 Proz.). Tuberkulose nach dem Flecklieber erschien meist
wohl als Resultat vorher latent verlaufener tuberkuloser Prozesse. Lippen, Gaumen
waren trocken, Zunge trocken, belegt (85 Proz.). In schweren Fallen machte es den
Pat. Muhe, die Zunge zu zeigen, una gel an g es ihnen, so zitterte sie. Verstopfung war
Regel; Erbrechen (14 Proz.) selten am Anfang der Krankbeit, meist in den ersten Tagen
der Genesung.

In vielen Fallen war vorubergehende Albuminurie zu beobachten; in 7 Fallen
Nephritis, an der der grdfite Teil aieser Pat. (6) einging. In einigen Fallen wurde
auch eine positive Diazoreaktion beobachtet. Vorubergehende Retentio urinae (1,5 Proz.)
fand sich ofters bei Frauen als bei Mannern. Die Menses kamen oft friiher, waren
reichlicher als gewohnlich. Die Graviditat verlief meist ohne Komplikationen, nur in
4 Fallen (von 21) kam es zu Abort, und in 4 anderen zu fruhzeitiger Geburt. Re-
zidive wurden nie beobachtet. Ternperaturansteigen in der Rekonvaleezenz wurde
irnmer hervorgerufen durch irgendeine Komplikation. Abortive Falle von 7—8—9—
10—11—12 Tagen waren meist leichtere Falle, doch fiel die kurzere Dauer und geringe
Bchwere der Krankheit nicht immer zusammen. Abortive Falle — meist bei Kindern
beobachtet — betrngen 6 Proz. unserer Falle. Ambulatorische Fleck fieberfalle sind
hdchst wahrscheinlich. In einzelnen Fallen beobachteten wir T. exanthem at. gleich-
zeitig mit anderen Krankheiten: in 10 Fallen mit Febris recurrens, wahrend des
Sommers in 6 Fallen gleichzeitig mit Dysenteric; in 1 Falle Variolois gleich nach dem
Fleckfieber, in 2 Fallen Scarlatina.

Durchschnittsdauer der Krankheit war 13—17 Tage, worauf die Konvaleszenz
begann, die in Fallen ohne Komplikationen recht schnell verlief. 5—7 Tage nach dem
Abfiebern konnten die Pat. das Bett verlassen und 10—14 Tage spater auch das Kranken-
haus. Oft aber wurde die Konvaleszenz in die Lange gezogen durch verschiedene
Komplikationen, und zwar meist der Atmungsorgane: Bronchitis in 92, Pneumonia,
Bronchopneumonia in 72, Pleuritis exsudativa in 14 Fallen; seltener des GefaBsvstems
(Endocarditis und Venenthrombose) und noch seltener der Harnorgane (Nephritis).
Decubitus war verhaltnismafiig selten (42 Falle), und nur in schweren Fallen, wo eine
tiefe Nekrose der Gewebe im Gebiete des Os sacrum, Trochanterum femoris (lmal auch
der Ohrmuschel und Scapulae) zustande kam. In 15 Fallen hatten wir Erysipelas in
der Konvaleszenz, in 48 Entziindung der Speicheldrusen, meist einseitige, seltener
doppelseitige Parotitis, lmal Entziindung der Gland, sublingualis. Die Komplikationen
waren oft (in 20 Proz. der Todesfalle) auch Drsache des fatalen Ausganges der Krank¬
heit, besonderB bei jiingeren Personen. In fatalen Fallen ohne Komplikationen wurde
der Tod durch Herzschwache hervorgerufen (in 80 Proz. der Todesfalle). Wahrend
der g&nzen Epidemie hatten wir 309 Todesfalle, 13,26 Proz. der gesamten K ran ken zahl.
Anzunehmen 1 st, dafl die Mortalitat wahrend der Epidemie in der Stadt etwas geringer
gewesen ist und nur schwere Falle in unsere Hande gelangten, die natiirlich ofters
einen uuglucklichen Ausgang hatten. Der Hauptausbruch der Epidemie erfolgte wahrend
der Bolschevikenherrschaft, wahrend welcher, wie erwahnt, die Lebensbedingungen sehr
schlechte waren, trotzdem war die Epidemie keine besonders bosartige. Das Geschlechfc
war ohne EinfluB auf die Mortalitatshaufigkeit; die Zahl der fatalen Falle war bei
beiden Geschlechtern ungefiihr gleich (160 : 149). Dagegen hatte das Alter einen ge-
wissen EinfluB. Der groBte Teil unserer Todesfalle betraf Pat. iiber die 40er Jahre,
67 Proz. der gesamten Zahl. Die Mortalitat bis zum 10. Lebensjahre war 0, stieg dann
allmah lich und erreichte 70 Proz. iiber die 60er Jahre. Reichsdeutsche schienen schwerer
als die hiesige Bevolkerung and die Juden weniger als andere Nationalitaten durch
die Krankheit zu leiden. In Fallen ohne Komplikationen trat der Tod zwischen dem
10. und 17. Tage ein (in 64 Proz.). Friihes Erncheinen schwerer IStorungen seitens des
Nerven- und Zirkulationssystems machte die Prognose sehr bedenklich, doch gab es
Ausnahmen, wo der Puls mehrere Tage kaum zu fiihlen war und doch spater Genesung
eintrat. Friihes und schnelles Verwandeln der Roseola in eine reichliche petechiale
Eruption war ein boses Zeichen fur die Prognose, desgleichen das Erscheinen von
Komplikationen, besonders Nephritis, Pneumonie, Pleuritis.

In zweifelhaften Fallen kiarte die Weil-Felixsche Reaktion oft
die Diagnose. Sie war meist nur in der 2. Krankheitswoche positiv,

: 3*

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CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 1.

dann und wann auch am Ende der 1., aber dann nor bei schwacher
Konzentration (1:50—1:100), bei erneuter Untersuchung auch bei stfir-
kerer (1:200—1:400). In einzelnen Fallen blieb die Reaktion wahrend
der ganzen Krankheit positiv nur bei Serum in schwacher Verdflnnung
(1:100 — 1:200); sie blieb aber negativ bei 1: 400—1 :1000. Eine posi¬
tive W eil-Felix-Reaktion bei Verdflnnung von 1:100 gait als ge-
nflgend, um die Diagnose sicherzustellen. Das positive Resnltat bei
Verdflnnung 1:50 war ungenflgend, da sie auch bei anderen Krank-
heiten positiv ausfallen kann. Die Agglutination trat meist schon in
den ersten 30 Min. ein; war das in der Zeit nicht der Fall, so gait sie
als negativ. In Fallen mit undeutlicher Eruption versuchten wir oft
die Biersche Stauung des Armes, bei der nach 15 Min. oft ein.deut-
liches petechiales Exanthem, besonders in der Cnbitalgegend, auftrat.
Diese Hilfsmethode ist aber nicht zuverlassig. da sie positive Resultate
anch bei anderen Krankheiten, wie Scarlatina nnd anderen, gibt. Unsere
Therapie war eine rein symptomatische. Einige Male versuchten wir
Neosalvarsan (0,75), erzielten aber keine Wirkung auf den weiteren
Verlauf der Krankheit. Sorgfaltige Pflege und Darreichung von Cardiaca
waren die Hauptanfgaben der Behandlung. Unsere Aufgabe bestand
auch im Kampfe mit den L&usen, durch die die Krankheit Qbertragen
wird. Die materielle Lage der Bevolkerung hatte auch einen groBen
EinfluB auf die Krankheitsverbreitung. W&hrend der Bolscheviken-
herrschaft, wo die Bevolkerung mit ganz geringen Ausnahmen nnter
Hunger und Not stark zn leiden hatte, nahmen die Dimensionen der
Epidemic rapid zn. Nach der Befreiung von den Kommunisten jedoch,
als unsere Nahrung nnd Lebensbedingungen sich besserten, nahm die
Epidemic rapid ab, und in den letzten Zeiten waren fast alle unsere
Pat. Fldchtlinge aus Rufiland, wo die Epidemic auch jetzt noch auBer-
ordentlich verbreitet ist.

Naohdruok verboten.

Ueber die Mnkultur des Pockenerregers.

6. Mitteilung.

Von W. Fornet, Saarbrflcken.

Mit 1 Abbildung im Text.

Die mit einem Vortrage auf dem XVII. Internat. Medizin. Kongrefi
zu London 1913 begonnenen Mitteilungen fiber die Reinkultur des
Pockenerregers sollen durch nachstehende Veroffentlichung zu einem
vorlfiufigen AbschluB gebracht werden, da es mir zunfichst nicht mfig-
lich sein wird, diese Untersuchungen fortzuffihren. Aus meinen bisher
veroffentlichten (1—5) Versuchen batten sich folgende Schlfisse ergeben:

1) Durch Behandlung von Rohlymphe mit Aether gelingt es, die zahlreichen Be-
gleitbakterien des Pockenerregers abzutbten, ohne dabei die Lebensfahigkeit desselben
und damit seine Brauchbarkeit zur Pockenschutzimpfung zu vernichten.

2) Unter geeigneten Kulturbedingungen kann der rockenerreger zur Vermehrung
gebracht werden.

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For net, Ueber die Reinkultur dee Pockenerregers.

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3) Ee gelingt mit den nach unaeren bieherigen bakteriologischen Begriffen vQIiig
aterilen Keinaulturen dee Pockenerregers, bei alien geeigneten Versuchstieren typiache
Pocken zn erzeugen.

4 ) In den Reinkulturen treten kleinate Gebilde anf, die ala die Pockenerreger
anznsenen aind und die von mir die Bezeicbnnug Microaoma variolae erhielten.

5) Die ana Material von echten Pockenkranken erzielten Reinkulturen dea Pocken-
erregers unterechieden sich in nichta von aolchen, die aus gewdbnlicher Rohlymphe
angelegt waren.

Diese Mitteilungen sind schon verscbiedentlich nachgepriift, aber
bisber nur teilweise best&tigt worden. Es sollen daher im folgenden
technische Einzelheiten hinzugefflgt warden, die eine eingehendere Nach-
prfifung meiner Versuche gestatten:

Ueber die Entkeimung von Rohlymphe unter
Erhaltung ibrer spezifischen Wirksamkeit war
bisber nur mitgeteilt worden, dafi sie gelingt,
wenn man Rohlympbe 24—100 Std. lang mit
Aether schfittelt. Das Ergebnis dieser Behand-
lung war nicht immer gleichmaBig und hing, wie
sich erst sp&ter herausstellte, von der jeweils im
Laboratorium herrschenden Temperatur ab. Um
diesen Faktor auszuschalten und die Einbaltung
einer bestimmten Temperatur nach Mbglichkeit
bei alien Versuchen automatisch sicherzustellen,
wurde der flflssige Aether durch den Aether-
dampf ersetzt.

Hierzu bediente icb mich des nebenstehend
abgebildeten Apparates. Aus dem halb mit Aether
gefflllten GeffiB A gelangen die Aetherdfimpfe
durch den Vorraum V und durch die Steig-
rbhren St in den Innenraum J, in dem sich
die zu behandelnde Rohlymphe befindet. Die
Aetherd&mpfe versetzen die Rohlymphe in
starke Wallung, steigen empor, kondensieren
sich an der OberflSche des Kilhlers K und der
fl&ssige Aether tropft durch das Trichterrohr 2
in das Ausgangsgef&B A zurlick, um von dort
aus wieder seinen Kreislauf zu beginnen. Der

ganze Apparat ist aus Glas hergestellt, steht j«j„ 1# Fornetscher
in einem Wasserbade von 42° und kann nach Aetherdampfapparat D.R.P.
einer freundlichen Mitteilung. die ich Herrn Pro- Nr - 334670.
fessor Plaut-Hamburg verdanke, ohne Schaden

im strbmenden Dampf sterilisiert werden. Im iibrigen sterilisiert sich
der Apparat selbst durch den Aetherdampf, wenn man den Apparat
vor Gebrauch l&ngere Zeit leer laufen lafit.

Bei Verwendung des Aetherdampfes an Stelle von flilssigem Aether
ergab sich nun die bemerkenswerte Tatsache, daB zur Erzielung der
gleichen Wirkung nur etwa der hundertste Teil der bis dahin notwen-
digen Behandlungszeit erforderlich ist. In der Regel werden die Be-
gleitbakterien durch den Aetherdampf bereits nach 5—10 Min. ab-
getStet, wfihrend sich der Pockenerreger dann noch lebensfflhig er-
weist.

Bei der vielfachen Wiederholung dieses Versuches hat sich nun
herausgestellt, daB in der vom Kalbe gewonnenen Rohlymphe nicht all-
zu selten Begleitbakterien vorkommen, die eine erheblich grdBere Wider-

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Centr&lbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

standsfahigkeit gegen den Aetherdampf besitzen und durch ihn erst
nacb 30 Min. abgetdtet werden. In solchen Fallen handelte es sich
moistens um Kokken. Auch Sporenbildner bieten fflr die Entkeimung
von Rohlymphe durch Aetherdampf ein Hindernis, das aber durch be-
sonders strenge Stallhygiene (Holzwolle als Streu etc.) von vornherein
ausgeschaltet werden kann.

Die besten Ergebnisse erzielt man, wenn die Rohlymphe noch lebens-
warm in einer sterileu Lymphmiihle mit der 10- fachen Menge ange-
wkrmter physiol. Kochsalzlosung verrieben und sofort anschliefiend daran
atherisiert wird. Nach dieser Behandlung muB der Aether zur Ver-
meidung einer schadigenden Nachwirkung sofort unter hohem Vakuurn
entfernt werden.

Bei Prflfung der so von den Begleitbakterien befreiten Rohlymphe
auf „Sterilitat“ ist es notwendig, mindestens y, ccm davon in ein
Erlenmey er-K5lbchen mit 100 ccm Bouillon zu geben, diese 5 bis
6 Tage lang bei 37° zu bebrflten und hiervon je 1 ccm auf mehrere
SchrSgagarrflhrchen zu iibertrageD. Andernfalls besteht die Gefahr, daB
die wachstumshemmende Nachwirkung des Aetherdampfs Sterilitat vor-
tauscht, obwohl sich in der Lymphe noch vereinzelte fremde Keime
lebensfahig erhalten haben. An Stelle von Aether konnen auch Petrol-
ather, Benzol, Schwefelkohlenstoff, Trichlorathylen und andere leicht
siedende Flflssigkeiten verwendet werden, gegebenenfalls unter Anwen-
dung eines Vakuums bei L am Kflhler K.

Die Prflfung der so als „steril“ befundenen Lymphe auf ihre spezi-
fische Wirksamkeit geschieht durch den Paulschen Kornealversuch und
durch intrakutane Injektionen von Lymphverdflnnungen am enthaarten
Kaninchen. Zum Vergleich werden Verdflnnungen von nicht atherisierter
Rohlymphe Oder von kauflicher Glyzerinlymphe dem Kaninchen auf der
anderen Seite des Rtickens ebenfalls intrakutan eingespritzt. Bei diesem
Vergleich ist zu berflcksichtigen, daB die Aetherlymphe bereits vor der
Aetherisierung auf das 10-fache verdflnnt worden ist. Eine 5—7 Min.
lang atherisierte, „sterile tt Lymphe erwies sich meist noch in einer Ver-
diinnung von 1 :100 als wirksam.

In der angegebenen Weise „sterilisierte“ und als spezifisch wirksam
befundene Lymphe bildet nun das geeignete Ausgangsmaterial fflr Kultur-
versuche. Als Kulturflflssigkeit dient, wie schon frflher mitgeteilt, eine
Traubenzucker-Serum-Bouillon unter anaeroben Bedingungen. Bringt
man 1 ccm atherisierter, also von vornherein auf 1:10 verdflnnter Roh¬
lymphe in einen Pasteurschen Kolben mit 100 ccm dieser Kultur-
bouillon, so erweist sich diese Mischung zunflchst sowohl im Paulschen
Kornealversuch, als auch bei der Intrakutanprobe am Kaninchen als
vollig unfahig, eine fflr Pocken spezifische VerAnderung hervorzurufen.
Wiederholt man aber dieselben Versuche, nachdem die KOlbchen 7 bis
10 Tage bei 30° gestanden haben, so beobachtet man in beiden Ver-
suchsanordnungen die bekannten typischen Pockenverflnderungen.

Da der Kolbeninhalt nach bakteriologischen Begriffen steril ge-
blieben ist und da er die Fahigkeit, typische Pockenveranderungen zu
erzeugen, erst im Laufe der Bebriitung erworben hat, ist hierin ein
Beweis fflr die Kultur, und zwar fflr die Reinkultur des Pockenerregers
zu erblicken.

Eine andere Versuchsanordnung, durch die das Wachstum des
Pockenerregers veranschaulicht werden kann, bildet die Kultur in
Kapillarrohrchen nach Vincent, wobei eine 1-proz. Traubenzucker-

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Neumark u. Heck, Ueber Ratten vertilgungsmittel.

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Glyzeringelatine mit Indigozusatz zur Verwendung gelangt. Die an-
fangs blauen Kapillaren nehmen nach mehrtagiger BebrQtung bei 30°
einen grdnlichen und schliefilich einen kanariengelben Farbton an. Da
der Inhalt der Kapillaren bakteriologisch „steril u ist, kann diese in den
unbeimpften KontrollrQhrchen ausbleibende VerSnderung des Indigos
nur durch den gleichzeitig eingebrachten Pockenerreger hervorgerufen
sein. Diese LebensauBerung des Pockenerregers muB aber mit einer
Vermehrnng desselben einbergeben.

Die Vermehrung des Pockenerregers l&Bt sich endlich auch un-
mittelbar mikroskopiscb, enter Verwendung geeigneter FSrbemethoden,
veranschaulichen. Am besten eignet sich hierzu die von Paschen
angegebene Metbode mit Loeffler-Beize und Karbolfuchsin. Man
findet dann in den als wirksam befundenen Kulturfldssigkeiten die frtther
von inir beschriebenen und pbotographisch wiedergegebenen, als Micro¬
soma variolae bezeichneten Gebilde.

Literatux.

1. Dtech. med. Wochenschr. Bd. 39. 1913. S. 1813. — 2. Berlin, klin. Wochenscbr.
1913. Nr. 40. — 3. Hyg. Rundsch. 1913. Nr. 23/24 u. Wien. med. Wochenechr. 1913.
Nr. 41. — 4. Rev. intern, de la Vaccine, Sept.-Okt. 1913. — 5. Berlin, klin. Wochen-
echri/t 1913. Nr. 50.

Naehdruek verboien.

Ueber Rattenvertilgungsmittel ‘).

[Aus dem Hauptgesundbeitsamt der Stadtgemeinde Berlin. (Hygienisch-

bakteriologiscbes Institut).]

Von Dr. Eugen Neumark und Dr. Heinrich Heck.

Infolge der Kriegsverhaitnisse hat in Deutschland, das frtther un-
bestritten als eines der reinlichsten Lander gait, eine Starke Zunahme
von Ungeziefer der verschiedensten Art stattgefunden. Verlausung von
Menscben und Wohnst&tten, Verwanzung der Hauser, besonders in
groBeren Stadten, usw. sind Erscheinungen, die alienthalben aufiraten
und auch heute noch in gegen die Friedenszeit stark erhohtem Mafie
bestehen. Eine andere Art von Ungezieferplage ist die erhebliche Zu¬
nahme von Mausen und besonders Ratten. Auch in diesem Falle ist
die Hauptursache in dem Rttckgang der allgemeinen Reinlichkeit zu
seheii. Wahrend des Krieges waren besonders der Mangel an Arbeits-
kraften, die unzweckmBBige Lagerung riesiger Mengen Lebensmittel, die
Verschlechterung der Schutt- und Mflllaufbewahrung und -abfuhr, das
Halten von Kleinvieh in menschlichen Behausungen Oder deren un-
mittelbarer Nahe Umstande, die zur Verbreitung und Vermehrung der
lAstigen Nagetiere beitrugen. Wenn auch die Ratten als UebertrBger
menschlicher Krankheiten (Trichinose, ansteckender Gelbsucht, Pest) in
Frage kommen kOnnen, so spielt, wenigstens bei uns, ihre wirtschaft-
liche Bedeutung die Hauptrolle. Enorme Mengen Nahrungsmittel fallen
ihrer GefraBigkeit zum Opfer. Nicht nur Deutschland ist von der

1) Nach einem Vortrag in der Berliner Mikrobiologischen Gesellschaft, gehalten
am 25. April 1921.

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40 Centralbi. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Rattenplage befallen, auch andere europfiische Lander haben darnnter
zu leiden. In England hat man sogar ein besonderes Gesetz zur Ver-
tilgung der Ratten erlassen.. Nach Dewberry 1 ) wird der in GroB-
britannien und Irian d durch Ratten jahrlich verursachte Schaden anf
mindestens 15 Mill. Pfund geschfitzt, nach anderen Angaben sind es
sogar 40 Mill. Pfnnd. Nach Mitteilung der frauzosischen Tagespresse
herrscht anch in Paris und anderen Stadten eine Starke Rattenplage.

In Berlin sind besonders in den letzten beiden Jahren aus den
Kreisen der verschiedensten Verwaltungsstellen stfidtischer und staat-
licher Art sowie aus Hausbesitzer* und Mieterkreisen Klagen fiber die
Zunahme der Ratten lautgeworden, so dafi beinahe von einer allge-
meinen Rattenplage gesprochen werden kann. Einzelne Vororte von
Berlin haben sich veranlaBt gesehen, von Gemeinde wegen dagegen vor-
zugehen. Bisher mit wenig befriedigendem Erfolg. Auch in anderen
Stfidten und Gemeinden des Reiches herrschen fihnliche Verhaitnisse.

Hier in Berlin, wo allerdings die Verhaitnisse besonders ungfinstig
liegen, hat man die alte Erfahrung bestatigen mfissen, dafi der einzelne
Haus- und Grundstficksbesitzer auf die Datier allein wenig gegen die
Ratten ausrichten kann. Man ist sich vollstfindig im klaren, dafi eine
wirksame Bekfimpfung von behfirdlicher Seite im Einvernehmen mit den
Grundbesitzer- und Mieterverbfinden nach einheitlicbem Plan energisch
und moglichst gleichzeitig in die Wege geleitet werden mufi. Die Be-
kampfung der Rattenplage hat in der Abstellung ihrer Ursachen und in
der Vernichtung der Ratten selbst zu bestehen.

Mit der Zunahme der Ratten nahm auch die Zahl der von den ver¬
schiedensten Seiten angepriesenen Mittel zu ihrer Vernichtung zu. Eine
grfifiere Anzahl der auf dem Markt erschienenen Praparate wurde von
uns auf ihre Wirksamkeit geprfift.

Es handelt sich zunfichst um 2 Gruppen von Rattenvertilgungs-
mitteln:

1) Bakterienpr&parate und 2) Giftpraparate.

1 .

Von Mitteln, deren wirksames Prinzip rattentfitende Bakterien sein
sollen, untersuchten wir folgende: Rattoleum.Rattenfort, Pogrom,
Pestigen, Ratin, Terror, Rattapan, Rattagallin, Maura-
bazillin, aufierdem einen eingesandten Stamm von Danyszschen
Rattenpestbazillen. Im folgenden mfigen die damit angestellten Ver-
suche kurz besprochen sein.

Das „Rattoleum u ist laut Begleitschreiben „ein in einem Berliner
Laboratorium aus eigener Bakterienzucht, auf Grund jahrelanger Ver-
suche und Erfahrungen hergestelltes und mit Witterung versehenes
Prfiparat“, das ffir Federvieh und andere Haustiere unschfidlich sein soil.
In einem beigegebenen Prospekt wird das Mittel auch als unschfidlich
ffir den Menschen bezeichnet, in einem anderen Prospekt bzw. Merk-
blatt wird dagegen betont, dafi es bei sehr empfindlichen Menschen
Darmstfirungen verursachen kann, wenn etwas davon in den Mund
gelangt.

Das Prfiparat wird in Form von Agarkulturrohrchen, die gleich¬
zeitig auch ein geeignetes Lockmittel enthalten sollen, in den Handel

1) Dewberry, The prevention and destruction of rats. (Journ. of the Roy,
med. Corps. Vol. 34. 1920. p. 335 u. 409.

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Neumark u. Heck, Ueber Ratten vertilgungsmittel.

41

gebracht. Zur Prflfung auf seine Wirksamkeit wurden 2 eingefangene
graue Ratten mit einer ganzen, abgeschwemmten Kultur gefflttert.- Beide
Ratten erschienen zwar nach 5 Tagen leicht krank, erholten sich jedoch
wieder and blieben am Leben. Das Pr&parat lieB also die versprochene
Wirkung vollstflndig vermissen. Bei der bakteriologiscben Prflfung
fanden sich keine als Rattensch&dlinge anzusehenden Bakterien.

Ein weiteres, von Uns untersuchtes, bakterielles Rattenv^rtilgungs-
mittel ist das „Rattapan“. Es wird ebenfalls in Berlin hergestellt.
Dies Pr&parat wurde zum 1. Mai von uns 1918 untersncht. Damals
warden 2 verschiedene Packungen geprtlft: 1) Rattapan fflr Mfiuse
and Wflhlmfiuse and 2) Rattapan fflr Ratten und Hamster.
Der Vollst&ndigkeit halber seien auch die Untersuchungsergebnisse fflr
das „M&use-Rattapan“ mitangefflhrt.

Bei Verimpfung von „M&use-Rattapan“, das Loefflersche
M&usetyphusbazillen enthalten sollte, entwickelten sich auf Drigalski-
C onradi-Agar hauptsSchlich rote Kolonien, die sich bei weiterer Prfl¬
fung als B. coli erwiesen; die wenigen kulturell Paratyphusbazillen
gleichenden Keime versagten bei der Agglatinationsprflfung, waren also
keine typiscben M&usetyphusbazillen. Das Rattenpr&parat sollte
den Danyszschen Rattenpestbazillns enthalten. Trotzdem wird in einem
Prospekt betont, das „Rattapan u sei das einzige Bazillenpr&parat, das
nicht enter die ministerielle Verordnung vom 23. Juli 1917 falle, laut
welcher gewisse VorsichtsmaBregeln und Vorschriften betreffs der Aus-
legung za beachten sind. Durch das Kulturverfahren gelang es nicht,
den spezifischen Bazillus nachzuweisen, vielmehr wuchsen auch hier
grdfltenteils nur C o 1 i - Bakterien und in geringerer Anzahl solche Bak¬
terien, die kulturell dem Paratyphusbazillus entsprachen, serologisch sich
jedoch von ihm unterschieden. Auch durch den Tierversuch an weifien
und grauen M&usen — Ratten standen damals nicht zur Verfflgung —
konnten pathogene Bakterien nicht nachgewiesen werden.

1920 wurden von uns weitere Proben von „Rattapan“ fflr Ratten
untersucht. Das Pr&parat, in Pappkarton verpackt, stellt ein grobes,
braunes Pulver dar, das zahlreiche Splitter von Holz oder Stroh ent-
hd.lt. Ein besonderer Geruch ist nicht wahrzunehmen. Nach dem Auf-
druck wird es als „Bester Ratten- und Hamsterbazillus (z. Pat. angem.) u
und weiterhin als „Epochemachende Erfindung aus dem bekannten
Laboratorium Dr. Piorkowski-Berlin“ bezeichnet. Bei der bakterio-
logischen Untersuchung konnten auch diesmal keine Bakterien aus der
Paratyphusgruppe nachgewiesen werden. Lediglich B. coli und Kokken
kamen zur Entwicklung. Zunfichst wurden 3 graue Ratten fortlaufend
gefflttert. Am 5. Tage zeigten 2 davon leichte Krankheitserscheinungen.
Nach 14 Tagen lebten jedoch noch alle geffltterten Tiere. Mit einer
zweiten Probe, die doppelte Starke haben sollte, wurden 2 weitere
Ratten 11 Tage lang gefflttert, ohne daB es gelang, sie krank zu
machen.

„Rattapan“ erwies sich also nach unseren Versuchen als vflllig
ungeeignet zur Rattenvertilgung. Zu den gleichen Resultaten kamen
auch Raebiger und Baumeier 1 )-

Das n&chste Pr&parat „Rattenfort“, kommt als Agarschragkultur
in den Handel. Auch hier soil der N&hrboden gleichzeitig die Witte-

1) Raebiger u. Baumeier, Ber. iiber die Tatigk. dea Bakt. Inat. der Landw.-
Kammer f. d. Prov. Sachsen f. 1918/19. 1920. S. 25.

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Ccntralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

rung enthalten. 2 eingefangene graue Ratten warden mit dem Inhalt
eines Rohrchens gefiittert. Beide Tiere blieben am Leben, ohne Krank-
heitserscheinungen zu zeigen. Eine Ratte bekam sogar wShrend der
Versuchszeit Jungo. Eine bakteriologische Untersuchnng der 1. Probe
land leider nicht statt. Uebrigens hat Uhlenhuth 1 ) dieses Praparat
neuerdings auch untersucht. Er kam bezflglich der Wirksamkeit zu
demselben negativen Ergebnis. Bei der bakteriologischen Untersuchung
konnte Uhlenhuth feststellen, daft es sich um eine Mischkultur von
Kokken, Proteus und Sporenbildnern handelte. Nur in 2 von 7 ge-
prflften Proben fand er auch paratyphus&hnliche Bakterien, die durch
GSrtner- bzw. Danysz-Serum jedoch nicht agglutiniert warden.
Neuerdings, d. h. nach Erscheinen der Uhlenhuthschen Arbeit, haben
wir nochmals „Rattenfort“ untersucht, das wir direkt von dem Her-
steller bezogen. Diesmal war es eine Reinkultur von Stabchen, die sich
kulturell wie Paratyphus verhielt und von Gartner-Serum agglu-
tiniert wurde. Eine rattenpathogene Wirkung war auch diesmal nicht
festzustellen.

Also auch das Praparat „Rattenfort“ erwies sich in unseren
Versuchen wie in denen Uhlenhnths als wirkungslos.

Das folgende Praparat „Pogrom u wird ebenfalls in Form von
Agarkulturrohrchen abgegeben. Dem Praparat sind Drucksachen (Pro-
spekt und Merkblatt) beigegeben, die beide bis auf den Kopf nach Form
und Inhalt vollstandig mit den Drucksachen betr. das bereits erwahnte
Bakterienmittel „Rattoleum“ Qbereinstimmen. Die beiden Praparate
scheinen demnach aus derselben Quelle zu stammen.

Die von der betr. Firma erbetene Rultur erwies sich bei mikro-
skopischer und kultureller Untersuchung vor alien Dingen als keine
einheitliche Art von Bakterien. Es fanden sich hauptskchlich knrze,
plumpe, gramnegative Stabchen, teilweise mit Scheinfadenbildung, da-
neben reichlich grampositive, groBe Diplokokken. Auf. Drigalski-
Conradi-Agar wuchsen grQfiere und kleinere rote Kolonien, sowie
kleinere weiBlicbe. Das Praparat bestand aus einer Mischkultur von
Bacterium coli und Kokken. Bakterien der Paratyphusgruppe lieBen
sich nicht nachweisen. Ffltterungsversuche an einer Anzahl grauer
Ratten fielen trotz Verabreichung groBer Mengen Kultur vOllig negativ
aus. Die Ratten blieben am Leben und wurden nicht einmal krank.

Wir haben es also auch hier wieder mit einem Praparat zu tun,
das vollstandig wirkungslos ist, und es nach seiner Zusammensetzung,
wie sie von uns festgestellt wurde, auch sein muB. Eine grofie Ber¬
liner Vorortgeraeinde, Steglitz, hat mit diesem Praparat eine „Ratten-
woche“ veranstaltet. Ein befriedigender Erfolg wurde nicht erzielt.

„P e s t i g e n“, ebenfalls in Form von Agarkulturen im Handel, wies
bei der bakteriologischen Untersuchung nur verschiedene Kokkenarten
und Subtilis-ahnliche Stabchen auf. Paratyphusahnliche Bakterien
fehlten. Eine rattentbtende Wirkung war nicht festzustellen.

„Rattagallin“ ist eine mit Bakterien durchsetzte und mit K8der
versehene Gallertmasse, die in Tuben gefiillt in den Handel gebracht
wird. Nach der Gebrauchsanweisung ist die Masse in teelOffelgroBen
Portionen auf kleine StQckchen Zeitungspapier auszudrflcken, diese sind
zusammenzufalten und an entsprechenden Stellen auszulegen. Das wirk-

1) Uhlenhuth, Gutachten iiber einige Handelspraparate von Batten- und Mause-
vertilgungsmitteln. (Central!)!, f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 85. 1 ICO. 8. 186.)

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Neumark a. Heck, Ueber Rattenvertilgungsmittel.

43

same Prinzip sollen Danysz-Bazillen sein. Die Verpackung io Tuben
erscheint recht praktisch and wSre geeignet, eine bequeme Anwendang
des Pr&parates zu gew&hrleisten. Das „Rattagallin“ wtirde also
einen Fortschritt bedeuten, wenn mit ihm eine nennenswerte Wirkung
erzielt werden kQnnte. Unsere nach dieser Richtung hin angestellten
Versuche baben folgendes ergeben:

Bei der kultarellen Untersuchung, ZQchtung auf Drigalski, lieBen
sich Bakterien aus der Paratyphusgruppe nicht nachweisen, lediglich
rotwachsende Kolonien, die sich bei weiterer Prflfung als B. coli er-
wiesen, kamen znr Entwicklnng. FQtterungsversuche an einer Anzahl
grauer Ratten (5 Tiere) verliefen vollst&ndig negativ. Die Tiere er-
krankten nicht. Also anch bei diesem Pr&parat wieder vdllige Wirkungs-
losigkeit.

Ein ahnliches PrSparat wie „Rattagallin“ ist das „Maurabazillin“.
Es stellt eine feste, gallertige, agar&hnliche Masse dar, die in WeiB-
blechdosen zum Versand kommt. Nach Angabe der Hersteller soli das
Pr&parat aus dem N&hrboden, in dem die Bakterien geztlchtet wurden,
also aus Agar und Bouillon, bestehen. Hierdurch soil erreicht werden,
daB sich die Bakterien nicht nur am besten lebensf&hig erhalten, sondern
sich sogar weiterentwickeln kbnnen, indem sie nach Art einer Anagroben-
kultur den ganzen NShrboden durchwuchern. Dadurch soil die Zahl
der wirksamen Bakterien gegenflber anderen Bakterien pr&paraten eine
weit grQBere sein. Der N&hrboden als solcher ist gleichzeitig als Nah-
mngsmittel fflr die zu vertilgenden Nager gedacht; zur Anlockung ist
noch ein Kflderstoff beigegeben.

Von diesem Pr&parat untersuchten wir einige Proben zun&cbst kul-
turell auf ihren Bakteriengehalt. In einer Bflchse fanden wir nur coli-
fthnliche Bakterien und Kokken. In einer anderen Probe lieBen sich
mittels Drigalski-Platte Bakterien nachweisen, die sich kulturell wie
Paratyphaceen verhielten, agglutinatorisch mit verschiedenen Paratyphus-
nnd G&rtner- Seren nicht reagierten. Typische Rattenscb&dlinge waren
also nicht vorhanden.

Znr Prflfung auf seine rattent&tende Wirkung wurde der Inhalt
yerschiedener Bflchsen des Pr&parates an 10 graue Ratten verftlttert.
Es starben 2, eine nach 2 Tagen, die andere nach 15 Tagen. Bei der
1. war der Zerlegungsbefund vbllig negativ. Aus Blut und Organen
lieBen sich keine Bakterien der Paratyphusgruppe ztichten. Bei der
anderen, die nach 15 Tagen starb, bestand starke Injektion der Darm-
gef&Be, Leber- und Milzschwellung. Aus Blut und Organen wurden die
oben erw&hnten Bakterien isoliert, die sich kulturell wie Paratyphus
verhielten, agglutinatorisch im wesentlichen jedoch versagten, nur eine
ans der Milz gewonnene Kultur reagierte schwach (1 :400) mit G&rtner-
Serum. Die ttbrigen geftitterten Ratten blieben am Leben.

Eine weitere Probe des Mittels, die laut Aufschrift einen Zusatz
von Meerzwiebelextrakt enthalten sollte, erwies sich bei einem Ftitte-
rnngsversuch an 2 Ratten als wirkungslos.

Nach diesen Ergebnissen besitzen wir auch im „Maurabazillin“
kein Mittel, das in der Praxis fflr die Rattenvertilgung in Frage
kommen kann.

Das in Deutschland wohl am meisten angewandte Bakterien pr&parat
„Ratin“ wurde von uns bereits 1912 auf seine Wirksarakeit geprtift 1 ).

1) Neumark, Ueber die Bedeutung von Bakterienpraparaten ala Rattenver-
tilgungamittel. (Geaundheitaingen. 1913. S. C>69.)

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44

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heit 1.

Es handelte sicb damals darum, die Rattenplage im Friedrichshain zu
beseitigen. Mit Rflcksicht darauf, daB maoche Rattenrassen sich gegen-
flber den Ratin-Bazillen immun erweisen sollten, wurde zun&chst
ein Filtterungsversuch im Laboratorium an einer Anzahl dort einge-
fangener Ratten angestellt. Es ergab sich damals, dafi die Ratten am
Leben blieben. Selbst einer'subkutanen Verimpfung widerstanden sie.

Im Sommer 1920 wurden die Versuche mit „Ratin“ wieder auf-
genommen. Zunachst wnrde eine flussige Kultur, die von der Ratin-
gesellschaft in Berlin frisch bezogen war, an eine grdBere Anzahl Ratten,
die samtlich aus Berlin stammten, verfflttert. Die Ratten blieben alle
am Leben, ohne irgendwelche Krankheitserscheinnngen zu zeigen. Kul-
turell entsprachen die benutzten Bakterien dem Paratyphus B- bzw.
Gartner-Bazillus. Agglutinatorisch wurden sie von Gartner-Serum
beeinflufit. Bei subkutaner und intraperitonealer Impfung gingen dies-
mal die Ratten innerhalb 1—2 Tagen ein. In den Organen fanden sich
Bakterien, die der Ausgangskultur entsprachen.

Weiterhin fanden Infektionsversuche mit einer Ratinkultur statt,
die uns direkt von dem Ratinlaboratorium in Eopenhagen zuging. Auch
mit dieser Kultur gelang es nicht, Ratten auf dem Wege der Ffltterung
zu tflten, wahrend subkutane Impfung zum Tode fflhrte. Bei der Zer-
legung zeigten diese Tiere Oedem der Impfstelle, Milzschwellung und
Enteritis. Aus den Organen lieBen sich die verimpften Bakterien zflchten.
Aber auch nach dieser Passage waren sie nicht imstande, Ratten auf
dem Wege der Ffltterung zu toten.

Auf Grund dieser Versuche kdnnen wir auch das „Ratin“, wenigstens
wie es zurzeit abgegeben wird, nicht als geeignet ansprechen, als Ratten-
vertilgungsmittel zu gelten.

SchlieBlich untersuchten wir auf Antrag von dritter Seite noch eine
Kultur, die angeblich als Danysz-Kultur frisch von der Krdlschen
Sammlung in Wien bezogen war. Diese Bakterien zeigten ein Wachs-
tum wie B. coli. Eine geffltterte Ratte blieb am Leben.

Ein Bakterienpr&parat „Terror“, das frflher mit groBer Reklame
angepriesen wurde, scheint nicht mehr hergestellt zu werden. Wenigstens
konnten wir eine Probe davon nicht mehr erhalten. Vor einigen Jahren
haben wir auch dieses Pr&parat untersucht. Bakteriologisch handelte
es sich urn eine Mischkultur, die auch vereinzelt Gflrtn er-Bazillen
enthielt. Tierversuche wurden nicht angestellt.

Unsere Erfahrungen, die wir mit einer Anzahl von bakterienhaltigen
Rattenbek&mpfungsmitteln in Laboratoriumsversuchen gemacht haben,
mflchten wir kurz, wie folgt, zusammenfassen.

Von den erw&hnten Bakterien pr Spar ate n enthielt nur das „Ratin“
und eine von mehreren untersuchten Proben „Rattenfort“, die
deklarierten Bakterien in Reinkultur. Die ubrigen bestanden aus Misch-
kulturen verschiedener Bakterien, meist B. coli und Kokken. Nur
„Maurabazillin“ wies auBerdem noch Bakterien auf, die sich kul-
turell wie Paratyphusbazillen verhielten, agglutinatorisch jedoch nicht
zu identifizieren waren. In dem Prflparat „Terror“ konnten vereinzelte
Gflrtner-Bazillen nachgewiesen werden.

Bei der Mehrzahl der untersuchten Mittel war somit schon die
bakteriologische Beschaffenheit nicht einwandfrei. Wer einen gewissen
Einblick in die Entstehungsgeschichte derartiger Prflparate gewonnen
hat, wird sich diese mangelhafte Qualitat leicht erklflren kflnnen. Wenn
z. B. eine Firma ein bakterielles Rattenprflparat herstellen und ver-

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Neumark u. Heck, Ueber Rattenvertilgungsmittel.

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treiben will, so glaubt sie, nur nfitig zu haben, von einer anderen Firma
eine passende Kultur zu beziehen, die sie nun im eigenen Betriebe
recbt und scblecbt weiterimpfen lfifit. Was dabei herauskommt, lebren
unsere Versuche. In anderen Fallen begnugen sicb die Firmen damit,
von irgendeinem „bakteriologischen Institut** die fertigen Kulturrohrchcn
zu beziehen, die dann unter verscbiedener Bezeicbnung in den Verkehr
kommen. Auch bei dieser Methode ist, wie unsere Erfahrungen zeigen,
das Produkt kein besseres.

Es ist scbon aus der Art der Zusammensetzung vorerwahnter Prfi-
parate ohne weiteres klar, dafi von ihnen eine wesentliche rattentQtende
Wirkung nicht erwartet werden kann. Dem entsprechen auch unsere
im Laboratorium angestellten Ffitterungsversuche. Wenn bierbei fQr
jedes einzelne der untersucbten Pr8parate nur eine verhfiltnismfifiig
geringe Anzahl von Versuchstieren zur VerfGgung stand, so gibt doch
die Gesamtheit der Versuche ein ausreicbendes Bild von der Wirksam-
keit bzw. Unwirksamkeit derartiger Mittel. Von alien geffitterten Ratten
— es waren im ganzen fiber 40 — starben nur 2. Beide waren mit
Maurabazillin gefflttert. Wie erwahnt, war bei der einen der Tod
nicht auf das Mittel zurfickzuffihren. Bei der anderen lag zwar ein
charakteristischer Zerlegungsbefund vor, auch fanden sich in den Organen
Bakterien der Paratyphusgruppe. Trotzdem ist damit nicht sicher die
Wirksamkeit des Mittels bewiesen, denn einerseits kommen derartige
Bakterien sehr hfiufig bei Ratten als Saprophyten vor und konnen ge-
legentlich virulent werden, und andererseits ist zu bedenken, dafi 11
andere mit dem gleichen Prfiparate behandelte Ratten nicht starben.
Von samtlichen mit Bakterienpraparaten per os iniizierten Ratten starb
also gfinstigstenfalls nur 1. Auch das „Ratin“ und die eine Probe
„Rattenfort“, die doch die Bakterien in Reinkultur erhielten, erwiesen
sich bei der Ffitterung als wirkungslos.

Wir mfissen also sagen, dafi alle von uns geprOften bakteriellen
Rattenvertilgungsmittel im Laboratoriumsversuch vfillig versagten. Dafi
dies bei den Prfiparaten, die sich schon bakteriologisch als nicht ein-
wandfrei erwiesen, beobachtet wurde, ist nicht weiter verwunderlich.
Aber auch die wenigstens biologisch typischen Bakterien waren fQr
Ratten nicht virulent, wenn sie per os gegeben wurden.

Es kfinnte nun hier der Ein wand gemacht werden, die Labora-
toriumsversuche liefien sich nicht ohne weiteres auf die Verhfiltnisse
der Praxis flbertragen. Demgegenfiber mochten wir nur auf eine Arbeit
von Messerschmidt 1 ) verweisen, der bei einer umfangreichen Be-
k&mpfungsaktion gegen Feldmfiuse im Elsafi Mfiusetyphuskulturen ver-
wandte. Im Laboratorium erwiesen sich die Bakterien als hochvirulent.
In der Praxis versagten sie jedoch vollkommen. Wenn hieraus eine
Schlufifolgerung ffir die dem Mfiusetyphusbazillus sehr nahestehenden
rattenschfidigenden Bakterien erlaubt ist, werden also derartige Bak¬
terien in der Praxis erst recht nicht wirken, wenn sie schon im Labora¬
toriumsversuch versagen.

Wir kfinnen also mit vollem Recht dieAnwendung der
von uns geprfiften Bakterienprfiparate als zwecklos be-
zeichnen, wenn auch einzelne Benutzer eine gewisse
Wirkung beobachtet haben wollen. Mit einer weiteren

1) Messerechmidt, Die Bekampfung der Manseplage im Elsafi mit Mause-
typhusbazillen. (Zeitschr. f. Immunitatsr. Ong. Bd. 31. 1921. S. 137.)

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4 fj C^trml&L L b*k\~ eu^ I. Abi. Onginjue. B>i- ST. Heft L

Anzahl ah n lie her ilittel wird es sich nicht ander* ver-
halten.

2 .

Weiterhin haben wir uns damit beschaftigt, eine Anzahl von Gif:-
priparaten auf ihre Wirksamkeit geeenuber Ratten zu prufen.

L'nter der Bezeiehnnng .Rattengift* ist eine gaDze Reihe verseiie-
dener Stoffe bekannt, und es gibt eine groSe Anzahl von Rattenver-
tiigungsmitteln, die solche als wirksame Substanz enthalten. In der
Praxis mud es sich hierbei im wesentlicben nm Giftstoffe handeln. die
den Ratten mit der Xahrung beigebracht werden. Die Anwendung
giftiger Gase kommt nnr fur ganz besondere Verhaltnisse in Betracht.
Bei der Auswahl der Gifte ist Vorsicht am Platze, damit nicht stark
wirkende Gifte Menschen oder Haustiere schadigen. Diese Gefabr ist
deshalb grofi, weil die ausgelegten Gifte bzw. die vergifteten Nahrungs-
mittel von den Ratten verschleppt werden. Gegenuber stark hervor-
tretenden Geschmacks- und Geruchseigenschaften der Giftstoffe scheinen
die Ratten, so sensibel sie sonst auf Witterung reagieren, nicht beson-
ders empfindlich zu sein. Gerade die Gifte, die bei der Rattenvertilgung
am meisten angewandt werden, zeichnen sich durch besonders hervor-
stechenden widerlichen Geschmack bzw. Gernch aus nnd werden trotz-
dem, wie die Erfahrung lehrt, meist anstandslos genommen.

Die Mehrzahl der bekannten Rattengifte entstammt dem Pflanzen-
reiche, nnd zwar handelt es sich fast ausnahmslos nm tropische Gift-
pflanzen. Es sind znm Teil volkstOmliche Mittel, deren Anwendnng in
der Regel nur in den Gegenden beliebt ist, in denen die betreffende
Pflanze heimisch ist. Von solchen seien z. B. genannt die Samen des
in Mittelamerika heimischen Stranches Gliricidia maculata, dessen
wirksamer Bestandteil, das Alkaloid Gliricidin ist, oder die Samen des
ostindischen Strauches Trichosantesamara; als Rattengift gebrSnch*
lich sind auch die Blatter und Stengel der brasilianischen Standen
Palicourea rigida nnd Psychotria noxia. Zuverlassige Angaben
Ober die Brauchbarkeit dieser bei uns bereits zu den obsoleten Drogen
gehdrenden Mittel liegen nicht vor. Eine bei uns heimische Droge, das
Secale cornutum, ist in einem Pr&parat, das aus Frankreich unter
dem Namen „Tord-Tripl“ vertrieben wird, enthalten. Aus bitteren Man-
deln wird das „Sculein* benannte Prfiparat hergestellt. Die als Ratten¬
gift am h&ufigsten angewandte und in zahlreichen Zubereitungen ent-
haltene Droge ist die als Meerzwiebel bekannte Zwiebel der in den
Mittelmeeriandern heimischen Liliacee Urginea maritima.

Von tierischen Produkten werden aus spanischem Fliegenpulver ver-
fertigte Boli empfohlen.

Aus der Reihe der anorganischen Gifte ist in 1. Linie der weifie
Phosphor zu nennen, der in 2—5-proz. Beimengung in sogenannten
Phosphorlatwergen verschiedenster Zubereitungsweise als bew&hrtes
Rattenmittel gilt. Das Arsen und fertige PrSparate mit Arsengehalt
sowie Strychnin sind weniger beliebt wegen der Gef&hrlichkeit ftir Men¬
schen und Haustiere. Auch Baryt, in einer aus Mehl, Zucker und
Wasser bereiteten Paste, ist als Rattengift bekannt.

Von alien den genannten Rattengiften haben die Meerzwiebel und
der Phosphor die verbreitetste Anwendung gefunden. Beide Stoffe
werden deshalb alien anderen Giften vorgezogen, weil sie als sehr wirk-
sam gegen Ratten gelten und besonders deshalb, weil sie wegen ihrer

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Neumark u. Heck, Ueber Rattenvertilgungsmittel.

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widerlichen Geschmacks- und Geruchseigenschaften selten zu Vergif-
tongen von Menschen and Haustieren geftihrt haben, und desbalb auch
fast unter alien Verh&ltnissen ausgelegt werden kbnnen. Wahrend
Phosphor immerhin auch ftir Menschen und Haustiere ein starkes Gift
ist, enthalt die Meerzwiebel nur Giftkbrper, die ftir Menschen und Haus¬
tiere relativ harmlos sind; tftdlich verlaufene Vergiftungen beim Men¬
schen sind in der Literatur nur als seltene Falle bekannt; wegen ihres
ekelhaften, bitteren, schleimigen Geschmackes werden daraus hergestellte
Praparate in schadlich wirkenden Mengen nicht aufgenommen. Somit
hat auch die Bezeichnung „Giftfreies Ratten gift u ftir die Scilla-Pra-
parate eine gewisse Berechtigung. Verwendet werden frische Zwiebeln.

Die Zwiebel ist birnformig und bis kopfgrofi. Die BuBeren Schalen
sind trockenhautig, die mittleren tleischig und die inneren schleimig.
Die Zwiebelscbalen sind weiB oder rotbraun. Deshalb unterscheidet man
eine weifie und rote Sorte. Die rote Scilla soli reicher an wirksamen
Bestandteilen sein. Die aufieren trockenen Schalen sowie die innersten
weichen enthalten am wenigsten Giftstoffe. Die wirksamen Bestandteile,
soweit man sie bis jetzt kennt, sind Scillitoxin, Scillipikrin, Scillin, das
Glykosid Scillaln, ein Kohlehydrat Sinistrin, ein hbelriechendes Oel,
ferner oxalsaurer Kalk, Zucl er und Schleim. Weichen von diesen Be¬
standteilen die Hauptwirkung zuzuschreiben ist, ist nicht naher bekannt.
Als Haupterscheinung ruft Scilla Diurese hervor; ob dies mehr eine
Herzwirkung ist oder mehr auf Nierenreizung zurflckzuftihren ist, steht
nicht fest. AuBerdem treten gastroenteritische Veranderungen auf.

Die in der pharmazeutischen Praxis gebrauchlichste Darstellung zu
Rattengift geschieht in der Weise, daB die frischen Meerzwiebeln in
einer Fleischhackmaschine zerkleinert und mit Wurst oder Hack-
fleisch und Mehl zu einem Teig verarbeitet werden, den man mit Fett
wie Pfannkuchen backen laBt. Zahlreich sind die im Handel befindlichen
Rattengiftmittel, die aus der Meerzwiebel hergestellt sind, fast alle die
angepriesenen sogenannten giftfreien Rattengifte sind Meerzwiebel-
priparate.

Wie erwahnt, kommen Arsen und Strychnin wenig in Frage,
weil sie in der tddlich wirkenden Dosis weder im Geschmack noch Ge-
ruch wahrnehmbar sind und leicht zu unabsichtlicher Vergiftung von
Menschen und Haustieren fiihren konnen. Der Phosphor dagegen
ist durch seinen Geruch derart leicht kenntlich, daB Vergiftungen aus
Unachtsamkeit zu den Seltenheiten gehfiren. Die Nager scheinen sich
an seinen Geruch und Geschmack nicht zu stofien. Seine Zubereitung
zur Latwerge geschieht in der Weise, daB abgewogene Mengen weiBen
Phosphors in einer vorerwfirmten Reibschale in heiBem Wasser verrieben
und geschmolzen werden; nach dem Erkalten wird Fett oder Oel und
Mehl zugesetzt, bis eine breiige Konsistenz erreicht ist. Auch Zucker
kann beigefflgt werden. Die fertigen Latwergen enthalten etwa 2—5 Proz.
Phosphor. Die Wirksamkeit dieser Latwerge hangt weniger vom Gehalt
an Phosphor ab als davon, daB der Phosphor moglichst fein verteilt
oder noch besser, gelost ist, was durch den Zusatz von Oel oder Fett
erreicht wird. Grdfiere Phosphorstuckchen konnen unter Umst&nden
den Darmkanal passieren, ohne schwerere Erscheinungen hervorzurufen,
wahrend fein suspendierter oder gelbster Phosphor bereits in sehr ge-
ringer Menge tfldlich wirkt. Die Phosphorlatwerge verliert mit dem
Alter an Wirksamkeit, haltbarer ist solche mit Fettzusatz.

Die beiden Hauptgifte ftir Ratten, Phosphor und Meerzwiebel, prflften

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Centralbl. L Bakt etc. 1. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 1.

wir nun bei nnseren Untersuchungen auf ihre Wirksamkeit Teils be-
nutzten wir von uns selbst nach den Vorschriften der pharmazeutischen
Praxis hergestellte PrSparate, teils fertige HandelsprSparate.

1. Yersnche mlt Phosphor.

Die Herstellung der Latwerge geschah in der ublichen Wdise. 4 g
weiBer Phosphor wurde in erwarmter Reibschale in 40 ccm heiBem
Wasser verrieben, bis der Phosphor geschmolzen war, dann wurden
40 ccm Rflb61 zugesetzt; diese Emulsion wurde rait 100 g Brotmehl zu
einem Brei verrQhrt. Die fertige Latwerge gab an der Luft deutliche
Pbosphordampfe ab. 5 g der Latwerge vermengten wir mit 50 g weicher
Wurst. Damit geffltterte Ratten starben nach 2—4 Tagen.

Das Sektionsbild bot die typiscben Erschein ungen der Phosphorvergiftung dar:
Blutige Magendarmentzundung und schwere fettige Entartung der Leber. Nach 10 Tagen
mit aieser Latwerge gefiitterte Ratten starben ebenfalls unter denselben Erscheinungen
innerhalb 2—4 Tagen. Das Mittel wirkte also prompt.

Ferner priiften wir ein Praparat, daB unter der Bezeichnung „Phosphor brei 4<
von einer chemischen Fabrik in Ems hergestellt wird. Das Mittel, das in Blechbuchsen
verpackt in den Handel kommt, stellfc eine graue, pastenartige, stark nach Phosphor
riechende und Phosphordampfe verbreitende Masse dar.

Zum Zwecke der Verfiitterung wurde die Masse nTit zerkleinerter Dauerwurst ver-
mengt und an eine Anzahl grauer Ratten sowie eine weiBe Ratte verabfolgt. Alle
Ratten starben, am schnellsten die weiBe, die schon in 24 Std. dem Gifte erlag. Eine
graue Ratte starb erst nach 6 Tagen. Der Zerlegungsbefund war bei alien Tieren
typisch: blutige Magendarmentzundung, fettige Entartung der Leber.

Das Mittel erscheint deshalb als brauchbar zur Rattenbekampfung.
2. Versuch© mit Meerzwiebel.

Auch hierbei sei zunachst das von uns selbet hergestellte Praparat angefiihrt
Kleingehackte Stuckchen frisch bezogener Meerzwiebel wurden mit 60-proz. Alkohol im
Verhaltnis von 1:56 Tage lang extrahiert und dann durch ein Koliertuch gepreBt.
Mit diesem gelbrot aussehenden, diinnfliissigen Auszug wurden kleine Brotstiickchen
durchtrankt und an graue Ratten verfiittert. Schon im Verlaufe von 10 Std. trat die
Giftwirkung ein. Die Ratten zeigten heftige Zuckungen, blutige Diurese. Am 2. Tage
waren beide Ratten eingegangen. Die serosen Haute wiesen Hamorrhagien auf. AuB^*-
dem bestand ham. Nephritis und Enteritis.

Unter dem Namen „giftfreie Rattenbrocken 44 wird von einer chemischen
Fabrik in Landsberg a. W. ein Mittel hergestellt, das als wirksame Substanz Be ilia
enthalten soli, daneben aber noch andere Btoffe als Witterung und zur Anregung der
FreBluat. Diese Brocken — in Pappkartons verpackt — sind von schmutzig-grauer
Farbe und von Form und GroBe kleiner Kakes. Nach der beiliegenden Gebrauchs-
anweisung soli gleichzeitig den Ratten reichlich Trinkwasser gegeben werden.

Zunachst wurden 3 Ratten mit diesem Praparat gefuttert. Sie blieben am Leben.
Erwabnt sei jedoch, daB verabsaumt wurde, fiir Trinkwasser zu sorgen. Von 4 weiteren
unter Zugabe von Trinkwasser mit demselben Material gefiitterten Ratten starben 3,
eine jedoch erst nach 16 Tagen. Eine blieb am Leben. Das Mittel wirkte also nicht

1 turner.

Eine 2. Sendung des Praparates erwies sich ineofern als wirksamer, als alle ge-
futterten Ratten — es waren allerdings mu* 2 — in 1 bzw. 2 Tagen starben.

In letzter Zeit wurden nochmals Futterungsversuche angestellt mit einer weiteren
Bendung dieses Praparates, das jetzt so weit verstarkt sein sollte, daB die Ratten schon
innerhalb weniger Btunden sterben. In der ublichen Weise futterten wir 3 Ratten,

2 graue und 1 weifie. Eine von den grauen Ratten war nach 24 Btd. schwer krank,
zeigte heftige Krampfe und war am 2. Tage tot. Der Zerlegungsbefund bot keine Be-
sonderheiten dar. Die andere graue Ratte starb nach 4 Tagen. Die weiBe Ratte blieb
am Leben, ohne irgendwelche Krankheitserscheinungen zu zeigen. Hierzu moebten wir
bemerken, daB diese Ratte 3 Wochen vorher eine Probe des Praparates, einer friiheren
Sendung entstammend, erhalten hatte und infolgedessen unter schwersten klonisch*
tonischen Kr&mpfen erkrankt war, von denen das Tier sich jedoch nach 3 Tagen vOllig

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Neumark a. Heck, Ueber Rattenvertilgungemittel.

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erholt hatte, Vieileicht rfihrte hiervon eine gewisse Giftfeatigkeit gegeniiber der er-
neaten Gabe her.

Em wei teres hier zu nennendes Pr&parat ist das „Rodro 11“ („Ro-
dro 1“ soil ein Bakterienpr&parat sein).

Ueber die Zusarnmensetzung des „Rodro 11“ wird in dem Proepekt nichts ge-
Bagt. Nach seiner Wirkungsweise durfte es sich um ein Meerzwiebelpraparat bandeln.
Wir steliten nur mit „Rodro 11“ Vereuche an. Es ist eine pastenahnliche, ranzig
riechende Masse von graubraaner Farbe und enth&lt einen parfumahn lichen Stoff, wolu
als Lockmittel fur die Ratten. Die bakteriologiscbe Untersuchung dieses Mittels ergab
nichts Besonderes. Ratten, die damit gefiittert wurden, erkrankten unter schwersten
klonisch-tonischen Krampfen, die nach 3—4 Tagen prompt znm Tode fuhrten. Der
Zerlegungsbefund zeigte nichts Besonderes.

Eine Wiener Firma vertreibt ein Mittel, das sie „Virusyl“ nennt.

Es sind dies graubraune Brocken von 20—30 g Gewicht. Der Grundstoff soli
Meerzwiebel sein. Wir konnten in Futterungsverauchen an grauen Ratten die in den
Prospekten versprochene Wirkung nicht beobachten. Die Tiere blieben am Leben.

Das „Ratinin“, das bei dem sogenannten Ratio system dazu dienen
soil, die Ratten, bei denen die Ratinbaklerien versagt haben, zu tOten,
ist ebenfalls, wie die herstellende Firma jetzt selbst an gib t, im wesent-
lichen ein Meerzwiebelextrakt

In mehreren Versnchsreihen gingen Ratten, die wir mit Ratinin einmalig fiitterten,
stets prompt in 1—2 Tagen ein. Die Krankbeitserscheinungen wie die Obduktions-
befunde sprachen fur B c i 11 a - Vergiftung. Eine vorherige Gabe von Bakterien war
dorchane nicht erforderlich.

Fflr die Bewertung der gebrftucblichsten von uns geprflften Ratten-
gifte geht aus nnseren Versuchen hervor, daB sowohl der weiBe krystal-
linische Phosphor wie auch die Meerzwiebel geeignet sind, Ratten
sicher zu tQten, daB fernerhin beide Giftarten in geeigneter Form an-
scheinend von den Ratten nicht ungern genommen werden. Die Wirkung
des Phosphors ist in solcher Latwerge intensiver, die reichlich Fett und
damit den Phosphor mSglichst gelOst enth&lt. Aufierdem ist fetthaltige
Phosphorlatwerge haltbarer.

Die Wirksamkeit der Meerzwiebel ist in solchen Zubereitungen eine
prompte, die die Bestandteile in fltlssigen Medien enthalten, wie z. B.
die Versuche mit „Ratinin“ und dem von uns selbst hergestellten Aus-
zng beweisen. Die festen Scillapr&parate scheinen in ihrer Wirkung
nicht so sicher.

Jedenfalls haben wir in Laboratoriumsversuchen mit den genannten
Giftpr&paraten ganz andere Ergebnisse erzielen konnen, als mit den
nntersuchten Bakterienpr&paraten, von denen wir keinem einzigen eine
Ratten totende Wirkung zuschreiben konnten.

Wie verhalten sich nun die verschiedenen Rattenvertilgungsmittel
in der Praxis?

Der Magistrat von Alt-Berlin hat im vorigen Jahre versucht, auf
dem Wege der Belehrung und Aufkl&rung der Grundbesitzer durch ein
Merkblatt eine gleichm&Big einsetzende, allgemeine Rattenbek&mpfung
ins Werk zu setzen. Hierbei sollte die Auswahl der Mittel dem ein-
zelnen flberlassen bleiben. Wie eigentlich nicht anders zu erwarten war,
ist tats&chlich nur von sehr wenigen Grundbesitzern $twas veranlafit
worden, und zwar war es besonders die Kostenfrage, die hindernd im
Wege stand. Eine zielbewufite Rattenbek&mpfung kann eben nur ent-
weder mit polizeilichem Zwange oder dadurch bewerkstelligt werden,
daB die Behdrde die erforderliche MaBnahme einschlieBlich der Kosten
selbst Qbernimmt. Ein derartiges Vorgehen ist neuerdings von Dresden

Erste Abt. Orig. Bd. 87. ' Heft 1. 4

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50 CentralbL f. B&kt, etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

»

und NeukOlln bekannt geworden. In beiden Orten wird Phosphor*
latwerge verwandt. Wenn also in Berlin, wie man ruhig sagen kann,
die Rattenbekampfung auf den PrivatgrundstQcken noch sehr im Argen
liegt, so sind doch durch die erwahnte Aktion anf stadtischen Grund-
stQcken recht gute Erfolge erzielt worden. Ohne auf die Einzelheitcn
naher eingehen zn konnen, wollen wir nnr so viel sagen, dafi auch hier
mit Giften, besonders mit Phosphorlatwerge, die besten Resultate beob-
achtet wurden.

FQr allgemeine Rattenbekampfungsaktionen dOrfte also nach den
bisherigen Erfahrungen die Phosphorlatwerge die Hauptrolle zu
spielen baben.

Nochdruck verbolen.

Ueber Selenomonas palpitans n. sp.

Von Dr. phil. nat. Hellmuth Simons, DQsseldorf.

In meiner Arbeit tiber „Eine saprophytische Oscillarie im Darm des
Meerschweinchens“ (Diese Zeitschr. Abt. II. Bd. 50. 1920. S. 356) er¬
wahnte ich (S. 364) eine nebenher beobachtete neue Selenomonas-Spe-
zies aus dem Blinddarm des gleichen Wirtes. Die Gattung Selenomonas
war seinerzeit durch v. Prowazek (Diese Zeitschr. Abt. I. Orig.
Bd. 70. S. 1913) fQr Mikroorganismen aus dem Darminhalt von Giraffen,
Gazellen und Schirrantilopen aufgestellt worden. Wegen ihrer eigen-
tQmlichen Bewegungen benenne ich diese neue Spezies Selenomonas
palpitans. Mein SchQler, Erwin Boskamp (DQsseldorf), wird an
dieser Stelle deranachst Qber Bau, Lebensweise und systematische Stel-
lung dieses hochst interessanten Mikroorganismus ausfQhrlich berichten.

DQsseldorf, Juni 1921.

Nqchdruck verbolen .

Studien tiber den Komplementgehalt des menscblicben

Blutes.

[Aus der Inneren Abteilung des Krankenhauses zu St. Georg Leipzig:

(Prof. Dr. W a n d e 1).J

Von Dr. Brinkmann,

Assistenzarzt der Abteilung, z. Zt. Assistenzarzt an der Med. Universitatsklinik Jena.

Anfang vorigen Jahres veroffentlichte Hintze die von ihm ge-
machte Beobachtung, daB das Komplement anscheinend vollkommen ge-
sunder Meerschweinchen, die aber doch mit beginnender Pseudotuber-
kulose behaftet waren, im hamolytischen Vorversuch zur Wasser-
mannschen Reaktion auffallend schnell und hoch loste, dagegen im

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Brink in an n, Studien fiber den Komplementgehait dee meuschl. Blutee. 51

Hauptversuch erheblich mehr Heramungen verschiedenen Grades her-
vorrief als das Komplement wirklich gesunder Tiere. Die gleicbe Erfah-
rang macbten auch wir in unserem Laboratorium. Das gab ffir mich auf
Herrn Prof. Hintzes Anregung hin den AnlaB, der Frage des Kom¬
plementgehaltes unter verschiedenen Verhfiltnissen nochmals nfiher zu
treten. Aufgabe'war, an einer mdglichst umfangreicben Anzahl von
Blutseren mit einer mOglichst einfachen, sich stets gleich bleibenden
Methode etwaige Schwankungen des Komplementgebaltes zn studieren.
So bin ich seit Januar 1920 bis Ende des Jahres mit fiber 1000 Einzel-
untersuchungen dem Wechsel des Komplementgehaltes bei nahezu 500
menschlichen Seren nacbgegangen.

Untersuchungen fiber den Komplementgehait dee menechlichen Blutes unter
pathologischen Verhaltnissen liegen scnon in einer ganzen Reihe vor. Bie stammen
zameist aue frfiheren Jahren und eind gewfihnlich au einer nur beschrankten Anzahl
?on Seren angestellt. Die ersten waren Neifier und Doring, die bereits 190L
20 Falle untersuchten. Ihnen folgte Laqueur mit 3, Hedinger mit nicht genau
angegebener ZahJ, von denen 8 eingehend analyeiert wurden, Trommedorff mit 25,
Kreibich mit 26, Kentzler mit 51 Fallen. Eingehender behandelte die Frage spater
Moro an fiber 200, Lfidtke an 80 Seren. Weniger zurfiek liegt eine Arbeit von Cori
and Radnitz mit 52 Fallen. Die alteren Untereuchungen arbeiteten mit einem hochst
einfachen System: 5-proz. Biutkorperchenaufschwemmungen mit abgeetuften Serum-
gaben. Das kritisierte spater Moro, weil jja bei dieser Methode auf die Normalambo-
zeptoren des menechlichen Blutes keine Rucksicht genommen und also nicht so sehr
das Komplement als solches, als vielmehr der ^hamolytische Blankwert u bestilnmt
wird, wie sich Moro ausdruckt. Man kann die Mitwirkung der Normalambozeptoren
aoaschalten, indem man die Blutkorperchen mit Immunambozeptoren beladt. Hierauf
hat Moro seine Arbeitsmethode aufgebaut, indem er als Zwischenkorper quantitativ
ausgewertetes Hammelblutimmunserum vom Kaninchen benutzte (Methode A). Er
mufite sich aber selbst davon uberzeugen, dafl die Versuchsbedingungen selbst solcher-
weise nicht ganz einwandfrei wurden, da sich die komplettierende Eigenschaft des
frischen menschlichen Serums auf die Normal- wie auf die Immunambozeptoren be-
ziehen kann, und da die Kaninchenambozeptoren sich fur die Aktivierung durch
menschliche Seren fiberhaupt nicht besonders eignen. Deshalb arbeitete Moro spater
auch eine weitere Methode B aus, bei der er als Zwischenkorper die eines inaktivierten
menschlichen Serums von beknnntem Ambozeptorengehalt verwendete. Die Schwierig-
keit bestand nun aber in der Beschaffung ernes solchen ambozeptorreichen mensch¬
lichen Serums. Lfidtke stellte deshalb spater auch Verauche an, bei denen er Affen-
immunserum als Zwischenkorper benutzte. Schliefilich mufite Moro aber unter dem
Eindruck seiner praktischen Ergebnisse zugeben, daB der Komplementgehait des Serums
and die Udhe des hamolytischen Blankwertes einander entsprechen, und diesem doch
,eine erhdhte Bedeutung* einraumen.

BewuBt habe ich bei meinen Untersuchungen von der Einschaltung
eines besonderen fremden Ambozeptors abgesehen. Es lag mir daran, mit
einem moglichst einfachen System zu arbeiten, indem ich mir sagte, daB
bei alien derart gerichteten biologischen Reaktionen jeder neu in das System
gebrachte K6rper die Vorgfinge beira Ablauf der Reaktion weitgehend
verschwierigt. Fenyvessy leugnet fiberhaupt, daB wir eine Methode
zor Bestimmung des wahren Komplementgehaltes hatten. Neuere Unter¬
suchungen von Leschly zeigen, daB die Ambozeptormenge an sich
fiberhaupt nur geringe Bedeutung hat, insofern nur eine ausreichende
Menge vorhanden ist, urn fiberhaupt Hfimolyse zu erzeugen. So ist
denn die von mir angewendete Arbeitsweise aufierordentlich ein-
fach gewesen. Zur Verwendung kamen 0,5 ccm 3-proz. Aufschwemmung
von Hammelblutkorperchen und abgestufte Gaben der zu untersuchen-
den Seren. Ein beliebig herausgegriffenes Versuchsprotokoll (Nr. 645)
eines normalen Falles mag das statt vieler Worte erliiutern.

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4 *

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

52

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Name

Ablesung nach

30*

| 60-

| 120'

1 24k i

Bemerkungen

Du Ch. 9

Hbl. 0,5

6 btd. n. E,

20 Jahre

Kompl. 0,01

+ + +

+

—

’ _ |

„ 0,06

+ +

T

—

1

Geaund

„ 0,08

T

—

—

—

2. Nov. 1920

„ 0,1

T

—

—

1 -

WaR. neg.

Die Aufzeichnung folgt dabei der bei der Wassermannschen
Reaktion allgemein Oblichen. indem g&nzliche Hemmung mit +++; die
fibrigen Stufen mit ++, +, ±, +, Sp. und vollstfindige Ldsung mit —
bezeichnet werden.

Besonders betonen mOchte ich, dafi die Blutkorperchen
w&hrend der ganzen Untersuchungen von ein and demseiben
Tiere stammten, so dafi ungewollten Schwankungen durch diesen an-
bedingt erforderlichen Bestandteil des h&molytischen Systems im vorn-
herein vorgebengt warde. Trommsdorff hatte schon Entsprechen-
des gefordert, and Morgenroth and Sachs hatten auf die Ver-
schiedenheit der Rezeptoren der roten Blutkdrperchen hingewiesen.
Das Hammelblat warde gewdhnlich am Tage der Untersuchang Oder
am vorhergehenden gewonnen. In diesem Falle warde es ausgewaschen,
also' vom eigenen Serum grflndlichst gereinigt und als zusammenge-
schleuderte feste rote Masse mit nur wenig darflber stehender physiol
Kochsalzldsung aufbewahrt. Bekanntlich hat Leschly darauf aufmerk-
sam gemacht, dafi die Widerstandskraft der roten Blutkdrperchen beim
Aufbewabren abnimmt, und zwar schneller in 5-proz. Aufschwemmung
als in Breiform. Ebenso fand Biot die Ldslichkeit der roten Blut-
kdrperchen beim Aufbewahren gegenfiber filteren Seren ungleich ver-
schoben. Das entspricht durchaus meinen eigenen experimentellen
Erfahrungen mit aufgehobenen und aufgeschwemmten Hammelblut-
kdrperchen. Statt vieler dazu nur ein Versuchsprotokoll (Nr. 92).

Name

Ableeung nach

30'

60'

120'

24 h

Bemerkungen

Lannicke 9
32 Jahre

Hbl. 0,6
Kompl. 0,1

T

T

T

Gallensteinleiden

„ 0,2

T

T

T

—

9 Std. n. E.

4. Febr. 1920

„ 0,3

T

T

T

WaR. neg.

Name

i

Ablesung nach

30'

60'

120'

| 24 ““

Bemerkungen

Lannicke 9
32 Jahre

5. Febr. 1920

Hbl. 0,5
Kompl. 0,1
,, 0,2
,, 0,3

1

Hammelblut

1 Tag ge&tanden

30 Std. n. E.

Da wir an unserer Inneren Abteilung bei jedem neu aufgenommenen
Falle grundsatzlich die Wassermannsche Reaktion anstellen, hatte
ich nur notig, unter den zu diesem Behufe mir ins Laboratorium zuge-
schickten Blutproben die ffir meine Zwecke geeigneten Seren auszu-
wahlen. Gfinstig fiir meine Untersuchungen war, dafi wir gerade im

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Brin km an n, Studien iiber den Komplementgeh&lt des menscbl. Blutes. 53

Verlaafe des vorigen Jahres eine gr&Bere Grippe- und Ruhrepidemie
durchmachten, so daB mir gerade von den in diesem Zusammenhange
ganz besonders interessanten Infektionskrankheiten reichlich Seren zur
VerfQgung s tan den. Nebenher warde in jedera Falle die Wasser-
mannsche Reaktion und bei den einschiagigen Fallen Widal und die
entsprecbenden anderen serologischen Untersuchungen angestellt, freilich
ohne far die Frage des Komplementgehaltes irgendwie Bedeutung zu
gewinnen. Das Patientenblut wurde jeweils morgens zwischen 8 und
10 Ubr entnommen, urn Einflflsse durch die Verdauungsvorgange nach
Moglichkeit auszuschlieBen. Moro z. B. verm'utet auch einen innigen
Zusammenhang der hamolytischen Serumwirkung mit den durch physio-
logische Einflusse herbeigefQhrten Aenderungen des StoffWechsels. Das
steril durch Punktion der Armvene gewonnene Blut wurde sofort be-
arbeitet, sobald sich das Serum von selbst abgesetzt hatte, also im
Durchscbnitt meist innerhalb der ersten 5—8 Std. Mandelbaum,
der bei jedem Menschen gleichen Komplementgehalt des stromenden
Blutes annimmt und den Komplementschwund auf Vorgange im Prttf-
glas zurQckfflhrt, zentrifugiert unmittelbar nach der Blutentnahme. Das
Zentrifugieren kann aber sicher nicht bedeutungslos sein, kennen wir
doch den weitgehenden EinfluB des SchQttelns auf das Komplement. Fttr
die Reaktionen selbst wurden nur Glaser aus Jenaer Glas genommen,
am auch nach dieser Richtung hin vor unwagbaren EinflUssen sicher
zu sein. Die mit Blutkdrperchenaiifschwemmung und Serumgaben be-
schickten Prufglaser kamen in den Brutschrank und wurden jeweils,
wie oben das Versuchsprotokoll schon zeigt, nach 30, 60, 120 Min. zum
Ablesen herausgenommen und dann bis 24 Std. nach Anstellung der
Reaktion bei Zimmertemperatur stehen gelassen, um dann noch einmal
abgelesen zu werden.

Zufailigerweise entstammen weitaus die meisten Serumproben
Frauen. Gay und Ayer wollten fOr diese durchschnittlicb geringeren
Komplomentwert gefunden haben. Das kann ich nach meinen Auf-
zeichnungen aber durchaus nicht bestatigen.

Vollkommen gesunder Personen Serum konnte ich aus
naheliegenden GrOnden nur in verhaitnismaBig geringer Zahl unter-
suchen. Denn das durch die Revolution hindurchgegangene groB-
stSdtische Personal dQrfte nur schwer zur Hergabe von Blutproben zu
bewegen sein. Ich verfOge Qber 12 solcher Falle, bei denen in weit
flberwiegender Zahl bei 0,1 Serum nach durchschnittlich 120 Min. voll-
stindige Hamolyse auftrat. 1 Fall fiel freilich ganz aus dem Rahmen,
insofern er noch nach 24 Std. bei 0,1 jede Losung vermissen lieB.
Eine genauere Analyse der obwaltenden Verhaltnisse soil spater er-
folgen.

Aus der geringen Zahl wQrde sich nur schwer ein Urteil gewinnen
lassen. Aber ich habe da noch 4 Falle von Scabies, bei welcher Er-
krankung man wohl einen tiefergehenden EinfluB auf den Gesamtorga-
nismus ausschliefien darf. Auch deren Seren 15sten bei einem Zusatz
von 0,1 ccm.

Den Gesunden am nachsten stehen Kranke mit leichteren
chirurgischen Erkrankungen wie Bruchen, Quetschungen, Her-
nien, bei denen man einen EinfluB von Trauma und etwaiger Operation
auf die humoralen Schutzkrafte zur Not annehmen kbnnte. Es sind
ihrer 26 Falle. Weitaus die Mehrzahl loste bei 0,1 ccm nach durch¬
schnittlich 60 Min.

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54

Centfalbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 1,

Den KomplementgehaltbeiGraviden konnte ich an 27 Fallen
stndieren. Auch hier wieder Hamolyse flberwiegend bei 0,1 ccm nach
30—60 ‘Min. Das wflrde mit Lfldtkes Befunden tlbereinstimmen, der
den Koraplementgehalt bei graviden Versuchstieren feststellte und im
Gegensatz zu Staubli keine irgendwie ins Gewicht fallende Steigerung
des Titerwertes finden konnte.

Von Erkrankungen der weiblichen Genitalorgane ira
Sinne von Dysmenorrhoe, Parametritis, Salpiftgitis und anderen wurden
31 Faile untersucht. Urn nur einmal eine Verhaltniszahl zu nennen,
losten 25 davon bei 0,1 nach 30—60 Min.

Folgen nervfise Erkrankungen wie Neurasthenic, Hysterie,
Epilepsie usw*., 23 an der Zahl. Auch hier wieder L6sung bei 0,1 inner-
halb von 30—60 Min. Dabei konnte eine ganze Reihe davon mit gutem
Gewissen auch den kfirperlich Gesunden eingeordnet werden. Tabes
und wassermann positive Faile mit Verschleierungsdiagnose wie
Depression oder Aehnliches werde ich unter Lues aufffihren.

Herz- und Lungenkrankheiten mit Ausschlufi der Tuber-
kulose sind 52 Faile aufgefiihrt. Im groBen und ganzen das gleiche
Bild. Immerhin sind es 7 Faile, die bei 0,1 jicm Serum selbst nach
24 Std. noch keine ganz vollkommene Lfisung (+) aufweisen. 2 weitere
fallen wieder vollkommen aus dem Rahmen, da sie selbst bei 0,3 und
0,5 ccm noch nach 24 Std. vollstandige Hemmung zeigen. Ihre gemein-
sarae Analyse folgt entsprechend der des obigen Falles spater.

Von Anamie. so interessant sie in diesem Belange ware, habe
ich leider nur 1 Fall, mit vollstandiger Losung bei 0,1 ccm nach
60 Min. Uebrigens konnte ich genau wie andere aus der Analyse der
Blutbilder nichts von Bedeutung fflr die Frage der Komplemente und
ihrer Entstehung herauslesen. Kommen dazu 3 Faile von Ik ter us und
1 von Hamatoporphyrinurie mit normalem Lfisungsvermfigen.
Kiinstlich hervorgerufener Ikterus stofit im Tierexperiment auf unend-
liche Schwierigkeiten. Jedenfalls fanden Stadelmann und Lildtke
in ihren dahin zielenden Versuchen keine Veranderungen des Komple*
mentes.

In das entsprechende Fach gehfiren auch die Vergiftungen,
3 an der Zahl: Gasvergiftung und Bleienteritis ohne veranderten Hamo-
lysewert. Bei sehr starken Vergiftungen mit Phosphorlfisung haben
andererseits Ehrlich und Morgenroth beim Kaninchen Komple-
mentschwund gefunden.

Es folgen 6 Nierenfalle, die ebenfalls ganz regelrechten Titer
aufweisen. Leider fehlt Urdmie vollstandig darunter. Bekanntlich haben
Neifier und Dfiring den Komplementgehalt gerade bei dieser Er-
krankung eingehend studiert. Sie fanden bei Zusatz von inaktiviertem
Uramieserum eine Hemmung, wdhrend doch zuvor 0,1 ccm des frischen
Serums noch eben gelost hatte, und fiihrten den Vorgang auf anzu-
nehmende Antilysine zuriick. Laqueur bestatigte diesen Befund,
wahrend Hedinger in drei weiteren Fallen auch beim unveranderten
Serum schon Hemmung fand. Von anderer Seite konnten diese Be*
funde nicht ausschlieBlich bestatigt werden. Mich el is und andere
fanden entsprechende Erscheinungen auch bei anderen Erkrankungen.
Experimeutelle Nachprufung konnte die Losung der Frage nicht ffirdern.
Jedenfalls kommt der Erscheinung keine diagnostische Bedeutung zu.

Gelenkrheumatismus mit 10 Fallen leitet schon zu den In-
fektionshranklieiten hiniiber.

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Brinkmann, Studien iiber den Komplementgehalt des menschl. Blutes. 55

Deren Reihe wird von der Grippe rait 67 Fallen eroffnet. Reich-
lich die Haifte 15st mit 0,1 ccm im Durchschnitt innerhalb 60—120 Min.
Wenn bei anderen Fallen Ldsung mit 0,2 zu einer urn Weniges frtiheren
Zeit aufgezeichnet ist, so besagt das nicbts fiir eine Veranderung des
Komplementgehaltes, und das gilt selbstverstandlich auch filr die ent-
sprechenden Befunde bei alien anderen Erkrankungen; vielmehr mflssen
wir dann die raschere Losung auf Rechnung der Konzentration setzen,
wie wir denn aus Fenyvessys und Leschlys Untersuchungen lernen,
dafi die Komplementwirkung, nach dem Endergebnis gemessen, im Wider-
spruch zu den Angaben Schellers im wesentlichen von der absoluten
Menge, nicht von der Konzentration abhangig, dad die Konzentration
dagegen von EinfluB auf die Geschwindigkeit der Hamolyse ist.

Bei 22 Fallen von Typhus linden wir die Hamolyse durchschnitt-
lich bei 0,08-0,1 ccm. 2 Faile stehen unter den anderen alien ausge-
zeichnet nach der Regel Itfsenden ganz vereinzelt da mit ihren selbst
nach 24 Std. mehr weniger starken Hemmungen.

Von Ruhr sind es 52 Faile, ebenfalls mit Hamolyse bei 0,08 bis
0,1 ccm. Auch hier linden sich 6 Faile darunter mit Hemmungen noch
nach 24 Std.

Die gleichen Werte zeigen auch die iibrigen Infektionskrankheiten
akuter Art, wie Diphtherie, Masern, Scharlach usw., 38 an der
Zahl.

Im groBen nnd ganzen kann ich M o r o s Ergebnisse nicht bestatigen,
der mit der Schwere der klinischen Erscheinungen ansteigenden Kom¬
plementgehalt fand. M o r o glaubte, aus seinen Befunden prognostische
Schltisse ziehen zu diirfen und sprach von guten und schlechten Kom-
plementbildnern. Er befand sich aber schon seinerzeit im Widerspruch zu
den meisten anderen Autoren. Meine Ergebnisse stimmen unter anderen
mit denen von Cori und Radnitz aus jilngster Zeit flberein. Sie
fanden librigens als den am hauligsten erhobenen Komplementwert den
von 0,06, wie es ja auch Mandelbaum tut. Wenn wir in Rechnung
setzen, dafi sie Kaninchenambozeptoren einschoben, wflrde das meinen
eigenen Werten nahezu vollkommen entsprechen. Das Gleiche gilt
fibrigens auch von dem Ltidtkeschen Werte von 0,04. NeiBer und
DSring, die wie ich ohne zugesetzte Ambozeptoren arbeiteten, fanden
dementsprechend denn auch ebenfalls 0,1 ccm als Durchschnittswert.

Von den chronischen Infektionskrankheiten sei in erster
Linie die Tuberkulose mit 36 Fallen genannt. In Uebereinstimmung
mit Kentzler fand ich die gewohnten Werte. 3 Faile freilich fallen
wieder mit ihren ungewobnlichen Hemmungen selbst nach 24 Std. noch
anf. Nebenbei sind selbstverstandlich Faile aller Stadien untersucht
worden, einzelne wiederholt, wie ich das Oberhaupt haufiger, namentlich
auch bei akuten Infektionskrankheiten getan habe. Der immer gleich-
mlBig erhobene Hamolysewert gewinnt so gerade nachhaltigere Be-
deutung.

Die Lues und die metaluetischen Erkrankungen sind mit
38 Fallen vertreten. Auch hier wieder der gewbbnliche Titer und nur
1 der allgemeinen Regel widersprechender Fall. Mandelbaum fand,
wenn er das aus der Armvene entnommene Blut 24 Std. im Eisschrank
hielt, bei pathologischen Seren haufig Konipleraentschwund, und zwar
fiberwiegend bei Luesfailen, allerdings auch bei chronischer Tuberkulose,
chronischen Eiterungen, Scharlachrekonvaleszenten. Das bestatigen
Eicke nnd Mascher, die den gleichen Refund bei alten namentlich,

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:jt‘) f. ev:. L &:sl ue. Bd. -7. Hen 1.

gar nicht Oder doch an genu gen d behanie'iten Luesfillen erboben and
in ihirn eir.en Hiuwcis auf etwaige zerebrale AiTektion sehen wollten.
Schon Kafka und Haas widersprechen oem. Ich Laos nun. ganz ab-
ge-.eben von den sons*;gen vieiiacben Wiederholnngen der UntersncLung
ein and desseif>en Biutes. in 177 f aiien das Seram 5—6 S:d. naeh Ent-
nahrne und dann nocb einmal naeh 24 Sid. untersuebt. Leicbtere
Sehwankangen kainen scbon vor. aber derartig ausgesprocbener Kompie-
mentseijwand. wie ihn Mandelbaum. Eicke und Mascher sahen.
fand ich nur 2rnal. 1 Fail betraf allerdings eine nnbehandeite Lues
init zweifeihaftern Ausfail der W a s ser m a n n sehen Reaktion >bei An¬
tigen a bei b —). Der andere ging unter der Diagnose Grippe.
Der Washerman n war ebenfalls fraghch (bei a —•. bei o 77 1 . Dabei
wind unter den 177 zweitagig untersuchten Fallen alle oben aufgefuhrten
'18 Lueslalle. die meisten latenter Natur, und nauientlicb aueh reeht
zahlreiehe metaluetiseher Erkrankung. Paralyse und Tabes, und keiner
zeigte einen irgendwie auffalligen Korupleinentsehwund.

Von Karzinomkranken habe ich t> Fiille untersucht. die in der
Mehrzahl sehr weit fortgeschritten waren und eine weitgehende Kaehexie
hervorgerufen batten. Sie zeigen eiue vielleieht etwas hinausgezogerte
Lbhliehkeit. wurde das die Liidtkeschen Befunde verminderten

Komplementgehaltes andeuten.

Diesen mbehte ich noch einen Fall von akutester Erschopfung
anschlieBen. Es bandelte sich um eine Frau, die mit einem schweren
Sack Kartoffeln einen weiten Marsch uber Land gemacht, dann wahrend
einer langen Ilahnfahrt in kaltem Wagen gestanden batte und schlieC-
iich auf einem der hiesigen Bahnhofe nachtens zusammenbrach. Das
Blut wurde eofort an dem der nachtlichen Aufnahme unmittelbar fol-
genden Morgen entnommen und der Komplementgehalt in normalem
Werte gefunden, wfthrend die Ergebnisse zahlreicher Tierversuche einen
Komplementschwund hatten erwarten lassen. Die Experimente arbeiten
alle mit verhiiltnismkBig groben Schadigungen, Hnngernlasseu, Wasser-
entziehung, Erhohung oder Herabsetzung der Temperatur, st£rkste
Uebermtidung, wie denn jflngst erst wieder Vincent die Abnahme der
Widerstandskraft des Kdrpers durch Uebermfldung auf Komplement-
schwund zurlickfdhrte. Insofern hatten alle Voraussetzungen des Ver-
suches auf diesen einen Fall gestimmt. Aber die Tierexperimente arbeiten
alle mit viel zu kurzen Zeitraumen, wie sie bei dem pathologischen Ge-
schehen beim Menschen ganz gewiB nie und nie stattbaben, so daB der
menschliche K6rper immer wieder Zeit findet, seinen Komplementgehalt
wieder auf die Ubliche Gleichgewichtslage zu brmgen. Das gilt z. B.
auch von Sachs’ berfihmtem Versuch intravenoser Blutinjektionen und
ihnen folgender Prtifung des Serums auf Komplementgehalt in kurzen
Zwisehenriiumen. Sachs fand solcherweise erst ein Siukeu, dann
eine Steigerung und schlieBlich Riickkebr des Komplementgehaltes zur
Norm. So etwas liiBt sich wohl im Tierversuch, nie aber bei den lang*
Hitmen Vorgiingen pathologischen Geschehens ira Menschenkbrper fest-
stellen. So batte z. B. ein junges Madcben mit einer sehr schweren
Ruhr, der sie schlieBlich auch erlag, bis kurz vor ihrem Tode gleich-
hleihondcn guten Titcrwert (Nr. Die Tierversuche konnen also in der

Frage des Komplementgehaltes von nur sehr eingeschrSnkter Bedeutung
sein. Wenn ich fur das menschliche Serum auch bei pathologischen
VerliiUtnissen einen — selbstverstandlich in miiBigen Grenzen.schwanken-
den, ini allgemeinen sich aber immer gleichbleibenden Komplement-

Got igle

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Brinkmann, Studien iiber den Komplementgehalt des menscbl. Blutes. 57

gehalt in Anspruch nehme, befinde ich mich ubrigens in Ueberein-
stimmung mit der weitaus grdBten Mehrzahl der Untersucher.

Leichtere Schwankungen fallen in die Breite immerhin moglicher
Fehler der reinen Technik. Es bleiben dann aber doch noch die schon
aufgezahlten 16 Ffille iibrig, die unter den vielen Hunderten regelrecht
ISsender Falle durch ihre selbst 24 Std. fiberdauernden starken
Hemmungen ohne weiteres auffallen. Um sie noch einmal besser
znsammenzustellen, fand ich darunter

1 Fall bei organiech vollkommen Gesunden,

2 „ „ Pneumonia,

2 „ „ Typhus abdom.,

6 „ „ Ruhr,

3 „ „ Tuberkulose,

1 „ „ Lues

1 „ „ Karzinom

Jedenfalls macht es zun&cbst einmal den Eindrnck, daB derartig auf-
fallender Komplementmangel Qberwiegend bei Infektionen akuter wie
chronischer Art vorkomme. DaB es sich aber tatsfichlich nm Komple-
men tmangel bandelt, konnte bei einigen Fallen durch schlichteste Analyse
klargestellt werden, indem ich die Seren einfach mit hdheren Serum-
gaben fiber die gewtfbnlichen hinaus austitrierte. Als Beispiel diene
folgender Fall (Nr. 607):

Name

Ablesung nach

30 1 |

60' j

120' |

24“

Bemerkungen

Koch g

Hbl. 0,5
Kompl. 0,4

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

Herzfehler

„ 0,06

+ + +

+ + +

+ +

+ +

7 Std. n. E.

,. 0,08

+ +

+ +

I +

+

„ 0,1

+ +

+ +

1 +

+

» 0,2

8p.

—

| -

—

„ 0,3

Sp.

—

—

—

15. Sept. 1920

„ 0,4

Sp. |

—

—

Ein Gegenstuck dazu bilden andere Versnche, bei denen ich mich
bemflhte, durch zugesetzten Ambozeptor L6sung zu erzielen. Und zwar
benutzte ich als Ambozeptor Seren, die am vorhergehenden Tage pflnkt-
lich gelfist batten, nnd die ich nun bei 56° inaktivierte. Protokoll 54
mag das nfiher erlfiutern:

Name

Ablesung nach j

30' j 60'

120' |

24“ !

Bemerkungen

Mufigang 9

27 Jahre

19. Jan. 1020

Hbl. 0,5
Kompl. 0,1
„ 0,2 j

1

I +-I-+ T

i ++ —

+ —

—

;

Gesund

5 Tage n. E.

WaR. neg.

Name

j Ableeung nach |

30' | 60' 1

120- |

24“ |

Bemerkungen

Frenkel $

Hbl. 0,5

1

1

leichte Grippe

Kompl. 0,1

+++ +++

+++

+ + +

3 Tage n. E.

„ 0,2

+ + + + + +

+++

+ +

23. Jan. 1920

0,3

+ + + 1 + + +

+++

1 +

WaR. neg.

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

58

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Name

Ableaung nach

30*

60' |

120'

24“

Bemerkungen

Frenkel Q

23. Jan. 1920

Hbl. 0.5 I
Amboz. 0,1
Kompl. 0,1
„ 0,2

0,3

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ + + 1

+ + +

•

+ + +
+ + +
+ + +

Amboz. = inakt.
Serum Muflgang

In winder anderen Versuchen, in denen ich an sich hohe Dosen
Seram verwendet hatte, ging ich so vor, dafi ich dazu noch weitere
Gaben neuen Komplementes setzte. Dies neue Komplement gewann
ich mit dem typischen Ehrlichschen K&ltetrennungsversuche, indem
ich ein gut lOsendes Serum mit auszentrifugierten roten Blutkdrperchen
in fiberschiefienden Gaben, damit nur ja alle etwa vorhandenen Ambo-
zeptoren von deren Rezeptoren aufgenommen wfirden, bei 0° ansetzte
und fiber Nacht stehen lieB. Nach Ausschleuderung und Abhebung
des Serums setzte ich dieses erst einmal in einem Vorversuch an, urn
nur ja etwa noch vorhandene Ldslichkeit auszuschlieBen. Dazu Pro-
tokoll 533:

Name

Ableeung nach

30'

60'

|

| 120'

24“

Bemerkungen

Biniak Q

Hbl. 0,5
Kompl. 0,1

+ + +

+ + +

!

+++

l .

+ + +

Gesund

56 Std. n. E.

a o

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

„ 0,3

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

26. Aug. 1920

„ 0,4

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

WaR. neg.

Name

Ableaung nach

30'

60' j

120'

| 24“

Bemerkungen

Mielert Q 1

Hbl. 0,5
Kompl. 0,04

+ +

i

+

i

+

1

Ruhr

32 Std. n. E.

26. Aug. 1920

ooo

Sp.

Sp.

Sp.

—

WaR. neg. ^

Name

Able8ung nach

30' j

60' |

120' ;

24“

| Bemerkungen

Komplement —
Serum
Mielert

28. Aug. 1920

Hbl. 0,5
Kompl. 0,06

+ + +

+ + +

! i

+ 4* +

i

1 ~~

+ +

Seram 24 Std. bei
0° + 0,1 100 •/,
Hanunelblutkor-
perchen.

Name

Ableaung nach

30' ; 60' |

120'

24“

Bemerkungen

Biniak Q

Hbl. 0,5

.

Kompl. = Serum

Serum 0,1 + Ko. 0,05

+ 1 ±

Sp.

—

Mielert nach Kal-

„ 0.2+ „ 0,04
,, 0,3 + ,, 0,03

± ±

± ±

! — ;

tetrennungsvera.

28. Aug. 1920

» 0,4 + „ 0,02

.+ j ±

j -

i

Gewinnt man aus den VersHchen den iiberzeugenden Eindruck, daB
die Analyse der einschlfigigen Ffille doch immer wieder auf einen mehr
weniger groBen Komplementmangel herauskommt, so verfflge ich auch

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Brinkmanu, Studien fiber den Komplementgehalt dee menacbl. Blutes. 59

fiber Protokolle anderer Versuche, bei denen ich nicht ohne einen Zu-
satz von Ambozeptor auskam. Als Beispiel diene Nr. 101:

Name

Ableeung nach

30'

60'

120'

24“

Bemerkungen

Moechineki Q
18 Jahre

Hbl. 0,5
Kompl. 0,1

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

Lungenentzfindung

1

» 0,2

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

9 Std. n. E.

4. Febr. 1920

I

0,3

+ + + !

!

i

+ + +

+ + +

1

+ + +

WaR.

Seram Stock ldet am 4. Febr. 1920 mit 0,1 ccm nach 30'

„ Schmidt „ „ 24. Jan. 1920 „ 0,1 „ „ 60'

Name

Ableeung nach

30' |

60'

120'

24 h

Bemerkungen

Komplement =
Serum Stock
each Kalte-
trennungsvers.

6. Febr. 1920

| Hbl. 0,5
Kompl. 0,1
„ 0,2
0,3

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

Seram 24 Std. bei
0° mit 100 %
HammelblutkOr-
perchen.

Name

Ableeung nach

1

Is

o

00

120'

24 h

Bemerkungen

Ambozeptor-
inaktiv. Serum
Schmidt

6. Febr. 1920

Hbl. 0,5

Amboz. 0,1

„ 0,2

„ 0,3

1

+++!++ +
+++ +++
+++ +++

+ + + ;
+ + +
+++

+ + +
+ + +
4- + +

Serum x /» 8td. in-
aktiv. bei 56°.

Name

Ableeung nach

30'

60'

120'

24-

Bemerkungen

Moechinski Q

Hbl. 0,5
8erum 0,2
Kompl. 0,2

+ + +

+ +

i

++

+ +

Kompl. = Serum
Stock nach Kalte-
trennungeversnch

6 . Febr. 1920

0,3

+ +

+

+

+

» 0,4

+ +

+

+

+

Name

Ableeung nach

30'

60' | 120'

24 h ’

Bemerkungen

Moachinski 9

6. Febr. 1920

Hbl. 0,5

Serum 0,2
Amboz. 0,2
„ 0,4

» 0,6

+ + +
+ + + ;

+ + + 1

I

•+++ +++
+++ +++
+ + + + + +

+ + + "

I + + +

i

Amboz. = inakt.
Serum Schmidt

Name

Ableeung nach

30'

60' |

120'

24 b

Bemerkungen

Moechinski J

Hbl. 0,5

Serum 0,2

•

!

Kompl. — Serum
i Stock nach K&lte-

Kompl. 0,2, Amb.

0,2

+

1 +

T

T

trennungsvers.

6. Febr. 1920

0,4, „

0,4

T

T

—

—

Amboz. = inakt.

>> 0,6, ,,

0,6

T

' T

—

1

Serum Schmidt.

I

Im grofien und ganzen habe ich aber doch den Eindruck, daB der
Komplementmangel weitaus das Ueberwiegende sei. Auch Eicke und
Mascher halten einen isolierten Schwund des Ambozeptors fiir fiuBerst

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60

Centralbl. f. Baku etc. I. Abt. Originate. Bd. 87 . Heft 1.

selten und nehmeu als Ursache der von ihnen beobachteten Hemmungen
ein Zugrundegehen von Komplement und Normalambozeptor an. Worauf
aber dieser in seltenen Fallen ausgesprochene Kompleraentschwund letzten
Endes beruht, ob er wirklich, wie Mandelbaum,Eicke und Mascher
annehmen, nur durch Vorglnge im Prfifglas bedingt ist, miissen erst
uocb weitere Untersuchungen klarstellen.

Bei den fiber Monate ausgedehnten Untersuchungen war es mir
mfiglich, einzelne Seren in kilrzeren und lingeren, oft Monate umfassenden
Zwischenraumen zu studieren, um so Einblick in etwaige Komplement-
schwankungen bei ein und derselben Person zu gewinnen. Und da
stellte sich denn nun eine auBerordentliche Beharrlichkeit des bestehenden
Komplementwertes heraus. Ich will nur einzelne Beispiele anffihren —
auf das Serum Schrfidter wurde schon oben hingewiesen — und
notiere unter dem jeweiligen Datum die Komplementgabe, bei der am
friihesten vollstSndige Losung auftrat, unter gleichzeitiger Angabe der
in Frage kommenden Zeit.

15. Jan. 1920

Jentzsch $. Graviditat, Lues 0,1 (60')

28. Jan. 1920

Nagel $. Lues, Cystitis 0,1 (300

26. Aug. 1920

Fasel J. Ruhr 0,1 + + (24 h )

1. Juli 1920

Cicinska 9- Tuberkulose 0,1 + + + (24 b )

3. Marz 1920
0,1 (600

24. Marz 1920
0,1 (300

1. Sept. 1920
0,1 ++ (24 h )

27. Okt. 1920
0,1 ++ (24-)

17. Marz 1920
0,1 (600

28. April 1920
0,1 (30')

Wir sehen also den Kompiemen tgehalt bei ein und der¬
selben Person ungemein fest, gleichviel ob er nun in H8he
des allgemeinen Durchschnitts liegt Oder darflber. Selbstverst&ndlich habe
ich auch Protokolle mit leichten Schwankungen etwa wie dies:

4. Juni 1920 9. Juni 1920 17. Juni 1920 30. Juni 1920
Hoyer 9- Hamatoporphyrinurie 0,08 (300 0,1 (600 0,06 (1200 0,1 (600

Aber ich kann mich nicbt dem Eindrucke verschlieBen, als ob alle der-
artigen Schwankungen mehr oder weniger in der Breite technischer Un-
zullnglichkeiten l&gen. Aus der eigenartigen Beharrlichkeit des Kom¬
plementwertes, unabhSngig davon, in welcher H6he er sich befindet, ge-
winnt man leicht die Vorstellung, daB der Komplementgehalt Qberhaupt
nur durch unw&gbare konstitutionelle Eigentiimlichkeit bedingt sein
mSchte.

In entsprechender Weise bin ich auch bei dem einmal entnommenen
Serum durch systematische Nachuntersuchungen der Frage seiner
Lebensdauer nachgegangen und fand, selbstverst&ndlich keimfreies
Gewinnen und keimfreies Aufbewahren vorausgesetzt, recht betr&cht-
liche Dauer.

Walter 9- Pneumonie 48 Std. n. E. 6 Tage n. E. 10 Tage n. E. 15 Tage n. E.

0,1 (120) 0,1 (1200 0,2 (600 0,2 T (600

Richter 9- Endo- 24 Std. n. E. 5Tagen.E. 9 Tage n. E. 14Tage n. E. 24Tage □. E.
metritis 0,1 (600 0,1(600 0,3(60') 0,2(120') 0,3 + + + (24 k )

Die Seren wurden im Eisschrank aufbewahrt. Dabei machte es
nicht den geringsten Unterschied, ob sie abgegossen wurden, oder ob
ich sie liber dem Blutkuchen stehen lieB zum Studium etwaiger biolo-
gisch-chemischer Vorgange zwischen Blutkuchen und Serum. Das be-

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Brinkmaun, Studien tiber deu Komplementgehalt des men.-chl. Blutea. 61

statigt aucb Mandelbaum, der andererseits die Beobachtung macbte,
daB das Komplement verschwindet, wenn man das abgeheberte Serum
allein bei 37° in den Brutschrank bringt, daB es dagegen erhalten
bleibt, wenn man das Serum iiber dem Blutkuchen steben lafit und so
in den Brutofen stellt. Er scbliefit bieraus auf besondere Krftfte im
Blutkuchen, die er Socine nennt. Hinsichtlicb der Lebensdauer des
aufgebobenen Komplementes drtickt sich Mandelbaum flbrigens sebr
vorsichtig aus. Bis 4 Tage, meint er, kfinnten Normalseren die H6he
ihrer Komplementwirkung fast ungeschwacht bei Eisschranktemperatur
erhalten. Nun, meine Versuche lassen weit fiber 4 Tage, ja fiber 14 Tage
hinaus recht ansehnliche Komplementwerte feststellen. Sobald freilich
Keime in das aufbewahrte Serum dringen, ist es aus mit seiner kom-
plettierenden Kraft. Leschly stellte dazu fest, daB das Komplement
unter dem EinfluB des Aufbewahrens in weit hoherem MaBe vom Ambo-
zeptor abbangig wird, als es die frischen Komplemente tun, wie wir
schon vorhin betonten.

Leider konnte ich bei den schier unerscbwinglichen Preisen der
Versuchstiere nacb Komplementen des menschlichen Serums gegen
noch and ere als Hammelblutkdrperchen nur in geringerem
Umfange fahnden. Meerscbweinchen- und Kaninchenblut-
kfirperchen wurden entschieden ebenso kraftig gelost wie die sonst
fur hfiraolytische Systeme allgemein verwendeten Hammelblutkorperchen.
Aus der Zahl der Versuche greife ich ein paar Beispiele heraus:

Miiller Q Hammelblutkorperchen Meerschweinchenblutkdrperchen

0,1 ( 120 -) 0,1 ( 120 ')

Mordau Q Hammelblutkorperchen Kaninchenblutkorperchen

0,1 ( 120 ') 0,1 (1200

Gegen Katzenblutkorpercben hatte ich einmal versuchsweise
10-fach verdfinntes Serum verwendet und bekam damit natfirlich ebenso
wenig Hamolyse, wie ich auch keine bei Verwendung von Hammelblut-
khrperchen und 10-fach verdflnnten Serums hatte erreichen kfinnen.
Meine Befunde stehen in einem gewissen Gegensatz zu denen von Kolm er
und Casselman, die gegen Kaninchen- und Meerschweinchenblut-
korperchen nur wenig Hamolysine fanden. Hierher gehfirt auch die
Frage der Auflfisung menschlicher roter Blutkfirperchen
durch menschliches Serum. Ich habe auch hierzu Versuche an-
gestellt und auBerdem bei den zahlreichen Bluttransfusionen, die an
unserer Abteilung gemacht wurden, die vorher nfitigen klinischen Proben
auf Hamolyse und Hamagglutination gemacht. Allein in den letzten
o Mon. sind 13 solcher Untersuchungen ausgefflhrt worden. Hamolyse
sah ich kein einziges Mai, genau so wenig wie bei meinen lfinger zuriick-
liegenden Experimenten, dagegen 4mal Hamagglutination, entsprechend
den Grfitzschen Befunden. Kfirzlich wohnte ich zufallig einer Trans¬
fusion bei, die nicht an unserer Abteilung vorgenoramen wurde. Anderen
Tages bekam die Patientin eine schwere Hamaturie. Ich wurde um nach-
trlgliche Untersuchung gebeten und konnte den MiBerfolg dahin auf-
klfiren, daB das Serum des Spenders, in diesem Falle des leiblichen
Bruders, das der Empfangerin, der Schwester mit anderen Worteu,
auBerordentlich stark agglutinierte.

Zusammenfassung.

Der Komplementgehalt menschlicher Seren ist auch unter patho-
logischen Verhaitnissen ein weitgehend gleichmaBiger. Im Mittel liegt

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62

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87 . Heft 1 .

er bei der verwendeten Versuchsanordnung bei 0,08—0,1 ccm. Es gibt
aber einzelne Seren, die im vornherein Komplement-, zuweilen Korn-
plement- und Normalambozeptorenmangel aufweisen. Da dieser Mangel
auch bei organisch ganz gesunden Leuten vorkommt, und da der
Komplementgehalt bei den einzelnen Menschen ein aufierordentlich be-
harrlicher iet, scheint er konstitutionell bedingt zn sein.

Der Komplementgehalt des Serums ist auch im Prflfglas hervor-
ragend beharrlich.

Komplementschwund Innerhalb der ersten 48 Std. ist selten und
diagnostisch ohne Wert.

Es gibt verschiedene Komplemente in ein und demselben Serum
(PluralitSt).

Eine Auflflsung menschlicher roter BlutkOrperchen durch mensch-
liches Serum ist selten, h&ufiger die Hamagglutination. Auf alle F§lle
mull vor jeder Transfusion auf H&molyse und Hamagglutination unbe-
dingt untersucht werden.

Iiiteratur.

Birt, Compt. rend. Soc. de Biol. T. 78. 1915. p. 185. — Cori u. Radnitz,
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Klin. 1911. Nr. 31.

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Jungeblut, Zum Nachweis des Bacterium coli ini Wasser etc.

63

Nachdruck verboten.

Zum Nachweis des Bacterium coli im Wasser mittels

der Bulirschen Prohe.

[Aus dem Institut zur Erforschung der Infektionskrankheiten in Bern
(Direktor: Prof. Dr. G. Sobernheim).]

Von Dr. Clans W. Jungeblnt.

Dem Nachweis des B. coli im Wasser kommt sicherlich eine hohe
Bedeutung zu. Wenn er auch nicht die alleinige und absolute Ent-
scheidung fiber die Gflte eines Wassers zu liefern vermag, so spielt er
doch eine wichtige Rolle als wertvolle Hilfsmethodd in der bakteriologi-
schen Wasseruntersuchung und hygienischen Prophylaxe.

Bei der Wichtigkeit des Nachweises des B. coli im Wasser ist es begreiflich, daft
mao sich schon seit langem damit beschaftigt hat, Methoden zum Auffinden dieser
Bakterienart in Wasserproben auszuarbeiten. Ist es doch der Vorteil der Coli-Proben,
daft wir iiber das qualitative Verhalten der ins Wasser gel an gten Keime unterrichtet
werden, wahrend wir bei der gewohnlichen Keimzahlung auf Gelatineplatten ja nur
iiber die quantitative bakterielle Verunreinigung des Wassers Aufschlufi erhalten.
Hierdurch werden jedenfalls die Schliisse auf die Gefahrlichkeit und Infektiositat des
betreffenden Wassers erleichtert.

Die Methoden zum Nachweis des B. coli, anfanglich meist nur qualitativ ver-
wendet (Vincent, Lignifcres und andere franzosiscne Autoren) gestatten zumeist
auch eine quantitative Verwertung, indem fallende Wassermengen der Prfifung unter-
worfen werden. So gelingt es fiir eine bestimmte Wasserprobe nicht nur den Coli-
Nachweis zu erbringen, sondern zugleich auch den jjColi-Titer* 4 festzustellen, d. h. die
Ermittlung der kleinsten Waasermenge, in der noch B. coli nachgewiesen werden kann
(Parietti, Houston, Petruschkj und Pusch); erwahnt seien ferner die Arbeiten
von Partis, Hesse und Marmann, die auf verschiedenen Wegen ebenfalls die
quantitative Bestimmung des B. coli im Wasser zum Ziele haben.

Einen groflen Fortschritt stellte die Veroffentlichung der Eijkmanschen Probe
dar, die das B. coli aus der Vergarung des Traubenzuckers und dem thermophilen
Wadistum bei 46° diagnostizieren liefi. Es schien hierdurch 1. die Ueberwucherung
durch gewohnliche Wasserbakterien bei der hohen Temperatur verhindert und 2. eine
elektiv gute Anreicherungsfliissigkeit geschaffen, die das B. coli aus einem seiner bio-
logischen Hauptmerkmale mit ninreichender Eindeutigkeit erkennen liefi. Die rein
makroskopische Betrachtung der Wasserproben sollte hier schon iiber die Anwesenheit
von B. coli unterrichten.

Eine Verbesserung der Eijkmanschen Probe suchte dann Bulfr
einznfflhren, indem er noch die Eigentfimlichkeit des B. coli, Neutralrot
zu rednzieren, ausnutzte; um die Reduktion des Neutralrots zu ermbg-
lichen, ersetzte er den Traubenzucker durch Mannit Das Bulfrsche
Verfahren besteht im wesentlichen in folgendem: 1 kg gehacktes Fleisch
wird wShrend 24 Std. mit 2 1 Wasser mazeriert; der ausgepreBte Fleisch-
saft (Fleischextrakt ist nicht zu verwenden) wird versetzt mit 2,5 Proz.
Pepton, 1,5 Proz. Kochsalz, 3 Proz. Mannit. Das Ganze wird 1V 2 Std.
fiber der freien Flamme gekocht, mit Sodaliisung neutralisiert, tiltriert
nnd 2 Std. im stromenden Dampf sterilisiert. Das zu untersuehende
Wasser wird zur HSlfte seines Volumens mit der besproclienen Mannit-
houillon versetzt, der Mischung 2 Proz. einer sterilisierteu Ldsung von

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64 Oentraibl. f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

0,1 g Neutralrot auf 100 ccm Wasser zugesetzt, das Ganze in ein GSr-
rOhrchen gegeben und 24 Std. bei 46° gehalten. Innerhalb dieser Zeit
soli dann das B. coli Neutralrot reduziert, sowie Gas und Saure ge-
bildet haben. Die Flttssigkeit erscheint zugleich diffus getriibt, ihre
frflher rote Farbe in eine gelbliche, grim fluoreszierende verwandelt.
Fehlt die eine oder andere dieser Reaktionen (Gasbildung, Skurebildung,
Triibung, Entfarbung), „so handelt es sich um das echte B. coli gauz
gewifi nicht tt .

Diese Probe arbeitet in gewissem Sinne auch quantitativ, da
sie nach Bulfrs Vorschrift das Vorkomraen des B. coli in 100 ccm
als einheitliche untere Grenze bestimmt. Man konnte, wie es in ver-
schiedenen Untersuchungsstellen geschieht, sie auch mit groBeren und
kleineren Wassermengen vornehmen, und damit den Coli-Gehalt „aus-
titrieren“.

Die beschriebenen Vorteile der Eijkmanschen Probe und der
Bulfrschen Modifikation haben dazu gefflhrt, daB diese beiden Ver-
fahren heute wohl in den bakteriologischen Untersuchungs&mtern die
am mristen angewendeten sind. Die Erfahrungen mit dem Bulfrschen
Verfahren scheinen giinstige zu sein. Wenigstens liegen keine gegen-
teiligen Beobachtungen dariiber in der Literatur vor. Aber gerade
wegen dieses Mangels an systematischen Untersuchungen habe ich mir
die Aufgabe gestellt, an Hand einer grbBeren Anzahl von Versuchen
festzustellen, inwieweit die Bulfrsche Modifikation der Eijkman¬
schen Probe den Anspruch auf ZuverlfLssigkeit erheben darf. Es kam
also darauf an zu untersuchen, ob die Bulfrschen Forderungen fur
den positiven Ausfall seiner Probe fflr alle typischen Coli-St&mme,
insbesondere Warmblttter-Coli-St&mme, zutreffen, und ferner ob event,
andere Bakterien auch ein positives Verhalten der Bulfrschen Probe
bedingen kbnnen.

Ich ging bei meinen Versuchen so vor, daB ich die Frage nach
2 Richtungen hin prtifte. Einmal wurden eine groBere Anzahl Wasser-
proben nach dem Bulfrschen Verfahren behandelt, und ferner wurden
aus menschlichen und tierischen Fazes Coli-Bakterien reingeztichtet,
in Wasser ausgesat und schlieBlich mit der Bulfrschen Probe unter-
sucht.

I. Tell.

Untersuchung von Wasserproben.

Zur Verfiigung standen mir die der Untersuchungsabteilung des
hiesigen Instituts zugehenden Wasserproben verschiedener Art. Sie
wurden an Ort und Stelle von sachverstandiger Seite unter alien Vor-
sichtsmaBregeln entnommen und in sterilen Flaschen dem Laboratorium
iibermittelt.

Die Wasserproben wurden dann in der Menge von je 100 ccm in
U-formig gebogene Glasrohren, die ca. 150 ccm Fliissigkeit fassen, ein-
gefiillt, mit 50 ccm Mannitbouillon, die nach Bulfrs Angaben herge-
stellt war, und 3 ccm einer 0,1-proz. sterilen Neutralrotlosung vermischt
und im Brutschrank bei 46° bebriitet. Es wurde abgewichen von dem
Vorschlage Bulfrs, die Gesamtmenge von 150 ccm auf mehrere kleinere
Garungsrohrchen zu verteilen, weil sich durch einige Stichproben her-
ausstellte, daB diese Versuchsanordnung, ganz abgesehen von ihrer
Kompliziertheit, keine Vorteile vor der hier angegebenen bot. Die

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Jungeblut, Zum Nachweis des Bacterium coJi im Wasser etc. 65

Temperatur des Brutschranks war ziemlich genau eingestellt, so daB
Abweichangen bloB nach unten als kleine Sckwankungen von Vs—1°
vorkamen. Die Beobachtung der Kulturen und Registrierung der Re-
sultate erfolgte im allgemeinen nach 24 Std. und nach 48 Std., da es
im Laufe der Untersuchung auffiel, daB sich die Ergebnisse von 24 Std.
nach weiterem 24-stQnd. Aufenthalt im Brutschrank ver&ndern konnten.
Geachtet wurde speziell auf TrUbung, Saurebildung, Gasbildung und
Entfarbung des zugesetzten Neutralrotes unter Fluoreszenz. Aus jeder
Probe wurden dann, unabhangig von dem makroskopischen Ausfall der
Bulirschen Probe, mehrere 'Oesen FlQssigkeit nach vorherigem Um-
schfitteln auf Endo- und Drigalski-Platten ausgestrichen und auf
Wachstum von Coli-Kolonien, nach 24 stGnd. Verweilen im Thermo-
staten bei 37°, kontrolliert. Verd&chtig aussehende Kolonien wurden auf
eine neue Platte einzeln abgeimpft und von dieser durch Ueberimpfung
isolierter Kolonien auf Schr&gagar Reinkulturen gewonnen. Die erhal-
tenen Reinkulturen wurden auBer dem charakteristischen Wachstum auf
Endo- und Drigalski-Agar auf ihre Coli-Natur noch hinsichtlich
folgender biologischer Artmerkmale geprGft:

1) Keine VerflOssigung der Nfihrgelatine (ZQchtung bei
20°), auch nicht bei l&ngerer Beobachtung. 2) Verg&rung des
Traubenzuckers unter Gasbildung (Zuckeragar). 3) EntfQr-
bungund Gasbildung im Rothbergerschen Neutralrotagar.
4) Gerinnung der Milch, eventuell nach mehreren Tagen. 5) Rot-
farbung und TrQbung der Lackmusmolke durch Saurebildung. 6) In-
dolbildnng in Bouillon.

Diese Eigenschaften, die als charakteristisch gelten fQr das typische
B. coli, sind bei meinen als B. coli angesprocbenen Stammen stets
vorhanden gewesen, mit Ausnahme der Entfarbung des Neutralrotagars
and der Indolbildung in Bouillon, die ich in der Mehrzahl der
Faile vermiBte 1 )* Ich habe daher auch eine Bakterienart kulturell
als B. coli bezeichnet, wenn Entfarbung des Neutralrots und Indol¬
bildung fehlten.

Der Indolnachweis wurde mit einer Modifikation der gewbhnlichen
Probe angestellt, die sich mir als sebr brauchbar. erwiesen hat. Die
BouillonflQssigkeit wurde mit etwa 1 ccm konz. H 2 S0 4 auf 10 cctn
Bouillon unterschichtet und dann einige Tropfen einer 0,02-proz. Na-
triumnitritlQsung zugesetzt. An der BerQhrungsstelle der beiden spe-
zifisch verschieden schweren FlQssigkeiten Oder in unmittelbarer Nahe
trat dann bei indolartigen Abbauprodukten des Peptons nach kurzer
Zeit ein schoner roter Ring auf. Die Rotfarbung war so viel deutlicher
zu beobachten als die diffus schwache Farbung bei dera gewohnlichen
Mischen der Reagentien.

Mikroskopisch muBte sich der fragliche Bazillus als ein kleines
bis ovoides, plumpes, gramnegatives Stabchen mit geringer Eigen-
bewegung bei wechselnder Molekularbewegung erweisen. Das so aus
Wasser reingezQchtete B. coli wurde dann noch als ErgQnzung der
Untersuchung zur Anstellung einer „Kontroll - B u 1 i: - Probe 44 ver-
wendet, um zu sehen, inwieweit dieser Versuch den Hauptversuch
bestatigte.

1) Das gleiehe VerhaJten wurde auch bei Coli-Stammen beobtchtet, die ich direkt
aus Fazes isolierte (cf. Abschnitt II).

Ente Abt. Orig. Bd. 87. Heft 1.

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66 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Dieser Kontrollversuch wurde in kleinen G&rungsrShrchen von etwa
15 ccm Inhalt angestellt, indem 5 ccm Mannitbouillon mit 10 ccm
sterilem Leitungswasser vermischt in die Rohrchen unter entsprechendem
Zusatz von Nentralrot eingefiillt wurden; diese RShrchen wurden mit
einer PlatinSse Reinkultur beimpft und 24 Std. bei 46° gebalten und
dann beobachtet.

So wurden im ganzen von mir 107 Wasserproben untersucht.
In 79 Proben konnte B. coli nachgewiesen werden, in 28 fehlte es.
Es ergaben sich also 2 Serien.

Serle I. 79 Wasserproben, die B. coli enthielten.

Von diesen 79 Proben zeigten:

1) Entfarbung 21

Keine Entfarbung 40

Zweifelhafte Entfarbung IS

2) Gasbildung 1 ) nach 24 Std. 65

Keine Gasbildung Dach 24 Std. 12

Spuren von Gasbildung nach 24 Std. 2

Von den 12 Fallen ohne Gasbildung nach 24 Std. bildeten 6 noch nach 2mal
24 Std. Gas, wahrend die anderen 6 unverandert blieben.

3) Triibung und Saurebildung trat in alien Fallen ein.

Das Verhaltnis zwischen Gasbildung und Entfarbung bei den einzelnen Proben
Btellte sich so dar, dafi von den 65 Fallen mit Gasbildung nach 24 Std. 19 entfarbt
waren, 28 nicht entfarbt waren, 18 zweifelhaft entfarbt waren.

Von den 12 Fallen ohne Gasbildung nach 24 Std. waren 2 entfarbt, 10 nicht
entfarbt.

Die beiden Falle edit zweifelhafter Gasbildung nach 24 Std. waren beide
nicht entf&rbt.

Die 12 F&lle ohne Gasbildung nach 24 Std., sowohl die 6, die noch
verzogerte Gasbildung nachtr&glich zeigten, als auch die 6, die weiter-
hin ohne Gas blieben, zeigten bei der Kontroll-Bui if-Probe s&mtlich
nach 24 Std. prompte Gasbildung, bis auf 1 Fall, der blofi bei 37 0 Gas¬
bildung aufwies. Nach den Resultaten, die ich im 2. Teil der Arbeit
gefunden babe, mochte ich annehmen, dafi bier ein Kaltblfiter-Cpli vor-
lag. In alien diesen F&llen handelte es sich um das typische B. coli,
allerdings teilweise, ohne Indolbildung und Neutralrotentffirbung im
Rothbergerschen Agar.

Serle II. 28 W asserproben ohne B. coli.

Von diesen 28 Proben zeigten:

1) 3 Entfarbung,

1 zweifelhafte Entfarbung,

24 keine Entfarbung.

2) Gasbildung war in keinem Falle einwandfrei vorhanden, bis auf 1, wo eine
kleine Gaskuppe bei gleichzeitiger Entfarbung notiert wurde. Die iibrigen 27 Falle
zeigten durchweg keine Spur von Gasbildung.

3) Triibung x:nd saure Reaktion habe ich gelegentlieh hier und da beobachtet.

Die meisten Proben, die kein B. coli enthielten, waren, wenigstens
so weit Bakterien in Betracht kommen, die auf dem Endoschen und
Drigalskiscken Nahrboden wachsen, steril.

1) Die Gasbilcung war in den meisten Fallen, wenn vorhanden, eine reichliche t
die gut i L — bo der einen Schenk el liinge des Garungsrolires einnahm. Es sind immer-
hin aber 2 Falle als zweifelhaft registriert, in denen nur Spuren von Gas in der Kuppe
zu beobachten warer.

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Jungeblut, Zum Nachweit* des Bacterium cola im W&s9er etc.

67

In den Journalen liber Wasseruntersuchungen der Untersuchungs-
abteilnng des Institnts habe icb unter ungefahr 450 Fallen wfihrend
2 Jahren 5 Falle gefunden, in denen Gasbildung und 2mal gleichzeitige
Entfarbung registriert waren, obne dafi es gelang, aus den betreffenden
Proben B. coli zu isolieren. Es wfire hiernach also anzunehmen, dafi
nnter Umst&nden einmal anuere Bakterien die Fahigkeit baben, eine
positive B u 1 i r-Probe zu geben. Doch wurde hierbei, da es ja nur auf
den Nachweis des B. coli ankam, auf andere Bakterienarten nicht weiter
gefabndet. Zu berficksichtigen ware ferner noch, dafi bei den laufenden
Wasseruntersuchungen nur einige Flflssigkeitstropfen aus dem GSrungs-
rohr auf einem Sektor einer E n d o -Platte ausgestrichen werden. so dafi
sich einige vereinzelte Coli-Keime aus diesera Grunde sebr wobl dem
Nachweise entziehen konnten. Im Gegensatz dazu kamen bei meinen
Untersnchungen stets ganze Platten mit grbfieren Fliissigkeitsmengen
zur Anwendung.

Ergebnisse.

Aus diesen beiden Versuchsreiben geht hervor, dafi die Angaben
B u 1 i r s im allgemeinen nicht zutreffen. In weitaus der Mehrzabl der
Falle zeigten die Wasserproben, die B. coli enthielten, nach dem Bu-
lifschen Verfabren bei 46° behandelt, zwar eine deutliche Gasbildung,
aber das gleichzeitige Zusammentreffen von Gasbildung
und Entfarbung blieb beinahe in der Haifte der Falle aus.

Betracbten wir zunfichst einmal Gasbildung und Entf&rbung ge-
trennt, so mufi man sagen, dafi die Gasbildung in Mannitbouillon
bei 46° sich als eine ziemlich konstante Eigentttmlichkeit des B. coli
erwiesen hat.

Unter 79 c o 1 i-haltigen Wasserproben zeigten blofi 6 keine Gas¬
bildung nach 48 Std. Von den ilbrigen 73 Proben bildeten 65 einwand-
frei Gas nach 24 Std., bei 2 waren zuerst nur Spuren von Gas vor-
handen, die sich im Laufe der nachsten 12 Std. zu einer deutlich
mefibaren Gasmenge vermehrten. Der Rest von 6 blieb zwar nach
24 Std. zuerst ohne Gas; dagegen war dann nach weiteren 24 Std. eine
deutliche Gasbildung eingetreten. Es bleiben so blofi 6 Falle tibrig, die
ganz aus dem Rahmen fallen. Wodurch dieses Verhalten bedingt war,
ist schwer zu erklfiren. Vielleicht waren in den 6 Fallen mit verzogerter
Gasbildung zu wenig Keirae vorhanden, als dafi ihre Anzahl schon nach
24 Std. genfigt hfitte, um Gasbildung hervorzurufen, die dann nach
weiterer Anreicherung noch nachtraglich eintrat. Bei den 6 absolut
refraktaren Fallen bleibt wohl nur die Annahme flbrig, dafi das betref-
fende B. coli durch seinen Aufenthalt im Wasser, als einem verhfiltnis-
mSBig ungflnstigen Medium, einen Teil seiner biologischen Artmerkmale
eingebufit hatte, die es dann durch ZUchtung auf zusagenden kiinstlichen
Laboratoriumsnfihrboden wiedergewann. In diesem Zusammenbang
mSchte ich eine Arbeit von Henningson erwahnen, der auf Grund
ausfflhrlicher Versuche die Annahme vertritt, es konne durch aufiere
schadliche Einwirkungen sogar eine konstante anaerogene Varietat des
B. coli entstehen; andererseits kommt Grijns zu der Ansicht, B. coli
erwerbe erst im Darm des Warmblflters die Fahigkeit, Traubenzucker
bei 46° zu vergaren. Vielleicht waren in diesen Fallen die Coli-Keime
auch schon vor verhaltnismafiig langer Zeit ins Wasser ubergetreten, so
dafi sie durch den langen Aufenthalt darin eine Abschwachung ihrer
Lebensfahigkeit erfahren batten.

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68 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Die coli*negativen Proben ergaben einen Fall mit zweifel-
bafter Gasbildung, die aber nachtrfiglich durch eioe mit etwas Flussig-
keitsmaterial angestellte Kontroll-B u Ifr-Probe *) sichergestellt und be-
statigt werden konnte. Hier gelang es mir in der Wasserprobe nur
einen Sporenbildner aus der Gruppe der Heubazillen nachzuweisen, der
sehr iippig auf Endo- und Drigalski-Platten wuchs. Von B. coli
konnte keine Spur entdeckt werden. Vielleicht trug aber eben dieses
tippige Wachstum die Schuld an einem Ueberwuchern eventuell vor-
handener Coli-Keime auf den Platten. DaB, nebenbei bemerkt, es
Bakterien gibt auBer B. coli, die in Dextrosebouillon Gasbildung her-
vorrufen, gibt Eijkman bereits selbst an. Er spricbt in diesem Zu-
sammenhang von Buttersaurebakterien und gewissen Bakterienarten, die
sich im Kompost und Humus vorfknden. Doch wurde auch davon in
diesem Falle nichts entdeckt.

In den iibrigen 27 Wasserproben, die kein B. coli enthielten,
konnte, wie erw&hnt, niemals Gasbildung festgestellt werden. Diese Tat-
sache macht es unwahrscheinlich, daB andere in Mannitbouillon gas-
bildende Bakterieu in der Praxis der bakteriologischen Wasserunter-
suchung eine groBe Rolle spielen konnten, und kann in Uebereinstimuiung
mit den positiven Ergebnissen der coli-haltigen Proben als weiterer
Beweis der Spezifitat der Gasbildung im Bu 1 ff-Versuch fur B. coli
gelten.

Welche Erkl&rung die aus den Wasserjournalen zusammengestellten
5 Falle von Gasbildung ohne Anwesenheit von B. coli bean-
spruchen konnen, habe ich oben schon naher besprochen.

Was die Entf&rbung anbelangt, so konnten hierbei leider nicht
so gQnstige Ergebnisse erzielt werden. Unter 79 Wasserproben, die
B. coli enthielten, zeigten bloB ungefahr ein Viertel, namlich 21, ein-
wandfrei Entfarbung. wahrend der Rest teils nicht entf&rbt, teils zweifel-
haft entfarbt war. Diese Resultate wurden durch die Kontroll-B u 1 ff-
Proben bestatigt, und ein ahnliches Verhalten wurde auch im Neutral-
rotagar beobachtet, der ebenfalls nur ungefahr in der Halfte der Falle
deutlich entfarbt wurde. Die Zusammensetzung des Neutralrotagars hielt
sich dabei streng an die Vorschrift von Rothberger. Worauf diese
mangelhafte Entfarbung zuriickzufflhren war, konnte ich nur vermuten.
Das verwendete Neutralrot war einwandfrei, da ich ein Prkparat von
GrAbler aus Friedenszeit zur Verfugung hatte. Hingegen lieB sich
vielleicht der Verdacht rechtfertigen, daB die verwendeten Zuckerarten
heute nicht mehr in der gleichen Qualitat wie fruher vorhanden waren;
auch konnte die Zusammensetzung des verwendeten Peptons eine Rolle
spielen.

In diesem Zusammenhange mochte ich noch auf eine Arbeit von
Moore und Re vis hinweisen. Die Autoren fanden namlich, daB erstens
die Neutralrotreduktion unter alien Zuckerarten am besten bei Gegen-
wart von Laktose von statten geht, und zweitens, daB eine erhebliche
Saurebildung die Reaktion hemmt. Einige orientierende Versuche, in
denen bei sonst gleicher Zusammensetzung der Bulfrschen Bouillon
Milchzucker statt Mannit genonunen wurde, konnten diese Angaben be-
statigen. Auch war die hierbei gebildete Sauremenge eine geringere.

1) Es wurde rent steriler Pipette 1 com Flussi<rkeii aus dem betreffenden Garrohr
entnoinmen und dainit auf schon beschriebene Weise die Kontroll-B ul&r-Probe an-
gestellt.

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Jungeblut, Zum Nachweis ties Bacterium coli im Waseer etc.

69

als bei der Vergarung von Mannit, wie sich durch Titrierung mit der
von Bulfr angegebenen Lackmustinktur ergab (100 ccm Lackmustinktur
Kahlbaura-f-2 ccm Normalnatronlauge).

Die 3—4 Faile von Entfhrbung in Wasserproben, die kein
B. coli enthielten, sind leicht erkiart. In alien diesen’ Fallen gelang
es mir aus der betreffenden Probe einen Sporenbildner aus der Gruppe
der Heubazillen herauszuzfichten, der, wie aus dem nachtraglichen Kon-
trollversuch mit Reinkultur hervorging, hierfilr verantwortlich zu
machen war.

Es ist dieses Verbalten ein weiterer Beitrag zu der Feststellung,
daB die Neutralrotreduktion keine fflr B. coli streng spezifische Re-
aktion, sondern auch anderen Bakterienarten eigentiimlich ist. (Vgl.
Rochaix und Dufourt, die fanden, daB die Neutralrotreduktion eine
konstante Eigentflmlichkeit der Mikroben der ammoniakalischen Ga-
rung ist.)

Es blieb noch eine Moglichkeit der Erkiarung ffir das hinsicbtlicb
Gasbildung negative Verhalten der erwahnten 6—12 Ffille flbrig. Es
konnte namlich das Wachstum des B. coli in diesen Fallen durch das
gleichzditige Vorhandensein und den hemmenden EinduB anderer Wasser-
bakterien unterdruckt worden sein, und von dieser Erwfigung ausgehend,
babe ich noch eine andere Versuchsanordnung aufgestellt:

I. Reihe. Zunachst wurden die 12 Kulturen in Mischkultur mit dem Heubazillus,
den ieh ofters im Wasser aDtraf, in den fruher erwahnten kleinen Garungarohrchen
nach Bulif behandelt. In alien Fallen zeigte sich einwandfreie Gasbildung. Auch
die Entfarbung trat, wie in diesem Falle vorauszusehen war, prompt ein.

II. Reihe. In der zweiten Versuchsreihe wurden zur Mischkultur die gewbhn*
lichen Wasserbakterien verwandt; der Gang der Untersuchung war iolgender:

Gewohnliches Leitungswasser, das vorher auf die Abwcsenheit von B. coli nach
Bnlir geprflft war, wurde in sterilcn Kolben aufgefangen. Es wurde dann von den
12 Coli-8tammen je eine Aufschwemmung einer Oese m 10 ccm 0,9-proz. NaCl-L6su^ig
hergestellt. Von diesen Aufschweramungen wurden einmal 0,5 ccm und einmal 1 ccm
zu einem Gemisch von 5 ccm ManDitneutralrotbouillon und 10 ccm des erwahnten
Leitungswassers zugesetzt und das Ganze in Garungsrohrchen bei 46° bebrutet. In
beiden Versuchsserien zeigte sich bei alien Fallen jedesmal Gasbildung.

Es geht aus diesen Versuchen hervor, daB die Anwesenheit von
Begleitbakterien des Wassers das B. coli in seiner Gasbildung nicht
hemmen konnte, soweit keine anaeroben Bakterien in Betracht kommen,
sondern daB das abweichende Verhalten der betrefffenden Coli-
Stfimme eher in den eingangs erwahnten GrOnden zu suchen ist.
SchlieBlich wbre noch zu erwagen, ob die Temperatur von 46° fflr das
Wachstum des B. coli nicht etwa zu hoch ist und es dadurch in der
Manifestation seiner Eigentllmlichkeiten, so wie fiber haupt seines Wachs-
tnms gehemmt werden konnte, wie von manchen Autoren angenommen
wird.

Ein Ueberblick flber die Literatur zeigt, daB andere Autoren mit
der Eijkmanscben Probe schon ahnliche Erfahrungen gemacht haben.
Da Untersuchungen fiber die Bulirsche Modifikation anscheinend fehlen,
kann ich bloB die Nachprfifungen desEijkman erwahnen. Es ist aber
nicht anzunehmen, daB die Verhaltnisse hinsichtlich Gasbildung beim
B. coli in Traubenzucker- und Mannitbouillon so fundamental verschie-
dene seien, daB die Ergebnisse des einen Verfahrens fiir das andere
nnzutreffend whren. Die Forscher, die die Eijkmansche Probe naher
nntersucht haben, teilen sich in 2 Gruppen: Die einen (Hilgermann,
Thomann) halten die Methode fQr zuverlassig, die anderen (Konrich,

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70

Centr&lbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Kruse, Nowack) bezweifeln ihre Leistungsfahigkeit praktisch in hohem
MaBe. Einen mehr vermittelnden Standpunkt nehmen From me und
Federolf ein, obwohl der letzte Autor auch einen Fall angibt, wo bei
Eijkman keine Garung eintrat, obwohl das Wasser im Liter 2614
Coli-Keime enthielt. Wichtig ist ferner eine Arbeit von Mar gar ethe
Sachse, die feststellen konnte, daB durch Anreicherung des negativen
Eijkman mit Filter in 16 Proz. doch Coli nachgewiesen werden
konnte; in 7 Fallen sei ferner der Eijkman nach Anreicherung noch
negativ gewesen, obwohl auf der Drigalski-Platte Coli-Kolonien fest-
gestellt werden konnten. A us alien Arbeiten scheint als gemeinsames
Resultat hervorzugehen, daB die Anzahl der Coli-Keime nicht unter
ein gewisses Minimum heruntergehen darf, wenn man noch mit einiger
Sicherheit Gasbildung erwarten will, und daB ferner die Temperatur von
46° so weit jenseits des Temperaturoptimums fflr B. coli liegt, daB es
dadurch in seinen biologischen Eigenschaften geschadigt wird.

Es ist nun bedauerlich, daB, wie aus meinen Versuchen hervorgeht,
die Bulfrsche Modifikation keine erheblichen Vorteile vor der alten
Eijkmanschen Probe bringt, da die Reduktion des Neutralrots in so
vielen Fallen versagte, so daB Gartner wohl recht hat, wenn er meint:

„Die vorher fflr die Eijkmansche Methode geltend gemachten Be- \

denken bestehen auch fflr die Bulfrsche Modifikation/ Im besonderen (

laBt sich wohl die kategorische Behauptung Bulffs, daB jedes typische '

B. coli die 4 Merkmale seiner Probe gebe, in dieser Form nicht aufrecht j

erhalten. j

Als praktische Konsequenz meiner Versuche lieBe sich hflchstens >
die Beobachtung verwerten, daB es gelingt, in einem gewissen Prozent- j
satz von Fallen durch langeres Verweilen im Brutschrank von anfangs
negativen Proben einen positiven Ausfall zu gewinnen. Man wird also
gut tun, negative Proben lieber noch jnehrere Tage bei 46° zu beob-
achten, bevor man von der Abwesenheit von B. coli flberzeugt ist.

II. Tell.

Versuche mit Reinkulturen von B. coli aus menschlichen

und tierischen Fazes.

Die Ergebnisse der Wasseruntersuchungen, die, so weit sie das
prinzipiell Neue der Bulfrschen Probe betreffen, namlich das vom
Autor mit besonderem Nachdruck postulierte gleichzeitige Zusam-
mentreffen von Neutralrotreduktion upd Mannitvergarung, eigentlich
recht ungleichmaBige Resultate lieferten, lieBen es wflnschenswert er-
scheinen, an Hand einer Anzahl frisch gewonnener Reinkulturen zu
untersuchen, wie weit es wirklich ein Charakteristikum des typischen
B. coli ist, die Bulfrsche Probe positiv ausfallen zu lassen. Man
konnte so eine Menge unkontrollierbarer Nebenfaktoren ausschliefien.

Zu diesem Zwecke wurden von mir aus 55 menschlichen Stubl-
proben, aus 16 tierischen Warmbltiterfazes und 6 Kalt-
blttterfazes Reinkulturen von B. coli geziichtet.

Diese Reinkulturen wurden mit dem Bulfrschen Verfahren geprfift
auf folgende Weise: 100 ccm steriles Leitungswasser wurden mit 50 ccm
Bulffs Mannitbouillon und einem Zusatz von 3 ccm einer 0,1-proz.
wasserigen sterilisierten Neutralrotlosung vermischt, und die ganze Flflssig-
keitsmenge auf 10 Garungsrohrchen von je 15 ccm Inhalt verteilt; jedes
Rohrchen wurde dann mit je einer Oese Reinkultur verschiedener Coli-

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Jungeblut, Zum Nachweis des Bacterium coli im Wasser etc. 71

st&mme beimpft. , Eine solche Serie von 10 Rohrchen wurde in den
Brutschrank gebracht, der auf 46° eingestellt war, und dort zunftchst
24 Std. belassen. Die Beobachtungen wurden dann hinsichtlich Gas-
bildnng, Entfarbung, Saurebildung und Trflbung vorgenomraen. Eine
zweite Registrierung geschah nach nochmaligem 24-stQnd. Verweilen der
Rohrchen im Brntschrank. Diese Metbode wnrde gewahlt, weil ein an-
flnglicher Versuch mit Reagenzglasern, in die ein kleines, an einem
Ende zngeschmolzenes Rohrchen mit. der Oeffnung nach unten herein-
gebracht war, zu unsichere Resultate lieferte. Sowohl die Gasbildung
im kleinen RShrchen wie die Entfarbung des zentralen Teiles konnte
nur nngenau beobachtet werden. Wir wollen die Ergebnisse fflr die
Coli Stamme von Menschen, tierischen Warmblfltern und Kaltblfltern
getrennt betrachten und erhalten so 3 Serien.

I. Serie.

55 Coli-Reinkulturen, aus menschlichen Fazes geztichtet.

Von diesen 55 Bulif-Versuchen zeigten eine glatte Reduktion
des Neutralrots nur 12 Falle; 6 waren zweifelhaft entfarbt, d. h. es
lag wohl ein Stich ins Gelbliche vor, aber die Farbennuance war mehr
rfitlich und ohne deutliche Fluoreszenz; bei 37 zeigte sich Qberhaupt
keine Farbenveranderung; hflchstens dafi der Farbenton von dem Rosarot
mehr ins Kirschrot flbergegangen war. Die Resultate anderten sich
nach langerem Verweilen im Brutschrank betreffs Entfarbung nicht
wesentlich. Einige Male ging die Entfarbung nach 48 Std. wieder
zurflck und einige Male wurde eine anfanglich zweifelhafte Fluoreszenz
noch zur vollstfindigen Entfarbung. Uebrigens war die Entfarbung in
alien Fallen, auch den rein positiven, immer nur in dem geschlossenen,
mit der Luft nicht in Verbindung stehenden Schenkel des RShrchens
sichtbar.

Die Trflbung und Saurebildung trat in alien Fallen einwand-
frei ein.

Was die Gasbildung anbelangt, so sind hier im allgemeinen die
Resultate durchaus gflnstige. Von den 55 Fallen war eine deutliche
Gasbildung in 53 Fallen zu beobachten; die zwei abweichenden Resultate
verteilen sich, wie folgt:

Einmal war bei einem Stamm, der sich sonst durchaifs typisch ver-
hielt, eine Gasbildung bei 46° durchaus nicht zu erreichen; dagegen trat
prompt Gasbildung mit gleichzeitiger Entfarbung bei 37 0 ein, und zwar
war dies Verhalten dauernd zu beobachten, auch bei mehrfacher Wieder-
holung des Versuches.

Das andere Mai verhielt sich ein Coli-Stamm hinsichtlich Gas¬
bildung absolut negativ, und wurde nach mehreren erfolglosen Ver¬
suchen bei 46° und 37° zunflchst nicht weiter geprflft. Auch dieser
Stamm war kulturell und mikroskopisch absolut typisch. Nach 4-w6chigem
Aufbewahren der Kultur wurde abermals ein Versuch damit angestellt,
der diesmal flberraschenderweise eine einwandfreie Gasbildung zeigte,
und zwar auch bei 46°.

Urn die Frage einer vielleicht vorhandenen biologischen Labilitat oder
abnormen Variationsfahigkeit bei den 2 im Bulirschen Versuch hin¬
sichtlich Gasbildung atypisch sich verhaltenden Coli-Stammen zu prtifen,
wurden diese Stamme auf event, auftretende Mutationen beim Waehs-
tum auf gewflhnlichem Agar, Endoschem Fuchsinagar und Drigalski-

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72 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

Agar Ifingere Zeit beobachtet. Es konnte aber weder in der Verfinde-
rung des Nfihrbodens noch in der Form der Kolonien etwas Aufffilliges
festgestellt werden. Es bleibt somit nur 1 Stamm, der im Bulir-
Versuch bei 46° keine Gasbildung zeigte.

II. Serie.

Die 2. Serie beschSftigt sich mit 16 Reinkulturen von B. coli,
gewonnen aus den Fazes der verschiedensten Tiere. Durch Zu-
fall kam ich in den Besitz von Kot einiger seltener Tiere, wie L5we,
Elefant, Kamel, Affe, aus dem des Interesses halber auch Coli*
Stfimme reingeziichtet und nach Bulir geprflft wurden; auBerdem er-
streckt sich die Untersuchung auf Coli-Stfimme einiger einheimischer
Tiere (Pferd, Kalb, Hund, Katze, Huhn, Kaninchen, Meerschweinchen,
Maus, Sperling). Die untersuchten Coli-Stfimme zeigten ohne Aus-
nahme das bekannte kulturelle und mikroskopische Verhalten und unter*
schieden sich, mit den gewdhnlichen diagnostischen Proben untersucht,
in nichts von dem B. coli des Menschen. Ich erhielt ungeffihr fihn-
liche Resultate. Von 16 Ffillen war die Entf fir bung im Bulir-
Versuch bloB einmal glatt vorhanden und 3mal zweifelhaft. Dem stehen
gegeniiber 12 Ffille mit dem Fehlen jeglicher Farbenverfinderung. Tru-
bung und Sfiurebildung war stets vorhanden, ebenso die Gas¬
bildung bis auf einen Coli-Stamm, der allerdings schon 1 Jahr auf-
bewahrt worden war. Dieser Stamm war aus dem Herzblut eines Kalbes
gezflchtet, das an Enteritis und konsekutiver Septikfimie eingegangen
war. Der Versuch fiel anfangs sowohl bei 46° wie 37°durchaus negativ
aus. Als ich ihn nach 4-wochigem Weiterziichten des Stammes auf
Endo-PIatten wiederholte, zeigte sich deutliche Gasbildung, allerdings
ohne daB diese von gleichzeitiger Entffirbung begleitet gewesen wfire.

In einem letzten Fall schlieBlich trat die Gasbildung bei einem
Coli-Stamm, der vom Huhn stammte, erst nach 48 Std. ein, wfihrend
derselbe Stamm, bei 37° nach Bulir behandelt, sofort ohne diese Ver-
zbgerung Gas bildete.

ITT. Serie.

Zum ScMusse wurden vergleichshalber noch einige (6) Coli-Stfimme
von Kaltbliitern herangezogen. Ich entnahm mit steriler Oese aus
dem Rektum frisch getbteter Frosehe etwas Darminhalt und gewami
daraus Reinkulturen von B. coli. Diese verhielten sich kulturell voll-
kommen typisch und zeigten bloB mikroskopisch hier und da kleine
Abweichungen. Die Stfibchen waren im allgemeinen sehr klein, teil-
weise fast kokkenartig. Einmal wurde eine Andeutung von Kapsel-
bildung beobachtet und ein anderes Mai wieder erschienen die Enden
eines sonst durchaus typischen Stfibchens etwas intensiver geffirbt bei
der Ffirbung mit Karbolfuchsin, so daB beinahe eine Art Polffirbung
zustande kam. Diese Coli-Stfimme wurden nun zum Anstellen des
Bulir-Versuchs bei 37° und 46° verwendet. Es ergab sich, daB die
Gasbildung bei 46° unter 6 untersuchten Stfimmen 5mal nur in
Spuren vorhanden war, die eine minimale Kuppe bildeten, und lmal gar
nicht eintrat. Die Neutralrotreduktion war lmal zweifelhaft und
5mal nicht vorhanden. Dagegen trat bei 37° stets einwandfrei Gas¬
bildung und Entffirbung ein. Trfibung und Sfiurebildung boten

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JuDgeblut, Zum Nachweis des Bacterium coli im Waaser etc.

73

nicbts Bemerkenswertes. Dieses Verhalten des Kaltblfltercoli ist schon
bekannt and bestatigt die Angaben der Literatur, daft er bei 37 0 Zucker-
arten vergaren kann, wahrend diese Eigenschaft bei 46° nicht vorliegt
oder zweifelhaft ist.

Zusammenfassung.

1) Bei Anwesenheit des B. coli lassen Wasserproben, die
oach dem Bulirschen Verfahren verarbeitet werden, in den meisten
Fallen Gasbildung auftreten. Die Gasbildung ist in der Regel sehr
reichlich, kann aber auch ausnahmsweise in geringen Mengen erfolgen.

2) Die Gasbildnng ist in der Regel nach 24 Std. nachweisbar, mit-
unter erfolgt Gasbildung erst nach 48 Std.

3) In einigen Fallen (6 unter 79 Proben) kann Gasbildung auch
bei Anwesenheit von B. coli vollig ausbleiben. Die aus solchen
Fallen reingezflchteten Coli-Stararae geben bei Aussaat in Wasser und
Anstellung der BuIff-Probe vollkommene Gasbildung.

4) Die Entfarbung desNeutralrotes trittin Coli-haltigen Wasser¬
proben sehr ungleichmaiiig ein; unter 79 zeigten nur 21 eine typische,
18 eine schwach angedeutete Reduktion des Farbstoffs. Die iibrigen 40
veranderten die Farbe des Nahrbodens flberhaupt nicht.

5) Trflbung und Saurebildung waren bei Anwesenheit von
B. coli stets nachweisbar.

6) Wasserproben, die frei von B. coli sind, geben nach unseren
Beobachtungen niemals Gasbildung; wohl aber kann Entfarbung des
Neutralrots eintreten, eine Veranderung, die z. B der Heubazillus hervor-
zurufen vermag.

7) Die von Bulif geforderten fcriterien: Gasbildung, Entfarbung
des Neutralrots, Saurebildung und Trflbung des Nahrbodens wurden
gleichzeitig nur in ganz wenigen Fallen von Coli-haltigen
Wasserproben beobachtet. Ausschlaggebend ist nach unseren Befunden
in der Hauptsache die Gasbildung, wodurch das Bulirsche Verfahren
vor der Eijkmanschen Methode keine wesentlichen Vorteile mehr
besitzt.

8) Versuche an Reinkultureu von Coli-Stammen ergaben ahn-
liche Resultate.

Die von uns geprflften Kulturen aus menschlichen Fazes (55)
reagierten bei dem Bu Mr-Verfahren in 53 Fallen mit Gasbildung; ein
Stamm erwarb seine Fahigkeit erst nach langerer Fortzflchtung im
Laboratorium, ein anderer bildete lediglich bei 37 °, nicht aber 46 0 Gas.

9) Die menschlichen Coli-Stamme verhalten sich bezflglich der
Veranderung des Farbstoffs sehr inkonstant. Trflbung und
Saurebildung sind stets vorhamlen.

10) Coli-Stamme, aus den Fazes warmblutiger Tiere ge-
wonnen, verhalten sich nach ineinen Beobachtungen in Reinkulturen

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74 Uentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

ganz wie menschliche Coli-St&mme. Dies bezieht sich auf die mor-
phologischen und kulturellen Eigenschaften der St&mme im allgemeinen,
ganz besonders auch auf die Reaktion bei der Bulfr-Probe.

11) Ct)li-St&mme von Kaltbliitern (Frbschen), von denen 6
verschiedepe Kulturen geprflft wurden, bilden bei 46° hdchstens in
Spuren Gas. Auch die Neutralrotreduktion bleibt in der Regel aus.
Wohl aber erfolgt bei 37° einwandfreie Gasbildung und Entf&rbung.

12) Das Bulfrsche Verfahren gibt bei Wasserproben, die mit
Reinkulturen von B. coli kfinstlich infiziert werden, gflnstigere
Resultate als bei den uatflrlichen Coli-WSssern. Es ist
mbglich, daB das B. coli durch lSugeren Aufenthalt im Wasser in seinen
biologiscben Eigenschaften beeinfluBt wird. Die Zahl der Coli-Keime
konnte auch eine Rolle spielen, dagegen scheint die Anwesenheit anderer
Bakterienarten far den Ausfall der Bu Hr-Probe weniger von Bedeu-
tung zu sein.

13) Die unregelmSBige und unvollkommene Reduktion des Neutral-
rots ist mbglicherweise dadurch bedingt, daB das Mannit im Gegensatz
zu den Angaben Bulfrs sich nicht besonders eignet. Der Zusatz von
Milchzucker scheint vorteilhafter zu sein.

14) Aus der makroskopischen Beschaffenheit der Bulif-
Proben lSBt sich ein sicheres Urteil-fiber die Anwesenheit von Coli-
Bakterien nicht abgeben. Gasbildung spricht for einen posi-
tiven Befund. Dagegen sind gasfreie Proben noch weiter-
hinzuprUfen. Zu diesem Zweck ist es nbtig, nicht zu geringe
Wasserraengen beim Ausstreichen auf Platten (Endo- und Dri-
galski-Agar) zu verwenden.

Literatnr.

Bullr, Arch. f. Hyg. Bd. 62. 1907. — Eijkman, Centralbl. f. Bakt- Abt 1.
Grig. Bd. 37. 1904. — Federolf, Arch. f. Hyg. Bd. 70. 1909. — 'Fromme, Ibid.
Bd. 65. 1908. — Gartner, Hygiene des Wassers. Braunschweig 1915. — Grijns, Cen¬
tralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 86. 1921. — Henningson, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 74.
1913. — Hesse, Dtsch. Mil.*Aerztl. Zeitschr. 1912. — Hilgermann, Klin. Jahrb.
Bd. 22. 1909. — Houston, Journ. of Pathol, a. Bact. Voi. 9. 1904. — Konrich,
Klin. Jahrb. Bd. 23. 1910. S. 1. — Kruse, Weyls Handb. d. Hyg. Bd. 1. 1919. —
Lignifcres, Ref. a. Handb. d. path. Mikroorg. v. Kolle-Wassermann. Bd. 2.

402. — Marin ann, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 50. 1909. — Moore a.
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1913. — Parietti, Riv. d’ig. e sanit. pubbl. 1890. — Petruschky u. Pusch,
Z(‘itschr. f. Hyg. Bd. 43. 1903. — Kochaix et Dufourt, Ann. de rlnst. Pasteur.
Vol. 9. 1911. p. 156. — Sachse, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 81. 1916. — Thomann,
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Gildemeister, Ersatz der Nutrose in Bakteriendifferentialnahrboden. 75

Naohdruck verbolen.

Ueber Ersatz der Nutrose in Bakteriendifferentialnahrboden.

[Aus der bakteriologischen Abteilung des Reichsgesundheitsarats in

Berlin (Direktor: Geh. Regierungsrat Prof. Dr. L. Haendel).]

Von Prof. Dr. E. Gildemeister.

In Nr. 51 der D. m. W. 1920 berichtete I. Leucbs fiber erfolgreiche
Versuche, die Nutrose in den Differentialnfibrboden nach Barsiekow
dorch ein nach den Angaben von Klein dargestelltes Serumalkalialbu-
minat zu ersetzen. Da Nutrose zurzeit kaum Oder nur zu recht hohen
Preisen erhaltlich ist, so war die Mitteilung von Leuchs besonders zu
begrfiBen, da nunmehr wieder die Mfiglichkeit gegeben war, die be-
wlhrten NShrbfiden auf billige Weise herzustellen.

Die Herstellung der Barsiekow-Nahrbfiden nach I. Leuchs er-
folgt in der Weise, daB nach der Vorschrift von Klein (D. ra. W. 1920.
S. 297) 9 Teile Serum — vom Pferde oder Rinde — mit 1 Teil offi-
zineller (also 15-proz.) Natronlauge gemischt werden. Die Mischung wird
2 Tage lang im Brutschrank von 37 0 gehalten und dann mit 25-proz.
Salzsaure bis zu schwach alkalisoher Reaktion fflr Lackmus versetzt.
Alsdann wird 1 Teil Serum mit 4 Teilen Wasser verdfinnt, die Ver-
dfinnung nach Zusatz von 0,5 Proz. Kochsalz im Dampf sterilisiert und
nach AbkfihlUng filtriert. Der weitere Hersteflungsgang vollzieht sich
entsprechend der Bereitung der Original-Bar si eko w-N&hrboden.

Auf Grund eigener Untersuchungen kann ich bestfitigen, daB die
Leuchs schen Serumalkalialbuminat-B a r s i e k o w -Nfihrboden tatsfichlich
ein vollwertiger Ersatz der OriginalnShrboden sind. Die Reaktionen
erfolgen auf den Leuchsschen Nahrboden genau in derselben schonen
Weise wie auf den OriginalnShrbfiden.

Die Herstellung der Leuchsschen Nfihrbfiden ist einfach, nur ist
darauf zu achten, daB die ffir den Aufenthalt des Serumalkaligemisches
im Brutschrank vorgeschriebene Zeit genau innegehalten wird; anderen-
falls tritt beim Kochen nach der Neutraljsierung doch noch eine Ge-
rinnung des Serums ein. Dieser Umstand und die Verzogerung in der
Herstellung des Nfihrbodens durch die 2-tfigige Einwirkungsdauer des
Alkalis auf das Serum veranlaBten mich, Versuche in der Richtung an-
zustellen, ob nicht eine Verwepdung von Serum ohne Alkalibehandlung
moglich ist. Die Versuche haben zu einem vollen Erfolge gefuhrt; da
das von mir gefundene Verfahren an Einfachheit und Billigkeit wohl
kaum zu fibertreffen sein dflrfte, mochte ich hier kurz daruber berichten:

Verdfinnt man Rinderserum im Verhaltnis 1:10 oder 1:20 mit
physiol. Kochsalzlosung, so tritt beim Erhitzen auf 100° zwar keine
Oerinnung, aber eine Starke milchige Trubung ein. Verdfinnt man
Rinderserum in dem gleichen Verhaltnis wie vorher mit destill. Wasser
ond erhitzt auf 100°, so bleibt das Gemisch bei Durchsicht vollig oder
nahezu vdllig klar, wfihrend es bei Aufsicht leicht opalesziert. Setzt
man dem destill. Wasser 0,02—0,03 Proz. Natrium citricum hinzu, so

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Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 67. Heft 1.

bleiben meist auch solche Sera, die beim Kochen mit destill. Wasser eine
leichte Triibung gaben, nahezu klar. Auch nach dem Erkalten treten
keinerlei Trflbungen in deni Serumwasser auf. Eselserum, das ein
anderes Verhalten wie Rinderserum zeigt, gibt mit destill. Wasser in
der K&lte eine starke milchige Triibung, die beim Erhitzen etwas
zuruckgeht.

Das mit destill. Wasser verdfinnte und erhitzte Riuderserum erwies
sich bei meinen weiteren Versuchen als ein in jeder Hinsicht gleich-
wertiger Ersatz der NutroselSsungen nach Barsiekow und des Serum-
alkalialbuminats nach Leuchs. Die Herstellung der Serumwasser-
Barsieko w-Nahrboden geschieht in folgender Weise:

5—10 ccm Rinderserum werden mit 90 — 95 ccm destill. Wasser
gemischt und 1 Std. lang im Dampftopf sterilisiert. Der weitere Gang
der Herstellung ist alsdann derselbe wie bei den B a r s i e k o w-Original-
nfihrbbden: 1 g Traubenzucker, Milchzucker Oder Mannit werden in 5 ccm
Kubel - Tiemannscher Lackmuslbsung im Wasserbade zur Losung
gebracht. Nach Zusatz der Lackmuszuckerlosung zum Serumwasser er-
folgt Abfiillen auf Rflhrchen in der flblichen Weise und Sterilisation der
RShrchen an 3 aufeinanderfolgenden Tagen fttr 15—20 Min.

Die Serumwasser-Barsiekow-Nfihrboden zeigen das gleiche Aus-
seheu wie die Originaln&hrbSden; sie sind vollig durehsichtig und vou
schdner blauer Farbe. Die Ausfallung des Serumeiweifi ist iu den
10-proz. Serurawasserlosungen ebenso voluminbs, zuweilen noch starker
als in <len Nutroselosungen, weshalb es zweckmafiig ist, bei Losungen,
denen Garun gsrohrchen zugesetzt werden, nur 5-proz. Serumwasser zu
verwenden, damit die etwa entstehenden Gasblasen ungehindert in dem
GarungsrQhrchen emporsteigen konnen. Der Farbenumschlag erfolgt in
den Serumwassernahrbbden ebenso prompt und charakteristisch wie in
den Originalnahrbdden; nicht selten geht die R6tung in Entfarbung
iiber, wie dies auch des ofteren bei den Originalnahrboden zu gescheben
pflegt.

Auf Grund meiner Versuche kann daher dag Serumwasser bei Ver-
wendung in der von mir angegebenen Weise als ein sehr einfacher, sehr
billiger und vollig gleich wertiger Ersatz der Nutroselosungen in den
Differentialnahrboden nach Barsiekow bezeichnet werden.

Nachdruck verboten.

Dunkelfelduntersuchungen und Azimutfehler.

[Aus der Dermatologischen Klinik der .Universitat Leipzig (Direktor:

Obermedizinalrat Prof. Rill e).J

Von Dr. med. et phil. F. W. Oelze.

Mit 6 Abbildungen im Text.

Die Untersuchung im Dunkelfeld hat bis jetzt ihre ausgedehnteste
Anwendung zur Erkenntfug der Mikroorganismen, insbesondere der
lebenden Spirochaten, gefunden. Doch auch Trockenausstriche, ob gefarbt
oder ungefarbt, wurden im Dunkelfeld untersuclit, z. B. von Arning(l)
1907, Gas to u (2) widmete 1912 der Untersuchung gefarbter Objekte

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Oelze, Dunkelfeldunterduchungen und Azirautfehler. 77

in seinem Buche eine besondere Besprechung. Ich selbst empfahl fflr
die Untersuchung lebender gefarbter Spirochaten einen amikroskopisch
dispersen Farbstoff (Chinablau), der zugleich Beleuchtungskontraste aus-
gleicht. Andere Objekte, insbesondere Harnsedimente, sind eingehend
von Posner (3) untersucht worden. Nach diesen Arbeiten hat E. Hoff¬
mann (4) die Untersuchung gefarbter Objekte im Dunkelfeld als
„Leuchtbildmethode tt beschrieben. Der Initiative Hoffmanns wird es
vielleicht zu danken sein, wenn das Dunkelfeld mehr als bisher eine
der Hellfeldbetrachtung gleichwertige und diese gegenseitig ergdnzende
Stelle in der mikroskopischen Technik einnehmeu wird. Es ist ein
gflnstiges Zusammentreffen, dafi der neue von Siedentopf schon 1914
beschriebene Hell-Dunkelfeldkondensor, der den Uebergang von der

Fig. 1. Fig. 2.

Fig. 1. Richtige Dunkelfeldbeleuchtung. Original.

Fig. 2. Fehlerhafte Dunkelfeldbeleuchtung. Original.

einen zur anderen Betrachtungsweise mit groBter Leichtigkeit ermbg-
licht [Naheres s. (7)], jetzt vom Zeisswerk im GroBen hergestellt wird.

Eine gesteigerte Benutzung des Dunkelfeldes wird aber nur dann
von Nutzen sein, wenn die eigentumlichen moglichen Fehlerquellen
dieser Beleuchtungsart auch ej-kannt und vermieden werden; auf den
haupts&chlichsten und auch ofters in der Literatur zu findenden, den
Azimutfehler mochte ich hier naher eingehen.

Bekanntlich entsteht Dunkelfeld bei schrdger seitlicher Beleuchtung
des Objektes; der Dunkelfeldkondensor ist in seinem zentralen Teile
durch eine Blendenscheibe unduichsichtig gemacht, das Licht (Fig. 1)
kann nur in einem peripheren kreisformigen Saum eintreten. erleidet in
dem hier als Beispiel angenommenen Zeissschen Paraboloidkondensor
eine Spiegelung und tritt in Form eines Hohlkegels aus dem Kon-

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

densor aus, die Kegelspitze, der Schnittpunkt der beleuchtenden Strahlen,
bezeichnet zugleich den Ort, in deni das Objekt ein fur alleraal liegen
muB. Bei fehlerfreier Beleuchtung erhalt also das Objekt Licht von
alien Seiten. 1st jedoch die Beleuchtung fehlerhaft, so ist es moglich,
daB die Objekte nur von einer Seite beleuchtet werden.

Auf Fig. 1 habe ich den richtigen Strahlengang in einem Dunkel-
feldkondensor moglichst verstandniserleichternd darzustellen versucht.
Als Beispiel wurde der Paraboloidkondensor von Zeiss gewahlt, itn
Prinzip gilt jedoch die Darstellung fur alle gebr&uchlichen Kondensoren.
Das durch eine Linse gesaramelte Licht einer hellen Lichtquelle falle
parallel auf den Mikroskopspiegel, es fiillt diesen vollig aus und wird
als Lichtzylinder auf die ganze Unterfl&che des Kondensors geworfen.
Die Unterfl&che des Kondensors ist in ihrem zentralen Teil (durch Ver-
silberung) abgeblendet, so daB das Licht nur ringformig am auBeren
Rande eintreten kann. Der Lichtring erfahrt an der parabolischen
Fiache des Kondensors eine Spiegelung, durch die die Lichtstrahlen
eine starke Neigung zur optischen Achse des Mikroskopes erfahren. Es

Fig. 3.

Fig. 3. Schlitzblende zur ex-
perimentellen Hervorrufung von Azi-
mutfehlern nach biedentopf.

Fig. 4. Spirochaeta pal¬
lida, gefiirbt mit Fuchsii richtige
und gewollt fehlerhafle Abbildung
j nach biedentopf 1908.

Fig. 4.

tritt also aus dem Kondensor ein Hohlkegel von Licht aus, seine
Spitze stellt den oben erwahnten Strahlenschnittpunkt dar, in dem das
Praparat liegen muB. Dieses erhalt also von alien Seiten schrag auf-
fallendes, helles Licht. Das beleuchtende Licht setzt seinen Weg fort,
es verlauft auBerhalb des Objektives. In das Objektiv gelangt nur vom
Praparat abgebeugtes Licht, daher erscheint das Praparat hell (bzw.
wenn gefarbt, mit komplementarfarbig leuchtendem Saume) auf dunkelm
Grunde.

Fiillt dagegen das beleuchtende Licht den Planspiegel des Mikro¬
skopes nicht voll aus, so erhalten wir den in Fig. 2 veranschaulichten
Strahlengang. Das Objekt wird nicht von alien Seiten'beleuchtet, sondern
von einem gewissen Teile der Kondensoroberflache gehen keine beleuchten¬
den Strahlen aus. Die Folgen fiir das entstehende mikroskopische Bild
sind schwerwiegende. Experimentell hat Siedentopf (5) solche Azimut-
fehler dadurch hervorgerufen, daB er die in Fig. 3 abgebildete Blende
drehbar unter dem Dunkelfeldkpndensor anbrachte. Solche Beleuch-
tungsfehler kdnnen auch im Hellfeld entstehen, jedoch sind sie dort da¬
durch sofort augenfallig, daB ein Teil des hellen Gesichtsfeldes dunkel
bleibt, das fallt sofort auf, wahrend dieser Fehler im Dunkelfeld un-

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Oelze, Dunkelfelduntersuchungen und Azimutfebler.

79

bemerkt bleiben kann, und nun dasselbe Objekt scheinbar ganz ver-
schiedene Formen zeigt.

Bei jeder Dunkelfeldbeobachtung muB man besonders auf Azimut-
fehler achten, sie entstehen sehr haufig. Arbeitet man mit Bogenlicht,
so genilgt es z. B. schon, wenu die negative Kohle den Lichtkrater der
positiven teilweise verdeckt, um das Bild fehlerhaft zu machen. Ein
gutes Objekt zur Untersuchung auf Azimutfehler sind Erythrozyten, ihr
Rand mufi gleichm&Big hell erscheinen. Kleinste punktfflrmige Objekte
erlauben keine Beurteilung auf Azimutfehler, wohl dagegen dunne lange
Objekte, wie Spirochaten etc. Benutzt man einen drehbaren Objekt-
tisch, so darf das Bild einer Spirochate sich nicht dndern, vor alien
Dingen darf die Spirochate nicht in Punkte aufgelost erscheinen.

Siedentopf (5) hat

1908 die fflr die bakterio-
logische Untersuchung so
wichtige Frage der Azimut¬
fehler experimentell geklart
und festgestellt, daB schon
bei 10°—20°Aenderung des
relativen Azimutes ein Ab-
sinken der Intensitat des
abgebeugten Lichtes fast bis
auf Null eintritt Daher er-
klaren sich die auffalligen
Befunde, die er an einer
mitFuchsin gefarbten
Spirochaeta pallida
erhielt. Siedentopf stellte
sich die Spirochate im Para-
boloidkondensor ein, er er¬
hielt das Bild Fig. 4 a, der
daneben stehende Kreis

Fig* 6.

Fig. 5. Asterio-
nella, richtig und
mit gewolltem Azi¬
mutfehler abgebil-
det, Original.

Fig. 6. Spirocha-
teu im Dunkelfeld
naeb Kasai und

deutet an, daB Licht von _ Kobayaahi 1919

alien Seiteu auf die Spiro- Fl * 5 - (Azimutfehler).

chate fiel. Nun schaltete er unterhalb des Kondensors seine Schlitz-

blende (Fig. 3) ein, die Lage des Schlitzes geben die Striche rechts
neben Fig. 4, b—d an. Man sieht, wie auBerordentlich verschieden
die erhaltenen Bilder von derselben Spirochate sind. Die Fig. 4 stellt
eine Reproduktion aus der Abhandlung von Siedentopf dar; es handelt
sich nicht um ein Schema, sondern um genaue Nachzeichnung des Be-
obachteten. Man sieht, daB bei einem beschrdnkten Azimut nur diejenigen
Teile der gewundenen Spirochate sichtbar werden, die annahernd senk-
recht zu dem gerade vorhandenen Azimut liegen. Besteht kein Azimut¬
fehler, erhait mit anderen Worten die Spirochate Licht von alien Seitea,
so konnen auch alle Teile der Spirochate Licht abbeugen und wir er-
halten eine ununterbrochene, geschlossene Abbildung.

Die Natur liefert uns Organismen, die wegen ihrer geometrischen
Bauart sich besonders gut zur Demonstration der Azimutfehler eignen.
In Fig. 5, oben, habe ich die bekannte Planktonalge Asterionella im
Dunkelfeld bei guter Beleuchtung abgebildet. Darunter sieht man die-
selbe Asterionella, wie sie bei einem (kiinstlich hervorgerufenen)
Azimutfehler erscheint.

Das Studium der Literatur zeigt, daB durch unbeabsichtigte Azimut-

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 1.

fehler eine auBerordentliche Verwirrung, namentlich auf dem Gebiet der
. SpirochStenkunde hervorgerufen ist.

Gas to u (2) beschreibt in seinem 1912 erscbienenen Buche in dem Kapitel
„Adspekt der Spirochaeta (pallida) im Ultramikroskop" verschiedene Formen, sie
erscheine namlicb 1) als Sene -glanzender Punkte, 2) ale Serie paralleler scbiefer
Stabchen, 3) als Korkzieber oder gewellter Faden, 4) als ans nebeneinander gereihten
Knopfen bestehender Faden, 5) als Evolutionsformen. Wie man sieht, hat Gaston
ungefahr alle mdgltchen Azimutfehler praktisch erprobt.

Kasai nnd Kobayashi (6) veroffentlichen 1919 eine Arbeit uber „Spirochaten
im Magen von Saugetieren“. Es heifit darin: „The spirochete in the dark-field illu¬
mination shows a fair distinction (Fig. 4 reproduziert als Fig. 6 dieser Arbeit). The
consecutive turns seem almost to touch, and accordingly the whole body presents the
appearance of a coil, the transverse section of which was clearly proved by the rota¬
tory movement of the organism to be an ellipse. The dark-neld microscopic view
also shows that each of the two extremities of this spirochete is tapered into a fine
terminal flagellum 11 . ^

Betrachten wir die hier genau wiedergegebene Figur 6, so sehen
wir, dafi Kasai und Kobayashi eine fehlerfreie Abbildung der Spiro-
chfite flberhaupt nicht wiedergegeben haben, alle 8 Formen zeigen alle
mdglichen Azimutfehler recht objektiv dargestellt Nur in einem Punkte
ist das fehlerhafte Bild auch fehlerhaft. beobachtet. Nach den Autoren
trftgt die Spiroch&te an jedem Ende eine Geifiel, diese ist auf alien
Bildern gezeichnet; sie konnte selbstverstfindlich nur bei einem zufSJlig
geeigneten Azimutfehler gesehen werden, keinesfalls also z. B. auf den
Bildern 3 und 7 (von oben). Ob flberhaupt diese Spirochfiten eine
Geifiel haben, erscheiut mir unwahrscheinlich, feststellen liefie es sich
natflrlich nur mit fehlerfreier Methodik. Wie man Azimutfehler im
praktischen Gebrauch des Dunkelfeldes vermeidet, habe ich in meinem
Buche (7) in ex ten so dargestellt.

Uteratnr.

1) Arning, Ed., Neue Anwendungweise der von Sieden topf angegebenen Dunkel-
feldbeleuchtUDg. (Dtsch. med. Wochenschr. 1907. IS. 2118). — 2) Gastou, P., L’ultra-
microscope, dans le diagnostic clinique etc. Paris 1912. — 3) Posner, zahlreiche
Arbeiten in der Berlin, klin. WochenBchr. 1907—1918. — 4) Hoffmann, E, Geber
die Verwendung des Dunkelfeldes zur Auffindung von Spir. in fixierten und gefarbten
Ausstricb- und Schnittpraparaten. (Dtsch. med. Wochenschr. 1921. S. (55). —
5) Siedentopf, H., Die Sichtbarmachung von Kanten im mikroskopischen Bilde.
(Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. 1908. S. 424). — 6) Kasai, K., und Kobayashi, R.,
The stomach spirochete occurring in mammals. (The Journ. of Parasitol. 1919. p. 1).
— 7) Oelze. F. W., Untersuchungsmethoden qnd Diagnose der Erreger der Ge-
echlechtskrankheiten. Muncben 1921.

Inhalt.

Bernblnm, Wilhelm, Vergleichende Unter-
suchungen der von Ziehl-Neelsen,
Gasis - Telemann, Kronberger,
Unna-Pappenheim und Konrich
angegebenen Farbemethoden zum Nach-
•weis von Tuberkelbazillen, S. 23.

Brinkmann, Studien fiber den Komple-
mentgehalt des menschiichen Blutes, S. 50.

Feinmann, S., Die Flecktvphusepidemie
in Riga in den Jahren 191S—1920, S. 33.

Fornet, W., Ueber die Reinkultur des
Pockenerregers. 6. Mitteilung. Mit 1 Ab¬
bildung im Text, S. 36.

Gildemeister, £Ueber Ersatz der Nutrose
in Bakteriendifferentialnahrboden, S. 75.

Jungeblnt, Claus W., Zum Nachweis des
Bacterium coli im Wasser mittels
der Bulirschen Probe, S. 63.

Heumark, Eugen, u. Heck, Heinrich,

Ueber Rattenvertilgungsmittel, 8. 39.
Oelse, F. W. f Dunkelfelduntersuchungen
und Azimutfehler. Mit 6 Abbildungen
im Text, S. 76.

Pfeiffer, Robert, u. Robitschek, Walter,

Ein neuesTuberkelbazillenanreicherungs-
verfahren mit Mastixemulsion, S. 27.
Flasaj, S., u. Pribram, £., Beitrage zur
Systematik der Mikroorganismen. Zur
Systematik der Bacteria bipolaria.
Bakterien der hamorrhagischen Septi-
kamie im weiteren Sinne. Mit 1 Tafel,S. 1.
Rotky, Hans, Ueber die Analyse der Ag¬
glutination bei Typhuskranken, S. 16.
Simons, Hellmuth, Ueber Selenomo-
nas palpitans n. sp., 8. 50.

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Frommannsche Bucbdruckerei (Hermann Pohle) in Jena.

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Centnlbl. f. Bakt etc. I. Abt Originate, fid. 87. Heft 2.

Ausgegeben am 15. Oktober 1921.

Nachdruck verboten.

Beitrag zur Kenntnis der Fluorescens-Grappe.

[Aus der Biologischen Versuchsanstalt, Mflnchen.]

Von Dr. Kurt Lantzsch.

Mit 1 Abbildung im Text.

Bodenbakteriologische Untersuchungen forderten eine Reihe von
Fluorescens-St&mme zutage, die einer vergleichenden Uebersicht
bezflglich ihrer Abweichungen unterworfen werden sollen. Die Stamme
verschiedenster Herkunft wurden fortlaufend numeriert mit FI. 1, FI. 2
nsw. bis FI. 22..

Aus Parkland (Gartenerde) stammten:

FI. 2, FI. 3, FI. 4, FI. 16, FI. 17, aus Alpenhumue (1700 m Meeresh.) wurden
isoliert: FI. 5, FI. 7, FI. 11, FI. 19, FI. 22, auf Kalksteinen aus ca. 2900 m Hohe
fan den sich: FI. 6, FI. 8, FI. 10, FI. 11, FI. 14, auf Moospolster der gleichen Hohe
FI. 12; in sumpfigen, stehenden Gewassern der Ebene kamen vor FI. 1, FI. 18; aus
Luft riihrt FI. 20, aus Jauche FI. 9, aus Hochmoor FI. 21, aus Pferdemist FI. 15 her.

Der Standort der angefflhrten Stamme ist also ein sehr verschie-
dener, and die Vielseitigkeit der Herkunft liefie sich noch besser ver-
deutlichen, kflnnten hier die Angaben der Literatur liber das Vorkommen
in Sputum, Sauglingsstuhl, Flaschenbier, Leitungswasser, Bfldern usw.
verzeichnet werden. Alle diese Stamme haben das eine Merkmal, einen
gelbgrfinen Farbstoff, das Bakteriofluoreszin zu bilden, gemeinsam.

AuBer den angefflhrten wurden noch 3 Stamme in die Untersuchung
einbezogen, die mir Herr Prof. Sflpfle, Hygien. Institut Mflnchen, flber-
lieB. Meinen ergebensten Dank fflr diese freundliche Unterstfltzung!
In dieser Arbeit sind diese Stamme bezeichnet als: Pyocyaueus 1
und 2 = P y o c. 1 und 2 und P u t i d u m = Put.

Die von mir beobachteten Stamme wurden bei Zimmertemperatur
auf Uschinsky-Agar gezflchtet. d. i. Nahrlosung nach Uschinsky
mit 2 Proz. Agar. Wachstum und Farbstotfbildung waren gut bis auf
FI. 21, FI. 22, die rasch Degenerationserscheinungeu zeigten und nicht
mehr zu retten waren. Es wurden Kartoffel- und Pepton-Agarkulturen
dazwischengeschaltet, die Farbstoffbildung durch Zusatz von Na-Humat
wrieder regeneriert, als sich Abnahme zeigte. Von einer 2-proz. NaOH-
Erdabkochung wurde 1 ccm zu 10 ccm Nahragar gesetzt. Wachstum
und Farbstoffbildung waren nach dieser Auffrischung vorziiglich, eine
Erscheinung, die von Azotobacter, Amylobacter und den Nitri-
fikationsbakterien ebenfalls berichtet wird.

Die Untersuchung erstreckte sich auf die morphologischen Merk-
male, Zuckervergflrung, Nitratreduktion, Denitritikation, Indolbildung,
Gelatineverflflssigung und serologisclie Daten. I^s wurde versucht, das
Gemeinsame, Bindende und das Trennende dieser Gruppe mog-
licbst herauszuarbeiten.

Ente AM. Png. Bd. 87. Heft 2.

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82

Ceotraibl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2.

Auf Zuckervergflrung wurde untersncht:

In 1-proz. Dextrose-Laralose-Mannitbouillon, Nitratreduktion wurde festgestellt in
der eiweiflfreien Losung nach Massen:

H.O 1000 Na,HPO. 0,5 g

KNO, (0,5-) 1,5 g NaCl 0,5 „

Glyzerin 20 g Na,CO, 0,5 »

Apfelsaure 7 g mit Soda neutralisiert MgS0 4 0,1 „

Es warde zagleich aaf Ammoaiak geprOft, da ich Afters bei Erd-
stflmmen Redaktioa des Nitrats bis zu Amraoniak, das einwandfrei dnrch
Destination nachgewiesen warde, beobachtete. Zam Nitratnachweis warde
die KulturlAsung mit 5 Proz. — H 2 S0 4 angesauert und mit Jodzinkstarke
versetzt. Es tritt Blaafarbnng ein bei Vorhandensein von Nitrit. Fflr
NH g wurde Nesslers Reagens verwendet. Selbstverstandlich warden
Kontrollproben mit anbeimpften Robrchen ausgefflhrt, denn nach l&ngeretn
Stehen bildet sich in der Massenlosung Nitrit, and NH 8 kann ans der
Loft aufgenommen werden.

Fflr den Indolnachweis wurde Peptonboaillon in der flblichen Form
benatzt, die Reaktion mit H,S0 4 and Nitrit auBerdem nach den Ehr-
lich-B6hme-Vorschriften durchgefflhrt

Fflr die Gelatineverflflssigung wurde Uschinsky-LAsung mit 10 Proz.
Gelatine verwandt.

GeiBelf&rbung warde versacht nach Loeffler, Peppier and Tri-
bondeau (1). Wo die GeiBelzahl angefflhrt ist, liegen Beobachtnngen
von 2—3 Prflparaten ans verschiedener Zeit vor. In der Prflfung der
Einschlflsse richtete ich mich nach A. Meyer (2). Die Tingierung mit
Methylenblau 1:10 warde im h an gen den Tropfen und im Ausstrichprfi*
parate, fixiert mit 36-proz. Formalin, durchgefflhrt, auf Volutin durch
Entfflrben mit 1 Proz. H 2 S0 4 des Ausstriches und Nachbehandlnng mit
Jodjodkali geprflft. Volutin tritt als runde, schwarze Kflrperchen in der
Bakterienzelle auf.

Die Einordnung der Fluoreszentenstamme ist eine willkflrliche. Da
ein Prinzip herausgegriffen werden muBte, ordnete ich nach einem aufier-
!ich sichtbaren Merkmale, der Intensitat des Wachstums auf Schragagar.
Besonders glflcklich ist diese Einreihung nicht, da sich eine Variability
geltend machte, die durch Temperatur, Zflchtungsdauer des Stammes
und andere Ursachen bedingt sein mochte; es zeigen sich Unterschiede,
die sich schwer in Worte fassen lassen. Die Aufstellung erfolgte nach
folgender Beobachtung: Von einem flieBenden, weiBlich-schleimigen Be-
lag mit Fettglanz, starkem Absatz im Kondenswasser, ahnlich Pneu-
monie, ist ein Uebergang zu beobachten zu nicht flieBenden Typen mit
weniger glanzender, glatter Oberflache, endlich mit Mattglanz und leicht
runzliger bis glatter Strichoberflache. Belag ist im allgemeinen wie das
Substrat mit einem grflnlich-gelben Tone gefflrbt, bisweilen auch weiB-
lich, besonders bei den flieBenden Typen. Es kdnnen nur Kultnren
gleichen Datums verglichen werden.

FI. 1, flieflend, schleiraig, Fettglanz, Belag gelblichgriin, starker Absatz im Kon¬
denswasser. Durch das FlieOen entstehen Anhaufungen mit weidem Bchimmer. — FI. 2,
d^gleichen, nur Belag weiBlich. — FI. 3, nicht fliefiend, stumpfer Glanz, Oberflache
runzlig, narbig. Belag weittlieh bis grunlich. — FI. 4, nicht flielaend, Fettglanz. Ober¬
flache glatt, Belag weifi. — FI. 5 wie FI. 4, FI. b wie FI. 4, nur Oberflache weniger
glatt. Fl. 7 wie FI. 4, FI. 8 wie FI. 6, alter© Kulturen bisweilen mit leicht eince-
senkten Grubchen, FI. 9 wie Fl. 4, Fl. 10 wie Fl. 8, Fl. 11, Fl. 12 wie Fl. 4, nur Belag
nicht so stark, weniger erhabeu. Fl. 13, Fl. 14 runzlige bis glatte Oberflache, Fettglanz.
Fl. 15, Fl. 16, Fl. 17, Fl. 18 wie Fl. 13, Fl. 14; nur weisfc Fl. 16 weifien Belag auf,
nicht von Farbstoff durchtrankt. Fl. 19 wie die vorhergehenden; FL 20 dunner Be¬
lag, Fettglanz. Fl. 21 dunner, kaum sichtbarer Belag, eingegangen wie Fl. 22.

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Lantzsch, Beitrag zur Kenntnis der F1 uorescens-Gruppe. 83

# 1

Die morphologischen Bilder sind recht iibereinstiimnende. Es scheiden
aus der Reihe aus: FI. 3, FI. 4, FI. 22. FI. 3 zeigt in Slteren Kul-
turen stark lichtbrechende Korner, 2—3 im Individuum, die sich im
mit Methylenblau 1:10 behandelten Ausstrich als belle, ungef&rbte
H5fe hervorhoben; Fettfiirbung ergab keine Sicherheit, Glykogenfar-
bung mit Jodjodkali war negativ, Plasma farbte sich gelb, Membran
wnrde sichtbar. In 96 proz. Alkohol, in Chloralhydrat (5 g auf 2 g
H»0), in Eisessig schwinden diese Granula; Osmiumsaure ergab keine
Reaktion. Es mflssen diese Gebilde also als Vakuolen angesprochen
werden Daneben treten 1 — 2 Volutinkugeln auf. Ein Uebergang
von dieser Form zu den anderen bildet vielleicht FI. 5, die im mit
Methylenblau behandelten Pr&parate sehr kleine, vereinzelte Vakuolen

Pyoc. I. FI. 20. FI. 11. FI. 1. FI. 18. FI. 4.

Fig. 1. Figur der vorhandenen Verfliissigungsintensitaten. Kulturen vom 26. Nov.,
photographiert 9. Dez. 1920. Zu beachten sind die verschiedenen Horizonte der Ver-
flussigung. Von links nach recbts: 1) Pyoc. I, 2) FI. 20 intensive Verfliissigung,
3) FI. 11 rasche Verfliissigung, 4) FI. 1 langsame Verfliissigung, 5) FI. 18 Erweicnung,
6) FI 4 ohne Verfliissigung.

und Volutin aufweist, sich jedoch durch GeiBelzahl von FI. 3 unter-
scheidet und in der Fadenbildung sich wiederura den Hauptformen
nahert. Ferner fallt FI. 4 durch die Gallerthulle auf, die besonders bei
Ketten deutlich ist. Im Gallertfaden liegen die gefSrbten Einzelzellen
in deutlichen, ungefarbten Zwischenraumen nebeneinander. Gallerthulle
0.15—0.2 n dick, auBerdem weicht diese Form von den iibrigen durch
die GroBenverhaltnisse ab.

FI. 22 ist morphologisch wie physiologisch ein atypischer Fluoreszent.
tritt als dickes Kurzstiibchen oder als Kokkus auf. Leider konnte
diese Form nicht weiterziichten.

Die iibrigen Formen treten als bewegliche Stabchen auf, die nicht
unter 1,5 /u Lange, lebend gemessen, heruntergehen, auBer FI. 5, bis

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VjAJ v UNIVERSITY OF CALIFORNIA

Es

ich

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84

Centralbl. f. Bakt. etc. L Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2.

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1,2 fx. Es sind alle Uebergange vorhanden von dieser Gr8Be bis zu 20
bis 80 u langen Faden. Meist bowegt sich die Hauptmasse der Indi-
viduen um eine GroBenordnung von 1.5—2 — 4//, Breite schwankt
zwischen 0,6—0,8 //, geht bis 0,9 // bei FI. 6, sinkt bis 0,5-0.6 // bei
FI. 9, Pyoc. 1, 2, Put. Ketten- und Fadenbildung ist fast bei alien aus-
geprSgt.

Die StSmme, im hSngenden Tropfen betrachtet, weisen alle Ueber¬
gange auf von geraden bis leickt gekriimmten Stabchen init rotie-
rendem Vorderende, dem Vibriotyp, und weiter bis zum Spirillentyp.

Vibriotyp fehlt bei: FI. 5, FI. 6, FI. 9, FI. 12, FI. 13, Pyoc. 1, 2;
ist wenig ausgebildet bei FI. 7. FI. 10, FI. 14, FI. 15, FI. 18, FI. 19,
Put., vorhanden bei FI. 1, FI. 2, FI. 8, FI. 11, ausgepragt bei FI. 16,
wo Exemplare mit 1—1 */ 4 - Umgkngen beobachtet wurden neben geraden,
gestreckten Individuen.

Der hangende Tropfen zeigt alle Abstufungen nebeneinander. Die
Einreihung ist naturgemaB keine straffe, denn wo der Vibriotyp als
fehlend augegeben wurde, mogen immerhin einige Exemplare mit be-
ginnender Kriimmung vorhanden sein. „Wenig ausgepragt“ soli die be-
ginnende Krtiimnung bezeichnen; „vorhanden*, daB der Vibriocharakter
deutlich wahrnehmbar ist, besonders in der Bewegung.

Die GeiBelfarbung bietet unvollstandige Augaben, da sie nicht bei
alien Formen gelang. Wo Beobachtungen vorliegen, stammen diese rain-
destens von 2 Praparaten. 1—2 GeiBeln finden sich bei: FI. 1?, FI. 5,

FI. 11, FI. 12, die als monotrich bezeichnet werden kbnnen; es findet
sich auch die lophotriche Anordnung von mehreren GeiBeln, 3—6. Bei *
FI. 16 zeigten sich auch bipolar begeiflelte Teilungsstadien. Die Be- i
funde Burckhardts (3) kann ich aus meinen Beobachtungen nicht
bestatigen: „Das Bacterium pyocyaneum besitzt anscheinend
immer nur eine GeiBel, das B. fluorescens (liquefaciens) meist
2—5, das B. putidum meist ein Biischel von 6—12 GeiBeln.“

Dieser Satz wird durchbrochen durch obige Angabe, auch besteht
keine Parallelitat zwischen BegeiBelung und Gelatineverflttssigung nach
meinen Befunden; ich muB auch ablehnend dieser Behauptung gegen-
iiberstehcn, da ich das Vermpgen, peptische Fermente auszuscheiden,
als Speziesmerkmal aus spater zu erorternden Griinden nicht anerkennen
kann. Klimenko (5) findet als GeiBelzahl fiir den Fluoreszenten 2
bis 4—5. ;

Volutin wird gebildet von den Siammen FI. 3, 1— 3 Granula in der Zelle. auch
on.st abweichend, FI. "> vereinzelte Voltiunkugeln, FI. 6 Volutin in j unger Zelle spar-
lich, in Fiiden rosenkranzartig, FI. 11 wie Fl. 5, FI. 12 weist 1-4 Volutinkorper im
Exemplar auf, Fl. 13, FI. 17, FI. 20 zablreiche Volutinkorper, die rosenkranzartig an- '
georduet sind.

Aus diesen Daten laBt sich fur die Fluoreszenten folgende morpho-
logische Grundlage gewinneu:

Die Fluoreszenten sind bewegliche Stabchen mit be-
gei Bel tern Ende. monotrich bis lophotrich. Lange, lebend
gem essen. um ein MaB von 1,5—6#/ sich bewegend, seltener darunter.
Ketten und Fadcn bildend; Fiiden bis 40—80 u lang, Breite 0,5
bis 0,8 fi. Die Staimnc weisen alle Uebergiin ge von gestreckten,
geraden Stiibchen bis zu leiclit gekriimmten und weiter zu Stam-
men mit mehr als einem Umgange auf. V olutinbildung kann
auftreten von vereinzelte n Ivor perch on bis zu dichter Rosen-
kranzanordnung.

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Lantzsch, Beitrag zur Kenntnis der Fluorescen8-Gruppe.

85

Lehmann-Neumann gehen in ibrer „Bakteriologischen Diagnostic* fur B. pyo-
cyaneum (Geaa. Fluegge) L. und N. 1,4—6:0,4 fiir B. putidum (B. fluo-
rescens non liquefaciena) 1,9—5:0,4— 0,8 ju an. Migula verzeichnet im Sy¬
stem der Bakterien" fur Pseudomonas aeruginosa = B. pyocyan. 2—3:0,6 p
(nach Messungen an 8 verschiedenen Stammen), zuweilen langer, selten kiirzer, fiir
Pseudomonas f luorescens — B. fluor. 1,17—1,86: 0,68/i, fiir Pseudomonas
putida = B. floor, non liquef. keine Mafie. In Fluegge, „Mikroorganismen u ,
nnden sieh fiir das B. pyoeyaneum mehrere Angaben verschiedener Autoren: nach
Fluegge: 1—2:0,3^, nach Ernst 2—6 :0,5—0,7//, nachCharlin 1:0,6 /*; fur den
Bacillus tluorescens 1—2:0,3- 0,5

Gemeinsam alien diesen St&mmen ist die Farbstoffproduktion, Bil-
dung des gelbgrQnen Bakteriofluoreszins und die Unf&higkeit, Zucker-
arten, Dextrose, L&vulose, Mannit unter Auftreten von gasformigen
Produkten zu zerlegen; ebenso'fehlt die Sporenbildung.

FI. 16, das sich am starksten dem Spirillentyp nShert, hatte das
Vermdgen, Galaktose zu verg&ren; aber bereits nach der 2. Abimpfung
schwand diese F&higkeit. Ferner machte FI. 22 eine Ausnahme; dieser
Stamm vergor Zucker unter Gasbildung; er zeigte sich als atypischer
Fluoreszent und gibt zugleich einen Hinweis, daB unter dem gemein-
samen Namen „Fluoreszenten“ sicherlich St&mme vereinigt werden. die
keine verwandtschaftliche Beziehungen aufzuweisen haben, und daB die
Farbstoffproduktion, wenn auch ein sehr augenfalliges Merkmal, ebenso-
wenig zur Speziesaufstellung ausreicht wie etwa die Gelatineverfliissigung
ohne genaue Priifung anderer Qualitaten.

Ueber das Wachstum auf Kartoflfel ist wenig zu berichten. Eine
gewisse Variabilitat besteht, die auf die Diflferenz der Stamme, wie auf
das Kartoffelsubstrat geschoben werden kann. Es zeigt sich das Bild,
wie es Lehmann-Neumann ausreichend beschrieben haben. Auch
die Oberflachenkolonien auf Agar bei 120-facher VergroBerung konnten
als identische bezeichnet werden: braunliche Kolonie, peripher ver-
blassend, Zentrum fein gekornt, scharfrandig; nur Pyoc.’1, 2 weisen
eine lappige VergroBerung des Randes auf, sonst aber gleich.

Die Farbstoffbildung auf U schinsky-Agar beginnt mit einem
zarten Blaugriln, das fibersehen werden kann. Nur im Vergleich mit
Ilteren Kulturen lafit sich diese Beimischung sehen. Es geht in helles
MoosgrQn fiber, dem noch Blau beigemischt ist, und mit der Intensi-
vierung des Grflns in dunklere Tdne beginnt auch die Braun- oder Gelb-
fSxbnng des Substrates Diese Verfarbung, welche bis Tiefbraun gehen
kann, riihrt von der Umwandlung des Bakterioduoreszins her.

Jordan (6) sagt, daS durch langsame Einwirkung von Licht und Luft, sowie
apwisaen Reagentien der fluoreszierende Farbstoff in ein gelbes, das Pyozyanin in gleicher
Weise in ein schwarzes Pigment umgewandelt wird. Dan Geib mancher Stamme fasse
ich als ein abgeschwachtes Braun auf, je nach der Quantitiit des gebildeten Farbstoffes.
Auch Thumm (7) machte die Beobachtung, daft alte Kulturen ein orangerotes Aus-
sehen und eine dunkelgriine Fluoreszenz besitzen, ebenso berichtet Ruzicka (8) von
Braunfarbung beim Fluorescens, wenn auch in geringerem Mafte als beim Pyo-
cy&neu m.

Eine Intensivierung des Farbstoffes durch KC10 s -Zusatz habe ich
auf Uschinsky-Agar niclit beobachten konnen.

Von den gelben bis braunen, diffundierenden Farbstolfen anderer
Bakterienspezies, wie ich an einem Bact. pneumoniae und sonstigen
StUmmen sah, unterscheidet sich das Fluoreszentenbraun durch Bei-
mischung von schwach grtinen bis diinkelgriinen Nuancen.

Eine Tabelle liber Farbstoflanderuug atizufiihren, unterlasse ich, da
diese Qualitaten nicht exakt zu erfassen sind. Gelb bis leiclit braun
erschienen nach 3—4 Woclien: FI. 2 Ins FI. S, FI. 10, FI. 11, FI. 13,

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86

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

FI. 16 bis FI. 20. In Braun bis Dunkelbraun finderten abl FI. 1, FI. 9,
FI. 12, FI. 15. Es zeigte sich in' der Quantity der Farbstoffproduktion
ein FluB, UebergBnge von Viel bis Wenig, weiter bis zum Aufhoren der
Bildung im Laufe der Zflchtung. Als festes, konstantes Merkmal kann
diese Eigenschaft nicht angesehen werden. Stettenheimer (9) fflhrt
ahnliche Beobachtungen an: „Stamme, die eine Zeitlang farblos ge-
wachsen sind, kflnnen nach lSngerer Ruhepause zu flnoreszieren an-
fangen. tt

Thumm (7) fflhrt die verschiedenen Nuancen von Blaugrfln zu
Dunkelgrfln des Farbstoffes auf wechselnde Alkalibildung der Stamme
zurflck. Dazu kdnnen einige kleine Belege angefflhrt werden. FI. 9
bildjete einen schmutzig-blaugrflnen Farbstoff; Extrahieren mit Chloroform
gelang nicht, ebeusowenig konnte Pyozyanin nach Sullivanschem (10)
Rezept erzeugt werden. UebergieBen. der Platte mit einer 5-proz. NH S -
Lflsung ergab einen Umschlag in Gelbgrfln, das sich durch nichts von
den anderen unterschied.

Die Stamme wurden in eine Uschin sky-Losung geimpft, die mit
HC1 neutralisiert wurde; Methylorange als Indikator. Der Indikator
befand sich nicht in der Nahrlflsung, sondern es wurde ein Bruchteil
neutralisiert, auf die Gesamtmenge verrechnet und einige Probetiter
durchgefflhrt.

Nach 10 Tagen geringe Entwicklung, schwache Trflbung wahrnehm-
bar bei FI. 9, FI. 12, FI. 14, FI. 15, FI. 19, FI. 20; aUe Kulturen ohne
Fluoreszenz, mit Ausnahme von FI. 15. Die FlflssigkeitssSule stand
in den Rflhrchen 7 cm hoch, so daB an ungflnstige 0 2 -Verhaltnisse zu
denken war. Eine Zucker-Peptonlflsung stand 8 cm und hober in den
Rflhrchen, und die Entwicklung vollzog sich tadellos.

AuBer Alkaligehalt ist hier zweifellos die Anwesenheit von Kolloiden
ausschlaggebend, wie ich an anderer Stelle nachweisen mflchte. Es
wurden deshalb nochmals Stichproben ^ngesetzt mit Stamm FI. 1 bis
FI. 5, die folgende Abstufung der Alkalitat zeigten:

1) Us chin sky Losung neutral, 2) mit 1 ccm */ J0 nKOH auf 100 ccm der Losung.
8) mit 2 ccm, 4) mit 3 ccm, 5) mit 4 ccm */. 0 nKOH auf 100 ccm Nahrlosung. Dio
Fliissigkeitssaule stand 3 cm hoch in den Rohrchen. %

Nach 2 Tagen ergab sich folgendes Resultat:

neutral

i 1 ccm

f

2 ccm j

3 ccm j

4 ccm V l0 nKOH
auf lOo ccm

FI. 1

I

leichte Trii- j
bung

leichte Trii-
bung

' leichte Trii-
1 bung

leichte Trii-
. hung

zart blaugriin

9 1

» ~ |

dgi.

dgi.

, dgl.

dgl.

dgi.

„ 3 |

-

ohne Tru-
bung

ohne Trii-
* bung

blaugrune
i Kahmhaut

! blaugrune Kahm
| haut

” 4

j ohne Trii-
‘ bung

dgl.

getriibt

| dgl.

f dgl.

|

i, 5

dgl.

1

1 n

i

| ohne Trii-
1 bung

* getriibt

1 '

i

i

l

Es ist also der Alkaliuitsgehalt 3 ccm V^uKOH auf 100 ccm neutraler .Nahr¬
losung als untcre Gren/.e liir die Farbstoffhildung zu bctrachten. Thumm versetzte
seine neutrale Nahrlosung mit f> ccm ^uKOH auf das Liter, das sind 5 ccm V 10 nKOH
auf das 100.

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Lantzsch, Beitrag zur Kenntnie der Fluorescens-Gruppe.

87

Die Us chin sky- Lbsung, die ich ffir den Agar benutzte, zeigte
einen Alkalit&tsgehalt von 1,5 ccm l /i n KOH == 15 ccm Vio d KOH auf
das 100. Es darf also der Alkalit&tsgehalt innerhalb weiter Grenzen
schwanken. FI. 3 behielt bei vorstehendem Versuch seinen blaugriinen
Farbstoff bei, wbhrend die flbrigen 4 Stamrae mehr Oder minder in Gelb-
grfln ubergingen. Zusatz von 10-proz. NH 8 -L6sung gab einen Umschlag
ins Gelbgrfln der anderen Kulturen, was ebenfalls fur T h u m m spricht.
Durch Chloroform war der blaugrline Farbstoff nicht extrahierbar. Auch
kann ich dessen Angaben fiber das Fehlen des Farbstoffes in Trauben-
zuckerkulturen bestatigen. Das Pigment ist nach Thumm und Sulli¬
van an das Vorhandensein von Phosphaten und Sulfaten neben geeig-
neten C- und N-Quellen gebunden, setzt zur Bildung einen Alkalit&ts-
gehalt von mindestens 3 ccm y 10 nKOH auf 100 ccm voraus.

Das blaue, durch Chloroform extrahierbare Pigment, das Pyozyanin,
bat Thumm hbersehen. Er ISBt es vielmehr als Bakteriofluoreszin in
geringerer Alkalilosung gelten.' DaB dem nicht so ist, beweisen die fol-
genden Zahlen, ferner die Beobachtung, daB Pyoc. 1, 2 bei Zimmer-
temperatur zuerst fluoreszierendes Pigment entwickeln, das nach einigen
Tagen durch das sattblaue Pyozyanin iiberdeckt wird.

Rohrchen mit 8 ccm U Bch in b k y-Losung, neutralieiert und mit 4 ccm ’/touKOH
auf 100 ccm versetzt, wurden beimpft und nach 14 Tagen mit 1 / 1 ' 0 r »H.Cl auetitriert.
Verdunstung betrug in dieser Zeit 0,6—0,8 ccm. Es werden die gefundenen Werte
ohue Rucksicht auf Verdunstung und auf den Alkalitatsgehalt der Ausgangslosung
angegeben. Dieser betrug fur jedes Rohrchen (4 - */ 10 n) • ®/. 04 = 0,31 ccm l /. 0 uKOa.
Doch kann der Neutralpunkt der geimpften Losung nicht besonders genau festgelegt
werden. Es verbrauchten zur Neutralisation

FI.

7)
V

Jt

Ti

71

7)

1

3

4
6

9

11

12

13

“{

3,7 ccm ‘/,o-nKOH

3,0 ,

4,0 „

3,6

4 » „

4,0

3,8

3,7

4.5

3.5

n
v
n
n
in

FI. 15
»

”

v 20

Pyoc. 1
Pvoc. 2

S un
rblos
grim
farblos

3,6 ccm

V.p-hKOH

4,o „

7)

3,8 ,

n

4,1 *

»

3,4 „

D

2,7 ,

V

4,2 n

7i

2,8 ,

V

Die fehlenden StSmme waren nicht angegangen. Der AlkalitStsgrad,
der in diesen 8 ccm Nahrlosung, Verdunstung ungerechnet, entwickelt
wird, ist ein recht bedeutender; doch miissen wir bedenken, daB diese
Zahlen als gewisse Endzahlen anzusehen sind, als das Hdchstmafi, das
jeder Stamm aus dem gebotenen Medium entwickeln kann. Thumms
Vermutung besteht nicht zu Recht: Die Pyocyaneum-St&mme, die
verilflssigenden und die nicht verfliissigenden, zeigen keine durchgreifen-
den Unterschiede in der Alkalitatsbildung. Eine Parallelitat mit anderen
Eigenschaften, z. B. Pigmentbildung, habe ich nicht herauslesen kbnnen.

Als Gemeinsames weist die Fluoreszentengruppe bis jetzt auf: die
morphologischen Verhaitnisse der Zelle, nicht frei von Variabilit&t und
zum Vibriotyp und Spirillentyp fiberleitend, den Mangel an Sporenbil-
dung, die UnfShigkeit, Zucker zu vergaren, und die Pigmentbildung.
Die Farbstoffproduktion zeigt eine Abstufung, die nicht von der Inten¬
sity des Wachstums abhangig ist, sondern von der Ziichtungsdauer und
anderen unbekannten Faktoren beeinfluBt wird. Es gait, ein diagnosti-
scbes Merkmal zu finden, in dem sich die einzelnen Stamme unter-
schieden. Und dieses schien gefunden zu sein im Verhalten gegen
Salpeter. Denitrifikation, Salpeterreduktion, Indifferenz gegen dieses

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88

Centr&lbl. f. Baku etc. 1. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 2.

Salz schienen eine Klassifikation zu ermoglichen. Docb zeigte eingehen-
dere Prilfung ein durchaus wechselndes Verhalten. FI. 9 denitrifizierte
anfangs mit Schaumbildung, dann ohne diese Erscheinung, erwies sich
zuletzt als nitratreduzierend. Bei dea anderen Formen konnte bald
Nitrit nachgewiesen warden, bald nicht. Hier lagen Schwankungen vor,
die zu kiaren waren:

Nach einer sondierenden Probe mit FI. 1 und FI. 7 wurden die Stamme, in je
3 Rohrchen mit a «= 2 ccm, ,b = 6 ccm, c = 10 com Maasenldsung geimpft, nach
7 Tagen auf Nitrit and Nitrat untersucht. Nitrit wurde nachgewiesen durch Ansauern
mit 5 Proz. H.SO, und Versetzen mit Jodzinketarke. Blieb die Nitritreaktion a as, so
wurde mit H,SO, konz. und Diphenylamin auf Nitrat gepruft. Folgende Tabelle gibt
Uebersicht uber die Stamme:

a = 2 ccm, b = 6 ccm, c = 10 ccm Massenlosung.

!

NO,

^0,

; NOw“

NO,

( »

2 b

u

_

_

f a

FI.

+

.

Fl.

15f b

schwach

tiefblau

+

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( a

3 b

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—

—

1 a
16 b

1 c

—

FI.

—

Spur

FI.

schwach

+

•

FI.

( a

4 b

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_

Spur

Fl.

nib

+

—

|c

f a

18 b
lc

+

•

FI.

+

Fl.

__

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.

—

—

( a

Spur

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—

—

FI.

6 b

lc

Fl.

1W b

—

—

—

lc

i

schwach

FI.

1 a
8) b

(c

Fl.

1 a

20 b

U

l a

■h

! Z

_

nichtangegangen

nicht angegaugen

+ Spur

Spur

FI.

9 I b

_

—

Pyoc.

_

_

lc

—

•

+

•

1 a

_

_

_ j

_

FI.

10 b
lc

—

Spur

Pyoc.

—

—

FI.

12-jb

—

—

Put.

1 a
b

1 C

—

—

lc

schwach

.

+

\ a

13 b

1 c

14 nicl

_

—

Kon-

no.-

m

FI.

—

—

trolle

no; +

1

FI.

tit angegangen.

1

DaB bisweilen von Nitrat eine Spur gefunden wurde, wenn Nitrit
nicht vorhanden war, hat seinen Grund darin, daB die Diphenylamin-
probe doppelt so enipfindlich ist als die Jodzinkstarkereaktion.

Schaum trat nicht auf, nur bei FI. 1-3, FI. 15 und Pyoc. 1 waren
sehr feine Gasblasen unter der Oberflache. Das Resultat in Worten:
denitrifizierend erweisen sich alle Stamme, wenn kleine
Mengen von Nitrat zur Verfiigung stehen; diese werden
bew&ltigt. Als schwiichste denitrifizierende Formen miissen ange-
sehen werden: FI. 1, FI. 2, FI. 5, FI. 15, FI. 17. Bei diesen wurde im

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Lantzsch, Beitrag zur Kenntnis der Fluorescens-Gruppe.

89

b-R6hrchen = 6 ccm und im c-Rohrchen = 10 ccm Nitrit noch nach
7 Tagen gefunden, sie sind auch eventuell als nitratreduzierend zu be-
trachten. Als n&chste Gruppe haben die Formen zu gelten, die im c-
Rohrchen Nitrit aufweisen, im- a- und b-Rohrchen fehlt Nitrat und Ni¬
trit. Das sind: FI. 3, FI. 12, FI. 19, FI. 20, Pyoc. 1, Put. Der Rest
der Starome hat in dieser Zeit Nitrat und Nitrit vollstSndig zersetzt.

Wir haben also eine langsame bis relativ rascheSalpeter-
zersetzung. Die ersten Vertreter kbnaen vielleicht auch als nitrat-
reduzierende in Anspruch genommen werden. Nur die Lange der
Gntwicklung und die Quantitat des verfflgbaren Nitrat-
salzes sind ausschlaggebend fflr die Raschheit der Zerstdrung.
Es liegt ein Uebergang von sehr langsamer Denitrifiktltion,
resp. Nitratreduktion vor bis zur stiirmischen Salpeter-
zerstorung unter Schaumbildung manchor Pyocyaneum -
Stamme, wie auch FI. 9 im Anfang der Zilchtung. Zu Shnlichen Er-
gebnissen kommt auch Trommsdorf (11):

„In der K u n tze-LosuDg denitrifizierten samtliche 27 Pyocy a n e u a-Stamme,
aber auch ein groBer Teil der Fluorescens-Stamme (die Mehrzabl der Putidum-
Slamme'denitrifizierte ebenfalls)“. Und Stetten heimer (9) berichtet: „Bei zahlrdchen
Fluoreszenten (3) und Punktaten (0) fiel der Denitrifikationsnachweis positiv aus, doch
war die Reaktion meist schwach.“ Und „verschiedene Abirapfungen eines Stamm eg
denitrifizierten bald, bald nicht. Die Farbstoffbildung ist davon ganz unabhiingig.“
Nur Klimenko (5) kommt zu anderem Resultat; die«cr Autor gondert eine Fluo-
regeeng-Gruppe aus der dee Bact. alcaligenes aus: r Die Griinde hierfiir sind
fuleende: eine fortwabrende Bildung von Pigment, die Fahigkeit, eine ziemlicb groBe
Mt-nge von Kohlenwasserstoffen zu spalton, die Unfiibigkeit der Mehrzabl, mit Aus-
nahtue von Petruschkv (3), salpetersaure Salze in salpetrige zu verwandeln.“ Leider
1st nicht gegngt, ob auf Salpeter gepriift wurde; denn eg kann hier ebenso eine Deni-
trifikation obne Scbaumbildung vorliegen, und dag iet dag Wahrscheinlicbe.

Fur die Fluorescens-Gruppe ergibt sich'aus obiger Erdrterung,
daB Nitratreduktion und Denitrifika tion als differential-
diagnostische Hilfsmittel versagen, da alle Abstufungen ver-
treten sind. Einerseits ergeben sich alle Uebergange innerhalb der
Gruppe, andererseits Schwankungen und Ab&nderungen wkhrend der
Zuchtungsdauer. Das Verhaltcn dem Salpeter gegentiber gibt nicht die
Mdglichkeit zur Speziesaufstellung (12).

Wie wir uns den Mechanismus der Nitratreduktion vorzustellen
haben, darflber geben vefschiedene Arbeiten neuesten Datums Anhalts-
punkte: Cl. Cohen (13), C. Neuberg, Nord, Wolff (14), Kosty-
tschew (15) wiesen die zentrale Stellung des Azetaldehyds bei Zucker-
zersetzung nach. Das reaktionsf&liige Azetaldehyd vermag sicherlich
eine Reduktion der Nitrate zu Nitriten zu vollziehen, indem es sich selbst
zu S§ure oxydiert. Die weitere Spaltung der Nitrite zu elementaren
N* miissen wir uns als einen GarungsprozeB vorstellen zur 0 2 -Gewin-
nung. Aus der Indolbildung liell sich ebenfalls keine Sicherheit
gewinnen zur Aufstellung von Spezies. Indol wurde nicht oder nur
spurenweise gebildet. Zu gleichem Resultat kam auch Trommsdorf
(11): B Indol konnte bei einer ganzen Reilie uuserer Pyocyaneum-
Stamme nachgewiesen werden. Die Fluorescens- und Putidum-
StSmme bildeteri s&mtlich, zum Teil allerdings spurenweise, Indol. u

Das VermOgen, Gelatine zu verfliissigen, und das Felilen
solcher peptischer Fermentwirkung fuhrte in der Fluoreszenten-
gruppe zur Aufstellung der beiden Spezies liquefaciens und non
liqoefaciens, von Lehmann - Neumann als B. fluorescens
(Fluegge) L. et N. und B. p u t id u m (Fluegge) L. et N. bezeic-hnet.

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Central bL t. Balct. etc. L Abe. Or finale. B-L 87. Heft 2.

: m)

Nach verschieJen longer ZuektungsJouer von 7 4 bis l 1 /* Jahr wurden
fiie S tarn me systematisch zusammengefaftt. Vor der Prflfung auf Ver-
riassigung warden alle Stamrne omal uber Piotten geschickt and noch-
maks oaf Reinheit gepruft.

Die Vertiassigang begann mit einem longen. sehlanken Trichter, der
oben meist eine Luftblase festhielt. Je nach der Vertiussignngsintensitlt
erweitert sieh der Trichter oben. die Luftblase sehwindet. Die Ver-
rldssigung schreitet weiter nach unten fort, so dab wir einen Zylinder
mit Trichter bekommen, und schlieftlich erfclgt der Uebergang in den
Zylinder ohne Trichter. Die gesamte oder fast gesamte Gelatine ist
vertiii.ssigt.

Enter Erweichung ist zu verstehen. daft der Stichkanal sieh allm&h-
lich von oben her erweitert, daft eine Spar der Gelatine gelost und
verbraucht wird. ohne daft eiue eigentliehe Verdiissigung stattfindet.

Es lassen sieh mehrere abgestufte Grade von Verdussigungsintensitat
heraaslesen. Ich mochte sie in 5 Stafen einteilen:

1 r Intensive Verflussi^ung: nach S—10 Tageu (Zimmertemperatur) ist die
Gelatine ganz oder bis auf eerin±re Keste verfUissigt. d. FL 9, FI. 14, FI. 19, FI. 20
i*. Fifef. 1. S. 83).

2) Rasche Vert 1 us si gun g: nach S—10 Tagen bleibeo 1—2 cm Gelatines&ule
ubrig. icurzer Zylinder mit Trichter: FI. IF FI. 1"> Fig. 1, S. 83).

?j) Lantriame Verfiussigung: FI. F FI. 2. FL 12 is. Fig. 1, S. 83). Nach
9 Wochen zeigte FL 17 Verfiussigung. vorher unter Stute 4 eingereiht.

4; Erweichung und sofortiger Verbrauch: FL 7, FL IS, FL 13 zeigt
nach 6 Wochen Erweichung mit einer 8pur von Verfiussigung, FL 17 war bereiu
unter 3 aufgefuhrt.

h\ Keine Verfiussigung , Einstich umwailt oder Nagelwuchs (FL 6): FL 3,
FL 4. EL 5, EL 6, FL S, Put. In einer Photographic sind aile Uebergiinge zusammen-
gectellt (s. Fig. 1, S3). Wie Fi. 10, FL 13. FL 17 einzurtuhen sind, kann man im

Zweifel *e;n. Grad 3. 4, 5 sind eben durch Uebergiinge verbunden, 1 und 2 zeigen nur
grad u die Unterschiede.

Intensive Verfiussigung undNichtverflussigung stellen
also nur die Extreme einer Reihe dar, die durch Zwischen-
glieder luckenlos miteinander verbunden sind. Es sind
die Fluoreszenten: liquefaciens und non liquefaciens durch
Uebergiinge innerhalb der Stammreihe aneinander geschlossen; aber auch
wiihrend der Ziichtungsdauer traten Aenderungen ein: FI. 1, FI. 2 ver-
loren stark an Intensitat der Vertiiissigung, ebenso ging FI. 7, das erst
langsarn verfliissigte, zur Erweichung liber, das gilt auch fur FI. 18.
FI. 8, das anfanglich vertiiissigte. verlor dieses Yermogen ganz. Gleiches
sagt. auch Stettenheiiner (9): „Es kaun zufallig ein Stamm seine
Fahigkcit, zu verfliissigen, verliereir. und Matz uschita (16) berichtet
ebenfalls von einer Verwandlung des B. fluorescens in B. putidum.

Auch liier hei diesem Merkmal, das immerhin noch kr&ftig genug
gait, liir Speziesaufstellung, finden wir Uebergiinge, die die Lflcke zwischen
beidon Gruppen B. fluorescens und putidum schlieBen. Wir
miissen die beiden Spezies als Varietiiten einer Form auffassen,
wie dies schon Lehmann und Neumann vorschlagen. Beide VarietSten
a liquefaciens und ,i non liquefaciens sollen liier zusammen-
genommen als B. fluorescens weitergefiihrt werden.

Es eilieht sieh nun die Frage nach dem Verhiiltnis des B. fluore-
scens zum B. pyocyaneum. Nochmals mochte ich das Geraeinsame
(h r heiden Gruppen hervorhehen: die morphologische Gleichheit, soweit

mit unseren I lilfsmitteln beurteilen kunnen, Bildung von Bakterio-
zin, (lessen l’roduktion verschieden stark sein und bis 0 abfallen

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91

Lantzsch, Beitrag zur Kcnntnis^der Fluorescens-Gruppe.

kann. Beide Formenreihen bilden keine Sporen, verg&ren Zucker nicht.
Ebenfalls ist das Verhalten gegen Salpetersalze eine gemeinsame Eigen-
scliaft, die nicht zur Unterscheidung herangezogen werden kann. Auch
ist die Alkaliproduktiou von gleicher H8he in der Uschinsky-NShr-
losung.

Pathogenitfit besitzen B. pyocyaneum wie B. fluorescens,
letzteres nur in geringerem MaBe. Es gelang Ruzicka (17), durch
Infektion mit B. fluorescens bei Meerschweinchen Eiterentwicklung
zu veranlassen. Klimenko (5) erregte eitrige Bauchfellentziindung
darch das gleicbe Bakterium bei Ratten mit todlichem Ausgang.

Nach eigenen Beobachtungen ist B. fluorescens wie pyocya-
nenm fflr Frosche, also fflr Kaltbliiter, weder in der Kalte noch in der
Wanne pathogen. Eitrige Bildung babe ich nie beobachten konnen,
weder an der Einstichstelle noch im Qbrigen Organismus. Bei ungefahr
50 Proz. der geimpften Tiere trat starker Hydrops auf.

Es bliebe als unterscheidendes Merkmal flbrig die Bildung eines
blauen Farbstoffes, des Pyozyanins, Warmetoleranz und ein spezi-
fischer Geruchsstoff nach Lindenbliiten; in diesen Eigenschaften unter-
scheidet sich das B. pyocyaneum von dem B. fluorescens.

Nach Jordan (6) existieren 4 Gruppen von Pyocyaneum-Stammen: '

l) die gewohnliche, Pyozyanin und fluoreszierenden Farbstoff erzeugende, 2) die
nur Pyozyanin bildende, 3) eine nicht seltene, die dem B. fluorescens liquefaciens
verwandt ist und nur fiuoreszierenden Farbstoff erzeugt, 4) eine nichlchromogene.

Sullivan (10) kommt zum gleichen Resultat, auBerdem konnte er
an einem Stamme die Erscheinuugen unter 1 — 3 hervorrufen durch
Mediumwechsel, Lehmann und Neumann vertreten in ihrer „Bak-
teriologischen Diagnostic dhnliche Auffassung: denn, so sagen sie,
,2) haben wir und andere Autoren Pyozyaninstdmme besessen, die keine
Spur von Pyozyanin mehr bildeten, und hat Ruzicka in geliifteten
Pyocyaneum-Kulturen eine starke Abnahme der Pyozyaninbildung
beobachtet (ob nur Umwandlung in Pyoxanthose?).“ Wir haben also
anch bei den Pyocy an e um-Stammen zwei Extreme zu verzeichnen,
Stamme mit voller Produktion des blauen Pigments, Stamme ohne
diese Eigenschaft. Und hier schieben sich die Beobachtungen Stetten-
heimers (9) ein: An 5 seiner Stamme, die sich bis dahin als Fluore-
szenten erwiesen hatten, begann die Pyozyaninbildung nach 16 Tagen,
einwandfrei festgestellt durch Extraktion mittels Chloroforms. Bei 3 der
Stamme ging die Pyozyaninbildung wieder zuriick, bei 2 blieb sie bc-
stehen.

Also auch fur die Pyozyaninproduktion kommen wir zu den gleichen
Auffassungen wie fflr die Gelatineverflussigung. Es bestehen Ueber-
gange von 0 bis zur vollen Intensitat der Produktion. Und doch liegen
bier die Verhaltnisse nicht so klar und so einfach wie bei der an-
gefflhrten Eigenschaft: Alle Pyocyaneu m-Stamme sind warmetolerant,
and zugleich ist in der mir bekannten Literatur kein Fall eines nicht
verllussigenden Pyocyaneu ms verzeichnet. auch verbindet sich mit
dem blauen Farbstoffe ein spezitischer Geruchsstotf. Es liegt hier zweifel-
los eine Eigenschaftskoppelung vor: Pyozyanin, Warmetoleranz, Gelatine-
verflfissigung und Riechstotf.

Es kann aber zweifellos Pyozyaninbildung ausfallen, ohne dad zu¬
gleich Warmetoleranz und Gelatineverdussigung sclnvinden. Es liegt
demnach eine Qualit&tenkoppelung vor, die sich nur in einer Rich-
tung betatigt, beim Auftreten, amlererseits mud mit dem Authoren der

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Centralbi. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Gelatineverflflssigang auch die Pyozyaninproduktion schwinden, sonst
miiBten alle FSlle bekannt sein eincs Pyocyaneums ohne Verflussi-
gung. Es liegt hier Mechanismus vor, der noch experimenteller Prflfung
bedarf.

Gestiitzt. werden diese Angaben durch Bedbachtungen Stetten-
heimers. Dieser schreibt:

„Es ist nuu hochst interessant, daft die Abkonimlinge des Stammes I, welche
Pyozyanin bilden, auch thermotolerant, geworden bind — man konnte v.on einer {Cor¬
relation beider Eigenschaften sprechen. Das Bacteriu-m pyocyaneum ist thermo-
tolerant, wahrend Bacterium fluorescent) psychrophil ist."

Auch die letzte Angabe wird durchbrochen. Ruzicka gibt Ge*
w5linung der Fluoreszenten an W&rme an. Die eigenen St&nnne FI. 3,
FI. 4, Fl. 16 wuchsen bei 37 u , waren allerdiugs nicht so raschwucbsig
wie Pyoc. 1 u. 2. Eigeuartig ist zugleich, daB die 3 genannten St&mme
Gelatine nicht verfliissigen. In Zimmertemperatur gebracht, entwickelten
sich nach der Wachstumsheramung weiter Fl. 2. Fl. 5, in 2 Parallel-
kulturen, Fl. 11, Fl. 12, Fl. 13, Fl. 15, Fl. 16, Fl. 18.

Es wurde der Versuch gemaclit, die Fluoreszentepstamme durch
Warmebehandlung an hohere Temperaturen zu gewohnen. Sie wurden
1 Monat lang bei 33 °— 37 0 gezflehtet, alle 4 Tage umgeimpft. Es blieben
iibrig: Fl. 2, Fl. 3, Fl. 4. Fl. 5. Fl. 6, Fl. 8, Fl. 9, Fl. 10, Fl. 11, Fl. 12,
Fl. 13, Fl. 16, Fl. 18, Fl. 19, |T. 20. Wachstum war im allgemeinen
diinn, auBer bei Fl. 5. Farbstoffproduktion goring bis 0, ein leichtes,
blasses Hellgelb. Auf Gelatine iibergeimpft, zeigen obige Formen ge*
ringes, unscheinbares Wachstum, Farbstoffproduktion war geschwunden
bis auf Fl. 3 und Fl. 11, beobachtet nach 8 Tagen. Verfliissigung war
noch vorhanden bei Fl. 11. Dieses Vermogen haben eingebiifit Fl. 9,
Fl. 12, Fl. 19, Fl. 20. Ein allgemeines Nachlassen der Lebenst&tigkeit
durch die Warme von 33°—37° bei den psychrophilen Formen ist das
Resultat: Farbstoffproduktion, Ausscheidung tryptischer Fermente, Wachs*
tumsintensitat haben nachgelassen Oder sind ganz geschwunden. Keinerlei
Annaherung an die warmetoleranten Pyocyanea hat sich in dieser Zeit
beobachten lassen ‘j.

Wie haben wir die warmetoleranten Fluoreszenten aufzufassen ?
Sind es Pyocyanea mit Verlust der Pigmentbildung, sind es Fluore¬
szenten mit neuer Eigenschaft? Haben nach Stettenheimer Fluore¬
szenten Eigenschaften des B. pyocyaneum angenommen, so bleiben
sie auf langere Zeit hinaus konstant. Jedenfalls ist der Zusammenhang
zwischen Fluoreszenten und Pyocyaneum-Stannnen geschaffeu, und
falls sich Stettenheimers Angaben bestatigen, ist der Beweis ge-
liefert fiir korrelative Aenderung mclirerer Eigenschaften zugleich.

Der Versuch, aus dem serologischen Yerhalten der Fluoreszenten-
gruppe Riickschliisse auf die Verwandtschaftsgrade zu ziehen, ist mehr-
mals gemaclit worden. Die uns interessierenden Arbeiten sind die von
Pribram und Pulay(lS), ferner Trommsdorf (11). Welches syste-
matische Gewicht diirfen wir der Gruppenagglutination zuerteilen? Der
positive Ausfall der Gruppenreaktion berechtigt uns zum SchluB auf
Verwamitschaft, der negative lalit den SchluB auf das Fehlen verwandt-
schaftlicher Beziehungen nicht zu.

1) Zusatz bei der Korrelctur: Alle Fluoreszenten b lift I on in der Hitze period e dieses
•Tib res die Fahigkeit, Bakteriofluorescin zu bilden ein, Pyoc. I. II eingeschlossen.
’-e produzierten nur noch Pyocyanin.

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Lantzsch, Beitrag zur Kenntnis der FI u ore seen 8 - Gruppe.

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Paltauf (19) sagt wonlirh: „Auffallencl let es ferner, daB sich solche Gruppen-
agglutination auch nicht dort lindet, wo wir wirklich Grund haben, von Gruppen im
sjstematiscli-natarwissenschaltlirhen Sinne zu sprechen, z. B. bei den Choleraviorionen.
Kolle und Gotachlich sagon diesbeziiglich: Die Gruppenreaktiouen, welehe bei
Typhus und Coli vorhanden sein sollen, treten bei den Vibnonen nicht zutage. Kolle
konnte solche bei seinen zahlreichen fiber 1000 verschiedenen quantitativen Bestim-
muugen mit Choleraserura ebensowenig nachweisen wie bei der Pest.-*

Auf Grund meiner Untersuchungen kam ich zu der Anschauung,
daB innerhalb der Fluoreszentengruppe ein gewisser FluB nachweis-
bar ist, eine Variabilit&t, die sich nicht nur dadurch geltend macht, daB
zwischen den beiden Extremen einer Reihe Ueberg&nge existieren,
sondern daB auch der einzelne Stamm im Laufe der Ziichtung Schwan-
kungen unterworfen ist. Wenn dem so ist, konnen wir von der Gruppen-
reaktion fflr die Fluoreszenten erwarten, daB wir einen positiven Ausfall
bekommen bei der auBerordentlichen Empfindlichkeit and SpezifizitSt
dieser Reaktion?

So mbchte ich die Ergebnisse Tromrasdorfs ausdeuten. Dieser
Autor fand weder zwischen dem Pyocyaneum (27 Stdinme), Fluore-
scens(17 StSmme) und Putidum (11 St&mme) gegenseitige verwandt-
schaftliche Beziehungen. AuBerdem zerfielen die 3 systematischen Spezies
wiederum in mehrere agglutinativ abzutrennende Arten. Wenn schon
innerhalb der anerkannten systematischen Gruppe, z. B. bei Pyocya¬
neum ergaben sich 5 Untergruppen, verwandtschaftliche Diflerenzen
sich erweisen, dtirfen wir es noch weniger von Formen erwarten, die,
wie liqnefaciens und non liquefaciens, die entgegengesetzten
SchluBglieder einer Reihe bilden.

Leugnet Trommsdorf auf Grund seiner serologischen Ergebnisse
Verwandtschaft der 3 Gruppen, so miiBte er auch innerhalb der einzelnen
Gruppen Beziehungen ausschlieBen. Seinen Versuch, die agglutinativ
erraittelten Gruppen durch Verhalten verschiedenen C-Quellen gegenilber
zu differenzieren, halte ich fur unzulfinglich, da hier nur eine der Eigen-
schaften herausgegriffen wurde, und, wie es scheint, gerade eine der
konstantesten.

Es wurden Versuche angestellt mit Kaltblfltern, mit Frdschen, .die
mit FI. 1 und Pyoc. 1-Aufschwemmungen geimpft wurden. Die Do-
sierung war eine recht starke: je 1 ccm einer Suspension, die eine Oese
Bakterienkultur auf 10 ccm physiol. Kochsalzlosung enthielt. Nach 8
bis 10 Tagen Neuimpfung von 1 ccm einer Suspension, die 2 Oeseu auf
10ccm enthielt; nach 6 Tagen Wiederholung in gleieher St&rke. Impfung
geschah intramuskuliir in den rechten Hinterschenkel. Ueberstanden
die Frdsche die Prozedur, so schienen sie nicht in ihrem Wohlbefinden
gestort. Trotz der starken Dosierung zeigten sich besonders die warm-
gehaltenen Frosche sehr ungebiirdig, waren nervos, begannen die Copula.

Weder an der Einstichstelle noch im Organismus zeigte sich eine
Eiterung. Die Einstichstelle war blutig infiltriert, doch wurden die
Wunden rasch ausgeheilt. Einige Exemplare starben nach der 2. Impfung,
sie zeigten einen allgemeinen Iivdrops. Beim Anschueiden der Bauch-
wand floB eine klare, gelbliche Fliissigkeit, die fast keine gefornien Ele-
mente und nur wenig Bakterien enthielt. Eine Entscheidung, ob diese
Wassersucht primar durch die Impfung verursacht oder ob sie sekundar
ausgelost wurde, ist mir unmbgiich. Jedenfalls driingte sich mir der
Eindruck auf, daB weder Pyocyaneum noch FI. 1 irgendwelchc direkt
pathogene Wirkung auf Frosche auszuiiben vermogen. Weder das Serum
noch die Hydrops fl iissigkeit ha lien eine agglutinierende

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 2.

Wirkung ausgeubt. Der Versuch verlief negativ. Andere
Agglutinationsversuche wurden nicht angesetzt.

Zusam menfassun g.

Zusammenfassend mQchte ich sagen: Die Fluoreszenten im engeren
Sinne, unter AusschluB der Pyocyanea, zeigen in ihrem Verbalten
einen FluB, eine VariabilitSt, welche sich erstreckt auf Farbstoftbildung,
Denitrifikation, Nitratreduktion nnd GelatineverflQssigung. Es lassen
sich UebergQnge innerhalb der Gruppe nachweisen, die beide Extreme,
vollste Ausbildung einer Eigenschaft bis zum Fehlen, lOckenlos durch
Uebergange verbinden, aber auch am einzelnen Vertreter ist dieser FluB
nachweisbar,

Gemeinsam ist den Fluoreszenten wie den Pyocyanea Bakterio-
fluoreszinproduktion, UnvermQgen, Zucker zu vergSren, Sporen zu bilden,
morphologische Beschaffenheit, PathogenitQt fGr WarmblQtler.

Fassen wir die Pyocyanea in diese Gruppe mit ein. so sind wir
gezwungen, eine Qualitatenkoppelung anzunehmen, die sich in Warme-
toleranz, Gelatineverfitissigung, Bildung von Pyozyanin und einem Ge-
ruchsstoffe auBert. Dabei scheint sich diese Koppelung nur in einer
Richtung, beim Auftreten, zu betatigen, wahrend Pyozyaiiinbildung aus-
fallen kann, ohne die GelatineverflQssigung und Warmetoleranz zu be-
einflnssen. Finden Stettenheimers Angaben Bestatigung, dann ware
die LQcke geschlossen: wir hatten eine Gruppe vor uns! Bei voller
Ausbildung aller Eigenschaften ware die Gruppe zu charakterisieren:
GroBe bewegt sich um 1,5—6/t : 0,5-0,8 Ketten und Faden bildend,
alle Uebergange von geraden Stabchen bis Spirillentyp vorhanden, Yo-
lutinbildung auftretend oder fehlend, BegeiBelung mono- bis lophotrich.
Pyozyanin- und Bakteriofluoreszinbildung, die wechselseitig oder beide
fehlen kQnnen. Uebergange von Nitratreduktion bis Denitrifikation, von
GelatineverflQssigung bis Fehlen, Betatigung der angefQhrten Qualitaten¬
koppelung.

Literatnr verz eichni s.

1) Tribondeau, L., Fichet, M., et Dubreuil, I., Methodes de coloration
dcs cils iuicrobiens. (Compt. rend. Soe. de Biol. T. 79. 1916; Ref. Centralbl. f. Bakt Abt. I.
Ref. Bd. 69. 1920. 8. 13-1.) — 2) Meyer, A., Die Xclle der Bakterien. Jena 1912. —
3) Burekhardt, Die BegeiBelung a'ls differentialdingnostisches Merkmal in der Fluo-
rescensgruppe. (Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Orig. Bd. 79. 1917.) — 4) DerB., Ueber
Veramlerlichkeit der Bewegung und BegeiBelung. (Arch. f. Hyg. Bd. 82. 1914. S. 23a.)

— 5) Klimenko, Die Gruppe dcs Bac. faeealis alcaligenes. (Centralbl. f. Bakt.
Abt. 1. Orig. Bd. 13. 19U7.) — 6) Jordan, Hyg. Rundsch. Bd. 10. 1900. S. 930. —
7) Thumni, Beitnige zur Biologic der iluoreszierenden Bakterien. (Arb. a. d. Bakt.
I net. Karlsruhe. I. 1897.) — 8i Ruzicka, 8t., Vergleichende 8tudien liber deu Bac.
pyoeyaneus und den Bac. fluoresce ns. (Arch. f. Hyg. Bd.34. 1899.) — 9) Stetten-
neimer, Variationsstudien in der Gruppe der Fluorescentes. (Verhandl. d. Plivs.-med.
Ges. Wurzburg. N. F. Bd. 42. 1913. Nr. 6.) — 10) Sullivan, M. X., Die pyozyanin-
und fluoreszenzbildende Kraft der Bakterien. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Ref. Bd. 33.
1 903. S. 277.) — 11 ) T r o m m s d o r f, Zur K en n tn is des B a c t . p v o c y a n eu tn und
seiner Beziehung zu den Iluoreszierenden Bakterien. (Ibid. Abt. I. Orig. Bd. 78. 1916.)

— 12) K u n n e m aim, Bacillus fluorescent 1 i q u e f a c i e n s als Denitrifikator.

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Hausherr, Zur Frage der pbysiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazillen. 95

(Landwirtach. Versuchsstat. Bd. 50. S. 65.) — 13) Cohen, CL, Ueber die BHdung von
Acetaldehyd bei den UmRetzungen von Zucker durch Pilze. (Biochem. Zeitschr. Bd. 112.
1920.) — 14) Neuberg, C., u. Nord, Wolff, Acetaldehyd als Zwischenprodukt bei
der Vergarung durch B. lactis aerogenes. (Ibid. Bd. 112. 1920.) — 15) Kosty-
tschew, Ueber Alkoholgarung. (Hoppe-Seylers Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. 111.
1920.) — 16) Matzuschita, T., Ueber die Veranderlichkeit der Eigenscbaft des
Bacillus anthracis, Gelatine zu verfliissigen. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Bd. 28.
1900. 8. 303.) — 17) Ruzicka, St., Vergleichende Studien fiber den Bac. pyo-
cyaoeus und Bac. fluorescens liquefaciens. (Arch. f. Hyg. Bd. 37. 1900.)

- 18) Pribram u. Pulay, Beitrage zur Systematik der Mikroorganismen. I. Die
Gruppe des Bact. fluorescens. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 76. 8. 321.)

— 19) P a 11 a u f, Die Agglutination. (Kolle-Waseermann, Handb. d. path. Mikroorg.
Bd. 4.)

Naohdruck verboten.

Beitrag zur Frage der physiologischen Agglutination von

Y-Ruhrbazillen.

[Ans dem Institut zur Erforschung der Infektionskrankheiten in Bern
(Direktor: Prof. Dr. G. Sobernheim).]

Von Dr. Otto Hausherr.

Im allgemeinen enthSlt das Blutserum des Menschen noch in -
hoheren Verdflnnungen (V 50 —V 100 ) wirksame Agglutinine gegen Krank-
heitserreger nur dann, wenn eine Aufnahme der betreffenden Mikro¬
organismen und .eine Reaktion des Korpers gegen sie vorangegangen
ist; solche Agglutinationsreaktionen sind dann also spezifisch. Es
gibt freilich auch unspezifische Bakterienagglutinationen, nicht nur die
Ausflockungen von Bakterien durch weniger stark verdttnutes Serum,
sondern auch solche in hbheren Verdfinnungen. Das bekannteste und
praktisch wichtigste Beispiel hierfiir ist die Agglutination banaler, aus
dem Korper Fleckfieberkranker herausgeziichteter Bakterien, Proteus
and Pyocyaneus, durch Fleckfieberserum,. die so regelm&Big auftritt,
daB sie mit einem der Proteus-StUmme, x 19, als Weil-Felix sche
Reaktion diagnostisch verwertet wird. Weiterhin mochte ich auf die
durch mehrfache Literaturangaben bestatigte Tatsache binweisen, daR
der Micrococcus melitensis auch in hohen Verdtinnungen durch
das Serum von Menschen agglutiniert wird, die nie an Maltafieber ge-
litten batten, und daB in diesem Falle die spezifischen und die unspe-
zifischen Agglutinine sich durch die Hitzebestandigkeit nur der ersteren
nnterscheiden lassen sollen.

Es rouB also erst fflr jede einzelne Art von Infektionserregern
durch Erfahrungen und Untersuchungen Auflarung gewonnen werden,
ob und inwieweit gegen sie gerichtete Agglutinine spezifisch sind. Wie
liegen nun die VerhSltnisse bei den. Ruhrbazil len? Ich mochte mich
nor auf 2 Autorit&ten auf dem Gebiete der Ruhrforschung berufen,
deren Anschauungen' durch zahlreiche AeuBerungen in der Literatur
leicht zu stfitzen waren.

Lentz sagt 1909:

„Dae Blutserum von Dysenteriekranken und Rekonvaleszenten enthiilt die spezi-
bschen Agglutinine und gestattet durch ihren Nachweis einen indirekten bzw. retro-
'•pektiven Schlufl auf den der Krankheit zugrunde liegenden Erreger. 4 * „Als beweiscnd
iiir das Vorliegen einer bazillaren Dysenteric kann bei verdiichtigen Krankheitserschei-
nuDgen .... die Agglutination des 8higa-K r use-Bazillus in der Serumverdunnung

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96 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 2.

V #0 , die dee Flexner- und Y-Bazillus ... in der Berumverdiinnung 1 / 100 angesehen
werden.“

Kruse dagegen, der Entdecker der Ruhrbazillen in Europa, fafit 1915 seine Ao-
sicht in folgenden Worten zusammen: „Wird der Dysenteriebazillus mindestens bei
50-facher Verdlinnung des Krankenserums verklebt, so' handelt es sich wabrscheialich
um echte Dysenterie, wird er auf die Dauer nicht verklebt, um Pseudodysenterie. Die
Agglutination von Pseudodysenteriebazillen im Krankenserum hat dagegen im einzelnen
Fall nur recht bedingten Wert, da schon das Blut Gesunder, geschweige denn das
echter Ruhr- oder Typhuskranker nicht selten Pseudodysenteriebazillen in hoher Ver-
diinnung verklebt." '

Gehen die Anscbauungeo dieser beiden berufenen Ruhrforscher abo
schon in der Bewertung der Agglutination der Shiga-Kruse-Bazillen
deutlich auseinander, so scheinen die Gegensfitze in der Frage der
Agglutination der giftarmen Typen vollends unfiberbrfickbar.

Berilcksichtigen wir die Jahre, aus denen diese AeuBerungeu
stammen, 1909 und 1915, so gewinnen wir schon einen Anhaltspunkt
zur Erklfirung der Gegensfitze: zwischen ihnen lag der Beginn und das
1. Jahr des Weltkrieges mit seiner Ffllle von Erfahrungen auf deni Gebiete
der Infektionskrankheiten; und eine der wichtigsten Kriegsseuchen ist
von je her die Ruhr gewesen. Wfihrend des Krieges tauchten denn die
zahlreichen Zweifel an der Bedeutung der Ruliragglutination auf; hier-
hin gehoren die Befunde, daB das Serum gegen Typhus oder Cholera
schutzgeimpfter Leute Ruhrbazillen, auch die des Typus Shiga-Kruse,
hoch agglutiniere (Kutscber, Schmidt, Schiemann u. a.), zahl-
reiche Beobachtungen fiber Ruhragglutinationen bei nicht Ruhrkranken,
die Forderung besonders grobtlockiger Agglutination (Dfinner, Friede-
mann und Steinbock) oder wesentlicher Heraufsetzung des Ver-
dttnnungsgrades, von dem an eiuer Agglutinationsreaktion Bedeutung
beizumessen sei (Sonne, Utnnus u. a.). Alle diese Zweifel und Forde-
rungen waren auf den Befund zurflckzufuhren, daB auch das Serum von
Personen, bei denen eine Ruhrinfektion nicht nachweisbar war, Ruhr¬
bazillen agglutinierte, und so ist es wohl verstfindlich, daB die Hfiufung
solcher Beobachtungen die Spezifizitfit der Agglutination von Ruhr¬
bazillen uberhaupt fraglich erscheinen lieB. Den entgegengsetzten SchluB
zog Loewenthal; er erblickte in diesem Verhalten geradezu einen
Beweis fflr die Spezifizitfit der Ruhragglutination. Er argumentierte:
vor dem Kriege ging, wie sich statistisch nachweisen lfiBt, die Haufig-
keit der Sera, die in hoherer Verdtinnung Ruhrbazillen agglutinieren,
der Verbreitung der Ruhr parallel; wfihrend des Krieges hat die Ver-
breitung der Ruhr stark zugenommen, die Mehrzahl aller Kriegsteil-
nehmer ist der Ruhrinfektion ausgesetzt gewesen, also waren in der Mehr¬
zahl ihrer Sera Ruhragglutinine zu erwarten und ihr Fehlen nur wfirde
die Spezifizitfit in Zweifel stellen konnen.

Diese Argumentation erscheint durchaus einleuchtend, und sie lfiBt
sich durch einige weitere Ueberlegungen noch sttitzen. 1) Die Ruhr
ist sicherlich nicht an alien Teilen der Kriegsschauplfitze und zu alien
Zeiten gleich verbreitet gewesen, und es ist daher zu erwarten, daB
auBer den schon angefiihrten Erfahrungen (Ruhragglutination bei der
Mehrzahl der Nicht-Ruhrkranken) auch das entgegengetzte Verhalten,
namlich Seltenheit der Ruhragglutinine bei nicht nachweisbarer Ruhr-
infektiou, beobachtet worden sei; das ist denn auch tatsfichlich der Fall.
AuBer den Beispielen, die Loewenthal erwahnt, mochte ich vor
alletn auf die Uutersuchungen von Goldzieher verweisen, der zu dem
SchluB kommt, das Auftreten von Agglutinineu bei Nichtdysenterischen

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Hausherr, Zur Frage der physiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazilleu. 97

oder Gesandeu sei an ortliche Verh&ltuisse gebunden und wohl auf
voraugegangcne und nicht erkannte Dysenterieinfektionen zu beziehen.
Er hat bei 27 Gesunden, bei wiederholter Untersuchuug, 5mal, bei 53
rneist fieberhaften Kranken obne Darmsymptome nur 2mal Agglutination
von Ruhrbazillen in der Verdunnung V 60 gefunden, nieraals in hfiherer
Verdunnung; unter 390 klinisch Ruhrkranken dagegen 42mal, und nach
Abzug der in der ersten Krankheitswoche Untersuchten unter 275 Fallen
206mal = 75 Proz. positive Reaktionen. Welchen Typus der Ruhr-
bazillen er benutzt hat, gibt Goldzieher nicht an. Goldzieher
zitiert auch die mir nicht zuganglichen Befunde von Dienes, der unter
313 Nichtruhrkranken nur 7mal Agglutination in Verdflnnung von fiber
3 ' 50 beobachtete. Auch die Veroffentlichung von Hennis ist erwahnens-
wert, der im Ruhrkohlengebiet wahrend der Ruhrepideraie 1917 aus
einigen Bezirken kautn positive Blutuntersuchungen hatte, aus anderen
dagegen zahlreiche. Wahrend des Epidemiejahres ergaben von 2279 Blut-
proben 1009 = fast 44 Proz. bei 24 Std. Beobachtung Agglutination
von Ruhrbazillen in der Verdunnung von '/ion oder hoher. 1m darauf
folgenden Jahre, zu ruhrfreier Zeit, ergab die Untersuchung von 100
Blutproben von Nichtruhrkranken „nur in einigen wenigen Fallen 44
eine Agglutination mit Ruhrbazillen; sie stieg mit Kruse- Bazillen
iiie hoher als 3 / 50 und erreichte mit Flexner- und Y-Bazlllen nur
selten 3 /ioo-

2) Die verminderte Einschatzung der Ruhragglutination wahrend
des Krieges betraf nicht nur die giitarmeu Typen, sondern auch den
Typus Shiga-Kruse, also Bakterien. deren Agglutination durch
Patientenserum als so sicher spezifisch gegolten hatte, daB die Reaktion
ichon mit nur 50-fach verdunntem Serum als positiv, als beweisend ffir
eine stattgehabte Ruhrinfektion angesehen worden war. W 7 ie eingangs
zitiert, bezeichnet 1915 Kruse selbst bei einer Agglutinationsreaktion in
dieser Verdflnnung eine Dysenterieinfektion nur noch als „wahrschein-
lich“, die Anerkennung nur der grobflockigen Agglutination als spe¬
zifisch beziehen Friedemaun und Steinbock gerade auf Shiga-
Kruse-Bazillen, ebenso Umnus u. v. a. die Forderung einer Agglu¬
tination in hflheren Vcrdunnungen.

Wfihrend des Krieges hatte eben auch die Shiga-Kruse-Ruhr
eine erhebliohe Verbreitung, und daB auch diese Infektiou ebenso leicht
und unbemerkt verlaufen kann, wie die Infektiou mit den giftarmen
Typen, ist eine Kenntnis. die durch die Ivriegserfahrungen in grofiem
Umfang bestatigt worden ist.

3) Man braucht nicht anzunelunen, daB eine vorangegangene Ruhr¬
infektion, die eine positive Agglutinationsreaktion bei Untersuchuug
Nichtruhrkranker verursachen soli, nur kurze Zeit zuriickliegen konne
und daher in der Erinnerung noch haften und bei genauer Befragung
uoch feststellbar sein mulite. Wjeder <ien Kriegserfahrungeu verdanken
wir die Kenntnis, daB eine spezifische, z. B. durch Ty-Erkrankung oder
-Schutzimpfung hervorgertifene Agglutininbildung nach ilirem Abklingen
durch fremde Reize, also durch andersartige Infektionen oder Fieber von
neuem angefacht werden kann. Insbesondere hat Marck beobachtet,
daB bei Personen, die Ruhr fiberstandcn batten, die bereits negativ ge-
wordene Ruhragglutination nach Ausfiihrung der Ty-Schutzimpfung wieder
positiv wurde. Con rad i und Biel in g haben diese Vorgiinge im Tier-
versuch bestatigt und fiir die bei Einwirkung eines neuen Reizes er-
folgende Reaktivierung von Agglutininen, die auf Immunisierungsvor-

Abt. Orig. Bd. 87. Hell 2. 7

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98

CentralbL t. Bakt, etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

gange in der Vergangenheit hinweisen, die Bezeichnung „anamnestische.,
Serumreaktion gepragt. Die anamnestiscbe Serumreaktion also, die die
Infektionen eines groBeren Zeitabschnittes noch zur Geltung kommen
laSt, trkgt auch dazn bei, die Haufigkeit der Ruhragglutination bei
Personen, die zur Zeit der Untersuchung nicht an Ruhr litten, zu er-
kiaren.

Es erscheint nacb alledem nicht nur als gerechtfertigt, sondern als
geboten, die Agglutination von Ruhrbazillen durch menschliches Serum
nach wie vor als spezifisch anzuerkennen. Eine ganz andere Frage
ist es, ob diese Reaktion, selbst wenn sie spezifisch ist, diagnostiscb,
zur Aufklarung eines vorliegenden Krankheitsfalles, verwertbar ist. Das
wird von den zeitlichen und brtlichen Verhaitnissen abhangen. Zu Zeiten
und in Gegenden, wo Ruhrinfektionen und dementsprechend die Rubr-
agglutination auch bei Nichtruhrkranken weit verbreitet sind, wird der
positive Ausfall im einzelnen Krankbeitsfall zur Sicherung der Diagnose
nicht viel beitragen konnen, wahrend unter anderen Umstanden, wie sie
z. B. bei Goldziehers Material vorlagen, die Agglutinationsreaktion
auch diagnostisch verwertbar sein wird (mit den Einschrankungen, die
sich aus dem meist schnellen Krankheitsverlauf und dem spaten Auf-
treten der Agglutinine ergeben, und unter Berucksichtigung der Eigen-
schaften der benutzten Kulturen und der Beobachtungsdauer). Ganz
ahnlich liegt es ja mit der Gruber-Widalschen Reaktion fiir Typhus,
deren Spezifizitat nicht zweifelhaft ist und die ein sicheres Hilfsmittel
ftlr die Ty-Diagnose darstellte: sobald durch umfangreiche und wieder-
holte Typhusimpfungen bei den Heeresangehorigen Ty-Agglutinine er-
zeugt waren, hatte die Reaktion bei den Schutzgeimpften ihren dia-
gnostischen Wert verloren.

Physiologische Agglutination.

I. Fremde Untersuchungen.

Wenngleich nach dem oben Ausgefuhrten die Agglutination von
Ruhrbazillen durch menschliches Serum spezifisch ist, so scheint doch
eine Ausnahme zu bestehen, eine Agglutination von Ruhrbazillen, die
nicht mit einer vorausgegangenen Infektion, sondern mit dem physio-
logischen Zustand des untersuchten Menschen in Zusammenhang ge-
bracht und deshalb von den ersten Beobachtern dieses Phanomens als
physiologische Agglutination bezeichnet worden ist. Loewen-
thal und Bertkau teilen namlich mit, daB vor dem Kriege in Berlin,
wo 1911 nur 5 Ruhrfalle zur polizeilichen Meldung gelangten und von
103 durch Privatarzte eingesandten Blutproben nur 10 = 9,7 Proz. in
der Verdflnnung von x /ioo Y-Ruhrbazillen agglutinierten, von 82 Sera
von Ammen aus den stadtischen Waisenhausern 26 = 31,7 Proz. mit
Y-Ruhrbazillen positive Agglutinationsreaktion gaben. Da der Aggluti-
nationstiter mit der Dauer des Stillens abnahm, glaubten sie nicht, dad
die Laktation das ausschlaggebende Moment sei, was denn auch durch
Untersuchungen an KreiBenden bestatigt wurde. Hier fanden die Autoren,
soweit die Geburt am normalen Ende der Schwangerschaft erfolgte, in
Berlin unter 241 Sera 93mal = 38,58 Proz. und in Konigsberg i. Pr.
unter 73 Sera 24mal = 32,9 Proz. Agglutination von Y-Ruhrbazillen;
es schien, daB die h8heren Titerwerte etwa vom 6. Schwangerschafts-
monat an zahlreicher werden. Da auch eine besondere Kontrolle an
freilich nur kleinem Material zeigte, daB das Serum nichtschwangerer

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Hausherr, Zur Frage der physiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazillen. 99

Frauen aus derselben Klinik in Berlin nur in 12,5 Proz. der F&lle Y-Ruhr-
bazillen hoch agglutinierte, schlosseu die Autoren, dafi tatsachlich nur die
Schwangerschaft die Ursache dieser „physiologischen“ Agglutination sei.

Nach AbschluB meiner Untersucbungen ist in jiingster Zeit eine
Veroffentlichung von Vorschiitz erschienen, der in Kiel die Sera von
39 Schwangeren bzw. KreiBenden untersucht hat. Er best&tigt und er-
weitert die Angaben der genannten Autoren; 18 Sera agglutinierten
Y, Flexner-, Coli-Bazillen und Choleravibrionen mindestens in der
Verdiinnung Vxoo* Aeltere, in anderera Zusammenhang, n&mlich zur Fest-
stellung der biologischen Verschiedenheit des mQtterlichen und kind-
lichen Blutes vorgenommene Agglutinationspriifungen von Schwangeren-
sera durch v. Fellenberg und D611 bieten ebenfalls Vergleichsdaten.

II. Eigene Versuche.

Die Befunde von Loewentbal und Bertkau stutzten sich auf
Material aus Berlin und Konigsberg; Nachuntersuchungen liegen bisher
nur aus Kiel vor. Deshalb folgte ich gern der Anregung des Herrn
Prof. Sobernheim, zu priifen, ob die Befunde auch fiir Bern zutreffen,
wodurch sie dann als allgemeingUltig angesprocben werden konnten. Ich
werde weiter unten darlegen, inwiefern gerade bier ausgefflhrte Unter-
suchungen fflr die Frage entscheidend sein konnten. Herr Prof. Guggis-
berg, der sich lebhaft dafOr interessierte, hatte die Freundlichkeit, aus
der hiesigen Univ.-Frauenklinik Blutproben von KreiBenden zur Ver-
fflgung zu stellen.

Entsprechend dem Vorgehen von Loewenthal und Bertkau
wurde zur Untersuchung Retroplazentarblut benutzt, von dem ein Teil
wahrend der AusstoBung der Plazenta in einem Glaschen aufgefangen
wurde. Nach der Gerinnung wurden die Sera klar zentrifugiert und
daraus mit physiolog. NaCl-Losung die Verdiinnungen 7 60 , Vioo unc l V 2 co
hergestellt. Die Agglutinationspriifung erstreckte sich auf eine Reihe
verschiedener Bakterienarten und -Stamme, und zwar gelangten zur Ver-
wendung: 3 Stamme Y-Ruhrbazillen („Bern u , „Bflrgi u , „Frank-
furt tt ), je ein Stamm Flexner („Bern“), Shiga-Kruse („Otto IP')
und Typhusbazillen, sowie 1 Cholerastamm.

Der Rasen junger, hbchstens 24-std. Agarkulturen wurde in 2,5 ccm
physiol. KochsalzlSsung aufgeschwemmt. Ein Tropfen dieser Aufschwem-
mung wurde zu je 1 ccm der Serumverdiinnung hinzugefiigt. Hierauf
kamen die Proben fiir 2 Std. in den Brutschrank (37 °). Dann wurden die
Resultate protokolliert, die Agglutinationsproben weiterhin bei Zimmer-
temperatur belassen und nach 24 Std. nochmals kontrolliert. Die Be-
obachtung der Agglutination erfolgte mit Hilfe einer Lupe, nach starkem
Aufschtitteln.

Parallel zu den Agglutinationspriifungen der Schwangerensera wurden
die erforderlichen Kochsalzkontrollen angesetzt.

A. Agglutin atio nspr umng mit Buhrbazillen. •
1. Y-Ruhrbazillen.

Meinen Untersuchungen iiber die Wirkung der Schwangerensera
schickte ich eine Agglutinationspriifung mit einem hochwertigen Ka-
ninchenserum Y-Berp ypraus,.,um- die Eiguung der fhr die Agglu¬
tination zu verwenderideii .Y-Stamme ffcstzustellen und ihre individuellen
Versehiedenheiten kenneri zii lernen.

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100

Centralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Diese Prfifung ergab folgende Resultate:

1:500 l: 1000

1:2000

1:4000 1:8000 l

: 16 OOOjl: 32000] 1:64(X,K)

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Die Tabelle zeigt, daB Y-Bern noch in einer Verdiinnung von
Visooo nach 2 Std. eine vollstSndige Agglutination ergibt, wahrend
Y-Biirgi und Y-Frankfurt nur einen viel geringeren Agglutinationstiter
erreichen. Auch der Befund nach 24 Std. zeigt ebenso deutlich, wio
individuell verschieden diese 3 St&mme auf das Kaninchenserum Y-Bern
reagieren.

Zu einem Teil spricht dabei sicherlich der Umstand mit, daB der
Stamm „Y-Bern“ mit dem homologen Serum geprfift worden ist, doch
ging aus anderen Versuchen, die gleichzeitig im Institut ausgefflhrt
wurden, hervor, daB der Stamm „Y-Frankfurt“ im allgemeinen von
Y-Sera nicbt voll beeinfluBt wurde und daB Y-Bern durchaus nicht in
auff&lligem MaBe unspezifisch reagierte. Der Stamm „Y-BQrgi“ nimmt
eine Mittelstellung zwischen beiden ein. Es erschien ganz besonders
wichtig und interessant, zur Agglutinationsprufung der Sera von KreiBen-
den gerade 3 so individuell verschiedene Y-Stamme zu benutzen.

Zur Untersuchung gelangten 100 Sera von KreiBenden aus dem
hiesigen Frauenspital, bei denen die Geburt in 1 Fall im 9. und bei
den iibrigen am Ende des 10. Schwangerschaftsmonats erfolgte. Als
vollstandig wurde eine Agglutination angesehen, wenn die Bakterien auch
nach starkerem Aufschutteln so stark zusammengeballt waren, daB die
Zwischentlussigkeit bei Lupenbetrachtung klar erschien. Ein Unterschied
zwischen fein- und grobflockiger Agglutination wurde fur die Beurteilung
nicht gemacht, da die FlockengroBe, wie sich erwies, in hohem MaBe
von der Starke des Aufschiittelns beeintluBt wird, und weiterhin jede
kraftigere Agglutination von Ruhrbazillen zum mindesten in den niederen
Verdiinnungen grobflockig ist, uin in den hoheren feiner zu werden.
Wollte man daraus Schliisse auf die Spezifizitiit ziehen, so k&me man
zu dem unwahrscheinlichen Resultat, die Sera enthielten spezifische
Agglutinine, die z. B. bis zur Verdiinnung Vr,o wirksam seien, und da-
neben noch unspezifische, die bis zur Verdiinnung ’/-mo reichen, wahrend
doch im allgemeinen das Umgekehrte zutritl’t, uamlich Ausschaltung un-
spezifischer Reaktionen gerade (lurch hohcre Verdiinnung.

Von den gepriiften 100 Sera betrug die hbchste Verdiinnung, in der
eine vollstandige Agglutination eintrat:

mit Stamm

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/ 100

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\ 24 h

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22

2

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\24 h

24

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16

Y-Frankfurt

/ 2 h
\ 24 s

12

23

3

38

2

15

• i . * • * ,

Ildhere Verdiin-puijgen als Vsuo* wurden r’i,.dit gepruft. Es trat also
<■''■!e vollstiindige Agglutination mihde'stens in' der Verdiinnung Vioo (d. i.

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Gen igle

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Haneherr, Zur Frage der physiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazillen. JQl

also die VerdQnnung, die nach den Vorkriegserfahrungen als beweisend
fflr eine stattgehabte Infektion gait) in 2 Std. mit Stamm Y-Bern in
37 Proz. der F&lle ein, mit Y-Frankfurt nur in 5 Proz. und Y-Biirgi
in 2 Proz. Bei 24-sttind. Beobachtung gleichen sich die Unterschiede
etwas aus, insbesondere der Stamm Y-Biirgi holt das Versaumte nach;
die Zahlen betragen nun fOr Y-Bern 90 Proz., Y-Bilrgi 57 Proz. und
Y-Frankfurt 53 Proz.

Es wird also hiermit die bekannte Tatsache best&tigt, dafi die Agglu¬
tination von Ruhrbazillen nach 2 Std. noch nicht beendigt ist, so daB
bei langerer Beobachtung bedeutend hohere Werte erreicht werden.
Immerhin sei aber betont, dafi nach 24-stiind. Beobachtung selbst fur
die Stamme Y-Biirgi und Y-Frankfurt die Zahlen recht hoch erscheinen;
leider liegen umfangreichere Vergleichszahlen ftlr ldngere Beobachtungs-
dauer nicht vor, denn dicjeDigen Autoren, die das groBte Kontrollmaterial
untersucht haben, geben entweder die Beobachtungsdauer nicht an
(Sonne, Liefmann und Nieter, Dresel und Marc hand u. a.)
oder nur die Resultate nach 2 Std. (Loewenthal). Doch kann zum
Vergleich die kleine Zahlenrcihe vonUmnus dienen, der bei 20-stflnd.
Beobachtung, wiihrend des Krieges, bei Untersuchung der Sera von 26
Nichtruhrkranken nur 4mal, das waren 15,4 Proz., Agglutination von
Y-Ruhrbazillen in der Verdunnung von 1:100 oder holier feststellte *).
Ziehen wir aber nur die nach 2-stiind. Bebriitung sich ergebenden Werte
in Betracht, so gehen die Resultate der 3 benutzten Y-St&mme sebr
weit auseinander und wiinlen fiir Y-Biirgi und Y-Frankfurt uichts Auf-
falliges bieten, wiihrend die Zahl der Sera, die den Stamm Y-Bern agglu-
tinieren, 37 Proz., sehr hoch ist und merkwiirdig genau mit den Zahlen
iibereinstimmt, die die Voruntersucher bei Kreiliemlen in Berlin und
Konigsberg gefunden haben. Es ist nun das Bedenken naheliegend,
Y-Bern sei ein so leicht agglutinabler Stamm, daB er vielleicht auch mit
anderen Normalsera einen iilinlich hohen Prozentsatz positiver Agglu-
tinationsreaktioneu ergeben wiinle. Das ist jedoch nicht der Fall, gerade
fiir diesen Stamm Y-Beru liegt ein grofies Vergleichsmaterial vor. Frau
Dr. A bei in hat im hiesigeu Institut die Agglutinationsverhaltnisse der
zur Wassermannsehen lleaktion eingesandten Blutproben untersucht 2 );
derselbe Stamm Y-Bern wurde bei 525 untersuchten Sera nur 2-lmal
= 4,6 Proz. in 2 Std. in der Verdiinnung 1 :100 oder holier vollstiindig
agglutiniert. Es ist damit also auch fiir Bern erwiesen, dad Y-
Ruhrbazillen durch Serum von K r ei 11 enden in einem auBer-
ordentlich hohen Prozentsatz der F;'i 11 e agglutiniert wer-
den. Bei deni einen der 3 benutzten Stamme war das schon nach
2-stiind. Beobachtung (ieutlich, bei den beideu anderen erst nach 24 Std.
Die physiologische Agglutination kommt also nicht bei alien Stammen
von Y-Ruhrbazillen in gleichem Malic zur Geltung.

Die Ergebnisse mbgen im Zusammenhange gewiirdigt und zuniichst
die Resultate der Agglutinationsversuche mit anderen Bakterienarten
mitgeteilt werden.

2. F1 e x n e r - B a z i 11 c n.

Der von mir verweudete F1 exner-Stamm (Flexner-Bern) envies
sich bei Prufung mit einem liomologen F lex ner-Serum als gut agglu-

1) Noch seltener hat an.-cheinend Hermis bei Nichtruhrkranken nach 24-Htiind.
Beobachtung Ruhragglutinati<>n gesehen.

2) Noch nicht"veroffentiicht.

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J 02 OntraibL f. B&kt, etc. L Abu Or: tie ale. Bd. ST. Heft 2.

tinubeL Von den untersuchten K/> Schwanaerensera betrug die hochste
Yeruunnung, in der der Stamm Flexner-Bern vollstandig agglutiniert
nTjrde.

1 : y< 1 : 100 ] ; 2 »

2 Sid. 4 — -

24 „ 23 19 3

Wie sich zei"t, ergaben meine Untersuchuneen mit F1 exner-Bazillen
each der 2-sturid. Beobachtungsdauer nur 4mal eine Agglutination in
der Verdiinnung 1:50; etwas hbhere Agglatinationswerte konnten nach
24-stiind. beobarhtung festgestellt werden, namlich 22 Proz. in der Ver-
durinung 1 :100 oder libber. Ziehen wir wieder zum Vergleiche die
Zalilen von Umnus heran, der zur Ruhrzeit unter 26 Sera von Nicht-
ruhrkranken firrial = 2d Proz. nach 20 Std. Agglutination in dieser Hohe
fand, und benieksichtigen wir, daft in Bern keine Ruhr herrschte, so
erscheinen meine Werte auch fur die Agglutination vonFIexner-
Bazillen durch Sera von Kreifienden sehr hoch. Doch ist
mit diesem Stamme die Agglutination nicht so haufig wie mit den Y-
Si&mmen; es ist ja eine bekannte Tatsache, daB nicht alle Y- und
F1 e x n e r -Stamme agglutinatorisch miteinander ubereinstimmen. Immer-
liiri zeigt sich aus meinen Protokollen, daB Flexner-Bern dort hbhere
Agglutinationswerte aufweist, wo dies die 3 Y-Stamme in besonders
hohein Grade tun. Zur Erlauterung dessen mogen einige derartige Er-
gebnisse angeflihrt werden:

ST-Korn

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3. Shiga-Kruse-Bazillen.

Auch flir die Agglutinationsprufung mit Shiga-Kruse-Bazillen
wurde ein gut geeigneter Shiga-Kruse-Stamm („011o II U ) verwendet.
Von den untersuchten 100 Schwangerensera betrug die hochste Ver-
dtlnnung, in der vollsUindige Agglutination eintrat:

1:50 1:100 1:200

2 Std. 0 3 —

21 „ 19 3 -

Shiga erreicht also nach 2 Std. hbhere Agglutinationswerte alsFlexner-
Bern. Ein anderes Bild zeigt sich uach 24 Std. Wahrend Flexner-

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Hausherr, Zur Frage der physiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazillen. 103

Bern zwischen den 2-stiind. und 24-stfind. Resultaten eine bedeutende
Divergenz anfweist, fallt letztere bei Shiga-Kruse viel geringer aus.
Zieht man in Betracht, daB eine vollst&ndige Agglutination in der Serum-
verdflnnnng 1:50 fttr Shiga- K r u s e-Bazillen allgemein als positive
Reaktion gait, und meine Untersuchungen nach 2 Std. 9 solche positive
Reaktionen aufweisen, so scheint es, daB Schwangerenserum in
relativ hohem Prozentsatze auch Shiga-Kruse-Bazillen
agglutiniert. Ziehen wir auch die Ablesung nach 24 Std. in Be¬
tracht, so ergibt sich in 19 Proz. Agglutination in der Verdiinnung 1:50,
in 3 Proz. 1:100, zusammen also 22 Proz. Umnns hat in Ruhrmilieu
fur 20 Std. hShere Werte gefunden, n&mlich bei 26 Untersuchungen Nicht-
ruhrkranker 10 = 38,4 Proz. derartige Reaktionen. Mangels gentigender
Vergleichszahlen laBt es sich also nicht mit vOlliger Sicherheit ent-
scbeiden, ob der allgemeine Eindruck, daB auch der von mir benutzte
Shiga-Kruse-Stamm durch Sera von KreiBenden in besonders hohem
Malle agglutiniert wird, zu Recht besteht.

Es ist noch der wichtige Umstand hervorzuheben, daB der Stamm
Otto II in seinem Verhalten demjenigen der Y- und Flexner-Ba-
zillen nicht immer genau parallel geht, d. h. Stamm Otto II reagiert
mit 2 Schwangerensera positiv, mit denen Y-Bern keine positive Re¬
aktion ergibt, wahrend die tibrigen positiven Reaktionen von Shiga-
Otto II mit Y-Bern (ibereinstimmen, wie die folgende Tabelle zeigt:

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1 Y-Bern

Y-B ii rgi

Y-FraDkfurt |

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1:100 |

1:200

1:50 [

1:100

1:200

1:50

1 : 100 jl :200

1:50;

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B. Typhusbazillen.

Auch fflr die Agglutiuationspriifung mit Typhusbazillen wurde eiu
gut agglutinabler Typhusstannn (Typhus I) verwendet. Von den unter-
suchten 100 Schwangerensera betrug die hochste Verdtinnung, in der
der St. Typhus I vollstandig agglutiniert wurde,

1 : 50 1 :100 1 : 200

2 Std. Id 3 2

24 „ 20 14 2

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104

Centr&lbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Nach allem, was wir wissen, ist der Typhns-Widal spezifisch, and eine
vollst&ndige Agglutination in der Serumverdunnung 1:100 nacb 2 Std.
gilt als beweisend fflr eine stattgehabte Typhusinfektion. In diesern
Sinne ware die Ileaktion in 5 Proz. der von mir untersuchten Sera
positiv. Da Typhus in der Schweiz von Zeit zu Zeit hSufiger auftritt,
insbesonderc auch im Kt. Bern selbst in einigen Orten wiederholt
Typbusepidemien beobachtet worden sind, deuten die 5 von mir er-
hobenen positiven Agglutinationen wohl auf vorangegangeue Typhus-
erkrankungen bin. Ganz bestimmte anamnestische Feststellungen lielien
sich in den betreffenden Fallen leider nicht machen.

Auch fiir Typhus I lafit sich nachweisen, daB sein Verhalten dem-
jenigen von Y-Bern nicht genau parallel geht. Unter den 5 positiven
Typhusreaktionen sind 3 Falle, bei denen Y-Bern mit deraselben Serum
keine positive Reaktion ergibt, wahrend die beiden iibrigen Falle mit
Y-Bern libereinstimmen. In Anbetracht nieiner geringen positiven Be-
funde mit Typhusbazillen scheint dieSchwangerschaft keine Stei-
gerung der Agglutination von Typhusbazillen zur Folge
zu haben. Iinmerhin ist es auffallend. daii bei 24-stund. Beobachtung
in einetn relativ hohen Prozentsatz der Proben (10) noch vollsiiiudige
Agglutination der Typhusbazillen eintrat.

C. Cholerabakterien.

Jedes der 100 Sera von KreiBeuden wurde scldieBlich nocli mit
Choleravibrionen gepriift; 10 der Sera agglutinierteu in 2 Std. in dei
Verdiinnung 1 : 1(X) in ziemlich vollstandiger Weise. Auch die Mehrzahl
der iibrigen Sera zeigte eine BecinHussung der Choleravibrionen, doch
haudelte es sich durchweg nicht uni eine typische Agglutination: Bildung
von grdberen Flockeu uiid Kdrnchen innerhalb einer noch vieie freie
Bakterien enthaltenden mid daher nicht gekh'irten Fliissigkeit, anniihernd
gleicher Grad der Beeindnssung in alien 3 Verdiinnungen, mehr oder
weniger starke Andeutung davon auch in der NaCl-Kontrolle. Diese
etwas unsicheren Befuude gestatten nicht den SchluB. daB Cholera¬
vibrionen durch das Serum KreiBeuder in hoherein MaBe agglutiniert
werden.

D. Untersuchung extrahierter Sera.

Zur Erklarung der erhohten Y-Ruhragglutination durch Schwangeren-
sermn hatte Loeweuthal die sclion niehrl'ach festgestellte Tatsache
herangezogen, daB wahrend der Graviditiit der Clio 1 esterin gehalt des
Serums ansteigt mul gegen Ende derselben seinen Hohepunkt erreicl.t.
Da sich auch zeigte, daB Zusatz von Cholesterin zu einem aggluti-
nierenden lvaninchenserum sowie auch intravenose Cholestenuinjektion
beim rulirimmunisierten Kaninchen zmn rnindesten niauchmal die Ag-
glutinationskraft stark erhohen kaun (in anderen Yersuchen hatte der
Cholesterinzusatz k einer lei EintiuB). so naiim er an, die auch sonst
in gleicher llautigkeit vorhandenen Nornialagglutinine konnten durch
deu orhohten Cholesteringehalt des Gravidensorums so weit in ilirer Wir-
kung gesteigert werden. daB auch in der 10t>-fachen Serumverdunnung
eine vollstamlige Agglutination tier Rulirbazilleii eintritt. Wenn dieser
Erki:iniiigsversucli richtig war, dann niiiiite eine kiinstliche Vermin-
derung des Gehaltes des Gravidenserums an Cholesterin oder iiber-
haupt an Iapouleu zu einer llerabsetzmig seiner agglutinierenden Kraft
fiihreu. Deun es konnten neben deni Cholesterin noch andere Lipoitie

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Hausherr, Zur Frage der physiolog. Agglutination too Y-Ruhrbazillen. 105

bei der Beeinfiussung der Agglutination in Betracht kommen, und es
ist ja von Stuber sogar die Behauptung aufgestellt worden, die Ag-
glutinine selbst hatten nicht EiweiBcharakter, sondern seien Lipoide.

Dies hat mich veranlafit, experimentell festzustellen, ob die Ver-
minderung des Gehaltes des Serums an Lipoidstoffen das Zustande-
kommen der Agglutination verhindern oder tiberhaupt beeinflussen ktinne.
Zu diesem Zwecke habe ich bei meinen Untersuchungen der Schwangeren-
sera Parallelversuche gemacht und den EinfluB der Extraktion durch
Aether geprtift, indem ich das unbehandelte und das extrahierte Serum
miteinander verglich. Dabei ging ich folgendermaBen vor: Von der
Serumverdflnnung 1:50 habe ich von vornherein eine groBere Menge
hergestellt; einen Teil davon habe ich zur gewohnlichen Agglutinations-
prufung verwendet, den anderen Teil im Scheidetrichter mit Aether 2mal
ausgeschuttelt. Nachdem der an der Oberflache der Fliissigkeit an-
gesammelte Aether mit der Pipette nach Moglichkeit abgehoben war,
wurde das extrahierte Serum ohne die Grenzschicht unten abgelassen
und in dflnner Schicht in eine Petriscliale gebracht, deren Deckel zur
Verdunstung des Aethers V* Std. often gelassen wurde. Dieses extra¬
hierte Serum gelangte dann am darauf folgenden Tage, als sich kein
Aethergeruch mehr nachweisen lieB, zur Agglutinationspriifuug. Auf
diese Weise habe ich 40 meiner Sera extrahiert und daraufhin mit den
Stammen Y-Bern und Typhus I geprtift.

Ein EinfluB der Aetherextraktion auf die agglutinierende Kraft der
Sera lieB sich nicht nachweisen, im a 11 gem einen erwiesen sich
die extrahierten und nicht extrahierten Sera als tiberein-
stimmend. Kleine, zurneist ganz unwesentliche Abweichuugen kamen
freilich vor und zwar hauftger im Siune einer Verstarkung der Agglu¬
tination durch die Extraktiou als im Sinne einer Abschwiichung. Es
mag dies wohl damit zusammenhangen, daB zugleich mit deni Aether
auch Wasser verdunsten konnte und so die Serumverdtinnung konzen-
trierter wurde. Jedenfalls flndet die Annahme der Bedeutung des er-
hohten Cholesteringehaltes der Sell wan geren sera ftir die Ruhraggluti-
nation durch meine Versuche keine Sttitze; sie sprechen fernerhin auch
gegeu die Lipoidnatur der Agglutinine.

III. Vergleichung und Dcutung der Befiinde.

Vergleiche ich nun meine Befunde mit den in der Literatur bereits
niedergelegten und suehe ich sie zu deuten, so ergibt sich zunachst.:
Die Tatsache, daB Y-Ruhrbazillen (lurch Schwangerensera in stark
erhohteni MaBe agglutiniert werden, die bisher nur ftir Norddeutschland
(Berlin. Konigsberg, Kiel) bekannt war, wild auch itir Bern bestiitigt
und dahin erganzt, daB dies Phanomen nicht bei alien benntzten Y-Ruhr-
stammen in gleicher Weise hervortritt. Unter den von mir herangezogenen
Y-Sttiinmen zeigten die beiden Stiimme Btirgi und Frankfurt es erst nach
24-sttind. Beobachtung, wahrend Loeweuthal und Bertkau wohl
zufiillig mit zwei ubereinstimmend agglutinalden Stiimmen gearbeitet
hatten. Die Agglutination von Flexner- Ruhrbazillen haben Loewen-
thal und Bertkau mit Gravidonsera uiclit besonders geprtift, da ihr
Stamm sich in vorangegangonen Untersuchungen als mit ihren Y-Stammen
parallel gehend erwiesen liatte. Yorschtitz hat bei IvreiBenden den-
selben Prozentsatz Agglutination ftir f’lexner- wie ftir Y-Bazillen ge-
funden. Der von mir benutzte Stamm Flexuer Bern dagegen ging nicht mit

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106 Centralbi f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

meinen Y-Stfiramen fiberein; aber wenn auch selbst nach 24-sttind. Be-
obachtung bei weitem nicht so hohe Werte erreicht warden wie bei der
Y-Agglutination, so konnen sie doch immerbin den Befund von Vor-
schiltz ftir Bern bestatigen, daB auch Flexner-Bazillen in erhfihtem
MaBe durch Sera von KreiBenden beeinflufit werden. In bezug auf
Shiga-Kruse-Bazillen liegen auBer meinen eigenen Befunden nur die
von Vorschfitz vor. Nach Vorschfitz werden diese Bakterien in
der Serumverdunnung 1:100 nicht ansgeflockt (Beobachtungszeit ist nicht
angegeben), wahrend dies nach meinen Versuchen doch in 3 Proz. der
Fall war und Berticksichtigung der 50-fachen Verdtinnung und Ab-
lesung nach 24 Std. eine verst&rkte Agglutinierbarkeit zu ergeben scheint.
Moglicherweise spielen dabei Stammesdifferenzen und die geringe Gr5Be
von Vorschfitz’ Material eine Rolle.

Ffir Ty-Bazillen stimmen meine Befundemit denen von Loewen-
thal und Bertkau, v. Fellenberg und Dfill sowie von Vor¬
schfitz fiberein: eine erhohte Agglutination durch Gravidensera ist nicht
nachweisbar. Das Gleiche gilt fur Pa-B-Bazillen, deren Verhalten
von den 3 genannten Autorengruppen geprfift wurde, und fur Pa-A- und
Gaertner-Bazillen, mit denen nur Vorschfitz gearbeitet hat und
die ich nicht in meine Versuche einbezogen hatte.

Weniger klar liegen die Verhfiltnisse fur Choleravibrionen:
hier fandeu v. Fellenberg und D511 bei 26 untersuchten Sera nur
3mal eine Agglutination 1:50, niemals h6her, Vorschfitz bei 39 Sera
18mal = 46 Proz. Agglutination miudestens 1:100, und ich beobachtete in
der Mehrzahl der Sera nur atypische Agglutination. Inwieweit hier
Stammesdifferenzen Oder andere Umstfinde in Frage kornmen, entzieht
sich meiner Beurteilung.

Ferner haben v. Fellenberg und D811 sowie Vorschfitz Bac¬
terium coli mitherangezogen; nach Vorschfitz erwies sich B. coli
als ebenso agglutinabel wie Y, Flexner und Cholera, wahrend bei den
Versuchen der erstgenannten Autoren nur 6mal auf 26 Sera eine Coli-
Agglutiuation in der Verdunnung 1 :100 oder hoher gefunden wurde.
Fur B. coli ist es nun ja eine bekannte Tatsache, daB in agglutina-
torischer Hinsicht fast jeder Stamm eine Sonderstellung einnimint, und
das wird wohl auch ffir die Agglutination durch Gravidenserum gelten
konnen. v. Fellenberg und D811 haben bei einem Teil ihrer Ver¬
suche 2 Coli-Stamme nebeneinander benutzt, und sie erwiesen sich als
weitgehend verschieden beeinfluBbar.

Auf Staphylokokken schlieBlich haben nur v. Fellenberg
und D811 ihre Untersuchungen ausgedehnt und diese als am hochsten
und regelmaBigsten agglutinabel gefunden. Von den 26 untersuchten
Gravidensera wirkten 25 auf Staphylokokken, nur je 4mal betrug die
hochste wirksame Verdfinnung 1 :100 bzw. 1 :200, bei den flbrigen Sera
war der Endtiter noch hoher und betrug in 2 Fallen sogar 1 :2000.

Zusammenfassend lafit sich also sagen: EineAnzahl Bakterien-
arten werden durch menschliches Gravidenserum in er-
hohtem MaBe agglutiniert, andere nicht; ftir den Grad
der Agglutination kommen neben der Art der Bakterien
auch noch individuelle Verschiedenheiten der benutzten
Bakterienstamme in Betracht. Die umfangreichsten positiven
Agglutinationsbefunde nebst den entsprechenden Kontrolluntersuchungen
piegen ffir Y-Ruhrbazillen vor, bei denen auch die iudividuelle Eignung
ler Kulturen weit verbreitet zu sein scheint (von 6 verschiedenen Stammen

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Hauefierr, Zur Frage der phyaiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazillen. 107

zeigten 4 das Phfinomen deutlich, 2 weniger gut); Dicht ganz in gleichem
MaBe gilt dasselbe fur Flexner-Ruhrbazillen. Soweit die einzige vor-
handene kleine Versucbsreihe ein Urteil gestattet, sind auch Staph ylo-
kokken der Agglutination durch Schwangerensera auBerordentlich zu-
ginglich. Weniger klar liegen die Verhaltnisse fiir Choleravibrionen
und Bact. coli, bei denen Stammesdifferenzen eine hervorragende Rolle
zu spielen scheinen und die offenbar nur bei geeigneter Wahl der Kultur
der physiologischen Agglutination unterliegen. Eine erhfihte BeeinfluB-
barkeit von Shiga-Kruse-Bazillen ist wolil uicht vorhanden Oder
zum mindesten noch nicht sichergestellt. Durch Schwangerenserum
nicht erhdht agglutinabel sind nach den bisherigen Untersuchungs-
ergebnissen Typhus-, Paratyphus- (B und A) und Gaertner-
Bazillen.

Die Frage, ob dieselben Schwangerensera, die eine Baklerienart
agglutinieren, auch auf andere Arten einwirken, oder ob die verschie-
denen Bakterien auch in verschiedenen Sera ihr Agglutinationsoptimum
haben, ist noch nicht geklfirt. Bei Vorschiitz reagierten die 18 Sera,
mit denen er ein positives Ergebnis hatte, mit alien 4 Bakterienstfimmen,
die sich ihm fiberhaupt als agglutinabel erwiesen haben. In demselben
Sinne sprechen filtere Untersuchungen von E. Btirgi, der eiue groBere
Reihe von Tiersera auf Normalagglutinine gegen viele verschiedene Bak-
terienarten prfifte und fand, daB die einzelnen Bakterienarten zwar an
sich verschieden stark agglutinabel sind, dafi aber die Tiersera, nach
ihrer agglutinierenden Kraft geordnet, eine fur alle gepriiften Bakterien
fibereinstimmende Reihenfolge ergeben. Aus den Tabellen, die v. Fellen-
berg und D611 ihrer Arbeit beigeben, laBt sich etwas derartiges nicht
entnehmen, und daB das auch in meinen eigenen Versuchen nicht inimer
der Fall war, habe ich ira Vorangehenden wiederholt erwalmt.

DaB es sich hier nicht um eine spezifische, durch vorangegangene
Infektion mit den betreffenden Krankheitserregern hervorgerufene Ag¬
glutination handeln kann, ist klar. Es ware absurd, zu glauben, daB in
Kiel von 39 Frauen 18 Cholera und Ruhr durchgemacht haben sollten.
Und selbst wenn wir die Cholera beiseite lassen und uns auf die Y-Ruhr
beschr&nken, spricht doch alles gegen die Annahme einer spezitischen
Reaktion bis auf die hohen Zahlen von VorschUtz. Schon die ersten
Beobachter des Phfiuomens hatten die zahlenm&Bigen Verhaltnisse, ge-
ringeren Prozentsatz von Ruhragglutinationen in Konigsberg als in
Berlin, als Gegengrund gegen die spezifische Bedeutung der Aggluti¬
nation durch Schwangerenserum geltend gemacht. Hat nun Vorschiitz
statt der 32 Proz. bzw. 38 Proz. positiver Befunde von Loewenthal
und Bertkau vor dem Kriege, jetzt in Kiel fiber 46 Proz. der Sera
positiv reagiereud gefunden, so konnte man das mit dor Tatsache in
Zusammenhang bringen, daB wahrend des Krieges in Deutschland Ruhr
auch in der Zivilbevolkerung weit verbreitet war. Das mag ja auch
mitsprechen, daneben aber ist zu berficksichtigen, daB Vorschiitz nur
ein sehr kleines Material hatte und sich auf die Ergebnisse nur eines
Y-Stammes stiitzte, wahrend die ersten Untersucher eine Reaktion erst
als positiv gezahlt hatten, wenn sie fibereinstimmend mit 2 Stammen
erzielt worden war. Ausschlaggebend aber sind meine 37 Proz. posi¬
tiver Befunde mit dem Stamm Y-Bern hier in Bern. Diese Zahl ist in
derselben GroBenordnung wie die in Berlin, Konigsberg und Kiel ge-
fundenen, obwohl in der Schweiz und insbesondere ira Kt. Bern die
Ruhr gar keine Rolle spielt. Die eidgenossische Statistik ffihrt ffir das

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108

(Jentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Jahr 1918 fiir die ganze Schweiz 49 gemeldete Ruhrf&lle an, davon far
den Kt. Bern mit seinen 600000 Einwohnern nur 2. Nun geben
freilich die Meldungen bekanntermafien die wirklich vorgekommenen
Erkrankungen hOchst nnvollstandig wieder, namentlich bei einer Krank-
heit wie Ruhr, die h&ufig so leicht verlSuft, daB sie nicht diagnostiziert
wird Oder uberhanpt Zuziehung eines Arztes nicht ndtig macht. Aber
die schon erw&hnte agglutinatorische Priifung der zur Wassermann-
schen Reaktion eingesandten Sera im hiesigen Institut bestatigt, daB
der Kt. Bern tatsfichlich sehr ruhrarm ist. Der trotzdem so hohe Prozent-
satz ruhragglutinierender Schwangerensera erweist also, daB diese Re¬
aktion unabh&ngig ist vom Vorkommen der Ruhr.

Diese ZahlenverhSltnisse zeigen aber ferner, daB auch nicht Vor-
gSnge nach Art der anamnestischen Serumreaktion in Betracht
kommen konnen. An sich ware wohl die Mdglichkeit zu erwagen, daB
auch der Reiz der Gravidit&t eine weiter zurtickliegende spezifische Ag-
glutininbildung neubeleben konnte, denn nach den Untersuchungen von
Fleckseder sind dazu nicht nur sekundare Infektionen, sondern auch
uuspezifische Reize (Deuteroalbumose u. a.) imstande; gerade in diesein
Sinne sprechen Stfiublis Beobachtungen, daB bei Ty-imraunisierten
Meerschweiuchen der Agglutinationstiter zur Zeit des Werfens hhutig
ansteigt, Beobachtungen, die freilich Loewenthal am ruhrini-
munisierten Kaninchen nicht hat bestatigen konnen, und auch die
Befunde von de Landro und Tore Hi iiber verminderte Autikorper-
bildung beim kastrierten Tier kounten herangezogen werden. Dann
iniifite jedoch die Haufigkeit der Ruhragglutinatiou bei Gravideu mit der
vorangegangenen Gelegenheit zur Aufnahme von Ruhrbazillen einiger-
maBen parallel gehen, und da das nach den angefiihrten Zahlen nicht
der P’all ist, ist iiberhaupt jeder Zusammenhang der Reaktion mit einer
Infektion auszuschlieBen, sie ist also nicht spezifisch.

Es kanu sich duller nur darum handeln, daB die normalen aggluti-
nierenden Krafte des Serums durch die Schwangerschaft in ihrer Wir-
samkeit gesteigert werden. DaB dies nicht durch Aenderungen im Kalk-,
Kieselsiiure- oder Lipoidstoffwechsel bedingt ist, haben Versuche von
Loewenthal und fiir den Lipoidgehalt auch meine eigenen Unter-
suchungen extrahierter Sera dargetan. Loewenthal hat dann die
Schwangerenagglutiuation von Bakterien mit der Agglutination der
roten Blutkorperclien im Gravidenplasma in Parallele gestellt, die nach
Fiihraeus auf einer Verminderung der negativen elektrischen Ladung
beruht. Weitere Untersuchungen fiber (lie Hiimagglutination hat
Linzenmeier angestellt und gefunden, daB die Senkungsgeschwindig-
keit bei menschlichem Blut ansteigt in der Reihenfolge Nabelschnurblut,
Blut von Mannern, Frauen, Graviden, bis zum Blut bei fieberhaften
exsudativen Prozessen. Grad und Geschwindigkeit der Agglutination
hiiugen aber nach Linzenmeier nicht nur von den Eigenschaften
der Blutdiissigkeit ab, sondern auch von der Agulutinierbarkeit der ver-
schiedenen roten Blutkbrperchcn, wie schon friiher Hirschfeld in
Parallele zu Biirgis Untersuchungen fiber Normalagglutination von
Bakterien fiir eine grfiBere Reihe von Tieren gezeigt hatte und auch
Linzenmeier wieder bestatigt. Die Entladung der roten Blutkorper-
chen erfolgt. gleicherweise in Graviden- wie im Tierplasma, nach Linzen-
meier durch eine relativ elektropositive Substanz, wie sich durch die
verschiedenartige Wirkung der Ausschfittelnng des Plasmas mit Ad-
sorbentien fiir positive oder negative Teilchen und- durch Kataphorese-

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Hauaherr, Zur Frage dcr phyaiolog. Agglutination von Y-Ruhrbazillen. 109

versuche erweisen laBt. Vorschutz schliefilich hat gezeigt, daB all
die fur Blutkorperchen gefundenen Tatsachen auch fttr Bakterien zu-
treffen.

Damit ist denn die deni Arzt und insbesondere dem Hygieniker
auffallige und zunSchst isoliert erscheineude Tatsache, dafi pathogene
Bakterien hSufig bei dem physiologischen Zustand der Sell wan gerschaft
in ungewbhnlichem Grade agglutiniert werden, anderen biophysikalischen
Erscheinungen eingereiht und in ihren Grundlagen erkl&rt.

Zusammenfassung.

Die Tatsache, daB Y-Ruhrbazillen durch Blutserum kreiBender Frauen
in hohem MaBe agglutiniert werden konnen, wird auch ftir Bern be-
statigt. Der Grad der Agglutinabilit&t ist ftir die einzelnen Y-Stamme
verschieden; der eine der benutzten Y-St&mme wurde durch 37 Proz.
der untersuchten Sera in 2 Std. in der Serumverdunnung 1:100 oder
holier vollsthndig agglutiniert. Diese Zahl stimmt mit den in verschie-
denen Orten Norddeutschlands erhobenen Befunden uberein. Die er-
hohte Agglutination ist auch ftir Flexner-Ruhrbazillen nachweisbar,
fur Shiga-Kruse-Bazillen und Choleravibrionen zweifelhaft; Typhus-
bazillen werden nicht in erhbhtem MaBe agglutiniert.

Die Agglutination ist von dem Lipoidgehalt der Sera unabhangig.
Die Agglutination von Ruhrbazillen durch Sera von KreiBenden ist
nicht spezifisch, denn es bestehen keine Beziehungen zwischen ilirer
Haufigkeit und dem Vorkommen von Ruhr.

Die physiol. Bakterienagglutination beruht auf denselben biophysi¬
kalischen VorgUngen, wie die unter gleichen Yerhaltnissen bcobachtete
Agglutination der roten Blutkorperchen.

Literatnr.

Bieling, Zeitsehr. f. Immunitiitsf. Bd. 28. 1919. — Biirgi, Arch. f. Hyg.
Bd. 62. 1907. — Con rail i u. Biding, Dtsch. med. Woehenschr. 1910. Nr. 12. —
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Zeitsehr. f. Hyg. Bd. 76. 1914. — Diinner, Berlin, klin. Woehenschr. 1915. Nr. 46.

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bock, ibid. 19J6. Nr. 8. — Go Id zit* her, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Ong. Bd. 82.
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Bd. 68. 1907. — Kruse. Dtsch. med. Woehenschr. 1915. Nr. 86. — Kutscher,
Miinchen. med. Woehenschr. 1915. Nr. 36. — do Landro u. Torelli, Rif. med.
1512. No. 9. — Lentz, in Ko 1 le-Wasser m an ns Hand!). 1. Anil. Krg.-Bd. 2. 1909.

— Liefmann u. Nieter, Miinchen. mod. Woehenschr. 1906. Nr. 43. — Linzen-
nieier, Pfliig. Arch. Bd. 181! 1920, u. Bd. 186. 1921. — Loewenthal, Zeitsehr. f.
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Bertkau, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig. Bd. 83. 109. — Marek, Wien. klin.
Woehenschr. 1915. Nr. 26. — Schi email n , Zeitsehr. f. Hyg. Bd.82. 1916. — Sch m id t,
ibid. Bd. 81. 1916. — Sonne, Centralbl. f. Bakt. Bd. 76. 1915. — Stiiubli, Inaug.-
Diss. Zurich. 1904. — Stuber, Miinchen. mod. Woehenschr. 1915. Nr. 35. u. Bioch.
Zeitsehr. Bd. 77. 1916. — Uni nus, Zeitsehr. f. Imniunitatsf. Bd. 26. 1917. — Vor-
schufcz, Pfliig. Arch. Bd. 186. 1921.

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110

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

NachdrUck verboten.

Die aussere Gestalt der Pferdebandwiinner.

[Aus dem Zoologischen Institut der Landesuniversitat Giefien.]

Von Dr. Rudolf Becker in Uelzen.

Mit 6 Abbildungen im Text.

Alle drei Bandwurmarten, welche im Darmkanal der Equiden vor-
kommen, sind seit l&ngerer Zeit in ihrem anatomischen Aufbau erforscht
worden.

An 1. Stelle waren zu nennen die Arbeiten von Kahane (1880) fiber Anoplo-
cephala perfoliata, von Zschokke (1888) fiber A. mammillana sowie von
Scheibel (1895) fiber A. magna. Weiterhin hat besonders die feinere Untersuchung
von A. perfoliata vielfach fiber allgemeine Fragen Aufechlufl geben kbnnen. Ich
erwiihne Lfihes (1894) Abhandlung fiber die Morphologie des Tanienskolex, diejenige
von L. Cohn (1899) fiber das Nervensystem der Cestoden, w&hrend Bald (1908) die
Entwicklung der Geschlechtsgiinge bei A. magna schildert.

Es fehlte bislang eine umfassende, sicb gleicbm&Big auf alle Arten
erstreckende Darstellung, die um so berechtigter erscheint, als diese
der einen Gattung Anoplocephala angehoren, welch letztere inner-
halb der Familie der Taeniidae einen besondereu Typus bildet. Schon
Stiles (1896, S. 151, FuBnote) fordert zu einer Nachuntersuchung mit
Korrektur der Artnamen auf. Hierzu kain der ganzliche Mangel an
einwandfreien Abbildungen — von A. magna fehlten solche fast ganz,
von den beiden anderen Arten waren zum Teil nur Skizzen vorhanden,
die keinen Anspruch auf Genauigkeit erheben konnten. Inzwischen hat
Fiebiger (1912) in seinem Parasitenwerk einige schone, diagnostisch
wertvolle Bilder gebracht.

Mein Wunsch war es, diese Cestodengruppe in monographischer
Form zu bearbeiten. Eine Verdifentlichung meiner langj&hrigen Unter-
suchungen in diesem Sinne gestatten leider die heutigen Verhaitnisse
nicht. Parzellierung und Beschr&nkung des Textes sowie der Figuren-
zahl muBten eintreten. Auf Materialquellen und technische Hilfsmittel
habe ich an anderer Stelle (d, 1921) hingewiesen.

Anoplocephala magna (Abildgaard).

Als die gr6Bte der PferdetSnien stellt Anoplocephala magna
zugleich auch den breitesten unter den Bandwfirmern unserer einheimi-
schen SSugetiere flberhaupt dar. Die LSnge des Tieres kann weiten
Schwankungen unterliegen, die sich eiuerseits nach der Entwicklungsstufe
desselben, andererseits, wie bei alien Sammlungsobjekten, nach der Be-
schaffenheit des Konservierungsmediums richtet, weil ja fast alle Rea-
gentien eine mehr Oder weniger starke Kontraktion des ganzen Tieres
herbeifiihren und sp&ter noch durch Wasserentziehung Schrumpfungs-
erscheinungen bedingen. Die einwandfreiesten Messungen lassen sich
naturlich nur an frischen, allenfalls in allmahlich ansteigendem Alkohol
konservierten Exemplaren anstellen, vor allem an solchen, welche ziem-
lich spitz nach hinten zu auslaufen, als Anzeichen dafflr, daB die Ab-
stoBung der Proglottiden noch nicht vorgeschritten ist und auch nicht

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Becker, Die aufiere Gestalt der Pferdebandwurmer. HI

nachtrfiglich durch Unvorsichtigkeit u. dgl. kfinstlich herbeigeffihrt wurde.
An solcben Exemplaren lassen sich die Angaben Scheibels bestatigen,
welcher als Lange bis zu 500 mm, als Maximalbreite 20 mm angibt,
jedoch kommen in der Literatur noch hfibere Zahlen vor. Abildgaard,
der ein lanzettformiges Exemplar beschreibt, findet 650—750 mm als
LAnge and Breiten von 15—30 mm; ZOrn sogar 1 m als langstes MaB.
Neomann (Trait6 des maladies parasitaires, 1892) scbreibt dagegen der
Art nur 15—80 mm Lange zu.

Die Anzahl der Glieder betragt durchweg fiber 500 und reicht
bei den lfingsten Exemplaren sicber an 1000 heran. Von diesen hat
jedes bis zu 3 mm Lange im Maximum, so
daB sich an jedem Gliede Lange zu Breite wie
1:7 verbalten, was ffir den ganzen mittleren
Teil der Gliederkette gilt, wo die Gliediange
etwa 2 mm, die Breite 12—16 mm betragt.

AuBer zablreichen ausgewachsenen Exemplaren
stand mir ein noch jugendliches in Formol
konserviertes Tier mit unentwickeltem Ge-
schlechtsapparat zur Verffigung. Hier betrug
das LangenmaB 40 mm, die Maximalbreite
3,3 mm, die Gliedzahl ungefahr 140 (Fig. 1).

Der Skolex dieser Tfinie zeicbnet sich
durch seine stattliche Grofie aus. Er miBt bei
groBen Exemplaren an Lange 4 mm, an Breite
5 mm, im Tiefendurchmesser etwa 4,5 mm,
bei Tieren von mittlerer Gr6Be ist das Ver-
haitnis ungefahr 2,5: 3,5:3,0. S ch e i b e 1 hat
seinerzeit die Abbildungen bei Abildgaard,

Pallas und Bremser nachgemessen und
hiermit fibereinstimmende Zahlen gefunden.

Wir haben also nicht die Gestalt eines an den
Kanten abgerundeten Wttrfels vor uns, wie
manche aitere Autoren meinen; nachSchei-
bel gleicht der Kopf vielmehr einer abge-
stutzten Pyramide mit abgerundeten Ecken
und Kanten, die am Scheitel je einen Saug-
napf tragen, wahrend Rostellum und Haken-
kranz ganzlich fehlen. Auf der Scheitelflache Fig. 1. Anoplocephala
selbst sind zwei konstan-te, zueinander senk- magna. Jugendform. Ver-
rechte Furchen sehr deutlich erkennbar, welche grdBerung 7:1.
zwischen den Saugnfipfen einschneiden, indem

sie das Zentrum des Scheitels in einer ziemlich groBen, rhombischen,
aber nur fiachen Delle kreuzen und so das Gebiet der einzelnen Saug-
napfe gegeneinander abgrenzen.

Richtung, GrfiBe und Gestalt der Saugorgane sind wechselnd
und lassen sich aus dem jeweiligen Kontraktionszustand der Skolex-
muskulatur ableiten. Wahrend die aiteren Autoren, soweit sie sich damit
beschaftigt haben, samt und sonders die Richtung der Achsen nach
vorn annahmen (Neumanns Abbildung zeigt dies noch deutlich), hat
Scheibel konstatiert, daB die Neigung der Saugnapfachsen gegen die
Skolexachse einen Winkel von etwa 45° ausmacht, indem je zwei Saug-
nlpfe der Dorsal- und der Ventralflache des Tieres zugekehrt liegen.
Letzteres gilt nur ffir langsam abgetotete Tiere, wahrend die aitere An-

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CentralbL f. Bakt, etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

gabe fflr stark kontrahierte Tiere richtig ist. Die mebr oder weniger
kreisruude OeffnuDg der Saugnapfe hat im Mittel etwa 1,0—1.2 mm
Innendurchmesser und ist durchweg 0.8—1,1 mm tief. Sie wird auch
in nicht kontrahiertem Zustande von 6 oder 7 konzentrischen, in gleichen
Abstflnden von etwa 0,4 ram angeordneten Furchen umgeben, von deneu
die auBersten gegenseitig verschmelzen und so den Grund aller Saug-
organe rings umkreisen. Von da ab kommen nacli aufien zu weitere
4 oder 5 Ringfurchen hinzu, so daB sich im ganzen etwa 30 Ringwfllste
ergeben, welche offenbar reichliche Muskulatur zur Grundlage haben
und zu einer gleichm&Big starken Kontraktion aller Teile des Skolex
beitragen mogen.

Auf die Ringwfllste folgt an der Basis des Kopfes ein mehr als
0,8 mm, also doppelt so breiter und holier, kragenartiger Wulst,
welche sich fiber den folgenden Abschnitt, den kurzen, noch unge-
gegliederten Hals hertiberschiebt und ilm nebst den ersten deutlich er-
kennbaren Proglottiden ganz vcrdeckt. so daB dieser Teil nur bei seit-
licher Betrachtung sichtbar wird. Das ebengenannte Verhalten des
Kragenwulstes hat Zeder zu der Benennung „plicatus“ bewogen.

Der als „Hals“ bezeichnete Korperabschnitt nimmt nach hinten
allmahlich an Breite zu, er iniBt dicht hinter dem Skolex 2,0—2,8 mm.
noch weiter nach hinten 2,4—3,2 mm; die Lange betragt im Mittel
2 mm, die Dicke 0,2—0,8 mm.

An die Halszone schlieBt sich ohne scharfe Abgrenzung die Kette
der Glieder. Zunachst ist die Unterscheidung der einzelnen Glieder
ohne optische Hilfsmittel nicht moglich, bald aber nimmt die minimale
Lange zu, wahrend die Breite in rascherem Tempo eiue grofiere wird.
Im allgemeiuen wird die grflBte Breite der Proglottiden fast schon in
der Mitte der Strobila oder wenig dahinter erreicht, dann bleibt sie
entweder erhalten oder nimmt gegen das Hinterende zu wieder ab, so
daB sich dieser Abschnitt inehr zuspitzt, ja bei ganz jungen Tieren fast
lanzettlich angetroffen wird. So war es bei dem oben genannten Exem¬
plar meiner Sammlung (Fig. 1), so wird es auch von Abildgaard
abgebildet. In der Literatur wird bei A. perfoliata mehrfach daranf
hingewiesen, daB es sich dann um junge Tiere handelt, welche ihr
steriles Endstuck noch nicht abgeworfen haben. Allerdings sind von
maucher Seite einige Zweifel dagegen erhoben, so neuerdings wieder
von Schaefer (15)13, S. 588). Lurch Zerlegung des genannten lanzett-
fdrmigen Tieres in Serienschnitte halie ich mich davon flberzeugen
konnen, daB die Geschlechtsorgane dieser A. magna nur in den letzten
aeht Proglottiden ganzlich fehlten, diese verrieten sich schon durch ihre
lan gore Gestalt (Lange: Breite = 4:1), im iibrigen aber noch nirgends
vollstandig entwickelt waren. Die mittlercn Glieder zeigten Stadien.
welche sonst in den ersten mit bloBem Auge deutlichen Proglottiden aus-
gewachsener Exemplare vorkommcn, wo das Endstuck in der Regcl
langst abgeworten ist.

Ein gemeinsames Merkmal aller Pferdctanien ist die Kflrze ihrer
Glieder, die bei dem ersten kaum wahrnchmbar, in der Mitte ausge-
wachsener Tiere etwa 0.5—1 nun, am Ende gar 2—3 (nach Scheibel
bis 5) mm betragt. Das ist, wie schon erwahnt, der 6. bis 10. Teil der
Breite; bei reifen Glicdern linden wir demnach die liingsten MaBe.

Die einzelnen Glieder sind trapezformig, ihre Riinder scharf, nur
wenig gewellt. Ids legt sich iinnier der hintere Band einer Proglottis
etwa manschettenartig fiber den vorderen Rand des folgenden Gliedes

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Becker, Die auSere Gestalt der Pferdebandwiirmer. ' 113

herflber, so daB am Rande ein scharfer, zackiger Vorsprung sichtbar
wird und der ganze bandformige Wurm gewisse Aehnlichkeit mit einem
doppelseitig gezahnten Sfigenblatt bekommt. Die „Zacken“ haben in der
Mitte ungef&hr ein L&ngenverhaltnis von 2,5:1,0 min. Auf dem Quer-
schnitt erscheint jede Proglottis langlich-elliptisch und verschieden dick,
jc nach der Reife der Geschlechisprodukte, es lafit sich dabei eine
liellere durchscheinende AuBenzone von einem dunkleren Innenfelde
deutlich unterscheiden, in welchem die inneren Organe gelegen sind.
Die Dicke betragt bei mittelgroBen Exemplaren ganz vorn hinter dem
Hals 0,7 mm, in der Mitte etwa 1,0 —1,5 mm, nach hinten zu 1,6—2,2 mm.

Als ein weiteres Merkzeichen der Gattung Anoplocephala
rreffen wir hier die einseitige Lage derGeschlechtsoffnungen
an. Besonders an mittleren Gliedern sieht man bei Lupenbetrachtung
und geeigneter Unterlage an dem einen Seitenrande, den man als
.,Genitalrand“ bezeichnet, ein Undeutlicherwerden der sonst so scharfen
Zabnelung der Proglottiden. Indem sich die Geschlechtsoffnungen in
die Korperoberflache einsenken, wird am Rande ein Zug sowohl nach
vorn als nach hinten ausgeubt, die Konturen runden sich ab. Dazu
kommt noch die groBere Dicke dieses Randes wegen der M&chtigkeit
des Cirrusapparates, so daB hier sogar ein mehr „gekerbter“ als ge-
sagter Rand anzutreffen ist. Die Genitalseite wird allgemein als die
linke angesprochen, wenn man die von Leuckart festgelegte Norm
beriicksichtigt, welcher die uberwiegend von den mannlichen Organen
eingenommene Gliedhaifte als die dor'sale bezeichnet.

Nur bei eben geschlechtsreifen Gliedern sind die Geschlechtsoff¬
nungen offen und lassen feine F&den, die Cirri Oder Penes, hervor-
ragen. Nach mehrfach bei geeigneter Beleuchtung vorgenommenen
Zahlungen beginnt dieser Vorgang etwa am 40. bis 70. Gliede und er-
streckt sich bis zum 100. bzw. 120. Gliede. An den nun folgenden
Gliedern sieht man die oben geschilderten Abrundungen am Rande immer
mehr verschwinden, so daB sich dieser Rand von dem agenitalen in
seiner Form kaum noch unterscheidet. Es bleibt aber bis an das Ende
der Kette, vom 60. Gliede ungefahr beginnend, ein heller Parallel-
streifen von 1,0—2,0 mm Breite deutlich sichtbar, welcher vom Genital-
rande nur halb so weit entfernt liegt als vom entgegengesetzten. Bei
naherer Untersuchung im durchfallenden Lichte gewahrt man eine fort-
laufende Kette aus lauter ovalen Blaschen, in jedem Gliede eines. Es
sind die mit Sperma gefflllten Receptacula seminis, welche auch in den
letzten, sonst nur noch Embryonen enthaltenden Gliedern erhalten ge-
blieben sind.

Diese letzten, prall mit Eiern gefullten Proglottiden losen sich sehr
leicht von den iibrigen ab, da die befestigenden Wiilste nicht mehr so
weit flbereinander greifen als bei den iibrigen Gliedern. Dazu kommt
die zunehraende innere Spanuung. Nicht selten sind 50—60 solcher
ablosungs„reifer“ Glieder vorhanden, deren Verbindung mit dein Mutter-
boden sich zu lockern beginnt, so daB sich gewohnlich ganze Serien
gleichzeitig losstoBen.

Sehr selten findet. man noch das „sterile Endstiick u erhalten.
Dieses beginnt mit einer lanzettlich zulaufenden Uebergangsstelle und
setzt sich aus einer Anzahl quadratischer, ziemlich glcichgroBer Glieder
zosammen, welche sich durch ihr geringes spezifisches Gewicht — sie
schwimmen in Fliissigkeit oben — und durch starkere Faltenbildung
vor den mit Embryonen gefullten Gliedern auszeichnen.

Erste Abt. Orig. Bd. 87. Heft 2.

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CentraibL.f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2.

MiBgestaltete Proglottiden kommea an fast jedem Exem-
piare, oft sogar mehrmals vor; so viel sei hier erw&hnt, daB sie sich in
alien Fallen auf zwei Ursachen zurvickfuhren lassen: einmal kann der
hintere Proglottidenrand mangelhaft ausgebildet bzw. stellenweise unter-
brochen sein, obne daB die innere Struktur der Glieder sich geSndert hat,
oder es handelt sich um eingeschaltete, unvollstandige („interkalierte“)
Glieder mit gleichfalls unvollkommenen Genitalien. Eine ausfuhrliche
Uebersicht sowie einige Figuren finden sich in meinen „Teratologischen
Studien“ (b. 1920).

Anoplocephala perfoliata (Goeze).

Diese haufigste und am langsten bekannte Art besitzt in ausge-
wachsenem Zustande eine DurchschnittslSnge von 60 mm, doch
kommen auch Exemplare bis zu 80 mm Lange vor; jflngere Tiere sind
erheblich kleiner, ich habe welche von 12 mm, einmal sogar solche von

nur 4—7 mm angetroffen (Fig. 2 n. 3).
Diese waren 2—3 mm breit und liefen
hinten lanzettformig au§. Im Gegensatz
zu den gleichzeitig vorhandenen Exem-
plaren von A. in am iliana waren sie
von gelbbrauner Farbe. Die Breite aus-
gewachsener Tiere, welche schon das
Endstuck eingebfiBt* haben, betragt am
Hraterende ungefahr 8 —15 ram, im
Durclischnitt 10 mm. Die Anzahl der
Glieder schwankt zwischen 70 und 150.
Die Lange der einzelnen Proglottiden
raiBt am hinteren Ende etwa0,8—1,2 mm,
falls diese Embryonen enthalten; ist
dieses nicht der Fall, so sind sie be-
deutend kttrzer. Man findet die sterilen
Endglieder oftmals in grofier Zahl, manch-
mal stellen sie sogar die Mehrzahl aller
Glieder dar. Schon auBerlich fallen sie
durch ihre Kleinheit, durch sehr starke
Faltelung, durch blendend weiBe Farbe
und das geringe spezifische Gewicht ins
Auge, indem sie auf Alkohol fast schwimmen. Bei den allerkleinsten
Exemplaren fand ich die letzte Proglottis von abweichender Form, mehr
lang als breit, so daB sich die voraufgehenden Glieder mit bogenfSrmig
nach hinten gerichteten Seitenlinien um diese herumlegten, ahnlich wie
man es am Skolex bzw. den ersten Gliedern antrifft.

Der Skolex hat eine Lange von 1,3 2,8 mm, eine Breite von 1,6
bis 3,0 mm und eine Tiefe von ca. 2,0 mm, er ist also hier gleichfalls
recht groB, nicht „assez petite“ (Dujardin). Die Gestalt Shnelt der
von A. magna, ist aber mehr wiirfelformig mit abgerundeten Ecken,
an denen die durchschnittlich 0,8 mm AuBendurchmesser habenden Saug-
niipfe auffallen. Auch hier sind sie nicht direkt nach vorn gerichtet,
sondern etwas seitlich; ferner findet sicli in der Mitte des Scheitels die
kleine Delle, dort. wo sich die beiden Kreuzfurchcn schneiden. Hingegen
fehlen regelmaBige Furchen und Falten um die SaugnSpfe und den bin-
teren Skolexabschnitt hier giinzlich, einige inkonstante Falten kommen
wohl bei ganz jungen Tieren vor.

/'V

> ■

Fig. 3.

Fig. 2. A. perfoliata. Jugend-
form, 7 mm Jang. 10:1.

Fig. 3. A. per f olia ta. Jugeufl-
form, 4 mm laDg. 10:1.

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Becker, Die auBere Gestalt der Fferdebandwurmer.

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Ein sehr wichtiges Merkmal, welches alien anderen Bandwurmarten
in dieser Form fehlt— von der vielleicht identischen A. zebrae natiir-
lich abgesehen —, und somit eine sofortige und sichere Artdiagnose
gestattet, ist das Vorhandenseii\ sogenannter „Fleisch- oder Kopf-
lappen a . Es sind dies groBe zipfelartige VerlAngerungen an den vier
Ecken des hinteren, etwas spitzer zulaufenden Kopfes von etwa 0,8 bis
1,0 mm LSnge und ebensolciier Breite, die aui Ende bogig abgerundet,
in der Mitte oft etwas kugelig aufgebiaht erscheinen. Kahane hat nur
0,22 bzw. 0,11 mm gemessen, gibt aber die Mbglichkeit einer Schrum-
pfung selbst zu. Er erkiart sich die Entstehung dieser Gebilde durch
das Vorhandensein wachstumshemmender Momente fiir die freie Ent-
wicklung eines Halses. Dann miiBte man mit demselben Rechte fragen:

Warum fehlen diese Lappen bei A. m ami liana? Ihr Verlauf ist bei
A. perfoliata zunkchst parallel der Richtung der L&ngsachse nach
hinten, dann wenden sie sich unter einer
leichten Umrollung und Abrnndung nach
auBen, an der Wurzel stehen sie (lurch einen
schmalen, vielfach undeutlichen Querwulst in
gewissem Zusammenhang. Bei ganz jungen
Tieren sind Kopflappen kaum entwickelt,
sondern nur durch mediane Einkerbungen
des hinteren Skolexrandes und stSrkere Fal-
tenbildung an den Seitenteilen desselben
angedeutet (Fig. 2 u. 3).

Der hintereTeil desSkolex ist in
die ersten 6- 8 Glieder tief eingesenkt und
zurflckgezogen, so daB diese ihn von den
Seiten halbkreisformig umgreifen, ein Ver-
halten, welches wir auch bei A. mamil-
lana antreffen werden. Vergeblich suchen
wir nach einer ungegliederten Uebergangs-
zone, einem „Hals“ zwischen Skolex und
Proglottidenreihe. Wenn man bei weniger
kontrahierten Wfirmern einmal einen nicht
eingesenkten Skolex antriftt, wo also ein
schmaler, sich allmShlich verbreitender Kbr-
per auf den Kopf folgt, so ist dieser doch
sofort gegliedert. Bei einem Exemplar (Fig. 4)
war wohl eine Gliederung in der Mitte sichtbar, aber die Zahnelung des
Proglottidenrandes begann erst hinter einer Stelle, wo die Verschmale-
rung der ersten Proglottiden aufhdrte. Dies Tier war 27:5 mm groB
und, wie sich spAter herausstellte, vollkommen steril.

Am Vorderteil des Korpers nelimen die Proglottiden von
beiden Seiten her gleichmilBig rasch an Breite zu, dann werden sie im
groBen und ganzen nur noch wenig breiter, bzw. verschmiilern sich bei
lanzettlichen Exemplaren wieder. Bei einem Material von etwa 250
Exemplaren aus 14 verschiedenen Bcfunden traf ich im ganzen 4 ver-
schiedene Formen an: noch unent.wickelte, lanzettliche von geringer
GroBe, ahnliche, aber liingere ohne jede Spur von Geschlechtsorganen,
weiterhin ziemlich breite, mit lanzettlicher Spitze, und schlieBlich ganz
breite, denen offenbar das Endstiick schon fehlte. Sehon Kahane
stellte zwei Hauptformen fest: eine jugendliche, lanzettfbrmige, und eine
altere, abgestutzte. Neuerdings hat Fillers (1011) eine grOBere An-

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Fip. 4. A. perfoliata.
Exemplar mit au^estrecktem
Skolex und sterilen (vliedern.
7 : 1.

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Gentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2 .

zahl von Typen aufgez&hlt (vgl. meine Zusammenstellung b. 1920). Ent-
gegen Schaefers Bedenken scblieBe ich mich der Ansicht Kahanes
an, denn man wird annehmen miissen, dafi die Entwicklung des Ge-
schlechtsapparates erst in einem spSteren Alter, vielleicht ganz unregel-
mafiig, einsetzt, nicht etwa immer in gleichem Abstande von dem stets
sterilen Hinterende, und daB sogar sterile Glieder auch spSter noch
eingeschaltet werden oder.der ganze Bandwurm unter Umstfinden steril
bleibt (Fig. 4).

Die Proglottidenr&nder sind bei dieser Art nicht sageartig, sondern
liegen infolge der breiten freien Proglottidenwiilste mehr ubereinander
wie die Blatter eines Buches. Ihre Genitalseite ist nur dort deutlich
unterscheidbar, wo dio Cirri als feine Fadec ilber den Rand hervorragen.
An einigen Exemplaren habe ich sie am 10.—21., an anderen am 15. bis
27. Gliede erkennen kSnnen.

Die ffir die Anopiocephaliden typische K urzgliedrigkeit hat
sich hier am starksten ausgepragt. Mittlere Glieder sind kiirzer als
2 mm, meist 0,5—1,0 mm lang, hingegen 10 mm breit, nur die End-
glieder pflegen langer zu sein. Im einzelnen sind sie, von der Fiache
betrachtet, schmal trapezfijrmig, ihre Rander sind verdflnnt, daher durch*
scheinend und stark facherartig gefaltet; am ausgepragtesten ist dies
wieder bei sterilen Gliedern der Fall. Hier bildet der hintere Glieder-
rand eine einzige geschwungene Wellenlinie; die Lage zur Achse des
Korpers ist verschieden nach dem Kontraktionszustande, entweder igt
sie nach hinten gerichtet oder senkrecht, d. h. unter rechtem Winkel
abstehend. Im Querschnitt erscheint jedes Glied langlich oval, kflrbis-
kernahnlich, mit deutlicher Mittel- und Rindenschicht. Man kann als
mittleren Dickendurchmesser etwa 1,0—1,2 mm konstatieren.

Im ganzen habe ich in meinem reichlichen Material nur 3 Falle von
MiBbildungen an Proglottiden angetroffen, die den bei A. magna ge-
tundenen entsprechen. Neumann (1890) hat einmal sogar einen 3-
kantigen Skolex mit 6 Saugnapfen gefunden (vgl. meine Untersuchungen
b. 1920).

Anoplocephala mamillana (M e h 1 i s ).

Die kleinste Pferdet&nie, A. mamillana, stellt einen mehr weill-
lich-bldulich durchscheinenden Bandwurm dar von durchschnittlich 25 mm
LSnge und 4—6 mm Maximalbreite. In der Literatur linden wir An-
gaben iiber 6—50 mm lange Exemplare. Die Anzahl der Proglottiden
an vollstandigen Tieren belauft sich auf 30 bis hochstens 50.

Der Skolex ist klein und unscheinbar und miBt 0,7—0,8 (Lange):
0.4 (Breite): 0,4—0,6 (Tiefe), bei einem Exemplar fand ich sogar ein
Verhaltnis von 0,8:1,0: 1,2. Stets ist der Kopf unbewaffnet und bat
das Aussehen eines kurzen Zapfens, der nach hinten zu allmhlich schin§ler
wird und sich mit diesera Teil in die ersten 12 Proglottiden einsenkt,
welche im Bogen urn seine Basis kreisen, ein Verhalten, das sich auch
bei A. perfoliata fiudet. Die Scheitelflache ist jedoch nicht eben,
man lindet dort, wo bei den beiden anderen Arten in der Regel eine
Hache Delle zu sehen ist, eine halbkugelige Vorwolbung. Da sich nun
die an den abgerundeten Kanten liegcnden Saugnapfe mit ihren musku-
losen Randern etwas vorwolben, so entstehen auf dem Scheitel je zwei
parallele Furchen, welche sich seitlich vor der eben erwahnten Vor¬
wolbung kreuzen.

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Becker, Die auQere Gestalt der Pferdebandwurmer.

117

folgen, im
Es ist mir

A

A l

Die Saugnapfe liegen inehr lateral als apikal, sie stellen in der
Regel ovale, bisweilen dreieckige oder langlich spaltformige, median
bogig gewolbte Vertiefungen von ungefahr 0,4 mm LSngendufchmesser
vor, w&hrend ihr Qnerdurchmesser etwa die Hiilfte ausmacht. Die Tiefe
ist verhSltnismBBig gering, iiberhaupt erscheinen die Saugorgane nicht
sehr krSftig ausgebildet im Vergleich mit diesen Organen bei anderen
Arten.

Faltungen bestehen am Skolex hochstens in der L&ngsrichtung, aber
niemals in querer Lage, vielleicht sind sie nur Kunstprodukte. In
manchen Fallen sielit man eine tiefe, enge Einstillpung in der Scheitel-
mitte, von welcher auf der dorsalen und ventralen Seitenflache je eine
mediane Fnrche an die Basis des Skolex zieht.

Wie schon erwahnt, besitzt A. mamillana gewohnlich keinen Hals,
jedoch kommen manchmal Abweichungen vor, indem der Kopf lang
ansgestreckt ist und nun 5—6 schmale, gerade Proglottiden
ubrigen ist der Korper von normaler Form (vgl. Fig. 5).
gelungen, nachzuweisep, daft es sich um
keine neue Art Oder Varietat handelt, son-
dern nur um einen verAnderten Kontrak-
tionszustand der Muskulatur, so daB damit
der Name „mamillana* 4 seine Bedeutung
als Kennmal der Art verliert.

Die Proglottiden haben in der Mitte
eine Lange von ca. 1,2 mm, am Ende sogar
von 2,2 mm, wahrend die ersten deutlich
sichtbaren nur 0,4 mm lang sind. Die rnaxi-
male Breite liegt etwas vor deni Hinterende,
denn die letzten 4-6 Glieder sind betracht-
lich in die Lange gezogen, mehr abgerundet
und prall mit Eiern geKillt. Es konimt auch
vor, daB sich das Hinterende etwas verjungt.

Dies beobachtete ich bei 2 Exemplaren,
welche 1 bzw. 2 sterile Endglieder bcsaBen.

Es waren offenkuudig Jugendformen, der
ganze Habitus und die geringere GroBe deu-
teten darauf, daB sic noch in Entwicklung
begriffen waren (Fig. 5 u. 6).

Die einzelnen mehr breiten als langen Glieder des Baniiwurmcs
gleichen in der Gestalt einem Trapez, sie legen sich anfangs nur wenig
ubereinander, so daB die Ziihnelung des Randes scharfer hervortritt:
erst bei den mittleren Gliedern werden die Wiilste der Glicdcnden
breiter, aber nicht „blattartig“ wie bei A. perfoliata, sondern nur
leicht faltig. Die Querschnitte erscheinen l&nglich-elliptisch und je nach
der Dicke der Glieder, die zwischen 0,4 und 0,8 mm, schwankt, lassen
sich Rinden- und Markschicht mehr oder weniger gut unterscheiden.

Sehr charakteristisch fiir A. mamillana ist die am 6. Gliede etwa
beginnende Hervorwblbung des Cirrusbeutels in Gestalt eines
konischen oder zylindrischen Zapfens, welcher etwa 1,5 nun lang, 0,6 mm
breit und meist nach hinten gekriimmt ist. Dadurch erhiilt die Genital-
seite ihr geradezu typisches Aussehen: sie erscheint in diesetn Ahschnitt
stark vorgebaucht, nnsymmetrisch zu der Gegenseite. Vom 21. Gliede
an ist die Geschlechts])apille wieiler eingezogen, nur eine kleine Ein-
kerbung macht ihren Sitz noch deutlich erkennbar. Diese eigentiimliche

Fig. r>. Fig. 6.

Fig. f>. A. mamillana.
Jugendform mit ausgestrccktcm
Skolex. 5:1.

Fie. t). A. mamillana.
Jugemilorm mit MiBhildung.
a Alternation. 5:1.

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118

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Erscheinung steht im Zusammenhang mit dem Modus der Begattung,
welche derart vor sich geht, daB jede Proglottis durch ihre Vorg&ngerin
befruchtet wird (vgl. meine Mitteilung c. 1920).

Unter mehreren hundert Exemplaren dieser T£uie habe ich nur
eine MiBbildung angetroffen bei einem jugendlichen Tier mit zwei
sterilen Endgliedern (Fig. 6). Hier lag der Cirrus des viertletzten
Gliedes auf der rechten Seite (Alternation). Durch Muskelwirkung
veranderte Formzustande sind dagegen haufiger zu finden (vgl. b. 1920).

SchluBbemerkungen. i

In obiger Beschreibung der auBeren Formverbaitnisse bei den
Anoplocephala-Arten wurde zum ersten Male mehr Gewicht auf
die Angabe von MaBzahlen fur die Schwankungen der Gestalt und
Gr6Be gelegt, als es bisher iiblich war, wo man sich mehr oder weniger
mit mittleren DurchschnittsgrbBen und Normalforraen beschaftigte. Nur
durch Studium eines moglichst gr'oBen Materiales, welches zu
verschiedenen Jahreszeiten und in verschiedenen Gegenden gesammelt
wiirde (vgl. a 1920), konnte man zur vollstandigen'Beherrschung
aller Formgestaltungen vom vollentwickelten bis zum aller-
kleinsten Exemplare gelangen. Auf diesem Wege, so glaube ich, wurde
sich auch unser Auge mehr und mehr scharfen ftir das eine noch in
unsicherer Feme schwebende Ziel: die Klarstellung der Entwick-
lungsgeschichte dieser Parasiten.

Liter atar.

Becker B., (a) Ucber das Vorkommen von Bandwurmern beim Pferde. (Berlin.
Tieriirztl. Wochenschr. 1920. Nr. 20.) — Ders., (b) Teratolog. Studien an Pferdeband-
wiirmern. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 84. 1920. 8. 435—440.) — Ders.,

(c) Ueber die Art der Begattung bei Pferdeb. (Ebenda. 8. 537—539.) — Ders.,

(d) Beitriige zur Kenntnis des Nervensystems der Pferdeb. (Zool. Jahrb. Bd. 43. Anat.
1921.) — Braun, Al. f Cestodes (Bronns Klass. u. Ordn. d. Tierreichd. Bd. 4. 1894 bis
1900) [enthalt samtl. altere Literatur.] — Kahane, 8., Anatomic von Taenia per-
foliata Goeze. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. 34. 1880.) — Schaefer, R., Die Ent-
wicklung der Geschlechtsausfiihrwege bei einigen Cestoden. (Zool. Jahrb. Bd. 35.
Anat. 1913.) — Scheibel, A., Der Bau der Taenia magna Abildgaard [Diss.J
Giefien 1895. — Stiles, Ch. W., (Proceed. U. S. Nat. *Mus. Vol. 19. 189t>.) —
Zschokke, F., Recherches sur la structure anat. et histol. des Cestodes. Geneve 1S8S.

Nachdruck verboten.

Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung und die bio-
logiscke Wirkung der Farbung auf die Keime.

[Aus dem Patliologischen Institut zu Heidelberg (Direktor: Geheimrat

Paul Ernst).]

Von Dr. Fr. Keichert, Assistent.

Mit 11 Abbildungeu im Text.

Die Vitalf;irbung der Einzelligen, bei der allgeinein biologische Fragen
im Vordergrund stelien, hat fiir die Bakteriologie im engeren Sinne nur

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Reichert, Ueber deu Ablauf vitaler Bakterienffirbung etc.

119

bedingtes Interesse, da durcbgreifendc neue morphologische Ergebnisse
an Bakterien damit kaum zu gewinnen sind und die Erkenntnis der
biologischen Leistungen der Keime auch andere Wege erfordert. Die
Wertschatzung. dieser Abhandlungen durch die Bakteriologen dilrfte aber
durch die Einsicht steigen, dab bei der Anwendung von bakteriologischen
Methoden und Objekten auf die Erforschung von Aufgaben allgemein
biologischer Art Aufschliisse gefordert werden kdnnen, die an Metazoeu
mit gleicher Klarheit kaum zu gewinnen sind. Ueberdies ist nicht zu
verkennen, daB auch fflr die eigentliche Bakteriologie bei der Erforschung
vorliegender Fragen einige wertvolle Aufschlflsse abfallen.

Die Physiologie, normale und pathologische Anatomie bemuhen sich,
durch farberische Darstellung der lebenden Zellen einen Einblick in ihren
unveranderten Aufbau zu gewinnen. Liefert doch die Untersuchung des
abgestorbenen und fixierten Materials nur Ergebnisse, die Nissl als
„Aequivalentbilder u bezeichnet, und Rossle (Aschoff) spricht von
,h6chstens Shnlichen Uebei;resten der lebenden ’Zellen und Gewebe“.
Will die V.F. eine Ahnliche Kritik vermeiden, so muB sie als ersten
Beweis den erbringen, dafi ihre Mittel keine ZellschSdigungen und Ver-
anderungen setzen. Es gilt zu belegen, daB eine F&rbung der lebenden
Zellen ohne Giftwirkung moglich ist. DaB diese Gefahr auBerordentlich
naheliegt, geht aus gelauligen physiologischen Ueberlegungen hervor.
Normalerweise nimmt jede Zelle aus der Zahl der angebotenen Sub-
stanzen nur die auf, die sie assimilieren kann, indem sie sie in der ihr
streng spezifischen chemischen und morphologischen Zusammensetzung
ablagert. Dringen aber infolge von Wirkungen, die die Zelle nicht auf-
beben kann, Stoffe ein, die von der Konstitution der normalerweise eiu-
verleibten abweichen, so resultieren daraus Storungen ihres Aufbaues.
Alle diese unphysiologischen Zustiinde sind nur insofern nicht gleich
zu bewerten, als eine Reaktion der Fremdkdrper entweder mit der
lebendigen Substanz Oder mit solchen Zellbestandteilen, die nicht im
engeren Sinne dazu gehdren, wie paraplastischen Substanzen, Reserve-
stoffen, Stoffwechselprodukten und Sekreten erfolgen kann. Hat auch
eine Konstitutionsanderung von Zellkorpern der zweiten Art nicht die
gleiche Bedeutung fur die Erhaltung des Zellebens wie StSrungen in
der erstgenannten Richtung, so ist das doch nur eine graduelle, aber
keine prinzipielle Differenz. In beiden Fallen haben wir krankhafte Zu-
stAnde vor uns. Wird solch ein Y r organg dadurch, daB als wirksames
Agens ein Farbstoff verwandt wird, morphologisch dargestellt, so er-
halten wir Zustandsbilder eines pathologischen Geschehens aber keinen
Einblick in den unveranderten Zellbau.

Gottlieb faBt diese Zusamineuhange bei Bakterien in folgemle
Worte:

„Im besonderen wird das Protoplasma durch eine Vertinderung dor Kolloide Oder
Lipoide geschiidigt; deshalb mud nine jede Fremdsubstanz als Bakteriengift wirkon,
*enn sie in die Bakterienzelle eindringt und mit oinem >einer lebenswichtigen Bestaml-
teile in chemische oder physikalisch-chcmische Reaktion tritt.“ Diese Worte kbnnen
wohl ohne weiteros auf die Boziehungen der Metazoenzolb* zu Fremdsubstanzen iibor-
tragen werden. Aehnliche Gedanken finden sich auch hoi Schulemann. Kr er-
klitrt die Entstehung einer Anzahl der bei V.F. naeliweisbaren Granula fulgendcrmaden:
Zuerst bilden sich durch die Einfiiisse des Farbstoftes Vakuolen ini Protoplasma. Durch
Polymerisation der Farbstoffmolekiile entstehen alliniihlich Kdrnchen, die die Vakuolon
ausfullen. Evans. Bowman, W intern itz (zit. 8 G 1 uleman n) hobon hervor, dad
bei chronischer V.F. bei in Kaninchen allmahlieh die gleichen Veriinderungen entstehen
wie bei der Rindertuberkulose. Schu Ionian n schliedt sich dieser AuffasMing an. —
Bei vielen Untersuchungen iiber die V.F. seheinen aber diese Verhaltnis^e nicht immer

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120 Centralb). f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

geniigend bewertet zu sein. Darauf weist allein die grofic Menge der verschieden-
artigsten Farbkorper hin (Ernst, „ Pathologic der Zelle* 4 ), die verwandt wurden
Anderseits kann nach Kossle (zft. Aschoff) schon durch physiol. NaCi-Losung bei
Nierenepithelien eine Protoplasmaschadigung eintreten, die zur Ausfallung in Tropfeu-
form fuhrt.

Aus diesen Ueberlegungen diirfte hervorgehen, daB es a priori
theoretisch unwahrscheinlich ist, eine lebende Zelle ohne jede Sch&digung
xiiit Farbstoff impr&gnieren zu kbuuen. Diese Fragp muB daher auf ex-
perimentellem Wege entschieden werden. Da nun mbglichst einfache
Versuchsbedinguugen am ehesten eindeutige Resultate liefern, ist es
wohl nicht unzweckmaBig, dahin gerichtete Untersuchuugen an der ein-
fachst organisierten Zelle, die wir kennen, der Bakterienzelle, anzustellen.

Weil Raummangel das EinfOgen einer Literaturubersicht nicht ge :
stattet, konnen hier die Ergebnisse der friiheren Arbeiten (sie sind in
dem am SchluB stehenden Verzeichnis genanut) nur in aller Kiirze sum-
marisch wiedergegeben werden: Ist eine gichtbare Farbaufnahme bei
Behandlung lebender Keime mit Farbstoffen nachgewiesen, so mangelt
es an einer einwandfreien Kontrolle ihrer Lebensfahigkeit und am Nach-
weis, daB dieser Vorgang ein vitaler war. Wurde aber nur die Gift-
wirkung der Farben durch Nahrbodeuzusatz untersucht, so horen wir
nio, daB es bis zu einer Anfarbung kam. Aus diesem letzten Umstande
aber zu schlieBen. daB schon optisch nicht nachweisbare minimale Spuren
aufgenommenen Farbstoffs abtoten, und daB damit ja die Frage gelost
sei, ist man nicht berechtigt. denu einmal schlieBen Vermehrungshem-
iii ungen noch keine Totung des Individuums oder Aufhebung aller an-
deren Funktionen in sich, und dann kann diese Aufhebung der Keira-
fiihigkeit eine Folge der Veranderung des Nahrbodens durch den Farb-
stoft sein, der dadurch fiir die Zelle unangreifbar wird. Das braucht
dann mit Eindringen und AnfSrben gar nichts zu tun zu haben. Es
bleibt daher zur Klftrung nichts weiter iibrig, als mit neuen Methoden
die LebensiiuBerungen nachweislich gefarbter Keime zu prflfen.

Bei den ersten orientierenden Versuchen muBte besonders auf die
Deutlichkeit der Farbung Wert gelegt werdeu, um damit die Auswahl
einwandfrei aniarbender Farbkorper zu sichern. Bei Farbgleichheit von
Losung und Zelle kdnnte es sich nur um ein Durchscheinen der Farbe
durch den feinen Zelleib handeln. Ebenso wichtig ist die Anfarbungs-
zeit. Ist namlich eine sehr lange Einwirkungsdauer bis zur Imprag-
nierung nbtig, so kann man eiuwenden, daB die Bakterien erst infolgc
von nicht ausschlieBlich auf die Farbwirkung zuriickzufflhrenden Ein-
fliissen absterben und sich schlieBlich postmortal anfarben.

Um Farbstoffe, die diesen Bedingungen gerecht Werden, zu finden,
wurden folgende 53 Farbkorper untersucht, die den verschiedensten
chemischen Gruppen angehoren: Gentianaviolett, Methylviolett, Neutral-
violett, Magentarot, Anilinviolett, Dahliablau, Pyoktanin,' Viktoriablau.
Methylenblau, Neutralrot, Lichtgriin, indigschwefelsaures Natron, Diamin-
blau, Trypanblau, Chrysoidin, Bismarckbraun, Vesuvin, Kresylviolett.
Thionin, Anilinblau, Karmin, Brillantgrun, Malachitgriin, Neutralviolett,
Methylgriin, Nilblau, Kongorot, Brillantkresylblau, Brillantdianilblau.
Anilingelb, Alizarin, Berlinerblau, Indigkarmin, Indigo, Anilinschwarz,
Erythrosin, Jodanilingriin, Jodeosin. Pyrolblau 2 R., Phloxinrot, pri-
krinsaures Ammon, Rosolsaure, Orange G, Wasserblau, Tropaolin,
Uranin, Eosin, Chromogen, Ilamalaun, Fluorescin, Orcein, Magdalarot
Als Farbungsobjekte dienten Typhus und Anthrax. In einigen FSllen

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbuog etc.

121

kam auch Hefe dazu. Der Typhus scheint seiner lebhaften Beweg-
lichkeit und der groBen Anspruche wegen, die er an sein NShr-
medium stellt, geeignet. Bekanntlich hemmt schon ein Reaktionsfehler
des N&hrsubstrates sein Wachstum. Man ist daber zu dem Schlusse
berechtigt, dafi schon geringe Sch&digungen in verlangsarater Beweglich-
keit und herabgesetztem Wachstum sich manifestieren werden. Diese
Eigenschaften machen ihn zu einem feinen Indikator auch fur Farb-
wirkungen., Der Anthrax zeichnet sich durch Eigenheiten aus, die ganz
andere experimentelle Mbglichkeiten bieten. Fiir die Farbwirkung und
ihre Beobachtung schatfen gewiB sein grampositives Verhalten, der enorme
GroBenunterschied gegenfiber dem Typhus und die Sporenbildung ganz
andere Bedingungen.

Zur Priifung auf Anfftrbbarkeit wurden Emulsionen beider St&mme
durch Abschwemmung einer SchrSgagarkultur mit 2 ccm physiol. NaCl-
Ldsung hergestellt. Die FSrbung erfolgte durch Vermischen von 1 bis
3 Oesen dieser Emulsionen mit 1—3 Oesen des Farbstoffes auf dem
Objekttrager, so dafi Mengenverh&ltnisse von 1:1—1:2—1:3—2 :1—3:2
und 3:1 zwischen Farbldsung und Emulsionen auf diese Art herstellbar
waren. Im Falle der Farbung wurde das Bild, das sich bei der geringsten
noch farbenden Farbstoffkonzentration, die so hergestellt werden konnte,
bot, zur Grundlage der weiteren Beobachtungen gemacht. Der Erfolg
der Farbwirkung wurde nach Bedecken des Gemisches mit einem Deck-
glas durch Untersuchung mit der Oelimmersion festgestellt. Alle an-
gewandten Farbldsungen waren 2-proz. wSBrig und in der WSrme geldst.
Soweit keine vSllige Ldsung in Wasser eintrat, wurde die heiBges&ttigte,
wieder abgektihlte, w&Brige L8sung verwandt. Als vitalfarbend wurden,
wie schon hervorgehoben, nur solche Farblosungen angesehen, in denen
sich alle Bakterien sofort durch intensiveren Farbton vom Farbmedium
abhoben. — Die hohe Konzentration der Farbstoffe bei dieser Versuchs-
anordnung kann deshalb als kein Fehler gelten, weil hier nur zu ent-
scheiden war, ob die Farbe augenblicklich eindringt oder nicht. Bei
den spateren Feststellungen flber den schadigenden EinfluB der vital
aufgenommenen Farbkorper kam dann nur die niedrigste Verdiinnung
zur Anwendung, die noch der Forderung der momentanen AnfSrbung
entsprach.

Durch die eingangs beschriebene Methode wurden als anfSrbend
folgende FarbkSrper ermittelt:

1) Malachitgriin, BrillantgrOn und Chrysoidin. die in Typhus und
Milzbrand augenblicklich eindringen.

2) Gentianaviolett, Magentarot, Methylviolett, Anilinviolett, Dahlia-
blau, Pyoktanin und Viktoriablau. Mit ihnen war nur beim Anthrax
augenblickliche Anferbung zu erzielen. Diese letzte Gruppe sei
unter dem Namen „Violette u zusaramengefaBt.

Die geringste, den Anthrax noch augenblicklich intensiv anfarbende
Konzentration dieser Farbstoffe war bei einer Mischung von 3 Teilen
Bakterienaufschwemmung und 1 Teil Farblosung folgende: Malachitgriin
0,2 Proz., Brillantgriin 1 Proz., Chrysoidin 0,3 Proz., Gentianaviolett
0,25 Proz., Magentarot 1 Proz., Methylviolett 0,2 Proz., Anilinviolett
0,7 Proz., Dahliablau 0,15 Proz., Viktoriablau 0,08 Proz., Pyoktanin
0,12 Proz.

Diese Konzentfationen wurden bei alien nunmehr folgentlen Unter-
suchungen verwandt.

Die erste Frage nach dieser Feststellung bezog sich verstiiudlicher-

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122 Centralbl. f, Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

weise auf den chetnischen Charakter dieser als brauchbar gefundenen
Farbstoffe. Ihre cbemische Zusaramensetzung ist folgende:

1) Malachitgriin — Rosanilin. 2) Brillantgriin — Rosanilin. 3) Chrysoidin — Azo-
farbe. 4) Gentianaviolett — Rosanilin. 5) Dahliablau — Rosanilin. 6) Methylviolett —
Para-Rosanilin. 7) Pyoktanin — Base des Methylvioletts. 8) Magentarot — Rosanilin
+ Para-Rosanilin. 9) Anilinviolett — Saffranin. 10) Viktoriablau — Diphcnylnaphthyl-
methan.

Gehbren diese Farben nun im Gegensatz zu den nicht aniSrbenden
bestimmten chemischen Gruppen an, und lassen sich so Beziebungen
zwischen ihrer Konstitution und dem Anf&rbungsvermogen erkennen?
Wenn aucb der grOBte Teil der Anfarbungstflchtigen zu den Rosanilinen
oder Para-Rosanilinen gehbrt, so z&hlen doch andere ebenfalls gut brauch-
bare zu ganz entfernten Gruppen, w£hrend anderseits wieder zahlreiche
Rosaniline nicht die geringste Anffirbungsfhhigkeit besitzen, so z. B. Jod-
grfln, Methylgrttn, Fuchsin. Unter den Azofarben, die im Chrysoidin auch
einen brauchbaren Vertreter stellen, sind dagegen unbrauchbar das Diamin-
blau, Vesuvin oder Bismarckbraun. Eine Regel l&Bt sich aus diesem Ver-
halten sicher nicht ableiten, und die Beziehungen zwischen chemischer Zu¬
saramensetzung und vitalf&rberischer Kraft Bakterien gegenflber mtissen als
ungekl&rt betrachtet werden. Die Anf&rbungsfahigkeit kann von Fall zu
Fall nur empirisch festgestellt werden. — Zu einer Erprobung der
Wirkung dieser Farbkorper auf den LebensprozeB der Zelle hatte man nun
mit Ausnahme der „Violette u iibergehen kbnnen. Diese waren wohl auch
bef&higt, den lebenden Anthrax anzufarbcn; aber sie warfen durch mannig-
faltige, in ihrer Ausdeutbarkeit ganz unsichere Nebenbefunde eine Reihe
bedeutsamer Vorfragen auf, die erst gelost werden muBten.

Die betrefienden Beobachtungen seien kurz hervorgehoben: Bei den
„Violetten“ tanzen in ganz verschieden groBen Mengen feinere und grdbere
gefSrbte Flocken, grSBere und kleinere Tropfchen und Haufen aus beiden
im Gesichtsfeld. Die Bakterien tragen die gleichen Gebilde und sind oft mit
ihnen in Klumpen geballt. Ja, sie kbnnen derart mit diesen Produkten
behaftet sein, daB besonders beira Typhus der Eindruck entsteht, eine
augefarbte Zelle vor sich zu haben, wdhrend es sich bei n&herem Zusehen
nur um einen dichten Mantel aus diesen Korpern handelt. Oft sitzen
kugelige Gebilde nur an den Enden oder mehr zentral, so daB man an
strukturelle Einzelheiten glauben kann. Das Verwirrendste aber ist, daB
es nicht gelingt, auch nur 2mal qualitativ und quantitativ gleiche Bilder
zu erzeugen. Alles wechselt tS.glich. Aus diesem Grunde verbot es
sich, diese Gebilde irgendwie als Bestaudteile des Bakterienleibes zu
deuten. Ihre Provenienz als Produkte dauernd variierender Kompo-
nenten wurde immer deutlicher, und die Unmoglichkeit, aus solchen Re-
sultaten einwandfreie Schltisse zu ziehen, immer klarer. Die Notwendig-
keit, experimentell mit absoluter Sicherheit ein stets gleiches, leicht
deutbares mikroskopisches Bild zu erhalten, wurde immer zwingender,
falls nicht alles auf eine unlosbare Gleichung mit unzahligen Unbekannten
hinauslaufen sollte. Dazu war das Aufspuren der Ursachen dieses ewigen
Wechsels das erste Gebot. Die Annahme, hier Farbniederschlagen
gegenfiberzustehen, lag auf der Hand. Es war auch nicht zweifelhaft,
daB sich die Farben in kolloidaler Lbsung — wahrscheinlich als Suspen-
sionskolloide — befanden. Diese konnen besonders leicht durch Elektro-
lyten aber auch durch andere Kolloide in ihrera Gleichgewicht gestOrt
werden. Beide Fallungsmittel betinden sich in der Bakterienaufschwena-
mung namlich NaCl und Spuren gelbsten Agars. Wenn auch die Menge

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler B&kterienfarbung etc.

123

des Elektrolyten nicht variiert, so ist doch die zufailig mitabgesptllte
Agarmenge den grdfiten Schwankungen unterworfen. Der Wechsel des
Farbungsresultates konnte mithin auf diesen unberechenbaren Zusatz
wohl zurdckgefflhrt werden, falls diese beiden Komponenten die Schuld traf.

Folgende Versuchsanordnung muBte Klarheit bringen. Die Farben
wurden mit physiol. NaCl-L6sung, einer sehr schwachen Losung von Agar
in Aqna dest. and einer ebenso konzentrierten von Agar in physiol. NaCl-
Lbsung unter den gleichen Bedingungen vcrsetzt und untersncht wie
die Bakterienemulsionen. Die meisten fielen schon bei der Berfihrung
mit NaCl oder Agar in Aqua dest. stark aus. Die gleichen Flocken,
Kugelchen und Trbpfchen wimmelten im Gesichtsfeld und wurden teil-
weise als grobe Haufen schon makroskopisch sichtbar. Die starkste
Ausfallung aber entstand bei der Anwesenheit beider Fallungsmittel.
Die Herkunft dieser stdrenden Gebilde als ausgeflockte Kolloide war
damit klar, ihr Anbaften an den Bakterien als Adsorptionsvorgang nicht
zweifelhaft, und die Mbglichkeit ihrer Ausschaltuug jetzt gegeben.

Es sei hinzugefiigt, daB bei der Farbmischung mit Bouillon die
gleichen Gebilde entstehen. Man kann je nach Art der Farbe und ihrer
Konzentration grbBere Oder kleinere, zahlreiche Oder sp&rliche Tropfen,
Kornchen, Kugelchen und Flocken erzeugen. Sie befinden sich in leb-
hafter molekularer Bewegung, und die grbBeren heben sich oft durch
einen belleren, lichtbrechenden Rand hervor. Es dr&ngt sich bei der
Betrachtung dieser Gebilde der Gedanke auf, daB manche der bisher fflr
ultravisibel gehaltenen Erreger, die man jetzt als kbrnchenartige Gebilde
beschreibt, solche Farbf&llungen sein konnten.

Diese Erfahrungen der Farbflockung durch NaCl und Kolloide lieBen
sich am einfachsten dadurch auf die Bakterienfarbung libertfagen, daB
die Zellen mit Aqua dest. abgeschwemmt, durch Zentrifugieren und Wieder-
aufffillen von Aqua dest. von noch anhaftendem NaCl und Agar befreit
(Waschen) und so mit dem Farbstoff vermischt wurden. Der Erfolg war
der erwartete. Der Anthrax stellte sich bei der Behandlung mit den
„Violetten“ als ein intensiv homogen, mit dem jeweils benutzten Farb¬
stoff impragniertes Stabchen dar. Alle kugeligen oder flockigen Gebilde,
die ihm frflher anhafteten, fehlten, und auch die umgebende Farblosung
war frei von alien Niederschlagen.

Trotz dieser im farberischen Sinne brauchbaren Resultate konnte
diese Versuchsanordnung wegen des schweren Vorwurfs, daB die Zellen
in Aqua dest. geschadigt wiirden, nicht beibehalten werden. Man
mufite verlangen, daB sie in einer isotonischen Umgebung blieben. Doch
durfte kein Elektrolyt dabei im Spiel sein. Im Traubenzucker lieB
sich schnell ein Korper finden, der diesen Anforderungen genugte. Seine
2,5-proz. L6sung ist ziemlich isotonisch mit 0,8-proz. NaCl und iallt,
wie dahin gerichtete Versuche erwiesen, in keiner Weise die so emp-
tindlichen n Violette u .

Nunmehr wurden Anthraxkulturen mit 2,5-proz. Traubenzucker-
Idsung abgeschwemmt, darin gewaschen (d. h. Abspulung mit Trauben-
zuckerlosung, Abzentrifugieren, das Zentrifugat erneut mit Trauben-
zuckerlosung auffQllen) und mit den zu untersuchenden Farben ver¬
mischt. Das mikroskopische Bild entsprach in alien Stucken dem
bei Anwendung von Aqua dest.

Unter Berflcksichtigung der vorher erwalinten Beobachtungeu der
an Intensitat auBerst wechselnden Farbflockung beim Vermischen der
Farbstoffe mit Bouillon, war es geboten, das Eiudringungsvermogen der

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124 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Original©- Bd. 87. Heft 2.

Farbkfirper in den Milzbrandbazillus auch in Bouillon zu prflfen. Es
wurden hierzu Bouillonaufschwellungen (16 Std. alt) des Anthrax mitden
Farben in den auf S. 121 genannten Starken versetzt und mikroskopisch
in der Qblichen Weise untersucht. Die nachstehende Tabelle gibt fiber
die Resultate Auskunft (siehe Tab. Nr. 1).

Tabelle Nr. 1.

Farbe

1 Bakterienemulsion in Bouillon
+ Farblosung

Farbe

1 Bakterienemulsion in Bouillon
+ Farblosung

Magentarot

Vieie schwach
rot, Rest farb-
los

A. + + +
Ad. + + +
Ag. + + +

Pyoktanin

Alle schwach
violett

! A. + +

! Ad. + +

; A g- + +

Viktoriablau

Alle farblos

A. + + +

' Ad. + + +
Ag. + + +

Anilinviolett

Alle farblos

[ A. + +

■ Ad. + +
Ag. + +

Gentiana-

violett

Alle violett

A. + +

- Ad. + +
Ag. + +

Malachit-

griin

Allekraftiggrun

A. i
Ad. i
Ag. ± '

Methylviolett

Alle violett

A. + +
Ad. + +
Ag. + +

Chrysoidin

Alle kraftig gelb

, A. + T
Ad. +
Ag. +

Dahliablau

Alle schwach
blau

A. +

Ad. + +
Ag. + +

Brillantgriin

|

Alle deutlich
griin

A. Jt
Ad. ±
Ag. ±

Zeicbenerklarung siehe am SchluC von Tabelle Nr. 2.

Wir sehen hier, dafi die Anffirbung beim Anilinviolett ausbleibt and
beim Magentarot, Dahliablau und Pyoktanin stark berabgesetzt ist. Ein
das Farbpermeieren hemmender EinfluB von Bouillonbestandteilen hob
sich hiermit deutlich hervor.

Die Benutzung der Traubenzuckerlfisung gestattete, wie vorher er-
wfihnt, den Farbungsvorgang deutlich in einem klaren Bilde zn ver-
folgen. Es gait nunmehr, nach der Orientierung fiber das ffirberische
Verhalten des Anthrax die Eigentfimlichkeiten des gramnegativen Ty¬
phus beim Anffirbungsprozefi zu erforschen. Zur Erzielung brauch-
barer Resultate wurden genaue Vergleichsuntersuchungen in 3 ver-
schiedenen Aufschwemmungsflfissigkeiten, d. h. Traubenzuckerlosung,
NaCl und Bouillon mit den Violetfen angestellt. Die Versuchsanord-
nung gestaltete sich folgendermaBen: 16-stund. Typhuskulturen wurden
mit 2,5 - proz. Traubenzuckerlosung, NaCl und Bouillon abgespfilt.
Die Reaktion der Flfissigkeit war bei der TraubenzuckerlSsung neu¬
tral, bei NaCl und Bouillon ganz schwach alkalisch. Nach Filtration
der Emulsionen wurden die Traubenzuckeraufschwemmungen abzen-
trifugiert und das Zentrifugat von neuem mit Traubenzuckerlosung
aufgeffillt. Die beiden anderen Abschwemmungen wurden nur filtriert.
Die Dichtigkeit der Bakteriencmulsionen wurde dann jeweils so fest
gelegt, dad sie beim Einfullen in ein etwa 1 cm breites Reagenz-
glas die Durchsichtigkeit von etwa zu ’/ 3 mit VVasser verdflnnter Milch
bei gleicher Schichtdicke batten. Zu je 1 ccm Bakterienemulsion kamen
dann 0,5—1 ccm Farblbsung (die Konzentrationen der Farben und die
Men gen sind jeweils in der nachstehenden Tabelle verzeichnet). Das
Bakterienl'arbgeniisch wurde dann in ein Wasserbad von 17 bis 19° ge-
stellt. Nach verschiedenen Zeiten kamen nunmehr kleine Mengen des

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

125

Gemisches zur mikroskopischen Untersuchung. Etwa 1 NormalQse voll
wurde auf eioen gut gereinigten Objekttrdger gebracht und sofort mit
einem Deckglas bedeckt. Nur ein ganz feiner, kapillarer Spalt darf mit
Lfisung erfQllt sein, da jede grofiere Schichtdicke eine genaue Be-
obachtung ausschlieBt. — Die mit dieser Methode gewonnenen Ergeb-
nisse sin d in nachstehender Tabelle verzeichnet (Tab. Nr. 2).

%

Tabelle Nr. 2.

Gentianaviolett 0,25 Proz. 1,0 ccm Emulsion 4- 0,5 ccm Farbe.

Zeit in Min.

18

41

61

Tr,

f. 40—50 Proz.
A.

Ad. —

Ag. —

f. 95 Proz.
A. —

Ad. —

Ag. —

t. alle

A. -
Ad. —

Ag. -

Zeit in Min.

5 | 29 ! 50

Na,

f. keine

Ad. + +

Ag. + +

A. + 4-

last alle
Ad. ±

Ag. ±

A. ±

f. alle I,

Ad. —

. Ag. — 1

1

Zeit in Min. 1 6 j 27 53 j 110

B -

f. keine

A. + + +

Ad. -
Ag. —

Ebenso Ebenso

1

Ebenso

Dahliablau 0,15 Proz. 1,0 ccm Emulsion 4- 0,5 ccm Farbe.

Zeit in Min. j
Tr,

1 ' 1
L _ 1 . . . J

f. fast keine

A, —

Ad. -
Ag. —

f. faf*t alle

1 A. -
! Ad. —

Ag. —

| J

f. alle

A. —

Ad. -
Ag. -

1

Zeit in Min.

1 1

i 11

| 22

31

Na,

f. keine

f. 50 Proz.

1 f. 70 Proz.

i f. alle

A. +4-

A. ±

A. ±

! A. i

Ad. 4-4-4-

i Ad. ±

Ad. 4:

1 Ad. ±

, Ag. + + +

Ag. -

| Ag. —

Atr. —

Zeit in Min.

1 ... • _J

45 |

103

B,

f. keine

1 Ebenso

Ebenso

A. +4-4* |

Pyoktanin 0,12 Proz, 1,0 ccm Emulsion 4- 0,5 ccm Farbe.

Zeit in Min.

1 |

^ |

Tr i !

f. 30 Proz.

f. alle 1

A. —

A. - i

Ag. ±

Ag. ± |

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126

CentralbL f, Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

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Zeit in Min. i

1

15

Na,

1

f. keine

A. + +

Ad. + + +

Ag. + +

f. alle

A. —

Ag. ±

Zeit in Min.

16

60 i ■

®i

f. keine

A. + 4-4-
Ad. —

Ag- —

f. keine

A. + + +
Ad. +

Ag. +

Methylviolett 0,2 Proz.

1,0 ccm Emulsion + 0,5 ccm Farbe.

Zeit in Min.

1

4

17

Tr,

f. keine

A. —

Ad. —

Ag. —

! f. 50 Proz.
A.

Ad. -
Ag. -

f. alle

A. —

Ad. —

Ag. —

Zeit in Min.

19

21

Na,

f. 50 Proz.

A. +

Ad. + +

Ag. + +

f. alle

A. -
Ad. ±

Ag. +

Zeit in Min.

5

42

68

f. keine

A. + + +
Ad. —

Ag. —

Ebenso

Ebenso

Viktoriablau (frisch) 0,08 Proz. 1 ccm Emulsion + 1 ccm Farbe.

Zeit in Min.

i !

2

Tr,

f. 40 Proz.

f. alle

A. -

A. -

Ad.—

Ad. —

Ag. -

Ag. — |

1

Zeit in Min.

7

110

Na,

f. keine

A. + +

Ad. + + +

Ag. + + +

f. vereinzelte
‘A. + +

Ad. + + +
Ag. + + +

Zeit in Min. |

13

86

B*

f. keine

A. 4- +

Ad. + + -f-
Ag. + + +

Ebenso

1

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127

Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienf&rbung etc.

Magentarot (frisch) 1 Proz.

1,0 ccm Emulsion + 0,5

ccm Farbe.

Zeit in Min.

2

13

Tr,

f. fast keine

A. —

Ad. —

Ag- ~

f. alle

A. —

Ad. —

Ag. —

Zeit in Min.

I 10

90

Na,

f. keine

A. + + +
Ad. + + +
Ag. + + +

Ebepso

Zeit in Min.

12

91

B,

f. keine

A. + + +
Ad.

Ag. + + +

Ebenso

j

|

Viktoriablau (alt) 0,08 Proz. 1 ccm Emulsion + 1 ccm Farbe.

Zeit in Min.

5 1

22

44

50

f. keine

A. —

Ad. —

Ag. + +

1 Ebenso

i

Ebenso

Ebenso

Zeit in Min.

12

29

56

Na,

f. keine

A. 4-

Ad. + + +
Ag. + + +

Ebenso

1

:

i

1

Ebenso

Zeit in Min.

16

44

59

B,

f. keine

A. +

Ad. + + +
Ag. + + +

Ebenso

Ebenso

i

i

Magentarot (alt) 1,0 Proz. 1,0 ccm Emulsion 4- 0,5 ccm Farbe.

Zeit in Min.

2 1

15

40

57

Tr,

f. keine

A. —

Ad. —

Ag. +

f. keine

A. 4*

Ad. 4"

Ag. 4-

Ebenso

j

Ebenso

Zeit in Min.

7

23

62

Na,

f. keine

A. +

Ad. + + +
Ag. + + +

Ebenso

! Ebenso

]

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128

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2 .

Zeit in Min.

I 14

~ 35

! 65

B,

Anilin vi<

f. keine

A. +

Ad. + + +

Ag. + + +

Aett 0,7 Proz.

Ebenso i Ebenso 1

i

! i

J

1,0 ccm Emulsion + 0,5 ccm Farbe.

Zeit in Min.

4

15

1 50

D,

f. keine

A. + +

Ad. 4*

Ag- +

Ebenso

Ebenso

|

I

Zeit in Min.

7 j

25

51

Na,

f. keine

A. + +

Ad. + + +

Ag. + + +

Ebenso

Ebenso

i

1 i

■

Zeit in Min.

11

27

53 i

B, ;

f. keine

A. 4-4-
Ad. 4-4-4- 1

Ag. +4-4-

Ebenso

Ebenso

Zeiehenerklarung:

Zeit = Zeit in Minuten der Einwirkungsdauer des Farbstoffes.

Tr, = Tvphu.sstamm 1 in Traubenzuekerlosung.

Na, = Typhusstamm 1 in NaCl-Losuug.

B, = Typhusstamm 1 in Bouillon.

f — angefiirbt.

A = Ausfiillung der Farbe in Kiigelchen oder Flocken, soweit sie nicbt adsor-
biert ist.

Ag. = Agglutination der Bakterien ± sehr gering, + goring, + + mafiig, + + + stark.

Ad. = Adsorption der Farbfallungsprodukte an die Bakterien + sehr gering,
+ gering, + + miibig, + + + stark.

Erganzen wir nun kurz die in der Tabelle aufgezeichneten Be-
funde durch moglichst gesonderte Besprechungen jeder Farbe. — Beim
Gentiana V. sieht man in Traubenzuckerlosung die farblosen St&b-
chen, die gelegentlich etwas verklumpt sind, langsam dunkler werden,
wobei dieser ProzeB bei den einzelnen Individuen ganz verschieden
schnell einsetzt und ablauft. Nur vereinzelte — offenbar geschfidigte
— sind schon nach wenigen Sekunden farbdurchtrankt. Nach etwa
5 Min. hebt sich eine groBere Zahl der Zellen aus der Menge der durch-
sclieinenden, hellen durch ilircn Farbton hervor, sei es nun, daB das
Stabchen :rst leicht verfurbt ist, Oder daB es schon in kraftiger Weise
den Farbstoff aufgenomincn hat. Im Augenblick leichtester AnfSrbung
alter hdrt jede Eigenbewegung auf und nur noch niolekulares Zittern
bleibt iibrig. So vermehrt sich fast unmerklich die Zahl der Farb-
tragenden, bis nach etwa 1 Std. samtliche Individuen dunkelviolett er-
scheinen.

In NaCl-Losung spielt sich ein in vielen Einzelheiten andersartiger
Vorgang ah: Die anfangs samtlich farblosen Zellen sind mit einem
dichten Mantel von feinsten Kbrnchen besetzt und meist in verschieden
groBe Haufen aneinandergeballt, welche langsam an Umfang zunehmen.

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Reichert, Ueber den Ablauf vit&ler B&kterieufarbung etc.

129

Allmihlich aber, ctwa in den gleichen Zeitrfiumen wie bei der Trauben-
zackerldsung, vollzieht sich nacheinander eine Anfarbung der Zellen.
Sobald die Mehrzahl der Stabchen dunkelviolett sind, bemerkt man eine
erheblicbe Abnahme der Farbkornchen, und bei volliger Anfarbung aller
Zellen nacb etwa 1 Std. sind die Kiigelchen ganzlich verschwunden,
und die Bakterienbaufen haben sich fast restlos aufgelfist. Die Stabchen
schwimmen, distinkt angefSrbt, in klarer L5sung, so daB dies Endbild dem
bei der Traubenzuckerlosung fast gleicht. Darauf hingewiesen sei jedoch,
dal! solch klare Bilder nur bei Vermeidung von Farbuberschilssen zu
erzielen sind. Denn sonst sind die Zellen naturgemaB nicht imstande,
samtliche Farbe aufzunehmen, und das Bild bleibt durch Farbtlocken
gestort. — Wir konnten demndch bier neben deni Anf&rbungsvorgang
3 andere Erscheinungen beobachten, d. h. Farbenausfallung zu feinsten
Kornchen durch den Elektrolyten, Adsorption der Farbflockung durch
die Zellen und Agglutination.

Ein wiederum ganzlich neues Bild Qberrascht uns beim Zusatz von
Gentianaviolett zur Aufschwemmung des Typhus in Bouillon. Die Stab¬
chen sind alle farblos und in lebhaftester Bewegung. Der Farbstoff
tanzt in Form feinster Kiigelchen, die sich nicht im geringsten an die
Zellen anlagern, im Gesichtsfeld. Es ist, als seien Stabchen und Korn¬
chen ohne jeden EinfluS aufeinander. Selbst jede Agglutination fehlt.
Dies Bild andert sich abgesehen von allmahlicher Verlangsamung der
F.igenbewegung der Bakterien infolge Abkliblung auch nach 2 Std. in
keiner VVeise. Die Unterschiede zwischen diesem Vorgang und den Er¬
scheinungen in Traubenzuckerlosung und NaCl sind in die Augen springend.
In Bouillon erfolgt keine Anfarbung, der stark ausgeflockte Farbstoff wird
nicht adsorbiert und jede Agglutination fehlt. Die auffallende Hemmung
der Anfarbung, Adsorption und Agglutination kann nur eine Folge der
Bouillonkolloide sein, die als Schutzkolloide vielleicht die Farbflocken oder
<lie Stabchen einhQllen und damit die obengenannten Reaktionen hindern.

Dahliablau, Pyoktanin und Methylviolett lassen sich zusammen be-
•sprechen. Das Anfangsbild in Traubenzuckerlosung entspricht durchaus
item beim Gentianaviolett geschilderten. Der AnfarbungsprozeB vollzieht
sich hier aber bedeutend schneller, ja beim Pyoktanin sind nach wenigen
Sekunden schon ca. 40 Proz. der Zellen kraftig blau. Nach 4—20 Min.
■•rscheinen bei alien 3 Farben samtliche Individuen angefarbt. Aus-
tallnng der Farbe, Adsorption und Agglutination fehlen ebenfalls. — Eine
gleiche Uebereinstimmung des Ablaufes der Anfarbung mit dem beim
Gentianaviolett besteht beim NaCl-Versuch. Es tritt starke Farbflockung
in Form feinster Kiigelchen auf, die den Stabchen anhaften, uud ebenso
starke Haufenbildung der Zellen. Nach 15—30 Min. ist dann die An¬
farbung vollzogen, die KOrnchen verschwinden und die Klumpenbildung
ist groBtenteils gel8st. Der FarbungsprozeB lauft in NaCl-Losung also
offenbar etwas langsamer ab als Traubenzuckerlosung. — Auch die Vor-
gange in Bouillon sind bei diesen 3 Farben die gleichen wie beim
Gentianaviolett. Farblosigkeit der Zellen besteht bei starker kugeliger
Farbflockung und fehlender Adsorption und Agglutination. Die Schutz-
kolloidwirkung ist also wieder deutlich. Auch nach 1 — P/ 2 Std. sind
VerJnderungen nicht feststellbar.

Das Viktoriablau bietet in Traubenzuckerlosung auch nichts wesent-
lich Neues 1 ). In der klaren, mikroskopisch fast farblos anmutenden

1) Ea sei hervorgehoben, dafl hier das Alter der Farbldsung und die Temperatur
erheblich mit?rirkt. Schon nach wenigen Tagen Stehen verringert sich der Dispersitiits-

Er*t« Abt. Orig. Bd. 87. Heft 2. 9

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130 CentraibL t. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Lbsung sind nach wenigen Augenblicken etwa 40 Proz. der Bakterien
krSftig blau gef&rbt. Ziemlich schnell folgen die anderen nach, so daB
nach 2—3 Min. die vbllige Anfarbung vollzogen ist. Jede Zusammen-
ballung und Farbflocknng fehlt. — In NaCl-L5sung und Bouillon er-
halten wir diesmal die gleichen Bilder. Alle Bakterien sind farblos
und mit einem Mantel feinster Farbflockchen besetzt. Es entstehen
kleine Bakterienhaufen, die sich durch Aneinanderlagerung schnell ver-
grbBern, so daB sie bald makroskopisch sichtbar werden. Die groBen
Klumpen erscheinen mikroskopisch in toto blau. Wie aus einem dichten
Farbschleier sieht man oft durchscheinende, helle Stabchen sich abheben.
Es besteht beim Anblick dieser Haufen kein Zweifel, daB sie nicht aus
angefdrbten Zellen bestehen, sondern daB farblose Bakterien zwischen
Farbwolken liegen. Dies wird um so eindrucksvoller, wenn sich nach
etwa l 8 /* Std. eine kleine Anzahl von Stabchen anfarbt und sich nun
scharf von den alle Einzelheiten nur in undeutlicher Form durch-
schimmern lassenden Klumpen abhebt. Ueberdies bleiben die wenigen
einzelnen, nicht verklumpten Zellen auch nach l 3 / 4 Std. noch fast restlos
farblos, was deutlich gegen die Annahme einer Anfarbung der ver¬
klumpten Bakterien spricht. Das Neue ist mithin hier die Adsorption
des ausgefallten Farbstoffes auch in Bouillon bei gleichzeitiger Agglu¬
tination, d. h. das Fehlen der Schutzkolloidwirkung. Dazu koramt das
Ausbleiben der Anfarbung in NaCl.

Magentarot gehort zum gleichen Typus wie Viktoriablau. Die An¬
farbung aller Individuen in Traubenzuckerlbsung erfolgt beim frischen
Farbstoff in etwa 15 Min., wobei die FarblSsung ganz klar ist und
Agglutination fehlt. Auch hier stimmt das Verhalten in NaCl mit dem
in Bouillon iiberein. Beidemal entstehen augenblicklich groBe, makro¬
skopisch sichtbare Haufen aus groben Farbklumpen und Bakterien, die
wie in Farbnebel gehiillt erscheinen. Undeutlich schimmern meist an
den Randern der Komplexe farblose Zellen hervor, zum Beweis, dafi
ein Eindringen des Farbstoffes in die. Stabchen in wesentlichen Mengen
nicht stattgefunden hat, sondern nur eine Verklebung der Bakterien
durch Farbschichten. Die wenigen nicht verklumpten Individuen sind
hell und durchsichtig. So bleibt das Bild noch nach l 1 /* Std. unver-
andert. Starke Farbausfallung verbindet sich hier mit grober Agglutina¬
tion und kraftiger Adsorption beim ganzlichem Fehlen der Farbimprag-
nation. Auch hier vermogen die Bouillonkolloide die Adsorption und
Agglutination nicht aufzuheben.

Wesentlich abweichend von den frischen Losungen der beiden zu-
letzt besprochenen Farben verhalten sich solche, die mehrere Wochen
alt sind. Es findet namlich beim Stehen eine langsame Ausflockung
der Farblosungen statt, die beim Viktoriablau bis zu Fallungsprodukten
von makroskopisch sichtbarer GroBe ftihrt. Ob diese Verringerung der
Dispersitat nun eine Folge von Elektrolytspuren ist, die sich von der
Glaswand ablosen, oder ob andere Grunde vorliegen, bleibe dahin ge-
stellt. Jedenfalls erweisen sich diese ausgeflockten Farben auch in
Traubenzuckerlosung ganzlich unfahig, den Typhus anzufarben. Noch
nach 1 Std. sind alle Zellen farblos. Dagegen tritt starke Adsorption
der Farbteilchen an die Stabchen und Agglutination auf. In NaCl und
Bouillon entstehen die gleichen Bilder wie bei der frischen Farblbsung.

grad des Viktoriablaus. Folgende Angaben beziehen sich auf eine 1 Tag alte Losung
und 17° Temp.

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

131

Das Anilinviolett erweist sich in alien Aufschwemraungsflttssigkeiten
unf&hig znr Anfarbung. Bezeichnend ffir diese Farbe ist auBerdem die
schon in Traubenzuckerlftsung niederige Dispersitat bei starker Bak-
terienverklumpung. In NaCl und Bouillon sind Farbf&llung, Adsorp¬
tion und Agglutination noch erbeblich gesteigert.

Wie schon anfangs erwShnt, gelingt die Anfarbung des Typhus mit
3 Farben in NaCl schon bei Zimmertemperatur augenblicklich. Das
sind Malachitgrlin, Brillantgriin und Chrysoidin. Doch auch hier tritt
der EinfluB der Aufschwemmungsflflssigkeiten zutage. Malachitgrun und
Brillantgrun Sndern ihre Dispersitat in NaCl und Bouillon in nachweis-
barer Form nicht. Die Anfarbung der Keime ist fiberall deutlich.
Chrysoidin flockt in NaCl und Bouillon aus. Im ersteren besteht schwache
F&rbung und in Bouillon Farblosigkeit (siehe Tab. Nr. 3).

Tabelle Nr. 3. Zeichenerklarung siehe Tabelle Nr. 2.

Farbe

Traubenzuckerlosung

NaCl-Losung

Bouillon

Malachitgrfin

Deutlich grun

Kraftig grun |

Deutlich griin

05 Proz.

A.- Ag.-

A. - Ag. —

A. ± Ag. ±

Chrysoidin

Kraftig gelb

Leicht gelb

Farblos

0,3 Proz.

A. —

A. +

A. + +

1

Ag. ±

Ag. ±

Ag. —

Brillantgrun
1,— Proz.

Deutlich griin

A. —

Kraftig griin

Deutlich griin

A. —

Ag-n:

Ag. 4-

! Ag. + +

Bakterieuaufschwemmung _

Farblosung

Weitere, unsere Kenntnisse des Anfarbungsvorganges mehrende Be-
obachtungen lieBen sich aus der Untersuchung des farberischen Ver-
haltens der Zellen bei hoheren Temperaturen im Augenblick des
Farbzusatzes gewinnen. Leichte Erwarmungen des Wasserbades bei den
soeben besprochenen Versuchen hatten auf eine starke Beschleunigung
des Prozesses durch Warmewirkung hingewiesen. Aber nur durch eine
exakte Bestimmung war eine brauchbare Auskunft fiber den Temperatur-
einfluB zu erwarten. Dazu muBte zuerst die Frage genau prazisiert
nnd die Methode einwandfrei gestaltet werden. Es gait zu ermitteln,
welche Temperatur geniigt, um bei Anwendung einer bestiramten Farbe
von bestimmter Konzentration in einem bestimmten Aufschwemmungs-
medium die augenblickliche Anfarbung samtlicher Zellen herbeizu-
ffihren. Diese Temperatur sei kurz „minimale Anfarbungstemperatur“ ge-
nannt. Als zweckmaBigste Versuchsanordnung erwies sich nach einigen
MiBerfolgen nachstehende: Es wurden zunachst Bakterienemulsionen in
Traubenzucker, NaCl und Bouillon ebenso hergestellt wie auf S. 124
geschildert, und je 6 Tropfen in ein Reagenzglas abgefullt. Diese Auf-
schwemmungsmenge kam dann gleichzeitig mit der betreffenden Farb-
lbsung in ein genau auf eine bestimmte Temperatur eingestelltes Wasser-
bad und wurde dort 3 Min. erwarmt. Danach wurden, wahrend die
Emulsion im Wasserbad blieb, 3—4 Tropfen der erwarmten Farblosung
zugesetzt und anschlieBend nach 3 Sek. langer neuer Erwarinung 1 Oese
des Gemisches auf einen sauber gereinigten Objekttrager zur mikro-
skopischen Untersuchung gebracht. Erst weun alle Keime ausnahms-
los sich als intensiv angefarbt erwiesen, wurde die gefuudene Tempe¬
ratur als „minimale Anfarbungstemperatur u notiert.

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132

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2 .

Streng genommen handelt es sich ja nan hei der mikroskopischen
Untersnchung des erwUrmten Bakterienfarbgemisches gar nicht um eine
Beobachtung des Zastandes, der bei der ira Moment der Mischung vor-
liegenden Temperatur eintritt, sondern um die Feststellung eines Be-
fundes, wie er nach erfolgter Abkiihlung des vorher erwfirmten Ge-
misches sich ausbildet. Dieser Umstand miifite bei schnell reversiblen
Vorgangen die hier gewonnenen Resultate unbrauchbar machen. Dafi
wir es hier aber nicht mit schnell sich umkehrenden Erscheinungen zu
tun haben, beweist die Verschiedenheit der zur Beobachtung gelangen-
den Bilder, die sich bei steigender Temperatur in sinnvoller Progression
verfindern. Sich bei der Abkiihlung sofort umkehrende Zustande mtlBten
aber auch stets wieder die gleichen Bilder bei der gleichen Abkflhlungs-
temperatur ergeben ganz unabhangig davon, ob das betreffende Bak-
terienfarbgemisch im Moment der Mischung einer Temperatur von z. B. 20°
oder 40° ausgesetzt war. Da dies aber in keiner Weise eintritt, sondern
jedem Temperaturgrad eine ganz bestimmte Veranderung entspricht,

Tab ell e Nr. 4. Zeichenerklarung siehe Tabelle Nr. 2.
Geutianaviolett 6 Tropfen Emulsion + 3 Tropfen Farbe.

Temp. 0

Traubenzuckerlosung

| NaCl-Losung

Bouillon

20

•

f. fast keine

Ad. “p A. -f-
Ag.+ +

•

30

f. keine

A. + 4* +

Ad. -
Ag. —

35

f. 50 Proz.

Ag. 4-

f. keine

Ad. +

Ag. +

*

40

f. 75 Proz.

f. 50 Proz.

f. keine

Ag. 4-

Ad. +

Ag. +

A. + + +

Ad. —

Ag. —

42

f. fast alle

Ag. +

•

43

.

.

44

f. alle

Ag. + +

* i

1

|

•

45

•

f. fast alle

Ad. -I ■

Ag. +

•

48

•

f. alle

Ad. —

f. fast alle hellviolett
A. + +

Ag. -

>
C JQ PL

1 1

55

f. fast alle

A. + +

Ad. +

Ag- ±

57

:

f. alle

A. + +

Ad. —

Ag- —

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

133

miisseD wir annehmen, daB der in der WS.rme erzeugte Zustand kurz
nach der Abkiihlung keine wesentlichen Veranderungen erf&hrt.

Die so gewonnenen Ergebnisse seien nun zunfichst kurz tabellarisch
mitgeteilt. Die Angaben beziehen sich auf den Typhusstamm Nr. 1.
Natflrlich zeigen andere Stamme wie bei jeder biologischen Reaktion
hiervon kleine Abweichungen.(Tab. Nr. 4).

Pyoktan in 6 Tropfen Emulsion + 3 Tropfen Farbe.

Temp. 0

j Traubenzuckerlosung

NaCl-Ldsung

Bouillon

21 1

i

i

i

f. fast keine

Ad. + +

Ag. + +

•

28

f. groSt.Teilschwachblau
Ad. + +

Ag. + +

f. keine

A. + +

Ad. —

Ag. —

30

•

f. fast alle echwach blau
Ad. + +

Ag. + +

31

f. 80-90 Proz.

Ag-—

i

•

34

. j

■

!

f. 95 Proz.

1 Ad. +

Ag. +

*

35

f. fast alle

A. —

Ad.—

Ag. —

1

i

f. fast keine

A. + +

Ad. —

Ag. —

38

1

'

f. fast alle

Ad.—

Ag.—

f. wenige

A. +

Ad. -
Ag. -

40 |

1

I

f. fast alle

Ad.—

Ag.-

41

f. alle

A. —

Ad.-

Ag.-

42

f. alle

Ad.—

Ag. —

•

50

|

f.fastalleschwach blau
A. + +

Ad. -
Ag- —

55

l

f. alle

A. + +

Ad. -
Ag. —

Dahliablau 6 Tropfen Emulsion + 3 Tropfen Farbe.

Temp. 0

TraubenzuckerHteung

NaCl-Losung 1

Bouillon

20

f. fast keine |

f. fast keine

f. keine

A. — !

Ad. ±

A. +

Ag. —

Ag. ±

Ad. -

•

i

Ag. —

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134

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Original©. Bd. 87. Heft 2.

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Temp. 0

Traubenzuckerlosung

NaCl-Losung

Bouillon

30

f. 30 Proz.

f. wenige

f. keine

A. —

Ad. ±

A. + +

Ag. —

Ag. ±

Ad. -
Ag. —

35

f. 50 — 60 Proz.

f. 20 Proz.

f. keine

Ag. —

Ad. ±

Ag. db

A. + +

Ad. -

Ag- —

40

f. 90 Proz.

f. 50 Proz.

f. keine

Ag- —

Ad.—

A. 4 4

Ag. -

Ad. -
Ag- —

45

f. fast alle

{. 80—90 Proz.

f. ganz vereinzelte

A. —

Ad. —

A. + +

Ag. —

Ag. —

Ad. -
Ag. -

47

f. alle

A. —

Ag. —

1

*

50

.

f. 95 Proz.

f. 30 Proz. hellblau

I Ad. -

1 Ag. —

! A. + +

i Ad. —

Ag. —

53

f. alle

! f. fast alle hellblau

Ad. — A. —

1 A. +

Ag.-

1 1

«

55

.

.

00

f. alle

A. +

Ad. —

Ag- -

Methyl violett

30

f. 90 Proz.
Ad. —

Ag. -

37

.

38

f. 90 Proz.
Ad. — A. —
Ag. -

40

•

41

f. fast alle
Ad. -
Ag. —

44

f. fast alle
Ad. —

Ag. —

45

6 Tropfen Emulsion 4

f. fast alle
Ad. 4 4
Ag. +4

Tropfen Farbe.

i

!

f. ca. 10 Proz.
A. 4 4 4
Ad. -
Ag. -

f. 50 Proz
A. 4 4
Ad. —

A g* -

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

135

Temp. 0

j Traubenzuckerlosung

NaCl-Ldsung |

Bouillon

46

' f. alle

Ad. -
Ag- —

i

•

47

•

f. alle

Ad. +

Ag. +

.

48

.

.

.

50

l

f. 90 Proz.

A. + +

Ad. —

Ag. —

55

i

f. fast alle

A. + +

Ad. i

Ag. ±

57

i

i

f. fast alle

A. + +

Ad. ±

Ag. ±

60

1

Ebenso

63

1

!

.

i

1

|

f. alle

A. + +

Ad. +

Ag. ±

66

1 •

i

.

Farbe.

20

f. keine

f.?

f.?

A. + +

Ad. + + +

Ad. + + +

Ad. -
Ag. —

Ag. + + +

Ag. + + +

30

.

•

31

f. keine

A. + +

Ad. -

Ag- —

33

.

.

Ebenso

35

f. keine

A. + +

Ad. —

Ag. -

i t 1

40

f. 10 Proz. hellviolett

{.?

f. keine

A. -f +

Ad. + + +

Ad. + +

Ad. —

Ag. —

Ag. + + +

Ag. + +

45

f. fast alle hellviolett
A. + +

Ad. —

Ag. —

f. viele hellviolett

Ad. + +

Ag. + +

i

50

f. alle

A. +

Ad. —

Ag. —

| Eoenso

f. wenig
A. + +
Ad. +
Ag. +

60

V'—V 1

f. alle

Ad. + +

Ag. + +

f. alle

A. + + +
Ad. +
Ag. +

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Gougle

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136

CentralbL f. B&kt. etc. 1. Abt Originate. Bd. 87. Heft 2.

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Viktoriablau (frisch) 6 Tropfen Emulsion + 4 Tropfen Farbe.

Temp. 0

Traubenzuckerldsung

NaCl-Losung

Bouillon

17

f. 10—20 Proz.

A. —

Ad. —

Ag. —

•

•

21

f. fast alle

A. —

Ad. -
Ag--

25

Ebenso

. .

.

27

Ebenso

.

.

30

f. alle

A. —

Ad. -
Ag. —

f. keine

Ad. + +

Ag- + +

31

f. keine

A. + +

Ad. + +

Ag. + +

35

•

f. wenige

Ad. +

Ag. +

40

•

f. wenige

Ad. + + +

Ag. + + +

f. wenige

Ad. ±

Ag. ±

50

*

f. etwa 10 Proz.

Ad. +

Ag. +

•

54

f. 20 Proz.

A. +

Ad. —

Ag. —

55

*

f. 10 Proz.

Ad. —

Ag. —

*

60

f. 20 Proz.

A. +

Ad. -
Ag. —

f. 90 Proz.

A. +

Ad. —

Ag. —

65

•

.

Ebeneo

70

f. alle

Ad. —

Ag. —

f. alle

A. +

Ad. —

Ag. —

Viktoriablau (alt) 6 Tropfen Emulsion + 4 Tropfen Farbe.

44

f. keine

Ad. + +

Ag. + +

50

f. keine

Ad. -j-

Ag. + +

55

Ebenso

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

137

Temp. 0

Traubenzuckerlosung

NaCl-Losung j

Bouillon

57

j

i

f. keine

Ad. + + +

Ag. + + +

•

60

i

1

■

f. keine

Ad. 4-4-4-
Ag. + + 4-

65

f. keine

Ad. -f- 4~

Ag. + 4-

•

70

Ebenso

Ebenso

Ebenso

1

a

dagentarot (frisch) 6 Tropfen Emulsion + 3 Tropfen Farbe.

19

f. keine !

A. —

Ag. + +

•

f.?

Ad. 4-4-4-
Ag. +4-4-

29

f. 95 Proz.

A. —

Ag. + +

•

•

30

f.?

Ad. + +

Ag. + +

31

•

f.?

Ad. + + +

Ag. + + +

•

32

f. alle

A. —

Ag. + +

Ebenso

36

.

Ebenso

.

40

f.?

A. +

Ad. + +

Ag. + +

f. wenige

A. 4-
Ad. 4-
Ag. +

43

•

f. alle

Ad. +

Ag. 4-

•

45

•

•

•

50

f. wenige

A. +

Ad. +

Ag. +

60

t. alle

A. + +

Ad. ±

Ag. ±

Magentarot (alt) 6 Tropfen Emulsion + 3 Tropfen Farbe.

20

f. keine

f.?

f.?

A. +

Ad. + + -b

Ad. + + +

Ad. ±

Ag. ±

Ag. 4-4-4-

Ag. 4- 4- 4*

30

f. wenige

Ad. + +

Ag. + +

*

•

34

.

Ebenso

•

35

Ebenso

*

i

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Origins

UNIVERSITY OF

138

CeDtralbl. f. B&kt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Temp. 0

Traubenzuckerlosung

NaCl-Losung

Bouillon

40

f. wenige

.

f. keine

Ad. + +

A. + +

Ag. + +

Ad. +

Ag. +

45

Ebenso

f. keine

#

Ad. +

Ag. +

50

f. fast alle hellrot

f. z&hlreiche

Ad. + +

A. + +

Ag. + + +

Ad. ±

Ag. i

55

f. alle

f. alle

Ebenso

Ad. + +

A. -

Ag. + + +

Ad. ±

Ag. ±

Zeichenerklfirung siehe Tabelle Nr. 2.

Auch hier ist wohl eine kurze Zusammenfassung der tabellarischen
Ergebnisse zweckm&Big. — Beim Gentianaviolett erfolgt die augen-
blickliche Anf&rbung sSmtlicher Zellen in Traubenzuckerlosung bei etwa
45—47° und bei etwa gleicher Temperatur (48°) in NaCl, w&hrend in
Bouillon 57° erforderlich sind. So tritt auch hier die Schutzkolloid-
wirkung zutage. — Beim Pyoktanin, Dahliablau und Methylviolett
liegen die Verh&ltnisse ganz ahnlich; die „minimale Anfarbungstemperatur*
in Traubenzucker und NaCl liegen ziemlich dicht nebeneinander, doch
so, daB die des NaCl stets etwas hbher ist. Bis zur FSrbung in Bouillon
wird aber noch ein erheblicher Sprung von meist 10° nbtig. In NaCl
beobachten wir aufierdem hier stets ein Verschwinden der Flockungs-
produkte beim Eintritt der FSrbung und ein fast gfinzliches Aufhbren
der vorher ziemlich kr&ftig entwickelten Agglutination. Das Unsichtbar-
werden der dispersen Phase ist wohl die Folge der Farbaufnahme durch
die Bakterien, die zu einer starken Verminderung des Farbgehaltes der
LSsung fiihrt. Doch laBt sich eine Erhohung des Dispersitfitsgrades
durch die W&rmezufuhr, was auch zu einem Verschwinden der Farb-
flocken ftihren wiirde, nicht mit Sicherheit ausschlieBen, ist aber aus
sp&ter zu erbrternden Griinden hSchst unwahrscheinlich.

Das schon in Traubenzucker ausfallende Anilinviolett braucht 50°
in diesem Medium zur AnfSrbung und 60° bei NaCl und Bouillon. Die
starke Verklurapung in Bouillon bei 20° schwindet mit zunehmender
Temperatur schnell, so daB sie bei 60° fast g&nzlich fehlt, w&hrend da-
bei oft die Farbflocken frei in der Losung schwimmen, ohne den Zellen
anzuhaften. In Traubenzucker beobachten wir bei Temperaturerhdhung
mit nachfolgender AnfSrbung wohl eine Abnahme der Zahl, aber nicht
der GroBe der Farbflocken.

Ganz anders verhait sich frisches Viktoriablau. Einer Anf&rbungs-
temperatur von 30° in Traubenzucker steht eine solche von 70° in NaCl
gegeniiber. Hier kann man wohl kaum noch von einer „vitalen F&r-
bung“ einer gesunden Zelle sprechen, da diese Temperatur allein schon
eine Schadigung zur Folge hat. In Bouillon ist der gleiche W&rmegrad
wie in NaCl orforderlich. In beiden elektrolythaltigen Medien sehen wir
auBerdem parallel mit der Anfarbung ein Verschwinden der Farbflocken
und Zerfallen der Bakterienhaufen einhergehen. — Ist der Farbstoff

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eioige Wochen alt, so wird er selbst in Traubenzucker auch bei einer
Temperatur von 70° noch nicht anfArbungsfAhig. Starke Adsorption
feinster Kdrnchen verbindet sich hier mit Farblosigkeit und grofiflockiger
Agglutination. Schon bei der Farblosung a lie in lABt sich eine zunehmend
starke Ausfallung mit der Temperaturerhdhung und erneute Steigerung
der DispersitAt bei der Abkilhlung makroskopisch einwandfrei beob-
achten.

Magentarot (frisch) bewahrt auch bei dieser Versuchsanordnung eine ge-
visse Aehnlichkeit mit dem Verhalten des Viktoriablau. Einer AnfArbungs-
temperatur von 32° in Traubenzucker steht eine solche von 43° in NaCl
gegenuber, wAhrend in Bouillon der starken Agglutination wegen eine
sichere Beobachtung des fArberischen Prozesses gar nicht mOglich ist.
Die AgglutinationsfAhigkeit dieses FarbkOrpers scheint besonders hoch,
da schon in Traubenzucker starke Zusammenballung eintritt, was aber
nicht hindert, daB die Verklumpung in NaCl und Bouillon beim Steigen
der Temperatur stark nachlABt. Bei der alten LSsung des Magentarot
macht sich bei der verringerten DispersitAt wieder das herabgesetzte
AnfSrbungsvermdgen geltend. In Traubenzucker und NaCl sind 55°
erforderlich, wAhrend bei gleicher Temperatur in Bouillon noch fast jede
Farbeaufnahme fehlt. Abnahme der Agglutination bei steigender WArme-
zufuhr ist in NaCl und Bouillon auch hier deutlich.

Das Wesentliche dieser letztgenannten Versuchsergebnisse ist mithin
die nicht anzweifelbare Tatsache, daB sich bei entsprechender ErhShung
der Temperatur eine augenblickliche AnfArbung sAmtlicher Keime
bei alien untersuchten Farben erreichen laBt. Dabei zeigt sich, daB der
erforderliche Warmegrad bei jeder Farbe ein anderer ist und iiberdies
noch von der Zusammensetzung der Fliissigkeit, in welcher die An¬
fArbung vorgenommen wird, abhAngt. VVorin soli nun diese WArme-
wirkung, die alle scheinbar sonst dem Eindringen der Farbkorper ent-
gegenstehende Faktoren aufzuheben vermag, bestehen ? Nach van Ryss
(zit. Hdber) wird durch Temperatursteigerung die Permeabilitat der
Pflanzenzelle fflr geloste Stoffe bedeutend gesteigert. Wir sind daher
wohl berechtigt, das von uns bei Bakterien beobachtete PhAnomen eben-
falls als PermeabilitAtssteigerung zu deuten. Leider muB dieser Begrilf
als inhaltlich nicht mit Sicherheit geklArt betrachtet werden. Es ist
durchaus zweifelhaft, ob wir uns darunter die zunehmende VergroBerung
hypothetischer Zellmembranporen vorzustellen haben, indem die Plasma-
haut, wie Hober sagt, als „Molekiilsieb“ wirkt, oder ob wir an die
Steigerung des LSslichkeitsvermogens der ZellauBenscliicht denken sollen
im Sinne von Overton und Nernst (zit. Hdber). Es kommt aber
fflr die Tatsache der erleichterten und beschleunigten Farbaufnahme bei
WArmewirkung noch eine andere Erklarungsmoglicbkeit in Betracht, so-
bald wir der Annahme einer Siebwirkung der Zellhaut Raum geben.
Durch die Temperaturerhohung konnte der Dispersitatsgrad der Farbe
zunehmen und damit sein Permeieren moglich werden, ohne daB sich
dabei die Beschaffenheit dor Plasmahaut za Andern braucht. Gesetz-
lichkeiten hinsichtlich des Einflusses von WArmewirkungen auf die Dis-
persitAt von kolloidalen Losungen sind bisher nicht bekannt. Zsig¬
mondy ftihrt nur einige Beispiele an. So koagulieren beim Erwarmen
Goldsolen nach Faraday, Platinhydrosolen nach Bredig und kolloi-
dales Silber. UnverAndert bleiben Goldsolen nach Zsigmondy und
Grahams Tonerde. Die Koagulation des EiweiBes ist allgemein be¬
kannt. Nur Gelatine wird feiner dispers. Wir kdnnen dieseu Angaben

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 2.

nor die eine eigene Beobachtung binzufflgen, daB alte Viktoriablaulosung
und Magentarot in Bouillon beini Erwiirmen ihren Dispersitatsgrad ver-
ringern. Die Annahme also, daB eine Erhohung der Dispersitat der
Farbstoffe der Grund dieser scheinbaren Permeabilitatssteigerung sei,
ist recht unwahrscheinlich. Inimerliin muB man sich dessen bewuflt
bleiben, daB Zustandsanderungen der dispersen Phase bei Temperatur-
steigerung mitspielen konnen.

Die gesamten hier beschriebenen Yersuche uber die Anfarbungszeit
bei Temperaturen von 17 — 19° und fiber die „minimale Anfarbungs-
temperatur“ haben nun gelehrt, daB bei der Yermischung einer Bakterien-
emulsion mit einem der erwahnten Farbstoffe eine Reihe von Erschei-
nungen in wechselnder Starke scheinbar in engster Abhangigkeit von-
einander sichtbar werden so: die Anfarbung der Zellen, eine Aen*
derung der Dispersitat der Farbe, die Adsorption des
Farbstoffes an die Zellen und eine Yerklumpung von Bak-
terien und Farbe. In groBter Mannigfaltigkeit abhangig vom Elektro-
lyt- und Kolloidgehalt der Losung, von der Temperatur,
der chemischen Struktur der Farbe und der Dauer der
Einwirkung scheinen alle diese Prozesse fast regellos durcheinander
zu spielen und andererseits sich gegenseitig aufs Eingreifendste zu be-
dingen. Versuchen wir, um das Unbefriedigende, das solche scheinbare
Willkurlichkeit hinterlSBt, zu beheben, irgendwelche Gesetzmafiigkeiten
aufzudecken, so scheint mir dies nur auf die Art moglich, daB wir die
einzelnen oben herausgestellten Erscheinungsgruppen moglichst getrennt
betrachten und die einzelnen Faktoren, die auf sie EinliuB zu gewinnen
scheinen, zu isolieren versuchen. — Am einfachsten liegt dies wohl bei
der Aenderung der Dispersitat der Farbe. Als Kolloid erfahrt der
Farbkorper durch Elektrolyten und entgegengesetzt geladene Kolloide eine
Zustandsanderung im Sinne einer Ausdockung der im Losungsmedium be-
findlichen Farbteilchen. In NaCl, Bouillon und Agar finden sich diese
ausfailenden Korper. AuBerdem kann die Dispersitat des Farbstoffes
durch Warme verandert werden, wie wir das bei der starken Ausflockung
von altem Viktoriablau bei Teraperaturerhohung sahen. Auch frisches
Magentarot, das in Bouillon bei 20° in kaum sichtbaren Kugelchen aus-
fallt, zeigt bei 60° im gleichen Medium groBe, grobe Tropfen. — Wenden
wir uns nun dem Farbungsprozesse zu, so scheint seine BeeinfluBbar-
keit durch den Dispersitatsgrad der Farbe ganz zweifelsfrei. Die
Yerzogerung des Anfarbungsvorganges durch Farbflockung geht eindeutig
aus der bedeutend langeren Zeit und hoheren Temperatur hervor, die zum
EindriDgen der ausgefallten Farben erforderlich sind. Das alte, aus-
geflockte Viktoriablau und Magentarot vermag auch in Traubenzucker keine
Anfarbung hervorzurufen, walirend bei den frischen Farben mit hoher
Dispersitat in 3 resp. 13 Min. die Anfarbung aller Keime eintritt. Ferner
farben Dahliablau, Pyoktanin und Viktoriablau (frisch) den Typhus in
Traubenzuckerlfisung erheblich friiher als in NaCl. Das schon in Trauben¬
zucker stark flockige Anilinviolett braucht in diesem Medium 50° zur
Anfarbung. wahrend bei den tibrigen, feiner dispersen Farben nur 30°
bis hochstens 48° notig sind. Die starke Erhohung der Anfarbungs*
temperatur in NaCl verglichen mit der in Traubenzuckerlosung, ist auch
beim Viktoriablau und Magentarot (frisch), Anilinviolett und Dahlia¬
blau deutlich. Auch die Gegenfiberstellung von altem und frischem
Magentarot in Traubenzucker kann hier angefuhrt werden. Ersteres
braucht 55°, letzteres nur 32° zur Anfarbung. Ein nicht zu den Vio-

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letten z&hlender Farbkflrper, das Chrysoidin, erlautert auch unsere Be-
hauptung. Chrysoidin wird in NaCl leicht, in Bouillon st&rker und Trauben-
zuckerlbsung gar nicht ausgeflockt. Es f&rbt deraentsprechend bei 17—19 0
den Typhus in Traabenzucker krSftig, in NaCl schwach und in Bouillon gar
nicht an. Mit diesen Beispielen ist wohl die Wirksamkeit der Dispersit&t
anf den Anffirbungsvorgang genflgend dargetan. — Der in die Augen spriu-
gende EinfluB der Temperaturerhohung, auf den Anf&rbungsprozeB den
wir uns berechtigterweise als PermeabilitStssteigerung der ZellauBenschicht
denken dflrfen, braucht kaum durch einzelne Daten belegt zu werden.
Es genflgt darauf hinzuweisen, daB eine augenblickliche Anf&rbung aller
Keime mit fast jeder Farbe in fast jedem Medium bei entsprechender
Warmezufuhr erreichbar ist selbst da, wo sie bei Temperaturen von 17
bis 19° erst nach stundenlanger Farbeinwirkung mbglich wird. — Als
3. die Anf&rbung entscheidend beeinflussender Faktor mfissen die Bouil-
lonkolloide angefflhrt werden. NaCl-Losung und Bouillon unterscheiden
sich nur durch den Gehalt der letzteren an kolloidalen EiweiBkSrpern
voneinander. In Bouillon ist nun das Eindringen der FarbkSrper, ver-
glichen mit NaCl, zeitlich stark verzogert und auBerdem sind betr&cht-
lich hohere Temperaturen dazu erforderlich. Die Bouillonkolloide
scheinen hier ahnlich wie Schutzkolloide zu wirken, insofern. sie den
Farbstoff vom Eindringen in den Zellkbrper abhalten, vielleicht indem
sie, wie einhfillende Mantel wirkend, ihn davor schiitzen. Als besonders
aberzeugende Beispiele fiir dieses Faktum seien Dahliablau, Pyoktanin
und Methylviolett genannt, bei denen in NaCl in 10—25 Min. vbllige
Anf&rbung bei 17—19° erzielt wird, wahrend in Bouillon bei gleicherTem-
peratur noch nach mehr als 1 Std. jedes Farbeindringen fehlt. Ebenso
einleuchtend sind die Daten der Anf&rbungstemperatur in NaCl und Bouil¬
lon bei Dahliablau, Gentian a violett, Pyoktanin und Methylviolett.
Das Mittel liegt in NaCl, hier bei 48°, in Bouillon aber erst bei 59°.
- Zuletzt sei nicht vergessen, auf die Wichtigkeit der chemischen
Znsammensetzung der Farbe fflr den AnfarbungsprozeB hinzu¬
weisen. FrQher war fiber diesen Punkt ausgefflhrt, daB bestimmte Ge-
setzm&Bigkeiten hinsichtlich der chemischen Strukturen der brauchbaren
FarbkOrper nicht aufzuzeigen sind, sondern daB die Anwendbarkeit je-
weils rein empirisch festgestellt werden muB.

Wir kommen nun zur ErOrterung des 3. Erscheinungskom-
plexes, der sich bei den obigen Versuchen vor uns abspielt. Das ist
die Agglutination. Die tritt so oft und in so wechselnder Starke
auf, daB die Aufdeckung bestimmter Beziehungen zu anderen Vorgangen
hier besondere Schwierigkeiten bereitet, insofern sie mit alien anderen
Prozessen in der mannigfaltigsten Form verbunden zu sein scheint. Unter-
suchen wir zunSchst ihr Verhaltnis zum Elektrolytgehalt der
LSsung, so ergibt sich eindeutig, daB das Auftreten der Verklumpung
nicht an die Gegenwart eines Elektrolyten gebunden ist. In altem aus-
geflockten Viktoriablau bei 17 — 19° und ebenso in frischem Magentarot
meist ab 19°, bei Anilinviolett bei 17—19° und bei Gen tiana violett von
35° an tritt in Traubenzuckerlosung starke Zusammenballung der Keime
ein; bei altem Magentarot wird sie schon bei 30° kr&ftig. In dieser
Unabhangigkeit von NaCl scheint mir ein wesentlicher Unterschied
zwischen dieser Farbagglutination und der spezitischen Serumaggluti-
nation zu liegen. Andererseits ist nicht zu leugnen, daB durch Elektro-
lytznsatz die Keimausflockung erheblich verstarkt wird, da ihre Zunahme
in NaCl verglichen mit Traubenzuckerlosung, sich bei fast alien Farben

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142

Centr&lbL f. B&kt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

nachweisen lfiBt. Wir kSnnen uns demnach die Farbagglutination wohl
nicht als einen AusflockungsprozeB durcb einen Elektrolyten, wie bei den
sich fihnlich wie ein Suspensionskolloid verhaltenden Bakterienemulsionen
— eine Vorstellung, die filr die Serumagglutination sicherlich ihre Be-
rechtigung hat — denken. Es mfissen andere Vorstellungsweisen d. h.
Vergleiche mit anderen Naturvorgfingen herangezogen werden. Stellen
wir uns vor, daB eine Anzabl der gleichen Farbflocken durch die gleichen
Bakterien adsorbiert wird, so mfissen diese Keime durch die ihnen an-
haftenden Farbteile wie durch ein Bindemittel zusammengehalten werden.
Es ist Agglutination eingetreten. Den verstfirkenden EinfluB des Elektro¬
lyten aber konnen wir uns so der Begreifbarkeit nfiher bringen, daB wir
ihn in Zusammenhang mit der Zunahme der Gr5Be der Farbflockungspro-
dukte bei NaCl-Gegenwart bringen. Bei groBerer Oberflfiche und damit
einem grfiBeren Durchmesser, der schon dem Querdurchmesser der Bak¬
terien nahe kommt oder ihn Obertrifft, kfinnen sich naturgem&B an ein
Farbteilchen me hr Keime anlagern als bei geringerer K5ruchengr6Be,
wobei durch Verbindung solch groBerer „Bakterienbfindel“ auch grobere
Flocken entstehen mfissen. Wem diese Anschauungsweise zu „grob-
mechanisch u ist, der kann wohl mit der gleichen Berechtigung annehmen,
daB durch den Elektrolyten Umladungen der Farbflocken oder Bakterien
eintreten, wodurch vorher der Adsorption entgegenstehende Krfifte auf-
gehoben werden und so mit fosterer Bindung grSBere Haufenbildungen
eintreten kfinnen.

Schon bei diesen Ausffihrungen ist das enge Verhfiltnis von Ag¬
glutination und Adsorption zum Ausdruck gekommen. Die folgenden
Beispiele werden ihre zwangslfiuflge Abhfingigkeit voneinander dartun,
auf die ein strikter Parallelismus zwischen beiden Erscheinungen schlieBen
lfiBt. Krfifte, die den einen Vorgang verfindern, haben eine gleichsinnige
Schwankung des anderen zur Folge. Zunahme oder Abnahme der Ad¬
sorption wird mit einer gleichgerichteten Kurve der Agglutination be-
antwortet. Am auffalligsten tritt dieses gleichsinnige Verhalten bei
dem Vergleich der Vorgfinge in Bouillon bei Gentianaviolett, Methyl-
violett, Pyoktanin und Dahliablau mit denen der gleichen Farben in
NaCl-L5sung hervor. Hier erfolgt starkste Adsorption und Agglutination,
in Bouillon aber fehlt beides gfinzlich. Als Grund fflr das Ausbleiben
beider Erscheinungen in Bouillon sind zweifellos wiederum die Bouillon-
kolloide heranzuziehen. Wir lernen hiermit die 2. Wirkung der Schutz-
kolloide kennen in Form der Verhinderung der Adsorption und
damit ihrer Folge- oder Parallelerscheinung der Agglutination. Wie
hier die Kolloide imstande sind, Adsorption und Zusammenballung ganz
zu verhindern, so zeigt sich in anderen Ffillen, wo die Bakterienflockung
trotz Anwesenheit der EiweiBkorper eingetreten ist, eine Herabsetzung der
Festigkeit der Bakterienverklumpung bei gleichzeitiger StQrung der Ad¬
sorption. So findet sich beim Anilinviolett starke Adsorption und Aggluti¬
nation inNaCl noch bei 60°, wfihrend bei der gleichen Temperatur in Bouil¬
lon nur noch minimale Bakterienverklumpung eintritt. Dabei herrschten
bei 20° in beiden Medien ganz entsprechende Zustfinde st&rkster
Bakterienffillung. Analoge Vorgange entwickeln sich bei Magentarot
(alt) und Viktoriablau (frisch). Beide Male verschwinden Adsorption
und Agglutination in Bouillon bei erheblich niedrigerer Temperatur als
in NaCl. DaB aber auch die Temperatursteigerung allein, unabh&ngig
von der Anwesenheit eines Kolloides, beide Vorgfinge zu findern ver-
mag, lehren die Beobachtungen bei Wfirmeerhfihung beim Viktoriablau

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Reichert, Ueber den Abiauf vitaler Bakterienfarbung etc. 143

(frisch) und Pyoktanin in NaCl. Wahrend beim Viktoriablau bei 31°
and beim Pyoktanin bei 34° in dieser Fliissigkeit scarke Agglutination
and Adsorption anftritt, sind sie beim ersteren bei 55 0 und beim letzteren
bei 42° verschwunden.

Ich fasse nunmehr die zuletzt gewonnenen Ergebnisse zusammen:
Die Dispersitat der Farblbsung hangt ab vom chemischen Charakter
der Farbe, dem Elektrolyt* und Kolloidgehalt der Aufschwemmungs-
flussigkeit und der Temperatur. — Die Anfarbung wird bestimmt
vom Dispersitatsgrade des Farbstoffes, seiner chemischen Konstitution,
der Permeabilitat der Zelle (beeinflufibar durch die Temperatur) und
der Anwesenheit von Schutzkolloiden. Die Farbagglutination tritt
auch ohne Gegenwart eines Elektrolyten anf. Sie wird aber verstarkt
durch die Anwesenheit von Elektrolyten und verandert durch Schutz-
kolloide und Temperaturandernngen. Die Agglutination und Ad¬
sorption sind Parallel vorgange, worans auf einen kausalen Zusammen-
hang zwischen beiden geschlossen werden muB. Die Agglutination ist
wahrscheinlich eine Folge der Adsorption.

Wenn sich durch diese hier mit den uns geiaufigen Begriffsbildungen
wie Agglutination, Adsorption, Dispersitat usw. vorgenommene Analyse
der beobachteten Vorgange auch keine restlose Aufdeckung der Wechsel-
wirkungen dieser komplizierten, dauernd ineinander spielenden Zustands-
anderungen geglQckt ist, so haben sich doch sicherlich einige brauchbare
Richtlinien ftir weiteres Forschen auf diesem Gebiet ergeben.

Anschliefiend seien noch gleichgerichtete Farbeversuche an einer
Hefesorte, die aus Milch isoliert wurde, erwahnt. An diesem Objekt
lafit sich das verschieden schnelle Eindringen der feineren oder grOberen
dispersen Phase der „Violette“ in die gleiche Zelle besonders gut de-
monstrieren. In NaCl-L6sung farben diese Farbstoffe, abgesehen von
Dahliablau und Pyoktanin, die hier augenblicklich in samtliche In-
dividnen eindringen, die Hefe nur zu einem .Teil sofort an, der Rest
leistet der Impragnierung mehrere Min. Widerstand. Die Zeiten, die
bis zur restlosen Anfarbung verstreichen, schwanken nur innerhalb ge-
ringer Grenzen und sind fiir die einzelnen Farben charakteristisch. Man
kann deutlich eine allmahliche Steigerung des Farbtones beobachten.
In den meisten Fallen geht der vollen Farbaufnahme ein Stadium un-
vollstandiger Anfarbung, bei dem sich ein ovoider zentraler Teil (Kern ?)
von einem dunklen, peripheren Mantel abhebt, voran. Dies Verhalten
in NaCl entspricht mitbin durchaus den Eigenschaften des grampositiven
Anthrax unter gleichen Bedingungen bei verlangsamtem Abiauf.

Farbt man die Hefe aber in Traubenzucker, so sind bei alien Violet-
ten samtliche Zellen augenblicklich von Farbe durchtrankt. Die
Geschwindigkeitssteigerung des Permeierens bewirkt, daB bei den vorher
nor langsam eindringenden Farben die Anfarbungszeit von mehreren
Min. auf fast 0 herabgesetzt ist. Beim Viktoriablau, das in NaCl selbst
nach 10 Min. nur in ganz wenige Zellen eindringt (wahrscheinlich ab-
gestorbene), tritt im gleichen Zeitraum eine Anfarbung aller Zellen ein.

Vergleichen wir nun kurz die Einfldsse, die bei der Anfarbung von
nnseren wich tigs ten Untersuchungsobjekten, dem Anthrax und Typhus,
als ausschlaggebend erkannt wurden, so zeigt sich, daB das Eindringen

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144 Ontralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

des Farbstoffes beim Typhus von der chemischen Eonstitution der Farbe,
seiner Dispersitat (bestimmt durch Elektrolyt- und Kolloidgehalt der
L5sung), der Temperatur (als Zellpermeabilitat veranderndes Moment)
und der Anwesenheit von Schutzkolloiden abhangt. Beim Anthrax aber
wird die Anfarbung fast ausschlieBlich durch den chemischen Charakter
der Farbe bestimmt, wahrend sie von den anderen beim Typhus wirk-
samen Faktoren weitgehend unabhangig ist. Nur durch Bouillonkolloide
kann sie in einzelnen Fallen verhindert werden.

Nachdem so die Grundlage fflr eine V. F. der Bakterien ge-
schaffen war, konnte an die Untersuchung der Wirkung dieser
Farben auf den LebensprozeB der Keime herangetreten
werden. Die Klarstellung der biologischen Wirkung der „Violette“ auf
den Anthrax bot erhebliche und unerwartete Schwierigkeiten. Einige orien-
tierende Versuche ergaben, daB der Anthrax von 18 Std. das Gentiana-
violett in einer Konzentration, die alle Stabchen sofort intensiv anfarbt
(0,051 Proz.), 24 Std. mit nur geringer Schadigung der Keimfabigkeit er-
trdgt. Magentarot konnte sogar in Starke von 0,25 Proz. 48 Std. zur
Einwirkung gebracht werden, ohne daft sich eine nachtragliche Wirkung
beobachten lieB. Diese Versuche wurden so durchgefiihrt, daB 1,5 ccm
einer Anthraxemulsion mit 0,5 ccm Gentiana violett von 0,25 Proz.
Starke resp. mit 0,5 ccm Magentarot von 1 Proz. Starke vermischt, und
dann nach verschiedenen Zeiten 1 Tropfen dieses Gemisches auf eine
Agarplatte mit dem Spatel ausgestrichen wurden. Das gleiche Ergebnis
hatten 24-sttind., bei gleicher Versuchsanordnung vorgenommene Behand-
lungen mit Methylviolett (0,2 Proz.), Anilinviolett (0,7 Proz.), Dahlia*
blau (0,15 Proz.) und Pyoktanin (0,12 Proz.). Die hier erprobten Farb-
konzentrationen sind, wie anfangs gesagt, die niedrigsten, die den An¬
thrax augenblicklich in physiolog. NaCl-Losung anfarben. — Eine starke
Resistonz steht hier einer groBen Empfindlichkeit gegenflber, wie spatere
Ergebnisse beim Zusatz der gleichen Farben zum Nahrboden zeigten.
Hier gentlgt ein Farbgehalt des Nahrsubstrates von ca. 0,000625 Proz n
rnn jedes Wachstum auszuschlieBen. Dies paradoxe Verhalten lieB sich
durch Heranziehung der Beobachtung, daB die Sporen bei der Vital-
farbung scheinbar farblos bleiben, einer Erklarung naher bringen. Es
war zu vermuten, daB nur die vegetative Form vom Farbstoff abgetdtet
wurde, wfthreud die farblosen Sporen ungeschadigt blieben. Sie keimen
daher bei Aussaat auf normalen Nahrboden aus. 1st aber der Farbkorper
dem Niihrsubstrat zugesetzt, so kann er, sobald die Sporen in die
Stiibohonform iibergehen, seine Giftwirkung entfalten and sie entweder
abtbten oder doch eine weitere Teilung verhindern. Die experimentelle
Richtigkeit dieser Erklarungsmoglichkeit war jetzt die nachstliegende
Forderung. Die dahin gerichteten Versuche konnten 2 W T ege ein-
schlagen: Einmal lieB sich durch einen AnalogieschluB wahrscheinlich
machen, daB die Spore der farbresistente Bestandteil ist, indem gram¬
positive sporenfreie Mikroorganismen der gleichen Behandlungausgesetzt
wurden wie vorhor der Anthrax. Oder es konnte direkt durch ge-
sonderte Beobachtung beider Lebensformen des Milzbrands der Beweis
erbracht werden. Beide Wege wurden experimentell durchgefiihrt.

Friihere rntersuchungen hatten das vitalfarberische ahnliche Ver¬
halten der Hefe und des Anthrax beleuchtet. Die Eignung dieses
Saecharomyzeten zum Testobjekt in dieser Frage war hiermit gegeben.

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

145

Auf Grand dieser Geraeinsamkeit kam folgende Versuchsreihe zur Aus-
fflhrung. 18-sttind. Hefekulturen wurden mit Traubenzuckerlosung vora
Agarrdhrchen abgeschwemmt, dann lraal abzentrifugiert, von neuem mit
Traubenzuckerlosung aufgefiillt, mit den „Violetten“ (in gleicher Starke
vie sie vorher beim Anthrax zur Anwendung kamen) versetzt und
1 Tropfen des Geraisckes auf eine Agarplatte mit dem Spatel ausge-
strichen. Die Anfarbung muBte in elektrolytfreier L6sung ausgefiihrt
werden, da, wie erinnerlich, nur hier ein augen b lick liebes gleich-
maBiges Eindringen der Farbstolfe in alle Zellen eintritt.

Das auf diese Art erzielte Ergebnis konnte als recht eindeutig be-
zeichnet werden. Schon nach 1 Min. Farbwirkung tritt hier vollige
Aufhebung der Keimfahigkeit ein. Sehr bezeichnend ist die weniger
eingreifende Wirkung allein des Anilinvioletts, das — wie fruher ge-
zeigt — auch in elektrolytfreier Lbsung einen ziemlich groben Dis-
persitatsgrad aufweist. Hierdurch ist seine Eindringungsgeschwindigkeit
und parallel damit seine Hemmungswirkung beeintrachtigt. Es totet
namlich erst nach 30 Min. alle Hefezellen. Es bestand somit kein
Zweifel, daB ein sporenfreier, dem Anthrax in vitalfarberischer Beziehung
nahestehender Mikroorganismus fast augenblich durch die Violette aufs
schwerste geschadigt wird; und der SchluB, daB die Sporen des Anthrax
die farbfeste Komponente sind, war erheblich gestutzt.

Der 2. oben angeftihrte Beweisweg bot groBe experimentelle
Schwierigkeiten. Eine getrennte Beobachtung von Stabchen und Sporen
WQrde anfangs dadurch versucht, daB 5-stUnd. Anthraxkulturen, von denen
eine vollstandige Sporenfreiheit angenommen werden konnte, in gleicher
Weise wie vorher die 18-stOnd. Milzbrandkulturen den „Violetten u zur
Einwirkung ausgesetzt wurden uud dann auf Platten zur Aussaat kamen.
Eine Hemmungswirkung der Farben war auch in Form einer deutlichen
Kolonienverminderung der mit vorbehandelten Keimen besaten Platten
verglichen mit den Kontrollen nicht zu verkennen. Doch blieb die er-
wartete und nur eindeutig beweisende Sterilitat der mit farbbehandelten
Keimen beschickten Platten aus. Die zu losende Frage hatte sich damit
Bogar kompliziert. Denn es stand nunmehr zur ErwSgung:

1) wird nur ein Teil der Stabchen geschadigt?

2) sind die in Bildung begriffenen Sporen auch schon farb-
resistent?

3) enthalten die jungen 5-st(ind. Milzbrandkulturen noch alte, unaus-
gekeimte Oder schon frisch entwickelte Sporen, die sich als farbfest erweisen ?

Mit der unter 2) genannten Moglichkeit muBte unter Berucksichtigung
der Untersuchungsergebnisse von Wauschkuhn (Centralbl. f. Bakt.
Abt. I. Orig. Bd. 84. 1920. S. 31) besonders gerechnet werden. Der Autor
hatte festgestellt, daB schon in 5-stund. Milzbrandkulturen die ersten
Zeichen der Sporulation in Form von feinen, lichtbrechenden Kbrnchen
erscheinen. DaB diese erste zu Sporenmaterial umgebildete Protoplasma-
stelle, die sich farberisch ebenso verhalt wie die ausgereifte Spore, auch
die gleiche Kesistenz gegen die Giftwirkung der Farbe besitzt, lieB sich
nicht von der Hand weisen. Sehen wir doch in der Umwandlung des Milz-
brand in die resistente Dauerform die Antwort des Stabchens^uf Schadlich-
keiten. Die nach Uebertragung des gefarbten Kulturmaterials auf den
neuen Nahrboden v6llig ausreifenden Sporen wurden dann den Aus-
gangspunkt fur eine Kolonie, die uns keimfahige vegetative Formen
vortauscht, bilden. — In ahnlicher Weise konnte die 3. der oben ge¬
nannten MSglichkeiten AnlaB zu Fehlschliissen geben. Wir besitzen
fc.r*te Abt. Orig. Bd. 87 . Heft 2. 10

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146

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2.

keine genauen Kenntnisse darflber, bis wann alle alten, zur Aussaat ge-
brachten Sporen ausgekeimt sind. DaB sich Each 4—5 Std. noch unver-
anderte Dauerformen finden, wage ich nicht auszuschlieBen; auBerdem
aber kann solch juDgo Kultur auch ganz frisch entwickelte Sporen ent-
halten. Dies tritt dann ein, wenn das Aossaatmaterial Stabchen mit
beginnender Sporulation enthait. In der 5-stflud. Bebrfitungszeit voll-
zieht sich dann die Ausreifung der Sporen und die junge Kultur ent¬
hait damit ausgereifte Dauerformen. Daraus geht hervor, daB es nicht
moglich ist, ein Kulturmaterial zu erhalten, in dem sich mit Sicherheit
nur vegetative Formen befinden. Wir konnen durch verschieden
lange Brutzeiten nur erreichen, daB die eine oder andere Formflberwiegt.
— Nach diesen kritischen Erwagungen und den obigen Erfahrungen
muBte die ganze Methode als unbrauchbar zur Losung der aufgeworfenen
Frage fallen gelassen werden.

Es war damit klar geworden, daB eindeutige Ergebnisse nur durch
ein Versuchsverfahren, das die direkte und getrennte Beobachtung der
einzelnen Bakterienzellen oder Sporen wahrend des Wachstums zu-
lieG, erreichbar sein konnten. Die einfachste, diesen Ansprfichen gerecht
werdende Versuchsanordnung bot sich in Form des h&ngenden Agar-
tropfens. Zu seiner Herstellung wurde in flflssigem Agar von 45—50®
Milzbrandmaterial ausgesflt, gut umgeschflttelt, 1 Tropfen davon auf ein
Deckglaschen gebracht und dieses wie ein hangender Bouillontropfen
auf einem hohl geschliffenen Objekttrager mit Vaseline befestigt. Nacb
Einstellung einer Zelle mit der Oelimmersion und genauer Aufzeichnung
des Bildes kam das Mikroskop mit dem festgeklemmten Objekttrager
in den Brutschrank. Bei stoBfreiem Transport der ganzen Anordnung
laBt sich auch die geringste Verschiebuug des eingestellten Objektes ver-
meiden und die Neubeobachtung ist jederzeit mflglich. Mit dieser Methode
wurde zunachst eine erhebliche Anzahl von Untersuchungen an nicht
mitFarben vorbehandeltem Anthrax gemacht. Die zahlreichen,
so gewonnenen Resultate gestatteten die Feststellung einer weitgehen-
den Uebereinstimmung des formalen Entwicklungsmodus der Milz-
brandzellen. Das GesetzmaBige sei hier kurz als Grundlage fflr die
Ausdeutung der spateren Versuche wiedergegeben: Einzelne, nicht mehr
mit anderen zu Faden verbundene Stabchen erweisen sich fast stets
nicht mehr als teilungsfiihig. Das beste Beobachtungsobjekt ist ein aus
mehreren Einzelzellen bestehender Faden von gauzlich homogener, gut
lichtbrechender Beschaffenheit, ohne daB eine Gliederung an ihm kennt-
lich sein darf. Segmentierung, Kornchen- und Tropfenbildungen sind
Zeichen der Degeneration. Faden oder Zellen mit diesen Merkmalen
sind nicht mehr entwicklungsfahig. Oft beobachtet man an den FSden
nur eine feine, fast staubformige Trflbung oder die Andeutung einer
Trennungslinie in einzelne Glieder. Im Verlauf weniger Std. werden die
feinen Kornchen bei Brutschranktemperatur groBer und zahlreicher, und
bald ist ein scholliges Stadium erreicht. Bei weiterer Verfolgung des
Vorganges verlieren sich die Konturen der Zelle immer starker, bis eine
scheinbare Auflosung das Objekt der weiteren Wahrnehmung entzieht.
In selteneren Fallen treten anfangs trotz leichter Trflbung die Zeichen
der Zellvermehrung auf, dann aber setzt der oben geschilderte Zerfalls-
prozeB ein. Die Wachstumserscheinungen des unversehrten Stabchens
beginnen in der Schlaugelung des anfangs mehr gestreckt, nur in Bacben
Bogenformen verlaufenden Fadens. Schon nach 1 Std. kann diese Ver-
flnderung deutlich werden. Es folgt in den michsten 6 Std. eine an

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Zahl and AusmaB zunehmende Schleifenbildung, die in meist viel-
fach verschlungene Knauelbildungen ttbergeht (Fig. Nr. 1—3). Eine
Segmentierung in Einzelglieder wird aber auch jetzt niemals sichtbar.
In anderen Fallen wieder kommt es zur Bildung mehr langer, glatter
Schleifen in ziemlich paralleler Anordnung (Fig. Nr. 4). Diese Form-
bildnng kann wohl als das Ausgangsstadinm der Zopffiguren angesehen
werden, die in spateren Etappen vora Rand der Kolonien ausstrahlen
and ein Charakteristikum der Milzbrandkolonie darstellen. Im einzelnen

wire dieser Vorgang so zu denken, dafi sich eine ziemlich parallele

Schlingenbildung mit der Langs-
richtung senkrecht zur Achse des
Ursprungsfadens entwickelt. Diese
SchlSngelungen erhalten im wei-
teren Verlauf der Entwicklung neue
Faltungen, die mit ihrer Langs-
achse wieder mit dem Ausgangs-
faden parallel laufen und sich in
gleicbgerichtetem Zuge in dichten
Windungen aneinander schmiegen
(Fig. Nr. 5). — Der Grund fflr die
alle diese Entwicklungsstadien be-
herrschenden,sichimmerweiterkom-
plizierenden Schlingenbildungen ist

scheinbar ein mechanischer. Jedes Fig. l. l unbebrflteter Faden, 2 nach
Gued des Fadens teilt sich und 3 1 j. Std. Brutzeit, 3 nach 5 Std. Brutzeit.

nimmt damit an Lange zu. Jedoch

nur die endstandigen kdnnen unbehindert vorrUcken, die mittleren mtissen
seitlich ausweichen. Da aber nie die Kontinuitat des Fadens durch-

brochen wird, springen die Teilungsprodukte nicht als Baikchen hervor
sondern fflhren zur Entstehung von Schleifen.

Fig. 2. 1 unbebrUteter Faden, 2 nach 2 1 /, Std. Brutzeit, 3 nach 6 Std. Brutzeit.

Wesentlich verschieden von diesen hier geschilderten Prozessen
gestaltet sich die Sporenauskeimung. Nach 1—2 Std. Brutzeit fallt die
stark verminderte Erkennbarkeit des die Spore umgebenden Protoplas¬
mas auf. GrSBe und Glanz der Sporen nimmt dagegen fortschreitend
zn. Allmahlich wird ein Stadium erreicht, in dem die Spore eine langs-
ovale Gestalt angenomraen hat, die flieBend unter Abnahme ihres Licht-

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

brechungsvermogens durch Langswachstum wieder in eine Stabchenform
Qbergeht. Die jungen, vegetativen Formen scheinen a Langen ihre Ur-
sprungsstabchen zu iibertreffen, denn sie
haben in dem durch Auflbsungder „Mutter-
zelle“ entstandenen Abschnitt nicht aus-
reichend Platz, sie verschieben sich „dach-
ziegelartig u gegeneinander (Fig. Nr. 6-8).

Fig. 3. 1 unbebriiteter Faden,

2 nach 3 ‘/ t Std. Brutzeit.

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149

An die Auskeimung schliefit sich unaufhaltsam die weitere Teilung an,
wodurch spitzwinklige und Parallellagerungen der neu entstandenen Faden
sich ausbilden (Fig. Nr. 7—8). Das Bild einer solchen 6-stflnd., aus aus-
gekeimten Sporen hervorgegangenen Neubildung ist grundverschieden von
dem, das sich nach 6-stflnd. Bebrfltung eines fortpflanzungsfahigen Fadens
ergibt. Beide sind auf den ersten Blick unterscheidbar (vgl. Fig. 2 u. 8).

Fig. 8.

Fig. 6 u. 7. 1 unbcbruteter Faden mit noch nicht voli entwickelten Sporen. 2 nach

2 Std. Brutzeit. Bei c in Auskeimung begriffene Spore. Bei d leichte Abknickung.

3 nach 6 Std. Brutzeit. Bei a, b und e Sporen ohne Zeichen der Auskeimung. Alle
anderen Sporen sind zu Stiibchen entwickelt. 4 nach 7 Std. Brutzeit. Sporen bei a
and b kleiner als vorher, bei c verschwunden. Alle Stiibchen sind erheblich langer und
haben sich bei e und d schon geteilt. 5 nach 8 Std. Brutzeit. Sporen bei a und b
*ind weiter unentwickelt. Stiibchen bei d und e haben sich verdreifacht, andere ver-
doppelt. Es ist Parallellagerung eingetreten.

Fig. 8. 1 unbebriiteter Faden mit voll entwickelten Sporen, 2 F'aden nach 3'/, Std.

Sporen sind ausgekeimt; 3 nach 6 Std. Starke Vermehrung der frisch entwickelten
Stiibchen.

Nachdem somit das morphologisch Erkennbare des normalen Fort-
pflanzungsprozesses der Milzbrandzelle festgestellt war, kormte von einer
ffesicherten Grundlage aus an die Beobachtung der duroh Farbwirkung
beeinfluBten Keime gegangen werden. Doch stellten sich schon bei

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den ersten Versucben Schwierigkeiten herans, die znr Anfgabe oder doch
wenigstens zur weitgehenden Abanderung auch dieser Methode notigten.
Die der Farblbsung ausgesetzt gewesenen Bakterien adsorbieren nSm-
lich an ihrer Oberflache eine derartige Menge des Farbstoffes, daB da-
durch der Nahrboden, sobald die Keime ihm in ftir die Beobachtung
ausreichenden Mengen zugesetzt werden, deutlicb angefarbt wird. Bei
der frtlher festgestellten groBen Empfindlichkeit des Anthrax gegen
minimalen Farbzusatz zum Nahrsubstrat konnte aber an ein einwand*
freies Rcsultat unter solchen Umstanden nicht gedacht werden. Die
Befreiung der Keime von den Farbresten muBte unter alien Umstanden
erreicht werden, wenn die Methode arbeitsfabig bleiben sollte. Znr Er-
reichung dieses Zieles wurden folgende V T ersuchsanordnungen durchprobiert.

1) Dem Farbstoffbakteriengemisch wurde zur Adsorption der Farbe
Tierkohle zugesetzt und anschlieBend die Abfiltrierung der Keime durch
FlieBpapier versucht. Das miBlang, da auch die Zellen durch die Tier*
kohle zuriickgehalten wurden. Sie werden offenbar selber adsorbiert,
wie das ja bei Typhus und Coli von Michaelis beobachtet worden ist.

2) Die Trennung der zum Farbstoff-Bakteriengemisch zugesetzten
Kohle von den Keimen wurde durch kurzdauerndes Zentrifugieren bei
geringer Tourenzahl versucht in der Hoffnung, daB die viel groBeren
Kohleteilchen sich erheblich schneller absetzen wflrden als die kleineren
Bakterien. Auch hier trat ein MiBerfolg ein, da die Kohleteilchen die
Bakterien, deren Ausschleuderung sonst erst bei groBer Geschwindigkeit
gelingt, schnell mit zu Boden rissen.

3) wurde der Versuch gemacht, durch fortgesetztes Ueberspfllen
der Keime mit Wasser in einem fur die Zellen undurchlassigen Filter
die Reinigung von der Farbe zu erreichen. Starkeres Pergamentpapier
erwies sich als undurchlassig fur den Milzbrand. Wasser aber konnte
durch Druck hindurchgepreBt werden. Das Farbstoffbakteriengemisch
wurde nunmehr in einen mit Pergamentpapier armierten Glastrichter
gegossen, dessen AbtluBrohr in eine Flasche fflhrt, in der durch die
Wirkung einer Wasserstrahlpumpe ein Vakuum hergestellt wurde. Die
Absaugung der Farblosung gelang auch anfanglich, doch wurde das
Papier vor volliger Auswaschung der Farbe infolge Verstopfnng durch
Farbstoffteilchen undurchlassig. Der erwiinschte Erfolg lieB sich ant
diesem Wege mithin auch nicht erreichen.

4) wurde fortgesetztes Abzentrifugieren aus immer von nenem hin-
zugesetzter physiol. NaCl-Losung versucht. Eine ausreichende Ent-
fernung der Farbe gelang hiermit aber erst nach 10—12maligem Aus-
schleudern. Nach diesen schweren mechanischen Insulten waren jedoch
alle Faden in Einzelglieder zerrissen. Diese eignen sich nach dem Vor-
hergesagten nicht zur Beobachtung, da einzelne Keime sich als nicht
melir entwicklungsfahig erwiesen hatten. Es konnten nunmehr solche,
die infolge eines primSr degenerativen Zustandes aus dem Verbande
gelost waren, von solchen, die mechanisch zerrissen waren, nicht unter-
schieden werden. Es mufite dem Zufall iiberlassen werden, ob man ein farb-
behandeltesund nur mechanisch herausgerisseneslndividuum vor sichhatte
oder ein primar degeneriertes. Die Entscheidung, ob bei der betreffenden
Zelle beim Ausbleiben des Wachstums eine Farbschfidigung vorlag, konnte
mithin niemals mit Sicherheit getroffen werden. Damit muBte auch von
dieser Versuchsanordnung als unbrauchbar Abstand genommen werden.

Der nachstliegende Ausweg schien mithin der, die Verh&ltnisse der
gewbhnlichen Agarplatte, auf der ja ein Wachstum gef&rbter Bakterien

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bukterienfarbung etc.

151

nachgewiesen war, in solch kleinen Dimensionen nachzubilden, dafi eine
fortlaufende mikroskopische Beobachtung einer eintnal eingestellten Zelle
moglich wurde. Die diesen Forderungen geniigende Apparatur wurde
folgendermaBen ausgefflhrt: Auf eiuen ObjekttrBger wurden 4 Tropfen
flflssigen Agars gebracbt und mit der Platinose zu einer etwa 1 mm
dicken Schicht ausgestrichen. Nach dem Erstarren wurden die Rander
mit dem Messer entfernt, so daB eine quadratische, scharfrandige Agar-
scheibe zurGckblieb, die sich mit einem Deckglaschen 18 X 18 mm be-
decken liefi. Auf diese Agarplatte wurde das Bakterienmaterial in mini-
maler Menge mit einer feinsten Platinnadel ausgestrichen. Das danach
darflber gelegte Deckgl&schen erhielt durch UmgieBen der Rander mit
flfissigem Wachs seine Fixation, und die Agarschicht war gleichzeitig
vor Austrocknung geschfitzt. Diese Versuchsanordnung sei kurz „Wachs-
platte“ genannt. Die auf diese Weise vorgenommenen Beobachtungen
von normalem Milzbrand, wobei wie beim hangenden Agartropfen das
eingestellte Mikroskop in den Brutschrank gesetzt wurde, zeigten die
gleichen gaten Ergebnisse wie die zuerst verwandte Agartropfenmethode.
Faden und Sporen lieBen gleich gutes Wachstum erkennen. Bei der
Verwendung geffirbten Materials, wobei zuerst 5-sttind. Kulturen zur
Beobachtung der vegetativen Formen verwandt wurden, ergaben die Ver-
snche aber Qbereinstimmend das Ausbleiben jeder Wachstums-
erscheinung. (Die Farbkonzentration der Violette waren die gleichen
wie bei den zuerst bescbriebenen Kulturversuchen auf S. 144, doch
waren die verwandten Mengen geringer. Zu 0,5 Bakterienemulsion
wurde 0,17 ccm Farbe gefiigt und das Gemisch nach 5 Min. bis auf
10 ccm mit physiol. NaCl-Losung aufgefiillt. Die hierbei eintretende
VerdOnnung der Farbe auf das ca. 60-fache konnte wolil einer Auf-
hebung der Farbwirkung gleichgesetzt werden. Nach erneutem Aus-
schleudern wurde eine Nadelspitze Material auf die Agarschicht aus-
gesSt.) Der Ablauf des Vorganges war folgender: Nach 3—4 Std. stellte
sich Verblassen der Konturen und Kornerbildung ein. In diesem Zu-
stande blieb das Objekt Oder wurde nach etwa 10 Std. unsichtbar.
Nichts stand dem im Wege, diese Feststellungen als FarbstotfschSdi-
gnngen durch die AnfSrbung zu deuteu und nicht als Hemmung durch
Farbeverunreinigung des N&hrbodens, zumal sich bei Verwendung dieser
minimalen Mengen von Aussaatmaterial nie auch nur eine spurenweise
Verffirbung des Nahrbodens bemerkbar gemacht hatte. Die Verbaltnisse
schienen mithin denen bei den gebrfiuchlichen Kulturplatten durchaus
analog. Im AnschluB daran kamen 20-sttind. Milzbrandkulturen nach
gleicher Anf&rbung, wie eben genannt, zur Beobachtung, um das Verhalten
der Sporen zu studieren. Wiederum war das Resultat flberraschend.
Anch hier konnte k einer lei Wachstumsvorgang erkannt werden.
Die Sporen blieben regungslos. Die einzige Veranderung bestand in
dem allm&hlichen Verblassen des eingestellten Fadens. Dieses Ergebnis
widersprach den Erfahrungen, die auf der gewbhnlichen Platte gewonnen
waren, wo trotz langsttindiger Farbwirkung dichte Kolonien aufschossen,
aufs scharfste. Von Stabchen oder Sporen muBte doch das auf der
Platte beobachtete Wachstum. ausgegangen sein. Eine von beiden
Formen blieb mithin trotz der Farbwirkung sicher vermehrungsfahig!
Daran konnte nicht gezweifelt werden. Hier aber schienen beide
keimungsunfahig. Der Grund fur dies fast unerklarliche Verhalten
konnte nur in Verschiedenheiten der Lebensbedingungen auf der Wachs-
platte und der gewbhnlichen Platte gesucht werden. Der einzig fest-

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origiuale. Bd. 87. Heft 2.

stellbare Unterschied bei beiden Zuchtungsverfahren lag in derMenge
des zur Keimung zur Verfugung stehenden Sauerstoffes. Bei der
Wachsplatte lageu beinahe anaerobe Verhaltnisse vor. Der Anthrax aber ist
ein obligater Aerobier. Andererseits hatten nun die Kulturversuche mit
unvorbehandeltem Milzbrand auf der Wachsplatte ein einwandfreies
Wacbstum seiner beiden Lebensformen ergeben. Fiir das nicht ange-
f&rbte Bakterium muBte also der Sauerstoffgehalt der Wachsplatte aus-
reichen. Da man nun berechtigt ist, die Spore als die gegen Schadi-
gungen aller Art resistentere Form des Milzbrandes anzusehen, und da
die Versuche mit 5-sttind. Kulturen, die nach Anf&rbung auf gewdhn-
lichen Platten ausgesat wurden, eine ScMdigung der St&bchenform fflr
wahrscheinlich gemacht hatte, so schien der richtige SchluB aus diesen
Erfahrungen der, daB die angefarbte Spore bei ausreichendem
Sauerstoffgehalt noch auskeimt, wahrend sie bei einem relativen Sauer-
stoffmangel, der von der nicht angeiarbten gut ertragen wird, dazu
nicht mehr imstande ist.

Eine Verbesserung der Sauerstoffzufuhr aber lieB sich auf der
Wachsplatte technisch nicht durchfiihren. Damit war auch die Un-
brauchbarkeit dieser Versuchsanordnung erwiesen. Denn es gait nicht
zu zeigen, daB unter gewissen Umst&nden weder die angef&rbten Stfib-
chen noch die farbbehandelten Sporen mehr wachsen, sondern es muBte
entschieden werden, welche Lebensform sich unter optimalen Bedingungen
farbresistent verh&lt. Die Forderung einer Neuanordnung der Versuchs-
bedingungen, die alle bisherigen Mangel vermied, war damit zwingend
geworden. Folgenden Ansprflchen gait es nunmehr zu geniigen:

1) Die Menge des verwandten Aussaatmaterials muBte so gering
sein oder so weit von Farbe gereinigt sein, daB keine schfidigenden
Farbbeimischungen zum Nahrboden entstehen.

2) Das zu beobachtende Objekt muBte moglichst nahe an der Front-
linse liegen, damit eine Betrachtung mit starken Objektiven moglich war.

3) Es muBte ausreichend Sauerstolf vorhauden sein.

4) Eine Eintrocknung der Agarschicht durch ungehinderten Luft-
zutritt durfte nicht entstehen.

Nach langeren Versuchen glQckto es, ein Zuchtungsverfahren aus-
zuarbeiten, das mit Ausnahme einer der oben aufgestellten Postulate
den erforderlichen Anspriichen geniigte. Es gelang unter Beruck-
sichtigung aller anderen Bedingungen nicht, dem Punkt 2 obiger For¬
derung gerecht zu werden. Die Beobachtung litt daher von vornherein
schwer unter dem Nachteil, daB nur mit schwachen Objektiven gearbeitet
werden konnte, und die erforderliehe VergrdBerung durch die Anwen-
dung starker Okulare erreicht werden muBte. Es ist leicht einzusehen,
daB darunter die Erkennbarkeit zarter, farbloser Objekte — denn die
Bakterien erscheinen trotz ihrer vorherigen Anf&rbung im Agar vollig
ungefarbt — leiden muBte. Die jetzige Methode bestand in der Ver-
wendung einer kleinen Glasschale von etwa 2 cm Durchmesser und etwa
0,5 cm Hohe, in die eine Agarschicht von 2—3 mm Dicke gegossen
wurde. Diese wurde mit der Platinnadel beimpft, auf einen Objekttr&ger
gesttilpt und durch UmgieBen eines Wachsrandes befestigt (Fig. 9). Die
Ziichtung und Beobachtung von Stabchen gelang auch wohl auf diese
Art, doch war die Deutlichkeit der Sporen bei Verwendung von ZeiB-
Objektiv A und Okular 5 oder Kompensationsokular 18 so beeiDtr&ch-
tigt, daB von weiteren Versuchen dieser Anordnung Abstand genommen
wurde.

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc. • 153

Der Forderung des Punktes 2 konnte endlich durch folgende Aende-
rung genflgt werden: Das Schaichen wurde in aufrechter Stellnng init
Wachsauf dem ObjekttrSger befestigt und sein Boden mit Wasser bedeckt.
Als Nahrboden diente 1 Tropfen Agar, der auf einera Deckglaschen (20:
28 mm) mit der Platinbse zur Dflnne eines Papierblattes ausgestrichen
nnd dann beimpft wurde. Das Wasser im Boden des Scbaichens verhin-
derte seine Austrocknung. Nach Bestreichen des SchSlchenrandes mit Vase¬
line wurde das Deckglaschen aufgedriickt. Diese Apparatur lieB wieder
das Arbeiten mit der Oelimmersion zu (Fig. 10). Alle Schwierigkeiten
waren hiermit aber auch nicbt Uberwunden. Die ZQchtung und Beob-
achtung der Stabchen gelang wohl eiuwandfrei, doch schienen die frei-
gewordenen Sporen im Gesichtsfeld uraherzugleiten und keimten nicht
zn vegetativen Formen aus. Es handelte sich hier wohl um ein Schwimmen
in einer feinen Wasserschicht, die sich durch Verdunstung des Wassers
im Boden des Schaichens auf der AgaroberflSche niederschlug. Die Aus-
keimung aber blieb aus, weil der Nahrstoffgehalt dieser Wasserschicht
offenbar zu gering war. Zur Ausschaltung dieses Fehlers mufite die
zur Aussaat verwandte Bakterienmasse auf dem Nahrboden fixiert wer¬
den. Dies lieB sich nach einigen verfehlten Versuchen am einfachsten
dadurch erreichen, dafi das Kulturmaterial mit dem auszustreichenden

Afl Ag Wa

Fig. 9. Fig. 10.

Fig. 9 u. 10. A Objekti v, D Deckglas, Ag Agarschicht,

W Wachsrand, Wa Wasser, 6' Schaichen, 0 Objekttrager.

Agartropfen vermischt wurde. Eine Verminderung der Sauerstoffzufuhr
war bei der minimalen Dicke der Agarschicht nicht zu beffirchten. Die
Versuchsergebnisse waren jetzt befriedigend. Die Sporen verAnderten
nicht mehr ihren Ort und keimten zu Faden aus. Doch schien das
Wachstum nicht so tippig wie bei der Anwendung des h&ngenden Agar-
tropfens und der Wachsplatte. Der Grund hierfiir dflrfte wohl mit
Recht in einer Quellung der Agarschicht durch aufgenommenes Kon-
denswasser gesucht werden, wodurch die N&hrstoffkonzentration nicht
unwesentlich herabgesetzt wurde. Es gait also, diesen N&hrstoffmangel
auszugleichen, was durch Zusatz von 2,5 Proz. Traubenzucker zum Agar
geschah. Die Untersuchungsergebnisse waren nunmehr einwandfrei.
Ein krAftiges Wachstum von Stabchen und Sporen lieB sich beobachten.
Hiermit war endlich eine alien Forderungen genugende Untersuchungs-
methode hergestellt l ).

1) Zusammenhangende Beschreibung der Methode: Ein Glasschalehen von etwa
2 cm Durchmesser una etwa 0,5 cm Hohe wird durch Wachs auf einen Objekttniger
befestigt, sein Boden mit Wasser bedeckt und der Rand dick mit Vaseline bestrichen.
Das zu untersuchende Kulturmaterial wird in miuimalcr Menge, d. h. etwa V ?0 Oese
mit 3 ccm 2,5 Proz. Traubenzuckeragar vermischt und vom Gemisch 1 Tropfen auf
einem Deckglaschen zu Papierdiinne ausgestrichen. Das Deckglas wird dann auf den
Rand des tichalchens aufgedriickt, so dafi es iiberall luftdicht abschliefit. Bei Ver-

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Centralbl. f. Bakt. etc. Abt. I. Originate. Bd. 87. Heft 2.

Die Versuche mit farbbehandeltem Milzbrand fielen jetzt ebenfalls
ganz eindeutig aus. Es wurden die Violette in der gleichen Starke wie
auf S. 144 genannt, und auBerdero Malachitgrun 0,2 Proz., Brillantgrun
0,1 Proz., Chrysoidin 0,3 Proz. bei 5 Min. dauernder Einwirkung gepruft.
StSbchen aus 4—5-stiind. Kulturen liefien jedes Wachstum vermissen.
Nach einigen Stunden Brutzeit traten nur die bekannten Degenerations-
erscheinungen in Form kbrnigen Zerfalles hervor. DiePrflfungder Sporen
wurde an 20 Std. altem Kulturmaterial vorgenommen, das reichlich intra-
zellul&re Sporen aufwies. Hier lieB sich ubereinstimmend fast in alien
Fallen eine Auskeimung in gleicher Ueppigkeit wie bei den nicht mit
Farbe vorbehandelten Keimen feststellen. Die reicblichen, im Verlauf von

24 Std. emporgesproBten Kolonien wiesen jedoch
den merkwftrdigen Befund auf, daB die FSden,
aus denen sie bestanden, niemals Sporen
trugen, sondern ausnahmslos in schwerster
Form kbrnig degeneriert waren. Einige cha-
rakteristische Besonderheiten der einzelnen Farb-
kbrper diirfen aber nicht tibergangen werden:
Wahrend die in wasseriger XSsung angefarbten
Stabchen in Agar bei alien flbrigen Farben
stets farblos erscheinen, behalten die Keime bei
Behandlung mit Viktoriablau auch in Agar ihre
Farbe und werden als deutlich blaue Gebilde
sichtbar. Nach 1—2 Std. sind sie aber ver-
blaBt. Dieses starke Festhalten dieses Farbkorpers
riihrt wohl von der auBerst hohen Aviditat des

A

w

L^ H

Bakterien

ii

\J

„

Bakterien

Fig. ll. A Objektiv, Anthrax zum Viktoriablau her. Die Keime

D Deckglaa, tfhangender scheinen aus wasserigen Losungen die gesamte

Tropfen, Ag feine Agar- Farbe in sich aufzunehmen, so daB man bei

schicht. dichten Bakterienemulsionen oft neben tief-

blauen Individuen ganz farblose sieht, fflr
deren Anf&rbung offenbar die Menge des Farbstoffes nicht mehr aus-
gereicht hat. Erscheinen sie doch bei Zusatz einer grSBeren Farb-
menge alle in blauer Farbe. Auch bei der Einwirkung auf die Sporen-
auskeimung wies das Viktoriablau Besonderheiten auf. Es kam bei

wendung gefarbten Bakterienmaterials wird, wie auf 8. 151 ausgeffihrt, verfahren, ehees
dera Agar beigemischt wird Die Farbbeimischungen zum Nahrboden eiud jetzt wegen
der auSerordentlich geringen Menge des zugefugteu Materials und wegen einer gewissen
Befreiung desselben von Farbstoffreeten so gering, daB sie das Wachstum nicht mehr
beeinflussen. Bei Anwendung des hangendcn Agartropfens ist die Verwendung so ge-
ringer Mengen von Aussaatmaterial nicnt moglich, weil hier die Anzahl der Keime in
der der Beobachtung zugiinglichen Agarschicht so gering ist, daB die Auffindung eines
geeigneten Fadens auf die groBten 8chwierigkciten stoBt. Ein Schema (Fig. 11) ver-
anschaulicht dieses. I = Mikroskop, eingestellt auf hangenden Tropfen, II = Mikroskop,
eingestellt auf feine Agarschicht.

Nehmen wir an, daB von den 6 oben gezeichnetcn Keimen nur 1 zur Beobach-
tung geeignet ist, so miiBten beim hangenden Tropfen, unter der Voraussetzung, daB
jedesmal tat^achlich 1 in den Bereich der Beobachtungstiefe des Objektivs komint,
durchschniulich 6 Tropfen hergestellt werden, bis der gcsuchte crkennbar wird. Es ist
aber durchaus moglich, daB noch viel mehr Tropfen hergestellt werden miissen, bis der
1 geeignete in die oberste Agarschicht zu liegen kommt. Beim Ausstreichen des Tropfens
zu einer dunnen Schicht sind dagegen sofort samtliche Keime mit der Oeliramersion
erreichbar. AuBerdem wurden in der dem Deckglase zunachst liegenden Schicht des
Agartropfens wieder Storungen der Sauerstoffzufuhr eintreten, die sich bei friiheren
Versuchsanordnungen als aufs schwerste hinderlich erwiesen hatten.

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

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seiner Anwendung scheinbar wohl zu einer Auskeimung der Sporen,
aber eine weitere Teilung und damit Vermehrung der jungen Stllbchen
blieb aus. Ebenso verhielten sich bei der Sporenkeimung Malachitgrfln
und Brillantgrttn. Trotzdem waren nach 24 — 48 Std. Brutzeit auch
bei Anwendung dieser 3 Farben oft einige Kolonien gewachsen.
Hire Entstehung konnte mithin nur auf die Auskeimung extrazellu-
larer, freier Sporen zurflckgeftthrt werden. Waren doch freie Sporen
des optischen Verhaltens dieser Kttrper wegen im Agar nicht auffindbar,
so daB stets die Einstellung von sporentragenden St&bchen vor-
genommen werden muBte. Dieser Befund weist darauf bin, daB die
freien Sporen gegen gewisse chemische Einfliisse noch resistenter sind
als die intrazellularen. Im ttbrigen war durch diese Ergebnisse ein-
wandfrei klargestellt, daB, abgesehen von den 3 zuletzt genannten Farben,
durch eine Farbeinwirkung, die die vegetativen Formen vermehrungs-
unfahig macht, die Keimfahigkeit der Sporen bei geniigender Sauerstoff-
zufuhr in keiner Weise behindert wird, und daB bei keiner Farbe das
Wachstum der Stabchen durch die doch immerhin noch vorhandene,
spurenweise Farbbeimischung des Nahrbodens gehemmt wurde.

Problematisch blieb nur die Genese der Sporenlosigkeit und die
Ursache der Absterbungserscheinungen bei den neu entstandenen Kolo¬
nien. Der Gedanke, daB diese Unfahigkeit zur Sporenbildung eine Nach-
oder Spatwirkung der Farbbehandlung war, liefi sich a priori nicht von
der Hand weisen. In 2. Linie muBte aber auch an mbgliche Folgen
einer Schadigung durch die Farbspuren des Nahrsubstrats gedacht
werden. Es war nun nicht schwierig, die Richtigkeit der einen Oder
anderen MSglichkeit auf experimentellem Wege darzutun. Hierfflr wurde
2,5 Proz. Traubenzuckeragar, mit minimalen Mengen der „Violette tt ver-
mischt, als Schragagar abgefttllt und mit gut sporulierendem Anthrax
beimpft. Zu 5 ccm Traubenzuckeragar kam l / t Tropfen Farblosung, so
daB die Farbkonzentration im Agar folgende St&rken hatte:

Gentianaviolett 0,00019 Proz. Dahliablau 0,00019 Proz.

Methylviolet 0,00029 „ Mngentarot 0,00125 „

Pyoktanin 0,00015 „ Anilinviolett 0,0009, „

Das Untersuchungsergebnis nach 20-stiind. Brutzeit bestand im Be¬
fund ganzlich sporenfreier, stark kdrnig degenerierten Faden in alien
Fallen. Die minimale Farbmenge des Nahrbodens war also doch nicht
wirkungslos, sondern hatte die Sporulationsfahigkeit des Anthrax auf-
gehoben. Hierdurch war die merkwiirdige Tatsache erkannt, daB nicht
der AuskeimungsprozeB der Sporen, nicht das Wachstum des Stabchens,
sondern der Sporulationsvorgang der gegen gewisse Einfliisse
empfindlichste Teil des Lebensprozesses des Anthrax ist.

Der EinfluB der sogenannten Violette und der ttbrigen Farben auf
die lebende Milzbrandzelle konnte nach AbschluB dieser Versuche als in
geniigender Weise gekiart angesehen werden und die Untersuchungen
der Wirkungen dieser Farben beim Typhus beginnen. Es sei am
Anfang dieser Besprechungen darauf hingewiesen, daB der 1. Teil der
Arbeit die Abhangigkeit der Anfarbbarkeit des Typhus vom Aufschwera-
mungsmedium erwiesen hatte. Die Aufgabe der jetzigen Versuche war
es daher aufzuweisen, inwiefern sich die Wirkungen der betreffenden
Farben bei den verschiedenen Aufschwemmungsfliissigkeit. voneinander
unterscheidet, und ob der Typhus eine Anfarbung mit den „Violetten u

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Origin ale. Bd. 87. Heft 2.

oder mit den anderen Farben schadlos ertrftgt oder nicht. Die Versuchs-
anordnung bestand in der Abschwemmung 18-stflnd. Typhuskultnren
mit Bouillon, mit NaCl und dann mit 2,5 Proz. Traubenzucker-
ldsung. Die Aufschwemmung des Typhus in Tranbenzuckerlosung
wurde wie frflher vor dem Farbzusatz abzentrifugiert und von neuem
mit Traubenzuckerlosung aufgefflllt, urn jede Spur von NaCl oder Agar
zu entfernen. Zu je 1 ccm Bakterienemulsion wurden dann die „Vio-
lette tt in den stets beim Anthrax verwandten und auf S. 144 genanntes
Konzentrationen hinzugefilgt. 1 Tropfen des Bakterienfarbgemisehes
wurde dann auf Drigalski-Agar in Platten von 18 cm Durchmesser
mit dem Spatel ausgestrichen. Bei einer Einwirkungszeit der Farben
von 5—10 und 30 Min. waren keine deutlichen Hemmungen des
Wachstums feststellbar. Erst bei 1-stand. Farbwirkung trat eine
deutliche Herabsetzung der Wachstumsfflhigkeit der in Trauben-
zuckerlOsung oderNaCl angefflrbten Typhusbakterien hervor. Bei
einer F&rbezeit von 90 Min. war das Resultat eindeutig. Eine Tabelle
gebe genaueren AufschluB.

Tabelle Nr. 5.

Farbwirkung 90 Minuten.

1,5 ccm Typhus-
emulsion + 0,5 ccm
Farbe

Kontrolle

Traubenzucker¬

losung

NaCl-L5sung

Bouillon

Geotianaviolett

0,25 Proz.

Dichter Rasen

Herabsetzung auf
etwa "/so ^ er Kolo-
nienzahl

Kolonienzahl
etwa ‘/so von
Kontrolle

Ebenso wie Kon¬
trolle

Magentarot (frisch)
1 Proz.

dgl.

dgl.

Etwa 1 /* vonKon-
trolle

dgl.

Methylviolett

0,2 rroz.

11

1

|

Etwa 1 /jo von
Kontrolle

Anilinviolett

0,7 Proz.

dgl.

Herabsetzung
auf etwa l / 3 o der
Kolonienzaiil

Dahliablau

0,15 Proz.

' I

>»

11

Ebenso wie Kon¬
trolle

Pyoktanin

0,12 Proz.

)>

eteril

11

dgL

Viktoriablau (frisch)
0,08 Proz.

11

Herabsetzung auf
etwa X L 0 der Kolo-
nienzanl

EbeDso wie Kon-
trolle

11

Wir konnen aus dieser Aufstellung leicht erkennen, daB der Typhus
die Anfarbung mit den Violetten im allgemeinen erheblich lflnger ertrfigt
als der Milzbrand. Nach einer Anfarbungszeit von 90 Min. wachsen von den
E b e r t h schen Stabchen in Traubenzucker und NaCl noch etwa 3,3 Proz.
der Keime, trotzdem, wie frflher gezeigt, bei Zimmertemperatur nach
5—60 Min. beim Gentian a violett, Dahliablau, Pyoktanin und Me-
thylviolett die Anfarbung aller Keime vollzogen ist. Lfifit auch das
mikroskopische Bild bei Anilinviolett und Magentarot in NaCl selbst
nach 1—IV 2 Std. keine deutliche Farbung erkennen, so beweisen diese
Resultate bier, daB schon geringe, optisch nicht nachweisbare Spuren
eines Farbkorpers zur Abtotung der Zelle fiihren kflnnen. Nur Vik-
toriablau bleibt in NaCl-Losung wirkungslos, ebenso wie es dort keine

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

157

sicbtbare Anfarbung erzeugen kann. Der EinfluB der Schutzkolloide
in Bouillon tritt bei diesen Versuchen stark zutage, da abgeseben
vom Anilinviolett die Gegenwart der Farben in der Bouillon ganz ein-
fluBlos ist. Die in den anderen Aufschwemmungsmedien stark giftigen
Farben sind in Bouillon wirkungslos.

Feine Unterschiede in der Farbwirkung auf die einzelnen Lebens-
iunktionen der Typhusbakterien lieBen sich bei der Prflfung von Malacliit-
grfin, Brillantgrfln und Chrysoidin erkennen. Dieser Einblick in eine die
einzelnen Lebensprozesse nacheinander aufhebende Farbwirkung wurde
durch plStzliche Entfernung der iro Zelleib aufgespeicherten Farbe er-
reicht, wodurch ihre Wirkungsdauer genau begrenzt wurde. Versetzt
man eine Typhusaufschwemmung, die mit einer der 3 eben genannten
Farben behandelt ist, mit Tierkohle, so wird der gesamte Farbstoff von
der Kohle adsorbiert, so daB auch die Stabchen augenblicklich als
farblose Gebilde in farbloser Flflssigkeit erscheinen. Die
technische Anordnung bei diesem Verfahren war folgende:

1) 1 ccm Bakterienaufschwemmung 0,33 ccm Farbe.

2) Dazu nacb der gewiinschten Zeit eine Aufschwemmung aus
0.25 g carbo anim. Merk in 9 ccm physiolog. NaCl-Losung.

3) 1 Min. bei mittlerer Tourenzahl zentrifugieren.

4) Die fiberstehende, leicht trtibe FlQssigkeit abgieBen. Sie enthalt
in groBen Mengen den Typhus, wahrend fast die gesamte Kohle am
Boden des Giaschens ist.

5) Von der flberstehenden FlGssigkeit 1 Oese auf eine Platte von
18 cm Durchmesser mit Lackmus-Laktose-Agar ausstreichen.

Die nunmebr aufsprossenden Kolonien zeigen, daB beim Malachit-
?rfin die wieder farbfreien Stabchen teilweise noch nach 20. Min. Farb¬
wirkung auskeimen, wahrend bei den nicht farbbefreiten nach
5 Min. fast vollige Sterilitat eingetreten ist (in nachstehender
Tab. sind die farbbefreiten, „gewaschen“ genannt und die nicht wieder
entflrbten „ungewaschen“).

Tabelle Nr. 6.

5 Min. i

10 Min.

20 Min. ,

Kontrolle

Malachit- ,

gewaechen

Ehenso wie Kon-

Etwa ! / a der Ko-

Etwa f / 4 der Ko-|

Diehter

spun 1

trolle

Ionienzahl von

Ionienzahl von

Kasen

ungewaschen

10 Kolonien

Kontrollc

nteril

Kontrolle

steril

dgl.

Briilant-

gewaschen

EtwaV l0 ^ er Ko-

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1

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Kon trolle

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Chmoi-

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gewaschen ■

i i

i »

it

n

ii

jungewaschen

tt

it

i

' it 1

li

Aus diesen und schon frflher beim Malachitgrfln gewonnenen Resultaten
ergibt sich, daB sofort nach dem Farbzusatz die Beweglichkeit der Typhus¬
bakterien aufhdrt, dafi.dann eine StOrung der Keimfahigkeit eintritt, wahrend
das Leben noch erhaiten bleibt. Erst nach 5 Min. Farbwirkung beginnt

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158 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 2.

langsam die Abtotung derart, daB nach 20 Min. noch etwa 1 / i der
Keime lebensfahig ist. Die Schadigung ergreift mithin zeitlich deut-
lich voneinander abgrenzbar nacheinander die einzelnen Lebenstatig-
keiten der Zelle. Es wird hier deutlich, daB das Ausbleiben des
Wachstums nicht mit der Abtotung gleichzusetzen ist. Beim Chry-
soidin und Brillantgriin vollzieht sich der ganze ProzeB schon inner-
halb von 5 Min., so daB eine Trennung der einzelnen Stadien kanm
moglich ist.

Verglichen mit den „Violetten tt scheinen diese 3 Farbstoffe also erheb-
lich giftiger fflr den Typhus zu sein. Alle Versuche aber zeigen aufs
deutlichste, daB das Eindringen von Farbe in die Zelle
selbst kurze Zeit schadlos nicht ertragen wird, sondern
dafi nach mehr Oder weniger ausgedehnter Wirkungsdauer
stets der Tod eintritt. *

Ein kurzer zusammenfassender Rtickblick auf diese Versuche, die
die Wirkung der Anfarbung auf die Lebenvorgange von Anthrax and
Typhus zum Gegenstande hatten, lehrt uns folgendes:

1) Die vegetative Form des Anthrax wird durch 5 Min. dauernde
Einwirkung der Farben, die sofort in ihn eindringen, in alien Fallen
abgetotet.

2) Die Dauerform ist resistenter. Unter optimalen Wachstums-
bedingungen keimt sie, trotz einer Farbbehandlung, die die Stabchen
abtbtet, noch aus. Doch auch die Sporen sind durch die Farbwirkung
von 5 Min. geschadigt. Ein relativer Sauerstoffmangel, der auf die Aus-
keimung unbehandelter Sporen wirkungslos ist, hindert die vorher farb-
behandelten an der Auskeimung.

3) Minimale Farbstoffzusatze zum Nahrboden, die weder die Tei-
lung der Stabchen noch die Auskeimung der Dauerform nachteilig beein-
flussen, heben den Sporulationsvorgang auf und fuhren zu frOhzeitiger
Degeneration der Bakterien.

4) Auch Hefezellen werden durch kurze Farbwirkung stets ab¬
getotet.

5) Die Typhusbakterien scheinen die Einwirkung der gleichen Farb¬
stoffe etwas langer zu ertragen als der Anthrax. Doch auch sie werden
in alien Fallen nach kurzer Zeit abgetotet, wo nicht ihre Anfarbung durcb
hemmende Einfliisse verhindert wird. Durch letztere (Schutzkolloide)
kann die Giftigkeit der Farben ganzlich aufgehoben werden.

6) Es gelingt, das Malachitgriin und einige andere Farben wieder
aus den Typhusbakterien zu entfernen. Durch genaue zeitliche Ab-
stufung der Wirkung dieser Farbkorper lassen sich die einzelnen Lebens-
funktionen der Bakterien getrennt voneinander aufheben.

Diese Ergebnisse sind wohl eine eindeutige Antwort auf unsere
anfangs gestellte Frage nach der Schadlichkeit des Eindringens von
Farbstoffen in die Bakterienzelle. Sehen wir doch, dafi die Keime eine
optisch nachweisbare Anfarbung nie langer als wenige Min. ertragen.
Die deletare Wirkung des entgegen den physiologisch chemischen
Eigenheiten der Zelle eingedrungenen Fremdkorpers ist unbestreitbar.
Der Fremdkorper ist ein Gift! Sollten sich nun Metazoenzellen anders

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Reichert, Ueber den Ablauf vitaler Bakterienfarbung etc.

159

verhalten? Solllen sie, die wir als spezialisierter und damit wahrschein-
lich noch enger auf einen bestimmten Stott'wechsel eingestellt kennen,
diese Insulte aushalten, die fiir die primitivere (ira Sinne der Differenzie-
rung) Bakterienzelle todlich sindV ErtrSgt doch nicht einmal die in
jeder Richtung auBerordentlich resistente Rlilzbrandspore solche Ein-
griffe schadlos! Das muB zum mindesten als auBerst unwahrscheinlich
bezeichDet werden. Wer gesehen hat, wie eine minimale Elektrolyt-
menge die Dispersitat einer kolloidalen Farblosung ganzlich Sndert,
kann nicht glauben, daB eine lebende Zelle, deren chemische, physika-
lisch-chemische und morphologische Konstitution aufs feinste abgestimmt
ist, das Eindringen eines chemischen Fremdkorpers reaktionslos ertrdgt.
Es ist wohl moglich, daB es Farbstoffe gibt. die sich nur an para-
plastische Substanzen oder ahnliche Zellbestandteile von sekunddrer
Lebenswichtigkeit anlagern, oder die in ihrem Aufbau den physiolo-
gischerweise durch die Zelle aufgenommeuen Stoffen ahneln, woraus
eine geringere Schiidigung des Zellchemismus resultieren konnte. Zell-
fremd aber bleiben auch diese Substanzen auf alle F&lle und damit,
wie oben gezeigt, giftig! Der Nachweis einer Schddigung der Meta-
zoenzelle ist aber deshalb erschwert, weil meist fiir eine erkrankte so-
fort eine gesunde kompensierend eintritt, und somit feinere Storungen
weniger Zellen eines Organs sich dem Nachweis entziehen mflssen.
Dartiber konnen auch die genauesten chemischen Untersuchungen von
Se- und Exkreten nicht hinwegtauschen, die normale Befunde ergeben.
Man kann nur behaupten, daB eine funktionelle Schadigung des ganzen
Organes oder groBerer Abschnitte desselben nicht eingetreten ist. Ein
Resultat, das, wie gesagt, die Folge der ausgleichenden Wirkung der fUr
die geschadigten Zellen aushelfend eintretenden gesunden ist. — Fiir
den Morphologen aber ergibt sich hieraus die Folgerung, daB auch
die VitalfSrbung allein nichts iiber den normalen Bau der lebenden
Zelle aussagen kann. Sie macht uns nur die Struktur einer irgend wie
chemisch und damit sicherlich auch morphologisch gestbrten Zelle sicht-
bar. Hiermit soli nicht die Moglichkeit in Abrede gestellt werden, daB
auch einmal in der lebenden Zelle praformierte Gebilde durch Farb-
stoffanlagerung ohne wesentliche morphologische Aenderungen durch
vitale Farbimpragnation sichtbar gemacht werden konnten. Umgekehrt
aber dflrfen nach obigen Erfahrungen nur durch V. F. dargestellte Einzel-
heiten einer Zelle nicht als normale Struktureigentiimlichkeiten derselben
bezeichnet werden, solange nicht durch andere unschadliche Mittel ihr
Vorhandensein in der nicht chemisch oder sonstwie beeiutluBten Zelle
einwandfrei dargetan ist. Die nur vitalfarberisch nachgewiesenen Bildei
mQssen als Aequivalentbilder im Sinne Nissl gelten gerade so wie
die, die durch das Fixationsverfahren mit anschlieBender Farbung bei
toten Geweben gewonnen werden.

Liter aturverseichnis.

1) Aschoff, Patholog. Anat. Bd. 1. — 2) Birch- H i rschf eld, Centralbl. f.
Bakt 1888. Bd. 3. S. 569. — 3) Buchner, Ebenda. B. 7. 1S90. 8. 733. — 4) Cohn,
Zeit^chr. f. Hyg. Bd. 2. S. 386. — 5) Risen berg, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig.
Bd. 71. 1913. 8. 420. — 6) Ernst, Pathologie d. Zelle. (Centralbl. f. Bakt. Abt. IT. Bd. 8.
1902. — 7) Krehl-M archan d, Allg. Bath. Bd. 3. I9lf>; Kicker, Centralbl. f. Bakt.
Abt. I. Ref. Bd. 32. 1903. 8. 723. — 8) Class ner, Ebenda. Abt. I. Orig. Bd. 83. 1919.
S. 301. — 9) Gottlieb, Experiment. Pharmakolog. 1911. 8. 4f>0. — 10) Gutfeld,
Centralbl f. Bakt. Abt.I. Orig. Bd. 8.1 1919. 8. 102. — 11) Ho her, Bhysikal. Chemie d.
Zelle.—12) Jasinski, Ebenda Abt. I. Bd. 9. 1891. 8. 387. — 13) Jaenicke, Ebenda,

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160

Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 2.

Abt. I. Bd. 8. 1890. S. 598. — 14) Kayser, Ebenda. Abt. I. Ref. Bd. 53. 1912. S. 53.
— 15) Kitasato u. Weyl, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 8. S. 41. — 16) Krumwiede,
Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Ref. Bd. 59. 1914. 8. 589. — 17) Liebreich, Ebenda.
Abt. I. Bd. 9. 1891. 8. 136. — 18) Mandelbaum, Ebenda. Abt. I. Ref. Bd. 47. 1910.
S. 42. — 19) Muller, Ebenda. Abt. I. Bd. 26. 1899. S. 801. — 20) Marzi-
nowski, Ebenda. Abt. I. Ref. Bd. 57. 1913. S. 46. — 21) Nakanishi, Ebenda.
Abt. I. Bd. 27. 1900. 8. 547. — 22) Nietzki, Chemie d. org. Farbstoffe. — 23) Noeg-
gerath, Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Bd. 3. 1888. S. 481. — 24) Plato, Ebenda.
Abt. I. Ref. Bd. 30. 1902. 8. 190; Bd. 27. 1900. S. 286. — 25) Roszahegyi,
Ebenda. Abt 1. Bd. 2. 1887. S. 418. — 26) Rothberger, Ebenda. Bd. 24. 1898.
8. 513. — 27) Spina, Ebenda. Bd. 2. 1887. S. 71. — 28) Stoic, Ebenda. Abt. I.
Ref. Bd. 32. 1903. S. 276. — 29) Schulemann, Biochem. Zeitschr. Bd. 80. H. 1 u. 2.
30) Sommaruga, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 12. S. 271. — 31) Schroder, Centralbl. f.
Bakt. Abt. I. Ref. Bd. 53. 1912. S. 471. — 32) Stilling, Ebenda. Abt. I. Bd. 8.
1890. S. 155. — 33) Trainbusti u. Galeotti, Ebenda. Abt. I. Bd. 11. 1892.
S. 717. — 34) Unna, Ebenda. Abt. 1. Ref. Bd. 45. 1910. 8. 552. — 35) Winter-
nitz u. Hirschfelder, Ebenda. Abt. I. Ref. Bd. 59. 1914. 8.* 98. — 36) Zsig-
rnondi, Lehrb. d. Kolloidchem.

Drackfehlerbeiichtigung.

In der Arbeit Bender ,,Zur Technik de8 Nachweises der Tuberkelbazillen im
8putum“ (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 86. H. 6. S. 467) mufi es in der Zu-
sammenfassung 8atz 3 heifien: Proz. positive Originalausstriche anstatt 193 posi¬

tive Originalausstriche.

An die Herren Mitarbeiter

Die jetzigen abnorraen Verhaltnisse zwingen uns leider, mit dem ver-
t'iigbaren Raum so sparsam wie mbglich unizugehen. Wir sehen uns daher
genotigt, in Zukunft Arbeiten, welche den Umfang Ton 2V 2 bis 3 Drock-
bogen (einschlieBlich Tafeln, Figuren, Tabellen, Kurven etc.) Ober-
sehretten, Ton der Annahme auszusclillefien und bitten daher die Herren
Mitarbeiter, in den einzuliefernden Manuskripten sich raoglichst kurz
fassen zu wollen, Tabellen, Kurven, geschichtliche Ein-
1 eitungen usw. aber zu vermeiden, oder aber die Herstellungskosteo
des obengenannte Bogenzabl ttberstelgenden Textes nnd die der
Tafeln, Figuren, Tabellen, KurTcn u. dgl. sclber zu tragen. Ffir
Manuskripte, welche zum Zwecke der Kiirzung etc. zuriickverlangt werden,
ist das znr Riicksendung ntitige Porto an die Redaktton einzu-
senden. In der Hoffnung, daB bald wieder normalere Verhaltnisse die
jetzigen Einschrankungen unnotig machen, zeichnen

Rcdaktlon und Verlag

des Centralblatt fttr Raktcriologie, Parasitenkunde
und Infektionskrankheiten.

Inhalt

Becker, Rudolf, Die auBere Gestalt der
Pferdebandwiirmer. Mit 6 Abbildungen
im Text, S. 110.

Haasherr, Otto, Beitrag zur Frage der
physiologischen Agglutination von Y-
Ruhrbazillen, S. 95.

Iiantssch, Kurt, Beitrag zur Kenntnis

der Fluorescens-Gruppe. Mit 1 Ab
bildung im Text, 8. 81.

Reichert, Fr., Ueber den Ablauf vitaler
Bakterienfarbung und die biologische
Wirkung der Earbung auf die Keime.
Mit 11 Abbildungen im Text, S. 118.

Frommannsche Buchdruekerei (Hermann Pohle) in Jena.

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Ceitralhl. i. Bah. etc. I. Hit Ori|imle. 1187. left 3.

Ausgegeben am 4. November 1921.

NaoMruck verboten.

Weitere Untersiichungen zur Paratyphusfrage, insonderheit
zor pr^ktischen Brauchbarkeit des Absattigungsverfabrens

fiir die Typentrennung.

[Aus der bakteriologischen Abteilung des Reichsgesnndheitsamts
(Direktor: Geh. Reg.-Rat Prof. Dr. L. Haendel).]

Von P. Manteufel und H. Beger.

Frflhere Untersuchungen von uns (1) hatten ergeben, daB die in
verschiedenen Gegenden Europas bei menschlichen Paratyphusepidemien
gefundenen sogenannten Paratyphus /^-Kulturen auf Grund der Agglu-
tinationsreaktion als Pestifer-Bazillen bezeichnet werden mQssen, und
damit eine Vermutung bestatigt, die bereits Pfeiler (2) geSuBert hatte.
Bernhard, GeiBler, Neukirch, Weil und Schiff (3), die der-
artige FSlle festgestellt und beschrieben haben, bezeichneten die Kulturen
als Pestifer-Bazillen vom Typus Voldagsen, eine Ansicht, die insofern
mit der unserigen flbereinstimmt, als der Typus Voldagsen nach unseren
friiheren Untersuchungen nichts anderes als eine VarietSt des Typus
Pestifer ist. Weiterhin hatte sich dann an der Hand von umfang-
reichen Agglutinationsreaktionen herausgestellt, daB durchgfingig eine
serologische Differenzierung der Paratyphus 6- und Pestifer-Bazillen
moglich ist, indem nS.mlich monovalente Paratyphus B-Sera vom Kanin-
chen im aligemeinen die Pestifer-Kulturen unserer Sammlung wenig
oder gar nicht beeinfluBten und Pestifer-Sera von den zahlreichen
menschlichen SammlungsstEmmen des Gesundheitsamts nur die oben-
erwahnten Paratyphus /?-Kulturen spezifisch agglutinierten, die wir auf
Grand ihrer biochemischen und serologischen Merkmale als identisch
mit dem Typus Pestifer erkannt hatten.

Es steht also fest, daB bei menschlichen Erkrankungen aufier den
lusher anerkannten 3 Vertretern der Paratyphaceenfamilie, n&mlich Para¬
typhus A, Paratyphus B und Enteritis Gartner noch eine 4. sero-
logisch abgrenzbare Untergruppe vorkommt, fttr die der jetzt eigentlich
gegenstandslose Name Suipestifer eingebflrgert ist. Die letztge-
nannten Bazillen sind bei Untersuchung von menschlichem Krankheits-
material anscheinend bisher hhufig verkannt worden, weil man sie ent-
weder als inagglutinable paratyphusahnliche oder als Paratyphus C-Ba-
zillen angesprochen hat.

Da bei den auf Pestifer-Infektion beruhenden menschlichen Er¬
krankungen eine Nahrungsmittelvergiftung durch Schweinefleisch zum
Teil von den Autoren als ausgeschlossen bezeichnet wurde, ist der Aus-
gangspunkt dieser menschlichen Erkrankungen noch unklar, und wir
bezeichneten es deshalb als wiinschenswert, auf das Vorkommen von
Pestifer-Staramen bei anderen Tieren zu fahnden, die zu der Nah-
ningsmittelversorgung des Menschen Beziehung haben. Pfeiler gibt
bereits an, daB er Pestifer-Bazillen nicht nur beim Schwein, sondern

&tte Abt. Orlf. Bd. 87.

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Heft a

11

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162

Centnlbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

auch beim Rind gefunden habe, andererseits sind bekanntlich bei Rindern
und Schweinen auch bereits Gartner-Stamme festgestellt worden.

Wir haben zunachst 8 Kalberruhrstamme mittels aller fflr die frflheren
Untersucbungen benutzten monovalenten Kaninchenimmunsera einer aus-
giebigen serologischen Prflfung unterzogen 1 ). G&rtner-Bazillen, die
yon anderer Seite als Erreger der „Kalberruhr“ ja bereits festgestellt
sind, befanden sich nicbt darunter, dagegen reagierten alle 8 auf Para-
typhus B-, nicht aber auf Pestifer-Sera. Auch unter den weiterhin
untersuchten Stammen von Stutenabort (9 Stamme), Kaninchen paratyphus
(3 Stamme), Meerschweinparatyphus (3 Stamme) sowie Maui, phos (3
Stamme) baben wir keine auf Pestifer-Sera ansprechenden kulturen
gefunden; in alien Fallen liefi sich serologisch die Zugehflrigkeit zum
Paratyphus B-Typus erweisen. Mit dieser geringen Anzahl von
Untersuchungen ist natfirlich nicht bewiesen, daB'Pesti-
fer-Bazillen bei anderen Haustieren als beim Schwein
nicht vorkommen, wir sehen aber in dem serologischen
Verhalten dieser Stamme tierischer Herkunft eine Be-
statigung unserer Annahme, daB auch bei den tierischen
Stammen die serologische Differenzierung in einenP&ra-
typhus B- und Pestifer-Typus in die Erscheinung tritt

Im Verlaufe der Untersuchungen ergab sich eine weitere Bestati-
gung dieser Auffassung darin, daB sich bei der serologischen Prflfung
von Stammen, die dem Gesundheitsamt von auBerhalb mit der Diagnose
„Pestifer u zugegangen waren, einige von Schweinen stammende Kul-
turen fanden, die auf unsere Pestifer-Sera nicht ansprachen, wobl
aber auf die Immunsera aus der Paratyphus B-Gruppe. Wir ziehen
daraus denSchluB, daB nicht alle „Schweinestamme tt ohne
weiteres zur Pestifer-Gruppe gerechnet werden dflrfen,
sondern daB es vorher einer Prflfung bedarf, ob man es
mit einem Vertreter des Typus Pestifer, des Typus Para¬
typhus B oder des Gartner-Typus zu tun hat. Hierin
scheint uns auch der Schlflssel fflr dieErkiarung derlat-
sache zu liegen, daB die meisten Untersucher bisher zu
keiner einwandfreien Differenzierung der ParatyphusB-
und Pestifer-Bazillen gelangen konnten: Die ohne weitere
Untersuchung als Pestifer-Bazillen angesprochenen Kulturen vom
Schwein waren eben teilweise keine Pestifer-Bazillen, sondern Para¬
typhus B- und Gartner-Kulturen, und dementsprechend haben aoch
die mit solchen verschiedenartigen Stammen hergestellten Immunsera
verschiedenartige Reaktionen gegeben und zu einer Verwirrung der
Sachlage Veranlassung geboten. Tatsflchlich also zeigen die Paratyphus
B- und Pestifer-Bazillen untereinander erheblich grQBere serologische
Differenzen wie die Paratyphus B- und Gartner-Stamme. Das zeigte
sich im Verlaufe der Untersuchungen zuerst bei der Durchprufung der
samtlichen Sammlungskulturen von Paratyphus B, Gartner und
Schweinepest — 99 Nummern — mit 15 monovalenten Kaninchenseren.
Dabei wurden die Pestifer-Stamme und deren Varietaten von den
Paratyphus B- und Gar tner- Seren nicht agglutiniert, ebensowenig
von einem Paratyphus B- und einem Giirtner-Eselserum, die wechsel-
seitig auf die zugehorigen Gruppen stark iibergriffen. Dieser Weg der

1) Auf die Wicdenrabe der sehr zahlreichen Aerglutinationstabellen haben wir aas
Sparsanikeitsgriinden verzichten zu miissen geglaubt.

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Manteufel u. Beger, Weitere Untereuchungen znr Paratyphusfrage etc. 163

Difierenzierang ist ersichtlich fiir die Untersuchungspraxis aber zu urn-
stSndlich, denn das Arbeiten mit einer grSBeren Anzabl von Immun-
seren erfordert viel Zeit. Wir haben daher auf eine einfachere Weise
zu einer Differentialdiagnose zu gelangen versucht.

Auf dem von Bitter (4) vorgeschlagenen kulturellen Wege ist uns,
wie wir bereits in der frflheren Mitteilung berichteten, weder zwischen
Paratypbus B und Gartner, noch zwischen diesen beiden und dem
Pestifer-Typus eine Abgrenzung gelungen. Bitter macht bekannt-
lich gar'’! bestimmte Angaben, daB man auf diese einfache Weise die
„echten .aratyphus B-Stflmme von den viel haufigeren „Fleischver-
giftern“ v i.ogrenzen kSnne, allerdings nur dann, wenn es sich um frisch
aus dem K dr per geztichtete Kulturen handelt. Das letztere ist
nan bei unseren Sammlungskulturen nicht der Fall. Es gelang uns indes
anch nicht mit den 15 Teststammen, die uns Herr Bitter 1 ) freundlichst
uberlassen hat; deshalb will es nichts beweisen, daft die verschiedenen Ty-
pen unserer Sammlung keine diagnostisch verwertbaren Unterschiede
zeigten, insonderheit dafi wir nach diesem Verfahren nicht bestimmen
konnten, ob man die Pestifer-Bazillen zu den „Fleischvergiftern u zu
rechnen hat, was doch wahrscheinlich anzunehmen ist. Wir fanden z. B.
unter den Mflusetyphen einen starken Schleimwallbildner und vermiflten
diese Fahigkeit bei echten Paratyphen, wir fanden unter denPestifer-
Kulturen solche, die auf Raffinoseagar Knopfe bildeten, und unter den
echten Paratyphen solche, die es nicht taten. OfFen lassen mflssen wir
die Frage, ob vielleicht die Verftltterung an Mause konstante Unter¬
schiede zwischen den Typen Paratyphus B und den Fleischvergiftern
anch bei Verwendung von alten Sammlungskulturen ergibt, wie es
Bitter bei frischen St Seamen so einheitlich gesehen hat.

In der frflheren Mitteilung haben wir bereits auf die verschiedene
Benrteilung hingewiesen, die dem Castellanischen Versuch bezflglich
seiner Brauchbarkeit fflr die Differentialdiagnose innerhalb der Para-
typhusfamilie zuteil geworden ist, und stellten angesichts der von
Kruse und seinen Schfllern nachgewiesenen Brauchbarkeit dieses Ver-
fahrens fflr differentialdiagnostische Zwecke innerhalb der Dysenterie-
familie eigene Untersuchungen in Aussicht.

Diese Versuche wurden zuerst unter Benutzung der hier mehrfach
erw&bnten monovalenten Kaninchensera angestellt. Die Ergebnisse waren,
im ganzen beurteilt, unbefriedigend. Einzelne Sera lieBen sich durch
den homologen Stamm ilberhaupt schwer absattigen, bei anderen gelang
es das eine Mai gut, das andere Mai gar nicht. Dementsprechend war
anch das Ergebnis der Differenzierung schwankend. Bis in die letzte
Zeit dieser bis flber 1 Jahr hindurch betriebenen Absat-
tignngsversuche, die im Laufe der Zeit zu einer ganz
homogenen Technik geftihrt haben, ist es uns nicht ge¬
lungen, mit einem beliebig heravisgegriffenen, aggluti-
nierenden Kaninchenserum einheitliche Resultate zu er-
zielen und die Ursache dieser unregel >n a Bigen Ergebnisse
aufzudecken.

Spater haben wir dann in der Erwagung, daB Eselsera sich wegen
der grSBeren von jeder Operationsnummer zur Verfiigung stehenden
Menge und ihrer nachweislich umfassenderen Agglutinationsbreite fiir

1) Fur die UeberlassunK dioser Stamme dan ken wir Horrn Prof. Hitter anch an
dieser Stelle ferner sind wir Herrn J'rof. Kaebitrer in Halle und Herrn Re^.-Rat
Zell er in Dahlem fiir die Ueberlassung ihrer Stamme zu grotiem Danke verpflichtet.

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CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

Absflttigungs versuche in groBeren Reiben besser eignen mttBten, die in
der Abteilung zwecks Abgabe an andere Dienststellen,vorrStig gehaltenen
diagnostischen Eselsera fflr Paratyphus B und Gartner znm Castel¬
lan ischen Versnch herangezogen, um auf breiterer Grnndlage ein
sicheres Urteil flber die praktische Brauchbarkeit dieser Versuchs-
anordnung zu gewinnen. Diese letzteren Versuche haben in
auffallendem Gegensatz zu den Versuchen mit Kaninchen-
serum hei vielfacher Wiederholung der einzelnen Ver¬
suche durchaus gleichm&Bige Ergebnisse geliefert. Wir
sehen auf Grund dieser Beobachtung die Ursache fflr die
widerspruchsvolle Beurteilung dieses Verfahrens in erster
Linie darin, daB sich bei weitem nicht alle .Immunsera
fflr dergleichen Absflttigungsversuche eignen, vielmehr
mflssen sie auf ihre Brauchbarkeit fflr diesen besonderen
Zweck erst ausgewertet werden. Vielleicht ist es dabei nur
ein Zufall, daB sich die Eselsera in unserem Falle brauchbarer erwiesen
haben. Allerdings hat auch ein Paratyphus B-Pferdeserum, das wir
versucht haben, sich als ungeeignet gezeigt.

Das vorerwahnte Eselserum fflr Paratyphus B ist mit einem Samm-
lungsstamm hergestellt, der als Erreger einer „echten u Paratyphus B-
Infektion angesehen werden kann. Es hat einen homologen Titer von gut
10000 bei Lupenkontrolle und agglutiniert auBer den zahlreichen, umer
Paratyphus B gefflhrten St&mmen, deren genaue Herkunft meist nicht
mehr zu ermitteln ist, auch die Gftrtner-Stamme unseref Sammlung.
Dagegen beeinfluBt es die Pestifer-Stamme, die aus den frflheren
Untersuchungen des Gesundheitsamts ttber Schweinepest herrflhren, ferner
2 von Pfeiler stammende Stamme „Pestifer Kunzendorf“ und schlieB-
lich auch die Voldagsen-Glasser- und Ferkeltyphusst8mme, die wir
als Varietaten des Typus Pestifer ansehen, fast gar nicht. Auch die
sogenannten Paratyphus /3-Kulturen, deren Identitat mit dem Typus
Pestifer wir in der frflheren Arbeit nachgewiesen zu haben glauben,
gehen bei der Agglutination mit diesem Serum nicht mit.

Die Technik der Absattigung wurde im Laufe der Zeit auf folgende
einfache Formel gebracht: Je eine Schragagarkultur der benutzten Bak-
terien wird mit 1 ccm physiol. Kochsalzlosung abgeschwemmt (je eine
Petri-Schale der OberMchenaussaat mit 5 ccm physiol. Rochsalz-
Iflsung), gewaschen und mittels elektrischer Zentrifuge ausgeschleudert.
Nach Entfernung der Waschflflssigkeit wird der Bodensatz mit der
gleichen Menge (1 ccm auf eine Kultur) des auf J / 100 verdflnnten Im-
munserums flberschichtet, darin fein verteilt und 1 Std. bei 37 0 gehalten.
Alsdann wird abermals scharf zentrifugiert und der AbguB zur Aggluti-
nationsprflfung verwendet.

Zunachst wurden Versuche mit den obenerwahnten Bitterschen Test-
stammen angesetzt, weil deren Herkunft genau bekannt ist, und weil sie
nach den Bitterschen Gesichtspunkten in Kiel als ^Paratyphus B“,
^Enteritis Breslau 11 und ^Enteritis Gartner 44 bestimmt waren. Durch
Absattigung mit einem Stamm der „Paratyphus B-Gruppe 44 wurden aus
dem Paratyphus-Eselserum die Agglutinine fflr alle 3 Typen herans-
genommen, nach Absattigung mit einem Stamm der nBreslaugruppe*
blieben nur die Agglutinine fflr ^Paratyphus B 44 im Serum nachweisbar,
und bei Absattigung mit einem ^Gartner-Stamm 44 blieben die Agglu¬
tinine fflr Paratyphus und Breslau erhalten. Diese Ergebnisse erwiesen
sich bei vielfacher Wiederholung als konstant. Es hat danach den

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Manteufel u. Beger, Weitere Untersuchungen zur Paratyphuefrage etc. 165

Anschein, daB den von Bitter auf kulturellem Wege dif-
ferenzierten Typen aucb kennzeichnende Verschieden-
heiten am Rezeptorenbau zukommen. Das Verfahren wurde
nunmehr bei sAmt lichen Sammlungskulturen mit dem gleichen ganz ein-
dentigen Ergebnis dnrcbprobiert: Absattigung unseres Testserums
mit einem Stamm der „Pestifer-Gruppe“, die von dem Serum nur
in den stArksten Konzentrationen mitagglutiniert wird, laBt die Agglu-
tinine fGr Paratyphus B, Enteritis Breslau und Enteritis Gartner un-
beeinfluBt. Absattigung mit einem Stamm der „Gartner-Gruppe tt
Mt nur die Agglutinine filr Paratyphus B und Breslau im Serum, und
nach Abbindung mit einem Stamm der „Breslaugruppe u agglutiniert das
Serum nur einige wenige unserer unter Paratyphus B gefilhrten Samm-
lung8stamme, darunter den homologen Stamm, den wir als Erreger eines
echten Paratyphus B kennen. Wenn man dieser Differenzierung durch
Absattigung maBgebliche Bedeutung beilegt, dann muB man also schlieBen,
dafi die groBe Mehrheit unserer Sammlungsparatyphen Breslaustamme,
d. h. Fleischvergifter im Bitterschen Sinne sind und nicht Erreger
von Paratyphus B-Erkrankungen.

Abgesehen von dieser durch den Absattigungsversuch zutage
tretenden Unterschiedlichkeit der Breslau- und Paratyphus B-Stamme,
fillt die Bestimmung der einzelnen Kulturen nach dem Absattigungs-
verfahren zusammen mit den Ergebnissen, die man mit der Aggluti-
nationsreaktion durch monovalente Kaninchensera erhait.

Durch den Castellanischen Versuch erhait man also
auBer den anerkannten Untergruppen 2 weitere in der
Paratyphus B-Familie, die noch nicht allgemeine Aner-
kennung genieBen, namlich die Typen Pestifer und Breslau.

Was die Abgrenzung des Pestifer-Typus anlangt, so linden wir
eine Berechtigung dazu darin, daB die Agglutinationsreaktion mit mono-
valenten Kaninchenseren in dem gleichen Sinne spricht. Allerdings be-
steben in dieser Hinsicht, wie wir bereits in unserer frflheren Mitteilung
betonten, zwischen unseren Ergebnissen und denen anderer Autoren
Widersprflchej die nur durch eine NachprQfung der Befunde von dritter
Seite aufzuklaren sind. Wir glauben den Grund dieser Widersprflche
jetzt darin gefunden zu baben, daB wir bei Schweinen verschiedene von
pestkranken Schweinen stammende Kulturen ermittelt haben, die nicht
auf Pestifer-Sera, wohl aber auf Paratyphus B- und Gartner-Sera
re&gierten. Diese Starame haben auch beim Castellanischen Versuch
einen unzweifelhaften Paratyphus-Charakter gezeigt und jede Verwandt-
schaft mit dem Pestifer-Typus abgelehnt Es ist mithin sicher, daB
ein Angehdriger der Paratyphaceenfamilie durchaus nicht ein Bacillus
suipestifer zu sein braucht, weil er aus einem pestkranken Schweine
herstammt, vielmehr muB man, wie bereits bekannt, mit dem Vorkommen
von Gartner-Stgmmen rechnen und, wie wir gezeigt haben, auch mit
Vertretern der Paratyphusgruppe. Hierbei sind sicher oft Verwechslungen
vorgekommen, und man hat Kulturen von ganz verschiedenem antigenem
Charakter zusammengeworfen. Dementsprechend haben dann auch die mit
diesen Stammen hergestellten Immunsera ganz verschiedene Reaktionen
gegeben und die serologischen Unterschiede zwischen Paratyphus B- und
Pestifer-Stammen verschleiert. Unter solchen Voraussetzungen muB
natQrlich auch der Absattigungsversuch unrichtige Resultate liefern. So
erkiaren wir uns in der Tat z. B. die Ergebnisse von Bock (5), der
im Castellanischen Versuch zwar Differenzen zwischen „echten tt

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Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt Originate. Bd. 87. Heft 3.

Paratyphus B- und Fleischvergifterkulturen erhalten hat, aber keine
Unterschiede zwischen den ietzteren und Schweinepestbazillen. Der
verwendete Pestifer-Stamm rflhrte offenbar zwar von einem pest-
kranken Schwein her, gehdrte aber zur Paratyphus B- und nicht znr
Pestifer-Gruppe.

Weun auch fflr das Kraukheitsbild der Schweinepest jetzt das filtrier-
bare Virus ziemlich allgemein als Ursache anerkannt ist, bleibt doch
immer noch die Frage offen, ob die Pestifer-Bazillen an sich nicht
ebenfalls als Erreger seuchenhafter Erkrankungen bei diesen Tieren an-
zusehen sind, namentlich bei jungen Schweinen. Wir wissen jetzt, daB
die Pestifer-Bazillen beim Menschen seuchenhafte und tddlich ver-
laufende Krankheiten vernrsachen, daB die verschiedenen Typen bei
Mensch und Vieh zwar auch dann im Organismus zu linden sind, wean
keine Krankheitserscheinungen vorliegen, daB sie aber auch sicherlich
ortliche krankhafte Erscheinungen und septische Prozesse hervorrufen.
Deshalb ist der Gedanke nicht von der Hand zu weisen, daB gesunde
Schweine, die im Darm Pestifer-Bazillen beherbergen, als Dauer-
ausscheider anzusehen sind, deren Ungefahrlichkeit ffir die menschliche
und tierische Umgebung nicht auf der mangelnden Pathogenitat der
ausgeschiedenen Bazillen beruht, sondern auf einer endemiscben Dnrch-
seuchung, die eine gewisse Widerstandsfahigkeit gegen akute Erkran¬
kungen mit sich bringt. Vielleicht ist die Hauhgkeit der Pestifer-
Infektionen beim Menschen in ISndlichen Bezirken weit groBer, als man
es gegenwSrtig annimmt, und bisher teilweise deswegen unaufgekl&rt
geblieben, weil man immer im Banne der Identitat von Pestifer- nnd
Paratyphus B-Bazillen untersucbt hat. Zun&chst handelt es sich hier
allerdings lediglich um eine Arbeitshypothese.

Wir kommen nun zu der Bewertung der zwischen den „echten
Paratyphuserregern u und den „Fleischvergiftern tt gefundenen Unter¬
schiede. Wfthrend frflhere Untersucher hier weder kulturell und bio-
chemisch noch serologisch durchgreifende Unterschiede feststellen konnten,
mehren sich neuerdings die gegenteiligen Ansichten. In Deutschland
ist namentlich Bitter in letzter Zeit fiir diese Ansicht eingetreten, und
ihm hat sich aus klinischen GrQnden' Sc hit ten helm (6) angeschlossen.
Bitter findet bekanntlich bei frisch aus dem menschlichen Korper iso-
lierten Stammen dieser beiden Krankheitsformen folgende Unterschiede:
Die Erreger des Paratyphus B (und die Gartner-Stamme) bilden auf
den flblichen NahrbSden Schleimwalle und auf Raffinoseagar zahlreiche
Knfipfe, was die Bazillen der NahrungsmittelvergiftUng nicht tun. Letztere
zerfallen in den Typus Gartner und den Typus Breslau (Flfigge-Kaen-
sche), die wiederum dadurch zu unterscheiden sind, daB die Gartner-
Stamme sich durch Agglutination mit monovalenten Kaninchenseren von
den Paratyphus B-Stammen trennen lassen, wahrend das zwischen den
Typen Paratyphus B und Breslau nicht einwandfrei gelingt. Ferner sollen
die „Fleischvergifter a nach Bitter bei Mausen per os tOdliche Infektionen
hervorbringen, was bei den Erregern des Paratyphus B nicht der Fall ist.
Da wir mit alten Sammlungskulturen gearbeitet haben, haben wir die kul-
turellen Unterschiede nicht mehr feststellen kOnnen, sie allerdings auch
bei den von Bitter zur Verfiigung gestellten Kulturen vermiBt, aber
das beweist wohl nichts gegen die Richtigkeit der Bitterschen Fest-
stellungen. Serologisch konnten wir nur mit einem unserer Kaninchen-
sera Differenzen bekommen, namlich mit dem Immunserum unseres
Sammlungsstammes Hellwig, der nur eine kleine Sondergruppe unserer

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Manteufel u. Beger, Weitere Untersuchungen zur Paratyphusfrage etc. 167

Paratyphus B-Knlturen agglutinierte, die wir aos spater zu erorternden
{Jrfinden ffir echte Paratyphus-Erreger halten. Die (ibrigen Sera beein-
flnCten beide Gruppen ziemlich gleichmfiBig, auch ein Gfirtn er-Esei-
sernm griff auf beide Typen gleichmfiBig fiber. Es muB mithin zunfichst
weiteren Untersuchungen vorbehalten bleiben, ob man durch bessere
Answahl der Stfimme Immunsera bei Kaninchen erzielen kann, die nur
auf Paratyphen und nicht anf Fleischvergifter wirken, Oder ob das Er-
gebnis mit, unserem Kaninchenserum Hell wig ein blofier Zufalls-
befund ist.

Im Gegensatz zu diesen unsicheren Ergebnissen hat, wie bereits
oben angegeben, das Absfittigungsverfahren mit einem Paratyphus B-
Eselserum ganz klare Resultate geliefert, indem namlich bei der Ab-
bindung mit einem von Bitter nach seinen Angaben als Breslau
diagnostizierten Stamme die Agglutinine fflr die meisten unserer so-
genannten Paratyphus B-Kulturen ausgeloscht wurden, dagegen fflr eine
Heine Sondergruppe erhalten blieben, zu der auBer den Bitterschen
,echten Paratyphen" auch die vereinzelten Sammlungsstamme gehfiren,
die durch die Agglutination mit unserem Serum Hell wig als zusammen-
gehSrig aufgefallen waren. Es hat also nach den bisberigen ,
Untersuchungen tatsfichlich den Anschein, daB den von '
Bitter zusammengefaBten Unterscheidungsmerkmalen ge-
wisse serologische Differenzierungsmfiglichkeiten ent-
sprechen. Immerhin sind wir nicht der Ansicht, daB ein
gflltiger Beweis daffir bereits erbracht ist und halten
eine weitere Bearbeitung dieser Frage fflr notwendig.

Es lag nahe, die Brauchbarkeit des Absfittigungsverfahrens auch
gegenfiber Stfimmen tierischer Herkunft zu erproben. Uns standen
auBer den bereits besprochenen Stfimmen von Schweinen, die ihre Zu-
gehorigkeit zum Pestifer und Gfirtner erwiesen hatten, die oben
erwfihnten Paratyphus B-Eulturen aus Schweinen, ferner eine Anzahl
Kfilberruhr-, Pferdeabortus-, Kaninchen- und Meerschweinchenparatyphus-
8tfimme zur Verffigung. Alle diese Paratyphus B-Stfimme
tierischer Herkunft verhielten sich gegenfiber unserem
Paratyphus B-Eselserum wie die Breslaustfimme mensch-
licher Herkunft.

Wenn wir auch nicht verkennen, daB die vorliegenden Unter-
snchungen nach mancher Richtung der Ergfinzung bedflrfen, so wollen
wir doch darauf aufmerksam machen, daB fflr die Prflfung der angeschnit-
tenen Fragen 164 Kulturen und 18 Immunsera Verwendung gefunden
haben und etwa 3000 Agglutinationsreihen durchgeprflft worden sind.
Eine gewisse Beweiskraft kfinnen die Untersuchungen mithin beanspruchen.

Die Fehlerquellen, die nach unserer Meinung die
Brauchbarkeit des Castellanischen Versuches beein-
trfichtigen kfinnen, liegen weniger in der an sich ein-
fachen Technik, als in der richtigen Auswahl der Sera
und Stfimme. Man kann nicht erwarten, daB jedes hoch-
wertige agglutinierende Serum sich fflr den Absattigungs-
versuch eignet, sondern man muB das „Testserum“ vor-
ber daraufhin auswerten. Ebenso wichtig ist es anderer-
seits, daB die „Teststfimme u , mit denen man die einzelnen
Oruppenagglutinine absfittigen will, in bezug auf ihre
Herkunft und Eignung genau geprfift sind. Unter den
obigen Vorau ssetzungen dtirfte indes die umfangreiche

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Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Akt Originale. Bd. 87. fieft 3.

Verwertung des Absattigungsversuches sicherlich keiners
Schwierigkeiten begegnen und zur Beseitigung der gegen*
wftrtigen Unsicherheit in der Paratyphusfrage beitragen..

Nicht minder kbnnte die Verstandigung (lurch Beseitigung gewisser
Unzweckmafiigkeiten in der Nomenklatur gefbrdert werden. Beispiels-
weise kann man die Abtrennung der Voldagsen-Glfisser- und Ferkel-
typhusbazillen in eine besondere Untergruppe wohl fallen lassen, da sie
nichts anderes als inkonstante Variet&ten des Bacillus pestifer sind.
Auch diese letztgenannte Benennung ist allmfihlich gegenstandslos ge-
worden, denn der Bacillus suipestifer ist weder ein ausschlieB-
licher Schweineparasjt noch der Erreger der Schweinepest. Er kommt
auch beim Menschen und wahrscheinlich ebenso bei anderen Haustieren
vor und ist ebenso wie der Bazillus Gartner und Paratyphus B der
Erreger einer septischen Infektion, die mit den krankhaften Ver&nde-
rungen der Schweinepest nichts zu tun hat. Schliefilich muB man unseres
Erachtens die Abzweigung einer „Fleischvergiftergruppe“ als irrefflhrend
bezeichnen, denn das Wesen dieser Krankheitserreger besteht doch mehr
in einer Infektion als in einer Intoxikation, wenn der Kraukheitsbeginn
auch manchmal durch die in den Nahrungsmitteln vorgebildeten Gifte
beeinfluBt wjrd. Und dieses Krankheitsbild wird nicht von einer be-
stimmten Gruppe der Paratyphaceen hervorgerufen, sondern mindestens
von einer Mehrzahl, wenn nicht von alien, da sie alle anscheinend durch
Vermittlung infizierter Nahrungsmittel zu „Vergiftungen“ Veranlassung
bieten kOnnen. Im Organismus der Haustiere sind ja jetzt wohl alle
anerkannten Typen bereits nachgewiesen, auch die Paratyphus A*BazilIen,
die Uhlenhuth und Hfibener (7) bei Schweinen in 3 Fallen ge*
funden haben. Nur bei dem Typus Paratyphus B Schottmuller
engeren Sinnes, wie ihn Bitter und Schittenhelm von dem Fleisch-
vergiftertypus Breslau abzutrennen vorschlagen, ist es fraglich, ob man
nur mit Kontaktinfektionen von Mensch zn Mensch zn rechnen hat
Wir lassen es, wie gesagt, noch unentschieden, ob die Unterscheidnngs*
merkmale zu einer Typentrennung ansreichen.

Den Weg zu der anzustrebenden Vereinfachung der Nomenklator
hat Krnse (8) in der 1920 erschienenen 1. Auflage seiner EinfQhrnng
in die Bakteriologie beschritten. In Anlehnung an die allgemeiu ein*
gebflrgerte Unterscheidung der Typen A und B bezeichnet er ala
Untergruppe C diejenige Abart, die bisher mit Paratyphus B zusam-
mengeworfen wurde, sich aber durch weniger umfassende Agglutinine
(nach Selter) von letzteren unterscheidet Paratyphus D nennt er den
Bacillus suipestifer Glass ers (Ferkeltyphus Pfeiler) und E
den Bazillus Gartner. Diese Einteilung ist nach Ansicht des Autors
nur eine vorlaufige. „Der Paratyphus bedarf einer ebenso sorgfaitigen
Bearbeitung, wie sie der Pseudodysenterie schon zuteil geworden ist“

Wir haben zu dieser Einteilung folgendes zu bemerken:

1) Ob die Paratyphus A-Gruppe homogen ist, bedarf noch der Unter-
suchung.

2) Fflr die Paratyphus B-Gruppe liegt von Bitter der Vorschlag
einer Zweiteilung in die Untergruppen Schottmuller, den eigentlichen
Paratyphus B. und Breslau, die Fleischvergiftung vom Typus FlQgge-
Kaensche, vor. Wir konnten die von Bitter als maBgeblich bezeich-
neten kulturellen Unterschiede bei unseren alten Sammlungsstammen
nicht mehr nachweisen. fauden aber im Caste 11anischen Versnch-

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Hanteufel u. Beger, Weitere Untereuchungen zur Paratyphusfrage etc. 169

Differenzen. Es bleibt abzuwarten, ob diese Differenzen zu einer Typen-
trennung ausreichen.

3) In der Gruppe C glauben wir nicbt nur den Typus Voldagsen,
sondern den ganzen Typus Pestifer einschliefilich der menschenpatho-
genen Paratyphus /?-Bazillen und der tierpathogenen Giasser-Vol-
dagsen- und Ferkeltyphusstimme zusammenfassen zu kdnnen.

4) Gruppe D wflrde dann den Typus GQrtner umfassen, Qber
dessen Einheitlichkeit allerdings auch noch Zweifel bestehon.

Diese 4 Untergruppen lassen sich durch Agglutination mit mono-
valeoten Kaninchenseren und den Absattigungsversuch unter den von
uns angegebenen Voraussetzungen gut voneinauder unterscheiden.

5) Ob sich die Benennung der Typen mit Buchstaben allerdings
einbiirgern wird, scheint uns nach den Erfahrungen bei der Einteilung
der Dysenteriebazillen fraglich. Kruse glaubt, hier mittels der Ab-
sattigung bereits 10 Rassen oder Unterarten differenzieren zu kdnnen,
die er mit den Buchstaben A bis J bezeichnet. Es dQrfte auch dem
mit der Materie vertrauten Fachmann nicht leicht sein, mit diesen Buch¬
staben die zugehftrigen Begriffe verbinden zu lernen. TatsSchlicb haben
sich auch die frQher Qblichen Benennungen als Shiga-Kruse, Flex-
ner-, Y- und Strong-Bazillen bisher nicht verdr&ngen lassen, und so
wird es in der Paratyphusliteratur sicherlich auch komrnen. Im Interesse
der so dringend wQnsclienswerten Erleichterung einer VerstQndigung
moll man derartigen praktischen Erwagungen wohl Rechnung tragen.
Dazu kommt noch ein weiterer Nachteil der Buchstabenbenennung, der
in der Paratyphusfrage bald akut warden kann, n&mlich dann, wenn
weitere Untersuchungen tats&chlich die Angaben von Bitter als zu-
treffend erweisen, dad die Paratyphuserreger und die „Fleischvergifter“
vom Typus B in verschiedene Unterarten zu trennen sind. Die letz-
teren wQrden dann den neuen Buchstaben E bekommen mflssen, wShrend
sie doch der Verwandtschaft nach dicht neben der Unterart B stehen
bleiben mQfiten. Auch dieBezeichnungParatyphus C ist von Uhlenhuth
und HQ boner eigentlich bereits in einem anderen Sinne als von Kruse
vergeben und kann zur Verwirrung Veranlassung geben. Endlich ist
es auch zweifelhaft, ob sich die bisherige scharfe Gegenuberstellung der
Typen A und B, von denen der erstere als ganz homogeu angeuommen
wird, wdhrend der letztere als aus mehreren Rassen bestehend erkannt
ist, aufrechterhalten l&llt. Wir schlagen daher vor, die Zweiteilung in
den A- und B-Typus fallen zu lassen und die samtlichen Paratyphaceen
in eine gemeinsame Gruppe zusammenzufassen, die folgeudermalien dif-
ferenziert wird:

Typus Brion-Kayser = bisher Paratyphus A-Bazillus

„ SchottmQller = „ „ B „

( „ FlQgge-Kaensche = „ „ B „ )

„ Salmon-Smith = „ Suipestifer-Bazillus

„ GQrtner = „ Gartner-Bazillus.

Zusammenfassung.

1) Die Angabe in unserer frtiheren Mitteilung, dad sich die Para¬
typhus B-Bazillen vom Typus SchottmQller und Flugge-Kaensclie
serologisch von den Pestifer-Bazillen des Typus Kunzeiulorf ab-
grenzen lassen, hat sich in weiteren Untersuchungen bestiitigt. Auch
vom Typus Gartner sind die letzteren sicher zu unterscheiden.

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CentralbL f. Bakt. etc. 1. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

2) Der Typus Pestifer kommt nicht nur beim Schwein vor, sondern |
ist aucb beim Menschen festgestellt. Somit hat man bei der bakterio- 1
logischen Diagnose menschlicher Erkrankungen auf 4 Unterarten (Rassen)

zu achten.

3) Der Typus Para typhus B kommt nicht nur beim Menschen,
soudern auch bei Schweinen vor. Somit hat man bei diesen auf die
gleichen 4 Untergruppen zu achten.

4) Die Differenzierung dieser 4 Unterarten gelingt nicht nur durch
Agglutination mit monovalenten Kaninchenseren, sondern auch durch
den Caste 1 lanischen Versuch. Voraussetzung fur die Brauchbarkeit
des Absattigungsverfahrens ist, dafi man ein fiir den Zweck ausgewertetes
„Testserum tt und geprflfte „TeststSmme tt zur VerfQgung hat.

5) Bei Benutzung unseres fflr den Castellanischen Versuch be- I
nutzten Paratyphus B-Eselserums gestaltet sich die Differenzierung
beispielsweise folgendermafien: Pestifer-St&mme werden Qberhaupt !
nicht agglutiniert. Bei der Abs&ttigung mit einem Stamm des Pestifer* >
Typus Kunzendorf bleiben a 11 e Agglutinine im Serum erhalten. j
Bei der AbsQttigung mit einem geprQften Stamm des Typus Gartner
bleiben nur die Agglutinine fflr die Bazillen des echten Paratyphus B
(SchottmQller) und fGr die Bazillen der „Fleischvergiftung a (F1G g g e-
Kaensche) im Serum. Bei AbsQttigung mit einem geprQften Stamm '
des Typus FlQgge-Kaensche (nach Bitter) bleiben nur die Ag- <
glutinine fflr den Typus SchottmQller erhalten. Die AbsQttigung '
mit einem nach Bitter bestimmten Stamm des Typus SchottmQller
entfernt alle Agglutinine aus dem Serum.

6) Die im Castellanischen Versuch bisher von uns geprQften
Kulturen von Kfilberruhr, Pferdeabort, Mausetyphus, Kaninchen- und
Meerschweinchenparatyphus verhielten sich sdmtlich wie die aus dem
Menschen gezQchteten Kulturen vom Typus FlQgge-Kaensche (En¬
teritis Breslau).

7) Da die Differenzierung der Typen Schottmiiller und FlQgge-
Kaensche durch monovalente Kaninchen sera nur ausnahmsweise ge¬
lingt, sind wir noch im unklaren, welche Bedeutung man in dieser Be-
ziehung dem Castellanischen Versuche beizumessen hat.

8) FGr die Widal-Untersuchung beim Menschen ist unbedingt
neben den Teststammen des Typus Brion-Kayser (Pt. A) und Schott¬
mQller (Pt. B) auch ein Teststamm vom Typus Salmon-Smith
P e s t i f e r) heranzuziehen. Besser benutzt man auch noch einen
Gartner-Stamm.

9) Da bei den verschiededen Haustieren ebenso wie beim Menschen
jeweilig verschiedene Untergruppen der Paratyphusfamilie nachweisbar
sind, ist eine Unterscheidung nach der Herkunft der StQmme in einen
menschlichen und einen tierischen Typus nicht durchfQhrbar.

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Bachmann, Zur Diagnostik der Pfieudotuberkulose, 1 J7J

Quellen&ng&ben.

1) Manteufel, Zschucke u. Beger, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 86
H. 3. — 2) Pfeiler, Weichhardts Ergebo. d. Hyg. Bd. 3. 1919. — 3) Die JLite-
raturaDgabeo finden sich in unserer unter 1) zitierten Arbeit. Bei dem groflen Um-
fange der P&ratyphusliteratur ist es moglich, da6 wir die eine oder andere Arbeit, die
diese Frage behandelt, ubersehen haben. Wir bitten dieserhalb um Nachaicht/—
4) Bitter, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 90. 1920; Centraibl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 85.
1920. — 5) Bock, Arb. a. d. Reichsgesundheitsamt. Bd. 24. 1906. — 6) Schitten-
helm. Miinchen. med. Wochenschr. 1920. Nr. 46. — 7) Uhlenhath u. Hubener,
Haadb. d. pathog. Mikroorganismen von Kolle u. Wassermann. 2. Aufl. 1913.
Bd. 3. — 8) Kruse, Einfiihrung in die Bakteriologie. 1920.

Nachdruck verboten.

Zur Diagnostik der Pseudotuberkulose.

Aus dem Hygienischen Institut Dflsseldorf (Direktor: Prof. Dr. Bflrgers).]
Von Dr. Werner Bachman, 1. Assistant des Instituts.

Die wirtschaftlich ungflnstigen Verhfiltnisse der heutigen Zeit bringen
es mit sich, dafi die zn wissenschaftlichen wie diagnostischen Zwecken
unentbehrlichen Tierversuche immer mehr eingeschrankt werden mtissen.
Jeder, der noch im Besitze eines wohlgeftillten Tierstalles sich befindet,
mnfi angstlich daruber wachen, alle Schadlichkeiten von seinem Tier*
bestand fernzuhalten. (Jnser besonderes Interesse mufi sich daher alien
senchenartigen Erkrankungen in TierstUllen zuwenden. Besonders die
Pseudotaberkulose der Nagetiere, die unter den haupts&chlichsten Ver-
suchstieren, den Meerschweinchen, immer wieder groBere Opfer fordert,
mQBte rechtzeitig erkannt und damit die Mdglichkeit gegeben werden,
die infizierten von den gesunden Tieren im Frflhstadium der Krankheit
abznsondern, event, zu vakzinieren und damit neue Uebertragnngen der
Pseudotuberkulose zu verhindern. Da eine Friihdiagnose aus dem
kSrperlichen Befund der Tiere nicht zu stellen ist, so war die nahe-
liegende Frage zu beantworten, ob nicht mit Hilfe der Oblichen Im-
munitatsreaktionen (Agglutination, Komplementbindung, Intrakutan-
reaktion) die kranken von den gesunden Tieren getrennt werden k5nnten.

Um das Serum pseudotuberkulosekranker Meerschweinchen in ver-
schiedenen zeitlichen Abstfinden nach erfolgter Infektion priifen zu konnen,
warden im ganzen 21 Tiere infiziert (s. u.). Als Krankheitserreger
standen 18 Pseudotuberkidosebazillenstamme zur Verfugung, von denen
16 sicher als Pseudotuberkulosis rodentium Pfeiffer bestimmt wurden,
wahrend 1 Stamm, 10 L, nur dadurch unterschieden war, daB er, im
Gegensatz zu den anderen Stfimmen, weder Maltose noch Mannit zu
verg&ren vermochte. Ein 18. Stamm wurde als echter Paratyphus B
erkannt (Bezeichnung 3924 B). An sich wfire es nun wtinschenswert
gewesen, die Virulenz s&mtlicher 18 StSmme im Tierversuch genau
festzustellen, bevor die ftir die serologischen Untersuchungen notwendigen
Tiere infiziert wurden. Es wfire dann vermieden worden, daB die Tiere
eingingen, bevor ihr Serum auf seinen Agglutiningehalt und seine kom-
plementablenkenden Eigenschaften geprtift werden konnte, bzw. ehe der
Intrakutanversuch Aussicht auf Erfolg versprach. Aus Sparsamkeits-
rficksichten muBte jedoch von einer genauen Virulenzbestimmung ab-

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172 Centralbl. f. Baku ecU 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

gesehen werden. Nor 1 von den 16 St&mmen vom Typus rodentium
Pfeiffer, ID, wurde an weifien M&usen auf seine krankmachende Wir-
kung geprflft, wobei sicb herausstellte, dafi eine Oese des fraglichen
Staraines genflgte, um 2 MHuse je am 4. Tage zu toten. Sektionsbefund:
eitrige Peritonitis, septische Milz. Aus Milz und Herzblut wird der
Impfstamm in Reinkultur herausgeztichtet. Wurde die Impfdosis auf
v* Oese herabgesetzt, so machte die infizierte Maus zwar in den ersten
Tagen einen schwerkranken Eindruck, um sich spdter aber wieder zu
erholeh. Die hier beobachtete geringe Virulenz des Stammes I D fur
. Mause wird wobl daraus erklfirt, daB es sich um einen alten Labora-
toriumsstamm handelte.

Es erschien nicbt ratsam, bei den nun folgenden Infektionsversuchen
an Meerschweincben mit verschiedenen Pseudotuberkulosest&mmen durch-
weg eine so hohe Dosis zu wahlen, da ja auch von anderen Autoren
beschrieben wurde, daB VlOO Oese geniigen kann, um ein Meerschwein-
chen mittleren Gewichtes in wenigen Tagen zu toten.

Diejenigen Tiere, die am Leben blieben, wurden 6 Wochen nacb
erfolgter Infektion getdtet. Der Sektionsbefund bei alien 21 Tieren er-
gab stets Pseudotuberkulose. Aus Milz und Herzblut konnten die Er-
reger in jedem Falle in Reinkultur herausgezttchtet werden.

Bereits Vso Oese kann gentigen, um ein Meerschweinchen am 6. Tage
nach der Infektion zu toten, weiterhin kttnnen die Tiere sich gegen
denselben Stamm verscbieden resistent verhalten. Es sei zun&chst
noch bemerkt, daB nur sehr kraftige Meerschweinchen von ungefahr
gleichem Gewicht verwendet wurden. Die ersten 13 Tiere wurden nun
zu den beabsichtigten serologischen Versuchen und zum Intrakutanver-
suche benutzt wfihreud die Meerschweinchen VII bis XIII wegen ihres
schon am 6. Tage nach der Infektion erfolgten Todes fflr diese Ver-
suche ausfielen.

Agglutinationsversuche.

Zunachst wurde das Serum verschiedener Norraaltiere auf seinen
Agglutiningehalt gepriift. Es wurden Serumverdflnnungen von 1/10 bis
1/160 verwendet; zur Agglutination dienten die St&mme ID, 5 L, 10 L,
3924 B; da in der Kochsalzkontrolle stets Spontanagglutination auftrat,
wurde das Filtrat einer abgesetzten Bakterienaufschwemmung verwendet.
wodurch die Spontanagglutination auf ein ertragliches Mafi zurQckgedr&ngt
wurde. Es ergab sich nun, daB das Serum von Normaltieren bis zur
Verdflnnung 1:160 deutliche Agglutination zeigte, und zwar trat die
Normalagglutination gegen fiber alien den Stammen ein, die zur Infektion
der Meerschweinchen gedient hatten. Nachdefn die physiologische Koch-
salzlosung als Medium durch 0,85 proz. Sodalosung ersetzt wurde, er¬
schien die Normalagglutination weniger deutlich, w&hrend die geringe
Ausflockung in der Kochsalzkontrolle bestehen blieb. Auch der Ab-
sattigungsversuch nach Castellani fiihrte nicht zum Ziel. Wie zu
erwarten war, ergab auch die Priifung des Serums eines infizierten
Tieres, das in Abstanden von 7—50 Tagen untersucht wurde, keine
Unterschiede im Agglutiningehalt gegeniiber dem Serum von Normal¬
tieren. Auch hier storte die allerdings geringfiigige Spontanagglutination
die Beurteilung des Endtiters, so daB diese Versuche als ergebnislos
abgebrochen wurden 1 ).

1) Wegen Raummangel.s rnuSten die diesbeziiglichen Tabellen fortfallen.

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Bachmann, Zur Diagnostik der Pseudotuberkulose.

173

Komplementbindungsversuche 1 )*

Zu den nun folgenden Kornplejnentbindungsversuchen wurde ais
Antigen ein Extrakt verwendet, der folgendermafien gewonnen war:
24-stflnd. Agarplattenkulturen wurden mit je 10 ccm physiol. Kochsalz-
losung abgeschwemmt, die Bakterienaufschwemmung mehrmals am Tage
geschflttelt, 1 Tag bei 37°, 1 weiteren Tag bei Zimmertemp. gehalteu,
daranf abzentrifugiert nnd die (iberstehende FlQssigkeit abpipettiert, die
mit einem Phenolzusatz von 0,5 Proz. versehen wurde. In dieser Weise
warden Extrakte aus den StAmmen ID, 5L, 10L und 3924B, sowie
ein Mischextrakt aus alien verfflgbaren 18 StAmmen bergestellt. Diese
Antigene wurden zu den Komplementablenkungsversuchen in fallen den
Dosen von 0,4—0,025 verwendet. Als Komplement diente, wie fiblich,
frisches Meerschweinchenserum 1:10, und zwar wurde je nach der ver-
fBgbaren Blutmenge nur mit der Komplementeinheit Oder auch mit der
iy,-fachen und doppelten Komplementeinheit gearbeitet. Das inakti-
vierte Serum der zu untersuchenden Meerschweinchen wurde in der
konstanten Dosis 0,1 binzugegeben; nach 1-stflnd. Bindung bei 37 0
wnrde das hAmolytische System hinzugegeben, 1 weitere Stunde bei 37 0
gehalten, darauf zum ersten Male, nach 2 weiteren Stunden endgliltig
abgelesen. Die Gesamtmenge in jedem Rfihrchen betrug 1,25 ccm; es
wurde also in 7 4 -Dosen gearbeitet. Komplement -1 und Ambozeptor-
einheit wurden in eigenen Vorversuchen jedesmal besonders festgestellt.

Zunachst wurde das Serum normaler Tiere auf seine komplement-
bindenden Eigenschaften hin untersucht. In alien RShrchen erfolgte bei
Extraktmengen von 0,4—0,1 glatte HAmolyse. Die genaue Einstellung
der Extrakte, die urspriinglich beabsichtigt war, wurde mit ROcksicht
anf die Versucbstiere vorlaufig zuruckgestellt.

Die nun folgenden Untersucbungen an infizierten Tieren ergaben
denn auch so eindeutige Resultate, daB von einer genaueren Einstellung
der Extrakte abgesehen werden konnte.

Aus den Versuchen geht hervor, daB das Serum kranker Tiere be-
reits vom 8. Tage an nach erfolgter Injektion deutliche Komplement-
bindung zeigt. Die in einzelnen Serumkontrollen auftretende minimale
Hemmung kann die Brauchbarkeit der Ergebnisse nicht beeintrAchtigen.
Wenn es moglich gewesen ware, bei alien Versuchen mit abgestuften
Seram- und Komplementmengen zu arbeiten, so hfitte sich auch dieser
kleine Fehler sicherlich beseitigen lassen. So befriedigend der Ausfall
der Komplementbindungsversuche war, so mufiten wir uns doch sageu,
daB diese Methode fflr die Praxis kaum verwertbar sein wurde, erstens
wegen des damit in Frage kommenden Aufwandes an Zeit und Kosten,
und vor allem deswegen, weil' bei der Gewinnung des notigen Serums
(Herzpunktion) eine SchAdigung der Tiere nicht zu vermeiden ist.

Intrakutan versuche.

Unser Bestreben ging deshalb weiter darauf hin, durch intrakutane
Einverleibung des Antigens einen Unterschied des Titers bei kranken
Tieren gegenuber gesunden festzustellen. Das zu verwendende Antigen
wurde in der Weise gewonnen, daB je eine 24-stiind. Schragagarkultur
der verschiedenen Pseudotuberkulosestamme mit 1 ccm 0,85-proz. NaCl-
Losung abgeschwemmt, die Bakterienaufschwemmungen fraktioniert, bei
30—65° abget5tet und darauf durch doppeltes Faltenlilter tiltriert

1) Auch hier mufiten die Tabollen fortbleiben. Ked.

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174 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

wurden. Zur Verwendung karaen einmal ein Mischantigen sSmtlicher
18 Pseudo'tuberkulosestamme, weiterhin Antigene, die aus den Stammen
ID, 5L, 10L und 3924B gewonnen waren, also den Stammen, die zar
Infektion der Meerschweinchen verwendet worden waren. Die Antigene
wurden in abgestuften Mengen eingespritzt und eine positive -+- Reaktion
dann verzeicbnet, wenn eine deutliche Rdtung und ddematdse Schwellung
der Umgebung der Einstichstellen zu beobachten war. Von der An-
nahme ausgebend, dad eine gut bewacbsene Schr&gagarkultur ca. 10 Mil*
Harden Keime enth&lt, entsprach 0,1 Antigen etwa 1 Milliarde Keime.
Durch entsprechende Verdflnnung des Antigens mit 0,85-proz. NaCl-
L6sung wurden die Impfdosen in jedem Versuch entsprechend abgestuft.

Zuerst wurde das Verbalten gesunder Meerschweinchen untersucht,
'auderdem wurden 3 Tiere, die mit verschiedenen Stammen infiziert
waren, mit dem aus dem homologen Stamm gewonnenen Antigen in
Abstufungen von 1 Milliarde bis zu 1 Million geprttft. 4 weitere Tiere
wurden mit dem aus s&mtlichen 18 Stammen hergestellten Misch¬
antigen geimpft. Es zeigte sich, dad die Intrakutanreaktion nach 48 Std.
nur bis zur Antigendosis von 100 Millionen positiv ausfiel, bei den
Tieren II, III und VII sogar nur bei einer Keimzabl von 1 Milliarde. Bei
der nun folgenden Impfung infizierter Tiere wurde die Antigendosis
von 10 MilUonen bis zu 200000 Keimen abgestuft, und zwar wurden
3 Tiere mit dem homologen Antigen, 3 andere Meerschweinchen mit
dem Mischantigen geimpft. Hier zeigte sich nun, dad 3 Tiere noch bei
einer Dosis von 1 Million nach 48 Std. eine positive Reaktion ergaben,
bei Meerschweichen 587 und 588 lag der Endtiter bei der Dosis 5 Mil¬
lionen, wAhrend bei Meerschweinchen 573 sogar die Dosis von 200000
noch eine positive Reaktion ergab.

Versuch bei infizierten Tieren.

I

Versuch
* Nr.

Be-

nennung
der Tiere

Dauer der
Erkrankung

Welches

Antigen

Wieviel

injiziert

Erg'

nach 24 Std.

ebnis

nach 48 Std.

1

573

9 Wochen

3924 B

10000000

+

++

5000000

+ j

++

1000000

+

+

200000

+

2

v i

12 „

ID

10000000

+ +

++

5000000

+

+

!

1000000

+

200000

—

±

3

585

b „

5 L

10000000

+ +

++

50O0000

+

+

1000000

—

+

200000

_

4

574

9 „

Mischantigen

10000000

+

++

5 0000C0

+

+

1000(.)00

±

+

2iX)000

5

587

<1 . „

n

10000 000

+

+

5 000000

±

+

1000000

—

■

1

200 000

—

_

J

588 j

6 „

>»

10 000 000

+

+

5 000 000

±

•

1000 000

_

1

200000

—

' —

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UIMIVER: T' OF CALIFORNIA

Bender, Meningitis durch Influenzabazillen.

175

Die tfnterschiede des Reaktionstiters gegenOber gesunden Meerschwein¬
chen sind also so bedeatend, daC eine Diagnose der Pseudotuberkulose
mit Hilfe der Intrakutanmethode gestellt werden kann; und z war ist
eine Verschiebung des Titers insofern festzustellen, als 2 von den
3 Tieren, die sp&ter infiziert waren (6 Wochen), erst auf eine hbbere
Antigendosis positiv reagierten als die seit lfingerer Zeit (9 — 12 Wochen)
crkrankten Meerschweinchen.

Zusam men fas sung.

1) Die Diagnose der Psendotuberkulose der Meerschweinchen durch
Prflfang ihres Serums auf semen Agglutiningehalt ist nicht in alien
Fallen ausfQhrbar, da sowohl die Kochsalz- wie die Normalserumkon-
trollen Ausflockung zeigen kdnnen.

2) Die Komplementbindungsreaktion erlaubt es, mit homologem
Antigen wie mit Mischextrakten bereits 8 Tage nach erfolgter Infektion
die Pseudotuberkulose der Meerschweinchen zu erkennen.

3) Die Intrakutanmethode gestattet es, ebenfalls die Diagnose
^Pseudotuberkulose" bei Meerschweinchen zu stellen; unsere Erfahrungen
eretrecken sich nur auf Tiere, deren Infektion 6—12 Wochen zurftck-
gelegen hat, wobei die seit kfirzerer Zeit infizierten Tiere erst auf hdhere
Dosen reagieren als die seit l&ngerer Zeit erkrankten Meerschweinchen.
Diese Methode erscheint ftir die Praxis als bequem und sicher.

Nachdruck verboten.

Meningitis durch InfluenzahaziUen.

[Aus der bakteriologischen Untersuchungsabteilung (Leiter: Prof. Dr.
C. Prausnitz) des Hygienischen Institutes der Universitfit Breslau
(Direktor: Geheimrat Prof. Dr. R. Pfeiffer).]

Von Dr. Willy Bender, Assistent.

Mit 1 Abbildung im Text

Die Aetiologie der Influenza ist von Pfeiffer auf der 8. Tagung
der freien Vereinigung ftir Mikrpbiologie zusammenfassend dargestellt
worden. Er kommt hier in Uebereinstimmung mit der grbfiten Zahl
der Diskussionsredner ebenso wie Neufeld in seiner vor kurzem ver-
dffentlichten Arbeit zu dem Scblufl, dall der Influenzabazillus der Er-
reger der Influenza ist.

Wahreud nun die Fragen nach dem Influenzabazillus als Erreger des tvpischen,
ktinischen Influenzaanfallee im Vordergrunde der Untersuchungen standen, wurde seinem
Vorkommen im menschlichen Korper bei den so haufigen Komplikationen der Krank-
bdt weniger Arbeit gewidmet, Icn meine hier vor Allem die Befunde von Influenza-
bizillen im Zentralnervensystem. Die oft das Krankheitsbild beherrschenden Alterationen
deg Zentralnervensystems haben ja bereits in der Epidemie von 1889—92 zur Aufstel-
hing des Symptomenkomplexes der nervosen Influenza gefiihrt.

Die Entstehung dieser Affektionen ist durchaus nicht allseitig anerkannt oder gar
▼oil geklart. Zwei Moglichkeiten erscheinen — wie bereits Pfeiffer 1893 erwahnt —
gege&en, die Schadigung der peripheren Nerven oder des Zentralnervensystems durch

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176

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

Gifte oder durch lokale Ansiedlung des lnfluenzabazillus. Gestiitzfc werden beifle Mog-
lichkeiten durch eine eingehende Arbeit von Can tan i bereits 1891 und durch spatere
Unfcersuehungen von Wollstein. Cantani vermochte durch die nehr eingreifende
Methode der intrazerebralen Injektionon von kleinsten Mengen lebender oder abgetoteter
Influenzabazillen bei Kaninchen typische Bilder schwerer zerebraler Storungen hervor-
zurufen, die sich unter todlichem Verlauf in schnell entwickelnden Extreinitatenlah-
mungen auflerten. Spater ist ea dann Ritchie und beaonders Woilstein gelungeo
— von Flexner bestatigt — durch intralumbale Injektion von Influenzabazillen oei
Affen eine akute, meist todliche, Zerebrospinalmeningitis zu erzeugen.

Neben diesen experiraentellen Grundlagen stehen eine kleine Anzahl von bakterio-
logischen Untersuehungen nienschlicher Erkrankungen, bei denen es gelungen ist, den
lnfluenzabazillus, sei ea in Reinkultur, sei es mit anderen Bakterien verraischt, aus dem
erkrankten Zentrainervensyatem zu ziichten. Wahrend Beck 1903 das Vorkommen
des lnfluenzabazillus im Zentralnervensystem als gesichert ansieht, wird es von Scheller
1913 unter Beriicksichtigung des 1909 von Cohen beschriebenen Bazillus und von
Kolle und Hctech 1919 stark bezweifelt.

Im Zusammenhang mit 2 eigenen Beobachtungen tiber unzweifelhatte
Influenzabazillenmeningitis babe ich die bisher vorliegenden in- und
auslfindischen Arbeiten einer kritischen Durchsicht unterworfen, fiber
deren Resultat kurz berichtet werden soli. Hierbei roochte icb von
vornherein alle diejenigen Falle unberilcksichtigt lassen, bei denen die
bakteriologische Untersuchung nicht eindeutig zu bewerten ist oder ganz
fehlt. Auch die Fklle will ich nicht erwfihnen, in denen der Influenza-
bazillus nicht in Reinkultur in den Meningen oder dem Lumbalpunktat
vorhanden war, urn den Einwand, der den lnfluenzabazillus als Misch-
infektionserreger hinstellt, zu entgehen.

Die Literatur fiber die folgenden 35 Fade war mir zuganglich:

Batten 5 Fade (1910; 6, 7, 7, 14, 16 Mon. alt), Bertini (1906; 11 Mon.), Cag-
netto 2 Fade (1903/4; 12. 1 Mon.), Cohoe (1909 ; 33 Mon.), Davie 3 Fade (1911;
4 und 7 Tage, 7 Mon.), Douglas (1907; 19 Mon.), Dubois (1902 ; 4 Mon.), Dud¬
geon und Adams (1907; 10 Mon.), Fraenkel 2 Fade (1898 ; 21/2 und 9 Mon.).
Gaehtgens (1914; 10 Mon.), Ghon (1902 ; 8 Mon.), Grossmann (1911; 9 Jahre),
Hecht (L903 ; 2 Jahre), Hiibschmann (1914; 20 Mon.), Jundell (1904 ; 8 Mon.l,
Langer (1901; 9 Jahre), Lehmacher2 Fade (1907 ; 3 Jahre, 1908; 19 Jahre), Meu-
ni.er (1900; 16 Mon.), My a (1902; 9 Mon.), Oeller (1918; 5 Jahre), Pacchioni
2 Fade (1904; 12 und 8 Mon.), Schroder (1914; 29 Jahre), Slawyk (1899 ; 9 Mon.),
Simon (1902; 7 Mon.), Tobler (1917; 5 Mon.), Trailescu (1901; 6 Mon.). Hierzu
kommen noch 14 Fade, bei denen klinische Angaben feblen, namlich 8 von Woil¬
stein, 5 von Simons und Aisne und 1 Fall von Tedesco. Die Literatur der
folgeDden 7 Fade war mir nicht zuganglich: Longo, Cattaneo, Thomesco und
Groceski, Sprigg, Bentz und Frye, Agar und Avery, Torrey.

Bei der fiberwiegenden Mehrzahl ffilit sofort auf, daB die Erkran-
kung in den ersten beiden Lebensjahren aufgetreten ist, nur 7 Patienten
sind filter als 2 Jahre. Die Symptome im Beginn der Erkrankung ent-
sprechen den 3 Formen der Influenza, der katarrhalischen, der gastro-
intestinalen und der nervosen. Die katarrhalischen Erscheinungen der
oberen Luftwege stehen allerdings meist im Vordergrunde, z. B. in den
Fallen von Fraenkel, Meunier, Ghon. Pacchioni (F. 2), Du¬
bois, Simon, Grossmann, Batten (F. 5), Tobler, Bertini.
Meist treten Bronchopneumonien, oft Empyeme auf. Nach wenigen Tagen
stellen sich die typischen Erscheinungen der Meningitis ein. Es kommt
jedoch auch vor, daB die ausgesprochenen Lungenerscheinungen erst
nach Beginn der meningealen einsetzen, z.B. Slawyk, Batten (F. 2).
Die gastrointestinale Form zeigt sich vornehmlich in 3 Ffillen (Davis
F. 1 und 2, Trailescu). Als Begleitsymptom bei vorhandener pul-
monaler Affektion ist sie hiiufig vorhanden. Vereinzelt ist eine primfire,
rein nervose, nur auf die Meningen lokalisierte Affektion anzunehmen
(z. B. Jundell F. 1, L e h m a c h e r F. 2, Pacchioni F. 2, Douglas.

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Bender, Meningitis durch Influenzabazillen.

177

Batten F. 1, 3, 4). Neben diesen 3 Symptoraenbildern treten Kompli-
kationen aof, die durch den Befund der Influenzabazillen im Blute, in
tier Milz und im Eiter der metastatischen Herde (z. B. in Gelenken) als
Influenzabazillensepsis gekennzeichnet sind (Pacchioni F. 1, Oeller,
Davis F. 1, 2 eigene Faile).

Die Temperatur schwankt zwischen 38 und 40°. Die meningealen
Sjmptome der Influenzabazillenmeningitis bieten keineriei Besonderheiten.
Das Lumbalpunktat ist nur in dem l Faile von Trailescu klar, sonst
immer trttbe bis dick-eitrig, oft gelb-grfln und enthait reichlich poly-
unkle&re Leukozyten und sehr zahlreiche Bazillen vom Charakter der
Influenzabazillen. Die gesamte Krankheitsdauer schwankt zwischen
2 Tagen und 5 Wochen, wfihrend die meningealen Erscheinungen meist
nur wenige Tage dauern. Die tlberwiegende Mehrzahl der Erkrankten
stirbt; nur 6 bleiben am Leben (Langer, Lehmacher F. 1, Batten F. 1,
Grossmann, My a, Co hoe). 4 dieser Faile gehbren zu den 7 Fallen,
die fiber 2 Jahre alt sind, und stellen unter diesen auch wiederum die
altesten dar. Der einzige todliche Fall bei einem Erwachsenen betrifft
den Schroderschen Patienten (29 Jahre alt), bei dem aber aufier der
Meningitis eine Otitis media vorlag, in deren Eiter sich Influenzabazillen
znsammen mit Pneumokokken fanden. Yollig ausgeheilt ist nur Fall
Grossmann und Fall Cohoe, Fall Lan ger behielt rechtsseitige
SchwerhOrigkeit, Fall My a linksseitige Facialis))arese und rechtsseitige
Hemiparese, Fall Batten erblindete. Ueber Fall Lehmacher fehlen
Angaben. Es bleiben also von den Kindern unter 2 Jahren ungeffihr
9 Proz., von den Slteren 56 Proz. am Leben. Es zeigt sich hier wieder,
wie bei vielen anderen Affektionen, die vergleichsweise hohere Wider-
standskraft des erwachsenen Organismus.

Zur Frage der Therapie ist die Beobachtung von Grossmann
bemerkenswert, in dessen geheiltem Fall, ebenso wie bei dem von
Lan ger, sich die Temperatursenkung am Tage nach der Lumbalpunktion
einstellte. Die Angabe von Batten, 2mal deutliche Besserung am
Tage nach der Injektion von Influenzabazillenautovakzine gesehen zu
haben, muB wohl mit grofier Vorsicht bewertet werden.

Pathologi8ch-anatomische Besonderheiten sind kaum zu erwfihnen,
die Meningen der Konvexitfit und der Basis des Gehirns werden in
gleicher Weise betroifen wie die Rtickenmarksh&ute. Die Entzundungs-
erscheinungen selbst sind, beginnend mit der Hyperfimie der GelaBe und
geringem Oedem der Pia, in alien Abstufungen bis zur Bildung von
gelb*grfinlichen, dickeitrigen, wenig Fibrin enthaltendem Exsudat vor-
handen, das sich auch meist in den Seitenventrikeln des Gehirns findet.

Ffir den Infektionswcg mflssen verschiedene Moglichkeiten zuge-
geben werden. Der haufigste wird wohl der septisch-metastatische vom
primaren Herd der Lungen aus sein, analog der Pneumokokken-Me-
ningitis. Die Infektion vom Nasenrachenraum aus durch die zum Schfidel-
inneren ziehenden Lymphbahnen diirfte bei.den primaren Fallen ebenso
wie bei der Meningitis epidemica anzunehmen sein. In einigen Fallen,
2 . B. bei Schroder, kommt auch ein Uebergreifen von einer Otitis
media in Frage.

Die obige Ausfuhrung hat ergeben, daB die Diagnose auf Grand
der klinischen Erscheinungen nicht gestellt werden kann. Die Muglich-
keit hierzu ist nur gegeben durch die bakteriologische Untersuchung,
d- h. durch den kulturellen Nachweis der Influenzabazillen im Lumbal-
punktat oder Gehirn. Dalier ist auch zu fordern, daB in jedem P’alle

Erst* Abt. Ortg. Bd. 87.

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Heft

12

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178

CentralbL f. Bakt etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

die bakteriologische Untersuchung umfassend und eindeutig gesichert
ist, eine Forderung, die s in dem groUten Teil der oben angefflhrten Falle
nicht erfiillt ist. Es fehlt meist die Differentialdiagnose gegenflber dem
Cohen schen Bazillus und gegenflber dem von Ritchie gezflchteten,
influenzaShnlichen Bazillus 1 ). Dieser Anforderung glaube ich, in einem
der beiden eigenen F&lle genflgt zu habcn, so dafi eine eingehende Be-
sprechung angezeigt erscheint.

Beide F&lle stammen aus dem hiesigen st&dtischen S&uglingsheim
(Leiter: Priraararzt Dr. Freund).

Fall 1 (Frl. Dr. Land6): Das 12 Mon. alte, kunetlich gen&hrte, rhachitische Kind
war in seinem 3. Mon. erkrankt an Dyspepsie mit Meningismus (starker Erregungszu-
stand and Hypertonic ohne vermehrten Lumbaldruck) und Bronchitis, bei der mehrmals
asthmaartige Zustande auftraten. Seitdem hatte das Kind sich nicht mehr recht erholt,
fieberte seit seinem 10. Mon. (Dezember 1920) dauernd leicht und erkrankte am 2. Febr.
1921 an Bronchitis mit bronchopneumonischen Herden. Bei seiner Aufnahme am
17. Febr. 21 zeigte es einen, seinem Alter nicht entsprechenden, zuruckgebliebenen Er-
nahrungs- und Entwickiungszustand. Neben Fieber waren die Erscheinuogen einer
Rhinitis, Angina, Bronchopneumonie des rechten LJnterlappens und rechtsseitigen Pleu-
ritis exsudativa ausgepragt. Die Milz war nicht tastbar. Am Nervensystem waren mit
Ausnahme von erhohten Sehnenreflexen keine Stflrungen bemerkbar. Nachdem bis
zura 22. Febr. unter Schwanken der Temperatur zwischen 38,2 und 39 2 eine cntschie-
dene Besserung im Allgemeinbefinden eingetreten war, trat in den folgenden Tagen
unter Ausbildung auch einer links&eitigen Bronchopneumonie eine Verschlechterung ein.
Bei der Pleurapunktion wurden am 28. Febr. 4 ccm trubseroser Fliissigkeit enueert
An diesem Tage zeigten sich zum ersten Male deutliche Symptome einer Meningitis.
Der Druck im Lumtbalkanal war nur wenig erhoht (15 cm). Es wurden 10 ccm aeut-
lich gelriibte Fliissigkeit abgelassen. Ein Teil des Pleurapunktates, Liquors und ein
Rachenabstrich wurden znr bakteriologischen Untersuchung iibersandt. Das Kind starb
am gleichen Tage abends urn l L10 Uhr. Klinisch diagnostiziert wurde eine schwere
Grippe mit doppelseitiger Bronchopneumonie, beiderseitiger Pleuritis exsudativa und
Meningitis.

Die Sektion (Dr. Meyerstein) wurde am 2. Marz 21 vorgenommen. Von In-
tere8se sind die Veranderun^en an Lun^.e, Milz und Gehirn. Neben alien, pleuritischen
Verwachsungen und einem in Organisation befindlichen Empyem rechts (wahrscheinlich
ein Ueberrest der Erkrankung im 9. Mon.?), fand sich links ein beginnendes Empyem.
Beiderseits waren reichlich bronchopneumonische Herde vorhanden. Die Milz zeigte
septischen Charakter. Sie war mit ihrer Umgebung verwachsen, ihre Pulpa war weich,
von graurotlicher Farbe Die Follikel traten deutlich hervor. Wie die Nieren durch
trube Schwellung und Quellung der Kanalchenepithelien mit Einlagerung feiner Fett-
tropfchen nekrottsch verandert waren, so war auch die Leber im Zustande fettiger De¬
generation.

Am Gehirn fand sich eine Trubung der weichen Hirnhaut, besonders an der Hirn-
basis, aber auch an der Konvexitat.

Diagnostisch erschien das Gesamtbild als Sepsis.

Da ich erst nach begonnener Sektion benachrichtigt wurde, konnte
ich nur folgendes Material bakteriologisch untersuchen: Milz, broncho¬
pneumonische Herde der linken Lunge, Meningealeiter von der Gehirn-
konvexitSt, Inhalt des steril eroffneten linken Ventrikels und das an
zwei Stellen aus dem steril erdffneten Sinus longitudinalis mit der
Platinose entnommene Blut, dazu kommt noch das bereits in vivo ein-
gesandte Lumbalpunktat, Pleurapunktat und Rachenabstrich.

In folgender Tabelle gebe ich nun das Ergebnis der Untersuchnng
wieder.

Es gelang also aus dem Lumbalpunktat die bereits im Originalaus-
strich massenhaft vorhandenen gramnegativen Stabchen in Reinkultar
zu zfichten, gleichfalls in Reinkultur fanden sie sich im Meningealeiter

1) Der gleiche Einwand ist gegen die nach Beendigung meiner Arbeit erechienene
Mitteilung von Kotz (Berlin, klin. Wochenschr. 1921. Nr. 17) zu erheben, da hier ge-
nauere bakteriologische Angaben feblen.

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Bender, Meningitis durch Influenzabazillen.
Tabelle I.

179

1

Art dee Ma¬
terials

Mikroskopischer Befund
im Originalausstrich

Kulturelles Ergebnis

Nr.

Influenzabaziilen-
ahnliche Stabchen

Andere Bakterien

1

Lumbalpunktat
in vivo ent-
nommen

Massen)iaft, feinste schlan-
ke gramnegative Stab¬
chen, vereinzelt wie Di-
plokokken aussehend,

sparlich in* Fadenform,
meist extra-, aber auch
intrazellular gelagert, viel
polymorphkernige Leuko-
zyten, wenig Lympho-
zyten. Siehe Abbildung

+

Fehlen •

2

Pleurapunktat in
vivo

i

Der gleiche Befund wie im
Lumbalpunktat, keine
anderen Bakterien sicht¬
bar

+

Sparlich Pneumo-
kokkenkolonien

3

Rachenabstrich
in vivo

1

Nicht untersucht

Verdachtige Kolo¬
nien gramnega-

tiver Stabchen,

deren Isolierung
nicht gelang

Gram + Kokken.
Nicht naher diffe-
renziert

4

I

i

1

Milz

I

Sehr sparlich feine, ver¬
einzelt und zu zweien
liegende gramnegative
Stabchen

+

Sparlich Staphy¬
lococcus au¬

reus haemoly-
ticus

5 |

i

1

Lunge

Sehr sparlich gramnega¬
tive, feine, plumpe Stab
chen, viel grampositive,
teilweise in kurzen Ketten
gelagerte, vereinzelt lan-
zettfdrmig aussehende

Kokken

Kolonien gramne-
gativer Stabchen,
aeren Isolierung
nicht gelang

Pneumokokken,
Bact. coliund an¬
dere nicht identi-
fizierte gramposi¬
tive Kokken

6

Meningealeiter

Nicht untersucht

+

Fehlen

7

Ventrikelfluseig-

keit

>» »»

+

u

8

1

Blut aus Sinus!
longitudinalis
in sectione

+

Sparlich Bacte¬
rium coli

und der VentrikelflQssigkeit. Obgleich im Originalausstrich des Pleura-
punktates nor gramnegative Stabchen sichtbar. waren, fanden sich kul-
turell doch auch Pneumokokken, deren Kolonien immerhin sparlicher
waren. Dieses Vorwiegeu der gramnegativen Stabchen mikroskopisch
and knlturell kennzeichnet sie wohl auch hier als den primaren Erreger,
wihrend die Pneumokokken wohl erst sekundar hinzugetreten sind. Das
Vorhandensein von Stapbylokokken und Bact. coli in Milz bzw. Blut
Ut als agonale Erscheinung zu deuten. Die iufluenzaverd&chtigen Stab¬
chen und Kolonien in Lunge und Rache.nabstrich lassen auch hier ihre
Anwesenheit vermuten.

Zur Identifizierung der isolierten Stamme mit dem Influenzabazillus
mnEte zunachst die Feststellung der obligaten Hamoglobinophilie er-
folgen. Samtliche isolierten Kulturen (aus bei Lebzeiten entnommenem
Lumbal- und Pleurapunktat, post mortem entnommenem Meningealeiter,
Ventrikelinhalt, Sinusblut und Milz) erwiesen sich als obligat h&mo-

12 *

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180 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

globinophil und blieben es auch wShrend der Dauer der Beobachtung
bis zu 2 Mon. Diese nach langerer Zeitdauer wiederholte Prufung er-
scheint notig bei Stamraen, die aus meningealen Erkrankungen stammen,
am das Vorhandensein eines vorilbergehend h&moglobinophilen Bazillus
auszuschlieBen, wie wir ihn im Keuchhustenbazillus und dem von Rit¬
chie in 3 Fallen von Meningitis bei 5—14 Mon. alten Kindern aus dem
Lumbalptfnktat geziichteten Bazillus kennen. Ritchies (an influenza
like Bacillus) wuchs erst nach mehrmonatiger Zuchtung auf haraoglobin-
haltigen Nahrboden auch auf gewohnlichem Agar, eine Tatsache, die
beim echten Influenzabazillus bekanntlich nicht vorkommt.

Nachdem so morphologisch und kulturell die geziichteten StSinme
die typischen Charaktere des Pfeifferschen Influenzabazillus zeigten.

konnte noch ein Ein wand gegen
ihre Identit&t mit dem letz-
teren erhoben werden. Cohen
ist es 1909 gelungen, bei 3
Fallen von Meningitis einen
dem Pfeifferschen Stabchen
sehr ahnlichen Bazillus aus
den Meningen, dem Brustfell-
und GelenkerguB zu zuchten.
Die Dilferenzierung gegen-
iiber letzterem gelingt nur
durch die Prufung der Tier¬
pathogenitat bei Kaninchen
und Meerschweinchen, bei
denen der Cohensche Ba¬
zillus auch bei Injektion nur
kleiner Dosen eine typische,
langsam verlaufende Sep-
tikSmie mit gleichzeitiger, eit-
riger Entziindung der serosen
Korperhohlen hervorruft. Er
bedingt also im Gegensatz
zum Influenzabazillus eine
echte Sepsis, wahrend letz-
terer nur bei Einverleibung
groBer Dosen durch seine Gifte akut tbdlich wirkt. Sehe ich von den
bisher veroffentlichten Fallen von Influenzameningitis ab, bei denen die
Tierpathogenitat der geziichteten Stamrne meist nicht gepruft wurde
oder sich als fehlend herausstellte, so ist doch immerhin der Cohen-
sche Bazillus, den er selbst als Bacille de la meningite c^rebrospinale-
septic^mique bezeichnet, in einzelnen Fallen gefunden worden. Soweit
ich die Literatur iibersehe, wurde er von Prasek und Zatelli in einem
Fall, ferner nach den Angaben von Cohen und Fitzgerald, von Rhea
und von Van der Hasselt in je 1 Fall, und von Wilkinson in
0 Fallen isoliert.

Es ist demnach mit dem Vorkommen dieses Bazillus zu rechnen
und daher die Tierpathogenitat der aus Meningitisf&llen isolierten In-
fluenzabazillen ahnlichen Bazillen zu priifen.

Folgende Tabelle zeigt die Tierversuche, die nur mit dem in vivo
aus dem Lumbalpunktat isolierten Stamm ausgefiihrt wurden.

Fig. l.

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Bender,'Meningitis dutch Influenzabazillen.
Tabelle II.

181

to. Tier

i J

Tag der

ImpfuDg j

!

1. Kanin -

11. III. 1921!

chen

1

W 215

30. III. 19211

13. IV. 19211

Material

Injek-

tionsart

124. IV. 1921

Kanin-
chen
W 240

;3. V. 5 Uhr
nachmittagB

hagen - Kultur

*/, Oese 24-etiind.Levin-| intraven.
t hal-Kultur

1 Oese 24-stiind. Levin-
thal-Kultur

4 Oesen 24-atund. Levin-! „
thal- Kultur
des Patientenstamnies j

l L 24-stund. Levi n thal-j intraven.
Kultur des Patienten-j
stammes

Ergebnis

Tier bis 9. V. gesund.
Anfangs- und Endgewicht
1870-2220 g

9. V. Entblutung: Innere
Organe gesund

! 4. V. vormittags 10 Uhr
15 Min. Tod unter starker
Dyspnoe. Geringe epipleu-
rale Blutungen; in Ori-
ginalausstrichen (Lunge,
Milz, Herzblut) keine Bak-
terien sichtbar; in Herz¬
blut, Milz und 1-eber In¬
fluenzabazillen in Rein-
kultur. Angesichts der
groGen injizierten Bazillen-
‘ menge ist hier der Tod
I jedeofalls durch Vergif-
| tung bedingt

3. Kanin¬
chen

W 220

i

6. V.

•

1 Oese 24-stiind. Levin-
t h a 1 -Kultur des Passace-
stammes aus Herzblut des
Kaninchens W 240 (Nr. 2
der Tabelle) geziichtet

intraven.

22. V. Tier gesund

4. Kanin¬
chen

W 37

j

9. V.

1 Oese 24-stiind. Levin-
thal-Kultur des Patien-
tenstammes

endolum-

bal

nach 4 8td. schlaffe Lah-
mung der Hinterpfoten
(Stichverletz. des Riicken-
raarkes). Tier sonst gesund
bis 26. V.

7. Meer-
schw.

W 41

3. V.

1 Oese 24-stiind. Levin-
thal-Kultur des Patien-
j tenstammes

II. . 1

intraperi*

toneal

22. V. Tier gesund. An-
fangs- und Endgewicht

380—380 g

6. Maus
114 |

3. V.

l / 10 Oese 24-stiind. Le vi n-
! thal-Kultur

intraperi-

toneai

22. V. Tier gesund.

Durch subkutane, intraperitoneale, intravenose und endolumhale In-
jektion selbst verhfiltnismSBig holier Mengen des aus dem Lumbalpunktat
gezflchteten Starames ist es also nicht gelungen, bei Kaninchen, Meer-
schweinchen und Maus eine PathogenitSt festzustellen. Dagegen ist die
Giftwirkung ebenso wie beim Influenzabazillus vorhanden.

Das morphologische, kulturelle und tierpathogene Verhalten des von
mir iu einem Fall von Meningitis aus dem bei Lebzeiten entnommenen
Lumbalpunktat in vivo in Reinkultur geziichteten, gramnegativen Stab-
chens zeigt also diejenigen Eigenschaften, die ihn nach dem Stande
unserer heutigen Kenntnisse als Pfeifferschen Influenzabazillus kenn-
zeichnen.

Als 4. Hilfsmittel zur Identifizierung mit dem Pf eifferschen Stiib-
chen wurde nun auch noch versucht, die Methode der Agglutination
heranzuziehen. Diese ergibt allerdings bisher beim Influenzabazillus
nor recht wenig verwendbare Resultate. Demgennill zeigte sich auch

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182

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

hier, daB durch 1 polyvalentes und 2 monovalente Kaninchen-Immunsera
(Laboratoriumsstamme) der Meningitisstamm nicht agglutiniert wurde,
wahrend die homologen St8mme immer, und andere heterologe Stimme
oft agglutiniert wurden. Ein Immunserum, das mit dem Meningitis¬
stamm hergestellt wurde (siehe Tierversuch Nr. I Kanincben W 215)
agglutinierte den eigenen Stamm bis zur Verdunnung 1 :800, einen
fremden Stamm bis zur Verdflnnung 1:100 und 3 fremde Stamme gar
nicht. Aus diesem Ergebnis der Agglutination konnen wir also keinerlei
brauchbare Schliisse ziehen.

Bei der Seltenheit der Affektion erscheint es eigenartig, daB ich
wenige Tage spater Gelegenheit hatte, einen ahnlichen Fall, allerdings
nur unvollstandig, zu untersuchen. Die kurze Mitteilung dflrfte deshalb
besonders wertvoll erscbeinen, weil es mir hier gelang, den Influenza*
bazillus* unmittelbar nach dem Tode in Reinkultur aus dem Herzblut za
ziichten.

Fall 2 (Frl. Dr. Land6): Es handelt sich um einen 6y 2 Mon. alten
Saugling, der bereits vom 8. Jan. bis 26. Jan. 1921 wegen Broncho¬
pneumonia und Meningismus behandelt wurde. Die damalige Lumbal*
punktion ergab klaren Liquor ohne entzundliche Erscheinungen mit
kaum vermehrtem Druck. Mitte Februar erkrankte dann das Kind unter
Hasten und Erbrecben. Neben hochgradiger Pharyngitis und beider-
seitiger Bronchopneumonia bestand ein ruhrartiger Darmkatarrh. Am
Tage vor dem Tode traten Varizellen auf und gleichzeitig die Zeichen
einer ausgesprochenen Meningitis.- Bei der Lumbalpunktion wurde unter
vermehrtem Druck etwa 15 ccm leicht getrflbten Liquors abgelassen.
5 Min. nach dem Tode wurde die Herzpunktion vorgenommen und uns
das so gewonnene Blut zur bakteriologischen Untersuchung Qbersandt.
In der angelegten Blutbouillon wuchsen typische Influenzabazillen in
Reinkultur.

Bei der Sektion (Dr. Braun) fanden sich in den Lungen bronchopneumooische
Herde, beiderseits Empyem, Hyperamie und Blutaustritte im Dickdarm, Vergrofierung
und teilweiser Zerfall aer Follikel und Peyerschen Plaques. Die Milz war vergrSBert
und weich, Nieren und Leber anamisch und verfettet. Die meningealen Verapde-
rungen waren hier erst gering, indem nur ein starkes Oedem der getrubten Pia mit
stellenweiser schwach gelblicher Verfarbung besonders an der Konvexitat vorhanden war.

Ein direkter Abstrich der Flflssigkeit von der Gehirnoberflache ent-
hielt reichlich polynukleare Leukozyten und massenhaft meist extrazellulSr,
selten intrazelluiar gelagerte gramnegative, feinste, oft wie Diplokokken
aussehende, vereinzelt in Fadenform gelagerte Stabchen. Im Verein mit
dem positiven kulturellen Nachweis der Influenzabazillen im Blut sind
auch die im Meningealeiter gefundenen Stabchen als Influenzabazillen
anzusehen. Auch hier lautet also die Diagnose Influenzameningitis.

Beachtenswert in den Krankengeschichten erscheint noch, daB in
beiden Fallen im ersten 9 Monate, im zweiten 5 Wochen vor Ausbildung
der Influenzameningitis ein Krankheitsbild bestand, das wir als Menin¬
gitis serosa bezeichnen. Vielleicht schuf diese flberstandene meningeale
Affektion eine gewisse Bereitschaft zur Lokalisation der 2. tbdlichen In-
fektion, eine Ansicht, die ja bereits von vielen Autoren geteilt wird.
Pesina (3) teilt mit, daB zwar die Meningitis serosa der Kleinkinder
an sich eine gunstige Prognose bietet, aber die Empfanglichkeit fflr
spatere Erkrankung an Meningitis tuberculosa und Neuroscn steigert.
Es erscheint vielleicht wichtig darauf hinzuweisen, daB dann auch die
kurz dauernde Meningitis serosa arteficialis, wie wir sie als Folge von
Lumbalpunktionen doch nicht zu selten sehen, nicht als so harmlos zo

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Bender, Meningitis (lurch Infiuenzabazilien.

183

bezeichnen wfire, da auch sie dann immerhin die Entstehung sp&terer
meningealer Oder cerebraler Erkrankungen begunstigen kbnnte.

Nachdem ich den Nachweis geftihrt habe, daB es eine echte, durch
das Pfeiffersche Stabcben bedingte Influenzameningitis gibt, mbchte
ich noch kurz die Aetiologie der Encephalitis lethargies streifen. In
nicht seltenen Fallen (z. B. Loewenthal) ist es ja gelungen, aus der
Milz den Influenzabazillus zu ztichten. Bemerkenswert ist noch der Be-
fond von Ziegler, der vor kurzem ans dem Lumbalpunktat eines Falles
Influenzabazillen und Pneumokokken ztichten konnte. Auch die Olsen-
schen Untersuchungen verdienen Beachtung, der in 4 von 10 Fallen im
Rachensekret Influenzabazillen nachweisen konnte. Ich hatte nun Qe-
legenheit, leider nnr ein kleines Material, und auch dieses nur unvoll-
stSndig untersucken zu kbnnen. In 7 vollstandig klaren Lumbalpunk-
taten, sowie in drei von der Leiche entnommenen Ventrikelpunktaten
konnte ich weder den Diplococcus pleoraorphus Wiesner finden,
noch auch trotz genauester Dunkelfelduntersuchung den Sittmann-
schen Spirochatenbefund bestatigen. 5 Lumbalpunktate waren steril, in
der gegossenen Blutplatte (0,5 Kaninchenblut, 0,75 Lumbalpunktat, lOccm
Agar) des 6. entwickelten sich bei Sterilbleiben der Kontrollplatte etwa
20 Mischkolonien eines schlecht wachsenden, nicht h&molytischen Sta¬
phylococcus aureus mit feinen, gramnegativen Stabchen. Die Iso-
lierung der Stabchen gelang nicht. Sie wuchsen immer nur als Misch¬
kolonien oder in naebster Nahe der Staphylokokkenkolonien als feine,
tautropfenahnliche, durchsichtige Kolonien. In der 6. Generation wuchsen
nnr noch die Staphylokokken. Die ausgeprflgte Symbiose mit den
Stapbylokokken, das Aussehen der Kolonien sowie die Morphologic der
auBerst feinen Stabchen auch in ihrer Gesamtlagerung in Klatschpra-
paraten lassen trotz fehlender Isolierung die Diagnose Influenzabazillns
mit an Sicherheit grenzender Wahrscheinlichkeit stellen. Auf den Be-
fnnd von vereinzelten, feinen, gramnegativen Stabchen in einem der beiden
steril gebliebenen Ventrikelpunktate mochte ich wegen der Schwierigkeit
der Identifizierung nicht allzuviel Wert legen. Einen merkwflrdigen
Befnnd zeigte das 3. Ventrikelpunktat, da in ihm der Streptococcus
viridans in Reinkultur vorhanden war. Dieser Befnnd des Strepto¬
coccus viridans im Zentralnervensystem ist wohl bisher nicht er-
hoben worden, wenn nicht der von House gleichfalls aus dem Gehirn
eines Falles von Encephalitis lethargica gezQchiete Streptococcus
mit grflnem Hof auch ein Streptococcus viridans war. Das Vor-
bandensein einer Endocarditis war in meinem Falle klinisch und patho-
logisch-anatomiscb auszuschlieBen. In einem weiteren Fall, der klinisch
mit einer aknten Endocarditis kompliziert war, konnte ich aus dem
Veneublut gleichfalls den Streptococcus viridans ztichten. Es ist
wohl anzunehmen, daB in dem 1. Fall die Viridans-Sepsis sich erst
im Anfangsstadium befand, so daB ihr typisches Symptom, die Endo¬
carditis sich noch nicht entwickelt hatte.

Zusammenfassung.

In Zeiten von Influenzaepidemien hat die bakteriologische Unter-
suchung von Lumbalpunktat und Gehirn wiederholt das Vorhandensein
Infloenzabazillen-Ahnlicher Bazillen ergeben. Sie waren in einem er-
heblichen Teil der Ffille in Reinkultur im Gehirn, den Lungen und
anderen Organen nachweisbar, so daB ihre atiologische Bedeutung sehr

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184 CentralbL f. Baku etc. I. AbU Originate. Bd. 87. Heft 3.

wahrscheinlich ist. Ihre Identifizierung als echter Influenzabazillus ist
jedoch in den meisten Fallen nicht ausreichend gesichert. Vor allem
fehlt fast immer die Unterscheidung gegenOber dem stark tierpathogenen
hSmoglobinophilen Bazillus von Cohen.

In 2 hier nntersuchten Fallen von Sauglingen, die im AnscbluB an
eine Erkrankung des Atraungsapparates von Meningitis befallen wurden,
fanden sich im eitrigen Lurabalpunktat nnd anderen Stellen des Zentral-
nervensystems sowie auch in anderen Organen Bazillen, die dnrch ibr
kulturelles Verhalten als Influenzabazillen diagnostiziert wurden. In
einem dieser Falle wurde durch den Tierversuch die Differentialdiagnose
gegenOber dem Cohenschen Bazillus gesichert.

Die Zusammenstellung der in- und auslandiscben Literatur ergibt
folgende Symptomatologie der Influeuzameningitis:

Die Influenzameningitis ist eine fast ausschlieflliche Erkrankung der
Kinder nnterhalb des 2. Lebensjahres.

Die Erkrankung beginnt mit katarrhalischen, gastrointestinalen oder
prim5r-nerv6sen Symptomen.

Die klinischen Erscheinungen gestatten keine Differentialdiagnose
gegenOber den anderen eitrigen Meningitiden.

Die Mortalitat betrSgt bei Kindern unter 2 Jahren ca. 91 Proz., bei
Olteren Personen ca. 44 Proz.

Pathologisch-anatomisch erscheint die Erkrankung als Meningitis
cerebrospinalis purulenta, die in gleicher Weise die Konvexitat wie die
Basis des Gehirns ergreift und auf die RQckenmarkshSute flbergeht.

Als hSufigster Infektionsweg kommt in Frage der septisch-meta-
statische vom prim&ren Herd der Lungen aus, weniger oft die Ver-
schleppung der Keime vom Nasenrachenraum aus durch direkte Lymph-
bahnen zu den Meningen, vereinzelt auch direktes Uebergreifen von
einer Otitis media aus.

Bei Eucephalitis lethargica wurde in 1 Fall aus dem Lumbal-
punktat ein Bazillus gezflchtet, der als Influenzabazillus angesehen
werden kann, in 2 anderen Fallen der Streptococcus viridans,
und zwar einmal aus der Ventrikelfliissigkeit und einmal aus dem Venen-
blut eines mit Endocarditis komplizierten Falles.

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Loesberg, Em Blasenabszefl mit B. pyocyaneus etc.

185

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Tedesco, Centralbl. f. Bakt Abt. 1. Orig. Bd. 43. — Thomesco u. Grocerki, Rev*
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Bd. 56. 1910. — Wilkinson, ebenda. — Wiesner, Wien. klin. Wochenschr. 1917.
Nr. 30, u. 1918. Nr. 41. — Wollstein, Journ. exper. Med. Vol. 13. 1911; nach
Centralbl. f. Bakt Abt I. Ref. Bd. 50. 1911. — Ders., Amer. Journ. of Dis. of Childr.
Vol. 1. 1911. — Ziegler, Freiburg, med. Gesellsch. 25. Jan. 1921; nach Dtsch. med.
Wochenschr. 1921. Nr. 12.

Naohdruch verboten.

Ein Blasenabszess mit B. pyocyaneus und B. Proteus
anindologenes van Loghem als Mischerreger.

[Am dem Hygienisch-Bakteriologischen Laboratorium der Universit&t
Amsterdam (Direktor: Prof. Dr. R. H. Saltet).]

Von £. Loesberg, Med.-Cand.

Mit 2 Abbildungen im Text.

1905 hat van Loghem zum ersten Male die Aufmerksamkeit anf
eine Pro tens-Art gelenkt, welche in Peptonwasserkulturen kein Indol
bildet Mit der Salkowskyschen Indolreaktion entsteht wohl rote
Firbung, aber diese Farbe wird nicht durch Indol bedingt, sondern
durch and ere Substanzen (Pseudoindol).

Dies lfiBt sich dadurch beweisen, daB spezifische Indolreaktionen
keioe Rotf&rbnng geben. Es entsteht z. B. keine Indolreaktion, wenn
die flQssige Kultur bei 100° C destilliert und im Destillat die Ehr-
liche Reaktion vorgenommen wird, Oder wenn die Kultur mit Aether
geschQttelt, der Aether abpipettiert und dann die Ehrlichsche Reak-

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186

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

tion ausgefuhrt wird. (Indol hat namlich die Eigenschaft, im Destillat
iiberzugehen, wenn bei 100° C destilliert wird, und ist auch in Aether
loslich.)

Van Log hem nahm nun auf Grund dieser Eigentfimlichkeit Indol
gegeniiber eine Unterabteilung der Proteus-Bazillen an und nannte
die von ihm gefundene Art Bacillus proteus anindologenes.

. Die weiteren Eigenschaften des anindologenen Proteus sind
folgende:

Gram-Farbung —

Gelatine verfliissigt

Wachstura fakultativ anaerob

Indolbildung —

Pseudoindolbildung -f

1 Proz. Pepton Witte f Laktose —

7, Proz. NaCl-Ldsung Saccharose —

4- 6 Proz. Lacknius i- 1 Proz. | Mannit —

Petruschkvs Lackmusmolke erst rot, spater blau

Kartoffel gelb-brauner Belag

Hamolyse (5 Proz. Ziegenblut-Agarplatte) -f

schrieb Berthe-
lot mehrerePro-
teus-Bakterien,
die in Pepton-
wasser ebenfalls
kein Indol bil-
deten, wohl aber
in Tryptophan-
lbsungen (Tryp¬
tophan ist Indol-
alanin und eins
i der einfachsten

jS v, Spaltungspro-

schlieBt daraus,
daB es keinen
Proteus anin¬
dologenes gibt,
sondern daB die
von van Log¬
it am gefundenen
Stamme nur ab-
gesch wSchte,
indologene
Proteus-Bazil-
lensind. Groot
fand aber, daB
die verschiede-
nen Stamme von
£| van Loghem

Fi j in Tryptophan-

lbsungen kein

Indol bildeten, wohl aber alle Stamme Pseudoindolreaktionen

zeigten.

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Loesberg, Ein Blasenabszefi mit B. pyocyaneus etc.

187

Eine analoge Differenz wie zwischen Pepton und Tryptophan finden
wir bei Saccharose und Glykose. In Saccharose kommt das Glykose-
molekul auch vor, aber in viel zusammengesetzterer Verbindung. Es
gibt nun Bakterien, welche sowohl Glykose wie auch Saccharose ver-
garen, und andere, welche nur imstande sind, Glykose anzugreifen,
wahrend sie die Saccharose (= zusatmnengesetzes Glykosemolekfil) unbe-
riihrt lassen. Auf Grund dieser Differenz kann man 2 Bakterien doch
nicht als identisch betrachten. Es ist daher klar, daB der B. proteus
anindologenes van Loghem, welcher nach Berthelots Ansicht
nicht imstande ist, das ganze Peptonmolekul anzugreifen * wohl aber
das abgebrochene Peptonmolekul (Tryptophan), als eine Unterabteilung
der Proteus-Gruppe zu betrachten ist.

Ob die Ansicht
Berthelots wirk-
lich richtig ist, wird
sich noch zeigen.

Durch Zufall er-
hielt ich einen Ba-
zillenstamm zur Un-
tersuchung, welcher
von Dr. J. A. van
Hass el t aus hell-
grunem Urin, der
steril aufgefangen
war, geziichtet wor-
den war.

Herr Dr. E n -
gel kens und Dr.

J. A. van Has-
selt, welche die
Kranke behandelten,
werden den klini-
schen Verlauf aus-
fuhrlich beschreiben,
doch halte ich es fur
wiinschenswert,

fiber die Herkunft dieses Bakterienstammes das Allernotigste zu be-
merlcen:

Der Pat. wurde wegen doppeUeitiger Salpingitis und Oophoritis der Uterus mit
den rechten Adnexis exstirpiert. Nach gunstiger Wundheilung stieg die Temp, nach
5 Tagen plbtzlich auf 39° C, sank nach 4 Tagen wieder, und gleichzeitig wurde mit
dem Urin eine grofie Menge gasreichen, hellgriinen Eiters frei. Die Wuude usw. wurde
sofort untersucnt und ein retrovesikaler AbszeS konstatiert, dessen gasreichcr, griiner
Eiter mit dem Urin zum Vorschein kam. Aus den Ureteren wurde mittels Katheter
normaler Urin aufgefangen. Der Eiter stammte also nicht aus einem NierenabszeU.
Der Urin wurde beim Stehen immer griiner und griiner.

Eine 24 Std. alte, aus einem steril entnommenen Urin stammende
Schrfigagarkultur war dunkelgriin gefarbt. Da bei der Katheterisierung
der Pat. neben Urin eine grofie Menge Gas frei wurde, drSngte sich
mir alsbald der Gedanke auf, es mit einem Proteus-Bazillus zu tun
zu haben. DaB aber eine so intensiv griine Ffirbung des Agars von
einem Proteus verursacht wurde, war unwahrscheinlich, vielmehr
konnte es sich vielleicht um eine Mischung von 2 Bakterien handeln,
nfimlich den B. pyocyaneus und den B. Proteus. Impfung im

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188

CentralbL i. Bakt. etc. L Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

Kondenswasser des Schr&gagars, also ganz am Boden des Reagenz-
robres, best&tigte mir, daB das Bakterium stark ausschw&rmte, da eine
reiche Kultur in 1' Tage, die ganze Agaroberfl&che entlang, emporge-
stiegen war. Gram- F&rbung und Untersuchung des h&ngenden
Tropfens zeigten, daB es sich um ein stark bewegliches, gramnegatives
St&bchen bandelte.

Um nun die verschiedenen Bakterien rein voneinander zn erhalten,
wurden Gelatineplatten gegossen. Aber nach 24 Std. war bei 24® C
alle Gelatine vollst&ndig verflflssigt, worauf versncht wurde, ein besseres
Resultat durch Impfung immer weniger Bakterien zu erhalten. Aber
auch hier waren die Platten g&nzlich verflflssigt, Oder es war nichts
darauf gewachsen; niemals konnten gesonderte Kolonien unterschieden
werden.

Da es also wegen der starken Ausschw&rmung unmdglich war, aaf
diese Weise Reinkulturen zu bekommen, wurden Agarplatten gegossen
und bei 24° C bebrfltet. Jetzt wurde nicht haehr der N&hrboden ver¬
flflssigt und das Ausschw&rmen verminderte sick bedeutend, so daB
unter dem Mikroskop gesonderte Kolonien unterschieden werden konnten.
Ich impfte etwas davon ab, und so gelang es nun, einen B. pyocya-
neus und einen B. Proteus reinzuzflchten. Der B. pyocyaneus
zeigte gar keine Eigentflmlichkeiten, der B. Proteus (genannt Pro¬
teus D) hatte folgende morphologische und kulturelle Eigenscbaften:

Morphologic

Gram-Farbung

Ausschwarmung

Wachstum

Agar

Laktosebouillon

Glykosebouillon

Milch

Peptonwasaer

Bouillon

Kartoffel

Lackmusmolke

GlukosePepton-Lackmus-Loeung
in Wasser

St&bchen mit vielen peritrichen Geifieln; stark
beweglich

sehr stark
fakultativ anaerob
grauweifier Belag

Triibung; kein Gas; Bautchen an der Ober-
flache

Triibung; viel Gas; Sediment

keine Kx>agulation; keine Peptonifikation

wenig triibe

Triibung; Hautchen an der Oberfliche

gelber Belag

wenig rot und triibe

rot; triibe, Sediment

Indol {

Ehrlichsche Reaktion in)
1 Proz. Pepton Witte >
‘/, Proz. NaCl-Ldsung J

kein Indol

I Salkowskysche Reak-1
tion in derselben Ldsung /
E n d o - Platte
Hamolyse

Gelatineeticbkultur

Roter Bing
leicht rosa

kein; Platte scbokoladenbraune ^mothamo-
globine) Farbe; starke Ausschwarmung
verflusBigt; unscharfe Konturen.

t

l

.i

Nachdem das Bakterium reingezflchtet war, gelang es auch, die
Kolonien auf der Gelatineplatte und auf der Agarplatte zu erhalten.
Fig. 1 zeigt die 15 Std. alte Kolonie auf Gelatine.

Fig. 2 die 24 Std. alten Kolonien auf Agar.

Aus beiden Figuren ist deutlich zu sehen, daB die Ausschw&rmung
auf Gelatine sehr viel st&rker ist als auf Agar.

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Loesberg, Ein Blasenabszefl mit B. pyocyaneus etc.

189

Folgende Tabelle zeigt die S&urebildung aus verschiedenen Zuckern:

Neutral b Proz. Lackmustinktur-, 1 Proz.

Pepton Witte, 7* Proz. NaCl-Lbsung in Saurebildung
Wasser +

a) 1 Proz. Glukose +

b) 1 „ Laktose —

c) 1 „ Maltose —

d) 1 „ Mannit —

e) 1 „ Saccharose —

Es frug sich jetzt noch, ob die von mir eliminierte Bakterie auch
in Tryptophanlfisungen Indol bildet Oder nicht. Ich impfte daher diesen
Bazillus in eine Nfihrlfisung folgender, Zusammensetzung: Pepton
Witte: 10 g, NaCl: 5 g. Tryptophan: 1,5 g, Leitungswasser: 1000 g.

Nach 3 Tagen waren die Reaktionen von Ehrlich and S a 1 -
kowsky positiv. Destillierte ich aber und priifte das Destillat
auf Indol (Indol geht im Destillat tiber, wenn man bei 100° C destil-
liert; im Residuum findet sich also kein Indol), so fand ich: Ehrlich
neg&tiv, Salkowsky negativ, bei denselben Reaktionen in residuo
land ich: Ehrlich positiv, Salkowsky positiv.

Die Stoffe, welche hier mit Ehrlich und Salkowsky Rotf&rbung
geben, sind also kein Indol. Damit wurde wiederum der Beweis
geliefert, daB in Tryptophanlfisungen Bac. Proteus anindologenes
keine Spur Indol bildet. Dasselbe hatte Groot (1917) far die
verschiedenen St&mme von van Loghem gefunden.

Die Folgerung Berthelots fiber die Indolbildung findet
ihren Grund in folgendem: Die Ehrlichsche Reaktion gait, bis
Steensma die Unrichtigkeit der Annahme nachwies, als eine spezi-
fische Indolreaktion. Ich bin auch der Ansicht, daB man, urn die Indol-
bildung eines Bakteriums zu prfifen, immer entweder die flfissige Kultur
destillieren muB bei 100° C und im Destillat die Ehrlichsche Reak¬
tion vornehmen, oder die Kultur mit Aether zu schfitteln, diese abzu-
pipettieren und im Aether die Ehrlichsche Reaktion vorzunehmen.

Zor weiteren Identifizierung des Bazillus habe ich auch agglutina-
torisch die Eigenschaften mit Seren von Kaninchen bestimmt, welche
mit 2 Stfimmen von van Loghem immunisiert waren und mit dem von
mir gefundenen „Stamm D“. Ich benutzte zu diesen Reaktionen also:

Somm T / Kaninchen immunieiert mit B. Proteus \ Titer mit bomologem Stamm

m A \ anindologenes D. / 1 s 1000

Sprnm Ti / Kaninchen immunisiert mit B. Proteus \ Titer mit homologem Stamm
\ anindologenes Elders. / 1:2500 .

Seram III \ Kaninchen immunisiert mit B. Proteus 1 Titer mit homologem Stamm
\ anindologenes Swaan. / 1:2500

In folgender Tabelle ist das Resultat wiedergegeben:

Serum I (Proteus anindologenes D)

Bazillensuspension

von

Verdunnuug des Serums

1:50

1:100

1:250

11:500

1: 1000

Kontr.

f D

clar

clar

clar

1 + + +

+

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9

9 1

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•§ 5 §

Pneumaturie

—

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Krdl 167

(clar)

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190

Centralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originate Bd. 87. Heft 3.

Serum II (Proteus anindologenes Elders),

Bazillensuspension

Verdiinnung des Serums

von

1:50

1:100

[l: 250

1:500

1:1000

1:2500 1 : 5000|l:10000 Kontr.

©

p i

Elders

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clar

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Pneumaturie

(clar)

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Krai 167

I clar

clar

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1

1

Serum III (Proteus anindologenes Swaan)

Bazillensuspension

Verdiinnung des Serums

% von

8

8

1:25011:500 1:1000 1:2500ll: 5000

1:10 000 Kontr.

de Swaan

clar

clar

(clar) (clar) + + + ((+))

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_ _

© D

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((d))

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§. i ® Elders

cl

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2 2 S Pneumaturie

cl

(cl)

(cl) 4-4" 4- 4-4- 4-

—

- —

Jo2 Kr.il K.

cl

cl

4-4-4- 4-4- 4- (4-)

—

- -

flp 4 Urine I

cl

cl

(cl) ++ + (+)

—

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< TI

(cl)

((d))

+++ ++ + (+)

—

- -

( Krdl 167

clar

(cl)

+++ ++ + —

—

- -

Erklarung der Zeichen:

Klarifikation = Tiichtiger Bodensatz; obenstehende Flusaigkeit ganz klar.
4-4-4- = Deutliche Agglutination (grobe Flocken). ++ = Weniger deutlxch. + =
Noch sichtbare Agglutination. (+) = Schwache Agglutination. — = Kleine Agglu¬
tination.

Bezfiglich des Verlaufs der Agglutinationsreaktion bei der Proteus-
Gruppe war es auffallend, daB derselbe ganz anders war, als wir es bei
Typhus, Cholera usw. gewOhnt sind. Bei der Proteus -Gruppe war die
Agglutination sehr grobflockig; bald sanken die Flocken zu Boden, so
daB die obenstehende Flussigkeit ganz klar oder homogen trfib war.
Ein deutlicher Bodensatz mit flockiger, darttberstehender
Flfissigkeit zeigte sich nie.

Diese Agglutinationen lehren am deutlichsten: 1) daB der von mir
untersuchte B. Proteus D zu der Unterabteilung der Proteus-Gruppe
gehfirt, welche van Loghem Bac. Proteus anindologenes nannte,
weil diese StSmme bis zur Titergrenze der spezifischen Sera agglu-
tinierten; 2) daB die anindologenen P r o t e u s-Bazillen nicht nur bio-
chemisch, sondern auch agglutinatorisch in eine bestimmte Gruppe ge-
hSren; die indologenen Stfimme verhalten sich agglutinatorisch den
anindologenen Stammen gegeniiber ebenso wie z. B. Paratyphus A zu
B. typhi.

Die Habitilationsschrift von Groot gibt genaue Auskunft fiber die
serologischen Ergebnisse verschiedener indologener P r o t e u s-St&mme.

Literatur.

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1013. p. 2(51.) — Berthelot, A., Rccherches lur le Proteus vulgaris. (Ann.de
lTnst. Pasteur. 1014. p. 839.; Reclierches sur quelques caractfcres du Proteus vul¬
garis. [These.] 1913. — Bohnie, Die Anwenduug der Ehr lichschen Indolreaktion
tur bakteriologische Zwecke. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 40. S. 129.) —

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191

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Le Bac. proteus, sa distribution dans la nature. (Ann. de lTnst. Pasteur. 1911.
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u. Hachla, Beitrag zur Kenntnis der Proteus-Bakterien. (Zeitachr. f. Immunitatsf.
Bd. 11. 8. 310.) — Groot, K. P., Bijdrage tot de rangschikking der zoogenaamde
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Ders., Over het voorkomen van Proteus-Bazillen bij den mensch, in het bijzonder
bij gezondeen zieke zuigelingen. (Tijdschr. v. Geneesk. 1918.) — Ders., Bacterium.
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1914. p. 102.) — Steensma, F. A., Ueber den Nachweis von Indol und die Bildung
Ton Indol vortauschenden Stoffen in Bakterienkulturen. (Centralbl. f. Bakt. Abt L
Orig. Bd. 41. 8. 295.) — Ders., Ueber Farbenreaktionen der Eiweifikorper des Indols
und des Skatols etc. (Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. 47. 8. 25.) — Sullivan, M.;
Indolbildung auf eiweifihaltigeNabrbdden. (Centralbl. f. Bakt Abt. I. Ref. Bd. 40. S. 348.)
— Wolf, 8., Beitrage zur Lehre der Agglutination mit besonderer Bezugnahme auf
die Differenzierung aer Coli- und Proteus-Gruppe und auf die Mischinfektion.
(Centralbl. f. Bakt Abt I. Bd. 25. S. 311.) — Zipfel, H., Zur Kenntnis der Indol-
reaktion. (Centralbl. f. Bakt Abt I. Orig. Bd. 64. S. 65.) — Ders., Weitere Beitrage
m Kenntnis der lndolreaktion. (Ebenda. Bd. 67. S. 572.)

Nachdruck verboten .

Ueber Cblamydozoa-Strongyloplasmen.

VIII. Ueber Gefliigelpocke 1 ).

fAns dem staatl. serotherapeutischen Institut in Wien (Vorstand: Hofrat

Prof. Dr. R. Paltauf).]

Von Privatdozent Dr. B. Lipschtttz.

Fflr vergleichende Studien flber Chlamydozoen bieten Untersuchungen
fiber GeflQgelpocke den besonderen Vorteil, Einzelfragen unter leichten
Arbeitsbedingungen, ganz nach Belieben des Untersuchers studieren zu
kfinnen. Fur das tiefere Verstandnis der „Einschlulikrankheiten“ schienen
mir aber seit vielen Jahren gerade derartige vergleichende Unter-
snchungen lehrreich zu sein und die in friiheren Mitteilungen 2 ) be-
schriebenen Befunde bei Paravakziue, bei Herpes zoster, Herpes fe-
brilis und Herpes genitalis konneu fur die Richtigkeit der eingeschlagenen
Arbeitsmethodik angefiibrt werden.

1) Der gr56te Teil der Untersuchungen wurde in der V r orkriegszeit ausgefuhrt
und geiangt aus auBeren Griindon erst jetzt zur Veroffentlichung.

2) Ueber Chlamydozoa-Stroiigyloplasmen. (Wien. klin. Wochensehr. 1919 u. 1920
u - Wien. med. Wochensehr. 1921 .)

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192

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 8.

1) In mikroskopisch-tinktorieller Hinsicht hat sich bei der Geflflgel-
pocke zunfichst die bemerkenswerte Tatsache ergeben, daB die Zell-
einschliisse — fihnlich dem Verhalten der G uarnierischen KQrper und
der von mir beschriebenen „Paravakzinek6rper tt — amphophil sind.
Die „GeflQgelpockenk8rperchen u f&rben sich demnach bei der Behand-
lung mit einem basischen and einem sauren Farbstoff (z. B. bei der
H&malaun-EosinfSrbung) mit dem sauren Farbstoff, sie sind azurophil
nach Giemsa, w&hrend sie bei Behandlung mit einem Gemisch zweier
basischer Farbstoffe (z. B. mit Pappenheims Farbstoff) zum Methyl-
grfln Affinitat zeigen. Nachdem in der letzten Zeit ausgefQhrte Unter-
suchungen ein ahnliches Verhalten auch der. KerneinschlOsse bei Herpes
zoster erbracht haben, dflrfte es sich urn ein in tinktorieller Hinsicht
allgemein giiltiges gesetzmafiiges Verhalten . der Zelleinschlttsse
handeln.

Die „GeflQgelpockenk5rperchen“ treten ansschlieBlich im Protoplasma
der Retezellen der Epidermis, bzw. im Follikelepithel hervor; Kernein-
schliisse, wie sie bei der Variola und Paravakzine zur Ausbildung ge*
langen, werden hier regelmtBig vermiBt. Aber auch im Corium sind
EinschlQsse — wiederum im Gegensatz zur Variola der Affefi und za
den bei Herpes zoster erhobenen Befunden — nicht anzutreffen. Die
strenge Beschrankung der Gebilde auf das Protoplasma der Epithelzellen
und das verschiedenartige farberische Verhalten einerseits der EinschluB-
gebilde, andererseits der Kernbestandteile lassen mit Sicherheit die
SchluBfolgerung annehmen, daB in genetischer Hinsicht die „Ge-
flQgelpockenkQrperchen tt nicht von praformierten Kern-
bestandteilep abzuleiten sind. Zum gleichen Ergebnis fuhrt
auch die Untersuchung der mit Taubenpockenvirus geimpften Cornea
des GeflQgels (Taube). Auf diese Tatsache muBte hier in KQrze ein-
gegangen werden, weil in jflngster Zeit der Versuch gemacht worden
ist (Hammerschmidt), gerade das Verhalten der EinschlQsse bei der
Taubenpocke als StQtze fQr die nukleolare Genese der EinschluBgebilde
heranzuziehen — eine Ansicht, gegen die ich schon in einer fruheren
Mitteilung („Ueber die Herkunft der Guarnierischen K5rper u ) ein-
gehend Stellung genommen habe. Nur die „B enda schen K5rperchen“
bei der GetlQgelpocke (abgebildet im Handb. d. path. Protoz. in meinem
Beitrag „GeflQgelpocke u Taf. V, mittlere Zeichnung Fig. 4 und 5) ent-
sprechen ins Protoplasma ubergetretener Nukleolarsubstanz und stellen
nach der von mir eingefQhrten Nomenklatur „ZelleinschlQsse II. Ord-
nung“ dar. Im Gegensatz zu diesen erweisen sich die eigentlichen
„GeflQgelpockenk5rper tt als „Viruskolonien im Gewebe“, die von Re-
aktionsprodukten lipoider Natur des Gewebes eingehQllt werden. Wird
diese EinschluBmasse (Lipoid) durch ein geeignetes Verfahren gelOst, so
gelingt es, wie dies von da Rocha-Lima zuerst gezeigt worden ist,
miihelos die Zusammensetzung des Zelleinschlufigebildes aus Strongylo-
plasmen nachzuweisen, Qhnlich wie ich es schon frQher (1911) ffir das
Molluscum beschrieben und abgebildet hatte (Arch. f. Derm. 1911).

Nach dem Verfahren von da Rocha-Lima habe ich die Fixation
kleiner HautstUckchen im Camoyschen Gemisch (Alkohol 6, Chloro¬
form 3, Acid. acet. glac. 1 Teil) vorgenonimen, die Paraffinschnitte mehr-
stiindig in Giemsa-Losung gefarbt und mit Azetonxylolgemischen
differenziert. Man erzielt dabei ungemein klare und lehrreiche Bilder,
die in mehrfacher Hinsicht Beachtung beanspruchen. An Stelle des bei
gewdhnlicher Farbung in der Regel homogen erscheinenden EinschlnB-

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Lipschiitz, Ueber Chlamydozoa-Strongyloplasmen.

193

gebildes findet man den EinschluB aus einer enormeo Aozabl kleinster,
intensiv rot gef&rbter Kdrperchen zusammengesetzt. Sie treten zu
groBeren und kleineren Haufen zusammen, die voneiDaoder durch helle,
offenbar verflussigter Plasmasubstanz entsprechende Rflume getrennt
sind. Im Gegensatz zu den Bildern beira Moliuscum contagiosum, bei
denen die Vermehrung der Strongyloplasmen schlieBlich (bis auf den
peripher verlagerten Kern) zur fast vdlligen Ausfflllung des Protoplasmas
der erkrankten Retezelle fflhrt, lassen die „Gefliigelpockenkdrperchen“
Doch einen Teil des Protoplasmas unver&ndert. Die intensive Rotffirbung
der Strongyloplasmen im Schnitt, die an Deutlichkeit den bekannten
Bildern der Trachomchlamydozoen nicht nachsteht, lassen die Ausfflh-
ruDgen Huntemflllers, der einerseits den Trachorabefunden para-
sitologische Bedeutung beilegt, aber den Strongyloplasmenbefunden beim
Moliuscum und bei der Geflflgelpocke die Anerkennung versagt, ganz
unverstandlich erscheineri. Gerade die histologischen Untersuchungs-
ergebnisse bei den 2 zuletzt genannten Affektionen stellen bedeuteude
Stutzen fflr die Cblamydozoenlehre dar und weisen gleichzeitig auf voll-
koramene Uebereinstimmung mit den Bildern in AusstrichprUparaten
der Strongyloplasmen hin.

An dieser Stelle mdchte ich noch in KQrze auf die Verteilung der
Zelleinschlflsse im Rete und auf ihr Verhalten in der geimpften Cornea
eingehen. Es war zunfichst von Interesse, auch den zeitlichen Mo-
menten des Auftretens der EinschluBbildung nach der Hautimpfung
nachzugehen. Histologische Untersuchungen haben diesbezflglich ge-
lehrt, was aucb im allgemeinen fflr die „EinschluBkrankheiten“ der Haut
Oeltung besitzt, daB die „Geflflgelpockenkdrperchen tt schon sehr frflh-
zeitig zur Ausbildung gelangen. 3 Tage nach kutaner Impfung, zu einer
Zeit, in der das charakteristische Hautbild der Gefliigelpocke noch gar
nicht angedeutet, vielmebr bloB die durch die Impfung gesetzte Kruste
wahrzunehmen ist, sind bereits anatomische Verinderungen (Akanthose)
and mittelgroBe, wohlgef&rbte Einschlflsse, namentlich im Follikel-
epithel anzutreffen.

Ueber das Verhalten der Zelleinschlflsse zum Rete Malpighi sei
erwahnt, daB die Basalzellenschicht und in der Regel auch die zweit-
nJchste Zellschicht — die normale Epidermis der Taubenhaut setzt sich
aus einer 1- bis hOchstens 2-reihigen Schicht platter Zellen zusammen
- keine EinschluBbildung aufweist, wflhrend in den hdheren Lagen das
Protoplasroa nahezu jeder Zelle einen EinschluBkdrper beherbergt. In
rergleichender Hinsicht sei erwflhnt, daB auch beim Moliuscum
contagiosum die Basalzellenschicht und die darauf folgenden 2—3 Zell-
lagen keine Einschlflsse enthalten, w&hrend bei der Variola Zelleinschlflsse
sich bereits im Stratum germinativum vorfinden. Auch bei Herpes zoster
konnte ich Kerneinscblflsse bereits in der Basalzellenschicht nachweisen.
Im Gegensatz zu diesen Befunden treten bei der Paravakzine EinschluB-
korper ausschlieBlich in den hdheren Lagen des Rete Malpighi, bzw. an
der Grenze zwischen Rete und Stratum corneum auf. Es ergeben sich
somit in der topographischen Lokalisation der EinschluBkorper im Epi-
thel bei den einzelnen hier angefflhrten Affektionen ausgeprflgte Unter-
schiede, auf die hiermit die Aufmerksamkeit gelenkt sei.

Das akanthotisch verflnderte Follikelepithel ist ungemein reich an
Zelleinschlflssen, doch ist auch hier das Stratum germinativum in der
Regel intakt. Wlhrend die meisten erkrankten, betrfichtlich geschwellten
Epithelzellen in der Regel nur einen groBeren, wohlausgebildeten „Ein-

Inte Abt. Ori*. B4. 87. Heft 8. 13

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194

Centralbi f. Bakt etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 3.

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schluBk6rper“ enthalten, begegnet man hier und da Zellen, die neben
einem m&ch tiger entwickelten EinschluBgebilde noch eine Reihe kleinerer,
.rundlicher, in der Nahe des grOBeren gelegene Kdrperchen beherbergen.
Obenbar konfluieren alle in sp&teren Stadien zur Bildnng des einen
groBen EinschluBgebildes.

Mit der Beobachtung des Auftretens der „Geflflgelpockenk5rper“ in
der geimpften Taubencornea wurden nach mehreren Richtungen hin be-
merkenswerte Erkenntnisse erzielt. In der letzten Zeit hat Star gar dt
die Zellver&nderungen der geimpften Hornhant n fiber studiert. In meinen
eigenen Untersuchungen wurde das Gewebe in Subliroatalkohol oder —
nach da Rocha-Lima — in Carnoyschem Gemisch fixiert und zu-
meist nach Giemsa geffirbt. Die Einschlusse treten in sehr betrficht*
licher Zahl auf und beschrfinken sich nicht allein auf die Impfritzen,
sondern reichen auch in deren weitere Umgebung. Sie liegen ausschliefi*
lich im Protoplasma der Epithelzellen, wobei jedoch die Basalzellen-
schicht in der Regel nicht befallen wird. Oft liegen mehrere in der-
selben Zelle und erreichen die GroBe des Zellkernes Oder flbertreffen
ihn urn mehr als das Doppelte. Der Form nach erscheinen die Ein*
schluBkdrper rundlich oder leicht unregelmfiBig begrenzt und unterscheiden
sich leicht in ihren ffirberischen Eigenschaften vom Zell kern. Letzterer
beherbergt keine fl Einschliisse“ und enthfilt 1 —2 tiefdunkel geffirbte
Nukleolen. Eine Ausstofiung von Kernsubstanzer. findet nicht statt;
auch sind die Zelleinschlflsse etwa 10—20mal grbfier als die Nukleolen.
Die mit Taubenpockenvirus geimpfte Hornhaut stellt ein mehr geeig-
netes Material fiir das Studium der Zelleinschlfisse dar und fiihrt mit
zwingender Sicherheit zur endgtiltigen Ablehnung der von einzelnen
Autoren vertretenen Ansicht von der nukleol&ren Genese der EinschluC*
gebilde.

2) In einer friiheren Arbeit habe ich Uber eine Reihe von Versuchen
berichtet, die sich mit der Frage der Immunisierung von Tauben gegen
das Virus der Geflugelpocke beschaftigten. Namentlich wurde auf den
Parallelismus der Immunisierungsvorgange mit GeflQgelpocken- und
Vakzine';irus hingewiesen. Hier mbchte ich noch auf einige erganzende
Versuche, die fflr das Verstandnis der Immunitat bei der Geflttgelpocke
von einiger Bedeutung sind, eingehen.

Nach Untersuchungen von Lowenthal, Burnet und mir gelingt
es regelmaBig das spezifische Virus in den Organen nachzuweisen, und
ich habe daher schon in friiheren Arbeiten betont, daB es sich bei der
Geflflgelpocke um eine Durchseuchung des Organismus handeln mOsse,
bei der allerdings bloB das Hautorgan klinisch und pathologisch-ana-
tomisch erkrankt, wahrend die Parenchymorgane frei bleiben. Dieses
eigentumliche Verhalten der Haut wurde durch eine maximal gesteigerte
spezifische Beziehung des Virus zur Haut erkiart und der Vorgang, der
auch bei anderen, der Getliigelpocke biologisch nahestehenden Affektionen
(Vakzine-Variola, Maul- und Ivlauenseuche etc.) nachgewiesen werden
kann, als D er m otr op is in u s bezeichnet.

Mit Riicksicht auf die bereits nachgewiesene Generalisierung des
Virus erschien es nun von Interesse, festzustellen : einmal, wann der
Uebertritt des Virus aus der erkrankten Haut in die Parenchymorgane
stattfindet, also in welcliem Zeitpunkte die Verallgemeinerung des Krank-
heitserregers nachzuweisen ist, und ferner, wie lange das Virus in
den inneren Organen am Leben bleibt, bzw. ob Unterschiede in der
Virulenz des Erregers, je nachdem mit Ilautmaterial oder mit Produkten

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Lipechutz, Ueber Chlamydozoa-Strongyioplasmen.

195

innerer Organe geimpft wird, bemerkbar sind. Zur Klfirung dieser Frage
babe ich Versuche in mebreren Heihen derart ausgeffihrt, dafi verschieden
lange Zeit nach kutaner Impfung — vom 6. Tage bis zu 6 Wochen —
die inneren Organe auf ihren Yirusgebalt durch weitere Hautimpfung
gesunder Tauben geprfift wurden. Es zeigte sicb dabei zunfichst, in
Best&tigung der Versuche Burnets, dafi erst am 8.—10. Tage Leber
und Milz Virus enlhalten. In der 2. Krankheitswoche scheint der Virus-
gehalt der Organe zuzunehmen. Von besonderem Interesse war jedoch
die mehrfach festgestellte Tatsache, dafi noch 4 Wochen nach vollkom-
mener Abheilung der Hauterscheinungen, etwas mehr als 6 Wochen nach
erfolgter kutaner Infektion, nachdem die Tiere eine vollstandig ausge-
bildete aktive ImmunitSt erlangt hatten, in den Parenchymorganen (aus
Sparsamkeitsgrflnden wurden in der Regel blofi Leber und Niere oder
Milz untersuclit) Virus experimentell in allerdings nicht sehr betrficht-
lichen Mengen zu finden war. Nach Beendigung dieser Untersuchungen
hat dann S an f el ice mitgeteilt, dafi er sogar 71 Tage nach kutaner
Impfung die inneren Organe virushaltig fand. Es geht also aus diesen
Versuchen hervor, daB der immune Organismus Parasitentrager
und dafi die erlangte Immunitat eine „Immunitas non sterilisans“ ist.

1st aber das Gediigelpockenvirus im Organismus generalisiert und
bleibt es l&ngere Zeit in den Organen erhalten, so kann die erlangte
Immunitat der Haut — wie dies auch Manteufel nach Abschlufi vor-
liegender Versuche ausffihrte — nicht blofi histogener Natur sein, mufi
vielmehr als Ausdruck der erlangten allgemeinen Korperimmunitat auf-
gefafit werden. Fiir diese Ansicht kann auch die Tatsache angeffihrt
werden, dafi Tauben auch durch intravenose Virusinjektion immunisiert
werden kfinnen, ohne dafi dabei krankhafte Hautverfinderungen auftreten
mflfiten. Durch die hier vertretene Anschauung nahern wir uns ge-
wissermafien der von filteren Autoren (z. B. Pfeiffer) aufgestellten
Ansicht fiber die Erlangung von Immunitat von im Korper zurflckge-
bliebenen Keimen. Bei der Geflfigelpocke ist eine derartige Annahme
experimentell fiberprfifbar, jedoch sind noch weitere Untersuchungen nach
dieser Richtung hin notwendig.

Zur Prage der Resistenz des Geflfigelpockenvirus mfichte ich in
Kurze anftihren, dafi in Glasrfihrchen mehrere Monate aufbewahrte, von
Schimmelpilzen flberwucherte Hautstiickchen kranker Tauben ihre Viru-
lenz entweder gfinzlich eingebfifit, oder doch eine ganz besonders aus-
gesprochene Abschwachung erfahren hatten. Da nach Marx und Sticker,
Barnet, sowie nach eigenen Erfahrungen die Eintrocknung noch nach
1 und l 1 /* Jahren die Virulenz keineswegs schadigt, erscheint die An¬
nahme naheliegend, die Starke Verunreinigung des Materiales mit Pilzen
fur die beobachtete Tatsache verantwortlich zu machen.

Ueber den Infektionsmodus konnte ich bisher in mehrjiihrigen
Untersuchungen zu keiner bestimmten Anschauung gelangen. Dringt
das Virus durch eine kleine Hautverletzung in den Korper ein, gelangt
daselbst zu allgemeiner Verbreitung und wird sekundar auf hamato-/
genem Wege verschiedenen Ilautstellen zugefuhrtV Oder handelt es
sich um eine primare HautaH'ektion V Oder stellt etwa der Darmkanal
i vielleicht die Speiserohre) die Eintrittspforte darV Fiir letztere An¬
schauung konnen die Angaben Burnets angefiihrt werden, dem es be-
kanntlich durch Ffltterungsversuche gelang, Tiere zu intizieren. In
eigenen Versuchen, in welchcn gesundc Tauben lange Zeit zusammen
mit kranken Tieren in demselben Kiifig unter gleiclien Ernahrungsbe,

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Original©. Bd. 87. Heft 3.

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dingungen gehalten warden, konnte kein einziges Mai eine Spontan-
erkrankung festgestellt werden, obwohl im Experiment bereits mit einer
1000-fachen Virusverdflnnung die Krankheit regelm&Big hervorzurufen
ist. Fur die spontane Erkrankung erscheint daher auch zweifellos eine
bestimmte, uns derzeit nicbt genau bekannte Eintrittspforte von Be-
deutung.

3) In den bisherigen Untersuchungen der durch filtrierbare Erreger
hervorgerufenen Hautprozesse ist den Coriumveranderungen in der Regel
nur geringe Bedeutung beigelegt worden. Nur Bose scheint ihnen in
aiteren Untersuchungen gerecht worden zu sein. Borrel, der wohl
als erster in seiner Studie „Les 6pith61ioses infectieuses et les 6pith6-
liomas u in systematischer Weise die durch EinschluBbildung und Fil-
trierbarkeit ihres Virus gekennzeichneten Krankheiten zu einer gemein-
schaftlichen Gruppe zusammengefaBt hat, legt hauptsSchlich auf die
Epithel- (bzw. Endothel-)VerSnderungen Wert, und v. Prowazek be-
rticksichtigt in den „Chlamydozoen“ ebenfalls vornehralich die Erkran¬
kung des Epithels. Diesen Arbeiten gegeniiber babe ich schon 1909
(3. Tagung der Freien Vereinigung fflr Mikrobiologie, Wien) den Kreis
der durch filtrierbare Erreger gesetzten Ver&nderungen erweitert und
betont: 1) daB das Vorkommen des Erregers im erkrankten Gewebe
vermutlich nicht ausschlieBlich an das Vorhandensein der Einschlfisse
gebunden ist, und 2) daB die Art der Reaktionsffihigkeit des erkrankten
Gewebes auf das Eindringen des filtrierbaren Virus sehr mannigfaltig
sein kann. Fur die hier in Betracht kommende Gefiflgelpocke konnte
gezeigt werden, daB neben der Bildung der in die Tiefe des Corium ;
reichenden Retewucherungen und dem Auftreten der „Einschlflsse u regel- ■
mSBig auch ausgesprochene Coriumveranderungen auftreten. Nur bei
Reischauer finden wir die kurze Bemerkung, daB die entzfindlichen,
die proliferativen Retezapfen umgebenden Coriurainfiltrate bisher mit
Unrecht vernachlassigt worden sind. Fflr die spezifisch-pathologische '
Bedeutung dieser Entziindungsprodukte spricht die Tatsache, daB ihr
Zustandekommen nicht allein nach kutaner, sondern auch nach iutra-
venoser Infektion erfolgt. Ihrem Charakter nach handelt es sich urn j
das ausgesprochene Bild der subakuten Entzfindungsform, bei welcber <
die einzelnen Herde stellenweise hoch hinaufreichen, namentlich dort,
wo die schmale, nicht infizierte Epidermis ihre normale Beschaffenheit
beibehalten hat; eine schmale Zone fibrill&ren, nicht erkrankten Binde- :
gewebes bleibt dann (fihnlich wie dies auch bei anderen Affektionen. i
z. B. bei Lepra, beim Boeckschen Sarkoid etc. der Fall ist) zwischen
Epidermis und entzfindlichem Infiltrat frei.

Besonders verdienen die in Haufen auftretenden Plasmazellen her- <
vorgehoben zu werden, und schlieBlich seien degenerative Verfinderungen {
und brtliche Nekrosen erw&hnt, die schon in der 2. Woche, meist in den (
zentralen Anteilen stSrker ausgebildeter Coriuminfiltrate, angetroffen j
werden. In den nekrotischen Herden siedeln sich h&ufig sekund&r sapro-
phytfire Mikroben an, die im Schnitt (namentlich in Pappenheim-
Pr&paraten) in Haufen nachzuweisen sind und in der Regel einem weifien
Staphylokokkus entsprechen. Die Coriumveranderungen stehen den Epi-
thelwucherungen an Masse und Ausdehnung nicht nach; sie reichen
haufig bis zur Subkutis oder selbst in letztere hinein. Einschlfisse sind '
im Corium nicht enthalten; fflr ihr Auftreten dflrften besondere 6rt-
licheMomente maBgebend sein, indem, wie es scheint, nurgewissen
Zellen die biologische Funktion der EinschluBbildung zukommt.

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Lipschiitz, Ueber Chlamydozoa-Strongyloplasmen.

197

Das Hervorheben der Corium verfinderungen scheint mir bei der
Aosfflhrung vergleichender Untersuchungen fiber „EinschluBkrankheiten“
der Haut von Interesse zu sein. Wird das Virus bei der natfirlichen
Infektion auf hfimatogenem Wege der Haut zugeffihrt (Variola, Geflfigel-
pocke, Schafpocke etc.), so stellen die Zellen des Corium den primfiren
Angriffspunkt ffir den Erreger dar. Dementsprecbend kommt es auch
bei der experimentellen Variola der Aifen zur Ausbildung Guarnieri-
scher Korper in den GeffiBendothelien des Corium nnd desgleichen treten
,Scbafpockenk5rper“ im Corium auf. Auch bei Varizellen (Tyzzer)
and Herper zoster (Lipschfitz) gelangen Zelleinsdhlflsse in den Kernen
der vakuolisierten Endothelzellen im Corium zur Ausbildung. Bei der
menschlichen Variola und bei der Geflfigelpocke werden sie jedoch da-
selbst vermiBt, obwohl sie in der Epidermis, zum Teil sogar schon in
der Basalzellenschicht in groGen Mengen angetroffen werden. Diese
dorch vergleichende Untersuchungen gewonnenen Tatsachen weisen auf
anGerordentlich weitgehende, feinst abgestufte Beziehungen, offenbar
chemischer Natur, zwischen Erreger und tierischer Zelle hin, wobei das
gleiche Virus bei verschiedenen Tierarten ein verschiedenes Verhalten
bezfiglich der EinschluGbildung zeigen kann.

4) Die von Lewis Hart Marks gemachte Mitteilung fiber gfln-
stige Versuchsergebnisse mit Salvarsan bei Vakzine, denen allerdings
die negativen Versuche von Camus, Nicolle und Conor undBelin
gegenfiberstehen, veranlafiten mich, die Wirkung des genannten Heil-
mittels auf das Virus der Taubenpocke zu studieren. Handelt es sich
doch bei Vakzine und Geflfigelpocke um in die gleiche Gruppe der
Chlamydozoa und Strongyloplasmen gehSrende Infektions-
erreger, die durch zahlreiche gemeinsame morphologische Merkmale und
biologische Eigentflmlichkeiten ausgezeichnet sind; eine gewisse Beein-
flossung des Virus erschien also a priori nicht unwahrscheinlich.

Zu den Versuchen wurden Tauben von 270—300 g Kfirpergewicht
benfitzt und zunfichst versucht, die Dosis maxima tolerata festzustellen.
Dabei konnte ich eine auGerordentliche Resistenz der Tauben gegenflber
der Injektion des Prfiparates feststellen.

Wahrend in den ersten Versuchen 0,015 g des Prfiparates pro Kilo-
gramm Versuchstier verwendet wurde, injizierte ich spfiter bis etwa
ungeffihr 0,2 g Salvarsan pro Tanbe. Nimmt man die derzeit Qbliche
Menge von 0,01 g pro Kilogramm Mensch als Dosis tolerata an, so er-
hielten die Versuchstiere mehr als die 60-fache menschliche Dosis auf
1 kg KGrpergewicht, also eine Menge des Prfiparates, die genfigend groG
erscheinen muGte, um eine Beeinflussung des Krankheitsprozesses er-
kennen zu lassen. Bemerkt sei auch, daB selbst auf grfiGere Dosen die
Tiere vollkommen munter blieben, keine Abnahme der FreBlust und
keine nervOsen Erscheinungen zeigten etc., bloB an der Injektionsstelle
im Musculus pectoralis kam es zur Bildung eines mfiBigen Infiltrates,
das nach 8 Tagen fast ganzlich geschwunden war.

Die Untersuchungen ffihrten zu folgenden Ergebnissen:

1) Eine Beeinflussung des Virus findet in vitro durch Salvarsan
nicht statt.

Versuch: 2 ccm einer neutralen Aufschwemmung des Prfiparates
(0,6 Salvarsan in 6 ccm Flfissigkeit) wurden mit 2 ccm der Virusemul-
sion gemengt, gut durchgeschtittelt und nach 1—24 Std. zur kutanen
Impfung verwendet.

Ergebnis: Kein Unterschied gegenuber der Kontrolltaube.

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198 ' Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

2) Dem Pr&parat kommt keine schQtzende Wirknng zu.

Versuch: 0,6 g des PrSparates werden in neutraler Aufschwem-

mung (nach Wechselmann) mit 6 ccm Wasser verrieben, damit
3 Tauben mit 0,5, 1,0 und 2,0 intramuskul&r injiziert. Nach 48 Std.
kutane Impfung mit virushaltigen Erusten.

Ergebnis: Nach 6 Tagen ist die Iropfang wie bei der Kontroll-
taabe aufgegangen.

3) Das Salvarsan besitzt keinerlei heilende Wirknng.

Versuch: 48 Std. nach kutaner Impfung, zu einer Zeit, in der die

geimpften Hautstellen noch keine pathologischen Verfinderungen zeigen
(im Inkubationsstadium), werden die Versuchstiere mit 2,0 und 1,0 einer
neutralen Aufschwemmung von 0,6 g des PrSparates in 6 ccm Wasser
injiziert.

Ergebnis: Nach 6 Tagen kein Unterschied gegenuber der Kon-
trolltaube.

Nach dem Ausfall dieser Versuche, welche einwandfrei beweisen, daB
dem Ehrlichschen Praparat keinerlei Wirkung auf das Taubenpocken-
virus zukommt, glaubte ich, davon absehen zu konnen, den EinfluB des
Salvarsans auf den Calmetteschen Versuch (intravenfise Injektion mit
angeschlossener traumatischer Hautreizung), der von Burnet und mir
vor langerer Zeit mit Tauben ausgeffihrt worden ist, zu verfolgen.

Literatur.

Belin, Rev. intern, de la Vaccine, 1911. — Borrel, Ann. Pasteur. 1903. — Bobc,
Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig. Bd. 34, 37 u. 39. — Burnet, Ann. Pasteur. 1906. —
Camus, Compt. rend. Soc. Biol. 1911. — Huntemiiller, Zeitechr. f. Chemother.
1914. — Lipschiitz, B., Handb. d. path. Protozoen. Bd. 1. — Ders., Ueber Chlamy-
dozoa-Strongylopiasmen. (Wien. klin. Wochenschr. 1919 u. 1920 u. Wien. med. Wochen-
schrift 1920./— Lowenthal, Dtsch. med. Wochenschr. 1906. — Manteufel, Arb.
a. d. Kais. Gesundheitsamte. 1910. — Marx u. Sticker, Dtsch. med. Wochenschr,
1902. — Nicolle et Conor, Compt. rend. Soc. Biol. 1911. — v. Prowazek, Handb.
d. path. Protozoen. Bd. 1. — da Rocha-Lima, Verh. d. dtsch. path. Gee. 1913. —
Reischauer, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 40. 1906. — Sanfelice, Zeitschr.
f. Hyg. 1914. — Stargardt, Zeitschr. £ Augenheilk. Bd. 41. 1919.

Nachdruck verboten.

Ueber Spirochaten in Wasserleitungen.

[Aus dem Institut fiir Hygiene und Bakteriologie der UniversitSt Bonn
(Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. R. O. Neumann).]

Von Priv.-Doz. Dr. F. W. Bach,

Assistent am Institut fiir Hygiene und Bakteriologie in Bonn.

Mit 1 Abbildung im Text.

Mikrobiologische Untersuchungen fiber die Wasserverh&ltnisse Bonus
und Umgebung, die seit langerer Zeit von seiten des hiesigen Institnts
fiir Hygiene vorgenommen werden, veranlaBten mich, auf das vor kurzem
bekannt gewordene Vorkommen von Spirochaten in Wasserleitungen 1 )
zu achten. Bei dieser Gelegenlieit gelang mir der Nachweis zweier

1) Uhlenhuth u. Zuelzer, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 85. 1921.
S. 141 t u. 154*.

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Bach, Ueber Spirochaten in Wasaerleitungeo.

199

SpirochStenarten in der Bonner stadtischen Wasserleitung, von denen
fir die eine Art der Fundort bis jetzt noch nicht bekannt sowie in bio-
logischer Hinsicht interessant ist.

Nach meinen bisherigen Untersuchungen beherbergt die Bonner
Wasserleitung 2 Spirochatenarten; andere als die im folgenden beschrie-
benen Arten wurden nicht beobachtet. Der Nachweis beider Spirochaten-
arten gelang nicht direkt, sondern durch Kulturverfahren, indem kleine
Stuckchen des an den Zapfhahnen gebildeten sogenannten organischen
Filzes in Reagenzgiasern mit ca. 4—5 ccm frischen Leitungswassers tiber-
schichtet und mit je 1 Tropfen menschlichen inaktivierten Serums ver-
setzt, im Dunkeln bei Zimmertemperatur (ca. 20° C) gehalten wurden.
Unter diesen primitiven Verhaitnissen traten in den „Kulturen“ schon
oach 5 Tagen neben zahlreichen verschiedenartigen Bakterien und ver-
einzelten Protozoen (Flagellaten und Ziliaten) die beiden Spirochaten¬
arten auf.

Die 1. Art war relativ selten. Sie fand sich nur in den ersten Tagen
der Kulturen etwas haufiger, und wurde sehr bald darin vermiBt., Schon
am Ende der 1. Kulturwoche muBten oft mehrere Praparate im Dunkel-
feld durchsucht werden, ehe sich Exemplare fanden. Dabei waren diese
wegen ihrer Gr6Be und der Art ihrer Bewegung nicht zu ubersehen.
In den von der Ausgangskultur nach 8 Tagen angelegten Subkulturen
fand sich diese groBe Spirochate noch gelegentlich. Kann es sich auch
hierbei immerhin nur um eine mechanische Uebertragung aus dem vor-
bergegangenen KulturrShrchen handeln, so mufi doch eine Vermehrung
unter kiinstlichen Bedingungen stattgefunden haben, da in dem zur An-
iage der 1. Kultur benutzten Material diese Spirochate direkt nicht ge-
funden wurde.

Das Dunkelfeld zeigte den Organismus als eine Kette stark leuch-
tender, relativ grofier Kiigelchen, die in einer geradezu krampfhaften
Bewegung sich befand. Die Spirochate windet sich planlos, verkrfimmt
nnd verknauelt sich, streckt sich aus und zieht sich zusammen und
kommt dabei nicht wesentlich von der Stelle. Ein freies Schwimmen
konnte nicht beobachtet werden. Anders dagegen ist die Bewegung,
wenn die Spirochate der Unterlage anbaftet. Dann horen die Ver-
schlingungen auf und sie bewegt sich, schlangenartig gewunden, ziem-
lich schnell von der Stelle, indem sie die Richtung ruhelos wechselt.
Unter dem Deckglase verliert der Organismus bald seine Beweglicbkeit:
im wachsumrandeten Praparate konnte bereits nach ca. Vs Std. volliges
Erloschen der Bewegungen festgestellt werden. Die flachen sekundaren
Windungen, die die Spirochate beim Kriechen auf der Unterlage zeigt,
werden von ihr, wenn sie frei im Wasser liegt, beibehalten, je nach
der Gesamtlange verschieden an Zahl, ebenso wie die engen primaren
Windungen, die im Dunkelfelde die Erscheinung leuchtender Kiigelchen
vernrsachen.

In osmiumfixierten, lufttrockenen und gefarbten Praparaten stellt
sich die Spirochate, entsprechend der Projektion des lebend dreidimen-
sionalen Gebildes in eine Ebene, dar als ein Band, gewellt Oder unregel-
maBig verschlungen, das in sehr feine, steile, enge und regelmiiBige
W'indungen gelegt ist. Diese engen, steilen Windungen sind bis an die
Enden zu verfolgen, Endfaden sind weder im gefarbten Praparat noch
im Leben zu beobachten. Die engen Windungen zeigen oft an der
Biegungsstelle keinen gleichmSBig abgerundeten Verlauf, sondern eine
schwache Zuspitzung, genau so, wie wenn man kiinstlich eine starre

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200 Centralbl. f. Rakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

Spirale in eine Ebene prefit. Gelegentlich kamen auch PrBparate vor r
in denen die Spirochate nicht als ein ausgezogenes Band, sondern wie
ein gedrebter Strick erschien, indem eine gleichgerichtete Windung eng
neben der anderen lag. FBrbung mit Giemsa-Losung, mehrmals er-
neuert, brachte den Organismus gut zur Darstellung (s. Fig. 1); eine Dif-
ferenzierung war kaum nOtig, ebenso fBrbte sich die Spirochete auch mit
Karbolfuchsin. Das Verhalten zur Eisenhamatoxylinfarbung nach Heiden-
hain (Darstellung eines Achsenfadens) konnte ich bis jetzt nicht be-
urteilen, da der Organismus in den Kulturen zu selten war und rair
die Kultur in groBerer Menge fur derartige Zwecke nicht gelungen ist.

Die Lange dieser Spirochete in mit OsmiumsBure fixierten und ge-
fBrbten Praparaten schwankte auBerordentlich. Neben sehr langen
Exemplaren fanden sich auBerordentlich kurze, so daB sich die Ver-

mutung aufdrBngte, ob jene kurzen Spirochaten
nicht etwa kunstlich abgerissene TeilstOcke langerer
Individuen seien. Die Moglichkeit, daB es sich tat-
sechlich urn Vollindiyiduen handeln kbnnte, ist
allerdings nicht genzlich von der Hand zu weisen;
denn M. Zuelzer 1 ) beschreibt bei der sehr Shn-
lichen Spir. plicatilis wie bei der Spir. steno-
strepta eine Vielfachteilung mit Entstehuug kur-
zer Stucke (11—13 ,u). Teilungsforraen habe ich
nicht beobachtet, aus denen man hette SchlQsse
auf die GroBe frisch hervorgehender Einzelindivi-
duen ziehen konnen. Die IBngste der aufgefun-
denen Spirochaten maB 43 /u, die kilrzesten da*
gegen nur 3—7 — 8 /t. LBBt man diese kurzen
Spirochaten auBer Betracht, so ergab sich ira
Durchschnitt von 14 gemessenen Exemplaren ca.
24 u LBnge (15—43 /<). die Dicke des gewundenen
Fadens zu schatzungsweise V* /.i.

Der Habitus dieser Spirochete erinnert, wie
schon erwBhnt, durchaus an den der von M. Zuel-

Fig. i. Spirochate vom ze r beschriebenen Spir. ste nostrep ta, bei der
Typus der bpir. steno- . , . . r . ,

strepta. (Bonn, Wasaer- es S,C11 um eine in seii r enge untl steile Spiralen
leitung, Vergr. 1:1500.) gewundene, mit Achsenfaden versehene Spirochate

von y 4 // Dicke und durchschnittlich 20 —60 u,
in Ausnahmefallen bis zu 200 ju LBnge han4elt und die in H 2 S-hal-
tigem SuBwasserschlamm unter fast anaeroben Verhaltnissen ange-
troffen wurde. Ebenso wie die ihr sehr nahe verwandte freilebende
Spir. plicatilis geliort Spir. stenostrepta nach den Unter-
suchungen M. Zuelzers zu den Mesosaprobiern, die nur bei Vor-
handensein von freiem H 2 S gut gedeihen. Nach dieser letzten Angabe
ist der Fundort der Bonner stenostrepta -Bhnlichen Spiro¬
chate auffallend. Denn diese fand sich nBrnlich gerade nicht in den
Kulturen, die von deni Filze eines lange nicht benutzten Zapfhahnes
angelegt waren, sondern in einem Filze, der sich am Auslaufrohre des
durch stBndige Wasserkiihlung temperierten 22°-Brutschrankes gebildet
hatte. Anaerobe Verhaltnisse liegen nun gerade hier nicht vor, da ein-
mal frisches Wasser, wenn auch nicht ununterbrochen, so doch stets in
kurzen Abstanden vorbeirieselt und Luft ungehindert an den AusfluB

1) Arch. f. Protistenk. Bd. 24. 1912.

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Bach, Ueber Spirochaten in Wasserleitongen.

201

Aerantreten kann. Zudem machte das schnelle Absterben der Spiro¬
chete unter dem Deckglase auch eher eine gewisse Empfindlichkeit gegen
.Sauerstoffmangel wahrscheinlich. Freier H 2 S ist im Bonner Leitungs-
wasser nicht vorhanden, es sei denn, daB geringe Mengen in dem or-
ganischen Filze sich durch ZersetzungsvorgSnge bilden, die aber doch
sofort wieder weggespQlt werden mBBten. In der „Kultur tt , die auf ca.
5 ccm Wasser nur 1 Tropfen Serum enthielt, ist dagegen mit der Ent-
stehnng von H 2 S dnrch die gleicbzeitig mitwachsenden Bakterien zn
rechnen, wenn auch diese Mengen nur minimal sein kbnnen. Beachtens-
wert ist aber, daB M. Zuelzer fQr eine marine Variet&t der ebenfalls
H 2 S-liebenden Spir. plicatilis selbst angibt, daB sie weniger H 2 S als
die SQ&wasservariet&t brauche. Das H t S-Bediirfnis scheint also schwanken
zu kbnnen x ).

Von anderen bisher beschriebenen freilebenden Wasserspiroch&ten
k&men Dobells Spir. fulgurans nnd minima in Betracht 2 ),
beide im FluBwasser beobachtet. Spirochaeta fulgurans ist nach
Dobells Angabe „a very small copy of Spir. plicatilis 44 , sie hat
eine L&nge gewbhnlich bis zn 50 n, ausnahmsweise bis zu 200 /u, jedoch
auch nnr 3—4 n lange Exemplars wurden beobachtet, fihnlich also wie
bei der Bonner Spirochate. Spirochaeta minima ist noch kleiner,
2—25 /< lang, sonst aber in ihrem Habitus nnd ihren LebensauBerungen
der Spir. fulgurans durchaus ahnlich. Wenn sich auch, wieM.Zuel-
zer bemerkt, ein sicherer Entscheid nicht wird treffen lassen, welche
der von Dobell beschriebenen freilebenden Spirochaten mit den von
M. Zuelzer beschriebenen Arten identisch sind, so gehbren doch alle
die von Zuelzer und Du bell gefundenen Organismen gleich der von
mir beobachteten Art einera gemeinsamen charakteristischen Formen-
kreise an, far den die Spirochaeta pallida Ehrbg. der Gattungstyp
ist. Die ferner von Nagler 8 ) im SQBwasser beobachtete Spir. flexi-
bilis (20—70 y) weicht in wesentlichen Punkten von den eben er-
wahnten freilebenden Spirochaten wie von den von mir gefundenen Arten
ab. Nach meinen Beobachtungen und nach Durchsicht der Literatur
glaube ich, daB die von mir beobachtete Wasserleitungs-
spirochate mit der von M. Zuelzer zuerst beschriebenen Spir.
stenostrepta identisch ist, die hbchstens ihrem bis jetzt noch
nicht beobachteten Fundorte nach als Standortsvarietat aufzufassen
ware 4 ).

Die 2. Spirochatenart war, um es gleich vorwegzunehmen,
durchaus identisch mit der von Uhlenhuth und Zuelzer beschrie¬
benen „icterogenes-ahnlichen 44 Spir. pseudoicterogenes aus der
Berliner Wasserleitung und erinnert wie diese fast in alien Einzelheiten
an den echten Erreger der Weilschen Krankheit. Eine eingehende

1) Schwefelwasserstoff, kiinstlich den Kulturen zugefiihrt, war ohne Einflufi.

2) Arch. f. Protirttenk. Bd. 26. 1012.

3) Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 50. 1900.

4) Aus einer Fuflnote einer Arbeit M. Zue lzers im Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig.
Bd. 85. 8. 157* kann man entnehmen, dafi Zuelzer die Spir. stenostrepta Zlz.
mit Spir. fulgurans Dob. und die Spir. eurystrepta Zlz. mit Spir. minima
Dob. fur identisch halt. Nach den Beschreibungen una Abbildungen Dobells und
M. Zuelzers konnte man Dobells Spir. fulgurans am ehasten mit Spir. steno¬
strepta Zlz. fflr identisch halten, wofiir auch Dobells GroOenangaben (bis 200 /i,
gewShnlich bis 60 p lang) sprechen wurden, wahrend Dobells Spir. minima eine
besondere Art zu sein scheint (2—25 /*). Treponema vivax Dobell, ebenfalls frei-
lebend, stellt, nach den Abbildungen zu urteilen, einen ganz besonderen S[)irochaten-
typ dar.

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202

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

Beschreibnng diirfte daher fiberflfissig sein. Die Spirochate zeigt die
bekannte 3-Teilung bei langen Exemplaren, ein lfingeres Mittelstfick mit
beiderseits gebogenen Endstficken, bei kurzen war ein Mittelstfick oft
kaum ausgebildet. Im Gegensatz zu der stenostrepta-fihnlichen
Spirochate war diese Art ungleich viel hfiufiger in den „Kulturen“ an-
zutreffen und erhielt sich liber 6 Wochen lebend in ein und derselben
Kultur. Manche Praparate zeigten gelegentlich an einzelnen Stellen
Schwfirme von Spirochaten, atn besten dann, wenn das „Filz tt -Material
herausgefischt und auf den Objekttrfiger aufgetupft wurde. In derartigen
dichten Anhaufungen von Spirochaten verhakten sich die Organismen
hfiufig mit ihren Enden, auch lieB sich das von Hoffmann und Haber-
mann 1 ) bei der Weil-Spirochate beobachtete Aneinander-Vorbei-
scbrauben verfolgen. Derartig verschraubte Individuen kamen manch-
mal gar nicht raehr voneinander los, sie schraubten sich wohl etwas
auseinander, kamen aber immer wieder zusammen- Um eine Inkur-
vation handelte es sich dabei sicher nicht, da gelegentlich die 4 getrennten
Enden sichtbar wurden. Ferner konnte ich die auffallende Beobachtung
machen, daB 2 Spirochaten wie durch eine geheimnisvolle Anziehungs-
kraft mehrmals hintereinander sich ein Sttick zusammenverschraubten
und wieder auseinander gingen. Die neben der aktiven Eigenbeweg-
lichkeit der Enden vorhandene starke Flexibilitfit fflhrte die Organismen
hfiufig zur Bildung von Ringen oder Schleifen. Einer Unterlage an-
haftend, vollffihrte die Spirochate ein schiangelndes Kriechen, die Krfim-
mung der Enden war dann meist nicht mehr vorhanden, hochstens nur
noch angedeutet. Wurde der Organismus aber wieder flott, so nahm
er die ursprfingliche 3-teilige Form wieder an. Ein cristispirenartiges
Auf- und Zuschnellen, wie esM. Zuelzer, sowie Haendel, Unger-
mann und Jaenisch 2 ) ffir die W e i 1 - Spirochate angeben, habe ich
nie beobachtet. — Teilungsformen wurden in jungen, wie aber auch in
fiber 4 Wochen alten Kulturen festgestellt, die Teilstucke waren meistens
ziemlich gleich lang, jedoch auch recht verschieden. Mehrfachteilungen
habe ich nie zu Gesicht bekommen. Knopfbildurg an den Enden oder
anderen Stellen wurde stets vermiBt. Meerschweinchen, mit Kultur-
material intraperitoneal gespritzt, erkrankten nicht.

Die Ffirbung dieser Weil-fihnlichen Wasserspirochfite gelang am
besten nach Osmiumfixation mit Giemsa-Losung, und zwar wenn die
Farbflttssigkeit haufig erneuert und die Farbung lange fortgesetzt wurde.
Notwendig ist dann ein vorsichtiges Differenzieren, am besten mit der
von Krzysztalowicz und Siedlecki (1905) und Hoffmann (1906,
1917) empfohlenen 25-proz. Tanninlosung. Auffallend war es, daB der
feine Windungsbau dieser Wasserspirochfite trotz der verschiedensten
Versuche nie so deutlich herauszubekommen war, wie bei der echten
Weil-Spirochate. Auch M. Zuelzer betont, daB ihre Weil-fihnliche
Wasserspirochfite schwerer fiirbbar sei als die echte W e i 1 - Spirochate.
Vielleicht konnte dies mit den Kulturbedingungen zusammenhfingen, da
die echte W e i 1-Spirochate aus einem eiweiBreichen Medium staramt,
wfihrend die W eil - fihnliche Wasserspirochfite in fast eiweiBfreier Lfisung
sich entwickelte. Fiir ihre Zficbtung war, wie ich feststellen konnte, ein
Serumzusatz zum Wasser nicht einrnal notwendig. Die Spirochaten
ffirbten sich ferner noch mit Karbolfuchsin, Karbolgentianaviolett, Me-

1) Dtsch. med. Wochenschr. 1917. Nr. 23.

2) Arb. a. d. Keichsgesundheitsamt. Bd. 51.

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Klarenbeek, Syphilisparasiten ahnliche Spirochaten boim Kaninchen. 203

thylviolett, am besten nach vorausgegangener Beizung mit Loeffler-
Beize. Wesentliche Vorteile boten derartige Farbungen wie auch Ver-
silberungsmethoden nicht. Gar nicht farbten sic.h die Organismen da-
gegen nach der Heidenha in schen Eisenhamatoxylinmethode nach
Sublimat-Alkoholfixation. Wie auch M. Zuelzer fur die Weil-Spiro-
chiite angibt, erhalt man nur Negativdarstellungen. Die Beniansche
Negativfiirbung mit Kongorot-Salzsaurealkohol lieferte Bilder, die fur
Messungen den von Zuelzer fur diesen Zweck empfohlenen Tusche-
praparaten vorzuziehen sein durften.

Der Erwahnung wert erscheint mir, daB ich beide Spirochiitenarten
nur in den ersten Kulturen vom Msirz und April des Jahres haufiger
zu Gesicht bekam, wahrend sie im Laufe des Sommers immer seltener
wurden und schlieBlich gar nicht mehr anfzuHnden waren. Weitere Be-
obachtungen konnen vielleicht dariiber AufschluB geben, ob das Auf-
treten der Spirochaten mit den Jahreszeiten schwankt.

Zusammenfassung. In organischem Filz von Zapfhahnen und
AusfluBrohren der Bonner Wasserleitung fanden sich 2 Spiroch&tenarten.
Diese Spirochaten lieBen sich nicht direkt, sondern durch Kulturver-
fahren nachweisen. Das Aussehen der einen, in Kulturen verhaltnis-
mSBig in geringer Zahl auftretenden Spirochatenart entsprach dem der
Spirochaeta stenostrepta Zlz., der Charakter der 2., reichlich
sich entwickelnden Art dem der Spirochaeta pseudoicterogenes
Uhl. o. Zlz.

Nachdruck verboten.

Ueber das spontane Yorkommen der dem Syphilisparasiten
ahnlicben Spirochate beim Kaninchen
(Treponema pallidum var. cuniculi.)

[Ans der Klinik fflr kleine Haustiere (Prof. Dr. H. Jakob) und dem
Institut fflr Infektions- und parasitare Krankheiten (Prof. Dr. L. de Blieck)
der Tierflrztlichen Hochschule zu Utrecht, Holland.|

Von Dr. A. Klarenbeek, Konservator.

Mit 1 Tafel.

In der Wiener klinischen Wochenschrift 1914. Nr. 29 publizierten
Arzt und Kerl eine merkwiirdige Entdeckung. Wiihrend ihrer experi-
mentellen Syphilisuntersuchungen bekamen sie namlich mehrmals Kanin¬
chen, welche zwar gesund aussahen, aber an einer lokalen Entzundung
des Perinealgewebes, die von einem Parasiten hervorgerufen worden
war, der morphologisch vom Treponema pallidum nicht zu unter-
scheiden war, erkrankt waren.

Sie untemichten darauf systf matiseh S50 Tiere aim 5 grofien Kaninchenziichtereien
in der Umgebung Wiens und fanden 2t),b Proz. nut Treponema infiziert. Skarifi-
kationen der Clitoris eines gesunden Kaninehens und naebneriges Einreiben mit spiro-
chatenreicber Gewebseniulsion eines inlizierten Tieres verursacbte naeh 27 Tugen beim

1) S. Edmund Hofmann, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 8G. 1921.

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204

Centr&Ibl. f. fiakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

ersten Tiere die Krankheit. Impfungen unter anderem in den Hoden beim Kaninchen
und in die Augenbrauengegend beim Affen hatten keinen positiven Effekt.

Der Krieg unterbrach die Untersuchungen, und erst 1919 konnten sie wieder auf-
genommen werden. Auf einer Ausstellung zu Innsbruck fand Arzt wieder einige in-
fizierte Kaninchen mit der bekannten lokalen Entziindung der Perinealgegend, welche
er in der Dermatolog. Zeitschr. Bd. 29. 1920. Nr. 2 beschrieb. Die Tateache, dafi in
Innsbruck mit Syphilisvirus experimentell nicht gearbeitet wird, war fur ihn ein Be-
weis, dafi diese Kan inch enapirochatose sehr wahrscheinlich eine spontane Kaninchen*
krankheit ist, welche nicht direkt vom syphilitischen Tierexperiment abzuleiten war.
Die von dem Autor zitierte Literatur iiber experimentelle Syphilis mit Bezug auf diese
.Kaninchentreponemose ist sehr wertvoli.

Einige Wochen nach dieser Publikation von Arzt beschrieb Jacobsthalin
der Dermatolog. VVochenschr. 1920. Nr. 33 dieselbe Krankheit, die von ihm bei einem
Kaninchen gesehen wurde. Er schlug vor, die Krankheit „Paralues cuniculi 4t zu nennen.
Mause und Meerschweinchen konnte er nicht infizieren; (lurch Skarifikation der Vulva-
gegend infizierte er wohl gesunde Kaninchen; intratestikulare Impfungen gelangen
nicht, ebensowenig die Corneaimpfung. Er konnte ebenfalls die Identitat des Parasiten
nicht feststellen und meinte, es mit einem angewohnten Treponema pallidum zu
tun zu haben.

Ein neuer Artikel von Arzt und Kerl in der Dermatolog. Wochenschr. 1920.
Nr. 52, der zum Teil als Kritik der von Jacobsthal publizierten Befunde aufzufassen
ist, bringt ziemlich wenig neue Gesichtspunkte. Die ,,lmpfung iibers Kreuz“, die
Jacobsthal zur Identifizierung der Spirochate empfiehlt, wobei ein experimentdl
an Syphilis erkranktes Kaninchen mit Material von dieser spontan vorkommendeu
Kaninchentreponemose und umgekehrt geimpft wird, ist ihrer Meinung nach ohne
Beweiskraft, zumal es nicht bewiesen ist, ob bei Syphilisinfektion der Kaninchen eine
vollkommene oder eine relative Immunitat eintritt. Nur die gelungene Impfung einea
Menschen mit der Kaninchen sp i roc hate ist ihres Erachtens beweisend fur die voU-
kommene Identitat der beiden Parasiten. Auch einer gelnngenen Impfung bei Affen
kann man nach dieser Richtung hin etwas Wert zuerkennen.

Endlich erschien von Schereschewsky in der Berlin, klin. Wochenschr. 1920.
Nr. 48 ebenfalls eine Publikation liber die „Gesehleehtlich ubertragbare originare Ka¬
ninchen syphilis 4 4 , wobei er interessante Mitteilungen liber die grofie Menge Spirochaten
im entziindeten Gewebe und die leichte Uebertragbarkeit der Krankheit bei dem Koitus
machte. Unmiltelbar nach dem Koitus abgeschabtes Schleimhautgewebe der Genitalien
enthielt zahlreiche Spirochaten. Schereschewsky konnte die Krankheit nicht auf
weifie Mause, Meerschweinchen und einen Cynomoigus-Affen iibertragen. Auch
konnte er nachweisen, dafi die Infektion viel leichter erfolgt, wenn vorher die Perineal-
gegend oberflachliche Exkoriationen aufweist. Perioden schwerer drtlicher Entziindung
wechseln dabei oft mit solchen peringer Krankheitseymptome ab. Es gelang ihm, ein
erkranktes Kaninchen mit Syphilismaterial ins Auge zu infizieren (Keratitis syphilitica
specifica) und umgekehrt Tiere, die an Syphilis erkrankt gewesen waren, mit der ori-
ginaren Kaninchensyphilis. Seiner Ansicht nach verhMt sich die originare Syphilis
beim Kaninchen zur Syphilis beim Menschen wie die Kuhpocken zu den humanen
Pocken.

Unbekannt mit dieser Literatur, die zu dieser Zeit nur teilweise
publiziert war und hauptsSchlich in der dermatologischen Fachpresse
erschien, fand ich im Oktober 1920 in einem Tuscheprfiparat den bei
oberflachlicher Untersuchung dem Treponema pallidum vollkommen
fihnlichen Parasiten. Das Material stammte von einem Kaninchen, das
an einer perinealen Entziindung litt, welche schon friiher von mir bei
Kaninchen beobachtet worden war und die erfahrungsgemSfi mit den
sonst bei derartigen Hautaffektionen gebr&uchlichen emollierenden oder
desinfizierenden Mitteln nicht zur Heilung gebracht werden konnte,
sondern monatelang bestehen blieb. Das brachte mich auf den Ge-
danken, auf Spirochaten zu untersuchen, wobei ich, wie erwahnt, schon
in dem ersten Tuschepr&parat des Serums unter der Kruste des be-
treffenden Tieres zahlreiche Spirochaten fand.

Bei der Untersuchung der anderen, bei demselben Besitzer sehr
gut verpflegten Tiere konnten noch weitere 5 infizierte Tiere, darunter
ein Rarum, nachgewiesen werden. Die Tatsache, daB diese infizierten
Tiere zu einer bestimmten Rasse gehorten, wahrend die anderen fast

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Klarenbeek, SyphiJisparasiten ahnliche Spirochaten beim Kaninchen. 205

alle anderen Rassen entstammten, darf gewissermaBen als Beweis gel ten,
daB der Koitus bei dieser Krankheit wahrscheinlich eine Rolle spielt.

Untersuchungen nach der Verbreitung dieser Treponemose
in Holland ergaben, daB auf einer Ansstellung im Januar-1921 4 Proz.
von 160 makroskopisch untersuchten Kaninchen erkrankt waren. Die
Tiere gehorten zu verscbiedenen Rassen und wurden von ihren Besitzern
ans mehreren St&dten zur Ausstellung gesandt. Der Spirochaten befund
war dabei stets positiv. Auch aus anderen Teilen des Landes konnten
nocb erkrankte Kaninchen in der Klinik ffir kleine Haustiere untersucbt
werden. Beim Besitzer der 5 Tiere, bei denen ich zuerst die Krankheit
konstatierte, konnte Ende Mfirz dieses Jabres nochmals ein schwer er-
kranktes Tier von derselben Rasse wie die frfiher erkrankten Tiere nach-
gewiesen werden. Von 2 Tieren der Ausstellung konnte bewiesen werden,
daB sie vor ungeffihr 14 Tagen in geschlechtlicher Berflhrung waren,
wobei das eine Tier das andere wahrscheinlich infiziert hatte.

Das Resultat dieser Untersuchungen weist auf eine groBe Ver-
breitung der Krankheit hin.

Das meist vorkommende Bild der Perinealentztin-
dang, wobei die nachste Umgebung von Anus und der Geschlechts-
Sffnung mehr oder weniger deutlich infiziert und verfindert ist, wurde
schon in einer kurzen Publikation in dieser Zeitschr. Abt. I. Orig.
Bd. 86. 1921. Nr. 6.) besprochen (Fig. 1). Bisweilen ist auch die
Vulva- undVaginalschleimhaut entzfindet, sie ist dabei
rot und geschwollen. Dasselbe ist ab und zu mit der Penisschleim-
haut der Fall. Eine geringgradige GeffiBinjektion, meistens in der Nfihe
der Oeffnung der Urethra, oder eine geringe Gewebsschwellung, welche
besonders deutlich beim Ausschachten ist und meistens auf die Penis-
spitze lokalisiert ist, ist schon sehr verdachtig.

Fast immer verlauft die Entzfindung ohne Eiterbildung. Nur ein
einziges Mai konnte eine geringgradige Eitersekretion der Vaginal- oder
PrSputialschleimhaut bei den infizierten Tieren konstatiert werden, wobei
fast immer die Geschlechtsoffnung durch Schwellung und Krustenbildung
der Haut geschlossen ist. Auch die Ulzerationen in den Seitenfalten
der Perinealgegend, wobei die entztindete Hautflfiche stets andere Haut-
partien berfibrt, sind ziemlich oft mit einem etwas eiterigen, pseudomem-
branSsen Belag teilweise bedeckt, mit dem sich wahrscheinlich viel normal
produziertes Smegma vermischt hat. Befindet sich die Entzfindung noch
im Anfangsstadium, dann konnen die Symptome leicht fibersehen werden.
Geringgradige Hyperfimie, kleine Exkoriationen, kleine Maculae in der
unmittelbaren Umgebung der Perinealgegend sind sehr verdachtig und
werden oft von Spirochaten verursacht. Es ist klar, daB auch andere
Einflflsse an dieser Stelle geringe Lasionen verursachen konnen (u. a. der
Koitus). Sobald jedoch das Gewebe beim Abschaben frflh-
zeitig feucht wird und ein mehr oder weniger blutiges
Serumtran8sudiert, hat manes in der Regel mit der Krank¬
heit zu tun und findet fast stets bei mikroskopischer Untersuchung
sehr viele Parasiten.

Die Entzfindung ist fast stets scharf lokalisiert, und die prominierende
entzfindete und kahle Perinealgegend grenzt sich scharf von dem gesunden
und mit langen Haaren besetzten Gewebe ab. Eine Schwellung der
regionSren Lymphdrfisen konnte niemals konstatiert werden.

Nur ein einziges Mai konnten Aenderungen wahrgenommen werden,
die auf eine allgemeine Infektion der Haut und Verbreitung mit dem

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206

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

Blut- oder Lymphstrom hinweisen. So konnten bei einem, tibrigens
vollkommen gesund aussehenden Ramm Ulzerationen konstatiert werden,
bilateral an den Nasenfiffnungen und an den Augenlider-
rfindern, an mehreren Stellen der Kopfbaut, anter an-,
derem an der Ohrbasis, auf der Rfickenhaut und an den
Extremitfiten (Kubitalgegend, Fig. 2—4). Ein erbsengroBes
Ulcus in der Nfihe der Prfiputial mfindung entstand erst
spa ter. Die Hautulzerationen hatten alle dieselbe Beschaffenheit; sie
prominierten etwas fiber das normals Hautniveau und hatten an ihrer
Grenze einen mehr oder weniger roten Wall, waren mit grauen Krusten
bedeckt; der Haarwuchs war vollkommen verschwunden, wodurch ein
scharfer Uebergang vom gesunden zum erkrankten Gewebe entstand.
Die Geschwfire der Augenlider waren im Anfang etwas prominierend,
spfiter mehr flach, obwohl sie von dicken, grauen Krusten bedeckt waren.

Bei einem anderen Ramm, der schon raonatelang eine sehr heftige
lokale Entzfindung in der Perinealgegend hatte, konnten in der Augen-
bogengegend beiderseits ungeffihr pfenniggrolle, vollkommen haarlose
Stellen konstatiert werden (Fig. 5). (Alopezie kann tibrigens nach
Pearce und Brown in den Hautformen bei der generalisierten ex-
perimentellen Syphilis des Kaninchens vorkommen.) In der Mitte einer
solchen haarlosen Stelle befand sich eine Lage von Krusten und in dem
von dieser bedeckten Gewebsmasse, die sehr leicht blutete, konnten sehr
zahlreiche Spirochaten von typischer Form nachgewiesen werden.

Einige morphologischeundbiologischeEigenschaften
warden in der schon erwfihnten und in dieser Zeitschrift erschienenen
vorlfiufigen Publikation beschrieben. Nachfolgendes sei noch hinzugeffigt:

Der Parasit hat eine Lange von 8—13 /n (minimal 4 /i, maximal
22 ju); seine GroBe ist demnach sehr variabel. Die Prfiparate wurden
fast immer nach der Fontana-Silbermethode gefarbt, eine Methode,
mit der sehr gute Resultate erzielt wurden. Im Anfang und weiter noch
ausnahmsweise wurde neben dem Dunkelfeld- auch das Burrische
Tuscheverfahren benutzt (Fig. 6). Im groBen und ganzen werden mit
dieser letzten Methode die Spirochaten deutlich sichtbar und sind speziell
die morphologischen Verhfiltnisse sehr gut zu erkennen. Viele Para-
siten, hauptsfichlich die kleineren, konnen jedoch nur mit grofier Mfihe
auf diese Weise identifiziert werden. Auch die Giemsa-Ffirbung ist
ebensowenig bei der SyphilisspirochatenfSrbung gut brauchbar. Sie istviel
zu zeitraubend, da erst nach vielen Stunden (12—24) der Parasit als
ein rosa geffirbtes Schlanglein sichtbar wird. Auch bei dieser Ffirbung
bleibt tibrigens die vollkommene Uebereinstimmung mit der Syphilis-
spirochiite bestehen. Wfihrend viele andere Spirochaten sich mit Giemsa
dunkelrot bis blau farben, demnach groBe AffinitSt lfir den Farbstoff
besitzen, ist dies weder der Fall mit dem Treponema der Kaninchen-
treponemose noch mit dem Syphiliserreger (Treponema pallidum;
pale = bleich).

Die Fontana-Methode, welche von mir benutzt wurde, ist eine
der Modifikationen, welche von Fontana angegeben wurde, und womit
die Ffirbung in einigen Minuten erreicht wird. Die Methode ist folgende:

1) Das dfinn ausgestrichene Prfiparat (lufttrocken) 1 Min. lang
fixieren in der Flfissigkeit von Ruge (Formalin 20,0, Acid, aceticum
1,0, Aqua dest. 100,0), oder fiber der Flamme.

2) 20—30Sek. bis Dampfbildung erwfirmen nachUebergieBen mit einem
einzigen Tropfen 5-proz. Acidum tannicum -f- 1-proz. Acidum carbolicum.

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Klarenbeek, Syphilisparasiten ahnlicbe Spirochaten beim Kaninchen. 207

3) V*—1 Min. abspfllen in flieBendem Wasser.

4) 20—30 Sek. erwfirmen (nicht kochen) nacb UebergieBen mit
5-proz. Argentum nitricum-Lfisung, geraischt mit Liquor ammonii caustici,
bis die erst entstandene braune Trtibung verschwuuden ist und eine leichte

' Opaleszenz auftritt.

5) Abspfilen, trocknen, einscblieBen in Kanadabalsam.

(Praktische Bemerkungen: Es empfiehlt sich, die Flfissigkeit von

Ruge zur Fixation zu verwenden und nicht fiber der Flamme zu fixieren;
mit der 1. Methode wird das Praparat auch ausgelaugt, wodurch storende
Niederschliige des EiweiBes vermieden werden konnen. Weiter spfile
man tflchtig nach dem Beizen mit der Tanninlosung ab, da sonst un-
erwfinschte Niederschlage oft nicht ausbleiben. Die Silbernitrat-Ammoniak-
I5sung muB stets frisch bereitqt werden. Das Praparat ist niemals zum
Kochen zu erhitzen, da die Morphologie der Spirochaten, die sich an
sich schon etwas findert, abnorm verfindert wird; endlich darf das Prfi-
parat nicht in Zedernol eingeschlossen werden, da es sonst schnell bleicht
und verdirbt.)

Die Ansicht Schneemanns, daB die Fontana-Farbung undeut-
liche Bilder gibt und sich demnach nicht fur Spirocliatenfarbung eignet,
kann von mir nicht geteilt werden; ich bekara stets sehr gute Prapajate,
und der schwarz gefarbte Parasit konnte immer leicht ira hellgelben
Hintergrund beobachtet werden. Die von Schueemann warm emp-
fohlene Methode von Becker, bei welcher die Spirochate mit Ziehl-
schem Karbolfuchsin rot gefarbt wird, ist im Prinzip schon 1912 von
Sabraz&s erapfohlen worden. —

Das mikroskopische Studium der Parasiten dieser
Kaninchentreponemose lfiBt keine Unterschiede mit dem
Treponema pallidum der Menschensyphilis erkennen. Um
zur weiteren Identifizierung dieses Parasiten zu kommen, wurden Ex-
perimente gemacht und die Resultate der Impfuugen beim Kaninchen
mit denjenigen der experimentellen Syphilisexperiinente verglichen.

Nachdem die Untersuchungen Ber tare His 1906 gezeigt hatten,
daB beim Kaninchen unter anderein nach dem Einbringen kleiner Ge-
webestuckchen von einem primar luetischen GeschwUr in die vordere
Augenkammer spezifische Entzundungen, die durch Treponema pal¬
lidum verursacht wurden, entstanden, untersuchten zahlreiche Forscher
den Wert des Kaninchens als Syphilisversuchstier. Das Resultat dieser
Untersuchungen war, daB man im allgemeinen das Kaninchen als eiu
sehr geeignetes Tier fur die experimentelle Syphilisuntersuchung hielt.

Vor allem haben die jahrelangen Experimente von Uhlenhuth
und Mulzer sehr wertvolle Beitriige zur Kenntuis der experimentellen
Syphilis geliefert. Die 1920 erschienenen Arbeiten von Pearce und
Brown aus dem Rockefeller Institute zu New York geben hierzu ein
schSnes Bild des amerikanischen Standpunktes in bezug auf dieses
wissenschaftliche Problem.

Nach dem Studium zahlreicher seit 1906 erschienenen Publikationen
wurden dieselben Tierimpfungen mit dem Material dieser
Kaninchentreponemose ausgefflhrt.

Die erzielten Resultate sind dabei die folgenden:

1) Skarifikation der Perluealgegend und Einreiben einer spiro-
chatenreichen Emulsion eines spontan oder experimentell aufgetretenen
Geschwfirs kann in kurzer oder lfingerer Zeit (15—30 Tage)
spezifische Entzfindun gen verursachen (Fig. 7).

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208

Centralbl. {. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

Diese Entzflndungen treten zuweilen in der n&chsten Um-
gebung von Anus und der Geschlechtsbffnung auf, Oder
sie entstehen in den Seitenfalten der Haut neben der
Perinealgegend. Im ersten Fall ver&ndern sie sich bald in krustose,
dickschnppige, graubraune, etwas prominierende Entzflndungen, wie sie
schon bei den spontanen Erkrankungen beschrieben sind. Die Ent-
zflndung der Seitenfalte ist stets flach. Das Gewebe wuchert nicbt, es
bildet sich kein Wall, aber ein feucht-roter, mit Pseudomembranen.be-
deckter Fleck. Erst entsteht dabei eine kleine, rote Macula, an der die
Haut dfinner wird und schlieBlich perforiert; von hier aus schreitet die
Entzflndung stets weiter. Eiterung tritt kaum auf; nur wenn die Ge-
schlechtsdffnung am grflfiten Teil des Tages von den dichten Krusten
und der Hypertrophie des anliegenden Gewebes geschlossen ist, kommt
es zu geringer Suppuration. In diesem Eiter sind jedoch die Parasiten
fast niemals nachzuweisen. Der Verlauf der Entzflndung ist chronisch;
die Prozesse kflnnen spontan, meistens nach Monaten heilen; .dabei wechseln
Perioden geringer Entzflndung und solche augenscheinlicber Heilung
mit Perioden ernster Symptome. Uebrigens machen die Tiere stets
einen gesunden Eindruck.

2) Skariflkation der IMickenhaut und 1—2 Min. langes Einreiben
mit Material, welches fflr die perineale Impfung benutzt wird, kann nach
ungef&hr 50 Tagen eine spezifische Entzflndung verursachen (Fig. 8).
Auf der eingeriebenen Stelle entstehen dabei nach einer Inkubationszeit
von mindestens 30 Oder hochstens 80 Tagen krustbse, zuerst leicht
schuppige, entzflndete, etwas erhflhte, umschriebene Stellen, welche beim
Abkratzen ein leicht blutiges Exsudat liefern, in welchem viele typische
Spirochflten nachgewiesen werden konnen. WAhrend die perineale Skari-
fikation stets ein positives Impfresultat ergibt, ist dies mit dem Ein¬
reiben spirochatenreichen Materials in die enthaarte Rflckenhaut nicht
stets der Fall, obwohl eine ausgedehnte skarifizierte Hautflache mit
dem Virus in Berflhrung kommt. Es ISBt sich daraus der Schlufi ziehen,
daB das Virus an dieser Stelle nicht so konstant haftet

Auch diese Ulzerationen verlaufen stets chronisch. Die Dauer
dieser Prozesse beiauft sich meistens auf viele Wochen. Der allgemeine
Zustand des Tieres ist dabei sehr gut. Die Entzflndungssymptome sind
verschieden stark.

Diese Hautaifektion scheint oft den Haarwuchs intensiv zu
beeinflussen. Speziell in den akuten Fallen, in denen man meistens
noch viele Parasiten nachweisen kann, findet man oft einen kr&ftigen
Haarwuchs, hauptsachlich in der Mitte der Ulzeration.

3) Skarifikationen der Augenbrauengegend und Intrapalpebrale
Injektioncn mit spirochatenhaltigem Material (im MQrser zerriebene
Gewebsteilchen, mit lauwarmer physiol. Kochsalzlflsung gemischt) ver¬
ursachen fast stets nach ungefahr 40 Tagen (minimalste Inkubations¬
zeit 36, maximalste 48 Tage) eine ulzerative Entzflndung (Fig. 9).
Die Entzflndung fangt mit der Bildung eines oder mebrerer kleiner,
roter, etwas schuppiger und nur wenig prominierender Geschwflre an
der Grenze des oberen Augenlides oder bei der Augenlidhaut an der
geimpften Stelle an. Nach einigen Tagen stoBt sich die Haut an einem
solchen Entztindungsherde ab. und es entsteht ein feuchtroter Fleck, von
einem roten Hofe umgeben. Diese feuchte Stelle, welche beim Berfihren
blutiges Serum traussudiert und sich nicht mit Eiter bedeckt, breitet
sich an der Peripherie ziemlich schnell aus. Die auf diese Weise ent-

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Klarenbeek, Syphilisparasiten ahnliche Spirochaten beim Kaninchen. 209

standenen, ziemlich grofien Geschwflre sind nur wenig Oder gar nicht
prominierend und gleicben flachen Ulzerationep. Durch die starke Se-
kretion nicht purulenten Exsudates wird die OberflBche bald mit einer
unregel mSBigen, an der Peripherie nor locker sitzenden, an der an-
grenzenden, mit Haaren bedeckten gesnnden. Haut fest anliegenden
Kmstenmasse bedeckt, welche graubraun aussieht. Unter dieser
Krustenbildung schreitet die EntzQndung stets fort. Nach Entfernung
der ganzen Masse wird nicht selten eine groBe, feuchte, rote F13che
sichtbar, die beim Abscbaben sehr leicht zahllose Spirochaten erkennen
iSBt. Die EntzQndung verlSuft wieder chronisch nnd danert wochen-
lang. Spontane Heilung kann ohne Narbenbildung dintrelen.

4) IntraoknlUre Impfung. Bei derselben werden kleine Gewebs-
partikelchen spezifischer, von Spirochaten verursachter Wucherungen in
die vordere Augenkammer gebracht. LokalanBsthesie mit 5-proz. Co-
cainnm hydrochloricum; kleine Inzision in die Cornea, in der NBhe des
Skleralrandes, wodurch die vordere AugenkammerflQssigkeit ausflieBt und
die Cornea kollabiert. Festbalten der Conjunctiva scleralis zur Fixation
des Bulbus mit feiner Pinzette und Einbringen eines kleinen Gewebs-
stflckchens durch die Corneawunde in die vordere Augenkammer. Ge-
websteilchen nicht zu weit einbringen, da sonst Irritationen der Iris
auftreten kdnnen, die unter anderem zur Occlusio pupillae und sekun-
dSrem Glaukom fQhren kdnnen. Nach Heilung der akuten reaktiven
Erscheinungen. welche einige Tage dauern und die bisweilen zur Pan*
ophthalmie fQhren, entsteht oft nach ungefahr 40 Tagen (maximal 90 Tagen)
eine augenscheinlich geringgradige Keratitis. An der Stelle der Cornea,
welche das Gewebsteilchen passiert hat, entsteht zun&chst nur ein ge-
ringer Paunus, der sich spater etwas ausbreitet; nicht selten ist auch
an der angrenzenden Conjunctiva scleralis erhohte Vaskularisation mit
Verdickung zu sehen. Vielfach l&fit sich im oberfl&chlichen Abschabsel
der Cornea der Parasit nachweisen. Auch die Conjunctiva scleralis ent-
bait oft sehr viel Spirochaten. Nur ein einziges Mai gelang es nicht,
aus dem oberflfichlich abgekratzten - Gewebe die Parasiten zu linden.
Wohl aber sind sie nach Inzision des Epithels der Cornea nachweisbar.

Nicht selten entsteht nach Impfung in die vordere Augenkammer
keine spezifische Keratitis, sondern nur eine konjunktivale Wucherung,
wobei eine bandformige Verdickung des Gewebes, das sich auch etwas
auf die Cornea erstreckt, auftritt, die bei leichtem Druck auf das obere
Augenlid etwas prolabiert. Dieses Gewebe enthait zahlreiche Parasiten
(nach Zerreiben des Gewebes im Morser).

Ebenfalls tritt nach dieser Impfung nur eine GeschwQrsbildung an
den Augenlidern auf (wie sie bereits bei der Skarifikation dieser Gegend
beschrieben ist), und welche fQr sich Oder zusaminen mit der beschrie-
benen kornealen oder koujunktivalen Aenderungen bestehen kQnnen.

Die Dauer aller dieser Prozesse ist lang; sie kann Mo-
nate betragen. Dielnkubationszeit derlmpfkeratitis dauert
ungef3.hr 40 Tage, wechselt aber sehr stark.

Die koujunktivalen Wucherungen und die AugenlidergeschwOre treten
erst nach Wochen und Monaten auf. Die Tiere sind dabei sichtbar nicht
krank und behalten ihre gute Kondition. Es ist nicht wahrscheinlich,
dad die ab und zu auftretenden Aenderungen an anderen Teilen des
Auges (u. a. Dyskorie, Synechien, Occlusio pupillae, Iritis, Iridocyclitis,
8ekandares Glaukom) spezifisch sind, sondern nur die Folge der ver-
ursachten GewebsISsionen und Gewebsreizungen.

Ente Abt. Orif(. Bd. 87 . Heft 3. 14

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210

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 8.

Nach dieser Impfung kann eine Generalisation der Krank-
heit auftreten (siehe sp&ter).

Auch nacli iiitraokut&rer Impfung einer Emulsion spiroch&ten-
reichen Materials, das mit einer feinen Kanule nach teilweisem Aus-
fliefien der vorderen Augenkammerflilssigkeit eingespritzt wird, entstehea
nach langer Inku bationszeit spezifische Verknderungen. In eineui
Falle bildeten sich ungef&Ur 2 Mon. nach der Injektion dieselben typi-
schen Geschwtire der Haut (Fig. 10), wie sie vorher bei der Skarifikation
der Augenbogengegend beschrieben wurden. Diese Ulzerationen be-
decken bald darauf einen groBen Teil dieser Gegend, ferner die des
inedialen Augenwinkels und die untere Augenlidgegend. Der ProzeB
dauert Monate. Das injizierte Ange blieb vollkommen normal; an der
Stelle der Injektion war ein kleiner, weifier Fleck iibrig geblieben.

Das andere Auge desselben Kaninchens, das zur gleichen Zeit mit
demselben Material injiziert wurde, reagierte etwas anders. Die Cornea
sah aus wie beim auderen Auge; es gelang nicht, in abgeschabten Teilen
der tieferen Schichten Spirochaten nachzuweisen. Ungefahr 3 Mon. nach
der Injektion entstand eine diffuse, geringgradige Trflbung der Cornea
in der Nahe des oberen Augenlides, von ungefahr bohnengroBer Aus-
dehnung, begleitet von schwacher, GefaBinjektion auf der Conjunctiva
scleralis. Diese Entzundung war das Resultat eines sehr chronischen,
von Spirochaten verursachten Prozesses, wobei speziell die Con¬
junctiva scleralis an dieser Stelle follikular entzundet
war. Das wuchernde Gewebe breitete sich dabei bandahnlich fiber die
Cornea aus, so daB der normale, regelnjaBige, sklerale Rand an dieser
Stelle der Cornea abnorm war (Dyscornea). Eine Keratitis war nicht
entstanden.

Auch nach Injektion einer spirochatenreichen Emulsion in die vor-
dere Augenkammer kSnnen allgemeine Symptome eintreten (siehe spater).

. 5) Intraskrotale und iiitratestikul&re Impfung geschah in der
Weise, daB kleine StUckchen spirochatenreichen Gewebes in das Scrotum
und in den Hoden nach der Methode von Uhlenhuth und Mulzer
implantiert wurden, Oder wobei eine spirochatenreiche Emulsion unter
die Skrotalhaut Oder in die Testikel injiziert wurde. Auch wurde die
Emulsion bisweilen nach Skarifikation der Skrotalhaut eingerieben. Sie
verursacht mehr oder weniger tiefgehende drtliche Entztindungen der
Skrotalhaut (Fig. 11), nicht nur an der Injektionsstelle, sondern auch
go anderen, weiter davon entfernten Stellen des Scrotums. Die Haut-
lasionen treten nach 14—100 Tagen ein und bestehen entweder
in einer leichten Schuppenbildung der zarten Haut, wobei die
kleinen, weiBen Schuppen teils der Haut, welche nach Entfernung der
kleinen Krusten transsudiert, fest anliegen, Oder wobei auch heftigere
Entziindungssymptome mit Geschwiirsbildung, begleitet von einer
Verdickung des Skrotalgewebes an Stelle des Geschwures, auftreten. Das
Ulcus kann dabei erbsengroB werden, mit Krusten bedeckt, etwas ge-
rotet und schuppenformig an der Peripherie sein. Der Verlauf dieser
Prozesse, welche, soweit sie kontrolliert werden konnen, mit den nicht
schweren Skrotalhautaffektionen, welche nach intraskrotaler Inokulation
mit Syphilismaterial auftreten konnen (Uhlenhuth und Mulzer),
ubereinstimmen, ist im a 11 gem ein en chr o n i sell und dauert meistens
mehrere Wochen. Die Tiere sind sichtbar nicht krank.

Auch spezifische Prozesse im Scrotum selbst kOnnen mit-
unter auftreten. In 1 Falle wurde auBer der beschriebenen Skrotal-

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Klarenbeek, Syphilisparasitcu ahnliche Spirochaten beim Kaniuchen. 211

entzundung im Scrotum eine erbsengroBe, harte, nicht mit dem
umgebenden Gewebe verwachsene Geschwulst koDStatiert,
die sich zwischen Haut und Tunica gebildet hatte. Nach Exstirpation
dieses kleinen Tumors konnten im Geschabe dieses Gewebes sehr viele
Spirochaten nachgewiesen werden.

Ebenfalls konnte bei einem geimpften Kaninchen eine lokale Ver-
dickung der Tunica vaginalis nachgewiesen werden. Auch hier waren
sehr viel Spirochaten im Gewebsprkparat zu konstatieren. Bei diesein
Kaninchen und auch beim vorigen kopnten keine Spirochaten im
Hodengewebe nachgewiesen werden.

Bis jetzt gelang es nicht, eine typische Orchitis zu erhalten,
wie diese wohl bei der intraskrotalen und intratestikuiaren Impfung von
Syphilismaterial des Menschen und vom Kaninchenpassagevirus geiingt.
Bei der Untersucbung des Hodens nach dem Vorkommen von Spiro¬
chaten im Hodengewebe wurden die Testikel oft bei den geimpften
Tieren punktiert und die PunktionsUussigkeit untersucht.

Auch gelang es nicht, nach dieser intraskrotalen Impfung einen
charakteristischen Primkraffekt in der Skrotalhaut mit indurierten Ran-
dern zu bekommen, wie dies mit Syphilismaterial oft gelingt. Moglich
ist es, daB hier die Urshche in einer Unvollkommenheit der Impfung
liegt. Zweifellos bestehen aber Unterschiede zwischen diesen,
bei der intraskrotalen Impfung erreichten Resultaten
und denjenigen, die mit Syphilismaterial experimente 11
beim Kaninchen erhalten wurden. Treponema pallidum
var. cuniculi, wie diQ Spirochate der Kaniuchentreponemose genannt
werden kann, scheint, wie bis jetzt noch angenommep werden muB, eine
geringere Affinitat fur Hoden, Tunica und Skrotalgewebe
zn haben als Treponema pallidum hominis. Zahlreiche Imp-
fungen Sind aber noch notig, um diese Tatsache festzustellen.

6) Intraventfse Injektionen mit Blut von lokal oder generalisiert
erkrankten Tieren und mit einer Gewebsemulsion v.on einer spezifischen
konjunktivalen Wucherung, in der zahlreiche Spirochaten waren, wurden
haufig ausgefhhrt. Stets aber wurden hierzu erwachsene Tiere gebraucht.
Niemals wurden bei diesen Tieren, selbst nicht nach Monaten, Symptome
wahrgenommen, die auf Treponemose hinwiesen.

Im Blute konnten niemals die Parasiten nachgewiesen werden.
Viellmcht fuhrt die Injektion beim Gebrauch j unger Kaninchen und bei
intrakardialer Injektion, die auch fur das Syphilisexperiment mehr ge-
eignet ist (Uhlenhuth und Mulzer), zu positiven Resultaten.

Eine generalisierte Treponemose der Haut wurde nach
intraokularer Impfung wahrgenommen. Zahlreiche Ulzerationen, ahnlicli
dea Ulcera, welche bei generalisierter spontaner Hauttreponemose kon-
statiert werden konnten, waren bei einem Kaninchen iiber die Haut
zerstreut. Dabei waren einige Hautstellen mehr befallen als andere,
"ie dies ebenfalls bei der experimentellen Kaninchensyphilis der Fall
jst. An der Kopfliaut saBen die meisten Geschwiire; unter anderen
’ n der Nasengegend, zwischen den Augen, an den Augenlidern und der
Ohrbasis (siehe Fig. 12 u. 16).

Auch die Haut der Extremitaten ist aftiziert; in der Kubital- und
Kniegegend sind sehr ausgebreitete Ulzerationen in der GroBe einer
HaselnuB nachweisbar (Fig. 15). Ferner befinden sich viele Ulzerationen
auf detn Riicken (Fig. 16 u. 14); das groBte Ulcus ist etwa pfenniggroll.
hie Testikel, das Praeputium und der Penis sind spirochatenfrei, obwohl

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212 CentralbL f. Bajrt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

17 Tage vor dem Auftreten der Geschwflre intratestikular geimpft warde.
Die spfitere Sektion ergab, daB diese Impfung obne Erfolg geblieben war;
der Hoden war wohl etwas sklerotisch, doch frei von Spiroch&ten. Nur
im Scrotum befanden sich unter geringen Schuppen kleine flache Ge-
schwQre mit einigen Spiroch&ten.

Die ulzerativen Prozesse sind chronisch. Das Tier war nicht sicht-
bar krank. In wiederholten Blutpraparaten (Giemsa) konnte die
Spirocbate niemals nachgewiesen werden. Bestehen die Geschwure lange,
dann entwickeln sich darin lange Haare (vgl. Fig. 13 u. 14) t welche
sehr schnell wachsen und weit fiber das andere kurzbaarige Hautniveau
liervorragen.

Prfiparate ans der Leber und der Milz und ebenfalls solche aas
dem geimpften Hoden sind spirochatenfrei. Impfungen mit Leber-Milz-
brei konnten nicht kontrolliert werden, da die Tiere schon am nficbsten
Tage starben. — Auch bei einem anderen Kaninchen konnten Symptome
generalisierter Hauttreponemose nachgewiesen werden (Fig. 17). Es ent-
standen dabei nach Augenkammerimpfung mit einer Gewebsemulsion nach
einigen Monaten Geschwflre in der Perinealgegend und an der Ohrbasis.

Die Untersuchung wurde auch in anderer Richtung fortgesetzt,
woraus sich die folgenden Schlfisse ziehen lieBen:

Eine spontane Infektion, wahrscheinlich durch den Eoitus,
konnte sowohl bei Rammlern, als auch bei weiblichen Kaninchen wahr-
genommen werden. Die Tiere bekamen dabei, nachdem sie kfirzere
oder l&ngere Zeit beieinander waren, die bekannte und charakteristische,
lokale, perineale Entzfindung. In 1 Faile konnte konstatiert werden.
daB bei einem weiblichen Kaninchen, welches ungeffihr 8 Wochen mit
einigen infizierten Kaninchen, unter denen sich auch ein Rammler be-
fand, zusammen gelebt hatte, ohne infiziert zu sein, schon ca. 16 Tage
nach einer geringen Skarifikation der Perinealgegend die
Entzfindungssymptome auftraten. Schereschewsky wies schon auf
die sehr erhohte Empfindlichkeit bei kleinen Exkoriationen hin; Kolle
und Ritz bewiesen ferner einwandfrei die leichte Uebertragungsmfig-
lichkeit durch den Koitus beim Kaninchen mit Treponema palli¬
dum hominis, die experimented perineal infiziert waren.

Der Koitus bei denjenigen Tieren, welche an einer perinealen Ent¬
zfindung leiden, kann zur Folge haben, daB wohl augenscheinlich
gesunde Jungen geworfen werden, die sich vollkommen normal ent¬
wickeln. Bei einem Kaninchen, welches experimented mit Spirochfit,en-
material in der Perinealgegend infiziert wurde, entstand ein Prolapsus
uteri, sehr wahrscheinlich verursacht durch die verminderte Elastizitat
bzw. durch Erschlaffung der Vulvawand.

Es konnte bis jetzt noch nicht bewiesen werden, ob die Abkomm-
linge von infizierten Eltern genau so auf kunstliche Infektionen reagieren
wie die Jungen gesunder Tiere.

Bei 2 niedrigen Affen (Macacus cynomolgus) wurde beider-
seits die Augenbrauengegend einige Minuten lang kr&ftig mit fur Kanin¬
chen virulentem Material eines perinealen Geschwtirs voin Kaninchen,
welches spontan entstanden war, eingerieben. Die Haut wurde an dieser
Stelle zuvor tief skaritiziert. Nach dieser Impfung, welche bei Kanin¬
chen zweifellos in der betreffeuden Zeit Ulzerationen zur Folge ge-
habt hatte, entstanden nach 2 1 / 2 Monaten keine Ulzerationen.
Eins der Tiere starb spater an Pseudotuberkulose. vor allem der Leber.
Milz und auch der Lungen. Gleichzeitige Inokulation der Skrotalhaut

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Klarenbeek, Syphilisparasiten ahnliche Spirocb&ten beim Kaninchen. 213

bei einem dieser Affen and der Prfiputial- and Penisschleirahaut init
nachfolgender Skarifikation mit fflr Kaninchen viralentera Material blieb
ebenfalls ohne Resultat.

Impfungen eines Hundes in der Aagenbraaengegend und in die
Pr&putial- und Penismucosa, bei einer Katze in der Augenbrauengegend
(Einreiben nach Skarifikation), bei Meerscbweinchen und Ratten
an derselben Stelle nach Implantierung eines kleinen Gewebspartikel-
chens in eine Hauttasche und auch in die Skrotalhaut beeinflufiten das
oormale Gewebe bei diesen Tieren nicht im geringsten.

Die Wassermannsche Reaktion wurde aus dem Grande zur
Untersuchung nicht benutzt, weil diese Methode bei Kaninchen nicht
als zuverlassig gilt, worauf schon frQher u. a. von Uhlenhuth und
Mulzer hingewiesen wurde. Sie konnten n&mlich beweisen, daB ge-
sunde Tiere oft positiv und sehr sctiwer erkrankte Tiere negativ reagierten.

Kflrzlich publizierte Kuczynski seine Untersuchungen und konnte
diese Befunde nur best&tigen. Er sah ebenfalls oft beim gesunclen Kanin¬
chen eine -|- W.R., speziell bei Tieren, welche mit Kokzidien infiziert
waren. (In Holland leiden die meisten jungen Kaninchen an Kokzidiose.)

Chemotherapeutische Behandlung mit Neosalvarsan ergab
sowohl bei spontanea als bei experimentell erzeugten Fallen sehr gute
Resnltate. Viele Tiere, welche zur Behandlung zugesandt wurden und
die im allgemeinen schon Wochen und sogar Monate an einer infizierten
Perinealgegend litten, erhielten eine Injektion von 250—350 mg (0,25
bis 0,35) Neosalvarsan, das in 1,5 ccm destill. Wasser oder physiol. Koch-
salzlQsung gelost wurde. Die lauwarme, sterile Flflssigkeit wurde intra-
mnskul&r in die Hinterschenkelmuskeln beiderseits eingespritzt. Die
Schmerzreaktion ist dabei nicht sehr stark. Schon nach 24 Std.
waren die sehr zahlreichen Spiroch&ten fast vollig aus
dem entzflndeten Gewebe verschwunden, so daB meistens
vergebens in dem Silberprfiparat danach gesucht wurde.

Ohne weitere lokale Behandlung heilt dann die Entzflndung voll-
kommen in ca. 14 Tagen, die Krusten trocknen sehr schnell ein, fallen
ab, und eine blasse, trockene Hantflache wird sichtbar. FOrdert man
die Heilung mit einer inditf'erenten, emollierenden Behandlung, z. B. mit
Oleum olivarum, dann lflsen sich die Krusten schon bald (in ein paar
Tagen) ab, und die Haut bleibt auch spater vollkommen normal. Heilung
kann auf diese Weise in 4—5 Tagen eintreten.

Auch die experimentell erzeugten Ulzerationen heilen in derselben
Weise nach Behandlung mit Neosalvarsan. Geschwiire des Oberaugen-
lides und der Vulva wurden nach einer Einspritzung gcheilt, ebenfalls
eine konjunktivale Entzundung.

Zusam men fas sung.

Beim Kaninchen kommt ziemlich hdufig eine Treponemose vor,
wobei hauptsachlich das perineale Gewebe entziindet ist. Die Ent-
ziindung ist lokalisiert und nicht selten sehr geringgradig, die Tiere
raachen keinen kranken Eindruck, sie fressen gut, wodurch es zu er-
klaren ist, • daB die Krankheit nicht schon fruher siclier erkannt wurde.
Einige Male verlauft die Krankheit in anderer Weise; es treten dann
ulzerative Entzfindungsprozesse der Haut an anderen als an den ge-
Uannteu Stellen des Korpers auf, bisweileu kombiniert mit Alopecia
circumscripta. Diese Prozesse stimmen dann im groBen und ganzen
mit dem Syinptomenkomplex der generalisierten Hautinfektion, welche

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214 OentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Beft 3.

bei jungen Kaninchen nach intravenoser Oder intrakardialer Injektion
syphilitischen Materials hervorgerufen werden kann, Qberein.

Die Spirochate koromt in dem entzfindeten Gewebefast immer massen-
haft vor und konnte morphologisch und biologisch von Treponema pal¬
lidum horn in i s nicht unterschieden werden. Auch nach Impfungen
gesunder Tiere, wobei die Resultate nach intraokularer, intratestikul&rer,
i'erner nach paipebraler, perinealer, intravenoser und Rfickenhautimpfung
untersucht wurden, konnten keine deutliche charakteristische Unter-
schiede von den experimentellen Syphilisimpfungen nacbgewiesen werden.
Meisteufalls — nicht immer — sind die Geschwure mit trockenen, grauen
Schuppen bedeckt; vielleicht ist' dies ein ziemlich konstantes Merkmal
zur Differenzierung von syphilitischen Geschwuien.

Stets konnte bei den Impfungen eine lange und inkonstante In-
kubationszeit, der chronische Character der Geschwfire, der wechselnde
Verlauf derselben beobachtet werden. Das Resultat nach Impfung mit
Passagevirus war genau dasselbe wie das nach Injektion einer Gewebs-
emulsion eines spontanen Geschwiires.

Die infizierten Tiere sind nur ausnahmsweise krank; sie bleiben fast
stets in sehr guter Kondition.

Das Virus haftet an mehreren Stellen des KSrpers; speziell die
Impfung in die vordere Augenkammer war fast stets positiv, ebenso wie
die Ska» ifikationen der Perinealgegend, der Augenbrauengegend und die
Impfung der Skrotalhaut. Die Haftung war auf der Rfickenhaut nicht
stets so konstant. Auch der Hoden besitzt scheinbar nicht die Affinitiit
ffir das Virus, wie dies beim Treponema pallidum hominis der
Fall ist.

Es gelang, einige schon infizierte Tiere wahrend der Erkrankung
wieder zu infizieren. So konnte z. B: auch die Haut eines Tieres, das
schon an einer spezifischen Entziindung der Augenbogengegeud litt,
wieder infiziert werden. — Hieraus' laht sich wohl schlieBen, daB eine
Iuimunitat, jedenfalls eine vollkommene Immunitat nicht besteht. Mehrere
Impfungen sind zur weiteren Beantwortung dieser Frage gemacht, auch
Impfungen mit Syphilismaterial vom Menschen zum Studium der „Impfung
fibers Kreuz tt . Eine derartige positive Impfung soil z. B. nach Jacobb-
thal beweisend sein ffir eine Nichtidentitat des Treponema der
Kaninchentreponemose mit Treponema pallidum hominis. Die
Beweiskraft derartiger Experimente ist jedoch zweifelhaft, wie dies auch
von Arzt angenommen wird, zumal beim Kaninchen die Frage der
Superinfektion und Immunitat nach experimenteller Syphilisinfektion
noch nicht klar bewiesen ist.

Schereschewsky hatte, wie am Anfang dieser Arbeit erw&hnt
wurde, schon dergleichen Impfungen gemacht.

Die Kaninchentreponemose oder Lues cuniculi ist nahezu jedesmal
nur eine lokale Krankeit. Auch nach lokaler Impfung konnte, wie dies
auch bei dem spezifischen Syphilismaterial der Fall ist, nur ausnahms¬
weise ein generalisierter ProzeB konstatiert werden. In diesem Fall
treten dann Hautkrankheiten auf, die auf eine allgemeine Verbreitung
des Virus im KOrper hinweisen (nach intraokularer Impfung). Intra-
venose Impfungen erwachsener Tiere mit Blut infizierter Kaninchen, auch
mit Blut allgemein erkrankter Tiere. miBlangen stets. Bei der Sektion
primar oder gcneralisiert erkrankter Tiere konnten niemals Lymphknoten-
schwellungen beobachtet werden. Bis jetzt konnte im Blut, in der Milz,
der Leber und den Nebennieren die Spirochate niemals gefundeu werden.

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Klarenbeek, Syphiiisparasiten ahnliche Bpirochaten beim Kaninchen. 215

Experimentelle Impfungen anderer Tiere miBlangen. Die Krankheit ist
<iarch direkte Berfihrung, wahrscheinlich durch den Koitus, speziell auch
each Skarifikationen der Perinealgegend zu iibertragen.

Tiere mit ausgedehntem, lokalenr, perinealem Geschwilr kOnnen noch
gesunde Jungen erzeugen. Auch der infizierte Rammler ist zeugungs-
fahig. Nach intrarauskul&rer Injektion von 250-350 mg Neosalvarsan
verschwinden die Spirochaten schon in einigen Stunden. Rezidive
konnten bis jetzt noch nicht beobachtet werden.

Diese Untersuchung, ferner die Publikationen von Arzt, Kerl,
Jacobsthal und Sch eresche wsky berechtigen wohl zu den folgenden

SchluBfolgerungen.

1) Das Virus der Treponemose beim Kaninchen ist morphologisch
vom Syphilisvirus nicht zu identifizieren. Im Tierexperiment gibt es nor
kleine, nicht sehr charakteristische und nicht konstante Unterschiede.
Notwendig ist aber, dafl ausgedehntere Versuche nach dieser Richtung
hin gemacht werden.

2) Der Parasit kann vorl&ufig als eine Variet&t des Treponema
pallidum hominis aufgefaBt und als Treponema pallidum
varietas cuniculi bezeichnet werden. Die Krankheit selbst kann man
Spirochaetosis oder Lues cuniculi nennen.

3) Wenn die Ansicht richtig ist, daB Treponema ein ange-
wdhntes ursprQngliches Treponema pallidum hominis ist, dann
besitzt man fflr das experimentelle Syphilisstudium darin ein Passage-
virus, wie dies bis jetzt noch niemals durch Weiterimpfung erhalten
wurde.

4) Das Kaninchen ist ein nicht vollkohimen zuverl&ssiges Probetier

fur das experimentelle Syphilisstudium. Utrecht, Mai 1921.

Literatur.

Arzt u. Kerl, Ueber experimentelle Kaninchensyphilis und ihre praktische Be-
deutung. (Wien. klin. Wochenschr. 2914. Nr. 23.) — Dies., Weitere Mitteilungen fiber
bpirochatenbefunde bei Kaninchen. (Ebenda. 1914. Nr. 29.) — Dies., Zur Frage der
Kaninchensyphilis. Bemerkungen zur Arbeit Jacobsthals. (Dermat. Wochenschr.
1920. Nr. 52.) — Arzt, Spirochatenbefunde in Genitalveranderungen ungeinipfter Kanin¬
chen. (Dermat. Zeitschr. Bd. ^9. 1920. Nr. 2.) —- Brown and Pearce, On the gene¬
ralisation of Treponema pallidum in the rabbit following local inoculation. On
the production of generalized syphilis in the rabbit by local inoculation, (Proceed. Soc.
t. experim. Biolog. a. Med. Voi. 17. 1920.) — Dies., A note on the dissemination of
"pirochaeta pallida from the primary focus of infection. (Arch, of Dermat. a. Syph.
Vol. 2. 1920.) — Dies., Experimental syphilis in the Rabbit. (Journ. of experim. Med.
Vol. 31. 1920. No. 4, 6, und Y r ol. 32. 1920. No. 4, 5.) — Jacobsthal, Untersuchungen
uber eine syphilisahnliche Bpontanerkrankung des Kaninchens (Paralues cuniculi).
<Dermat. Wochenschr. Bd. 71. 1920. Nr. 33.) — Hartmann u. Schilling, Die
parbogenen Protozoen. Berlin (Jul. Springer) 1917. — Heller, J., Die vergleichcnde
Pathologic der Haut. 1910. — Klarenbeek, A., CeiUralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig.
Bd. 80. 1921. Heft 6. — Kolle u. Hetsch, Die experimentelle Bakteriologie und
(lie lnfektionskrankheiten. 1919. — Kolle u. Ritz, Ueber spontane Uebertragung der
Kaninchensyphilis. (Dermat. Zeitschr. Bd. 27. 1919.) — Kuczynski, Ueber die
lV aaKermann8che Reaktion beim Kaninchen. (Berlin, klin. Wochenschr. 1921. Nr. 0.)
— Lesser, E., Lehrbuch der Haut- und Gesehlechtskrankheiten. — Neumann u.
Mayer, Wichtige tierisehe Parasiten und ihre Uebertrtiger. — Schncemann, Ver-
jrleichende Untersuchungen fiber neuere Bpirochutenfiirbungen. (Centralbl. f. Bakt. Abt. 1.
Drig. Bd. 86. 1921 Nr. I.) — Uhlenhuth u. Mulzer, Beitnige zur oxperimentellen
Pathologie und Therapie mit besomlerer Berucksiclitigung der Impfsyphilis der Kanin-

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216

CentralbL f. Bakt etc. I. AbL Originale. Bd. 87. Heft 3.

chen. (Arb. a. d. Kais. Gee.-Amt. Bd. 44. 1913. 8.307—630.) — Dies., Atlas der ei-
perimentellen Kaninchensyphilis. Berlin (Jol. Springer) 1914. — Dies., Weitere Bei-j
trage zur experimentellen Syphilis. (Berlin, klin. Wochenechr. 1917. S. 645—649.)

Weitere, sehr ausgebreitete Literaturangaben in den Publikationen von Dhlen
huth und Mulzer (1913) nnd yon Brown und Pearce (1920).

lider.

Fig. 1. Bpontane und lokale Spirochatose der Perinealgegend.

Fig. 2. Spontane und generalisierte Infektion der Haut. Geschwure der Augen-

Fig. 3. Spontane und generalisierte Infektion der Haut. Geschwfire an der Nase.

Fig. 4. Spontane und generalisierte Infektion der Haut. Geschwure der Ruckeo*

haut.

Fig. 5. Spontane und generalisierte Infektion der Haut Alopecia circumscripta
mit Ulzeration und Krustenbildung in der Mitte (z&hlreiche Spirochaten)

Fig. 6. Treponema pallidum var. cuniculi; Tuschepraparat. Vergr. 1050.

Fig. 7. Experimentelle lokale Perinealspirochfitose, 20 Tage nach Impfung.

Fig. 8. Experimentelle lokale Spirochatose der RQckenhaut etwa 10 Wochen nach.
lokaler Impfung.

Fig. 9. Experimentelle lokale Spirochatose in der Oberaugenlidergegend.S
6 Wochen nach lokaler Impfung.

fig. 10. Experimentelle lokale Spirochatose in der Augenwinkelgegend. 2 Monate
nach intraokularer Impfung. ^

Fig. 11. Experimentelle lokale Spirochatose des Scrotums. Geschwflrbildong
2 Monace nach intraskrotaler Impfung.

Fig. 12. Experimentelle generalisierte Spirochatose der Haut 11 Wochen nach
intraokularer njektion. Geschwure an der Ohrbasis und beim medialen Augenwinkel.

Fig. 13. Experimentelle generalisierte Spirochatose der Haut 11 Wochen nach
intraokularer Impfung. Ulzerationen der Riickenhaut.

Fig. 14. Experimentelle generalisierte Spirochatose der Haut Wie Fig. 13.J
15 Wochen nach Impfung (Haare).

Fig. 15. Experimentelle generalisierte Spirochatose der Haut. 15 Wochen na
intraokularer Impfung. Geschwure in der Kubitalgegend.

Fig. 16. Experimentelle generalisierte Spirochatose der Haut 15 Wochen na
intraokularer Impfung. Ulzerationen der Augenlider und in der Nasengegend.

Fig. 17. Experimentelle generalisierte Spirochatose der Haut 18 Wochen na
bilateraler intraokularer Impfung. Geschwure in der Ohrbasisgegend (a).

Nachdruck verboten .

Weitere Beitrage zur Anatomie der Pferdebaudwiirmer.

[Aus dera Zoologischen Institut der LandesuniversitSt GieBen.J
Von Dr. Rudolf Becker in Uelzen.

Mit 4 Abbilduugen im Text.

Meine „Beitrage zur Kenntnis des Nervensystems der Pferdeband-
wiirnier u (Zool. Jahrb. Bd. 43. Anat. 1921) enthalten zugleich eine Ana-
toraie des Skolex, hinsichtlich der Proglottiden jedoch nur -kurzfi
topographisch notwendige Hinweise. Es gilt also, einerseits diese nocb
vorhandene Liicke auszufullen. andererseits ein Bindeglied zu schaffenJ
welches von der „auBeren Gestalt 11 dieser Bandwiirraer (diese Zeitschr)
Bd. 87. 1921. Ileft 2) zu ihrer inneren Morphologie hinOberleitet. Vor-J
liegende Untersuchung erstreckt sich auf den Bau der Cuticula nebsnl
Parenchym, der Muskulatur und des Exkretionssystems.f
wahrend ich mir die Schilderung des Genitalapparates fflr sp&ter vor-
behalten habe. Sowohl in Form wie in innerer Organisation dokumen-|
tieren die Anoplocephala-Arten den Grundgedanken der geschlos-^
seneu Einheit des C estoden kor pers („Monozootie u , Spengel).

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UMIVER5ITY OF CALIFORNIAJ

Klavenbeek, Kaninchenspirochatose.

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

Becker, Weitere Beitrage zur Anatomie der Pferdebandwiirmer.

217

Caticula und Parenchym.

Als eine elastische Chitinhfllle, welche deni ganzen Kdrper des Band-
wurmes gegen verschiedene Eingriffe — einerseits siod es die ver-
daaenden chemischen Wirkungen des Darmsaftes, andererseits trauma-
tiscbe Beschadigungen durch den Darminbalt selber, insbesondere durch
stacheliges Raubfutter — einen gewissen Schutz verleiht, ist die Cuti-
cula anzusprecben.

Anoplocephala magna. — Die Cuticula besitzt eine vom
Skolex bis zu den aiteren Gliedern allm&hlich von etwa 8 fi auf 18
zuaehmende Dicke und steilt im ganzen eine einzige zusammenhSngende,
leichtgefaltete, hellgianzende Membran dar, die bei gflnstiger Farbung
mehrere Schicbten erkennen laBt (Fig. 1 On). Es sind offenbar drei
Lagen Qbereinander, und zwar sieht man dies am deutlichsten an den
jQngeren Gliedern: zu fiufierst eine feine homogene Schicht (4 /.i dick),
die sicb mit Kernfarben sehr dunkel farbt, dann folgt eine schwacher
gefarbte Schicht von etwas grOBerer Dicke (6 /i) und schlieBlich eine
scbmale (2—3 /t dicke) glashelle Zone an der Grenze zwischen Haut-
muskeln und Cuticula. Von mancber Seite wird ibre scharfe Grenz-
kontur gegen das Parenchym wohl als „Kunstprodukt tt angesprochen,
doch ist sie mir stets bei noch so mannigfach vorbebandelten Objekten
der verschiedensten Herkunft entgegengetreten. Ich stehe also nicht
an, diese sogenannte „Basalmembran tt (Fig. 1 JBs) als AbschluB der
Cuticula gegen das Parenchym anzusehen, wobei sie die innerste Schicht
derselben bildet. Dieso Schicht ist Qbrigens auch am „Halsteil“ und
am Scolex sehr deutlich und enthalt bei aiteren Proglottiden haufig
winzig kleine, in gleicben Abstanden aneinandergereihte blaschenfbrmige
Hohlraume. Auch nach auBen grenzt sich die Cuticula scharf ab und
zeigt aufier der schon erwahnten groBen Farbbarkeit ein verschieden
starkes LichtbrechungsvermSgen. Ihre Dicke halt sich in der ganzen
Ausdebnung des Kdrpers in den genannten Grenzen, nur als Ausklei-
dung der Saugnapflumina und an' den Eingangen zu den Geschlechts-
organen wird sie merklich diinner (bis auf etwa 2 /< Durchmesser). Die
mittlere Schicht enthalt (auf feinen Querschnitten) zahlreiche rundlich-
ovale Blaschen sowie einzelne senkrecht zur Obertlache laufende, augen-
scheinlich ganz durchgehende Kanale, die man friiher als „Porenkannle , ‘
deutete, weil durch sie „wimpernde Protoplasmafaden 11 zur AuBenfladie
hindurchtreten sollten. Hin und wieder habe ich, besonders an den
aiteren Gliedern, zahlreiche feine, etwa 0,8 u lange, oft biirstenartig zu-
sammenhaftende Fortsatze als Besatz der Cuticula gefunden, alter
niemals eine dem entsprechende Anzahl von zugehorigen Porenkatnilen.
Darum sehe ich die sogenannte VVimperung eher fiir eine teilweise Auf-
faserung der auBeren Schicht der Cuticula an, welche durch ungleieh-
maBige Abreibung und LosstoBung wahrend der Fortbewegung des
Tieres entstanden sein dflrfte. GroBere CuticulabrUche sind dagegen
nicht als periodische Hautungsreste. sondern als Kunstprodukte zu deuten.
Andererseits zeigen die letzten Proglottiden schon vor ihrer Ablosung
naturliche Risse und Sprunge, aus denen spater die Embryonen nach
auBen gelangen.

Nach innen zu von der Grenzmembran liegen Hautmuskel-
fasern (Fig. 1, Mu), auf welche typische Zellen folgen. Diese bilden
als Subcuticula (Fig. 1 .SV;), wie nunmehr nach jahr/.ehntelang
wogendem Streit als sicher gilt, die Matrix der tMticula. Sie sind nach
Blochmann das in die Tiefe gesunkene Epithel der Cestoden, und

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218 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt.. Originate. Bd. 87. Heft 8.

die Cuticula im engeren Sinn6 ist ihr Ausscheidungsprodukt. Auf Grand
von Untersuchungen an Anoplocephala magna hat BalB (1908)
allerdangs versucht, der Subcuticula eine andere Bedeutung beizalegen.
Er sieht das Mesoderm (Parenchym) als Ursprungsboden dieser Zellen
an, wfihrend sich, seiner Theorie nach, das eigentlicbe ektodermale
Epithel infolge der verdauenden Wirkung des Mageilsaftes schon fruh-
zeitig losgestoBen hat nnd zugrtmde gegangen ist, so daB nur noch die
von ihr gebildete widerstandsfahigere Cuticula zuriickblieb. Diese Auf-
fassung laBt sich wohl kaum aufrecht erhalten,. zumal die feinere Strnktur
dagegen spricht, auch ist Blochmanns Ansicht, schon von alteren
Autoren ausgesprochen, im allgemeinen die verstandlichere.

Die Subcuticula besteht aus einer einfachen, auf Schragschnitten
infolge des ungleichen Abstande& der Kerne von der Cuticula scheinbar
mehrschichtigen Lage spindelformiger oder birnformiger Zellen, die
senkrecht zur Cuticula stehen. Die Zellen messen im LSngendurch-
messer etwa 16 // und besitzen einen 2,5 u groBen, stark tingierbaren

rundlichen Kern mit ein oder zwei Nukleolen und
einen dflnnen, nur schwach gefSrbten, oft ganz un-
deutlich feinkornigen Protoplasmamantel, welcher
nach auBen und innen reichverzweigte Fortsfitze
entsendet. Die typische Spindelforra ist je nach
dem Modus der Ivonservierung bei diesen Zellen
mehr oder wieniger verandert, besonders an alteren
Gliedern erscheinen diese mehr rundlich, andere
Male kegelformig und sind somit kautn von den
benachbarten Parenchymzellen zu unterscheiden.
Manche Autoren haben an ihnen eine Zellhulle
gesehen, andere leugnen sie und nehmen eine fein-
kornige „Interzellularis“ als Haftmittel zwiscben
den einzelnen Zellen an. Ich habe ebenfalls keine
Htillenmembran gesehen. Die feinen Ausiaufer
gehen einesteils zwischen den Fasern des Hautmuskelschlauches hindurch*
tretend an die Basalmembran, anderenteils nach innen zu an die eigent-
liche Grundsubstanz.

Leicht zu verwechseln mit den Subcuticulazeilen sind iiberall ein-
gestreute Zellen, die ihre feinsten Ausiaufer nach einwarts an die Ver-
zweigungen von Parenchymzellen entsenden. Es sind die Myob lasten
der Hautmuskulatur, von Blochmann als Som m er-Landois-
sche Zellen bezeichnet. Sie sind verhaltnismaBig ansehnlich (12// grofi)
und haben einen bis 5 // groBen, langlich-runden blaschenformigen Kern
und einen stark gekornelten Plasmaleib. Ihr peripheres Ende erscheint
in Schnittpraparaten oftmals mehr oder weniger verjiingt, wahrend der
zentrale Teil mehr abgerundet ist.

SchlieBlich bedarf es der Erwahnung, daB feine Nervenfasercben
zwischen die Subcuticulazeilen treten und mit je einer kolbigen An-
schwellung in einer Vertiefung der Basalmembran der Cuticula endigen.

An die Subcuticulazeilen schlieBt sich nach dem Korperinneren zu
das allgemeine Parenchym (Fig. 1 P) an, in welchem alle ubrigen
Organe: GefaBe, Nerven, Muskeln und Genitalien eingelagert sind. Es
liandelt sich urn ein lockeres, ziemlich zartes Gewebe, das in der Haupt*
saclie aus feinen, reich verzweigten MascliQn von 8—16 (x Weite be-
stelit, in welche einzelne runde Kerne mit Kernkorperchen sowie zahl*
lose Ivalkkoiper eingestreut sind. Im Skolex und dem darauffolgendeu

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^ Sc

p

. v + * P

K.K.

Fig. 1. Anaploce-
phala magna. Sagittal-
schnitt durch die Cuticula.
500:1.

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Becker, Weitere Beitrage zur Anatomic der Pferdeband warmer.

219

Abschnitt ist diese Bauweise weniger gut zu erkennerr als in Slteren
Gliedern. Nach neueren Autoren (RoBler, Zernecke) sind die
Maschen als feinste Ausl&ufer des Zellprotoplasmas anzusehen, so daft
dadurch die Zellen einige Aehnlichkeit mit multipolaren Ganglienzellen
bekommen. Vielfach sind nun die Zellen in hoherem Alter zugrunde
gegangen, und es ist nur noch das ebengenannte Maschenwerk fibrig
geblieben, was an den aitesten Proglottiden am deutlichsten in Erschei-
nung tritt. Nach Zernecke enthalten die Zwischenraume in den
Maschen eine „homogene ungefSrbte Fliissigkeit“.

Kalkkorper (Fig, 1 Kk) liegen fast tiberall im Parenchym ver-
streui. oft jedoch gruppenweise beieinander; besonders in Slteren, Pro¬
glottiden, wo Zellen nur noch sp&rlich vorkommen, ffillt ihre Haufigkeit
in der Rinde sehr ins Auge. Sie sind durchweg scheibenformig, von
rundlichem bis ovalem Querschnitt, und messen 8—14 ft. Im Innern
sind zwei oder drei konzentrische Schichten erkennbar, die durch ver-
schiedenes Liehtbrechungsvermogen hervorgerufen werden, auch Doppel-
bildungen sind nicht selten. Mit H&matoxylinfarbstoffen sind sie intensiv
farbbar, dagegen verschwinden sie bei Anwendung saurer Farbstoffe
oder Reagentien.

Anoplocephala perfoliata. — Trotz Kahanes abweichen-
der Beschreibung — die subcuticularen Muskelfasern, ihre Myoblasten
sowie die Kalkkdrper erwhhnt er flberhaupt nicht — zeigen sich im
wesentlichen grofte Uebereinstimmungen. Auch hier setzt sich die Cuti-
cula aus den genannten drei Schichten zusammen, von denen die fiuBerste
bis zu 4 ft stark ist, jedoch besitzt sie, wie Kahane richtig bemerkt,
eine glatte Oberflache ohne „Wimperung“. Bei sehr starker VergrOfie-
rung sind auch bei dieser Art feine, zur Oberflache des Korpers senkrecht
belle Streifen darin sichtbar, die als feine Kanalchen gedeutet werden
konnten. Die beiden inneren Cuticulaschichten haben zusammen einen
Durcbmesser ven etwa 2 ft, so daft die Cuticula insgesamt 6 ft stark ist.

Die Subcuticulazellen finden sich ebenfalls in einer einzigen Schicht,
sie sind spindelfdrmig, 14 fi lang (nach Kahane nur 8:4 /<)» ihre
4 u groften Kerne liegen auf Schnitten fUr gewohnlich nicht genau in einer
Roihe angeordnet, an den Gliedfalten sieht man dies am deutlichsten.
Das Maschenwerk des Parenchyms ist sehr dicht, doch ist die Grofte
der Zellen wie bei A. magna, also 14 n bzw. 4 ,o. Ebenso groB sind
die Myoblasten der subcuticularen Muskeln.

In der Rinde wie im Mark finden sich unzahlige Kalkkorperchen,
am zahlreichsten natflrlich in der Rinde alterer Glieder. Durch Zahlung
stellte ich an feinen FlSchenschnitten in jeder Proglottis durchschnittlich
3—4 Stflck pro Schnitt fest. Ihr Umrifi ist meist kreisrund, selten
O'al, die MaBe betragen in erster Form 4 /t, bei letzteren 8:10 fi. In
eiuem Falle sah ich eine deutliche Drillungsbildung, Doppelbildungen
sind haufiger; die Schichtung ist immer sehr ausgeprSgt.

Anoplocephala mamillana. — Von den drei Cuticulaschichten
zeichnet sich die aufierste durch viele Unebenheiten aus, welche in Form
von ziemlich 1 fi langen Fortsiitzen die Korperobertiiiche bedecken.
Diese Schicht ist durchweg 4 « stark, die ganze Cuticula 6 ft. Die
Streifung der ^Porenkaniile 11 ist besonders in der Mittelschicht anzu-
treffen (vgl. Zschokke, 1888). Jedoch in manchen Punkten stimme
ich nicht mit Zschokke uberein. Er zalilt vier Cuticulaschichten, von
denen die innerste gleichformig gelagert. aus Parallelfasern zusammen-
gesetzt ist, und zwar im ganzen aus Zirkularfasern des Parenchyms,

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220

CeotraibL 1 Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

durchquert von zahlreichen sebr feinen PorenkanSlchen, die senkrecht
zu den Fasern verlaufen. AuBerhalb findet sich nach Zschokke eine
stSrkere granulierte Scbicht, auf welcbe noch weiter nach aufien eine
feine durcbsichtige Lage mit zahlreichen PorenkaniUchen folgt. Dieses
letztere ist offenbar erst die basale Zone, w&hrend die zuerst beschrie
benen beiden Schichten als die beiden subcuticularen Muskellagen, die
auBere, granulierte, quergetroffen, die innere in der L&ngsrichtung be-
trachtet, zu deuten sind. Zschokke hat ihren muskuldsen Charakter
nicht erkannt, was bei Anwendung von Karminffirbung erkiarlich ist.
Ferner hat er „feine Protoplasmafaden tt als direkte Fortsetzungen der
Subcyticulazellen durch die Porenkan&le gehen sehen. Es folgt daraus ein
Wimperbesatz auf der ganzen Oberfl&che des Tieres. In der Tat haben
die FortsBtze der Cuticula eine ganz regelmSBige dichte Anordnung, sie
sind auch ziemlich gleich lang.

Die spindelfdrmigen Subcuticulazellen sind in einfacher Lage an-
geordnet — Zschokke will sie, seltener, doppelt gesehen haben —
und zeichnen sich durch ihre erhebliche GrdBe (20 ft) aus. Ihr runder
4—5 ft grofier Kern hat ein deutlich gegen die Umgebung abstechendes
Plasma, aber keine „Hfllle“ wie Zschokke meint. Die Myoblasten
sind Zellen von 10 ft GrdBe, ihr bl&schenformiger Kern miBt 4 ft im
Durchmesser.

Die Maschen des Parenchyma sind ziemlich weit (6 ft) und ent-
halten ansehnliche Kerne, aufierdem liegen in ihnen eine groBe Anzahl
Kalkkdrper von ovaler bis runder, geschichteter Form. Die GrdBe der
ovalen betrfigt 6:12 ft, die der runden 10 ft.

Muskulatur.

Ihren physiologischen Aufgaben entsprechend, hat man zwei Haupt-
gruppen von Cestodenmuskeln zu unterscheiden: 1) die ganz allgemeio
durch den Korper verbreitete Bewegungsmuskulatur; 2)-die besonderen
Funktionen angepaBte Organmuskulatur.

Letztere hat ohne Frage aus der erstgenannten ihre Entwicklung
genommen und ist dann im Skolex in den Dienst der Haftwerkzeuge.
in den Proglottiden in den der Geschlechtsorgane getreten, ihre Be-
schreibung erfolgt also zweckmaBig dort.

Die allgemeine Korpermuskulatur wiederum hat zwei Untergruppen.
Wahrend die Hauptmasse von den Parenchyramuskeln, den eigentlicben
Muskeln der Fortbewegung gebildet wird, hat der nur schwach ent-
wickelte subcuticulare „Hautmuskelschlauch u wahrscheinlich andere,
noch unbekannte (vielleicht exkretorischeV) Funktionen wahrzunehmen.
dem gleichnamigen Gebilde der Nematoden ist er nicht vergleichbar.

Schon bei ganz jungen Proglottiden ist die Hautinuskulatnr
deutlich entwickelt, sie tritt in Gestalt zweier dflnner Hiillm&utel on-
mittelbar unter der Cuticula (Fig. 1 Mu) auf, wo sie auf feinen. ober-
diichlich gefiihrten Schnitten als ein zartes, regelmaBiges Gitterwerk
erscheint. Zu aufierst liegen die Ringfasern dicht aneinander, nach
innen zu die mehr einzeln laufenden, zu ersteren senkrechten LSngsfasern.

An oplocephala inagna. — Die zuerst genannte Schicht hat
eine Starke von 4 u, sie erweist sich als die kriiftigere und ist beson-
ders in den gcschlechtsreifen Gliedern gut ausgebildet und nach den
Spezialmethoden fiir Muskellarbung (van Gieson, Blochmann) tj-
pisch farhbar. Sie ist aus einer groBen Anzahl dicht gedrSngter, etvas
wellig verlautcnder, feinster Fibrillen zusainmengesetzt, die im allgemeinen

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Becker, Weitere Beitrage zur Anatomic der Pferdebandwiirmer.

221

einander parallel angeordnet sind. Ganz anders die Lftngsmuskeln. Diese
kommen nur in einfacher, hbchstens 2 ,u starker Schicht vor and liegen
in ziemlich gleichmSBigen Abstftnden voneinander, so daB die Ausl&ufer
der Subcuticulazellen durch die Zwischenr&ume hindurch zur Basal-
mem bran treten kbnnen. Kerne sind in den Hautmuskeln selbst nicht
anzutreffen, jedoch ist es Blochmann und Zernecke gelungen, durch
vitale Methylenblauf&rbung und durch Anwendung der Golgi-Methode
die Myoblasten d,er Ringmuskeln als multipolare, nahe bei den Sub-
cnticulazellen belegene Zellen nachzuweisen. Denn ven jeder dieser
Zellen entspringen viele zarte ProtoplasmafortsStze, welche sich peripher
mit einzelnen subcuticularen Ringmuskelfasern verbinden, nach einw&rts
mit Parenchymzellen in Zusammenhang treten. Sommer und Lan-
dois haben bei anderen Cestoden ein mit diesen Zellen verbundenes
„plasmatisches Kanalsy-
stem“ beschrieben — hier
babe ich derartiges nicht
angetroffen.

Die Parenchym-
muskeln der Proglot-
tiden (Fig. 2) sind in fthn-
licher Weise angeordnet
und gebaut wiediejenigen
anderer T&nien. Sie sind
krAftig entwickelt und
lassen in ihrem Verlaufe
drei zueinander senk-
rechte ' Rich tun gen er-
keunen. Besonders gut
ausgebildet ist die zu
SuBerst gelegene Lfin gs-
muskulatur (Fig. 2 Lm),
indem sie nach der Peri¬
pherie zu (dorsal und
ventral) unmittelbar die
Faltenbuchten der Pro-
glottiden tangiert, welche
die Grenze jedes Gliedes bezeichnen, und in die Falten selbst mit ein¬
zelnen BQndeln strahlenartig eindringt. In Proglottiden mittlerer Grolie
ist dieser Teil der Muskulatur etwa 150 /i stark und deutlich in zwei un-
aleiche Portionen (70:40 /li) geteilt, welche sich durch die ganze Strobila
hindurch bis zum Scheitel des Skolex verfolgen lassen. Die Fasern liegen
ziemlich locker, teils zu BQndeln angeordnet, toils wirr durcheinander.
Beide Portionen schlieBen eine, im obigen Falle etwa 40 /u breite. von
Parenchym und spQrlichen. in anderer Richtung laufenden Fasern durch-
zogene Zone in sich. Die LQngszQge der besonders in der AuBenpartie
sebr kraftigen BQndel sind. da und dort in ihrem Verlaufe unterbrochen,
regelmSBig natQrlich da, wo die AusfQhrwege der Geschlechtsorgane hin-
durchgehen, aber auch sonst, niemals jedoch in einer Weise, daB dadurch
eine Abgrenzung der einzelnen Bandwurmglieder auch nur angedeutet
wfirde. Es besteht also ein unmittelbarer Zusammenhang zwischen dem
gesamten System dor LQngsfasern. Auf Querschnitten ergibt die innere
Greuze der LQngsmuskulatur die Form einer Ellipse, an welche sich nach
innen zu die Transversalmuskulatur (Fig. 2Tm) (frdher allgemein

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2 22 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

„Ringmuskulatur u genannt) anschlieBt. Diese besteht aus verh&ltnism&Big
schmalen unterbrochenen Bundeln, welche im mittleren Teil der Dorsai-
und Ventralflache der Glieder relativ am starksten und dichtesten sind,
nach den Seiten aber, ohne einen geschlossenen Ring zu bilden, strablig
auseinandergehen. Die drei lateralen Nervenlangsstrfinge jederseits
werden durch sie fest umschlossen und somit deutlich voneinander ge-
sondert. Weiter peripher kreuzen sich die Fasern groBenteils unter
spitzem Winkel, wobei sie die L&ngsbiindel durchbfechen. VVie aus
Sagittalschnitten hervorgeht, ist die Starke der Quermuskeln nicht iiberall
im Verlaufe der Proglottiden die gleiche, sie schwankt in mittleren
Gliedern zwiscken 20 und 35 /«. Auch die Lage in bezug auf den Ab-
stand von der Langsmuskulatur wechselt fortw&hrend, indem sich nam-
lich zeitweise Nervenkommissuren in Ringform dazwiscben schieben.
An der Grenze'der Proglottiden, vor und hinter den noch zu schildern-
den Trennungssepten der Sagittalmuskulatur zwischen den einzelnen
Proglottiden, bilden sich jederseits auffallend kr&ftige Verstarkungszuge,
welche bei prall gefiillten Gliedern vielleicht als Haltegurten wirkeu konneo.

Die Dorsoventral- oder Sagittalfasern (Fig. 2 Dvtn) selbst
verlaufen in mehreren Bundeln, teilweise auch in einzelnen Fasern von
der dorsalen zur ventralen Flfiche des Parasiten. Bei unserer Art sind
diese Biindel am Ende jeder Proglottis zu einer kr&ftigen, etwa 15
starken Muskelplatte verschmolzen, was zu einem vollkommenen Ab-
schluB des Markraumes gegen die Nachbarproglottis fQhrt, eine Tatsacbe,
auf welche zuerst Scheibel hinweist. Diese Platte ist wohl ursprung-
lich durch die verdrangende Kraft der heranwachsenden Geschlechts-
organe entstanden, sie ist jedoch schon bei jungen und selbst bei ganz
sterilen Proglottiden deutlich ausgepragt. Auch zwischen den einzelnen
Geschlechtsorganen laufen in dieser Richtung einige starkere Strfinge
hindurch, die sowohl die einzelnen Hodenblaschen wie die Eierstock-
und Dotterstockfollikel voneinander sondern, wahrend einzelne Fasern
durch Quer- und LSngsmuskeln hindurch zur Peripherie ziehen, um
schliefilich an der Cuticula sehnig zu endigen.

Der Bau der stets htillenlosen Muskelfasern ist durchaus gleichartig.
Den Dorsoventralmuskeln liegen ihre Muskelzellen meist dicht an. Sie
sind an GroBe den Parenchymzellen gleich, die Kerne sind kugelig bis
oval, das Plasma ist kfirnig. In unmittelbarer Verbindung mittels faden-
formiger Fortsatze stehen ihit den einzelnen Fasern ihre ^Myoblasten^.
Es sind dies groBe sternformige Zellen mit granuliertem Plasma und
einem groBen Kern. (Naheres vgl. ineine Untersuchungen iiber das
Nervensystem 1921.)

Anoplocephalaperfoliata. — Die Muskulatur zeigt im wesent-
lichen den gleichen Aufbau wie bei A. magna, natflrlich ist sie ent-
sprechend schwiicher. Nur die subcuticularen Muskelschichten sind
ebenso stark (G /<)• Die Langsbiindel weisqn zieinlich groBe Lflcken
auf. Von den Parenchymmuskeln sind die Llingsmuskeln dadurch aus-
gezeichnet, daB sie in der Regel in 3 Portionen geteilt sind, welche
zwischen sich zwei schinale, von Parenchym. Nervengewebe und spar-
lichen Muskelfasern erfullte Zonen eiuschlieBen. Die Langsziige sind
bier hiiufiger in ihrem Verlaufe unterbrochen, niemals aber an den
Proglottidengrenzen in groBerer Anzahl. Ihre Starke betragt in mitt-
leren Gliedern ini ganzen etwa 80 a. Die dritte, innerste Portion,
welche sich nur in sterilen und noch nicht nut Eiern gefiillten Gliedern
klar unterschciden liilit, ist bei weiteiu die schwiichste. Die Transver-

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Becker, Weitere Beitriige zur Anatomie der Pferdebaadwiirmer. 223

salmuskeln sind auf der Dorsal- und Ventraltiache, ini Maximum 10 /.t
stark, nacb den Seiten zu schwacher und schwacher, bis die teilweise
Ueberkreuzung stattfindet. Auf Sagittalschnitten sieht man besonders
am ADfang einer jeden Proglottis starke Anhaufungen dieser Muskeln
als rundliche Konglomerate in den zwischen Langs- und Dorsoventral-
muskeln gebildeten Winkeln, wiihrend nach hinten zu nur einfache
dunne Bilndel quergeschnitten sind. Die Sagittalmuskeln verlaufen teils
in Biindeln, teils als einzelne Fasern von einer Seite zur andern. Duiek
Konzeutrierung in eiuer Ebene bilden sie auch Muskelsepten zwischen
den einzelnen Gliedern.

Anoplocephala mamillana. — Noch schwacher (4/<) sind die
beiden Muskelschichten der Cuticula bei dieser kleinsten Art. Anderer-
seits iibertrifft aber die LBngsmuskulatur der Proglottiden mit einem
Gesaratdurchmesser von 100 diejenige von A. perfoliata. Jede der
beiden Portionen hat namlich eine Starke von 40 n ; die Liicke, welclie
neben Parenchym in der Hauptsache Nervengewebe enth&lt, miBt 20 /t,
wird aber nach den lateralen Randern zu iramer enger, so daB sich
beide Schichten immer mehr ndhern. Eine segmentale Anordnung fehlt
den Langsfasern. Die Transversalmuskeln messen im mittleren Teile
bis zu 6 f.i und bilden hier eine kompakte Schicht, nach den Seiten diver-
gierend umschlieBen sie die NervenlSngsstrBnge. Die Sagittalmuskeln
verhalten sich insofern anders, als sie nicht so deutliche Treunungsw&nde
an den Grenzen der Glieder bilden wie bei den beiden anderen Arten,
damit fehlen auch die Tragegurten der Quermuskeln (vgl. Fig. 2).

ExkretionsgefSBc.

Im Jahre 1877 hat Blum berg in einem kurzen Beitrag zur Aua-
tomie der Pferdetadien die zwei groBen Langskandle, welche in jedetn
Gliede anastomosieren, fur „Darmschenkel“ erkl&rt. Dem widersprachen
Leuckart und sein Schiller Kahane (1880). Letzterer weist zuin
ersten Male auf die lichtbrechende Eigenschaft der GefSBwand hin, rechnet
jedoch die ihr von auBen anliegenden Zellen dem Korper'pareuchym zu;
ferner hat er an den Abgangsstellen der Queranastotnosen keine Klappen
angetroffen, eine Tatsache, die Kohler (1894) in seiner Spezialarbeit
uber den Klappenapparat fur A. perfoliata ausdrucklich bestatigt.

Anoplocephala magna. — Scheibel bringt nur weniges iiber
das GefSBsystem: Er findet jederseits ein HauptgefaB (Fig. 2 u. 3 He),
welches durch die benachbarten Genitalieu von seinem sonst geraden
Verlauf ein wenig abgelenkt wird, am meisten dasjeuige der linkeu Seite,
indem es namlich durch den Cirrusbeutel auf die ventrale Seite ver-
drangt wird. Die flbrigen GefaBe bilden ein dichtes Netzwerk; un-
mittelbar hinter dem Skolex bleiben nur zwei den HauptgefiiBen parallele,
ventral von diesen und ein wenig lateral verlaufende GefaBe iibrig.
AuBerhalb der Quermuskeln liegen keine GefaBe. Die SkolexgefaBe hat
Scheibel wegen ihrer komplizierten Anordnung flberhaupt nicht unter-
sucht. Ich habe dies in meiner Arbeit uber das Nervensystem nachgeholt.
Schliefilich hat Deiner (1912) bei A. latissima h. sp. ahnliche Ver-
haltnisse gefunden, wie ich sie im folgenden fiir A. magna wiedergehc.

AuBer jenen beiden von Scheibel beschriebenen HauptgefiiBen,
welche beilaufig in mittleren Gliedern etwa 4 mm vom AuBenrande ent-
fernt verlaufen, existiert noch eine gauze Anzahl in ziemlich gleichen
Abstanden voneinander angeordneter Neben 1 ang sgefaBe (Fig. 3AV),
etwa 1 Dutzend in den geschlechtsreifen Gliedern, davon zicht eines auf

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224

CentralbJ. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

jeder Seite als BegleitgefSB (Fig. 3 Be) noch auBerhalb von dem
HauptgefaB hin. Im hinteren Teile jeder Proglottis sind diese sich
mehrfach gabelnden NebengefaBe durch Queranastomosen (Fig.34 m)
untereinander verbunden. Die letztere Einrichtung ist jedesmal doppelt,
d. h. dorsal und ventral vorhanden, so daB also ein Anastomosen-
ring in jedem Gliede besteht, in den aber das HauptlangsgefSB nicht
direkt einbezogen wird, sondern der seitliche AbschluB gegen die Mus-
kulatur durch die peripheren NebengefaBe gebildet wird, wShrend die
HauptgefaBe nur einige feine, indirekte Verbindungen mit ihnen baben,
in der Hauptsache jedoch der Sammlung der zahlreichen KapillargefaBe
(Fig. 3 Kp ) dienen, welche aus dem Markraume des Gliedes kommen.
Durch den eben beschriebenen Zusammenhang zwischen Ringanastomosen

und NebenlangsgefaBea entsteht
also, im ganzen betrachtet, ein ziein-
lich gleichmaBigesMaschenwerk
von GefSBen, das auf Quer- sowie
Sagittalschnitten wie eine Strick-
leiter aussieht. Nur der starke Ful-

Fig. 3.

Fig. 4.

Fig. 3. A. perfoliata. Flachenschnitt
durch den agenitalen Rand einer steriien
Proglottide. 200 :1.

Fig. 4. A. perfoliata. 3 Wiroper-
flaromen aus dem Bindegewcbe des Cirruf-
beutels. 700:1.

lungszustand der vollreifen Glieder laBt in diesen Abweichungen von dieser
Bauart erkennen, indem durch den Druck der Embryonen Verzerrungen u
bzw. Verlegungen der Lumina bewirkt werden. Schon dicht hinter dem ti
Skolex, wo noch keine Organe ausgebildet sind, sieht man auf Quer- fe
schnitten sehr deutliche, breite ZickzackgefaBe, die spater zur Ring- i'
anastomose werden. Bei der je nach dem Kontraktionszustande des t
Tieres mehr oder weniger ausgesprochenen Spiralform der LangsgefaBe t
wird also der Hauptliingsnerv (Fig. 3 llhi) jeder Seite von dem auBersten 1
NebenlangsgefaB (Fig. 3 Be) spiralig umwunden. In die sogenannten ']
Proglottidenfalten erstreckt sich jederseits dorsal und ventral je eine
blind endigende Fortsetzung der Ringanastomose, so daB auf dem Quer-
schnitt eine gabelige Form herauskommt. t

Das Kaliber der HauptgefiiBe betragt hinter dem Skolex etwa ^
35 (i und steigt bis auf 80 //, das der NebengefaBe und Anastomosen t|

n

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Becker, Weitere Beitrage zur Anatomie der Pferdebandwiinner.

225

uagefahr 20—40 p. Im feineren Bau ist keine Abweichung gegen-
flber anderen Cestoden zn erkennen. Die Wand der HauptgefaBe ist
oft stark in Falten gelegt und mit einer feinen Cuticula von 1,5 p Dicke
ausgekleidet, dann folgt ein dentlicher Epithelbelag aus 20 p groBen
Zellen, ferner sind noch einige zirkulare Muskelfasern dazwischen ge-
schoben, welche eine gewisse Kontraktilitfit bewirken. Die ttbrigen Ge-
fifie haben nur den Zellbelag, aber keine muskulfise Cuticula. Kon-
traktile Endblasen lassen sich ebensowenig nachweisen wie „ Foramina
8ecundinaria“.

Die Exkretionszellen (Fig. 4) sind von typischer Gestalt, 15/u
groB, ihr Kern (Fig. 4 Ee) nierenfSrmig, 2,5 p groB. Der trichter-
fbrmige Uebergang in die Kapillare enth&lt einen zungenartigen Fortsatz
(Fig. 4, Z) im Innern und jederseits muskulbse Wandleisten (Fig. 4 Wl).
Ich habe diese Zellen besonders zahlreich in den lockeren Parenchym-
maschen angetroffen, welche den Cirrnsbeutel rings umhttllen; aber auch
sonst im inneren Teil der Rinde, im Skolex sowie in der Mittelschicht
der Glieder fehlen sie nicht. Sie liegen meist zu 2—5 dicht beiein-
ander, wobei sich ihre Eapillaren (Fig. 4 Kp) seilartig miteinander ver-
flechten. Diese sind sehr fein, kaum 1 p stark im Durcbmesser, von
ihnen mflnden oft mehrere an der gleichen Stelle in die Sammelrohren
oder in HauptgefaBe ein.

Wenn man sich den ganzen Aufbau des Exkretionssystems klar
gemacht hat, was bei dieser groBen Cestodenart besonders gnt moglich
ist, so kommt man mehr oder weniger zu der Ueberzeugung, daB es
sich eigentlich umzweiverschiedene, nur wenig zusammenhangende
Systeme handeln muB: Anastomosen und NebengefaBe (einschl. Be-
gleitgefafi) einerseits, HauptgefaBe und Trichterzellen nebst Eapillaren
andererseits. Vielleicht entspricht dieser Dualitat im inneren Bau auch
ein physiologischer Gegensatz, indem eines die Aufgabe der Exkre-
tion, das andere (im AnschluB an das „plasmatische System" von
Sommer und Landois) die Resorption zu bewerkstelligen hatte.
DaB zwei direkt entgegengesetzt gerichtete Prozesse von denselben
Zellen ausgefflhrt wtirden, ist schwer verstandlich. Nach Organen der
Nahrungsverarbeitung und ihres Weitertransportes — die Aufnahme
konnte schon durch Diffusion bzw. Osmose allein geschehen — hat man
immer noch vergeblich ausgeschaut Es ist moglich, daB Blum berg
in gewissem Sinne dennoch Recht bekommt mit seiner einst so heftig
bekampften Ansicht.

Anoplocephala perfoliata. — Das GefaBsystem ist von
Kahane beschrieben. Auch bei dieser Art findet sich jederseits, in
gleichem Abstande wie bei A. magna, nur ein HauptlangsgefaB mit
einer 2 p dicken, faltigen und lichtbrechenden Cuticula, mit Ringmuskeln
und Wandzellen von 20 p GrSBe (der Kern ist 3,5 p groB). Auf der
Genitalseite liegt das Gefafi stets ventral vom Geschlechtsapparat, und
zwar nach einwarts von dem Hauptseitennerven, in etwa 60 p Ent-
fernnng bei Proglottiden mittlerer GroBe. Dazwischen befindet sich in
der Regel das BegleitgefaB, ein NebengefaB, welches frtiher zu den
HauptgefaBen gerechnet wurde (vgl. Kahane), aber von den iibrigen
12—15 dorsal und ventral auftretenden Nebeniangsgefafien morpho-
logisch nicht verschieden ist und auch mit diesen durch ein Anasto-
mosennetz in direktem Zusammenhange steht. Allerdings ist der Auf¬
bau nicht so gleichmaBig wie bei A. magna. Meistens besteht eine
stJrkere, ventral verlaufende (Haupt-) Anastomose und eine ganz feine

Erne Abt. Orig. Bd. 87. Heft 3.

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226 CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

dorsale (Neben-) Anastomose, wie sich besonders an Querschnitten steriler
Glieder ergibt. Wahrend das Kaliber der NebengefaBe und der Haupt-
anastomose 14 betrSgt, bat die Nebenanastomose nur 6 n Durch-
messer. Die von Kahane beschriebenen RindengefaBe sind erheblich
feiner. Die Cuticula der HanptgefaBe iiberschreitet nicht die Dicke von
1 n, die Wandzellen sind iiberall gleichartig. Die beiden Anastomosen
umgreifen in jedem Gliede das HauptgefaB bogenformig und stehen durch
feine Kapillaren mit ihm in Verbindung. Der groBte Teil der Kapillaren
jedoch nimmt seinen Ursprung aus je einer der vielen Flimmerzellen
(14 n Grofie), die in der Mittelschicht am haufigsten sind (Fig. 3 u. 4).

Anoplocephala mamillana. — Zschokkes im allgemeinen
zutreffende Beschreibung bedarf nur weniger Erganznngen. Innerhalb
der Hauptiangsnerven liegen jederseits zwei LangsgefaBe entweder neben*
oder flbereinander, das Verhalten wechselt. In den vorderen Proglot-
tiden sind die GefBBpaare fast gleich weit, etwa 20 ju, bald wird aber
das ventrale bzw. innere starker als das andere Paar. In der Mitte
der Strobila betrBgt die Weite etwa 40 n, wahrend das andere nor
halb so weit ist. Letzteres wird nach hinten zu noch enger, dagegen
erreicht das „HauptgefaB“ nahezu 50 ft. In den meisten Fallen ver*
laufen die vier LangsgefaBe getrennt bis an das Hinterende, in einem
Faile habe ich jedoch das angetroffen, was Zschokke nicht fur un-
moglich halt, eine „kontraktile Endblase u . Es handelte sich am
ein ganz junges Tier mit lanzettlichem Ende, wo sich die GefaBe in eine
etwa 60 /t weite Blase verloren, diese stand mit der AuBenwelt durch
eine ganz feine Oeffnung am proktalen Ende in Verbindung. Der Ver-
lauf der LangsgefaBe ist ein spiralig gewundener, die Weite der Spiral-
bogen resultiert aus dem jeweiligen Kontraktionszustande, in welchem
das Tier fixiert wurde. Auf Fiachenschnitten sieht man zwei parallele
Zickzackbander, deren konkave Seiten in der Gliedmitte nach innen, an
den Gliedgrenzen hingegen nach auBen gewandt sind. FQr die Haupt-
gefaBe ist die beiderseitige Verbindung durch eine sehr weite GefaB-
anastomose charakteristisch, die besonders an Querschnitten in die Augen
springt. In Gliedern mit wenig vorgeschrittener Entwicklung der Ge-
schlechtsorgane, wo sie ca. 15 Kaliberweite aufweist, verlauft sie im
hinteren Teile der Proglottis, aber nicht in gerader Richtung, sondern
iminer in drei oder vier bogenformigen Windungen, die bald gegen die
dorsale bald gegen die ventrale Fiache gekehrt sind. Nach der KSrper-
mitte zu nimmt die Weite noch zu bis auf 30 u im Maximum. Auch
in den mit Geschlechtsorganen gefflllten Gliedern bleibt der Verlauf der
gleiche, um erst in den mit Eiern vollgepfropften zu obliterieren. Die
auBeren (dorsalen) LangsgefaBe haben keine Anastomosen und machen
sich dadurch leicht kenntlich. Ein anderer Unterschied besteht in dem
feineren Bau, denn bei letzteren fehlen Cuticula und Ringsmuskeln. Den
darunter belegenen Wandzellen schreibt schon Zschokke die Rolle
eines Epithels zu, da sie sich durch ihre GrdBe und die Beschaffenheit
ihrer Kerne von den benachbarten Parenchymzellen scharf abheben.
Langsmuskulatur habe ich an den GefaBen niemals wahrnehmen kfinnen,
ebensowenig Klappea. Die Wimperzellen sind am haufigsten direkt
unter der Subcuticula der Proglottiden, hier verlaufen Qbrigens auch
sehr enge LangsgefaBe in unbestimmter Anzahl. Diese scheinen mit den
kleinen Hohlr&umen (Fig. 2, Ho) in Verbindung zu stehen, welche zu
mehreren (2—6) beieinauder liegen. Man sieht diese sehr deutlich auf
Sagitalschnitten durch vollentwickelte Glieder, und zwar in dem dorsalen

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Lange, Ueber die Koktoatabilitat gebundener Antikorper.

227

und ventralen Proglottiswulst direkt unter der Subcuticula. Die Wand
der Blaschen ist sehr zart, ihr liegen einige dunkle Kerne an, der In¬
halt besteht aus kleinen helleu Kornchen, die in geringer Anzahl ver-
streut liegen. Ob hier vielleicht ein „plasmatisches Kanalsystem u vor-
liegt, welches nutritorische Aufgaben zu erfOllen hat, wie es von
Sommer und Landois bei Bothriocephalen, von Zernecke und
Blochmann bei verschiedeuen Cestoden beschrieben wird, ist noch
nicht erwiesen.

Literatur (Erganzungen).

Balfl, H., Ueber die Entwicklung der Gertchlecktegiinge bei Cestoden, nebst Be-
merkungen zur Ek tod ermf rage. (Zeitscbr. f. wiss. Zool. Bd. 91. 1908.)

Kohler, E., Der Klappenapparat in den ExkretiousgefaBen der Tanien. (Ebenda.
Bd. 57. 1894.)

S pen gel, J. W., Die Monozootie der Cestoden. (Ebenda. Bd. 82. 1905.)

Nachdruck verboten .

Ueber die Koktostabilitat gebundener Antikorper.

Bemerkung zu der Arbeit von Spftt, dieses Centralbl. Bd. 86. H. 3.

[Aus dem Hygiene-Institut der Universitat Greifswald (Direktor: Prof.

Dr. E. Friedberger).]

Von Dr. Arthur Lange.

In dieser, erst verspfitet zu meiner Kenntnis gelangten Arbeit kommt
Spat zu einem mit Bessau tibereinstimmenden und den Versuchen
von Friedberger und Pinczower sowie Kumagai entgegen-
stehendem Ergebnis.

Ich habe bereits vor liber Jahresfrist auf Veranlassung von Herrn
Prof. Friedberger an einer groBeren Zahl von Typhusst&mmen Ver-
suche in der gleichen Richtung mit Agglutininen angestellt und in Ueber-
einstimmung mit Friedberger und seinen Schlilern die Koktostabilitat
der gebundenen Antikbrper erneut festgestellt. Ich habe des weiteren
gezeigt, daB auch der von Bessau benutzte Stamm „Bock u , im Gegen-
satz zu dessen Angaben, nach dem Kochen Agglutinin bindet. Zur
vSlligen Beladung muBten allerdings die Bakterien 9—lOmal hinterein-
ander w&hrend je 1—2 Std. mit Immunserum ausgiebig beladen werden.
Eine Mitteilung uber diese Versuche erscheint deinniichst in der Zeitschr.
f. Immunitatsforsch.

Spat hat seine Experimente mit Komplementbindung und Normal-
agglutininen angestellt. Bezflglich der Komplementbindungsversuche gilt
zuniichst das, was Kumagai schon gegenflber den bakteriolytiscben
Versuchen Bessaus betont hat, daB naralich hier, im Gegensatz zur
Agglutination, neben der haptophoren Gruppe noch die vielleicht emp-
findlichere komplementophile interveniert. Allerdings glaubt Spat, durch
seine Versuche auch die Thermolabilitat der haptophoren Gruppe des
komplementbindenden Antikbrpers gezeigt zu haben.

Wie sind nun diese entgegengesetzten Befunde von Spat zu deuten?

Wenn man die Versuchsprotokolle Spats durchsieht, so fallt auf,
daB er lmal, hSchstens 2mal, bis zu 1 / i Std. bei 37° sensibilisiert hat,
und wenn er auch unter diesen Bedingungen einmal bei neuem Zusatz
des Immunserums keine weitere Antikorperadsorption gesehen hat, so

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228

Centralbl. i. Bakt etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 3.

lassen sich doch diese Versuche bezfiglich der Dauer und des Grades
der AbsSttigung nicht mit denen von Friedberger, Pinczower, Ku-
magai und meinen eigenen vergleichen, wo bei der bis zn 10mal wieder-
holten, langdanernden Adsorption sicber eine ganz andere Beladnng der
Bakterien und viel intensivere Verfestigung der Antikorper eingetreten
war als dort.

Bei den Agglutinationsversuchen hat S p II t flberhaupt nur mit
N ormalrinderserum (anscbeinend lmal) beladen. Hier gelten also die
gleicben Einwendungen. Die Spuren von normalen Antikorpern, die so
von den Bakterien adsorbiert worden sind, konnen nicht mit den Mengen
von Immunagglutininen in unseren Bindungsversuchen verglichen werden.
Im fibrigen sind wir, durchaus in (Jebereinstimmung mit SpSt der
Meinung, dafi „die bei Normalantikbrpern nachgewiesenen Verb&ltnisse
nicht obne weiteres auf die Immunantikdrper flbertragen werden ddrfen u .

Diese Versuche Sp&ts kbnnen also mit den unsrigen nicht ver¬
glichen werden und scheinen mir als Beweismaterial fflr das vorliegende
Problem nicht verwendbar.

Nachdruck verboten .

Untersuchungen liber Scharlach.

Experimentelle Erzeugung von Leukozyteneinschliissen.

[Aus dem Pathologischen Institut der UniversitSt Kiel.]

Von Dr. R. Hflppll,

Assistenten am Institut fur Schiffs- und Tropenkrankheiten, Hamburg.

Mit 2 Abbildungen im Text.

Der Erreger des Scharlachs ist bis heute noch unbekannt; auf die
besonders in der Siteren Literatur sich findenden Ausfflhrungen fiber
angeblich spezifische Mikroorganismen, die einer n&heren Nachprfifung
nicht standhielten, brauche ich hier nicht einzugehen. Die seit dem
Aufkommen der bakteriologischen Forschung zahlreich angestellten Ver¬
suche, bestimmte Bakterien als Erreger festzustellen, haben trotz aller
aufgewandten Muhe den Nachweis einer bakteriellen Aetiologie des
Scharlachs nicht erbringen konnen. DaB dabei einzelne dieser Arbeiten
groBes theoretisches und vielleicht auch praktisches Interesse bean-
spruchen konnen, ist zweifellos.

So gelang esGabritschewsky durch Injektion eines aus Streptokokkenbouillon-
kulturen nergestellten Vakzins scharlaehahnliche Exantheme und andere Erscheinungen
eines leichten Scharlachs beim Menschen zu erzeugen, nach deren AbkliDgen eine Im-
munitat gegen Scharlach bestehen soil. Inwieweit diese Versuche, deren Ergebniese
von zahlreichen, vor allem von russischen, Nachuntersuchern bestatigt wurden, berufen
sind, praktisch verwertet zu werden, entzieht sich meiner Beurteilung. Schleissner
brachte Streptokokkenkulturen, die aus Scharlachleichen geziichtet waren, mittels feiner
Zerstaubung in die Nasen- und Kachenhohle von Affen und beobachtete danach ein
scharlachahnliches Krankheitsbild. Begreiflicherweise wurde das Hauptaugenmerk von
jeher auf die Streptokokken gerichtet, deren grobe Bedeutung fur den Ablauf der
Krankheit ja uber allem Zweifel steht. Nach Jochmann gelingt es, aus etwa *L aller
Scharlachleichen Streptokokken zu ziichten. Gleichzeitig wurden aber in den Enter-
suchungen des gleichen Autors bei 23 Scharlachkranken Streptokokken intra vitam i®
Blute wahrend der ersten beiden Tage der Krankheit vermifit, desgleichen fehlten sie
in foudroyant verlaufenden Fallen. Man wird daher nicht fehlgehen, bei dem Schar¬
lach eine Art Symbiose der Streptokokken mit dem unbekannten Virus anzunehmen

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Hdppli, Untersuchungen iiber Scharlach.

229

<8ynergetische Symbionten, v. Prowazek). Gegen die atiologische Bedeutung der

S tokokken spricht auch die fast ausnahmslos nach Ueberstehen des Scbarlacbs vor-
;ne Immunitat, da erfahrangsgemafi das Ueberstehen von Streptokokkeninfektionen
zu erneuten Streptokokkenerkrankungen disponiert. 1st so nach aem augenblickiichen
Stande unserer Kenntnisse, ungeachtet vereinzelter gegenteiliger Aeufierungen in der
Literatur, eine bakterielle Aetioiogie des Scharlachs nicht nur nicht erwiesen, sondern
vieimehr als wenig wahrscheinlieh anzunehmen, so sprechen verschiedene Momente da-
fur, den Erreger unter den Chlamydozoen - Strongyloplasraen zu suchen. Jene von
?. Prowazek aufgestellte Organismengruppe, deren Hauptkennzeichen neben der
intrazellularen Entwicklung des Virus, der besonderen Art der Fortpflanzung, das
Passieren bakteriendichter Filter durch die meisten Arten darstellt, erscheint durch
zahlreiche eingehende Arbeiten in ihrer Existenz gesichert. Die Haimtschwierigkeit
ihrer Erforschung beruht in der aufierordentlich geringen Grofie des Virus, die eine
Verwechslung mit korpereigenen Produkten, Eiweidgranula, Zelltriimmer leicht moglich
macht, und daher eine besondere Erfahrung voraussetzt. Der Erreger des Scharlachs
wurde 1907 durch v. Prowazek zu den Chlamydozoen gerechnet ira Anschlufi an die
Befunde Mallorys, der in der Haut von Scharlachkranken, die kurz nach dem Auf-
treten des Exanthema gestorben waren, in den Epithelzeilen und zwischen ihnen ovale
Gebilde mit einer besonderen Innenstruktur fand. Die Korperchen besitzen eine Grofie
von 2—7 p und sind mit Methylenblau unscliwer darstellbar. Eine zweite Form sind
rosettenartige Korper, in denen 10—18 Segrnente um ein zentrales Korn liegen. Letztere
Gebilde fand Mallory in Vakuolen der Epithelzeilen und frei in den Lymphraumen
der Epidermis und des Corium. Die Befunac Mallorys wurden von Duval, Field,
v. Prowazek, Hlava, Bernhardt, nachgepruft und bestatigt. Field halt die
Gebilde fur in ihrer chemischen Natur veranderte Teile des Protoplasma der Epithel-
zellen; auch die zwischen den Zellen gelegenen meist kleineren rundlichen Gebilde faflt
er als Degenerationsprodukte auf. Auffallenderweise lassen sich die groBeren runden
und ovalen Gebilde in wiihrend des Lebens exzidierten HauUtiicken im Stadium des
Exanthems oder im Stadium der Abechuppung nicht nachweisen, so dafi man bei ihrer
Entstehung an einen post mortem in den Zellen weiterlaufenden Prozefi denken mufi.
Sah Mallory bereits im Inneren der grofien intrazelluliir gelegenen Korper des Stra¬
tum granulosum netzformige innenstrukturen, so gelang v. Prowazek bei seinen
Nachunterauchungen im Innern der groberen Einschliisse die Darstellung feinster Korn-
chen, die im Einklang mit seiner Chlamydozoentlicorie als Elementarkdrperchen auf-
zufassen waren. Daher setzt auch Bernhardt die Malloryschen Einschliisse in
Parallele zu den Guarnierischen und Negrischen Korperchen.

Bei dieser Auffassung stellen sie Kolonien des Virus dar, die durch die zunachst
wenig geschadigte Zelle mit einem aus protoplasmatischen und Kern best and teilen be-
stehenden Mantel umgeben werden.

Ich war bei meinen eigenen Untersuchungen flber den Scharlach
bemfiht, die Befunde Mallorys nochmals nachzuprflfen. Zur Verwen-
dnng kam Material von einer 6 Std. post mortem sezierten Leiche eines
11-jahr. Knaben mit sicherem Scharlach. Reste des Exanthems waren
an der Leiche noch nachweisbar. Es gelang mir, mit Methylenblau und
Giemsa-F&rbung nach verschiedenartiger Fixierung in den Hautstiicken
die Malloryschen EinschlUsse nachzuweisen. Sie lagen zum Teil in
den Epithelzeilen, deren Kern teilweise abgeplattet und zur Seite ge-
drUngt war, teils, und dies waren zumeist die kleineren Formen, lagen
sie in der Peripherie des Protoplasmas oder zwischen den Epithelzeilen;
auch grSBere, an einem Pole der Zelle gelegene EinschKisse wurden
beobachtet. Im ganzen waren die intra- und interzellular gelegenen
Gebilde sp£rlich. Die KSrperchen waren meist homogen, zuweilen maul-
beerfSrmig, liefien teils einen hellen Hof erkennen und farbten sich nach
Giemsa blau. Rosetten- bzw. Chrysanthemum-Formen habe ich
nicht gefunden. Desgleichen gelang es mir auch bei verschiedenartiger
F&rbnng nicht, die von v. Prowazek beschriebenen feinsten Kornchen
im Innern der EinschlQsse darzustellen. Bei den intrazellul£r gelegenen
Korperchen fiberwog die ovale Gestalt, die extrazellul&ren waren ge-
wdbnlich rund, daneben fanden sich einzelne von unregelmaBiger Form.
In den Lymphspalten des Corium beobachtete ich keine den Mallory-

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230

CentraJbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

schen Einschlu&sen ahnliche Gebilde, desgleichen vermiBte ich sie stets
in den inneren Organen. Die iibrigen Ver&nderuDgen der Hant waren
gering. Stellenweise fand sich beginnende herdformige Kolliquation, an
anderen Orten waren die Hornschichten durch kornige Massen abge-
hoben. Oedein im Bereiche des Stratum cylindricum und im Corium
lieB sich zwar nachweisen, spielte aber im Gegensatz zu den von Hlava
beobachteten Fallen eine unbedeutende Rolle. Hyperamie war gering.
Leukozyteneinwanderung zwischen die Epitlielien Sufierst spSLrlich.

In 2. Linie richteten sich meine Untersuchungen auf den Nacbweis
kleinster runder Gebilde, wie sie von Paschen, Cantacuz&ne, Bern¬
hardt, Hoefer bcim Scharlach beschrieben sind.

Paschen fand kloinste runde Kornchen in Tonsillarabstrichen ScharlachkTanker
nach Loef fler-Beizung und Farbung mit Karoolfuchsin. Cantacuzbne beschreibt
2 verschiedcne Arten, groBerc irreguliire Formen, oft zuzweit angeordnet, in Ausstrichen
von Lyrnphdriisen (sie werden von Bernhardt als Zerfailsprodukte gedeutet), zweitens
kleine l / A —V» ^ groBe chromatische Kornchen in Tracheobronchialdrusen; sie lageu bald
einzeln, bald in Ncstern im Innern von Leukozyten, Endothelien, Makrophagen, teils
auch frei und waren nur mit besonderen Furbemethoden sichtbar zu machen. Die
Untersuchungen von Bernhardt erstreckten sich auf Menschen, sowie auf mit tfchar-
lachmaterial infizierte niedere Affen, die unter scharlachahnlichen Erscheinungen er-
krankien. Bernhardt beschreibt in den Retikuloendothelzellen der mesenterialen
Lyrnphdriisen Anhiiufungen feinster, 0,1—0,3 fi groBer, nach Giema sich leuchtend
rot fiirbender Kornchen von kugelrunder Gestalt. Die Kornchen lagen oft zu 2 bei*
einauder, und zeigten hantelfbrmige Teilung. In 1 Faile vom Menschen lieBen sich
die Gebilde auch in Nierenepithelien nachweisen. Nach dem morphologischen und
tinktoriellen Verhalten wird man versucht sem, an Elementarkorperchen zu denken,
doch weist Bernhardt in seinem Scharlachreferat bereits selbst auf die Schwierigkdt
der differentialdiagnostischen Abgrenzung gegeniiber korpereigenen Zerfallsprodukten
hin. Die von Hoefer in den Zellen von Milz- und Lymphuriisen Scharlachkranker
mit Heideuhain-F'arbung dargestellten grdBeren Gebilde diirften, wenigstens der
Beschreibung nach, mit Zentrosomen identisch sein. feie erscheinen als eine hellere
Zone des Protoplasma in der Niihe des Kerns, in deren Innern teils einzeln gelegeDe,
teils durch Desmose verbundene Kornchen nachweisbar sind.

Ich babe mich bemiiht, mittels verschiedenartiger Fixierungen und
FSrbungen in den Organen des erwahnten Scharlachfalles, vornehmlich
in Milz, Lyrnphdriisen, Leber und Nieren, Gebilde darzustellen, die mit
den soeben angegebenen Uebereinstimmung zeigten. Die darauf ge-
richteten Untersuchungen batten ein vollig negatives Ergebnis. Die
5fter auftretenden, nach Giemsa sich rot fArbenden KSrnchen konnten
bei unbefangener Beurteilung nicht als korperfremde Elemente ange-
sprochen werden. Bei dem infolge der Infektion starken Zellzerfall ist
das Auftreten zahlreicher Plasma- und Kernreste unschwer verst&ndlich.
Dabei liegt es mir jedoch fern, die Befunde der oben angefiihrten Au-
toren im Hinblick auf meine Degativeu Resultate bei dem einen Fall
anzweifelu zu wollen. Ich werde weiter unten bei den Tierversuchen
noch darauf zuriickkommen.

Der 3. Teil meiner Untersuchungen befafite sich mit den Doehle-
scben Leukozyteneinscbliissen.

Bokanntlich hat Doehle in 2 Verdffentliehungen 1911 und 1912 in den neutro-
philen Leukozyten bei Scharlach Einschliisse beschrieben, die verschiedenartige, teils
spirochatenakniiche Gestalt batten, und die er, wenig>tens in der 2. Mitteilung, wo er
von eincr Spi r oc hae to a ear I at i n ae spriebt, geneigt war, in atiologische Beziebungen
zura Seharlack zu setzeu. Doehle selbst weist bereits schon in seiner 1. Veroffent-
licbung auf eine Arbeit von Wechselmann und Hirschfeld, sowie eine weitere
von May bin, worin iihnliche Einsebliisse dargestellt werden, jedoch hielt er die von
jenen Autoren beschriebenen Gebilde nicht fur identiseh mit den von ihm im fcjeharlaeh-
blut gefundenen. Was die Einsehliisse von Wechselmann und Hirschfeld *n-
geht, so wurden sie in einein Falle von myeloider-nnikrolymphozytarer Leukamie ge-
funden. Sie lagen meist in den polymorpkkernigen Leukozyten, aber auch in Mono-

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Hoppli, Untersuchungen uber Scharlach.

2;n

uuklcaren. Der beigefiigten Abbililung naeh erschoincn *ie profier aU die bei Scharlach
^ewohnlieh auft retention, aueh ist die Vakuole sehr allies prochen vorhanden. Es 1 st
jet loch zu berueksicktigen, dab eine gewisse Ungenauigkeit der reproduktiven Wict I cr¬
eate vorliegen kann, auBerdem weisen die Autoren selbst darauf bin, dab eine beson¬
ders grofie Einschluftform wiedergegeben ist. Tinktoriell verhielten sic sieh genau wie
die Doehleschen Einschliisse, und ich mbchte daher Papponheini boipliichten, der
beicie EinschluBkbrper, die von \V ee hsel m a n n und Hirselifeld gesehenen und die
Doehleschen tiir identisch halt. Noeh inehr entspreehen die Doehleschen Forinen
denen, die May bei einem Oedemfalie nnt uriklarer Aetiologie fund. Aueh these Ge-
bilde verbieiten sieh, wie aus der bei^ogcbcnon Talel ersielitlieh, ganz wie die Doeh 1 e-
sehen Einschi Qsse. Dali sie von May aidier in neutrophilen Lenkozvten aueh in
Eodnophilen und in Mastzellen naehgewie>en wurden, seheint mir aueh koine Ver-
anlassung zur Ahtrennung der MayMhrn von don Doehleschen Kdrpern zu gobon,
denn ich selbst Labe, weun aueh sparhch, Doehlcsehe Kdrper bei Scharlach in
EosiDOphilen gefunden. Inwieweit Bh r rn n i ko w , der in der Kehderschen Disser¬
tation iiber die Doehleschen Leukozyteneinsehliisse ziliert wird, Leukozyteneinsehliisse
bei Scharlach sehon vor Doehle gcschen, bzw. besehrieben hat, vermag ich nicht zu
beurteilen, da mir die betreftende Arbeit zurzeit nicht zugiingig ist.

Wenn es nach dem soeben Ausgefiihrten mir sehr wahrscheinlich
vorkommt, daB die Doehleschen Leukozyteneinsehliisse tatsiichlich
schon vor Doehle besehrieben wurden, so gebiihrt dem letzteren Autor
doch zweifellos das Verdieust, dadurch, daB er sie zu dem Scharlach
in Beziehung setzte, die allgemeine Aufmerksamkeit darauf gelenkt zu
haben. Er hat sicher dem Kliniker ein, wenn aueh nicht absolut zu-
verlassiges, doch brauchbares differentialdiagnostisches Hilfsmittel ge-
geben und hat weiterhin auf morpliologische Eigentumlichkeiten der
Einschliisse, besonders die eigenartig gewundenen spirochatenShnlichen
Formen hiBgewiesen. Kaum waren die Doehleschen Befunde ver-
fiffentlicht, so wurden, namentlich von klinischer Seite NachprOfungen
vorgenommen. Es entstand in den nachsten Jahren geradezu eine
kleine Spezialliteratur iiber die Leukozyteneinsehliisse bei Scharlach.
Aueh auslhndische Autoren, besonders Amerikaner, sind mehrfach ver-
treten.

Ueberblickt man die Gesamtheit der Arbeiten, so kann man zu-
nichst feststellen, daB die Einschliisse bei frischen Scharlachfhllen in
den ersten 6 Tagen fast ausnahmslos gefunden wurden. Eine Ausnahme
machen bloB ganz leichte (Hill, Li ppm an n und Hufschmidt) und
extrem schwere, sehr schnell zum Exitus fiihrende Falle (Granger,
Kingsley Pole). Des weiteren liiBt sieh aus der Literatur der siehere
SchluB ziehen, daB die Einschliisse nicht fiir Scharlach spezifisch sind,
und daher aueh als Parasiten nicht in Frage koinmen kbnnen. Alle,
sieh mit Kontrolluntersuchungen befassenden Arbeiten stimmen oline
Ausnahme darin flberein, daB die Leukozyteneinsehliisse aueh bei ge-
wissen anderen, sicher nicht skarlatinoseu Erkrankuugen vorkommen.
(Lippmann und Hufschmidt, Glomset, Cummins, Gromski,
Kretschmer, Nicollund Williams, Kolmer, Iskender Ahmed,
Frinken, Bernhardt, Preisich, Harriehausen, F'arfel,
Massini, Hill, Rosanoff, Schippers, Brinckmann, Isen-
schmid und Schemensky, Granger, Kingsley Pole, Schwenke,
Bel&k, Bongartz, Rehder.) Hinsichtlich der Hiiufigkeit der Ein-
schliisse bei nicht skarlatinosen Erkrankungen und bei Gesunden gehen
die Angaben weit auseinander. Beispielsweise fa ml Bongartz Ein¬
schliisse bei gesunden Erwachsenen in 87—88 Proz. der Falle, noeh
haufiger war der Befund bei Kindern. Bei fieberhaften Erkrankungen
schienen sie vermehrt aufzutreten. Die Unstimmigkeit der Angaben
in den verschiedenen Arbeiten ist wolil auf den verschieden weit ge-

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232

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

faBten Begriff „EinschlQsse“ zurfickzufuhren. Rechnet man jedes bei
MethylenblaufBrbung im Protoplasma der neutrophilen Leukozyten sich
darstellende kleinste Kornchen zu den Einschliissen, so wird man solche
tatsachlich bei den meisten Krankheiten und auch bei vielen Gesnnden
finden. Untersucht man Tiere, so trifft man, wie ich selbst festslellen
konnte, beispielsweise bei Katzen, die keinerlei Krankheitserscheinungen
darbieten, in zahlreichen Leukozyten feine Kornchen zuweilen auch ganz
feine kurze Fadchen in der Einzahl, zuweilen sogar mehrere. Diese
Gebilde sind aber nur bei fehlender Oder schwacher F&rbung der Proto-
plasmagranulationen sichtbar, und waren in bezug auf den Menschen
von Do eh le bei der Beschreibung seiner EinschlQsse zweifellos nicht
gemeint. Sieht man von den Arbeiten ab, die durch einon sehr weit
gefaBten Begritf „EinschluB“ die Gebilde sehr zahlreich bei Kontrollen
fanden (Bongartz, Glomset, Cummins), so glaube ich, kann man
auch die (ibrigbleibenden Differenzen unter den Angaben der einzelnen j
Autoren auf die graduell verschiedene Bewertung der einzelnen Form ;
als EinschlQsse zuruckffihren. Um die Willkfir in der Beurteilung der j
im Leukozytenprotoplasma vorkommenden korpuskul&ren Elemente etwas I
einzuschr&nken, unterschied Belkk scharfe und blasse EinschlQsse sowie
unbestimmte Trubungen. Eine noch differenziertere Einteilung gibt
R eh der. Zieht man die verschiedene Bewertung der EinschlQsse durch '
die einzelnen Untersucher in Rechnung, so lSBt sich bei den Resultaten
der Kontrolluntersuchungen doch das gemeinsame Ergebnis heraus-
schaien, daB EinschlQsse, wie sie beim Scbarlach auftreten, sich nicht
selten bei Pneumokokken- und Streptokokkeninfektionfe (Belkk,
Schwenke, Massini, Kolmer, Granger, Isenschmid und
Sch emen sky, IC retschmer, N icol 1, S chipper s), ferner bei Typhus
exanthematicus (Preisich) finden. Verschiedene Nachuntersucher weisen
daher auf einen Zusammenhang der EinschlQsse mit Streptokokken- und
Pneumokokkeninfektionen hin, und auch Doehle selbst teilt in seiner
ersten VerQffentlichung mit, daB er EinschlQsse auch in einem Fall von
Pneumonie gefunden habe. Was die morphologischen Eigentumlich-
keiten der EinschlQsse anlangt, so finden sich kleinere und groBere
rundliche und ovale KQrner, ferner grQBere stfibchenfQrmige Gebilde,
die, wie auch die KQrnchen, oft paarweise nebeneinander liegen. Weiter-
hin kommen birnformige und auch kurze, dicke, leicht gewundene F&den
vor. Am auffallendsten sind aber zweifellos Formen, die gewfihnlich
auch beim Scharlach verhfiltnismBBig spQrlich sind, und die auf den un-
befangenen Betrachter zuweilen ganz den Eindruck einer Spirochfite
machen. Ich muB hinzufugen, daB ich selbst genau die gleichen Gebilde,
allerdings ebenfalls sehr sparlich, in einem Blutausstrich eines Pneu-
moniefalles und eines Diphtheriekranken gefunden habe, desgleichen ge-
lang die experimentelle Erzeugung dieser Gebilde beim Tier. Die Spiro-
chatenformen zeigen untereinander Verschiedenheiten. Einmal wechselt
die Zahl der Windungen, von 2 bis fiber 6, dann auch die Dicke der
Gebilde, die Qberall gleichmaBig sein kann, daneben auch bei ein und
demselben EinschluB variiert. Mehrmals fand ich Formen mit 2 l / t dicken
Windungen, die an einem Ende in einen auBerst feinen, mit einem
winzigen Kornchen endigenden Faden auslaufen. Die gleichen Formen
werden auch in der Dissertation von Rehder beschrieben, der fttr sie
den unverbindlichen Namen „Trypochaete“ vorschlagt. Gegen die Spiro-
cbatennatur aller dieser Formen sprechen, abgesehen von den unten
angegebenen Versuchergebnissen, nach meinem Daffirhalten mehrere

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Hoppli, Untersuchungen fiber Scharlach.

233

Momenta. Einmal der starke Wechsel der Gestalt, der nur bei den
Trypochfitenformen einigerraaBen konstant ist, and zweitens der Um-
st&nd, daB zuweilen die Spiroch&tenformen unscharf, verklumpt, die
Kontaren wie ausgefranst erscheinen, so daB man den Vergleich mit
einer Schliere in einer Fltlssigkeit gebrauchen kSnnte, die im Begriff
steht, ibren Inhalt mit dem umgebenden Medium zu miscben. Auch in
Wellenlinie angeordnete Kornchen von wechselnder GrflBe sind zu finden.
Die genaue photographische Wiedergabe der Gebilde ist nicht leicht,
eine gute Abbildung findet sich in der kurzen Arbeit von Wagner;
die Darstellung des feinen F&dchens ist allerdings auch hierbei nicht
gelungen. Immerhin wird man es beim Betracbten der Abbildungen
begreiflich finden, wenn Doehle zur Annahme einer Spiroch&tennatur
der Gebilde gebracht wurde. Hinsichtlich der kliniscben Verwertung
der Einschlflsse, zur Prognose und besonders zur differentialdiagnostischen
Abgrenzung des Scharlachs verweise ich auf diesbezttgliche Arbeiten
(Isenschmid und Schemensky, Massini, Eosanoff, Kretsch¬
mer, Schwenke, Bel&k, Rehder). Auf jeden Fall bin ich der
Ansicht, daB es nicht ang&ngig ist, eine bestimmte Form von Ein-
scblQssen als einzig beim Scharlach vorkommend und daher fflr ihn
spezifisch anzusehen. Wenn sich in der Literatur mehrmals die Angabe
findet, daB spiroch&ten&hnliche Formen selbst beim Scharlach nicht ge-
fnnden warden, so betonen andere Autoren ihr zweifelloses Vorkommen
auch bei nicht skarlatinosen Erkrankungen.

Der 4. Teil meiner Untersuchungen betrifft Uebertragungsversuche
des Scharlachs auf Tiere.

In der Literatur wird mehrfach von gelungenen Ueberfcragungsversuchen be-
richtet. Ein h6chst zweifelhafter Fall von unbe&bsichtigter Uebertragung auf eine
K&tze gelangte durch Rapin zur Kenntnis, er demonstrierte eine Katze mit einer
Art Exanthem, das entstanden war nach innigem Kontakt des Tieres mit scharlach-
kranken Kindern. Aus den Versuchen Casagrandis, der Filtrate von vom Menscheu
stammendem Scharlachmaterial Kaninchen und Hunden injizierte, wonach die Tiere er-
krankten, laBt sich,. wie auch Bernhardt in seinem Referat ausfuhrt, nur schiiefien,
daB die Filtrate Mr die Tiere toxische Eigenschaften besaflen. Eine Uebertragung
wird hierdurch nicht bewiesen. Vornehmlicn wurden niedere und hdhere Affen als
Venuchstiere verwandt. Bereits 1904 bestrich Grunbaum die Rachenschleimhaut
ernes Schimpansen mit Tonsiliarabstrich eines Scharlachkranken; das Tier bekam eine
Angina. 1911 stellte Cantacuz^ne 9 Versuche mit niederen Affen an, zur Ueber-
tragnng benutzte er Blut, Perikardialfliissigkeit und Lymphdrusenemulsion Scharlach-
kranker. In 4 Fallen zeigten die Tiere ein scharlachahnliches Krankheitsbild mit stark
wechselnder Inkubationsdauer — hohes Fieber, Driisenschwellung, Exantheme — auch
starkere Schwankungen des Leukozytenblutbildes wurden beobachtet. Versuche, die
der gleiche Autor an Kaninchen anstellte, lieferten zum Teil positiv scheinende Ergeb-
niflse, die jedoch Bernhardt bei Nachprufungen als nicht einwandfrei feststellte.
Bernhardt benutzte zu seinen gleichfalls 1911 angestellten Versuchen niedere Affen.
Er zerrieb Zungenbelag eines Scharlachkranken in physiologischer Kochsalzlosung, die
Aofichweminung wurae 1 Std. bei Zimmertemp. geschiittelt und einem Affen in die
LeUtenbeuge injiziert. Dem Tier, das an Streptokokkensepsis zugrunde ging, wurden
die Leistendriisen der nicht behandelten Seite herausgenommen, wie der Zungenbelag
zerrieben und einem zweiten Tier injiziert. Bernhardt gelangte bei dieser Art der
Uebertragung bei der 3. Passage zu einem Lymphdrusenmaterial, das sich kulturell
als steril erwies, indem die Tiere gewissermatlen als Bakterienfilter wirkten. Es gelang
feroer mit Pustelinhalt von Scharlachkranken, desgleichen durch Einstreichen von
Zongenbelag auf die Rachenschleimhaut, sowie durch Injektion von Material, das
Berkefeld-Filter passiert hatte, Krankheitserscheinungen bei den Affen zu erzielen.
— Himbeerzunge, allgemeine Driisenschwellung, Temperaturanstieg und Abschuppung.
Bei den infizierten Tieren wurden die oben erwahnten kleinsten koraigen Gebilde in
den Retikuloendothelzellen gefunden. Wean auch das Krankheitsbild dem mensch-
lichen Scharlach ahnelt, so ist doch der beobachtete starke Wechsel in bezug auf In-
kubationsdauer und Intensitat der Erscheinungen ein Grund, in der Beurteilung der
Versuchsergebnisse vorsichtig zu sein. Mit niederen Affen experimentierten 1911 auch

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Ceutralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

Hectoen und Weaver, indem sie mit Scharlachmaterial infizierte Milch den Tieren
verfutterten, die danach erkrankten. In das gleicbe Jahr fallen VerQffentUcbungen
von Landsteiner, Levaditi und Prasek aus dem Institut Pasteur in Pahs
Es handelt sich um Uebertragung des Scharlaehs auf hohere Affen. Indem die Autoren
die unabhangig von ihnen von anderer Seite gleichfalls angewandte Tecbnik benutzten,
8tricben sie Scnarlachmaterial auf die Rachcnschleimhaut eines Schimpansen; es ent-
wickelte sich eine eitrige Entziindung. Nach subkutaner Injektion voq Scharlaeh-
material entstand bei einem anderen Versuchstier ein scharlachartiges Exanlhem. Nach
dem Tode des Tieres wurden in den Nieren Verfinderungen analog den fur den
menschlichen Scharlach charakteristischen festgesteilt. Ein junger Orang-Utang er*
hielt 10 cctn nicht defibrinierten Schariachblutes subkutan injiziert, gleichzeitig wnrde
ihm Tonsillarabstrich eines Scharlachkranken auf die Rachenschleirabaut aufgepinselt
Der Affe erkrankte, im Urin waren Eiweift und Zylinder nachweisbar, es trat Ab-
schuppung ein, und nach 6 Wochen starb das Tier. Durch Injektion von Strepto-
kokken gelang ee den Autoren nicht ahnliche Krankheitsbilder bei Affen zu erzeugen.
In einem gcwissen Widerspruch zu den Ergebnissen Bernhardts steht die Angabe
der franzosischen Forscher, da8 die Uebertragungsversuche auf niedere Affen stets
negative Resultate zeitigten. Diesen ebon erwahnten Angaben von anscheinend ge-
lungener Uebertragung der Krankheit der Tiere stehen andere gegeniiber, in denen
eine solche Uebertragungsmoglichkeit bcstritten wird. Krumwiede, 31. Nicoll
und Pratt versuchten mittels einer Tecbnik, die der soeben angegebenen entsprach,
ferner durch intrapentoneale Einverleibung grower Quantitaten Scharlacbblutes, weiterhin
durch Streptokokken scharlachahnliche lvrankheitserscheinungen bei Tieren hervorzu-
rufen, hatten aber durchweg negative Resultate. In vollig ablehnendem Sinne be*
urteilen Draper und Hanford auf Grund ihrer Nachpriifungen die angeblich ge-
lungenen Uebertragungsversuche. Im Hinblick darauf, dafl Affen uberhaupt auf In-
fektionen leicht mit Driisenschwellungen und auch Abschuppung reagieren, sehen sie
die Ergebnisse der angeblich gelungenen Uebertragungsversuche so wok l auf hdbere
Affen (Landsteiner, Levaditi, Prasek), als auch auf niedere (Cantacuzfene,
Bernhardt, Bchleissner), nicht als beweisend an. Da nach der Technik der ver-
schiedenen Untersucher mit Sicherheit anzunehmen ist, dafi das Virus dem Tierkorper
einverleibt wurde, folgern sie, dafi bei Affen eine aufierordentlich starke naturliche
Resistenz besteht.

Zu meinen Versuchen benutzte ich Meerschweinchen und junge
Katzen. Die Meerschweinchen, Tiere von 400—600 g Gewicht, wurden
mit undefibriniertem Blut von Gesunden vorbehandelt, indem ihnen
zweimal im Abstande von einer Woche je 0,5 ccm Blut subkutan in¬
jiziert wurde. 4 Wochen spater erhielt ein Tier subkutan 0,2 ccm un-
defibrinierten Blutes, das von einem 7 Tage alten Scharlachfalle stammte.
Abgesehen von einem etwas gegen die Norm abstechenden ruhigen Ver-
halten wahrend zweier Tage nach der Injektion, das vielleicht auf ana-
phylaktische Wirkung zurtickzuffihren ist, war an dem Tiere nichts
Auffallendes zu bemerken. Im Blute wurden Einschlflsse in den Leuko-
zyten nicht gefunden; auf Kurloff-Korper wurde nicht geachtet. Zwei
weitere Tiere erhielten je 0,3 ccm undelibrinierten Blutes von einem
frischen Scharlachfall, subkutan bzw. intraperitoneal, Auch an diesen
Tieren waren irgendwelche Krankheitserscheinungen nicht festzustellen,
auch bei ihnen traten keine Einschliisse in den Leukozyten auf.

Bei den Katzen, 3 Monate alten Tieren vom gleichen Wurf war
die Versuchsanordnung folgende: K. I, die, bevor ein Eingriff bei ihr
geschehen war, infolge eines im Oesophagus eingekeilten Speisebrockens
zugrunde ging, wurde zu Kontrollzwecken benutzt. K. Ill erhielt 1,5 ccm
Aufschwemmung vom Zungenbelag eines Scharlachkranken in physiol.
Kochsalzlosung subkutan ins linke Hinterbein, 1,0 ccm der gleichen
Aufschwemmung intraperitoneal. Das Tier verlor in den folgenden Tagen
an Lebhaftigkeit, magerte zusehends ab und starb 11 Tage nach der
Injektion, nachdem es zuvor 2 Tage lang sich scheinbar etwas erholt
hatte. Bei der Sektion fand sich makroskopisch kein deutliehes Bild
einer Peritonitis, dagegen waren die Lymphdrusen, vor aliem die raes-

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Hoppli, UntereuchuDgen iiber Scharlach.

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enterialen, stark vergroBert, von weicher Beschaffenheit. Aus der Leber
warden Streptokokken in Reinkultur gezuchtet. Die Organe des Tieres
warden in Sablimatalkohol und den bekannteren anderen Flflssigkeiten
fixiert und nach den Qblichen Methoden gefilrbt. Dabei gelang es, in
den mit Sablimatalkohol fixierten, nach Giemsa gefSrbten Schnitten
von Leber und mesenterialen Lymphknoten bei st&rksten VergrdBerungen
(Zeiss, horn. Immersion 2 mm, Komp.-Okul. 12, 16, 18) in Retikulo-
endothelzellen feinste runde, hellrot gefarbte Kornchen in nesterformiger
Anordnung nachzuweisen. Eine hantelfbrmige Einschniirung konnte ich
nicht beobachten. Am meisten erinnerten die Korperchen an die von
Bernhardt beschriebenen nnd die feinsten Kbrnchen von Canta-
cuzfcne, obwohl letztere angeblich nur nach Loeffler-Beizung dar-
stellbar waren. Hinsichtlich der Deutung dieser Gebilde, die ich bei
der Kontrollkatze nicht fand, mochte ich den Standpunkt Bernhardts
einnehmen, der eine sichere Abgrenzung von kbrpereigenen Zerfalls-
produkten fflr auBerordentlich schwierig halt. Erwahnen mochte ich
Doch, daB sich in Leber, Milz und Lymphdriisen sowohl intrazellul&r als
frei verh&ltnismaBig zahlreich kleine, nach Giemsa sich dunkelrot
fSrbende KOrnchen fanden, die gegenuber den ersterwhhnten deutlich
groBer waren; ich mbchte diese Gebilde als sichere Degeneration spro-
dukte ansprechen.

Ein besonderes Interesse forderte das Blutbild, es traten schon am
3. Tage in den deutlich vermehrten Leukozyten, an Zahl allmahlich zu-
nehmend, aufs deutlichste Doeh 1 esche Einschliisse auf. Ich wiederhole
bier nochmals, daB im Blute vollig gesunder Katzen in den neutrophilen
Leukozyten gar nicht selten feine Kornchen, zuweilen auch kurze feine
FSdchen sich linden, wie sie von anderen Autoren auch bei gesunden
Menschen beschrieben worden sind (Bongartz). Diese kleinen Ge¬
bilde zeigen tinktoriell das gleiche Verhalten wie die viel groBeren
Doehleschen EinschlQsse.

Im Meerschweinchenblut habe ich diese Gebilde bis jetzt in den
Leukozyten nicht gefunden. Vielleicht neigt bei der Katze das Proto¬
plasma der Leukozyten im besond'eren Grade zur Bildung .kleinster
Klumpchen und infolgedessen auch zur Entwicklung der groBen Ein¬
schliisse. Die bei dem Versuchstier auftretenden, und bis zum Tode
reichlich vorhandenen Einschliisse verhielten sich sowohl morphologisch
als tinktoriell wie diejenigen, die ich im Menschenblute bei Scharlach
fand. Auch spirochatenahnliche Formen, besonders solche mit faden-
fSrmigen, mittels eines Kliimpchens endigenden Bildungen habe ich ent-
sprechend wie beim Scharlach sparlich, aber einwandfrei beobachten
konnen. Wfthrend der scheiubaren Besserung im Befinden des Tieres
farbten sich die Einschliisse weniger intensiv und schienen zum Teil in
Kdrnchen zu zerfallen; kurz vor dem Tode fanden sich wieder die in¬
tensiv gefSrbten scbarf begrenzten Formen.

Katze II erhielt zun&chst Aufschwcmmung von Hautschuppen eines
Scharlachkranken in physiologischer Kochsalzlosung subkutan ins linke
Hinterbein, ohne daB, abgesehen von leichtein Hinken an dem ersten
Tage nach der Injektion, irgend etwas Besonderes in den folgenden
3 Wochen zu beobachten gewesen ware. Auch das Blutbild zeigte durch-
aus regelrechte Verhaltnisse. War dieser Versuch vollig negativ aus-
gefallen, so gilt das gleiche von zwei weiteren an K. IV ausgefiihrten.
Diesem Tiere wurde zunachst Scharlachzungenbelagaufschwemmung in
den Rachen gestrichen, ohne daB irgendwelche Veriinderungen sich da-

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236

CeutralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 3.

nach im Verhalten der Katze zeigten, 10 Tage sp&ter erhielt das gleiche
Tier 1,0 ccm undefibrinierten Scharlachblutes intraperitoneal. Auch
dieser Eingriff blieb ohne Folgen.

Beide Tiere wurden danach zu Versuchen benutzt, die den fOaften
und letzten Teil meiner Untersuchungen ausmachten. Ich war bemQht,
die beim Scbarlach des Menschen auftretenden Leukozyteneinschliisse,
besonders die gewundenen Formen, experimentell durch verschiedene
MalSnahmen beim Tiere za erzeugen. Versuche dieser Art wurdeo mehr*
fach, allerdings fast stets mit negativem Ergebnis, bereits frOher aogestellt.

Schoo Doehle versuchte ohne Erfolg durch Injektion von Scharlachblut Ein-
schluflse bei weiiien Mausen, Kaninchen und Schweinen zu erzeugen. Kolmer inji-
zierte erfolglos Btreptokokken bei Kanincheu. Kretschmer benutzte Hunde und
Katzen und sah keinen Erfolg bei subkutaner und intrapleuraler Injektion von Strepto-
kokkenbouillonkulturen und abgetoteten Btreptokokken, Rehder beobachtete nach In-
fektion von Kaninchen und Mausen mit Recurrensspirillen keine Einschliisse. Dagegep
entstanden im Hundeblute bei Versuchen von Kretschmer, der die Tiere mit l)i-
phtherietoxin vergiftete, wenige Btunden vor dem Tode kleine kokkenartige Einschliisse,
wie sie auch bet der Diphtheria des Menschen gefunden warden. Ein positives Er¬
gebnis halten auch die Versuche von Schippers und de Lange, die, von der Beob-
achtung ausgehend, da6 auch bei Btreptokokkeninfektionen des Menschen Einschliisse
ofter auftreten, einem Hunde Streptokokken in Reinkultur subkutan injizierten. Sie
fanden am ersten Tage nach der Injektion in 230 Leukozyten 10 Einschliisse von typi-
scher Form, auBerdem kleine Kornchen. Im Verhaltnis zum menschlichen Bchariach
und zu dem Verhalten meiner mit Scharlachzungenbelag infizierten Katze war die Zahl
der Einschliisse bei den hollandischen Autoren sehr gering, jedoch zeigte auch der
Hund keine wesentliehen Krankheitserscheinungen. Als .Nebenbefund bei seines
Uebertragungsversuchen des Fleckfiebers auf Meerschweinchen werden von Eocha-
Lima in den Leukozyten dieser Tiere Doehlesche Einschliisse beschrieben:

Bei dem Versucbsergebois von K. Ill war zundchst die Mdglichkeit
offen zu lassen, dafi entweder das in dem Material flbertragene hypo-
thetische Scbarlacbvirus Oder die Streptokokken, vielleicht beide, die
EinschluBbildung bewirkt batten. Zur Entscheidung dieser Frage erbielt
K. II 3 Wochen nach der ergebnislos verlaufenen Injektion von Haut-
schuppen 1,0 ccm Zungenbelagaufschwemmung eines Falles von Me-
ningokokkensepsis subkutan. Am folgenden Tage war die Zahl der
normalerweise vorkommenden kleinen Kornchen in den Leukozyten etwas
vermebrt. Vereinzelt fanden sich meist paarweise liegende grSBere
Kdrner. Klinisch zeigte das Tier keinen besonderen Befund. 2 Tage
nach der ersten Injektion erfolgte eine zweite von 1,0 ccm Zungen¬
belagaufschwemmung eines Polyarthritiskranken subkutan; am folgenden
Tage fanden sich neben den kornigen auch einige kommaformige Ge-
bilde. 6 Tage danach war der Blutbefund wieder vdllig regelrecht, das
. Tier frei von erkennbaren Krankheitszeichen. Katze IV erhielt 19 Tage
nach der erfolglosen intraperitonealen Scharlachblutinjektion ebenfalls
intraperitoneal 2,0 ccm Streptokokkenbouillonkultur und 1,0 ccm der
gleichen Kultur subkutan. Trotzdem die Streptokokken von einem
frischen Falle schwerer Sepsis stammten, zeigte das Tier keine Krank¬
heitserscheinungen. Im Blutbilde waren keine Einschlusse nachweisbar.
Waren die Einschliisse im Falle der Katze II auch sp&rlich, entsprechend
dem nicht merklich gestdrten Befinden des Tieres, so scheint mir doch
der Beweis erbracht, dafi es durch eine rein bakterielle Infektion gelingt,
bei jungen Katzen Einschliisse hervorzurufen. Das negative Ergebnis
von K. IV muB man meiner Ansicht nach auf eine Sch&digung der
Virulenz der Streptokokken in der Kultur oder auf eine abnorme Resi-
stenz der Katze zuriickfiihren. Es schien mir weiter von Interesse,
nachzupriifen, ob die Mikroorganismen selbst oder ihre Toxine die Ein-

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Hoppli, Untcrsuchungen iiber Scharlach.

237

schluBbildung auslSsen. Zu diesem Zwecke injizierte ich nach dem
Vorgange Kretschmers K. II 0,5 ccm Diphtherietoxin in der Yer-
dtinnung 4:1000 subkutan. Am folgenden Tage traten bereits groBere
runde, ovale, diplokokkenfortnige, kommaartige sowie gewundene Ein-
schlusse auf (s, Fig. 1). Auf eine erneute subkutane Injektion von
1,5 ccm der gleichen Losung trat noch eine weitere leichte Vermehrung
der Gebilde auf. 3mal gelang es auch, gewundene, mit Faden und End-
kornchen versehene Einscblusse aufzufindcn (s. Fig. 2). Die Katze starb,
nachdem sclnvere Lahmungserscheinungen aufgetreten waren, 7 Tage
nach der 2. Injektion.

Katze 4 erhielt an 3 aufeinanderfolgenden Tagen insgesamt 1,3 ccm
Ait-Tuberkulin-Stammlosung subkutan in die hinteren Extremitiiten.
Wahrend 2er Tage nach der letzten Injektion fanden sich im Blut groBe
runde und ovale Einschltisse in geringer Anzahl. In der Folgezeit
waren sie nicht mehr nachweisbar. Das Tier blieb am Leben.

Was die Natur der Einschlusse angeht, so halte ich sie fur Zu-
sammenballungen und Verklumpungen gewisser Teile des Protoplasmas,

Fig. 1. Vergr. 1:1000. Fig. 2. Vergr. 1:1000.

hervorgerufen durch Toxine, speziell solche bakteriellen Ursprungs.
Pappenheim bezeichnet die Doehleschen Einschlusse als patbo-
logisch degenerative Zusammenballungen des basophilen Grundplasmas
der plasmatisch unreifen Zelle. Einschltisse wie sie von Politzer,
Amato, Ross und Castellani in verschiedenartigen Zellen gefunden
wurden, haben auf Grund ihres verschiedenen morphologischen und tink-
toriellen Verhaltens mit den Doehleschen KSrperchen nichts zu tun.
Ich schlieBe mich der Ansicht derjenigen Autoren an, die ein Hervor-
gehen der Doehleschen Einschltisse aus abgesprengten Kernstiicken
auf Grand der fSrberischen Eigentiimlichkeiten ablehnen. Die Ein¬
schlusse fSrben sich z. B. mit Methylgriin - Pyronin leuchtend rot
(Kerne blaulich), nach May-Grunwald bzw. Giemsa blau, oft mit
einem Stich ins Griinliche (Kerne violett). Farbungen, durch die die
Granulationen des Protoplasmas scharf hervortreten, empfehlen sich
zur Darstellung der Einschltisse im allgemeinen nicht. Gute Resultate
gibt Methylenblau in verschiedener Modifikation; sehr zufrieden war ich
mit der Methylgrun-Pyronin-FSrbung (2 Std. im Brutschrank bei 37°).

Eigenartig und etwas riitselhaft bleiben die gewundenen Einschltisse
Doehles. Handelt es sich bei den fadenartigen Gebilden vielleicht

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238 Centraibl. f. Bait. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 3.

um eine Art Spur der infolge der Protoplasmabewegung der Leuko-
zyten verschleppten dicken klumpigen Formen, oder spielen etwa die
Polstrahlungen eine Rolle Oder Mitocbondrien?, alles dieses sind bloBe
Vermutungen. Es scheint rair durcb die Mflglichkeit jene merkwflrdigen
Formen beim Tier experimentell zu erzeugen, vielleicht ein Weg ge-
wiesen, ihrer wahren Natur n&herzukommen.

Zusammenfassung.

Nacbpriifungen bestfltigten die Befunde Mallorys hinsicbtlich der
Einschitisse in der Haut von menschlichen Scharlachleicben.

Sicher korperfremde Einschitisse vom Charakter der „Elementar-
korperchen“ waren in von einer menschlichen Scharlachleiche stammen-
dem Material, vornebmlich auch in den Retikuloendothelien nicht nach-
zuweisen.

Die Doebleschen Leukozyteneinschlflsse, auch gewundene spiro*
chatenflhnliche Formen, wurden im Menschenblut in den ersten Tagen
des Scharlachs stets gefunden, desgleichen, wenn auch nicht mit der
gleichen Hflufigkeit, bei Pneumokokken und Streptokokkeninfektionen,
ferner bei Diphtherie.

Uebertragungsversuche des Scharlachs auf Tiere vermochten kein
dem menschlichen Scharlach fihnliches Krankheitsbild zu erzeugen; bei
einer mit Scharlachzungenbelag intraperitoneal infizierten Katze fanden
sich in und zwischen den Retikuloendothelzellen der Leber feinste, an
der Grenze der Sichtbarkeit stehende Kflrnchen vom Charakter der
Elementarkorperchen.

Es gelang, die Doehleschen Leukozyteneinschlflsse, auch die ge-
wundenen Formen, experimentell bei jungen Katzen durch Infektion
der Tiere mit Scharlachmaterial, Streptokokken und Meningokokken,
ferner durch Diphtherietoxin und Alttuberkulin zu erzeugen.

Die Leukozyteneinschlflsse stellen Verklumpungen des Zellproto-
plasmas dar.

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Schippers, I. C., u. de Lange, zit. n. Ref. Centralbl. f. d. ges. inn. Med. Bd. 5.
1913. H. 1. — Dies., Berlin, klin. Wochenschr. 1913. Nr. 12. — Schleisner, F.,
zit n. Ref. Ebenda. Bd. 6. 1913. H. 8. — Schleisner, F., u. Bernhardt, G.,
Erg. d. inn. Med. Bd. 10. — Schwenke, J., Munchen. med. Wochenschr. 1913.
Nr. 14. — Wagner, G., Ebenda. 1916. Nr. 28.

Nachdruck verboten.

Beschreibung eines neuen KontroUinstrumentes
fur Dampfdesinfektionsapparate.

Von Dr. Fr. Reichert, Jena.

Mit 1 Abbildung im Text.

Um das einwandfreie Arbeiten von Dampfdesinfektionsapparaten zu
gew&hrleisten, ist eine bestandige Kontrolle des Grades der an ver-
schiedenen Stellen des erwarmten Raumes eintretenden Temperatur und
des Zeitpunktes des Eintritts dieses Wannegrades erforderlich. Zu
diesen Feststellungen bediente man sich bisher verschiedenartiger Kon-
trollinstrumente. So waren das Klingelthermometer, bei dem der Strom-
schluS und damit das Glockensignal durch das Schmelzen bestiinmter
Metallegierungen eintrat, oder Kontakttliennometer, oder das Sticher-
sche Kontrollrohrehen in Gebrauch. Abgesehen von einem verstellltar
konstruierten Kontakthermometer (L a u t e n sc h 1 a ge r), batten alle diese
Apparate den Nachteil, nur bei einer einzigen Temperatur in Funktion
zu treten. Das auf verschiedene Grade einstellbare Lautenschlager-

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240

CentralbL f. Baki. etc. I. Abt. Originals. Bd. 87. Heft 3.

sche Kontaktthermometer bereitete aber aucli durch umstSndliche Hand-
habung und unsicheren StromschluB Schwierigkeiten bei der Anwendnng.

Aus diesen Grdnden dflrftc die Beschrei-
g jHj bung einer neuen, einfacben Konstruktion eines

auf jeden beliebigen Temperaturgrad mflhelos
einstellbaren Kontaktapparates von Wicbtigkeit
sein. Das U-f6rmig gebogene, mit Hg gefflllte

D |_P Glasrohr zeigt einen kurzen Schenkel E und

\*/ einen langen F. Der obere Teil von F ist

innen kapillardflnn, sein unterer Teil und E
aber haben ein weiteres Lumen. An den En-
den von E und F sitzen Klemmschrauben .1
<S> und B , die zum AnschluB der Polenden der

I Stromleitung dienen. AuBerdem geht von der

f G Klemmschraube B ein feiner Platinstift P in

I das birnformig erweiterte Lumen D des kapil-

laren Anteils von F. E trSgt eine Stellschraube
IH a Q durch deren Tieferschrauben Hg verdrUngt

wird UQ d dadurch in F in die H5be steigt.
|flj w Funktion : Man erhitzt nach dem Hochschrauben

p |p von C den Kontaktapparat gleichzeitig mit

einem Thermometer bis zu dem Temperatur-
v// grad, bei dem der StromschluB eintreten soil.

und reguliert dann durch Verstellen der
Schraube C das Hg-Niveau in F derart, dall
E die Hg-Kuppe eben den Platinstift beruhrt.

% Damit ist die Einstellung vollzogen. Der Kon-

% |p takt tntt dann stets wieder bei der gleichen

|p p Temperatur ein und das mit dem Kontrollappa-

rat in den gleichen Stromkreis eingeschaltete
Lftutewerk ertSut.

Der Apparat ist durch D.R.G.M. geschOtzt
. und bei C. Desaga, Heidelberg, HauptstraBe,

F, «- L erhaitlich.

Inhalt.

Baoh, F. W., Ueber Spirochaten in Was-
serleitungen. Mit 1 Abbildung im Text,
8. 198.

Bachmann, Werner, Zur Diagnostik der
Pseudotuberkulose, 8. 171.

Becker, Rudolf, Weitere Beitrage znr
Anatomic der Pferdebandwiirmer. Mit
4 Abbildungen im Text, S. 216.

Bender, Willy , Meningitis durch Influenza-
bazillen. Mit 1 Abbildung im Text, 8.175.

H5ppli, B., Untersuchungen iiber Schar-
lach. Experimentelle Erzeugung von
Leukozyteneinschliissen. Mit 2 Abbil¬
dungen im Text, S. 228.

Xlarenbeek, A., Ueber das spontane Vor-
Koraraen der dem 8yphilisparasiten ahn-
lichen 8pirochate beim Kaninchen (Tre-

E onema pallidum var. cuniculi.)
lit 1 Tafet, S. 203.

I>ange, Arthur, Ueber die Koktostabilitat

gebundener Antikorper. Bemerkung zu
der Arbeit 8 p a t, dieses Centralbl. Bd.86.
H. 3, 8. 227.

liipschdts , B. , Ueber Chlamydozoa-
fctrongyloplasmen. VIII. Ueber Gefugel-
pocke, 8. 191.

Boesberg, B., Ein Blasenabszefi mit B.
pyocyaneus und B. Proteus anin-
ciologenes van Loghem als Misch-
erreger. Mit 2 Abbildungen im Text,
S. 185.

Manteufel, P., u. Beger, H. , Weitere
Untersuchungen zur Paratyphusfrage,
ineonderheit zur praktischen Brauchbar-
keit des Absattigungsverfahrens fur die

xeit des Absattigungsvei
Typentrennung, S. 161.
teichert, Pr., Beschreibi

Reichert, Pr., Beschreibung eines neuen
Kontrollinstrumentee fiir Dampfdeeio-
fektionsapparate. Mit 1 Abbildung im
Text, S. 239.

Frommannsche Buchdruckerei (Hermann Pohle) in Jena.

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fantnlkl. f. BakL etc. I. Mil Orijiaale. IJ. 87. Heft 4.

Aosgegeben am 5. Dezember 1921.

Naohdruoh verboten.

Ueto Variabilitatserschemungen bei Vibrionen.

[Aus der Bakteriologischen Abteilung des Reich^gesundheitsamts
(Direktor: Geh. Regierungsrat Prof. Dr. L. Haendel).]

Von Prof. Dr. E. Gildemelster.

Mit 11 Abbildungen im Text.

1. Ueber dte Kuhnsehen Varfationsfonnen des Vibrio

Metscknikoff.

Im Joli 1919 und 1920 berichtete Kuhn in dem Medizinisch-oatur-
wissenschaftlichen Verein in Tfibingen und in der Berliner mikro-
biologischen Gesellschaft fiber Variabilitfitserscheinungen beim V. Metsch¬
nikoff, die sowohl an sich wie inbesondere wegen der von Kuhn den
beobachteten Erscheinungen gegebenen Deutung unsere Beachtung ver-
dienen. Inzwiscben hat Kuhn seinen Vortrag in Nr. 13 der Berl. klin.
Wochenschr. verSffentlicht.

Kahn bat, wie hier kurz wiedergegeben aei, die morphologischen Aenderungen,
die beim V. Metschnikoff zu beo bach ten Bind, eingehend Btudiert. Er ist hier bei
in der Weise vorgegangen, dafi aufier der Untersucbung der lebenden Bakterien auf
der Agarplatte unter dem Mikroskop eioe von ihm erprobte Modifikation ernes Auf-
klebeverfahrenB angewendet wurde, das v. Wasielewski uud Kuhn zur Fixierung
and Farbung von Amdben angegeben haben. Das Verfahren, das Kuhn in seiner
Arbeit eingehend beechreibt, besteht darin, dafi die auf der Agarplatte im AusBtrich
gewachsenen Kolonien an DeckglaBchen durch Bichromat-Essigsfiure fixiert und nach
entsprechender Nachbehandlung nach Giemsa gefarbt werden. Dieses Verfahren ist
nach Kuhn den bisherigen Fixierverfahren weit fiberlegen. Die Ausstriche des
V. Metschnikoff erfolgten aus iS-stiind, Bouillonkulturen auf gewohnlichen Agar-
platten; die beimpften Plat ten blieben zunachst fiir 1—2 Std. im Brutschrank bei 37°
nnd aUdann bei Zimmertemperatur, bei etwa 16°, stehen. Indem von Zeit zu Zeit mit
der zuvor genannnten Met bode Praparate angefertigt wurden, konnte die morphologische
Entwicklung der Vibrionen verfolgt werden. Kuhn konnte auf diese Weise feststellen,
dafi im Laufe der Beobachtung, fiber die genauere Zeitangaben nicbt gemacht werden,
die ursprunglicben Vibrionenformen nicht rein bestehen blieben, sondern dafi aufier
ihnen verschiedene andere Formen auftraten, und zwar folgende:

1) Fadenformen.

2) Dendritiscbe Formen (d-Formen): Fadengebilde, deren Dicke das Mehrfache
der gewdhnlichen Faden betrfigt. Sie sind oft ziembch lang, schlangenartig gewunden,
andere manchmal in kolbenartigen Anschwellungen, und baben oft Verzweigungen.

3) Amdbenahnlicbe Formen (a-Formen), deren Entstehung und Aussehen folgender-
malen beschrieben wird: Zwischen den Vibrionen und den Faden sieht man bereita
aof den fruhesten Praparaten rotlicbe, feinste Kugelcben frei liegen, ferner blaurote
Gebilde. bie nebmen an Zabl und Grofie mit der Zeit zu. Sie liegen auch an den
Fideo. Letztere sind an solcben btellen meist etwas d tinner als sonnt; sie eehen wie
sogeoagt aus. Mit zunehmender Grofie nehmen diese Gebilde eine blaue Farbung an.
Tells sind sie hellblau, teils blafiblau, dunkelblaue sind seitener. Ihr Bau ist wabig,
hier und da siebt man in ihnen ein roteB, licbtbrechendes, feines Kornchen. Oft sieht
man die Formen zu zweien und mehreren aneinanderliegen; sie scbeinen zu verschmelzen.
Manchmal ist von 2 zusammengehenden Formen die eine blafiblaulich, die andere kraftig
Wan gefarbt. Die Vibrionenfaden in ihrer Nahe sind vielfaoh zwirnsfadenartig dfinn.
Manchmal sieht man zahlreicbe Gebilde an einem solchen „Zwirnsfaden“. Mit der Zeit

EnU Abt. On*. Bd. 87 . Heft 4. 16

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242

(JentralbL L Bakt etc. 1. Abfc. Originate. Bd. 87. Heft 4.

nimmt die Zahi dieser Gebilde immer mehr zu, anch ihre Grofie wachet durch die Ver- \

schmelzung; aufier kreisrunden Formen treten durch Zusammenlagerung auch langliche j

auf, die oft an Flaschenkurbisse erinnern. Auch die Kornchen werden zahireicher; I
man findet immer mehr grofiere darunter bis zu 0,7 p Durchmesser. Bchliefilich treten
die rundlichen Gebilde in grofien Massen auf. Bie wachsen zu 9 n Durchm. an. Bei
solch grofien Formen sind die Grenzen der einzelnen Gebilde manchmal noch deutlieh
zu erkennen. Man zahlt in ihnen bis zu 30 und mehr Kornchen. H&uiig sieht man
eine Oder mehrere Vakuolen. Die Vibrionenfaden sind an vielen Stellen stark gelichtet.
oft nur noch Triimmer und „Zwirnsfaden“. In manchen Praparaten sieht man deutlieh,
dafi die runden Formen aus einer dufieren, hiiilenartigen Bchieht und aus einer inneren
Masse bestehen. Die letztere hat einen blaueren Ion als die erstere, welche mehr
rotlich erscheint. Schliefilich zerfallen die grofien Gebilde, und die Kbrncben in ihnen
werden frei.

4) Kokkenahnliche Formen (c-Forraen): Sie entstehen nach der Be-
schreibung von Kuhn durch das Wachsen der lichtbrechenden Kornchen, welche in )
alteren Kulturen oft zu 4 und mehr in den Vibrionen enthalten sind. Letztere sind
dann dicker, plumper und gerader als bei einem Ausstrich aus einer frischen, jungen
Kultur, mancnmal sind sie an einem Ende kolbenformig verdickt. Die Kornchen (
wachsen zur Grofie von Kokken aus. Solche kokkoide Gebilde liegen oft in Doppel- j
form. Bie sehen im lebenden Praparat griinlich aus und glanzen etwas. Anfangiich J
unterscheidet man um ihren Band herum noch die matten, grauen Vibrionen, die ihre '
Beweglichkeit lange erhalten. Vibrio und c-Formen zusammen bieten das Bild des au? .
der Mutationsforschung bekannten plumpen, kokkenahnlichen Bakteriums der trtiben j
Kolonien, die sich von vornherein durch starke Kornchenentwicklung ihrer Einzelwesen ]
auszeichnen, im Gegensatz zu den hellen Kolonien, bei denen die Kornchen und die ‘
plumpen Bazillen von vornherein seltener zu finden sind. Bei Neisser-Farbunz •
sehen die Kolonien mit starker Entwicklung juuger c-Formen schwarzlich aus, w&hrcnd '
die iibrigen braun sind. Aeltere Kolonien zeigen braune, kreisrunde c-Formen mit
blaugrauem Ton in der Mitte, in denen man zuweilen ein oder mehrere schwarze, \
lichtbrechende Kbrner entdeckt. Bie erscheinen frei von jedem Bakterienrest und sind *
dann unbeweglich. |

Letztere Form hat Kuhn in jjBonderkultur 4 * dargestellt. Er gibt fur seine Sonder-
kultur folgende Beschreibung: Die c-Formen vermehren sich in der Weise, dafi aus 1
einer Form zwei entstehen. Ihr Aussehen erinnert stark an Sarcinen. Die Kulturen
sind nicht so zahschleimig wie gewoh cliche Bakterienkulturen, sondern zerfliefien
beim Abimpfen und lassen sich deshalb schwer mit der Oese abnehmen. Auf gewohn-
lichem Agar wachsen sie sehr zart, nach frischer Ueberimpfung sind sie in der Kegel
erst vom 3. Tage an als zarter Hauch sichtbar. Auf manenen Agarsorten gedeihen sie
besonders gut, z. B. auf Maltoseagar und auf Berumagar. Auf Endo-Agar wachsen
sie rot. In Milchzucker- und Traubenzuckerbouillon bilden 6ie kein Gas. In Lack-
musmolke verursachen sie keine Triibung, diese wird nach 24 Std. rubinrot und bldbt
so monatelaug. In den Sonderkulturen treten kleinere und grofiere c-Formen auf; die
grdfiten, die beobachtet wurden, batten einen Durchmesser von 1 (i . An manchen
Stellen bilden sich Knopfe, die mit blofiem Auge sichtbar sind. Bie bestehen aip
crofieren c-Formen, die sich mit Giemsa-Losung stark blau farben, wahrend die
Formen ihrer Umgebung mattblau sind. Bei N eisser-Farbung sind die nach
Giemsa dunkelblau gefarbten Formen im ganzen lichtbrechend, so dafi ein Knopf
eigentumJich glasig und gliinzend aussieht. Es gelang, auch von dem Tubinger Mauee*
typhusstamm die c-Form zu cewinnen. Vibnonenformen sind nie wieder in der Rein*
kultur erschienen, auch in solchen nicht, die unter aufiergewohnliche Bedingungeo ge-
bracht wurden.

Serologische Dntersuchungen fiihrten zu dem Ergebnis, dafi agglutinierendes Serntn
der c-Form nur diese und nicht die Vibrionen aggiutinierte, und dafi umgekehrt ag-
glutiniereudes Vibrionenserum nur Vibrionen, aber nicht die c-Formen beeinflufite.

Was nun die Deutung der zuvor beschriebenen Formen anbetrifft, so aufiert sich
Kuhn hieruber folgendermafien:

Bei den d-Formen handelt es sich um engverschlungene und dicht aneinando’-
liegende Faden. Bei den a-Formen handelt es sich wohl nicht um Mifigestalten der
Bakterien, sondern man hat den Eindruck wohlcharakterisierter, feingebauter Lebewesen
mit einem ganz bestimmten Entwicklungsgang. Es liegt der Gedanke nabe, dafi ein
besonderes Entwicklungsstadium der Bakterien vorliegt. Auch bei den c-Formen handelt
es sich keinesfalls um Mifigestalten oder Degenerationsformen der Bakterien. Sie and
wohlgeformte, widerstandKtahige Lebewesen mit besonders bezeichnenden, lichlbrecben-
den, nach Giemsa rot farbbaren Innengebilden. Man ist immer und immer versnchk*
sie fiir verunreinigende Kokken zu halten. Ihre Entstehung aus den Kbrncben der
Bakterien ist nicht anzuzweifeln, aber es fiihrt kein Weg zu den Vibrionen zorick.

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Gi ldemei8ter, Ueber Variabilit&tserscheinungen bei Vibrionen.

243

Da bei den a-Formen die Mdglichkeit der Entstehung aus den Vibrionenformen nicht
ganz von der Hand zu weisen ist, bei den c-Formen feststeht, so mufi man die Mog-
lichkeit offen lassen. dafi sowohl bei a- wie bei c-Formen Eutwicklungsstufen der
Vibrionen vielleicht im Rahmen eines Generation8wechsels vorliegen. Eine andere Mog-
licbkeit halt Kuhn fur wahrscheinhcher, namlich die, dafi die a- und c-Formen be-
sondere Parasiten Bind; welche mit den Bakterien in einer Art von Syrobiose leben.
Wenn angenommen wird, dafi es sich um einen Parasiten handelt, bo waren a- und
c-Formen als besondere Entwicklungsstufen aufzufassen. Der Werdegang der a-Formen
lige dann so vor uns: sie entstehen aus den Kornchen, wachsen zu rundlichen Gebilden
heran, verschmelzen zu grofieren Formen, die wieder zu Kornchen zerfallen. Sie nahren
sich von den Bakterien, die eie aufsaugen. Die c-Formen waren als Dauerforraen des
Parasiten aufzutassen. Bie entstehen aus den Kornchen, die in oder an dem Vibrionen-
leib liegen, und wachsen auf Kosten des letzteren. Bobald sie herangereiit Bind, konnen
die unter besdnderen Umstanden auf gewohniichem Bakteriennahrboden weiterleben und
sich durch Teilung vermehren. Ein Uebergang zu den a-Formen ist bisher nicht nach-
gewiesen. Darum mufi auch an die Aldglichkeit gedacht werden, dafi es sich bei den
c-Formen um einen zweiten Symbionten handelt.

Bei der Wichtigkeit der hier zur Diskussion stehenden Fragen schien
es mir angezeigt, eine Nachprfifung der Kuhnschen Angaben vorzu-
nehmen, fiber deren Ergebnis ich nachstehend berichten mOchte.

Kuhn weist bereits in seiner Arbeit darauf hin, dafi die von ihm
bei Vibrionen beobachteten Erscheinungen schon vor ihm von anderen
Untersuchern beobachtet worden sind. Ich mfichte diese Angaben dahin
ergSnzen, dafi die von ihm angeschnittene Frage nach der Bedeutung
der bei Vibrionen beobachteten Form- und Ffirbbarkeitsfinderungen be¬
reits in den ersten Jahren nach der Entdeckung des Choleraerregers
durch R. Koch Gegenstand eines lebhaften Meinungsaustausches ge-
wesen ist, der bis in die 90er Jahre hineinreichte. Mit Rflcksicht auf
den Raummangel mufi ich es mir versagen, auf die hierfiber entstandene
umfangreiche Literatur ausffihrlich einzugehen, und mufi mich darauf
beschr&nken, die wichtigsten Ergebnisse hier kurz anzufuhren :

Den in alternden Kulturen zu beobachtenden Formenreichtum der Vibrionen gibt
eine einfache Zeichnung aus einer Albeit von Ermenghem (s. Flugge, Die Mikro-
organismen. Bd. 2. 18 1 j 6. S. 535) in vortrefflicber Weise wieder. In dieser Abbildung
sind Kommaformen nur noch vereinzelt anzutreffen; beheTrscht wird das Bild von
fadenlormigen, an den Enden zum Teil kolbig verdickten Gebilden und von grofien
rnnden oder mehr ovalen Blaschen formen, die teilweise deutliche Vakuolen erkennen
lassen; aufierdem sieht man einige kokkenahnliche Formen. Auch in dem Atlas von
Lehmann und Neumann (6. Aufl. Teil 1. Taf. 58. Fig. 5 u. 6) sowie in dem Atlas
▼on Frankel und Pfeiffer finden eich gleichislls recht instruktive Bilder.

Was nun die Deutung dieser verschiedenen Gebilde, die mit der ursprunglichen
Vibrionenform nichts mehr gemeinsam haben, anbetrifft, so werden sie allgemein als
Degenerations- und Absterbeformen angesprochen (Kolle und Bchiirman n). Aber auch
andere Aneichten sind geaufiert worden. Mehrfach haben die Absterbeformen der Vibrionen
zu der irrtumlichen Annahme einer Bporenbildung gefiihrfc. Bo haben Carlton und
Ferran, Ceci u. a. Fruktilikationsvorgange bei Vibrionen beschrieben; Ferran will
aogar festgestellt haben, dafi die Vibrionen in den Entwicklungskreis ernes Schimmel-
piizes gehoren. H ueppe, der sich eingehend mit den bei Vibrionen zu beobachtenden,
kugligcn, kokkenfoxmigen Gebilden beschattigt hat, sprach diese Gebilde als Dauer-
formen — „Arthrosporen u — an. Hueppe verfolgte die Entwicklung der kugligen,
kok ken form i gen Gebilde unter dem Mikroskop una sah im Verlauf eines Vibrionen-
fadene 2 Kiigelchen entstehen, welche den Durchmesser des Fadens um ein weuiges
fibertrafen und starker licbtbrecbend waren. Demnachst entstanden im weiteren Ver¬
lauf dee Fadens noch 2 oder 4 Kiigelchen; zuweilen beobachtete er formlose Zoogloea-
haufen, die aus den Kiigelchen bestanden. Die Kiigelchen. die unbeweglich sind. sollen
sich nicht durch Teilung vermehren, sondern sich unter Verminderung ihres Brechungs-
vermdgens zu einem kurzen Btabchen strecken, welches sich dann unter Verlangerung
zu einem Komma kriimmt und sich teilt, nachdem es S-Form erreicht hat.

Die Angaben H ueppes sind nicht unwidersprochen geblieben. Kitasato hat
sich mit ihnen eingehend beschaftigt; er stellte fest, dafi ein besonderer Dauerzustand,
welcher die Choleravibriooen an und fur sich widerstandsfahiger gegen das Eintrocknen

16*

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244

CeuiralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

raacht, nicht nachweisbar ist, und dafi die Hueppeschen Kornchen zu dem Aqb-
keimen der Vibrionen in keiner Beziehung stehen. Auch Berckholtz bat die An-
oahme von Dauerformen bei Cholera vibrionen abgelehnt. Friedrich, der ausfuhr-
liche Untersuchungen zb dieter Frage angestellt hat t auBert sich folgendermafien: „Ohoe
mich auf die Wideratandsfahigkeit der in Frage Btehendeo Gebilde einzulassen, die bei
Kitas&to,. Berckholtz u. a. gegen den Sporencharakter der Kiigelchen ausfideo
und pie eines eotsprechenden Wertes entkleideten, rechtfertigen meine Beobachtungeo
auch keine Deutung dereelben im H ueppeschen Sinne ala Bporen anderer biologischer
Wertigkeit; was ich an ihnen babe sehen konnen, notigt vielmehr dazu, sie als Zer-
fallateile des Zellplaamas aufzufasaen. tt Auch Friedrich ist es, wie Kitasato, nie-
mals gelungen, aus einem Kiigelchen einen neuen Keim entstehen zu sehen.

Friedrich macht weiterhin in der gleichen Arbeit auf das haufige Vorkommen
von Vakuolen bei Vibrionen, vornehmlich aus etwas alteren Kulturen, aifmerksam.
Diese Vakuolen erscheinen ala feinste Lichtpunkte oder durchsetzen den Vibrio in ganier
Breite oder treiben das Plasma und die Hullmembran mehr oder weniger weit ails'
einander. Sie nehmen rait zunehmendem Alter der Kultur oft betrachtlich an Umfang
zu und konnen dann ebeufalls in Verbindung rait Verzerrungen des Zeliplasmas za
iiberraschend mifigestalteten Involutiousformen fiihren.

Eingehende Studien iiber die Morphologie der Vibrionen liegen ferner von Pod-
wyssocki vor, dessen Untersuchungen sich in zweierlei Richtung erstreckten: 1) auf
das Vorhandenaein und die Verteilung einer chroraatischen Subatanz im Zellkorper der
Choleravibrionen, und 2) auf die Bildung von Vakuolen und AnschweJIung der Vibrionen
bis zu einer Metamorphose dereelben in ein ungeheuer groBes Gebilde. Pod wyssocki
beobachtete, wie bereits auch Friedrich, eine ungleichmaBige Farbung und kornige
Beschaffenheit des Vibrionenkorpers und unterscheidet zwiachen den Kornchen, die
innerhalb von typisch geformten Vibrionen liegen, und solchen, die in ZerfalMorraen
von Vibrionen sich finden. Das Auftreten der erstgenannten Kornchen wird erheblich
beeinilufit von der Art und Reaktion des Nahrbodens, auf dem die Vibrionen ge-
wachsen sind. Obgleich es Podwysocki nie gegliiekt ist, die Teilung eines chro-
matischen Kfirnchens zu beobachten, ist er doch geneigt, ein derartig deutliches Her-
vortreten der sich differenzierenden chromatischen Substanz in eine gewisse Beziehung
zur Teilung der Bakterienzelle zu stellen. Die Kornchen der Involutionsformen be:
zeichnet er als naehgebliebene Teile der degenerierten Zelle. Sowbhl der Arbeit von
Friedrich wie der von Podwyssocki sind zahlreiche Abbildungen beigegeben, auf
die hier besonders hingewiesen sei.

Schliefilich seien noch Beobachtungen von Dowdeswell angefubrt, von denen
allerdings bereits Friedrich meint, dafi sie wohl kaum ernst zu nenmen seien. Dieser
Autor sammelte seine Erfahrungen an Bouillonkulturen und gibt an, dafi er in zwei
verschiedenen Zyklen entweder von Birnen- und Flaschen formen, mit Neigung zu
Pseudopodienbildungen, als Sporangien oder von amobenahnlichen Kfirpern die Sporen-
bildung ausgehen oder filamentose Massen von verschiedener Grdfle, die sich zum Toil
in Sporen und Kugelkorperchen auflosten, sich bilden sah.

Aus dieser Uebersicht geht in der Tat hervor, dafi die von Kuhn beschriebeoen
Forraveranderungen zum grdBten Teil als bereits bekannt anzusehen sind, und mao
kdnnte geneigt sein, auch sie ohne weiteres in die Gruppe der Absterbeformen su
rechnen. Gegen eine solche Annahme fuhrt Kuhn an, daB er bei semen araoben-
ahnlichen a-Formen einen gewis^en Entwicklungsgang beobachtet habe, und daB ibm
bei den kokkenabnlichen c-Formen die getrennte Fortziichtung der Gebilde gelungen
sei; infolgedessen konne es sich bei diesen beiden Formen nicht um sterile Gebilde
handeln.

Meine Aufgabe war durch die Kuhnsche Stellungnahme gegeben;
sie bestand darin, mir fiber die Morphologie der Vibrionen in den ver-
schiedensten Entwicklungsstadien AufschluB zu verschaffen und nach
dem Vorgange von Kuhn zu versuchen, etwa auftretende abnorme
Formen in Reinkultur zur Darstellung zu bringen. Zu meinen Unter¬
suchungen zog ich 2 St&mme des Vibrio Metschnikoff heran, von
denen ich den einen Stamm der Liebeoswflrdigkeit des Herrn Prof.
Kuhn verdanke — es ist derselbe Stamm, mit dem er seine Versuche
angestellt hat —, wahrend der andere Stamm aus der Sammlung des
Reichsgesundheitsamts stammt, ferner je eine Kultur V. Finkleruiyi
und V. Elwers und zahlreiche Cholerakulturen.

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Gildcmeister, Ueber Variabilitatser6chcinungen bei Vibrioneu.

245

I

}

Zunachst sei auf die bekannte Tatsache hingewiesen, daB der Cholera-
vibrio und die ihm nahestehenden Vibrionen oft die typische Form ver-.
raissen lassen. Man sieht Vibrionen, deren Kriimmung so gering ist,
daB sie fast Stabchen gleichen, oder deren Gestalt so gedrungen ist,
dafi eine ovoide, an Kokken erinnernde Form entsteht. Insbesondere
linden sich von der Norm abweichende Vibrionenformen in variierenden
StSmmen, wie sie von Kolle, Baerthlein, Eisenberg, Bern¬
hardt u. a. beschrieben worden sind (vgl. Baerthlein, Arb. a. d. Kais.
Gesundheitsamte. Bd. 40. Taf. V), und die zum Teil auch durch ein
eigenartiges Idrberisches Verhalten ausgezeichnet sind. Aber alle diese
Formen lassen doch mehr oder weniger deutlich Zusammenhange in it
der Grundform, dem kommaformig gekrflmmten Stabchen, erkennen.

In Ausstrichen aus
ganz alten Vibrionenkul-
turen trifft man meist
nur noch mehr oder we¬
niger schlecht f&rbbare
KQgelchen an, Vibrionen
dagegen nur ganz verein-
zelt oder gar nicht.

Verfolgt man syste-
matisch die morphologi-
schen Verknderungen,
die in Vibrionenkulturen
auf festen oder fiflssigen
Nahrboden allmahlich
eintreten, so lafit sich
zunachst feststellen, daB
die einzelnen Vibrionen-
starame unter sich und
bei verschiedenen Prii-
fungen unter sonst glei¬
chen Bedingungen ein
durchaus verschiedenes
Verhalten aufweisen kon-
nen. Ich beobachtete Vi-
brionenstamme, die noch
nach lSngerem Aufent-
halte bei 37° in Ausstrichen von Agar wie von Bouillonkulturen vornehmlich
schbne Vibrionenformen und nur vereinzelt Vibrionenfaden und kokken-
ahnliche Gebilde erkennen lieBen. Andererseits traf ich Vibrionenstamme
an, die bereits nach 24 Std. ein morphologisch recht buntes Bild auf-
wiesen. Insbesondere zeichnete sich in dieser Richtung zeitweilig der
V. Fi n k 1 e r - Stamm unserer Saramlung aus. In Ausstrichen aus 24-stdg.
und noch mehr natflrlich aus 48-stdg. Bouillonkultur fanden sich neben
Vibrionen und Vibrionenfaden viele kleine, kokkenahnliche Gebilde, zahl-
reiche wesentlich groBere, runde oder ovale Formen (Blaschenformen),
trjpanosomenahnliche Gebilde, Kolben, wie sie bei Actinomyces sich
finden, und Zwischenformen der verschiedensten Art (s. Fig. 1). In
Ausstrichen aus jungen Agarkulturen war das Bild nicht ganz so bunt;
vorherrschten hier die kleinen Kokkenformen und die Blaschenformen,
wihrend die anderen bizarren Formen erst spater auftraten. Aus diesen
Beobachtungen geht somit hervor, daB das, was man bisher als Absterbe-

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246 Centralbl f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 4. j

formen zu bezeichnen pflegte, unter Umstanden bereits in ganz jungen
Vibrionenkulturen angetroffen werden kann.

Weiterhin suchte ich die Frage zu kiaren, ob das zeitige Auftreten ’
der von der Norm abweichenden Formen in Agarkulturen an einen be-
stimmten Kolonietypus gebnnden ist. In der Tat lieB sich feststellen,
daB insbesondere bei dem erwahhten V. Finkler-Stamm die atypischen
Formen vornehmlich in einer Kolonievariante anzutreffen waren, die sich
von der Normalkolonie durch geringere Durchsichtigkeit auszeicbnete.
Diese Kolonievariante zeigte jedoch keine besondere Konstanz, sie schlug j
sebr leicht aucb bei kurzfristiger Ueberimpfung in die Normalform zuruck.
Aber aucb die zu gleicher Zeit gewonnene Normalform des V. Finkler
lieB atypische Formen, wenn aucb in wesentlich geringerer Zabl, im j
mikroskopischen Ausstrich erkennen. Niemals jedoch ist es mir
gelungen, bei den zahlreichen Kolonievarianten der ver-
schiedensten Vibrionenst&mme, die ich eingehend mo-
natelang daraufbin verfolgt habe, irgendwann eine
Kolonieform anzutreffen, die ausschlieBlich aus kokken¬
ahnlichen Oder sonstigen atypischen Gebilden bestanden
hktte, wie sie Kuhn beschrieben hat

Was nun das f&rberische, Verhalten der von mir beobachteten
atypischen Vibrionenform anlangt, so haben meine Untersuchungen, so-
weit einfache Farbungen mit Fuchsin- Oder Methylenblaulbsungen in ]
Frage kommen, nur die frdheren Beobachtungen anderer Untersucher j
bestatigen kbnnen. Sowohl die Blaschenformen und die ihnen ahnelnden
Gebilde nehmeh wie die dendritischen Formen die genannten Farbstoffe
nicht gleichmafiig auf; sie lassen starker gefarbte und ungefarbte Stellen
in ihrem Inneren erkennen. Auch die. kokkenahnlichen Gebilde sind oft
ungleich gefarbt. Die Giem sa-Farbung hat mir nicht die Resultate >
geliefert, wie sie Kuhn beschreibt, auch bei solchen Praparaten nicht,
die nach seiner Vorschrift mit Bichromatessigsaure fixiert waren. Wohl 1
sah auch ich Farbunterschiede zwischen Biaulich und Rbtlich, aber in
keinera Falle die scharfen Unterschiede, ,wie sie Kuhn angibt. Ob die 1
Vorbehandlung mit Bichromatessigsaure eine besonders gfinstige Vor-
bereitung fflr solche Praparate ist, die mit einer so empfindlichen Firbe-
methode, wie sie die Giem sa*Farbung nun einmal ist, nachbehandelt
werden, lasse ich dahingestellt. Es ist jedoch mbglich, daB Unterschiede
in der technischen Behandlung der Praparate die farberischen Ab-
weichungen zwischen Kuhns und meinen Praparaten bedingt haben.

In eingehender Weise habe ich die Frage der Begeifielung der
atypischen Vibrionenformen untersucht. Zur Anwendung kam aus-
schlieBlich die Methode nach Zettnow. Ich konnte, wie ich bereits in
der Diskussion zu dem Vortrage von Kuhn in Berlin mitgeteilt habe,
bei den kleinen kokkenformigen Gebilden (c-Formen), sowie bei den
groBen Blaschenformen (a-Formen) GeiBeln derselben Art nachweisen,
wie sie dem normalen Vibrio eigen sind (s. Fig. 2 u. 3). Auch Frl.
Zuelzer hat, wie ich in der Diskussion erwahnte, bei kokkenahnlichen
Formen eines Wasservibrios gleichfalls typische VibrionengeiBeln nach-
gewiesen. Durch die Art der BegeiBelung ist nach meinem Dafflrhalten
die Abstammung dieser Kokken- und Blaschenformen von den Vibrionen-
formen einwandfrei erwiesen. Kuhn allerdings bezweifelt, daB Frl.
Zuelzer und mir wirklich reine c-Formen vorgelegen haben; er glaubt
vielmehr, daB diese von uns beobachteten Kokkenformen noch in der
Hulle der Bakterien gesteckt haben.

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Gildemeister, Ueber Variabilitatserscheinungen bei Vibrioneu.

247

Von Interesse sind weiterhin die Ergebnisse meiner GeiBelfSrbungen
an Vibrionenfaden, da sie iiber ihre Entstehung Auskunft geben. An
gut gebeizten Vibrionenfaden sieht man in Abst&nden, die einer Vi-
brionenlange zu entsprechen pflegen, je eine typische VibrionengeiBel.
Der Vibrionenfaden weist an der Stelle des Ansatzes der GeiBel eine
mehr Oder weniger deutlich erkennbare Einschnttrung auf. Aus diesen
Beobachtungen, die in gleicher Weise von Frl. Zuelzer an dem erwahnten
Wasservibrio gemacht worden sind, kann gefolgert werden, daB der
Vibrionenfaden durch unvollkommene Teilung entsteht. Die Vibrionen
besitzen in einem solchen Falle nicht die Fahigkeit, sich bei der Teilung
vOllig zu trennen; es bleiben vielmehr die Tochterzellen in Verbindung
miteinander und verraehren sich unter Umstanden in gleicher Weise

Fig. 2. c- und a-Form

mit GeiBel. Fig. 3. a-Form mit GeiBel.

weiter. Auch an Praparaten, die in einfacher Weise mit Fuchsin- oder
Methylenblaulosung gefarbt sind, kann man gelegentlich diese Ein-
schnurungsstellen beobachten l ).

Meine lange Zeit fortgesetzten Bemuhungen, die kokkenahnlichen Ge-
bilde oder die BlSschenformen in Reinkultur zu gewinnen, blieben erfolglos.
Wohl gelang es mir, wie ich schon zuvor anfiihrte, Kulturen zu erhalten,

1) In der Junisitzung der Berliner Mikrobiologischen Gesellschaft berichtete ich in
der Diskussioo zu dem Vortrage meines Mitarbeiters Herrn Dr. VV. Seiffert iiber Pro-
teinkorpertherapie, daB wir die von diesem gemachte Feststellung, daB lebende Bakterien
sich unter gewissen Bedingungen in proteinhaltigen Farbstofflosungen andera verhalten
wie tote, d h. sich im Gegensatz zu diesen nicht farben, auch fur die K uhnschen Gebilde
in Anwendung gebracht haben. Dabei hatte sich gezeigt, daB lebende Vibrionen sich
nicht farbten, daB dagegen Vibrionenfaden sich in einzeinen Abschnitten farbten und
sowohl a- wie d-Formen durchgangig gefarbt wurden. Bei den c-Formen war eine
einwandfreie Beurteilung wegen der Kleinheit der Gebilde nicht moglich; wir hatten
jedoch den E»ndruck, daB die Mehrzahl von ihnen sich farbte. Wir schlossen aus diesen
Beobachtungen, daB is sich bei den a- und d Formen urn tote Gebilde handelt, wahrend
t die Beurteilung der c-Formen nach diesen Versuchen nicht ohne weiteres mftglich erschien.

Anm. bei der Korrektur. NVeitere Untersuchungen haben ergeben, daB die Fiirb-
barkeitsverhaltnisse der Vibrionen in proteinhaltigen Farbldsungen insofern nicht ganz
einfach liegen, als bereits ein geringer FarbstofruberschuB (z. B. bei Gentianaviolett)
amreicht, um auch lebende Vibrionen zu farben. Seiffert land aUdann in dem hoch-

niolekularen Kongorot einen Farbstoff, der in wasseriger Losung die zuvor genannten
Unterschiede deutlich zeigte.

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248

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

die zwar reichlich KokkeDformen enthielten, aber auch stets daneben
einwandfreie Vibrionenformen. Da ein positives Ergebnis naturgem&fi
beweisender ist als viele negative Versuche, so war es fflr mich von
grofiem Wert, die von Kuhn als Sonderkultur bezeichneten Gebilde der
c-Formen kennen zu lernen. Herr Prof. Kuhn hatte die Liebenswurdig-
keit, mir im Oktober und November 1920 je eine Abimpfung seiner
Reinkultur zur Verfiigung zu stellen. Die beiden Kulturen erwiesen
sich, wie gleich vorweg bemerkt sei, als identisch. Die Untersuchung
der Kulturen, die ausschlieBlich von mir selbst durchgefuhrt worden ist
ergab folgendes:

Die Kuhnsche Kultur besteht aus mittelgroBen unbeweglichen
Kokken von ziemlich gleichmaBiger Grofie, die hfiufig zu 2 oder 4 ge-
lagert sind. Sie lassen sich mit den gewohnlichen Farbstoffen leicht
ffirben. Bei der Ffirbung nach Gram — fiber diese Farbung finde ich
bei Kuhn keine Angaben — geben die Kokken den Farbstoff nur
schwer ab, so dafi sie nicht als durchaus gramnegativ angesprochen
werden kdnnen. Niemals habe ich, wie hier eingeschaltet sei, in Aus-
strichen von Vibrionenkulturen Formen angetroffen, deren Ffirbung nach

Fig. 4. Normalform
der Kuhnschen Son¬
derkultur.

Fig. 5. Variante
der Kuhn schen Son¬
derkultur.

Gram nicht stets zweifelsfrei negativ gewesen ist. Nach Giemsa fSrben
sich die Kuhnschen Kokken gleichmfiBig hellviolett; bei der Farbung
nach Neisser nehinen nur einige wenige Kokken, insbesondere die groBen
Exemplare, schwarze Ffirbung an. GeiBelffirbungen hatten, wie zu er-
warten war, ein durchaus negatives Ergebnis.

Die Kuhn sche Kultur wachst auf alien tiblichen Nfihrbfiden, und
zwar auf Scbrfigagar in einem zarten, leicht trfiben, zuweilen mit der Oese
leicht abhebbaren, .zuweilen auch etwas klebrigen Belage. Im Ausstricb
auf Agarplatten zeigte die zuerst gesandte Kultur nach 24 Std. sehr
kleine, streptokokken&hnliche, trtibe, glattrandige Kolonien mit vfillig
glatter Oberilache; nach 48 Std. erreichten einzelne Kolonien einen
Durchm. bis zu 2 mm, an der Konfiguration der Kolonie finderte sich
aber nichts. Die zu zweit gesandte Kultur bestand im Ausstricb auf
der Agarplatte aus Kolonien von der gleichen Kleinheit der Kolonien
der erstgesandten Kultur; die Kolonien hatten jedoch ein anderes Aus-
sehen. Sie besaBen ein knopfformiges, etwas erhabenes und trubes
Zentrum, das von einer breiten, hellen Zone umgeben war. Rand und <
Oberflache auch dieser Kolonie waren glatt und glfiuzend (s. Fig. 4 u. 5).
Wahrend die Kolonien der ersten Kultur sich mit der Oese leicht auf-
nehmen lieBen, war dies bei der zweiten Kultur nicht der Fall; die |

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1

Gildemeister, Ueber Variabilit&teeracheinungen bei Vibrionen.

249

Bakterienmasse war fadenziehend und nur schwer vom NAhrboden abzu-
faebeo. Mikroskopisch und fArberisch gaben beide Kulturen flberein-'
stimmende Bilder; auch das soostige kulturelle Verhalten lieB keioe
Differenzen erkennen. In Bouillon wuchsen beide StAmme unter geringer
Trflbung des NAhrbodens; am Boden des NAhrboilenrdhrchens bildete
sich nach einigen Tagen eine kleine schleimige Wolke, die bauptsAchlich
die lebensfahigen Mikroorganismen enthieit. In Peptonwasser war das
Wacbstum etwas geringer. Gelatine wird im Gegensatz zu V. Metschni-
koff nicht verflBssigt. Auf Dieudonnd- Agar entwickeln die Kulturen
rich ungefAhr in der gleichen GrfiBe wie auf Agar. Auf Drigalski-
Agar sieht man nach 24 Std. kleiuste, rote, trflbe Kolonien.

Serologische Untersuchungen sind von mir nicht ausgeftthrt worden;
aie scbienen mir nicht erforderlich zu sein, da Kuhn bereits angibt,
dafi zwischen seiner Kultur der c-Form und dem V. Metschnikoff
keinerlei serologische Verwandtschaft besteht. Dagegen habe ich einen
Tierversuch an Tauben angestellt, der leider ein negatives Ergebnis
insofern zeitigte, als auch der zur Kontrolle verwandte V. Metschni¬
koff-StraBburg sich ebenso avirulent erwies als die Kuhnsche Kultur.

Eingehende Untersuchungen sind weiterhin von mir bezQglich der
bei den Kuhnschen Sonderkulturen zu beobachtenden VariabilitAts-
erscheinungen gcmacht worden. Die oben beschriebenen Differenzen in
dem Kolonietypus der beiden von Kuhn mir Qbersaudten Kulturen
liefien sich hierbei bald aufklSren. Mit Leichtigkeit konnte aus Bouillon-
kulturen der erstgesandten Kultur der Kolonietypus der zweiten Kultur
gewonnen werden und umgekehrt. Der erste scheint der artbestAndigere
zu sein, wAhrend der zweite Typus mehr die Neigung zu RQckschlAgen
besitzt. Es war somit auch durch diesen Versuch die IdentitAt der
beiden Kulturen erwiesen. Bei meinen zahlreichen und immer wieder
voo neuem wiederholten Variationsversuchen ist es mir jedoch in keinem
Falle gelungen, einen RQckschlag zur Vibrionenform zu erhalten. Stets
warden nur Variationen innerhalb des Kokkentypus erhalten.

Die WiderstandsfAhigkeit der Kuhnschen Kulturen gegen schAdigende
Einflflsse wie Austrocknen und hdhere Temperaturen ist gering. Sie ist
in Agar- und Bouillonkulturen, die bei Zimmertemperatur gehalten wer-
den, jedenfalls nicht gr&fier als die von Kulturen des V. Metschnikoff.
Adfschwemmungen der Kuhnschen Kultur in Kochsalzlftsung, die
l’/i Std. im Wasserbade bei 60° oder 1 Std. bei 65° gehalten werden,
sind mit Sicherheit abgetdtet. SchlieBlich sei moch bemerkt, daB kflrzlich
in dem von mir geleiteten Laboratorium gelegentlich anderer Unter-
sochungen eine Kultur als Verunreinigung geztichtet wurde, die in bezug
auf das Wachstum auf Agar und auf die Morphologic groBe Aehnlichkeit
mit der Kuhnschen Sonderkultur aufwies.

Zusammen fas sung.

1) Vibrionenkulturen zeigen bezQglich des Auftretens von atypischen
Formen, wie sie von Kuhn als a-, c-, d- und Fadenformen beschrieben
werden, sowohl unter sich wie auch zeitlich bei verschiedenen PrQfungen
«in durchaus verschiedenes Verhalten. Derartige Formen treten zuweilen
aehr zeitig nnd reichlieh auf.

2) Eine isolierte FortzQchtung derartiger atypischer Gebilde ist mir
nicht gelungen.

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250

Centralbl. f. B&kt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

3) Die von Kuhn beschriebene Sonderkultnr der c-Form besteht
aus Mikroorganismen, die morphologisch, kulturell and serologisch keine
Beziehungen za dem V. Metschnikoff besitzen. Die Eultar variiert
ausschlieBlich im Kokkentypus; ein RQckschlag znr Vibrioform konnte
nicht erzielt werden. Die Resistenz dieses Stammes gegen schfidigende
Einflflsse ist nicht grOfier als die des V. Metschnikoff.

4) Die in 24-stdg. Vibrionenkuituren zu beobachtenden groBkngligen
(a-) und kleinkngeligen (c-)Formen sind in der gleichen Weise begeifielt
wie normale Vibrionen. Die Zagehdrigkeit dieser Formen za dea
Vibrionen steht somit aufier Zweifel. Ob jedoch all die zu verschiedenen
Zeiten auftretenden verschiedenartigen kngligen Gebilde bezflglich ihrer
Entstehung und Bedeutung als gleichwertig anzusehen sind, erscheint
mir unwahrscheinlich.

5) Die in Vibrionenkuituren- zu beobachtenden und von Kuhn be-
schriebenen atypischen Formen sind meiner Ansicht nach, wenn man von
den in jungen Kulturen zu beobachtenden morphologischen Varianten
absieht, Absterbeformen verschiedenster Art und verschiedensten
Stadiums.

6) Die hypothetischen Schlufifolgerungen Kuhns stfltzen sich vor-
nehmlich auf 2 Punkte: 1. darauf, daB die von ihm beobachteten Gebilde
einen Entwicklungszyklus durchmachen, und 2. auf die Tatsache, daB
es ihm gelungen sei, die c-Form als Sonderkultur ffir sich fortzuzQchten.
Hinsichtlich des 1. Punktes ist der Ein wand zu erheben, daB auch Ab¬
sterbeformen einen Entwicklungszyklus — natfirlich regressiver Art —
besitzen. Aus den Ausffihrungen Kuhns und meinen Untersuchungen
ergibt sich nichts, was gegen die Annahme spricht, daB es sich bei den
in Frage stehenden Gebilden um regressive Ver&nderungen handelt. Was
den 2. Punkt, die Gewinnung der Sonderkultur der c-Form, anbetriflt,
so habe ich auf Grand meines eingehenden Stadiums dieser Kultur
nicht die Ueberzeugung gewinnen konnen, daB sie tats&chlich aus der
Vibrionenkultur hervorgegangen ist und irgend etwas mit dem Vibrio
Metschnikoff zu tun hat. Ich komme somit zu dem Endergebnis.
daB alles gegen die Kuhnschen Hypothesen und nichts filr sie spricht.

II. Zwergkolonien bel Vibrionen.

Baerthlein, der in eingehendster Weise die Variabilit&tserscbei-
nungen bei Choleravibrionen und sonstigen Vibrionen untersucht hat.
unterschied in seiner ersten Arbeit Ober diesen Gegenstand 3 voneinander
scharf abgrenzbare Kolonietypen, und zwar 1) belle, bl&ulich durcb-
scheinende Kolonien, 2) gelbweiBe, undurchsichtige, coli-ahnliche Kolonien
und 3) Ringformen. Eisenberg fiigte dann noch einen weiteren
Kolonietypus hinzu, den er als gewulstete dunkle Form bezeiebnete. In
seiner letzten Arbeit fiber diese Frage hat Baerthlein die Zahl der bei
variierenden Choleravibrionen unterscheidbaren Kolonietypen bereits auf
9 vermehrt. und bei verschiedenen Typen noch Unterteilungen vor-

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Gildemeister, Ueber VariabiIitii tserscheinungen bei Vibrionen

genomraen. Als Deue, besonders auffallige Kolonietypen werden von
ihm sogenannte Zwergformen beschrieben, bei denen er folgende 2 Arten
onterscheidet:

1. AeuBerst feine,
punktfdrmige, stark licbt-
brechende, graugrflnliche

Kolonien, die nach 24- f 1

stdg. Bebrutung erst die
GroBe

von feinsten
Streptokokkenkolonien
aufweisen. Nach 48 Std.
hat sich ein heller, matt-
grfiner, schwach durch-
scheinender Ring gebil-
det, wahrend das aus
der ursprunglichen Ko-
lonie bestehende Zen-
trum der gealterten Ko-
lonie gelblich-weiB, stark
gefAltelt und trocken
wird und knopfartig der
vergrofierten Kolonie
aufsitzt. Die Zwergkolo-
nien erwiesen sich bei
der Weiterzflchtung als
stSndig riickschlagende
Sippe.

2. Stark irisierende,
perlmutterartig gliin-
zende Zwergkolonien,
die bei der Weiterziich-
tung sich stSndig in
3 Formen aufspalteten,
also gleichfalls zu den
standig riickschlagenden
Sippen gehoren.

Zunachst kann ich
bestatigen, daB die Zahl
der bei Vibrionen vor-
kommenden und unter-
scheidbaren Kolonie¬
typen — und das gleiche
gilt auch fur andere
Bakterienarten — recht
erheblich ist. Je mehr
man sich mit einer Bak-
teriengruppe beschfiftigt,
um so groBer wird die
Zahl der verschiedenen
Kolonieformen, die man
kennen lernt. Bei Vibrio¬
nen fand ich am h&ufigsten die von Baerthlein zuerst beschriebenen Ko¬
lonietypen, daneben aber zahlreiche andere, von diesen[abweichende, schein

Fig. 6. Typus 1 der bei Vibrionen zu beobach
tenden Zwergformen. 24-stiind. Wachstum.

is 1 nach 48-stund. Wachstum

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(Central!>1. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4

bar selbst&ndige Koloniearten, die aber zumeist doch nur Uebergangs-
formen oder Zwischenformen der 3 Haupttypen darstellten. Eine besondere

Gruppe bilden zweifel-
los die Zwergformen,
die bekanntlich auch
bei anderen Bakterien-
arten, z. B. Typhusba-
zillen, beobacbtet wor-
den sind. Auch icb
babe sie haufig ange-
troffen uud mochte
nachstehend eine kurze
Beschreibung der von
mir angetroffenen For-
men geben. Es handelt
sich auch hier sicher-
lich um eine Gruppe
von Kolonieformen, und
es ist bis zu einem ge-
wissen Grade GefQhls-
sacbe, welche man als
die charakteristischsten
Vertreter dieser Gruppe
bezeichnen will. Am
haufigsten kehrten bei
meinen Untersuchun*
gen folgende Formen
wieder:

1) Nach 24-stdg.
Wachstum auf Agar die
GroBe von Streptokok-
kenkolonien errei-
cbende, stark gewolbte,
warzenformig vor-
springende, glanzende,
graugelbliche, meist
wenig durchsichtige Ko-
lonien mit leicht un-
regelmaBigem, in den
Nahrboden scheinbar
hineingedrQcktem
Rande. Nach 48-stdg.
Bebrutung ist die Ko-
lonie erheblich gr8Ber,
zeigt ein knopfartiges
Zentrum und radiar ge-
faltelte Oberfl&che (siebe
Fig. 6 u. 7). Die Ko-

Fig. 8. Typus 2 der bei Vibrionen zu beobach
tendon Zwergkolouien. 24-ctiind. Wachstum.

>u$ 2 nach 4S-stuud. Wachstum

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GiIdemeister, Ueber Variabilitatserscheinungen bei Vibrioneo.

253

Fig. 10. Typus 3 der bei Vibrionen zn bcob-
achtenaen Zwergkolonien. 24-stiind. Waehstum.

typischen Zwergformen Norraalformen abzuspalten. Sie dflrfte im
wesentlichen der von Baerthlein beschriebenen 1. Zwergform ent-
sprechen.

2) Nach 24 - stdg.

Waehstum auf Agar war-
zeuformig vorspringende,
gelbliche, wenig durch-
sichtige Kolonien mit
kranzformigem Rande,
der nach 48 Std. stark
gewolbt ist, w&hrend das
Zentrum der Kolonie
starke FSltelung auf-
weist (s. Fig. 8 u. 9).

Auch diese Kolonieform,
die sich bei Weiterimp-
fung im allgemeinen als
konstant erweist, haftet
dem NShrboden fest an.

3j Ein beim V.

Metschnikoff haufig
wiederkehrender Typus,
der nach 24*stdg. Wachs-
tum bei 37° aus einem
flachen, etwas geitlltelten
Zentrum und einem
ruschenartig gewulsteten
Rande besteht. Nach
48 Std. ist der Rand
noch mehr gewulstet und
hat eine ziemlich regel-
maCige Segmentierung
erfahren (s. Fig. 10 u. 11).

Die Kolonieform ist bei
kurziristiger Ueberimp-
fang konstant.

Die unter 2 und 3
ton mir beschriebenen
Zwergformen entspre-
chen keiner der von
Baerthlein angegebe-
nen Formen. Ich sehe
diese Feststellung als
einen weiteren Reweis
ffir den Formenreichtum
der bei der Bakterien-
Tariation rabglichen Ko-
lonietypen an.

Was die HSufigkeit
des Auftretens derarti-
ger Zwergformen in Aus-
strichen von Yibrionenkulturen anbetriflt, so ist diese durchaus verschieden.
In der gleichen Kultur, in der sie an einem Tage beobachtet werden,

Fig. 11. Typus 3 nach 48 stiind. Waehstum.

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254

(Jentralbl. f. Baku etc. 1. AbU Originate. Bd. 87. Heft 4.

konnen sie bei spfiteren Untersuchungen vollig fehlen und nmgekehrt.
Zuweilen treten sie in den Ausstricben nnr ganz vereinzelt auf, zuweilen
aber auch in solchen Massen, daB sie das Kolonienbild vfillig beherrschen.
So beobachtete ich mehrere Cholerastfimme, bei denen in Ausstricben
aus alten Bouillonkulturen und ganz besonders aus alten Peptonwasser-
kulturen derartige Zwergformen fast ausschliefilich vorbanden waren.

Mikroskopisch bestehen die Zwergformen aus Vibrionen, die im all-
gemeinen kleiner und feiner gestaltet sind als Vibrionen aus Normal-
kolonien; sonstige nennenswerte Unterschiede hinsichtlicb der Form und
Ffirbbarkeit waren jedoch nicbt zu erkennen.

Auch auf anderen festen N&brbfiden — Dieudonn6- Agar, Endo*
agar — bleibt das Wachstum der Vibrionenzwergkolonien zwerghaft.

Zusammenfassung.

Es werden die Angaben von Baerthlein fiber das Vorkommen
von Zwergkolonien bei Choleravibrionen und anderen Vibrionenkulturen
best&tigt und 3 besonders charakteristische Arten von Zwergkolonien
beschrieben.

Literaturverseichnis.

Baerthlein, Karl, Arb. a. d. Kais. Geflundheitsamt. Bd. 40. 1912 und CentraJ-
blatt f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 78. 1916. — Carlton, zit. nach Fliigge. — Ceci,
zit. nach Fliigge. — Dowdeswell, zit nach Friedrich. — Eisenberg, Ergebn.
d. Immunitateforeeh. upw. Bd. 1. 1914. — Ermenghem, zit. nach Flugge. —
Ferran, zit. nach Fliigge. — Fliigge, Die Mikroorganianoen. Bd. 2. 1896. —
Friedrich, Arb. a. d. Kais. Gtsundheitnamt. Bd. 8. 1893. — Hueppe, Fortschr. d.
Med. 1885. — Kitaeato, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 3. 1888. — Kolie u. Schiirmann,
Handb. d. pathogen. Mikroorganism. v. Kolie u. Wasserm&nn. 2. Aufl. Bd. 4. —
Podwyssocki, Ccntralbl. f. allg. Pathol, u. pathol. Anat. Bd. 4. 1893.

Nachdruck verbotm.

Beitrage zur Frage der Indolbildung und der Indolreaktionen
sowie zur Kenntnis des Verhaltens indolnegativer Bakterien.

[Aus dem Stfidt. Hygienischen Univ.-Institut zu Frankfurt a. M.
(Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M. Neisser).J

Von Dr. Walther Frieber.

So wicbtig die Tatsache der bakteriellen Indolbildung als Differen-
zierungsmerkmal ist, so interessant ist die Frage nach dem Verbalten
der indolnegativen Bakterien gegeniiber dem Mutterkfirper des Indols,
dem Tryptophan. Was machen die Bakterien mit dem Tryptophan, wenn
sie kein Iudol bilden konnen V Lassen sie das Molekfil intakt? Wird
z. B. das indolnegative Bact. typhi deswegen nicht zur Indolbildung
befahigt sein, weil es die Alaninseitenkette des Tryptophans nicht an-
greifen kann, weil ihm die Stickstoffquelle des Tryptophans nicht zusagt,

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Frieber, Beitrage zur Frage der Indolbildung und der Indolreaktionen. 255

vie Zipfel meint, Oder sollten Herzfeld und Klinger recht baben,
wenn sie vermuten, daB die indolDegativ erscbeinenden Bakterien die
Fihigkeit, das Tryptophan zum Indol abzubauen, wohl besitzen, daB aber
das gebildete Indol „in statu nascendi“ znr Synthese der Zellsubstanz
weiter verarbeitet wird, wodurch der chemische Nachweis freien Indols
miBlingt. Herzfeld und Klinger glauben, eine Stiitze fflr diese An-
nahme darin gefunden zu haben, daB sie in Bakterienkulturen tatsfichlich
ein Verschwinden freien Indols feststellten. Es erscheint immerhin
denkbar, daB in dem Moment, wo durch die Sfiure des Ehrlicbschen
Indolreagens die Zellfunktion gelfihmt wird, nicht so viel ungebundenes
Indol vorbanden ist, daB selbst bei der auBerordentlichen Scbfirfe der
Reaktion (1:2000000) der Nachweis intermedi&r gebildeten Indols ge-
lingt Oder sollte das Tryptophan ungeteilt zum Aufbau verwendet
werden? Der von Herzfeld und Klinger ge&uBerten Ansicht fehlt
aber die Beweiskraft, zumal keine Versuche angestellt wurden, das Vor-
handensein von komplexen Indolderivaten im ZelleiweiB nachzuweisen.

Die Frage nach dem Verhalten indolnegativer Bakterien soil daher
im Vordergrunde des Interesses stehen.

Eng hiermit verknflpft ist die andere Frage nach der besten Methode
des Indolnachweises. Denn wenn fiber positive Oder negative Indol¬
bildung berichtet werden soli, so muB zun&chst Einstimmigkeit fiber die
Mbglichkeit des Nachweises bestehen. Dies ist, wie die in der Literatur
rorhandenen Angaben fiber Indolbildung zeigen, nicht der Fall.

Die beiden am h&ufigsten verwendeten Nachweismethoden des Indols,
die filtere von Salkowski und die seit 1906 durch Bdhme weiteren
Kreisen bekannt gewordene P. Ehrlichsche Indolreaktion mit p-Di-
metbylamidobenzaldehyd zeigen hfiufig nicht fibereinstimmende Ergebnisse,
im Gegenteil, sie widersprechen sich sogar. Urn ein besonders prfignantes
Beispiel herauszugreifen, das nicht allein dasteht — ohne der ill ter en
bakteriologischen Literatur zu gedenken — seien Befunde von Zipfel,
Bfihme und Jaff6 mitgeteilt. Jaff6 fand in Kulturen von mehr als
20 St&minen von Bact. typhi Indol. BOhme wies bei 25 verschie-
denen Typhus- etc.-Stiimmen, Zipfel bei 85 Stiimmen derselben Gruppe
nach, daB Indol nicht gebildet sei. JaffO bediente sich der Salkowski-
schen Reaktion, Bdhme legt die Ehrlichsche Aldehydreaktion zu-
grunde, und Zipfel verwendet sowohl die Reaktion nach Salkowski,
nach Ehrlich und die Nitroprussidnatrium-Reaktion und betont, daB
er selbst innerhalb 6 Wochen mit diesen 3 Methoden Indol nicht habe
nachweisen kOnnen.

Andererseits sind derart widersprechende Befunde insofern wichtig,
als dadurch die Bedenken von der Indolbildung abgelenkt und mehr
auf die Nachweismethoden gerichtet werden. So ergibt sich die Frage,
ob die erwfihnten Reaktionen echte Indolreaktionen sind, oder ob der
einen ein grOBerer Wert vor den anderen als spezifische Indolreaktion
gebflhrt.

Alle Untersucher, die mit reinem Indol Vergleiche anstellen, er-
heben nur die Frage nach der SchSrfe, der Empfindlichkeit und geben
dann meist der Ehrlichschen Reaktion den Vorzug, oder empfehlen
»egen der geringeren Kosten der Reagentien den Nachweis nach Sal-
kowskL Ira fibrigen erachtet Zi pfel die Ehrlichsche und Sal-
kowskische Reaktion bei Verwendung der von ihm angegebenen syn-
thetischen NfihrlOsung mit Tryptophan ffir gleichwertig.

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256

Centralbl. f. JBakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 4.

Untersuchungen, die Verf. mit Paracoli-Stammen (Coli muta- j
bile Neisser-Massini und anderen, fiber die weiter unten berichtet wird)
in der Zipfelschen Tryptophanldsung machte, ergaben, daB bei absolat
negativer Ehrlichscher Indolreaktion eine Starke Reaktion nach Sal-
kowski auftreten kann. Diese Befunde lieBen sowohl die Angaben
Zipfels, wie auch den Wert der beiden Reaktionen in Zweifel ziehen.

Auch von anderer Seite (Steensma, Groot, Bach) sind derartige
Befunde (bei Proteus-Stfimmen) mit positiver Salkowski-Reaktion
mitgeteilt, ohne dad mit p*Dimethylamidobenzaldehyd Indol nachzn- ;
weisen war.

Da nach dem bisber Gesagten der Frage der Indolbildung nnd ihres
Nachweises groBe Bedeutung beizumessen ist, so wurde es im folgenden
unternommen, den Wert der Indolnachweismethoden einer genaneren
Prfifung zu unterzieben.

Es sei vorangestellt, daB ich zu diesen Untersuchungen in erster
Linie die synthetische Tryptophanldsung von Z i p f e 1 verwendete,
da ich sie ffir meine Zwecke fflr geeigneter hielt als die kurze Zeit vor
Zipfel von Borthelot (1911 und 1912) angegebene, Oder sogar schon
1903 von Hopkins und Cole — den Entdeckern des Tryptophans —
verwendete kfinstliche Tryptophanldsung. In der Zipfelschen Ldsang
(enthaltend Tryptophan 0,3 g; Ammonium lacticum 5,0 g; Asparagin
5,0 g; sek. Kaliumphospbat 2,0 g; Magnesiumsulfat 0,2 g; dest. Wasser
1000 ccm) bildeten einige Paracoli-StSmme, die im Hygienischen Institnt
wegen ihrer krfiftigen Phenolbildung isoliert waren, keine Spur von Indol,
die mit Ehrlichschem Reagens nachzuweisen gewesen wire, zeigten
aber eine starke Salkowskische Reaktion bei absolut farblos bleibenden
unbeimpften Kontrollrdhrchen. Gleiches Ergebnis hatten 5 Proteus*
Stfimme. Dieser Befund muBte insofern verwundern, als Zipfel aus-
drfickiich angibt, daB die mit den Reagentien Aldehyd, Nitrit und Nitro*
prussidnatrium in Tryptophanldsung auftretende F&rbung nur vom Indol
herrfihren kdnne.

Urn bei meinen Versuchen die Mdglichkeit aoszuschlieBen, daB der
die Salkowski-Reaktion gebende Kdrper vielleicht gar nicht in Be-
ziehung zura Tryptophan stfinde, gar kein bakterielles Tryptophan-Abban-
produkt sei, sondern daB er durch bakterielle Umsetzung des Aspagarins
oder des Ammonlaktats entstanden sein kdnne, wurden folgende 4 Ver-
suchsreihen angelegt: Reihe I stellte Tryptophanldsung nach Zipfel in
der oben angegebenen Zusammensetzung dar. In Reihe II fehlte gegen-
fiber Nr. I das Tryptophan, in Reihe III blieb nur Asparagin fort, nnd
Reihe IV enthielt kein Ammonlaktat. Geimpft wurde mit 3 Paracoli-
Stfimmen und 2 Proteus-Stammen. Wachstum war bei alien Rdhrchen
vorhanden, nur war dies in den asparagin- und ammonlaktatfreien Rdhr¬
chen der Reihe III und IV schwficher. Die Salkowski-Reaktion trat
fiberall nach 3 Tagen ein, nur in den Rdhrchen der Reihe II, die trypto¬
phan frei waren, blieb sie trotz guten Bakterienwachstums aus. Die
Ehrlichsche Reaktion, die zur Kontrolle angestellt wurde, blieb in
alien Rdhrchen negativ. Hieraus ergibt sich, daB der Kdrper tatsSchlich
aus dem Tryptophan entsteht.

Bezuglich der Ausfiihrung der Reaktionen ist folgendes zu sagen:

Die Ehrlich sche Reaktion wurde angestellt in der Modifikation von
E. Pringsheim, indent zu 5 cent KulturHiissigkeit 5—10 TropfMt
Reagens gegebeu wurden (von der Zusammensetzung 5 g p-Dimethyl-

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Frieber, Beitr&ge znr Frage der Indolbildung und der indolreaktionen. 257

amidobenzaldehyd, 50 ccra Methylalkohol (96-proz.) und 50 ccm konz.
SalzsSure (spezif. Gewicbt 1,19), jedoch ohne Kaliumpersullat. Die ur-
sprflnglich von Bdhme angegebenen Mengenverh&ltnisse der Reagentien
for die £hrlichsche Reaktion sind unzweckm&dig, da sie eine zu starke
Verdflnnnng der KulturflQssigkeit ergeben und zu wenig SalzsSure ent-
balteo, als dad mit 10 Tropfen eine stark alkalisch gewordene Kultur-
ilfissigkeit genflgend angesSuert wtirde. Das Kaliumpersulfat in gesSttigter
Lfisung, das auch E. Pringsheim noch angibt, ist auderdem als Oxy-
dationsmittel entbehrlich.

Die Salkowskiscbe Reaktion wurde in der Weise ausgefQhrt, dab
die mit Vs Volumen etwa 50-vol.-proz. Schwefels&ure (erhalten durch
Miscben gleicber Teile Wasser und konz. Schwefelsfiure) gut vermiscbte
KulturflQssigkeit mit Natriumnitritlfisung (0,02 g in 100 ccm Wasser)
tropfenweise Qberschichtet wurde. Konzentrierte SchwefelsSure ist zn
vermeiden; bei Versetzen mit 50-vol.-proz. Schwefels&ure tritt keine
oennenswerte Erw&rmung der KulturflQssigkeit und keine Dunkelf&rbung
Oder Verkoblung ein.

Nacb 2-tSgiger Bebrfltung der geimpften Rfihrcben trat nach An-
g&uern mit Schwefels&ure und Nitritzusatz zun&chst an der Oberfl&che,
dann nach Umscbiltteln eine sich auf die ganze Fltlssigkeit verteilende
RotfSrbung auf. Nach 4-tSgiger Bebriltung nahm die anfangs ungefSrbte
Kulturfliissigkeit namentlich bei Proteus-StSmmen einen dunkleren
Farbton an und gab eine weit stSrkere Reaktion als vorber. Die Ehr-
licbscbe Reaktion blieb auch nunmehr negativ, dagegen trat in den mit
Ehrlichschen Reagentien versetzten Rbhrchen nach Zusatz von Nitrit
die Salkowskische Reaktion auf, ohne dafi die Anwesenheit des Al-
dehyds stdrte. Auch die Nitroprussidnatriumreaktion (Zusatz von 1 ccm
2 proz. frisch bereiteter Nitroprussidnatriumlosung und 1 ccm n-Kalilauge
und AnsSuern mit EssigsSure) war negativ.

[Damit die Mdglichkeit ausgeschlossen werden konnte, dad etwaige
Nitritmengen des NShrbodens die Ehrlicbsche Reaktion hemmen wflrden,
wurde die KulturflQssigkeit sowohl unverdflnnt, wie 1:100 verdQnnt, mit
SchwefelsSure angesQuert und mit einer IndollCsung 1:5000 (von der
1 Tropfen ‘/so entspricht) zunfichst tropfenweise, dann weiter bis
insgesamt mit 5 ccm auf 100 ccm Losung versetzt. Eine auftretende
gerioge Rdtung durch Bildung von Nitroso-Indol zeigte, dad Nitrit
bakteriell nur in geringer Menge gebildet war. Mit Jodzinkst9rkel6sung
konnte Nitrit nicht nacbgewiesen werden.]

Der mit den Salkowski-Reagentien reagierende KOrper konnte
also kein Indol sein, da er sonst die Ehrlich sche Reaktion h&tte geb$n
mOssen.

Auf Grund von Erfahrungen, die ich beim Studium der verschie-
denen Indolreaktionen gesammelt hatte, konnte nun noch die Mbglichkeit
vorliegen, dad das mit dem Ehrlich schen Aldehyd reagierende C-Atom
des Indols infolge unvollstSndigen Abbaus der Alaninseitenkette des
Tryptophans noch nicht so weit freilag, dad die Ehrlichsche Reaktion
auftreten konnte.

Ehe die Untersuchungen des die Nitritreaktion gebenden KSr-
pers weiter gefGhrt werden, sollen in Anbetracht des Interesses an
der Kenntnis des Chemismus der Reaktionen hier vergleicbende Unter¬
suchungen fiber die verschiedenen Indolreaktionen an chemisch reinen
Kfirpern mitgeteilt werden. Diese Ergebnisse werden uns einen Schritt

Ente Abt. Orig. Bd. 87.

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Heft 4.

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258 CentralbL f. B&kt. etc. I. Abt. Original©. Bd. 87. Heft 4.

vorwfirts briDgen. Wir werden ein Bild bekommen, wie die einzelnen
Reaktionen wirken, wo sie am Indolkern ansetzen, und wir werden vor
alien Dingen sehen, ob die Ehrlichsche und Salko wskische Reaktion
in gleicher Weise reagieren, also genau parallel gehen.

Indolreaktion en.

Von den Indolreaktionen wurden die folgenden 5 als wichtigste heran-
gezogen.

1) Reaktion mit dem Paul Ehrlichschen p-Dimethylamidobenzaldehyd, modi-
fiziert: 5,0 g p-Dimethylamidobenzaldehyd, 50 ccm Alkohol, 50 ccm konz. Salzsaure,
haltbar in Glasstopfenflaschen. 5—10 Tropfen zu etwa 5 ccm Kulturfliissigkeit zusetzen.
Indol gibt kirschrote Farbung 1 ).

2) 8alkowski-Reaktion. Ausfiihrang: 5 ccm Kulturfliissigkeit mit V 3 Raumteil
50*vol.-proz. Schwefelsaure durchmischen, iiberschichten mit Kaliumnitritldsuog (0,02 g
in 100 ccm Wasser). Indol hellrot.

3) Reaktion mit l,4-p-naphto-chinon-mono9ulfo?aurem Kalium nach de Graaf; in
Kulturfliissigkeit nicht verwendbar. Zusatz von einigen Tropfen wafiriger Losung m
5 ccm schwach alkalisiertera Destillat. Auftreten eines braun-blauen F&rbtons, der in
Chloroform rotlich loslich ist.

4) Nitroprussidnatriumreaktion nach Legal-Weyi. Versetzen von 5 ccm schwach
alkalisierter Nahrlosung mit 0,5—1 ccm friscn bereiteter 2-proz. Nitroprusfiidnatrium-
ldsung. Nach Zusatz von Essigsaure: Blaufarbung.

5) Vanillinreaktion, Zusatz von *0 Tropfen 2 proz. alkohohscher VanillinlSsung
zur Kulturflussigkeit. Stark Ansauern mit konzentrierter Salzsaure. Indol: geib-or&oge.

An chemiach reinen indolderivaten s tan den mir folgende, in a- oder p-Stelle am
Indolkern substituierte Korper zur Verfiigung:

I. a- und p-Stelle frei: 1) Indol;

II. a-Stelle besetzt: 2) a-Methylindol, 3) Indolkarbonsaure;

III. p-Stelle besetzt: 4) (J-Methyliddol (Skatol), 5) p-Indolaldehyd. 6) p-Indolessigsaure.

7) p Indolbrenztraubensaure (Indol-a-Keto-Propionsaure; Indolacetylameisensiure)*

8) (l-Indolathylarain (Tryptamin), 9a) p-Indolalanin (l Tryptophan), 9b) synth.
(d+ l) Tryptophan (Ellinger), 10) p-Indolglyzylalanin (Glyzyltryptophan);

IV. a- und p*Stelle besetzt: 11) a-, p-Indoldikarbonsaure, 12) a-Methyl-p-Indolalanin
(a-Methyltryptophan), 13) Indoxyikarbonsaure, 14) Isatin.

Vorstehende Korper waren groBtenteils nicht im Handel zu taaben.
Ihren Besitz verdanke ich in erster Linie dem freundlichen Entgegen-
kommen von Herrn Geh. Med.-Rat Ellinger, Frankfurt a. M. y Herrn
Prof. Hans Fischer, Mttnchen, Technische Hochschule, der Badischen
Anilin- und Sodafabrik, Ludwigshafen a. Rh., vor allem aber Herrn
Dr. Ellger, Grenzach-Werke, Grenzach i. B., welcher mir in besonderfl
liebenswiirdiger Weise Tryptophan, Tryptamin und andere Derivate
kostenlos uberlieB. Allen genannten Herren sei auch an dieser Stelle
ganz besonders herzlich fflr ihre Liebenswflrdigkeit gedankt.

Diese Korper warden zun&chst in wafiriger Losung (30 mg in 100 ccm
Wasser) gepruft, desgleichen in Zipfelscher Losung, der sie statt
Tryptophan in derselben Menge zugesetzt wurden. Wegen Raummangels
muB auf Wiedergabe der Befunde in Tabellenform verzichtet werden*

l) Gebrauchsfertige Losung und Ausgangsmaterialien sind bei Dr. G. Grabler
und Co., Leipzig, Liebigstrafie zu beziehen; das Frankfurter Institut priift dieBrauch-
barkeit.

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Frieber, Beitrage zur Frage der Indolbilduug und der Indolreaktionen. 259

Zum besseren Versliindnis diene die folgende Stmkturformel des Tryptophane:

fl

C \ P «

H-C 0- 3 C CH.CHOOOH

I li "II \

H —C C aC-H NH,

q/ / a-Amiuo* Propion-
• • saure = Al&nin

H H

1 ndol

p-Indol-Alanin = Tryplophan

Indol.

1) Mit Ehrlichschem Reagens: eine kirschrote bis himbeerrote Farbung, die in
Amylalkohol eowie Chloroform gut ausschiittelbar ist (Amylalkohol ist zu priifen, ob
er nicht an sich Rotfarbung gibt). Aether, Benzol, Toluol Ibsen nicht. Nachtragliche
Zugabe von Nitritlosung bedingt Verstarkung des Farbtons, desgleichen Persulfat; aus-
»chuttelbar mit Amylalkohol und Chloroform. Viel Nitrit kann den Farbstoff zu farb-
losem Produkt oxydieren.

2) Mit Vanillin: Orangefarbunjr, die durch Nitrit oder Persulfat unverandert
bleibt, in Chloroform wenig orangefarben ausschiittelbar.

3) Salko wg ki-Reaktion: hellrot bis himbeerrot, leicht in Amylalkohol und
Chloroform iibergehend.

4) Nitroprussidnatrium: blau, nicht extrahierbar.

5} p-Naphtochmon: Farbe braunrot, mit viel Indol dunkelgriin bis blau, in Chloro¬
form himbeerrot iibergehend (sehr wichtig!). Auch farblos erscheinende Reaktionen
sind stets mit Chloroform auszuschiitteln, wobei Chloroform bei Anwesenheit selbst
von Spuren Indol deutlich rosa wird.

Skatol (P-Methy lindol).

1) Ehrlich reagiert nicht. Erst durch viel Salzsaure: violett-bis purpurfarben;
durch Nitritzusatz tiefblau, in Chloroform blauloslioh. Bestandig. (Unterschied von
Indol das nie blau wird, sondern leicht durch viel Nitrit farblos wird.)

2) Vanillin gibt normalerweise keine Reaktion. Durch viel konzentrierte Salzsaure
purpura, das durch viel Nitrit farblos wird und ganz verblafit, wahrend durch Persulfat
keine Aenderung eintritt.

3) Salkowski reagiert normalerweise nicht, bei Anwesenheit von viel Schwefel-
*aure odcr Salzsaure gelb.

4) Nitroprussidnatrium und p-Naphtochinon reagieren nicht.

a-Metbylindol.

Chrlichsche Reaktion kirschrot, in Chloroform kirschrot, loslich, durch Nitrit-
zusatz keine Farb verstarkung gegeniiber Indol; Vanillin orangegelb, Nitrit und Persulfat
keine Veranderung.

Salkowski normalerweise keine Reaktionen (mit konz. Sehwefelsaure rot).
Nitroprussidnatrium keine Reaktion.

^-Naphtochinon: braunrot, in Chloroform rot loslich.

p -Indo laldehyd.

Ehrlich-, Vanillin-, Salkowski-, Nitroprussidnatrium- und p-Naphtochinon-
Re&ktionen = 0 (bei starker Saure schneller, sonst nach einiger Zeit mit Ehrlich
und Salkowski rot).

P-Indolessigsaure.

Ehrlich-, Vanillin-, Nitroprussidnatrium- und Naphtochinon-Reaktionen = 0.
Salkowski- Reaktioa hellrot, in Amylalkohol iibergehend, nicht in Chloroform (Amyl-
alkohol, der mit Ehrlichs Reagens rot gefarbt wurde und daher zum Ausschiittein
bei dieser Reaktion nicht geeignet ist, stort die Sal ko wskische Reaktion nicht, sondern
bleibt auf Nitrit und Schwefelsaurezusatz farblos und kann daher zum Ausschiuteln
der Salkowaki-Reaktion verwendet werden).

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260

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

(3-lndol-Brenzjraubensaur e. v

Ehrlich*, Vanillin-, Nitroprussidnatrium-, Naphtochinon-Reaktionen =0. 8al-
kowski- Reaktion purpurrot (zutn Un terse hied von Indoleaaigeaure, welche rot wirdy

Tryptophan, a-Methyltryptophan, eymh. Tryptophan, Glyzyltryptophan, a-Indol-
karbonsaure, Jndoxvlkar bonsaute, a| I ndolkarboneaure und teatin geben mit dee
5 Reagentien keine Reaktion. Indolaihylamin (Tryptamin) reagiert mit Ehrlich alkie
nicht, wird aber auf Zusatz von Nitrit blau.

Aus vorstehenden Untersuchungen gebt hervor:

Ehrlichs Reagens reagiert mit Indol and a-Methylindol; nicht
reagieren: /S-Methylindol (Skatol nor bei starker SSure), Indolaldehyd,
Indolkarbons&ure, Indolessigs&ure, Indoibrenztraubens&ure, Tryptophan.
Tryptamin, a-Methyltryptophan, Glyzyltryptophan.

Salkowski reagiert mit: Indol, Indolessig^finre, Indolbrenz-
traubens&nre; nicht mit: a*Methylindol, /?-Methylindol, a-Methyl¬
tryptophan, Indolaldehyd, Indolkarbons&ure, a-^-IndoldikarbonsSure, In-
doxylkarbonsSure, Isatin, Tryptophan, Glyzyltryptophan, IndolStliylamin.

Nitroprussidnatrium reagiert mit Indol, nicht mit den flbrigen
13 Korpern.

Vanillin reagiert mit Indol und Methylindol, nicht mit den fibrigen
Kbrpern.

Daraus ergibt sich ein prinzipieller Unterschied der 5 Reaktionen.

I. Die Ehrlichsche, Vanillin- und Naphtochinon-Reaktion ver-
langen ein freies C-Atom, sie werden nicht gehemmt durch eine
Metbylgruppe am a-C-Atom (a-Methylindol).

II. Die Salkowskiscbe und die Nitroprussidnatrium-Reaktioo
verlangen vor allem eine freie a-Stelle des Indolkerns (a-Methylindoi
gibt mit ihnen keine Reaktion). AuBerdem verlangt die Nitroprussid-
natrium-Reaktion noch eine freie /?-Stel)e und ist somit von alien
5 Reaktionen am anspruchsvoilsten. Bei Salkowski darf bei freiem
a-C-Atom am Indolkern in der /? C-Stelle Essigs&ure oder Brenztrauben-
s&ure als Seitenkette .sitzen, ohne daB dadurch die Reaktion gehemmt
wflrde. a-Methylindolessigs&ure gibt keine Salkowskische Reaktion.

Nach ihrer Spezifit&t geordnet, steht von den 5 Reaktionen obenan
die Nitroprussidnatrium-Reaktion, sie geht nur auf freies Indol. Es
folgen die Ehrlichsche, Vanillin-, und Naphtochinon-Reaktionen, die
eine freie j?-Stelle fordern, wahrend das a-C-Atom des Kerns methyliert
sein kann. Wie eine lange Seitenkette am a-C-Atom des Kerns wirken
wflrde, entzieht sich der Prflfung aus Mangel an derartigen Indol-
derivaten.

Die Salko wskische Reaktion ist am an spruchslosesten:
wenn nur das a-C-Atom frei ist, so darf in ^-Stelle Essigs&ure oder
Brenztraubens&ure substituiert sein.

Zieht man in Betracht, daB das Nitroprussidnatrium den Zusatz von
drei Stoffen erfordert, Naphtochinon eine Destination der Kultur nfltig
macht, Vanillin sehr starke Salzs&ure verlangt und keine besonders
schone Farbung gibt (gelb-orange), wahrend die Ehrlichsche Reaktion
praohtig kirschrot wird, so scheint der Vorzug der Ehrlichschen
Reaktion zuzukommen.

Die vorstehenden Ausfiihrungen zeigen, daB tats&chlich zwischen
dem Ausfall der Ehrlichschen und der Salko wskischen Reaktion
ein prinzipieller Unterschied besteht, daB liier die Ehrlischsche Reak-

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Frieber, BeitrSge zar Frage der Indolbildung und der Indolreaktionen. 261

tioo den Vorzug der Spezifit&t hat. Es ergibt sich ferner, daS die
Salkowskische Reaktion nicht allein eine Indolreaktion ist, sondern
eine Indol-Essigs&ure-Reaktion Oder bei violetter Farbentonung eine
Indol-Brenztraubens&ure- Reaktion.

Ans diesen Ergebnissen erhalten die Unstimmigkeiten zwischen der
Ehrlichschen und Salkowskischen Reaktion ihre experimented
Best&tigung

Der gleiche durchgreifende Unterschied, wie er sich bei chemisch
reinen Praparaten gezeigt hat, tritt auch sehr schfln bei den Produkten
des bakteriellen Abbaus zutage. Aus Tryptophan und Glyzyltryptophan
biltlen indolpositive Bakterien freies Indol. Dieses kann mit den
5 Reaktionen der beiden Gruppen nachgewiesen werden. Der Abbau
des a-Methyltryptophan (a-Methyl, /Mndol Alanin) kann bei indolposi*
tiven Bakterien, welche nur die Alaninseitenkette abspalten, niemals zum
freien Indol, sondern nur zum a-Methylindol fiihren.

Eine synthetische Losung Dach Zipfel, enthaltend statt Tryptophan
0,03 g a-Methyltryptophan, wurde mit folgenden indolpositiven Bakterien-
arten geimpft: Bact. coli commune, Proteus X19, Vibrio
cholerae und Bact. dysent. (Flexner).

Die angestellten Indolreaktionen fielen aus:
bei Gruppe I (Ehrlichsche, Vanillin-, /?-Naphtochinon-Reaktion):
positiv,

bei Gruppe II (Salkowski-, Nitroprussidnatrium - Reaktion) :
negativ.

Obwohl die Alaninseitenkette tats&chlich abgespalten war, wie der
positive Ausfall der Reaktionen der I. Gruppe, die im /? C-Atora ein-
setzen, beweist, so konnten dennoch die Reaktionen der II. Gruppe, die
eine freie a C-Stelle des Indolkerns verlangen, nicht eintreten, da dieses
noch mit einer Methylgruppe blockiert war.

Da das a Methyltryptophan, welches von Herrn Geh. Rat El linger
syothetisch gewonnen war, im EiweiBmolekal nicht vorkommt, so haben
diese Befunde in erster Linie theoretisches Interesse.

Bei der spfiter zu erdrternden Frage, wie das Tryptophan von indol-
negativen Bakterien angegriifen wird, wird uns das synthetische a-Methyl¬
tryptophan noch einmal eine wertvolle StOtze bieten. Hier genflgt es,
mit seiner Hilfe den prinzipiellen Unterschied zwischen den beiden
Grnppen von Reaktionen, im besonderen aber deu Unterschied zwischen
den im Vordergrunde des Interesses stehenden Ebrlichschen und
Salko wskischen Reaktionen auch am bakteriellen Abbau gezeigt zu
haben.

In gleicher Weise wie der bakterielle Abbau des Tryptophans, Glyzyl-
tryptophans und a-Methyltryptophans wurde auch die bakterielle Spaltung
der a-Iodolkarbons&ure, der a /? Indoldikarbons&ure,/?-Methylindol (Skatol),
^Indolaldebyd, IndolessigsSure, IndolbrenztraubeusSure, Iudol&thylamin
durch Bact. coli commune sowie Proteus X19 versucht. In
keinem Falle konnte durch bakterielle Umsetzung ein Endprodukt er¬
halten werden, welches eine positive Ehrlich scbe Reaktion gegeben
hitte.

Der *Zwischenk9rper“.

Nachdem durch vorliegende Untersuchungen festgestellt war, daB
die Ehrlichsche und Salko wskische Reaktion tats&chlich nicht

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262 Oentraibl. f. Bakt. etc. I. Abt, Originate. Bd. 87. Heft 4.

parallel gehen und dafi der die positive Salkowskische Reaktioa
gebende Kdrper als Tryptophanderivat betrachtet werden mufi, ist es
interessant, NShores fiber die Natur dieses Kdrpers, den wir „Zwischen-
k5rper u nennen wollen, zu erfahren.

Dafi ein Widerspruch mit der Ansicht Zipfels insofern besteht,
als die in seiner Tryptophanlbsung auftretende Rotffirbung — einerlei
mit welcher Reaktion — nur vom Indol herrfihren k5nne nnd dafi ein
Ausschfltteln des Farbstoffes mit Amylalkohol Oder Chloroform, wie es
bei Pepton geboten w&re, nicht nOtig sei, wurde bereits oben erwfihnt
Auch der farbige Zwischenkbrper geht in Amylalkohol ebensognt fiber
wie bakterielles Nitrosoindol. Da von alien Indolderivaten aufier Indol
nur noch die Indolessigsfiure und Indolbrenztraubens&ure eine Sal¬
ko w ski-Reaktion geben (von denen die Indolbrenztraubens&ure wegen
ihres mehr violetten Farbtons von der Betrachtung wohl ausscheiden
kann), so wird man auch im vorliegenden Falle im Zwiscbenkorper
Indolessigs&ure vermuten kdnnen. Im Destillat der Kulturflfissig-
keit, das zwecks Anstellung der Naphtochinonreaktion gewonnen wurde,
war sowohl diese Reaktion wie auch die Salko wskische, Er lie hsche,
Nitroprussidnatrium- und Vanillin-Reaktion negativ. Da der Kdrper also
mit Wasserdampf nicht flfichtig ist, so kann er nicht Indol sein. Reine
Ldsungen von Indolessigs&ure und Indolbrenztraubens&ure (0,020 g in
100 ccm sowohl neutral wie schwach sodaalkalisch) zeigten dasselbe
Verhalten. Im Destillat war keine Salkowski-Reaktion, auch keine
Ehrlichsche Reaktion festzustellen Erst bei ISngerer Destination, nach
Ansfiuern mit Schwefels&ure Oder Salzs&ure trat zuletzt, wenn die Ldsnng
konzentrierter wurde, im Destillat eine schwache Ehrlichsche Reaktion
auf, die auf Nitritzusatz nach blau verfindert wurde. Die Salko w ski sche
Reaktion trat aber nicht auf. Es war also bei der S&uredestillation
des ZwischenkOrpers ein Stoff fiberdestilliert, der nicht Indol war,
sondern Reaktionen des Skatols gab. Es war ferner die Skatolreaktion
nach Sasaki: Auftreten eines violettroten Ringes in der mit Methjl-
alkohol versetzten Losung nach Unterschichten mit konzentrierter
Schwefels&ure positiv. Dieser Befund spricht ffir Indolessigs&ure, denn
diese geht durch st&rkeres Erhitzen in Skatol und Kohlendioxyd fiber:

(C 8 H 6 N) CH 8 -COQH - (C 8 H 6 N)-CH 8 -f CO,
Indolessigs&ure Skatol.

Weiterbin kam auch das optische Verhalten des Zwischenkorpers in
Frage. Bei spektroskopischer Priifung zeigte der in der Kultuiflfissig-
keit durch Zusatz von Nitrit und SchwefelsSure erhaltene Nitrosofarb-
korper in gleicher Weise wie der Amylalkoholauszug ein breites Ab-
sorptionsband im Grun. Auch die in chemisch reinen Lbsungen von Indol-
essigsSure und von Indolbrenztraubens&ure mit Nitritschwefelsfiure
gewonnenen Farbstoffe zeigten in w&firiger Losung, sowie in Amyl-
alkobol ebenfalls einen breiten Absorptionsstreifen in Grfin des Spek-
trums, das in gleicher Schichtstarke und Farbst&rke als gleich anzu-
sprechen war. (Der mit chemisch reinem Indol sowie in indolhaltiger
Kultur gewonnene Nitrosoindolfarbstoif verhielt sich davon verschieden.)

Wurde dieser extrahierte bakterielle Zwischenkbrper im Rbhrchen
erhitzt, so trat Skatolgeruch auf, und der an den kalten Teilen gebildete
Niederschlag gab nach Salkowski keine Reaktion. Mit Ehrlichs
Reagens+Nitrit: Blaufarbung. Desgleichen war die Reaktion nach Sasaki
positiv. Dieses beweist Skatol, welches nach der bereits oben ange-

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Frieber, Beitr&ge zur Frage der Indolbilduog und der Indotreaktionen. 263

gebenen GleichuDg aus Indolessigsfiure entstanden sein mufi. Ferner
8timmte die von E. Salkowski beschriebene Reaktion der Indolessig¬
sfiure (ven ihm noch fflr Skatolkarbonsfiure gehalten) mit dem isolierten
Kdrper Qberein. In alkalischer Lfisung mit Zinkstaub unter Erwfirmen
reduziert, entffirbte sich der K6rper. Das Filtrat ffirbte sich an der
Loft nicht wieder. Desgleichen verhielt sich chemisch reine Indolessig¬
sfiure. Indol, in der gleiqhen Weise bebandelt, wurde intensiv blau. Das
Aosbleiben dieser Blauffirbung zeigt also, dafi der Zwischenkbrper kein
Indol sein kann, sondern dafi er mit indolessigsfiure Qbereinstimtot.
Danach dfirfte es keinem Zweifel mehr unterliegen, dafi
der Zwischenkdrper tatsfichlich Indolessigsfiure ist. Der
Befnnd wird dadnrch bestfitigt, dafi von Salkowski 1887 Indolessig¬
sfiure in Bakterienkultnr nachgewiesen wnrde. Salkowskis Befunde
verlieren jedoch dadurch an Wert, dafi er die Indolessigsfiure (sogen.
Skatolkarbonsfiure) nicbt mittels Reinkultnr gewann, sondern aus Ffiul-
nisgemisch isolierte. 1906 berichtet Steensma fiber einen Proteus-
Stamm, welcher eine positive Salkowski-Reaktion gibtf, die nicbt auf
Indol beruht. Die Ehrlichsche Reaktion prfift er nicbt. Hinsichtlich
der Natnr dieses Kfirpers bebt er ausdrficklich hervor, dafi die Skatol¬
karbonsfiure (Indolessigsfiure) wabrscheinlich nicht vorliege. Doch irrt
Steensma darin wohl. Denn 1908 bescbrieb auch Herter 2 Protens-
Stfimme mit Indolessigsfiurebildung. 1911 berichten Herter und Ten
Broeck fiber 2 Proteus-Stfimme, die neben Indol auch Idolessig-
sfiore bilden. 1913 teilt A. Berthelot Befunde bei Proteus-
Stfimmen mit, die am 2. Tage eine leichte Rotf fir bung mit Kalium-
nitrit und Salzsfiure geben. Berthelot isoliert den Kdrper aus den
Protens-Kulturen und weist nach, dafi es sich urn Indolessigsfiure
handelt.

Soweit diese genannten Autoren nicht mit Ffiulnisgemischen arbei-
teten, so ziehen sie nur Proteus-Stfimme in den Kreis der Unter-
snchnngen. Hier erhebt sich nnn die anfangs der Arbeit aufgeworfene
Frage, wie sich andere Bakterien hinsichtlich der Bildung des Zwischen-
kdrpers aus Tryptophan verhalten.

Um dies zu prfifen, wurde, da die Zipfelsche Ldsung anspruchs-
vollen pathogenen Bakterien kein gutes Wachstum gewfihrt, eine mittels
Pepsinsalzsfiure aufgeschlossene Gelatine, die den Tryptophankern nicht
enthfilt, mit Zusatz von 0,3 pro Mille Tryptophan verwendet. 20 g
Gelatine wurden in 1 Liter Wasser mit 10 ccm konzentrierter Salzsfiure
und 2 g Pepsin Witte einige Tage verdaut, dann mit Natronlauge
neutralisiert. 500 ccm dieser Gelatinelosung wurden versetzt mit 500 ccm
Wasser, 5 g Kochsalz, 2 g sec. Kaliumphosphat, 0,2 g Magnesiumsulfat,
0,3 g Tryptophan und 7 ccm n-Sodal6sung ab Lackmusneutralpunkt.
Diese fast farblose und wasserklare Nfihrlosung bot auf Grund ihres
Gehaltes an natfirlichen Aminosfiuren den Bakterien ein vorzOgliches
Wachstum. In diese L6sung wurden folgende Bakterienarten geimpft:

Bact. typhi, paratyphi A, 4 Stamme paratyphi B, Enteritis, 2 Starome
Staphylococcus pyog. aur., Bact. dysenteriae Shiga Krupe, S Stamme Para-
coli pnenologenes, sowie 10 andere, frisch isolierte Siamme indolnegativer Para-
coli-Arten, Sarcine, Bac. diphtheriae, Bact. pneumoniae (Friedliinder),
Bact. pyocyan., Micrococcus bicolor, Bact. Zopfii, Bact. disciformans,
Bact. Titnlinum und Eartoifelbazillus.

Gleichzeitig wurde eine Serie Tryptophanwasser (Zipfel) mit diesen
Bakterien geimpft, sowie je eine Kontrolle von Gelatine und Zipfel-

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264 CentralbL f. Bakt etc. 1. Abt. Originate, fid. 87. Heft 4.

TryptophanlSsung ohne Tryptophan. Nach 7 Tagen trat anf Znsatz von
Schwefelsfture umi Nitrit in den Gelatinetryptophanrdhrchen, wie auch
in den Z i p fe 1 - TryptophanrOhrchen eihe dentliche, teils sogar starlce
Rotffirbung auf. Ltei den 13 Phenolbildnern, bei Shiga-Krnse,
Bact. Zopfii, vitulinum, disciformans war die Keaktion am
starksten. Bei Paratyphus B, Friedl&nder, Diphtherie nicht ganz
so stark, bei den Obrigen schwftcher, aber noch deutlich. In deo
Zipfel-Tryptophanrohrchen war bis auf die Phenologenes-St&rame die
Reaktion infolge schwdcheren Wachstums auch merklich schwacher, aber
noch deutlich.

Die Ehrlichsche Reaktion war in alien Fallen negativ; desgleichen
die Salkowski- und Ehrlichsche Reaktion in den tryptophanfreien
Kontrollen.

Hieraus ergibt sich das erstaunliche Resultat, dafi fast alle bis-
her als indolnegativ bekannten Bakterien aus Trypto¬
phan einen Korper bilden, der eine positive Reaktion
nach Salkowski gibt, bei absolut negativer Ehrlichscher Reaktion.
Bei einigen ist je nach dem Wachstum und den N&hrb5denansprfichen
die Reaktion schon nach 3 Tagen deutlich positiv. Es sind also alle
aufgefflhrten Bakterien imstande, aus Tryptophan den Zwischenkorper zn
bilden. Auch der Pestbazillus und der Rotzbazillus, sind, wie heroach
geprQft wurde, dazu imstande.

In vielen Fallen (Paratyphus A) war die Salkowskische Farb-
reaktion nur als Ringprobe zu sehen, die erst innerhalb 10 Min. ein*
trat. Sie war auch nur deswegen so sch6n sichtbar, weil die FIQssigkeit
keine Eigenfarbe hatte, wie fleischextrakthaltige Bouillon, und weil die
Reaktion zunachst vorsichtig als Schichtungsreaktion angestellt wurde.
Man geht auch wohl in der Annahme nicht fehl, dad die Grande, daB
die Salkowski -Reaktion bei frDheren Untersuchern nicht h&ufiger positiv
befunden wurde, in der unzweckmaBigen Anstellung der Reaktion bei zn
stark gefdrbtem Medium zu suchen sind.

Auch in Gelatinel5sung mit 0,03 Proz. Glyzyl-Tryptophanzusatz
gaben Bact. typhi, Paratyphus B, Paracoli phenologenes,
mutabile und anindolische Proteus-St&mme den Salko w ski sehen
FarbkSrper.

Um festzustellen, ob Witte-Peptonzusatz das Auftreten der Sei¬
ko wsk i-Reaktion hemmen wOrde, wurde eine synth. Ldsung herge-
gestellt mit 0,5 Kochsalz, 0,2 Proz. sec. Kaliumphosphat, 0,02 Proz.
Magnesiumsulfat und 0,03 Proz. Tryptophan. Der Peptonzusatz wurde,
am mdglichst geringe Eigenfarbe zu haben, nur zu 0,25 Proz. ge*
nomraen. Innerhalb 5 Tagen gaben bier Bact. pyocyan., Staphyloc.
pyog., Bact. pneumoniae, Bac. diphtheriae, Kartoffelbazillus,
disciformans und der Rotzbazillus positive Salkowski-Reaktion,
wahrend die Ehrlichsche, sowie die Kontrolle mit ungeimpfter Nfihr-
lOsung negativ war.

Nach diesen Befunden war zu erwarten, daB auch bei ZQchtnng in
gewohnlicher Bouillon die Salko wski-Reaktion auitreten wQrde, falls
nicht die stSrkere Eigenfarbe, oder der noch peptidartig gebundene
Tryptophankern hemmeod wirkten. Um dieses festzustellen wnrdea
folgende Versuchsreihen angesetzt:

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Frieber, Beitrfige zur Frage der Indolbildung and der Indolreaktionen. 265

A. GewShnliche Bouillon, wie sie im Hygienischen Institut ge-
brSuchlich ist, mit 1 Proz. Pepton*) (gewonnen aus mit Pepsinsalzs&ure
verdautem Fibrin unter Zusatz von Placentawasser), 0,5 Proz. Fleisch-
extrakt Liebig and 0,5 Proz. Kochsalz mit einer Alkalitat von 7 ccm
NormalsodalOsung pro Liter.

B. Bouillon wie unter A mit 0,03 Proz. Tryptopbanzusatz.

Geimpft wurde mit Bact. typhi, Paratypbus A, B, Paracoli-

pbenologenes, Bact. dysenteriae, Shiga-Kruse, Staph,
pyog. aur., Bac. diphtberiae, anindol. Proteus (2 St&mme)
sowie Bact. pestis, ferner mit dem indolpositiven Vibrio cholerae
and Proteus XI9. Nach 8-tfigiger Bebrfltung zeigten alle RShrchen
der Reihe A und B positive Reaktion. Paratypbus A ergab die
schwSchste Reaktion, Paratyphus B, Stapb. pyog. aur., Bact. typhi
zeigten eine st&rkere, Shiga-Kruse, Diphthbrie- und der Pestbazillus
die kr'&ftigste Salkow ski-Reaktion. Die Ehrlichsche Reaktion war
absolnt negativ bis auf die indolpositiven Bakterien Coli commune,
Proteus X19 und Cholera, die eine kr&ftige' Ehrlichsche Reaktioa
und eine ebenso starke Nitroso-Indolreaktion aufwieseo. In den mit
Tryptophan versetzten BouillonrOhrchen der Reihe B war das gleiche
Resultat, nur waren Qberall die Reaktionen etwas krSftiger.

Also auch in gewOhnlicher Bouillon wird genilgend von dem
Zwischenkdrper gebildet, so daQ er mit der Salkowskischen Reaktion
nachgewiesen werden kann. Besonders stark wird Indolessigs&ure ge¬
bildet bei Paratyphus B, Diphtheria, Dysenteric und anindolischen
Proteus- und Paracoli-Stftmmen. Es zeigt sich, daQ die Bakterien
JLhnlich, wie sie das Dipeptid Glyzyltryptophan, so auch das im Pepton
noch in Polypeptidform gebundene Tryptophan zu Indolessigs&ure ab-
bauen kOnnen. Aber reichlicher tritt das Produkt auf, wenn die Bak¬
terien in der NfihrlOsung schon freies Tryptophan oder Dipeptid vor-
finden.

Die Ehrlichsche Reaktion war bei alien indolnegativen Bakterien,
das sei immer wieder betont, in keinem Falle positiv. Namentlich be-
zlglich Bact. diphtheriae sei dies im Hinbiick auf die Angabe von
Lehmann-Neumann sowie Palmirski und Orlowski hervor-
geboben. Auch die Nitroprussidnatrium-, sowie die Vanillin-Reaktion
war absolut negativ. Desgleicben konnte im Destillat keine der 5 Reak¬
tionen erhaiten werden. Danach ist Indolbildung beim Diphtherie-
bazillus als ausgeschlossen zu betrachten. Das gleiche gilt vom Rotz-
ond Pestbazillus.

Aus den mitgeteilten Versuchen geht bis jetzt hervor, daQ nicht
our die indolpositiven Bakterien bef&higt sind, das Tryptophan anzu-
greifen, sondern daQ dies eine Eigenschaft ist, die alien genannten indol¬
negativen Bakterien ebenso zukommt. Dies ist ein sehr wichtiger
Befund. Die Salkowskische Reaktion ist, streng genommen, keine
Indolreaktion, sondern eine Indolessigs&urereaktion. Solange die
Salkowskische Reaktion aber als Indolreaktion gait, muQten Irrtflmer
entstehen. DaQ nicht h&ufiger und noch zahlreicher die Pseudoindol-
reaktion gefunden wurde, hangt damit zusammen, daQ der Zwischen-
kCrper bei den meisten pathogenen Bakterien nicht so kr&ftig gebildet
wird, sondern erst vom 3. Tage an nachweisbar ist. Es kann aber

1) N&heree W. Frieber, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. BtJ. 80. 1921. S. 424.

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Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

dann die geringe Rotfarbung wegen der Eigen far be der FlQssigkeit
iibersehen werden. Anders ist es, wenn die Nitritldsung sorgflltig
fiber die mit Saure gut vermischte Kulturfliissigkeit geschicbtet wird.
Nur als Ringreaktion gelingt der Nachweis bei den meisten pathogenen
Bakterien.

Wie aus dem ersten Teil der Arbeit hervorgeht, verlangt die Sal*
kowskische Reaktion eine freie a Stelle des Indolkerns. Aus a-Methyl-
trjptophan kdnnen indolpositive Bakterien nur a-Methylindol bildeu,
welches nur durch die Reaktionen, welche am /?-C-Atom ansetzen (Ehr¬
lich, Vanillin, Naphthocbinon), nachgewiesen werden kann. So mQBten die j
indolnegativen Bakterien aus a - Methyltryptophan ebenfalls den
Zwischenkdrper bilden, jedoch besaBe dieser eine methylbesetzte o-Stelle, 1
und es ware zu erwarten, daB die Salkowski-Reaktion hier nicht
auttritt. Das Experiment bestatigt diese SchluBfolgerung. Bei Parallel-
versuchen trat in Zipfel-Tryptophanwasser bei Paracoli phenolo-
genes, Paratyphus B, anindolischem Proteus die Salkowski-Reak- i
tion ^eutlich auf, dagegen in den entsprechenden Rdhrchen mit
«-Methy 1 try p top hah war keine Reaktion zu erhalten, auch Ehrlich
war absolut negativ. [Zum Beweis, daB keine Hemmungskdrper vor-
handen waren, wurden die bewachsenen Rdhrchen mit C o l i - Bakterien
und Choleravibrionen nachgeimpft; darauf trat die Ehrlichsche Reak¬
tion am ngchsten Tage sehr stark auf, desgleichen die Vanillin* und j
Naphthochinonreaktion (detztere im Destillat)]. Die S a 1 k o w s k i-Reaktion ^
und Nitroprussidnatriurareaktion blieb auch in den Kulturen, sowie im j
Destillat der Kulturen aus. Dieser Befund ware praktisch zu verwerten, \
indem man statt Tryptophans nur a-Methyltryptophan verwendet Man )
wttrde dann bei indolpositiven Bakterien stets nur die Ehrlichsche *
Reaktion bekommen. Eine Salkowskische IndolessigsSurereaktion,
welche Indol vortauschen k6nnte, wflrde dadurch ganz unmdglich
gemacht.

Man muB sich wundern, daB Zipfel selbst nach 6 Wochen keine |
positive Reaktion mit S a 1 k o w s k i bei Typhus- und Paratyphus B*Bazillen ]
gefunden hat. Einige von ihm nebenbei gemachte Angaben deuten j
jedoch darauf hin, daB die Salkowski-Reaktion trotzdem eingetreten
ist. So erwahnt Zipfel, daB in aiteren Peptonkulturen (14 Tage bis
3 Wochen alt) von Bacterium typhi, Paratyphus B, Kapselbazillen,
auf Zusatz von Nitrit Oder Aldehydreagens eine ieichte Rotfarbung anf-
getreten sei. Zweifellos verbirgt sich hinter diesen Angaben die Indol-
essigsaure. DaB sie mit p-Dimethylamidobenzaldehyd-Reagens auftrat,
durfte wohl nur auf den Gehalt an Saure zuruckzuffthren sein, die in
Gemeinschaft mit dem bakteriell gebildeten Nitrit und der Indolessig-
saure die Farbreaktion ergab.

Da friiher jede auch noch so Ieichte Rotfarbung als Indolreaktion
angesprochen wurde, so ist zu verstehen, wie die Angaben iiber Indol-
bildung in der Literatur so widersprechend lauten kdnnen. Alle An¬
gaben, die auf der Nitroso-Indolreaktion beruhen — ganz besonders
scheint dies im Lehmann-Neumann der Fall zu sein — sind, soweit
sie nicht (lurch die positive Ehrlichsche Reaktion bestatigt sind, mit
Vorbehalt aufzunehmen. Leider steht die Salko wskische Beaktion in
vielen Lehrbiichern (Kolle-Hetsch, Heim, Lehmann-Neumann)
noch immer an erster Stelle. Vor Bekanntsein der Ehrlichschen
Reaktion hat die Salko wskische Reaktion viel geleistet, aber heate

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Frieber, Beitrage zur Frage der lodolbiiduag und der Indolreaktionen. 267

kann sie diesen Platz nicht rnehr beanspruchen. Besonders skeptisch
innfi man sein, wend die Angaben der Salko wskischen Reaktion sich
aof altere Kulturrdhrcben bezieben. Vor allern ist fflr eine zu er-
wartende schnelle und gute Indolbildung Bedinguug, daB die Bakterieu
genflgend freies Tryptophan in einem guten N&hrmedium vorfinden.
Beides bietet ihnen die sogenannte „Trypsin-Bouillon u . (N&heres in
der Zusammenfassung.) .

Nunmehr konnen wir der Beantwortung der Frage n&her treten, was
die indolnegativen Bakterien aus dem Tryptophan machen, da sie die
ganze Alaninseitenkette nicht abspalten konnen. Von Berthelot und
Bertrand wurde ein dekarboxylierender Bazillus beschrieben (Bact.
aminophilus intestinalis). Dieser verbraucht nur die CO,-Gruppe
and liefert so Tryptamin (Indoiathylamin), welches auf diese Weise von
den Grenzachwerken gewonnen wird. Dazu bedarf er jedoch der An-
wesenheit von Nitraten im Nahrboden, und nur unter dem EinfluB dieser
Stickstoffquelle lftBt er die NH,-Gruppe intakt. Tryptamin gibt weder
eine Ehrlichsche noch eine Salkowskische Reaktion und kann daber
nicht das Produkt der indolnegativen Bakterien sein. Indolpropion-
saure, die durch einfache Desamidierung entstehen kann, wird gleich-
falls nicht gebildet. Diese S&ure stand mir zwar selbst nicht zur Ver-
fflgnng, doch gibt sie nach Salkowski und Hoppe-Seyler-Thier-
felder nur auf Zusatz von konzentrierter Kaliumnitritlosung und Essig-
saure eine Nitrosoverbindung, die aber nicht rot, sondern gelb gefarbt
ist. Auch Tryptophol (Indol-Aethylalkohol) kommt nicht in Frage,
da es nach F. Ehrlich keine Salkowski-Reaktion gibt Eine ein¬
fache Dekarboxylierung oder Desamidierung ist also ausgeschlossen.
Damit Indblessigs&ure entsteht, welches die bekannte Nitrosoreaktion
gibt, gentigt nicht eine einfache Desamidierung, sondern es muB die
NH,-Gruppe mitsamt dem sie tragenden a-C-Atom, also die CH-NH 2 -
Gruppe austreten:

(C 6 H 6 N) • CH 2 • CH • NHjj • COOH-* (C 8 H 6 N) • CH 2 • COOH.

Das vermeintliche Fehlen der F&higkeit, den Amidstickstoff des
Tryptophans zu verzehren, wie Zipfel kuBert, ist bei den indoluega-
tiven Bakterien also nicht die Ursache der mangelnden Indolbildung.
Denn die Tatsache besteht fQr die in dieser Arbeit genannten Bakterien-
arten und ist fQr andere zu folgern, daB alle Bakterien die Amido-
gruppe des Tryptophans verwerten konnen, nur mit graduellem Uuter-
schied.

Der Grund der Indolbildung der indolpositiven Bakterien ist also
nicht im Verhalten zum Stickstoff der Alaninseitenkette zu suchen,
sondern zu dem nach Austritt des a-C-Atoms ubrig bleibenden alipha-
tischen Rest 1 ).

Liegt die Ursache des verschiedenen Verhaltens der Bakterien tat-
sachlich in ihrer Stellnng zum /?-C-Atom des Alanins, wie wir annehmen

1) Vielleicht Jafit eich diese Eigentumlichkeit mit dem Bau der Zellmembranen
in Zusammenhang bringen, denn es mufl auffallen, wie streng der Faralielismus bzw.
Antagonism ns zwischen Gramfarbbarkeit und Indolbildung durchge-
fuhrt ist. Es sind keine grampositiven Bakterien bekannt, die Indol bilden. Alle in¬
dolpositiven Bakterien sind gramnegativ (Coli commune, Pseudodys-
eoterie, Vibrionen, Huhnercholera, Proteus-Stiimme). Es ware denkbar, duli F.igen-
arten der Membranstruktur, welehe die Gramfarbbarkeit bedingen (kolloidchemischer
Natur, Adsorption) und welehe Indolbildung ausschliefien, auch bei den indolnegativen
Bakterien mitspielen kounten.

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CentralbL f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

mGssen, und ist unsere Annahme richtig, daB die indolpositiven Bak- j
terien den gesamten C des Alanins abspalten kdnnen, wQbrend diese !
Ffthigkeit den indolnegativen Bakterien nur binsichtlich des a-C-Atoms (
zukommt, so ware es denkbar, daB man indolnegative Bakterien nicht
zur vollstandigen Abspaltung der Seitenkette, zur Indolbildung, bringen |
kann, daB aber andererseits die indolpositiven Bakterien gewissennaBen \
temporar indolnegativ werden kdnnten, wenn ibnen auBer Tryptophan i
eine nocb leicbter assimilierbare C : Quelle geboten wird, wenn sie an- '
greifbare Kohiehydrate zur VerfQgung haben. j

Wir haben es nun tatsachlich in der Hand, indolpositiven Bakterien ;
zeitweilig durch Zuckerzusatz und ffir die Dauer des Zusatzes die j
Fabigkeit, Indol zu bilden, zu nehmen. i

t j

< Versuche mit Zuckerzusatz.

1

Da das zugefQgte Kohlebydrat nur die C-Quelle ersetzen kann, !
nicht den Stickstoff, und da alle Bakterien die Amidogruppe des Trypto¬
phans qualitativ anzugreifen befahigt sind, so mQBte ein indolnegatives {
Bakterium trotz Anwesenheit von assimilierbarem Zucker das a-C-Atom j
und die NH,-Gruppe angreifen und Indolessigsaure entstehen lassen. ■
Die C-Quelle des Zuckers mQBte also auf indolnegative Bakterien bis
auf den wachstumsfdrdernden EinfluB ohne Wirkung bleiben.

Andererseits wQrden indolpositive Bakterien, wenn sie infolge !
Zuckeranwesenheit die C-Quelle des Kohlebydrats der C-Quelle des .<
/f-C-Atoms des Alanins vorziehen, nunmehr das /#-C-Atom nicht mehr -j
angreifen und sich wie die indolnegativen Bakterien verhalten: der •
Tryptophanabbau wQrde also nicht mehr bis zum freien Indol gehen,
sondern es ware voraussichtlich Indolessigsaure zu erwarten.

Zwecks experimenteller PrQfung wurden die indolnegativen Bak-
terienarten: Bact. typhi, paratyphi A, B, 2 Stamme Paracoli-
phenologenes, 2 Stamme Proteus anindolicus, sowie die indol¬
positiven Arten: Bact. coli commune. Proteus X19, Vibrio
cholerae in folgende Nahrlbsungen geimpft:

A. Gewdhnliche Nahrbouillon mit 0,03 Proz. Tryptophan und 3 Proz.
Traubenzuckerzusatz.

B. Synth. LOsung: Tryptophan 0,03 Proz., Natriumchlorid 0,5 Proz.,
sek. Kaliumphosphat 0,2 Proz., Magnesiumsulfat 0,02 Proz. und 3 Proz.
Traubenzucker. Es sei ausdrQcklich hervorgehoben, daB Ldsung B
weder Ammonlaktat noch Asparagin enthielt. Die Amidogruppe des
Tryptophans war also die einzige N-Quelle.

Zur Neutralisation der aus Traubenzucker entstehenden Saure, die
das Wachstum hem men kdnnte, erhielten die zu je 50 ccm auf Kolben
abgefQllten NahrlQsungen noch einen Zusatz von 10 Proz. sterilem
kohlensauren Kalk. Da dieser wegen seiner Schwere nicht lange sus-
pendiert bleibt, sondern sich bald am Boden ablagert, so wurden be-
sonders breite Kolben (sogenannte Fernbachkolben) gewahlt. Bei flacher. .
etwa nur 1 cm tiefer Fliissigkeitsschicht ist beim Sfteren UmschQtteln
die Gefahr, daB die Saure durch nicht geniigende Neutralisation schQdigeod
wirken kann, nur gering.

Das Resultat war folgendes:

In Losung A hatten nach 24 Std. die 7 indolnegativen Bakterien
trotz Traubenzuckeranwesenheit Indolessigsaure gebildet. Die Schwefel-

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Frieber, Beitrage zur Frage der Indolbiidung and der Indolreaktionen. 269

sitire-Nitritprobe trat krSftig auf. Die Ehrlichsche Reaktion war
negativ. Die indolpositiven Bakterien P,roteus X19 und Vibrio
choler&e gabeo am n&chsten Tage deutliche Sal kow ski -Reaktion,
aber keine Ehrlichsche Reaktion. Indol war also nicht vorhanden.
An dessen Stelle war nur Indolessigs&ure durch die Salko w ski-Reak¬
tion nachweisbar 1 ).

In Ldsung B war das gleiche der Fall: Trotz Traubenzucker-
anwesenheit bildeten beide Arten, die indolnegativen wie die indolposi-
tiven Bakterien Indolessigs&ure, letztere aber kein Indol. Nach 3 Tagen
war bei den indolnegativen Bakterien die Reaktion noch starker.

Interessant ist es, dal! namentlich der Paratyphus B, durch die
ihm besonders zusagende C-Quelle der Glukose angeregt, auBerordent-
lich stark wuchs und in der vom Kalk abgegossenen Flussigkeit mit
Schwefelsaure und Nitritldsung fast die gleich starke himbecrrote Farb-
reaktion gab, wie der Paracoli-phenologenes-Stamm. Dies ist
ein Zeichen dafttr, daB auch bei Abwesenheit einer anderen N-Quelle
als Tryptophan die Desamidierung vollzogen und bei Anwesenheit des
leicht assimilierbaren Kohlehydrats gefordert wird.

Gleiches Verhalten zeigten die Bakterien in einer synth. Ldsung,
die nur NaCl, K 2 HP0 4 , MgS0 4 , kein Ammonlaktat und kein
Asparagin enthielt und als einzige N-Quelle nur 0,03 Proz. Glyzyl-
Tryptophan sowie 3 Proz. Traubenzucker und 10 Proz. kohlensauren
Kalk aufzuweisen hatte. Nach 24 Std. bildeten die indolpositiven Bak¬
terien Proteus X19, Coli commune, noch kein mit der Ehr-
lichschen Reaktion nachweisbares Indol. Coli commune gab aber
eine sehr starke Indolessigsfiurereaktion (mit Nitrit). Proteus X19
gab die Salko wskische Indolessigs&urereaktion erst nach dem 2. Tage,
sowie auch schon schwach Ehrlichsche Indolreaktion. Das Nahr-
medinm scheint dem Proteus X19 wie dem anindolischen Proteus
nicht sehr zu behagen, letzterer zeigte ebenfalls erst nach 2 mal 24 Std.
positive Salkowskische Reaktion, Das Bact. coli phen. gibt
wie das echte Coli commune nach 24 Std. starke Indolessigs&ure¬
reaktion. Der Paratyphus B bildet am 1. Tage ziemlich stark, nach
2mal 24 Std. fast ebenso stark Indolessigs&ure. Hier macht sich wahr-
scheinlich der doppelte NHj-Gehalt des Dipeptids geltend.

Mit a-Methyltryptophan und Traubenzucker, sowie Kalkzusatz trat
bei Bact. paratyphi B und paracoli-phenelogenes keine Sal'
kowski-Reaktion ein, was den frQheren Darlegungen entspricht. Die
a-Methylindolessigs&ure ist wegen Blockierung des a-C- Atoms des Indol-
kerns nicht nachweisbar.

Zu den bisher mitgeteilten Versuchen wurde nur Glukose heran-
gezogen. Andere Kohlehydrate verhalten sich dem Traubenzucker gleich.
Ezperimentell wurde dieses geprfift mit dem indolpositiven Bact. coli
commune nnd dem indolnegativen B. paracoli phenologenes
(lurch Bebrfltung in Tryptophanldsung mit Zusatz von Maltose, Sac-

1) Bact. coli commune machte bier eine Ausnahme insofern, als weder die
Salkowskische noch die Nitropru^sidnatrium*Reaktion eintraten, p-Dimethylaraido-
benzaldehyd jedoch eine Rotfarbung zeigte, die durch /msatz von Nitrit tiefblau wurde.
Der Verdacht lenkte sich auf SkatQl. £)er blaue Farbstoff war aber nicht mit Chloro¬
form, Aether, Amylalkohol, Toluol, Benzol auszuschiitteln Indol und Bkatol miiKfien
also auRgertchloesen werden. Eine weitere Untersuchung konnte aus aufieren Oriinden
oicht vorgenommen werden.

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270

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

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charose, Laktose, Lflvulose und Mannit, jedoch obne Ammonlaktat und
Asparagin. Das Resultat war lolgendes: Mannit, Maltose, Lavulose
hindern Bact. coli commune innerhalb 24 Std. an der Indolbilduog.
Es wird nur Indolessigsaure produziert, wie die negative Ehrlichsche
Reaktion und positive Salkow ski-Reaktion beweisen. Nach 2mal
24 Std. kann in Mannit- und Maltoselflsung Indol mittels Ehrlichschen
Reagens nachgewiesen werden. Nach Aufzehrung des Maltose- und
Mannitkohlenstoffs baut nun Coli commune das Alanin des Trypto¬
phans bis zum Indol ab. Bei Saccharose liegt der Grund fflr die so-
fortige Indolbilduog darin, daB Bact. coli commune den Rohrzucker
als C-Quelle nicht verwenden kann. Das indolnegative Bact. para-
coli phenolog. bildete in alien Rohrchen seine Indolessigsaure aus
dem Tryptophan ohne Rflcksicht auf die Kohlehydratzus&tze. Die
Kohlehydrate ermflglichen ihm wie dem echten Coli commune bei
der N-tlrmeren Kost tiberhaupt erst das krSftige Wachstum.

Diese Befunde stehen im Widerspruch zu der Ansicht von
A. Fischer, der als Ursache der Hemmung der Indolbildung durch
Zuckerarten, speziell filr Glukose, eine das proteolytische Enzym des
Bact. coli commune inaktivierende Wirkung annimmt.

Bekanntlich geben nur Kulturen des Choleravibrios und andere
indolpositiver Vibrionen die sogenannte Cholerarotreaktion auf Zusatz
von S&ure, d. h. sie bilderi gleichzeitig Indol und Nitrit. Bei Bact.
coli comm, bekommt mau die Cholerarotreaktion niemals. Setzt man
gleichzeitig Nitrat und Tryptophan zu, so wird Indol gebildet, sowie das
Nitrat zu Nitrit und weiter zu Ammoniak reduziert Gibt man viel
Nitrat zu, so kann man auf Zusatz chemisch reiner Indollosung und
SchwefelsSure eine schwache Rotfarbung (Nitrosoindol) bekommen als
Beweis fflr vorhandenes Nitrit, doch ist seine Menge nur minimal. Die
Nitritstufe wird sehr schnell durchlaufen. Andererseits schfltzt Nitrat
das Tryptophan, so daB, wenn der Nachweis des Nitrits gelingt, sich
noch kein bakterielles Indol vorfindet, dagegen, wenn Indol nachzuweisen
ist, das Nitrit verschwunden ist. In einer Lflsung von, 0,03 Tryptophan
in physiologischer Kochsalzlosung war jedoch die interessante Feststellung
zu machen, daB die Ldsung mit Bact. coli .comm, nach 5-tflgiger Be-
brfltung sowohl mit Ehrlichs Reagens eine Starke Indolreaktion er-
gab, andererseits mit nitritfreier Schwefelsflure allein eine Rotfarbung.
also Cholerarotreaktion, zeigte. Hier hat also das Bact. coli aus dem
Tryptophan sein ProtoplasmaeiweiB gebildet und die C-Kette des Trypto¬
phans ganz abgebaut, andererseits aus der Amidogruppe Nitrit pro¬
duziert, welches unter dem durftigen N-Gehalt des Mediums nicht so
schnell verschwinden konnte.

Ein ahnlicher interessanter Befund wurde bei Tryptamin gemacht.
Tryptamin (Indolathylamin) in einer Lflsung von 0,03 Proz'. (mit 0,5 Proz.
Kochsalz, 0,2 Proz. sek. Kaliumphosphat, 0,02 Proz. Magnesiumsulfat
und 3 Proz. Traubenzucker, sowie Kalk ohne weitere N-Quelle) kann
indolpositiven Bakterien nicht als Proindol dienen; doch scheint Bact
coli commune sowie das indolnegative Bact. coli phenologenes
unter dem EinfluB des Kohlehydrats die Stickstoffqueile verwerten zn
konnen. Nach 2 Tagen entsteht auf Zusatz von Schwefels&ure Oder
Salzsaure (nitritfrei! und ohne weiteren Nitritzusatz) eine deutliche Rot¬
farbung, die aber nicht in Amylalkohol, Aether, Benzol, Chloroform,
Toluol ausschflttelbar ist, also weder Indol, Skatol noch Indolessigsfiore

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Frieber, Beitrage zur Frage der Indolbildung und der Iodolreaktionen. 271

gein kanD. Welcher Kfirper hier gebildet wurde, konnte aus SuBeren
Grfinden nicht ermittelt werden. Aber jedenfalls ermoglichte das Kohle-
hydrat den beiden Bakterien, die N Quelle des Tryptamins anzugreifen
und anch Nitrit zu bilden, denn der rote Korper ist zweifellos ein
Nitrosoderivat.

BezQglich der die Indolbildung hemmenden Wirkung der Kohle-
hydrate sei ausdrticklich entgegen der von W. Kruse u. a. vertretenen
Ansicht betont, daB diese nicht auf S&uresch&digung zurflckzuffihren ist.
Auch dieses wurde bereits in dem oben erwahnten Artikel von M. Neisser
und W. Frieber, „Ueber Indol- und Phenolbildung bei Bakterien u
(Handb. von Kraus-Uhlenhuth) hervorgehoben. Es sei das Resultat
hier kurz wiederholt: Impft man zwei indolpositive Bakterien A, B (von
denen B auch indolnegativ sein kann) gleichzeitig in „Trypsinbouillon“
mit Zusatz von 2 Zuckerarten C, D, so bildet da3 Bacterium A,
welches den Zucker C nicht angreift, iDdol, unabh&ngig von Bacterium B,
welches aus dem Zucker C Oder D S&ure produziert, z. B. „Trypsin-
bouillon u (Herstellung siehe Zusamraeniassung) ohne Calciumkarbonat-
zusatz

1) mit 2 Proz. Saccharose: A = Bact. coli commune; Reaktion
schwach alkalisch (da Saccharose nicht angegriffen wird). Indol = -j-.
B = V ibrio cholerae. Reaktion schwach sauer. Indol = 0. A + B
in Symbiose: Reaktion schwach sauer; Indol = + ;

2) mit 2Proz. Laktose: A = Vibrio cholerae. Reaktion schwach
alkalisch. Indol =+. B = Bact. coli commune. Reaktion sauer,
Indol = 0. A + B in Symbiose: Reaktion sauer; Indol = 0;

3) mit 2 Proz. Mannit: A = Proteus X19; Reaktion schwach al¬
kalisch. B = Bact. coli commune. Reaktion sauer; Indol = 0.
A + B in Symbiose: Reaktion sauer; Indol = +.

Diese Beispiele lassen sich vielfach variieren, doch immer mit dera-
selben Ergebnis, daB die das Kohlehydrat nicht angreifenden Bakterien
(A) ohne ROcksicht auf die S&ureproduktion von Bact. B Indol bilden.

Die Frage, ob auch ohne Anwesenheit von assimilierbaren Kohle-
hydraten der Abbau des Tryptophans durch indolpositive Bakterien fiber
Indolessigsaure ffihrt, kann mangels einer Reaktion, die bei Anwesenheit
von Indol nur Indolessigs&ure nachweisen lSfit, sowie wegen der Schwierig-
keit, Tryptophan und Indolessigsfiure in einer Kulturflfissigkeit, die noch
weiterhin als NShrboden dienen soli, quantitativ zu trennen, nicht ent-
schieden werden. Die Tatsache aber, daB chemisch reine Indolessig¬
s&ure in Ermangelung einer den Angriff lohnenden N-Quelle indolposi-
tiven Bakterien nicht als Proindol dienen kann, ist kein gfiltiger Gegen-
beweis. „In statu nascendi u dfirfte sich die Indolessigs&ure doch anders
verhalten als in chemisch reiner Form.

Zusammenfassung.

Die in der Literatur geauBerte Ansicht, daB die indolnegativen Bak¬
terien entweder das Tryptophan intakt zum Zellaufbau verwenden kfinnten
oder sogar Indol bilden, welches, da es etwa „in statu nascendi 14 sofort
zum EiweiBaufbau diene, als Indol chemisch nicht nachzuweisen sei
(Herzfeld-Klinger), ist nicht haltbar, desgleichen die Meinung, daB
die indolnegativen Bakterien das Tryptophan deswegen nicht angreifen

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I

272 Centralbl. i. Bakt. etc. I. Abt. Originate, fid. 87. Heft 4. ]

sollten, weil ihnen die Stickstoffquelle des Alanins (a-Amidopropions&ure)
nicht zusage (Zipfel).

In vorstehender Arbeit ist bewiesen, dafi alle indolnegativen Bak-
terien, soweit sie in den Kreis der Untersnchungen gezogen warden
(Bact. typhi, paratyphi A, paratyphi B, enteritidis, dysen-
teriae (Shiga-Kruse), pneumoniae (Friedl&nder), anindolische ,
Proteus (Zopfii) und paracoli-St&mme (phenologenes, muta-
bile (Neisser-Massini), sowie Pest-, Rotz- und Diphtheriebazillen,
Staphylococcus pyog. aur., Sarcine, Micrococcus bicolor, ;
Bac. mycoides, B. ochraceum und vitulinum), den Amidstick-
stoff des Tryptophans angreifen und dabei ein Produkt (aller Wahr-
scheinlichkeit nach Indolessigs&ure) bilden, welches stets mittels der
Salkowskischen Reaktion als roter Farbkdrper nachgewiesen werden ,
kann, dem aber keine Reaktion mit Ehrlichschem Aldehyd, Vanillin, ;
Naphthochinon und Nitroprussidnatrium zukommt.

2) Der bakterielle Abbau des Tryptophans zum Indol durch die
indolpositiven Bakterien vollzieht sich wohl in 2 Etappen.

Die I. Etappe geht vom Tryptophan unter Abspaltung des a-C-Atoms
mitsamt der Amidogruppe (also des —CH-NH,-Restes) bis zur Indol¬
essigs&ure (positive Salkowski-Reaktion).

Die JI. Etappe verl&uft von der Indolessigs&ure bis zum Indol (posi¬
tive Ehrlichsche Reaktion).

3) Das Endglied der I. Etappe kann von alien Bakterien (indol- j

negativen und indolpositiven) erreicht werden. Die indolpositiven Bak- j
terien machen hier jedoch nicht Halt, sondern durchlaufen auch die j
II. Stufe. \

Die II. Etappe kann nur von indolpositiven Bakterien im An-
schluB an die I. Etappe zurflekgelegt werden. Dies gilt aber nur fQr '<
den Abbau des Tryptophans. Reine Indolessigs&ure kann nicht als Pro-
indol dienen. i

Das gemeinsame Merkmal der indolpositiven und der in dw
Arbeit genannten indolnegativen Bakterien ist das, daB sie die NHj-
Gruppe des Tryptophans als N-Quelle verwenden kdnnen (allerdings
entsprechend ihren N&hrbodenansprOchen mit quantitativen Unterschieden)
und daB dieser Angriff, bei dem auch das a-C-Atom verschwindet, zor
positiven Salko wski-Reaktion fQhrt.

Von den indolnegativen Bakterien macht auch der Bac. amino-
philus intestinalis insofern keine Ausnahme, als er nach Berthe-
lot und Bertrand nur bei Anwesenheit von Nitraten dekarboxylieren
und Indol&thylamin bilden kann.

4) Der durchgreifende Unterschied zwischen indolpositiven
und indolnegativen Bakterien liegt in ihrem Verhalten zum Kohlen*
stoff und auBert sich so, daB die indolpositiven Bakterien auch d‘.e

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Frieber, Beitrage zur Frage der Indolbildung and der Indolreaitionen. 273

i C-Quelle der II. Etappe (das /?-C-Atom), also die des ganzen Alanins
I abspalten kdoneo, w&hrend die indolnegativen Bakterien nur den Kohlen-
' stofif des in der I. Etappe abspaltbaren a-C*Atoms des CH<NH S -Restes
verbraachen nnd hernach keiuen assimilierbaren Kohlenstoff mehr vor-
tinden.

Das a-C-Atom des Alanins im Tryptophanmolekfll, welches durch
lie Aroidogmppe asymmetrisch ist, unterscheidet sich also deotlicb von
■ lem 0-C-Atom.

\ 5) Die Behauptung, dad bei den indolpositiven Bakterien nicht etwa

;in Ferment tfltig ist, welches, wie man sich leicht vorstellen kdnnte,
nnfach das Tryptophanmolekfll zwischen Indolkern und Alaninseitenkette
paltet, sondern daB tatsSchlich ein in dem Verbalten zum a- und /ff-C
es Alanins begrflndeter etappenweiser Abbau erfolgt, findet in folgendem
hren Beweis: Indolpositive Bakterien (Bact. coli commune, Vibrio
holerae und Proteus X19), die bei ihrem Angriff normalerweise die
1L Etappe durchlaufen, kflnnen nach Belieben durch Zugabe einer leichter
ssimilierbaren C-Quelle in Form von Kohlehydraten (Traubenzucker,
Maltose, Laktose, Saccharose, L&vulose, Mannit) dazu gebracht werden,
■aB sie die II. Stufe bis zur positiven Ehrlichschen Reaktion nicht mehr
irflcklegen, sondern bei der hiologischen Endreaktion der I. Etappe, der
'alkowskisehen Reaktion Halt machen. Sie bilden erst dann Indol
(positive Ehrlichsche Reaktion), wenn die C-Quelle des Kohlehydrats
sufgezehrt ist Oder sich im Gleichgewichtszustande mit der C-Quelle
Her II. Etappe befindet. Betont sei, daB Kohlehydrate, die von den
Bakterien nicht assimiliert werden (Laktose von Vibrio cholerae und
Proteus X19, so wie Saccharose von Bact. coli commune), die
C-Quelle der II. Etappe nicht ersetzen, also die Indolbildung nicht be-
eintrfichtigen konnen.

i Die Annahme einer die proteolytischen Enzyme der indolpositiven
Bakterien hemmenden Wirkung der Kohlehydrate, speziell der Glukose,
Wie sie A. Fischer macht, ist hiernach nicht nur unnfltig, sondern
taeines Erachtens auch unbegrflndet.

Die indolnegativen Bakterien der I. Etappe sind durch Trauben-
i.ucker sowie durch die Qbrigen Kohlehydrate dagegen nicht beeinfluBbar.
Anindolische Proteus-, Paracoli-, Typhus-, Paratyphus A- und B-
ptfimme bilden unbekflmmert urn Traubenzucker etc.-Anwesenheit Indol-
bsigsflure, durchlaufen also in diesem Falle die I. Etappe. Sie werden
togar durch Traubenzucker deutlich in ihrem Wachstum gefOrdert, was
hesonders bei Paratyphus B in den synthetischen Lflsungen (weniger in
Bouillon) in einer st&rkeren Salkowski-Reaktion zum Ausdruck
kommt

6) Der Abbau der I. Etappe beruht eben auf dem Verbalten der
Bakterien zur N-Quelle des Tryptophans als Aminos&ure. Seine Amido-

Kntc Xbt Ori*. Bd. 87 . Heft 4. 18

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274

Centr&lbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

gruppe ist fflr Bakterien prinzipiell zuganglich und kann nicht durch
andere Aminos&uren, wie Asparagin (Amid der Amidobernsteins&ure).
ersetzt warden, was vielleich darauf schliefien lfLBt, daB der Indolkern
eine bis jetzt noch unbekannte Bedeutung fur den Bakterienleib haben
konnte.

7) Der EinfluB des Kchlebydrats auf den Abban in der II. Etappe
kann indirekt zur Feststellung dienen, ob ein indolpositives Bakterium
eine bestimmte Kohlenstoffquelle(Kohlehydrat, Alkohol) assimilieren konne.

8) Die Frage, ob unter alien Qmst&nden der Abbau des Tryptophans
zum Indol fiber IndolessigsSure geht, mud wegen zu groBer experi-
menteller Schwierigkeiten vorl&ufig offen bleiben und kann nicht einfach
auf Grund der Tatsache, daB chemisch reine IndolessigsSure nicht als
Proindol dienen kann, verneint werden.

9) Auffallend ist es, daB zur Indolbildung nor gramnegative
Bakterien beffihigt sind und daB bis jetzt kein gram positives
Bakterium bekannt ist, welches fiber die I. Etappe hinaus bis zum freien
Indol, zur positiven Ehrlichschen Reaktion filhrt.

10) Der Abbau des Dipeptids Glyzyltryptophan verhSlt sich in alien
Stficken dem Tryptophan gleich. Es wird in I. Etappe von indolnegativen
Bakterien (sowie von indolpositiven bei Zuckeranwesenheit) zur positiven
Salkowski-Reaktion, in II. Etappe von den indolpositiven Bakterien
bis zur positiven Ehrlichschen Reaktion abgebaut. Eine geringe
Wachtumsverst&rkung in der sonst N-freien synthetischen LOsung (Para-
typhus B) ist auf die doppelte NH,-Gruppe zurOckzuffihren.

11) BezQglich der Indolnachweismethoden ist folgendes zu sagen:
Von den verschiedenen Reaktionen (Ehrlich-, Vanillin-,Naphthochinon-,
Nitroprussidnatrium- und Salkowski-Reaktion) ist, wie die Prfifung
an verschiedenen chemisch reinen Indolderivaten zeigt, die Nitroprnssid-
natriumreaktion am w&hlerischsten. Sie reagiert nur mit dem freien
Indolkern. Wo der Ehrlichsche Aldehyd zu kostspielig sein sollte.
wird meines Erachtens die Nitroprussidnatriumreaktion mit ihrem tief-
blauen Indolfarbkdrper vorteilhaft als Indolreaktion herangezogen werdei
kOnnen. Die Ehrlichsche, Vanillin- und Naphthochinon-Reaktion ver-
langen nur ein freies /?-C-Atom des Indolkerns; a-Methylindol reagiert
wie freies Indol. Die Salkowskische Reaktion bedarf nur eines freiei
a-C-Atoms des Kerns; dann gibt sie sowohl mit freiem Indol wie mit
/?-IndolessigsSure und /?-Iadolbrenztraubens£ure FarbkSrper, die wi«
Nitrosoindol in Amylalkohol flbergehen.

12) In der Hauptsache sind bisher in der bakteriologischen Literatur
zum Nachweis von bakteriellem Indol die beiden Reaktionen nach Paul
Ehrlich und Salkowski verwendet worden. Von diesen beiden ist
ntfr die Ehrlichsche Reaktion eine spczlfische Indolreaktion.
(Zweckm&Bigste Anwendung: KulturflQssigkeit versetzen mit5— lOTropfeo

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Frieber, Beitrage zur Frage der Indolbildung und der Indolreaktionen. 275

Iadolreagens [5 g p Dimethylamidobenzaldehyd, gelSst in 50 ccm 96-proz.
Alkohol und 50 ccm konz. Salzsaure]; in Glasstopfenflaschen zu 10 bis
20 ccm abgefQllt, baltbar.) Als zweckmSBigste KulturflOssigkeit, die sich
seit vielen Jahren im Hygienischen Institut Frankfurt a. M. bew&hrt hat,
ist „Trypsinbouillon u zu empfehlen. [I 1 gewfihnliche Bouillon, ent-
baltend 10 g Pepton, 5 g Liebigs Fleischextrakt, 5 g Kochsalz mit
einer AlkalitSt von 7 ccm n-Sodaldsung, wird 40° C warm mit 0,2 g
Trypsin-Grflbler in Glasstopfenflasche mit Chloroform und Toluolzusatz
24—48 Std. im Brutschrank angedaut und durch angefeuchtetes Falten-
filter gegeben (Stammlosung). Zum Gebrauch 1 Teil Stammlfisung mit
3 Teilen physiol. Kochsalzlfisung verdflnnen („Trypsinbouillon tt ). Steri-
lisieren.] Cf. Frieber.

Ehrlichs Indolragens gibt in „Trypsin-Bouillon tt Enltnren bei An-
wesenheit von Indol eine kirschrote F&rbnng, anderenfalls bleibt die
FlQssigkeit absolut farblos.

12) Die Salkowski-Reaktion ist keine echte Indol-,
son d e r n hinsichtlich des Tryptophanabbaus einelndolessigs&ure-
reaktion. Der nach Zusatz von Nitrit und Schwefels&ure in Bak-
terienkulturen auftretende rote Farbton darf daher nicht auf Indol be-
zogen werden. Nur wo gleichzeitig die Ehrlichsche Reaktion Oder
eine andere Indolreaktion positiv ist (jedoch niemals bei negativer
Ehrlich-Reaktion!), darf die Salkowskische Reaktion als fflr Indol
beweisend angesprochen werden.

Die Salkowskische Reaktion verdient nicht die ihr in den ver-
schiedenen bakteriologischen Lehrbdchern angewiesene 1. Stelle unter
den Indolreaktionen.

Die Tatsache, daB die Salkowskische Reaktion noch immer als
,Indol u -Reaktion gilt, hat nnheilvolle Verwirrung in der Bewertung der
Angaben fiber Indolbildung zur Folge gehabt (indolpositive Typhus-
bazillenl) und hat die echte Indolreaktion, deren Wert als Differen-
ziernngsmerkmal dem der anderen Methoden (SSure- und Gasbildung,
Verhalten zur Gramfhrbung) gleich zu erachten ist, in schlechtes An-
6 ehen gebracht und bis heute verhindert, daB dem Nachweis des Indols
sis biologischer Endreaktion die gebfihrende Stelle eingerdumt wurde.

13) Besonders sei im Hinblick auf dieim Lehmann-Neumann
(Anfl. 1920) fiber positive Indolbildung bei Pest-, Rotz- und Diphtnerie-
bazillen, Staphylokokken u. a. gemachten Angaben hier hervorgehoben:
Die Bakterien der Pest, der Diphtherie, des Rotzes, der
Pneumonie, sowie Staphylokokken und Sarcine sind keine
Indolbildner. Wie in vorliegender Arbeit ermittelt wurde, geben
diese Bakterien unter keinen Umstfinden eine positive Indolreaktion, nur
die Salkowskische Reaktion tritt ein. Es wurden ferner auch die
von Lehmann-Neumann als indolpositiv bezeichneten nichtpatho-

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276

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 87. Heft 4.

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genen Arten (Bact. Zopfii, vitulinum, ochraceum, Micrococe.
bicolor) einer PrOfung unterzogen und ebenfalls gezeigt, daB ihre
positive Salkowski-Reaktion nicbt auf echtem Indol, sondern aof
IndolessigsSure beruht.

Auch die weiterhin in den Kreis der Betrachtnng gezogenen Bak-
terien des Typhus, Paratyphus A, Paratyphus B (4 St&mme), Enteritis,
Ruhr (Shiga-Krnse), 3paracoli, phenologenes (Rhein), muta-
bile (Neisser-Massini) und 10 andere anindolische Paracoli-
Stamrae, 5 anindolische Proteus-St&mme, sowie Bac. mycoideg)
ergeben ebenfalls positive Salkowski-Reaktion bei absolut negativer
Ehrlichscher Reaktion.

Hinsichtlich der von Lehmann-Neumann gemachten Angaben
fiber Indolbildnng bei Bact. ochraceum, fulvum, lateritium,
violaceum, syncyaneum, cremoides, erythrogenes, lactis
viscosum, die ich nicht nachprtlfen konnte, kann allein auf Grnnd der
Tatsache, daB diese Bakterienarten als grampositiv beschrieben sind, mit
groBer Wahrscheinlichkeit gesagt werden, daB sie keine echten Indol-
bildner sein werden; es kann auch hier meines Erachtens nur eine falsche
Deutung positiver Salko wski - Reaktionen vorliegen. Ffir Bact
ochraceum sowie Bact. Zopfii (von Kr&l bezogen, aber far gram-
negativ befunden) konnte dies bewiesen werden.

Da die Salkowskische Reaktion somit alien Bakterienarten zuzn-
kommen scheint, so hat sie qualitativ keine diagnostische Bedeutung.
Auch zur quantitativen Differenzierung erscheint sie belanglos. Als
echte Indolreaktion kommt sie nicht mehr in Frage. Hier mull sie der
spezifischen und schdneren Reaktion nach Paul Ehrlich weichen.

Analoges Verhalten werden Qbrigens die Bakterien auch dem Tyrosin
und Histidin gegenOber zeigen; nur fehlen hier noch die entsprechendeo
Farbreaktionen auf den Zwischenk5rper, sowie bei Histidin auch auf das
Endprodukt des bakteriellen Abbaus. Bezflglich des Tyrosinabbans s«
auf die vom Verf. angewendete Phenolreaktion mittels p-Amidophenols
hingewiesen.

Iiiteratnr.

Bach, Vergleichende Untersuchungen fiber Proteus-Stamme etc. (Centralbl f.
Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 85. 1921. 8. 305.) — Bertheiot, Sur l’emploi de milieux
chimiquement d£fmis k base de tryptophane. (Compt rend. 8oc. Biol. T. 72. 1912. p. 505;
Compt rend. Acad. Scienc. T. 24./7. 1911.) — Ders., Recherchee sur le Proteus vul¬
garis consid6r4 coname producteur de 1’indol. (Compt rend. Acad. Scienc. T. 156k
1913. p. t>U.) — Ders., Kecherches sur quelques caractferes sp4cifiques du Protem
vulgaris. (Compt. rend. Soc. Biol. T. 74. 1913. p. 575.) — Bertheiot et Bertrand.
Sur quelques propri£t6s biochimiques du Bacillus aminophilus intestinalis. (Compt
rend. Acad- 8cienc. T. 154. 1912. p. 1826.) — Boh me, Die Anwendung der Ehrlich*
schen Indolreaktion fiir bakteriologische Zwecke. (Centralbl. f. Bakt. Abt I. Orig. Bd. 40.
1906. 8. 129.) — Ehrlich, Felix, Berl. Ber. d. Deutsch. Chem. Ges. Bd. 45. 1912.
S. 886. — Fischer, A., Hemmung der Indolbildung bei Bact coli in Kulturen mi
Zuckerzusatz. (Biochera. Zeitschr. Bd. 70. 1915. 8. 105.) — Frieber, Zura Naehireis
von Phenol in Bakterien kulturen. (Centralbl. f. Bakt Abt I. Orig. Bd. 86. 1921. S. 58)
— Ders., Ueber feelbstbereitung von bakteriologischer Peptonlbsung und fiber Trypsin-

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Kalkbrenner, Beitrage zur Biologie des Influenzabazillus.

277

bouillon znr Prufung anf indolbildende Bakterien. (Ebenda. Abt. I. Orig. Bd. 86. 1921.
8.424.) — de Graaf, Untersuchung iiber Indolbildung dutch Bact. coli commune.
(Ebenda. Abt. I. Orig. Bd. 49. 1909. 8. 175.) — Groot, Kecherches sur le Bact. proteua
auindol. (Ann. de rlnst. Pasteur. T. 32. 1918. p. 299; ref. Centralbl. f. Bakt. Abt. J.
Ref. Bd. 70. 1920. 8.85.) — Herter, On indolacetic acid. (Journ. Biol. Chem. Vol.4.
1 ( ,< 08 . p. 2.) — Herter and Ten Broeck, A biochemical study of Proteus vulgaris
Hauser. (Ibid. Vol. 9. 1911. p. 491.) — Herzfeld u. Klinger, Quantitative Unter-
suchungen iiber den Indoi- und Tryptophanumsatz bei Bakterien. (Centralbl. f Bakt.
Abt. 1. Orig. Bd. 76 1915. 8. 1.) — Hopkins and Cole, A contribution to the che¬
mistry of Proteids. A preliminary study of a hitherto undescribed product of tryptic
digestion. (Journ. of Physiol. Vol. 27. 1901. p. 2.) — Dies., The constitution of Trypto¬
phane and the action of Bacteria upon it. (Ibid. Vol. 29. 1903. p. 451) — Hoppe-
beyler-Thier felder, Handb. d. physiol, u. pat hoi. chem. Analyse. 8. Aufl. Berlin
[Hirschwald) 1909. — Jaft6, Variationen in der Typhus-Coli Gruppe. (Arch. f. Hyg.
fad. 76. 1912. 8. 145.) — Kitasato, Die negative lndolreaktion der Typhusbazillen
im Gegensatz zu anderen Bazillenarten. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. 7. 1889. 8. 515.) —
Kruse, Allgemeine Alikrobiologic. Leipzig 1910. 8. 511. — van Loghem, Bact.
proteus anindologenes bei gesunden und kranken 8auglingen. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Orig. Bd. 82. 1919. 8.449.)— Neisser u. Frieber, Indoi- und Phenolbildung durch
Bakterien. (Mikrolog. Handbuch von Kraus-U hlenhuth. Urban-8chwarzenberg.
Noch nicht erschienen.) — Palmirski u. Orlowski, Ueber die lndolreaktion bei
Diphtheriebouillon-Kulturen. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 17. 1895. 8. 358.)
— Pringeheim, E., Zur Verbilligung und Verscharfung der lndolreaktion. (Ebenda.
Abt I. Orig. Bd 82. 1918. p. 318) — Salkowski, Zur Kenntnis der Eiweififaulnis.
Diehkatolkarbonsaure nach mit H. 8a lko wski-Munster i. W. angestellten Versuchen.
(Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. 9. 1885. 8. 8.) — Sasaki, Ueber eine neue empfind-
liihe Skatolreaktion. (Biochem. Zeitschr. Bd. 23. 1910. 8. 402.) — Steensma, Ueber
den Nachweis von Indoi in Baktenenkulturen. (Centralbl. f. Bakt. Abt I. Orig. Bd. 41.
19(6. 8. 295.) — Zipfel, Zur Kenntnis der lndolreaktion. (Ebenda. Abt. I. Orig. Bd. 64.
1912. 8. 65.) — Der8., Weitere Beitrage zur Kenntnis der lndolreaktion. (Ebenda. Abt. I.
Orig. Bd. 67. 1913. 8. 572.)

Naehdruck verboten.

Beitrage zur Biologie des Mueuzabazillus.

[Aus der Untersuehungsabteilung (Leiter: Prof. Dr. Prausnitz) des
Hjgienischen Instituts der UDiversit&t Breslau, Direktor: Geh. Med.-Rat

Prof. Dr. Pfeiffer).]

Von Dr. Kalkbrenner, Assistent am Augustahospital in Breslau.

Schon 1892 wurde durch Pfeiffer das Hamoglobin als der fur die Influenza-
b&zillen wesentliche Nahrbodenzusatz ermittelt und darauf hingewiesen, dafi wahrschein-
Iich das Eisen der wichtigste Bestandteil fur das Gedeihen der I.*B. sei. Neuerdings
stellte Olsen in Erweiterung friiherer Arbeiten von Ghon und v. Preyss fest, dafi I.-B.
anf Hamatin-, Hamin-, und Hamatoporphyrinagar nicht wachsen, dagegen auf Methamo-
elobinagar sich ebensogut entwickeln wie auf Osybamoglobinagar. Er suchie die das
Wachstum der I.-B. begiinstigenden 8ub*tanzen in Zusammenhang zu bringen mit
der katalytischen Funktion und halt den Eisenkern des Molekiils fur den zum Wachs-
tum der LB, wichtigen Bestandteil des Hamoglobins.

Eine Keihe von Untersuchern (Huber, Fichtner, A. Cantani jun., Nast-
jukoff, Capaldi, Kitasato, Canon un d Chan temesse, Richter) hat sich
bemuht, I-B. auf kahiboden zu ziicbten, in dcnen das Hamoglobin durch andere
Oenvate des Tier- ui d Pllanzenkorpers oder durch chemisch cbarakterisieite Stoffe
ersetzt wurde. Die Deutung dieser Versuchsergebnisse wird allerdings erschvsert durch
folgende Erwagungen:

1) lo einem Teil der Versuche ist es sehr zweifelhaft, ob mit ecbten l.-B. ge-
vbdtet wurde. 2) Ein Teil der Nahrbodenzusatze, vor aliem aber das Fleisch wasser

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278

Centralbl. I. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 4.

eelbet, enthalten von vornherein geringe Hiimoglobinraengen, die fur da9 Gedeihen der
I.-B. nicht bedeutungslos Bein dtirfien. 3) Endlich wind die I.-B., wie zuer-t tod
Grassberger fo-tgestellt, dann eingehend von Cantani, Lueraaen, Ghou uod
v. Preyas, Neiaaer, Wolff unteraucht wurde, in MUchkuliur niit verachioienei
Baktericn (Diphtherie-Baz., auch Luftkokken) weit weniger anapruchavoll uud kdiioen
dann zuweilen auch auf gewohnlichen blutfreicn Nahrboden wachaen.

Daher besteht in der Beurteilung vieler dieser Versuche eine ge-
wisse Unsicherheit. Ferner schien die Frage nach dem wirksamen Be-
standteil des Hamoglobins ebenfalls einer Nachpriifung wert. AufVer-
anlassuug von Herrn Geh. Med.-Rat Prof. Dr. Pfeiffer, dem ich fQrdie
Anregung zu dieser Arbeit und fiir seine vielfachen Ratschl&ge bei deren
Ausfiihrung auch hier meinen ergebensten Dank ausspreche, habe ich ;
die hier aufgeworfenen Fragen bearbeitet.

In einer grofien Reihe von Vorversuchen habe ich die Ergebnisse
von Ghon und v. Preyss und von Olsen bestatigt gefunden, wonach 1
I.-B. auf Hamoglobinagar gu f , auf Methamoglobinagar fast ebenso gut
gedeihen, dagegen auf Hamin-, Hamatin-, und Hamatoporphyrinagar }
nicht wachsen. {

Ferner fand ich die Angaben derselben Forscher bestatigt, wonach j
I.-B. in Mischkultur mit geeigneten Bakterien (Streptokokken, Staphylo- j
kokken) noch auf Hamin- und Hamatinagar, aber nicht auf Hamato- j
porphyrinagar zur Entwicklung kommen. Die Beeinflussungszone der j
Begleitbakterien auf das VVachstum der I.-B. erstreckte sich auf der j
Oberfiache der mit dem Bakteriengemisch beimpften Agarplatte bis in
einer Entfernung von 3 cm.

Diese Resultate hatte seinerzeit Olsen so gedeutet, daB die •
fSrdernde Wirkung des Blutfarbstoffs auf das Wachstum der Influenza-
bazillen mit dem Eisen in Zusammenhang stande. Dieser SchlnS :
scheint allerdings nicht ohne weiteres gerechtfertigt zu sein, da dae '
Hamatoporphynn nicht nur kein Eisen, sondern auch kein Eiweifi mehr
enthalt; vielleicht ist also fur seine Unwirksamkeit der Mangel an Ei* ,
weiB verantwortlich zu machen. HierfQr scheint die Tatsache
zu sprechen, daB Influenzabazillen auf vollstandig blut-
farbstofffreien N ahrboden wachsen kdnnen, wenn mange- •
eignete Bakterien hinzufiigt.

Luerssen hatte bereits bei Zusatz gewisser anderer Bakterien-
arten ein VVachstum der Influenzabazillen auf gewdhnlichem Fleisch-
wassernahragar beobachtet. Immerhin war mit der MSglichkeit zn
rechnen, dall der zu diesen Versuchen verwendete Fleischwasseragar
noch winzige Spuren von Iiamoglobin enthalten konnte. Solclie Spuren
wOrden nicht ausreichen, urn die I.-B. allein zum Wachtum zu bringen;
sie konnten aber vielleicht in Geineinschaft mit den Leibessubstanzen
der Begleitbakterien hinreichen, um ihr VVachstum in Gang zu bringen.
Diese MSglichkeit muBte ausgeschlossen werden. Daher wurden die nun
zu beschreibenden Versuche gleichzeitig auf l l / 2 -proz. Fleischwasseragar
und auf einem 1 Proz. Nutrose, 1 Proz. Pepton Witte, 0,5Proz.
NaCl enthaltenden l‘/ 2 *proz. Wasseragar ausgefilhrt. Bei
den orientierenden Versuchen dienten als Begleitbakterien Rosa-Hefe,
Sarcina lutea, Staphylococcus albus undaureus, Strepto¬
coccus longus, Micrococcus catarrhalis, Meningococcus,

B. prodigiosus, B. violaceus, B. pyocyaneus,B. fluorescens
liquefaciens und non liquefaciens, FriedlUnders Bazillus,
Typhus-, Paratyphus B-, Shiga-, Flexner-, Y-, Coli-, Xld-Bazillen,

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Kalkbrenner, Beitrage zur Biologie des Influenzabazillus.

279

B. acidi lactici, Diphtheriebazillen (frisch aus dem Kbrper herausge-
zfichtet), Milzbrandbazillen, B. mycoides, B. mesentericus, B. sub-
tilis.

Mit diesen Bakterien geraischt wurden 3 I.-B.-Stttmmen untersucht,
ron denen 1 Kultur vor mehreren Jahren, die anderen beiden wahrend
der letzten Epidemie herausgeziichtet worden waren. Die I.-B.Kulturen
wurden vora Levinthal-Agar unter Kontrolle des Mikroskops ent-
noinmen und in Kochsalzlosung verdflnnt, urn moglichst auszuschlieBen,
daB auch nur eine Spur von Blutfarbstoff ubertragen wiirde. Die Be-
gleitbakterien wurden in physiol. Kochsalzlosung fein verrieben und
so weit verdOnnnt, dad auf der mit der Emulsion oberflachlich beschickten
Platte etwa 60 — 100 Kolonien von ihnen wuchsen. Die N&hrboden-
oberflSche wurde unmittelbar hintereinander mit den Aufschwemmungen
der I.-B. und der Begleitbakterien beimpft. Mehr oder weniger regel-
mSBig gelang der Nachweis feiner Kolonien von I.-B. in dei; Umgebung
der grbBeren Kolonien der Begleitbakterien. Solche Befunde wurden
vereinzelt erhoben bei Typhus, Paratyphus B, Coli-, Flexner- und
Friedlfinder-, konstant bei Shiga- und Diphtheriebazilllen.

Bei eingehenderen Untersuchungen iiber die Wachstumsbegtlnstigung
der I.-B. durch Diphtheriebazillen stellte sich — entsprechend den bei
der Stapbylokokkenkultur gemachten Beobachtungen — die interessante
Tatsache heraus, daB hier die mit Diphtheriebazillen vergesellschafteten
I.-B. sowohl in der Kolonieform wie auch im Aussehen der einzelnen
Bazillen sich ganz atypisch verhielten: die Kolonie erschien bei etwa
50-facher VergrbBerung nicht glashell und kegelfbrmig erhaben, sondern
war zackig umrandet, gekbrnt und nach Art einer Kugelkappe ab-
geflacht. Das mikroskopische PrBparat, das bei 500-faeher VergrbBe-
rung von den auf Lev in thal- oder Blutagar gewachsenen I.-B. SuBerst
feine, verhSltnisra&Big kurze StSbchen und nur ganz vereinzelte Schein-
fSden aufweist, zeigt in der Diphtherie-Mischkultur ganz abeuteuerliche
Formen: die einzelnen Stabchen sind wesentlich grober, plumper und
zeigen h&ufig Scheinf&den. Dieser Befund war so auffallend, daB zu-
nSchst an Verunreinigung gedacht wurde; aber regelmkBig zeigte es
sich, daB bei Rflckimpfung dieser Kolonien (die Abimpfung geschah unter
dem Mikroskop) auf Levin thal-Agar der normale Typus der Kolonien
und der einzeiuen Bazillen nach 1—2 Generationen wiederkehrte. Ganz
ahnliche Beobachtungen hatte in diesem Institut M. Preuss gemacht,
als er I.-B. auf Levin thal-Agar unter Zusatz hypertonischer Losungen
gewisser Salze zflchtete. Die beobachteten Erscheinungen sind hiernach
wohl als eine Schadigung und beginnende Degeneration der I.-B. unter
dem EinfluB eines ihnen weniger zusagenden Nahrbodens zu deuten.
Und in der Tat ist es auch mir unter diesen Bedingungen (Zflchtung
auf Nutrose-Wasseragar in Gesellschaft lebender Diphtheriebazillen) nie
gelungen, die I.-B. durch meiir als 3—4 Generationen am Leben zu
erhalten.

Im AnschluB an die oben erwahnten Befunde von Grassberger
u. a. war kaum anzunehmen, daB hier eine echte Symbiose von Diph¬
theriebazillen und I.-B. vorlag. Um aber diese Frage mit Sicherheit
zu entscheiden, wurde auch hier eine ahnliche Versuchsreihe mit
den abgetdteten Begleitbakterien auf Nutrose-Pepton-
Wasseragar ausgefuhrt. Auch hier entwickelten sich die I.-B., aller-
dings mit derselben Eigenart des Wachstums. Der l'/a'proz. Nutrose-
Pepton-Wasseragar wurde in einem Teil der Versuche in Platten ge-

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280 Centr&lbL f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

gossen, oberflfichlich mit Diphtheriebazillen beimpft and nach 24-stfind.
Bebrfitung durch Chloroforuidfimpfe sterilisiert; nach Verdunsten des
Chloroforms wurden dann die Flatten niit I.-B.-Eraulsion bescbickt:
regelm&Big entwickelten sich reiclilich I.*B.-Kolonien. -- In anderen Ver-
suchsreihen wurde der Rasen von Diphtheriebazillen, der auf der Ober-
flache von Loeffier-Serum Oder Fleischwasser-Agarplatten gewachsei
war, in Kochsalzlosung aufgeschwemmt und durch Erhitzen im Wasset-
bad auf verschiedene Temperaturen zwischen 60 und 100° abgetotet.
Diese Aufschwemmungen wurden dem verflfissigten Nutrose-Pepton-
Wasseragar zu^esetzt; diese Nahrboden wurden in Platten gegosset
und nach dem Erstarren auf der Oberflache mit I.-B. beimpft.

War die Diphtheriebazillen-Aufschwemmung bei 60—70° abgetfitet
worden, so entwickelten sich die l.-B.*Kolonien gut; waren die Diph¬
theriebazillen auf 90° erhitzt worden, so wuchsen die I.-B. nur noch
kflmmerlich; bei Erhitzung der Diphtheriebazillen auf 100° blieb das
Wachstum der I.-B. fast vollkommen aus. In den Kulturen, zu denen
die bei 60° abgetoteten Diphtheriebazillen verwendet waren, wurden die
I.-B. Kolonien sogar etwas gioBer als auf den Mischkulturen mit lebendeo
Diphtheriebazillen; sie erreichten freilich nicht die GrfiBe der Kolonien
aut Levinthal- Agar. Auch hier wurden die oben beschriebenen Ab-
normit&ten im Aussehen der Kolonien wie der einzelnen Bazillen be-
obachtet; aber auch hier wichen diese Abnormit&ten nach eiuigen Pas-
sagen fiber Levinthal-Agar dem normalen Aussehen der I.-B. Im
fihrigen waren diese Stfimme in der Reinkultur auf den sonst fiblichen
Nfihrboden (z. B. Fleischwasseragar) genau so strong hfimoglobinophil
wie sie es vor Beginn dieser Versuche gewesen waren; es war also nicht
etwa im Laufe dieser Untersucbungen eine Verringerung der Ansprfiche
unserer Kulturen an die Gfite des Nahrbodens eingetreten.

Diese Ergebnisse wurden in 8 Versuchsreihen mit stets gleichem
Erfolge wiederholt. Auf dem Nutrose-Peptonwasseragar, dem die anf
60° erhitzten Diphtheriebazillen zugesetzt waren, gelang die Fortzfichtung
der I.-B. bis zur 3. Generation.

Um den wirksamen Bestandteil der Diphtberiebazillenleiber
zu ermitteln, wurde der Kulturrasen mebrerer in K o 11 e- Flaschen ge-
zflchteter Fleischwasseragar-Massenkulturen von Diphtheriebazillen mit
einem Spatel vorsichtig abgeschabt, im Exsikkator getrocknet und im
Achat mbrser fein zermahlen: 0,2 g dieses Pulvers wurden in 10 ccm
absoluten Alkohols aufgeuommen, geschfittelt und nach 24-stfind. Stehen
scharf abzentrifugiert. Der Bodensatz wurde noch einmal in Alkohol
aufgenommen, abzentrifugiert und im Paralfinschrank bei 55° zur Trockne
eingedunstet. Die beiden Portionen der Alkoholldsung wurden dnrch
FlieBpapier filtriert und ebenfalls bei 55° eingedunstet. Der Alkohol-
rfickstand wurde mit 4 ccm physiol. Kochsalzlosung emulgiert. Der
Alkoholextrakt wurde zunfichst mit 2 Tropfen Alkohol angefeuchtet nod
dann ebenfalls mit 4 ccm physiol. Kochsalzlosung emulgiert. Von jeder
der beiden Emulsonen wurden jeweils 2 ccm mit Nutrose-Peptouwasser-
agar cemischt. Die NShrboden wurden nach dem Erstarren auf der
Oberfliiche mit I.-B. beimpft. Auf den Kulturen mit Alkoholextrakt
aus Diphtheriebazillen wuchsen keinel.-B.; auf den Alkohlrfick-
stand kulturen entwickelten sich in der gleichen Weise wie oben
beschrieben I.-B.-Kolonien, die auch hier bis zur 3. Generation fort-
gezuchtet werden konnten.

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Kalkbrenner, Beitrage znr Biologic des Inlluenzabaziilus.

281

Aehnliche Ergebnisse konnten auch mit lebender, sowie durch Chloro¬
form abgetflteter Shigaruhr-Kultur erhalten werden.

Eine Nachprflfung der nach AbschluB meiner Arbeit verflffentlichten
Tocunagaschen Untersuchungen war mir noch nicht mOglich. Nach
diesem Forscher soil der for das Wacbstum des L-B. wesentliche Be-
standteil im Globin, dem eisenfreien Kern des Hamoglobins zu
snchen seio.

Id meinen Versuchen ist es jedenfalls nicht mdglich gewesen, ab-
solot eisenfrei zu arbeiten. Sowohl der verwendete Nutrose-Peplon-
wasseragar wie die zugesetzteo Diphtheriebazillenleiber enthielteo noch
geringe, aber deutlich nachweisbare Mengen von Eisen. Inwieweit diese
Eisenmengen fflr die Entwicklung der I.-B. noch wesentlich sind, mufi
in spateren Untersuchungen festgestellt werden.

Aus den vorliegenden Ergebnissen ist aber schon jetzt zu ersehen,
dad die bis dahin als so sehr anspruchsvoll angesehenen
Influenzabazillen auch auf verh&ltnism&fiig sehr ein-
fachen und sicher blutfreien Nahrbdden eine beschr&nkte
Zeit wachsen kflnnen, wenn man ihnen die reinen Oder
die mit Alkohol ausgezogenen Bazillenleiber verab-
reich t.

Dieser Befund spricht entschieden dafflr, daB fflr die Entwicklung
der I.-B. der Zusatz gewisser EiweiBkflrper das Wesentliche ist.
Anch meine. Versuche haben es bestatigt, dad den Influenzabazillen die
Blutbestandteile am besten zusagen; aber das Hamoglobin kann wenig-
8tens eiue Zeitlang durch die eiweiBartigen Bestandteile der Leibessub-
stanzen mancher Bakterien vertreten werden. Es ware vielleicht daran
zu denken, daB es sich bier um das Aufspeichern organisch gebundenen
Eisens in der Leibessubstanz dieser Bakterien handelte, ahnlich wie die
geringen Jodmengen in unserer Nahrung durch die Schilddrflse auf-
gesammelt und in organisch gebundener Form aufgespeichert werden.
Immerhin ist es eine merkwflrdige und heute noch unerklarliche Tat-
sache, daB eine weitgehende Spezifitat existiert, daB von vielen unter-
suchten Bakterienarten ein kleiner Teil das Wachstum der I.-B. sehr
begflnstigt, wahrend andere sich hierzu als wenig geeignet und noch
andere als ganzlich ungeeignet erwiesen haben. Vielleicht ist die Er-
klirung fflr die letztere Tatsache in einer hemmenden Wirkung einiger
Bakterien zu suchen. Diese Frage konnte aus Zeitmangel nicht ent¬
schieden werdeu. HSchst eigenartig ist es auch, daB relativ geringe
Mengen bakterieller EiweiBsubstanz das Wachstum der I.-B.
ermdglichen, wahrend hochwertige andere EiweiBsubstanzen, wie Pferde-
serum, Ascites fast immer ganzlich versagen. Offenbar muB eine gewisse
Verwaudtschaft oder Aehnlichkeit dieser bakteriellen EiweiBsubstanzen
mit dem Globin des Hamoglobins bestehen, wenn sie auch quantitativ
in ihrem Nahrwert fflr die I.-B. dem Hamoglobin sehr nachstehen. Denn
die Untersuchungen Levinthals u. a. haben ja gezeigt, wie auBer-
ordentlich geringe Hamoglobinmengen ein flppiges Wachstum der I.-B.
ermflglichen, wahrend von den meist begflnstigenden Diphtheriebazillen
immerhin erheblich grflBere Mengen notig zu sein scheinen, und auch
diese die Influenzabazillen hflchstens durch 3—4 Generationen am Leben
erhalten, wobei bereits ausgesprochene Hungerformen auftreten.

Da in alien den Nahrbflden, auf denen die Ziichtung gelang, 1 Proz.
Pepton Witte enthalten war, so muB auch an die Mflglichkeit gedacht
werden, daB im Pepton selber ein fflr das I.-B.-Wachstum wesentlicher

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282 CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

Faktor enthalten ware. So ist es dorchaus moglich, dafi im Pepton
noch geringe Mengen mehr Oder weniger abgebauten Blutfarbstoffs vor-
handen sein kQnnten; diese brauchten an sich nicht zu genOgen, konnten
aber zusammen mit den Bakterienbestandteilen hinreicben, um wenig-
stens ein beschrknktes Wackstum der lufluenzabazillen zu ermoglichen.

Zusammenfassung.

1) Influenzabazillen-Reinkulturen stellen erhebliche Anspruche
an die Qualitat des Nahrbodens. Bei Zusatz von reinem Oxyhamoglobin
wachsen sie auf Wasseragar nicht, auf Hefeagar nbr ausnahmsweise.
Auf Fleischwasseragar gedeihen sie bei Zusatz von Oxyhamoglobin gut,
von Meth&moglobin weniger gut, von H&min, HSmatin und Hamato-
porphyrin gar nicht.

2) In Mischkultnren mit Streptokokken Oder Staphylo-
k ok ken geiang ihre Zflchtung noch auf Fleischwasseragar unter Zusati
von H&min oder HSmatin, aber nicht von Hamatoporphyrin.

3) In Mischkulturen mit gewissen anderen Bakterien, vor allem
den Diphtheriebazillen konnen die I.-B. auch obne Zusatz von
irgend welchen Blutderivaten, selbstauf einem l l /»-proz. Wasser¬
agar mit 1 Proz. Nutrose, 1 Proz. Pepton Witte, 0,5 Proz. Kochsalz
sich leidlich entwickeln und 3—4 Generationen lang erhalten bleiben.

4) Bei dem Wacbstum der Iniiuenzabazillen in Mischkulturen handelt
es sich nicht um Symbiose; denn sie wachsen ebenso gut, wenn die
zugesetzten Hilfsbakterien durch Chloroform Oder durch vorsichtiges
Erhitzen auf etwa 60° abgetdtet worden sind. Dieser begQnstigende
EinfluB geht verloren, wenn die Hilfsbakterien gekocht werden.

5) Der far die Ern&brung der L-B. wesentliche Bestandteil der
Hilfsbakterien ist also koktolabil; er ist alkoholunldslich: er ist wabr-
scheinlich eine eiweifiartige Substanz, vielleicht von fermentartigem
Charakter.

6) Bei der ZOchtung der I.-B. auf blutfreien NahrbSden unter Zu¬
satz lebender oder abgetdteter Hilfsbakterien wachsen die I.-B. in ganz
atypischer Form: die Kolonien sind nicht mehr glashell und kegelfCrmig,
sondern zackig umrandet, gekSrnt und abgeflacht; die Bazillen selber
sind wesentlich plumper und gr6ber und weisen eine starke Neigung
zur Bildung von Scheinfaden auf. Bei Ruckimpfung auf Levin thal-
Agar kehrt nach wenigen Generationen die typische Gestalt sowohl der
Kolonien wie der einzelnen Bazillen zurdck.

Zum SchluB sei es mir gestattet, Herrn Prof. Dr. Carl Prausnitz
fQr die liebenswflrdige UnterstQtzung u»d sehr vielfach gewahrte Hilfe
meinen verbindlichsten Dank auszusprechen.

Literatnr.

Canon, Dtsch. med. Wochenschr. 1892. 8. 28 u. 48; Virchows Arch. 1893. -
Can tani, A. jun., Zeitschr. f. Hyg. Bd. 36. 1901. 8. 29, Bd. 23.1896. 8. 265; CentralbL
f. Bakt. Abt. 1. Bd. 22. 1897. 8. 601. Bd. 28. 1900. S. 743; Grig. Bd. 32. 1902. 8. 692.
— Capaldi, A., Ebenda. Bd. 20. 1896. 8. 800. — Cornil u. Chantemesse,' Ball

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Preuss, Epidemiologische and morphologische Influenzabazillenstudien etc. 283

mid. 1892. p. 183; Ref. Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Bd. 13. 1892. S. 489. — Fichtner,
Ebenda. Abt. I. Orig. Bd. 35. 1904 8.374. — Ghon, A., u. v. Preyss, W., Ebenda.
Bd. 32. 1902. S. 90, Bd. 35. 1905. S. 531. — Grassberger, R., Ebenda. Bd. 33. 1903.
8.353; Zeitschr. f. Hyg. Bd. 25. 1897. 8. 453; Wien. klin. W’oihenschr. 1897. —
Huber, Zeitschr. f. Hyg Bd. 15. 1893. S. 454. — Hufner u. Otto, Zeit>chr. f.
physiol. Chem. Bd. 12. 8. 05. — Kitasato, 8., Dtscb. med. W ? o<heuschr. 1892. 8.28.
- Luerssen, A., Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Orig. Bd. 35. 1904. 8. 434. — Levin-
th&l, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 86. 1918. 8. 1. — Nastjukoff, Inaug. Dias. Petersburg;
Wratsch. 1893. Nr. 33/34; Ret. Centialbl. f. Bakt. Abt. 1. Bd. 19. 1896. 8. 474; Baumg.
Jahresber. Bd. 9. 8. 203. — Neisser, M., l>isch med. Wocbenschr. 1103. 8. 462. —
Olsen, Centralbl. f. Bakt. Abt I. Orig. Bd. 84. 19*20. S. 497, Bd. 85. 19*20. 8. 12. —
Pfeiffer, R., Dtsch. med. Woehenschr. 1892. 8. i.8; Zeiisthr, f. Hyg. Bd. 13. 1893.
8.357. — Der». u. Beck, Dtsch. med. Wothensthr. 1892 8. 465. — Pfuhl, A.,
Centralbl. f. Bakt. Bd. 11. 1892. 8. 397. — Richter, M., W r ien. klin. Woehenschr.
1894. 8. 529. — Scheller, R., Handb. d. path. Mikroorg. 2. Aufl. Bd. 5. 1913. —
Tocunaga, Dtsch. med. WcHbenschr. 1920. 8. 1357. — Wolff, J. E., Centralbl. f.
Bakt Abt. I. Orig. Bd. 84. 1920. 8. 241.

Nachdruck verboten.

Epidemiologische und morphologische Influenzahazillen-
studien aus dem Ende der letzten Pandemie.

[Ans der bakteriologischen Untersuchungsabteilung (Leiter: Prof. Dr.
C. Prausnitz) des flygienischen Institute der Universit&t Breslau
(Direktor: Geh. Med.-Kat Prof. Dr. R. Pfeiffer).]

iVon Max Preuss,'

(ruher Volontarassiatent am Hygieni6chen InMitut, jeizt Apeistenzarzt am Stidt. Wenzel*

Uancke-Krankenhaas in Bretdau.,,

Die Untersuchungen der letzten Jabre haben im wesentlichen zur
Uebereinstimmung darflber gelOhrt, daB der Iniluenzabazillus unter Ver-
tendung geeigneter Metboden bei klinisch Grippekranken in der Regel
gefunden wird (Referat von R. Pfeiffer und Diskusssionsbemerkungen
auf dem Mikrobiologentag in Jena 1920: Neufeld 1921). Ferner 1st
es im Verfolg der ersten Versuehe Pfeiffers den amerikanischen
Forschern Blake und Cecil gelungen, durch Einbringung von In-
fluenzabazillen-Reinkulturen in den Alund, die Nase und die Trachea von
Affen die typischen Erscheinungen der Grippe, wie wir sie am Menschen
kennen, eiuschlieBlich der Grippepneumouie, ktlnstlich hervorzurufen.
Hierdurch ist die Frage nach der Stiologischen Bedeutung des I.-B. fflr
die menschliche Grippe im wesentlichen entschieden.

Schwierigkeiten bereitete jedoch tnanchen Forschern die Tatsache,
dafi der I.-B. *fibrend der letzten Grippepandemie verh&ltnismfiBig hSufig
auch bei solchen Personen geiunden wurde, die nicht an klinisch fest-
gestellter Grippe erkrankt waren. Manche Autoren waren geneigt,
hieraus anf eine „UbiquitiLt“ des I.-B. zu schlieBen. Die nfiher liegende
Deutung solcher Befunde ist jedoch die, daB es sich hier entweder um
Personen handelt, die frflher an Grippe, vielleicht einer ganz leichten
Form, erkrankt waren, und I.-B.-Daueransscheider geblieben waren,
Oder daB diese Personen mit Grippekranken in nShere Bertibrung ge-
kommen und dadurch zu BazilleutrAgern geworden waren. FOr
diese Deutung sprechen jedenfalls die Beobachtungen R. Schellers,

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284 . Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Original e. Bd. 87. Heft 4.

der in KSnigsberg nach einer kleineren Grippeepidemie 1906—1908 dieses
Vorkommen von I.-B. bei nicbt klinisch Grippekranken w&brend des
Vorherrschens der Gpidemie verhaltnism&Big reichlich, aber in der Folge-
zeit immer seltener und seitener feststellte. Aehulich haben auch Nen¬
fold und Paparaarku 1912 bei ihren ausgedehnten und sorgfSltigen
Untersucbungen keine I.-B. fiuden konnen. Um eine weitere Kl&raog
dieser Frage zu erzielen, habe ich auf Anregung von Herrn Geheimrat
Pfeiffer, dem icb auch an dieser Stelle meinen ergebensten Dank
ausspreche, im 2. Halbjabr 1920 eine groBere Zahl von Untersuchnngen
des Rachensekrets und Auswurfs von Personen ausgefohrt, die teils an
Erkrankungen der oberen Luftwege litten, teils auch gesund waren 1 ).

Die Untersuchnngen lassen sich zeitlich in 2 Gruppen einteilen,
deren 1. von Anfang Juni bis Mitte September 1920 dauerte, also nock
in die Ausl&ufer der letzten Pandemie hineinfiel, wShrend die 2. von
Mitte November bis Mitte Januar 1921, also zu einer Zeit erfolgte, ala
in Breslau kaum noch Influenzaf&lle vorkamen.

A. Untcrsuchungcn ron Eranken.

(Unter AusschluB von Grippekranken.)

I. Akute Infektionskrankheiten.

Aus der Reihe dieser Untersuchungen auszuscheiden sind 11 Fille,
die an allgemeinen fieberhaften Krankheitserscbeinungen litten, welche
klinisch an das Bild der Grippe erinnerten. Da aber bei einern Teil
von ihnen I.-B. gefunden wurden, ist anzunehmen, daB es sich auch,
wenigstens bei einem Teil von ihnen, um echte Grippe gehandelt hat

Bei 5 Fallen von Scharlach, 2 von Diphtherie, 3 von Encephalitis
lethargica fanden sich keine I.-B.

Besonderes Interesse beanspruchten die Untersuchnngen von Masern-
fallen, da bei solchen z. B. Jochmann, Lewinthal und Wolf ver¬
haltnismaBig baufig I.-B. gefunden haben.

Ich hatte Gclegenheit, 2 Gruppen von raasernkranken Eindern zu
untersuchen: erstens 24 im stadtischen Wenzel-Hancke Kranken-
haus befindliche — trotz Entnahme des Materials und Beimpfung der
Kulturen am Krankenbett waren sie alle negativ; zweitens 13 Patienteu
der Universitats-Kinderklinik, bei denen 3 in einem Saal liegende I.-B.
im Nasenrachenraum aufwiesen. Da in der Universitats-Kinderklinik
zu jener Zeit h&ufig chronische Influenzaerkrankungen (Bronchiektasien)
von uns festgestellt wurden, ist dieser Befund nicht im Sinne Joch-
manns, sondern als eine zufallige Sekundarinfektion. wie sie in jedem
Krankenhaus vorkommen kann, aufzufassen.

II. Erkrankungen der Luftwege.

36 an verschiedenen Erkrankungen der Luftwege leidende Personen
wurden untersucht; bei 9 von ihnen fanden sich im Sputum Oder Rachen-
abstrich I.-B. Da bei 7 von ihnen eine frflhere Grippeerkrankung fest-
stand, erklart sich der Befund ungezwungen als Dauerausscheidung.
Die Mehrzahl der positiven Befunde (8) entfallt auf die erste, nur ein
Fall auf die zweite Periode.

Das kliniache Material wnrde in Iiebenswiirdiger Weise von der Tnediziniachtft
Univeraitatsklinik, der Universitats-Kinderklinik, der Universitata-Ohrenklinilc und dea
hiesigen stadtischen Krankenhausern zar Verfiigung geslellt.

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Preuss, Epidemiologische und morphologische Influenzabazillenstudien etc. 285

Tabelle I.

Vorkommen von Inflaenzabazillen bei Erkrankungen der oberen

Luftwege.

1. Periode (8ommer 1920)

2. Periode (VV

inter 1920/21)

Krankheit

1 Rachenabstrich!

Sputa

Rachenabstrich!

Sputa

Ges.-

davon

Ges.-

davon

Ges.-

davon

Ges.-

davon

Zabl

positiv

Zabl

positiv

Zahl

positiv

Zabl

positiv

Stomatitis aphthoea

—

_

_

! i

_

r-~

_

Angina

3

—

—

4

1

I —

_

Mandelhypertrophie

—

—

—

—

2

—

—

Rhinitis

—

—

—

—

2

_

—

_

Pharyngitis

1

1

—

—

3

—

—

—

Laryngitis

2

—

1 -

2

—

—-

—

Bronchitis

4

—

1 4

2

1

—

—

—

Pneumonie

3

—

3

1 |

—

—

—

—

Bronchiektasie

—

—

1

1

—

—

Longenabszefi

—

—

1

—

—

—

—

—

Pieuritis

1

—

2

—

—

—

—

_

Pertussis

2

—

3

1?

—

—

_

—

Taberkulose

3

i

9

2

2

—

i

—

Gesamtzahl |

19 |

2 I

23

6-1? |

1 17 |

i i

H i~l

Die sonstigen, ira Rachenabstrich oder Sputum gefundeoen Bak-
terien boten keioe Besonderheiten: vorwiegend ianden sich Strepto-,
Staphylo , Pneumokokken, weniger hftufig Kokken vom Typus des
Micrococcus catarrhalis, Gram-positive St&bchen (oft Sporen-
bildner), selten Gram-negative Bazillen (mebrfach AngehOrige der
Coli- Gruppe). Die Rachen- und Sputumflora zeigte im allgemeinen
ein ziemlich einheitlicbes Bild, gleichgQltig, ob I.-B. vorhanden waren
oder nicht.

B. Cntersuchungen Gcsunder.i

Insgesamt wurden 205 Personen untersucht, die zur Zeit der Ent-
nahme gerund waren. Die Mehrzalil waren alt ere Medizinstudierende,
deren Angaben wohl als veihaltnism&Big zuveriassig anzusehen sind;
fast alle tibrigen Personen befanden sich in Wutschutzbehandlung und
konnten infolgedessen mehrere Wochen lang beobachtet werden; diese
blieben w&hrend der Beobachtungszeit gesund.

In der 1. Periode fanden wir bei 11 von 129 (8,5 Proz.), in der
2. Periode nur bei 2 von 76 Personen (2,6 Proz.) I.-B. Auch bei
den Gesunden verschwinden also die I.-B.-Tr8ger, je weiter wir ui s von
den Auslaufern der Pandetnie entfernen. Die Zahl der auf den Kulturen
wachsenden I.-B.-Kolonien war ganz verschieden, zuweilen sehr reichlich,
zuweilen auch nur sehr sparlich.

Tabelle II.

Untersuchungen Gesunder auf Influenzabazilleu.

Von den Untersuchten
kitten in der Anamnese

1. Periode

(Sommer 1920) |

2. Periode (Winter 1920/21)

Gpsnmt/flhl

1 davon I.-B. pos.

Gesamtzahl |

davon I.-B. pos.

richer Grippe

76

7 = 9,2 Proz. 1

45

2 = 4,4 Proz.

vielleicbt Grippe
ingeblich nicht Grippe

9

1 = 1U „

6

44

3= «.« , l!

25

Gesamtzahl

129

11 = 8,5 Proz. ||

76

1 2 = 2,6 Proz.

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i

t

286 Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4 \

j

Es uberrascht nicht, daB die I -B. besonders h&ufig bei solchen Per- i

sonen zu linden waren, die frflher mit Sicherheit eine Grippe durcb- ;

geraacht hatten; aber bei der ungeheuren Verbreitung der Grippe und j

dem verh&ltinismSBig hdufigen Vorkoinmen sehr leichter Falle wsihrend !
der Paademie kana man wohl ungezwungen auch bei vielen von denen, I
deren Anamnese negativ ist, eine solche ganz leichte Grippe vorans-
setzen Oder annehmen, daB es sich hier um echte Bazillentrdger handelte. j
DaB die I.-B. nach Ueberstehen der Grippe bei solchen Personen '
noch sehr lange auf der Schleimhaut erhalten bleiben konnen, beweist
nachstehende Tabelle III. ‘

Tabelle III. j

Von 73 Personen, die 1918 an Grippe gelitten hatten, beherbergten 6 I.-B. *

93 1Q1Q 3 i

„ 21 „ „ 1920 „ „ „ „ „ 0 „

„ 4 „ „ die in den letzten Jahren Grippe gebabt hatten, J

bei denen die Zeit der Erkraukung nicht bekannt war, hatten 0 „ j

Fassen wir die Ergebnisse der oben angefflhrten 3 Untersuchungs- i
gruppen A I. A II und B zusammen, so fanden sich in 28 von 326 Fallen ;

(8,6 Proz.) I.-B.; von diesen entfallen 224 Personen mit 25 positiven |

Befunden (10,3 Proz.) auf die 1. Periode, 102 Personen mit 3 positiven ;
Befunden (2,9 Proz.) auf die 2. Periode der Untersuchungen. Ueber ;
die Beziehungen zwischen der Grippeanamnese und dem positiven L-B.- )

Befund unterrichtet nachstehende Tabelle IV. i

i

Tabelle IV. I

Gesamtzahl der positiven I.-B.-Befu nde bei Nichtgri ppekranken. ;

Von den Unter-

1. Periode

2. Periode

Zusammen

such ten hatten in
der Anamnese

Gesamt¬

zahl

positiv J

jGesamt-
1 zahl

positiv

Gesamt¬

zahl

positiv

sicher Grippe
▼ielleicht Grippe
angebl. keine Grippe

108

52

[ __ «i_

17 = 16 %
2 = 3.8 „ j

! CO
! 4

| 38

3 = 6%

" i

1C8

56

102 1

20 = 119’/,
2= 3.6,

6 = 5,9 ,

Gesamtzahl j

224

1 25 = 10,3 % ]

| 102

1 1

[ 3 = 2,9%

326 |

28 = 8,6 %

Zu dieser Tabelle ist kritisch dasselbe zu bemerken, wie zu der
vorigen Tabelle III.

Was das zahlenm&Bige Vorkommen der I.-B. betrifft, so fanden sie
sich in Reinkultur lmal, fast in Reinkultur 2mal, reichlich 6mal, m§Big
zahlreich llmal, sparlich 7mal, ganz vereinzelt lmal. Die Begleitbakterien
boten keine Besonderheiten, so daB auf das oben Gesagte verwiesen
werden kann.

C. Morpliologlschc Studien.

In dem MaBe, wie die Influenzapandemie sich ihrera Ende nSherte,
wurden also auch die I.-B-Danerausscheider und Bazillentr£ger immer
sparlicher; gleichzeitig wurde das immer hSufigere Aultreten abnormer
Wuchsforraen bei den gegen Ende der Pandemie isolierten I.-B.-SUUnmen
beobachtet. Solche abnorme Wuchsformen sind bereits in der ersten
Arbeit Pfeiffers beschrieben und von spateren Forschern hJufig R® -
sehen worden. UrsprQnirlich wollte sie Pfeiffer als Pseudoinfluenz*
bazillen von den echten I.-B. abtrennen; er hat diese Forderung spMtf

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P reuse, Epidemiologische und morphologische lnfluenzabazillenstudien etc. 287

fallen gelassen. Delius, Scheller u. a. konnten namlich aus typischen
I.-B.-Kulturen solche Formen durch Ziichtung auf nicht zusagenden
Nahrbdden kflnstlich erzeugen; daher wird man wohl nicht fehlgehen in
der Annahme, daB auch die bei uns gegen Ende der Pandemie heraus-
gezflchteten influenzaShnlichen atypischen Stamme als Involutionsformen
des I.-B. aufzufassen sind.

Es erscheint durchaus begreiflich, wenn gegen Ende eines Seuchen-
ganges die auf den Schleimhauten befindlichen I.-B. vielfach in ibrer
Lebensenergie geschwacht sind: derartige bereits geschadigte Stamme
reagieren dann, auf kQnstlicbe Nahrboden gebracht, durch die Bildung
abnormer Wuchsformen.

Das abnorme Aussehen zeigte sich in dem verhaitnism&Big reich-
lichen Auftreten von Scheintaden, von birnenfSrmigen nud sonstigen, zum
Teil h5chst abenteuerlich geformten Gebilden, die manchmal an die In-
volutionsformen des Pestbazillus erinnerten. Auch die Kolonien zeigten
bei 50-facher MikroskopvergroBerung nicht die typische zarte, durch-
scheinende Kegelform, sondern sie hatten eine mehr rosettenartige Ge¬
stalt, und vielfach waren sie trflbe und mehr oder weniger kraftig ge-
kornt. Fast alle diese Stamme aber haben sich im Laufe der Zeit,
nachdem sie sich an unsere Nahrbdden gewdhnt hatten, den typischen
Influenzakulturen in ihrem morphologischen Verhalteu genahert. Es
liegt also kein Grund vor, anzunehmen, daB diese Stamme von den
echten I.-B. artverschieden sind. Diese Auffassung wird auch durch die
folgende Beobachtung gestiitzt:

Bereits einmal, als die Epidemie noch auf der Hohe war, wurden
ahnliche atypische Siamme verhaltnismaBig haufig gefunden. Damals
war das zur Bereitung des Pfeifferschen Taubenblutagars verwendete
Blut ausnahmsweise nicht defibriniert, sondern durch Natriumcitrat un-
gerinnbar gemacht worden. Da wir vermuteten, daB die Hypertonie des
Nahrbodens die Bildung der Involutionsformen begfinstigte, wurde der
Versuch gemacht, durch Zusatz hypertonischer Salzkonzentrationen aus
typischen I.-B.-Kulturen ahnliche abnorme Wachstumsformen klinstlich
zu erzielen. Zu diesem Zweck wurde der Hundeshagensche NShr-
boden mit verschiedenen Konzentrationen von Natrium citricum versetzt.
4 Stamme, von denen 2 seit vielen Jahren im Institut fortgeziichtet
waren, 2 aus der letzten Pandemie stammten, wurden untersucht. Bei
Konzentrationen liber 3 Proz. gelang die Fortziichtung sehr schlecht.
Zwischen l 1 /* ond 3 Proz. wuchsen die I.-B. nicht weseotlich schlechter,
als auf den citratfreien Kontrollnahrbdden. Indessen traten bei den
genannten Konzentrationen nach wenigen Ueberimpfungen dieselben
abnormen Wuchsformen, wie sie eben geschildert worden sind, auf; —
anfangs nur Langformen und Scheinfaden, spater kokkenartige, birnen-
flascheufdrmige und ganz unregelmaBig gestaltete, fast ambbenahnliche
Gebilde. Auch die Kolonien waren haufig gekornt oder rosettenartig.

Diese VerAnderungen erwiesen sich bei alien Stammen in mehr oder
weniger kurzer Zeit reversibel: bei einigen Stammen, die, 14Tage lang
tSglich auf Citrat-Hu ndeshagen-Agar umgeziichtet, regelmaBig diese
Involutionsformen gezeigt hatten, trat bereits nach der 1. RQckimpfung
anf citratfreien Hundeshagen-Agar das typische Bild des normalen
I.-B. auf. Bei anderen Stammen dauerte es etwas langer, in 1 Fall bis
zu 5 Tagen.

Die Reinheit der Involutionsformen und ihr obligat hamoglobinophiles
Verhalten wurden regelmaBig geprlift und waren immer einwandfrei.

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288 Centralbl. f. Baku etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

Diese Versuche haben also ergeben, daO verhaltnisroaBig geringe
Schadlichkeiten bei langerer Einwirkung eine wesentliche Aenderung in
der auBeren Erscheinung des I.-B. bedingen kbnnen. Hocbst wahr-
scheinlicb ist eine solche morphologische Aenderung nur der Aasdrnck
far eine immerhin tiefere Schadigung des Bakterienplasmas. Falls diese
Auffassung zutrifft, so wOrde das haufige spontitne Vorkommen der-
artiger abnormer Wuchsformen gegen Ende der Grippepandemie als
Ausdruck zunehmender Schadigung des Inlluenzabazillus im Kampfe
mit seinem Wirt, dem Menschen, aufgefaBt werden konnen. Diese
Schadigung kdnnte vielleicht mit einer allmahlich sich entwickelnden
Immunitat der Bevdlkerung in Zusammenhang gebracht werden. Mit
dieser Selbstimmunisierung der Menschen wUrde dann das allmabliche
Verschwinden der wahrend der Epidemie so reichlichen Bazillentrager
sich erklaren. SchlieBlich wflrden nur noch ganz vereinzelte Bazillen¬
trager Obrig bleiben, welche die Brttcke von einem Seuchengang zu dem
nachstfolgenden bilden wQrden.

Zusammenfassung.

1) Die Umgebungsuntersuchungen auf Influenzabazillen wurden in
zwei Perioden vorgenommen, deren 1. noch in das Ende der Epidemie
hineinfiel, deren 2. in einer fast influenzafreien Zeit lag.

Von 224 in der 1. Periode Untersuchten fanden sich I.-B. bei 25
(10,3 Proz), von 102 Personen der 2. Periode fanden sich I.-B. bei 3
(2,9 Proz.). Die I.-B. wurden also gegen Ende der Epidemie immer
sparlicher gefunden.

2) Ueber die Iialfte der Untersuchten gab an, frhher eine Grippe
Qberstanden zu haben. Unter den Personen mit positiver Grippeanamnese
waren die I.-B.-Trager bei weitem am haufigsten. Von den wenigen
Personen, die eine negative Anamnese angaben, aber trotzdem I.-B. be-
herbergten, darf angenommen werden, dafi sie entweder frflher eine
ganz leichte Grippe unbemerkt tiberstanden, Oder dafi sie sich an Grippe-
kranken infiziert hatten, wobei es aber nur zur Ansiedelung der L-B.
auf der Schleimhaut, aber nicht zur ausgesprochenen klinischen Er-
krankung gekommen war.

3) Ein Teil der Untersuchten erwies sich als I.-B.-Dauerausscheider.
obwohl ihre Grippeerkranknng bis zu 2 Jahren zurQcklag.

4) Gegen das Ende der Untersuchungszeit, das mit dem Abklingen
der Pandemie zusammenfiel, wurden abnorme Wuchsformen des I.*B.
immer haufiger gefunden.

5) Aehnliche abnorme Wuchsformen konnten kOnstlich durch Zn-
satz von Natriumcitrat zum Nahrboden erzeugt werden. Diese Degene-
rationsformen behalten ihre charakteristischen Abweichungen auch nach
RUckverpflanzung auf die normalen isotonischen bluthaltigen Kahrboden
mehrere Generationen hindurch, um erst allmahlich zur Norm zurflck*
zukehren.

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Bender, Ein Fall von Septikamie bei einem Saugling etc.

289

Nachdruck verboten.

Ein Fall von Septikamie bei einem Saugling, hervorgerufen
durch das Bacterium lactis aerogenes.

[Aus der bakteriologischen Untersuchungsabteilung (Leiter: Prof. Dr.
C. Prausnit z) . des Hygienischen Inrstitutes der Universit&t Breslau
(Direktor: Geheimrat Prof. Dr. R. Pfeiffer).]

Von Dr. Willy Bender, Assistent.

Das Bacterium lactis agrogenes ist als Erreger einer Sepsis
bisber nur in sehr wenigen Fallen gefunden worden.

Von Dungern berichtet liber einen Fall von h&morrbagischer Sepsis beim Neu-
geborenen, die von einer Nabelinfektion lhren Ausgangspunkt nabm. Bei den iibrigen
Fallen stehen immer die Darmerscheinungen im Vordergrund des Krankheitsbildes, so
dafi der Diinndarm, in dem des Bacterium lactis aerogenes fast regelmaflig,
besonders bei Sauglingen, zu finden ist, wohl als Ein trittsf porte zu gelten hat. Czerny
und Moser fanden ibn zusamroen mil Staphylokokken 1 Tag vor dem Tode im Blute
eines Saugliugs. In 2 Fallen von akuter MagenDarmentzundung bei Erwachsenen
konnte Cimmino ibn bei dem Sektionsmaterial aus Darm Milz und Blut neben dem
Bacteriu m coli ziichten. In Keinkultur war er im Herzblut der 27-jahrigen Patientin
von Hischbruch und Ziemann vorhanden, die gleichfails infoJge akuter Gastro¬
enteritis gestorben war.

Bei der Seltenheit der Krankheit diirfte daher ein von mir unter-
suchter Fall von Interesse sein. Er stammt aus dem hiesigen stSdtischen
Sauglingsheim (Leiter: Primararzt Dr. Freund).

Krankengeschicbte (Frl. Dr. Boeder): Der am 3. Febr. 21 geborene Herbert H.
wurde 6 Wochcn lang gestillt. Bei der kunstlichen Ernahrung in der 8. \Voche trat
ein Gewicbtsstillstand ein. Er wurde am 31. Marz aufgenommen. Am 11. April war das
Kind sehr matt und unrubig; es traten unter Temperatureteigerung dyspeptieche Stuhle
anf. Bei der wegen leicbter Nackensteifigkeit ausgefiihrten Lumbalpunktion entleerte
sich unter wenig erhohtem Druck (24 cm) klarer Liquor mit normalem Zell- und
Eiweifigehalt, aber negativer Trom m erscher Probe. An Herz, Lungen, Hals qnd
Ohren war kein krankhafter Behind zu erheben. Nach Regelung der Nahrungszufuhr
besserte sich allmahlieh das Allgemeinbefindeu des Kindes, das Erbrecben lieft nach
and die Temperatur wurde fast normal. Eine 2. Lumbalpunktion ergab obne Druck-
steigerung normale Werte; die Trom m ersche Probe war schwach positiv. Am 20. April
trat plotzlich starke Verschlimmerung ein. Die Temp, stieg auf 39,6, es zeigte sich
tiefe Benommenheit und unstillbares Erbrechen. Die Stuhle wurden wieder dunn,
spritzend und schleimig Das am 21. April durch Sinuspunktion gewonoene Blut war steriL
In den nachsten Tagen zeigte die Temp, eeptischen Charakter; trotz Feblens nach-
wrisbarer Lungenerscheinungen wurde das Vorhandensein einer Bronchopneumonie
angenommen. Nach weiterer Verschlechterung wurde am 25. April abends 11 Ubr wiedenim
Blut durch Sinuspunktion zur bakteriologischen (Jntersuchung entnommen. Um */ 4 2 Uhr
nachts starb das Kind.

Das Krankheitsbild wurde aufgefaSt als schwere Ernahrungsstdrung (in 18 Tagen
750 g Gewichtsabnahme), die unter dem typiscben Bild der alimentaren Intoxikation
auf infektidser Basis (Bronchopneumonie oder Sepsis?) todlich verlief.

Die Sektion ergab im recbten Ober- und Unterlappen und linken Unterlappen der
Lange Verdichtungsherde. Das Gehirn erschien etwas weich und zerfliefilich, die Leber
weifilich-gelb. Im Darm fanden sich kleine hyperamische Btellen und geringe Follikei-
schwellung.

Von dem am 25. April entnommenen Blut wurde je eine Blutagar-
platte mit 0,5 und 1,5 ccm und ein hochgeschichtetes Agarrohrchen
mit 0,5 ccm und ein Fleischwasser-Boillonkolbchen mit 0,5 ccm Blut
angelegt. In s&mtlichen Kulturen wuchs nach 24 Std. ein Gram-negatives,

KnU Abt. On g. Bd. 87. Heft 4. 19

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290 Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originale, Bd. 87. Heft 4.

unbewegliches, oft in Fadenform liegendes St&bchen in Reinkultur. Die
Aoszahlung der Kolonien auf der Blutplatte ergab ffir einen Kubik-
zentimeter Blut berechnet die Gesamtzahl von 1700 Keimen.

Die Kolonien waren weifilich, leicht gewfilbt und von schleiraiger,
fadenziehender Beschaffenheit. Die Scbleimbildung wnrde im Verlaufe
der Weiterzflchtung geringer, demgemSB auch die \V61bung der Kolonien
flacher und die anfangs meist deutliche Kapselbildung noch schw&cher.
Die Endo-Platte, auf der besonders die weifiliche Farbung auffiel, wurde
nicht gerbtet. Die Malachitgrlinplatte wurde entfarbt und nahm einen |
gelben Farbton an. Im Neutralrot-Traubenzuckeragar trat unter geringer j
Fluoreszenz reichlich Gasbildung ein. Gelatine wurde nicht verflussigt.
Milch zeigte nach 24 Std. Sauerung und beginnende, nach 48 Std.
beendete, starke Koagulation, die bei weiterer Beobachtung erhalten
blieb. Indolbildung konnte nicht nachgewiesen werden.

Zur Priifung der Tierpathogenitat erhielt eine Maus am 29. April
mittags 0,1 cun einer 24 stflnd. Bouillonkultur intraperitoneal. Sie
wurde am 30. April morgens tot aufgefunden. In Originalausstrichen von
der Oberflache des Peritoneums, Milz, Leber, Lunge und Herzblut waren
reichlich Gram-negative Stabchen vorhanden, die eine nur wenig ausge-
bildete Kapselbildung zeigten. Aus den gleichen Organen wuchsen die
Stabchen in Reinkultur.

Es handelt sich also urn ein tierpathogenes Bakterium aus der
Gruppe der Kapselbazillen. i

Die Bildung von Gas sowie die Koagulation und Sauerung der (
Milch unterscheidet es vom Sklerombazillus und dem Bacillus lactis j
innocuus (Wilde). Der Friediandersche Pneumoniebazillus saoert <
zwar Milch, bringt sie aber nicht zur Gerinnung. Die immerhin nur I
schwache Kapselbildung konnte den gezflchteten Bazillus als zugehbrigzur 1
Gruppe desunbeweglichen Bacterium coli erscheinen lassen. DieFonn
die eigenartig weifiliche Farbe und die schleimige Beschaffenheit der Kolonien
und vor allem die fehlende Indolbildung trennt ihn aber vom letzteren. >
Die morphologischen und kulturellen Eigenschaften sowie die Dif- »
ferentialdiagnose geeentiber deu verwandten Arten kennzeichnen also
diesen, aus dem Blut eines Falles von Septikfimie beim Sfiugling in
Reinkultur geztlchteten Bazillus als Bacterium lactisaSrogenes.

Literator.

Cimmino, Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Ref. Bd. 37. 1906. S. 424. — Czerny u
Moser, Jahrb. f. Kinderblk. 1894. S. 343. — v. Dungern, Centralbl. f. Bakt. Abt.

1. Orig. Bd. 14. 1893. *B. 541. — Hirschbruch u. Ziemann, Ebenda. Bd. 70.1913.

S. 281.

Nachdruek verboten.

Beitrage zur Biologic des Bacillus pyogenes

anaerobius.

[Aus dem I. patholog.-anatom. Iustitut der kdnigl. ungarischen Univer¬
sity in Budapest (Direktor: Prof. K. Buday).]

Von Privatdozeut Dr. B61a Johan, I. Assistant.

Mit 2 Abbildungen im Text.

In der Sitzung des kbnigl. Aerztevereins zu Budapest berichtete
am 13. Nov. 1915 Dr. 0. Bogd&n, Spitalsdirektor in Balassagyarmat

Go^ 'gle

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641a Johan, Beitrage zur Biologic des Bac. pyog. anaerobius. 291

fiber eine eigentflmliche pyfimiscbe Erkrankung, die sicb in die Kranken-
zimmer des ais Reservespital eingericbteten Koraitatsbauses einnistete.
Von der Erkrankung wurden blofi Kriegsverwundete befallen. Die Ffille
verliefen meistens tbdlich; bei der Sektion wurden am konstantesten
Leberabszesse gefunden. Meistens waren auch, noch anderswo Eiterungen.
so in den Gelenken, Lungen und daneben in der Brusthbhle. Prof.
R. Bud ay referierte in derselben Sitzung Qber die Befunde seiner,
diese Ffille betreffenden Untersuchungen. Er stellte fest, dafi der Er-
reger dieser Seuche ein gramnegativer, obligat anafirob wachsender,
Polffirbung zeigender, sebr kleiner Bazillus ist, der nur auf NfibrbodeD,
die native Eiweiflsubstanzen enthalten, wfichst. Im Einverstfindnis mit
Herrn Prof. Buday gaben wir dem Bazillus den Namen: Bacillus
pyogenes an'a@robius.

Die Untersucbungsergebnisse wurden bald in der Literatur ver-
fiffentlicbt (Bogdfin, Med. Klin. 1916; Buday, Centralbl. f. Bakt. Abt. I.
Orig. Bd. 77. S. 453). Trotzdem hdrte man nicht, dad irgendwo fihn-
licbe Ffille vorgekommen wfiren. Mbglicherweise aus dem Grunde, dad
in vielen Krankenhfiusern, wo Kriegsverwundete gepflegt wurden, Sek-
tionen Qberbaupt nicht gemacht wurden.

Am Ende des Jahres 1916 sandte Oberarzt Dr. Ruszny&k aus
Zsolna an Prof. Buday eine Eiterprobe, mit der Bemerkung, er glaube,
dad der Fall, aus dem der Eiter stammt (es war dies tlbrigens schon
sein 3. derartiger Fall) jenen aus Balassagyarmat fihnlich sei.

Es gelang uns tatsfichlich, schon in Stricbprfiparaten, die ganz typi-
scben, gramnegativen, Polffirbung besitzenden, zarten Bazillen nach-
znweisen, sodann gelang auch die Zfichtung derselben unter den von
Prof. Buday aufgestellten Bedingungen.

Ueber die kliniscben Daten und die sghr interessanten Beobach-
tungen, die Dr. Rusznyfik bei diesen Fallen zu sammeln Gelegenbeit
hatte, bat er an anderer Stelle referiert 1 ). Nach den ersten Erkrankungen
kamen in Zsolna neue Ffille vor, ganz fihnlich der ersten; wir hatten
Gelegenbeit, auch diese Ffille zu untersuchen. Die Erfahrungen der En-
demie in Balassagyarmat zeigten, dad, wenn die Krankbeit einmal an
irgendeiner Stelle vorkommt, das weitere Auftreten neuer Ffille schwer
zu verhindern ist. Es war also die Furcht vor weiteren Fallen wohl-
begrfindet. Dabei verlfluft die Krankbeit meistens tfidlich und da sie
meistens noch im Leben diagnostiziert werden kann, entschlossen wir
uns znr Herstellungj, einer therapeutischen Vakzine.

Durch anafirobe Keime hervorgerufene Krankheiten treten bei Men-
scben im allgemeinen nur sporadiscb auf; deshalb bietet sich nur selten
Gelegenheit, eine Vakzine aus anaeroben Keimen herzustellen. In der
Veterinfirmedizin kommt dies Sfters vor, doch ist im ganzen die Her-
stellungsart einer solchen Vakzine nicht derart ausgearbeitet, wie bei
den Aerobiern. Inzwischen wurde das Weitergreifen der Erkrankung
durcb energische Madregeln verhindert, und so wurde auch die Anwen-
dung der Vakzine nnndtig. Wfihrend der Herstellung derselben tauchten
jedoch zahlreiche, recht interessante Eigenschaften dieses Mikroben auf,
die dann weitere Untersuchungen notwendig machten; in dieser Weise
machten wir binsichtlich der Biologie der Anafirobier recht interessante
Beobachtnngen, und da die morphologiscben und biologischen Merkmale
noch wenig bekannt sind,sollen diese im folgenden zusammengefaCt werden.

1) Berlin, klin. Wochenschr. 1918. S. 234.

19*

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292 Oentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 4.

Zur eben erwfihnten Vakziuation wollten wir durch Hitze abgetotete
und mit irgendeinem Antisepticum behandelte Bakterien benfitzen. Wir
setzten die 1. Kultur dieser Bakterien aus AbszeBeiter in Ascitesagar-
Sticbkultur an. Zur Herstellung einer Vakzine entsprach aber dieses
Verfahren nicht, da auf diese Weise nur sebr wenig Bakterienmaterial
gewonnen werden kann.

Am einfachsten wire es gewesen, eine anaerobe Plattenkultur an-
zulegen; doch sei schon hier erwfihnt, daB auch auf schiefer Ebene die
Zfichtung dieses Bazillus nur schwer gelingt. Nach 36—48 Std. sehen
wir in schrfigen Ascitesagarrobren bloB im Kondenswasser ein Sediment;
die Agarflfiche ist noch leer. Wenn wir nun das Kondenswasser 2 bis
3mal fiber den Nahrboden flieBen lassen, so bilden sich nach weiteren
48 Std. nabe dem Kondenswasser kleine, durchsichtige, hochstens 1 bis
l 1 /} mm groBe Kolonien, die spfiter konfluieren. Ohne diesen Kunst-
griff entwickeln sich sehr spfit, erst am 5.—6. Tage, vereinzelte recht
kleine Kolonien. Allerdings ist die Entwicklung auf Schrfigagar viel zu
scbwacb und unsicber, entsprach daber nicht uuseren Zwecken.

Deshalb wandten wir uns den flQssigen ^Nfihrmedien zu und ver-
suchten eine Mischung von Ascitesflfissigkeit mit Nahrbouillon. Um das
beste Miscbungsverhaltnis zu linden, bei dem der Bazillus am fippigsten
wfichst, versuchten wir verschiedene Verdfinnungen mit sehr verschie-
denem Erfolge 1 ). <

Die zu diesem Versuche bentttzte Ascitesflfissigkeit stammte von
einem Nephritiker, war licbtgelb, schwach opaleszierend, enthielt nacb
Ess bach 5 pr. M. ( 7 * Proz.) EiweiB. ' Es lieB sich erkennen, daB ,
dieser Bazillus in einer Mischung, die 0,5 Proz. EiweiB enthfilt, nicht
wfichst, ebenso blieb das Wachstum aus, wenn der EiweiBgehalt weniger
als 0,1 Proz. betrug (wir verstehen unter EiweiBgehalt immer nur den !
Gehalt an nativem EiweiB). Es wurde der Versuch mit einer 2. Ascites- \
flussigkeit gemacht, die von einem Kranken stammte, der an Carcinosis j
peritonei litt. Die Fliissigkeit war ganz durchsichtig, intensiv gelb.
doch enthielt sie einen ziemlich reichlichen Bodensatz aus sulzigem
Fibrin. Der EiweiBgehalt betrug 4 Proz. nach Essbach. !

In diesem Falle befand sich das Optimum der Bazillenentwicklung
bei 2 Proz. Gehalt au nativem EiweiB. Bei 2,8 Proz. begann die Ent-
wicklung verspfitet, bei 1,2 Proz. hingegen fehlte sie vollstfindig.

Vergleicht man nun die beiden Versuchsergebnisse, so kann man
mit Recht behaupten, daB die Entwicklung dieses Mikroben nicht blofi
von dem Gehalte der Nfihrsubstanz an nativem EiweiB abhfingt, sondern
gewitl noch von anderen Bestandteilen des Nfihrmediums bedingt ist.

Vergleichen wir in beiden Versuchen die Merfge der Ascitesfldssig-
keit, so sehen wir, daB das Entwicklungsoptimum bei 30—50 Proz. As-
citesgehalt steht. Wenn wir also nicht den EiweiBgehalt, sondern das
in der Flussigkeit enthaltene Ascitesquantum miteinander vergleichen,
so stehen die Untersuchungsergebnisse miteinander sehr nahe, was wir
tibrigens auch bei einem 3. Ascitesserum zu sehen Gelegenheit batten.

DaB wir, die Menge der Ascitesflfissigkeit allmfihlich herabsetzend,
endlich zu einer Mischung gelangen, wo die Entwicklung nicht mehr
einsetzt, kann uns nicht uberraschen. Es ist aber urn so auffallender,
daB die Entwicklung auch bei einer gewissen Steigerung der Ascites-
flussigkeitsmenge ausbleibt, und daB in reiner Ascitesflfissigkeit eine
Entwicklung uberhaupt nicht stattfindet. Man wird dadurch zur Voraus-

1) Die Tabellen inuftten leider aus technischen Grunden weggelassen werden.

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Bela Johan, Beitrage zur Biologie dee Bac. pyog. anaerobius. 293

setzong gezwungen, daB in der Ascitesfliissigkeit vielleicbt gewisse Sub-
stanzen fehlen, die wir gewohnlich mit Beigabe der Bouillon binein-
bringen. Es klingt dies zwar uicht sehr wahrscheiDlich, doch lSBt sich
die Mflglichkeit Dicht ganz abweisen. Nachdem icb mittlerweile erfahren
habe, daB es dem Herrn Assistenten Boer (inzwischen verstorben) ge-
lungen ist, den Bazillus aus dem Blute eines Kranken zu ziichten, so
yersucbte ich aocb, menscblicbes Blutserum als Nahrmedium zu ver-
wenden. In reinem Blutserum eiDes Menschen, gleichgflltig ob das
Serum vorher bei 56° C inaktiviert war oder nicbt, gedieh der Bazillus
nicht, ebenso wie er dies in der Ascitesfliissigkeit nicbt tat.

G. Seiffert verflffentlichte Versuche, die er hinsichtlich der Ent-
wicklung verschiedener Mikroben, besonders des Bac. typhi im Blut¬
serum anstellte. Er faud, daB eine gewisse Gruppe der Bakterien ent-
wicklungsunfflhig ist im iuaktivierten Serum solcber Leute, die fflr jene
Krankbeit, welche von den erwflhnten Bakterien verursacht werden,
empfSnglicb sind; sie gedeiben hingegen gut im Serum solcher Menschen,
bzw. Tiere, die entweder angeboren oder kflnstlich gegen das fragliche
Bakterium immun sind.

Es mufite bei unseren Versuchen daran gedacht werden, dafi viel-
leicht bier ihnliche Verbflitnisse vorliegen, deshalb setzten wir unsere
Eiperimente auf folgende Weise fort:

Wir impften aus dem Sediment einer frischen Ascitesbouillonkultur:
1) inaktiviertes Serum eines gesunden Menschen, 2) solches eines ge-
sunden Kaninchens, 3) das inaktivierte Blutserum eines vorher geimpften
Kaninchens, das einen Abszefi an der Injektionsstelle bekam, welcber
sich langsam wieder zuriickbildete.

Die so beschickten KulturrQhren wurden anaflrob verscblossen mit
Kalilauge und Pyrogalluss&ure. In der 1. und 2. Fliissigkeit blieb jede
Entwicklung aus, in der 3. erhielten wir eine reichliche typische Kultur.
Icb kann also G. Seifferts Untersucbungen durch meine
Befunde ergfinzen und konnte jene von ihm beobachtete,
scbeinbar paradoxe Erscheinung auch bei diesem an-
agroben Keime kon statieren. Ich meine fibrigens, daB unsere,
mit Ascitesflflssigkeit erhobenen Befunde in demselben Sinne zu deuten
sind, wie die mit dem Blutserum festgestellten. G. Seiffert meint,
es handle sich hier um eine entwicklungsbemmende Substanz. Unsere
Befunde machen das ebenfalls wabrscheinlich, und diese Substanzen
dflrften dann nicht nur im Blutserum vorhanden sein, sondern auch in
die Ascitesflflssigkeit flbergehen. Als ein Beweis fur G. Seifferts
Annahme sei noch erwfihnt, daB durch entsprechende Verdfinnung der
Ascitesflflssigkeit jene entwicklungshemmende Substanz derart verdflnnt
werden kann, daB bei einem gewissen Grade der Verdflnnung die Ent¬
wicklung einsetzt. Es stellte sich endlich noch heraus, daB diese Sub¬
stanz in keiner direkten Beziehung zu der, nach Essbach bestimm-
baren EiweiBmenge der Ascitesfliissigkeit steht, und dafi sie in ver-
scbiedenen Ascitesseren scheinbar in gleicher Menge vorhanden ist.

Ich kehre nunmehr zur Herstellung der Bouillonkulturen zuruck.
Die oben geschilderten Versuche haben das Optimum des Ascitesbouillon-
gemisches ffir diesen Mikroben festgestellt (es lag bei 30 — 50 Proz. As-
citesgehalt), und diese Mischung wurde dann im weiteren benutzt. Als
Ausgangsraaterial wurde ein Stamm verwendet, der aus dem 5. Falle
von Zsolna in Ascitesfliissigkeit geziichtet wurde. Die Eprouvette wurde
am unteren Ende der Kultur mit einer Feile eingekerbt und abgebrochen,

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294

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

der Nfihrboden daselbst mit einera heifien Messer durchscbnitten und
Bakterienmaterial mit einer PlatinSse zum flberimpfen entnommen. Aus
Alteren und ofters ohne Tierpassage uberimpften Kulturea muBte stets
eine grdfiere Menge in den flQssigen Nahrboden flbertragen werden,
damit eine Entwicklung stattfindet Die beimpfte Rdhre wurde dann
anaerob verschlossen (auf den hineingeschobenen Wattepfropfen wurde
Pyrogallolbrei gegossen und in diesen ein Stflckchen Aetzkali geworfen).
Es sei hier bemerkt, daB der verschlieBende KorkstOpsel recht tief ein-
geschoben werden muB, dgmit dariiber noch eine mindestens 4—5 mm
dicke Siegellackschicht geschmolzen werden kann (statt des teueren
Siegeilacks wenden wir heute bartes Paraffin an). So kam es niemals
vor, daB der VerschluB einer Eprouvette nicht geniigend sicber war,
was bei den Experimenten eventuell die Unbraucbbarkeit der ganzen
Serie hatte verursachen kftnnen.

Die Entwicklung der Kulturen gebt in typischen Fallen in folgender
Weise vor sich: nach 24 Std. sind die RObren noch uaveraodert und
erst nach 36 Std. erscheinen an der Oberfiache der FlQssigkeit verein-
zelte feine Luftbiaschen; zu dieser'Zeit kann man schon mittels einer
Lupe die Bildung feinster Fldckchen wahrnehmen, die sich in den fol-
genden 6—8 Std. allmahlich vermehren und vergrOBern; wir finden nun*
mehr an der Oberfiache der FlQssigkeit eine 2—3 mm breite, schaumige
Scbicht. Die ganze FlQssigkeit erscbeint stark flockig und wie im Sieden
begriffen. Die Fldckchen und die zwischen ihnen befiodlichen feiuen
Luftbiaschen sind in einer steteD Auf- und Abwartsbewegung. Nach
48 Std. ist die Entwicklung meistens schon beendet. Am Boden der
Eprouvette steht das Sediment in einer 5—10 mm hohen Schicht, die
FlQssigkeit darQber ist vollkommen rein, an der Oberfiache sind noch
einige Blasen, die aber auch bald verschwinden. War die Zusammen-
setzung des NQhrbodens dem Bazillus nicht ganz entsprechend, so be-
gann die Entwicklung der Blaschen spQter, in einem Falle setzte sie
z. B. erst am 5. Tage ein, dauerte aber langer als gewdhnlich. Auch
ein schon lange nicht Qberimpfter Stamm verhielt sich ahnlich.

Das Verhalten dieser Bazillen in der Ascitesbouil-
lonkultur ist, wie wir gesehen haben, recht typisch. Das
Vorhandensein eventueller verunreinigender Mikroben kann man leicht
daran erkennen, daB in diesen Fallen z. B. die Entwicklung schon frQher
einsetzt oder die FlQssigkeit Qber dem Bodensatze trfib bleibt. In
solchen Fallen kann die nahere Untersuchung dieser Kulturen stets ver-
unreinigende Mikroben nachweisen.

Das Oeffnen der auf oben geschilderte Weise verschlossenen an-
aeroben Kulturen muB mit gewisser Vorsicht geschehen, urn-dem Hinein-
flieBen der alkalischen Pyrogalluslosung vorzubeugen. (Bei ana&roben
Schiefagarrohren verhindert das Prof. Preisz in der Weise, daB er die
Rohre vor dem Oeffnen umdreht, und in dieser Lage die durchtr&nkten
Pfropfe herauszieht.) Beim Oeffnen meiner AscitesbouillonrQhre ver-
fahre ich in folgender Weise: zuerst erwarme ich die Eprouvette rings
urn die Oeffnung und ziehe sodann mit Hilfe einer feinen Pinzette den
Korkstopsel heraus und steche vorsichtig ein dickwandiges, spitz aus-
gezogenes Glasrohrchen, das mit der Wasserstrahlpumpe verbunden ist,
in den durchtrankten Wattepfropfen und entferne so aus der Watte den
groBten Teil der Absorptionsfiiissigkeit. Dann ist der Wattepfropfen,
ohue Gefahr, daB von dem alkalischen Pyrogallol etwas in die Kultur
hineinflieBt, leicht herauszuziehen.

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B61a Johan, Beitrage zur Biologie des Bac. pyog. auaerobius. 295

Zur Weiterimpfung beniitzte ich meistens den Bodensatz der Kul-
tur; die obere reine Flflssigkeit wurde mittels Wasserstrahlpumpe ab-
gesogen und das Material zur Impfung rait einer Oese Oder Kapillare
entnommen. Bei frischen Kulturen geniigten 2—3 Oesen voll, bei alteren
wurden 3—4 Tropfen iibertragen.

Wie oben erwahnt, nahm ich als Ausgangsmaterial eine Ascitesagar-
kultur, die sehr schone kleine, polgefSrbte Bazillen enthielt (Fig. 1 a).
Um so mehr war ich erstaunt, als ich im Sedimente der 1. Ascites-
bouillonkultur ganz andersformige, viel groBere und dickere Mikroben
fand. Die Polfarbung war aber auch jetzt recht schbn, ja sogar noch
ausgeprSgter als in der Ursprungskultur (Fig. lb —f). Als Farbstoff
benutzte ich am meisten eine verdflnnte Karbolfuchsinlbsung. Die Ba¬
zillen sind zu 5—8 in Ketten geordnet und ebenfalls gramnegativ. Die

Fig. l.

dunkelgefSrbten Polenden der Bazillen zeigen keine Ernst-Babes-
schen Kornchen. Blieben die Kulturen einige Tage im Thermostatcn, so
erschienen ofters darin sich schlecht farbende Kugeln, an deren ent-
gegengesetzten Enden oft kapseiahnlich sich dunkler farbende Stellen
ins Auge fielen. Anfangs, als das Optimum der Ascitesbouillonmischung
noch nicht festgestellt war, erhielten wir in diesen Kulturen Qfters recht
unregelmaBige, groBe Bazillen und Faden, worilber unten noch die Rede
sein wird.

VVir haben mit Organstuckchen Kulturen nach Tarozzi angelegt
und dazu LeberstUckchen benutzt. die wir in Bouillonrbhren warfen, und
das Ganze nicht zu lange sterilisierten. Die Entwicklung war sehr
reichlich und begann in diesen Tarrozzi-Rbhren meist fruher als bei
anderen Kulturmethoden, besonders wenn die Rohren einige Tage vorher
schon hergestellt wurden. Wir versuchten, Tarozzische Kulturen mit ver-
schiedenen Organteilen anzulegen, doch erwiesen sich diese nicht gleich gut

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296

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

Bei der Untersuchung der Tarozzischen Kulturen fanden wir in
diesem die Bazillen recht mannigfaltig gestaltet, und zwar uni so mehr,
je weniger das betreffende Organ dem Kulturverfahren nach Tarozzi
entsprach; in diesen erschienen die Bazillen als dicke, lange Faden.
viel dicker, als wir das bei den Faden bildenden Bazillen zu sehen
pflegen. Die Polfdrbung war aber trotzdem, und zwar oft sehr ausge-
pragt, vorhanden. Recht interessant sind Bazillenketten, in denen die
Glieder in der Mitte derselben angeschwollen sind, so daB die ganze
Kette spindelformig erscheint; ein andersmal sind die einzelnen Bazillen-
glieder nur an dem einen Ende der Kette geschwollen. Es sei noch
erganzend erwahnt, daB die Bazillenentwicklung in den Tarozzischen
Rohren nicht so leicht zu erkennen ist als in den sonst eingestellten
Anaerobenrohren, was leicht verstandlich ist. Die Entwicklung in den
AnaerobenrShren kann innerhalb 6—8 Std. (also wahrend einer Nacht)
beginnen und aufhoren. In den Pyrogallusrbhren verrat sich die statt-
gehabte Entwicklung durch den entstandenen Bodensatz, in den Ta¬
rozzischen Kulturen ist ein solcher nieht leicht zu erkennen, da hier

die vorhandenen zerfalleuen Gewebs-
triiramer dies erschweren. Doch l&Bt
sich die Entwicklung nach dem charak-
teristischen Geruche (dessen schon Prof.
Buday in seinem Artikel Erwahnung
tut) sowie aus dem iiber der Fliissig-
keit schwimmenden Schaume erkennen.

Die Bazillen, welche in den mit Le-
berstiickchen bereiteten Tarozzischen
Kulturen wuchsen, zeigten im ganzen
denselben Typus, den wir aus den As¬
cites Bouillonkulturen kennen: aufge-
blahte, ovale, ziemlich groBe Bazillen
mit deutlicher Polfarbung, die von den
feinen Bazillen der Ascites - Agaraus-
gangskultur, der Leberabszesse und der
Abszesse der geimpften Tiere stark ab-
weichen. Wir versuchten wiederholt, aus
Ascites-Agarkulturen stammende, feine Bazillen auf flilssige NShrbbden zu
iiberimpfen, und fanden stets diese Formver&nderung. Buday erwahnt
in seinem Artikel, daB die Mikroben, welche sich in den Ascites-Agar¬
kulturen entwickelten, meistens etwas groBer sind, als die Bazillen der
Leberabszesse; oft sind sie sogar stark aufgebl&ht. Die von uns ge-
sehenen groBen Exemplare iiberragten die Erreger der Leberabszesse an
GroBe vielfach.

Es ist eine wohlbekannte Tatsache, daB Bakterien unter veranderten
Bedingungen ihre Gestalt und GroBe verandern konnen, was haupt-
sachlich bei anaeroben Keimen wiederholt beobachtet worden ist. Ein
Teil dieser Gestaltsveranderungen kommt auch unter normalen Verhalt-
nissen vor (Diphtherie-, M al 1 e u s bazillen usw\), ofters aber in solchen
Fallen, wo der Bazillus in ungiinstige Verh&ltnisse gerat, z. B. wenn
der Nahrboden ihtn nicht zusagt. Diese Gestaltsveranderungen werden
Degenerations- Oder Involutionsfonnen genannt. Ist der Nahrboden nicht
ganz zusagend, so kann es geschehen, daB die Bazillen sich nicht ver-
mehren, jedoch ihre Wachstumsenergie behalten. Ich glaube, ein schbnes
Beispiel dafiir in jenen Tarozzischen Kulturen beobachtet zu haben,

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B61a Johan, Beitrage zur Biologie des Bac. pyog. anaerobiue. 297

in denen die Entwicklung der Kultur ausblieb, unter dem Mikroskope
aber gewaitig groBe Bazillenexemplare oder Ffiden (Fig. 2) zu sehen
waren. Ich halte es nicht fdr erwiesen, dafi diese groBen Exemplare
als Degenerationsformen zu deuten sind, denn die Bezeichoung „Dege-
neratiou u oder sogar „Involution“ enthalt zugleich den Begriff einer
verminderten Lebensfahigkeit und mithin auch den eines herabgesetzten
Vermehrungsverraogens. In unserem Falle sehen wir aber, wenn wir
die gebiahten Formen Qberimpfen, dieselben sich tadellos vermebren,
and sie erwiesen sich auch bei der Tierimpfung recht virulent. Ich
glaube demnach, daB wir uns in dieser Frage den Ansichten Maasens
oder Peju-Rajats anschlieBen kdnnen, nach denen diese abnorm
grofien Exemplare als Entwicklungsvariationen bzw. Abnormitaten be-
trachtet werden milssen („teratologische Wuchsformen Maasens u ).
Aehnlich groBe Exemplare wurden haupts&chlich dann beobachtet, wenn
sie gewisse Bakterien, z. B. Pestbazillen, auf Nfihrbdden gez*flchtet
hatten, die viel Salz enthielten. Unter solchen Bedingubgen kdnnen
vielleicht die Formver&nderungen als Folgen osmotischer EinflQsse be-
trachtet werden; es kdnnen aber diese Ver&nderungen auBer den Salzen
auch andere Chemikalien verursachen.

Wahre Degenerationsformen haben auch wir gesehen, wenn
wir die Kulturen durch l&ngere Zeit (mehrere Tage) im Thermostaten
hielten; in solchen Kulturen verschwinden die Ronturen der Bazillen,
sie farben sich sehr schwach, auch die Polf&rbung verschwindet sehr
rasch. Die Bazillen nehmen in diesen Fallen oft eine Kugelform an
(Buday). Die Ueberimpfung aus solchen Kulturen gelang nur dann,
wenn wir betrachtliche Bazillenmengen Qbertrugen.

Dafi die oben besprochenen groBen, gebiahten Bazillen keine De¬
generationsformen, sondern Entwicklungsabnormitaten sind, lSfit sich
auch daraus folgern, dafi sie auf gewissen Nahrboden schon nach 24 Std.
entstehen, wfihrend andere, ganz gleich, wie lange sie im Thermostaten
gestanden hatten, nie ahnliche GrdBen erreichten, sondern nach einer
gewissen Zeit die oben geschilderten degenerativen Veranderungen zeigen
(mangelbafte Farbung, Verschwinden der Kdrnelung).

Die Polfarbung ist eine ganz typische Eigenschaft dieser Bazillen,
doch ist sie keineswegs stets vorhanden, denn wir linden auch dazwischen
ganz regelmafiig homogen gefarbte Stabchen. Bei den grofieren Exem-
plaren laBt sich ebenfalls an den beiden Enden je 1 intensiv farbbares,
scharf begrenztes Kdrnchen erkennen. An den grofieren Exemplaren
sind auch die Kdrnchen grofier (nach Vay sind bei den Pestbazillen
die PolkOrnchen der grbBeren und kleineren Exemplare gleich groB).
Sie sind nicht immer kugelig. sondern kdnnen auch eine ovoide oder
kappenahnliche Form annehmen. Bei den groBen Bazillenindividuen
konnen sich auBerdem auch im Bazillenleibe anderswo Kornchen linden,
die nahe der Oberflache gelagert sind. Um sicher zu sein, daB es sich
tatsachlich nur um eine eiufache Gestaltsveranderung handelt, und daB
wir es bei unserer Arbeit nicht etwa mit einem anderen Bazillus zu tun
haben, wurden weitere Untersuchungen angestellt. Wir machten nhm-
lich aus dem Sediment einer Ascites Bouillonkultur (die jene gebiahten
Bazillen enthielt) eine Sticlikultur in Ascitesagar und erhielten wieder
die ursprfinglichen, sehr feinen, polgefarbten Bazillen. Der Erfolg war
der gleiche, wenn wir die Kultur auf schief erstarrten Ascitesagar impften.

Wir impften mit dem Eiter eines Leberabszesses aus dem Fall V,
zu Zsolna ein Kaninchen (Nr. 73); an der Injektionsstelle entwickelte

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298 CeDtralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

aich nach ungeffihr 6 Tagen ein Abszefi und dach 16 Tagen waren an
dieser Stelle 2 Knoten zu fiihlen von der Grofie je einer NuB, die sich
nach Spaltung der Haut leicht entfernen liefieo. Diese Knoten bestanden
aus einer dicken weiBen Masse, in welcher sich viele Polffirbung zeigende
Bazillen fanden. Aus diesem Eiter wurden hohe Ascites-Agarrohren
geimpft; nach 48 Std. entwickelte sich Ifings des Stichkanals, jedoch
1 cm unter der Oberflfiche, eine ganz typische Kultur mit charakte-
ristischen feinen Bazillen. Gleichzeitig wurden auch aerobe Ascites-
Bouillonkulturen angelegt; in den letzteren wuchsen in der bekannten
Weisc aufgeblfihte, Polffirbung aufweisende Bazillen. Auffallend war es
nur, dafi auch in den aeroben Rdhren eine Kultur anging. Diese Er-
scbeinung konnten wir uns nicht gleich erklfiren. Die einfachen Bouillon*
kulturen, die gleichzeitig angelegt wurden, wiesen keine Entwicklung anf.
Es sei hier erwfihnt, dafi bei alien Ueberimpfungen stets parallel auch
aerobe Ascites-Bouillonrbhren, sowie aerobe und anaerobe Nfihrbouillon*
rdhren beimpft wurden. War die flberimpftc Kultur rein, so blieben es
auch diese Kontrollrohren stets. Wir versuchten nun, die Kultur ans
der aeroben Ascites*Bouillon weiterzuimpfen; sie verhielt sich von
nun an ganz regelmfifiig; bei dieser Ueberimpfung gedieh sie in aerober
Ascites-Bouillon nicht mehr, wfihreod unter anaeroben Bedingungen sie
recht fippig wuchs. Dasselbe Phfinomen sahen wir sich bei einem 2. Eiter
wiederholen. Ich glaube, dafi diese Erscheinung ebenso wie die Tarozzi-
schen Kulturen gedeutet werden mfissen; nur war hier die Leber durch
den in grofierer Menge flbertragenen Eiter ersetzt; auch konnte dies
nur in jenen Fallen konstatiert werden, wo Eiter zwecks Impfung in
Ascites-Bouillon iibertragen wurde, wfihrend dann, wo nur eine reine
Kultur iiberimpft wurde, eine Entwicklung in aeroben Ascites-Bouillon-
rohren nie eintrat. Ich glaube, dafi man darauf iramer achten muB,
dafi, wenn man Bakterien samt eiweifireichen Substanzen (z. B. Eiter)
auf Nfihrbdden impft, diese sich oft anders verhalten, als sie sich an
dem fraglichen Nfihrboden verhalten wflrden, wenn sie allein ohne
fremde Materiale iibertragen wfiren. Als Beispiel sei ein Fall erwfihnt,
wo die vorhandene Eiterung durch einen anaeroben, ausschliefilich auf
asciteshaltigem Nfihrboden wachsenden Streptococcus verursacht
war. Wir erhielten in den anaeroben, gewfthnlichen AgarnfihrbSden
ebenfalls eine Kultur, mit aller Wahrscheinlichkeit durch das im Eiter
iibertragene Eiweifi verursacht. Wir wissen ja, daB, wenn wir eine
grofiere Menge eines Trippereiters auf gewbhnliche Agarplatten ver-
impfen, sich hier Gonokokken entwickeln konnen, oder wenn wir ge-
wohnliche Agarplatten mit viel Sputum bestreichen, wir darauf schfine
Tuberkelbazillenkulturen erhalten konnen.

Das Sediment der aus dem oben erwfihnten KaninchenabszeB
(Nr. 73) stammenden, auf Ascitesagar angegangenen, dann in Ascitesagar
uberimpften frischen Kultur impfte ich auf 2 weitere Kaninchen: einmal
intravenos (Nr. 80) und einmal subkutan (Nr. 81). Es sei hier erwfihnt,
dafi die Ascites-Agarkultur sehr feine, polgeffirbte Stfibchen zeigte, die
Bouillonkultur, die ich zur Tierimpfung benutzte, teils aus grofien, ge-
blaliten, polgefiirbten Bazillen, zum kleineren Teil aus rundlichen Ge-
bilden, endlich aus vereinzelten, gramnegativen, feinen, Polffirbung ver*
missen lassenden Bazillen.

Das intravenos geinipfte Kaninchen (Nr. 80) ging nach 13 Tagen
ein. 5 Tage vor dem Tode bemerkten wir, dafi das Tier seinen rechten
Full sellout und nicht darauf tritt. Zu dieser Zeit konnte ungeffihr in

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B41a Johan, Beitrfige zur Biologie des Bac. pyog. anaerobius. 299

der Mitte der dorsalen Wirbelsaule, mehr nach links, ein Knoten von
der GroBe einer italieniscben HaselnuB gefQhlt werden.

Bei der Sektion wurde in dem recbten Knochelgelenk Eiter gefunden
mit einem AbszeB in der Nachbarschaft, der nahe zum Durchbruche
stand. Wir untersuchten auch die Knochen und fanden in der Mark-
kohle der rechten Unterscbenkelknochen dicken Eiter (an der anderen
Seite war rotes Mark vorhanden). Ans dem erwahnten Abszesse des
Rfickens entleerte sich dicker, zfiher Eiter.

In den Strichpr&paraten fanden sich die ganz typiscben, gramnega-
tiven, Polfirbung aufweisenden Bazillen, die sich auf den NahrbSden
typisch verbielten und in Ascites-Agarstichkulturen sehr feine, polgefarbte
Stabchen, in flQssigen Nahrmedien groBe geblahte Bazillen bildeten.

Bei dem subkutan geimpften Kaninchen (Nr. 81) entwickelte sich
ca. nach 10 Tagen an der Impfstelle ein AbpzeB, der am 14. Tage am
gr5Bten war, dann sich wieder allmahlich verkleinerte, so daB nach
4 Wochen an der Stelle nunmehr bloB ein kleiner Knoten tastbar war.
Nach 2 Monaten wurde das Tier sehr schwach und zog die Hinterbeine
nach. Zu dieser Zeit entblutete ich das Kaninchen. Bei der Sektion
fand ich bloB an der Injektionsstelle einen haselnuBgroBen AbszeB,
w&hrend in den Knochen, iih Wirbelkanal sich nicbts Pathologisches
nachweisen lieB. ’Im AbszeBinhalt waren etliche typische Bazillen. Ich
verimpfte das Material auf verschiedene NahrbSden; die Kulturen gingen
erst recht spat an, so z. B. in den Ascites-Agar Stichkulturen erst am
8. Tage, in Ascites-Bouillon nach 2 1 /* Tagen. Die Kulturen waren
(kbrigens ganz charakteristisch; es bildeten sich namlich in den flQssigen
Nahrmedien lange, dicke Bazillen, an kompakten kleine feine Stabchen.

Ich glaube, durch obige Untersuchungen dargetan zu haben, daB
das erwahnte feine Stabchen und die stark aufgeblQhten
Bazillen nur Gestalts- und GrSBenverQnderungen eines
Mikroben sind, da die eineFormindie andere durch Ueber-
impfung auf verschiedene Nahrbbden QbergefQhrt werden
kann. Verimpfen wir einem Tier die geblabten Bazillen,
so entsteht an der Injektionsstelle ein AbszeB, in dessen
Eiter nur noch feine Stabchen sind. Wir sehen also in
den flQssigen NahrbQden die gebiahten, in den festen die
feinen, zarten Formen des Bazillus. Der Uebergang kann ex-
perimentell ganz regelmQBig erzielt werden; es sei aber erwahnt, daB
in den flQssigen NahrbQden der Bazillus schneller abstirbt. Je spQter
die Weiterimpfung aus dem flQssigen XQhrmedium geschieht, desto mehr
Bakterienmaterial muB auf den neuen Nahrboden Qbertragen werden.

Es gelang uns nicht, nach dem Tode des oben erwahnten Kaninchens
(Nr. 81, das Kaninchen verschied ca. 2 Monate nach der Impfung, als
der AbszeB schon stark zurQckgegangen war) den Bazillus aus dem

Blute und der Milz herauszuzuchten.

* *

*

Wir untersuchten das Serum des schon wiederholt erwahnten Ka-
ninchens Nr. 81 mit RQcksicht auf die Frage, ob sich spezifische Anti-
kflrper gebildet hatten. Agglutinine konnten darin nicht nachgewiesen
werden, toils weil eine homogene Bakterienemulsion weder durch Reiben
noch durch SchGtteln mit Glasperlen gelang; wurde das doch bis zu
einem gewissen MaBe erreicht, so konnte doch die Reaktion wegen der
Spontanagglutination nicht verwertet werden. Die Reibmethode nach
Plaut lieB uns ebenfalls im Stich.

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* Original frem

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300 CentraibL f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 67. Heft 4.

Icb ging desbalb zur Forschang nach komplementbindenden Anti-
kfirpern fiber. Das Serum wurde 30 Min. bei 56 0 C inaktiviert. Als An¬
tigen wurde eine Flflssigkeit angewandt, die vom Bodensatz enter
ca. 3 Wocben alten Ascites-Bouillonkultur abpipettiert, dann 2 Std. bei
56° C gehalten wurde. Als Komplement wurde frisches Meerschweinchen-
serum, als tndikator die titrierte Menge eines Hammelblutarnbozeptors
uud 5-proz. Hammelblutkorperchen-Emulsion benfitzt. Bei 0,2 ccm An¬
tigen und 0,1 ccm Serum war eine vollkommene Hemmung der H&mo-
lyse vorbanden.

Der Versuch wurde mit Serum zweier normaler Kaninchen wieder-
holt; eine BiDduDg blieb bei diesen stets aus. Ebenfalls blieb sie negativ.
wenn das benutzte Antigen aus Typhusbazillen Oder luetiscber Leber
bergestellt war. Da die Bazillen, welcbe zur Kaninchenimpfung benutzt
wurden, in Ascites-Bouillon emulgiert waren, konnte nicbt obne weiteres
die Mfiglichkeit ausgescblossen werden, daB die bei der Reaktion nach-
gewiesenen Antikfirper vielleicht bloB dem EiweiBe der Ascites-Bouillon-
flfissigkeit entstammen. Desbalb wurde der Versuch wiederholt, und
zwar mit jener Ascites-Bouillonmischung, die als Nfibrboden benutzt
wurde; in diesem Falle blieb die Koraplementbindung ganz aus.

Die Reaktion wurde also nicbt durch die Antikorper
der Ascites-Bouillonipischung, sondern durch spezifische,
auf die Bakterieninjektionen im Kaninchenserum ent-
standene Antikfirper bewirkt. In dem eben beschriebenen Ver-
suche wurde der Antikdrpergebalt im Serum eines solchen Kaninchens
nachgewiesen, das mit einer Bakterienemulsion geimpft wurde, die auf-
gebl&hte Bazillen enthielt. Wir untersucbten aber weiter auch
das Serum eines Kaninchens, das mit dem Eiter eines Leberabszesses
aus dem 5. Falle zu Zsolna (das also bloB feine Stfibchen enthielt) ge¬
impft wurde. Bei diesem Versuche wurde das Antigen folgenderweise
bergestellt: das Kondenswasser einer 5-tagigen anaeroben Menschenblut-
serumagarkultur, in dem sicb Bazillen massenhaft befanden, wurde ab-
gesaugt, mit der gleicben Menge physiol. Kocbsalzldsung verdunnt.
abzentrifugiert; zur reinen Flflssigkeit wurde so viel mit 2,5 proz. Karbol-
sfiure versetzte 0,85-proz. Kochsalzlfisung gegeben, daB sie 0,5 Proz.
Karbolsfiure enthielt. Die Blutentnahme gelang bei diesem Kaninchen
recht schwer, weil das Blut jeden Augenblick gerann. Da uns desbalb
nur kleine Mengen Serum zur Veritigung standen, wurde die Reaktion
mit kleinen Mengen eingestellt. Bei 0,01 ccm uud 0,03 ccm Serum war
die Hemmung der Hfimolyse vollstfindig.

Es gelang uns auch in diesem Falle, spezifische Antikorper nachzu-
weisen, wenn auch in geringerer Menge; ich muB hinsichtlich dieses
Unterschiedes darauf hinweisen, daB die Blutentnahme in dem 1. Falle
1 Monat, hier 16 Tage nach der Impfung geschah.

Da unsere Versuche beztiglich des Nachweises komplementbindender
Antikorper stets so prompt positive Reaktionen gaben, tauchte die Frage
auf, ob diese auch beim Menschen vorhanden sind. Es standen uns
Sera aus den Fallen zu Zsolna -nicht zur Verfflgung; wir hatten aber
noch 2 steril aufbewahrte Blutsera aus Fallen in Balassagyarmat (ans
dem Jahre 1915). Obwohl diese Sera schon sehr alt (zur Zeit der Unter-
suchungen schon etwa 22 Mon.) waren, gelang es docb, mit dem einen

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B41a Johan, Beitrage znr Biologie des Bac. pyog. anaerobius. 301

[Bezeichnung: Liessner 1 )] eine positive Komplementbindung zu erhalten,
wahrend das zweite bei der Reaktion eine Starke Eigenhemmung auf-
wies; zu weiteren Versuchen (Austitrieren der Eigenhemmung) fehlte
rnir genfigendes Serum.

Als Antigen wurde jenes verwendet, welches bei den Versuchen
mit dem Serum des Kaninchens Nr. 81 zur Anwendung kam, nSmlich
eine rein abpipettierte Fltissigkeit aus Ascites-Bouillonkulturen, die mit
den St&mmen aus den Fallen zu Zsolna angelegt wurden. Die Reaktion
wnrde mit den entsprechenden Kontrollen eingestellt. (Antigen 0,3 ccm,
Serum 0,2 ccm: totale Hemmung.)

Das Ergebnis fiel positiv aus.

AuB diesem letzten Versuche konnen folgende SchlQsse gezogen
werden: 1) Im Serum der mit diesen Bazillen infizierten
Menschen entstehen spezifische Antikdrper. 2) Das Serum
wahrend der Endemie in Balassagyarmat Erkrankten re-
agiert positiv mit einera Antigen, das aus einem Bazillen-
stamm, geziichtet aus denFailen in Zsolna, hergestellt
wnrde.

* *

*

Nach diesen Versuchen kann gefragt werden, ob die Identitfit
der Faile von Zsolna und Balassagyarmat (sowie auch der
infizierenden Mikroben) vollkommen erwiesen ist? Sie
kann nunmehr als bewiesen betrachtet werden: l)durchden gleichen
klinischen Verlauf der Faile (es sei nochmals betont, dad an
beiden Stellen bloB Kriegsverwundete daran erkrankten, und daB die
Krankbeit endemisch aultrat); 2) durch das a) morphologisch,
b) ku 1 turell und c)biologisch (durch Tierversuche festgpstellte)
identische Verhalten des Bazillus; 3) durch serologische
Reaktionen; 4) durch identische Sektionsergebnisse;
5) durch identische histologische Befunde.

Die Sektionsergebnisse und histologischen Befunde stimmen

ganz mit jenen Fallen Oberein, die von Prof. Buday beschrieben wurden.

* *

*

Spater bot sich mir die Gelegenheit, einen Kriegsverwundeten mit
Leber- und Lungenabszessen zu sezieren. Da es sich wieder urn einen
Kriegsverwundeten mit demselben Befunde handelte und da weiter eine
andere Ursache far das anatomische Substrat nicht gefunden wurde,
fragten wir uns, ob in diesem Faile nicht auch der in diesem Artikel
behandelte anaerobe Bazillus die Ursache des pathologischen Befundes
sei. Dagegen schien zu sprechen, daB am Rande des Abszesses das
Lebergewebe schmutziggrfln verfarbt war und am Rande die sonst vor-
handeue nekrotische Zone fehlte.

Ueber, diesen Fall wird noch klinischerseits eingehend berichtet
werden. Ich will hier nur erwhhnen, daB im Strichprftparate neben
vereinzelten anderen Mikroben auch die typischen, sehr feinen, pol-

1) Aus liebenswurdieer Mitteilung des Herrn Spitalsdirektor Dr. Bogdan kann
ich die Krankheitsdaten Liessners in folgendem zusammenfassen: Pat. hatie eine
SchuBwunde am Oberarm. Im Krankenzimmer, in dem er lag, waren noch mehrere
Kranke mit Leberabszessen. Ein Verwundeter im Bette nebenan erkrankte ebenfalls
an Leberabszefi. Die Krankbeit Liessners verlief ganz typisch; er befand sich in
einem sehr iiblen Zustande. Als aber schon sein Tod erwarlet wurde, fing sein Fieber
an, langsam zn sinken, und er erholte sich langsam bis zur vollstiindigen Genesung.

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302

Ceatralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 67. Heft 4.

gefSrbten. Bazillen sich vorfanden. Da im Eiter aufier den letzteren
auch noch andere vorbanden waren, so waren anch die Kulturen nicht
rein; der Bazillus konnte auch nicht reingeziichtet werden, da mir damals
zu diesem Zwecke die nbtigen Gerkte nicht zur Verfflgung standen. Die \
typischen polgelarbten, gramnegativen feinen Bazillen waren aber in der J
Kultur gut zu seben. Als ich dann die Kultur in Ascites-Bouillon an- !
aerob uberimpfte, erhielt ich auch die aufgebiahten, typischen Razillen. j
Der Inhalt eines Leberabszesses wurde auch einem Kaninchen sab- 1
kutan eingeimpft; das Tier verendete in 4 Tagen. An der Injektions- j
stelle fand sich ein kleiner AbszeB mit vielen typischen, gramnegativen '
Bazillen, die polgefarbt waren, daneben noch Staphylo- und Strepto- j
kokken. \

Auch das histologische Bild war nicht ganz typisch. Ich suche die
Ursache darin, dad in diesem Falle eine Mischinfektion vorhanden war.
Auf diese Weise kann auch die schmutziggraue VerfSrbung der AbszeB-
umgebung und das volkommene Fehlen der nekrotischen Zone erklirt
werden.

2 andere, noch sp&ter sezierte derartige Ffille boten nichts Nenes.

Sie enthielten im Eiter des Leberabszesses den Bacillus pyogenes
anaSrobius in Reinkultur. Im ganzen scheint dieser Bazillus als
Erreger von Leberabszessen nicht ailzu selten zu sein.

Meine Kulturen dieses Bazillus sind seitdem eingegangen. Der
Stamm wurde aber frtkher schon von Herrn Prof. Buday der Kral-
schen Sammlung flbergeben.

Naohdruck verboten

Wirkung von Bakteriengiften auf Ziliaten.

Von Dr. £ud. Oehler, Frankfurt a. M.

Anmerkung wfihrend der Korrektur in Bd. 86. Heft 6. S. 494.

Im Maiheft des Journal of Physiology, Cambridge-London. Vol. 55.
1921. S. 1—32 bringt R. A. Peters eine Abhandlung: „The substances
needed for the growth of a pure culture of Colpidium colpoda*.
in der berichtet wird, daB die Colpidien durch Waschen von den Be-
gleitbakterien gereinigt und in bakterienfreier Reinzucht ohne gekflrnte
Nahrung in diinnen, aminos&urefreien Nahrlosungen geziichtet werden
konnen. Diese Mitteilungen widersprechen meinen gemachten Erfab*
rungen durchaus. Die Reinigung durch Waschung habe auch ich ver* •
sucht, aber ohne Erfolg. Das bedeutet nichts: eine andero Hand kann
giinstiger greifen. Dagegen habe ich eine Sterilzucht von Colpoda
Steini noch heute zur Verfugung, die alien Proben auf SterilitSt nicht
nur bei mir, sondern auch in andern Anstalten standgehalten hat; und
diese Sterilzucht brachte zweifellos das Ergebnis, daB genannter Ziliat
nur mit gekornter Nahrung, nie mit klaren, tlfissigen Nahrlosungen fort-
geziichtet werden kann. Ein gleiches zeigten verschiedene Am5ben und
Kleinziliaten, die ich in Sterilzucht gewinnen und prflfen konnte. Hin-
sichtlich der SterilitatsprUfung mochte ich darauf hinweisen, daB nach

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Lipschiitz, Der Zellkern als Virustrager.

303

meiner Erfahrung es nicht genfigt, sich nach Peters auf die Entnahme
eines Oesentropfens aus der zu prufenden Flflssigkeit zu verlassen. Bei
diesen dflnnen, wfisserigen, klaren LOsurigen muB man mindestens eine
Pipette voll entnehmen und auf Schrkgagar und Bouillon flbertragen,
urn eine sichere Kontrolle der Bakterienfreiheit zu bekommen. Es wflre
dringend notwendig, die Petersschen Colpidienreinzuchten ausgiebig
nachzuprflfen. Peters hat nnr mit ganz dflnnen, n&hrstoffarmen Lo-
sungen gearbeitet. Die vermeinte Reinzucht mfifite auf gebaltvollere
NShrbflden, auf Vio—Vs Bouillon und Scbrflgagar flbertragen werden.
1st sie bakterienfrei, so mtiBte es gelingen, auf Agar ein Wachstum in
Kolonien zu erzielen, wie bei reingezflcbteten Flagellaten. Erst wenn
alle diese Proben vorliegen, kann von einer Reinzucht und einer Er-
nihrung mit ungekflrnter Nahrung gesprochen werden.

Nachdruck verbolen.

Der Zellkern als Virustrager.

(Die Karyooikongruppe der Chlamydozoa-Strongyloplasmen.)

Von Privadozent Dr. B. Lipschtttz, Wien.

In den Beziebungen der Infektionserreger zu den Geweben des
Organismus tritt bei den unter der Bezeichnung „EinschluBkrankheiten“
zusammengefaflten Affektionen eine besonders ausgeprfigte GesetzmSBigkeit
hervor. Der Calmettesche Versuch bei Vakzine, die Untersuchungen
von Burnet und Lipschfltz bei der Getiflgelpocke, die in der Literatur
vorliegenden Beobathtungen fiber Variola, Scbafpocke, Maul* und Klauen-
seuche etc. lassen es zweifellos gerechtfertigt erscheinen, bestimmte Be-
ziehungen des im Organismus kreisenden Virus zur Haut, bzw. zum
Ektoderm anzunehmen, wobei schon eiri geringfflgiges Trauma zum „Auf-
schlieBen* 4 des Epithels gentigt. Ich habe dieses gesetzmSBige biologi-
sche Verhalten der Erreger als Dermotropismus bezeichnet.

Die eingehende Erforschung der „EinschluBkrankheiten“ der Haut hat
weiter gelehrt, daB die spezilischen Aviditaten der Erreger zu den Epithel-
und Bindegewebszellen der Haut noch eine weitere Abstufung erfahren,
indem das Virus sich nicht nur im Protoplasma, sondern auch gleich-
zeitig im Kern ansiedeln kann, ferner jedoch — und auf diese Tatsache
mflchte ich in vorliegenden Ausffihrungen besonderes Gewicht legen —
bei einer Reihe von Krankheiten das Virus ausschlieBlich zum Kern
der erkrankten Zelle Aviditfit besitzt, ein Vorgang, fflr den ich die Be-
zeichnung Nukleotropismus vorgeschlagen habe (1913). Wflhrend
in frflheren Jahren auf diese biologisch bemerkenswerte Tatsache kaum
geachtet wurde, bin ich heute auf Grund einer Reihe von Einzelbeob-
achtungen imstande, das Typische des Vorganges nachzuweisen, was in vor¬
liegenden Zeilen versucht werden soli.

W&hrend bei bakteriellen Erkrankungen die Virusansiedlung im Kern
vflllig unbekannt ist und Protisten nur ausnahmsweise den Kern von
Metazoenzellen zu befallen pflegen, stellt die nukleflre Lokalisation der
Erreger bei den Chlamydozoen und Strongyloplasmen ein Vorkommnis

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304 CenfcralbL f. Bakt. etc. L Abt Originate. Bd. 87. Heft 4.

dar, das durch die Ausbildang der „Zelleinschlfisse“ im Kern zam Aub-
druck gelangt. Je nacb dem Sitz and dem Verhalten der Einschlfisse zu
den einzelneu Zellbestandteilen hatte ich daber scbon in einer frflheren
Arbeit eine neue Gruppierung der Chlamydozoa und Strongyloplasmen
vorgenommen and neben der Cytooikon* und Karyocytooikon-
gruppe eine Reihe von Krankbeiten zusammengefaBt, die durch aus-
schlieBliche Lokalisation der Einschlfisse im Zellkern gekennzeicbnet sind:
Karyooikongruppe. Als Vertreter dieser Gruppe konnten bisher
nur 3 tierische Krankbeiten aus der Literatur angeffihrt werden: die
Bornascbe Kranlcheit der Pferde, das Virus myxomatosum der Kanin-
chen und die Gelbsucht der Raupen; eine wesentliche Ergfinzung bringen
nun die von mir in der letzten Zeit erhobenen Befunde bei 3 mensch-
lichen Hautaffektionen: Herpes zoster, Herpes febrilis und Herpes ge¬
nitalis, und die hier zu gebende Schilderung der Karyooikongrnppe
soil auf Grund dieser Untersuchungen erfolgen.

In den PrSparaten treten die Kerneinschlfisse („Zosterk6rperchen“,
„Herpesk8rperchen“ a und /?) als rundliche oder elliptische Gebilde auf;
sie stellen daher de facto kompakte, etwa eiformig gestaltete Korper dar,
die natfirlich kleiner sind als der sie beherbergende Kern. Nehmen sie
nur einen Brucbteil des stark geschwellten hydropischen Kernes ein
(z. B. bei Herpes zoster), so zeigen sie verschiedene GrfiBendurchmesser
und beben sich vom hellen Grund (Kernodem) scharf ab. Oft begegnet
man Gebilden, die im Kern wie ein Ei in der Schale liegen, ihn also
nahezu ganz ausfflllen, indem sie entweder bis an die Kernmembran
reichen oder zwischen sich und dieser noch einen schmalen, hellen
Raum frei lassen.

Die Form der Kerneinschlfisse erleidet bedeutende Ver&nderungen
in seitlich komprimierten oder in die Lfinge gezogenen Zellen; die Ein-
schlfisse passen sich dann der Kerntorm an und zeigen Zigarren- oder
Wurst- oder selbst unregelmSBige Formen, die auf einen nicbt geringen
Grad von Plastizitfit der Gebilde hinweisen. Die Lfingendurchmesser
konnen dann (z. B. in den Kernen der Bindegewebszellen der Kaninchen-
cornea) bis zu 6 fi und darfiber betragen.

Die Begrenzung ist im allgemeinen scharf ausgeprfigt, nur hie and
da findet man die peripheren Anteile etwas verschwommen; einen be-
sonders kompakten Eindruck machen die Einschlfisse in den bdheren
Zellagen des Rete Malpighii bei Herpes zoster, in denen sie bis zum
Stratum corneum zu verfolgen sind.

Die Ausbildung der Kerneinschlfisse kann sehr rasch erfolgen, so
z. B. in der mit Material von Herpes febrilis geimpften Hornhaut scbon
nach 7 Std. In der Regel treten zuerst 2 oder mehrere, rundlich-
kugelige, kleinere Einschlfisse auf, aus deren ZusammenflieBen die groBen,
wohl ausgebildeten, in der Einzahl die Kerne nahezu ganz ausffillenden
Gebilde hervorgehen. Der Vorgang entspricht den Bildern bei der Ent-
stehung der machtigen „Geflflgelpockenkorper“ in der mit Geflfigel*
pockenvirus geimpften Taubencornea.

Wahrend im allgemeinen die Kerneinschlfisse homogen erscheinen,
gelingt es zuweilen, nach entsprechender Differenzierung beiHeiden-
hain-Farbung oder selbst durch Hamalaun-Eosinffirbung Einzelheiten
im Bau festzustellen, die fiir die Deutung der Gebilde besonders wichtig
sind. Es liilit sich mimlich die Zusammensetzung der Kerneinschlfisse
aus sehr zahlreichen und feinen, ungefahr gleich groBen KSrperchen

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Lipscbutz, Der Zellkern ale Virustrager.

305

nachweisen, die in einer schwach geffirbten Grnndsubstanz eingebettet
liegen. Dieser Bau entspricht demnach annfihernd den beim Molluscum
(Lipschfltz), Trachom (Halberstfid ter und v. Prow azek), Geflfigel-
pocke und Verruga peruviana (da Rocha Lima) beschriebenen Bildern.
Wie ich dies fflr die „Einschlfisse 1. Ordnung*' (siehe 2. Mitteilung Qber
Chlamydozoa-Strongyloplasmen) als charakteristisch hingesteilt habe,
sind am Aufbau des KerneinschluBgebildes zwei Komponenten zu er-
Hennen: eine von der Wirtszelle gelieferte Kittsubstanz und der als
Virus gedeutete Haufen kleinster Elementarkorperchen (Strongylo-
plasmen).

Das ffirberische Verhalten der Kerneinschlfisse entspricht ganz dem
der anderen Zelleinschlfisse (Molluscum, Vakzine-Variola, Geflugelpocke
etc.), worfiber ich in frflheren Mitteilungen berichtet habe. In ffirberischer
Hinsicht erscbeinen daher auch die Kerneinschlfisse durch ihr ampho-
philes Verhalten gekennzeichnet. Bei Behandlung mit einem basischen
and einem sauren Farbstoff zeigen sie Afl'initfit zu letzterem; sie sind also
eosioalfin bei der Hfimalaun-Eosinffirbung; ffirbt man nach Pappenheim
(also mit einem Gemisch zweier basischer Farbstoffe), so nehmen sie Methyl-
grfln an. Nach alien meinen bisherigen Erfahrungen fiber die Chlamydo-
zoonosen der llaut dfirfte diesem tinktoriellen Verhalten der Zelleinschlfisse
gesetzmSBige Bedeutung zukommen, und es spielt insofern eine Rolle,
als wir auf Grund dieser elektiven Ffirbeaffinitfiten eine sichere Trennung
der Kerneinschlfisse von den Nukleolen vorzunehmen imstapde sind,
eiDe Frage, auf die ich schon in frfiheren Arbeiten wegen ihrer grund-
sfitzlichen Bedeutung eingegangen bin und die auch hier eingehehend
erdrtert werden mufi.

Zuvor aber ist es notwendig, das Verhalten der Nukleolen in den
von EinschluBorganismen befallenen Kernen zu schildern, wie es sich
sowohl in den krankhaften Produkten der menschlichen Haut als auch
in den mit Material von Herpes experimentell erzeugten Keratitiden
darbietet.

Beim Menschen bleiben die Nukleolen stets innerhalb der Kerne
gelegen; beim Studium der Karyooikongruppe werden also ins Proto-
, plasma flbergetretene Kernsubstanzen — Befunde, wie sie sich z. B. beim
Molluscum und bei der Geflfigelpocke nachweisen lassen — regelmSBig
vermiBt. Bei Herpes zoster und Herpes genitalis findet man die Nukleolen
verkfimmert und an die Peripherie des Kernes verdrangt, wo sie oft der
Kernmembran anhaften.

Bei der Keratitis des Kaninchens lassen sich die diesbezfiglichen
Verhiltnisse an den Nukleolen nicht studieren, weil hier bekanntlich die
Nukleolen tiberhaupt sehr selten zur Ausbildung gelangen, bezw. meist
nicht darstellbar sind — eine Tatsache, auf die von Wassiele wski',
ich u. a. schon hingewiesen haben. Anders liegen die Verhaitnisse beim
Meerschweinchen; hier kfinnen jedoch nur die allerjflngsten Stadien heran-
gezogen werden, da die hydropische Kerndegeneration ungemein frflh
einsetzt und weitere zytologische Studien vereitelt. Hier hat man des
flfteren Gelegenheit. neben dem Einschlufikorper den Nukleolus, peripher
verlagert und different gefarbt, aufzutinden.

Ffir die ffirberische Trennung der Kerneinschlfisse von den Nukleolen
hat sich die exakt ausgeffihrteGiemsa-Farbung nach Fixation in Sublinfht-
alkohol besonders bewfihrt, wobei Nukleolen tiefdunkelblau, Einschlfisse
hingegen schfin rot gefarbt erscheinen. Aber auch bei der Hfimalaun-
Into Abt. Ori*. Bd. 87 . Heft. 4. 20

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CentralbL f. Bakt. etc. L Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

Eosinf&rbung nach gleicher Fixation ist die Trennnng leicht durchzuffihren
(Einschliisse sattrot, KernkOrperchen dunkelblau). Scharfe FSrbekontraste
liefert ferner die BenQtzung des Pappenheim schen Farbstoffes (Alkohol-
fixation): Nukleolen leuchtend rot, EinschlQsse blaBblau. SchlieBlich
gelingt das Auseinanderhalten der Gebilde auch bei der Heidenhain-
FSrbung, indem bei stfirkerer Differenzierung die EinschlQsse graugelb
werden, w&hrend die Kernkorperchen den tiefdunklen, schwarzen Farben-
ton beibehalten.

Diese geradezu entgegengesetzten farberischen Affinitaten der Nukle-
olen und KerneinschlQsse, ihre ungleichartigen Formverh&ltnisse, die
Moglichkeit, beide Gebilde innerhalb des Kernes zwar nebeneinander
nachzuweisen, sie aber mOhelos auseinanderzuhalten, and schlieBlich
der oft zu erbringende Nachweis eines charakteristiscben Baues der
KerneinschlQsse, wahrend die Nukleolen homogen gefdrbt bleiben, lassen
die Annahme einer Ableitungder KerneinschlQsse von den Kernkdrperchen
nach gar keiner Richtung hin gerechtfertigt erscheinen.

Im Rahmen dieser Schilderung der KerneinschlQsse verdient ihre
Lokalisation in den Kernen der Bindegewebszellen besondere
Beachtung. Sowohl in Endo- und Perithelien der menschlichen Haut-
effloreszenzen (Herpes zoster und Herpes genitalis) als auch in den fixen
Hornhautkorperchen der mit Herpesmaterial geitnpften Kaninchenhornhaat
lassen sich hSufig KerneinschlQsse nachweisen. Die Bilder weisen ein*
dringlich auf die innigen und gesetzmaBigen Beziehungen des biologiscben
Vorganges der EinschluBbildung zu den den Zellkern aufbauenden Sub-
stanzen hin; sie rechtfertigen auch die Bezeichnung „Nukleotropismus“
als Ausdruck fQr die unserer Auffassung nach erfolgte nukleare Virus-
ansiedlung, die die Bildung von Reaktionsprodukten des Kernes in Gestalt
der „KerneinschlQsse“ auslost.

Namentlich die fixen Bindegewebszellen der Kaninchencornea weisen
sehr charakteristische morphologische Bilder auf. Der Kern dieser
Zellen schwillt stark an und weist eine zentral gelegene Vakuole auf
(Kernodem), in der der langliche, oft zigarrenformig gestaltete und gut ge-
farbte EinschluB zu sehen ist. Im Querschnitt getroffen, zeigen derartige
Zellen Siegelringformen.

Weisen schon die bisher gemachten Angaben auf die besondere Rolle
der KerneinschlQsse hin, so kann die wissenschaftliche Grundlage fur ihre
exakte Deutung doch nur auf dem Wege der experimentellen Erzeugung
der Gebilde gewonnen werden; wersich daher mit ihrera Sta¬
dium in zukQnftigen U'ntersuchungen wird beschQftigen
wollen, wird immer wieder aufdas experimentelle Arbeits*
gebiet zurQckkommen mQssen. Hier bietet sich auch die Moglich-
"keit, die Untersuchung in beliebigen Phasen des Ablaufes des biologischen
Prozesses und unter den verschiedensten Versuchsbedingungen vorzu-
nehmen.

Als Material koramt, wie bereits erwahnt, die geimpfte Kaninchen-
hornhaut in Betracht, die ein nahezu ideales Studienobjekt fQr vorliegende
Untersuchungen abtribt. Zur Impfung dient Miterial von Herpes febrilis
Oder Herpes genitalis, wQhrend Zosterblaseninhalt unregelmSLBig angeht,
Ahnlich etwa dem Haften des svphilitischen Virus bei der experimentellen
Erzeugung der Keratitis parenchyinatosa.

Ist das Ausgangsmaterial Herpes febrilis, so untersucht man inner¬
halb der ersten 24 Stunden nach der Impfung, nachdem die hydropische

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Lipschiitz, Der Zellkern als Viruatrager.

307

Kerndegeneration bier ungemein frtih einsetzt und das Beobachten
zytologischer Einzelheiten spflterhin erschwert Oder sogar ganz unmbglich
macbt.

Verwendet man Material von Genitalherpes, so verlSuft der ProzeB
mebrsubakut; hier hat sich der 3. Tag nach der Impfung als zeitliches
Optimum fur die Untersuchung erwiesen. Stets sind die Zellbilder
ungemein charakteristisch uud fur den einigermaBen Erfahrenen zurnm-
dest ebenso eindeutig wie die Befunde der Gu arnierischen Kbrper in
der vakzinierten Kaninchenhornhaut.

KerneinschlQsse habe ich bisher in der Kaninchencornea noch nach
7 Tagen aufgefunden; im allgemeinen verschwinden sie schon nach kurzer
Zeit, offenbar infolge der durch die intensive bydropische Kerndegeneration
bedingten Kernsch&digung (Herpes febrilis). Da durch das starke inter-
zellulare Oedem die Zellen aus dein Verband gesprengt und durch den
Lympbstrom mechanisch entfernt werden, so gehen mit ihnen auch die
Kerneinschlflsse zugrunde.

Die experimentelle Erzeugung der Kerneinschlflsse (bei Verimpfung
des infektibsen Materials von Mensch auf Tier, von Mensch auf Mensch
[Herpes genitalis] Oder auch von Tier auf Tier) gestattet daher auch
meines Erachtens die Gebilde bezflglich ihrer biologischen Wertung
vollkommen den anderen wohl bekannten Zelleinschliissen an die Seite
zu stellen, und ich deute sie daher auch als Reaktionsprodukte der
Kernsubstanzen auf das im Kern parasitierende lebende Virus. Als
solches dflrften wohl fihnlich wie bei den anderen EinschluBkrankheiten
die kleinsten Kbrperchen zu deuten sein, von denen schon oben hervor-
gehoben wurde, daB sie ofters (z. B. bei Herpes zoster) in groBen
Haufen, die Einschliisse aufbauend, angetroffen werden. Ihr Studium
wire noch in weiteren Untersuchungen zu verfolgen, ebenso die
Frage ihrer eventuellen Durchgangigkeit durch Filter.

An dieser Stelle mbchte ich noch mit einigen Worten das Verhalten
gewisser Gebilde erwahnen, die in vereiuzelteu Praparaten neben den
Einschlflssen aufgetreten waren und denen trotz gewisser Aehnlichkeiten
mit letzteren zweifellos eine andere zytologische Wertung zukommt. Es
sind dies rundliche, leuchtend rote (Hamalaun Eosinfarbung) und glan-
zende, scharf konturierte, verschieden groBe Gebilde, die bald im Proto¬
plasma, bald in den Kernen auftreten und im ersten Augenblick an
echte Einschlflsse erinnern. Sie entsprechen den uncharakteristischen
Befunden, denen man zuweilen nach Impfung der Kaninchencornea mit
verschiedenartigem, selbst nicht infektibsem Material in sparlicher Zahl
begegnet und die ich schon frtiher bei anderen Untersuchungen kennen
lernte. Sie dflrften als durch hyaline oder kolloide Degeneration um-
scbriebener Anteile des Zyto- oder Karyoplasmas entsteben und haben
mit den gesetzm&Big zur Ausbildung gelangenden Einschlflssen nichts
zu tun; wegen ihrer Aehnlichkeit mit letzteren kann man sie als „Pseudo-
einschlflsse 44 bezeichnen.

Die Ausbildung der Kerneinschlflsse lost mit groBer Regel maBigkeit
eine Reihe von Verflnderungen an den prflformierten Kernbestandteilen
aus, die auch im Experiment wiederkehren und eine etwas eingehendere
Besprechung erheischen. Im allgemeinen erscheint der Kern bei dem
Auftreten mflchtiger Einschlflsse vergroBert oder geschwellt. Die weiteren
VerSnderungen sind dann eine Folge der gegenseitigen mechanischen
Behinderung der wachsenden „EinschluBkbrper“ und des gewissermaBen

20 *

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308

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

als Scbale dienenden Kernes. Diese VerSnderungen des Kernes sindaller-
dings bei den einzelnen hierhergehflrigen Krankheiten graduell verschieden,
je nach der Iutensit&t des Prozesses und je nacb dem langsameren Oder
rascheren Ablauf des Vorganges.

Das normale Kerngerflst verkflromert nnd gebt zngrunde and damit
natflrlich auch die FShigkeit der Kernteiluug durch Mitose. Der Kern-
raum hat eine grbBere Menge Wassers aufgenoimnen und erscheint mehr
oder weniger hydropisch. Besonders starke Verflnderung erleidet die
Kernmembran. Sie zeigt in der Regel Hyperchromatose und kann zu-
weilen auch etwas verdickt sein, und zwar ungleichmaBig, so dafi stSr-
kere Anteile mit schwScheren abwechseln: die Kernmembran siebt daun
wie punktiert oder scheinbar unterbrochen aus und gewfibrt zierlicbeo
Anblick. Infolge der mechanischen (durch das Wachsen des EinschluB-
kbrpers bedingten) Verh&ltnisse im Kernraum wird die Kernmembran
deformiert und sieht hfiufig wie zerknittert aus, sie verliert dann ihre
Kreis- oder Ellipsenform und nimmt unter Umstflnden eine recht bizarre
Gestalt an. Diese Deformierung der Kernmembran bleibt aus, wenn der
ProzeB weniger stttrmisch verlfiuft und die KerneinschlQsse auf einer
bestimmten GrOBe verbarren, obne den Kernraum ganz auszuffillen,
also ein Verhalten zeigen, dem wir auch bei der Zytokary ooikon-
gruppe (Variola, Paravakzine) begegnen.

Die Nukleolen erleiden ebenfalls VerSnderungen, die schon oben aus-
fflhrlich geschildert worden sind. Besonderes Interesse bietet hier dem
Zytologen die sowohl in menschlichen Hautefflorezenzen als auch bei
der Keratitis des Kaninchens ' unter dem Einflufi der Kerneinschlaft-
bildung ungemein prflgnant auftretende „ballonierende Degeneration 11
(Unna) der Epithelien. Auf diesen Teil der Untersuchungen habe ich
in einer frQheren Arbeit ausfiihrlich hingewiesen; es kommt dabei znr
amitotischen Kernteilung der Epithelien unter dem EintluB des spezihschen
Kernparasiten, wodurch vielkernige Epithelzellen entstehen.

Alle hier geschilderten Einzelbeiten lassen sich natflrlich nur bei der
Durchsicht einer grbBeren Anzahl von Prflparaten, die den verschiedeneo
in die Karyooikongruppe gehbrenden Krankheiten entsprechen, nadi-
weisen.

Die Entstehung der Kern ein schlflsse mbchte ich im Sinne der
Chlamydozoenlehre folgendermafien erklflren: Das nukleotrope Virus
16st ungemein rasch — wie die Tierversuche zeigen, sehon nach weni*
gen Tagen, ja selbst Stunden — eine Revolutionierung der prSformierten
Kernbestandteile und eine chemische Dekompositiou der prflexistenteo
Kernsubstanzen aus. Soweit wir mit fdrberiscben Verfahren und auf
zytologischer Beobachtung fuBenden Arbeitsmethoden in den Ablauf des
Vorganges Einblick zu nehmen vermogen, handelt es sich um zwei
miteinander parallel verlaufende Prozesse. Der eine ist ein kernmor*
phologischer, der andere ein kerntinktorieller Vorgang. Durch den Ein-
fluB des sich rasch vermehrenden Kernvirus werden Reaktionsprodukte
in Gestalt einer Hypertrophie vorzugsweise oxyphiler Kernsubstanzen
ausgelost, die, an Masse zunehmend und das Virus mantelartig umgebend,
schlieBlich das kompakte und scharf umschriebene „Zoster“-, bz».
„Herpeskorperchen“ darstellen. An die Kernmembran wird dabei basi-
chromatische Kernsubstanz in groBeren oder geringeren Mengen ver-
schoben.

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Lipschutz, Der Zellkern &U Virus trager.

309

Der Vorgang der KerneinschluBbildung beruht nach unseren Vor-
stellungen demnach auf chemischen Alterationen prSexistenter Kern-
substanzen uod auf Hypertrophie solcber und filhrt hierdurch zur
Entstehung bestimmter kernmorphologischer Bilder. Mit der Chromatolyse,
die nur eine spezitische konstante Farbenreaktiou darstellt, darf der hier
beschriebeue Kernvorgang schon wegen seiner morpbologiscben End-
produkte nicht identitiziert werden.

FQr die Diagnose der Kerneinschlusse glaube ich wie fiir die der Zell-
einschlusse Oberhaupt folgende Postulate aufstellen zu raflssen:

1) GesetzmiBiges Auftreten in groBer Zabl und in cbarakteristiscber
Form;

2) bestiramtes tinktorielles Verhalten (nach alien meinen bisherigen
Untersuchungen flber „EinschluBkrankheiten“ der Haut sind die Gebilde
amphophii);

3) bestimmte Beziehungen in ibrem zelltopographischen Verhalten
(zum Plasma oder Kern der Zelle);

4) die Moglichkeit der experimentellen Erzeugung der Einschlusse
durch Ueberimpfung (von Mensch auf Mensch, von Mensch auf Tier oder
von Tier auf Tier), wobei sich wiederum die bisher angeiiihrten Merk-
raale in typischer VVeise vorfinden miissen, und

5) in einzelnen Fallen die Moglichkeit des Nachweises eines charak-
teristischen Baues: Zusammensetzung aus dem kdrperfremden Virus
(Strongyloplasmen) und dem Reaktionsprodukt (Kittsubstanz) der Wirts-
zelle.

Urn eine mSglichst scbarfe Definition des Begriffes „KerneinschluB“
zn geben, sei daber hier nochmals angefQbrt, daB ich darunter verstebe:
die Ausbildung eines in der Kernhohle liegenden, ver-
schieden gestalteten, meist kugeligen, gut f&rbbaren,
von denNukleolen stets leicht differenzierbaren Korpers,
der entweder kompaktund homogen erscheint oder auch
eine weitere Differenzierung zeigen kann und die Kern-
hdhle teilweise oder auch nahezu ganz ausfOllt, wobei
jedoch der „EinschluBkorper“ stets durch eine, wenn
auch sehr schmale, helle Raumspalte von der Kernmem-
bran getrennt ist. 1st der ,.KerneinschluB“ von geringen Dimen-
sionen, so ist der erw&hnte belle Raum entsprechend groBer.

Die Erreger dieser Krankheitsgruppe vollbringen zumindest einen
Teil ihres Lebens in den Zellkernen des tierischen Organismus, mit
denen sie vorflbergehend eine Art symbiotischen Verh&ltnisses eiugehen.
Letzteres dflrfte bei manchen Affektionen, mit deren Studium ich mich
schon seit Ifingerem befasse, betrSchtliche Zeit (Monate und Jahre)
andauern, wShrend bei akut entzflndlichen Dermatosen (z. B. bei der
Herpesgruppe) die Wirtszellen rasch absterben und entfernt werden,
womit auch das Schicksal der Kerneinschlfisse besiegelt ist.

Wie aus vorliegender Arbeit zu entnehmen ist und wie ich dies
schon in eiuer frflheren Mitteilung hervorgehoben habe, stellt das fitio-
logische Studium der EinschluBkrankheiten im wesentlichen ein Zell-
studium dar. Die bei der Karyooikongruppe nachgewiesenen Kern-
verSnderungen bieten meines Erachtens wertvolle morphologische und
tinktorielle Handhaben fiir die atiologische Erforschung einer weiteren
Reihe infektioser, bisher fast gar nicht studierter Dermatosen dar, mit
denen ich mich seit einiger Zeit befasse. Die Zahl der in diese Gruppe

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310 CentralbL f. B&kt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

der Chlamydozoa-Strongyloplasmen eingereihten Krankheitserreger dfirfte
daher auch durch weitere Untersuchungen eine Vermehrung erfahren 1 :.
Aber nicht allein parasitare KraDkheiten des Menschen und der Tiere
mit bisher nicht ertorschter Aetiologie dflrften sich als durch Chlamydo-
zoen und Strougyloplasmen hervorgerufen erweisen, vielmehr mochte
ich auf Grund allgemeiner biologischer Ueberlegung ahnliche Unter-
suchungsergebnisse auch beim Studium einzelner pflanzlicher Infektions-
krankheiten voraussetzen. Somit ergibt sich hier noch ein sehr weites
Feld der Betatigung fiir mikroskopisch-atiologische und zytologische
Untersuchungen.

Literatnr.

De Beaurepaire-Aragao, Brazil medico. 1912. Nr- 47. — Joeet, Zeitechr l.
Infekikrb. d. Hausl. Bd. 10. 1911. — v. Prowazek, Arch. f. Protisttnk. Bd. 10. H07.
— Lipschutz, Centralbl. f. Bakt. 1913: Handb. d. path. Protozoen. Eld. 1. H. 2;
Wien. klin. Wochent*chr. 1919. Nr. 34. u. 47; Wien. med. Wochenschr. 1920. Nr. 32;
Wien. klin. Woohenecbr. 1920. Nr. 38; Wien. med. Wochdnschr. 1921. Nr. 5; Dermat. VVoch.
1921; Arch. f. Derm. 1921.

Nachdruek verbote*

Entwicklungsliemmeiide Wirkung von Kupfer-Glas-
verbindungen auf das Wachstum von Bakterien.

Ik Von Prof. Dr. GrSfin y. Linden, Bonn.

Eine Reihe von Forschern (1—5) haben gezeigt, daB die Wftndevon
Glasbehaitern, in denen Kupfersalzlfisungen gestanden hatten, bakterizide
Eigenschaften annehmen, und auch dann noch entfalten, wenn die GefSBe
nach dem Ausleeren der Kupfersalzlosung mit Wasser verschiedentlich
ausgesptilt werden. Sie haben ferner gezeigt, daB das Waschwasser
solcher GefaBe bakterizide Eigenschaften annimmt und diese auf andere
GefaBe flbertragen kann. Saxel (4, 5) folgert aus dieser fiberrascheDden
Wirkung, daB die Oligodynamie nicht durch die chemische W 7 irkung allein
erklhrt werden konne, sondern daB hier noch andere Krafte physikalischer
Natur zum Verstandnis der rBtselhaften Wirkungen herangezogen werden
miissen.

Durch meine Arbeit auf dera Gebiete der Chemotherapie (6, 7) war
mir die auBerordentlich stark bakterizide Wirkung bestimmter Kupfer-
salze auf einzelne Bakterienarten, namentlich auf Tuberkelbazillen und
andere pathogene Bakterien, bekannt geworden. Ich konnte, um hier
nur ein Beispiel anzufiihren, Typhusbazillen und Choleravibrionen in
Wasserkulturen durch Zusatz von zimtsaurer Kupferlezithinemulsioo
Oder Dimethylglykokollkupferldsung innerhalb 2 Std. zum Absterben
bringen, in einer Verdiinnung dieser Substanzen, die so minimal war,

1) In jfingoter Zeit haben Levaditi und Harvier fiber das Vorkommeh von „Ei»-
MchluBsen*' in den Kernen der Ganglienzellen bei Encephalitis lethargica berichtet

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v. Linden, Entwicklungnhemniende Wirkung v. Kupfer-Glasverbindungen. 311

daB die Kupferkonzentration, auf das Metall berechnet, 1 :10 Millionen
betrug und der absolute Kupfergehalt, der auf die Bakterien zur Wir¬
kung kam, 0,002 mg nicht Uberstieg. Die WirkuDg dieser mioimaleu
Kupfermengen kam aber nur zur Geltung, wenn sich die Bakterien in
w&sserigen Medien befanden, ohne Zusatz von EiweiBkorpern. In
Bouillonkulturen und auf festen N&hrboden erwiesen sich nur die Tuberkel-
bazillen so auBerordenllich kupferempfindlich, bei den anderen schneller
wacbsenden Bakterien muBte, urn eine ahuliche Wirkung zu erzielen,
das Vielfache der in Wasserkultur zur Abtfltung liihrenden Kupfermengen
verweDdet werden. Nach den Beobacbtungen Saxels schien mir $ber
die bakterizide Wirkung der Kupfer-Siliziumverbindungen, denn um eine
solche muBte es sich in den angeftthrten Versuchen wohl handeln, eine
weit bohere zu sein, als ich sie bisher gesehen hatte. Die Versuche
scbienen mir deshalb der Nachprfilung vert, auch von dem Gesichts-
punkt aus, daB es vielleicht mflglich sein konnte, auf diesem Wege zu
Verbindungen zu gelangen, die durch besonders groBe Bakteriotropie
in der Kupfertherapie Verwendung finden konnten.

Ich variierte den Versuch in der Weise, daB ich mich statt des
Becherglases einer Lflhrschen Spritze bediente, in die ich eine 1-proz.
LOsung von Kupferchlorid aufzog. Ich belieB die Kupferchloridlflsung
24 Std. in der Spritze, spfllte dieselbe dann, nachdem die Kupferlflsung
ausgespritzt war, 2mal mit destilliertem Wasser aus und zog. dann in
die so vorbereitete Spritze eine Emulsion von Micrococcus pyo¬
genes aureus auf, die in 2 ccm Leitungwasser 1 Oese-Bakterienkultur
enthielt; 1 ccm der Emulsion Iflllte die Spritze, der Rest blieb in dem
Uhrsch&lchen, um daraus die Kontrollplatten anzulegen. Die ersten
Platten strich ich nach 1 Std. aus. Auf jede Platte kamen 3 Tropfen
Bakterienaufschwemmung, die vorher umgeschflttelt wurde, um die Keime
gleichmaBig zu verteilen. Die Tropfen wurden gleichm&Big mit der
Platinflse ausgebreitet, und die Platten bei Bruttemperatur 24 Std. be-
lassen. Im Vergleich zur Kontrolle hatte sich die Keimzahl in der Spritze
nach der 1. Std. bereits erheblich vermindert, nach 2 Std. vraren die
Aureus-Keime in der Spritze sSmtlich abgestorben, wkhrend die Kon¬
trolle keine Verminderung ihrer Keimzahl zeigte. Nach 8 Std. und nach
3 Tagen war das Ergebnis dasselbe, die Aureus-Kokken in der Lflhr¬
schen Spritze waren abgetfltet geblieben; sie hatten sich nicht wieder
erholt, die Kontrolle war dagegen, wie vorher, flppig gewachsen. Nach
3 Tagen waren in der mit Kupfer impragnierten Spritze selbst die
wenig kupferempfindlichen Wasserkeime zum Absterben gekommen.
Nachdem ich die LUhr-Spritze entleert und wieder 2mal mit destill.
Wasser durchgespritzt hatte, wiederholte ich den Versuch. Das Ergebnis
war dasselbe wie vorher. Beim 3. Versuch, dem ebenfalls ein 2maliges
Ausspritzen mit destill Wasser vorausgegangen war, zeigten sich die
Aureus-Keime erst nach 48 Std. abgetotet, die bakterizide Wirkung
hatte also abgenommen.

Mit bloBem Auge betrachtet, konnte man an der durch Kupfer¬
chlorid prSparierten Spritze keine VerSnderung erkennen; wenn man die
Glaswaud indessen mit der Lupe besah, so befand sich auf der Innen-
seite des gl&sernen Tubus ein feiner, gelblichbrauner, schleierartiger
Ueberzug.

Einen 2. Versuch maebte ich mit Glaspulver: Glaspulver wurde
gewaschen, getrocknet und gewogen. Es waren 25,8 g. Diese Menge

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312

Centralbl. f. Baku etc. I. AbU Originate. Bd. 87. Heft 4.

trug ich in 20 cctn einer 1-proz. Kupferchloridlbsung ein. Nach 16 Std.
hatte sich ein gelblicber Niederschlag gebildet, der zum Teil auch in
der flberstehenden Fltlssigkeit suspendiert sein muBte, da diese nicht j
bl&ulich, sondern grunlich erscbien. Nach dem Filtrieren, nachdem
die gelben Suspensionen entfernt wareo, batte das Filtrat wieder die
blBuliche Kupferchloridf&rbung angenommen; die Farbe war aber weniger
intensiv als die der verwendeten Lbsung. Beira Vergleichen der F&rbuog \
ergab sich, daB ungefahr Vs des ursprQnglichen Kupfergehaltes aus der i
Lbsung verschwuDden war, was, auf Kupfer berechnet, einer Menge von
ca. 7,2 mg Co entspricbt Das Glaspulver wurde nun gewascben and
getrocknet. Das getrocknete Pulver war von scbwach grflnblauer Fir-
bung. Das 3. Waschwasser enthielt noch kleine, mit Ferrozyankalimn
nachweisbare Kupfermengen. Von diesem imprfignierten Glaspulver
bracbte ich je 1 g in 2 Glasschaichen, in die eine der beiden Schalen <
goB ich 10 ccm einer Paratyidius-, in die andere die gleiche Menge einer
M. aureus-Suspension. Jede Suspension enthielt 1 Platindse voll
Bakterienkultur. 2 Kontrollsch&lchen wurden mit reinem Glaspulver and
den gleichen Mengen Bakteriensuspension versehen. Nach 1 j 3 , l 1 /* und
nach 7 Std. wurden aus alien 4 Schalen Platten angelegt. Die nach
V, und 1V* Std. ausgestrichenen Platten ans den Kupferglaspulverschalen
III zeigten ebenso tippiges Bakterienwachstum wie die Kontrollen, nach
7 Std. waren aber die Keime unter der VVirkung des von Kupfer im-
prSgnierten Glaspulvers abgestorben, w&hrend die Suspensionen der
Kontrollschalen. Qber reinem Glaspulver ebensoviel lebenskrSftige Keime
enthielten wie nach der 1. Std. Das mit Kupferlbsung behandelte Glas¬
pulver entfaltete somit ahnliche bakterizide Eigenschaften wie die mit
Kupferldsung impr&gnierte Lfl hr-Spritze, nur trat die Wirkung etwas
spater, nach 7 statt nach 2 Std., ein, was wohl damit zu erklaren ist,
daB die Keimzahl in dem 2. Versuch grbBer war als im 1.

Zu einem 3. Versuch verwendete ich Reagenzzylinder, in denen die
Kupferchloridlbsung nur 6 Std. stehen blieb. Hierauf wurde die Kupfer-
losung ausgcgossen und die Rohrchen 2mal mit VVasser gespQlt. Als
Reagens dienten Reinkulturen von Typhus, Paratyphus und Vibrio
cholerae El Tor. Die kupferimprSgnierte Glaswand der Reagenz¬
zylinder zeigte sich weniger wirksam als die der L 0 h r - Spritze. Para¬
typhus wurde gar nicht beeinfluBt, Typhus und Vibrio cholerae
wurden erst nach 8 Std. zum Absterben gebracht. Die Bakterienmengen
waren dieselben wie im Glaspulverversuch. Ich hatte den Eindruck,
daB die Glasw&nde der Reagenzzylinder weniger kupferaffin sind und
deshalb eine geringere desinfizierende Kraft entfalten.

Um die Frage zu losen, ob bei den Glasimpr&gnierungsversncbeo
meBbare Kupfermengen zur Wirkung kommen, hatte Herr Dr. Kieser
in Beuel a. Rh., die groBe Freundlichkeit, genaue chemische Unter-
suchungen nach dieser Richtung anzustellen. Er verwendete zn seinen
Messungen Glaspulver und kam zu den im folgenden im Originalbericht
mitgeteilten Ergebnissen:

„Je 5 g eines groben, mit ziemlich feinen Teilen vermischten Glas¬
pulvers wurden mit je 50 ccm einer Vio-molekularen Losung, einer
Vioo-molekularen und einer 7iooo' m °l e kularen Losung von Kupfersulfat
iibergossen und im Schiittelapparat 2 Std. geschiittelt. Nach dem klaren
Absetzen wurden 10 ccm herauspipettiert, mit 1 ccm Ammoniak (0,910)
versetzt und im Konigsberger-Autenrieth-Kolorimeter mit den
gleich behandelten Kupfersulfatnormallosungen verglichen.

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v. Linden, £ntwickltmgshemmende Wirkung v. Kupfer-Glaeverbindungen. 313

Nach weiterem 6-stflnd. SchQtteln wurde die Kupferbestimmung
wiederholt. Es ergab sich folgendes:

Einstellun g:

1. Im Keil KupfermilfatlOeung (ammoniakalisch) in der Ver-

gleichskuvette dieselbe Losung 7

Nach 2 fetd. mit Glaapulver 23

• 8 „ „ 24

2. Im Keil ‘/too-mob (ammoniakalische) Losung, in der Kuvette die¬

sel be Losung 3

Nach 2 fetd. mit Gla-pulver 42

. 8 „ . 48

3. Im Keil y i00 -mol. Losung von dimethylamidoeasigsaurem Kupfer,

in der Kuvette die gleiche Ldsung 6

Fiir die ‘/ t(m) mol.-Losung eriibrigt sich die Meesung, da alles Cu
aufgenommen war (vgl. nacht-te Seite)

Die 1-proz. Losung 6 fetd. mit Glaspulver geschuttelt 8

Durch Dekantieren nnd auf dem Filter warden die Glaspulver mit
kaltem Wasser ausgewascben. Dabei verlor sich bei dem mit Dimethyl-
glykokollknpfer behandelten Glaspulver die Kupferreaktion im Filtrat
sehr rasch, nicht dagegen bei den beiden anderen. Das Filtrat reagierte
mit Ferrozyankalium sehr deutlich und bei jedem Wasserwechsel in nahe
der gleichen Intensity, bei der y 10 -mol. Lbsung starker als bei der mit
Viooe'tDol. Lbsung behandelten. Nach lOmaligem Aufgeben von je etwa
30 ccm Wasser wurden die Pulver getrocknet.

Die beiden ersten Pulver waren auf dem Filter schwach deutlich grau-
grfln, und zwar die mit der 7ioo*L8sung behandelten Portionen deutlicher.
Bei der mit y i000 -Ldsung behandelten Probe war die Farbe sehr schwach,
aber erkennbar; bei der mit dem organischen Kuplersalz behandelten
war die Farbanderung unsicher. Beim Befeuchten mit neutraler Ferro-
zyankaliumlbsung gaben die mit Sulfat behandelten 3 Proben nahezu gleiche
nnd recht intensive Ferrozyankupferfarbung, die mit Dimethylglykokoll-
knpfer behandelte dagegen nur schwache, aber deutlich erkennbare
Firbung.

Die mit y i000 Kupfersulfat behandelte Probe gab schon nach 2 Std.
SchtlUeln in der ReaktionsflQssigkeit keine Ferrozyankupferreaktion mehr;
es war alles Kupfer adsorbiert. An Wasser, das 6 Std. damit geschflttelt
wnrde, wurde kein Kupfer abgegeben, ebensowenig beim Auswaschen
auf dem Filter.

Auf 1 g Glaspulver berechnet war Cu aufgenommen:

1. Aub der V 1# -Loaung nach 2 Std. :\ 0 0380 CuS0 4 = 0,0152 Cu
» « ho » » ° » J

2 - „ 7* „ ,, 2 „ 0,(096 „ „ =0,0385 „

8 „ 0,0122,, „ =0,0400 „

1000 „ „ 2 „ 0,0025 „ „ =0 0100 „

hmethylglykokollkupferloBuug nach 6 Std.: 0,00079 = 0,00016 Cu.

Es kann folgender SchluB aus den Versuchen gezogen werden: Die
Anfnahme des Kupfers erfolgt zum Teil durch Adsorption; dieser Teil
ist aufierordentiich fest mit dem Glaspulver verbunden und wird beim
Auswaschen nicht mehr abgegeben — zum grbBeren Teil jedoch durch
chemische Umsetzung mit den Bestandteilen des Glases uuter Bildung
nines schwer, aber keineswegs unloslichen Kupfersilikates. Dasselbe
nesitzt jedenfalls eine grbBere Lbslichkeit als Ferrozyankupfer.

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314

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heit 4.

Es zeigt somit die Kiesersche Untersuchung, daB es sich bei der
ImprUgnierung des Glases mit Kupfer um die Aufnahme ganz erheb-
licher Kupfermengen handelt, die in einer Form im Glase fixiert werden,
in der sie, weun auch auf einmal nur in kleinen Mengen, an Wasser ab-
gegeben werden und diesem lange Zeit hindurch (bzw. auch neuen
Wassermengen) bakterizide Eigenschaften verleihen kOnnen. Durch die
Kieserscken Feststellungen war nun auch ein MaBstab gegeben, um
die bakterizide Wirkung der von den Bestandteilen des Glases auf-
genommenen und an dieses abgegebenen Kupfermengen mit anderen
Kupferpr&paraten zu vergleichen. Es konnte jetzt entschieden werden,
ob tatsachlich den im Glas entstehenden Kupferverbindungen eine
grdBere bakterizide Wirkung zuzuschreiben ist, als bisher geprflften
Kupfersalzen. Ich priitte die entwicklungshemmende bzw. abtotende
Wy-kung je von 1 g der verschiedenen Glaspulver gegen Typhus und
gegen Choleravibrionen. Es ergaben sich filr die genannten Bakterien
die folgenden Abtdtungszeiten:

1 . Glaspulver */ l0 CuS0 4 totet Typhus 1 mg Bakteriensubstanz in 10 ccm Wasser 58td

Ein wirkungsdauer

„ Vio » ,i Cholera (El Tor) 1 mg Bakteriensubstanz in 10 can

Wasser 1 Std. Einwirkungsdauer

2. „ ‘/ im) „ „ Typhus 1 mg Kultur in 10 ccm Wasser 5 Std.

,, Vioo *> „ Cholera (El Tor) 1 mg Kult. in 10 ccm Wasser 1 Std.

3. „ V.ooo •> „ Typhus 1 mg Kultur in 10 ccm Wasser 5 Std.

» 7 1003 » »» Cholera (El Tor) l mg. Kult. in 10 ccm Wasser 1 Std.

4. „ 7,0, Dimethylglykokollkupfer tbtet Typhus 1 mg Kultur in 10 oca

Wasser 24 Std.

„ 7,oo „ „ „ Cholera (El Tor) 1 mg Kultur

in 10 ccm Wasser 1 Std.

Bei den Glaspulverproben 1—3 schwaukt der Kupfergehalt nach den
Kieserscben Bestimmungen zwischen 15 and 1 mg, trotzdem der Effekt
bezuglich der Abtotungszeit derselbe ist. Es ist anzunehmen, daB von
dem Wasser, das die Bakterienaufschwemmung enthalt, gleiche Mengen
Kupfersalz gelost werden, einerlei, ob der Kupfergehalt des Glaspulvers
groBer oder kleiner ist. VVenn wir mit der kleinsten in 1 g enthaltenen
Kupfermenge von 1 mg rechnen, so wQrde das, in 10 ccm Wasser ge-
I5st, einer Kupferkonzentration vou 1: 10000 entsprechen, einer Kon-
zentration, von der ich bei meinen friiheren Versuchen als h6chste
ausgegangen bin. Wir kommen indessen zu der Annahme eines viel
geringeren Kupfergehaltes des die Bakterienaufschwemmung enthaltenden
Wassers, wenn wir dieses der Ferrozyankaliumreaktion unterwerfen.
Wahrend Kupfersalzlosungen noch bis 1:10000 deutliche Rotfarbung
zeigen, war bei dem von Glaspulver und Bakterienuiederschlag ab-
gegossenen Wasser nur eine schwache rStliche Verfarbung wahrzunehmen.
Am folgenden Tag hatte sich in den die Fliissigkeit enthaltenen Reagenz-
giasern ein sehr dilnner, braunroter Bodensatz gebildet, der in simt-
lichen Giasern ziemlich gleich voluminSs erschien und der einer Kupfer-
konzentration von ca. 1:60000 entsprechen diirfte.

DaB es sich andererseits um eine groBere Kupfermenge handelt all
in Probe 4, wo der Kupfergehalt ‘/io nig betrhgt, zeigt die viel geringere
bakterizide Wirkung des mit Dimethylglykokollkupferlosung impragnierten
Glaspulvers. Es ist daher anzunehmen, daB die im Wasser gelostfl
Kupfermenge in Probe 1—3 zwischen 1:60000 und 1:100000 gelegen
ist. Die Kupfermengen, die vom Glas aufgenommen und an Wasser
abgegeben und die Bakterizide des impragnierten Glases bedingen, be*

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Reichert, Eine neue Methode zur Bestiuimuug der Konzentration etc. 315

tragen somit gut meBbare Mengen. Ihre Wirkung ist den anderen von
rnir geprQften Kupfersalzen nicht iiberlegen. Das iiberraschende Ph5-
nomen der mit Kupfer imprfignierten und bakterizid gewordenen Glas-
gefaSe koinmt dadurch zustaude, daB die in der Glaswand eutstandenen
Kupferverbindungen, wenn sie mit Wasser in Berflhrung koinmen und
geiost werden, eine verduonte Kupfersalzlosung bilden. Diese verdiinnte
Kupferlosung kann in ein anderes GefaB tibertragen werden, auch hier
die Glaswand wieder impragnieren und auch diesem GefiiB, nur viel-
leicht in geringerern Malle, bakterizide Eigeuschaften verleihen. Denn
auch hier wird eingelulltes Wasser das in der Glaswand enthaltene
Kupfersalz aufnehmen. Dieser ImprSgnierungsprozeB wird so lange weiter
geffihrt, als in dem Wasser noch Kupfer enthalten ist, das von der
Glaswand adsorbiert werden kann, oder als wasserlosliche Verbindung
chemisch aufgenommen wird.

Es kommen danach wenigstens fflr die in diesen Fallen flber-
raschenden Wirkungen mit Kupferlosung impragnierten Glases keine
anderen Erklarungen in Betracht als die, welche fur die Wirkung hoch
verdflnnter gelSster chemischer Korper gelten.

Literatur.

'■'? 1) Pfeiffer, H., u. Kadletz, H., Ueber die oligodynamische Wirkung ver-

dunnter Kupfersalzlosungen. (Wien. klin. Wochenschr. Bd. 30. 1917. 8. 1221.) —
2) Baumgarten, A., u. Luger, A, Ueber die oligodynamische Wirkung von Metalien
auf Fermente. (Ebenda. 8. 1222.) — 3) Dies., Ueber die Wirkung verdiinnter Metall-
losungen auf Diastase. (Ebenda. 8. 1224.) — 4) Saxel, Ueber die keimtotende Fern-
wirkung von Metalien. (Ebenda. 1917. Nr. 23.) — 5) Ders., Ueber die keimtotende
Fern wirkung von Metalien und Metallsalzen. (Ebenda. 1917. Nr. 28.) — 6) Grafin
?. Linden, E x peri mentalforschun gen zur Chemotberapie der Tuberkulose mit Kupfer-
ind Metbylenblausalzen. (Leipzig [Kurt Kabitzscb] 1920, u. Beitr. z. Klin. d. Tuberk.
Bd. 37,40,43,44.) — 7) Dies., Die entwicklungshemraende Wirkung von Kupfersalzen
auf krankbeiterregende Bakterien. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Ong. Bd. 85. 1920. H. 2.)

Nachdruck verboten.

Eine neue Methode zur Bestimmung der Konzentration
der Hammelblutkorperchenaufschwemmung fiir die
Wassermannsche Reaktion.

[Aus dem Hygienischen Institut der UniversitSt Jena.]

Von Dr. Fritz Reichert.

Die in der Sonderbeilage zu den VerSffentlichungen des Reichs-
gesundheitsamtes. 1920. Nr. 46. gegebene Anleitung liir die AusfUhrung
der Was sermann schen Reaktion bestimmt, daB die Hammelblut-
kSrperchenaufschwemmung stets von der gleicheu Dichte sein und
durch Mischung von 1 ccm Bodeusatz und 19 ccm 0,85-proz. Kochsalz-
lOsung hergestellt werden muB. Die Forderung, immer mit derselben
nnd in alien Unteisuchungsanstalten gleichmSfiig hergestellten Blut-
kSrperchenaufschwemmung zu arbeiten, ist zweifellos von erheb-

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316

Centr&lbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originaie. Bd. 87. Heft 4.

licher Wichtigkeit fflr die Genauigkeit der Wa.R. Doch bereitet
die Uerstelluug eines stets gleichmaBigen Zentrifugats der BlutkQrperchen
durch das Auswaschungsverfahren ganz betrachtliche Schwierigkeiten. Die
Konzentration des Bodensatzes hangt ab von der Dauer des Zentrifugierens,
der Tourenzahl der Zentrifuge, der Form der Robrchen, der Geschwin-
digkeit des Anhaltens, eiDem etwaigen Aufschfltteln beim Abgieflen der
ubersteheuden Kochsalzlosung und von dem nach dem Abgiefien noch fiber
dem Zentrilugat zuruckbleibenden Rest von Flflssigkeit, der sich nicbt mit
Sichei licit abpipettieren lflfit. Die die Dichtigkeit bestimmenden Eintlfisse
siud daber so zablreich und so unberechenbar, dafi die Herstelluag
eines stets gleichmaBigen Bodensatzes bei dem allgemein geiibten Vor-
geben kaum durchfuhrbar ist.

Wir haben uns daher beniiiht, eine exakte Metbode zur Erzielungeiner
gleichmaBigen Aufschwemniung auszuarbeiten. Die Methode beruht auf
kolonnietrischen Grundsfltzen. Wir stellten uns durch Verdflnnen einer
abgemessenen Menge von gewascbenen Hammelblutkorperchen mit Aqua
dest. eine Losung von hamolysiertem Blut her, die im Farbton der
Serumkontrolle einer nach den Reichsvorschriften ausgefflhrten Wa.R.
glich. Dann wurde in einem 2. Robrchen zur gleichen Menge von ge-
waschenen Hammelblutkorperchen zuerst Aqua dest. bis zur vollstfin-
digen H&molyse, dann 2 Proz. IICl bis zur Braunf&rbung und schlieB-
licb wieder Aqua dest. hinzugefflgt, bis in Summa die Kubikzentimeter
Menge des I. RQhrchens erreicht war. Die 2. Lflsung enthielt mithin
eine der Hflmoglobinmenge der 1. genau entsprechende Menge an salz-
saurem H&matin. Diese Losung flndert, luftdicht abgeschlossen auf-
bewahrt, beim Stehen ihre Farbe nicht. Fflr unseren Zweck befindet
sie sich in einem Rohrchen, das eine bestimmte Weite des Lumens, eine
bestimmte Wanddicke und Glasfarbe hat. Dies benutzen wir, geradeso
wie es beim Sahlischen Verfahren der Hflmoglobinbestimmung im Blut
fiblich ist, als Standardrohrcben in folgender Weise: Von der Masse
der gewascbenen Hammelblutkflrperchen, die zur Anstellung der Wa.R.
hergestellt ist, wird eine kleine Menge (0,1—0,3 ccm) mit Aqua dest.
und 2 Proz. HC1 ebenso behandelt wie vorber das Standardrflhrchen.
Mit dem Hinzusetzen von Aqua dest. nach der Salzsflurezugabe wird
aber diesmal so lange fortgefahren, bis der Farbton des Vergleichsrflhr-
chens erreicht ist. Da die so entstandene Lflsung von salzsaurem Hi-
matin langsam nachdunkelt, wird nach 30—40 Min. noch einmal HC1
hinzugefflgt, bis wieder der Farbton des Standard hergestellt ist. Selbst-
redend mufi diese Austitrierung in einem Reagenzglas des gleichen Ka-
libers wie das, in dem sich die Standardflflssigkeit befindet, vorgenom-
men werden. Urn eine mflglichst genaue Uebereinstimmung derFarbtfine
in den zu vergleichenden Losungen zu erzielen, bedienen wir uns eines
einfachen Apparates, Komparator genannt, beschrieben von Michaelis.
[Michaelis, Die Prufung der Alkalitat in Nfihrbflden. (Zeitscbr. f. Im-
munitatsforsch. T. I. Orig. Bd. 32. H. 2. S. 194).] Aus der Summe der
Mengen des zu den Blutkorperchen hinzugetugten Aqua dest. und der
HCl laBt sich durch Division durch die Menge der Hammelblutkflrper*
chen leicht die Grofie der Verdunnung bestimrnen. Dann errechnet man
die 5 fache Konzentration dieser Losung. Letztere ist erforderlich, da
die fur den Wassermann herzustellende Blutaufschwemmung durch
die 4 anderen Bestandteile der Reaktion auf das 5 fache verdflnnt wird.

Beispiel: Zu 0,2 ccm gewaschener Hamnielblutkflrperchen seieu
7,0 ccm aqua dest. und 4,8 ccm HCl hinzug> fflgt, bis Farbgleichheit

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rtlumenthal, Universal pipette fur serologiache Arbeiten.

317

mit dem StandardrOhrchen eingetreten ist. Die erzielte Verdflnnung
ist 1 :60. Die fflr den Wassermann erfor'erliche Blutkorperchen-
aofschwemmung wird mitbin durch die 12-facbe Verdflnnung des eben
titrierten Zentrifugates erreicht.

Man kdnnte gegen diese Metbode nnr den einen Vorwurf erheben,
dafi durch sie zwar eine Bestimmung der H&moglobinmenge aber nicht
der Zahl der Erythrozyten ausgefQhrt wird. Da wir es bei unseren
Versuchstieren aber mit gesunden, gut ernfihrten Individuen zu tun
haben, dflrfte eine wesentlicbe Schwankung der Zahl der roten Blut-
korperchen kaum vorkommen. Andererseits steht es wohl auch noch
nicht fest, daB nur die Zahl der Erythrozyten die vom H&molysin
za leistende Arbeit bestimmt. Es ist durchaus vorstellbar, daB zur
Herauslosung einer grflBeren Menge Hemoglobins aus einem Erythrozyten
eine st&rkere H&molysinwirkung erforderlich ist, als zutn Ausschwemmen
einer kleineren Hflmoglobinmenge aus einem gleichen BlutkQrperchen.
Bei dieser Vorstellungsweise wUrde der Menge des Hamoglobins die
gleiche Bedeutung bei der Konzentrationsbestimmung der Blutkflrperchen-
aufschwemmung zukommen wie der Zahl der Erythrozyten. Daher mOBte
sich ein auch theoretisch fehlerloses Verfahren auf beide GrflBen
stfltzen. Fflr den praktischen Gebrauch aber dflrfte oben genanntes
Verfahren zweifellos ausreichend sein und die Genauigkeit der Aus-
ffihrung der Wa.R. nennenswert erhohen.

tfachdruck verboten.

Universalpipette fiir serologische Arbeiten (speziell flir
Wassermann-Untersuchungen mit l U Dosen).

[Aus der serologischen Abteilung des Instituts fflr Infektionskrankheiten
Robert Koch tt (Abteilungsdirektor: Geh. Rat Prof. Dr. Otto).J

Von Dr. Georg Blumenthal, Assistant am Institut

Mit 1 Abbildung im Text.

Die nachstehend nflher beschriebene Feinpipette ist gekennzeichnet:
1) durch Vioo ccm-Teilung fflr den Auslauf bis zu 0,5 ccm und 2) durch
neuartige, sich von der Feinteilung durch tiefschwarze Striche und ebenso
gef&rbte Zahlen deutlich abhebende 1 / i ccm-Einteilung, die bis zu 2 ccm
durcbgefahrt ist.

In den letzten Jahren hat sich in der Serologie, vor allem bei der
Anstellung der W assermannschen Reaktion, aus Sparsamkeitsgrflnden,
das Arbeiten mit sogenannten V 4 -Dosen allgemein eiugebflrgert und auch
gut bewflhrt. Nachdem man die Original- Wassermann-Reaktion zu-
nichst mit ganzen Dosen (d. h. jedes Reagens wurde auf 1 ccm auf-
gefflllt) ausgefQhrt hatte, setzte man allmflhlich das Volumen aller Re-
agentien auf je Vs ccm herab, urn schliefllich w&hrend des Krieges auf
l U ccm herunterzugehen. Da nun bei Reihenuntersuchungen, im be-

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318

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 4.

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sonderen bei der Wassermannschen Reaktion, dieselbe Menge von
0,25 ccm von den meisten Reagentien, z. B. beim Einfflllen der Extrakt-

und der SerumverdQnnungen, sowie beim Zu-
^ setzen der 10-proz. Komplementverdflnnung,

dauernd wiederkehrt, so werden die verschie-
densten Pipetten mit l / 4 ccm*Teilung benutzt,
deren Hauptfehler aber, abgesehen von ihrer Un*
genauigkeit, in dem Mangel einer Feinteilung
von Vioo ccm zur Abmessung kleinster Menges
and in dem Feblen einer durch eine besondere
Farbe deutlich von den Flfissigkeiten sich ab-
hebenden Markierung lagen.

Diesen Mfingeln hilft unsere Pipette voll-
kommen ab.

Sie besitzt ein Fassungsvermfigen von 2 ccm
and ist daher etwas linger gebahen als die fib-
lichen 1 ccm-Pipetten. Sie miBt 42 cm, paBt
also in die flblichen PipettenkSsten bzw. rnnden
HQlsen von durchschnittlich 46 — 47 cm Liage
bequem hinein. Der Abstand von der Mfindung
bis zum Beginn der Skala betrigt ungetahr Vs
ihrer ganzen Lange, also etwa 14 cm, so d&8
reicblicb Spielraum zum Aufsaugen vorhanden
ist und noch 28 cm ffir die 8 Viertelteilungen,
fQr jeden Viertelkubikzentimeter, also fiber
3Vi cm, zur Verfflgung stehen. AuBerdem
besitzt die Pipettenspitze eine Oeffnung von nor
1 mm Durcbmesser, wfihrend das Mundstfick
einen solcben von 3—4 mm aufweist, wodurcb
die Fiassigkeit nur verhiltnismifiig langsam
durch die Pipette ablaufen kann. Aus dieses
Grfinden ist eine groBe Genauigkeit beim Pipet-
tieren gewfihrleistet. Im Gegensatz dazu ist bei
alien fibrigen Pipetten mit Viertelteilung das
Verhfiltnis der Oeffnungen von Mundstfick nod
Spitze ein grdBeres (durchschnittlich 1:2), so
dafi sie wesentlich rascher laufen, und der Spiel¬
raum zwischen den einzelnen Abmessungen be-
trfigt bei ihnen nur 9 mm bis hfichstens 1 cm,
was natfirlich ihre Zuverlassigkeit auBerordentlich
beeintrfichtigen muB.

Eine sehr groBe Bequemlichkeit bietet ferner,
wie bereits angedeutet, die an der Spitze ange-
brachte Vioo-Feinteilung, dj e dj e genaue Pipet-
tierung von kleinsten Mengen bis zu 0,01 ccm,
wie bei den gewohnlichen 1 ccm - Feinpipetten,
gestattet. Sie ist der Uebersichtlichkeit halber
zum Unterschied von der anderen noch auBer-
Fi fr 1 - dem angebrachten Einteilung farblos gehaltes

und nur bis 0,5 ccm durchgeffihrt, da bei sero-
logischen Untersuchungen und spcziell bei der Wassermannschea
Reaktion in der Regel genauere Abmessungen grfiBerer Mengen von den
einzelnen Reagentien kaum bendtigt werden. Man braucht z. B. bei der

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Kasparek, Bemerkung zum Artikel „Ein praktisches Beageozglas“. 319

Wasserm annscben Reaktion vora Serum durchschnittlich bei der
PrDfung mit 3—4 Extrakten und doppelter Serumkontrolle je 0,25 bis
0,3 ccni.

Das Hauptcharakteristikum der Pipette stellt aber die 1 / i ccm-Teilung
dar, die aus den schon oben erwflhnten GrQnden sehr genau arbeitet
nod einheitlich durch die ganze Pipette durchgefuhrt ist. Zwecks
raschester Erkennung sind zu ihrer Markierung schwarze Zahlen und
ebenso gefSrbte Striche verwendet, die sich sowolil von der unten an-
gebracbten Feinteilung als auch von jeder ikterisch oder blutig tingierten
Fiflssigkeit gut und deutlich abheben. Diese schwarzen Stricbe sind
noch zur Erleichterung der Ablesung bei den halben Kubikzentimetern,
also bei 0,5, 1,0, 1,5 und 2,0 ganz urn die Pipette herumgeiiihrt, wShrend
sie bei den dazwischenliegenden Abmessungan von 0,25, 0,75, 1,25 und
1,75 die ilbliche Lange von etwa l / 8 Pipettenumfang besitzen.

Was nun zum SchluB die Kosten einer solcben Pipette*) anlangt,
die, wie aus den obigen Ausfilhrun gen hervorgeht, die
Vorzflge der 1 ccm-Pipette mit mit

denen der Pipette mit l / 4 ccm-Teilung in sich vereinigt,
so hat sich doch erreichen lassen, daB sie verh&ltnism&Big niedrig be-
messen werden konnten. Denn die Mehrkosten fflr Glas und Farb&tz-
material werden durch die etwas geringere Anzahl der Einzelgraduierungen
wieder kompensiert. So ist der Preis der neuen 2 ccm-Pipette derselbe
wie der einer gewohnlichen 1 ccm Pipette und auch aus diesem Grunde
ihre Anschaffung als Ersatz fflr 1 ccm-Pipetten sehr zu empfehlen.

Nachdruck ve/boten.

Bemerkung zum Artikel „Ein praktisches Reagenzglas“.

Von Prof. Dr. Theodor KaSparek, Prag.

In Heft 7/8. Bd. 86. 1921 des Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. be-
merkt For net: „In letzter Zeit hat Kasparek ein fihnliches Reagenz-
glas angegeben, dieses jedoch durch eine besondere Einkerbung unnbtig
kompliziert u . Dieser Bemerkung wflrde ich sonst keine besondere Be-
achtung schenken, wenn ich nicht noch nachtriiglich nach der Beschrei-
bung meines Reagenzglases im Jahre 1917 (1) auf eine andere An wen-
dung dieser Einkerbung, welche als OefTnung fflr den fflr die Kultur
ootwendigen Luftzutritt und fflr den beim Stcrilisieren entweichenden
Dampf dienen sollte, gekommen ware. Dies besteht darin, daB die
spitze, etwas scharfe Kante der Einkerbung die Glaskappe am Reagenz-
glas durch Drehen derselben unter leichtem Drucke festhalt.

Da sich, zum Unterschiede vom Schillschen (2), mein Reagenz-
glas aus gewdhnlichen Reagenzglflsern leicht und billig in jedem Labo-

1) Die patentamtlich gegchiitzte Pipette wird von der Firma F. u. M. Lauten-
•chl&ger, Berlin, Luiaenstr. 49, hergestellt

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320

CentralbL f. Bakt etc, L Abt. Originate. Bd. 87. Heft 4.

ratorium herstellen l&Bt, ist es schon in vielen Laboratorien in Gebranch.
Wie ich erst nachtrfiglich erfahren hatte — da es keinen Musterschutz
besitzt — wurde es w&hrend der in den letzten Jahren herrschenden
Wattenot zu Tausenden bestellt und fand auch in Amerika, wo ich es
vor kurzer Zeit in mehreren Laboratorien demonstrate, Anklang. Die
einzige Schwierigkeit bei seiner Anwendung in den Laboratorien be-
stiinde vielleicht darin, daft die fiblichen Reagenzglisergestelle etwas
niedrig sind. Diese kdnnten durch Fornetsche Gestelie ersetzt werden.

1) Kasparek, Th., Ein einfacher Reagenzr5hrchenverachlufi ohne Watteatopfen.
(CentralbL f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 79. 1917. S. 318.) — 2) Bchill, Beitrage zur
bakteriolog. Techmk. (E bend a. Bd. 10. 1891. IS. 657.)

Inhalt.

Bdla, Johan, Beitrage zor Biologie des
Bacillus pyogenes anaerobius.
Mil 2 Abbildungen im Text, 8 . 2‘jO.

Bender, Willy, Ein Fall von 8eptikamie
bei einein iSaugling, hervorgerufen durch
das Bacterium lactie aerogenes,
S. 289.

Blnmenthal, Georg, Universalpipette fur
serologische Arbeiten (speziell fiir Was-
Berman n- LJnteniuchungen init l / 4 Dosen).
Mit 1 Abbildung im Text, 8. 317.

Frieber, Walther, Beitrage zur Frage
der indolbildung und der Indolreak-
tionen sowie zur Kenntnis des Ver-
haltens indolnegativer Bakterien, 8. 254.

Gildemeister, E., Ueber Variabilitats-
erncheinungen bei Vibnonen. Mit 11 Ab-
bildungen im Text, 8. 241.

Xalkbrenner, Beitrage zur Biologie des
IniluenzabazilluB, 8. 277.

Basparek, Theodor, Bemerkung rum
Artikel „Eiu praktischea ReagenzgUa*,
S. 319.

▼. Linden, Grftfln, Entwicklungshem-
mende Wirkung von Kupter-Cilasverbin-
dungen auf das Wachstum von Bak-
terien, S. 310.

ZiipschhtB, B., Der Zellkern als Virus-
trager. (Die Karyooikongruppe der
Chlamydozoa-Strongyloplasmen), 8. 303.

Oehler, Bud., Wirkung von tiakterien-
giften auf Ziiiaten, 8. 302.

Freues, Man, Epidemiologische und mor-
phologische Influenzabazdienstudien aoi
dem Ende der letzten Paudemie, 8. 283.

Beiohert, Frits, Erne neue Method*
zur Bestimmung der Konzentration der
Hammelblutkorperchenaufschwemmung
fur die Waseermannsche Reakiioo,
8 . 315.

Frommannache Buchdruokerei (Hermann Pohle) in Jena.

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CntralU. f. Bah. ate. I. Abt Orijioale. Id. 87. Heft 5.

Ausgegeben am 17. Dezember 1921.

Naohdrude verboten.

Beobachtungen liber das Auftreten von Diphtheric in einer

Erziehungsanstalt.

[Aus dem Hygienischen Institut der Universit&t Jena.]

Von Dr. Helmut Gaumitz.

In einer Erziehungsanstalt fur geistig abnorme Kinder in der Nfihe
einer mitteldeutschen Stadt batten sich von Ende M5rz 1918 bis zur
Uebernahme dieser Arbeit im Februar 1919 33 Diphtherief&lle aneinander-
gereiht in einer Kette, die 2mal durch je eine 2 monatige Pause unter-
brochen wan Bei den verwickelten VerhSltnissen des Zusammenlebens
in dieser Anstalt war fiber den Gang der Infektionen bisher kein klares
Bild zu gewinnen gewesen. Abstrichuntersuchungen groBerer Anzabl von
Anstaltsbewohnern waren auf Veranlassung des Anstaltsarztes 1918 nur
3mal vorgenommen worden (Ende April, Ende Juni und Ende Oktober),
ohne die Gesamtheit systematisch zu erfassen, und hatten hierbei auch
drei Bazillentr&ger ergeben, die aber bei mehrmals wiederholter
Untersudhung nicht konstant positiven Bazillenbefund zeigten. Als der
Januar 1919 noch kein Ende der Epidemie brachte, diese sich jetzt aber
anf ein einzelstehendes Haus der groB angelegten Anstalt (Mfidchenheim)
beschrankte und dort Bazillentrfiger zu vermuten waren, liefi das Hy-
gienische Institut Abstrichuntersuchungen in ganz kurzen Zeitabstfinden
(hdchstens bis zu 1 Woche) vornehmen. Hierbei fand sich nun bis
Mitte Februar 1919 eine grfifiere Zahl von Bazillentrfigern (5),
darunter auch Pflegerinnen und Lehrerinnen der Anstalt, die durch ihr
nSheres Zusammenleben mit vielen Zdglingen diese besonders zu ge-
fahrden schienen.

Die genaue Erforschung der Zusammenh&nge in dem Auftreten der
Diphtherie wurde Ende Februar 1919 dem Verfasser fibertragen.

Entsprechend den allgemeinen Erfahrungen bei Diphtberieepidemien
in Anstalten, war die Hauptschuld an der Weiterverschleppung, vielleicht
auch an der Entstehung der Diphtherie, in dem Vorhandensein von Ba-
zillentrfigern zu suchen, mit deren Unschfidlichmachung die Epidemie
erloschen mufite. Auch die vorliegende Epidemie ist ein Beisp^iel ffir
die ausschlaggebende Rolle der Bazillentrfiger an der
Weiterverbreitung der Diphtherie. Doch handelte es sich bei
ihr um ganz eigenartige und besonderS verwickelte Verhfiltnisse, die auch
besondere Methoden der Untersuchung und BekSmpfung erforderten.
Zur Beurteilung mull daher erst auf die Besonderheit der VerhSltnisse
etwas nfther eingegangen werden.

Bei der Anstalt handelte es sich um ein parkartiges Gruudstiick, in dem t>
grdfiere Gebaude und 3 kleinere Nebengebaude errichtet waren. Von den grdtieren
waren 4 durch iiberdachte, ummauerte G&nge innerlich miteinander verbunden: 1) das
Hanptgebaude (enthaltend Buros, die Wohnung der Direklorfamilie, Bpeiscsale und
Kuche, Schlafsale fur die grbfieren Knaben, Einzelzimmer und Kebenraume), 2) das
Turnhallengebaude, kurz Turnhalle genannt (ein Turnsaal, 2 Schlafsale,

KnU Abt. OH*. Bd. 87.

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Heft 5.

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322

CentralbL f. Bakt. etc. L Abt Original©. Bd. 87. Heft 5.

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1 kl ernes Zimmer, 1 Emzelzimmer a. N. entbaltend), 3) das sogenannte Knabenhau-
(ohne Beziehung zur Epideniie), 4) das Schulbaus mit den Klassenzimmern fur den
Unterricht. Durch breiten Gartensireifen getrennt, stand dan Madchenheim (mit
Schlaf- und Spielzimmern ftir die kleinen Knaben und fur die Madchen, mit Einzel-
zimmern, Speiseraum und Ncben rau men). In seiner Nahe, aber im Verkehr von den
anderen Gebauden abgeschlossen, lag das Wirtschaftsgebaude; zieoilich abseits
standen die Ncbengebaude: das Pfleeeneim (fiir besonders gepflegte und kranke Kinder t
ein kleines Sonderbaus und die Gartnerei. Die Verbindung zwischen Turnhalle—
Knabenhaus—gchuLbaus wurde nicht benutzt

Diese Verteilong der Gebaude war fOr die Untersucbong von groBter
Wichtigkeit, denn sie gab verschiedene Gelegenheiten zum Zu-
saramentreffen der Bewobner der EinzelbUuser.

An 3 Punkten trafen die Bewobner von Hauptgebaude, Turnhalle
und Madchenheim zusammen: 1) bei der Andacht im Turnsaal, 2) bei
den groBen Mahlzeiten (mittags, znm Teil auch abends) im Hauptgebiude.
3) zum Schulunterricht im Schalhaus. Damit waren aber die Ueber-
tragungsmdglicbkeiten noch nicht erschbpft, sondern es kamen noch drei
Gruppierungen der Zdglinge in Betracbt: 1) das gemeinsame
Schlafen in verschiedehen Schlafraumen mit bestimmter Bettordnnng
und mitschlafender Aufsichtsperson, 2) der gemeinsame Unterricht
in verschiedenen Klassenzusammenstellungen mit verschiedenem Lehr-
personal, und 3) die Zusammenfassung w&hrend des Tages in
sogenannte Gruppen mit wieder anderer Zusammenstellang nod
anderem Aufsichtspersonal, das von Zeit zn Zeit wechselte. Eine be-
sondere Komplikation bedeutete es, daB diese Zusammenstellang hSofig.
oft innerbalb Wochen, sich Snderte; besonders die Schlafordnnngen
wechselten Qfters, gewohnlich nach den Ferien, aber abgesehen davon.
auch auf Grund von Anordnungen zur Bek&mpfung der Epidemie. Im
ganzen herrscbte ein sehr enges Znsammenleben aller miteinander.

Zu diesen mannigfacben Beziehungen trat hinzu die Eigenart der
Zdglinge, die in uberwiegender Zahl geistig abnorm und znm groBen
Teil auch korperlich debil waren: Unsanberkeit war ziemlich bdufig, in
4 Fallen von Keimtr3gern (1 Erkrankung, 3 Bazillentrager) ganz stark
ausgepr&gt, z. B. die Bazillentr3gerin A. F. mit dem lingsten positiven
Befund (18 Monate) war nicbt an einen geregelten Gebrauch des Taschen-
tuches zu gewdhnen; andere waren von pathologisch Obertriebener ZSrt-
lichkeit zueinander: ausgepr3gt bei 4 Fallen, die erkrankten, und bei

2 Bazillentragern. Bei emem Bazillentrager (B.) traf Unsauberkeit und
Zartlichkeit zusammen; ein Zogling, der aus einem Erkrankten ein
Dauerausscbeider von 13 Monaten wurde, hatte die Gewohoheit, alles in
den Mund zu stecken.

FQr die hygienischen Notwendigkeiten einer Epidemie war bei solcben
Zoglingen kein Verstandnis zu erwarten; der Erfolg der Bekampfung las
ganz in der Energie und Geschicklichkeit des Aufsichtspersonals und
bing ab von der Klarheit und Entschiedenheit der Anordnungen. Ancb
hierbei ergaben sich durch die Besonderheit der Anstalt Schwierigkeitec.
Auf solche Vorkommnisse nicht vorbereitet, muBte Lehr-, Aufsichts- und
Dienstpersonal erst in die Anfgabe hineinwachsen; erst Ende des Jabres
1919 war das voile Verstandnis fiir die Notwendigkeit durchgreifender
MaBnahmen vorhanden. So wurde die ini Januar 1919 begonnene syste-
matische Untersuehung aller in Frage koinmenden Personen in kurzen
Zeitabschnitten bereits im Mai wieder uuterbrochen und trotz Mahnungen
erst bei neuen Erkrankungsfiillen im September 1919 wieder anfge-
noinmen. wiibrend bereits im Juli einige Erkrankungen und im AnschlnB

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Ga|umitz, Auftreten von Diphtherie in einer Ensiehnngeanstalt.

323

daran 3 BazillentrSger neu festgestellt waren, die dann nicht in Zu-
sammenhang mit der ganzen Epidemie gebraclit werden konnten.

Bei diesen Julifailen waren auch infolge des Wechsels von Lehr-
und Aufsichtspersonal keine allgemeinen Beziehungen zu erforschen.
Eine sebr verdachtige Bazillentragerin war gerade deni Abstrich entzogen
worden; anch spater kamen noch bisweilen unliebsame Ausnahmen vor.
Die Abbangigkeit aller Beobachtungen und FeststelImogen von den Aus-
sagen anderer war ausschlaggebend fQr die ganze Zeit vom Marz 1918
bis Februar 1919, die vor Uebernahme der Untersuchung durch den
Verfasser lag.

Handelte es sich auch urn eine geschlossene Anstalt mit Internat,
so ffihrten doch einige Beziehungen nach auderhalb. Gab es
doch einige wenige Zdglinge, die zwar ira Institut wohnten und alien,
aber teilweise in der Stadt unterrichtet wurden. Das Lehrpersonal lebte
teils in der Anstalt, teils kam es taglich aus der Stadt heraus. Auch
fflhrten Besorgungen oder Spaziergange alle Institutsbewohner in die
Stadt und ibre Umgebung. Durch das dauernde Gehen von Erkrankten
and Kommen von Genesenen ergaben sich Beziehungen zur Diphtherie-
isolierstation der Stadt. Einige Anstaltsbewohner wechselten ihren Ort
vortlbergehend durch Reisen; Zu- und AbgSnge von Lehr-, Dienstpersonal
and Zdglingen kamen vor, wodurch an neue Aloglichkeiten der Infektion
zn denken war. Zu diesen Schwierigkeiten, bedingt durch Lage der
Anstalt, Anordnung der Gebaude, durch die KombinationsmSglicbkeiten
in den verschiedenen Gruppierungen, die Eigenart der Zoglinge und
die Art der Materialsammiung kamen solche bei der Bekampfung der
Epidemie durch Isolierung und Desinfektion, auf deren Notwendigkeit
noch kritisch eingegangen wird. Ibre AusfQhrung wurde erschwert durch
Mangel an Raumen und Personal, zum Teil auch an Verstandnis.

Ebeuso standen der langst wQnschenswerten Entfemung von viru-
lenten Bazillentr8gern Schwierigkeiten entgegen, die erst die harte Not¬
wendigkeit beseitigte. Diese Besonderheiten der Anstaltsepideraie machen
den Fall aber gerade interessant und lehrreich.

Auch die Zeitumst&nde waren von Einflufi auf die Untersuchung
and BekSmpfung. Zwang bereits im Kriegsjahr 1918 der Mangel an
Knlturmaterial zu Beschrankungen bei den Abstrichen, so
brachte auch der Frieden nur teilweise Besserung. Daher wurden aus-
schliefilich Rachenabstriche gemacht, deren Zahl im ganzen an
die 1000 reicht, obwohl Langer (1) fQr Enduntersuchungen die kul-
tnrelle Verarbeitung von Nasen- und Rachensekret gleichzeitig als ab-
solut notwendig fordert und Seligmann (2) einige Falle anfiihrt, die
positives Nasensekret aufweisen bei negativem Rachenabstrich. Nachteile
der BeschrAnkung auf Rachenabstriche habe ich jedoch nicht bemerkt. Auch
die Vornahme von Tierversuchen zur VirulenzprUfung muBte
anf das unbedingt Notwendige beschrankt werden.

Die besonderen Methoden, die trotz der verwickelten Lage
der Dinge alle nur mogliche Klfirung der Verhaltnisse herbeifflhrten und
die Grundlage einer tatsachlich erfolgreichen Bekampfung gaben, sollen
bier angegeben werden, da sie fQr jede Art ahnlich verworrener Ver¬
haltnisse mit entsprechenden AbQnderungen zu genugen scheinen:

I. Erstens wurde ein Plan des GrundstQckes mit Lage der
GebSude hergestellt, in den die verschiedenen Moglichkeiten des Zu-
sammentreffens der Bewohner aus den einzelnen GebSuden eingezeichnet
wurden.

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324

Centr&lbl. f. Bakt. etc. Abt. I. Originale. Bd. 87. Heft 5.

II. Zweitens wurde eine Liste der Erkrankten, chronologisch
nach dem Tag der ersten Krankheitszeichen, angelegt mit folgenden,
alle Beziehungen erschOpfenden Spalten:

1 ) Laufende Nummer.

2) Vor- und Zunahme, Alter, Stand, besondere Eigentumlichkeiten.

3) Datum 1 ) der ersten Krankheitszeichen und Angabe, in welchem Haus uod
Zimmer diese festgestellt wurden.

4) Datum des deutlichen Ausbruchs als Di. und Haus- und Zimmerangabe zu
diesem Datum.

5 ) Resultate aller Racbenabstriche und Tierversuche, chronologisch.

6 ) Zeit und Ort der Behandlung der Di. mit genauer Zeit&ngabe des AufenthalU
in bestimmten Zimmern, wann und wo isoliert, wann im Krankenhaus.

7) Tag des Ausgangs der Krankheit oder Entlassung als gesund mit Angabe, wo-
hin entlassen, wann in die Anstalt zuriick, und in welches Zimmer.

8 ) Angabe von Wohnhaus, Speisesaal und Schlafsaal bis zur Erkrankung, wie
lange aiese benutzt wurden, notigen falls welcher vorher benutzt wurde.

9) Namentliche Angabe der Schlafgenossen und Schlafaufsicht, mit deren Bazilla*
befunden zur Zeit der Erkrankung oder deren eigenem Erkrankungsdatum.

10) Ort und Klasse des Schuibesuchs, ob lnterner, namentliche Angabe der Klassen-
genossen und Lehrer, mit deren Bazillenbefunden wie 9.

11 ) Gruppenzugehorigkeit mit namentlicher Angabe der Qruppengenossen trod
Gruppenaufsicnt usw.

12) Pflegerin, Kindergartnerin, Dienstpersonal des Schlafsaals bis zur Erkrankung.

13) Pflegerin und Pflegepersonal wahrend der Erkrankung in der Anstalt.

14) Bemerkungen.

III. Eine Liste der BazillentrSger und Dauerausschei-
der mit besonderer Anlage:

Spalte 1. Laufende Lummer.

„ 2. Vor- und Zuname, Alter usw.

„ 3. Stand und Angabe, seit wann dberhaupt in der Anstalt.

In Spalte 4—11 waren alle Angaben durchgehend zeitlich genau
begrenzt, also

Spalte 4. In der Zeit von — bis?

„ 5. Beschaftigt als? (Schiilerin, Lehrerin, Pflegerin, verreist, isoliert ah

Bazillentrager).

„ 6. In welchen Kaumen?

„ 7. Mit welchem Schlafraum?

„ 8. Welchem Speisesaal?

„ 9. In Beziehung zu welchen Kranken oder Bztr.? und in welcher Weise #

mit Angabe deren Bazillenbefunde wie II 9 ff.

„ 10. Jeweilige Bazillenbefunde und Tierversuche im betreffenden Zeitabschnitte.

„ 11. Bemerkungen.

Aus dieser Liste konnte glatt abgelesen werden, wo zn bestimmter
Zeit ein Bazillentrager sich aufgehalten hatte, in Beziehung zu welches
Verdachtigen er gestanden hatte, und wie der damalige Bazillenbefund war.

In die Listen eingelegt wurden die Zusammenstellungen der Resultate
von Gesamtabstrichen grSBerer Gruppen entsprechend dem Datum. Nach
Durchfflhrung dieser beiden Tabellen waren samtliche Beziehungen ohne
weiteres ablesbar.

IV. Es wurden Plane der Schlafsale mit Belegung undBett-
anordnung zu den Hohezeiten der Epidemic angelegt, die besonders im
Madchenheim bei dem haufigen Wechsel der Schlafordnung gate Dienste
leisteten. Auch hierbei waren die Bazillenbefunde zu bestimmter Zeit
eingetragen.

1) Datum, Tag und Stunde.

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Ganmitz, Aaftreten von Diphtherie in einer Erziehungeanstalt. 325

Gaben diese Untersuchungen auch ohne Zuhilfenahme der Abstrich-
resultate schon bestimmte Hinweise, wie der Gang der Epidemic erfolgt
war, und welches die gefahrlichen Personen sein mufiten, so beruhten
natflrlich die endgQltigen MaBnahmen in erster Linie auf den Be-
fnnden der Eachenabstriche. Sie warden zum Teil Srztlich vor-
genommen, meist vom Verfasser, zum Teil von ausgebildetem Pflege-
personal and schliefilich auch nach hnndertmaligem Zusehen unbedenk-
Lich vom Lehrpersonal. Abgestrichen warden alle Erkrankungs- und
Verdachtsf&lle von Di. bei den ersten Anzeichen, bis auf 10 klinisch
'sofort deutliche, die erst nach den ersten Tagen nach Einlieferung ins
Krankenhaus, dort abgestrichen, untersucht warden. Zwei davon waren
so schwer, dafi sie trotz rechtzeitiger Behandlung starben. Diese Ab-
striche warden im Krankenhaus und zum Teil in der Rekonvaleszenz
fortgesetzt und ebenfalls ins Hygienische Institut eingesandt. Die Keim-
tr&ger warden nach besonderer Anordnung kontrolliert

Ergebnisse:

Das Allgemeinergebnis des ganzen verfolgten Zeitabschnitte^
vom 1. Fall im Marz 1918 bis zum AbschluB der Arbeit im September
1921 stellt sich in folgender Tabelle dar, die nur auf Tatsachen und
nicbt auf SchluBfolgerungen aufgebaut ist.

Tabelle I.

1

Turnhalle

Haupt-

gebaude

Madchen-

heim

Gesamtzahl

(5

1 _?J

ZU8.

L <5.1

L$._

j ZU8. 1

di

1 ?

ZllS.

d 1

9 1

ZUS.

1. Darchschnittebewohner-
z&hl

■ ,

,

■

!

i

164

2. Erkrankun^8falle

8

—

8

15*)

i

16

8

14*)

22

31

15

46.

3. Dauerausecheider v. 2

—

—

—

—

—

1

i :

2

! l

1

2

4. fiztr. ohne oachg.- vorh.
Erkrankung

1

_

_

3

i

4

1

10

11

1

i 5

11

16

Bztr. im ganzen (B + 4)

1

—

—

3

i

4

2

11

13

1 6

12

18

*) 1, *) 1 = 2 Todeefalle.

‘^Querreihe 1 gibt die Durchschnittsbewohnerzahl w&hrend des
gesamten Zeitraums der Untersuchung an, d. h. die Durchschnittszahl
derer, die in den verschiedenen H&usern geschlafen und gewohnt haben,
einschlieBlich derer, die regelmfiBig den grdBten Teil des Tages in der
Anstalt verbrachten und dort die Hauptmahlzeiten einnahmen. Die Zahl
erneuerte sich durch Zu- und Abgange um etwa 40. Sie blieb nahezu
Constant und schwankte nur zwischen 169 und 157.

Querreihe 2 umfaBt alle Anstaltsbewohner, die klinisch einwand-
frei an Di. erkrankt waren. Unter ihnen sind 10 (mit 2 Todesfftllen),
die beim Ausbruch nicht abgestrichen wurden und bei spSteren Unter-
sachungen negativ waren. Zu den 10 nicht rechtzeitig abgestrichenen
muB noch bemerkt werden, daB sie ausschlieBlich Perioden gehaufter
DL-Falle angehbrten, die die Unterlassung zum Teil erkl&ren. Unter
den 46 Gesamtf&llen ist mitgezahlt der letzte alleinstehende Fall im
Januar 1920, der, uachweislich auswartig infiziert, am Tage der Riickkehr
ins Institut erkrankte, also mit der Epidemie in keinem inneren Zu-
sammenhang stebt. Diese ist vielmehr seit Ende September 1919 mit

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326 OentralbL f. Bakt. etc. i. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 5.

dem letzten Fall vom 17. Sept. 1919 als erloschen anzusehen. Zwei FSlle
erkrankten 2mal und sind doppelt angefQhrt.

Querreihe 3 — 5: Die alte Bezeichnung Dauerausscheider isthier
der Klarheit ihrer Begrenzung wegen beibehalten worden trotz des an-
greifbaren Ausdrucks Ausscheider. Ebenso die Bezeicbouog Bazillen-
trfiger in Spalte 4 und 5. Auf neuere Einteilungen und die jetzige
Verwischung der Grenzen wird spdter eingegangen. Die Einordnnng
in die Spalten 3—5 hat nur die Personen erfafit, bei denen Rachen-
abstricke tatsSchlich echte Bazillen aufwiesen. In alien 18 Fallen mit,
pos. Bazillenbefund bei Keimtr&gern (DA. und gesunde Bztr. zusammen*
gefaBt) fand sich ein zeitlich und brtlich unmittelbarer Znsammenhang
unit den jeweiligen Erkrankungsfailen, was ebenfalls fflr Echtbeit der
Di.-Bazillen spricht. Unter diesen waren 3 Faile, die auch aufierhalb
dieser Erkrankungsfalle nach langer Negativitat plbtzlich einmal wieder
pos. Befund zeigten.

6 Tierversuche wurden ausgefuhrt, sie ergaben bei 1 DA. (Frl. L)
Virulenz, bei dem anderen DA. (K. H.) Avirulenz (9 Wochen nach
sicherer Di.-Erkrankung); bei doppeltem Tierversuch an 2 Bztr. ergab
sich bei 1 (A. F.) 2mal Virulenz; beim anderen (M. H.) lmal Virnlenz.
8 Monate spater Avirulenz.

Stellen die Spalten 2—5 sichere Keimtrager dar, so ist die Frage
der Vollstandigkeit der Keimtragerzahl nicht unbedingt zu bejahen;
1918 erfolgten die Abstriche unsystematisch und in groBen Zwischen-
raumen, aber auch das Jahr 1919 zeigt Lflcken von Monaten. Die all-
gemeine Durcharbeitung fflhrte jedenfalls nicht auf andere Personen als
die bei Abstrichen positiv gefundenen, und als Ende des Jahres 1919
systematisch vorgegangen wurde, ergaben sich immer nur die alten,
stets verdachtigen Personen, die schon friiher positiven Befund aufwiesen.

Die Aufldsung der ganzen Epidemie in einzelne Abschnitte zeigte
5 Haufungsperioden, mit vbilig erkrankungsfreien Zwischenzeiten,
dazu im Januar 1920 der initgezahlte Einzelfall, der die Infektion sicher
von auswarts mitgebracht hatte.

Tabelie 11.

1

i

1

f

Ge8arut-
bewohner-
zahl des

Zahl der Er-
krankungs-
falle

Zahl der jew.
io Beziehurvg
stehenden

1

i

i

Instituts

Bztr.

1. Abschn. vom 19. 3. 18 i
bis 27. 6. 18

169

23

3

danach 2 Monile
' Pause, im Inatit.
5 VVoch. Ferien.

2. Abschn. vom 29. 8. 18

bis 6. 11. 18 |

i

1 (>H

7

2 ?

z. betr. Zeit |
nicht miters,
im Okt. —

2 Mon. Pause

■8- Abscbn. vom o 1. 19
bi> Marz 19*)

l08 t im
! Madcb.-Heim
ca. 58

ee

12©

3 Mon. Pause
© 1 DA. geblieb.

4. Abschn. vom 4. 7. 19 !
bis 15. 7. 19 I

G

6

““

5. Abachn. vom 5. 9. 19
bis 17. 9. 19

1G3

i

3

l

4

*) Betrifft ausschlieGlich das Miidehenheiuj.

4 von diesen Epidemieabschnitten fallen in Jahreszeiten, die
zur F.rkaltung disponieren: 2mal Nachwinter und Vorfrflhling, 2mal

Go^ 'gle

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Gaumitz, Auftreten von Diphtheric in einer Erziehungsanatalt. 327

Herbst uod Vorwinter. Daneben steht ein Abschnitt im Juli. Hierin
ZasammenhSnge zu sehen, vermag ich in unserem Fall nicht; hier hing
es haupts&chlich ab von der Ansteckungsmdglichkeit durch Bztr. und
Erkrankte, ihrer augenblicklicben Gefahrlichkeit nach Virulenz und
Lebensart, die allerdings von der Jahreszeit bestimmt wird, z. B. ob
eager Verkehr mit anderen mdglich war oder die Ansteckungstrager
gerade isoliert waren.

Das erstrebenswerte Ziel: einen lttckenlosen Gang der Infektion von
Fall zu Fall rekonstruieren zu kdnnen, ist wohl nur selten erreichbar.
ZunScbst haben ja aucli die Bazilienbefunde, die sifcherste Grund-
lage von SchluBfolgerungen, nur einen relativen Wert.

Negativitat bedeutet nichts Entscheidendes: Aasers
Ausspruch, zit. von Langer (3): „Es ware naiv, zu glauben, dad nach
2—3 negativen Proben samtliche entlassene Patienten wirklich Ohne
Di.-Baz. sind“, wird bestatigt durch die Wahrscheinlichkeit von 5 In-
fektionen durch negativ entlassene Rekonvaleszenten (1 war 2mal —,
1 anderer 4 mal —, 2 3mal — befunden). Ein Fall darunter ist be-
sonders bemerkenswert: ein Junge (0. K.) erkrankt am 29. Aug. 1918,
die letzte Erkrankung (G. S.) ist am 27. Juni 1918 erfolgt, dazwischen
liegen die Ferien, kein Bztr. ist in Beziehung zu setzen. Nur die Riick-
kehr des letzten Falles vom 27. Juni am 17. Aug. aus der Klinik nach
2mal negativem Befund schiagt hier die BrQcke, wenn man nicht eine
Infektion durch Gegenstande, an denen ja virulente Bazillen lange haften
kdnnen [Abel (4)], oder eine Inkubationszeit von ca. 10 Tagen mit Ein-
schleppung von auswarts annehmen will.

Genflgt auch der Grad der Wahrscheinlichkeit, auf desseu Bewertung
nachher eingegangen wird, hier wie in den meisten Fallen nicht zu Be-
weisen, so hat dafiir die Zusammenstellung der Bazillenbefunde des Dauer-
ausscheiders K. H. Beweiskraft, der nach 2 -j- Befunden wahrend seiner
Krankheit 2 Monate lang in 6 Abstrichen negativ war, dann lmal +,
7mal —, lmal +, 13mal —, lmal dann llmal — war, wahrend einer
Beobachtungszeit von 19 Monaten!

Die gleiche Unzuverlassigkeit zeigen die Bazillenbefunde sauitlicber
Bztr., die zum Teil noch angefQhrt werden. Wecbselt also Negativitat
and positiver Befund in solcher Unberecbenbarkeit, so bedeuten negative
Befunde um so weniger, je seltener die Abstriche vorliegen. Denn ein
negativer Abstrich zu irgendeiner Zeit laBt schon gar keine ScblOsse
ziehen auf Negativitat zu anderer Zeit. Und Schliisse auf Positivitat
kdnnen dann gezogen werden aus der Ansteckung anderer zu dieser Zeit,
wie bei den obenerwahnten 5 WahrscheinlichkeitsfBllen von Infektion
durch sicber negativ entlassene Rekonvaleszenten.

Ueber die Bedeutung positiven Bazillenbefundes ist schon
bei dem allgemeinen statistischen Ergebnis der Beobachtungen gesprochen
worden; er bedeutet fQr uns die tatsachliche Anwesenheit der patbogenen
Keime, die eine Di.-Ansteckung verursachen kdnnen. Aber diese selbst
hangt von den verschiedensten Faktoren ab. Gottstein s (5) Kontagions-
index gibt einen Anhalt, wieviele von 100 Menschen, die mit dem Kon-
tagium in BerQhrung kommen, tatsachlich erkranken. Es ist anzunehmen,
daB viel haufiger Keime fibertragen werden als Erkrankungen vorkommen.
Doch bei dem Akt der Uebertragung selbst fehlt jeder Zeuge von bak-
teriologischer Beweiskraft bis auf seltenste Ausnahmen; das bedeutet:
positiver Bazillenbefund allein gibt keinen Anhaltspunkt dafiir, daB der
TrBger Qberhaupt die Erkrankung verschuldet hat. Nur andere Be-

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328 Centralbi. t. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 5.

ziehungen durch bestimmte Verhfiltnisse geben bier Wahrscheinlichkeits-
beweise.

Noch eiu Problem erschwert die BeweisfOhrung fQr Uebertragungs-
zusammenh&nge: wer ist bei ann&hernd gleichzeitigem positiven Befund
von Erkrankten und Bztr. der Angesteckte und wer der Ansteckende,
wenn beide vorber nicht untersucht oder negativ waren? Folgende Be-
obachtung kbnnte die Bztr. entlasten: 2 Bztr. hatten nach langen nega-
tiven Intervallen (llmal und 5mal —) pldtzlich wieder positiven Befund
zur Zeit neuer Erkrankungsf&lle. Kdnnten diese nicht auch die Bazilien
erst bei den neuen Erkrankungsf&llen wieder gefangen haben und kraft
ihrer besonderen allgemeinen oder lokalen Disposition, vgl. Abels
Untersuchuogen, zit. von Loeffler (6), beibebalten haben? Eine ahn-
liche MSglichkeit zeigte der Epidemieabschnitt Januar bis MSrz 1919, wo
6 Erkrankungen pldtzlich von 12 Bztr. begleitet waren. Von diesen
waren & chronische Bztr. im Sinne Gaethgens (7), die anderen 7 our
temporkr (= kiirzer als 2 Monate positiv, diese Zeit ist von mir will*
kfirlich festgesetzt, um ein MaB zu haben, da G. keine Zeitabgrenzung ,
gibt); diese 7 zeigten nie wieder Bazilien bis auf einen, der aber abging \
und nicht weiter untersucht werden konnte. j

DaB aber solche tempor&re Bztr. eine Gefahr bedenten, beweisen j

3 Ansteckungen, die von ihuen ausgegangen sind. Eine Erkrankte scheint j
5 temporSxe Bztr. erst dazu gemacht zu haben, da sie mit ihrem posi- ;
tiven Befund beim Erkrankungsausbruch die Priorit&t vor diesen hatte,
die am gleichen Tage u. f. noch negativ waren, erst etwas sp&ter positiv ;
warden, soweit man die Negativit&t anerkennen will. Nach einem :
positiven Befund sind sie dann dauernd negativ geblieben. AuBerdem j
gibt z. B. Langer (8) die Mbglichkeit des Uebergangs von Bztr. in
Kranke an, eine neue Erschw'erung, Ansteckungswege aufzndecken.

Der schlagende Beweis fur die tats&chliche Schuld von
Bztr. mit positivem Befund liegt bei dieser Epideraie darin, dal
vom Sept. 1919 keine Di.-Falle mehr vorgekommen sind, nachdem bis
dahin 3 Bztr., darunter 1 DA. die Anstalt verlassen hatten; 1 war bereits
Okt. 1918 gestorben; temporfire Bztr. waren nicht wieder festgestellt
nnd die 3 noch verbleibenden ehemaligen Bztr., darunter 1 DA., warden
seitdem dauernd genau kontrolliert. Von den 3 zurQckgebliebenen Bztr.
sind im Laufe des Jahres 1920 noch 2 endgiiltig aus der Anstalt entfernt
worden, nur 1 DA. befindet sich noch da und wird in groBeren Zeit-
abstanden kontrolliert. Eine Okt. 1919 neu festgestellte Bztr. (Zngang
M. H.) wurde nach mehreren positiven Abstrichen ebenfalls entfernt Die
Anstalt ist seit nunmehr 2 vollen Jahren von Diphtherie
vollst&ndig verschont geblieben! (AbschluB Sept. 1921).

Trotz dieser unsicheren Grundlagen wurde der Versuch gemacht.
dem Ansteckungsgaug mit Berucksichtigungaller erwShnten Momente
nachzugehen. Auf Grund der beiden Haupttabellen wurden fflr jeden
Erkrankungsfall die Uebertragungsmoglichkeiten zusammen-
gestellt, die auf Grund der Feststellungen anzunebmen waren. Dabei
ergab sich iiberraschend, daB nur fur wenige F&lle keine bestimmteu Be-
ziehungen zu linden waren, fur alle anderen aber sogar mehrere (3—4)
Mbglichkeiten, entsprechend den Besonderheiten der Anstalt und ihrem
engen Zusammenleben.

Dann wurden die einzelnen Moglichkeiten genau geprfift; bis auf

4 Falle, die unklar blieben, konnte bei alien eine wabrscheinlichste
Mdglichkeit als die in Frage kommende angenommen werden. Wenn

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Gaumitz, Auftreteu von Diphtheria in einer Erziehungaanatalt. 329

dies auch zam Teil subjektive SchluBfolgerungen waren, gab es doch
aadererseits roanche Momeote von Beweiskraft, so daB 4 Wahrschein-
lichkeitsgrade der Uebertragung abgegrenzt werden kounten:

1) sichere Uebertragung, 2) hdchstwahrscheinliche, 3) vermutliche und
4) unklare.

Sie wurdeo folgendermaSen gegeneinander abgegrenzt: 1) die erforachfce Be-
ziehung bei der Uebertragung gilt ala sicher (bewiesen), a) bei einem
zeitlichen and drtlichen Zusammentretfen, das so belastend iat, daB alle anderen Ueber-
tregnngswahrscheinlichkeiten ala fernliegend nichl in Frage koromen; b) wenn durch
Unpiaueroden engaten Verkehr und zum Teil mebrfache Belaatuugamomente dieee Ueber¬
tragung unausweichlich eracheint. Hierunter gehoren vor allem geraeinaamea Schlafen
mil Bztr. im gleichen Schlafsaal und Anateckung durch Bztr. und friach Erkrankende
infolge Schlafene ini Nebenbett.

2) Ala hdchatwahracheinlicher Uebertragungsweg gelten Ansteckunga-
mSglichkeilen, die zeitlicb und Srtlich nur allgemein, aber nicht genau fixiert werden
k5nnen: wie Zusammentretfen mil lufektionatragern in Klasaen und Uruppen, in Freund-
•chaften, in gem ein sa men Wohn- und Spielzunmern, beim Schlafen im nicht abge-
acblosaenen Nebenaaal ala nachBte mdgliche Beziehungen. ich habe in diese AbteUung
nor aolche Falle genoramen, die ich aubjckiiv fur sicner halte.

3) Ala vermutlicher Uebertragungsweg gelten vorhandene Beziehungen
za lofektionstragern, deren Moglichkeit unbestritten iat, die aber zeitlich und drtlich
gar nicht fixiert werden konuen: z. B. Zusammentreffen mit Bewohnern anderer Hauser
im Hpeiaesaal, in der Schule, bei der Andacht, in Spielzimmern, Uebertragung durch
nichtbeatimmte Gegenstande auBerhalb der Wohn- und Schlafatatten usw.

4) Unklar bleibt die Uebertragung, wenn gar keine Beziehungen her-
zuatellen eind, Oder die Anateckung irgendwo auf Keisen erfolgt iat, wobei sicner keiu
Xtuammenhang mit der Anataltaepidemie bestebt

Alle dieae 4 Kategorien beziehen eich nur auf die Anateckung, die Erkrankung
zur Folge hatte, nicht auf die von Bztr. ohne Krankheitserscheinungen.

1) Sichere Uebertragungen. Im Laufe der Epidemie
warden von mir 13 aufgedeckt. Hiervon gin gen 7 aus vom Schlafen
im Nebenbett, 4 erfolgten durch Schlafen im gemeinsamen Schlafsaal,
1 Fall infolge Fattening des spflter erkrankenden Kindes durch eine
Lehrerin am Abend vor Ausbrnch ihrer eigenen Di.-Erkrankung, 1 Fall
dmlnrcb, daB im Nebenraum Bztr. schliefen, die erst 4 Tage spSter positiv
befunden wurden. Acht dieser sicheren Ansteckungen waren
darch Bztr. erfolgt, davon hatte 1 Bztr. seine beiden Schlafgenossen
angesteckt; die anderen Ansteckungen geschahen durch Erkraokte.

2) Hdchstwahrscheinliche Uebertragungen waren 14 an-
zanehmen, davon 10 durch Zusainmentreffeo in Klassen und Gruppen,
Spiel- und Wohnzimmern, 3 durch Schlafen im Nebensaal mit Ver-
bindungstQr, 1 Fall durcbe enge Freundschaft mit einem ebenso zart-
lichen wie unsauberen Bztr. (B.). Hierbei waren 7 Ansteckungen
Bztrn. znr Last zu legen.

3) Vermutliche Uebertragungen waren in 15 Fallen an-
zunehmen, 2 bei allgemeiner Aufsicht in verschiedenen Mumen, 2 bei
Dienst in mehreren Gebauden (Dienstmadchen). lOraal unbestimmtes,
aber nicht zu bestreitendes Zusammentreffen mit Infektionstragern, sowie
1 interessanter Fall der Uebertragung durch ein Dienstmadchen, das,
selbst erst spater auf andere VVeise angesteckt, den Keim an eine dritte
Person hbertragen baben muB beim Umbetten aus dem Zimmer einer
Grkrankten in ein anderes. 9 der vermutlichen Falle batten
Beziebnngen zu Bazillentragern. 5 dieser Falle wiesen als
nSchste nnd fast einzige Mdglichkeit auf eine Bztr., die bereits im April
1918 zum 1. Mai positiv und zugleich im Tierversuch virulent geweseu
war (AF.). Diese halte bis Juli positive und negative Abstriche gehabt
nnd war dann nicht wieder untersucht worden. Auf Grund der 5 Er-

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330

Centralbl. t Bakt. etc. I. Abt. Original©. Bd. 87. Heft 5.

krankungsf&lle, deren 1. im Okt 1918 begann, wurden im Jan. 1919 an
ihr die Untersuchungea systematised wieder aufgenommen. Est am
27, M&rz wurde die vermutete Bztr. durch positiven Bazillenbefund ent-
larvt und durch sofortigen positiv ausfallenden Tierversuch best&Ugt

Die Feststellung von 24mal an zunehmender Ueber-
tragung durch Bztr. bedeutet doch schon ein starkes Belastuogs-
material fQr die Schuld von Bztr. uberhaupt, selbst wenn man bloB die
15 sicheren und hdchstwahrscheinlichen Uebertragungen geiten lassen
will; Sie bildet zusammen mit dem Erfolg der Epidemie-
bek&mpfung nach Unschftdlichmachung der Bztr. die Grundlage zu
der Behauptung, dafi diese Epidemic wesentlich auf der An-
wesenheit von Bztr. beruht hat.

4) Nur 4 Faile blieben unklar; 2 davon waren die ersten der
Epidemie und konnten keinerlei Beziehungen aufweisen. Auch bei 1 Fall
mitten in der Epidemie lieBen sich keioe unbestrittenen Beziehungen
finden: die einzig in Betracht komraende Bztr. war wochenlang auBer-
halb isoliert. Der letzte unkiare Fall betrifft den nicht mit der Epidemie
zusammenbangenden Erkrankten, der den Keim von der Reise mitbrachte.

Noch einem Einwurf war zu begegnen, der besonders von seiten
der Anstalt gemacht wurde, da(5 die Infektion von auBen in die
Anstalt herein getragen w&rde. Das ist bei 5 schon erw&hnten Rekon-
valeszenten von Di., die aus dem Krankenhaus zurQckkehrten, wahr-
scheinlich. In alien anderen Fallen aber lag die Heranziehung der tat*
sachlich festgestellten Bztr. viel naher und ihre Unschadlichmachung ge-
nflgte ja zur Bekampfung. Neuaufnahm^n wurden ab Ende 1919 stets,
zum Teil auch schon frQher, sofort durch Abstrich untersucht.

Entwieklungsgang der Epidemie.

Unter aritischer Verarbeitung aller der angefiihrten Momente ergibt sich folgender
Entwickluogsgang der Epidemie:

Sie begann am 19. Marz 1918 mit einem Di.-Fall im Einzelzimmer der Turnhaile,
bei einem Pensioner der Anstalt, der eine hdhere Schule iu der Stadt beeuchte. lo-
fektionsweg blieb unklar, Beziehungen zu Infektionsquellen etwa m der Schule ergaben
sich nicht, sie in der Stadt festzustellen, wurde vergeblich versucht. Der 2. Fall am
gleichen Tage war ebenso unklar, trat auf im Madchenheim in einem Einzelschtafraum.
Bis 19. April erfolgten 5 weitere Erkrankungen, 3 im Madchenheim, 1 im Hauptgebaude,
dieser mit todlichem Ausgang, 1 im kleinen Zimmer der Turnhaile (3. bis 7. Fall).
Jetzt wurden alle Zdglinge in den 3 Hausern abgesirichen; dabei ergaben sich 1 Bazi llen-
fcrager im kleinen Zimmer der Turuballe und 1 Bazill entrageri n im Madchenheim,
denen 2 Erkrankungsfalle zur Last zu legen waren, die ihrerseits 3 weitere infiziert
hatten. Diese 2 Bztr. wurden voriibergeheud isoliert; der Bztr. der Turnhalle infizierte
nach seiner Freilassung seinen Freund als 8. Fall, und spater semen 2. Schlafgenoesen
als 14. Fall. Dazwischen hatte der 8. Fall in seiner Gruppe den Keim weitergegebeo,
und 1 Di.-Rekonvaleszentin hatte im Madchenheim eine weitere Erkrankung verursaebt
Als im Juni der 15. Fall (ira Hauptgebaude) erkrankte, wurden Lehr-, Aufsichts- und
Dienstpersonal aller Hauser abgestrichen und offeubarten 1 Lehrerin im Hauptgebaude
als Bztr. und im Madchenheim einen beginnenden 16. Fall. Isolierung kam, wie «
scheint, zu spat, es folgte durch direkte Uebertragung von den Erkrankten und von
Rekonvaleszenien die 17. bis 23. Erkrankung (am 27. Juni). Hierauf begannen die
Sommerferien und schlossen den 1. Abschnitt der Epidemie ab, die zahlenm&fiig folgen-
des Ergebnis (s. Tab. Ill, S. 331) zeigt.

Nach zweimonatiger Pause erfolgte am 29. Aug. 18. der 24. Erkrankungsf&ll im
Turnballcngebaude, dessen vermutliche Infektion auf einen aus der Klinik zuruck-
kehrenden Rekonvaleszenten zuruckzutuhren ist. Ihm folgten unmittelbar 2 Falle i®
Hauptgebaude; die Beziehungen zu der Bazillen tragendeu Lehrerin im Hauptgebaude
hatten, 14 Tage spater l Fall im Madchenheim, der vor 8 Tagen zugereist war und
an eine Infektion von auBen denken lieB. Als sich im Oktober 1918 ein 28. und 29.
Fall anschloB (im Madchenheim), machte man am 31. Okt. einen Gesamtabstrich dee

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Gaumitz, Auftreten von Diphtheric in einer Erziehungsanstalt.

331

Tabclle III.

Turnhalle

Hanpt-

geb&ude

Madchen¬

heim

Gesamtzahl

d |

$

zus.

d

1 Q zus.

k!

9 ZUS.

1 d

1 ^

ZUS .

Inatitutobewohner
Erkrankungsfalle (1 todl.)

ca.

25

5

!

5

1

8

! ' 1

— i 8

5

1 ca.
j 47

•5 10

|

18

5

169*)

23

Bazillentrager

1

1

1

— 1

1 ! 1

—

1 ! 1

;

1

2

3

*) einschlielUich Nebengebaude des Institute.

Madchenheims und begnugte sich mit seinem negativen Ergebnis, ohne die Falle erkl&ren
zu konnen.

Die Bazillentragerin votn April 18 (A. F.) war damals negativ, die Bazillentragerin
im Hauptgebaude (Frl. Scb.) gerade am 10. Okt. negativ gewosen. Der November
brachte den 30. Fall, ebenfalls im Madchenbeim, der sich im Jan. 1919 nach 6 negatives
Abetncben p)5tzlich aid DA. entpuppte (K. H.). Darauf folgten 2 Monate ohne Er-
bankung. Tabelle dea 2. Epidemieabschnittes:

Tabelle IV.

Turnhalle

Haupt¬

gebaude

i Mfidchen-
j heim

Gesamtzahl

d |

1 $ 1

ZUS.

1 1

| 9 |

zus.

d

9

[ ZUS.

| d

1$

ZUS.

Institutsbewohner

.

46

169*)

Erkrankungsfallle

l

—

1

1 2

2 i

i**)

3

4

4

3

’7

BuillentrSger

—

—

—

—

(i)

(1) 1

—

(1)

(1)

—

(2)

(2)

*) einschl. Nebengebaude des Institute. **) wurde DA. () im September nicht
untereuchfc, im Oktober negativ.

Der 5. Jan. 1919 brachte im Madchenheim den nachsten Fall (31), ein Dienst-
madchen, ohne d?6 ein bestimroter Zusammenhang herzustellen war, da sein Dienst es
im Madchenheim uberall hintuhrte. Bereits am 9. Jan. 1919 folgte der 32 Fall, auch
im Madchenheim, und jetzt bat die Anstait urn energische Hilfe. Das Hygieniache
Institut ordnete sofoit Gesamtuntersucbungen aller Bewohner des Madchenheims an,
und bereits die ersten Gesamtabstriche am 14., 15. und 17. Febr., die die einzelnen
mehrmals hintereinander erfaBte, ergab 4 Bztr. und mehrere Verdacbtige, die sotort
isoliert wurden. Der Abstrich am 2. Febr. wies wieder einen neuen Bztr. auf, und
der am 26. und 27. Febr. im ganzan sogar 6 weitere Bztr. einschliefilich einer
bereits isolierten Erkrankten, die DA. wurde (Frl. L.). Am 22. Febr. hatten Schiilerinnen,
erst spa ter als Bztr. erkannt, den Fall 36 infiziert, 3 Falle waren dazwischen erkrankt.
Die Verbaltnisse schienen unubersehbar, als der Verf&sser jetzt Ende Februar die Be-
irbatung libernahm. Im Madchenbeim wurden 4 gut abtrennbare Zimmer zur Isolier-
station eingerichtet, die alle Bztr. und Bekonvaleszenten aufnahmen. In dreitagigen
Pausen wurden Abstriche genommen; am 28. Marz verlassen 7 Isolierte nach 5mal
negativem Abstrich die Isolierstation. Isoliert bleiben die 2 DA. (Frl. L. und K. H.)
wegen positiven Refunds, dazu tritt die stets verdacbtige Bazillentragerin vom
April 1918, am 27. Marz 1919 plotzlich wieder positiv (auch im Tierversuch).
Ibr waren zur Last zu legen aie schon oben angefiihrten Erkrankungsfalle vom
Oktober bis Januar, fur die eonst keine naheren Beziehungen zu finden waren. Im April
warden die 3 Keimtrager im Wirtschaltsgebaude isoliert, im Mai verreisen sie nach
anem Luftkurort auBerhalb. K. H. kehrt nach 7 — Abstrichen zuriirk ins Madchenheim,
die beiden anderen bleiben positiv und kommen nicht zuriick. Die Epidemie scheint
erloschen. Tabelle fur diesen 3. Abschnitt, der sich aussehlieBlich im M&dchenheim
abspieit.

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332

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 5 .
Tabelle V.

Madchenheira

d ! 9 ! ZU8- J

Gesamtbewohnerzahl dee Institute
Zahl der Madchenheimbewohner
Erkrankungsfalle
Bazillentrfiger

168 (einschl. Nebengebaude)

6 *)

10

47

6*)

12

*) 1 (Frl. L.) blieb DA.; auch unter Bztr. mitgez&hlt.

1

An fang Juli 1919 ereignen eich 3 neue Fall© (37—-39^): 1 in dor Turnhalie, 2 im
Hauptgebaude. Friihere Bztr. in Turnhalie und Hauptgeoaude siod nicht vorhanden,
aber Gesamtabatriche der Zdglinge von Turnhalie und Hauptgebaude ergeben 3 nene
Bztr. unter den Knaben, davon 2 in der Turnhalie. Am 11. und 14. Juli erfolgten
2 weitere Falle, 1 in der Turnhalie, 1 im Hauptgebaude in denselbeu Bchlafsalen vie
die ersten. In der Turnhalie sind 2 Erkrankte Beltnachbarn einee Bztr. Die bt
treffeoden Schlafraume werden im ganzen isoliert, der im Hauptgebaude erhalt rur
Aufsicht eine friihere, bei den letzten Abstrichen im April negative Bazillentragenp,
die sich selbat dem A bat rich entzieht (Frl. Schr.). Am 15. Juli erkrankt eine Lehrerin
im Hauptgebaude ohne bestimmte, aber mit zahlreichen allgemeinen Beziehungec
(42. Fall). Abreise des Verfassers hindert die vollige Klarlegung; nach Ruckkehr Ut
dies© inlolge mehrfachen Lehrerwechsels nicht mehr moglich, der Zusammeohang mit
dem Ganzen bleibt dunkel. Die Bztr. sind nnr 3 Wochen untersucht worden, batten
zuletzt 3mal neg&tiven Befund. Tabelle fur den 4. Abschnitt der Epidemic:

Tabelle VI.

Turnhalie

Hauptgebaude

Madchenheim j

d 1 1

9 ! zus - 1

cJ 9

zus.

a !

9 i zufi * 1

Institutsbewohner

! •

IT! .

1

•

69 !

. j 40 i

Erkrankungefalle

2

— i 2

3 1 1

4

1

Bazillentrager

—

_ i _

3 | -

3

! i*)

2*)! 3*) !

*) 1 Bztr. erst 2. Okt. untersucht und positiv,
2 n 5, bept. v n » *

Gesamtzahl

<3 I $ *»■

5

4*)

. 169

*.fc
1 6
2 *) 6 *)

Im September folgen 3 letzte Di.-Falle (43—45), 2 am 5. Sept., davon 1 im
Madchenbeim, 1 im Hauptgeb&ude. Untersuchuogen der 8chIafgenossen uud fruher
verdachtigen Bztr. ergeben 2 friihere Bztr. (A., Frl. Schr.), pldtzlich wieder
positiv, die beide isoliert werden (m der Ktinik), wahreud im Institut die betreffendeo
Schlafsale abgesperrt worden. Der DA. K. H. ist zu dieserZeit negativ. Am 17. Sept
erkrankt der letzte Fall (45), nachd*m die beiden Bztr. nach 3 negativen Abstrichen
uns von der Klinik wieder zugeschickt worden sind, 6 Tage Zusammensein des eineo (A.)
mit dem am 17. Sept, erkrankenden in der Hilfsklasse geben den Infektionsweg. Off
Bztr. A. wird neu isoliert, dann, negativ, wieder freigelassen, dann wieder einnial po«-
tiv, seither 16 ausschliefilich negative Befunde. Hiermit ist die Epidemie tat
sachlich erloschen. Der andere Bztr. (Frl. Schr.) ist im Dezember 2mal positiv,
wird isoliert und verlafit die Anetalt am 1. Januar. Am 2. Okt. ergibt die Erstunter*
suchung einer im Mai neu aufgenommenen Schulerin (M. H.) positiven Befund; da*i*
bei 20 Abstrichen 7 positive Befunde aufweist. wird sie nach langer Isolierung am
20. Dez. aus der Anstalt entfernt. Von alien Neuaufnabraen werden seither Abstriebe
gemacht, die verdachtigen friiheren Bztr. 14-tagig bis 3-wochentlich untersucht. Tab. VII
fur den letzten Epideniieabschnitt (s. 8. 333).

Am 13. Jan. 19.0 erkrankt, wie action erw&hnt, der 46. Fall, nachweisbar nicht
im Zusammenhang mit der Epidemie. am Abend nach der Ruckkehr von einer Rewe-
Der DA. K. H. ist am 23. Jan. 1920 plotzlich positiv und wird isoliert, im Tierversuch
aber avirulent und am 14. Febr. nach 4 negativen Abstrichen freigelassen, seither daoerod
negativ. Die am 20. Dez. 1919 entlassene Bazillentragerin M. H. kommt, angeblich

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333

Gaumitz, Auftreten von Diphtherie in einer Erziehungsanstalt.

Tabelle YU,

Turnballe

Hauptgebaude

1

Madchenheim

Gesamtzahl

d j Q j zus-

! <J'| 9

| zus.

f d | 9 |

ZUS. j

| d | 9 J

ZUS.

Inetitutsbewohner

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Erkrankungsfalle

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Bazillentrager

— 1 — j — ,

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2 1 2*)

4*)

2 2*)

1 4*)

*) 1 Bztr. erst 2. Okt. nntersucht und positiv.

aoewarts xnehrfach negativ, am 8. April 1920 zuriick in die Anstalt; sie ist im Juni
2roal positiv und verlattt sie endgiiltig am 24. Juni 1920. Die Kontrolle dcr verbleibenden
Keimtrager geht regeJmafiig weiter; im Laufe des Jab res werden sie bis auf 1 DA.,
der dauernd kontrolliert wird, enllassen. Erkrankungsfalle sind nicbt wieder vor-
gekommen.

Bek8mpfangsverfahren.

Mit dem Verlaufe der Epidemie bildete sich ein bestimmtes Be-
kSmpfungsverfahren heraus, das schliefilich alien Anforderungen genugte,
aber erst ab September 1919 konsequent angewandt wurde. Es bestand
in folgenden MaBnabmen:

1) Sofortiger Abtransport des Erkrankten bei kliniseh deutlichem Befund (nicht
erst bakt. Unlersucbung abgewartet).

2) Sofonige Isolierunu: des ganzen Sehlafsaals des Erkrankten mit alien Insassen
and Verdachtigen, die zu den Erkrankten besondere Beziebungen batten Oder Schnupfen
und Eikaltung zeigten.

3) Sofortiger Abstrich aller Isolierten.

4) Entfernung der beim Abstrich positiv Befundenen und deren gesonderte Jso-
iierung.

5) Weiterisolierung und 2. Abstrich 6-8 Tage nach dem er6ten.

6) Bei 2mal negativem Abstrich Freilassnng nacb Desinfektion der Person; danach
SchluBdesinfektion des Baales.

7) Weitere Beobachtung des ganzen beteiligten Kreises.

8) Erfolgt danach ein weiterer Fall oder ist der Erkrankte bis kurz vor dem Aus-
bmcb mit alien in Beziehung getreten, dann Abstrich des ganzen fiauses.

9) Dauerkontrolle der Bztr.

10) Bei mehrfach negativem Befnnd der Bztr. mehrwdcbige Entfernung aus der
Anstalt, nach weiterem negativen Befund Wiederaufnahme unter Dauerkontrolle.

11) Bei wiederholtera positiven Befund Entlassung aus der Anstalt; zuvor Biche-
rung durch Tierversuch.

12) Abstriche bei jeder Neuaufnahme, jeder verdachtigen Hals- und Nasenerkrankung.

13) In grofieren Abstanden Getumtabstriche der ganzen Anstalt.

14) Kekonvaleszenten kommen (nach mindestens 3 negativen Abstrichen) erst in
due besondere Behausung fRekonvata-zentenheim) und werden erst nach einiger Zeit
bei weiter negativem Beiund in die Allgemeinheit aufgenommen.

Diese MaBnahmen, ein KompromiB von theoretischen Forderungen
und praktischen ErwSgungen, erscheinen sehr streng, entsprech^n aber im
allgemeinen den 3 Hauptforderungen von Seligmann und S eh loss (9):
*1) Schon in seuchenfreien Zeiten bakteriologische Untersuchung aller
verdachtigen Nasen- und Halskrankheiten. 2) Bakteriologische Unter-
suchung aller Insassen bei Epidemien in geschlossenen Kreisen. 3) Bak¬
teriologische Kontrolle aller Kekonvaleszenten auch in seuchenfreien
Zeiten.

Die Strenge der Einzelforderungen in unserem Falle er-
gibt sich ans dem engen Zusammenleben in den einzelnen Hausern.
aus der Gefahr des Uebergreifens auf die anderen Hauser, aus der
Eigenart der Zoglinge.

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334

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 87. Heft 5.

Forderung 1 ist selbstverstflndlich. Alle FUlle bis auf einen warden
in die Klinik eingeliefert. Sie in der Anstalt zu isolieren and zn be-
handeln, war zu belastend nnd auch zu geffihrlich fQr die anderen.

2—5 ermdglicht die frQhe Erfassung bereits Angesteckter und der
Bztr. und wird einer Durchschnittsinkubationszeit gerecht, die Strfim*
pell auf „selten mehr als 2—5 Tage, Baginsky allerdings „2—20 Tage
and lfinger tt angibt (zitiert von Langer, 10).

Die Isolierung der Bztr. machte mangels geeigneter Mu me and
besonderer Aufsicht stets Scbwierigkeiten, die durch besondere Iso*
lierstationen in solchen Anstalten Qberwunden werden mussen.
Lange Isolierung in einem abgeschlossenen Zimmer eines gleichzeitig
als Internat benutzten Hauses ist, wie beobachtet, sebr problematisch;
wir haben schliefilich Bztr. aufierhalb im WirtschaftsgebSude isoliert;
nur die vorflbergehende Isolierung .der Scblafs&le im ganzen hatte sich
bew&hrt und wurde fast stets durcbgefflbrt (die mit dort scblafende Auf-
sicbtsperson wurde mitisoliert). Krankenanstalten sind fflr solche „Ge-
\ sunde", die BebandlungsbedOrftigen nur den Platz wegnebmen, nicht da
und behalten sie nur in den seltensten Fallen.

6 entspricht der Anffassung Abels (11), dafl Schlufidesinfektionen
erst bei mehrmals negativem Befund der Isolierten und Beseitigung der
Keimtrager von Wert sind.

8. Gesamtabstricbe baben uns trotz ibrer nor lmaligen Untersachnng
in vielen Fallen wertvolle AufschlQsse gegeben, Bztr. und Beginn der
Erkrankung aufgedeckt, im Notfalle warden sie wiederholt. Nur darf
man sich bei allgemeiner Negativitat nicht beruhigen, sondern mul
weiter allgemein beobachten.

Forderung 9 ist die Hauptfolgernng aus dem ganzen Verlauf der
Epidemic: die Dauerkontrolle der Bztr. mufi durch Abstriche in kurzen
Zeitabstdnden vorgenommen werden (erst 8— 14-tagig, spater monatlich).

Forderung 10 sucht bei aller Problematik der Negativitat einen Modns
vivendi, fordert doch Sommerfeld (12) ganz allgemein Bazillen-
freiheit bei Rfickkebr in die Internate, Waisenhauser und ahnlicbe
Anstalten.

11 ist die strengste Forderung, notwendig durch die Unmdglichkeit,
Bztr. mit wiederboltem positiven Befund ausreichend lange Zeit in einer
Anstalt zu isolieren. Sie erst durch den positiven Ausfall des Tier*
versuchs zu rechtfertigen, den Klinger und Schoch (13) unbedingt
zu dieser MaBnahme fordern, erscheint bei der Sicherheit bakteriologiscb-
mikroskopiscber Diagnostik wohl nicht unbedingt erforderlich. 3 Bztr.,
darunter ein DA., wurden auf Grund der Tierversuche entfernt, 2 Bztr.
mit sehr haufigem positiven Befund gingen ohne Tierversuch freiwillig,
1 Bztr. fiel durch Todesfall weg. Der noch in der Anstalt gebliebene
Dauerausscheider K. H. war im Tierversuch avirulent und hat noch nicht
wieder positives Abstrichmaterial geliefert, der andere gebliebene Bztr. A.
ist, positiv am 2. Dez. 1919, damals nicht auf Tiervirulenz gepruft worden
und seither dauernd negativ. Das Problem der konstanten Virulenz,
die Klinger und Schoch (14) bejahen, erhielt in einem Fall BestS-
tigung, in einem blieb es offen (bei doppeltem Tierversuch).

12 ist eine dringende Forderung von Seligmann und Schloss (15X
der sich dabei, wie wir, mit einem Abstrich begnttgt, ebenso wie For¬
derung 13.

14 basiert auf der Forderung Loeff lers (16) und zahlreicher n&ch
ihm, Wiederzulassung zum Schulbesuch erst nach mehrmaligem nega-

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Gauinitz, Beob. ub. d. Auftrefen v. Diphtherie in einer Erziehungsanstalt. 335

1

tiven Befund zn gestatten. Die Unterbringung in besonderen Rekon-
valeszentenheimen and Asylen zur Entlastung von Kliniken und An-
stalten empfiehlt Gabritschewsky (17) and Heubner (18). 8 Ffille
warden bei uns so behandelt and zam Teil in Nebengeb&uden der An-
stalt nntergebracht. Die Kliniken baben uns Genesene oft sebr frflh
zurfickgeschickt, da sie den Platz notwendig brauchten.

Die wirklich ernsthafte Durchfflhrung dieser Mafinahmen erspart das
groBe, dabei nicbt sehr zuverl&ssige Radikalverfahren: die Schliefiun'g
der Schule oder Anstalt, die Seligmann (19) nur empfiehlt bei
sehr grofier Zahl von Erkrankten oder Bazillentrfigern. Bei unserem
Fall (st sie nicht angewendet worden; die Unterbrechung durch die
Ferien bat nur scheinbar gfinstig gewirkt, die Bztr. waren geblieben.
Zur MaBnabme der Isolierung ist kritisch zu beraerken, daB lfinger
dauernde gemeinscbaftliche Isolierung von Bztr. die Gefabr bedeutet, die
Bazillen dauernd zu ergfinzen. Ebenso ist es eine zweischneidige MaB-
uahme, bei Isolierung VerdSchtiger einen Bztr. zur Aufsicht mitzu-
isolieren, wenn man auch andererseits Gesunde ohne Bazillen davon
fernzuhalten sucbt.

Bei den Erkrankungen im September 1919 wurden diese Forde-
rungen, wie im letzten Epidemicabschnitt beschrieben ist, aucb von seiten
der Anstalt mit groBer Gewissenhaftigkeit konsequent durcbgeftthrt mit
dem Erfolg, daB seitdem die Epidemie erloscben ist.

Beobacbtungen fiber lokale Bekfimpfung der Bazillen von Bazillen-
trigern warden nicht gemacht.

Besondere Beobacbtungen.

Stellt man die Zahl der Keimtrfiger (Erkrankte, DA. und Bztr.)
ngch Stand und Geschlecbt zusammen, so ergibt sich folgendes Bild:

Tabelle VIII.

i , |

Erkrankte |

• i

Davon DA.

Bztr.

ohne DA.

Geoamtzahl der v. d.
Epid. direkt Betroff.

_6J

Q 1

| zns.

<3 ! Q 1

<s .

i $ i

ZU8. |

6 i

2 | ru8.

Lehrperaooal

HauspensOQ.

Pflegerinnen

Schtiler

1 29 |

4

2

9

4

2

38

! — ! i;f 1

6

! i i

! 2
i 8

i 1

2

14

1 _

| 35

5 i 5

2 2

2 2

17 i 52

Somme |

29*)l'

15 j

1 44*)

1 - t i i i

1 6

! n 1

i I?

j 35 '

26 I 61

*) Die Zahl der Erkrankungsfalle erhoht sich durch 2 Schuler, die 2mal er-
kTankten, auf 31 bzw. 46.

Prozentverbfiltnisse wurden aus keiner Tabelle berecbnet, dazu halte
ich die Zablen ffir zu gering. Eine besondere Bevorzugung eines Ge-
schlechts bei der Gesamtbeteiligung an der Epidemie mfichte ich nicht
herauslesen. Aufffillig ist die ausscblieBliche Beteiligung des erwachsenen
weiblicben Gescblechts in Lehr- und Hauspersonal (Pflegepersonal war
ausschliefilich weiblicb) und scheint Gaethgens (20) Recbt zu geben,
daB von Erwachsenen hautsachlich das weibliche Geschlecbt von Bazillen
befallen wird, wohl infolge seines intensiveren Verkehrs mit Kindern,
der in diesem Falle unbestritten war. Es gehfirten aber zur Anstalt
nur durchschnittlich 10 mfinnliche Erwachsene neben 50 weiblicben.

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336

Centralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

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Die Zahl der BazillentrSger einschlieClich DA. (znsammen 18) er-
scbeint im Verhfiltnis zur Zabl der Erkranknngen (46) niedrig, wenc
man sie mit der Beobachtung Kruses (21) vergleicht, der in eioer
Taubstummenanstalt von 256 Insassen 16 Erkrankungen und 90Bz(r. fand.
Geme8sen an der Durchschnittszabl der Bewobner unserer Anstalt (164)
entspricbt die Zahl der Bztr. etwa dem Prozentsatz, den Sacqn6p6e(22)
fflr die Zabl von Bztr. in grQBeren KinderkrankenhSusern annimmt
(12 Proz.); bliebe also hinter der von ihm angegebenen Prozentzahl tod
20 - 25 Proz. bei Endemien Oder Epidemien in Schulen zurfick. Ueber-
sieht man aber noch einmal die EiDzelabschnitte, so bedentet die Bztr.-
Zahl von 12 im M&dcbenheim Januar bis M&rz 1919 bei einer Bewobner-
zahl des M&dchenheims von 47 ein ganz anderes Resultat. Hier war
sie zudem doppelt so groB als die Erkrankungsfcahl (6).

Es bleiben von dieser Arbeit folgende langere Beobachtnngen von
Keimtrfigern, deren Bazillenbefunde wert sind, verdffentlicht zu werden:

A. die 2 Dauerausscheider

1) K. H. <5 8 J. erkrankt am 6. Nov. 18. Befunde:

12.

11. 18

+

20. 1. —

24. 4.

23. 1. 20

14.

11.

22. 1. -

2. 5. -

29. 1.

18.

11.

+

24. 1. -

15. 5.

4. 2.

21.

11.

5. 2. -

17. 5. -

10. 2.

23.

11.

24. 2. —

Liicke

13. 2.

20.

11.

—

10. 3. -

5. 9.

20. 2.

19.

12.

19. 3. —

8. 9. —

27. 2.

27.

12.

27. 3. +

17. 9. -

15. 3.

30.

12.

—

31. 3. —

30. 9. —

22. 4.

14.

1. 19

+

3. 4.

8. 11. -

Liicke

17.

1.

—

17. 4. —

2. 12. —

3. 6.

wird weiter beobachtet.

Resultat: Bei fast 20 Monaten Beobachtung 13 MonateDauer des Bazilleo-
tragens (5mal +, 1 TV. —).

2) Frl. L. Q 21 J. Lehrerin, erkrankt am 19. Jan. 19. Befunde:

31.

10. 18 —

5. 2. —

19. 3. +, TV. +

15.

1. 19 —

24. 2. +

24. 3. +

21.

1. —

28. 2. +

27 m 3m *{“

22.

1* +

3. 3. +

17. 4. +

24.

1. ~b

5. 3. +

24. 4. +

27.

1« “b

7. 3.

Abgegangen 31. 5.

29.

1* “b

11. 3. —

Abetriche im August 19 (in Gdrlitz)

31.

1. +

13. 3. -

positiv

Resultat: Bei 10 Monaten Beobachtung 7 Mon ate Dauer des Bazillentrageni-
nachgewiesen (14mal u. mehr +, 1 TV. +).

B. 4 Bazillen trager

1) A. F. 9 10 J.

Befunde :

29 . 4 .

18 +, TV. +

27. 6.

+

3. 5.

-b

4. 7.

+

6. 5.

+

11. 7.

— -

8. 5.

—

Liicke

10. 5.

—

31. 10.

_

13. 5.

—

Liicke

27. 5.

+

14. 1. 19

—

10. 0.

-b

24. 1.

—

13. 0.

-b

3. 2.

—

20. 0.

—

10. 3.

—

21. 6.

+

19. 3.

—

Resultat: Bei Beobachtung von
Bazillcntragens nacbgewiesen (lima! +,

27. 3. +, TV. +

31. 3. +

17. 4. —

24. 4. —

Abgegangen; im August 19 in Gdrlitz +.

November 19 — bis auf eine + AusnahnK
Nicht weiter verfolgt.

19 Monaten 10 (18) Monate Dauer des
! TV. +).

Gck igle

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Gaumitz, Auftreten von Diphtherie in einer Erziehungsanstalt.

337

2) Frl. Bohr. Q 22 J. Erankenpflegerin. Befunde:

15. 1. 19 +

29. 1. —

3. 4. —

2. 12. +

17. 1.

+

31. 1. —

Liicke

5. 12. +

20. 1.

5. 2. —

5. 9. +

10. 12. —

22. 1.

—

26. 2. —

8. 9. -

16. 12. +

24. 1.

+

19. 3. —

30. 9. —

22. 12. —

27. 1.

24. 3. -

Liicke

Abgegangen

Resultat: Bei 11 Monate Beobachtung 11 Monate JDauer dee Bazillentragens
nachgewiesen (7mal +).

3) A, (J J- Befunde:

29. 4. 18 —

7. 3. —

5. 9. +

22. 12.

Liicke

Liicke

10. 3. —

8. 9. -

31. 12. —

3. 6. -

31. 10. —

14. 3. -

10. 9. —

8. 1. 20 —

16. 6. -

Liicke

19. 3. —

24. 9. -

23. 1.

29. 6. —

14. 1. 19 ?

24. 3. -

Liicke

29. 1. —

15. 1. —

27. 3. —

8. 11. —

10. 2. -

3. 2. -

31. 3. —

2. 12. +

20. 2. -

26. 2. +

3. 4. —

5. 12. —

27. 2.

3. 3. -

19. 5. —

10. 12. —

15. 3. —

5. 3. —

Liicke

16. 12. -

22. 4. —

Wird weiter beobachtet.

Resultat: Bei 26 Monaten Beobachtung 10 Monate Dauer dee Bazillen-
trageng (3mal poeitiv).

4) M. H. 9 10 J. Befunde:

2. 10. 19 +

24. 10. —

10. 12. —

6. 10. +

27. 10. +

16. 12. —

8. 10. "f*

29. 10. —

Auswarta 2mal —

10. 10. —

31. 10. +, TV. +

22. 4. 20 -

13. 10. +

3. 11. —

Liicke

15. 10. —

14. 11. — '

10. 6. +

20. 10. —

2. 12. +

16. 6. +, TV. —

22. 10. +

5. 12. —

Abgegangen

fie8ultat: Bei 8 Monaten Beobachtung 8 Monate Dauer des Bazilientragens
nachgewiesen (lOmal poeitiv, 1 TV. +, 1 TV. —).

Bei der Kleinheit der Zahlen konnte keiue Stellung genommen
werden zu der Auffassung H. Con rad is (23), der die Daaerausscheider
als Haupttr&ger bezeichnet, die die geffihrlichen seien im Gegensatz zu
den yon ihm Nebentr&ger genannten Bazillentr&gern im alten Sinne.
Den beiden Dauerausscheidern, die wir batten, konnten Ansteckungen
anderer nicbt nachgewiesen werden; bei dem einen ist ein 20-rnonatiger
Aufentbalt in der Anstalt mit wenig Unterbrechungen verfolgt worden,
wobei schlieBlich Gelegenheit zur Uebertragung gewesen w&re; dafQr
sind aber 16 Bazillentr&gern (NebentrSgern Conradis) 24 Infektionen
zur Last zu legen, davon 8 sicher bewiesene, was ihre Gef&hrlichkeit zur
Genflge darlegt.

Die Endergebnisse aller Beobachtnngen und Erfahrungen der
vorliegenden Arbeit lassen sich folgendermafien zusammenfassen:

1) Der Verlauf der Epidemie war Qberwiegend ab-
hangigvonder Anwesenbeit von Bazillentr&gern, denen
auch in zahlreichen Fallen die Schuld der Uebertragung direkt nach¬
gewiesen werden konnte.

2) Die positiven Bazillenbefunde fanden sich geh&uft bei „Gesunden“
zur Zeit von echten akuten Erkrankungsf&llen, um sich bei der Mehr-

Ente Abt. Orig. Bd. 87. Heft 6. 22

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Gougle

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338 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

zahl nicht zu wiederholen; bei wenigen „chronischen u Bazillentrigern
(einschlieBlich Dauerausscheider) wiederholten sie sich bei Neuerkran-
kungen und in erkrankungsfreien Intervallen.

3) Als l&ngste Dauer des Bazillentrageus konnten bei einer kind-
lichen Bazillentr&gerin noch 16 Monate nach dem ersten positiven Be-
funde Bazillen nachgewiesen werden.

4) Bei der BekSmpfung von Diphtherief&llen in einer geschlossenen
Anstalt sind unentbehrlich: die strenge Isoliernng aller Erkrankten nnd
der Bazillentr&ger mit positivem Befund, die mehrraalig nachgewiesene
Bazillenfreibeit von Genesenen und BazillentrSgern vor Wiederznlassnng,
die dauernde regelm&Bige Abstrichkontrolle der Bazillentr&ger in knrzen
Zeitabschnitten, die endgflltige Entfernung von cbronischen Bazillen¬
trSgern, von Zeit zu Zeit vorzunehmende Gesamtabstriche aller Insassen
und die sofortige Abstricbuntersuchung von Neuaufnahmen und Ver-
dSchtigen.

5) Bei ErkrankungsfSllen mflssen vorQbergebende Isolierungen anch
grOBerer Kreise bis zur vOlligen KISrung und Beseitigung der Infek-
tionsquellen vorgenommen werden.

6) Fflr grofiere gescblossene Anstalten ist die Einrichtung besonderer
Rekonvaleszentenheime und Isolierstationen mit besonderem Pflege-
personal wflnschenswert.

Iiiteratur.

1) Lanier, Ueber Geschwistererkrankungen und Heimkehrfalle. (J&hrb. d.
Kinderheilk. Bd. 85. 1917. S. 171.) — 2) Beligmann, Die Bekarnpfung der Diphtheric
in Schulen und geschlossenen Anstalten. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. 70. 1912. B. 66 u. 67.) —
3) Langer, vgl. 1) B. 171. — 4) Abel, Beitrag zur Vrage der Lebensdauer der Di-

{ htheriebazillen. (Centralbl. f. Bakt. Bd. 14. 1893. S. 761.) — 5) Gottstein, zit von
ganger, vgl. 1)S. 158. — 6) Loeffler, Zur Diphtheriefrage. (Dtsch.med. Wochenschr.
1894. Nr. 47.) — 7) Gaethgens, Ueber Krankheitsubertragung durch Gesunde.
(Zeitschr. f. arztl. Fortb. 1919. Nr. 7.) — 8) Langer, vgl. 1) B. 164. — 9) Selig-
mann und Bchloss, Beitrage zur Epidemiologie und Klimk der Diphtherie. (Zeitschr.
f. Kinderheilk. Bd. 4. 1912.) — 10) Langer, vgl. 1) B. 163. — 11) Abel, Erfolge
und Mangel der Diphtheriebekampfung. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 64. 1912.
S. 238.) — 12) Sommerfeld, Zur Infektionsdauer der Diphtherie. (Dtsch. med.
Wochenschr. 1912. S. 243.) — 13) Klinger u. Bchoch, Weitere epidemiologische
Untersuchungen fiber Diphtherie. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. 80. 1915. S. 55.) — 14) Klin¬
ger u. SSchoch, vgl. 13) ebenda. — 15) Beligmann u. Sch loss, vgl. 9) B. 475—476.
— 16) Loeffler, vgl. 6) These 17. — 17) Gabritschewsky, Zur Prophylaxe der
Diphtherie. (Zeitschr. f. Hyg. Bd. 36. 1901. B. 66.) — 18i Heubner, Diskussion zu
einern Vortrag Bommerfelds. (Berl. klin. Wochenschr. 1911. S. 52.) — 19) Beiig-
mann, vgl. 2) S. 45. — 20) Gaethgens, vgl. 7). — 21) Kruse, Die Verbreitung
und Bekarnpfung der Diphtherie. (Munch, med. W. 1916. S. 1253—55.) — 22) Zit
von Gaethgens, vgl. 7). — 23) H. Conradi, Vorarbeiten zur Bekarnpfung der Di¬
phtheric. Jena (G. Fischer) 1913. S. 86.

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Knorr, Wirkung von RindergalJe auf Ruhrbazillen.

339

Naohdruck vet bo ten .

Experimented Studien liber die Wirkimg von Rindergalle

anf Rubrbazillen.

[Ads der Bakteriologischen Untersochungsanstalt Erlangen, Prof. Dr.

W. Weichardt.]

Von Dr. Maximilian Knorr.

In unserem Institut werden sQmtliche Blutproben, die zur Agglu¬
tination eingesandt werden, ohne besonderen Antrag auch in Rindergalle
yerirapft. Obwohl meist nur 1—3 ccm Blut, oft nur ein blutgetr&nkter
Wattetupfer, in die Galle gegeben werden konnte, gelang es in zahl-
reichen Fallen, Typhus- und Paratyphus B-Bazillen zu zQchten, so daB
das Verfahren in mancher Hinsicht Vorteile bietet.

Bei einem klinischen Typhusfall (Agglutination Ty l:200-f-, Dys.
negativ) wurde nun durch Anreicherung in Rindergalle Dys. Y gezQchtet.
Da ich mich eines gleichen Falles aus dem Felde erinnerte, hielt ich es
der MQhe wert, die Literatur in dieser Hinsicht durchzusehen.

Nowicki (1) stellt die Falle zueammen, in denen Ruhrbazillen anfierhalb dee
Darmtraktus gefunden wurden. Es ergibt sieh der interessante Betund, daS Dys. Y
lOmal mit der Anreicherung in Rindergalle, ’somit mit meinen Fallen 12raal, aus dem
etromenden Blute geziichtet werden konnle. 2mal fand sie sich in der Gallenblase und
einmal in der Milz.

Im Gegensatz hierzu wurde Dys. Shiga-Kruee und Flezner nie¬
mals mittels der Galleanreichernng aus dem strbmenden Blute ge-
zuchtet. Dys. Flezner scbeint an und filr sich seltener gefunden zu werden, so
lieB sie sich auSerhalb des Darmtraktus nur lmal in der Milz, lmal in der Gallenblase
und 2mal im Uarn nachweisen.

Dys. Shiga- Kruse konnte nachgewiesen werden;

5mal in der Milz, lmal gleichzeitig im Herzblut, 7mal in der Galle bzw. Leber,
3mal in Leber und Leberabszessen, 3mal mit obigem Fall im Herzblut und endlich
lmal im Harn.

Nach diesen Angaben schien die Rindergalle ein guter
Nahrboden, vorzGglich fflr Dys. Y zu sein.

Auffallig war, dafi Shiga-Kruse-Bakt., obwohl sie ebenso haufig
anfierhalb des Darmtraktus nachgewiesen wurden, wie Ruhr Y-Bakt.,
also im Kreislauf gewesen sein mflssen, niemals aus dem strbmenden
Blate gezQchtet werden konnten. Es w&re doch ein groBer Zufall, wenn
man nur Y mit Hilfe der Galleanreicherung gezQchtet hatte nnd niemals
Shiga-Kruse, unter Umstanden auch Flexner. In gewissen Grenzen
konnte allerdings ja bei letzterem auf die Seltenheit des Vorkommens
anfierhalb des Darmtraktus diesbezGglich hingewiesen werden.

Betrachtet man aber die Fundorte der Dys. Shiga-Kruse auBer¬
halb des Darmtraktus, so zeigt sich, daB sie sich in nicht weniger als
in % der Falle, in denen ihr Nachweis uberhaupt mbglich war, in der
Leber, in der Galle und in Leberabszessen fand. Daraus geht hervor,
daB sie in der Leber und ihrem Sekret, der Galle, wenigstens ihr Fort-
kommen fin den muBte. Obwohl ja die chemische Zusammensetzung der
Menschen- nnd Rindergalle bezQglich der GallensQuren und ihrer Salze

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22 *

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340

(Jentralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 5.

□icht ganz gleich ist, so kommen sie sich doch sehr nahe, ferner zeigen
sich ja Schwankungen in dieser Beziehung auch bei ein und demselben
Individuura.

Somit ergibt sich, daB einerseits noch nie der Nachweis der Dys.
Shiga-Kruse aus strdmendem Bint glQckte, auch nicht mittels der
Galleanreicherung, andererseits der Nachweis in der flberwiegenden Mehr-
zahl der Falle, in denen sie aufierhalb des Darmtraktus gefnnden wnrde,
gerade in der Leber und ihrem Produkte gelang — allerdings nicht in
der konzentrierten Zusammensetzung der Blase, sondern nur in den
Gallon gUngen.

Es wurde versucht, fflr diese Befunde auf experimentellem Wege
eine ErklSrung zu finden 1 2 ).

Frische Rindergalle wurde filtriert und im strdmenden Dampf eine
Stnnde sterilisiert, dann in Reagenzgl&ser zu 6—8 ccm abgefflllt. Diese
Gallerdbrchen wurden mit je einer 2 ram-Oese einer 18—48-std. Bouillon-
kultur beimpft, die Galle dann sofort grQndlich gemischt, und je eine
2 mm-Oese zu einer Gelatinez&hlplatte verwendet. Nach 6-, 24-, 48- und
72-std. Bebriitung bei 37° wurden in der gleichen Weise Z&hlplatten ge-
gossen. Waren sie steril, so wurde fiberdies 0,3—0,5 ccm in Bouillon
eingesftt.

Diese Versuche wurden mit 5 Shiga-Kruse-St&mmen, 2 V-
Stfimmen und mit je 1 Stamm Dys. A, D und H*) angestellt. Zur
Kontrolle wurden Typhus- und Paratyphus B-Stamme verwendet, die
immer stark angereichert wurden und meist nach 24—72 St. unz&hlbare
Kolonien aufgehen liefien. S&mtliche Stamme waren serologisch und
biologisch fortlaufend geprflft.

Aus Raumersparnis unterlasse ich die Aufstellung der Tabellen.
Das Ergebnis war:

1) Y wird in Rindergalle stets ganz erheblich angereichert, bereits
nach 6 Std. ist die Keimzahl in vielen Fallen 4mal grOBer als in der
Aussaat. Der 12malige Fund dieser Keirae mittels des Galle-
anreicherungsverfahrens aus strdmendem Blute ist somit
experimentell gekiart.

2) Dys. D zeigt ein ahnliches Verhalten wie Y, lmal wurde jedoch
eine nur schwache Anreicherung nachgewiesen. Dys. H konnte nur lmal
angereichert werden, allerdings in einem Versuch, der bezQglich der Be-
impfung, wie spater dargelegt wird, anders zu beurteilen war. 5mal
wurde die bakterizide Wirkung der Rindergalle fflr diesen Keim festge-
stellt. Dys. A war stets in Galle nach langstens 48-std. Bebriitung
nicht mehr nachzuweisen. Des Vergleiches halber seien die biologischen
Reaktionen in Zuckernahrboden beigefflgt. Die Y-St&mme bildeten in
Maltose und Mannit-Nutroseldsung nach Ddrr stark Saure, so daB das
EiweiB zur Gerinnung kam; Rohrzuckerlosung liefien sie unverandert.
Dys. D rdtete Maltoselosung stark, liefi Mannit und Rohrzuckerldsung
unverandert. Ebenso verhielt sich A. H kam bezflglich des Verhaltens
in diesen Nahrlosungen den Y-Stammen gleich.

3) Die Shiga-Kruse-Stamme wurden von der Rindergalle in
verschiedenen Versuchen anscheinend ganz gegensatzlich beeinfluBt.
Wurden doch in einem Versuche (im gleichen wie auch der H-Stamm)

1) Die lanpjabrige Praparatorin der Anstalt, Frl. Elsbeth Gugel, hat mich
hierbei durcb aorgfaltige Arbeit in dankenswerter Weise unterstiitzt.

2) Fur die Ueberscnduug der Pseudodys. A, D und H bin ich Herrn Geheimiat
K ruse zu Dank verpfiichtet.

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Knorr, Wirkang von Rindergalle auf Ruhrbazillen.

341

s&mtliche, in einem weiteren Versuche 2 Shiga-Kruse-Stamme, an-
gereichert. In alien anderen Versuchen konnte Shiga-Kruse nach
48-std. Bebrfltung in Rindergalle nicht mehr nachgewiesen werden. Als
Gesamtresultat erhielt man eine 9malige Anreicherung, gegenOber einer
34-tnaligen Abtfltung. Aus diesen Ergebnissen ging zwar die bakterizide
Wirkung der Rindergalle auf Shiga-Kruse einwandfrei hervor, jedoch
zeigte sich gerade in 2 Versuchen, und nicht etwa verteilt fiber siimt-
liche Versuche, daB unter gewissen Bedingungen eine Anreicherung der
Shiga-Kruse in Galle stattfinden kdnne.

Mflhsame Versuche, die in verschiedenen chemisch - biologischen
Richtnngen angestellt wurden, bewiesen, daB die Anreicherungserfolge
von Shiga-Kruse und gewisser Pseudodys.-Stamme, z. B. H, nicht
darch das Feblen Oder Mangeln eines gewissen Stoffes in der Rindergalle
bedingt sei, sondern durch dieMenge der in die Rindergalle
eingesSten Keime.

Nun wurden alle bisherigen Versuche, von denen ja Zahlplatten an-
gelegt waren, unter Zugrundelegung dieses neuen Gesichtspunktes durch-
gesehen. Die Fehlerquellen der Zahlmethodik wurden selbstverstandiich
berflcksichtigt, trotzdem ergab sich, daB die Anreicherung von
Shiga-Kruse gerade dann stattfand, wenn die ersten Zahl¬
platten der Galleaussaat nach sofortiger Beimpfung an-
gelegt, die moisten Kolonien aufgehen lieBen. Dies wiederum
erklarte sich im Versuch, wo alle Shiga-Kruse-Stamme und auch der
H Stamm angereichert wurden, einfach durch die Entnahme des Impf-
materiales aus Fleischwasserpeptonbouillon, wahrend bei alien fibrigen
Versuchen das Impfmaterial aus Hottinger-Bouillon stammte. Ein
einfacher Versuch bezGglich der optischen Dichtigkeit zeigte, daB nach
der gleichen Zeit, bei gleicher Beimpfung die Peptonfleischwasserbouillon
etwa 5—6mal so keimhaltig war, als Hottinger-Bouillon. Auch im
zweiten Versuch, wo nur 2 Shiga-Kruse-Stamme angereichert wurden,
zeigten deren erste Zahlplatten anifallend zahlreiche Kolonien.

Da die Kritik der Versuche die Uebertragung des Nahrboden-
materiales fflr die Anreicherung beschuldigen konnte, obwohl nur eine
2 mm-Oese in Betracht kam, so suchte ich auf einem anderen Wege
zum gleichen Beweis zu kommen. Die Gallerdhrchen wurden nun mit
18-std. Schragagarkulturen in der Weise beimpft, daB in die eine Gallen-
reihe nur ein winziges Stippchen, in die andere dagegen nur eine 1 mm-
Oese der Schr8gagarkultur verimpft wurde. Da weiterhin die frflheren
Versuche mit ziemlich alten Stammen angestellt waren, schien es ganz
vorteilhaft, zahlreiche aus den einzelnen Ruhrepidemien herausgezfichtete
Stamme in den Versuch stellen zu kdnnen.

In den ersten Galleversuchsreihen, wo nur verbaltnismaBig wenig
Material zur Aussaat kam, erlag Shiga-Kruse (15 verschiedene
Stamme) 20mal der bakteriziden Wirkung der Rindergalle und wurde
6mal angereichert. In den zweiten Galleversuchsreihen wurde
imraer Anreicherung festgestellt. Noch nach 10 tagiger Be-
brfitung konnten die Shiga-Kruse-Stamme aus der Galle gezQchtet
werden. Die 6malige Anreicherung bei Beimpfung der Galle mit Stippchen
von Schragagarkulturen ddrfte sich eben ohne weiteres daraus erklaren,
daB diese Methode der Beimpfung zu ungenau ist, so daB es auch bei
grdBerer Uebung nicht immer gluckt, nur die Keimzahl in der Galle
auszusaen, die ihrer bakteriziden Wirkung unter alien Umstanden erliegt.

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342

Centralbl. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

3 Ruhr Y-Stimme wurden aber stets in beiden Ver-
suchsreihen angereichert.

Die flbrigen Pseudodysenterien (8 Stfimme) wurden in der 1. Ver-
suchsreihe 12mal angereichert und 4mal abgetdtet. Somit zeigten diese
Versuche ebenfalls die bakterizide WirkuDg der Galle auf Shiga-Kruse.
Aussaaten, in denen bei sofortiger Verarbeitung je einer 2 mm Oeseder
frisch beimpften Rindergalle zur Zfihlplatte noch 1—300 Kolonien auf-
gingen, waren nach lfingstens 48 Std. vOllig steril, so daB es selbst bei
Aussaat von 0,2—0,3 ccm Galle nicht moglich war, ein Wachstum Dach-
zuweisen. Es steht weiterhin fest, daB Dys. Shiga-Kruse, sobald
die bakterizide Korrelation zwischen Menge der Rindergalle und ein-
geimpfter Keimzabl flberschritten wird, durch Rindergalle angereichert
oder wenigstens nicht abgetdtet wird. In den Versuchen wurden nicht
etwa bestimmte Stfimme stets angereichert Oder abgetdtet, sondera
bestimmte Versuche fielen durch die Erscheinung der Anreicherung, der
Lebeusffihigkeit Oder der Abtdtung heraus.

Eigentlich mfiBte man ftlr jeden eigenen Shiga-Stamm
die Keimzahl bestimmen, die eben noch in der Lage ist,
sich in der Galle wie in anderen Nfihrflfissigkeiten am
Leben zu erhalten. In vielen Versuchen wurde die Wachstnms-
intensity der verschiedensten Ruhrstfimme studiert, und man konnte
sehen, wie in der gleichen Nfihrflfissigkeit nach gleicher Zeit und bei
gleicher Beimpfung der eine Stamm den anderen durch Wachstumsst&rke
bereits nach 12 Std., ja auch frflher schon makroskopisch sichtbar, fiber-
flfigelt hatte. Im allgemeinen kann man sagen, daB Y-Stfimme bezfiglich
der Intensitfit des Wachstums an 1. Stelle stehen. Jedoch glflckte
es auch bei Berficksichtigung dieser Tatsache durch Ein-
saat kleinster Keimmengen von Y nicht, die Anreichernng
hintanzuhalten. Fflr Dys. A, D und H scheint die Rindergalle in
den meisten Fallen bakterizide Wirkung zu haben. Es kommt jedoch.
wie bei der schwankenden Biologie dieser Stfimme nicht wundernehmen
darf, auch hie und da die anreichernde Wirkung der Galle zum Ausdruck.

Nach diesen Darlegungen dfirfte die experimentelle Erklfirung far
die aufffillige, schon eingangs erwfihnte Tatsache erbracht sein, daB der
12malige Befund von Dys. Y mittels der Anreicherung in Rindergalle
aus stromendera Blute glflckte, wfihrend es nicht gelang, Shiga -Kruse
jemals wfihrend des Lebens oder nach dem Tode mit dieser Methods
zu zflchten, obwohl gerade Shiga-Kruse ebenso hfiufig auBerhalb des
Darmtraktus vorkam, wie Y und in 2 /s der Ffille in der Leber und Galle
gefunden wurde.

Es sei gestattet, an dieser Stelle auf 2 weitere Fragen einzugeheo,
die sich ohne weiteres aus den niedergelegten Befunden und Versuchen
ergeben:

So ist es auffallend, daB von den 12 Ffillen, in denen der Nachweis
von Y aus dem strdmenden Blute mittels der Gallenanreicherung glflckte,
4raal Misch- oder Sekundfirinfektion mit Typhus vorlag.

Ghon und Roman (2) glauben, dafi von ibren 9 Fallen 2 eicher auf Grand
serologiseher Befunde mit Typhus kompliziert waren, 3 weiteren geben sie eine gteMie
„Deutung*. Was meine 2 Falle betritft, so wurde der Nachweis aer Typhusbazillen in
einem Fall durch ihre Ziichlung aus Htuhl und im anderen Fall durch das Vorhaoden-
aein eines Titers fiir Typhus in der Hohe 1 :200 erbracht. Wieweit sich aus der Tiier-
hohe 1:80 Bchliisse fiir eine Typhuserkrankung ziehen lassen, sei dahingestellt, da aba
Ghon und Roman 2 weitere Falle daraufhin als Typhuskomplikatinn ansprecha,
mufite dies erwahnt werden. Ueberdies wurde in meinem 2. Falfe durch die LiebeiH-

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Knorr, Wirkung von Bindergalle auf RuhrbaziUen.

343

wurdigkeit des Herrn Hofrat Dr. Kohler, Regensburg, ein eingehender Krankheits-
bericht der Aostalt fibersandt. Daraus geht hervor, aafi es sich klinisch um eioen
leichten Fall von Typhus mit Roseolen am 9. Tag und geriuger Milzschwellung handelte.
Die Id feklion mit Typhus war ferner dadurch siehergestellt, dafi die erkranfete Pflegerin
im Typhussaal war. Ruhrsymptome fehlten vollig. Zweifellos handelte es sich
also in diesem Falle um eiDe Einschwemmung der RuhrbaziUen in die Blutbahn. Bchon
friiher (3) hatte icb darauf hingewiesen, dafi unter gewissen Bedingungen die Virulenz
soD8t paihogener Keirae damederliegen konne. so dafi sie als harm lose Darmbewohner
anzusprechen seien. Wird dann der Barm in unseren Fallen z. B. durch Typhus alteriert,
so werden vorzuglich solche Bakterien in die Blutbahn ausgeschwemmt. Zweifellos
kdnnen sie dann ihren harmlosen Charakter verlieren, miissen jedooh keine Virulenz-
steigerung eifahren. Qhon und Roman haben fur viele ihrer Falle die gleiche An-
sicht und betonen insbesondere in einem Fall, dafi es sich zweifellos um eine Schadigung
der Darm wand durch einen nicht hamolysierenden Streptococcus handelt, der nach
dem Tode aus dem Eiter eines Gehirnabszesses geziichtet werden konnte. Wenn auch,
wie schon diese Autoren betonen, der Uebertritt von Y in die Blutbahn eine ver-
scbiedene Bedeutung und eine verschiedene Ursache haben kann, so sei doch der Hin-
weis gestattet, dafi es vielleicht gerade diesem Bakterium infolge seines Verhaltens zur
Oalie moglich ist, sich dauerud im Darm in grofier Menge anzusiedeln, ohne dafi un-
bedingt anatomische Veranderungen vorhanden sein miissen.

G. Bruckner (4) ziichtete bei einer Typhusbazillentragerin, die mit einer Faszien-
Dekrose der unteren Extremitat gestorben war, aus den Gallengangen der Leber Y-
Bakterien. Darmveranderungen waren nicht vorhanden. Die Kranke hatte */ 4 Jahr
yorher noch Typhusbazillen ausgeschieden und hatte wahrend ihres Aufentbaltes in der
Klinik Y im Btuhl, Typhusbazillen dagegen nicht mehr. In der Gallenblase selbst
konnte Y nicht gefunden werden.

Ich ftthre diesen Fall an, weil es sich hier auch wahrscheinlich
wieder um eine Ausschwemmung der vielleicht schon lange den Darm
bewohnenden Y-Bakterien in die Blutbahn handelt; die Ursache dazu
war durch die Allgemeinschadigung des Kflrpers gegeben. Vielleicht
hatten sich die RuhrbaziUen auch gelegentlich der frflheren typhoseri
Erkrankung schon in der Leber angesiedelt und wurden nun aus der
Leber wieder in den Darm geschwemmt. Damit blieb jedoch die Ansicht
fiber das Vorkommen der RuhrbaziUen aufierhalb des Darmtraktus die
gleiche. Brttckner scheint nicht abgeneigt zu sein, daran zu denken,
dafi gewisse biologische Beziehungen zwischen Y und Typhus im ant-
agonistischen Sinne bestehen.

A. Galambos (5) berichtet uber Komplikationen vou Typhus mit Ruhr und
nmgekehrt an Hand eines ziemlich grofien Materials, leider jedoch nur auf Grund
anatomisch pathologiecher Unterlagen.

Bei 41 Fallen trat nach tiberstandenem Typhus Dysenteric auf; fast alle Falle
endeten todlich.

In 9 Fallen war Typhus und Dysenteric gleichzeitig vorhanden. Von diesen
9 Fallen starben 8. Der einzige gebeilte Fall bezog sich auf einen rezidivierenden
Typhus, wo die Dyaenterie im Hohepunkt des Rezidivs auftrat. Els schien so, als ob bei
diesen Fallen die Dysenterie das Rezidiv oder die verlangsamte Heilung verursacht hatte.

Iq 12—15 Fallen trat Typhus nach bestehender Dysenterie auf, und es war auf-
fallend, wie viel be&ser die Prognose gerade bei dieser Gruppe zu stellen war.

Nicht unwahrscheinlich, wenn auch nicht bewiesen, erscheint es
deshalb, dafi in deo letzteu Fallen die Ansiedelung der RuhrbaziUen im
Darme, vielleicht gerade vom Typ Y, die Typhusbazillen nicht recht 'fcur
Wirkong kommen liefi, da auch andere FfiUe der Y-Typhuskomplikationen
gate Prognose hatten.

Erwfihnenswert ist, dafi A. Galambos in Fallen der posttyphosen
Dysenterie 3 f in Fallen der Mischinfektion 6 und in postdysenterischen
Typhuserkrankungen 2 Falle von Extremitatengangran sah, in Ueberein-
stimmung mit dem Fall von Brflckner, bei dem ja auch die frflhere
Typhusbazillentragerin wegen einer Extremitatennekrose in die Klinik

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344 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 5.

kam, dann gleichzeitig im Stahl and nach dem Tode anch in der G&lle
Y batte.

Die 2. Frage, die sich aus den Folgerangen des Verbaltens der
HuhrbazilleD in Rindergalle ergibt, wird dadurcb anfgeworfen, dafi Rage,
wie Brauer (6) angibt, ebenso wie franzosische Kolonialarzte die
Meinuag vertritt, daB wfihrend der akuten Ruhr die Gallensekretion
mangel baft oder fast aufgehoben sei. Ruge stfltzt diese Ansicht nach
Brauer durch eine Beobacbtnng Uffelmanns, der bei einer Frau,
die eine Gallenfistel batte nnd an Ruhr erkrankte, die Gallenabsonderang
aus der Fistel am 2. Krankbeitstage aufhOren nnd erst am 9. wieder
beginnen sah, als die Kranke sich in Rekonvaleszenz befand. Darans
zog Ruge den Schlufi, daB es durch HerbeifQbrung einer reichlichen
Galleabsonderung gelingen kdnne, den Verlauf der Ruhr gfinstig zu be-
einflussen, ja weiter, daB die gute Wirkung der Salina, Ipecacuanha and
des Kalomels vielleicht dadurch verstfindlich sei, daB die PrSparate galle-
treibend wirken. Brauer kann diesen SchluBfolgerungen nicht zn-
stimmen, weil diesen Mitteln eine galletreibende Wirkung nicht zukomme
und fiberdies der antiseptische Wert der Galle so gering sei, dafi eine
bedentende Schfidigung der Ruhrbazillen nicht erwartet werden kflnnte.

Die letztere SchluBfolgerung dflrfte nach meinen experimentellen
Erfahrungen, wenigstens soweit Shiga-Kruse und ihnen nahestehende
Stfimme in Frage komraen, nicht aufrecht zu erhalten sein. Es wire
empfehlenswert, diese Dinge von klinischer Seite nachzuprflfen, vielleicht
durch SpBInngen des Darmes mit Rindergalle unter gleichzeitiger An-
wendung galletreibender Mittel. Patienten mit bakteriologischem nnd
serologischem Befund von Shiga-Kruse mfiBten sich am besten ffir
eine solche Therapie eignen, am aussichtsreichsten dann, wenn weniger
Eeime anwesend sind, z. B. im Beginn der Erkrankung und in der Re¬
konvaleszenz. S. Neumann (7) berichtet fiber ausgezeichnete Erfolge
mit Choleval bei Ruhr. Choleval besteht aus Silber, das durch gallen-
saures Natrium in kolloidaler Ldsung gehalten wird. Der Silberwirkung
allein dflrften nach meinen Erfahrungen kaum die gflnstigen Wirkongen
der Darmspfilungen zuzusprechen sein. Zweifellos spielt das gallen-
saure Natrium als bakterizides Mittel ffir Ruhrbazilen eine Rolle, moglich
ist auch, daB Choleval noch andere Bestandteile der Galle enthSlt. Ver-
suche in dieser Richtung werden angestellt, es scheint jedoch nicht
mfiglich zu sein, mit gallensaurem Natrium allein die beschriebene bak-
terizide Wirkung ffir Shiga-Kruse zu erreichen.

Zusammenfassung.

Galle wirkt auf Shiga-Kruse-Bakterien bis zu einem gewissen
Grade abtfitend, auf den einen Stamm mehr, auf den anderen weniger
stark. Eine geringe Keimeinsaat wird in ihr immer vernichtet, einer
reichlichen folgt meistens Vermehrung.

Da im Blute bei echter Ruhr zumeist wenig Krankheitskeime and
nur im Beginne der Krankheit vorhanden sind, ist die Aussicht, Shiga-
Kruse-Bakterien mittels der Galleanreicherung zu gewinnen, gering.

Auf Pseudodysenteriebakterien A, D und H wirkt die Galle eben-
falls bakterizid, aber nicht so stark als wie auf Shiga-Kru se-Bakterien.

Die unter der alten Bezeichnung Y verstandenen Pseudodysenterie¬
bakterien unterliegen der bakteriziden Wirkung der Galle nicht

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Kaneko, Zur Kultur der Spirochaeta icterohaemorrhagiae etc. 345

Iofolgedessen kann man nur Blut, das diese Art von Erregern ent-
hftlt, mit Anssicht anf Erfolg in Rindergalle geben, wofflr auch die Er-
fahrnngen anderer Beobachter sprechen.

Durch die mitgeteilten zQchterischen Befunde erkl&rt sich das
reichliche ond l&nger dauernde Vorbandensein von Y-Bakterien im Darm
ohne gleichzeitige auffallende anatomiscbe VerBnderungen.

Bei der echten Shiga-Kruse-Dysenterie und ihr nabestehenden
Psendodysenterie besteht die Aussicht, Galle therapeutisch verwenden
zo kOnnen, indem man nicht bloB galletreibende Mil tel anwendet. sondern
gleichzeitig Einlanfe mit Tiergalle macbt.

Meinem hochverehrten Chef ond Lehrer, Prof. Dr. L. Heim, bin
ich fflr die Durchsicht der Befunde und der Arbeit zu grofltem Danke
verpflichtet.

Literatur.

1) Nowicki, W., BerL klin. Wochenschr. 1917. S. 1237. — 2) Ghon und
Roman, Wien. klin. Wochenschr. 1915. S. 579. — 3) Knorr, M., Munch, med.
Wochensdir. 1919. 8. 961. — 4) Bruckner, G., Dtsch. med. Wochenschr. 1910.
8.2047. — 5) Galfimbos, A., Wien. klin. Wochenschr. 1915. 8. 589. — 6) Brauer, I.,
Die Ruhr, ihr W«*sen und ihre Behandlung. Berlin. (Fischers med. Buchhandlung
H. Kornfeld. 1918). — 7) Neumann, 8., Med. Klinik. 1918. 8. 638.

Nachdruck verboten.

Zur Kultur der Spirochaeta icterohaemorrhagiae
und der Spirochaeta hebdomadis.

[Aus dem Institut zur Erforschung der Infektionskrankheiten in Bern
(Direktor: Prof. Dr. G. Sobernheim).]

Von Prof. Dr. Renjiro Kaneko.

Seit der Entdeckung der 8 pirochaeta icterohaemorrhagiae (Wei l-Spiro¬
chate) sind in der Literatur viele Mitteilungen iiber die Kultiviening dieser Spirochate
erschienen. In ad a und Ido waren die ersten Forscher, denen die Ziichtung gclang.
Sie benutzten ala Nahrmediura, nach der von Noguchi zur Ziichtung der Recurrens-
spirochate angewendeten Methode, Ascitesfluesipkeit, die mit einem Stuekchen Meer-
schweinchcnniere beschickt worden war. Darauf folgten weitere Angaben iiber das
Kulturveriahren der genannten Spirochate von lto und Matsuzaki, Ohara, Oba,
Ungermann, Uhlenhuth und Fromme, Reiter und Ramme, Noguchi,
Martin, Pettit und Vaudremer, Dietrich, Uhlenhuth, Wani,Gieszczy-
kiewicz, Stefanopoulo, Mant utel u. a.

Ueber die Ziichtung der Spirochaeta hebdomadis (Siebentagefieber-Spiro-
chate) liegen nur die Angaben von Ido, lto und Wani vor. Nach ihnen soil sich
diese Spirochate mit Hilfe des gleichen Verfahrens wie die Spirochaeta ictero¬
haemorrhagiae zur Entwicklung bringen lassen.

Gelegentlich eines von Dr. Morihana und mir angestellten Ver-
gleiches der aus Japan mitgebrachten SlSmme der Spirochaeta
icterohaemorrhagiae und der Spirochaeta hebdomadis mit
dem deutschen Stamm der Spirochate der Weilschen Krankheit habe
ich mich mit dem Kulturverfahren dieser Spiroch&tenarten etwas n&her
bef&Rt.

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346

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Original®. Bd. 87. Heft 5.

Obwohl die verschiedenen Antoren mit ihren besonderen Methoden
zum Ziele gelangten und Kultoren der Weil-Spirochfite erbielten, Bind
doch die Angaben fiber die ffir die Kultivierung wichtigen Bedingungen
nocb ziemlich widersprechend. Dies veranlaBt mich zur Mitteilung der
voq mir gewonnenen Ergebnisse. Sie bezieben sich auf Kulturversuche
mit den beiden Spirochfitenarten, der Weil-Spirochfite (japan, and
deutscher Stamm) und der Siebentagefieber-Spirocbfite.

I. Der Wert von Aszitesflfissigkeit, Organextrakt und Eiereiweifi

als Kulturmedieu.

Zunfichst habe ich mich der Untersuchung von menschlicher Aszites-
flussigkeit und Organextrakt gewidmet. Eine ganz steril entnommene
Aszitesflfissigkeit wurde mit Ringerscber Flfissigkeit, in ver¬
schiedenen Konzentrationen verdflnnt, mit Oder ohne Zusatz von etvas
(1 Tropfen auf 2 ccm) Kaninchen- oder Meerschweinchenblut, und nach
Erhitzung wfihrend 30 Min. in einem Wasserbade von 56°—58° C Oder
ohne Erhitzung zum Gebrauch hergestellt. Organextrakt wurde von
Gehirn, Niere, Leber und Milz von entbluteten Meerschweincben oder
Kaninchen in folgender Weise prfipariert: Das Organstfickchen wurde
unter steriler Manipulation verrieben, in verschiedenen Mengen von
Ringerscher Flfissigkeit wfihrend 24 Std. extrahiert und nach oder ohne
Erhitzung mit dem Keime beimpft.

Nach vielfach wiederholten Untersuchungen konnte ich schliefilich
feststellen, daB Aszitesflfissigkeit als Medium znr Kultivierung der Spiro-
cbfiten recht geeignet ist, wfihrend Organextrakt, in Uebereinstimmong
mit der Angabe Noguchis sich mir als fast unbrauchbar erwies. In
reiner unverdfinnter oder verdfinnter Aszitesflfissigkeit konnte ich kcin
deutliches Wachstum der Spirochfiten nachweisen. Dagegen gediehen die
Spirochfiten in der mit etwas Kaninchen- oder Meerschweinchenblnt
vermengten Aszitesflfissigkeit ziemlich gut. Zuweilen konnte ich anf der
H6he der Entwicklung 20—40 Exemplare in einem Gesichtsfeld (Yu Oel-
immersion, Okular 3, Leitz) zfihlen, wobei Kaninchenblut ffir die Ver-
mehrung der Keime etwas gfinstiger zu sein schien, als Meerschweinchen¬
blut, aber freilich ist der Unterschied nicht bedeutend. Erhitzung flbt
auf den Nfihrwert der Aszitesflfissigkeit keinen groBen EinfluB aus.

Obwohl Inada und Ido, spfiter auch Ito und Matsuzaki die
Aszitesflfissigkeit als Nfihrboden ffir die in Rede stehenden Spirochfiten
mit gutem Erfolg benutzt hatten, konnten Noguchi und Reiter in
dem gleichen Medium kein deutliches Wachstum der Spirochfiten nach¬
weisen. Das hfingt wohl damit zusammen, daB die letzteren Forscher
nur reine Aszitesflfissigkeit verwendeten, die keine Spur von Blut ent-
hielt, wfihrend Inada und Ido ein Stfickchen Meerschweinchenniere, Ito
und Matsuzaki dieses oder ein Stfickchen Blutkoagulum noch hinzu-
ffigten. Ungermann hatte Peritonealflfissigkeit von Meerschweinchen
mit oder ohne Hinzuffigung von Blut oder Organstfickchen als Kultur-
medium versucht, ohne damit eine befriedigende Ver mehrung der Spiro¬
chfiten zu erreichen.

Doch bestfitigt mein Versuch die Angabe von Inada und Ido,
daB Aszitesflfissigkeit als flfissiges Kulturmedium bei der Zfichtung der
betreffenden Mikroorganismen brauchbar ist.

Endlich habe ich auch EiereiweiB mit Ringerscher Flfissigkeit
in verschiedenen Konzentrationen verdfinnt und mit oder ohne Beimischong

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Kaneko, Zur Kultur der Spirochaeta icterohaemorrhagiae etc. 347

von BlnttrOpfchen untersucht. Ich konnte aber kein deutliches Wachstum
der Keime darin konstatieren. Dies stimmt mit der Angabe Noguchis
flberein.

II. Sera verschledener Haustiere und you Menschen.

I to und Matsuzaki untersuchten zuerst Blutserum als Kultur-
medium ftir die Weil-Spirochate. Sie konnten in dem mit destill.
Wasser 2fach verdflnnten, ein Stflckchen MeerschweinchenDiere Oder
Blutkoagulum enthaltenden Blutserum von Menschen und Rindern diese
Spirochete zflchten. Gleich darauf verdffentlichte Unger man n seine
Ergebnisse, daft reines Serum das beste Kulturmedium bildet, und seit-
dem wird flussiges Blutserum, besonders des Kaninchens, von vielen
Seiten als N&hrboden zur ZQchtung der Spir. icter o haemorrhagiae
bevorzugt. Ungermann hat zunachst reines Meerschweinchenserum,
sp&ter aber reines Kaniochenserum alp das beste Medium empfohlen.
Nach ihm gedeihen die Spirochaten auch in Hammelserum in Gppiger
Weise, aber in Menschen- und Eselserum weniger stark, und in Rinder-
nnd Hdhnerserum gar nicht Ungermann konnte aber die Parasiten
durch allm&htiche Gewohnung an beliebige Serumarten anpassen. So
gelang es ihm zuletzt, in reinem Eselserum ein Gppiges Wachstum der
Spirochaten hervorzurufen, indem er die urspriinglich in Meerschweinchen-
nnd Kaninchenserum gezGchteten Keime zunachst in ein aus 3 Teilen
Kaninchenserum und 1 Teil Eselserum bestehendes Gemisch Gberimpfte,
dann, nachdem sie darin ausreichendes Wachstum entfalteten, in eine
Mischung aus gleichen Teilen Esel- und Kaninchenserum, darauf in ein
Gemisch aus 3 Teilen Esel- und 1 Teil Kaninchenserum, und schliefilich,
nachdem sie in diescm Nahrboden durch 3 Passagen ein gutes Wachstum
gezeigt hatten, in reines Eselserum. Martin, Pettit und Vaudremer
knltivierten die Weil-Spirochate in verdQnntem Rinderserum ebensogut
wie in Kaninchenserum. Auch Noguchi hat flQssiges Kaninchenserum
als das beste Nahrmedium fflr die Kultivierung dieser Spirochate an-
gesehen, nachdem er durch vergleichende Untersuchungen die Sera ver-
schiedener Tiere, wie Schaf, Meerschweinchen, Pferd, Kalb, Ziege, Esel,
Schwein und Ratte, sowie von Menschen auf ihre Eignung gepriift hatte.
Nach Noguchis Erfahrungen ist Ratten- und Schweineserum zu diesem
Zwecke fast unbrauchbar, Kaninchen-, Perde- und Ziegenserum besser
als das Serum von Meerschweinchen, Schaf, Esel und Kalb; auch Menschen-
serum ist brauchbar.

In meinen Versuchen habe ich das Wachstum der Spirochaten in
Seren von Kaninchen, Meerschweinchen, Schafen, Rindern, Kfilbern,
Pferden, Ziegen und Menschen geprflft. Alle Sera wurden aus steril
entnommenem Blute unter aseptischen Kautelen keimfrei gewonnen.
Unsere Spirochaten gedeihen in alien von mir untersuchten reinen Sera
von Tieren und Menschen mehr Oder weniger flppig. Es scheint mir
aber Kaninchenserum fflr diesen Zweck am besten geeignet zu sein.
Darin stimmen meine Ergebnisse mit denen von U ngermann,
Noguchi u. a. tiberein. Aber Sera von Meerschweinchen sind eben-
falls sehr gut, und auch die anderen Sera sind brauchbar, obwohl dabei
der Wachstumsgrad der Spirochaten verschieden sein kann, wie Tab. I
lehrt.

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348

Centr&lbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

Tabelle I.

Impfmaterial: Spirocbaeta ic terohaemo rrhagiae (japanischer Stamm).
Untersuchung: Dunkelleldbeleuchtnng.

Vergrdfierung: Oelimmersion, Okular 3, Leitz.

Bpirochatenzahl in einem Geaichtsfelde nach

der Beimpfung

4 Tagen

8 Tagen

12 Tagen

Menschenserum

0

10—15

20-30

10-20

Schafoerum

0

5-10

10-20

5-10

Stierserum ,

0

10-15

20-30 j

10-20

Kuhserum

0

10-20

20-30

15-20

Pferdeserum

0

10—20

20-30

5-10

Ziegenaerum

0

5-10

10—20

10-20

M eerschwei n chenserum

0

10-20

20-30

30-40

KaninchenBerum

0

20-30

40—50

40-50

9

Als Menschensera habe ich eine Anzahl von Proben untersacht, die
der Untersuchangsabteilong des Institute zwecks Anstellung der Wasser-
mannscben Reaktion zugegangen waren. Unter vielen Fallen warden
nur wenige Sera gefunden, die fast kein Wacbstum der Spirochaten zu-
stande komraen lieBen. In frisch gewonnenen, klaren Sera war fast
immer eine Qppige Entwicklung der Keime zu erzielen.

III. Verdttnnung der Sera.

Ungermann hat, wie bereits erwfihnt, das unverdhnnte Kanincben*
serum als das gQnstigste Kulturmedium fflr die W ei 1 - Spirochfite an-
genommen. Und zwar behauptet er, daB nur in Gemischen von 9 Teilen
Serum und 1 Teil Wasser Oder Bouillon die Keime noch ebenso fippig
gedeihen, wie in reinem Serum, so daB die Anwendung verdQnnter Sera
als Nihrboden kaum lobnend erscbeine. Hingegen wurden von vielen
Forschern verdflnnte Sera als Nahrboden mit gutem Erfolg gebraucbt,
und zwar von Martin, Pettit und Vaudremer ein mit 9 Teilen
physiol. KochsalzlQsung oder Ringer sober FlQssigkeit verdQnntes Rinder-
serum oder ein mit 5 Teilen derselben Flassigkeiten verdOnntes Kanincben*
serum; von Reiter, sowie Gieszczykiewicz ebenfalls ein mit 5 Teilen
pbys. Kochsalzlosung verdQnntes Kaninchenserum; von Uhlenhuthso-
gar mit 30 Teilen Leitungswasser verdQnntes Kaninchenserum. Noguchi
erreicbte nicbt nur bei Kaninchenserum, sondern auch bei Sera anderer
Tiere oft durch VerdQnnung einen besseren Erfolg als ohne VerdQnnung.
Manteufel bestatigte in letzter Zeit, daB verdQnntes Serum sicb znr
ZQchtung besser als konzentriertes eignet und daB Leitungswasser oder
eine Salzlosung mit einem 0,5-proz. Gehalt an milchsaurem Kalk sich
besser als physiol. Kochsalzlosung bewfihrt.

Zur Feststellung des optimalen VerdQnnungsgrades fQr das Wachs-
tum des Keimes habe ich zunQchst mit einem Kaninchenserum eine
Versuchsreihe angestellt, wie aus Tab. II ersichtlich ist.

Nicht nur dieser Versuch, sondern noch weitere, mehrfach variierte
Untersuchungen ergaben, daB in mehr oder weniger verdQnntem
Serum das Wachstum der Spirochaten gQnstiger ist als in
reinem Serum, wenn auch in letzterem, wie wir sahen, ein Qppiges
Wachstum mdglich ist. Bezuglich des VerdQnnungsgrades gibt Noguchi
an, daB in der Losung mehr als 10 Proz. Kaninchenserum enthalten

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Kaneko, Zor Kultur der Spirochaeta icterohaemorrhagiae etc. 349

Tabelle II.

Impf material: der japanisehe Stamm der Spirochaeta icterohaemorrhagiae.
Untersochung: Duokelfeldbeleuchtung.

Vergriiflerung: */,, Oelimmersion. Okular 3, Leitz. (10 Geaichtsfelder gezahlt.)

Verd0nnung6grad
des Serums

Durchschnittliche Parasitenz&hl

^ 5 10 t *»”

in 1 Gesichtsfeld nach

2 Woch. 3 Woch. 4 Woch.

K&ninchenserum 2,01
Ringer-Lfteung 0/

0

1 I

17

16

24

12

4

Eaninchenserom 1,01
Binger-Ldsong 1,0 j

0

5

25 1

38

36

30

24

Eanincheoserom 0,7 1
Binger-Lfisung 1,4 |

0

6

85

46

25

20

14

Eaninchenserum 0,51
Binger-LOsong 1,5/

0

2

34

44

26

35

26

Eanincheoserom 0,41
Bi n ge r - Losung 1,6 J

0

4

34

26

14

15

13

Eaninchenserum 0,31
Binger-JL5song 1,5/

0

2

33

16

15

17

12

Eaninchenserom 0^ 1
Binger-Ldsong 1,8 j

0

2

16

10

7

7

6

Eaninchenserom 0,21
Binger-Ldsong 1,4 /

0

0

10

10

3

2

3

Eaninchenserom 0^ 1
Binger-Ldsong 1,6/

0

0

12

8

3

2

3

Eaninchenserom 0^ 1
Binger-Ldsong 0,8/

0

0

3

4

2

2

0

Eaninchenserom 0,11
Bi n ger - Losung 1,9 /

0

0

0

4

1

0

0

Eaninchenserom 0 1
Ringer-Ldsong 2,0/

0

0

0

0

0

0

0

sein rnQssen, am genflgendes Wachstum zu bewirken; in 5-proz. Se-
rumlOsung wacbsen die Keime nur mBBig und in einem weniger als
2 Proz. enthaltenden Medium gar aicht. Nach meinen eigenen Unter-
suchuDgen scheint ein mit 2—5 Teilea Ringerscher FlQssigkeit ver-
dlinntes Serum fQr das Wachstum der Keime am zweckm&Bigsten zu
sein. Bei VerdQnnung der Sera, nach dem Vorgange von Uhlenhuth,
mit einfachem Leitungswasser ist wohl ein noch stBrkerer Wasserzusatz
mOglich, doch hatte ich selbst keine Gelegenheit, diese Art der Ver-
diinnung zu prflfen.

Auch Sera anderer Tiere und von Menschen kdnnen durch Ver¬
dQnnung in der genannten Weise mit besserem Erfolg zu Kulturzwecken
angewandt werden, als in reinem Zustande.

IV. EinfluB des Blutfarbstoffcs auf die Scrumkultur.

Reiter und Ungermann beobachteten, daB eine Beimischung
von Blutkbrperchen resp. Hemoglobin das Wachstum der Spirochete in
Seramkultur beeintrechtigt. DemgegenQber scheint nach meinen ver-
gleichenden Untersuchungen die Anwesenheit von Blutkorperchen Oder
Hemoglobin in der Serumkultur eher fbrdernd auf das Wachstum der

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;J50 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 5.

Spiroch&ten zu wirken. Wohl hemmt eine zu groBe Menge von Blot
das Wacbstum der Keime, doch macht sicb ein geringer Zusatz von Blot
in gGnstigem Sinne bemerkbar. Es genflgt schon, 1 Tropfen Bint in
ca. 2 cctn Serum einzutragen. Ich babe gem and mit gatem Erfolg
ein darch H&molyse leicht gef&rbtes Kaninchenserum gebraucbt; selbst
ein durch H&molyse dunkelrotlich gef&rbtes Serum erlaubt nocb ge-
nflgendes Wacbstum der Spirocb&ten. Bei den durch die Gbliche Methode
frisch gewonnenen Kaninchensera kann man gewGhnlich obne Blutzusatz
den Kulturzweck erreichen, aber zuweilen triflt man doch auf solche
F&lle, bei denen die eingeimpfen Keime in dem reinen Kaninchenserum
nicht zur Entwicklung gelangen. Ich habe in 2 F&llen dieses Versagen
des reinen Kaninchenserums beobachtet. Die Sera waren von etwas
alten, groBen Kauinchen gewonnen uud frei von BlutkSrperchen. Durch
HinzufGgen eines Tropfchens Kaninchenblut wurden die gleichen Sera
zu guten N&hrboden und liefien ein Qppiges Wachstum der einges&ten
Keime konstatieren.

Bei den Sera von anderen Tieren wirkt der Blutfarbstoff gleichfalls
fordemd auf die Vermehrung von Spiroch&ten, ganz &hnlich wie beim
Kaninchenserum.

Nach alledem mbchte ich annehmen, daB der Blutfarbstoff bei Kulti-
vierung in flGssigem Serum die Spiroch&te in ihrem Wachstum fGrdert,
worauf Inada und Ido bei ihrer AszitesflQssigkeit, Wani bei seiner
Agar-Serumkultur bereits aufmerksam gemacht haben. Auch Stefano-
poulo gibt an, daB er verdGnntes Blutkorperchenextrakt als N&rboden
mit gutem Erfolg verwendet habe. Dies deutet wohl darauf hin, daB
in der Tat die Beimengung von Blutfarbstoff zu dem Kulturmedium fflr
die Weil-Spiroch&te eine wichtige Wachstumsbedingung darstellt

V. EinflufJ von Agarzusatz; feste oder halbfeste N&hnnedlen.

Die Anwendung von agar- oder gelatinehaltigen N&hrbdden zur
Kultivierung dieser Mikroorganismen verdankt man dem Versuche von
Ito und Matsuzaki. Sie benutzten gewGhnlichen Blutagar uud Blut-
gelatine in verschiedenen Konzentrationen. Darauf kultivierte Noguchi
die Spiroch&ten hauptsachlich in Agar oder Zitratplasma enthaltendem,
mit 3 Teilen Ringerscher FIGssigkeit verdflnntera Kaninchenserum.
Auch bei den Sera vom Schaf, vom Pferd, von der Ziege und anderen
konnte er durch Zusatz von Agar einen besseren Erfolg erzielen als
mit reinem Serum. Wani hat ebenfalls befriedigende Resultate er-
halten, indem er verdGnntes Pferdeserum und AszitesflQssigkeit mit
einem Zusatz von Agar versah. Demgegenuber ist -es auff&llig, daB
Ungermann die Zuchtung seiner Spiroch&ten in agarhaltigem NShr-
boden niemals gelang.

Nach meinen Untersuchungen lassen sich Sera von Kaninchen und
anderen Tieren, sowie AszitesflQssigkeit durch Zusatz von Agar zu be-
sonders guten Spiroch&ten-N&hrbodeu machen. Die Spiroch&ten wachsen
in solchen Agar-Serumkulturen sehr Gppig, meist ganz massenbaft, wie
Bakterien. Man kann sie dann in einem Gesichtsfelde nicht mehr z&hlen.
Da unsere Spirochaten sich offenbar gern in gallertigem Material an-
siedeln und dort ein besonders starkes Wachstum aufweisen, so ist es
nicht verwunderlich, daB die Spiroch&ten sich in Agarkulturen leicht
und Gppig vennehren. Wie schon Wani bemerkte, wachsen die Spiro¬
ch&ten hauptsachlich in der oberflachlichen Zone der Agarkultur und

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Kaneko, Zur Kultur der Spirochaeta icterohaemorrhagiae etc. 351

bewirken bier eine makroskopisch sichtbare TrQbung. Die Agarkultur
ist zum praktischen Gebrauche, wie z. B. zur Immunisierung von
groBen Tieren Oder Vakzinierung von Menscben und Tieren, vorteilhafter
als flflssige Kulturen, da die Vermebrung der Keime, wie gesagt, sebr
flppig ist. Man erhhlt von Agarkulturen wesentlich grdBere Spiroch&ten-
mengen, wahrend in flQssigen Substraten die Entwicklung der Keime auch
im gOnstigsten Falle doch immer nur so weit geht, daB man die Zahl
der Keime mikroskopisch in jedem Gesicbtsfelde noch gut zablen kann.
Zu Laboratoriumszwecken aber ist die flQssige Kultur bequemer als die
Agarkultur, weil der Agar in der Kultur die Farbung der Parasiten
oder andere Manipulationen stdrt. Die Haltbarkeit der Agarkultur ist
wesentlich langer als die der flQssigen Kultur. So konnte ich unsere
Spirocbaten im Agarmedium, trotz der 2 Mon. langen Reise durch
tropische Gegenden und durch SQdeuropa wahrend der Monate November
and Dezember, ohne Verlust ihrer Lebensfahigkeit und Virulenz trans-
portieren, wahrend alle flQssigen NQhrbdden sich unter den gleichen
Verhaitnissen als unbrauchbar erwiesen hatten.

BezQglich der Konzentration des Agars kann man, je nach dem
Zwecke, flQssigere oder festere Kultursubstrate anwenden. Das Optimum
der Agarkonzentration fQr das Wachstum der Spirochaten scheint aber
ungefabr 0,3 Proz. zu sein, wie Noguchi und wir sie gebraucht baben.
Zusatz von Blutfarbstoff ist bei Agr.r-Serumkulturen fQr das Wachstum
der Spirochaten ebenfalls wichtig (cf. Wani). Auch sichert verdQnntes
Serum, genau wie bei flQssigen NQhrbQden, einen besseren Erfolg als
onverdQnntes Serum. FQr Agarkulturen scheint mir Kaniuchenserum
am zweckmQfiigsten zu sein, doch lassen sich Sera von Pferden, Rindern
ond Ziegen etc. gleichfalls gut verwenden, und man dQrfte auf diesem
Wege Kulturmaterial zur Immunisierung groBer Tiere gewinnen kbnnen,
ohne jede Gefahr der Ueberempfindlichkeit.

YI. Temperatur bei der Kultivierung.

In ad a und Ido kultivierten die Spirochaten in ihren Nahrboden
am besten bei einer Temperatur von 22 — 25° C. I to und Matsuzaki
folgten hierin der Angabe von Inada und Ido. Hingegen zog Unger¬
man n die Kdrpertemperatur bei seinen Serumkulturen vor, und er
konnte sogar bei einer Temp, von 25° C ein Wachstum der Spirochaten
in reinen, frisch beimpften NahrbQden nicht mehr konstatieren. Nach
ihm kOnnen die Spirochaten aber ihre Vermehrung auch bei 25 °C fort-
setzen, wenn die Kulturrohrchen nach mehrtagigem Aufenthalt bei 37° C
weiterhin bei 25° C gehalten werden. Noguchi hat als die optimale
Temperatur fQr das Wachstum der Spirochaeta icterohaemor-
rhagiae 30—37° angegeben, obwohl sie nach seinen Beobachtungen
auch bei 10—30° noch gut gedeiht. Reiter bezeichnete 22—37°,
Martin und seine Mitarbeiter 23—33° C und Uhlenhuth die Tempe-
raturen unter 35° C als die optimale Zone fur unsere Spirochaten.
Nach meinen Erfahrungen besitzen die Spirochaten gegenflber Tempe-
raturschwankungen innerhalb gewisser Grenzen eine weitgehende Toleranz.
Sie wachsen noch bei Zimmertemperatur, natQrlich aber etwas langsamer,
doch bleiben diese Kulturen langere Zeit haltbar als die bei Korper-
warme gezQchteten. Es scheint mir daher zweckmaBig zu sein, unsere
Spirochaten, wenn sie frisch Qberimpft worden sind, zunachst bei 37° C
zn kultivieren und, nachdem das Wachstum eingesetzt hat, weiterhin bei
Zimmertemperatur zu halten, wie Unger man n, Wani etc. verfuhren.

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352

CentralbL f. Bakt. etc. 1. Abt. Original*. Bd. 87. Heft 5.

Das Temperaturoptimam ist Qberdies auch abhBngig von der Art
des Nahrbodens. In Agarkulturen scheinen unsere Spirochaten gegeo
Temperaturschwankungen widerstandsfQhiger zu sein, als in flassigen
Substraten.

VII. ParaffinUbersehlchtung.

Bezftglich des Sauerstoffbedflrfnisses der Spirochaten sind die Mei-
nungen der Autoren verscbieden. I to und Matsuzaki bebaupten, dafi
diese Parasiten fakultativ anaSrob sind. Ungermann, Reiter and
Dietrich stimmen darin flberein, daB die Spirochaten in anaerobes
Kulturen besser wachsen als unter aSroben Bedingungen. Dietrich
nimmt an, daB das Wachstura der Parasiten durch Zufuhr von Sauer-
stoff bedeutend langsaraer wird. Hingegen schlofi Noguchi aus seines
Versuchen, daB die Spirochaeta icterohaeraorrhagiae streog
aerob sei. Nach ihm wirken alle Faktoren, die den Zutritt des Sauer-
stoffs hindern, auf das Wachstum der Spirochaten hemmend; deswegeo
mflsse auch die Verwendung eines zu stark konzentrierten Agars ffir
die Gewinnung einer guten Eultur von Nachteil sein. Wani konnte
in seinen Agarkulturen die Spirochaten ohne Paraffinfiberschichtung
ztichten, was er fur wichtig hielt, urn die Penetration der Luft nicht zn
verhindern, wahrend andere Forscher gerade umgekehrt die schfltzende
Paraffinschicht immer als einen wichtigen Faktor betrachteten. Man-
teufel bestatigt neuerdings, daB die Wei 1 - Spirochate sowohl nnter
aeroben als.auch unter anagroben Wachstumsbedingungen gedeiht.

BezQglich des SauerstoffbedQrfnisses unserer Spirochaten geht meine
eigene Ansicht nach alien meinen Beobachtungen dahin, daB zum Wachstum
dieser Mikroorganismen Sauerstoffzutritt in gewissem Grade not-
wendig ist. Ein zu starker Sauerstoffgehalt scheint aber das Wachstum
der Parasiten zu storen. Immerhin sehe ich die Paraffinftberschicbtung
der Kulturen fiir die gute Entwicklung der Spirochaten als eine wichtige
Manipulation an, nicht nur zwecks Sicherung des Luftabschlusses, son-
dern auch aus anderen GrQnden. Es bleibt unter der Paraffindecke in
dem fldssigen Kulturmedium dann immer noch die erforderliche Sauer-
stoffmenge enthalten, das Paraffin aber schiitzt namentlich die obermi
Schichten der Agar-Serum-Eultur vor Austrocknung.

VIII. Erhitzung von Kulturmedlen.

Nach Noguchi soli der Nahrwert des Serums durch Erhitzung auf
60° wahrend 30 Min. beeintrachtigt werden. Ito, Matsuzaki, Unger¬
mann und Wani erhitzten dagegen ihre Kulturmedien, je nach dem
Zweck (Sterilisation oder Inaktivierung), bei Temperaturen von 50—60*0,
ohne hiervon einen Nachteil zu sehen. Nach meinen Erfahrungen flbt
eine Erhitzung des NQhrmediums bis zu 60° C auf das Wachstum der
Spirochate keinen groBen EinfluB aus. Es ist ja auch kaum denkbar,
daB Kulturmedien durch Erwarmen auf diese relativ niedrigen Tempe¬
raturen an Nahrwert einbOBen sollten. Mir schien sogar fflr die Er-
reichung eines sicheren Angehens und einer Qppigen Entwicklung der
neu flberimpften Kulturen eine solche Erhitzung, besonders bei Serum-
kulturen, wie auch Ungermann meint, vorteilhafter zu sein.

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Kaneko, Zur Kultur der Spirochaeta icterohaemorrhagiae etc. 353

IX. Reaktion dcs Kultnrincdlums.

Meine Ansicht fiber die Reaktion des Nfihrbodens stimmt mit der
zaerst von In ado und Ido ausgesprochenen Meinung fiberein, die dann
von alien fibrigen Forschern anerkannt worden ist, dafi eine ganz schwach
alkalische Reaktion fflr die Knltivierung der Spirochfite am zweck-
mfifiigsten ist.

X. Einige BcmcrkongcH fiber die Untersehicdc,

die bei dem Kulturverfahren zwischen den von mir untersuchten 3 Spiro-
chfitenstfitamen gefunden wurden.

Im allgemeinen konnte ich die 3 Stfimme, und zwar den deutschen
und den japanischen Stamm der Spirochaeta icterohaemorrha¬
giae sowie den Stamm der Spirochaeta hebdomadis, unterden-
selben Bedingungen zfichten. Aber hier und da machten sich bezfiglich
des Wachstums kleine Differenzen bemerkbar. So z. B. war unter den
3 Stfimmen die Spirochaeta hebdomadis am leichtesten kultivierbar.
Dieser Stamm wuchs in alien von mir gebrauchten Kulturmedien fippig,
oboe Schwierigkeiten, wShrend der deutscbe Weil-Stamm zuweilen der
weiteren Vermehrung Wider stand leistete. Besonders schien der deutscbe
Stamm auf Agarkulturen in den ersten Versuchsreihen schwer anzu-
geben, wShrend spfiter seine Fortzfichtung in Agarkulturen gut gelang.
Der japanische Stamm der Spirochaeta icterohaemorrhagiae
stebt in dieser Hinsicht zwischen den beiden anderen Spirochfiten-
stfimmen. Es ist dabei von Interesse, dafi die Unterschiede der Kultivier-
barkeit mit den Unterschieden der Virulenz zwischen den 3 Stfimmen
ubereinstimmten. Wie bereits in unserer frflheren Arbeit hervorgehoben
wnrde, war der deutsche Stamm am stfirksten virulent, der Stamm der
Spiroch. hebdomadis am schwfichsten. Also war hier der virulenteste
Stamm am schwersten kultivierbar. Dies erklfirt vielleicht die Schwierig¬
keiten, die sich mitunter bei Zfichtungsversuchen, auch bei sonst be-
wfihrter Technik, bemerkbar machen, indem eben die Kultivierbarkeit
der Spirochfiten je nach dem Stamme mehr Oder weniger variieren kann.

Zusamuienfassung.

1) Menschliche Aszitesflfissigkeit ist als titissiger Nfihrboden zur
Knltivierung der Spirochaeta icterohaemorrhagiae und der
Spirochaeta hebdomadis gut brauchbar, wenn man ein wenig
Blutfarbstoff hinzuffigt.

2) Verschiedene Sera von Tieren und Menschen eignen sich gleicbfalls
als flfissiges Kulturmedium, Kaninchenserum ist, wie auch andere
Forscher feststellten, am gfinstigsten.

3) Das Kaninchenserum wird am besten in verdfinntem Zustande,
and zwar durch Verdfinnung mit 2—5 Teilen Ringerscher LOsung ge-
braucht.

4) Zur Kultivierung der genannten Spirochfiten ist die Anwesenheit
von BLutfarbstoff notwendig, zum mindesten wirkt er ffirdernd auf
das Wachstum der Mikroben.

5) Agarzusatz wirkt auf das Wachstum der Mikroben in den
genannten flfissigen Nfihrboden gflnstig.

Ente Abt. Orif. Bd. 87. Heft 5. 23

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354

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 87. Heft 5.

6) Die Ueberschichtung der fliissigen oder halbstarren Kultarmedien
mit flfissigem Paraffin ist zweckm&Big, wenn auch nicht anbedingt
erforderlich.

7) Schwach alkalische Reaktion des N&hrbodens gibt die
gfinstigsten Knlturbedingungen.

8) Die Entwicklung der Spirochfiten erfolgt am raschesten bd
Brnttemperatur. Zur weiteren Konserviernng werden die ange-
gangenen Kulturen dann zweckm&Bigerweise bei Zimmertemperator ge-
halten.

9) Das Wachstum der Spiroch&ten in diesen Kultarmedien kaon je
nach dem Stamm der Spirocb&ten graduell variieren. Die Viralenz
scheint vielleicht von EinfiuB zu sein.

10) Auf Grand meiner Untersuchungen haben sich die folgenden
Kulturmedien zur ZQcbtung der Spirochaeta icterobaemorrba-
giae and der Spirochaeta hebdomadis besonders bewfihrt:

a) Flfissiger Ndhrboden. In 2—3 ccm eines mit 2—5 Teilen
Ringerscher LOsung verdfinnten Kanincbenserums wird ein Tropfen
Kanincbenblut eingebracht. Die Mischung wird w&hrend 30 Min. im
Wasserbad von 56—58° C erhitzt und darauf mit flfissigem, sterilem
Paraffin fiberschichtet

b) Halbstarrer Nfihrboden. Eine nach a) bereitete Mischang
— Sera anderer Tiere und Aszitesfltissigkeit sind auch brauchbar — wird
mit gewfihnlichem Agar in der Konzentration von etwa 0,3 Proz. ver-
setzt. Man lfist zu diesem Zweck 3 g Agar in 100 ccm Ringer-
Ldsung und gibt zu 9 ccm des verdfinnten Serums 1 ccm der Agar-
108ung. Nach der Erhitzung (wie bei a) fiberschichtet man mit flOssigeni
Paraffin.

Das flfissige Substrat eignet sich zur Verwendung bei fortlaufenden
Arbeiten im Laboratoriura, das halbstarre besonders zur Gewinnnog
groBerer Spirochfitenmengen, z. B. ffir Immunisierungszwecke sowie znr
lfingeren Konservierung der Kulturen.

Literatur.

Dietrich, Zeitechr. L Immunitatsf, Orig. Bd. 26. 1917. — Gieszczykiewici,
Ann. Pasteur. 1920. — Inada u. Ido, Baikingaku Zasshi. Nr. 239. 1915. — Inadt,
Ido, Kaneko, Hoki n. Ito, Journ. of exper. Med. Vol. 23. 1916. — Dieselben,
Okuda u. Wani, MitteiJ. a. d. med. Fakult. d. Kaiserl. Univers. Kyushu. Bd. 3. 1917.
H. 1. — Ito u. Matsuzaki, Journ. of exp. Med. Vol. 23. 1916.— Kaneko iu Mori-
hana, Zeitechr. f. Immunitatef. Orig. Bd. 31. 1921. — Manteufel, Dtsch. mei
Wochenschr. 1921.— Martin, Pettit u. Vaudremer, Compt. rend, des e&mc. d.L
Soc. de Biol. Paris. T. 80. 1917. — Martin u. Pettit, 8piroch4tose ict&ohdmorrht*
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Soc. de Biol. Paris. T. 84. 1921. Nr. 16. — Uhlenhuth, Dtsch. med. Wochensdff
1917. Nr. 50. — Uhlenhuth u. Frorame, Zeitschr. f. Immunitatef. Orig. Bd. 26
1916. — Ungermann, Berliner klin. Wochenschr. 1916. — Ders., Arb. a.d. KaiserL
Ges.-Amt. Bd. 51. 1918. — Wani, Verhandl. d. japan. Kongr. f. inn. Med. 1919.

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Marcuse, Wassermannsche Reaktion und Kokzidiose beim Kaninchen. 355

Naohdruok verboten.

Wassermannsche Reaktion und Kokzidiose beim

Kaninchen.

|Ans dem Hanptgesundheitsarat der Stadtgemeinde Berlin, Hyg.-bakt.
Institut (Vorsteher: Prof. Dr. Seligmann).]

Von Dr. Knrt Marcuse.

Schon bald nach Bekanntwerden der Wassermannscben Reaktion wurde die
Beobachtung gemacht, dafi ein grower Teil der zum Vereuch benutzteo Kaninchen im
Komplementbindungsversuch mit Wasserman nschen Extrakten positive Resultate

a b, sowohl wenn das Serum von normalen, anecheinend gesunden, nicht voibehan-
m Tieren stammte, wie auch, wenn es von Tieren herruhrte, die zu bestimmten
Zwecken vorbehandelt waren (Fleischmann, Berl. klin. Wochenscbr. 1908; Wendt-
Und, Ztschr. f. Iraraun. Bd. 30. S. 208; Hartog-Yakimof f, Wien. klin. Wochen-
schrift. 1908; Schilling-v. Hofilin, Dtsch. med. Wochenschr. 1908; Levaditi-
Yamonouchi, Bull. Soc. path. exot. T. I. zit. nach Schillin g; Schwarz-Flem-
ming, Munchen. med. Wochenschr. 1910; Emanuel, Berl. klin. Wochenschr. 1910,
1921; Friedemann, Ztschr. f. Hyg. 1910; Wassermann, Berl. klin. Wochenschr.
1821 ).

Ein Teil der Autoren hat diese Tatsache als eine physiologische Eigenheit des
Kaninchenserums angesehen (Schilling, Wassermann). Andere Forscher n ah men
in Analogieschlussen infektionen als Ursache an (Blumenthal, Berl. klin. Wochen-
schrift. 1908. S. 618. Diskussionsbemerkung; Calc a terra. Ref. Centralbl. 1911. 8. 80).

Fur die letzte Ansicht sprechen Versuche, wie sie Citron*Munk, Dtsch. med.
Wochenschr. 1910; Bluinenthal-Meyer, Berl. klin. Wochenschr. 1911; Ztschr. f.
Immun. Bd. 31. H. 3; Landsteiner-Potzel Muller. Wien. klin. Wochenschr.
1907; Schilling-v. Hofilin, Dtsch. noed. Wochenschr. 1908; Hartog-Yakimoff,
Wien. klin. Wochenschr. 1908 beschreiben.

Es gelang ihnen namlich, teils durch Vorbehandlung mit luetischen Organextrakten
(Citron-Munk, Blumenthal-Meyer), teils durch Infektion mit Proiozoen — Na-
gana, Dourine — (Lan dstei ner-Potzel-M tiller, Schilling v. Hofilin, Har¬
tog- Yakimoff), ursprtinglich negative Sera in positive umzuwandeln.

Alle Autoren aber betonen von vornherein, dafi ein grofier Teil ihrer Tiere von
Anfang an poeitiv reagierte, und dafi dadurch der Gang der Versuche erheblich beein-
trachtigt wurde.

Blumenthal-Meyer halfen sich in diesem Falle durch Aenderung der Dosen
von Serum und Extrakt und erzielten so bei nichfc vorbehandelten Tieren dauernd ne¬
gative Resultate. Nach Vorbehandlung mit luetischen Extrakten reagierten die Tiere
ansteigend positiv.

An das Auftreten der positiven Wassermannscben Reaktion nach entsprechen-
der Vorbehandlung wurden infolgedessen weitgehende theoretische und praktische Fol-
gerungen geknupft. Das schien urn so gerechtfertigter, als es spfiter auch gelang, vor-
nandene positive Reaktiouen ohne Vorbehandlung und auch nach Vorbehandlung zum
Verschwinden zu bringen, wenn die Tiere mit anti luetischen Mitteln, wie Quecksilber
und Salvarsan behandelt wurden. Ja Wassermann will sogar aus der verschiedenen
Wirkung der Praparate auf die Serumreaktion des Kaninchens Schliisse auf ihren
Wirkungsmechanismu8 bei der Lues ziehen (Emanuel, Berl. klin. Wochenschr. 1910;
Pribram-Epstein, Ztschr. f. exper. Path. u. Ther. Bd. 7. H.2; Schwarz-Flem-
ming, Mtinenen. med. Wochenschr. 1910; Wassermann, Berl. klin. Wochenschr.
1921).

In letzter Zeit haben dann Much und Schmidt (Dtsch. med. Wochenschr. 1921.
Nr. 21) im Anscblufi an die jtingste Wassermannsche Iheorie von der Lipoidanti-
korpernatur der Reagine (Berl. klin. Wochenschr. 1921. Nr. 9) Versuche mitgeteilt, in
denen die Tiere mit Aminoktirpern (Leuzin), oder mit Lipoiden (Tbk.-Partigen) behan¬
delt wurden. Die Verff. zeigten, dafi vorher seronegative Tiere nach solcher Behand-

23l*

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356 OentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

long eine positive Reaktion aufwiesen, die je nacb der Starke der Vorbehandlong in
4—24 bid. auftrat und nach 24 bid. wieder zurOckging. Sie bringen daraulhin dv
Wesen der Wassermannscben Reaktion in Zusammenhang mit dem Aulueten tod
A minot-auren und LipoidantikOrpern im Blute.

Man sieht aus diesen Beispielen, zu wie weit gehenden Folgerungen die Beobach-
tung poaitiver Serumreaktioneo beitn Kanincben Anlafi gegeben bat. Ob ee zulassig
iat, auf Gruod einer hiufig normalerweise vorbandenen und offenbar leicbt wechselndeo
EigenBchaften dee Kanincheneeroms derartige tichlfisse zu ziehen, scheint zum mindeatea
zweifelhaft. -

Eine neue Wendung erbielt die ganze Frage durch die Veroffentlicbangen too
Kuszinski (BerL klin. Wochenschj-. 1921. bir. 6), der den poeitiven Aut-fall der
Wassermannscben Reaktion bcim nicbt vorbehandelten Kanincben mit der ver-
breitetaten Kaninchenkrankheit, der Kokzidioee, in engaten uraachlichen ZuaanimeB-
bang brachte. Kuszinski land, dafl zwar eine Anzabl von lieren bei bestebender
Kokzidioae — sowohl im friscben als auch im auagebeiiten Stadium — negativ reagiereo
kdnne, dafl aber bei positivem Ausfall nie eine Kokzidioae vermiflt wurde. Die iSeein-
flussung der Reaktion, die er bei kokzidiosekranken Tieren durch- Bebandluog mit
Quecksilber und Saivarsan beobachtele, erklart er daher als Folge der direklen Ein-
wiikung dieser Medikamente auf den Kokzidioseprozefl.

Scbon vor Kuszinski batten Blumentbal (Bert. klin. Wocbenscbz. 1906.
S. 618. DiskussioDsbemerkung) und Galcaterra (Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Kef.
Bd. 50. 1911. S. 80) auf das bautige Zusammentreffen von positiver Wassermann-
scher Reaktion und Kokzidioee hingewiesen und einen ursachlichen Zusammenhang ak
mOglicb hinges tell t.

Bei der prinzipiellen Wicbtigkeit der ganzen Angelegenheit hielten
wir eine uml&ngliche Nachprfifung der Kuszinskischen Befunde fur
angebracbt.

Zur Untersuchung stand eine grfiBere Anzabl von Tieren des Haupt-
gesundbeitsamts zur Verfflgung.

Wenn irgeud mfiglich, wurden die Tiere wiederholt in bestimmten
Zwischenr&umen untersucht. Wir wollten auf diese Weise nicht nur
den einmaligen, von ZufSlligkeiten nicbt freien Befund erbeben, sondern
gleichzeitig auch feststellen, ob die beobachtete Serumreaktion eine kon-
stante Eigenschaft des betreffenden Serums ist. Es w&re durchaus mfig-
lich, daB ReaktionsSnderungen eintreten, die entweder mit dem veriu-
derten Gesundheitszustande des Tieres zusammenhSngen, oder aber der
Ansdruck un.kontrollierbarer physiologischer Schwankungen sind.

Gleichzeitig wurden alle Versuchstiere dauernd auf das Vorhanden-
sein von Kokzidien untersucht (Kotuntersuchung) und, soweit ang&ogig.
durch den Obduktionsbefund eine Kontrolle fiber etwaige nachweisbare
Kokzidienerkrankung ausgefibt. Der Komplementbindungsversucb wurde
nach den Vorschriften der Wassermannscben Reaktion durchgefiihrt
(halbe Dosen): Das iuaktivierte Kanincheoserum, das mcist 24 Std. vor-
her durch Venenpuuktiou entnommen war, wurde iu den Verdfinnungeu
1 :5 und 1 :10 aDgesetzt. Als Antigen wurden die staatlichen Wasser-
mann-Extrakte benutzt (ein Teil der Reaktionen wurde mit einem Ex-
trakt, ein anderer mit zwei Extrakten angestellt). Kompleroentverdiln-
nung 1:10 . Als Ambozeptordose wurde die 4-fach losende Menge
benutzt, als Blut 5-proz. Hammelblut. Einige Versuche warden wegen
der geringen Serummengen in 1 / i Dosen ausgeffihrt. Im Verlaufe der
Untersuchungen wurden keine grundlegenden Unterschiede zwischen
dem Verhalten der Verdflnnungen 1:5 und 1:10 gefunden. Manchmal
reagierte die Verdiinnung 1:10 etwas schwficher, gelegentlich auch etwas
starker als die VerdiinDung 1:5. Bei stark positiven Ausf&llen waren
fiberhaupt keine Unterschiede zu bemerken. Der Nachweis der Kok¬
zidien im lebenden Tiere wurde analog den Untersuchungen des Kotes

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Marcuse, Washermannsche Reaktioo und Kokzidiose beim Kaninchen. 357

aof Parasiteneier vorgenoramen (vgl. Myajawa, Centralbl. f. Bakt.
Abt. L Orig. Bd. 61. 1913).

Die erbsengrofien Kotteilchen wurden mit einer Ldsung von 2 ccm
konzentr. Saizs&ure plus 6 ccm destill. Wassers fein verrieben; dann mit
ca. 7 ccm Aether vorsichtig durchgeschflttelt; das Ganze durch fein-
maschigen mehrfach gelegten Mull filtriert. Das Filtrat wurde mSBig
scbarf zentrifugiert. Es entsteben beim Zentrifugiereu 4 Schichten: zu
oberst Aether, dann die Schicbt der Pflanzenreste, darauf Salzsaure, in
der letzten Schicbt, dem Bodensatz, befinden sich die Parasiten. Da
sich die Kokzidien im Darmsaft resp. Kot der meisten untersuchten
Kaninchen vorfanden, gleichviel, ob die Tiere krank Oder gesund er-
schienen, ist es nicht ang&ngig, in solchen Fallen ohne weiteres von
Kokzidienerkrankung der Tiere zu sprechen. Das Auflreten von
vereinzelten Kokzidien ist nicht pathognomonisch fflr die Kokzidiose als
Krankheitsform, sondern nur als eine Form der aliment&ren Ausschei-
dnng der mit der Nabrung aufgenommenen Parasiten aufzufassen. Wir
sprechen als echte Kokzidiose nur die Fklle nachweisbarer Leber- und
Darmerkrankungen an.

Das Ergebnis der Untersuchungen legen wir in 2 Tabellen vor.

1) Tiere obne nachweisbare Kokzidienerkrankung, Kot und Darmsaft entweder
rrei von Kokzidien, oder gelegentlich mit vereinzelten Parasiten behaftet. Organe obne
Rokzidienbefund [21 Tiere).

2) Tiere mit n&chgewiesener Kokzidienerkrankung (13 Tiere). Die Bezeicbnung
deB Reaktionsausfalies entspricht der fur die Wassermannsche Reaktioo iiblichen:
4- + + + komplelle Hemmung, + + -f fast koraplette Hemmung, + -h Kuppe, ± Spur
ungelost, E Eigenhemmung.

Ergebnis der Tab. 1: Komplette Hemmung wurde bei diesen Tieren
nur ganz vereinzelt beobachtet. Auch solche Tiere (Nr. 150) zeigten
im Verlauf der Untersuchungen wechselndeu Reaktionsausfall, derzwischen
+ und — ohne ersichtlichen Grund schwankt. Einige Tiere
(Nr. 149, 4) zeigten mit einer gewissen RegelmaBigkeit fast komplette
Hemmungen. Die Mebrzabl der auderen weist st&rkere Schwaukungen
and Qberwiegend negative oder ganz scbwache Reaktionen auf. Eigen¬
hemmung wurde ziemlich haufig beobachtet. Bei keiuem dieser
Tiere lieB sich in vivo oder in vitro der Nachweis einer
Kokzidienerkrankuug fdhren. Die Tiere bliebeu entweder ge-
snnd, oder sie gingen an interkurrenten Krankheiten (Sepsis, Pseudo-
tuberkulose) ein. Ein Teil von ibnen litt an Genitalspiroch&tose.

Ergebnis der Tab. II Nur 1 Tier von 13 gibt regelmfiBig positive
Reaktionen. Dies Tier (Nr. 163) entstammt mit den Tieren 160—162
einem Wurf von 6 Kaninchen, von denen 2 bereits vor Anstellung der
Versuche an Kokzidiose eingegangen waren. Es handelt sich hier um
eine besonders schwere Durchseuchung mit Kokzidien. Tier 163 ist das
einzige, das die Infektion Qbersteht und am Leben bleibt. A lie an-
deren Tiere, mit zum Teil schwersten anatomischen Ver-
anderungen infolge Kokzidiose zeigen negative Serum-
reaktionen.

Aus den vorstehend mitgeteilten Untersuchungen ergibt sich, daB,
im Gegensatz zu den Angaben von Kuszinski, ein Zusammenhang
zwischen Wassermannscher Reaktion und Kokzidiose nicht zu er-
weisen ist. Denn einmal verlAuft die Reaktion bei demselben Tiere
durchans wechselnd: stark positive Resultate konnen von vdllig nega-

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358 Tabelle I. Tiere ohne nach

Nr.

Alter

UntersuchuogBergebQisse an verschiedeoen!

147

ansge-

wachsen

+++

+++

++

±

E

■

++ |++ +++! E

. i

148

dgl.

+++

++

E

—

^ j i zb ; + + + ! e I

E

149

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+++I+++

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+ + + I + + + ! E j + + + x ) —

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151

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153

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•

164

6 Wo-
chen

—

•

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•

j

• i • j

j i

•

105

ausge-

wachaen

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—

•

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129

dgl.

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144

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•

14

n

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1

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i * !

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137

77

—

i

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i

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3

4 Mon.

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j

1 •

. 1

170

8 Wo-
chen

—

±

±

1

’ ’ ; ’ ;

i

!

-

175

10 Wo-
chen

+ + +

—

\

. ' I ‘ i ‘

i

i

•

176

dgl.

—

—

1 1

i !

• ; • • • !

i

-

1) Auftreten der Primaraffekte am Genitale (Kaninchensyphilis). 2) Beginn der Sepsis

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359

weisbare KokzidienerkrankuDg.

Tagen _ Krankheitsverlauf und Sektionsbefund

• • • In der letzten Zeit abgemagert. Darmkatarrh. 10 Tage nach der letzten

Reaktion gee tor ben. Sektion: Pseudotuberk. Im Darmaaftausatrich Kok¬
zidien. Keine Orgaokokzidioae

In letzter Zeit kranklich. 2 Tage nach der letzten Reaktion gestorbem
Sektion: Pseudotuberk? Keine Kokzidioae

Steta geaundea kraftigea Tier. Partus. 10 Tage nach der letzten Reaktion
plbtzlich an Darmeinklemmung geatorbeo. Sektion: Im Darmsaft ver-
einzelte Kokzidien, keine Organkokzidioae

! • Steta geaundea Tier. Im Kot auch bei Anreicherung keine Kokzidien.

I Das Tier lebt noch. Mitte Juni, ca. 18 Tage nach Koitus mit apirochatoee-

krankem Bock, beginnende Genitalapirochatoae

— dt — — Steta geaundea Tier. 2 Tage nach der letzten Reaktion interkurrent ge-

atorben. Sektion: Keine Zeichen beatehender Kokzidioae. Im Auaatnch
der Darmachleimhaut befinden sich Kokzidien

— j zt — — Steta geaundea Tier; lebt noch. Im Kot nach Anreicherung ganz verein-

zelte Kokzidien

+ 4- j — — — Mafiig kraftigea Tier, zeitweiae kranklich und abgemagert. Hat aich in
letzter Zeit wieder erholt; lebt noch. Im Kot auch nach Anreicherung
keine Kokzidien

• j . Kraftigea, steta geaundea Tier. Interkurrent an Sepsis erkrankt und ge-

| atorben. 1. Tag nach der letzten Reaktion. Sektion: Keine Anzeichen

von Kokzidioae

In letzter Zeit abgemagert, spontan geatorben 3 Tage nach der letzten
Blutentnahme. Sektion: Pseudotuberk., keine Kokzidioae

... In letzter Zeit abgemagert, 3 Tage nach der letzten Blutentnahme. apon-
tan geatorben. Sektion: Pseudotuberk., keine Kokzidioae

Jungtier. Steta geaund. Plotzlich outer Krampfen erkrankt. Am Tage
der Blutentnahme getotet. Sektion: Keine Zeichen von Kokzidioae

. i . Altee Zuchtweibchen. Genitalapirochfitose. Im Kot auch bei Anreiche¬
rung keine Kokzidien. Am Tage der letzten Blutentnahme spontan ge-
storben. Sektion: Pseudotuberk., keine Kokzidioae

Altea Zuchtweibchen. Schwere Genitalspirochatoae. Im Kot ganz vereih-
zett und nicht konatant Kokzidien. Spontaner Tod an Sepsis 2 Tage
nach der letzten Blutentnahme. Sektion: Keine Kokzidioae

. | . . . Schwere Genitalapirochatoae. 9 Tage nach der letzten Blutentnahme spon-

) tan geatorben. Sektion: Alte Lebernarben (auageheilte Kokzidiose?) Peri-

! carditis. Keine Zeichen beatehender Kokzidioae

. i . . Kraftigea Tier. Schwere Genitalapirochatoae. Lebt noch. Im Kot auch

| bei Aoreicherung keine Kokzidien

j

. | . In letzter Zeit aehr abgemagert. Am Tage der Blutentnahme getotet. Sek*

; 1 tion: Schwerer Darmkatarrh. Pseudotuberk., im Darmaaft vereinzelte

Kokzidien

i . j . Altea krankliches Tier. 1 Tag nach der Blutentnahme geatorben. 8ek-
! | tion: Alte Lebernarben (auageheilte Kokzidioae?). Koproataae, im Darm-

inhalt durch Anreicherung ganz vereinzelte Kokzidien nachzuweiaen

. . ! . Steta kranklich, hat aich in letzter Zeit erholt. Lebt noch, Im Kot bei

! Anreicherung vereinzelte Kokzidien

| . Geaund, lebt noch. Im Kot bei Anreicherung Kokzidien

!

j . . Geaundea Tier. Lebt noch. Im Kot bei Anreicherung vereinzelte Kok-

| zidien

. | . Geaundea Tier. Lebt noch. 'Im Kot bei Anreicherung vereinzelte Kok¬

zidien

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360

Centralbl. f. B&kt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

i

Tabeile II. Tiere mit n&chweisbarer Kokzidiose.

N,

Alter

Outers uchungsergebnisse an ver-
echiedenen Tagen

Krankheitsverlauf nnd Sektionsbefuod

160

8 Wo-
chen

I

• i

. i

Schlechter Ernahrungszustanri, kranklieh j
5 Tage nach der Blutentnahme spontan
gestorben. Sektion: Darmkatarrh,adiwer*
Leberkokzidiose

161

dgl.

ZE.

zk

*

Schlechter Ernahrungsznstand, krinklkh.

Am Tage der letztenBlutem nahmegetotet
Sektion: Darmkat&rrh, schwere Leber
kokzidiose

162

r»

1

.

#

Schlechter ErnahrungszustaDd, krinkM |
8 Tage nach der letzten Blutentnahme *
spontan gestorben. Sektion: Darm*
katarrh, schwere Leberkokzidiose

163

n

•

1

+ + + + (Zeitweise krank, typische Zeichen der Kok
zidio.se (Darmkaiarrh, feuchte Schnaoz*
„SchnupfRD“). Im Kot masaenhaft Kok
v zidien, hat sich in letzter Zeit wieder
erholt. Lebt noch

n

V

•

Stets gesund. Plotzlich on ter Krampfeo er¬
krankt Am Tage nach der Bluteotnabai*

; getdtet. Sekt: Schwere Leberkokzidio*

11

7 Wo-
chen

zt-

*

•

Krankliches Tier, Zeichen von Kokzidio*: i
(Feuchte Schnanze, D&rmkatarrb). Ab J
Tage der Blutentnahme getotet Sktios !
Schwerste Leber- und Darm kokzidiose

20

8 Wo-
chen

•

•

. jPldtzlich erkrankt Am Tage der Blutem

nahme spontan gestorben. Sektion

1 Pseudotuberk., Kokzidiose der Leber

171

1 dgl.

Gesund. In letzter Zeit infolge Fatter
mangel abgemagert. Im Kot nach An
reicberung vereinzelt Kokzidien. AraTagt
nach der letzten Blutentnahme geetorbes
Sektion: Mafiige Kokzidiose der Leber

172

V

Gesund. In letzter Zeit infolge Fatter
mangel abgemagert. Am Tage der letzten
Blutentnahme spontan gestorbeo. Sek
tion: Maflige Kokzidiose der Lebef

177

1 6 Wo-
1 chen

•

Plotzlich unter Krampfen erkrankt As
Tage der Blutentnahme getbtet Setter
Kokzidiose der Leber

8! 4 Monate

±

•

Stets gesund gewesen. Plotzlich ante
Krampfen erkrankt. Am Tage der Bias
entnahrae getotet Sektion: Schwtf'
Leberkokzidiose I

5

3 Monate

_

i

•

Krankliches Tier. 11 Tage nach der leu
ten Blutentnahme spontan gestorbeo
Sektion: Leberkokzidiose, schwere Darm
kokzidiose

35

ausge*

wachsen

+ + !

1 ±

i

!

1

In letzter Zeit* abgemagert DarmktUrri
Am Tage der letzten Blutentnahme epos
tan gestorben. Sektion: Schwere Dane
kokzidiose

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Marcuse, Wassermaunscbe Reaktion and Kokzidiose beim Kaaincben. 361

tiven abgelOst warden, und zwar innerhalb knrzer Zeitspannen, sodann
aber wnrde h&ufig beobachtet, daB kokzidiosekranke Tiere negativ rear
gierten, w&hrend kokzidiosefreie Tiere positiven Ausfall der Reaktion
zeigten. Worauf das wechselnde Verhalten des Kaninchens im Kom-
plementbindungsversuch zurfickzuffihren ist, kann nach diesen Unter-
sachungen nicht mit Sicherheit entschieden werden. Wir nehmen an,
daB es sich hier uni physiologische, mit der Verdauungzusammenh&ngende
Vorgange handeln kdnnte, die das Serum beeinflussen. Einen Hmweis
in diesem Sinne gibt die Beobachtnng von Flemming und Schwarz
(Mflnch. med. Wochenschr. 1910. Nr. 41), daB seropositive Tiere nach
einer Hungerzeit seronegativ wurden. Auch die Versuche von Much
and Schmidt (Dtsch. med. Wochenschr. 1921. Nr. 20), durch intra-
venfise Injektion von Aminokdrpern (Leuzin), die auch beim normalen
EiweiBabbau auftreten, positive Resultate zu erzielen, lassen sich in
diesem Sinne verwerten.

Bemerkenswert ist das Verhalten der Tierserie 147—154. Die Tiere
waren Anfang April direkt vora Zflchter geliefert. Genaueres fiber Her-
kunft und Ffitterungsverhfiltnisse beim Zfichter ist nicht bekannt. Jeden-
falls erhielten die Tiere im Hauptgesundheitsamt sorgsamste Pflege und
bestes Futter (viel Hafer, Mohrruben, wenig Heu). Vielleicht erklfirt
sich hierdurch der Unterschied zwischen den ersten stark positiven Re-
aktionen und den folgenden schwacheren, resp. negativen Ausffillen. In
diesem Zusammenhange ist auch noch folgender Urastand zu erwahnen:
Als Anfang Mai die frische Grfinfutterung einsetzte, nahm die Zahl der
Sera mit Eigenhemmung und derjenigen mit positiver Reaktion vorfiber-
gehend zu. Das alles spricht ffir Zusammenhange zwischen Verdauungs-
vorgfingen und Serumreaktion; Zusammenhange, fiber deren Natur wir
jedoch nor Vermutungen. fiuBern kdnnen.

AuBer Komplementbindungsversuchen mit Wassermann-Extrakten
haben wir uns bemfiht, neben dieser anscheinend unspezifischen Reak¬
tion spezifische Resultate zu erzielen, indem wir Experimente mit a Ik o-
holischen Kokzidienextrakten analog der Echinokokkenkomple-
mentbindungsprobe ansetzten. Als Ausgangsmaterial ffir das Kokzidien-
extrakt wShlten wir die Leber eines an schwerster Leberkokzidiose ein-
gegangenen Kaninchens. Die Kokzidienknoten wurden aus dem Paren-
chym herausgeldst und nach Mdglichkeit von dem noch anhaftenden
Lebergewebe befreit. Dann wurde zu je 10 g Substanz 50 ccm absol.
Alkohol zugeffigt. Nach 24-stfind. Stehen wurde die Mischung mit
sterilen Glasperlen versetzt und mehrere Stunden im Schtittelapparat
geschflttelt, bis die 'Substanz zu einem homogenen Brei verarbeitet war.
Nach abermaligem 24-stfind. Stehen folgte mehrfaches Filtrieren, bis das
Filtrat vollstfindig klar blieb.

Bei der 1. Austitrierung des Extraktes ergab sich als geringste
nicht mehr hemmende Dosis die Menge von 0,02 ccm gelost in 0,5 phy-
siologischer KochsalzHjsung. Im Verlaufe der Untersuchungen stieg
dieser Wert auf 0,04 ccm in 0,5 ccm Gesamtvolumen. Die Versuchs-
anordnung folgte im tibrigen genau der Wassermannschen Reaktion.
Die Ergebnisse entsprachen mit geringen quantitativen DiflFerenzen dem
Reaktionsausfall, den das gleiche Serum mit Wasserm an n-Extrakten
gab. Diese Parallelitfit betraf nicht nur Kaninchensera, sondern auch
Menschensera. Syphilitische Sera reagierten mit dem Kokzidienextrakt
positiv, Sera von luesfreien Personen negativ. Das spricht dafur, daB
es sich auch bei dem Kokzidienextrakt in erster Linie um die Wirkung

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1

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362 Centralbl. f. B&kt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

in Ldsung gegangener Lebersubstanz handelt, die, wie auch andere
Organextrakte, zur Komplementbindung mehr oder weniger geeignet Bind.
Die AusfQhrung einer spezifischen serologischen Kokzidiendiagaose ist \
daher in diesem Versuche nicht gelungen.

Zum SchluB sei noch angefflhrt, daB wir Gelegenheit batten, eine j
Anzahl Tiere zu beobachten, die an Genitalspirochfitose (sogenannte
originfire Kaninchensyphilis) litten. Bei einera Teile dieser Tiere konnte
die Erkrankung wfihrend der Versuchsdauer von ihrer Entstehung an
verfolgt werden. Das Verhalten der Wassermannschen Reaktion
bei dieser der menschlichen Lues verwandten Krankheit muBte beson- {
deres Interesse erwecken. Keines der 5 in Betracht kommenden Tiere
zeigte eine positive Reaktion. 1 Tier (Nr. 150) zeigte sogar insofern ;

paradoxes Verhalten, als es in der ersten Versuchszeit stark positive

Reaktion gab. Als, dann Mitte Juni — ca. 20 Tage nach dem Koitns j

mit einem spirocbfitenkranken Bock — ein Primaraffekt am Genitale j

auftrat, war die Reaktion negativ und ist ancb negativ geblieben, trotz j
Fortschreitens des Prozesses (Zerfall des PrimSraffekts und Geschwfirs- I
bildung). SSmtliche Tiere wiesen lokale Ver&nderungen auf. Generali- j
sierte oder hereditfire Formen sind nicht zur Beobachtung gelangt, so ;
daB immerhin die Moglichkeit offen bleibt, daB diese FSlle serologisch
andere Resultate geben kdnnten.

Zusammenfassung. j

1) Ein Zusammenhang zwischen Wassermann seller Reaktion and
Kokzidioseerkrankung beita Kanincben liefi sich nicht feststellen. Nor-
male Kaninchen zeigen uokontrollierbare Schwankungen des Reaktions-
ausfalles. Kokzidiosekranke Tiere konnen positiv, kokzidiosefreie Tiere
negativ reagieren und umgekehrt.

2) Eine spezifische Komplementbindung mit Kokzidioseextrakt liefi
sich nicht erzielen.

3) Kaninchen, die an Genitalspirochfitose litten, wiesen keine posi¬
tive Wassermannsche Reaktion auf.

4) Auf Grund dieser Befunde ist fflr die Verwertung positiver Se-
rumreaktionen beira Kaninchen, fiir die Verwertung ihres Auftretens
und Verschwindens auBerste ZurQckhaltung geboten.

Nachdruck verboten.

Ueber die Eier unserer Anopheles.

|Aus dem Institut f. Schiffs- und Tropenkrankheiten, Hamburg.!

Von Dr. E. Martini.

Mit 4 Abbildungeu im Text.

Die Arbeit von Taenzer, Morphogenetische Untersucbungen und
Beobachtungen an Culicidenlarven 1 ), erinnert mich daran, daB wir noch

1) Arch. f. Naturgesoh. Jahrg. 87. A. 1021. S. 1UR.

Go^ 'gle

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Martini, Ueber die Eier unserer Anopheles.

363

iinmer keine Abbildungen besitzen, welche die wichtigsten Unterschiede
der Eier unserer einbeimiscben Anophelen deutlich zeigen. Der Autor
erw&hnt, daB die LSnge des Schwimmkammerapparates, welche Br ess -
lan 1 ) als Unterscbied angibt, bei Stflcken der gleicheu Art. recht ver¬
schieden ist und daher nicht als zuverl&ssiges Merkmal verwendet werden
kann. Darin hat er sehr recht. Er nimmt dann als Unterscbied die
Verwerfungen der einzelnen Kammergrenzen, welche bei A. bifurcatus
viel starker als bei A. maculipennis seien, und betont/ferner, daB
die Schwimmkammern bei A. bifurcatus auf der ROckseite des Eies
weiter gegen die Mittellinie bin vorgreifen. Er scheint iibersehen zu
haben, daB icb bereits 1920 2 ) die unterscheidenden Merkraale angegeben
habe mit den Worten: „Die Eier von maculipennis baben eine
grbbere Fleckung des Grundes, auf der Unterseite noch mehr als auf
der Oberseite. Der Saum, der vom Schwimmapparat bei beiden Arten
durchbrochen wird, verlauft bei maculipennis am Rande, bei bi¬
furcatus auf der RUckseite des Eies. tt Taenzer hat offenbar meine
Figur nicht beachtet, sonst hatte er seine Figuren von A. bifurcatus-
Eiern, von denen la das Merkmal von A. maculipennis trfigt, wohl
kaum so gegeben. Die Fig. 1—4 verdeutlichen die von mir gemeinten
Merkraale. Ein Vergleich mit Bresslaus Figuren lebrt leicht, wie
sehr dieser Autor der Unzuveriassigkeit des von ihm in den Vorder-
grund gestellten Kennzeichens zum Opfer gefallen ist; denn die Fig. 16a
und b sind zwar sicher A. bifurcatus, 15 jedoch ist im Gegensatz
zu der Figurenerkl&rung mit groBter Wahrscheinlichkeit ebenfalls A. bi¬
furcatus, 20 aber, die als A. bifurcat us bezeichnet ist, ist A. ma¬
culipennis und 21 wohl sicher ebenfalls. So hervorragend also
auch die Abbildungen bei Bresslau sind, kann es doch mit seiner
Darstellung nicht sein Bewenden haben, und wir konnen auch nicht
zustimmen, daB er einen Irrtum bei Eysell 3 ) wahrscheiniich gemacht
habe.

Unter den Merkmalen von Taenzer ist die Stellung der Schwimm-
kammern gewissermaBen nur die 2. Seite der von mir erw&hnten Stel¬
lung des Schwimrarandes, da derselbe innen ja ziemlich gut bei beiden
Arten mit den Schwimmkammern fluchtet. Die eigenartige starkere
Kuickung der Grenzen der Kammern wird wohl niemand, der nach dem
oben Gesagten die Abbildung von Bresslau betrachtet, als geeignet
fur die Bestimmung halten. Dieselbe ist in der Tat in manchen Ge-
legen von A. bifurcatus sehr auffailig, fehlt aber in vielen Gelegen
ganz. Sie ist sehr unregelmSBig, einmal gegen das stumpfe, ein ander-
mal gegen das spitze Ende des Eies gerichtet, flbrigens selbst bei Eicrn
desselben Geleges so verschieden ausgebildet, daB man neben Eiern mit
geradezu bizarren Verwerfnngen der Kammern solche sieht, bei denen
fiberhaupt so gut wie nichts von Unregelm&Bigkeiten wahrzunehmen ist.
Die Verwerfungen sind daher in meinen anliegenden Schemata auch
nicht mitgezeichnet; sie ermoglichen meiner Meinung nach keine sichere
Unterscheidung der Anopheleneier.

Die beistehenden Fig. I und 3 zeigen deutlich die wesentlichen
Unterscbiede bei Ansicht von oben. Man sieht, daB die L&nge der
h'amraerreihe nicht sehr verschieden ist, wenn sie auch (im vorliegenden

1) Biolog. Centralbl. 1920. IS. 317.

2) Beih. Arch. f. Schilf*- u. Tropenhyg. Bd. ‘24. S. 57 u. Fig. 17. Taf. 1.

3) Arch. f. Schiffs- u. Tropenhyg. Bd. 16. 191*2. S. 421.

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364

Ceutralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

Falle) bei A. b ifu r cat us deutlich erheblicher erscheint als bei A. ma-
culipennis. Ferner ist leicht zu sehen. daB die Kamraern uDd der
Schwimmgurtel bei A. bifurcatus mehr auf die Rflckseite des Eies
verschoben sind, wahrend bei A. raaculipennis der Schwimmgurtel
dem Rande der RQckseite folgt, und auch die Kamraern nicht so weit
gegen die Mittellinie reichen. Es wird daher bei A. bifurcatus zu
beiden Seiten des Schwimmgurtels die dunkle Grund-
farbe der Seitenteile des Eies noch einmal sichtbar. Ob
dadurch das Ei von A. bifurcatus dem Auge schraaler erscheint als
das von A. maculipennis, mochte ich nicht entscheiden. Es scheint
rair das eine Frage der Subjektivit&t des Sehens. Dieses Merkmal ist
urn so bequemer, als es bereits mit schwacher VergroBerung mit einem
Blick die Eier erkennen laBt, ohne daB man die der anderen Art zum

Fig. 1.

Fig. 2.

Fig. 3.

Fig. 4.

Vergleich daueben haben miiBte, da es eben kein relatives Merkmal und
durchaus konstant ist. Ferner sieht man leicht die grobere Felderung
des Exochoriums auf der oberen mittleren Flache bei A. maculipen¬
nis gegeniiber der ganz feinen Kornelung bei A. bifurcatus. Die
kleine Nebenfigur bei 3 zeigt dann in gleichem MaBstabe die Felderung
der unteren Teile des Exochoriums von demselben A. maculipennis-
Ei. In der Seitenansicht des A. bifurcatus-Eies (Fig. 2) sieht man
von einer solchen Felderung nichts; dagegen sind die Unterschiede in
der Lage des Schwimmrandes naturlich in der Seitenansicht besonders
auf der Zeichnung weniger leicht zu erkennen.

Fig. 4 gibt endlich zur Vollstandigkeit ein Ei von A. nigripes in
Ansicht von oben. Hier fehlen die Schwimmkammern vollstandig. Es
ist nur der Schwimmgurtel vorhanden. Die Darstellung Ey sells am
angegebenen Orte ist also vollstandig korrekt. Die Abbildung von

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Blei, Drei neue Schafzestoden.

365

Galli-Valerio und Rochaz de Jongh 1 ) grtindet sich offenbar auf
ein stark beschadigtes Ei und kann nicht zu dem Schlusse verwendet
werdeo, den Bresslau zieht, daB die Eier dieser Art mit denen unserer
beiden anderen Anopbelen ziemlich gut (ibereinstimmen. Sie sind sehr
verscbieden, vie A. nigripes fiberhaupt trotz der grofien Aehnlich-
keit der Weibchen sehr weit entfernt von A. bifurcatus steht.

DaB man iiberhaupt etwas leichtsinnig die Bilder von A. maculi-
pennis auf alien Anophelen verallgemeinert, lehren die Darstellungen
im 3. Band von Theobald*) von sehr abweichenden Eiformen.

Kerschbaumer 8 ) gibt an, die Eier seien blau; er habe auch
einige Male rote Eier erhalten. Ich habe nie blaue Eier gesehen. Die
Facetten des Exochoriums reflektieren jedoch gruppenweise das Licht
blaugrau und geben dadurch in der Tat. ein sehr zierliches Bild und
bei schwacher Vergrbfierung eine perlgraue Bereifung des Eies (conf.
Eysell). Gelegentlich sah ich auch rotbraune Gelege, die nicht auf
dem Wasser, sondern auf schwimmenden GegenstSnden lagen. Das Bild
der normalen Eier andert sich aber auf Zusatz von Nelkenbl pldtzlich.
Die Teile des Schwimmgflrtels werden einer nach dem anderen gelb
gefarbt, die tlbrigen Teile des Eies erscheinen prachtvoll blau. Frisch
abgelegt, sind die Eier bekanntllch ganz hell.

Nachdruck verbotm.

Drei neue Schafzestoden.

Nebst Beitragen zur Kenntnis der Ubrigen Wiederkauerzestoden.

[Aus dem Institut fflr Allgemeine Zoologie und Parasitenkunde der
Tierfirztlichen Hochschule Wien (Vorstand Prof. Dr. Th. Pintner).]

Von Tierarzt Dr. med. vet. Rudolf Blei.

Mit 17 Abbildungen im Text.

In der Zeit vom Nov. 1917 bis Ende M&rz 1919 gelang es mir, aus
Schafen aus Ungarn, wohin sie entsprechend den damaligen Handels-
verhaitnissen z. T. aus der Ukraine eingeffihrt worden waren, ein reiches
Anoplocephaliden-Material zu sammeln. Es ist anzunehmen, dafi einzelne
der gefundenen Arten typische Vertreter der osteuropSischen oder asiati-
schen Fauna sind [Blei 1 )].

Gesammelt wurde das Material z. T. auf der Lehrkanzel fur pathol.
Auatomie a. d. Tierarztlichen Hophschule in Wien und im stadt. Schlacht-
haus in Meidling durch Vermittlung des H. Tierarztes Dr. Sknorzil;
zum weitaus Qberwiegenden Teile jedoch im stadt. Schlachthaus zu
St. Marx.

Beim morphologischen Studium des Materials, das eine grofie Anzahl
von Arten enthait, ergab sich, daB sich unter ihnen auch Formen be-
fanden, die ich mit den bisher bekannten nicht identifizieren konnte; ich
betrachtete es deshalb als eine erfolgversprechende Aufgabe, diese
Formen neu zu beschreiben.

1) Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 67. 1913. S. 477.

2) A Monograph of the Culicidae of the world. London 1903. p. 15.

3) Malaria. Wien u. Leipzig 1901.

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366

Centralbl. f. Baku etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 5.

FQr alle Anregungen und RatschlSge, die mir H. Prof. Dr. Th. P i n t n e r
im Verlaufe meiner Studien zuteil werden lieB, sowie fQr die stSndige
Ueberlassung eines Arbeitsplatzes im Iastitut f. Zoologie und Parasiten-
kunde spreche ich meinen warms ten Dank aus. Desgleicben dem Assi-
stenten an der Lehrkanzel, H. Dr. pbil. et. med. vet. L. K. Bohm:
weiter dem Vorstand der Lehrkanzel fQr patbol. Anatomie, H. Prof. Dr.
R. Hartl, der mir das Sammeln von Parasiten gestattete, und dem
Leiter des stadt. Schlachthanses zu St. Marx, H. Vet.-Rat Juritsch.
Schliefilich danke ich dem H. Tierarzt Dr. Sknorzil fQr die Ueber-
mittlung sehr wertvollen Materiales.

Technik. Beim Sammeln des Materials ging ich ahnlich wie die
DarmwSscher vor, um die damals sehr wertvollen DSrme moglichst zu
schonen und die parasitenfreien nicht anschneiden zu mQssen. Zunachst
trachtete ich, die noch warmen DSrme zu untersuchen. Ich nahm das
hintere Ende des DQnndarmes in die rechte Hand und setzte kurz vor
sie die linke derart, daB ich den in diesem Abschnitte sehr dflnnen.
durchscheinenden und in der Regel mit sehr flQssigem Inhalt geiQllteu
Darm fest zwischen Daumen und Zeigeiinger zusammenpreBte und nuu
mit der recbten Hand den Darm schubweise nach rGckwarts zog. Sind
BandwQrmer vorhanden, so werden auf diese Weise die abgestoBenen
Teile Oder die Endabschnitte der Ketten etwas zusammengeschwemrot
und heben sich infolge ihrer lichteren FSrbung ziemlich deutlich vom
dunkler gefSrbten Darminhalt ab, indem sie durch die dQnne Darro-
wand durchschimmern. Hatte ich Parasiten festgestellt, so schnitt ich
den hintersten Teil des Darmes, der von ihnen frei war, ab und den
parasitenhaltigen Teil mit einer gekndpften Schere, den Kopf gegen die
obere Wand des Darmes gedrGckt, nach vorne zu vorsichtig auf, bis ich
beim Kopf der Kette angelangt war; die freigelegten Individuen wurden
einfach mit Spatel und Beinpinzetten in ein mit dem zugehdrigen Darm¬
inhalt (weil sie darin auf dem Transport am wenigsten mazerieren)
gefQlltes Glas gegeben. Auf die geschilderte Weise war es mir mQglich.
in der Stunde 10—20 D9rme zu untersuchen.

Die so gewonnenen Bandwurmer, vom anhaftenden Darminhalt be*
freit, zeigten nun jene Eigenschaften, die als „AeuBerer Habitus* an-
gefQhrt sind. Ich konnte bald schon bei der Betrachtung des frischen
Materiales sagen, in welches Genus die gefundenen Zestoden gehSrten.
in vielen Fallen sogar die Spezies bestimmen. Die bequemste Fixierungs-
art ist die mit Formalin. Ich ffillte eine grofiere Glaswanne etwa 3 cm
hoch mit einer Formalinldsung, bestehend aus 9 T. Aqu. dest. +1 T.
kfl. Formalin, gab eine Kette hinein, setzte etwa in deren Mitte eine
Beinpinzette an und beschrieb nun Achtertouren am Boden der Wanne
etwa 10—20 Minuten lang, bis sich die Kette schon gestreckt hatte; war
dies der Fall, so gab ich sie direkt in eine Formalinlosnng, bestehend aus
3 T. Aqu. dest. und 1 T. klf. Formalin, zur Konservierung bis zu ihrer
Vcrarbeitung, oder ich ftihrte sie am nachsten Tage allmShlich in 75-proz.
Alkohol fiber. Behufs Streckung des Materials wShrend der Fixierung
bin ich auch ahnlich den Angaben von Gought (31) so vorgegangen,
daB ich i(as hintere Ende der Kette, etwa 2 cm vor diesem, um eine
Beinpinzette legte und nun vorsichtig den Bandwurm in die H6he zog.
um ihn bald darauf wieder lanpsam in die Fixierungsflflssigkeit zurflck-
sinken zu lassen (etwa 5mal); die Tiere streckten sich so in der Regel
sehr schon infolge ihrer eigenen Schwere. Ferner habe ich die von
Stiles und Has sal 1(16) angegebene Mischung: ges. wSssg. Sublimat-

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Blei, Drei neue Schafzestoden.

3*>7

losung, 50 T. 75-proz. Alkohol und V 2 ccm Eisessig als Fixierungs-
flussigkeit verwendet und 3 Stunden einwirken lassen, hierauf das
Material 2 Stunden im fliefienden Wasser gewSssert und dann allin&hlich
in 75 proz. Alkohl tibergeffibrt.

Wenn die Tiere sebr kurz und nicht zu dflnn sind, so kann man
sie nach Angaben von L 00 B (6) in einer groBeren Eprouvette schfltteln;
bei liingeren Ketten kommt es aber da leicbt zu Knotenbildung.

Bei der makroskopischen Bestimmung des friscben Materials be-
siebtigte ich das vorliegende Individuum mit dem Binokularmikroskop.
Hierauf farbte ich den Kopf, ein kurzes anschliefiendes Stiick der Stro-
bila und einige gescblechtsreife Segmente. So ist es in vieien Fallen
mOglich, eine einwandfreie Diagnose zu stellen; bei dickem und undurch-
sichtigem Material ist man gezwungen, Schnitte anzufertigen. Zum Studium
der Kalkkdrperchen habe ich stets frisches, nicht fixiertes Material
zwischen zwei Glasplatten gequetscht.

Zum FSrben der Totoprfiparate verwendete ich hauptsachlieh Borax-
karmin; ich habe diesen Farbstoff auf das PrSparat je nach seiner Dicke
2—3 Tage einwirken lassen; diese FSrbung liefert sehr schone Bilder.
Aufgehellt habe ich die PrSparate sowohl mit Xylol als auch mit Zedern51.
Schnitte habe ich fdr auatomische Untersuchungen in der Dicke von
10—15 {t, fGr histologische Studien von 5—10 ji hergestcllt. Die Schnitte
warden mit Alaunhamatoxylin nach Del afield, Hdmatoxylin-Eisen
nach He idea hein, H&malaun Oder HSmatoxylin nach Grenacher
gefBrbt; die letzte Methode lieferte die schnellsten und besten Ergeb-
nisse. Stets wurde zur Kontrastf&rbung mit alkoholischem Eosin nach-
gefirbt.

Moniezia pellucida nov. spec. (Fig. 1—5). Dunndarm, Schaf.
Ungaro, Ukraine. Jan. 1919 wurde mir im Meidlinger Schlachtbaus ein
Glas mit Bandwflrmern ubergeben, die der stSdt. Tierarzt Dr. A. Sknorzil
5 Wochen vorher fur mich gesammelt batte. Das Material war in einer
Formalinlosung (1 T. kfl. Formalin + 9 T. Aqu. dest.) fixiert und wurde
nach Erhalt z. T. in 75 proz. Alkohol, z. T. eine starke Formalinlosung (1 T.
Form. + 3 T. Aqu. dest.) Gberfiihrt. Es waren insgesamt 8 Ketten in der
L5nge von 30—119 cm, alle aus dem DGnndarm eines aus Ungarn bzw.
der Ukraine stammenden Schafes. Die Untersuchung ergab, daB alle
8 $ehr schon gestreckten Individuen einer bisher nicht beschriebenen
Art angehdrten.

Sofort fiel mir auf, daB die Tiere dGnn, sehr durchsichtig, nahezu
wasserhell waren. Von Moniezia expansa unterschied sie eine aufier-
ordentlich rasche, mehr fiir M. planissima sprechenne Breitenzunabme
der Kette, von dieser aber die viel geringere Breite der geschlechtsreifen
and hintersten Segmente sowie anderes. Als Grundlage der folgenden
Beschreibung diente das 119 cm lange Individuum, das im hinteren
Teil einen starken Stich ins Gelbliche infolge des sich entwickelnden
und mit Eiern vollgepfropften Uterus zeigte. Diese gelbliche FSrbung
ist bereits 45 cm hinter dem Kopf wahrzunehmen. Die Ventral-
kanSle sind besonders durchsichtige Streifen; sie verlaufen bogen-
fSrmig parallel zum entsprechenden Seitenrande und an der Gliedgrenze
ziemlich eckig abgesetzt. Eine doppelte Anlage der Genitalien ist bereits
LO cm hinter dem Kopf makroskopisch deutlieh zu erkennen; sie heben
sich als weiBe Klflmpchen sehr scharf von der ubrigen, gallertartig aus-
sehenden Kette ab und werden durch den entsprechenden Ventralkanal
halbiert; ihr medialer Teil liegt schief und zwar zieht er von hinten

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368

Centtalbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

medial nach vorne lateral. Der Genitalporus ist wenig deutlich vor-
springend. Anomalien in Form von Proglottidenverschmelzungen sind
Vorhanden. Der Kopf erscheint klein und nach hinten verjungt Die 4
Saugnfipfe sind makroskopisch noch voneinander zu nnterscheiden. Die
Breite der Kette nimmt anfangs sehr rasch zn, wie bei M. planissima,
spfiter nur. ganz allmfihlich und bleibt schlieBlich anscheinend gleich;
die letzten Segmente sind wieder etwas schmfiler. Die auBerordentliche
Durchsichtigkeit der Kette hat diese Art mit M. expansa gemeinsam.
Sfimtliche Segmente sind rechteckig, bzw. anfangs trapezfbrmig, indem
ihre vordere Begrenzung kilrzer ist, als die hintere; sie sind anfangs
sehr kurz und gewinnen erst allmfihlich an Lfinge. Mit zunehmender

Fig. 5.

Entwicklung des Uterus werden die fibrigen Genitalorgane immer un-
deutlicher.

Der Kopf (Fig. 1, 2) geht in den Hals ziemlich kontinuierlich fiber.
Von vorn betrachtet erscheint er rechteckig, fast quadratisch und ver-
jfingt sich nach hinten. Die Vorderflfiche des Kopfes miflt in ihrer
Diagonals 736 /u, seine Lange 320 ju, die Breite ist mehr als doppelt
so groB. Die 4 Saugnfipfe sind diagonal angeordnet, fast kugelffirmig
und haben einen Durchmesser von 208 /i. Die Oelfnungen der Saug¬
nfipfe stehen ebenfalls diagonal; ihre Rfinder sind geschweift, so dal
sie einen birnfflrmigen UmriB zeigen. Die Oeffnungen der Saugnfipfe
von M. planisima wurden bisher in dieser Form nicht beobacbtet
(wobei ich wohl weiB, daB die Form der Saugnapffiffnungen bei ihrer

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Blei, Drei neue Schafzestoden.

369

AbhSngigkeit vora jeweiligen Kontraktionszustand nur geringe diagno-
stiscbe Bedeutung hat). Haken sind keine vorhanden. Eine Lappung
des Kopfes ist bei deo einzelnen Exemplaren mehr oiler weoiger dcut-
iich ausgeprSgt; ira Qbrigen weist auch hier der Kopf geradeso die
mannigfaltigsten Variationen auf, wie der aller Gbrigen Moniezien. Bald
ist er mehr gelappt, bald weniger, bald erscheint er rechteckig, bald
quadratisch. Der unsegraentierte Teil (Fig. 2), ist vora segmeDtierten
darch eine deutliche (bei planissima nicht beobachtete) EinschnQrung
scharf getrennt, wShrend der Uebergang zum Kopf ein allm&hlicher ist.
Er zeigt weder eine echte noch eine Scheingliederung nnd ist vollst£ndig
glattrandig; er hat eine LAnge von 800 ft und unmittelbar hinter dem
Kopf eine Breite von 485 //, am Uebergang zum gegliederten Teil eine
solche von 288 /<, verjQngt sich somit nach hinten. Die ann&hernd gleich-
breiten Dorsal- und VcntralkanQle haben einen Durchmesser bis zu
50 ft. Der Dorsalkanal liegt deutlich dorsal und medial vom Ventral-
kanal. Unmittelbar hinter der erw&hnten EinschnQrung beginnt die
Oliederung, anfangs durch eine feine Querstreifung angedeutet, bald
ganz deutlich; die Kette gewinnt jetzt sehr rasch an Breite. Die ersten
Spuren der Genitalanlagen sind bereits 9 mm hinter dem Kopf jeder-
seits wahrzunehmen.

1 cm von Kopf ist das Segment 1220 ft breit, bis 40 ft lang. Die
Gliederung ist bereits sehr scharf durchgefQhrt. Die Genitalanlagen
sind deutlich in Form von dichten, langlichen Klfimpchen; sie sind
40—50 ft lang, 25—30 ft breit und medial von den Exkretionsgef&fien
gelegen; mit der LUngsachse stehen sie senkrecht auf die Gefaile. Der
Ventralkanal ist bereit§ 60 ft breit. 3 cm vom Kopf ist die Proglottidis
3 min breit, 240 ft lang. Die Segmente sind am hinteren Ende breiter
als am vorderen und haben somit die Gestalt eines Trapezes. Der
hintere Rand einer Proglottis ist Qber den vorderen Rand der folgenden
Proglottis glockig hinubergestulpt und bildet einen Randsaum, ein Ve¬
lum, die Glieder sind deshalb im Sinne Pintners(ll) als „craspedot“
zu bezeicbnen.

5 cm vom Kopf ist das Segment 4 mm breit, 395 ft lang; die
aneinandcrstoEenden Render der einzelnen Proglottiden zeigen das be-
schriebene Verhalten noch deutlicher. Dio Segmente sind mehr recht¬
eckig, nicht mehr so ausgesprochen trapezfOrmig. Die Genitalanlagen
haben etwa die Gestalt eines quergestellten Rhomboids, das etwas
schief von hinten medial nach vorne, lateral zieht und 100 — 180 /i lang,
30—40 ft breit ist; von der lateralen Ecke zieht bereits ein verdichteter,
aber weiter noch nicht ditferenzierter Gewebsstrang zum Seitenrand
fgemeinsame Anlage der Vagina und des Vas def.), der Ventralkanal ist
bereits 80 ft breit.

10 cm vora Kopf (Fig. 4) ist die Proglottis 5 mm X 512 ft. Linien-
formige Interproglottidendriisen sind bereits sehr deutlich in der Breite
von 600 —650 ft nachzuweisen. Der hintere Rand eines Segments ist
etwas wellenfSrmig, desgleichen der Ventralkanal, der 150 ft breit ist;
der Dorsalkanal millt noch zirka 40 ft. Die Genitalanlagen haben eine
ausgesprochen pistolenformige Gestalt, man kann an ihnen bereits eine
deutliche Differenzierung wahrnehmen. Der Lauf der Pistole (Anlage
von Vagina Vas def.) erreicht den Seitenrand in der vorderen Halite
des Segmentes und hat den Rand bereits dorsal vom Dorsalkanal durch-
brochen. In den Seitenfeldern sind die ersten Anlagen der Hoden
als kleiuste KlQmpchen schon zu erkennen. 15 cm vom Kopf wird das

Ema AM. Orig. Bd. 87 . llefl 5. 24

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370

Centralbl. f. fiakt. etc. 1. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 5.

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Glied 5 1 /* mm X 600—640 (x. Die Interproglottidendrfisen sind bereits
sehr deutlich ausgeprfigt, desgleichen die Hoden mit eioem Durchmesser
von 9—12 (.i jederseits in einem rechtwinkligen Dreieck angeordnet,
eine Kathete parallel zum Hinterrand der Proglottis, die andere *
parallel zum Seitenrande und die Hypotenuse die Proglottis schief von
hinten medial nach vorne, lateral kreuzend; zwischen diesen beiden i
Dreiecken bleibt ein zirka 1350—1450 (x breites Mittelfeld frei von *
Hoden. Lateral vom Ventralkanal sind keine Testikeln anzutreffen.
Man kann an den Genitalorganen bereits deutlicbe Ovarien, Dotter- and i
Scbalendrttsen, Vagina ond Vas def. unterscbeiden. 30 cm vom Kopf
wird das Glied 7 mm X 80Q und au6gesprochen rechteckig. Die i
Interproglottidendrfisen kann man sebr schfin beobachten. Die Geschlechts- |
reife ist fast erreicbt. Die Genitalien sind vollstfindig differenziert, das
kreisrunde Ovarium setzt sicb aus parallel nebeneinanderliegenden R5hr-
chen zusammen und schlieBt die traubenartigen, kugeligen Dotter-
drfisen teiiweise ein; die wenigen deutlichen Schalendrflsen werden vom
Ovarium und den Dotterdrfisen rings umgeben, ein Receptaculum seminis
ist deutlich, der Dorsalkanal bereits obliteriert. Die Genitalkan&le ziehen .
dorsal vom Ventralkanal (bis 200 fx breit). Die Vagina liegt dorsal oder ,
ventral vom Cirrusbeutel; ich habe sie auch teiiweise vor und fainter :
ihm beobachtet. W&hrend im vorderen Teil der Kette der Genitalporns \
mebr in der vorderen H&lfte des Segmentes liegt, rfickt er jetzt mehr j
gegen die Mitte, ist aber immer noch dem vorderen Rande genfihert:
er ragt zapfenartig fiber den Seitenrand vor und ist durch eine ring- l
ffirmige Einsenkung scharf abgesetzt; er ist 288 /x breit, 45 /u Iang. ’
Der Cirrusbeutel ist von birnformiger Gestalt, 200 X 80 //. Ein etwi
800 ju breites Mittelfeld ist vom Hoden vollst&ndig frei. Die Hoden
messen bis zu 75, die Ovarien baben einen Durchmesser von 400,
die Dotterdrfisen von 240 fx\ Interprdr. sind in einer Breite von
900—1000 |U angeordnet.

45 cm vom Kopf (Fig. 5) ist das Segment 8 mm X 900 /<. Der
Beginn der Gescblechtsreife ist schon etwas fiberschritten. Interpro-
glottidendrfisen sind nicht mehr so deutlich wahrzunehmen. Der Ventral-
kanal erreicht die kolossale Breite von 320 /a. Die rObrenffirmige Zo-
sammensetzung der Ovarien ist deutlich; der Uterus beginnt sicb zu ent*
wickeln und reicbt lateral auch fiber den Ventralkanal hinaus. 60 nun j
vom Kopf ist ein Segment 9 mm X 1466 /w. Der Uterus ist mit Eiern ■
geffillt, Hoden, Ovarium, Dotter- und Schalendrfisen sind fast vollst&ndig
rfickgebildet; Receptac., Vag., Vas def., Cirrusbeutel und Cirrus sind
noch deutlich vorhanden. Der Genitalporus tritt nicht mehr so scbarf
hervor. Der Ventralkanal ist nur mehr ca. 240 n breit; die Interpr.
sind noch deutlich. 80 cm vom Kopf ist das Glied 9‘/ 2 mm X 1890 «-
Es ist nur mehr der mit Eiern gefiillte Uterus, Receptac., Vag., Vas def..
Cirrusbeutel und der noch ausgestfilpte Cirrus nachzuweisen. Der Cirrus¬
beutel uberragt bedeutend weniger den Seitenrand, der nunmehr bogen-
ffirmig gestaltet ist. Interpr. bereits sehr undeutlich.

100 cm vom Kopf ist die Proglottis 8 mm breit, bis zu 1980 fi
lang und prall mit Eiern gefiillt, Interpr. nicht mehr nachzuweisen, der
Ventralkanal nur mehr 180 ju breit; 119 cm vom Kopf hat man 8 mm
Breite und fiber 2 mm Laoge. Der mit Eiern vollgepfropfte Uterus
nimmt das ganze Segment ein; auBerdem ist nur noch Receptac., Vag.,
Vas def., der Cirrusbeutel und der noch immer etwas ausgestfilpte Cirrus
nachzuweisen; der Genitalporus ist bedeutend unansehnlicher. Die beiden

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£Blei, Drei neue Schafzestoden.

371

letzten Proglottiden sind hantelformig und kiirzer; das letzte Segment
bat in der Mitte eine Lange von 1040 ft, zu beiden Seiten 1600 ft\ aus
allem zn schlieBen, dUrften zwischen der vorhaudenen letzten und der
bereits abgestoBenen Endproglottis nur wenige Segments gewesen sein.
Der Ventralkanal hat noch eine Breite von 150—180 ft.

Wahrend die Durchsichtigkeit mindestens der von M. expansa
gleichkommt [s. Neumann (8)J, ahneln die GrOBenverbaitnisse der M.
planissima, bleiben jedoch in den BreitenmaBen hinter ibr alsbald
zuruck, ein Hauptunterschied der vorliegenden Art von planissima;
denn die neue Art erreicht 60 cm hinter dem Scolex mit 9 mm die grdBte
Breite; weiter hinten verliert sie wieder etwas an Breite, wahrend bei
M. planissima die Breite der Kette kontinuierlich zuuimmt und die
reifen Segmente bis zu 26 mm breit sind. Die langste gefunden Kette
mit 119 cm ist nicht vollstandig, die voile Lange der neuen Spezies
dQrfte 120—150 cm betragen. Die einzelnen Segmente sind anfangs sehr
kurz, gewinnen jedoch bis zu der drittletzten Proglottis konstant an Lange,
so dafi die genannte Proglottis mit 2023 ft das Maximum erreicht.

Die Exkretionskanale sind im Verlaufe des Halses annahernd gleich
breit und messen hier ca. 50 ft. Nach hinten verliert der Dorsalkanal
an Breite, wahrend der Ventralkanal kolossal gewinnt und 45 cm hinter
dem Kopf mit einer Breite von 320 ft das Maximum erreicht; yon hier
an verliert er wieder und miBt 119 cm vom Kopf entfernt nur mehr
150—180 ft. Der Dorsalkanal ist 30 cm vom Kopf entfernt nicht mehr
nachzuweisen; er liegt deutlich dorsal und etwas medial vom Ventral¬
kanal.

Die deutlichst ausgesprochene Anordnung der Hoden
in zwei Dreiecken mit einem zwischen beiden liegenden,
sehr breiten, vollstandig hodenfreien Mittelfeld wurde
bisher bei keiner Moniezia beschrieben. Wir linden zwar bei
M. trigonophora ebenfalls eine Anordnung der Hoden in zwei Drei¬
ecken, jedoch verschmelzen bier die beiden Dreiecke meist vollstandig
miteinander, und es ist kein, zumindest aber kein so breites hodenfreies
Mittelfeld vorhanden. Von M. planissima berichteu S.tiles und
Hassail (16), daB die Hoden anfangs in Dreiecken angeordnet, weiter
hinten aber im Mittelfeld meist ebenso zahlreich wie in den beiden
Seitenfeldern sind. Sauter (15) verneint diese Anordnung der Hoden
im Dreiecke. Soweit meine diesbeztlglichen Untersuchungen reichen,
schliefie ich mich der Meinung von Stiles und Has sail an, muB je¬
doch sagen, daB die Trennung der beiden Dreiecke keine so scbarfe wie
bei meiner Art, mindestens aber kein so ausgesprochen breites, hoden¬
freies Mittelfeld vorhanden ist. Im Qbrigen ist ja bei planissima die
Anordnung der Hoden in zwei Dreiecken nur in der vordersten Partie
der Kette zu beobachten, weiter hinten sind sie in der ganzen Proglottis
ziemlich gleichmaBig verteilt, wAhrend bei meiner neuen Art
durchweg ein 0,8—1,5 mm breites hodenfreies Mittelfeld
anzutreffen ist. Die neue Art ist somit betreffs Anordnung der
mAnnlichen Keimdrusen leicht vom M. planissima zu differenzieren;
eine Verwechslung mit M. trigonophora ist nebst anderen GrOnden
schon deshalb nicht moglicb, weil meine Spezies lineare Interproglottiden-
drflsen aufweist, somit der planissima-Gruppe zuzuweisen ist, im
Gegensatz zu trigonophora, die mit ihrer Anordnung der Driisen
um Blinds&cke der ex pa n sa-Gruppe zugehort. Die Testikeln erreichen
einen Duichmesser von 75 ft. Das Vas def. ist in der Gegend des Ova-

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;}7 2 OentralbL f. Baku etc. I. Abu Originate. Bd. 87. Heft 5.*

riums kuBerst geschlfingelt, vor dem Eintritt in den Cirrnsbeutel fast
garade verlaufend; im Cirrusbeutel selbst ist es ebenfalls nor wenig ge-
wunden und stfilpt sicb schlieBlich aus ihm bei den geschlechtsreifen
Proglottiden ais 55 langer und 32 /< breiter Cirrus aus.

Die weiblichen Genitalien sind wie bei alien Moniezien gebant, nnr
sind sie in ihren Formen nicbt ganz konstant. Das Ovarium ist ge-
wdhnlich rund, kann jedocb bald mehr in die L&nge, bald mehr in die
.Breite gezogen sein, so daB es ein elliptisches Ausseben erhalt. Das
Receptaculum seminis ist eifSrmig, fast kugelig Oder birnfdrmig, der
Dotterstock von mehr Oder weniger secbseckiger Gestalt und z. T. vom
Ovarium eingeschiossen; die SchalendrQse schliefit sich direkt an die
DotterdrQsen an und kommt vollst&ndig zwischen sie und das Ovarium
zu liegen. Sie ist etwas unregelmSBig, nicht so kugelig und zentral vie
bei M. planissima. Der Uterus begiDnt sich 45 cm hiuter dem Kopf
zu entwickelh; je weiter er in seiner Entwicklung vorschreitet, urn so
mehr bilden sich die anderen Organe zurOck. Er stellt ein stark ver-
Ssteltes, von Eiern vollgepfropftes Netzwerk dar. Die Eier zeigen den
fflr das Genus typischen Bau und erreichen einen Durchmesser von
64 /<. Der Nerv liegt jederseits unmittelbar auBerhalb des Ventralkanales.
Die L&ngsmuskulatur ist zu Buodetn gruppiert, was an der haufenweiseo
Anordnung der Muskelquerschnitte deutlich zu sehen ist (Fig. 4). Kalk-
korperchen sind ziemlich h&ufig, besonders im Mittelfeld. Sie sind von
rundlicher Form, klein und gehen kaum liber die GroBe von 8 /< hinaus.

In dcr Mitte eines jeden Segmentes in der Entfernung von 10-80 cm
vom Kopf bemerken wir am hinteren Rand lineare Interprogtottideu-
drflsen (Fig. 5), die sich 5—10 cm hinter dem Kopf zu eotwickeln be-
ginnen. Am schonsten sind sie zu beobachten in den Proglottiden, die
20—40 cm vom Kopf entfernt 1 sind. Mit fortschreitender Entwicklung
des Uterus werden sie immer undeutlicher und sind 100 cm hinter dem
Kopf nicht mehr nachzuweisen. Stiles und Hassall (16) teilen die
beim Schaf vorkommenden Vertreter des Genus Moniezia nach der
Anordnung der InterproglottidendrUsen in 3 Gruppen: In die planis-
sima-Gruppe (planissima, Benedeni, Neumanni) mit linear
angeordnetcn Driisen, in die expansa-Gruppe (expansa; trigono-
phora) mit Gruppierung der genannten Driisen urn Blindsacke, und
schlieBlich in die denticulata-Gruppe (denticulata, alba) ohne
DrDsen. Sauter (15) hat durch die Neubeschreibung seiner beim Rind
gefundenen Spezies M. conjungens gezeigt, daB die Differenziernng
in diese 3 Gruppen nicht so scharf durchgefOhrt werden kann, sonders
daB es Ueberg&nge gibt, indem bei conjungens in den jQngera
Segmenten linear, in den Slteren, mit Eiern vSllig angefQllten Glieden
um Blindsacke angeordnete Driisen anzutreffen sind. Trotzdem kann
naturlich der bisherige BestimmungsschlQssel filr das Genus Moniezia-
der auf dem Vorhandensein bzw. Fehlen, sowie der Gestalt der Driisen
basiert, weiterhin Geltung behalten.

Ich will nun alle mit linear angeordneten InterproglottidendrUsen
bisher bekannten Arten in ihren wichtigsten, von meiner Spezies ab-
weichenden Merkmalen kurz skizzieren. Zunachst die 3 Vertreter der
planissima-Gruppe: planissima: Langel—4 m; 14 cm hinter dem
Scolex bereits 8 mm breit; die reifen Segmente bis zu 26 mm breit.
Keine durchgehendo Anordnung der Ilodcn in zwei Dreiecke, kein boden-
freies Mittelfeld, Testikeln im Mittelfeld meist ebenso zahireich wie in
den Seitenfeldern. Driisen 1,9 mm breit. Benedeni: L§nge bis liber

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Blei, Drei neue Bchatzeetoden.

373

4m; die reifen Glieder 10—12 mm breit, 3 mm lang, 2 mm dick. Hoden
nicht bekannt. Scolcx 1 mm breit Oder darflber; Hals 2—2,5 mm lang.
Drflsen undeutlich. Kette sehr undnrchsichtig. Neumanni: Kopf and
Hals haben dieselben MaBe wie Benedeni; Hals fadenfflrmig, Hoden
in der ganzen Proglottis anzutreffen. — Die Unterscbiede dieser drei
Arten von der oben beschriebenen Bind so auifallend, daB eine Identi-
fizierung wohl ausgeschlossen ist. 1

Non wire der beiden folgenden, nur sehr mangelhaft beschriebenen
Arten zu gedenken, bei denen jedoch Angaben fiber Drflsen fiberhAnpt
feblen: nullicollis: LAnge der Kette 40 cm; reife Segmente 1 mm
lang. Der Kopf hat einen Durchmesser von 1,3 mm. Hals ist keiner
vorhanden. Vogti: die breitesten Segmente sind 2,5 mm breit and
5 mm lang. Auch hier ist eine Verwechslung mit meiner Art nicht
mfiglich.

Nun wfiren noch anzuschlieBen die von Sail ter (15) beim Rind ge-
fundenen 4 nenen Spezies, deren Beschreibung allerdings etwas zn
wfinschen fibriglABt: conjungens: reife Segmente 10 mm breit, 5 mm
lang (2:1). Drflsen anfangs linear, spAter in 3 BlindsAcke angeordnet.
latifrons: Kopf 1,9 mm breit; Segmente anffallend lang, Hals 1,5 mm
lang. Die ersten Spuren der Genitalanlagen sind 20 cm hinter dem
Kopf wahrzunehmen. crassicollis: LAnge der Kette 45 cm. Kopf
1,26 mm breit, Hals 3 mm lang. Reife Segmente 10 mm breit, 3 mm
lang, Interproglottidendrflsen undeutlich linienfftrmig. parva: LAnge
der Kette 25— 30 cm, Hals 2,5 mm lang; reife Segmente 2,75 mm breit,
1,25 mm lang. Auch hier ist nicht im entferntesten eine Verwechslung
meiner Spezies mit einer der genannten moglich.

Da somit alle in Frage kommenden Arten ausgeschlossen sind, so
ist es gerechtfertigt, die gefundene als eine neue, bisher nicht be-
schriebene auzusprechen, fflr die ich den Namen Moniezia pellucida
vorschlage.

Speziesdiagnose: Kette fiber 119 cm lang, dflnn, durchsichtig,
in der vorderen Hfilfte nahezu wasserhell, in der hinteren HAIfte gelb
pnnktiert, so daB die Segmente in ihrer Gesamtheit einen starken Stich
ins Gelbliche haben. Die Strobila nimmt anfangs rasch an Breite zu;
reife Segmente 2 mm lang, 8-9 mm breit. Kopf klein, verjflngt sich
nach hinten; von vorn betrachtet rechteckig bis quadratisch; die Lappung
tnebr Oder weniger deutlich ausgeprSgt, 500—800 n breit, 280—350 u
lang. Die 4 SaugnApfe diagonal angeordnet, kugelfflrmig, nach vorn
und answArts gerichtet, mit birnfflrmiger Ordnung, bis zu 208 y im
Durchmesser. Haken fehlen. Der Hals verjflngt sich nach hinten, so
daB Kopf und Hals, die allmAhlich ineinander flbergehen, zusammen-
genommen, kegelfSrmig erscheinen; er ist 150 - 500 /i breit, 7(X)—1000 /<
lang; vorn segmentierten Teil der Kette durch eine deutliche Ein-
schnflrung srharf getrennt. Die ersten Spuren der Genitalanlagen 9 mm
hinter dem Kopf bereits deutlich. Genitalien doppelt. Die Hoden be-
ginnen in einer Entfernung von 10 cm vorn Kopf; sie sind von ihrer
Entwicklung bis zu ihrer vollstAndigen Rfickbildung
scharf in zwei Dreiecken angeordnet; zwisch-en den beiden
Dreiecken bleibt durchgehend ein 0,8—1,5 mm breites
voll stfindig hodenfreies Mittelfeld. Interproglottidendrflsen
deutlich linear angeordnet. bis 800 // breit, bilden sich mit dem sich
entwickelnden Uterus zurflck. Entwicklung unbekannt. Dflnndarm des
Schafes; Ungarn, Ukraine.

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374

Centr&lbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

Avitellina laciniosa nov. spez. (Fig. 6—7). DQnndarm, Schaf,
Ukraine, Ungarn.

Am 12. Febr. 1918 kam ein ans Ungarn bzw. der Ukraine stammendes
Schaf an der Hochschule znr Sektion, das am vorhergehenden Tage mit
der klinischen Diagnose: „Leberegel, Lungenwflrmer und Kachexie“ ver-
endet war. Bei ErOffnung des Darjnes wurden im vorderen Drittel ;
Bandwflrmer gefunden. Leider stellte sich bald heraus, daB kein ein-
ziges Exemplar vollst&ndig war, sondern nur einzeine Kettenstflcke vor-
lagen, darunter ein 3 cm langes mit Kopf und ein 21 cm langes mit
Endglied; das l&ngste Stflck miflt 46 cm. Schon die makroskopische
Betracbtung lieB die Vermutung aufkommen, daB eine Stilesia, bzw.
Avitellina vorliege. Die Anatomie der Genitalorgane, die Hoden,
der elliptische, quergestellte Uterus sprachen ganz Iflr Avitellina.
Trotz des mazerierten Materiales konnte ich in bezug auf das Paruterin-
organ eine bedeutende Abweichung gegeniiber dem bisher bekannten
Vertreter dieses Genus, der Avitellina centripunctata, feststellen.

AeuBerer Habitus: Der Kflrper ist ein sehr dQnnes, anscheinend '
ganzrandiges, 1—2 mm breites, gallertartiges Band. In die Augen
springend sind im durcbfallenden Licht 2 zu den Seitenr&ndern parallel
verlaufende, besonders durchsichtige Streifen, die ventralen Exkretions-
organe. Das Feld zwischen den belden Kan&len ist mehr Oder weniger
undurchsichtig. Bei sebr genauer Betrachtung kann man auch schon .
makroskopisch eine Gliederung in sehr kurze, aber relativ sehr breite
Proglottiden nachweisen. ;

Anatomie. Der Kopf (Fig. 6) ist vom Qbrigen Kflrper deutlieh
abgesetzt, da er ziemlich unvermittelt in ihn flbergeht. Er ist mehr
breit als lang (grofite Breite 832, L&nge 576 ju). Hiermit zeigt er ganz
betr&chtliche Gr6Benunterschiede v gegeniiber dem Kopf von Avitellina
centripunctata [Gough (4)]. Die 4 Saugn&pfe sind diagonal an-
geordnet und nach vorn und auswflrts gerichtet; ihr Querdurchmesser
betrflgt 404, ihre Hflhe 320 //. Die Oeffnungen der Saugn&pfe sind
kreisformig bis elliptisch, ebenfalls diagonal nach vorn und auBen ge¬
richtet, keine Haken. Unmittelbar hinter dem Kopf konnte ich eine
Breite von 500 ,u, 3 cm hinter dem Kopf eine solche von 280 /t messen.
Auffallend ist hier eine Dunkelscbattierung im Mittelfeld, die sich anch
weiter rttckwfirts verfolgen lflBt. Die beiden Exkretionskanale sind bier
noch annahernd gleicht breit. Gliederung noch nicht nachweisbar. Die
grQBte Breite der Kette, die flberhaupt gemessen wurde, betr§gt 2 mm
bei geschlechtsreifen Segmenten. Bei einem Stflck von der Breite 788 p
ist eine undeutliche Gliederung und eine schmale Schattierung in der
Mitte vorhanden. Die beiden Exkretionskanale sind annahernd gleich
(32 //). Genitalanlagen deutlich. Ein Stuck der Strobila, 1041 // breit,
zeigt die Proglottis 36 lang; das Mittelfeld ist vom quergestellten,
elliptischen Uterus eingenommen (260 n breit, 48 (i lang). Samtliche
Teile der Genitalien entwickelt; der Cirrnsbeutel 12 (x lang, 32—48 p
breit, von walzenformiger bis hantelformigen Gestalt; nur der Ventral-
kanai (52 ft) nachweisbar; er halbiert ungefahr den Raum zwischen
Uterus und Seitenwand. Cirrus ausgestiilpt, 42 /i lang.

Bei 2 mm breiten Proglottiden ist voile Geschlechtsreife eingetreten.
Proglottiden, die 20 cm von der Endproglottidis entfernt sind, messen
977 64 u. Der Uterus bereits riickgebildet, an dessen Stelle tritt non

ein Organ, das sich von dem bei A. centripunctata vorkommenden
Paruterinorgan durch seine Gestalt weseutlich unterscheidet (Fig. 7).

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Blei, Dret neue Schafzeetoden.

375

Es ist breiter als lang, ebenso quergestellt wie der Uterus und gegen
das hintere Ende zu auch schon makroskopisch deutlich erkennbar; im
frischen Zustande wie im ungeffirbten Totopraparate gelbbrfiunlich, im
Gegensatz zn dem gewohnlich kugeligeu Paruterinorgan bei A. centri-
pnnctata, das mebr weiB erscheint. Die Gestalt ist sebr unregelmfiBig
and wechselnd; der hintere Rand gerade oder konkav, die vordere und
seitliche Begrenzung sehr unregelmfiBig, mit zablreichen Ein- und Aus-
buehtungen. Eine genaue histologische Untersuchung war nicht mdglich.
Es erreicbt eine Breite bis zu
240, eine Lfinge bis zu 112 /u.

Hoden in einem Abstand von
20 cm von der End proglottis
bereits in Rbckbildung. Das
Ovarium rdckt nfiher an den
Ventralkanal heran, ist von
mebr eif&rmiger Gestalt und
steht mit der Lfingsachse senk-
recht auf den Exkretionskanal;
es mifit 60 y. im Lfings-, 4 im
Querdurchmesser. Ventralka¬
nal (67 fi) von zahlreichen Nie-
derschlfigen ausgefflllt. Der ausgestiilpte Cirrus
78 ju lang, 12 /< breit.

Segments 10 cm vor der Endproglottis 950 X
68 ju. Ovarien nfibern sich noch mehr dem Ven¬
tralkanal und erreichen einen Durchmesser von
64—80 ft. Hoden noch deutlich. Segmente 2 cm
vor der Endproglottis: Paruterinorgan und Ovarien
sehr deutlich, Hoden noch nachweisbar, Cirrus noch
ausgestfllpt, Cirrusbeutel ebenfalls noch deutlich.

Segmente 1 cm vor der Endproglottis: Paruterin¬
organ und Ovarien in RGckbildung. Segmente 3 mm
vor der Endproglottis 800 X 46 j«. Hier ver-
schwinden (Fig. 7) fast plbtzlich das Paruterinorgan
and die allmfihlich kleiner gewordenen Ovarien.

Das letzte Ovarium miBt 95 ^ im Durchmesser.

Mit dem plotzlichen Verschwinden des Paruterin-
organs und der Ovarien treten unmittelbar daran •
anschlieBend etwas unregelmfiBige, kantige oder
rondliche, verschieden groBe Gebilde auf, sowohl
im Mittelfeld als auch lateral von den Exkretions-
kanfilen; teilweise zu Haufen gruppiert; sie setzen sich bis in die End¬
proglottis fort und messen 32—72 n im Durchmesser. Ihre Bedeutung
war wegen der schlechten Erhaltung des Materials nicht festzustellen.

Noch mehr gegen das Ende sind die einzelnen Glieder nur mehr
sehr schwer voneinander zu unterscheiden. Die beiden Rfinder werden
unregelmfiBig wellenfdrmig begrenzt, um schlieBlich in die Endproglottis
uberzugehen.

Die Anatomie der vorliegenden Individuen deckt sich mit Ausnahme
der auffallenden GroBenunterschiede des Kopfes, der abweichenden Ge¬
stalt des Paruterinorgans, der Anwesenheit zahlreicher Kalkkorperchen,
der abweichenden Breiten und Dickenverhfiltnisse der Strobila und der
eigentftmlichen Gebilde in der Strecke 3 mm vor der Endproglottis mit

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376

Centr&lbl. f. Bokt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 5.

der von A. centripunctata. Die einzelnen Segmente sind sebr kurz.
verh&ltnism&Big breit, sehr dflnn und durchsicbtig. Bei den gescblecbts-
reifen Proglottiden, die mit 2 mm die grbBte Breite erreichen, ist der
Seitenrand, an dem sich der Genitalporns befindet, konvex gewdlbt and
aufierdem etwas breiter, der andere Rand ist ganz flach. Proglottides
vor und nach der Geschlechtsreife zeigen dieses Verhalten wesiger
deutlicb. Die einzelnen Segmente folgen direkt aufeinander derart, da£
der hintere Rand der vorbergehenden Proglottis den vorderen Rand der
nachfolgenden nicht Gberragt. Der Ventralkanal ist sebr stark ent-
wickelt and erreicht eine Breite bis zu 90 ft. Die Genitalorgane sind
einfacb. Die Genitalporen sind unregelmSBig alternierend, der Porus
unscbeinbar. Die Hoden sind in 4 Reiben angeordnet, und zwar so, daB
jederseits von den beiden Ventralkan&len eine Reibe zu liegen koromt. Die
beiden lateralen vom Ventralkanal gelegenen Reiben sind scbmSler als die
medialen. Die drsteren zfihlen 2-3 Hoden, die letzteren 2—5; niemals
sind im Mittelfeld Testikel anzutreffen; sie erreichen einen Durcbmesser
bis zu 55 ft. Das Vas def. bildet in seinem Verlauf zablreiche Schlingen,
besonders vor dem Eintritt in den Cirrusbeutel und in diesem selbst;
es bildet sich aus den Vasa eff. derjenigen Seite, die vom Genitalporns
frei ist, ziebt quer tiber das Mittelfeld, nimmt die Vasa eff. der anderen
Seite auf, erweitert sich zur Vesicula und mflndet endlich in den Cirrns*
beutel. Der Cirrus stQlpt sich in der Mitte des Seitenrandes vor
(120 X 12 ft) und ist nocb 2 mm vor der Endproglottis nacbweisbar.
Der Cirrusbeutel bat etwa eine iSngliche, mebr zylindrische Gestalt
(120—160 ft lang, 35—40 ft breit). Die Lage der Vagina zum Cirrus-
beutel wecbselt; sie ist weniger geschlBngelt als das Vas def., die Ovaries
sind von rundlicher bis elliptischer Gestalt, rGcken gegen das hintere
Ende zu immer mehr gegen den Ventralkanal heran (70 ft Durcbmesser
und darQber). Der Uterus ist ebenfalls einfach und zeigt die typische
Form von A. centripunctata: elliptisch und quergestellt; er ist
260 ft breit, bis 50 ft lang. An Stelle des Uterus tritt weiter hiotea
das oben besebriebene Paruterinorgan. Dotterstock und Schalendrflseu
feblen. Jederseits, lateral vom Ventralkanal, zieht ein Nerv, der die
GuBere Hodenreihe nach der Seite zti abgrenzt.

Kalkkdrperchen babe ich in auBerordentlich groBer Zahl im ganzen
Kbrper zerstreut vorgefunden; im Gegensatz zu den Untersuchungen
von Gough (4), der sie bei centripunctata als sehr selten be-
zeichnet; sie sind eft direkt zu Ilaufen gruppiert. Man kann eine Unz&h)
kleinster, lichtbrechender Korperchen von 2—4 ft bis zu solchen von
15 ft auffinden. Ihr Formenreichtum ist sehr groB. Weiter sieht man
nnregelm&Big gestaltete groBe Gebilde, die vielleicht fettiger Natur sind.

Systematische Stellung. Fuhrmann (2) faBte das Genus
Stile si a mit dem Genus Thysanosoma in eine Unterfamilie zu-
sammen, die er Thysanosominae nannte. Gough (4) trennte, nacb-
dem die Anatomie von Stilesia avitellina genauer bekannt geworden
war, diese beiden Genera von dem Genus Thysanosoma und ver-
einigte sie zu einer neuen Unterfamilie, der er den Namen Avitelli-
ninae gab.

Die von mir beschriebenen Individuen zeigen folgende Abweichungen
von der von Gough gegebenen Genus und Speziesdiagnose: Das
Paruterinorgan hat eine wesentlich verschiedene Gestalt. Kalkkorperchen
sind sehr zahlreich, oft zu ganzen Ilaufen gruppiert. Die grbBte Breite
wird von den geschlechtsreifen Proglottiden erreicht und nicht, wie bei

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Blei, Drei none Schafzestoden.

377

A. centripunctata fast unmittelbar hinter dem Scolex. Der End-
abschnitt mit der Endproglottis ist ebenso flach und durchsichtig wie
alle flbrigen Teile der Kette und nicht nahezu zylindrisch. Die GrOfie
des Kopfes bleibt bedeutend hinter der von centripunctata zurflck.
SchlieBlich sind bei centripunctata, die bei der vorliegenden SpeziOs
von mir beobachteten Gebilde im Endabschnitt der Kette nicht be-
schrieben worden.

Aus den angeffihrten Griinden, insbesonders infolge der abweichenden
Gestalt des Paruterinorgans, glaube ich berechtigt zu sein, das gefundene
Individuum als eine neue Spezies des Genus Avitellina ansprechen
zu durfen. Ich schlage fflr diese neue Art den Namen „laciniosa tt

vor (laciniosus = in Zipfel auslaufend) nach der oben beschriebenen
Eigentfimlichkeit des Paruterinorgans.

Speziesdiagnos e: Scolex mit 4 Saugn&pfen, ohne Haken. Strobila
sehr dflnn, schmal und durchsichtig. Segmente bedeutend breiter als
Iang. Genitalporen unregelmABig alternierend. 4 Reihen von Hoden,
jederseits von den beiden VentralkanAlen eineReihe; niemals Hoden itn
Mittelfeld. Ovarien einfach und treten gegen hinten immer mehr an den
Ventralkanal heran; keine Dotterdrflsen; keine Schalendrflsen, Uterus
einfach, quergestellt und elliptisch. Paruterinorgan ebenfalls quergestellt,
breiter als lang, von unregeimABiger Gestalt und brauner Farbe. Dflnn-
darm des Schafes, Ungarn, Ukraine. Entwicklung unbekannt.

Hexastichorchis Pintneri nov. gen. nov. spec. (Fig. 8—17).
DQnndarm, Schaf, Ungarn, Ukraine.

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378

CentralbL f. Baku etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 6.

Am 29. Jan. 1919 fand ich im St. Marxer Schlachthans bei Erdff-
nang des DQnndarmes eines aus Ungaro, bzw. der Ukraine stammenden
Schafes die oben genannte neue Art. Schon mit unbewaffnetem Aoge
konnte ich groBe Achnlichkeit mit A vitellina centripunctata and
laciniosa feststellen, aber gleichzeitig, daB das vorbandene Exemplar
betr&chtlich dicker nnd weniger dorcbsichtig als diese beiden Formen
war. Weitere Abweichongen, besonders die anffallende Anordnnng der
Hoden, lassen es nicbt einmal in das Genas Avitellinae einreihen.

Fig. 12.

sondern zwingen mich, ein neues Genas za schaffen und es unter gleich-
zeitiger Erweiterung der von Goagh (4) gegebenen Diagnose fOr die
Unterfamilie Avitellininae dieser Unterfamilie zuzuweisen.

AeuBerer Habitus. Der Kdrper des Parasiten ist ein halbdorch-
sicbtiges, auf beiden Seiten anschcinend ganzrandiges, 1—2 mm breites
and 95 cm langes Band; die Kette ist unvollstfindig. Auffallend sind die
zwei zu den beiden Seitenr&ndern parallel verlaufenden wellenfOrmigec
VentralkanSle, die ira Querschnitt sich bereits dem unbewaffneten Auge
als kreisfdrmige Lumina kundtun. Das Feld zwischen den beiden
Kanalen ist anfangs. gleicb den Seitenfeldern, balb durchsichtig, wird

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Blei, Drei neue Schafzestoden.

379

jedoch alsbald infolge des sich entwickelnden Uterus mit der zunehmenden
Dicke der Kette iramer mehr und mehr uudurchsichtig, bis schlieBlich
im Mittcifeld nur mehr der weifiliche, quergestellte Uterus und im Ab-
stand von 85 cm vom Scolex das Paruterinorgan zu seben ist. Am Kopf
kann man bereits makroskopisch die 4 Saugnfipfe deutlich voneinander
unterscbeiden, ebenso eine Gliederung.

Anatomie. Der Kopf (Fig. 8) ist vom iibrigen Korper scharf ab-
gegrenzt und von vorn betrachtet quadratisch. Eine Seite mifit 1 mm,
die Lange erreicht 720 /t; er ist somit breiter als lang. Die angefQhrten
MaBe zeigen einen betrfichtlichen Unterscbied gegeniiber den beiden
Avit.-Arten. Die Vorderflache ist schwacb, die Seitenflachen sind
starker konvex gewolbt. Haken sind nicbt vorhanden. Die Saugnapfe
sind diagonal angeordnet und nur nach auBen gerichtet, im Gegensatze
zu Avit. centrip., bei der Gough die Saugnapfe nach vorn und
auswarts, Railliet und Tempore nur nach vorwArts gerichtet fanden;
sie unterscheiden sich auch von dfenen der Avit. laciniosa, wo sie
nach vorn und auswarts gestellt sind. Sie sind eifdrmig, nfihern sich
aber schon sehr der Gestalt einer Kugel (480 X 400 /*), und sind im
zarten Gewebe des Kopfes eingeschlossen, jeder einzelne von einer, der
Gestalt des Saugnapfes entsprechenden, eiformigen, hinten mehr eckigen
Bildung umgeben, die sich, den Saugnapf hGllenartig umschliefiend, an
(lessen vorderem Pole allmahlich verliert. Die auBere Seite des Gebildes
geht nach hinten in die entsprechende Kante der Strobila ilber, die
innere vereinigt sich mit der des benachbarten Saugnapfes. Das beschriebene
Gebilde ist fur die neue Spezies typisch. Die Oeffnungen der Saug¬
napfe sind groB, langlich, haben ausgeschweifte Rander und sind eben-
falls direkt diagonal nach auswarts gerichtet; ihr grSBter Durchmesser
betrfigt 458 /u.

Unmittelbar hinter dem Kopf konnte ich eine Breite von 720 f.i,
eine Dicke von 590 f.t messen, also genau so breit, wie der Kopf lang
and nur etwas breiter als dick. Die Dicke nimmt rasch ab und betrfigt
1 cm hinter dem Kopf nur noch 45 /u; von hier ab wfichst sie wieder,
anfangs ziemlich rasch, spater allmahlich. Auffallend bei der vor-
liegenden Spezies und abweichend von Avit. centrip. und laciniosa
ist eine schon ausgcpragte und durchgreifende Scheingliederung (Fig. 8,
9. 10), die unmittelbar hinter dem Kopf beginnt und sich durch die
gauze Strobila fortsetzt, anfangs allein, weiter hinten neben der echten
Gliederung bestehend. Schon bald zu Beginn der Kette kann man
scharf abgesetzte Seitenflfichen wahrnehmen (Fig. 8, 10, 12) die immer
mehr an Breite zunehmen und dabei in der Mitte eine Einsenkung
zeigen, aus der sich der Cirrus herausstiilpt. Im iibrigen gehen die
beiden Seitenflachen weiter hinten mehr bogenformig ineinander iiber
iFig. 13). Die beiden Avitellininiae weisen dieses Verhalten nicht
auf. Eine bedeutende und fGr die neue Art charakteristische Abweichung
uegenGber samtlichen Avitellininae weisen die Exkretionskanfile auf
'Fig. 9—13). Sie sind anfangs annahernd gleich breit und messen beide
1 cm hinter dem Scolex 32 /<. Wir konnen bereits in dieser Entfernung
einen medialen, geschlfingelten, im Zickzack verlaufenden und einen
lateralen, geradlinigen Kanal jederseits unterscheiden. Wie die folgenden
Untersuchungen zeigen, stellt sich der medial gelegene geschlangelte
Kanal im Gegensatz zu alien Avitellininae als der sich nach hinten
kollosal verbreiternde Ventralkanal heraus; der lateral gelegene, gerad-
finige als der Dorsalkanal, der sich nach hinten nicht verbreitert, son-

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380

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 5.

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dern obliteriert. Der Dorsalkanal liegt also hier in typischer Weise
lateral vom Ventralkanal, w&hrend er bei alien Stilesia- und Avitel-
lina-Arten medial vom letzteren zu liegen kommt

1 cm vom Kopf ist die Kette 1185 i* breit, in der Mitte mit dnnkler,
etwa 50 fi breite Schattierung, LSngskanfile noch immer annihernd
gleich breit, der Ventralkanal verl&uft scharf im Zickzack. 3 cm vom
Kopf (Fig. 9) 1521 n breit. Der Ventralkanal mifit 35, der Dorsalkanal
30 (t. Die dunkle Schattierung in der Mitte ist deutlicher. Der Seiten-
rand weist infolge der Scbeingliederung keilformige Einschnitte a in, wo-
durch er in verscbieden lange Abschnitte zerlegt wird. 8 cm vom Kopf
1650 /t breit, Schattierung in der Mitte intensiver. Zu beiden Seiten
des V.-K., besonders aber an dessen medialer Seite bereits in geringer
Zahl die ersten Hoden, der V.-K. ttbertrifft den D.-K. ziemlich betrficht-
licb an Breite. 13 cm vom Kopf (Fig. 10) 1729 n breit. Die Schein-
gliederung ist sehr sch&n ausgeprfigt. Die Schattierung im Mittelfeld
ist keine einheitliche mehr, sondern hat sich in eine querstrichfdrmige
aufgelost und ist 160—180 n breit geworden. GrOBenunterschiede
zwischen den L&ngskan&len schon ganz auffallend, Hoden schon sehr
deutlich, in 4 bzw. 6 Reihen angeordnet, und zwar medial vom V.-K.
Hoden vereinzelt vorzufinden, so daB eigentlich eine 5. nnd 6. Reihe
von Hoden angelegt ist. 16 cm vom Kopf (Fig. 11) 1840 fj breit. Am
Rande sind die Ans&tze zu einer wirklichen Gliederung bereits deutlkh
vorhanden; ein Segment ist bis 44 ju lang. Die ersten Spuren de>
Cirrusbeutels sind strichformig angelegt und unregelm&Big alternierend
Die dunkle Schattierung in der Mitte der Kette ist geschwunden un«
wir haben ein helles 112 /n breites Mittelfeld vor uns, zu dessen beida
Seiten sich fast ebenso breite strichfdrmige Gebilde vorfinden, die weiter
hinten mehr oder weniger kugelig werden. Es sind dies erste Entwick-
lungsstufen der „Handgriffe der pistolenfdrmigen Genitalanlagen“ vos
Stiles u. Hassall (16). Sie sind unregelmBBig alternierend und
stehen mit dem sich entwickelnden Cirrusbeutel in Verbindung.

Wir sehen in dieser Hinsicht hier eine auffallende UebereinstiiD-
mung mit Avit. centripunctata. Daneben liegt jederseits ein etva
82 n breiter lichter Streifen, hierauf nach auBen zu die breite, mediate
Reihe der Hoden, dann der 80 /u breite Ventralkanal, schlieBlich eine
zweite Reihe von Hoden zwischen V.-K. und dem 23 /i breiten D.-K.
und noch vereinzelte Testikel lateral vom D.-K.

20 cm vom Kopf ist das Glied 1819 fi breit. In ihrer gesamten
Breite sind die einzelnen Glieder noch immer nicht voneinander at-
gesetzt, sondern nur am Rande. Der Schaft der Genitalanlagen hat sich
zweigeteilt; die beiden Str&nge stellen die ersten Entwicklungsstufen der
maunlichen und weiblichen Genitalkan&le vor. Vom medialen Pol de>
Handgriffes zieht ein dicker Gewebsstrang (Fig. 12) in entgegengesetzter
Richtung vom Schaft und verliert sich zwischen zwei benachbarten Hand-
griffen der gegeniiberliegenden Seite; zweifellos sind dies die ersten
Anlagen des sich entwickelnden Uterus (Ahnlich bei Stiles und Has¬
sall). 25 cm vom Kopf ist eine Proglottis 1602 fi breit. Es sind sehr
deutlich auf einer Seite 3, auf der anderen Seite 2 Reihen von Hoden
nachzuweisen. Der D.-K. ist auf jener Seite, wo bloB 2 Reihen von
Hoden vorhanden sind, bereits obliteriert, auf der anderen Seite, wo
3 Reihen sich befinden, ist er noch deutlich, das lateral vom Dorsal¬
kanal gelegene Feld hat sich auf Kosten des zwischen den beiden
Kanalen gelegenen Feldes verbreitert. Infolge der einseitigen Obfitera-

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BLei, Drei neue Schafzestoden.

381

tion des D.-K. ist nun eine deutliche Anordnung der Hoden in 5 Reihen
erlolgt; wir haben also bei der vorliegenden Spezies in der Tat 6
(Fig. 10, 11), auf eine kurze Strecke vor der Obliteration des zweiten
D.-K. 5 Reihen von Hoden (Fig. 12, 13). Es ist jederseits in jedem
Segment eine mediale, medial vom V.-K. gelegene breite Reihe mit
3—5 Hoden vorhanden, eipe laterale, zwischen D.-K. und dem Nerv ge¬
legene schmfilere Reihe mit 2—3 Hoden. und sehlieBlich eine mittlere,
zwischen den beiden Langskan&len gelegene schmale Zone mit einem,
selten zwei Hoden. Der Cirrusbeutel zeigt zwei bis drei kugelffirmige
Auftreibungen. Der Cirrus beginnt sich bereits auszustOlpen. Der Nerv
halbiert ungefShr das laterale Feld, den zwischen V.-K. und Seitenrand,
der Proglottitis gelegenen Raum.

Strobila, 30 cm vom Kopf (Fig. 12, 13), 1617 f.i breit. Der.
Handgriff zeigt ein traubenartiges Aussehen und ist durch einen breiten,
etwas geschlfingelten Kanal mit dem bereits mit Spermatozoon gefiillten
Receptaculum (Fig. 12, 13, 17) in Verbindung, von dem die Vagina („the
muzzle of the pistol — shape genital anlagen u , St u. H.) zum Seiten¬
rand hinzieht und dorsal, ventral, Oder was das h&ufigere ist, hinter dem
Cirrusbeutel (Fig. 6) ausmundet. — 40 cm vom Kopf ist auch der zweite
D.-K. bereits obliteriert und infolgedessen das mittlere und laterale
Hodenfeld auch auf der zweiten Seite zu einer Reihe verschmolzen, so
daB nun in der Tat nur mehr vier Reihen von Hoden existieren. — 60 cm
vom Kopf erreicht die Kette mit genau 2 mm das Maximum ihrer Breite
und mit 695 das Maximum ihrer Dicke. Die Gliederung ist noch
immer keine durchgreifende. Am Rande mit dem Genitalporus erreicht
ein Segment eine Lange von 78 /(, am entgegengesetzten eine solche
von 36 /(. Der Cirrus ist bei meinem Individuum vollstfindig ausgestfllpt
und erreicht die grfifite Lange von 127 p. Die Geschlechtsreife ist hier
erreicht Der Uterus ist in vorgeschrittener Entwicklung. Der V.-K.
ist in auffallender Weise darmartig gewunden (Fig. 14), so daB es den
Anschein hat, als ob er von Querbalken durchzogen ware; diese Drehung
ist bereits makroskopisch deutlich erkennbar; am Querschnitt erscheint
er als kreisfOrmige Oeffnung schon bei Betrachtung mit freiem Auge.
Er erreicht die kolossale Breite von 260 p, der zufolge die beiden Seiten-
felder beulenartig aufgetrieben sind und der Querschnitt der Kette ein
hantelformiges Aussehen erhalt. Die Ovarien sind kugel- bis eiffirmig
und erreichen einen Durchmesser bis zu 78 /<. — 72 cm vom Kopf
(Fig. 14, 15) ist eine Proglottis 1762 p breit; an der Porusseite 98 p,
an der anderen 64 p lang. Erst jetzt ist eine schone, deutlich ab-
gesetzte, durchgreifende Gliederung zu erkennen. Der Uterus ist be¬
reits mit Eiern gefflllt. Die Eier messen bis zu 26 p im Durchmesser.
Am Wege vom Ovarium bis zum Uterus sind Eier wahrzunehmen. Der
V.-K. ist besonders schfin darmartig aufgedreht. Die mannlichen Genital-
organe sind in Rfickbildung begriffen, der Cirrus nur wenig ausgestfllpt.
— 87 cm vom Kopf beginnt sich das Paruterinorgan zu entwickeln. Es
ist 592 p breit und 114 p lang, zu beiden Seiten ein wenig aufgetrieben.
am vorderen Rande etwas konkav, am hinteren etwas konvex gewolbt.
Der V.-K. ist nicht mehr darmartig aufgewunden, in sein Lumen
ragen kuppen- bis kegelfSrmige Parenchymvorspriinge hinein. Das
Paruterinorgan geht fiber die Grenze des zugehorigen Segmentes hin-
aus und fiberragt sowohl das vorhergehende als auch das nachfolgende
(Fig. 16), so daB die Paruterinorgane teilweise fiber und untereinander
zu liegen kommen. — 95 cm vom Kopf (Fig. 16) ist die Proglottis

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Centralbl. f. fiakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

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1480 ft breit, 160 ft lang. S&mtliche Organe siod deutlich nachweisbar.
Das Parnterinorgan ist bereits in vorgeschrittener Entwicklung, 450 (t
breit, 210 fi lang. Der V.-K. erreicht eine Breite von 166 ft.

Wie aus Bescbreibung und Abbildung hervorgeht, zeigt die vor-
liegende Art zahlreiche Abweichungen von A. centrip. und A. laci-
niosa, andererseits auch wieder manche Aehnlichkeiten. Die einzelnen
Segraente sind stets breiter als dick und dicker ais lang. Die drei ge-
nannten GroBen verhalten sich bei den gescblechtsreifen Proglottiden
etwa wie 14:5:4; die Glieder sind also relativ sehr breit und dick,
dagegen sehr kurz. Bemerkenswert ist nun, daB die Proglottiden gegen
den Rand zu nicht keilformig verlaufen, sondern dafi die Dorsal- uod
Ventralfiache ziemlich parallel zueinander sind, jederseits stumpf nm-
biegen und eine Art Seitenfldche bilden, die in der Mitte eine Einsenknng
aufweist, in der sich der unscheinbare Genitalporus befindet (Fig. 13).
Die Seitenfiache mit dem Genitalporus ist gewdlbt und breiter als die
gegenQberliegende und schmalere Fldche. Die einzelnen Segmente folgen
so aufeinander, daB der hintere Rand der vorhergehenden Proglottis
den vorderen Rand der folgenden Proglottis nicht flberragt (acrasped.
Pintner, 11).

Nochmals sei als Charakter fOr Genus und Art betont, daB der
D.-K. lateral vom V.-K., also anders als sonst liegt, daB er gerade, der
V.-K. aber wellig bis zickzackartig verlfiuft (Fig. 14). Die erwShnte
fruhere Obliteration des einen D. K. ist jedenfalls eine Anomalie.
Wahrend ferner der D.-K. zuerst das Feld zwischen Seitenrand and
V.-K. mehr oder.weniger halbiert, tritt er weiter hinten itnmer mehr
an den V.-K. heran, so daB sich das zwischen beiden Kan&len gelegene
Feld immer mehr verschmalert, das laterale sich dagegen auf dessen
Kosten verbreitert. Hierin liegt das Hauptmerkmal fflr die neue Spezies
und das neue Genus: zun&chst tinden sich Hoden lateral vom D.-K.
nur vereinzelt vor, so daB eine 5.-6. Reihe von Hoden in Erscheinnng
tritt; nach der Obliteration des D.-K. tlieBt die mittlere und laterale
Reihe zu einer Reihe zusammen, so daB hernach nur 4 Reihen da sind.

Der V.-K. liegt, wie auf Querschnitten gut zu sehen ist (Fig. 13),
ungefahr in der Mitte, der D.-K. meist auch in der Mitte, Oder bald
mehr der einen, bald mehr der anderen Fiache genfihrt; das gleiche
gilt von der Vagina. Da also einerseits die Lage des D.-K. keine kon-
stante ist, andererseits die der Vagina zum Cirrusbeutel st&ndig wechselt
und Dotter- und Schalendriisen iiberhaupt fehlen, entf&llt bei meiner
Spezies jeder Anhaltspunkt dafilr, die eine Fiache als die dorsale, die
andere als die ventrale zu bezeichnen. Bezflglich der Lage der Genital-
kanale kann ich nur sagen, daB sie stets ein und derselben Flfiche mehr
genahert sind, auch stets an derselben Seite des D.-K. zu liegen kommen;
ob nun diese Fl&che als die dorsale oder als die ventrale anzusprecben
ist, liiBt sich ira vorliegenden Falle nicht entscheiden. Die liezeicb-
nungen „Dorsal u - und „Ventralkanal“ habe ich aus den fflr die beiden
Kantile cliarakteristischen und unterschiedlichen Eigenschaften gefolgert.
KalkkSrperchen habe ich trotz eifrigsten Suchens nur auBerst selten
vorgefunden.

Die vorliegende Spezies zeigt, kurz zusammengefaBt, folgende weseut-
liche Abweichungen von den beiden Vertretern des Genus Avittelina:
Die Kette ist dicker und infolgedessen weniger durchsichtig als bei
centrip. und laciniosa nov. spec. Die Durchmesser des Kopfes
.sind bedeutend kleiner als bei centrip. und nicht unerheblich grfiBer

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Blei, Drei neue Schafzestodeu.

383

als bei laciniosa. Die Saugnfipfe sind direkt nach aufien gerichtet,
im Gegensatz zu cent rip., bei der sie Gough nach vorn and aus-
wfirts, Railliet und Tempfere nnr nach auswfirts gerichtet fan den
uod laciniosa, bei der sie nach vorn und auswfirts gerichtet sind.
Ferner sind die Saugnfipfe von der oben nfiher geschilderten charakte-
ristischen Bildung umgeben. Der D.-K. liegt lateral vom V.-K.,
im Gegensatz zu sfimtlichen Vertretern der beiden Genera Avit. und
Stilesia. Die Hoden sind bereits 8 cm hinter dem Kopf deutlich
uachweisbar, bei centrip. erst 13 cm hinter dem Kopf entfernt;
sie sind bis zur Obliteration der Dorsalkanfile in 6 deut¬
lich e Reihen voneinander geschieden. Der Querschnitt der Kette ist
abgerundet rechteckig; bei Centrip. und Laciniosa ausgesprochen
elliptisch. Die Genitalpori befinden sich in einer rinnenformigen Ein-
seokung der Seitenflfiche, wfthrend bei Avit. centrip. und Avit. laci-
niosa nov. spec, die Genitalkanfite einfach am Seitenrand ausmflnden.
Durch die ganze Kette hindurch ist eine deutlich ausgeprfigte Schein-
gliederung vorhanden und eine wirkliche Gliederung ist erst 72 cm
hinter dem Kopf deutlich nachweisbar. Kalkkfirperchen sind selten, bei
laciniosa dagegen hfiufig.

Systematische Stellung. Es ist klar, dab das vorliegende
Individuum als eine neue Art anzusprechen ist. Trotz grofier Aehnlich-
keit mit A. centrip. und laciniosa, ist diese Art, insbesondere
wegen der geschilderten Verhfiltnisse am Kopf, der Anordnung der Hoden,
<ler gegenseitigen Lage der Lfingskanfile etc. auch nicht in das G. Avi-
tellina einzureihen. Es ist ein neues Genus zu schaffcn und in die
Unterfamilie Avitellininae einzureihen, unter Abfinderung der von
Gough gegebenen Diagnose. Ftir das neue Genus schlage ich den
Xamen „Hexastichorchis u vor. FOr die hier beschriebene typische Art
dieses Genus schlage ich den Namen „Pintneri“ vor.

Die Diagnose auf Grund der von mir neugefundenen Art hat zu
lanten: Kopf ohne Haken, mit 4 Saugnfipfen. Segmente kurz; Genital;
poren unregelmfibig alternierend. Der D.-K. liegt medial oder
lateral vom V.-K.; die Hoden sind in 2—6 Reihen ange-
ordnet, randstfindig, mentals im Mittelfcld. Ein einfaches Ovarium;
weder Dotter noch Schalendrfiscn. Uterus einfach oder doppelt. Die
Eier werden schlielllich in einem Paruterinorgan eingeschlossen. Typisches
Genus: Avitellina, Gough, 1910. Stilesia, Railliet, 1893.
Typische Art; globipunctata (Siv.) Raillet, 1893. Kopf mit vier
Saugnfipfen, keine Haken. Kette dfinn und schmal. Genitalporus un-
regelmfiBig alternierend oder doppelt. Segmente breiter als lang. Der
D.-K. liegt medial vom V.-K. Zwei deutliche Reihen von Hoden
in jedein Segment, jederseits eine Reihe, nie sind Hoden im Mittelleld.
Ovarium auf der Porusseite gelegen. Keine Dotter-, keine Schalendrusen.
Uterus doppelt und schlieBlich ohne Eier; diese sind in Eiersficken
(Paruterinorgan) enthalten. Die Genitalkanfile ziehen dorsal vom Nerv
und dem V*-K. Die Eier haben zwei Hfillen. Avittellina, Gough,
1911; Typische Art; centrip. (Riv.) Gough 1911. Scolex mit 4 Saug¬
nfipfen, keine Haken. Kette dfinn und schmal. Segmente breiter als
lang. Genitalporen unnregelmfifiig alternierend. Der D.-K. liegt
medial vom V.-K. In jedein Segment vier deutliche Reihen von
Hoden; jederseits der V.-K. eine Rcilte; niemals sind Hoden im Mittel-
feld. Ovarium auf der Porusseite gelegen. Keine Dotter-, keine Schalen-

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Blei, Drei neue Schafzeatoden.

385

drflsen. Ein einfacber Uterus. Die Eier sind schliefilich in Eiersficken
(Paruterinorgan) eingeschlossen.

Fflr das tod mir neugeschaffeue 6. Hexastichorcbis und die typische
Art Pintneri gebe ich folgende Diagnose: Scolex mit 4 Saugn&pfen,
keine Haken. SaugnSpfe von einer charakteristischen, der Gestalt der
Sangn&pfe entsprechenden Hfllle nmgeben. Kette schmal und verhflltnis-
mfiBig dick. Segmente breiter als dick und dicker als lang. Genital-
poren unregelm&Big alternierend. Der D.-K. li&gt lateral vom V.-K.
Bis zur Obliteration der beiden D.-K. sind in jedem Segment 6, nach-
her 4 deutlich voneinander getrennte Reihen vob Hoden vorhanden.
Keine Dotter-, keine SchalendrQsen. Die Eier sind schliefilich in Eier-
stOcken (kein Paruterinorgan) eingeschlossen. Dflnndarm des Schafes,
Ungarn, Ukraine.

Beim Studium der Querschnitte mdchte ich vor einem Beobachtungs-
fehler warnen, in den man fiufierst leicbt verfallen kann n&mlich, daB
die Genitalorgane doppelt angelegt seien. Die Segmente sind, wie be-
scbrieben, sehr kurz und dabei an den beiden R&ndern ungleich lang.
So wird es nur kuBerst schwer gelingen, das PrSparat derart einzustellen,
daB das Messer nur immer Schnitte einer Proglottis liefert, man wird
in den gBnstigsten Fallen zwei Proglottiden anschneiden. Langs- und
FlBcbenschnitte lassen leicht eine Entscheidung treffen.

Geschichte der Unterfamilie A vi tellininae.

Im Jahre 1874 beschrieb Rivolta 2 neue Zestoden aus dem Darm
des Schafes: Taenia globipunctata und centripunctata (14).
Perroncito akzeptierte die beiden Spezies in seinen Beschreibungen
in den Jahren 1882 (4) und 1886 (15). 1893 fasste Railliet die beiden
Spezies in ein Genus zusammen, das er Stilesia nannte. 1893 gaben
Stiles und Hassall eine sehr gute Beschreibung von globipunctata
und centripunctata, sie zweifelten jedoch schon damals wegen des
anffallend verscbiedenen anatomiscben Banes an der Zugebdrigkeit der
beiden Arten zu demselben Genus (16). 1896 bescbreibt Railliet (13)

eine'neue St. vittata aus dem Darm des Dromedars, die groBe Aehn-
lichkeit mit glob ip. zeigt. 1903 beschrieb M a r o t e 1 (7) cen trip, aus
dem Darm einer Ziege, die aus Lahor (Indien) stammte. Er zweifelt
ebenfalls an der Zugeh5rigkeit von cen trip, und globip. zu dem¬
selben Genus und mochte sie lieber in zwei verschiedene Genera unter-
bringen. 1903 beschrieb Wolffhflgel (18) eine neue St. hepatica,
aus den Galleng&ngen von Schafen und Ziegen aus SUd- und Ostafrika.

1908 stellte Fuhrmann die beiden Genera Stilesia und Thysano-
soma in eine Unterfamilie zusammen, dieerThysanosominae nannte.

1909 beschrieb Fuhrmann (2) eine neue St. Sj5stedti, die aus
Tragelaphus sylvaticus meruensis stammte. 1909 gab Gough eine voll-
stfindige Beschreibung der Anatomie von centripunctata (Riv.) sowie
Bemerkungen fiber hepatica. 1911, nachdem die Anatomie von centrip.
(Riv.) einerseits und die von glob. (Riv.), vittata (Railliet), hepatica
(Wolffh.) und SjSstedti (Fuhrm,) andererseits genauer bekannt ge-
worden war, schuf Gough (4) fflr centrip. ein neues Genus, daB es
„Avitellina“ nannte — nach dem Fehlen der Dotterstflcke — wShrend
die flbrigen erwflhnten Spezies im Genus Stilesia vereinigt blieben.
Hough trennte nun diese beiden Genera von der Unterfamilie Thy-
sanosominae und faBte sie zu einer eigenen Unterfamilie zusammen,
die er nach dem besser bekannten Genus Avitellina als Avitellini-

Krste Abt. Orig. Bd. 87.

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Heft 5.

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

nae bezeichnete. Er gab gleichzeitig eine Beschreibung der Anatomie
der in diese Unterfamilie gehdrigen Arten und eine genaue bistologische
Darstellung von centrip. Der Autor scbreibt fiber die systematische
Stellung der Genera Stilesia und Avittellina (4).

Die systematische Stellung der beiden Genera Stilesia
and Avitellina. Fuhrmann (1908) steilte das Genus Stilesia
mit dem Genus Thysanosoma in eine Unterfamilie zusammen, die
er Thysanosominae benannte. Da jetzt die Anatomie der Arten
von Stilesia und Avitellina um so viel besser bekannt ist, als dies
frfiher' der Fall war,' ergibt sich die Notwendigkeit, ihre Stellung im
System einer Revision zu unterzieben und zu untersuchen, in welchem
Grade sie mit Thysanosoma verwandt sind.

Die gemeinsamen Punkte der 3 Genera Stilesia, Avitellina
und Thysanosoma sind die randstandige Anordnung der Hoden, die
unregelmSBige Alternation der einfachen Genitalporen (ein Punkt, weicher
nicht fflr Thysanosoma zutrifft, nachdem doppelporige Individuen
haufig in Sfidafrika augetroffen werden) und der Besitz eines Paruterin-
organs. Sie unterscheiden sich jedoch in manchen wesentlichen Merk-
malen. Avitellina und Stilesia besitzen weder eine Schalendrflse
noch einen Dotterstock; ihre ‘Eier werden von Ernfihrungszellen im
Ovarium und Uterus ernfihrt. Die Punkte, in welchen die 3 Genera
ubereinstimmen, sind kamn wichtig; die Lage der Hoden und Genital¬
poren ist mannigfaltigen Variationen innerhalb einer Unterfamilie unter-
worfen, der Besitz eines Paruterinorgans kann, wie Fuhrmann gezcigt
hat,, von Gattungen, die verschiedonen Unterfamilien angehdren, un-
abhfingig erworben werden. Der Mangel an Dotter- und Schalendrfisen
reicht demnach vollstfindig hin, um diese beiden Genera von alien anderen
bekannten Zestoden zu trennen. Ich schlage daher vor, die Genera
Stilesia und Avitellina aus der Unterfamilie Thysanosominae
herauszunehmen und sie in eine neue Unterfamilie der Anoplocepha-
liden zu stellen, die ich Aviteliininae nenne, nach dem Genus
Avitellina, welches sicherlich das bekanntere der beiden Genera ist
Diagnose fiir die Unterfamilie Aviteliininae und ffir das Genus Avi¬
tellina s. oben. 1912 gibt Gough (5) eine vollstandige Beschreibung
der Anatomie von glob. Juni 1920 beschreibt Blei (1) eine neue
Spezies des Genus Avitellina und weiter cine neue Spezies der Unter¬
familie Aviteliininae, fiir die er das Genus Hexastichorchis
schafft. Die vorstehende Arbeit lag seit Juni 1920 vollig abgeschlossen vor.

Literatar.

lj Blei, Rudolf, Drei neue Schafzrstoden. Vorl. Mitteil. (Wien. Tierantl.
MonatsBchr. Jahrg. 7. Heft 6. S. 183 — 184. Wien. Juni 1920). — 2) Fuhrmann, 0.,
Cestodea. (Wissonxchafll. Ergebn. d. Bchwed. zool. Exped. Kilimandjaro. 22. Verme*.
p. 21— 22. Stockholm). — 3) Gough, L. H, The anatomy of Stilesia centripuncttta
(lliv). (The Transvaal Veterinary Bnct. Lab. Pretoria 1909). — 4) Dera., A monograph
of the tape-worms of the subfamily Aviteliininae, being a revision of the genii*
Stilesia and an account of the histo!o?y of Avitellina ceDtripunctata. (Am. Journ.
Micr. Sc (2). Vol. 56. 1911. p. 317—385. Taf. 12—24). — 5) Ders., The anatomy
of Stilesia globipunetata (Riv.) (Parasitology. Vol. 5. 1911. Nr. 2. p. Ill—117. 2 fig).
— 6) Loobb, A., Zur Sammel- und Konaervierungstechnik von Helminthen. (Zool.
Anz. Bd. 24. Nr. 643. 644). — 7) Marotel, G., Contribution & R4tude zoologiqoe
de Stilesia centripunctata (Riv.) [Note pr41iminaire.] (Journ. de m4d. v4t4r. l!w.
Nr. 1. p. 24—25). — 8) Neumann, L. G., Observations sur lea Tenias du Mouton.,
(C. R. de la Soc. de l’hist. naturclle de Touloupe. Seance. 10 f4v. 1891). — ft) P«r-
roncito, E., 1 parassiti dell’uomo e degli animali utili. Milano 1882. — 10) Ders.,
Trattalo teorico-pratico suite malattie pid comuni degli animali domeatici. Torino
1886. — 11. Pintner, Th., Vorarbeiten zu einer Monograpbie der Tetrarhynchoidea.

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Dir ska, Sterihsationsfrage komplizierter zahnarztlicher Instrumente. ;(87

(Sitzungsber. d. Akad. d. Wissensch. in Wien, math.-nat. KL Bd. 122. Abt I. 1913)-

12) R&illiet, A., Traits de zoologie m&iicale et agricole. 2. 6d. Paris 1805. —

13) Ders., Sar qaelaues parasites du dromadaire. (C. r. Soc. de bioi. 22. mai 1896.
p.489—492). — 14) Kivolta, S., Bopra alcuna specie di Tenie della Pecora. Pisa
1874. — 15) Banter, K., Beitrage zur Anatomie, Histologie, Entwicklungsgeschicbte
und Systematik der Rindertanien. [Inaug.-Dis*.] Kulmbach 1017. — 16) Stiles, C. W. f
and Has sal, A., A revision of the adult Cestodes of cattle, sheep and allied ani¬
mals. (Bull. 4. Bureau of Animal Ind. U. S. Dep. of Agr. Washington. D. C. 1893.
p. 1—134. 16 pis.). — 17) Terapfere, J., Les parasites internes de i’homme et des
animaux domestiques. (Micr. pr£par. Vol. 14. 1904). — 18) Wolffhugel, K, Btilesia
hepatica nov. spec., ein Bandwqrm aus den Gatlengangen von Bchafen und Ziegen Ost-
afrikas. (Berl. tierarztl. Wochenschr. 1903. Nr. 43. B. 661—665. Fig. 1—6.

Nachdruck verboton.

Ein Beitrag zur Losung der Sterilisationsfrage komplizierter
zahnarztlicher Instrumente.

[Aus dem Medizinalamt der Stadt Dortmund (Loiter: Medizinalrat
Dr. K5ttgen), Abteilung: Hygienisch-bakteriologisches Institut (Vor-

steber: Dr. L5ns).]

Von Dr. Carl Dirska, Dortmund.

Mundflora.

Die MundhOhle stellt eine wesentliche Eingangspforte und einen
(lurch viele Verh&ltnisse, wie feuchte Wfirme, zerfallene Speisereste, be-
dingten gttnstigen Nfthrboden fQr Mikroorganismen dar.

Nach Untersuchungen von Miller und anderen sind Arten und Zahl der Mund¬
flora ungeheuer groS. Erwiesen ist, dafi unter dieser Mundflora sehr viel pathogene
Mikroorganismen vorhanden sind, die wir bei bestimmten Krankheiten nachweisen
konnen. Auch bei Gcsunden und besonders bei JRekonvaleszenten, noch lange Zeit
nach uberstandenen Infektionskrankbeiten, wird eine reiche Zahl pathogener Keime im
Munde beherbergt. Von bekannten Infektionserregern sind im Munde die Tuberkel-, In-
fluenzabazillen, Meningokokken, Pneumokokken, Keuchhustenbazillen, Klebs-Loeff *
lersche Diphtheric-, Pseudodiphlheriebazillen, Pestbazillen, die Bpirochaeta pallida
und andere mehr anzutreffen. Oft sind die Krankheitserscheinungen der genannten
Erreger allgemein oder lokal nachweisbar; sehr oft fehlen aber irgendwelehe Krankheits-
symptorae. Auch bei Allgemeinerkrankungen weist die Inspektion des Mundes oft gar
keine Krankheitssymptome auf, obwohl die Erreger im Munde anwesend sind. Hierzu
kommen noch die bisher noch nicht ziichtbaren Mikroorganismen, iiber deren Art
Form, Lebensweise und Wirken wir noch ohne Kenntnis sind. Die schweren Er-
seheinungen von Btomatitiden und Alveolarpyorrhoe, die be-onders wahrend des Krieges
endemisch und nach dem Kriege in erscbret kend grower Zahl auftraten, sind in ihren
Ursachen sowohl in den disponierenden Verhaltnissen, als auch besonders in den Er-
regern vollig ungeklart. Wenn wir auch bei diesen Munderkrankungen im Ausstrich
Spirochaten, fusiforme Stabchen, Kokken in vertrchiedensten Formen nachweisen kdnnen,
so befinden wir uns doch bis jetzt noch immcr im Dunklen uber die wirklichen Erreger.
Aufier den vielfach im Munde auftretenden Keimen konnen aber stets neue Keime von
aufien durch E6- und Trinkgef&Be, Blasinhtrumente, arztliche und zahnarztliche In¬
struments zugefuhrt werden. Wir miissen also im Munde mit einer ungeheuer gro&en
Zahl von Mikroorganismen rechnen, die uns sogar grdBienteils noch nicht hinlanglicli
bekannt sind.

Notwendigkeiterschopfender Sterilisation im allgemeinen.

Aus diesen Betrachtungen erwSchst daher vom zahn&rztlichen Stand-
punkt die Pflicht, bei der Bebandlung der Patienten alles zu tun, um
eine Uebertragung von pathogenen Keimeu auf dieselben auszuscliliefien,
d. h. ZahnSrzte haben eine einwandfreie, erschOpfende Sterilisation aller
bei den Pat. in Frage kommenden Instrumente zu iiben. Bei dieser

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388 Oentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

grofien Flora, die teilweise in ihrer Art und Lebensweise, teilweise in
ihrer Resistenz unter den Mundverhflltnissen noch nicht genflgend er-
forscht ist, mflssen wir also auch die allerhflchsten Anforderungen an
die zahnflrztlichen Sterilisationsmethoden stellen.

Notwendigkeit einwandfreiester Sterilisation der Bohr-
maschinenhand- und Winkelstflcke.

Bei der heutigen groBen Bedeutung der konservierenden Zahnheil-
kunde dflrften wohl die Bohrmaschinenhand- und Winkelstflcke als In-
strumente anznseben sein, die bei der zahn&rztlichen Behandlung mit
am meisten im Munde benutzt werden. Die Zahn&rzte wissen sehr got,
wie bei Arbeiten an oberen 2. nnd 3. Molaren die Hand- und Winkel-
stflcke oft vom Speicbel geradezu eingehflllt sind, wie Speicbel in die
inneren Teile dieser Instrumente, die inneren Hfllsen und Zahnr&der,
eindringt. Wie oft linden wir beim Abschleifen von Wurzeln bis unters
Zahnfleisch Blutspuren an den Handstflcken. Selbst eine einfache mecha-
niscbe Reinigung ist an diesen, aus vielen Teilen bestebenden Instrumenten.
die auch noch an ihrer Oberflflche zur besseren Handhabung Uneben-
heiten und Rauheiten aufweisen, sehr schwer. Bedenken wir weiter,
dad wir das Handstflck des ofteren auch bei grflBeren operativen Ein-
griffen zum Abtragen und Glfltten der Alveolarrander mittels des Karbo-
rundsteines, zum Abfrfiseu des Kieferknochens, um tief frakturierte
Wurzeln wieder freizulegen, gebrauchen mflssen, dann dflrfte wohl noch
ganz besonders die Notwendigkeit einer absoluten Sterilisation des Hand-
stflckes als chirurgisches Instrument erwiesen sein.

Grundforderungen fflr eine einwandfreie Sterilisation
komplizierter zahnflrztlicher Instrumente.

Es muB daher wundernehmen, wenn heute noch bei sonsteinwand-
freier Praxisfflhrung, bei der eine gewissenhafte Sterilisation aller chirur-
gischen und konservierenden Instrumente durchgefflhrt wird, die Sterili¬
sation der Hand- und Winkelstfleke vflllig unterlassen wird. Der Grand
dflrfte wohl darin zu suchen sein, daB bis heute noch immer keine
vftllig einwandfreie Methode far die Sterilisation dieser komplizierten
Instrumente gefunden worden ist. Welche Grundforderung muB nan
eine einwandfreie Sterilisationsmethode fflr komplizierte zahn&rztliche
Instrumente erfflllen?

1) Bei der Durchfflhrung der Sterilisation dflrfen die Instrumente
nicht leiden.

2) Die Sterilisationsmethode muB im Sprechzimmer durchgefflhrt
werden kdnnen. Da ja die Handhabung der Sterilisation von unseren
Helferinnen flbernommen werden muB, die Zuverlassigkeit unserer Hilfs-
krflfte aber nicht einheitlich einwandfrei ist, mflssen wir Zahn&rzte jeder-
zeit die Mdglichkeit der Kontrolle bei diesen wichtigen Hilfsleistungen
behalten. Dies ist nur im Sprechzimmer mflglich.

3) Die Sterilisationsmethode darf die Praxisfflhrung nicht erschweren.

4) Die Sterilisationsmethode muB moglichst ohne groBe, komplizierte
und teuere Apparate durchgeliihrt werden konnen.

5) Das Sterilisationsmedium darf weder auf die SuBere Haut noch
auf die Schleimhaut Reize, geschweige denn Aetzwirkungen auslosen.

6) Es muB absolute AbtOtung, selbst des resistentesten Materials,
in hochstens 15 Min. erzielt werden. Auch muB absolute Keimfreiheit
in alien inneren Teilen dieser Instrumente erreicht werden.

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Dirska, Sterilisationsfrage komplizierter zahnarztlicher Instrumente. 389
*

Sterilisationsmethoden.

Als erstes Streben nach einer Sterilisation der Hand- und Winkel-
stficke dtirften wohl die von Kieffer angegebenen Kondomflberztige
flber die Handstucke und die von Hinrichsen 1907 mitgeteilten auS-
kochbaren Blechhfllsen ftir Hand- und WinkelstGcke anzusehen seiri.
Diese Methoden erfflllen selbstverstflndlich nicht unsere Grundforde-
rungen, denn eine Sterilisation der inneren Teile wird hierbei nicht
erzielt, auch bedeuten die Hinrichsenschen Hfllsen fflr die Winkel-
stucke eine wesentliche Erschwerung der Praxisfuhrung, weil bei jedem
Bobrerwechsel erst die HGlse abgenommen werden mufi.

Die flbrigen sonst ublichen Desinfektionsmethoden, wie chemische
Wirkungen durch wasserige antiseptiscbe Losuhgen, Oder die Beifl-
wengersche Formaldehydmethode, wie physikalische Wirkungen durch
kochendes Wasser, strdmenden Dampf, trockene Hitze sind fflr unsere
komplizierten Instrumente aus dem Grunde nicht anwendbar, weil hierbei
durchgehend die inneren Teile der Instrumente, die Hfllsen und Zahn-
rflder, entweder infolge der Oxydation Oder durch die hohe Temperatur
von 180° bei trockener Hitze leiden und nach kurzer Zeit unbrauchbar
werden mflssen. Auch benfltigt die Trockensterilisation eine viel zu
lauge Zeit.

Oelsterilisation nach Andresen.

Viggo Andresen lenkte 1907 zum ersteomal in der zahnarztlichen Literatur die
Aufmerksamkeit darauf, unaere komplizierten zahnarztlichen Instrumente in Oel, und
zwar in Paraffinum liquidum bei einer Temperatur von 120—150“ zu steriliaieren. Um
ein Ueberhitzen des Oele§ auszuschlieflen, gab Andresen eineu Apparat an, bei dem
bei einer bestimmten Temperatur der Gashahn selbsttsitig geschlossen wird. Bei dem
(led»nken der Oelsterilisation folgte Andresen Anregungen der Chirurgen Forgue
und Reclus, die bereits 1898 in „Trait6 de th4rapeutique chirurgicale“ Oel fiber 100“
als ein gutes Sterilisationsmedium bezeichnen, das weder Vernickelung noch Stahl, noch
die Schneiden der Instrumente angreife. Auch Gonradi macht 1909 in der Dentsch.
med. Wochenschr. aut die Vorzfige des Oels, und zwar des Jaffa-Sesamols, bei einer
Temperatur von 200° fur chirurgische Instrumente aufmerksam. Andresen liefi in
2 Kontiollanstalten die keimtotende Wirkung des Paraffinum liquidum bei 120° und
bei 150° prfifen. Zur Prfifung wurden Sporen des Bacillus subtilis verwandt. Bei
120° war nach 30 Min. und bei 150° nach 10 Min. noch keine Keimfreiheit erzielt
worden. Erst bei 160° wurde nach 30 Min. Abtdtung der Sporen erreicht. Die Unter-
suchung von Andresen erfolgte mit infizierten Handstficken.

Methode Kieffer mit Paraff. liq. und mit Paraff. liq. plus

2-proz. Thymol bei 120°.

Kieffer unterzog nun ebenfalls das Paraffinum liquidum ein-
gehenden Prufungen auf die keimtotende Wirkung bin. Als Testmaterial
benutzte er 2 und 8 Tage alte Milzbrandsporen, 48 Std. alte Staphylo-
kokken und 8 Tage alte Kartoffelbazillen. Das Infektionsmaterial trug
Kieffer auf Messingdrahtgeflechte auf. Die infizierten Drahtgeflechte
wurden nach der Sterilisation in Bouillon gebracht und die Bouillon-
kultur nach 48 Std. geprflft. AuBerdem suchte Kieffer durch Zusatz
von 2 Proz. Thymol zum Paraffinum liquidum eine erhflhtere Des-
infektionskraft zu erzielen.

Aus den Untersuchungen von Andresen und Kieffer geht hervor,
dafi im Paraff. liq. bei einer Temperatur von 130° nach 20 Min. und
bei 150° nach 10 Min. noch keine Abtotung sehr resistenten Materials,
8 Tage alter Milzbrand- oder Subtilis-Sporen, erreicht worden ist.
Wohl aber sind nach Kieffer in einer 2-proz. Thymol-Paraffin-Lflsung
bei 120° nach 10 Min. selbst Me sen ter icus-Sporen, also das resisten-

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390 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

teste Material, abgetbtet wordeD. Als ganz einwandfrei sind aber die
Beobachtungen von Kieffer aus dent Grande nicht anznsehen, veil er
die Boaillonkulturen angeblich nur 48 Std. beobachtet hat. Es kann
n&mlich nach einem Sterilisationsversuch eine starke Wachstumsbemmnng
der Sporen eintreten, die dann erst nach 3, 4 oder auch 5 Tagen zum
Auskeimen and Wachstum gelangen kdnnen.

Kritik der Methoden nach Andresen und Kieffer.

Praktisch sind auch sonst die beiden Methoden — die Anwendung
des Paraff. liq. bei 150° und die Anwendung der 2-proz. Thymol-Paraffin-
Idsung bei 120° — im Sprechzimmer nicht durchfflhrbar. Paraff. liq.,
l&ngere Zeit in geschlossenem Raum auf 150° erhitzt, fQUt das Zimmer
so stark mit OelausdQnstungen, daB der Aufenthalt in diesem Raum un-
mSglich wird. Eine 2-proz. Thymol-ParaffinlOsung babe ich mehrmals
bei 120° anzuwenden versucht, bekam aber beim Aufenthalt in dem be-
treffenden Raume starke Reizungen der Rachen- und Nasenschleimhinte,
w&hrend bei meiner Helferin Reizung der Tr&nendrflsen eintrat Auch
ein Kollege berichtete mir von einer Konjunktivitis, die er sich in einem
Raum zugezogen hatte, in der ein Oelsterilisator mit einer 2-proz.
Thymol-Paraffinlosung bei 120° im Betrieb war. Es erfQUten also bis
jetzt die bisher aogegebenen Methoden nicht die eingangs gestellten
Forderungen; denn es wird entweder keine Keimfreiheit erzielt, oder
die Methode ist im Sprechzimmer undurchfQhrbar.

Eigene Untersuchungen.

Auf dem Wege, eine Sterilisationsmethode fflr komplizierte zahn-
arztliche Instrumente zu linden, die alle gestellten Forderungen erfiillt,
nahm ich zun&chst systematisch eine NachprQfung des Paraff. liq. als
Sterilisationsmedium vor. Als Testmaterial verwandten wir stets an
Seidenf&den angetrocknete Sporen des Mesentericus fuscus. Die
Untersuchung nahm ich in dem Oelsterilisator nach H. Schulte (Dtsch.
Zahn&rztl. Wochenschr. 1916. S. 252) in der Weise vor, daB ich in das mit
Oel gefullte Oelgef&B Reagenzglfiser mit dem Sterilisationsmedium und in
diese wieder das Testmaterial brachte. Der Spiegel des Sterilisations-
mediums in den ReagenzglSsern stand unter dem Oelspiegel im Oei-
gef&B. Die Temp, im OelgefSB und in den Reagenzgl&sern wurde durch
2 Thermometer verglichen. In jedes Reagenzglas wurden 2, mit Mes-
entericus-Sporen angetrocknete SeidenKiden gebracht, am stets eine
Kontrolle zu haben. Die ReagenzglBser wurden dann zu verschiedenen
Zeiten dem OelgefaBe entnommen und die Seidenf&den mit sterilen In-
strumenten in Ndhrbouillon gebracht. Die folgenden angegebenen
Methoden und Sterilisationsmedien prflfte ich vor den Untersuchungen
im hygienischen Institut erst immer in meinem Sprechzimmer auf ihre
praktische Durchfiihrbarkeit, d. h. auf die Ausdiinstung der Flflssigkeiten,
auf das Verhalten den Instrumcnten gegenuber und auf eventuelle
Reizungen auf Schleimhaut und auBere Haut. Die Resistenz des Mes-
entericus-Stammes aus dem bakteriologischen Institut Dortmund
stellten wir zuniichst im 0h 1 inu 1 lerschen SporenprQfer fest. Das
Resultat dieser und aller weiteren Untersuchungen lasse ich aus dem
Grunde in ausfiihrlichen Tabellen folgen, well bisweilen durch die Sterili¬
sation Wachstumshemmungen eintraten. und erst nach mehreren Tagen
sich Kulturen entwickelten, so dad ein einwandfreies Bild nur eine
Tabelle mit einer Beobachtungsdaucr von 8—10 Tagen ergeben konnte.

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392 Centralbl. f. B&kt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5.

TabeUe IV.

Sterilisationsmedium: Paraff. Jiq. Temperatur: 180°.

Sterilisat.-

Dauer

Wachstum in Bouillon nach Tagen

KontroUe.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

Minuten

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TabeUe V.

Sterilisationsmedium: Paraff. liq. plus 2 Proz. Thymol. Temp.: 120°.

Sterilisat-

Dauer

Wachstum in Bouillon nach Tagen

KontroUe.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

Minuten 1

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Kieffer hatte bei seinen Untersuchungen im Paraff. liq. pins
2 Proz. Thymol bei 120° in 10 Min. 8 Tage alte Sporfen dea Mes-
entericus abtdten konnen. Da meine Untersuchungen laut Tab. V,
wonach ich im Paraff. liq. plus 2 Proz. Thymol bei 120 0 selbst in
30 Min. keine Keimfreiheit erzielen konnte, also von den Kieffer-
schen Resultaten abwich, machte ich dieselbe Untersuchung wie Tab. V
nochmals zur KontroUe und dehnte diesen Versuch auch auf 40 Min.
aus. Auch bei 40 Min. trat schon am 1. Tage Wachstum ein. Die *
Untersuchungen mit Paraff. liq. bei 150° und 180° und ebenso die Unter- •
suchungen mit Paraff. liq. plus 2 Proz. Thymol habe ich lediglich nnr •
aus theoretischen Grflnden vorgenommen, obwohl mir die Undurcbfuhr-
barkeit dieser Methoden im Sprechzimmer wegen der starken Verdun-
stungen bekannt war. Alle weiteren Versuche, irgendein stark wirkendes
Antiseptikum auOer dem Thymol im Paraff. liq. zur Losung zu bringen.
blieben erfolglos. Immer bildeten sich gflnstigstenfalls nur Emulsionen.

Weitere Versuche mit pflanzlichen Oelen, besonders mit Rizinusfil,
erwiesen sich auch als undurchfuhrbar, weil dieselben eindickten nod
auf den Gang der Maschinenteile hemmend wirkten.

In den weiteren Bereich meiner Untersuchungen zog ich daher nun
reines, wasserfreies Glyzerin, das genflgend diinnfliissig ist, Instrument*
geschmeidig macht und einen hinreichend hohen Siedepunkt (280°) be-
sitzt. Da ja Glyzerin als ein dreiwertiger Alkohol auch als gutes Kon-
servierungsinittel bevorzugt wird, hoffte ich, in Glyzerin bei hdherer
Temp, ein zweckmaBiges Sterilisationsmedium zu finden. Hierzu kam
noch, dall mir das Glyzerin die Moglichkeit bot, Losungen mit fast alien
Antiseptika erzielen zu konnen. Das Resultat meiner Untersuchungen
mit Glyzerin bei 120* erlautert folgende Tabelle:

Gck 'gle

Original from

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Dirska, Sterilisationsfrage komplizierter z&hnarztlicher Jn^truraente. 393

Tabelle VI.

SterilUation8mediuin: Reines, wasserfreies Glyzerin. Temp.: 120*.

Bterilisat-

Dauer

Wachstum in Bouillon nadi Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tageu

Minuten

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Die Uotersuchungen Tab. VI zeigten mir im Verhfiltnis zum Paraff.
liq. and Paraff. liq. plus 2 Proz. Thymol, dafi Glyzerin ein zweifellos
gfinstigeres Sterilisationsmedium ist, wenn auch dieses Resultat als nicbt
abschliefiend zu bezeichnen ist. Deshalb ging ich bei meinen weiteren
Versuchen zu einer Mischung von Glyzerin mit einem Antiseptikam
fiber. Als letzteres benutzte ich zun&chst Formalin, war mir. aber hierbei
von vornhqrein klar, dafi ich wegen der starken Verdunstung des Form-
aldehyd weit niedrigere Temperaturen wie bei den frfiheren Versuchen
wihlen muBte. Die nachfolgende Tabelle zeigt uns das Resultat meiner
Untersuchungen mit Glyzerin plus 5 Proz. Formalin bei 50°.

Tabelle VII.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 5 Proz. Formalin. Temp.: 50 s .

Sterilisat.-

Dauer

Wachstum in Bouillon nach Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

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Bei dieser Tabelle ist die bakterienhemmende Wirkung des Formalins
anschaulich dargetan. Erst am 2 Tage trat Wachstum auch bei nur
5 Min. Sterilisationsdauer ein. Keimfreiheit war aber bei dieser Methode
selbst nach 60 Min. nicht zu erzielen.

Als ein geeignetes Antiseptikum ffir eine Glyzerinlosung glaubte ich
nun, das Sagrotan, ein Chlor-Kresolseifenprfiparat, aus dem Grande zu
sehen, weil dieses Prfiparat fast ganz geruchlos ist und auch bei starken
Konzentrationen fast keine Reizung auf Haut und Schleimhaut auslSst.
Schottelius berichtet im „Arch. f. Hyg.“ eingehend fiber die wesent-
lich hfihere desinfizierende Wirkung des Sagrotans im Verh&ltnis zu
den fibrigen Phenolen. Auch hat er die Reizlosigkeit einer 10-proz.
Ldsung nach mehrstfindigem Einwirken auf die Inuenflfiche des Vorder-
armes nachgewiesen. Selbst eine 2-stflnd. Einwirkung von 25 proz. und
gar 100-proz. Sagrotan auf die rasierte Bauchhaut von Meerschweinchen
und Kaninchen verursachte wohl eine Rotung der Haut, aber nieraals

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

394

CentralbL t iiakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5-

eine Ver&tzung. Ieh selbst babe bei Versuchen, die ich bei mir an der
SuBeren Haut der Lippen nod an der Schleimbaut des Mundes vor-
genommen babe, die diesbezuglichen Angaben von Schottelius be-
statigt gefunden. Anch weist Schottelius praktisch genommen die
Ungiftigkeit des Sagrotans dadurch nacb, daB er Hunden bis zn 10 g
Sagrotan pro Kilogramm Kbrpergewicht durch die Scblundsonde ein-
fflbrte, ohne daB Krankheitserscheinungen aufgetreten wSren, und ohne
daB nach der TOtung der Tiere die Sektion irgendeine VerSndernng der
Magenschleimbaut und der Nieren ergeben hstte. Stahlinstrumente, die
icb wochenlang in reinem Sagrotan und in einer Sagrotan-Glyzerinlosung
liegen hatte, zeigten in keiner Weise Oxydationserscheinungen. Alle
diese Eigenschaften lieBen mir das Sagrotan als ein geeignetes Anti-
septikum in einer Glyzerinldsung erscbeinen. Der Siedepunkt des Sagro¬
tans liegt nach Angabe der Firma SchQlke u. Mayr-Hamburg un-
gefahr bei 100°. In einer 10-proz. Sagrotan-Glyzerinlbsung konnte ich
den Siedepunkt bei ungef£br 106° feststellen. In den nachstehenden
Tabellen sind die Eesultate eingehender Untersuchungen mit Sagrotan-
Glyzerin in verschiedenen Ldsungen und Temperaturen zusammengestellt.

Tabelle VIII.

Sterilisati.onsmedium: Glyzerin plus 5 Proz. Sagrotan. Temp.: 110".

Sterilis&t.

Dauer

Wachstum in Bouillon nach Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

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Tabelle IX.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan. Temp.: 100*.

Sterilteat.-

Dauer

Wachstum in

Bouillon nach Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tagea

Minuten

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Obige Untersuchungen (Tab. IX) kdnnte ich wohl bereits als eine
Lbsung der ganzen Frage betrachten. Immerhin ist man bei Tempera¬
turen von 100° auf einen besonderen Apparat mit Thermometer und
Thermoregulator angewiesen, der doch bei den sehr hohen Ausgaben
einer allgemeinen Einfuhrung dieser Methode hinderlich ist. Um eventuell
die 10-proz. Sagrotan-Glyzerinlbsung auch ohne grbBere Apparate, wenn
mbglich im Wasserbad, vornehmen zu kbnnen, machte ich weitere Unter¬
suchungen in der Weise, daB ich die Reagenzglfiser mit dem Sterili¬
sationsmedium, in dem sich die mit dem Testmaterial getrockneten

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Dirska, Sterilisationsfrage komplizierter zahnarztlicher Inetrumente. 395

Seidenfaden befandeo, im offenen Wasserbad erhitzte. Je nach dem
verschiedenen Verbaitnis des Wasser- und Glyzerinspiegels erhielt ich
bei meinen Versuchen verschiedene Temperaturen, die ich stets durch
ein Thermometer feststellte und kontrollicrte.

Tabelle X.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan.
_Temperatur: Wasserbad 90°._

Steriliaat.-

Dauer

Minuten

5

10

15

20

25

30

40

60

Wachstum iu Bouillon nach Tagen

12 3 4 5 6 7 8 910

+ 1+ +

+

+

+

+

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

— j Bouillonrohrchen zer-
schlagen

+ +

I-

12 3 4 5 6 7 8 910

Nach dieseo UDtersuchungen mufite ich dud auch zu dem Versuch
abergeheo, festzustelleo, ob das SterilisatioDsmedium auch geodgeod
zwischeu die iDoereo Hfllseo der HandstQcke eindringe. Zu diesem
Zvreck brachte ich io die iooere HQlse des HaodstQcks die mit dem
Testmaterial verseheoeo SeideDffideo so tief, daC sie nicht aus der darQber
sitzeodeo SuKeren HQlse hervorschauteo. Nach der Sterilisatioo schraubte
ich die Qufiere HQlse ab und Qbertrug mit der sterileD Pinzette die
Seidenf&den in die Bouillon. Das Resultat dieser Untersuchung, die
ohne Kontrollversuche vorgenommen ist, erweist Tab. XI.

Tabelle XI.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan. Temp.: 90*.

Das an Seidenfaden angetrockbete Testmaterial befand sich in der inneren Htilse
des Handhtilrkes.

Stenlinat.-Dauer

Wachstum

in Bouillon nach Tagen

Minuten

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Tabelle XII.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan.
Temperatur: Wasserbad 96°.

<Abspulen der Seidenfaden in sterilem Wasser vor dem Ueber-
t r a gen in Bouillon._

Sterilieat.-

Dauer

Wachstum

in Bouillon nach Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

Minuten

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396

Oeotralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 5.

Der Versuch Tab. X, wurde nochmals wiederholt, die Tempentar
im Wasserbad ergab diesmal 96°. Das Resaltat war dasselbe wie
Tab. X. Nach 10 Min. haben wir absolute Keimfreibeit. Die weiteren
Versuche macbte ich in der bisherigen Form, nur mit dem Unterschied,
daB icb einmal die Seidenf&den zwischen dem Uebertragen aus dem
Sterilisationsmedium in die Bouillon in sterilem Wasser abspfllte, das
andere Mai das Sterilisationsmedium in Kalilauge neutralisierte.

Tabelle XIII.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan.
Temperatur: Wasserbad 9& 9 .

Neutralisation in 2-proz. Kalilauge vor dem Uebertragen in Bouillon.

Steriligat.-

Dauer

| Wachstum in

Bouillon nach Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Bouillon nach Tagen

Minuten

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Um nun schlieBlich noch ganz streng vorzugehen, verwandte icb
nach der Sterilisation einen anderen Nfihrboden, und zwar 1-proz.Trauben*
zuckerbouillon, die sich bei anderen Versuchen als NShrbodenoptimnm
erwiesen hatte.

Tabelle XIV.|

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan.
__Temperatur: Wasserbad 92°._

Sterilisat.-

Dauer

Wachstum in Traubenzuckerbouillon
nach Tagen

Wachstum

Kontrolle.

in Traubenzuckerbouillon
nach Tagen

Minuten

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Tabelle XV.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan. Temperatur

Wasserbad 92°.

Abspiilen der Seidenfaden in sterilem Wasser nach der Sterilisation

Sterilisat.-

Dauer

Wachstum in Trau ben zuckerbouillon
nach Tagen

Kontrolle.

Wachstum in Trau ben zuckerbouillon
nach Tagen

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Um nun den wirklichen Verhaltnissen der Praxis bei meinen Unter-
suchungen naher zu kommen, nahm ich die weiteren Untersuchungen
direkt an Hand- und Winkelslucken, und zwar im Oelsterilisator nach
Dr. H. Schulte vor. Zunachst fiihrte ich in jedes Hand- und Winkel-

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Dirska, Uterilisationsfrage komplizierter zahnarztlicher Instrumente. 397

stiick 2 Seidenf&den ein und Qbertrug diese nach der Sterilisation in
Bouillon. Ein Qberraschendes Ergebnis (Tab. XVI), das einer n&heren
Erklarung bendtigt, trat insofern ein, als wir bei der gleichen Sterili-
sationsmethode, wie vorher, hierbei nach 25 Min. noch Wachstum be-
kamen. Der zweifellos interessante Grand ist darin zu sehen, daft ich
die Hand- und WinkelstQcke meinem Oelsterilisator in der Praxis, in
welcher ich bis dahin noch mit Paraff. liq. und zuf&llig gerade an diesem
Tage mit einem nicht ganz reinen und etwas dickfiussigen Oel arbeitete,
ohne weitere Reinigung der inneren Teile fQr die Versuche im hygieni-
schen Institut entnahm. Die Seidenf&den waren daher so sehr in dem
dickflflssigen Oel eingehilllt, dafi das Sterilisationsmedium an das Test-
material nicht wirkungsvoll herantreteu konnte. Der Kontrollversuch
iTab. XVII), den ich daher nachtrdglich, nach Reinigung der inneren
Teile der Hand- and Winkelstiicke, sonst aber unter den gleichen Be-
dingungen vornahm, best&tigte mir meine Annahme.

Tabelle XVI.

Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotau.

Temperatur: 100® (Oelsterilisator nach Dr. H. Schulte).

Die Seidenfade'n waren in die inneren Teile der Hand- und Winkelstiicke eiu-
i^efugt ohne vorhergehende Reinigung von anhaftendem Paraff. liq.

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Minuten

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Tabelle XVII.

t Sterilisationsmedium: Glyzerin plus 10 Proz. Sagrotan. v
Temperatur: 100° (Oelsterilisator nach Dr. H. Schulte).

Die Seidenfaden waren in die inneren Teile der Hand- und Winkelstiicke ein-
gefugt nach grundlicher Reinigung von Paraff. liq.

Bauer 1- ' I Wach9tum in BouiIloD Dach Ta « en Wachstum i“ nach Tagen

Den letzten Versuch, der die praktischen VerhSltnisse am natflr-
licbsten darstellen sollte, fiihrte ich in der Weise aus, daB ich Bohr-
maschinenhand- und -winkelstiicke in weitcm Reagenzglas mit meiner
10 Tage alien Mesentericus-Kultur infizierte und diese Kulturen
antrocknen lied. Die Hand- und Winkelstiicke brachte ich dann nach
der Sterilisation in weite Reagenzglaser mit Bouillon. Nachstehende
Tab. XVIII illustriert das Ergebnis.

Durch meine vorstehenden Untersucbungen und Ausfuhrungen glaube
ich den Beweis erbracht zu haben, daB wir mit Glyzerin plus 10 Proz.
Sagrotan bei 95° C in 10 Min. eine absolute Sterilisation erzielen kdnnen.

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398

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 5.

Tabelle XVIIL

S ter i lisation b mcd i um: Glyzerin plug 10 Proa. Sagrotan.
Temperatur: 100° (Oelsterilisator nach Dr. tL Schulte).

Hand- and Winkelstucke warden fur den Sterilisations versuch direkt infiziert.

Sterilisat.-Dauer Wachsttim in Bouillon nach Tageo

Minuten i

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9

10

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Da wir auBer der absolaten Keimfreiheit bei dieser Methode sogar eine
Schooling unserer Instrumente erreichen, da weiter diese Methode im
Sprechzimmer obne groBe. komplizierte und teoere Apparate and ohoe
Erschwerung der Praxisfflhrung durchgefuhrt werden kann, and da
schlieBlich noch unser angewandtes Sterilisationsmedinm keine schadi-
genden Reize auf Haut Oder Schleimhaut ausflbt, dflrften wohl alle
6 Bedingungen, die wir eingangs als Hauptforderung fflr eine zweck-
m&Bige Sterilisation komplizierter zahn&rztlicher Instrumente gestellt
haben, erfflllt sein.

Nachtrag: Fflr die praktische Durchfflhrung der angegebenen Me¬
thode w&ren noch 2 Punkte nachzutragen:

1) Unbedingt notwendig ist die Verwendung reinen wasserfreien
Glyzerins. Glyzerin dickt ebenso wie Oele nach l&ngerem Gebranche
ein, so daB es dann erneuert werden muB.

2) Aus Grunden einer bequemeren Durchfflhrung der Sterilisations*
methode und aus GrQnden eines besseren Gas- und Glyzerinverbrauchs
ist der Oelsterilisator nach Dr. H. Schulte von groBer Zweckm&Bigkeit

Iaiteratur. ,

l)Andresen, Ein neuer Oelsterilisator. (Dtsch. zahnarztl. Monatsschr. 1907,08.)

— 2) Blessing, Bakteriologie des Mundes und der Zahne. — 3) Conradi, Dtsch.
med. Wochenschr. 1900. S. 1015. — 4) Croner, Lebrb. d. Desinfektion. — 5) Flugge t
GrundriG der Hygiene. — 6) Heim, Lehrb. d. Bakteriologie. — 7) Hinrichsen.
Dtsch. zahnarztl. Monatsschr. 1907. S. 461. — 8) Lehman n-Neu raann, Bakterio-
logie. — 9) Kief fer, Asepsis u. Antisepsis d. Zahnheilkunde. — 10) Kolle u. He tech,
Bakteriologie u. Infektionskrankheiten. — 111 Mikulicz u. Kutnme), Die Krank-
heiten des Mundes. — 12) Miller, Die Mikroorganismen der Mundhohle.— 13) Mul¬
ler, Erich, CJntersuchungen iiber das Vorhandensein von Diphtheriebazillcn in der
Mundhdhle von nicht dipbtherischen Kindern. (Jabrb. f Kinderbeilk. Bd. 43 u. 54.)

— 14) Schottel i us, Chlor-Xylenol Sapokreeol (Sagrotan) ein neues Desinfektions-
mittel. (Arch. f. Hyg. Bd. 82. H. 2.) — 15) Schulte, H., Ein neuer Oelsterilisator.
Dtsch. zahnarztl. Wochenschr. 1916.)

Nachdruck verboten.

' Eine neue Dunkelfeldlampe 1 ).

Von Oberingenieur Falkcnthal, Berlin-Dahlem.

Mit 1 Abbildung im Text.

Fur Mikroskopierzwecke werden die Beleuchtungsquellen bekannt-
lich unterschieden in solche fur Hell- und fur Dunkelfeldbeleuchtung.
Wiihrend fur Beobachtung im Hellfeld fast alle kuustlichen Lichtquellen

1) Die Lampe ist dureh DRGM. und DRPA. geschiitzt.

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Falkenthal, Eine neue DuDkelfeldlampe.

von der Gas-Gliihlichtlampe bis zur Bogenlampe Anwendung finden,
konnen fur Dunkelfeldbeleuchtucg nur die starken Lichtquellen, vorzugs-
weise kleine Bogenlampen und in neuester Zeit Starkstromglflhlampcn mit
groBer LichtstBrke von 100—200 Kerzen und entsprechend hoheni Strom-
verbrauch benutzt werden.

Die nachstehend beschriebene neuartige Dunkelfeldbeleuchtung, welche
in Laboratorien offentlicher Anstalten bereits erprobt wurde, ist ein vor-
teilhafter Ersatz der zuletzt erwahnten Starkstromgluhlampen. Die Nach-
teile, welche letzteren anhaften, wie groBer Energieverbrauch, hohe Kerzen-
zahl, storende Heizwirkung, leichte Zerbrechlichkeit der langen, diinnen
Faden und daher kostspielige Unterhaltung sind hier jedoch beseitigt.

Die Konstruktion der neuen Lampe beruht auf der Erkenntnis, daB
von dem ca. 1 m langen Gliihfaden der Starkstromgluhlampen, welcher
bekanntlich in Zickzackform zu groBer FlSche in der Gliihbirne aufge-
wickelt wird, von einer Linse odor Spiegel nur immer ein kleiner Bruch-
teil der erzeugten Lichtenergie gesammelt und fur das Mikroskop nutz-
bar gemacht werden kann. Dies hat seinen Grund darin, daB die gewohn-
liche Linse bei geringen Abstanden zwi-

schenLichtquelleund Linse nur dasjenige

Licht sammelt, welches in ;1 u -

punkt vorbanden ist. Man
kanntlich mit der Bogen
eine punktformige Licht
des gliihenden Kohlekra
gunstigste Lichtausbeute.
haltnisse, wie sie bei der
liegen, sind bei der neuen

lampe nachgeahmt. Es wird daher zunacbst ei >3 Gluhlampe ver-
wendet, bei welcher der gesamte Gluhdraht zu einer nur wenige Milli¬
meter messenden weiBgluhenden Spirale zusammengerollt ist. Infolge
dieser Zusammendrangung des lichtspendenden Gluhfadens erreicht
man mit ganz kleinen Energien von ca. 40 Kerzen im Mikroskop den
gleichen Effekt, wie mit kleinen Bogenlampen oder den hochkerzigen,
groBen Starkstromgluhlampen, deren Stromverbrauch 5 bis lOmal so
groB ist. Da GHihlampen mit derartig eng zusammengerollten kurzen
und dicken F&den zweckmaBig fur ganz kleine Spannungen von 2—12 Volt
hergestellt werden, wurde, urn die Dunkelfcldlampe auch an Starkstrom-
netze anschlieBen zu konnen, ein Spannungstransformator in das Lampen-
gehause eingebaut. Dieser wandelt, wenn Wechselstrom vorhanden ist,
die Netzspannung von beispielsweise 220 Volt praktisch ohne Verluste
in die eigentliche Lampenspannung von 12 Volt urn. Da Spannungs-
transformatoren fur Gleichstrornnetze z. Z. noch sehr kostspielig sind,
empfiehlt sich in solchen Fallen der Betrieb der Lampe durch kleine
Akkumulatoren.

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400

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Centr&ibl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 5 .

Nachstehend seien die besonderen Vorztlge der neuen Dunkelfeld-
lampe, welche sowobl fdr Hell- als auch Dunkelfeldbeleuchtung vie auch
fQr Mikroaufnahmen benutzbar ist, zusammengefafit:

Der Stromverbrauch betrSgt nur ca. 20 Watt, d. h. etwa soviel als
eine gewOhnliche Zimmerlampe.

Die Unterhaltungskosten belaufen sich daher nur auf etwa */s bis
Vio aller bisher bekannten Dunkelfeldlampen.

Da die Gliihbirne nur mit 6 — 12 Volt betrieben wird, kdnnen, wie
vorher angedeutet, dort, wo kein Netzanschlufi vorhanden ist, auch kleine
Akkumulatoren zur Speisung Anwendung fin den.

Der Gluhfaden der Lampe besteht nur aus einer kurzen, dicken
Drahtspirale von nur wenigen Milimeter Lange. Er ist daher, im Gegen-
satz zu den Lampen fQr hohe Spannungen, sehr widerstandsfahig gegeo
jede ErschOtterung. Die Lebensdauer der Lampe betrSgt daher auch
mehrere 1000 Std.; die Ersatzkosten sind also sehr gering.

Die Lampe arbeitnt, im Gegensatz von Dunkelfeldbogenlaropen,
vollig geruch- und gerauschlos und erfordert keine Nachregulierung. Die
Wflrmeentwicklung ist infolge des kleinen Stromverbrauches naturgemaB
sehr gering.

Das Licht der Lampe ist fast weiB und &hnelt sehr dem der Bogeo-
lampe. Bei Betrachtung gefirbter Objekte erscheint dies besonders wert-
voll. Die Abmessungen der Lampe sind sehr klein, sie nimmt etwa den
Raum eines Mikroskops ein, ist also als sehr handlich zu bezeichnen.
Urn das Arbeiten zu erleichtern, wird ein Distanzbalter zwischen Lampe
und Mikroskop mitgeliefert.

Zur bequemen Einstellung des Lichtkegels ist das Lampengehluse
kipp- und in jeder Lage feststellbar, auch kann durch Ilerausziehei der
Lampenlinse der Lichtkegel konvergierend gemacht und die Leuchtkraft
dadurch fur besonders viel Licht erfordernde Beobachtungen noch etwas
gesteigert werden. Fiir Heilfeldbelcuchtung wird die Leuchtkraft der
Lampe im allgemeinen zu stark zu sein; hier schaltet man daher zwcck-
mSBig eine Mattscheibe in den Weg des Lichtkegels ein, wie solche z. B.
fOr jedes Mikroskop zum Auflegen auf die Irisblende des Abbekondea-
sators mitgeliefert werden.

Inhalt.

Blei v Rudolf, Drei neue Schafzestoden.
Nebst Bcitragen zur Kenntnis der iibrigen
Wiederkauerzeatoden. Mit 17 Abbil-
dungen im Text, 8. 365.

Dir ska, Carl, Kin Beit rag zur Ldsung der
8terilisaiionsfrage komplizicrlcr zahn-
arztlirher ln»trumenle, 8. 3S7.

Falkenthal, Kine neue Dimkelfoldlampe.
Mit L Abbildung im Text, 8. 3i)8.

Oaumitz, Hellmut, Beobachtungen liber
das Auftreten von DiphLherie in einer
Erziehung&anatalt, S. 32 i.

Kaneko, Renjiro, Zur Kultur der Spiro-
chaeta icterohaemorrhagiaeand
der Spiroch&eta hebdomadi*,

S. 345.

Knorr, Maximilian, Experi men telle Sto-
dien iiber die VVitkuna von Rinderplle
auf Ruhrbazillen, 8. 319.

Marouse, Kurt, Wassernaannsche Ra-
aktion und Kokzidiose beim Kaniucto.
8. 355.

Martini, E., Ueber die Eier unserer Ano¬
pheles. Mit4 AbbildungenimText,6.3(2.

Frommannsehe Bucbdruckerei (Hermann Pohle) in Jena.

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CeatnlhL f. Iikl etc. I. ML Origincli. 84.81 Heft 8.

Ausgegeben am 30. Dezember 1921.

Nachdruck verboten.

Untersudumgen iiber die chemische Beschaffenheit der
Kapselsubstanz einiger Kapselbakterien 1 ).

[Au 8 dem Bakteriologischen Institut der Universit&t Budapest
(Direktor: Prof. Hugo Preisz).]

Von Dr. Engen Kram&r, Assistenten am Institut.

Die Morpbologie der Bakterienkapseln gehbrt zu den wohlbearbeiteten
Kapiteln der bakteriologischen Forscbung, und groBes Interesse wurde
auch dem Parallelismus entgegenbracht, welcher zwischen der Kapsel-
bildung der pathogenen Bakterien und ihrer Virulenz zweifellos besteht.
In Bezug der chemischen Natur der Bakterienkapseln findet man da-
gegen fiuBerst wenige Angaben niedergelegt.

Aus den von verschiedenen Autoren an verschiedenen Bakterienarten
angestellten Untersuchungen kann mit Bestimmtheit festgestellt werden,
daB namlich die Kapselsubstanzen der verschiedenen Bakterien in
chemischer Hinsicht bei weitem nicht identisch sind, sondern im Gegen-
teil nicht einroal in den Rahmen einer durch cbemisch verwandte Sub-
stanzen gebildeten Gruppe eingegliedert werden kdnnen.

Bezfiglich der hierher gehorenden Literaturangaben sei auf die Arbeit
Toenniessens verwiesen. Wir beschr&nken uns daher nur auf die
Znsammenfassung der verschiedenen Untersuchungsresultate. Nach den
gefundenen Tatsachen konnen die Kapselsubstanzen der verschiedenen
bisher untersuchten Bakterienarten in 2 groBe Gruppen eingereiht
werden:

Zu der 1. Gruppe gehbren diejenigen, die keinen Stickstoff enthalten,
nach vorherigem Kochen mit verdQnnten Sfihren schwere Metallsalze
reduzieren und daher als Polymere verschiedener Monosaccharide auf-
gefaBt werden kdnnen. Das schOnste Beispiel hierfflr ist die Kapsel-
substanz des Pneumobazillus, weiche nach den Mitteilungen vonToen-
niessen als Galaktan, ein Polymer von Galaktose, anzusehen ist.
Das gleiche hat Emmerling fQr die Gummisubstanz des Bac. lactis
aerogenes gefunden. Die Schleimsubstanz des Bac. radicicola
besteht nach den Angaben Buchanans aus einem Kohlehydrat, welches
nach der Hydrolyse Glykose liefert.

Die 2. Gruppe bilden die Kapselsubstanzen, weiche Stickstoff ent¬
halten und im aligemeinen von glykoproteider Natur sind. So fanden
Burri und Allemann bei dem Bac. casei eine cbitinartige Substanz,
Ooethart bei dem Streptococcus hollandicus eine Art von
Muzin. In seiner Arbeit fiber den Milzbrandbazillus hat sich Preisz
auch dahin ge£ufiert, daB die Kapselsubstanz der Anthraxbazillen zu der
Gruppe der Muzine gehdre.

1) Nach einem in der Ungarischen Naturwissenschaftlichen Gesellschaft am
10. Mai 1921 gehaitenen Vortrage.

Kr*t« Abt. Orig^Bd. 87,

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Heft 6.

26

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402

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Die unserer Arbeit zugrunde liegenden Untersuchongen erstrecken
sich auf 4 verschiedene Bakterienarten, und zwar: den Pneumobazillus
Friedlfinder, den Milzbrandbazillus, den Bac. radicicola und auf
einen aus fadenziehendem Wein von uns isolierten Kapselbaziilus.

Zur Darstellung und Isolierung der Kapselsubstanz fanden wir von
den verschiedenen Methoden die von Toenniessen ausgearbeitete am
geeignetsten; dies Verfahren erwies sich bei den rein koblehydratartigen
Bakterienkapseln ebensogut verwendbar, als bei den Kapselsubstauzen
eiweifiartiger Natur.

Bezflglich der Details des Verfahrens sei auf die betreffende Mit-
teilung Toenniessens 1 ) verwiesen, hier m5ge nur das Wesen der
Methode kurz angedeutet werden:

Die von der Agaroberflache mit destilliertem Wasser abgewaschene Kulturmasse
wird mittels Alkohol niedergeschlagen, gereinigt and getrocknet. Nach Zerreiben im
M6rser gewinnt man ein femes Pulver, welches, in Wasser emulgiert und in Tu.-che
untersucnt, die Kapseln um die Bazillenieiber unversehrt geblieben zeigt. Die Ab-
trennung der Kapseln vou den Bazi lien lei bern erfolgt durch Kochen mit verdunnter
Kalilauge, wodurch die Kapselsubstanz in Ldsung gebracht wird, wahrend die ibrer
Kapseln beraubten Bazillen durch langes Zentrifugieren entfernt werden kbnnen. Die
in Ldsung befindliche Kapselsubstanz wird dann mittels Alkohol gefallt, der N'ieder-
schlag in dest. Wasser geldst, wieder mit Alkohol gefallt und der ganze ProzeB oiters
wiederholt. Die derart gereinigte Substanz wird getrocknet und fein zerrieben der
naheren Untereuchung unterzogen.

Pneumobazillns FriedlSnder.

Nach den Mitteilungen Toenniessens besteht die Kapsel des
Pnenmobazillus aus einem kohlehydratartigen K5rper, welcher bei der
Hydrolyse Galaktose liefert. Er kultivierte hierzu den Pneumobazillus
auf 3% Glyzerin enthaltendem Heimschen Glyzerinnfihragar und fiufterte
daber die Meinung, daft der Bazillus zur Bildung seiner Kapsel vielleicht
dieses Glyzerin des Nfihrbodens verwende.

Da aber der uns zur Verfugung stehende Pneumobazillusstamm
anch auf gewShnlichem Nfihragar sehr fippig gedieh, begnflgten wir uns
mit dem Kultiviercn auf gewdhnlichem Agar, um so mebr, als es nicbt
ohne Interesse war, zu wissen, ob durch die Verfinderung des Nfihr¬
bodens sich nicht aucb die Natur der Kapselsubstanz verwandle.

Die nach Toenniessens Verfahrens dargestellte Kapselsubstanz
ist ein schneeweiftes, lockeres Pulver, welches sich in Wasser, Sfiuren
und Laugen unter Opaleszenz leicht 16st. Sie gibt nicht die Farben-
reaktionen des Eiweiftes, wird durch Kocheo nicht koaguliert; Essigsfiure,
Sulfosalicylsfiure, Salpelersaure, Kupfersulfat, Quecksilberchlorid, Gerb-
sfiure, Ferrozyankali-Essigsfiure bewirken in ihrer L5sung keinen Nieder-
schlag. Alkohol, in Gegenwart von Neutralsalzen und bei schwach
saurer Reaktion, ffillt sie als lockere Flocken aus; ebenso wird sie ge-
ffillt durch Eisenchlorid und Bleiazetat. Bei Sfittigung mit Ammon-
sulfat scheidet sie sofort aus, bei Halbsfittigung bildet sich der Nieder-
schlag erst nach mehrstilndigem Stehen; die untere Greuze der Ausffill-
barkeit liegt ungeffihr bei Vs-SfittiguDg. Die Lasseignesche Probe
ist auch bei Verwendung grofterer Mengen (40— 50 mg) stets negaiiv.

Die unverfinderte Kapselsubstanz reduziert schwere Metallsalze nicht;
durch Ifingeres Kochen in verdiinnter Sfiure erhielt sie aber eine starke
Reduktionsffihigkeit. Sie ist optisch aktiv, wirkt rechtsdrehend; durch

1) Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 85. H. 4.

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Kramar,Chem. Beschaffenheit der Kapselsubstanz einiger Kapseibakterien. 403

Hefe wird sie zwar langsam, aber vollstfindig vergoren. Den Zersetzungs-
punkt des aus garbenformig angeordneten Nadeln bestehenden Phenyl-
osazons fanden wir bei 193° C.

Diese Angaben bestatigen die Untersuchungen von Toenniessen
and machen es bdcbst wahrscheinlich, dafi die Kapsel des Pneumo-
bazillus aus irgendeinem Polymere der Galaktose bestebt.

Da wir aber bei unseren Untersuchungen gewohnlichen Agar zum
NShrboden verwendeten, ergibt sich die Frage, welcher Bestandteil
dieses Nahrbodens als unmittelbare Quelle bei der Kapselbildung zu
betrachten ware? Die Annahme, dad hier selbst Agar-Agar als Kohle-
hydrat eine Rolle spiele, ist wegen seiner bekanntlicb schweren An-
greifbarkeit nicht wahrscheinlich; es konnen daher aufier den im Fleisch-
extrakte befindlicben geringen Kohlehydraten nur die EiweiBsubstanzen
and Peptone des Nahrbodens als jene angeseben werden, durch deren
Hilfe die Bakterien mittels komplizierten Abbaues und Wiederaufbaues
die nbtige Kohlehydratgruppe bereiten.

Bacillus anthracis.

Da die virulenten Milzbrandbazillen, auBer im TierkOrper, nur im
Serum kultiviert Kapseln bilden und die Reindarstellung der Kapsel-
snbstanz aus solcben Serumkulturen wegen der aus dem NShrboden
stammenden Verunreinigungen auf Schwierigkeiten st5Bt, wShlte ich zu
meiner Untersuchung einen von Herrn Prof. Preisz aus der Pasteur-
schen Anthraxvakzine gezuchteten sog. milden Stamm. Dieser nur fflr
MSuse pathogene Stamm zeichnet sicb, auch auf gewdbnlichem Agar
gezflcbtet, durch seine iippige Kapselbildung aus und schien daher zum
Stadium seiner Kapselsubstanz besonders geeignet.

Die Kapselsubstanz der Milzbrandbazillen stellt ein grOnlich-weiBes
Pulver dar, welches mit Wasser, Laugen und SSuren eine dickfltissige,
viskdse, wenig opaleszierende Losung gibt. Da schon minimale Mengen
(einige Zehntel Milligramm) dieser Substanz eine starke Lasseignesche
Berlinerblau-Reaktion verursachten, so ergab sich die Frage, ob wir
da nicht einem eiweiBartigen Kbrper gegenflberstehen. Dieser Richtung
folgend, stellte sich dann heraus, dafi die Kapselsubstanz des Bac.
anthracis die Farbenreaktionen des Eiweifies gut gibt, durch Kocben
jedoch nicht koagulierbar und mittels Essigsfture, Sulfosalizylsfiure und
Ferrozyankali-Essigsaure nicht ffillbar ist Von den schweren Metall-
salzen bewirken Kupfersulfat, Eisenchlorid und Bleiazetat, unter den
Alkaloidreagentien Gerbsfiure in ihren LSsungen einen grobflockigen
Niederschlag. Sie wird schon bei ^-S&ttigung mit Ammonsufalt gleich-
falls ausgeschieden.

Sonderbar ist ihr Verhalten gegentiber Alkohol: ihre wSsserige
LSsung enthalt schon bei 50 proz. Alkoholkonzentration eine milchartige
Trfibung, welche mit der Erhohung der Konzentration allmahlich steigt.
Nach 10—12 Std. kiart sich in Gegenwart von Neutralsalzen und bei
schwach sauerer Reaktion die FlOssigkeit, wahrend der Boden und die
Wandung des Becherglases mit einer diinnen Schicht einer weiBlich-
grflnen, klebrigen Masse iiberzogen wird.

Anlfifilich der qualitativen Analysen fanden wir regelmafiig Schwefel,
wahrend der Nachweis von Phosphor uns nie gelang. Der Stickstoff-
gehalt des bei verschiedenen Gelegenheiten dargestellten Materials
schwankte zwischen 7.4 — 8,0 Proz.

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404

Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Schwere Metallsalze warden dnrch die unver&nderte Kapselsnbstanz
nicht reduziert; nach vorherigem Kochen mit verdttnnten S&uren (wenig-
stens 10 Std. lang) and Einengen erfolgt eine zwar schwache, aber
deutliche Rednktion.

Auf Grund des Obenerw&hnten w&ren in betreff der chemischeo
INatur der Kapselsubstanz der Milzbrandbazillen 2 Annahmen gerecht:
sie kann in die Klasse der Glykoproteide gehOren, und dann mufi die
nachgewiesene Kohlehydratgruppe als Komponent des EiweiBmolekfils
betrachtet werden, Oder aber die Kapselsubstanz ist chemisch nicbt homo-
gen, sondern enth&lt nebeneinander einen eiweiB- und einen kohlehydrat-
artigen K6rper.

Gegen die 1. Auffassung spricht nur der relativ (bei EiweiBen on-
gewohnlich) niedrige Stickstoffgehalt der Kapselsubstanz, obwohl man
ausnahmsweise auch EiweiB mit noch niedrigerem N-Gehalt findet; so
fand Hammarsten in dem aus den EiweiBdriisen der Helix pomatia
dargestellten sog. Helikoproteid kaum 6 Proz. Stickstoff.

1m 2. Falle w&re es bei der heterologen Beschaffenheit der Kapsel¬
substanz dagegen unbedingt erforderlich, daB die EiweiBkomponente von
dem kohlehydratartigen Korper dnrch einfache chemische Verfahren,
ohne grdfieren Eingriff, getrennt wird, so daB wir am Ende einen eiweifi-
freien Kbrper von der Natur eines Kohlehydrates gewinnen. Unsere
bierauf gerichteten Versuche blieben aber immer erfolglos; die Abtrennung
■der Kohlehydratgruppe war nur nach linger dauernder Hydrolyse mbglich,
was nicht raehr einer Isolierung, sondern einer Abspaltung gleichkomml

Dessen bewufit, daB man eine endgGltige Klfirung dieser Frage nor
mach genau vollbrachter quantitativen Analyse gewinnen konne — wo-
von wir aber wegen der geringen Menge des uns zur Verfflgung stehen-
den Stoffes absehen muBten — halten wir es doch fflr wahrscheinlich,
daB die Kapselsubstanz des Bac. anthracis einheitlich ist und einen in
die Klasse der Glykoproteide passenden Eiweifikbrper darstellt. Da sie
sich leicht in Wasser lost und mit Essigs&ure nicht ausf&llbar ist, kann
sie noch am besten in die Gruppe der Pseudomuzine eingereiht werden.

In letzterer Zeit bin ich zufallsweise in der Lage gewesen, eine
andere, auch eiweiBartige Kapsel bildende Bazillenart zu prflfen. Bei
der Untersuchung fadenziehender Weine isolierten wir einen, morpho-
logisch dem Milzbrandbazillus fihnlichen Kapselbazillus. Schon bei do 1
Darstellung und Reinigung der Kapselsubstanz fiel uns ihr an die
Anthraxkapsel erinnerndes Verhalten auf: die mittels Alkohol nieder-
geschlagene Substanz ist von der gleichen, klebrig-z5hen Beschaffenheit,
wie wir sie bei dem Milzbrandbazillus so charakteristisch fanden. Im Laufe
der ntiheren Untersuchung stellte sich dann heraus, daB diese Substanz
mit jener der Milzbrandbazillen, wenn auch nicht identisch, so doch
nahe verwandt ist.

Bac. radlcicola.

Gewisse Stamme des Bac radicicola werden dadurch gekenn-
zeiclinet, daB ihre Kolonien, auf gewissen Agarn&hrb5den gezflcbtet,
eine stark schleimig-sulzige Eigenschaft annehmen. Bei dem von nns
gepriiften, schleimbildenden Stamm war es auffallend, daB die schleimige
Masse die Bazillenleiber nicht als wohlbegrenzte Hiillen umfaBte, son¬
dern die Bazillen vielmehr in die schleimige Grundsubstanz eingebettet
zu sein schienen. Infolgedessen war die Isolierung dieser, durch den
Bac. radicicola erzeugten Schleimsubstanz erheblich erleicbtert

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Kramar, Chem. Beechaffenheit der Kapeelsabstanz einiger Kapselbakterien. 4 Q 5

Andererseits wird durch die Eigenschaft des Schleimes — daB er
namlich mit Alkohol nicht als feiner Niederschlag ausgeschieden wird,
sondern als eine durchsichtige Sulzmasse im ganzen erstarrt — die
Entfernung der begleitenden Verunreingungen begflnstigt.

Zur Darstellung des Schleimes kana der Bac. radicicola auch
auf festem NBhrboden gezOchtet werden; zur Gewinnung grdBerer Men-
gen wird man aber, eben wegen der oben erw&hnten begflnstigenden
UmstSnde, auch einen flBssigen Nahrboden anwenden kSnnen.

Wir benfitzten eine NShrflflssigkeit von 0,5 Proz. Pepton- und
2 Proz. Saccharosegebalt, in groBe Kolben abgegossen. Nach Verlauf
1 Monates nach dem Beimpfen nahm, bei Zimmertemperatur gehalten,
der ganze Inhalt des Kolbens einen sulzig-schleimigen Charakter an;
nach Zusatz von */, Proz. Lauge wurde aber diese Eigenschaft derart
eingebQBt, daB die Entfernung der Bakterien durch Ausschleudern und
Filtrieren moglich war.

Die jetzt schon bakterienfreie, alkalische Ldsung wird angesSuert
and mit der 3-fachen Menge Alkohols zusammengebracht. Die Schleim-
substanz scheidet dann als gelbe, halbdurchsichtige Sulzmasse aus. Diese
wird herausgefischt, in warmem dest. Wasser geldst, wieder geffillt und
der ganze Vorgang dfters wiederholt. Die anfangs dunkelgelbe, wasserige
Ldsung wird dann im Laufe des Reinigungsprozesses immer heller und
die erstarrende Sulzmasse immer durchsicbtiger. Nach Trocknen und
Verreiben erhalten wir endlich die Schleimsubstanz als gelbliches Pulver.

Der in geschilderter Weise gereinigte Schleim des Bac. radicicola
16st sich leicht im Wasser zu einer gelblichen, sehr dickfltissigen, syrup-
artigen Fliissigkeit; auBer Alkohol bewirken in dieser Ldsung auch Eisen-
chlorid, Bleiazetat und Ammonsulfat eine sulzartige Ausscheidung, w&hiend
die ftbrigen, auch bei den vorerw&hnten Kapselsubstanzen beniitzten Rea-
gentien auf ihn ohne Einflufi sind.

Diese Schleimsubstanz gibt nicht die Farbreaktionen des EiweiBes,
auch nicht die Lasseignesche Probe. W&hrend sie unver&ndert schwere
Metallsalze zu reduzieren nicht imstande ist, erhfilt sie nach der Hydro¬
lyse eine starke Reduktionskraft. Sie dreht die Ebene des polarisierten
Lichtes nach rechts und wird durch Saccharomyces leicht vergoren.
Der Zersetzungspunkt ihrer Osazonkrystalle liegt bei 205° C.

Es ist daher kein Zweifel, daB die durch den Bac. radicicola
erzeugte Schleimsubstanz aus einem Kohlehydrat besteht, welches nach
der Inversion Glykose liefert.

Zusammenfassung.

Es wurden 4 verschiedene Bakterienarten in bezug auf die chemische
Natur ihrer Kapselsubstanz untersucht:

1) Die Kapselsubstanz des Pneumobazillus Friedl&nder be¬
steht aus Galaktan, einem polymeren Kohlehydrat, welches nach der
Inversion Galaktose liefert. Wir erhielten also bei Anwendung von
gewdhnlichem Agar dasselbe Resultat, welches Toenniessen durch
ZBchtung auf Heimschera Glyzerinagar erhalten hatte.

2) Die Kapsel des geprtiften Milzbrandbazillus fanden wir eiweiB-
artig. Da sie phosphorfrei, aber schwefelhaltig ist und eine durch
lfingere Hydrolyse abspaltbare Kohlehydratkomponente enthalt, kann
sie als ein Glykoproteid aufgefaBt werden.

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 87. Heft 6.

3) Die Eapselsubstanz des aus fadenziehendem Wein von nns iso-
lierten Kapselbazillus ist der Milzbrandkapsel chemisch derart fihnlich,
daB eine Vcrwandtschaft zwischen beiden mit Recht vermntet werden
kann.

4) Die Schleirasubstanz eines nns zur Verffigung stehenden Stammes
des Bac. radicicola stellt ein polymeres Kohjehydrat dar, welches
bei der Hydrolyse Glykose liefert und demnach als Dextran zn bezeichnen
ware.

Nachdruck verbotm.

Ueber die Natur der leukozytaren Einscbliisse bei
Encephalitis lethargica.

Bemerknngen znr Arbeit der Herrn Prof. Dr. Hilgermann,
Dr. Lauxen und Charlotte Shaw.

[Aus dem Institut fiir allgemeine Pathologie der K. Universitat Pisa
(Direktor: Prof. Dr. C. Sacerdotti).]

Von Dr. Ugo Pardl, Privatdozenten and erstera Assistenten.

In Heft 5 des 86. Bdes. dieses Centralblattes berichteten Herr Prof.
Hilgermann, Dr. Lauxen und Charlotte Shaw fiber einige
bakteriologische und klinische Befuude bei Encephalitis lethargica.
bei welchen es ihnen gelungen ist, spezielle Gebilde ira Dunkelfelde
sowie auch in nach Giemsa gefarbten Prfiparaten von Blutausstrichen.
von Blutanreicherungen wie auch im Leberpunktate zu sehen, die sie
ffir die Erreger dieser Krankheit ansehen und eingehend beschreiben.

Ich beabsichtige nicht, hier auf das naher einzugehen, was Hilger¬
mann, Lauxen und Shaw fiber die Bildungen der Organzellen
schreiben, welche fibrigens, wie aus den Figuren auf den Tafeln ihrer
Arbeit deutlich hervorgeht, morphologisch und farberisch verschieden
von denen der Leukozyten sind, sondern ich will hier nur hervorheben,
daB die von ihnen in den Blutausstrichen festgestellten Befunde von
mir (1) bereits beschrieben worden sind, und zwar sowohl bei der
Encephalitis lethargica wie auch bei anderen morbSsen Zustanden, wor-
fiber ich der Societk Toscana di Scienze Naturali am 9. Juli 1920 Mit-
teilungen gemacht habe, die den Verfassern unbekannt geblieben sind.
Ich teilte darin mit, daB man bei exanthematischem und dem Ileotyphns,
bei bazillarer Dysenterie, bei Diphtheritis und der Encephalitis lethargic*
mehr oder minder h&ufig im Zytoplasma einer Anzahl polynukleSrer
neutrophiler Leukozyten ausgepragte Bildungen wahrnehmen kflnne,
welche bei Farbung nach Giemsa durch ihre blaBblaue Farbe manch-
mal ganz gut abgegrenzt waren, in anderen Fallen aber verschwommen
und undeutlich aussahen und an der Peripherie des Zytoplasma, maneh-
mal in dessen Zwischenpartien, lagern und manchmal dem Kern an*
lagerten, von welchem sie jedoch immer durch ihre verschiedenen Farben-
tone gut zu unterscheiden waren.

Im Gegensatze jedoch zu Hilgermann, Lauxen und Shaw
deute ich diese Gebilde als ahnlich denjenigen, welche bereits 1912 von

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B5hm, Beitrage zur Kenntnis tierischer Parasiten.

407

DShle (2) aus dem Blute von Scharlachkranken beschrieben worden
waren, und nehme an, dafi dieselben, anstatt spezifische, fur die Diagnostik
oder Aetiologie wichtige, mehr als Entartungen des Plasmas der nentro-
philen polymorphen Leukozyten anzusehen seien, die sich unter dem
EinfiuB verschiedener Toxine bilden kbnnen, und zwar nicht allein auf
Grand ihres Vorkommens in verschiedenen Krankheiten, sondern auch,
and zwar haoptsfichlich weil man dieselben experimentell erzeugen kann,
dnrch verscbiedene Vers ache mit infektibsen oder toxischen Reizen.
Meine Untersuchungen an Meerschweinchen, denen ich subkutan be-
stimmte Mengen von Typhusbazillen, Proteus X19 oder diphtberischen
Toxinen einimpfte, ergaben das Vorkornmen der leukozytfiren Einschlfisse.

Ich teile dies hier mit, nicht der Prioritatsfrage wegen', sondern nur
am darauf hinzuweisen, dad unsere heutigen Kenntnisse fiber diese Ein¬
schlusse schon genfigend vorgeschritten sind, um mit Recht annehmen
zn konnen, dafi diese leukozytfiren Einschlfisse, entgegen den Anschauungen
von DOhle nnd anderen fiber den Scharlach, Vallejo (3) fiber den
exanthematischen Typhus, und Hilgermann, Lauxen und Shaw
fiber die Encephalitis lethargica, Keine fitiologische Bedeutung haben.
Auch ihre diagnostische Bedeutung ist deshalb ziemlich gering, weil sie
in verschiedenen morbosen Formen vorkornmen, die verursacht sind
darch unbekannte oder durch jetzt allgemein bekannte Erreger in-
fektibser Natur.

Literatnr.

1) Pardi, U., Contribute) alia conoacenza delle inclusioni leucocitarie di Dohle.
(Atti d. Soc. Toacan. di Sc. nat. Proc. verb. Vol. 29. No. 4.) — D5hle, Leuko-
zyteneioachliiase bei Scharlach. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 61. 1912.). —
3) Vallejo, Laa inclusionea leucocitarias de Dohle en el tifo exantematico de la
ciudad de Mexico. (Bol. Eatud. Biol. Mexico. 1917. No. 1.)

Naohdruck verboten.

Beitrage zur Kenntnis tierischer Parasiten.

[Aus dem Institut ffir allgemeine Zoologie und Parasitenkunde der Tier-
arztlichen Hochschule in Wien (Vorst.: Prof. Dr. Theodor Pintner).]

Von Privatdozent Dr. phil. et med. vet. Leopold Karl BOhm.

Mit 1 Tafel und 4 Abbiidungen im Text.

Inhalt: Vorwort, S. 408. — 1) u. 2) Kokzidien-Oozysten im Darm einea Fasan-
kfikena und einea Rehes. Auf Schnitten durch die Darmwand keinerlei vegetative
Stadien. Bedeutung dieser Erscheinung, S. 408. — 3) Eigenartiges Krankheitsbild bei
Befall durch Dicrocoelium lanceatum, S. 409. — 4) Diatomum sp. aus einem
Fasankuken, 8. 409. — 5) Sogenannte „Bandwurrazyaten tt vom Peritoneum einea Wasser-
froaches, S. 409. — 6) Cercariaeum lanceolatum nov. spec, aus Viviparua
viviparu8 (L.), S. 410. — 7) Diphyllobothrium decipiena (Diesing) aus Felia
parau8 L. Beitrag zur Teratologie der Bandwiirmer, S. 411. — 8) Diphy llobothr.
decipiena aus dem Darm einea Hundea, S. 414. — 9) Erganzungen zur Erstbeschrei-
bung von Davainea laticanalis Skrjabin. Das Haushuhn ala neues Wirtatier fiir
Dav. laticanalis (dieser Bandwurm neu fiir Europa), S. 414. — 10) Untersuchungen
fiber die Muakulatur dea Cirrusbeutels von Hymenolepia villosa (Bloch), S. 416.
“7 11) Nachweia, dafi fiir die Unteischeidung zwischen Taenia serrata und T. mar-
ginata das Merkmal des gespaltenen kurzen Wurzelfortaatzea der kleinen Roatellar-
haken von keinerlei differentialdiagnostischem Wert ist. Der Lowe ala neues Wirtatier
fur Taenia marginata (Batach). (Erater Befund dieser Bandwurmart in einem

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408

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 6.

katzenartigen Raubtier), S. 417. — 12) Fimbriaria plana v. Linstow aus eiuer |
Wildente. Erganzungen zur ersten und bis jetzt einzigen Beschreibung, S. 419. - ]

13) Das Trutbuhn als neues Wirtstier von Dithyridium variabile (Dieeineg '
Anatomisch-bistologische Beschreibung dieser Zestodenlarve. Eritik der beiden in aer j
Literatur gebrauchlichen Gruppennamen Plerocercue und Pierocercoid, Unmog-
lichlichkeit, diese beiden Larvenkategorien auseinanderzuhalten und Vorschlag, tile
parencbymatosen Finnen mit dem IN amen Plerocercus zu bezeichnen, 8 . 419. -
Literalurverzeicbnis, S. 426.

Die vorliegenden Ausfflhrungen sind das Ergebnis von Unter-
suchungen an tierischen Parasiten, welche ich aas dem Material heraus-
gegriffen babe, das w&hrend meiner Assistententatigkeit am Institute
von verschiedenen Stellen aus — amtlichen und privaten — zur Be- i
stimmung eiigesendet'wurde. Mafigebend fflr die Auswahl der einzelnen
bier angefuhrten Parasiten war stets die Erw&gung, ob sie parasito-
logisch von irgendwelchem besonderen Interesse waren, sei es faunistisch,
oder anatomisch-histologisch, Oder weil es sicb um neue Arten Oder did
neue Wirte fflr bereits beschriebene Formen, oder schlielllich um bisher
selten gefundene Parasiten handelte. Als Vergleicbsmaterial neben den
zur Bestimmung eingesandten Parasiten stand mir unsere Institute-
sammlung, die Sammlung des I. Zoolog. Institutes der Universit&t, die
Privatsammlung des Herrn Prof. Dr. Th. Pintner, sowie die flel-
mintbensammlung des Naturhistorischen Staatsmuseums, samtlich in
Wien, zur Verfflgung.

Die Untersuchungen wurden durchgefflhrt in dem eingangs an-
gefiihrten Institute, dessen Vorstand, Herrn Prof. Dr. Th. Pintner.
meinem verehrten Lehrer und Chef, ich ftir die zahlreichen, wertvollen
Anregungen und Ratschlage, mit denen er mich ununterbrochen unter-
sttitzte, zu dauerndem, warmem Danke verpflichtet bin.

I. Elmerla tenella (Eailliet et Lucet) [= Eimer ia avium (Silvestrini

et Rivolta)].

(Lehrk. f. patholog. Anatomie ) 1 ).

Im Darme eines Fasankukens vereinzelte Oozysten; auf Schnitten
durch verschiedene Darmabschnitte keine vegetativen Stadien zu finden.

. 2 . Elmerla sp.

(Lehrk. f. patholog. Anatomie.)

Im Darminhalt eines Rehbocks zahlreiche Oozysten, auf Schnitten
durch den Darm keinerlei Stadien. Bisher wurden Kokzidien
beim Reh noch nicht beschrieben.

Die Befunde, Nr. 1 u. 2, scheinen darauf hinzudeuten, daB die An-
gaben Eckardts (14) einer Ueberpriifung wurdig w&ren, nach welchen
„die Kokzidien nur fakultative Parasiten sind, die in feuchter
Gartenerde etc. gedeihen, sich massenhaft bei schwfller Sommertempe-
ratur in fauligen Futterresten etc. vermehren, und, wenn sie dann von
V6geln (offenbar gilt dies auch von anderen Tieren) zuf&llig aufgenommen
werden, sich im Darme weiter entwickeln 2 ).“

Bis jetzt findet sich allerdings in der Literatur keine einzige An-

1) Bei jeder Nummer 1st die Stelle vermerkt, von der aus die betreffenden Psr»-
si ten an die hiesige Lehrkanzel zur Untersuchung eingeschickt wurden. Die angefukren
Institute bzw. Lebrkanzeln gehoren der Tierarztlichen Hocbscbule zu Wien an.

2) Dieser Anscbauung E.s wird niemand zustimmen! Vielleicht sind die rer-
meintliehen Eimerien gar keine Kokzidien.

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Bdhm, Beitrage zur Kenntnis tieriscber Parasiten.,

409

gabe, welche dafflr sprechen wttrde, dafi eine Vermehrang der Kokzidien
aach im Freien stattfindet. Die Erscheinung, dafi im Darme von Tieren
Oozysten gefunden werden, manchmal wenige, manchmal zahlreiche, ohne
dafi auf Schnitten irgendwelche Stadien nachzuweisen wfiren [wie z. B.
in meinen Befunden 1) and 2)J kann auch darin begriindet sein, dafi
entweder das betreffende Individuum, welches die Oozysten per os auf-
nahm, nicht infektionsfahig war (infolge bereits zu weit vorgeschrittenen
Alters oder dergl.), Oder dafi es zu einer Art gehfirt, in welcher das
betreffende Coccidiura keine gunstigen Bedingungen fflr sein Fortkoromen
bzw. seine Vermehrang findet.

S. Dicrocoeltam lanceatnm Stiles et Hass.

(Nieder-Oesterr. Bez.-Tierarzt A. Grufi, Hainfeld.)

Zahlreiche Individuen in einer Schafleber. Wegen des interessanten
patholog.-anatom. Befundes will ich die die eingesendete Schafleber be-
gleitende Zuschrift und den Befund anfflhren:

„Herr E. R., Brauerei- und Wirtschaftsbesitzer in H. (Nied.-Oest.) bezog Ende
Sept. 1916 durch die Viehverwertungs-Gesellschaft 100 Schafe (angeblich .Sieben-
burgische Fluchtlinge“). Ende Nor. waren einige bereits derart erkrankt, dafi sie teils
verendeten, teils der Notschlachtung zugefiihrt werden mufiten. Sie boten das Bild
aUgemeiner Wassersucht. Ala Ursacbe wurde die maaaenhafte Anwesenheit von
Faaciola bepatica festgeatellt. Am 4. Dez. wurde vom Gefert. die Verabreichung
von K&mala angeraten und dies auch Mitte Dez. durcbgefiihrt. Das durch die hiesige
Apotheke beschaffte Mittel griff die Schafe, von kleinen Durchfallen abgeeehen, nicht
merklich an. Ein 24 Std. nach der Verabreichung notgeschlachtetea Schaf war bereits
frei von Faac. hepatica* (? ?). „8eit einigen Wochen sind nun wieder einige Stiicke
teils verendet, teils notgeschlachtet worden; allgemeine Wassersucht und Leberfaule.
Als Ursache stellt Gefert. jetzt Dicroc, lanceatum fest. Obwohl nach Marek
(Wien, tierarztl. Mon., Lit. 155. 1917), die Lanzettleberegel nur selten eine schwere Krank-
heit verursachen u , nimrat Gefert. dies im vorliegenden Falle nach der durch Fasc.
hepatica vorausgegangenen Schadigung dennoch an. Herr R. ersucht hiermit um ein
Gutachten mit der gleichzeitigen Verstandigung, ob und wie er die von den anfang-
lichen 100 Schafen jetzt nur eriibrigten 50 vielJeicht doch in irgeneiner Weise zu retten
versuchen kdnnte.*

Befund an der eingeschickten Schafleber: In den Gallongfingen
allenthalben aufierordentlich zahlreiche Individuen von Dicroc, lan-
ceatnm, keine einzige Fasc. hepatica. Leber nicht ver&ndert,
anch die Galleng&nge fast gar nicht verdickt.

Jedenfalls ist dieses Krankheitsbild von dem durch Fasc. hepatica
hervorgerufenen, wo bei chronischem Verlaufe stets Starke Verfinde-
rnngen in der Leber bzw. den Galleng&ngen zu konstatieren sind, wesent-
lich verschieden.

4. Distomum sp.

(Lehrk. f. pathol. Anatomie.)

1 kleines (2 mm langes, 0,6 mm breites) Individunm ans dem Darm
desselben Fasankiikens wie Nr. 1. Eine n&here Bestimmung event. Neu-
beschreibung ist zurzeit an dem einzigen Exemplar nicht mdglich. Bis-
her ist noch kein Trematode aus dem Fasan beschrieben.

5. Codonocephalus urnigerus (Rud.).

(Lehrk. f. Physiologie.)

Ans Rana esculenta L., wo diese Trematodenlarve in zahl-
reichen, runden, subperitonealen Zysten sich vorfand. Nach Lflhe (25)

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410

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 67. Hett 6.

zweifellos die JageDdform einer Strigea (Trematoden-Familie der
Holostomiden). In den physiologischen Instituten, wo Frosche massen-
haft zu Versucbszwecken benfltzt werden, ist die Larve unter der irrigen
Bezeichnnng „Bandwurmzysten“ allgemein bekannt.

Der ausfflhrlichen Beschreibung dieser Jugendform dnrcb Kop*
czynski (21) habe ich nicbts Wesentlicbes hinzuzuffigen.

6. Cercariaeum lanceolatnm nov. spec, ans Viviparusviviparus(L.)

= Paludina vivipara autt. (Lebrk. f. Fleischbyg.)

Im Mai 1916 wurde neben einer Menge anderer Scbnecken auch
eine Anzahl Sttlcke der lebendig gebdrenden Sumpfschnecke, welcbe aos
Donautumpeln bei St. Andrae stammten, in das Fleischbygienische In-
stitut gebracbt. Nach dem daselbst vorgenommenen Herauspraparieren
von jungen Schnecken aus den alten fanden sich in der betreffenden
Glasscbale Jugendstadien von Trematoden, welcbe der hiesigen Lehr*
kanzel zur Bestimmung Qbermittelt wurden. Redien bzw. Sporozysten
waren nicht vorhanden. Die Untersuchnng ergab, daB es sich um
schwanzlose Trematodenlarven, also um Zerkari&en handelte, wie sie
aus Landschnecken des bfteren beschrieben wurden, aus SuBwasser-
scbnecken hingegen bloB in einigen wenigen (5) Formen bekannt sind.
Aus Viv. viviparus (L.) fiihrt Lb he in der neuesten, zusammen-
fassenden Uebersicht der Zerkarien (25) kein Cercariaeum an.
v. Linstow verzeichnet in seinem „Compendium“ (23) aus dieser
Scbnecke 2 Zerkariden, ndmlich Cere, ovatura Diesing und Cere,
paludinae viviparae Diesing. Ersteres bat auszuscheiden, da es,
wie Linstow in dem 12 Jahre spdter erschienenen Nachtrag zu seinem
„ Compendium* zugibt, identisch ist mit Distomum luteum v. Baer,
einer enzystierten Distomenlarve, welche der berflhmte, vielseitige Natur-
forscher K. E. v. Baer (4) bereits 1827 beschrieben hatte; sie wurde
spdter wiedergefunden und abgebildet von La Valette St George
(44), Pagenstecher (34) und Wagener (45), zuletzt von Erco-
lani (15), der sie fiir eine verirrte Larvenform hdlt, die sich in Viv.
viviparus (L.) nicht zu Ende entwickelt, sondern daselbst dem Unter*
gang geweiht ist.

Diese Form unterscheidet sich in wesentlichen Belangen von der
mir vorliegenden.

Der Name Cercariaeum fiir die 2. der oben erwdhnten Formen
ist auf eine falsche Auffassung der Nomenklatur Diesings (10 u. 11)
zurbckzufiihren. 1818 beschrieb ndmlich der damalige Professor am
Tierarznei-Institut in Wilna, L. H. Bojanus (7) seine Beobachtungen
uber Redien und Zerkarien aus Limnaea stagnalis. Aus der bei-
gefiigten Abbildung ist zu ersehen, daB er hierbei in Wirklichkeit ge-
schwdnzte Zerkarien vor sich hatte. Die Redien, in denen diese ein*
geschlossen waren, halt er noch fiir die Distomen selbst. Bei dieser
Gelegenheit erwdhnt er nun von ihm schon vorher gemachte, dhnliche
Funde aus der bier in Frage stehenden Schnecke Viv. vipiparus(L)
mit folgenden wenigen Worten: „Ich bemerke hierbey, daB ich frflher
schon in der Leber der Helix vivipara Distomata gefunden hatte,
die dem ocreato Rud. nahe kamen und in ihrem Innern dasselbe
Spiel eingeschlossener Brut zeigten. Doch waren hier die Jungen der
Gestalt der Alten viel ahnlicher. u Diese hier erwdhnten Saugwurm-
larven belegt nun Diesing 1850 in seinem zusammenfassenden Werke
(10) mit dem Namen Cercaria helicis viviparae und reiht sie

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6ohm, Beitrage znr Kenntnit tierischer Parasiteu.

411

in die Unterordnung der Cercariaea ein, die er, in Verkennung ihres
Larvencharakters, als gleicbwertige Gruppe neben die Unterordnungen
der Trematoden und 6 dell idea stellt, in welchen die endo-und ekto-
parasitischen Saugwflrmer zusammengefafit erscheinen. In seiner 5 Jahre
spfiter erschienenen „Revision der Cercariaeen“ (11) betrachtet Die sing
diese Larvenformen immer noch als selbstSndige geschlechtslose Trema¬
toden und fflhrt die hier in Frage stehende Form in dem Kapitel *Cer-
cariaea minus cognita u , diesmal aber unterdem Namen Cercariaeum
paludinae viviparae an; unter diesem Namen wurde sie in die
spitere Literatur ilbernommen.

Fafit man nun die Worte von Bojanus „doch waren bier die
Jungen der Gestalt der Alten Shnlicber tt so auf, daB er eine schwanz-
lose, in Redien oder Sporozysten eingeschlossene Brut, also Zerkariaen
im heutigen Sinne, vor sich batte, so braucht bei einer Neubeschreibung
diese Notiz nicht berflcksichtigt zu werden; es gebt nicbt an, die er-
wShnten wenigen Worte, welche die Larven gar nicht kennzeichnen und
nicht mehr Wert besitzen als ein Nomen nudum im Sinne der Nomen-
klaturregeln (46), als eine Beschreibung gelten zu lassen. Uebrigens
ist es gar nicht wahrscbeinlich, daB Bojanus das so auff&llige Merkmal
der Schwanzlosigkeit nicht besonders hervorgehoben hatte, wo doch die
anderen in der Notiz beschriebenen, aus Limnaea stagnalis stam-
menden Larven als geschw&nzt beschrieben und abgebildet werden.
Hatte er also geschwfinzte Zerkarien vor sich, so fallt eine BerUck-
sichtigung derselben bei der Neubeschreibung der mir vorliegenden un-
geschwanzten Larven von selbst weg.

Ich lasse die Beschreibung der von mir entdeckten Zerkarifien folgen:

Cercariaeum lanceolatum mihi (vgl. Fig. 1).

Der Korper ist breitlanzettfdrmig, flach, seine Lftnge betrBgt (an
Alkoholmaterial, wie alle folgenden GrSBenwerte, gemessen) ca. 0.61
bis 0,93 mm, seine groBte Breite (in der H6he des Aequators des Bauch-
saugnapfes) ca. 0,30 mm. Die Farbe der Tiere ist eine opak-weiBe.
An der Hautoberflache keinerlei Stachel- oder Wfirzchenbildungen. Mund-
saugnapf etwas lfinger als breit, 0,13:0,11 mm, ohne Bohrstachel; hinter
ihm der nicht ganz 1 / 2 so lange Pharynx. Bauchsaugnapf zur Gftnze
in der hinteren Korperhaifte liegend, derart, daB sein vorderer Rand
eine quer durch die Mitte des Kdrpers gezogen gedachte Linie erreicht.
Er ist bedeutend gr8Ber als der Mundsaugnapf, ungefhhr kreisformig,
ca. 0,22 mm im Durchmesser haltend (sSmtlichen Zahlenangaben mit
Ausnahme der TotalgroBenmaBe sind Messungen an einem mittelgroBen
Individuum von ca. 0,81 mm Lange zugrunde gelegt). Oesophagus
ziemlich kurz, Darmschenkel ungefahr bis zur Mitte zwischen Hinter-
rand des Bauchsaugnapfes und Korperende reichend. Die terminale
Exkretionsblase birnformig, sehr klein, ca. 0,03 mm lang, nach vorn
ziehende Schenkel konnten nicht beobachtet werden. Zwischen Ex¬
kretionsblase und Hinterende der Darmschenkel die 3-teilige, kornelige
Anlage der Geschlechtsorgane. — Ob sich die Zerkariaen in Redien
oder Sporozysten entwickeln, konnte nicht festgestellt werden, da der-
artige Gebilde in meinem Materiale nicht vertreten waren.

7. Diphyllobothrium declpiens (Diesing).

4 Ketten mit Scoleces, die lfingste ca. 55, die kiirzeste ca. 25 cm
lang aus dem Diinndarm eines schwarzen Panthers (Leopards, Felis

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CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

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pardus L.) von der Menagerie Schdnbrnnn (Lehrk. f. pathologische
Anatomie).

Auffailig waren bei diesen Ketten die vielen Anomalien. So fanden
sich: Einzelne zentral gefensterte Proglottiden; ferner waren die letzten

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Bdhm, Beitrage zur Kenntnis tierischer Parasiten.

413

Glieder sSmtlicher Ketten abnorm gestaltet, bzw. in ihrem anatomischen
Baa von der Norm abweichend. Die eine Kette zeigte ein gegabeltes
Hinterende (vgl. Fig. 2), and zwar setzte sich der eine, etwas langere
Gabelast aus 3, der andere aus 2 Gliedern zusammen, welche ungefahr
halb so breit waren wie die letzten normalen Proglottiden. Die letzten
Genitalpori waren auf dem letzten ungegabelten Glied zu sehen, die
Proglottiden der beiden Gabel&ste zeigten keine Genitalpori.

Das letzte Glied der 2. Kette (vgl. Fig. 3) war ebenfalls bloB etwa
halb so breit wie die vorhergehenden, unregelm&Big spitz zulaufend und
wies keine Genitalbffnungen auf.

Bei der 3. Kette (vgl. Fig. 4) gabelte sich wieder das drittletzte
Glied in 2 Aeste, von denen der eine klein und zipfelfdrmig, der andere,
welcher auch die Geschlechtsdffnungen trug, breiter und bedeutend in
die LEnge gestreckt war; an ihn schlossen sich noch 2 ebenfalls lang-
gestreckte, schmale Proglottiden ohne Geschlechtsdffnungen an.

Bemerkenswerte Anomalien wies auch die 4. Kette auf, welche im
ganzen ein tanioides Aussehen hatte, wie dies bei vielen Exemplaren
von Dibothriocephalus latus (L.) aus dem Menschen vorkommt
[vgl. Braun (9). S. 1612]. Besonders lang (im Verhaitnis zur Breite)
waren die hinteren Proglottiden, und die beiden letzten von diesen waren
noch dadurch ausgezeichnet, daB der mit den charakteristischen, ge-
deckelten Eiern prall gefQllte Uterus des letzten Gliedes vor der Grenze
zwischen diesem und dem vorletzten Gliede nicht halt machte, sondern
bis in die Mitte des letzteren hineinreichte, so dafi also die beiden letzten
Proglottiden, wenn nicht der deutlich ausgesprochene Einschnitt zwischen
ihnen vorhanden gewesen ware, den Eindruck eines einheitlichen Ganzen
hervorgerufen hatten.

Das Auftreten so mannigfaltiger Anomalien bei alien Ketten er-
scheint, wie erwahnt, auffailig. Ihre Ursachen wage ich nicht zu deuten,
doch mdchte ich immerhin darauf hinweisen, dafi vielleicht ein Zu-
sammenhang zwischen ihnen und dem Leben des Bandwurmtr&gers in
der Gefangenschaft, fern von seiner eigentlichen Heimat, besteht. Ich
denke an Degenerationsvorgfinge bei diesen Bandwnrmexemplaren, welche
durch die abnormen Lebensverhfiltnisse ihres Wirtes sich wohl erklaren
liefien; hiefflr wfirde auch die verhaitnismafiige Kleinheit der Ketten
sprechen. Wahrend Die sing in seiner Erstbeschreibung filr die tin
Frage stehende Art (12) eine Lange von 5' (= ca 162,5 cm) und eine
grdfite Breite von 4"' (= ca 8,8 mm) angibt, ist von den mir vor-
liegenden Ketten die lBngste bloB ca 55 cm lang und an ihrer breitesten
Stelle nur ca 4 mm breit. — Zu einer anderen ErkiarungsmOglichkeit
fflhrt die Erw&gung, ob die vielen Abnormitaten nicht etwa damit im
Zusammenhang stehen, daB von Bothriozephaliden so oft zahlreiche, ja
sehr viele Ketten in einem Wirte zu finden sind. Wenn die zahlreichen
Parasiten lebhaft gegeneinander sich bewegen, sich umschlingen etc.,
k5nnen sie leicht stark mit Eiern gefQllte Uteri zum Platzen und da¬
durch die Kette zur Deformierung bringen.

Auch an Verletzungen der Kette an jenen Stellen, wo die Spaltung
beginnt, durch spitze, scharfkantige Korper im Darminhalt, etwa Steinchen,
Knochensplitter u. dgl. ist zu denken. Braun gibt zwar in seinem
groBen Zestodenwerke (9, S. 1618), wo er die 12 bis dahin bekannt
gewordenen Falle von Bifurkation zusammenstellt, nur zwei MSglich-
keiten fOr das Zustandekommen dieser Anomalie an: Einmal Fensterung
von Gliedern und zweitens die Bildung von anormalen, an der Seite

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Centralbl. £ Bakt etc. 1. Abt Originals. Bd. 87. Heft 6.

von Gliedern gelegenen Knospen. Grohmann (18), der die Abnor*
mitfiten in den Proglottiden, insbesondere der Bothriozephaliden zu-
sammenfassend abhandelt, glaubt zeigen zu kdnnen, dafi bei Gabelnng
von Bandwnrmketten „von nichts anderem die Rede sein kann als von
einer Spaltung, welche voraussichtlich durch eine Verletzung entstanden
sein dttrfte, die den in starkem Wachstum begriffenen vordersten Teil
der Kette getroffen hat tt . Seine Argumente hieffir und die zu ihrer
Sttitze herbeigezogenen Figuren erscheinen sehr beweiskrfiftig.

Der Kadaver des die Bandwfirmer beberbergenden Leopards wurde
von der Menagerieverwaltung Schfinbrunn an die Lehrk. f. pathol. Anat
der Wiener Tierfirztlichen Hochschule behufs Feststellung der Todes-
ursache fiberbracht. Der Sektionsbefund lautet 1 ): „Rechtsseitige sero-
fibrindse und hamorrhagische Pleuritis, beiderseitige Endokarditis,
Dfinndarmkatarrh, Bandwfirmer im Dfinndarm* 4 .

In seiner Monographic der Bothriozephaliden fflhrt Ariola(2) aus
dem Panther blofi die beiden Arten Bothrioceph. sulcatus (Mol.)
und Bothrioceph. maculatus F. S. Leuck. (irrtflmlich! Soli heifien:
Rud. Leuck.!) an; mit Unrecht, wie der vorliegende Befund zeigt and
wie auch aus den Angaben von 0. v. Linstow (23), Stiles u. Has*
sail (42) u. a. hervorgeht.

8. Diphyllobothrlum decipiens (Diesing),
ca. 60 cm lange Kette samt Scolex aus dem Darm eines Hundes
(Lehrk. f. patholog. Anat.). In der Literatur ist, soweit mir bekannt,
an einer einzigen Stelle diese Art als Parasit des Hundes angeffihrt,
und zwar leider ohne Quellenangabe, nfimlich in der Wirtsliste der
Gedoelstschen Parasitenkunde (16).

Grubenkopf-Bandwfirmer sind in den fleischfressenden Hanstieren
selten, fiber ihre pathogene Bedeutung ist fast nichts bekannt. Merkmale
von Anfimie, wie sie beim Befall des Menschen mit dem breiten Gruben-
kopf charakteristisch sind, wurden in vorliegendem Falle nicht kon-
statiert. Ich lasse den Sektionsbefund folgen:

„Hund (Ikterus). Paakreaskarzinom. Geschwiire im Duodenum, in der Umgebung
der Ginmuudung des Lebergallenganges. Hochgradige blutige Injektion und Schwellung
der Darmschleimhaut, mit leichten oberflachlichen Epithelverlusten und zahweichen
Auflagerungen. Metastasen in der Leber. 1

9. Davainea laticanalis Skijabin.

3 Eetten (die lfingste 165 mm lang) aus dem Darm eines jungen
Huhnes (Lehrk. f. patholog. Anat.). Skrjabin beschrieb diese Art
vor wenigen Jahren (41) als 20. Davainea-Art aus Galliformes,
und zwar aus einer brasilianischen Perdix sp. Mithin ist mein Be¬
fund neu ffirEuropa und Gallus ferrugineusGm., das Hans-
huhn, ein neuer Wirt fflr diesen Bandwurm.

Nun bedarf die Wirtsangabe Skrjabins „Perdix sp., Brasilien*
noch einer Klarstellung. Die Verbreitung der Rebhfihner beschrftnkt
sich nfimlich der einschlfigigen Literatur zufolge auf die Alte Welt, aus
Sfidamerika ist keine freilebende Art bekannt. Nach einer Mitteilung des
Herrn Hofrats R. Wettstein-Wester sheim, der Sfidamerika bereiste

1) Ich fiige die Sektionsbefunde der von den hier abgehandelten Pansiten be-
fallenen Wirtstiere, soweit sie mir zur Verfugung stehen, bei, da derartige Angaben
sehr geeignet sind, wertvolle Beitriige zur Kenntnis der Biologic und pathogenen Be¬
deutung der betreffenden Parasiten zu liefern.

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BObm, Beitrage zur Kenntnie tierischer Parasiten.

415

und den ich hieriiber urn Auskunft bat, bezeichnen jedoch die dortigen
Pflanzer andere, an der OstkQste SQdamerikas weitverbreitete Angehflrige
der Ordnung der HQhnervflgel, die eine den RebhQhnern Bhnliche Lebens-
weise fQhren, nQmlich die HokkovOgel (Arten der Gattung Penelope
Merr.) mit dem Namen „RebhQhner“, und so dfirfte die Wirtsangabe
Skrjabins zu erklSren sein.

Charakteristisch fQr die in Frage stehende Davainea-Art ist nach
Skrjabin der Bau des Exkretionssystems: „Die beiden ventralen Lftngs-
gefSBe sind am hinteren Rande der Proglottis durch einen Verbindungs-
kanal vereinigt, der in seinem mittleren Teil 2 blasenfQrmige Anschwel-
lnngen bildet; die letzteren sind mit ihren konvexen Seiten nach vorn
gerichtet (vgl. Fig. 10 der zitierten Arbeit!). Dieses Merkmal halte ich
tatsachlich fQr sehr charakteristisch, weil sich fQr keine der zahlreichen
Davainea-Formen eine Qhnliche Angabe in der Literatur findet und
weil ich bei vielen Arten dieser Gattung, teils aus meinem Material,
teils aus dem des Wiener Naturhistorischen Staatsmuseums (aus den
verschiedensten Wirten), die ich daraufhin untersuchte, vergeblich nach
einer analogeu Bildung fahndete. Ich halte mich daher, da dieses
charakteristische Artmerkmal neben anderen wichtigen (doppelte Haken-
krone, gleiche Hakenlange, unregelmSBig abwechselnde Geschlechts-
bffnungen, Qbereinstimmende L&nge der Bursa cirri) bei den mir vor-
liegenden Ketten sehr deutlich ausgeprfigt ist, zur oben angefQhrten
Artdiagnose berechtigt, will jedoch nicht verschweigen, daB eine Anzahl
von Charakteren mit der Erstbeschreibung Skrjabins nicht Gberein-
stimmt. Wahrend dieser Autor die Lange der Strobila mit 110 mm,
bei einer Maximalbreite von 3,5 mm angibt, ist bei meinem Material
die langste Kette, wie erwBhnt, 165 mm lang, bei einer Breite von
1,8 mm. Ferner gibt Skrjabin ca. 160 Haken an, wahrend ich un-
gefahr 220 zBhlen konnte. Diese Verschiedenheiten fallen jedoch bei der
auBerordentlichen Variabilitat der Davaineiden nicht sonderlich ins Ge-
wicht. Ich fQhre als analoges Beispiel die sehr voneinander abweichenden
Beschreibungen einer anderen, jQngst beschriebenen HGhner-Davainea
(Dav. penetrans Baczynska) beiihrer Erstbeschreiberin Baczynska (3)
und bei Skrjabin (40), der sie nachuntersuchte. Wahrend erstere fQr
diesen Zestoden eine Lange von bloB 40 mm angibt (Breite der reifen
Glieder 0,48 mm) fand letzterer in Russisch-Turkestan, wo die in Frage
stehende Davainea-Art als der weitverbreitetste HQhnerparasit er-
scheint, Exemplare von 180 mm bei einer Breite von 3 mml Die Zahl
der Rostellarhaken erreicht nach Skrjabin ca. 300, nach Baczynska
240. Das ZQhlen der zahlreichen, dabei minutiosen Haken (ihre Lange
variiert von 8—17 ju bei den einzelnen Arten) ist eben mit ziemlichen
Schwierigkeiten verbunden, namentlich auch infolge des Umstandes, daB
an den Seiten des Rostellums, wo die beiden Haiften des Hakenkranzes
zusaramentreffen, eine oft bedeutende Anzahl der Haken beider Haiften
einander decken, so dafi sie vom Mikroskop, auch bei Anwendung der
starksten VergrOBerungen, nicht aufgelost werden k6nnen. Auf diese
Weise erklQren sich die bei den einzelnen Autoren verschiedenen Zahlen-
angaben. Vielleicht kommt noch dazu, daB die Hakenanzahl, wie so
manche andere Charaktere bei den Davaineiden, innerhalb gewisser
Grenzen variiert. — Noch eine Verschiedenheit zwischen dem mir vor-
liegenden Parasiten und Dav. laticanalis nach der Erstbeschreibung
muB ich erwBhnen: Wie bei alien Davainea-Arten zerfallt auch hier
der Uterus in eine mehr Oder weniger groBe Anzahl von Parenchym-

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416 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

kapseln, in denen sich die „Eier tt (richtiger: Onkosphflren) in bei den
einzelnen Arten wechselnder Zabl finden. W&hrend nun Skrjabin
angibt, auf Flachenschnitten durch reife Proglottiden von Dav. lati-
canalis 3—4 „Eier“ beobachtet zu haben, konnte ich auf Fl&chen-
echnitten durch meine Exemplare blofi je 1 OnkosphSre in einer Uterus-
kapsel sehen. Auch die Konstanz dieses Merkmales scheint mir nicht
festzustehen. So konnte ich z. B. auf Flachenschnitten durch reife
Glieder einer Fasan-Davainea (Dav. Friedbergeri Linstow ans
dem Materiale des Naturhistorischen Staatsmuseums in Wien) 4 Onko-
spharen in einzelnen Uteruskapseln zahlen, wahrend allgemein blofi 2
bis 3 als fflr diese Art charakteristisch angefflhrt erscheinen.

Alles in allem ergibt sich mir aus meinen Untersuchungen an
Davaineiden aus Vflgeln, dafi diese wichtige Gruppe von Bandwfirmern
einer modernen Bearbeitung in vieler Hinsicht bedflrftig ware.

10. Hymenolepis villosa (Bloch).

3 Ketten (400 mm, 330 mm und 290 mm lang, alle ohne Scolex)
aus einer Trappe (Lehrk. f. patholog. Anat.).

Die beiden Hauptmerkmale dieser Art, die ihr ein ganz eigenartiges
Geprage geben, sind: An dem einen Seitenrand (der dem Genitalporus
entgegengesetzt liegt) ist jedes Glied in einen langen Zipfel ausgezogen,
der die Breite des Gliedes um die Halfte und mehr flbertreffen kann;
dadurch bekommt die Kette ein eigentilmlich zerfranstes und ganz
asymmetrisches Aussehen. Weiter ist fflr diese Art charakteristisch die
ungewdhnlich starke muskulose Wandung des Cirrusbeutels. Dieser
letztere Umstand legt den Gedanken nahe, Untersuchungen darflber an-
zustellen, ob hier nicht ein Fall von quergestreifter Muskulatur bei
einem Bandwurm vorliegt, etwa wie bei den quergestreiften Muskeln in
den Rflsselkolben der Tetrarhynchen (jener interessanten Fischzestoden),
wie sie zuerst Sanders (38) erwahnte und viele Jahre spater Pint-
ner (35) bestatigte und genauer beschrieb. (Sonst sind quergestreifte
Muskeln bei Zestoden nur noch durch K1 a p t o c z (20) bekannt ge-
worden, der bei einem Bothriocephaliden quergestreifte Retraktoren und
Protraktoren des Cirrus im Cirrusbeutel beschrieb.) In der Tat sah
ich auf Flachenschnitten Bilder, welche tauschend den Eindruck quer¬
gestreifter Muskulatur hervorriefen (vgl. Tafelfig. 1). Fflr Zeicbnungen ein-
zelner quergestreifter Muskelfasern, namentlich um die GroBenverhilt-
nisse zwischen den sarcous elements und der einfach brechenden Sub-
stanz darzustellen, fertigte ich nun am Binokuiarmikroskop Zupfprflparate
an, konnte aber weder an gefflrbten noch an ungefarbten Exemplaren
Querstreifung der einzelnen Fasern beobachten, ob ich nun in Glyzerin
oder in Zedernol oder in 2-proz. Essigsflure untersuchte. Dadurch stutzig
gemacht, stellte ich nochmals recht dflnne (4 fi dicke) Fiachenschuitte
her und farbte mit Hamatoxylineisen nach Heidenhain, einem fflr
das Studium quergestreifter Muskulatur besonders geeigneten Farbstoff.
Da zeigte sich nun, dafi die Querstreifung der Muskulatur des Cirrus¬
beutels, wie ich sie zuerst beobachtet hatte, eben nur eine scbeinbare
war und ihre Erklflrung in folgendem findet: Die die Muskulatur des
Cirrusbeutels zusammensetzenden Muskelfasern sind fafidaubenartig ge*
bogen, und zwar in um so stflrkerem Mafie, je mehr sie gegen die Ober-
fl&che des Beutels zu gelegen sind. Auf Flachenschnitten durch die
Proglottiden, in denen der Cirrusbeutel also lfingsgeschnitten erscbeint,
und zwar namentlich auf solchen Schnitten, die sich der Medianebene

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6ohm, Beitrage zur Kenntnis tierischer Farasiten.

417

dieses muskuldsen Organes nShern (aber auch auf meh{ gegen die Ober-
fldche zu gelegenen) sieht mao nun neben den scbdn parallel nebenein-
ander liegenden, mehr gestreckten Muskelfasern die quergeschnittenen
Enden der starker gebogenen Fasern, und zwar in mehreren Lagen naher
zum und entfernter vom Genitalporus, je nachdem sie eben starker oder
weniger gebogen und daher naher Oder entfernter von ibren Endpunkten
durchgeschnitten wurden. Diese Querscbnitte von Muskelfasern, die den
Farbstoff viel intensiver aufnebmen als die Obrige Oberflache der Fasern,
sind es, welche eine Querstreifung der Muskulatur vortauschen.

Ich babe diesen Befund hierhergesetzt, um spatere Untersucher vor
dem naheliegenden Irrtum, als ob es sich hier um quergestreifte Musku¬
latur bei einem Zestoden handle, zu bewahren.

11. Taenia marginata Batscb.

Ca 325 mm lange (nicbt vollstandige) Kette samt Scolex aus dem
Duodenum eines an Pleuropneumonie umgestandenen Lowen. Der-
selbe, ein mannliches Individuum, war 4 Jabre alt, aus der Menagerie
des Zirkus Henry, seine Herkunft nicht eruierbar (Lehrk. f. patbolog.
Anat.).

Bis jetzt ist in der Literatur nur eine Tanie aus dem Ldwen er-
wahnt, und zwar: Taenia taeniaeformis (Bloch) = T. crassi-
collis Eudolphi, welche aus diesem Wirtstier in einer von Gough
aufgestellten Liste der in Sfldafrika vorkommenden Zestoden, Trema-
toden und Nematoden (17) angefflhrt wird. Nach AusschluB dieser Art,
welche viel grSBere, klobigere Haken besitzt als die mir vorliegende
Form, ergab die vergleichende Heranziehung samtlicher Tanien aus
Earnivoren, daB es sich um Taenia marginata Batsch handle.

Bei der Gelegenheit mochte ich einer Eigenthmlichkeit der kleinen
Rostellarhaken bei dieser Art gedenken, die in den einschiagigen Be-
schreibungen nicht genflgend hervorgehoben ist. Neben anderen Unter-
schieden zwischen den beiden ahnlichsten typischen Hundebandwtirmern,
T. pisiformis (Bloch) = T. serrata Goeze und T. marginata
Batsch, ftlhrt Railliet in seiner klassischen Parasitenkunde (36) auch
den an, daB bei ersterer der kurze Wurzelfortsatz gespalten („& garde
bifide“), bei letzterer dagegen einfach sei („& garde simple 11 ). Ich
scheute mich daher lange, obwohl alle anderen Merkmale stimmten, den
mir vorliegenden LOwenbandwurm als T. marginata zu bestimmen,
denn seine kleinen Rostellarhaken zeigten gespaltene kurze Wurzelfort-
sfttze. Nun hatte bereits 1893 Schwarz (39) auf der Suche nach
differentialdiagnostischen Merkmalen zwischen Cysticercus tenui-
collis, der Finne von Taenia marginata, und Cyst, cellulosae,
der Schweinefinne, „bei ca. 75 Proz. aller Hakenkrtlnze von C. tenui-
collis einen Oder mehrere kleine Haken“ gefunden, „deren Hocker
(Wurzelfortsatz) an seinem Ende gespalten war, so daB er die Form
einer Flilgelmutter erhielt 11 . . .; auBerdem finden sich noch Original-
abbildungen nach allerdings nicht deutlichen Photographien derartiger
kleiner Haken mit gespaltenem kurzen Wurzelfortsatz von Cyst, tenui-
collis bei Ostertag (33) mit ausdrticklichem Hinweis im Texte auf
die Schwarzschen Befunde und von T. marginata bei Olt und
Strdse (32), hier ohne Erw&hnung dieses Merkmales im Texte. (Auch
in der vielverbreiteten Bakterienkunde und patbolog. Mikroskopie von
Kitt (19) ist in einer zusammenstellenden Abbildung der Haken von
T. coenurus, serrata und marginata [nach Leuckart] der kurze

Elite Abt. Orig. Bd. 87. Heft 6. 27

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Gentralbl. f. Bakt etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 6.

Wurzelfortsatz des kleinen Hakens der letztgenannten Art gespalten
dargestellt; doch*beruht dies auf einer Verwechslung der Elischees; was
bei Kitt als T. serrata bezeichnet ist, ist in Wirklichkeit margi¬
nal a, und umgekehrt; ein Fehler, der sicb dnrch s&mtliche Auflagen
dieses Werkes hindurchzieht.)

Ich untersuchte nun eine gauze Anzahl von Scoleces der T. mar¬
gin at a und zur Kontrolle auch von deren Finne nnd fand, dafi bei
alien kleinen Haken dieser Art der kurze Wurzelfortsatz gespalten ist
Allerdings ist dies dentlich nur in der Ansicbt von vorne auf die Haken
festzustellen und nicbt in der seitlichen bzw. Fl&chenansicht, in der sich
die Haken auf dem Rostellum dem mikroskopiscben Beobachter zumeist
darbieten. So erkl&rt sich auch der Umstand, daft Schwarz jeweilig
nur bei einem oder mehreren kleinen Haken diese Eigentflmlichkeit vor-
fand, und daB dieselbe bei einem so h&ufigen Hundebandwurm so vielen
Beobachtern fiberhaupt entging.

Fflr die Unterscheidung zwischen den beiden h&ufig-
sten Hundebandwflrmern T. pisiformis (Bloch) = T. ser¬
rata Goeze und T. marginata Batsch ist das Merkmal des
gespaltenen kurzen Wurzelfortsatzes der kleinen Haken
daher von keinerlei differentialdiagnostischem Wert.

Es diirfte diese Eigentflmlichkeit bei den Cystotflnien flberhaupt
weit verbreitet sein. DafQr spricht das Auftreten dieses Merkmales in
den Diagnosen so mancher moderner Neubeschreibungen, ich erw&hne
in dieser Hinsicht bloB die von G. Neumann, betreffend Taenia
novella n. sp. aus der Hauskatze (29) und die von M. Lflhe, betr.
Taenia omissa n. sp. aus wilden Katzenarten (26).

Der L5we als Wirtstier fflr Taenia marginata ist neu.
Bis jetzt ist dieser Bandwurm iin erwachsenen Zustande nur im hunde-
artigen Raubtiere gefunden worden, und zwar im Hund, Wolf und
Schabrackenschakal. Der hier mitgeteilte Fund ist analog zu dem vor
einiger Zeit von Dramard und Bdnoit-Bazille (13) gemeldeten,
wo gleichfalls zum ersten Male ein anderer typischer Hundebandwurm,
Taenia pisiformis Bloch = serrata Goeze, in einem katzenartigen
Raubtiere (im Konigstiger) nachgewiesen wurde.

Derartige Befunde sind parasitologisch von hohem Interesse. Dr a*
mard und B6noit-Bazille erkl&ren die Invasion des Eflnigstigers
mit T. pisiformis in folgender Weise: „En ce, qui concerne le
Taenia serrata, nous avons dit plus haut que le tigre mangeait des
lapins. Or, on sait que la larve de ce Tdnia, le Cystic, pisiformis
Zeder, vit dans le pdritoine de ces rongeurs et se transformen Cestode
adulte dans l’intestin du chien. — L’dtiologie est ici trfcs simple: le
tigre a remplacd le chien.“ Derselbe Invasionsmodus ist auch in
dem hier mitgeteilten Falle anzunehmen: Der Menagerieldwe dflrfte mit
Innereien von Schweinen und Wiederkfluern die im Netz und Gekrose
derselben befindlichen Finnen von T. marginata (Cyst. tenuicollis)
gefressen haben. Die Finnen entwickelten sich im Lflwendarm bis zu
einem gewissen Grade; dab die von mir gefundene Kette bloB ca. 325 mm
lang war, wiihrend T. marginata einige Meter lang wird, lflfit sich
ohne Zwang durch das fur einen Hundebandwurm ungewohnliche Milieu,
als welches sich der Darm eines Feliden fur ihn darstellt, erkl&ren.

Aus den oben angefuhrten Grflnden schlieBe ich das Sektionsprotokoll
hiermit an:

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Bohm, Beitr&ge zur Kenntnis tierischer Parasiten.

419

„Maunlicher, 4 Jahre alter Lowe, stark abgem&gert, am Kinn 2 grauulierende
Fistelgeschwttre, an den sichtbaren Schleimhauten keine Veranderung. In beiden Pleura-
sacken eine mafiige Menge eines braunroten, truben Exsudates, Pleura in ganzer Aus-
dehnung lebhaft injiziert. Beide Herzlappen infiltriert, die ubrigen Lappen stark
emphysema toe, bzw. leicht hyperfimisch. Magen schleimhaut lebhaft ger5tet
und im Pylorus grau pigmentiert. Fleckige Rotungeu im Darm in
gaozer Ausdehuung. Im Duodenum ein Bandwurm. Fast samtliche Korper uod
E!ii||€!weide-Lymphdrii8en seros geechwollen. In der Leber in panzer Ausdehnung
gelbliche, anscheinend anamische Partien, innerhalb welcher die einzelnen Acini deut-
Rch sichtbar Bind. Bakteriologischer bzw. histologischer Befund: Streptokokken. tt

12. Flmbrlarla plana v. Linstow.

3 junge und ein reifes Exemplar aus einer Wildente (Lehrk. f.
patholog. Anat.).

Dieses Mitglied der merkwfirdigen Gruppe der Fimbriariiden wurde
1905 von Otto v. Linstow beschrieben (24) und ist seitdem in der
Literatur, auBer in Zitaten der Erstbeschreibung, nicht wieder aufgetaucht.
Was die hierhergehdrigen Arten (bis jetzt sind 2 bekannt, die hier in
Frage stehende und F. fasciolaris [Pallas] aus dem Huhn, der Ente
u. a.) vor den meisten flbrigen Zestoden auszeichnet, ist das Fehlen
jeglicher Proglottidenbildung; es sind Querfurchen vorhanden, doch
reichen sie nicht tief und sind keineswegs der Ausdruck einer serialen
Gliederung. Dies geht namentlich auch aus der Art der Anordnung der
Genitalorgane hervor: Die Geschlechtsoffnungen finden sich massenbaft
an einem Korperende in mehreren Lagen fibereinander, ganz regellos.
Charakteristisch ist ferner ein mehr oder weniger umfangreicher Pseudo-
scolex, das ist eine abnorme, mit reicher Faltenbildung einhergehende
Verbreiterung des Vorderendes, eine vikariierende Bildung fflr den
uberaus hinffllligen, unscheinbaren Scolex. — Der wesentlichste Unter-
schied zwischen den beiden Arten besteht darin, daB der mitunter sehr
umfangreiche Pseudoscolex von F. fasciolaris in 2 seitliche Zipfel
ausgezogen ist, so dafi ein quer zur L&ngsachse des Kdrpers gestelltes,
hammerformiges Gebilde entsteht (worauf der alte Name Taenia mal¬
leus von Goeze Bezug nimmt), w&hrend diese seitlichen Fortsatze bei
F. plana fehlen, wie auch bei meinen Exemplaren deutlich ersichtlich.
Ferner ist bei ersterer Art der dorsoventrale Durchmesser in der Mittel-
linie im Verhaltnis zum Querdurchmesser sehr groB (1:2 bis 1:1), so
daB ein rhombischer Durchschnitt resultiert, wahrend die hier vorliegende
Art, wie ich namentlich an dem reifen Exemplar bestatigen konnte, ganz
flach ist. Endlich sind bei unserer Spezies die Miindungen der Cirrus-
beutel mit 10 Haken umgeben (ich konnte noch mehr beobachten),
gegenflber den 8 Haken, die fflr die andere Form angegeben werden.

Als Durchschnittsiange gibt v. Linstow 15 mm an. Die Lange
meiner Exemplare betrug 25 mm (1 Stflck), 35 mm (2 Stflcke) und
310 mm (das reife Individuum). v. Linstow hatte ganz junge Exem¬
plare vor sich, wie schon aus seiner Angabe: „Eier waren noch nicht
entwickelt“ hervorgeht Auch fflr F. fasciolaris finden sich jedoch
Angaben fiber die Lange von 1 mm bis 425 mm. Die bei Linstow
fehlenden Daten flber die Uterusverhaitnisse und die Eier konnte auch
ich nicht beistellen, da das bereits alte und sehr hergenommene Material
sich fflr derartige Untersuchungen nicht mehr geeignet erwies.

18. Dlthyrldium varlabile (Diesing);
allenthalben an der Pleura costalis eines Truthahnes (Meleagris gal¬
lop avo L.) (Lehrk. f. patholog. Anatomie).

27*

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420

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Diese interessante Finne ernes bis jetzt unbekannten Bandwurmes
ist bloB in einigen wenigen Fallen zur Beobachtung gekommen. Zum
ersten Male von dem Kustos am Wiener Hofmuseum J. 6. Bremser
in einem Steinhuhn, Caccabis (Perdix) saxatilis M. W. gefunden,
fand sie ihre Erstbeschreibung (jedoch obne Einreihung in eine be-
stimmte Gattung) als „Dubium perdicis saxatilis** in der „Synopsis k
von Eudolphi (37). (Fttr nahestehende Formen, deren „magna cam
Taeniolis saxatilis affinitas** ihm auffiel, stellte er das Genus
Dithyridium auf.) Einige Jabre spater begegnete ihr Hasse in
einer Saatkr&he, Trypanocorax (Corvus) frugilegus L. (Lit-
Nachweis: In dem dnrchschossenen Exemplar der „Synopsis u aus der
Wiener „k. k. Naturalienkabinetskanzlei“ findet sich neben der betr.
Nummer folgende handschriftliche Notiz: „In corvi frugilegi palm,
vesiculis incl. Febr. 1835. Dr. Hasse u ). SpSter fand sie, gleicbfalls im
Steinhuhn („in cavo abdominis**), der bekannte Wiener Helmintholog
Diesing, in dessen „Systema Helminthnm (10) sie unter dem Namen:
Piestocystis variabilis figuriert. Die erste branch bare Abbildung
(einen Lkngsschnitt) von ihr gibt Leuckart (22,1. Bds. Abt. I. Fig. 184),
der sie „in der Lunge der Kr8he“ beobachtete (eine andere „verwandte
Form** entdeckte er im Unterhautbindegewebe der Nachtigall). DaB der
von Baillet in seiner „Histoire naturelle des helminthes** angefflhrte
Fund (5) — 3 enzystierte Tfinienfinnen am Peritoneum von Gallos
domesticus, Skolex mit 4 Saugn&pfen, ohne Haken — wie Braun(9)
behauptet, hierher gehdrt, ist wahrecheinlich, doch nicht ganz sicher.
In neuerer Zeit fand ferner in Rom den in Frage stehenden Parasiten
bei der Sektion eines spontan umgestandenen Huhnes, nnd zwar in
dessen Lungen, Alessandrini (1). Er spricht auf Grund gewisser
anatomischer Details der Finnq (Form des hakenlosen Scolex, Form der
Saugnfipfe) als dazugehdrigen, geschlechtsreifen Bandwurm den Meso-
cestoides lineatus (Goeze) an, ein Zusammenhang, auf den fibrigens,
ohne n&here Begrflndung, schon Eudolphi (1. c.) hinweist (indem er
bei Anffihrung seines Dubium perdicis saxatilis die Worte hinzo-
fiigt: „Confer Taeniam lineam“) und nach Rudolphi spSter eine
ganze Anzahl von Autoren (vgl. weiter unten). Endlich beschreibt noch
L. G. Neumann in jtingster Zeit (30) vom Huhn, und zwar von der
unteren FISche der Lunge und aus den „R6servoires diaphragmatiqnes
anl^rieures et post6rieures“ (Cellae thoracicae craniales et caudales?)
Finnen derselben Art und gibt eine gute Abbildung nach unaufgehellten
TotoprSparaten. (Auch im Lungengewebe, sowie in der interkostalen
und suprasternalen Muskulatur wurden von ihm einige Exemplare ge*
funden.)

Mithin sind hierhergehorige Finnen gefunden worden: Im Cavum
abdominis von Steinhiihnern, in der Lunge von Corvus-Arten, am Peri¬
toneum eines Haushuhnes (? Fund von Baillet) und in der Lunge,
den LuftsScken und der Thoraxmuskulatur des Haushuhnes. An diese
reiht sich das Truthuhn, Meleagris gallopavo L., nach
meinem Befund als neuer Wirt.

Die Zugehorigkeit von Dithyridium variabile zu einem Band¬
wurm der Gattung Mesocestoides erscheint schon wegen der Aehn-
lichkeit der Konhguration des Scolex und seiner Organe bei beiden
plausibel. Es braucht sich jedoch nicht um die Art M. lineatus (Goeze)
zu handeln, die bisher in der Wildkatze, der Hauskatze und dem Haas*
hund, im Fuchs, im Luchs und im Wustenluchs gefunden wurde, sondern

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B o h m , Beitrage zur Kenntnis tierischer Parasiten.

421

es kommen als Wirtstiere fflr den erwachsenen Bandwurm meiner An-
sicht nach auch Tagraubvogel in Betracht, in welchen ja auch schon
Mesocestoides-Formen beobacbtet wurden.

Ob ferner alle unter dem Namen Dithyridinm variabile
beschriebenen Funde aus mebreren, unter ganz verschiedenen Daseins-
bedingungen lebenden Vbgeln auf eine und dieselbe Species zu beziehen
sind, erscheint mir fraglich. Jedoch ist dieses Problem nur so einwand-
frei zu losen, daB die den einzelnen Autoren vorgelegenen Typen,
soweit sie noch vorhanden sind, einer genauen vergleichenden Unter-
suchung unterzogen werden, eine Aufgabe, die ruhigeren Zeitlauften
vorbehalten bleiben muB.

Beschreibung der von mir beobaohteten Finnen.

Die vom Wirtstier gelieferten Zysten, in denen der Parasit frei
flottiert (vgl. Tafelfig. 2), sind dQnnwandig, ziemlich durchscbeinend, so
daB man die Konturen der Finne gut durchsieht, meist ei- Oder herzfbrmig,
seltener kugelrund, 2—5 mm im l&ngsten Durchmesser haltend. Die
Larven selbst sind Plerozerken im Sinne Brauns 1 ): Kompakte, ab-
geflachte, reinweifie Finnen ohne Scbwanzblase und obne Schwanzanhang,
meist etwas linger als breit, 1 — 2 x / 2 mm lang mit queren Runzeln und
mit je einem LSngsspalt an jedem KSrperende, von denen der vordere
zu der Scolexeinstulpung, der hintere zu der Exkretionsblase in Beziehung
steht. Schon bei nicht aufgehellten Exemplaren sieht man den eingestfllpten
Scolex am Vorderende in Form einer milchweiBen, rundlichen Sckeibe
bindurcbscbimmern. Auf Schnitten lafit sich feststellen, daB die Differen-
zierung dieser Larven noch nicht sehr weit vorgeschritten ist, ein Umstand,
der das Ausdinanderhalten der einzelnen Formen aus den verschiedenen
Wirtstieren so erschwert.

Zu oberst an dem LarvenkOrper liegt eine dflnne, strukturlose
Membran (Tafelfig. 4 a); sie entspricht offenbar der H&rchenschicht der
Zestoden. Unter ihr liegt eine breite, homogene, mit Eosin sich intensiv
rot farbende Schicht (6), welcher der weitaus grbBte Anteil an der
Zusammensetzung der Gesaratmasse der Cuticula zukommt. Auch Blu m -
berg (6.), der diese Verhaitnisse fflr Dithyridium elongatum
(Blumberg) aus Hund und Katze naher ausfQhrt, unterscheidet diese
beiden Schichten. — Dann kommt eine wiederum schmaiere Schicht (c),
die sich auf Fiachenschnitten, soweit sie ungefahr die Mitte der Gesamt-
dicke der Larve treffen, als aus Stabchen zusammengesetzt reprasentiert,
die zur Oberflache senkrecht stehen, etwa wie die feste, aus Stabchen
aufgebaute kutikulare Embryonalschale einer Taenia solium. Auf
Schnitten jedoch, welche der Oberflache benachbarte Teile des Dithy¬
ridium s trefl'en, (also auf tangentiale Anschnitten) erscheint diese
Schicht netzffirmig infolge einer Streifung, die im rechten Winkel zu
der zuerst erwahnten zieht. Blum berg fQhrt diese Schicht (nach ihm
die 3. Kutikularschicht) als „einfache Lage von Muskelfasern an.“ In der
Tat handelt es sich um jene 2 bei alien Zestoden unterhalb der Cuticula
sich findenden, einander rechtwinkelig kreuzenden Fasersysteme, welchen
von den meisten Autoren muskulose Natur zugeschrieben wird, und
welche als sogenannter Hautmuskelschlauch den ubrigen Parenchyra-
oder Kdrpermuskeln gegenflberstehen. Ihrem stabchenformigen, auBerst

1) vergl. jedoch weiter unteo

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422

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

zarten Aussehen nach ware man nach meinen Bildern weit eher geneigt,
sie als ein fibrill&res Stfltzgewebe anzusprechen, eine Ansicht, die von
manchen Autoren auch ausgesprochen wurde (vgl. Braun, Nr. 9, S. 1247).

Die Gesamtdicke der 3 bis' jetzt beschriebenen Scbichten beUigt
auf meinen Scbnitten ca 23 ju an der Peripherie, in den Fatten der
SkolexeinstQlpung wird sie immer geringer, je weiter von der Ansatzstelle
der EinstGlpung man mifit, bis die Dicke in der Nahe der SaugnSpfe
bloB 4,5 iu halt. Unter der letzterwahnten Schicht folgt, aber stets durch
eine schmale, bellere Partie (d) von ihr getrennt (Basalmembran V), eine
Reihe palisadenartig angeordneter Zellen (e); es sind dies die Matrixzellen
der Cuticula oder die Subcuticula. B1 u m b e r g (1. c.) zahlt sie unkor-
rekterweise als vierte, „k6rnerreiche Subcuticularschicht“ der Cuticula
zu. — Das KSrperparenchym ( f) weist keinen Besonderbeite auf und fflllt
den ganzen, von anderen Organen nicbt eingenommenen Raum aus, so
daft keinerlei der Mutterblase der Zystizerken entspnechender Hoblraum
vorhanden ist. — Die Kalkkorperchen ( g ) finden sich im Kopf- and
Halsteil resp. Zwischenstflck in grofier Zabl, in den seitlichen Rand-
partien sind sie bloB in geringer Anzahl vorhanden, im hinteren Abschnitt
fehlen sie nahezu vollstfindig. Sie sind meist lfinglich oval, seltener nfihern
sie sich der runden Form, im Durchschnitt 7 n lang, und ruhen stets
in einer langlich ovalen Hdhlung von durchschnittlicb 18X9 n Durch-
messer. Ob dem ganzen Gebilde, Inbaltskorperchen + H6hlung, die
Wertigkeit einer Zelle zukommt, wage ich nicht zu entscbeiden; immerhin
ware eine diesbezflgliche Feststellung wichtig im Hinblick auf die nocb
offene Frage der inter- oder intrazellularen Genese der KalkkOrperchen.
Auch ihre verschiedenartige Verteilung im LarvenkOrper, namentlich ihr
Fehlen im hinteren Abschnitt ist m. E. nicht ohne Bedeutung, insofern
als planmafiig angestellte Untersuchungen in dieser Richtung an vieleu
Formen Licht aut die noch umstrittene Frage der Funktion dieser
offenbar so charakteristischen Gebilde werfen kdnnten.

Von der Muskulatur fallt vor allem am Totopraparat sowobl wie
auch auf Fiachenschnitten die Langsmuskulatur in die Augen (Tafelfig. 3.
Im. b. u. Im. s.). An den Individuen mit eingestfllptem Skolex (und nur
solche standen mir zur Verfugung) sieht man sie als einen an beiden Enden
geschlossenen Sack, dessen eines Ende, entsprechend der Scolexein-
stfllpung, gleichfalls handschuhfingerfOrmig eingestfllpt ist, so daB man
von einem auBeren und inneren Blatt der Langsmuskulatur sprechen
kann, vergleichbar etwa dem parietalen und viszeralen Blatt an Pleura
und Peritoneum eines SSugers. Ersteres (Im. b.), welches der Parencbym-
Langsmuskulatur des Blasenkorpers entspricht, zieht parallel zum AuBen-
rande, ca 0,1 mm von ihm entfernt und scheidet so das Parenchym in
eine Rinden- und Markschicht. Letzteres ( Im.s.), welches der Parenchym-
Langsmuskulatur des Scolex entspricht, ist viel machtiger ausgebildet,
an der Basis des Scolex bis zu 100 /r dick und kleidet auch die durch
die Einstiilpungsfalten des Scolex entstehenden Divertikel aus (m. dir.)
Die Diagonalmuskulatur ist nun- schwach ausgebildet; ich konnte nur
einzelne schmale Ziige durch das PareDchym verfolgen. (diag. m.).

Den Beschreibungen des rostellar- und hakenlosen Skolex, wie sie
Neumann (1. c.) und Alessandrini (1. c.) geben, habe ich nichts
hinzuzufiigen.

Ich habe oben die Larven als Plerozerken im Sinne Brauns
bezeichnet. Das Belegen von Larvenformen mit den verschiedenen Genus-
namen ist, streng genommen, nomenklatorisch nicht ganz korrekt und

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Bohm, Beitrage zur Kenntnis tierischer Parasiten.

423

auch nur provisorisch: Sobald die zugehdrigen geschlechtsreifen Formen
eruiert sind, haben ja die Arten in das Genus der betr. Geschlechtsform
eingereiht zu werden. Immerhin bilden bis dahin die Genusnamen auch
der Larvenformen einen notwendigen Arbeitsbehelf, notwendig insofern,
als eine Menge unnfltzer Umschreibungen wegfallen, wenn die Larven
auf Grand wesentlicber Unterscheidungsmerkmale in einzelne groBe
Gruppen zusammengefaBt erscheinen. Von diesen Erwflgungen ausgehend,
baben die verscbiedensten Autoren im Laufe der Entwicklung der
Helminthologie eine groBe Zabl von Namen fflr die mannigfaltigen
Larvenformen der Zestoden in die Literatur eingeftihrt, bis der so
anBerordentlich verdienstvolle Parasitologe Brann in der 1. Aufl. seiner
Parasitenkunde (Nr. 8) die Finnenzust&nde der Zestoden in 4 groBe
Kategorien einteilte, welche, mit einigen Erweiterungen allerdings, sicb bis
hente erhaltenhaben: Cysticerci (Finnen mit Schwanzblase; bieher auch
Coenurus und Echinococcus gehflrig), Cysticercoide (mit Schwanz¬
blase, aber ohne Flflssigkeit in derselben), Plerocerci 1 ) (parenchymatose
Entwicklungsstadien, die keine Flflssigkeit enthalten) undPlerocercoide 1 )
(„Formen, welche den Plerocercen entsprechen, d. h. deren Schwanzteil
ganz parenchymatos ist, aber sich nicht vom Kopf absetzt 1 *). M. E. ist
es jedoch nicht mbglich, die beiden letzteren Kategorien
auseinanderzuhalten. Braun fflhrt in der erwflhnten 1. Aufl.
seines Parasitenwerkes (in alien sp&tereren Auflagen kommt er nie wieder
auf die oben angefflhrte Einteilung der Finnen zurflck, der betr. Passus
fehlt in ihnen vollstflndig) fflr alle 3 anderen Finnenformen Beispiele
aus der Gruppe der Taniaden an, nur nicht fflr einen Plerocercus.
BloB eine Figur (Fig 27) mit der Legende: „Plerocercus aus der
Leibeshdhle von Lacerta agilis, rechts mit ausgestfllptem Kopf“ soli
dem Verstflndnis des Gesagten dienen. Nun zeigt aber gerade nach
dieser Figur die betr. Finne keinen deutlich vom Kopf abgesetzten
Schwanzteil, w&re also vielmehr als Plerocercoid zu bezeichnen. Ganz
dieselbe Figur trflgt bei Leuckart (1. c. I. Bds. Abtlg. 1 Fig. 185), woher
sie Braun ttbernahm, die Inschrift: „Unbewaffneter Blasenwurm aus der
Leibeshdhle von Lacerta crocea 2 ) [Pietocystis 3 ) Dithyridium
Diesing],“ die Finne wurde also von ihm ganz richtig als eine nflchste
Verwandte der von uns oben ausfflhrlich beschriebenen Dithyridium-
Larve erkannt (Dithyridium Rudolphi = Piestocystis Diesing);
flbrigens erkennt schon lange vor Leuckart Valenciennes von ihm
entdeckte ganz gleichartig mit obigen aussehende Zestodenlarven aus
Lacerta viridis L. gleichfalls als zum Genus Dithyridium gehdrig
und beschreibt sie als Dithyridium lacertae (Nr. 43).

In seiner klassischen Bearbeitung der Zestoden in Bronns „Klassen
und Ordnungen des Tierreichs“ (Nr. 9) fflhrt Braun nun verschiedene
Autoren an, welche Piestocystis-Formen als zu Me socestoides
gehdrig betrachten (Neumann, v. Lin stow u. a.), ohne dieser Ansicht
entgegenzutreten, ja er selbst sagt einige Seiten spfiter von Piestocystis
crispa (Rud.) ... „sie dflrfte ein Plerocercoid sein“ ... und fflhrt in
Anlehnung hieran aus (S. 1568): „Es ist gewiB bequem und erspart
lange Beschreibungen, wenn man sagt, die Finne der T. solium ist ein
Cy8ticercus, die der T. serialis ein Coenurus, die des Bothrio-

1) Von rcX7]p*r)c voll, auBeefiillt fee. mit Parencbym) und xepxo<; Schwanz).

2) Braun wirft die bei<ien verschiedenen Arten Lacerta crocea Wolf (jetzt L.
vivipara Jacqu.), Bergeidechse, und L. agilis L., Zauneidechse, zibamracn.

3) PietocyetiB von Leuckart irrtumlich fur Piestocystis.

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424

CentralbL f. Bakt etc. I. Abt. Origin ale Bd. 87. Heft 6.

ce phal us, des Triaenophorus, Mesocestoides (das sind
Dithyridium-Formenl) etc. eiu Plerocercoid ... “ Braun selbst
also l&Bt ganz zusammengehdrige Formen einmal Plero-
zerken, daun wieder Pierozerkoide sein. Es ist auch nieht
einzuseben, weshalb man die Finnen von Dibothriocephalus latus
mit Braun als Plerozerkoide und die ganz gleichartig gebildeten yon
Mesocestoides lineatus des Hundes und der Katze (Dithyridi-
um elongatum, siehe oben) als Plerozerken bezeichnen sollte. Rail-
lie t benennt denn auch ebendiese Larven nach Baillet, der sie aos
dem Abdomen von Hund und Katze erwfihnt (Nr. 5) Plerocercoides
Bailleti. — Bedeutsam erscheint mir, und kennzeichnend fflr das
Schwanken der Autoren gegenfiber den beiden Begriffen Pier ocercus
und Plerocercoid, daB Railliet in seiner Zoologie mddicale (Nr. 36) bei
Gelegenheit der Klassifikation der Zestodenlarven (S. 213) folgende
Formulierung fQr die beiden in Frage stehenden Kategorien gibt:
„Plerocercu8 M. Braun. Larve solide, globuleuse. Plerocercoides
M. Braun. (Piestocystis Dies.; Dithyridium Rud.) — Larve
solide, rubanaire ou ovale, allong6e.“ Wie man sieht, sind unter Berufnng
auf Braun hier 1) andere Unterscheidungsraerkmale eingefQbrt (die
nach obigen Ausfflhrungen ebensowenig brauchbar sind), nfimlich, ob
die betr. Finnen rund Oder bandfflrmig verl&ngert sind; und 2) werden
Piestocystis Dies., Dithyridium Rud. und Plerocercoides
Braun direkt als synonym nebeneinandergestellt, w&hrend doch Braun,
wie oben erwflhnt, als Typus fflr seine Kategorie Plerocercus ein
Dithyridium abbildet.

Ein weiteres Beispiel fflr die vSUige Unsicherheit des Begriffes
Plerocercus: Auf S. 1569 in Bronns „Klassen und Ordn.“ (1. c.)
schreibt Braun: “... Eine Ausnahme macht nur T. murina und der
Cysticercus maciocystis Dies., der nach den Untersuchungen
Moniez’ einen Plerocercus darstellt.“ Er selbst bezeichnetalso
diese Finne als Plerocercus, dean Moniez kennt diesen Ausdruck
noch gar nicht, den Braun 3 Jahre spflter erst prflgte, und ich konnte
ihn natflrlich deshalb in der Arbeit Moniez’(Nr. 28) auch nicht linden.
‘Wie sieht es nun mit diesem „Plerocercus“ in Wirklichkeit aus?
Moniez untersuchte besagten Cysticercus macrocystis aus einem
Hasen eingehend, gibt sehr gute Abbildungen von ihm, aber leider auch
eine ganz mifiverst&ndliche Deutung seiner morphologischen Charaktere.
Diese Finne wurde n&mlich von Lflhe (Nr. 6) als zu einem Katzen*
zestoden (Taenia macrocystis Lflhe) gehdrig erkannt, der unserem
gewohnlichen Katzenbandwurm (Taenia crassicollis Rud.) fiuBerlich
frappant Shnlich sieht und sich nur durch die wesentlich kleineren Haken
des Rostellums, einen anders gestalteten Uterus etc. unterscheidet. Wie
die erwachsenen Bandwflrmer, so gleichen sich auch ihre Finnen auff&llig.
Es ist daher die „vesicule“ bei Cysticercus macrocystis, von der
Moniez schreibt, dafi sie schmal und sehr lang (bis 80 mm) sei, obne
hydropische Flflssigkeit, abgeplattet, mit Ausnahme des Hinterendes, welches
eiformig aufgeblSht ist, nichts anderes, als das Zwischenstflck mit der
daranh&ngenden verhaltnismflBig kleinen Mutterblase, ganz genau wie bei
Cysticercus fasciolaris, der Finne von Taenia crassicollis,
welche ja wegen dieses auffallig langen Zwischenstflckes bekannt ist
Der angebliche Plerocercus ist also in Wirklichkeit ein
echter Cysticercus. Braun hat zwar an einer frflheren Stelle
(1. c. S. 1561) nach der Habitusfigur Moniez’ von Cystic, macro-

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Bohm, Beitrage zur Kenntnis tieriecher Paraeiten.

425

cystis (Fig. 3, T. III.) auf die Aehnlichkeit mit Cystic. fasciolaris
hingewiesen, aber der Umstand, daB das Kopfende eingezogen bzw.
umgestQlpt und die, wie LQhe (1. c.) ausgefQhrt, irrige „Auffassung, daB
die Schwanzblase im Gegensatz zu alien anderen Cystot&nienlarven von
Bindegewebe gebildet werde, ohne hydropische Fliissigkeit“, haben ihn
bewogen, Cystic, macrocystis als Beispiel fQr einen Plerocercus
zu bezeichnen.

Icb will aus der FQlle von Argumenten, die ich zur StQtze meiner
Anschanung noch vorbringen konnte, nur zwei noch hervorheben: Die
unter dem Gattungsnamen Gry porhynchns beschriebenen Cyclophylli-
deenlarven aus Schleien gebbren zu den wenigen Schulbeispielen, die
Braun fflr seine Plerozerkoide bei Gelegenheit der Neuaufstellung der
4 Gruppen von Zestodenlarven anfflhrt (,,Paras. d. Menschen“ 1. Aufl.
S. 100). Einige Jabre sp&ter jedoch, in seiner Bearbeitung der Zestoden
in Bronns „Klassen u. Ordn.“, kora rat er wieder auf die 2 bis dahin
(auch bis jetzt) bekannten Gryporhynchus-Arten zuriick, sagt aber
hier: „Beide Formen sind Plerozerken.“

Nicht obne Bedeutung erscheint mir fQr meine Argumentation, daB
bei LQhe Nr. (27) die Gryporhynchus-Larven wieder unter den
Flerozerkoiden figurieren und dafi die Figur „Scbematischer L&ngsschnitt
durch ein Plerocercoid“ bei LQhe (ibidem, Fig. 147) nichts anderes
ist, als die vereinfachte Figur 184 bei Leuckart (Nr. 22) von einer
Piestocystis, welche, wie oben nQher ausgefQhrt, Braun als Illustration
zu seinem Plerocercus gibt.

Aus der Gruppe der Bothriaden bringt Braun als Beispiel fQr seine
Plerocerci die Larven der Tetrarhynchen. Er sagt von ihnen (Nr. 8,
1 .Aufl. S. 102); „Als Plerocercus muB z. B. die Larvenform der
Tetrarhynchen bezeichnet werden; wir erkennen an ihnen den Kopfteil ...
darauf folgt ein kurzer Hals und die parenchymatbse Schwanzblase. ...
Mitunter wSchst der anfangs kuglige Hinterteil bandfdrmig aus und erreicht
eine bedeutende LSnge.“ Also auch hier wieder als Charakteristikum
das deutliche Abgesetztsein der Schwanzblase vom Kopf bzw- Hals.
An anderer Stelle aber (Nr. 9, S. 1570) lSBt er den Gryporhynchus-
Larven, welche er doch ursprQnglich als Beispiel fQr die Gruppe der
Plerozerkoide anfQhrt, ebendasselbe Merkmal zukommen; er schreibt hier
nimlich; „Beide Kbrperteile (Scolex und Schwanz) trennt
eine deutliche Ringfurche voneinander, wie auch die ver-
schiedene Struktur beide leicht unterscheiden l&Bt.“

Ich fasse zusammen: Die Inkonsequenz in der Bezeichnung von
Zestodenlarven bald als Plerocercus bald als Plerocercoid, die Ver-
wirrung, die in der Literatur bezQglich dieser beiden Begriffe herrscht,
endlich meine Erfahrungen selbst, denen zufolge es mir zu wiederholten
Malen unmdglich erschien, mich bei der Bestimmung von Finnen fQr
die eine Oder die andere Bezeichnung zu entscheiden, zeigen deutlich,
daB es unmbglich ist, die beiden Begriffe scharf auseinanderzuhalten,
und ich schlage daher vor: Die beiden Gruppennamen Plero¬
cercus und Plerocercoid mbgen nicht mehr auseinander-
gehalten werden, sondern alle parenchymatdsen Finnen,
d.h. Zestodenlarven ohne HohlraumimSchwanzteil,mbgen
mit dem Namen Plerocercus bezeichnet werden

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426

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

I*i ter atur verm eichnis.

1) Allessandrini, Giulio, Su un Dithyridium Rud. del polmone di gallina.
(Boll. Soc. Zoolog. Ital. Roma. Ser. II. Vol 8. 1907.) — 2) Ariola, V., Revisione deUa
famiglia Bothriocephalidae s. str. (Arch, de Parasitol. III. Paris 1900.) —
3) Baczynska, Helene, Etudes anatomiques et histologiques sur quelques nouvelles
espfcces de cestodes d’oiseaux. (Bull. Hoc. Neuch&tel Sc. natur. T. 40. Ann. 1912—1914.1

— 4) Baer, Karl Ernst v., Beitrage zur Kenntnis der niederen Tiere. (Nova Acta
Acaa. Caes. Leop.-Carol. Bonn 1827. Bd. 5. Abt. II.) — 5) Baillet, H. C., Histoire
naturelle des helminthes des principaux mammiteres domestiques. Paris 1866. (Abdr.
aus „Helminthes u in: Diet, de m&lec., de chir. et d’hygtene vdt^rin. T. 8. 186*>.) —
6) Blumberg, C., Ueber einen neuen Parasiten beim Hunde und der Katze (Cvsti-
cercus elongatus). (Dtsch. Zeitschr. f. Tiermed. Bd. 8. 188J.) — 7) Bojanus,
Ludw. Heinr., Kurze Nachricht iiber die Zerkarien und ihren Fundort. (^Lsis*. her-
ausgeg. v. Oken. Bd. 1. H. 4. Jena 1818.) — 8) Braun, Max, Die tierischen Para¬
siten des Menschen. 1. Aufl. Wurzburg 1883; 2. Aufl. 1895; 5. Aufl. 1915. — 9) Ders.,
Cestodes. (In: H. G. Bronns „Klassen u. Ordnungen des Tierreichs tt . Bd. 4. Vermes.
Abt. Ib. Leipzig 1894—1900.). — 10) Diesing, Carl Maurit., Systema Helminthum.
Wien. Bd. 1. 1850; Bd. 2. 1851. — 11) Ders., Revision der Cercarieen. (Sitz.-Ber. Akad.
Wise. Wien. Math.-naturw. Klasse. Bd. 15. 1855.) — 12) Ders., Zwanzig Arten von
Cephalokotyleen. (Denkschr. Akad. Wiss. Wien. Math.-naturw. Klasse. Bd. 12. 1856.)

— 13) Dramard et Benoit-Bazille, Deux nouveaux parasites du tigre royaL
(Naturaliste. S£r. 2. 428. Paris 1905.) — 14) Eckardt, Ueber Coccidiosis intest-inalis
beim Gefiiigel. (Berl. Tierarztl. Wochenschr. 1903. S. 177/80.) — 15) Ercolani,
Giambattista, Dell'adattamento della specie airambiente, nuove ricerche sulla storia
genetica dei Trematodi. (Mem. Accad. scienz. Istit. Bologna. Ser. 4. Vol. 2. 1880.) —
16) Gedoelst, L., Synopsis de Parasitologie de l’homme et des animaux domes liquet
Lier u. Brussel 1911. — 17) Gough, Lewis Henry, Notes on South African para¬
sites. (Ann Rep. South Afric. Assoc, for the advancem. of scienc. VI. Cape-Town.
1908.) — 18) Grohmann, Werner, Die Abnormitaten in den Proglottiden der
Cestoden, insbesondere der Botriocephaliden. [Dissert.] Giefien 1906. — 19) Kitt, Th.,
Bakterienkunde und pathologische Mikroskopie. Wien. 5. Aufl. 1908. — 20) Klaptocz,
Bruno, Polyonchobothrium polypteri (Leydig). (Centralbl. f. Bakt. Abt. 1.
Orig. Bd. 41. 1906.) — 21) Kopczynski, Paul, Ueber den Bau von Codono-
cephalus mutabilis Diesing. (Zool. Jahrb. Abt. f. System. Bd. 24. 1907.) —
22) Leuckart, Rudolf, Die Parasiten des Menschen und die von ihnen herruhrenden
Krankheiten. 2. Aufl. Leipzig 1879—1901. — 23) Li ns tow, Otto v., Compendium der
Helminthologie. Hannover 1878; Nachtrag 1889. — 24) Ders., Helminthologi9che Be-
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25) Liihe, Max, Parasitische* Plattwiirmer. I. Trematodes.'’ (In: Suflwasserfauna
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siidamerikanischer Feliden. (Zool. Jahrb. Supplem. XII. Jena 1910.) — 27) Ders.,
Parasitische Plattwiirmer. II. Cestodes. (In: SiiSwas9erfauna Deutschlands, herausgeg.
v. A. Brauer. H. 18. Jena 1910.) — 28) Moniez, R., Essai monographique sur les
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dolphi, Carol. Asmund, Entozoorum synopsis. Berolini 1819. — 38) Sanders, A,
On an undescribed stage of development of Tetrar hynchus coroilatus. (Monthly
micr. Journ. Vol. 3. 1870.) — 39) Schwarz, Zur Unterscheidung des Cysticercus
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Cestoda and Cestodaria. (Public Health and Marine Hospit. Service of the U. St. A.
Hyg. Laborat. Bull. 85. 1912.) — 43) Valenciennes, A chi lie, Observation

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m

Rudovsky, Die Kokzidiose der Wanderratte etc.

427

d ; une esp&ce de ver de la cavity abdominale d’un Lizard vert-piquets . . . le Dithy-
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lette St. George, Adolph. Baro de la, Symbolae ad Trematodum evolutionis
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Haarlem. II. Verz. XIII. Deel. 1857.) — 46) RSgles internationales de la nomenclature
zoologique adoptSes par les congr&9 internationaux de zoologie. (In drei Sprachen.)
Paris ly05.

Tafelerkl&rnng.

Fig. 1. Langsschnitt durch den Cirrusbeutel von Hymenolepis villosa
(Bloch). Erklarung a. Text, S. 416 u. ff.

Fig. 2. Mehrere Exemplare von Dithyridium variabile in ihren Zysten an
der Pleura costalis eines Truthahnes. Natiirl. GroBe.

Fig. 3. Flachenschnitt (ungefahr die Mitte der Geaamtdicke der Larve treffend)
durch Dithyridium variabile. Schwache VergroB. (Okul. 3, Objekt. 3, Mikroak.
von Leitz). Erklarung der Buchataben s. Text, S. 422 u. ff.

Fig. 4. Flachenschnitt (ungefahr die Mitte der Geeamtdicke der Larve treffend)
durch ein Divertikel der Scolexeinstulpung. Starker vergroBert ala in Fig. 3 (Okul. 0,
Objekt. 7, Mikroak. v. Leitz). Erklarung der Buchataben a. Text, S. 421 u. ff.

Die Textfiguren sind vom Verf. gezeichnet, die Figuren der Tafel nach Skizzen
des Verfa. vom Universitatszeichenlehrer Herrn Adolf Kasper.

Nachdruck verboten.

Die Kokzidiose der Wanderratte (Mu s de cum anus Pall.)
und Hire Beziehung zur Kaninclienkokzidiose.

[Aus dem Institut fflr Allgemeine Zoologie und Parasitenkunde (Vor-
stand: Prof. Dr. Theodor Pintner) der Tier&rztl. Hochschule in Wien.]

Von Dr. med. vet. Franz £ndovsky.

Mit 1 Tafel und 1 Abbildung im Text.

E i n 1 e i t u n g.

Unter dem Eindrucke der grofien wirtachaftlichen Schaden durch RattenfraB hat
England 1919 daa Rattentilgungsgeaetz erlasaen. Der Schaden, den die Ratte durch
Verbreitung verschiedener Parasiten veruraacht, ist nicht genau bekannt, vieileicht aber
auch recht bedeutend. Die Untersuchungen vieler Forscher zeigten, welche verhiingnis-
volle Rolle die Ratte und der Rattenfloh (Loemopsylla cheopis Rotsch. 1908) als
Peatiibertrager spielen. Auf die Bedeutung der Ratte als Wirtstier der Trichin el la
epiralis hat R. Leuckart (1860) hingewiesen. P. Uhlenhuth und M. Zuelzer
(1920) zeigten in neuesten Untersuchungen, daB 10 Proz. der Berliner Ratten infiziert
aind mit dem Erreger der ansteckenden Gelbsucht Leptospira icterogenes); weiter
wurden von W. A. Hofmann (1920) Blutspirochaten in der Rattenniere nachgewiesen,
welche beira Tierversuch „Zeichen der Weilschen Krankheit“ erzeugten. Auch die
Verschleppung der Pferderaude wurde den Ratten zugeschrieben, doch bedarf diese
Angabe noch der Ueberpriifung. Jedenfalls mussen die Ratten parasiten, deren grofie
Zahl bei der Lebensweise der Ratte selbstverstandlich ist, genau morphologisch und
biologisch untersucht werden, ob sie identisch sind mit den Parasiten der Haustiere
bzw. des Menschen, oder nicht vielmehr anderen Arten zugehoren, die nur die Ratte
zmn Wirtstier haben.

In der Literatur finden sich zerstreut Angaben liber Kokzidien-
erkrankungen der Ratte, und ein zuf&lliger Kokzidienfund in den Fazes
einer Ratte gab AnlaB, mich naher mit dieser Frage zu beschaftigen
in der Ueberlegung, daB sie flir den Kleintierzflchter wegen der Kok-

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428

Gentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

zidienubertragung auf seine Zuchttiere vielleicht bedeutungsvoll sein
kOnnte. Die diesbezOgliehen Literaturangaben sprecben von „grauer‘\
„ wilder" „schwarzer“ Ratte, doch findet sich nirgends die Artbestimmung.
Ich untersuchte nur die Wanderratte, Mus decumanus Pallas (Epi-
mys norvegicus Erxl.), die Bestimmnng erfolgte nach Tiraboschi
(1903/04) (Farbe, Gaumenstaffel, Ohren- und Schwanzlfinge, Sohlenballen).

Ueber Kokzidienerkrantung bei der Ratte schreibt Carazzi (1913). Ergebraocht
den unbestimmten Ausdruck ratto und gibt S. 129 das JBild einer Rattenleber mit an-
geblicben Kokzidien; es ergibt sich jedoeh bei genauerer Besichtigung, dafi eine Ver-
wechslung mit Trichozephaleneiern stattfand. Auch seine Angabe uber Eimeria
falciformis Eimer als seltener Leberbefund bei der Maus ware noch zu (iberprufen
deehalb, weil Eimeria falciformis in der iibrigen Literatur nur als Darmschmarotzer
beschrieben ist. Eine schone Abbildung von Nematodeneiern in der Rattenleber gibt
M. C. Hall (1916) in seinem Werk; dieser weist auch S. 32 darauf hin, daB dieEier
der HepaticoJa hepatica (Bancroft 1893, Hall 1916, Synon. Trichosoma hepa-
ticum Bancroft 1893, Familie der Trichinellidae Stiles und Crane 1910) ofter zu
Verwechslnngen mit Kokzidien Anlafi geben. Denselben Parasiten beobachtete anch
Galli-Valerio (1904 und 1905) 2mal in der Leber von Mus decumanus. Die
Arbeit Ohiras uber ein neues Rattenkokzidium (Eimeria Miyairii n. sp., woruber
Fukuhara (1912) im Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 58 unzulanglich referierte.
erhielt ich vom Autor, doch bleibt mir der genaue Inhalt der Arbeit unbekannt, weil
ich den japanischen Text nicht verstehe. Auch Nissle hat, wie Wasielewski
(1904) S. 102 angibt, im Darm grauer Ratten in Berlin eine Eimeria gefunden, doch
geht aus der Angabe nicht hervor, ob und wo diese Arbeit veroffentlicht wurde. Gras?i
(1888) macht darauf aufmerksam, dafi die Kafige, in denen mit Eimeria fa lei-
for mis infizierte weifie Ratten gehalten wurden, einer sehr grundlichen Desinfektion
bedfirfen, um weiteren Infektionen vorzubeugen. Grassi hat auch die Entwicklung
der Sporozoiten in der Oozyste der Eimeria falciformis im Kot der weifien Ratte
beobaehtet, doch nicht naher beschrieben. Erst Schuberg (1897) und Reich (1913)
geben nahere Angaben und Bilder von der Entwicklung der Eimeria falciformis
bei der Maus.

Unter den jetzigen Verhaltnissen sind die kleinen Hanstiere in der
Stadt zu Ebren gekommen, und es ist wicbtig, die Krankheitserreger von
ibuen fernzuhalten. Nun ist es nicht ausgescblossen, dafi die Ratten
solche Krankheitskeime in sich bergen und verschleppen; verschaffen
sie sich doch ilberallhin Zutritt; die okonomische Frage erhebt sich, ob
sie vielleicht bei der Kokzidiosisverbreitung unter den Kaninchen mit-
beteiligt seien. Wie schon erw&hnt, veraniafite mich der Oozystenfond
bei einer RattenfSzesuntersuchung, die Kokzidien der Wanderratte naher
zu betrachten"wegen der Uebertragungsmoglichkeit auf das Kaninchen.

Material and Technlk.

Im allgemeinen scheinen junge Ratten ein dankbareres Objekt fur
Entoparasitenstudien zu sein als alte, dagegen zeigen tr&chtigealte Weibchen
wieder viele Ektoparasiten; bei einem z. B. fing ich 32F18he(Cerato-
psyllus sp.).

Fur ihre Hilfe bei der Materialbeschaffung muB ich Herrn Prof.
Dr. Zaribnicky, Dr. Sknorzil und Dr. Niedoba danken. Herrn
Prof. Dr. Th. Pintner danke ich fur die liebenswurdige Ueberlassung
eines Arbeitsplatzes in seinem Institnt und die vielen Anregungen,
Herrn Privatdozenten Dr. L. K. Bohm fflr wertvolle Ratschl&ge.

Die mit Kokzidiose behafteten Kaninchen waren zum grdBten Teil
aus einer Kleintierfarm bei H. Leider handelte es sich um leichter
kranke Tiere, so daB ich eine Masseninfektion bei den Versuchstieren
nicht ausfiihren konnte. Vielleicht entspricht diese Art der Infektion
jedoeh mehr dem natflrlichen Vorgang. Die weitere Entwicklung der

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Rudovsky, Die Kokzidiose der Wanderratte etc. 429

P&r&siten und die Krankheitserscheinungen sind freilich schwieriger zu
beobachten.

Die Ratten meiner Untersuchung stammten:

Ana dem RinderBchlachthaus St Marx 2 Tiere, aus der Kadaverkammer dee path.-
aoat. Institute der Tierfirztlichen Hochechule in Wien 26 Tiere, ans dem Meidlinger
Schlachthaus 7 Tiere, aus dem Pferdeschlachthaus 12 Tiere. aus der Qrofimarkthalle
2 Tiere, aus dem Versucbstieretall der internen Klinik der Tierirztiichen Hochechule
Wien 15 Tiere, aus dem XI. Bezirke 4 Tiere, aus dem Rainerspital Wien XIII 13 Tiere,
aoe der Molkerei Wien V 18 Tiere, zueammen 99 Ratten.

Sie warden mir lebead gebracht, worauf ich durch einige Zeit die
Ffizes beobachtete. Da die Materialbeschaffang auf verschiedene Schwierig-
keiten stieB, zog sicb die Untersuchung der Ratten durch ungef&hr
1 Jabr hin.

Die Fixierung und die Aufbewahrung des Materiales erfolgte meist
in 10-proz. Formol, zum Teil fixierte ich in S c h a u d i n n scher Flflssig-
keit (Sublimat-Alkohol-Eisessig); die bequeme Formol fixierung hat sich
fQr meine Zwecke bewfihrt. Von F&rbungen wandte ich H&malaun,
Delafield- und Heidenhain - H&matoxylin, auch Grenacher-
Hftmatoxylin mit EosingegenfSrbung an. Die in der Literatur an ver-
scbiedenen Stellen zum Ausdrucke gebrachte auBerordentliche Schwierig-
keit der Oozystenf&rbung machte auch mir zu schafien. Versuche, die
sporulierte Oozyste der Eimeria stiedae nach Reich mit Pankreatin-
behandlung in Heidenhain-H&matoxylin zu f&rben, fflhrten zu keinem
brauchbaren Ergebnis. Ich lieB die Objekte 2 Wochen in der Beize
and 3-Wochen in der Farblflsung; es trat wohl Schrumpfung, doch keine
gate Ffirbung ein. Moglicherweise ist daran schuld, dafi ich nicht
Pankreatin-Gr Abler, wie es Reich empfiehlt, sondern ein aus dem
Landeskrankenhaus Graz erhaltenes Prfiparat unbekannter Herkunft ver-
wendete. Das Gr Abler -Pankreatin konnte ich nicht erhalten. 3-wOch.
F&rbung mit alkoholischer Boraxkarmin- und Safraninldsung gab gleich-
falls kein Resultat. Ich lieB weiter DarmstQcke infizierter Tiere (Ka-
ninchen und Ratten) in Leitungswasser bei Luftzutritt liegen. Am 2. Tag,
wenn in den Oozysten die Sporoblastenbildung zu sehen war, wurde
das ganze Stfick fixiert und weiter behandelt. Die Oozyste war im
Schnittpraparat etwas besser erhalten und geffirbt, doch zeigten sich
gleichfalls Schrumpfungen, so daB das Pr&parat fflr die genauere Be-
trachtung von Einzelheiten nicht zu brauchen war. Die Ausstrich-
pr&parate, die ich anfangs machte, zeigten sich tiberfliissig, well die
Kokzidien unter den Kotpartikeln schwer zu finden waren. Die Oozysten
insbesonders blieben ungef&rbt und waren in kurzer Zeit undurchsichtig.

Eigene Untersuchung.

Bei s&mtlichen Ratten wurde die Leber im Nativ- und Schnitt-
pr&parat untersucht, urn den Augaben Carazzis (1913) nachzugehen.
Ich kann vorausnehmen, daB ich bei keiner Ratte in der Leber ein
Coccidium land. Bei 42 Lebern zeigten sich makroskopisch kleine,
gelbe Herde von Sandkorn- bis etwa StecknadelkopfgroBe, mehr Oder
weniger zahlreich; hiervon waren bei 27 Tieren als Ursache die Hepati-
cola hepatica bzw. ihre Eier zu finden. Auch krfimeliger Belag,
weifigelbe Streifen in der Nahe des Hilus unter der G1 is son - Kapsel
war zu sehen, hervorgerufen durch genannten Parasiten. Weiter fanden
sich Zysten (Cysticercus fasciolar is?), Rundwurmzysten, binde-

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430

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

gewebige, abgekapselte Herdchen, besonders hfiufig bei alten Ratten,
vermutlich abgeheilte BohrgSnge nach tiberstandener Parasiteninvasion.
Da R. Erdmann (zit. bei Reich 1913) bei der Maus im Magenepithel
die Eimeria falciformis fand, so durchsuchte ich bei der Ratte
auch Magenepithel und -Submucosa.

Trotz vieler SchnittprSparate aus den verschiedensten Abschnitten
des Magens konnte ich hier kein Coccidium Auden. Nur bei Ratte
Nr. 89 fanden sich in der Submucosa bindegewebige Herdchen mit
Trichozephaleneiern. Eine Leberkokzidiose bei der Ratte durch die Futte*
rung von Eimeria stiedae bzw. falciformis konnte ich nicbt
zustande bringen. Die Rattenkokzidien erscheinen daher, fihnlich vie
Eimeria bovis Zueblin, auf den Darm beschrfinkt. Sie linden sich
das ganze Jahr. Die Untersuchung des Darmes und der Fazes ist weit-
aus interessanter als die der Leber. Makroskopisch, beim ersten An*
blick kfinnten vielleicht die Lymphfollikel, die an verschiedenen Stellen
in verschiedener Gr5Be durch die Serosa schimmern, den AnlaB geben
zur Verwechslung mit Kokzidienherden, wie sie bei stark entwickelter
Darmkokzidiose der Kaninchen auftreten. Solche gelbe Herdchen in
der Darm wand konnte ich bei der Ratte in keinem Fall sehen; erst bei
der mikroskopischen Untersuchung zeigten sich die manchesmal zahl-
reich vorhandenen Kokzidien. Schwierig ist die Untersuchung der F&zes;
Flagellaten und Amfibenzysten, Eimeria falciformis und stiedae,
ferner Trichozephaleneier miissen unterschieden werden. In 1 Fall
sah ich bei der Sektion eine auffallige MilzvergroBerung, Dfinndarm-
katarrh und stark verschmutzten After; in Kctproben aus verschiedenen
Teilen des Darmes fand sich zahlreich eine Amdbe. Da ich eine Am&be
aus der Ratte nicht beschrieben fand, so wird es Gegenstand einer
weiteren Arbeit sein, die morphologischen etc. Eigentfimlickeiten, die
allf&llige Verwandtschaft oder ldentitat dieser Amdbe mit einer schon
beschriebenen Entamoeba festzustellen. Eine Mitteilung darfiber er-
schien in der Wien. tier&rztl. Monatsschr. Jahrg. 8. 1921. H. 7: Ueber
Ratten am bbiase (1 Taf.).

Von den untersuchten Ratten waren behaftet:

1) Mit Eimeria falciformis zusammen 35 Tiere, und zwar: aus dem Schlacht-
haus St. Marx 1 Ratte, aus der Kadaverkammer des palh.-anat. Institutes der Tierint-
lichen Hochschule Wien 11 Ratten, aus dem Meidlinger Schlachthause 2 Ratten, am
dem Versuchstierstall der internen Klinik der Tierarztlichen Hochschule Wien 9 Ratten,
aus dem Pferdeschlachthaus 3 Ratten, aus dem XI. Bezirke 1 Ratte, aus dem Rainer-
spital Wien XIII, 2 Ratten, aus der Molkerei Wien V, 6 Ratten.

2) Mit Eimeria stiedae zusammen 4 Tiere, und zwar: aus dem path.-anal
Institut der Tierarztlichen Hochschule Wien 1. Ratte, aus dem XI. Bezirke 1 Ratte,
aus der Molkerei Wien V, 2 Ratten.

Eimeria falciformis fand sich bei den jungen und anscheinend
ganz gesunden Ratten sehr reichlich vertreten, bei den Slteren Ratten
war sie in einzelnen Exemplaren in den F&zes des Coecum bei der
Sektion zu finden. Da die mir zugangliche Literatur keine Angaben
fiber das Vorkommen der Eimeria falciformis bei der Wander*
ratte bringt, so ist diese als neues Wirtstier aufzuz&hlen. Auch die
Eimeria stiedae finde ich nicht angeffihrt als Parasiten der Wander*
ratte, doch bezieht sich vielleicht die Bemerkung Wasielewskis im
Handbuch der Hygiene von Rubner-Gruber-Ficker (1913) S. 136
darauf: „ffir Ziichter und Laboratoriumsversuche empfiehlt es sich, stets
mit dem Aultreten von akuter Darmkokzidiose bei Ratten, M&usen und
KanarienvSgeln zu rechnen. 44

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Rud'ovakyi Die Kokzidiose der Wanderratte etc.

431

Das haufige Vorkommen von Eimeria falciformis bei jungen
Batten erscheint analog dem Vorkommen der Eimeria stiedae bei
jungen Kaninchen. Es erwcrben sich die Ratten wahrscheinlich so wie
die Kaninchen mit zunehmendem Alter Immunitat.

Bei den genannten 35 Ratten, die mit Eimeria falciformis in-
fiziert waren, wurde die Sporulation beobachtet und der Parasit im
Schnittpraparat nachgewiesen. Weitere 7 Falle, bei denen ich in den
Fazes die kleinen Oozysten (Lange 20—23 ft, Breite 15—18 ft) beob-
achtete, rechne ich nicht dazu, veil ich ihre Zugehorigkeit zu E. falci¬
formis mangels weiterer Beobachtung und Fehlen von Kokzidienformen
in den histologischen Praparaten nicht mit Sicherheit aussprechen konnte.
Die E. stiedae konnte ich, wie erwahnt, bei 4 Ratten sicher in den
Fazes nachweisen. Ein Fall war deswegen bemerkenswert, weil die an
Kokzidiosis umgestandenen Kaninchen von Ratten angefressen wurden;
eine dieser mit E. stiedae behafteten Ratten stammte aus dem ver-
seuchten Gehfifte (Mitteilung des Herrn Prof. Dr. Zaribnicky), auf
welche Angabe ich mich noch spater beziehe.

Die Bestimmung der Oozysten nach ihrer ZugehSrigkeit erfolgte
nicht bloB morphologisch durch GrfiBenmessung, sondern auch biologisch
(Weiterentwicklung des Oozysteninhaltes in Fliissigkeit bei Lul'tzutritt).
Die Bestimmung lediglich nach Gestalt und GrfiBe der Oozyste, wie es
meistens geschieht, dfirfte nicht gentigen. Die auBerordentlichen GroBen-
und Formschwankungen der Oozysten (E. stiedae ist rnehr eiffirmig,
E. falciformis nahert sich der Kugel; die Lfingendifferenz kann 4 ft
nnd weniger ausmachen, in der Breite braucht gar kein Unterschied zu
sein), das gleichzeitige Vorkommen verschiedener Arten von Eimerien
machen die biologische Untersuchung notwendig. Ich beobachtete in
einem Falle das Vorkommen von E. stiedae und falciformis zur
selben Zeit in den Fazes eines Kaninchens, sah auch die Sporulation,
so daB kein Zweifel war bezflglich der Zugehfirigkeit der Oozysten zu
2 Arten von Eimerien. Mir scheint es fiberhaupt unwabrscheinlich, daB
derselbe Parasit, Eimeria stiedae, so verschiedenen Wirten, wie
sie alle angetfihrt werden, angepaBt sei; auch die verschiedenen Arten
der Erkrankung der Kaninchen an Kokzidiose (Leber, Darm, oto-rhino-
pharyngeale Erkrankung) waren noch genauer zu untersuchen, denn es
scheint mir, daB es sich nicht iminer um ein- und dieselbe Art Eimeria
stiedae handelt. Ich verweise nur, abgesehen von der erwahnten
eigenen Beobachtung, auf die alteren Angaben Pachingers (1886)
undRivoltas (zit. bei Neveu-Lemaire, 1912). Ersterer will E. fal¬
ciformis in der Pferdeniere gesehen haben, letzterer beobachtete
E. falciformis und stiedae zu gleicher Zeit in der Kaninchenleber.

Eine wichtige Aufklarung fiber das Heranreifen der Oozyste gibt
die histologische Untersuchung des Darmes. Sie ist notwendig, um die
intrazellulfiren Kokzidienformen nachzuweisen, die einzeln Oder zu 3, 4
im Epithel einer Darmkrypte verborgen sind, wfihrend das fibrige Epi-
thel frei von Parasiten biieb. Bei einer Lange des Darmes von fiber
1 m bei einer grfiBeren Ratte konnte ich mich natfirlich nur auf Stich-
proben beschrfinken. Daher sind auch die Falle hfiufiger (wie erwahnt
7mal), wo in den Ffizes sich Oozysten befanden und im Schnitt nichts
nachweisbar war. Ich ffihre den negativen Untersuchungsbefund auf
den Umstand zurfick, daB eben nicht der ganze Darm in Schnitte zer-
legt wurde. Eine andere Erklarungsmoglichkeit ware auch, daB unent-
wickelte Oozysten den Darmtrakt durchwanderten. Um diesbezfiglich

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432

CeutralbL {. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87; Heft 6.

etwas N&heres zu erfahren, beobacbtete ich, welche Zeit die nicht sporu-
lierten Oozysten der E. stiedae, die in gef&rbter Nahrnng von der
Ratte aufgenommen warden, zu dieser Wanderung benotigten: schon
nach 6—7 Std. waren die ersten Oozysten zn linden. Sie passierten un*
geschfidigt den Verdauungskanal, denn sie sporalierten hierauf ira Freien.

Hier sei auch des zuffilligen Befundes von eosinophilen Zellen in
Schnittpr&paraten gedacht. Der Fund ist wohl bedeutungslos, da bei
der Ratte immer eine Mehrfacbinfektion von Parasiten vorliegt Es
mfifiten Tiere zum Nachweis der Eosinophilie als Begleiterscheinung der
Kokzidiose erst bei geeigneter Ffitterung aufgezogen werden unter Aus*
schlufi jeglicber Infektion. Daher sind auch die Untersuchungen Pa-
nizzas (1910) fiber Bluteosinophilie bei der Kaninchenkokzidiose von
wenig Wert. Denn so wie bei der Ratte kommen auch beim Kanincben
Mebrfacbinfektionen vor — nur gesunde Tiere, die eigens aufgezogen
und kfinstlich erst mit Kokzidien infiziert werden, kfinnen einwandfrei
auf Eosinophilie untersucht werden.

Um die metagamen Formen zu beobachten, warden die RattenfSzes
in Glasschalen mit groBer Oberflfiche und dickem Bodenbeleg aus Lfisch-
papier mit wenig hoher Wasserschicht bei 18—20° C verbracht. Die
Schalen blieben im Zimmer bei genannter Temperatur offen stehen. Am
3. Tage waren die Kokzidien des Enddarmes sporuliert. Die Entwick*
lungszeit, welche Reich (1913) ffir E. stiedae des Kaninchens angibt,
ist l&nger; ich konnte, wie Metzner (1903), nach 3 Tagen beide Ei-
merien mit entwickelten Sporozoiten beobachten.

Schon die miBglflckten Ffirbungsversuche zeigten mir, wie auBer-
ordentlich widerstandsffihig die Wand der Eimerienoozyste ist; noch
mehr aber zeigte sich diese Widerstandskraft, als ich die Sporozoiten-
entwicklung in sogenannten Desinfektionslosungen beobachtete. An-
geregt wurde ich hierzu durch die Mitteilung in der Arbeit A. Ba-
ranski (1879), welcher mit Oozysten der E. stiedae, die in Karbol-
sfiure (3-proz. Losung), Chroms&ure, Chloroform je 2 Wochen gelegen
waren, Infektionsversuche machte. Auch Wasielewski (1904) ffihrte
Lfisungen an, in welchen die Sporulation zustande kam: Metbylen-
blau-, Safraninlfisung, 4 Proz. Kal. bichrom. (die 10-proz. Lfisung h&lt
er todlich ffir die Oozyste) — in 5-proz. Karbols&ure beobachtete er
noch Sporoblastenbildung, in 1—2-proz. Formollfisung sah er Sporen-
bildung. Die Sporulation der Eimeria Zfirni untersuchte Galli-
Valerio (1919) in verschiedenen Lfisungen, darunter 10—50-proz.
Schwefelsfiure und fand eine auBerordentliche Resistenz der Oozysten.
Ich beobachtete die Sporozoitenbildung in Lfisungen, wie sie Hutyra-
Marek (1913) bei verschiedenen Gelegenheiten der Besprechung der
Haustierkokzidiosen angibt, zum Teil ffir Desinfektion, zum Teil als
Medikamente; ich verwendete sie immer bei Zimmertemperatur und
gleichzeitiger Kontrolle von Proben in Leitungswasser.

Schwefelsaure 3 und 4 Proz. Kal. bichrom. 10 Proz.

Karbolsaure 3 „ Resorzin 3 „

Borsaure 3 „ Natr. thiosulf. 4 „

Zink-Kupfervitriol 1 „ Tannin 3 „

Kreolin 1—5 „ Alaun 3 „

1) In der 2 proz. Kreolinlfisung erfolgte die Entwicklung der Sporo¬
zoiten so ungestort, daB ich in der Folgezeit statt des kostspieligen
Thymolzusatzes zu den Fazes zur Verhinderung der Ffiulnis die ge-
nannte Lfisung verwendete.

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RudoYBky, Die Kokzidioee der Wanderratte etc.

433

2) Durch die 3-proz. Schwefels&ure sollen die Kokzidien unsch&d-
lich gemacht werden (Hutyra-Marek): die Kokzidien, die sich im
Enddarra der Ratte und des Kaninchens finden, entwickeln sich nach
3—4 Tagen zu Sporozoiten, die groBen Oozysten, die beim Kaninchen
wahrscheinlich aus der Leber stammen, gehen nach 5-6 Tagen, ein-
zelne auch frGber, zugrunde, das Plasma in der Oozyste zerf&llt.

3) Die gleiche Beobachtung konnte ich bei der 10-proz. Kal. bi-
chrom.-Ldsung machen und ebenso bei Natr. thiosulf. in 4-proz. Losung
— ich verneine daher die Frage Wasielewskis (1904), ob die 10-
proz. Kal. biochrom.-LQsung fQr die Oozysten der E. stiedae tOdlich
sei, fQr die Oozysten, welche sich im Enddarm des Kaninchens and der
Ratte befinden. Diese widerstandsf&higen Oozysten hatten immer eine
L&uge von 36 p, 26—30 n, Breite 11—20 //.

Warura die groBen und kleinen Formen der Eimeria stiedae
so verschieden von der Natur ausgestattet sind, ist mir nicht klar. Ob
chemische Vorg&nge etwa mitspielen, die den Bau der Oozystenwand
beeinflussen, w&re noch zu erforschen. Ich denke hierbei an die Be-
obachtungen Metzners (1903), welcher durch CO,-Atmosph&re die
Zweiteilung der Plasraakugel in der Oozyste statt der gewdhnlichen
Vierteilung bewerkstelligte; vielleicht wird das GrOfienwachstura und
die Widerstandsffihigkeit der Oozystenwand der E. stiedae gleichfalls
darch chemische Vorg&nge bedingt

Jedenfalls ist es fQr den Veterin&rhygieniker bedeutsam, zu wissen,
wie wenig wirksam die gewdhnlich recht oberfl&chlicbe Desinfektion eines
Kaninchenstalles nach einer Kokzidioseerkrankung ist und sich in der
sogenannten Desinfektionsldsung die sporulierten Oozysten am Leben
erhalten und eine neuerliche Infektion zustande bringen kOnnen.

Die E. falciformis zeigt geringere Widerstandskraft infolge des
dfinnen Baues der Oozystenwand. Sie entwickelte Sporozoiten noch in
2 proz. Kreolin-, l-proz. Schwefels&ure, 4 proz. Kal. biochrom.-, 2-proz.
Natr. thiosulf.-, 2 proz. Alaun-, Tannin-, ResorzinlQsung.

Die Untersuchung auf Sporozoitenbildung in hOherprozentigen L5-
sangen von Desinfektionsmitteln und die AufkI&rang der Frage, wie
lange wieder die Sporozoiten in der LQsung lebens- und infektionsffihig
bleiben, bleibt sp&teren Untersuchungen vorbehalten.

Uebertrflgt man DarmstQcke von kokzidiosekranken Kaninchen ohne
Znsatz einer f&ulniswidrigen Substanz in Leitungswasser bei Zimmer-
temperatur und tlberl&Bt das Objekt der F&ulnis, so ist nach einigen
Tagen die F&ulnis bereits weit vorgeschritten, die Darmwand fast zer-
flieBend, mit Ansi zen von Pilzrasen; die groBen Oozystenformen zeigen
dann ein teils scholliges, unregelra&Big geformtes Plasma, teils 16st sich
das Plasma in fetttropfen&hnliche Kugeln auf. Die kleinen Formen der
Oozysten hingegen zeigen am 3. Tage Sporoblasten oder Sporozoiten¬
bildung, nach 5—7 Tagen fast alle Sporozoiten; sie sind also bedeutend
widerstandsf&higer. Im allgemeinen sah ich bei DarmstQcken (Enddarm)
des Kaninchens die Sporulation der Oozysten in 2—3 Tagen, bei Leber-
stQcken in 7—9 Tagen in Leitungswasser bei Zimmertemperatur und
freiem Luftzutritt.

Diese Beobachtungen (Verhalten der Oozysten in der Desinfektions-
flOssigkeit bzw. im faulenden DarmstQck) zeigten mir. wie leicht ein
empf&ngliches Tier die Kokzidien dort aufnehmen kann, wo sie gar
nicht vermutet oder fQr abgetQtet gehalten werden. Hatte mich schon
die Mitteilung des Herrn Prof. Dr. Zaribnicky auf die Ratten auf-

K*tta Abt. Ori*. Bd. 87. Heft 6. 28

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434

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.|

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merksam gemacht, welche den weggeworfenen Kaninchenkadaver aui- I
fraBen, so gaben andere Befunde noch mehr Anregung. Es heifit, daB
die Grflnfiitterung, nasse Jabreszeit etc. bei der Verbreitung der Kanin-
chenkokzidiose eiue groBe Kolle spielen. Bei wilden Kaninchen ist e<
nachgewiesen (Olt und StrOse, 1914), daB sie lQr das erste Auftreten ;
der Hasenkokzidiose verantwortlicb zu machen sind, und wird die De.~ |
infektion der Kaninchenlosung empfohlen. Nun spielen Futter- and 1
Witterungseinflilsse in der GroBstadt, wo die Kaninchen in alten Rinder-
stallungen etc., selbst in Wohnr&umen gehaiten werden, wohl eine sehr
geringe Rolle. Und docb ist es unmogiich, hier in Wien ein kokzidieo- '
freies Kaninchen zu beschatfen. Ich untersuchte den Kot von Kamo- ;
chen, die bei drmeren Leuten fast als Tischgenossen lebten, junge and
alte Exemplare, und alle zeigten in den F&zes die Oozysten. Die M6g-
lichkeit, daB Futter Oder Wasser von einer W'iese, die Kaninchendunger
entbielt, verwendet wurde, kommt hier nicht in Frage: Grflnfutter wird
nur ganz sp&rlich gegeben und stammt hdchstens von einem Park, vo
es verbotenerweise abgerupft wurde. Ich erkundigte mich nacb der
Ffltterung und erfuhr, daB gelegentlich und selten Heu gegeben wird.
das von da und dort geuommen wurde; ich untersuchte hierauf Hen
mikroskopisch bei 5 Pferdeh&ndlern meines Dienstbezirkes, von vo
solches Heu stammte. Auch Heu aus der Molkerei M.. wo die Kanin-
chen angeblich seit 2 Generationen vollkommen gesund waren und vo
ich eine mit E. stiedae infizierte Ratte gefunden hatte, kam zur Uoter-
suchung. In den Stallungen der 5 Pferdeh&ndler werden keine Kanin-
chen gehaiten. Wohl aber leiden die Leute unter der Rattenplage; sie
zernagen die Kisten und S&cke mit KOrnerfutter. Leider konnte ich
von den Bediensteten niemand dazu bewegen, mir Ratten zu fangen
Aus der Molkerei erhielt ich in der Folgezeit dauernd Material.

Die zu untersuchende Heuprobe, wobei ich abgelegenes, verstaubtes.
wie es die Kinder fflr ihre Kaninchen wegnehmen, bevorzugte, gab ich
in ein groBes Glas mit Wasser und schOttelte tflchtig mehrmals dnrcb.
Der erhaltene Bodensatz wurde mittels Pipette in ein Spitzglas uber-
tragen und dann in NativprSparaten untersucht. Die langwierige Durei-
suchung des Bodensatzes hatte Erfolg: es linden sich im Heu die Oo¬
zysten, und die weitere Beobachtung der Sporozoitenentwicklung zeigte
mir in einem Falle, daB es sich urn E. stiedae handelte. Es entstebt
nun die Frage, woher die Oozysten im Heu stammen. Im Heu,
mit Kaninchen Oder Ratten in BerQhrung war, linden sich stets aoeb
Haare Oder Fazespartikel. Die Herkunlt dieser Kotteilchen von der
Ratte oder vom Kaninchen festzustellen, ist erleichtert dadurch, daB im
Kaninchenkot stets die groBen Saccharomyces-Pilze (S. gutto-
latus Robin 1847) in groBerer Zahl sich linden; besonders bei Diar-
rhoe im AnschluB an Kokzidioseerkrankung sind sie Qberaus zahlreicb
und zu ganzen Klumpchen vereinigt. Teile von Rattenfftzes jedoch ent-
halten immer die Rattenhaare, die kenntlich sind an den Markzellen in
der Form von kurzen und breiten Zylindern, oder, wenn nur die Haar-
spitze zu sehen, eine runde Markachse und scharfkantige Epidermicnla >

Diese Rattenhaare land ich in 2 Proben in Gesellschaft der Oozjste:
die eine Probe war aus dem Stalle eines Pferdehfindlers, die andere au?
der Molkerei M. Das Beisammensein der Oozysten mit den Ratten-
haaren kann selbstverstSndlich auch zufSilig sein — doch lSBt mich die
Abwesenheit der Saccharomyces-Pilze einen Zusammenbang ver
muten, denn diese Pilze vermiBte ich nie im Heu, mit welchem kok-

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Emil Zettnow.

Am 31. Januar 1922 vollendet Herr Prof. Dr. E. Zettnow sein
<10. Lebensjahr in beneidenswerter Rfistigkeit und Arbeitsfreudigkeit,
die ihm sein ganzes Leben eigen war. Von Hans ans Naturwissen-
schaftler, hat er den Geist der Medizin leicht erfafit; seit Robert Koch,
auf seine mikrophotographischen Leistungen aufmerksam geworden, ihn
in den 80er Jahren, da er noch am Sophien-Realgymnasium zn Berlin
lehrte, kennen lernte, nnd vollends seitdem er nach seinem Uebertritt
in den Ruhestand (1900) als dauernder wissenschaftlicher Mitarbeiter in
das Kochsche Institut Gbergesiedelt war, hat seine erfolgreiche Arbeit
eingesetzt.

Das Centralblatt fQr Bakteriologie schatzt fast seit Anfang seines
Bestehens den Jubilar als einen erfolgreichen Mitarbeiter, der nicht blofi
dnrch seine meisterhaften Leistungen in der Mikrophotographie, die ihm
unter anderem das „Zettnow-Filter" verdankt, sondern auch dnrch die
Ergebnisse seiner wissenschaftlichen Untersuchungen fiber die Morpho¬
logic der Bakterien und besonders durch die gleichfalls seinen Namen
tragende GeiBelffirbungsraethode, den Fachmfinnern aller L&nder bekannt
ist Sein vortrefflicher morphologischer Blick, verbunden mit einem
scharfen, kritischen Urteil, und sein technisches Kfinnen haben ihn zu diesem
Erfolg geffihrt. Viele, die im Laufe der langen Jahre sich bei ibm Rat
anf den von ihm gepflegten Gebieten holten, haben von ihm gelernt,
and manche Ansicht hat bei Besprechungen mit ihm eine Umstimmung
oder Richtigstellung erfahren.

Seine Liebe zur Natur zog ihn zu den Schdnheiten der Berge, ver-
anla&te ihn zn Reisen in der Heimat und nach fernen Lfindern, sie
ffihrte ihn zu gfirtnerischer Tfitigkeit und half ihm zur Erhaltung der
Frische des Kdrpers und Geistes, der wir so manche mfihevolle und
schfine Untersuchung auf wissenschaftlich - bakteriologischem Gebiete
rerdanken.

Heute widmen ihm die Herausgeber des Centralblattes fQr Bakterio¬
logie, die Mitglieder des Instituts fQr Infektionskraukheiten ^Robert
Koch* und seine dankbaren Freunde in aufrichtiger Verehrung dieses
Gedenkblatt mit dcm herzlichen Wunsche, die Schaffenskraft dieses ein-
fachen, schlichten und aufrichtigen Mannes sich und der Wissenschaft
noch lange erhalten zu sehen.

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Budovsky, Die Kokzidioee der Waoderratte etc. 435

zidiosekranke Kaninchen in Berflhrung waren. AnCerdem ergab die
Nachfrage, daB in der Gegend Oder dem Platze, von welcbem das Hen
stammte, das icb untersuchte, keine Kaninchen gehalten werden, daher
eine Infektion durch KaninchendOnger auszuschiieflen war. Ich stelle
mir daher die Beziehnngen zwischen der Ratten- und Kaninchenkok-
zidiose derart vor, daB als ursprflngliches Wirtstier fQr die in
Frage kommenden Kokzidien die Ratte anzusehen ist, bei der die Kok-
zidiose ganz fihnlich wie die Trichinose enzootisch vorkommt. In den
meisten, wenn nicht in alien F&llen, dflrfte sich das Kaninchen dnrch
Fatter infizieren, dafi in irgendeiner Weise mit Rattenffizes beschmutzt
wurde. In den F&llen, wo die Kaninchen, wie oben geschildert, in den
Wohnrflumen ihrer Besitzer aufgezogen and so scheinbar in gar keine
Berflhrung mit Ratten kommen konnten, ist an die Infektion durch
Rauhfutter zu denken, welches in dem Fouragedepot wohl in den aller-
meisten Fallen wieder durch Rattenf&zes beschmutzt wurde. Immerhin
ist es moglich, dafi die Ratten sich umgekebrt wieder durch Berflhrung
mit kokzidienkranken Kaninchen anstecken kflnnen, und zwar auf iol-
gende Weise: Die Ratte frifit entweder, wie in dem einen nachge-
wiesenen Fall, kokzidienhaltige Kaninchenkadaver an, Oder sie nimmt
zur Nahrung weggeworfene Leber- bzw. Darmstflcke; auch Futter frifit
sie vielleicht weg, das kokzidienkranken Kaninchen vorgesetzt und von
diesen beschmutzt wurde. Wie oben erw&hnt, kommt es bei der Ratte
zn baldigem Kotabsatz und die Verbreitung entwicklungsfahiger Oozysten
nach verschiedenen Orten ist damit gegeben. DaB in der Aaskammer
des Pathol.-anat. Institutes und im Versuchstierstall der hiesigen Hoch-
schule eine Infektion der Ratte durch E. stiedae mdglich ist, bewiesen
mir 2 Funde von Oozysten in den Rattenf&zes; bei 2 Ratten wurden
aufierdem, wie oben erwfihnt, die E. stiedae im Darm nachgewiesen.

In den Heuproben fanden sich die Oozysten mit von der Zysten-
wand zurflckgezogener Plasmakugel und die Zystenhfllle anscheinend
nnbescbftdigt. Ob die einzelnen feinen Linien auf der Zystenwand
Falten Oder Risse vorstellen, konnte ich nicht entscheiden. Die Grdfie
der Cysten war 17 p. in der Breite und 32 ft in der L&nge, vermutlich
also eine Oozyste der E. stiedae. In einem Falle konnte ich, wie er-
wShnt, die Entwicklung der Sporozoiten der E. stiedae beobachten.
Ebenso fanden sich in den Heuproben kleine Oozysten, 16 /u breit, 20
bis 22 p. lang mit deutlicher Delle an einem Ende; ich glaubte, hier
eine andere Art, nicht E. stiedae, vor mir zu haben.

Die Eintrocknung auf dem Heu scheint den Oozysten nicht zu
schaden. Wie lange die Trockenheit dauern dflrfe, ist nicht bekannt.
Nicht untersucht ist auch, wie lange der Aufenthalt in faulender Sub-
stanz dauern dflrfe, damit die Sporozoiten in ihrer Lebensf&higkeit nicht
geschfidigt werden.

Tierversnche.

Eine besondere pathogene Bedeutung konnte ich bei dem Mangel
yon Krankheitszeichen sowohl bei den natflrlich wie bei den kflnstlich
infizierten Ratten der E. falciformis und stiedae nicht beimessen.
Die Tiere waren bei bestem Appetit, kletterten im K&flg auf und ab —
auf die geringe Aenderung der Kotbeschaffenheit komme ich noch zu
sprechen. — Wie schon frflher erwfihnt, konnte ich keine massigen In-
fektionen von Kokzidien ausfflhren und sind vielleicht aus diesem Grunde

28 *

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft (5.

die Krankheitserscheinungen nicht grobsinnlich wahrnelimbar zum Aus-
druck gekommen.

Die kiinstliche Infektion der Ratte erfolgte im allgemeinen derart,
daB die Ratte Zwieback (ital. galetta, Schiffszwieback) zur Nahrung er-
hielt, der sehr poros war und die Oozysten mit der Fliissigkeit, in der
sie sporuliert hatten, rasch aufsaugte. In ahnlicher Weise wurde das
Kaninchen infiziert. Die Futterung der Kaninchen ist schwieriger; es
muB sich an den Rauhfuttermangel gewohnen. Unter den herrschenden
Verh&ltnissen ist es iiberaus schwer, alle MSglichkeiten einer Kokzidien-
infektion durch das t&gliche Futter auszuschalten. Vorausgeben mu&
dem Versuch auch mehrmalige Durchsuchung der Fazes nach Oozysten.
und erst, wenn die oftere Untersuchung negativ ist, kann nut dem Ver¬
such begonnen werden. Ich war nur 2mal in der gliicklichen Lage,
kokzidienfreie, junge Tiere zu erhalten. Ich zog das 1. Tier mit Suppen
und Zwieback auf, doch schien es zu friih von der Mutter genommen.
weil es nach kurzer Zeit einging. Erst das 2. Tier brachte ich weiter;
daher konnte ich nur einen Uebertragungsversuch der E. stiedae aus
den RattenfSzes auf ein kokzidiosefreies Kaninchen macben. Nachdem
mir aber dieser Versuch gelang, gibt er inimerhin einen Anhaltspunkt
filr weitere Untersuchungen. Um das Kaninchen kokzidiosefrei zu er-

Fig. 1. Eine Diinndarmzotte des infizierten Kaninchens. Farbung nach Heiden-
h'alin. Vergr. Reich. Okul. 4, Obj. 5.

halten bis zum Versuch, erhielt es nur Suppen, Teile meiner Mahlzeit,
Zwieback und als Lager eine Kiste, die t&glich mit Papier ausgelegt
wurde an Stelle der Holzwolle. Das Kaninchen blieb auf diese Art
kokzidiosefrei, n&hrte sich dauernd gut und zeigte erst gegen Ende der
Versuchszeit leicht breiigen Kot mit den zahlreichen Oozysten. Vor
kurzem entwohnt, 760 g schwer, wurde das Tier zuerst beobachtet durch
2 VVochen; da Oozysten im Kote fehlten, wurde das Kaninchen zum
Versuche verwendet und vom 13. MArz 1920 an durch ungefahr 1 Woehe
mit den sporulierten Oozysten der Rattenfazes gefuttert. Am 9. Tage
nach der 1. Futterung der Oozysten sah ich entwicklungsfahige Oozysten
in den Fazes auftauchen; nach 5 Wochen wurde das Kaninchen, cs.
1900 g schwer, getotet; die histologische Untersuchung lieferte ein po¬
sitives Ergebnis.

Ich machte folgende Uebertragungsversuche:

1) iibertrug ich E. falci formis a) von einer Ratte mittleren Alters auf einepleich-
alte, welche nach 6 Tagen getotet wurde; b) von der gleicben Ratte auf zwei alte Ratw.
die nach 8 Tagen getotet wurden. 2) iibertrug ich E. falciformis auf eiu Kaninch®,
das an einer interkurrenten Tympanie einging. 3) iibertrug ich E. stiedae
Kaninchen auf 2 Ratten; beide nnttleren Alters, a) nach 18 Tagen getotet, b) d»™
2 Monaten getotet. 4) iibertrug ich E. stiedae aus den Fazes der Ratten ties Vereuch«3
auf ein Kaniuchen.

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Rudovsky, Die Kokzidiose der Wanderratte etc.

437

Bei diesen Untersuchungen ergab sich folgendes:

Im Fall la) war am 5. Tag der Kot nicht, wie sonst, dunkelgrQn
and hart geballt, sondern mebr breiig und braun. Am 6. Tag aber war
die Konsistenz bereits wieder fester und wurde die Ratte getdtet. Das
histologische Bild zeigte in mebreren Darmepithelzellen zahlreicbe Aga-
meten der E. falciformis.

Im Fall 1 b) zeigten die Ratten gar keine VerSnderung, der Kot
blieb von normaler Farbe und Konsistenz. Entwicklungsfahige Oozysten
waren in der 2. Versuchswoche spfirlicb im Kot, verscbwanden aber
wieder. Die Ratten wnrden nach 8 Wocben getOtet, im histologischen
Scbnittpr3parat war kein Kokzidium zu seben.

Fall 2) Der Versuch miBlang, da das Kanincben vorzeitig einging
(in der Versucbswoche). Der Darm kam bereits in leicbter F&ulnis zur
Bntersncbnng. Ein bistol. SchnittprSparat des Dickdarmes zeigte junge
Kokzidienformen ganz vereinzelt. Da ich in den KanincbeDfazes keine
Oozysten fand, die in der Sporozoitenentwicklung die Eimeria-Art klar
batten zeigen kOnnen, so sind weitere Versuche n5tig, die vermutlich
Erfolg baben werden.

Fall 3a) Die Ratte zeigte dnrch 2 Tage breiigen Kot, und zwar
am 6. - 8. Tag des Versucbes. Am 11. Tag beobacbtete ich entwicklungs¬
fahige Oozysten, am 18. Tag wurde die Ratte getdtet und fanden sich
im bistol. Schnitt die intrazellul&ren Kokzidienformen.

Fall 3b) zeigte gleichfalls durch 2 Tage breiigen Kot; am 13. Tag
sab ich die entwicklungsfahigen Oozysten nach 2 Monaten wurde die
Ratte getdtet; der bistol. Darmbefund war negativ.

Fall 4) Sporulierte Oozysten der E. stiedae aus Ratten fazes des
Falles 3a) auf ein kokzidienfreies Kaninchen flbertragen; Vorgang und
Verlauf des Versuches wurde bereits oben geschildert.

Folgerungen.

1) Bei der Wanderratte kommen 2 Arten von Eitneria als Erreger
von Kokzidiosen vor, E. falciform is (Eimer) und Eimeria stiedae
(Lindemann). Fflr beide Arten ist die Wanderratte als neues Wirtstier
anzusprecben.

2) Es bestehen Beziehungen zwiscben der Ratten- und Kaninchen-
kokzidiose in der Richtung, daB die Wanderratte als ursprdnglicbes Wirts¬
tier der fraglicben Kokzidien anzuprechen ist, und daB sie als Ueber-
tr&gerin der Kokzidiose auf das Kaninchen eine wichtige Rolle spielt.

3) Gegenflber vielen (im Text angefflhrten) Desinfektionsflflssigkeiten
erwiesen sich die Oozysten dieser Kokzidien als auBerordentlich wider-
standsf&hig, was bei der Desinfektion von Seuchest&llen mehr als bisber
m berflcksichtigen sein wird.

4) Die Uebertragung der Rattenkokzidiose auf das Kaninchen ist
dnrch den Tierversuch gelungen.

Ialteratur.

Baranski, A., Psorosperraien der Hauppaugetiere. (Oesterr. Vierteljahrz. f.
viaaeDbch. Veterinark. Bd. 51. 1879. 8. 101—131.) [Hier au«fuhrliche Angaben liber
die iltere Literaturj. — Carazzi, Davide, Parabsitologia animale. Milano 1913.

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438

Ceutraibl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

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dien iiber die Schwimmbiasenkokzidien der Gadus-Arten (Eimeria gadi n. gp.}.
(Arch. f. Protistenk. Bd. 31. 1913.) — Galii - Valerio, B., Notes de parasitologie et
technique parasitologiaue. (Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 35. 1904. 8. 8fcU —
Ders., Ebenda. Abt. 1. Orig. Bd. 39. 1905. S. 240.) — Ders., Schweiz. Arch. f. Tier-
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1899 ) — Lotsch, Ratten als Uebertrager der Pferderaude. (Zeitschr. f. Veteriuark.
Bd. 30. 1918. 8. 360/361.) — Metzner, R., Untersuchungen an Coccidium cuni-
culi. T. I. (Arch. f. Protistenk. Bd. 2. 1903. S. 13—72.) -• Moll, A. M., Animal
parasites of rats of Matison. (Journ. of Parasit. Vol. 4. 1917. p. 89.) — Moroff-
Fiebiger, Ueber Eimeria subepithelialis n. sp. (Arch. f. Protistenk. Bd 6.
1905. S. 166—174.) — Neveu-Lemaire, M., Parasitologic des animaux domestique*.
Paris 1912. (Angabe iiber Rivolta. p. 219.) — Ohira, Ein Beitrag zur Kokzidiea-
forechung: Ueber ein bei Ratten gefundenes Kokzidium (Eimeria Miyairii). (Mitt
d. med. Gesellscb. Tokio. Bd. 26. 1912. H. 17; das Referat Fukuharas, enthalteo
im CentralbL f. Bakt Abt. J. Ret Bd. 58. 8. 308.). — Olt-Strose, A., Die Wikl-
kr&nkheiten und ihre Bekampfung. Neudamm 1914. —Pachinger, J., Mitteilungeo
uber Sporozoen. (Zool. Anzeig. Bd. 9. 1886. S. 471.) — Panizza, Alb., Eosinofilia
nei comgli affetti da coccidiosi. (Clin, veter. Vol. 33. 1910. p. 81.)— Reich, Felix,
Das Kaninchenkokzid Eimeria stiedae (Lindemann 1865), nebst einem B^itrag
zur Kenntnis von Eimeria falciformis (Eimer 1870). (Arch. f. Protistenk. Bd. 28.
1913. H. 1.) — Rubner-Gruber-Ficker, Handb. d. Hyg. Bd. 3. Abt. 3. Leipzig
(Hirzel) 1913. — Schuberg, A., Die Kokzidien aus dem Darm der Maus. (Verh&ndL
d. nat-med. Ver. Heidelberg 1897 Bd. 5. S. 369—398.) — Tiraboschi, C., Les rats,
lee souris er leurs parasites cutan£s ec. (Arch. d. Parasit. T. 8. 1903/1904. p. 161-394.)

— U hlenhuth, P., u. Zuelzer, M., Das Vorkommeu des Erregers der an^teckendea
Gelbsucht bei freilebenden Berliner Ratten. (Dtsch. med. Wocbenscbr. 1920. Nr. 4 it
Ref. d. Sitzber. d. Berlin, mikr. Ges. in Berlin, kliu. Wochenschr. 1902. 8. 306.) —
v. Wasielewski, Th., Studien u. Mikrophotogramme zur Kenntnis path. Protozoco.
H. 1. Leipzig 1904. — Wen yon, C. M., Observations on the Protozoa in the intestine
of mice. (Arch. f. Protistenk. 8uppl.-Bd. 1. 1907.)

Tafelerkl&rang.

Fig. 1. E. stiedae im Rattendarm (Diinndarm). Farbung nach Heidenhain.
Vergr. Reich. Ok. 4, Obj. 5.

Fig. 2a. Schizogonie der Eimeria falciformis. Schnittpraparat aus dem
Rattendarm (Dickdarm). Farbung nach Heidenhain. Vergr. Reich. Ok. 4. Obj. 5.

Fig. 2b. Dasselbe Praparat wie oben. Vergr. Reich. Ok. 4. 1 / lJ hom. Imm.
Apert. 1,30.

Nachdruck verbot

Einige Anoplocephaliden der VogeL

Von Prof. Dr. 0. Fnhrmann, Universit&t Neuchatel.

Mit 21 Abbildungen im Text.

Seit wir die fiir S&igetiere so charakteristische Gruppe der Ado-
plocephaliden auch bei Vbgeln konstatiert und dieselben zusammengestellt

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Ctniralblall fBaktaiobgie Abt.l Ong.Bd.87.

Fr. R lid ox'skv, /{athnkokz id ins*'

««?i

P Wcjse. Lith , Jrnd

VerUy von Guslav Tischer in Jena

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Fuhrmann, Einige Anoplocephaiiden der VogeL

439

haben 1 ), hat sich deren Zahl vermehrt und die systematische Stellang
einiger Genera verSndert.

Wie wir anderweitig*) beraerkt, hat es sich als notwendig erwiesen,
das von uns unterdrOckte Genus Paronia Diamore wieder zu retablieren,
da es, wie eigene Untersuchung der S&ugetiere - Moniezien ergeben,
nicht, wie wir glaubten, mit Moniezia vereinigt. werden kann, indem
namenilich der Uterus einen ganz verschiedenen Bau aufweist.

Die als Bertia pinguis Fuhnn. beschriebene Form ist (wie weiter
unten, S. 440, ausgefQhrt) in das Genus Anoplocephala zu stelleu.

Das Genus Zschokkella Rans (syn. Zschokkea Fuhrm.) muB
eine emeute Umtaufe erleiden, da Auerbach (Zool. Anz. 1909. 5. Okt.)
eine Myxosporidienart mit diesem Genusnamen benannt hat. Wir schlageu
fiir ohjges Genus den neuen Namen Multicapsiferina vor.

Fflr die von uns frflher beschriebene 8 ) T. anoplocephaloides
beantragen wir das neue Genus Triuterina mit folgender Diagnose:
Knrzgliederige Anoplocephaiiden mit starker Parenchym-
rauskulatur. Geschlech tsoffnungen unregelmaBig ab-
wechselnd. DieGeschlechtsgfingegehenseitlichzwischen
den beiden L&ngsstammen des Exkretionssystems durch.
Die sehr zahlreichen Hoden liegen im ganzen Markparen-
chym verteilt, namentlich antiporal in mehrfacher Lage,
aber auch ziemlich zahlreich auf der poralen Seite des
weiblichen DrQsenkomplexes, sowie in einfacher Lage
fiber demselben. Die weiblichen Geschlechtsdrfisen liegen
in der poralen H&lfte der Proglottis. Der Uterus ist deut-
lich dreiteilig und besteht aus einem mittleren, vorderen
und zwei seitlichen hinteren Teilen. Eier ohne birnfbr-
migen Apparat.

Folgendes sind die bis jetzt aus Vbgeln bekannten Anoplocephaiiden:

Anoplocephala minima Mello 1912, aus Gallus dom.; Italien (ganz un-
genugend beschrieben und wohl gar kein Anoplocephalide); Anoplocephala pin-
guis Fuhrmann 1904 aus Coraciiformes, Afrika; Bertiella delafondi (Rail-
liet) 1892 aus Columbiformes, Europa, Siidafrika; Bertiella meridionalis
Obolod. 1913 aus Charadriiformes, Siidruflland; Triuterina anoploce¬
phaloides Fuhrmann 1902, aus Psittaci for mes, Afrika; Cittotaenia a vicola
Fuhrm. 1897, aus Anseriformes, Fundort unbekannt; Cittotaenia psittaeea
Fuhrm. 1904, aus Psittaciformes, Neuseeland; Cittotaenia rhea Fuhrm. 1904,
aus Kheiformes, budamerika; Cittotaenia columba Skriabin 1914, aus Co-
lumbiformes Neu-Guinea; Cittotaenia cuvaria (Shiplev) 1900 aus Columbi-
formes, Sumatra. Bismarck-Archipel, Neu-Britanien; Paronia columba Fuhrm.
1902, aus Col um bi formes, Australien, Neu-Guinea; Paronia carrinoi Diana.
1900 (= T. trichoglossi Linst.), aus Psittaciformes, Australien, Neu-Guinea;
Paronia ambigua Fuhrm., aus Psittaciformes, SQdamerika, Paronia beau-
forti v. Jamcki, aus PsittaciformeB, Neu-Guinea; Paronia variabilis Fuhrm.,
aus Caraciiformes, budamerika; Moniezioi'des rouxi Fuhrm. 1918, aus
Psittaciformes, Neu-Caledonien; Aporina alba Fuhrm., aus Psittaciformes,
Siidamerika; Aporina fuhrmanni skriabin 19U>; Wirt unbekannt, budamerika;
Multicapsiferina (Zschokkella) linstowi (Parona) 1885, aus Galliformes,
Afrika.

Als Wirte koramen, wie aus obigem zu ersehen, vor allem Papageien
und Taubeo in Betracht, wahrend aus Coraciiformes nur 2 Arten,

1) Fuhrmann, O., Die Cestoden der Vogel. (Zool. Jahrb. Bupplem. 1908.)

2» Kuhrmann, O., Centodes d’oiseaux de laNouvelle(Jal&ionie et des lies Loyalty*
(Id: F. Sarasin u. J. Roux, Nova Caledonia. Zoologie. Vol II. 1918.)

3) Fuhrmann, O., Die Anoplocephaiiden der Vogel. (Centralbl. f. Bakt. Abt* I.
Bd. 32. 1902. 8. 144.)

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440

CentralbL f. B&kt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

aus Rheiformes, Galliformes, Charadriiformes and Anseri-
formes bis jetzt nur je 1 Spezies bekannt wurde.

Wenn wir die geograpbiscbe Verbreitung dieser interessanten Formen
flberblicken, so konstatieren wir, daC in dem helminthologisch am besten
bekannten Europa sich nur eine sichere Anoplocephalide, Bertiella
delafondi findet, w&hrend die meisten Arten in SQdamerika und Oze-
anien angetroffen wurden.

Im nachfolgenden sollen einige Arten, welcbe ich 1 ) frflher korz
ohne Beigabe von Figuren charakterisiert habe, unten bescbrieben werden:

Anoplocephala pinguis (Siebold). (Fig. 1—5).

Synonymic: Taenia pinguis v. Siebold nom. nnd. Fnbrmann.

Bertia pinguis (v. Sieb.) Fubrmann.

Diese aus Bucorax abyssinicus Bodd. stammende, interessante
Art habe icb 1904 kurz als Bertia pinguis bescbrieben, glaube aber
nach genauer Untersucbung, dafi sie besser ins Genus Anoploce*
phala zu stellen, obwohl sie auch bier, wie wir sehen werden, nicht
ganz an ihrem Platze ist. Wie ich schon frOher bemerkt, fand sich
diese Art unter dem Namen T. pinguis v. Siebold im Mnseum von
Mttnchen.

Die stark kontrahierte Strobila ist sehr kurzgliedrig* 70 mm lang,
bei einer Dicke von 2 mm und einer maximalen Breite von 4 mm. Der
Skolex zeigt einen Durchmesser von 0,5 mm, die leicbt ovalen Sang*
nfipfe baben einen Lfingendurchmesser von 0,24 mm und einen Quer-
durchmesser von 0,2 mm.

Die Strobilation beginnt direkt binter dem Kopf; ein Hals feblt
Da, wo die Geschlechtsorgane angelegt, sind die Glieder nur 0,08 mm
lang, weiter binten, wo diese Organe wohlentwickelt, betrfigt die L&nge
der Proglottiden 0,13 mm, bei einer Breite von 3,7 mm und einer Dicke
von 0,17 mm. Die reifen Glieder zeigen eine Breite von 4 mm bei
einer Lfinge von 0,17 mm.

Die Kbrperkutikula ist sebr dick und zeigt deutlich 3 Zonen: eine
dflnne, fiufiere, die sich mit Hamalaun stark ffirbt, eine mittlere dicke,
hellblau, und eine dQnne, farblose, glfinzende, innere Zone, welcbe letz*
tere wobl die sogenannte Basalmembran darstellt. Subkutikularmusku*
latur und Subkutikuiarzellen sind sebr zart ausgebildet. Die Parencbym-
muskulatur ist stark entwickelt und erfflllt mehr als */s der Dicke der
Glieder. Die zahlreichen L&ngsbtiDdel zeigen das Auffallende, dafi die
inneren bedeutend kleiDer als die Sufieren, welcbe boch und schmal sind
(0,1 X 0,024 mm). Auch die Transversalmuskulatur ist sehr milchtig
und die Dorsoventralfasern sehr zahlreich. Zwiscben den in etwa ffinf-
fachen Lagen angeordneten L&ngsbtindeln liegen zahlreiche kleine Kalk-
kdrperchen.

DasExkretionssystem bestebt aus 2 mfichtigen ventralen Lfingsgeffifien,
die einen Durchmesser von 0,24—028 mm haben und durch ein leicht
sichtbares Quergefafi verbunden sind. Besonders deutlich sind am
Hinterende jedes Gliedes die Klappenapparate ausgebildet, welche den
Riickflufi der in den Exkretionsgefafien zirkulierenden Flflssigkeit V6f-
hindern (Fig. 2 Kl). Das dorsale Gefafi ist dickwandig und eng und

l)Fuhrmann, Otto, Neue Anoplocephaliden der Vogel. (Zool. An*. Bd.27.1904.
S. 385-388.)

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Fuhrmann, Einige Anoplocephaliden der V6gel.

441

nor im vorderen Toil der Strobila sichtbar, wo es deutlich dorsal and
innerhalb der ventralen Gef&Be liegt.

Die Geschlechtsoffnungen mQnden einseitig; das Genitalatrinm ist
sehr eng and tief, an seinem Grande mQnden die beiden Genitalg&nge,
welche Qber dera LfingsgefQB und dem LQngsnerven durchzieben.

Der Cirrasbentel mQndet vor und Qber der Vagina aas; doch habe
ich mehrfach beobachtet, dafi er gelegentlich auch deutlich unterhalb,
d. h. ventral von der Vagina, in das Genitalatrium mQndet (Fig. 3).
Der Cirrasbeutel ist zylindrisch, bis 0,68 mm, und miBt nur 0,04 im
Dnrchmesser. Der Cirrus ist dickwandig und unbewaffnet, der Ductus
ejaculatorius macbt nur einfache Schlingen und es bildet sich keine
Vesicula interna. Beim ^ustritt aus dem Cirrusbeutel legt sich das Vas
deferens in wenige Windungen, worauf es sich zu einer langgestreckten

Fig. 3. A. pinguis. Fig. 5.

Fig. 1. Querschnitt (lurch das Rindenparenchym. Lm Langsmuskulatur; 7V//
Tran>versalmuskulatur; Dm Dorsoventralmuskulatur.

Fig. 2. Fliichenschnitt durch den seitlichen Teil von 3 Proglottiden. Lm Liings-
muskuJatur; N Liiiursncrv; Tg Transver^altrefafl; Kl Klappenapparat des ventralen
Liingsgefaftes; K Keimstoek, H Hoden, Yg Vagina.

Fig. 3. Querschnitt. Lq Lan<r*gefiiQ; N Langsnerv; Cb Cirrusbeutel; R Re-
traktor des Cirrusbeufels; Vd Vas deferens; Vg Vagina; Rs Receptaculura seminis; Do
botterstock.

Fig. 4. Die woiblichen Genitalgiinge, Rokonstruktion. Rs Receptaculurn seminis;
Vg Vagina, K Dotterstock mit Dottergang; Do Keimstock, Od Ovidukt; Sd Schalendriise;
Vg Uteringang.

Fig. 5. Seitlieher Toil oines Flachenschnitl.es durch cine Proglotti*. Ac Atrial-
kanal; Cb Cirrrusbeutel: Yg Vagina; Lm Langsmuskulatur.

Vesicula seminalis erweitert. Die Fortsetzung des Vas deferens zieht
nicht, wie dies meist der Fall, dorsal von den Hoden durch, sondern
drfingt sich zwischen die doppelte Lage von HodenblSschen ein, ver-
zweigt sich stark und bildet Anastomosen und Erwciterungen. Die Hoden,
etwa 100 an der Zahl, sind undeutlich in 2 Lagen angeordnet und er-
fGllen die ganze Hohe des Markparenchyms; sie liegen natiirlich grdfiten-
teils antiporal neben den weiblichen GeschlechtsdrQsen, doch zieht eine

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442 Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 6.

einfache Reihe von Testikeln hinter dem Keimstock durch and liegen
auch mehrere Hoden auf der poralen Seite des Ovariums. Ihr dorso*
ventraler Darchmesser betr&gt 0,16—0,22 mm, ihr transver6aler 0,06
bis 0,08 mm.

Die Vagina, die, wie schon bemerkt, etwas hinter dem Cirrusbeutel,
moist ventral, hier und da auch dorsal von ihm in das Genitalatrium
mflndet, ist bis auf die HOhe des Lfingsgef&fies sehr dickwandig und
muskulbs, wird dann etwas dQnnwandiger, ist aber von zahlreichen Zellen
umgeben (Myoblasten oder Drflsenzellen). Auf der H6he des Dotter*
stockes wird sie pldtzlich auf eine kurze Strecke sehr eng, um sich dann
zu einem ziemlich grofien Receptaculum seminis zu erweitern. Aus
diesem tritt die Vagina sehr dickwandig aus, strebt ventralw&rts, um
sich mit dem kurzen, von der Ventralseite aufw&rts steigenden Ovidukt
zu vereinigen. Da die Proglottiden sehr kurz (—0,13 mm), ist die
zwiscben den QuergefiLfien gelegene Markparenchymzone sehr schmal
und deshalb die beiden Keimdrfisen, Ovarien und Dotterstock in der
L&ngsrichtung sehr schwach entwickelt, um so mehr, als hinter ihnen,
wie oben bemerkt, eine Reihe von Hodenbl&schen liegt. Der Keimstock
liegt deutlich poral verschoben, 0,7—0,9 mm breit, zeigt er bei voller
Entwicklung breite, dorsale Lappen, die bis fast an die dorsale Trans*
versalmuskulatur heranreichen. Der Dotterstock ist fiufierst schmal,
aber verb&ltnismfifiig sehr breit (0,5 mm); er liegt ganz ventral und
hinter dem Keimstock. Der Dottergang steigt senkrecht dorsal warts,
wo er sich vor der dorsalen Schalendrflse mit dem Ovidukt vereinigt
(Fig. 4). Dorsal tritt ein leicht gewundener Kanal aus, der dann, ven-
tralwarts strebend, in den anfangs ventralen Uterus mfindet, der auch in
reifem Zustande die lateralen Wassergeffifie nicht fiberschreitet. In
ganz reifen Gliedern erfilllt der sackfdrmige Uterus das ganze Mark*
parencbym und ist vorn und hinten, aber namentlich dorsal und ventral
gelappt. Die Eier sind von 3 Hullen umgeben, von welchen die mittlere
etwas dicker ist. Der Embryo hat einen Durchmesser von 0,034 mm,
die Haken der Quersph&ren einen solchen von 0,02. Ein birnfdrmiger
Apparat fehlt vollstandig.

Die systematische Stellung dieser Art ist nicht leicht zu bestimmen;
wir hatten dieselbe ursprtinglich in das Genus Rertia (Bertiella) ge-
stellt, weil die Anordnung der Hoden (auch auf der poralen Seite des
Keimshockes) und der Bau des Cirrusbeutels (ohne Vesicula seminalis
interna) den Verhaltnissen im Genus Bertiella zu entsprechen schienen.
Der Umstand aber, dafi T. pinguis die Genitalpori einseitig angeordnet
hat, wahrend sie bei alien Bertiella alternierend, stdrte die Einheit
dieses Genus, weshalb ich B. pinguis in das Genus AnoplocephaU
stelle, als dem einzigen Genus der Unterfamilie der Anoplocepha^
linae, welches einseitige Genitalpori hat. Dazu kommt, dafi, wie bei
Anoplocephala, die Vesicula seminalis externa gut entwickelt
ist; die bei den Arten dieses Genus existierende Vesicula interna fehlt
allerdings. Nicht mit Anoplocephala iibereinstimmend ist aufierdem
die Anordnung der Hoden und das Fehlen eines birnfdrmigen Apparates,
doch ist das Genus nicht so einheitlich gestaltet, dafi nicht auch diese
Art vorlfiufig in ihm Platz linden kdnnte.

Clttotaenta psittaeea Fuhrm. (Fig. 6—12.)

Diese aus dem interessanten Erdpapagei, Stringops habro-
philus stammende T&nie, die erste, welche aus diesem Vogel bekanot.

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r

Fuhrmann, Einige Anoplocephaliden der VOgel.

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ist eine Anoplocephalide und, wie auf S. 440 zu ersehen, nicht die erste
ids dieser Vogelgruppe. Das ausgezeichnet erhaltene Material stammt
ans der zoologischen Sammlu'ng des Wiener Museums.

Der Cestode hat eine Lftnge von 13 cm, vom Skolex an langsam
an Breite zunehmend, erreicht er erst nahe dem Hinterende sein grOBtes

.j **

Fig. 11.

Cittotaenia psittacea.

Fig. 6. Strobila.

Fig. 7. Skolex.

Fig. 8. Die weiblichen Genitalg&nge. Rekonstruktion. Figurenerklarung siehe
Fig. 4; Sa Schluckapparat

Fig. 9. Querschnitt (lurch das Vaa deferens mit Prostatazellen. P 9 Ed Epithel-
auskleidung dee Vaa deferens.

Fig. 10. Reife Oncosphare.

Fig. 11. Querschnitt durch eine Proglottis mit 4 weiblichen Geschlecbtsdrfisen.
und EL normal© Keimstdcke; Do t und Do % normale Dotterstdcke; und . P,°%
nnd I)o 4 uberzahiige Keim- und Dotterstdcke; Vg Vagina; Rs Receptaculum seminis;
Si Schalendruse; Ut Uterus; Cb Cirrusbeutel; Vd Vas deferens; E Hoden; JV Lfcngs-
nery; d W dorsales Wassergefafi; vW ventrales WassergefaS.

Fig. 12. Querschnitt durch eine Proglottis mit nur einem uberz&hligen weiblichen
| Drfisenkomplex Do v JE^, und einem uberzihligen Vas deferens Vd t ohne Cirrusbeutel.

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444 Centr&IbL f. B&kt etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 6.

Mafi von 6,5 mm. Von da an nehmen die stets reifen Glieder an Breite
ab, an Lftnge aber etwas zu.

Der Skolex mifit 0,57 mm im Querdurchmesser, seine Sangnipfe
sind leicht oval, 0,23 in der Transversalrichtung, 0,26 mm in der L&ogs-
richtung messend. Der Scheitel scheint in der Regel stark eingezogen.

Die P&renchymmuskulatur fQllt das ganze Rindenparenchym aas
nnd reicht fast an die Subkutikularzellen heran. Die Lfingsmuskulatur
best eh t aus zahlreichen, nicht sehr deutlichen, sehr nngleichen Muskel*
biindeln, welche nach der Peripherie immer kleiner werden. Eine An-
ordnung in konzentrische Lagen von L&ugsbOndeln ist nicht sichtbar.
Anf Flfichenschnitten sieht man, daB dieselben sehr wenig selbst&ndig
und durch zahlreiche Fasern untereinander verbunden sind, die ein dichtes
Netzwerk bilden. Die Transversalmusknlatur ist ziemlich stark, die
Dorsoventralmuskeln sind dagegen sp&rlich. Im Hals konzentrieren sich
die L&ngsmuskelbQndel in 2 Lagen.

Das Nervensystem besteht im Skolex aus 2 mhchtigen Ganglien.
die unter sich durch eine Nervenkommissur verbunden und von einem
Nervenring umspannt sind, von welchem nach vorn 4 Nervenpaare aus*
strahlen. Nach hinten in der Strobiia sieht man deutlich auBer deni
m&chtigen LSngsnervenpaar deren dorsale und ventrale Begleitnerven.
Das WassergefaBsystem besteht in der Strobiia aus den flblichen 4 Lings-
gef&Ben, 2 ventralen, sehr weiten und 2 dorsal von ihnen gelegenen.
die bedeutend enger sind. Im Hals sind die Querkommissuren des
ventralen L&ngsgefaBes so weit, wie das Markparenchym hoch ist. Im
Skolex selbst sieht man auf Schnitten nur 4 WassergefaBquerschnitte,
die durch wenige ganz zentral gelegene GefSBe untereinander verbunden
sind. Zwischen den Saugn&pfen, aber namentlich hinter denselben und
im Hals, sieht man iiberaus deutlich eine sehr groBe Zahl von Wimper-
flammen von bedeutender GroBe (0,018 mm), die oft zu 3 miteinander
vereinigt sind.

Im Skolex und auch im Markpareuchym finden sich wenig zahlreiche
KalkkSrperchen.

Da wir es hier mit einer typischen Cittotaenia zu tun haben.
sind die Geschlechtsorgane in den sehr kurzen Gliedern doppelt an-
gelegt. Sie mflnden beiderseits randstandig an der Grenze des 1. und
2. Drittels.

Was nun die doppelten mauulichen Geschlechtsorgane betrifft, so
bestehen sie aus ca. 200 Hodenbliischen (von 0,08—0,16 mm Durch-
messer), in deren Anordnung keine Treunung in 2 Hodenfelder sichtbar
ist, indein sie in jungen Proglottiden den ganzen dorsalen Teil des
Markparenchyms einnehmen, wahrend sie dagegen in ganz geschlechts-
reiten Gliedern fast die ganze Hohe des Markparenchyms erfflllen. Sie
gehen seitlich von den weiblichen Geschlechtsdriisen bis zum Cirrus-
beutel. Auf Querschnitten zeigen sie sich teils in einfacher, teils in
doppelter Lage. Ueberaus leicht sichtbar sind die ganz dorsalen Vasa
efferentia und namentlich das Vas deferens; sie alle haben ihre deutlich
sichtbare Waudung, welcher Zellkerne anliegen. Vor seinem Eintritt in
den Cirrusbeutel, zwischen diesem und dem Keirastock, bildet das Vas
deferens zahlreiche Schlingen, die die ganze Hohe des Markparenchyms
einnehmen und von sehr groBen Zellen umkleidet sind, die sicher als
Prostatazellen aufzufassen sind, denn Myoblasten kSnnen es nicht sein.
da keine Muskelfasern diesen Teil des Vas deferens umgeben. Mit den
Driisenzellen gemessen, hat das Vas deferens einen Durchmesser von

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Fuhrmann, Einige Anoplocepbaliden der Vdgel.

445

0,04 mm, wobei auch das in reifen Gliedern von Plattenepithel aus-
gekleidete Vas deferens einen Durchmesser von 0,009 mm hat.

Bei seinem Eintritt in den Cirrusbentel verengt sich das Vas deferens,
am in ganz reifen Proglottiden sich sofort zu einer spindelffirmigen
Vesicnla seminalis zn erweitern, welche dann in den stark aufgerollten
laagen Cirrus fibergeht.

Der Cirrusbentel ist schlauchfdrmig, 0,5 mm lang, bei einem Durch¬
messer von nur 0,05 mm. Die ihn umhQllende Muskulatur ist meist
gleichm&Big stark und besteht aus fiuBeren, dicken L&ngs- und sehr
zahlreichen feinen inneren Ringmuskeln, welch letztere in der Umgebung
des Eintritts des Vas deferens eine etwas dickers Lage bilden. Auf der
InBeren Oberflfiche des Cirrusbeutels findet man in jfingeren Proglottiden
eine Lage von Myoblasten in Form platter, polygonaler Zellen. Der im
Cirrusbeutel gelegene Teil des Vas deferens ist in seiner ganzeu Lange,
aach in der Region der sich erst nachtrSglich durch Spermaanh&ufung
bildenden Vesicula seminalis von einer doppelten Lage von Ring- und
Lfingsmuskelfasern umgeben.

Auf dem zurflckgezogenen Cirrus findet man dicht gedrfingt, feme,
nach der Mfindung des Kopulationsorganes gerichtete Haare. Von der
Wandung des Cirrusbeutels ziehen schief randwfirts nach dem Cirrus
zahlreiche Fasern elastischer oder muskulfiser Natur. Am Hinterende
des Cirrusbeutels setzt auBen ein m&chtiger Retraktor an, der nach der
dorsalen Transversalmuskulatur verlfiuft und sich in ihr verliert. Der
Cirrusbeutel verlfiuft, wie die Vagina, fiber den beiden LfingsgeffiBen
des Exkretionssystems durch, ebenso fiber dem lateralen Hauptnerven,
aber zwischen ihm und dem dorsalen Begleitnerven durch nach dem
Geoitalatrium. Auf einer Reihe von Querschnitten habe ich beobachtet,
dafi auf der einen Seite der Glieder, wie bei Moniezia, der Cirrus¬
beutel ventral von der Vagina ausmfindet, w&hrend er auf der anderen
Seite dorsal von derselben liegt.

Die doppelten weiblichen Geschlechtsdrfisen bestehen aus dem ganz
ventral gelegenen Keimstock, der fficherartig den etwas dorsaler ge-
legenen Dotterstock umfafit. Da eine Hodenlage fiber den ganzen weib¬
lichen Drfisenkomplex wegzieht, so reichen die Ovarialschlfiuche nur
etwa bis in die Mitte der Hfihe des Markparenchyms. Am moisten
dorsal, fast direkt fiber der Mitte des Keim- und Dotterstockes, liegt
die m&chtige sog. Schalendrfise. Das Ovarium hat eine Breite von
0,8 mm, der Dotterstock eine solche von 0,28 mm und die SchalendrQse
einen Durchmesser von 0,1 mm. Das tief gelappte Ovarium zeigt seine
Eischlfiuche erffillt von 0,014 mm im Durchm. messenden Eiern. Der
ziemlich stark gelappte Dotterstock besteht aus viel kleineren, sich dunkel
flrbenden Zellen, und zeigt da, wo der Dottergang entspringt, einen
weiten Hohlraum, der wobl als Dotterreservoir aufzufassen ist, in welchem
die reifen Dotterzellen aufgespeichert werden.

Der Verlauf der GeschlechtsgSnge lfiBt sich am besten in jfingeren
Proglottiden verfolgen (Fig. 8). Der Ovidukt, der sich vom Ovar bis
zur Einmfindungsstelle der Vagina erstreckt, ist sehr kurz und beginnt
mit einem wenig muskulfisen, verhfiltnismSfiig grofien, glockenfdrmigen
Ovarialtrichter. Er entspringt auf der Dorsalseite des Keimstockes und
verlfiuft etwas dorsalwfirts, um, wie gesagt, sich bald mit der noch nfiher
zu beschreibenden Vagina zu begegnen, von wo an er als Uterusgang
immer weiter dorsalw&rtsstrebend zunachst den kurzen Dottergang em-
pffingt. Nachdem er die sogenannte Schalendrfise durchquert, hat er

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Centralbl. f. Bakt etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 6.

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die dorsale Flfiche des Markparenchyms erreicht, urn sich nan ventral-
wfirts nmbiegend in den Uterus zu dffnen. In ganz geschlechtsreifen
Gliedern ist der Uteringang bedeutend Unger and zeigt dann zahlreiche
Windungen, bevor er sich in den Uterus ergieSt. Die Vagina verlinft
meist unter dem Cirrusbeutel durch zur Genitalkloake, wobei der auBer-
halb des WassergeUBsystems gelegene Teil ganz anders struiert ist als
der innerhalb gelegene. Der erstere Abschnitt ist von dichten, feinen
Hfirchen ausgekleidet, welche auf einer starken Mem bran aufsitzen.
Diese wird umhfillt von Muskeln, welche namentlich in der Lfings-
richtung zu verlaufen scheinen und auf welche nach aufien eine Lage
dicht gedrfingter Zellen, wohl Myoblasten, folgt. Auf der Hohe des
WassergeUBsystems wird die Struktur der Vagina sehr einfach, indem
sie aus einer zarten Membran besteht Leicht gewellt zieht sie zum
Keimstock und bildet ein langgestrecktes, mfichtiges Receptaculum se-
minis (Fig. 8), von welchem dann ventralw&rts ein kurzer Kanal zom
Ovidukt ffihrt.

Der Uterus ist anfangs ein die ganze Breite der Proglottis durch-
ziehender Schlauch, der auffalleuderweise in jungen Gliedern ganz am
Hinterrand der Proglottis verl&uft, so dafi die Hoden samtlich vor ihm
liegen. Er ist dem rechts- und linksseitig gelegenen Geschlechtsdrfisen-
komplex gemeinsam und geht seitlich, wie die Geschlechtsgfinge, fibs’
den Lfingsstammen des WassergeUBsystems durch. Ffillt er sich mit
Eiern, so erweitert sich der Schlauch, zeigt sackartige Ausbuchtungen,
bis er schlieBlich das ganze Markparenchym erffillt und die auch his
noch bestehenden Hoden gegen den Vorderrand der Proglottis drangL

Die Onosphfiren sind von 3 Hfillen umgeben, von welchen die
fiuBerste ziemlich starkwandig, die mittlere sehr zart, worauf der von
3 nahe zusammengerfickten Zellen gebildete, birnfdrmige Apparat folgt,
der den Embryo eng umhfillt. Letzterer ze gt einen Durchmesser von
0,0144 mm, wfihrend die Anhfinge zusammengelegt 0.021 mm lang
sind. C. psittacea ist die erste Anoplocephalidenart mit der nach-
folgend zu beschreibenden C. rhea aus Vogeln, bei welcher wir den
birnfdrmigen Apparat antreffen.

Bei dem von uns speziell untersuchten Exemplar habe ieh eine
interessante Anomalie beobachtet, welche sich fast auf die ganze Strobila
erstreckte. Es fanden sich nfimlich in der Medianzone des Markparenchyms
1 oder 2 kleinere, wohlentwickelte weibliche Geschlechtsdrfisenkomplexe
in normaler Anordnung. Da, wo es sich nur urn einen fiberzShhgen
Genitalapparat handelt (Fig. 12) ist derselbe nicht median, sondern links
oder rechts von der Medianlinie gelegen. Keimstock und Dotterstock
sind bedeutend gr5Ber als wenn, was ebenfalls vorkommt, 2 fiberzahlige
Genitalapparate vorhanden sind. Dieser Drfisenkomplex, der kleiner ist,
als die beiden normalen seitlichen, besteht aus einem gelappten Keim¬
stock, einem dorsalen Dotterstock und einer grofien Schalendrfise. Ovidukt
Dotterkanal und Uteringang sind entwickelt. Interessant ist, daB neben
diesen Organen ein gut entwickelter Knfiuel eines Vas deferens liegen
kann, der dicht umhfillt ist von Prostatazellen, wie solche bei den nor¬
malen Organen sich finden. Spuren eines Cirrusbeutels habe ich sehr
selten angetroffen. Da, wo es sich um 2 fiberzahlige Genitalapparate
handelt (Fig. 11) sind sie nahe beisammen beiderseits der Medianlinie
gelegen und ist Keimstock, Dotterstock und Schalendrfise klein. Auch
hier treffen wir Ovidukt, Dottergang und Uteringang. Letzterer scheint
Oberall in den Uterus zu mfinden, was ich allerdings nicht mit Sicher-

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Fuhrmann, Einige Anoplocephaliden der Vftgel.

447

heit konstatieren konnte, mir abef deshalb sehr wahrscheinlich scheint,
weil sich im Uterus zablreiche unbefrucbtete Eier fanden, welcbe wohl
von diesen Geschlechtsdrflsen herstammen, aber natfirlich unbefrucbtet
geblieben sind. Derartige Abnormit&ten sind sehr selten bei Cestoden,
doch erwfihnt Riehm ahnliches von Cittotaenia denticulata.
Riehm 1 ) sagt diesbezfiglich, dafi er hier und da in einem Glied nocb
einen 3. Genitalapparat gefunden. Er bestand aucb bier nur aus den
3 weiblichen Genitaldrfisen; Vagina und Cirrus feblten immer. Was die
Lage anbetrifft, so beobachtete Riehm wie wir, dafi der 3. DrQsenappar&t
so situiert war, als mfifite ihm auf der entgegengesetzten Seite noch ein
4. Apparat entsprechen; er fand aber, im Gegensatz zu uns, nie Pro-
glottiden mit 4 weiblichen Genitalkomplexen.

Cittotaenia rhea Fuhrm. (Fig. 13—16.)

In Rhea americana fand sich in sehr grofier Zahl (ca. 100 Exem-
plare) eine interessante TSnie, die, obwohl ziemlich mazeriert, als zum
Genus Cittotaenia gehdrig bestimmt warden konnte. Diese Art be-
sitzt einen sehr grofien Skolex, der einen Durchmesser von 1,2 mm
zeigt; der Hals ist in der Regel bedeutend schmfiler, so daB der Kopf
deutlich abgesetzt erscheint. Die Saugn&pfe des Skolex sind iiberaus
groB und m&chtig entwickelt, indem sie einen L&ngsdurchmesser von
0,7 und einen Querdurchmesser von 0,55 mm aufweisen. Die Oeffnung
der Saugn&pfe stellt sich meist als eine L&ngsspalte dar (Fig. 13). Die
Strobilation, die etwa 1,7—2,3 mm hinter dem Skolex beginnt, ist sofort
eine deutliche; die Glieder sind anfangs nur 0,04 mm lang, wfihrend sie
hinten 0,28 mm lang und 2 mm breit sind. In den nicht kontrahierten
Exemplaren ist die Breite auf der ganzen Lfinge fast dieselbe, n&mlich
1,5—2 mm, wfihrend kontrahiert die 5—9 cm lange Strobila bis 3 mm
breit ist.

Die Muskulatur der Proglottis ist eine iiberaus mfichtige, so dafi
die Hdhe des zentralen Markparenchyms kaum Vs der Dicke der Pro¬
glottis ausmacht. Die Lfingsmuskeln bilden 5—7 Lagen von kleinen,
6—23 Fasern enthaltenden Muskelbflndeln, welche aber ganz unregel-
mfifiig verteilt, d. h. nicht in deutlich konzentrische Lagen angeordnet
sind. Die inneren Transversalfasern, sowie die Dorsoventralmuskeln
sind sparlich entwickelt.

Die ventralen, ganz lateral gelegenen Wassergefafie sind 0,06 bis
0,08 mm weit, ebenso das QuergeffiB. Das dorsale, viel engere GeffiB
liegt direkt fiber dem ventralen.

Die Geschlechtsorgane scheinen sich sehr langsam zu entwickeln,
denn erst im hinteren Teil der Strobila sind sie vollstfindig ausgebildet.
In den 9 cm langen Strobila sind die Eier im Uterus noch nicht voll¬
stfindig entwickelt, so daB also der Wurm noch l&nger wird. Strobilen-
fragmente enthielten ganz reife Oncosph&ren (Fig. 16).

Die mfinnlichen Geschlechtsorgane zeigen, wie bei C. psittacea,
einen langgestreckten, schlauchfdrmigen Cirrusbeutel, der fiber das Wasser-
geffifi reicht, so dafi also diese Art in die Untergruppe mit dem Typus
C. pectinata gehSrt. Das Genitalatrium mfindet zwischen dem 2. und
letzten Drittel des Proglottidenrandes aus. Die Penistasche ist 0,4 bis
0,6 mm lang und mifit nur 0,01—0,02 mm im Durchmesser. Das in

1) Riehm, G., Studien an Cestoden. [Dias.] Halle 1881.

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Originale. Bd. 87. Heft 6.

ihr liegende Vas deferens verlSuft nur leicht gewellt, dagegen ist es
direkt auBerhalb zu einem kleinen Knauel aufgerollt.

Obwohl die Geschlechtsorgane doppelt sind, bilden die Hoden eine
kontinuierliche Masse, welche in der Medianlinie nicht geteilt ist. Es
sind etwas mehr als 100 Hoden bl&schen (Durchmesser 0,05—0,06 mm),
welche die ganze Dorsalseite des zwischen den weiblichen Keimdrusen
gelegenen Markparenchyms erfflllen, wobei ahnlich, wie bei C. pecti-
nata, auch vor und hinter dem Keimstock einige Hoden liegen.

Die beiden randstandigen weiblichen Geschlechtsdrflsengruppen sind
ungefahr 1 mm voneinander entfernt. Das facherformige Ovarium ist
0,5 mm breit, der von ihm umfaBte und hinter ihm gelegene Dotter-
stock ist 0,19 mm breit. Die Vagina verlSuft leicht gewellt zum Pro-

Fig. 15.

Cittotaen ia rhea.

Fig. 13. Seitenansicht des Skolex.

Fig. 14. Gequetschter Skolex, von oben gesehen.

Fig. 15. Horizontalschnitt durch den Uterus eines reifen Gliedes
Fig. 16. Reife Oncosphare.

glottidenrande und miindet dort in die flache Genitalkloake mit einem
trichterfdrmigen, im Gegensatz zum flbrigen Kanal schwach gefSrbten
Endteil, der sich in eine enge, dunkelblau sich farbende Vagina fort-
setzt, die so lang wie der Cirrusbeutel ist. Weiter medianwarts erweitert
sie sich zu einem birnformigen Receptaculum seminis.

Der Uterus bildet anfangs ein querverlaufendes einfaches Rohr, das
wie die Genitalwege uber die WassergefaBe hinaus bis an den Pro-
glottidenrand reicht. Schon wenn nur wenige Eier in ihm liegen, zeigt
er bereits stellenweise nach vorn und hinten gehende Ausbuchtungeo.
In ganz reifen Gliedern ist das ganze Markparenchyrrf vom gelappten
Uterus erfiillt und drangt er sich lateral bis ganz nahe der Cuticula.
so daB nur eine ganz schmale Zone des Rindenparenchyms bestehea
bleibt. Dorsal und ventral wird die m&chtige Muskulatur ebenfalls stark
zusammengedrUngt.

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Fnhrmann, Einige Anoplocephaliden der Vogel.

449

Die Eier sind von 3 HOllen umgeben; die ilufierste hat einen Durch-
messer von 0.07 mm, die mittlere einen solcben von 0,054 mm, und die
innere mifit 0,021—0,023 mm und tr&gt an den beiden Polen 2 0,01 bis
0,012 mm lange, hSrnchenfOrmige Anh&nge. Die beiden Anh&nge gleicben
in der Form denjenigen von C. marmotae, doch sind bei letzterer
Art die zipfelformigen Verlfingerungen der inneren Hfllle nebeneinander
nnd nicht an den beiden Polen gelegen.

Paronia variabllis Fuhrm.

(Syn. Moniezia variabilis.) (Fig. 17—21.)

In mehreren Rhamphastos-Arten (Rh. culminatus Gould,
Rh. dicolorus Lin., Rh. erythrorhynchus Gm. t Rh. toco Mtill.)

Fig. 20. Fig. 21.

Paronia variabilis.

Fig. 17. Skolex.

Fig. 18—20. Verschiedene Entwicklungsstadien von Proglottiden (nach TotalprS-
paraten gezeichnet). Cb Cirrusbeutel; Vg Vagina; Rt Receptaculum Berninis; K Keim-
stock, Do Dotterstock; Ut Uterus.

Fig. 21. Seitlicher Teil des Flachenschnittes einer Proglottis, vg ventrales Ex*
kretionsgeffiS; Kl Klappenapparat dee ventralen GefaSes; dg aorsalee Gef&fl; vTg ven¬
trales TransversalgefaS; dTg dorsales Transversalgefafi.

land sich der nachfolgend nSher beschriebene, interessante Cestode, den
wir in einer frflheren kurzen Bescbreibung in das Genus Moniezia
gestellt batten (s. o.). Diese 4. Art des Genus Paronia Diam. schliefit
sich den Qbrigen Formen und namentlich Rb. ambigua an, von der
sie aber leicbt zu unterscheiden ist.

Leider war das Material zu mangelhaft erbalten, urn auf Schnitt-
serien untersucht werden zu kOnnen, doch konnten sehr gute Total-
prSparate angefertigt werden, nach welchen nachfolgende kurze ana-
tomische Beechreibung gemacht ist:

Bnu Abt. Orig. Bd. 87. Heft 6. 29

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450

Central!)!, f. Bakt etc. 1. Abt Originate. Bd. 87. Heft 6.

Das grofie Material bestand aus grOBeren and kleineren, reifen
Exemplaren; die einen maBen bis 7 cm bei 2,5 mm Breite, andere eben-
falls reife aus derselben Rbam p hast os-Art stammende dagegen waren
nur 4 cm lang und 1,5 mm breit

Der Skolex besitzt einen Durchmesser von 0,45 mm, ist rostellamlos
and bewaffnet mit 4 starken, meist leicht ovalen Saugnfipfen, deren
Lftngsdurchmesser 0,25 mm mifit, wShrend die Breite 0,19 mm betrSgt
Die Strobiia ist knrzgliedrig and erreicbt ihre grfifite Breite etwas vor
dem Hinterende, wo die reifen Glieder schm&ler und I5nger, ja fast
quadratisch werden. Das Wassergef&Bsystem besteht aus 2 Paar sich
im Kopf verzweigenden LSngsgefSBen, welcbe beide am Hinterende jeder
Proglottis darch ein QuergefSB verbunden sind. Die ventralen Langs-
wie QuergefftBe sind sebr weit, und bemerkt man an den TotalprSpa-
raten sehr leicht, dafi am Hinterende jeder Proglottis, da, wo das Quer-
gefSB entspringt, sicb eine Klappe findet (s. Fig. 21), welcbe das Ruck-
strdmen der im Exkretionssystem befindlichen Flfissigkeit verhindert
Urn das Ueberschlagen der Klappen zu verhindern, findet sich auf der
fiufieren Wandung des WassergetSBstammes eine leicbte Erhebnng, auf
welcher in geschlossenem Zustande die Klappe aufrubt Das dorsale Ex-
kretionsgefafi und seine Querverbindung sind sebr eng.

Die Geschlechtsdrfisen und Gange zeigen eine den tlbrigen Arten fast
identische Disposition.

Der Cirrusbeutel mfindet beiderseits sebr nabe dem Hinterende der
Proglottis aus; er ist schlauchffirmig und sebr lang (0,27 mm) und ver-
lauft scbief nach dem Vorderrand der Proglottis. Der in der Penis-
tasche eingescblossene Teil des Vas deferens, dessen Ende der stark-
wandige Penis bildet, ist kaum Ifinger als der Cirrusbeutel und bildet
nie eine Vesicula seminalis im Inneren. Daffir ist aber das Vas deferens
direkt auBerhaib des Kopulationsorgans stark aufgerollt und bildet einen
dicbten, groBen Knfiuel nahe dem Vorderrand des Gliedes. Die Hoden,
ca. 100, sind spharisch und messen 0,04 mm im Durchm. Sie erfOllen
die ganze Dorsalseite des Markparenchyms und liegen sowohl fiber den
weiblicben Geschlechtsdrfisen, als auch fiber den LfingsgefSBen des Ex-
kretionssystems. Die doppelten weiblichen Geschlechtsdrfisen haben ganz
die gleicbe Disposition wie beiden anderen Arten. Das fficherfSrmige
Ovarium hat eine Breite von 0,32—0,4 mm, der hinter dem inneren
Flfigel des Keimstockes geiegene Dotterstock nur eine solche von
ca. 0,09 mm. Da, wo diese Organe in voller Entwicklung sind, ist das
Receptaculum seminis sehr groB und liegt fiber dem Keimstock. Die
Vagina mfindet mit einem trichterldrmigen Endteil etwas hinter dem
Cirrusbeutel in das flache Genitalatrium, aber immer ist ihre Lage
sehr deutlich auf der rechten Seite ventral, auf der linken dorsal vom
Cirrusbeutel, wie solches auch ffir Moniezia typisch ist. Cirrusbeutel
und Vagina gehen fiber den WassergeffiBen und Lfingsnerven durch.

Der Bau des Uterus bildet den wichtigsten Speziescharakter dieser
Art. Derselbe ist doppelt, ISnglich hufeiseufdrmig oder halbkreisfdrmig,
je nachdem die Proglottis mehr oder weniger gestreckt ist; meist bildet
er ein halbkreisformiges Gewfilbe um die weiblichen Geschlechtsdrfisen.
Anffinglich sind die beiden Uteri jeder Proglottis getrennt, doch wenn
sie voll Eier sind, findet eine teilweise Verschmelzung statt, und zwar
ist diese deutlich verschieden von der von Paronia columbae und
R. ambigua, indem dieselbe am hinteren Teil der beiden median sich
berfibrenden Schenkel stattfindet, w&hrend bei R. ambigua die Ver-

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Steiner, Beitrage zur Eenntnis der Mermithiden.

451

schmelzung vorn statthat. Diese Vereinigung zu einem Uterus vou sehr
typischer Form (Fig. 20) findet erst in den letzten reifen Proglottiden
statt Sie zeigt sich nicht immer anf dem gleichen Stadium der FQIlung
des Uterus und der Entwicklung der Oncosph&ren. So fanden wir bei
dem grSBten Exemplar (7 cm), das aus Eh. dicolor us stammte, dafl
in den letzten Gliedern die Verschmelzung kaum begonnen hatte. An
der binteren Berfihrungsstelle der beiden Uteri tritt eine Resorption der
Wandung ein, welcbe dann die ziemlich weite Verbindung am Hinter-
ende berstellt. Die Eier besitzen 3 Scbalen, der Embryo zeigt einen
Dnrchmesser von 0,016—0,019 mm, die &uBerste Scbale einen solchen
von 0,043 mm. Ein birnfbrmiger Apparat fehlt.

Naohdruok verbotsn.

Beitrage zur Kenntnis der Mermithiden.

I. Teil. Mermithiden von Neu-Mecklenburg und Revision einiger
v. Linstowscher Alien und Rudolphis Filaria truncatula =

Mermis truncatula.

Von Privatdozent Dr. ©. Steiner, Bern-Bflmpliz.

I Mit 23 Abbildungen im Text.

Die ordnungsm&fiige Gruppierung der individuellen Erscheinungs-
formen in einem System ist Vorbedingung zu ersprieBlichem Schafl'en
anf jedem Teilgebiet der Biologie. Bitterbdse steht es in dieser Be-
ziebung mit den Nematoden. Eine wirklich brauchbare Gruppierung
der Formen gibt es bis heute da nicht. Mancherlei Ans&tze dazu sind
gemacht worden, aber gescheitert, einerseits weil bisber dabei wesent-
Uch nur die Parasiten berucksichtigt und die ungeheure Fulle der frei-
lebenden Formen nicht Oder kaum gewflrdigt wurden. Anderseits muBten
?iele dieser Versuche ohne befriedigendes Ergebnis bleiben, weil eine
groBe Zahl der bis beute beschriebenen parasitisch lebenden Nematoden-
formen nur uagenOgeud bekannt sind. Die Parasitologic ist ja schon
recht alt, und insbesondere sind parasitiscbe Nematoden schon sehr frfih
beschrieben worden. Aber heute ist es oft sehr schwer, ja unmdglich,
die dlteren Artbeschreibungen noch zu verwenden. In solchen Fallen kann
dann nur ein Nachprilfen der Typenexemplare, falls sie noch vorhanden
sind, zum Ziele fiihren. Das schier unentwirrbare Durcheinander, das
nos heute die Nematodensystematik bietet mit ihren Synonyma und vielen
anvollst&ndigen Diagnosen, ist das Ergebnis dieser Verhaitnisse. Die
vorliegende Mitteilung entsprang dem Wunsche, die von v. Lin stow
nicht immer in grOndlicher Weise aufgestellten Artdiagnosen einiger
Mermithiden nacbzuprfilen. Die Bearbeitung eines recht umfangreichen
diesbezQglichen Materials aus der Schweiz und Deutschland machte es
wflnschenswert, ja notwendig, dies zu tun. In hbchst liebenwflrdiger
Weise kamen mir das staatliche Zoologische Museum in Berlin und be-
sonders der entsprechende Abteilungsvorstand, Herr Prof. Dr. Collin,
entgegen. Nicht nur erhielt ich die gewflnschten Typenstflcke, soweit

29*

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452

Centr&lbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 6.

sie noch vorhanden waren, sondern noch ein umfangreiches Material
dazu. Die Ergebnisse der Untersuchung sollen in einer Keihe kleinerer
Mitteilungen in dieser Zeitscbrift verOffentlicht werden. Dem Zoologischen
Museum Berlin und insbesondere Herrn Prof. Dr. Collin mochte ich
an dieser Stelle noch herzlichst danken. Besondere Freude machte mir,
daB unter den Tieren sich auch ein Typenstflck des von mir so boch-
verehrten Vaters der wisseuschaftlichen Parasitologie, Carl Asmund
Rudolphi, fand, namlich seine Filaria truncatula = Mermis
truncatula. Sie wurde heute vor mehr als 100 Jabren beschrieben;
leider handelt es sich nur um ein Bruchstflck einer Larve.

Vorausgeheud mochte ich 2 Formen von Neu-Mecklenburg knrz
darstellen, die daselbst ira Jahre 1911 durch Herrn Peckel gesammelt
und dann dem Berliner Museum tibergeben wurden. Die weltweite Y r er-
breitung der Angehorigen der Mermithidenordnung ist ja schon linger
bekannt. In dieser Beziehung sind diese beiden ersten Funde von Neu-
Mecklenburg nichts Besonderes. Unbedingt wird sich das Heer der
Mermithidenformen in Zukunft noch ganz gewaltig vermehren, und die
Tropengebiete roit ihrem ungeheuren Insektenreicbtum, den beliebtesten
Wirtstieren unserer Parasiten, werden da sicher ein umfangreiches {Con¬
tingent stellen.

a) Mermlthlden aus Neu Mecklenburg.

Fundangabe: 2 $? bei
19. Juli 1911 (Peckel).

GrdBenverh&ltnisse:

Lfinge »

Dicke am Eopfe
„ bei der Vulva
Entfernung der Vulva
vom Vorderende

Neu-Mecklenburg am

Qi

Q2

48,067 mm

75,019 mm

0,110 „

0,105 „

0.442 „

0^61 „

55,2 Proz.

50,6 Proz.

1. Mermis namatanalensis 1 ) n. sp.
Fig. 1—6.

Namatanai in

Der KOrper ist nach vorn und hinten etwas verjQngt, das Kopf-
ende schwach abgesetzt, da die Papillenregion leicht verbreitert ist
(Fig. 1 u. 2). Haut glatt und ohne Kreuzfaserung; ihre Dicke
beim Nervenring 15—16 ju. Die Zahl der L&ngswttlste ist unsicher;
Lateral- und Medialwfllsle sind sicher vorhanden, die ersteren auch
m&chtiger als die letzteren. An manchen Querscbnittsbildern sind auch
Ventrosubmedialwiilste schwach zu sehen. Die‘allgemeine Korperfarbe
ist ein ziemlich dunkles Gelbbraun (Alkoholkonservierung!)

Kopf vorn fast gerade abgestutzt oder doch der Kopfvorderrand
nur schwach vorgewdlbt; Kopfpapillen ganz nach vorn gerflckt,
wenig vorragend, in flblicher Anordnung, je lateral und submedial eine.
Die sie umgebenden Stfltzzellen sind nur schwach entwickelt, die End-
organe der Papillen ebenfalls nur schwach (Fig. 1 u. 2).

Die Seitenorgane liegen den Lateralpapillen sehr eng an (Fig. 1
u. 2), sind becher- bzw. taschenformig, besitzen eine ovale Mflndung
und eine ansitzende Drflsenzelle; die Endfasern, d. h. die Endorgane
des Nerven konnte ich nicht erkennen.

1) Nach Namatanai, dem Fundorte, benannt.

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Steiner, Beitrage zur Kenntnis der Mermitbiden.

453

Das Oesophagusrohr ist nur schwach kutikularisiert und lieB sich
nur auf eine kurze Strecke verfolgen, ja bei dem einen Tiere war tiber-

Fig. 2.

Fig. 1. Mermis na-
matanai’eesis d. sp.
Kopfende, seitlich gesehen.
Vergr. etwa 500.

Fig. 2. Mermis na~
matanaiensis n. sp.
Kopfende, medial gesehen.
Vergr. etwa 500.

Fig. 3. Mermis na-
matanai'ensis n. sp.
Vorderende, seitlich ge¬
sehen, mit Exkretion^porus
und den beiden Ventral
drusenzeilen. Vergr. etwa
125.

haupt kein Rohr zn sehen, sondern nor ein gelbbrauner Strang (Fig. 2);
immerhin sind, wie Fig. 1 zeigt, schwach entwickelte Retraktoren vor-
handen.

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454

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Der FettkOrper des einen Tieres zeigte am Vorderende deatlich
eine Doppelreihe groBer Zellen (Fig. 4).

Der Nervenring war bei dem 75,019 mm langen Tiere0,425mm
vom Vorderende entfernt; nicbt weit dahinter, d. b. 0,544 mm vom
Vorderende, dffnet sich ein gut ansgebildeter Exkretionsporns (Fig.3
u. 4). Das Bemerkenswerteste und filr unsere Art Pr&gnanteste sind
aber zwei groBe Ventraldrflsenzellen, die unmittelbar hinter
dem Porus ventromedial nebeneinander liegen; die eine der Zellen ist
etwas l&nger (Fig. 4). Diese Zweizahl der VentraldrQsenzellen ist meines
Wissens bei Mermithiden bisher noch nie beobachtet worden; Ventral-
drflsen sind da Qberhaupt eine seltene Erscheinung.

Fig. 5.

Fig. 4. Mermie namatanie naia n. ap. Ab-
echnitt hinter dem Nervenring, medialgeaehen. N Nerven¬
ring, E Ezkretionsporoa, V\ a. V t Ventraldrflaenzdlen,
Z vorderater zeliiger Abachnitt dea FettkOrpera. Vergr.
etwa 125.

Fig. 5. Mermia namatanaienaian. ep. Me¬
diate Ansicht der Vulva, Vagina und der beiden Utvne-
rohre einee Weibchena. Vergr. etwa 62.

Fig. 6. Mermia namatanalenaia n. ap.
Schwanzende einee 9* Vergr. etwa 62.

Die Vagina des Weibchens ist S-fdrmig gewunden (Fig. 5) nnd
fOhrt in einen doppelten, nacb vorn und hinten ausgestreckten, ebenfalls
schlauchfdrmigen Uterus mit radiirer Muskulatur. Die Ovarien sind
gerade ausgestreckt; die Eier haben kurz-ovale bis nahezu kugelige
Form und einen Durcbmesser von 68—70 /u.

Das Scbwanzende des Weibchens ist auf Fig. 6 dargestellt; es
ist also stumpf gerundet

Die vorliegende neue Form ist vor allem durch die
weit nach vorn verschobenen Kopfpapillen, die unmittel¬
bar binter den Lateralpapillen liegenden becherfCrmigen,
kleinen Seitenorgane, durch den beim Weibchen (ob auch

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Steiner, Beitrage zor Kenntnis der Mermithiden.

455

beim <J?) stumpf gerundeten Schwanz und die 2 groBen,
mSchtig entwickelten Ventraldrflsenzellen gekennzeichne.t.
Das Wirtstier ist unbekannt.

2. Mermis nigrescens Dujardin var. athysanota 1 ) n. var.

Fig. 7—9.

Fundangabe: 1 ? bei Namatanai auf Neu-Mecklenburg,
1911 (leg. Peckel).

Verbreitung der typischen Art: Earopa.
GrdBenverhSltnisse:

9

Lange 208,845 mm

Durcbmeeser, Mitte 0,141 „

Entfernung dee Nervenringes vom Voider-
ende 0,425 „

Entfernung der Vulva vom Vorderende 47,05 Proz.

Bemerkungen. Auf den ersten Blick glaubte ich eine typische
Mermis nigrescens vor mir zu haben und fflr diese das Vorkommen
auf Neu-Mecklenburg feststdllen zu kdnnen. Ein nShores Zusehen er-
gab aber, dafi es sich bei dem vorliegenden Tiere keinesfalls um die
typische Form handeln konnte, sondern um eine dieser nahestehende
VarietSt PrSgend fflr diese ist der Ban der Eier, der von jenem der
typischen Form ganz wesentlich abweicht. Die Eier der letzteren tragen
an den beiden Polen je einen quastenartigen Anhang, besitzen eine
glatte OberflSche und eine Ringfurche als vorgebildete RiBstelle. Den
Eiern der neuen VarietSt fehlen die QuastenanhSnge v51-
lig, ebenfalls die Ringfurche, und die Eischale besitzt
eine nnebene, rauhe, fast kleinwarzige OberflSche (Fig. 8
u. 9). Die allgemeine Eiform entspricht sonst jener der typischen Art
ziemlich gut; sie ist etwas abgeflacht (Fig. 9), von der Breitseite ge-
sehen aber kreisrund (Fig. 8). Die Schale ist an manchen Stellen etwas
dicker als an anderen und besteht aus 2 Schichten, die sich unter Druck
voneinander lflsen; die SuBere Schale zerfSUt dann in einzelne Stflcke,
wShrend die innere nur aufspringt und als Ganzes aus der SuBeren
herausgleitet. Im Innern ist, wie bei der typischen Form, ein Embryo
vorhanden.

Die Fig. 7 gibt uns noch eine submediale Ansicht des Kopfendes
der neuen VarietSt Die OrganisationsverhSltnisse entsprechen ganz
jenen der typischen Form, nur sind die vorderen nur lateral vorhandenen
Kopfpapillen, die sogenannten Mundpapillen, statt kegelfdrmig, zylindrisch,
wie die Fig. 7 es ja deutlich zeigt. Auch die Einschnflrung gleich hinter
dem Kopfe ist recht stark betont; sie betrifft allerdings nicht den SuBeren
Umrifi, sondern nur die unter der Haut liegenden Teile. Die Cuticula
ist da plStzlich, wie die Fig. 7 zeigt, stark verdickt, indem ihre innerste
Schicht viel mSchtiger wird; letztere zeigt flbrigens auch eine radiSre
Streifung, wShrend die oberflSchliche Schicht in FISchenansicht deutlich
Ereuzfaserung erkennen ISBt. Die Haut ist flbrigens vielfach wellig
quer gefaltet und tSuscht so an manchen Kdrperstellen eine Ringelung vor.

Die von anderen Forschern fflr die typische Form erwShnte brSun-
liche Pigmentierung hinter der Kopfregion war auch hier vorhanden.

1) dv 0 cmoT& = mit Quasten vereehen, a = alpha privativom vom Fehlen der
Qoastenanhange an den Eiern.

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456 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 6.

Das vorliegende Weibchen hatte seinen Fettkbrper schon ziemlich
aufgebraucht, doch war der Kbrper gleichwohl undurchsichtig, wenigstens
stellenweise; die Hauptmasse der Eier schien schon abgelegt zu sein.
Das Wirtstier ist unbekannt.

Fig. 7.

Fig. 7. Mermis nigrescens Duj. var. athysanota n. var. Eopfende,
submedial gesehen. Vergr. etwa 500. M zylindrische Mundpapille, <S Seitenorgan,
K Kreuzfaaerung der obemachlichen Hautschicht, R radiar gestreifte Hautschicht.

Fig. 8. Mermis nigrescens Duj. var. athysanota n. var. Ein Ei, von
der Breitseite gesehen. Vergr. etwa 500.

Fig. 9. Mermis nigrescens Duj. var. athysanota n. var. Ein Ei, von
der Schmalseite gesehen. Vergr. etwa 500.

b) Revision einlger Typcnstiicke der von v. Lins tow
beschriebenen Mermithiden-Arten.

v. Lin stow hat wahrend seines Lebens eine groBe Zahl von
Nematodenformen beschrieben, aber leider oft die Diagnosen so kurz
und unscharf gehalten und so stark schematisierte Abbildungen bei-
gegeben, daB es oft einfach unmoglich ist, sich ein brauchbares Bild
dieser Formen zu machen. Freilich ist auch hier mancher Mangel auf
die UnvollstSndigkeit des Materials und namentlich auf die SuBeren
Schwierigkeiten von Nematodenuntersuchungen an sich zurflckzufuhren.

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Steiner, Beitrage zur Kenntnia der Mermithiden. 457

Fig. 11.

Fig. 10. Mermia pneilla v. Linstow. Ansieht des Kopfendea von der rechten
Kdrperseite. Vergr. etwa 1000. S Seitenorgan.

Fig. 11. Mermia pnsilla v. Linstow. Anaickt dee Kopfendea von der Ventral-
eeite. Vergr. etwa 1000.

Fig. 12. Mermia puailla (v. Linatow). Aaaicht dea Vorderendea. Vergr.
etwa 500.

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458

CentralbL t Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 6.

Immerhin glaube ich die Formen durch die nachfolgenden Angaben and
die Abbildungen, soweit mdglich, erkennbar gemacht za haben. Da
sich manche Beschreibung nur auf larvale Tiere grflndet, ist natOrlich
von vornherein Unvollst&ndigkeit gegeben.

3. Mermis pusilla (v. Linstow).

Fig. 10—12. •

Pseudomermis pusilla v. Linstow 1906. S. 248. Taf. 5.
Fig. 25, 26.

Fundangabe: 1 jngendliches Tier Langenburg, Nyassa-See,
Deutsch-Ostafrika (leg. Dr. Ffllleborn).

Bemerkungen: Dr. v. Linstow hat die vorliegenden Tiere
seinerzeit znm de Manschen Genus Pseudomermis gestellt. Dies,
wie seine kuBerst dOrftige Beschreibung erkennen lkfit, wohl nur deshalb,
weil die Haut keine Kreuzfaserung besitzt. Das de Mansche Genas
ist aber tats&cblich durch die nur 4 Eopfpapillen und die kurze,
nicht gewundene Vagina gekennzeichnet, wfthrend dem Fehlen
Oder Vorhandensein der Kreuzfaserung in der Haut kein derartiger Wert
zukommt, daft auf Grund dessen Gattungen voneinander getrennt werden
kdnnten. Wir sehen uns infolgedessen gendtigt, die vorliegende Art zar
Gattung Mermis zu stellen; denn es sind 6 Kopfpapillen vorhanden,
und auch die flbrigen Bauverh&ltnisse scheinen mir auf dieselbe Gattung
zu weisen. Der Bau der Vagina und allf&llig der mfinnlichen Geschlechts*
organe ist freilich an dem jugendlichen Tiere nicht zu erkennen; aber
wir glauben trotzdem in der Zuordnung nicht fehlzugehen. Jedenfalls
gehOrt sie nicht in die Gattung Pseudomermis, wie wir diese heute
fassen. Auch Paramermis kann nicht in Frage kommen, da die so*
genannte Dorsalkommissur zwischen den Seitonorganen fehlt.

Das Tier (Larve) ist, wie v. Linstow schreibt, 17—18 mm lang
und 0,12 mm dick. Der Haut fehlt die Kreuzfaserung; es scheinen
mindestens 6, vielleicht sogar 8 L&ngswQlste vorhanden zu 6ein, von
denen die lateralen und medialen aus aufierordentlich groBen Zellen
bestehen, w&hrend die submedialen sehr schmal sind.

Das Kopfende ist, wie v. Linstow dies gut erkannt hat, in eigen*
artiger Weise verdickt (Fig. 10—12); es sind 6 niedrige, k&um etwas
vorragende Papillen vorhanden. Die Seitenorgane sind an den Larven
nur schwer zu sehen (Fig. 10 u. 11) und stellen kleine Taschen mit
enger Oeffnung dar; sie lie gen genau lateral etwas hinter den Seiten-
papillen.

Das Oesophagusrohr besitzt ganz vorn ansetzende RQckziehmusbeln
(Fig. 11); der FettkOrper reicht bis nahe zum Nervenring nach vorn;
die Fig. 12 gibt eine Darstellung der diesbezQglichen Verhftltnisse.

Die eigenartige Verdickung des Kopfes und die Lage und
Form der Kopfpapillen und Seitenorgane bilden die Haupt-
merkmale der Art.

4. Mermis quadripartita v. Linstow.

Fig. 13, 14.

Mermis quadripartita v. Linstow 1906. S. 247. Fig.18. Taf.4

Fundangabe: Insel Reunion, Plaine des palmistes. Aus einer
Phasmide (leg. Frau Sikora).

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Steiner, Beitrage zur Kenntnis der Mermithiden.

459

Die wenigen Angaben v. Lin stows kann ich kanm erg&nzen, so
daS die vorliegende Art nach wie vor als ungenfigend gekennzeicbnet zu
gelten bat. FQr v. L in sto w war die von ihm anQuerschnitten festgestellte
eigenartige Vierteilung des Fettkfirpers (dnrch membranflse Scheide-
wfinde) scheinbar das Hauptkennzeichen der Form (s. Fig. 18, Taf. 4 bei
v. Lin stow). Vermutlicb handelt es sich da noch urn Ankl&nge an den
in der Pbylogenese ehemals zelligen Bau des FettkSrpers, dies um so
mehr, als er auch in der Richtung der Korperachse zellig gegliedert
scbeint. Wenigstens lieBen sich in etwas unregelmafiigen Abstanden
schwache Einschnfirungen nnd an diesen scheinbar Querwfinde feststellen.
Ob nun diese Ankl&nge an einen zelligen Bau nur gewissen onto-
genetischen Stufen zukommen Oder ob sie auch der Fettkfirper eines
geschlechtsreifen Tieres zeigt, w&re erst noch festzustellen; sollte letzteres

Fig. 14.

Fig. 13. Mermis quadripar-
tita v. Linetow. Ansicht dee
Eopfendes. Vergr. etwa 125.

Fig. 14. Mermis quadripar¬
tite v. Linetow. Ansicht dee
Schwanzendee. Vergr. etwa 125.

nicht zutreffen, so w&re natQrlich auch der systematische Wert dieser
Eigenschaft kaum hoch einzusch&tzen.

Wie v. Lin stow schon erw&hnt, sind 6Kopfpapillen vorhanden;
sie stehen sehr weit vorn (vgl. Fig. 13). Leider gelang mir nicht, die
Seitenorgane sicher aufzufinden. Ich vermute aber, dafi sie hinter den
Seitenpapillen liegen nnd nur eine enge Oeffnung nach aufien besitzen,
fiberhaupt sehr klein sind.

Die Munddffnnng liegt in der Mitte der wenig ausgepr&gten
KopfvorwQlbung. Das Oesophagusrohr war nnr wenig fiber das
Vorderende des Fettkfirpers hinaus zu verfolgen, da letzterer kompakt
war und alles verdeckte.

Der Nervenring war noch sehr undeutlich ausgepr&gt.

Das Schwanzende ist, wie die Fig. 14 zeigt, stumpf gerundet
und zeigt bei dem einen Tier noch ein kleines Anh&ngsel. v. Lin stow
zeichnet auf seinem Querschnitt je einen breiten Lateral-, je einen
8chmfileren Medial- und einen ganz feinen Ventrosubmedialwulst. Er

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460

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 6.

scheint das Tier etwas hinter dem Vorderende des Fettkfirpers geschnitten
zu haben. Seine Angaben fiber die prozentualen Ausdehnnngen der
Muskelfelder im Querscbnitt scbeinen nicht ganz richtig zu sein, da er
dabei die in Abzug zu bringenden Prozente
der Lfingswfilste nicbt berficksichtigt.

Wie aus diesen Angaben hervorgeht,
muB die Art als noch sehr unsicher und
ungenfigend bekannt angesehen werden.

Fig. 16.

Fig. 15. Mermis involute v. Linetow. Aneicht des
Kopfendee von einer Medialseite. Vergr. etwa 600. M sogeo.
Mundpapiiie, L Lateralpapille oder vielleicht Seitenorgan.

Fig. 16. Mermis involata 7. Linstow. Seitliche An-
sicht des Vorderendee. Vergr. etwa 260. M sogen. Mnndpa-
pi lie, R Retractor oesophagi, L Lateralpapille oder vielMcht
Seitenorgan.

Fig. 17. Mermis involnta y. Linstow. Schwanzend*.
Vergr. etwa 62.

5. Mermis involuta v. Linstow.

Fig. 15—17.

Mermis involuta v. Linstow 1906. S. 247. Taf. 4. Fig. 22;
Taf. 5. Fig. 23.

Fundangabe: 2 jugendliche Tiere in Amedjowe in Togo,
von „Yam“-Wurzeln abgenommen (leg. Graf Zecb).

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Steiner, Beitrage zur Kenntnis der Mermithiden.

461

Gr5fienverh&ltnisse: L. = 103—158 mm; D. = 0,39—0,47 mm.

Bemerkungen: Die Haut besitzt ziemlich grobe Kreuzfaserung
und ist sebr dick (15—16 fi in der Gegend des Nervenringes).

Das Kopfende ist breit gerundet; die von v. Lins tow erw&hnte
„Vorragung u der OesophagusmOndung habe ich nicht bernerkt. Die
Zahl und Anordnung der Kopfpapillen ist anders, als der erwahnte
Forscher dies darstellt. Er scbeint nur die Submedialpapillen geseben
zu baben, wfihrend ich dafbr halte, daB 6 Kopfpapillen und 2 so-
genannteMundpapillen vorhanden sind. Die letzteren liegen lateral
and weiter vorn ganz nahe der Mundbffnung. Ihr Bau (Fig. 15) scheint
eher auf ein rudimentdres Organ zu weisen. In der FISchenansicht
(Fig. 16) war lediglich ein kleines feines Kreischen zu sehen. In der
Profilansicht (Fig. 15) erweist sich die Haut an dieser Stelle verdunnt,
und von innen sieht man einen Faden (vielleicht nervbser Art!) an die
Oberfldcbe streicben; er ist aber von keinen StQtzzellen umgeben, wie
dies sonst bei den Papillen der Mermithiden der Fall ist. Der „Faden“
scheint aucb keinem Fapillenendkdrpercben zu entsprechen.

Die Frage liegt nun nabe, ob es sich bier noch urn eine funktions-
fdbige oder eine schon funktionslose, rudiment&re Bildung handle. Ich
glaube, daB es sich hier urn die gleiche Bildung, die Hagmeier als
Mundpapillen bezeichnet(z.B. bei M. arenicola Lauterborn), handelt

Was nun die 6 Kopfpapillen betrifft, ist folgendes zu bemerken. Die
submedialen haben ganz Papillennatur; betreffend der lateralen bin ich
einigermallen im Zweifel; es k6nnte sich auch um die Seitenorgane
handeln. Von der FISche gesehen, treten sie kaum hervor (Fig. 16);
in Profilstellung (Fig. 15) waren, wenigstens bei dem vorliegenden
Stflcke, die Papillenorgane nicht sicher und deutlich zu erkennen.

Der ganze Bau des Vorderendes erinnert an jenen der Mermis
arenicola Lauterborn (s. bei Hagmeier S. 574. Taf. 18. Fig.22;
Taf. 20. Fig. 43 u. 43 a). Diese letztere Art scheint aber 6 einander
durchaus gleiche Papillen und dann viel deutlichere und hdher gestielte
Mundpapillen zu besitzen. Weiter konnte ich bei den vorliegenden Tieren
an der Stelle, wo bei M. arenicola die Seitenorgane liegen, diese
nicht auffinden.

Das Schwanzende ist breit gerundet (Fig. 17); auch in dieser
Beziehung ergibt sich grolle Aehnlichkeit mit Mermis arenicola
Lauterborn.

Die L&ngswtllste bat v. Linstow an einem Querschnittsbild bereits
dargestellt (Fig. 22, Taf. 4 seiner Arbeit). Falls seine Darstellung richtig
ist, hstten wir etwas dorsal verschobene Lateralwiilste, schmale Ventro-
submedialwfllste und je einen dorsalen und ventralen Medialwulst, von
denen der letztere wieder etwas krfiftiger ist.

Der Nervenring liegt 0,357 mm vom Vorderende entfernt; der Fett-
kdrper beginnt 0,153 mm weiter hinten.

SchlieBlich wfire noch die Frage zu berflhren, ob nicht die Formen
mit Mundpapillen zweckmafiig n&her vereinigt wiirden, indem sie als be-
sonderes Subgenus zu Mermis gestellt, allfallig sogar als eigenes Genus
von diesem getrennt wflrden. Hindernd zur Entscheidung und Stellung-
nahme ist leider immer wieder das unvollstandige Material. Von vielen
Mermithidenformen kennen wir nur noch die Larven, was auBerordentlich
binderlich ist fOr die Aufstellung einer befriedigenden systematischen
Gruppierung.

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462

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 6.

6. Mermis pachyderma v. Linstow.

Fig. 18—20.

Mermis pachyderma v. Linstow 1906. S. 248. Taf. 4. Fig. 24;
Taf. 5. Fig. 23.

Fun dan gabe: 1 jngendliches Tier. Mftrz 1906, Colonia popular
(Ozaco), Buenos Aires, aus der Wanderbeuschrecke Schistocerca para-
nensis (leg. Prof. Dr. Wolffhflgel).

Bemerkungen: v. Linstow scheint mehrere Stficke dieser
Art zur Verfflgung gehabt zu haben; mir lag ein einziges vor.
Auch fflr diese Form sind die Angaben des erwfihnten Forschers nicht

Fig. 18.

Fig. 19.

Fig. 18. Mermis pachyderma v. Linstow. Kopf-
ende, seitlich geseben. Vergr. etwa 250. M sogen. Mund-
papille, L Lateralpapille Oder vielleicht Seitenorgan.

Fig. 19. Mermis pachyderma ▼. Linstow. Kopf-
ende, medial gesehen. Vergr. etwa 250. M Mundpapille,
L Lateralpapille Oder vielleicht Seitenorgan, Sm Submetiial-
papille.

Fig.20. Mermis pachyderma v.Linstow. Schwanz-
ende. Vergr. etwa (52.

ganz zutreffend. Immerhin bandelt es sicb nur
um larvale Tiere, und so muB die Beschreibung
sehr unvollstandig bleiben. Nach Aufhellen des
einzigen Stuckes in essigsaurem Glyzerin und sorg*
ffiltiger Untersuchung namentlich des Vorderendes kann ich v. Lin¬
stow s Angaben etwas vervollst&ndigen.

Die H a u t ist in der Tat sehr dick; ich mail 80—85 ; die Kreuz-

faserung ist gut sichtbar, ja auffailig.

Das Kopfende ist breit und stumpf gerundet. Die Zabl der Kopf-
papillen ist nicht nur 4 wie der genannte Forscher meint; wir haben
vielmehr lateral je eine sogenannte Mundpapille, die sehr weit vorn liegt;
v. Linstow hat sie auch gesehen, was aus seiner Fig. 23 Taf. 5 deutlich
hervorgeht; aber er wurde sich der Papillennatur dieser Bildung nicht
bewuBt, da er die Tiere nur in Seitenlage untersucht zu haben scheint.
In der Mediallage (Fig. 19) werden sie als solche sehr gut erkennbar;
immerhin bin ich der Ansicht, daB es sich hier um Papillen in Rflck-
bildung handelt; die Fig. 19 zeigt eine derselben noch mit nervOsen

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Steiner, Beitr&ge zur Kenntnis der Mermithiden.

463

Endbildungen, die andere nicht mehr; es war mir nicht mfiglich, genauen
AufschluB fiber das wirkliche Vorhandensein von Endiasern Oder End-
st&bchen zn erhalten.

Merkwflrdig verhalten sich die weiter hinten stehenden eigentlichen
Kopfpapillen. Ibre Zabl betrfigt 6; je eine steht submedial und
lateral, v. Linstow scheint nor die 4 submedialen erkannt zn haben.
Non muB allerdings gleich bemerkt werden, daB die letzteren deutlicber
Bind als die lateralen, und wir es hier vermutlich mit ungleichwertigen
Bildnngen zn ton baben; die lateralen ragen kaom etwas vor und scheinen
auch etwas abweichend nnd leicbt dorsal verschoben zu sein (vgl. Fig. 18
a. 19). Ja, man mdchte vermuten, daB bier ein papillenartig ge-
bildetes Seitenorgan vorliegen wfirde; denn trotz alien Snchens
gelang es mir nicht, die letzteren aufzufinden.

Fig. 21.

Fig. 21. Mermiei gracilis r. Linstow.
geeehen. Vergr. etwa 500.

Fig. 22. Mermis gracilis v. Linstow.

Fig. 22.

Kopfende, scheinbar leicht submedial
Schwanzende. Vergr. etwa 125.

Das Schwanzende ist stumpf gerundet und etwas verjflngt (Fig. 20);
fiber den inneren Aufbau gibt das Querschnittsbild v. Lin stows (s. seine
Fig. 24 Taf. 4) etwelcben AufschluB.

Grfifienverh&ltnisse: L. = 108,0 mm; D. = 0,595 mm; Dicke
bei den Kopfpapillen = 0,160 mm.

Schliefilich mfissen wir noch auf die groBe Aehnlicbkeit dieser Form
mit M. involuta hinweisen. Der Bau des Vorderendes ist SuBerst
ihnlich; die Papillenzahl und Anordnung ist dieselbe. Die Vermutung,
daB wir es hier mit derselben Form zu tun baben, ist gewiB berechtigt.
Die Verschiedenbeit des Fundortes (hier Argentinien, dort Togo) spricht
gewiB nicht dagegen. Das Auffinden geschlechtsreifer Tiere wird da
Licht zu bringen vermogen.

7. Mermis gracilis v. Linstow.

• Fig. 21 u. 22.

Mermis gracilis v. Linstow 1906. S. 247. Fig. 19,20. Taf. 5.
Fnndangabe: 4 larvale Tiere aus Raupen in Ost-Java (leg.
Zim mermann).

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464 Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Bemerkungen: Es gelang mir nicht, zur Kennzeichnung dieser
Art wesentlich mehr beizubringen, als schon v. Lin stow auffQbrt Die
Haut ist tats&chlich mit Kreuzfasern versehen, aber sehr dQnn (in der
Gegend des Nervenringes 3,8—4 n). Das Kopfende hat 6 Papillen, die
sich breit und flach vorwSlben und stark nach vorn gerflckt sind (Fig. 21).
Die Seitenorgane waren nicht mit Sicherheit aufzufinden; vielleicht, daB
sie etwas hinter dem Papillenkreis und leicht dorsal verschoben liegen,
dort wo sie auf Fig. 21 hingesetzt sind.

Das Schwanzende (Fig. 22) hat v. Linstow gut dargestellt; es
ist verl&ngert. Das Oesophagusrohr war sehr schwach; vorn sah ich
bei einem Tiere noch deutlich die Spitze eines Mundstachels. Nach der
Fig. 19 bei v. Linstow kdnnte man meinen, es wire ein mit radiSrer
Muskulatur ausgerflstetes Oesophagusrohr vorhanden, was aber nicht

zutrifft. Was der erw&hnte For-
scher als zum Oesophagusrohr ge-
hdrend bezeichnet, ist ein vor dem
Nervenring liegender plasmatischer
K6rper (vielleicht ein weit nach
vorn ragender Teil des FettkSrpers
oder eine grofie Zelle unbekannter
Natur), dessen Deutung mir nicht
mOglich war. Der Nervenring nnd
die umgebenden Ganglien bilden
einen sehr kompakten Kdrper, Jhn-
lich wie etwa bei jugendlichen Her-
mis nigrescens.

v. L i n s t o w ftlhrt eine Kdrper-
lftnge von 122 mm und eine Dicke
von 0.26 mm an.

SchlieBlich mag noch erwfihnt
sein, daB ich die von v. Linstow
erw&hnte dor sale und ventrale lip*
penartige Erhebung am Kopfende
nicht sah.

Mermis gracilis bleibt so
eine recht ungenflgend beschrie*
bene zweifelhafte Art.

c) Rudolphls Filarla trancatula = Mermis trnnc&tnla (Bndolphl).

Fig. 23.

Filaria truncatula Rudolphi 1819. S. 214.

Gordius truncatulus Diesing 1851. Bd. 2. S. 87.

Mermis truncatula MeiBner 1856. S. 48.

Mermis truncatula v. Linstow 1899. S. 158.

Rudolphi hat diese Form 1819, wie folgt, beschrieben:

Cel. de Baer, Professor Regiomontanus Filariam misit in Pha-
langii Opilionis abdomine a se repertam, in aqua autem disruptam,
ut integram non acceperim.

Pars mihimet oblata fere bipollicaris tenuissima, alba; capite
truncata; ore, ni fallor, sex papillis cincto; parte posteriore paulnlnm
increscente.

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Steiner, BeitrSge znx Kenntnis der Mermithiden.

465

Tabus cibarias rectas, in qaadam ab ore distantia constrictns.

Meifiner hat dann als erster erkannt, dafi es sich bei vorliegender
Form wohl am eiae Mermis baadelt.

v. Lin stow scbeint (I8b9) Radolphis Stflck ebeafalls unter den
Hlinden gehabt zu haben, macht aber keine weiteren Angaben anfier
bezQglich der Lfinge, far die er 54—136 mm aaffQbrt. Wie er za diesen
Mafien kam, ist mir nicht klar. Das mir vorliegende Tier Radolphis
ist tats&chlich nor ein vorderes TeilstQck.

Ich habe versucht, den Baa dieses Teilstflckes, das, wie Qbrigens
y. Lin stow bereits erkannt hat, einer Larve angehOrt, eingehender za
antersachen; leider gestattete der Erhaltungszustand nicht, za be-
friedigenden Ergebnissea za kommen. Das Vorderende ist in Fig. 23
dargestellt. Die Hant weist dentliche Kreuzfasernng auf and
scheint auch noch verhfiltnismfifiig dick za sein. Die Zahl der Kopf-
papillen hat Rudolphi in richtiger Weise mit 6 angegeben; sie ragen
deatlich als runde Hdcker vor. Vergeblich mflhte ich mich am die
Seiteaorgane. Vermutlich liegen sie den Seitenpapillen eng an, so
wie es die Fig. 23 zeigt; aber was dort dargestellt ist, darf nicht als
endgflltig feststehend angesehen werden; das Tier war za wenig dorch-
sichtig, als dafi diese Verhfiltnisse mit der nbtigen Sicherheit hfitten
erkannt werden k5nnen.

Der Oesophaguskanal war nnr ganz vorne deatlich erkennbar. Die
yon Rudolphi erwfihnte Einschnfirang des Verdaaangskanals scheint
mir aaf Tfiuschung za berahen; das vorderste Stack des Fettkbrpers ist
nach meinem Dafflrhalten beim vorliegenden Tiere losgerissen; die Rifi-
stelle hat dann einige Aehnlichkeit mit einer Einschnflrung.

Mehr liefi sich bezaglich der Organisationsmerkmale an diesem
TypenstOck Radolphis heate nicht mehr feststellen. Jedenfalls handelt
es sich am eine Mermis-Form.

Als Wirtstiere werden Yon Rndolphi (1819. S. 6) Phalangium
cornntum und Opilio angegeben.

▲ufgefthrte Sdurifton.

Diesing, C. M., Systems Helmintbum. Vindobonae 1850. — Dujardin,
M. Felix, Histoire naturelle des Helminthes on vere intestinaux. Paris 1845. —
flagmeier, Arthur, Beitr&ge zur Kenntnis der Mermithiden. I. Biologische Notizen
nod svstematische Beschreibung einiger alter und neuer Arten. (Zool. Jahrb. Abt.
8yst. Bd. 32. 1912.) — Li ns tow, O. v., Qordiiden und Mermithiden des Kgl. Zool.
Museums in Berlin. (Mitt. a. d. ZooL Mus. zu Berlin. Bd. 3. 1906.) — MeiBner, G.,
Beitrage zur Anatomie und Physiologie der Gordiaceen. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. 7.
1856.) — Rudolphi, C. A., Entozoorum synopsis. Berolini 1819.

Unit Abt. Otic. Bd. 87.

Heft 6.

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466

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Naehdruck verhoten.

Ueber Rattenvertilgiingsmittel.

Von Tierarzt L. Bahr, Laboratoriumsvorsteher in Kopenhagen.

Im Centralblatt fttr Bakteriologie etc. Abt. I. Orig. Bd. 87. 1921.
S. 39-50 haben Dr. Eugen Neumark und Dr. H. Heck kfirzlich
dieses Thema behandelt.

Die Genannten haben eine grfiBere Anzahl verschiedener, zur Ratten-
vertilgung im Handel befindlicher Bakterienpr&parate bakteriologisch
untersucht, mit dem Ergebnis, dafi von 10 untersucbten Kulturen nor
3 Prfiparate Bakterien aus der Paratyphus- Gfirtner-Gruppe enthielten.
Sie waren aber in der Mebrzahl der Ffille stark mit andersartigen Keimen
verunreinigt. Nur bei 2 Prfiparaten, nfimlich bei „Ratin“ nnd „Ratten-
fort u wurdeeineReinkultur gefunden, und zwar „Enteritidis Gfirtner*.

Diesen Untersnchungsresultaten kann ich auf Grand vieljfihriger
Erfahrungen bei Untersuchung vieler anderer „zur Rattenvertilgnng*
im Handel befindlicher Bakterien prfiparate (z. B. „Azoa“, „ Raticide 4 ,
„Pehrs Rfittbaciller" (Schweden), „Reefers Rat Virus", „Fragile“, „Liver¬
pool Virus" (Kartoffelkultur) etc. vollstfindig beistimmen. Die meisten
der unter dem Namen „rattentfitende Bakterienkulturen" in den Handel
kommenden Prfiparate enthalten entweder grobe Verunreinigungen von
Coli, Kokken u. a. Saprophyten, und nur bei genauester Untersuchung
lassen sich in einigen derselben „Rattenschfidlinge“ in sehr geringen
Mengen nachweisen, oder — und das ist meistens der Fall — sie ent¬
halten gar keine „Rattenschfidlinge“, in mebreren Fallen sogar Rein-
kulturen von unschadlichen Saprophyten.

Wenn die oben genannnten Untersucher darum fiber MiBstfinde im
Verkehr mit bakterienhaltigen Ratten- und Mfiusevertilgangsmitteln
sprechen, und wenn sie hervorheben, daB, wenn z. B. eine Firma ein
bakterielles Rattenprfiparat herstellen und vertreiben will, glaubt nor
ndtig zu haben, von einer anderen Firma eine passende Kultur zu be-
schaffen, die sie nun im eigenen Betriebe recht und schlecht weiter-
impfen IfiBt, so ist dies sicher als richtig zu bezeichnen, und diese Tat-
sache sollte Veranlassung dazu geben, alle Bakterienkulturen zur Ratten-
und Mfiusevertilgung einer stfindigen amtlichen bakteriologischen Ron-
trolle auf ihre Reinheit zu unter werfen, ehe die Freigabe im Handel
erfolgt, zur Bestfitigung, daB solcbe Prfiparate wirklich „Rattenschid-
linge" in Reinkultur oder so gut wie Reinkulturen enthalten. Zweifels-
ohne werden diese Untersuchungen den AnstoB dazu geben, solche
Kontrollmafinahmen einzuffihren. Dieselben werden mit Freuden von
solchen Laboratorien begrfiBt werden, die immer bestrebt waren, ein-
wandfreie Kulturen abzugeben.

Soweit bin ich in voller Uebereinstimmung mit den genannten
Forschern. Wenn aber Neumark und Heck auf Grand der von ibnen
vorgenommenen Ffitterungsversuche an Ratten den SchluB ziehen wollen,
daB auch keins der als Reinkulturen bezeichneten Prfiparate als Ratten-
vertilgungsmittel von Bedeutung ist, so muB dieser SchluB mit Rfick-
sicht auf das von ihnen veroffentlichte Versuchsmaterifil als vdllig un-
berechtigt bezeichnet werden. Denn welche Versuche haben sie vor-

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Babr, Ueber Batten vertilguugsmittel.

467

genommen? Im ganzen haben sie mit „tiber 40 Ratten“ experimentiert,
wie sie sagen, das soil wahrscheinlich heiBen, daB sie mit ca. 40 Ratten
alle Prfifungen vorgenommen haben. Eine bestimmte Anzabl von Ratten
zn jedem Versuche nennen sie nicht, so daB es schwierig ist, die ein-.
zelnen Versuche kritisch zu beurteilen. Haben sie nun aber, sagen wir,
40—42 Ratten im ganzen benutzt, dann haben sie, wenn 10 verschie-
dene Babterienkulturen untersucht worden sind, von diesen Tieren durch-
schnittlich ca. 4 Ratten fur jeden Versuch gehabt, ein gar zu kleines
Tiermaterial (siehe unten), wenn man aus den Versuchen beweiskrfiftige
Schliisse ziehen will, wie es Neumark und Heck gemacht haben (siehe
S. 45—46). Denn wir wissen ja, daB Ratten den zu der Gruppe der
„Rattenschadlinge“ gehdrigen Bazillen gegenflber von verschiedener Em*
pf&uglichkeit sind, und daB durchscbnittlich nur ein gewisser Prozent-
satz davon infizierbar ist, daB es also Rattenst&mme gibt, welche so
gut wie immun sind. Versuche mit solchen Ratten sind nicht maBgebend.

Gehen wir n&her auf das Versuchsmaterial Neumarks und Hecks
ein, dann ergibt sich folgende Uebersicht:

(Im ganzen)

Mit „Rattoleum“ haben sie 2 eingef&ng. Ratten gefiitt., d. h. 2 Ratten

„ „Rattapan“ ,, yy 5 » „ „ iy » 5 yy

?» v Rattenfort u I. V. (1920) » » 2 » yy ff yy ,, 2 „

„ „Rattenfort“ 2. V. „ „ 2(?) 4 ) „ „ „ „„ 2 „

« »Pogrom“ i) ft 4 (?) *) }J yy yy yy ff 4 yf

>i „Pestigen“ yy „ 2(?) 8 ) „ „ yy yy ,, 2 ,,

ii „Rattagalin“ yy yy 5 n » » i» » ^ »

u „Maurabazillin“ yy yy 12 yy yy yy 19 yy 12 yy

ii jjOanysz Bacil.“ „ 1 ,, ,, yy yy ,, 1 yy

Im ganzen = 35 Ratten

Im Sommer 1920 haben N. und H. angeblich auch Versuche mit der
in bakteriologischer Hinsicht als einwandfrei bezeichneten Ratinkultur
vorgenommen. Sie geben an, daB sie „eine grOBere Anzahl Ratten,
die sfimtlich aus Berlin stammten 44 , mit dieser Kultur geffittert haben.
1 Ratte haben sie intraperitoneal und 1 subkutan injiziert, welche beide
der Ratininfektion erlagen. Von der „gr6Beren Anzahl 44 Berliner-Ratten,
die mit Ratin geffittert wurden, starben keine. Vergleicht man die von
N. und H. im ganzen benutzte Anzahl von Ratten und die oben an-
geffihrten Zahlen, so ergibt sich, dafi N. und H. gar nicht berech-
tigt sind, zu schreiben, daB sie eine „gr5Bere Anzahl 44
Berliner-Ratten mit Ratin geffittert haben, sondern es geht
aus diesem Vergleich der von denAutoren selbst angegebenen
Zahlen mit aller Deutlichkeit hervor, daB sie hfichstens 4-5 Ratten
mit Ratin geffittert haben kOnnen (35 + 2 + 5 = 42). Also haben sie
nicht mit einer „gr5Beren Anzahl 44 Berliner-Ratten experimentiert, sondern
mit einem sehr kleinen Material, das vie! zu gering ist, um

1) Genaue Angaben fiber gefutterte Ratten wurden beim 2. Versuch nicht ge¬
macht, da aber N. u. H sagten: „Eine rattenpathogene Wirkung war auch diesmal
nicht featzu8tellen tt , mussen also Ratten — ich nabe angenommen, wenigstens 2 Ratten
— beim Versuch eingegangen sein.

2) Hier sind ebenfalls keine genauen Zahlen mitgeteilt, aber wenn es bei N. u. H.

heifit: ^Futterungsversuche an einer Anzahl von Ratten fielen-voilig negativ

aus*, habe ich unter „einer Anzahl* mindestens 4 Ratten verstanden.

3) Auch hier ist keine bestimmte Zahl von Ratten angegeben; es wird nur mit-

S eteilt, „eine rattentfitende Wirkung war nicht festzustellen*. Hier mussen also min-
estens 2 Ratten verwendet worden sein.

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468

Centralbl. f. Bakt. etc. Abt. I. Originate. Bd. 87. Heft 6.

allgeraeine Schlflsse ziehen zu kSnnen. Als ezakte wissenschaftliche
Untersuchungen kdnnen derartige kleine Versuche nicht gelten.

Ich habe in einer Abhandlnng in dieser Zeitschrift bereits 1905
(Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 39. 1905) folgende Schlflsse ge-
zogen auf Grnnd umfassender Ffltternngsversnche mit Ratin an Ratten:

s Zar Benrteilung des Katins als rattentdtendes Mittel warden
desbalb (d. h. weil Ratten von verschiedenen Btelien sehr verschteden empfinglicb
gcgen fiber Katin sind) nur eolche Versnche sich verwerten lessen, die an
Batten von verschiedenen Orten angestellt warden, da man erst dann
das richtige Resultat erhalt Als Basis dieser BchluSfoIgerung teUte ich da¬
rnels das Ergebnis einer Reihe von FntternngsverBUchen an Ratten von einer groBerec
Anzahl verschiedener Stellen mit. Diese batten nachstehendes Ergebnis:

10 Ratten ans „R6dovre“, geffitt. m. Ratin, starben 8 an Ratininfekt., 2 uberiebt.

10

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„Vanlo»e“, „

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„Leraee“, „

„Zoolog. Gart.“, „
(Kphg.)

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„Aluminia“,

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„Tivoli 44 , „

„Helge8vej“,

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„Rygaard“,

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„Marienburg“, ,,

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„Hinnerup 4 S ,,

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„GI. Kongevej 44 , n
„ChriBtianBhavn“, , ,

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„8axogade 44 , ,,

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„Roarsvej 44 ,

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M GIorup 44 , „

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„Knutnenborg“, „

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8

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7

-

Von 166 Ratten von 16 Orten, gefiitt. m. Ratin, starben also 114 Ratten an Ratininfektion.

Die Durchschnittsresnltate dieser Versnche sind also znfrieden-
stellend hinsichtlich der Virulenz der Ratinkultnr bei Ffltterung Ratten
gegenfiber. Hfitte man zuffillig nur mit Ratten ans „Aluminia“ experi-
mentiert, dann hfitte man wahrscheinlich sehr wenig befriedigende Re¬
sultat e erhalten, nnd umgekebrt, hfitte man ausschlieBlich mit Ratten ans
„Marienborg u gearbeitet, hfitte man wahrscheinlich zn gfinstige
Schlflsse aus den Versuchen gezogen. Arbeitete man ferner nicht
mit 8—20 Ratten von jedem Ort, sondern nur mit z. B. 1—3 nnd nur
mit hdchstens 2-4 Ratten in jedem Versuch, dann dflrfte der Spiel -
ranm fflr Zuffille noch grofler sein. In dieser Belenchtong
mflssen nach meiner Meinung N. nnd H.s Untersuchungen gesehen
werden, dann wird man zu dem SchluB kommen, dafi diese Versuche
ohne Bedeutung bei Benrteilung der untersnchten Enltnren anf ihre
Brauchbarkeit als rattentfltende Mittel sind.

N. nnd H. haben die vorgenannten Versuche mit Ratin 1920 vor-
genommen. In demselben Jahre hat zum Vergleich die schwedische
Staatskontrolle ! ) Ffitterungsversuche an Ratten angestellt mit Ratin, das
von den Stockholmer Vertriebsstellen bezogen wurde. 94 Proz. der
Ratten erlagen der Futterungsinfektion!

In demselben Jahre habe ich selbst 27 Ratinknltnren durch
Ffltterung an Ratten untersucht. Das Ergebnis dieser Versuche war.
daB 81 Proz. der Ratten der Ratininfektion erlagen.

1) Prof. Dr. Arvid M. Bergmann, AarBredogbrelse for statekontrolien i Sverige
over ratin prepara ten under 1920. Afgiven till kungl. medicinalstyrelsen den 31. Januari.
1921 (Ref. Skand. Vetr. Tidskrift XI. 1921. p. 13).

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Bahr, Ueber Rattenvertilgungsmittel.

469

Weiter mflchte ich darauf aufmerksam machen, daB ich im Centralbl.
f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 80. 1917. S. 213—219 meine 10-jfihrigen Er-
fahruogen liber Ffltterungsversnche tnit Katin verdffentlicht habe, wobei
ca. 6000 Katten zur Verwendung kamen. Durch das Studium dieser
Abhandlung werden leicht verscbiedene MiBversthndnisse betreffs „Ratin tt
und der Virulenz des Ratinbazillus aufgekl&rt werden. Wenn N. und H.
nicht imstande waren, aus Ratten, die bei subkutaner Oder intraperi-
tonealen Injektionen von Ratinknitnr gestorben waren, fQtterungswirk-
same Ratinkulturen herzustellen, dann ist dieses eine nacb meinen viel-
jShrigen Erfabrungen sehr natflrliche Sache. Diese Erscbeinnng wird
auch beobachtet, wenn Ratten nach Fiitterun gsinfektionen mit
Ratin sterben, und bedeutet nur, dafi einige Ratten imstande sind, die
Virnlenz zu vermindern. Das Entgegengesetzte ist aber auch moglich!
Ich werde mich jetzt nicbt mit dieser Virulenzfrage hier n&her be-
sch&ftigen, sondern beschr&nke micb darauf, auf eine spStere Arbeit
darliber zu verweisen.

Auf Grund dieser verschiedenen EmpfSnglichkeit der Ratten sind
Bakterienkulturen allein nicht genQgend als wirksames Ratten ver¬
tilgungsmittel, insofern, als bei einem Teil der rattengeplagten Stellen
es sich zeigen wird, daB der Erfolg zu gering ist. Dies baben wir hier
iu Danemark schon 1906 beobachtet und infolgedessen als Supplement-
prfiparat das r Ratinin“ (ein Scilla-Pr8parat) hergestellt zur 2. Aus-
iegung an den Stellen, wo die Bakterienkultur zu geringe
Wirkung gezeigt hat. Diese Kombination einer virulenten ratten-
totenden Bakterienkultur und eines wirksamen Meerzwiebelprfiparates,
wie das Ratio system, ist z. B. bekanntlich auch von Xylan der als
das am besten geeignete Mittel zur rationellen Vertilgung der Ratten
bezeichnet werden. Bakterienkulturen allein haben irn groBen und
gauzen in der Praxis nicht geniigend Wirkung. Gifte allein, darunter Meer-
. zwiebel und andere, wie Phosphor, Arsenik, Strychnin etc., sind auch nicht
zuverlassig und bewirken unter anderem einen schnellen Tod von vielen
Individuen in kurzer Zeit, die oft widerwartige Geriiche hervorrufen
und oft zu groBen Reparaturkosten Veranlassung geben. Es miissen
z. B. haufig FuBboden etc. abgehoben werden, um die Kadaver zu ent-
fernen. Also auch vom hygienischen Standpunkt ist dieser Vertilgungs-
modus nicht zu empfehlen. Wenn nun z. B. N. und H. scheiubar
Phosphor etc. empfehlen, dann zeigt dies, daB sie eine gar zu geringe
Kenntnis von den praktischen Verhhltnissen haben. AuBerdem ist der
Phosphor ein sehr gefahrliches Mittel, besonders wenn es sich darum
liandelt, Dbrfer und Stiidte von Ratten zu befreien, abgesehen von der
Feuersgefahr. Ein gutes Meerzwiebelpraparat ist absolut immer vor-
zuziehen, d. h. wenn dieses (wie z. B. „Ratinin u ), elie es von den Labo-
ratorien abgegeben wird, an Ratten kontrolliert und so hergestellt wird,
daB es von den Ratten gern aufgenommen wird. Hingegen ist die An-
wendung von Meerzwiebel und Meerzwiebelpraparaten ohue vorherigen
Tierversuch ohne praktische Bedeutung, denn der Giftgehalt der Meer¬
zwiebel wecliselt im hohen Grade je nach Art und Standort u. dgl.
Verhaltnisse, und darum gibt es viele — darunter die meisten im Handel
befindlichea Meerzwiebelpraparate — die keine Oder zu wenig ratten-
tStende Eigenschaften besitzen und daher von keiner oder zweifel-
hafter Wirkung sind.

DaB es in vielen Giiteru, Dorfern uud St&dten etc. gelungen ist,
mit Hilfe des Ratinsystems eine so gut wie vollstandige Vertilgung

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470

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 6.

der Ratten zn bewirken, geht unter anderem ans meiner oben zitierten
Abbandlung in dieser Zeitschrift bervor. In Deutschland hat man fihn-
liche Resultate aufzuweisen •). in Schweden and Norwegen desgleichen.

Die Bekfimpfung der Ratten ist jetzt eine Weltfrage, veil die Pest-
gefahr Europa n&her and nfiher kommt, and die Ratten bekanntlich
wichtige Verbreiter der Krankheit sind. Es ist leicht, eine oberfllch-
liche Kritik an einem PrSparat auszaflben, schwieriger aber etwas
Besseres an dessen Stelle zu setzen, daher muB man verlangen, daB
nur umfassende Untersuchungen zu Allgemeinschlfissen verwendet werden.

Kopenhagen, den 12. Oktober 1921.

Naehdruek verbotm.

Agglutinationsversuche mit polyvalenten Coli-Seris.

Von Dr. Eagen Rom&n, Seraminstituts-Bakteriolog in Budapest.

Die grollen Schwierigkeiten, welche ans in der Haman- wie in der
VeterinfLr-Serum therapie bezflglich der Bearteilung der Wirkung ver-
schiedener Schatz- und Heilsera lediglich auf Grund der klinischen Be-
obachtung begegnen, lassen das Bestreben, den Wirkungsmechanismos
dieser Sera auch mit Hilfe des Laboratoriumsversuches zu ergrfinden,
notwendig erscbeinen. Besondere Schwierigkeiten bietet die rein klini-
sche Beurteilung der Wirkung und des Wirksamkeitsradius der Heil¬
sera bei denjenigen Krankheiten, deren Benennung auf Grund ihrer
klinischen Symptome erfolgt, bei denen wir aber fiber den Grad ihrer
Einheitlichkeit in Stiologischer Beziehung noch immer nicht im klaren
sind. Im folgenden will ich einige BeitrSge zur Frage der Polyvalenz
der gegen die Coli-Ruhr der Kfilber benutzten Sera liefern.

Meine Untersuchungen beziehen sich zwar, mit Ausnahme einiger,
aus kranken Tieren stammender, pathogener C o 1 i - St&mme, auf solche
StSmme, die aus gesunden Kalbern gezfichtet wurden. Doch lassen so*
wohl die positiven als auch die negativen Ergebnisse im wesentlichen
Folgerungen auf die analogen Verh&ltnisse bei pathogenen Coli - Arten zu.

Eine Erfirterung der Frage, ob eine passive Immunisierung gegen
die Ruhr der K&lber fiberhaupt gelingt, liegt auBerhalb des Rahmens
dieser Arbeit. Neben dieser in erster Linie wichtigen Frage ist es von
grofier Bedeutung, zu entscheiden, ob und inwieweit durch ErhShung
der Serumpolyvalenz die Wirksamkeit des Serums gegen Erkrankungen,
die durch verschiedene Coli-StSmme verursacht wurden, erhfiht wird.

Als Indikator ffir die Polyvalenz benutzte ich die Agglutination.
Obwohl die Agglutination ffir die Beurteilung der Schutz- Oder Heil*
wirkung eines Serums nur von beschrfinktem Wert ist, sind wir doch
zu der Annahme berechtigt, daB die Stfimme, die sich bei der Aggluti¬
nation verschieden verhalten, auch gegenfiber den Serumschutzstoffen
verschieden reagieren. Wenn z. B. 2 Coli-St&mme verschieden agglu-
tinieren, so ist es ganz unwahrscheinlich, daB das Schutzserum des einen
gegen die Infektion mit dem anderen Stamme schfitzt.

1) Prof. Dr. H. Baebiger in Halle a. S. hat mir erst kfirzlich wieder aaf Anfnge
bestatigt, dafi seine in der Prov. Sachsen, Anhalt und Thuringen seit vielen Jahren mit dem
Batinverfahren gemachten Erfahrungen vollkommen mit den hiesigen flbereinstinuDea.

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Roman, Agglutinationsvereache mit polyvalenten Coli-Seris.

471

Die fflr meine Untersuchungen benutzten 6 pathogenen Coli-
St&mme zflchtete ich zum Teil selbst aus rubrkranken Kfilbern, teils
erhielt ich sie von verscbiedenen anderen Institutes Stamm A wurde
im Dezember 1919, Stamm B und C im Mai, D und E im November
1920, F im Febrnar 1921 gezflchtet. Von diesen sind die St&mme A,
D und F auch m&usepathogen. Aufierdem babe ich im August 1920
aus den F&zes von 13 gesunden K&lbern 48 und im M&rz 1921 von
10 Kfilbern 30 Coli-Stfimme gezflchtet. Von je 1 Tier babe ich 2 bis
5 Stamme isoliert, die ich mit gemeinsamen arabischen Ziffern und
aufierdem mit dem Index a, b, c, d, e bezeichnet habe. Jeder Stamm
wurde genau identifiziert. Als Coli betrachte ich die Stfimme, welche
gramnegativ, beweglich sind und sowohl Trauben- als auch Milchzucker
vergfiren. (Endo, Drigalski rot.)

Unter Benutzung dieser Stfimme habe ich aus Kaninchen je 4 1-,
3- und 10-valente Sera hergestellt. Bei der Herstellung der Sera habe
ich folgende Erfahrungen gemacht: WAhrend der grofite Teil der Autoren
Radziewsky, Jatta, Achard, Reiter, teilweise auch Burk und
Rothberger, mit RQcksicht auf die Toxizitfit der Co 1 i-Bakterien ab-
getdtete Kulturen als Antigen benutzten, fand ich, dafi man unter Be-
obachtung einer gewissen Vorsicht auch gut lebende Kulturen verimpfen
kann. Dabei ist dieses Verfahren weniger zeitraubend.

Bei Herstellung der monovalenten Sera erhielten die Kaninchen
zum erstenmal eine Emulsion von 1 Normalise 24-stflnd. Agarkultur
in 1 ccm physiol. KochsalzlOsung intravenos und nach 5 Tagen 2 Oesen.
Nach weiteren 5 Tagen wurde eine Probeagglutination ausgeiflhrt. Wenn
das Serum den homologen Stamm mindestens in einer Verdflnnung von
1: 1000 agglutinierte, so wurden dem Tiere 10 ccm Blut entzogen.
Anderenfalls erhielten die Tiere nochmals 3 Oesen Kultur, eventuell
mehrfach, bis der Titer von 1:1000 erreicht war. Nach erfolgter Blut-
entnahme immunisierte ich die Kaninchen mit 3 St&mmen und nach
Ueberstehen dieser Immunisierung mit 10 St&mmen. Nach Herstellung
der trivalenten Sera erhielten die Tiere zun&chst Vs Oese von jedem
Stamm, dann je Vs Oese und endlich je 1 Oese in 1 ccm KochsalzIOsung
in 5-t&gigen Intervallen. Bei 10-valenten Seris babe ich die Immuni¬
sierung mit je Vio Oese begonnen, dann je Vs Oese gegeben und diese
Dosis 1—2mal wiederholt. bis der Serumtiter gegenflber den benutzten
St&mmen ann&hernd 1:1000 betrug. Hierbei konnten naturlich St&mme
beobachtet werden, welche den Titer von 1:1000 nicht erreichten. Tier-
verluste kamen anfangs selten vor; erst bei der Immunisierung mit
10 St&mmen sind mehrere Kaninchen verendet. Von 13 verwendeten
Kaninchen verendeten, bevor ihr Serum brauchbar war, 4, so dafi die
12 Sera mit 9 Kaninchen hergestellt wurden. Die Sera wurden mit 0,5-
proz. Phenol konserviert. Auf diese Art habe ich folgende Sera erhalten:

a) Monovalent* Sera: 1)601 eeinAntig.:

2) 531 „ „

3) 591 „ „

4) 621 „ „

b) Trivalente Sera: 1)69111 „ „

2) 53 III „ „

3) 59111 „ „

4) 62111 „ „

c) Decern valente Sera: 1) 69 X „ „

2) 73 X „ „

3) 76 X „ „

4) 74 X „ „

A

B

la

6a

A, B, la

B, 7a, 9d
la, lOd, lie
6a, 12a, 13b

A, B, la, 6e, 7e, 9e, lOe, 15 e, 17d, 18e

B, lb, 6b, 7a, 9d, 10b, 11a, 12b, 13a, 14a
la, 6c, 7c, lOd, lie, 12c, 15c, 16a, 17c, 18c
Id, 6a, 7b, 10c, lib, 12a, 13b, 15a, 16d, 17a.

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

4 D

5 E

10 9c
9d
9e I

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1600

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—

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— 100

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1600

— 6400

—

1600

— —

800 +

800 +

1600 +

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1600

800

— —

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200 +

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— 200

—

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— 200

_

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— 6400

50 +
100 +
200
200

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Roman, Agglutinationsversuche mit polyvalenten Coli-Seris.

473

J, s

= 1

Agglutinationstiter mit Serum Nr.

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601

69 III

69 X

531

53111

73 X

591

59 III

76 X

621

62 III

74 X

16a

200

400

6400

50

6 400

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16 b

—

—

200

—

200

—

50

—

6400

—

6400

1600

16d

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

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60 +

16 e

50 +

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17 a

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100 +

400

17 c

—

—

—

—

—

—

—

—

800

—

—

400

17 d

50 +

—

800

—

—

—

—

—

—

—

1600

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_

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3200

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18 b

—

—

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—

800

1600

—

—

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6400 +

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~ — |

800

800 +

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—

—

400

800

1600 +
800

50

—

3200

400

6400

1600

Alle geziichteten Stfimme babe ich znnSchst mit sSmtlichen Seris eioer
Probeagglutination anterworfen. Hierzu stellte ich in Agglutinations*
rOhrcben VerdQnnungen von 1:50 und 1:100 her und setzte je 1 Tropfen
einer Aufscbwemmung 24-stfind. Agarkultur zu. Die Rbhrchen blieben
24 Std. im Brutschrank. Von einer Bestimmnng der Normalagglutinine
der Kaninchensera babe ich abgesehen, weil nach den Untersuchungen
▼on Jatta, Reiter nnd anderen sich in den Kaninchenseris nor aus-
nahmsVeise Normalagglutinine gegen Coli-Bakterien, und dann auch
nor hdchstens in Verdflnnungen von 1:30 bis 1:40, linden. Daher
babe ich nur die StSmme mit den entsprecbenden Seris bis zur Titer-
grenze agglutiniert, die bei der Probeagglutination mindestens bei 1:50
ein positives Ergebnis zeigten.

Bei den Hauptagglutinationsversuchen (Dezember und Januar) bin
ich von einer Verdflnnung von 1:50 ausgegangen und babe die StSmme
bis zur Titergrenze agglutiniert. Daneben wurden immer Kontrollen
angesetzt. Die Resultate wurden nach 24 Std. abgelesen und sind in
Tab. I wiedergegeben 1 ).

Die Agglutination der frisch (im MSrz 1921) gezficbteten StSmme,
die bei der Herstellung der Sera nicht Verwendung fanden, zeigt die
Tabelle Nr. II.

Auf Grund dieser Daten wollen wir zu der viel umstrittenen Frage
Stellung nehmen, ob alle zu derselben Zeit aus dem Darmtraktus eines
Individuums geziichteten Coli-StSmme identisch sind. Sidney Wolf
bebauptet an Hand eines Immunisationsversuches, daB in einem Darm nur
1 Art Coli vorhanden ist Dagegen fanden Jatta, Burk, Radziewsky,
daB die zu gleicber Zeit geziichteten Coli-StSmme in ihrem Agglu-
tinationsvermdgen verschieden sind, obgleich ihre kulturellen un'i bio-
logiscben Eigenschaften Qbereinstimmen.

1) Die Nummern der Hera stimmen uberein mit den Nummern der Raninchen; die
nebenstehende romiacbe Zabl zeigt die Valenz an. Die Agglutinationstiter der bei der
Herstellung der Hera benutzten isobomologen Stamme sind in der Tabelle mit fett ge-
drnckten Zahlen wiedergegeben.

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

474

Centralbl. f. Bakt. etc. Abt. I. Originate. Bd. 87. Heft 6.
Tabelle II.

Gruppe

Coli-

Agglutinationetiier nut 8erum Nr.

y tarn m

601

69 III

| 69 X

| 531

53 mi

73 X

591

59 III

76X

621

62 III

741

20

21a

—

—

—

—

—

50 +
10O±

—

—

—

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—

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_

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1600

6400

1600

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—

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—

_

200

200

—

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6400

3200

22c

—

—

—

—

—

100

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—

—

100

—

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22

23a

_

_

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50

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_

_

—

23b

—

—

—

—

—

50

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—

—

—

—

23c

—

—

—

—

—

50

—

—

—

—

—

23

24a

—

—

—

—

—

—

—

—

_

—

—

24b

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

24c

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

24

25a

_

_

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100

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800

800

1600

160.

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_

_

_

100

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1600

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3200

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—

—

100

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—

100

1600

800

1600

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25

26a

_

_

_

_

_

_

_

—

_

—

20b

—

—

_

_

_

_

_

_

—

—

—

—

26c

— |

—

—

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—

—

—

—

—

—

26

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_

_

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3200

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3200

3200

27c

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1600

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320.

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_

_

_

_

_

_

400

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160)

28c

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—

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—

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1600

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200

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1600

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100 ±

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200

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—

—

400

—

—

—

—

j -

50

—

400

50

Aus den Tabellen ist festzustellen, dafi alle von je einem Kalbe stam-
menden Stamme — mit wenig Ausnahmen — von einem und demselben
Serum agglutiniert werden. Doch sind die Agglutinationstiter innerhalb
dieser Gruppen fast immer verschieden.

So z. B. agglutiniert Serum Nr. 69 X 4 StSmme der Gruppe 11
bis zur Verdunnung 1:100, den 5. bis 1:200. Serum 621 agglutiniert
seinen isohomologen Stamm bis 25600, dagegen die anderen 4 Stamrae
dieser Gruppe bis 1:800—1:3200. Stamm 1 wird uur durch die
10-valenten Sera agglutiniert, wahrend die anderen zu dieser Gruppe
gehorigen Stamme auch mit anderen Seren reagieren. In anderen Fallen
wieder agglutiniert jeder Stamm von einer Gruppe bis zum gleichen
Titer. Daraus konnen wir folgern: Die aus dem Darm eines Indivi*
duuras geziichteten Coli-Bazillen sind einander nahe verwandt, be-
sitzen aber immunbiologische Verschiedenheiten. Ihre Rezeptorapparate
sind nur teilweise gleich. Mit Rucksicht auf ihre ahnliche Aggluti-
nabilitMtstendenz miissen wir sie in unserem Versuche bei der Beurteilung
des Polyvalenzvermogens als gleich ansehen. Aus diesem Grunde be*
trachten wir im folgenden die aus einem Tiere stammenden Stamme

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UNIVERSITY OF CALIFORNIA

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I

I

i

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Rom&n, Agglutinationaversuche mit polyvalenten Coli-Seris. 475

al8 1 Gruppe. Wir haben also insgesamt 29 Gruppen mit 84 Bakterien-
individuen.

Hinsichtlich der Titer zeigen die einzelnen Sera bedeutende Ver-
schiedenheiten. Eine Beeinflussung des Titers gelang durch ErhShung
der Impfdosis nod mehrmalige Wiederhoiung der Behandlung mit dem
Antigen nur bis zn einer bestimraten Grenze. Auf die Hobe des Titers
war vielmehr die Agglutinabilit&t des betreflfenden Stammes, noch mehr
aber die AntikOrperbildungsf&higkeit des mit dem Antigen geimpften
Kaninchens von Einflufi. Eine erhbhte Einwirkung der Virulenz des
Stammes auf die Agglutininbildung habe ich nicht beobacbten kdnnen.
Zwar gelang es mir, mit den pathogenen St&mmen hochwertige Sera
herzustellen, doch waren mit Hilfe der apatbogenen ebenso hohe, mitunter
sogar nocb hohere. Titer zu erzielen. Das 1- und 3-valente Serum dgs
Kaninchens Nr. 62 hat den grbBten Titer (ca 25000 bezw. 100000),
w&brend das Serum Nr. 591 den niedrigsten Titer zeigt. Dieses letztere
kdnnen wir im folgenden als gleichwertig mit 69III bezeichnen, weil
die hier vorbandenen A- und B-Komponenten aufier dem eigenen Stamm
andere St&mme obnehin nicht agglutiuieren, und, wie wir aus der
Tabelle sehen, die 2 Sera aucb vollst&ndig gieich wirken. Gerade aus
diesetn Grunde kdnnen wir das Serum Nr. 53 III als bivalent betrachten,
weil in diesem Serum aufier den Stgmmen 7 a und 9d auch der Stamm B
vorhanden ist Der Titer dieses Serums betr&gt gegen 1 : 1000. Die
mit pathogenen A-und B-Stfimmen hergestellten Sera Nr. 601 und 531
haben einen hohen Titer (beide 32000). Das Serum Nr. 69 X hat
einen niedrigen Titer (unter 1000). Die Titer der Sera 73X und 59III
betragen ann&bernd 1:1000. Nr. 76 X hat einen Wert von 3000—6000,
Nr. 74 X steht zwischen den beiden vorigen.

Die Agglutinationswirkung der Coli- Sera gegen die verschiedenen
Coli- St&mme, besonders in serodiagnostischer Hinsicht, wurde von
mehreren Autoren untersucht. Dabei wurde festgestellt, dafi die Coli-
Sera aufier ibren eigenen St&mmen nur ausnahmsweise und auch nur
wenige fremde St&mme agglutiuieren. Mit polyvalenten Coli- Seris haben
Rodet und Rothberger experimentiert. Die 2 10 valenten Seren von
Rothberger agglutinierten von den zur Immunisierung benutzten St&m¬
men nur 2—3, von 5 fremden St&mmen nur 1. Sein 20-valentes Pferde-
aerum agglutinierte aber 5 von 8 fremden St&mmen.

Aus unseren Versuchen geht hervor, dafi die mit Hilfe der patho¬
genen St&mme A und B hergestellten monovalenten Sera 601 und 531,
trotz ibres hohen Titers, aufier ibren eigenen Stgmmen weder einen
anderen pathogenen noch apatbogenen Stamm agglutinieren. Die Ursache
hierfflr kann darin liegen, dafi der Zeitpunkt und der Ort der ZQchtung
dieser St&mme weit von den anderen untersuchten St&mmen entfernt
lag, auch w&re es mdglich, dafi ihre Rezeptorapparate in dem Organism us
des erkrankten Tieres eine spezielle und individuelle Ver&nderung er-
fahren haben. Doch diese 2 erw&hnten wie die anderen pathogenen St&mme
agglutinieren auch mit denjenigen polyvalenten Seris, welche ohne patbo-
gene St&mme hergestellt wurden. Ich bemerke aber, dafi die St&mme
A, B und C bei der Probeagglutination negativ waren und vielleicht
nur durch die kQnstliche WeiterzQchtung sp&ter agglutinabel wurden;
eine Erscheinung. welche mit der Auffassung Rodets in Einklang
stehen wflrde. Uebrigens fand ich, dafi die pathogenen Coli St&mtne
serologisch gerade so voneinander abweichen wie die nicht pathogenen.
Das Serum des einen pathogenen Stammes agglutiniert den anderen

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476 Centralbl. f. Bakt. etc. Abt. I. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Stamm nicht, wfihrend sie doch selbst eventuell mit anderen Seren eine
positive Reaktion geben.

Daa mODOvalente Serum Nr. 691 (=69111) agglutiniert von den 28 heterologen
Gruppen inegeeamt 2—3 Gruppen (10,7 Proz.), daa bochwertige Serum Nr. 621 aul«r
seiner eigenen, achon 9 Gruppen (32 Proz.), obwobl viel niednger ala aein Titer iat

Daa trivalente Serum Nr. 62 III agglutiniert von den 26 fremden Stammgruppcn
15 (55,6 Proz.) daa Serum Nr. 59111 7 Gruppen (27 Proz), Nr. 53111 (eigentlich
bivalent) 10 Gruppen (38,4 Proz.).

Daa dezemvalente Serum Nr. 69 X agglutiniert von den 19 heterologen Gruppu
10 (52.6 Proz.), Nr. 73 X 9 Gruppen (47 Proz.), Serum Nr. 76 X 12 Gruppen (63 Proa),
Nr. 74 X agglutiniert 10 Gruppen (52,6 Proz.)

Das heifit, die monovalenten Sera agglutiniereo von den untersochten
fremden Stfimmen 10—30 Proz., die trivalenten 27—55 Proz., die dezem-
valenten 47—63 Proz. Diese Resultate zeigen, dad zwar die ErhShung
der Polyvalenz zu einer grfiBeren Wirkungsbreite der Sera ffihrt, daB wir
aber bei der Agglutination der untersuchten Stfimme doch nicht wit
fiber 50—55 Proz. hinausgekommen sind. Diesen Prozentsatz haben
wir aber auch bei den trivalenten Seris fast erreicht. Es ist daher
bei der Steigerung der Polyvalenz fiber diese Grenze hinaus ein erheb-
lich besseres Resultat nicht zu erwarten, die weitere Steigerung daher
nicht zweckmfiBig.

Eine starke Erhfihnng des Titers wirkt auch vorteilhaft auf die
Verst&rkung der Wirkungsbreite des Serums. Das kfinnen wir an
den hochwertigsten Seris Nr. 621, 62 III und 76 X feststellen, die von den
heterologen Stfimmen den grdBten Prozentsatz beeinflussen. Doch betrftgt
auch bei diesen Seris der Agglutinationstiter gegenfiber den weiter ab-
stehenden Stfimmen nur einen Bruchteil des Titers gegen den homologen
Stamm.

Bei Zusammenfassung unserer Untersuchungsergebnisse scheinen
uns die vorliegenden Laboratoriumsversuche zu folgendem Schlusse zu
berechtigen: Bei Coli-Seris ffihrt die ErhOhung des Titers und der
Polyyalenz zwar zu einer VergrfiBerung der Wirkungsbreite, doch l&Bt
sich diese Erhfihung durch beliebige Vermehrung der ffir die Seram-
herstellung benutzten Stfimme nicht so weit fortsetzen, daB der hierdurch
erzielte Wirkungsumfang des Serums bei alien durch C o 1 i-Bazillen
verursachten Erkrankungen einen spezifischen Schutz Oder therapeutischen
Erfolg erwarten lieBe.

Zum Schlufi mdchte ich Herrn Privatdozenten Dr. Ludwig Dienes fur die An*
regung zu den Versuchen, sowie fiir das meinen Arbeiten entgegengebrachte standige
Interesse meinen ergebenen Dank aussprechen, ebenso den oeiden Serum institute*
Dr. Pd pay und „Laboratorium fiir Bchutzimpfstoffe, A.—G.“ in Budapest, fiir die Ueber-
lassung des Materials.

Literatur.

1) Burk, A., Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Orig. Bd. 45. — 2) Jatta, Mauro,
Zeitschr. f. Hyg Bd. 33. — 3) Kli en eberger, C M Dtsch. Arch. f. Klin. Med. Bd. 90. —
4) Pfaund ler, M., Centralbl. f. Bakt. Abt 1. Bd. 23. — 5) Radziewsky, AL, Ebeoda
Bd. 14. — Reiter, Hans, Zeitschr. f. Imm.-Forbchg. Bd. 21. — Rothberger,C.
Zeitschr. f. Hyg. Bd. 34. — 8) Sidney, Wolf, Centralbl. f. Bakt. Abt I. Bd. 25.—
9) Totsuka, K., Zeitschr. f. Hyg. Bd. 45.

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Kister, Hefeoahrboden aus Hefeextrakt und Hefepepton.

477

Nachdruck verboten.

Hefenahrboden aus Hefeextrakt und Hefepepton.

[Aus dem Hygienischen Institut zu Hamburg (Direktor:

Prof. Dr. Dunbar.)]

Von Prof. Dr. J. Kister.

Als w ah rend des Krieges der Mangel an Fleisch, Fleischextrakten
und Peptonen die Herstellung der NShrbflden in der bisber gebr&uchlicken
Weise in Frage stellte, lag die Notwendigkeit vor, fflr das Fehlende
Oder schwer zu Beschaffende Ersatzstoffe heranzuzieben. Eine groBe
Reihe von pflanzlichen Ersatzmitteln, Infusen, Extrakten, Abkochungen,
ist von verschiedenen Seiten geprflft und empfoblen worden. Es lag nahe,
dabei aucb an die eiweifireiche Hefe zu denken, die frflher sebon in
Form von Hefeextrakten vielfach fflr N&hrbdden verwendet worden war.
Earn mann ist es gelungen, durch ein besonderes Verfabren aus dem
Hefeeiweifi anch ein Pepton herzustellen, das einen Ersatz fflr das in
der Bakteriologie frflher allgemein angewendete, nun aber nicht mebr
Oder nicht in der gleichen Gfite erhaitliche Witte-Pepton bieten sollte.

Die mit Hefeextrakt und Hefepepton angestellten Untersuchungen
ergaben so zufriedenstellende Resultate, daB im hiesigen Hygienischen
Institut seit 1916 allm&hlich diese Ersatzstoffe immer mehr verwendet
worden. Auch fflr die Herstellung von Impfstoff, der 1914—1916 im
biesigen Institut in grdfieren Mengen hergestellt wurde, baben sich die
HefenflhrbOden bestens bew&hrt. Quantitative Untersuchungen ergaben
beispielsweise folgendes Resultat:

Datum

der

Pr&fuug

Art dee
Nahrbodens

Bakterienart

Knbikzentimeter

Impfstoff

Milligram in
Kulturmasse
berechnet

9. Juni 1916

Fleisch wasseragar

Typhnsbakterien

1000

666

dgL

FleiscHextr&ktagar

iy

500

3o3

fj

Hefeagar

7J

1200

800

n

Hefeagar

jj

1000

666

4. Jan. 1917

Fleisch waseeragar

n

1800

1200

dgl.

Hefeagar

>>

1600

1066

n

Fleisch waseeragar

Choleravibrionen

225

900

»

Hefeagar

99

285

1140

Hefeagar

99

250

1000

Die ersten Prflfungen waren mit einem Hefeextrakt von der Kon-
sistenz des Liebigschen Fleischextraktes und eines Hefetrockenpeptons
vorgenommen. Bei dem groBen Bedarf des Institutes war es aber nicht
mOglich, die erforderlichen Mengen Trockenpeptons und eines hin-
reichend eingedickten Extraktes mit den im Institut zur Verfflgung
stehenden Hilfsmitteln fortlaufend darzustellen. Es muBte daher mit
flilssigen 5—10-proz. Peptonstammlflsungen und einem dickflflssigen
Hefeextrakt als Ausgangsmaterial gearbeitet werden. Auch diese gaben
im allgemeinen gute Resultate. Jotten (Arb. a. d. Reichs-Ges.*Amt

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478 Centralbl. f. Bakt. etc. Abt I. Originale. Bd. 87. Heft 6.

Bd 52.. H. 2.), der die von verschiedenen Autoren empfohlenen HefenShr-
boden und auch den Hamburger Nfihrboden eingebend untersucht hat,
ist hinsichtlich der Verwendbarkeit der Hefe im groBen und ganzen zn
gflnstigen Ergebnissen gekommen. Seine Versuche mit Hefepepton-
fltissigkeit ergaben, daB alle zur Prflfung herangezogenen Bakterien ein
ebenso typisches, morphologisch ganz eiuwandfreies und Qppiges Wachstum
zeigten, wie in der gewbhnlichen Fleischbrflhe. Aucb die Verwendung
als Peptonwasser zur Anreicberung der Choleravibrionen war vdllig
ausreichend. Ein fast ebenso befriedigendes Resultat lieB sich bei der
Heranziehung der Hefepeptonlbsung zu den Agarn&hrbdden erzielen. Auch
zu Elektivnahrboden war die Hefepeptonldsung verwendbar. Nurempfiehlt
Jdtten, Fucbsinagarldsungen jedesmal friscb herzustellen, da sie
infolge Rotung der Agarmasse bald unbranchbar werden. Zur Impfstoff-
bereitung konnen bei Fehlen der erforderlichen Fleischmengen diese
durch Hefepepton ersetzt werden, da die Unterschiede gegenQber den
mit Fleischwasserpeptonnfibrbdden erhobenen Resultate nur nnerheblicb
waren.

Leider machte sich aber bei unseren HefenfihrbOden im Laufe der
Zeit ein groBer Uebelstand bemerkbar. Die gelieferte PreBhefe war
h&ufig von dunkler Farbe und minderwertiger Beschaffenheit. Das war
von ungiinstigem EinfluB auf die aus ibr gewonnenen Hefeextrakte und
Peptone. Bei dem ungleichartigen Ausgangsmaterial fielen die Nfihr-
bdden weniger durchsichtig und in ihrer Gtite sebr verscbiedenartig aus.
Ferner buBten die flflssigen Peptonvorr&te wegen ihrer begrenzten
Haltbarkeit mit der Zeit an Brauchbarkeit ein. Ein Versuch, mit Toluol
die Haltbarkeit zu erhfihen, fflhrte, auch wenn das Toluol vor der
Verwendung des Nahrbodens wieder vollst&ndig entfernt wurde, zu keinem
zufriedenstellenden Ergebnis. Diese Ungleichartigkeit in der Beschaffen-
heit des Hamburger HefenShrbodens ist auch Jbtten bei seinen Unter-
suchungen aufgefallen. Auch nach unseren Erfahrungen kann unter Um-
st&nden der im kleinen selbst hergestellte HefenShrboden sogar v511ig
ungeeignet ausfallen. Andere empfohlene HefenBhrbdden kdnnen aus
gleichen Grflnden gelegentlich ebenso versagen, insbesondere wenn bei
der Herstellung auch nur kleine Abweichungen vorkommen. Ein Nfihr-
boden von stets gleicher Zuverl&ssigkeit kann nur gewahrleistet werden,
wenn die Zutaten von gleichmBBiger Beschaffenheit sind. Die Vorbedingung
dafur ist, daB Hefeextrakt und Hefepepton aus gleichm&Bigem Ausgangs¬
material hergestellt werden, die Herstellung in stets gfeichm&Biger Weise
vor .sich geht und Extrakt wie Peptone hinreichend haltbar gemacht
werden konnen. Dieses ist jetzt ermoglicht, seitdem nach Ueberwindung
der mit der Herstellung im groBen anfangs noch verbundenen Schwierig-
keiten das Hefepepton und der Hefeextrakt nach dem neuen Kammann-
schen Verfahren fabrikmSBig hergestellt werden. Bei der groBen Be-
deutung, die einem stets zuverl&ssigen Nahrboden in der Praxis zukommt
der zugleich einen billigen vollwertigen Ersatz fBr die Fleischn&brbdden
darstelit, erscheint ein Hinweis auf diese Hefeextrakte und besonders
Hefepeptone angezeigt.

Die Herstellung der Hefeprfiparate erfolgt in folgender Weise:

Als Ausgangsmaterial dient eine fur diesen Zweck besonders her¬
gestellte Trockenhefe, also von bestimmtem EiweiB- und Extraktivgehalt.
Aus dieser Trockenhefe werden die Extraktivstoffe herausgelost und zu
einem stets gleichmtlBigen sirupartigen Produkt eingedickt. Diese stellt
den gebrauchsfertigen Hefeextrakt dar.

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Kid ter, Hefenahrboden aus Hefeextrakt und Hefepepton.

479

Bei obigem Vorgang werden die eigentlichen HefeeiweiBtoffe koagu-
liert Dieses Koagulum, aus unldslichen EiweiBstoffen und Zell mem bran en
bestebeud, wird durch gespanuten Wasserdanipf zu wasserloslichen
Peptonen aufgespalten. Es komrnt hierbei auf die Innehaltung besonderer
PuDkte an, deren ErSrterung zu weit fflhren wflrde. Die von den Zell-
resien abgetrennte Peptonlosung wird in Apparaten modernster Kon-
struktion in ein volumin&ses und schwachgelblicbes Trockenprodukt ver-
wandelt, das scbon in kaltem Wasscr restlos klarloslicb ist und alle
' erf order lichen Peptonreaktionen gibt. Dieses Pulver stellt in stets gleich-
maBiger Zusammensetzung das gebrauchsfertige Pepton dar.

Wenn man einen Hefenfihrboden von derselben Be-
schaffenheit wie die frfiheren Fleischwasserpeptonnfihr-
bOden herstellen will, so mufi man sowohl Hefeextrakt als
auch Hefepepton verwenden. In dem Hefeextrakt ist n&mlich kein
Pepton enthalten. Die EiweiBstoffe der Hete mflssen erst nach Ent-
fernung der Extraktivstoffe in geeigneter Weise durch hydrolytische
Spaltung der EiweiBkdrper mittels SalzsSure unter Druck Oder mit
Pepsinsalzs&ure bei Bruttemperatur zu wasserldslichem Pepton umge-
wandelt werden. Der Hefeextrakt ersetzt also nur das Fleischwasser
Oder den Fleiscbextrakt. Das Hefepepton tritt an Stelle des frflheren
Witte-Peptons. Die von beiden Hefepr&paraten zuzusetzenden Mengen
entsprechen den bekannten Vorschriften der N&hrbodenbereitung.

Bei der Herstellung der N&hrb5den und insbesondere der Hefe-
nihrbSden ist die Einstellung einer den betreffenden Bakterienarten
zusageuden Alkaleszenz von nicbt zu untersch&tzender Bedeutung. Die
Alkaleszenz des fertiggestellten Nahrbodens wird meist mit Lackmus-
papier nach der TQpfelmethode bestimmt. Diese Einstellung mit Lackmus-
papier als Indikator kann unter Umstanden zu TrugschlQssen fflhren;
es ist dabei von Bedeutung, ob und inwieweit die in dem Nahrboden
enthaltenen Phosphate bei der Bestimmung der Alkaleszenz eine Rolle
spielen. Die Frage der Alkaleszeozbestimmung wird von Noll zurzeit
eiogehend bearbeitet und die Ergebnisse werden demnachst in einer
Verdffentlichung zusammengestelIt.

In vorgeschriebener Weise hergestellte und richtig
alkalisierte HefenShr boden aus dem oben erwahnten
Hefeextrakt und Hefepepton, sind, wie neuere Unter-
suchungen ergeben haben, den alten Fleischwasserwitte-
peptonnahrbdden der Vorkriegszeit voll und ganz an die
Seite zu stellen. Alle in Frage kommenden Krankheitserreger
wacbsen auf Hefeextraktpeptonagar tippig und ebensogut wie auf dem
zum Vergleich beimpften Fleichwasserwittepeptonagar. Durch quantitative
Bestimmung der Kulturmasse konnten nur ganz geringe, nicht ins Gewicht
fallende Unterschiede auf den beiden NfihrbSden festgestellt werden,
z. B. ergab sich gelegentlich auf Fleischwasseragar eine Cholerakultur-
masse von 440 mg, auf dem Hefeagar eine solehe von 420 mg. Auch
fflr die Herstellung von SpezialnShrboden eignet sich der Hefeextrakt und
Hefepepton durchaus. Ein aus den Hefeersatzmitteln bereiteter Endo-Agar
lSBt deutlich das verschiedenartige Wachstum der Typhus-, Paratyphus-
nnd Coli-Bakterien erkennen und nimmt auch, wenn seine Alkaleszenz
richtig eingestellt ist, nicht allzu frflh die stbrende rote Farbe an. Mebr-
fach wiederholte Prflfungen des HefenShrbodens mit den verschiedensten
Bakterienarten, immer die richtige Herstellung des Nfihrbodens voraus-
gesetzt, ergaben stets zufriedenstellende Resultate. Besonders gut wachsen

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480 CentralbL f. Bakt. etc. Abt. I. Originate. Bd. 87. Heft 6.

Vibrionen in dent Hefepeptonwasser. Gelegentlich zeigte es sich allerdings
bei der Prflfung von Peptonwasser zur Anreicherung von Cholera- and
cholera&hnlichen Vibrionen, daB die Cholerarotreaktion ausblieb; dieses
war aber nicht nur der Fall im Hefepeptonwasser, sondern ebenso in
dem mit Witte-Pepton nach Angabe von Wolffel hergestellten
Peptonwasser. Einige Vibrionenst&mme waren offenbar nicht imstande,
das fflr das Eintreten der Reaktion erforderliche Indol zu bilden. Sobald
aber dem Peptonwasser Tryptophan (1,0 ccm einer 1-proz. Tryptophan-
I6sung auf 10 ccm PeptonlSsung) zugesetzt wurde, trat, sobald Wachstum'
in den RShrchen eingetreten war, nach Zusatz von Schwefelsiure die
Rotreaktion mit burgunderroter Farbe auf.

DaB auch die verschiedenen Hefen£hrb5dem dem gewOhnlichen
Fleischwasserpeptonagar bezuglich des Antigenwertes der Kulturen nicht
nachstehen, hat bereits J 811 e n nachgewiesen. Es braucht daher darauf
nicht n&her eingegangen zu werden.

Es kann also nach unseren Erfahrungen der Hefeextrakt an Stelle
des Fleichwassers oder Fleischextraktes und das Hefepepton an Stelle
des Witte Peptons als zuverlassiges und billiges Ersatzmittel empfohlen
werden. Es wird jetzt auch ein Gemisch von Hefeextrakt, Hefepepton
und Kochsalz in den vorgescbriebenen Mengen in Trockenform im
Handel vertrieben, wodurch die N&hrbodenherstellung wesentlich verein-
facht wird.

Druekfehlerberiehtlgung.

Id der Arbeit Bach „Ueber Spirochaten in Wasserleitungen" (CentralbL f. Bakt
Abt I. Grig. Bd. 87. H. 3. 3. 198) mufi ea heifien auf 8. 201, Zeile28: Spirochaeta
plicatilis Ehrbg. anstatt Spirochaeta pallida Ehrbg.

Inhalt

Bahr, L., Ueber Rattenvertilgungsmittel,

8. 46t>.

BOhm, Iteopold Karl, Beitrage zur Ffennt-
nis tieriHi'her Parasiten. Mit 1 Tafel und
4 Abbildungen im Text, S. 407.

Puhrmann, O., Einige Anoplocephaliden
der Vogel. Mit 21 Abbildungen im Text,

8. 438.

Kiater, J., Hefenahrboden aus Hefeextrakt
und Hefepepton, 8. 477.

Kram&r, Eugen, Untersuchungen fiber
die chemische Beschaffenheit der Kapsel-
sub-*tanz einiger Kap*elbakterien, 8. 401.

Pardi, Ugo, (Jeber die Natur der leuko-
zytaren EinschliisBe bei Encephalitis Je-
thargica. Bemerkungen zur Arbeit der
Herrn Prof. Dr. Hilgermann, Dr.

Lauxen und Charlotte Shaw,
S. 406.

Rom&n, Eugen, A ggluti nations versuche
mit poly valen ten Coli-Serfs, 8. 470.

2tndov8ky, Frans, Die Kokzidioee der
Wanderratte (Mus decuman us PlalL)
und ihre Beziehung zur Kaninchenkok-
zidiose. Mit 1 Tafel und 1 AbbUdung
im Text, 8. 427.

Steiner, G., Beitrage zur Kenntnis der
Mermithiden. I. Teil. Mermithiden von
Neu-Meckienburg und Revision einiger
v. Linstowscher Arten und Rudol¬
ph is Filaria truncatuia = Mermia tran-
catula. Mit 23 Abbildungen im Text,
8. 451.

Prommannsche Buchd nicker ei (Hermann Pohle) In Jens.

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CentralM. f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7|8.

Ausgegeben am 31. Januar 1922.

Nachdruak verboten.

Ueber die Bcdeutung der Eigenwasserstoflzahl
(des H*Ionenoptinmm) der Bakterien.

[Aus der Heidelberger Kinderklinik (Prof. Moro).]

Von Dr. A. Adam, Assistenten.

Jedem Bakteriologen ist gelSnfig, daB die MikroorgaDismen ver-
schiedene Reaktionsgrade des Nahrbodens bevorzugen. Die meisten
Bakterien, insbesondere die pathogenen, zfichtet man auf lackmnsneu-
tralen oder scbwach alkalischen Medien, Hefen und Schimmelpilze da-
gegen auf sauren.

Die Reaktion eines NShrbodens ist abhkogig von der Menge darin
enthaltcner Wasserstoffionen. Bestimmen wir den Lackmusneutralpnnkt,
so weisen wir damit einen pH-Wert von annQhernd 6,8 nach, bei dem
Phenolphthaleinumschlag einen solchen von etwa 8,9.

Wir sind aber in der Lage, die H-Ionenkonzentration, die auch kurz
als „ Wasserstoffzahl" bezeicbnet wird, viel genauer zu bestimmen, nnd
zwar mit der Gaskettenmethode oder einer feineren Indikatorenmethode.

In der gesamten Biologie hat sich die genaue Beachtung der Wasser¬
stoffzahl als auBerordentlich fruchtbar erwiesen. In der bakteriologischen
Technik hat sie aber noch verh&ltnism&Big wenig Eingang gefunden.
Nur aus Amerika liegt aus der Zeit w&hrend und nach dem Kriege eine
Reihe zum Teil schwer zug&nglicher Arbeiten vor, die auf diese Ver-
haitnisse bei bakteriologischen Arbeiten ROcksicht nehmen 1 ).

Ira Folgenden sei an der Hand einiger Beispiele gezeigt, welcher
bedeutende EinfluB der Wasserstoifzahl bei der ZQchtung von Bakterien
zakommt, und welche Aussichten ihre genauere Berficksichtigung auch
in der Bakteriologie bietet.

Gelegentlich der ZQchtung schwer kultivierbarer, anaerober Bakterien-
arten des SQuglingsstuhles, insbesondere des Bacillus bifidus, machte
sich die Erscheinung sehr stSrend bemerkbar, daB der Bifidus in
zuckerhaltigen NQhrboden sehr rasch zugrunde ging. OfTenbar lag dies
an dcr starken S&ureproduktion dieses exquisiten G&rnngserregers. In
zuckerfreien Medien lQBt sich aber der Bifidus nicht gut zQchten.

Die genauere BerQcksichtigung der Wasserstoffzahl des N&hrbodens
ffihrte zu dem wichtigen Ergebnis, daB der Bifidus bei bestimmten
S&uregraden (pH 5,5 — 5,9) am Oppigsten gedieh, wShrend er auf
schwBcher sauren, alkalischen oder stQrker sauren entweder nicht an-
wuchs, oder seine charakteristischen Degenerationsformen (Verzweigungen,
Plasmolyse) aufwies 2 ).

Der EinfluB der Wasserstoffzahl machte sich auch bei der Stunden-
g&rnng bemerkbar. Ging man von einem annfihcrnd neutralen Nahr-
boden aus (etwa ph 6,5), in dem die Entwicklung etwas gehemmt wird,

]) Clark, W. M. f The determination of hydrogen ions. Baltimore 1920.

2) Adam, Ueber den Einflufi der H-Ioneukonzentration des Nahrbodens auf die
Entwicklung dee Bacillus bifidus. (Zeitschr. f. Kinderheilk. Bd. 29. 1921.)

Erst* Abt. Orig. Bd. 87 Heft 7/8. 31

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482

ICeatr&lbi. f. Bakt. etc. I. Abt Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

so sah man, daft die Hemmuug nur so lange anhielt, bis infolge der
SSuerung durch Zuckerspaltung uugefahr ein p H von 5,9 erreicht war.
Dann setzte plotzlich eine starke Zunahme der Vermebrung ein. Der
Bifid us bildet sich also innerhalb gewisscr Grenzen selbst sein Op¬
timum. Die Sauerung geht dann aber rasch vorwarts und iiberschreitet
noch betr&chtlich das Optimum. Sie erreicht beim Bifid us konstant
den Wert von ph 4,3—4,1.

Da dieser End-pH-Wert weit das MaB des fQr die Erhaltung des
Lebens der Zelle Ertiaglichen iibersteigt — auf N&hrboden mit diesem
AusgangspH geht der Bifid us sofort zugrunde — so kann als Ur-
sache desselben nur die Wirkung des beim Zellzerfall frei gewordenen
Fermentes in Frage kommen.

Da es sich bei den Versuchen urn Anstellung groBer Reihen handelt,
ist es vielleicht nicht ohne Interesse, mitzuteilen, wie die Schwierigkeiten
der Anagrobenzflchtung dabei flberwunden wurden.

Als einfachste Methode hat sich mir in vielen Hunderten von An-
aerobenkulturen der Zusatz von Koks (in eibseogroBen StQckchen) zur
Bouillon bewahrt. Die Verwendung von Koks als Adsorbens ist zwar
schon versucht worden, hatte aber bisher nicht zu ermutigenden Ergeb-
nissen gefQhrt. Wahrscheinlich spielt dabei auch die Vorbchandlung
des Koks eine Rolle. Er muB sehr sorgfaltig mit reichlich destilliertem
Wasser ausgekocht werden. Das Wasser muB so oft erneuert werden,
bis die DSmpfe geruchlos werden. Die Reagenzgl&ser werden 6—8 cm
hoch mit den getrockneten Kokssttickchen angeftillt und trocken sterili-
siert. Die Nahrbodenfltissigkeit wird in 10 ccm Menge zugefBgt und
nur 1—2 mm hoch mit sterilera, fliissigem Paraffin ilberschichteL

Mit derartiger Mcthodik gelang es mir bedeutend schneller, An-
aerobenwachstum zu erzielen als z. B. mit sorgfaltig ausgekochter Bouillon
im Buchner-Rohr. Die empfindlichen Kopfchenbakterien des Meko-
nium konnte ich in einigen Fallen iiberhaupt nicht im Buchner-Rohr
zur Vermehrung bringen, wahrend sie in Koksbouillon fippig gediehen.
Ebensogut gelang die ZQchtung der anaeroben Buttersaurebazillen. Be-
sonders hat sich mir die Methode bewahrt in Versuchen, in denen der
EinfiuB bestimmter Nahrstofte auf das Wachstum des Bifidus und der
KQpfchenbakterien festgestellt werden sollte, weil der Koks eben ein
indifferentes Material ist. Seine Wirkungsweise ist wahrscheinlich eine
komplexe, bei der die Adsorption des Sauerstoffes, der Nahrstoffe, der Fer-
mente und nicht zura mindesten der Bakterien selbst (mit Verminderung
der Oberflachenspannung der Zellmembran) zusaramen wirken dQrften 1 ).

Die Bedeutung der Wasserstoffzahl des Nahrbodens bei der Zflch-
tung des Bifidus kam in ganz entsprechender Weise bei der Kultor
der sporenbildenden Kopfchenbakterien, der anaeroben beweglichen und
unbeweglichen Buttersaurebazillen und verschiedener Coli-Rassen zur
Geltung. In jedem Falle lieB sich ein Optimumbereich feststellen.

Nun sind aber diese Optima sehr verschieden. Der Bifidus hat
seine giinstigste Entwicklungsmoglichkeit zwischen Ph 5,5 und 5,9, die
Kopfchenbakterien zwischen 6,9 und 8,2, die beweglichen Buttersaure¬
bazillen um ph 6,3, die unbeweglichen urn 5,1, die bisher untersuchten,
aus dem DUnndarm schwer dyspeptischer Sauglinge gezQchteten 6 Coli-
Rassen samtlich zwischen ph 6,4 und 7,1. Eine aus dem Stuhl ge-

1) Adam, Ziichtung der Buttersaurebazillen auf Koksrailch. Ein Beitrag zor
Theorie dor Auaerobenkullur urter Luftzutntt. (Zeitachr. f. Kinderheilk. Bd. 20. 1921.)

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Adam, Eigenwasserstoffzahl (dew H-Ionenoptimnm) der Eakterien.

483

zuchtete Coli-Rasse wuchs am bcsten bei pn 7,1 —8,2. Dabei war es
gleicbgflltig, ob die NSbrboaillon Zucker enthielt Oder nicht. Die opti-
male Produktion eines zuckerspaltenden Fermentes ist also an einen
besonderen Kolloidzustand der Zelle gebnnden, der durch die Wasser-
stolfzahl beeinfluBt wird und auch fOr die Vermehrung von ausschlag-
gebender Bedeutung ist.

Diese Optima sind so konstant, daB ich den BegriflF der Eigep-
wasserstoffzahl dafiir vorgeschlagen babe. Dieser besagt, daB eine be-
stimmte H-Ionenkonzentration des ernShrenden Mediums die gflnstigste
Entwicklungsmoglichkeit fflr die betretfende Bakterienart bietet Dieses
Optimum bezieht sich aber nicht allein auf die Ernte.

Dabei ist selbstverstandlich zu beriicksichtigen, dafi man die Ernte nicht blofi
nach der Zahi der iiberlebenden, sondern auch der geatorbenen Keime beurtcilt. Denn
das Absterben in der Kultur erfolpt um so schncller, je rascher die Nahrstoffe ver-
braucbt werden. Dieses geschieht aber in vitro dort am ausgiebigsten, wo die giinstig-
sten Lebensbedingungen sich darbieten.

Im Bereich der Eigenwasserstoffzahl kora men auch die Normal-
formen, wenn man es so bezeichnen will, die gesundesten Individuen,
zur Entwicklung. Gerade bei der Ziichtung des Bifid us war es bis-
ber nicht gclungen, iippige Reinkulturen derjenigen Normalformen zu
gewinnen, vie sie im Stuhle des gesunden Brustkindes vorkommen. In
den tiblichen Agarkulturen degenerieren sie sehr rasch, wie jetzt ver-
stSLndlich, infolge des tiblichen Alkaligehaltes derselben. Bei dem pn*
Optimum entstehen aber sofort normale Formen.

Das Gleiche gilt von den anderen, bisher von mir untersuchten
Arten. Immer ist die Formbildung im Gebiete der Eigenwasserstoffzahl
am gleichmaBigsten, wShrend zu beiden Seiten mehr oder weniger ent-
artete Individuen entstehen. Bei den Kopfchenbakterien war zu beob-
acbten, daB im Optimum keine oder nur geringe Sporenbildung auftrat,
wfihrend zu beiden Seiten derselben auffalleud viel Sporen gebildet
wurden *). Das lenkt die Aufmerksamkeit auf den EinfluB der H-Ionen-
konzentration auf die Sporenbildung.

Aber auch der Stolfwechsel der Bakterienzelle ist, wie ohne weiteres
verstandlich, im Optimum am gunstigsten. So war die Indolbildung der
untersuchten Coli-Rassen im Optimumbereiche aufierordentlich stark,
wfthrend sie auBerhalb desselben bedeutend schwacber war, ja trotz
ziemlich guter Vermehrung vtillig fehlen konnte.

Diese Beobachtungeu liaben meines Erachtens auch praktiscbes In-
teresse. Folgender Versuch lSBt dies z. B. erkennen: Ich stellte mir
2 N&hrboden von genau gleicher Zusammensetzung her*) und variierte
nur die H-Ionenkonzentration. In dem einen bildete ich durch Zusatz
von Essigsaure ein p« von 5.0, in dem anderen durch NaOH-Zusatz
ein Ph von 7,0. Der 1. enthiilt das Optimum desBifidus, der 2. das
der K6pfchenbakterien. Dann beimpfte ich beide Nahrboden mit genau
gleichen Mengen frischer Reinkulturen von Bifid us und Kopfchen¬
bakterien, stellte also gewissermaBen eine VeruDreinigung des Nfihr-
bodens her. Nach kurzer Zeit (etwa 3—4 Tagen) war in dem Nfihr-
boden mit Ph 5,0 — wenigstens im Ausstrich — eine Reinkultur von
Bifid us und im anderen eine solche von Kopfchenbakterien entstanden.

1) Adam, Uober das H-Jonenoptimwn der Kopfchenbaklericn des Mekonium.
Beitra^ zur Entstehung der phygiologischen Daimilora. (Zeitbchr. f. KinderheilL
Bd. 30. 1921.)

2) Koks, lackmu.^nfutrale Bouillon, 1 Proz. Milchzucker, 0,5 HamatinlSsung.
(Vgl. Zeitbchr. f. Kindeiheilk. Bd. 29. 1921. S. 65.)

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484

Central bl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Es erubrigt sich, zu erwahnen, daB die NSbrboden in neutralem Zustande
beide Arten durchaus zur Entwicklung bringen, dafi es sicb also nicht
um einen Mangel an Nahrstoffen handeln kann.

Darait kiindigt sich eine neue Moglichkeit an, durch alleinige Diffe-
renzierung der H-Ionenkonzentration des Niihrbodens zum mindesten
Anreicherung, in manchen Fallen wahrscheinlich sogar Reinkulturen be-
stimmter Bakterienarten zu gewinnen. Auf diese VVeise habe ich mir
jedenfalls schon die Isolierung des Bifid us wesentlich erleichtern
konnen. Fiir die Ziichtung pathogener Arten, z. B. der Ruhrbazillen
aus einera Coli-Gemisch, ware eine solche Metbode event von Werte.

Sie eroffnet aber auch noch andere Aussichten. Es unterliegt keinem
Zweifel, daB die Giftproduktion der Bakterien innig mit ihrem Stoff-
wechsel zusammenhangt. Es ist daber moglich, daB die Menge und
StSrke der Endo- und Ektotoxine bei Ziichtung im Bereiche der Eigen-
wasserstoffzahl besonders groB ist.

Wahrscheinlich wird auch die Differenzierung nahe verwandter Bak-
terienrassen dadurch erleichtert werden. Meine Beobachtungen haben
jedenfalls den ausgesprochenen Artcharakter im Verhalten der H-Ionen-
menge gegeniiber erwiesen.

Bei jungen Coli-Kulturen fand ich, daB im Optimum die meisten
Iudividuen und am lebhaftesten bewcglich waren. Fiir die Feststellang
der BegeiBelung in schwierigen Fallen scheint mir daher die Methode
unerlaBlich. Ferner ermoglicht die optimale Formbildung die Darstel-
stellung der Normalform leicht degenerierender Arten.

Bei Fermentstudieu, Studien iiber Farbstoftbildung, bei Gewinnung
von Stoffwechselprodukten wird die Eigenwasserstoffzahl unbedingt zu
beachten sein. Das Verhalten der Virulenz, die Mutationsfrage lassen
sich mit dieser Methode bearbeiten.

Endlich gewinnt die Erforschung der Darmbakterienflora ein neoes
Arbeitsfeld. Die Besiedelung des Darmkanales mit Bakterien, die gerade
in der Padiatrie eine groBe Bedeutung besitzt, hSngt sicher mit der
Entstehung der Eigenwasserstoffzahl fur die betreffenden Arten zn-
sammen. So stimmt z. B. die Eigenwasserstoffzahl des Bifid us ther¬
ein mit dem haufigsten pH-Werte des normalen Brustmilchstuhles. Der
Bifid us kommt aber bei jedein mit Frauenmilch ernahrten Saugling
nahezu in Reinkultur vor. Es besteht also bei dieser Nahrung die M5g-
lichkeit, daB die Eigenwasserstoffzahl des Bifid us im Dickdarm ent-
steht und unterhalten wird. Bei Ernahrung mit einfacher Kuhmilch
dagegen verschwindet der Bifid us sofort. Aber auch die Wasserstoff-
zahl des Kuhmilchstuhles wird eine ganz andere, und zwar eine solche,
bei der der Bifid us nicht melir gedeihen kann.

Derartige Beobachtungen lenken die Aufmerksamkeit auch auf die
Beziehung der Infektion zur Eigenwasserstoffzahl. Es ist hochst wahr¬
scheinlich, daB eine pathogene Art nur daun den geeigneten Boden tindet,
wenn die Moglichkeit zur Entstehung ihrer Eigenwasserstoffzahl gegeben
ist. Wir wissen nun aus der Fermentlehre, daB auch die Zellfermente
ihr bestimmtes H-Ionenoptimum haben. Ist dieses vorhanden, so kann
z. B. ein der Zelle angebotener Nahrstoff gespalten werden. Wird es
aber nur wenig verschoben, so ist die Spaltung unvollkommen oder
verzogert, oder gar aufgehoben. Ist die fur das Zellferment ungeeignete
H-Ioneukonzentration aber gerade eine optimale fQr eine oder mehrere
an dieser Stelle vorhandene Bakterienarten, so belegen diese unter Um-
stiinden die vorhandenen Nahrstoffe mit Beschlag und konnen sich ver-

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Adam, Eigen was tseratoffzahl (dee H-Ionenoptimum) der Bakterien.

485

mehren. Wenn auch sicher noch andere Faktoren dabei mitspielen,
meine Studiea fiber die Ernahrungsphysiologie des Bifidus, die aa
anderer Stelle veroffentlicht werden, haben bereits ergeben, daB auch das
Augebot bestiramter Nahruugsstoflfe eine sehr wichtige Rolle spielt,
so bietet die Berficksichtigung der Eigenwasserstoflfzahl doch eine neue
experimentelle Grundlage, um die Frage der Iofektion auch mit physi-
kalisch-chemischer Methodik in Angriff zu nehraen. Es w&re natflrlich
verfehlt, nun alle biologischen Wechselspiele mit der Eigen wasserstoflf-
zahl erkl&ren zu wollen.

Zum SchluB mfichte ich noch einige Angaben fiber die eigentliche
Methodik machen. Das Wichtigste ist die Herstellung und Messung
bestimmter H-Ionenkonzentrationen. Die bisher geflbte Methode der
Bestimmung mittels Gaskettenmethode war urast&ndlich und zeitraubend.
Dagegen erleichtert die Indikatorenmethode von Michael is 1 ) ganz
auBerordentlich die Ausfuhrung zahlreicher Messungen. Ihre Brauch-
barkeit auch fQr die Untersuchung stark getrfibter Bakterienkulturen
kann ich durchaus best&tigen.

FQr die einfachsten VerhSltnisse genfigt der Zusatz von bestimmten
Essigsfiure- und Natronlaugemengen zur Herstellung von flttssigen Nfihr-
bdden mit verschiedenen pn-Werten. So kann man z. B. folgende

Reihe herstellen:

1. 2. 3. 4. 5. 6.

N/l Essigaaure 1,5 0,8 0,4 0,1 N/10 Eseigsaure 0,6 0,4

Ijackmusneutral-

Bouillon 8,5 9,2 9,6 9,9 9,4 9,6

7. 8. 9. 10. 11. 12.

N/10 NaOH 0,2 0,8 1,6 N/l NaOH 0,2 0,4 0,8

Lackmusneutral-

Bouillon 9,8 9,2 8,4 9,8 9,6 9,2

Die Messung der H-Ionen erfolgt in ebenso hergestellten Kontrollen
nach fertiger Sterilisierung. Man erhfilt mit obigen Reihen ungeffihr
folgende Werte:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12.

p H 4,1 4,45 4,7 5,5 5,8 6,4 7,0 7,75 8,15 8,6 8,6 8,7

Die in der Bouillon enthallenen Salze wirken nur kurze Zeit als
Puffer gegen die von den Bakterien gebildete Sfiure Oder Alkali, da sie
zum Teil zum Aufbau der Zelle verbraucht werden. Will man stfirkere
Pufiferung erzielen, so muB man sich eines Phosphat- oder Azetatge-
misches bedienen 2 ). Eine absolute Dauerpufferung, d. h. eine mehr oder
weniger vollstILndige, stetige Neutralisierung etwa gebildeter Sfiure, kann
man in einfachster Weise durch Zusatz von CaC0 8 erreichen, eine Me¬
thode, die schon in der Bakteriologie gebrauchlich ist. Um bei Anaeroben-
zuchtung gleichzeitig die Oberfiachenwirkung eines Adsorbens damit zu
verbinden, habe’ich mit gutem Erfolge erbsengroBe Marmorstfickchen ver-
wendet. Auf Marmor-Milchzuckerbouillon habe ich z. B. auch bei hoher
Zuckerkonzentration (bis zu 10 Proz.) das uppigste Wachstum des Bi¬
fidus erhalten 8 ). Der End-pH-Wert, welcher auf diesen Marmornfihr-

1) Mich&elis, Vereinfachung der Indikatorenmethode. (Dtsch. med. Wochen-
achrift. 1921. Nr. 17.)

2) Michael is, Die Wasserstoffionenkonzentration. Berlin 1914.

3) Adam, Ziichtung des Bac. bifidus auf Hamatinnahrbdden. (Zeitschr. f.
Kinderheilk. Bd. 29. 1921.

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Centralbl. t Bakt etc. L Abt Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

bflden entsteht, geht aber nicbt immer bis zum Neotralpunkte, teils vreil
die Oberflflche nicbt ausreichend mit der Saure in Berfihrung kommt, teils
weil sich unter Umst&nden schlieBlich eine Kruste von unldslichen Salzen
darum bildet. Will man eine vollstflndige Neutralisierung erreicben, so
verwendet man pulverisierte Kreide and rflhrt den N&hrboden 6fter$
auf, weil die Kreide zn Boden sinkt.

Hachdntek verbote*.

Kann der Paratyphus B abdominalls in klinischer, patho-
logisch-anatomischer, epidemiologischer und bakteriolo-
giscber Hinsiclit von der sogenannten Gastroenteritis para-
typhosa B abgetrennt werden?

[Ans dem Hygienischen Institut in Kiel (Direktor: Prof. KifikaltM
Von Dr. Wolf Gfirtner, Privatdozent, Assistent am Institut.

Mit 2 Kurven im Text.

Seitdem A chard und Bensaude (77), Schottmflller,
Kurth (103) u. a. einen Bazillus beschrieben hatten, der ein typhus-
Shnliches Bild hervorruft, wurden in der Folgezeit Erreger nachgewiesen,
die diesem biologisch und morphologisch auBerordentlich nahe standen.
Teils wurden sie bei Einzelffillen, teils bei Epidemien gefunden. Je mehr
Erreger solcher Art beschrieben wurden, zu denen nocb solche aus der
Tierpathologie traten, wurde es immer schwieriger, eine allgemeingflltige
Einordnung in ein bakteriologisches System vorzunehmen. Daher schien
es ratsam, die sich nahestehenden Erreger zu Gruppen zusammenzufassen.
Man spricht desbalb heute von der „Paratyphus B-Gruppe“ und stellt
ihr diejenige Gruppe gegeniiber, deren Vertreter viel aus kranken Tieren
gezflchtet wurden. Die letztere, sogenannte G fir tn er-Gruppe, ist
morphologisch und biologisch gegeniiber der 1. Gruppe gut abtrennbar.
In der Paratyphus B-Gruppe aber sind Erreger vereinigt, die zum Teil
aus Kranken gezflchtet wurden, die nicbt nachweislich mit krankem
Fleisch in Berflhrung gekomraen waren, die vielmehr ihre Erkrankung
auf gleiche Art erworben hatten, wie es fflr den Abdominaltyphus
charakteristisch ist; andererseits finden sich aber viele Erreger, die
flhnlich wie bei der Gflrtner-Gruppe aus Nahrungsmitteln, insbesondere
aus Fleisch stammen. Aber die Aufteilung der Erreger der Paratypbus-
gruppe in 2 Untergruppen bzw. die Schaffung von 2 gleichberechtigten
Gruppen stieB vornehmlich deshalb auf Schwierigkeiten, weil bei rein
bakteriologischer Betrachtung nicht genflgend Charakteristika vorzuliegen
schienen. Immerhin ist es der Muhe wert, diese Frage erneut zu prufen.
zumal bei der klinischen, pathologisch-anatomischen uud auch bei der
epidemiologischen Betrachtung verschiedene Krankheitsbilder vorliegep.
Im allgemeinen unterscheidet man bier 2 bzw. 3 besondere Formen, die
man mit Schottmflller (31) folgendermafien benennt: 1) Paratyphus B
abdominalis, 2) Gastroenteritis paratyphosa B, 3) Cholera nostras para-
typhosa. Die Abtrennung der Cholera nostras von der gastroenteritischen
Form ist nicht so scharf durchfuhrbar wie gegeniiber der typhflsen Form

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 487

uad wird nicht mehr strong innegehalten. Die beiden hauptsSchlichen
Krankheitsbilder sollen von ein und demselben Erreger herrfihren, and
os sind eine Reihe von Ansichten in der Literatur niedergelegt, die zu
erkl&ren suchen, weshalb einmal dieses, das andere Mai jenes Krankheits-
bild zur Entwicklung kommt. Es sei bier an die Arbeiten von Htlbner (95),
HQbschmann (8), Roily (27), Schottmfiller (31), Trautmann (128,
129) u. a. erinnert Die wesentlichen Momente werden in der ver-
scbiedenen Wirksamkeit der Toxine, in der Masse der aufgenommenen
Erreger und in der Reaktionsfahigkeit der befallenen Individuen erblickt.
Anffallend bleibt aber trotz aller Erklarungsversuche,
daB es relativ haufig Epidemien gibt, die entweder nur
das typhfise oder nur das gastrointestinale Bild darbieten
(s. w. u.). Demgegenfiber sind einzelne Massenerkrankungen bescbrieben,
die beide Arten dargeboten haben sollen. Hierin gehSrt die von Levy
[zit. nach Uhlenhuth und Hfibner (130)J beobachtete Epidemic, bei
der innerhalb einer Familie 6 Kranke das toxische Bild darboten und
1 Fall das typhose; ferner die von Prigge und Sachs-Mfike (115),
bei der neben mehreren gastroenteritischen Erkrankungen 1 einen typhus-
ahnlichen Verlauf nahm. Aehnlich ist die von Jakob (96) bescbriebene
Epidemie. Hierzu treten noch 2 Epidemien nach dem Genufi von SflB-
speisen. Bei ihnen kamen hauptsSchlich typhfise Formen vor, die aber
mit solcben vermischt waren, die man als gastroenteritische anzusprechen
pflegt [Walser (135), Hamburger und Rosenthal (41)]. Im ein-
zelnen wird auf die hier geschilderten Verhaltnisse bei Betrachtung der
Epidemiologic eingegangen.

Im Kieler Hygienischen Institut wird nun seit Jahren versucht,
sowohl die einzelnen Ffille, wie auch die zur Kenntnis kommenden
Epidemien danacb zu trennen, ob eine typhfise Oder eine gastro¬
intestinale Form vorliegt. Aus den Arbeiten von B. Fischer (85, 86),
Reiner Mfiller (66, 111), L. Bitter (52, 80, 81) und G. Wagner
(131—134) geht hervor, daB mit einer an Sicherheit grenzenden Wahr-
scheinlichkeit eine bakteriologische Differenzierung der beiden haupt-
sacblichen Krankheitsbilder vorgenommen werden kann. Die systematische
Untersuchung hat ergeben, daB bei der typhosen Erkrankung (Para¬
typhus B abdominalis) das Bact. paratyphi B (Schottmfiller) gefunden
wird, daB dahiogegen bei der sogenannten Gastroenteritis paratyphosa
der von Kaensche (59) aus dem Fluggeschen Institut beschriebene
B. enteritidis Breslavensis als Erreger anzusprechen ist. Letz-
terer ist als identisch mit dem Aertrykstabchen anzusehen.

Diese Trennung wurde nicht nur im Untersuchungsamt durchgefiihrt, sondern
auch gegenuber den einsendenden Kliniken und Aerzten. Somit sind seit Jahren die
einsendenden titellen an diese hier gciibte Differenzierung gewohnt, und es ist sicherlich
kein Zufall, daB sich auch in der klinischen Beurteilung der Krankheitsfaile diese
Trennung durchecsetzt hat. Zur Illustration mag folgendes dienen: Bei akut ein-
setzenden Krankheitsfallen, die mit Durchfallen, Erbrechen und einem toxischen
Krankheitsbild einhergchen, senden die Aerzte das Material mit der Bitte um Unter¬
suchung auf „Fleischvergifter“ oder auf „Bact. Breslav 1 * oder G artner ein. Es koramt
neuerdings iramer seltener vor, dad bei derartigen Fallen an uns die Anfrage auf Para-
typhusbazillen gestellt wird. Insbesondere ist diese Art der Differenzierung von der
hiesigen medizinischen Klioik aufgenoramen worden, wie aus der Arbeit von tic hi tten-
helm (1 IS) zu entnehmen ist. tielb-dverstandlicb ist eine klinische Verwechselung mit
einem durch das Bact. en teri tid is Gartner erzeugten Krankheitsbild nieauszuschlieden,
da eine Trennung dieser Krankheitsbilder kauin jemals am Krankenbett bzw. in der
Bprechstunde moglich sein diirfte. Daher hat sich hier die Zusammenfassung des
klinisch bedingten Begriffs: Fleischvergifter auf das Bact. enteritidis Bres¬
lavensis und Gartner zu erstrecken.

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488

Centralbl. f. Baku etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Zur Prflfung des wichtigsten Punktes, namlich ob eine Trennung
der beiden Krankheitsbilder flberhaupt dnrchfflhrbar ist, sollen neben
der bakteriologischen Betrachtung auch die klinische, die pathologisch-
anatomische und die epidemiologische herangezogen werden. Denn wenn
sie zu Recht besteht, so rauB sie in gleicher Weise bei diesen 4 Unter-
suchungsmethoden durchfuhrbar sein. Hierbei ist spezielles Angenmerk
auf die sogenannten Uebergangsformen zn richten.

Elinik der „paratyph6sen“ Erkranknngen.

Von Schottmttller (31), Jochmann (98),.Roily (27, 117) u. a.
liegen so eingehende Beschreibungen der verscbiedenen Krankheitsbilder
vor, dafi hier nur die fur das vorliegende Thema wichtigen Pnnkte hervor-
gehoben zu werden brauchen.

Die typhose Form setzt nach iibereinstimmenden Ansichten vieler Autoren und
nach den Beschreibungen der Epidemien relativ haufig mit gastrointestinalen Symptomen
ein, die von Temperatursteigerung, eventuell auch von Schuttelfrost begleitet sind. Dabei
bestehen Kopfschmerzen, Uebelkeit, Erbrechen. Die Zahl der Durchfalle erreicht nur
auSerst selten die Zahlen wie bei der gastrointestinalen Form. Meist werden diese
initialen Symptome, die schon wenige Stunden nach der Infektion auftreten, nicht in
vollem Mafie erfafit. Die Erkrankten kommen erst dann dem Arzt zu Gesicht, wenn
die Erscheinungen den typhosen Charakter darbieten. Immerhin ist dieser Einsatz, dem
ich aus spater darzusteilenden 'Griinden eine besondere Bedeutung zumesse, oft beob-
achtet una beschrieben worden. Am deutlichsten ist er aus Fieberkurven derjenigen
Falle zu entnehmen, die von Anbeginn der Erkrankung in arztlicher Beobachtung

standen. Es liegt in der Natur der Dinge, dafi uuter militarischen Verhaltnissen der
Krankheitsbeginn besser erfafit werden kann. Aber auch sonst wird der beschriebene
Einsatz beobachtet. So beschreibt Roily (27) einen Fall, der nach dem 30. Tag im
Krankenhaus an Paratyphus erkrankte. Nach den heutigen Kenntnissen uber die In-
kubation bei echtem Paratyphus B mufi man annehmen, dafi die Infektion im Kranken>
haus erfolgt ist. Nach anderweitigen Beobachtungen mochte ich schliefien, dafi die
Infektion wenige Stunden vor dem akuten Einsatz erfolgt iet. Auch Jochmann
bildet eine derartige Kurve ab (p. 83), ebenso Htibner (95) (p. 165), und Otto (68«
(Kurve 7), sowie Mann und Pette(12) (Kurve7), Stephan (124) Kurve 1), Freund(88)
(p. 328), de Feyfer und Kayser(38) (Fall 5). Ferner finden sich unter den von Kon-
rich (44) abgebildeten Kurven solcne, die einige Tage vor Einsetzen der typhosen Fieber-
kurve derartige Temperatursteigerungen erkennen lassen. Nachstehend ist eine solche
Kurve wiedergegeben, die hier beobachtet wurde. Im 1. Fall handelt es sich um die
Erkrankung eines Arztes, San.-Rat Dr. B. Er hatte am Abend des 27. Sept einen
Buckling gegessen, der nach den angestellten Nachforschungen als Infektionsquelle an-
gesehen werden raufi. In der Nacht stellten sich Durchfalle ein, die sehr heftiger Natur
waren und mit Tenesmen einhcrgingen. Sie dauerten am folgenden Tag iu gleicher
Starke fort Wie aus der Kurve zu entnehmen ist, bestand Fieber, das aber nach
3 Tagen abfiel. Gleichzeitig fiihlte sich der Kranke subjektiv besser. Der vorher zu
Rate gezogene Arzt hatte inzwischen Blut und Stuhl mit der Bitte um Untersuchung
auf B. „Breslau u eingeschickt. Hier wurde jedoch ein Bakterium geziichtet, das in
alien seinen Eigenschaften, einschliefilich der fehlenden Mausepathogenitat, dem echten
B. paratyphi B entsprach. Der einsendende Kollege war, wie er zunachst selbst
zugab, nicht von der Richtigkeit der bakteriologischen Diagnose uberzeugt und sandte
noch mehrmals Material ein, aus dem aber jedesmal der gleiche Erreger geziichtet wurde.
Als dann an den sturmischen Einsatz sich ein rein typhdses Bild anschlofi, erkanote
er die hier gestellte bakteriologische Diagnose an. Der weitere Verlauf der Erkrankung

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Gartner, Paratypku* B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 489

entsprach dem Bilde eines mittelschweren Falles. Es bestand Milztumor, dahingegen
fehlten Roseolen.

Ein ahnlicher Fall kam hier jungst auf der Wochenstation eines Krankenhauses
zur Beobachtung. Nach vollig norraaler Geburt bekam die Frau plotzlich Durchfiille;
es traten Temperaturen auf, der Fall bot den Eindruck einer schweren Erkrankung.
Man dachte zuerst an eine septisehe Infektion. Das Fieber Bank zunachst ab und ale
es sich dann wieder erhob, achopfte man Verdacht, dafi eine typhose Erkrankung vorlage.
Hier wurde B. paratyphi B geziichtet. Der weitere Verlauf entsprach vollig dem
eines Typhus.

Dieser akute „gastrointestinale“ Einsatz ist besonders schon aus den Kurven 2,
3, 4, 6, 8, 9, 10 und 12 der von Hamburger und Rosenthal (41) beschriebenen
Epidemie unter Militarpersonen zu sehen (a. w. u.).

Die zeitliche Dauer dieses gastroin testinalen Einsatzes schwankt zwischen 1 bis
4 Tagen. Die Temperatur kehrt gelegentlieh vollig bis zur Norm zuriick, in anderen
Fallen einkt sie nur auf 37 °, dann schliefit sich die eigentliche Typhuskurve an.

Die Dauer der Erkrankung schwankt und ist im allgeineinen von der Schwere
des Falles abhangig. Schottmiil ler (31) hat die durschnittliche Dauer auf 21 Tage
berechnet. Die abortiven Falle pflegen nur einige Tage zu dauern, ohne dafi es zu einem
eigentlichen Krankcnlager kommt. Schon hier sei bemerkt, dafi es akut einsetzende
„gasfcrointestinaie“ Formen gibt, deren typhoses Bild abortiv verlauft. Diese, allerdinge
selteneu, P'alle beansprucben ein besonderes intereese, weii sie innerhalb tvphos
verlaufender Epidemien den Eindruck erwecken konnen, dali hier
echte gastroin testinale Verlau fsformen vorlagen.

Die Inkubation der paratyphosen Erkrankungen betragt im Durchschnitt 4—6 Tage.
In denjenigen Fallen, die einen gastrointestinalen Einsatz darbieten, ist die Iukubatiou

^Kurve 2.

f /T * ^ ' S •' S* r ' ' * ? ■ ' ' r * $

auf wenige Stunden reduziert. Aber auch in diesen Fallen setzt das typhose
Bild mit der sonst ublichen Zeitspanne von rund 6 Tagen ein.

Von den weiteren Symptomen aei hier auf die Roseola eingegangen. Sie wird
nicht in alien Fallen gefunden. So sah sie Konrich nur 5mal unter 18 Krankheits-
fallen einer Epidemie, die auf der Kinderabteilung der Jenaer chirurgischen Xlinik aus-
gebrochen war. Im allgerneinen trat sie zwischen dem 6. und 10. Tage auf. Gelegent-
lich wird berichtet, daB sie eine sehr starke Ausbreitung darbietet. Bilder bringen
Jochmann (98) und Hamburger und Rosenthal (41).

Die Milz wird nicht sehr einheitlich beurteilt. Die Mehrzahl der Untersucher
spricht sich dahin aus, dafi die Milz auf der Hohe der Krankheit zu fiihlen ist. Ihre
Konsistenz ist nach Jochmann (98) derb.

Der Krankeitsverlauf ist in einer nicht unerheblichen Zahl der Falle leicht bzw.
uncharakteristisch, worauf bei der Besprechung der Epidemiologie einzugehen ist. Er-
krankungen, die zu lokalen Prozessen fiihren (Abszesse usw.), sind keineswegs selten.

Die Gastroenteritis paratyphosa ist in ihren klinischen P>scheinungen von
den gleichen Autoren beschrieben, die auch die typhose Form geschildert haben. Hinzu
tritt die spezielle Beschreibung 8 ch i 11 en hel m s (118).

Der Einsatz ist stets ein plotzlicher: 6—12 8td. nach dem Genufl des infektidsen
Nahrungsmittels treten Uebelkeit, P^rbrechen, Kopfechmerz und Durchfiille ein. Letztere
konnen bis zu 40 in 24 Std. betragen. Vielfach sind sie mit ausgesprocbenen Tenesmen
verkniipft. Die Temperatur steigt sogleich an und erreicht in schweren P'allen 40° und
darilber. Der Einsatz der Erkrankung ist in den meisten Fallen abhangig von der
Menge der aufgenommenen und inlizierten Nahrung. Die Dauer des Fiebers schwankt
zwischen 3 und 10 Tagen, moist iiberschreitet es jedoch nicht die Dauer von 4—5 Tagen.
Der Abfall der Temperatur erfolgt hiiufig kritisch und es kann zu deutlichen sub-
norm alen Temperaturen kommen. lu gleicher Weise kehrt dieser Temperaturabfall
bei der sog. choleraahnlichen P'orm wieder und fehlt stets beim Paratyphus B abdominalis.

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490

Centra!bL f. Bakt. etc. i. Abt. Originate. Bd. 87. Heft;]7/8.

Auffallend ist die Zirkulationsschwache, auf die neuerdings Schi ttenhelm (118)
hinweist. Der Puls ist schwach, kaum fiihlbar. In den Fallen mit reichlichen Durch-
fallen macht sich der Wasserverlust bemerkbar. Wadenkrampfe konnen auftreten, die
Stimme wird aphouisch. Die Kranken werden sehr hinfallig.

Diese Falle werden meist in der Literatur als Cholera nostras paratyphosa be-
zeichnet. Sie sind die Todesform der Gastroenteritis. Diese Todesfalle werden our bei
Epidemien mit gastroenteritischen Krankheitszeichen gefunden, soweit sie nicht als
sporadische Falle in die Erscheinung treten. Bei typhos verlaufenden Epi¬
demien ist bisher kein derartiger Todesfall beschrieben. Die sonstigen
todlich verlaufenden Falle von Gastroenteritis sterben an den Folgen der Intoxik&iion,
die den Kreislauf und die parenchymatosen Organe schadigt. Die Intoxikation macht
sich ofters an den Nieren bemerkbar, indem sie hier zu einer Nephritis fiihrt [Joch-
mann (98), Schitteuhelm (118), Ruge und Rogge (70) u. a.].

Eine typische Roseola ist meines Wissens nie beschrieben, wohl aber vereinzelt
eine urtikarielle Eruption in den allerersten Erkrankungstagen. Sie ist sicherlich einer
Roseola nicht gleichzusetzen, da man sie als eine toxische Erscheinung auffassen mo£
[Jochmann (98)]. Sie hat eher Beziehungen zu den Arzneiexanthemen. Eine Milz-
vergrofierung wird relativ selten beschrieben. Sie ist nur selten ausgesprochen pal-
pabel, perkutorisch lafit sie sich ofters nachweisen.

Die Rekonvaleszenz gestaltet sich in der Regel giinstig. Nacbkrankheiten werden
kaum beobaehtet. Bitter (52) berichtet, dafi 2 Falle der Alakrelenepidemie, die eine
hinausgezogerte Rekonvaleszenz hatten, keinerlei Anzeichen einer typhosen Erkrankung
darboten. Erkrankungen, die mit lokalen Froze seen einhergehen, sind nach dem
gastroenteritischen Krankheitsbild noch nicht beobaehtet.

Stellt man die beiden hauptsachlichen Krankheitsbilder gegenflber.
so zeigen sie wesentlich verschiedene ZGge. Nur insofern kann eine
Aehnlichkeit vorget&uscht werden, als beim Paratyphus B abdominalis
wenige Stunden nach Aufnahme des infizierten Nahrungsmittels ein
gastroenteritischer Krankheitsbeginn zustande kommt, der aber nach der
fur Paratyphus B-Infektionen charakteristischen Inkubation von einem
typhosen Bild gefolgt wird.

Pathologische Anatomic der beiden Krankheiten 1 ).

B Wer den Versuch untemimmt, das gesammelte, zurzeit vorliegende Material an
einzelnen Sektionsergebnissen neb>t den allgemeinen Ableitungen der Autoren zu sichten,
urn daraus den Typus fur das Sektionsbild der Erkraukung abzuleiten, gerat in em
Labyrinth von VViderspruchen und betindet sich bei deru Versuch, den leiteuden Faden
der GesetzmaOigkeit zu finden, bald in einer sich fast bis zur Mutlosigkeit steigernden
Verlegenheit. tt Diese VVorte Picks (17) wird jeder UDterschreiben, der sich mit dt-m
vorliegendcn Thema befafit, und man geht sicherlich nicht zu weit, wenn man die
Worte auch auf die Klimk, Epidemiologie und Bakteriologie ausdehnt.

Erst bei eingehendem Studium gelingt es einige Richtlinien herauszuschilen.
Berucksichtigt man lnfektionsalter, Schwere der Infektion, interkurrierende Einfliisse
usw., so treten auch in der paikologischen Anatomic die beiden im klinischen Teil be-
schriebenen Bilder scharfer hervor. Aber neben dicsen sind noch andere beschrieben,
die dem einen oder dem anderen mehr odcr weniger gleichen. Insbesondere seien die-
jenigen Formen erwahnt, die unter dem Bilde emer Ruhr verliefen, bei der Sektioo
ruhrartige Darmveranderungen darboten, aber in der bakteriologischen UntersuchuDg
Paratyphus B-Bazillen ergabeu. Solche Falle hat Stephan (124) beschrieben, auch
Sluka und Strisower (122) leiten solehe Falle aus ihren klinisch-epidemiologischen
Betrachtungen ab. Bei Koh 1 i sch (101) finden sich gleichfalls ahnliche lleberlegungeu.
Beitzke (l), der 2 Bektionen dieser Art sah, nimmt — sicherlich mit Recht — kom-
binierte Krankheitsbilder an. Er warnt davor, Ruhr deshalb auszu$chlie£en, weil ihre
Erreger nicht bakteriologisch nachgewiesen wurden. Bchittenhelm (118) hat bei
derartigen Fallen den Emdruck gehabt, dab Mischinfektionen vorlagen. Auch ein F&li
von Herxheirner (7) gehort hierher. Bternberg (125), der iiber ein reichhaltiges
Bektionsmaterial verfugr, hat ebrnialls 6 solcher Fiille beschrieben. Er rechnet sie
selbst nicht zum eigentlichen Bilde des Paratyphus B. Ganz im Binne dieser Ueber-
legungen sprechen die Bektionen Picks (17), der bei 4 Fallen neben Para B Bak tenor
auch Ruhrerreger kulturell nachweisen konnte. Einen ahniichcn Fall hat A. Bauer (Tv

1) Zusammenfassende Darstellungen s. bei fliibschmann (8), Loele (2Si
Sternberg (125).

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 491

serfert und beschrieben. Diese Falle betreffen Sektionen, die im Felde gemacht wurden,
und es ist hinlanglich bekannt, daB im Felde Mischinfektionen recbt haufig beobachtet
wnrden; es sei bier an die Feststellungen Meggendorfers erinnert Ich babe daher
diese Falle nicht mit in die Betrachtung hineingenommen, weil icb mich bierzu durch
die Untersuchnngen Picks (17), Bauers (79) und Sternbergs (115) berechtigt
balte.

In den Tabellen I und II sind die Sektionen ausschlieBlich nach dtm patho-
logischen Befund geordnet. Diejenigen Falle, die nicht binreicbend genau anatomisch
beschrieben sind, und diejenigen, die in den vorliegenden RefeTaten nicht klar den Be¬
fund erkennen lieBen, mufiten weggelassen werden. Fiir das, was hier gezeigt werden
soli, reicht das vorliegende Material aus.

Bezuglich des Geschlechts laBt sich — auch bei Beriicksichtigung der nicht zur
Kriegszeit gemachten Sektionen — nichts Beetimmtes aussagen. Bezuglich des Alters
ergeben sich gleichfalls keiue wesentlichen Gesichtspunkte, die nicht durch die Infektions-
gelegenheit erkiart werden konnten. Auffallend ist vielleicht die relativ hohe Zahl der
Kinder und der alten Personen bei der Gastroenteritis, zumal bei der typhosen Form
die Kinder fast vollig fehlen.

Bei der Gastroenteritis liegt der Todestag in den ersten 6 Tagen. Bei den Fallen
mit typhosem Krankheitsverlauf liegt er meist nach dem Ende der 2. bis in die 4. Woche
hinein. Sicherlich ist nicht in alien Fallen der Todestag absolut richtig. Aber man
wird eher annebmen durfen, daB er falschlich zu frtih gelegt wird, zumindest bei der
typhosen Erkrankung, da der Infektionstag hier viel schwerer zu fixieren ist, als bei
der gastroenteritisohen. Fall I von Hiibschmann (8), der auch in anderer flinsicht
Besonderheiten darbietet, kann hier nicht verwertet werden, weil er an einet operativen
Blutung (bei bestehendem Ikterus) zugrunde ging. Ebenso fallt der Fall von Buday (3)
aus dem Rahmen; hier trat der Tod durch Embolie in der Rekonvaleszenz ein. (Phlebi-
tiden bzw. Thrombosen sind bei Paratyphus wiederholt beschrieben worden [Sick(121)]
und erklaren so derartige Todesfalle). Fall II von Bei tzke (1) starb an einer Stapnylo-
kokkenpleuritis, auch hier ist der Todestag nicht zu verwerten.

Die klinischen Symptome sind leider in vielen Fallen recht sparlich, so daB
sie oft keinen RuckschluB gestatten. Hier tritt stdrend hervor, daB jede Disziplin die
sie interessierenden Facta in den Vordergrund stellt, wodurch die zusammenfassende Be-
arbeitung sehr erschwert wird.

Ich habe mit Stichworten die Angaben tabellarisch zusammengestellt.
Tabellen konnen naturgem&ft Sektionsprotolle nicht ersetzen, aber da
die Lektflre so vieler Beschreibungen die Uebersicht erschwert, muBte auf
diese Art der Darstellung zuruckgegriflfen werden.

In Tab. I findet sich ein vornehmlich typhbses Krankheitsbild. Soweit
Angaben dariiber vorliegen, sind Roseolen, Milzvergrofierung und Leukopenic aufgefiihrt.
In einem Fall war eine Peritonitis infolge Perforation eines Geschwiires eingetreten.
Hier sei angefiihrt, daft sowohl Heidler (92) wie auch SuBenguth (127) solche para-
typhose Peritonitis in Heilung iibergehen sahen. In dem Fall von SuBenguth (127)
liefi sich bei der Operation ein Geschwiir nachweisen, das kurz vor der Perforation
stand und bezuglich seines Sitzes einem Peyerschen Haufen entsprach.

Der Sitz der Darm geschwiire entspricht in vieler Beziehung dem Bild des
Typhus. Die Geschwiire entsprechen im allgemeinen der Stadieneinteilung beim Typhus.
*/, aller hier wiedergcgebenen Todesfalle bieten diese Geschwiire dar, und wenn man
diese zu dem Todestag in Beziehung bringt, so entsprechen sie etwa der 2. Woche.
Auf der anderen Seite finden sich unter den Fallen, die keine Geschwiire darbieten,
solche, die nur eine markige Schwellung der Lymphknoten erkennen lassen; diese Falle
kamen also im 1. typhosen Stadium zu Tode. Das 3. Stadium, das der Vernarbune
bieten der Fall 4 von Marchand (13) und Fall 2 von Rings (18) dar. Gelegeotlich
finden Bich Geschwiire, die nicht so unbedingt wie bei Typhus an den lymphatischen
Apparat gebunden sind. Hierroit in Verbindung steht wohl auch, daB die mesenterialen
Lymphdriisen nicht so sehr in Mitleidenschaft gezogen sind. Die Schwellung der
Follikel und der Peyerschen Haufen wird selten vermiBt, aber sie hat nicht immer
den ausgesprochcn markigen Charakter, der fur Typhus bezeichnend ist. Haufiger
als beim Typhus linden sich Geschwiire im Dickdarm [Brion und Kayser (2),
Ellermann (5), Buday (3), Luksch (11), Burckhardt (4), Jaff6 (9), Herx*
heimer (7) u. a.]. Ein Milztumor ist offers gefunden, aber er ist auch nicht von der
Beschaflenheit der Tvphusmilz. Gegeniiber dem Typhus ist noch zu bemerken, daB
die alJgemeine Enteritis ausgesprochcn ist. Hierauf weist besonders Herxheimer (7)
hin, aber auch in verschiedenen anderen Sektionsprotokollen ist diese Enteritis, die neben
den typhbsen Gesehwiiren besteht, zu finden. Hier ist ein Zusammenhang mit

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Weis xl. Bcott iTyphusRhnl. Verlauf. Oberfl. Oeschw. nicht im Bereich der P. H. vergr.

S . Journ. of infect.] Darmblutung.

•mo* 1904. 1

Gartner, Paratyphu6 B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 495

den anfanglichen Durchfallen unverkennbar. Besonders charakteristisch ist Fall 3 tod
Beitzke (l). In etwas gekurzter Darstellung lautet das Protokoll folgendermafien:
Mmketier H., 18 J., erkrankt 10. Marz 1918 mit Dttrchfall, Kopf- und Leibschiuerzen,
Schut tel frost. Lazarettaufnahme 11. Marz mit 39,7°, Puls 81, ciikrot Einzelne bron-
chitiache Gerausehe. Leib maBig gespannt, druckempfindlich, Milz fuhlbar. Erbsbrei-
artige, diarrhoische Stiihle. 14. Marz Entfieberung, geformte Stiihle; 21. Marz erneuter
Fieberanstieg, Kontinua. Stuhl wird wicder schuppenartig (?), Benommenheit, Roseolen,
kein Diazo, am 23. Marz Paratyphus B Bazillen im tilut nachgewiesen. Tod am 31. Marz.

A us dein Sektionsprotokoll: „Magen fast leer, weit; im Fundus stark getullte
Kapillaren, am Magenausgang einige kleine Blutpunkte in der Schleimbaut. Duodenum
weit, schlaff. gallig. Auf der Hohe einiger Falten kleine Blutungcn. Die Schleimbaut
des oberen Dunndarms ist sehr feucht, leicht gerotet, 6cblaff, hie und da kleine Blut¬
punkte. Darrainhalt breiig, gelblichgrun. In den tieferen Dunndarmabscbnitten wird
die Farbe der Schleirahaut ein ganz dunkles Rot. Hie bat ein samtartiges Aussehen.
Die zusamraenstebenden Lymphknotchen sind ganz leicht geschwellt, ubernll von un-
versehrter Schleimhaut uberzogen. Die einzelnen Lympbknoten springen haufig knopf-
artig in die Darmlichtung vor, sind stecknadelkopf- bis linsengrofi. Im allgemeinen
sind sie graurot, ganz vereinzelt jedoch gelblichweiB und zeigen dann beginn nde Substanz-
verluste an der Oberflache. Diehl vor der Bauhinschen Klappe eine Menge solcher
oberflaehlich nekrotisch geschwellter, grauweiBer bis graugelber Lympbknoichen. Auch
die Schleimbaut im auf^teigenden Dickd&rm und Querdarm stark gerotet. Fast iiberall
finden sich HnsengroBe, vorspringende Lymphknotchen, die stellenweise nekrotisch, grau-
gelblich sind. Besonders an den Flexurstellen treten solche zerfallende Knotchen ver-
mehrt auf.“

Hier zeigt sich deutlich ein Nebeneinander von beginnenden typhSsen
und von enteritischen Veranderungen, die wohl zwanglos durch die auf-
einander folgenden Krankheitsbilder erklfirt werden konnen.

Derartige enteritische Veranderungen bieten nicht nur bezQglich der
pathologischen Abtrennung des Paratyphus vom Typhus ein besonderes
Interesse, sondern sie scheinen mir darflber hinaus einer genauen Analy-
sierung wert, um die sogenannten UebergSuge zur Gastroenteritis zu
verstehen. In vielen Fallen wird der akute, toxogen bedingte Einsatz
ohne bleibende Folgen verlaufen, aber wie bei alien anderen Darm-
erkrankungen organische Irritationen angenommen werden mflssen, so
wird man sie hier nicht ausschlieBen konnen. Jedenfalls scheint mir hier
der Schliissel znm Verstandnis der Uebergangsformen zu liegen.

Zu den weiteren Symptomen, die Aehnlichkeit mit dem Typhus haben, gehoren
die eogenannteq Typhuszellen, die vornehmlich in den Mescnterialdrusen zu finden
sind und groBe, vakuolenreiche, in phagozytischer Tatigkeit bogriffene Zellen darstellen.
Leider ist nicht in alien Fallen auf sie geachtet worden, aber sie werden bei darauf ge-
richteter Aufmerksamkeit kaum vermiBt [Beitzke (1), Buday (3), Burckhardt (4).
Sternberg (125)].

Hier diirfen die miliaren Lebernekrosen erwahnt werden, die gleichfalls
dem Bilde des Typhus entsprechen. Sie stellen bedeutendere Oder geringere Men gen
von epitheloiden Zellen, kleinen Rundzellen oder Leukozyten dar, die haufig von kleinen
Hamorrhagien begleitet sind [Pick (17), Lewy (110), Beitzke (1), Burckhardt (4).
Bauer (79), Hubschmann (8), Jaff6 (9, 97), Longcope (10), Sternberg (125)).
In der Regel sind sie nur m kroskopisch sichtbar, konnen aber auch makroskopisch
sichtbar sein, wie aus der Beschreibung und dem Bild von Pick (17) hervorgeht. Leider
ist auf diesen Befund gleichfalls nicht regelmaBig geachtet worden 1 ).

Bei der gastroen teritischen Erkrankung fehlfc in der Vorgeschichte aus-
nahmslos die Roseola. Die Anamnese wird vollstandig von schweren Durchfallen und
Tenesmen beherrscht. Wiederholt haben diese Durchliille einen choleraartigen Eindruck
^eraacht. Es darf erwahnt werden, daB in einigen Fallen, die in Kiel zur bakterio-
logischeo Untersuchung eingingen, die Fragesteilung auf Cholera und auch auf Arsen-
vergiftung lautete. Pathologisch-anatomisch im Vordergrund stehen naturgemiiB
die gastrointestinalen Veranderungen. Der Magen zeigt fast ausnahmslos einen

1) Hier sei insbesondere auf die Arbeit von Wagner und Emmerich (134):
„Experi men teller Paratyphus (A und B) durch Gallenbiaseninfektion** verwiesen. Sie
konnten bei Meerschweinchen die analogen Veranderungen in der Leber nachweisen.
Daselbst bildliche Wiedergabe der Nekroseherde5

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 499

schweren Katarrh, vereinzelt wird eine Gastritis purulenta bericbtet. [Habscbmann (8) r
Beitzke(l), Bracbt (22)]. Die Veranderungen der Darmschieimhaut sind im
gToflen und ganzen ziemlieb einheitlicb: Starke Schwellung und Rotung, vereinzelte
Blutungen greifen ausnahmsios auf den Dickdarm tiber. Gelegentlich finden sich
kleine Gescbwure, nur in 5 Fallen von 30 fctektionen; sie bieten aber sowohl nach Grfifie
als aucb nach Konfifforation ein ganz anderes Bild dar als die typhbsen. Charakte-
rietisch fiir diese Erkrankung sind die Blutungen in die DarniFchleimhaut. Sie
werden aber auch auf der Darmserosa, im Kierenbecken, in der Harnblase und auf der
Pleura und dem Epikard gefunden.

Die me8enterialen Lymphdriisen und die Milz sind im allgemeinen von
normaler Grtifie oder nur wemg vergrofiert.

Die sog. Typhuszellen und die Lebernekrbsen sind in keinem Fall be-
schrieben.

Epidemiologic (s. Tab. Ill und IV).

Die Epidemien mit gastroenteritischen Erscheinungen iibertreffen
sowohl der Zabl als auch der Grdfie nach diejenigen mit typhdsen Er¬
scheinungen. Anch die absolute Zabl der Toten ist bei der 1. Er¬
krankung grOBer. Demnach darf man schlieBen, daB der Verlauf ein
eindrucksvollerer sein muB. Sie fordern daher zur Bearbeitung und zur
Beschreibnng auf. Diese Ueberlegung scheint nicht unwichtig, denn die
Tfitigkeit der Laboratorien zeigt ein anderes Bild. Hier stehen die Einzel-
f&lle ira Vordergrund, bei entsprechenden Erkundigungen erfabrt man,
daB diese eiuen typhSsen Charakter tragen und daB sie vereinzelt ge-
blieben sind. Bei gehauften Fallen wird man, entsprechende Nach-
forschungen vorausgesetzt, beide Krankheitsformen antreffen kdnnen,
aber ein Vorkommen beider Formen zu gleicher Zeit, bei einer Epidemie
wird man so gut wie nie beobachteu. Nur selten werden die bakterio-
logischen Stellen den akuten Einsatz an ihrem Material allein beobachteu
kronen. Man ist daher auf die spStere epidemiologische Erfassung der
Fille angewieseu. Das vorliegend gegenfibergestellte Material zeigt
diese Verscbiedenheit in sehr ausgesproebenem Mafie, insofern als die
gastroenteritischen Epidemien akut und plfltzlich einsetzen,
wahrend die typhosen niebt so akat und nicht so schlagartig beginnen.
Besonders bei den durch Wasser bedingten Epidemien ziebt sich die
Erkrankungszeit tiber mehrere Tage Oder Wocben bin. Im allgemeinen
sind die Eins&tze der Nahrungsmittelepidemien auf einige Stunden oder
1—2 Tage zusammengedrUngt; langere Infektionszeitr&ume sind aus-
gesprochen selten.

Zu letzteren gehort die tod Matthes, Wollenweber und Dorsch (29) be-
sebriebene Fleischepidemie im Regierungsbezirk Arnsberg. Hier war das anscheinend
sehr stark bakteriell durchsetzte Fleiscn im Verlauf menrerer Tage an verschiedenen,
auseinanderlregenden Orten in die Hande der Konsumenteu gekommen und hatte so
einen protrahierten Epidemieeinsatz vorgetauecht. Ganz abnlich ist der epidemiologische
Ablauf der kleinen von uns in Kiel beobachteten Epidemie (s. Tab. IV). bei der ein
Geheimscblacbter verschiedenen Fleischern Fieisch eines anscheinend kranken Tieres
mZUT Wurstbereitung“ abgab. Aber betrachtet man den Krankhcitsheginn in bezug auf
aie Nahrungsmittelaufnabme, so zeigt sich auch hier die plotzliche Erkrankung kurz
nach dem GenuB der ypeisen. Ganz ahnlich liegen die Nahrungsmittelepidemien nach
GenuB von Mehl- und SuBspeisen, wenn die Abgabe nicht mit einem Male beendet war.
Am klarsten lassen sich die verschiedenen Epideraietypen bei den Trup|>enteilen beob-
achten; es sei hier auf die Saarbriickener Paratyphu>»epidemie (35—37) auf der einen
und anf die Greifswalder Epidemie (75) auf der anderen Seite verwiesen. Eines darf
man allerdiugs auch beim Militar nicht vergessen, daB man namlicb die Angaben ein-
seiner Leute mit Vorsicht aufnehmen muB, weil es immer solche gibt, die kraftiger als
ihre Kameraden sein wollen und daher nicht einen riebtigen Infektionstermin angeben
wollen. Auch bei der den Lenten so gut instruierten Fleckfiebererkrankung konnte man
die Beobachtung machen, daB sie nicht krank sein w oil ten.

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5(X> Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Das Auftreten der Epideraie ist ontrennbar von der Frage der
Bazillentrager und Dauerausscheider. Fiir die Verbreitong
der Epidemien kommen iD erster Linie diejenigen in Betracht, die selbst
derartige Erkranknngen durchgemacht haben. Es ist daber erlaubt, zn
fragen, ob diejenigen, die derartige Erkrankungen zu Epidemiezeiten
durchgemacht haben, zu Dauerausscheidern werden. Yon den Para-
typhus B-Kranken weiB man seit langer Zeit, daB sie relativ haufig zn
Dauerausscheidern werden. Das lehren die Nachbeobachtungen beim
Militar und in den Irrenanstalten, sowie auch die Nachbeobachtung vieler
Einzelfalle. Auch weiB man seit langem, daB die Frauen hier ein er-
heblich grOBeres Kontingent stelien, genau wie beim Typhus. So zeigt
z. B. eine systematische Durchuntersuchung einer Irrenanstalt, daB alie
gefundenen Bazillenausscheider Frauen betrafen, wie aus den Arbeiten
von Fleischauer (87) und von Knauer (100) zu entnehmen ist.
Diese prinzipiell wichtige Tatsache sei wegen der Gefahr der Weiter-
verbreitung der Keime auf Nahrungsmittel durch krank gewesene Frauen
angefQhrt. Von gleicher Wichtigkeit ist die Bedeutung der Kontakt-
infektionen. Bei den meisten Epidemien mit typhosem Charakter
werden solche erwahnt. Sie geben ihrerseits diesen Epidemien eio be-
sonderes Bild, indem bereits gegen Ende der direkt bedingten Er¬
krankungen solche sich anschlieUen, die auf Ansteckung bei der Pflege
zuruckgefiihrt werden mOssen. Insofern gleicht der epidemische Ablauf
dem des Abdominaltypbus.

Bei der gastroenteritischen Krankheitsform ist das Verhalten ein
ganz anderes. Es ist bisher kein Fall beschrieben, daB ein Erkrankter
mit Sicherheit zum Dauerausscheider geworden ware.

•

Bitter, der in den letzten Jahren hierauf geachtet hat, Bah Bazillenausscheidunj:
bis zum Ablauf von hfichstens 5 Wochen. Jakobson (01) teilt mit, daB bei der
Epidemie im (Men Berlins die Bazillen 2 Wochen nach der Erkrankung im Stuhl nicht
mehr nachweisbar waren. Nur im Urin waren sie in mehreren Fallen vorhanden. Von
ganz besonderem interesse sind hier die Untersuchungen von Matthes, Wollen-
weber und Dorsch (29) fiber die Zeit der Baziilenausscheidung naeh der Fleisch-
epidemie im Regierungsbez. Arnsberg, bei der die Erkrankungen nusschlieBlich von
irastrointestinaler Form waren. Danach fanden sich Bazillen im Btuhi bis

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Huge und Rogge (70) sahen nur bis zur 5. Woche Ausscheidung der Errestr
bei ihren nach Nahrungsmittelinfektion Erkrankten. Bei der von Marx (6b) be-
schriebenen Militarepidemie (43 Falle) wurde niemand zum Dauerausscheider. Nur
Brum m u nd (54) berichtet fiber einen Fail, der erst nach 3 Monatcn die Erreger veTlor
Nach U hlen h nth und H fibner (130) stammten von den 10 in der Saaibruckener
Untereuchungsanstaltfostge^ellten Dauerausscheidern keiner vonNahrungsmittelepidemien
(die anderen Falle betrafen ubrigens au>schlioBlich Frauen). Die Seltenheit der Kontakt-
infektionen geht aus der Literatur einwandfrei hervor [Rimpau (110) u. v. a.]; nidbt
nur, dafi keine solchen erwahnt werden, sondern verschiedene Autoren [From me (56)
Jakob son (61), Kutscher (00), Uhlenhuth (75)] weisen ausdrficklich auf da-
Fehlen derselbon bei ihren Beschreibungen hin. In der Literatur sind nur weoisc
Kontaktinfektionen bekannt geworden, so einmal ein Fall, der auf das Waschen be-
schmutzter Wasche zuruckgefiihrt wird [Matthes (29)]. In dieser Beziehung zeigt
also diese Erkrankung starke Achnlichkeit mit der Gartner-Bakterieninfektion, mit
der sie auch in klinischer und pathologisch-anatomischer Beziehung viel Aehnlichkeit

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratypbosa B. 501

hat. Otto (68) nirmnt allerdings an, dnB bei der Osnabrucker Epidemie einige Leute
durch Kontakt infiziert worden sind. Es handelt sich z. T. um Leute, die mit der Pflege
Erkrankter betraut waren.

Auch in der von Bruns und Casters (53) beschriebenen Epidemie sind einige
Kontaktinfektionen be^chrieben, aber die Zahl ist auifallend gering, denn bei der auf
2000erkrankte Personen geschalzten Epidemie wurden ^httchstens 12—20 Falle tt beobacbtet.
Die Selteuhcit der Kontaktfalle laBt daran denken, daft es sich weniger um direkten
Kontakt, ala vielmehr um indirekten handelt. Man muB annebmen, daB die direkte
Aufnahme der Erreger nicht so sehr zur Krankheit fiihrt, als die auf irgendeinem
Nahrungsmittel angereicherten Keime. Erst dann scheinen die Verhaltnisse gegeben,
die zum Haften der Keime ausreichen. Bei Umgebuogsuntcrsuchungen, die nach auf-
getretenen Fieiachvergiftungsepidemien vorgenommen wurden, hat man recht haufig
Personen, insbesondere Fleiacner, festgestellt, die die fraglichen Erreger ausschieden.
Auch in einer spater noch zu beeprechenden Epidemie an Bord 8. M. IS. Posen wurden
auffallend viele Leute ermittelt, die die fraglichen Keime ausschieden. In diesem Zu-
sammenhang muB auch daran erinnert werden, daB ali men tare Ausscheidung von Para*
typhusbakterien beschrieben sind [Conradi (83)]. Man wird sich jetzt die Frage vor-
legen miissen, ob es sich hier um echte Paratyphusbakterien gchandelt hat, oder aber
um Erreger, die dem Bact. enterit. Breslau ent^prechen oder nahe stehen. DaB
eine Ausscheidung von echten Paratyphus B Keimen vorkommt, geht an sich schon
aus der Tatsache hervor, daB es Bazillenausseheider gibt, also Menschen, die ohne
nachweisbare Erkrankung die fraglichen Keime ausscheiden. Wir hatten unlangst bei
der in der Tab. Ill angegebenen Epidemie auf einer Krankenabteilung Gelegenheit,
zu verfolgen, wie durch eine Dauerausscheiderin eine bisher gesunde Person durch mitlel-
baren oder unmittelbaren Kontakt aneresteckt wurde, diese jedoch nicht erkrankte, aber
die Keime nicht verlor, mit anderen Worten, tinier unseren Augen zur Bazillentragerin
wurde.

Wir sehen also bei der typhffscn Form relativ hSufig: Kontakt-
infektionen,Dauerausscheider, fernerUebertragung der
Krankheit von Kranken aufden Gesunden oder aber durch
infizierte Nahrungsmittel und durch Wasser, bei der
gastrointestinalcii Form: nie oder nur auBerst selten
Kontaktinfektionen, nie Dauerausscheider, kaum jemals
Uebertragung der Krankheit von Kranken auf den Ge¬
sunden, dahingegen stets als Vermittler ein Nahrungs¬
mittel, und zwar meist Fleisch, vielleicht gelegentlich
Wasser. Auf der einen Seite viele sporadische F&lle,
aberwenigEpidemien,aufderanderenSeiteseltenEinzel-
f&lle, aber relativ viele, z.T. rechtumfangreiche Epidemie n.
Letztere treten ausgesprochen explosionsartig auf.

Eine Ueberlegung sei in diesem Zusammenhang noch angefiigt:
Sowohl bei den tjphusahnlichen wie auch bei den gastroenteritischen
Erkrankungen findet man vielfach die Keime in enormen Mengen. In-
fektionsstotf ist also bei den beiden Krankheitsformen reichlich und
wahrscheinlich in ann&hernd gleicher Menge vorhanden. Bedenkt man
nun, daB oft enorme Fleischvergiftungsepidemien beschrieben wurden,
von denen eine einzige mehr Kranke aufweist, als viele Typhusepidemien
zusamraen. und daB bei den ersteren nie, bei den letzteren aber fast
ausnahmslos Kontaktinfektionen gefunden werden, so drSngt sich doch
der Gedanke auf, daB auBer dem Erreger noch ein wichtiger Faktor
zum Zustandekommen der Infektion gehohrt. Hfibner (95) nimmt
zwar an, daB bei der gastrointestinalen Form der pldtzlicbe Krankheits-
einsatz eine besondere Vorsicht mit den Dejekten wecke, daB hier also
gleich mit Beginn der Erkrankung die wichtigste Infektionsquelle be-
seitigt werde. Bei der typhosen Krankbeitsform trete aber die Auf-
merksamkeit zurflck, zumal die Benommenheit der Kranken ungQnstig
einwirke. Aber mag man die Benommenheit beim Typhus noch so sehr
in Rechnung setzen, beim Paratyphus B tritt sie schon erheblich zuriick.

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Tabelle III.

Paratyphus B-Epidemieu.

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 507

Andererseits sind die spritzenden Entleerungen der anderen Erkrankung
sicheriicb sehr geeignet, den InfektionsstofF zu verstreuen.

Man wird daran denken mflsscn, daB zum Zustandekommen einer
Infektion mehrere Momente zusammenwirken mussen. Das Wicbtigste
scheint mir die Einbringnng von vorgebildcten Toxinen, die bei der
gastrointestinalen Erkrankung in den Verdauungstraktus koratnen mussen.
Hierbei ist anscbeinend eine notwendige Bedingung, daB diese Toxin-
bildung auBerhalb des Korpers vor sich geht, denn sonst mflBten
auch in den Verdauungstraktus eingebracbte Keime den gleichen Effekt
hervorrufen konnen. Wie aber wflrde man sich zu erklflren haben, daB
die Toxinbildung auBerhalb des Organismus eine wesentliche Voraus-
setzung sein muB? Das scheint schwieriger zu beantworten, da hierfflr
entsprechende Experimentaluntersuchungen notwendig w&ren, die aber
noch nicht vorliegen. Hier ist vielleicht das EiweiB der notwendigste
Faktor fflr die Toxinbildung. Wie wichtig das animalische EiweiB zum
Zustandekommen einer kliniseben Erkrankung ist, gebt fur den Gflrtner-
Bazillus aus Untersucbungen hervor, die Aug. Gartner (90) 1888
angestellt hat. Er schreibt:

„Sehr erwahnenswert ist, daB 3 Mause, 2 weifie und 1 grane, von welchen 2 schon
mehrere Tage erfolgios mit frischer Kartoffel-Kullur gefiittert waren, innerhatb
24—30 Bid., und zwar unter den ausgesprochenen Zcichen der Intoxikation star ben,
ala eie das infizierte, ausgekochte Fleisch zur Nahrung erhiellcn.*

Einerseits weifi man, daB auf eiweiBhaltigen Nabrungsmitteln die
Toxinbildung eine gute ist, andererseits sind hauptsachlich eiweiBreiche
Nahrungsmittel die wichtigsten Verbreiter der Infektionen. Wird nun
ein Nahrungsmittel mit den Erregern der gastrointestinalen Form ver-
unreinigt und steht dieses Nahrungsmittel bei entsprerhenden Temperatur-
bedingungen genQgend lange Zeit, so sind die Bedingungen zum Zu¬
standekommen einer. Erkrankung gegeben. Werden aber die Keime
unter Umgehung des eiweiBhaltigen Nahrbodens in {len Verdauungs¬
traktus aufgenommen, so fflllt die causa nocens fflr die Darmschleimhaut
weg; die Erreger linden im Verdauungstraktus nicht die notwendigen
Vorbedingungen.

Verfolgt man diesen Gedankengang weiter, so wird man zu der
Annahme gedr&ngt, daB die Gastroenteritis in allcrerster Linie eine
toxogene Erkrankung darstellt, und dafi das bakteriell im Kdrper be-
dingte Krankheitsbild demgegenuber sehr weit in den Hintergrund tritt.
Bei der Paratyphus B-Erkrankung liegen die Verh&ltnisse bei Beginn
der Erkrankung ahnlicb, und zwar moglicherweise gerade in den Fallen,
die auf mit Paratyphus B-Bazillen infizierte Nahrungsmittel zurflek-
zufflhren sind. In den direkten Kontaktfallen, und wie mir aus dem
Studium der Paratyphus B-Epidemiologie hervorzugehen scheint, bei
den Wasserepidemien fehlt der toxische Einsatz; hier werden eben die
Toxine nicht mit in den Organismus aufgenommen. In solchen FSllen
verlfluft die Krankheit vom 5.-7. Tage ab wie ein Typhus. Beim
Typhus selbst gibt es scheinbar keine Beeinflussung des Krankheits-
bildes durch auBerhalb des Korpers gebildete Toxine.

Unter Berucksichtigung der klinischen Symptome kann man die
Krankbeitsbilder in 2 Komponenten zerlegen: eine toxogene, und eine
bakteriell bedingte. Das ist in gewissem Sinn ein Widerspruch da auch
die toxogene Krankheitskomponente die Bakterien zur Voraussetzung
hat; aber hier liegt der Unterschied in der Einverleibung auBerhalb
des Kbrpers gebildeter Toxine und in der Aufnahme leben-

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508

(Jeutralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

der Keime mit dem iDfizierenden Nahrungsmiltel, die nun ibrerseits
im Kdrper krankmachend wirken. Die schematiscbe Darstellnng er-
mdglicht auch die anderen Nahrungsmittelvergifter mit in die Betrachtung
hineinzunehmen:

bediDgte Krankheitsbild ist:
beim [Bac. botulinus
„ „ enter it. Gartner

n ti » Breslau

* * paratyphi B

W * W A.

* » typhi

Das toxogene,

sehr stark Torhanden
stark
stark

ausgesprochen bis fehlend
fast fehlend
fehlt

Das bakterielle
fehlt]

wenig ausgespr.
wenig ausgespr.
ausgesprochen
ausgesprochen
sehr ausgesprochen

DaB diese Darstellung nur schematisch aufgefaBt werden darf, ver-
steht sich von selbst; selbstverst9ndlicb gibt es wohl bei alien Er-
krankungen Abweichungen vom Mittel nach beiden Seiten hin. Ins-
besondere wird man der aufgenommenen Toxinmenge bei der Beurteilung
Recbnung tragen mflssen. Ist sie grofi, so wird der Effekt groB sein;
ist sie klein Oder hat eine ScbSdigung derselben durch Kochen statt-
gefunden, so wird der Effekt geringer sein. Ferner wird die Giftmenge
noch von der individuellen Verschiedenheit der Giftbildner abh&ngig
sein.

Es taucht noch die Frage auf, ob es bei den typhus&hnlichen Er-
regern Krankheitszustfinde gibt, die nur durch die aufierhalb deS Kdrpers
gebildeten Toxine zu erklSren sind. Bei den G&rtner-Bakterien sind
die Vorh&ltnisse schon hinreichend geklSrt, und zwar in bejahendem
Sinn.

Schon bei der Entdeckung des Erregers hat Aug. Gartner (90) festgestellt, daB
Meerschweinchen bei Verfutterung gekochler Bouillonkulturen an akuter Gastroenteritis
erkrankten 1 2 * * ). Kruse fand das Gift in Filtraten noch wirksam. Es folgten dann eioe
Reihe weiterer Nachprufungen, die keinen Zweifel lassen, daB die Gifte alleiu wirksam
sind. Zur Abtotung der Erreger genii gen bei entsprechenden Bedingungen auch wecent-
lich niedere Tempcraturen, wodurch die Wahrscheinlichkeit, mit den Giften Krankheits-
erschein ungen zu erzeugen, wachsen mufi.

Das in Frage stchende Gift wird aber nur von frisch geziicbteten Kultnren in
deutlicher Menge geliefert. Die Toxizitat geht bald verloren, worauf auch Aug.
Gartner (!iO) schon seinerzeit hinwies.

Bezilglich der Paratyphus B-Bazillen hat Schottmuller (119) bereits 1903 nach-
weisen koiinen, dafi gekochfe Bouillonkulturen bei der Futterung an Meerschweinchen
krankmachend wirken 8 ). (Weiteres s. IS. 511).

Eine noch offeno Frage ist die der Immunitat. Ich mochte an-
nehmen, daB man hier zweierlei unterscheiden muB. Einmal eine Gift-
immunitat und eine Immunitat gegenuber dem Erreger.
Letztere ist vielleicht abzuleiten aus der Tatsache, dafi beim Paratyphus 6
in vielen Fallen auf die Dauer die Erreger aus dem K6rper ver-
schwinden, d. h. der Organismus erwirbt auf die Dauer die Ffihigkeit,
die Erreger zu beseitigen. Bei der gastroenteritischen Erkrankung
verschwinden, wie wir sahen, die Erreger fiber kurz Oder lang ausnahms-
los. Also mtissen bier die ImmunitatsverhSltnisse gfinstiger liegen.
Die Giftimmunitat ist in diesem Zusammenhang meines Wissens noch
nicht untersucht worden. DaB bei beiden Erkrankungsarten Gifte eine Rolle

1) Er war zu dieser Versuchsanordnung veranlafit worden, weil bei der Franken-
hausencr Epidcmie nicht nur Leute erkrankt waren, die robes Fleisch, sondern auch
solche, die gekochtes Fleisch. ja sogar nur Suppc genossen batten.

2) Nach B. Fischer (85i besteht aber dor gut begriindete V’eidacht, dafi Schott¬

muller damalu, als er den Begriff der Gastroenteritis paratyphosa schuf, mitKulturen

von B. enterit. Breslau gearbeitet hat.

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 509

spielen, dOrfte nach den vorstehenden Angaben nicht zu bezweifeln sein.
Ob man aber Erkrankungen annehmen darf, die nur aufToxine zurGck-
gefuhrt werden konnen (d. h. Aufnahme solcher ohne gleichzeitige Auf-
Dalime lebender Keirae) muB z. Z. fur die beiden vorliegenden Krank-
beiten noch als unbewiesen gelteu. Fur die G&rtner-Enteritis wird
man sie aus der damaligeu BeobacbtUDg ableiten kdnnen, da auch Per-
sonen erkrankt waren, die nur Suppe genossen hatten. Die toxischen
Krankheitserscheinungen versehwinden bei alien Erkrankungen relativ
scbnell, nach 2—4 Tagen. Nach dieser Zeit sind die Erreger oft noch
wochenlang im Stuhl Oder Urin nachweisbar, auch werden sie mitunter
im Blut nach Abklingen alter Krankheitserscheinungen gefunden. Ei-
weiB und Sauerstoff sind genfigend vorhanden, die Temperatur ist eine
gflnstige, auch erweisen sich die Erreger, wenn sie frisch vom Kranken
gezttchtet werden, als besonders toxisch; daher muB man also annehmen,
daB die F&higkeit zur Toxinbildnng auch im Kdrper in
unvermindertem MaBe besteht. Wenn aber eine „Krankheit“
nach Abklingen der ersten Erscheinungen nicht nachweisbar ist, dann
muB man aunehmen, daB der Organismus schneller die F&higkeit er-
wirbt, mit den Toxinen fertig zu werden als mit den Erregern selbst.
DaB diese Giftimmunit&t gelegentlich verloren gehen kann, lfiBt sich
vielleicht aus den Rezidiven ableiten, die der Ausdruck einer Immuni-
tatsschwache sind. Allerdings wird man die Rezidive wohl in erster Linie
als Immunitatsschw&che gegenflber den Erregern auffassen mflssen
(Typhus). Aber es treten auch bei den hier hauptsSchlich besprochenen
KrankHeiten gelegentlich erneute Durchfaile auf, die an diese Verh&ltnisse
denken lassen.

Die klinisckcn Ucbergangsformcn nnd die gemlschtcn Epldemicn.

Die UebergGnge bed (lr fen zunhchst einer Besprecbung, weil sie, wie
gezeigt werden wird, bei den gemischten Epidemien eine besondere
Rolle spielen. Sie sollen nach der Annahme einzelner Autoren die
Bindeglieder zwischen den sonst so scharf getrennten Krankheits-
formen sein.

Ich greife zunachst einen Fall von Roily (27, Tab. II) herans, den er zu den gastro-
enteritischen rechnet. Es bandelt sich hier um den beieits erwahnten Kranken, der
am 30. Tag seines Krankenhausaufentbaltes plotzlich ein sehweres Krankbeitsbild dar-
bot. Die Temperatur blieb zunacbst 2 Tage boob (40°, Durchfaile), sank dann auf 38°
and erst im Anschlufi an diese Absenkung entwickelte sich das eigentliche typhose
Bild. Milz palpabel, am 9. Krankheitstag Roseolen. Verlauf der Temp, absolut
typhusahnlich. Meines Erachtens mufi man dieseu Fall zu den typhosen Verlaufs-
formen rechnen.

Den aDderen Fall, den Roily (27) zu den gastrointestinalen rechnet, mochte icb
auch dazu rechnen. Der Kranke war plotzlich 6 Std. nach einer Alahlzeit erkrankt
und 3 Tage spater unter den Symptomen der Cholera nostras gestorben. Ich sche
hier von den weiteren Untersuchungen ab, die Roily zur Jdentifizierung der Er¬
reger vornahm, und beschranke mich auf die Wiedergabe der Fiitterungsversuche an
Mausen. Er veriiitterte die aus den Krankheitsfiillen gewonnenen Keime auf Brot.
Am 13. V er such stage starb die Maus, welche die Erreger des tod lichen
gastroenteritischen Fades erhalten hatte. Die ubrigen Erreger vermochten
die Mause nicht zu to ten, obgleich sie 7 Wochen lang den Tieren gegeben wurden.

Diese FQtterungsversuche raSchte ich als sehr wichtig ansehen, weil
sie sich vollstSndig mit den Beobachtungen decken, die das hiesige In-
stitut bei den Erregern der beiden Krankheitsbilder gemacht hat.

Bei derartigen Fallen wie dem vorstehenden besteht keine Schwierig-
keit, sie in die jetzt tibliche Nomenklatur einzufiigen; daB hier von
einer wirklichen Gastroenteritis nicht die Rede sein kann, durfte jedem
klar sein, der die klinischen Symptome richtig wertet. Nicht so einfach

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Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

liegen die VerhSltnisse bei denjenigen Erkrankungen, die im Verlauf von
geuiischten Epidemien vorkommcn. Es erscheint daher erforderlich, an
dieser Stelle eioe Betrachtung der Epidemien vorzunchmen.

Es kommen folgende in Frage: Die Epidemie im Orte A. in der Schweiz, beschrieben
von Walter (13>), die von Jakob (96) beschriebene am Lehrseminar in Wurzburg,
die von Hamburger und Rosenthal (41, Tab. Ill) beschriebene SuBspeisenepi-
demie bei Alilitarpeminen und die von Prigge nnd S&chs-Miike (115) beschrie-
benen Erkrankung* fall e in F.

Leider mull gesagt werden, daB diese Epidemien gerade in den
Ponkten, die hier von ausscblaggebender Bedeutung sind, nicht hin-
reichend untersucht sind. llier muB eine genaue epidemiologische Durch-
arbeitung verlangt werden, und es darf nicht, wie es offensichtlich ge-
schehen ist, eine Zusammenstellung der Ffille vorgenommen werden, die
schlieBlich den einzelnen Fall in diese oder aber in jene Verlaufsform
hineinpreBt. Ein wenig mehr oder weniger Gewalt wird dabei nicht
gescheut, um einereine Scheidung zu bekommen. Damit ist aber gerade
eine groBe Gefahr verbunden, es werden die abortiven Ffille falsch
rubriziert.

Was zunachst die Erkrankungsfalle von Prigge und Sachs-Miike (115) an-
betrifft, kann ich mich kurz fassen, indem ich die Worte wiedergebe, mit denen von
der gemischten Epidemie gesprochen wird. „Die akut einsetzenden Erscheinungen be-
standen lediglich in geringem Fieber, Kopfschmerzen, Appetitlo?dgkeit und Durcbfallen.
Sie gingen mit Ausnahme eines Falles, der typhusahuiichen Verlauf mit Milzschwellung,
Roseolen, und langsamen typischen Fieberaubtieg zeigte, in wenigen Tagen voriiber/

Diese Angaben reichen in keiner Weise aus, um sie als Stutze fur
die verschiedene Verlaufsform einer Epidemie gelten zu lassen. So fehlt
der Nacbweis der einheitlichen Infektionsquelle, des gleichen Epidemie-
beginns, und es ist nicht zu ersehen, ob die als gastroenteritische Er¬
krankungen angesprochenen Bilder tatsachlich solche waren und nicht
abortiv verlaufende typhusfihnliche. Auch ist nicht die MQglichkeit be-
rucksichtigt, daB die Krankheitsbilder mbglicherweise nur toxisch
waren, wahrend der eine typhose Fall auf lebende Erreger zuruck-
zufQhren ist.

Den letzteren Ein wand muB man gegen die Arbeit von Jakob (96)
erheben. Hier sind die epidemiologischen Nachforschungen flberhaupt
nicht mitgeteilt. Ueber die Aetiologie findet sich nur folgender Satz:

„Ara 3. Marz erkrankten im hiesigen Lehrerseminar nach dem Genufi von Leber-
wurst eine grofiere Anzahl von Seminaristen an starken Kopfschmerzen, Frostgefuhl,
Leibschmerzen, Erbrechen und heftigen Durchfailen. 44 Spater findet sich noch der
Satz: „Aus den verdorbenen Nahrungsmitteln konnte leider der Erreger nicht mehr
gezuchtefc werden, weil bei Beginn der bakteriologischen Untersuchung keine Reste mehr
vorhanden waren.' 4 Auch ist nicht ersichtlich, ob das fragliche Nahrungsmittel in ge-
kochtcm oder rohem Zuatand genosseu worden war. Nach der Jakobschen Beschrei-
bung dauerte bei* der ersten Gruppe der Patienten (20 nicht ins Spital eingelicferten
und 4 daselbst aufgenommenen) die ganze Erkrankung nicht langer als eine Woche.
,Nach 4—6, hochsten 7 Tagen kohrte die Temperatur zur Norm zuriick, und zwar
moistens in ziemlich steilem Abfali, so dnO die Patienten in 1—2 Tageu fieberfrei
wurden. Durchfall und Albuminurie, sowie alle anderen Symptome verschwanden,
und eine ausgesprochene Pulsverlangsamung stellte sich wahrend des Ab-
klingens der akuten Erscheinungen bei den meisten ein.

Anders bei der 2. Gruppe. Hier dauerte die ganze Erkrankung langer, denn an
das Stadium des akuten Brecbdurchfalls, das diese Pat. ebenso wie die der 1. Gruppe
durchgemacht hatten, schloS sich eine etwas langere Fieberperiode an und die Tempera-
tureo kehrten dann erst allmiihlich in statfcllormigem Abstieg zur Norm zuriick. &
war also der Verlauf, abgesohen vom Beginn, dem eines Typhus ahnlich. „Es folgt
dann eine Fieberkurve, die vdllig dem Bill entspricht, wie ich oben ein solches wieder-
gegeben habe. Auffallend ist noch das Verhalten der Agglutinationen. 41 Von 32 Unter*
suchten waren 27 krank, 5 gesund. Bei letzteren war die Reaktion negativ, ebenso bei
f 5 der Erkrankten (davon 4 ziemlich schwer, 11 nur leicht). Bei 12 Patienten war die

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 5H

Reaktion positiv (sowohl bei Prufung mit einem L&boratoriumsstamm ala gegen die
verachiedenen, ana dem Blute geziichteten Stamme), und zwar waren von diesen 3
schwerer erkrankt, 4 nur leicht“

Bei dieser Krankheitsbeschreibung fallt zunachat auf, dafi aueh die ©rate Gruppe
eine Pulaverlangaamung darbot, die sonst bei diesera Krankheitsbild fehlt, worauf
bereita an anderer tftelle hingewiesen ist. Die klinische Beschreibung iat zu unvoll-
atandig, wohl deshalb weil dieae Kranken kaum zur Aufnabme ins Krankenhaua kamen.
Immerhin ist zu erwagen, ob es aich nicht ura abortive typhusahnliche Falle gehandeit
hat. Die Agglutinationen, die 8—lOTage nach der Entfieberung vorgenommen wurden,
sind nicht einheitlich. Aber alle dieae UeberJegungen bleiben bei der ungenauen Dar-
stellung der Epidemie mehr oder weniger fcpekulation.

Die wichtigate Epidemie auf dieaem Gebiete ist die von Hamburger und Rosen¬
thal (41, Tab. Ill) beschriebene, die aich beim Militar ereignete. Die lnfektion erfolgte
durch eine Reispuddingspeise und durch Oremeschnitten, welche von einem Backer
hergestellt waren, der Paratyphus B-Bazillenausacheider war. Der epidemische Verlauf
zeigt 2 Krankheitsanhiiuf ungen, die auf die jeweiligen, an verschiedenen Tagen bereiteten
Speisen zuriickzufiihren sind. Im ganzen handelt es aich um 65 Kraukheitsfalle. Nur
in 4 —6 von diesen Fallen war eine Kontaktinfektion anzunehmen. Genaueres wird
iiber letztere nicht gesagt, aber aua den reichlichen beigegebeuen Abbildungen der
Fieberkurven lafit sicn, wie spater gezeigt wird, doch schliefien, dafi gerade diese spat-
liegenden Fall© eine beatimmte VerJaufsform darbieten. Hamburger und Rosen¬
thal nehmcn bei 41 Fallen das klinische Bild des Paratyphus B. abdominalis an.
Die Inkubation berechnete sich auf wenige bis hochstens 24 Std. In 9 Fallen ver-
gingen 3—6 Tage bis zum Auftreten der typischen Krankheitserscheinungen. Leider
ist nicht ersichtlich, um welche Falle es sich bei letzteren Erkrankungen gehandeit hat,
insbesondere, ob die Kontaktinfektionen hierher zu rechnen sind. Sie kommen zu der
Annahme, dafi die Erreger in dem Korper lediglich in der person lichen Resistenz des
Kranken ein Hindernis finden, wodurch der Krankheitsprozefi bestimmt wird. An-
scheinend ist den Autoren nicht der Gedanke gekommen, dafi neben der pereonlichen
Disposition die Menge der vorgebildeten aufgenommenen Toxine zunachat das Krank¬
heitsbild bestimmen kann. Die auagezeichneten Fieberkurven lassen auf das deutlichste
erkennen, dafi der toxische Krankheitseinsatz geradezu ein integrierender Bestandteil
dieser Epidemie gewesen ist. Ich kann auf die genauen Krankengcschichten nicht
eingehen, nalte mich aber fur verpllichtet, auf diese hinzuweisen. Bei der 1. Gruppe
der Erkrankungen dauerte die lnfektion 9—23 Tage, nur 3 Fall© zogen sich bis zum
36. Tage hin. Das Sensorium blieb frei; zwischen dem 6. und 10. Tage trat bei samtlichen
Fallen der typhosen Form eine Roseola auf, die zum Teil sehr ausgesprochen war.
Ruhrahnliche Erscheinungen wurden nie gesehen, ebensowenig Darinblutungen. Die
Milz war in 35 Fallen weder palpatorisch noch perkutorisch vergrofiert. In 6 Fallen
war sie mit derber Beschaffenheit fiihlbar. Meist bestand eine relative Bradykardie.
Eine typische Leukopenie war nicht deutlich nachweisbar. Erwahnt sei noch in
3 Fallen eine toxische Albuminuric. 1 dieser Falle kam ad exitum. Er ist von mir
in der Tab. Nr. I aufgefiihrt. Die weiteren 14 Falle rechnen die Autoren zur para-
typhosen akuten Gastroenteritis. „Sie verliefen in 9 Fallen unter dem von den friiher
genannten Autoren, vor allem von Schottmiiller, beschriebenen Bilde des hoch-
fieberhaften, mit toxischen Allgemeinsymptomen einhergehenden Darmkatarrhs, der be-
reits nach wenigen Tagen abklang und von einer ruehr oder minder lang anhaltendeu
Verstopfung gefolgt wurde. In 5 weiteren Fallen trat die paratyphose Gastroenteritis
so mild, unter den Symptomen leichter uncharakteristischer Durchfiille, in die Erschei-
nung, dafi nur das Ergebnis der bakteriologischen Untersuchung eine Identifikation der
Krankheitsprozesse ermoglichte. Da derartige Abortivfiille gewohnlich der klinischen
Beobachtung zu entgehen pflegen, seien folgende Beispiele wiedergegeben“: (Es folgen
dann einige Beispiele.) Die Milz war bei einer iiberwiegenden Zabl nicht nachweisbar
vergrbfiert, Roseolen und Herpes wurde nie gesehen. „Die auf den Darm beschrankte
Ansiedelung des Erregers bei den paratyphosen Gastroenteritiden erklart, dafi wir neben
dem Fehlen von Roseolen eine Bakteriiimie niemals angetroffen haben. Ferner blieb
auch in samtlichen Fallen dieser Art die Diazoreaktion dauernd negativ. Choleraahn-
liche Falle fehlen unter unserem Beobachtungsmaterial.“ Im weiteren Verfolg dieser
Fall© geben Hamburger und Rosenthal 2 Kurven, die auch einen gastroenteriti-
schen Emsatz erkennen lassen, die dann nach einigcn Tagen „fieberfreien Interval!*
einen kurzen erneuten Fieberanstieg, eine Exazerbation“ darbieten. Gerade diese FaJle
scheinen mir deutlich zu zeigen, dafi hier ein abortiver Typhusverlauf beim Para¬
typhus vorlag, und zwar trotz ausgesprochen toxischen Einsatzes. Weiterhin er-
wahnen sie einen Fall von Paratyphus Jevissimus, der am 3. Krankheitstag Bazillen im
Blut hatte. Dieser Blutbefund spricht deutlich gegen die friiher gemachte Annahme,
dafi bei einzeluen Erkrankungen dieser Krankheitsform die Bazillen nicht ins Blut iiber-

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Centralbl. f. Eakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

f>i2

ireten. Sicherlich wurde man haufiger positive Befunde bei rechtzeitiger Blutentnahme
haben. Gs wird dann noch die sogenaonte Pseudoinfluenzaform des Paratyphus be-
schrieben, die mit reiativ uncharakteristischem Fieberbild und sonstigen Anzeichen eiu-
hergeht. Im ganzen wurden 7 solcher Faile gesehen. Auch wird noch erwahnt, da*
i»ei einigen Fallen nur die bakterioiogische Jstuhluntersuchung bzw. der positive Ausfail
^ier G r u b e r - W i d a 1 schen Beaktion die Diagnose gesichert habe.

Diese Epidemic macht in der Tat den Eindruck, ais ob hier ein und derselbe Er-
reger 2 verschiedene Krankheitsbilcler hervorgerufen habe. Aber bei genauerem Zu-
seken zeigt sich, daB von der rem typhosen Form alle moglichen Uebergange von
Hamburger und Rosenthal beschrieben werden. Auch die fieberfreien Faile, die
imr durch bakterioiogische Uutersuchungen festgestellt wurden, fehlen nicht. Ganz be-
Konders charakteristisch ist der toxische Krankheitseinsatz, der kaum auf einer der vieleu
Fieberkurven vermiRt wird. Von besouderem Interesse ist die Kurve 6, weil aus dem
Vergleich ihres Kopfes mit der graphischen Darstellung des zeitlichen Aufeinander-
tolgens der Infektionen hier eine Kontaktinfektion angenommen werdeu mub. Dieaer
Kail liegt ca. 3 Wochen nach den iibrigen. Er zeigt keinen toxischen Krankheite*
ein>atz, sondern bietet nur ein typhbses Bild. Auch Fall 7 scheint nach dem Kopf und
dem Vergleich mit den Kulminationspunkten der Epidemie ein Kontaktfall zu sein.
Insbesondere bei der Saarbriickener YVasserepidemie, die von Priefer (37) in ihrem
epulemiologischen Teil beschrieben ist, kann man sehr deutlich erkennen, dafi der gastro*
tmteritische Einsatz fehlt. Damals war ein Paratyphuskranker in einer JSaarbriickener
Kaserne der Ausgangspunkt der Epidemie gewesen. Er hatte ein Kiosett benutzt, von
dem der Inhalt in die Wasserleitung iibertrat. Es erkrankten fiber 80 Leute. Der
Krankheitsverlauf, der von Priefer (37) gcnau beschrieben wird, entsprach im allge-
meinen dem typhosen Krankheitsbild; allerdings waren die anfiinglichen Symptome in-
fluenzaartig. VVas hier am meisten interessiert, ist, daB keine gastrointeetinalen Krank-
heitseinsatze vorhanden waren, was ich darauf zuriickfiihren mochte, dafl die Krank*
heit in erster Linie durch die Bakterien als solche, und nicht durch vorgebildete Toxine
bedingt war. Der klinische Verlauf zeigte alle Grade der Verlaufsformen von den
schweren bis zu den ambulant verlaufenden.

Eine weitere v Mischepidemie“ ist die von Walser (135) l ) beschriebene Epidemie
hi dem schweizer Ort A. Es erkrankten damals innerhalb 22 Tagen 37 Pereonen.
„Die ersten erkrankten unter den Erscheinungen eines akuten Magen-Darmkatarrhs,
die spateren unter dcnen eines Typhus. Fur diese Diagnose sprachen Roseola, Milz-
lurnor, Erbsbreistuhle und Triibung des Sensoriums bei mehreren Kranken.“ „Als Aus*
piugspunkt der Epidemie konnte mit Sicherheit eine Konditorei festgestellt werden, und
/war konnte die JSehuld mit grower Wahrscheinlichkeit gewissen Cremeschnitten zuge-
-vhoben werden/* „Wir haben Familien- und Einzeierkraukungen zu verzeichnen. Die
Familienepidemien hatten nicht alle den gleiehen Charakter: nei der einen traten die
Faile innerhalb 1—2 Tagen auf, bei anderen, namentlich in der Konditorei, verteilt*
-ich der Beginn der einzelnen Faile auf mehrere Wochen. Klinisch haben wir alle
Uebergange von einem akuten Magen-Darmkatatarrh oder Cholera nostras zu emeni
klassiHchen Typhus abdominalis/ 4 Die Epidemie ist nicht so restlos geklart. wie es
wiin^chenswert ware. Aber man wird zugeben miissen, da£ zunachst das Bild den
• Eindruck einer gemischteu Epidemie macht; bei jeder grofieren Epidemie, die sich uber
iiingere Zeit erstreckt, besteht die Gefahr, daB Faile mit eingerechnet werden, die atio-
iogisch nicht hinzu gehoren. Auffallend ist, worauf der Autor ausdriicklich hin*
weist, dafi die ersten Faile den Eindruck ein er Gastroenteritis gemacht
haben und dafl die spateren Faile typhusartig verlaufen sind. Mir
scheint, die Erkliirung hierfiir ist darin zu suchen, dafi die gastroenteritischen Faile
durch Nahrungsmittel verursacht waren, die neben den Erregern auch Toxine enthielteo,
wabrend die anderen Faile als Kontaktfalle zu erklaren sind. Fur diese Annahoie
findet man auch eine weitgehende Bestatigung in den Angaben Waisers, da auch
bei den meissen gastrointestinalen Fallen sich ein typhusahnliches Bild zum Teil
nach 1— 2-tagigcra fieberfreien Intervall anschloB. Bei einigen, klinisch nicht genauer
bciobachteten Fallon findet sich die Bemerkung, da£ die Kranken sich einige Tage
nach dem akuten Einsatz nicht wohlfiihlten.

Genaucre Untersuchuugen iiber die Erreger der letztbeschriebenen Epidemien liegen
3iirht vor. Nur von Hamburger und Rosenthal (41) sind einige Versuche an-
gestelll, die Schliisse auf die spezielle Art gestatten. „Die Tierpathogenitat des BazilJua
bei Fiitterung (Ratte, Mans) war gering ocler negativ. Fiir seine geringe TierviruJeox
-pricht auch, daft die todliche Dosis fiir Miiuse bei subkutaner Einverleibung 0,5 ccm
emer 24-stundigen Bouillonkultur war. Aus den Organen der nach langerer Zeit unter

1) In der Literatur findet sich der Verfasser irrtiimlicherweise als Walker iui-

• ‘i'tbrt.

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 51 3

starker Abmagerung erlegenen Tiere konnten die Keime nicht zuruckgeziichtet werdeu,
was fur ein Erliegen durch Intoxikation spricht. 1 ccm einer 6 Tage alten, 10 Min.
gekochten Bouillon (hitzebestiindiges Gift) vermochte Mause innerhalb 36 Std. zu to ten,
wahrend mit 0,5 ccm gespritzte Mause sich nach schweren Krankheitserscheinungen
wieder erholten.“ loi bakteriologischen Teile meiner Ausfuhrungen ist gezeigt woraen,
dafi Mause, welche mit Paraty phusbazillen im hiesigen Institut gefiittert wurden,
niemals zugrunde gegangen sind, wahrend die mit dem Breslau-Bakterium gefutterten
Mause ausnahmslos gestorben sind. Hierdurch komme ich zu der Annahme, dafi
der Erreger der von Hamburger undBosenthai beschriebenen Epidemic ein echter
Para B gewesen ist. Nach personlicher Mitteilung ist der Stamm Jeider verloren ge-
gangen.

Hier miissen noch 2 Epidemien besprochen werden, die der Einordnung Schwierig-
keiten machen. Es sind die von Prigge (114) und die von v. Wilucki (136) be¬
schriebenen Massenerkrankungen, die auf Wassergenufl zuruckzufiihren sind.

In der von Prigge (114) beschriebenen Epidemie handelt es sich um den Ein-
bruch von verseuchtem Bachwasser in eine Zentralwasserleitung. Den fraglichen Er¬
reger beschreibt Prigge folgendermafien: „Die kulturelle und serologische Priifung
der gefundenen Stiimme bewies ihre Zugehorigkeit zur Paratyphusgruppe, sie stimmten*
in alien Merkmalen mit anderen, in der Anstalt friiher gefundenen Paratyphusstammen
vou Kranken und chronischen Bazillentragern ubereiQ und zeigten alle Eigensch&ften,
die als charakteristisch fiir Paratyphus B-Bazillen angesehen werden miissen. Auf der
Drigalski-Conradi-Platte trat deutliche Nestbildung auf, wie sie von Fischer als
typisch fur diejenigen Bakterien der Paraty.-Gruppe, welche bei sporadisch Erkrankten
gefunden werden, angegeben sind. Man wiirde die Stamrue somit unter der Voraus-
setzung,.dafi die Mitteilungen Fischers iiber die Moglichkeit einer Trennung zwischen
Fleischvergiftern der Paratyphusgruppe und Stammen, die bei vereinzelten Erkran-
kungen isoliert werden, sich bestatigen sollten, nicht zur Gruppe der Fleischvergifter zu
rechnen haben.“

Die eingehenden Ermittlungen, die von Prigge angestellt wurden, ergaben, dafi
von 6227 Einwohnern der beiden in Frage kommenden Orte 744 Personen = 12 Proz.
der Einwohnerschaft erkrankt waren. Die Dauer der Epidemie erstreckte sich auf iiber
2 Monate. Von den Erkrankten benotigten nur 64 — 8,3 Proz. arztlicher Hilfe. Die
Dauer der Erkrankungen verteilte sich folgendermafien:

1 Tag waren krank 67 Personen

2 Tage „ „ 95

d » M 111 >!

4 85

6 >, ,, >> 30 ,,

Der Verlauf dieser Erkrankungen bestand mit auffallender Gleichmafiigkeit in den-
selben Erscheinungen: plotzlicher Beginn, Erbrechen, einige Tage anhaltender Durch -
fall, echnelle Rekonvateszenz.

Einen typhosen Verlauf nahmcn nur 7 = 0,1 Proz. aller Erkrankungen. Bei
ihnen betrug die durchschnittliche Krankheitsdauer 21 Tage.

Die Erklarung der Epidemie ergab sich durch die Feststellung, dafi Wasser eines
Baches, der Hausabwasser und Abortgrubeninhalt fiihrte, in starkem Strahl in das
Sammelbassin der Wasserleitung eintrat.

Mit der von mir geforderten Trennbarkeit der Erkrankungen steht diese Epidemie
in Widerspruch, deun der Erreger zeigt so wesentliche Aehnlichkeit mit dem Paraty.
B-Bakterium, dafi eine Verwechslung mit dem Bacterium enterit. Breslau nicht
angenomoien werden darf. Aber trotz der genauen Erhebungen Prigges (114) wird
man doch zweiteln diirfen, dafi die iiberwiegende Zahl der Erkrankungen (echte) Para-
typhen in unserem Sinn gewesen sind. Zuniichat gelangten iiberhaupt nur 8,3 Proz.
der Erkrankungen zur arztlichen Kenntnis; die iibrigen Erkrankungen wurden dnrch
nachtragiiche Feststollungen (Sehulversautnnis usw.) ermittelt. Da die Epidemie in
den Monaten Juli bis August herrschte, konnen sehr wohl Darmkatarrhe andcrer
Aetiologie sich in die statistische Erfassung eingeschlichen haben. Bei 37 von den
744 Fallen sind bakteriologische Untersuchuneen vorgenommen worden; bei alien fand
sich eine Agglutination von wenigstens 1 :100 gegen Paraty. B-Baktenen und bei 22
wurden die Erreger im Blut odor iStuhl und Urin nachgewiesen.

Prigge ist der Ansielit, dafi die von ihm besehriebene Epidemie gegen die An-
sicht spreche, dafi nur Nahrungsmittelinfektionen mit Brechdurchfall einsetzen. Er
fiihrt als Stiitze die von Hetsch (93) besehriebene Epidemie an. Meines Eracbtens
darf man diese Epidemie nicht zu weitgehenden Schlussen heranziehen, weil hier die

Erst© Abt. Orig’. Bd. 87. Heft 7/8, 33

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514

Centralbl. f. Bakt* etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Entstehungsursachen nicht restlos geklart werden konnten und moglicherweise mehrere
atiologische Momente in Betracht aamen. Aber es existieren einige andere Wweer-
epidemien, die fur den echten Paratyphus erweisen , daB geradedas Durch-
fallbild feblt. Es sei bier an die Saarbriickener Epidemie und an die von Keller-
mann (43) beschriebenen Erkrankungen nach Wassergenufi bei Soldaten bei einer
Felddienstiibung errinnert; hier ist aucb die von Grisar beschriebene Was6erepidemie
zu erwahnen, die^ucb auf Einbruch von Fakalabwassern zuruckgefuhrt werden muB,
Man kann daher den Einwand nicbt von der Hand weisen, daB in der Prigge-
schen Epidemie mehrere, moglicherweise sich nahestehende Erreger in Frage kommeD.
Hierzu berechtigt schon die Ueberlegung, daB der mehrere Wochen dauernde
Einbruch von verunreinig tem Bachwaseer nicht nur Paratyphus-
bakterien in die Wasserlei tung geBpiilt haben wird. Auch hier mufl an
die Grisarsche Epidemie (40) erinnert werden, bei der neben Paratyphen auchTypheu
vorkamen. Ob das Bacterium enterit. Breslau der hauptsachlichste andere Keim
gewesen ist, lafit sich jetzt nicht mehr entscheiden. Ob dieser Erreger, wenn er in*
Wasser eingcbracht wird, auch das sonst bekannte Bild beim Menschen hervorroft.
ist bisher nicht mit Sicherheit erwiesen. Hieriiber gibt vielleicht die nun zu beschreibende
Epidemie neue Gesichtspunkte.

Es handelt sich um eine Reiha von 33 Paratyphus B-Erkrankungen an Bord
8 . M. 8. Posen in der Zeit vom 19. Sept. 1914 bis 12. Jan. 1915. Nach der von
v. Wilucki gegebenen Darstellung kommt mit groBer Wahrscheinlichkeit das den
Trink- und Waschwassertanks entnommene Wasser als Infektionsvermiltler in Frage.
Dieses ist sowohl aus einigen epidemiologischen Beobachtungen abzuleiten, als auch
aus dem Ergebnis der bakteriologischen Wasseruntersuchung vom 25. Okt., die neben
hohem Keimgehalt auch Keime ergab, die „sehr paratyphusahnlich* waren; der mit
Dampf vorgenommene Desinfektionsverauch hatte keirien Erfolg, sodaB erst einige Zeit
spater die VVasserleitung als desinfiziert angesehen werden konnte. V. Wilucki(136>
gibt im wesentlichen eine Darstellung fiber den klinischen Verlauf, ohne im einzelnen
auf die epidemiologische Aufeinanderfolge einzugehen. Er hat die Beschreibung der
Erkrankungen in folgende Gruppen geteilt:

Gastroenteritis paraty. 3 Falle
Enteritis paraty. 9 „

Influenza paraty. 7 „

Paratyphus levissimus 6 „

Bazillentrager 8 „

34 FiilJe

Hier interessiert zunachst die Feststellung, daB keine typischen typhdsen Verlauis-
formen vorkamen. Die als Paraty. levissimus gedeutete Verlaufsform lalat jeden Anhalts-
punkt fur einen typhosen Verlauf vermissen; in alien 6 Fallen liegt nach Ausweis der
Krankengeschichten eine akut einsetzende, allerdings mehr oder weniger ambulatorisch
verlaufende Uebelkeit oder Appetitlosigkeit vor. Diese beiden Symptome stehen aoch
bei alien iibrigen Erkrankungen im Vordergrund, sind aber mit mehr oder weniger
aosgesprochenen anderen Erscheinungen vergesellschaftet. Dio recht genau mitgeteilten
Krankengeschichten ermoglichen eine Aufeinanderfolge der Erkrankungen aufzustellen
Hiernach ergibt sich folgendes; es erk rank ten:

am 18. Sept. 1 Mann

am 29. Sept. 1 „

zw. 31. Okt. u. 1. Nov. 9 „

16. Dez. 1 „

18. Nov. 1 „

am 21. Nov. 1 ,,

2. Dez. 2 ,,

7. Dez. 1 „

12. u. 15. Dez. 5 „

am 28. Dez. 1 „

am 12. Jan. 1915 1 „

am

am

am

am

zw.

Demnach handelt es sich um einen protrahierten Epidemieverlauf, mit 2 deutlicheu
Haufungen von Erkrankungen. (Die Bazillentrager und 2 Erkrankungen, bei deneii
die Angaben fehlen, konnten iu diese Zusammenfassung nicht mit aufgenommen werden.)
Nach Lage der Trinkwasserversorgung an Bord von Kriegsschiffen erscheint es veil*
korumen im Rahmen der Mflglichkeiten zu liegen, daB sich Epidemien iiber so lance
Zeit binzieben, denn aus secnuinnischen und anderen Gesichtspunkten werden die Trips*
wassertanks wechselweise in Gebrauch genommen. Wenn nun ein solcher Tank infiziert
ist, so kann die Verstreuung des Infektionsstoffes iiber das Schiff dadurch scheinbar aul-

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Gartner, Paratyphus B abdorainalis — Gastroenteritis paratypbosa B. 515

boren, dafi ein nicht infizierter Tank in Betrieb genommen wird. Mit Ingebrauehnahme
des erateren beginnt wieder ein neuer Scbub von Erkrankungen. Die vereinzelt bleiben-
den Krankheitsfalle riihren entweder aus der infizierten Pumpleitung her oder
8 ie stammen von Waseer, das zur Zeit der Verseuchun^ in Wasserkaraffen gefiillt,
aber nicht gleich verbraucht war. Ein solcber Fall wird von v. Wilucki bei dieser
Epidemic beschrieben. Ein Wachtmeister erkrankte mit Bchweren Durchfallen, wenige
Stunden nachdem er in der Nacht aus starkem Durst seine Wasserflasche geleert hatte
die bereits seit inehreren Tagen in seiner Kammer stand.

Diese Epidemie liiflt somit mit Recht vermuten, daB bier eine durch infiziertes
WaBser bedingte Epidemie vorliegt, und wenn der Erreger „sehr paratyphusabnlich u
war, bo wird man an das Bacterium enter. Breslau denken diirfen. Jedenfalls
wird man in Zukunft auf die Moglichkeit einer solchen Epidemie achten miissen. Ob
bei derartigen Epidemien die Zabl der — wahrscheinlich voriibergehenden — Bazillen-
auBBcbeider immer so groB ist wie hier und ob hier besondere Verhaltnisse patho-
genetischer Art vorliegen, sei zunachst dahingestellt, auffallend ist jedenfalls, daB von
dem Kiichenpersonal, das allein auf Bazillenausscheidung untersucht wurde, 8 als Aus-
scheider festgestellt wurden. Wieviel Leute mogen von der rund lOOOkopfigen Be-
satzung die fraglichen Keime ausgeschieden haben! Wenn trotzdem so wenig Erkran¬
kungen vorgekoinmen sind, dann bat fraglos der Erreger Eigenschaften, die ihn nicht
leicht befahigen, im Organismus eine Kraukheit hervorzurufen; denn Infektionsmoglich-
keiten gibt es an Bord trotz ausgezeichneter Organisation des Sanitatsdienstes genug, es
gibt kerne Menschenanhaufung, die so dicbt ist, wie die Unterbringung einer Kriegs-
schiffsbesatzung in See und im Kriege.

Die Bakterlologle des (echtcn) Paratyphus B abdominalis und der
Gastroenteritis „Breslau“ (Fltiggc-Kaeuschc).

Die aus echten, d. h. typhusShnlichen Verlaufsformen der Para-
typhus B-Erkrankungen gezflchteten Erreger steheu bakteriologisch den
Erregern der gastroenteritischen Erkrankung so nahe, daB eine Differen-
zierung in der allgemeinen bakteriologischen Praxis kaum durchfiihrbar
erschien. Erschwerend kommt hinzu, daB eiu Unterschied zwischen
alten Laboratoriumsst&mmen und frischen Kulturen besteht, ferner gibt
es eine groBe Zahl von Varianten, die mehr oder weniger groBe Ab-
weichungen von der Norm darbieten. Einige aus Tieren gezuchtete sind
vielleicht nicht menschenpathogen, andere konnen gelegentlich den Men-
schen krank machen. Jedenfalls liegt hier ein wichtiges Moment, urn
die Erreger zu Gruppen zusammenzufassen.

Nachdem in den vorhergehenden Ausfiihrungen gezeigt worden ist,
daB die typhosen Verlaufsformen sowohl in klinischer und pathologisch-
anatomischer Beziehung, als auch in epidemiologischer Hinsicht von der
gastroenteritischen abtrennbar sind, erscheint es notwendig, die bakterio¬
logischen Charakteristika der beiden Keime gegeniiberzustellen.

Bei der Darstellung der bakteriologischen Einzelheiten halte ich
mich im wesentlichen an die aus dem hiesigen Institut hervorgegangenen
Arbeiten von B. Fischer, Reiner Muller, L. Bitter und G. Wagner.

Die Erreger haben folgende gemeinsame Merkmale:

1) Auf der Platte leichte Alkalibildung schon nach 16 Std. 2) Die Kolonien sind
ahnlich beziiglich ihrer Wachstumsform nach 16 Std. Brntscbrankaufenthalt (s. Tab.).
3) Gasbildnng nach 24 Std. in Neutralrottraubenzuckeragar. [Es gibt jedoch gelegent-
lioh gaslose Paraty. B-Stamme (Oette (112), G. Wagner)]. 4i Kein Indol. 5) Trii-
bung der Molke nach 24 Std. 6 ) Blauung dcr Chmablaumolke nach 24 Std. (Rd-
tnng der Lackmusmolkei. 7» Aufhellung dcr Chinablaumolke nach mehreren Tagen
(bzw. Blauung der Lackmusmolkc). Eine absolute zeitliche GesetzmiiCigkeit lafit Mch
bisher nicht aufstellen. 8 | Alle bis jetzt gepriiften Zuckerarten verhaiten eich gleich-
maflig. (Raffinoseniihrboden b. epatcr.)

Folgende Unterschiede bestehen bei den beiden Er¬
regern (vgl. auch nachstehende Tab. V).

33*

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516

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

1) Schleimwallbildung auf Agarnahrboden: Bact. paraty. B. bildet
Schleimwalle. Bact. enterit Breslau bildet sie nicht. Man bringt
sie folgendermaBen zur Darstellung: Das ansgestrichene Material kommt
fflr 1 Tag (oder bei sparlichem Wachstum fflr 2 Tage) in den Brutschrank.
Alsdann lSBt man die Platten mindestens 1 Tag bei Zimmertemperatur
stehen. In manchen Fallen genfigt jedoch fflr die makroskopische Sicht-
barkeit 1 Tag nicbt, roan muB die Platten dann lSnger stehen lassen
(2—3 Tage). Im Winter, wenn die Zimmertemperatur nachts zu kalt
wird, bleibt infolge geringen Wachstums das Wallbildungsphfinomen ans.
Es empfiehlt sich dann, die Platten auf den Brutschrank zu stellen, da
hier meist eine ausreichende W&rme vorhanden ist.

Am besten ist eine Wallbildung bei frisch kultivierten Kolonieu
zu sehen. Bei alten Kulturen kann sie abnehmen. Jedoch habe ich sie
noch bei den im Krdlschen Museum fortgezuchteten Original-Schott-
mflller-Stammen und dem Stamm „B“ von Achard und Bensande
gesehen. Versnche, die Wallbildung wieder zu wecken durch Zflchten
auf rohem Fleisch bei Brutschranktemperatur, haben zu keinero verlail-
lichen Ergebnis geffihrt. Bei zu dichten Platten ist die Wallbildung
nicht gut zu sehen. Am deutlichsten tritt sie bei alleinstehenden
Kolonie zutage. Es wird am besten in durchfallendem, wie in auf-
fallendem Lichte beobachtet. Im durchfallenden Licht fallt sehr leicht
die weiBliche Verfarbung der Randzone auf, die bei der dann folgenden
Betrachtung im autfallenden Licht einer Aufwulstung entsprechen muB.
Es sei hier hervorgehoben, daB nicht jede weiBliche Verfarbung der
Randzone (durchfallendes Licht) einer Wallbildung entspricht. Fur den
weniger Getibten empfiehlt es sich aber, zuerst immer nach dem leicht
wahrnehmbaren Farbunterschied zu suchen.

Die Wallbildung kann sehr deutlich zur Anschauung gebracht werdeu.
wenn man von den fraglichen Kolonien auf neuen Platten Striche oder
Punkte weit voneinander entfernt anlegt und in der oben dargelegten
Form verfdhrt. Man sieht dann die W&lle besonders charakteristisch
an den Randern.

Mikroskopisch (VergroBerung 1:60) liiBt sich die Wallbildung bereits
nach 16 Std. Zimmertemperatur sehen. (Selbstverstandlich muB die 1-tag.
Bebrfltung vorausgegangen sein.)

Man stellt auf den Rand ein. Hier zeigt sich eine grobe radiare
Streifung; in dem Bereich, der spater dem makroskopischen Wall entspricht.
Diese dunkle Strichelung hebt sich von dem homogcnen Zentrum ab.

Photographische Bilder finden sich bei Reiner Mflller und bei
G. Wagner. Mit einiger Uebung wird man sehr schnell entscheiden
konnen, ob Wallbildung vorliegt oder nicht. Die Wallbildung wurde
zuerst von B. Fischer und unabhangig von v. Drigalski und Con¬
rad i (35) beschrieben.

2) Strichkultur auf Schraggelatine: Paraty. B-Bakterien zeigen
nach 4—5 Tagen ein schlcimiges, rahmartiges Wachstum. Die Kultur
„rutscht“ (Fischer), der Schwere folgend, nach unten. Das Bacterium
enterit. Breslau wiichst weniger iippig, trockener und gleitet nicht
ab. Abbildung bei Reiner Muller (111).

3) Raffinosereaktion nach Reiner Muller (111).

Die Parat 3 r phus B-Bakterien zeigen auf gewohnlichem Nfihragar mit
1 Proz. Raffinosezusatz nach 14-tiig. Aufenthalt viele Tochterkolonien.
die knopfartig auf den Knlturen sitzen.

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphoea B. 517

Bact. enterit. Breslau laBt diese Knfipfe vermissen oder zeigt
sie in geringerem Grade. Nach Mil Her (111) wird „der diagnostische
Wert der Reaktion hierdurch aber ebensowenig beeintrfichtigt, wie etwa
der W T ert der spezifiscben Agglutination durch die sogenannte Mitagglu-
tination* 1 .

4) Pathogenitat der Reinkulturen gegenuber MSusen.

Bact. paratyphi B in Reinkultur auf Brot tQtet MSuse nicht.
auch wenn man sie mehrere Tage mit den Keimen ffittert. BeiTotung
gelingt es nicht, die Bakterien aus dem Herzblut zu zfichten. Es
empfiehlt sich nicht, die Bakterien auf Fleisch zu geben, da bei langerem
FleischgenuB die Tiere spontan zugrunde gehen.

Bact. enterit Breslau totet MSuse innerhalb 7—10 Tagen. Aus
den Organen konnen die Erreger in Reinkultur geziichtet werden. Erst
bei iSngere Zeit fortgezfichteten Stammen geht vielleicht diese Patho-
genitSt verloren. Ich habe sie noch bei altcn MuseumstSmmeu
(Kaensche, Greifswald) beobachtet. Bei einigen Fallen, die sonst
wio Breslau sich verhalten, fehlt sie jetzt; allerdings fehlt auch der
Nachweis, daB sie fruher vorhanden war.

5) Agglutination der fraglichen Erreger mit spezifischen Sereu.

Erforderlich sind hochwertige Sera; das hiesige Institut verwendet

solche vom Titer 1:100000, Agglutination mit dem liomologen Stamm.
Der andere Erreger wird nur in geringem Mafie mitagglutiniert (siehe
nachstehende Tabelle (S. 518 u. 519) nach Bitter aus Brugsch und
Schittenhelm).

Die Mitagglutination anderer Erreger ist bei Typhus-, Paratyphus und Enteritis
Breslau und Gartner nicht so ganz selten. Gelegentlich werden vom Typhuskran-
kenserum Paratyphusbakterien gleich hoch oder sogar hoher mitagglutiniert. Aehnlich
iiegen die Verhiiltnisse zwischen Gartner-Bakterien und Typhuskeimen. Auch beini
Paratyphus und bei dor Enteritis kommt ein derartiges Uebergreifen der Agglutination
im Beginn der Erkrankung oder in der Rekonvaleszenz vor. Der Wert der Agglu¬
tination wird aber durch diese gelegentJichen, und zwar meist voriibergehenden Erschei-
nungen nicht beeintriichtigt.

Nach den Untersuchungen von Vorschiitz (137) besteht auch ein Unterschied
in der Agglutinabilitat durch Losung von Lantbannitrat in 0,85 Proz. NaCl. Wahrend
Typhus, Paratyphus A und B-Bakterien bis zu einer Verdiinnung von m / ltH)f) agglu-
tiniert werden, agglutinieren Breslau- (und Gartner-)Bakterien nur bis Ueber

diese Verhaltnisse werden von Prof. Bitter weitere Versuche angeatellt.

Fur die bakteriologische Praxis kommt man fast stets mit dem
Wallbildungsphanomen und der Agglutination aus. Hierbei ist es aber
wichtig, daB man sich wirklich spezifischer Sera bedient. Wahrscheiil¬
licit erklaren sich aus der Nichtverwendung absolut spe¬
zifischer Seren viele widersprechendeAngaben in der Li¬
ter at ur. Der Wert der spezifischen Agglutination wird in einer sehr
eingehenden Arbeit von S el ter betont. Die von ihm auf Grund dieser
Untersuchung vorgenommene Einteilung der Krankheitserreger deckr
sich sowohl mit der alten Trautmannschen Einteilung als auch mit
der sich aus dieser Arbeit ergebenden Trennung der klinischen und
epidemiologischen Ergebnisse.

Erwahnt sei noch, daB mir von Wien ein Stamm flberschickt war.
der die Bezeichnung „Dauerausscheider“ trug. Nach dem, was hier
fiber das Fehlen der Dauerausscheider bei den gastroenteritischen
Erkrankungen ausgefiihrt wurdo, lag fur uns die Vermutung auf der
Hand, daB es sich hier urn einen echten Paratyphus B-Stamm handeln
mfisse; in der Tat ergab die Durchuntersuchung alle Eigenschaften, die
ffir einen solchen Stamm cliarakteristisch sind.

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518

Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Bakteriam

Wachs-

Form der

Sehleira-

Gas aus

Reduktion v.

Lack

turn

Kolonie

wall

Glukose

Neutralrot

Rotung i

Typbi

zart

rundl., unregelmf fi.
gerand., Weiublatt,

1

; _ i

—

—

Paraty. B

iippig

rundl., im allgem.
scharf gerandet

+

H-

4

1 4

Enterit.

Breslau

rundl., oft unregel-
mafiig gerandet

—

i +

1

+

i

Enterit-

Gartner

«»

rundl., im allgem.
scharf gerandet

4-

[ +

+

_L

Toxizitat und ImmunitSt.

Die Toxizitat der beiden Keime ist gleichfalls verschieden, aber
sie ist nur schwer vergleichbar, da von den Autoren nicht einheitliche
Metboden angewendet wurden. Im allgemeinen hat man sich auf die
Injektion durch Hitze abgetoteter Reinkulturen beschrankt. Diese hitze-
bestandigen Toxine sind beispielsweise durch Bach (49), From me (56).
Heller (26), Schottmtiller (119), Tiberti (33), Trautmann (128),
de Kobele (67), Roily (27), Uhlenhuth (75) nnd Vagedes (76) bei
gastroenteritischen Erkrankungen nacbgewiesen worden. Auch tiltrierbare
Gifte sind vereinzelt beschrieben, so von Tiberti (33) bei der Bologneser
Fleischvergiftung und von Uhlenhuth (75) bei der Greifswalder Epidemie.
Die Toxizitat scheint aber nicht vbllig constant zu sein, wie aus einigen
Bemerkungen zu entnehmen ist. Andererseits existieren fur die echten
Paratyphusstamme einige Untersuchungen, die dafQr sprechen, daB die
abgetoteten Kulturen nicht toxisch wirken. So vermiliten Knrth (103!
und Korte (102) die Toxizitat bei ihren auf 100 Oder auf 60° bzw. 56*
erhitzten Kulturen. Die von Ad. Fischer (84) isolierten Paratyphus
B-Bakterien von Dauerausscheidern schadigten nach Abtdtung bei 56 s
und intraperitonealer Injektion Meerschweinchen nur vorflbergehend.
Bei der Saarbriickener Epidemie waren Kulturen, die mittels Chloroforms
abgetotet waren, unwirksam. Der Erreger der von Konrich (44)
beschriebenen Paratyphusepidemie zeigte bei Meerschweinschen den
gleichen Befund wie bei den eben genannten Kulturen, jedoch waren
sowohl Bouiilonkulturen als auch Filtrate fOr Mause toxisch. Ebenso
fielen die Versuche von Brion und Kayser aus. Die Kulturfiltrate
der beiden eingangs beschriebenen toxisch einsetzenden Paratyphus
B-Falle waren bei intraperitonealer Injektion von 2,5 ccm bei Meer¬
schweinchen nicht giftig. Die getoteten Tiere zeigten normalen Befund.
Ebensowenig sch&digte die Tiere intrastomachale Einverleibung von
10 ccm des Filtrates.

Da mir bei der Bearbeitung der Klinik und Epidemiologie des
Paratyphus auffiel, daB bei einer ganz betrachtlichen Zahl von Krankheits-
fallen ein toxischer Einsatz besteht, habe ich versucht, dieses toxische
Kranheitsbild bei mir experimentell zu erzeugen. Ich habe mir zunachst
von etwa 8-tag. Bouiilonkulturen Berkefeld-Filtrate hergestellt und
dieselben getrunken (5 und 10 ccm), nachdem die Kontrollen die Keimfreiheit
ergeben batten. Ich habe hiervon keinerlei krankhafte Erscheinungen
bekommen. Sodann habe ich eine 48 std. Agarkultur eines friscli isolierten
Keimes der bereits erwahnten Kieler Krankenhausepidemie getrunken.

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphoea B. 519

mu&moike

Agglutination durch

Trubuog

Nachtragl.

Blauung

! Typhus-

| Paraty. B- | Breslau-
Serum

| Gfirtner-

:

—

bis zum End-
titer

schwach bis
mittel

schwach

hoch

+ !

1

+

schwach bis
mittel

bis zum End-
titer

hoch

schwach

+

+

schwach

hoch

bis zum End-
titer

schwach

+

+

hoch

1

schwach

i

1

schwach

1 j

bis zum End-
titer

Hierbei handelte es sich um die Kranke, deren Fieberkurve eiDgangs
wiedergegeben ist. Die Kultur war Dach vorherigem Zusatz von Phenol
(V 2 Proz.) wflhrend 20 Min. im Wasserbad bei 60 0 abgetotet. Wiedernm
habe ich keinerlei Erscheinungen bemerkt. Daraufhin habe ich frisches
Hackfleisch beimpft und es 3 Tage kflhl und 3 Tage bei Ziratner-
temperatur stehen lassen. Nach 20 Min. Aufenthalt im Dampftopf habe
ich etwa 80 g gegessen. Einige Std. spater bemerkte ich eine lebhaftere
Darmtfitigkeit als sonst, Erbrechen und Durchf&lle traten nicht auf, nur
war der Stubl dflnner und hflufiger als gewohnlich. Ich mflchte hierin
noch keinen Beweis erblicken, daB die Toxizit&t auf diese Weise nach-
weisbar w5re. Vorlaufig ist man also noch auf die Deduktion aus dem
klinischen Bild und aus der Epidemiologie angewiesen. Sicherlich handelt
es sich nur um eine geringe und leicht zerstflrbare Giftwirkung.

Ein weiterer Prflfstein fflr die Verschiedenheit der beiden Erreger
ist die Immunity t. Die Tierexperimente, die in spflrlicher Zahl vor-
liegen, geben noch kein vollig klares Bild. Es sei daher auf die ent-
sprechende Darstellung von Uhlenhuth undHfibner (130) verwiesen.
Bisher fehlten Beobachtungen am Menschen. Hier fQllt nun eine sehr
interessante Fesstellung von Baradachzi und Barabas (50) eine
Ltlcke aus. Bei der in der Tab. IV dargestellten Schweinefleischepidemie
in Przemysl mit ausgesprochenen gastroenteritischen Symptomen be-
schreiben sie folgende klinische Beobachtung: „DaB das Ueberstehen
einer Paratyphus B-Iufeklion nicht gegen eine neuerliche Erkrankung
schfltzt, zeigte folgende Beobachtung: Ein 29-jflhriger Jflger, der am
1. Aug. an mittelschwerem Paratyphus mit positivem Blutbefund erkrankt
war, und sich bereits in voller Rekonvaleszenz befand, erkrankte trotzdem
zur Zeit der beschriebenen Massenerkrankung am 9. Okt. von neuem
und bot dieselben Erscheinungen dar wie die flbrigen Erkrankten.*
Da hier von einem mittelschweren Paratyphus und von Rekonvaleszenz
gesprochen wird, darf man annehmen, daft eine typh6se Verlaufsform
vorgelegen hat. Demnach wtirde das Ueberstehen der einen Art keinen
Schutz fQr die andere hinterlassen.

Es sei hier noch auf die praktisch wichtigen Gesichtspunkte der
Trennbarkeit eingegangen. weil von einzelnen Seiten fu. a. Spitta (123)]
eine solche fflr bedeutungslos gehalten wird. Die Verbreitung des
Paratyphus B abdominalis erfolgt im wesentlichen wie beim Typhus; es
haben demgemaB die gleichen BekampfungsmaBnahmen einzutreten, und
in prophylaktischer Uinsicht wird man ebenso wie beim Typhus vorzu-
gehen haben. Bei der Gastroenteritis (Breslau und Gfirtner) ist

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520

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

die Prophylaxe schwieriger, solange nicht in alien verdachtigen Fallen
die obligatorische bakteriologische Fleischbeschau zur Anwendung kommt.
DaB die iibrigen hygienischen SchutzmaBnahmen durchgefuhrt werden
iniissen, ist naturgemaB zu fordern, aber man wird, wie auch Frigge
hervorhebt, den Wert derartiger MaBoahmen nicht zu hoch anschlagen
diirfen, weil es in der Natur dieser Epideinien liegt, daB sie nur SuBerst
selten zu Kontaktfallen fubren.

Aus den Epidemiebeschreibungen und aus der gelegentlichen Dnrch-
sicht von Medizinalakten gewinnt man den Eindruck, daB nacb Bekannt-
werden des bakteriologischen Befundes: „Paratyphus B-Bakterien" die
Aufmerksamkeit in allererster Linie auf das Fleisck als Infektionsvermittler
gerichtet wurde. Wenn man jetzt mit Sicherheit wird entscheiden
konnen, daB keine Breslau-Infektion vorliegt, wird man mit groBerer
Berechtigung als frflher von vornherein auch den anderen Infektionswegen
nachgeben rnussen. Bei Epideipien, dieganzpldtzlich mit gastroenteritischen
Erscheinungen einsetzen, wird man an die UntersuchungsSmter direkt
die Anfrage auf „Fleischvergifter Breslau Oder Gartner" richten
konnen, um so die bakteriologische Bearbeitung auch auf diese Moglich-
keit hinzuweisen. Ob es in Zukunft mdglich sein wird, allein aus dem
kliniscben und epidemiologischen Krankheitsablauf die Diagnose Para-
typhus B abdominalis zu steflen, muB fraglich erscheinen. Voraussichtlicb
wird eine Abtrennung vom Typhus sehr schwierig bleiben, wenn nicht
gerade die oben geschilderten gastroenteritischen Einsatze auf die richtige
Diagnose hinlenken.

In diesem Zusammennang muB auch auf die Schutzimpfungs-
frage hingewiesen werden. Der Krieg hat die geographische Verteilung
der einzelnen typhusartigen Krankheiten gelehrt. Je nach der H&ufigkeit
der einen oder anderen wird man die SchutzmaBnahmen einzuricbten
haben, wie es ja auch bereits geschehen war (z. B. Paratyphus B-Schutz-
impfung vor Verdun oder Paratyphus A-Schutzimpfung bei der Marine
in der Tiirkei). Wollte man nun auf die Wirksamkeit der Paratyphus
B-Schutzimpfung nach der bisherigen Differenzierung schlieBen, so
wiirde man dann zu sehr unzuverlassigen Ergebnissen kommen, wenn
nicht die gastroenteritischen Erkrankungen gewissenhaft
ausgeschaltet werden.

Iii der Literatur nfedergclegte und eigcnc Bcobacktungen Uber die
bakteriologische Versckicdenheit der Erreger.

Die Frage der bakteriologischen Trennbarkeit der bisherigen typhSsen
und gastroenteritischen Form muB noch insofern nachgepriift werden,
als sich durch eine nachtragliche Untersuchung mittels der oben
geschilderten Methoden noch jetzt eine Verschiedenheit der Erreger
nachweisen l£Bt. Hierzu liegt um so mehr Veranlassung vor, als sowobl
von Fischer als auch von Bitter und Wagner bei einzelnen ander-
weitig beschriebenen Epidemien die Trennbarkeit durchgefiihrt werden
konnte. Ich babe nun, um zu einem auf breiterer Basis beruhenden
Ergebnis zu kommen, verscliiedene St&mme, die aus der Literatur
bekannt wareD, zur Nachpriifung erbeten. Allen denen, die auf diese
Weise meine Untersuchungen ermoglichten, bin ich zu groBem Dank
verpflichtet, insbesondere den Herrn Dr. Buss on und Prof. Pribram
in Wien, denen ich die Uebersendung der im Kr&lschen Museum fort-
geziichteten Stamme verdanke. Von den ubersandten Stfimmen habe

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Gartner, Paratyphos B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 521

ich diejenigen ausgeschieden, die nicht absolnt rein waren, und ferner
diejenigen, die sich bei den hiesigen Untersuchungen als andersartige
Erreger (Gfirtner- Oder Typhusbakterien) erwiesen.

In der nachfolgenden Tab. V (S. 522) sind zunSchst diejenigen Er¬
reger zusammengestellt, die hier nachgepriift sind. Auch die filteren
Stamrae zeigen noch jetzt die gleichen Merkmale, wie wir sie bei frisch
isolierten Kulturen zu sehen gewohnt sind. Beim Bacterium para¬
typhi B (Schottmfiller) habe ich zunfichst die Schleimwallbil-
dung nur bei dem Stamm „B“ von Achard uncf Bensaude (77)
vermifit, indessen ergab eine erneute Aussaat nach 48 Std. deutiiche
While, wfihrend ille tibrigen hierhergehorigen Stfimme sofort das Schleim-
wallbildungsvermfigen aufwiesen. Dali die Schleimwfille in hlteren Kul¬
turen verloren gehen kfinnen, ist besonders fur die Gfirtner-Bakterien
erwiesen. Auch bei meinen Nachuntersuchungen anderweitig fortge-
ztichteter Gfirtner-Bakterien fehlten die While fitters. Auf die Ver-
finderlichkeit der Kolonien bei Paraty. B-B. hat auch Gildemeister
(90a) hingewiesen. Das Wachstum auf Schrfiggelatine war aus-
nahmslos so, wie wir es hier zu sehen gewohnt sind. Ebenfalls stimmte
die spezifische Agglutination mit den sonstigen Befunden tiberein. Eine
Tierpathogenitfit wurde nie beobachtet. Einige Stfimme vermfigen
kein Gas zu bilden. Sie haben aber auch fiber Jahre hinaus diese Eigen-
tfimlichkeit bewahrt (Oette, Wagner). Der letzte Stamm hat das
Wallbildungsvermfigen verloren.

Bei den Stfimmen, die als identisch Oder als sehr nahe mit dem
B. enter it. Breslau verwandt angesehen werden mfissen, zeigte sich
gleichfalls kein wesentlicher Unterschied gegenfiber dem sonst gewohnten
Bild. Der Typus. der Kolonien, das Wachstum auf der Schrfiggelatine,
entsprach vfillig den sonstigen Befunden. Die Mfiusepathogenitfit
scheint vielleicht etwas modifiziert, indem der Tod etwas spfiter erfolgte.
Bei 3 Stfimmen, die agglutinatorisch und kulturell zum Bacterium
Breslau zu rechnen sind, fehlte die Mfiusepathogenitfit; ob sie hier vorhan-
den war, lfiBt sich nicht entscheiden. Frisch isolierte Kolonien toten Mause im
allgemeinen in 8 Tagen. Hier schien es, als ob bei hlteren Kulturen der
Tod erst nach 10—12Tagen eintrat. Jedenfalls habe ich in keiuem
Fall, wo nach den Literaturangaben (Epidemiologic, patho-
logischer Befund, Klinik) Oder nach den Krankheits-
geschichten eine Gastroenteritis vorlag, die Mfiusepatho-
geuitht vermillt.

Bezfiglich der Agglutination ergaben sich bei einigen Stfimmen
Schwierigkeiten da eine spontane Agglutination vorlag, die kaum zn
fiberwinden war. Die von uns verwendeten spezifischen Seren (hergestellt
von Prof. Bitter) waren insbesondere ffir Paratyphus und Breslau
sehr hochwertig, so daB die Mitagglutination dementsprechend auch
hoch war. Aber der Abstand der spezifischen Agglutination von der Mit¬
agglutination war in alien Fallen so ausgesprochen, dad die Beweiskraft
nicht leidet. Die Mitagglutination ffir die anderen Erreger (Gartner
und Typhus) ist bei den einzelnen Erregern verschieden; am niedrigsten
ist sie ini allgemeinen ffir Gfirtner-Bakterien (s. Tab. V, S. 522).

Vergleicht man mit den bier gewonnenen Ergebuissen noch die
Angaben, welche sich in der Literatur finden und differentialdiagnostisch
in unserem Sinn verwertet werden kfinnen, so ergibt sich aus unseren
Tabellen und aus den anderweitigen Literaturangaben) Folgendes:

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522

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt Origin ale. Bd. 87. Heft 7/8.
Tabelle V.

Name

des Stammea

Paraty B

Wall- Gelatine- Mause-

bildung atrich pathogenitat-- —

t : 100000 |

Agglutination mil
enter it. enter.l Ty-
Breal. Gart.! pbik
Titer

1:100 000| 1:5000 ! 1 :5M‘

Paratyphus B-

Bakterieu.

„B“ Achard u. Ben-

nach 3 Tag. achw. feucht,

fehlt

Spec-

eaude (Krdl, Wien/

bei 3. Ausaaat rahmig

! tanagi.

deutlich „rut 8 cht“

;

„Thot“ Schottmiiller

deutlich dgl.

100000 +

20000 +! 500 —' 2000 x

(Krdl, Wien)

200000 +

50 0.0 — j

„Seemann“ Schottrafll-

nach 2 Tag.schw. „

100000 +

50 000 +• 2000 +! 1000 -

ler (Krai, Wien)

„ 3 „ deutl.

200000 +

100000 — 5000—i

B. bremens. febris

deutlich „

50000 +

5 000 + 500 +! 1000 X

gastricae Kurth

100000 +

loooo— : 1000 - 20 . 0 -

(Krdl)

1 )

Burckhardt(Krdl,Wien)

nur mikroakop. „

200000 +

5C00+! 500 ± 2000 t

8 . Tab. I, Nr. 4

i

10000 —;

„Dauerau 88 cheider“

deutlich „

20000 +

5 000+; . i .

Wien (Krdl, VVien)

50000 +

non gasoformans Oette

200000 +

5 000 + 200 — 50'Jt

(Krdl)

10000 —' 1000 -

„HaBsee“ non gasofor-

fehlt jetzt! „

mans (Wagner)

Station 24 a (Pfeifer,

deutlich „

100000 +

5000+! 500- son-

Breslau)

i

, ■ 1000 -

„Behn“. S. Kranken-

1

100000 +

2 000 +i 200 — i 1000 -

gesch. S. 488

|

5 000—; 20X1-

Qustabel. 8 . Kranken-

100000 +

2000+! 500— 2000 —

gesch. S. 489

1

i ; 1

Epid. Flenaburg 20/21.

1

1

100 000 +

2 000+1 500- 200-

8 . Tab. Ill, Nr. 46a

Bact. enteritidis Breslau.

B.brealauenseKaenache

fehlt l fpSrlirh, n<

10 Tag.

+ | 5 000+ 100 000+1 500 ±11000 -

(Krdl, Wien)

trocken,
rutscht mcht

10000 +

11000 - 2000 '

Cohn —. (Krdl,

77 77

lebt

5 000 ±1100 000 + j 1000 ± 2000 t

Wien)

1

1

;

„Bari H.“ Sobemheim

i !

77 77

77

1 5 000 —

20 000+' 500+ ! 2000 r

(Krdl, Wien)

!

50 COO +1000—;

„Meer“ Sobernheim

77 l 71 i

77

! 5000 —

20 OOO + 2000 + 1000 i

(Krdl, Wien)

|

1

50000 +

Greifswald Uhlenhuth

M 77

10 Tag.

+ 5 000 +

50 000 +! 200 ±! 100t*i-

(Krdl, Wien)

1

1

10 000 +

100 000 ±i 500 — 1 2000 t

„B. paraty. B Nr. 2“

1

77 »> T»

11

+ 5 000 +

iooooo +i . ; •

Wien (Krdl, Wien)

1 1

100C0 ± 200000—1 |

Hammelfleiach. Bruns

77 | 77 1 7/7

8 „

+ 10000 +

. 1

u.GaHters. 8 .Tab. IV,

1

, !

1

Nr. 53.

i

Makrelenyergift. Bitter.

77 77 i 71

8 .

+

. . '

S. Tab. IV, Nr. 52

| :

1

Mettwnrat Kiel 1920.

77 1 77 1 71

8 .,

+ f) 000 +

100000 +! 200 — 200 -

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1

I

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Gartner, Para typhus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 523

Fur Bacterium paratyphi B (Schottmiiller) spricht:

Wallbildung beobachtet bei dem Erreger der
Saarbriickener Epidemie 1902 [Couradi, v. Drigalski, Jurgens (35)J f
Kieler Epidemie '11)03 [Fischer (85)],

Jenaer Epidemie 11*07 [Konrich (44)],

Flensburger Epidemie 1917 (vgl. Tabelle III),

Kieler Epidemie 19JO/21 (vgi. Tabelle III),

„Rutschen“ der Bakterien masse auf Schraggelatine
Die beiden Kieler und die Flensburger Epidemien,

Jenaer Epidemie 1907 [Konrich (44)],

Sektion, mitgeteilt von Burckhardt (4).

Mausepathogeni tat fehlte bei der Verfutterung von Reinkultur bei der
Saarbruckener(35), den beiden Kieler, der Flensburger, der J enaer(44)
und der von Hamburger und Rosenthal beschriebenen Militar-
epidemie;

bei den Krankheitefallen, beschrieben von Kurth (103) und von Korte (102).
z. T. bei den von Bonhoff (82) und Kutscher u. Meinicke (108)
untersuchten Stammen, ferner in dem in dieser Arbeit zitierten Fall von
Roily (27);

bei der Sektion I, mitgeteilt von Hiibschmann (8);

bei dem von Horowitz (94) aus New&wasser geziichtetem Paraty. BSt&mm,
untersucht von Wagner (131).

Fur Bacterium enterit. Breslau spricht:

Fehlende Wallbildung. die nur beiden Epidemien und Einzelerkrankungen
beschrieben wurde, die im hie.sigen In*titut bakteriologisch geklart wurden
(Fischer, Reiner Muller, Bitter, Wagner).

W N icht-Rutschen tt der Bakterienmasse auf Schraggelatine wie vorstehend.
Fischer macht noch auf die Beobaehtung Schottmtillers 1904 (119) auf-
merksam, dafi die von ibm bei Fallen von Gastroenteritis paratyphosa beob-
achteten Kulturen *den viel uppigeren, fast schleimartigen fliekcnden Belag tt ver-
missen liefien. Fischer identifiziert diese Stamme auf Grund des Wachstums,
der Mausepalhogenitat sowie nach der Serumnachprufung mit dem B. enterit
Breslau.

Mausepathogenitat wurde beschrieben nach Verfutterung von Reinkulturen:

bei den Epidemien von Bach (49), Bitter (52) [Makrelenvergiftung und fest-
gestellt bei dem Erregcrder Hammelfleischvcrgiftung von Bruns und Gasters(53)],
Brum und (54), Bin gel (51), Gunther (58), From me (56), Kaensche (59),
K utscher (60), Marx (65), Reiner Muller (66, 111), Otto (68), Tiberti (33),
Trautmann (128), Uhlenhuth (75), Vagedes (76), Schiitz (71), Liebe-
trau (64), ferner bei der Epidemie in Flensburg 1917 und Kiel 1920/21;

bei den Bektionen von Berg (21), Hiibschmann (7) [bzw. Roily (27)],
sowie in dea Fallen, die in Kiel seziert und dcren Erreger teils von Bitter,
teils von mir gepriift sind. Bei einzelnen anderen Sektionen dcckt sich der
Befund mit den zugehorigen Epidemien. Ebenso pathogen waren die Stamme
von Symanski und Gunther, nachuntersucht von Wagner (131).

Gruppierungen der verschiedenen Erreger nach agglu-
tinatorischen Gesich tspunkten sind von verschiedenen Autoren
vorgenommen worden, so von Trautmann (128), Kutscher u.
Meinicke (108), Selter (120) und Uhlenhuth (75). Vollige Einigung
ist noch nicht erzielt, aber im groBen und ganzen kann man auch hier schon
eine Trennung der echten Paratyphen von den Gastroenteritiden erkennen.
Auf diese Arbeiten sei hier ausdriicklich verwiesen. Nach den sonst in
der Literatur sich findenden Angaben sind noch folgende Beziehungen
auf diesem Wege festgestellt: Der Erreger der von Abraham (47)
beschriebenen Epidemie wird mit dem Aertrykstamm (= Breslau)
identifiziert. Ebenso liegen die Verhaltnisse bei dem Kutsch erschen
Stamm (60), auch der Stamm, jder von Krehl, Kayser und Cahn (63)
beschriebenen Epidemie zeigte hoheMitagglutination fiir „Breslau tt und
pGaustad*. Tiberti (33) rechnet seinen Erreger zur Aertrykgruppe,
Trautmann (128) den Stamm der Dfisseldorfer Epidemie zur Gruppe
„Breslau a und ^Gunther-Posen*. In gleicher Weise ordnet Selter (120)

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524

Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Origmale. Bd. 87. Heft 7,8.

den Fleischvergifter HoDnef ein, wfihrend er den Erreger der Rbeydter
Epidemie, die eincn typhfisen Verlauf dargeboten hatte, agglutinatonsch
zu den echten Paratyphen rechnet.

FaBt man alle Angaben, die sich in der Literatnr fin den.
zusamraen, so muB man zn demErgebnis kommen, daB die
Auffassungen fiber die Trennbarkeit in ibr eine sehr
wesentliche Stfitze finden. Es erscheint daber erforderlicb, daB
man auch an anderer Stelle die Erreger derartiger Epidemien, die man
bisher als paratyphdse aufgefafit hat, auf die hier geschilderten Verb alt-
nisse hin untersucbt.

Bezflglich der Benennnng der Erreger sei hier noch einiges
bemerkt. Sobald man sich zu der Ansicbt bekennt, daB der Erreger der
Gastroenteritis nicht dem echten Bact. paratyphi B entspricht,
dann muB man den Zusatz „paratyphosa B u logischerweise fortlassen.
An seine Stelle hat die Bezeichnong zn treten, die anf den wirklichen
Erreger binweist. Dieser Zusatz wird in Analogic zn dem Erreger der
klinisch nnd epidemiologisch am nfichsten verwaodten Krankheit zu
wahlen sein. Diese Erkranknng ist die durch das Gfirtner-Bakterium
hervorgerufene Gastroenteritis. Man wird also von einer Gastroenteritis
„Breslauensis tt zu sprechen haben. Diese Bezeichnung hat auch eine
gewisse historische Berechtigung, da die Gastroenteritis fitiologisch vor
dem Paratyphus durch A. Gfirtner bzw. durch Flfigge u. K&nsche
nnd durch van Ermengem geklart wurde. Erst durch Schott-
mfiller sind die Formen 1904 auf Grund bakteriologischer Forschungen.
die aber die Epidemiologic end Pathologie nicht entsprechend zur
Geltung kommen lieBen, zusammengefafit worden. Die Zusammenfassung
hat sich dann in der Folgezeit erhalten. Eine weitere Verwendung des
Zusatzes paratyphfis verbietet sich auch deshalb, weil unter dem Be-
grifF „Paratyphus u ein klinisch und epidemiologisch einheilliches Krank-
heitsbild verstanden werden kann J ). Daran fin der t auch die Tat-
sache nichts, daB beim Paratyphus Krankheitsablfiufe gefunden werden.
die in mancher Beziehung vom klassischen Bild abweichen, sei es dafi
ein gastroenteritiseher Einsatz besteht, sei es daB die Verlaufsform
weniger typhfis ist. Wenn aber Stephan u. a. diese letztere Form,
deren Berechtigung ich nach meinen Erfahrungen anerkenne, eine
,typhoide u nennt, dann muB hierzu bemerkt werden, daB diese Bezeichuung
deshalb wenig glficklich ist, weil man im Franzdsischen und im Englischen
unter „Typhoid u die Krankheit versteht, die wir mit „Typhus“ bezeichnen.
wfihrend dort unter „Typhus“ unser Fleckfieber verstanden wird. Der
Zusatz „typhoid u wirkt also eher verwirrend als klfirend.

Zusammenfassend komme ich zu dem SchluB: Sowohl die
Klinik, die anatomische Pathologie, als auch die Epidemiologic und
die Bakteriologie lassen eine Trennung des Paratyphus B abdomioalis
(Schottmfiller) von der sogenannten Gastroenteritis paratypbosa B
wfinschenswert erscheinen. Die hier besonders interessierende Bakteriologie
lfiBt eine Trennung sowohl im Wachstum (Wallbildung, Gelatinestrich).
als auch durch die spezifische Agglutination und durch die M&use-

1 ) Bei der gagtroenteritiRcben Epidemie im Osten Berlins lehnten die praktirierrodexi
Aerzte nach Jakobson (61) die Bezeichuung ^Paratyphus* a b, da sie hier unter eine
Krankheit verstanden, die typhusahnlich verlaufe!

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Gartner, Paratyphus B abdominalis — Gastroenteritis paratyphosa B. 525

pathogenitat, die ToxizitSt und wahrscheinlich auch darch die Immunit&ts-
verhaltnisse erkennen. Bei alten „Breslau“-Kulturen nimmt vielleicht
die M3usepathogenit3t im Laufe der Jahre ab.

Hieraus folgt, dafi man die bisher zu 2 Gruppen zusammengefaJJten
Erreger der Fleischvergiftungen und des Paratyphus B in 3 Gruppen wird
scheiden mOssen, und zwar: B. enteritidis GSrtner-Gruppe, B.
enteritidis Breslau-Gruppe, B. Paratyphus B-Gruppe.

Gruppenbildung wird auch weiterhin erforderlich sein, weil bei den
3 verschiedenen Gruppen Erreger vorkommen, die Abweichungen erkennen
lassen. Der Begriff Gastroenteritis paratyphosa verlieit somit seine
Berechtigung und ist am besten durch Gastr. Breslau (in Analogie
zur Gastr. Gartner) zu ersetzen.

Litaratur.

Die Literaturangaben 1—76 sind in den ersten Rubriken der Tabellen I—-IV enthalten.

77) Achard u. Bensaude, Soc. m6d. des hdp. de Paris. — 78) Aumann,
Centralbi. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 57. — 79) Bauer, R., Wien. klin. Wocbenschr.
1920. — 80, 81) Bitter, L., Centralbi. f. Bakt. Atyt I. Orig. Bd. 85. IS. 110 u. 339. —
82) Bon ho f f, Virch. Arch. Bd. 216. 1914. — 83) Con rad i, Klin. Jahrb. Bd. 21. 1909. —
84) Fischer, Adolf, Centralbi. f. Bakt. Abt I. Orig. 1913. — 85), 86) Fischer,
Klin. Jahrb. Bd. 15. 1905. u. Zeitschrf. f. Hyg. Bd. 39. 1902. — 87) Fleischhauer, N.,
Zeitschr. f. Psych, usw. Bd. 76. — 88) Freund, Arch. f. klin. Med. Bd. 107 1912.
S. 328. — 89) Galambos, Kriegsepidemiolog. Erfahrungon. Wien u. Leipzig 1917.—
90) Gartner, A., Bresl. arztl. Zeitschr. 18-8; Korresq.-Bl d. allg. &rtztl. Ver. Thiir.
1888. — 90a) Gilderaeister, Centrbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 78. — 91) Graichen,
Ein Fall von Paratyphussepsis [Diss.] Jena 1913. — 92) H eidler, Wien. klin. Wochenschr.
1918. Nr. 38. — 93) Hetsch, Klin. Jahrb. Bd. 16. 1905. — 94) Horowitz, Centralbi.
f. Bakt Abt. II. Bd. 3,8. 8. 527. — 95) Hiibncr, Fleischvergiftungen u. Paratyphus-
infektionen. Jena 1910. — 96) Jakob, Miinch. med. Wochenschr. 1920. Nr. 48. —
97) Jaff6, Virch. Arch. Bd 228. I92u S. 377. — 98 Jochmann, Lehrb. d. Infekt-
Krankh. Berlin (Springer) 1914. — 99) Junghans, [Diss.] Kiel 1918. — lC0)Knauer,
CentralbL f. Bakt. Bd. 8.5 i920. — 101) Kohlisch, Berlin, klin. Wochenschr. 1916.
H. 14. — 102) Korte, Zeitschr. f. Hyg. Bd. 44. 1913. — 103) Kurth, Dtsch. med.
Wochenschr. 1901. H. 30,31. — 108) Kutscher und Meinicke, Zeitschr. f. Hyg. Bd.
52.1906. —109) Kwasniewsky, Arch. f. Hyg. Bd. 88. 1920. — 110) Lewy, Beih. z.
Arch. f. Schilf9- u. Tropenhyg. Bd. 23. 1920. 8. 337. — 111) Muller, Reiner, Dtsch.
med. Wochenschr. 1910. H. 10. — 112) Oette, Centralbi. f. Bakt Abt I. Orig.
Bd. 68 — 113) Pribram E. Mikroorganisraen der vorm. Krdlschen Sammlung. Wien
191w. — 114) Prigge, Klin. Jahrb. Bd. 26. 1912. — 115) Prigge u. Sachs-M tike,
Klin. Jahrb. Bd. 21. 1919. — 116) Rimpau, Arb. a. d. Kais. Gesdh.-Amt. Bd. 41. —
117) Roily. Miinch. med. Wochenschr. 1907. — 118) Schittenhelm. Miinch. med.
Wochenschr. 1920.Nr. 46. — 119) Schottmiiller, Ebenda. 1914.Nr. 8. — 120) Selter.
Zeitschr. f. Hyg. Bd. 81. 1916. — 121) Sick, Miinch. med. Wochenschr. 1918. 8. 237. —
122) Sluka u. Strisower, Wien. klin. Wochenschr. 1917. S. 337. — 1*3) Spitta,
Hyg. Rundsch. 1921. H. 1/2. — 124) Stephan, Berlin, klin. Wochenschr. 1916, 8. 569;
Beitr. z. Klin. d. lnfektionskrankh. Bd. 5. 1916. — 125) Sternberg, Zieglers Beitr.
Bd. 64. 1918. — 126) Stin tzi n g, Kongr. f. inn. Med. in Warscbau. — 127)Siilenguth,
Miinch. med. Wochenschr. 1918. 8. 915. — 128, 129) Trautmann, Zeitschr. f. Hyg.
Bd. 44 u. 45. — 130) Uhlenhuth u. Hiibner, in Kolle-Wasserman n, 2. Aufl.
Bd. 3. — 131), 132), 133) Wagner, (Diss.) Centralbi. f. Bakt Abt. 1. Orig. Bd. 71.
1914. (Mikrobiologentagung Jena 1920.) — 134) Wagner u. Emmerich, Centralbi.
f. Bakt Bd. 79. 1916. — 135) Walser, [Dies.] Zurich. 1908. — 136) v. Wilucki,
Arch. f. Schiffs- u. Tropenhyg. Bd. 19. 1915. — 137) Vorschiitz, PIliigers Arch.
Bd. 186. 1921. 8. 295. —.

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526

Oentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Nachdruek verbotm.

Ueber das Vorkommen von Protozoen in der Zerebrospinal-
fliissigkeit von Fleckfiebererkrankten.

[Axis der Bakteriologischen Abteilung des Laboratoriums des milit&r.

Hauptsanitfitsamtes und dera Bakteriologischen Institut der Reichs-
medizin. Hochschule in Moskau (Direktor: Prof. J. L. Kritsche wsky).]

Von Prof. Dr. med. et phil. J. L. Kritscliewsky.

Mit 5 Abbildungen im Text.

Der Flecktyphus gehOrt zn den wenigen Erkrankungen, bei denen
der Erreger, obwohl er morphologisch unbekannt ist, sehr grflndlich in
seinen biologischen Eigenschaften erforscht ist. So wertvoll an sich
diese Feststellungen auch sein mbgen, so durfte doch erst durch die
morphologische Eutdeckung des Erregers die Aussicht geschaffen werden,
neue Hilfsinittel im Kampfe gegen den Flecktyphus (Vakzination, Sero-
therapie und insbesondere Cheinotherapie) zu finden.

Gotschlich 1 ) glaubt, dad das Auffinden des Flecktyphnserregers
hentzutage nur einen bedingten Wert besitzt. Ich selbst jedoch war
niemals dieser Ansicht. Die Erfahrung des letzten grofien Ivrieges gibt
allerdings einigen Grund fQr den von Gotschlich vertretenen Stand-
punkt, denn dank der ausgedehnten Erfahrungen, die in der Flecktyphus-
lehre seit den klassischen Arbeiten von Nicolle gesammelt waren, war
es mbglich, dad das Fleckfieber in diesem Kriege trotz der ungeheuren
Ansammlung von Menschen niemals solche katastrophalen Dimonsionen
wie in friiheren Kriegen annahm. Aber das letzte Jahr in Rudland hat
bewiesen, dad es im Leben der Menschen Momente gibt, in denen der
Kampf mit der Infektion, der auf normale kulturelle, fiuBere Lebensbe-
dingungen aufgebaut war, zur Unmoglichkeit wird. Und wenn noch bis
vor kurzem der Hygieniker oder der Bakteriologe glaubte, die Epidemic
des Flecktyphus auf einen gewissen Rayon begrenzen und relativ schnell
bekSmpfeu zu konnen, so steht er jetzt fast machtlos der Seuche gegen-
flber und ist in die Rolle eiues Zuschauers oder Opfers gedrSngt.

Bei solcher Sachlage bot die Eutdeckung des Erregers dieser Er-
krankung Aussicht, bei gunstigem Zusammentreflen der Umst&nde nene
Mittel zur Bekampfung des Flecktyphus zu schaffen.

Von Beginn meiner Arbeit an babe ich auf die Idee, daB der Er¬
reger bakterieller Natur sei, verzichtet, weil mit dieser Idee alle unsere
wissenschaftlichen Erfahrungen uber den Flecktyphus unvereinbar sind.

Als Erreger des Flecktyphus kann nur ein Protozoon in Frage kom-
men, und jeder Forscher, dor die bakteriologische Literatur mit unniitzem
Ballast zu vermehrert vermeidet, kann auf keinem anderen Standpunkte
stehen, weil die Erfahrungen des Krieges und die Literatur der letzten
Jahre zwingend auf die animalische, aber in keinem Falle auf die vege-
tabilische Natur des Erregers hinweisen.

Ich muB erkliiren, warum ich gerade die ZerebrospinalflQssigkeit
zum Objekt meiner Untersuchungen gew2,hlt habe. Schon seit Mot-

1) Gotschlich, Ueber den jetzisren Stand der Lehre vom Fleckfieber. (Ergebn.
d. Hyg., lmmunitiitbf. u. exper. Thor. Bd. 2. 1907.)

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Kritsche waky, Protozoeo in der Zerebroapinalflussigkeit tuw. 527

schutkowskys Zeiten (1900) ist festgestellt, dad das Virus des Fleck-
typhus im filute sich aufhfilt; Nicolle, Conseil und Conors 1 2 3 )
Uutersuchungen haben dieses Faktum an einem groBen Material experi¬
mented einwandfrei best&tigt Dieselben Autoren haben nachgewiesen,
da& das Virus in den geforinten Blutelementen, und zwar, wie es scheint,
in den weifien KOrperchen (Nicolle, Conseil und Conor) und m6g-
licherweise auch in den Erythrozyten (Anderson und Goldberger)*)
enthalten ist. Trotz alledem ist der Erreger des Fleckfiebers bisher nicht
entdeckt. Erfolglos bleiben, wie es scheint, alle BemQhungen, ihn im
Organismus und in jenen spezifischen Herden in den perikapillfiren Ge-
ffiBen, welche von Fr fink el beschrieben wurden, nachzuweisen. Wo
liegen die Ursachen einer solchen paradoxen Tatsache?

Der Organismus reagiert auf das Eindringen des Virus durch Anti-
kOrperproduktion und aktive Tfitigkeit der Zelle, infolgedessen nimmt
der Mikroorganismus des Flecktyphus im Blute die fQr seine Arterhal-
tuug gQnstigste Form an. Solche Metamorphosen sind bekannt bei den
Bakterien, aber auch bei den Protozoen; ich erinnere an die Kapsel-
bildung bei Anthrax, bei Pneumokokken, an die Leishmania-fihnliche
Form des Schizotrypanum Cruzi in den Geweben und an die
Trypanosomenform im Blute, an den Uebergang der Rekurrensspirochfite
im Verlauf von 24 Std. nach dem BiB in dem Organismus der Laus in
ein mit unseren optischen Mitteln unsichtbares Entwicklungsstadium
und an die Uinbildung dieser unsichtbaren Formen in Spirochfiten im
Verlauf von 8 Tagen 8 ), 4 5 * * ).

Nach meiner Ansicht kommen hier 3 MQglichkeiten in Frage: ent-
weder existiert das Flecktyphusvirus im Blute in einer Form, die mit
unseren optischen Mitteln nicht erkannt werden kann, oder es handelt
sich um Gebilde, welche mit den Ffirbemethoden unserer heutigen Technik
nicht sichtbar gemacht werden kdnnen, oder endlich, die Gebilde sind
in den Zelien nicht mit Sicherheit zu erkenneu oder wie die Prowa-
zekschen Kdrperchen noch umstritten. Es scheint mir, daB derartige
Erwfigungen nicht ganz willkflrliche sind. Die Metamorphose der afri-
kanischen Rekurrensspirochfiten, wie oben schon gesagt wurde, und die
Umwandlung der Protozoen, welche von mir bei Flecktyphus entdeckt
wurden, sprechen fQr meine Voraussetzung. Wenn aber die UnmQg-
lichkeit, den Mikroorganismus des Flecktyphus an den Tag zu bringen,
durch das Vorhandansein der von ihm selbst im Blute hervorgerufenen
Immunkdrper abhfingig ist, wie lfifit sich diese Schwierigkeit umgehen?

Die RQckenmarksflQssigkeit hat im Organismus in dieser Beziehung
eine Sonderstellung. Im normalen gesunden Organismus enthalt sie
nicht jene Antikorper, welche im Serum sind s ). Bei krankhaften Zu-
stfinden gchen diese Antikftrper aus dem Blute in die RQckenmarks-
flilssigkeit entweder gar nicht uber oder nur in geringer Menge im Ver-
gleich zu den im Serum nachweisbaren AntikQrpern.

FQr mich war die Erklfirung dieser Frage bezuglich des Verhaltens
der Zerebrospinalflussigkeit der Flecktyphuserkrankten von Wichtigkeit.

1) Ann. de Flnstit. Pasteur. 1911.

2) Zitiert nach Gotschlich etc.

3) Nicolle, Blaizot vt Conseil, Ann. de l’lnstit. Pasteur. 1913.

4) Nicolle et Blanc, Compfc. rent!, de l’Acad. de Sc. 1915.

5) Weil u. Kafka, Wien. klin. Wochenschr. 1911. Nr. 10, haben bewiesen, dafi

die Hamoiysine gepen die Hammelerythrozyten, die im Serum vorhanden, in der Riicken-

markeflussigkeit fehlen.

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528

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Zu diesem Zwecke wurde die Weil-Felixscbe Reaktion sowohl mit
der Lumbalflfissigkeit wie mit dem Serum von 31 Fallen der verschie-
densten Krankheitsstadien ausgeffihrt. Es wurde festgestellt, daB Agglu-
tinine nur in 7 Fallen in der Zerebrospinalililssigkeit nachweisbar waren,
wobei die quantitativen Verhfiltnisse zwischen Blutserum und Lumbal¬
flfissigkeit folgende waren:

Titer des Blutserums

Titer der ZerebrospinaK
fliissigkeit

L: 300

1:25

1:400

1: 100

1: 5u0

1:300

1:400

I 1:50

1 :3(X)

1:100

1:300

1:100

1:300

1:50

NormalhSmolysine (Weil-Kafkas Reaktion) des menschlichen Se¬
rums gingen in unseren Fallen in die FlQssigkeit nur 6mal fiber, dabei
war ihre Quantit&t so klein, daB 10 ccm FlQssigkeit kein einziges Mai
eine vollstSndige Hfiraolyse ergaben.

Wir konnen also mit vollem Rechte bei Flecktyphus die Zerebro-
spinalflfissigkeit als ein Medium sui generis betrachten, in dem Antikorper
vollstfindig feblen (24 Ffille) Oder nur in geringer Menge vorhanden
sind. Und wenn wirklich der Mikroorganismus des Flecktyphus im
Blute in einer Form eines Protozoons existiert, die mit unseren gewfibn-
lichen Methoden der Bearbeitung und mit unseren optischen Mitteln
nicht zu fassen ist, so muB er in der Zerebrospinalflfissigkeit in einer
durchaus ffir unsere Wahrnehraung zugSnglichen Form vorhanden sein.

Diese „Arbeitshypothese tt diente mir bei meinen Untersuchungen
als Leitfaden und hat mir zu einigen positiven Resultatcn verholfen,
fiber die ich nachstehend bericbten will.

Notwendig ist es zunfichst, auf die Frage, unter welchen Be-
dingungen der Uebergang der Mikroorganismen in die Rfickenmarks-
flfissigkeit stattfindet, n&her einzugehen. Bekanntlich ist der Ueber¬
gang der Mikroorganismen nur mfiglich bei Affektion der Hirnh&ote.
Unter denselben Bedingungen muB auch der Uebergang der Erreger des
Flecktyphus in die Zerebrospinalflfissigkeit stattfinden. Als Indikator
einer Hirnhauterkrankung dient beim Lebenden die Pleozytose. Man
kann also nur in jenen Fallen des Flecktyphus das Eindringen ihrer
Erreger in die Zerebrospinalflfissigkeit erwarten, in denen bei der Puok-
tion dio Pleozytose nachweisbar ist, und zwar um so reichlicher, je in-
tcnsiver die Pleozytose ist.

Wir rcsumieren also: Wenn bei Flecktyphus eine Affektion der
Hirnhaute sich findet, welche durch die Pleozytose konstatiert wird, so
mtissen in der Zerebrospinalflfissigkeit, welche im Gegensatz zum Blute
Antikorper nicht Oder nur in kleiner Menge enthfilt, die Erreger der
Krankheit. sich finden.

Und in der Tat wurden unter diesen Bedingungen in 4 Fallen Pro-
tozoen entdeckt. Ich bringe hier kurz die Krankheitsgeschichten und
Protokolle der Flussigkcitsuntersuchung:

1) P„ 23 J. alt. Das Flecktyphnsexanthem ist scharf ausgepragt auf der Brest
und auf dem Bauch. 5. Tag der Erkiankung. Keine Normabwcichung der inuer«*n
Organc. Von seiien des Nervensysteins keine Erschemungcn. Bei der Punklion wunicn
15 ccm Icicbt triiber Flustigkeit erhalten, die ein an geformten Eleiuenten armes Ge-
erinnsel ausschied.

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K ritschewsky, Protozoen in der Zerebrospinalfliissigkeit uaw.

529

2) F., 24 J. alt. Flecktyphusexanthera trat zuerst auf dem Bauch und anf den
Extremitaten auf. 10. Tag der^ Erkrankung. Von aeiten der inneren Organe keine
Abweichungen, von aeiten dea Ncrvcnwystems wurde Irrereden beobachtet. Man erhielt
10 ccm ganz durchsichtiger Lumbnlilussigkeit.

3) b.. 28 J. alt. Stark auagepragtea Exantbem auf der Bruat, auf dem Bauch
und auf aen Endgliedern. Die inncrin Organe o. B. Von aeiten dea Nervensys terns
nicbta Beaonderea. Die Punktion ergab 12 ccm durchaichtiger Fliissigkeit. 14 Er-
krankungatag.

4) K., 23 J. alt. Exanthem wenig scharf auageprSgt auf der Bruat und dem
Bauch. 7. Erkrankungatag. In der Lunge diaaeminicrte, trockene Oerauache. Keine
nervosen Eracheinungen. Die Punktion ergab ungefahr 10 ccm Fluaaigkeit.

Die bakteriologische Untersuchung, welche (lurch Beimpfen von
Bouillon und Agar sowie von Ascitesbouillon und Ascitesagar ausgefOhrt
wurde, ergab in alien diesen 4 Fallen ein negatives Ergebnis; die be-
impften NahrbOden blieben steril.

Ergebnis der Untersuchung der Cerebroapinalflussigkeit der
4 Kranken, bei welchen Protozoen gefunden wurden.

Nr.

Reaktion

Wei 1 - Felix-
Beaktion

Ra fkas-

Bakterio¬

logische

Unter-

suchung

Protozoen

Tag der Er¬
krankung

dea Blut-
serums

der Zere-
bro*pinal-
fliiiasi^keir

Reaktion

1 .

scharf

poaitiv

1:300 +

negativ

positiv

steril

sebr

reicblich

5.

2.

scbwach

positiv

1:100 +

negativ

»»

dgl.

10.

3.

mittel-

mafiig

poaitiv

1:300 +

1 :100 +

if

vereinzelt

14.

4.

mittel-

mafitg

pobitiv

1:200-

negativ

71

wenige

7.

Bei 2 Erkrankten (Fall 1 und 2) wurden Protozoen in groBer Menge
gefunden, in den bciden anderen Fallen dagegen nur wenige Exemplare.
In 27 Fallen fanden sich in der ZerebrospinaltiQssigkeit keine Protozen.
Haben nun die Bedingungen, unter welchen von mir in der Zerebro-
spinalflflssigkeit Protozoen nachgewiesen wurden, mit denjenigen leitenden
Grflnden, welche ich mir im Anfange meiner Untersuchung gestellt habe,
fibereingestimmt?

Ich mochte diese Frage bejahen. Der Uebergang der Protozoen in
die ZerebrospinalflOssigkeit ist in der Tat nur mfiglich beim Vorhanden-
sein von Hirnhauilasionen, fftr die als Indikator die Pleozytose anzu-
sehen ist. Wir haben nun starke Pleozytose unter 31 Fallen 2inal,
Pleozytose mittleren Grades 4mal beobachtet und, wie ich erwartete, in
3 von diesen 6 Punktaten Protozoen gefunden. Aus 6 Punktaten mit
Behr schwacher Pleozytose wurden Protozoen nur bei 1 Kranken nach-
gewiesen.

Was nun die Abhangigkeit des Nachweises der Protozoen von dem
Gchalt der Lumbalflflssigkeit an Antikdrpern anbetrifft, so hat meine
Annahme sich als richtig erwiesen. Bei denjenigen Kranken, bei denen
Protozoen in groBer Zalil gefunden wurden, waren ImmunkOrper gar
nicht oder nur in unbedeutender Menge vorhanden. Dort aber, wo Im-
munkbrper in die Flilssigkeit in relativ grSBerer Menge tlbergingen,
wurden die Protozoen entdeckt. Den Mikroorganismus, der von mir in

Em* Abt. Orig. Bd. 87. Uefl 7/8. 34

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530

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

der Zerebrospinalflussigkeit gefunden wurde 1 ), habe ich Nicollia ag-
gregata genannt zu Ehren des GrUnders der heutigen Lehre von der
Aetiologie des Flecktyphus. Der Artname beweist die innewohnende
Neigung dieses Organismus zur Koloniebildung und zur Bildung von
mehr Oder weniger groBen Anhaufungen.

Bei der Untersuchung der Nicollia stellte ich das Vorhandensein
von 2 Formen fest, welche zwischen sich keine UebergSnge haben.
Die Frage, welche Verh&ltnisse diese zueinander haben, ob sie manuliche
oder weibliche Individuen sind. oder Verh&ltnisse anderer Natur sind,
muB wegen meines geringen Materials zunachst unbeantwortet bleiben.

Alle anderen Nicollia

Fig. 5.

Fig. 3.

Fig. 4.

lassen UebergSnge un-
tereicander ohne wei-
teres erkennen.

Die Nicollia stel-
len sich des Sfteren als
lSngliche Gebilde dar;
seltener sind runde
Formen von ca. 1,8 n
GroBe. Siebesitzeneine
scharf ausgepragte
Hulle; ihr Protoplasma
ist fein rosablaulich ge-
fSrbt. Der Kern ist zu-
meist stabformig, zu-
weilen auch oval; er
liegt perpendikular zu
dem iangeu Diameter
der Zelle nahe der Mitte,
ist aber nicht selten
gegen die Hulle, die
violett-rot gefarbt ist,
zu verschoben (Fig. 1
und 2).

Bei der Teilung,
welche perpendikular zu
dem LSugsdurchmesser
erfolgt,wird derKern zu*
erst verdickt; er sch willt
an und teilt sich pa¬

rallel zur LUnge in 2 Halften 2 ) (Fig. 2). Meistenteils beginnt die

HUlle sich gleichzeitig mit dem Protoplasma einzuziehen; nach dem all-

1) Wegen der gebrauchten Methodik will ich nur einigo Wortesagen: Die Fliissig-
keit wurde bald nach der Ankunft ira Laboratoriura bakteriologisch untersucht und
nachdern zentrifugiert. Das Sediment rauB auf Glas geschmiert werden als diinnes
Deckglaspraparat, wie man Blut behandelt. Leider habe ich selbst solehc Deckglaa-
praparate nur gebraucht, wenn die Pleozytose komplett und das Sediment in groSer
Wcnge vorhanden war. In der Mehrheit der Falle war das Sediment unbedeutend. so
dafi es nui zur Anfertigung tropfenweiser Deckglaspraparate nach Ravant (zur Zah-
lung der geforraten Elemente) gentigt; gleichzeitig aient es far das Auffinden der Pro-
tozoen, ist aber fur diese Zwecke unbedingt cine unvollkommcne Method©. Die Deck¬
glaspraparate werden in Spiritus und Aether ca. 5 Min. fixiert und mit Gru biers
G iemsa-Losung gefarbt, wobei 1 oder 3 Tropfen zu 1 com Aqua destill, gegeben
wurde; einige Praparate wurden nachdern mit Spiritus differenziert.

2) Ee ist moglich, daft die Individuen, welche eincu pravalierenden Durchmesser

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Kritschewsky, Protozoen in der ZerebrospinalfluBsigkeit usw. 532

mShlichen Auseinandergehen beider H&lften schnflren sich die Kerne ab
ond teilen sich zusammen mit dem Protoplasma; endlich dringt die
Hfille selbst in die Mitte der Zelle durch, womit die Teilung der letz-
teren vollendet ist. Zuweilen (Fig. 2) begleitet die Kernteilung nicht
die Zellteilung, wie Fig. 5 zeigt; zuweilen fangt umgekehrt die Ilfllle
mit dem Protoplasma sich friiher zu teilen an als der Kern (einzelne
Nicollia in Fig. 1).

In Fig. 5 sind Parasiten abgebildet, die durch ihre Grdfie an sich
und die Dicke ihrer Hfllle ausgezeichnet sind.

Andererseits gibt es auch Nicollia, die ganz ohne Hiillen sind;
ihre GrbiSe betr&gt 0,9 ft. Sie sind in Fig. 4 abgebildet. Mit den Ni¬
collia der Fig. 1 sind sie durch allmahliche stufenweise UebergSnge
verbunden (Nicollia 2 mit dtinneren Hiillen als in Fig. 1; 2 Individuen
in dem oberen Teil der Fig. 3 mit sehr diinuen Hullen). Parallel mit den
dCtnner werdenden Hullen hort das Protoplasma des Parasiten mehr und
mehr auf, sich zu fSrben, so daB die Nicollia in Fig. 4 Bildungen mit
ungefSrbtem, durch starke Lichtbrechung jedoch ausgezeichnetem Proto¬
plasma darstellen 1 ), und umgekehrt ist das Protoj)lasma je nach der
Verdickung der Hulle starker gefSrbt. Als ProgreBausdruck des Ver-
dflnnungsprozesses dienen die Nicollia, welche ein durch Lichtbrechung
dnterschcidbares Protoplasma nicht besitzen; solche Formen konnen
leicht als Bakterien angesehen werden 2 ), insbesondere bei der Verfarbungs-
verfinderung des Kernes, von welchem Irrtum uns das aufmerksame
Studium der Nachbarindividuen bewahrt, welche ein lichtbrechendes
Protoplasma noch besitzen. Die Acnderung in der Verfarbung des
Kernes findet auch bei Individuen statt, welche unverfarbtes Protoplasma
aufweisen; es ist erkennbar an einer blauen, statt violetten FSrbung des
Kernes.

Welches ist nun die Ursache fQr diesen scheinbaren Polymorphismus
der Nicollia? Meiner Ansicht nach ist es der auBerliche Ausdruck
jencr komplizierten Beziehungen, welche zwischen dem Mikro- und
Makroorgauismus im Zwischenkainpfprozesse stattfinden. Als Schutz-
erscheinung des Mikroorganismus dient das Verdickungsstreben der Hulle
und damit das Streben, seinen KSrper der Wirkung der ImmunkSrper
zu entziehen, deren Sieg, wie es scheint, in der allmahlichen Zerstorung
der HQllen und in der Abschwachung sowie in dem Verlust der Farb-
barkeit des Protoplasmas durch Vernichtung desselben und in der Ver-
inderung der Kernfarbung zum Ausdruck kommt.

Bezfiglich der Stellung der Nicollia in dem Protozoensystem kann
ich auf Grund des bei mir vorhandenen Materials nur sagen, daB die
Nicollia in keiner Beziehung zu den bisher beschriebenen pathogenen
Protozoen des Menschen steht.

Was nun meine Ansicht hinsichtlich des Verhaitnisses der Nicollia
aggregata zum Flecktyphus anbetrifft, so glaube ich, daB sie sehr
wahrscheinlich die Erreger des Flecktyphus sind.

Weitere Untersuchungen der Zerebrospinalfliissigkeit unter den von

in der Lange haben, die anfanglichen Stnfen vor dem Momente der Teilung des Kernea
dan-tellen. Dann darf man die runde Nicollia als im Ruhezu&tande bleibende Zelle
belracbten.

1) Auf der Photograpbie bnben auch die Pedimentzcllen um eicb eine helle Zone;
in der Tnt jcdoch ist es abcr bloli ein Lichtcffekt bei der Phoiogrnpbie.

2) Mir acbeint dninit zum 1. Mai auf die wirkliche Mctamorpbosemoglichkeit der
Protozoen in bakterielle Formen (Strongy loplasma Lipschiiiz) bingewiesen zu sein.

34*

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532

CentralbL f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

mir oben angegebenen Bedingungen werden diese Frage entscheiden.
Es ist jedoch notig, zu beachten, daB leider der kliniscbe Verlauf der
Krankheit Indikationen fflr die PleozytosemOglichkeit nicht gibt. Meine
mit VV. I. Autonomow zusammen ausgefQhrten Untersuchungen haben
dargetan, daB bei den schwersten Erscheinungen von seiten des Nerven-
systems die Pleozytose feblen kann, und daB umgekehrt bei Fehlen alter
klinischen Erscheinungen diese scharf ausgedrflckt sein kann.

Figurenerkl&rimffen.

Mikrophotographiert wurde bei einer VergrdBerung von 1:1400.

Fig. 1. Eine Gruppe von 15 Ni colli a. 14 Bind zusaroraengefugt, 1 liegt be-
Bonders. Das Protoplasms ist rosablaulich, der Kern violettrot. Die Hiillen Bind scharf
auBgedruckt, etwas dicker aU auf Fig. 2. 2 Individuen im Anfang der Teilung.

Fig. 2. 5 Nicollia mtt klar au^edriickten Hiillen, etwas feiner als Fig. 1. Die
Kerne Bind Btabformig. 3 Nicollia Bind im Teilungsstadium: in 1 rechts oben hat
sich der Kern bald geteilt, aber noch nicht auseinanderzugchen angefangen, und Hulle
nnd Protoplasma, sich iiberschnurend, haben sich noch nicht geteilt. Die unten liegenden
Nicollia haben Bich auch nicht ganz geteilt, und obgleich die Kerne schon genug
auseinandergingen, Bind die Kftrper noch nicht mit einer Scheidewand abgegrenzt. In
dem dem letzteren sich anschlie&enden Individuum ist der TeiJungsprozei} im Proto¬
plasma beendigt.

Fig. 3. Unten Bind 2 Nicollia mit scharf ausgebildeter Hulle (aber feiner als
Fig. 5). Eine hat 2 Kerne. Oben Bind 6 Nicollia mit sehr feinen Hiillen. Das
Protoplasma ist fast unverfarbt. Die Kerne Bind Btabformig.

Fig. 4. Eine grofie Anhaufung von Nicollia. Die Hiillen fehlen schon. Proto-
plasma nicht verfarbt, aber bei deu moisten Individuen deutlich sichtbar durch ihre
Btarke Lichtbrechung; nur bei einigen Bind sie nicht zu .unterscheiden. Kern meist
violett rot, nur einzelne blau; Mehrzahl Btabformig, einige teilen sich.

Fig. 5. 8 Nicollia mit dickeren Hiillen. Protoplasma in hohem Grade ver¬
farbt. Ganz oben liegt 1 im Teilungsstadium, rechts 2 ohne Hulle.

Nachdruck verboten.

Ueber einen meningokokkenahnlichen Erreger bei einem
klinischen Fall von Meningitis.

[Aus dem Hygieuischeu Institut der Universit&t GieBen (Direktor: Prof.

Dr. Gotschlich).]

Von Dr. Wilhelm Rcufi,

Assistenzarzt am Philippshospital bei Goddelau in Hessen.

Im folgenden soil das mikroskopische und kulturelle Verhalten eines
meningokokkenabnlichen Stammes beschrieben werden, der aus der
eitrigeu SpinaldQssigkeit eines unter den klinischen Zeichen der Meningitis
cerebrospinalis verstorbenen 8V 2 -j4hrigeu Knaben gezQchtet worden ist

Auszug aus der Krankengeschichte.

Albin Lenz, 8'/* Jahre. Aufgenommen am 9. Jan. 1921. Erkran-
kung plotzlich mit hohem Fieber und Kopfschmerzen.

Auszug aus dem Sektionsprotokoll.

Eitrige Meningitis der GroBhirnbasis, besonders im Bereiche des
Chiasma opticum und nach dem Kleinhirn zu entlang deu stark gefflllten
Venen nach beiden Seiten auf die Konvexitat Obergreifend. Hydro¬
cephalus iuteruus acutus. Starke eitrige Meningitis spinalis, die unter

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Reufi, Meningokokkenahnl. Erreger bei einem klin. Fall von Meningitis. 533

vblliger Freilassung des Ilalsmarkes am Brustmark beginnt and bis
zur Cauda equina reicht. Auffallend weites Herunterreicben des eigent-
lichen Rtickenmarkes bis zu den Kreuzbeinwirbeln. Eitrige EntzQndung
des 1. Auges (Panophthalmie). Schwellung im Bereiche des Handgelenkes.
Offenes Foramen ovale. Bronchien und Lunge o. B.

Die bakteriologische Untersuchung des Falles „Lenz“, ausgefOhrt im
Hygienischen Institut der Universit&t GieBen, zeitigte folgende Ergebnisse:

Zur Untersuchung gelangten das am 9., 11. und 14. Jan. entnom-
mene Lumbalpunktat und ein bei der Sektion am 17. Jan. entnommenes
Gewebsstflckchen mit eitrigem Exsudat. Aus s&mtlichen 4 Proben wurde
derselbe Stamm mit stets den gleichen Eigenschaften gezflchtet, der von
echten Meningokokken in mehrfacher Beziebung deutlicb abwich.

1) Originalausstrich (Gram-F&rbung). Im PrSparat zahlreicbe poly-
nukleilre Leukozyten, wenig Lymphozyten, gramnegative sowie grampositive
Diplokokken von verschiedener GroBe, zum Teil intrazellulSr, jedoch meist
extrazellul&r. Oft schwer zu unterscheiden, ob grampositiv Oder gramnegativ.
In dem aus der Leiche, aus dem RQckenmark gewonnenen Originalpr&parat
▼erhielten sich die Diplokokken &hnlich wie im Lumbalpunktatausstrich.
Die meisten Diplokokken waren extrazellul&r gelagert, viele jedoch aucb
intrazellulSr. W&hrend im Lumbalpunktatausstrich hbchstens bis zu
4 Diplokokken intrazellul&r gefunden wurden, lagen hier bis zu 10 in
ein und demselben Leukozyten. In ihrem Verhalten zur Gramschen
F&rbung verhielten sie sich wechselnd, so daB es oft schwierig war, sie
als grampositiv Oder gramnegativ zu erkennen. Die meisten wurden
jedoch als grampositiv erkannt. Die Leukozyten enthielten oft gram¬
positiv gef&rbte Granula, die vielleicht als verdaute Diplokokken aufzu-
fassen sind.

2) Agarplatten. Wachstum in kleinen, ca. 1—2 mm Durchm., wenig
durchsichtigen, grauweiBlichen, loicht erhabenen, scheibenfdrmigen Kolo-
nien, die bei schr&g auffallendem Lichte blfiulich opaleszieren. Aus-
8tricbprSparat nach Gram gefarbt. Gramnegative Diplokokken von ver-
schiedener GrbBe und Farbe in staphylokokkenShnlichen Haufen, da-
zwischen zahlreiche, besonders groBe Diplokokken, die am intensivsten
gefarbt sind. Die Kokken liegen oft zu 4 zusammen. In den frischen
Kulturen sind die Kokken ausnahmslos gramnegativ, ftltere Kulturen
(3—5 Tage) zeigen in der Mitte brSunliche Verfarbung und Knopfbildung
an den Randern und im mikroskopischen PrSparate Involutionsformen
yon sehr ungleicher GrbBe und teilweisen grampositiven Verhaltens.

3) Ascitesagarplatten. Wie 2.

4) Agglutination. Mit Meningokokken serum des Reichsgesundheits-
amtes (Tit. 1:2000): Bei 50° 1 Std. und bei 37° 24 Std.

1:25

1 • 100 ne 8 atlv >

1:200 J

auch bei bfterer Wiederholung des Versuches mit langer fortgezOchteten
Stammen. Kontrolle mit 2 verschiedenen typischen Meningokokken-
stAmmen positiv.

Andererseits zeigt das Serum eines mit dem Stamm „Lenz“ ge-
impften Kaninchens mit dem eigenen Stamm deutlich Agglutination bis
zu einer Verdflnnung von 1 :400 nach 24-stiiud. Stehen im Brutschranke,
sowie auch nach 1 Std. bei 55°. Dagegen koine Agglutination echter
Meningokokken mit r Lenz“-Serum.

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534

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Zur Gewinnung des Serums wurde einem Kaninchen in 8-tSgigem
Abstande 3mal je V 8 Oese abgetoteter Kultur intravenbs injiziert.

Der negative Agglutinationsausfall ibr sich allein wfirde nicht gegen
die Zugehorigkeit des Stammes „Lenz tt zur Spezies Meningococcus
sprecben, da auch echte Meningokokkenstfimme oft nur schwer oder gar
nicht mit Meningokokkenserum agglutinieren, das nicht ffir den zu ag-
glutinierenden Stamm spezifisch ist [Kutscher (1), Rautenberger
(2), K olle und v. Wassermann (3), Eberle (4), Eisner und Hun-
t o o n (5), K fl s t e r (6), M a r m a n n (7), Neumann (8), S1 6 v e s a n d (9),
Trautmann u. Fromme (10), Zeissleru. Gassner(ll), Klinger
u. Fourmann (12), Gotschlich (13) Hancken (14), Huntemtll-
ler (15), Vonderweidt (16)].

5) v. Lingelsheimsche Lackmus-Ascites-ZuckernShrbSden. Die
Lackmus-Ascites*Zuckernfihrboden wurden hergestellt nach der Vorschrift
von v. L i n g e 1 s h e i m. Maltose, LSvulose, Dextrose unverandert. (Kon-
trolle mit echten Meningokokken, M+, L—, D +.)

Die Aussaat gescliah mit 24-stilnd. Kulturen. In Slteren Kultnren
jedoch zeigte sich Vergarung von Maltose schwach schon vom 2., deut-
lich vom 4. Tage ab. Vergarung der Dextrose nur lmal bei einer
14-tSg. Kultur.

Atypisches Verhalten bei der Vergarung der verschiedenen Kohle-
hydrate ist mehrfach beschrieben worden [K utscher (1), Arkwright
(17), Bruckner (18), Ghon (19), Stbvesand (9), Gotschlich (13),
Vonderweidt (16), Zeissler u. Gassner(ll), Klinger u. Four-
man (12), Hancken (14)J.

6) In Bouillon bilden sich an der OberflSche kleine, grauweifie
Schiippchen, die bei Erschfltterung zu Boden sinken, sowie TrQbung der
Bouillon. Bei langerem Stehen bildet sich ein Bodensatz. 7) Auf
Gelatine kein Wachstum (nach 10 Tagen). 8) Lackmusmolke wird blau
und trtibe. 9) Traubenzuckeragar (Stiehkultur): keine Vergarung. Aus-
schlieBlich Obeiflachenwachslum. 10) Milch wird nicht verandert. 11) Auf
Blutplatten keine HStnolyse.

Ausstriche von der Bouillonkultur, Lackmusmolke und Trauben-
zuckeragar nach 7 Tagen auf Ascitesplatten zeigen dasselbe Wachstum
wie oben beschrieben. Der Milchausstrich ergab kein Wachstum.

Der von mir beschriebene Stamm unterscheidet sich also von
typischen Meningokokken durch eine Reihe verschiedener wichtiger Merk-
male:

1) Wechselndes Verhalten gegenuber der Gram-Ffirbung, ins-
besondere im Originalausstrich aus Liquor cerebrospinalis und in filteren
Kulturen. 2) Solortiges Wachstum auf gewbhnlichem Agar. 3) Wachs¬
tum bei 22°. 4) Felilen von Vergarung von Maltose und Dextrose bei
frischen Kulturen, wahrend in alteren Kulturen Maltose vergoren wird.
5) Felilen der Agglutination mit echtem Meningokokkenserum und rezi-
prokes, negatives Ergebnis bei der Prufung echter Meningokokken mit
Serum „Lenz“. 6) Erhohte Resistenz gegenGber fiufieren EindQssen.
Im Brutschrank hielten sich die Kulturen auf SchrSgagar und Ascites-
rfihrchen lange lebensiahig (bis zu 54 Tagen). Der Stamm Lenz er-
wies sich noch lebensfahig nach 10 Min. dauernder Erhitzung auf 45®
und 5 Min. dauernder Erhitzung auf 47°, w&hrend die entsprechenden
Kontrollversuche mit echten Meningokokken ein negatives Resultat er*
gaben.

Es entsteht nun die Frage, ob es sich in unserem Falle um einen

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Reufl, Meningokokken&hnl. Erreger bei einem kiin. Fall von Meningitis. 535

atypischen, weitgehend veranderten Stamm Oder urn eine, von Meningo-
kokken artverschiedene Kultnr handelt.

In der Literatur sind mebrere Fade von atypischen Meningokokken
[Ceradini (20), Vicenci (21), Huntemfiller (15), Klinger u.
Fonrmann (12) u. a.], sowie meningokokkenahnliche Diplokokken be-
schrieben worden [Harzer u. Lange (23), Frenzel (22), Eich-
hoff (26)].

Die aitesten Befunde sind die von jager (24, 25) und Heubner
(27), bei denen es jedocb nicht immer klar war, ob es sich urn den
Meningococcus Weichselbaum allein gehandelt hat. Ferner er-
wahnt v. Lingelsheim (28) den Diplococcus crassns, der sowohl
als Begleitbakterium als auch allein bei Meningitis, bei Tuberkulose und
nach Traumen gefunden worden ist. Interessant ist, daB auch im Fade
„Lenz u ein Trauma stattgefunden hat. Der Dipl, crassus ist im
vorliegenden Falle nicht anzunehmen, da er sich durch seine Vergarung
von Maltose, Dextrose und Lavulose und seine Farbbarkeit nach Gram
unterscheidet. Es ist anzunehmen, daB es sich im Fade „Lenz“ um
einen auf der Schleimhaut der oberen Luftwege vegetierenden Mikroben
handelt, der sich an dem durch das Trauma hervorgerufenen Orte ge-
ringeren Widerstandes festgesetzt hat und dort pathogen geworden ist.
Da es sich um einen vereinzelten Fad mit vorangegangenem Trauma
und ohne weitere anschlieBende Ansteckung handelt, ist der in Rede
stehende Stamm wahrscheinlich als „unfertiger Infektionserreger im
Sinne von Gotschlich (13) anzusehen.

Als atypischer oder durch Mutation (KShlisch, 29) verSnderter
Meningokokkenstamm kann der Stamm „Lenz“ nicht aufgefaBt werden,
da er zu viele Abweichungen von echten Meningokokken aufweist, mit
denen er auBer dem klinischen Bilde der Erkrankung und dem patho-
logisch-anatomischen Befunde nur die Diplokokkenform gemeinsam hat.

Bei geh&uftem, bzw. gruppenweisen Auftreten gleicher Fade ware
naan berechtigt, von Parameningokokken zu sprechen, da die gleichen
klinischen Symptome durch verschiedene, untereinander verwandte Er¬
reger hervorgerufen werden kSnnen (Typhus, Paratyphus, Ruhr).

Vora praktischen Standpunkte aus, besonders unter Berflcksichtigung
der Frage der Seuchenbekampfung, sind dem Fade „Lenz tt identische
Fdlle stets als Seuchen anzusprechen, da es filr den praktischen Arzt
meist unmSglich sein wird, festzusteden, ob es sich um einen typischen,
atypischen oder nur um einen dem typischen Erreger ahnlichen Mikroben
handelt.

Die Krankengeschichte und einen Teil der Originalausstriche des
Lumbalpunktates verdanke ich der Freundlichkeit des Direktors der
GieBener Universitatskinderklinik, Herrn Prof. Dr. Koeppe, wahrend
das Sektionsprotokod und ein Ruckenmarkssegment rair vom Direktor
des Pathologisch-anatomischen Institutes, Herrn Geheimen Medizinalrat
Prof. Dr. Bostroem, giitigst dberlassen wurde. Es sei mir erlaubt,
an dieser Stelle den beiden vorgenannten Herren ergebenst zu danken.

Zum SchluB erlaube ich mir, meinem hochverehrten Lehrer, Herrn
Prof. Dr. Gotschlich filr die Ueberlassung der Arbeit, sowie filr die
liebenswflrdige Unterstfltzung bei derselben meinen besten Dank aus-
zusprechen.

Literaturverceichnis.

Fliigge, GrundriS der Hygiene, Anhang (Gram-Farbung). — R6the, Centralbl.
f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 46. 8. 645 (v. Lingelsheimeche Lackraus-Ascites-Zucker-

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536

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Original©. Bd. 87. Heft 7/8.

nahrboden). — 1) Kutscher, Handb. d. pathog. Mikroorganiamen v. Kolle und
y. Wassermann. 2. Aufl. Bd. 4. — 2) Rauten berger, VerSffentl. a. <L Ueb. d.
MiL-San.-Wesen. 1905. H. 31. — 3) Kolle u. v. W a^ermann, Klin. Jahrb. Bd. 15.
1906. — 4) Eberle, Arcb. f. Hyg. Bd. 64. 1908. — 5) Elser u. 11 an toon, Journ. of
med. Ree. Vol. 20. 1909. — 0) Kiister, Hyg. Rund^ch. 1909. Nr. 8. — 7) M*t-
m aon, Ibid. 1908. Nr. 17. — 8) Neumann, Ibid. 1908. Nr. 8. — 9) StSvesand,
Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 46. 1908 — 10) Trautm&nn u. Fromme,
Miiuchen. med. Wochenechr. 19i8. S. 791. — 11) Zeissler u. Gassner, Zeitscbr. i
Hyg. Bd. 84. 1917. 8. 294. — 12) Klinger u. Fourmann, Miincben. med. Wochen-
schrift 1915. 8. 1037. — 13) Gotschlich, Dtsch. med. Woehensrhr. 1919. Nr. 22. —
14) Hancken, Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Orig. Bd. 78. 1916 S. 365. — 15) Hunte-
miiller, ZeiUchr. f. Hyg. Bd. 81. 8.316.— 16) Vondefweidt, Ibid. Bd. 88. 8. 481.
— 17) Arkwright, Journ. of Hyg. Vol. 9. 1908. — 18) Bruckner, Compt. rend.
Soc. Biol. 1908. Nr. 15. — 19) Ghon, Wien. klin. Wochenschr. 1907. 8. 1277. —
10) Ceradini, Ceniralbl. f. Bakt. Abt. I. Ref. Bd. 40. 1907. S. 372. — 21) Vicenci.
Ibid. Abt. I. Orig. Bd. 59. 1911. — 22) Frenzel, Ibid. Bd. 83. 1919. S. 509. -
23) Harzer u. Lange, Miinchen. med. Wocheneenr. 1916. 8. 950. — 24) Jatrer,
Ceniralbl. f. Bakt. Abt I. Orig. Bd. 33. 1903. S. 23. — 25) Ders., Zeitschr. f. mg.
Bd. 44. 8. 241.* — 26) Eichhoff, Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 84. S. 461. —
27) Heubner, Jahrb. f. Kmderhcilk. Bd. 43. 1896. — 28) v. Lingel9heim, Klin.
Jahrb. Bd. 15. 1906. — 29) Kohl inch, Zeitechr. f. Hyg. Bd. 80. 1915. 8. 404.

Naehdruek verbotm.

Ueber die fusospirillare Symbiose, die Gattung Fuso-
bacterium (K. B. Lehmann) und Spirillum sputi-

genum.

(Zugleich ein Beitrag zur Bakteriologie der Mundhohle).

[Aus dem Hygienischen Iostitut der Universitfit Wflrzburg and der
BakteriologischeD Untersuchungsanstalt Erlangen.]

I. Mitteilung.

I. Die Epidemiolosrie der fasospirlllftren Symbiose, besonders der
Plaut-Vincentsclien Angina.

Von Dr. med. Maximilian Knorr.

In den Nachkriegsjahren, jedoch auch schon in den ietzten Kriegs-
jahren, wurde flber ein geh&ultes Auftreten von Eikrankungen berichtet,
bei denen das cbarakteristische mikroskopische Bild der fusospirillSren
Symbiose fflr den Bakteriologen im Vordergrunde des Interesses steht.
Obwohl ja das gleiche Bild bei Stomatitis ulcerosa, gangraenosa, mer-
curialis, Gingivitis, Noma, Hospitalbrand, Phaged&nismus usw. erscbeint
[Matzenauer (1), Vincent (2) u. a.), wird jetzt gerade die Hftufig-
keit der P.V.A. 1 ) betont.

Den Grund fur die Haufigkeit dieser Angina sieht der eine in Ein schlep*
pung durch unsere Balkan- Oder die Besatzungstruppen [Kronenberg (3), Rosen¬
berg er (4)], der andero in der Schwachung des KOrpers durch Unterernahrun^
[E. Huber (5), H Heck (6) u. a.]. P. Eisen (7) hat schon 1905 auf sozt&lhygiem*
sche Momente, wie grofiere Unsauberkeit, speziell schlechtere Mundpflege als dispo-
nterend hingewiesen, was neuerdings wieder von H. Heck betont wird.

Experiment und Erfahrung eprechen gcgen eine Uebertragung von Mensch in
Mensch, so dafl die Einschlfppung kaum eine wesentlicbe Kolle bei der Haufigkeit der
P.V.A. gespielt haben diirfte. Uebrigens kann ich W. Gartner (8) dann beistiroroeo,
dafl in der Tiirkei keine groflere Haufigkeit oder ein andersartiger Verlauf derarliger
Krankheiten bemerkbar war. Denn den Epidemien Heinemanns (9) und Saner*

1) Plaufc-Vincentsche Angina.

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Knorr, Fusospirillare Symbiose der Gattung Fueobacterium usw. 537

Walds (10) mil 76 Ffillen auf dem Balkan steht die Angabe E. Hubers gegenhber,
dafl Weinbard Ende dee Kneges Koropagnien roit 10—20 Pro*, an Stomatitis er-
krankten Leuten land (wo, ist nicbt bemerkt). Aucb Kolle (11) wies schon in den
letzten Kriegsjabren auf diese haufige Erkrankung der Truppen im Osten bin.

Die Scbwachung des Organistnus durch mangelbafte Ernabrung
und ihren Folgen (Avitaminosen), vielleicht gememsam mit anderen Momenten, wie
mangeiude Muudpflege, ist vor aUem pradisponierend fur derartige Er-
kraukungen, wie aus der Literatur bervorgebt. Wir sehen da 2 Gruppen von An-
ginen Oder Erkrankuugen mit glenbem mikroskopischen Befunde: die einen verlaufen
scbwer, meist todlich, die andertn aulfallend leicht, so dafl der Arzt sebon desbalb sel-
tener in die Lage kommt, derartige Erkrankungen zu sehen, und wenn, dann nicbt im
Prodromalstadium. Die Scbwere 1 st nicht etaa durcb die fusospirillare Symbiose, son-
deru den Krafiezustand der Patienten bedmgt; so waren z. B. die Kranken Sauer-
walds und tieinemanns stark untereruahrt, ja sie litten sogar an ausgepragtem
Skorbut, ganz abgeseben von noch bestebenden oder abgeklungenen Infektiouen (Re-
currens). Reichel (12), der sonst einen guten Verlauf sah, erlebte gerade bei einem
scbwacbiicben Knaben und H ijmans (13) bei lymphatischer Leukamie einen Todesfall.
Andere Autoren, die bei Erkrankungen mit fusospirillarem Befunde todlichen Ausgang
saben, erwahnen ebenfalls fast durcbweg eine scbwere vorausgegangene oder gleicb-
zeitige Storuug des Allgemeinbefindens durch Scharlacb, Skorbut, Leukamie, Tuber-
kulose, Pyamie. Gleicbzeitig tritt bervor, dafl die Lokalisation dieser fuK^pirillaren
Erkrankungen bei scbwer gestorter Konstitution oft keine sebarfe ist. Es kann scbliefi-
lich eine gewisse Generalisation eintreten. So fiihrt z. B. eine P.V.A. zu schwerer
Stomatitis gangraenota und Zerstorung der Knocben.

Prad^pomerend fur fusospirillare Erkrankungen ist ferner z. B. auch Nikotin
(vielleicht Lt die engliscbe Zigarette ale Reiz gar nicbt so unscbuldig, wie Schotz (14)
meint), Alkohol (Vincent), nicbt selten findet man gerade bei Jugendlichen gleicb¬
zeitig Diphtheriebazillen.

Obwohl die Unterernfihrung, besser vielleicht mangelhafte EmSh-
rnng, frQher am haufigsten als pradisponierendes Moment fflr fuso¬
spirillare Erkrankungen anerkannt wurdjs, bestreitet man dies beutzu-
tage aus folgenden Grttnden: Als wientigsten Punkt fflhrt man die
Tatsache an, daB gerade 15—30-Jabr. von P.V.A. befallen wurden. An-
dere Autoren beobachteten P.V.A. bei wohlgenahrter Landbevtilkerung
and wieder andere betonen, dad die fusospirillaren Erkrankungen erst
nach dem Kriege haufiger geworden seien, wo die scblimmste Hungerzeit
schon lange Qberwunden war. Diese Punkte sind nicbt stichhaltig:

Mangeiude Nahrungszufuhr trifft gerade das kraftigste Alter am
schwersten. Wie wir weiter aus Weinhards und Kolles Mitteilung
sahen, bauften sich die fusospirillaren Erkrankungen schon in den letzten
Kriegsjahren. Ferner machte sich gerade die Unterernahrung auch
spater durch Haufung von Tuberkulose, Spatrachitis und Neigung zu
Infektionen als pradisponierender Faktor reebt deutlich bemerkbar. Den
vereinzelten Beobachtungen von P.V.A. bei wohlgenahrter Landbevfilke-
rung stehen die zahlreichen Erkrankungen der von mangelhafter Ernahrung
betroffenen Klassen gegentiber. Man darf in epidemiologiscben Fragen
nicht sebematisieren, sondern muB Hauptursachen hervorheben und nicht
dnreb den einen oder anderen Fall, der aus der Reihe herausfSilt, ver-
decken. So mufi man auch bertlcksichtigen, daB die Vorkriegszahlen der
Erkranknngen an P.V.A. in den Nachkriegszahlen entbalten sind.

* An dieser Stelle sei hervorgehoben, daB man in den Nachkriegs-
jabren den weseDtlichsten Punkt, die Beschreibung des KOrperzustandes,
bei P.V.A. oder ahnlichen Erkrankungen, vernacblassigte. Nur R. Fischer
(15) schreibt: „Objektiv findet man unter den Patienten mit
P.V.A. haufig Leute von einem gewissen hochaufgeschos-
senen und blutarm aussehenden Typus.“

Fflr die Epidemiologie dieser fusospirillaren Erkrankungen ware es
sehr erwttnscht, zu wissen, ob anamnestisch P.V.A. und Influenza, eine

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538 Centralbl. f. Baku etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Massenerkrankung, die dann auch die Landbev51kernng und besonders
das krfiftige Alter betroffen hatte, in Zusammeuhang gestanden hatten.
Bevor jedoch nicht genfigend Unterlagen vorliegen, ist ein SchluB kaum
berecbtigt. Lediglich der Vollstfindigkeit halber sei angeftlhrt, daB Heine-
mann (16) in 76 Fallen den Zusamtnenhang von Grippe und Stomatitis
ulcerosa feststellen konnte und spanische Aerzte sich fihnlich auBern.

Weiterhin finden wir, daB Mfinner hfiufiger an P.V.A. erkrankten
als Frauen [0. S. Tarnow (17) 33:20, W. Gftrtner 188:106J. Nur
wenige Autoren finden beide Geschlechter in gleicher Weise beteiligt.
Es ist mdglich, daB hier das starke Rauchen der Nachkriegszeit bei der
Mfinnerzahl kumulierend gewirkt hat.

Auch bezfiglich der jahroszeitlichen Verteilung der Erkrankungen
besteht in den Angaben nicht vfillige Uebereinstimmung.

Somit ergibt sich:

1) Die Annahme, die Angina sei eingeschleppt worden, widerspricht
den Experimenten und Erfahrungen fiber (Jebertragbarkeit der Symbiose
von Mensch zu Mensch.

2) Die P.V.A. resp. die fusospirillfiren Erkrankungen sind nicht erst
in den Nachkriegsjahren, sondern bereits in den letzten Kriegsjahren
hfiufiger gewesen als vor dem Kriege.

3) Es ist auffallend, daB in den Nachkriegsjahren bei Mitteilungen
fiber P.V.A. das Wesentlichste, der Kdrperzustand und kurz zurfick-
liegende Erkrankungen nicht oder nur mangelhaft berficksichtigt
werden.

4) In der Unterernfihrung, besser mangelhaften Ernfihrung (A vita-
mi nose) und ihren Folgen, Tiegt eine genfigende Erklfirung ffir das
hfiufigere Vorkommen der fusospirillfiren Erkrankungen in den letzten
Kriegs- und Nachkriegsjahren. Vielleicht ist auch Grippe ein bcgfin-
stigender Faktor, der manchen bisher schwer zu deutenden Fall er-
klfiren lfiBt.

Die Biologle dor fusospirillfiren Symbiose.

A. Entstehung und P athogenitfit der fusospirillfiren

Symbiose.

Als die ergiebigsten Fundorte der Fusobakterien, Spirillen und Spiro-
chfiten seien der Belag des Zahnhalses, hfiufig auch Zungenbelag, ferner
die Krypten der Tonsillen, sowohl bei Mensch als bei Tier, angeffihrt
Ferner kommen diese Organismen bei zahlreichen Erkrankungen des
menschlichen und tierischen Korpers, die durch f6ti<le Eiterungen und
Nekrose charakterisiert sind, z. B. Lungengangrfin, Leberabszesse, vor.
Neuerilings faBt man nicht ganz glucklich alle diese Erkrankungen unter
dem Namen „Fusospirochatosen“ zusammen.

Diese Organismen finden sich auch im Darm des Menschen und
vieler Tiere und auBerhalb in stagnierenden Gewfissern.

Vorwiegend interessiert den Mediziner die Aetiologie der P.V.A.,
mit der ja die fusospirillare Symbiose eng verknupft ist. Da anscheinend
alle Fusospirochatosen resp. Spirillosen die gleiche Genese haben, mochte
ich sie am Beispiel der P.V.A. eutwickeln.

Schon Muhlens (26) fand bei vollig normalen Mundhfihlen das
bezeichnende Bild der P.V.A. Zahlreiche Nachprfifungen bestfitigten

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Knorr, Fueoepirillaxe SymbioBe der Oattuog Fueobacterium uew. 539

dies. Die Erkl&rung scheint einfacb. SSmtliche Gattungen der Sym-
biose sind normale Bewohoer der menschlichen Mundhohle, ausge-
sprocben serophil und anaerob. Nun genflgen Zahnfleischtaschen,
Krypten und sonstige Nischen des Mundes an und fflr sich zur Erifil-
lung der Anaerobiose. Sie kann jedoch durch eine Symbiose ohne
AnaOrobiose weitgehend ersetzt werden. Und nun zur Serophilie!
Die geringste Exsudation bietet dieser fusospiiillSren Symbiose ein Op¬
timum der Ernfihrung. Schnell baben die Kokken, die ja in jeder
Mundhohle zu finden sind, die Vorbereitung des Serums fflr eine raschere
und sichere Ansiedlungsmoglichkeit der scbon in geringen Mengen vor-
handenen Fusobakterien tibernommen, so daB wiederum Spirillen Oder
Spirochflten alles zum besten Gedeihen vorfinden. Unbediugt erforder-
lich sind vielleicht die Kokken gar nicht, sie gestatten nur eine schnellere
Entwicklung der Symbiose, denn, wie sp&ter mit Reinkulturen gezeigt
werden soli, genflgen scbon kleinste Spuren nativen Fiweifies zur besten
kulturellen Entwicklung dieses Organismus, so daB das fast konstante
Vorkommen gerade in den Zahnfleischtaschen ein Indikator fflr die ge-
riDge Exsudation ist, die sich naturgemSB nach jeder Mahlzeit einstellen
kann. In schlecht gepflegten Mundlidblen und bei zeitlichen odcr chro-
niscben Keizen (z. B. Rauchen) baben wir natflrlich die gleichen Ver-
hflltnisse. Der Bedarf an nicht oder wenig verandertem EiweiB ist auch
im Reagenzglase ganz ausgesprochen, so daB ohne Zugabe, wenn auch
kleinster Mengen, ein Fortkommen fflr die gezflchteten Fusobakterien
nicht mOglich ist. Jetjoch konnen diese Organismen in unver&ndertem
Serum, das unter dem Einflusse von Kokken stand, wachsen.

Wie kommt es nun, daB nicht bei alien Menschen bei der Hflufig-
keit derartiger exogener Reizursachen das bezeichnende Bild entsteht?
Als Erklflrung seien aus einer Anzahl Beobachtungen 2 herausgegriifen,
die diese Frage beantworten:

In einer normalen, sehr gut gepflegten Mundhbhle, in der kaum
Fusobakterien, SpirochSten oder Spirillen selbst an den Prfidilektions-
stellen gefunden wurden, wurde die Wurzel eines Molaren heraus-
gemeiBelt. Diese ausgiebige Alteration fflhrte zum Bible der fusospiril-
lfiren Symbiose nicht nur am Orte der LSsion, sondern im ganzen
Munde, ohne aber irgendwelche Erscheinungen zu machen. In einer
anderen Mundhohle, die schon normaliter viele derartige Keime auf-
v?ies, wurde durch einen geringffigigen AnlaB, wie kleine Magen-
verstimmung mit der Folgeerscheinung mangelhaften Speichelflusses,
bald das mikroskopische Bild der P.V.A. hervorgerufen. In der zu-
erst genannten Mundhdhle genflgten derartige kleine Storungen nicht,
um das Bild auszulosen. Die 2. Mundhohle besaB also in gewissem
Sinne eine Disposition fflr das Bild der P.V.A. Alle Individuen,
die nun so disponiert sind, dflrlten bei Schfldigungen, die eine Ex¬
sudation im Gefolge haben, zum mikroskopischen Bible der fusospiril-
I3ren Symbiose neigen x ). Kommt nun eine noch grbBere Schfldigung
binzu, oder wurde diese Exsudation durch eine derartige SchSdigung
ausgelflst, wie z. B. bei mangelhafter Nahrungszufuhr (beobachtete doch
schon Babes 1884 diese Symbiose bei Skorbut), so kflnnen sekund&r
diese Organismen zur Entwicklung der genannten Krankheitspiozesse
( n Fusospirochatosen u ) fflhren. An dieser Stelle sei erwiihnt, daB auch
Rahnenfflhrer (18) nach Zahnextraktion klinisch die Entstehung von

1) O. Lubarsch fuhrt die P.V.A. auf Zirkulatioiisstorungen zuruck.

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540 Ccntralbl. f. Baku etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

P.V.A. sah. Jedoch neigen bei schwer gestdrtem Allgemeinbefindeu alle
diese Fusospirochatosen Oder Spirillosen zur Generalisation.

Wir haben somit primar eine ursachlich verschieden-
artig hervorgerufene Ezsudation, sekundar, je nach dem
normalen Stande der Mundhbhle, inehr Oder weniger aus-
gepragt, das bezeichnende Gernisch, das wiederum ent-
sprechend deraKbrperzustande auch kliniscb in Erschei-
nung treten kann. Die primare atiologische Bedeutung
der fusospirillaren Symbiose ist deshalb allgemein zo
verneinen. Von zahlreicben Autoren wird allerdings auf Grand pa-
thologisch-histologischer Praparate dem widersprochen and der Nachweis
dieser Organismen an der Grenze des kranken und gesunden Gewebes
Oder selbst in den nachsten Schicbten des gesunden Gewebes als Gegen*
beweis angefflhrt. Es fehlt jedoch der Nachweis der primaren Gewebs-
schadigung durch die Symbiose oder durch einen ihrer Vertreter, so
daB das Ueberhandnehmen des typischen Gemisches als Folge einer
Gewebsscbadigung aufzufassen ist und die Bdsartigkeit derartiger Er-
krankungen auf das schwer gestdrte Allgemeinbefinden zurfickgefQhrt
werden mufi. Fast alle experimentellen Angaben und meine Erfahrungen
sprechen fflr diese Stellungnahme. Es ist doch auffallend, daB nur
Mischkulturen der fusospirillaren Symbiose mit Kokken pathogene Wir*
kung hatten; das fusospirillare Gernisch allein nicht einwandfrei und
nur in ganz wenigen Fallen.

Wenn man jedoch bei patbologischen Prozessen in Prkparaten die
fusospirillare Symbiose allein antrifft, dann wird man bei genauerem
Nachforschen meist auch nicht allzuschwer irgendein vorhergegangenes
schadigendes Agens nachweisen konnen.

Es muB betont werden, daB es noch nie gelungen ist, mit Rein-
kulturen von Fusobakterien, Spirochaten des Spir. sputige-
num oder auch des Gemisches ihrer Reinkultur einwandfrei eine
Infektion ahnlich oder gleich der P.V.A. oder einem anderen pathologi-
schen Prozesse hervorzurufen, so daB diesen Organismen als ubiqui-
taren Saprophyten nicht primare pathogene Wirkung zugesprochen werden
kann, wenn sie auch sekundar durch ihre ungeheure Anzahl bei man-
chen Prozessen dem Korper nicht indifferent gegenflberstehen.

Die Behauptung, die Fusiformen erfflhren durch die Spirochaten
eine Virulenzsteigerung, entbehrt vollig des experimentellen Beweises.

B. Die experimentelle Analyse der fusospirillaren

Symbiose.

E i n 1 e i t u n g. Die Bezeichnung fusospirillare Symbiose (Assoziation),
auch fusospirillares Gernisch, ist nicht eindeutig. Ebenso haufig wie Spirillen
kommen namlich Spirochaten vor und umgekehrt. Ferner gibt es Falle,
wo nur Spirillen oder nur Spirochaten vorhanden sind. So erfaBt also
die Bezeichnung „Fusospirochatose u das mikroskopische Bild dieser Er-
krankung auch nicht ganz; Die Spirillen erscheinen als Einzelindividuen
(Vibrionen), meist aber in langeren Verhanden und sind in Nativprapa*
raten im letzteren Falle nur dem Getibten als Spirillen erkenntlich.
Das Gemeinsame der Fusobakterien, Spirillen und Spirochaten ist bio-
logisch strenge Anaerobiose und Serophilie, morphologisch eine Pro-
teus-artige Polymorphie, die es unmoglich macht, in den gewdhnlichen

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Knorr, Fuaospirillare Symbiose der Gattung Fueobacterium usw. 541

gef&rbten PrQparaten von manchen gewundcuen Verb&nden die Gattung
zu bestimmen. Diese morphologischen Eigenschaften haben ebenso wie
die Verwechslung Spirochete uud Spirille zu groBen IrrtQmern gefflhrt;
es sei nur an die Behauptung erinnert, daB die Fusiformen die „Mutter-
scbiffchen" der Spirochftten seien [R. Tun i cl iff (19) u. a.]. Trotz
der mehrfach gewonnenen Reinkulturen der beiden Qrganismen wird
die Spirochete noch in jflngster Zeit als „Evolutionsform des Bact. fusi¬
form e u angesprochen (20).

Experimentelle Untersuchungen. Etwas Zahn- Oder Ton-
sillenbelag wurde nach genauer mikroskopischer PrQfung auf Vorhanden-
sein der Symbiose in Serumbouillon mit ParaffinabscbluB gegeben. Schon
nach 4— 5 Std. erschienen lange Streptokokken, am 2. und 3. Tage
Fusobakterien, zugleich war Gas- und Gestankbildung wahrzuneh-
men, nach weiteren 3—4 Tagen traten Spirillen und auch Spirocheten
auf. Veszprgmi (21) konnte ehnliche Befunde erheben. Spirocheten
kamen nur in Kapillarkulturen zur Entwicklung. Die Aufeinanderfolge
der Streptokokken, Fusobakterien und Spirocheten resp. Spirillen kann
man gut mit dem Kommen und Gehen der Mikroorganismen bei der
Feulnis vergleichen. Ein Organismus bereitet den Boden fOr den anderen,
der dann das Bild beherrscht. Am 5.-6. Tage sind die Streptokokken
meist so tlberwuchert, daB das Bild der fusospirilieren Symbiose im
Reagenzglas entstanden ist. Bei diesen Beobachtungen erscheint es auf-
feilig, daB nie andere Keime, etwa StBbchen, zur nachweisbaren Ent¬
wicklung kamen. Allerdings wurde, wie schon erwBhnt, nur Material
ausgeset, das fast durchweg diese Organismen dem mikroskopischen Bilde
nach enthielt.

1) Die Symbiose zwischen Fusobakterien und Strepto¬
kokken.

Die Meinungen, ob die Fusobakterien durch Streptokokken ge-
fdrdert oder gescbadigt werden, si nd geteilt. R. Abel (22) konnte in Mtsch-
kulturen ein Bact. f usiforme mit Streptokokken in 2 Generationen aerob zuchten, ein
Zeichen iur die fordernde, vor allem die reduzierende Eigenscbaft der Streptokokken.
Ellermann (23) hingegen kommt zu dem Resultat, daB Streptokokken den Nahrboden
fur die Fusiformen vergiften. Veszprdmi wiederum gelang nur die Kultur der
Fusiformen gemeinsam mit Kokken.

Auch ich fand, daB die Trennung der Fusobakterien von den be-
gleitenden Streptokokken schwer ist, was biologisch f(ir eine gegen-
seitige Forderung spricht. Die meiste Schwierigkeit verursacht das
schnelle, die Fusobakterien QberflQgelnde Wachstum der Streptokokken.
Dadurch sind die Streptokokken in der Lage, den gUnstigen Nahrboden
fUr Fusobakterien zu bereiten. Ueberdies haben die zur Zuchtung
ndtigen SerumnShrboden anreichernde Wirkung auf die Begleitkokken,
und da die meisten Arten dieser Gattung auch anaerob gut, manchmal
besonders die Arten des Mundes besser wuchsen als aerob, begegnet
schon die Analyse des 1. Teiles der Symbiose groBen Schwierigkeiten.
So konnten Rosenow und Tunicliff (24) bei Aussaat von Pyamie-
eiter nie von den Fusiformen anaerobe, Maltakokken fihnliche Organis¬
men trennen.

Eine Isolierung der fordernden Stoffe der Kokken fQr die Fuso¬
bakterien war nicht mQglich. Schon Babes (25) versuchte dies zu er-
reichen, indem er Nahrboden mit Ausgangsmaterial beimpfte, diese dann
sterilisierte und nun nochmals mit Ausgangsmaterial beimpfte. In zahl-
reichen Versuchen mit verschiedenen Moditikationen der NShrbdden

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542

Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Origin&le. Bd. 87. Heft 7/8.

glQckte mir auf diese Weise eine Kultur der Fasobakterien nicht Jedoch
konote ich auf anaeroben gewObulichen Agarplatten bei direkter Aussaat
zahlreicbe Kolonien erhalten, die im Zentrum groBenteils aus Kokken,
am Raude, der ganz unregelmfiBig zerscblissen war, dagegen aus Fuso-
bakterieo bestanden. Eine Treuoung gelang nicht Wenn man be-
denkt, daB Fusobakterien in jungen Generationen fiberhaupt nie auf
serumfreien NShrbQden und nie auf der Oberfl&che wachsen, so bat
zweifellos die Symbiose mit den Kokken die zu diesem Wachstum
ndtigen Faktoren ersetzt, die sonst das Serum nicht einmal volt bietet
Ob es sicb hier um Stoife handelt, die chemisch zu definieren sind, oder
ob diese Wachstumsmdglichkeiten mit dem Zusammenleben der Or-
ganismen eng verknQpft sind, kann noch nicht mit Sicherheit gesagt
werden. Es scheint, daB diese Stoffe durcb Erhitzen ibre Eigenscbaft,
die Fusobakterien zu fdrdern, verlieren. JedenfallsistdieAnsicht,
daB die Streptokokken Fusobakterien fdrdern, richtig,
ja sie ernioglichen ihr Fortkommen unter Bedingungen,
die ftir Reinkulturen ein Wachstum ausschlieBen. Es er-
scheint so wahrscbeinlich, daB der ersten Entwicklung der fusospirillSren
Symbiose im Organismus eine Streptokokkeninfektion h&ufig vorausgebt.

2) DieSymbiose zwischen Fusobakterien und Spirillen.

Als Beispiel sei angefiihrt: Gingivitismaterial wurde in steriler
physiol. Kochsalzlosung verrieben, in die stark verddnnte Aufschwem-
mung eine Nadel getaucht und eine Reihe halb erstarrter Rinderserum-
rdhrchen beimpft. Bald gingen bei 37° Kokkenkolonien auf, nach
3 Tagen bildeten sich strahlige Kolonien, wie sie spfiter im Photogramm
festgehalten sind, teils aus den Kokkenkolonien hervorgehend, teils
isoliert stehend, und endlich am 7. Tag begannen feine hauchartige Trfi-
bungen in der Umgebung der strahligen Kolonie. Diese mondnebel-
artigen Trfibungen wurden als Spirillen, durch genauere Untersuchungen
als Spirillum sputigenum (MQhlens), identifiziert, die strahligen
Kolonien erwiesen sich als Fusobakterien Diese Symbiose von Fuso-
bakierien und Spir. sputigenum konnte ich noch 5fter beobachten 1 ).

Nun liegen viele Angaben vor, wo die Symbiose von Bact. fuel forme und
Spirochate beobachtet wurde. Ich habe diese auch gesehen, mud jedoch wiederum be-
tonen, daB aus der Literatur nur zu deutlich hervorgeht, daB Spirillum und Spiro-
chale oft verwechselt wurden. P. Sdguin (26 a), der ebenfalls die fusispirillare Sym¬
biose zu analysieren versuchte, beschreibt eine Mischkultur von Bact. fusiforme
und einer abgeplatteten „Spirochate“ mit zugespitzten Enden (Spir. acuta). Nabere
Beschreibungen f eh ten, und es ist so schwer, mit Sicherheit zu urteilen, jedoch sind
die zugespitzten Enden sehr charakterislisch, gerade fur Spir. sputigenum (siehe
spater Photogramm). Sdguin beobachtete die Symbiose von Bact. fusiforme
und Spir. acuta in Ascitesagar nach Veillon. bie gleicht der Beschreibung nach
vollig meinen Aufzeichnungen liber Symbiose Fusobakterium Spir. sputigenum,
so daB alle gemachlen Angaben fur Spir. sputigenum sprechen. Es gelang
Sdguin einige Male, etwas weiter von den Fusobakterienkolonien stehende iso-
lierle Kolonien dieser Spir. acuta abzustechen. Sie waren jedoch allein in Serum-
agar, Ascitesagar usw. nicht zum Wachstum zu bringen. Der Autor scbloB daraus,
daB das Bact. fusiforme eine sehr begiiustigende Wirtung auf die Ernahrung der
Spir. acuta ausiibt. Neu ist, daB es ihm gelang, diese Wacbstumsforderung noch
dann nacbzuweisen, wenn man beide Organismen durch eine Kollodiummembran trennte.
Im iibrigen haben die Beobachtungen Sdguins liber die Leichtigkeit der Ziichtung
von Mundspirochiiten im Gemisch mit andercn Baklerien. besonders Kokken und Fusi-
formen, bcreits alle Autoren gemacht, die iiber dieses Gebiet arbciteten. Ich mdchte

1) M iihlens (32) widerlegte die Annahme Plauts, daB das Spirillum sputi¬
genum eine Entwicklungsform des Bac. fusiformis sei.

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Knorr, Fusospirillare Symbiose der Gattung Fusobacterium usw. 543

sie auch auf Spirillen ausgedehnt wissen. 86guin gibt ferner an, daft die Reia-
kulturen dieser „Spirocbfitenart u bald eingeben, ira Gegensatz zu den Mischkuituren.
Ich konnto bei Spir. sputigenum wochenlange Lebensfahigkeit in balb erstarrtem
Kinder serum beobachten. Diese Dinge sind eben schr abhangig von Art des Nahr-
mittels und Temperatur, bo da8 ohne diese genauen Angaben ein Vergleich unrooglich
iat. Zur Angabe doe ansbleibenden Wachstuma bei Abimpfung isolierter Kolonien in
die erwahnten Nahrboden sei angefugt, daft aua unbekannten Griinden bei den Rein-
kulturen dea Spirillum eben fails zahlreiche Ueberimpfungen nicht angingen, andere
jedocb sehr uppig.

Y. Ozaki (27), auf dessen Bericht ich erst spater eingehen kann, hatte ebenfalls
ein Spirillum und keine Spirochate in Handen.

3) Die Symbiose von Fusobakterien und Spirochaeten.
Spiroeh&ten kommen fast in jeder MundhOhle vor. Aufgestellt
hat man die verschiedensten Arten mit mehr Oder weniger groBer Kritik,
indem man es sich geniigen lieB, diese Organismen im Dunkelfeld und
hfingenden Tropfen im AnschluB an verschieden gef&rbte PrSparate zu
beobachten* Gezflchtet wurde nur eine Art: die Spirochaeta
dentium (Muhlens).

Die Muhlenssche Reinkultur eteht so unumstdOlich fest, daft Gande (28) die
Bemerkung, daft die Miihlenssche Kultur vielleicht doch noch niebt ganz ieoliert
war, besser nicht gemachl hatte. Sehr treffend untersebeidet nun Muhlens (26)
„Normaltypcn‘ und , f Modifikationen der Normaltypen 44 , die alle mbg lichen Verwechs-
lungen obne die sichere Basis der Reinkultur zugelas^en batten. Aus der
einen Reinkultur sind nun meines Erachtens mebr Schliisse erlaubt, als aus den
Hunderten gefarbter und ungefarbter Nativpraparate. Sie gehen dahin, daft nur
ganz wenige Arten, vielleicht nur 1, in der Mundhohle vorhanden sind. AuchM. Ziii-
zer (29) spriebt sicb ahnlich aus.

Kranz und Schloftberger (30) erwahnen, in Uebereinstimmung mit zahl-
reicben anderen Autoren, daft ihre Mischkuituren dann das Wachstum der Spirocbaten
ermogliebten, wenn das Serum peptonisiert war, so daft der Bewris erbrachi sei, daft
gewint-e chemische Veranderungen des Substrates die Votbedineung ffir eine Vermehrung
aer Spirochaten im kiinstlichen Nabrmiltel, wahrschemlich auen im lebenden Organism us,
darstellten. Nun findet man in der Literatur Angaben, wonach die Ziichtung der
Spir. dentium (Muhlens, Shraamine) erst nach 6 — 8 Tagen gliiekte und
dann zum erfolgreichen Weiterziichten die Uebertragung eines „Kulturpartikelchens tt
ndtig war.

Die Erfahrung lehrt, daft sowohl Kokken wie Fusobakterien Stoffwechselprodukte
bilden, die besonders in diesen balbstarren Serum nahrboden weit diffundieren, und so
befinden sich natiirlicb auch die zum Wachstum des Symbionten notigen Stoffe in
dem mit der Kultur iibertragenen Nahrboden. Daraus geht hervor, daft diese das
Wachstum ermoglichen, da die Substanzen nur in aufierst geriuger Menge voihanden
zu sein brauchen.

Die ohemischen Leistungen der Symbiose.

In erster Linie sei auf die Gestankbildung eingegangen. Am
bekanntesten dOrfte der Foetor ex ore bei Stomatitis und P.V.A. sein.
Da nun auch Autoren, die Reinkulturen von Fusobakterien in Handen
hatten, teilweise Gestankbildung beobachteten, priifte ich 3 isolierte Fuso¬
bakterien - Arten besonders auf diese Eigentumlichkeit. Es ergab
sicb, daB in jiingeren Generationen die Kulturen vollig gerucblos waren
und nur bei einer Art sich unter den speziellen Bedingungen der Ka-
pillarkulturen in Slteren Generationen Geruch-, aber nicht Gestankbil¬
dung einstellte. Naheres wird spater berichtet. Ebenfalls gerucblos
waren die Reinkulturen des Spir. sputigenum. Auffallend war je-
doch, daB Aussaaten von den bereits erwfihnten Fusobakterien-
Kokken-Oberflachenkolonien, in N&hrflussigkeiten (L.L.B.) 1 ) verimpft, Ge-

1) L.L.B. = Leber-Leber-Briihe.

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544

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 7/8.

stankbildung erzeugten. Nach Isolier.ung der beiden Keime
konnte bei keinem diese Eigenschaft festgestellt werden,
und die kflnstliche Vereinigung hatte das gleiche Ergeb-
nis. Eine sichere experimentelle Klarstellung war nicht mdglich, da die
Fusobakterien aus SuBeren Griinden eiogingen. Vielleicht gelingt
es aber bei neugezuchteten Stdmmen, durch wechselnde BeimpfuDg von
Reinkulturen mit den Kokken in gewissen Intervallen das Auftreten der
Gestankbildung in der Originalmischkultur zu erklSren. Es ist nahe-
liegend, daB einer der beiden Organismen die F&higkeit besitzt, aus
gewissen, im Verlaufe der Symbiose auftretenden Stoffwechselprodukten
stinkende Stoffe zu erzeugen. Da es nun sicher ist, daB es eine ganze
Gruppe fusiformer Organismen gibt (siehe hierflber und flber die Gat-
tung Fusobacteriu m die spStere Mitteilung), so gelten natflrlich der-
artige Beobachtungen nur fQr den betreffenden Stamm.

Das Gemisch von Fusobacterium und Spirillum sputi-
genum erzeugte keinen Geruch bei Prtlfung mit den Reinkulturen von
2 Fusobakterienarten.

Angaben fiber Gestankbildung von Reinkulturen der Spir.
dentium lauten auch nicht Qbereinstimmend, selbst nicht bei Beob-
achtung ein und derselben Kultur.

Bo betont Shmamiae (31), daB die Reinkulturen einen eigenartigen, jedoch nicht
derartig iiblen Geruch hat ten, wie man ibn regelmfifiig bei Mischkulturen findet.
Dort werde er durch die Begleitbakterien hervorgernfen. In einetn
Nahrsubstrat (1—2 g Na. nucl., 20 ccm NaCl, 1000 ccm Pferdeaerum) war beim Vet-
fahren nach Buchner uberhaupt kein Geatank nachweinbar. Man sieht,
wie schwankend diese Verhaltniase eind. Leider wird hierauf nur selten bingewirsen.
(Jffenheimer und Dopter (siehe 26) sind der Meinung, daB bei der Entwicklang
des Gestaukes die Spirochateu die Hauptrolle epielen; andererseits sind Falle beachneben,
wo man Bact. fusiforme und Bpirochaten fand, und uberhaupt keinen Gcslank
wahrnahm (Matth4 nach Veszpr4mi). Ellermann betont, daB vielleicht die
Gestankbildung uberhaupt mit anderen Anaerobionten in Zusammenhang steht

Gas wird von der Symbiose anscheinend nur erzengt, wenn gleich-
zeitig Streptokokken vorhanden sind. In Reinkultur und in gegenseitiger
Mischkultur bildeten weder Fusobakterien noch das Spir. sputi-
genura Gas. Manche Autoren sahen angeblich Reinkulturen des Bact
fusiforme „wenig“ oder fl kaum“ Gas bilden. Dies beobachtete ich
nur bei Verunreinigung mit Kokken. Da Gasbildung auch bei Spiro-
ch&tenreinkulturen nicht gesehen wurde, so folgt, daB die Kokken fttr
die Gasbildung von Bedeutung sind. Es sei aber darauf hingewiesen,
daB die Kokken in Reinkultur diese Eigenschaft nicht hatten, so d&fi
wiederum auch diese Leistung durch das Zusammenwirken der ein-
zelnen Organismen zustande kommt.

Wir erblicken somit in der fusospirill&ren Symbiose
eine Vereinigung von Organismen, die wechselseitig in
lhrem Fortkommen und ihren biologischen Leistungen in
groBer Abhdngigkeit stehen.

Iaiteratnr.

]) Matzenauer, Arch. f. Dermat. Bd. 4. 1901. — 2) Vincent, Arch- ded^rmat-
at syphilogr. 1905. p. 401. — 3) Kronen berg, E., Med. Klin. Bd. 20. S. 317.

4) Rosenberger, F., Dtsch. med. Wochenschr. Bd. 21. S. 868. — 5) Huber, E.,
Miinchen. med. Wochenschr. Bd. 21. H. 393. — 6) H eck. H., Med. Klin. Bd. 21. 8. 347. —
7) Risen, P., [Inaug.-Diss.J Heidelberg 1905. — 8) Gaortner, W., Dtsch. med.
Wochenschr. Bd. 21. 8. 950. — 9) Heinomann, Berlin, klin. Wochenschr. Bd. 17

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v. Gutfeld, Ernte Mafinahmen bei Laboratoriumsinfektionen.

545

S. 110. — 10) Sauerwald, ebenda 8. 111. — 11) Kollo, W., Med. Klin. Bd. 17.
8. 59. — 12) Reiche, F., ebenda Bd. 21. S. 282. — 13) UijmauR, H. M., Dtach.
med. Wochenachr. Bd. 19. 8. 51. — 14) 8chdtz, Med. Kim. Bd. 20. 8. 151. —
15) Fischer, R., ebenda S. 594. — 16) Heinemann, Dtch. Monatsschr. f. Zahnheilk.
Bd. 20. 8. 374.— 17) Tarnow, O. 8., Med. Klin. Bd. 21. 8. 1924. — 18) Rahnen-
fuhrer, ebenda 8. 718. — 19) Tunicliff, R., Journ. of inf. Dis. Vol. 3.1906. No. 1.
— 20) Kurzer Abrifl von Krankheitabildern, Med. Klin. 1921. S. 11. — 21) Veaz-
pr6mi, D., Ceutralbl. f. Bakt. Abt 1. Orig. Bd. 44. 8. 332. — 22) Abel, R., ebenda.
Bd. 24. 8. 1. — 23) Ellermann, V., ebenda. Bd, 38. 8. 383. — 24) RoBenow, E. C.,

u. Tunicliff, R., Journ. of inf. Die. Vol. 10. No. 1. — 25) Babes, V., Dtech.
med. Wochenachr. 1893. 8. 1035. — 26) Miihlens, P., u. Hartmann, M., Zeitschr.
f. Hyg. Bd. 55. 8. 81. — 26a) 84guin, P., C. r. Acad. Sc. T. 171. 1920. p. 1243. —
27) Ozaki, Y„ Centralbl. f. Bakt. Abt. 1. Orig. Bd. 76. 8. 469. — 28) Ganae, Samml.

v. Abhandl. a. d. Zahnheilk. u. ihr. Grenzgeb. 1919. H. 14. — 29) Zulzer, Marg.,

8. Tag. d. fr. Verein. f. Mikrobiol. Jena 1920. — 30) Kranzu. SchloSberger, Dtsch.
MonaiBschr. f. Zahnheilk. Bd. 21. 8. 494. — 31) Shmamine, T., Centralbl. f. Bakt.
Abt. I. Orig. Bd. 65. 8. 311. — 32) Miihlens, P., Centralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig.
Bd. 65. 8. 311. •

Nachdrucb verboten.

Erste Massnahmen bei Laboratorimsinfektionen

] Aus dem Hygienisch-bakteriologischen Institut des Hauptgesundheitsamtes

der Stadtgemeinde Berlin.]

Von Dr. Fritz t. Gutfeld, Bakteriologe.

Eine Laboratoriumsinfektion, die sich eine Laborantin zugezogen
hatte, gab mir Veranlassung, mich mit den Laboratoriumsinfektionen
und ihrer Verhfltung eingehender zu beschfiftigen. Aus der Literatur
sind besonders zwei Arbeiten hervorzuheben: Kisskalt 1 ) hat fiber
eine grQBere Anzahl von Typhusinfektionen genaue epidemiologische Mit-
teilungen geraacht und Fricke 2 ) hat „Schutzmafinahmeu bei bakterio-
logischen und serologischen Arbeiten tt angegeben. In dem kleinen Buch
von Fricke, das flbrigens auch Literaturhinweise enthait, ist der Haupt-
wert, dem Titel entsprechend, auf die VerhQtung von Laboratoriums¬
infektionen gelegt, wShrend die Mafinahmen, die nach doch eingetretener
Infektion ergriffen werden mflssen, nur ganz kurz gestreift ‘werden.
Anlfifilich des oben erwahnten Falles konnte ich feststellen, daB die von
verschiedenen Seiten vorgeschlagenen Mafinahmen sich zum Tcil direkt
widersprachen. Es schien mir daher wOnschenswert und notwendig,
Richtlinien anzugeben, die es bei eingetretenen Laboratoriumsinfektionen
ermoglichen, durch planmaBiges Vorgehen die flblen Folgen abzuwenden,
oder wenigstens zu mildern.

Trotzdem es selbstverstandlich ist, daB in einem bakteriologischen
Laboratorium alle nicht sterilisierten Gegenstande (z. B. Tische, Brenner,
Federhalter usw.) praktisch als infiziert zu gelten haben, bringt doch
die Gewohnheit des Umgangs mit infektiSsem Material eine gewisse
Gleichgilltigkeit gegenflber den Gefahren der Ansteckung mit sich. Diese
GleichgQltigkeit ist aber nicht ein Zeichen von Mut, sondern Leichtsinn
und um so mehr zu verwerfen, als die betreffende Person sich nicht nur
selbst nutzlos in Gefahr begibt, sondern unter Umstanden (beispielsweise
als Bazillentrager) auch die Umgebung gefahrdet. Es ist naturgemafi

1) Kisskalt, Zeilschr. f. Hyg. Bd. 80. 1915.

2) Fricke, Jena (Gust. Fischer).

Ertte Abt. Orig. Bd. 87. Ueft 7/8.

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546 Ceotr&lbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origin ale. Bd. 87. Heft 7/8.

nicht mdglicb, eine Vorschrift zu geben fflr das nfitige MaB von Vorsicht
beim bakteriologiscben Arbeiten; zuviel ist besser als zo wenig. Trotz
aller Vorsicht komtnen, wie die Erfahrung lehrt, von Zeit zu Zeit Labo¬
ratoriumsinfektionen vor. Nur solcbe Infektionen, bei deren Zustande-
komnien keinerlei FahrlSssigkeit nachweisbar ist, kann man (auch in
versicherungsrecbtiicbem Sinne) als UnfSlle bezeichnen.

Die Mehrzahl der Laboratoriumsinfektionen unterscheidet sich von
den natfirlich vorkommenden in zweierlei Weise: 1) ist fast immer der
Erreger und 2) der Zeitpunkt der Infektion bekannt. Diese beiden
Umstande erleichtern die Bekfimpfung bzw. Verhiitung der Infektions-
folgen ganz bedeutend.

Das Eindriogen von pathogenen Bakterien in den Kdrper kann ver-
schiedene Folgen haben:

1) Die eingedrungenen Keime gehen bereits an.der Eintrittspforte
zugrunde; es kommt weder zur Erkrankung, nocb zur Bazillenans-
scheidung. 2) Die Keime verursachen die betreffende Erkrankung; im
spRteren Verlauf kann nachweisbare Bazillenausscheidung ansbleiben
oder auftreten. 3) Es kommt nicht zur Erkrankung, aber zur Ans-
scheidung von Bakterien.

Den sichersten Erfolg unserer MaBnahmen werden wir erzielen,
wenn es uns gelingt, die Keime an der Eintrittspiorte in den Organismus
zu erfassen und zu vernichten. Das wird aber nur in gewissen Falien
mfiglich sein. In den anderen Fallen, in denen mit der Moglichkeit der
Keimvernichtung an der Infektionsstelle nicht gerechnet werden kann,
ist es haufig noch moglich, die Keime im Innern des KOrpers wenig-
stens zu schadigen, so dafi sie ihre krankmachende Wirkung gar nicht,
oder doch nur abgeschwacht entfalten kfinnen. Zur Beurteilung der
hierbei anzuwendenden Mittel ist die Inkubationszeit bei den einzelnen
Erkrankungen mit in Betracht zu ziehen. Wahrend der Inkubationszeit
befindet sich der Erreger bzw. seine krankmachenden Produkte auf dem
Wege von der Eintrittspforte zu den Erfolgsorganen (im weitesten Sinne
des Wortes). Es wird also unter Umstanden noch mOglich sein, ihn
auf diesem Wege wirksam zu bekampfen.

Eine spatere Sorge ist die urn die Ausscheidung der Erreger durch
den Genesenen oder nicht erkrankt gewesenen Infizierten. Es ist selbst-
verstandlich, daB bei alien Laboratoriumsinfektionen mit Keimen, bei
deren Verbreitung Trfiger und Dauerausscheider eine Rolle spielen
(Typhus, Ruhr, Cholera, Diphtherie), nach Ablauf der fiblichen Frist
untersucht werden muB, ob die infizierte Person etwa zum Keimtrager
geworden ist.

Eine wichtige, nie zu unterlassende MaBnahme bei alien Labora¬
toriumsinfektionen ist die Meldung des Vorfalls an den diensthabenden
Arzt. Gerade bei dem Hilfspersonal (Laborantinnen, Diener) besteht
haufig eine Scheu, Laboratoriumsinfektionen zu melden, namentlich wenn
eine Fahriassigkeit vorliegt. Im tibrigen ist es auch nicht unzweckmaig,
wenn ein Arzt, der sich im Laboratorium infiziert hat, mit einem Kol-
legen den Vorfall bespricht, da bei der mitunter folgenden begreiflichen
Aufregung des Infizierten der Rat eines objektiven Beurteilers von
Nutzen ist.

Es dfirfte sich vielleicht auch empfehlen, von Zeit zu Zeit mit dem
gesamten Laboratoriumspersonal Besprechungen fiber Verhtttung von
Laboratoriumsinfektionen und erste BekfimpfungsmaBnahmen nach er-
folgten Infektionen abzuhalten. Namentlich ffir jfingere und neu ein-

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v. Gutfeld, terete Mafinahiuen bei Luboratoriumsinfektionen.

547

getretene Mitglieder konnten derartige Besprechnngen von Nutzen sein.
Auch ware es mbglich, bei solcben Gelegenheiten in erzieherischer Hin-
sicht besonders auf das Unterpersonal einzuwirken.

Zur Vernichtung patbogener Keime steben uns sehr verschiedene
Mittel zur VerfQgung. Bei dem rein praktiscben Zweck, der hier vor-
liegt, ist es natiirlich wichtig, auf mbglichste Einfacbheit bei grSBter
Wirksamkeit der Mittel zu achten. Es werden daber in den folgenden
Ausfiibrungen nur solcbe Mittel zum Gebrauch empfohlen, die entweder
in jedem Laboratorium vorhanden, oder aber einfacb herzustellen und
haltbar sind. Es wird beispielsweise von der Verwendung des Wasser-
stoffsuperoxyds abgeseben, da dieses nicht immer ira wirksamen, frischen
Zustande vorhanden ist.

Es soil nun zunachst besprochen werden, mit welchen Mitteln man
versuchen kann, Infektionserreger an der Eintrittspforte zu vernichten.

Eintrittspforten der Infektionserreger.

1) Haut. Das Eindringcn pathogener Keime durch die Haut wird
im allgemeinen nach Verletzungen vorkommen. Das Aussaugen einer
mit pathogenen Keimen infizierten Wunde mit dem Mund ist in jedem
Falle zu unterlassen! Wenn die Wunde stark blutet, so werden die Er-
reger sicher zum groBen Teil mit dem Blutstrom ausgeschwemmt; es
soli also die Blutung zunachst nicht unterdriickt werden. Spater kann
eine weitere Desinfektion durch Alkoholverband versucht werden. Bei
Ideinen, nicht Oder nur wenig blutenden Verletzungen, z. B. Stich mit
einer Kaniile, ist die moglichst tiefe Veratzung der Stichstelle das wirk-
samste Mittel. Man benutzt dazu Jodtinktur oder rauchende Salpeter-
saure. Sublimat wirkt nicht geniigend in die Tiefe.

2) Augenbindehaut. Es soli schon an dieser Stelle betont
werden, dad das Hineingelangen - von Infektionserregern in den Augen-
bindehautsack nicht immer als ein lokales Ereignis aufzufassen ist,
sondern dad durch die Kommunikation des Bindehautsackes mit der
Nase und infolgedessen mit dem Nasenrachenraum und Verdauungs-
kanal von dort aus Allgemeininfektionen mit Typhus, Cholera etc. ihren
Ausgang nehmen kdnnen. Erreger, die nur lokal wirken, kann man
mit emer gewissen Wahrscheinlichkeit im Bindehautsack abtoten, wenn
man eine 1-prom. Lbsung von Hydrarg. oxycyanat. ins Auge eintr&ufelt
und dies mehrfach wahrend mehrerer Minuten wiederholt. Bei dem
geschilderten Verfahren ist die Hauptsache das mechanisehe Auswaschen.
Das Auswischen des Bindehautsackes mit Wattetupfer ist unzweckmaBig.
Urn eine langer dauernde Desinfektionswirkung zu erzielen, kann man
nach der Auswaschung etwas 1-prom. Oxyzyanatvaseline in den Binde¬
hautsack einstreichen. Handelt es sich urn Erreger, deren Eindringen
in den Tr&nennasengang (und damit in den Verdauungskanal) vermieden
werden muB, so ist das Schnauben der Nase zunachst mSglichst zu ver-
meiden, da durch die hierbei entstehende Luftverdflnnung FlQssigkeit
aus dem Bindehautsack in den TrSnennasenkanal gepreBt wird.

3) Magendarmkanal. Die haufigste Ursache des Eindringens
von Infektionserregern in den Magendarmtraktus ist das Pipettieren mit
Pipetten ohne Sicherung. Aufschwemmungen pathogener Keime dOrfen
grundsatzlich nur mit gesicherten Pipetten angesaugt werden.
Andere MSglichkeiten fQr das Hineingelangen von Infektionserregern
in den Magendarmkanal sind gegeben, wenn infektiQses Material in den
Bindehautsack ( r ins Auge“) oder in die Nase gelangt. Ueber die

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Desinfektion des Bindehautsackes ist oben das Notwendige gesagt. Eine
primSre Infektion der Nase gehOrt zu den extremen Seltenheiten. Die
Abtdtung der Erreger an dieser Eintrittspforte kann durch Einstreichen
1-prom. Oxyzyanatvaseline versucht werden. Sind Keime in den Mund
gelangt, so bat man sofort auszuspeien, and zwar nicbt auf den Fufi-
boden, sondern in ein mit Sublimatlosung gefQlltes GeffiB, das Oberall
vorhanden sein muB. AnschlieBend hat die Desinfektion der Mnndhdhle
zti erfolgen. Theoretisch erscbeint es zun&chst unmoglich, Keime in
der Mundhohle restlos zn vernicbten. Es muB aber trotzdem in manchen
Fallen gelingen, da eine ganze Anzabl von Laboratoriumsinfektionen
keine Erkrankung hervorgerufen hat, nacbdem die gleich zu beschrei-
benden DesinfektionsmaBnahmen ergriffen worden waren. Es kommen
MundspUIungen und das Trinken keimtotender FlQssigkeiten in Frage.
Abzulehnen ist Sublimatlfisung wegen ihrer hohen Giftigkeit auch zum
Spfllen, da bierbei doch etwas verschluckt werden konnte. Die von
Fricke empfohlene mechanische Reinigung der Zahne mit einer Zahn-
bQrste mag nutzlich sein; im gegebenen Augenblick wird es doch wahr-
scbeinlich vergessen werden Oder aber am Nichtvorbandensein einer
ZabnbOrste scheitern! — Als gleichsam physiologisches Desinfektions-
mittel kommt verdOnnte (0,2-proz.) SalzsBure in Betracht. Diese kann
erstens zu MundspQlungen l ) benutzt werden, wobei ein etwaiges Ver-
schlucken nicbt nur nicht schadet, sondern sogar von Nutzen ist, da
die keimtotende Wirkung der normalerweise im Magen vorhandenen
Salzsaure hierdurcb unterstfltzt wird. Im einzelnen ist also folgender-
maBen zu verfahren: Ausspeien der in den Mund gelangten keimbaltigen
FlQssigkeit in ein GefaB mit Sublimatldsung. Langdauernde (mehrere
Minuten) Mundspfllung mit 0,2-proz. Salzsaurelbsung Oder Kalium-
permanganatlosung (1 :4000), Trinken eines Glases (etwa 150 ccm) einer
0,2-proz. Salzsaureldsung und Wiederbolung dieser Prozedur noch 2
bis 3mal im Verlauf der nachsten Stunde. — Die Verwendung von Al-
kobol zur Desinfektion des Mundes und zur AbtOtung der in den Magen
gelangten Keime balte ich nicht fbr zweckmSBig. Geringe Mengen
konzentrierten bzw. groBe Mengen vcrdQnnten Alkobols baben keine
gentlgend sichere Wirkung; grSBere Quantitaten sind zu vermeiden, und
zwar aus zweierlei GrQnden. 1) wird die berauscbende Wirkung groBer
Alkoholmengen leicht dazu verleiten, die Gefahr nicht mit der nbtigen
Sorgfalt zu bekampfen; 2) bringt der Qberreichliche GenuB von Alkobol
eine Katarrh erzeugende, also die Abwehrkrafte direkt schadigende
Wirkung hervor. Diese ungflnstige Nebenwirkung muB aber um des-
willen vermieden werden, weil man in den nachsten Stunden nach der
Infektion noch damit rechnen muB, dafi Keime, die im oberen Teil des
Verdauungstraktus zurflckgeblieben sind, nachtraglich noch in den Magen
hinuntergespiilt werden khnnen.

Je nach der Art des Erregers und seiner jeweiligen Eintrittspforte
sind die zu ergreifenden MaBnahmen verschieden. Ob gleich alte Labo-
ratoriumskulturen im allgemeinen weniger virulent als frisch ans dem
Korper gezuchtete Stamme zu sein ptlegen, soli doch jede Labora-
toriumsinfektion, auch mit alten Stammen, genau ebenso
sorgfaitig behandelt werden wie eine Infektion mit fri¬
se h e d hochvirulenten Erregern.

1) Btarkere Salzsaurekonzentrationen scheinen nicht put aDwendbar zn aein. Porch
eigene Vcrsuche babe ich mich davon iiborzcugt, dnfi z. B. eine 1 proz. Balza&oreldaong,
wie aie tod Emmerich (zit. nach Fricke) empfohlen wird, kaum crtragiich ist. —
Als weiteres Mittel zum Mundspulen sei Kaiiumporujanganatloeung 1:4000 angetuhrt.

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v. Gutfeld, Erste Madnahmen bei Laboratoriumsinfektiouen.

549

Im einzelnen sind folgende Madnahmen zu ergreifen:

I. Typhus und Paratyphus.

Vorbemerkung: Das fflr Typhus Gesagte gilt in gleicher Weise auch
ftlr Paratyphus A und B.

Als iufektiflses Material kommen im Laboratorium aufier Reiukul-
turen in Frage: Stuhl-, Blut*, Urin- und Sputumproben. So selbstver-
st&ndlich es fflr jeden im Laboratorium Arbeitenden ist, dad in den
genannten Arten von Untersuchungsproben Typhusbazillen enthalten sein
konnen, so auffallend ist es, dad namentlich das Absaugen des Serums
vom Blutkuchen zum Anstellen der Widal schen Reaktion hflufig mit
groder Unvorsichtigkeit, namlich mit ungesicherten Pipetten, vorge-
nommen wird. Obwohl die Zflchtung der Bazillen aus dem verbleibenden
Blutkuchen eine ganz gelfiutige Arbeit darstellt, wird das flberstehende
Serum meist als harmlos betrachtet.

Die Erkrankung an Typhus ist eine Sepsis mit Typhusbazillen,
welche sich im ganzen Kflrper finden kdnnen. Die Infektion ge j
schieht sowohl vom Magendarmkanal (weitaus am h&ufigsten), als
auch vom Unterhautzellgewebe aus. Es sind demnach folgeude

Eintrittspforten

zu berficksichtigen: Augenbindehautsack, Nase, Mund, Hautverletzungen.

Das Hineingelangen von Typhusbazillen in den Bindehautsack
ist kein rein lokales Ereignis, sondern es kann zu einer Allgem sin-
infektion infolge Weiterdringens der Keime (Tr&nennasengang—Nasen-
racbenraum — Speiserflhre—Magendarmkanal) fflhren.

Madnahmen: Grflndliches Spfllen des Augenbindehautsackes mit
1-prom. Oxyzyanatlflsung w&hrend mindestens 5 Min. Danach Einstreichen
von 1-prom. Oxyzyanatvaseline in den Bindehautsack. Das Scbifauben
der Nase ist zu vermeiden. Das gescbilderte Verfahren bietet zwar eine
gewisse Wahrscheinlichkeit, die Erreger abzutflten, aber keine voile
Sicherheit. Als weitere Madnabme sei deshalb das Gurgeln mit 0,2-proz.
SalzsSureldsung bzw. Kaliumpermanganat 1:4000 (wfihrend der nflchsten
Stunde mehrfach zu wiederholen) sowie auch das Trinken von 0,2-proz.
SalzsSure empfohlen.

Um alles zu tun, was getan werden kann, dflrfte auch noch eine
Schutzimpfung ausgefflbrt werden. Bei der verhflltnismfldig langen
Inkubationszeit des Typhus braucht man die „negative Phase" nicht zu
fflrchten, sondern mao kann damit rechnen, dad eine kurze Zeit nach
der Infektion vorgenommene Schutzimpfung noch ihren immunisatori-
schen Zweck erfflllt. Es empfiehlt sich daher, in den Laboratorien
Impfstoff gegen Typhus fflr Unglflcksf&lle bereitzuhalten. Hat man
keinen Impfstoff vorrStig, so bietet es keine Schwierigkeit, ihn von dem
Stamm, mit dem die Infektion erfolgt ist, zu bereiten. Wenn man mit
der Her8tellung am Tage der Infektion beginnt, kann der Impfstoff nacb
2 bis 3mal 24 Std. fertig sein; die Schutzimpfung kommt dann noch nicht
zu spflt Es ist flbrigens sehr leicbt, einen jahrelang unverSndert halt-
baren Impfstoff herzustellen, wie ich an anderer Stelle 1 ) beschrieben habe.
Dieser kflme fflr den hier geschilderten Zweck in erster Linie in Betracht.

Trotz aller dieser genannten Madnahmen, wenn sie auch
noch so sorgfflltig durchgefflhrt worden sind, ist niemals die vollo

1) Zurzeit im Druck.

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550

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originale. Bd. 87. Heft 7/8.

Sicherheit dafflr gegeben, daB die Erreger auch wirklich abgetCtet
sind, and daB der Ausbruch der Erkrankung Oder die Aasscheidung der
Erreger vermieden werden. Es muB daher in jederp Falle einer Infek-
tion init Typhus die infizierte Person sich l&ngere Zeit (mindestens
2 VVochen) beobachten und alsbald sowie etwa 3 und 4 Wochen nach
stattgehabter Iofektion ihren Stuhl und Urin bakteriologisch untersuchen
lassen. Bei Anwesenheit yon Bazillen treten die gesetzlichen Bestim-
mungen in Kraft.

In extrem seltenen Fallen kann es zu einem Eindringen von Ty-
phusbazillen in die Nase kommen. Die anzuwendenden MaBnahmen
sind folgende: Einstreichen von 1-prom. Oxyzyanatvaseline in die Nase,
Gurgeln mit Salzs&ureldsung und Trinken derselben Losung wie bei
Infektion des Bindehautsackes angegeben. Schutzimpfung, Beobachtung,
sowie Stuhl- und Urinkontrollen alsbald sowie 3 und 4 Wochen nach
der Infektion ebenfalls wie dort.

Bei weitem am baufigsten werden Typhusbazillen durch den Mund,
und zwar meist bei unvorsichtigem Pipettieren, aufgenommen. Sofortiges
Ausspeien in ein mit Subhmatlosung geffllltes Gef&B, ausgiebige Mund-
spQlung mit 0,2-proz. SalzsSure oder Kaliumpermanganatlosung 1:4000,
Trinken 0,2 proz. Salzsaurelbsung und Wiederholung der Prozedur 2 bis
3mal im Laufe der n&chsten Stunde. Ferner Schutzimpfung, Beobach¬
tung, Stuhl- und Urinkontrollen wie oben.

Auch das Eindringen der Typhusbazillen in das Unterhautzell-
gewebe (bei Verletzungen mit zerbrochenen Kulturrdhrchen, Stich mit
der an einer gefQllten Spritze befindlichen KanUle) kann zur Allge-
meininfektion filhren. Stark blutende Verletzungen soli man zu-
n&chst ruhig bluten lassen, da mit dem Blute sicherlich ein grofier Teil
der Erreger ausgeschwemmt wird. Spater kann man einen Alkohol-
verband machen. Die Gefahr, daB es trotzdem zur Erkrankung bzw.
zur Ausscheidung von Bazillen kommt, bleibt aber besteben. Eine
Schutzimpfung ist daher dringend zu empfehlen. Beobachtung, sowie
Stuhl- und Urinkontrollen sind selbstverst&ndlich. — Bei Stichverletz-
ungen wird es in einem Teile der Falle gelingen, durch Veratzung der
betreffenden Hautstelle mittels Jodtinktur oder der starker und tiefer wir-
kenden rauchenden Salpetersaure die Keime restlos zu vernichten. Ist man
sich aber seiner Sache nicht absolut sicher, so sind auch in diesen Fallen
Schutzimpfung, Beobachtung, Stuhl- und Urinkontrollen erforderlich.

Infektionen mit Typhus infolge Eindringens der Keime in das Unter-
hautzellgewebe scheinen ubrigens auBerordentlich selten zu sein; unter
den 57 von K is ska It (1) zusammengestellten Fallen von Laboratoriums-
infektion ist kein einziger derartiger.

II. Ruhr.

Infektios sind auBer Reinkulturen nur Stuhlproben; im Urin und
im Blute werden Ruhrbazillen kaum jemals gefunden. Zur Erkrankung
an Ruhr kommt es nur dann, wenn Ruhrbazillen In den Darm gelangen.
Die Ei ntrittspforten sind demgemaB: Augenbindehautsack, Nase,
Mund; ungefahrlich ist das Eindringen von Ruhrbazillen in das Unter-
hautzellgewebe.

Die zu ergreifenden MaBnahmen zur Keimvernichtung bei Infektion
von Auge, Nase und Mund sind die gleichen wie bei Typhus, eine Schutz¬
impfung kommt nicht in Frage. Beobachtung wahrend der nBchsten
8 Tage sowie Stuhlkontrollen auch nach 8 und 14 Tagen sind unerl&Blich.

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v. Gutfeld, Erste Maflnahmen bei Laboratoriumsinfektionen.

551

III. Cholera.

Die Erkrankung an Cholera kommt durch das Eindringen der Keime
in den Darm zustande; die Eintrittspforten sind also: Bindehaut-
Back, Nase, Mund. Die MaBnahmen zur Keimvernichtung sind dieselben
wie bei Typhus.

Die Eigenart der Erkrankung an Cholera macht nun noch beson-
dere MaBnahmen notwendig.

Da die Inkubationszeit der Cholera eine sehr kurze ist — mitunter
erfolgt der Ausbruch der Krankheit schon wenige Stunden nach der
Aufnahme der Keime — kommt eine Schutzimpfung nicht in Frage.
Man ist allerdings leicht geneigt, an cine Schutzimpfung zu denken, da
diese wBhrend des Krieges sich gut bewShrt zu haben scheint. Man darf
aber dabei nicht vergessen, daB die Impfung damals an Gesunden, Nicht-
infizierten vorgenommen wurde, und daB man mit einem Schutz ersteinige
Zeit. (etwa lOTage) nach erfolgter Impfung rechnen kann. Vorher ist nicht
nur kein Schutz, sondern vielleicht sogar eine erhbhte Empfindlichkeit
(negative Phase) die Folge der Impfung. Die Schutzimpfung nach
einer Laboratoriumsinfektion mit Cholera ist also zu unterlassen.

Die auBerordentliche Gefiihrlichkeit der Cholera besteht in ihrer
bohen Infektiositat und der grolien LetalitSt der Erkrankten. Es miissen
daher vor alien Dingen auch MaBnahmen zum Schutz der Allgemeinheit
getroffen werden. 1st eine Laboratoriumsinfektion vorgekommen, Oder
auch nur anzunehmen, so ist die betr. Person unverziiglich in
Quarantine zu nehmen, auch wenn die oben angegebenen Vorschriften
aufs sorgf&ltigste befolgt worden waren. Sind nach einer Beobachtungs-
zeit von 5 Tagen keincrlei Erscheinungen aufgetreten, und hat die drei-
malige Stuhluntersuchung jedesmal die Abwesenheit von Choleravibrionen
ergeben, so kann die Quarantine aufgehoben werden.

Es ist selbstverstandlich kein leichtcr EntschluB, bei dem bloBen
Verdacht, sich mit Cholera infiziert zu haben, auf mehrere Tage in
Quarantine zu gehen. Das Bekanntwerden des Unfalles bzw. der eigenen
Fahrlissigkeit sowie auch die Frage der Kostendeckung spielen eine nicht
zu unterschfitzende Rolle. Gerade in solchen Fallen zeigt es sich aber,
ob die einzelnen im Laboratorium titigen Personen das geniigende Ver-
antwortlichkeitsgefulil der Allgemeinheit gegenflber besitzen. Durch ge-
meinsame Besprechungen, wie ich sie oben vorgeschlagen habe, wird es
gelingen, auch das epidemiologist und irztlich nicht gebildete Personal
davon zu tiberzeugen, daB die Isolierung im Interesse des Gemeinwohls
liegt, und daB persbnliche Empfindungen und Interessen in solchem
Falle hintangesetzt werden miissen. — Die Kostendeckung wird wohl
im allgemeinen von der Krankenkasse, einer Unfallversicherung, oder
von dem betreffenden Laboratorium flbernominen werden. Es empfiehlt
sich nicht, die Kosten der infizierten Person, gleichsam als Strafe, auf-
zuerlegen; man veranlaBt auf diese Weise unter Umstanden nur, daB
eine lnfektion verschwiegen wird.

IV. DIplithcrIe.

Die Diphtheriebazillen Oben ihre krankmachende Wirkung von den
SchleimhSuten (Bindehaut, Nase, Rachen) und von der verletzten Haut
her (Wunddiphtherie) aus.

Beim Eindringen von Diphtheriebazillen in den Bindehautsack
wird man sich mit Spulung des Bindehautsackes mittels 1-prom. Oxy-
zyanatldsung begnQgen konnen.

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552

CentraibL f. Bakt etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

In den Rachenraum gelangte Diphtheriekeime sind znnSchst
nach Mdglichkeit durch Ausspeien in ein Sublimatgef&B za entfernen,
nachtr&gliches Gurgeln ist znr mechanischen Elirninierung weiterer Keime
zu empfehlen. Man wiederholt das Gurgeln entweder mehrfach itn Laufe
der n&chsten Stunden Oder man pinselt Mandeln und hintere Rachenwand
mit Jodtinktur bzw. Lugolscber Losung. Was fQr eine FlQssigkeit
man zum Gurgeln niinmt, ist von geringer Bedeutung, da es vor allem
auf eine mechanische Entfernung der Keime ankommt. Es ist also nichts
dagegen einzuwenden, wenn man die oben scbon mehrfach vorgescblagene
Kaliumpermanganatlbsung benutzt.

Mit Diphtheriebazillen infizierte Hantverletzungen werden mit
Jodtinktur gepinselt. Von der Anwendung der rauchenden Salpetersflure
kann man abseben.

Die Schutzimpfung mit Diphtheriebeilserum sollte, wenn flber-
baupt, mit antitoxischem Rin der serum vorgenommen werden. Man
braucht dann, bei sp&ter etwa notwendig werdender Reinjektion zu Heil-
zwecken, anaphylaktische Erscheinungen nicht zu fQrcbten, wenn man zur
zweiten Injektion vom Pferd gewonnenes Heilserum benutzt.

V. Eltcrcrrcgcr (Staphylo- nnd Streptokokken).

Hautwunden, in welche Eitererreger gelangt Bind, IfiBt man zun&chst
in Sublimatldsung ansbluten. Danacb Ver&tzung mit Jodtinktur odor
rauchender Salpetersdure. Alkobolverband. Falls EntzQndungserschei-
nnngen auftreten, ist Hilfe eines Cbirurgen in Anspruch zu nehmen.

VI. Gonokokkcn.

Nur die Infektion des Augcnbindehautsackes kommt bier in Betracht.
Es genflgt eine grQndliche Auswaschung des Bindehantsackes mit 1-prom.
Oxyzyanatldsung mit nachfolgendem Einstreichen l-%o Oxyzyanatvaseline.

VII. Syphilis.

Die Mdglichkeit, sich im Laboratorium mit Syphilis zu infizieren,
ist beim Arbeiten mit Reizserum und bei Tierversuchen gegeben. Das
Absaugen des Serums vom Blutkuchen bei den zur Wassermann-
schen Reaktion eingesandten Blutproben scbeint, obwohl das Blut des
Syphilitikers zu gewissen Zeiten sicherlich infektids ist, noch nie za
Laboratoriumsinfektionen Veranlassung gegeben zu baben. Infektions-
pforten sind Haut und Schleimh&ute.

Die Keimvemichtung auf der Haut oder bei kleinen Wunden ge-
schieht am besten mittels rauchender Salpeters&ure.

Der Bindehautsack wird mit 1-prom. Oxyzyanatldsung grQndlicb
ausgespQlt, dann wird l prom. Oxyzyanatvaseline eingestrichen.

Die Lip pen werden mit 1-prom. Oxyzyanatldsung grQndlicb ge-
waschen, wobei das Verschlucken der Ldsung sorgf&ltig zu vermeiden ist.

Ist infektioses Material in den Mund gelangt, so wird nach Ans-
speien grQndlich mit 0,2-proz. Salzsaureldsung gegurgelt.

Eine prophylaktische Luesbehandlung bei Infektionsver-
dacht ist vdllig unzweckmaBig, da man in solchen Fallen niemals
wissen kann, ob das Ausbleiben der Symi>tome eine Wirkung der statt-
gehabten prophylaktischen Behandlung darstellt, Oder ob vielleicht Qber-
baupt gar keine Infektion stattgefunden hatte. Treten im Laufe der aaf
die vermutliche Infektion folgenden 4 Wochen keine Erscheinungen aut
und ist die eventuell nach 6 Wochen angesetzte (nur zur psychischen

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Epstein, Beitrage zur Kenntnis der Rickettsia Prowazeki. 553

Beruhigung erforderliche) Wassermannsche Reaktion negativ, so kann
man mit Sicberheit damit rechnen, daB etwa seinerzeit eiogedrungene
Spirochaten sofort an Ort und Stelle vernichtet worden waren.

ErfahrunpsgemaB ist die wirkliche oder vermutete Infektion mit
Syphilis mit starken psychischen Erscheinungen verbunden; in derartigen
Fallen soil daher sofort der Rat einer objektiv urteilenden Person ein-
geholt werden. —

Es empfiehlt sich, die Mittel, welche bei einer etwa eingetretenen
Laboratoriumsiofektion anzuwenden sind, in jedem Laboratorium an fQr
jeden erreichbarer Stelle vorratig za halten, was bei der geringen Anzahl
und der groBen Haltbarkeit der betreffenden Medikamente obne Schwierig-
keit ausfQhrbar ist. NOtig sind:

1) eine braune Literflasche mit 1-prom. OxyzyanatlOsung,

2) eine kleine Porzellan- oder Steingutbtlchse (10 g) 1-prom. Oxy-

zyanatvaseline,

3) eine kleine Flasche (20 ccm) Jodtinktur,

4) eine kleine Flasche (20 ccm) Lugolsche LQsung,

5) eine kleine Flasche (5 ccm) rauchende SalpetersQure,

6) eine Literflasche mit 0,2-proz. SalzsQureldsung,

7) eine Literflasche mit KaliumpermanganatlOsung 1:4000,

8) einige Glasstahe und Augenpipetten, zum Schutz gegen Ver-

staubung in Papier gewickelt.

Nachdruck verboten.

Beitrage zur Kenntnis der Rickettsia Prowazeki

[Aus der Protozoologischen Abteilung des Instituts fflr Infektionskrank-
heiten „Elias Metchnikov u in Moskau.]

Von Dr. H. Epstein 1 ).

I. Tccknisckcs.

Die Lanse wurden unter der Binokularlupe zerzupft und der Darm-
inhalt in physiologischer NaCl-L5sung aufgeschwemmt Auf diese VVeise
gelang es, auBer ihm auch die Darmcpithelzellen wie auch die akzessori-
schen Drilsen des Darmes sehr schon darzustellen. Fixiert wurde mit
Methylalkohol oder mit Osmiumsauredampfen. AIs bestes Farbungs-
mittel erwies sich die G iemsa-Losung, welche in Qblicher Verdflnnung
schon nach 3—5 Min. Vorzflgliches leistete.

Um Material fQr biologische Experimente zu gewinnen, wurden die
Lause vor der Praparierung in 5-proz. AgN0 3 -Losung lebend ca. 1 Std.
lang behandelt und dann in steriler NaCI-Losung abgespQlt. Auf diese
Weise gelang es, etwaige QuBere bakterielle Verunreinigungen der Lause
auszuschlicBen.

Die Qblichen bakteriologischen Anilinfarben eignen sich fur die
Rickettsiendarstellung sehr wenig. Mit Loefflers Methylenblau sowie
mit Methylenblau nach Man son werden sie nur ganz schwach gefarbt.
Die Gram-Farbung ist negativ. Safranin, Toluidinblau, HQmatoxylin

1) Vortrag, gehalten auf dem Bakteriologischen Kongrefi in Moskau im August 1920.

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554 Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

nach Bdhmer und Del afield wie auch MethylgrOngeraiscbe schlagen
fehl, desgleicben auch verschiedene Granulaf&rbungen. Die Eiseobfima-
toxylinfarbung nach Heidenhain gelang uns nicht. Die Rickettsien
wurden sehr rasch entffirbt, doch sind in dieser Richtung weitere Ver-
guche erforderlich.

II. Morphologlsches.

1) Die Mittelwerte fur die Lange der Rickettsien aus verschiedenen
Lausen schwanken in einigen Serien zwischen 0,2—0,4 //, in anderen
Serien zwischen 0,4—1,0 /<. In Ausnahmefailen wurden Exemplare von
1,5 pi angetroffen. Die Dicke der Rickettsien betragt ungefahr 0,2 pi.
Exemplare von 0,3 pi Dicke kommen nur selten vor.

2) Am haufigsten baben die Rickettsien das Aussehen von korzen
Stabchen. Doch kommen nicht selten auch kokkenartige Forrnen und
verschiedene Uebergangsstadien vor. Sehr charakteristisch sind die
Biskuitformen, welche am wahrscheinlichsten den Teilungsstadien ent-
sprechen.

3) Im Gesichtsfelde liegen die Rickettsien gleichmaBig zerstreut
Recht haufig werden Gruppen von parallel geordneten Rickettsien an¬
getroffen. Manchmal fimlet man kokkenartige Forrnen in Ketten von
6—8 Gliedern oder stabchenartige Forrnen in 4—6 gliedrige Ketten ge-
reiht, die an den Bacillus von Ducrey erinnern.

4) Die Rickettsien weisen verschiedene Grade der inneren Diffe-
renzierung auf. In vielen Fallen ist es moglich, bei ihnen eine Kern-
struktur nachzuweisen. Im letzten Falle erscheinen sie als zarte, manch¬
mal von beiden Seiten zugespitzte Gebilde von 0.5—0,6 pi Lange. Die
Farbung nach Giemsa laftt bei ihnen ein rotes Kornchen in der Milte
eines biaulichen Plasmakflrpers differenzieren. Die Existenz von ver-
schieden differenzierten Rickettsienformen lafit unter anderem eine ent-
wicklungsgeschichtliche Deutung vermuten. Aehnliche Gebilde mit diffe¬
renzierten Kornchen im Plasmaleibe kommen auch als Entwicklungs-
stadien der Rickettsia-Forrnen vor. Doch dQrfen diese beiden
Forrnen nicht untereinander verwechselt werden, zumal da zwischen
den letzteren auch die allerkleinsten Rickettsia-ahnlichen Gebilde
niemals weniger als 3 Kbrnchen im Innern haben, wahrend wir bei den
wahren Rickettsien immer nur ein einziges KSrnchen sehen.

Uebrigens erscheinen die Rickettsia-Forrnen stark polymorph,
da in einem Gesichtsfelde alle moglichen Uebergange von den kleinsten
(0,2—0,3) bis zu 2 pi langen, mit 4 — 6 Kfirnchen versehenen Exein-
plaren angetroffen werden. Bei Rickettsia-Infektionen wurde ein
derartiger Polymorphismus niemals beobachtet. Es ist sehr wahrschein-
lich, daB einige von den bei den Strickeria-Formen gefundenen
Kbrnchen metachromatischer Natur sind.

<111. Biochcmischcs.

Die Rickettsien sind in konzentrierter EssigsBure nnldslich, in kon-
zentrierfen Alkalien werden sie oline weiteres aufg«l6st. Durch kochen-
des, destill. Wasser, 2 proz. NaCl-Losung, Aether, Azeton, Toluol, Xylol,
Benzin, Alkohol und Alkohol-Aethermischung werden sie nicht ange-
gritfen, durch Pepsin aber verdaut, dagegen nicht durch Trypsin. '

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Epstein. Beitrage zur Kenutnis der Rickettsia Prowazeki.

555

IT. Experimentallcs.

1) Beobachtung eines Falles von kontrollierter, freiwilliger Labora-
toriurosinfektioa beim Menschen. Die subkutane Einspritzung eiaer
Rickettsienaufschwemmung (ca. Vio eines LSusedarminhalts) rief nach
einer Inkubationsdauer von 12 Tagen eine sehr schwere und vielfach
komplizierte Erkrankung an T. exanthem, hervor (vollstandige Genesung).

2) 2 gesunden Meerschweinchen wurde je 1 L&usedarminhalt mit
lebenden Rickettsien in NaCl-Ldsung intraperitoneal eingespritzt. Die
Tiere gingen binnen 12 Std. ohne makroskopisch merkliche anatomische
Ver&nderungen zugrunde.

T. Blologlsche Rcaktionen.

1) Die Rickettsien wurden mit Fleckfieber-Rekonvaleszentenserum
agglutiniert (1:1000). Spontane Agglutination im Lausedarm wurde
nicht selten beobachtet; im letzten Falle am haufigsten in Anwesenheit
von noch unveranderten Erythrozyten. Es liegt also die Vermutung
nahe, daB hier die Agglutination durch das noch nicht verdaute F.F.-
Serum bedingt wurde.

2) Die Rickettsien lenkten mit F. F.-Rekonvaleszentenserum das
Kompleinent ab. Zur Kontrolle wurde eine Aufschwemmung eines
Rickettsia-freien LSusedarms und N-Serum benutzt.

3) F. F.-Rekonvaleszentenserum enthait spezifische Opsonine fflr die
Rickettsien.

Zu diesem Versuche dienten: a) eine Aufschwemmung von Rickett¬
sien in physiol. NaCl-Losung, b) normals Leukozyten aus Zitratblut,
c) F. F.-Rekonvaleszentenseruin, d) N-Serum als Kontrolle.

Nach Verlauf von 10 Min. warden bei 37° im KontrollprBparat
groBe Mengen von freiliegenden Rickettsien gefunden, dagegen keine
pbagozytierten. Im F. F.-Serumpraparat waren die meisten Rickettsien
bereits durch die weiBeu Blutzellen phagozytiert.

Die Praparate wurden mit Man so ns Borax-Methylenblau gefarbt,
was gewissermaBen vor einer etwaigen Verwechslung der phagozytierten
Rickettsien mit Leukozytengranulis sicherte.

Hervorgehoben sei, daB die Phagozytose der Rickettsien nicht nur
durch die polymorphkernigen Leukozyten, sondern vielmehr von Mono-
nuklearen stattfand. Im AnschluB daran sei noch erwahnt, daB am
4. —6. Tage der F. F.-Erkrankung wir im peripheren Blute regelmaBig
Zellen voin Monozytentypus im typischen Zerfallszustande fanden. Beim
Zerfall dieser Zellen wurden sehr haufig Rickettsien-ahnliche Gebilde
von deutlich ditferenziertera Typus (s. oben) freigelegt.

4) Eine Rickettsienaufschwemmung in 30 Proz. Glyzerin laBt eine
verdQnnte Methylenblaulosung auch nach 15 Min. bei 37° unverandert,
wahrend im Kontrollversuch mit Vakzinevirus die Methylenblaulosung
in ihre Leukobase leicht reduziert wird (v. Prowazek).

VI. Tlicorctischcs.

Die angefflhrten Beobaclitungen fiber den Bau der Rickettsien, die
Pathogenitat und die Toxizitat dos Rickettsien-haltigen Materials und
das Verhalten der Rickettsien gegenOber spezifischen AntikSrpern im
Zusammenhang mit den allgeraein bekannten Tatsachen flber ihr Ver-

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556

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

halten in Fleckfieberiausen sowie mit den Befunden verschiedener An-
toren Qber das Vorkommen von Rickettsien&hnlichen Gebilden in Or-
ganen von lleckfieberinfizierten Tieren berechtigen uns in dieser Frage
zum AnschluB ao jeoe Richtung, welche die Rickettsien zu Protozoen-
(resp Chlamydozoen-)ahnlichen Gebilden rechnet und ihre fitiologische
Bedeutung verteidigt

Moskau, Mai 1921.

Nachdruch verbote

Ueber das intra vitam beobachtete Vorkommen des
grossen Leberegels (Fasciola hepatica L) bei einem

Kinde.

[Aus dem Zoologischen Institut der UniversitSt TQbingen.]

Von Prof. Dr. R. Vogel.

Im September 1920 erhielt ich Stuhlproben eines 8-j5hr., ans der
Gegend von Ravensburg (Oberschwaben) stammenden M&dchens zur
Untersuchung auf Wurmeier aus eiDer hiesigen Klinik zugesandt.
Die erste, wie alle anderen, in mebrtSgigen Abst&nden vorgenommenen
Untersuchungen ergaben zahlreiches Vorkommen von frisclien Eiern des
grofien Leberegels (Fasciola hepatica L.), so dafi an einer Infektion
der Pat. mit diesem Parasiten nicht mehr zu zweifeln war. Urn den
Fall far die zoologische Literatur zu retten, entscblofi ich mich, ihn in
dieser Zeitschrift zu veroffentlichen.

Obwohl ich die Eier des groBen Leberegels genau kenne, babe ich
doch, urn alien Zweifeln die Spitze abzubrechen, noch Messungen vor-
genommen, welche Uebereinstimmung mit den Angaben in der Literatur
ergaben. Wer nicht haufiger mit der Untersuchung von Wurmparasiten-
eiern zu tun hat, sollte stets, wenn die Sachlage nicht ganz klar ist,
Messungen (nicht gedrflekter) Eier vornehmen, um Verwechslungen aus-
zuschlieBen, wie sie z. B. zwischen Dibothriocephalus latus und
Fasciola hepatica nicht selten vorgekommen sind.

Als Sitz der Parasiten sind im vorliegenden Falle wohl, wie ge-
wohnlich, die Gallengange anzunehmen. Die klinischen Befunde und die
Behandlung sind von Ilerrn Dr. G. Bihlmeyer in der Monatsschr. f.
Kinderheiik. kurzlich mitgeteilt worden. Hier sei der Blutbefund
bei der Aufnahme der Pat. mitgeteilt: „Iiamoglobin 26 Proz., rote
Blutkorperchen 2370000, weiBe 2480.“

Ende November 1920 erhielt ich wieder frische Stuhlproben der
Pat. zugesandt. Sie enthielten itnmer noch reichlich Eier, wenn auch
nicht ganz so zaldreich wie bei den fruheren Untersuchungen. Das
Allgemcinbefinden der Pat. hatte sich bedeutend gebessert. Der Zustand
wird folgendermaBen charakterisiert: „Wohlbehnden, geht zur Schule,
sehr fett, gelldich, blaB. Hamoglohingehalt 38 Proz., rote Blutk6r|>er-
clien 3640000, weiBe 5600.“ Im November 1921, also l Jahr spliter,
war Herr Dr. Bi h 1 in eyer (Ravensburg) so freundlich, mir wieder eine
Stuhlprobe des Madchens zuzusenden. Es waren iturner noch Eier von

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Galli-Valerio, Beobachtungen fiber Culiciden uaw.

557

Fasciolahepatica vorhanden, etwa 20— 30 Stflck in einer linsen-
groBen Probe! Das Kind erfreute sich dabei aber bester Gesundheit.
Ich werde diesen Fall auch ferner im Auge behalten.

Ueber die n&heren Ursachen der Infektion liefi sich Sicheres nicht
mehr ermitteln. Bei uns gehdren Infektionen mit dem grofien Leber-
egel bekanntlich zu den Seltenheiten. In der Literatur werden 30 bis
40 Ffille erwfihnt; die fast alle von Obduktionen herzuriihren scheinen.
Ob es sich bei Perroncitos Angaben, der bei den mit Ankylo-
stom a infizierten Arbeitern am Gottliardtunnel neben den Eiern dieses
Parasiten in manchen FSllen auch Eier von Fasciola hepatica ge-
gefunden hat, um Infektion Oder um Verunreinigung durch GenuB in-
fizierter Leber handelt, ist ungewiB.

Der vorliegende Fall gibt Veranlassung, erneut darauf hinzuweisen,
daB man in Gegenden, wo die Leberseuche der Schafe h&ufiger auftritt,
keinenfalls Kinder — Erwachsene nur mit Vorsicht — zum Sammeln
der als Zwischenwirte des Leberegels dienenden Schnecken (Limnaeus
minutus Drap. — L. truncatulus MAIL) verwenden sollte, wie es
tats&chlich vorgekommen ist. Es ist durch neuere Beobachtungen be-
kannt geworden, daB die Infektion nicht nur, was allerdings die Regel
ist, durch den GenuB der an GrSsern und anderen PHanzen enzystierten
jungen Egel erfolgt, sondern daB auch die Schneckenschalen selbst mit
Zysten bedeckt sein kdnnen, die an der Hand kleben bleiben und Ver¬
anlassung zur Infektion der Sammler geben kdnnen. Es besteht auch
die Moglichkeit, daB cerkarienhaltiges Schneckengewebe direkt in den
Darm gelangt und zur Infektion fiihrt (s. Braun).

Literatur.

Braun -Seifert, Die tierischen Parasiten des Menschen. 5. Aufl. 1015. — Leh¬
manns mediz. Atlanten. Bd. 11. Tierische Parasiten. Bearbeitet von R. O. Neu¬
mann und M. Mayer. 1915. —Leuckart, R., Die Parasiten des Menschen und die
yon ihnen herruhrenden Krankheiten. 2. Aufl. Leipzig 1879. — v. Ostertag R., Hdb.
d. Fleischbe&chau. 1913.

Nachdruch verboten .

Beobachtungen iiher Culiciden, nebst Bemerkungen liber

Tabaniden und Simuliden.

[Hygienisch-parasitologisches Institut der Universitat Lausanne.]

Von B. Galli-Yalcrio.

1. Culiciden (Ende Oktober 1920 bis Ende Oktober 1921).
a) Beobachtungen in den verschiedenen Jahreszeiten.
Noch am 18. Nov. 1920 habe ich Larven und Puppen von Th. annu-
lata und zahlrciche kleine Larven von A. bifurcatus in Vidy gelunden
(Luftiemp. +<>°, Wassertcmp. + 10°). Im Dezember war die Mehrheit der
Plfiizen von Vidy ganz eingetrocknet, nur in einer mit noch elwas W'asser
fand ich am 14. Dez. Larven von Th. annulata, A. bifurcatus und
Sayomyia, die alle noch am 22. Jan. 1921 lebten (Lufttemp. -f- 7°,

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558

Centralbl. f. fiakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Wassertemp. +5°). Im Februar war auch diese Pffitze fast ganz aua-
getrocknet und am 19. Februar wimmelte es mnter dem Eise im feuchten
Moos vod Sayomyia-Larven. Nachher war diese PfQtze ganz aus-
getrocknet und erst am 3. Juui fand ich wieder etwas Wasser darin und
zahlreiche kleine Larven von Culex und Dixa, etwa 3 Tage alt Am
24. Juni (Lufttemp. +27°, Wassertemp. +24°) erschienen die ersten
Puppen von Culex, undam 9. Juli(Lufttemp. -J-26°, Wassertemp. +24*)
junge Larven von Th. ann ulata und A. bifurcatus. Nach 2 Regen*
wocben fand ich am 26./VIII. (Lufttemp. +17°, Wassertemp. 22°) viel
Wasser in der PfQtze von Vidy und sehr viele Larven von C. pip ions,
Th. annulata, A. bifurcatus, einige von A. maculipennis und
viele Puppen von C. pipiens. Am 26. Sept. (Lufttemp.-j-17°, Wasser¬
temp.-fl7°) fand ich nochmals viele Larven und Puppen von C. pi¬
piens und Th. annulata. Am 28.Okt. (Lufttemp. -f-10°, Wassertemp.
+ 10°) war nur noch sehr wenig Wasser in einigen PfQtzen und darin
sehr kleine Larven von Culex pipiens, Th. annulata und A. bifur¬
catus sehr zahlreich, selten die Puppen von Th. annulata.

b) Beobachtungen fiber die Brutpl&tze der Culiciden.

Cbarakteristisch fflr dieses Jahr war in Vidy die starke Trockenheit.
Die groBe Mehrzahl der PfQtzen war eingetrocknet und der Genfersee
sehr gesunken. Die MQndung einiger AbfluBkanftle in den See war durch
Sand versperrt und das stagnierende Wasser dieser KanSle war ein
Brutort fQr die Culiciden geworden. Wegen Mangels an stagnierenden
Gewassern kSnnte man denken, daB diesen Sommer die Culiciden sehr
selten geworden waren, statt dessen ist im Kanton Waadt eine wahre
Culicidenplage gewesen, und zwar deshalb, weil wegen des Wassermangels
man in jedem Garten in Tonnen, GefaBen usw. Wasser zum BegieBen
sammelte, und dadurch sehr gute Brutpl&tze fQr die Culiciden hergestellt
ljat. Speziell im September und Oktober, wo die groBe Verschiedenheit
zwischen der Temperatur von Tag und Nacht herrschte, waren die Culi¬
ciden sehr zahlreich in die HQuser eingedrungen. Ein weiterer Beweis,
daB die Culicidenplage durch Aufsicht Qber die G&rten zu bek&mpfen
ware.

c) Beobachtungen Qber die Biologie und die Verbreitung

der Culiciden.

Gegen die immer von mir verteidigte Ansicht, daB im allgemeinen
die Winde keine wichtige Rolle bei der Verbreitung der Culiciden spielen,
wQrde eine Beobachtung von Ball 1 ) sprechen, der angibt, daB beim
Leuchtturm von Tortugas (Florida) sich nur MQcken finden, wenn der
Wind von Florida, Cuba Oder den Marquesas her wehten. Nach Ball
kommen diese Culiciden mit dem Winde von Cuba (95 Meilen) und Kap
St. Antonio (230 Meilen). Wahrscheinlich rollen bei solchen Winden
und starken Wellen an den Leuchtturm von Kuba und St Antonio auch
PHanzen und Baumstamme an, die die MQcken tragen, was noch wahr-
scheinlicher ist, weil Ball sagt, daB die gefundenen Culiciden im Salz-
wasser leben. Mein Schuler de Bruyn, der lange Zeit in Neu-Guinea
lebte, sagte mir, daB man dort oft Mueken in kleinen Hohlen von Baum-
stQmmen findet, die auf dem Meerwasser treiben.

1) Carnegie Instit. of Washington. Yearbook No. 16.1917. p. 167. [Washington 1918.]

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Galli-Valerio, Beobachtungen iiber Golicideo uaw.

559

Bezttglich der Verbreitaog der Culiciden in der Schweiz kann ich
bemerken: Die Anwesenheit eines groden Herdes von A. raaculipennis
an der Miindung der Venoge in den Genfersee, von Th. annulata in
Al&ze (600 m Kt. Wallis) und von Mansonia-Larven in Vidy. 1907 l )
habe ich eine Culiciden-Larve aus Vidy beschrieben, die ich und
Prof.Theobald far eine A e d e s - Larve hielten. Am 8. und 21.Jan. 1921
fand Dr. Bornand in derselben PfQtze wie 1907 nochmals einige jener
Larven. Diese Larven, graugelb oder grtin gef&rbt, habe ich jetzt als
solche von Mansonia erkannt; sie zeigten die charakteristischen Merk-
male, die Wesenberg-Lund beschrieben hat 2 3 ). Diese Larven kamen
sehr selten an die OberflSche des Wassers, wo sie eine fast horizontal
Stellung annahmen. Im allgemeinen aber blieben sie unter Wasser, wo
sie mit ihrem kurzen Atmungsrohr an Wasserpfianzen (Elodea cana¬
densis, Utricularia) fixiert waren, und so unbeweglich gegen 17 Tage
blieben. Leider sind diese Larven gestorben, bevor sie sich in Puppen
und Imagines entwickelt hatten.

2. Tabanidcn.

Die Tabaniden waren niemals so zahlreich auf den Alpenweiden von
Waadt und Wallis wie im Sommer 1921. Schon in den ersten Tagen
des Juni waren sie eine schreckliche Plage. Gegen die sehr verbreitete
Ansicht, dad die Tabaniden auf Alpenweiden mit dem Vieh erscheinen,
bemerke ich, dad am 5. Juni auf Alpenweiden, die seit dem Sommer 1920
ohne Vieh geblieben waren, die Tabaniden so zahlreich waren, dad meine
Kleider ganz bedeckt von diesen Parasiten waren. Sie kamen wie Wolken
aus dem Grase heraus und stachen so, dad meine Hftnde mit roten
Flccken bedeckt und ganz geschwollen waren. Verletzungen, Jucken
und Schmerz dauerten 2 Tage, und es war mir fast unm5glich, zu
schlafen. Experimentell habe ich bemerkt, dad die Tabanidae sich far
5* fixieren und bis zwei Male das Gewicht ihres Kftrpers saugen. Die
meisten Tabanidae fixicrten sich auf den schwarzen Teilen meiner Kleider;
es scheint also immermehr moglich, mit schwarzen. mit Vogelleiro Ober-
schichteton Lappen sie zu zerstoren 8 ). Nach den Tabaniden, die sich auf
mich fixiert hatten, wurde ich nicht von T. bovinus gestochen, wohl
aber von T. bromius, Therioplectes sol/stitialis, Atylotus
ater, Chrysops coecutiens und Haem, plnvialis 4 ). Alle waren
Weibchen.

8. Simulidcn.

Die Biologie der Simuliden, die auf den hohen Alpen leben, ist
noch im Dunkeln. Da sie auf Bergen von 2000 m Hdhe sehr weit von
fliedenden GewSssern in groden SchwSrmen fliegen, mOssen sie sich ent-
weder nicht in fiiedendem GewSsser entwickeln oder sehr weit vom
Produktionszentrum wegfliegen konnen. FOr die erstere und gegen die
letztere Vermutng sprcchen die Untersuchungen, die ich in diesem Jahre
gemacht habe. Wegen der groden Trockenheit waren nicht nur die

1) Centralbl. f. Bakt Abfc. I. Orig. Bd. 43. 1907. p. 471.

2) Sacrtr. af Videnak. Medd. fra Dan*k Naturhi&t. Foren. Bd. 69. 1918.

3) B. Galli-Valerio, Centralbl. f. Bakt Abt. I Orig. Bd. 60. 1911. 8. 362.

4) Ich daake Herrn Prof. Bezzi fur die freuudiiche Unterauchung dieser Arteu.

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560

Centralbl. f. Baku etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Pfiitzen, sondern auch viele kleine Seen anf den Alpen eingetrocknet.
wahrend in den T&lern noch Gewasser flossen. Man h&tte, wenn die
Alpen - Simuliden sich in UieBenden GewSssern entwickeln, sie auch
dieses Jahr zahlreich anf den Bergen finden mussen. Anstatt dessen
waren sie aber sehr selten und felilten an einigen Punkten ganz. Ich
babe auch in vielen AlpenbScben nach Larven und Puppen der Simu¬
liden gesucht, habe aber nur Larven von Per la, Ephemera und
Dixa gefunden. Nachdem es im August geschneit und geregnet hatte,
und sich ncue PfGtzen entwickelt batten, sind auf den Hochalpen die
Simuliden erschienen. GrOnberg 1 ) hat eine Shnliche Vermutung aus-
gesprochen; er schreibt: „Die Larven leben vorzugsweise in flteBendem
Wasser, meist in B&chen, selten in feuchter Erde Oder zwischen nassem
Moos.“

Ich habe nochmals probiert, mich von S. gallii steeben zu lassen.
aber ohne Resultat. Sie nahmen auch keinen Honig und sind nach
2 Tagen gestorben. Simuliden, die in Mullkafige gesetzt waren, die
sehr brauchbar for Culiciden sind, traversieren sehr gut die sehr kleinen
Maschen, indem sie ihren Kopf in die Maschen stecken und sich so
schnell bewegen, daB sie die Oeffnung erweitern und fortfliegen.

Naehdruek verboten .

Die Konservierung von agglutinierenden und hamolysie-

renden Seren.

[Aus dem Hygienischen Institut in Kiel (Direktor: Prof. Dr.

K. Kisskalt).]

Von Prof. Dr. med. Ludwig Bitter.

1m Jahre 1908 bat Loeffler anlaBlich eines von Weidanz auf
der 2. Tagung der Freien Vereinigung fQr Mikrobiologie gehaltenen
Vortrages meines Wissens zuerst die Konservierung von ImmunsereD
mit Glyzerin erw&hnt. Es handclte sich um prSzipitierende
Seren, und Loeffler stellte fest, dad zu ihrer llaltbarmacbung ein
Zusatz von 20 Proz. Glyzerin ungeeignet sei, weil dadurch die Re-
aktion mit diesen Seren verlangsamt wflrde. 1913 hat Reiner Muller
im Hygienischen Institut in Kiel versucht, agglutinierende Sera
durch Zusatz von gleichen Teilen reinen Glyzerins haltbar zu machen.
Er hat nach einer personlichen Mitteilung an mich von der Fortsetzung
dieser Versuche und von ihrer Verbffentlichung Abstand genommen.
weil er den Eindruck hatte, dafi „der Titer dieser Sera doch etwas starker
zurflckging als bei den mit Karbol versetzten“. Ich habe im April 1914
im Untersuchungsamt fQr anstcckende Krankheiten in Kiel ein von
Reiner MQller hergestelltes agglutinierendes Choleraimmun-
serum (Kaninchen) Qbernommen, das den aufgezeichneten Titer 1:5000C>

1) Die blutsaugenden Dipteren. Jena 1007. S. 115.

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Bitter, Konservierung von agglutinierenden und hamolysierenden Seren. 561

bis zum Ende des Jabros 1920 unverfindert beibebalten hat. Das Serum
war und blieb bis zum letzten Rest vollst&ndig klar. Seit April 1914
habe ich selbst agglutinierende Sera verschiedeuster Art mit hobem und
niedrigem Titer mit gleichen Teilen Glyzerin versetzt und ge-
funden, dad der durch den Glyzerinzusatz selbstverst&ndlich urn die
Hfilfte erniedrigte Titer sich in diesen Seren mindestens 3 Jahre
bei den fiblichen Temperaturscbwankungen unver&ndert halt. Allerdings
wurden die Sera dunkel aufbewahrt. Ich besitze Typhus-, Para-
typhus- und En ter iti s-Sera, die einen ungewdhnlich ho hen Titer von
1:200 000 aufweisen. Ich erhielt diese Sera, indem ich weibliche
Kaninchen mit abgetoteten Erregern in Abstfinden von je 5 Tagen 4mal
intravenos spritzte. Die AbtOtung der etwa V 3 Oese im Kubikzenti-
meter entbaltenden Abschwemmungen von 24 Std. alten Agarkulturen
erfolgte bei 53—56° (Typbusimpfstoff) Oder nach der von mir ange-
gebenen Salzs&uremethode 1 ). Die Injcktionsmengen betrugen jedes-
mal 1 ccm. Zwischen letzter Injektion und Entnahme lieB ich winder
5 Tage verstreichen. Diese Sera habe ich, mit gleichen Teilen Glyzerin
versetzt, zum Teil seit fiber 2 Jahren, mit dem unver&nderten Titer von
1 :100000 im Gebrauch. Sie haben mir und anderen besonders bei der
Unterscheidung von Angehfirigen der Paratyphus-Enteritis-Gruppe
wertvollste Dienste geleistet.

Die Sera bleiben meistens vdllig klar und von Bakterienwachs-
tum frei. Auch die in den karbolisierten Seren so hfiufig auftretenden
Torula-Arten fehlen in ihnen. Gelegentlich allerdings vermfigen sich
in ihnen Schimmelpilze, insbesondere Angehfirige der Gruppe
Aspergillus, anzusiedeln, ohne dad darunter aber, wie gesagt, der
Titer leidet. Ich halte die geschilderte Art der Konservierung ffir
empfehlenswert; cine vorherige Sterilisierung des verwendeten, im Handel
erhfiltlichen, reinen Glyzerins erscheint mir unnfitig.

Seit Mitte 1917 habe ich auch hfimolysierende Sera (Ambo-
zeptoren) mit Glyzerin konserviert und den gleichen guten Er-
folg gehabt. Die Sera bleiben bis zum letzten Tropfen voll leistungs-
f&hig und zeigeu meiner Meinung nach nicht die immerhiu erheblichen
Schwankungen in der jedesmaligen Gebrauchsmenge, wie die mit Karbol
versetzten. Die Gegenwart von Glyzerin stfirt den Ablauf der Komple-
mentbindungsreaktion in keiner Weise. Selbst erhebliche Mengen, wie
sie bei einem Titer des Ambozeptors von nur 1:1000 ohne Glyzerin
in die RQhrchen kommen, fiben auf Zeit und Art der Reaktion, wie mir
weit fiber 2000 Kontrollversuche gezcigt haben, keinen EinfluB aus.
E. H. Ruediger 2 ) in Manila hat offenbar Shnliche Erfahrungen ge-
macht. Er schlfigt nfimlich, wie mir nachtrSglich zur Kenntnis gekommen
ist, 1916 vor, die an die Untersuchungsstellen einzusendenden, nach
v. Wassermann zu prfifenden Serumproben mit gleichen Mengen
sterilisierten, reinen, neutralen Glyzerins zu versetzen. Dieser Vor-
schlag wird erklfirlich, wenn man bedenkt, daB in den heiBen Kli-
maten die oft lange Zeit unterwegs befindlichen Serumproben sehr hfiufig
vfillig zersetzt an der Untersuchungsstelle eintreffen. Auch bei uns ist

1) Fischer, Bitter, Wagner, Vereinfachung und Verbilligung der Heretel-
iung von Choleraimpfxtoff. (Miinchen. med. Wochenschr. 1915. S. 813.)

2) Ruediger, E. H., WaBBermann-EraHion wilh glycerinatcd human Be-
rum. (The Philippine Journ. of 8c. Vol. 11. B. 1916. No. 2.)

Ente Abt. Orig. Bd. 67 . Deft 7,8. 36

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562 Centraibl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origiu&le. Bd. 87. Heft 7/8.

dieser Uebelstand in der w&rmeren Jabreszeit in UntersuchungsSmtern
mit grdfierem Wirkungskreise nianchmal unangenebm bemerkbar. Es
dflrfte sich empfehlen, Ruedigers Vorschlag gelegentlich auch in un-
seren Breiten zu entsprechen. Freilich darf nach diesbezGglichen eigenen
Versuchen nur das Serum mit Glyzerin versetzt werden. Fflgt man das
Glyzerin der Blutprobe — also Serum -+* Blutkuchen — hinzu, so leidet
die anzustellende Reaktion im Sinne einer positiven Beeinflussung.

Nachdruck verbotam.

Zur Reinkultivienmg der pathogenen Schimmelpilze.

1 Aus dem Institut fOr tropische Hygiene des Kolonialinstitutes in Amsterdam]
(Direktor: Prof. Dr. J. J. van Loghem).]

Von Dr. nenrik Egyedl.

Bekanntlich stdfit die Befreiong der Schimmelpilze von Mitparasiten
in der 1. Kultur oft auf unflberwindliche Schwierigkeiten. Wenn wir
auch durch die von Sabouraud angegebenen K&hrbdden in einer
groBen Zahl der Ffille mit einiger Vorsicht zum Ziele gelangen, kdnnen
sicb doch hfiufig F&lle ergeben, in denen wir durch einfaches Auslegen
des Untersuchungsmaterials auf Sabouraudschen Agar keine Rein-
kultur gewinnen kdnnen. Ich denke hier speziell an Ffille, wo, wie
beim eiterigen Material von Kerion Celsi, das Grundmaterial stark
infiziert erscheint.

Die von verschiedenen Autoren zur Gewinnung von Reinkulturen
angegebenen chemischen und physikalischen Verfahren erfreiien sich
keiner besonderen Popularity, da durch Zerreiben des Ausgangsmate-
rials oder Versetzen mit chemischen Mitteln sehr oft die Erreger selbst
leiden.

Bevor ich auf mein eigentliches Thema eingehe, mdchte ich die
Beschreibung einer Eigenbeit des Achorion Schdnleinii and der
Trichophy ton-Arten vorangehen lassen, einerseits um diesbezugliche
MBDgel in den Lehrbdchcrn zu ergfinzen und die Aufmerksamkeit auf
die charakteristischen Artmerkmale der genannten Pilze zu lenken.
andererseits, um meine Methode verstfindlich zu machen.

Bei der Beschreibung der kulturellen Eigenschaften der pathogenen
Schimmelpilze fand ich nSmlich in der mir zugSnglichen Literatur
nirgends Rucksichtnahme auf das Tiefenwachstum dieser Erreger im
Agar. Die hier folgenden Erdrterungen sollen daher den tiefen Aesten
der Schimmelpilze gelten, die ich hier weiterhin der Einfachheit halber
als Wurzel bezeichnen mdchte.

Die Entwicklung dieser Wurzel schreitet im Agar parallel mit der
Ausbreitung an der Obertlache ziemlich rasch vor, so dafi nach 1 Woche.
wenn das Oberflachenwachstum 2—3 mm betragt, auch die Wurzeln einige
Millimeter tief vorgedrungen sind. Dabei erweist sich zwischen Favus

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Egyedi, Zur Rernkultivierung der pathogenen Schimmelpilze. 563

und Tricbophytie (die Mikrosporie aufier acht lassend) ein viel charakte-
ristiscber Unterscbicd als bei BetracbtuDg der Oberflfichenkolturen.
Dieser besteht in folgendem: Die Wurzeln der Trichophyton-Artec,
die ich nntersucbte, sind bei seitlicber Betracbtung der Scbielagarkulturen
gegen das Licht als schwach sicbtbare, schmale, strahlenfOrmige Gebilde
zu sehen, die immer einen geradlinigen Verlauf zeigen. Ihre Ausbreitung
entspricht dem Durchmesser der Oberflfichenkultur.

Die Wurzeln des Favuserregers jedoch weichen davon in folgenden
Punkten ab: 1) dafi sie im ganzen Verlaufe und speziell an den Enden'
gut sichtbar und scbarf abgegrenzt sind, 2) dafi sie stark gewunden
erscbeinen, also nie gerade verlaufen, 3) dafi sie mehr ausgebreitet sind
als die Oberfl&chenkolonie. Dadurcb sind sie auch von oben sichtbar.
Im allgemeinen erwecken sie den Eindruck eines flockigen Niederschlags
im Agar.

Bei mikroskopischer Betracbtung findet man die Erklfirung dafiir
1) in der viel grdfieren Anzahl der Verzweigungen, 2) in der relativen
Dicke der A chorion-Wurzeln, 3) in der zahlreichen, oft gruppenweisen
Anwesenheit dicker Sporen, Chlamydosporen und Spindelformen.

Diese elektive Eigenschaft der Schimmelpilze, das Tiefenwachstum,
benutze ich zu ihrer Isolierung.

Ich lege nach Vorschrift von Sabouraud kleine Stilckchen des
zu untersuchenden Materials auf Sabouraudscben Agar, Oder streiche
den Eiter nach den Regeln der Bakteriologie aus. Dann lasse ich die
Kulturen bei Zimmertemperatur stehen, bis die Erreger eine gewisse
GrOfie erreicht haben, unbekiimmert um das Wachstum saprophytischer
Bakterien, grbfitenteils Staphylokokken. Nachdem die Wurzeln einige
Millimeter tief gewuchert sind, erfolgt die Isolierung und Ueberimpfung
auf folgende Weise: Mit einem Feuerstein, einer Feile, oder besser Dia-
mant ritze ich das Kulturrohrchen an einer Stelle, welche der H6he
der Kolonie entspricht, rings um. Mit einem glQhenden, noch weichen
Glasstab berilhre ich hierauf diese Stelle, wodurch die Eprouvette hier
regelmafiig bricht. Nun ziehe ich die beiden Teile auseinander und
bekomme so die entsprechende Agarfliiche frei. Hierauf wird der Agar
mit einem scharfen Instrument von der nicht infizierten, der Glaswand
zugewandten Flache des Nahrbodens in der Hohe der Kolonie abge-
schnitten. So erhSIt man 2 getrennte Teile.

Mit einem scharfen spatelfdrmigen Instrument trennt man nun
in einem der Teile die inttzierte Oberflache von ihrer Unterlage ab,
wodurch man die tiefe, reine Agarpartie mit den darin gelegenen
Schimmelpilzwurzeln freibekommt, befreit von den Mitparasiten. Ich
fiberimpfe nun von hier auf trischen Sabouraudschen oder Maltose-
Agar.

Beziiglich der Ausfflhrung der Methode faDd ich als spatelformiges
Instrument entwcder eine breite Platinlanzette geeignet oder in Er-
mangelung deren einen Teil eines Gillette-Messers, den ich in das
Ende eines Glasstabes fafite. Dasselbe mufi vor Gebrauch in der Flamme
sterilisiert werden. Ferner ist es zweckmafiig, um beide Hfinde frei-
zubekommen, die Eprouvette in die Branchen eines Eprouvettenstativs
zu setzen und so die Manipulationen auszufQhren.

Die Methode versagte nur in jenen FSlIen, wo die Kulturen kiinst-
lich mit beweglichen Bakterien (Bact. coli, oder Proteus) versetzt

3C*

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564

Centr&lbl. f. Bakt, etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

waren, weil diese Bakterien einige Male auch in die Tiefe wacherten und
so die Isolierung der Schimmelpilze erschwerten. Da aber unter ge-
wohnlichen Verhaltnissen die Verunreinigung fast durchweg aus Kokken
besteht, komrat dieses Moment kaum in Betracht.

Es sei mir noch gestattet, bier dem Herrn Dr. Muys, Leiter der
„Stedelijke-Favus-Polykliniek“, fflr seine RatschlSge nnd Bereitwilligkeit
bei der Beschaffung des Untersnchungsmaterials meinen Dank aus-
zusprechen.

Naehdruck verboten.

Ueber Thermoregulatoren 1 ).

|Aus der Dermatologischen Klinik ZQricb (Direktor Prof. Dr. B. Bloch).]

Von Dr. K. v. Neergaard.

Mit 4 Abbildungen im Text

Je inehr Laboratoriumsmethoden in den Dienst unserer kliniscben
Arbeiten treten, um so groBer werden auch die Anforderungen, die wir
an die Genauigkeit und Betriebssicberheit unserer instrumentellen Hilfs-
mittel stellen miissen.

Besonders die immer zunehmende Berucksicbtigung physikalisch-chemiecher Vor-
gange erheischt auch ofter die Berucksichtigung des Temperaturfaktors, d. h. die Ein-
haltung bestimroter Teraperatur. Ein vie! gebrauchte* Hiltsmittel im Laboratonum be¬
steht daher in Vorrichtungen, um eiue bestimrnte Temperatur wahrend iangerer Zeit
konstant zu erhalten, so vor allem im Brutschrank unu im ParaffinH'hrank. Aufier-
dem kommeu in der Biologie noch Temperaturen von ca. 2b° fiir Gelatinekulturen in
Frage, sowie solche zwischen 50 und 00° zur {Sterilisation oder Inaktivierung von
Serum, sowie Wasserbader von 37° fiir Versuche an iiberlebenden Organen etc. Grofi
ist die Zahl der Gelegenheiten in der Chemie und physikalischen Chemie sowie in der
Technik, wo die Einhaltung bestimmter Temperaturen wichtig ist. Die Zahl der im
Handel befindlichen Modelle ist aufierordentlich grofi. Aber jeder, der viel im Labo-
ratorium gearbeitet hat, weifi, wie oft sie versagen und wie oft muhsauie und wertvolle
Versuche dadurch scheitern. Der Grund ist der, dafi die meistcu der kaufiichen Ke-
gulatoren physikalisch nicht durchkonstruiert sind und die quantitativen Abhanigkeits-
verhaltnisse nicht geniigend beriicksichtigen. Manchmal geben wir uns auch nicht die
Miihe, die physikalischen Verhaltnisse der von uus taglich benutzten instrumentellen
Hilfamittel zu verstehen. Denn sonst wiirden wir oft in der Lage sein, die Uraache
der Storungen zu erkennen und leicht zu beseitigen.

Da man in den Hilfsbiichern der klinischen und physiologischen
Methodik nur sp&rliche Auskunft liber dieses so vielfach benutzte Hilfs-
instrument findet, so seien in den folgenden Zeilen die Hauptprinzipieo
der Thermoregulierung kurz dargelegt und einige Ausffihiungen im ein-
zelnen besprochen, die sich auf Grund eingehender praktischer Versuche
gut bewahrt haben. Ferner sollen diese Zeilen im konkreten Falle er-
moglichen, den Fehler eines Regulators zu erkennen und zu beseitigen.

1) Die folgenden Erfahrungen baben sich bei Gelegenheit kolloid-chemischer Unter-
suchungen ergeben und werden vielleicht dem einen oder anderen von Nutzen sein und
die Arbeit erleiehtern.

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Neergaard, Ueber Thermoregulatoren.

565

Sfimtliche Regulatoren beruhen auf der Eigenschaft gasffirmiger,
flfissiger Oder fester Kdrper, sich bei Erwfirmung auszudebnen 1 ). Durch
die dabei eintretenden Form verSn derun gen der sich ausdehnenden Teiie
wird die Wfirmezufuhr mehr Oder weniger gesperrt, bis durch die dann
eintretende Abkflhluug des konstant zu erhaltenden Kfirpers wieder eine
Formverfinderung dcs Regulators im entgegengesetzten Sinne eintritt,
wodurch die Wfirmezufuhr wieder verraehrt wird. So ist es, streng ge-
uoramen, unmoglich, eine Temperatur absolut konstant zu erhalteu, viel-
mehr handelt es sich am ein Pendeln zwischen 2 Temperaturen. Die
Aufgabe gestaltet sich also so, daB wir durch geeignete Abmessungeu
daffir sorgen, daB diese beiden Temperaturen, namlich die hdhere, bei
der die Warmezufuhr gesperrt wird, und die niedere Temperatur, bei
der die Warmezufuhr wieder freigegeben wird, mfiglichst nahe beiein-
ander liegen. Anders ausgedrfickt, es muB die GrdBe dieser Schwan-
kungen den Anforderungen des Einzelfalles angepaBt werden. Eine
2. wichtige Anforderung ist die der Betriebssicherheit, d. h. ohne viel
Wartung muB der Apparat durch lange Zeit hindurch sicher funktio-
uieren ; er muB also mfiglichst einfach gebaut sein. Diese beiden Haupt-
anforderungen konnen wir kurz formulieren als: 1) gentigende Empfind-
lichkeit, 2) Betriebssicherheit.

Nach der Art der Regulierung konnen wir folgende Gruppen 2 ) von
Thermoregulatoren unterscheiden, je nach dem Zustande des sich aus¬
dehnenden KSrpers. Derselbe ist 1) luftformig, d. h. ein UDgesattigtes
Gas, 2) ein gesattigtes Gas, das mit seiner Mutterfllissigkeit in Berfih-
rung steht, 3) eine Flfissigkeit von mfjglichst hohem Ausdehnungsver-
mfigen, 4) ein fester KOrper.

1) Luftregulatoren: Nach den Gasgesetzen dehnt sich ein un-
gesattigtes Gas, resp. ein Gemisch von solchen, wie die Luft eines ist,
um 1 / tia seines Volumens bei 1° Erwarmung aus. Wenn wir also in
die Flitssigkeit des Brutschrankes Oder Wasserkastens ein GefaB hangen,
das mit Luft gefiillt ist und das in ein U-formiges, mit Quecksilber ge-
ffllltes Rohr endigt, so wird bei einer Erwarmung infolge des groBen
AusdehnungsvermSgens der Luft das als Sperrflttssigkeit dienende Queck¬
silber in dem einen Schenkel um eine gewisse Niveaudifferenz steigen
und ist so imstand^, ein fiber dem Quecksilber mfindendes Kapillarrohr,
das mit der Gasleitung in Verbindung steht, zu verschlieBen und so die
Gaszufuhr zu sperren. Bei der Abkfihlung zieht sich die Luft zusam-
men, das Quecksilber sinkt wieder und gibt die Gaszufuhr frei. Aus
dem Volumverhfiltnis des Luftraumes und dem Durchmesser des Queck-
silberschenkels laBt sich die Empfindlichkeit fflr ein beliebiges Tempe-
raturintervall leicht berechnen, und die Empfindlichkeit eines solchen
Regulators laBt sich ohne Mfihe auBerordentlich hoch gestalten. Gfinstig
ffir die Empfindlichkeit ist noch die auBerordentlich geringe spezifische
Warme der Luft, d. h. es bedarf einer sehr geriogen Wfirmezufuhr von
auBen, um eine gewisse Luftmenge, sagen wir um 1 °, zu erhohen. Die
Folge davon ist, daB die Lufttemperatur sehr rasch der wechselnden
Temperatur der Flfissigkeit des Thermostaten folgt, d. h. der Regulator
besitzt eine geringe Trfigheit. Ein wesentlicher Nachteil dieser Systeme

1) Denn die Temperatur durch enteprechend gewahlte Gefriergemische oder durch
Wahl geeigneter FiuKsigkeiten, deren Biedepunkt koufitant bleibt, gleich zu erhalten y
kommt fiir uneeren Zweck kaum in Bctracht.

2) Oetwald, Luther u. Drucker, Hand- und Hilfsbuch der Physiko-chem.
Meflmethoden.

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566 Oentralbl. f. Bakt. etc. i. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

ist aber die grofie Empfindlichkeit gegen Schwankungen des Barometer-
druckes, die z. B. eine Schwankung der Temperatur des Thermostaten
von 0,37° fflr 1 mm Barometerdruckdifiereuz bei dem HOhenniveau von
ZOrich (420 m) ausmacbt 1 ). Das sind Schwankungen, die bei einem
Wettersturz mit einem Sinken des Barometerdruckes urn 20—25 mm
Fehler in der Einstellnng des Tbermostaten ansmachen, die das prak-
tiscb zulSssige MaB fflr manche Anfgaben flbersteigen. Eine nicbt ge-

ringe Schwierigkeit bestebt darin, das
System auf Iflngere Zeit genflgend
luftdicbt zu machen. Sie sind da-
gegen auBerordentlich einfach und ffir
kuzfristige Versucbe, wo die Baro-
meterschwankungen keine wesentliche
Rolle spielen, gut branchbar.

Wie wir durch eine geeignete
Vorrichtung auch die Luftregulatoren
von Luftdruckschwankungen unab-
bfingig machen und somit fflr gewisse
Aufgaben mit groBem Vorteil ver-
wenden konnen, wird weiter unten
gezeigt werden.

2) Dampfdruckregulatoren:
Bei geringem Volumen haben die Re-
gulatoren, bei denen ein Gas mit seiner
Mutterflflssigkeit in Berflbrung steht,
den Vorteil noch grSBerer Empfind¬
lichkeit wie die Luftregulatoren, wobei
die Empfindlichkeit sich je nach dem
Siedepunkte der gewahlten Flflssigkeit
beliebig den Anfordernngen *des Ein-
zelfalles anpassen lSBt. Ein einfacbes
Modell zeigt Fig. 1.

In dem linken, oben geschlossenen
Schenkel befindet sich eine Flussig-
keit, im unteren*Teile des U-formig
gebogenen Rohres Quecksilber. Wird
dieses System erwflrmt, so wird ein
Teil der Flflssigkeit verdampfen und
einen Druck nach unten ausflben —
da der linke Schenkel nach oben ge-
schlossen ist — nnd so das Queck¬
silber ira rechten, langen Schenkel
beben, bis es die gaszufflhrende Kapil-
lare verschliefit und so die Gasznfuhr sperrt. Da mit steigender Tempe¬
ratur der Gasdruck w&chst, indem einfach mehr Flflssigkeit verdampft, so
wird das Quecksilber im anderen Schenkel um so mehr steigen, je hflher
die Temperatur ist. Da es hier absolut nicht auf das Volumen
des Gasraumes, wie bei den Luftregulatoren ankommt, son der n
auf den Druck, der nur von der Temperatur abh&ngig ist, so kann

Fig. l. Fig. 2.

Fig. 1. Schema eines ein-
fachen Dampfdruckregulators
(nach Luther und Drucker) Hg —
Quecksilber, FI = FlQssigkeit, D —
Dampfraum.

Fig. 2. Elektriecber Dampf-
druckregulator, unabhangig vom
Luftdruck. (Wegen Raumersparnie sind
die MaSe in der UQhe verkurzt.) Hg =
Quecksilber, Hg x = Abdichtungsman-
schette gegen den Luftdruck mit Queck-
•ilberfulhiDg, 11 = FHissigkeit, D =
Dampfraum, P = Platinkontakte (fur
Gasheizung wurde die Manschetten-
dichlung = M fortfallen und die Gaszu-
und Abfuhr wie bei Fig. 1 atattfinden.

1) Auf Meeresniveau betragt dieeer Wert 0,36° fur 1 mm und nimmt mit der
HOhe zu, um z. B. auf der H6be von Daroa (1560 m), wo die Versuche mit den Re-
gulatoren hauptsaeblich ausgefiihrt wurden, 0,43°/mni zu betragen.

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Neergaard, Ueber Thermoregulatoren.

567

Gas- and FlQssigkeitraum sehr klein sein. Durch Ineinanderschachteln
der beidenSchenkel laBt sich die Form noch bequemer gestalten (Fig. 2).
Wenn wir auBerdem den untcren Teil des Aufienmantels kolbig erweitern,
so vergrOBern wir damit das untere, d. h. fiuBere Quecksilberniveaa.
Damit wird bei sonst gleicben Bedingungen die Empfindlichkeit erhOht,
weil nun nicht mehr ein betrOchtlicher Teil der Druckdifferenz durch
Senkung des OuBeren Quecksilberniveaus nutzlos verloren geht, sondern
sich fast reio im Stcigen des Quecksilbers im inneren Steigrohr aus-
wirkt. Wfihlen wir z. B. eine Flflssigkeit, deren Siedepunkt nahe der
gewOnschten Temperatur ist, so wird ihr Gas bei dieser Temperatur
etwa den Druck von 1 Atmosphere ausilben. Denn der Siedepunkt
einer FlOssigkeit ist ja eben die Temperatur, wo ihr Gasdruck den
Atmosphftrendruck gerade flberschreitet. In diesem Falle werden wir
also auBerordentlich groBe Niveaudifferenzen des Quecksilbers bei ver-
hSltnismSBig kleinen Temperaturunterschieden haben. Eine so groBe
Empfindlichkeit ist aber praktisch vollig unnotig. Dazu kommt, daB
sehr bald wieder, wie bei dem Luftregulator, sich der Fehler durch Be-
eintlussung des wechselnden Barometerstandes unangenehm bemerkbar
macht.

Wichtig ist noch folgender Umstand: Warden wir den kurzen, ge-
schlossenen Schcnkel ganz mit der regulierenden Flflssigkeit fallen, so
sind 2 Moglichkeiten vorhanden, wenn wir annehmen, daB das Queck-
silber in beiden Schenkeln gleich hoch steht, also far das Gleichgewicht
des Systems keine Rolle spielt.

1. kann der Fall eintreten, daB der Siedepunkt der FlOssigkeit hflher
ist als die gewunschte Temperatur des Thcrmostaten. Der Gasdruck
der regulierenden FlOssigkeit wird geringer als 1 Atmosphere sein, also
geringer als der Luftdruck, dcr auf dem Quecksilber des otfenen Schenkels
lastet. Es wird also keine Verdampfung und damit keine Regulierung
eintreten, wenn wir von der viel zu geringen Volumvermehrung der
kleinen Flflssigkeitsmenge durch Ausdehnung absehen.

Die andere Mdglichkeit ist die, daB der Siedepunkt der FlOssigkeit
niedriger ist als der des Thermostaten. Dann wird der Dampfdruck
der FlOssigkeit bei der gewttnschten Temperatur groBer sein als 1 Atmo¬
sphere. Wegen Siedeverzug mangels Berflhrung mit einem Gasraum
wird es zu einer plotzlichen starken Gasentwicklung kommen und das
Quecksilber in dem oflenen Schenkel rapid in die H6he getrieben werden,
da ja der auf ihm lastende Luftdruck von 1 Atmosphere das Gleich¬
gewicht nicht zu halten vermag. Wenn nun der oftene Schenkel nicht
sehr lang ist und der geschlossene ein groBes Quecksilbcrreservoir dar-
stellt, so wird durch die fast explosionsartige Gasentwicklung Queck¬
silber und Flussigkeit zum offeuen Schcnkel herausgejagt werden. Be-
sonders gem wird das, wie schon erwehnt, dann eintreten, wenn in der
unbewegten, vollig abgeschlossenen FlOssigkeit ein Siedeverzug eintritt
und die Gasentwicklung erst wesentlich tiber dem Siedepunkt ganz
plStzlich einsetzt. Mit anderen Worten, weder der 1., noch der 2. Weg
ist praktisch gangbar.

Wenn wir nun Qbor der Flflssigkeit noch eine klcine Luftblase
lassen, die so groB ist, daB sie auch bei lOngerem Stehen sich nicht in
der Flflssigkeit lost, so haben wir — wieder Gleichstand des Quecksilbers
in beiden Schenkeln vorausgesetzt — folgendes Kralteverh&ltnis: in dem
oflenen lastet auf dem Quecksilber 1 AtmosphOro Luftdruck, in dem ge-
schlossenen steht die Luftblase zusammen mit dem noch niedrigen

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568 Oentralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Dampfdruck der FlQssigkeit gleichfalls unter 1 Atmosphere Druck (das
geringe Gewicht der FlQssigkeit auf dem Quecksilber kdnnen wir ver-
nachlQssigen). Wenn wir dud den Regulator erwfirmen, so tritt zweierlei
ein: 1) wird sich die Luftblase eutsprecheud dem Gay-Lussacscben
Gesetz bei jedem Grad Erwftrmuog um Vj78 ihres VolumeDS ausdehnen.
Bei dem geringen Yolumeu der Luft wird das praktisch keioe groBe
Rolle spicleu. 2) wird ein Teil der FlQssigkeit verdampfen, und da bei
einem gesQttigten Gase der Druck nur von der Temperatur abhSngig ist,
so wird sich zu dem Druck der Luftblase noch der Dampfdruck der
FlOssigkeit entsprechend der jeweiligen Temperatur hinzugesellen und
das Quecksilber iin offenen Schenkel so viel heben, wie dem Dampfdruck
der FlQssigkeit bei dieser Temperatur entspricht. Da nun der Dampf¬
druck um so rascher pro Tempcratureinheit wQchst, je nfiher die be-
treffende Temperatur dem Siedepunkt der FlQssigkeit ist (Fig. 3), so
wird die Niveauschwankung. des Quecksilbers und damit die Empfind-

Fig. 3. Kurve der Sattignngsdrucke der Dampfe von / Aether, U Chloro¬
form, 111 Alkohol, IV Benzol, V VVaaser.

lichkeit des Regulators um so grOBer sein, je weniger der Siedepunkt
der FlQssigkeit uber der Thermostatentemperatur liegt. Dadurch haben
wir durch Wahl des Siedepunktes der FlQssigkeit es in der Hand, die
Empfiodlichkeit des Regulators, d. h. die Grdfie der Niveauschwankung
des Quecksilbers bei 1° Temperaturdifferenz, nach Bclieben zu walilcn.
Und wenn wir grade keine FlQssigkeit vom gewQnschten Siedepunkt
haben, so konnen wir durch Mischen einer FlQssigkeit mit zu hobem
und einer mit zu niedrigem ein Gemisch von passendem Siedepunkt
herstellen, da hier nicht die Partialdrucke der Komponenten, sondero
der Gesamtdruck entschcidct. Durch die Luftblase, die immer scbon
etwas Dampf der darunter befindlichen FlQssigkeit enthSlt, werden wir
den unliebsamen Siodevcrzug und allzu bruske Niveauschwankungcn des
Quecksilbers verhindcrn.

Leider steht den groBen Vorteilen dieses Systems, nSmlich der kom-
pendidscn Form und beliebig groBen Empfindlichkeit, ein groBcr Nacbteil,
den wir schon erwQhnten, gepenQbcr: die AbhQngigkeit vom Barometer-
druck. Wenn wir Leuchtgas zum lleizcn benutzcn, dQrfte dieser Febler

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Neergaard, Deber Thermoregulatoren.

569

nicht auszuschalten sein, selbst wenn man sehr komplizierte Vorrich-
tungen anbringt, die fur immer glcichen Gasdruck sorgen, dcnn die
Oeifnung des Brenners wird immer die Einwirkung des wechselnden
Barometerstandes zulassen. Dagegen gelang es, fur elektrische Re-
gulierung eine Vorrichtung zu finden, die das Rcgulatorsystera voll-
stSndig von der Einwirkung des wechselnden Luftdruckes abschliefit,
wie Fig. 2 zeigt. Am oberen Ende ist dcr Regulator mit einem durch-
bohrten Kork verschlossen; durch die Durchbohrung geht ein dflnnes
Glasrobr, in dem sich 2 isolierte, dlinne DrShte bcfinden. An deren
Unterende sind kurze Platindr&hte angeldtet und das Glasrobr ist um
diese Platinstiickchen herum zugcschmolzcn. Durch vertikales Ver-
schieben des Glasrohres lassen sich die Platinspitzen auf die gewflnschte
Niveauhdhe des Quecksilbers und damit auf die entsprechende Tempe-
ratur einstellen. Sind diese beiden DrShte nun mit den Polen einer
Stroraquelle verbunden, so wird durch Steigen oder Fallen des Queck¬
silbers ein StromschluB resp. eine Stromunterbrechung stattfinden. Mit
diesem Strom konnen wir nun ein zwischengeschaltetes Relais bedienen,
das seinerseits den Heizstrom einschaltet, wenn der Regulatorstrom
unterbrochen wird, d. h. wenn bei AbkOhlung des Thermostaten das
Quecksilber sinkt, dagegen steigende Thermostatentemperatur Steigen
des Quecksilbers, Einschaltung des Regulatorstroraes und Ausschalten
des lleizstrome8 durch Vermittlung des Relais bewirkt. Die genaue
Einstellung der gewflnschten Temperatur erfolgt nun einfach durch verti¬
kales Verschieben des dttnnen Rohres in der Korkdurchbohrung. Weil
wir diese Regulierung dringend notig haben, kdnnen wir den AbschluB
des Regulators vom Luftdruck nicbt einfach durch Zuschmelzen be-
wirken. Wenn wir dagegen den Regulator oben mit einem etwas weiteren,
kurzen Glasrobr versehen, das den Kork um einige Zentimetcr ttber-
ragt, in diese aufgeseizte Manschette und auf den Kork Quecksilber in
etwa 2,5 cm hoher Schicht gieficn, so wird der Innenraum des Regu¬
lators deu Einwirkungen des wechselnden Luftdruckes entzogen. Denn
nehmen wir an, wir batten den Regulator bei normalem Barometerstand
eingestellt, und es trete jetzt ein Luftdruckmaximum auf, so wird dieses
nicht imstande sein, das Quecksilber durch die Poren des Korkes durch-
zupressen, sondern das Quecksilber wird einen luftdichten AbschluB be-
wirken. Andererseits wird bei einem Wettersturz ein Luftdruckminimum
der Umgebung nicht zur Geltung kommen, da der Ueberdruck ini Innern
des Regulators nicht grofi genug ist, um die dartiberlagerndo Quecksilber-
schicht zu durchbrechen. Voraussetzung ist natiirlich, dad die H6he der
Quecksilberschicht etwas groBer ist als die groBten Luftdruckschwan-
kungen unterhalb des Normal-Barometerstandes. Der Regulator muB
selbstvcrstfindlich bis oben in den Thermostaten eintauchen, damit nicht
der tote Luftraum fiber dem inneren Quecksilbermeniskus infolge
Schwankungcn der Zimmertemperatur seinen Druck Sndert und einen
Fehler hineinbringt, der die Ausschaltung des Barometerdruckes illu-
sorisch macht. So ist ein luftdichter AbschluB des Regulatorinnern be¬
wirkt und doch durch Vertikalverschiebung des Kapillarrohres eine be-
liebige Einstellung des Regulators gewahrleistet. Eine Einstellung des
Regulators mit einer seitlich angebrachten Regulierschraube, die den
Quecksilberspiegel holier oder tiefer zu stcllen erlaubt, hat verschiedene
UnzutrSglichkeiten und kommt fiir genauere Anforderuncen nicht in
Frage. Wir kbnnen so den Vorteil der groBen Empfindlichkeit der Re-
gulatoren mit ges&ttigten Gasen voll ausnutzen. Bei Bedarf kann natflr-

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570

Centr&lbL f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

lich das elcktrisch bctriebcne Relais ebensogut eine Gasheizung wie
einen elektrischen Ilcizstrom aus- und einschalten.

Wo es also auf groBte Empfindlichkeit und exaktestes Arbeiten an-
kommt, und dort vor allem, wo der Thermostat elektrisch geheizt wird,
kbnnen wir den eben beschriebenen Dampfdruckregulator mil elektriscber
Unterbrechung anwenden *). Als Regulierfiilssigkeit fQr Temperaturen
um 37° eignct sicb am besten ein Gemisch von ca. 35 Proz. Alkobol
und ca. G5 Vol.-Proz. Aether, dessen Siedepunkt etwas fiber 40 Grad
liegt. Ffir niedrigere Temperaturen wird man mehr Aether oder reinen
Aether, ffir hohere mehr Alkohol nehmen und dabei nacb den oben ge-
gebenen Gcsichtspunktcn den Siedepunkt der gewfinschten Empfindlich-
keit anpassen. Der Aether ist zuvor durch SchUtteln rait Quecksilber
zu reinigen.

Die Empfindlichkeit steht in folgendcr Bezichung zum Sattigungs-
druck des Dampfcs: Wie Fig. 3 zeigt, wfichst der Sfittigungsdruck nicht
linear mit der Temperatur, sondern immer rascher mit steigender. So
nimmt z. B. beim Aethylalkohol der Dampfdruck von 0-20° um 44,1
bis 12.5 -= 31,6 mm zu, wahrend er im gleich groBen Intervall von
60—80° um 812—351 = 461 mm wfichst. Ffir 1° Temperaturschwan-
kung wird der Regulator zwischen 0 und 20° im Durchschnitt 1,6 mm
Ausschlag geben, wfihrend ffir den gleichen Temperaturunterschied
zwischen 60 und 80° der Ausschlag, d. h. die Empfiudlichkeit, im Mittel
23 mm betrfigt. Je nfiber die durch den Regulator innezuhaltende Tempe¬
ratur dem Siedepunkt der verwandten Flfissigkcit liegt, um so grdfier
wird die Empfindlichkeit demnach sein 1 2 ). Es ist nun bchauptet worden,
daB es keinen Zweck babe, die Empfindlichkeit dicser Regulatoren aufs
fiuBerste zu treiben, da die Fehler durch den wechselnden Barometer-
stand bald grdBere Schwankungen bedingen. Das ist aber nur zum Teil
richtig. Dean der EiafiuB des Baromcterstandes ist folgender: Nehmen
wir an, der auf dem otfenen Schenkel ruhende Luftdruck babe um 1 mm
zugenommen. Dann wird das Quecksilber um 1 mm heruntergedrfickt
und durch vermehrte Gaszufuhr die Temperatur im Regulator so lange
steigen, bis diese Niveaudifferenz wieder ausgeglichen ist. Bei unserem
obigen Beispicl wird beim Alkohol zwischen 0 und 20° die Temperatur
des Thermostaten demnach um 0,63° steigen, wahrend die gleiche Baro-
meterschwankung zwischen GO und 80° nur einen Fehler von 0,04* be-
wirken wird. FQr eine ja ofter vorkommende Luftdruckschwankung von
10 mm macht das bei niedriger Temperatur einen Fehler von 63°, bei
hfiherer nur von 0,4°. Allgem ein ausgedrfickt, ist der durch
den Baromctcrstand bewirkte Fehler also umso geringer,
je h fiber der Sfittigungsdruck bei der verlangten Tempe¬
ratur ist. Dadurch haben wir es in der Hand, den Barometerfeiiler
dieser Art von Regulatoren weitgehend zu verrii gern.

Ivennen wir von einer FlQssigkeit den Sfittigungsdruck bei 3 ver-
schiedcuen Temperaturen, so kfinnen wir nach folgender Formel den
Sfittigungsdruck und damit, wie gesagt, die Empfiudlichkeit und Ab-

1) Der bcsehricbene Regulator wird nach meinen Angabcn von der Gasbla*erei
Kunz & Cie., Zurich, Uuivensiiauslr., hergcsiellt und den Dcduriuibscn dea Einzel-
faliea angepnfit.

2) Selbstver*tandlich ateht Iheorctnch nichts im Wcge, bei Renutzung genugend
hoher Regulatoren uml von KliUsigkeilcn, deren Siedepunkt tiefer ala die verlangte
Temperatur liegt, die Euipliudlichkcit uoeh mehr zu ateigern.

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Neergaard, Ueber Thermoregulatoren.

571

hSngigkeit vom Barometerdrack n&herungsweise fQr jede beliebige
Temperatur erhalten:

10 10 .

4,57 log p = a log (273+t) — 273+t + c

Darin sind a, b und c aus den Beobachtungen zu bcstimmende Eon-
stanten, p der Sattigungsdruck bei der dazu gehbrigcn Temperatur t 1 ).

Wenn wir also praktisch einen Dampfregulator mdglichst empfindlich
und gleichzeitig moglichst unabh&ngig vom wechselnden Lulidruck machen
wollen, so werden wir eine Fliissigkeit wfihlen, deren Siedepunkt nahe
der verlangten Temperatur liegt. Wenn wir aber den gleicben Regulator
fflr verschiedene Temperaturen benutzen wollen, so mQssen wir besonders
bei den niedrigen Temperaturen mehr Oder weniger auf UnabhSngigkeit
vom Luftdruck verzicliten, oder nach der oben angegebenen Form den
Luftdruck ausscbalten.

Aus der Bereclinung der Eonstante f der van der Waalschen
Znstandsgleichung der Gase

(p = Sattigungsdruck bei der absoluten Temperatur T, p k = kritischer
Druck bei der kritischen Temperatur T k , f = Eonstante) ergibt sich,
daB die Eriimmung der Dampfdruckkurve urn so geringer ist, je kleiner
f ist. Bei Wasser und Aethylalkohol ist f nun infolge teilweiser Dis-
soziation abnorm groB, w&hrend z. B. Benzol eine normale Eonstante f
aufweist, d. h. bei niedrigen Temperaturen ist sein Druck relativ hoch,
bei hohen relativ niedriger. Es wird also Benzol bei niedrigen Tempe¬
raturen weniger unempfindlich und vom Barometerdruck abhSngig sein,
also eine etwas glcichmiiBigere Empfindlichkeit tiber einen grdBeren
Tcmperaturbereich aufweisen als z. B. Alkohol. Dazu ist er wegen
seines etwas hSheren Sicdcpunktes auch noch gflnstiger als Alkohol (vgl.
die Eurve).

Nun sind noch einige Bemerkungen am Platze tiber verschiedene
praktische Einzelheitcn. Bei den meisten Regulatoren, besonders dem
Qblichen Quecksilberregulator, wird das gasfuhrende, innere Kapillarrohr
unten schrag abgeschniitcn in dem Glauben, dadurch eine feinere Re-
gulierung dcr Gaszufuhr zu erreichen. Man vergiBt aber dabei ganz,
daB es viel groBerer Niveauschwankungen des Quecksilberspicgcls be-
darf, urn eine wesentliche Aenderung der Gaszufuhr zu bewirken, als
wenn man die Eapillare unten ganz gerade abschneidet. WShrend bei
gerade abgeschnittenem Rohr das Quecksilber eben noch das Glasrohr
Qberall bertihrt und das Gas so ganz sperrt, kann schon im nSchsten
Augenblick eine sehr geringe Senkung des Quecksilberspiegels von
Bruchteilen eines Millimeters schon cine bctrSchtliche Gaszufuhr erlauben.
Bei der Kapillare ist aber noch ein anderer Umstand zu beachten, namlich
die Weite derselben. SclbstverstSndlich muB sie weit genug sein, um
bei der niedrigsten, im Laboratorium vorkommenden AuBcntemperatur
genQgcnd Gas durchzulassen, um den Thermostaten auf gcwilnschter
WSrmehohe zu erhalten, d. h. ihm so viel Warme zuzufuhren, wie er
durch Abgabe an W3rme an die Umgebung verliert. Auf der anderen
Seite darf die Eapillare im VerhSltnis zu dem sie umgebenden Rohr,

1) Kohlrnuflch, Prakt. Phyeik. 1914.

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572

Centralbl. f. Bakt. etc. 1. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8. ;

in deni sich das Qnecksilber auf and ab bewegt, nicht zn weit sein, da
sonst bei nicht exakt konzentrischer Stellung der beiden Rohre eine un-
regelmfiBige, gebuchtete Gestaltung der Quecksilberoberflfiche eintritt,
die zu unregelmfiBiger Regulierung und verminderter Empfindlichkeit
AnlaB gibt.

3) FlQssigkeitsregulatoren, d. h. Regulatoren, bei denen die
Warmeausdehnung von Flussigkeiten eine Unterbrechung der Heizung
bewirkt.

Die meist gebrauchte Form der Regulatoren gehort in diese Gruppe.
Es sind die fiblichen Quecksilberregulatoren, die, fihnlich wie bei einem
Thermometer, unten ein groBeres Oder kleineres QuecksilbergeffiB haben,
dessen Ausdehnung einen AbschluB des Gases durcb den oberen Meniskus
bewirken soil. Sie funktionieren bekanntermaBen in der Mehrzahl der
Ffille recht schlecht. Das liegt nicht nur an prinzipiellen Fehlern, die
diesem System anhaften, sondern oft auch an f'alscher Konstruktion.

Urn uns fiber die Eignung einer Fltissigkeit fur diesen Zweck ein
Urteil zu bilden, mfissen wir uns fiber die verschiedenen Eigenschaften
der Flfissigkeiten, die liier in Betracht kommen, klar werden. In 1. Linie
ist natfirlich ein moglichst groBer Ausdehnungskoeffizient zu verlangen,
um mit einem nicht zu groBen Flfissigkeitsreservoir groBe Ausschlage,
d. h. eine genfigende Empfindlichkeit zu erzielen. Dann muB die Flfissig-
keit noch die Eigenscbaft einer geringen spezifischen War me haben,
denn je kleiner die letztere ist, um so weniger Wfirmezufuhr von auBen
braucht es, um die gleiche Flflssigkeitsmenge um eine bestimmte Tem¬
peratur zu erwfirmen. Nehmen wir als Beispiel an, daB die Temperatur
im Wassermantel des Brutschrankes um 7io° boher sei als die der Re-
gulatorflussigkeit, dann wird eine Flfissigkeit mit geringer spezifiscber
Wfirme — gleiche Leitfahigkeit des RegulatorgefaBes vorausgesetzt —
viel rascher die gleiche Temperatur des Wassermantels annehmen als
eine mit hoher spezifischer Wfirme, die viel grfiBere Wfirmezufuhr zu
gleicher Temperaturerhohung bedarf. Bei geringer spezifischer Wfirme
wird infolgedessen der Regulator viel rascher den Temperaturschwan-
kungen des Wassermantels folgen, daher rascher regulieren, und es
werden die Temperaturschwankungen z. B. im Brutkasten geringere sein.
DaB ferner chemisch die Regulatorsiissigkeit genfigend bestfindig sein
muB, ist eine weitere selbstverstfindliche Eigenscbaft. AuBerdem ist der
gleiche Regulator ffir niedrige und hohe Temperaturen gleichzeitig zu
verwenden, wenn der Siedepunkt der Flfissigkeit mdglichst hoch liegt.

Wie stelit es nun mit diesen Eigenschaften beira Quecksilber? Die
wichtigste, der groBe Ausdehnungskoeffizient, ist nun gerade nicht vor-
handen, denn der Ausdehnungskoeffizient desselben ist 0,00018, d. h.
bei einer Temperaturerhohung um 1° C dehnt sich ein bestimmtes Vo-
lumen Quecksilber um nicht einmal 2 /ioooo seines Volumens aus. Fast
den gleichen Ausdehnungskoeffizienten hat das Wasser. Wenn wir nun
also mit Quecksilber eine genfigende Empfindlichkeit erzielen wollen,
dann mfissen wir unverhfiltnisinfiBig groBe Mengen davon benutzen, wo*
durch der Regulator nicht nur unnotig kostspielig und schwer wird,
sondern auch durch das nfitige groBe Volumen der Vorteil der geringeo
spezifischen Wfirme des Quecksilbers zunichte gemacht wird (spez.
YVfirme 0,0333).

Ueber die Unzulfinglichkeit der Qblichen Quecksilberregulatoren wird
uns am besten die Durchrechuung eines konkreten Beispieles aufklfiren:
Kin MaB ffir die Empfindlichkait dieser Regulatoren, die durch Steigen

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Neergaard, Ueber Thermoregulatoren.

573

und Fallen eines Quecksilbernfveaus die Gas- Oder Stromzufuhr dffnen
oder schliefien, gibt uns wieder* wie bei den unter 1) und 2) genannten
Regulatorsystemen, die Ilohe der Niveauschwankung des Quccksilbers
bei einer bestimmten Temperaturschwankung, sagen wir von 1°. Es
ergibt sich folgende Formel:

worin bedeutet: hti=H6he der Niveauschwankung des Hg im Millimeter
bei 1 0 Temperaturdifferenz, d. h. MaB der Empdndlichkeit des Regulators.

V = Volumen der sich ausdehnenden FlQssigkeit im Regulatorreser-
voir in Kubikmillimeter.

k = Ausdehnungskoeffizient der Regulatorfllissigkeit.

Q = Querschnitt in Quadratmillimeier des Regulators an der Stclle,
wo durch die Niveauschwankung die Unterbrechung der Heizung er-
folgt.

Da haben wir nun z. B. einen der iiblichen Quecksilberregulatoren,
dessen Reservoir 5 ccm Quecksilber enth&lt und dessen regulierender
oberer Meniskus einen Durchmesser von 7 mm hat.

Es ist daher Q = r 2 7c = 3,5**3,1415 = 38,4 qmm, wir erhalten also

durch Einsetzen dieser Werte in obige Formel:

, 5000.0,00018 nn9 ,- m

h« =--= 0,0235 mm.

Der Schlitz der Kapillare, die in die obere Quecksilberkuppe eintaucht
und zur Regulierung mehr oder weniger verschlossen werden soli, ist
nun aber 5 mm hoch. Da begreift man, daB eine Niveauschwankung
von Vso mm pro Grad absolut wirkungslos sein muB. Selbst wenn wir
die 5 fache Quecksilbermenge nehmen, also 25 ccm, die schon i / 9 kg
Quecksilber darstellt und so groB ist, wie wir sie noch in keinem Queck-
silberregulator gesehen haben, so erhalten wir erst bei 1 0 Temperatur¬
differenz ein Steigen des Quecksilbers urn V10 mm. Wie sollen da
Bruchteile eines Grades reguliert werden? Und haben wir doch schon

Aetbylazetat

Aetbylather

Aetbylbromid

Aelhyljodid

Benzol

Chloroform

Essigsiiure

Metbylalkohol

Methyljodid

Schwefelkohlenstoff

Toluol

Wasser

Quecksilber

Glyzerin

Paraffin

Ausdehnungs-
koeffizient
bei 18°

Spezifisches
Gewicht
bei 18°

Spezifische
Warme
bei 18°

Siede-

temperatur

1 0,00137

0,90

0,48

1 77,1

i 163

0,717

0,56

34,5

i 137

1,46

0,21

! 38,0

116

1,9

0,16

73,0

124

0,881

0,41

80,2

126

1,493

| 023

62,0

1 107

1,053

0,50

118,5

122

0,80

0,60

64,7

121

2,3

43,0

121

1,265

0£4

46,2

109

1 0,89

0,40

1 110,8

018

l 0,999

0,999

100,0

0181

13,551

0,033

i 356,7

I 050

1,26

1 0,58

290,0

1 065

0,84

] ~

ca. 290,0

1) Die Korrekkion durch Ausdehnung des Glases, die eine geringe Verminderung
der Erapfindlichkeit bewirkt. ferner der EinfluQ von Temperaturschwankungen der Um-
gebung auf die aus dem Thermostaten herautragenden Teile des Kegulatora etc. sind
n ihrer Grdfienordnung so goring, dafl sie hier praktisch vernachlossigt werden kdnnen.

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574

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

Rcgulatoren mit einem Reservoir von nur 2,5 ccra gesehen bei gleichem
Querschnitt ties oberen Meniskus!

Nun gibt es aber Flussigkeiten, die wesentlich groCere Ausdehnungs-
koeffizienten besitzen und dabei viel leichter und billiger sind. Einige
dieser Fliissigkeiten mit ihren physikalischen Ivonstanten zeigt vor-
stehende Tabelle.

Eine groBere Ausdehnung wie reines
Wasser haben einige konzentrierte Salz-
losungen, z. B. Kalziumchlorid, docb
komnien dieselben hochstens auf den 2
bis 3-fachen Wert des Wassers, also niclit
entfernt so hoch wie einige der oben ge-
nannten organiscben Flussigkeiten. So
hat z. B. Chloroform eine 7mal st&rkere
Volumausdehnung wie Quecksilber und
Wasser. Bei der gleichen Flussigkeit
steigt die AusdehnungsfShigkeit mit zu-
nehmender Temperatur. Da also ge-
wohnlich bei hoheren Temperaturen als
18° gearbeitet wird, wird der praktisch
in Bctracht kommende Ausdehnungskoef-
fizicnt je nach der Temperatur etwas
boher, als in der Tabelle angefuhrt
liegen.

Ich versuchte nun mit Hilfe dieser
Flussigkeiten, einen Regulator zu kon-
struieren, der bei Unabliangigkeit von
Barometcrschwankungen eine genOgende
Empfindlichkeit mit guter Betriebssicher-
heit und einfacher Bedienung gewalir-
leistet, indem ich teilweisc schon fruher
von Physikochemikern benutzte Konstruk-
tionsprinzipien kombinierte, resp. fur
unscre Zwecke umanderte *). Es wurden
eine Reihe hierzu bisher niclit benutzter
Flussigkeiten theoretisch und praktisch
auf ilire Eignung fur unsere Zwecke un-
tersucht und die quantitativen VerhSlt-
nisse aller zusammenwirkenden Faktoren
gegeneinander in moglichst optimale Ab-
hangigkeit gebracht. Besonderc Aulmerk-
samkeit wurde auch der Erscheinung des
„Durchkriecliens“ gewisser, fOr diesen
Fall besonders wertvoller Flflssigkeiten geschenkt. Da das „Durch-
kriechen“ eine konstante Einstellung verhindert, ist seine Beseitigung
bei langerem Betriebe uncrlaBlich. Gute Regulierfahigkeit, auch der
StichHamme, und bequeme Form wurden wegen ihrer praktischen Be-
deutung gebiihrend berticksichtigt. Der Platzmangel verbietet es, eine
ganzc Reihe theoretisch moglicher Formen, deren praktische Erprobung
niclit stand hielt, und die dabei gemacliten Erfahrungen alle aufzu-
fiiliren.

Fig. 4. 8 c hem a einets

F1 ii h sigkcit«rcgu 1 ators. li =
Rczipicnt, FI = Ausdchnung>flus-
eigkcit, Zw = ZwipchenBchaltlliissig-
keit, 7/, = RegulatoThnhn, 0= Re¬
servoir tier ZwiechenscbaltlluBsigkeit,
mit VerschluBkork Kr v lbj = Que< k-
Bilber, Kp = Knpillare mit zufiih-
rcndcm Schlaucbaneatz S x und Kork-
fassung Kr 2 , 8’ = abtiihrcnder

Scblaucbansatz, Zwiscbenstuck:

= Regulierhahn fiir die Dauer-
flamme, T x = gaszufiihrcndcr 8chcn-
kel dew Zwipfhen»tucke8 mit //, zu
verbinden, = gapabfubreudcr

Scbenkel zum Brenner.

1) Luther n. Drucker, Hand- u. Hilfsbuch d. pbyaikal.-chem. MeBmithoden.

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Ncergaard, Ueber Thermoregulatoren.

575

Fig. 4 zeigt die Konstruktion') eines erprobten Modells. Ein zy-
lindrisches GeffiB aus nicht zu dickwandigem Glase — um den W&rme-
austausch mOglichst wenig zu verzogern 1 2 ) — taucht in den Wasser-
mantel des Therniostaten und ist mit der (lurch ihre Ausdehnung regn-
lierenden Fliissigkeit gciQIlt. Als solche kommen verschiedene in Frage,
je nach der Temperatur, auf die eingestellt werden soli.

So hat z. B. einen recht gflnstigen Ausdehnungskoeffizienten das
Chloroform, doch ist es wegcn seines Siedepunktes nur bis ca. 60°
im Maximum verwendbar. Das AusdehnungsgefaB (Rezipient R) lBuft
in ein dickwandiges Glasrohr von ziemlich engcm Querschnitt aus, das
nach Durchtritt durch die Muffe des Brutschrankes rechtwinklig umbiegt
und in ein U-formiges Rohr von etwa gleichem Durchmesser miindet.
Am oberen Teil des Schenkels des U-Rohres, in den das Ausdehnungs¬
gefaB miindet, befindet sich ein gut eingeschliffener Glashahn, der die
Verbindung mit einem darliber beiindlichen, durch einen Kork verschlos-
senen Gel&B herstellt. Der andere Schenkel des U-Rohres trSgt seitlich
einen Schlauchansntz, wahrend in einer Erweiterung oben mittels eines
durchbohrten Korks, ein rechtwinklig gebogenes, vertikal verschiebbares
Rohr eingefiihrt wird, das nach unten in eine Kapillare ausgezogen ist.
Die Kapillare ist unten gerade, nicht schrag abgeschnitten. Nicht in
fester Verbindung 3 ) mit dem Regulator befindet sich ein H-f5rmiges
Rohr, das an seinem Verbindungsschcnkel einen Glashahn trfigt, der
vermbge eines besonderen Sohlifles eine sehr feine Einstellung erlaubt.

Im unteren Teil des U-Rohres des Regulators befindet sich etwas
Quecksilber (in der Fig. bei Ilg), das,durch Steigen und Fallen die
Gaszufuhr durch VerschlieBcn ties Kapillarrohres unterbricht. Das
Quecksilber dient also nur als Sperrfliissigkeit und es bedarf bloB etwa
1—2 ccm. Zwischen Quecksilber und Chloroform ist nun noch Chlor-
kalziumlosung eingeschaltet ( Zw ), und zwar aus zwei Grlinden: Wflrde
namlich das Chloroform direkt an das Quecksilber angrenzen, so zeigt sich
bei langerem Gebrauch eine langsame Veranderung der Einstellung des
Regulators, weil das Chloroform zwischen Quecksilber und Glaswand
„durclikriecht“. Das gleiche gilt auch flir verschiedene andere der in
Frage kommenden organischen Flussigkeiten. Dieses sehr stfirende
„Durchkriechen“ berulit auf der Kapillaritat und hat zur Yoraussetzung,
daB die durchkricchende Fliissigkeit das Quecksilber und die Glaswand
gut benetzt, was ja eben bei den meisten organischen Fliissigkeiien der
Fall ist, und hat ferner zur Voraussetzung, daB das Quecksilber das
Glas nicht benetzt. Dadurch muB ein auBerordentlich feiner Spalt
zwischen Quecksilber und Glas entstehen. Durch Zwischenschalten von
Wasscr Oder einer Fliissigkeit, die dieses „Durchkriechen tt nicht zeigt,
zwischen Quecksilber und Clilorofoim, wird dieser Fehler verraieden.
Diese Zwischenschaltfliissigkeit darf also das Glas und Quecksilber nicht
zu sehr benetzen. Nicht absolut reines Glas wird nun von Wasser
schon mangelhaft benetzt, noch weniger z. B. von gewissen konzen-

1) Auch die Heretellung dieses Modelles hat die obeu genannte Glasblaserei Kunz
A Cic. in Ziirich ubernomnien.

2) Kin RJetallgcfiifl wiirde die Warroe zwar bcsscr leifen, aber die Verbindungs-
stelle mit dem Glase wiirde auf die Dauer nicht dichl zu haltcn scin und sein grofierer
Aubdrhnnngskocfbzient wiirde hinderlich sein.

3) Zur Vermeidung unniitiger ISchlauchverbindungen und wegen der handlieheren
Form wird neuerdings der Rcgulierhahu fiir die Dauerilamme an den Regulator feat
angcschmolzen.

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576

CentralbL. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8. »

trierten Neutralsalzlbsungen, etwa CaCl,. Ween das Quecksilber zur
Benetzung mit dem Glas zu bringen ware, so wflrde selbstverstandlicli
diese Schwierigkeit ausgeschaltet sein. Es wurde daher versucht, durch
Versilbern des U-Rohres ^n der Glaswand eine Silberamalgamschicht
zu erzeugen, die das Glas beuetzen und nach inneo allm&hlich in das
reine Quecksilber tibergehen wflrde. Es wird aber fast momentan der
Silberbelag ganz aufgelost. Eventuell ware eine st&rkere Benetzung bei
noch fliissigem Silberamalgam — die anderen Araalgame oxydieren zu
rasch an der Oberfl&che — zu erreichen, aber es ist dann auch, weun
es wirklich gelingen sollte, ein Klebenbleiben des Quecksilbermeniskus
an der MOndung der Ivapillare zu beffirchten, was natQrlich die Regu-
lierung sehr behindern wurde.

Ein 2. Grund, eine FlQssigkeit dazwischen zu schalten, ist folgender :
Der Hahn (H^) ist zur Dichtung mit Vaseline geschmiert und wurde
die Vaseline in den meist gut Fett losenden AusdehnungsflQssigkeiten
sich Ibsen, der Hahn undicht werden und so die Einstellung sich ver-
andern. Durch Verwendung von Glyzerin als Hahnschmiermittel laBt
sich zwar auch eine Dichtung fiir fettlbsende organische FlQssigkeiten
erreichen.

Nun kommen wir zum Zweck dieses Hahnes: Soil der Regul&tor
iu Betrieb gesetzt werden, so wird der Rezipient R in den Wasser-
mantel des Brutkastens geh&ngt, der Hahn H x gebffnet, der Brutkasten
erwSrmt. Dann dehnt sich die Ausdehnungsdussigkeit aus und dr&ngt
das leichtere Wasser in das Aber dem Hahn befindliche Gef&8,
w ah rend das Quecksilber im U-Rohr unbeeinduBt bleibt. Sobald die
gewOnschte Temperatur im Thefmostaten erreicht ist, wird der Hahn H v
geschlossen und die Regulierung der Gaszufuhr durch Steigen und
Fallen des Quecksilbers tritt in Funktion. Kleinere Differenzen der
Einstellung konnen dann imraer noch durch Vertikalverschiebung des
Kapillarrohres Kp bewirkt werden. Zu diesem Zweck darf das Kapillar-
rohr nicht mit einem Gummistopfen, in dem durch Verkleben mit dem
Glase die Verschieblichkeit bald aufhbren wBrde, sondern mit einem
guten Kork eingefflhrt sein. Der Hahn 2^ erlaubt nun nicht nur eine
auBerordentlich bequeme Einstellung auf jede gewflnschte Temperatur,
sondern verhutet auch bei Erkalten des Regulators, indem man ihn
dffnet, ein Eindringen von Luft zwischen Quecksilber und Chloroform.
Das ist praktisch besonders zu beachten. Denn wenn wir den Regulator
erkalten lieBen und sich die Ausdehnungsdussigkeit zusammenzoge, so
wurde ohne Oeffnung des Hahnes das Quecksilber im einen Schenkel
bis zum untersten Punkt des U-Rohres fallen, dann aber wiirde Luft
aspiriert werden. Wollte man das sicher verhindern, so ware das nur
mdglich durch Einschalten eines wieder viel Quecksilber erfordernden
Reservoirs; die Ftillung des Regulators und vor allem die Einstellung
waren eine viel schwierigcre. Das Volumen der auBerhalb des Thermo-
staten befindliehen Flussigkeit des Regulators muB aber, was ein weiterer
tirund ist, moglichst gering sein, damit die durch die Schwankungen
der Zimmertemperatur entstandenen Fehler praktisch ausgeschaltet
werden.

Das T Stuck (T t u. 8 ) hat den Zweck, eine Dauerdamme zu regu-
lieren. Wie wir gesehen haben, ist es fiir die Empfindlichkeit des Re¬
gulators von groBer Wichtigkeit, daB die Kapillare Kp unten gerade
abgeschnitten ist. So wttrde bei Berflhrung mit dem Quecksilber jedes-
ma’ die Gasflamme ganz abgeschlossen und daher auslbschen. Das

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Neerg&ard, Ueber Thermoregtiiatoreo.

577

konote nun, wie das bei einigen Rcgulatorsystemen friiher geschehen
ist, durch eine kleine, seitliche Oeffnung in der Glaskapillare, die eine
dauernde kleine Gaszufuhr erlauben wurde, vermieden werden. Aber
dann wSre dicse Stick- oder Dauerflamme in ihrer Grdfie nicht regu-
lierbar, was absolut nbtig ist.

Die Gr5Be dieser Dauerflamme muB so bemessen sein, daB sie von
sich aus den Thermostaten auf einige Grade unterhalb der gewQnschten
Temperatur halt. Denn jo geringer das Warmedefizit ist, was durch
den Pendelbetrieb des Regulators noch auszugleichen ist, um so kleiner
werden die einzelnen Temperaturschwankungen sein. Die Regulicrung
dieser Dauerflamme ist nun durch den Hahn H t mdglich. Das von der
Gasleitung kommende Gas strdmt durch den Hahn H t direkt zum
Brenner und speist die Dauerflamme. Das T-StOck ist durch Schlauch-
stiicke von wenigstens 20 cm Lange mit den Ansatzstiicken S L und
des Regulators verbunden, oder direkt an den Regulator angeschmolzen.
Das Gas strdmt von der Gasleitung S t durch die Kapillare und, wenn
diese nicht durch Quecksilber verschlossen ist, durch S t zum Brenner,
worauf die Flamme groBer wird.

Die Einstellung der Dauerflamme und der vollen Flamme erfolgt
nun am besten so:

a) Ausprobieren der ungefahren durchschnittlichen Flammenhdhe.
Mittels des Gashahnes stellt man die Flamme durch Regulierung von
Hand so ein, daB sie ungefahr die gewilnschte Temperatur konstant er-
hait. Je nach der GrdBe des Thermostaten wird man in kflrzerer oder
langerer Zeit die ungefahr richtige Flammenhohe ausprobiert haben,
spatestens aber in 1, 2 Tagen.

b) Einstellung der Regulierflamme. Nachdem die Schlauchverbin-
dungen mit dem Regulator hergestellt sind, also die Gasleitung mit S L
und S t mit dem Brenner verbunden ist (nicht umgekehrtl), die Kapil¬
lare Kp so weit heraufgezogen, daB ihre untere Oeffnung sich ca. 1 mm
fiber dem Quecksilber befiudet. Nun wird der Hahn der Gasleitung
allmahlich so weit geschlossen, daB die Flamme etwas groBer als die
des Vorversuches ist und sicher auch bei den niedrigsten vorkommenden
Zimmertemperaturen den Thermostaten genilgend erwarmen kann. Dabei
ist darauf zu achten, daB eine leuchtende Flamme den Boden des
Thermostaten nicht berflhrt, damit sich kein RuBzapfen bildet. Ferner
ist auBerordentlich wichtig, daB nie das Gas bei St zustromt, weil sonst
der Ueberdruck des Gases das Quecksilber bei Bertihrung mit der
Kapillare in die. letztere hinaufdrficken und so eine Regulierung ver-
hindern wtirde.

Sollte der Gasdruck nicht kraftig genug sein, um durch die Kapil¬
lare eine genflgend groBe Flamme zu erzeugen, so muB eine etwas
weitere Kapillare gewaklt werden, wobei man aber einen unnbtig groBen
Durchmesser, wie schon erwahnt, vermeiden muB.

c) Einstellung der Dauer- oder Stichflamme. Nun wird zur Ein¬
stellung der Dauerflamme des Regulators geschritten, der mit gefiffnetem
Hahn H t zweckmaBigerweise schon wahrend des Vorversuches sich ini
Thermostaten befand, um vfillig durchzuwarmen und allfailige Spannungen
im Glas zu beseitigen. Jetzt wird der Hahn //* geoffnet, durch geringe
Tieferstellung der Kapillare Kp die Gaszufuhr fiber den Regulator ge-
sperrt und nun durch allmfihliches Zudrehen des mit einem Spezial-
schliff zur feineren Einstellung versehenen Hahues H t die Dauerflamme
so weit verkleinert, daB sie sicher den Thermostaten von sich aus nicht

£r*te AbU Qrip. Bd. 87L.

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Heft 7/8.

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Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

ganz auf der gcwflnschten Temperatur erhalten kann, also etwas kleiner
ist als die Flamme des Vorversuches. Darauf wird die Kapillare wieder
bis zur Bertihrung des Quecksilbcrs gehoben, Dauerflamme und voile
Flamme sind eingestellt und der Regulator kaun funktionieren.

d) Einstellung der gewflnschtcn Temperatur. Nunraehr wird, vor-
ausgesetzt daB der Thermostat jetzt die gewflnschte Temperatur hat,
der Hahn H y geschlossen, der Kork Ko v aufgesetzt, urn ein Verdunsten
und Verstauben des Wassers im GefaB G zu verhindern. Ist die Tem¬
peratur noch zu hoch, so laBt man nach Loschen der Flamme bei ge-
bffnetem Hahn H x die Temperatur langsam sicken, wodurch am
ehesten gleichmSBige Erwarmung des ganzen Thermostaten erzielt wird.
Bei Erreichung der gewiinschten Temperatur wird angezQndet und i?,
geschlossen. FOr alle groBeren Temperaturverfinderungen muB H v ge-
bffnet werden.

e) Zur Auswahl der Flflssigkeiten sei noch folgendes bemerkt:
Beim Chloroform ist darauf zu achten, daB es, ehenso wie das Wasser
zur Ueberschichtung, unmittelbar vor dent Einlflllen ausgekocht wird, denn
sonst wird durch die geldste Luft, Oder richtiger durch den darin ent-
haltenen Sauerstoff die schon frilher bei Narkoscn so unangenehm be-
kannt gewordene Phosgenbildung bewirkt. Das Sufiert sich im Auf-
steigen von Gasblasen, die durch Vermehrung des Volumens im Regulator
ein dauerndes Sinken der eingestellten Temperatur zur Folge haben.
Durch Austreiben der Luft wird wegen Sauerstoffmangel diese Reaktion
unmoglich. Unter diesen Kautelen ist cs bis ca. 60° gut brauebbar.
Wegen „Durchkriechens“ bedarf es nnbedingt einer Zwischenschalt-
losung.

Eine grdfiere Bestandigkeit hat das Toluol, das sich auch wegen
seines hohen Siedepunktes gut eignen wilrde, dagegen leichter wie
Wasser ist und daher durch dasselbe nicht vom Quecksilber und dem
Hahn getrennt werden kann. Der Ausdehnungskoeffizient ist auch
ein nicht so hoher wie beim Chlorlorm. Da das Toluol stark durcb-
kriecht, miiBte oberhalb des Quecksilbers bis zur Abzweigung des Re-
zipienten eine Zwischenschaltflussigkeit eingeschaltet und Hahn JB t mit
Glyzcrin geschmiert werden 1 ).

Bei seinem niedrigen Siedepunkt eignet sich far nicht zu hohe
Temperaturen bis ca. 40—45° auch der Schwefelkohlenstoff, der
mit eincm Ausdchnungskoeffizienten von 0,00121 noch relativ gQnstige
Ausdehnungsbedingungen bietet, schwerer wie Wasser ist und eine ebenso
geringe spezifische Warme wie das Chloroform besitzt. Er ist gleich-
falls wegen Durchkriechcns durch eine Zwischenschaltflussigkeit zu iso-
lieren.

Gewisse Vorteile bietet fur manche Falle die Essigs&ure wegen
ihres hohen Siedepunktes von 18,5°. Da sie durchkriecht, bedarf sie
einer Zwischenschaltflussigkeit. Als solche kommt wegen der Mischung
mit wSsserigen Losungen nur ein Oel, am ehesten Paraffin51, in Frage.
Letzteres ist dann vom Quecksilber seinerseits wieder durch eine wSsse-
rige Losung zu trennen, das bis zur Abzweigungsstelle des Rezipienten
reicht. Zuin Sclnniercn des Hahnes dient wieder Glyzerin. Das ist
etwas umstandlich, dazu kommt der etwas niedrige Ausdebnnngskoef-
fizient von 0,00107, der ein etwas grSBeres Rczipientenvolumen erfordert.

1) Bet-ser noch cine Dextrinlosung in Glyzcrin (s. Zsigmondy, Kolloidchemic.
*"'• Hi), eog. Ramsey-Fctt, ist in diesen Flussigkeiten auch etwas loslich.

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Neergaard, Ueber Thermoregulatoren.

579

Letzteres muB Qberhaupt dem Einzelfall angepaBt werden, doch wird
in der Regel eine GrdBe von 50 ccm bei einem Innendurchmesser des
U-Rohres von 4 bis 5 mm genilgen. Denn unter eine Niveauschwan-
kong des Quecksilbers von 2 mm fOr 1°, d. h. von 0,2 mm fdr ‘/jo 0
sollte man in der Empfindlichkeit nicbt heruntergehen.

Aethylbromid hat ein sehr gflnstiges AusdehnungsvermSgen,
zersetzt sich aber viel zu rasch und ist daher unbrauchbar. Ebcnso
sind die anderen Grenzkohlenwasserstoff-Halogcno zu unbest&ndig.

Einen sehr gflnstigen Ausdehnungskoeffizienten hat der A ethyl-
ather mit 0,001G3, ist aber wegen seines niedrigen Siedepunktes von
34,5 ftir Thermostaten von 37° und daruber daher nicht mehr geeignet.
Der Siedepunkt kann aber durch Zusatz von Aelhylazetat mit dera
Siedepunkt 77,1° leicht entsprechend erhdht werden, ohne wesentlich
am Ausdehnungskoeffizienten zu verlieren, da das Aethylazelat mit
0,00137 fQr sich allein schon einen gfinstigeren Ausdehnungskoeffizienten
wie das Chloroform hat. Schwierigkeiten macht bei diesen beiden Sub-
stanzen wegen des spezifischen Gewichtes und der Mischbarkeit die
ZwischenschaltflQssigkeit, da Wasser nicht geeignet ist. Oele sind wegen
ihrer Mischbarkeit nicht brauchbar.

Aethylazetat ist leichter als Wasser, hat eine sehr gfinstige
Ausdehnung und ist doch bis 77° verwendbar. Wegen starken Durch-
kriechcns ist im U-Rohr Wasser einzuschalten und der Hahn mit
Glyzerin einzuschmieren.

Glyzerin ist wegen seines sehr hohen Siedepunktes von 290° fQr
hohere Temperaturen zu empfehlen; es kriecht aber durch und hat einen
geringen, aber noch geniigenden Ausdehnungskoeffizienten.

In letzterer Beziehung giinstiger ist das ParaffinSl, dessen Aus-
dehnungskoeffizient ich bei der mir vorliegenden Sorte zu 0,00065 be-
stimmte und das wegen geringer spezifischer WSrme rasch reagiert und
dabei auch bis ca. 290° verwendet werden kann. Es bedarf bei lSngerera
Gebrauch einer w&sserigen Zwischenschaltflussigkcit.

Bei nicht zu groBen AnsprQchen an die Empfindlichkeit w&re auch
die Verwendung konzentrierter Neutralsalz- Oder ZuckerlSsungen zu be-
rflcksiclitigen. Je nach der Konzentration und Art des Salzes sind Aus¬
dehnungskoeffizienten bis 0,00040 zu erreichen.

Die Form des Rezipienten ist nicht ohne Belang. WShlen wir den
Durchmesser zu groli, so braucht es zu lange Zeit, bis der Regulator
die Temperatorschwankungen des Wassermantels mitmacht. WShlen wir
dagegen ein diinnes, aber sehr langes Reservoir, das durch die ganze
Holie des Thermostaten bis auf den Boden geht, so zeigt sich folgende
Erscheinung: Auch bei BrutschrSnkcn mit relativ dickem Wassermantel
und guter Isolierung werden je nach der Stromungsrichtung zwischcn
den unteren und oberen Wasserschichten gewisso Temperaturdifferenzen
von wechselnder GroBe, je nach der AuBentemperatur und dem dadurch
entstehenden TemperaturgcfSlle, sich vorfinden. Der Regulator wird also
die Mitteltemperatur der vcrschiedenen Schichtcn einhalten. Wenn wir
nun mit den Ublichen Thermometern die Tempcratur messen, so kann
bei Wechsel dor Temperaturdifi'crenz zwischen oberen und unteren
Wasserschichten scheinbar eine zicmlich betrSchtliche Schwankung zu-
stande kommen, obwohl dcr Regulator die gleiche Durchschnittstempe-
ratur innegchalten hat.

Das gleiche, in Fig. 4 bezeichnete Modell kann nun auch sehr gut

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580

Oentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originate. Bd. 87. Heft 7/8.

als Luftregulator benutzt werden. Es braucht dann lediglicb in das U-
Rohr als abscblieBendo FlQssigkeit etwas Quecksilber gegossen zu werden,
w&hrend der Rezipient mit Luft gefflllt ist, die durch ihre WSrmeaus-
dehnung die Regulierung besorgt. Da die Luft sich als ungesSttigtes
Gas bei 1 0 Erwarmung um 7273 ibres Volumens, also als Dezimalbruch
ausgedrtickt, utn 0,00306 ausdchut, das ist fast 3mal soviel wie Chloro¬
form, brauchen wir daher einen 3mal kleineren Rezipienteo. Wegen
dcr oben aogegcbenen starken Beeinflussung durch Luftdruckschwan-
kungen wird dieser Fchler bei ldngerem Gebrauch zu groB und sind
die Luftregulatoren daher nur fflr kurze Versuche geeignet, wo jedesroal
neu eingestellt wird. FQr lSngere Zeit ist auch eine genflgende Dichtung
schwer zu erzielen.

Bei elektrischer Regulierung und Heizung I&Bt sich allenfalls auf
die gleiche Art wie bei dem Dampfdruckregulator durch eine Queck-
silberdichtung oberhalb des vertikal verstellbaren Vertikalrohres, Oder,
wenn man es vorzieht, durch eine seitliche Regulierschraube durch
eingeschmolzenen Platinkontakt das System von jeder Luftdruckschwan-
kung unabhangig machen. Wir gewinnen damit noch den Vorteil, den
gleichen Regulator fQr die verschiedensten Temperaturen verwenden zn
konnen.

4) Metall regulatoren. Auch die W&rmeausdehnung fester
KOrper, speziell der Metalle, kann zur Regulierung benutzt werden.
Da dieselbc aber recht klein ist, benutzt man sogenannte Bimetall-
streiien, die aus 2 verschiedenen Metallcn zusammengelStet werden.
welclie sich durch moglichst groBe Unterschiede in ihrem Ausdehnungs-
vermbgcn unterscheiden. Wenn das eine Ende fixiert ist, kdnnen leicht
genflgend groBe Ausschlfige des anderen Endes erzielt werden. Durch
diese Bewegung kann dann ein elektrischer Hilfsstrom zur Bedieoung
des Rclais oder der Ileizstrom selbst geoffnet Oder geschlossen werden.
Die geeignetste Form, um mdglichst groBe Anschldge zu erhalten, ist
die Schraubenform, oder, wo diese aus r&umlichen GrQnden unpraktisch
ist, die Schnecken- oder Spiralform. Erstere bietet auch die gunsligsten
Bcdingungen zu raschem Warmeaustauch mit der Umgebung, die nicht,
wie man das bei Fabrikware otter sieht, durch schlccht wSrmeleitende
Lacke crschwert werden darf. Gewflhnlich sind die Konstruktionen viel
zu plump und auch viel zu dicke Streifen gebraucht, wodurch eine rasche
Regulierung nur erschwert wird. Fur uuscre Zwecke werden Streifen
von etwa 5 mm Breile, 1 mm Dicke und ca. 30 cm L&nge — um un-
gefahre MaBe zu nennen — geniigen.

Fur Thermostaten mit Wassermantel sind diese Regulatoren nicht
sehr gut geeignet, weil die Metalle von der umgebenden FlQssigkeit
allmahlich angegriffen werden und eine ExtraumhQllung zu sehr ver-
langsamt. Dagegen sind diese Regulatoren fQr Thermostaten mit Luft-
mantel sehr geeignet, da die gute Leilfahigkeit der Metalle und die
diinnen Schichten einen guten Warmeausgleich mit der Luft erlauben.
In diesetn Fall sind sie den Gas- und FlQssigkeitsregulatoren, die in
Luftumgebung viel trager sind, cntschieden iiberlegen.

Als geeignetste Metalle waren zu nennen: einerseits Stahl mit cinem
linearen Ausdchnungskoelfizicnten von nur 0,000010 oder noch besser
Invar (04 Teile Eisen, 30 Teile Nickel) mit noch 5inal geringerer Aus-
dehnung, und auf der anderen Seitc Messing mit 0,000018, Silber
0.0000185 und vor allem Zink 0,000020.

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Neergaard, Ueber Therm oregulatoren.

581

Wegen immer im Metall vorhandener Spannungen, die auch durch
sogenanutes „kunstliches Altern“ (Auskochen) nie ganz beseitigt werden,
wird die Stetigkeit dieser Regulator en bei langer Benutzung die der
FlQssigkeitsregulatoren oie erreichen.

Es mdgen nun noch ein ige Bern erkun gen fiber die Konstruktion
der Thermostaten, spezieil der Brutschrfinke gesagt sein. Deon es
ist klar, wenn auch nicht immer beacbtet, dafi auch der beste Regulator
in einem mangelhaften Thermostaten seinen Zweck verfehlt.

Zunfichst rnfige besonders hervorgehoben sein, dafi es mebrere Tage
dauert, bis einer der genannten Regulatoren, wie fast jedes pbysikalische
Prfizisionsinstrument, sich im Gleichgewicht betindet und erst nach
ISngerem ununterbrocbenen Betriebc richtig funktioniert. Man darf also
die Geduld bei der Einstellung nicht verlieren.

Der Grund hierffir ist neben dem Ausgleich von Spannungen im
Glas des Regulators die Eutstehung von Konvektionsstromen im YVasser-
oder Luftmautel. Durch die Heizquelle erwfirmt, steigt das Wasser an
bestimmten Stellen des Wassermantels empor, um nach einer grfifieren
oder geringeren Abkuhlung an anderen Stellen wieder hinabzusinken.
Die Lage der aufsteigenden uud absteigenden Strome ist ablr&ngig von
der Form des Wassermantels, seiner Dicke, von der Isolierung nach
aufien, von dem Temperaturgefftlle gegen die Umgebung und a. m.
und Ififit sich im voraus nie berechnen. Auch bei dem gleichen Ther¬
mostaten kann die Lage dieser Strtimungen wechseln, infolgo verfinderten
Temperaturgefallcs zur Umgebung. Auch die Gr5Be der hierbei auf-
tretenden Temperaturdilferenzen im Wassermantel ist in jedem Fall ver-
schieden, nicht vorauszusehen und kann von Stunde zu Stunde wechseln.
Dieser Faktor ist auficrordentlich wichtig und kann unter Umstfinden
die Wirkung des feinsten Regulators illusorisch machen.

Ffir gewohnlich werden diese Stromungen einen bestimmten Weg
einhalten, und Mittel, die diese Strfimungen in eine bestimmte Bahn
leiten, werden daher auch die Regulierung erleichtern. So wfirde es
ffir die Zirkulation ein Vorteil sein, wenn der innere Boden und Deckel
des Brutschrankcs nicht wie bei den fiblichcn Brutschrfinken horizontal
und parallel den AuBenwfinden, sondern etwas geneigt angebracht wfirden.
Gerade bei etwas grofiercn Hasten wfirde es weniger zu einer Stagnation
des erw&rmtcn Wassers am Boden und dann regcllosem Emporsteigen
nach verschiedensten Richtungen kommen. Dadurch wfirde die auf-
steigende Stroinung auf einer bestimmten Seite stattfinden und um-
gekehrt durch Neigung der inncren Decke das abgekuhlte Wasser an
gewfinschter Seite wieder abtlicfien. So wfirde sich eine ganz bestimmte
Zirkulationsrichtung einstelien und die Unbcrechenbarkeit der Kon-
vektionsstrfime sich wesentlich vermindern. Neben diesem Ilauptstrom
wird allerdings immer ein gewisser Wasserteil an der warmen Innen-
wand emporsteigen, um an der benaclibarten Stelle der kalten Aufien-
wand wieder abzusiuken. Durch diese 2. Art der Strfimung, die bei
horizontalcn Inncnboden und -decken vorherrschen wird, wird bei der
fiblichen Form die Wasserschioht zwischen Innen- und Aufiendecke sich
nur mangelliaft an dcr Zirkulation beteiligen, wahrend bei schrfigen
Decken auch dieser Wasserraum zur Zirkulation gezwungen wfirde. Bei
schon vorliandenen Brutschifinkcn wird eine Erhohung des ganzen
Hastens vorn Oder hintcn um einigo Zentimetcr einen filinliclien Erfolg
haben und die Zirkulation in bestimuiter Richtung befordern. Denn

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582 Centralbl. f. Bakt. etc. L Abt. Origioale. Bd. 87. Heft 7/8.

das beste Mittel, die Fehler mangelhafter Zirkulation zu beseitigen,
nSmlich durch eio Rflhrwerk fflr dauernde Durcliinischung zu sorgen,
ist fOr die gewflhnlichen Zwecke zu umstSndlicb und auch unnfltig. Je
groBer die gesamte Wassermasse ist, besooders im Verhaltnis zur Ober-
flache, urn so groBere Tragheit, d. h. ura so geringere Schwankungen
wird der Thermostat zeigen. Es muB also der NVassermantel genugend
dick seiu und sollte auch bei kleioen Brutschranken wenigsten 6—7 cm
betragen. Bei groBcren mufi die Dicke naturlich steigen, wenn auch
nicht proportional zur fluBeren Obertlache des Thermostaten. Da bei
groBen Brutschranken wegen des bctrachtlichen Wasserdruckes zwischen
Innen-und AuBenwand zahlreiche, die Wasserzirkulation behindernde
Versteifungen angebracht sind, so ist die Dicke des Wasserraantels bei
groBen Brutschranken meist eine zu geringc. Als Metall ist nicht nur
wegen dor Dauerhaftigkeit, sondern auch wegen der guten Warnie-
leitung, Kupfer andcren Metallcn vorzuziehen. Wellblech fflr den
Innenkasten bietet neben groBerer Stabilitat den Vortcil, das Kasten-
innere nach dem Oeffnen wioder rascher auf die richtige Temperatur zu
erwarmen.

Von auBerordentlicher Bedeutung ist eine gute Isolierung des ganzen
Thermostaten nach aufien. Dcnn es wird dadurch nicht nur die Re-
gulierung wesentlich erleichtert, sondern auch viel Heizkraft erspart
Als Isoliermaterial ist ein guter, dicker Filz dem Linoleum wesentlich
flberlegen; Asbest ist noch ungeeigneter als Linoleum. Letztcres ist da-
gegen vorteilhaft als AuBenbekleidung fflr den leicht verstaubenden Filz-
belag zu benutzen. Ich erwShne diese mehr technischcn Einzelheiten,
weil es manchem bei der Auswahl als Wegleitung vielleicht von Vorteil
sein kann und die im Handel befindlichen Thermostaten manchm&l
mangelhaft sind.

Die Rcgulatoren sind dort anzubringen, wo die grOBten Temperatnr-
schwankungen sind, also bei Bassin-Thcrmostatcn am besten Ober dem
Boden des GefaBes, bei Brutschranken, wo das technisch unbequem wire,
in den auf- Oder zur Not auch absteigenden Wasscrstrom, Da in den
hinteren Ecken durch das Zusammenstolien zweier Seitcn des Wasser-
mantels die gunstigsten Bedingungcn fflr rasche Zirkulation sind, so ist
hier auch der gegebene Ort fur den Regulator. Denn bei den Therroo-
staten mit Flussigkeitsfflllung gchort der Regulator selbstverstSndlich in
die von dcr Ileizquellc zunflehst erw&rmte und durch die groBo spezi*
fische WSrme triige Fiussigkeitshullo und nicht in den Luftraum, der
durch Oeffnen viel zu groben Schwankungen ausgesetzt ist. Das gleiche
gilt auch fflr den Thermometer, der zur Kontrolle und Einstellung des
Regulators dient. Dieser sollte in moglichster Nflhe und in gleicher
Niveauhohe wie der Rezipient des Regulators sich itn VVassermantel be-
finden. Ein zweiter Thermometer im inneren Luftraum gibt die erzielte
Mittcltempcratur an und damit die Wcgleitung im allgemeinen fur die
Regulierung der Temperatur des Wassermantels.

Wo der Versuchszweck es gestattet, z. B. Serum-Inaktivierung und
Sterilisierung, sind die einfachstcn Thermostaten groBo Tflpfc oiler
Wannen, die bei ihrer groBen WassermaS'e itn Verhflltnis zur Obcr-
flache und wegen der sehr giinstigen ZirkulationsverhSltnisse auch
ohne jede Isolierung ausgezeichnet funktionieren. Dazu hahen sie
den Vortcil, daB die konstant zu erhaltenden VersuchsgefaBo direkt
iin Wasser die verlaugto Temperatur viel rascher als in warmer Luft

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Neergaard, Ueber Thermoregulatoren. 588

annehmen. Es liefien sich so auch Brutschr&nke sehr gut improvi-
sieren.

Als Heizung kommt heutzutage wohl nur noch Gas oder Elektrizitat
in Frage. Gasheizuug ist technisch einfacher und daher leichter betriebs-
sicher zu gestalten, zumal die mehr theoretisch vorhandenen Gefahren
durch die automatische SchlieBvorrichtung des Hahnes des Brenners
beim Ausloschen des Brenners beseitigt sind. Elektrische Heizung ist
dagegen sauberer, kann am besten in den unteren Wasserboden einge-
baut sein, wodurch am wenigsten Warme nacb aufien verloren geht.
Dagegen muB, wie schon erwfihnt, zur Ein- und Ausschaltung des Heiz-
stromes ein Relais zwischengeschaltet werden, das durcb einen sekundfiren
Stromkreis des Netzstromes oder eine kleine Schwachstromquelle in Be-
trieb gesetzt und durch den Regulator ein- und ausgeschaltet wird. Das
Relais besteht, ahnlich wie eine elektrische Klingel, aus einem kleinen
Elektromagneten und einem Anker, der angezogen wird und durch seine
Bewegung StromscbluB und -dffnung besorgt. Fttr Wechselstrom muB
der Elektromagnet einen Blattkern haben.

In den letzten Jabren benutzt man wegen der geringen Anschaffungs-
kosten vielfach Brutscbrknke aus Holz ohne Wassermantel mit Heizung
durch Kohlenfadenlampen, die unten im Hasten angebracht sind. Diese
KSsten haben verschiedene groBe Nachteile. Infolge der geringen spe-
zifischen Warme der Luft hat das ganze System eine sehr geringe Sta-
bilitat und kommen grofie Temperatursprilnge in kurzer Zeit vor. Durch
strablende Warme der Heizquelle haben die Bakterienkulturen oft eine
ganz andere Warme, als das Thermometer nach der Lufttemperatur an-
gibt. Diese Nachteile kdnnen nur dadurch auf ein praktisch gentigendes
MaB reduziert werden, daB man in den Holzkasten einen kleineren Hasten
aus ziemlich dickem (ca. 3 mm) Aluminiumblech mit Asbcstboden stellt.
Der Einsatzkasten muB von einem nicht zu dfinnen Luftmantel (ca.
8—10 cm) umgeben sein, in dem sich unter dem Einsatzkasten die
Heizquelle und an einer Seite der Metallregulator befindet. Die zu er-
wkrmenden Gegenstande sind dann vor direkter Strahlung der Hitze
geschfltzt, und bis die Temperatur im auBeren Luftmantel sich durch
das dicke Aluminiumblech mit seiner relativ groBen spezifischen Warme
fortgcpflanzt hat, sind die raschen Einzelschwankungen im AuBen-
mantel ausgeglichen und im Innern des Einsatzkastens herrscht
eine gleichmaBige Mitteltemperatur, vorausgesetzt, daB sein Inneres
durch eine Glastiire an der Vorderseite gegen den Luftmantel abge-
schlossen ist.

Zusammenfassung.

Zur Regulierung von Thermostaten werden je nach den Auforde-
rungen des Einzelfalles folgende Regulatoren empfohlen:

1) Fflr Dauerbetrieb eignet sich fflr Gazbeizung ein von den Baro-
meterschwankungen unabhangiger Flflssigkeitsregulator, dessen Regula-
tionspr||^ip auf der groBen Warmeausdehnung gewisser organischer
Flflssigkeiten beruht, der filr verschiedene Temperaturen leicht einstellbar
ist und dessen genaue Konstruktion und Anwendung angegeben wird.
Die Temperaturkonstanz ist eine sehr gute.

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584 Oentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Originaie. Bd. 87. Heft 7/8.

2) Fflr kleine Brutschranke und Paraffinofen, wo es auf Temperatur-
schwankungen von ca. 1—2° C infolge verschiedenen Barometerstandes
nicht ankommt, sowie wenn auf kleines Volumen des Regulators Gewicht
gelegt wird, sind die sehr empfindlichen Dampfdruckregulatoren zu em-
pfehlen.

Das unter 1) uud 2) Gesagte bezieht sich auf Gasheizung.

3) Fflr elektrische Heizung und grdfite Erapfindlichkeitsanspruche
wird eine besondere Konstruktion der unter 2) genannten Luft- sowie
besser der Dampfdruckregulatoren angegeben, die bei groBer Empfind-
lichkeit unabhSngig von Feblern infolge von Luftdruckschwankungen sind.

4) Fflr Thermostaten ohne Wassermantel, wie z. B. die einfachen
Brutschrflnke aus Holz, sind Bimetallregulatoren mit elektrischer Heizung
vorzuziehen, deren geeignete Form angegeben wird. AuBerdem wird
eine bequeme Vorrichtung gezeigt, um die einfachen hdlzernen Brut-
schrSnke durch einen Aluminiumblecheinsatz von den groBeu, praktisch
recht hinderlichen Nachteilen dieses Systems fflr die gewflhnlichen An-
forderungen genflgend zu befreien.

5) Es werden die physikalischen Richtlinien fflr die geeignete Kon¬
struktion von Thermostaten mit Wassermantel angegeben.

Inhalt.

Adam, A., Ueber die Bedeutung der Eigen-
wasserstoffzahl (des H - Ionenoptimum)
der Bakterien, S. 481.

Bitter, Ludwig, Die Konservierung von
agglutinierenden und hamolysierenden
Seren, 8. 560.

Bgyedi, Henrik, Zur Reinkultivierung der
patbogenen 8chimmelpilze, 8. 562.

Epstein, H. ? Beitrage zur Kenntnis der
Rickettsia Prowazeki, S. 553.

G&rtner, Wolf, Kann der Paratyphus B
abdominalis in klinischer, pathologisch-
anatomischer, epidemiologischer und bak-
teriologischer Hinsieht von der soge-
nannten Gastroenteritis paratyphosa B
abgetrennt werden? Mit 2 Kurven ira
Text, S. 486.

Galli- Valerio, B., Beobachtungen iiber
Culiciden, nebst Bemerkungeu iiber Ta
baniden und Simuliden, 8. 557.

v. Gutfeld, Frits, Erste MaSuahmen bei
Laboratoriumsinfektionen, 8. 545.

Knorr, Maximilian, Ueber die fusospiril-
lare Symbiose, die Gattung Fu so bac¬
terium (K. B. Lehmann) und Spiril¬
lum sputigenura. (Zugieich ein Bei-
trag zur Bakteriologie der Mundhohlei.
I. Mitteilung. 1. Die Epidemiologie der
fusospirillaren Symbiose, besonders der
Plaut-Vincentschen Angina, S. 536.

Xritachewsky, J. L., Ueber das Vorkom-
men von Protozoen in der Zerebro-
spinalfliissigkeit von Fleckfieberer-
kVankten. Mit 5 Abbildungen ini Text,
8. 526.

Neerg&ard, K. ▼., Ueber Thermoregula-
toren. Mit 4 Abbildungen im Text, 8.564.

HeuB, Wilhelm, Ueber einen meningo-
kokkenahn lichen Erreger bei ein cm kli-
nischen Fall von Meningitis, S. 532.

I Vogel, Ueber das iutra vitpii beob-
achtete Vorkommen dee Leber-

j egels (Fasciola hepatnTa L.) bei
einem Kinde, S. 556.

Frommannsche Buchdnickerei (Hermann Pohle) in Jena.

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I nhalts verzeich n is

I. Yerzeiehnis der in Band 87 enthaltenen Arbeiten.

▲dam, A., Ueber die Bedeutung der Eigen-
waferstoffzahl (dee H-Ionenoptimume)
bei Bakterien. 481

Baeh, F. W., Ueber Spirochaten in Was-
serleitungen. 198

Baehmann. Werner, Zur Diagnoetik der
Peeudotu Derkuloee. 171

Bahr, L ? Ueber Rattenvertilgungsmittel,

46(5

Becker, Rudolf Die aufiere Gestalt der
Pferdeband wiirmer. 110

-Weitere Beitrage zur Anatomie der

Pferdebandwurmer. 216

Beger, II. 8. Manteufel, P.

Bela, Johan, Beitrage zur Biologie dee
Bacillus pyogenes anaerobius. 290

Bender, Willy? Ein Fall von Septikamie
bei einem Saugling, hervorgerufen durch
das Bacterium lactis aerogenes. 289

-Meningitis durch Influenzabazillen.

175

Berablum, Wilhelm, VergleichendeUnter-
suchungen der von Ziehl-Neelsen,
Gasis -Telemann, Kronberger,
und K on rich angegebenen Farbeme-
thoden zum Nachweis von Tuberkel-
bazillen. 23

Bitter, Ludwig, Die Konservierung von
agglutinierenden und hamolysierenden
Seren. 560

Biel, Rudolf, Drei neue Schafzeetoden.
Nebst Beitragen zur Kenntnis der fibrigen
Wiederkauerzestoden. §65

Blumenthal, Georg, Universalpipette fiir
serologische Arbeiten (speziell ffirWas-
sermann* Untersuchungen mit */ 4 Dosen).

317

Bdhm, Leopold Karl, Beitrage zur Kennt¬
nis tierischer Parasiten. 407

Brinkmann, Studien fiber den Komple-
mentgehalt des menschlichen Blutes. 50
Dtrska, Carl, Ein Beitrag zur Losung der
Sterilisationsfrage komplizierter zahn-
arztlicher Instrument©. 387

Egvedl, Henrik, Zur Reinkultivierung
der pathogenen Schimmelpilze. 562
Epstein,%!(., Beitrage zur Kenntnis der
Rickettfig- Prowazeki. 553

Falkenthal, Eine neue Dunkelfeldlampe.

398

Felumann, liL, Die Flecktyphusepidemie in
Riga in den Jahren 1918—1920. 33

Fornet, W., Ueber die Reinknltur des
Pockenerregers. 6. Mitteiluug. 36

Frieber, Walther, Beitrage zur Frags
der Indolbildung und der Indolre&r-
tion sowie zur Kenntnis des Ver-
haltens indolnegativer Bakterien. 254
Fuhrmann, O., Einige Anoplocephaliden
der VfigeL 438

Galli-Yalerio, B., Beobachtungen fiber
Culiciden, nebst Bemerkungen fiber Ta-
baniden und Simuliden. 557

GUrtner, Wolf, Kann der Paratyphus B
abdominalis in klinischer, pathoiogisch-
anatom ischer, epidemiologischer und
bakteriologischer Hinsicht von der so-
genannten Gastroenteritis paratyphosa B
abgetrennt werden? 486

Gaumitz, Uellmut, Beobachtungen fiber
das Auftreten von Diphtheria in einer
Erziehungsanstalt. 321

Gildemeister, E., Ueber Ersatz von Nu-
trose in itakteriendifferentialnahrbdden.

75

— Ueber Variabilitatserscheinungen bei
Vibrionen. 241

Gutfeld, Fritz, Erste Mafinahmen bei
Laboratoriumsiofektionen. 545

Hausherr, Otlo, Beitrag zur Frage der
pbysiologischen Agglutination von Y-
Ruhrbazillen. 95

neek, Heinrich s. Neumarb, Eugen.
HflppH, IL, Untersuchungen fiber Schar-
lach. Experimentelle Erzeugung von
Leukozyteneinschliissen. 228

Jungeblut, Claus W., Zum Nachweis des
Bacterium coli im Wasser mittels der
B u I i r schen Probe. 63

Kalkbrenner, Beitrage zur Biologie dee
Inlluenzabazillus. 277

Kasparek. Theodor, Bemerkung zum Ar-
tikel „Ein praktisches Reagenzglas". 319
Kaneko, Renjlro, Zur Kultur der Spiro-
chaeta icterohaemorrhagiae und der Spi-
rochaeta hebdomadis. 345

Klster, J., Hefenahrboden aus Hefeextrakt
und Hefepepton. 477

Klarenbeek, JL, Ueber das spontane Vor-
jcommen der dem Hyphilisparasiten ahn-
lichen Spiroohate beim Kaninchen (Tre¬
ponema pallidum var. cuniculi). 203
Knorr, Maximilian, Ueber die fusospiril-
lare Symbiose, die Gattuog Fusobac-

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586

Centralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Original©. Bd. 86. Heft 7/8.

terium (K. B. Lehmann) und Spirillum
sputigenum. (Zugleich ein Beitrag zur
Bakteriologie der Mundhohle). I. Mit-
teitung, I. Die Epidemiologie der fuso-
spiriilaren Symbiose, besondera derPlau t-
Vincentschen Angina. 536

Knorr, Maximilian, Experimented© Stu-
dien iiber die Wirkung yon Rindergalle
auf Ruhrbazillen. 339

Kram&r, Eugen, Unterauchungen iiber
die chemiache Beschaffenheit der Kapsel-
substanz einiger Kapselbakterien. 401
Kritscliewsky, I. L., Ueber das Vor-
kommen von Protozoen in der Zerebro-
spinalfluseigkeit von Fleckfiebererkrank-
ten. 526

Lange, Arthur. Ueber die Koktostabilitat
gebundener Antikorper. Bemerkung zu
der Arbeit Spat, dieses Centralbl. Bu. 86.
II. 3, S. 241. 227

Lantzsch, Kart, Beitrag zur Kenntnis der
FI uorescen agru ppe. 81

?. Linden, Grafin, Entwicklungahemmende
Wirkung von Kupfer-Glasverbindungen
auf das Wachstum von Bakterren. 310
Llpschtitz, B., Der Zellkern als Vims-
trager. (Die Karyooikongruppe der
Chlamydozoa-Strongyloplasmen). 303
—, Ueber Chlamydozoa-Strongyloplasmen.

VIII. Ueber Gefliigelpocke. 191

Loesberg, E., Ein Blasenabszett unit B.
pyocyaneus und B. Proteus anindolo-
genes van Loghem als Mischerreger.

185

Mantenrel, P., u. Beger, n., Weitere Un-
tersuchungen zur Paratyphusfrage, in-
eonderheit zur praktischen Brauchbarkeit
desAbsattigungsverfahrensfiirdieTypen-
trennung. 161

Marcuse, KurL Wassermannsche Re-
aktion und Kokzidiose beim Kaninchrn.

355

Martini, E., Ueber die Eier unserer Ano¬
pheles. 362

v. Neergaard, K«, Ueber Thermoregula-
toren. 564

Nenmark, Eugen, und neck, Heinrich,
Ueber Rattenvertilgungsnnttel. 39
Oeliler, Rudolf, Wirkung von Bakterien-
giften auf Ziliaten. 302

Oelze, F. W., Dunkelfelduntersuchungen
und Azimutfehler. 76

Pardl, Ugo, Ueber die Natur der leuko-
zvtaren Einschlusse bei Encephalitis ie-
thargica. Bemerkungen zur Arbeit der
Herren Prof. Dr. Hilgermann, Dr.
Lauxen und Charlotte Shaw. 406
Pfeiffer, Robert, und Robitsckek, Waller,
Elio neuesTuberkelbazillenanreicherungs-
verfahren mit Mastixemulsion. 27
PlasaJ, 8., und Pribram, E., Beit rage zur
Sy^tematik der Mikroorgaoismen. Zur
Systematik der Bacteria bipolaria. Bak-
terien der bamorrhagischen Septikimie
im weiteren Sinne. 1

Preuss, Max, Epidemiologische und mor-
hologiache Influenzabazillenstudien aur
era Ende der letzten Pandemie. 283
Pribram, E. s. Plasaj, S.

Reichert, Fr., Beschreibuug einee neuen
Kontrollinstrumentes fur Dampfdesin-
f ek tionsapparat e. 239

—, Eine neue Methode zur Bestimmung
der Konzentration der Hammelblot-
korperchenaufschwemmungfur die W as-
sermanusche Reaktion. 315

—, Ueber den Ablauf vitaler Bakterien-
farbung und die biologische Wirkune
der Farbung auf die Keime. llS

Reuss, Wilhelm, Ueber eiuen meningo*
kokkenahnlichen Erreger bei einem kli-
nischen Fall von Meningitis. 532

Robitschek, Walter s. Pfeiffer, Robert.
Kom&n, Eugen, Aggluiitiaiionsversuche
mit polyvalenten Coli-Seris. 470

Rotky, Ilans, Ueber die Analyse der Ag¬
glutination bei Typhuskranken. 16
Rudovsky, Franz, Die Kokzidiose der
Wanderratte (Alus decumanus Pall.) uud
ihre Beziehung zur Kaninchenkokzidiose.

Simons, Hellmuth, Ueber Selenomonas
pal pi tans n. sp. 50

Sleiuer, (L, Beitrage zur Kenntnis der
Mermithiden. I.leil. Mermithiden von
Neu-Mecklenburg und Revision einiger
v. Linstowscher Arten und Rudol-
phis Filaria truncatula = Mermis trun-
catula. 451

Yogel, R.. Ueber das intra vitam beob-
achtete Vorkommen des groBen Leber-
egels (Fasciola hep&tica L.) bei einem
Kinde. ^

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Lnhalteverzeichni*.

587

EL Sachrcrzciclmis.

Agglutination bei Typhuskranken. 16

— in it Coli. 470

— von Y-Ruhrbazillen. 95

Anophclcs-Eier. 362

Anoploccphala magna. 110. 217

— mamiliana 116. 219

— perfoliata. 114. 219

— pinguis. 440

Anoplocephaliden der Vogel. 438

Anreicherungsverfahren fiir Tuberkelba-

zillen. 27

Antikorper, gebundene, Koktostabilitiit.

227

Avitellina laciniosa n. sp. 374

Aziinutfehler. 76

Bac. influenzae s. Influenzabazillen.

Bac. proteus anindoIogene3. 185

Bac. pyocyaneus. 185

Bac. pyogenes anaerobius. 290

Bacteria bipnlaria. 1

— rnultoseptica. 1

Bact. coli, Agglutination. 470

-, Nachweis in Wasser. 63

— lactis aerogenes. 289

Bakterien der hamorrhagischen Septik-

itrnie. 1

Bandwurmer des Pferdes. 110. 216

BI ut k orperchenaufsch wem mung, Bestim-
mung der Konzentration. 315

Bulirsche Probe. 63

Oercariaeum lanceolatum. 410

Chlamydozoa-Strongyloplasmen. 191. 303
Cittotaenia psittaeea. 442

— rhea. 447

Codonoeephalus urnigerus. 409

Culiciden. 557

Dampfdesinfektionsapparat, Kontrollin-

strument. 239

Davainea laticanalis. 414

Desinfektion zahniirztlicker Instrumente.

387

Dicrocoelium lanceatum. 409

Diphtherie-Epidemie. 321

Distomum. 409

Diphyllobothrium dccipiens. 411. 414
Dithyridium variable. 419

Dunkelfeldlampe. 398

Dunkelfelduntersuchungen. 76

Eimeria tcnella. 408

Encephalitis lethargica. 406

Fiirbung von Tuberkelbazillen. 23

—, vitale, der Bakterien. 118

Fasciola hepatica. 556

Fimbriaria plana. 419

Fleckfieber in Riga. 33

-Protozoen. 526

Ftuorescens-Gruppe. 81

Fusobacterium. 536

Galle, Wirkung auf Ruhrbazillen, 339
Gastroenteritis paratyphosa B. 486

Gefliigelpocke. 191

Hamorrkagische Septikamie, Bakterien der

1

Hefenahrboden. 477

Hexastichorchis Pintneri n. g., n. sp. 377
H-Ionenoptimum der Bakterien. 481

Hymenoiepis villosa. 416

Indobildung. 254

Influenzabazillen, Biologie. 277

—, epidemioiogische und morphologische
Studien. 283

—, Meningitis. 175

Kaninchenspirochiitose. 203

Kapselbnkterien, Kapseisubstanz. 401

Karyooikongruppe. 303

Kokzidiosc des Kaninchens. 855

— der Wanderratte. 427

Komplementgehalt des menschlichen Blutes.

50

Konservierung von Seren. 560

Kupferglasverbindungen, entwicklungs-
hemmende Wirkung. 310

Laboratoriumsinfektionen, erste MaB-

nahmen. 515

Leu k ozy teneinschl iisse, bei Encephali t is
lethargica. 406

— bei Scharlach. 228

MastixemuLsion zum Nachweis von Tu¬
berkelbazillen. 27

Meningitis. 175. 532

Mermis gracilis. 463

— involute. 460

— namatanai'ensis n. sp. 452

— nigrescens Dujardin var. athysanota

n. var. 455

— paehyderma. 462

— pusilla. 458

— quadripartita. 458

— truncatula. 464

Mermithiden. 451

Moniezia pellucida n. sp. 367

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588

(Jentralbl. f. Bakt. etc. I. Abt. Origiaale. Bd. 87. Heft 7/8.

Nahrhoden a us Mefeextrakt und Hefe-

]x j plon. 477

Ersatz der Nut rose. 75

—, Reakt ion. 481

Nicollia aggregata. 520

Nut roe, Ersatz derselben. 75

Parasiten, tierisclie. 407

Paratyphus, Systematik. 161

Paratyphus *B abdominal is. 486

Paronia variabilis. 449

Pferdebandwurmer. 110, 216

Pipette, Universal-, fur Wasserinann-
Reaktion. 317

Pookenerreger, Reinkultur. 36

Protozoen bci Fleckficber. 526

Pseudol utx*rkulose, Diugnostik. 171

Rattemertilgungsmittel. 39. 466

Reagenzglas, praktisches. 319

Rickettsia Prowazeki. 553

Rudoiphis Filaria truneafula. 464

Ruhrbazillen, Agglutination. 95

- , VVirkung von Rindergalle. 339

Salonoinonas palpitans n. sp. 50

Schafzestoden. 365

Seharlach, Leukozyteneinsehliisse. 228
Sehimmelpilze, pathogene, Ziichtung. 562
Septikiimie durch Bact. lactis aerogenes.

289

Sera, Konservierung. 560

Sirnulid^n. 557

Spirillum sputigenum. 536

Spirochaeta hebdomadis, Ziichtung. 345
—- icterohaemorrhagiae, Ziichtung. 345
Spirochiiten bei Kaninchen. 203

— in Wasserleitungen. 198

Sterilisation zuhmirztlieher Instrumente.

387

Systematik derBakterieu der humorrhagi-
schen Septikamie. 1

Tabaniden. 557

Taenia marginata. 417

Thermoreguiatoren. 564

Treponema pallidum var. cuuiculi. 203
Tuberkelbazilien, Anreicherungsverfahren.

27

—, Fiirbung. 23

Typhus, Agglutination. 16

Universal pipette fur Wassennann-Reaktion.

317

Variabilitiitserscheinungeii bei Vibrionen.

241

Vibrionen, Variabilitiitserscheinungen. 241
Vitalfarbung der Bakterien. 118

Wassermann-Reaktion 815. 317. 355
Wasserstof fzahl. 4S l

Ziliaten, Wirkung von Bakteriengiften.

302

III. Vorzcichnis

Anopheles. Eier. 364

AnoplnoepliaLa rnagua. 111. 218

- - marnillana. 117. 221

— perfoliata. 114. 115. 224. 225

AnopI(x*epbaliden der Vogel. 441—449
Azirrmtfehler. 77—79

Bac. proteus anindologenes. 186. 187

Bac. pyogenes anaerobius. 295. 296

Bakterien der hiimorrhagischen Sept i a-

ainie (Taf.).

15

I >iphyIlobothrium decipieus.

412

FI u o res( *e n s-G r u p pe.

83

Fornefscher Aetherdainpfapparat.

37

KaniiiidumapiroHiiitcsc (Taf.).

216

Kokzidiose der Wanderratte.

436

der Wanderratte (Taf.).

138

der Abbildungen.

Kont rol linst rument f u r Damp* do* i n f e k -

tionsapparate. 24<

Leukozyteneinschlusse. 237

Meningitis (lurch Inf luenzabazi I : • m. iso

Me rm ith i den. k >3—4 0 4

Parasiten, tierische (Taf.). A '2 7

Protozoen bei Fleckfieber. *

Schafzestoden. 3H^ s

Spirochiitc in Wasserleitung.

Thermoregulator. 56*' » i

Universalpipette. 31 *

Vi b rionen, Va r iabili tii tse rschei 11 ui •. 'zeu.

245—203

Vitale Bakterienfarbung. 147—154

Frommannflche Buchdruckerei (Hermann Pohle) in Jena. — 4943

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