Zentralblatt Fur Bakteriologie Parasitenkunde Und Infektionskrankheiten Vol-xci(1934)

BOUNO BY .*

STAR BOOK BINDING WKS,
PUSA NEW DELHI.

InI) 1\N AdinOlIliTlTBUi
HMrtiui{(jri iNMTiTiirK). Nhw Diimh

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Zentralblatt

fur

Bakteriologie, Parasitenkunde
und Infektionskrankheiten

Begrandet von Oskar Uhlworm

Zweite Abteilung:

Allgemeine, landwirtsdiaftliche, technische^ Nahrungsmittel-
Bakteriologie und Mykologie (einschlieBlich der Garungs-
physiologie und Enzymologie), Protozoologie, Pflanzen-
krankheiten und Pflanzenschutz, sowie Tierkrankheiten
(ausschlieBlich der in das Gebiet der Medizin gehorenden)

herausgcgebcn von

Oberregicrungsrat Dr. C Stapp

Berlin*Dahlcni| Konigin-Luise^Str. 17/19

91. Band

Mit lOS Abbildungen im Text und 4 Tafein

Jena

Verify von Gustav Fischer
1Q34/35

Alle Bechte vorbehalten
Printed in GensAny

Zentralllatt filr Bakt etc. E Att. B1 9L No. 1|3.

Aiisgegobcn am 22. Oktobor 1934.

JSacftdrvck verhotm.

Effect of Meat Curing Solutions on Anaerobic Bacteria.

UL Sodium Nitrite.

IDopaitinciit of IJactpriology, University of Illinois Urbana, Illinois.]
By Fred W. Tanner and Florence I. Evans.

The nitrites of sodium and potassiiim have an important role in im-
puting a desiiod r(‘d color, to cured meats. Pood control officials have rigbt-
lully legulated the conipoftitioii of curing solutions to prevent the addition
of uniu'cessaiily large amounts of certain constituents which might injure
tlie health of the consumer.

JNifrilcs liave recently l)een used in meat curing solutions as color fixa-
tives. When iiitrati's are iised, it is assumed that they are reduced to nitrites.
Dining late years, evidence has been accumulating to indicate that nitrites
may also tunction to some extent as preservatives. This paper reports re-
sults \Nhich have beim secured in a study of this question. Results with
sodium chloride and sodium nitrate have already been published [Tanner
and P va ns (I, 2)].

Use ol nitiite in place of nitrate in the curing of meat is of more recent
development. This pi act ice arose from an observation made by P o 1 e n s k i
(3, 4) that nitrite •was present in old nitrate curing solution. He believed
that reduction ol nitrate to nitrite was accomplished by bacterial activity.
Noth wa ng (5) made the same observation, but added that reduction
might be due to the meat tissue itself. In light of Bernheim and
Dixon’s work ((>), I’olenski’s explanation is more probable.
Bern h e i m and Dixon found that muscular tissue from a considerable
number ol animals including the ox and the pig was completely without
power to reduee nitiate to nitiite. Lelimanti (7) and Kisskalt (8),
working separately, lonnd Hint red color of cured meal was due to nitrite
and not to nitiali'. L e h m a n n boiled Iresli meat with nitrite in a weak
aeid solution and secured a product having the red color of cured meat.
When treated with sodium nitrate, this red color did not appear, Kiss-
kalt lomid ill addition, that, if meat were allowed to stand several days
ill contact with nitrate, a red color would result. Haldane (9) proved
that the color of meat cured with nitrate and nitrite was due to nitric-oxido-
heraoglobin which was formed by the action of nitrous oxide on hemoglobin.
He also found that the permanent pink color of boiled cured meat was due
to a water insoluble compound which proved to be nitric oxide-hemoehro-
niogen. II o a g 1 a n d (10, II) repeated H a 1 d a n o’ s experiments and
obtained the nitric oxide-hemoglobin as the red colored element of cured
meat. He concluded that neither nitrates nor nitrites, as such, had any
influenee in preserving the color of fresh meat. The brown color of meat
cured with excessive nitrate was thought to be due to the action of sodium
Zwelt* Abt. Bd. ti 1

2

FredW Tanner and Florence L. Evans,

nitrite on hemoglobin. An interesting observation was made by K1 u t (12),
who noted that some waters would change the color of beef to a lighter or
deeper red on boiling. Experiments showed that very small amounts of
nitrite were sufficient to cause the change in color. Nitrate containing waters
might give the color if they were allowed to remain in contact with zinc,
for the metal acted as a reducing agent in this case and the nitrite so pro-
duced would cause the change in color.

After it had been shown that the active agent in color fixation was
nitrite and not nitrate, efforts were made to use the former in curing so-
lutions. Among the first to recommend it was G 1 a g e (13) who proposed
the use of partially reduced nitrate prepared by heating dry saltpeter in
a kettle. Ibis procedure, of course, led to a product of unknown nitrate-
nitrite composition which, when used in the curing of meat, gave somewhat
irr^lar results. From this time on, however, commercial preserving sails
containing nitrite made their appearance on the market. Auerback
and R i e s s (14) found that meat cured with nitrite contained more of this
salt than meat cured with nitrate. They found that meat exposed to the
action of an ordinary curing solution containing five per cent potassium
nitrate for several weeks, contained, at the most, a few mil^rams of nitrile
per 100 grams of meat. Amounts exceeding ten milligrams per 100 grams
were found only in the surface portions. Curing solutions which contained
a large amount of sodium nitrite caused it to penetrate uniformly into the
meat. Ten to forty milligrams per 100 grams were found in surface samples.
Auerback and E i e s s believed that amounts of sodium nitrite excee-
ding fifteen milligrams per 100 grams indicated that a nitrite cuie had been
used. Poliak (15) found that a nitrite cure was practical. The amount
of nitrite in the finished product was even sandier than usually found in
meat cured with nitrate. Careful control was required in order to obtain
good results. Experimental work on a commercial scale by Lewis, Vose,
and Lowery (16) demonstrated that a nitrite cure, when properly carrh'd
out, yielded a product equal, or superior, to that resulting from a nitrate
cure. The amount of sodium nitrite found to be most satisfactory was one
tenth the amount of sodium nitrate usually used. The resulting product
contained no more, and often less, nitrite than when the customary amount
of saltpeter was used. These conclusions were, in general, concurred in by
Kerr, Marsh, Schroeder, and Boyer (17).

The results of this investigation were confirmed by R i e s s, Meyer,
and Mull er (18) who compared the effects of curing solutions containing
nitrite with those containing nitrate. They found that meat cured with
nitrite never contained more than 10 mg. of sodium nitrite per 100 grams
and frequently only a fraction of a milligram was found. They also pointed
out that meat cured with two per cent saltpeter^) contained, in addition
to the traces of sodium nitrite, 100 to 150 mg. of saltpeter. The possibility
exists that this saltpeter may be transformed suddenly under uncontrolled
conditions into nitrite. They recommended, as a result of their experiments,
a s^t mixture containing not more than 0.6 per cent sodium nitrite with
sodium chloride. When this mixture was stored in dry rooms, very little
destraction of nitrite occurred, but, when it was placed in wet rooms, ap-
preciable los s took place in a short time. Riess, Meyer, and M ii 1 1 e r

1) Saltpeter according to Rieas, Meyer, and Muller lefers to a mix-
tuxe of sodium and potassium mtrates

Effect of Moat Ouiing Solutions on Anaeiobio n<u!toiia. III.

3

found that the advantages of the use of 0.6% sodium nitrite curing mixtures
are as lollops: (1) a curing time of one halt to one third that usually ne-
cessary wiih saltpeter; (2) thorough reddening of the meat and thorough
salt penetration proceeded faster when tins cure was used; (3) the nitrite
content ol the finished product was no larger and was frequently smaller
than that receWing a nitrate cure; (4) the appearance, odor, flavor, and
keeping quality of such products were equal to, or superior to, those cured
Avith saltiieter.

The equivalence of sodium nitrate to sodium nitrite in meat curing
has been stated to be 10 to 1 by L e w i s and Moran (19); others have
stated it to be 5 to 3 and lower. An exact equivalence which will hold under
all conditions is probably not possible since the conditions which obtain
in each separate experiment will greatly effect the results. Assuming that
nitrites are somewhat geimicidal, the number of nitrate-reducing bacteria
influence the results. If nitrate reduction is slow, there will be less effective
nitrite. At the Iowa Agricultural Experiment Station (20), nitrites proved
effective in a concentration of from 1/10 to 3 /20 that of nitrates generally
used. A desirable color was not produced until the concentration of salt
was at least 10 p(‘r cent. It is quite well established that constant equivalence
values do not exist, for the amount of nitrite resulting from bacterial reduc-
tion of nitiate, would depend upon many different factors: type, numbers
and activities of microorganisms, physical conditions which obtain in the
curing solution, time of curing, etc.

Another factor of importance is that constant relationships do not seem
to exist between the amount of ingredients in curing solutions and their
incidence in cured meats. This seems to bo borne out by data in publications
of Kerr, Marsh, Sehroeder, and B o y e r (17) and others. This
would seem to indicate, therefore, that it might bo better to control amounts
of nitrate and nitrite in the finished product tlian in the curing solution.

Saltpeler (sodium nitrate) has had the longest use in meat curing so-
lutions. Since nitrates must be reduced to nitrites, packers desired to use
nitrites as such to avoid the dangers which might result from inadequate
conversion of nitraf es to nitrites. Losses from uneven or inadequate fixation
of color were not uncommon. Since many bacteria exist which may reduce
nitrites, it is necessary to (dther add sufficient to fix color before it is used
up or to have a constant source of supply (nitrates). The nitrate cure per-
mitted this but the nitrite cure introduced the hazard of nitrite disappea-
rance. ('onae(|uently, there may be much merit in the mixed cure in which
both nitrates and nitriles are added. The nitrates may act as a reservoir
for replacement of lost nitrite.

Kegulation of the amounts of these salts used in meat curing solutions
rests in the United States with the Bureau of Animal Industry and the
bureau has rightfully been diligent to prohibit the use of unnecessarily largo
amounts. Too little is known, however, about the toxicity of nitrites in
cured meat products.

The conditions caused by the World War made it necessary for the
Secretary of the United States Department of Agriculture (21) to revise
regulations to permit the immediate use of sodium nitrate (Chile saltpeter)
in place of potassium nitrate for curing of meat in establishments whore
Federal inspection is maintained. This salt has been used since then in spite
of the fact that many packers claim that bettor results are secured with

I*

4

Jred W. Tanner and Florence L. Evans,

potassium nitrate. In 1922 (22) the United States Dopartmont of Afifricul-
ture amended the rules to permit among other things saltpeter and nitrate

^*!^endment 4 to B. A. I. Order 211, revised, issued October 19, ^>25 (23)
permitted the use of saltpeter, nitrate of soda, and nitrite of soda, llus
was indeed a mixed cure and a distinct depart lire ironi former ])raetu;e.
The bureau stated that meats could be successfully cured with qiiantihes
of sodium nitrite that would not result in the presence of more Ilian 1.00
parts per million in the finished moats. It was slated that in general, the
correct quantity of nitrite is approximately one-tenth that of nitrate. 1 he
substitution of one pound of nitrite for each 10 pounds of nitrate was re<‘oni-
mended. The basis for this ratio (10 to 1) is hard to determine.

After use of excessive amounts of sodium nitrate in pumping pickle
was observed by the Bureau of Animal Industry in 1926 (24), a, warning
was issued that amounts of saltpeter or sodium nitrate over one per ccnl
would be held excessive in pumping pickle.

Immediately after release of these rulings, the bureau began to record
itself in favor of a nitrite cure as the approved cure for comiiunuted meats
and sausage. It was suggested that the use of nitrate be eliminated when
as much as one-quarter oz. of sodium nitrite is used per 100 lbs. of meat.
This opinion was based on the observations that satisfactory cured meat
could be made with such a cure.

Although many meat packers favored the niteite cure, others believed
that a mixed cure containing both nitrate and nitrite, was more satisfactorj’.
It was suggested that, although nitrites made cured meats red, a little resi-
dual nitrate would be desirable to act as a constant source of nitrites. Ac-
cordingly, in the fall of 1931, the chief of the Bureau of Animal Industry
issued a statement permitting oz. of nitrite, and 2% oz. of nitrate per
100 lbs. of meat in curing solutions. The arguments in favor of such mixed
cures were several. The most important was that satisfactory cured meals
had been prepared for years with a mixed euro and to change abruptly to
the nitrite-cure would change the properties of the final products from those
packing plants which had worked out a satisfactory procedure. Kurtlier-
more, it would be unnecessary to rely absolutely on the activities of nitrate
reducing bacteria.

The practice in Germany was reviewed by R i e s s , Moyer, and
Muller and need, therefore, not bo reviewed here.

The amount of nitrite in cured meats naturally varies with I he product
and the method used for curing it. Moulton (26) has summarized the
taowledge on this question. Lewis and V o s o (27) reported from 42 to 53
parts per million of nitrite in a ham which had loceived a regular nitrafi*
cure. Jones (28) reported from 72 to 960 parts per million of nitrite in
American ham. In his published article the methods of sampling, analysis,
and manipulation of the samples were not given. The amounts which would
be secured would depend largely on the type of sample and its treatment
after collection.

The ruling of the B. A. I. that the finished product should contain less
than 200 parts per million is in many respects meaningless. Nothing was
said as to how or when the samples were to be taken. It is apparent that
a surface sample of a ham recently removed from a curing solution with
600 or 700 p.p.m. of nitrite would show nitrite content considerably in ox-

Effect oi Moat Cuiuig Solution*! on Anaerobic Bacteria. III.

5

cess of 200 p.p.m. On the other hand, a sample from a deeply seated area
in tlie ham would show a nitrite content well within the limits of 200 p.p.m.
Unless the method of sampling is specified, a ruling such as the one under
discussion, can but lead to contusion. A standard such as that just men-
tioned is meaningless unless standard procedures or methods are used in
its enforcement. A surtace sample would contain large amounts of nitrite
while a sample from the center of the ham might contain very little.

Another very serious element for error is the technic used for prepa-
ration and handling of the sample. Jf the samples are not properly prepared
and analyzed immediately, nitrate and nitrite data will be inaccurate. Bac-
teria may reduce nitrates and yield very high nitrite results, or, on the other
hand, they may decompose the nitrites giving lower data than should be
expected. Samples for the determination of nitrates must be analyzed
promptly or stored under adequate refrigeration only for very short periods
of time.

Tn some products such as spiced luncheon loaf in tin cans, the nitrite
content decreases rapidly during storage, the rate of disappearance depen-
ding on the temperature of storage and probably the numbers and activity
of the bacteria present. Ruylc and Tanner (29) in an examination
of commercial canned meats did not find curing salts in sufficiently high
concentration to prevent development of common anaerobes. After storage
for several months the nitrite content in many cans is zero and almost so
in the majority. Cooking, as carried out in the home, also destroys nitrite
in cured meats. Tn experiments now in progress, it has been shown that
boiling and frying frequently destroys all of the nitrites not oven a trace
showing on analysis even with products wliich have received a commercial
nitrite or nitrate cure.

Nitrates are readily reduced to nitrites by many different chemical
substances and microorganisms. In the preservation of meats with curing
solutions containing nitrate only, it is well known that it must be reduced
to nitrite before the color may be fixed.

Bacteria are known to be active in reducing nitrates and probably play
the most important role in this respect in moat curing solutions containing
nitrates. The subject has betm studied mainly from the standpoint of agri-
culture and methods for delemiiiiing the reduction with pure cultures.
JM a a s 8 0 n (30) studied the process with over 100 species of tmeroorganisms
in peptone brolli containing 5% of potassium nitrate. Eighty-five of these
species formed large amounts of nitrites. Maassen stated that the
amount of potassium nitrate used hindered the growth of some of tho bac-
teria. lie also stated that some of them wore hindered by the nitrite for-
med showing that it has a detrimental effect on bacteria. Results of investi-
gations by many others have shown the importance of bacteria as nitrate-
reducers.

It is possible that the meat itself may also reduce nitrates. A b e 1 o u s
and Gerard (31) reported results of an investigation which seemed to
indicate the presence of an enzyme in horse flesh which reduced nitrates.
Their conclusions have been criticized, however, on tho basis that they did
not work with sterile extracts and the reduction they attributed to the en-
zyme may have been brought about by microorganisms. Bernheim
and Dixon obtained just the opposite results (6). H o r o v i t z - V 1 a -
8 0 V a (32) has recently reported Bacillus halobious, an obligate

6

Prod W. Tanner and Floronoo L. Evans,

halopMlic organism which reduces nitrates to nitrites and thou to fi ee ni-
trogen. Z obeli (33) showed that many bacteria could reduce "'J™
to nitrites. The latter, in turn, were also rcducoable. b 1 1 c K i a n u
reported nitrate reduction by E s c h c r i c h i a c o 1 1.

Nitrites may also be decomposed by bacteria and some ol tlie oss
nitrite must be attributed to microorganisms.

Pharmacology ol Nitrites.

The chemical properties of sodium and potassium nitrite
pharmacology of these salts of importance m meat preservation. Most o ^
the evidence in literature, however, involves ingestion of far larger amounts
of nitrite than are used in meat curing and certainly larger amounts than Yomd
be found in cooked cured meats as they would be prepared for the table.
There is no evidence as far as can be found in the literature, to indicate that
the amounts of nitrite ordinarily found in cured meats are harmful.

Since sodium nitrite and nitrate have been added to moat curing so-
lutions, many investigators have suggested that those salts might have a
detrimental effect on the health of human beings. Important
reports which We been published are those by Gr i n d 1 o y and M a c -
Neal (36). Physiologically, nitrites are very active, and they reached the
conclusion that their poisonous action in largo doses was due to two factors.
The first was the effect on the blood. They found that animals poisoned with
nitrite had had a large part of the blood oxyhemoglobin changed to racthemo-
globin. The second factor was the direct effect on the tissues. The
of this action was not definitely known, but G r i n d 1 e y and M a c N c a I
believed that it was direct tissue asphyxia. Nitrites have boon found to
be toxic for all animals examined, both hemoglobin containing and non*
hemoglobin containing. This includes insects, arachnidac, protozoa, infu-
soria and mammals. Many plants were also injured by nitrites.

Riess, Meyer, and Muller (18) gave, as an introduction to
their paper, a brief history of the uso of nitrite in meat curing in Germany.
Since 1916 it had been forbidden in the industrial preparation of meat pro-
ducts. The dangerous properties of the salt wore domonstralcd by the do-
sages regarded as pormissable in medical practice. The (lonnaii pharma-
copoeia gave, as the largest single dose for an adult man, 0.3 gm. and as
the largest daily dose 1.0 gm. The Swiss pharmacopoeia gave as the corre-
sponding doses 0.1 gm. and 0.3 gm. Doses of 0.2 to 0.3 gms. can produce
humming in the ears, vertigo, sensitivity to light, nausea, cyanosis, and
irregularity in heart action. The literature was found to contain records
of severe illness caused by 0.3 to 0.6 gms. It was considered in Gorniaiiy
that any material that affected the health of men in amounts of loss than
one gram shoidd be used with the greatest care. However, they found by
experiment that a carefully controlled curing process made possible the use
of nilrite in the preparation of cured meats without the resulting product
containing this substance in quantities sufficient to be detrimental to health.
Riess, Meyer, and M ii 1 1 e r’ s experimental work seemed to be
complete. They found that substitution of nitrate with nitrite docroasod
the curing time by one-third. Addition of 0.6 per cent of nitrite to common
.salt was sufficient when waing 80 gms. of salt for 1000 gms. of meat.

There are few data on the reaction of the salts of nitrous acid on bac-

Effect of Meat Curing Solutions on Anoorobio Bactoria. III.

7

tcria, but one would suspect that a substance affecting so many other types
of living tiling, might have some influence on such small organisms as bac-
teria. Lewis and Moran (39) found this to bo the ease. Their experi-
ment included determinations of the effect of nitrite alone and also the ef-
fect of combinations of nitrite with sodium chloride. They found that 0.2
per cent of sodium nitrite, the lowest concentration used in their work, com-
pletely inhibited proteolysis in cultures of Clostridium putrifa-
c i e n s. Jii another experiment using concentrations of 0.01 to 0.05 per cent,
they observed no inhibition at any concentration below 0.05 per cent. Appa-
rently, the effective concentration lies between 0.05 and 0.2% sodium ni-
trite. An experimeirt was also conducted with beef round covered with a
solution containing nitrite, nitrate or chloride. The nitrite solutions con-
tained 0.03, 0.06, 0.09, 0.12, and 0.18 per cent of sodium nitrite. After
9 days, growth and putrefaction were present in all the vessels containing
nitrate and salt of concentrations ton times that of the nitrite. The nitrite-
beef combinations showed no evidence of spoilage even after 21 days. This
would seem to indicate that nitrite is very effective in inhibiting bacterial
growth even in very low concentrations. The actual amount of effective
nitrite must have been lower than the percentage concentrations appearing
in the tables, for the amount of meat added was not considered in the calcu-
lations. The effect of nitrite, according to these data, must be different for
Clostridium putrefacions than for the ordinary moat flora.
Whether inhibition of bacteria would be noticeable in the curing cellar is
another matter.

The experiment on the effect of combinations of sodium nitrite and
sodium chloride was performed with Clostridium aporogenes
as the tost organism. Proteolysis for the 48 hour period was inliimted at
0.05 per cent sodium nitrite in all the salt concentrations from one per cent
to five per cent. However, for the seven to fourteen day period, proteolysis
was observed in all nitrite concentrations from zero to 0.2 per cent (the hig-
hest sodium nitrite concentration used) in all the tubes containing zero to
two per cent salt. In other words, after two weeks incubation, growth had
appeared over tho entire range in the tubes containing nitrite only. Proteo-
lysis was checked in nitrite concentrations at and above 0.05 per cent in salt
concentrations from three per cent to five per cent. In another similar ex-
periment, these authors found that concentrations of 0.05 per cent and above
prevented proteolysis in the absence of sdt for the same incubation period.
The difference between tho effective concentration for these two experiments
is tho difference between 0.05 per cent and 0.2 per cent or 0.15 por cent.

Some attention has also been given to the formation of nitrites from
nitrates in the intestines and tho possible evil effects of tho former. Barth
(36) in 1879 studied the effect of Chile Saltpeter on animals which had acci-
dentally ingested it. Symptoms of illness resulted including weakness, un-
consciousness, muscle twitchings, etc. Barth attributed tho symptoms
to nitrites formed from the nitrates, an opinion which was not generally
accepted by toxicologists. B i n z and Gerlingor (37) confirmed
B a r t h’ s work and believed that nitrite poisoning occurred. The experi-
ments just reported leave tho situation in an unsatisfactory state. Clear-out
conclusions cannot be reached on the toxicity of nitrites in foods. It is evi-
dent, also, that tho amounts of nitrite used in the above experiments wore
considerable greater than would be found in cured meats.

8

FredW. Tanner and Florence L. Evanb,

A comprehensive investigation of the effect of saltpeter in llio diet was
earned out at the University of Illinois in 1907 and 1908 (36). IVenty-four
pbjects were used in these experiments. The results of this investigalion
indicated that potassium nitrate as used in meat curing solutions showed
no effect on the subjects. Mathews (38), who studied the pharmacology
of nitrates and nitrites in this investigation, stated tliat the potassium iii
the potassium nitrate could be disregarded when the nitrate was taken in
such small doses as those given in the experiments. The nitrate ion, in it-
self, was said to possess about the same physiological power as the elilorine
ion. Sodium nitrate as such was said to have the same action on nictal)oIiMn
and nearly all tissues of the body as sodium chloride.

The situation for sodium nitrite is apparently different. Mathews
quoted a number of cases of iUness following ingestion of nitrites but the
founts were usually greatly in excess of those used in curing solutions.
Data from injection experiments are not pertinent to this discussion.

Experimental.

These experiments were carried out to determine whether or not sodium
nitrite in concentrations approximating those added to meat curing solu-
tions had any effect on the putrefactive anaerobes, some of which are fre-
involved in meat spoilage according to K 1 e i n (.39) and M e D r v d c
(40). Specie attention was given to Clostridium botulinum
becau^ of the dangerous properties of the toxin formed by this organism

Twelve strains of spore formers were used as follows: Clostridium
botulinum type A, cultures 1 and 2; Clostridium botulinum
type B, cidtures 5, 6, 7, 8, and 9; Clostridium putrifienm,
cultures 12 Md 13; and Clostridium sporogenes, cultures 10,
11 and 14. These were grown in four different media to which various con-
centrations of sodium nitrite had been added.

l^e technic used needs no special discussion since it differed in no wav
irom that used in experiments, results of which have been published re-
cent y in this journ^. Special attention was given, however, to sterilitv

incubated before use and all a|»i)ii-
heating was tested with media whu*h had passed
stenhty tests. This is necessary in work involving the use of such micro-
^ themophilic bacteria and spore-forming anaerobic bacleria

found that they decreased in media during storage. Determinations wore
y,hm tlie meta ^ inoculated. Wc.%ddDd to rod,™V”w
stenhzation wotb uniformly destroyed to a great extent.

nutrient bouillon was inoculafod by means

dctoxifiMl, spore

raspension. This had been prepared from cultures growing in brain mash

at 370 c. for two weeks ; then they were s! oTed
was remamder of the incubation period. (Irowth

was .^teeted by_ comparing the tubes with corresponding ones containim*-

conta^g a smajf amoult of sterile bram
masn meoium. Only small amounts of gas were produced bv tho<?o

ra™ to toi, rS SlortL .rtrSh

teemed to be turbidity. This was ttansieiit and Inetcd from a day or Two

Effect of Meat Curing Solutione on Anaerobic Bacteria. III.

9

to a week or more. Toxicity was determined for each Clostridium
b 0 1 u 1 i n u tn culture by feeding a portion of it to a guinea pig.

Sodium nitrile was added to the medium in the following concentrations:
0.149, 0.187, 0.22:{4, 0.239, 0.299, 0.337, 0.374, and 0.449%. After sterUi-
zalion and the preliniinary incubation, sodium nitrite determinations were
made on re]»resentative tubes from each lot of the medium. The concen-
trations thus obtained were as follows: 0.1372, 0.1508, 0.2352, 0.2744, 0.3528,
0.392, 0.490, and 0.588%.

Itesults: Both growth and toxin formation showed considerable irre-
gularity. Visible growth aj)peai'cd to be inhibited in six out of seven of
Clostridium botulinum cultures by the lowest concentration
of sodium nitrite (0.1372%) and the two highest ones (0.490 and 0.588%).
All of them grew in this medium containing 0.2352 and 0.2744%. Clo-
stridium putrificum and Clostridium sporogencs cul-
tures grew more evenly. The only concentration that showed appreciable
inhibition for the latter organisms was the highest one. Of the entire group
of cultures, only tlirce grew in this concentration (0.588%).

Toxin formation, while quite irregular, yielded more understandable
results. If the “skips” arc disregarded, the lowest concentration which pre-
vented toxic Clostridium botulinum cultures was 0.3528%,
and the lowest one which inhibited all toxin formation was 0.490% of so-
dium nitrite. Toxin formation and growth did not necessarily show simultan-
eously in a culture, h'or instance, Clostridium botulinum failed
to show growth, except in one instance, in 0.1372%, but all but one of these
cultures formed toxin in this concentration. On the other hand, cultures
7, 8, and 9 grew in 0.3528%, but failed to form toxin when this amount of
sodium nitrite was present. Occasional failure of growth to accompany
the appearance of toxin in cultures may be explained by the fact that the
former is not always easily determined visually.

(11 u cose Broth: Glucose broth was made up in lots containing
0.149, 0.187, 0.2243, 0.239, 0.299, 0.337, 0.374, and 0.449% of sodium ni-
trite (before sterilization), li was inoculated, as in the previous experiments,
with approximately % cc. of healed, uniform spore suspensions of the orga-
nisms. The incubation period was two weeks in the 37® C. incubator and
several months at room temperature. Growth was detected by gas formation
and turbidity of the medium. Considerable gas was formed in this medium.
'Furbidity, although transient, was also important evidence of development.
A portion of each of the Clostridium botulinum cultures was
fed to a guinea pig in order to detect presence of toxin.

The concentration of sodium nitrite was dotermined after sterilization
and two weeks preliminary incubation. It was found that tho amounts of
sodium nitrite present at the time of inoculation were: 0.1372, 0.1764, 0.2352,
0.2744, 0.294, 0.392, 0.490, and 0.588%. Those concentrations correspond
to a range of 1,372 ports per million to 5,880 parts per million.

Besults: Under the conditions of this experiment, tho repressing effect
of nitrite was extremely irregular. The tubes that showed growth were
scattered over tho entire range excepting the last concentration (0.588%).
Fewer tubes among thoso inoculated with Clostridium botulinum
showed growth than among those inoculated with Clostridium pu-
t r i f i 0 u m and Clostridium sporogenos. Only ono culture
of Clostridium botulinum showed growth in concentrations

10

F r o d W. Tanner and Florence L. Evans,

above 0.294% of sodium nitrite, but it is doubtful whether siefiiificance ciin
be attached to this observation. The highest concentration, O.bSd",,, pr«'-
vented growth of all the organisms used.

Clostridium botulinum formed toxin in the lowest concen-
tration of sodium nitrite in all cases, and two strains formed it in th(> next
concentration (0.1764%). None of the tubes containing 0.2.‘5r)2 and 0.27 ! 1**„
proved toxic, but cultures 6 and 8 formed toxin in ().294‘,’„ and culture f)
was toxic in 0.392% of sodium nitrite. None of the cultures formed toxin
in 0.490 and 0.588%, the highest concentrations used.

Egg-Meat Medium: Tubes of sterile egg-meat medium were
inoculated with detoxified spore suspensions of the organisms. I’lie same
amount of detoxified spore suspension (%, cc.) was introduced into the Inil-
tom of the tubes by means of Pasteur pipettes. The inoculated cultures
were incubated for two weeks at 37® C. and at room temperature for several
months. Tubes which had been inoculated with Clostridium botu-
linum were tested for toxicity by feeding portions of the contents to guiiu'a
pigs.

Sodium nitrite was added to the medium in such amounts that the
concentrations were; 0.149, 0.187, 0.2243, 0.239, 0.299, 0.337, 0.374, and
0.449% by weight of the C. P. salt. Colorimetric determinations of the so-
dium nitrite were made at the time of inoculation, and the following amounts
were found: 0.0588, 0.0882, 0.1862, 0.1862, 0.1862, 0.2156, 0.;}724, and 0.392<;„.

Results: Sodium nitrite failed to completely inhibit growth in any of
the concentrations used in egg-meat medium. The amount of growth was
smaller than in the corresponding controls in most cases as judged by the
mount of gas present in the respective tubes. Growth also appeared later
in the tubes containing sodium nitrite than it did in those containing none
of this salt.

Toxin was poduced by the Clostridium botulinum cul-
tures in a most irregular manner. Only three of the seven strains did not
produce “skips”. Four of the seven strains wore inhibited by concentrations
above 0.0882% (0.1862—0.392%). One of the remaining strains produced
toxin in the highest concentration used, which was 0.392%.

Pork Infusion: Tubes of sterile pork infusion inediuiu were
inoculated with uniform suspension of detoxified spores. 'I’he same* cultures
were used as in the other experiments. The inoculated tubes were incubated
at 37® C. for two weeks and wore then hold at room temperatun' for H('V(Tal
months. Growth was said to have occurred when gas was prt'senl, when
digestion of the meat had taken place, and when a dotoclablo odor was i^ro-
sent. Toxin formation in the tubes inoculated with Clostridium l)o-
t u 1 i n u m wag detected by feeding portions of the contents to guinoa pigs.

The medium was prepared in lots containing 0.149, 0.187, 0.224:1, 0.2;J9.
0 299, 0.337, 0.374 and 0.449o/, by weight of C. P. sodium mLt

stenlization and preliminary incubation, colorimetric determinations of the
amount of nitrite were made. It was found that the concentrations present
at the time of inoculation were: 0.0588, 0.0784, 0.1372, 0.1470, 0.1600, 0.1 764,
0.2548, and 0.3136%.

Kesults; Complete inhibition of growth in any culture with any concen-
tration of sodium nitrite used was not observed. In most cases, less gas
was formed m cultures containing the compound than in cultures without it,
nut at the end of the incubation period, growth was evident in all of them.

Effect of Mc<vt Curing Solutions on Anaerobic Bacteria. III.

11

Toxin formation by Clostridium botulinum was affected
to some extent by sodium nitrite, but so many irregularities were observed,
lliat definite conclusions cannot be drawn as to the effective concentration
of the compound in this medium. Two strains formed potent toxin in the
highest concentration used (0.31116%). One strain (culture 6) produced toxin
in pork infusion medium throughout the entire range of sodium nitrite con-
centrations tested.

Tablo J . Strains showing pj p o w f h.

JVuk Inf union

Egg Moat Medium

Nutrient Bouillon

Glucose Bouillon

0 ^

/o

_NaNq,

0

/o

NaNC),

%

NaNOa

0

All niraiuh

0

All strains

0

All strains

0

All strains

O.O.'ivSS

0.0588

tt ft

0.1372

0, 10, 11, J 2, 13,

0.1372

0, 9, 10, 11,

0.0784

0.0882

tt tt

0.1508

14

0, 7, 8, 10, 12,

0.17G4

12

2, 9, 14

0.1372

»»

0.1802

tf tt

0.2352

13, 14

All strains

0.2352

2, 5, 6, 9, 10,

0.U70

f*

(I.I8()2

1,2,5. 7,

0.2744

tt tt

0.2714

11, 12, 13, 14
1.5, 8, 9,10,

O.IOOO

It )»

0.1802

8, 0, 10,
11, 12,14
All Rtroms

0.3528

2, 0, 7, 8, 9, 10,

0.2040

11, 12, 13, 14

1, 2, 0, 9, 10,

0.1704

tt tt

0.2150

ft

0.3920

12, 13, 14

1,2, 6, 0, 8, 0,10,

0.3920

11, 12, 13
9, 11, 12, 13,

0.2548

tt tt

0.3724

tt tt

0.4900

11, 12, 13, 14
0, 10,11,12, 13,

0.4900

14

7, 9, 10

0.3130

tt ft

0.3020

tt tt

0.5880

14

0, 10, 14

0.5880

Tablo 2. Strains of Clostridium botulinum producing toxin.

Pork Infusion

Egg Moat Medium

Nutrient Bouillon

Glucose Bouillon

%

NaNOj

Cl

0'

/O

NaNO,

%

NaNOj

0

1, 2. B. e,

0

1. 2, 5, 0, 7,

0

1, 2, 5, 0, 7,

0

1, 2, 5, 0, 7,

7. «, i»

8, 9

8, 9

8, 9

0.0588

1, 0, 8

0.0588

1. 2, B, (J, 7, «

0.1372

1, 2,0, 7, 8,9

0.1372

1, 2, 5, 0, 7,

8, 9

0.0784

1,2, 0,7, 8

0.0882

I, 0, 7

0.1508

2, 5, 0, 7. 8, 9

0.1784

1. 7

0.1372

It 0

O.I8«2

1, T)

0.23B2

1, r>, 7, 8, 9

0.2352

0.1470

2, r>, 0

0.1802

1, 2

0.2744

2, 5. 0, 7, 8, 9

0.2744

O.IOOO

5, 0, 9 i

O.J802

5

0.3B28

2, 0

0,2940

0, 8

0.1704

5, 0, 7

0.2150

2

0.3920

1, 2, 5, 0

0.3920

5

0.2548

0, 7

0.3724

1

0.4900

0.4900

0.3130

0, 7

0.3920

1

0.5SS0

0.5880

Discussion: The discrepancy between the concentrations of so-
dium nitrite added and found upon analysis presents a different problem
than in the case of sodium chloride and sodium nitrate. In plain broth and
glucose broth, analysis showed lowered nitrite contents for the two lowest
concentrations. The third in the series showed approximate equality, al-
thoug;h the figures obtained by analysis are slightly higher. In plain broth
the higher percentages showed more sodium nitrite upon analysis than was

12

Fred W. Tanner and Florence L, Evans,

added in the beginning. This is also true of glucose broth except in the fifth
concentration where the values are approximately the saine. This might
bo explained as follows: A small amount of sodium nitrite is destroyed by
sterilization. In the lower concentrations this is not entirely made up by
evaporation, but in the higher concentrations the small quciiility des(roy<Hl
is not as important a factor as the comparatively large increase due to eva-
poration. '\'^en the substrate used was either egg-ineat or pork-infusioii
media the concentration of sodium nitrite, found upon analysis, was always
smaller than the amount added to begin with. The loss amount ed to <),l
— 0.15% over the entire range. It is attributed to the destruction of sodium
nitrite by the meat protein in the medium which presumably acjted as a
reducing agent and the heat of sterilization. A comparison of the final so-
dium nitrite values obtained after adding the same amounts of this salt
to the various media is given below:

Amount secured by Analysis after Storilizatioo.

Amount

Glucose

added

Broth

%

%

■m

0.1372

0.1372

0.0688

0.0686

0.1368

0.07‘^4

0.08S2

0.2243

0.2352

0.2362

0.1372

0.1862

lb 1^1

0.2744

0.1470

0.1862

0.3528

0.1606

0.1862

Is

0,3920

0.17C4

0.2166

0,4900

0.2548

0.3721

0.449

0.6880

0.6880

0.3130

0.3020

The results of these four experiments tend to show that the amounts
of sodium nitrite used cannot be relied upon to suppress either growth or
toxin production by Clostridium hotulinum, or to prevent the
growth of Clostridium p u t r i f i e u m and Clostridium
sp or 0 genes. It is evident that the higher concentrations of sodium
nitrite do not allow the formation of as many toxic cultures as the low eon-
centrations. However, these data must be interpreted witli caution, for
each strain may have been harmless for gidnea pigs when grown in stinio
concentoations, and yet fom a potent toxin in tubes containing higher ({on-
centrations of sodium nitrite. In the case of glucose or nutrient hrofh, it
seems safe to conclude that 0.490 per cent and 0.588 per cent, in (>itlier oJt
these media, completely represses toxin formation under the conditions of
the experiment. _ As as growth is concerned, inhibition of nine out of
twelve cultures in plain broth, and of all the cultures in glucose broth by
0.588 per cent of sodium nitrite wore the only definite evidence of a harmful
action on the part of this salt. When it is considered that the amount of
sodium nitrite in the tests where a meat medium was used ranged from about
toe times to about 19 times the maximiun allowed in finished cured meats,
it is evident that reliance cannot bo placed upon this salt alone to prevent
spoilage by such organisms as were used here, when other conditions aro
favorable for their growth.

Effect of Moat Curing Solutions on Anaerobic Bacteria. HI.

13

Conelnsions.

1. Concentrations of sodium nitrite from 0.1372 to 0,588% in plain
broth cannot be relied upon to prevent growth of all strains of Clostri-
dium botulinum, Clostridium putrificum, and Clo-
stridium H j) 0 r 0 g (‘ 11 0 s.

2. A con(*entration of 0.588% of sodium nitrite in glucose broth inhi-
bited twelve strains of putrefactive anaerobes, including: Clostridium
b 0 1 ii I i n u m types A and B, Clostridium putrificum, and
Clostridium s p o r o g e n e s.

3. Concentrations of 0.490 and 0.588% completely inhibited toxin for-
mation by Clostridium botulinum types A and B in both plain
broth and glucose broth.

4. Concentrations of sodium nitrite from 0.0588 to 0.3920% failed to
inhibit Clostridium botulinum, Clostridium putri-
ficum, and Clostridium sporogenes in either pork infusion
of egg-meat medium under the conditions of the experiments.

5. Concentrations of 0.0588 to 0.3920% did not prevent toxin formation
by all strains of Clostridium botulinum when grown in either
cgg-nieat medium or in pork infusion.

6. The concentrations of sodium nitrite present in cured meat cannot
be relied upon, in itself, to prevent spoilage or toxin formation by these
organisms.

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1911.)

Haehdruck verftoten.

tlber den Emflufi der Temperatur und der Jahreszeit auf die
biologische Abwasserreinigung.

[Aus dem Laboratorinm der stadtischen Klilranliigt'n in
Von Karl Viohl, untcr Mitarbcit von Bombard MoiBner.

Mit 3 Abbildungon im Text.

Die vorliegende Arbeit slellt oinon Vcrsuch d<ir, die Wiricung dor Toni-
peratur und der Jahreszeit auf die biologische Abwasserreinigung, insbe-
sondere das Belebtschlammverfahren in chemischer und biologischer iUn-
sioht zahlenm^Big zu erfassen. AuBerdem wurde versucht zii erinittelu,
ob bei diesem ProzeB noeh eine jahreszoitliche Schwankung vorliegt, die
unabhangig von der Temperatur ist. Dies schien besonders in biologiHclier
Hinsicht von Interesse, weil bei der Abwasserreinigung die Bedingungeu
— abgesehen yon der Temperatur, die sich aber nur vorhaltnismafiig wt^nig
andert, und einer geringen ja^eszoitlichen Schwankung in dor ZiiHanimen-
setzung des Abwassers — koinon durch den Wechscl dor Jahroszeiten Ikt-
vorgerufenen regelmaBigen Schwankungon unterliegen, vielmehr in diestT
ffinsicht so konstant sind, wie dies selten in dor Natur dor Fall ist. Dabtn

li]influ(3 dor Tomporatur uud dor Jahre&zcit auf die Abwasserreinigung. ]5

kann man die Bediiip;ungcn nicht als laboratoriumsmaBige bozeichncn,
sondorii sie sind doneii in der frcien Natur sehr ahnlich.

Die durcligofiihrten Untersuehungcn bestchcn entsprechcnd der Fragc-
stellung aiiR zwoi Teilen. Kinraal wurdo durch Laboratoriunisversuchc
der liinfluB der Teinperatur aiit das Belcblschlammverfahren ermittelt.
Anberdom wurden 4 Belebtsehlamnianlagen iiber 2 Jairrc und cine Tropf-
kdrperanlage I Jahre lang in cbemischer und biologischer liinsicht beob-
aelilet und die erhaltenen Daten naeb Jahreszciten zusammengcstellt.

1. Eiiitlutt dcr Tomperatur.

Mothodisches.

Die Versuclie iibor den Einflufi der Temperatur wurden in derselben
Wcise durcligeFiihrt und kontrolliert, wie es bereits fttr eine friihere Ver-
suchsreihe bescliriebeu isl(J), also in Laboi'atoriums-BelebtBchlammanlagcn
nach S i e r p. Die Belastung sowio die Beliiftungsstllrke wurden mOgliehst
den Verhaltnissen der Praxis angepafit. Die Anlageu wurden auch nicht ge-
fiillt und nach Beendigung des Reinigungsvorganges wiedcr abgclassen,
Rondern standig langsain durchflossen. Die Beluftungsdauer betrug 7% Std.
Die Zulaufflasclien faBten 11 1 und wurden zu Mittag und Mitternacht mit
inechanisch g(‘reinigteni Abwasser von dcr Leipziger Hauptklaranlage go-
fUllt.

Es wurden zunSchst nur die Tcniperaturen variiert, die iibrigen Bedin-
gungen waren bei alien Anlagen dicselbcn. Die Durchschnillstemperaturen bei
dieser Itcihe betrugen 1,5, 8, 17, 26, 29, 36, 46 und 65® C. AuBerdem
wurden noch einige Versucho mit 16- bzw. 4 stiind. Beliiftungsdauer durch-
goftthrt, die aber liauptsachlieh nur chemisch kontrolliert wurden. Jedor
Versucli lief, abgesehen von der Einarbeitungszeit, mindestens 6 Wochen.
Fiir die bei hoheron Tomperaturen betriebenen Anlagen wurde der Schlamm
von der mit dor nadist niedcren Temperatur ubernommen, so daB die Lobe-
wesen bereits an die Warme gewohnt waren. Nach einer Woche waren die
Anlagen dann eingearbeilot. Nur bei dem Versuch bei 1,6®, zu dem Be-
lobtschlamm von Zimmertemperatur verwandt worden war, dauerte die
Einarbeitungszeit wesentlich langer. Die Versuche bei 8, 17, 26 und 35®
wurden gleichzeitig durchgefiihrt. Andcre EinflUsse als die der Temperatur,
wie Jahreszeit, Uulcrschiede in der Beschaffonheit des Abwassors und
dergl. waren also ausgeseluillet. Die Anlagen von 1,5 und 8® wurden wahrend
der Wintermoriate in einein ungeheizten, bzw. schwach geheizten Raumo
aufgcstellt, zu dem Versueh bei 1,5® wurde das Wasscr auBerdem noch von
auBen mit Eis gekiihlt. Die Anlago von 17® wurde bei Zimmorteiuperatur
ohne woitore lleizung betrieben. Die anderen Anlagen mit hohercr Tera-
peratur standen im Wasser- bzw. Glyzerin-Bad und wurden von unten elek-
trisch geheizt. Dio siarkste Abwoichung von dor mittleren Tomperatur
betrug 6®. Doch traten solchc oxtromen Temperaturen nur ausnahmsweiso
auf, platdicho Tcmporaturschwankungen kamcn nicht vor.

Ergobnisse in chcmischer Hinsicht.

Dio Ergobnisse dcr vorgenoiumonen chomischen Untersuehungcn sind
aus T a b. 1 und Abb. iund2 zu ersehen. Die Daten zoigen, dafi die
Wirkung dor Tomperatur im oinzelnen ganz ver-
schieden ist. Am starksten wird die Nitrifikation bccinfluBt.

16

Karl Viohl,

Tab. 1. EinfliiCt dor Tompo-

BelUf-

tungs-

dauer

Std.

Temper. -
Du^ch-
schaitt
(Niedrig-
ste —
hochste)
u

Versuchs-

dauer

(ohne Ein-
arbeitungs-
zoit)

Belc

schl

Wasser

(1 Std.
Absitzen)

*bt.

amm

% Organ.
Substanz/
Trocken-
Hubstanz

lyborf

schl

coin /I

schufi-

amm

mg /I

Schrift-

probo

mm

Pormp

verb

Zu-

latiE

llljr/l

Liigaiiat*

rauch

Ablauf
im;/l
("„ Ab-
iiuhmo)

1.6

(0-5)

29. 11. 33—
9. 1. 34

90,82

00,2

1,9

GO

41

.322

18!)

(11,3)

8

(2-12)

15. 11. 32—
28. 2. 33

99,23

74,0

15,0

110

130

280

128

(•■51.3)

17

(11-21)

1. 11. 32—
28. 2. 33

99,58

73,8

45,9

172

201

271

10.“>

(01,3)

26

(23—29)

18. 1. 33—
28. 2. 33

99,71

(74,7)

65,6

103

348

(IO.|)

(02,.'>)

(24—32)

1. 11. 32— !
19. 12. 32

99,53

72,1

37,5

J70

307

(97)

((.3.9)

35

(33—39)

18. 1. 33—
28. 2, 33

99,43

C7,5

(10,4)

(00)

120

277

(167)

((3,3)

45

(39—49)

8.— 28. 11.32,
31. 3.-3. 5.33

97,00

05,5

‘ 0,0

0,0

57

250

l.'iS

(38.8)

55

(5(1—58)

0. 6. 33—
28. 7. 33

(95,32)

(40.1)

0,0

0,0

49

228

217

((.«)

15

a

(5-17)

1. 3. 33—
13. 4. 33

99,10

69,1

97

185

330

103

(08,8)

4

25

(22—28)

17. 1. 34—
27. 2. 34

99,38

73,7

—

—

! 200

300

lit)

(OI.l)

Zimmertemperatur zu derselbon Zoit 7»27.

die bei 1,5® innerhalb der angewandton Beliiftungsdauer Uborliaupt nicht
crfolgte and bei 8® nur ganz schwaoh war. Das Optimum dor Witratbildung
wurde bei 26® und das der Nitritbildung bei 36® gcfunden. Oborhall) 40®
traten nur noch Spuren von Nitrit und Nitrat auf. Bei 25" wurde inuorhall)
4 Std. ebensoviel Mtrat gebildet wie bei 11® in 16 Std., so daB die Nitri-
fikation danaeh durch eine TompcraturorhShung von 11® auf 25® um olwa
das Vierfache beschleuni^ wird. Sie verlSuft also innerhalb dieses
Temperaturbereiches nach der van ’tJHoffschon
R e g e 1 , naoh der durch eine TemperaturerhShung um 10® cine Steigerung
der Eeaktionsgesehwindigkeit um das 2— Sfache eintritt. Ungofahr das
Gleiehe gilt fiir die Abnahme des A m m o n i a k - S t i c k s t o f f s zwischon
2 und 25®. Die Zunahme der Reduktion des Ammoniak-Stickstoffs, die bei
56® gegeniiber 45® erfolgte, ist physikalischer hfatur.

^ Entspreehend der waehsenden Nitrifikationsgeschwindigkeit sank mit
steigender Temperatur zunaehst der pa- Wert des gereinigton Abwassers,
um dam bei 35® wieder langsam, bei 45® starker zuzunehmen. Schrinten-
siv WM aueh die Wirkung der Temperatur auf die £ 1 a r h c i t des Wassers
(Sohriftprobe). Die Parallelitat dieser Kurve mit der fur den Mtratstick-
stoff ist auffallend.

Einflufi dor Tomporatur und dor Jahreszoil anf die Abwasserromigung. 17

ratur, chomisoho Eaton.

*) Zoliruiig iwcU 2(1 Tagon.

Ahiiliclu* Foslst(»lhingen belrelfs (icr Nitrifikatiou durch den Bolobt-
scblanjm bei v('ra(ihiodon(>n Temporaluron niacbto bereits C a m b i o r (2),
niir vorwandtc duwr oin sohr diinnos Al)wassor, so dafi bier dor Ammoniak-
Htickaioff aueh no«h bci 0** zwar langsam, inncrhalb 17 Std. abor vollstUndig
OKydiort ■wiird(*. S i (> r p (8) land das Optimum dor Nitratbildung durch
Bp|(‘l)t8chlainin bci 20". Kiir dk Nitrifikatiou im Bodon licgt die Optimal-
Tom poratur nach lintorsuchungon von Schlosing und Miintz,
L ti h u i » , von B a z o r o w s k i (4) und andoron bci etvra 30®. Die
Nitratbildung kann dort, wonn aucn langsam, noch bci 0® erlolgen, da-
gpgon ist sic oborhalb fiO® })raktisch au%ohoben.

Im Vorgloich zur Oxydation dcs anorganischen
Stickstoffs wird nun der Abbau dor organischen
Substanz durch die Tomperatur nur sehr wenig
booinflu0t. Es goht dies besondors aus dem in Abb. 1 angefiihrten
„Mittolwort“ horvor, dor das Mittcl von der prozentualen Abnahme
dcs biochomischon Sauerstoffbedarfs, dos Perman-
ganatvorbrauohes und dos organischon Stickstoffs
darstellt und oin bossoror Mafistab fiir die Abnahme der organischen Sub-
stanz ist als die Werto jedor Bestimmungsmethodc fiir sich allein. Die

Zwrtte Abt. BA. SI. 2

18

Karl Viehl,

Kurven zeigen, dafi die Wirkang der Anl^en in dieser Hinsicht zwischeii
15® und 30® praktiseh gleieh ist. Erst bei 8® und vor allem oberhalb 35®
ist ein starkerer Eiickgang zu bemerkon. Die fiir die Temporatur von 20®
und noch mehr fiir 35® ennittelten Permanganatwerte sind infolge des hoben
Mtritgehaltes des Wassers zn booh ausgefallon. Fur die Berccbnung dos
Mittelwertes wrden deshalb diese Baton korrigicrt.

Die Eeduktion des organischen Stickstoffs zeigt bci 17® cin doutliclios
Maximum, -wahrend die Kurven fiir den Permanganatverbrauch und bio-
chemischen Sauerstoffbedarf wesentlich f lacker verlaufon. Aueh S i o r p (3)
beobachtete, daB zwischen 6® und 25® die Wirkung der Tcmporatur in bezug
auf die durch den Belebtschlamm erzielte Abnabme des biochemisclien

Sauerstoffbedarfs ziemlich gering war. Im Gegensatz dazu bostand bei
% mm Versuchen, die Hatfield (6)

^ mit TropfkSrpcrn durchfiihrte,
im allgemeinen eine ParallelitSt
° zwischon der Tcmporatur dos

24Q Abwasscrs und dor erzicltcn Kc-

duktion der Sauerstoffzehrnng.
160 Dieselbe Feststollung machte
E u d 0 1 f 8 (6), und zwar warm
80 die beobachteten Untcrschiodc
ziemlich groB, was aber vielleicht
5g.° teilweise durch bcsondero Uin-

mg/, stande bedingt war. Bei der

20 ■ Bestimmung des biochemisclien

Sauerstoffbedarfs im Laborato-
rium beobachteten Green-
,2 field & Elder (7), daB der
Abbau bei 14® nur wenig lang-
8 samer verlief als bei 20®, bci (5®
war die VerzSgerung starker und
4 bei 2® wurdo erst nach otwa

65 Tagen der Wort erroicht, dor
1.S B 17 26 29 35 45 55’° 20® schoH nuch 16 Tagen

Abb. 1. vorlag. C 0 0 p 0 r (8) boobaeh-

EinfluB der Temperatur, chemisehe Daten. tete, daB die Zohrung boi 10“

lofl j 1. • langsamcr verlief als boi

18®, wahrend boi 22 und 37® die Unterschiodo ziemlich gering waren. Nach
Streeter & Phelps (9) dagegen wird zwischon 0 und 26® boioinor
Temperaturerhshung um 15® die Gesehwindigkeit der Zohrung in den crston
Tagen un^ahr verdoppelt, spater sind die unterschiedc geringer.

1 OJ.J Belebtschlammes, dor nach

1 btf Absitzen bestimmt wurde, war bei 1,5® sehr niedrig. Dieser Sohlamm
m^elt aueh verhaltnismaBig wenig organische Substanz und
ha^ erne sohwache Adsorptionskraft. Er war ziemlich dioht und feinflockig
sehnell ab. Der Schlamm von 45® hattc eine ahnlioho Be-
sehaffeMeit, wahrend der von mittlerer Temperatur viol lookorer war.
to gleichen ^ne schwankte der GehaJt an organischer Substanz, Dor
Smia^von 8® ^ beim Stehen im Brutschrank (37®) bereits nach 1 Tago
gefault, der von 26® nach 5 Tagen, wahrend dor von 45® nach 10 Tagen nwh
rnsch war. Dagegen hatte eine vortibeigehende Untcrbrechung der Bo*

%

100

80

EjinHuD tier Tomperatur und der Jabreszeit auf dia Abwafiserreinigung, 29

liiftunfi: bei dor Anlago von 29 und 36® eine viel stSrkcre ScMdigung zur
Folgp, als dies bei niedercr Temperatur der Fall war. Das ist darauf zu-
rUckzufUhren, daB, wie noeh ausgeftthrt wird, die anaerobe Zersetzung der
organisohen bubstanz im Gegensatz zur acroben durch Tcmperaturerhbliung
sehr stark beschleuuigt wird. Infolgedessen besteht bei dickem Abwasser,
das einen liohon Sauerstoffbedarf hat, im Sommer leicht die Gefahr, daB
die Faulnis die Oborhaud bekommt, worauf sehon S i e r p hinweist.

1 )ie Mengo dcs gebildetcn ttberschufischlammes nahm von
],6— 17® zu, blieb dann bis 29® ungefahr konstant und ging bei 35® wieder
stark zuriick. Bei 45® wurdc iiborhaupt koin tJberschuBsehlamm mehr ge-
bildet, und bei 55® wurde der eingebraehte Belebtschlamm sogar aufgezehrt.
Dieser Sehlaram bestand
naoh 34tagiger Vcrsuchs-
daucr zu 35,1% seiner
IVockcnsubstanz aus CaO,
das zum groBton Teil als
kohlensaurer Kalk vorlag.

Bei der Tempera-
tur von l,6®wiu-dc eine
ungcwdhnlich lange
Einarbeitungsz cit
beobaehtot. £s geht dies
aus Abb. 2 hervor, in dor
die einzelnen Funkte dor
Kurvon Durchschnittsworto
aus etwa je 10 Betriobsta^on
darstellcn. In Abb. 1 sind
ftir die Temperatur von 1,5®
die Daten der 2. (niedere
Werte) und 8. (hOheroWerte)

Wocho eingotragen. In der
8. Wocho hatton die Werte
die der Anlago von 8® bald
erroioht, wtthrond sio in der
2. Wocho um etwa ein Drittol
niedrigor warou. Tn der 9.

Wocho stUfg dann wilhrend
einer Naoht die Wassertom-

])oratur aiif 9®. Dio Loistung der Anlago ging daraullun stark zuriick. In dor
folgondon Wocho betrug bei 35 stUnd. BelUftungsdauer die Abnahme dos Mittel-
wortos nur 67,9%, wahrend sie vordem bei halb so langor Boltiftungszoit
64,7% betragen hatto, und es dauorte mohrere Woohen, bis sick die .Amlage
wieder orholt hatto. Dor gttnstigste Wart, der Uberhaujjt erreicht wurde,
betrug 68,3%. Nach don Kurven hatto dies normalerweise in der 11. Be-
triebswochc der Fall soin mlisscn, die Kurven milfiten dann annahemd
horizontal weiter laufen. Als darauf noehmals liber Nacht die Temperatur
auf 10® gosteigert wurde, ging die Abnahme des Mittelwertes bei 7% stUnd.
Belttltungsdauor auf 57,6% zuriick. Bei dem Versuch war ausgegangen
Worden von oinem Belebtschlamm, der auf Zimmertemperatur (dngcstellt
gewesen war. Als der Versuch wiederholt wurde mit einem Sehlamm, dor
vordem bei etwa 10® goarboitet hatte, betrug die Abnahme des Mittelwertes

2*

60

40

20

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0 4 11

22

3.T 41

52

(75)1009

Abb. 2. Allm&liliche Einarbeitung bei 1,5^ C.

20

Karl Viehl,

in dor 1. Woeho 53,0% in einem Falle, in einoni anderen 50,2%, wahrond
sic beim 1. Versuch mit Schlamm von Zimmertompcratnr noch iiieht
betragen hatte (Abb. 2). Ein pl6tzlichcr To m p c r a t u r a b -
fall hat also je naeh seiner Starke eineu mehr oder
weniger starken Riickgang in dor Lcistung ein or
biologischen Anlagc zur Folgc, dor sicii alliiiahlioli
■wieder toilwoise ausglcichen kaiiii. Abor aiich oine vorubor-
gehende Temperaturerhohung scheint sich nachteilig auszuwirkoii, indoiii
die Kaltebakterien, die sich herangebildet haben, toilweiso duroli Baktorion
mit einem hSheren Temperaturoptimum ersetzt werden.

Die allmahliche Einarbeitung, die bei niederer Temporaiur ohitrctou
kann, ist besonders fiir die natiirliche Sclbstroinigiing in
den Flussen von Bedeutung, da hior die Teniperatiir lango
Zeit sehr niedrig ist. Allcrdings verbleiben die Bakterion und das Plankion
in der Regel nicht so lange im Flu6, sondern werden grofitouteils bald in
das Meer abgeschwommt, so daB oine so weitgehendo Anpassung niclJt nuig-
lich ist. Gunstig wird fiir die Oxydationsvorgange bei niederer Teinporatur
auch noch der Umstand sein, daB die LSslichkeit des Sauerstoffs im Wassi'r
erhSht ist und somit ein hoheror Sauerstoffgohalt zur Verfiigung stolit,
vorausgesetzt naturlich, daB die Sauerstoffaufnahrao nicht diirch Eisbil-
dung unterbunden ist. Vielleicht ist umgekehrt der starko Riickgang der
Leistung bei hoher Temperatur wenigstens zu einem kleincn Toil eiru* Kolgo
des niedrigon Sauerstoffgehaltes. So wird nach Meyerhof (10) die
Nitratbildung schon bei einem Sauerstoff-Parlialdruck von 10% niorklieh
gehemmt.

Da die A n 1 a g e von 55® sehr schlecht arbeitete und der eingebraehie
Belebtsehlamm nach 14tagiger Botriebsdauer grOBtenteils aufgczehrt war,
wurde ein kleiner Tauchkorper aus Latten eingebaut, um so die Bilduug
eines biologischen Rasens zu ermdglichen. Doch auch dadureh trat koine
Besserung ein. Solbst bei 15 stiind. Beliiftungsdauer war der Perinanganat-
verbrauch nur um 36% reduzierl. Ein acrobor biologischer
Abbau bei hoheror Temperatur entspreeheud der
thermophilen Schlammfaulung ist also bei hliuH-
lichem Abwasser mit den bei dem Belebtschlam ni-
verfahren angewandten BelUftungsraothoden nielil
durchfiihrbar. Nun sind aber z. B. therniophilc aerobe Zelliilose-
Zersetzer bekannt (11) und Stalldiingor kann auch auf aerobein Wege bei
hoher Temperatur zersotzt werden, wie schon Doh6rain (12) uaeli-
gewiesen hat, und zwar verlSuft diese Zersetzung sehr lobhatt. Dieser Urn-
stand wird bei der HeiBver^Srung des Diingers nach Krantz (13) aus-
genutzt. Mit solchem HeiBmist^) wurde die bei 56° betriebene Anlago wiedor-
nolt beimpft, es konnte aber auch dadureh die Leistung nicht gesteigert
werden. Doch erseheint es nicht ausgesehlossen, daB bei inanchcn indu-
striellen Abw5ssem, wenn sie intensiv beltiftet werden, cine aerobe thermo-
phile Reinigung mSglich ist, zumal nach einem neuen amcrikanischon
Patent Kiarschlamm auf aerobem Wege mit Hilfe thermophiler Baktoricn
abgebaut werden kann (14).

Aus de m bei hsherer Temperatur eintretenden starken Riickgang

1) Er war uns in einem Falle von dem Institut fiir Bodonknndo der ITnivoreiiat
Leipzig zur Verfiigung gestellt worden, im andoren Falle stammto or von ohiom HoiB-
vergiuruiigsversuch von Rechengut.

EinflujQ dor Tomperatur und der Jahreszeit auf die Abwasserreinigung. 21

der Gosamtloistung goht hervor, dafi bei der biologiscben Ab-
wassorr cinigung die rein chemische Oxydation
gegcnUber dom biologisch-chemischen Abbau un-
b c (1 c ii 1 0 n d ist, da sonst die Leistimg mit steigender Temperatur
wciter zimehmoii muBto.

J)i(‘ V orauche zeigeii, daC die van ’tHoffsche Kegel auf
den at' rob on Abbau der organischen Substanz von
haualicliuin Abwasser ini allgem einen nicht ange-
■w a 11 d t w e r d c n k a n n. Eine Bereehnung des Einflusses der Temperatur
mit Uilfo dor auf diose Iiogol zuriickgehcnden Pormcn ist also nicht mdglich,
auch nicht innerhalb dcs Temperaturbereiches, der unter natiirliehen Ver-
haltnisson nur in Fragc kommt und innerhalb dessen diese Kegel bei e i n -
faehoron biologischon Vorgfingen, wie die Fntersuchungen von K a n i t z ,
Przibrani, (Jrozier, Loeb (15) u. a. gezeigt haben, gilt. Viel-
niehr wird bei dieaeni komplizierten ProzeB die Wirkung der Tem-
peratur (lurch andcre Kinflusse, auf die z. T. noch naher eingegangen wird,
niehr odor weniger libcrdeckt. Dagegen verlauft die anaerobe Zer-
Botzung dor organischen Substanz, also die Schlamm-
faiilung und die Oasbildung innerhalb 6—30® nach der van ’tHoff-
schen Kegel (Sierp, Fair & Moore [16]). Bei weitercm Tem-
peraturanstieg bleibt die Umsctzungsgeschwindigkeit bis etwa 42® ungefahr
konstant, vorausgesetzt, daB imincr auf die betrcffende Temperatur ein-
gestollter Impfschlamm in geniigender Mengc vorhanden ist, sonst tritt
oin kleiner Riickgang oin(llpukclokian [17]). Von 42—55® nimmt die
Zersetzungsgoschwindigkeit winder nach der van ’tHoffschen
liegol zu, orreicht hier ihr Optimum, oberhalb 60® geht die Leistui^ wieder
stark zuriick. Bei 55® verlauft der FaulprozeB etwa dreimal so schnell wie
bei 30® und etwa zchnmal so schnell wie bei 10®.

Ergobnissc in biologischer Hinsicht.

Die Lebewesen dcs Belebtschlammes der einzelnen Anlagen wurden
pin- bis zweinial wOehentlich nach Art und Zahl bestimmt. Die
Zaiilungeii warden wie bei den friiheren Versuchen in oiner Zahlkammer
von 50 omm Inhalt durchgofuhrt. Da der Belebtschlamm, abgcsehen von
den oxtremon Teraperaturon, sohr locker war, lieBen sich die Ciliaten und
Metazoen auf diese Weiso ohno Schwierigkeiten auszahlen. Sphaerotilus, Zoo-
gloeen, kleine Mastigophoron (vorwicgend 10—15 /t lang) und AmSben
wurden dor Mongo nach geschatzt und zwar wurde

nicht vorhandou — 0

voroinzolt (boi kloinon Mastigophoren bis etwa 10 000

im com) — 1

hAtifig (bis otwa 00 000 im com) =2

sohr haufig (bis otwa 160 000 im com) =3

stark uborwiegend (Uber 160 000 im com) .... =4

gcsetzt; daraus sind dann die in Tab. 2 fiir dieso Lebewesen eingefuhrten
Durchschnittsworto errochnct. Die iibrigen Daton in dieser Tabelle be-
zichen sich auf 1 com Wassor-Belebtschlammgemisch mit einem Schlamm-
gehalt von 15% nach 1 Std, Absitzen bei den Anlagen von 1,5 und 45® und
von 20—25% bei den iibrigon Anlagen. Die Bildung von Wand- und Boden-
schlamm, wio sio Hamburg-Eiscnberg (18) empfiehlt, wurde ab-
siehtlich vormieden, da derartiger Schlamm bei dom angewandten Ab-

Karl Viehl,

Tab. 2. Einflufi dor 'J'omporatur,

§ 1 ^

£ S'®

o

rS OJ
is

Versuchs-
dauer
(ohne Ein-

d

0)

o

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§ ft
2 §1

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ZOlt)

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boii

Arc(‘l-

I(Mi

W-P

KUuik)

< iroOo

29. 11. 33—

2,4

1,0

3,2

0,9

0

0

O

2

8

9. 1. 34

16. 11. 32—

1,4

2,4

1,3

0,5

0

0

95

t

28. 2. 33

17

1. 11. 32—

1,5

3.2

1,2

0,8

0

0

273

125

28. 2. 33

26

18. 1. 33—

0,6

3,0

1,0

0,7

0

0

210

77

28. 2. 33

29

1. 11. 32—
19. 12. 32

0,7

3,2

0,8

0,7

(20)

0

83

77

35

18. 1. 32—

0,9

2,5

1,0

0,4

0

0

2390

754

28. 2. 33

1

46

8.-28. 11. 32

0,0

(0,3)

(M)

(0,4)

0

0

(15 000

0

und 31. 3. —

Ofiiii/

3. 5. 33

kloiiio)

55

0. 5. 33—
28. 7. 33

0,0

0,0

0,0

(0,5)

0

0

0

0

wasser und der ziemlieh starkea Belastnng sehr viol Sphaorotilus onthalt
und infolgedessen von unten her, wo or festsitzt und die Luft wonig Zu-
tritt hat, trotz guter BelUftung leicht fault.

In Tab. 3 sind die beobachteten Arten zusammcngostollt, und zwar
ist prozentual angegeben, bei wieviel von den vorgenonimenon Bostim-
mungen die einzelnen Arten angetroffen wurden. Fur jede Bestiramung
wurden 2 Deckglaspriiparate durchgemustert, so daB die stlrkor vertre-
tenen Arten fast inuner erfaBt wurden.

Der Sehlamm von 1,5® enthielt nur sohr wonig (li-
1 i a t e n , hatte dagegen als einzige von der ganzon Vcrsuohsroihe rintui
sehr hohen Gehalt an kleinonMastigophoron, (lip
sieh allerdings erst nach 3 Wochen Vorsuchsdauer in starkerein MaBe (uH-
wiekelten. Babterienzoogloeon, dio auch verhftltnisniaBig stark
vertreten waren, bestanden aus groBen runden „Knollon“, wilhrend sip bei
hSheren Temperaturen eine langliehe, verzweigto Form halton. B p h ae-
ro t il u s war bei 1,5® nur sehr wenig vorhanden, or trat am starkslon bei
mittlerer Temperatnr auf; dicsor Sehlamm war domontsprochond auch am
loekersten. Schmiedt (19) dagegen berichtet, dafi bei soinen Ver-
suchen der Sphaerotilusgehalt dureh Einblasen von kalter ProBluft zunahm
und der Sehlamm sehr locker wurde. Dor Sehlamm von 8® wics
den hoehsten Gehalt an Ciliaten auf, mit steigonder
Temperatur ging dann im allgomeinen die Zahl der
Individuen zurttek. Auch S c h i 1 1 e r (20) beobaehteto, daB kaltes
Was^ (11—12®) unter seinen Versuchsbedingungen durehsehnittlich pro-
duktiver war als warmes. Es ist dies wohl eine Polge dor dureh die niodrigp
Temperatur hervorgerufenen Herabsetzung dor gesamten LobonstStigkeit,
BO daB von der gleiehen Nahrungsmenge eine grflfiere Zahl von Individuon
leben kann.

(lor loitiporutur und dor Jahreszoit atif die Abw&BSorreinigung. 23
Zahl dor Indivi(lu('u im Bolc'htsdilamm.

HyiKit

nolicn

IV'ritriciion

8uo-

Bota-

Nema-

Summe

Kloino

(Irolio

Opor-
c*u krion

Vorti-

c<»Iloii

Kpi-
Rt yhs

torion

tonon

toden

der

Ciliaton

(t

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12

0

0

4

6

386

21711

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2111

1 105

0

1

(30)

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0 p p r c u 1 a r i a herb, war die oinzige Ciliate, die bei 1,6“ noeh
in npnneiiswprtor Zahl vorkam. Bei 8® zeigte sie ein deutliehes MayiTrunn
und bei 29" war sie sehon wiedor ganz verschwundon. Ahnlich verhielten
sieli die kleinen Ifypotrichon (vorwiegend Aspidisca cost.),
llolotrichen traton dagegon erst bei 36® in stSfkereni Mafic auf. Es
lianrlelte sioh hauptsaohlich um kloino Holotrichen, sowie umParamae-
c i u ni c a u d a t u ni. Dieses scheint verhaltnismafiig unempfindlich gegen
hOhero Tempcraturen zu sein. Szalonniewiez (21) konnte cs durch
stufcnweisp Anpassung noch an 43® gewfihnen. AuBerdem wurden bei 35®
noeh Stylonichia Ilistrio, Yorticella alba und a p e r t a
sowie A in d b o n beobachlet. Die boiden lotzten Arten entwickelten sich
erst nach 6 Woehen Vorsuchsdauor, cs war also offenbar eine GewShnung
an die hohe Temperalur oingotroten. E p i s t y 1 i s trat bei 29® in grofier
Zahl auf. liotatorion wioson obonfalls boi dioser Temperatur ein
starkpB Maxiimun auf und waren bei 35® praktisch vollkommen wieder ver-
seliwunden. Auch Nomatodon and Suetorion bovorzugten mitt-
lore Temperatur.

Die Artonzahl war am hdchsten bei 26—29®, bei
welcher Temperatur die Individuonzahl schon wieder zurilckgegangen war.
Bei 36® war die Artonzahl boreits stark vermindert, und bei langsamer
Steigorung dor Temperatur trat ein weiterer Rhckgang ein. Bis zu etwa
44® wurden auBor 6—10 groBen AmSben nur 16—25 ^ grofie Holotrichen,
walirschcinlich aus dcr Familio Amphileptus, diese aber zeitweise
in sehr groBcr Zahl (bis zu 70 000 im ccm) beobachtet. Oberhalb 44®
waren nur noch vereinzelt kleine Amoeben vor-
h an don. Dio boobachteten Untersohiede in der Artenzahl sind einmal
eine dirokte Folgo dor Tomporatur. Dooh worden sie auch indirekt durch sie
beeinfluBt soin daduroh, dafi bei don verschiedenen Temperaturen die Be-

24

Karl Viohl,

schaffenheit des gereinigten Wassers vcrachieden war. Jedenfalls konntpn
wir bei noch nicht abgeschlossencn Versuchen iibcr den Einfhifi dor Be-
lastung und BeliiftnngsstSrke auf die Lcbowell des Belebtschlamnios beob-
aebten, daB guter Belebtschlamm fast itnmer mchr Artcn enthiclt als stark
belasteter.

Tabello 3. EinfluJ3 dor Temporatur, im BolobtRchlainiii boobnehtf^to AHon.

Mittlero Temperaiur 1,5®

Zahl der Bostimmungon 10

Zoogloeen 100

Sphaerotilus 100

Kleine Mastigophoren .... 100

Amoeba proteua

Amoeba verrucosa, radiosa . .

Dactylosphaerium

Hyalodiscub 80

Arcolla vulgaris

Ganz kleine Amoebeii ....

Peranema

Astrosiga

Amphimonas

Euglena

Prorodon .

Lionotus spec

Lionotus fasciola

Lionotus anser

Cbilodon oucul

Chiledon unc 10

Dysteria

Didinium

Spathidium

Ampbileptus (?)

Paramaecium (caudat., aurel.)

Balantiophorus

Cinetochilum

Glaucoma 10

Strombidium

Aspidisca cost 20

Euplotes patella

Euplotes oharon

Styloniohia

Oxytric^a

Vorticella 30

Opercularia boib. ...... 5o

Epistylis

Podophrya

Tokophrya

ISTematoden 40

Kotatorien (Rotifer, Hydatina,
Callidina, Pbilodina, Cathy-
Pna)

Obgochaeten

Zahl der beobachteten Arten
insgesamt

Zahl der beobachteten Arten im
Eurchschnitt je Bestimmung

Erst nach 5 Wochen Versuohsdauor.

8,8 12,2 12,7 (7,8)J) 1,5

Kin flu 0 (lor Ttnipoj*alur uiul dor Jahrcszeii auf die Abwasserreinigung. 25

Tab. 4. KinfluO <l(‘r Tcniporatur, Kcimzahlon dos biolo;][isch gereinigten Wassers.

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72 <MK)

81 000

74 000

100 000

(1 400 000)

(680 000)

Uic K 0 i in 7i a li 1 c n , die votn gereinigten Wasser bei verschiodenen
Bebriitungsleniiieraturcn erhalton wiirden, sind aus Tab. 4 zu ersehen.
Die libehsten Werte traten bei 1,5® anf, und zwar war bei dicser Tempe-
ratur die Keimziih], bei Ziinincrlcnipcratur bebriilct, wesentlich hoher als
bei einer IJobriltungsteiMperatur von 37®. Im Eisschrank bei etwa 2® wurden
Werle gefuncbni, die im Miltel nur um etwa 10% niedriger lagen als bei
Zimnu'rtemjieratur, doch war das Wachstum stark verzogert. Dagegcn ent-
wi(*k(>lten sicli die Keimo bei 0“ annahernd cbenso schnell wie bei Zimmer-
tempevatiir. Ks handelt sich also in der Hauptsache um echte Kalte-
b a k t e r i 0 u , die bei 0® noch gut wachsen und ihr Maximum bei etwa
35® haben. b’ast ausseliiieBlich waren cs kurze, beweglichc Stabchen, die
strong aerol) wucltsini, anf Agar weiBc, ziemlich runde JKolonion bildoten,
Zucker ((llukose, Maltose, Laktosc)') nicht vorgarten, kein Gas bildeten^)
und Mileh nic.ht koaguliertoii‘). Gelatine wurde in den meisten Fallon, aber
nicht iminer vertliissigt. Zuweilon trat schwaehe Fluoreszenz auf. Sie ahneln
also Bact. fluoroscons liquefaciens und non liquefa-
cions Howie Bact. herbicola.

Mit zunohmendcr Vorsuchstcnipcratnr gingen die Kcimzahlen dcs ge-
reinigten Wassisrs zunadist zurilck, bei 36® stiegon sie wieder etwas, und
zwar nahmen die bei einor Bobrutungstemperatur von 37® orhaltonen Werte
im Vorhaltnis besondors zu. Bei 45 und 55® wurden sohr hohe Durchschnitts-
werto der bei 37® waelisendcn Koimo gefunden, die Zahlen waren aber im
einzolnini selir schwankend. Ks ist dies wohl dadiureh zu erklaren, dafi diese
Bakterien sich im Wasser vermehrt hatten iind zusammengeballt waren.
J)ageg(‘n waren die Wortc der bei Ziramortemperatur wachsenden Keimo
viol gleichmaUigcr und niedriger; diese hatten sich also offenbar nicht im
Wasser vermehrt. Kinige Male wurde aueh zur Bestimmnng der Keimzahl
des Ablaules von dor Anlage mit 55® bei dicser Temperatur bebriitet. Es
ergabem sich dabei Werte, die im Mittol um etwa zwei JWttel niedriger lagen
als die, wolche gloichzeitig boi 37® erhalton wurden; diese waren aber auch
in diesen Fallon vcrhaltnismilBig sehr niedrig. Die Optimaltemperatur dor
moisten diescr Bakterien lag also untcr 55®.

Es goht aus don Tabollon hervor, dafi jeweils die Bakterien
im Wasser iiborwiegon, die bei dor betreffenden
Temporatur odor in dor NShe davon ihr Optimum
haben. In noch starkcrom MaBe wird das boi den Bakterien des Belebt-
schlammes dor Fall soin, da dioso langer dor betreffenden Temperatur aus-
gosetzt sind. Fiir don Abbau der organischen Substanz des hausliehen Ab-

q Diodo Angabe verdanke iolj Honm Dr. H. Q lathe, Leipzig.

26

Karl Viehl,

wasscrs, dcr durch. eine groBe Zahl von Bakterieuarten erfolgen kaun, findcn
sich offenbar innerhalb eines weiten Temperaturboreiches wirksanio Bakto-
rien, worauf der geringc EinfluB dcr Temperatur auf dicscii Vorgang zu-
rtickzufuhren sein wird. Auch Lohnis (22) wcist wiedorholt darauf bin,
daB die Temperatur auf baktcriologischo Umsctzungon bei Anwcndiuig von
Reinkulliiren einen viel grbfioren EinfluB hat, als dies in der freien Natur
bei Gegenwart eines Bakteriongcmischcs dcr Fall isl. Weiin () r c e n f i (‘ 1 d
(7) und insbesondere Streeter and Phelps (9) bei der laboratoriiiius-
milBigen Bestimmung dcs biochemischen Sauerstoffbodarfs einen starken
EinfluB dor Temperatur feststelltcn, so ist das wohl, wie schon G r e (‘ n -
field vermutet, darauf zuriickzufiihren, daB nicht geniigend auf die be-
treffende Temperatur eingostellte Bakterien vorhanden waren. ^ Im Gegen-
satz zur organischen Substanz vdrd der an organise he S tickstoff
nur durch verhSJtnismaBig wenige Bakterienartcn oxydiert; deslialb gilt
Mer die van ’t H o f f sehe Regel. Es ist auch anzunehmcii, daB der l<lin-
fluB der Temperatur auf den Abbau bestimmter organisclier Substanzen
aus Industrieabwassern, wie z. B. P h o n o 1 e , auf die auch nur woiiig
Bakterienarten eingestellt sind, sehr groB ist. Dafiir sprioht, daB in Flussen,
denen regelmaBig phenolhaltigo AbwSsser zugehen, bei Kintritt von stronger
Kalte ein starkes Anwachsen dos Phenolgehaltcs beobaehtet werden kann.

Die Einstellung des Belebtschlammes auf die vorschiedenon T<>mpera-
turen wd noch dadurch begunstigt, daB eine gowisse A n p a s s u n g s -
fahigkeit der einzelnen Bakterienarten an die
Temperatur besteht. So konnto Dioudonn4 (23) B a c t. f 1 u o r.
putidum durch langsamo Temperatursteigerung von 37® an 41,5® ge-
wQhnen. Mischustin (24) ermittelte eine stSrkere Anpassungsfflhigkcit
der nordischen Mikroflora zu einer Entwicklung bei nieckiger Temperatur
im Yergleich mit dor sudlichen und umgekehrt der sudlichen an hiihorc
Temperaturen. Und G u b i t z (26) konnte feststellen, daB bei Ksltobakterien
sich die Optimaltemperatur noch um einige Grade erniodrigen kann, wcun
man typische Khltepilze etwa 12 Generationon lang bei 0® halt. Diese An-
passuugsfahigkeit wd besonders fur die Einarbeitung dcr Anlage von 1 ,5®
von Bedeutung gewesen sein. Ivaltebaktcrien sind gorado im Wasser zahl-
reich vertreten, wie schon Forster (26) gozeigt hat. Von 20 Staminen,
die G u b i t z (25) aus Wasser isolierte, wuehsen 22 noch gut bei niodorer
Temperatur. Im ganzen konnte er 186 dorartige Stamme aus don vorschio-
densten Substraten isolieren. 48% davon wuehsen bei 37® nur noch ganz
sohwach oder uberhaupt nicht. Pur 12 Stamme wurdo cine urspriingliche
Optimaltemperatur von 15—25® ormittelt, doeh wird cs fiir miiglich ge-
halten, daB diese schon bei 12® beginnt. Rubentschik (27) fand, daB
das Temporaturoptimum von Bakterien, die auf Riesolfcldern noch bei 0
bis — 3® wirksam waren, nicht unter 20° lag. Dio Geschwindigkeit der durch
diese Bakterien durd^efiihrten Abbauprozesse (Paulnis, Harnstoffzorsotzung,
Denitrifikation, Mtritbildung) war bei dieser Temperatur geringer, als dcr
van ’tHoff schen Regel entspricht. Fur 5 bei 0® noch gut wachsondo
Bakterienstamme, die M. M ft 1 1 e r (28) isolierte, ergabon si^ zwischon 10
und 26® fiir die ktirzeste Generationsdauer Temperaturquotienten von 2 — 3,
die Teilungsgesehwindigkeit wurde also bei einer TemperaturerhBhung von
16 auf 25® noch mehr als verdoppelt. Bei 0® bildeton sie in Koinkulturen
noch deutlich aber schwach Kohlensfture und Ammoniak aus oiganischer
Substanz. P. E. B r o w n und Smith (29) bcobaehteten dagogon in go-

EiufluB dor Temporatur und der Jahreszeit auf die Abwasserreinigung. 27

frorenem Boden eine groBcreAmmoniakbildungkraft als in ungefroronem,
aiicli das Donitrifikations- und Stickstoff-Bindungsvermogen "war bei Frost
jioch betrachtlich, das Nitrifikationsvermbgen dagegen schwaeh. Audi
Schbnbrunn (30) stellte im Boden noch bei 0® eine mit der Zeit
kraftig einsetzcnde Anamoniakbildung fcst.

Fiir die 1* r 0 1 0 z 0 0 n wird die Toilungsgeschwindigkeit
(BUtschli, Woodruff und Baitsell und Michelson [3]])
und die Pulsationsfrcquonz (Kanitz, Zhainsky, Cole
[32]) bei Tcmperaturstcigcrung bis etwa 25® nach der van ’tHoff-
sehen Itegcl boschleunigt. Fur Glaucoma und Ghilodon cue.
beginnt das Optimum bereits bei etwa 20®. Nach Glaser (33) wird die
Geschwindigkeit der Vorwartsbewegung von Paramaecium durch die
Gleichung von Arrhenius:

i^/ Tx-To
Kx_„2\Tx-To

wiedergegebon, wobei ft von 6 — 35® gleich 16 000, oborhalb 15® gleich 8000
ist. In all dicsen Fallen ist eine Anpassung an die Temperatur, die aueh hior,
wio bereits erwahnt, crfolgen kann, nicht beriicksichtigt.

Bei don bcschriebonen Belebtschlammversuchon wird die bei niederer
Tompi'ratur oingotretene llemmung der Lebenstatigkeit der Protozoen noch
durch oino ErhOhung dor Individuenzahl teilweise ausgeglichen. So wurde
bei dor Anlage von 1,5® beobachtet, daB die Gesamtkeimzahl des Ablaufes
ungefahr in dom MaBe abnahm, wie sich die kleinen Mastigophoren im
Sehlamm entwickolten.

n. Einfinfi dor Jahreszeit.

t)bcr den EinfluB dor Jahreszeit waren Untersuchungen an folgenden
Anlagen durchgeftihrt worden:

1. Bolobtschlainm-Versuohsanlage I an der Loipziger Haupt-
kliivanlago. Bioso wio dio folgondo Anlage sind an anderer Stelle (34) ausftihrliob be-
flchriobon. ^Sio bostoht aus oinom 80 cbm fassenden Beltiftungsbecken mit Filter-
plattoii un<l HUhrwork, dem eixi 26 obm groBos Becken vorgesobaltet war, das zeitweise
als TaudbkOrpor, zoitweise als I. Bolobtsohlammstufe mit dom tJ^berschuSsohlamm
dor nachgoschttIt<»ton Sohlaminbolobung botrioben wurde.

2. BolobtRchlamm-yorsuohsanlage II an dor Leipzigor Haupt-
kliiranlago, bostobond aus oinom 190 obm groBon Beltiftungsbecken mit Paddelrftdern
und Kiltorplaiton, mit doin zoitweise oin 100 cbm groBes Sohlamm-Rogenorationsbecken
mit X*’il<orj>lattoii und RUbrwork verbunden war. In den beidon Versuohsanlagen
zusammon wurdon t&glich 700 bis 1100 cbm Abwasaer behandelt. Die BelOftungs-
dauor botrug i. M. otwa 0 Std., war abor im einzelnen sehr schwankend.

3. Bolobtsohlammanlago in Leipzig-Wahren. Diese be-
stand zu der Zeit, als dio Untersuchungen durchgeftihrt wurden, aus 3 je 160 cbm
groBon Beltiftungsbecken mit Filterplatten, denen 2 ebenso groBe Tauchktirperbeoken
vorgesobaltet waren. Bio Anlage hat einen Trockenwetter^ilauf von 1800 bis 2400
obm pro Tag.

4. Tropfktirperanlage in Leipzig-Leutzsoh, die 6 Tropf-
kdrper von je 900 obm Tnhalt hat. Bas Brookenmaterial ist in der Hauptsaohe Kessel-
schlaoke, z. T, auch Koks. Bei Trockenwetter werden L M. 2200 cbm pro Tag Abwasser
gcreinigt. Bio Anlage ist a. a. 0. (36) naher beschrieben.

6. Laboratoriums-Versuohsanlage nach dem Belebtsohlamm-
vorfahren. Biese war von derselben Art wie die zu den Versuchen des ersten Teiles
dieser Ar^it bonutzten. Sie wurde immor boi Zimmertemperatur betrieben, war also
nur oiner goringen jahroszeitlichen Temporaturschwankung unterworfen. Boch wurde

28

Karl Viohl,

die Anlage im Winter zeitweise et\^as starker abgokiihlt, da der Raum, in dcm sio axif-
gestellt war, Sonntags nur schwach geheizt ^uvde Dio Beluit-ungsdiiuor botrug im
ersten Jahre 0 bis 10 Std., dann 7^ Std.

Die Beobachtungon wurden durchgefiihrt vora Hcrbst 1930 bis Friih-
jahr 1933 bei den Belebtscblammanlagcn iind vom Ilerbst 1932 bis FrUii-
jaJir 1934 bei den Leutzschcr Troplkbrporn.

Die Anlagen wurden im allgeracincn nionatlich 4 () nial kontnillii'rt.
Beim Zu- und Ablauf handclt cs sieh naturlich uni zusamiiUMigoliiiriges
Abwasser, und zwar sind es, auBer bei Leutzscb und dcr Jjaboratoriiuiih-
anlage, Durchschnittsproben, die immer zu derselbcn Tagoszeit wahrond
mehrerer Stunden gesammelt wurden. Ober die Zusainmonactzung dcs lloli-
wassers zu den Anlagen 1, 2 und 5 ist a. a. 0. (36) ausfuhrlich bericlitet; das
Ton der Wahrener und Leutzscher Anlage ist von alinJicher Besclxaffenlipil,

Bei den grofien Versuchsanlagen traten wahrend der Beobachtungszeit
einige Betriebsstbrungen auf. Es konnten daher bei der Zusanimeii-
stellung der Ergebnisse (Tab. 5—7) die Daton, die mit groBter Wahrsehein-
liehkeit durch derartige TJmstande beeinlluBt waren, nieht mit venvaiidt
werden. Zuweilen war es auch aus Zcitmangel nicht mbglieli, llnlersuehnngen
in ausreichender Zahl vorzunehmen. Die Durchschnittswcrte, die nielit
genugend sicher erscMenen oder die sieh aus untereinander sehr veraeliie-
denen Einzelwerten zusammensetzen, sind deshalb in den Tabellen eiii-
geklammert.

Die Auswertung der Ergebnisse wird noch dadurch erseliwert, duB die
Konzentration des Rohwassers oinor regelmaBigeii
jahreszeitlichen Sohwankung unterworfen ist. I )er
Pennanganatverbrauch war im Mittel von 380 Bestimmungen im Sommer
urn 20% niedriger als im Winter zu denselben Probecntnahmezeiten. Der
Gehalt an Aimioniakstickstoff weist eine ahnliche Sohwankung auf. Zu-
riiekzufiihren ist (Beser Wechsel in der Konzentration auf den htiheren Heiu-
wasserverbraueh in der warmen Jahreszeit. Dieser war im Sommer (Mai
bis September) der betroffenden Jahre im Mittel um 13,6% hbher als im
Winter (Oktober bis April). Dor Abwasseranfall an der Hauptklaranluge
an je 40 Wochentagen bei Troekenwotter bestimmt — wurdo in den Monaleti
Mai bis September um 19% hcihcr gefundcn, als vom November bis Milrz.
Naeh Eigenbrodt (37) war 1920 bei 124 doutschen Stadten der gnilite
Tagesverbrauch von Reinwasser, der in die heiBosten Monato fallt, im Mitlel
imi ein Drittel hOher als der mittlero, so daB allgemein mit einer jahreszeit-
liohen Sohwankung in dcr Konzentration des Abwassors zu recbnen ist.
So berichtet Demine (38) bei dom Abwasscr dcr Stadt Moskaii von eincni
ahnliehen Wechsel der Menge und Konzentration, wio er hicr bcohachtet
wurde. Die absolute Menge dor anfallenden Sehmutzstoffe bloibt natiirlieh
annahemd dieselbe, so daB eine biologische Botriobsanlago dadurch nicht
nennenswert beeinfluBt wird. Wohl aber kOnnte diese Sohwankung auf dio
Wirksamkeit der Versuchsanlagen und der Laboratoriumsanlago einon Ein-
fluB gehabt haben, da deren Mengenbelastung im Sommer und Winter nicht
so VOTsehieden bzw. ganz gleich war.

Die monatlichen Dur^schnittswerte derWassertcmpcraturon
der emelnen ^lagen (Mittel aus Messungcn, die 2 Jahre lang zwoimal tSg-
li^ .durchgefiihrt wurden) sind aus Tab. 8 zu ersehen. Die Jahrosduroh-
schnattstmperaturen des Abwassers von 24 Klftranlagon vorscliiedenor
L&nder gibt I m h o f f (39) an. PlStzKche Schwankungen dor Rohwasser-

E influx dor Tompoiatur und der Jahroszeit auf die Abwasserreinigung. 29

tcmperaturon kommcn bpi groBcn Anlagen in der Regel nicht vor. Nur
bci eintrclendem Tauwotter odor kaltera Regen kann, venn ffir das Eanal-
netz Oeniisclit system besteht, die Temporalur schnell urn einige Grad ab-
sinkon. Als niedrigstc Teniperatur dcs Rohwassers wurde in solchcm Fall
an der Loipzigor llauptklaraukgo 6® gemessen.

Tab. 8. Tomparatiir dos Abuassors.

Monat

Laboia-

toiiuins-

VorsuchsanUgo 1

Wahren

Leutzsch

an la go

Zulauf

Ablauf

Zulauf

Zulauf

Ablauf

Januar

10,3

10,3

9,0

5,7

Fobruar

l(h3

0,0

8,3

6,0

Mars?

18,4

10,3

9,2

10,4

8,0

7,0

April

18,8

12,0

11,8

11,5

10,2

9,7

Mai

17,8

15,7

18,1

13,6

13,2

14,9

Juni

20,8

18,7

18,9

10,3

15,2

16,4

Juli

20,3

10,2

19,8

17,5

18,9

18,2

AuguHt

10,8

10,2

10,8

18,8

17,9

18,7

vSopiernber ....

17,5

17,8

18,0

17,6

16,7

10,0

Oktobor

18,8

15,6

15,5

14,6

14,3

12,1

Novoinbor ....

18,3

14,0

13,0

12,5

12,i

8,9

I )o 2 oinbor ....

18,2

11,8

10,2

10,3

10,6

6,4

Jahrowhii (‘hHchnil t

17,8

14,5

14,2

13,3

12,8

11,6

Ergobiiisse in chemischor Hinsicht.

Nach Tab. 8 sekwankt die Temperatnr des Abwassers der beobach-
teton Betriebsanlagen wahrond dcs Jahres im Monatsmittel etwa zwischen
8 und 20®. Aus Abb. J laBt sich errechnen, daB unter den dort herrsohenden
Vcrsiichsbpdingungpn cine Belebtschlammanlage boi 8® im Vergleich zu
dem, was bei 20® zu erwarten ist, in bezug auf

Abnahmo dt‘B Porinanganatvorbrauches etwa ....

Abnahnio <ioH biochoniischon Sauorstoffbedetrfes etwa

Abnabnio <lo8 organiHchon Bticksioffs etwa

Abnahmo do8 Mittolwortos otwa

Abnalimo doB AmmoniakRtickBtoffs otwa

Nitritbildung oiwa

Nitrat}>il<lung olwo

ISchr if 1 probe otva

leistel. Danaeh kann im allgemeinon die Wirkung dor jahreszoitlichen Tom-
peraturschwankting auf den Abbau der organisehen Substanz nur gering sein.
Ein starkoror EinfluB mliBte sicli da^(^on boi der Nitrifikation und der
Klarhoit des Wassers (Sohriftprobo) zeigen.

Trotzdem die Bedingungen bei den Anlagen, an denen die jahreszeit-
lichen Beobaehtungon gomacht wurdon, nicht inuner genau gleieh waren,
sind doch, wenn man die Ergebnisso nach Jahreszeiten ordnet (Tab. 5),
bei alien dioselbon Schwankungon zu bemerken,
die im groBon ganzon im orwarteten Sinne liegen
und mithin im wosentlichen als eine Wirkung der
Temperatnr aufzufasson sind. So haben alle Anlagen ftir
dieSchriftprobe und Sichttiefe des Wassers im Seiner einen
bedeutend gunstigeren Wert als im Winter. Bei der Laboratoriumsanlage
sind die Untorschiodc ontsprechond dor gloichmaBigeren Temperatur kleiner.

880 /o

96%

78%

87%

2 %

47 %

30

Karl Viehl,

Tab. r>. EinfluU <lpr Jaluos-

JcihreBzeii

Aniage

Durch-

schnitts-

tomporalur

0

Ht

% WasstT
(1 Std.
AbHiIzoTi)

Icbtschhini

Origan,
boz. auf

Abdnnipf-

Hchulo

m

Substanz

Trockcu-

tanz

Oooch-
i i<'gel

Versuchsanlage I

10,8

99,28

68,0

(80,8)

Fruhjahr

Versuchsanlago II ....

10,8

99,12

71,2

—

(Marz bis

Wahren

10,4

i)9,2«

(77,0)

(78,2)

April)

Leutzsoh

9,0

—

—

—

Durehschn. (auSer Leutzsoh)

10,7

09,23

(72,0)

(79,6)

Versuchsanlage I . . . .

18,3

73,8

Sommer

Versuchsanlage II ....

18,4

WBM

70.2

(Mai bis

Wahren

17,0

■im

KKB

78,0

September)

Leutzsoh

■91

40,3

—

Burohsclin. (auBer Loutzsch)

17,9

99,36

68,8

73,6

Versuchsanlago I . . . .

14,5

00,41

09,2

(71,0)

Herbst

Versuchsanlage II ....

14,5

t)9,46

68,7

(71,5)

(Oktober bis

Wahren

13,2

(99,38)

73,1

(78,4)

November)

Leutzsoh

12,0

—

54, (i

—

Durehschn. (auBer Leutzsch)

14,1

99,42

70,4

(73,6)

Versuchsanlage I . . . .

10,0

09,30

70,3

78,3

Winter

Versuchsanlage II ....

9,8

99,31

71,1

74,5

(Dezember

Wahren

8,8

99,00

76,5

70,2

bis Februar)

Leutzsch

7,6

—

55,3

Durehschn. (auBer Leutzsch)

9,5

09,20

72,6

77,3

Frtihjahr

Laboratoriumsanlage . . .

16,8

09,64

(«2,4)

(72,1)

Sommer

Laboratoriumsanlage . . .

19,7

66,2

72,3

Herbst

Laboratoriumsanlage . . .

16,3

99,34

07,1

74,2

Winter

Laboratoriumsanlage . . .

16,3

09,48

67,1

74,1

Die Abnahmo des Amnioniakstickstoffes ist im Winter otwas vorrinsert.
Die Nitrifikation ist bei den groBen VersuehRanlagon Bowio bci
der Wahrener Anlago auch im Sommer sohr schwaoh. Bei don Tropfkerpern
in Leutzsoh dagegen ist die Nitratbildnng selir krSftig, so daB auch ini Winlor,
obwohl die Temperatur etwas niedriger ist als in don Bolebtschlaiuni-
anlagen, noeh viel Mtrat gebildet wd; doch ist ein deutUohor lUickgang
gegeniiber dem Sommer zu bemerkon. Auch bei dem Tropfkflrpor in Leifizig-
Thekla, von dem keine iveiteren Untersuehungsdaton hier angofUhrt sind,
wrden bei mner Wassertemperatur von 6® noeh 14 mg/1 Nitralstickstoff
gefunden. Nun ist zwar die Belastung dieser beiden TropfkBrperanlagen
ni^t groB. Doch konnten mit einer Laboratoriums-Bolobtschlammanlage
bei 11® selbst bei 15 stiind. Aufenthaltsdauer trotz guter Beliiftung im Miltol
nur 6,5 mg/1 Nitratstickstoff (Tab. 1) erhalten werden. Es hat danach dwi
Attschein, als ob in TropfkSrpern, vorausgesetzt naturlioh, daB sio zweek-
maBig angeled sind, die Bedi:^ngen fur die Nitrifikation besonders gUnstig
liegen. Dieselbe Vermutnng ist auch von S i e r p (40) ausgosproohen wor-
den. Vielleicht ist das auf cine intensivore Beriihrung des Abwassers mit
der Lnft zunickzufahren. Bei der Laboratoriums-Belebtschlammanlage

EinfluC der Tomporatur und der Jahreszeit auf die Abwasserreinigung. 31

zeit, chcmiftche Daten.

Sic'ht-

ticfo

cm

Schrift-

probe

mm

Pc

ZulluO

‘rmangana

vcrbrauch

Abflufi

mg/l

L-

% Ab.
nahmo

Ammo

ZuHuIi

mg/l

niak-N

AbfluQ

mg/l

Nitrit-

N

Abflui3

mg/l

Nitrat-

N

AbfluB

mg/l

r»o

139

310

115

02,8

68

41

0,0

0,0

r>i

no

310

119

01,4

(53)

(36)

Spur

0,1

75

94

—

no

—

(fO)

46

0,1

0.5

—

118

—

90

—

36

9

0,7

18,0

05

114

mm

117

02,1

67

41

Spur

0,2

81

227

250

90

04,9

42

26

0,7

mm

74

177

2S6

89

05,2

42

27

Spur

Spur 1

00

150

—

82

—

61

37

1*6

—

172

220

78

—

4

1.5

82

185

250

89

06,0

45

30

0,8

IE 9

04

(149)

(201)

(07)

(64)

(44)

0,0

G3

(111)

(288)

(102)

(64,5)

(66)

(42)

<1,1

Spur

59

112

—

118

—

(63)

(42)

0,2

—

(145)

—

(78)

—

(10)

3,8

28,0

02

124

(290)

(100)

(66,6)

(37)

(42)

0,2

0,1

04

119

309

114

63,1

58

48

0,0

04

110

w

116

02,5

58

45

Spur

Spur

58

89

—

114

—

(72)

(53)

Spur

0,2

—

(108)

286

83

—

44

8

27.0

02

109

03

49

Spur

0,1

232

265

98

46

27

(3,6)

—

300

81

35

7

2,1

17,2

—

229

214

78

63,5

42

20

1,0

11,5

—

224

202

90

63,6

40

30

1,2

4,9

konnten wir jodenfalls foststcllen, daB die Mtrifikation durch die IntensitUt
der Beliiftimg stark boeinfluBt wird. Es mirde doshalb bei den Laborato-
riumsversuchen die Luft mittels Eotamesser kontrolliert.

Die Laboratoriumsanlage nun zeigto, trotzdem die jahreszeitlichen
Temperaturunterschiedc bier gering waren, eine Starke Periodizitat in der
Mtratbildung. Man kSnnte dies auslegcn als einen periodischon EinfluB
dor Jabroszeit, unabhangig von dor Temperato, alsFolge einerAnpassnng
dor Nitratbildner an den seit Jahrmillionen bestebenden Wecbsel der Jabres-
zeiten, wie das Lbbnis (4) und Limbaeb (41) fiir moglieb balten.
Docb ist zu beriicksicbtigen, daB bei dieser Aniage die Temperatur im Winter
vorubergebend etwas starker zuriickging und die Belastung im Sommer in-
folge der geringeren Konzentration des Ab^wassers etwas scbwacber war.
AuBerdem war bei der Aniage, die bei 26® arbeitete (Tab. 1), die Nitratbildung
gut, obwohl dieser Versuch im Winter durcbgefiihrt wurde. Es liegt also keine
Notwendigkeit zu der obigen Annabme vor, Viebnebr kbnnen die beobacb-
teten jabreszeitliehen Sebwankungen in der Nitratbildung erklart werden
durcb die Unterscbiede in der Temperatur und Konzentration des Ab-
wassers.

32

Karl Viehl,

Der Gehalt des Belebtschlammes an organise her
Substanz war im Sommer etwas niedrigor als ira Winter, beini Tropf-
kiSrperschlamm waren die Unterschiede noch grbBer. Fttr den W a s s er-
g e h a 1 1 des Belebtschlammes, der bestimmt wurdo, nachdem der Sehlatnni
1 Std. im senkrecht stohenden Zylindor abgcsctzt lialte, wiirdc' bei deu
Betriebsanlagen keine regelmaCige Schwankung getunden. liagegen s o ( z 1 e
der Schlamm in den Nachklarbeckeo wsilirend d(>r
warmen Monate, besonders im Mai, sclileelH(>r al)
als im Winter und Fruhjahr. Beider Laboratoriuinsanlage
war der Schlamm im Winter und FrUhjahr im aligemeinen etwas wasser-
reioher. An der Belebtschlammanlage in Milwaukee (42) wurde ini
Sommer ein starker Ruckgang des Wassergchaltes vom Schlamm beob-
achtet, woboi sein Gehalt an Fadenpilzen merkwurdigerweiso stark zunahni.

Fur die Abnahmc des Permanganatverbrauchos voni gi*-
reinigten Wasser bestand im Sommer und Winter prakliseh kein Unter-
schied. Dasselbe gilt fiir die Reduktion des biochemischen Sauersloff-
bedarfs, soweit Bestimmungen dariiber durchgefiihrt warden. Der aerobe*
Abbau der gelosten organischen Substanz des Ab-
wassers wird also in unserem gemaBigten Klim a
durch die Jahreszeit nicht nennonswert becinfluBt.
Daraus ist zu folgern, da6 die B e I a s t u n g s m 6 g I i c h k e i t e i n e r
Be lebtschlammanlage wahrend des ganzen Jahros
ziemlieh gleieh ist. Nur muB man damit rechnen, dafi dor Ablauf
im Winter truber ist und weniger Nitrat enthall als im Sommer.

Im ganzen sind die beobachteten jahrcszeitlichen Schwankungeti eher
noch e^as geringer, als sich aus den Temperaturditforonzen ergibl. Wahr-
scheinlich wirkt der Umstand noch ausgleichend, daC das
Rohwasser im Sommer gewShnlich starker gefault
i s t und dadurch der Reinigungsvorgang im Sommer etwas verziigert wird.
So berichtet Fries (43) von der Belebtschlammanlage in Ksseii-Helling-
hausen, daB dort im Sommer bei hoher Temperatur sogar ein gcringes Naeli-
lassen der Reinigungswirkung fostgestellt wurde, wahrend die Leistung in
dem strongen Winter 1929, als die Lufttemperatur — 20” betnig, iinvi'r-
andert war; die Wassertemperatur war damals allerdings nicht unler 8”
gesunken. In Los Angeles (44) kam os im Sommer, wenn das Ab-
wasser eine mittlore Temperatur von 35® hatte, sogar zu groBen Stiirungi'ii
der Belebtschlammanlage, wahrend diese bei Regenwetter und bei nieilriger
Lufttemperatur zufriedenstellend arbeiteto. Abhilfe konnte hier gescharCen
werden durch Vorchlorung des Abwassors im Stadtgebiet, wodurcii dieses
fnsch erhalten wurde. Auch an den Belebtschlammanlagen in K r f u r t
(48) und C 1 e V e 1 a n d (46) konnte kein schadigender EinfluB der kalteii
Jahimeit festgestellt werden. Copeland (47) beobachtote an der An-
lage in Milwaukee, daB bei kaltem Wetter der Ainmoniakgehalt nicht ab-
n^m und Mtrat nicht in neunenswerter Menge gebildet wurde. Aber die
Abnatoe der organischen Substanz war so groB, und die niedrige Temperatur
des Abwassers ermSglichte eine so groBe Sauerstoffaufnahme, daB der AbfluB
stabil war trotz der Abwesenheit von Mtraten. L e d e r e r (48) berichtet,
1* , . Viehhofabwassem dor Abbau der organischen

Sti^stoffvOTbindunpn im Gegensatz zur Oxydation des Aramoniakstoff-
stolts durch die Jahreszeit wenig beeinfluBt wurde.

Eine Heizung einer PreBluft-Belobtschlammanlago fUr hauslichos

EinfluCJ dor Tomporatur und der Jahreszeit auf dio Abvi asserieinigung. 33

Abwasaor wird also praktisch wenig Nutzen habon. In Milwaukee,
wo vorsiiclisweise cine solche eingebaut worden war, wurde sie wiedcr ent-
fernt, da kcinc Leistungsstoigerung dadurch crzielt worden konntc. Jedoch
kaiin cs vielleicht bei schwer zu behandelndem Industrieabwasscr, zumal
wonn os vorwiogend c i n c n Bcstandtcil als Veruuroinigung enthalt, vor-
toilhaft spin, dip biologische Reinigung bei hdherer Temppratur, vielleicht
sugar thprniophil vorzunehmen. Das wird besondors danu in Frage kommen,
wenn dieses schon heifi anfSllt, wie es z. B. bei Hefefabrik- und Brennerei-
abwasser dor Fall iat. So hat Eddy (49) Gerber eiabwasser bei 22® mit Belebt-
schlamm gereinigt, indcni er die eingeblasene PreBluft erhitzte, weil cr fest-
gestellt hatte, dafi dio Wirkung bei dieser Temperatur besonders gut war.
Dio Enlphonolung von Abwassern mittels Druckluft bei Temperaturen
oberhalb 70®, von denen Sehulze-Forster und Haase (50) be-
riehten, beruht nieht auf biologischen Vorgangen, sondern auf Polymeri-
sationserseheinungen und auf rein ehcmischer Oxydation. Etwaa gr6Ber
als bei Prefiluftaulagen wird der EinfluB der jahreszeitlichen Temperatur-
schwankung bei den Anlagen soin, die ausschlieBlich von der Oberflache
her durch Paddelrader u, dgl. beluftet werdpn, weil dadurch das Wasser
starker abgekiihlt wird, wahrend die Prefiluft dureh die Kompression er-
wiirmt ist. Hoch grSBer ist naturlich die Wirkung der Temperatur bei Riesel-
feldern, zumal bei diesen auch plotzliche Temporaturschwankungen auf-
treten keinnen.

Ergebnisse in biologischer Hinsicht.

Die biologischen Untersuchungen wurden in derselbcn Weisc dureh-
getiihrt wie im ersten Toil. Die Ergebnisse sind aus Tab. 6 und 7 zu er-
sehen. Von der TropfkSrperanlage wurden weniger Bestimmungen gemacht,
so daB die Daten davon hier nicht mit angefiihrt sind.

An den Daten fallt zunachst auf, daB im ganzen die durch den
Wechsel der Jahreszeiten hervorgerufone Perio-
dizitat in der Lebewolt des Belebtschlammes ent-
spreohend dor gleiehmafiigeren Umweltsbedingun-
gen (N ah rung, Temperatur, Sauerstoffgehalt) we-
sentlich geringer ist, als dies sonst in der freien
N a t u r z u b e o b a e h t e n ist. Diese Konstanz wird noch dadurch
begilnsligt, daB o h 1 o r o -
phyllhaltigo Pflan-
z e n , dio durch dio Jahres-
zeit boBondors stark booin-
fluBt werden, im Bolobt-
schlamm Uberhatipt nicht
auftreten.

Dor Gohalt dos Bolobt-
schlammes anZoogloo-
en, Sphaorotilus,
kloinon Mastigopho-
ron und Amoobon war

• 1' t. 1 • n fiD- « i. AOb. 9 . Jiimiiuu aoi tianreszeiv aiu cue z^amaer lueinen

ZlomllChgJeiChmaBlg. Auch Holotrichen und VortieeUen im BelebtacManun sowie

an der Struktur des Sphae-

Zwelte Abte Bd. 91.

auf die Wasseriexnperatur.

34

Kail Viohl,

Tab 0. EinfluB d(‘r Jahroszod,

Jahres-

ZClt

Anlage

Zoo-

gloeen

Spliaero-

tllUb

Mastigo-

phoren

Rhicc

Amoc-

bcn

)poden

At-

cchon

Hetero-

tnchen

Holoi

kloiTU*

lichen

groHc

Veisuchsanlage I .

LO

2,8

2,2

0,8

0

0

065

107

Fruhjahr

Veisuchsanlage II .

2,0

3,0

2,7

1,4

0

0

2

198

Wahren

1,2

2,0

1,6

1,3

0

0

232

0

Durehschnitt

2,6

2,2

1,2

0

0

400

102

Veisuchsanlage I .

2,4

2,8

1,7

1,5

25

25

4230

130

Sommer

Veisuchsanlage II .

2,3

2,4

1,7

1,4

0

0

18!>0

(>

Wahren

1,5

1.5

1,5

1,5

0

0

2700

80

Durchschnitt

2,1

2,2

1,6

1.5

8

8

2930

72

Herbbt

Veisuchsanlage I .

2,0

2,0

2,3

0,5

0

0

2260

4

Versuchsanlage II .

1.8

3,4

1,5

1,3

0

0

10,30

7

Wahren

1.8

2,2

1,8

0,8

> 0

0

2770

150

Durchschnitt

1,0

2,5

1,0

0,9

0

0

2020

54

Winter

Versuchsanlage I .

1,8

2,8

2,1

1,7

0

0

740

35

Veisuchsanlage II .

1,8

2.9

2.7

1,0

0

0

1 32

15

Wahren . .

1.3

1,6

1,6

1,4

0

0

380

12

Durchschnitt

1,6

2,4

2.1

1,4

0

0

1 380

21

Frubjahr

Labor. -Anlage . , .

L3

3,7

1,3

1,2

0

0

128

116

Sommer

Labor -Anlage . . .

1.7

3,3

1,3

1,6

140

! 14

1 1310

100

Herbst

Labor.-Anlage . . .

2,2

3,3

1.0

1,1

15

11

1520

130

Winter

Labor. -Anlage .

2,0

3,4

1,3

1,6

0

0

1 2(0)

47

rotilus konnten zu den verschiedenen Jahreszeiten keine regelmaBigcn Untor-
schiede festgestellt werden. Eine gleichmUBige Schwankung derlndividuon-
z a h I bei alien Anlagen wurde bei den kleinen Holotrichen und auBer-
dem, aber nicht so ausgeprSgt, bei den V o r t i c o 1 1 e n beobachtet. Dercn
Jahreskurv-en (Durchschnittswerte von den 3 Betriebsanlagen) sind in Abb. .3
wicdergegeben. Die Holotrichenkiirve geht ungefahr parallel mit dor Tein-
peraturkurvo. Dock trat eine ahnliehe, wcnn aueli schwSchore Schwankung
bei der gleichmaBiger temperiertenLaboratoriumsanlageauf; allordinga war
diese wahrend der einzelnon Jahre nieht so regelniaBig. Da mm die llolo-
trichenzahl im Winter nicht, wie es beim Nitratgehalt der Kail war, dureli
eine sehwache Heizung orhoht werden konnte (Tab. 2), aueh nicht, als der
Zulauf, um dio Sonmemrhaltnisse nidgliehst nachzuahmen, mit 20% Reiii-
wasser verdiinnt und die Anlage dementsprechend schwachcr belastet wurde,
so.handelt es sich offensichtlich um eine jahres-
zeitliche Schwankung, die unabhangig von auBeren
Faktoren ist.

_ Bei den Betriebsanlagen nahmen im Winter auBer den kleinen Holo-
trichen auch noch die kleinen Hypotrichen und 0 p e r c n 1 a -
r i e n etwas ab. Dafiir vermehrten sich zwar die V o r t i c e 1 1 e n , was
aber diesen Ausfall nicht ausgleichen konnte, so daB hier die Gesamt-
in^viduenzahl vom Sommer bis zum Fruhjahr eine regelmaBigc Abnahme
zei^. Bei der Laboratoriumsanlage dagegen nahmen die kleinen Hypo-
t r i c h e n und Opercularien im Winter zu; infolgedessen war hier

Einflufi dor Tomporatur und dor Jahre*3zeit auf dio Ab^\ aaserreinigung. 35

Zdbl doi TndiMdiion nn Bolobtscblamm.

FT j. pot

klonio

iirbon

ijjioCk*

Opel -
culai len

Per it i

Voiti-

collen

lehen

Epi-

stylis

Caiche-

%ium

Suc-
toi len

Rota-
te)! len

Noma-

toclen

Suiame

der

Cibatcn

I7b()

301

291

19(>3

0

83

1

1

14

5530

JO

0

243

1317

0

0

0

0

5

1770

400

34

472

2108

3

0

0

0

0

3250

7i>0

132

335

1800

1

28

0

0

e

3620

2000

JOO

780

1000

240

0

43

3

19

9270

700

53

130

1290

200

28

26

0

7

4280

82i)

10

1420

1210

240

0

29

30

27

0500

1190

55

780

1390

230

12

33

13

28

6680

970

75

330

1070

28

0

3

2

4

200

no

320

1580

0

0

3

5

4

3370

280

220

200

3330

50

0

0

0

35

r>oo

155

2S0

2190

20

0

2

2

14

5240

1590

140

370

2470

2

0

3

1

12

5350

70

8

120

2800

12 ,

0 1

0

0

4

3120

570

0

520

2820

0

1

0 i

0

0

740

49

340

2720

5

0

1

0

5

4200

2080

192

1085

1240

^ 0

0

4

0

58

1230

190

000

1770

280

4

12

150

140

6310

1000

140

550

1720

50

0

18

24

02

6820

2240

230

1010

1010

70

0 *

3

17

48

die Gesanitindividucnzahl ■wahrend des ganzen Jahres ziemlich konstant.
Epistylis, Suetorien und Metazoen vraren im Winter nur
in geringer Zahl, ini Sommer dagegen starker vertretcn, was nach Tab. 2 eine
Folge dor Tomporatnnintcrschiede ist.

Dor S c h 1 a ni m war in alien Fallon, aiieh bei dor Laboratoriums-
anlage, i in Sommer a r t e n r e i c h e r a 1 s i m Winter. Als
die Sonimerverhaltnisse im Laboratoriuni kunstlieh nachgeabmt wurden,
belrng die Artenzalil I-J,!! je Zahlnng, wiihrend bei der Parallelanlago untor
normalen Bedingungcn im Mittel 11,3 Arten je Zahlung gefunden wurden.
Da aueli im (‘rstcoi Versuehsteil bei 8 und 17® (Tab. 3) das Vcrhallnis der
Arteiizahlen alinlieh war wie bier bei Sommer und Winter, so scheint diese
Sehwanknng in der Hauptsaehe dureh die Tomporatur hervorgerufen
zu sein.

Wahrend bei den nicdoren und mittleren Teraperaturen im ersten Ver-
suehsteil die Individucnzahl umgekehrt proportional der Aitenzahl war,
wurden bei den jahreszeitlichen Untersuehungen im.
Sommer gleichzeitig die meisten Arten und Indi-
vid u o n gefunden. Ebcnso bcobacbtcte C r o z i c r (51) an Tropfkfirpern
bei Rhicopoden und Ciliaten ein direkt proportionalcs Verhalten der Genera
und Spezies. Die Zahl der Arten war bei seinen Untersuehungen eine lineare
Punktion des Logarithmus der ontsprechenden mittleren Zablen der Indi-
viduen.

3 *

36

Karl T 1 e h 1 ,

Tab. 7. EinfliiB der Jahreszeit, im Belebtschlamm beobachtMo Arton.

Anlage

3

Versuchs-
anlage I

2

Versuclis-
anlaeje IT

3

Wahrcn

1—3

Betriebs-

anlagon

Ourclisohn

4

Labor. -
Aula go

Jahrebzeit
(So. = Mai — Sept.)
(Wi. = Nov. — Marz)

So.

Wi.

So.

Wi.

So.

Wi.

vSo.

Wi.

So.

Wi

Zahl d. Bestimmungen

39

37

36

32

24

26

98

95

38

44

Zoogloeen

100

100

300

97

m

92

99

97

05

96

Sphaerotilus ....

98

100

100

100

96

100

98

300

300

300

Kleme Mastigophoren

98

100

100

100

100

92

99

98

100

98

Amoeben (prot., ver-

rucosa, radiosa). .

74

22

49

32

87

27

68

20

82

04

Dactylospha.eriuin .

30

27

37

(i

50

12

40

16

46

20

Hyalodiscus ....

5

19

20

34

4

38

30

29

21

6

Arcella \nilgans . .

23

0

0

0

0

0

9

0

50

31

Peranema

10

0

0

0

0

0

4

0

45

0

Afltrosiga

0

0

3

0

0

0

1

0

3

26

Amphimonas ....

10

22

40

37

10

8

26

23

10

10

Euglena

0

3

3

0

0

0

1

3

0

0

Dmobryon

18

0

3

0

0

4

8

1

3

0

Prorodon

0

0

0

0

0

0

0

0

40

23

Lionotus spec. . . .

87

97

80

34

96

54

87

(34

74

82

Lionotus fasciola . .

23

0

0

(5

8

0

11

2

24

18

Lionotus anser . . .

8

3

0

0

8

0

5

1

46

14

Cbilodon cucul. . .

20

10

0

0

0

0

8

C

32

14

Chilodon unc. . . .

20

32

6

0

8

31

12

21

24

20

Dysteria fluv. . , .

74

70

51

24

46

31

59

44

60

18

Enchelys

10

0

10

0

21

0

13

0

3

0

Didinium

0

0

0

0

0

0

0

0

8

10

Sphatidium ....

0

3

0

0

0

0

0

1

18

22

Loxophyllum . . .

3

0

0

0

0

0

0

0

0

0

Amphileptus ....

0

0

0

0

0

0

0

0

3

0

Paramaecium (cauda-

datum, aurelia)

3

8

0

0

0

0

1

3

63

61

Balaniiophorus . . .

3

3

3

0

0

0

2

3

0

2

Cinotochiluiu ....

3

0

i)

0

0

0

1

0

11

0

Colpidium

6

24

17

21

0

4

8

18

0

2

Glaucoma

3

5

5

0

0

0

3

4

0

0

Stentor Boeseli . .

0

0

0

0

0

0

0

32

7

Stentor coeruleus . .

0

0

0

0

0

0

0

0

J8

0

Spirostomum ....

0

0

0

1 0

0

0

0

0

11

0

Metopus

0

0

0

0

0

0

0

0

5

0

Aspidisca cost. . . .

92

100

63

53

87

65

83

74

68

82

Euplotes patella . .

8

5

5

9

0

0

5

6

50

25

Euplotes charon . .

26

38

3

0

0

0

11

14

8

34

Stylonicbia ....

49

69

57

15

29

10

47

33

82

93

Oxytrieha

3

0

0

0

0

0

1

0

3

2

VorticeUa

98

100

100

100

100

96

90

99

98

96

Opercularia berb. . ,

82

81

77

63

83

77

81

70

56

96

Epistylis

36

0

14

0

25

8

26

2

36

10

Carchesium ....

10

3

31

0

0

0

16

1

16

0

Einflufi dor Tompcratur und dor Jaliroszeit auf dio Abwasserreinigung. 37

Tab. 7. (Fortsetzung.)

Anlago

1

Vcrf.uoh'^-
anldco I

2

Versuohs-
anlago IT

3

Wahron

1—3

Betrieba-

anlagon

Diipchschn.

4

Labor. -
Anlage

TJahroszeit

(vSo. — Mai — S<*pt.)
(Wi. - Nov. — Mavz)

So.

Wi.

So.

Wi.

So.

Wi.

So.

Wi.

Ho.

Wi.

Zalil fl. Host nninunfion

30

37

35

32

24

2()

98

95

3S

44

Podophry.i

3S

'

10

28

0

4(>

10

37

9

21

5

Tokophrya

31

3

31

0

21

0

29

1

18

11

Acinela grandis . .

0

0

0

0

4

0

1

0

0

0

Nematodon ....
Rotatonen (Rotifer,
Hydatnia, Callidi-
na, CatJiypiia, Bra-

72

30

31

12

42

u

50

18

98

77

chionus)

25

5

0

3

54

8

24

5

70

34

Oligocliaotoii ....

Zahl dor boobaclitot.

0

0

0

0

0

0

11

0

Arton insi>(‘Hamt .
Durrhsohudt jo Ho-

m

20

28

10

23

20

39

32

42

35

st in iinunp: ....

13,0

10,0

10,7

7,3

11,3

8,0

11,7

8,9

10,5

13,0

Zusainmoi)[faSwSun&:.

Bci dor biologischen Alnvasserreiuigung verlaiift die Oxydation des
anorganiRchen Stickstoffs etwa zwischcn 2 und 25® naeh der van ’t H o f f -
sclien Kegel (KGT- Regel). Das Optimum fiir die Mtratbildung wurde bei
26®, das fiir die Nitritbildung bei 36® gefunden. In ahnlicher Weise wird
die Klarheit des biologiseh gereinigten WasRors durch die Temperatur be-
einfluiit, wofiir dor giinstigste Wert bei 29® ermittelt wurde.

Der Einflufi der Temperatur auf den Abbau der organischen Substanz
ist verhaltnismafiig achr goring. ZwiRchon 15 und 30® ist die Oxydations-
geschwindigkeit ziemlich konstant. Bei 8° trat ein schwacher Riickgang
ein, oberlialb 35® ging die Leistung stark zurtick. Eine aerobe thermophile
Abwasserreinigung konnte nichl durebgefuhrt werdon. Bei Temperaturen
nalie dem Nullpunkt war dor Abbanprozefi zunachst stark verziigert. Im
Laufe von Woehen pafite sich aber die Lebewelt des Belobtschlammes der
Kalto an, so dafi die Leistung naeh 2 Mon. niclit viol schlecliter war als bei 8®.

Der verhaltnismafiig geringe Einflufi der Temperatur auf die Oxydation
der organischen Substanz im Vergleich zu der des anorganischon Stickstoffs
wird darauf zurUckzuftthren sein, dafi die organische Substanz durch sohr
viele Bakterienarton abgebaut werden kann, so dafi sich innerhalb eines
weiten Temperaturbereiches wirksame Baktcrien dafttr finden, was bei der
Nitrifikation nicht in dem Mafie der Pall ist.

Der Wassergehalt des Bclebtsehlammes war bei mittlerer Temperatur
am hSchsten. Dieser Sehlamm enthielt auch am moisten Sphaerotilus.
Ebenso hatte er die hSchste Artenzahl der Protozoen und Metazoen, wahrond
die hSehste Individuonzahl bei niederer Temperatur bcobachtet vrardo.
Oborhalb 44® waren praktisch nur noch Bakterien vorhanden. Das Tem-
poraturoptimum der Bakterien des gereinigten Wassers lag jeweils in der
Nahe der Temperatur, bei der die Anlage betrieben worden war.

38

Karl Viehl, EinfluB der Temperalur auf dio Ab\\ dbSPrreini^ung.

Im Laufe des Jahres schwankt die Teniperatur des Kohwassera in der
Klaranlage etwa zwischen 8 und 20®. Die Konzcntration ist iin Soninier
yegen des hdhercn Eeinwasserverbrauchos schwadicr ala im Winter. Die*
iahreszeitliclien Schwankungen in der Wu'kungsweise der beobachteten
biologischen (4 Belcbtschlainm- und I Troj)fkbrj)cranlag(') waren eh(>r noch
geringer, als sich aus den Unterscliieden der Teniperatur und Ivonzentration
des Abwassors ergibt. Wahrsclieinlich wird der lieinigungsvoi’gang ini
Sommer dadui’cli etwas verzogert, dafi das XJohwasser weiiiger Mscli ist
als im Winter.

Der Wassergehalt des Belebtschlammes sowie sein (Jehalt an Sjihaerd-
tilus, Zoogloeen, kleinen Mastigophoren und Amoeben wics keine Periedizi-
tat auf. Dock setzte der Schlamm in den Nacliklarbcckcn im Sommer und
Herbst sehlechter ab als im Winter und Friihjahr. Im Sommer war sowohl
die Individuenzahl als aueh die Artenzalil der Protozoen und lletazoen des
Belebtschlammes am hSchsten. Die kleinen Holotrichen zeigten in der
warmen Jahreszeit ein starkes Maximum: dicse Sehwankuiig seheint z. T.
unabhangig von auBoren Faktoren zu sein.

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S. TH u in p r , ITntersuehungen ubor die Tibi-Garung.

39

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1925. S. 4(59.

Nachdrueh vtrhixim,

TJntersuohmigeii liber die Tibi-Garung.

V 0 r 1 a u f i g c M i 1 1 c i 1 u n g.
lAus (U'ni botanischen Institut der Universitat Bern.]

Von S. Blumer.

Mil 5 Abbildungon im Text,

Soil einigen .]alir(‘ii wird in der Schweiz und wobl auch anderswo in
vielen Familien ein nioussicrcndes JHausgotrank liergestellt. Die Garungs-
erreger sind weiBe Kornclien von iinregelmaBiger Pomi und GroBo, die etwaK
an gekochteii lieis crinnern (Abb. J). Bie verursaehen in Rohrzuckerlosungen,
denen man cinige Feigon, 'Weinbeeren und eine Zitrouenscheibe beifugt, cine
intensive Gaarung. Dioso KSrnehcn sind zweifellos mit dem von Lutz
(3, 4) beschriebenen Tibi idcntisch. Sie scheinen sebon uni 1890 in Paris
untcr der Bezeiohnung „graines vivantes" Oder Tibi bekannt gewesen zu
sein. Nach Lutz stammen die Earner aus Mexiko, wo sic auf Opuntia-
feigon vorkommen. Die Ergebnisse der Arbeiten von Lutz wurden in
die Lelir- und Handbiichor (Fuhrmann, Lafar, Handw8rtcrbueh
der Naturwissenschaften) iibemommen, doch schcuit dieser interessantc
Garungserreger in nouerer Zeit niohl mehr untcrsucht worden zu sein. Da

40

S. B 1 um e r ,

in den Tageszeitungen in letzter Zeit Artikel uber diescn GSrungaoircgcr
erscMenen, die von ganz irrigen Voraussetzungen ausgingcn, bcgann ich
vor einem halben Jahre diese GSrungserschcinungcn zii studieren, Icli
mochte nicht verfehlen, dcm Direktor dos botaniHchen Institutes, Herrii
Prof. Dr. Schopfer, fiir seine Mithilfe bci diesen Uiitcrsuclmngen, so-
wie fiir seine wertvollen Anregungen meinen besten Dank auszusprechen.
Ebenso danke ich Herrn Apotheker Dr. 0. Orogg fur die IJoscliaffung
des Materials.

Schon die oberflachliche mikroakopische Untcrsuchiing der K5rner
zeigt, daB sie aus Hefcn und Bakterien bostehen, die in einer weiBlichen
Grundsubstanz eingebettet sind. V i o 1 1 i e r (6) (offenbar in Anlebnung
an die in der Tagespresse erschionenen Angaben) betrachtet die Gnind-
substa^ der Korner als Agar. Fur diese Annahme spricht einerseits die
Eesorzin-Probe, die sowohl fur die KSrner, wie auch fiir Agar nach Hydro-
lyse eine deiitliche Eotfarbung
ergibt und ander&eits die fur
beide Substanzen positive F e h -
lingsche Reaktiou nach Hy-
drolyse und Neuti’alisation.
Diese Reaktionon kdnuen aber
nicht die Identitat bcider Siib-
stanzen bevreisen; sic zeigen nur,
daB in den Tibikornern, wie
aneh im Agar durch Hydrolyse
rednzierende Kohlehydrate ent-
stehon. BestUnde die Grund-
substanz der KSrner aus Agar, so
miiBte sich diese Substanz beinx
Erwarmen iiber 100® verfliissigen.
Das ist aber nicht der Fall. Kdr-
ner, die ini Autoklavcn 20 Min.
bei 120" gehalten wurden, ver-
anderten ihre Form und GriiBi'

. , . , , , nicht. Gegen die Annahme, daB

es sicli um .^ar handelt, spricht auch die schon von Lutz erwahnte Tal-
saehe, daB sich die Tibikorner in der Kulturfliissigkeit stark vermehren. Auch
auf den Feigen, die auf der OWflache der Kulturfltissigkeit schwimmon,
bilimn und vermehren sich die Kdrner. Diese Vermehrung erfolgt be-
sonders in den erston Tagen der Garung und macht nach Gewicht und
Volumen etwa 100% aus.

TJin einige vorlSufige Anhaltspunkto iiber die Vermehrung zu crhalten,
wiKde das feschgewioht dor KSrner vor und nach der Garung bestimnit,
indem das Wasser durch Auspressen in einem Tuche so gut als mdglich ent-
^nt wurde. Zugleich soUte durch diesen Versuch festgestellt werdon, welche
Zusatzstoffe dw gebrauchlichen Kulturfliissigkeit (Feigen, Weinbeeren,
Zitronen) fiir &e Vermehrung der Kdrner unbedingt notwendig sind. Die
^gebmsse smd aus der folgenden Zusammenstellung ersichtlieh. Obschon
das angewandte Verfahren bedeutende Fehlerquellen in sich schlieBt, er-
schemen nur die erhaltenen Zahlen doch so eindeutig, daB wohl auch
nocn auszufumende Bestimmung des Trockengewichtes kaum wesentlich
aDweicnencie Ergebnisse zeitigen wird.

Abb. Z. Tibikomer, sch^nach vergrdBert.

Uiitersuuhuiis;on uber die Tibi-Ganmg.

41

Fnschgewicht der Korner

Kaillui flugi«.iffkoit

vor

naoh

der Gamng
£?

dor G&rung

S

l(V\, Holn/nokcr, Koigoii, AVeinboeien, Zitr(»noii

49,2

SOfS

RoUvAUckor, bVigoii, V\oiu\>t'Oion, Ziiionen

49,8

10G,2

Kt)lii/uck(‘i\ Foiften, Wt^mbocien ....

50,0

107,4

10^\, Hohiyuckor, Zitronon

49,5

110,5

Holu/U(k<*r, Foigt'ii

49,4

104,9

10% Jioliiznoker, Zitionon, WciubeeuMi

49,5

49,7

10**0 Kohizurkor, Zitronen

49,8

51,3

I0**o Tiobrzucker, Wembeeron

40,4

52,6

Dip (larung war in alien Kultureu ungefahr gleich intcnsiv. Diese vor-
lanfigcn Krgobuishc zeigen, daB nur bei Zusatz von Feigen eine deutlieho
Vermplirung der Kiirner erfolgt. Zitronen und Weinbeeren werdeii offon-
bar nur zur Verbosserung dcs Goschmaekes beigegeben. In synthetischen

9 ^ m

j

wi# \

Abb. 2. Alls oinor „Einkornkullur“ onistanclone Kdmor.

Nalirliisungen konnte icli bis jetzt nie cine Vermchrung dor Kbmcr boob-
achlon. Ks wird nun Aufgabc dor woitoron Untersuchung soin, festzustcllcn,
wolcho Stoffp in dor Foigo fiir die KOrnervermohrung von Bedeutung sind.

Die Vorniohrung dor Kornor konnte auch in Vorsuchen festgestellt
wordcn, in donon die KulturlSsung nur mit cinem Korn boimpft wurdo.
Die moisten dicsor „Einkomkulturen“ miBlangon, weil offenbar durcli die
an den Fruohtcn haftenden Helen starke und storende NebengSrungen ein-
traton. In cinem Falle erhielt ich aus einer solchen Kultur naob 9 Tagen
die in Abb. 2 abgebildeten Kfirner. Audi auf diese Weise laBt sich fest-
stellen, daB eine starke Vermehrung der Substanz eintritt, was nicht denk-
bar wire, weim os sich um Agar handeln wtirde.

Dio Kornor nohmen in der Garfliissigkeit durch starke Vermehrung
der Bakterion und Helen an Gr66e zu. Ini Innern bildcn sich als Folge
dor Gfining Kohlonsaureblasen. Diese erscheinen als heller Kern und machen

42

8. B lum c r ,

das Korn spezifisch leichter, so dafi es in der Fliissigkeit schAvebt odor
schATinimt. Es scheint, dafi nun das Korn durch den Aron diesen Kohlonsilurc'-
blascn ausgeiibten Druck einfacb gespalten vrird, Avorauf die entstohendon
Tochterkdrner wieder zu Boden sinken. Bei intensiver Gening werdon die
Kiirner auch durch auBerlich anhaftende Kohlensaureblasen an die Obor-

flSche getrieben, wo sic die Kohlcnsaurc abgcbcn und sofort wieder al)-
sinken.

Die mikroskopischc Untersuchung der Korner zeigt, dafi iluH* Grund-
substanz nicht aus einer homogenen Masse bestcht, sender n aus den Sclih'iin-
kapseln eines Bakteriums. Diese Kapseln sind gerade oder AA'unnfiirmig
gebogen und erinnern in dieser Ausbildung stark an die Sehleinisclu'iden
des von Ward (7) beschriebenen B a c t e r i u in v e r ni i f o r m e ini
Ingwerbier oder auch an die Abbildungen, die L i n d n e r (2j fiir eiiu'
Giukose Hefen vergesellschaftete Fonn des Bacterium xyli-

% n u m gibt. Diese Schleinischeidon konnten bis jetzt mit dim

10 ^ gebrauchliehen Farbstoffen nicht gefarbt Averden. Nacli dem

g \><A schwach positiven Ausfall der M i 1 1 o n sehen Jieaktion Avie

iiach der oben erwahnten S' eh ling sehen
a \ Nv Probe kann man diesen Baktericnschleiiu als

\ aus Glykoproteiden bestehend betraehten

\ \ [Grogg(l)]. Das Bakteriuni erscheint in

6 , \ \ b fliissigen Kulturen als Stabchen ohne Schleiin-

\ V hullo Oder in Form voii langen leaden,

® a\ \ die durch unvollkommene Teilung

4 . \ \ /\ entstehon. Lutz (2) hat das Bak-

\ \/ terium isoliert und als Bacillus

3 • \ \ mesicanus lie-

2 \ schrieben, doch scheint

\ 'k diese Art in der neiieren

1 • \ \ bakteriologischen Lite-

\ ratur nicht nielir zu

' 2 4 ' 6 ' 8 ' w ‘ 12 ' 14 ' 16 iVtage figurieren.

Abb. 3. Zuokorvorbrauchdea Konsortiunis: a) bei normalor. Die Hofo bildotaut

b) bei auormaler Okrang. Malzagar gUt begreiizfl'

gelbliche Kolonien. Die

Zellen sind in Gr66o und Form sehr variabel. Nicht selten tritt Hyplien-
bildung auf. In den verwendeten Nahrlosungeii (Raulin, luodihzierte
Coonsche LOsung) Avird eiiio deutliche silberweifie Kalmihaut gebildet.
In Gipsblockkulturen entstehon leicht und reiclilich Askosporen ohne sicht-
bare soxuelle VorgUnge. L u t z (2) hat die Hefe als Sac c h a r o ni y c o a
Radaisii beschrieben, spater wurdo sie der Gattung Pichia zu-
gewiesen.

Die Lebensaufierungen dieses Konsortiums sind jc nach der Aktivitat
der beiden Partner sehr verschieden. Im „natUrlichen Substrat" (Rohr-
zueker mit Zusatz von Friiehten) beginnt schon naeli etwa 12 Std. eine deut-
liche Garung, die vom 2. Tage an sehr heftig ist. In einer mo^iziorten
Coonschen Lbsung (0,5®/oo Magnesiumsulfat, l,5®/oo Kaliiimphosphat,
0,5®/oo Asparagin, 10% Giukose) setzt die Garung etwas spater ein, Avird
aber dann ebenso intensiv. Nach I Woehe nimmt die Garung ab und nach
10 Tagon sind in den Glukosekulturen kaum noch Spuren von Zucker nach-
zuweisen (Abb. 3, Kurve a).

Untorsuchuntioii Uber dio Tibi-adrung.

43

Uiitcr Umstanden kann sick aber dasselbo Material unter don gleicben
Versuctsbcdingiingcn ganz abwcichend verhalten, -wie ans Abb. 3, Kurve b
liervorgcbt. Hier ist der Zuckcrvcrbrauch bedeutcnd kleiner, am 17. Tage
■warcn noth moBbare Mongon von Glukoso nacbzuweisen. In diosem Ver-
sticho Irat zuorst eine deutlicho Kabmhautbildung auf, erst naeb 5 Tagon
eni\vi(‘k('Uo sick Kohlonsaure, die in der ziemlich dicken Kakmhaut groBo
Aufwiilbungeii vcrursacktc. Die Garung war in Versuek b nic so intensiv
wie in VerKucli a. J)ie lirsache fur diese auffalligen Versehiedenheiten sind
wohl itn gegenscitigen Vorhaltnis der beiden Partner des Konsortiuras zu
suclien. Bchon Lutz beobachtete, daB die Hefe in Eeinkultur tiberkaupt
koine Garung verursacht, sondern nur eine Kakmkaut bildet. Auch in meinen
Vorsuckon mit oiner aus den Kkrnem isolierten Hefe wurde der Zucker
nicht vergoren. Wir kaben also die Ergebnissc von Versuek b wohl dahin
zu dcuton, daB das Baktc-

rium zucrst inaktiv war,
wodurch cUe Garung vcr-
hindcrt wurde. Erst im
Laufe doH Versuohcs fing
(las BaktcTium sick auch
an zu entwickeln, was sick
in sckwachor Garung und
in oinoni stilrkeren Ablall
dorZuckerkurve auswirktc.

Boim V<iru;loich dor boi-
don Kxirvoii in Abb. 3 falH
fornor auf, claB Kurvo a viol
rogolinilBigor und ausgoglioho-
nor vorlauft als Kurvo b. Dies
ist durch oino andoro Ver-
sxichsaiiordnung bodingi, TTUr
Vorsuch a wurdou groSo E r -
1 0 a in o y o r kolbon von 2
Liter Inhalt vorwendot. Dio
tagUcho Entnahuio dor Kul-
turfliisrtigkoit orfolglo durch
JEntiiahrno oinigor com mitiols
dos Moxiraotour st6rilo“, wio

Abb. 4.

or \()n H c h o p f 0 r konstmic^rt uud angewondot wurde. In Vorsuch b dagogon
vvurdtMi oinzelno Er lo nmoy or kolbon mit jo 100 com Nahrlosung vorw^ondot, wo-
bni tti(*lx natOrlich jo naeh dom Zustand© des Impfmatorials gowisso Unlorscliiodo

zwischon don oinzolnon Kolbon zoigon muBton,

Diesolben Versehiedenheiten zeigen sick auch in der Alkoholbildung.
In oiner normal garenden Kullur in der „natUrlichen Nahrlosung“ sind sekon
nach 12 Std. meBbare Mengen von Alkohol nachzuweisen. Dear Alkohol-
gokaJt stcigt dann ziemlich rogelmaBig bis auf etwa 4 Vol.-Proz. (vgl. Abb. B).
In alteren K-ulturen habe ich wiederholt iiber 7% Alkohol gefunden.

Im erwaknton Versuek b setzte dagegen dio Alkoholbildung erst am
5. Tago ein. Bis zu ^oser Zeit sekeint die Glukoso assimiliert worden zu
sein. Da dio GSrung in diesem Versucke auch spSter nie sehr intensiv war,
wurde rolativ won^; Alkohol gebildet, die letzten Bestimmungen ergaben
einon Alkokolgehalt von 2,3 Vol.-Proz, (Abb. 4), wSkrend bei normaler
Garung Bchon nack 8 Tagen Uber 4% gemessen wurden. Versucke mit der

1) 8 c h o p f 0 r , W. H., Boriohto Bohwoiz. Bot. Qesollsoh. Bd. 42. 1933*
8. 180.

44

S. B 1 n m e r ,

rasp
SAuregrad

Hefe allein in s 3 ?Titlietischen N&hrldsungen zeigten uberhaupt keine GSiung
und deshalb aucb keine Alkobolbildung.

Die TibigSrung ist mit bedeutender Saurebildung verbunden. In alteren
Kultoren nimmt diese so iiberhand, daB die Fliissigkeit ungeniefibar ■wird.
G r 0 g g (1) hat in der Garfliissigkeit Essigsaure, Milchsanre und Araeisen-
saure nachgewiesen. Durch Titration mit 0,1 n Natronlauge habe ich hi
einigen Versuchen die Menge der bestandigen und fluehtigen Saurou be-
stimmt. Die Gesamtsaure wurdo fiir die graphischc J)arstellung in don
Abb. 4 und 5 nach Janke-Zikes^) in Sauregrade umgercchnet, (i. h.
es wurde die Anzahl Kubikzentimeter n-Natronlauge borcchnet, die zur
Neutralisation von 20 com der Fliissigkeit verbraucht vdrd. Die Zunahnie
der bestandigen und fluchtigen Saure verlauft im allgcmeinen ziemlich jiar-
allel. Die fliiehtigen Sauren kommen (als Essigsaure berechnet) in Konzen-
trationen von 0,1— 0,5% vor. Abb. 4 zeigt, daB die Sauremengo mit dem
Eintritt der Garung stark zunimmt. Diese Erseheinung stinunt mit dei
Aitohoivoi-% Annahme liberein, daB die Garung uberhaupt erst durch er-
hohte Aktivitat des Bakteriums zum Durchbruch kommt.
Jedenfalls ist eine gewissc Parallelitat zwischen Saurebildung

und Garung unverkennbar.

SehlieBlieh wurdo in
einigen Versuchen die
Wasserstoffionenkonzentra-
tion auf kolorimelrischem
Wege bestimmt. In „natUr-
lichen“ 'wie auch in synthe-
tischen Nahrldsungen zeigto
sich ein starker Abfall der
ph-Werte zu Beginn dos
i^age Versuches (Abb. 4),

Abb. <5. Alkoholbildvmg (a) tuid Sauregrad (b) in der . . Hausfrauon, die
„naturli(3bea Losung". Die abzweigenden (gestrichelten Tibi vcrwenden, lassen die
resp.p'anktierten)LuuenbezeichnendieVeranderungen KulturflUSSigkeit 2 bis 4
des Alkoholgdialtes und des Saurogrados der in Tairp cSrPTi danu wirrl kio
verschloasene Flasohen abgefUllten Blussigkeit. Svt Zi ^

schlossene Flaschen abgo-
fttllt. Es wurde nun geprtift, in weloher Weise sich die in Flaschen ab-
gezo^ene Flussigkeit im Vergleich zur Ausgangskultur verandert. Die Er-
gebnisse sind in Abb. 5 dargestellt. In erster Linie fallt auf, daB der Alkohol-
gehalt auch in den Flaschen zunimmt, wenn auch etwas langsamer als in der
Ausgangskultur. Die Garung geht in den Flaschen welter, bis .der Zuckcr
verbraucht ist. Die KultiriKissigkeit ist reich an Hefen und Bakterien.
Der SauT^ad verandert sich nach dem Abfiillen in Flaschen nicht mehr
wesentlich.

Es handelt sich bei den TibikSmem sicher nicht nur um ein zufalliges
Nebeneinarndervorkommen von 2 Organismen. Wir kSnnen das Konsortiura
wohl als eine primitive Symbiose bezeichnen. "Wie bei einer eohten Symbiose
haben wir hiex ein gewisses Gleichgewicht zrwischen den beiden Organismen,
das sich in einem normalen.gleichmaBigen Ablauf der Garung zeigt. Wie
in jeder Symbiose kann das Gleichgewicht durch irgendwolche unbekannte

>)Janke-Zikos, Arbsitsmetboden der Mikrobiologie. 1928. S. 01.

UntersTichungen iiber die Tibi-Garung.

46

Ursachen zerstort warden. In unserem Falle kann eine Abweiehung in der
Aktivitat dor Bakterien cine deutliche Anderung in den Lebensaufieningen
des Konsortiums zur Folgo haben: Die Garang wird gehenunt Oder kann
iiberhaupt ausbleiben. Ob auch die Hefe einen EinfluB auf den Stoffwechsel
des Bakteriuim und damit des Konsortiums ausiibt, ist bis jetzt niehl be-
kannt, crscheint aber durehaus wahrscheinlieL

Als zweites Kritorium dor Symbiose kann man das Auftreten von
Lcbensvorgangen bczeichnen, die unter normalen Bedingungen weder beim
oinen noch beim anderon Partner vorkommen. Es gehSrt direkt in die Gat-
tungsdiagnose von P i c h i a , dafi diese Hefen nur Kabmhautbildner,
aber nicnt Garungsorroger sind. Das Bakterium muB also hier stimulierend
wirken. Es ist natiirlich gut denkbar, daB eine solche Stimulation auch
durch andere Stoffe bowirkt werden kann. Dafiir spricht die Tatsache,
daB es L u t z (3) gelang, auch in Reinkulturen der Hefe Garung zu indu-
zieren, wenn er sie in einem sehr komplexen Medium (flttssige Riibenbouillon-
gelatino) mchr odor weniger in Anaerobiose wachsen lieB. Lutz folgert
aus dieser Erscheinung, daB die Garung nur durch anaerobiotische Lebens-
weise der Hole bodingt sei. Die Rolle des Bakteriums ware also in dieser
Symbiose naoh der Annahme von Lutz eine sehr einfache. Er nimmt
an, daB die Hefe boL aerober Lobensweise den Zucker des Mediums assimiliere
und den Sauorstoff der Luft beniitze. Wird die Hefe aber durch das Bak-
terium eingehlillt und damit zur Anaerobiose gezwungen, so verschafft sie
sich nach Lutz den nbtigen Sauerstoff durch Vergarung des Zuckers.
Es rauB aber bomerkt werden, daB auch bei der (aeroben) Kahmhautbildung
immor zahlrcicho Hefezellen, die unter der kompakten Eahmhaut leben,
unter anaeroben Bedingungen stehen und trotzdem keine Garung hervor-
rufen. Versuche mit PyxogallolverschluB, die vielleicht diese Frage abklaren
kSimtcn, haben bis jetzt keine befriedigenden Resultate ergeben, da durch
den starken Sauerstoffentzug die Hefe iiberhaupt abgetbtet wurde. Nach
den neueron Ergobnissen der SymbiosMorschung muB man sich fragen, ob
bei dieser engen Vergesellschaftung der beiden Organismen wirklich nur
mochanischo Drsachen flir das Auftreten der Garung in Betracht kommen.
Es ware auch denkbar, daB durch Stoffwechselprodukte des Bakteriums
die Garungsonzyme der Hefe aktiviert werden kbnnten. Es erscheint nicht
ausgeschlossen, daB in den KSmern neben der Eahmhauthefe auch noch
andere garungso''regondo Hefe i vorhanden sind.

Wir haben endlich in der Vormohrung der Tibikbrner ein drittes Kri-
terium fur ihro symbiotische Natur. Diese Vermehrung ist als cine kon-
sortiale zu bezeichnen, da in jedem Tochterkorn beide Partner vorhanden
sind. Diese Vermehrung kann ohne weiteres mit der Propagation durch
Thallusbruchstttoke bei don Flechten verglichen werden.

Es ware interessant, fostzustellen, ob die Hefen und Bakterien des Tibi
nur im Konsortium vorkommen, oder ob es sich um weiter verbreitete Or-
ganismen handelt.

Znsanunenfassnng.

1, Die als Tibikbmer bezeichneten Glrungserreger stellen ein Kon-
sortium von Bakterien und Hefen dar. Ihre Grundsubstanz wird durch
die Schleimkapseln der Bakterien gebildet.

2. Die Kbrner vermehren sich, indem sie durch Kohlensaureblasen,
die im Innern entstehen, zersprengt werden.

46

Bucher, Institutsberichte usw.

3. Der Verlauf der Gariing wild stark durch die Anwesenlioit und Ak-
tivitM des Bakteriums bedingt. In Eeinkulturen der Hcfe schoint in
fliissigen synthetischen Medien koine ‘Garong einzutroton.

4. Das Konsortium der Tibikorner ist als eino primitive Syinbiose auf-
zufassen.

Literatur.

1, Grogg, 0., Ein interossanter OarungBorrogor. (Schwoiz. Apothokersstg.
Bd. 72. 1934. S. 231 — 233. — 2. L i n d n e r , P., Dio vermointlicho nouo Hofo Modu-
somyces Gisevji, (Ber. Dtsch. Bot. Ges. Bd. 31. 1913. S. 304 — 308.) — 3. L t z ,
L,, Recherches biologiques sur la constitution du Tibi. (Bull. Soc. Mycol. Franco.
T. 15. 1899. p. 68 — 72.) — 4. L ut z , L., Nouvelles reohorohos sur lo Tibi. (Ebonda.
1899. p. 157 — 162.) — 5. Lutz, L., Associations symbiotiques du Saccharoraycos
Radaisii Lutz. (Ebenda. T. 22. 1900. p. 96—98.) — 6. V i o 1 1 i e r , R., Mittoilungen
aus der Laboratoriumsprasds. Alkoholfreie Getr&nko. (Mitt, aus dem Gebiote dor
Lebensmitteluntersuchung und Hygiene, verbffentlidbt vom eidg. Qesundhoitsamt in
Bern. Bd. 25. 1934. H. 1. S. 59.) — 7. M a r s h a 1 1 , Ward H., The Ginger-Boor
Plant, and the Organisms composing it: a Contribution of the Study of Fermentation
Yeasts and Bacteria. (Philosoph. Transactions of the Royal Soc. London. Vol. 183,
1892. p. 126—197.)

Referate.

Bucher, Institutsberichte usw.

IMjchaelis, I., Oxydations-Reduktions-Potcntiale. Zwoi-
ter Teil der „Was s er s t o f f i o n onko nz e nt rat i o n“. 2.
Aufl. Monogr. aus d Gesamtgeb. d. Physiologic d. Pflanzen u. Tierc. Bd.
17. 269 S. Berlin (Julius Springer) 1933. Preis 18 RM., geb. 19,60 RM.

In bedeutender Erweiterung der rarsten wird in der vorliegenden 2. Auf-
lage der „Oxydations-Reduktions-Potentiale“ versuoht, eine Briicke zwi-
schen kinetischer und thermodynamiseber BetrachtungSTyeise des Stoff-
wechsels zu bauen; dabei wird zwangslaufig und in betonter Herausstellung
die Anwendungsmoglichkeit tbermodynamiseher Begriffe auf physiologischcs
Geschehen abgegrenzt.

Wie in der ersten Auflage worden im ersten Teil die thooretischen Grund-
lagen der Redoxpotentiale erortert; in Beriioksichtigung nouer Erkennlnisse
ist dioser um folgende Abschnitte erweitert: Der atoinistische Mechanistnus
der Potentialeinstellung an der revcrsiblen indiflerenlen Elektrode. Das
Grenzpotential. Semi<&inonc und zweistufigo Oxydationen. Dio matlie-
matische Analyse der zweistufigen Oxydation. Langsam verlaufendc soknn-
d&re Reaktionen. Das Verhalten irrcvcrsibel oxydierbarer Korper gegen
die indifferenten Elektroden und Betraehtungen tiber das Wesen der irtt*-
versiblen Oxydationen. Die Oxydations-Reduktionskatalysatoren. TVage
reversible Systeme.

Der z'weite Teil bebandelt die physiologiscben Anwendungen und ist
um folgende Abschnitte bereiehert: Dialursaure-Alloxan. Das Pigment
von Chromodoris. Pyocyanin. Aldehyd. Das Wesen der Grenzpotentialo in
Geweben und Zellen.

Yerf. bezeichnet selbst als den Hauptinhalt seiner Monographic das im
Rahmen der Arbeitsleistung der Zelle liegende Teilproblem, reversible cW
misebe Systeme zu suchen, die in den lebenden Organismon ilbe freie Enorgie
der Zelle fHr ihre energetische Leistung zur Verfiigung stellon. Da sowohl
die Herausstellung der Probleme wie auch ihre Behandlung in der vora Yerf.

Bucher, Institutsberiohte usw. — Allgomeiues und Methodisches.

47

bekannten griindliehen und dabei vorsiehtig kritiseb abwagenden Art durch-
geftthrt ist, kann nach der ersten das Stiidium dcr erweiterten zweiten Auf-
lagc des Werkes nicht nur dem physikalischen Chemiker, sondern auch jedem
Biologon cindringlich empfoWen warden. Dies gilt auch fiir don Bakterio-
logen, obgleLch Vcrf. wegen mangclnder eigener experimenteller Anschauung
spezioll baktcriologische Anwendungen leidor nicht aufnehmen konnto.

P f 0 i 1 (Berlin-Dahlcm).

Moliseh, Hans, Pflanzenchemie und Pflanzenverwandt-
schaft. Jena (Fischer) 1933. 318 S. 8®.

In seiner bekannten anregenden Form weist der Verf. den Systematiker
auf die bestehcnden Beziehungen zwischen Chemismus und Verwandtschaft
der Pflanzen hin. Da, wo Morphologie und Anatomie versagen, vennag
manchmal ein gemeinsamer biochemischer Zug den phylogenetischen Faden
weiterzuspinnen. Ein ausgedehntes Beweismaterial soil dartun, da6 che
Pflanze in ihrem Evolutionsgang gelegentlioh zah an bestimmten biochemi-
schen Sonderheiten festhalt, die nicht selten den Wert charakteristischer
Konstitutionsmerkmale annehmen. Dank seiner groBen Erfahrung bleibt
sich Verf. jedoch der Grenzen der biochemischen Verwandtschaftsforsehung
durehaus bewuBt und verschweigt auch die Falle nicht, wo sie versagt. Etwas
optimistisch erwartet Verf. von einem weiteren Ausbau der Methoden der
Pflanzcnanalyso oinen bedeutsamen Fortschritt dcr phylogenetischen For-
schung. Untcr dicsom Aspekt stellt sich Verf. auch positiv zur Serum-
Diagnostik ein, deren Entwicklung eingehend geschildert wird. Des weiteren
werden die Erfahrungen fiber Transplantation, Sexual- und Individualstoffo
zur Stiitzung der Forderung chemischer Verwandtschaftsforsehung heran-
gezogen. In loserem Zusammenhang hierzu stehen die Ausfiihrungen Uber
die S a c h s sche Theorie der organbildenden Stoffe, sowie der Wuchshormone.

In seinen Darlegungen bleibt Verf. auf dem Standpunkt statischer bio-
chemiseher Forschung stehen, wShrend Ref. von einem VorstoB ins dyna-
mische Gebiet des Stoffwechselphysiologisehen auch fiir die Vcrwandtschafts-
forschung neue Impulse glaubt erwarten zu kOnnen. Nicht nur was die
Pflanze an Stoffen produziert, offenbart ihre Eigenart, sondern in hdherem
MaB noch die Art, wio sic die einzelnen Stoffwechselvorgtoge dirigiert. Eine
vergloichcndo Stoffwochselphysiologie wird zweifellos tieferen Einblick in
die Eigenart der Pflanze vermitteln, als eine an der Oberflache klebendo
vcrgleichendc Biochemie. Wetzel (Leipzig).

Aligemeines und Methodisches.

Haime, R., Kontrolle und Priifung von Sterilisations-
apparaten mit Thermo cl ementen. (Ztschr. f. Hyg. u.
Imektionskrankh. Bd, 116. 1934. S. 44—66.)

Zur Bestimmung des Warmeverlaufes im Innem der Apparate genttgt
nicht das Einlegen von Maximalthormometem.. Auch Klingelthermometer
Oder Stichertsche RShrehon geben keinen brauchbaren Anhalt. Hier
befriedigt nur ein Thermoelement, wie es von K o n r i c h fiir die Sterili-
sationspraxis besonders gepriift ist. Der auf Grund dieser Forschungen
von der Fa. Lautenschlftger hergestellte Warmemesser „Dromo-
therrn" ist von K o n r i e h bereits eingehend besehrieben worden. Verf.
konnte an Hand dieses Instrumentes verschiedene wesentlichc Fehler im
Bau and im Betrieb speziell der im Erankenhaus gebrauchten Sterilisatoren
nachweisen. Rodenkirchen (KOnigsberg Pr.).

48

Allgemeines und Methodische'?.

Holopow, A. und Schkilko, I., Ein Metallexsikkator fUr An-
aerobenkulturen. (Laboratoriumpraxis. Nr. 3. 1934. S. 9— 11.)

Es wird die Einriehtung eines Kupferexsikkators beschrieben, aus wol-
chem die Luft in solchem MaBe ausgepunipt werden kann, daB keine Sauor-
Btoffabsorption durch Pyrogallol erforderlich ist.

A. IniScnecki (Leningrad).

I. G. Farbenindostrie A.-G., Verfahren zur Gewinnung von
Mikroorganismen fiir Enthaarungazwecke. (D.K.I*.
Nr. 541 831.)

Von einer Reihe von Bakterienstamnien, die von schwitzender Haut
in bekannter Weise auf verscMedenen eiweiBhaltigen Agarnahrbbdeu isoliert
■fforden waren, wurden tJberunpfungen auf sterile Epidermis, zweekmafiig
nacb Zusatz von 0,1% sek. Kaliumphosphat und 0,1% Pepton vorgenommen.
Hierbei machte sieh B a c t. o c h r a c e u m , ein auf Milchagar isolierler
Stamm, durch. energisohen Abbau der Epidermis besonders bemerfcbar. Es
wurde wiederholt auf von Gorium befreite Epidermis llbergeimpft, wodurch
seme Enzymwirkung noch erheblich gesteigert wurde. Seine onthaarende
Wirkung war den auf nicht spezifischen Nahrbdden geziichteten Baktcrien
weit tiberlegen. L i m b a c h (Leipzig).

Spenglor, 0. und Weidenhagen, E., Verfahren zur Darstellung
von Fruktose auf enzymatischeni Wege. (1).U.P.
Nr. 677 427, vom 31. 5. 1933.)

Die enzymatische Spaltung des Polysaccharids Inulin ist bisher nur
mit Ausziigen aus den Myzelien von Schimmelpilzen, wie P e u i c i 1 1 i u m
Oder Aspergillus niger, in meBbarem MaBe mBglieh geweson, und
zwar nur unter Anwendung se^ groBer Fermentmengen und sohr langer
Versuchszeiten. Nun wurde gefunden, daB das Rohrzucker spaltende Enzyni
Inulin quantitativ in Fruktose iiberftihrt, wenn man es in der geniigenden
Stfeke anwendet. Eine /d-h-Fruktosidase vom Enzymwert 380 spaltet bci-
spielsweise in einer Menge von 200 mg mehrere Gramm Inulin in 1 Tage
vollstandig in Fruktose. Das neue Verfahren eignet sich vorziiglich zur
Darstellung von reiner Fruktose, besonders well man danaeh boi Zimmor-
temperatur arbeiten kann und den sohr temperalurempfindlichen Ziiekor
in veUig farbloser Lbsung erhalt. AuBerdem findet die enzymatische Spal-
tung bereits bei einem pH von 4,7 statt, wo Zersetziingen des Zuckers, die
bei Anwendung von Sauren unvermeidlich sind, nicht eintreten. Der Zucker
ist bereits ohne Umkristallisation rein. L i m b a c li (Leipzig).

KQhl, H. und Soltau, G., Herstellung von Starke. fD.RP
Nr. 577 640, vom 1. 6. 1933.) ^

Der Fortschritt der vorliegenden Erfindung bestebt in der Verwendung
von Starke nicht hydrolytisch spaltenden Joghurtbakterien. Eine vom
Institut fiir Garungsgewerbe stammende Kultur des Bact. Delbrttckii
wde mittels eines Verstaubers in 100 g Reismehl des Handels eingespritzt.
Die so erhaltene Kultur wurde in einer Partie mit 200 com storilem Wasser
iibergossen im Itemostaten bei 40o C belassen. Es trat starko Sauerung
em. Bei mikroskopischer TJntersuchung zeigten sich augensoheinlioh abge-
ICste, d. h. verletzte Starkekbmer. Nach 24 Std. wurden 1,36% Milohsaure
titnert. Arbeitete man in gleicher Weise mit einer auf Milchzucker-Milohagar
gezdehteten Reinkultur des Joghurtbakteriums, so trat keine Sauerung mn*

AUgemeines und Methodiscbes. — Morphologie, Physiologie imd Systesaatik. 49

benatzte man jedoch eine ans Molken gewonnene Ealtur, so liefi sich nach
24 Std. eine la&f^e SSiuerung feststellen, die allerdings ^e des Sac t.
Delbrilckii nicbt erreichte. Sie betrag 0,47% Milchsaure. — Die Vor-
teile in der Benutzung des Joghurtbakteriums zur Beisstarkegewinnung
liegen also, vergliohen mit den bei gewbhnlioher Temperatnr garenden Sanren,
darin, daB eine Mektion im Betriebe leioht auszusebalten ist, weil das Bak-
terium wie auch das Baet. Delbrilckii bei verhaltnismaBig hoher
Temperatnr erst wachst und gart. Molgedessen sind die abfaUenden bzw.
anfallenden Abwasser als reine MUcksaoreeiweiJBlSsangen sebr wertvoll. Vor
dem in Brauerei- und Brennereibetrieben so wertvollen Bact. Del-
briickii haben die Joghurtbakterien den grofien Vorzug, dafi ihre Ver-
wendung zu keinem Starkeverlust fuhrt. L i m b a c h (Leipzig).

Herzberg, K., Viktoriablau zur Farbung von filtrier-
barem Virus (Pocken-, Varizellen-, Ektromelia-
und Kanarienvogelvirus). (Zentralbl. f. Bakt., Abt. I, Orig.,
Bd. 131. 1934. S. 358—366.)

Eine 3proz. L 6 simg von Viktoriablau 4E farbt in -wenigen Minuten
die verschiedenen Vira, obne dafi eine Fiderung oder Beizung notwendig
ware. Rodenkirehen (KSnigsberg i. Pr.).

Morphologie, Physiologie und Systematik der Mlkroorganismen;
Virusuntersuchungen.

Wenzl, H., Beitrage zur Physiologie von Azotobakter.
(Ostorr. Botan. Ztschr. Bd. 83. 1934. S. 67 — 61.)

Gelegentlich eines vergeblichen Versuchs, in Kulturen von A z o t o -
bacter chroococoum als Zwischenprodukt der N-Bindung Hydro-
xylamin mit Azeton abzufangen, beobaohtete Verf. schlauchartige Biesen-
zeUen, fungoide Formen, die mre Entstehung dem Einflufi des Azetons ver-
dankten. Femer beobachtete Verf., dafi Azotobacter agile den
bekannten fluoreszierenden Farbstoff nicht bildete, falls an Stelle von Man-
nit milchsaures Katrium als C-Quelle verwendet wurde.

Engel (Berlin).

Walker, B. H., Anderson, D. A. und Brown, P. E., Physiological
studies on Bhizobium. I. The effect of nitrogen
source on oxygon consumption by Bhizobium legu-
minosarum Prank. (Soil Science. Vol. 37. 1934. p. 387—402.)

Der mikromanometrisch nach der Warburg-Methode gomossene
Sauerstoffverbrauch stieg proportional der als Kulturmedium dienenden
Hefeexlraktmenge. Andere N-Quellen wie NH 4 CI, NaNOs, Hamstoff und
Alanin vermochten da^egen die Oj-Aufnahme der Bakteriumknlturen nicht
zu fSrdem. Worauf die Wirkung des Hefeextraktes zuriickzufUhren war,
ob es sich um besonders wirksame IT-Verbindungen handelte, um besondere
Vitamine Oder Wuchsstoffe, um Schwermetalle usw., konnte nicht ermittelt
werden. Zu den Versuchen dienten Beinkultuxen der EnSllehenbakterien
der Erbse. Engel (Berlin).

Bobetg, M., tJber den Erreger der Wurzelkn 6 llohen von
Alnus und denElaeagnaceen Elaeagnus und Hippo-
phaS. (Jahrb. d. wiss. Bot. Bd. 20. 1934. S. 472—492.)

Verf. kkrt die Frage, ob die Bhizothamnienbildung an der Erie, Ol-

ZweiteAbt. Bd.91. 4

50 Morphologie, Phyeiologie u. Systematik d. Mikpoorganismen; Virus-Unters.

■weide uad am Saaddorn von dem gleichen Organismus hervorgcrufen wird.
Bei A 1 a u s and obigea Elaeagaaceea siad zwei vcrschiodeno
Organismen aa der WarzeltaOllcheabilduag beteiligt. Es haadelt sich am
Strahleapilze, die vorlSafig dea Namen Actinomyces Alai bzvr.
A. Elaeagni erhaltea haben. A. A 1 a i vennag auf Elaeagaaceea
and amgekehrt A. E 1 a e a g a i aaf Erlen keinc Rhizothaninien za bilden.
Die Strahleapilze aaf Elaeagnas and H i p p o p h a c siad mitoin-
ander identiseh. Actinomyces in Symbiose mit Alans and E 1 a e -
agnaceen hat die Fahigkeit, den Laftstickstoff za bindon. In Wasser-
kaltur geben die WnrzelknSllehen keinen organisch gebandenen Sticks! off
ab. Sowohl die Erlen wie aach die ClweidengewSchse konnen sich daan ohne
■Warzelkndllchen normal entwickeln, wean gentigend Nitrate zar Verfagang
stehen. Earner (Berlin-Dahlem).

Stem, E. 0., tJber Dissoziation der taberkalSsea Bak-
terien der Fische (Bacteriam tuberealosis pis-
ciam) bei kombinierter Wirkang von Ebntgon-
strahlen, Kapfer and Gold. (Ann. de Koentg. et dc Radiol.
T. 13. Nr. 1—2. p. 44—58. 1934.)

Bei Untersachang der bakteriziden Wirkang von CUSO 4 and Aa(Sa 03 )Naj
(Sanokrisin) Tvorde festgestellt, daB Kapfersalfat starkere toxischc Wirkang
aaf ^e Bakterien aasilbt, als Sanokrisin. Bei kombinierter Wirkang von
Rontgenstrahlen and der erwahnten Salze war im Beisein von Sanokrisin
der bakterizide EinflaB starker infolge der hohen Atomzahl des Metallcs.
Rbntgenstrahlen allein tSten 34,6% der Zellen, Sanokrisin allcin 15,8%,
CaSOa allein 49,1%. Bei gleichzeitiger Wirkang von Rontgenstrahlen and
Sanotoin werden 78,5% Zellen getStet, bei gleiohzei%er Wirkang von
Strahlen and CaS 04 — 62,4%. Die erwahnten Salze wie aach die kombi-
nierte Wirkang derselben mit RSntgenstrahlen bewirken aafier Hcmmnng
der Entwicklxing der Kaltaren and teUweiser Tfitang der Zellen aach Disso-
ziation der Kaltaren der taberkalSsen Bakterien. Aas der Anfangsform R
entstehen die S- and O-Formen. Der Typas S, dessen Wachstam aaf ver-
schiedenen Nahrbfiden charakteristisch ist, zeigte karze Stabchen mit grobon
KSmem. Dieser Typas ist widerstandsfahiger gegen die Wirkang dor
Kapfer- and Goldsalze, gegen wiedcrholte Bestrahlanp; and hobo Tem-
peratar. Der Zwischentypas 0 ist nicht widerstandsfabig and ergibt nacb
wiederholter Bestrahlang oder Erwarmang den Aasgangstypas R. Vorf.
beschreibt aasfitbrlich die Formen R, S and 0 des B. tuberculosis
pisciam. A. Im§enecki (Leningrad).

Easehkin, P., Rassenbildang bei Bakterien dor Fisch-
taberkalose (Bacteriam tabercalosis pisciam) un-
ter dem EinflaB altravioletter Bestrahlang. (Ann.
de Roentg. et de Radiol. T. 13. Nr. 1 — 2 . 1934. p. 59 — 79.) [Russisch.]
Dem Stadiam der Rassenbildang ging Untersachang der bakteriziden
Wirkang der altravioletten Strahlen voraas. Es erwies sich, daB bei Be-
str^ang der Emalsion von B. tabercalosis pisciam in physio-
lo^cher NaCl-L 6 sang and Glyzerin-Boaillon nach 7 Min. Sterilisation ein-
tritt. Auf Glyzerin-Agar waren alle Zellen nach 15 Min. zerstOrt and auf
Kartoffel trat vSllige Veraichtang der Kolonien erst nach Bestrahlang
wShrend 25 Min. ein. Unter dem EinflaB altravioletter Strahlen trat Disso-

Morphoiogie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-XJnters, 51

ziation mit Bildung von S- und R-Formen ein. Charakteristisch fiir den
Typus S ist feuchtes, glattes, glSnzendes Wachstum, leichtes Emulgieren,
schwarz-violette FSrbnng der Knltur auf Kartoffel und Fleisch-Pepton-
Gelatine, zartes HSutchen, gleichmaBige Trtibung und flockiger Mederschlag
auf fliissigen NahrbSden. '!l^isch fiir die K-Form sind trockene, feinfaltige,
rauhe, graugelbe Kolonien, die sich schwer abnehmen lassen und schwer
emulgieren, feinhSckrigcs HSulchen und Fehlen der Triibung auf fliissigen
Nahrbddon. Mikroskopiseh l5Bt sich kein wesentlicher Unterschied zwischen
beiden Typen beobachten. Kulturen von gemischtem Typus sind nach An-
sicht des Verf.s nicht tJbergangsfonnen von S und R, sondem gemisohte
Kolonien. Zitr Bestimmung ihrer WiderstandsfShigkeit wurden Kulturen
beider Typen ultravioletter Bestrahlung unterworfen, femer dem Einflufi
erhShter Temperatur (45 — 60® im Verlauf von 6 — 30 Min.), dem Einfluft
von Kupfersulfat und Zink, der Kultivierung auf versehiedene NShrbSden
(24 NahrbSden). Der S-Typus erwies sich sehr widerstandsfSMg gegen die
erwahnten Einwirkungen und gibt „spontan“ keine neuen Rassen. Der
R-Typus gibt im Gogensatz hierzu unter dem EinfluB physikalischer und
chemischer Faktoren den glatten Typus, femer „spontane“ Dissoziation,
besonders bei andauemdom Kultivieren (6—8 Monate) auf Glyzerin-Bouillon
und Kartoffelbriihe. A. ImSenecki (Leningrad).

Eriwisski, A., EinfluB der RSntgenstrahlen und der
ultra violetten Strahlen auf die Entwieklung der
S a r z i n e n. (Ann. de Roentg. et de Radiol. T. 13. Nr. 1—2. 1934.
p. 80 — 92.) [Russisch.]

Bei Bestrahlung von Sarcina aurantiaoa, S. lutea und
S. urea erwies es sich, daB dieselben, bei versehiedener Empfindliehkeit
gegen ultraviolette und gegen Rontgenstrahlen, widerstandsfSMger gegen die
Bestrahlung sind als eine Anzahl anderer Bakterien. Unter dem EinfluB
der Bestrahlung verandert sich die Form der Pakete, der Umfang der ZeUen
nimmt zu und dio letzteren werden k6mig oder vakuolisiert. Wtraviolette
Strahlen hemmen die Sporenbildung der S. u r e a , stabile asporogene Ras-
sen wurden jedoch nicht gcwonnen. Neue Rassen ergab unter der Bestrah-
lung nur S. 1 u t e a , und zwar findet bei Rassenbildung Abnahme des Pig-
mentes stall. Die dutch RSntgenbcstrahlung gewonncne Rasse A bestand
aus einzolnen Zellen, die zu 2 und 4 lagen, und kurzen Ketten. Zellenpakete
fehlten und die Kultur hatte Ahnlichkeit mit Pediokokkenkulturen. Altere
Kulturen der Rasse enthielten Riesen- und Zwergformen und wiesen be-
deutende Polymorphic auf. Dio Rasse B gleicht der Rasse A. Dio Rasse C
bcsaB kein Rgment (Leukorasse) und wies schwacheres Wachstum auf.
Aus dieser Rasse wurde die hellrotlich gefarbte Rasse gewonnen. Morpho-
logisch und in betreff der Zellenbildung standen die Rassen B und G der
Rasse A sehr nahe. Die neuen Rassen sind meist nicht vSllig stabil, ihre
Dissoziation ergibt eine Anzahl neuer Formen und fiihrt oft zur RUckkehr
zur Ausgangsform. A. ImSenecki (Leningrad).

Stem, E. A. und Eriwisski, A. I., Fernwirkung von Metallen
auf Struktur und Entwicklung von Bacillus myo.
FI. (Compt. Rend. Acad. Sc. U.R.S.S. T. 2. Nr. 4. 1934. p. 254—267.)
[Russisch.]

Ein Objekttrager mit einer diinnen Schicht von erstarrtem Fleisch-

52 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorgainismen; Virua-Untera.

Pepton-Agar wurde mit B. mycoides geimpft. Der Objekttrager wurde
darauf umgewandt und auf Terschiedene Metallplatten derartig befestigt,
dafi zwischen Objekttrager und Metall ein Abstand nicbt iiber 0,5 — 0,7 mm
blieb. Die Verff. benutzten auch die Methode des hangcnden Tropfens. In
diesem Fall war der Boden der durch cinen Glasring und das Deekglas go-
bildeten Kammer aus Metall. Mittels dieser Methode wurde festgcstellt,
dafi die Femwirkung der Metalle mit sehworem Atomgewieht auf die Ent-
wicklung des Bac. mycoides cine hemmende ist. Dio StSjkc der
Wirkung ist dem Atomgewieht entsprechend Pb>Au — Pt>Mg. Unter
dem EinfluB der Metalle wird die S'^orenbildung gehcramt und os troten
stark von den normalen Zellen abweichende Involutionsformcn auf. Ver-
ilnderte Zellen findet man nur in den peripheren Teilen der Kolonien, daraus
ist ersichtlich, daB sehon einige Sehichten Bakterienzellen die Mctallwirkung
hemmen. A. ImSenecki (Leningrad).

Jexmoljewa, Z. W., Bujanowskaja, I. S. und Beljajewa, E. N., t) b c r d c u
K 0 hi enhy dr at 8 1 of f w echs el in Mischkultur cn. (Zen-
tralbl. f. Bakt., Abt. I, Orig. Bd. 131. 1934. S. 301-308.)

Die Menge der durch ein Kultur- oder Fermentgcmisch zersetzten
Maltose-Mannitmenge ist so gut wie nie gleich der Summe der Wirkungon,
die die Mikroben oder ihre Fennente in Einzelverwendung gegeniibor Maltose
Oder Mannit ausiiben. So bildeten z. B. T^husbazillcn und Staphylokokken
im Gemisch Gas, was bekanntlich bei Einzelkulturen nicht der P^all ist. —
Die Bakteriolysate (Auflosung der Bakterienkultur durch spezifischo Bak-
teriophagen, bei Staphylokokken durch Lysozym) entfalteten bei der Zer-
setzung von Mannit und Maltose und bei der Bildung von fluchtigen S9<uren
und von Gas eine erheblich starkere Aktivitat als die Kulturen derselbcn
Mikroben. Rodenkirchen (Konigsberg Pr.).

Wikullil, L. T., tJber den quantitativen Dextrosoabbau
in Coli-Paratyphus B-Mischzuchten. (Ztschr, f. Hyg.
u. Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 11 — 14.)

Fiir jeden Bakterienstamm gibt cs, wie Bail orstmalig gezeigt hat,
eine HSchstzahl von Individuen, die unter gleichen Umstandeu lebend ango-
troffen werden kfinnen. Diese HSchstzahl ist die sog. M- (maximal-) Kon-
zentration. Es hat sich abor writer ergoben, daB in Mischpopulationeu von
Keimarten, die die gleiehe M-Konzentration aufweiscn, bei glrichzeitiger
und gleichzahliger Beimpfung nicht die Summe der lebenden Zrilcn der
einzemen Arten nachweisbar ist, sondern nur diejenigo Mongo an lebenden
Zellen, wie sie der M-Konzontration der Einzolkultur entspricht. Diose bis-
her auch schon von anderer Seite festgestellte Tatsacho konnte Verf. auBor-
dem durch Priifung des Dextroseabbaues der Bakterienarten bestatigen.
Es ergab sich also dabei, daB in den Mischkulturen nicht die doppelto Menge
Dextrose abgebaut wurde, sondern nur diejonige Menge, die B a c t. c o 1 i
und Baot. paratyphi B allein zu spalten imstande sind, trotzdem
beide Arten in den MischJbilturen vorhanden und zur Entwicklung gelangen.

Rodenkirchen (Konigsberg Pr.).
Weufeld, F. und Kahn, H., Untersuchungen iiber„dirokton“
Bakterienantagonismus. (Ztschr. f. Hyg. u. Infektionskrankh.
Bd. 116. 1934. S. 95—110.)

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Milcpoorganismeii ; Viras-Unters. 53

Unter direktem Bakterienantagonismus werden Hemmungserscheinungen
verstanden, bei donen eine Beteiligung von Fermenten und Bakteriophagen
nicht erkennbar ist und bei denen die in Tieirersuchen beobackteten Eeiz-
wkungcn nicht in Frage kommen. Versuehe iiber diesen direkten Anta-
gonismus in vitro nach der Methode von Etinger-Tulczynska
zeigten deutliche Hemmungswirkungen nicht nur zwischen nahestehenden
Arten, sondcm auch selbst zwischen verschiedenen Typen der gleichen Art,
vie zwischen Pneumokokkcn versehiedener Typen und versehiedener Virulenz.
Bei geeignetem Mengenverhaltnis kann sogar ein sehr schwach virulenter
Stanun oinen hoeh virulenten in vitro wie auch in vivo unterdriicken. Die
absolute GriJfie der Einsaaten spielt dabei ebensowenig eine Bolle 'wie das
Volumen der Nahrbodenflttss^keit, es kommt fast nur an auf das zahlen-
mSJBige VerhSltnis der Einsaatmengen zueinander. Versuehe mit S- und R-
Fonnen bestatigten den eben erwahnten Fall, daB von zwei Stammen ver-
schiedener Virulenz der virulentere nicht immer der starkere Antagonist
ist. — Pseudodiphtheriebazillen werden sehr stark durch echte Diphtherie-
bazillen gehemmt, Milzbrandbazillen durch Friedlanderbazillen und
Pyoeyaneus. Diese Hemmung wurde auch beobachtet in der nach
scharfem Zentrifugieren fiber dem Bodensatz stehenden klaren Flfissigkeit
und in etwas sehwacherem Grade in dem AbguB davon, nicht aber in
Berkofeld filtraten. Die Hemmungswirkung des Zentrifugates und Ab-
gusses ist also sehr wahrscheinlich durch die immerhin (wenn auch zunachst
sparlich) noch vorhandenen lebenden Bakterien bedingt. — Die Theorie
uber den direkten Bakterienantagonismus wird abgeleitet aus den For-
schungsergebnissen von Bail und von Wikullil fiber Bakterien-
populationen. Danach beruht der Antagonismus auf der verschiedenen
GroBe der maximalen oder M-Konzentration der Bakterienarten, d. h. auf
der Zahl von lebenden Keimen, die in einem bestimmten Lebensranm im
Hbehstfall erreicht wird. LSBt man nun zwei Stamme mit wesentlich ver-
sehiedener M-Eonzentration in Mischkultur wachsen, so unterdrfickt der
Stamm mit der grbBeren M-Eonzentration den anderen, und zwar urn so
starker, je grCBcr die Differenz der M-Zahlen ist.

Rodenkirchen (ESnigsberg Pr.).
Sakamura, T. und Toshimnra, F., t!ber die Bedeutung der
H-Ioncnkonzcntration und die wichtige Rolle
ciniger Schwermetallsalze bei der Eu gelz ellbil-
dung der Asporgillen. (Journ. Faculty of Science, Hokkaido
Imp. University, Series V. Botany. Vol. 2. 1933. p. 317—331.)

In einer vorhergehonden Arbeit hatte Sakamura (ebenda Vol. 1.
1930. p. 1) die bekannte „Blasenzellbildung“ bei Aspergillus auf den
EinfluB der H-Ionenkonzentration zurfickffihren wollen. In der vorliegen-
den Abhandlung konnte aber festgesteUt werden, daB es sich hfiehstwahr-
scheinlich um eine Schwermetallwirkung handelt, die mit dem Sauregrad
der EahrlSsung in engem Zusammenhang steht. Gu-, Zn- und andere Salze
vermochten jene eigenartigen Zellbildungen hervorzurufen, die Verff. jetzt
als Eugelzellen bezeichnen. Es muBte sich um die Wirkung der Metall-
i 0 n e n handeln; denn mit abnehmender cH und infolgedessen zunehmen-
der Ausfallung der Schwermetalle nahm die Eugelzellenbildung ab. Die
frfiheren Beobachtungen mfissen auf jene Spuren von Zn usw. zurfickgeffihrt
werden, die selbst in den reinsten Chemikalien hfiufig noch enthalten sind.

Engel (Berlin).

54 Morphologte dsr MikroorgtucLisineii- — Enzymologi® nnd Bakteriophagie.

Mast, S. 0., and Pace, D. M., Synthesis from inorganic com-
pounds of starch, fats, proteins and protoplasm
in the colorless animal, Chilomonas paramae-
c i u m. (Protoplasma. Vol. 20 s, 1933. p. 326 — 358, 1 pi.)

Der farblose Flagellat Chilomonas paramaecium ent-
halt in der Regel viel StSrke und Fett, ohne Chlorophyll zu besitzen. Br
nShrt sieh nur von gelosten Substanzen. Fur den Aufbau seines Proto-
plasmas sind StickstoiK, Kohlenstoff, Sauerstoff, Magnesium, Kali und
Schwefel notwendig, sonstiges, wenn iiberhaupt, in auCerst kleinen Men^eu.
Er gedeiht in Dunkelheit ebensogut odor gar ein wenig bessor, als am Licht
und Ira.Tin bei volligem Fehlen des letzteren aus anorganischen Verbindun^cn
Kohlehydrate, Fette, Proteine aufbauen, denn er vrachst und toilt sich
freudig in steiiler Losung von MgS 04 , KjjHP 04 , NaC 2 H 302 und Glycin,
teilt sich darin bei 24° mehrmals am Tage und produziert viel Felt und
Starke. Es wird noeh eine andere Ldsung angegeben, mit dor das gloichc
erreicht wird. Stickstoff kann Chilomonas aus AnunosSuron odor Ammoniak-
verbindungen gewinnen, dagegen nicht aus Mtraton, Mtriten odor dor Luft,
KohlenstoS nicht aus Carbonaten, aber zum Beispiel aus Kohlciisaure und
Glucose. Es werden weitere Einzelheiten iiber die Ernahrung dos Flagellaton
mitgeteUt. K. F r i e d o r i c h s.

Enzymologie und Bakteriophagie.

Haehn, H. und Leopold, H., Zum weiteren Ausbau unsorer
Kenntnisse tiber die Hefeautolyse. (Wochonschr. f.
Brauerei. Bd. 61. 1934. S. 97—100.)

Der AuflosungsprozeB beginnt bei glykogenhalt^er Hefe zunSchst mit
einer alkoholischen Selbstgarung, spftter erst reagieren die verdauenden
Enzyme aus der Gruppe der Papainasen. ZunSchst werden die hoehmole-
kularen EiweiBstoffe von den Proteinasen der Hefe in Polypeptide ver-
wandelt. Dann erfolgt der Angriff der Polypeptidasen, die Zorlogung dor
niederen Polypeptide zu Dipeptiden, worauf die Dipeptidasen die Amino-
s&uren liefern. Man gelangt also dureh einen dreiphasigon ProzoB mit Hilfo
dreier Enzymgruppen von scharf getrennter SpezifitSt zu don niedrigston
Bausteinen der EiweiBstoffe. Neben den erwahnton AbbauvorgSngen gohon
aber auch noch andere Umsetzungsprozesse vor sich, worauf schon die Tat-
sache schlieSen laSt, daS mit der Autolyse cine Sauorung verbundoii ist.
Zu erwShnen ist hier der Abbau der Hukleino und Nnkleinsaurou. Dioso
S&urebildung im Yerein mit sterilem Arbeiten verhindort auch das Auf-
kommen von Faulnisbakterien bei der Autolyse. Dioso kommon erst auf bei
Anwendung uniichtiger Temperaturon, dureh Alkalisierung odor TJnsaubor-
keiten. Die Bakterien bilden dann unangenehmc Faulnisgeruchstoffe und
geffthrliche EiweiBgifte. Aus dem Cystin, das bis zu 2% in der Hole ont-
halten ist, werden Schwefelwasserstoff und Merkaptano entbundon, das
T^to^han liefert die bekannten Indolderivate, in erster Linie Skatol.
Die beim EiweiBabbau gefundenen Bakterien gehSren der Typhus- und
Paratyphusgruppe an. HeuB (Berlin).

Bach, A., lermoljewa, L. und Stepanjan, M., Bindung des froien
Stickstoffes bei gewShnlicher Temperatur und
gewbhnlichem Luftdruck dureh Enzyme aus Stick-
stoff bindenden Bakterien. (Compt. Rend. Acad. So. do
U.R.S.S. T. 1. Nr. 1. 1934. p. 22 — 24.) [Russisch.]

llnzjittologie wd Bakteriophagie.

55

Es warde die biologisclie Synthese des Ammoniaks dureh A z o t o -
bacter chroocoocuia erforscht. Derselbe wurde auf einem Nabr-
boden, der auf ein Liter 0,2 g KgHP 04 und 20 g Mannit oder Glukose ent-
hielt, kultiviert. Der Nahrboden warde auf mit CaCOs bestreute Gelplatten
gegossen. Die Kolonien des Az. ehroococcum warden nachher mit
sterilisiertem Quarzsand verricben und mit der Buchner sehen Presse
ausgepreBt. Dio Halfte des Saftes wurde durch dieChamberland sche
Kerze L m filtriert, die andere HAlfte pasteurisiert. Zu den Versuehen
dor enzymatisehen Bindung des Stickstoffes warden 5 com Saft, 22,6 com
Iproz. Mannit oder GlukoselSsung und 22,5 ccm PhospbatlSsung ph 7,2
genommen. In den KontroUversuchen wurde Zucker durch Wasser ersetzt.
In der Lbsung wurde der Anfangsgehalt des Ammoniakstickstoffes und des
Gesamtstickstoffes bestimmt und diese Untersuehungen weiterhin nach be-
stimmten Zwchenraumen wiederholt. Jede Probe wurde auf ihre Sterilitat
gepriift. Mittels dioser Methode gelang es Verff. festzustellen, daB der aus
Az. chroococcum ausgepreBte Saft fahig ist, Ammoniak zu syntheti-
sieren. Zugabe ron Mannit zum Bakteriensaft erhSht die Menge des ge-
bundonon Stiekstoffs, im Vergleioh zur Kontrolle um das 15faehe. Zugabe
von Glukose um das lOfaehe. Das Ammoniak ist fast das einzige Produkt
der Stickstoffbindung durch die Enzyme. Der filtrierte Saft wirkt starker
als der pasteurisierte. Wahrend in lebenden Kulturen auf 1 g Glukose 0,0025
bis 0,016 g gebundener Stickstoff gefunden wird, geben Versuche mit aus-
gepreBtem Saft auf 1 g Glukose 0,276 g Gesamtstickstoff, darunter 0,223 g
Ammoniakstickstoff. Gleichzeitig studieren die Verff. Bakterien, die molb-
kularen Wasseistoff als Energiequelle ausniitzen. Vielleicht kbnnte es ge-
lingen, durch Mischung der Enzyme dieser Bakterien mit Azotobakter>
enzymen aus emer Mischung von Lult mit Wasserstoff im UbersehuB Am-
moniak zu gewinnen. A. ImSenecki (Leningrad).

Nadson, G. und Stem, E., Wirkung der ultravioletten,
Ebntgen- und der Eadiumstr ahl en auf die Amy-
lase. (Ann. de Eoentg. et de Eadiol. T. 13. Nr. 1 — 2. 1934. p. 35 — 43.)

Auf Starkeagar in Petrischalen wurde Amylase aufgetragen. Die
Schalen warden mit einem Pappdeckel mit ausgesehnittenem Ereuz bedeckt.
Verff. stellton boi Bestrahlung dor Schalen mit ultravioletten Strahlen und
nachfolgondcr Bearbeitung der Agaroberflache mit Jod fest, daB die Amy-
lase nach Bestrahlung im Verlauf von 20 Min. zerstbrt wird, indem bei er-
wahnter Bearboitung stets oin dunkelblaues Kreuz auf blaBgelbliohem
Grunde horvortrat. Bei vorheriger Bestrahlung nur des Permeates noit
ultravioletten Strahlen trat nach 15 Min. gleichfalls seine Inaktivierung ein.
Ebntgenstrahlen iibon auf die Amylase sehx schwaohe Wirkung aus. Sekun-
dare Ebntgenstrahlen (Blei als Eadiator) zerstbren indes die Amylase und
Starke gibt bei Jodbearbeitung blaue FUxbung. Eadon in Dosen von
2,38 me, (24 Std.) bis 6,6 me. (48 Std.) inaktiviert gleichfalls Amylase. Alle
Veranderungen der Jodfarbung des Starkeagars hangen nicht, wie durch
entsprechende Untersuehungen fesIgesteUt wurde, von Veranderungen der
Starke selbst durch die Bestrahlung ab. A. I m S e n e c k i (Leningrad).

Miwa, 1. und Voshii, S., 'O'ber die Bildung der Urease bei
Aspergillus niger. (Science Eeports Tokyo Bunrika Da%aku.
Section B. Vol. 1. 1934. p. 243.)

56 Enzymologie uad Bakteiiophagie. — Mikiobiologie der Nahrungsmittel.

Entgegen anderer Ansicht konnte gezeigt werden, dafi der Pilz in seinom
Myzel Urease bilden und gleiehzeitig Harnstoff in die Kulturl6sung
ausseheiden kann. Zucker- und Fettzusatz fordorten die Bildung der Urease,
wobei die Hamstoffabscheidung nachliefi. Die Aktivitat der Urease war in
hohem Mafie von der H-Ionenkonzentration abhSngig, indem sie niit zu-
nelunenden SSuregraden ebenfalls zunahm. Diese Abhilngigkcit war nicht
bei KNOi als N-Quelle zu beobachten. Nach Vcrbrauch des Zuckers sown*
mit dem Altem des Pilzes nabm die Ureasebildung wieder ab.

Engel (Berlin).

Mikrobiologie der Nahrungs>, GenuB- und Futtermittel.

Seidel, F. und Heller, R., Verfahren zum Entkeimcn und
Haltbarmacben von fliissigen Nahrungsmitteln.
(D.R.P. Nr. 671 024, vom 23. 2. 1933.)

Die Erfindung betrifft ein Verfahren und die dazugehdrige Vorrielitung
zum En&eimen und Haltbarmacben verschiedencr fliissiger Nahrungsmittel,
z. B. Miloh, Wein, vegetabilische Ole, unter Vermeidung nachteiligor Vcr-
Snderungen, wie sie die bekannten Verfahren mit sich Mngen. Das Ver-
fahren beruht in der gleichzeitigen Einwirkung einer stillen elcktrischen
Entladung im luftverdunnten Raum und eincs magnetischen Kraftfeldcs,
wobei darauf zu achten ist, daB eine die Milch schadigendo Temperatur von
etwa 63® nicht erreicht werden darf. Mittels der bcschriebenen Molhode
wird Milch so konserviert, daB ihre natiirliche Zusanunensclzung unter
Abtdtung schadlicher Eeime vollstandig erhalten bleibt; auch wird dor
Vitamingehalt in keiner Weise ungiinstig beeinfluBl. Genaue Angabo dor
verwendeten Apparatur nebst Arbeitsvorschriften siehe Originid-Patentsehrift.

L i m b a c h (Leipzig).

Fromray Parent Cy., Verfahren und Vorrichtung zum
Frischhalten von Milch. p.R.P. Nr. 674 703, vom 19. 4. 1933.)

Nach dem Verfahrp wird die Milch mit ultravioletten und ultraroten
Slrahlen behandelt. Beide Strahlenarten werden durch Dampen ausgosendet,
die in die Milch eintauchen. Diese wird wahrenddessen erwaimt, bis im
wesentlichen eine Temperatur erreicht ist, die der Pastourisierungsleniperatur
angenahert ist, aber unter dieser liegt. Vcrsuchswoiso vorher bewirklo In-
fektion mit B a c. c o 1 i wurde durch die Besirahlung vollig auBer Wir-
kung gesetzt; die Organismenzahl von ca. 1 Million ging durch die Bcliund-
lung auf 100 Keimo zuruck. L i m b a c h (Leipzig).

Kersten, R. und Schultz, 0. K., Verfahren zur Hcrstellung
antirachitischer Milch. (D.R.P. Nr. 577 531, vom 1. C. 19.33.)

Die bisherigen Versuche, Fnschi^ch zweeks Verbesserung der anti-
rachifechen Eigenschaften mit ultraviolettem Licht zu bestrahlen, fuhrten
zu keinem befried%enden Ergebnis, weil die bestrahlte Mich Zersetzungen
erieidet und dann einen so unangenehmen Geschmack aufweist, daB sie
iiberhaupt nicht Oder nur mit Widerwillen aufgenommen wird. Auf Grand
nmfangreicher Versuche wurde nun festgestellt, daB die Bildung unerwiinsch-
ter Nebenprodukte bei der Bestrahlung der Milch durch die Anwosenheit
dOT Eiweifistoffe u. dgl. veranlaBt wird, die fiir die antirachitische Wirkung
Bind, daB aber die Bestrahlung des cholesterinhaltigen
Mdchfettes, durch die die antirachitische Wirkung verbessert wird, nicht
zur Bildung unerwiinschter Stoffe ftthrt. Das vorliegende Verfahren berulit

Mikrobiologie der Nahrtingg-, GenuB- und Fattennittel.

67

auf der Verwertung dieser neuen Erkenntnis und besteht daxin, dafi die
aus der Milch abgetrennten Fettbestandteile fiir sieh der Bestrahlung mit
ultraviolcttem Licht unterworfen werden, bis ein Hdchstwert der anti-
rachitischen Eigenschaften erreicht ist, und sodann wieder mit den iibrigen
Milchbestandtcilcn vereinigt werden, so daf! die neu zusammengesetzte
einheitliche Milch oin Praparat von ungleich hOherer antirachitischer Wir-
kung bildct. L i m b a c h (Leipzig).

Marawin, L. N., Desinfektion von Korn und Malz in der

Spiritusindustrie. 1934. S. 80, [Russisch.]

Verf. ist der Ansicht, dab es unmSglieh sei, eine reine, von Mikroorga-
nismen freie Maische durch Desinfektion des Kornes mit antiseptischen
Mitteln zu erhalten, da sich auf dem sterilisierten Kom wShrend der Kei-
mung eine reiche Mikroflora entwickelt. Auf Grund von Untersuchungen
im Institut der Spiritusindustrie kommt Verf. zum SehluB, dafi die beste
desinfizierende Wirkung durch Chlorieren des Maizes erreicht wiri Die
Prufung dor Methode bei Betriebsbedingungen zeigte, dafi bei 3000 mg Cl
auf ein Liter 99,7% Mikroorganismen vemichtet werden. Das Chlorieren
des Kornes bowirkt wohl starke Abnahme der Mikroorganismen, bald darauf
tritt jedoch stoke Vcrmehrung der Bakterien ein und der Bakteriengehalt
des Maizes steigt sehr hoch. Die Methode ist jedoch infolge besserer Kei-
mung, guter Waschung und Desodorierung des Kornes beim Chlorieren, bei
Malzbereitung aus minderwertigem Kom zu empfehlen. Desinfektion des
Maizes mit Formalin gibt ungeniigende Ergebnisse. Sterilisation des Kornes
durch Formalin kann erst bei Konzentrationen, die die Keimfahigkeit des
Kornes zerstSren, erlangt werden. Optimale Dosen fiir Desinfektion des
Kornes mit Formalin sind 0,07—0,17% im Verlauf von 6—18 Std. Durch
iibwaschen des Komes und Maizes mit warmom Wasser wird nur teilweise
Desinfektion erreicht. Ebenso verhalt es sich bei der Bearbeitung mit
Schwefels&ure. Kalk in den tiblichen Konzentrationen iibt nur schwache
Wirkung aus, und ist zudem unvorteilhaft, weil Temperaturerhohung seine
Wirkung abschwacht, wodurch seine Anwendung im Sommer erschwert
wird. Dutch Kalkwasser wird Abwaschung des Komes und nur zum Teil
Desinfektion erreicht. Es wird die zum Chlorieren des Maizes erforderliche
Apparatur beschrieben. Eine Anweisung fiber Chlorieren des Kornes und
des Maizes ist bcigeffigt. A. ImSenecki (Leningrad).

I.-G. Farbcnindustrie A.-0., Haltbarmachen von Grfinfutter.

(D.R.P. Nr. 689362, vom 6. 12. 1933.)

Die konservierende Wirkung von Sfturen wird erheblich erhfiht, wenn
man dem Grfinfutter auBer SSuren Salze der Milchsfture zusetzt, entweder
so, dafi man die Laktate in der Sfiurelfisung auflOst und mit dieser Lfisung
das Grfinfutter bespritzt, oder auch so, dafi man die Laktate schichtweise
zwischen einzelne Lagen des Grfinfutters streut und dann die Masse mit
saurer L6sung begiefit. Das neue Yerfahren bedeutet schon deshalb einen
erheblichen Fortschritt auf dem Gebiete der Grfinfutterkonserviemng, da
dem Vieh hierdurch gleichzeitig verschiedene Saureanionen zugeftthrt wer-
den und eine tlberffitterang mit einer einzelnen Saure vennieden wird. Ver-
wendbar sind alle aus Laktaten MUchsaure freimachende Sauren, auch same
Salze dieser Samen oder solche Stoffe, die beim Zusammenbringen mit
Wasser Samen bilden. L i m b a c h (Leipzig).

58 Mikrobiologie der ITabrungs-, Genufi- imd Futtermittol. — Dunger usw.

SSnre-Therapie Prof. Dr. v. Kapff G.m. b. H., Vcrlahren zum Halt-
barmachen von GrUnfutter. (D.E.P. Nr. 572 987, vom
26. 3. 1933.)

Zam Haltbarmachen von Griinfutter isl Chlorkalk vorziiglich ver-
wendbar, wenn er dureh SchwefelsSure oder deren saure oder noutrale Salzc
in neutralen schwefelsauren Kalk umgewandelt und gleichzcitig die untcr-
cklorige Saure freigemacht oder an Natron gebundon wird. Am boston ge-
scMeht die Behandlung mit Chlorkalk in einem sanron Medium, wozu so-
wohl SchwefeMuie oder deren saure Salze, oder Salzsaurc odor Miscliungeti
von diesen gebraucht werden kdnnen. Fur die praklischc Anwendung kann
man entweder Chlorkalk und Natriumsulfat oder Bisulfat einzelu odor in
Mschung auf das Futter aufstreuen oder dicse Mischung oder deren Kom-
ponenten in wasseriger Losung au%ieBen odor Chlorkalk aufstreuen und
dann mit einer LSsung aus Sehwefelsaure oder BisuUat odor Salzsaure oder
mit einer Mischung aus diesen begieBen. Die neue Wirkung dcs Verfahrens
geht aus der chemisehen Umsetzung des Chlorkalkes mit Sauren odor sauren
oder auch neutralen Salzen hervor. Bei Anwendung von Sehwefelsaure oder
Na-BisuUat wird zunachst unterchlorige Saure frei gemacht, die bekauntlich
die iibrigen, sonst zur Futterkonservierung gebrauchten Sauren boziiglich
desinfizierender Wirkung weit iibertrifft, so daB davon zur Zerstorung der
schadlichen Keime weit weniger gebraucht wird als von der seither moist
augewendeten Salzsaure wie auch von der wesentlioli teurcren Amcison-
saure. Die Verwendung eines trockenen Einstreupulvors ist praktischer
und bUliger. L i ra b a o h (Leipzig).

L-G. Farbenindustrie A.-G., Verfahren zur sauerstofffreion
Konservierung von Griinfutter. (D.R.P. Nr. 588 992, vom
30. 11. 1933.)

Das Verfahren beruht darauf, daB auBer saurer KonservierungslSsung,
die dureh AuflSsen von Phosphorpentaehlorid in Wassor hergosteilt wird,
feste kohlensaurelieferende StoflEe, z. B. Kalziumkarbonal, zugegeben werden,
am besten am Boden des Silos. Dutch die gebildete Kohlensaurc wird ira
Silo eine sauerstofffreie Atmosphare erzielt, xmd zwar soglcicli zu Beginn
des Sauerungsvorganges, so daB das Eintroten einer unorwiinschten Butter-
sauregarung verhindert wird. Es laBt sich nebon anderon Karbonateu auch
feste Kohlensaure anwondon. Die hierbei zuerst auftrotende Tomperalur*
emiedr^ung schadot dem Futter nicht. L i m b a c h (Lei])zig).

Mikrobiologie des DQngers, Bodens, Wassers und Abwassers.
Janke, A., Sekera, F. und Szilvinyi, A., Mikrobiologiseho Bodon-
untersuchungen im Lunzer Gebiet. I. Allgemoiner
Teil: Ziel und Methodik der TJntersuchungon.
Standortsfaktoren und Keimgehalt. (Archiv f. Milcro-
biologie. Bd. 5. 1934. S. 223—245.)

Die untersuohten 7 kleinklimatischcn Stationen im Lunzer Gebiet
werden zunachst Mimatologisoh und bodenkundlieh oharakterisiert. Mikro-
biologisch wurde untersueht auf Bakterien, Aktinomyzeton, Schinunelpilze,
SproBpilze mit dem Flatten- und auf Nitrifikanten, Denitrifikanten, aerobe
N-Binder, Amylobacter, Anaeroben mit dem Verdiinnungsverfahren.

EinEinfluB von Wasser- und Lufthaushalt des Bodens auf dossenGehalt
an Mikroorganismen konnte nicht festgestellt werden, vormutlich, woil die

Mikrobiologie des Ddngers, Bodens, Weisseis imd Abwaasers.

59

Proben zur Zeit der Entnahme infolge des feuchten Tflimaa aller Stationen
mit Wasser iibersSittigt waren. Auch koniite kein Zusammenhang zwiseben
einem TJmweltfaktor (Klima oder pbysiialische Bodeneigenschaft) und
Zahl Oder Art der Mikroorganismen erkannt werden. Entweder wirken
mehrere Faktoron zusammen oder es hat die Pflanzendeeke einen iiber-
ragendcn EinfluB. So wieson zwei in ihren Eigenschaften (einschl. Eeaktion)
ganz ahnliche B3dcn von gleieher klimatischer Umwelt bei Plattenzahlung
Is 891 bzw. 626 531 Gesamtmikroorganismen je 1 g trookenen Bodens auf.
Ahnliche Untersehiede fanden sich bei den physiologischen Bakteriengruppen.
Es handelt sich in dem einen Falle um Erica-Heide, im anderen um
hochgrasige Wiese.

Der Quotient aus Eeimzahl der Sehinunelpilze und der der Bakterien
+ Aktinomyzeten (nach Jensen) ergab keine Korrelation zur Wasser-
stoffionenzahl.

Aerobe N-Binder konnten in saurem Waldboden (bis zu ph 4,7) nach-
gowiesen werden; sie fehlten aber oder traten sehi- zuriick, trotz giinstiger
ph-Werte, in anderen Stationen mit engem Ca/Mg-Verhaltnis. Amylo-
b a c t e r (im Hfichstfalle 1 054 250 je 1 g trookenen Bodens) wurde meist
reichlichcr gefunden als aerobe N-Binder (im Hochstfalle 48 955).

Die Eohlensaurebildung hangt nicht nur von dem Gehalt an Mikro-
organismen ab, sondorn wird auch durch die Adsorptionskraft der BSden
bestimmt. 1st diese gering, so kann der Boden trotz vorhaltnismaBig nied-
riger Eeimzahl ziemlich bodeutonde Atmungswerte ze%en und umgekehrt.
Ein Zusammenhang zwischen Eohlensaurebildung im Boden und Schimmel-
pilzentwicklung konnte nicht festgestellt werden. R i p p e 1 (Gottingen).

Janke, A. und Wozak, M., Mikrobiologische Bodenunter-
suohungon im Lunzer Gebiet. IL Toil: Die Bakte-
rienflora. (Archiv f. Mikrobiologie. Bd. 5. 1934. S. 338 — 348.)

Die Arbeit bringt eine genaue Bakterienanalyse (aerobe koUelbive
Bakterienflora) dor im vorstehenden Referat angedeuteten Standorte. Die
gefundonen 37 Arten verteilen sich folgendermafien: Streptococcus

1 Art mit 1 Stamm, Micrococcus 6 Arten mit 9 Stammen, S a r o i n a

2 Arten mit 2 Stammen, Bacillus 14 Arten mit 42 Stammen, Pseudo-
monas 4 Alton mit 26 Stammen, Bacterium 10 Arten mit 28 Stam-
men. Allgcmein vorbroitol waren Bac. fusiformis, tumescens,
Ps. fluoroscons.

FUr die quantitativon Angaben wurde der „Gomeinschaftsquotient“
gewahlt, d. h. os wurde eine Station als Bezugsstation genommen und der
prozentuale Anteil einer Familie, Gattung oder Art an der Gesamtkeimzahl
fiir jede Station dividiort durch don prozentualen Anteil dOT gleichp Fa-
mUie usw. der Bezugsstation. Es ergab sich dabei, dafi die Bazillen
(Sporenbildner) durch starke Sohwankui^en von Temperatur und Feuchtig-
keit des Substrates begfinstigt werden, die Bacteriaceen, nament-
lich die Pseudomonas arten, durch gerii^e Schwankungen der Feuch-
tigkeit und gleiehmafiige Temperatur. Bei den Micrococeaceen war
keine GesetzmSBigkeit festzustellen; die Yerff. glauben, daB es sich bei den
Eokken um keine autoehthone Flora handele, sondern diese aus der Luft
in den Boden gelange. Die hdchsten Stationen waren besonders arm daran.

Die H-Ionenkonzentration scheint, von den N-Bindern abgesehen,
keinen besonders groBen EinfluB auf ^e Bakterienflora auszuiiben, eher

60 Mikrobiologie des Dungers, Bodens, Wassers usw. — Pflanzenkrankheiten.

die Puffemng. Hohe LuftkapazitSt begiinstigt die Mtrifikation im Gegen-
satz zur Denitrifikatioii. Die in 2 Fallen festgestellte geringe Zahl von An-
aeroben in tieferen BodenscMchten diirfte durcb Mangel an onergetisch
verwertbarer Substanz zu erklaxen sein.

Das „Dolomitpbanomen“, d. h. das Vorkommen einer hochalpinon
PflanzengeseUsckaft auf Dolomitboden einer Hohenstufe, die aui Kalkboden
noeh Torwiegend montane Vegetation trSgt, diirfte durch die geringo Mcnge
an Icieht bewegUehcm Bodenwasser verursaekt sein.

R i p p e 1 (Getlingon).

Verona, 0., Studio microbiologico di un torrcno tor-
bo s o. (Arckiv f. Mikrobiologie. Bd. 5. 1934. 328 — 337.)

Es wurde ein oberitalieniscker Moorboden aus dem Po-Tal mikrobiolo-
gisck untersnckt. Die Keimzahl ist sehr niedrig; es handelt sick im wesent-
lieken um Pilze; eine Liste der gefundenen Mikiroorganismen 'wird gegeben.
Ammoniakbildungs- und StickstoffbindungsvermSgen sind gering, das Nitri-
fikationsvermbgen ist fast Null. DeniMtikations- und COg-Bildungsvermogen
sind dagegen koek. E i p p e 1 (G6ttingon),

Sievers, 0., tJber die Empfindlickkeit einigor Abwasser-
bakterien gegen die Bakteriophagenwirkung. (Ztschr.
f. Hyg. u. Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 16—27.)

Die Fra^e, ob die im Kloakenwasser immer nachweisbaren Bakterio-
phagen fiir die Wasserreinigung von Bedeutung sind, konnte durch die vor-
li^enden TJntersuekungen nock nicht restlos geklSrt werden. Im bejahendeu
Sinne kSnnen jedock die folgenden Tatsacken ausgelegt werden: 1. Die
Lysine sind nach der Reinigung des Wassers schwacher und gegen weniger
Ba^erien geriehtet; 2. es war eine gewisse Abnakme der lysosensiblon Bak-
terienstamme feststellbar. Rodenkircken (Kknigsbcrg Pr.).

Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz im aiigemeinen.

Morstatt, H., 'Dber die Frage der Zunahme dor Pflanzcn-
krankkeiten. (Mitt. Biol. Reiehsanstalt Land- u. Forstwirtsch.
Heft 48. 1934s. S. 63— 72.)

Verf. stellt der Behauptung, die Pflanzenkrankheiten und die Sckad-
linge seien in standiger Zunahme bcgriffen, die Tatsacke gogonUber, dafi
die Emten immer grSBer und sicherer geworden seien, und wciidot sick
auch gegen ^e Annakme, (M die Kulturpflanzen als Kulturproduktc eine
„allgemeino innere Krankheitsanlage” hatten; nur eine starkere Anfalligk(>it
derselben liege wohl vor, wemi sic in ungunstigo Umweltverhaltnissc kamon.
„Wenn Kulturmafin^men in einseitiger Anwendung die Vormohrung von
Sehadliagen begiinstigen, so werden wohl in don meisten FaUcn oben JC u 1 -
turfehler vorliegen, und es wird eine Ausnakmo sein, dafi eino Ver-
besserung der Kultur zugleich bessere Lebensbedingungon fflr bestimmte
Sckadlinge schafft. Auch beim Anbau auf grofien cinkeitliehen Fiackon
kSnne nicht von einer aiigemeinen Zunahme der Sckaden otwa durch Rost
Oder Brand in den letzten 50 Jahren gesprocken werden. Das gloioho gclte
von der Monokultur. Es sei unriektig und eine ttbertreibung, daB erst die
mensckliehe Wirtsekaft dwartige Kalamitaten geschaffen hake, Verf. zitiert
literatur iiber die Waldwirtsckaft, wonaoh schon vor langer Zeit dor Wald
von Katastrophen betroffen worden sei; dafi sie in der Neuzeit haufiger
seien, kSnne nicht bewiesen werden.

Eine allgemeine Zunahme der alteinheimiscken Pflanzenkrankheiten

Sch&digungen d. Pflanzen durch physikalisohe Eisflfiase. — Pilze, Bakteriea usw.

liege nicht vor. Aber eine zunehmende Menge von Ejankheiten und Sch%d-
lingen werde durch den Verkehr eingeschleppt. Der Schaden sei fuhlbarer
geworden als fruher, wofiir verachiedene Grunde angeftthrt werden, darunter
die enge Grenze dor RentabilitSt. Es dfirfte richtig sein, sagt Verf., statt
von ciner Zunahme dor Ejankheiten von ihrer zunehmenden ■wirtschaft-
lichon Bedeutung zu spreehcn. K. Friederichs.

SchSdigungen der Pfianzen durch physikalfsche, chemische und
physiologische Einfliisse.

Wieler, A., Durch S^uren und teerige Stoffe hervor-
gerufene Atzsch3.den an Blattorganen. (Phytopath.
Ztschr. Bd. 7. 1934. 121—144.)

Verf. berichtet zunSchst iiber seine Erfahrungen mit der Einwirkung
dor hygrophilen SSuren SchwefelsSure und Salzs&ure sovde des Chlors auf ver-
schiedene Pflanzenarten, vornehmlich Koniferen. Die hervorgerufenen
Atzschaden worden beschrieben. AnschlieBend werden Schaden durch
teerige Stoffo besprochen, die naeh Ansicht des Verf.s ebenfalls unzweifelhaJt
Atzschaden smd undin der Nachbarschaft von Kokereien, Kohlenstoffabriken,
Teerdostillationen, Teerverarbeitungsfabriken, Braunkohlengencratoren u. a.
zu erwarten sind. Es wird vermutet, daB die Phenole der sehadliche Be-
standtoil sind. Besonderes Augenmerk ist auf (he Ausheilung der Schaden
durch die Pflanze gerichtet worden. Braun (Berlin-Dahlem).

Sehweizer, J., Tj emara-ziekle bij tabak. [Tjemara-
Krankheit boim Tabak.] (Mededeel. v, h. Besoekisch Proof-
station. 1933. No. 60. p. 1 — ^23, mit 9 photogr. Abb.)

Diese E[rankheit, benannt nach dem von den Eingeborenen „Tjemara“
genannton Baume Gasuarina equisetifolia wegen der Ahnlich-
keit der kranken Blattgebilde mit dessen Blattem, auBert sich in einer Be-
duktion der Blattspreiten zu schmalen Streifen an den Eauptnerven. Ih
schweren Fallen stehen dio Streifen in Eosetten beisammen. Da die
Blatter der befallenen Pfianzen vollig wertlos sind, waren eingehende Ver-
snehe liber dio Art der Ejankheit und doren Bekampfung angebracht. Diese
Ycrsuche ergaben, daB die Tjemara-Exankheit zu den physiologisehen
Krankheiten gorechnet werden muB und zwar ist die Ursache wahrschein-
lich eine Vergiftung, wortiber jedoeh Naheres noch nicht ermittelt werden
konnte. Die Bekampfung diescr nicht ansteckonden E^rankheit gesohieht
durch cncrgische Durcharbeitung des Bodens und zweekmaBige Dlingung.

van Beyma thoe Eingma (Baarn).

Schadigungen der Pfianzen durch Pilze, Bakterien und fiitrierbare Vira.

KSMor, E., TJntersuchungon iiber dieViruskrankheiten
der Kartoffel. III. WeitereVersuche mitViren aus
der Mosaikgruppe. (Phytopath. Ztschr. Bd. 7. 1934. S. 1—30.)

Von Kartoffelpflanzen wurden 6 Mosaikviren isoliert, die sich bei weit-
gehender sonstiger tJbereinstimmung bei der Weiterimpfimg auf der tiirki-
schen Tabaksorte „Samsun“ konstant verschieden verhielten. Sie gehoren
oftenbar zum gleichen Typus wie das X-Virus von K. M. S m i t h und die
latent-Viren der Amerikaner, und sind wie diese als Varianten des gleichen
Virus aufzufassen. Wegen ihrer Tendenz, auf den Tabakblattem chlorotische
Oder nekrotische Binge hervorzurufen, werden sie als Bingelviren bezeichnet.
Ihre Verschiedenheiten sind nachweislich nicht etwa durch Verunreinigung

62 Schiidiguiigen der Pflanzen durch Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

mit gewissen schwachen anderen Viren bedingt, was offenbar ebenfalls sehr
hSiufig vorkommt. Mit dreien von diesen Bingelviren warden mit der Blatt-
einreibemethode (Ibertragungsversuche auf me Kartoffelsorten „Erdgold“
und (iWohltmann" angestellt. Die tJbertragung gelang in der Memzahl
der Falle. Die beiden Stamme M 23 und W 19 erwiesen sich bei der Riiek-
iibertragung auf den Tabak als ganzlieh unverandert, wahrend der Stamm R
in beiden Kartoffelsorten vollig gleichsinnig eine deutliche Abschwachung
erfahren hatte und sich auch weiterhin auf dem Tabak konstant vom Aus-
gangsstamm untersehied. Es konnte also die Entstehung einer Varianto
im Versuch beobachtet werden, Entsprechende tJbertragungsversuche mit
einem vbllig andersartigen, Mher von der Kaitoffelsorte Wohltmann iso-
lierten Virus vom Y-Typ (Smith) auf gesunde Pflanzen dicser Sorte ge-
langen in zwei von drei Fallen. Das Virus iiberstand die Passage vollig un-
verandert. Dagegen gelang die tJbertragung auf „Erdgold“ (in 2 Fallen)
nicht. — Es warden auBerdem zwei Viren isoliert, die am Samsuntabak
eine leichte Nervenaafhellung verursachen und von denen das eine deutlich
schwacher ist als das andere. Vermutlieh sind sie als abgeschwachte Y-Viren
aufzufassen. Endlich wurden noch von der Sorte „Erdgold“ drei von alien
bisherigen versehiedene Viren E 8, E 9 und E 10 isoliert. Alle drei lasson
sich auf den Samsuntabak mechanisch iibertragen, sind aber auf dieser Pflanze
latent. Die beiden Viren E 8 und E 9 sind auch auf „Erdgold“ latent. In
Verbmdung mit einem Ringelvirus verursachen sie an Erdgold „Krausel-
mosaik", am Tabak „Spot necrosi8“-Symptome. E 9 verursacht auf Da-
tura stramonium ein Gelbflecken-Mosaik, die beiden anderen nicht.
E 10 ruft an ]&dgold ein eigentilmliches Dunkelmosaik hervor. — Der
zweite Teil berichtet fiber Kombinationsversuche mit verscluedenen Viren
der X- und Y-Gruppe. Die Versuche zeigen u. a., dafi zusStdiche Infek-
tionen mit einem Ringelvirus ei^ebnislos bleiben miissen, wenn die Pflanze
bereits mit einem anderen Ringelvirus durchsetzt ist. Hingegen entwickeln
sich an Pflanzen, die mit einem schwacheu Y-Virus durchsetzt sind, nach
zusatzlicher Beimpfung mit dem starken Y-Virus die Symptome dieses star-
ken Virus. Das schwache Virus ist also in diesem Falle kein Hemmnis fiir
die Ausbreitung des starken. Bei Kombination des starken Y-Virus mit
einem Ringelvirus treton am Tabak stets die gleichen bSsartigen Symptome
auf, gleichgiiltig, ob das betoiligtc Ringelvirus „stark“ oder „schwach“ ist.
Jimge, wachsende Pflanzen iiberwinden diese schwere Krantteit und ont-
wickeln fast vollig gesunde Zuwachsteile, obgleich in diesen die beidon Viren
noch in hoher Konzentration und ungeschwSchter Virulenz enthalten sind.
Die Pflanzen erwerben sich demnach einen hohen Grad von Toleranz. Aus
den von solchen Pflanzen in der Toleranzzone gebildeten Samen entwickeln
sich -rausfreie Pflanzen, die diese Toleranz nicht mehr besitzen. In der
Kombination X -f Y ist fiir die BSsartigkeit der Symptome che Virulenz
des beteiligten Y-Virus allein mafigebend. Autorreferat.

Doolittle, S. P., and Wellman, X. L., Commelina nudiflora, a
m 0 n 0 c 0 1 y 1 e d 0 n 0 u s host of a celery mosaic in
Florida. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p, 48—61, 3 figs.)

Wshrend der letzten 4 Jakre verursacht eine Mosaikkrankheit des Sel-
leries betrSchtliehe Verluste besonders in Florida, aber auch in anderen
Staaten, in denen Sellerie gebaut wird. Die hier beobaehtete Krankheit
scheint sich von der durch andere beschriebenen insofem zu unterscheiden,

Sch&digungen der Pflaxizen durch Pilze, Bakterien. — Tierische SobSdlinge. 03

aJs die Krankheit sich zwar in einer bestimmten Krauselung des Blatt-
werks und Verfarbung und Sehrumpfung der Blattstiele anBert, dafi aber
die MiBbildung der Blatteben feUt. Die Krankheit kann mechanisch aber
auch durch Aphis gossypii verbreitet werden. Sie konnte auf Gurke,
Tomate, Tabak und Physalis pubescens iibertragen ■werden.
Das Virus des Selleriemosaiks scheiat nicht im Boden oder im Samen vor-
zukominon. Die Krankheit 'wurde allgemein auf Commelina nudi-
flora und einmal auf Physalis lagascao gefunden. Vaif. nehmen
an, dafi die erste Infektion von Commelina aus erfolgte. Infolgedessen wiirde
die Ausrottung dieser Pflanze in der Nahe von Feldem mit SeUerie eine
wichtige Mafinahme zur Bekampfung der Mosaikkrankheit des Selleries sein.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Atanasoff, D., Is bitter pit of apples a virus disease?
(Phytopath. Ztsehr. Bd. 7. 1934. p. 145.)

Eine ratselhafte Krankheit der Apfelbanme, Bimbaume und gelegentlich
auch der Quitte ist seit vielen Jahren unter der Bezeiohnung „Bitter pit“
bekaimt. Sie auBert sich an den Eriichten durch eigentiimliche oberQachliche
Narben oder Schwellungen und durch Fleckenbildung im Meisch. Sie ist
nicht etwa auf AustraUen beschrankt, wo ihr Me Alpine eingehende
Untersuchungen gewldmet hat, sondem kommt nach den Erfahrungen des
Verf.s in alien ■wichtigeren Obstbaugebieten der Welt vor und schadigt die
Ernte empfindlich in quantitativer und qualitativer Hiasicht. Auf Grund
eingehender Literaturstudien und eigener Beohachtungen gelangt der Verf.
zu dor Ansicht, dafi es sich alter Wahrscheinlichkeit nach um emo oder meh-
rere verwandte Viruskrankheiten handle. Die bisher herrschende Auffassung,
die in der Krankheit eine Folge ungiinstiger 5kologischer Situation erblickte,
wird als unbefriedigend abgelehnt. E. K Shier (Berlin-Dahlem).

Tierische Schhdiinge.

Womersley, H.J A possible biological control of the clo-
ver springtail or lucerne floa(Sminthurus viridis
L.) in Western Australia. (Journ. Coun. Sci. a. Ind. Bes.,
Australia. Vol. 6. 1933. p. 83.)

Eine Spezies dor Bdellid Made, Biscirus lapidarius Kramer,
mSglicherweise von Europa eingefiihrt, wurde in BSden, die mit S m i n -
thurus viridis L. in&iort waren, gefunden. Untersuchungen, die
iiber zwei Jahre durchgefuhrt wurden, haben gezei^, daB diese Made ein
aktiver Feind des Sminthurus ist, vormSgo dessen seine Anzahl in kiirzester
Zeit stark reduziert werden kann. Uberfiihrungen in andere Gegenden sind
teilwoise glttcklich ausgefallen, und diese wurden von Sminthurus goreinigt.
Die kiinstliche Vermemung der Made in der nStigen Menge scheiat nicht
moglich, daher ist ihre Uberflihrung von Platzen, wo die Maden in groBer
Anzahl vorzufinden siad, erforderlich. Die Spezies und ihre einzelnen Ent-
•wicklungsstadien werden beschiieben. E. Munch-Petersen (Sydney).

Zeek, E. H., Investigations on the Green Vegetable
Bug(Nezara viridula Lin n.). (The Agric. Gazette of N.-S.-
Wales. Vol. 44. 1933. p. 591—594, 676—682, 2 Tafeln.)

Die grtine Gemiisewanze (Nezara viridula linn.) ist em welt-
verbreitetes Insekt, das zum ersten Male 1916 in Nen-Stidwales in „Goanty
of Cumberland" als „Plage“ verzeichnet wurde. Heute ist es liber eine Flaohe
von 50 000 Quadratmeilen in Neu-Siidwales verbreitet. Der Sehadling tritt

64

Tierisohe Schadlinge.

auf an Bohnen und Tomaten. Die ersten Eior werden Mitte September ge-
legt von Weibchen, die als Imagines iiberwintert haben. Die Eiablage wird
bis April fortgesetzt bci aufeinanderfolgenden Gesehlechtsfolgen. Die Eier
werdon in Haufchen von durchschnittlich 57 Stuck abgelegt; sie sehlupfen
vom 5. bis 8. Tag. Ein Wcibchen vcrmag bis zu vier Eihaufchen zu legon.
Die Larven machen liinf Hautungsstadien durch. Der Zeitraum vom Ei
bis zum Imago betragt durchschnittlich 40 Tago, bei kiirzester Entwicklungs-
zeit 39 Tage, bei langster 81 Tage. Parasiten, die die Eicr, Nymphen odor
Imagines angreifen, sind bisher keine gefunden. Als Bekampfungsmafinahine
■wird Vernichtung der bcfallenen alten Bohnen- und Tomatenpflanzen, in
•welchen die Insokten sich vermehrten und uberwinterten, cmpfohlen. Py-
rethrumstaub oder Pyrethrumstaub mit gleiehen Mengen 2%proz. Mkotin-
staub vermischt, mag etwas Hilfe geben. Untersuchungen aber haben ge-
zeigt, dafi das Bnaginalstadium nur mit grSfiter Schwierigkeit durch Kon-
takt-Insektizide getotet werden kann. E. Munch-Petersen (Sydney).

Bawlins, W. A., Experimental studies on the Wheat
Wiroworm, Agriotes mancus Say. (Journ. eeon. Ent.
Vol. 27 2 . 1934 i. p. 308—314.)

Drahtwiirmer, insbesondere (he Larven von Agriotes mancus,
fressen im Staate New York durchschnittlich 19,7% der Kartoffelknollen an.
Die Entwicklungsdauer des Kafers betragt 3 — 5 Jahre; er ist im August
des betr. Jahres fertig, verlaBt aber die Puppenwiege erst im nachston Fruh-
jahr. Die ubhehe Fruchtfolge ist: Getreide, Klee und Timothee, Kartoffeln.
Untersuchung der Altersklassen der Larven ze^e, dafi zur Eiablage das
Grunland bevorzugt wird und in den folgenden Jahren die Infektion nur
wenig wachst; der Sohaden tritt dann naturgemafi amstarksten an den
Kartoffeln in Erscheinung, da 45% der Larven in dem betr. Jahre ihre
Entwicklung vollenden; die genannte Fruchtfolge bietet ihnen ideale Lebens-
bedingungen. Bleibt <ier Boden zwei Jahre lang Griinland, so verstarkt
sich (he Mektion wahrend des zweiten Jahres; gelangt er dagegen dauernd
unter den Pflug, ohne Abweohslung mit Griinland, so vermindert sich die
Anzahl der DrahtwUrmor stark. — Die Untersuchung bringt einen neuen
Gcsichtspunkt in der Drahtwurmfrage und ist daher sehr bemerkenswert.

K. Friedorichs.

Glasgow, H., Seed treatments for control of root mag-
gots. (Journ. econom. Ent. Vol. 27 2 . 1934 4. p. 303 — 308, 2 fig.)

Wenn (he Kohlsaat angefeuchtet und mit viel Kalomel-Pulver vermischt
wird, so dafi dieses reichhch daran haftet, und dann ausgesat wird, so tritt
an den Samhngen viel geringerer Schaden durch die Madon der Kohlfliege
ein als ohne solche Behandlung. Das Drillon mufi flach erfolgen. Die Maden
treten in Nord-Amerika so stark in den Saatbeeten auf, dafi oft nahezu
aUe Pflanzen zerstSrt werden. Durch jene Behandlung kann erreicht werdon,
dafi etwa 60% der Pflanzen von den Maden ganz verschont werden und der
Best bis auf einige Prozent nur schwach bescha(hgt wird. — Jene Behand-
lung der Saat schtttzt auch vor derZwiebelfliege weitgehend, wenn
sehr (hcht gesat wird, wie es bei gewissen Zwiebelsorten zu geschehen pflegt.
Durch die Behandlung der Saat mit Kalomel wird Verfarbung der Blatt-
spitzen vermieden, wie sie als Folge der Behandlung junger Pflanzen damit
oft eintritt. K. Friederiehs.

Abgeschlossen am 3. Oktober 1934.

ZentraUlatt fnr BakL etc. U M Bd. 91. No. 4|7.

Ausgegeben am 7. Dezeraber 1934.

Nachdruck verboten,

Uber die Eotte des Stalldiingers unter besonderer Bertlck-
sichtigung der Anaeroben-Flora^).

[Aus dem Institut fUr landwirtschaftlicbe Bakteriologie uad Bodenkunde

der TJniversitat Leipzig.]

Yoa Haas Olathe.

Mil 8 Abbilduagen im Text und 1 Tafel.

1. Dio Biologie der Diingorrotte.

Eiae Erhohiiag der laadwirtschaftlichen Erzeuguag hat cine starkere
Bcaaspruchuag des Nahrstoffvorrates im Boden zur Edge. Das Streben
des Landwirts muB infolgedesson dahia gehea, die uaumgaaglich aotweadigc
Ausfuhr voa Nahrstoffea aas der Wirtschaft durch raschea aad mfiglichst
voUstaadigea Ersatz auszugleichea. Solaagc ihm geaiigcad Betriebskapital
zur Verfuguag steht, ist eia aasrcicheader Ersatz aa miacralischea Nahr-
stoffea leicht zu schaifea. Diese Mdglichkeit ist jedoch aioht mehr gegebea,
sobald siakeade Preise zu eiaer Verkaappuag der Betriebsmittel fhhrca.
Eiae bofriedigoade Ausautzuag der Nahrstoffe durch die Pflaaze ist aur
moglich, weBa der Bodea eiaoa ausreicheadea Humusgehalt auf-weist. Der
Humus kaaa jedoch im allgemeiaea aicht gekauft werdea, daher muB eia
regelmaBiger Iksatz durch sorgfaltige Ausautzuag aller Wirtschaftsdiiager,
die hierfur bosoaders geeigaet siad, aagestrebt werdea. Auf diesem "Wege
lassea sich bedeuteade Nahrstoffmeagea ia dea Stoffkreislauf des Wirt-
schaftsbetriobes ciaschalteB, vor allem, weaa viele gegeawSitig aoch immer
als AbfSlle betrachtctc Stoffe beriicksichtigt werdea. Im lateresse des eia-
zelaca Laadwirts uad der Eraahniag des gesamtea deutschea Volkes ist
eiae dorartige umsichtigo Behandluag des Bodeakapitals uabediagt zu for-
dem.

Zu dca ia dor Wirtschaft solbst erzeugtea Diiagemiltela ist ia erster
Liaie der Stallduag zu rechaoa. Bci seiaer Aaweaduag werdea zwei vor-
schiodoae Wege oiageschlagoa. Eiamal wird der Stalbaist sofort aach seiaer
Gewiaauag auf dea Acker gobracht uad uatergopfliigt. Schoa T h a e r ®)
halte iadessea richtig erkaaat, daB bei dieser Art der Auweaduag keiao
befriodigeadea Eratea erzielt werdea kSaaea. Spaterhia wurde aachge-
wiosea, daB auf diese Weise im Bodea grSBere Meagea iSslichea Stickstoffs
ia EiweiB iibergefiihrt uad der Pflaaze fiir laagere Zeit eatzogea werdea.

Der zweite Weg besteht daria, dea Stallmist vor dem Ausbriagea auf
der Diiagerstatte zu lagera uad wahread dieser Zeit durch eiae „Rotte“
ia D ii a g e r uberzufiihrea. Dabei wird leider ia dea meistea Faflea so ua-

1) Die Arbeit wurde als Habilitationsschrift von der inathematisch-natiirwissen-
schaftlidhen Abteilung der philosophischen Fakultat der XJniversitibt Leipzig an-
genoxnmen,

T h a e r , Mbglinsche Annalen der Landwirtsebaft. Bd. 11. 1823. S, 79 — 89.

Zweite Abt. Bd. 91. &

Hans Glatho,

saehgemafi verfahren, daB der Wirtschaft auBerordcntlich hoho Werte ver-
lorengelieii. Seit Jahrzelmten sucht man dalier Wege zu findon, dioso zu
erhalten und mSglichst vollstandig auszunutzcn. Doeh litt ein groBer Toil
dieser Versuehe an dem Mangel geniigcnder Kcnntnis der Bedingungen,
unter denen die Vcrluste entstelien. Mit fortschrcitendor Entwicklung nicht
nur der Chemie, sondern vor allom auch der Bakteriologio des Slalldiingors
■wurden die Grundlagcn fiir die ErschlieBung noner Moglichkeiton goschafjfcn.

Dio Erkenntnis, daB die Dungerrotte von Mikroorganismcn ausgclost
wird, war insofem von Bedeutung, als sio os crmogliokte, cinzolne TJin-
setzungsvorgango bewuBt zu beeinflussen. Da der im Stalldiinger cnthaltono
Stickstoff zugleich der wichtigste und teuerste Nahrstoff ist, riickto die Frage
des EiweiBabbaues in den Vordergrund des Interesses. Es wurdo festgestcllt,
daB verscMedene Gruppen von Bakterien die Proteino bis zur Ammoniak-
stufe abbauen und daB die Stickstoffverluste in erster linie auf das Ent-
weichen koUensauren Ammoniaks zuriickzufiihren sind. Hiltnor^)
suchte diesen Vorgang dadurch zu unterbinden, daB er den lagernden Diingor
mit ammonassimUierenden Pilzen impfte, die das Ammoniak wieder in £i-
weiB zuriiekverwandelten. Dadurch wurde der Stickstoff jedoch in einer
Weise festgelegt, die nur eine auBerordentlich langsame Verwortung des-
selben durch die hSheren Pflanzen gestattete. Chr. BartheP) vcr-
suohte ein Entweichen des Ammoniaks durch dessen Bindung an SHuren,
insbesondere Milehsaure, zu verhindern. Zur Forderung der Saurebildung
empfahl er eine Impfung mit Milchsaurebakterien, wahrend M. Gerlach
das gleiche Ziel durch Zuckerzusatz erreichte®).

Die Eotte hat weiterhin den Zweck, die Streuteile so weit zu mtirben,
daB sie im Boden leicht aufgeschlossen werden kSnnen mid keine Stickstoff-
festlegung bewirken. Dieser ProzeB sollte durch eine Impfung des Dangers
mit zellulosezersetzenden Bakterien*) gefSrdert werden.

Bei den bisher gestreiften Methoden handelte es sich darum, durch
FSrderung bestimmter Gruppen von Organismen bzw. durch Zufuhrung
neuer Arten die Garung in bestimmte Bahnen zu leiten, man kann in diesen
Fallen von einer fordemden Beeinilussung bestimmter Kottungsvorgango
sprechen. Demgegeniiber verfolgt die Edelmistbereitung das Ziel, die Mem-
zahl der Mikroorganismcn durch Pasteurisation auszuschalten.

H. K r a n t z , der das Verfahren®) ausarbeitete und einfUhrte, nutzte
m diosem Zweck die „Selbsterhitzung“ aus, die in lagemdem Danger auf
jeder boliebigen Dttngoi’statte mehr oder weniger intensiv einzusetzcn pflegt.
Die H6he der Temperatursteigerung hangt im wesentlichcn von folgenden
Bedingungen ab:

1) Hiltner, Heuischo landw. Presse. Bd. 28* 1901. S. 232.

*)Chr. Barthel, Deutsche landw. Presse. Bd. 33. 1906. S. 212. Chr.
B a r t h e 1 und S. E h o d i n , Deutsche landw. Presse. Bd. 39, 1912, S. 683, 697,
G. H o r n , Beitr6,ge zur Kenntnis der rationellen Verwertung des Stalldungors. Diss,
phil. Leipzig. 1929. S. 18.

®) M. Gerlach, 111. landw. Ztg. Jahrg. 35. 1915. S. 449. N*. C r a i g , Mau*
ritius Dept. Agr. Gen. Ser, Bull. 38. 1927, ref. Exp. Stat. Rec. Vol. 60. p, 120.

G, Horn, BeitrAge zur Kenntnis der rationellen Verw. des StaUdtingers.
Diss. phil. Leipzig 1929. S. 13. (Impfung mit Sperkit, vgl. hierzu DRP. 439 390.)

®) DRP. 386 312, 388 338 u. a. Ygl. auch H, Krantz, Binnenversorgung
durch Bodenkraftmehrung. Augsburg-Stutfcgart (Filser) 1924. Femer Zusammenstellung
der Literatur inG. Rusohmann, Biederm, Zentralbl. Bd. A 60, N. F. 1. 193lT
177—199 und Ldhnis-Euschmann, Handb. d. landw. Bakteriolojcrio.
2. Aufl. 1933. Teil HI.

'O^ber die Botte des Stalldlingers tisw.

67

1. Das zu vorgarcnde Material mu6 einen Wassergehalt von rund 75%
haben,

2. fiir ausreichende Sauerstoffzufuhr muB gesorgt sein und

3. das Gargut mu6 geniigond leicht aufnehmbaren Stiekstoff enthalten.

Die erste Bcdingung lafit sich in der landwtschaftlicben Praxis durcb

Mischung trockenen und nassen Dtingers leicht erfiillen. Der Sauerstoff-
bedaif dor Mikroorganismen kann ohne Schwierigkeiten gedeekt werden,
wenn der frische Diinger locker aufgeschiehtet wird. Die dritte Forderung
aber ist von vornherein erfiillt, wenn es sich um tierischen Diinger handelt ;
sie kann Schwierigkeiten bereiten bei der Vergarung von Stroh und son-
stigen 'WirtsohaftsabfaUen,

Die fiir die Einleitung der HeiSvergarung vorgesehriebene lockere Stape-
lung des Stalhnistes bewirkt eine intensive Vermehrung der aeroben Orga-
nismen, die dabei so groBe ‘Wannomengen erzeugen, daB der Block inner-
halb weniger Tage, ja mitunter Stunden eine Temperatur von 60“ C erreicht.
Da die fiir die Existenz der einzelnen Arten optimalen Temperaturen keines-
wegs auf glcicher Hohe liegen, ist anzunehmen, daB wahrend der Erwar-
mung bereits eine TJmschiehtung der Flora in der Weise eintritt, daB Orga-
nismen mit niedrigerer Optimaltemperatur zugrunde gehen, bevor die Tempe-
ratur von 60® C erreicht ist. G. Euschmann^) bezeichnet diesen Ab-
schnitt der Garung als aerobe Phase.

Sobald die Erhitzung so weit vorgeschritten ist, wird dutch intensive
Pressung den sauerstoffbediirftigen Organismen die ExistenzmSgliehkeit ge-
nommen, die Luft wird so gut wie restlos aus dem Block entfernt.
G. Euschmann gclangt auf Grund seiner Yersuche zu dem Ergebnis,
daB wahrend dieser anaeroben Phase die Tatigkeit der Mikro-
organismen iiberhaupt zum Stillstand kommt und nur noch chemische Pro-
zesso vor sich gehen. Diesen Abschnitt bezeichnet er daher auch als che-
mische Phase.

Obwohl die Behandlung des Stalldxmgs auf diese Weise einheitlich ge-
regelt ist, kann doch nicht in alien Fallen ein gleichaxtiges Garprodukt er-
wartet werden, weil das Ausgangsmaterial in seiner Zusammensetzung auBer-
ordentlich groBen Schwankungon unterworfen ist. Auch die Menge des je-
weils zu vergaronden Stalldungs ist dabei von Bedeutung, da ein groBer
Stapel die Warme langsamcr nach auBen ab^bt als ein solcher von kleinem
AusmaB. Dazu kommen schlieBlich eine EeUie von Emflussen dor TJmwelt,
die sich der Kontrollo ganzlich entziehen.

Beim Vcrgloich vorschiodener Lagerungsmethoden wird in der Eegcl
der kombinierto Lagerungs- und Fcldversuch zugrunde gelegt. Die Zahl
der unbekannten Faktoren, die der Diinger bereits in sich schlieBt, wird
auf diese Weise dutch die des Bodens nicht unbetrachtlich vermehrt. Die
H5he des Pflanzenertrages aber laBt nur ein Urteil iiber den Dilngerwert
des Garproduktes zu, gibt jedoch keine Erklarung fiir seine mehr odcr weniger
glinstige Wirkung, die dutch den Verlauf der Gtrung wesentlich beeinfluBt
wird. Zur Klarung solcher Fragen ist es unbedingt nBtig, die Veranderungen,
denen der Diinger wahrend der Lagerung unterliegt, zu beriicksichtigen.
Diese „Eotte“ bosteht aus mehreren meist ineinandergreifenden Vorgangen,
deren Studium daher auBerordentliche Schwierigkeiten bereitet. Aus Einzel-

^)G. Buschmann, Zuokerrfibenbau. Bd. 10. 1928. S. 111. Ergebnisse
der AgTak.-Cbeniie. Bd. 1. 1929. S. 132. Vgl. auch Q. H o r n , BeitrAge zur Kenntuis
der rationellen Verwertung des Stalldtingers. Diss. phil. Xieipzig 1929.

6*

68

Hans Glathe»

ergebnisscn, die bei der TJntersuchung verscHedener bei Beendigung der
Lagorung entnommoner Proben gewonnen wurden, konnte geschlosscn wer-
den, dafi die Rotte im wesentlichen. aus drei verschiedenen Teilprozessen
bestebt, ntoilich aus:

1. der Kohlehydratzersetzung,

2. dem EivcLBabbau und

3. der Huiuusbildung.

Dieso Vorgange werden von den jewoils herrsclicndon Temperaturen
sehx stark beeinflufit, sie inUssen daher besonders bei Vergleieh heiC- und
kaltvergorcner Diingcrarten doutlieh in Erscheinung treten. Ini allgenioincn
werden sie je nacb der Sorgfalt der Lagerung durch aerobe Baktericn bzw.
duroh ein Zusammenwirken aerober und anaerober Organismen ausgelost.
Bei festgelagertem Stalldunger wird man den anaerob verlaufenden VorgUngen
grOfiere Aufmerksamkeit zu-wenden miissen.

Durch die vorliegenden Untersuchungen sollte in erster Linie festge-
stellt vrerden, in welchem TJmfang obligat anaerobe Bakterien an dem Rotte-
verlauf beteiligt sind. Daneben sollten einige Unterlagen liber das Ver-
haltcn der aeroben Flora AufschluJB geben. Solche Versuche haben jedoch
nur bedingten Wert, solange uber einen augenblicklichen Zustand und nieht
liber den Verlauf des Rottevorganges und die ihn bedingenden verwickelten
Voranderungen Klarheit gesehaffen -wird. Aus diesem Grunde wurden die
heifi- bzw. kaltvergorenen Diingerstapel 10 Monate lang gelagert und je-
weils nacb 2 — 3 Monaten zur Untersuchung horangezogen.

Bei den Versueben liber die Bedeutung dor HeiBvergarung des Stall-
diingers warden haufig Temperaturen registriert, die liber die in der Vor-
sehrift bei 65® C festgelegte Grenze hinausgingen. Es war nun ven Bedeu-
tung, zu untersueben, welcben EinfluJB Temperaturen liber 66® C auf die
Rotte des Dangers ausliben.

2. Experimenteller Toil.

a)Metbodik der Untersuchungen.

Der bei den Versueben benutzte Stalldiinger wurde von der Universi-
tatslebrwirtschaft des Institute fur landwirtschaftliche Bctriobslebre, Ritter-
gut Cunnersdort, und von der Versuebswirtsehaft Probstbeida des Instituts
flir Pflanzonbau und Pflanzenzliehtung entgegenkommenderweise zur Ver-
fligung gestellt. In Cunnersdorf wurde der von 36 Milcbklibcn stammendo
Stalldiinger abwechsolnd in der offenen Garstatt heiU und in gr66crem Stapol
unter Aufwendung groUtmoglioher Sorgfalt kalt vergoren. Das tagliche
Dlingerquantum betrug etwa 14 dz. Jeder Stapel wurde 15mal besebiekt,
so daiS die insgesamt verarbeitete Dlingermenge sicb auf 201,7 dz belief.

In Probstbeida stand der Dlinger von 6 Maststieren zur Verfligung
und wurde in einer bedachten GSxstatt der HeifivergSrung unterworfen.
Die Ausma£e der beiden GUrstatton in Probstbeida und Cunnersdorf sind
die gleicben.

Der wahrend der Garung beobaebtete Temperaturverlauf ist aus der
grapbiseben Darstellung 1 (S. 82) zu ersehen. In der Garstatt Probstbeida
wurde der Dlinger erst festgetreten, wenn eine Temperatur von 70® C erreicht
war. Die gute Warmekonservierung der Garstatt flibrte dazu, daB die
Temperatur sicb sehr lange zwischen 60 und 70® C Melt.

Die Mtirbung des StaUmistes konnte wahrend der Untersuchungen
sehr gut verfolgt warden, beim HoiBmist schritt sie raschar vorwarts als

'Dber die Botte des StaUdUngers usw.

69

beim Kaltmist. Der in Probstheida erzeugte Heifimist war kaum gerottet,
war von dunkelbrauner Farbe und wics einen leicht sSluorKchen Geruch auf.

Die Baten der jeweiligen Probenahme sind in Tabelle 1 verzeichnet.
Es wurdo strong darauf geachtct, da6 nicht zwei Proben an derselbcn StoUe
entnommcn warden, da diese bei der erstmaligen Probenahme von aufien
batten infiziert worden sein konnen. Dio Proben batten in alien Fallen un-
bortthrt scit der Stapelung gclegen.

Um Unterlagon iibei’ die Bcdeutung anaerober Bakterien fUr die Eotto
des Stalldiingers zu gewinnen, mufite zunacbst festgestellt werden, welcbe
Arten im lagernderi Danger iiberbanpt vorkommcn und in welcher Menge
sie aiiftreton. Da ibro Ziichtung auf Flatten besondere Schwierigkeiten be-
reitet, mufiten vor der Isolierung der einzelnen Gruppen zunacbst Anreiche-
rungskulturen eingeschaltet werden. Fiir einen zahlenmafiigen Nachweis
blieb nur der Weg offen, Verdunnungen des zu untersucbenden Materials
herzustellen, diese quantitativ in die Anreicberungsnahrbdden zu iibertragen
und die Zabl der anwesenden Organismen nach der H6be der Vei'diinnung,
aus der sie isoliert werden konnten, zu schatzen. Im einzelnen wurde so
vorgegangen, dafi jeweils 100 g Diinger mit 1000 ccm Leitungswasser auf-
gescbwemmt und davon je 10 ccm in geeichten, sterilen Gefafien mit sterilcm
Wasser auf 100 ccm aufgefullt wurden.

Da unter den anaeroben Bakterien Gruppen vorkommen, die baupt-
saeblicb Kohlehydrate angi-eifen, und andere, die vorwiegend EiweiB ab-
bauen, wurden entspreebende Nahrbdden, die sich in Vorversuchen bercits
bewahirt batten^), verwendet. Die einzelnen Mcdien sind aus folgender Auf-
stcUung crsichtlich:

1. Fiir Kohlehydrat- und Eiweifizersetzer: Leberbouillon;

2. fiir Kohlehydratzorsctzer:

a) Ruschmanns Kartoffelbrci®),

b) Winogradskys mineraliscbe stickstolffreie Zuckerlosung*);

3. fiir EiweiBzersetzer; Rettgers Eier-Fleisch-Nahrboden*);

4. fitr anspruchsvolle Arten wie B. coeblearius: ZeiJBlers
verdauto Leberbouillon');

6. fiir Zellulosozcrsotzer: Omclianskis mineraliscbe Losung mit
Ammoniumsulfat und Filtriorpapier®).

Alio Kulturcn wurden in den von McIntosh und F i 1 d e s ’) fiir
die Ziichtung anaerober Bakterien erapfohlenen Gefafien bei 37® C in der
■Wasserstoff-Atmospharo bebriitet. Das Prinzip dieser Metbode bestebt darin,
im luftdiebt vorschlossenen Gefafi unter l^stund. Zufuhrung von Wasser-
stoff in oiner elektrisch gcheizlen und gegen Ausstrahlung geschutzten Spirale

1) H. G 1 a t h 0 and A. Cunningham, Journ. Agr. Science. Vol. 23. 1933.

4, p. 541—564.

2) G. Ruschmann, Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 75. 1928. S. 409.

®) Winogradsky, Arch, des scionc. biol. publ. par I’lnst, imp. de m6d,

©xp. St. P^tersbourg. T. 3. 1807. p. 297; Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 9. 1902.

5. 49.

*) L. P. R © 1 1 g © r , Journ. Biol. Chem. Vol. 2. 1 900. p. 75.

J. Z©i01er und L. RaSfeld, Die anaerobe Sporenflora dor ourop&i*
schen Rriogsschaupiatz© 1917. Jena 1928. S. 19.

®) Omelianski, Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 8. 1902. S. 220.

’) J. McIntosh and P. P i 1 d o s , Med. Res. Comm. Spec. Rep. Ser. Lon-
don, H. M. Siat. Office. iS^r. 12. 1917. p. 06. Brit. Journ. Exp. Path. Vol. 2. 1921.
p. 163.

70

Hans Glathe,

die Reste voa Sauerstoff bei einer Temperatur von etwa 260® C zu Wasser
zu oxydieren.

Im Mngenden Tropfen und in mit verdiinntem Fuchsia gefSrbten Aus-
striehpraparaten wurde das Wachstum mikroskopisch verfolgt. Nachdem
Versporung eingetreten ■war, •wiirden 1 — 2 ccm dcr bakterienhaltigen Nahr-
fliissigkeit in ein neues ROhrchen des gleichen Nahrbodcns tiberteagcn und
pasteurisiert. Die Intervalle der Erhitzung waren etwa die gleichen, wio
fiie Z e i B 1 e r bei seinen Untersuehungen angewendet hat, im allgomoinen
warden Erhitzungen, -wie sie nachstehend verzeichnet sind, durchgefuhrt:

20 ' 80 “ c
3' ioo» „

10 ' 100 "

30' lOO® „

90' 100 « „

Es muB jedoch betont werden, daB die Pasteurisation nicht als starres System
zur Anwendung gelangte, sondern daB die Temperaturen oft je nach dem
speziellen Falle festgesetzt -vrarden. Mtunter -wurden auch die gleichen
Temperaturen wiederholt angewendet, zumal, wenn Subkultur Oder Platte
kein Wachstum zeigten.

Abb. 1. Untersuchung einer Originalkultur.
136/3 (Eier-rieisch-Nahrboden, nicht pasteurisiert)

Zeichenerkl&iung: E Eier-Fleisch-N&hrboden, L » Leberbouillon,
K = Kartoffel, bei Milch koaguliert, 0 = nicht verlbndert, H « H&molyse, + «
veigoren, = kein Wachstum, -0 = nicht weitergeftihrt, da der Organismus be-
reits vorhanden war.

Uber die Botte des Stalldiingers usw.

71

Die Isolierung der einzelnen Stamme erfolgte mit Hilfe von Platten-
kulturon, und zwar auf Fleischextrakt-Agar mit einem Ziisatz von 0,6%
Traubenzucker. Von der Subkultur warden zunaehst einige Tropfen Ma-
terial in ein Roagenzglas mit 1 — 2 cem stcrilem Wasser iibertragen and hierin
pastearisiert. Aaf diese Weise soUte verhindert werden, daS dde in der Sab-
kaltar gcbildcten Saaren bzw. Alkalien bei der Pastearisiorangs-Temperatar
von 80® C schadigend aaf die Entwicklangsfreadigkeit der Organismen ein-
wirkten. Die Kolonien warden naeh 2 tagiger Bebriitang abgestochen and in
fliissigom Nahrboden weitergeziiohtet. Die Stamme konnten im allgemeinen
als Reinkaltaren betrachtet werden, wenn sie bei 3 maliger Plattenpassage
iibereinstimmende Merkmale gezeigt batten.

Die Identifikation der Stamme erfolgte aaf Grand der Reaktionen in
Agarstich, Gelatine, Milch, Glnkose-, Maltose- and Laktose-Nahrlbsang.
Ferner warden die Reinkaltaren mindestens einmal aaf der von ZeiBler^)
empfohlenen Traabenzaekerblat-Agarplatte gezaohtet. Aaf die exakte Be-
stimmang der Arten warde besonderer Wert gelegt, da nar dann ihre Be-
deatang far die Stalldiingerrotte gewiirdigt werden kann. Als Beispiel fiir
den Gang der Untersachang seien die bei einer Originalkaltar des Frisch-
mistes Probstheida erzielten Resaltate in Abbildang 1 wiedergegeben.

Da die hohen Temperataren des lagemden Dangers das Aaftreten thermo-
pbil-anaerober Organismen wahrscheimeb machten, warden einzelne Ver-
suche bei einer Temperatar von 57® C darchgefahrt.

AaBerdem war es wichtig, nachzaweisen, ob Schwankangen, die im
Gehalt des Dangers an anaeroben Keimen aaftraten, aach bei anderen Orga-
nismengrappen za beobachten waren, am dabei festzastellen, ob diese Oder
jene Organismeng^mppe fiir bestimmte Vertoderangen des lagemden Dtin-
gers verantwortlioh za machen sei. Unter Benatzang der gleichen Ver-
diinnangen warde festgestellt:

1. die Gesamtzahl aerob wachsender Keime,

2. die Zahl der Sporon aerober BaziUen,

3. die Zahl der Organismen der C o 1 i - Grappe,

4. die Zahl dor anter anaeroben Bedingnngen aaf Platten waehsenden
Organismen,

5. die Zahl der boi 57® C zar Entwicklang kommenden Arten.

Za don aeroben Plattonkaltaren warde Stalldang-Agar®) verwendet.
Die Bestimmai^ dor Sporenzahl erfolgte in gleicher Weise, nax warden die
Vordiinnungon vor der Bosohickang der Platten 20 Min. bei 80® C pasteari-
siert.

Dio 0 0 1 i - Bakterion warden in McConkey - Boaillon®) and
gloichzeitig aaf Bromthymolblaa-Agar mit Trypaflavinznsatz*) gezUehtet.
Die fiir die Zfihlang thennophiler bzw. thermotoleranter Organismen vor-

i)J. Zeifiler, Anaerobenztichtung. (Handb. d. path. Mikroorganismen
von KoHe, Kraus und Uhlenhuth, 3. Aufl. 1930, Bd, 10. S. 70.)

Der N&brboden wurde folgendermaBen bereitet: 500 g nicht zu stark gerot-
teten Stalldtingers wurden mit 1500 com Wasser im Autoklaven auf 1 Atmospbaren
tJberdruck erbitzt und filtriert. Die Filtration dauerte meist 2 Tage. Ein klares Filtrat
zu erhalten ist weder mdglich nooh erforderlich, da nach dem Zusatz des Agars eino
ernouto Filtration obnobin notwendig wird. Das Filtrat wurde auf 1500 ocm aufgeftUlt
und mit 0,06% KaHP 04 und 0,6% Glukose versetzt.

*) A. HoOonkey, Journ, of Hygiene, Vol. 6. 1906. p. 386 — 407.

^)M. Klimmer, H. Haupt und F. Borcbers, Milcbwirtschaftlidhe
Forsebungen. Bd. 9. 1929. 1/2, S. 236 — 248.

72

Sans Olathe,

geseheiien Flatten wurden, nm deren rasches Austrockncn zu verhindera,
in einem GefSB mit WasserverschluB bebrutet, dessen Bauart aus Abb. 2
ersichtlicb ist.

b) Identifikation der isoliertenStammo anaerober

Bakterion.

Da aus den 3 Stapeln im wesentlichen dieselben Organisnion isoliert
■RTirden, soil deren Besprechung gemeinsam erfolgen.

B. putrificus verrucosus ZoiBler.

Morpbologie. Der Organismus -wachst rasch und ist lebhaft be*
weglicL Die kurzen kraftigen Stabeben mit den ovalon, den Zelleib stark
aufti’eibenden, fast endstandigen Sporen sind hinreichend bekannt, so dafi

sieh eine ausfuhrliche Beschreibung eriibrigtD.

Die Leberbouillon -wird rasch und stark
getriibt, Gas wird gebildet, charaktoristiscli
sind vor allem Gestank, Schwarzung und
eine sptter einsetzende Eotung der Lcber-
stuckchen.

Auf Traubenzucker-Agar sind mohrere
Koloniefonnen zu beobachten, und zwar

1. eine gelbliche, stark erhabeno Kolonic,
die von einem flachen, feinen Haarkranz um-
geben ist;

2. eine stark erhabeno, gelbliche, vrurzel-
fSrmige Auslaufer bildende Kolonie;

3. eine unregelmaBige, flache Kolonie,
die mitunter als zarter Easen die Agarober-
flaehe uberzieht.

Die Kolonieform 3 wurde auch von
McIntosh und Fildes®) beobaclitct,
dem Organismus -vnude spater der Name
B. parasporogenes beigegebeu*).

Auf der Blutplatto -wurde dcutlichp Ha-

molyse beobaclitct.

^ 1 ®*^ zur Bebrutung Im Glukose-Agarstich ist langs des Stich-
vonPlatte^^t^thermophoier t^naLs ein intcnsiles Waehstum zu beobach-

ten, einzelne Gasblasen treteu auf, zu Zer-
reiBungen des Mediums kommt es indessen soltcn.

Physiologic. Die Gelatine -wird teils bereits nach 2 Tagen, toils
erst nach 8—10 Tagen verfliissigt, die ililch ivird zunachst koaguliert, spater
VCTdaut. Glukose und Maltose "werden rasch vergoren, bei Laktose -waroii
die Ergebnisse nicht ganz tibereinstimmend insofern, als von den 62 iso-
lierten Stammeii 2 sehr geringe Gasbildung zeigten. So-weit Glukose und
Maltose berU cksichtigt werden, -wurden die friiheren Ergebnisse*) bostatigt,

Vgl. Taf. I, Abb. 1.

•)J.JroIntosh, and P. B i 1 d e s , Med. Res. Comm. Spec. Rep. Sor. No. 12.
London 1917. p. 36.

’) J.MeIntosh, and P.Pildes, Med. Res. Comm. Spec. Rep. Ser. No. 39.
London 1919. p. 39.

(3^ la the, and A. Cunningham, Journ. Agr, Sci. Vol. 23. 1033.

4, p. o46.

tJber die Botte des Stalldungers ttsw.

73

sie stehcn im Widerspruch zu den von Z e i B 1 e r und R a 6 f e 1 d er-
langten Befundcn, stimmen jedocli mit den Angaben des Medical Research
Committee®) uberein. Ein Unterschied zwischen den hier isolierten StSmmen
und cinein zum Vorgleich herangezogenen, von J. ZeiBler isolierten
B. putri ficus verrucosus®) konutc nicht festgestellt vrerden.

Einer bosonderen Wuchsform des B. putrificus verrucosus
ist noch zu gcdenken, die gewissermafien ffle Verbindung mit B. putri-
ficus tenuis darstellt. Sie 'wardo in 8 Fallen beobaehtet und stimmt
in physiologischer Hinsicht vollig mit dem ersteren uberein, unterscheidet
sich jedoch von dicsem in morphologischer Hinsicht durch die Bildung langer
Ketten in fliissigen Nahrmedien^). In cinzelnen Fallen wurde anfangs reich-
liche Kettonbildung beobaehtet, die jcdoch bci langerer Fortziichtung ver-
loron ging. In den Tabellen wurde dieser Organismus der Gruppe des
B. putrificus verrucosus ZeiBler beigeordnet.

B. putrificus Bienstock.

Droi Stamme wurden isoliert, die zunachst dem B. putrificus
verrucosus ZeiBler vollig glichen. Auf Traubenzucker-Agar bildeten
sie unregclmaBige, haufig gezahnte Kolonien, aber der fur letzteren cha-
rakteristische Haarkranz wurde in keinem Falle beobaehtet. Die Stamme
vergoren die gepriiften Zuckerarten nicht, sie koagulierten die Milch zu-
nachst, verdauten sie aber nur sehr langsam. In physiologischer Hinsicht
entsprochen sie zwar der von J. ZeiBler®) fiir B. putrificus ver-
rucosus gegebenen Beschreibung, sie bildeten kein Gas, aber in Leber-
bouillon trat koine Schwarzung ein. Sie glichen vbllig dem von A. Cunning-
ha m *) als Form B 4a beschriebenen Organismus®), der vregen der tJber-
einstimmung mit den Angaben von Bienstock®) spater als B. p u t r i -
ficus Bienstock bezoichnet wird®).

B. putrificus tenuis.

Morphologic. Das Charakteristikum des B. putrificus te-
nuis sind lango Ketten, die haufig liber das ganze Gcsichtsfeld reichen®®).
Dio cinzelnen Stabchen sind kraftiger als die des B. p u t r i f i c u s ver-
rucosus ZeiBler, ihre GrSBo mirde 'wiederholt mit etvva 1—1,5 x 5 — 10
gemessen. Boi dem im Laufe dieser Unlersuchung isolierten Stamm konnte
im Dunkclfeld koine Beweglichkoit festgestellt werden.

Die Sporenbildung verlauft langsamcr als bci B. p u t r i f i c u s ver-
rucosus ZeiBler, nach 2 Tagen sind einzclnc sporentragende Stabchen
zu beobacht en, im allgemeinen sind die langen Ketten noch spore^ifrei. Erst

J. ZeiBlor und L. B a 13 fold, Dio anaerobe Sporenflora der europ.
Kriegs&chauplatze. 1917, Jena 3028.

Med. Res. Comm. Spoc. Bop. Ser. No. 39. 1919. p. 39.

®) Jfline Subkultur wurdo von Herrn Privatdozont Dr. M o y n freundlicherweise
zur Verfugung gestollt.

*) Vgl. Taf. T, Abb. 2.

®) J. ZeiBler, Anaerobenzuchtung, inKolle, Kraus, Uhlenhuth,
Handbuch der pathogenen Mikroorganismen. Bd. 10. 1930. S. 116.

®) A. Cunningham, Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 83. 1931. S. 11.

’) Zum Vergleich wurde eine entsprechende Kultur in entgegenkommender
Weise von Herrn Dr. Cunningham zur Verfugung gostellt.

®) Bienstock, Ann. Inst. Pasteur. T. 20. 1906. p. 407 — 416.

®) A. Cunningham, Journ. Bact. Vol. 31. 1932. 1, p. 61 — 70.

1®) Vgl. Taf. I, Abb. 3.

74

Hans Glathe*

nach einigen Tagen sind langere Ketten vSllig versporter Stabchen sichtbar,
sie erinnern an Subtilis-Ketten. Die Sporen sind oval und zumeist zcntral
gelagert, nur in einzelnen Fallen riicken sie naher an das Endc des Stabchens
neran. Im Gegensatz zu B. putrificus verrucosus werdcn dio
Stabchen durch die Sporen nicht aufgetrieben.

Die Leberbouillon wird getriibt, haufig tritt cine Sedimentation ein,
so dafi die iiberstehende Fliissigkeit wieder klar erscheint. Einzelno Gas-
blasen treten auf, langsame Schwarzung wurde beobachtet.

Auf Glukose-Agar bildet der Organismus teils runde, toils unregelmaBige,
erhabene, graue Kolonien. Der feine Haarkranz der verrucosus-Kolonien
tritt nicht auf. Hamolyse ■mirde beobachtet.

Im Glukose-Agarstich ist das Wachstum schwer von dem des B. p u -
trificus verrucosus zu unterscheiden.

Physiologic. Die Milch wd koaguliert und verdaut, Gelatine
verfliissigt. Von den Zuckern •werden Glukose und Maltose vergoren, Lak-
tose dagegen nicht. Die Tatsache, daJJ der Organismus Zucker und EiweiB
anzugreifen vermag, unterscheidet ihn also vom B. putrificus verru-
cosus nicht, der eigentliche Grund fiir die in der cnglischcn Literatur
iibliche Bezeichnung B. bifermentans ist also hinfallig. Der Stamm
stimmte mit 2 Stammen des B. bifermentans Tissier und Martclly^)
iiberein.

B. cochlearius.

Morphologic. Das auBerordentlich langsame Wachstum des
B. cochlearius erschwert seine Aufiindung und Isoliorung sehr. Zu-
nachst erseheinen einige wenige schlanke Stabchen, teils einzeln, teils kurze
Faden bildend. Nach einigen Tagen werden diese langer und zarter, schlioB-
lich bUden sie an den Enden zunachst Verdickungen, bis nach e^a 8 — 9
Tagen runde endstandige Sporen zu beobachten sind*). Die vegetativen
Fonnen nehmen die Farbstoffe nur schlecht an, die Sporen sind in der ersten
Zeit vollig gefarbt, erst spater, nach erfolgter Reife, bleiben sie farblos. Die
Hitzeresistenz der Sporen ist gro6. Ein Stamm wurde aus einer 30' 100®
erhitzten Subkultur isoliert.

Die EeinzUchtu^ des Organismus gelang ausRettgers Eier-Fleisch-
nahxboden. In gewbhnlicher Leberbouillon wachst er sehr langsam, nach
langer Bebriitung (mehr als 30 Tage) tritt einc geringe Schwarzung und
schwache Verdauung ein, etwas besser ist das Wachstum in verdautor Lcber-
bouillon.

Auf der Glukose-Agarplatte ersohienen nach 8 tagiger Bebriitung zarto,
graue Kolonien mit schlingenaitiger Zeichnung*). Auf der Blutplatto wurde
keine Hamolyse beobachtet.

Physiologie. Die 3 isolierten Stamme zeigten in Milch nach
16 Tagen keine Yeranderung. In Glukose, Maltose und Laktose war
nach 14 Tagen schwaches Wachstum, aber keine Vergarung festzustellen.
Eine Verfliissigung dw Gelatine konnte nach 14 Tagen nicht beobachtet
werden.

1) Kidtaren Nr. 508 tind 2914 der National CoUeotion of Type Cultures, Lister
Institute, London.

*) VgL Taf. I, Abb. 4.

») Vgl. Taf. 1, Abb. 5.

Uber die Botte des StaUdiiugers usw.

75

B. saecharobutyricus v. Klecki.

Morphologic. Die vegetativen Formen des B. s a c c h a r o -
butyricus v. Heeki sind etwas kraftiger als die des B. p u t r i f i c u s
verrucosus und stets lebhaft beweglieh. Sie bilden mittel- bis end-
standigo Sporen^), haufig sind Spindelfomen zu beobachten. Dio reifen
Sporen sind gegen Austrocknung sehr resistent und bleiben in vSllig trockner
Erde lange Zeit lebensfahig*).

In Leborbouillon ist regelmaBig starke Gasbildung zu beobachten, die
Fliissigkeit ■wird rasch getrubt, die Organismen sinken spater als grauweiBer
Niederschlag zu Boden, die Triibung verschwindet daher in alteren Kul-
turen, die Leberstiickchen erscheinen gebleicht. In Kartoffelbrei tritt starke
iSchaumbildung ein, die Kartoffelteilchen sinken spater zu Boden. In beiden
NahrbSden, besonders aber in Leberbouillon, treten nach kurzer Zeit De-
generationserscheinungen auf.

Auf Glukose-Agar bildet der Organismus Kolonien, die im Jugend-
stadium als zart und duxchscheinend, meist granuUert zu bezeichnen sind,
alters Kolonien sind undurchsichtig und nehmen einen grauweiBen bis grau-
gelben Farbton an. Die Bander der Kolonien sind teils glatt, teils gezahnt.
Basenartiges Wachstum wurde selten beobachtet, auf der l^aubenzueker-
blutagarplatte trat keine Hamolyse ein. In 2 Fallen wurde Wachstum unter
aeroben Bedingungen festgestellt.

In der Glukose-Agarstichkultur ist die Gasbildung so intensiv, daB das
Medium vOllig zerrissen wird.

Physiologie. Gelatine wird nicht verfliissigt, Milch sturmisch
koaguliert, das Kasein wird nicht verdant. Glukose, Maltose und Laktose
werden sturmisch vergoren. Die isolierten Stamme waxen identisch mit
B. saccharobutyricus v. Klecki®).

B. amylobacter.

Morphologie. B. amylobacter bildet in fliissigen Medien
zunachst zaxte, kurze Stabchen, die sich zur Zeit der SporenbUdung wesent-
lich verlangern und schwach gebogen erscheinen. Die Sporen sind end-
standig angeordnet, sind oval und haben ein Achsenverhaltnis von etwa
1 : 2 bis 1 : 3*). In vcrsportem Zustand ist B. amylobacter sehwer-
lich mit irgendeinom anderen Organismus zu verwechseln. Schwache Be-
weglichkoit wurde festgestellt.

In fliissigen NahrbSden waxen die Beobachtungen keineswegs einheit-
lich. In Kartoffelbrei vermehrte sich der Organismus rasch und bildete
in erster Linie Klostridien, Sporen dagegen meist gar nicht, so dafi eine
Weiterzuehtung nur dureh Nahrbodenwechsel mSglieh wax. Die mikro-
skopische Beobachtung des Waehstums wax in Leberbouillon oft dadurch
erschwert, daB die Sporen sehr rasch abgeworfen wurden, so dafi die cha-
rakteristisehen Formen fehlten. Da der Organismus im allgemeinen Kohle-
hydrate sehr lebhaft angreift, ist es iiberraschend, daB er in Eier-Fleisch,
wenn auch langsamer, so doch sehr chaxakteristisch wuchs. Die Gasbildung

1) Vgl. Taf. I, Abb. 6 und 7.

*) Vgl. auch A. Cunningham, Zentralbl. f. Bakt, II. Abt. Bd. 82. 1930.
S. 37.

®) Die Identifikation wurde mit BEilfe einer Kultur durohgeftthrt, die Herr Dr.
Cunningham zur Verfttgung gestellt hatte.

*) Vgl. Taf. I, Abb. 8.

76

Hans G lathe ,

war in alien flussigen N^hrmedien krMtig, reichte indesseu rein quantitativ
nicht an die des B. saccharobutyricus heran.

Als besonderes Kennzeicben sind femer die auf der Glukose- und Blut'
agarplatte auftretenden glatten, randen, meist kleinen Kolonien anzuschen.
Im durchfallenden Licht erscbeinen sie im allgenieincn faiblos, docli treton,
zumal auf der Blutplatte, in einzelncn Fallon auch zarte grunlichc odor blau-
liche Tone auf. Mitunter sind die Kolonien scliwacb granuliert. Auf dor
Blutplatte tritt keine Hamolyse ein.

Im Agarstich bildet der Organismus regelmaBig Gas, doch meist nur
in Form einzelner Blascben, nur selten kommt es zu einer ZerreiBung dos
Mediums. Hierin untersebeidet sicb der Organismus recbt deutlicb von
B. saccbarobutyrieus, der das Medium vdllig zersprengt.

P b y s i 0 1 0 g i e. Die Milcb wird koagubert, dock ist im Gegensatz
zu B. saccbarobutyrieus baufig trotz reicblicbor Gasbildung eine
siebtbare Veranderung der Milcb niebt "wakrzunebmen, erst beim Koeben
tritt in solchen Fallen die Gerinnung ein. Die Gelatine ■wird nicht verflUssigt,
Glukose, Maltose und Laktose "werden stiirmisch vergoren. Die isolicrten
Stamme waxen identiscb mit einer Subkultur des B. tertius Henry

B. tetanomorphus.

Morpbologie. In flussigen Nabrmedien bildet B. totano-
m 0 r p h u s kraftige Stabeben, die im Gegensatz zu denen des B. c o -
cblearius niebt gebogen bzw, geschweift sind. AUe isolierten Stammo
erwiesen sieb als beweglieh. Der Organismus bildet rascb endstandige, rundo
Sporen®). In einzelnen Fallen erfolgte die Sporenbildung erst nach langerer
Zeit, eine Beschleunigung konnte dureh Wechsel des Nahrbodens erreicht
werden. In Leberbouillon entwickelt sicb B. tetanomorphus gut
und bildet geringe Mengen von Gas.

Fiir die Identifikation sind die auf der Glukose-Agarplatte zu beob-
aehtenden flaehen, unregelmaBigen zur Easenbildung neigenden Kolonien
von besonderer Bedeutung. Die Oberflache der Kolonien zeigt zarte Granu-
lierung, die bei alteren Kolonien oft als mosaikartige Tafelung orscheint.
In den meisten Fallen tritt ein griinlicher Farbton auf. Auf dor Traubon-
zucker-Blutagarplatte ist keine Hamolyse zu beobaehten.

Physiologie. Gelatine 'wird niebt verfliissigt, in Milcb wachst
der Organismus scblecbt, meist war eine siebtbare Veranderung der Milch
niebt zu beobaehten, nui- einzelne Stamme koagulierten die Milch. Glukose
und Maltose ■vrurden vergoren, Laktose blieb unverandert®).

B. sphenoides.

Morpbologie. B. sphenoides wachst als zartes, kurzes, bo-
wegliches Stabeben, das an den Enden zugespitzt ersebeint. Die Bildung
kurzer Ketten wurde baufig beobaehtet. Bei beginnender Sporenbildung
scb'willt das eine Ende des Stabebens zunachst an, die fast endstandigen

1) Nr. 336 der National Collection of Type Cultures, Listor Institute, London.

Vgl. Taf. I. Abb. 9.

®) Die isolierten Stamme stimmten uberein mit emem Z e i J5 1 e r schen Stamm,
den Herr Dr. Meyn zur Verfugung gesteUt hatte, sowie mit dom B. tetano-
morphuB Nr. 500 der National Collection of Type Cultures des Listor Institute,
London.

'O'beT die Botte des Stalldungors usw.

77

runden Sporen sind wesentlich breiter als das Stabchen selbst^). Im flussigen
Nabrboden ertrugen einzelne StSmme die Temperatur von 100" bis zu 30 Min.

Tn Lcberbouillon tritt geringe Gasbildung ein, die Fliissigkeit ist in
alleren Kulturen moist ^iinlich verfarbt.

Aid Glukose-Agar bildet der Organismus zarte, graue, oft granulierte
Kolonien, auf feuchtem Substrat 'wnrde Neigung zur Easenbildung beob-
achtct. Anf dor Traubenzuckerblutagarplatte war im Gegensatz zu den
Angaben Zeifilers*) Hamolyse deutlich zu orkennen®).

Physiologic. Gelatine wurde nicht verflussigt, Milch wurde unter
Gabsildung koaguliert, Glukose, Laktose und Maltose wurden stiinnisch
vergoren.

Pectinobacter amylophilum Makrinow.

Morphologie. Pectinobacter amylophilum gehort
nicht zu den obligat anaeroben Arten, er wuehs aber unter anaeroben Be-
dingungen besser als bei Luftzutritt, er wird infolgedessen von I. A. Ma-
krinow*) als fakultativ aerob bezeichnet. In jungen Kulturen bildet er
zunachst kurzc, sehlanke Stabchcn. Die spSter erscheinenden Sporen sind
fast endstandig angeordnet, sio treiben den Zellcib stark auf. Das Proto-
plasma schcint die Sporen schleierartig zu hberziehen, da letztere nach Fax-
bung mit Karbolfuchsin gleichsam eingehUUt sind und daher plastischer
wirkcn®).

Das besto 'Wachstum wurde in Kartoffelbrei sowie inWinogradsky-
scher Zuckerlosung festgestollt. Besonders in Kartoffelbrei zeichnete sich
Pectinobacter amylophilum durch starke Gasbildung aus.
Er iibertraf darin auch B. saccharobutyricus. In LeberbouiUon
dagegen ist die Gasbildung meist auBorordcntlieh gering.

Der grauweiBe Ton der Kolonien auf der 'Draubenzucker-Agaxplatte
erinnorte an das Wachstum des B. saccharobutyricus. Neben regel-
maBig runden odcr schwach gczahnten Kolonien kamen flache Formen mit
stark erhabenem Zentrum vor, an der Peripherie wurde haufig em Ringwall
beobachtet. Auf der Traubenzuckerblutagarplatte trat keine Hamolyse ein.

Physiologie. Gelatine wurde in keinem Falle verflttssigt, Milch
wurde sturmiseh koaguliert, das farblose Serum reagierte stark saner. Die
Vergarung von Laktose war stets deutlich, Maltose und Glukose zeigten
ebcnfalls Wachstum und saure Reaktion, (loch unterblieb die Gasbildung
zuweilcn.

Pectinobacter amylophilum steUt, wie bereits I. A.
Makrinow") beobachteto, an das Nahrmedium auBerordentlich geringe
Ansprttcho. So wurde bei den vorliegenden Untersuehungen ein Stamm
aus der Vcrdunnung 10~® des Frischmistes Probstheida in stickstoff-
freier Zuckerlosung geziiehtot. Nachdem die Sporenbildung eingetreten war,
wurde eine SubkiStur wiederum im gleiehen Nahrboden angelegt, aus der
der Organismus in Reinkultur erhalten wurde. Untersucht man nun, welehe

1) Vgl. Taf. I. Abb. 10.

*) J. ZeiBler, in Kolle, Kraus, TJhlenliutli, Handbueh d. path.
Mikroorg., 3. Aufl. 1930. Bd. 10. S. 120.

*) Ein Z e i 6 1 e r sober Stamm des B. sphenoides, der von Herrn Dr.
M e y n zur Verfugting gestellt wurde, zeigte das gleiche Verhalten.

«) I. A. Makrinow, Zentralbl. f. Bakt. 11. Abt. Bd. 86. 1931/32. S. 342.

») Vgl. Taf. I, Abb. 11.

78

Hans Qlathe,

Stickstoffmengen dem Organismus zur Verfugung standen, so orgibt sieh
folgende Kechnung. Von dem Stickstoffgehalt des Erischmistes, aus dem
die Isolierung dureligeftilirt mtrde, kann, da es sick um einc wasscrige Auf-
sekwemmung kandelt, nnr der wasserloslicke Stiekstoff in Ansatz gobrackt
■werden. Dieser beMgt, wie Tabelle 10 zeigt, 0,053%. Dio etwa 9 com
Flussigkeit enthaltenden Zuckerrokrchcn 'wurden mit 1 ccni der Aufschwem-
mung 1 : 1000 geimpft, also kann die Stickstoffkonzentration in der Kultur
nnr etwa 0,0053 mg nnd in der Subkultur nnr etwa 0,00053 mg bctragcn
kaben. Das iippige "Wachstum, das der Organismus trotz der auBerst ge-
ringen Stickstoffnahrung zeigte, laBt ein weiteres Studium der Ernahrungs-
pkysiologie dieses Organismus notwendig ersckeinen.

Anaerobe Z ellul o s ez er s et z er.

Die in den einzelnen Dungproben beobackteten anaeroben Zellulose-
zersetzer gehoren zwei verschiedenen Arten an.

Die erste Art ist leiekt zu erkennen an den kurzen, auBerst scklanken
Stabcken, die sick zur Zeit der Sporenbildung stark verlangern. Dio sekr
groBen, runden Sporen sind endstandig angeortoet^). Auf dem Filtrierpapicr
ersckeint ein gelber Belag. Der Organismus zei^ groBe Aknlickkeit mit
dem von Y. Kkouvine-Delaunay®) isolierten B. cellulosae
d i s s 0 1 V e n s. In der zitierten Veroffentkckung ist zwar von ovalen Sporen
die Bede, trotzdem sckeinen die Organismen identisek zu sein, da auck im
vorliegenden Falle speziell bei jiingeren Kulturen, ovale Sporen beobachtet

wurden, in alteren kerrschten jedock runde Formen
durckaus vor. Eine weitere t3bereinstimmung be-
stekt insofem, als der Organismus auck bed 57® C
lebensfahig war.

Die zweite Art bildet groBe Mengen von Gas,
die vegetativen Formen sind denen des soeben be-
' <1 ^ sprockenen Bazillus sekr aknlick, sie werden bei

^ der Sporenbildung jedock bei weitem nicht so lang.

Die Sporen sind ebenfalls rund, aber wesentlich
kleiner als die oben besckriebenen®). Eine ge-

* nauere Identifikation des Organismus war jedock

nickt mdglick. Versucke, Reinkulturen von don
Abb. 3. Anaerobe ZeUnlose- Zellulosezersetzem ZU erkalten, wurden nickt unter-

zersetzer (2000facli vergr.). nn mTnftTi .

Tkermopkile anaerobe Organismen.

Da bei dem HeiBmist Probstheida hohe Temperaturen langere Zeit ein-
gewkt batten, wurden diese Proben als fiir den Nachweis anaeroW thermo-
philer Organismen besonders geeignet angeseken. Die entsprechenden Ver-
sucke wmden bei 57® C ebenfalls in Wasserstoff-Atmospkare durehgefiihrt.
Tatsaehlick wurde am 16. 6. bis zur Verdiiimung 10“®, am 17. 9. bis zu
10“® und am 26. 10. bis zu 10~® Waekstum beobacktet. Es gelang, die
Organismen auf die Platte zu bringen, dock gingen sie meist bei der 2. bzw.

1) Vgl. Abb. 3.

•) y. Kho'uvine-Delaunay, Compt. Rond. Soo. Biol. T. 87. 1922. p.
922 — 923.

») VgL Taf. I, Abb. 12.

tJber dio Rotto des Stallddngers us-n’.

79

3. Plattenkultur ein. TJm Anhaltspunkte fiir die Identifizierung zu bekom-
men, wurden einzelne Stamme bereits nach der ersten bz'w. zweiten Platten-
kultur in Agar-Stich, Zucker nnd Milch geimpft. Dabci zeigte sich, daB
ein Bazillus, der morphologisch dem B. tetanomorphus glich, bei
67® C Milch koagulierte nnd Glukose, Maltose und Laktose unter Gasbildung
vergor. Fiinf weitere Versuche, den Organismus noch einmal auf die Platte
zu bringen, schlugen fehl. Der Stamm 182/41 verhielt sich ebenso, nur lieB
er Maltose unverandert. Eine weitere Serie von 6 Stammen glich in morpho-
logischer Hinsicht dem B. putrificus verrucosus, bei der wie-
derum vorzeitig vorgenommenen Identifikation verhielten sich die Orga-
nismen folgendermafien:

Stamm

Nr.

Milch

Glukose

Maltose

Laktose

180/86

0

0

0

0

180/88

0

0

0

0

180/89

0

+

+

0

180/90

0

0

+

+

181/65

0

0

0

0

181/64

0

0

0

0

Im Agar-Stich zeigten diese Stamme besonders ausgepragt die typischen
Merkmale des Wachstums anaerober Organismen.

Obwohl auch S. E. D a m o n und W. A. F e i r e r bei ihren Versuchen
zur Ziichtung anaerober thermophiler Organismen nur schwaehe Fermen-
tationen beobachteten, sollen dock der Unsieherheit vorstehender ^gebnisse
wegen Vergleiche mit den von den genannten Autoren isolierten Kulturen
nicht angestellt werden. Auch hinsichtlich der von R. Veillon*) be-
schriebenen Arten sind keine Parallelen vorhanden. Vielleicht handelt es sich
im vorliegenden Falle um die bekannten bei 37® C gut gedeihenden Arten,
bei denen, wie es hier beobachtet werden konnte, Typen vorkonunen, die
auch bei 57® C zu wachsen vermSgen. Von derartigen Fallen berichtet auch
Th. Sames®), auch seine Organismen zeigten bei weiterer Ziichtung
immer schwacher werdendes Wachstum.

Einige orientierendc Versuche wurden angestellt, die iiber die bei 57® 0
auftretende Zcllulosezersetzung AufschluB geben sollten. Es kann keinem
Zweifel unterlicgcn, daB besonders im HeiBmist Probstheida bis in den
Juni hinein thermophile anaerobe Zellulosezersetzer tatig gewesen sind, da
die Zersetzung bei 67® C intensiver vor sich ging als bei 37® C, wie folgende
Tabelle zeigt.

Waren nur thermotolerante Arten anwesend gewesen, dann waren diese
wahrscheinlich auch bei 37® C zur Entwicklung gekommen, so daB in beiden
Fallen gleiche Zahlen hatten gefunden werden miissen. In morphologisoher
Hinsicht glichen die bei 57® C tatigen Organismen den bei 37® C beobach-
teten.

S. K. B a m o n » and W. A. F e i r e r , Joum. Bact. YoL 10« 1925. p.

37—46.

*) R. Veillon, Ann. Inst. Pasteur. T. 36. 1922. p. 422--^38.

®) Th. Sames, Ztschr. f. Hygiene. Bd. 33. 1900. S. 313 — 362,

80

Hans Glathe,

Heii3mil3t Probsthoida (10. 0. 1933)

1

Verdunnung

Zellulosozersetzung

37° C

67“ C

10-^ nicht pasteurisiert

+

+

pasteurisiert

+

+

10“® nicht pastern isiert

+

+

pasteurisiert

0

+

10“® nicht pasteurisiert

0

+

pasteurisiert

0

0

Nahrboden.

Die Veryendung verscMedener Aiireiclieruiigs-Nahrbodcn neben-
einander hat sich auBerordentlich gut bewahrt. Um feststellen zu koniien,
Tfelche Nahrboden fiir die einzelnen Arten besonders geeignot sind, sei cine
kurze ubersicht gegeben, in der die Nahrboden und die Zahl der aus ihnen
isolierten Stamme angefiihrt sind.

Eier-

Leber-

Kartoffel-

Zuckor-

Arten

Fleisch

bouillon

brei

losungi)

past.

n. past.

past.

n. past.

past.

n. past.

t

n. past.

B, putrif. verruc. .

22

18

0

6

5

5

0

0

B. putrif. Bienst. .

1

2

0

0

0

0

0

0

B. putrif. tenuis

0

0

1

0

0

0

0

n

B. coehlearius . . .

3

0

0

0

0

0

0

B. sacch. butyr.

1

5

0

3

12

16

0

2

B, amylobacter . .

4

11

0

4

1

2

0

1

B. tetanomorphus .

3

2

1

1

1

0

0

0

B. sphenoides . . ,

4

1

1

1

0

2

0

Pectinob. amyl. . .

0

0

1

2

8

5

1

2

38

39

i 10

17

27

30

1

5

Die Zuckerlosung -Btirde nur bei 3 Froben verwendet.

Wie ZU erwarten -war, sind fiir die Emeifizersetzer Loberbouillon und
Eier-Fleisch die geeignetsten Nahrboden. B. saccharobutyriciis
und Peetinobacter bevorzugen Kartoffelbrei. Auffallig ist, daJB B.
anaylobaeter, B. tetanomorphus und B. sphenoidos sehr
gut in Eier-Fleisch gedeihen, anseheinend sagt ihnen diesor Nahrbodcn
sogar besser zu als Leberbouillon. Insgesamt lieferten die einzelnen Nahr-
boden folgende Zahl von Stammen:

Eier-Fleisch .
Kartoffelbrei .
Leberbouillon
Zuckerldsung .
Insgesamt . .

77 Stamme
57 „

27 „

6 „

46.1 %

34.1 %

16.2 %
3.6 %

167 Sttome 100,0 %

Ei^Pleisch ist demnach ein ganz ausgezeichneter Nahrboden fiir anaerobe
Bafctoi^, K^offelbrei hat sich fiir Kohlehydratzersetzer sehr gut be-
wahrt. Leberbouillon wird in der Anaerobenbakteriologie vor allem dApbalh
geschatzt, veil die einzelnen Arten schon rein auBerlich an ihrem Wachstum
meist gut zu erkennen sind. Eier-Fleisch leistet in dieser Hinsicht kaum

Uber die Kotte des Stalldiingers usfr.

81

das gleiche. tlberraschend "war es, daB auch der Kartoffelbrei recht gute
Untprsclieidungsinerknialo gab, und z^rar spezicll fur diejenigen Orgauismen,
die in der Leberbouillon schwer zu unterschciden sind. B. amylo-
b a c t e r verandcrte den Nahrboden am wenigston, die iiber den Kartoffel-
teilehen stehcnde Fliissigkeit blieb meist schwach getriibt. B. saccharo-
butyricus fUhrte rasch zu einor ziemlich voTlstandigen Sedimentation
der Partikel, die ubersteliende Fliissigkeit war in der Eegel vollig klar. P e c -
tinobactcr amylophiliim bewirkte eine so stiirmische GSrung im
ROlircben, daB die Kartoffelteilchen nach oben gerissen wurden und von
Gasblasen v6llig durcbsetzt waren. Die darunter stebende Fliissigkeit war
aueh bier v6llig klar. Der Kartoffelbrei diirfte also fiir Arbeiten, die sicb
speziell mit Diinger und Boden bescbaftigen, neben Leberbouillon und Eier-
Fleiscb uncntbeMicb sein.

Die Neigung zur Rasenbildung auf der Traubenzucker-Agar-Platte kann
ansebeinend nur bis zu einem gewissen Grade als Artmerkmal gewertet
werden, da in oinzelnen Fallen ein hoberer Wassergebalt des Na&bodens
zur Easenbildung Veranlassung gegeben baben diirfte.

c) Die Anaerobenflora der einzelnen Dungarten.

Zweifellos entbalt jeder Stallmist zu Beginn der Lagerung anaerobe
Sporenbildner, da diese sowobl im Boden^) wie in der Streu*) in groBer ZaU
vorkommen. Aucb im Darminhalt®) waren sie anzutreffen. Isoliert wurden
obligat anaerobe Organismen aus Stalldiinger erstmalig von S. A. S e v e -
rin®). Wie der Autor selbst feststellt, scbeinen die gefundenen Stamme
zur Gruppe des B. t e t a n u s zu gchbren. Mit Sicberheit wurde B. t e t a -
n u s in Stalldiinger durcb v. H i b 1 e r ®) nacbgewiesen, ebenso B.amylo-
b a c t e r. In kalt vergorenem Diinger fand G. Euscbmann*)B. putri-
ficus und B. amylobacter in groBerer Zabl, dagegen konnte er in
beiB vergorenem Stalldunger obligat anaerobe Organismen nur sebr selten
nacbweisen. Da diese jedocb, wie eben gezeigt wurde, vorbanden gewesen
sein miissen, ist anzunebmen, daB aucb die Sporen wahrend der Lagerung
zugrunde gegangen sind. Das ist jedocb im Hinblick auf die auBerordentlich
groBe Widerstandsfabigkeit derselben iiberrasebend. TJnter der Voraus-
setzung, daB die Sporen nicht wahrend der aeroben Phase absterben, sondem
unter dem langanbaltenden EinfluB der erbdbten Temperatur langsam
zugrunde gchen, muBtc es moglicb sein, ihren Riickgang zahlenmaBig zu er-
mitteln, wenn ein und dcrselbe Stapel wabrend einer langeren Versuebs-

1) XJ c k 0 , Zentralbl. f. Baki. I. Abl. Bd. 23. 1898. S. 998. J. Kbrsteiner,
Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 19. 1907. S. 1—26, 97—116, 202—220, 385—309.
Derselbe und B. B u r r i , ebenda, Bd. 21. 1908. S. 289 — 307. Reindell, Finska
Morkult. Fdren. Arsbog. 1898. Zit. naeh E. Bamann, Bodenkunde. 3. Aufl.
1911. J. ZeiBler und L. Rafifeld, Die anaerobe Sporenflora der europfi-i-
schen Eriegsscbauplatze 1917. Jena 1928. S. 161.

»)J. Ktirsteiner, Zentralbl. f. Bakt. 11. Abt. Bd. 47. 1937. S. 191.

®) M. E. Metchnikoff, Ann. Inst. Past. T. 22. 1908. p. 929 — 956. W. H.
Holmes, Arch. Int. Med. Vol. 17. 1916. p. 463— 468. J.H. Brown, Joum.
Baot, T. 10. 1925. p. 613— 642.

4) S. A. Sever in, Zentralbl. £. Bakt. 11. Abt. Bd. 1. 1896. S. 799. Bd. 3.
1897. S. 628, 706.

®) V. H i b 1 o T , TJntersuchungen uber die path. Anaeroben. Jena 1908-

•) G. Buschmann, Zentralbl. f. Bakt. II. Abt, Bd, 70. 1927. S. 214,
383. Bd. 72. 1927. S. 193. Bd. 75. 1928. S. 182.

ZweiteAbt. Bd.91.

6

82

Hans Olathe,

periode in bestimmten Zeitabstanden untensucM wird, wie es bei den vor-
liegenden Untersucbungen der Fall war.

Tab. 1. Daten der Probeentnahme.

Cunnersdorf j

Probstheida

1 Kaltmist

Edelmist

HoiSmist

Datum

Temp.
0 C

Alter

Datum

Temp.
« C

Alter

Datum

Temp.
° C

Alter

27. 3.

20

6 Tage

20. 2.

5 Tage

6. 1.

70

14 Tage

4. 7.

19

3 I 2 Mon.

18. 6.

29

97 „

16. 6.

55

5 Mon.

6. 10.

14

21. 8.

27

61/4 Mon.

10 . 6.

55

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16. 11.

5

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16. 11.

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65

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Graphische Darstelliing 1. Temperaturverlauf.

Die Ergebnisse der einzelnen Untersucbungen sind in den Tab. 2 — 5 imd
p— 13 und in den graphischen Darstellungen 2 — 4 zusammongestellt. Es
ist jeweils die Zahl der isolierten Stamme einer Art angegeben. Mit Ki'ouzen
sind Stanune gekennzeichnet, deren Zugehorigkeit zii den einzelnen Gruppen
auf Grund ihres Verhaltens in fltissiger Kultur und auf Flatten anzunehmen
war, die jedoch ein^gen, bevor sie in die verscbiedenen Zuckerarten bzw.
in Milch und Gelatine geimpft werden konnten. Soweit dieses Zeichcn in
niedrigen Verdiinnungen auftritt, bezeichnet es Stamme, die als seiche nach
einm^iger Plattenkultur mit einiger Sicherheit erkannt, aber nicht weiter
identifiziert wurden, well sie gleichzeitig aueh in den nachsthoheron Ver-
dunnungen auftraten.

Kaltmist Cunnersdorf.

¥ie die Tab. 11 (graph. Daxst. 2) zeigt, ist das Ausgangsmaterial nicht
sehr reieh an anaeroben Keimen. Am staxksten istB. putrifieus ver-
rucosus vertreten. Er konnte bis zu einer Verdiinnnng von 1 : 100 000
aus der Probe isoliert werden, es miissen also mindestens 100 000 Organismen

tJ’ber die Rotte des Stalldiingers usw.

83

dioser Art je Gramm vorhanden gewesen sein. Von den iibrigen Arten waren
nur 100 — 1000 Keime je Gramm in der Probe enthalten. WSihrend der ersten
Zeit der Lagerung vermehrte sich B. putrificus verrucosus sehr
rasch, nach 6 Tagen wnrden rund 10 Millionen Organismen dieser Art jc
Gramm nachgewiesen. Von den anderen Arten tritt nur B. amylo-
b a c t c r ebeiifalls in der hoclisten Verdiinnung auf. Dieses Ergebnis laBt
allcrdings kaum SchluJSfolgerungen auf eine intensive Tatigkeit desselben zu,

Vorkonmien und Vortoilung anaerober Bakterien.

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Graphischo Darstellung 2. Ka It mist Cunnersdorf.

Tab. 2, Kaltmist Cunnersdorf.

Anaerobe ZeUulosezersetzer.

Ver-

Datum der TJntersuchung

dunnung

Frischmist

27. 3.

4.

7.

6.

10.

16,

11.

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0 = kein Wachstum; + e= Wachstmn.

da sowohl B. amylobacter wie B. saccharobutyricus nur bis
zu einer Verdiinnung von 1 : 1000 regelm^Big nachgewiesen werden konn-
ten. Vom Juli an, also nach 3 — 4 Monaton, tritt bei alien Gruppen eine
Starke Vermehrung ein. Die regste Entwicklung entfaltot wiederum B. p u -
tri ficus verrucosus, nach ihm B. saccharobutyricus,
an drittor Stelle ist B. amylobacter zu nennen. B. tetanomor-
p h u s , der zwar aus dem Frischmist isoliert werden konnte, verschwand
zunachst vollkommen, Im Oktober wurde er dann wieder beobachtet, kam

6 *

•84

Han s Glatho ,

aber scbon bei der ersten Plattenkultur niclit zur Entwicklung, erst aus
dem 8 Mouate gelagerten Diinger gelang seine Roinziichtung wicdcr. P e c -
tinobacter amylophilum war im Prischmist und auch noch im
4 Woehen alten Diinger vorlianden, fehlt aber spaterhin nnd wiirdo erst bei
der nach 8 Monaten vorgenommenen Untersuchung wieder nachgewiesen.

Die Zahl der anaeroben Zellulosezersetzer blieb wShrend der ersten
Zeit der Lagerung nnverandert. Im Juli hat sie sich verdreifacht, nach
8 Monaten ist sie auf das Sfachc gestiegen.

EdelmistCnnnersdorf.

Im Gegensatz zu dem Kaltmist trat im Edelmist (vgl. Tab. 12, graph.
Darst. 3) wahrend der Lagerung keine Vermehrung, sondcrn vielmchr ein
deutlicher Eiickgang in der Zahl der Keime des B. pu trificus
verrucosus ein. Erst nach 10 Monaten wurde er wieder in der-
selben Verdiinnung (1 : 100 000) nachgewiesen, aus der er im Frisch-

Vorkommen und Verteilung anaerober Bakterien.

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Graphisdie Darstellung 3, Edelmist Cunnersdorf.

mist isoliert worden war. Die tibrigen Organismen, vor allem Pec-
tinobaeter amylophilum, aber auch B. amylobactcr
und B. saccharobutyricus wiesen eine Zunahme auf. Dor zu-
erst_ genannte Oi^anismus erschien bei dem 5 Tagc alten Mist sogar
in einer hSheren Verduimung alsB. putrificus verrucosus. t)ber-
raschenderweise ging die Zahl der Kohlehydratzersotzer in don nhchston
Monaten so weit zuriick, dafi ihr Nachweis nicht gelang. Aus dem 3% und
6^2 Monate alten Edelmist konnton nur einige StSinme von B. putri-
ficus verrucosus isoliert werden. Es kann jedoch keinem Zweifel
unterliegen, dafi auch diese in irgendeiner 'Weise verandert waren, die Iso-
lierung der Stamme gelang haufig nur nach wiederholtem Wechsel des
Anreieherungsnahrbodens. Die Annahme, dafi die Kohlehydratzersetzor
vSllig zugrunde gegangen seien, ware jedoch ein Irrtum, denn bei der letzten
Untersuchung waren sie wieder ungefahr in der gleichcn Zahl anwesend
wie zu Beginn der Heifivergarung.

t}^ber die Kotto des Stalldiingers usw.

85

Tab. 3. Edclmist Cunnersdorf.

Anaerobe ZoUulosezersetzer.

Ver-

Datum der Untersuchung |

duiinung

Friscshmist

20. 2.

18

5.

21. 8.

16.

11.

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0 = kein Wachatum ; + = Waohstum.

Die Intensitat der ZelMosezersetzung nahm zunachst rascher zu als
bcim Kaltmist, am ScMufi des Versuchs ■wurden anaerobe Zellulosezersetzer
jedoch nur bis zur Verdiinnung 1 : 10 000 nachgeTOesen.

Vorkommen und Verteilung anaerober Bakterien.

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Qraphisoho BarstoUung 4. HeiBmist Brobstheida.

Hoifimist Probstheida.

Bei dem in Probstheida (vgl. Tab. 13, graph. Darst. 4) dureh-
gefiihrten Lagerungsversueh ist zunachst hervorzuhcbon, dafi das Aus-
gangsmaterial kanm Organismen der Gruppe des B. pu trificus
verrucosus enthielt. Dagegen war B. sacehar obutyricus
sehr stark vertreten, noch zahlreicher der fakultativ aerobe P e c -
tinobacter a.m ylophilum. Auch B. sphenoides war bis
zu einer Verdiinnung von 1 : 10 000 naehweisbar. Bereits naeh 14
Tagen trat eine Umschichtung ein. B. putrificus verrucosus
entmckelte sich sehr rasch, neben ihm erschien B. cochlearius.
Dio Eohlehydratzersetzer gingcn stark zurtick, B. sphenoides ver-
schwand vOUig, nur B. tetanomorphus vermochte sich etwas zu

86

Hans Glathe,

vermehren. Yom Mai bis September wareii nur wenig anaerobe Organismen
nachweisbar. Im 30. Monat der Lagerung kam auch B. pu trificus
verrucosus nicht mebr zur Entwicklimg, ebenso die meisteu Kolile-
hydratzersetzer, nur B. amylobacter konnte noch aus der Vorcliiimimg
1 : 10 isoliert werden.

Tab. 4. Hoifimist Probsthoida.

Anaerobe Zellulosczorsetzor.

Datum der Untor&uchung

Ver-

16

16

6.

17

9.

26.

10.

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6.

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6.

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0 = kein Wadistum; + = Wachstum.

Anaerobe Zellulosezersetzer wnrden im Ausgangsmaterial nicht gc-
funden. Sie traten jedoch bald in Erseheinung nnd waren bereits nach
14 Tagen bis zn der Verdiinnung 1 : 100 nachzuweisen. Auf diescr Hohe
halt sich ihro Zahl ■wahrend der nachsten Monate, aber am Ende der Lagerung
kommt die anaerobe Zellulosezersetzung vollig zum Stillstand.

Die untere Schioht des Heifimistes Probstheida hatte sich wahrend
der Lagerung nur ungenugend erwarmt. Die biologische Beschaffenheit
dieses Mistes -weicht infolgedessen von der des iiberhitzten Garproduktes
stark ab. Sie mrd gekennzeichnet durch hohe Keimzahl und das Vorhcrr-
schen von B. putrificus verrucosus (vgl. Tab. 5). Anaerobe
Zellulosezersetzer 'vnirden noch in der Verdiinnung liiOOOO gefunden
(vgl. Tab. 4).

Tab. 6. HeiBmist Probstheida, untoro Schicht (2C. 10. 1933).
Vorkommen nnd Verteilung anaerober Baktorion.

Verdunuung

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B. amylobacter

Kartoffelbrei .

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B. sphenoides

Kartoffelbrei .

1

t^ber dio Botte des Stalldlingcrs usw.

87

d) Die aerobe Flora derDiingerarten.

Obwohl OS nicbt der Zweck vorliogender UntersuchuDgen war, die aerobe
Flora wShrend des Verlaufs der Rottung zu studieren, soUen zur genaueren
KentizcichnuTig der Proben einige Angaben Meriiber gemacht werden, zu-
jiial sich dadureh ein umfassenderer Einblick in das Ineinandergreifen der
cinzclnen Umsetzungsvorgange ergibt. Die entspreehenden Ergebnisse sind
in den Tab. 6—8 und der graphisehen Darstellung 5 cnthalten. Hinsicht-
lich der Gesamtkcimzahlen werden die alteren Ergebnisse von G. R u s c h -
ui a n n nnd W. Goeters*) in voUem Umfange bestatigt, mit der
von F. L 6 h n i s ®) angegebenen Kurve ergibt sich eine deiitliehe tlberein-
stimmung. Im Einklang mit den Befunden G. Rnschmanns konnten
auch hier bei Edelmist hohe Sporenprozentzahlen errechnet werden. Bei
dem Heifimist Probstheida liegen die Dinge allerdings anders, doch handelt
es sich hier, wie noch naher auszufUhren sein wird, nicht nm nonnalcs Gargut.

Gosamtkeimzalilen aerober Bakterien.

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Graphische Darstellung 6.

Intercssant ist die starke Zunahme der Aktinomyzeten im Kaltmist
Cunnersdorf. Bcim Edehnist Cunnersdorf erscheinen sie dagogen erst am
Schluf! dor lOmonatigen Lagerung. Im Heifimist Probstheida traten sie
zwar im Mai auf, waren aber gegcn Ende dor Lagerung kaum mehr nach-
zuwcisen. Im Edelmist Cunnersdorf warden thermophile Aktinomyzeten
festgestellt, i^e Zahl schwankte zwischen 1000 und 10 000 je Gramm.

Die Zahl der Organismen der Coligruppe ging wahrend der Lagerung
stark zuruck, beim Edelmist rasch, beim Kaltmist sind naeh 3% Monaten
noch immer 1000 Keime dieser Art vorhanden. Im Hinblick auf die geringe

'■) G. Busohmann, Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 70. 1927. S. 214,
S83. Bd. 72. 1927. S. 193. Bd. 76. 1928. S. 182. Beitrftge z. Biooheinte d. Abbau-
vorg. b. pllanzl. Boh- u. Abfallstoffen. Hab.-Schrift. Berlin. 1929.

*)W. Ooeters, tTnters. tlb. Keimgeh. n. Wirkung versch. behand. Stall-
dilngers. Dies. pbil. Leipzig 1927.

®) F* LOhnis» Portscbr. d. Landw. Bd. 4. 1929* S. 66.

88

Hans Glathe

Hitzeresistenz der Colibakterien^) ist es iiberraschend, daB beim HeiBmist
Probstheida sich trotz der hohen Temperaturen immer noch cinige Keime
fiir langere Zeit lebensfahig zu erhalten vermochtcTi.

Tab. 6. Kaltmist Cunnersdorf. Keimgchalt jo g.

Datum
d. Un-
ter-
such.

Aerobe

Gesamt-

Heimzahl

Aktino-

myzeten

Aerobe

Sporen

Sporen
in % dor
Gesamt-
Heimzahl

Organis-
men dor
Coli-
gruppe

Therm 0 -
pliilo
Organis-
men

Anaerobe
Gosamt-
Keimzahl
a. Platton

31. 1.1)

16 000 000

400 000

2.6

100 000

150 000

- -

4. 2.1)

4 500 000

—

2 900 000

64,6

100 000

—

2 260 000

20. 2.1)

19 000 000

—

410 000

2,15

440 000

100

2 100 000

27. 3.

46 000 000

300 000

360 000

0,8

200 000

180 000

25 600 000

4. 7.

23 000 000

—

1 000 000

4,8

1 000

2 100 000

6 000 000

5. 10.

11 400 000

1 000 000

160 000

1,31

6

6 000 000

105 000

16. 11.

8 000 000

2 400 000

2 900 000

36,2

100

200 000

2 600 000

Frischmist.

Tab. 7. Edelmist Cunnersdorf. Keirngehalt je g.

Datum
d. Un-
tersuch.

Aerobe

Gesamt-

Heimzahl

Aktino-

myzeten

Aerobe

Sporen

Sporen
in % der
Gesamt-
Keimzahl

Organis-
men der
Coli-
gruppe

Thermo-
phile Or-
ganismen

Anaerobe
Gesamt-
Keimzahl
a. Flatten

Frisch -
mist

19 000 000

410 000

2,15

440 000

180 000

25 500 000

20. 2.

2 000 000

—

1 300 000

65,0

100

630 000

2 200 000

18. 6.

400 000

—

160 000

40,0

100

830 000

41 000

4. 7.

11 700 000

2 000

—

—

100

1 000 0001)

3 400 000

5. 10.

1 300 000

—

800 000

61,5

—

260 000

280 000

16. 11.

3 000 000

30 000

2 800 000

93,3

—

100 000>*)

1 500 000

1) 10 000 Aktinomyzoten.
®) 50 000 Aktinomyzeten.

Tab. 8. HeiBmist Probstheida. Keimgehalt jc g.

Datum
d. Un-
tersuch.

Aerobe

Gesamt-

Heimzahl

Aktino-

myzeten

Aerobe

Sporen

Sporen
in % dor
Gesamt-
Keimz.

Organis-
mon der
Qoli-
gruppe

Thermo-
phile Or-
ganismen

Anaerobe
Gesamt-
Koimzalil
a. Platton

Frisch-

mist

120 000 000

61000

0,04

500 000

210 000

30 000 000

10. 1.

390 000

—

—

100

—

16. 5.

400 000

—

4 900

1,20

100

80 000

3 000

16. 6.

7 600 000

10 000

19 000

0,26

100

14 000 000

< 1 000

26. 7.

< 100 000

—

—

0

28 000 000

....

12. 9.

300 000

60 000

60 000

0

500 000

3 000

26. 10.

36 000

600 000

600

0

10 000

40

26. 10.1)

11000 000

900 000

1 360 000

12,4

100

<1000

2 600 000

26. 10. s)

27 000 000

1 000 000

—

1000

—

—

1) XJntere Schicht.
*) Randschicht.

W. Patzschke, Ztschr. f. Hygiene. Bd. 81. 1916. S. 227 — 265.

tJber dio Botte des StaJldiingers usw.

89

Die Zahl der thermophilen Organismen stcigt bci den Heifimistarten
zicmlich rasch an, fallt aber spater stark ab. Da auch im Kaltmist Cunners-
dort cine deutliehc Znnahme der bei 67® C wachsenden Organismen beob-
aebtct wurdc, obwohl dio Temperatur im Stapel 20® C nicht iiberstieg, ist
anznnehmeu, daB cs sieh bier nicht um thcimophilc, sondern viobnehr um
therniotolorante Arten handelt. Auch thermotolerante Pilze •warden ■vriedcr-
holt boobachtct.

Die fakultativ anacroben Koimo warden in derselben Weise gezUhlt,
wic das G. R u s c h ra a n n i) bereits getan hat, nur warden ^e Flatten
bei don vorliegonden Untersuchungen in der Wasserstoffatmosphare be-
briitet. Dio ontsprechenden Kurven zeigen ahnliehe Schwankungen wie
die der aerobon Gesamtkeimzahlen. Bei dem HeiBmist Probstheida und
beim Kaltmist Cunnersdorf liegen sie etwa in gleicher Hohe wie die Zahlen
obligat anaerober Baktericn, beim Edebnist Cunnersdorf begen sie deut-
lich hoher. DaB bei dieser Methode vereinzelt auch obbgat anaerobe Keime
zur Entwieklung zu gelangen vermogen, 'wurde bereits festgestellt®). Auch
im Verlauf der vorliegenden Untersuchungen warden, besonders bei Gas-
bildung, einzelne Kolonien, die in ihrem AuBeren denen obligat anaerober
Bakterien glichcn, in den fur diose vorgesehenen fliissigen Nahrboden weiter-
geziichtct, dock erwiesen sich nur 25% der gepriiften Kulturen als obligat
anaerobe Organismen.

Ahnlich wie bci den anaeroben Bakterien®) machten sich auch in der
Zusammcnsotzung der aeroben Flora deutliche Unterschiede zwischen dem
Inneren dos Stapels und den ungeniigend erhitzten Teilen (Rand- und Boden-
schicht) geltend. Dio in Tab. 8 ftir diese Schichten angegebenen Werte
erganzon die bei der Isolierung anaerober Organismen gesammelten Er-
fahrungen in jeder Weise. Hohe Gesamtkeimzahlen und die Anwesenheit
von Organismen der Coligruppe konnen als Kennzeichcn derartiger Gkr-
produkto gelten. Innerhalb der Randschicht hatten sich auBerdem beim
Zusammensinken des Diingers kleine Hohlraume gebbdet, in denen lebhafte
Pilzent'wicklung zu einer starken Zersetzung des Materials gefiihrt hatte.

e) Dio Bcdeutung der Mikroflora fUr die Rotte der
untersuchten Diingerstapcl.

Wenn im folgenden der Versuch gemacht werden soil, Bezieliungen
zwischen dem Vorhandensein anaerober Organismen und den Veranderungen,
die im lagernden Diiiiger vor sich gegangen sind, festzustellen, so kann zu-
nachst cingewendet werden, daB die Anwesenheit der Organismen alloin
zu SehluBfolgerungen auf ihre Tatigkeit nicht bereehtigt, da die einzebion
Keime in Sporenform im DUnger enthalten scin kcinnen und keinerlei Be-
tatigung entfalten. Wonn es jedoch gelingt, eine deutbche Vermehrung
anaerober Arten nachzuweiscn, -wie es bei den vorliegenden Untersuchungen
wiodorholt der Fall war, kann angenommen werden, daB auch anaerobe
Bakterien sich an den Umsetzungen im lagernden Stalldunger beteiligen.

Ein Vergleich der beiden Cunnersdorfer Mistarten zeigt zunachst, daB
die anaeroben Bakterien durch die HeiBvergarung auBerordentlich stark
gehemmt wurden. Wenn es auch nicht zu einer Vemichtung derselben

1) G. R u s o 1i m a n n , 1. c.

H. G lathe and A. Cunningham, Joum. Agr. Soi. Yol. 23. 1933.

p. 561.

Vgl. Tab. 5.

90

HanB Glatho,

kam, so darf dock vermutet werdcn, dafi sie mindcstens fdr einige Zeit nicht
in groBerem Umfange an den Umsetznngen beteiligt waren.

Dafi die Abbauvorgange in heifivergorenem Diinger grundsaizlich anders
verlaufen als im Kaltmist, durfte schon duich obige Ausfuhrungcn klar-
gelegt sein. Eino 'weitere Stiitze fiir diese Ansicht crgibt sicb dann, wenn
man die Stadien berucksielitigt, in denen Vennehrung bzw. Abnahmc ein-
zelner Arten bcobachtet mirden. Beim Kaltmist toat schr rasch cine inten-
sive Vermehrung des B. pu trificus verrucosus ein, wahrend
die Zahl der Kohlehydratzersetzer (abgeseben von dem bereits erwahnton
unsicberen B. amylobacter des am 27.3. 1933 untorsuchten Kalt-
mistes) kaum eine Veranderung zeigt. Beim Edelmist nahm B. p u t r i -
ficus verrucosus zunachst ab, wahrend die Kohlehydratzersetzer
sich nachweisbar vermehrten. Im Treiteren Verlauf der Garung war B. p u -
trificus verrucosus zwar noch anwesend, aber, wie ebenfalls bereits
betont wurde, offenbar so stark geschwacht, dafi er kaum einen erheblichon
EinfluB auf die Ganing ausgelibt haben durfte. Bei der allgemeinen Ver-
mehrung, die am Schlusse der Versuche einsetzte, sind TJnterschiede nicht
festzustellen. Es seheint daher, dafi wahrend der ersten 10 Monate der
Lagerung die Eiweifizersetzer in ihrer Tatigkeit gehemmt und bis zu einem
gewissen Grade von Kohlehydratzersetzern abgelost wurden.

Es ist auffallig, dafi die meisten Kmven im Mai bzw. Juni ein Mini-
mum erreichen und sich dann wieder aufwarts bewegen. Viellcicht liegt hier
ein EinfluB der Jahreszeit vor, wie er besonders bei den Stickstoffumsetzungen
im Boden nachgewiesen wurde. Die Abstande zwischen den Probenahmen
der vorliegenden Untersuchungen sind indessen so groB, dafi bestimmte
Schlusse aus den Ergebnissen nicht gezogen werden kSnnen.

Das Ausgai^smaterial des in Probstheida durchgefuhrten Lagerungs-
versuchs untersehied sich deutlich von dem der Cunnersdorfer Dungarten
durch das Vorherrschen der Kohlehydratzersetzer. Vom Pectinobacter
amylophilum waren 1000 000 Keime je Gramm vorhanden, von
B. saccharobutyricus 100 000, aber nur 100 Organismen dor
Putrificus - Gruppe. Dagegen enthielt der Cunnersdorfer Erischmist
100000 Keime desB. putrificus verrucosus je Gramm und
nur 1000 von B. amylobacter. Bei dem Versuch in Probstheida wurde
die anaerobe Flora nach einem kurzen Aufflackem so gut wie restlos ver-
niehtet.

ft

In biologischer Hinsicht glich der Heifimist Probstheida einem einwand-
freien Edelmist durehaus, seine auBere Beschaffenheit entsprach jedoch,
wie bereits auf S. 5 ausgefUhrt wurde, in keiner Weise den Aiforderungen,
die an einen solchen gestellt werden miissen. Eine Priifung der Reaktion
ergab, dafi die Wasserstoffionenkonzentration auf pa 5,62 (in KCl-Auf-
s(£wemmung) gestiegen war. ErfahrungsgemaB weist aber der Stalldunger
in frischem Zustand eine Reaktion von etwa pa 7,1 und nach der Lagerung
von Pa 8,0— 8,6 auf.

Man kfinnte die saure Reaktion des Heifimists Probstheida zunachst
duauf zuriickfiihren, dafi groBere Mengen von Griinfutter-Silage von den
Tieren im Stall verstreut wurden und so in den Diinger gelangten. In dem
vorliegenden Falle besteht diese MSglichkeit jedoch nicht, da als Grund-
futter eingesauerte Kartoffeln gegeben wurden und nicht anzunehmen ist,
dafi Mervon grSfiere Mengen in den Diinger gelangten.

tJber die Rotte des Stalldungers umr.

91

Einc 'weiterc Erklarangsmoglichkeit besteht darin, daB vahrend der
Lagcrung oine Anhaufung der bei der Zersetzung der Kohlekydrate ent-
stchenden Saurcn eintrat. Im Ausgangsmaterial war Pectinobactcr
a mylopliilum am stai’kstcn vertrcten. Diesor Organismus wurde im
Jahro 1915 von LA. M a k r i n o w aus der Kostflussigkeit des Flachsos
isolicrt imd als Pektinzcrsetzer beschrieben. In ciner neueren Arbeit teilt
LA. M a k r i n 0 w mit, daB Pcctinobacter von den Kohle-
liydraten in crster Linic Starke angreift. Ein Vergleich der Tab. 11 — 13
(s. auch S. 80) zeigt, dafi seine VorHebe fur Stoke sick insofern auswirkte,
als er in 68% aller Ealle aus Kartoffelbrei gezuehtet "werden konnte, nur
16% dor Stamme wurdcn aus Leberbouillon, der Rest aus mineralischer
Zuckcrlosung isoliert.

Um Klarheit iiber die Ursachen des starken Auftretens von Pectino-
b a c t e r zu gewinnen, wurde die Anaerobenflora eingesauerter Kartoffeln
aus Probstheida sowie aus Cunnersdorf nahcr untersucbt. In Cunnersdorf
waren die gedampften Kartoffeln toils mit, teils ohne Zusatz von entrahmter
Milch eingesauert worden. In der letzteren Probe war Pectinobacter
nicht naclizuweisen, dagegen kam or in der zuorst genannten in geringer Zahl
vor. In groBer Menge wurde er jodoeh in dem aus Probstheida stammenden
Material nachgewiesen. Es kann dahcr wohl mit Bestimmtheit angenommen
werdcn, daB der Organismus walrrend des in Probstheida durchgefiihrten
Versuehs aus dem Futter in den DUngor gelangte, dock konnen uber den
Weg keine bcstiramtcn Angaben gemacht werden. Ein Verstreuen von
Futter im Stalle ist wohl kaum anzunehmen, es besteht aber die MSglich-
lichkeit, daB dor Organismus, dossen Sporen auBerordentlioh widerstands-
fahig sind, den Vcrdauungstraktus des Tieres ungeschadigt passierte und
sich im Diingor intensiv weiter entwickelte. In diesem Zusammenhang ver-
dient noch hervorgehoben zu werden, daB in Probstheida auch B. s pho-
no i d e s , der ebenfalls ein starker Kohlehydratzersetzer ist, sowohl im
Sauerfutter wie im Stalldiinger in grSBerer Zahl nachgemesen wurde, wahrend
er in den Cunnersdorfer Dungerproben fehlte.

Die saure Roaktion im HciBmist Probstheida kann wahrseheinlich z. T.
auf die Tatigkcit des Pcctinobacter zuriiekgefuhrt werden, da er
nach LA. M a k r i n o w ®) Essig-, Ameisen- und auch gcringe Mengen
von Milchsaurc erzcugt. Die Anhaufung von Sauren im Nahrboden fiihrt
bei diesem Organismus nicht wie bei vielen anderen*) zu einer friihzeitigen
Degeneration, er besitzt violmohr eino ausgesprochene Saurercsistenz. In
der RSstflussigkeit lebt er bei Reaktionen von pa 5,2 — 6,0, so daB auch
im vorliegendcn Falle von seiten der Reaktion keine Hemmung der Lebens-
tatigkeit zu erwarten geweson ist.

Venn nun die Wahrscheinlichkeit besteht, daB aus dem Putter stam-
mende Organismen den Rotteverlauf im lagernden Stalldiinger wescntlich
beeinflussen, so ergibt sich die Notwendigkeit, bei TJntersuchungen uber
die Diingerrotte die Piitterung in weit stokerem Mafie als bisher in Betracht
zu ziehen.

>) I. A. Makrinow, Arch. bioL Naiak. Bd. 18. 1916. 8. p. 440—462.

*) I. A. Makrinow, Zentralbl. f. Bakt. H. Abt. Bd. 86. 1931/32. S. 339
bis 348.

I. A. M a k r i n o w » 1. o., S. 343.

J. Z 6 i B 1 e r und L. KaBfeld, Die anaerobe Sporenflora der europ.
Kriegsschaupl&tze 1917. Jena 1928. S. 76. (Spez. Fra enke lecher Gasbazillus.)

92

Hans Glathe,

Da auch in dem Cunnersdorier Frischmist groBere Mengen von Kohlc-
hydratzersetzern enthalten ■waren, hatte auch dort eino hdhere Wasserstoff-
ionenkonzentration erwartet ■werden konnen. Ziemlieh iiberoinstinimend
zeigte jedoch die KCl-Aufschwemmung dieser beiden Mistartcn eino Reak-
tion von ps 8)5. Vemiutlich haben die Stoffwechsclprodukte des B. p u t r i -
ficus verrucosus, der wahrend der Lagcrung stets nachwcisbar
■war, hier neutralisierend gewirkt. Im HciBmist I^obslheida dagogon Irat
er gegeniiber den Kohlehydratzersetzem stets in den Hintergrund, auBcr-
dem wurde eine gevisse Hemmung der "Wachstumsfreudigkeit bei den iso-
lierten Stammen beobachtet. Um den EinfluB der hohen Tcmperaturen
aufB. putrificus verrucosus erkennen zu konnen, wurden ein-
zelne Stamme bei 57® C geziichtet. Die Kulturen zeigten Wachstum, die
Gasbildung var schv'aeher, in der Leberbouillon setzte die charakteristische
Schwarzung nur sehr langsam ein, in mehreren Fallen unterblieb sie vollig.
Diese Beobaehtung stiramt mit der von V. 0 p r e s c u ^), wonach das
proteolytische Enzym bei Temperaturen zwischen 60 und 65® C zerstSrt
■wird, iiberein. Die saure Eeaktion des in Probstheida erzeugten Garprodukts
diirfte somit auch auf die zu hohen Temperaturen zuriickzufuhren sein,
und zwar in der Weise, daB diese eine Hemmung der EiweiBzersetzung und
damit auch der Ammoniakbildung bewkt haben, so daB ein Mangel an
neutralisierend 'wirkenden Stoffen eintrat. Auch in anderen Fallen ist bereits
auf den ungunstigen EinfluB zu starker Erhitzung hingewiesen -worden®).

DaB die hohen Temperaturen sogar in erster Linie fiir das MiBlingen
der Garung verantsrortlich zu machen sind, geht auch aus folgender Uber-
legung hervor. Bei der Edelmistbereitung pflegen sich die unteren Schichten
nicht in demselben MaBe zu erhitzen wie das Innere des Stapels, infolgedessen
ist auch der Verlauf der Rotte und die Zusammensetzung der Girprodukte
verschieden. Der Dunger der unteren Schicht war stark verrottet, hatte
eine schwarzbraune Farbung angenommen und roch schwach faulig. Die
Faserung des Strobes war kaum noch zu erkennen, die Reaktion betrug
ph 8,48 (in KCl-Aufschwemmung). Die anaerobe Flora dieser Schicht (vgl.
S. 22) setzte sich wesentlich anders zusammen als die des Kernes, sie zeigte
die typisehen Merkmale eines Kaltmistes, wie er in Cunnersdorf erzcugt vuirde.
Neben einer auBerordentlieh starken Flora von B. putrificus verru-
cosus verschwinden die Kohlehydratzersetzer fast v5llig. Die aus dicsein
Mist isolierten Stsmme unterschicden sich deutlich von denen des stark er-
hitzten Stalldungs, sie zeigten groBere 'Wachstumsfreudigkeit, ihre Identifika-
tion gelang infolgedessen wesentlich rascher als die der aus dem iiberhitztcn
Material isolierten Organismen. Diese Erscheinung deutot darauf hin, daB
die physiologische Aktivitat besonders der eiweiBzersetzenden Stammo
durch die hohen Temperaturen stark geschadigt wurde. Die charakteristisehen
Untersehiede der unteren Schicht und des Kerns lassen klar erkennen, daB
die Ergebnisse von LagerungsvCTSUchen in kleinem MaBstab, wie sie haufig
angestellt worden sind, zu falschen SchluBfolgerungen fiihren kSnnen und
infolgedessen nicht verallgemeinert werden diirfen.

Auch die anaerobe Zellulosezersetzung zeigt bei den einzelnen Diinger-
arten recht auffallige Untersehiede. Im Kaltmist Cunnersdorf ist eine Steige-
rung der Zahl der Zellulosezersetzer bis zum SchluB des Versuchs zu bcob-

1) V. Opresou, Axoh. f. Hygiene. Bd. 33. 1808. S. 164.

•) K.Bexnert, Dtsdi. landw. Presse. Bd. 67. 1930. 8.636,649; Q.Rusoli-
mann, Biedermanns Zentialbl. f. Agrik.-Cliena. Bd. 60. 1931. S. 177.

tJber die Rotte des StalldUngers usw.

93

achten. Die Intensitat der Zersetzung durfte hier weiterhin durcli die Aktino-
myzeten, die sich vom Majz an sehr stark vermehrten, erhoht worden sein^).
Boim Edelmist Cunncrsdorf nahm die Zahl der Zellulosezersetzer vom April
an nieht mehr zu, blieb abcr immer auf gleicher H6he. Trotz der auBerordent-
lich hohen Temperaturen im HoiBmist Probstlieida sind bis in den Juni
hinein etwa 100 Zellulosezersetzer je Gramm vorhanden, von dicsem Zeit-
punkt an nohmcn sie jedoch stetig ab und sind am SchluB des Versuchs
iiberhaupt nieht mehr nachzuweisen. Auch hierfiir durften saure Keaktion
und hohe Temperaturen verantwortlich zu maehen sein, denn in der unter-
sten Schicht sind sie noch am SchluB bis zur Verdunnung 10-* vorhanden.

Die einzelnen Zomponenten der Rotte, die bereits eingangs kurz ge-
streitt wurden, sind nur bis zu cinem gewissen Grade biologische Umsetzungs-
vorgange, zum anderen Teil sind sie als chemisch-physikalische Prozesse
aufzufassen. G. Rusehmann*) stellt fest, daB bei der Rotte des HeiB-
mistes in erster Linie die letzteren mitwirken und hbchstens indirekt die
biologischen Faktoren. "Wird diese Theorie mit den im Laufe dieser Unter-
suchungen gesammelten Erfahrungen verglichen, dann kann sie kaum be-
statigt -werden. Der HeiBmist Probstheida war in keiner Weise gemiirbt,
er war bei jedcr Prufung don Cunnersdorfer Proben deutlich unterlegen.
Es ist nieht oinzusehen, weshalb eine starkere Erwarmung die Murbung
hemmte, wic os doeh offenbar der Fall war. Es hatte eher eine Forderung
der Rotte erwartet werden kSnnen, da alle chemischen Prozesse bei hSheren
Temperaturen beschleunigt verlaufen. AuBerdem konnen die groBen Schwan-
kungen, donen die Zahl der Organismen wahrend der Lagerung unterliegt,
wohl nur so gedeutet werden, daB sowohl im Kaltmist Cunnersdorf wie
wahrscheinlich auch im Edelmist anaerobe Bakterien sich an den Dmsetzungen
beteiligt haben. Die HeiBvergarung hat jedoch zur Folge, daB die ungeregelte
Entwicklung und Vermehrung von Organismen, wie sie im Kaltmist in Er-
scheinung tritt, in bestimmten Grenzen gehalten wird. Im HeiBmist Probst-
heida dagegen, dessen auBcre Besehatfenheit, verglichen mit dem Frisch-
mist, nur sehr geringe Veranderungen erkennen lieB, war die Zahl der Mikro-
organismen auf cin Minimum zuriickgegangen.

Vcrgleicht man die Endprodukto der 3 Lagerungsversuche, so ergibt
sich, daB nur bei Temperaturen bis zu 65® C ein einwandfreier EdeMst
erzeugt werden kann, daB dagegen eine Erhitzung des Dangers uber 65® C
hinaus unter alien Umstanden vermieden werden muB. Auch die lebhafte
Entwicklung von Mikroorganismen, wie sie sich beim Kaltmist Cunners-
dorf in don hohen Kohnzahlen fiir aerobe wie fiir anaerobe Organismen-
gmppen auspragt, ist jedenfalls nieht wiinschenswert, da sie zu EiweiB-
bildung und Verlusten an Masse fiihrt.

Auch bei der beheltsmaBigen Edelmistbereitung scheint die Garung
im allgemeinen in derselben Weise zu verlaufen, und auch hier kann es zu

1) A. Krainsky, Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 41. 1914. S. 673; A. E.
T r a a e & , Nyt. Magazin f. Naturw. Bd. 62. 1914. I, S. 120 — 121 ; F. H. S o a 1 e s ,
Bot. Gaz. Bd. 60. 1916. p. 149— 163; S. A.Waksman, Abstr.Baot. Vol. 3. 1919.
Ko. 6; derselbe \md H. Heakelekian, IV. Intern. Oonf. Soil Science. III.
Comm. Rom 1926, ref. in Zentralbl. 1. Bakt. II. Abt. Bd. 69. S. 266; derselbe nnd
C. E. Skinner, Joum. Baot. Vol. 12. 1926. p. 67 — 84; derselbe and R. J. B u b o s ,
Compt. rend. (Paris). T. 186. 1927. p. 1226—1228.

*) G. Rusobmann , 1. o.; Zuokerriibenbau. Bd. 10. 1928. S. Ill; Ztsdhr.
{. Spiritus-Ind. Bd. 61. 1928. S. 268; Fortschr. d. Landw. Bd. 2. 1927. S. 46; Bie-
derm. Zentralbl. Bd. 60. 1931. S. 177.

94

Hans Glathe,

ahnlichen Storungen kommen, wie sie in der GSrstatt Probstheida beob-
achtet wurden. Als Beispiel seien folgende Ergebnisse angefiihrt, dio bei
der Untersuchung von 3 Dungproben erhaltcn vurden:

Probe I: ein typisehor Kaltmist;

Probe II; ein typischer Edelmist^);

Probe III: ein saurer, ungeniigend gerotteter HciBmist®).

Probe

Mistart

I

Kaltmist

II

Edelmist

III

HeiOmist

Gesamtkeimzahl je g . . . .

2 600 000

1 000 000

2 800 000

Colikeime je g

Anaerobe Organismen je g:

60

0

10

B. putrificus verrucosus . .

1000

0

10

B. saccharobutyricus . . .

1 000

0

0

B. tetanomorphus ....

0

100

0

Zellulosezersetzer

10 000

100

0

Reakiion

schw. alkalisch

schw. alkalisch

schw. saner

■VVahrend Probe I und II dieselbe Tendcnz aufweisen wie der in Cunners-
dorf gelagerte Ealt- bzw. Edelmist, zeigte die Probe III die Kennzeichen
des in Probstbeida gevonnenen sanren Garprodukts. Besonders kennzcicbnend
sind die fiir die Zellulosezersetzer angegebenen Werte. Die bei den Gesamt-
keimzahlen zu beobachtenden geringen TJnterscMede konnen dadurch ent-
standen sein, daB 'wUhrend des Transports eine maBige Vermebrung aucb
bei dem beiBvergorenen Mist niebt ausgeblieben sein ■Bird.

Es erbebt sicb nun die Frage, inwieweit der versebiedene Rotteverlauf
die Wirkung des Stalldiingors im Boden beeinfluBt. Eeben vielen anderen
bat der Stalldiinger die A^gabe, die Pufferungsfabigkeit des Bodens zu er-
bbben, und ist bierzu in bervorragendem MaBe befabigt, -wie unter anderem
ein in Cunnersdorf im Jabre 1929 von G. Bartbel®) durcbgefubrter
Versucb zeigt:

Teilstuck

Tag der Probenahme

8. 4.

13. 6.

IS. 8.

_ 15.9.

Ohue organische Diinguug .

6,631)

5,67

6,73

6,0

5,47

Edelmist, 8 Mon. gelagert .

6,37

5,89

6,22

6,98

6,34

Schafmist

5,80

6,08

6,62

6,78

6,64

Behelfsm. hergest. Edelmist

6,68

6,10

6,40

7,23

6,09

Edelmist, 6 Mon. gelagert .

6,70

6,13

6,24

7,42

6,44

Hofmist, kalt vergoren . .

5,67

6,03

6,37

7,43

6,22

der n/10 KCl-Ausschuttelnng.

Es ■war ■wicbtig, festzustellen, vie die bier erzeugten Dungerarton sicb
verhielten, insbesondere ob der saure HeiBmist Abweiebungen zeigte. Zu
diesem Zveck ■wurde in der Zeit vom 29. 11. 1933 bis 10. 1. 1934 ein GefaB-

1) Probe I tind II stammten. von den Betrieben des Herm H. Schneider,
Saatzuchtwirtsohaft Eckersdorf, Kreis Namslau.

®) Probe III wurde zur Untersuchung ilbersandt, da man liber die Ursachen
der anonnalen Rotte Aufkl&rung suchte.

®) G. Barthel, Unters. z. Kenntn. d. Wirkung u. Ziisamznensetzung versch*
beh. Wirtsch.-Dtinger. Diss. phil. Leipzig 1931. S. 22.

tJbor die Botve des Stalldungers usw.

96

versuch durchgefiilirt. In Tontoplen^) wnrden 1500 g gute Gartenerde mit
1% der verschiodonen Stalldiingerproben versetzt, dieWasserkapazitat wnrde
zu 60% abgcsattigt, das verdunstende Wasser gewicbtsmaBig an jedem
2. Tage organzt. Dio Versuche 'wnrden bei 22® C durchgeftibrt. Die Bestim-
mung dor Roaktion in don einzelnen Parallelen criolgte einmal ■wbcbentlich
sowohl in dor Anfschwcmmung mit Wasser als aueh mit KCl-L6sung. Die
Ergcbnisso zcigten indesson so geringe Schwankungen, dafi auf eine Wieder-
gabe der Einzclwcrte vorzichtct werdon kann. In der Tab. 9 mirden daher

Tab. 9. Ergebnisse der Bodenuntersuchungen.

Total-

Gesamt-

Hochst-

Basen-

PH in Auf-
schwem-
mung mit

Ge-

m

Dungung

aziditat

T— S

basengoh.

S

sattigung

T

sSittigungs-

grad

V

Milliaquivalente je 100 g Boden

O'

.. /o .

H,0

KCl

1

1,74

137,74

98,74

■

2

Saurer

1,62

98,78

3

HeiOmist

1,68

133,6

127,2

135,28

98,76

4

1,98

129,18

98,47

6

1,66

146,66

98,93

Mittel:

1.74

134,2

136,94

98,73

7,16

7,24

6

1,62

142,42

98,86

7

Edolmist

3,62

147,22

98,83

8

Cunnersdorf

1,60

148,0

149,60

98,99

9

1.74

1,62

98,87

10

142,42

98,86

1,62

146,4

98,89

7,28

7,26

11

139,2

141,24

98,66

mm

139,2

141,24

98,66

13

Cunnersdorf

1,92

146,4

148,32

98,70

14

1,92

138,4

98,63

15

1,98

142,8

144,78

98,63

Mittel:

1,98

141,2

143,18

98,61

7,22

7,24

16

3,98

137,6

140,8

139,68

98,58

17

Ohne

2,04

142,84

18

Stalldung

142,4

144,38

19

1,98

134,4

136,38

20

1,68

120,0

131,28

Miitol:

1,92

136,9

138,82

98,61

7,16

7,21

nur die Durchscbnittswcrtc angegeben, sichere Schlufifolgcrungen lassen
indessen auch sie nicht zu. Da in erster Linie die hydrolytischeAziditat eine
beginnende Versaucrung anzuzeigen vermag, "irurde (Rose bestimmt, da-
neben auch der Gesamtbasengehalt, urn die HSchstsattigung nach der Formel

V-100.|

errechnen zu konnen®). Die Ergebnisse zeigen, da6 der saure HeiUmist die
Reaktion des Bodens zu verscnieben b^innt, sowohl Gesamtbasengehalt,

1) Bie Versuche wurden in 5 Parallelen angesetzt.

*) H. K a p p e n , Die Bodenaziditiit. 1920. S. 178.

Hans Glathe,

als aucli HSehstsattigung sind im Abgleiten begriffen. In tlbereinstimmung
mit den Tersuchen Barthels haben jedoch die beiden normal gerotteten
Dungerarten den Boden an Basen bereichert. Beim Edelmist Cunnersdorf
ist der Basensattigungsgrad am hoebsten. Also auch bier konnte der gtinstige
EinfluB des beiBvergorenen Dtingers anf die Bodenaziditat trotz der kurzcn
Dauer des Yersuchs nachge'wiesen ^erden.

Der verschiedene Yerlanf der Rotte bei den einzelnen Diingerarten kommt
aueb in einer kurzen tlbersieht iiber den Gebalt der Proben an Stiekstoff
und Troekensubstanz zum Ausdruck (vgl. Tab. 10). Beim HeiBmist Probst-
beida trat eine scheinbare Stickstoffanreicberung ein, die jedocb bei der Um-
recbnung der TVerte anf einen Troekensubstanzgebalt von 25% verscb'windet.
Sie wurde durcb Wasserverdunstung vorgetEuscbt. Dieses Ergebnis muBte
auch ervartet ■vrerden, deim das Material ■war in keiner Weise verrottet.

Tab. 10. Stickstoffgehalt der Stalldungproben.

Datum

Ammo-

niak-

stickstoff

?o

"VVasser-

loslicher

Stiekstoff

0"

/O

Gesamt-

stiekstoff

O'

/o

Troeken-

substanz

%

Bezogen

substar

Ammo-

niak-

stickstoff

%

aiif einen
Lzgehalt VO

Wasser-

loslicher

Stiekstoff

%

Trocken-
n 25%

Gesamt-

stickstoff

%

Kaltmist Cunnersdorf.

Frischm.

0,036

0,078

0,432

19,15

0,073

0,102

0,590

4. 7.33

0,105

0.119

0,458

16,60

0.158

0,173

0,689

3. 10. 33

0,087

0,101

0,439

18,35

0,118

0,137

0,624

16. 11. 33

0,096

0,089

0,472

17.00

0,139

0,131

0,694

9. 1. 31:

0,076

0,087

0.429

18,10

0,105

0,120

0,592

Band

0,016

0,022

0,722

20,95

0,019

0,026

0,861

Probe V,

Feld

0,047

0,074

0,463

16,70

0,070

0,111

0,693

Edelmist Cunnersdorf.

20. 2. 33 '

1 0,134

0,135

0,500

22,60

0,147

0,171

0,653

4. 7.33

1 0,081

0,108

0,528

16,60

0,121

0,162

0,795

4. 10. 33

1 0,100

0,126

0,535

16,50

0,161

0,191

0,802

16. 11. 33 ^

1 0,102

0,101

0,603

21,30

0,119

0,118

0,708

9. 1.34

0,070

0,119

0,578

22.90

0,076

0,129

0,631

Band
Probe r.

0,006

0,028

0,503

15,40

0,009

0,046

0,816

Feld

0,042

0,064

0,oo3

17,20

0,061

0,093

0,804

HeiBmist Probstheida.

Frischm.

! 0,017

0,053

0,393

17,50

0,024

0,076

0,561

26. 7.33

0,052

0,067

0,732

30,10

0,043

0,066

0,608

12. 9. 33

I 0,064

0,080

0,612

28,10

0,067

0,071

0,544

26. 10. 33

; 0,164

0,114 ,

0,576

25,60

0,160

0,111

0,662

Em Vergleich der Trockensubstanzgehalte der beiden Cunnersdorf er
Dungarten ze^, daB aucb bier der heifivergorene Mist infolge der hSberen
Temperaturen mebr Wasser verdunstet hat. Beim Ausfahren des Dangers
warden geringere Rohgewichte festgestellt. Legte man jedoch den Troeken-
^bstanzgehalt zugrunde, dann ergab sich, wenn die am 9. 1. 1934 ermittelten
Werte bertieksicbtigt werden, beim Edelmist eine geringe Mehrausfuhr an
Troekensubstanz.

'Ober die Botfce des Stalldttngers ustr.

97

Verfolgt man den Verlauf der Stickstoffumsetzungen in den beiden
Cunnersdorter Stapebi, so kann man feststellen, daB zu Beginn der Lage-
rung eine kraftige Ammoniakproduktion einsetzte. Beim Edelmist -wurden
zwar hohere prozentuale Werte ermittelt, legt man aber einen Trocken-
substanzgehalt von 26% zugrunde, so ergeben sick etwa dieselben Ver-
haltnisse "wie beim Kaltmist. Fiir den wasserlSslicben Stickstoff wurden
auch bei einem Trockensubstanzgebalt von 25% die bsheren Werte beim
Edelmist erreicbt. AuBerdem unterseheidet sick der Edelmist deutlich so-
wokl vom Kaltmist als auck vom HeiBmist durch die Anreickerung von
Gesamtstickstoff. Die Randschickten waren sekr stark zersetzt, sie zeigten
am Ende der Lagerung einen sekr koken Gekalt an Gesamtstickstoff wie
der Edelmist, aber im Gegensatz zu diesem sekr niedrige Werte fiir die leickt
aufnehmbaren Stiekstofformen. Auf dem Felde wird solckes Material nur
langsam zur Wirkung kommen.

Die Tatsacke, daB der Stalldiinger beim Ausbringen reeht betracht-
liche Verluste erleiden kann, wurde zwar wiederholt betont, sie wird aber
trotzdem nicht genligend beachtet. Tim im vorliegenden Falle einen Ankalts-
punkt zu gewinnen, wurden auf dem Felde, naekdem der Danger gebreitet
worden war, nock einmal Proben genommen. Die Untersuehungsergebnisse
lassen die Verluste, die der Diinger durch Ammoniakverdunstung erlitten
hat, klar erkennen, wenn auch infolge der TJnsicherheit der Probenahme
auf dem Felde liber ikre Hoke keine bestimmten Angaben gemackt werden
k6nnen. Bei vergleichenden Feldversuchen muB jedock hierauf Riicksicht
genommen werden, denn ein Dunger wird urn so groBere Verluste erleiden,
je mekr Ammoniak er entkalt.

Zusammenfassung.

1. Das Ziel der Untersuckungen bestand darin, das Verkalten deran-
aeroben Bakterien in verschieden behandeltem, lagerndem Stalldiinger kennen-
zulernen.

2. Zu diesem Zweck wurde ein Stapel bei Temperaturen bis 20® C kalt
vergoren, ein zweiter wurde nach den Vorschriften der Edelmistbereitung
heiB vergoren (Edelmist), bei einem dritten lieB man die VergSrungstemperatur
auf 70® C steigen (HeiBmist). Die Dauer der Lagerung betrug 10 Monate.

3. Wakrend der Lagerung wurden m Abstanden von etwa 3 Monaten
Proben entnommen und einer bakteriologischen Priifung unterzogen.

4. Zur Anreickerung von Kohlehydrat- und EiweiBzersetzern bewSkrte
sick die Verwendung versckiedener NahrbSden, insbesondere Eier-Fleisch,
Kartoffelbrei und Loberbouillon, nebenemander.

5. Folgende Stamme wurden isoliert: B. putrificus verru-
cosus, B. putrificus Bienstock, B. putrificus tenuis,
B. cocklearius, B. saccharobutyricus, B. amylo-
bacter, B. tetanomorphus, B. spkenoides und Pectino-
bacter amylophilum Makrinow.

6. Beim Kal tmi st schwankten die Zaklen fiir anaerobe Organismen
zwiseken 10 000 und 10 000 000 je Gramm, beim Edelmist wurden wakrend
der Lagerung ziemlich regelmaBig etwa 10 000 anaerobe Organismen je
Gramm nachgewiesen, wakrend beim HeiBmist die Zaklen von 1000 000
je Gramm im Frisckmist am Ende der Lagerung bis auf 10 je Gramm ge-
sunken waren.

Zwelte Abt. Bd. 91.

7

98

Hans Olathe ,

7. Die Zahl fiir die fakultativ anaaroben Organismen lag bei dem Kalt-
mist und bei dem Heifimist etwa in gleicher Hohe Trie die der obligat an-
aeroben Organismen, beim Edelmist deutUcb hShw.

8. Die aus dem Heifimist in grofiarer Zahl isolierten Organismen, P e c -
tinobacter amylophilum und B. sphenoides, wurden
auch in eingeshuerten Kartoffeln, me sie zur Zeit der Diingererzeugung ge-
futtert mirden, nachgeTriesen.

9. Die Zahl der anaeroben Zellulosezersetzer stieg beim Edelmist raseher
an als beim Kaltmist, bei letzterem aber hbher. Beim Eeibmist kam die
Zelluloseza'setzung bis zum SeUufi der Lagerung v6llig znm Stillstand.

10. Durch die HeifirergSrui^ wurde die Entwicklui^ aller Organismen-
gruppen stark beeintraehti^, Ende der Lagerung wurden im Edel-
mist 93,3% der aeroben Keime als Sporen gefunden, im Kaltmist nur 36,2%,
gegeniiber 2,15% im Frisehmist.

11. Beim Kaltmist bestand nach lOmonatiger Lagerung die aerobe
Flora zu 30% aus Aktinomyzeten.

12. Dmreh VergSxung des Stallmistes bei etwa 65® C kann ein einwand-
freier Edelmist gewonnen werden, durch Erhitzung des Diingers auf 70® C
entsteht ein saurer reagierendes GSrprodukt.

13. Der saure Heifimist bewirkte eine Senkung des Gesamtbasengehaltes
im Boden, Kalt- und Edelmist dagegen eine Steigerung.

14. Die Veranderungen, denen der Stiekston- und Troekensubstanz-
gehalt wahrend der Eotte unterlagen, bestatigten und erganzten die Er-
gebnisse der biologischen TJntersuchungen.

Tatelerkl&nmg.

Die photographischen Aufnahmen wurden mit dem ftr das Z e i fi sohe Mikro-
skop vorgesehenen Aufsatz ,^hoku** mit der KamereJinse L hergestellt.

Vergr6Berung (auBer Fig. 5) BOOOfach.

Fig. 1. Bac. putrificus verrucosus Zeifiler.

Fig. 2. Bac. putrificus verrucosus (kettenbildende Form),

Fig. 3. Bac. putrificus tenuis.

Fig. 4. Bac. cochlearius.

Fig. 5. Kolonie von Bac. cochlearius (etwa 40fa6h vergrdBert).

Fig. 6. Bac. saccharobutyricusv, Klecki,

Fig. 7. Bac. saccharobutyricus v. Klecki.

Fig. 8. Bac. amylobacter.

Fig. 9. Bao. tetanomorphus.

Fig. 10. B a c. 8 p h e n o i d 6 8.

Fig. 11. Pectinobacter amylophilum Makrinow.

Fig. 12. Anaerobe Zellulosezersetzer.

Tab. 11. KaltmiBt Ounnersdoif.

tJber die Rotte des Stalldttngers nsw. 99

CO

CO

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Tl!

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27. 3. 33

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pH fH rH

•d *n

iH pH fH

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pH

fH pH

•d ‘u

fH pH

0001 : I

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fH fH fH

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pH fH pH

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pH pH

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pH pH fH

•d •u

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fH fH

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CO CO

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■d *a

fH fH

Nahrboden

2§sao.2os§oos®
^-SS SSl-S SS'S'S g*§

llllllllllll

1

1

B. putzificus ver-
rucosus

B. saocharobuty-
ricus

B. amylobaoter

B. tetauomorpb.

Fectinobacter

amylopbilum

B. putrificus ver-
rucosus

B. saocharobuty-
ricus

B. amylobaoter

B. tetanoxnorphus

Fectinob.amylopb.

Tab. 13. HeiBmist Probstheida.

t^ber die Botte des Stalldtingers usw. 101

eo

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fH

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CO

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pH

d

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000 000 t

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pH pH rH CO pH

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pH pH pH pH

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001 : I

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fH fH

Frischmist I

000 00001
j T

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•d

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000 001
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•d *xi

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000 01 :t

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+

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pH pH -}- pH pH

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•d *n

pH

pH pH pH

•d ti

eq pH pH

cq rH

1

0

1

Eier-Fleisch . . .
Kartoffelbrei . .
Eier-Fleisch . . .
Leberbouillon . .
Eier-Fleisch . . .
Eier-Fleisch . , .
Leberbouillon . .
Kartoffelbrei . .
Eier-Fleisch . , .
Kartoffelbrei . .
Eier-Fleisch . . .
Leberbouillon . .
Kartoffelbrei . .
Leberbouillon . ,
Zuckerldsung . .

* 0 * »pj " 'p* ’S

lllllUl

2 ^ ^ o ©

Mi lilil

Organismus

B. putr. Bienst.

B. putrificus ver-
rucosus

B. cochlearius

B. saccharobuty-
ricuB

B. tetanomorphus

B. Bphenoides

Pectinobacter

amylophilum

B. putr, Bienst.

B. putrificus ver-
rucosus

B. saccharobutyr.
B. amylobaoter

B. sphenoides
Pectin, amyloph.

102

EHriede Winnegge iind W. Henneberg,

Naehdmek verboten,

Zur Kenntnis der stS.bchenfbrmigen MilobsS-urebakterieiiarten.
V orkommen im Menschen und Tier. Ansiedlungsversuche duroh
Qenufi Ton Milcb, KEse nnd Beiokulturen.

[Bakteriologisches Institut der PreuB. Versucts- und Forschungsanstalt
fiir Mleh-wirtschaft, Kiel.]

Auf Grand der gemeinsam mit Elfriede Winnegge ausgefiihrten
Untersuchungen mitgeteilt

von W. Henneberg.

Mit 15 Abbildongen im Text.

Die Gruppe der langen MilehsSiurebakterien hat seit langem, wie die
vielen und uinfangreichen VerSffentlichungen der medizinischen und tech-
nischen Bakteriologen zeigen, groBes Interesse g^nden. Es ist dies be-
sonders darauf zuruckziirahren, daB ein Teil dieser Bakterienarten den
Dana der Mensohen und der warmblutigen Tiere als standigen Wohnplatz
hat. M Menschen konunen sie vielfach aueh im Magen bei Stauungen
(Magenerweiterung, Carcmom) und regelmSBig in der Va^a, ebenso oft-
maJs in hohlen Z^nen vor. Aus der vagina erhalt sie bei der Geburt der
Saugling, in dessen Dana sie sich ansiedeln. XJnter der Bezeichnung „aGido-
philus“ sind verschiedene Arten eingehender beschrieben worden. Sie finden
z. T, bei der Bereitung von Acidophilusmilch („Refonnyoghurt“ nach
Henneberg) Verwendung. Das sieh im KSlbermagen findende Ther-
mobacterium helveticum wird in den SchweizerkSsereien aus-
genutzt. Bei der Yoghurtbereitung verwendet man die langen Milchsaure-
bakterienarten aus dem lAmmermagen, ebenso stammen die Erreger der
Malchsauerung der seit alten Zeiten gebrauchlichen Yolksgetranke des
Mazuns, Kumys, Lebenraib und dergl. sicherlich aus dem Darm der Eiihe
Oder der Stuten. Aus dem Euhdarm gelangen sie oftmals in die Milch und
60 auch in den Else, aus letzterem vneder beim EasegenuB in den Menschen-
darm. Manche Arten finden sich aueh in der freien Natur and spielen z. B.
bei der HeiB- und Warmeinsauerung von pflanzlichen Puttermitteln eine
sehr mchtige Bolle (H e n n e b e r gX Man muB annehmen, daB sieh er-
hitzende, aufeinandergehaufte, verrottende grtine Pflanzen die urspriing-
liehen Wohnstatten dieser Arten waren. Yon hier aus erfolgte die Besiedlung
des Darmes usw. der Tiere und des Menschen. Manche, die ein starkeres
MilchsauemngsvermSgen erwarben, wurden stance Bewohner des Magens
dra milchtrinkenden jungen Tiere bzw. des Darmes der mensehliehen Saug-
linge Oder Mllchpilze und Beifungspilze des Eases.

Diese kurze tJbersicht mag geniigen, urn sich die auBerordentlich groBe
Zahl und Yerschiedenheit der Wohnplatze der langen Milchsaurebakterien
vor Augen zu ftihren. Es handelt sich also sowohl um Saprophyten als auch
urn Parasiten bzw. Symbionten. Durch Anpassong an die verschiedenen
Standorte muBten eine TJnmenge von sich mehr oder weniger unterschei-
denden B^sen bzw. „Arten“ entetehen. Dem Baktmologen macht es z. Zt.
oft noch diegrdBte,bisweilenunuberwindlicheS<diwierigkeit, diese zu trennen,
d. h. Arten and Bassen zu erkennen und sie in ein System zu bringen. Eine

Zur Kenntnis der st&bchenfdnmgen Mildis^urebakterienaarten. Vorkommen usw. 103

Unmenge von Laboratoriumsuntersuchungen wd noch notig sein, um die
Verwandtschaft der Aiten untereinander nnd die jeweilige Stammart nach-
zuweisen. Verf. ist daher auch heute noeh (vgl. Handbuoh der GSrungs-
bakteriologie 1906 n. 1924) der Ansicht, da6 es zweckmEBig ist, zunSrChst
„Standortsgruppen“, d. h. die an ein bestimmtes „Milieu“ angepafiten Arten
i)zw. Rassen, soweit sie gleichzeitig morphologisch und physiologisch 3,bn-
lich sind, zusanunenzufassen. Die Wahrsoheinliehkeit ihrer urspriingliehen
Herkunft gibt dann ^e Arbeitsriehtung fur die Untersuebungen der ver-
wandtscbaftliehen Beziehungen und der Variationsbreite sowie fiir das Auf-
finden weitraer braucbbarer Anpassungen.

Die Untersuebungen, deren bisberige Ergebnisse bier nutgeteilt werden,
betreffen besonders &e in Milcb gut wacbsenden und scbnell sSuemden
„Menseben“- und „Kub“-Milcbs8,urebakterien und ihre Ansiedlungsfabig-
keit im Mensebendarm. Der praktisebe Zweek ist, den Einflu6 des Milcn-
trinkens und des KUseessens auf die Darmflora festzustellen und diejenigen
Milcbsaurebakterienarten ausfindig zu macben, die zur Bereitung einer
mSglicbst wirksamen Acidopbilusmilcb (besser Reformyoghurts) am meisten
geeignet sind. MSglicbst viele versebiedene Ease- und Darmmilcbsaure-
bakterien mufiten daher genauer untersucht und verfiittert werden. Eine
grofie Schwierigkeit war, die sicb von vornherein vielfach im Mensebendarm
vorfindenden Arten von den verfUtterten zu untersebeiden. Wenn auch die
sehr zeitraubenden Untersuebungen noch keineswegs zum AbschluB ge-
braebt werden konnten, so sollen die bisberigen Ergebnisse bier sebon mit-
geteilt werden, da die Naehpriifungen der Wirksamkeit der Acidophilus-
milch an Menseben mit Darmkrankbeiten doch nur nacb und nacb vor-
genommen werden kSnnen.

tlber die in Betracbt kommenden Milchsaurebakterien sind bekannt-
licb sebon eine Umnenge von Untersuebungen in alien moglicben wissen-
scbaftlichen Instituten vorgenommen. Rur das allarwichtigste aus der
medizinischen und techniseh-bakteriologisehen literatur sei bier in Ktirze
zusammengestellt.

M 0 r 0 erkannte bereits, daB sicb im Sauglingsdarm versebiedene
langgestreckte Milcbsaurebakterienarten vorfinden. Der von ibm einge-
fiilrte Name „B. acidophilus" (besser Bact. acidopbilum)
betrifit also eine Sammelgruppe, wie auch sebon daraus hervoi^ebt, daB
man mittels der verwendeten sauren oder angesauerten Nahrfliissigkeit
samtliche saurevertragende Milcbsaurebakterienarten anreichem kann. In
ddesem Sinne sind sebr viele acidophil, richtiger acidotolerant. Man batte
sicb dariiber einigen mtissen, welcbe von den versebiedenen Arten des
Sauglingsdannes ^s Bact. acidopbilum bezeiobnet werden soU,
da der von Moro reingeziicbtete Stamm niebt ausreiebend beschrieben
wurde. Die Angabe von Cahn und Ro della, daB der B. acido-
philus (ebenso wie B. ezilis) besonders zahlreicb im Darm der mit
Kubmileb ernahrten Sauglinge vorkommen soil, sagt nichts, wenn Roh-
mileb verfiittert wurde, da es sicb nattrlich auch um Kubdarmmilchsaure-
bakterien gehandelt haben kaim. Viel wertvoUer ist dag^en die Angabe
dieser Autoren, daB in Brustmilcb-Sauglingen der B. bifidus (besser
Bact. bifidum) die Hauptmenge bildet, wenn auch nacb unseren Beob-
aobtungen dies nur bisweilen der Fall ist. — Von Heim und S c h 1 i r f
(1926) wurde die Bezeichnung „Acidobacterium“ fiir eine Gruppe von langen
Milchsanrebakterien, zu der Moroi und aerogenes (Schlirf), lactis und D5di^-

104

Elfriede Winnegge omd W. Henneberg,

leinii (Heim) und bulgaricum gehoren, gewahlt. Schon vorher (1925) hatte
L 0 w i den Gruppennamen ,,Plocamobacterium“ (nach den haar-
flechtenahnlichen Kolonien) vorgescMagen, der auch in Lehmann und
Neumann (7. Auflage 1927) angenommen wurde. B e i j e r i n c k
und spater B e r g e y wahlten die Bezeichnung Lactobacillus,
Orla Jensen Thermobacterium bzw. Streptobacte-
r i u m bzw. Betabacterium. Die jetzigen technischen Bakterio-
logen folgten zum groBten Teil dem Vorschlag des zuletzt Genannten.

Tins interessieren hier zunachst die Beschreibungen der fiir unsere
Untersuchung in Betracht kommenden Arten, wie wir sie in L e h m a n n -
Neumanns Werk finden.

PL acidophilum ist mit B. necrodentalis Goadby (1903), mit
B. vaginalis minor Maunu ai Heurlin (1910) und Acidobact. lactis
Heim 1925 identisch. Es sind kiirzere und l&ngere Stfibchen, Ketten, auch Eaden von
0,7 {Jt Breite. Milchzueker, Glykogen usw. werden gesSuert, Milch in 2 Tagen diek-
gelegt (6. Tag 1% Milchsaure). Lackmusmilch wird erst entf&rbt, dann rot. Gasbildung
fehlt. Unter 22® kein Wachstum. Gegen Trookenheit sehr wenig empfindlieh. Fund-
ort: Stuhl der Neugeborenen in den ersten Lebenstagen, Barm der Erwachsenen, Sauer-
teig, normales Vaginalsekret, Frauen* \md Kuhmilch.

PL vaginae (Kruse) ist mit dem Vaginalst&bchen Boderleins, mit
B. vaginalis longusM. af. Heurlin, c r a s s u s Lipschiitz und A. B6der-
leinii Heim identisch. Die ZeUen sind breiter (1,2 jjl), zuweilen Involutionsformen.
Kolonien bisweilen mit Kandausld.ufern. Traubenzuckerbouillon s&uert bis 4. Milch
gerinnt nicht, Lackmusmilch bleibt blau. Best&ndlger Fundort; normales Vaginal-
sekret (Genaueres s. S. 116).

PL M o r o i. ZeUen wie bei PL acidophilum. Kolonien gewohnlich
grdOer und weiOlich. Keine Milchgerinnung. In karidsen Z&hnen.

PLgastrophilumL. u. K. identisch mit B. B o a s und O p p 1 e r. M&Bige
Sftuerung. Oft im Magen bei Stauungen und neben anderen Arten im Barm.

B. e s i 1 i s Tissier. Kleine diinne, einzelne ZeUen oder in Ketten. In Kulturen
oft etwas gekrdmmt. Im Barm bei Kuhmilchnahnmg.

PL aerogenes. ZeUen wie bei PL acidophilum. Keine Milchgerin-
nung. Gasbildung in Traubenzucker-LeberbouiUon. Im Mund, in hohlen Z&hnen und
im Barm.

Bact. bifidum Tissier. Strong anaerob. Oft Verzweigung mit kugel- oder
keulenfOrmigen Astenden. Milchzueker, Rohrzucker und Malzzucker werden gesauert.
Keben acidophilum im Sauglingsdarm.

Nach den vorstehenden Angaben sind Moroi, gastrophilum
nnd ex ills riel zu diirftig gekennzeichnet nnd nach den betr. Fund-
orten nicht wiederznerkennen, da sieh hier mehrere Arten zusammenfinden.
PI. aerogenes diirfte mit Betabacterium longumO. Jensen
identisch sein. Die Fundortsangaben zeigen, daB acidophilum ■wiedor-
um erne Sammelgruppe bezeichnet : acidophilum, wenn ohne Volutin,
und lactis (Heim), ■wenn mit Volutin, sind sicherlich Terschiedene Arten.
Acidophilum und exilis sind von keinem Milehbakteriologen
in der Kuhmilch gelunden. Eine Abgrenzung des acidophilum
vom vaginae nur nach Zellbreite und Milchdicklegung ist ganz un-
mSglich.

StabehenfSrmige Menschen- und Kuhdarm-MilchsS,urebakterien finden
sieh unter den Thermo-, Strepto-, Beta- und Mikrobakterien. Sehr wahr-
scheinlich ist, daB Aeidob. lactis, wenn mit Volutin, mit dem
Thermob. lactis, B. exilis mit Streptob. easei oder
plantarum und PI. aerogenes mit Betab. longum iden-
tisch sind. Die von uns im Darm beobachteten st&behenformigen Milehsaure-
bakterien sind aus den unten folgenden Mitteilungen zu ersehen.

ZxLT Kenntnis der st&bchenfdrmigen Milchs&urebakterienarten. Vorkommexi usw. 105

Eigene Untersuchungen.

I. Untersaehungsmethoden.

Zum Nachweis der Art des Wachstums ist die Federstrich-
m e t li 0 d e nicht zu entbehren^). Man kann auf diese Weise leieht erkennen,
ob rnehr oder weniger Kettenbildung oder diffuses Waelistum, ob kiirzere
Oder langere Fadcn, Verschiedenheiten in der Breite oder Involutionsformen
auftreten. Diese Methode gestattet auch, vorausgesetzt, daB nicht neutra-
lisierte, d. h. natursaure Wiirze (pn 5,6) benutzt wild, eine sehr sichere Ent-
scheidung, ob und wieviel und auch annShernd welche Milchsaurebakterien-
arten in den Fazes vorhanden sind, da c o 1 i usw. nicht oder nur weni^
in diesem sauren Boden wachsen kann. Erwahnt sei auch hier als sehr
brauchbar die von Henneberg vorgeschlagene Deekglas-Petri-
schalenmethode. TJnverdiinnt und in verschiedener wasseriger Ver-
diinnung wird z. B. an vier versehiedenen Stellen von etwa DeckglasgrBfie
je eine 5se von den Fazesproben auf der Chinablau-Milchzuckerbouillonagar-
Oberflache und gleichzeitig auf Pepton-Molkeagar und ebenso auf Wtirze-
agar — meist genttgt der zuerst genannte Chinablauagar — in Petri-
schalen verrieben und mit je einem sterilisierten Deckglas bedeckt. Mit
dem Mikroskop lassen sich zunachst mit einem schwacheren Objektiv, dann
mit der Olimmersion die bereits nach 24 Std. bei 30 — 37® unter dem Deck-
glas gewachsenen Kolonien leieht durchmustern. Auf natursaurem Wiirze-
agar wachsen auch hier in den Fazes-Praparaten Colibakterien nicht oder
nur wenig, so dafi die Anwesenheit verschiedener Milchsaure-Bakterienarten
leieht festgestellt werden kann. Diese wachsen unter den vorliegenden, fast
anaeroben Bedingungen ganz besonders gut. Handelt es sich um mit China-
blau gefarbten Milchzueker-Bouillonagar oder dgl., so erkennt man die
sauernden Kolonien sogleich an der tiefblauen Farbung unter dem Deck-
glas. Das Herausfinden der Milchsaurebakterienkolonien auf Traubenzucker-
bzw. Milchzuckerbouillonagar-Petrischalen zur Reinziichtung wird durch
Chinablau-Zusatz auBerordentlich erleicbtert.

Als Kahrfltissigkeiten sind Gerstenmalzmaische ohne oder
mit !l&eide (letzteres fiir Dauerziichtungen), Roggenschrotabkoehui^en,
Peptonmolke, Milch mit 1% Pepton- oder Hefeextraktzusatz sowie Bouillon
Oder Leberbouillon mit Lebersttickchen und 1% Zuckerzusatz (d. h. Tarozzi-
bouillon) am giinstigsten. Zu hoch oder zu lange erhitzte, d. h. braunlich
gewordene Milch ohne Zusatze erwies sich in vielen Fallen als vSllig un-
brauchto. ZweekmaBig ist, frische, aseptisch gewonnene Milch einmal
kurz auf zukochen oder gewShnliche Milch wiederholt bei 90® zu pasteurisieren.
Solche Milch in flaeher Petri schale war zum Nachweis von Diazetyl-
b i 1 d u n g bei Milchsaurebakterien usw. durch den Geruchsinn gut ge-
eignet. Gasbildung laBt sich am besten in Maische und oft auch in
der geronnenen MUeh erkennen.

Sehr wichtig zur Erkennung mancher Arten ist das Vorhandensein
oder Fehlen von Volutin. Notwendig ist die Priifung an verschieden
alten und unter versehiedenen Ernahrungs- und Temperaturverhaltnissen
gewachsenen Zellen.

Das SauerungsvermSgen muB in unsicheren oder besonders
wichtigen Fallen unter versehiedenen Bedingungen (s. u.) geprflft werden.

1) Vgl. Hennebergs „Bakteriologisohe Molkereikontrolle**. Verlag Parey-
Berlin 1934.

106

Elfriede Winnogge und W. Henneberg,

0. Jensen fand z. B. bei verschiedener N-ErnSrhrung (Witte-Pepton
bzw. Kasein-Pepton) bei Streptob. plantarum ein sebr abwei-
ehendes Verhalten bestimmten Zuckerarten u. dgl. gegeniiber,

II. Untersuchnngsergebnisse.

Morphologisches.

Das Gemeinsame der untersuchten Arten bzw. Kassen ist die mehr
Oder veniger langgestreckte Form. Diese ist oftmals je nach den Ziich-
tungsbedingungen sowohl der LUnge als auch der Breite nach bei der gleicheu
Art aufierst versehieden. So finden sich z. B. ganz allgemein in der ersten
Federstriehreihe, d. h. bei grofier Einsaat, kleinere Abmessungen als in der
dritten, in bezug auf Einsaat am meisten verdiinnten und daher mehr Nah-
rung enthaltenden Reihe, vfo bei manchen Thermobakterienarten lange,
soheinbax ungegliederte ZellfSden eharakteristisch sind. Gleichzeitig sind
Her in vielen Fallen am meisten Involutionsformen ansgebildet, offenbar
ein Zeiehen von gehemmtem Waehstum infolge einer in ihrer Zusammen-
setzung nicht ganz ansreichenden Nahrlbsung. Es sei besonders erwahnt,
daf! gar nicht selten das Wachstiun mancher frisch eingefangener Stamme
von Anfang an aufierst schlecht ist oder sogar ganz ausbleiben kann. Wir
miissen annehmen, dafi es sich hierbei um besonders empfindliche Stamme,
die den plotzliehen Nahrungswechsel nicht iiberstehen, handelt. Oft gingen
bestimmte Stamme, obwohl sie wie alle iibrigen behandelt warden, nach
einiger Zeit ohne ersichtliehe Ursache ein. Schon aus diesem Grunde mllssen
bei der BeiQziiohtung stets mehrere Parallelstamme eingefangen werden.
Sie brauohen sich bei der Fortzuchtung und bei den verschiedenen Unter-
suchungen durchaus nicht ganz gleich zu verhalten. Im allgemeinen lafit
sich nach den Federstrichpraparaten-Befunden folgendes sagen:

Thermobakterien. Meist lange, dunne, bei guter Nahrung oder
langsamem Wachstiun etwas dickere Zellen. Keine ausgesprochene Ketten-
bildung. Wo grbSere Verbande zuerst vorhanden sind, zerfallen sie leicht
in oft spitzwinklig zueinanderliegende Kettenstiicke. Wachstumsoptimum
etwa 37—42®. Milch ist (T h. c e r e a 1 e ausgenommen) z. T. sehr giinstig.

Betabakterien. Meist kiirzere oder langere Langstabchen, keine
langere Kettenbildung bei B. 1 o n g u m. Wachstumsoptimum 40® (1 o n -
gum) bzw. 37® (b r e v e). Milch oft ungunstig.

Streptobakterien. Meistens kiirzere Formen in deutlichen,
oft sehr langen Eetten. Am Trapfchenrand durch Eettenzerfall oftmals
Zellhaufen. Wachstumsoptimum 30 — 37®. Milch ist giinstig.

Physiologisches.

Volutin. Seit langem ist bekannt, dafi fiir manche stabchenfSrmige
Milchsaurebakterienarten ein Volutingehalt, dessen Menge von der Er-
nahrung und den Temperaturverhaltnissen abhangt, eharakteristisch ist.
Wir kfinnen Hernach im Yoghurt das volutinhaltige Th. bulgaricum
(0. Jensen) von dem volutinlosen T h. J u g u r t, ebenso das volutin-
haltige _Tn. lactis in der Milch (oftmals von Henneberg in der
Marktmilch gefunden) und im Ease von den volutinlosen Streptobakterien
ohne weiteres unterscheiden. Es ist von Wichtigkeit, dafi von uns Volutin-
bildner im Euhpansen, im Ealbermagen, im Sauglingsdarm (3 mal) und von
G. Henneberg auch bei einem Vaginalstabchenstamm nachgewiesen

Zur Kenntnis der stabchenfarmigen Milchsaurebakterienarten. Vorkommen usw. 107

•wurdeii. In den ersten beiden Fallen handelt es sieh um das Th. lactis,
im Sauglingsdann um 3 „A c i d o p h i 1 u s“ - Arten (S„ Sg, Sg aus je einem
Saugling), die teils zur „V a g i n a“ - Gruppe (Sj), teils zur „T h. 1 a c t i s“-
Gruppe zu stellen sind. Sehr beachtenswert ist, daB sich die „Volutin-
Sauglingsstabchen" bisher als die kraftigsten und dauerhaftesten (Si seit
1926, die iibrigen seit 1930) „Acidopbilus- besser Eeform-Yoghurt-
pilze“ bewahrt haben. Auch die aus Amerika erhaltenen 2 Stamme (S 4
und Ss) enthielten Volutin, was wohl ebenfalls auf die dortige gleiche Fest-
stellung zuriickzufiihren sein diirfte. Fiir Verfutterungsversuche (s. u.)
bewahren sich wegen ihrer leichten Wiedererkennbarkeit die Volutinbildner
sehr gut.

Mileh-Sauerung. Manche Arten, wie Thermo b. bulgari-
cum, Jugurt, lactis, helvetieum, legen bei Optimaltem-
peratur die Milch in 3 — 24 Std. dick. Langsamer, erst in 2 — 9 Tagen, ist
dies bei den beiden Streptobakterien der Fall. Die volutinbildenden Saug-
lingsdarmstamme bringen meist in 24 Std. die Milch zur Gerinnung. Die
Betabakterien konnen Milch nur nach Peptonzusatz in 2—7 Tagen dick-
legen, doch bleibt auch dann bei manchen Stammen die Gerinnung aus.
Microbacterium lacticum bringt mit Ausnahme mancher
Stamme Milch in 3 — 8 Tagen zur Gerinnung, Micro b. mesenteri-
c u m niemals nach 0. Jensen und ebenso auch nach A. Wittern
nicht nach Peptonzusatz. Wiederholt wurde von uns beobachtet, daB manche
Stamme Laci^usmilch nicht veranderten, obwohl sie Milch langsam dick-
legten. Es gibt auch im Zuckersaum-ungsvermogen („Zuckerreihe“, wor-
unter auch manche Alkoholarten und Glukoside zu verstehen sind) und in
bezug auf Milchdicklegung „schwache“ Stamme, die als atypisch zu gelten
haben (s. u.).

Milch ohne und mit 1% Traubenzucker-Zusatz.
Es wurde oftmals beobachtet, daB manche Darm-Stamme in reiner Milch
nur sehr langsam eine Sauerung bis zur Gerinnung Terursachen. In einer
Versuchsreihe war daher der EinfluB von Traubenzuckerzusatz (37®) zu
priifen. Bei S«, Sig wurde durch Zucker die Dicklegung um 2 Tage (2 : 4 Tage),
bei Si 5 um 1 Tag (3 : 4 Tage) beschleunigt. Der Stamm Si, brachte die Milch
tiberhaupt nur nach Zuckerzusatz (2 Tj^e) zur Gerinnung. Vaginastamm Vg
lieB die Milchgerinnung mit und ohne Zucker gleichzeitig am 2. Tag eintreten.

Mazimaltemperaturen fiir die Milchdicklegung.
InParallelreihenwurden Thermob. bulgaricum, helvetieum
Streptob. casei (Stamm 1), aus der Vagina 3 Stamme (Vg, V,, Vg),
aus dem Sauglingsdarm an Volutinbiidnern Sg, S 4 , an Mehtvolutinbildnern
s*, Si., Si„ aus dem Darm Erwachsener Ei, Eg, E., Ega bei 37, 46 und 60®
in l^ch, in Milch mit Hefeautolysat (Beinkulturhefe, unerhitzt) und in
Milch mit Leberstiickchen untersucht.

50° Gerinnung der Milch nach

1 Tag: helvetieum, bulgaricum.

2 Tagen: Streptob. oasei (St. 1), S2. Leberzusatz S^, Si„ E„ V®, Vg.

45° Gerinnung der Milch nach

1 Tag: helvetieum, bulgaricum, Streptob. oasei; S2, Sg,

Vg, Eg, Leberzusatz Sg.

2 Tagen: Leberzusatz S^g, 8,^7, Ei, Eg, Ega, Vg.

4 Tagen: Sg, Vg; Hefeautolysat Sgg, Sg,, Eg, Vg; Leberzusatz V,.

37° 1 Tag: helvetieum, bulgaricum, Streptob. casei; Sg, S4.

2 Tagen: Vg, Eg; Leberzusatz Vg.

4 Tagen: Sg, V*.

108

Elfriede Winnegge tind W. Henneberg

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4-

Zur Kenntnis der stabchenfdrmigen Mlchsaurebakterienarten. Vorkommen usw. 109

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110

Elfriede Winnegge und W. Henneberg,

Es ist bemerkenswert, daB in Milch ohne Zusatz bei 37® innerhalb von
4 Tagen S^b, Si„ Ei, Eg, Ega und V, nicht sSuerten. Fflr eine „A e i do-
p li i 1 u s - Milchbereitung** sind zur Vermeiduiig yon SporenbUdner-Infek-
tionen nur die Arten zu benutzen, die in 24 Std. die Milch dicklegen. Nach
Torstehenden Versuchen ■wiirden Sg, S 4 , Vg, Eg geeignet sein.

Gasbildnng. Bei vielen Darm-Stammen (z. B. bei Sg, Sg, Sg, S^, —
nicht bei S,) kann maTi in der dickgelegten Milch deutlich Gasblasen wahr-
nehmen. Eegelmafiig wurden daneben auch Maischekulturen, in denen
nach Hennebergs Beobachtungen die Gasblaschen z. T. zwischen
den Treberteilchen festgehaJten und infolgedessen leicht erkannt werden
konnen, zum Nachweis von Gasbildnng hergestellt. Wahrend die eben ge-
nannten Stanune in Maische kein Gas erzeugten, bildeten die Stamme Su,
Sjj, Si 4 , ebenso die Kasestamme Ki, Kg, Kg deutlich Gas.

Kaseinabbau. Der Kaseinabbau ist bei alien Thermobakterien,
mit Ausnahme des Thermo b. cereale, sehr deutlich, bei den Saug-
lingsdarmstammen meist sehr stark. Ebenso verhalt sich Streptob.
c a s e i , wahrend Streptob. plantarum nach 0. Jensen in
der Begel nicht abbaut. Manche Stamme des Betabact. breve und
des Microbact. lacticum greifen Kasein an, dag^en Betabact.
1 0 n g u m und Microbact. mesentericum nicht (0. J e n s e n).
Ein Kaseinabbau auf MHlchagar-Petrischalen ist nach unseren Beoo-
achtungen oftmals nur dann deutlich, wenn rohe, an Euterkokken sehr arme
Oder freie, aseptisch gewonnene Milch mit sterilisiertem Wasseragar ver-
mischt wurde und „Riesenkolonien“ (d. h. Auftragung einer Auischwemmung
vom Zentrifugatbodensatz) der betreffenden Bakterien angel^ werden.

Zuckerreihe (siehe die Tabelle). Zum Yergleichen muBten die
von 0. J e n s e n und friiher z. T. unter anderer Bezeichnung von Henne-
berg untersuchten Arten berucksichtigt werden.

Von uns konnte festgestellt werden, daB oftmals verschiedene Ergeb-
nisse ^zielt wurden in mit Lackmus gefSxbtem Hefewasser mit den zu
prufenden Zuckerarten usw. und anderseits in mit Chinablau gefUrbtem
Bouillonagar mit den gleichen Zus&tzen in flacher Schicht (Petri schalen)
bzw. in hoher Schicht (Reagenzglaser). Der S§>uerungsnachweis in flacher
Schicht erscheint wegen des bei zu reichlichem Luftzutritt geringen Wachs-
tums mancher Arten oftmals unsicher. Auch mittels der von Henneberg
abgeSnderten Lindner schen KleingSxmethode in mit Vaselin und Deck-
glas verschlossenen hohlen Objekttragerkulturen (zuckerfreies Hefewasser
bzw. Bouillon mit den betr. Zuckerzus^tzen und einem Zusatz von Lack-
mus Oder steribsierter Kreide) konnten oftmals, d. h. wenn mit einer genligend
groBen Bakterienmenge — Zentrifugatbodensatz — geimpft war, bei Wieder-
holung gleichartige, d. h. brauchbare Ergebnisse erhalten werden. Unsicher
blieb eine S&uerung, wenn dieLaekmusfarbe sich durch Beduktion entfSrbte:
Man wird diese Sparmethode meist nur bei sehr teuren Zuckerarten usw.
anwenden (s. unter Glykogensauerung).

Bei der Bestimmung des Sauerun^vermfigens muB, wie auch von ver-
schiedenen Verff. gefordert wird, die Art der langeren Vorziichtung genau
beachtet werden. Notwendig ist es also, einen Stamm sogleich nach der Eein-
ztichtung und spater nach langerer Weiterzuchtung unter geeigneten „be-
kaMten“ Bedingungen wiederum in der Zuckerreihe*' zu priifen (s. u.).
Wir stehen auf Grand unserer lar^jahrigen Erfahrungen heute auf dem
Standpunkt, daB trotz mancher Unsicherheiten die „Zuckerreihe“ zur Arten-

Zur Kenntnis der st&b6henf6rmigen Mildhs&urebakterienarten. Vorkoimnen usw. 1X1

bestimmung ebenfalls unbedingt notwendig ist. Natiirlich dtirfen hierbei
kleine TInterscHede nicht bewertet werden. Man wird nSmlich oftmals
beobachten, daB aus ein und derselben Herkunft von der gleichen
Petri schale gleichzeitig verschiedene Stamme mit etwas abweiohendem
ZuckersauerungsvermSgen, aber mit sonst gleichen Eigensehaften, rein-
gezuchtet werden. Auf diese Weise kann man ein Bild von der Variations-
breite unter scheinbar gleichen naturliehen Verhaltnissen erhalten, Ln
allgemeinen werden stark sauernde Stamme ein viel „sichereres“ Verhalten
in der Zuckerreihe ergeben als schwach sauernde (mit vielfach eingeklammer-
ten +- und — Zeichen). Da letztere bei lai^erer Laborziichtung gar nicht
selten verhaltnismaBig bald absterben, sollte man solche kunftig als „un-
normale“ Stamme bei der Artentrennung unberiicksichtigt lassen. Wenn
z. B. GaJaktose und Mannose, die wie Glukose und Lavulose von samtliehen
„normalen“ Stammen gesauert werden, bei einem oder dem anderen Stamm
derselben Herkunft keine Sauerung zeigen (in 3 Fallen auf der Tabelle),
so zeigt dies nach unserer Ansicht, daB auch die ubrigen Befunde in der
Zuckerreihe bei diesen Stammen nicht als normal zu bewerten sind.

MaltosesauerungsvermSgen. Druekrey hat die Be-
hauptung aufgestellt (Zentralbl. f. Bakt. Abt. 11. Bd. 74. 1928), daB sich
nur die Milchsaurebakterienarten mit Maltosesauerungsvermogen im Men-
schendarm ansiedeln kSnnen. Thermo b. bulgaricum (0. Jensen)
und Th. Jugurt ohne Maltosesauerung wiirden sich also im Gegen-
satz zuTh. helveticum, lactis, Streptobakterium, Betabakterinm
und den als „Saugling 8 darmstamme“ und „vaginae“ beschriebenen Arten
bzw. Bassen nicht anzusiedeln vermogen. Auch in dieser Hinsieht int^-
essierte daher die Frage, ob bei langer Zhchtung in einem maltosefreien Nahr-
boden das Maltosesauerungsvermogen erhalten bleibt. 3 wahrend 7 Jahren
dauernd in Milch mit Pepton- und Ereidezusatz fortgezuchtete Stamme
Si, S 4 und Ss konnten diesen Zucker noch sauem. Im April 1930 aus 2 Saug-
lingen gezuchtete Stamme Sj und S, (beide Volutin und etwas Gas in Maische
bildend) mit Maltosesauerung wurden ebenfalls langere Zeit in Milch mit
Pepton- und Ereidezusatz weitergeziichtet. Nach 1 Jahr 9 Monaten sauerte
S 2 nur wenig, S 3 nicht mehr Maltose, nach weiteren 1 Jahr 2 Monaten ergab
sich der gleiehe Befund. — Ein im November 1930 aus einem Sauglii^ ge-
zuchteter Stamm S,, der anfangs Maltose stark sauerte, zeigte nach 2 Jahren
4 Monaten nur noch ein sehr geringes MaltosesauemngsvermSgen.

Samtliche genannten 6 Stamme wurden vor der Prtifung im Marz 1933
in Milch mit Maltosozusatz zunachst 4mal iibertragen, um das Maltose-
sauerungsvermSgen bei Sj, Sg, Sg zu verstarken bzw. bei Sj wieder hervor-
zurufen. Tatsachlich sauerten samtliche 6 Stamme jetzt se^ stark Maltose.
Dies war auch spater noch der Fall, obwohl 3 Woehen lang die Kulturen
in Milch ohne Maltosezusatz weitergeziichtet warden. Der gleiehe Versuch
wurde an 11 aus Originalyoghurt (aus Bulgarien und Tiirkei sowie aus deut-
schem Trinkyoghurt verschiedener Herkunft) reingezttchteten Stammen
Th. bulgaricum (Orla Jensen) (mit Volutin) wiederholt. Anfangs
sauerten 8 Stamme nicht, 2 Stamme (5 und 6 ) wenig und 1 Stamm ( 1 )
stark Maltose. Nach 4 maliger Hbertragung in Milch mit Maltose sauerten
10 Stamme stark Maltose, nur Stamm 8 wenig. Die Weiterziichtung ge-
schah wahrend 3 'Woehen (an jedem 3. Tag tibertragen) in Milch ohne Maltose.
9 Stamme sauerten jetzt nicht mehr Maltose, nur 3 Stamme (3, 4, 6 ) noch
etwas. Es sei erwahnt, daB die Th. lactis - und Streptobacterium

112

Elfriede Winnegge tmd Eenneberg,

c a s e i - Stamme trotz jahrelanger Fortziichtung in Milch (ohne Maltose)
stets Maltose sauerten.

Rohrzuoker-, Dextrin- u n d S t ar k e- S an e r u n g s -
vermSgen. Anfangs hatten die Sauglingsdarmstamme Sj, S4, 85 diese
3 Kohlehydrate gut gesauert. Nach 6 Jahren Weiterzucht in Milch mit
Pepton nnd Kreide sauerten sie Dextrin und Starke nicht mehr. aber noch
Rohrzuoker. Sj und S3 sauerten gleich nach der Reinzuchtung keine Saccha-
rose, dagegen Dextrin. Nach 1 Jahr 9 Mon. — in Milch mit Pepton und
Kreide — wurde von beiden Saccharose und nur von 83 Dextrin gesauert.
Die Anpassung an Rohrzueker- und Dextrinsauerung mu-de entsprechend
der oben mitgeteilten Maltoseversuche in Milch mit den betr. Zusatzen ver-
suoht. Die Sauglingsdarmstamme sauerten nun beide Kohlehydrate wieder.
Nur 3 der obengenannten Bulgaricusstamme ( 3 , 4 , 6) lernten auf diese Weise
Rohrzueker sauern; es waxen die gleiehen Stamme, die das Maltosesauerungs-
vermBgen langer behielten, also zur Gruppe des T h. 1 a 0 1 i s gehSren mtissen
(s. u.). Keiner der 11 Bulgaricusstamme lernte durch die genannte Be-
handlung Dextrin sauern.

Glykogensauerung. Fiir die Vaginae-Gruppe ist von einigen
Verff.n wie auch von G. Henneberg eine Glykogensauerung nach-
gewiesen, was in Hinsicht auf das Vorhandensein von Glykogen in der Vagina
von groBem Interesse ist. Von uns wurde geprtift, ob auch der Volutin-
bildner S3 aus dem Saugling und Streptob. casei (St. 1 ) Glykogen
zu sauern vermdgen. Um mit dem Material sparen und das Glykogen in
nichterhitztem Zustand anwenden zu k6nnen, kam versuchsweise die Hein-
garmethode mit Laekmus oder Kreide (nach Henneberg) im hohlen
Objekttrager zur Verwendung. Der geprtifte Vaginastamm (Vg, ebenso
3 andere) zeigte sowohl in Hefewasser als auch in Bouillon, der Sauglings-
stamm Sg nur in Hefewasser deutlich rote Farbung, d. h. Sauerung. Das
Streptobacterium sauerte nirgends, entfarbte aber die Lackmusfarbe. Sehr
beachtenswert ist, daB auch die Erwachsenenstamme Eg, Eg und Ega und
ebenso die Sauglingsstamme Sj und Sjg nach der Hohlkammermethode
Glykogen (Hefewasser - 1 - 2 % Pepton -t- 2 % Glykogen) sauerten. Viel-
leicht lassen sieh hierdurch die ursprttngliehen Vaginastamme erkennen.
Dm die Sicherheit der Hohlkammermethode zu kontrollieren, wurden samt-
liehe ubliehe Zucker- und Kohlehydrat-Alkoholarten neben Salizin in der
Hohlkammer mit Kreidezusatz gleiehzeitig mit der Reagenzglasmethode
(Hefewasser H- Pepton -1- Laekmus) und der Chinablauagar-Methode (hohe
Sehicht im R^genzglas) gepriift. Bei Streptobacterium casei
(St. 1) fand_ sieh 13 mal (von 18 ) eine tJbereinstimmung allor 3 Versuchs-
methoden, 6m^ versagte die Hohlkammermethode. Die Ergebnisse im
letzteren Fall sind demnaeh nicht immer sicher.

Saure- und Alkalitoleranz. In Leberbouillon mit Leber
und 1% Glukose, sog. T a r 0 z z i bouillon, mit Ph 3 . 4 , 6,6. 7,6 und 8,8
wurden 10 versehiedene Stamme nach 24 Std. bei 37 ® auf ihr "Wachstum
gepriift.^ In alien Fallen war es gleich gut bei Strep t. casei (Str. 2)
und bei Sg. Nur Th. bulgaricum und helveticum wuchsen
nicht mehr bei 8,8, die iibrigen schleohter als bei 7 , 6 . Samtliche Sauglii^s-
darmatamme Sg, Sg, Sg, S^,, Erwachsener-Darmstamm E3, Vaginastamm
Vg. Streptob. casei Str. 1 und die bereits genannten wuchsen sehr
gut bei Ph 6,4 und 6,6. Bei 7,6 war gutes Wachstum nur noch bei S2,
S4, S5, Si7, Vg und den beiden Strep t. casei.

Zur Kenntms der &tabchenformigen Milchsaurebakterienarten. Vorkommen usw. 113

Milchsaurebakterien der Kalber und der Kiihe,
der Milch und des 'Kases.

Stabchenfdrmigo Milchsaurebakterien sind sehr haufig. wenn auch nicht
in gi’Sfierer Menge in der Milch, dagegen regelmaffig und in manchen Arten
in sehr groBer Menge im Ease. Es handelt sich in den meisten Fallen um

Abb. 1. Thermobaoterium lactis. Streptobactermm casei.

T h er m 0 b a c t e r ium lactis
(Abb. 1), Streptobaeterium
casei (Abb. 2) und plantarum,
seltener um Betabacterium
breve und 1 o n g u m (Abb. 3) sowie
um Microbacterium flavum
und 1 a e t i c u m. In der obigen Zucker-
reihentabelle wurden diese zum groBten
Teil boriicksichtigt. Um fiir unsere
verglcichendon Untersuchungen frische
Stamme zu haben, wurden nochmals
4 Stamme aus Milch, und zwar je 2
von 2 Lieferantenmilchproben dor Ver-
suchsmoicrei Mj, M^ — Mj, M 4 , ebenso
4 Stamme aus Ease und zwar 3 — Kj,
Kg, Kg — aus demgleichen „Fruhstucks-
kase“ (mit Limburgeraroma) und 1

Sto K. aus Emmentaler genauer 3 Thermobaotenum heU-eticum
untersucht. Die 4 Milchstamme mussen Betabaotenum longum.

zur Gruppe des Streptobakterium ge-

rechnet werden, da sie ohne Volutin sind, wenigstens in 2 Fallen, M,
und Mj, ausgesprochene Zellketten und eine ausreiehende tibereinstimmung
mit der Zuekerreihe des S t r e p 1 0 b. aufweisen. Die Eettenbildung ist
nach unseren Erfahrungon bei manchen Stammen — wie auch bei Mg und
Mg — weniger deutlich. Die 3 Easestamme Kj, Kj, K, enthielten Volutin.

ZweiteAbt. Bd. 91.

114

Elfriede Winnegge und W. Henneberg,

■waren ohne Ketten und zeigten mit T li e r m o b a c t. 1 a c t i s in der
Zuekerreihe groBe tJberein'stimmung. Eine vSllige ubereinstimmung auch
bei Kulturen aus einem und demselben ESse findet sich nacb unseren Er-
fabrui^en fast niemals. Der Emmentalerstamm ditrfte ebenfalls ein T h e r -
mobact. lactis sein.

Herkunft der Mileb- undESsebakterien (Abb. 4). In
den allermeisten Fallen stammen die st§,bchenf6nnigen MilcbsSurcbakterien-
arten aus dem Euhkot, nur in den Emmentalerk&sereien s4t man absichtlich
das aus dem ESilbermagen stammende Thermo b. helveticum (als
Reinkultur oder Anreicherung)indiezuverk&sendeMileh(Abb.3). Handelt

Abb. 4. „Tier-Mildis&TLrebakterieii“ (1000 x). Tbenaobacteiiunx lactis aus dem
Kubpansen (3) tind aus der Marktmilch (1 u. 3).

es sich Mer urn eine Anreicherungskultur (Labansatz), so sind selbstverstand-
lich meist auch Thermo b. lactis, Betabaeterium longum,
breve u. a. neben dem Th. helveticum vorhanden. Schwarz
(unter Leitung des Eef. angefertigte Dissertation Eiel 1929) fand in zwei
4tagigen EalbermSgen — wie iiblich zur Naturlabherstellung behandelt,
getrocknet usw. — bei der Anreicherung in pasteurisierter Molke 8 stabehen-
fisnnige Milchsaurebakterienarten. die wohl sicher aus dem Ealb stammtenr
Thermo b. lactis, helveticum, cereale, „Zwischenform“
bulgaricum: Jugurt, Maerckeri (?),Streptobaet. plantarum,
casei-plantarum, Betabact. longum und breve. In
den Ealbennagen miissen diese Arten, solange nur Milchnahrung vorliegt,
z. T. sehr giinstige Entwicklmigsbedingmigen finden. Da die Vagina der
Euh keine Milehsaurebakterien aufweist, gelangen letztere gewbhnlich
dutch das Belecken der Kuh in das Ealb. Hierdurch werden sowohl aus
dem Pansen (beim ’Wiederkauen vom Pansen ins hlaul gelangend) als auch

Zur Kenntnis dor atabchenformigen Milchsdiirebaktericnarten. Vorkommen usw, 115

aus dem Futter und der Streu Milchsaurebakterien ubertragen. Wahrend das
neugeborene Kalb im Heu oder im Gras liegt, leckl die Kuh alle Teile, auch
das Maul und die herausgcstreckte Zunge des Kalbes ab. Avobei die Zunge
der Kuh, wie man fcststcllon kann, regelmaBig auch die Unterlage (Heu,
Gras) bertthrt. Sobald das Kalb die Zitzen der Kuh, das Fell u. dgl. ableekt
Oder Milch aus dem Eimer sauft und Gras und Heu MBt, kommeu bestandig
alle moglichen Milchsaurebakterien in den Magendarmkanal. Von anderen
Forschern wurde festgestellt, daB das Th. helveticum bei dem Uber-
gang zur Heunahiung aus dem Kalbermagen verschwindet (s. u.). Bei der
Untersuchung von 24 Kuhpansen fand K r e i p e (unter Leitung des Ref.
angefertigte Dissertation Kiel 1926) nur selten Thermo b. cereale und
1 a c t i s (sehr viel Streptococcus bovis, "weniger f a e c i u m ,
thermophilus, Betac. bovis), dagegen nieht Th. helve-
tieum,Streptob. plantarum und cas ei(auchnicht Strepto-
coccus lactis). Die Verhaltnisse im gesunden Kuhpansen miissen
demnach fiir die stabchenformigen Milchsaurebakterien durchaus ungiinstig
sein. Anders ist es im Dunndarm der Kuh, da hier Albr. VoB (unter
Leitung des Ref. angefertigte Dissertation Eel 1928) stets (bei 5 Kiihen)
Thermo b. lactis (viel Streptococcus faecium, bovis,
thermophilus. auch eremoris (nicht in 2 Kiihen) — im Rectum
nur faecium und bovis — vorfand. Der Kuhkot zeigte naeh Ver-
ftitterung von frischen Riibenblattern (1 g der Blatter enthielt 70 000 Strepto-
bakterien und sehr viele Betabakterien sowie Strepto-, Beta- und Tetrakokken)
eine sehr groBe Zunahme an Streptobakterien, Beta- und Tetrakokken.
Die Streptobakterien in der Kuh diirften im Gegensatz zu T h e r m o b.
lactis demnach mehr als sehr haufige Passanten anzusehen sein. [Sehr
bemerkenswert erscheint, daB der gewahnliche Milchsaurestreptococcus
(Strepto c. lactis) weder in der Kuh noch im Menschen (s. u.) zur
Vermehking kommen kann. Dieser typisehe Milch- und Kasepilz kommt also
nicht aus dem Kuhdarm.] Im Kase reichem sich besonders die Strepto-
bakterien, etwas spater auch regelmaBig Thermobakterien und oft auch
Beta- und Mikrobakterien (neben Streptococcus bovis, fae-
cinm, liquefaciens, inulinaceus, Betacoccus bre-
vis, arabinosaceus), im Emmentaler — vde gesagt — infolgc der
groBen Einsaat besonders das Thermo b. helveticum an. Diese
gelangen also z. T. beim Rohmilchtrinken sowie je nach der Kaseart und je
naeh dem Alter des Kases in verschiedenen Arten und teilweise in sehr
groBen Mengen beim KAsegenuB in den Darm des Menschen (s. u.). Da der
Saugling in den allermeisten Fallen keine Rohmilch und natiirlich niemaJs
Kase erhalt, kommen die Rohmilch — falls nicht Buttermilch aus Rohmilch
gegebon wird — und die Kaso-Milchsaurebakterien auch nieht in seinen
Magen-Darmtraktus.

Herkunft der Yoghurtbakterien. — Zugehorigkeit
zur Gruppe des Thermo b. lactis.

Wiederholte Analysen von Yoghurt aus Bulgarien und der Tiirkei zeig-
ten, dait das volutinenthaltende Thermobakterium in den meisten Fallen
(regelmaBig in bulgarischen Yoghurtproben) vorherrseht. Unter diesen sind
auch stets Maltose und Rohrzuckcr sauernde Stanune, die also zu T h e r -
mob. lactis gerechnet werden miissen, von uns gefunden. 2m Original-
Yoghurt kommen demnach sowohl Th. bulgaricum als auch T h.

8 *

116

Elfriede Winnegge und W. Henneberg,

1 a c t i s vor, was selbstverstandlich erscheint, da in den Stadten dor Balkan-
lander heutzutage nie inehr wie urapriinglich die Lammermagen, sondern
fortdauernde Yoghurt-Milchubertragungen die Einsaat-Milehsaurebakterien
liefern. Ubrigens sind Th. bulgaricum und T h. I a c t i s keines-
wegs als Arten im botanischen Sinne aufzufassen; ersteres kann wobl nur
als eine durcli bestandige Zuchtung in llilch bei 45 — 50® „abgcschwachtc“
(s. Zuekerreihe) Easse des T b. 1 a c t i s d. h. als eine „Zuckerreihe-Varia-
tion" gelten. Die im Gauge befindliehen Versuche werden Meriiber entschci-
den. Nach der Zuekerreihe ist aueh das T h. h e 1 v e t i e u ni vom T h.
lactis kaum unterscheidbar, da derartige TJntcrschiede sich auch bei
Stammen des T h. lactis finden. Wir miissen helveticum als eine sich
im Kalbermagen bildende Easse, der das VolutinbildungsTcrmogen ver-
loren gegangen ist, auffassen. Hiermit wiirde auch sein sonstiges Nicht-
vorkommen eine Erklarung finden. Z. Z. wird von uns versucht, T h. 1 a c -
t i s in helveticum zu verwandeln. Th. bulgaricum unterscheidet
sich in der Zuekerreihe fast nicht von T h. j u g u r t, so daB letzteres als
volutinlose Easse des Th. bulgaricum gelten kann. Bisher kennt
man es nur aus dem Yoghurt.

Milchsaurebakterien der Yaginja) d e[s| Men s ch e n.

Zur Entscheidung der „Acidophilus£rage“ miissen unbedingt auch die
in der Vagina regelmaBig vorkommenden stabchenformigen Milchsaure-
bakterien beriicksiehtigt werden Bei der Geburt werden sie auf den Saug-
ling iibertragen, so daB in vielen Fallen das Plocamobacterium
vaginae mit M o r o s „Acidophilus‘* des Sauglingsdarmes identisch
sein diirfte (s. u.). Gleichzeitig mit dem Colibacterium werden aber aueh
Darm-Milchsaurebakterien aus der Mutter wahrend der Geburt oder des
ersten Badens in das neugeborene Kind einwandern. Uber die Vagina-
Milchsaurebakterien gibt es eine auBerst umfangreiche Literatur. Wir ent-
nehmen die folgenden Angaben einer soeben abgeschlossenen Disser-
tation von cand. med. et phil. Georg Henneberg (Uni-
versitats-Frauej±linik in Kiel, Direktor Prof. Schroeder). W e g e 1 i u s
(1909) unterschied besonders nach der Zellform und nach der Alkalitoleranz
versehiedene Arten, die M. a f H e u r 1 i n (1910) in ihrem Verhalten in
der Milch weiter charakterisierte: 1. kurz und dick — indifferens (4 Tage
Oder keine Milchgerinnung) — inversus (5—10 Tage) — subaerobius (koine
Milchgerinnung); 2) kurz und diinn = tenuis (2—10 Tage oder keine
Milchgerinnung) ; 3. lang = longus (keine Milchgerinnung) ; 4. dtinne neben
dieken Zellen = anaerophilus (7—10 Tage). Im „L e h m a n n und N c u -
m a n n‘‘ sind,_ wie schon oben gesagt, die langzeUige Art „vaginalis longus“
als P 1. V a g i n a e , die kurzzellige „vaginalis minor" als PI. a c i d o -
p h i 1 u m bezeichnet. G. Henneberg fand 2 morphologisch (Ketten
bUdend in 6 Frauen — oder einzelne Zellen in 4 Frauen — beide in 1 Frau),
aber nicht physiologisch unterseheidbare Gruppen. Hauptmerkmale:
Kein Volutin, durehschnittliche Zellgrofie 1,25—27 : 0,6— 1.1. bisweilen
Faden und rundliche hypertrophische Formen. T a r o z z i bouillon (ph 6.2)
wird in 48 Std. trube, spater bildet sich ein floei^er Bodensatz. Kolonien
auf Bluta^ax mit Auslauf em. In T a r o z z i bouillon mit 2% Glukose Saure-
bildungbis ph 3,3, Sauretoleranz 3,8; Alkalitoleranz bis 8,4. Memals Gas-
bildung. Lackmusmilch wird rosa oder voUig entfarbt und meist dick gelegt.
Die meisten Stamme — 8 Stamme aus 7 Frauen, und Cg aus der gleichen

Zur Konntnis der stabchenformigen Milchsaurobakterienarten. Vorkommen usw. 2.|[7

— sauern, wie auch auf der obigen Zuckerreibentabelle vermerkt wurde,
keinc Pentose und kcinen Alkohol, dagegen sauitliche Zuckerarten, die bbhe-
rcn Kohlehydrate (Glykogen. Imilin, Dextrin, Starke) und Salizin. Nur
2 Stamrae (ej, mj) sauern Arabinose, 3 (Ci, dj, ej) keine Mannose, J (cl) keine,

I (dg) wenig Laktose, 6 (fj, p^, c^, dg. e,) nur 'wenig Raffinose. 1 (Cj) kein
Dextrin. Charakteristisch ist das in der Regel langsame Sauerungsvermogen
in Milch (gcpriift 18 Stanimc aus 9 Frauen): Nui' 1 Stamm (Cg = Vg auf
unsercr Tabelle) legt die Milch in 1 Tag dick, ein anderer in 2 Tagen, 2 Stamme
in 3 Tagen, 3 Stamme in 5 Tagen. Es handelte sich in den bisherigen An-
gaben 3mal um die langzellige, 4mal um die kurze Form. Alle iibrigen

II Stamme brachton die Milch nieht in 6 Tagen zur Gerinnung. Milch mit
etwas Hcfecxtrakt hatto bei Vg am 3. Tag 0,8%, am 6. Tag 1,3 und am 7. Tag
1.6% Milchsaure (dg 0.2% — 0,5% — 0,91%). Diazetylbildung fehlte. —
Ein Tolutinbildender Stamm (s. u.) mirde beobachtet, aber nieht genauer
untersueht. — Uns intoressiert hier noeh besonders, dafi die Gynakologen
den in Rede stehenden Bakterien eine sehr mchtige Bedeutung beilegen, da
sio durch ihre Saurebildung (aus abgebautem Glykogen bzw. direkt aus
Glykogen) fremde Bakterienarten femzuhalten vermogen. Das ausnahmslose
Vorkommen in der Vagina — beim neugeborenen Madchen schon am 4. Tag

— beweist jedonfalls, daB die Bedingungen hier besonders giinstig sein
miissen. G.Honneberg nimmt mit anderen Forschern an, dafi die Besied-
lung der Vagina beim weiblichen SSugling von seinem Darm aus erfolgt:
Nach der Geburt sind uborall auf der Haut und an den Haaren des Neugebo-
renen die Vaginastabchen zu finden; von hier aus gelangen sie beim Baden
in den Mund und so auch in den Darm des Sauglings. Wenn auch das
oben beschricbene PI. vaginae die haufigste Art in der Vagina ist, so
diirften biswoilon — wenigstens zeitweise — auch andere urspriingliche
Darmstabchen zur Ansiedlung kommen.

Mil c hs aur oh ak t eri en des Darmes der Sauglinge.

Seitdem M o r o den „acidophilus“ aus den Sauglingsfazes gezuchtet
hat, sind die stabchenformigen Milchsaurebakterien aus dem Sauglingsdarm
von viclon Forschern mehr oder weniger genau untersueht. In manchen
bakteriologischen Instituten (z. B. in Kiel) werden seit langem „Acidophilus-
kulturen“ zur Abgabc an Acidophilusmilch-Betriebe und Privatpersonen
vorratig gehalten. Unabhangig von den amerikanischen Bakteriologen hatte
Ref. die Vervrendung von Menschendarm-Milehsaurebakterien an Stelle
der korpertremden Lammer-Milchsaurebakterien im Yoghurt zur Bereitung
eines „Rcformyoghurts“ vorgeschlagen, nachdem eigene Versuche ergoben
batten, daB sich nur erstere im Darm anzusiedeln vermogen. Die Bezeichnung
„acidophilus“ hatte M o r o gewahlt, weil diese Bakteriengruppe aus den
Sauglingsfazes durch die von Natur saure Bierwiirze anzureichern -vrar.
Wir miissen annehmen, daB es sich besonders um das sauretolerante PI.
vaginae (s. o.) gehandelt hat. Wenn spatere Forseher aus dem Darm
der Erwachsenen auf ahnliehe Weise (Milchzuekerbouillon mit 1% Milchsaure
Oder 0,6— Iproz. Essigsaure) den „acidophilus“ reinzttchteten, so kSnnen
natiirlich ganz versehiedene sauretolerante stabchenformige Milehsaure-
bakterien — endemisehe oder Passanten aus der Nahrung Rohmilch, Yog-
hurt, Kefir, Kase, Sauergurken, Rohobst — vorgelegen haben. Die Sammel-
gruppe „Acidophilus“ umschlieBt also mindestens im letzteren FaUe
PI. vaginae. Thermobacterium cereale und lactis.

118

Elfnede Wiiinegge und W Hennebeig,

Streptobaeterium plantarum und casci. Betabaote-
rium longum. Wenn man. 'vri.e im Handbuch von Lehmann und
N e u m a n n die Bezeichnung fur eine bestiinmte Art (PI. a c i d o p h i -
1 u m) einschranken will, so mu 6 die Abgrenzung gegen andere Alton moglichst
seharf sein. Schon die Fundortangaben im Werk von Lehmann und
Neumann (Vagina, Rauglingsdarm, Daim der Erwachsenen, Frauen-
und Euhmilch. Sauerteig) beweisen, daB hier vfieder eine Sammelart vor-
liegt. Es handelt sich mindestens um PI. vaginae und Thermo-
baeterinm lactis. die sieherlich nicht identisch sind Eine beson-
dere Art PI. acidophilum aufzustellen. erscheint demnach ganz
uberilussig. Will man die Bezeichnung beibehalten, so konnte sie fur die
im Saugling hkufige Volutinrasse desPlocamob. vaginae verwendet
werden (s. u.)

Abb. 5. Therm, lactis. tJbergangsform. Abb. 6. Hocamobacterium vaginae.

Im Bakteriologischen Institut der Kieler llilchforschungsanstalt war-
den die Sauglings- und Erwachsenen-Darmmilehsaurebakterien (s. u.) in
den letzten Jahren genauer untersueht, um einen moglichst wirksamen
,,Reformyoghurt‘’ (= Acidophilusmileh) herstellen zu konnen. Dio Er-
gebnisse seien hier mitgeteilt.

Es warden (1926 — 1934) etwa 20 gesunde SSuglinge untersueht; aus
11 meist nur mit Brustmilch erntdirten 16 MUchsaurebakterienstammo
(meist einer aus je 1 Skugling, nur Sg. S„ Sg— S,, Sm— S„, Su— Sig, S 14 aus
je einem Skx^ling) reingeziiehtet. Da die beiden aus Amerika erhaltenen
Stamme S 4 und S, ganz sicher (Volutingehaltl) ebenfalls aus Sduglingen
stammten, warden sie hier eingereiht. Der Bestand an stabchenfdrmigen
Milchsaurebakterien im Saugling ist aufierordentlich wechselnd. Nicht
selten finden sich in ganz jungen (z. B. 14r und 16 tagigen) Sauglingen noeh
gar keine. Auch das Bact. bifidum fehlt sehr oft. Ein einfacher Me-
thylenblauausstrich laBt erkennen, daB manchmal (z. B. Saugling ernahrt
mit 2^3 Milch, ^ Mehlsuppe, Stamme S*, S^, Sg) nur volutinlose Stabehen,
manchmal (z. B. Muttermilehsai^ling, Stamme Sg, Sw) vorherrschend volutin-

ZwL Kenntnis der stabohenformigen MUchsauiebakteiionaiten. Vorkomiuen uew. 1X9

haltige und in anderen Fallen (z. B. Muttermilch und Buttermilch) volutin-
lose neben volutinhaltigen etwa in gleicbem MisehungsverhSiltnis vorliegen.
Vertreter von beiden Arten — S, bis Ss mit Volutin — Sg bis Sig ohne Volutin
kamen zur Untersuchung. Sehr beachtenswcrt ist, dafi die Volutinst&bchen
Si, S4, S, in dcr Zuckerreibe auBerordentlicli den kein Volutin enthaltenden
pi. vaginae glcichcn (Sg vollig, S4 sauert kein Salizin, Si auBerdem
auch koine Raffinose). £s handclt sieh vielleicbt nm um eine Volutin ent-
haltende Basse dieser Art, die hocbstwahrsebeialich aucb in der Vagina noch
gefunden (G. Henneberg beobacbtete nur ein einziges Mai einen volu-
tinenthaltenden Stamm) werden kann. Die Stdmme und S3 ahneln in der
Zuckerreibe mehr dem Th. lactis (Sauerung der Alkobole. allerdings auch
der Arabinose). (Abb. 5 .) Wegen der verwandtschaftlichen Beziehung zum
Thermo b. lactis im Darm des Erwachsenen beanspruehen diese Stdmme

Abb. 7. Flocamobacterium vaginae. Abb. 8. Plocamobaot. vaginae (Rcbsse).

grofies Intercsse (s. u.). Unter den volutinfreien sind. soweit sieh aus dem
Vorhandonscin von Zellketten und aus der Zuckenreihe sehlieBen laBt, die
Stdmme Sn, Si„ Su zur Streptobakteriongruppe zu stellen. Die Stamme
Sy, Sg, Si-„ Si„ Si8 sind besonders w^en des Verhaltens in der Zuckerreibe
(keine Penlosen — keino Alkohole, dag^en hohere Kohlehydrate sauemd) P 1 .
vaginae (Abb. 6 u. 7 ). Sehr hervorzuheben ist, daB durch S3, S5, S15 Glyko-
gen gcsauort wird, sie sind vielleicht auch deshalb — die beiden letzteren s^on
wegen ihros sonstigen Verhaltens in der Zuckerreibe — eehte Vaginastamme.
Die iibrigen 4 volutinlosen Sauglingsstamme Sg, Sg, Sio, Si# stimmen nach der
Zuckerreibe nicht mit der zuletzt genannten Gruppe uberein. Bemerkenswert
hierbei ist, daB Sg und Sg mit dem Vaginaestamm S7 in demselben Saugling,
ebcnso Sjg mit dem Vaginaestamm Sg zusammen in einem anderen gefunden
wurden. Sie mussen wohl als „Zucker“-Varianten des Vaginae, mit dem sie
sonst iibereinstimmen (s. Abb. 8 = Sg), angesehen werden. Der Stamm
Sjg sauert keine Mannose, keinen Rohrzucker, nur wenig Malz- und Mileh-
zucker, kein hoheres Kohlehydrat, keinen Alkohol — ist also sicker unnormal,
d. h. „abgesohvracht“. In Milch bei 37 ® trat nur bei den 5 Volutinbildnem,

120

Elfriede Winnegge und W. H e n n r b e r g ,

d. h. Tliermob. lactis- bz\r. Volutin - Vaginae - Gruppe in
24 Std. Gerinnung (mit Hefeextraktzusatz, 1 Tropfen auf 10 ccm, Saure 0,96 —
l.t°o — 2 Tage 1,4% — 5 Tage 1,6 — 1.8®o) «n. walu’end bei den volutinlosen
Vaginastammen S^, Sg und bei den atypisehen Stammen Sa, Sg, Sjo erst ein
Ziisatz von Hefeextrakt vorgenommen verden muBte, um den gleiehcn
Erfolg in 48 Std. zu haben (Same 0,48 — 0,8 — 0,9%). Der Stamm S^ wuchs
in Milch liberhaupt nicht niehr an. Bei den meisten Stammen war wenig
COj-Bildung zu beobachten. Lackmusmilch wird unter Rdtung dickgelegt,
naeh einigen Tagen von unten her weiB. Bemerkenswert ist, daB in Lackmus-
molke die Farbe bisweilen ganzlich (3 Tage bei So) oder fast ganz (5 Tage Sj)
verschwindet. Die Volutinstamme Sj, S 3 , Sj, haben ein sehr starkes, S, ein
etwas geringeres und S 3 ein sehr geringes Kaseinauflosungsvermogen (Milch-
agar -Petri schale).

Das mehr oder weniger vollige Verschwinden der Colibakterien
bei groBer Anreichemng von bestimmten Milohsamebakterienarten im
Menschendarm (s. u.) gab AnlaB zu folgenden Versuchen: Es wurden 3 Saug-
lingsdarmstamme (2 volutinbildende [S^, S 3 ] und 1 Stamm ohne Volutin
[ 834 ]) in Milch, in Milchznckerbouillon und in Maische in etwa gleichcr Menge
mit 3 frisch aus dem Menschendarm reingeziichteten Colistammen (W.
Sch. K.) in Einzelversuchen bei 37® zusammengeimpft. Die Mischungen
vnirden nach 48 Std. in neue Nahrboden iibertragen, um festzustellen. ob
die Colibakterien ausgeschaltet waren. Beurteilung nach dem Auftreten von
Gas und nach dem mikroskopischen Bild. In der dmch tlbertragung aus
der ersten Milehkultm beimpften ilileh wuchs nur bei Sj keiner der 3 Coli-
stamme an. Das gleiche war bei Sg in Milchzuckerbouillon und in Maische bei

2 Colistammen der Fall. Offenbar wirkte hier die besonders schnelle und
Starke Sauerungskraft dieses Milchsamepilzes (Dicklegung der Mch in
24 Std.) entscheidend.

Milchsaurebakterien des Darmes der Erwachsenen.

Im Saugling fanden sich, wie wir im vorigen Absehnitt sahen, das
PI. vaginae der mutterlichen Vagina, das Thermo b. laetis und
die Streptobakteriu^ruppe. Die beiden letzteren stammen, wenn nicht
rohe Kuhmilch gereicht wmde. als haufige Darmstamme der Erwachsenen
(a. u.) urspriinglich wohl aus dem mutterlichen Darm. In dem alteren Kind
und in den Erwachsenen kommen allerlei ililchsamebakterien aus der Nah-
rung hinzu, z. B. aus Rohmilch, Butter, Kase, milchsauren Gurkcn (Salz-
^ken) und Rohkost (Mohrrtiben, Erdbeeren und dergl.). Wenn Milch
in grSBerer Menge und gleichzeitig Kase genossen wmden, so werden sich
wie man von vornherein annehmen muB und von uns bestatigt wurde (s. u.),
grSBere Mengen von Mileh-Milchsamebakterien im Darm anreichem. Im
Magen kommen sie unter normalen Salzsaure-Verhaltnissen nicht auf. So-
bald aber der Salzsaureschutz fehlt (keine oder zu wenig Saure), also bei
Stauungen, Magenerweiterung, Carcinom, findet schon hier eine starke Ver-
mehrung der Milchsaurebakterien statt, die „Sodbrennen“ verursachen
kSnnen. Henneberg fand z. B. neben Thermo b. eereale noch

3 andere stabchenfSnn^e Arten (wahrscheinlich Betab. longum,
Streptobact. casei) in einem Carcinom-Magen. Im mittleren
Dunndarm scheint nach den Beobachtungen von Henneberg, van
der ReiB, Resell u. a. ihre normale Wohnstatte zu sein. Von hier
aus gelangen sie in lebendem Zustand aueh dureh die hbrigen Darmteile,

Ziir Kenntnis der stabchenformigen Milchsdurebakterienarton. Vorkonimen usw. 121

in denen wohl nur unter bestimmten Verhaltnisscn fs. u.) eine Ansiedlung
moglich ist, in die Faces. Giinstige Wachstumsverhaltnisse werden vor-
liegen, ■wenn ein reiehlicher GenuB von Mich, Mlchzucker, zucker- und
starkehaltigen Fruchten, Gerniisen oder sonstigen zucker- und stSrkehaltigen
Nahrungsmitteln stattfindet. Eine ganze Eeihe von Milchsaurebakterien-
ai-ten vermag auch direkt Starke, die man oft noch in den Faces nachweisen
kann, anzugreifen. Jedenfalls sind den stabchenfi)nnigen Milchsaurebakterien-
arten cine eiweiBhaltige kohlehydratreiehe Eahrung some die gleichmaBig
hohe Temperatur, der Sauerstoffmangel und die schwach saure to schwach
alkalischo Beaktion im Darm sehr giinstig; ebenso scheint fiir sie die Gegen-
wart bakterizider Darmschleimhaut-Absonderungen und des B a c t. c o 1 i
unschadlieh zu sein (s. u.). Die Faces enthalten bisweilen mehr Mlehsaure-
baktericn als Colibakterien. auch kann letztere Art ganz fehlen (s. u.). —
Es ist keine Frage, daB urspriinglich aus dem Darm bestimmte stabchen-
fSrmige Milehsaurebakterien iiber den Damm — hier ■wurden verschiedene
Darmstamme von G. H e n n e b e r g fs. o.) regelmaBig nachgewiesen —
in die Vagina einwanderten und sich hier dem Standort anpaBten und so
zum PI. vaginae wurden. Wie lange und unter welchen Bedingungen
sich dieses im alteren Saugling, im heranwachsenden Kind und im Erwachse-
nen als Darmpilz zu halten vermag, konnte nur durch viele Untersuchungen
entschieden worden. Im Darm zweier Erwachsener (s. Stamm Ej und
Ei 3 Ey) konntcn wir das P 1. vaginae mit Sicherheit nachweisen (s. u.).
Viellcicht wird es meistens durch andere Arten (bisweilen mOglicherweise
auch erst bei der Anreicherung im Glas) unterdriiekt, wenn man nicht eine
allmahliche Umwandlung in eine andere „Art“ annehmen will. Mcht un-
mdglich ist, dafi manche volutinhaltigen Sauglings-Stamme (wohl sicher
bisweilen auch vaginaler Herkunft) bei den veranderten Nahinngsverhalt-
nissen im Darm der Erwachsenen zu den hier dfters gefundenen volutin-
haltigen Therm ob. lactis wurden. Die Yolutinstamme S® und Sg
des Sauglingsdarms konnten nach der Sauerung der Alkohole (s. Zuckerreihe)
tJbergangsformen zu dieser Art sein. Maurer, der unter Anleitung des
Ref. (Dissertation Kiel 1929) die Darmmilchsaurebakterien der Erwachsenen
(5 bzw. 8 Personen vor und nach dem GenuB von Itfilch, Milchzucker, Acido-
philusmilch s. u.) untorsuchte, fand bei seiner Untersuchungsweise — nach-
dem 8 Tage wedor Milch noch Milcherzeugnisse (Kase!) genossen waxen —
im Durchschnitt bei 4 Personen 23 — 65% Milehsaurebakterien unter den
noch lebenden Baktcricn. Es handelte sich bei dieser Zahl um 9 — 39%
stabchenfbrmige Milehsaurebakterien, von denen 2 — 13% volutinhaltige
als „Acidophilus“ bezeiehnete Stabchen, 1—7% Streptobakterium easei und
plantarum, 2 — 6% Betabakterium longum und breve und 3 — 13% Mi k r o -
bakterium laoticum waxen (daneben 61 — 91% Streptokokken
= 26 — 58% faecium, 18 — 36% glycerinaceus, 2 — 19% thermophilus). Diese
9 Arten halt Maurer fUrondemisch, wahrend die fo^enden 9 Arten,
da sie nur in einzelnen Personen (in Klaxnmern, wie oft bei direktem Platten-
guB bzw. nach Anreicherung) vorkommen, fiir P a s s a n t e n erklart
wurden: Volutinlose Axt [2 x, Anreicherung 1 x] (weil volutinlos = irrtiim-
lich als Thermo b. lactis bezeichnet I) — Thermo b. eereale
[Anreicherung 4x] — Microbaet. mesentericum [Anreicherung
2 x] — Streptococcus lactis [Anreieherung 3x] — cremoris
[Anreicherung 3 x] — Betacoecus arabinosaceus [Anreiche-
rung 2x] — bovis [Anreicherung lx] — pyogenes [Anreicherung

122

Elfriede Winnegge und W. Henneberg,

5 x] — liquefacieiis [Anreicherung 4 x] . Die von Maurer fur
seinen voliitinbildenden , .Acidophilus" angegebene Zuckerroihe (koine Pen-
tosen, koine Alkohole. dagegen Dextrin, StS.rke, Salizin sauernd) beweist,
dafi os sich um die gleiche Art Tvie bei unsereni SSiiglings-Volutinbildner
(s. o.J handelte. Maurers volutinlose Thermob. lac t is - Stamme
kSnnten, da sie vom vorigen in der Zuckerreihe iiur unwesentlich abweichen
(•vrenig Dextrin, keine Starke), etwas vertoderte PL vaginae (.,Zucker-
varianten‘') sein.

Kef. ist der Ansicht, dafi das Mchtvorkommen von manchen Arten
in den einzelnen Personen niehts iiber ihren Passantencharakter aussagt,
da sie bei den einzelnen Personen als endemisch auftreten kSnnen. Ver-
gleichen ■vvir die „Sauglings‘*- mit den „Erwachsenen“-MilchsSiurebakterien-
arten, so erscheint die Zunahme der Arten als charakteristisch. Obwohl
8 Tage IDlch und Mileherzeugnisse nicht genossen mirden, sind von Maurer
in den Erwaehsenen die Volutinstabchenart und die beiden Streptob^terien
stets gefunden vrorden, das volutinlose sog. Thermob. lactis mm
in 3 Personen. Diese Arten konnten nach unseren obigen Angaben vom
SSuglingsalter her ("wie die Colibakterien) dauernd vorhanden sein. Das
Yorkommen aller iibrigen stabchenfbrmigen Arten durfte in den moisten
Fallen auf spatere Einvanderung zuruckzufiihren sein (s. u.). Es braucht
sich hierbei wie beim Thermob. cereale durchaus nicht nur um
Milch-MUchsaurebakterien handeln. Das Thermob. cereale kann
z. B. mit Kohobst und Rohgemuse (Erde !) in den KSrper gelangen. Ther-
mob. helveticum mmde von Maurer nicht gefunden, obwohl
es doch mindestens zeitweise im Schweizerkase mitgenossen wird. Auf B a c t.
b i f i d u m 'vnirde von Maurer nicht geachtet.

Eigene Un t er s u c hu ng en der stabchenf ormigen

Milchsaurebakterien von 7 Ervachsenen (Abb. 9).

Es handelt sich um 14 Stamme, und zwar sind Ei bis E* aus Person I

— E, bis Ef aus II — Eg und Eg aus XYI — E^ aus IV — E^ aus V —
Ejs aus XVII — Ei 3 und E14 aus VII. Samtliche waren ohne Volutin. Wie
oben sehon gesagt, durften die Stamme Eg, E^ und .E14 zu PI. vaginae
(ohne Volutm) gehSren, da die Zuckerreihen groBe tJbereinstimmung zeigen.
Die Stamme Eg und Ej sauem -weder Galaktose noch Mannose und mussen
daher als atypische Stamme (siehe oben) angesehen werden. Die Stamme
Eg bis Ejg zeigten besonders ausgesprochene Kettenbildungen neben dcut-
licher Arabinose- und etwas schvacherer Rhamnososauerung, durften also

— auch nach dem Verhalten in Milch und bei verschiedenen Temperaturen —
sicher Streptobakterien sein. Da diese Kasein deutlich (besonders E^g) auf
der Milchagar- Petri schale aufliisten, handelte es sich um Streptob.
c a s e i. Ein absolutes tJbereinstimmen mit der von 0. Jensen ange-
gebenen Zuckerreihe kann — nochmals gesagt — nach unseren heutigen
Erfahrungen niemals gefordert werden. Die Glykogen-Sauerung (siehe oben)
far Eg Eg Ega ist besonders beachtenswert; Eg ist auch nach der Zuckerreihe
und dem morphologischen Verhalten (s. Bild Id) ein PI. vaginae.
Die ubri^en 4 Stamme (Eg Eg Ej Eg) sind nicht in die bekannten Arten (bes-
ser Gruppen) einzureihen. Eg und Eg (Eg Glykogen sauemd) sind aus der
gleiehen Fazesprobe, unterseheiden sich von aUen dutch das femende Madtose-
sauerungsvermbgen, sind auch sonst sehr ahnlieh. Von besonderem Interesse
ist, daB am gleiehen Tage aus der gleiehen Petrischale reingezuehtete

Zur Kenntnis der st3,bcbenformigen MilchsSiiirebakteripnartcn. Vorkommen 123

StSjame vrolil meist morphologiscli, aber nicbt in der Zuckerreibe iiberein-
stimmen (vgl. Ej und E,, Eg und E4, samtlich ans Person I, Eg und E, aus II,
Eg und E,, aus XVI, E^g und E^ aus VII). Es dtirfte dies fur die unter natiir-
lichen V^erhaltnissen vorkommenden „Zuckerreihe-Variationen“ (physio-
logisehe Rassen), die mdglicherweise durch die Verschiedenheit der Ansied-
lungsstellen in den einzelnen Darmabschnitten bedingt sind, verwertbar sein.
Jedenfalls erseheint es zweckmafiig, naeh dem Vorschlag des Ref. immer
„Gruppen“ und nicht scbarf zu kennzeichnende Arten zu unterscbeiden. Die
Personen I und II warden sehr oft zu verschiedenen Zeiten untersuoht (siebe

Abb. 9. ,,Men&chen-Milchsaurebakterieii“ (1000 X).

Aus Erwachsenen: la = Stamm E^, b = Eg, c « Betabactenum longum, d « Ej
(Plocamob. vaginae), 2a » Betab. longum, b-E6a. Aus Siuglingen; 1 =sSe.
Plooamob. vaginae (Basse). 2 -Sjg Streptobacierium. 3 S17 Plocamob. vaginae.

4 = S2 Tliormob. lactis (ubergangsform). 5 « Si Volutinrasse des Plocamob. vaginae.
Aus der Vagina (3 Frauen): Plocamob. vaginae, 4 Basse ohne Ketten.
(Aus Base: Streptobact. casei.)

unteni; bierbei lieB sieb sobon mit HiUe der Federstrichkulturen im groBen
und gabzen immer das gleiebe Bild feststeUcn. Person I batte fast stets
viele, aus dlinnen Zellen bestebende verschlungene Ketten, Person It da-
gegen nur zusammenbanglose Zellen. Abnliebes wurde aucb bei den wieder-
bolten TJntersucbungen anderer Personen beobacbtet, so daB man oftmals
sobon an dem Milcbsaurebakterienbestand in den Praparaten die Herkunft
(d. b. die betreffende Person) erkennen konnte. Wir kSnnen hieraus wobl
folgern, daB unter gleicbbleibenden Verbaltnissen (Nabrungsart, Gesundbeits-
zustand) jeder Menscb seinen eigenen der Menge und der Art nach cbarak-
teristisehen Milcbsaurebakterienbestand besitzt. — Die von Maurer an-

124

Elfriede Vrinnegcje und W. Henncborg,

gefuhrten Yolutiiibildner fs. oben) haben 'wir in den von uns untersuchten
Personen nicht aufgefnnden. (Maurer untersuchte nur mannliehe, w
niit 3 Ausnahmen nur veibliehe Personen.) Yiolleicht ist es nur ein Zufall.
Oder es ist auf irgendeine Abweichung iin Anreiclierangs- bzw. PlattengnB-
verfahren oder auf einen voraufgegangenen GenuB von „A c i d o p h i 1 u s -
niilcli*" (in unserem Institut!) zuriickzufuhren. Bei 'weiteren Untersuchungen
muB besonders axif das Yorkommen der Yolutinbildner ini Darm der Er-
waehsenen aclitgegeben ■werden.

Ansiedlungsversuche vonMilcbsaurebakterien durch
den GenuB von Milch. Milehzucker, Ease
und Reinkulturen.

Obwohl scion eine groBere Anzahl gleicier oder ahnlicherVersuche an
Menscien von verschiedenen Forsciem ausgefiihrt wurden, sind diese TJnter-
suchungen von uns yeiter fortgesetzt Tvorden, da noch sehr viele Fragen zu
beantvrorten sind. Yon den neueren Yersuchen liber dieses auBerst mchtige
Thema seien nur die Ergebnisse von Maurer (Dissertation unter Leitung
des Ref.. Kiel 1929) und von Orla Jensen und 0. Winther (1933,
Maelkeritidende, Nr. 19, S. 469 — 474) kurz genannt. Maurer stellte,
wie oben scion gesagt \furde, seine Untersuchungen an 6 Personen an, die
vrahrend 8 Tagen weder Milch noch IKlcherzeugnisse genossen hatten. Zu-
nachst trank jede Person (4 Personen) 8 Tage je Va I pasteuriaierte Voll-
niilch — in der zveiten Yersuchsreihe (3 Personen) taglicher GenuB von 60 »•
Malehzucker — in der dritten Reihe (3 Personen) taglich % 1 A c i d o'
p h i 1 u s milch mit Milehzucker (z. T. mit Kreide).

1 Nach dem GenuB von |

= :

Vorher

Milch

Milch.

zucker

Aeidophilusmilch
z. T. gleichzeitig mit
Kreide bzw. mit
Milehzucker

Unter den lebenden Bakterien
waren Milchsaurebakterien .
davon stfcbchenformig . . .

davon „Acidophilus*‘ (s. oben)

Streptobakterien ,

Betabaktenen

Mikrobakterien

0

0

23—55

9—39

1 2—13

1— 7

2— 6
3—13

0

yO

64—83

28—48

8—10

4—20

3—8

6—11

Oy

/o

90

49—66

28—37

12—14

3—6

2—6

yO

80 — 95 (mitKreide)

56 — 74 (mit „ )
92 — 99 (ohne ,, )
92 — 99 (mitMilchz.)

J®“sen und Winther berichten iiber Untersuchungen an
2 Personen (L II}. Versuchaperson I, die taglich 14 1 Dickmilch genoB, ent-
Melt in den Fazes neben zahlreichen B a c t. b i f i d u m 40% c 0 1 i — nach
dem GenuB von 100 g Milehzucker nur 0 . 4 % coli — nach dem GenuB

^ (Vi-Vs 1) mit 75 g Milehzucker viele stabchen-

lor^e Milchsaurebakterien neben bifidum und 6 , 3 % coli. — Ver-
suchspCTson II, die^angs viele stabchenfonnige Milchsaurebakterien und

mit Milehzucker 1,7-7% coli. A c i d 0 p h i 1 u s milch^eicheiJe die

Zur Kenntnis cler stabchonfoi mitten Milchsaurebakterienarten. Vorkommcn usw. 125

Acidophilus bakterieu bis auf 19% an. Gleichzeitig vermehi’ten sich
auch anderc stabchenfbrmige MilcbsSurebakterienarten und Streptokokken.
— Durch fruhere Untersuehungen von Orla-Jensen und anderen
wissen wir, daB der Strep t. lactis sich ini Darm des llenschen nieht
anzusiedcln vormag. Diese Art wd hier von Strept. faeeium und
glyccritiaecus vertreten. DaB die Yoghurt-Milchsaurebakterien sich
im Gegensatz zu dem „Aci dop hilus‘' nicht im Menschendarm halten
kbnnen, hat auBer inehreren anderen Forschern auch Ref. frliher nach-
gewiesen.

Eigene Untersuehungen.

Vor dem Beginn unserer Versuche wurde in den Fazes von einer groBeren
Anzahl Erwachsener die Milchsaurebakterienflora festgestellt, um geeignete
Versuchspersonen ausf indig zu maehen und gleichzeitig eine etvra vorhandene
Abhangigkeit vom bisher stattgefundenen Milch- bzv. KasegenuB oder
-NichtgenuB festzustelleii. Fiir unsere Zweeke geniigte (s. obenj ein Naeh-
weis mit der Chinablaumilchzuckorbomllonagar -Petri schale, ofters auch
nur die Wiirze- neben der Milchzuckerbouillon-Federstrichkultur und gleich-
zeitig die „Deekglas -Petri schalenkultur" und Wurzeanreicherung. In
einigen Fallon (Verfutterung bestimmter Arten) konnten nur Neuisolierungen
fiber die Arten entscheiden. Es werden mit den genannten Methoden selbst-
verstandlich nur die unter diesen Bedingungen gut wachsenden Milchsaure-
bakterienarton — das sind aber die uns hier zunachst nur allein interessie-
renden Arten — festgestellt. Ebenso werden sich so nur die Arten, die in
wesentlicher Monge und in lebenskraftigeni Zustand im Darm und daher
auch in den Fazes vorhanden sind, nachweisen lassen. Sehr geringe Mengen
Oder abgesehwachte Zellen irgendeiner Art konnten — wie sich auch probe-
weise in einigen Fallen ergab — nur mit dem Anreicherungsverfahren fest-
gestellt werden. Da solche nach jedem GenuB von Ease (s. unten), Rohobst
u. dgl. vorhandene Passanten uns hier nicht interessieren, wandten wir fast
stets nur die aufgoffihrten direkten Nachweismethoden (d. h. keine indirekten,
,.Anreicherungskulturen“) an. Nur in dieser Einschrankung haben also unsere
folgenden Angaben (z. B. „keine“ stabchenformigen Milchsaurebakterienj
ihre Berechtigui^.

Die Personen I bis IV gaben einen taglichen reichlichen KasegenuB
(IV Speisequarg) an. I sehr viel stabchenformige Milchsfiurebakterien (an-
schoinend 3 Arten, von denen Ej bis E 4 — siehe ,,Zuckerreihe“ — genauer
untersucht wurden) neben wenig Streptokokken. II maBig viel stabchen-
formigo MUchsaurebakterien (Ej bis E,) neben sehr viel Streptokokken.
Ill zahlreiehe stabchenformige MUchsaurebakterien. IV viele stabchen-
ffirmige Milchsaurebakterien in 2 Arten (Eio) neben sehr vielen Strepto-
kokken. Dio Personen V bis XV genossen nur wenig Ease und Milch (z. T.
keine Milch). V viele Langstabchen (Eij) und Streptokokken. VI maBig
viel Streptobakterien neben Bact. bifidum und groBzelligen Strepto-
kokken. VII sehr wenig stabchenffirmige Milchsaurebakterien (E 13 , Ej^)
und Streptokokken. VIII wenig Bact. bifidum neben sehr vielen
kleinzelligen Streptokokken. IX wenig stabchenffirmige Milchsaurebakterien
(2 Arten), wenig Streptokokken. X keine stabchenfbrmigen Milchsaure-
bakterien. XI wenig Streptobakterien, viel Bact. bifidum, sehr
wen^ Streptokokken. XII (keine Milch, wenig Ease) keine stabohenffirmigen
MUchsaurebakterien, kein Bact. bifidum, sehr wenig Streptokokken —

126

Eliriede Winnegge nnd W. Henneborg,

im Anreicherungsversuch nur Mikrobakterien. XIII mafiig vicl B a c t.
b i { i d u m. XIY viele, lange Milchsaiu’ebakteiien.

Es ist sicber kein Zxifall, dafi bei reichlickem KasegeiiuB in den meisten
F&llen ein besonders groBer Bestand an stabchenforniigen Milehsduiebakterien
festzustellen 'war. Bei geringeni KasegenuB feklten diese Arten in 2 Fallen
(X, XII; XII 'wiu’de sehr ott mit gleiehem Ergebnis gepruft). Da die fast
niit jedem KasegenuB eingefuhrten illilchsaurebakterien in lebendem Zustand
den Magen und Darm durckwandern konnen, sagt ihr Vorkommen in den
Fdzes noch nichts iiber ibre Yermehmngsfabigkeit (= Ansiedlung) im Darm.
Erst die Feststellung von sebr zahlreicben Kasebakterien und besonders
einer solcben nacb einem mebrtagigen (mindestens St&g^em) Venneiden
von Ease (naturlicb aucb jeder anderen Bakterienquelle) be'weist eine An-
siedlxing (s. u.).

A. GroBerer MilebgenuB.

Yon I und II 'wurde wahrend 8 Tagen taglicb je 1 1 pasteurisicrte Voll-
milch getrunken. Untersucbung am 2., 4., 5. und 8. Milcbtag. I noben den
bereits vorbandenen Arten findet sicb ein dickzelliges Streptobakterium
ein, Zunabme von Bact. bifidum (6 Tage), Abnabme der Strepto-
kokken, keine Abnabme von C o 1 i. II (4. Tag) eine sehr kleinzellige Strepto-
kokkenart verdrSngt die anfangs vorhandene groBere Art, erstere herrscht
am 8. Tag fast allein. Erst am 8 Tag treten stabchenformige Milchsaure-
bakterien in groBerer Menge auf. — XI trank an 6 Tagen je 1 1 kurz auf
90® erbitzte Vollmilch. Untersuchung am 2., 3., 4., 6. Tag: Die Anfangs-
flora — wenig Streptobakterium und Streptokokken, mSBig viel Bact.
bifidum, viel Bact. coli — zeigt gar keine Verandemng.

B. Milch und Milchzucker.

I und II nehmen an 8 Tagen je % 1 pasteurisierte Vollmilch und auBer-
dem 50 g Milchzucker zu sicb. Am 8. Tag bei beiden auBerst starke Zu-
nahme der Milebsaurebakterien. I 2 Arten stabchenformige Milcbsaurebak-
terien, sehr kleine neben groBeren Streptokokken, Bact. bifidum.
II die kleine Streptokokkenart ist zux Yorberrschaft gekommen; die Menge
der stabcbenformigen Arten und des groBeren Streptococcus ist verringert.

C. Schweizerkase (a us Norddeutscbland).

Yon I und II vurde an drei aufeinanderfolgenden Tagen je ^ Pfd.
Ease und gleicbzeitig % 1 pasteurisierte Yollmilch genossen. Wie die Ana-
lyse ergab, waren in diesem Ease Thermo b. belveticum, Beta-
bact. longum und ein auBerst kleinzelliger Streptococcus in groBerer
Menge. Bei I und II konnte in den Fazes vom 2. und 3. .,Kasetag“ T h.
belveticum in maBiger Menge nacbgewiesen werden, aber niebt mebr
bei der erst ■wieder am 12. Tage nacb Versuebsbeendigung vorgenommenen
Priifung. Betabact. longum konnte nocb am 14. Tag aus den Fazes
■wiedergezuchtet werden. Besonders auffallend verbielt sicb ein sehr kleiner
Streptococcus (Abb. 10). Bei Iwurde er erst am 14. Tag (nicht 12. und 13. Tag)
und dann r^ebnaBig in groBen (15. 17, 18, 19, 20 Tagen) bzw. in ungeheuren
Mengen (31, 32 Tagen) nacbgewiesen, dann nur nocb spurenweise (36. Tag)
und scblieBlich am 38. Tag gar nicht mebr. Bei II ■trat diese sehr leicht
naehweisbare Streptokokkenart zuerst am 13. Tag auf — sehr viel am 31. bis
33. Tag und bielt sicb viel langer (iiber den 52. Tag hinaus) in groBen Mengen.

Zur Kenntnis der stabchenformi^en Milchsauiebaktencnarten. Voikommen usw. 127

D. Tilsiterkase.

XI hatte an 6 aufeinanderiolgenden Tagen je 1 1 bei 90® pastenrisierte
Volbnileh getrunken, ohne daB eine Ploraanderung sich bemerkbar maehte
(s. 0 .). Am 7. Tag mirde nur einmal 125 g Tilsiterkase und weiter -wie Torher
taglich je 1 1 Milch genossen. Bereits nach 1 Tag (naeh dem „Kasetag“j
fanden sieli in Mengen Streptobakterien und Streptokokken. Letztere
nahmen an Menge (2. und 4. Tag) zu, erreichten nach 5 Tagen ihre Hochst-
menge, so daB Coli kaum noch nachzuweisen wai‘. Nach 6 Tagen maehte sich
eine Abnahme bemerkbar, nach 7 und 8 Tagen waren sie kaum noch vor-
handen. Coli hatte sich entspreehend mehr und mehr wieder eingefunden.
Am 14. Tag nach dem Kasegenufi -waren trotz des taglichen Milchgenusses
kein einziger Streptococcus, nur noch Streptobaeterium und die .^angs-
flora aufzufinden.

E. GenuB von Eeinkulturen.

a) Thermobacterium laetis. XIV nahm ■wahrend 8 Tagen
taglich 200 cem mit dem Stamm gesauorte (vor der Impfung pasteuri-
sierte) Vollmilch zu sich, auBerdem
wurde reichlich Milch getrunken. Schon
bei der Untersuchung nach einem Tag
und welter fanden sich massenhaft die
„verzehrten“ Thermobakterien. Nach
5 und 6 Tagen stellten sich daneben
auch Streptokokken in auffallender
Menge ein. Noch 5 Tage nach Ver-
suchsbeendigung konnten Thennobak-
terien und Streptokokken aufgefunden
werden.

b) Streptobaeterium ea-
sel. IX genoB wahrend 8 Tagen
taglich 200 cem mit dem Stamm Str. I
gesSuerte (vor der Impfung pasteuri-
sierto) Vollmilch. Am 3. Tag war die-
ses Kasebakterium neben zahlreichen
Streptokokken, die anfangs fehlten, in
sehr groBer Menge in den Fazes naeh-
weisbax. Naeh Versuchsboendigung war
es nur noch 2 Tage vorhanden, die
Streptokokken fanden sich nach 3 Tagen noch reichlich, naeh 7 Tagen nur noch
in geringer Menge.

c) Volutinbildner S.. XV trank zundchst nur whhrend 3 Tagen
taglich 200 cem mit dem Stamm Sj gesauerte (vor der Impfung pasteurisierte)
Vollmilch. Nach 2 und 3 Tagen war diese Art auBerordentlich zahlreich
in den Fazes nachweisbar. Die Eeinkultur wurde vor dem 2. Versuch erst
11 Tage in maltosehaltiger Milch (s. S. Ill) vorgezuchtet. Hierauf warden
200 cem Milchkultur wahrend 9 Tagen getrunken. Schon nach einem Tag
and weiter lieBen sich wieder die verzehrten Bakterien in auBerordentlich
groBer Menge, nach 3 und besonders nach 6 und 7 Tagen daneben auch sehr
viele Streptokokken naohweisen. Nach Versuchsbeendigung waren noch
naeh 4 Tagen beide Arten in sehr groBer Menge aufzufinden.

Abb. 10. Nach GenuB von Schweizer-
kase. Sehr kleine Streptokokken.

128

Elfri°de Winnegge nnd Hennoberg,

d) Yolutinbildner Sj und S 3 in Mibobung in einera
fabrikmdbig bergestellten Trockenprapaiat. X nabin ■wabrend 7 Tagen tbg-
lieb einige Teeloffel voll des in pastenrisierter Milch aufgeschweinniten
Prdparates zu sich. Bei den ■wiedeiholt vorgenonimenen Untcrsuchungen
zeigten schon die direkten Ansstriehe das Vorherrschen dor verzchrten
Yolutinstabchen. Federstricb- und Reinkulturen bewiesen die Tdentitat:
Colibakterien ■svaren nicht nacb^eisbar.

ej Es in Miscbung mit Vg. I und YI genossen an 2 aufeinander-
folgenden Tagen je % 1 pasteurisierte Vollmilcb, die mit Abscbwcnimungen
von je 3 Schragagarkulturen (150-ccm-Flaschen) der beiden MilchsSiurebakte-
rienarten vermiseht waren. Bei I nach einem Tag nacb Versucbsbeendigung
= auBerordentlicb groBe Mengen beider Arten, danebcn sebr vielo Strepto-
kokken, starke Abnabme des B a c t. c 0 1 i. Bei VI weniger deutlicbe Zu-

Abb. 11 .

Nach GenuB von Bemkolturen Vg u E,

Abb. 12.

Nach Gonufi \on KefoiiuspeisequaTg.

nabme der stabebenfdrmigen Milchsaurebakterien; Vg ist mit Sicherheit
erkennbax (Abb. 11). In Vorberrscbaft ein vorher nicht gefundener kleiner
Streptokokkus. Bact. bifid urn und coli sind ebenfalls zahlreich
vorhanden.

f) Speisequarg mit 5 Reinkulturen (Sj, S 3 , S^,, S 17 , Vg).
Die einzeln in sterilisierter Milch mit etwas Hefeextraktzusatz aufgefrischten
Stbmme -wurden in pasteurisierte Milch ubertragen. Nach der Dicklegung
(ph 4,75) diente die Milch zur Quargbereitung. Saurezunahme des im Eis-
schrank aufbewahrten Quargs bis ph 3,9 am 4. Tag. Die Untersuehung
nach 1 und 4 Tagen ergab das Vorherrschen der Volutinsthbchen Sg, S 3 .
I genoB am 1 ., 4. und 7. Tag je 200 g des sehr wohlschmeckenden Quargs.
Bereits am 1 . Tag nach dem QuarggenuB me auch am 4. Tag (d. h. unmittel-
bar vor dem zvreiten QuarggenuB) waren auBerordentUch groBe Mengen
Yolutinsthbehen nachweisbar (Abb. 12). Gleichzeitig traten massenhaft
vorher nicht vorhanden gewesene groBzellige Streptokokken auf. Ent-
sprechender Behind nach dem zweiten und dntten QuarggenuB. (Wdihrend

Zui Kenntnjs dei stabchenformigen Milchsaurebakteiienarton. Vorkommen us’R# X29

und gleich nach dein Versuch \Mirde — vrie bei alien diesen Versucben —
selb&tverstaiidlich jeder Kasegenufi u. dgl. vermieden.)

EinfluB von Milch und S t r ep t o k o k k e n. Da sieh in
manchen der vorstchenden Versuche gleichzeitig mit den verzehrten Bak-
terien bestimmte Streplokokkenarten im Darm in auffallender Weise an-
roicherton, wurden 2 Versuche mit bekannten Arten ausgefuhrt.

g) Streptococcus thermophilus. XI trank an 6 aufein-
anderfolgenden Tagen ie % 1 mit diesor Streptokokkenart gesauerte (vor der
Impfung pasteurisiertoj Vollmilch. Erst am 3. Tag naeh Versuchsbeginn fand
sio sich wenig, am 4. und 5. Tag in sehr grofien Mengen (Abb. 13). Wahrend
sich B a c t. b i f i d u m in gleicher Menge hielt. 'war Bact. ooli sehon
nach einem Tag nicht mehr nachweisbai-. Am 4. Tag nach Versuehsbeen-

Abb. 13. Nach Cjenufi von »Streptoc. ther-
mophilus (Kolonien \on Bact. bifidnm).

Abb. 14.

Nach Genufi von Streptoc. faecium-

digung lieB sich der Streptococcus nur noch wenig, am 5. Tag fast gar nicht
mehr feststellen. Coli stellt sich erst zwisehen dem 6. und 9. Tag wieder ein.

h) Streptococcus faecium (St. F. a). XII genoB nur ein-
mal % 1 einer 2 Tage alten, mit diesem Streptococcus geshuerten Vollmilch,
sonst vorher und nachher keine Milch. Magen- und Leibschmerzen naeh
einigcn Stunden, zeitweise noch naeh 1 und 2 Tagen. In den Fizes war
diese Baktorienart schon nach 15 Std. und besonders nach 1—3 Tagen fast
in Reinkulturvorhanden(Abb.l4); dann erfolgte eine schnelle Abnahme. Nur
Spuren liefien sieh nach 4 und 8 Tagen naehweisen. Coli, das vollig ver-
schwunden zu sein sehien, stellte sich wieder mehr und mehr ein.

F. FeigenundDatteln.

Von Metschnikoff war auoh zur Anreicherung der Yoghurt-
milchsaurebakterien im Darm der GenuB von Feigen und Datteln empfolUen.
1 und TI aBen an 2 aufeinanderfolgenden Tagen je 250 g Feigen und Datteln.

^wMteAbt. Bd 91. 0

130

Elfriede Winnegge und W. Hennebcrg.

Bei I ergab sich bei den Unterbucbungen nach 2 und 3 Tagen starke Zunabme
der Streptobakterien (und Hefen), Abnahme der Streptokokken. Bei II
keine Zunabme der stabcbenfdnnigen llilchsaurebaktericn mit Ausnabme
des Bact. bifid urn (Abb. 15). AuBerst starke Zunabme ciner kleinen
Streptokokkenart, geringere Vermebrung einer groBercn Streptokokkenart.

G. Fleiseb.

Ein erhbhter Fleischgenufi soli naeb Angabe verschiedener Autoren
die MilcbsS-urebakterien im Darni verdrSngen, ein Streptococcus
gracilis soil sicb anreichem. XI nahm an 5 aufeinanderfolgenden
Tagen in verschiedener Form je 500 g Fleiseb zu sich. Bei den am 1., 2., 3.,

4. und 6. Tag vorgenommenen Untersuebungen lieB sicb gar keine Ver-
^nderung (vie vorber zabbeicb Bact. bifidum, venig Streptokokken)

feststeUen.

Die wiebtigsten Ergebnisso dieser
Versuche sind folgende:

1. Die Versuchspersonen reagieren
in verschiedener Woise auf MilchgenuB,
ZuckergenuB (Feigen und Datteln) bzw.
Bakterienzufuhr (Versuch A, Ee, F).

2. Milch (genugend hoch pasteuri-
siert) mit Milchzuckerzusatz hat am
meisten EinfluB auf die Zunabme der
Milchsaurebakterien des eigenen Be-
standes (B).

3. Zur Ansiedlung der MUchsaure-
bakterien ist die gleiebzeitige Zufuhr
von Milch, MBchzaieker oder Fruebt-
zucker durehaus notwendig.

4. Durcb den KasegenuB verden
Milchsaurebakterien eingefiihrt, die sich
im Darm ansiedeln konnen. Eine be-

sonders viebtige Rolle spielen hierbei manebe Kasestreptokokkenarten
(C und D).

5. Streptokokken aus dem eigenen Bestand reicbem sicb auch in auf-
fallender Weise an. wenn Milch bzv. Speisequarg mit anderen Reinkulturen
genossen verden (Ea, b, e. e, f).

6. Die 2 geprbften Streptokokkenarten tbermophilus und faecium
vermehrten sicb — besonders faecium — im Darm in ungeheurer Weise.
Faecium haftet sofort, auch wenn am 2. und den folgenden Tagen Milch niebt
genossen vird.

7. Samtlicbe gepriifte stabchenformige Milchsaurebakterien (E a bis
E f) kdnnen sich im Darm vermehren. Am meisten betrifft dies die schnell
die Milch sauemden Volutinbildner aus dem Saugling (E c, d, e).

8. Die Wiederausschaltung gebt — soveit untersuebt — beiStrepto-
bacterium casei (Eb)am schnellsten vor sicb (3 Tage nach Versuchs-
beendigung nur nocb venig vorhanden).

9. Bei weitem am langsten hielt sicb im Darm eine sehr kleinzellige
Kasestreptokokkenart. Bei Person I 35—38 Tage, bei II langer als 52 Tage;

Abb. 15. Bact. bifidum.

Zur Kenntnis der stabchenformigen Milchsaurebakterienarton. Vorkommen usw. 131

strep t. faecium und tlicrmophilus Mclten sich kaum iiber
5 Tage (C. E g und E h).

10. Eine Wiedoraussckaltung der zugefuhrten Bakterien scheint Regel
zu sein. Trotz der kElchzufuhr verseh’windet der Kasestreptococcus zwischen
dem 8. und 14. Tag (D) wieder.

11. Der Bestand an Coli wd durch MilchgenuB nur bisweilen (A, I)
verringert. Bei Streptokokkeneinfuhr verseb'vrindet coli fast vollig (D 5 Tage,
E g, h), ebenso bei grofier Einfuhr von volutinbildendcn Sauglings-klilch-
saurebakterien (E d).

Praktischer Nutzen derMilchsaurebakterienzufuhr.

Nach unseren Versuehen, die z. T. die von anderen Forscbcrn erhaltenen
Ergebnisse bestatigen bzw. erganzen, gelingt eine Ansiedlung von bestimmten
klilehsaurebakterienarten mit Sieberheit, wenn und solange eine -vnederholte
Zufubr gleicbzeitig mit Milcb und Milchzucker erfolgt. Die starksten Saure-
bildner aus dem Mensohendarm, die bei 37“ sebr scbnell wachsen, werden
sich -wahrscheinlicb auch im Darm am meisten vermehren, d. h. sick besser
ei^en als die gewohnlichen Thermo- und Streptobakterienstamme des Eases.
Mit der Schaffung eines besonders geeigneten Eases ist das Bakteriologisohe
Institut in Eiel schon langere Zeit besehaftigt. Ebenso sind Versuche mit
andersartigen, Milch nicht oder nur schlecht sauemden Milchsaurebakterien-
arten im Gange. Bei „danngesunden“ Menschen durfte sich die Floraumstel-
lung, d. h. eine Vermehrung des Milchsaurebakterien-Bestandes im Befinden
wohl kaum bemerkbar machen, -wenn man nicht Metschnikoffs An-
sicht als zutreffend anerkennen ■will. Handelt es sich bei darmkranken
Menschen rrm die Verdrangung einer sich primar oder sekundar als schadlich
erweisenden „falschen“ Darmflora, so wurde die kiinstliche Milchsaure-
bakterien-Besiedlung aber durchaus in Frage kommen. Tatsache ist, daB
Colibakterien sehr schnell verdrangt werden kbnnen und ebenso sicher wohl
auch manche ahnlich sich verhaltende Arten, vorausgesetzt, daB sich letz-
tere im Darm (nicht in den Gallenwegen, "wie z. B. Bact. paratyphi)
befinden. Hieruber kdnnten natiirlich nur Versuche am Erankenbett ent-
scheiden. Ebenso muB noch entschieden werden, ob die Sauglinge durch
mSglichst friihzeitige Futterung mit den kraftigsten Sauglings-Milchsaure-
bakterien („Eeformyoghurt“) vor bakteriellen Darmstdrungen besser gesehiitzt
werden kdunen. Das gleicho ware mit entsprechenden Milchsaurebakterien-
arten bei ganz jungen Ealbern und Ferkeln in gefahrdeten Betrieben zu
priifen. Wahrscheinlicb wiirden die ausgesuchten Axten wahrend des ganzen
Lebens festhaften oder es miiBten von Zeit zu Zeit Neufiitterungen (mit
Milchzuckerzugabe) erfolgen.

SehluBfolgemngen und Znsammenfassung.

Die alte S amm el b e z eichnun g „B. acidophilus" um-
faBt, wenn die Anreicherung in sauren Nahrfliissigkeiten (Bierwiirze und
dgl.) aus den Faces von Sauglingen gesehah, Plocamobaeterium
vaginae, Thermobacterium lactis, Streptobac-
terium oasei, wenn sie aus den Faces Erwachsener vorgenonunen
wurde, auBerdem noch Betabaeterium breve und 1 o n g u m
und andere Arten. Die in der „Bakteriologie Lehmann und N e u -
mann“ beschriebene Art: PI. acidophilum ist nicht geniigend

9 *

132

Elfriede Winnegge and W. Henneberg,

charakterisiert — es fehlt besonders die „Ziickerreihe‘* und die Angabe.
ob Volutin vorhanden ist. Die Fundortangabe: Faces von Neugeborenen
und Erwaebsenen, Vagina, Frauen- und Kuhmilcb, Sauerteig deutet w i e -
derum auf eine Sammelgruppe, die nundestens PI. va-
ginae und Thermo b. lactis umschliefit. Es diii'fte sich also emp-
fehlen, eine besondere Art PI. acidophilum nicht aufzustellen und
fiir die Bezeichnung ..AcidopMlusniilch" die mehr neutrale „Reforni-
yoghurf‘ (Reform-Speisequarg: Reform-KSse) zu wahlen (s. u.). Wenn man
die Bezeichnung „acidophilus“ nicht fallen lassen will, so kdnnte sie fiir
die Volutinrasse des Ploc. vaginae im Sauglingsdarm Verwendung
finden (s. u.J.

Die 1. c. ebenfalls besehriebene Art PI. vaginae ist aueh nicht
genau genug charakterisiert. Die „Zuckerreihe‘‘ und ebenso die Angabe
der Volutinlosigkeit batten erkennen lassen, ob die fiir die Vagina typische
und hSufigste Art gemeint ist. Georg Henneberg (Dissertation
1934) unterscheidet 2 morphologisch, aber nicht physiologisch verschiedene
Rassen (naheres S. 116) In der Vagina kommt seltener auch eine bisher
nicht untersuchte volutinbildende Art {Rasse der vorigen oder T h e r m o b.
lactis?) vor. Wahrscheinlich werden sich bisweilen oder voriibergehend
hier auch andere „Darm-Stamme‘’ feststellen lassen.

Im Saugling wurden von uns bisweilen — in manchen Fallen
(z. B. 14tagiger Saugling) fehlen iiberhaupt stabchenformige Milchsaure-
bakterienarten — PI. vaginae ohne Volutin (im Sinne von G. H e n n e -
berg), eine Abart mit Volutin, Thermo b. lactis und Strepto-
baeterium easei gefunden.

Im Erw'achsenen sind von uns PI. vaginae (volutinlos),
Thermo b. lactis, Streptob. casei. Betabact. longum,
Bact. bifidura — von Maurer (1929) auBerdem T h e r m o b.
cere ale, Streptob. plantarum, Betabact. breve. Mi-
crobacterium lactic um nachgewiesen. PI. vaginae halt
sich also bisweilen von der Sauglingszeit (aus der mutterlichen Vagina
stammend) her. Vielleicht betrifft dies aueh einen Teil der Volutinbildner.
Die ubrigen konnen friihzeitig oder spater aus Rohmilch, Ease oder andercn
Nahrungsmitteln eingeschleppt sein. Der KasegenuB ist dauernd die wich-
tigste Neubezugsquelle. Die stabchenformigen Kase-Milchsaure-
baktericn stammen fast samtlich aus der Kuh (Kuhkot) z. T. auch
direkt aus dem Futter, beim Schweizerkase in der Hauptmenge aus dem
Kalbermagen (Thermo b. helveticum, das jetzt meist in Rein-
kulturen eingesat wird). Dieses Kalbermagenbakterium muB sich aus dem
Thermo b. lactis des Kuhdarms entwickelt haben, da iiber seine
sonstige Herkunft (und Vorkommen) nichts bekannt ist. Auch das T h e r -
mob. bulgaricum und Jugurt im Yoghurt sind zur Gruppe
„T h e r m 0 b. 1 a c t i s“ zu stellen. Ersteres unterscheidet sich nur im-
wesentlich; letzteres besonders nur durch die Volutinlosigkeit vom T h er -
mob. lactis. Thermo b. Jugurt diirfte eine im Lammermagen
entstandene volutinlose Abart (entsprechend Thermo b. helveticum
im Kalbermagen) sein, da es bisher sonst nirgendwo gefunden ist. Nach den
morphologischen und physiologischen Eigenschaften muB PI. vaginae
ebenfalls als nahverwandt dem Thermo b. lactis angesehen und
daher als „T h e r m o b. vaginae" zur ,, Gruppe Thermo b. lac-
t i s“ gerechnet werden. Kein Zufall diirfte es sein, daB auch in der Vagina

Zur Konntnis der stabchenformigen Milchsaurebaktenenarten. Vorkommen us^^. 133

die volutinlose Form vorherrschend ist. Es handelt sich u. E. in alien diesen
Fallen um metr oder weniger schnell sicli bildende j-Standortsformen*'.
Das Th. belveticum muB in jedem Kalbermagen men aus dem T h.

1 a c t i s entsteben, das T h. vaginae kann als solches aucb aus dem
Darm in die Vagina (in der es ursprunglich durcb Anpassung entstand)
zuriickgelangen.

Samtliehe Arten des Darmes der Erwachsenen, auBer PI. vaginae,
kommen aucb in dem Kubdarm (nicbt im Pansen) und daber aucb in den
meisten, aus Robmilcb bereiteten Kasesorten vor. Ln Darm der Erwacbsenen
sind, aucb wenn 8 Tage keine !Neuzufubr durcb Robmilcb- oder KasegenuB er-
folgt, nacb Maurers Feststellungen immer die S. 132 genannten stabcben-
fdrmigen Milcbsaurebakterien naebsuweisen. Der mittlere Diinndarm scbeint
ibr Wobnplatz zu sein. Bei reicblicbem KasegenuB finden sie sicb massen-
baft in den Faces. Sie durcbwandern also in lebendem Zustand den blagen
und vermebren sicb aucb im Darm. Fur Thermo b. lactis, Beta-
bact. longum, Streptococcus tbermopbilus, faecium
und eine sebr kleine Streptokokkenart wurde die Ansiedlung (Vermebrung
im Darm) von uns bewiesen. Verfiltterungen aucb anderer Arten im Kase
oder in Reinkulturen lieBen, soweit gepruft, stets eine Vermebrung im Darm
feststellen. Eine Daueransiedlung auf diese Weise laBt sicb fiir mancbe
Arten aber niemals beweisen, da wie gesagt, gleiebe oder abnlicbe Arten
stets im Erwacbsenen sind und festbaften und aucb auBer durcb Robmilcb,
Butter und Kase, durcb Robobat, Radiescben, Rettig. Salzgiuken, ebenso
vom Mundinnem (boble Zabne) usw. bestandig von neuem in den Darm
gelangen konnen. Wenn eine Ansiedlung sicb fiir bestimmte Arten beweisen
lieB (Thermo b. lactis. Betab. longum, Streptoc. ther-
mophilus, faecium, sebr kleine unbestimmte Art), so immer nur
eine Ansiedlung fiir eine gewisse Zeit. Die Wiederausschaltung der einge-
fiihrten Arten scbeint — soweit untersucbt — Regel zu sein. Die wirklieh
endemischen zur „Gleichgowichtsflora“ gebSrenden Darmmilchsaurebak-
terien diirften demnach im darmgesunden Erwacbsenen unabhangig von
der Neuzufuhr vom Sauglingsalter her stammen. Die festgestellte Ver-
scbiedenbeit des Milcbsaurebakterienbestandes in den verschiedenen Er-
wachsenen kann z. B. auf Verscbiedenheiten der Anfangsflora (PI. vaginae
braucbt durchaus nicbt stets einzuwandem), auf den friihzeitigen (in der
Kindbeit) oder dauernden GenuB oder NicbtgenuB mancber bakterien-
spendenden Nahrungsmittel (Kase !), auf zu viel oder zu wenig Magensbure,
Starke der Darmsehleimhaut^te, Zusammensetzung der iibrigen Darmflora,
Art des Colibestandes usw. zuriickzufiihren sein.

Tberapeutisch diirfte eine mindestens ofters oder bestandig zu wieder-
bolende Verabreicbung besonders kraftiger Milcbsaurebakterien oder be-
sonderer Arten, deren Anreicherung im Darm, wie wir nacbweisen konnten,
bei gleichzeitiger Zufiitterung von Milch oder, wenn diese vermieden werden
soil, von Milchzucker oder von zuckerhaltigen Friiebten (Feigen, Datteln)
Oder starkakaltigen Nahrungsmitteln (fiir Hafergriitze bereits z. T. gepriift)
leicht gelingt, zurBekampfung einerprimar oder sekundar
pathogenen Darmflora von grdBtem Wert sein. Pathogene
Stamme des B a o t. c o 1 i und ebenso aucb abnlicbe Arten kSnnen wohl
so mit Sicherbeit zum Verschwinden gebraebt werden. „Reform“-Buttermilch
(sog. geschlagene), ,.Reform“-Speisequarg, „Reform“-Kase usw. mit einem
Gemisob sebr kraftiger Mensehen-Milchsaurebakterien wurden neben dem

134 Elfricde Winnegge und W. Henneberg. Mdchsaurebakterienai'ten.

5,Refonu‘‘-Yogliurt von nns bei’eits in der Kieler Forscbungsanstalt fur
derartige Z^vecke bereitet. Aueh in die jiingsten Sauglinge und in gefahrdete
KSiber und Ferkel kbnnten kbrpereigene, aber bisweilen feblende oder in
zu schwachen Stammen vorhandene Jjteu durch entsprechendc Reinkultur-
verfUtterung gepflanzt werden. Auf diese “Weise lieBe sich hochstvabrsehein-
licb aucb bier ein Sebutz gegen mancbe bakterielle Darmki'ankbeiten er-
reieben.

Erkl&rungen zn den photographisclien Bildern and Zelehnungen.

(Vergr. /iOOx, nur Bild 15 = 750 X, Zeichnutigen 1000 X.)
Milchbakterien:

1 Thermo b. lactis (Stamm 14). Wurze-Peptonmolke-Federstrich, 37°.

Kasebakterien:

2 Streptobact. casei (Stamm 13). Wurze-Peptonmolke-Fedorstrich» 37°.

3 Thermo b. helvetieum imd Betabact. longum. Norddeutscher

, ,Sch weizerkase ‘

Abtupfpraparat (Deckglas-Petrischale. Peptonmolkeagar).

Abb. 4 (lOOOx vergr.) „Tier-Mi lchsaurebakterien“.
Milchsaurebakterien axis Magen xind Darm der Kaiber, Pansen der Knh, aus
Morktmilch, Yoghurt xmd aus dem Pferdemagen.

Kalb = Thermob. helvetieum aus der Schweizerkaserei-Kultur, Milcli-
saurebakterien aus trockenem und frisehem Magen, rechts Keinkultur daraus — aus
dem Darm von 3 Kalbern (1 — 3).

Aus dem Pansen \on 2 Kiihen (1 und 2; 2 Thermo b, lactis mit
Volutin).

Aus 2 Marktmilchproben, beides Thermo b. lactis mit Volutin.
Aus Yoghurt Thermo b. bulgaricum (0. Jensen) mit Volutin.

Aus dem Magen von 2 Pferden (1 und 2).

Sauglings-Darmbakterien:

5 Sj fthnlich Therm, lactis. GefSrbter Milchausstrich (Volutin).

6 Si 7 PI. V a g i n a e. Wtirze-Peptonmolke-Adhasionskultur, 37°.

7 Si8 PI. vaginae. Wtirze-Federstrich.

8 Sft ahnlich PI. vaginae, Wurze-Peptonmolke-Adhasionskultur, 37°.

Abb. 9 (1000 X vergr.) „Me ns ch e n -Mil chs aure b ak ter ien**.

Aus dem Darm Erwachaener;

1 a — d; aus Person I,
a = El der Zuekerreihe.
b = E,.

c = Betabacterium longum.
d = E 3 (Plocamobacterium vaginae).

2a und b: aus Person II.
a = Betab. longum.
b = E 6a.

Aus dem Darm von 6 Sauglingen 1 — 5:

1 = Sj Basse des PI. vaginae (rechts langere Stabchen aus der Tarozzi-

bouillon [ph 6,5]).

2 = Sja Streptobakterien.

3 = Si7 PI. vaginae.

4 = Sg VolutinbUdner, tTbergangsform zu Thermo b. lactis.

5 olutinbildner aus Amerika, Volutin-Basse des PI. vaginae).

Aus der Vagina von 3 Prauen (Prauenklinik):

1 = Vg der Zuekerreihe aus c.

2= li.

3 und 4 aus p. Isur 4 gehdrt zur kurzzelligen, keine Ketten bildenden Gruppe;

die tibrigen zur haufigeren. kettenbildenden Grupp© des Ploc. vagina©.
Anmerkung w ah rend der Korrektur: Zur Zeit laufende Versuche
(2 Personen) zeigen bereits^ daS Th. cereale nach ©imnaligem Genufi sich schon langer
3 Wochen !! im Darm halt.

Florenco L. Evans and F. W. Tanner, Anaerobic Bacteria. IV. 135

Zum Vergleich: Strep tob. case! ans Kasc. Die untere Kette mit dickeren

Zellen ans Tarozzibouillon.

10 Person I. Nach Oenufi von ,,Schweizerkiise“ mit sehr kleinen Streptokokken.
Deckglas-Petriscliale (Pepton-Molkeagar).

] 1 Person I. Nach 2 mal Milch mit Reinkulturen (Vg imd Eg) Deckglas-Petri-
schale (Pepton-Molkeagar).

12 Person I. 4 Tage nach ,,Reform-Speisequarg“ (s. S. 128) Wiirze-Federstrich.

13 Person XT. Nach 4tagigem GenuS von Streptoc. thermophilus-
Milch. Bact. bifid nm - Kolonien. Deckglas-Petrischale (Milchzucker-
bouillon-Agar).

14 Person XII. Nach GenuB von Streptoc. faecium. Deckglas-Petri-
schale {Milchzuckerbouillon-Agar).

15 Person II (750 mal). Nach 2tagigem Gemifi von Feigen nnd Datteln. Bact.
bifidum - Kolonien. Deckglas-Petrischale (Pepton-Molkeagar).

Nachdrvxik verhoten.

The Effect of Meat Curing Solutions on Anaerobic Bacteria.

IV. The Effect of Mixed Curing Solutions.

[Depaxtment of Bacteriology, University of Illinois Urbana, Illinois.]

Florence L. Ivans and F. TV. Tanner.

The origin of mixed curing solutions for meat products cannot be deter-
mined ■with certainty. They probably developed from salt solutions which
were first used by early peoples. Later, perhaps by accident, it was observed
that the addition of sodium or potassium nitrate would impart a red color
to salted meats and cause them to retain some of the appearances of fresh
meat.

Not much work has been done on the flora of meat curing solutions.
S t u r g e s (1) reported that such solutions for hams contained a hetero-
geneous flora even though fifteen per cent of salt was present. He believed
that hundreds of species of bacteria might be present in old brines. The
typical salt tolerant organism was a Gram negative, nitrate reducing, non-
spore forming bacterium developing at low temperatures, and living in
solutions with fifteen per cent of salt. It did not liquify gelatin and showed
only feeble fermenting powers. S t u r g e s and Heidemann (2) later
arranged the bacteria which they isolated from curing solutions into four
groups: (1) Salt Obl^ate; (2) Salt Preferential; (3) Salt Facultative; and
(4) Salt Tolerant. They also suggested that several new genera were needed
for these organisms and proposed Haloeoceus, Halo'vibrio, and Halophilus
as generic names.

Eesults of the experiments on the influence of sodium chloride, sodium
nitrate, and sodium nitrite have already been reported from this laboratory
(3, 4, and 5). It was sho'wn that so&um chloride possessed the greatest
activity as a preservative, and that the preserving value of meat curing
solutions must be attributed largely to this ingredient. When meat is placed
in curing solutions, it carries many microorganisms of diverse charac-
teristics. Some of these die out quickly, while others find the conditions
favorable and develope. Among the latter are those which reduce nitra-
tes to nitrites and which function in red coloration of cured meats.

136

Florence L. Evans and F. W. Tanner,

Another factor influencing the behavior of bacteria in meat curing
solutions is the temperature of the curing cellars. These are usually main-
tained at from 2.2'> to 4.4“ C. (36“ to 40“ F.). Curing at higher temperatures
has been found to result in greater spoilage due, perhaps, to the fact that
proteolytic bacteria are more active. Furthermore, the preservative action
of low temperatures is also lost. Low temperature apparently exerts^ a
selective action repressing spoilage bacteria and permitting those ^yhieh
reduce nitrates to develope. The latter apparently are not proteolytic.

The effect of salts used in curing solutions on bacteria is a subject that
has received little attention. Lewis and Moran (6) studied the com-
bined effect of sodium nitrite and sodium chloride on Clostridium
sporogenes. Sodium nitrite was used in concentrations of zero
to 0.2 per cent, in combination with sodium chloride concentrations up
to five per cent. Proteolysis was inhibited at 0.06 per cent, sodium nitrite
in all concentrations of salt from one to five per cent, for the 48 hour
period. However, for the seven to fourteen day period, proteolysis was
observed in all sodium nitrite concentrations in all the tubes containing
zero to two per cent, sodium chloride. Proteolysis was checked in nitrite
concentrations at and above 0.06 per cent, in salt concentrations from three
to five per cent. In another experiment they studied the effect of sodium
nitrate combined with sodium chloride, on Clostridium sporo-
genes. They found that one per cent, sodium nitrate with five per cent,
sodium chloride inhibited proteolysis.

Results already reported (3, 4, and 6) have shown that sodium chloride
was the most active constituent of meat curing solutions, influencing the
growth of Clostridium botulinum, Clostridium sporo-
genes, and Clostridium putrificum. Neither sodium ni-
trite nor sodium nitrate alone in the concentrations used commercially had
much effect. However, it was believed that small amounts of these salts
when combined with sodium chloride, as in commercial curing solutions,
might show some effect on development of anaerobic bacteria.

The following experiments were performed to determine whether or
not sodium nitrite or sodium nitrate with sodium chloride in the concen-
trations used in curing meat had any effect on the group of putrefactive
anaerobes, members of which are frequently involved in meat spoilage
according to K 1 e i n (7) and M c B r y d e (8) and others. Special atten-
tion was given to Clostridium botulinum because of the dange-
rous properties of the toxin formed by this organism.

Part of these tests were made with pure cultures in sterilized media
and part with pure cultui-es in meat which had not been sterilized. Table 1
gives the source of the cultures and also shows which were used in each
experiment. The medium was S t i c k e 1 and Meyers (9) peptic digest.
This was found to permit good growth of the organisms used, to be cheap,
and easily kept in stock. It was put in large tubes (30 ce. in each), covered
with paraffin, and starilized at twenty pounds pressure for two hours. The
medium was incubated one week at 37® C. and two weeks at room tempera-
ture before inoculation, as was done in the previous experiments. The
reaction was adjusted to a pH of 7.4. The meat used in the second set of
experiments was fresh, ground, defatted pork. After it had been mixed
with the curing salts, it was stuffed into 8 inch test tubes (75 gms. in each)
and stored at 10“ C. for one week.

The Effect of Meat Cvring Solutions on Anaerobic Bacteria. TV.

137

The salt mixtures used in the first experiments were four commercial
cures. The individual ingredients were weighed and mixed in a mortar.
Different proportions of the mixtiu-e were then added to separate lots of
peptic digest medium. The proportion of salt mixture to nutrient me^um
varied from one half to tvice the percentages specified in the original for-
mula. Table 2 gives the original formula and the variations for each lot
of medium. Analysis showed that the medium contained a little sodium
chloride.

Table 1.

Name of Culture

Type

Lab. -No.

Source of Cultures

Clostr. botulinum

A

1

American Type Culture Collection No. 441

Clostr. botulmum

A

2

American Type Culture Collection No. 688

Clostr. botulinum

A

4

American Type Culture Collection No. 442

Clostr. botulmum

A

16

University of Chicago, Baot. Laboratory

Clostr. botulinum

A

17

Dr. K. F. Meyer, Hooper Foundation,
San Francisco

Clostr. botulinum

A

19

Westfield, New York, Strain from outbreak

Clostr. botulinum

B

5

American Type Culture Collection No. 458

Clostr. botulinum

B

6

American Type Culture Collection No. 443

Clostr. botulinum

B

7

American Type Culture Collection No. 437

Clostr. botulinum

B

8

American Type Culture Collection No. 439

Clostr. botulinum

B

9

University of Illinois, Stock Labt. Strain

Clostr. botulinum

B

15

Unhersity of Chicago, Bact. Laboratory

Clostr. botulinum

B

18

Dr. K. F. Meyer, Hooper Foundation,
San Francisco

Clostr. botulimim

B

20

Strain from Chicago onion outbreak

Clostr. sporogenes

10

American Type Culture Collection No. 686

Clostr. sporogenes

11

American Type Culture Collection No. 319

Clostr. sporogenes

American Type Culture Collection No. 469

Clostr. putrificTim

12

American Type Culture Collection No. 679

Clostr. putrificum

13

American Type Culture Collection No. 610

Experiments with peptic digest-heart mash;

Cures 1 and

II, cultures: 1, 2

, 5. 6. 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13. 14, 16, and 16

Cures III and IV, cultures; 1, 2

and

5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17,
18

Experiments with ground meat:

Cooked meat, cultures: 1, 2, 4,

6, 15, 16, 17, 18, 19, and 20

Uncooked meat, crdtures; 1, 2,

4, 5, 6. 7, 8. 9, 16, and 16

Curing mixtures tested in ground meat differed in that the amounts
of sodium chloride and sugar were constant, while the amount of sodirun
nitrate or sodium nitrite was varied. The salt, sugar, and nitrate or nitrite
for each separate lot were weighed and thoroughly mixed in a mortar.
This mixture was then incorporated in the meat. Cures containing amounts
of sodium nitrite from 0.01 per cent to 0.2 per cent in steps of 0.05 per cent,
and sodium nitrate from 0.1 per cent to 2.0 per cent in steps of 0.5 per cent
were tested in both cooked and uncooked ground pork.

After inoculation with heated spore suspension, the peptic digest cul-
tures were incubated for two weeks at 37® C. and at room temperature for

138

Florence L. Evans and F. W. Tanner,

approximately five months. During the incubation period, observations
vrere made at regular intervals for growth, which was indicated by the
presence of gas, disintegration of the meat portion, and odor. At the end
of the incubation period, a portion of each Clostridium botuli-
n u m culture was fed to a guinea pig to determine the presence of toxin.

Table 2.

Cure I

Cuie II

Cure III

Cure IV

Cure

3i'> lb. NaCl

3i/> lb. NaCl

41^2 lb. NaCl

4^2 lb. NaCl

Formula

^2 oz. NaNO^

1 lb. sugar

100 lb. meat

oz. NaN 02

1 lb. sugar

100 lb. meat

^2 OZ. NaN02

1 lb. sugar

100 lb. meat

^2 OZ. NaNOg

1 lb. sugar

100 lb. meat

2 07 . NaNOg

Lot 1

1.75°o NaCl
0.0].5b°uNaNO,
0.6°o sugar

1.75% NaCl
0.0078°oNaNOj
0.5°(, sugar

2.25°^, NaCl
0.0156O/uNaNO,
0.3°o sugar

2.26% NaCl
0.0156% NaNO,
0.0025% NaNO,
0.5% sugar

Lot 2

2 34 o«>o NaCl
U.O209O0 NaNOi

0.67^0 sugar

2 . 345 O 0 NaCl
0.0104% NaNOi
0.07% sugar

3.015®^> NaCl
0.0209®iNaN02
0.67 ®q sugar

3.015% NaCl
0.0209°^, NaNO,
0.0837®'o NaNO^

0.67°o sugar

Lot 3

2.94°o NaCl
0.0262°oNaNO,
0.81 %8ucar

2.94^0 XaCl
0.0131% NaNOa
0.84% sugar

3 . 68 O 0 NaCl
0.0262°^, NaNOi
0.84% sugar

3.38% NaCl
0.0262% NaNO,
0.1087% NaNO,
0.84% sugar

Lot 4

3.5°^, NaCl
0.0312% NaNO,
1.0®o sugar

Z,o% NaCl

1 0 0156%NaN02
1.0® 0 sugar

4.5% NaCl
0.0312% NaNO,
1.0°o sugar

4.3% NaCl
0.0312% NaNO,
0.123% NaNO,
1.0% sugar

Lot 5

^ 4.655O0 NaCl
O.O4IO0 NaNOi

1 1.33°q sugar

4.653®o NaCl
0.0212®oNaNO,
1.33®o sugar

6.985% NaCl
0.0412% NaNO,
1.33% sugar

5.985% NaCl
0.0412% NaNO.
0.166°^ NaNO,
1.33°o sugar

Lot 0

3.8IO0 NaCl
O.OSISOq NaNOj
1.66% sugar

o.81®o NaCl
0.0259®oNaNO,
I 1.66®o sugar

7.47% NaCl
0.0618% NaNO,
1.66°o sugar

7.47O0 NaCl
0.0318% NaNO,
0.207% NaNO,"
1.66% sugar

Lot 7

7 .00 0 NaCl
0.0624®o NaNO.

2 .00 0 sugar

7.0®o NaCl
0.0212% NaNOj
2.0®o sugar

9.0% NaCl
0.0624% NaNO,
2.0°^ sugar

9.0% Naa
0.0624°^ NaNO,
0.23°^, NaNO,
2.0°o sugar

Part of lie cured meat was covered with hot paraffin and put in the
incubator immediately after it had been inoculated with detoxified spore
suspensions. A duplicate set was treated the same way except that it was
heated at 100® C. for ten minutes and cooled before it was put in the incu-
bator. The periods of incubation were the same as for the peptic digest cul-
tures at both 37® C. and at room temperature. At the end of incubation,
a portion of the meat from each tube (approximately five grams) was mixed

The Effect of Meat Curing Solutions on Anaerobic Bacteria. TV.

139

■with ten ec. of sterile ■water in a sterile test tube and allowed to stand
overnight in the ice bos. The estraot was tested for tosicity by feeding
one cc. to a 250 gm. guinea pig as in the other esperiments.

Table 3.

Cure I

Cure II

1

Lot 1

Analysis

Strains Showing
Growth (G)
and Toxicity (T)

Analysis

Strains Showing
Growth (G)
and Toxicity (T)

0

0% NaNO,

1.8% NaCI

Gr = All strains

T = 1, 2, 6, 0, 7, 8,
9, 16, 16

0% NaNOs
1.96% NaCl
2.02% NaCl

G = All strains

T = 1, 2, 6, 6, 7, 8,
9, 15, 16

1

0,0016% NaNO,
0.003% NaNOj'
4.07% NaCl
4.69% NaCl

G = All strains

T == 1, 2, 6, 6, 7, 8,
9, 16» 16

00.01% NaNO,
0.0015% NaNO,
3.07% NaCl
3.52% Nad

G ~ All strains

T = 1, 2, 5, 6, 7, 8,
9. 15, 16

2

0.0023% NaNOj
0.003% NaNOi

4.64% NaCl
3.22% NaOl

G = 1, 2, 6, 7, 9,
10, 11, 12, 14.
16, 16

T = 1, 2, 5, 6, 7, 8,
9, 15, 16

0.003% NaNO,

3.66% NaCl
4.29% NaCl

G = 1, 2, 5, C, 7, 8,
9, 10. 11, 12.
14, 13, 16

T = 1, 2, 3, 6. 7. 8,
9, 16, 16

3

0.004% NaNOj

4.44% NaCl
6.30% NaCl

G = 7, 9, 10, 11,
13, 14

T = 1, 2, 6, 7, 9,
16, 16

0.0016% NaNO,

4.42% Nad
6.36% Nad

G = 2. 6, 7, 9, 10.
11, 13, 14

T »= 2, 6. 7, 8, 9,
13, 16

4

0 0036%NaN02
0.004% NaNOj
4.88% NaCl
5.62% NaCl

G 1, 5, 8, 10, 11,
14, 16

T = 3, 2, 6, 7, 16

0.002% NaNO,

6.2% Nad
5.87% Nad

G = 2, 6, 7, 8, 9. 10,
11, 14. 16

T = 1. 2, 6. 6, 7,
8, 16

5

0.007% NaNOs

G = 9, 10, 11, 12, 14

0.002% NaNO,

G = 7, 11, 14

1 3.68% NaCl
' 8.4% NaCl

T = 2, 7, 9

6.7% Nad
6.77% NaCl

T = 2. 7.

6

0.008% NaNO,

G = 1, 7, 10, 14

0.0033% NaNO,

G = None

6.42% NaCl
7.98% NaCl

T = 7

7.21% NaCl
8.97% Nad

T = None

7

0.009% NaNO,
0.01% NaNO,
6.60% NaCl
9.40% NaCl

G = 8, 16

T =■ None

0.004% NaNO,

9.62% NaCl
12.5% NaCl

G = None

T = None

Analyses for sodium chloride and sodium nitrite were made on repre-
sentative samples of peptic digest medium at the time of inoculation and
on the uninoculated control tubes at the end of the preliminary incubation
period. These two sets of figures showed no significant variation, so the
first has been ommitted. The values obtained by analysis of the unino-
culated control tubes are given in Tables 3 and 4. Sodium chloride analysis
was made on the contents of each tube in two of the esperiments with peptic
digest medium. When gro^wth had broken the paraffin seal, evaporation,

140 Florence L. Evans and E. W. Tanner,

and consequent increase in sodium chloride concentration had occurred,
otherivise the amounts did not vary appreciably from those obtained in
the other analyses.

Table 4.

Lot

C

Analysis

ore III

Strains ShoTring
Growth (G)
and Toxicity (T)

C

Analysis

lire IV

Strains Showing
Growth (G)
and Toxicity (T)

0

0% NaNOj

G

= All strains

0% NaNOa

G = All Strains

1.8% NaCl

1.9% NaCl

T

= 1, 2, 5, 6, 7, 8,
9, 16, 16. 17. 18

1.8% NaCl

T = 1, 2, o, 6, 7, 8,
9, 15, 16, 17, 18

1

0.0016% NaNOj
0.002% NaNO.

G

= AH strains

0.0020/^, NaNOj

G = All Strains

4.0% NaCi
4.87% NaCl

T

= 1, 2, 5, 6, 7, 8,
9, 15, 16, 17, 18

4.60{, Naa
6.23% NaCl

T = 1, 2, 5, 6, 7, 8,
9, 15, 16, 17, 18

2

0.003% NaXOj

G

= 1, 2, 5, 6, 7, 8,
9, 10, 11, 12, 14,
15, 17, 18

0.003% NaNOj

G = All Strains

4.]Oo NaCl

5.1% NaCl

T

=■ 1. 2, 5, 6, 8, 9,
15, 16, 17, 18

4.72% Naa
6.64% Naa

T = 1, 2, 6, 7, 9, 15,
16, 17, 18

3

0.003% NaNOj
0.004% NaNO. I

G

= 2, 6, 9, 10, 11,
14, 15. 17

0.003 NaNO,%
0.004°^, NaNOj

G = 2, 5, 6, 7, 8, 10,
11, 14, 15,17,18

5.23 %NaCl
6.30% NaCl

T

= 2, 5, 6, 7, 8, 9,
15, 17

6.68% NaCl
6,6% NaCl

T = 2, 5, 6, 7, 8, 9,
15, 17, 18

4

0.0065% NaNO,
0.006% NaNO,"

G

= 6, 7, 10, 14, 17

0.004% NaNOj
0.006% NaNOj

G = 2, 9, 10, 14

6.59°i NaCl
7.67% Naa

T

= 6, 7

6.4% NaCl
7.83% Naa

T = 2, 6, 9, 17

5

0.0081% NaNO j
0.008% NaNO.

G

= 6, 10, 14

0.006% NaNOj

G = 9, 14

8.08% Naa
9.65% Naa

T

= 0

8.0% Naa

9.4% Naa

T = 2

6

0.008% NaNOj

1 ^

= None

0.0075% NaNOj
0.01% NaNO,

G = None

9.23% NaCl
10.82% Naa

T

= None

9.53% Naa
10.42% NaCl

T = None

7

0.009% NaNO,

G

== None

0.008% NaNO,
0.01% NaNO,
10.12% NaCl
12.0% Naa

G = None

10.0600 ifaci

12.0% Naa

T

= None

T = None

Representative samples from each lot of the ground meat were ana-
lyzed at the time of inoculation either vrith or without eookmg, depending
on the e^eriment. Moisture, hydrogen ion concentration, sodium chloride,
and sodium nitrite were deternained quantitatively in each case. These
values are given in Tables 5 and 6, columns 1 and 4. Every tube of meat
was analyzed for sodium chloride, sodium nitrite, and pH at the end of the
incubation period. The figures given in Tables 5 and 6, 2Ed and 5th columns
are averages of the values obtained on the last analysis.

The Effect of Meat Curing Solutions on Anaerobic Bacteria. IV. 141

Table o. Cooked Meat.

Sodium Nitrate Cures

Sodium Nitrite Cures

Analysis at
Beginnmg

Average of
Anal, at End

No. of Strains
Prod. Toidn

Analysis at
Beginning

Average of
Anal, at End

No. of Strains
Prod. Toxin

NaCl 3.29%

NaNO, 10 ppm.
pH 6.6

Moist. 38.94%

NaCl 2.74%
NaNOo 0.5 ppm.
pH 0.9

1, 2, 4, 5. 15,
16, 17, 18,
19, 20

NaCI 3.57%
NaNOj 20 ppm.
pH 6.8

Moist. 67.24%

NaCl 3.46%
NaNOo 0.12 ppm.
pH 6.37

1,2, 4, 6,13,
16, 17, 18,

19, 20

Naa 3.38%
HaNO. 6 ppm.
pH 6.8

Moist. 68.76%

NaCl 2.91%
NaNOo 0
pH 6.9i

1, 2, 4, 5, 16,
17, 18, 19, 20

NaCl 3.01%
NaNOj 33 ppm.
pH 0.8

Moist. 57.35%

NaCl 3.460^
NaNOa 0.66 ppm.
pH 6.57

1. 2. 4, 15,
16, 17, 88,
19, 20

NaCl 3.51%
NaNOa 10 ppm.
pH 6.8

Moist. 57.97%

HaCl 3.10%
NaNOj 46,1 ppm.
pH 7.53

1,2, 4,18, 19

NaCl 3.84%
NaNOa 73 ppm.
pH 7.0

Moist. 54.63

NaCl 3.7%
NaNOa 0.15 ppm.
pH 6.74

4, 13, 17, 19

NaCl 3.33°^
NaNOa 33 ppm.
pH 6.8

Moist. 59.03%

NaCl 2.66%
NaNOj 154.7ppm'
pH 7.84

2, 4, 13, 18,
19, 20

NaCl 3.75%
NaNOa 173ppm.
pH 6.8

Moist. 55.04%

NaCl 3.78%
NaNOa 1-22 ppm.
pH 6.9

4, 20

NaCl 3.24%
NaNOa 20 ppm.
pH 6.0

Moist. 58.98%

Naa 2.8%
NaNO,308.7ppm.
pH 8.18

1, 5, 18, 19,
20

NaCl

NaNOa 250 ppm.
pH 7.0

Moist. 63.19%

NaCl 3.620o
NaNOo 2.32 ppm.
pH 7.6

1, 2, 17. 18,

I

1

Table 6. Uncooked Meat.

Sodium Nitrate Cures I Sodium Nitrite Cures

Analysis at
Beginning

Average of
Anal, at End

No. of Strains
Prod. Toxin

Analysis at
Beginning

Average of
Anal, at End

No. of Strains
Prod. Toxin

NaCl 3.51%
NaNO, 16 ppm.
pH 6.0

Moist. 68.95%

NaCl 3.69%
NaNOa 0
pH 4,49

Naa 3.54%
NaNOa 2.5 ppm.
pH 6.0

Moist. 58.8%

NaCl 3.48%
NaNO, 0
pH 4.66

NaCl 3.87%
NaNOa 0
pH 6.2

Moist. 53.8%

NaCl 3.49%
NaNOo 2.2 ppm.
pH 4.6

7

NaCl 3.44%
NaNO, 15 ppm.
pH 6.0

Moist. 54.13%,

Naa 3.79%
NaNOj 0
pH 4.5

2

NaCl 4.03%
NaNOj 2.6 ppm.
pH 6.0

Moist. 68.88%

NaCl 3.04Oi
NaNO, 1.1 ppm.
pH 4.08

NaCl 3.58%
NaNOa 60 ppm.
pH 6.0

Moist. 53.5%

NaCl 3.76%
NaNOa 0
pH 4.65

6

Nad 3.38%
NaNO, 5 ppm.
pH 6.0

Moist. 58.88%

NaCl 3.61%
NaNO, 46.3 ppm.
pH 5.2

2

Naa 3.81%
NaNOa 126ppm.
pH 6.2

Moist. 64.58%

NaCl 3.46°^
NaNOa 1.37 ppm.
pH 4.67

NaCl 3.93%
NaNO. 0
pH 5.8

Moist. 51.37%

NaCl 3.66%
NaNO, 60.77ppm
pH 5.3

NaCl 3.51%
NaNOa 160 ppm.
pH 6.0

Moist. 53.83%

NaOl 3.65%
NaNOa 0
pH 4.7

142

Florence L. Evans and F. W. Tanner.

The methods of analysis ■were somewhat different from those used in
earlier experiments. The chief difference was in the reagent for the nitrite
test. The presence of sodium chloride interfered with the determination
when the reagent was prepared according to the method given in the Standard
Methods for the Examination of Water and Sewage (1925). The reagent
used under these conditions had a different composition^).

When ground pork or the meat portion of peptic digest medium was
analyzed, an extract had to be prepared. Fifty grams of ground meat were
weighed quickly, and put in a 500 cc. volumetric Erlenmeyer flask
with approximately 250 cc. of nitrite free distilled water, loosely corked,
and cooked two hours on the steam bath. The samples were cooled in run-
ning water and diluted to the 500 ce. mark with nitrite free water. After
shaking thoroughly, ten cc. were removed for sodium chloride deteimination.
A small part of the remainder was filtered, and a suitable aliquot (usually
one ce.) was used for the sodium nitrite determination®).

Sodium chloride was determined by titration with standardized silver
nitrate solution in the presence of chromate indicator according to the
Standard Methods for the Examination of Water and Sewage (1925). The
percentage of moisture was obtained by weighing ten grams of ground meat
rapidly in a tared evaporating dish, drying at 85 — 90® C. for ten hours,
cooling in a desicator, and reweighing. The loss multiplied by ten equaled
the per cent, of moisture. Hydrogen-ion concentration was determined
by adding the indicator to a VlO extract of the sample and comparing with
standards on a Lamotte Roulette comparator.

Results of these experiments in which different amounts of curing mix-
tures were added to nutrient medium, showed that larger quantities were
necessary to inhibit the growth of Clostridium botulinum,
Clostridium putrificum, and Clostridium sporo-
genes, and toxin formation by Clostridium botulinum than
are ordinarily used in meat curing (Tables 3 and 4). Examination of the
data indicates that the active ingredient in inhibiting growth is sodium
chloride. In every ease, the lot of medium that contained concentrations
of curing mixtures sufficient to prevent growth showed, upon analysis, con-
centrations of sodium chloride comparable to those that proved effective
in previous experiments (3) when this compound was tested alone. On the
other hand, the largest percentage of sodium nitrite found was approxi-
mately one sixth as much as the smallest amount tested in the nitrite ex-
periments (5) (Tables 3 and 4).

The amount of sodium nitrite shown by analysis for cure I at the time
of inoculation, varied from 0.001% to 0.008%, and the analysis at the end
of the experimental period gave values of 0.0015% to 0.01%. The highest
value obtained is still only one fifth of the lowest value tested in the nitrite

1) Boil one gram alpha-naphthylamine-hydrochloride until dissolved in less than
200 cc. nitrite free, distilled 'W'ater. Cool, filter, and make np the volume to 200 cc.

Two grams sulphamlic acid dissolved in 200 cc. nitrite free distilled water. Com-
bme the two solutions and add ten cc. concentrated hydrochloric acid. Use two cc.
for each test and read after standing thirty minutes. Bo not allow to stand more than
one hour before reading. Reagent recommended by the Research Lab. of the Institute
of American Meat Packers. Sodium nitrite standard was prepared, and the deter-
mination was carried out according to the method given in the Standard Methods for
the Examination of Water and Sewage (1925).

*) Adaptation from the method of the A. 0. A. C., 2nd Edition, 1925, p. 240

The Effect of Meat Curing Solutions on Anaerobic Bactoiia. IV, 143

experiments (6). The sodium chloride values, on the other hand, approxi-
mate the range found to be effective when this salt was used alone (3). The
lower values are those which were obtained by analysis of the meat fraction
of the medium, and the larger ones, by analysis of the liquid portion. The
latter are used in these experiments for purpose of comparison. Also, the
values obtained in the later analysis were selected arbitrarily for use in the
tables, although there was no significant variation in the two sets of figures.

The organisms used in this experiment grew consistantly in the first
two lots of medium, but in the others skips began to appear showing that
the concentration of curing salts was beginning to affect the anaerobes.
Both growth and toxin production became irregular in the higher concen-
trations. Lot 7, which represented about twice the amount used in com-
mercial meat curing, repressed toxin formation by all strains of Clostri-
dium botulinum, but failed to completely inhibit growth. Two
cultures gave evidence of growth in this last concentration.

The highest concentration contained 9.4% to 9.55% sodium chloride;
yet two cultures grew in it. This concentration approached that found to
be effective when sodium chloride was used alone. Lot 4, which represented
the same proportion of curing mixture used in practice, permitted the growth
of seven of the fourteen strains tested, and toxin production by five of the
nine strains of Clostridium botulinum. The sodium chloride
concentration for this lot was 5.5%.

In the experiment with Curing mixture II, the amount of sodium nitrite
found by analysis was smaller than in the proceeding ones. Analysis of the
medium at the time of inoculation showed a range of 0.0015% to 0.004%.
Analysis of uninoculated samples at the end of the experiment gave 0.001%
to 0.004%. The analysis for sodium chloride gave values ranging from 3.4%
to 11.05% at the beginning, and from 3.52% to 12.5% at the end of the
experiment. This range included the maximum concentrations at which
these organisms would still grow when salt alone was tested.

The same strains of putrefactive anaerobes were used here as in the
experiment with Cure I. Nine of them grew in lot 4 which represents the
concentration used in meat curing. The concentration of sodium chloride
found in samples from this lot was 5.79% to 5.87%. None of the cultures
grew or formed toxin in lots 6 or 7. The concentration of sodium chloride
in lot 6 was 8.97% to 9.06%, and that in lot 7 was 11.04% to 12.5%.

Analysis of samples from Cure III for sodium nitrite gave concentrations
similar to those obtained in the first experiment. The range was from 0.002%
to 0.01% before and 0.002% to 0.009% after incubation. The concentration
of sodium chloride ranged from 5.03% to 11.97% before incubation and
from 4.87% to 12.0% after incubation. These higher concentrations should
have proven effective in preventing growth and toxin formation by these
cultures, according to the results of the work with sodium chloride f3).

The two lots of medium containing the largest concentration of curing
mixture did not permit growth or toxin production by any of the cultures
used. Three of the sixteen grew in lot 5 and one Clostridium botu-
linum strain produced toxin. Lot 4, which contained the proportion of
mixture usually used in practical meat curing supported growth of five
Clostridium botulinum strains, and toxin production by two.

In Cure IV, the range of sodium nitrite given by analysis was 0.0015%
to 0.012% before and from 0.002% to 0.01% at the end of incubation. These

144

Florence L. Evans and F. W. Tanner,

values are not much different from those reported for curing mixtures I
and III. Sodium chloride range by analysis, vas from 6.06% to 12.043°o
at the beginning, and 5.23% to 12% at the end of the experiment. This
range includes the concentrations of salt that have been shown to be effec-
tive in preventing growth and toxin formation by these organisms.

Sixteen strains of anaerobic spore formers were used in this experiment.
Of these, four grew and four Clostridium botulinum strains
formed toxin in lot 4, which represents the proportion of curing mixture
to medium that would be used in commercial curing. The salt concen-
trations shown by analysis were 6.31% to 5.75% at the beginning, and 6.4°o
to 7.83% at the end of the experiment. Lot 6, showing sodium chloride
values of 9.31% to 10.3% before, and 9.53% to 10.42% after incubation,
inhibited both growth and toxin production of all strains used. This was
also true of lot 7 which contained twice as much salt-mixture as usually
used. The effective values are practically the same as those obtained with
sodium chloride alone.

Ground, uncooked meat, to which 3.5% sodium chloride, one per cent
of sugar, and 0.1% to 2.0% sodium nitrate or 0.01% to 0.2% of sodium
nitrite had been added, spoiled in a short time when it was inoculated with
Clostridium botulinum, regardless of the cure used. Spoilage
was greater in meat containing the two highest nitrate cures. Only in a few
instances, however, did this uncooked meat prove toxic (Table 6). Our re-
sults with uncooked meat agree with those secured by others showing that
the indigenous flora of microorganisms may prevent the appearance of toxin
in mixed cultures.

Cooked meat spoiled under the conditions of the experiment, but that
to which the larger amounts of sodium nitrite had been added seemed to
be in better condition; and less gas was formed than was the case with meat
containing nitrate and smaller amounts of nitrite. The high nitrate cures
permitted more spoilage than any of the others used in cooked meat. Toxin
was formed in cooked meat throughout the entire range of sodium nitrate
and sodium nitrite concentrations. However, the number of cultures that
proved toxic was smaller in the higher concentrations of both nitrate and
nitrite salts. It was noted that the reaction was alkaline and that ammonia
was present w'hen 1.5 per cent and 2 per cent sodium nitrate, had been added
to cooked meat. It was also observed that a larger amount of liquid separa-
ted from the meat in the tubes to which 0.15% and 0.2% sodium nitrite
had been added, than in the case of meat given other cures. Tables 5 and 6
give the toxicity data and analyses for experiments with cooked and un-
cooked ground pork.

Discussion: The results of previous experiments indicated that
the individual ingredients used in curing mixtures did not affect the growth
of putrefactive anaerobes in the concentrations used under commercial con-
ditions, provided other conditions are favorable for growth. These results
were borne out by testing different quantities of curing mixtures in peptic
digest medium. In all cases, the lot of medium to which the recommended
proportion had been added, supported growth and toxin formation. However,
there are several factors that must be taken into consideration in inter-
preting these results. The medium contained a little sodium chloride and
the mount was materially increased in all lots by evaporation during
sterilization. Also, the amount of sodium nitrite was reduced considerably

The Effect of Meat Curing Solutions on Anaerobic Bacteria. IV. 145

by sterilization. This decrease in sodium nitrite content may be similar
to that which occurs during the curing of meat due to bacterial action. The
result was that amounts of sodium nitrite from 0.001% to 0.01% were tested
in combination with sodium chloride concentrations of 3.5% to 12%. The
figures for sodium nitrite approximate those from analyses of cured meat
reported by Lewis and V o s e (10). The lowest value they gave was
0.00125% for nitrite cured beef hams and the highest value (satisfactory
cure) was 0.007% for nitrate ciured pork hams. In these experiments, the
concentrations of sodium nitrite found appeared to have no effect on the
course of the experiment.

The amounts of sodium nitrite were comparatively small. The lowest
concentration that was tested in the experiments on sodium nitrite alone
was 0.0588%; it was found to be ineffective (5). In this series of tests, the
largest amount of this compound that was added to the medium was 0.0624%;
this had been largely "destroyed in the process of sterilization. The largest
amount of sodium nitrite found by analysis was 0.012%. The quantities
of this salt that were present in the concentrations of the curing mixtures
that inhibited growth were 0.0035% in the case of Cure II, 0.008% for
Cure III, and 0.01% in the case of the fourth cure. Cure I which failed to
inhibit all strains, contained 0.01% of sodium nitrite in lot 7 (the highest
concentration used).

Two sets of figures are given for salt concentration in tables 3 and 4.
The higher value was obtained by analysis of the liquid and the smaller
one by analysis of the meat of the peptic digest medium. If it is assumed
that the salt was dissolved in the moisture, and that the meat contained
sixty per cent, of moisture, the percentage of salt given for the meat portion
actually represents a concentration higher than that in the liquid portion.
For instance. Cure I, lot 7 showed 9.4% in the liquid and 5.6% in the meat
portion. If the latter value is calculated accor^ng to the above premis,
it becomes 10.8% sodium chloride. This may or may not be the true ex-
planation of the lower quantity of salt in the meat portion. Some additional
data on this point are given by the analysis of cured, canned meat in which
a liquid is expressed containing a higher concentration of salt than the meat^).

The results obtained in this work indicate again that the most effective
component in curing mixtures is sodium chloride. The amounts ordinarily
used for curing meats are not sufficient to inhibit all strains of Clostri-
dium botulinum, Clostridium putrificum, and Clo-
stridium sporogenes. When the various curing mixtures were
used in amounts sufficient to inhibit growth of all strains, the salt concm-
trations were very close to the effective concentrations of sodium chloride
alone. The values varied slightly from one experiment to another.^ The
first cure failed to repress all growth in any concentration used. The highest
salt concentration was 9.4% in this ease. The second cure repressed all
growth when the salt concentration was shown to be 8.97%, and the third
was effective when the salt concentration reached 10.8%, and the fourth
Inhibited all of these organisms only when the salt concentration approached
10 . 4 %.

In all these experiments care was taken to maintain uniform conditions
of growth, but in the experiments with meat, two important factors were

1) Examination of commercially, and escperimentally canned meat at the TTni.
versity of Illinois Bacteriological Laboratory.

Zweite Abt. Bd. 91.

ID

146

Floxence L. Evans and E. W. Tanner,

altered. The hydrogen ion concentration had heretofore been adjusted to
pH 7.4. With raw meat it was found to be about pH 6.0 at the beginning
of the experiment. Cooked meat was more nearly neutral as the pH at the
time of inoculation was about 6.8. This was still considerably more acid
than the nutrient medium previously used. No attempt was made to steri-
lize the ground pork used in the cured meat experiments, and consequently,
the bacterial flora of the meat may have influenced the results. In the un-
cooked meat the reaction became decidedly acid upon incubation, and this
together with the initial acidity probably accounts for the scarcity of toxic
samples. In the other experiment, all but the resistant spore forming
organisms were probably destroyed by heating for ten minutes at 100® C.
The reaction of these tubes remained approximately the same or became,
slightly more acid upon incubation, except when 1.5 per cent, and 2 per cent,
somum nitrate had been used in the curing mixture. In these cases a decided
alkaline reaction developed and an odor of ammonia was noticeable when
the tubes were first opened. Numerous toxic samples were found in all lots
of the cooked meat. It seems probable, that in these experiments, hydrogen
ion concentration had more influence on toxin production by Clostri-
dium botulinum than did the concentration of any of the salts used.

All of the meat spoiled; i. e. gas was formed, the meat changed in color
or consistancy, and an odor different from that of fresh cured meat developed,
regardless of the amount of sodium nitrate, or sodium nitrite used in the
cure. In the case of raw meat, the most evident spoilage was found in that
which had received 1.6 per cent, and two per cent, nitrate cures. In these
eases the meat was a foul, brown or greyish, slimy mass. It was also observed
that the uncooked meat which had been given 0.16 per cent, and 0.2 per
cent, nitrite cures was in worse condition than the corresponding samples
which had received milder cures. As very few of these samples proved toxic,
tile spoilage of uncooked meat was probably due to the bacteria already
in the meat, and not to Clostridium botulinum.

Quite a different type of spoilage was found in the cooked meat samples
and a definite group of conditions seemed to be associated with toxicity.
Such samples were soft, but not slimy, and could be spread on a fiat surface
with a spatitia like soft cheese. The meat formed a thick, smooth suspens-
ion when mixed with water. The odor of these samples suggested a rather
strong, rancid cheese. The odor was very characteristic and could often
be detected even though the cultures had putrified. These are the clasRin a,]
indications of botulinus spoilage as described by van Ermengem (11).
As in the case of uncooked meat, 1.5 per cent, and 2 per cent, sodium nitrate
cures permitted more evident spoilage than any of the others. These samples
were soupy and putrid, and when first opened, an odor of ammonia was
app^ent. The samples having the least amount of spoil^e were those
receiving 0.15 per cent, and 0.2 per cent, sodium nitrite cures (cooked meat).

The amount of sodium chloride in the ground pork was fairly constant,
considering ^voidable irregularities in mixing. According to the premise
that the sotom chloride is dissolved mainly in the water of the meat, values
approximating 3.5 per cent, by analysis increase to about six per cent. In
eithw case, the values are lower than those found to be effective for all
strains when sodium chloride was tested alone.

The sodium nitrite concentration in nitrate cured meat was low and
very irregular at the time of inoculation. During incubation, the nitrite

The Effect of Meat Curii^ Solutions on Anaerobic Bacteria. IV. 147

concentration increased. At the end of the experimental p^od, large
amounts were present in the higher nitrate cures, while little or none could
be found in meat that been had given milder nitrate cures. The reverse
condition was true of nitrite cured meat. In this case, considerable sodium
nitrite was present at the time of inoculation, and at the end of the incu-
bation period practically all of it had disappeared. The presence of 175
to 250 parts per million (0.0176 — 0.026 per cent.) of sodium nitrite at the
beginning of the experiment reduced spoilage in cooked meat although it
did not prevent it altogether. Neither did it prevent toxin formation by
Clostridium botulinum.

Conclusions.

1. Four commercial curing mixtures used under laboratory conditions
failed to inhibit growth of Clostridium botulinum types A
andB, Clostridium putrifieum, and Clostridium sporo-
genes, or toxin formation by Clostridium botulinum, when
they were used in the proportions called for in the formula.

2. Commercial curing mixtures were effective in preventing growth
and toxin formation when the proportions of curing mixture to me^um
were such that the critical concentrations of sodium chloride was approxi-
mated.

3. The sodium nitrite present apparently produced no effect on these
organisms.

4. Spoilage of cooked and uncooked meat was not prevented by 3.5
per cent sodium chloride in combination with 0.1 per cent to 2 per cent
sodium nitrate, or 0.01 per cent to 0.2 per cent sodium nitrite added to
the meat.

5. The repression of toxin formation by Clostridium botu-
linum in uncooked meat was due to the acid reaction of the meat.

6. None of the cures completely inhibited toxin formation by Clo-
stridium botulinum in cooked meat.

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10 *

148 Allgemeines und Methodisches. — Morphologie, Physiologic, Systematik usw.

Referate.

Allgemeines und Methodisches.

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sigkeitsmengen. (Munch, med. Wochenschr. Jahrg. 81. 1934.
S. 647.)

Zum Pipettieren kleiner Flussigkeitsmengen -wild eine Pipette emp-
fohlen, bei der die Entleerung nicht durch Ausblasen zu erfolgen hat. Da-
dureh ist Gewahr gegeben fiir grofite Genauigkeit; auch sind Veninreini^ngen
von seiten der kohlensaurereiehen Exspirationsluft, Speichelfliissigkeit usw.
ausgeschlossen. Die Pipette besitzt zwei Ausbuchtungen, 'wodurch mit ein
und derselben Pipette zwei verschieden grofie Volumina abgemeesen werden
kSnnen. Beim Pipettieren von gift^en Flussigkeiten kann die obere Aus-
buehtung als Sieherheitavorriehtung gebraucht werden.

Eodenkirchen (Kfinigsberg Pr.).
Seifried, 0., Kippbares S er ie nf ar b ege s t ell (fiir einge-
baute Tisehbecken benutzbar). (Zentralbl. f. Bakt., Abt. I,
Orig. Bd. 131. 1934. S. 397-398.)

Zweck und Vorziige der von der Fa. H. Hauptner, Berlin NW 6,
Luisenstr. 56, in verschiedener Ausfiihrung und Grofie lieferbaren Gestelles
aind: Der Farberahmen kann nach zwei Seiten gekippt und achnell und
sicher in der Horizontalen f ixiert werden. Daher ist das Gestell zum Schwenken,
AbMppen und Abspiilen der Farbe im besonderen bei der Serienfarbung
geeignet (nicht jeder Obiekttr%er braucht einzeln angefaBt zu werden).
Spiilung mit Spritzflasche oder mit Gummischlauch versehenem Wasser-
hahn. Sauberes Arbeiten iat also gewahrleistet. Bei Verwendung an Tiseh-
becken kann das Farbegestell auf Gleitschienen weggeschoben oder ganz
weggenommen werden. Der Gasbrenn^ kann mit Elemmschraube an einem
Stander befestigt werden. Femer besteht die MSglichkeit, auf dem Objekt-
auflagerahmen eine Kupferplatte festznklemmen und als Eeizplatte zu ge-
brauchen. Das Gestell ist auch zerlegbar und kann leicht mitgefiihrt werden.

Eodenkirchen (Konigsberg Pr.).
BjaehowsM, "W., tJber Anwendung von Pflanzennahr-
boden in der bakteriologischen Praxis. (Laboratorium-
praxis. Nr. 3. 1934. S. 6 — 8.) [Eussisch.]

Yerschiedene Mikroorganismen entwickeln sich gut auf fliissigen und
festen EahrbSden aus Weizen, Hafer, Soja und tiirkischen Bohnen. Die in
diesen NahrbSden enthaltenen Kohlenhydrate hindem das Studium der
biochemisehen Eigenschaften der Gruppe Coli-Typhus nicht.

A. ImSenecki (Leningrad).

Morphologie, Physlologle und Systematik der Mikroorganismen;
Virusuntersuchungen.

BraSsky, W. P., Pleomorphismus der Knollchenbak-
terien. (Bull, of the State Inst, of Agric. Microbiol. USSE. Vol. 6.
1933. p. 67—81.) [Euss. m. deutsch. Zusfassg.]

Nach Beobachtungen des Yerf.s unterscheiden sich die dissoziierenden
Eassen (S-, E- und tJbei^angsformen [0]) von KnSllchenbakterien ein und
derselben Art z. T. dermaBen, daB sie verschiedene Arten vortSuschen kSnnen.
Die stark schleimi^ wachsenden S-Formen zeichnen sich in physiologischer
Hinsicht allgemein durch grSBere AktivitS.t aus, z. B. bei der Sllurebildung

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroopganismen; Virus-XJnters. 149

aus Kohlehydraten. In flussigen Medien bilden die S-Formen Bakteroiden,
die R-Formen dagegen nicht. Diese sind durch „Stenibildimg“ und starkere
Differenzierung des Protoplasmas charakterisiert. Durch Einwirkung des
Bakteriophagen sollen sich stets E- und O-Formen sowie reichlich Bak-
teroiden und auf den Verz-weigungen derselben „Gonidien“ bilden. Bei
den Bakterien der Wicke und der Soyabohne glaubt Verf. auch ein filtrier-
bares Stadium gefunden zu haben. Die zugehSrigen Bakterienkolonien
bestanden aus typischen Bakteroiden. Aus der Beobachtung, dafi die S-
Form der Wickenbakterien Knollehen bildet, in denen auBer den S- aueh
R- und 0-Formen wiedergefunden -vrarden, und ferner daraus, daB sich der
Bakteriophage in den Knollehen bilden soil, zieht Verf. den SehluB, „daB
die Wechselbeziehungen zwischen den Pflanzen und den Bakterien einen
mehr biologischen als physiologischen Charakter besitzen“.

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Sobemheim, 6., tJber das Bacterium typhi flavum. (Zen-
tralbl. f. Bakt., Abt. I, Orig. Bd. 131. 1934. S. 374—389.)

Aus 4 versehiedenen Gelbstammen konnten, angeblich unter Ausschal-
tung jeder Fehlerquelle, kulturell und serologisch einwandfreie Typhus-
bazillen herausgezuehtet warden. Es gelang dies auf dem Wege tSglicher
Dberimpfung nach 66 — 96 Passagen. In gleicher Weise wurde bei Wieder-
holung des Versuches die Umziiehtung von 3 Stammen in Paratyphus B-
Bazillen erzielt. Passagedauer 63 — 95 Tage. Die Paratyphusbazillen schienen
teils direkt, teils auf dem IJmwege iiber den Typhusbazillus aus dem gelben
Ausgangsstamm hervorzugehen. Damit ware eine Bestatigung der von
D r e s e 1 und seinen Mitarbeitern erhobenen Befunde erbracht und die
Zahl der umgeziichteten Kulturen betragt nunmehr 27. Bevor jedoch diese
Befunde nicht durch Einzellkulturen ihre Bestatigung gefunden haben,
kSnnen die Zweifel von anderer Seite nicht als iiberwunden gelten.

Rodenkirchen (KSnigsberg Pr.).
Fortner, F., Kulturelle und mikroskopische TJnter-
suchungen iiber das sogenannte Bacterium typhi
flavum. (Dtsch. med. Wochenschr. Jahrg. 60. 1934. S. 785—788.)

Versuche, durch Schragagarpassagen bei 37® in 1 — 2tagigem Wechsel
Gelbkeime in Typhusbazillen und umgekehrt umzuwandeln, ftihrten zu kei-
nem positiven Ergebnis, abgesehen von mehreren unwesentlichen Variationen.
Dabei wurden 10 Gelbkeime, die z. T. von D r e s e 1 stammten, und 2
Typhusstamme in je 220 Passagen fortgeziichtet. Die grundlegenden TJnter-
schiede zwischen beiden Keimarten (die Gelbkeime und ihre Varianten
rOten die Saccharose-Lackmus-LSsung und verflUssigen die Gelatine, die
Typhusbazillen niemals) waxen konstant. Die Befunde von D r e s e 1 imd
Mitarbeitern, von GroBmann und von Sobemheim konnten so-
mit nicht bestatigt werden. Zur Kritik wird gesagt, daB die Variations-
forschung, insbesondere bei Gelbkeimen, von der EinzeUkultur ausgehen
miisse. Rodenkirchen (KQnigsberg Pr.).

Szathm&ry, 3 . v., Variabilitatsstudien an Yibrionen.
(Zentralbl. f. BaM., Abt. I, Oiig. Bd. 131. 1934. S. 366—374.)

Es wurde untersucht, inwieweit gewisse biologische Eigenschaften von
Wasservibrionen durch Organpassj^e verandert werden kSnnen. In Gegen-
wart von KaninchenblutkSrperchen wurde die hamolytische Kraft der
Vibrionen gesteigert, die Gelatineverfliissigung beschleunigt. Dagegen die

150 Moi^hologie, Fhysiologie u. Systematik d. Mikroorgan iB m en ; Virus-TTuters.

MUchgerinnung aufgehoben. Die AgglutinabUitat steigerte sich, dureh Darm-
passagen wurde ebenfalls die Milchgerinnung aufgehoben. Die Gelatine-
verflussigung aber verzfigert und die Verdauung von geronnenem Blutserum
zuerst verzSgert, dann jedoch ganz aufgehoben. Diese Degenerationen
scheinen zunachst irreversibler Natur zu sein, da sie selbst nach 31 Passagen
(nach AusschaJtung der schadigenden Einfliisse) bestchen blieben.

Rodenkirchen (Konigsberg Pr.).
Botgaris, A., Zur Frage des TJltravirus der Tuberkulose.
(Zentralbl. f. Bakt., Abt. I, Orig. Bd. 131. 1934. S. 276-288.)

Nieht alle granul^en oder kokkoiden saure-alkoholfesten Formen dtirfen
als tuberkelbazillenartige, nicht einmal inuner als bakterieUe Formen auf-
gefaBt werden; sie kommen auch in ganz gesunden tmd nicht geimpften
Tieren vor. — Es wird die Hypothese aufgestellt, dafi der Tuberkelbazillus
zwei EntwicMungszyklen durehmachen kann, daB aufier der bazillaren
Form auch ein filtrierbares Virus besteht, das sich zur typischen Bazillen-
form entwickeln kann. Es ergab sich namlich, daB das lUtrs^ltrat in den
Organen zu Veranderungen flihrte, die patholo^ch-anatomisch als Ent-
ziindungsprozesse festgesteUt wurden. Verf. scUieBt daraus auf das Vor-
handensein von Substanzen im TJltrafiltrat und vermntet eben, daB es sich
um lebende Elemente handelt. Der Beweis hierfiir steht noch aus.

Rodenkirchen (KSnigsberg Pr.).
Meyer, E., Zur Biologie der hamophilen Bakterien.
I. Mitteilung: 'O’ber die Natur des V-Faktors. (Zentralbl.
f. Bakt., Abt. I, Orig. Bd. 131. 1934. S. 289—290.)

T h j 6 1 1 a und Avery hatten festgesteUt, daB der InfluenzabasdUus
zu seiner Vermehrung im besonderen zweier Faktoren bediirfe. Den einen
davon bezeichneten sie als V-Faktor, weU er sich me ein Vitamin verhielt.
Vorkommen und Eigenschaften des V-Faktors decken sich weitgehend mit
denen des Vitamin C. Wie die Untersuchungen Verf.s aber beweisen, sind
sie nicht identisch, weshalb auch das Vitamin C nicht imstande ist, den
von den InfluenzabaziUen benStigten V-Faktor zu ersetzen.

— , — , II. Mitteilung: tJber die Inaktivierung des V-Faktor
durch BlutkSrperchenstromata. (Ebenda. S. 291 — 300.)

VoUblut der meisten Tierarten iibt eine mehr oder weniger starke Hem-
mungswirkung aus auf das Wachstum der InfluenzabaziUen. Diese Wirkui^
ist besonders stark bei Hammel-, Binder- und Schweineblut, sie fehlt bei
Taubenblut und meist auch bei Pferdeblut. Sie wird verursacht dureh die
Stomata, die den V-Faktor inaktivieren, und ist die Folge einer Ferment-
wkung (mthrsoheinUeh oxydativer Art) und nieht einer Adsorption oder
einer chemischen Bindung des V-Faktors. Diese Beobaohtungen geben die
Erkl§ru^ fiir die besondere Eignung des Taubenblutes sowie fiir die tlber-
l^enheit des Koehblutagars (ZerstSrung des inaktivierenden Fermentes)
gegeniiber dem Vollblutagar bei der ZUchtung des InfluenzabazUlus.

Rodenkirchen (Kdnigsberg Pr.).
Gorbach, 6. und SablatnSg, A., tJber die Bildung von Lipoi-
den dureh Bakterien. 1. Mitt. Die Gesamtfettbildung
von Bacillus prodigiosus auf festen N9ihrmedien.
(Arehiv f. Mikrobiologie. Bd. 5. 1934. S. 311—317.) — II. Mitt. D i e
Gesamtfettbildung von Bao. prodigiosus in Nkhr-
16 sung en. (Ebenda. S. 318—327.)

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-XJnters. 161

I. Mitt. Das Material, farblos wachsender Stamm von B. prodi-
g i 0 s u s , wurde nach Toluolautolyse einer Extraktion naeh der vom ersten
Verf. ausgearbeiteten Mikromethode unterworfen. Auf festen Nahrbeden
ist das Maximum der Lipoidbildung (1,23%) bei schwach saurer Reaktion
(ph 6,6) nach 8 tSgiger Zucht erreieht, Ln j^Jter nimmt die Lipoidmenge bei
alkalischer und saurer Reaktion ab, bei neutraler bleibt sie annahernd kon-
stant. Durch Einwkung von AthylalkoholdSmpfen konnte bei alkal. Re-
aktion und 19tagiger Einwkung Steigerung von 100% erzielt -vrerden.
Von Glyzerin, Dextrose, Saccharose gibt Glyzerin die hoehste Ausbeute.
In fliissigen NahrbSden wd ein 2 — imal hBherer Lipoidgehalt erreieht
als auf festen.

II. Mitt. In fliissigen Rahrbdden nimmt die Lipoidmenge mit dem
Alter ebenfalls ab; das Temperaturoptimum der Lipoidbildung betrSgt
12® C. Am giinstigsten wirkt schwach saure bis neutrale Anfangsreaktion.
Giinstige C-Quellen sind Mannit, Glyzerin, Dextrose, Saccharose, Maltose,
BrenztraubensEure; wesentlichen Einflufi hat aber die Eonzentration, deren
Optimum bei ziemlich niedrigen Werten liegt (m/20 fur Dextrose). Ammon-
salze organischer SSuren fSrdern die Lipoidbildung besonders (8,1% bei Am-
moniundaktatl); ste^ende Eonzentration der N-Quelle erhoht die Lipoid-
menge. Der unverseSbare Anted im Lipoidextrakt betrug 12,8%.

R i p p e 1 (GSttingen).

Cramer, M., Zur Biologie und Einteilung der Strepto-
kokken, mit besonderer Beriicksiehtigung der
Antiviruswirkung. (Zentralbl. f. Bakt., Abt. I, Orig. Bd. 131.
1934. S. 308—323.)

Priifung einer groBen Anzahl von StSmmen der Streptokokkengpppe
in verschiedenen Bouillonkolturfiltraten und gleichzeitig auf den verscMeden-
sten N3hrb6den, einerseits zum Studium der antagonistischen Wirkung von
Filtraten gegeniiber den verschiedenen Streptokokkentypen und andererseits
im Hinblick auf deren Spezieseinteilui^. Dabei ergab sich, daS Filtrate
von Pyocyaneus, Fluoreszens, Proteus, Myeoides,
Paratyphus, Coli und Ruhr keinen merklich schSdigenden EinfluS
hatten auf Enterokokken und Milchstreptokokken, da6 sie dage^en Pneumo-
kokken und Mukosusstreptokokken erheblich schadigten. Die Resistenz
der iibrigen Streptokokken lag zwischen den beiden Extremen, sie nahm ab
in der Reihe: Galtstreptokokken, hSmolytische Streptokokken, Dmsestrepto-
kokken, griinwachsende Mundstreptokol^en. Die "^kung der Filtrate war
demgemafi nieht spezHisch elektiv in dem Sinne, daS jeweUs bestimmte
Typen von den einzelnen Filtraten bevorzu^ geschadigt wurden. Als Ur-
sache der Schadigung kann beim grOfiten Teil der Filtrate die Verandetung
des ph-Wertes angenommen werden; bei gewissen Filtraten blieb aber trotz
Neutralisation die Schadigung bestehen. Erhitzun^ der Filtrate auf 60®
wahrend dner halben Stunde war ohne EinflnJS auf ihre schadigende Eraft.
Die Starke dieser Eraft wax am grSfiten beim Pyocyaneus filtrat, es
folgten in abnehmender Reihenfolge die Filtrate von Fluoreszens,
Proteus, Myeoides, Paratyphus, Coli und Ruhr. Die
Filtrate von Staphylokokken und Streptokokken selbst waxen so gut wie
ohne Wiring bis auf die deutlieh sauer reagierenden, die natiirlieh den
saureempfindlichen griinwaohsenden Mundstreptokokken, Pneumokokken
und Mukosusstreptokokken nur schleohte WachstumsmSglichkdt boten. Eine
Virulenzbestimmung der Streptokokken durch Filtrate lieS sich also nieht

152 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorgamsmen; Virns-Unters-

durchfuhren im Sigwart schen Sinne (S i g w a r t nimmt an, dafi mit
Hilfe der Streptokokkeneigenfiltrate eine Trennung in virulente und aviru-
lente Stamme mfiglich ist). Mein die im allgemeinen avinilente Gruppe
der Enterokokken kann wegen ihrer anfierordentlich hohen Resistenz gegcn
alle mSglicken Einfliisse von den iibrigen Streptokokkenarten abgetrennt
werden. — Was die Aiteinteilung der Streptokokken betrifft, so zeigten sich
bei den TJntersuchungen mannigfaehe Standortsmodifikationen, die als tJber-
gSnge zwiscben den einzelnen Streptokokkenarten gedeutet werden. Es ist
also immer mit gewissen Scbwankungen im biologiscben Verhalten zu rechnen.
— Von den gepriiften NahrbSden bewahrten sich fiir die praktische und
sichere Diagnose der einzelnen Streptokokkentypen von den Blutnahrboden
insbesondere Hammelblutplatten mit und ohne Traubenzucker, daneben fur
die griinwachsenden Mundstreptokokken, Pneumokokken und Mukosus-
streptokokken die Kochblutplatte nach B i e 1 i n g und die Hamatinplatte
nach K 0 V a c s. Fiir die hamolytischen Streptokokken und Enterokokken
sind letztere zwei Nahrboden nur rwecks Vaiiationsforschung brauchbar.
Weiterhin sollten zur allgemeinen Typentrennung herangezogen werden:
Lackmusmilch nach Heim, Askulinbouillon, Eiweifibouillon nach Levin-
t h a 1 , Priifung der Hitze- und Galleresistenz.

Eodenkirehen (K6nigsberg Pr.).
Meyer, R., Beitrage zur Kenntnis der Cellulosezerset-
zung unter niedriger Sauerstoffspannung. (Archiv
f. Mikrobiologie. Bd. 5. 1934. S. 185-222.)

In Rohkulturen der Zellulosezersetznng nach Omelianski fand
sich einAktinomyzeten - ahnlicher Organismus (mit seitlicher Sporen-
abschntirung), der Zellulose kraftig zersetzt; jedoch sind die bekannten
Bakterien nicht auf seine Tatigkeit angewiesen. Auch fand sich ein, fiir die
Zersetzung der Zellulose nicht in Frage kommender, anaerober Azoto-
b a e t er - ahnlicher Coccus.

Versuche, durch Einzell-Isolierungen zu einer Eeinkultur der Ome-
lianski- Bakterien zu gelangen, schlugen fehl; bei mehr als 30 Isolierungen
trat keine EntwicMung ein. Die Eeinkultur wurde durch Waschen und
%,stiind. Erhitzen auf 75° C hergestellt. Die Jugendform ist schwer zu
j^den, lebhaft beweglich, spindelfdrmig (Amylobacter-ahnlich);
spater bilden sich die bekannten Stabchen- und (bei der Sporenbildung)
Plectridiumfonnen. Abweichend finden sich fadige und zitronen-
fSrmme Formen.

Wachstum findet auch in Fleisehbruhe statt, doch wird die von Bakterien
besetzte Zellulose nicht angegriffen. Selbst nach 33maliger tberimpfung
auf Fleischbriihe erfolgt auf Zellulose noch normale Entwicklung. Wachs-
tum findet auch auf Deztrosenahrboden statt.

In vielen Fallen wd ein gelba: Farbstoff bei der Zersetzung der Zellu-
lose gebildet, der aber bei vielmalig iibergeimpften Kulturen nicht mehr auf-
tritt; er sitzt in den auBeren Teilen der ZeUe und kann auch auf die Zellulose-
faser iibergehen. G^enwart von etwas Sauerstoff ist fiir seine Bildung not-
wendig. Er tritt nur auf Zellulose auf, nicht in Fleischbriihe Oder Dextrose-
kulturen. Er ist mit keinem Losungsmittel zu extrahieren; verdiinnte
Sauren schlagen ihn in fleischrot um.

Das Innere der Zellen enthalt Kdmchen, die axial gelagert sind. Verf.
glaubt, diese mehr der mechanischen Stabilisierung (Eenen. JedenfaUs
Hegen die naehweisbaren Reservestoffe (Volutin) peripher, aufierhalb der

Morphologie, Phjrsiologie und Systematik der Mikroorganismen; Vinifl-TJnters. 153

Achse. Verf. schlieBt auch aus besonderen Beobaehtungen, dafi dieser
Zellulosezersetzer keine eigentliehe feste aufiere Zellmembran besitzt. In
jfingeren Stabchen konnte bweilen Glykogen nachgewiesen verden, in
zwei Fallp fanden sich auch mit Jod sich blSuende Inhaltskdrper. Es wird
die Moglichkeit diskutiert, dafi der Organismus sich von der Amylo-
b a c t e r gruppe abgespalten hat.

Etwas Sauorstoff ist fur den Eintritt der GSxung vorteilhaft, zu deren
Beginn er toil'vreise verschwindet. Methan 'wnrde nicht gefunden, Wasser-
stoff z. T. nur in geringer Menge, im librigen KohlensUnre. Die Bildung
von Wasserstoff lafit bei hohen Uberimpfungen nach; dieses Gas 'wurde bei
einer 93. tJherimpfung iiberhaupt nicht gebUdet, trotz krSftiger Zersetzung
der Zellulose. Dabei konnten allerdings die geringen Sauerstoffmengen mit-
gewirkt haben. 'Oberhaupt sch-wanken die Gasmengen auBerordentlich; sie
waren bei dem Verf. gering im Vergleich zu den ubrigen Autoren.

R i p p e 1 (Gdttingen).

Issatschenko, B. L. und Wackenhnt, A. M., Einige Beobaehtungen
iiber den EntwicMungszyklus des cellulosezersetzenden Organismus.
(Archiv f. Mikrobiologie. Bd. 6. 1934. S. 303—310.)

Die bereits 1932 in russischer Sprache mitgeteilten Dntersuchungen
werden hier kurz deutsch verSffentlieht, unter Beigabe guter Ahbildungen,
und es wird der Entwicklungsgang desHutchinson-Clayton schen
aeroben Zellulosezersetzers beschrieben. Aus den „Sporoiden“ keimen feine,
fadige, anfUnglich ringfSrm^ aufgerollte, spS^ter sich streckende, aber ge-
wunden bleibende Formen, die an beiden Enden zugespitzt sind. Sie ver-
grdBern und verbreitern sich spSiter, es tritt eine zentrale, stark fSrbbare
Partie auf, schliefilich Querteilung und Teilung der „Chromatinsubstanz“.
Unter Abrundung werden die Zellhalften zu den „Sporoiden“.

Der Organismus wurde in der gem&Bigten und arktischen russischen
Zone (auch in Salzseen und im Wasser des Barentsmeeres) gefunden. Die
Verff. wShlen als Bezeichnung die von Winogradski gegebene: C y -
thophagaHutchinsoni. Rippel (GSttingen).

Wenzl, H., Zur Frage nach der Wachstumsgrenze von
Azotobacter chroococoum im alkalischen Bereich.
(Archiv f. Mikrobiologie. Bd. 6. 1934. S. 3B8— 365.)

Die Wachstumsgrenze von Azotobacter chrooeoceum im
alkalischen Bereich ist bisher noch nicht genau festgelegt worden. to Alkali-
bbden fand sich das Bakterium bis zu ph 9,5. Versuche wurden bei RajCOj-
Zusatz ausgefiihrt (Phosphate reichen nicht aus, Borate sind zu giftig). Da-
bei ist indessen das Anfangs-ph nicht mafigebend, da dieses sich dureh COg-
Aufnahme aus der Luft und Bikarbonatbildung nach der sauren Seite ver-
schiebt. Unter Beriicksichtigung dieses Umstandes wurde fiir Rein- und
Rohkulturen die Grenze zwischen ph 9,1 und 9,2 gefunden. 0,2% NagCOj
hemmten das Wachstum vollstand^. Aus dem erwahnten Vorkommen von
Azotobacter in stark alkalischen BSden schlieBt Verf. (ohne Versuche),
daB fiir Stamme daraus die Grenze um mindestens 0,3 — 0,4 Einheiten hdher
liegen miisse. Rippel (Gdttingen).

Bnsehmaim, G. und Meyer, W., Die auf griinen Pflanzen vor-
kommenden Coli- und eoliahnlichen Bakterien
und ihre Eigenschaften unter verschiedenen Ziich-
tungsbedingungen. (Arch. f. Mikrobiol. Bd. 6. 1934. S. 366 — 386.)

154 Morphologie, Physiologie tmd SjrstematSk der MiSiJOOigaiiismezi; Virus-Unters.

Angaben iiber Bakterien derColi aerogenes - Gruppe yon grunen
Pflanzenteilen finden sich bisher nnr vereinzelt, sind aber in JEnsicht anf
die Sohadlichkeit der Gruppe beim Einsauem aueb von praktischem
Interesse. Von frisehem Pflanzenmaterial (Easengras, Eieselfelder^as, Mais)
und solcbem, das einige Tage ■vrie zum Einsauem aufbewahrt war, in einigen
Fallen auch von mit anorganischen Sauren versetztem Material wurden
100 Stamme von C o 1 i und o o 1 i ahnlichen Bakterien, darunter 6 typisehe
C 0 1 i - Stamme isoliert und auf die verschiedensten Eigenschaften bin
untersucht, namentlieb auch naeh den deutschen und neueren amerikanisohen
Untersuchungsmethoden. Diese stimmten fibwein, wenn es sich um die
typisehen C o 1 i - Ponnen handelte, sonst nicht.

Atypische Stamme waren nur bis zu 37° C lebensfahig, typisehe C o 1 i -
Stamme bis 41° C, ■wahrend das zum Vergleich herangezogene, aus Darm
isolierte B. c o 1 i - Haar noeh bei 46° C wuchs, obwohl es jahrelang bei
niedrigerer Temperatur gezuchtet mirde.

Bei den 13 aui^efundenen indolbildenden Stammen blieb diese Fahig-
keit auch bei Ijahr^er Aufbewahrung in sterilem Leitungswasser_ erhalten,
ebenso me die sonstigen charakteristischen Eigenschaften, soweit es sich
um die typisehen Coli- Stamme handelte. Gelbmchsende, gelatinever-
fliissigende Indolbildner starben darin bald ab. Zimmertemperatur wurde
dabei besser vertragen als solche von 30° C.

Bei Zuchtung auf zuckerreichem, eiweiBarmem Substrat (Bierwurze-
Agar + 5% Zucker) gingen die gelbwachsenden Indolbildner nach 13 tJber-
impfungen ein, wahrend die typisehen Coli- Formen ohne Anderung der
Eigenschaften lange lebensfahig blieben.

Versuehe, durch Erhitzen die von Hilttig behauptete Umwandlung
von ColiinStreptocooeuslactis durchzufuhren, schlugen ganz-
lich f^l, auch die behaupteten Zwischenformen konnten nicht erhalten
werden. In Wasserabschwemmung vertrugen dabei die Bakterien das Er-
hitzen besser als in Fleischbriihe. Die Eitzeresistenz sinkt mit dem Alter
der ZeUen. E i p p e 1 (Gattingen).

Burgwitz, 6. E., Denitrification as the result of the
combined activity of bacteria. I. (Bull, of the State
Inst, of Agric. Microbiol. USSE. Vol. 5. 1933. p. 52 — 57.) [Euss. m.
engl. Zusfassg.]

AuBer der echten, durch eine einzige Bakterienart hervorgerufenen
DenitiiSkation gibt es noch eine andere, die sich aus der gemeinsamen Wir-
kung zweier Arten ergibt, ein zweifellos wichtiger mikrobiologischer Vor-
gang, der aber erst wenig untersucht worden ist. Verf. beschreibt zwei aus
turkestanischer Erde isoUerte Bakterien, die in Mischkultur denitrifizieren.
Back turanioum n. sp. reduziert Mtrat zu Mtrit und Bact.
nitrosovorum n. sp. reduziert das gebildete Nitrit weiter zu elemen-
tarem Stiekstoff. B o r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Korsakova, M. P., and Bylinkina, T. ST., Denitrification as the
result of the combined activity of bacteria. II.
(Bun. of the State Inst, of ^^ric. Microbiol. USSE. Vol. 5. 1933. p. 58
—66.) [Euss. m. eigl. Zusfassg.]

Die von Bact. turanicum und Bact. nitrosovorum
gemeinsam hervorgerufene Denitrifikation verlaidt schematisch in folgen-

Uorphologie, Physiologie and Systomatik der Mikiooiganismen; Viros-Uniars. 156

der Weise: 2 KN 03 -»-2 KN02-*2 KNO-+N 2 . erste Phase dieser

Eeduktionskette ist die Wirkung des Bact. turanicum, an der zwei-
ten sind beide Axten beteiligt, und die dritte wird nur von Bact. nitro-
s 0 V 0 r u m ausgelSst. B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem),

Hirscb, J,, Chemische und physiologische Studien fiber
die Keimvermehrung. (Ztschr. f . Hyg, u. Infektionskrankh.
Bd. 116. 1934. S. 182—205.)

Die Entwieklung einer Bakterienkultur — die XJntersuchungen 'wurden
an Diphtheriebazillen vorgenommen — verlSiuft diskontinuierlich mit wech-
selnden Perioden intensiverer und geringerer Keimvermehrung. Auf diese
Weise entstehen eine Reihe von Vermehiungszyklen, deren einzelne Dauer
sich fiber viele Stunden bis Tage erstreckt. Die Phasen des gesteigerten
Keimzuwachses sind ohemiseh durch einen hohen absoluten Phosphorgehalt
der Zellen und dutch ein niedriges Zellentrockengewicht charakterisiert,
wfihrend die Phasen des geringeren Keimzuwachses umgekehrt einen ver-
minderten Phosphorgehalt und — durch Einlagerung stickstoffarmen Oder
stickstofffreien Materials — ein hoheres Trockengewieht der Keime aufweisen.

R 0 d e n k i r c h e n (Kfinigsberg Pr.).
Ehrismann, 0., Pyocyanin und Bakterienatmung. (Ztschr.
f. Hyg. u. Infektionsfaankh. Bd. 116. 1934. S. 209 — 224.)

Pyocyanin, der blaue Farbstoff der Pyocyaneusbakterien, regt die At-
mung lebender Bakterien in geringem Ma6e an. Seine desinfizierende Wirkung
konnte bestfitigt werden, sie ist jedoeh oft nur gering und gegenfiber ver-
schiedenen Bakterienarten sehr verschieden stark ausgepragt. tJber die
oxydativen Leistungen durch Zusatz von Pyocyanin muB im Original nach-
gelesen werden. Rodenkirchen (KSnigsberg Pr.).

Etinger-Tolczynska, S., Superinf ektionen mit Bac. Fried-
1 fi n d e r. (Ztschr. f. Hyg. u. Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 72 — 80.)

Inf ektionen mit Bac. FriedlSnder verliefen bei MSusen, die
mit dem gleichen Stamm oder einem anderen Typ vorinfiziert waren, be-
deutend schwfieher als bei den Kontrollen. Diese Hemmung der Super-
infektion wird im wesentlichen auf das „Antagonismusphanomen“ zurfick-
geffihrt, das auch in vitro beobachtet wird. Danach werden die Erreger
der zweiten Mektion durch die in tiberzahl vorhandenen Err^er der ersten
Infektion gehemmt. Boi Meerschweinchen wirkte die Vorinfektion mit
Bac. Friedlfinder (die bei dieser Tierait nicht zu einer Generalisation
wie bei der Mans ffihrt) nicht abschwEchend auf die Superinfektion.

Rodenkirchen (KSnigsberg Pr.).
Olenow, L, tiber den EinfluB der Radiumemanation
auf Zygosacchar omyces mands churious Saito. (Ann.
de Roentg. et de Radiol. T. 13. Hr. 1—2. 1934. p. 93 — 97.) [Russiseh.]

Bei Aussaat nach 24 Std. aus einem Glase mit Bierwurze, in welcher
eine Kapillare mit Radiumemanation zerdrfiekt worden war, ergab Z y g o -
saccharom. mandschurious Kolonien, in denen die kopulieren-
den Zellen 1—3 lange Fortsfitze bildeten. Der Kopulationskanal bUdet sich
iidolge der Yereinigung der Fortsfitze zweier Zellen und ist in diesem Fall
langer als gewShidich. Durch wiederholte Bestrahlung wurde eiue Rasse
mit Zellen von amSbenaxt^er Form erhalten, die selten ko^ulierten und Asci
von unregelmfiBiger Gestalt bildeten, femer faltige Kolonien mit grSBeren,

156

Mikrobiologie d&c Nabrungs-, Genufi- tind Futtennittel.

reiehlich Fett enthaltenden Zellen, die keine Fahigkeit zu Kopulation und
Sporenbildung besaBen. Die faltige Easse vergait Glukose, L§.vulose und
Saccbarose starker als die Ausgangsrasse und hat zudem die Fahigkeit er-
TTorben, Galaktose and Maltose zu vergaren, die dem Ausgangsstamm fehlt.

A Im§enecki (Leningrad).

Mikrobiologie der Nahrungs-, GenuB- und Futtermittei.

Schwartz, W. und EaeB, G., Das Waehstum von Schimmel-
pilzen auf gekiihltem Fleiseh bei v er schi e d en en
Luftzustanden. (Archiv f. Mikrobiologie. Bd. 6. 1934. S. 157
—184.)

Enter 20 aus Kuhlhausem isolierten Pilzen herrschten M u c o r und
Penicillium vor, Aspergillus trat nur einmaJ auf, vereinzelt
wurden rote Helen gefunden. Besonders haufig waren die beiden fol-
genden zu den naeherwahnten Versuchen benutzten A^en: Penicillium
flavoglaueum Biourge Nr. 73 und eine niedrige Form von M u c o r
raeemosus Rabenh., ferner wurden herangezogen ein Schwarzepilz,
Cladosporiumherbarum Link, und ein von Dbrrfleisch isoliertes
Acaulium, Penicillium (Scopulariopsis) rufulusBai-
nier.

Die Versuche wurden so ausgefuhrt, dafi kleine Fleischstuckchen bei
wechselnder Temperatur und Luftfeuchtigkeit nach Beimpfung mit den
Pilzkulturen gehalten wurden. Doeh geben die Versuche genugend Hin-
weise auf die Verhaltnisse im praktischen GroBbetiieb.

Fiir Flachenwaehstum, Konidien- und Sporenzahl liegt das Optimum
bei etwa 95% Luftfeuchtigkeit. Die schlechtere Wirkung hSherer Feucht%-
keit kann durch Transpirationsschwierigkeiten und die nicht ganz zu unter-
drtickende Bakterienentwicklung vemrsaeht sein. Im einzelnen ist die
Wirkung von Temperatur und Feuchtigkeit auf die Pilze verschieden. Am
schnellsten keimt und wachst M u c o r. Da iiberhaupt Mucorineen
in erster Linie als Infektion in Frage kommen, so bestimmen sie die Be-
grenzung der Lagerzeit. Alle diese Versuche setzen allerdings voraus, daB
eine Pilzinfektion eine Bakterieninfektion tiberwiegt.

Bei Senkung der Temperatur um 3° C kann (he relative Feuchtigkeit
um 6 — 20% heraufgesetzt werden zur Erreichung gleichen Flachenwachs-
tums beim Pilz und gleicher Lagerzeit beim Fleiseh. Grundsatzlich wtirde
zwar allein durch entsprechende Senkung der Luftfeuchtigkeit eine Unter-
drttekung des PUzwachstums mdglich sein, wie Keimui^sversuche im han-
genden Tropfen zeigten, aber dabei wiirde die urspriingliche Beschaffenheit
des Fleisches zu stark verandert werden (Gewiehtsverlust, Verfarbung
usw.). R i p p e 1 (GSttingen).

EaeB, G., und Schwartz, W., Untersuchungen fiber den Ein-
fluB der Luftbewegung auf das Wachstum von
Schimmelpilzen auf gekfihltem Fleiseh. (Arch, f .
Mikrobiol. Bd. 5. 1934. S. 443 — 450.)

Zu den Versuchmi wurden die beiden auf gekfihltem Fleiseh vorkommen-
den Schimmelpilze Penicillium flavoglaueum und M u c o r
raeemosus benutzt. Bei einer Luftbewegung von 5 und 12 cm/sec und
90% Luftfeuchtigkeit ist das Wachstum der Pilze gegenfiber ruhender Luft
verzSgert, und zwar um so mehr, je hfiher die Gesehwindigkeit der Luft-

Mikiobiologie der ITahrongs-, Genuli- und Fattermiiitel.

167

bewegung ist. Die Hemmung ist starker, wenn die Luft seakrecht zur Infek-
tionsflache stromt als wenn sie parallel dazu streicht. Die Ursache der Hem-
mung ist Zanahme des Quelluags- und osmotiscben Drueks auf der Fleisch-
oberfiache infolge VergroBerung der Verdunstung.

Fraktisch ist die Wacbstumslienunung zu gering als daB die Lagerzeit
nennenswert vorlangert werden kSnnte. Luitumwalzung im Kuhlraum.
■wirkt also durch schnelleren Ausgleich ortlicher Temperatur- und FeueMig-
keitsunterscMede, nicht durch direkte Ein-wirkung auf den Pilz. Die Luft-
bewegung im Kuhlraum braueht also nur so groB zu sein, als sie diesen Aus-
gleich aufrechterhalten kann. Kip pel (GSttiugen).

Brekenfeld, Ergebnisse der Bakterioskopie vonFleisch-
waren. (Ztschr. f. Unters. d, Lebensmittel. Bd. 67. 1934. S. 577,
14 Abb.)

Es wurde durch Stichproben bei 48 versehiedenen Sehlachtereien Ost-
preuBens festgestellt, daB die bakterielle Durchsetzung der Fleisehwaren
im allgemeinen urn so groBer ist, je sehlechter die hygienischen Verhaltnisse
im Schlachtereibetriebe sind. Verf. fordert daher aus Griinden der Volks-
gesundheit sowie der Kontrolle der Betriebe die Festsetzung eines Grenz-
wertes fiir den Keimgehalt fiir Haekfleisch. Die Erfahrung zeigte, daB der
10 [I dicke Schnitt bei 800 facher VergroBerung unter dem Mikroskop nicht
mehr als 10 durch Methylenblau gefSrbte Bakterien im Gesichtsfeld zeigen
darf, soil das Fleiseh noch als einwandfrei bezeichnet werden. Es sind von
mindestens 3 versehiedenen Stellen des Fleisches Proben zu nehmen und
von jeder Probe mehrere Schnitte herzustellen. Die bakterioskopische Me-
thods erfordert zur Durchfiihrung nur 15 Min., ist nach Ansieht des Verf.s
sicherer als die Kulturmethode und gibt dort noch Auskunft, wo die chemische
Analyse versagt. Sie sei daher bei den Nahrungsmittel - Untersuchungs-
tmtern einzufuhren, evtl. seien dort besondere Stellen fur Faehbakteriologen
zu schaffen. Engel (Berlin).

Me Crady, M. H., and Archamhault, J., Examining dairy pro-
ducts for members of the Escherichia -A erobacter
group. (Joum. of Public Health. Vol. 24. 1934. p. 122—128.)

Da die Zahl der in Milch (besonders in pasteurisierter) vorhandenen
Coli-aerogenes-Vertreter vielfach sehr niedrig ist (10 — 20 pro 100 cem),
ergeben sich Schwierigkeiten fiir die iibliche Methode, oder ^/loo com
der betreffenden Probe auf Agarplatten zu verarbeiten. Hierbei erhaltene
n^ative Resultate tausehen eine Sicherheit vor, die in Wirklichkeit nicht
vorhanden ist. Infolgedessen kommt fiir solche Falls nur die Anwendung
fliissiger Nahrboden in dor Gasprobe in Frage. Eine andere Frage ist die
nach den quantitativen Unterschieden der versehiedenen Methoden sowie
nach deren Genauigkeit. Beziiglich der letzten hat die Plattenmethode
den Vorzug, vorausgesetzt, 1. daB auf der Platte mehr als 6 Coli-aerogenes-
Kolonien erscheinen, 2. daB diese zuverlassig als solche zu erkennen sind.
Andererseits ist die Garprobenmethode nur dann einigermaBen zuverlassig,
wenn von jeder Verdiinnung 5 ParallelrShren hergestellt werden. — Die
Elektivitat der bei der Plattenmethode verwendeten KahrbSden laBt viel
zu wiinschen iibrig. Es stellte sich z. B. bei Verwendung von Gallensalz-
nahrbSden, Endoagar und Eosin-Methylenblau-Agar heraus, daB von den
augenscheiidich typischen Kolonien nach genauer FrUfung in Wirklichkeit

158

Mikrobiologie der Nebhruzigs-, Gentifi* and Futterznittel.

nur 33% als wirkliche Coli-aerogenes-Organismen bestStigt werden konnten,
— Fur den Gasbildungsnachweis ist gewShnliche Laktosebouillon v6llig
ungeeignet. Tritt in den GtaShrehen mit Brillantgriin-Laktose-Galle'wasser
eine 10% iibersteigende Gasmenge auf, dann kann man bei pastemisierter
Milch mit 89%, bei roher Milch mit 99% Sicherheit auf Vorhandensein echter
Coli-aerogenes-StS-mme rechnen, bei gerii^eren Gasmengen sind die ent-
sprechenden Zahlen 46 bzw. 92%.

K. J. Demeter (Weihenstephan-Miinehen).
Bautenstein, I. und Scharow, L, Mikrobiologische Unter-
suchung von konservierten Friichten tiirkischer
Bohnen. (Konservenindustrie. Nr. 1. 1934. S. 14 — 19.) [Eussisch.]
Beim Aufbewahren von rohen Friichten findet starke Vennehrung der
Mikroorganismen statt, deren Zahl nach 6 Std. 44 000, nach 72 Std. 120 000
auf 1 g betragt. Auf den rohen Friichten wurden am haufigsten gefunden
B. herbicola, B. fluorescens, B. subtilis, B. mesen-
tericus, B. pudidum und Bakterien der Coligruppe, ferner MUeh-
sSurebakterien, die 'wahrend des ganzen technologischen Prozesses vor-
handen sind. Aus aufgeblahten Konservenbiichsen wurden folgende Milch-
saurebakterien isoliert: B. Aderholdi, B. cucumeris fermen-
tati, B. acidi lactic!, Lactobac. plantarum, femer B.
coli, B. subtilis und B. mesentericus. Wie Infizierung mit
Eeinkulturen zeigte, entsteht das Aufblahen der Konservenbiichsen vomehm-
lich durch die Milchsaurebakterien, seltener durch Bakterien der Goli-
Gruppe. B. mesentericus und B. subtilis verursachten kein
Aufblahen. Die Untersuchung der isolierten Kulturen auf ihre Widerstands-
faMgkeit gegen Erhitzung zei^e, da3 sporentragende Aeroben in Konserven-
biichsen Erhitzung bis 120® im Verlauf von 18 Min. ertragen. Milchsaure-
bakterien wurden bei Erhitzung bis 116® wahrend 18 Min, in 2 Fallen von
16 nicht getatet. A. ImSenecki (Leningrad).

Issatschenko, B., Ontschokowa, M., Predtetechenskaja, A. und Lipskaja, T.,
tJber Selbsterhitzung des Kornes. Compt. Bend. Acad.
Sc. U.R.S.S. T. 1. 1934. p. 507—509.) [Eussisch.]

Im Korn wurden wahrend der Selbsterhitzui^ in 1 g Gerste 13 915000,
in 1 g Eoggen 2 613 000 Mikroorganismen gefunden. Die Zahl der thermo-
philen Bakterien steigt wahrend der Erhitzung und kann 4 000 000 auf 1 g
errmchen. Versuche mit sterilisiertem und desinfiziertem Korn, bei einem
Feucht^keitsgehalt von 23,39% zeigten, daB bei der Entwicklung von
Actinomyces im Korn die Temperatur des letzteren im Verlam von
20 — 30 Tagen 41,5® erreichen kann. Ahnliche Versuche mit Asper-
gillus ergaben TemperaturerhShung bis 53,5®. Bei einem Feuchtigkeits-
gdialt des Eoggens von 16,85% stieg die Temperatur des Kornes im Ver-
lauf von 65 Tagen nicht Uber 21,6®. Sterilisierte Samen verschiedener Pflanzen
wurden mit Schimmelpilzen und thermophilen sporenbildenden Bakterien
infizimt, wobei Temperaturerh6hun| bis 68® erfolgte. Unter dem EinfluB
von Mikroorganismen verwandelt sich das Kom in eine schwarze Masse,
der Kohlenhydratgdialt und die Aktivitat der Amylase nehmen ab. Mit
Temperaturerhfihung des Kornes verbundene ph^ologische Prozesse in den
KSmem selbst fSrdem die Entwiddung der Mikroorganismen, die bei der
Selbsterhitzung des Kornes die Hauptrolle spielen.

A. ImSenecki (Leningrad).

Mikiobiologie des Diingers, Bodens, Wassers und Abwassezs.

159

Mikrobioiogie des Dangers, Bodens, Wassers und Abwassers.

Eoftman, M., Die Mikrofauna des Bodens, ihr Ver-
haltnis zu anderen Mikroorganismen und ihre
Rolle bei den mikrobiologisohen Vorgangen im
B 0 d e n. (Archiv f. Mikrobioiogie. Bd, 5. 1934. S. 246—302.)

Nach einem sehr erwunschten LiteraturUberbliek iiber die Protozoen-
forschung in den einzelnen Landern (426 Literaturnununeml) priift Verf.
die bekannte Russell sche Theorie. Bodenproben von verscHedener
Vorbehandlung (Anderung der H-Ionenkonzentration, N-Zusatz) wurden
partiell durcb Toluol oder Warme sterilisiert und toils mit, toils ohne Zusatz
von Protozoen auf Anunoniak- und Nitratbildung untersucbt; aueh direkte
mikroskopische TJntersuchungen mirden dabei durchgefiilirt. JedeMalls
ze^e sich, dafi Gegenwart von Protozoen eher gdnst^ als hemmend wirkte,
was jener Theorie widerspricht.

Direkte mikroskopische Beobachtungen an Bodenaufschlammungen
zeigten das Vorhandensein a k t i v e r Protozoen; es herrschen P 1 a g e 1 -
laten vor, wahrend Rhizopoden und besonders Z ilia ten stark
zuriicktreten. Auffallend ist ihre z. T. aufierst geringe Gr66e (Azoto-
b a c t e r - GrSfiel), wie namentlich beim Vergld<i mit fast gleichen aqua-
tischen Formen festzustellen ist. Eine reine linie von Colpoda, in
sterilen, mit B. subtilis versetzten Boden geimpfte, veranderte sich
bei Anpassung an die terrestrische Lebensweise in GrSBenreduktion, Ver-
anderung von Kern undNahrungsvakuolen, so dafi sie kaum wiederzuerkennen
war. Die Veranderungen waren um so starker, je trockener dw Boden
war. JedenfaUs kSnnen danach die Protozoen im Boden als Bakterienfresser
sieherlich keine so grofie Rolle spielen me im Wasser.

Im HSchstfalle konnten bis 60 000 Protozoen je 1 g Boden festgestellt
werden, noch mehr Cysten, z. B. 26 000 grofie und 63 000 kleine Cysten.
Die Cysten widerstehen teilweise der partiellen Sterilisation dureh antisep-
tische Mittel. Im gleichen Boden stellte Verf. durch unmittelbare mikro-
skopische Untersuchung fest (je 1 g Boden): 290000 Algenzellfragmente,
1 000 000 Algencysten, 540 000 Pilzfragmente, 3 780 000 Pilzsporen, 1 200 000
Aktinomyzetenzellen, an Kokken 994 Millionen unter 0,6 fi, 176 Millionen
von 0,6— 1,0 At, 92 Millionen von 1,0— 1,5 p,, 20 Millionen Uber 1,5 /t, ferner
27 Millionen Stabchen, davon 3 Millionen iiber 1 p dick. Der Vergleieh
zeigt, dafi die Protozoen den Bakterien und anderen Mikroorga^men ge-
geniiber an Masse so zuriicktreten, dafi sie unter normalen Verhaitnissen keine
grofie Bedeutung fiir den Stoflumsatz im Boden haben kSnnen.

Weiterhin finden sich eingehende Angaben iiber die Ziichtu^ und den
Entwicklungsverlauf einer ganzen Reihe von Protozoen (reine Linien, z. T.
auch Reinkulturen) auf fliissigen, halbfliissigen und festen Substraten; es
sei hier auf das Original verwiesen. R i p p e 1 (Gottingen).

Feh4r, D., Untersuohungen iiber die Schwankungen der
Bodenatmung. (Aich. f. Mikrobiol. Bd. 6. 1934. S. 421—435.)

Verf. verfoMe die Bodenatmung von zwei ungarischen WaldbOden
und ein em Freilandboden Iftngere Zeit im Zusammenhang mit einigen anderen
Faktoren. Sie geht vOllig dem Bakteriengehalt und seinen Schwankungen
parallel und ist wie dioser in erster lime dutch das Zusammenwirken von
Temperatur und Feuchtigkeit bedingt. Es tiitt ein sommerliches Maximum
auf. Die Jahresperiode der COg-Entwicklung zeigt den gleichen Verlauf

160

YI. Intemationaler Botanisoher KongreJB.

■wie die Eobertson sche 'Wachstuinskurve. Beim Maximum des Bak-
teriengehalts und der Bodenatmung siokt der Humusgehalt.

Der Ereilandboden (Brache mit Pflanzenwucbs) zeigt genaii dieselben
VerbSltnisse. Verf. glaubt, daB die auf land-wirtschaftlicb genutztcn Flaehen
beobachtete Sommerdepression ein den natlirlichen BSden fehlender, durch
kiinstlichen Eingriff erzielter Kunsteffekt sei; bei den natiirliehen Bdden
schutzt die Klanzendecke die obersten Sehichten vor ubermSBiger Aus-
trocknung. E i p p e 1 (Gdttingen).

YI. Intemationaler Botaniseher EongreB.

Amsterdam, 2. — 7. September 1935.

Der VorbereitungsausschuB des Sechsten Intemationalen Botaniscben
Kongresses gibt eine Eeihe von Themen bekannt, die vorlSufig zur Diskussion
gewablt "worden sind, and zwar in den Sektionssitzungen:

AGE. Agronomie. 1. Gegenseitige Wirkungen von Wurzeln und
Boden. Gegenseitige Wirkungen der Pflanzen. 2. Viruskrankbeiten. 3 a) Die
TJnkrautflora als Indikator fur Bodenverbaltnisse. 3 b) Grasland-Assoziationen.

4 a) Genetik und Zilebtung resistenter Eassen. 4 b) Inzucht. 5. Die Be-
deutung mikrobiologiscker Untersuchungen fur landwirtschaftlicbe Problemc.
6. Die Beeinflussung des Entwicklungszyklus bei Pflanzen.

CYT. Zytologie. 1. Struktur der Chromosomen. 2 a) tiber-
kreuzung versus Konversion. 2 b) Terminologie der Zytologie imd der Gene-
tik. 3 a) Die Paarung der Chromosomen bei Polyploiden. 3 b) Die Eeduk-
tionsteilung der Pilze. 4. Ketten- imd EingbUdung der Chromosomen.

5 a) Die submikroskopische Struktur der Zellwand. 5 b) Vakuom, Chon-
driom, Plastiden. 6. Die Kolloidchemie des Protoplasmas; vitale FSrbung.

GEN. Genetik. la) Experimentelle Mutationen. 1 b) Die gene-
tischen Grundlagen der GrSfie und der Form. 2 a) Uberkreuzung versus
Konversion. 2 b) Terminologie der Zytologie und der Genetik. 3 a) Sexuali-
tat bei Pilzen. 3 b) Eeduktionsteilung der Pilze. 4 a) Genetik und Ztich-
tung resistenter Eassen. 4 b) Inzucht. 6. Systematik und Genetik. 6a) Plasma
und Genotypus in ihren gegenseitigen Beziehungen. 6 b) Letalfaktoren.

MYC. MykologieundBakteriologie. 1. Differenzierungs-
merkmale der Hymenomyzeten. 2. Nomenklatiur der Pilze. 3 a) Sexualitat
bei Pilzen. 3 b) Eeduktionsteilung der Pilze. 4. Biologische Eassen der
Pilze. 5. Die Bedeutung mikrobiologiseher Untersuchungen fur landwirt-
sehaftliche Probleme. 6. Phylogenie und Systematik der Phykomyzeten.

PATH. Phytopathologie. 1. Die biologischen Grundlagen der
Pflanzenquarantane. 2. Viruskrankheiten. 3. Einzelvortrage. 4. Biologische
Eassen der Pilze. 5. Lnmunisierungsfragen. 6. Physiologische Krankheiten.

PH. Pflanzenphysiologie. 1. Photosynthese. 2a) Phyto-
hormone; allgemeiner Vortrag. 2 b) Phytohormone; Einzelvortrage. 3. Oxy-
dations- und Eeduktionsprozesse und Stoflfwechsd. 4. Permeabilitat und
Salzaufnahme. 5. Transport plastischer Stoffe. 6. Die Beeinflussung des
EntmoMungszyklus bei Pflanzen.

SYS. Systematik und Nomenklatur. 1. Einzelvortrage.

2. Caytoniales und Pteridospermae und die Evolution der Angiospermen.

3. Bliitenmorphologie. 4. Die ■weibliehe Fruktifikation und die Phylogenie
der Eoniferen. 5. Systematik und Genetik. 6. Phylogenie und Systematik
der Phykomyzeten.

Abgeschlossen am 8. November 1934.

ZentralUatt for BakL etc. n. Att. Bi 91. No. 8|10.

Ausgegeben am 29. Dezember 1934.

Nachdfuek verhoien^

tJber die Rolle von Fe" und Fe'" in den Garungs- nnd
Oxydationsppozessen der Hefe.

[Aus dem ■wissenschaftlichen Forscbungslaboratorinm der I. Staats-Hefen-

fabrik in Moskau.]

Von A. Malkow.

Hinsichtlich der Rolle des Eisens im ProzeB der alkoholischen Garung
ist^) festgestellt ■worden, daU mit dor Erhohung des Eisengebaltes in der
Nahrflussigkeit die Menge des sich bildenden Alkohols sinkt.

In der vorliegenden Arbeit interessierte uns die Frage tlber die Rolle
der Oxydul- und Oxydform des Eisens in den GSrungs- und Oxydations-
prozessen.

Methodik.

Dio Versuchsgdrungen mirden mit synthetischen Nahrfliissigkeiten von
folgender Zusammensetzung durchgefiihrt: 60 g Glykose, 6,0 g Pepton,
2.5 g MgSO,, 250 cem destilliertes w asset. Die erhaltene Fliissigkeit ■wurde
mit 25 com 0,66 m Na 2 HP 04 und 25 cem 0,66 m KH^POj verraisebt. Nach
Zufugung von 13 mg Fe" oder Fe"* in Gestalt von 'FeS 04 Oder Feg(S 04)3
wurdc die Kahrfliissigkeit mittels destillierten Wassers bis auf 650 com ge-
bracht.

Die Eisensalze waren vor der Einftthrung in die Xiihrflussigkeit mit
NaOH-Losung in Anwesenheit von Seignettcsalzlosung bis zur neutralen
Reaktion neutralisiert. Zu jedem Versuch -vnurden je 500 cem Fliissigkeit
genommen.

Im Laufe der Arbeit wurde bestimmt;

1. Eisen nach der Mothodc von®) A. Malkow.

2. Zueker nach der Methode von Bertrand.

3. Alkoliol gravimetrisch.

4. Die Hefemenge dutch Filtrieren eines bestimmten Volumen der ver-
gorenen Fliissigkeit dureh gewogene Filter und Trocknen derselhen mit der
Hefe bis zur Gevdehtskonstanz.

5. Die Triebkraft der Hefe nach der Methode des Deutschen Syndikats
der Hefefabrikation.

Bei der Berechnung des Oxydations- und Skonomischen Quotienten
der Versuchsgarungen bedienten wir uns der friiher von®) uns abgeleiteten
Gleichungen.

1) Maikov, A., XJkrainsky. Chemitschny Joiimal. 7,, -wiss. Teil. 73. 1932;
Chem, Zentralbl. II. 1612. 1933.

*) Malkow, A., Joum. of the Chem. Ind. 8. No. 1. 70. 1931. [Russisch.];
Chem. Zentralbl. 2. 280. 1931.

3) M a 1 k o w , A., Bioch. Zeitschr. 262. 186. 1933-

Zweite Abt. Bd. 91.

11

J.62 -A- M a 1 k o ■w , Fe" und Pe"* in den Garungs- und Oxydatiousprozessen.

Experimenteller Teil.

1. Der EinfluB von Fe" und Fe‘" auf den Garungs- und Oxydations-
prozefi.

Versuch 1.

Zur Mhriliissigkeit sind 10 g Hefe erster Generation hinzugefiigt. Die
Garung erfolgte unter Durchliiftung der Fliissigkeit im Laufe von 1% Std.
bei + 300 G.

Tabelle 1. Auf 100 ccm berechnet.

Nr.

PH

Vergoxene

Glykose

Erhaltene Hefe
in mg

auf Trockensub-

Triebkraft
der entstandenen
Hefe

Fe

in g

stanz berechnet

in Min.

in mg

1

1 6,12 *

1,143

! 345

59 ’

Fe" — 2,22

2

1 6,12

1,410

I 475

62

Fe"— 2,22

Die Ergebnisse des ersten Versuchs zeigten den gunstigen EinfluU des
Eisenoxyds auf die Garung und Vermehrung der Hefe, wahrend die Garung
in Anwesenheit des Eisenoxydulsalzes bei sonst gleichen Bedingungen schlech-
tere Resultate ergab.

Versuch 2.

Die Bedingungen sind dieselben 'wie beim Versuch 1. Die Garung dauerte
sys Std.

Tabelle 2. Auf 100 ccm berechnet.

!

PH

Fe

in mg

Ver-

gorene

Glykose

in g

Erhaltene
Hefe in mg
auf Trocken-
substanz
berechnet

Er-

haltener

Alkohol

in o.G

Triebkraft

der

entstandenen

Hefe

in hlin.

Oxy-

dations-

Quo-

tient

Oko-

nomi-

scher

Quo-

tient

1

2

6,10

6,15

Pe"— 2,22
Fe" — 2,22

3,36

3,68

487

487

1,25 1 54

1,00 63

0,177 ! 43.48
0.340 28,13

1

Der zrweite, unter gleichen Bedingungen ausgefuhrte Versuch zeigte,
daB die Garung in Anwesenheit von Fe"" mit einem hsheren Oxydations-
<]^uotienten erfolgte als die Garung mit Fe". "Was den Skonomischen Quo-
tienten anbetrifft, so bewegte sich derselbe, vde zu erwarten war, in um-
gekehrt proportionaler Abhangigkeit vom Oxydationsquotienten.

Versuch 3.

Die chemische Zusammensetzung der Nahrflussigkeit ist die gleiche
wie in den vorhergehenden Versuehen. Die Garung erfolgte ohne Durch-
leiten von Luft im Laufe von 3 Std. Als Aussaatmaterial wurde Hefe dritter
Generation genommen.

■William C. Snyder, Notes on Fusaria of the Section Martiella. 163

Tabelle 3. Auf 100 ecm bereehnet.

Nr.

Fe

in mg

Vergorene

Glykose

in g

Erhaltene Hefe
in mg

auf Trockensub-
stanz bereehnet

Erhaltener

Alkohol

in %

Oxy-

dations-

quotient

Oko-

nomischer

Quotient

1

2

Fe" — 2,0
Fe • — 2,0

3,35

3,35

234,7

273,9

1,00

0,68

17,91

13,97

Die Daten des Versuchs bestatigen die vorbergehenden Beobachtungen.
Somit fuhrte Fe"* aucb unter den Bedingungen der GSrung obne besondere
Durchluftung zu einer geringeren Alkoholbildung und grSBeren Hefebildung
als der Versuch mit Fe". Gleichzeitig ergab die Gfixung mit Fe"' einen
hbheren Oxydationsquotienten nnd einen niedrigeren okonomisehen Quo-
tienten als die Garung mit Fe".

Znsammenfassnng.

1. Der Zusatz gleicher Mengen von Fe" oder Fe"' zu der Nahrlosung
fUhrt

a) zu einer Verringerung der Menge des wabrend der Garung gebildeten
Alkobols im Falle von Fe'" im Vergleieb mit Fe";

b) zu einer absoluten ErbSbung der Menge der •wabrend der Garung
gebildeten Hefe im Falle von Fe"' im Vergleieb mit Fe".

2. Die Garung in Anwesenbeit von Fe"' ist, unabbangig davon, ob die
garende Flttssigkeit durcbliiftet wird oder niebt, mit einem bbberen Oxy-
dationsquotienten und einem niedrigeren bkonomischen Quotienten ver-
kniipft als die Garung mit Fe".

3. Die nacb der Garung mit Fe'" erbaltene Hefe besitzt eine geringere
Triebkraft als die mit Fe" gegorene Hefe.

Naehdruck verhoten*

Notes on Fusaria of the Section Martiella.

By WiUiam C. Snyder.

National Research Fellow in the Biological Sciences for the year ending Dec. 1, 1934.

Now Junior Pathologist, Division of Plant Pathology, University of California,
Berkeley, California, U. S. A.

With 5 Figures in the Text.

Recently occasion was bad to study taxonomically certain members
in tbe Section Martiella of tbe genus Fusarium Link. Altbougb tbe pri-
mary interest lay in tbe parasites of pea and of bean belonging to this section,
attention also was given to related or similar fungi in order to draw com-
parisons between them and the pathogens. Some of the fungi were isolated
from diseased plants and tested for pathogenicity at the University of Wis-
consin and later to the University of California. Others were received from
various sources in culture, and a few were isolated in Europe. It is tbe pur-
pose of this paper to record additional information upon the taxonomy of
these Fusaria and to report observations useful in arri'nng at their deter-
mination.

164

William C. Snyder,

Changes in nomenclature have been made in those cases "where it has
been necessary in order to conform with the revised and simplified taxo-
nomic scheme for the Section Martiella, as previously outlined (19), and
which will appear in the second part of the Fusarium-Monographie of
"Wollenweber.

The parasitic Fusaria of Section Martiella are of special interest o'wing
to the fact that the number of active pathogens upon otherwise healthy
gro"wing plants is somewhat limited in this Fusarium group. Some recognized
species of Section Martiella, namely F. s o 1 a n i (Mart.) App. et "Wr. and
F. javanioum Koord., are sometimes associated "with decaying plant
parts. The former is known more or less throughout the world and is often
found as a common soil organism; the latter apparently occurs more fre-
quently in warm countries including the tropics. F. alluviale Wr. et
Eg. might also be limited in its distribution. F. coeruleum (Lib.) Sacc.
is an active wound parasite (18) of the potato tuber. But with this excep-
tion, and relatively few others, these Fusaria are generally found in plant tis-
sues that have been weakened through age or some agency, organismal or
environmental, unfavorable to the best development of the plant. This is
in contrast to the virulent pathogenesis of certain Elegans Fusaria "wich
may kill the host plant rapidly even when the latter is placed under highly
favorable conditions for active growth (10). No attempt will be made to re-
view here the abundant literature dealing with Fusaria of the Section Mar-
tiella as associated with plant disease, since a recent summary has been
made by Wollenweber (20), but only to emphasize that the Section
contains cosmopolitan soil fungi, in the tropics (12) as well as in temperat
regions, which may be expected on plant parts under circumstances favo-
rable to decay. Indeed. F. s o 1 a n i is frequently isolated from plants
diseased primarily as a result of invasion by wilt fungi of Section Elegans,
as is attested by the fact that many cultures received for diagnosis have been
found, upon making single-spore cultures, to contain a mixture of a parasite
belonging to Section Elegans, and F. s o 1 a n i.

The fungi of Section Martiella dealt "with primarily in this paper are of
particular interest because of their parasitism for peas, beans, and potato, re-
spectively. It is meant to be noted however, that even these parasitic Mar-
tiella Fusaria may not exhibit the virulence and specificity that many of
the Elegans Fusaria possess.

Aknowledgements.

The writer wishes to express his grateful appreciation to the National Research
Council of America for the opportunity of undertaking the study which is recorded
here in part; to Director Dr. R i e h m of the Biologische Reichsanstalt, Berlm-Dahlem,
Germany, for his generous disposal of the facihties of the mstitute to the interests of
the study; and to Dr. H. W. Wollenweber, under whose guidance the study
was made, for the valuable suggestions frequently given during the course of the work
and in the preparations of the manuscript. The writer is indebted to Dr. H. N. H a n -
sen. Division of Plant Pathology, University of California, under whose direction
several hundred single-spore isolations w^ere made in a check upon the purity and
constancy of type of aU American Fusaria employed in the present work; to Dr.
Otto A. Reinking, and Dr. H. Richter, who read the manuscript; and
to Dr. R. W. Goss, Department of Plant Pathology, University of Nebraska,
and Dr. Joha. Westerdijk, Baam, Holland, for Fusarium cultures. The
writer is also pleased to express his gratitude to Dr. J. C. Walker, Department of
Plant Pathology, University of Wisconsin, whose interest in the study has been conti-
nually a source of encouragement.

Xotes on Fusaria of the Section Martiella.

166

Pea Root Rot.

Fusarium root rot of pea, P i s u m sativum L., caused by F.
s 0 1 a n i (Mart.) App. et IVr. v. M a r t i i (App. et Wr.) Wr. f. 2, n. c. :
syn. F. M a r t i i App. et Wr. v. p i s i F. R. Jones.

During the course of investigations on pea wilt (14, 16), carried on un-
der the direction of J. C. Walker at the University of Wisconsin, 1929
— 1932, the junior author frequently had the opportunity to isolate Fusaria
associated with a cortical decay of the lower stem and root of diseased peas.
A number of the isolants, derived from plants sent in for disease diagnosis
by pea growers in various sections of the United States, were tested for
pathogenicity and in most cases were found to produce a root rot similar
to that described by F. R. J o n e s (9) for F. M a r t i i v. p i s i. In cer-
tain cases however, disease symptoms were obtained which did not seem
typical of Jones root rot, and the isolants, dealt with in the following
discussion on taxonomy, appeared to differ cultiu-ally from F. Martii
V. p i s i. The following year in connection with pea disease studies in the
Division of Plant Pathology

at the University of Cali- 1 ^ \

fornia, pathogenicity tests 1 ff 1

were repeated using type
strains in comparison with
a California isolation of the
root rot fungus. These pa-
thogenic single-spore cultu-
res of pea root rot Fusaria
constituted the basis of the
present taxonomic studies
made at the Eiologische
Reichsanstalt, Berlin-Dah-
lem, Germany.

Pathology.

Root rot of pea has been
characterized by J o n e s (9)
as a cortical decay of the
underground portion of the
plant, usually beginning at
the base of the stem, a re-
gion found most susceptible
to invasion. The cortical
decay sometimes involves
the entire underground part
of the plant (Fig. 1), and
is reddish brown to very
dark brown in color. Dis-
integration of the ■fesue J>£g_ Plants of the pea variety “Bruce”, 5 weeks
lOllO'Wing an attack of the after planting in soil inoculated with strain No. 140
fungus may sever the stem, from Indiana of F. s o l a n i V. Martii f . 2. The
from the root causing the are very dark brown to almost black and involve

cortex of the entire underground portion of the
death of the plant, although, Yhe test and photograph were made in there-

under certain conditions new partment of Plant Pathology, University of Wisconsin.

166

William C. Snyder,

white roots sometimes emerge from the lesion and carry the plant to ma-
turity. When the decay reaches the vascular system the fungus has been
observed to grow upward in the x’ylem, beyond the zone of external
symptoms, producing a bright red or reddish brown color in the vascular
elements. This vascular discoloration has led to its confusion (16) with
that of the wilt disease, caused by F. orthoceras App. et Wr. v.
p i s i Linford. However, the disease is essentially a cortical rot, producing
vascular discoloration only late in the development of the disease as a
secondary symptom.

Host plants found susceptible to infection have been listed by Jones
asPisum sativum L. var. arvense, P. sativum var. s a c -
charatum, P. sativum var. umbellatum, P. elatius
Bieb. and P. jomardi Schrank. Lathyrus odoratus was only
slightly infected.

Although the pathogen appears to occur in most of the older pea grow-
ing regions of the United States and has been isolated by the writer from
diseased plants from the major pea growing areas from California to Mary-
land, the economic importance of the disease is apparently confined to re-
gions having a 'high average soil temperature during the growing season.
Jones (9) reports that the optimum temperature range for the develop-
ment of the disease extends from 24® to 33® C. This agrees closely with the
optimum temperature for mycelial growth of 20® to 34® C. The optimum for
the disease is seen to be above the optimum soil temperature for growth
of the pea plant, which Linford (10) found to be from 18® to 24® C.

It is possible that the disease of peas referred to in Europe under the
heading of “St. John’s disease”, and which seems to be most severe during
hot dry seasons, is due in part to the presence of the pea root rot Fusarium
under discussion. In the summer of 1934 diseased plants were collected
from several fields in central and northern Germany, showing symptoms
of what was taken to be St. John’s disease, and cultured. The results of this
simvey will be reported elsewhere; it suffices to mention here that a fungus
similar in morphology to the American root rot Fusarium, described here
in as F. s 0 1 a n i v. M a r t i i f . 2, was frequently isolated. The probabi-
lity that this fungus plays a r61e in the trouble known as St. John’s disease,
especially in seasons marked by the high temperatures and scarcity of
precipitation that characterized the 1934 summer, is also given support by
the work of W e n t (17), who attributed the cause of St. John’s disease in
Holland during the 1931 and 1932 seasons to a number of Fusaria including
F. s 0 1 a n i v. M a r t i i.

Taxonomy.

Although some variability in the pathogenicity of Fusarium so-
la n i V. M a r t i i f. 2 (F. M a r t i i v. p i s i) has been reported (9),
which might explain some differences in disease expression, apparently no
search for morphologic variability of pathogenic cultures of the fungus has
been made. Observations in this direction, reported here, have been made
upon one or more single-spore tested cultures from California, Idaho, Wis-
consin, Indiana and Maryland, and upon a culture received from T o g a s h i
(16) which in turn was originally obtained from F. R. Jones.

All cultures were transferred at the same time to differential media
from cultures of the same age. When examined at various intervals the
fungi were found to fall into two principal types, based upon morphologic

Notes on Fusaria of the Section Martiella.

167

and supplementary minor differences in macroscopic characters. These two
types, represented by the California culture (No. 47) and the Indiana culture
(No. 140), both apparently in high culture since pionnotal and sporodochial
masses of conidia occurred abundantly upon the various media, differed suffi-
ciently in spore measurements to raise the question of "whether or not they
•were the same fungus. These measurements, taken over a period of 65 days
and upon the different media, averaged as follows in the first transfer series :

Average measurements^), California culture, No. 47, Series 1. Conidia:

0; septate 8.6 x 3.3 ( 5.0—14.0 X 2.3— 4.3) to 17%

1: „ 16.6 X 3.5 (11.0—20.0 X 3.0— 3.8) to 5 %

2: „ 23.4 X 3.6 (20.0—28.0 X 2.0— 4.2) to 3%

3: „ 30.1 X 4.1 (20.0—41.0 X 3.6— 4.5) to 86%

4; „ 46.1 X 4.7 (40.0—52.0 X 4.4— 5.0) to 4%

Chlamydospores :

0: septate 8.0 X 8.0 (7.0 — 9.0 X 7.0 — 9.0)

Average measurements, Indiana Culture, No. 140, Series 1.

Conidia :

0: septate 7.7— 3.3 ( 6.0—14.0 X 2.5— 4.4) to 13%

1: „ 21.0 X 4.0 (16.0—24.0 X 3.5—5 0) to 4%

2: „ 28.3 X 4.7 (27.0— 30.0 X 4.2— 5 3) to 6%

3: „ 31.4 X 4.7 (23.0—42.0 X 3.7— 6.5) to 89%

4: „ 43.4 X 5.1 (38.0—47.0 X 4.7— 6.3) to 3%

Chlamydospores :

0: septate 8.0 X 8.0 ( 6.0 — 9.0 X 8.0 — 9.0)

1—2: „ 11.0 X 11.0 (10.0—12.0 X 10.0 X 12.0)

In both cases the 3-septate conidia were predominant on all media, the average
fluctuation for culture No. 47 being 24.3 — 36,3 X 3.7 — 4.5, and for culture No, 140,
2(5.0 — 36.0 X 4.3 — 6.1, the latter averagmg httle more than a half a micron wider
than the former. On most media 4-septate conidia were rare.

A comparison of the fungi with the original description of the pathogen
sho-wed that culture No. 47 was in very close agreement -with J o n e’s Fu-
sarium (9), characteristic measurements of which, as given in his Table 1 for
3-septate conidia, average 32.0 x 4.1. Culture No. 140, however, with
an average width of 4.7 for 3-septate conidia agreed more nearly 'with
F. s 0 1 a n i (Mart.) App. et Wr. v. m i n u s Wr., and appeared to be related
to but distinct from No. 47. These cultural stages are illustrated in Fig. 2
and 3, a — f.

Although the appearance of the cultures indicated that they were in
high culture, the technique for bringing the Fusaria into “Hoehkultur”
as originally described by A p p e 1 and Wollenweber (1), was applied
as a matter of routine followed in the current studies. The results, illustrated
by the measurements obtained, and the drawings in Fig. 2 and 3, g— k,
show an unsuspected ■wide range of morphological variability, and indicate
that cultures No. 47 and No. 140 are of the same fungus.

Average measurements, Calif orma culture. No* 47, Series 2.

3*septate conidia:

Ltupine stem .... 35.8 X 4.7 (29.0 — 41.0 X 4.3 — 4.5)

Potato plug .... 41.1 X 4.6 (34.0—47.0 X 4.2— 4.7)

Piobinia root .... 41.2 X 4.7 (86.0 — 47.0 X 4.5 — 5.0)

Potato agar .... 40.6 X 4.5 (36.0 — 48.0 X 4.3 — 4.8)

Oatmeal agar .... 39.8 X 4.8 (29.0—42.0 X 4.o — 6.0)

Average of all . . . 39.7 X 4.6 (30.8 — 46.0 X 4.4 — 4.8)

4-septate conidia:

AU media 43.8 X 4.7 (43.0—52.0 X 4.4— 6.0)

^) All mecksurements are given in microns throughout this paper.

168

William C. Snyder,

Fig. 2 (Explanation p. 169).

Notes on Fusaria of the Section Mai tie Ua.

169

Average measurements, Indiana culture No. 140, Series 2.

3 - septate conidia:

Potato plug .... 38.4 y 4.8 (31.0 — 44.0 X 4.5 — 5.3)

Elm twig 43.9 / 4.9 (3«.0— 68.0 X 4.7— 5.2)

Potato agar .... 39.9 X 4.9 (33.0—47.0 X 4.5— 5.3)

Oatmeal agar .... 37.0 X 4.9 (31.0 — 41.0 X 4.8 — 5.2)

Synthetic agar . . . 40.2 X 4.9 (35.0 — 48.0 X 4.8 — 5.0)

Average of all ... 39.9 X 4.9 (35.2 — 47.0 A 4.6 — 5.2)

4- septato conidia:

All media 48.5 X 6.0 (42.0 — 61.0 X 4.6 — 5.4)

All of the above measurements were made of conidia from pionnotes or
sporodochia during a period of several weeks. Up to 100% of 3-septate co-
nidia were obtained from both cultures No. 47 and No. 140, and in certain
instances, especially on oatmeal agar, up to 34% 4-septate conidia were
found.

It is interesting to note that in the second series the average spore length
of 3-septate conidia jumped nearly 10 /jl with both fungi while the diffe-
rence of 0.6 [i between the average widths was narrowed to 0.3 //. Later,
however, culture No. 47 yielded conidia which had the following measure-
ments: 3-soptate: 43.8 x 4.9 (32.0—50.0 x 47—5.2) 4- and 5-septate:
47.6 X 4.9 (45.0—51.0 x 4.7— 5.0). These measurements agree atoost
exactly with the average measurements of 3- and 4-septate conidia as
obtained from culture No. 140 in series 2. The occurrence of 5-septate
conidia was also observed in this series, no reference to which was made
in the original description. In series 3 a high culture was obtained, spore
averages for which are reported in Table 1, that was in full morphologic
agreement with F. solani v. Martii (Table 2).

Six other pathogenic strains of the pea root rot Fusarium from different
sources were brought into high culture for comparison with the two types
first selected and represented by cultures No. 47 and No. 140. In the first
series the average measurements of 3-septate conidia came up to 40.0 X 5.0,
and 4-septate conidia which appeared in greater numbers in this series averaged
48.8 X 5.0. These figures were in agreement with measurements also ob-
tained with the culture received from T o g a s h i , originally obtained by
him from Jones, and which was subjected to the same treatment: 3-sep-
tate conidia, second series 37.0 x 4.9, 4-septate conidia, 50.0 x 6.3.

During the period of observation upon this collection of cultures, covering
about 6 months, it was the experience that the morphology of the pea
root rot Fusarium became fairly uniform after brought into high culture
and maintained there, and that the differences between strains which appeared
distinctive in the original cultures became insignificant when all cultures
were subjected to an uniform and standardized procedure. The kind of me-
dium, age of the culture, and other factors yielded differences which brought

Pig. 2. Macroconidia, 1000 X, from pionnotes and sporodochia of the California
strain, No. 47 of the pea root rot fungns, F. solani Martii f. 2, in different
stages of culture, a — f, conidia from series 1. a, sporodochiuna on elm stem, after -8
days; b, sporodochium on elm stem, after 66 days; c, sporodochmm on h^ley ear,
after 26 days; d, pionnotes on oatmeal agar, after 28 days; e, pionnotes on potato agar,
after 23 days; g — conidia from series 2. g, pionnotes on oatmeal agar, after 2- days ;
h, sporodochium on lupine stem, after 22 days; i, pionnotes on potato agar, aftor 8
(Jays, j — k, conidia from series 3. j, sporodochium on Bobinia root, after 48 days;
k, pionnotes on oatmeal agar, after 11 days.

170

William C. Snyder,

Fig. 3 (Explanation p. 171).

Notes on Fusaria of the Section Martiella.

371

out the range of the fungus in respect to conidial size, septation and color,
all of which influence the average condition. Table 1 shows the range in
spore measurements of the California isolation of the root rot fungus as
obtained in different stages of culture. Parallel series with the Indiana
isolation yielded a similar condition of high culture, with spore measure-
ments in series 3 of the same order as that obtained for the California
culture.

Table 1.

Kange in average measurements of 3-, and 4-, and 6-septate conidia occurring
in different culture series started from the same single spore culture. No. 47 from Cali-
fornia, illustrating the transition into high culture.

Source
of Conidia

Average measurement e of 3-, 4-,
and 6-septate maeroconidia

0/

0

Potato stem

23 days

3 : 30.0 X 3.9 (27.0—36.0 X 3.5— 4.3)

68

series 1

4: — —

0

sporodochium

5: — —

0

Lupine stem

22 days

3: 3.5.8 X 4.7 (29.0—41.0 X 4.3— 5.0)

63

series 2

4: 40.0 X 4.8 —

1

sporodochium

5: — —

0

Bobima root

22 days

3: 44.4 X 6.0 (39.0—60.0 X 4.7— 5.3)

82

series 3

4: 50.7 X 6.1 (47.0—58.0 X 4.8— 6.4)

13

sporodochium !

6: 62.0 X 6.0 —

2

Bobinia root

48 days

3; 46.0 X 4.7 (36.0—50.0 X 4.6— 5.1)

47

series 3

4: 61,6 X 6.0 (47.0—60.0 X 4.8— 6.2)

40

sporodochium

6: 67.0 X 5.1 (53.0—61.0 X 5.0— 5.3)

5

In series 4 no essential variation from the results in series 3 was noted,
indicating that the averages obtained in series 3 might be considered nor-
mal measurements for high culture of the pea root rot fungus, with the me-
thod used. It is expected that by special treatment spores of still larger
dimensions and with higher percentages of 4- and 6-septate conidia would
be obtained. However the measurements in Table 1 show a fluctuation in
spore size that may be expected under ordinary conditions with this fungus,
and bring out its similarity to F. s o 1 a n i v. M a r t i i._

It deserves to be emphasized that all of the morphological data recorded
here on the strains of the pea root rot Fusaxium are based upon conidia
from pionnotes and sporodochia. None of these cultures were in the “Ab-
kultur” stage characterized by mycelial growth and a scarcity of maeroconidia,
as encountered with a culture of the bean root rot fungus which is dealt with
later in this paper. All cultures had been recovered relatively recently from

Fig. 3. Msicroconidia, 1000 X, from pionnotes and sporodochia of the Indiana
strain. No. 140, of the pea root rot fungus, F. solani Martii f. 2, in different
stages of culture, a — ^f, conidia from series 1. a, sporodochium on elm stem, after 36
days; b, sporodochium on elm stem, after 65 days; c, sporodochium on barley ear,
after 65 days; d, pionnotes on oatmeal agar, after 12 days; e, pionnotes on potato
agar, after 28 days; f, pionnotes on synthetic agar, after 36 days, g — ^i, conidia from
series 2. g, pionnotes on oatmeal agar, after 9 days; h, sporodochium on potato plug,
after 8 days; i, pionnotes on potato agar, after 9 days, j — ^k, conidia from series 3.
j, sporodochium on elm, after 12 days; k, pionnotes on oatmeal agar, after 13 days.

172

William C. Snyder,

diseased peas in connection with pathogenicity tests, except where otherwise
noted, and were normal cultnres in the usual sense of the word. It was there-
fore of special interest to the writer to observe the transition of s p o r o -
dochial conidia from those shown in Fig. 2 and 3, a— f, to those
in Fig. 2 and 3, g — k, and also recorded in Table 1. Whether the explanation
lies entirely in the method in which the cultures were handled, or is to be attri-
buted in part to the environmental factors of light and temperature which
prevailed during the study, is not certain. It seems that there can be no
question about the authenticity of the cultoes, owing to the fact that they
were derived from single spores from several tested isolants, and that all be-
haved in the same manner to the cultural treatment.

Table 2.

Comparative size and frequency (®o) of 3-, 4-, and 5-septate macrooonidia of
certam Martiella Fusaria. All values represent average measurements from sporo-
dochia or pionnotes.

Fusarium

3-septate

{%)

4-septate

{%)

5-septate

(%)

F. solani v. minus^)
F. solani v. Martii

30 X 4.3 (78%)

33 X 4.7 (]8%)

36 X 4.8 ( 1%)

f. 1

F. solani v. Martii

39 X 3.0 (67%)

46 X 5.2 (25%)

49 X 3.3 ( 4 O 0 )

f. 2, n. c

F. solam v. Martii

38 X 4.8 (81%)

48 X 5.1 (17%)

52 X 3.1 ( 2%)

f. 2, n. c.^) . . .

F. solani v. Martii

43 X 4.9 (66%)

51 X 5.1 (26%)

64 X 6.1 ( 30 ^)

f. 3, n. c

44 X 5.0 (46°i)

44 X 5.2 (32%)

49 X 6.1 (38%)

66 X 6.2 ( 2%)

65 X 3.5 (23%)

F. solani v. Martii .

50 X 5.3 (43%)

F. solani

34 X 3.6 (64%)

42 X 3.6 (23%)

46 X 6.8 ( 5%)

F. solani v. eumartii

38 X 5.2 ( 6%)

48 X 5.4 (18%)
and O-septate

69 X 5.8 ( 54 O 0 )

67 X 6.0 ( 8%)

The -writer is indebted to Dr. H. W. Wollenweber for the average mea-
surements of those fimgi listed other than F. solani v. Martii f. 2, and f. 3,
and F. solani v. eumartii.

These averages represent only those measurements obtained when the fungus
was in high culture (see Table 1), and therefore do not include averages of the small
conidia shown in Fig. 2 and 3, a — f, but which are contained in the measurements
immediately precedmg these.

A comparison of the pea root rot Fusarium with closely related Fusaria
shows that its spore measurements average too large to be included in F.
solani v. minus, unless the diagnosis be based only upon small coni-
dial types, but agrees well with those of F. s o 1 a n i v. M a r t i i f. 1 Wr.
(F. M a r t i i v. m i n u s Sherb.). F. s o 1 a n i v. M a r t i i f. 1 is a com-
mon soil fungus found both in temperate and tropical regions (11, 12), differ-
ing from F. solani v. Martii in characters considered only of form
value, principally, in a lower septation. A study of this fungus may justify
later its synonymy with F. s o 1 a n i v. Martii, as it is not characterized
by any special parasitism. The pea root rot fungus is distinguished from
F. solani v. Martii f. 1 upon the basis of its pathogenesis for pea.
The pea Fusarium in high culture closely approaches the size and septation
of F. solani v. Martii and the bean root rot fungus described by
Burkholder (2), found to be morphologically identical with it, but it

Notes on Fusaria of the Section Martiella.

173

differs also from both of these in its pathogenicity. The similarity in the
morphology of these Fusaria is illustrated in Fig 4, and average spore mea-
surements given in Table 2, may be compared to those for the pea fungus
shown in Table 1.

Since Burkholder (2) found the bean Fusaria would not attack
pea, and because of the distinctive parasitism of the pea Fusai'ium and cer-
tain of its minor characters, the pea fungus is placed in this paper as a new
form, forma 2 , of the trinomial F. s o 1 a n i v. M a r t i i . which
recognized member of the Section Martiella it closely resembles morpho-
logically.

Description of the fungus.

The following description for the fungus Fusarium solani (Mart.)
App. et Wr. V. M a r t i i (App. et Wr.) Wr. f. 2. n. f.. was given by J o n e s
(9j under the name Fusarium Martii App. et IVr. v. pisi (new
var.):

„Aerial mycelium short, white or grayish, sometimes absent when
spores are abundant. Pseudopionnotes or sporodochia methyl prussian, zinc,
or invisible green, sometimes avellaneous when young. Macroconidia mostly
3-septate, 27 — 40 x 4.0'-) — 4.5 /n, nearly uniform in diameter, typically
more curved toward the apex; niicroconidia present, not abundant. Chla-
mydospores present in mycelium and in older spores; in mycelium inter-
calary or terminal, singly or in chains, 8 — 10 /t in diameter. Selerotia absent
or very rare on old rice cultures only.

Pathogenic in varying degree upon Pisum sativum.

Differs from F. s o 1 a n i v. Martii (F. m a r t i i) in ha^^ng smaller
spores, and from F. s o 1 a n i v. Martii f. 1 (S h e r b a k o f f’s F.
Martii v. minus) in the smaller diameter of its spores®), comparative
scarcity of selerotia, and in the predominance of green and blue color in
conidial masses.”

In addition to the wide range in spore dimensions reported in the pre-
sent paper, striking contrasts in color have been noted. Jones noted
that the predominant color of cultures of the fungus was the green to blue
imparted by the conidial masses, although on potato dextrose agar a vina-
ceous coloration is often produced in the substrate. It should be added that
on certain media, such as oat agar and Brow' n's agar some strains of the
fungus produce various shades of brown in the medium, sometimes quite
dark. Also, two isolations of the fungus, one from Massachusetts and the
other from Idaho, developed a pimple or lavender pigmentation of such in-
tensity as to suggest another fungus, although also proven pathogenic on
peas. On potato plug in the first series there were no spore masses, but the
plug was covered with a deep, dark purple mycelium, and on potato dextrose
likewise a very dark lavender mycelial growth covered the surface of the
slant which bore no conidial masses, and the medium ranged from a bright
red-orange to almost blackish lavender. Examination of the slant revealed

In the original paper the width is given as o — 4.5 {i, hut this appears to be a
t 3 rpographical error. It is assumed it shoiild read 4—4.5, since in an accompanying
table giving diaracteristio spore measurements for the fungus the width in no case
goes above 4.5, and the absolute range is reported from 4 to 4.5. Similar measure-
ments were also obtained by Togashi (15) upon the strain sent him by J ones.

*) The results reported in the present paper make these distinctions in spore
size no longer valid.

174

William C. Snyder,

an abundance of dark lavender crystals which had accumulated on the sur-
face. These crystals in the presence of acid took on a vinaceous red, or rust
color. A similar production of pigment, of somewhat less intensity, occur-
red upon other media upon which these two strains were grown, and distinctly
set them apart from the other strains in which the green and blue pigmen-
tation of the conidial masses accounted for the predominate color of the
cultures. However it is of interest that in subsequent series, when brought
into Mgh culture this striking difference in pigmentation disappeared,
and all cultm'es were characterized by cream or green to blue pionnotes
or sporodochia. These observations are in support of other recent work (14)
in which it has been shown that too much emphasis should not be placed
upon color developed in culture, owing to the wide range of colors which
may be obtained from the same pure culture.

Fusarium solani (Mart.) App. et Wr. var. M a r t i i (App. et
Wr.) forma 2 n. c. (icon, of fig. 2 et 3).

Syn. Fusarium Martii App. et Wr. \ar. pisi F. R. Jones: Stem
and root rot of peas in the United States caused by species of Fusarium. Joum. Agr. Res.
Vol. 26. 1923. p. 459—476, ic.)

Fungus a forma 1 recedit praesertim parasitismo contra P i s u m
sativum, cui morbum pemiciosum affert, primo caulim subterraneum
penetrans, dein basim plantarum infectarum putrefaciens et necans. Macro-
coiiidia 3-, rarius (ca. 17%) 4-. rarissime (2%) 5-septata:

3: 3ft X 4.8 plerumque 30—46 x 3.9 — 5.0 (20 — 58 X 3.5 — 5.5),

4: 48 X 5.1 plerumque 40 — 62 X 4.7 — 6.3 (38 — 61 x 4.4 — 6.5),

5: 52 X 3.1 plerumque 48—67 X 4.9— 5.3 (45—60 X 4.7— 5.5).

Habitat parasitice inPiso sativoL. in America boreali et Europa
centrali^).

Bean Boot Rot.

Fusarium root rot of bean, Phaseolus vulgaris L., caused
by F. solani (Mart.) App. et Wr. v. Martii (App, et Wr.) Wr. f. 3,
n. c. ; syn. F. Martii App. et Wr. v. phaseoli Burk.

The dry root rot of bean, found in most bean growing regions of the
United States, and reported to occur in Europe®), is frequently the cause
of heavy crop losses. The general occurrence of the disease and its patho-
logy and etiology, are similar in the essential respects to the Fusarium root
rot disease of the pea. However since Burkholder (2) found the bean
pathogen would not attack pea. it must be considered at least physiolo-
^cally distinct from the pea Fusarium. Cultures of the fungus used in the
following taxonomical observations include a sub-culture of the Burk-
holder strain as deposited in the Centraalbureau voor Schimmelcultures,
Baarn, Holland, and fresh isolations from root rot infected beans from
western United States.

Since the completion of this manuscript, F. solani v. Martii f. 2 has
been found by the writer in Germany. Inoculation trials have proved the pathogeni-
city of the German strain of the fungus, isolated in the summer of 1034,

*) O g 1 1 V i e , L., Observations on the diseases of market-garden crops in the
Vale of Evesham. (Ann. Rep. Agr. a. Hortic. Res. Stat., Long Ashton, Bristol, for
1929, p. 149—164. 1930.)

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en Barco de Avila (Fusariosis). (Boletin de la Efiftacion de Patologia Vegetal Madrid.
I, 1: 1—7, 1926.)

Kotes on Fusaria of the Section Martiella.

175

Pathologj'.

First symptoms appear a week or two after emergence of the bean
plant above ground at which time a reddish discoloration may be observed
upon the taproot, either in streaks or indefinite lesions. As the disease pro-
gresses the diseased areas turn brown and longitudinal fissures may appear
in the cortex. The disease destroys the end of the tap root and lower lateral
roots which shrivel and dry, and new lateral roots which push out through
or above the diseased cortex also subsequently are subject to infection. As
in the case of pea root rot the new roots, which appear progressively higher
upon the plant, may enable growth to persist the remainder of the growing
season under favorable environmental conditions. At times the fun^s
has been observed to invade and discolor the vascular elements following
a decay of the cortical tissue, and this vascular invasion may be attended
by a more rapid failure of the plant, although the disease is not primarily
of the wilt type.

Sjrmptoms on the aerial part of the plant are not usually of a distinctive
character, appearing late as dwarfing, yellowing or prematurity, with few
or poorly developed pods.

In inoculation experiments in the greenhouse and field, Burkhol-
der (2) found the following plants susceptible to the fungus: Phaseolus
vulgaris L., P. acutifolius Gray v. 1 atif olius Freem., P.
coccineus L., P. multiflorus Willd., P. aconitifolius
Jacq., P. lunatusL., P. angularis Wight, Yigna sinensis
(L.) Endl. and Dolichos biflorusL. Negative results were ob-
tained with Pisuni sativum L., v. arvense Poir., Trifolium
pratenseL., T. hybridumL., Vicia sp., Soja max Piper,
Ze'a maysL., Solanum tuberosum L., Avena sativaL.,
Triticum sp., Ambrosia artemisiifolia L., Prunella
vulgaris L., Chenopodium album L., and R u m e x sp.

Temperature seems to be one of the chief limiting factors for the disease,
infection taking place between 15® and 34® C. Moisture is important in that
if lacking after new roots have emerged from the diseased plant near the
soil surface, the plants rapidly decline, whereas otherwise maturity might
be attained. Burkholder (3) also showed that the disease results
in a greater reduction in yield in dry than in medium wet or wet soils.

Taxonomy.

In the original description of the organism causing Fusarium ropt rot
of bean, Burkholder (2) pointed out its morphological similarity
toF. solani v. Martii (F. M a r t i i). Upon the basis of purely pior-
phological characters, such as the size and shape of the various conidial
and ehlamydosporal forms, the bean pathogen appeared indistinguishable
from the F. s o 1 a n i v. Martii. coinmonly isolated frorn potatoes and
other plants but was distinct physiologically. In pathogenicity in-
fection was obtained only with the isolation from root rot affected beans,
all other type cultures of F. solani v. Martii giving negative results,
thereby establishing the identity of the bean fungus.

Revival of a nine year-old culture.

The culture of the bean fungus received from Baam, was a subculture
from the Burkholder strain deposited by Leonian in 1926. ’nus mne

mamm

Notes on Fusaria of the Section ^lartiella.

In

appearance of the fungus upon various culture media agreed tvith Burk-
h 0 1 d e r s (4) observations upon a 6 year-old culture of the bean pathogen.
Instead a scant mycelial growth and copious masses of blue-green macro-
conidia occurring in sporodochia and in pionnotal sheets upon various cul-
ttire media, as is the case in fresh isolations, this culture vas characterized
by the absence of pionnotal or sporodochial masses, by the absence of any
pigment production, and by the presence of a fluffy white growth of aerial
mycelium, on all media employed. As Burkholder obsert'ed. the
Abkultur of the bean Fusarium presented an appearance of being a distinctly
different fungus. Microscopic examination revealed further differences.
Microconidia were plentiful, but macroeonidia were scarce, and when found
were generally lower in septation and abnormal in both size and shape,
tending to be shorter and broader than normal conidia (1), and to be some-
what wanting in respect to spore curvature and in the details of foot and
apex characteristic for the fungus. Burkholder (’4) has recorded
amply measurements of conidia from both of these stages of culture.

By passing the Abkultur of the bean Fusarium through its host, Burk-
holder (4) was able to regain a fungus more nearly resembling that upon
which his original description of F. M a r t i i v. p*h a s e o 1 i was based,
in fact, only a return to its original host plant brought back to any extent
its former characters. In view of the results the writer obtained with the
pea root rot Fusarium, discussed in the first part of this paper, an attempt
was made to revive the nine year-old culture from Baarn, purely by cul-
tural methods after the technique of Appel and Wollenweber (1).
The result was, that following several transfer series, normal macroeonidia
were plentiful, and in the subsequent series deep blue-green pionnotes on
agar media and sporodochia on natural media were obtained. Sometimes
white to cream plectenchymatic cushions, even as large or larger than a
pea, were observed on EoWnia root during the transition of the fungus. A
vinaceous pigmentation of the medium was also observed in some cases,
as with the pea Fusarium. Conidia of the high culture obtained from the
nine year-old Burkholder strain of the bean Fusarium are shown
in Kgure 4. and the average measurements WCTe as follows:

3- septate: 43.2 X 3.0 (33.0—62.0 y 4.6— 5.6) to lOOO^

4- septate: 60.0 x 3.1 (39.0—62.0 x 4.8— 6.3) to 32%

3-septate: 37.3 X 3.2 (34.0—62.0 X 5.0— 3.5) to 3%

This experience demonstrated that it was possible to revive the Ab-
kultur of the Fusarium used, after it had been in culture many years, to a
point where it was again in agreement with the description of the original,
merely through the use of cultural methods.

rig. 4. Macroeonidia, 1000 X , from pionnotes and sporodochia of the bean root
Jot fungus, F. solani v. Martii f. 3, a — o; and from other Fxasaria possessing
a similar conidial morphology, including F. solani v. Martii, d — ^f ; and F. s o -
lani V. Martii f. 1, isolated by R e i n k i n g (11), g — i. The isolations represented
by d — ^f, have not been tested for pathogenicity, therefore it is not knovm if they may
belong to the parasitic formae 2 and 3. a, pionnotes on oatmeal agar, after 50 da 3 rB;
b, pionnotes on medium made from decoction of Robinia root, after 35 days; c, sporo-
dochium on Hobinia root, after 30 days, d, from lima bean, California, pionnotes on
oatmeal agar, after 13 days; e, from pea, Germany, pionnotes on potato agar, after
14 days; f, from strawberry, Germany, pionnotes on potato agar, after 22 days, g and
h, pionnotes on potato agar, after 20 days; i, pionnotes on potato plug, after 15 days.

Zweite Abt. Bd 91.

178

William C. Snyder,

A fresh isolation of the bean root rot fungus recovered from diseased
beans grown in Idaho during the 1934 season, and proved to be pathogenic
in an inoculation test made by the -writer, yielded conidia having the follo-
wing average measurements:

3- septate: 44.6 x 3.0 (33.0 — 52.0 X 4.3 — 5.5) to 100°o

4- septate: 48.1 x 5.1 (39.0 — 56.0 X 4.7 — 5.5) to 81%

5- septate: 55.0 X 5.1 (52.0 — 58.0 X 5.0 — 5.3) to 2°o

Comparison With Related Fungi.

The morphologic agreement between the bean Fusarium and F. s o 1 a n i
V. M a r t i i (F. M a r t i i) has already been pointed out, and the similarity
to the pea root rot fungus F. solani v. Martii f. 2 has been dealt
■with earlier in this paper. However it is of interest to compare, further, normal
conidia of the bean pathogen -with those of isolations of F. s o 1 a n i v.
Martii from various sources, a few of which are illustrated in Figure 4.
In Figure 4, d, are type conidia from an isolation made from a root rot of
lima bean, Phaseolus lunatus, in California. The spore and other
characters of the fungus place it as F. solani v. Martii. The spore
masses were more of a deep blue than a blue-green, but morphologically the
fungus is the same as that described by Burkholder, and only a
positive test on pathogenicity is necessary to complete its identity -with
F. s 0 1 a n i v. Martii f. 3. Other isolations of F. solani v. Martii
are illustrated in e, and f, of Figure 4. If e were found parasitic on pea, from
which it was isolated, it would be placed as forma 2, but lacking pathogeni-
city data upon this isolation obtained from a diseased specimen in Germany
(see footnote ^ on page 174), the morphology permits its determination only
as plain F. solani v. Martii. The illustrations g, h and i of Figures 4
bring out the similarity ofF. solani v. Martii f. 1 to F. solani
V. M a r t i i and the forma on bean, and these slight differences are also shown
in the averages for spore measurements and septations listed in Table 2.
These illustrations, although necessarily limited in scope, are intended to
indicate the morphologic agreement of certain Fusaria isolated from various
substrates in different parts of the world, and to emphasize that although
they are morphologically similar, certain of them are physiologically distinct,
and for this reason these have been made forms of the morphologic species-
variety represented by the trinomial F. solani v. Martii.

Description of the Fungus.

The folio-wing description for the fungus Fusarium solani
(Mart.) App. and Wr. v. Martii (App. et Wr.) Wr. f. 3, n. c. was given
by Burkholder (2) for Fusarium Martii App. et Wr. v. p h a -
s e 0 li (new var.):

“Macroconidia mostly 3-septate (44.5 x 5.1), 4-septate (50.09 x 5.3),
rarely 5-septate, of nearly even diameter throughout more or less curved
near apes, -with somewhat rounded or but slightly pointed apex, usually
apedicellate. Microconidia rare. Aerial mycelium in culture scanty and
usually white. Spores borno mostly in pseiidopionnotes. Cultures when
mature from a lichen and montpellier green (on synthetic agar [Richards
solution 2% agar]) to a pale olive-buff or cinnabar-green (on steamed rice).
Spores in mass frequently yellowish. Chlamydospores terminal or inter-
calary, single or in short chains (11.6 /t in diameter).”

Notes on Fusaria of the Section Martiella. 179

Fusarium solani (Mart.) App. et MY var. Martii (App.
et M^r.) MTr. forma 3 n. e. (ic. ef. fig. 4, a— c).

Syn. Fusarium Martii App. et Wr. var. phaseoli W. H.
Burkholder: The dry root rot of bean. Cornell Agr. Esp. Sta. Me-
moir 26. Ithaca: 999 — 1033. 1919, ic.

Fungus a forma 2 recedit praesertim parasitismo positivo contra species
varias Phaseoli, Vignae sinensis, Dolichos biflori
(negative vero contra Pisum sativum, Trifolium, Viciam,
S 0 j a m etc.), quibus morbum perniciosum ceterum Fusariosi Pisi similem
affert, primo caulim subterraneum penetrans, dein basim plantarum putre-
faciens et necans. Macroconidia plerumque 3-septata 44.0 x 5.0, rarius
4-septata 49.0 x 5.1, rarissime 5-septata 56.0 x 5.2.

Habitat (sec. Burkholder) parasitiee inPhaseolo vulgar! L.,
P. acutifolio Gray v. latifolio Freem., P. c o c c i n e o L. (P. mul-
ti f 1 o r o Willd.), P. aconitifolio Jaeq., P. 1 u n a t o L., P. a n g u -
lari Wight, Vigna s i n e n s i (L.) Endl., Dolichos bifloroL.;
saprophytice in P i s o s a t i v o L.. var. a r v e n s i Poir., Trifolio
pratensiL., T. hybridoL., Vicia sp., S o j a max Pip. etc.
in America boreali, et Europa.

A similar Boot Bot of Potato.

A disease of the potato. Solan um tuberosum L., deserves
mention here because of its similarity to the pea and bean root rots both
in respect to symptoms and cause. This disease, characterized by a root,
stem, and tuber rot, (vilt) produced by F. solani v. eumartii
(Carp.) Wr. (synonym. F. eumartii), has been shown (5, 6, 7, 8) to
be an important disease in certain parts of the United States. Goss (6)
reports that infection takes place through the roots or stems in soil infected
■with the fungus, or through infected seed, and may spread to all below-
ground ps/rts of the plant. The fui^us, as in the case of the pea and bean
root rots, is primarily in the cortex, which may become dark brown to almost
black. Small roots may be completely destroyed and the stem served in
the region of the seed.

The browning of the vascular system, which is often sterile (6), follows
invasion of the cortex and appears as a secondary "wilt-like symptom.
Although the disease is generally referred to as “potato wilt”, the fact that
it is primarily a cortical decay, closely resembling in temperature and moisture
relationships and in both pathological and etiological respects the root rots
of pea and bean, shows that its nature is typically that of a Fusarium
root rot.

Observations made upon a sub-culture of G o s s’ strain of F. s o 1 a n i
V. eumartii, yielded results essentially in agreement ■with those already
reported by Carpenter (5) and Goss (6). Spore measurements and
septation frequencies were of a lower order in the first series than given
in G 0 s s’ measurements, but of a higher order in later series, equalling
those of C a r p e n t e r’s (5). The average conidial size and septation for
all series were as follows:

5- septate: 38.0 X 6.2 (25.0—44.0 x 4.8— 5.6) to 10%

4Haeptat©: 48.0 x 6.4 (36,0—67.0 X 6.0— 6.0) to 24%

6- septate: 68.7 X 6.8 (40.0—74.6 x 6.3— 6.6) to 68%

6-septate: 67.0 X 6.0 (66.0—77.0 X 3.6— 7.0) to 18%

12*

180

William C. Snyder,

It will be seen from the average conidial measurements listed in Table 2.
and from Pig. 3, 4, and 6, that F. s o 1 a n i v. e u m a r t i i is distinct
morphologically from all the others with which it may be compared, although
possessing the same general characteristics. The conidia are broader than
F. solani v. Martii and longer than F. s o 1 a n i , and the scptation
is higher than either. Differences from the others are still greater.

a

a

'a

Fig. 5 (Explanation p. 181).

Xotes on Fusaria of the Section Martiella.

181

Discussion.

In a sttidy of variation in the bean Fusarium. Burkholder (4)
called attention to the desirability of showing the relationship in a taxonomic
way that seems to exist between certain Martiella Fusaria. These Fusaria
are dealt with in the present paper. To quote from Burkholder:

“For instance, we have in the Martii group the original species F. M a r t i i . .
two varieties listed by Sherbakoff (13), F. M a r 1 1 i ... v. m i n u s . . . and
F. Martii. ..V. viride...;F. Martii v. pisi ..., a variety recently des-
cribed as parasitic on the roots of pea (9); the form species F. Martii. ..v. pha-
se o 1 i . . . dealt in this article: and F. e u m a r t i i . . . (6) which cause a disease of
potatoes. No doubt other forms belong also to this group. All these fungi vary from
each other by single or minor characters, and it is probable they all had a common
origin. That some plan might be adopted to hold such groups together m a taxonomie
way to show the relationship as it is found in this case, would seem highly desirable.*'

A like conclusion was readied in a study (14) of closely similar Fusaria
of section Elegans wherein it was thought advisable to denote in the taxo-
nomy both the close similarity in physical characters of certain vascular
Fusaria and their peculiar phyiologieal specifity as expressed by pathogeneses
for their respective host plants. To accomplish this end by the use of va-
riety names proves unsatisfactory from the standpoint of taxonomy, owing
to an understanding that the variety name carries distinct morphologic
value. The use of formae, on the otherhand. to indicate chiefly physiologic
characters, is serviceable to both taxonomist and pathologist in arriving at
the teripinology of these organisms. This plan has been followed byWollen-
w e b e r (19) in the Fusarium-Monographie and is further extended in the
study reported here, and in the opinion of the writer clarifies the position
of these fungi from the standpoints of both taxonomy and pathology. The
synonymy of the Fusaria in the paragraph quoted from Burkholder,
according to the new taxonomy, is as follows:

F.

Martii =

F.

solani

V. Marti

i

*9

„ V. m i n u s =

99

99

99 »»

f. 1

99

„ „viride =

99

99

99 '9

f. 1

99

„ „ p isi =

99

•>9

»• 99

f. 2

99

„ „phaseoli =

99

99

99 99

f. 3

99

eumartii =

99

99

„ eumartii

It will be seen from this tabulation that where formerly six species
or species-varieties existed, only two species-varieties are still recognized
as being distinct morphologically. The justification for the change in taxo-
nomy in the cases of F. M a r t i i v. pisi and F. Martii v. pha-
se o 1 i , has been given in the body of this paper. The other changes have
already been made byWollenweber (19). It is clear that when under
ordinary cultural conditions stages of one of these fungi, for example F.

Fig. 6. Macroconidia, 1000 X , from pionnotes and sporodochia of the potato root
rot fungus, F. solani v. eumartii (Goss’ strain), a— c; of the common
soil saprophyte, F. solani, obtained from decayed tissues of various plants, d — g;
and of F. solani v. minus, also from decayed plant material, h — a, pion-
notes on potato agar, after 33 days, series 1; b, piozmotes on oatmeal agar, after 13
days, series 2; c, pionnotes on potato agar, after 13 days; series 2. d, from sweet po-
tato, pionnotes on oatmeal agar, after 45 days; e, from potato, sporodochium on lupine
stem, after 20 days; f, from watermelon, sporodochium on potato plug after 35 days;
g, from cotton, sporodochium on barley ear, after 37 days, h, from sweet potato,
pionnotes on potato agar, after 30 days; i from orchid, pionnotes on potato plug, after
36 days; j, from asparagus, pionnotes on potato agar, after 25 days.

182

William C. Snj-der,

Martii v. pisi, are found which agree morpholo^eally at one time
or another with five other fungi in the above tabulation, and even with
F. solani v. minus, determination of the fungus becomes most diffi-
cult. In Table 1 is illustrated the wide range of conidial size and soptation
which may be obtained with such a fungus, a range which covers all of the
above named fungi except the variety eumartii. In the revised taxonomy
these fungi are recognized as being of the same morphologic type, designated
by the trinomial F. solani v. Martii, possessing some differences
in spore size but differences which have not proved to be practical from
the taxonomic standpoint, owing to an over-lapping in this character. The
final distinction between these fui^i lies with their physiologic behavior
in respect to certain species of growing plants.

Since average conidial measurements, taken in different stages of cul-
ture, may differ greatly between themselves, as is shown in Table 1, a grand
average of all averages is seen to tell only a part of the story. The question
arises as to how much value should be given to the averages of coni(ha from
those stages of the fungus which do not represent a high culture. For this
reason the data in Table 1 gives a more representative impression of the
fungus, F. solani v. Martii f. 2 than an average of aU the averages,
as recorded in Table 2.

In light of the similarities displayed in the morphology of the organisms
causing the stem and root rots of pea, bean and potato, it is not surprising
that the diseases should agree closely among themselves in type, as do the
wilt diseases caused by the typically vascular Fusaria of section Elegans.
The Martiella Fusaria, as typified by those dealt with here, are primarily
cortical in nature and therefore produce root rot symptoms, while certain
of the Elegans Fusaria are principally xylar and so may cause a wilting of
the plant unattended by any conspicuous evidence of cortical injury. In
advanced stages of disease other tissues become invaded, and as a result
a set of secondary symptoms may appear. This is illustrated in the pea,
bean and potato diseases by the invasion of the vascular cylinder following
complete decay of the cortical sheath of root or stem. The rot may become
so deep as to sever the plant from its roots, while the vascular system may
show distinct wilt-like symptoms.

These characteristics of the diseases, and of the organisms causing them,
set apart from other Martiella fungi F. s o 1 a n i v. Martii f. 2, F. s o -
lani V. M a r t i i f. 3, and F. solani v. eumartii, as pathogens
typically affecting the cortex of the subterranean organs of their respective
hosts.

Summary.

The writer reports the results of a taxonomic study upon certain mem-
b^ of the Section Martiella of the genus Fusarium Most emphasis has been
given to the pathogens ofPisum sativum and Phaseolus vul-
garis, although the pathogen of Solanum tuberosum and some
non-parasitic Fusaria of Section Martiella have been dealt with for means
of comparison.

The cultures of the pea, bean, and potato organisms used in these studies
represent single-spore lines of Fusaria that have been tested and proved to
be pathogenic.

Notes 'on Fusaria of the Section HarticUa.

183

The differences in strains of the pea root rot Fusarium in respect to pig-
mentation of the culture, conidial size, and the frequency of septation, that
at first appeared to be of species or varietal rank, -were found to have minor
significance after the vdde range of characteristics for the pathogen became
known. In the case of each of the single-spore pathogenic strains of the pea
organism studied stages of culture with small macroconidia were obtained
resembling F. solani v. minus, and later with larger ones agreeing
with F. solani v. Martii, yet in every instance the spores measured
were obtained from sporodochia or pionnotes.

Owing to the broad range in morphology which exists in the pea Fu-
sarium, an enlargement of the fungus description has been necessary; and
since the pathogen when in high culture agrees closely in morphology with
the saprophyte F. solani v. Martii, an alteration in the nomen-
clature has been made conforming with the revised taxonomy of the genus,
at the same time recording in the terminology a pathogenesis for pea.

The Martiella Fusarium, cause of the foot and root rot of pea, is des-
cribed as F. s 0 1 a n i v. M a r t i i f . 2, n. c. ; synonym F. II a r t i i v.
p i s i.

A nine year old Abkultur of the bean root rot Fusarium producing
predominantly a fluffy white mycelial growth with no pigment, no pionnotes,
no sporodochia, and only occasional macroconidia, was sufficiently revived
by purely cultural methods that it yielded an abundance of normd macro-
conidia in typical blue-green pionnotes and in sporodochia. Average mea-
surements of the spores agreed with those of a fresh isolation of the bean
root rot fungus. Previously it has been reported that only a passage though
the host plant brought back to any extent the former characters of the
fungus.

In conformation with present Fusarium taxonomy, and because of
morphologic agreement with the non-parasitie soil fungus F. s o 1 a n i v.
Martii, the bean root rot fungus is described as F. s o 1 a n i v. M a r t i i
f. 3, n. c. ; synonym, F. Martii v. phaseoli.

A summary of the pathology of the Fusarium stem and root rots empha-
sizes the similarity in the nature of the diseases caused by the closely similar
pathogens F. s o 1 a n i v. Martii f. 2, F. s o 1 a n i v. Martii f. 3,
and F. solani v. eumartii, respectively. The diseases in each case
are characterized primarily by an invasion and reddish-brown to dark brown
or almost black rot of the cortex of the below-ground stem and root, and
are frequently followed by secondary, wilt-like symptoms.

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H. W., H 3 rphomycetes in Sorauer, Handbuch. Bd. 3. 5. Aufl. 1932.

Nackdruck verb6ten,

Zur Biologie der Bakterienkolonie.

[Aus dem pflanzenphysiologischea Institut der KarlsuniversitUt in Prag.]

Von J. KoJinek.

Mit 12 Abbildungen im Text.

Einleitnng.

Die lilikrobenkolonie ist in den letzten Jahren Gegeustand eines eiMgen
Studiums geworden, -wozu hauptssichlieh die Arbeiten J. A.Arkwrights
(1) AnlaB gegeben haben. Zusanunenfassend bericbtet hieruber P. Had-
ley (4). Eine abnliche Richtung verfolgen die Arbeiten fiber die Gesetze
der ilikrobenpopulation. Hier bat 0. Bail (2) den Begriff .jM-Konzen-
tration"' in die Mikrobiologie eingeffihrt. Die M-Konzentration bei Misch-
kulturen ist von L. "W i k u 1 1 i 1 (12) und in unserem Institut von A.Je-
g 0 r 0 V untersucbt ivorden. Sebr beachtenswert sind aucb die Angaben
von J. Hit sob (5), der die Bakterienpopulation als biologiscbeEinbeit
betracbtet. Racb ibm lassen sicb in einer Kolonie eine kleine und eine groBe
■Wacbstumsperiode, eine generative und eine vegetative Phase unterscbeiden.
C. E. A. W i n s 1 0 'vr (13) bat fiber die Populationsgesetze zusanunenfassend
bericbtet. Von "Weebselseitigkeitsbeziebungen, Antagonisnius und Symbiose
bandeln ebenfalls zablreicbe Arbeiten, von denen die alteren von E. K fi -
s t e r und die neueren von "W. L. H o 1 m a n n (6) aufgeftibrt warden.
Bei meinen Studien fiber die Koloniestruktur babe icb micb der Metbode
von R. Legrous und J. M a g r o u (9) bedient, mit deren Hilfe ieh
sebon frfiber (8) die Struktur der R- und S-Kolonien bei Mykobakterien
untersucbt hatte und M. P i 2 o v a diejenige der Kolonien von Saecbaro-
my ces eerevisiae.

Die Glasrandknltnr.

TJnter einer Glasrandkultur ist eine Bakterienkultur zu versteben, die
auf gewobnlicbem festen NShrboden (Agar oder Gelatine) am Rande eines
Glasstuckebens entlang gewacbsen ist (Abb. 1). Ein solcbes Wacbstum einer

Zur Biologie der Bakterienkolonie.

186

Bakterienkolonie wird dadurch erreicht, daC in nmnittelbare Nahe eines in
einer Petrischale auf dem Agar liegenden sterilen Glasstiickchens
geimpft wd. Ani Glasrand halt sieh eine durch kapillare Krafte gebundene
diinne Fliissigkeitsschicht, in der sich die Bakterien zur selben Zeit Trie auf
dem festen Nahrboden ausbreiten und vermehren kSnnen. Der verwendete

Agar darf allerdings nieht zu alt sein, damit er noch genugend Fliissigkeit
ausscheidet. Der Bakterienkolonie ist es somit ermoglicht, gewissermaBen
auf einem zweiphasigen Kulturmedium von sonst ziemlich gleicher Besehaffen-
heit zu wachsen, so daB die Ausbreitungsgesch-vrindigkeiten in der fliissigen
und auf der festen Phase unmittelbar verglichen werden konnen.

Die Kolonie wachst am Glasrand in schmaler Zone entlang, ohne an
den Ecken eines Objekttragers oder Deckglases ebenfalls eine eekige Form
anzunehmen. Sie ist stets von abgerundeten Linien begrenzt. Die Frage,
ob eine Bakterienkolonie me pflauzliches Kallusgewebe fremde Kbrper
iiber-wachsen kann, muB verneint -werden. Niemals konnte beobachtet ver-
den, daB sich die Kolonie auf ein noch so
dunnes Glasplattchen in nennenswerterEnt-
femung vom Rande ausbreitet. Damit ist
zugleich auch eine Frage naeh der Nahr-
stoffversorgung der Zellen in der Kolonie
beantwortet. Einen Mhrstofftransport von
Zelle zu Zelle wie in der hoheren Pflanze
gibt es also in der Bakterienkolonie nicht.

Ihr ist infolgedessen Wachstum auf Distanz
■wie bei der Kallusbildung nicht moglich.

Zellen, die von der Nahrstoffquelle entfemt
sind, scheinen keine Vermehrungsfahigkeit

zu besitzen.

Unter dem auf der Agaroberflache
sehr fest haftenden Glas wurden bei Glas-

Abb. 1. Bact. prodigiosum
in Glasrandkultnr.

randkulturen ebenfalls keine oder nur sehr wenig Bakterien gefunden.
Fiir Aerobe ist das ohne weiteres verstandlich, nicht aber fiir fakultativ
anaerobe, wie z. B. B a c t. v u 1 g a r e. Als Ursache fur dieses Verhalten
kann der Widerstand angesehen werden, den die Bakterien zu liberwinden
batten, wenn sie unter das Glas vordringen vrollten. Wenn wir auch
hier die Verhaltnisso mit denen beim Pflanzengewebe in Vergleich zu
setzen wagen, so geht daraus hervor, daB eine Bakterienkolonie bei weitem
nicht so groBe Festigkeit besitzt wie echtes Pflanzengewebe, die es z. B.
einer Wurzel erlaubt, auch in verhaltnismSBig harte Substrate einzudringen.

Was nun die Geschwindigkeit betrifft, mit der sich die Kolonien ver-
schiedener Bakterienarten in der fliissigen Phase ausbreiten, so kdnnte man
annehmen, daB sie von der entsprechenden Geschwindigkeit auf der festen
Phase Oder der Beweglichkeit oder etwa der Wachstumsform (S- und R-
Form) der jeweiligen Art abhangig sei. Jedoch haben wir durch unsere
zaklreichen Yersuche solche Annahmen nicht bestatigen konnen. Z. B.
verbreitet sieh der unbewegliche Bac. anthracoides ebenso sehnell
oder noch schneller als die beweglichen Bact. pyocyaneum, Bact.
prodigiosum und Bact. coli. Bact. prodigiosum bildet
auf festem Nahrboden typische S-Kolonien, Bac. anthracoides da-
gegen R-Kolonien. Naeh einer Woehe betrug der Durchmesser der Kolonien
auf dem festen Agar bei Bac. anthracoides 46 mm, bei Bac t.

186

J Koiinek,

prodigiosum 8 mm. Die entsprechenden Werte fur die Lange der
Kolonien am Glasrande sind 67 bzw. 62 mm. Folglieh ist das Verhaltnis
der KolomegroBen von Bac. anthracoides:Bact. prodigio-
sum auf festen Medien = 5,75 und in der flussigen Phase des Glasrandes
= 1.08. Die entsprechenden Verhaltmszahlen furBac. anthracoides
und die ^vie Bact. prodigiosum S-Kolonien bildende, aber unbe-
wegliche Sarcina lutea sind 7.66 bzv'. 1,32.

Aus diesen und zabkeiclien andeien Beobachtungen sehlieBcn wir,
daB die Ausbreitungsgesch'windigkeit der Bakterienkolonien in der flussigen

Phase am Glasrande weder

von der entsprechenden Ge-
schwindigkeit auf festem
Nahrboden noch von der Be-
Tfeglichkeit der Zellen oder
von der K- oder S-Form un-
mittelbar abhangig ist.

Bei den meisten Bak-
terien dringt die Mehrzahl
der Individuen einer Glas-
randkultur in der Richtung
des geringeren Widerstandes
vor, namlich in der flussigen
Phase, vreshalb fast die ganze
Eolonie am Glasrand entlang
vrachst (Abb. 2). Die folgen-
den Zahlen, die die GroBe
der auf festem Agar ge-
wachsenen Kolonieflaehen in
Planimeterteilen angeben,
■wobei die in der flussigen
Phase der Glasrandkolonien

Abb. 2. Bact prodigiosum. Z^ei frei-
liegende Kolonien und emo Glasrandkultur. Impf-
stelle oberhalb der Mitte emei Glaskapillare.

geTvachsenen Anteile auBer
Betracht gelassen sind. zei-
gen das sehr deutlich.

Bact. prodigiosum
Bact. pyocyaneum
Bac. anthracoides
vSarcma lutea

Von diesem begreifliehen Verhalten der Bakterien macht Bac. my-
e 0 i d e s eine Ausnahme. Seine Glasrandkolonien breiten sich fast ebenso
schnell auf dem festen Agar me in der Flussigkeitslamelle aus. Den Grund
hierfur sehen wir in einer hoheren "Wachstumsfonn des B a e. m y c o i d e s ,
nSmlich der Fadenbildung, die sich sehr gut zur Uberwindung des Nahr-
bodenwiderstandes eignet^).

*) Auch Bact. radicicola, das m semer saprophytischen Form diese
Wachstumsart nicht besitzt, nunmt dieselbe an, v^enn es ms Wurzelgewebe der Legu-

Zui Biologie del Bakterienkolonie

187

Da es den Bakterien in einer Glabrandkultur ermoglicht ibt, sick auBer
auf dem Agar auch ini flussigen Medium, das ihnen eiiien geiingeren 'Wider-
stand entgegensetzt, auszubreiten, gelingt es mit Hilie dieser Methods auch

Wenn bei einer Glas-

randkultur nach langerer Abb. 3. Beschieibmig rm Text.

Zeit das Glas (Objekt-

trdger) entfernt wird, dann breitet sieh die Kolonie auf die nun freigewordene
Mache nur sehr wenig und zogernd aus (Abb. 4). Das hat seinen Grand
ebensowenig in irgendwelehen inneren GesetzmaBigkeiten der Kolonie wie
alle anderen bereits besprochenen Erscheinungen des Koloniewachstums.

Vielmehr ist es auch hier
wieder ein duBerer EinfluB,
wiewir annehmen, die Aus-
trocknung und Vergiftung
des hTahrbodens durch die
inzwischen herangewach-
sene Glasrandkultur selbst.
Einen Beweis hierfur sehen
w u. a. darin, daB B a c t.
prodigiosum unter
den geschilderten Verhalt-
nissen auf der freigeworde-
nen Agarflache nicht rot,
sondern weiB wachst, was
auf eine Verhnderung des
ISfahrbodens hindeutet.

Am Schlusse dieses Ka-
pitels soil noch auf eine
praktische Bedeutung der
Glasrandkultur hingewiesen

Abb. 4. Besdiieibimg im Text.

minosen emdringt. In einer fruheien Mitteilung (7) haben 'wir bereits die Vermutung
geaufiert, daB es unter den Pilzen mehr Pflanzenparasiten gibt als unter den Bak.
terien, weil der Pilz mit Hilfe seiner fadigen Hyphen die Zellulosemembran leichter
durchdringen kann als Bakteiien.

188

J. Kofinek,

werden. Wenn es sich daxum handelt, sehr langsam und schwierig an-
vrachsende Bakterien in groBeren Mengen sehnell zu ziichten, leistet die
Methode der Glasrandkultur sehr guto Dienste. Wir konnten beobachten, dafi
einzelne Kolonien des Myeobaeterium poikilothormorum
Friedmann auf Glyzerin-Bouillon-Agar naeh einer Woche nocb keine be-
dentende GroBe erreicht batten, wSbrend ein Objekttrager auf dom Agar
von den Bakterien schon in wenigen Tagen vbllig umwacbsen mirde.

Ferner mochte ich annehmen — allerdings imter ausdriicklicher Be-
tonung, daB es sich dabei lediglich urn eine Vermutung handelt — , daB bei
manchen bakteriellen Erkrankungen des menschlichen und tierischen Orga-
nismus die gesehilderten GesetzniaBigkeiten ebenfalls zur Geltung kommen.
Die Bedeutung einer mehr oder weniger reichlichen katarrhalischen Schleim-
absonderung bei solchen Erkrankungen konnte man nSmlich u. a. auch
darin sehcn. daB die Erreger leicht aus der festen Phase (Gewebe) in die
fliissige (Sekret) eindiingen, mit velcher sie dann aus dem infizierlcn Korper
ansgeschieden werden.

Filtrierpapierkultnren.

Aus dem Verhalten der Glasrandkulturen haben wir geschlossen, daB
sich die Bakterien im allgemeinen in dem Medium schneller ausbreiten,
das ihnen den geringeren Widerstand entgegensetzt. Als weiteren Beweis
fiir die Kichtigkeit dieser Anschauung lassen sich noch Versuehe anfiihren,
bei denen wir gewohnlichen Agarnahrboden in ahnlicher Weise verandert
haben wie bei der Glasrandkultur. Eine Scheibe Filtrierpapier, auf frischen
Agar gelegt, halt die von diesem ausgepreBte Flussigkeit kapillar fest,
in der sich die Bakterien ebensogut wie am Glasrand und besser als auf dem
Agar selbst ausbreiten kbnnen. Denn die chemische Beschaffenheit des
Nahrbodens ist auf diese liVeise kaum, die physikalische dagegen grund-
legend geindert worden. Der Widerstand, den der Agar der Verbreitung
der Bakterien entgegensetzt, ist auf ein blindestmaB herabgesetzt worden.
Alle von uns geprliften Arten sind auf dem Papier sehr gixt gewachsen.
Sarcina lutea hat typische S-Kolonien gebildet. In ihrer Umgebung
warden weder makroskopisch noch mikroskopisch vereinzelte Zellen fest-
gestellt. Das sich auch unter anderen Bedingungen schneller ausbreitende
B act. prodigies um hat auf dem Papier keine fiir Agar typische
S-Kolonien, sondem mu ganz vereinzelt sehr kleine Kolonien gebildet, die
in einem ausgedehnten Bakterienschwarm lagen. Noch starker hat sich
Bact. pyocyaneum auf der Papieroberflache ausgebreitet, ohne
eine einzige typische Kolonie zu bilden. Bact. coli hat sich sogar
mehrere Zentimeter von der Impfstelle bis auf den freien Agar ausgedehnt,
wo dann am Papierrand die iiblichen ninden Kolonien entstanden sind.
Geuau so hat sich Bac. anthracoides verhalten, der iiberall auf
dem Papier zu finden war, meistens in Form von Sporen, und rings um das-
selbe herum einen Koloniesaum gebildet hatte^).

Es seheint also, daB besonders der Wassergehalt des NSirbodens, wenig-
stens bei den beweglichen Formen, fur den Ausdehnungsumfang der Kolonie
von wesentlicher Bedeutung ist. Davon konnten wir uns auch tiberzeugen
dutch Kulturversuche mit halbflussigem Agar, bei dem der Widerstand

') Ahnliche Ersoheinungen hat auch S. P r & t (10) bei Callothrix ther-
mal i s beobachteu krinnen.

Zur Biologic der Baktcnonkolonip.

189

gogeii die Ausbreitung der Baktericn ebeiifalls herabgesetzt ist. B a c t.
prodigiosum hat dcnn auch auf solehem 0,5proz. Agar Kolonien ge-
bildet. deron Oberflacho 5mal so groB war wie diejenige der auf l,5proz.
Agar gewacbseuen Kolonien. AuBerdem war der Band der ersteren nicht
so glatt.

Die Methode, auf Filtrierpapier zu kultivieren, haben wir auch an-
gewendet, urn die bereits einmal gestreifte Frage naeh dem Nahi-stofftransport
in der Kolonie weiter zu klaren. Kleine, sterile Papierstuckehen wurden auf
Bakterienkolonien aufgelegt, so, daB sie die freie Agarflache nicht beriihrten.
Auf das schnell feucht werdende Papier wurde dann entweder dieselbe oder
auch eiue andere Art geimpft. Mit dieser Versuchsanordnung sollte ermittelt
werden, ob die Mhrstoffe aus dem Agar dureh die untere Kolonie und das
Papier bis zu den daraufliegenden Bakterien befSrdert werden kSnnen.
Von alien untersuchten Arten hat es nur die selir anspruchslose S a r c i n a
1 u t e a zu einem gewissen kiimmerliehen Wachstum auf den Papiersttickchen
gebraeht, woraus wir schlieBen mochten, daB die in das Papier aufgestiegene
Fliissigkeit sehr arm an Nahrstoffen war, und deshalb auch die oberen Zellen
dcr unter dem Papier befindlichen Kolonie nur selir sehlecht oder gar nicht
ernahrt werden.

Begenerationsversuehe an Bakterienkolonien.

Obwohl niemand auf den Gedanken kommen wird, eine Bakterien-
kolonie als Zellgewebe zu betrachten, so ist es doch auch nicht moglich,
in ihr lediglich einen Zellhaufen ohne jede Wechselseitigkeitsbeziehungen
zu sehen. Wir haben tins gefragt, ob bei einer Bakterienkolonie bereits
Eegenerationserscheinungen einfachster Art feststellbar sind, d. h. ob das
Koloniewachstum nur dureh auBere Einflttsse geregelt wird, oder ob sich
auch innere Einflusse geltend maehen, die dann dureh Begenerations- oder
Korrelationsersehoinungen zum Vorschein kommen miiBten, wenn kiinst-
liche Eingriffe in die GesetzmaBigkeiten des Koloniewachstums vorgenommen
wiirden. So besteht nach Bail (2) in fliissigen Nahrbbden eiue gewisse
maximale Grenze der Zellvermehrung, die nicht iiberschritten werden kann.
"Wird diese gr6Btm6gliehe Individuenzahl, nachdem sie erreicht ist, kiinst-
lich vermindert, dann tritt emeut Zellvermehrung ein, bis die urspriing-
liche Grenze, die sogenannte M-Konzentration. wieder erreicht ist, die
darum also nicht mit einer Ersehbpfung oder Vergiftung des Nahrbodens
erklart werden kann. Zur Beantwortung der Frage, ob solche GesetzmaBig-
keiten auch in der Bakterienkolonie vorherrschen, haben wir folgende Ver-
suche durchgefUhrt:

Der mittlere Teil einer ausgewachsenen Kolonie von Sarcina lutea
wurde mit sterilisiertem Skalpel bis auf den Agar entfernt. Das weitere
Yerhalten einer so veranderten Kolonie wurde dann mit demjenigen einer
unveranderten verglichen. Weder bei diesen noch bei anderen Versuchen,
bei denen ebenfalls Teile der Kolonien entfernt oder GrfiBe und Form der-
selben kiinstlieh beeinfluBt wurden, hat sich irgendein Anhalt dafiir er-
geben, daB es auch in der Bakterienkolonie eine M-Konzentration gibt oder
Korrelations- oder Eegenerationserscheinungen ausldsbar sind.

Es zeigt sich also inuner wieder, daB die GroBe der BaMerienkolonie
im wesentlichen vom Widerstand des Nahrbodens und der allmahlieh ein-
setzenden Erschbpfung und Vergiftung desselben mit Stoffwechselprodukten

190

J Koiinek,

bestimmt wird ]Mit einer Erschopfuiig und Vergittung des Nahrbodens
lassen sich z. B. Erscheinungen we die Zonenbildung an Kolonien von
Bact. vulgare und B a c. my c o i d es (Abb. 5) erklaren. Einzelne
mderstandsfahigere Zellen vermogen die Zone des ergchoptten und ver-

gittetenAgaxs amEande
der ausgewachsenen Ko-
lonie zu durehdringen
(bei Bac. mycoi-
d e s durch Fadenbil-
dung begunstigtl) und
jenseits dieser Zone
sich Tvieder in normaler
Weise zu einem Kranz
von Kolonien zu ver-
mehren.

Auf eine kurze For-
mel gebraeht, stellen
sich uns die erwahnten
Beziehungen aufiercr
Faktoren zum Kolonie-
waehstum wie folgt dar :

® (w + V

Darin bedeutet E die
Expansivitdt def Kolo-
nie, W den Widerstand
des Nhhrbodens und V
die Vergiftung oder Er-
Abb. 3. Beschreibucg im Text SChbpfung dessslben.

Misclikultnren.

Uber Biologie und innere Struktur der Bakterienkolonie lassen sich
an Mischkulturen einige besonders schone Bcobaehtungen anstellen. Es ist
die Frage, wie sich zwei verschiedene Arten verhalten, wenn sie auf den
gleichen Lebensraum angewiesen sind. Mit der Methode, die wir zundchst
anwendeten, und die darin besteht, daB wir ein kleines Tropfchen einer
gemischten Aufschwemmung zweier Arten in steriler physiologischor Koch-
salzldsung auf die Agarplatte impften. erhielten wir meistens Kolonien,
die aus einem zentralen Kem der einen Aii und einem darumliegenden
Ring der anderen Art bestanden. Die hiiCere Zone enthielt mikroskopisch
nahezu Eeinkiilturen. Im einzelnen ergab sich folgendes:

Sarcina lutea-Bact. coli (Abb. 6). In der Mitte eine gelbe
Kolonie von Sarcina, umgeben von einem weiBen Ring des Bac t.
coli.

Sarcina lutea-Bact. prodigiosum. Sarcina bleibt
in der Mitte. Bact. prodigiosum bildet einen roten Ring.

Bact. prodigiosum-Bact pyoeyaneum (Abb. 7). Hier
bleibt Bact. prodigiosum in der Mitte, wa,hrend die huBere Zone
der Kolonie von Bact. pyoeyaneum grun gef&rht ist. Auch in Misch-

Zur Biologie der Bakteiienkolonie

191

kultur mit Bac. mycoides bekommt Bact. prodigiosum die
Mitte der Kolonie zugewiesen (Abb. 8).

Im Gegensatz zu diesen Mischkulturen, in denen sich die beiden Kom-
ponenten in ihrem Ausbreitung&vormogen und ihrer Widerstandsfahigkeit
gegenuber antagonistischen Kraften nicht sehr staik nnterscheiden, stehen
jene, in denen die eine Art von der anderen melir oder weniger ganz unter-

Abb. 8, Beschreibimg im Text.

druckt wird. Hierher gehoren beispielsweise Miscbkulturen von Sar-
cina lutea mit Bac. anthracoides oder mit Bact. pyo-
cyaneum, in denen die Sarcina nahezu vollsttodig unterdruckt
wird, Nocb etwas anders liegen die Verbaltnisse, wenn sich beide Kom-
ponenten ungefahr gleich stark entwickeln, wie es in Miscbkulturen von
Bac. anthracoides mit Bact. pyocyaneum der Fall ist.

192

J Koilnek,

Es entstehen dann Kolonien, an denen cbenfalls keine Aufteilung des Eaumes

in eiiie auBere iind iiinere Zone
zii bemeikeii ist, die vielmebr
tells den Eindruck von Eein-
kultiiren der einen oder der
andcren Ait oder von Misch-
kultiiren beider Arten machcn.

Bei der Erfoischnng der
Biologie der Mischkiilturen be-
nutzten vir auch wieder die
Methode der Glasrandkulturen.
Aiif die eine Seite eines auf
dem Agar liegenden Objekttra-
gers impften wir Bact.pro-
d 1 g i 0 s u m und auf die an-
dcrc Sareina lutea oder
Bac. anthracoides. Bei
ilirer schnellen Ausbreitung am
Glasrand entlang begegneten
sich dann beide Arten sehr

Abb 9 Bact prodigiosum (grofie,
dunkle Kolonien) und Bact pjocyaneum
(links unten), Bac, anthracoidos (rechts
oben), Bact c o 1 1 (lechts unten;, S a r o i n a
lutea (links oben)

bald, vorauf sich Bact. pro-
digiosum stets uber der
anderen Art in der flussigen
Phase welter ausbreitete, ohne
auf dem Agar neben der irem-
den Art zu wachsen.

Eine befriedigende Er-
klamng fur deses son-
derbare Verhalten kon-
nen wir z. Z. noch nicht
geben.

Des weiteren haben
wir untersucht, wie sich
zwei verschiedene Arten
verhalten, wenn ihre
zunhehst getrennt lie-
genden Kolonien mit-
einander verschmelzen
(Abb. 9 u. 10). Wir
konnten immer beob-
achten, daS die nur
langsam sich ausbreiten-
den Kolonien von S a r -
oina lutea sowohl
von denen des B a e t.
prodigiosum als
auch von denen des

Abb. 10. Saroina lutea (Mitte der Kolonien) Au13en
Bact. pyocyaneum (links), Bao. anthracoi-
des (unten), Bact. prodigiosum (oben), Sar-
cina lutea (rechts, beide Kolonien \ ersohmelzend).

Bact. coli. Bact.
pyocyaneum und
Bac. anthracoi-
des umwachsen wur-

Zur Biologie dor Bakterienkolonie.

193

den, so daB um die S a r c i n a - Kolonie heium ein Ring der anderen Art
entstand. Dagegen lieB sich Baet. pyocvaneum von keinem
anderen Baktenum umwacksen In die Kolonien von Bact. coli ver-
mochte nur Bact. pyocyaneuni einzudiingen, ohne sie ring-
formig zu umwachsen ■nie
die Kolonien von Bact.
prodigiosum. Bao
antliracoides 'vrar im-
stande, die Kolonien von
Sarcina lutea und
Bact. coli zu umwach-
sen, nicht aber die von ,

Bact. pyocyaneum
und Bact. prodigio-
sum. Auch Mer ist es uns

nicht moglich, fur die Er- Abb ll Beschreibung im Text.

scheinungen in alien Einzel-

heiten erne ausreichende Erklarung zu geben.

Ganz anders als es eben geschildert wurde, verhalten sich zwei Kolonien
der gleichen Art, wenn sie miteinander in Beruhrung kommen. Wir haben
absichtlich immer zwei Kolomen verschiedenen Alters, die nacheinander
entstanden waren, zu den Versuchen benutzt und konnten stets feststellen,
daB beide mehr oder veniger
vollkommen miteinander ver-

schmolzen, so daB wieder eine
einzige runde Kolonie ent-
stand. Nur bei Sarcina
lutea blieb die jungere Ko-
lonie in der alteren in Gestalt
eines keilformigen Sektors
langere Zeit erhalten. Dutch
Ausmessung lieB sich fest-
steUen. daB die in einer
groBeren eingeschlossene
kleine Kolonie im Wachstum
stark behindert war mi Gegen-
satz zu einer gleich alten,
aber frei liegenden Kolonie
(Abb. 11).

Diemikroskopisehe Struk-
tur der hlischkulturen haben
•vdr an transversalen Schnitten

nach der Methode von L o -

grous und Magrou (9) Abb. 12a CoiaUna virgata.

untersucht. Die herausge-

schnittenen Teile 'wurden in flussigen aber nicht zu heiBen _ Agar ^ ein-
gebettet, nach N 5 m e c s Methode^) fixiert und weiter wie histolo^che
Schnitte behandelt®). Die gefarbten Praparate zeigten eine sehr verschieden-

1) 1% Chromsaiire -f 8% Formalin

®) Dies© Arbeiten hat Herr Dr. P. F. M x 1 o v i d o v ausgefuhrt, der mit der
Methode hesondeis eng vertraut xst.

Zweite Abt. Bd. 91.

13

194

J Kofinek,

artige Zusammensetzung der Mischkolonien. Zum Teil lagen die einzelnen
Aiten in ScMchten und Inseln getrennt und zum Teil Tvaren sie auch
ziemlich weitgehend miteinander vermcngt. Aus den vorliegendcn Beobach-
tungen lieBen sich keine allgemeingultigen Schlusse ziehen.

Abb. 13 b. B a c. m y 0 0 1 d e s.

Abb. 12 p. Mycobactenam smegmatis.

Die Bakterienkolonie als

ThaUnsnachbildong.

Wie sehr, zunachst rein
auBerlich. Bakterienkolonien,
vor allem die BrFormen,
den Eindruek eines Tballus
erweeken konnen, zeigt ein
Vergleich der Kolonieformen
von Bae. mycoides und
Mycobacterium smeg-
matis mit einem Thallus
der Seealge Coralina vir-
g a t a (Abb. 12i. Die auBer-
liche Ahnlichkeit dieser drei
Kolonien hinsichtlich der
thallusartigen Form ist un-
bestreitbar. Diese Ahnlichkeit
geht aber sogar noch weiter.
An transversalen Schnitten
dureh Kolonien von Bakte-
rien (Mycobacterium
pellegrini) wie auch
beispielsweise an solchen der
Hefe Saccharomyces
cerevisiae^) konnen
namlich oft Zellen im Agar
unter der Kolonie beobachtet
werden, die auffdllig lang und
mitunter zu Faden aneinan-
dergereiht sind und lebhaft
an die Rhizoiden eines Thallus
erinnern. Naturheh ist auch
hier der Vergleich rein auBer-
lich. Denn uber TJrsachen und
ZweckmdBigkeit dieses Zell-
dimorphismus in Bakterien-
kolonien ist uns niehts be-
kannt. Wenn sie auch nieht
als regellose Zellhaufen be-
trachtet werden konnen, so
beweisen doch der Mangel an
Korrelations- sowie Regene-
rationserseheinungen und die
Emahrungsverh&ltnisse in den

Die Stiuktur der Saccharomyces - Kolonien hat bei nns M. P i s o v a
untersucht.

Zur Biologie der Baktenenkolouie

195

Kolonien, daB diese nichts anderes sind als eben Zellkolonien, iind da6 sie
die hohere Form des Thallus lediglich naehbilden.

Zasammenfassvmg.

Unteisuchungen uber die Biologie der Bakterienkolonie an sog Glas-
randkulturen, an Filtricrpapierkulturen und Mischkulturen, sowie in Gestalt
von Regenerationsversuchen und morphologiscben Studien uber Habitus
und milffoskopischen Bau der Kolonie haben zu folgenden Ergebnissen ge-
fuhrt:

1. GroSe und Form der Bakterienkolonie werden in wesentlicben nicht
von Kraften bestimmt, die dieser selbst innewohnen, sondern von &uBeren
Faktoren.

2. Zu den wielitigsten dieser Faktoren geboren der Widerstand des
Nahrbodens und seine Erschopfung bzw. Vergiftung.

3. In der Bakterienkolonie gibt es keine Emabrung der Zellen auf
Distanz, vde etwa im Kallusge'webe boberer Pflanzen.

4. Regenerations- und Korrelationserscbeinungen sind an Bakterien-
kolonien nicht wahrnebmbar.

5. Mischkulturen verbalten sieb je nacb ibrer Zusammensetzung ver-
scbieden. Die einzelnen Komponenten konnen in einer Kolonie raumlicb ge-
trennt zur Entwicklung kommen. MaBpblicb sind die Ausbreitungsgeschwin-
digkeit und zuweilen aucb antagonistische Wirkungen der einzebaen Arten.

6. Gewisse Bakterienkolonien abneln sehr einem Thallus. Jedocb be-
steht diese Abnlichkeit nur SuBerlieb.

7. Die Bakterienkolonie bildet eine ZeUgemeinscbaft eigener Art.
Sie kann weder als regelloser ZeUbaufen nocb aJs ein Zellverband boberer
Ordnung betracbtet werden.

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les Mycobacteria. (Preslia. Prague 1932.) — 9. Legroux, B. et Magrou, J,
Etat organise des colonies bactenennes (Ann. Inst. Pasteui 1921.) — 10. P r a t , S.,
Studie o biohthogenesi. (Praha 1929.) — 11. Yanni, S, Recherches de variations
sur les germes cidtives en association avec le bacille tuberculeux. (Boll, di Microbiol.
Milano 1934 ) — 12 Wikullil, L, Wachstumsverhaltnisse in Baktenen-

populationen. (Zentralbl. f. Bakt., I. Ong. Bd 126. 1932.) — 13. Winslow,
0. E. A.. The rise and fall of bacterial population. (Jordana. Falk. Chicago 1928.)

13*

196

AUgemeines und Methodisches.

Referate.

AUgemeines und Methodisches.

Linderstrom, K., and Hotter, H., Studies on enzymatic histo-
chemistry. V. A micro-method for the estimation
of sugars. (Comptes rendus Laboratoire Carlsberg. Vol. 19. 1931
—1933. Nr. 14.)

Zur mikroanalytischen Bestimmung der Saccharase-, Maltase- und
Amylase-AktivitSit wurde die bei der enzymatischen Spaltung frei wer-
dende Hexosemenge (Glukose) ermittelt. Der Zucker mirde in alkalischer
Losung (Natriumkarbonat-Bikarbonat-Puffer vom ph-Wert 10,6) durch Jod
zu Glukonsaure oxydiert und der JodiiberschuB in saurer LSsung durch
Natriumthiosulfat zurucktitriert. Fur die Zveeke der Mikroanalyse waren
besondere Vorkehrungen erforderlich, die vor allem peinlichste Sauberkeit
der Gefafie ziim Ziel hatten und femer verhindern sollten, daB kein Jod
■wahrend der Titration durch Verdampfung verlorenging. Wie im einzelnen
verfahren vnirde, m6ge in der Originalarbeit nachgelesen werden.

Engel (Berlin).

linderstrom-Lang, E., and Hotter, H., Studies on enzymatic
histo-chemistry. VI. A micro-method for the esti-
mation of ammonia. (Compt. Bend. Laboratoire Carlsberg.
Vol. 19. 1931—1933. Nr. 20.)

Als ■weitere der in der 1. Mtteilung (Compt. Bend. Laboratoire Carls-
berg. Vol. 19. Nr. 4) angekundigten Mikromethoden bringen Verff. in vor-
liegender Arbeit ein Verfahren zur Bestimmung auBerordentlich kleiner
Mengen von Amm onia, k, Als Beispiel dient die Spaltung von Harnstoff
durch Urease. Enzymatische Umsetzung, Destination des entstandenen
NHj sowie Titration desselben finden gemeinsam in einer kleinen Kapillare
statt, die nicht langer als 26 mm ist und einen inneren Durehmesser von
3,8 mm hat. Mengen bis zu 1,4 x 10-® mg N kSnnen noch mit groBer Ge-
nauigkeit erfaBt werden, und die groBte Menge soil zweekmaBig nicht mehr
als 2,8 X 10-® mg N betragen. Engel (Berlin).

Gliek, D., Studies on enzymatic histochemistry VIII. A
micro method for the determination of lipolytic
enzyme activity. (Comptes rendus Laboratoire Carlsberg. Vol. 20.
1934. Nr. 5.)

Das Prinzip der Methode ist folgendes: Dem zu spaltenden Substrat
(Methylbutyrat) wird ein alkalischer Puffer zugesetzt, der im optimalen
Beaktionsbereich der enzymatischen Umsetzung wirksam ist. Als solcher
eignete sieh eine Mischung von GlykokoU und NaOH bestimmter Konzen-
tration (ph 8,7). Naeh Zugabe des fettspaltenden Enzyms bildet sich freie
Buttersaure, die einen Teil des NaOH neutralisiert, ohne daB dabei der
ph-Wert wesentlich absmkt. Die Umsetzung wird nach einer bestimmten
Zeit durch Zusatz von Phenol sistiert und der iibriggebliebene Alkalirest
mit HCl und Bromthymolblau als Indikator auf den ph-Wert 6,5 titriert.
Aus der Differenz des so erhaltenen Wertes und der Anfangstitration iSBt
sich die Menge der entstandenen Buttersaure und damit die Enzymaktivitat
herechnen. £i welcher Weise diese Methode den besonderen Anforderungen
der Mikroanalyse gereoht wird, mdge im Original nachgelesen werden.

Engel (Berlin).

Allgemeines tmd Hethodisohps.

197

Gay, F. P. und Clark, A. B., The differentiation of living
from dead bacteria by staining reactions. (Journ.
of Bacter. Vol. 27. 1934. p. 175 — 189.)

Eine cingehende Nachprufung der von Proca-Kayser ange-
gebenen Farbemethode zur Untorscheidung lebender und toter Bakterien-
zcllen ergab, daB diese Methode, wemi die Bedingungen streng eingehalten
werden, durchaus zuverlkssig ist. Es lassen sieh einvrandfrei dutch chemische
und physikalische Einwirkungen abgetotete Bakterien nachveisen. Abge-
thtete Bakteriensporen vrerden im Gegensatz zu den rot geflrbten toten
Bakterienzellen blau gefarbt. Der verschiedene Ausfall der Farbung bei
lebenden und toten Zellen ist wahrscheinlich auf Veranderungen der Per-
meabilitat und der reaktiven Gruppen zuriickzufiihren, es handelt sich be-
stimmt nicht um eine einfache Veranderung der Keaktion der Bakterien-
zelle. Ein ein-vrandfreier Nachweis dafur, dal bei der Phagocytose eine Ab-
totung der Zellen stattfindet, ist 'vreder mit der Proca-Kayser - Methode
noch mit der von Bordet und M e s n i 1 zu erbringen. Die bei der
Phagocytose bei der Neutralrotfarbung auftretenden Erseheinungen sind in
erster Linie auf Veranderungen der Eeaktion der Vakuolen zuruckzufiihren.

Rich ter (Kiel).

Hall, H. H. und Lothrop, E. E., The use of clarified honey
in culture media. (Joum. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 349—355.)

Die Verwendung von Honig-Agar (1 Teil Honig -1- 2 Teile 3proz. Nahr-
agar, pn = 6,8 — 7) fiir die Zuehtung und Identifizierung von bestimmten
Hefen hat in den letzten Jahren mehr und mehr zugenommen. Durch seinen
hohen Gehalt an Zucker und gleiehzeitig an Mineralsalzen ist dieser Nahr-
boden anderen NahrbSdon iiberlegen. Als Nachteil muBte bisher angesehen
vrerden, daB bei der Mischung beider Bestandteile eine Ausfloekung eintrat,
die die Herstellung klarer Nahrboden unmSglich machte. Lochhead
und Farrell hatten bereits 1931 nachgewiesen, daB durch Behandlung
mit Fullererde die das Hefewachstum aktivierenden Bestandteile des Honigs
nicht entfernt vrerden. Von dieser Tatsache ausgehend gelang es Verff.,
eine Methode zur Klarung des Honigs auszuarbciten, die die Eignung zur
Herstellung von Honignahrbhden nicht beeintrachtigt. 750 g Honig v'erden
mit 600 ccm Aqua dest. gemischt und im Wasserbad auf 50® erwarmt, dann
"werden 200 ccm einer 5proz. Aufschv'emmung von Bentonit (Klkrerde)
hinzugefiigt und die Mischung 15 Min. bei 50® gehalten. Nach Filtration
wird im Vakuum bei niederer Temperatur auf &e urspriingliche Konzen-
tration des Honigs eingedampft. Der geklarte Honig wird dann in ublicher
Weise versvendet. Verfi. glauben, daB das Verfahren auch fiir die Klarung
anderer NahrbSden verwendet vrerden kann. Richter (Kiel).

v. Angerer, K., t)ber die Verwendung von ein- und zwei-
farbigen Kontrastfilternin der bakteriologisohen
Mikroskopie. (Arehiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 110. 1933. S. 33 — 37.)

Es werden FilterlSsungen angegeben, die fiir ein oder fiir zwei Farben
durchlassig sind und die Verstarkung der gesuchten Objekte in reversibler
Weise gestatten. Der Zweck dieser FilterlSsungen ist der, sparlich vor-
handene Objekte besonders auffaJlig zu machen oder blaB gefarbte und
schwer erkeimbare Objekte kontrastreicher hervortreten zu lassen.

Rodenkirchen (K6nigsberg i. Pr.).

198

Allgemeines imd Methodisches. — Morphologie, Physiologie uaw.

Nielsen, N., A method for determining the velocity of
sedimentation of veast. (Comptes rendus Labor. Carlsberg.
Vol. 19. 1931—1933. Nr. 17.)

Die Hefesuspension kam in eine Burette, in der die Zellen sedimen-
tieren konnten. Nach 4 Std. vnirden die unteren 12,6 cem abgelassen und
in 10 cem davon wurde der Troekensubstanzgehalt der abzentrifugierten
Hefezellen bestimmt. Der so ermittelte Wert b wurde mit dem Trocken-
substanzgehalt a der in 10 cem der Original-Hefesuspension enthaltenen
Hefemenge verglichen. Der Quotient b/a diente als MaB der Sedimentier-
geschwindigkeit. Mit dieser Methods konnte nachgevdesen werden, dafi es
in einer Hefesuspension schneller und langsamer zu Boden sinkende Hefe-
zellen gibt. Die ersten zeichneten sieh durch hbheren N-Gehalt aus.

Engel (Berlin).

Morphologie, Physiologie und Systematik der Mikroorganismen;
Virus-Uniersuchungen.

Eingma Boltjes, T. X., Onderzoekingen over nitrifi-
ceerende Bacterien. (Delft. 1934. 191 S., 41 Abb.) [Holland.
Dissert, m. engl. Zusfassg.]

Nach kritischer Bespreehung der bisher auf diesem Gebiete vorliegenden
TJntersuchungen beriehtet Verf. iiber eigene Arbeitsergebnisse. Schon bei
der Anreicherung der nitrifizierenden Bakterien in groBen Erlenmeyer-
Kolben mit flaeher Nahrlosungsschicht boten sieh gewisse Schwierigkeiten.
Fur Nitritbildner erwies sieh die Nahrl6sung Winogradskys nicht
als optimal, 'srenn destill. Wasser und reine Salze verwendet •wiurden. Spek-
tralanalytische und ernahrungsphysiologische TJntersuchungen ergaben dann,
daB Ca fiir ein gutes Gedeihen der Bakterien unerlaBlich ist. Bei der Eein-
zueht mit Hilfe von nach besonderem Verfahren hergestellten Eeselgel-
Platten wurden die Bakterien in dem noeh nicht erstarrtenSol aufgeschwemmt.
Aus den so angereicherten Kulturen von Nitritbildnem wurden Reinkul-
turen als Einzellkulturen mit dem Mikromanipulator gewonnen. Nitrat-
bUdner-Beinkulturen lieBen sieh ohne Zuhilfenahme des Mikromanipula-
tors durch PlattenguB gewinnen. Die aus den verschiedenen Boden geziich-
teten Stamme gehSren zur Gattung Nitrosomonas bzw. Nitro-
b a c t e r. Die von Winogradsky aufgestellte Gattung Nitro-
socystis betrachtet Verf. als eine andere Entwicklungsform von Nitro-
somonas. Er halt es auch fiu: Tvahrscheinlieh, dafi die von Wino-
gradsky aufier Nitrobacter beschriebenen Nitratbildner nicht
nitrifizieren, sondern mit Bac. oligocarbophilus nahe verwandt
Oder identisch sind.

Die allgemein verbreitete Ansicht, daB organische Substanzen fiir die
nitrifizierenden Bakterien immer schadlieh oder indifferent seien, teilt Verf.
nicht. Nahrstoff-Heyden hbte sogar einen deutlieh gunstigen EinfluB auf
die Entwicklung der Nitritbildner aus. Das bessere Gedeihen derselben
in NahrbSden, die nicht mit destilliertem sondern mit Leitungswasser her-
gestellt warden, fiihrt Verf. auf darin enthaltene Spuren organischer Sub-
stanz zuriiek. Selbst in Nahrmedien mit 4% Glukose gelang Verf. die un-
gehemmte Nitrifikation und Vermehrung der Bakterien. Die Schadigung
trat erst ein, wenn die anorganische Eneigiequelle verbraucht war. Diese
ist ebensowenig wie die Kohlensaure durch organische Stoffe ersetzbar.
Der hemmende Etnflufi vonPepton ist auf darin enthaltene freie Amino-

JVIorphologie, Physiologie u. S3^tematik d. Mikroorganismen; Vzrus-Unters, 199

sauren zuruckzufiihren, die ebenso \vie einige andere «cbadigeiide organische
Stoffe offenbar das Atmungsfermentsystem blockieron.

Als haufiger Begleiter nitrifizierender Bakterien in Anreicherungs-
kulturen mirde Hyphomicrobium vulgare Stutzer et Hartleb
naber untersucht. Dieser eigenartige Mikroorganismus vermag ebenso wie
Bac. oligocarbophilus in den rein mineralischen Nahrbbden
zu gedeihen, weil er so anspmehslos ist, sick niit den in der Luft bewobnter
Raume vorhandenen Verunreinigungen organischer Natur zu begniigen.

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Orla-Jonsen, S., Hitherto unknown activators for the
growth of lactic acid bacteria. (Joum. of the Society
of Chemical Industry. Vol. 52. 1933. p. 374—379.)

Zucker sind fiir Milchsamrebakterien in den ersten Tagen der Bebriitung
praktisch erst dann vergarbar, wenn sie bei der Sterilisation mit Leitungs-
wasser infolge der geringfugigen Alkaliwirkung bis zu einem gewissen Grade
bereits aufgeschlossen sind Diese anfangliche Hemmung verliert sich,
wenn als Stickstoffquelle Hefeextrakt verwendet wird. Die akti-
vierende Wirkung des Hefeextrakts kann verglichen werden mit der ge-
koppelten Wirkung von Hormonen und Vitaminen. Von Wichtigkeit ist,
daB bei der gemeinsamen Sterilisierung (von Zucker und den ubrigen Stoffen
im selben Arbeitsgang) Methylglyoxal gebildet wird. Dieses iibt
aber als solches keinen aktivierenden EinfluB aus, sondem nur nach Zu-
sammensterilisierung mit autolysierter Hefe, also mufi die wirksame Sub-
stanz eine Verbindung von Methylglyoxal mit irgendwelchen N-haltigen
Stoffen sein. Diese Tatsache tritt um so mehr hervor, wenn man bei Ver-
suchen mit Milchsaurelangstabchen schwieriger angreifbare C-Quellen, wie
z. B. Rohrzucker und Inulin, anwendet. Bei Bact. acidophilum
ergab sich eine starke Vergarung erst dann, wenn der Rohrzucker zusammen
mit Hefeextrakt + Methylglyoxal erhitzt worden war. Da nach den mo-
dernen Theorien die Oxydo-Reduktion ein wesentlicher Bestandteil der
GSxungsvorgange ist, kann man leieht begreifen, daB Methylglyoxal als
gleichzeitiger Sauerstoff- und Wasserstoffakzeptor ein Katalysator fur die
MilchsauregSxung ist. Da von anderen Aldehyden Furfuraldehyd
ahnliche Ergebnisse zeitigte, wurden aueh Pentosen in die TJnter-
suchung einbezogen. Es zeigte sich, daB Arabinose und Xylose ahnliche
Wirkung hatten wie Methylglyoxal. Dies laBt vermuten. daB die aktivierende
Substanz Beziehungen hat zur Cozymase; dennEuler undMyrback
haben in der Hefecozymase das Vorhandensein von Pentose nachgewiesen.

K. J. Demeter (Weihenstephan-Miinchen).
Yamaha, G. und Abe, S., Weiteres iiber den isoelektrischen
Punkt bei Bakterien. (Science Reports Tokyo Bunrika Daigaku.
Section B. Vol. 1. 1934. p. 221.)

Folgende Bakterien wurden untersucht: Staphylococcus au-
reus, Sarcina lutea, Bacillus pyocyaneus, Bac.
pseudodiphteriae, Diplocoecus gonorrhoae, Bac.
subtilis, Bac. anthracis und Bac. proteus. AUe besaBen
mindestens einen isoelektrischen Punkt und zwar zwisehen pH 2 — 4. Die
nach der Flockungs- und nach der Kataphoresemethode erhaltenen Er-
gebnisse stimmten nicht immer ganz iiberein. Das Floekungsmaxim^
war meistens etwas weniger sauer als der Umladungspunkt, vermutlich
infolge der oberilaohlichen Ladung der Bakterienzelle. Engel (Berlin).

200 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-XJnters.

Hama, T., Studien iiber eine neue Eliodospirillumart
aus Yumoto bei Nikko. (Journ. of Science lEi’osluma TJniv.
Ser. B, Botany. Vol. 1. 1930—1933. p. 135.)

In den warmen, HaS-haltigen Quellen von Yumoto wurde eine neue
Ehodospirillumart mit folgenden Eigenschaften gefunden: Ecchtslaufige
Schraube; Dicke 1 — 1,2 /t, Lange 7 — 250 an beiden Enden, mitunter
auch an der Seite mit GeiBelzopfen verseben; Flexibilitat vorhanden; in
alteren Kulturen manchmal verzweigte Formen, sowie Individuon mit Plasma-
schwellungen; als Eeservestoff liefi sick Volutin nachweisen; Vermehrung
durch Querteilung; Zellen leicht plasmolysierbar, gramnegativ und fettann.
Da die Kulturen nicht ganz rein vraren, lieB sick iiber die physiologischen
Eigenschaften des Spirillums nickts Sickeres aussagen. Es wcks am besten
unter AussckluB des Luftsauerstoffs. Im Dunkeln fand keine Entwicklung
statt. Das Temperaturoptimum betrug etwa 26® C. Da die Eeinkultur
niekt gelang, konnte nickt entsckieden werden, ob das Spirillum zum auto-
trophen Leben befahigt ist. Engel (Berlin).

Hama, T., Nine species belonging to the order Tkio-
baeteriales Buchanan, found in Hiroshima. (Journ.
of Science Hiroshima University. Ser. B, Botany. Vol. 1. 1930 — 1933.
p. 157.)

Obgleick ihm die Eeinkultur nock niekt gelang, glaubt Verf. folgende
Sch'wefelbakterien besckreiben zu diirfen: Tkiospirillum erassum
Hama nov. sp., Thiosp. coccineum Hama nov. sp.. Chroma-
tium sphaeroides Hama nov. sp., Ckromatium minus
Winogradsky, Ckromatium gracile Strezeszewski, Thiospira
propera Hama nov. sp.. Eh o d o sp ir ilium gracile Hama
nov. sp., Beggiatoa alba Trevisan und Begg. arachnoidea
Eabenkorst. Auch die Fundorte werden besckrieben. Engel (Berlin).

Abe, S., On the syngamy of some myxomycetes. (Science
Eeports Tokyo Bunrika Daigaku. Section B. Vol. 1. 1934. p. 193.)

Verf. beobachtete bei einer Eeihe von Schleimpilzen (Fulgio sep-
tica, Erionema aureum, Didymium nigripes, Pky-
sarum crateriforme und Stemonitis fuse a) folgenden
Sexualvorgang: die Sporen entlassen geschlecktlick differenzierte Schwarmer,
Planogameten. Zwei morphologisck v6llig gleiche Planogameton vereinigen
sick darauf zur Planozygote, wobei Kernversckmelzung stattfindet. Die
Planozygote -wirft bald ihre GeiBel ab und "wird amSboid. Viele soleher
amoboider Zygoten vereinigen sick sodann zum Plasmodium. Die Kerne
des Plasmodiums smd demnach diploid. Bei den kopulierenden Sekwarmern
handelte es sick um Anisogameten, me einmal die Art der Zellverschmelzung
zeigte (Konjugation) und wie sick weiter aus dem Verkalten gegenuber
bestimmten Farbstorfen und lonen ergab. Die weiblichen Gameten waren
positiy geladen und besaBen ein kleineres Oxydations-Eeduktionspotential
als die negativ geladenen mannlichen Schwarmer. Engel (Berlin).

Kostytsehev, S., and Serg, V., Eesults of laboratory work
tending to ascertain the conditions of the ex-
perimental factory organisation of biochemical
production of citric acid. (Bull, of the State Inst, of Agric.
llierobiol. USSE. Vol. 6. 1933. p. 8 — 27.) [Euss. m. engl. Zusfassg.]

Morphologie, Physiologie u. S3^tematik d. Mikroorganismen; Virus-TJnters. 201

Fiir den Umfang der ZitronensSiirebildung durch Aspergillus
n i g e r sind die Kulturbedingungen von wesentlicher Bcdeutung. Der
Pilz wurde nach dem Verfahren von Kostytschev auf NaMosung
berangezuchtct und dann auf eine reine Zuckerlosung iibertragen. Die
grOBte Ausbeute an Zitronensaure wurde erhalten, wenn der Pilz 2 Tage
auf der Nahrlosung verblieb und 4 Tage auf der Zuckerlosung, deren Kon-
zentration 20%, und deren Schichtdicke 1 cm betragen soil. Unter diesen
Bedingungen werden bis 55% des fiir die TJmsetzung bestimmten Zuckers
in Zitronensaure verwandelt. Bei einer 8 — Otagigen anstatt 4tagigen Fer-
mentationsdauer konnen auch 40proz. Zuckerl6sungen verwandt werden.
Die Ausbeute betragt dann bis 50%. B o r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Schwartz, W. und Lang, H., TJntersuchungen iiber die Zitro-
nensauregarung bei Aspergillus niger. (Arch. f. Mikro-
biol. Bd. 5. 1934. S. 387—401.)

Ziichtung von Aspergillus niger auf Zitronen fuhrt zu einer
starken Abnahme des Vermogens der Zitronensaurebildung, das wieder
durch Kultur auf Gelatine gesteigert werden kann. Durch Zusatz geringer
Mengen von Gelatine zur Nahrlosung (0,1%) kann eine kraftige und kon-
stante Zitronensaurebildung erzielt und, bei Verwendung junger Sporen
zur Impfung (bei Impfung mit sehr alten Sporen sinkt die Zitronensaure-
bildung), aiSrechterhalten werden. Zusatz von Minpralsaure verhindert den
sonst ebenfalls durch Gelatinezusatz gesteigerten Abbau der Zitronensaure.
Auf angewendeten Zucker betragt die Ausbeute an Zitronensaure so 40—45%.

Zusatz von Arsenverbindungen begiinstigte die Zitronensaurebildung in
einigen Fallen unwesentlich, Chloroformzusatz wirkte ungiinstig, ebenso
Kaliumcyanid, das indessen hauptsachlich durch Yerzogerung der £nt-
wicklung schlechte Zitronensaureausbeuten ergab.

Zur Trennung von Zitronen- und Osalsaure auf Grund der verschiedenen
Losliehkeit ihrer KAlksalze wird das analytische Verfahren exakt ausgearbeitet.

R i p p e 1 (GSttingen).

Berg, V., Ascertaining of the optimum medium for
the cultivation of the activ Aspergillus niger,
and means of increasing acid formation in little
active races of the fungus. (Bull, of the State Inst, of Agric.
Microbiol. USSR. Vol. 5. 1933. p. 28 — 36.) [Russ. m. engl. Zusfassg.]
Von den sehr vielen untersuchten naturlichen Nahrboden erwies sich
Mostagar als der geeignetste zur Zuchtung von Aspergillus niger-
Stammen, die zur Gewinnung von Zitronensaure Varsrendung finden sollen.
Die Fahigkeit zur Zitronensaurebildung wird auf diesen Nahrbfiden bei
schwach wirksamen Rassen gestarkt und bleibt dann konstant, besonders
wenn regelmafiig in Abstanden von etwa 5 Tagen ubergeimpft wird.

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

ledeboer, M. S. J., Phy siologisehe on d er z o eking en over
Ceratostomella ulmi (Schwarz) Buisman. (Baarn.
1934. 95 S.) [Holland. Dissert, m. deutsch. Zusfassg.]

Die physiologischen Untersuchungen an dem Erreger des bekannten
Ulmensterbens wurden vomehmlich in synthetischen NahrlSsungen durch-
gefiihrt. Der Pilz wuchs schon gut bei 8]^® C, am besten bei 26“ C. Die
Coremienbildung wurde besonders durch den TeU des SonnenRohtes ge-
fSrdert, der durch gewShnliches Glas nicht absorbiert wird. Beim, EinfluB

202 Morphologic, Physiologic u. Systematik d. Mikroorganismen; Viias-Unters-

des pH-Wertes auf das Wachstum zeigte sich eine Abhangigkeit dieser Wir-
kung von der Zusammensetznng der Nahrlosung. Fiir die einzelnen Nahr-
stoffe wurde festgestellt, daB als Kohlenstoffquelle Saccharose brauchbai’er
ist als Glucose, und daB Zellulose uberhaupt nieht angegriffen vird. Als
Stickstoffquelle konnen Ammonsalze, Asparagin und Pepton Verwendung
finden, Mtrate dagegen nieht. Kalium wurde als KHjPO, oder KgSO*
gegeben. Koehsalz wkte stets schadlich, wahrend Magnesium fiir den
Pilz unentbehrlich ist. Eisen soil dagegen entbehrlich sein. Auf das Myzel-
wachstnm sind geringe Mengen Zink von gunstigem EinfluB. Mit ebenfalls
geringen Mengen von Calcium, Kupfer, Mangan und Quecksilber wurden unter
gewissen Bedingungen „stimulierende“ Wirkungen erzielt. Auch durch Bios
wird das Wachstum anfangs stark gefdrdert, wonach dann allerdings ver-
starkte Autolyse einsetzt. Aus alien diesen Untersuchungen haben sich keine
Anhaltspunkte fiir Bekampfungsmdglichkeiten mit chemischen Mtteln ergeben.

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Nadson, 6. und Rochlina, E., tJber die Wirkungszone, die
sterile Zone und die biologische Dosimetrie des
E a d i u m s. (Ann. de Eoentg. et de Eadiol. T. 13. Nr. 1 — 2. 1934.
p. 23 — 24.) [Russisch.]

Bierwurze-Agar in der Petri schale wurde mit Sacch. cerevi-
s i a e XII besat und in die Mitte der Schale eine Kapillare mit Radon ge-
setzt. In der Umgebung der Kapillare entsteht eine sterile Zone, deren
Ausdehnung in unmittelbarer Abhangigkeit von der angewandten Dosis
stand. Die Form der sterilen Zone veranderte sich gleichfaUs in Abhangig-
keit von der Dosis. Bei geringen Dosen (1,8 — 5,4 me.) ist sie elliptisch, und
zwar entspricht die lange Achse der Ellipse der Achse der Kapillare; bei
starkeren Dosen nahert sich die sterile Zone der Kreisform und bei noch
hoheren Dosen (6,6 — 7,4 me.) wd sie meder elliptisch, jedoeh liegt die
lange Achse der Ellipse perpendikular zur Achse der Kapillare. Die Dosis
7,4 me. zerstSrt alle Hefezellen. mit Ausnahme der an den Enden der Kapil-
lare gelegenen Teile des Nahrbodens. Der biologische Effekt kurzandauern-
der Wirkung starkerer Dosen ist geringer, als der EinfluB kleinerer Dosen
•wahrend langerer Zeit. Wirkt die gleiche Dosis 24 Std. oder 4 Tage, so ist
im zTveiten Fall die sterile Zone viel ausgedehnter. Bei kurzandauernder
Bestrahlung mit starkeren Dosen laBt sich auf eine bedeutende Strecke
uber die Grenze der sterilen Zone hinaus Undichtigkeit des Wachstums
beobaohten, infolge der Zerstorung schwacherer Zellen. Das Wirkungsfeld
des Radons ist viel ausgedehnter, als die sterile Zone. Es lassen sich 6 Zonen,
von denen jede ihre Eigenart besitzt, feststellen. 1. Die Zone der Nekrose
Oder die sterile Zone. 2. Die Hemmungs- und Degenerationszone, deren
Kolonien kleine Zellen mit viel Fetttropfehen und Riesenzellen mit dicker
Membran, die Dauerzellen ahnlich sind, enthalten. 3. Die Zone der Stimu-
lierung, die Kolonien bestehen aus runden, energisch sprossenden Zellen
und aus in die Lange gezogenen ZeUen. 4. Die Zone der subnormalen Zellen,
die etTvas mehr Fett enthalten, als in der Norm und deren Plasma starker
liehtbrechend ist. 5. Die Zone der normalen Zellen. Aus einer Zelle kulti-
vierte Hefe bietet ein gutes biologisches Testobjekt fiir Eadiumdosierung.

A. ImSenecki (Leningrad).

Nielsen, N., Investigations on the effect of age upon
the nitrogen content of yeast. (Comptes rendus Labor.
Carlsberg. Vol. 19. 1931—1933. Nr. 16.)

Morphologie, Physiologie u, Systematik d. Alikroorganismen ; Virus-Unters. 203

Der Gehalt der Hefezellen an Stickstoff war in ganz jugendlichen Kulturen
am lidchsten. Er nalim mit fortsehreitender Vermehrung der Zellen ab.
urn spater mit dem Aufhdren des Waehstums wieder etwas zuzunehmen.

Engel (Berlin).

Gwynne-Vauglian, H. C. J., and Williamson, H. S., The cytology and
development of Ascophanus aurora. (Annals of Botanv.
Vol. 48. 1934. p. 261.)

Der Pilz lebt saprophytisch in den Kotballen der Schafe. Er gehdrt
in die Gruppe der Discomyceten, Hhnelt Pyronema confluens,
unterscheidet sich aber von diesem durch seine Kleinheit und Zierlichkeit,
ist homothallisch und mondziseh, wie sich daraus zu erkennen gibt, dafi
sich seine Askusfruchte im Einspormyzelium entwickeln. Mehrere Sexual-
organe bUden ein Apothezium. Auffallend ist die geringe Zahl der Kerne:
im Antheridium 4—10, im Oogonium 8 — 20. Der Befruchtungsvorgang
wird genau beschrieben und durch zahlreiche Abbildungen illustriert.

Engel (Berlin).

GaBner, G. und Straih, W., Untersuchungen iiber das Auf-
treten b i o 1 o gi s c h er Kassen des W e i z en g elb r o s t e s
i m J a h r e 1932. (Arb. d. Biolog. Eeichsanstalt. Bd. 21. 1934. S. 59
—72.)

In 77 Proben von Puccinia glumarum aus59 verschiedenen
Herkunftssorten warden insgesamt 11 verschiedene Rassen festgestellt.
AuBer den bisher festgestellten Rassen 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9 und 12 warden
die Rassen 15, 16 und 17 neu gefunden. Am haufigsten warden die Rassen
2, 3 und 5 festgestellt. Die Rostanalysen erfolgten in der friiher beschrie-
benen Weise. Das Bestimmungssortiment wmde um eine Weizensorte
Rouge prolifique barbu erweitert. Diese Sorte wurde bisher
als Erganzungssorte gefuhrt. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Bonsdorf, L., Einige Yersuche liber biologische Rassen
des Gerstenzwergrostes. (Arb. d. Biolog. Reichsanstalt. Bd. 21.
1934. S. 109—114.)

Das von Hey vorgeschlagene Bestimmungssortiment wurde durch
Hinzunahme der Agyptischen 4 zeiligen Sommergerste erganzt. In 6 versehie-
denen Zwergrostherkiinften konnten die Rassen HI, IV und IK festgestellt
werden. Davon ist die letzte als neu beschrieben. Bei den Versuchen er-
gaben sich bei den Rassen II— V vielfach h&here Infektionstypen, als von
Hey ermittelt warden. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

GaBner, G. und Straib, W., Weitere Untersuchungen liber
biologische Rassen und liber Spezialisierungs-
verhaltnisse des Gelbrostes Puccinia glumarum
(Schm., Erikss. und Henn.). (Arb. d. Biolog. Reichsanstalt.
Bd. 21. 1934. S. 121-145.)

Aus 95 Gelbrostproben, die 1933 an 59 verschiedenen Orten gesammelt
warden, warden 18 verschiedene Gelbrostrassen bestimmt. Davon waxen
5 Rassen, 1 aus Deutschland und 4 aus dem Ausland, neu. Die Rassenverbrei-
tung hBi^ zwar von den Anbauverhaltnissen der verschiedenen Sorten ab.
Jedoch miissen nach Ansicht der Verff. auch die Weohselbeziehungen zwisehen
Klimafaktoren und den toch diese bedingten Resistenzverschiebungen der
Sorten zur KlSxung herangezogen werden. Der auf Gerste und Quecke ge-

204 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganisnaen ; Virus-Unters.

fundene Gelbrost erwies sioh als identiseh mit Basse 4. Bei der Prufung von
einer grSBeren Zahl von Gelbrostrassen von Weizen zeigte sich, daB alle
Eassen auf bestinimte Gerstensorten und anf Quecken iibergehen kdnnen.
Aucb bei Infektionsversucben mit 38 Eoggensorten vnu'den in schwachem
MaBe Infektionen dureh Gelbrost von Weizen boobachtet. Anf Gmnd ihrer
Versiiche sind Verff. der Ansicht, daB die von Eriksson yorgeschlagcne
Einteilung von Puceinia glumarum in formae speciales oder bio-
logiscbe Arten nicht aufreebterhalten urerden kann.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Bever, W. M., Effect of light on the development of
the uredial stage of Puceinia glumarum. (Phyto-
pathology. Vol. 24. 1934. p. 507—516, 3 figs.)

Ein 12-Std.-Tag verSnderte gegeniiber einem 6-Std.-Tag nicht den
Infektionstyp von Puceinia glumarum bei Temperaturen von
7—10® C und von 13 bis etm 16® C. Bei kiirzeren Tagen -wurde jedoch die
Inkubationszeit verlingert. Bei einer Tageslange von iiber 12 Std. bleibt
die Inloibationszeit unverandert. Der Infektionstyp -wechselte jedoch von
4 zu 0. Hohe Lichtintensitat verkiirzte die Inkubationszeit und begiinstigte
die nachfolgende EntwicMung des Pilzes, wahrend bei niedriger Lichtinten-
sitat der Eost nicht voll zum Ausbruch kam. Gute Infektionen wurden
erhalten, weim die Pflanzen nach der Infektion belichtet vrurden, nachdem
sie vorher 48 Std. lang beschattet wurden. In alien FaUen muBten die Pflanzen
mit Glasglocken bedeckt werden, um die notwendige Feuchtigkeit zu haben.
TJredosporen, die bei niedriger Lichtintensitat gebildet wurden, keimten nicht
in Kultur, mit ihnen wurden jedoch gute Infektionen erzielt. Bei iiber 22® C
gingen Infektionen nicht mehr an. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Bondorf, 1., tJber Plasmolyse und Vitalfarbung bei
Sporen und jungen Keimschlauehen und Getreide-
rostpilzen. (Phytopath. Ztschr. Bd. 7. 1934. S. 31 — 42.)

Wahrend die Keimungsvorgange der Eostsporen eingehend untersucht
worden sind, liegen fiber Stoffaufnahme und Permeabilitatsverhaltnisse von
Sporen und wachsenden Keimschlauehen nur wenige Angaben vor. Verf.n
hat Plasmolyseversuche mit solehen vorwiegend von Puceinia simplex
durehgeffihrt. Der osmotische Wert war bei den Sporen etwa 1,3 mol Eohr-
zueker, bei den Keimschlauehen 0,9. Bei Verwendung von CaClj lagen die
Werte stets h6her, w'as mit dessen schnellerem Eindnngen in Zusammen-
hang gebracht wird. Der Parasit weist auch bedeutend hShere Werte auf
als seine Wirtspflanze. Ein Einflufi von Temperatur, Licht und Alter der
Sporen auf den osmotischen Wert konnte nicht festgestellt werden. Langerer
Aufenthalt in plasmolysierenden LSsungen beeintrachtigt die Keimffihig-
keit der TJredosporen der meisten Eostarten sehx stark oder verhindert sie
ganz, wobei wiederum Unterschiede zwischen CaClg und EohrzuckrelSsungen
festgestellt werden koimten. Vitalfarbungsversuche mit Methylenblau und
Keutralrot deuten darauf bin, daB eine Ffirbung von Sporen und Keim-
schlauchen vor dem AbtSten derselben eintritt. Braun (Berlin-Dahlem).

Benny, F. E., Oxygen requirements of Keurospora sito-
phila for formation of pbrithecia and growth of
mvcelium. (Contributions from Boyce Thompson Institute. Vol. 5.
1933. p. 95.)

Morphologie, Physiologie; Virus-'Cnters. — Enzpnologie u. Bakteriophagie. 205

Die Bildung der Perithezien von Neurospora sitophila er-
folgte bei Zinimertemperatur nocb bei einem Oj-Gehalt der Luft von 1—2
Vol.-%. Darunter blieb sie aus. Die Bildung der Perithezien war auch stark
von der Temperatur abhangig. Bei 10® C blieb sie ohne Riieksicht auf die
02-Konzentration vollstandig aus, bei 15® trat sie gelegentlich auf. Da-
gegen war das Waehstum des My eels viel weniger sauerstoff abhangig. Noch
bei 0,3% Og fand rasches Waehstum statt, und selbst bei 0,01% und tiefer
konnte Weiterentwieklung des Myeels beobachtet werden. Erst in vSllig
Og-freier Atmosphare unterblieb das Waehstum. Engel (Berlin).

Cartwright, K. St. G., and Pindlay, W. P. K., Studies in the phy-
siology of wood-destroying fungi. II. Tempera-
ture and rate of growth. (Annals of Botany. Vol. 48. 1934.
p. 481.)

Verff. bestimmten die Temperaturkurven folgender holzzerstorender
Pilze: Merulius lacrymans, M. Sylvester. Coniophora eerebella, Lentinus
lepideus, Lenzites trabea, L. betulina, Poria vaporaria, Daedalea quereina,
Polystietus versieolor, Ganoderma applanatum, Trametes gibbosa, Tr.
serialis, Sehizophyllum eommune, Pleurotus ostreatus, Fomes cryptarum,
F. annosus, Stereum hirsutum, St. purpureum, St. spadiceum, St. frustu-
losum, St. rugosum, Paxillus panuoides, Polyporus adustus und P. fumosus.
Als MaB des Waehstums diente der tagliche Zuwachs des Myzels auf Malz-
extraktagar. Jeder Pilz hatte charakteristische Kardinalpui±te und wuehs
mit einer bestimmten Gesehwindigkeit, so daB die Temperaturkurve als
wiehtiges Hilfsmittel zur TJnterseheidung der verschiedenen holzzerstdrenden
Pilze dienen kann. Sie gibt aueh AufschluB uber bestimmte 6kologische
Fragen sowie tiber die geographisehe Verbreitung der Pilze.

Engel (Berlin).

Enzymologie und Bakteriophagie.

Tanner, P. W. und Byerley, J. R., The effect of ultraviolett
light on the fermenting ability of Yeasts. (Archivf.
Mikrobiologie. Bd. 5. 1934. S. 349—357.)

Die Verff. iiberpriiften neuere Behauptungen, wonach Ultraviolett-
bestrahlung von Hefe bzw. auch lediglich des Substrates vor derlmpfung
Garung und Vermehrung beforderten. Sie fanden indessen bei Bestrahlung
von Hefe in Dextrose-Fleischbriihe vor und nach Eintritt der Garung
in waBriger Aufschwemmung und von Dextrosefleischbriihe langere Zeit
vor der Impfung niemals fordemde, sondern nur schadliche Wirkungen, ge-
messen an der Gasbildung. Rip pel (Gdttingen).

Haritantis, B. J., Einige Beobachtungen uber die Stick-
stoffbindung durch Leguminosensamen. (Ztschr. f.
Pflanzenemahr., Diingung u. Bodenkunde. Teil A. Bd. 34. 1934.
S. 257.)

Verf. prtifte die Beobachtungen Vitas nach Biochem. Ztschr. Bd. 245.
S. 210; Bd. 252. S. 278; Bd. 255. S. 82), wonach keimende Legumi-
nosen den atmospharischen Stickstoff mit HiUe eines „Azoligase“ genannten
Enzyms binden konnen. Die Befunde Vitas warden bestatigt. Da aber
sowohl den Versuchen Vitas wie aueh Verf.s ein prinzipieUer Fehler an-
haftet, und da es sich hier um eine Frage von allergroBter Bedeutung han-

206

Enzymologie und Bakteriophagie.

delt — wiirde doch die K-Bindung bei den Le^iminosen kein rein bakte-
rieller Vorgang mehr sein — mufi auf die Ausfiihrungen Verf.s ndher ein-
gegangen werden. Der Gesamtstickstoff der Samen wSbrend der Keimung
wurde auf Trockensubstanz bezogen. Da aber die Trockensubstanzmenge
■wahrend der Keimung abnimnit, mufi der relative N-Gebalt bei gleichbleiben-
der absoluter K-Menge zunehmen. Mit dem Entfalten und Ergriinen der
ersten Blatter und der beginnenden Photosynthese mufi dann natumotwendig
der relative N-Gehalt vrieder abnehmen. Hiermit steben folgende Beobach-
tungen Verf.s in bester tlbereinstimmung: 1. Die Zeitkurve des Gesamt-N
besafi ein typisches Maximum. Diese Erscheinung veranlafite Vita wie
auch den Verf. dazu, der „Azoligase“ nicht nur die Pahigkeit zur N-Bin-
dung sondern auch zur N-Entbindung zuzusehreiben. 2. Im Dunkeln trat
der nachtragliche N-Verlust entweder iiberhaupt nicht ein, oder aber er war
im allgemeinen wesentlieh geringer als im Licht und lag dann meistens inner-
halb der mSglichen Abweichung der Parallelen. Da im Dunkeln photo-
synthetische Wgdnge nicht erfolgen, war diese Erscheinung durchaus er-
Idarlich. 3. Bei Luftabsehlufi waren die N-Gewinne geringer. Auch das ist
erklarlich, da unter anaeroben Verhaltnissen der Keimprozefi gestSrt, zu-
mindest aber die Trockensubstanzabnahme wesentlieh herabgesetzt ist. Es
liegt also vorlaufig noch kein Grund vor, fiir die Leguminosen eine „Azoli-
gase“ als Ursache der N-Bindung anzunehmen, und unsere bisherigen Vor-
stellungen iiber die Bedeutung der Knollchenbakterien zu andern. Es ist
zunachst eimnal nachdriicklichst zu fordern, dafi bei derartigen Versuchen
der N-Gehalt der Samen nicht in Prozenten der Trockensubstanz, sondern
in absoluten Zahlen mitgeteilt wird. Kur so lafit sich entscheiden, ob man
es tatsachlich mit N-Gewinnen zu tun hat. Engel (Berlin).

Sato, M., Studies of proteolytic enzymes. VII. On the
peptidase of green malt. (Compt. Bend. Laboratoire Carls-
berg. Vol. 19. 1931—1933. Kr. 1.)

Die TJntersuchungen machten wahrscheinlich, dafi der Peptidasekomplex
im Malz (wie in der Hefe) zusammengesetzter Natur ist. Das ergab sich
aus Versuchen, bei denen die Spaltungsgeschwindigkeit von Alanylglycin
und Leucylglycin sowie von einigen noch hoher zusammengesetzten Pep-
tiden ermittelt wurde. Je nach der Herstellung des Enzympraparates, vor
aUem jedoch nach der Konzentration der Dipeptidmischungen, verlief die
Aufspaltung verschieden schnell, so dafi die Ansicht nicht von der Hand
zu weisen war, dafi mindestens zwei Peptidasen wirksam waren. Die eine
zeigte grofiere Affinitat zum Alanylglycin (Nr. I), die andere zum Leucyl-
glycin (Nr. II). Die erste arbeitete optimal bei etwa ph 7,9, die andere bei
etwa 8,6. Engel (Berlin).

Sato, M., Studies of proteolytic enzymes. VIII. Note
on the stability of the enzymes of malt. (Compt.
Eend. Laboratoire Carlsberg. Vol. 19. 1931 — 1933. Nr. 2.)

Die Versuche stSrkten Verf. in der Annahme, dafi man es beim Pepti-
dasekomplex im Malz mit mindestens zwei verschiedenen Enzymen zu tun
hat. Eskonnte namlich gezeigt werden. dafi je nach den Versuchsbedin-
gungen entweder die Alanylglycin oder Leucylglycin bevorzugt spaltende
Peptidase bestandiger ist. So verier z. B. das Alanylglycin hydrolysierende
Enzym in Extrakten, die mit 88% Glycerin hergestellt waren, selff schnell

Enzymologie und Bakteriophagio. — Mikrobiologie der Nahrungsmittel. 207

seine Wirksamkeit, wahrend die Leucylglycin-Peptidase im Gegenteil sta-
bilisiert wTirde. " * Engel CBerlin).

Linderstrom-Lang, K., and Bolter, H., Contributions to the
histological chemistry of enzymes. 1. The esti-
mation of small cleavages caused by enzymes.
(Compt. Kend. Laboratoire Carlsberg. Yol. 19. 1931—1933. Nr. 4.)

Die Unzulanglichkeiten der bisherigen Methoden zur Bestimmung von
Enzymaktivitaten in Fallen, in denen es sich um die TJntersuchung kleiner
Gewebselemente oder nur "weniger Zellen handelt, veranlaBten Verff. zur
Ausarbeitung einer ganzen Reihe von Mikromethoden. Es sei auf diese
hier kurz hingewiesen, da sie sich auch fur die durch Mikroorganismen hervor-
gerufenen Spaltungen und Garungen besonders eignen. In der vorliegenden
I. Mitteilung wd eine Methode zur Bestimmung der Peptidase-Aktivitat
in Vorschlag gebracht. Im Prinzip vrird der naeh der Hydrolyse am Amino-
saure-Molekiil freigewordene NH^-N mit alkoholischer Salzsaure in Azeton-
iSsung titriert. Neu an der Methode sind die winzigen EeaktionsgefaBe,
Biiretten, Pipetten und sonstigen Titriervorrichtungen, die infolge der un-
gewfihnlich kleinen Fllissigkeitsmengen ganz besondere Veranderungen
erforderten. Diese werden eingehend beschrieben und durch eine Reihe
von Zeichnungen illustriert. Engel (Berlin).

Mikrobiologie der Nahrungs-, GenuB- und Futtermittei.

Stark, C. N., Gordon, R., Mauer, J. C., Curtis, L. R., and Schubert, J. H.,
Studies on Acidophilus milk. (Am. Joum. of Publ. Health.
Vol. 24. 1934. p. 470—472.)

Von insgesamt 2172 Stuhlproben von 124 versehiedenen Personen
wurde folgendes bestimmt: Zahl der Langstabchen, Zahl der gramnegativen,
nicht sporenbildenden gasbildenden Coli-Typen, Streptokokken, Hefen,
aerobe und anaerobe Sporenbildner, pH, Indolmenge, Gesamtgewicht und
Wassergehalt des Kotes.

Ergebnis : Alle Personen batten Ijangstibbcben in ihren Stiiblen, in der
Regel 1000 pro g. 40% batten mebr als dies nnd mancbe mebr als 1 Million. Es
zeigte sicb bierbei kein deutlicher Ziisanunenbang der normalen Verbreitnng von
Langstabchen im Stiihl Erwacbsener mit der gereicbten Diat. Wabrend der Zeit,
wo die Patienten Azidopbilusmilch gereicbt bekamen, wiesen Z6% der Proben Zahlen
von 10 Millionen, mnd 3o% Zahlen von 100 Millionen bis zu 1000 MiUionen und mebr
pro g auf. Die mit der Milch eingenommenen Azidopbilustypen verscbwanden aber
bald naeh Aufhoren des Azidopbilusmilchgenusses (innerhalb 2 — 6 Wocben) ohne
Riicksicht darauft ob die Patienten fortfubren, Milch- und Laktosedidt einzuhalten.
Die Co litypen fanden sicb in Mengen boher als 10 Millionen pro g bei mebr als
der Halfte der Proben, ein Ftinftel entbielt 100-^1000 Millionen und mebr. Die Ein-
nahme von Azidopbilusmilch brachte bierin wenig Anderungen. Betreffs der Strepto-
kokken zeigten voile zwei Drittel der Proben von solchen Personen, die niemals Azi-
dophilusmiloh genossen batten, mebr als 10 Millionen pro g und annabemd ein IMnftel
100 — 1000 Millionen und mebr. Wabrend des Azidophilusgenusses trat ein deutlicher
Riickgang ein. Hefen fanden sich nur sebr wenig, mebr als die Hftlfte der Proben
hatte weniger als 100 pro g. Vor dem AzidophilusgenuB besafien rund die Hdlfte aUer
Proben mel^ als 1 Million anaerober Sporenbildner, vereinzelte Proben
auch mebr als 1000 Millionen pro g. Hemacb war eine deutlicbe Abnabme festzustellen,
jedocb nicht so sebr bei den Arten, die, wie Cl. Welcbii, in Milch rascbe und
sttirmiscbe G&rungen verursachen. Die aeroben Sporenbildner ver-
bielten sich zablenmaBig fthnlioh wie die Hefen. Der Indolgebalt des Rotes
wurde sowobl durch AzidophilusgenuB wie durch Einnabme von mit Z% Laktose ver-
setzter Milch berabgedriiokt. Kein EinfluB wurde auf die Wasserstoffzahl
des Kotes ausgetibt (rund 7,3 pb). Die Sthble der an Verstopfung leidenden Personen

208

Mikrobiologi© der Nahrungs-, Genufi- und Futtermittel.

batten -weniger Wassergehalt als die normalen, die Azidophilusdiat erhohte in
beiden Fallen den Wassergehalt, der nach Sisticrung nur bei den gesunden Personen
wieder zuruokging. Diirch den AzidophilusmilchgenuB wurde das durchschnittliche
G e w i c b t des Stubles um voile 10 g erhobt, bei den nicbt an Verstopfung leidenden
sogar bis zu 20 g. Nach der 18 Monate daiiernden Untersuchung stellte sicb heraus,
daB zvrei Drittel aUer Patienten, die an Verstopfung litten, von der Azidophilusboband-
lung Besserung ihres Leidens erfahren batten, aber aueh die ubrigen Personen bebaup-
teten, daB sicb auf Grund der Azidophiluskur oine Besserung ihres physisehen Zu-
standes eingesteiit hatte. K. J. Demeter (Weiheastcphan-Munchen).

Partitt, E. H., Metliods for the microbiological ana-
lysis of butter. (Am. Jonrn. of Publ. Health. Vol. 24. 1934.
p. 303—308.)

Die Ursache dafiir, daB bei Pilz- und Hefekeimzahlbe-
stimmung der Molkenagar keine so hohen Werte 'wie andere Agarsorten
gibt, ist jedenfalls nicht in der mangelnden PufferangskapazitSt zu suchen;
denn bei dem viel starker gepufferten Tomatensaftagar z. B. konnte die Wir-
kung auf das Wachstum nicht entsprechend gesteigert werden. Auf der
Suche nach einem brauchbaren, jedoch leicht im Laboratorium herstell-
baren Nahrboden hat Verf. einen solohen in KArtoffelglukoseagar gefunden.
Zur Erzeugung der notwendigen Wasserstoffionenkonzentration (pH 3,5)
hat sich Weinsaure am zweckmaBigsten erwiesen; denn diese wird im Ver-
gleich zu den ubrigen organischen oder anorganisehen Sauren am lang-
samsten von den Sehimmeln und Hefen neutralisiert, was den Vorteil mit
sich bringt, daB das Bakterienwachstum wegen der langer bestehen blei-
benden sauren Eeaktion kaum in Erseheinung tritt. Was die Bestimmung
der Gesamtkeimzahl betrifft, so hat Verf. mit dem leicht her-
stellbaren 1% Bakto-Fleischextraktagar ebenso gute Resultate erhalten
wie White mit seinem 1% Laktose-Fleischwasseragar. Von den Bak-
teriengruppen sind die wichtigsten die EiweiB- und Fettzersetzer.
Fiir die Bestimmung der Proteolyten sind zwei Methoden vorge-
sehlagen: 1. Kolonien abzuimpfen und in sterile Magermilch zu verbringen;
2. Kaseinhaltige Nahrbeden zu verwenden und die aufhellenden Kolonien
direkt auszuzahlen. Hier ist noeh viel problematisch. Verf. schlagt als
einfacheres Vcrfahren vor, Fleisehwasseragar vor dem GieBen 34 com Mager-
milch zuzufiigen und die hofbildenden Kolonien zu bestimmen. In Zweifels-
fallen geniigt es, wenn die Flatten zur Ausscheidung falseher Protcolyse
mit 10 proz. Salzsaure iiberschwemmt werden. Fiir die Fettzersetzer
ist Nilblausulfatagar empfohlen worden. Die dutch diesen Farbstoff rot
gefarbten Fetttropfen farben sich bei der Hydrolyse blau. Es muB hierbei
darauf geaehtet werden, daB Kolonien, die lediglich den blauen Farbstoff
adsorbieren, nicht als fettzersetzende Kolonien betraehtet werden. Als
nukroskopische Methode kommt diejenige von Hammer und Nelson
in Betraeht (Auszentrifugieren und Mikroskopieren der Butterlake nach
dem Breed schen Zahlverfahren).

K. J. Demeter (Weihenstephan-Munchen).
Prouty, C. C., Studies on the Leucocyte content of milk
drawn from Brucella abortus infected udders.
(Joum. of Bacter. Vol. 27. 1934. p. 293—301.)

Untersucht wurden 18 mit Abortus Bang infizierte Tiere. Bei 13
dieser Tiere konnten Bang bazillen in der Milch aller oder doch einzelner
Viertel naehgewiesen werden. Der Gehalt an Leukocyten wurde in den
Viertelsgeme&en dutch direkte Zahlung festgestellt. Im Durchschnitt ent-

Mikrobiologie der Kahrangs-, GennS- nnd FuttermitteL

209

hielten die 21 infizierten Viertel 355 000, die 51 nicht infizierten Viertel
343000 Leukocyten im Kubikzentimeter. Da eine Anzahl Viertel gleieh-
zeitig eine Infektion mit dem Str. mastiditis auMesen, toeh die
der Gehalt an Leukocyten erhSht wird, wurde der mittlere Zellgehalt nach
Ausseheidung dieser Viertel bestimmt, Er ergab sich zu 145 000 bzw. 185 000
im Kubikzentimeter fiir die infizierten bzw. fiir die nicht infizierten Viertel.
Ahnliche Durchschnittswerte wurden fiir den Leukoeytengehalt in Milch
von Tieren, die aus BestSnden stammten, in denen keine Bang- Erkran-
kung vorlag. festgestellt. Durch die Bang- Erkrankung wird also der
Leukoeytengehalt der Milch nicht erhoht. E i c h t e r (Kiel),

Maey, H., and Steele, 6. H., Butter as a substrate for mold
growth. (Journ. of Dairy Science. Vol. 17. 1934. p. 397—407.)

Die rund 370 untersuchten Pilze stammten aus Butter, Molkerei-
g e r S. t e n und Fackmaterial. Sie wurden in ungesalzene sterile
Butter verimpft und die Proben bei starker Feuehtigkeit und reichlicher
Luftzufuhr bei verschiedenen Temperaturen aufbewahrt. Im besonderen
wurde darauf geachtet, inwieweit sich unter den regelmaBig vorkommenden
Schimmelpilzen auch solche finden, die keinerlei schadlichen EinfluB auf
die Bntterqualitat ausiiben.

Die Ergebnisse waren folgende: 1. Wachstum bei + 22® C: nmd drei
Fxinftel der Kulturen zeigten gates bis izppiges Wachstum, nor 4 lieDen tlberhaupt
kein Wachstum erkennen (Aspergillus niger, 2 Oospora lactis-
Stamme und eine nicht identifizierte Kultur). 2. Wachstum bei +^°0: Im
Gegensatz zu 22® C konnte hier bei keinem der Schimmelpilze auch nach der 4-Woch0n*
Periode ein gutes Wachstum beobachtet werden. Die Gattung Aspergillus war diesei:
Temperatur gegeniiber empfindlicher als die PeniciUium-Arten. tJberhaupt keine
Entw ioklung zeigten nach 2 Wochen folgende Arten : Acremoniella brevis*
Aorostalagmus cinnabarinus, Aspergillus oandidus, Asper-
gillus micro -virido -oitrinus, Aspergillus ustus. Monilia
geophila, Mucor plumbeus, Penioillium fellutatum und
Bhizopus speciosus. Nach Verbringung in -h 22® C setzte innerhalb 2 Wochen
bei den meisten Kulturen eine vielfach sehr tippige Entwicklung ein. Wachstum
bei — 18® C; Bei dieser Temperatur lieBen nur 2 Kulturen na^ 2w6chentlicher Be-
brtltung eine Spur von Wachstum erkennen: Penioillium viridicatum
und Penicillium griseo-fulvum. Der hemmende EinfluB dieser tiefen
Temperatur kam somit ilberzeugend zum Ausdruck. Die Verbringung dieser „oold
storage“-Proben fiir eine Woche auf -j- 5® C ergab keine Verftnderung, weitere 8 Tage
bei -h 22® C batten jedoeh bei den meisten Pilzen eine Erholung zur Folge, und zwar
vielfach in der Weise, als ob gar keine Kfilteperiode vorausgegangen gewesen wftre.
Verfferbung der Butter: Bei den Temperaturen von + 6 und — 18® O
konnte keine Verfftrbung der Butter als solche beobachtet werden, wenn
von der Eigenfarbe mancher Hyphen und Sporen abgesehen wurde. tJbeT die bei
4- 22® G aufgetretene eohte Verf&rbung ist folgendes zu bemerken: Acremoniella
und Aorostalagmus braim, Altemaria dimkelbraun oder ranch -schwarz* oft die
ganze Butter erfassend; Aspergillus in der Hauptsache gelb, aber auch rot, braun, griin
und Bchwarz; Cephalosporium braun bis schwarz; Hormodendrum dtinkelbraxm, dunkel-
griin oder rauch-sohwarz, oft die ganze Butter durohweg fkrbend; Monilia und Mucor
gelb, braun oder griin; Oospora rot oder braun; Penicillium haupts&chlich gelb oder
grtin, aber auch orange, rot, braun oder schwarz; Phoma rot, braun, griin oder schwarz;
Spioaria orange oder braun; Sporotrichum schwarz; Stemphyllium rosa, rot oder r6t-
lich -braun; iSichoderma gelb oder schwarz; Triohotheoium braun oder schwarz; von
den nicht identifizierten Schimmeln wurden rote, rosarote, gelbe, orangene, grtbie,
braune oder schwarze Verfftrbungen verursacht. Die st&rksten Farbstoff-
b i 1 d n e r waren Altemaria, Hormodendrum, Phoma und Stem-
phyllium. Die iibrigen Arten hatten, abgesehen von ihrer Eigenfarbe, keine Ver-
fSrbung der in ihrem Dmkreis befindlichen Butter zur Folge. EinfluB aufAroma:
Der allgemeine Charakier der schimmeligen Butterproben war nach „altem Kfise",
Zweite Abt. Bd. 91. 14

210

Mikrobiologie des Diiagers, Bodens, Wassers und Abwasseis.

des weiterea vi urden haufig folgende Urteile aiiagesproohen ; stecdiend, moderig, stinkend,
flu(ditig saner, naoh Frddbiten und unrein.

In manchen F&llen war eine Geschmaeksveranderung schon zu einer
Zeit bemerkW, wo noch gar kein sichtbares Waohstiun der betreffenden
Schimmelpilze beobachtet werden konnte.

K. J. Demeter (Weihenstephan-Miinchen).

Mikrobiologie des Dangers, Bodens, Wassers und Abwassers.

Korsakova, M. P.J and Nikitina, E. A., Decomposition of pectin-
substances by microorganisms. (Bull, of the State Inst,
of Agric. Microbiol. USSR. Vol. 6. 1933. p. 37—51.) [Russ. m. engl.
Zusfassg.]

Reinkulturen von Granul oba ct er p ectinovorum, Bac.
amylobacter, Bac. asterosporus, Bac. mesenteri-
cus, Bac. subtilis, Bac. fluorescens liquefaciens,
Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Mucor stolo-
n i f e r und Cladosporium warden hinsiohtlich ilrer Fahigkeit,
Pectin zu zersetzen, vergleichend untersucht. Dabei kamen nicht reines
Pectin, sondem Stoffe zur Verwendung, die besonders reich an Pectin sind.
Die Methode der Untersuchung beruht auf der Bestimmung der Bestand-
teile des Pectins: (jralacturonsfture, Pentose und Methylpentosane. Auf
diese Weise wurde nicht nur iiber die IntensitSt der Pectinzerstdrung son-
dern auch dariiber, welche Teile desselben bevorzugt angegriffen werden,
AufschluS erhalten. Yon den untersuchten Bakterien steht Bac. astero-
p 0 r u s an erster Stelle. Er ist imstande, bis 93,7% des g^ebenen Pec-
tins umzusetzen. Dann folgen Granulobaeter pectinovorum
mit 82%, Bac. mesentericus mit 50% und Bac. subtilis
mit ungefahr 20%. Von Bac. amylobacter wird Pectin nur sehr
schwach und von den anderen genannten Aiten gar nicht hydrolisiert. Ge-
wisse Unterschiede im Verhalten verschiedener Rassen derselben Art konnten
ebenfalls festgestellt werden. Der erste Angriff auf das Pectin erfolgt durch
Aufspaltung desselben in Araban und PectinsSure, wobei alles in Ldsung
geht, und ^s Gewebe zerfallt. Diese beiden Bestandteile unterliegen dann
einem weiteren Abbau, wobei Galacturonsaure im allgemeinen cbensogut
veratmet wird wie Arabinose. Nur Granulobaeter peetinovo-
rum vermag diese Saure nicht weiter abzubauen.

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Seharrer, K. und Sehropp, W., Wasserkulturversuche iiber
die Wirkung des Bors in Diingemitteln. (Phytopath.
Zeitschr. Bd. 7. 1934. S. 245-254.)

Zur Klarui^ der Frage nach der wirkung geringer Bormengen in ge-
wissen DUngendtteln haben Verff. Versuche in Wasserkultur mit Stick-
stoff in Form von synthetischem Natronsalpeter mit und ohne Zusatz von
Bor und in Form von Chilesalpeter durchgefuhrt. Als Versuchspflanzen
warden Sommerweizen und -roggen, Futtermais, Zucker- und Futterriiben
benutzt. Bei den drei ersten Pflanzenarten konnten keine gesicherten Er-
tragsunterschiede festgestellt werden mit Ausnahme von Sommerroggen,
der durch Chilesalpeter eine geringe ErtragserhShung eifuhr. Fatter- and
Zuckerriiben dagegen waren in Natronsalpeter ohne Bor voll^onunen herz-
und trockenfaul, bei Zusatz von Bor und in Chilesalpeter dagegen voU-
kommen gesund. Entsprechend groB waren auch die Ertragssteigerungen.

Braun (Berl^-DaUem.)

Mikrobiologie des DQngers, Bodens, Wasseis und Abwaesets.

211

Olsen, C., Studies of nitrogen fixation. I. Nitrogen
fixation in the dead leaves of forest beds. (Compt.
Eend. Laboratoire Carlsberg. Vol. 19. 1931 — 1933. Nr. 9.)

In kompostierenden Slattern von Buche und Eiche wurde nicht nur
eine Zunahme des relativen N-Gehaltes beobachtet (infolge des Verlustes
an Trockensubstanz), sondem ein absoluter Gewinn an Stickstoff. Dieser
var in den mit CaCOg gemischten Slattern besonders ausgepragt, namHch
bei den Buchenblattem 180 mg N je 100 g der urspriinglichen Trocken-
substanz, bei den Eichenblattem 170 mg. Unter ph 6,0 fand keine N-Bin-
dung statt. Die absolute N-Zunahme hSrte im allgemeinen auf, sobald im
Laufe der Verrottung der relative N-Gehalt auf etwa 2,2% gestiegen war.
Zu diesem Zeitpunkt, der je nach den Versuchsbedingungen verscMeden
war, setzte die Nitrifikation ein, wahrend vorher weder Nitrat-N noch
Ammoniak-N festgestellt werden konnten. In den Hainbuehenblattem
fand keine N-Bindung statt, da diese infolge ihres hohen N-Gehaltes sehnell
zersetzt warden. Bemerkenswert war noch, dafi in den Blattkomposten,
in denen N-Bindung stattfand, Azotobakter nicht vorhanden war, wohl aber
Clostridium-Formen. Engel (Berlin).

Feh6r, D., Experimentelle TJntersuchungen liber die
mikrobiologischen Grundlagen der Schwankungen
der Bodenaziditat. II. (Arch. f. Mikrobiol. Bd. 5. 1934.

S. 402—420.)

Verf. wendet sich gegen einige Einwande hinsichtlich seiner Versuchs-
methodik. Er gibt nun eine rechnerische Methode an, die gestattet, aus
dem Wassergehmt des Bodens die dadurch bedingte Anderung der ph-Zahl
zu ermitteln. Bei Feuchtigkeitsgehalten von 5 — 25% ist diese Wirkung der
Bodenfeucht%keit so gering, daO sie praktisch bedeutungslos ist. Der Unter-
schied ist bei dem festen Verhaltnis zur Dntersuchung Boden : Wasser =1: 2
meist kleiner als ph 0,1. Bei gr53eren Feuchtigkeitsschwankungen kann
mit Hilfe seiner Methode bei bekanntem Wassergehalt eine entsprechende
Korrektur vorgenommen werden, bzw. der nicht biologisch bedingte Anteil
an der Schwankung erkannt werden.

Die Veranderungen der ph-Werte bei feuchtem Aufbewahren des Bodens
sind mikrobiologischer Natur; sie bleiben in sterilisierten BSden aus, in
spater geimpften stellen sie sich wieder ein. Doch wirkt nur Sterilisation in
heibem Dampf unter Druck, da trockene Sterilisation die Tatigkeit der
Mikroorganismen nicht unterbindet. Durch gleichzeitige Bakterien- und
Pilzz Sh lung konnten die erwahnten Zusammenhange weiter gestiltzt werden.

Das Gesagte gilt auch flir die Leitfahigkeit bzw. Gesamtsalzkonzentration.

R i p p e 1 (GSttingen).

FeMr, D., Die Verwendung der el ek tr o m etr is ch en ph-
Messung bei der Ermittlung der Keimzahl der
BSden. II. Mitt.: Vergleichende tJbersicht liber die
gewonnenen Untersuchungsergebnisse. (Arch. f. Mikro-
biol. Bd. 5. 1934. S. 436—442.)

In Erganzung einer friiheren Mitteilung wird liber ausgeddmte Versudie
berichtet, die zeigen, daS man mit Biilfe der ph-Bestimmung im Verdlin-
nungsverfahren ^e Eeimzahl eines Bodens bestimmen kann (vgl. zur Methode
das Beferat in dieser Zeitschrift, Bd. 89, S. 170). Auch die Leitfahigkeits-
messui^ kann in gleioher Weise herangezogen warden.

212

Mikrobiologie des Dimgers, Eodens, Wassers uad Abwassers.

Verf. fiihrt den Begriff „Alrtivitats^ad“ ein, woranter ^ejenige hdehste
Verdiinnung eines Bodens verstanden ist, die beim Einbringen in sterilen
Boden noon mit pbysiko-chemischen Methoden mefibare, durch die Tatig-
keit der Bodenmikroorganismen bewirkte VerSnderui^en hervorruft.

B i p p e 1 (GSttingen).

Behrens, W. IJ., Zum Energieumsatz der Mikroorganis*
men des Bodens. (Ztschr. f. Pflanzenernahr., Diing. u. Bodenkunde.
Teil A. Bd. 34. 1934. S. 223.)

Verf. wendet sick gegen die allgemein herrschende Ansicht, dafi zur
Beurteilnng des Energieumsatzes der Mikroorganismen die Messang der
Warmetdnung der vollzogenen Eeaktion ausreiche. Allein maBgebend sei
die bei der TJmsetzung geleistete maximale Arbeit, die fiir einige Vorgange
■wie die Oxydation von Ammoniak zu salpetriger Sanre, von salpetriger zu
Salpetersaure, von Schwefelwasserstoff zu Schwefel, von Ferro- zu Perri-
eisen sowie fiir die Bildung von elementarem Stickstoff aus Mtraten be-
reohnet wird. Um dem Titel der Arbeit vollauf gerecht zu werden, hatte Verf.
die Erreger obengenannter Keaktionen mit ihren Namen oder doch wenig-
stens die gebrauehliohen biologischen Bezeichnungen wie Nitrifikation,
Denitrifikation usw. erwahnen sollen. Engel (Berlin).

McCool,M.M.,Eff eet of thallium sulphate on the growth
of several plants and on nitrification in soils.
(Contributions from Boyce Thompson Institute. Vol. 5. 1933. p. 289.)

Wahrend Thalliumsulfat schon in sehr gerii^en Konzentrationen das
Wachstum der hSheren Pflanzen ungUnstig beeinfluBte, waren verhaltnis-
ma£ig gro6e Mengen erforderlich (0,24%), um die Mtrifikationsorgauismen
im Boden merklich zu schadigen. S k a 1 1 a u (Berlin).

Kosehkin, M. L., Die Bedeutung des Ammoniaks fiir das
ChlorbindungsvermSgen. III. Mitteilung: Praammoni-
sation mit Ammoniumsalzen. (Ztschr. f. Hyg. u. Infektions-
krankh. Bd. 116. 1934. S. 86—94.)

Nicht nur das Ammoniak — wie bisher festgestellt — , sondem offenbar
die gauze Ammoniumgruppe besitzt die spezifischen Eigenschaften, das
Chlorbindungsvermbgen des Wassers herabzusetzen, die bakterizide Wirkung
des Chlors zu steigern und den Chlorphenolgeruch zu verhindern. Ver-
bindungen mit anderen Basen als Ammoniak zeigten ebensowenig eine
Wirkung wie einige gepriifte Aminosauren.

Eodenkirchen (KSnigsberg Pr.).
Bndolfs, W. und Ziemba, J. T., The efficiency of chlorine
in sewage disinfection as affected by certain en-
vironmental factors. (Joum. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 419
—442.)

Die Versuche wurden mit hauslichem Abwasser durchgefiihrt. Es zei^e
sich, da£ eine starke bakterizide Wirkung durch die Ghlorierung bereits eia-
trat, wenn wesentlich geringere Chlormengen zum Abwasser gegeben wurden
ab dem ChlorbindungsvermSgen innerhalb 10 Min. entsprach. Es ist also
nicht erforderlich, diJ noch freies Chlor vorhanden ist, vielmehr mu6 an-
genommen werden, da3 bakterizid wirkende Zwisehenprodukte entstehen,
die fiir die endgultige Wirkung bestimmend sind. Als solche Zwischenstoffe
kommen Chlor-Pepton- und Ghlor-Eiweifi-Verbindungen, wie die Versuche

BQanzenkrankheiten mid Pflanzenscbntz im aUgemeinen.

213

ergaben, nicht in Frage. Die Bakterienabnahme ist bei teilveiser Chlorung
bei Wassern mit starkem Chlor-Bindungsverm6gen starker als bei solehen
mit scbwachem Chlor-Bindui^sverm6gen. Bei j&wesenheit von Bbm muB
mindestens eine Chlorung bis zu 50% des Bindungsvennbgens erfolgen,
wenn eine ausreiehende AbtOtung eintreten soil. Gealtertes Abwasser zeigte
eine starkere Bakterienabnahme bei teilweiser Chlorung als frisehes, selbst
wenn die Alterung bei 0® vorgenommen wurde. Richter (Eel).

Pflanzenkrankheiten und Pfianzenschutz im allgemelnen.

Hunro, F. L., and Newton, W., The inhibition of the growth
of fungi by chemicals. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1934.
p. 560—564.)

Bei Anwendung von Chemikalien zur Parasitenbekimpfung kommt es
darauf an, daB der Quotient von Dosis tolerata und D o s i s
toxica mSglichst groB ist. Verff. haben eine groBe Relhe von Stoffen
auf ihre Wirlmng gegeniiber verschiedenen Fusarium-Arten, Pythium und
Rhizoctonia sowie auf Weizensamlinge untersucht. Eine Gegenliberstellung
der gefundenen Werte zeigt, daB der Quotient fiir 4 Stoffe (Phenol, Chresol,
Chinosol, Malachitgrlin) grOBer ist als 1, fiir ie 8 dagegen 1 bzw. geringer
als 1. Braun (Berlin-Dahlem).

Crosier, W., Abnormal germination in dusted wheat.
(Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 544 — 547, 1 fig.)

Bei Weizensaatgut, das im Februar 1931 mit Ceresan trocken gebeizt
wurde, zeigte sich im Juli 1932 bei Eeimversuchen in groBer Zahl anormale
Eeimung. Yon 100 Kdmem waren 49 normal gekeimt, 13 batten normale
Plumula, aber kurze, verdickte Wurzeln, 34 anormale Plumula und Wurzeln,
4 waren tot. Durch Waschen der KSmer koimten die SchSdigungen nicht
beseitigt werden. Bei der Dntersuchung der E3mer zeigte sich, dim die Sa*
menhaut vielfach gerissen oder abgebrockelt war, so daB der Embryo freilag.
Bei anderem Saatgut, bei dem die Samenhaut kiinstlich beschS.d^ wurde,
warden nach Beizung mit Ceresan Schaden nicht beobachtet. Ven. ist der
Ansicht, daB die Schaden entweder auf die Verletzungen oder auf ungtinstige
Lagerung zuriickzufiihren waren. (Wahrscheinlich waren beide Faktoren
beteUigt. Das kunstlich verletzte Saatgut lagerte nur kurze Zeit. D. Ref.)

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

E5ek, G., tJber die Rauchgasf iltrationswirkung eines
Fichtenbestandes. (Phytopath. Ztschr. Bd. 7. 1934. S. 255
—258.)

Verf. beriehtet liber einen in einem Fiohtenbestand durchgefuhrten
Versueh, der 600 m von einer Rauchgasquelle stand. Er hat mit Bllfe von
aufgehangten Barytlappen nachweisen kSnnen, daB ein diesen Bestand
flberragender Baum in einer Entfemung von 180 m von dem Waldrand von
unterschiedlich starken Rauchgasmengen getroffen wurde, und zwar wurde
die geringste Menge in der Durchschnittshohe des Fichtenbestandes nach-
gewiesen, was dafur sprieht, daB dieser als Filter gewirkt hat.

Braun (Berlin-Dahlem).

Swsdne, J.M., The relation of insect activities to forest
development as exemplified in the forests of
Eastern North America. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1933.
p. 8-31.)

214 Pflanzenkrankheiten und Pflanzensohutz. — Phyiskalisohe u. ohemisohe Einflusse.

Verf. gibt zunachst einen tJberblick uber die Geschicbte der Walder
an der Ostkiiste von Nordamerika und bringt zahlenmaBige Unterlagen
fiir die Veranderungen, die in dem Waldbestand eingetreten sind. Die Holz-
zarstorungen sind im wesentlichen auf 5 verschiedene Ursachen zuriickzu-
fuhren, auf die Tat^keit von Siedlern und Holzhandlern, auf Feuer, auf
Insekten, auf Pilze und auf Wind- und Schneeschaden. AuBer dem zahlen-
maBigen Euckgang ist aucb eine qualitative Versohlechterung der Bestande
eingetreten, indem weniger wertvolle Holzer an die Stelle von hochwertigen
getreten sind. Als Insektenschadlinge, die wesentlich an diesen Veranderungen
mit beteiligt sind und bei denen zwischen primaren und sekundaren unter-
sehieden wd, werden angefiihrt Caeoecia fumiferana Clem.,
Lygaeonematus eriehsoni Eg., Haploptilia laricella
Hb., Ellopia fiscellaria Guen., Dentroctonus pieea-
p e r d a Hopk., Dreyfusia pieeae Rtzb., Diprion poly-
tom u m Hartig, Peronea variana Fern., Crytocoeeus
fagi Barensp., iiber die im einzelnen nahere Angaben gemacht werden.
Dabei wird insbesondere aucb auf die Beziehungen zwischen den Insekten
und den anderen Organismen des Waldes eingegangen. Abschliefiend werden
die Faktoren ausfuhrlieh bebandelt, die fiir den Ausbrucb von Epidemien
und ihr Erlosehen bestimmend sind. Hier werden Klima und Witterung,
Gesoblecbtsverteilung, Nabrungsmenge in Verbindung mit den Waldtypen,
zeitliebe Folge der Epidemien, Anderungen in den Gewobnbeiten der Schad-
linge, Wirtswabl und Veranderungen der Wirtspflanze als Folge jabres-
zeitlicber Einwixkungen oder des Parasitenbefalls erdrtert und die nocb
sehr luckenbaften Eenntnisse, namentlicb aucb in der Biologie der Scbad-
linge, angedeutet. Braun (Berlin-Dablem).

Cameron, T. W. M., Tbe economic importance of para-
sitology. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1934. p. 540 — 546.)

Verf. gibt an Hand einer Beibe von Beispielen einen uberbbck iiber die
Bedeutung der Parasitologie, wobei er unter Parasiten nur tieriscbe Orga-
nismen verstebt, die auf oder in anderen Organismen leben und dort irgend-
welcbe Veranderungen cbemiscber oder pbysikaliscber Art obne Ruclmieht
auf deren AusmaB verursacben. Diese Erkeimtnis hat zur Erricbtung des
Instituts fiir Parasitologie an der McGill-TJniversitat in Eanada gefiibrt,
iiber dessen Organisation und Einrichtungen einige Angaben gemacbt
werden. Braun (Berlin-Dablem).

SchSdIgungen der Pflanzen durch physikalische, chemlsche und
physiologische Einflflese.

Sehreven, D. A. van, Uitwendige en inwendige symptomen
van boriumgebrek bij tabak. (AuBere und innere
Symptome von Bormangel bei Tabak.) (Tijdschr. over
Plantenz. H. 4 und 5. 1934. S. 97—122, 3 Taf.)

^ Verf. gelang es, sowohl mittels Wasser- wie Glassandkulturen, nachzu-
weisen, daB Bor fiir die Tabakpflanzen ein unentbehrlicbes Element 1st,
dessen Mangel in Sumatra (Deli) die als „Topziekte“ bekannte Krankbeit
hervorruft. Die KranMieit 3>uBert sich in den versohiedenen Altersstofen
verschieden. Bei ganz juz^en Pflanzchen entwickelt ^s Wurzelsystem sich
nur unvollkommen, indem der Vegetationspunkt der Wurzeln abstirbt. Im
weiteren Verlauf der Krankbeit sterben die Acbselknospen ab und es tritt

Schadigungen d. Fflanzen diuoh phyaikalische Einflusae. — Pilze, Bakteiien usw. 215

eine Stauchung auf, wodarch die Pflanzen klein und gedrungenbleiben. Durch
VergroBerung der Mesophyllzellen nimmt das Parenekymge’webe der Blatter
an Dicke zu und wSlbt sich naoh oben, wahrend die Rander und Spitzen
sich nach unten biegen. Inwendige Anzeichen von Bormangel auBern sich
u. a. zuerst in den Initialzellen und im Procambium der jungen Wurzeln,
spater auch in der procambialen Zone des Vegetationspunktes des Stengels.
Nachdem das ganze Wurzelsystem befallen ist, stirbt der Gipfel der Pflanze
ab, ohne jedoeh abzufallen, wie das manchmal in Deli der Pall ist. Samtliche
anatomischen Abweichungen werden in dieser Arbeit genau beschrieben.

van Beyma thoe Kingma (Baam).
Christensen, J. 3 ., Nonparasitic leaf spots of barley.

(Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 726—742, 6 %s.)

Verf. beobachtete in Minnesota vielfach Blattflecken an Gerste, die
denen durch Hehninthosporium oder andere Pilze verursachten sehr ahnelten.
Erreger konnten jedoch nicht festgestellt werden. Alle Anzeichen deuten
darauf hin, daB die Erscheinungen teilweise vererblich sind, teilweise jedoch
auf ungunstige ErnShrung oder auf das Vorhandensein giftiger Substanzen
im Boden zuruekzufiihren sind. Durch 20 verschiedene ifittel, die dem
Boden zugesetzt wurden, konnten Blattflecken nicht hervoi^erufen werden
mit Ausnahme vom Bor, das als BorsSure oder als Natriumborat gegeben,
ahnliche Plecke wie Helminthosporium sativum hervorrief.
Gerstenblatter, die durch Bor geschadigt waren, erwiesen sich nicht emp-
fanglicher fiirH. sativum oder resistenter gegen Erysiphe gra-
minis. Die Blattflecken konnten nicht durch Beizung des Saatgutes,
nicht durch Zugabe von Kalk, Kupfer, Magnesium und andere Substanzen
znm Boden, nicht durch Spritzen mit Mangansulfat und Eisenchlorid und
nicht durch Stauben mit Kolodust bekampft werden. Yon 125 untersuchten
Gerstensorten waren einige immer krank und ein^e immer gesund, wahrend
andere sich verschieden verhielten. Bei einigen ersehien me Krankheit im
Samlingsstadium, bei anderen dagegen spater.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Schadigungen der Pflanzen durch Pilze, Bakierien und flitrierbare Vira.

Bichardson, J. E., Eggplant wilt. (Scientific Agriculture. Vol. 14

1933. p. 120—130.)

Verf. hat die Welkekrahkheit von Solanum melongena naher
untersucht, die bislang auf Verticillium albo-atrum zurlick-
gefUhrt worden ist. Er beschreibt die Symptome der Erankheit und glaubt
auf Grund der reichlichen Sklerotienbildung des aus alien Teilen der kranken
Pflanze einschlieBlich der Samen isolierten Pilzes, daB es sich um Y. dah-
lias Eleb. handelt, der haufig auch in die Spezies Y. albo-atrum
eingeschlossen wird. Untersuchuugen liber den EinfluB der Temperatur
ergaben, daB der Pilz im Bereich von 8—34® zu wachsen vermag. Das Opti-
mum liegt zwischen 21 und 40®. Die Erankheitssymptome traten bei Tem-
peraturen von 11 — 30® auf. Die optimale ph-Zahl wird mit 5,4 angegeben,
wahrend Entwicklung zwischen 2,3 und 9 festgestellt werden konnte. Die
DUngung lieB keinen EinfluB auf die Erankheit erkennen. Dagegen iibte eine
Sublimatldsung, vor dem Aussetzen der Pflanzen dem Boden gegeben, im
Gewachshaus wie im Preiland deutlich eine hemmende Wirkung aus. Aus
dem Preiland isolierte Mikroben, die in vitro die Entwicklung des Parasiten
hemmten, lieBen eine solche teilweise auch bei Zugabe zum Boden erkennen,

216 Schadigungen del Pflanzen durch Pilze» Bakterien und filtrierbare Yira.

so dafi Verf. empfiehlt, die biologische Bekampfung einer weiteren Priifung
zu unterziehea. Braun (Berlin-Dahlem).

Santod, 6. B.j Apreliminary note on an unreported root-
rod of oats. (Scientific A^eulture. Vol. 14. 1933. p. 50 — 51.)

Verf. berichtet uber eine Wurzelfaule bei Hafer, die er 1933 weit verbreitet
in Edmonton (Kanada) beobachtet hat und deren Symptome er genau be-
sobreibt. Sie tritt vor allem an 4 — 8 Wochen alten Pflanzen auf und Sufiert
sich in einem Welken der unteren Blatter, die sich hellbraun bis rStlich
verfarben. Nach der Bildung der Kronenwurzeln kbnnen solche Pflanzen
sich wieder etwas erholen, bleiben aber dauemd in ihrer Entmcklung ge-
hemmt. HEufig laufen auch die Halmknoten rot an, und der untere Teil des
Halmes neigt sich zur Seite. Verf. vermutet als TJrsache einen Pilz, den er in
stSndiger Vergesellschaftung mit der Erseheinung fand und der vielleicht mit
Gliocladium roseum identisch ist. Braun (Berlin-Dahlem).

GoB, B. W., A survey of potato scab and Fusarium wilt
in western Nebraska. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 617
—527.)

Verf. sueht durch seine Versuehe zu ermitteln, in welchem Mafie die
Infektion mit Schorf und Fusariumwelke bei Kartoffeln vom Boden aus
erfolgt. Die Versuehe wurden in West-Nebraska mit Kartoffeln durchge-
fiihrt, die an einer Stelle mit Formaldehyd 1 : 200 bei einer Temperatur
von 51,5® C (125® F) 4 lOn. lang gebeizt und dann an 100 Stellen versandt
wurden. Auf 10,5 % der Felder trat sehwacher, auf 12,5% mittlerer und
auf 1,4% starker Schorfbefall auf, dazu zeigte sich auf 30% der Felder Ober-
flaehenschorf. Auf 94% der Felder wurde Fusariumwelke beobachtet. Der
Befall betrug durchschnittlich 4,5%, davon war die HSlfte stark befallen.
Hoher Befall wurde begiinstigt durch Hackfriichte und Brache im vorher-
gehenden Jahr, durch Aufeinanderfolgen von Kartoffeln innerhalb 4 Jahren,
durch Absinken des pH-Wertes von 8,25 auf 5,92, durch schweren Lehm-
boden und durch gro£e Mengen von Actinomyzes im Boden. Zusammen-
hS,nge zwischen Vorhandensein von organischer Substanz, NiederschlBgen,
Temperatur und Schorf konnten nicht beobachtet werden. Beziehungen
zwischen BuBeren Einfliissen und dem Auftreten von Fusarium konnten
nicht festgestellt werden. Es zeigte sich lediglich, da£ das Auftreten bei
Leguminosen als Vorfrucht geringer war als bei anderer Vorfrueht.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Me.Laughlin, A.M., A Fusarium disease of Cereus schottii.
(Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 495—506, 3 figs.)

Von erkrankten Stellen von Cereus schottii konnte ein Fusa-
rium isoliert werden, das im aUgemeinen F. oxysporum glieh, sich aber
von diesem besonders dadurch unterschied, da£ die Makrokonidien kleiner
und die Sporen zum erheblichen Teil 4- oder 5 mal septiert waren. Ktinst-
Mche Infektionen batten Erfolg. Die infizierten Pflanzen zeigten Verfftr-
bungen der Gefafie und der angrenzenden Zellen. Das VerfSrben der Gewebe
an den Zellen, die Hyphen des Pilzes enthalten, bringt Verf. zu der Annahme,
daB vom Pilz giftige Substanzen ausgesehieden werden. Den Beweis glaubt
er dadurch zu erbringen, daB sich in den GefaBen eines Stengelstfickes von
Cereus schottii, dasinein Filtrat von einer Kultur von dem iso-
lierten Erreger gestellt wurde, ebenfalls Verfarbungen zeigten.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Sohadigungen der Pflanzen durch Pilze, Bakteriea und filtrierbare Vila. 217

Tanbenhaas, J. and Ezekiel, W. N., Fasarium wilt and corm
rot of Freesias. (Botanical Gazette. 95. 128. 1934.)

Bei der Kulturder in einigen Staaten von U.S.A. in gro3en Mengen
als Schnittblumen in den Handel gebrachten F r e e s e a tritt hSufig eine
Krankheit auf , die durch eine Reihe von Fusarium - Arten hervorge-
rufen wird. Die Blatter vergilben und verwelken, die Wurzeln und vor allem
die Wurzelknollen unterliegen einer Trockenfaule. Das Krankheitsbild wird
genau beschrieben. Verff. isolierten aus erkrankten Enollen vier Fusa-
rium -Arten: F. bulbigenum, F. martii-minus, F.moni-
1 i f 0 r m e und F. s o 1 a n i , die gesunde Pflanzen zu infizieren vermochten.
Die Knollenfaule konnte aber auch durch Arten hervorgerulen werden, ^e
von anderen Fusarium - kranken Pflanzen stammten. So entstand ^s
gleiche Krankheitsbild durch Impfung mit F. conglutinans von Kohl-
pflanzen und mit F. lycopersici von Tomaten. Weniger schadHch
wirkten F. vasinfectum von Baumwollpflanzen, F. n i v e u m von
Wassermelonen, F. batatatis von sUBen Kartoffeta und einige andere.
Die Verbreitung erfolgt durch kranke Knollen, infizierte Pflanzenriickstande
und durch den Boden. F. s o 1 a n i und F. martii-minus befielen auch
die Zwiebeln von Allium cep a, nicht dagegen F. moniliforme
und F. bulbigenum. Alle via: zuletzt genannten Arten riefen bei der mit
F r e e s e a nahe verwandten Gladiolus ebenfalls KnoUenfSule hervor.

Engel (Berlin).

Went, Job. C., Fusarium aantastingen van erwten. (Fu-
sarium-Bef all bei Erbsen.) Dissertation, Druldrerij Hoeijen-
bos & Co., Utrecht. 77 S. 1934.

■Verf.n untersuchte die dutch Fusarien verursachte Sankt Johannis-
Krankheit der Erbsen. Diese Krankheit, welche meist zuerst Ende Juni
auftritt, befSllt stellenweise die Erbsenfelder, wodurch die Pflanzen gelb
werden und absterben. Von versehiedenen Autoren warden nach und nach
verschiedene Fusarien aus den kranken Pflanzen isoliert und fiir die Krank-
heit verantwortlich gemacht. yerf.n isolierte ebenfalls mehrere Fusaiium-
arten und stellte Infektionsversuche auf Erbsen in T6pfen mit tonhaltiger
Erde mit denselben an, wobei die Wurzeln mittels inzwischen auf gekochtem
Reis geziichteten Fusarien infiziert wurden. Als am meisten virulent erwiesen
sieh folgende Fusarium-Arten: Fusarium solani var. striatum
(Sherb.), Wr, Fusarium solani var. Martii (App. et Wr) Wr
und Fusarium oxysporum Schl. Andere Fusarien als Fusa-
rium solani var. medium Wr, Fusarium equis eti (Cda)
Sacc., Fusarium herbarum (Cda)Fr., Fusarium herbarum
var. viticola (Thiim.) Wr und Fusarium anguioides Sherb.
zeigten eine schwkchere Vfirkung auf die Pflanzen.

Weiter wurde dutch Versuche festeestellt, daB eine Periode mit pBBeren
NiederschlSgen im Fruhiahr die Entwi^ung der Krankheit begunstigt. Ein
EinfluB der Tanperatur bei der Auspflanzung konnte fiir die sowohl in Warm-
wie in Kalthkusern gezogenen ErbsenpMnzchen in bezug auf AnfSUigkeit
zwar festgestellt werden, jedoch lieBen sich allgemeine Mchtlinien fiir die
Anzucht der Erbsen daraus nicht herleiten. Von den untersuchten Erbsen-
VarietEten erwiesen sich alle mehr oder weniger fiir Fusarium empfindlich.
Es eigab si^, daB die Fusarien durch die Epidermiszdlen und Wurzelhaare
in die Wurzeln eindringen, wobei vorhergehende Verwundungen nicht not-
wendig sind. van Beyma thoe Kingma (Baam).

218 Sohadigungen der Pflanzen dureh Pilze, Bakterien und fUtrierbare Vira.

Carter, F. M., Investigation of factors affecting ad-
vance of certain ,.apple-spot“ fungi within the
host tissue. (Annals of Botany. Vol. 48. 1934. p. 363.)

Es wurde der Einflufi wechselnder Mengen von Apfels&ure, Glukose,
Eruktose, Saccharose und Asparagin airf die Waehstumsgeschwind^keit
versehiedener fur das Fleckigwerden der Apfel verantwortlichen Pilze unter-
sucht. Es handelte sich um einige Pleospora-, Polyopeus- und Altemaria-
arten sowie umFusarium fructigenum. Es zeigte sich, dafi je
nach der qualitativen und quantitativen Zusanunensetzung des Mediums
der eine oder der andere Pilz sich starker entwickelte, und dafi der unter-
schiedliche Befall von Apfeln verschiedenen Alters hzw. versehiedener Sorte
hdehstwahrscheinlich mit ihrem jeweiligen SEure-, Kohlehydrat- und N-
Gehalt in Verbindung zu bringen ist. Engel (Berlin).

Flakidas, A. 6., The mode of infection of Diplocarpon
carliana and Mycosphaerella fragariae. (Phytopatho-
logy. Vol. 24. 1934. p. 620 — 634, 4 figs.) _

Lifektionen mit Diplocarpon carliana und Mycosphae-
rella fragariae zeigten, dafi die Infektionen bei beiden Pilzen von
der Blattunterseite her erfolgen. Histologische TJntersuchungen ergaben,
dafi bei Diplocarpon der Keimschlaueh dureh die epidermalen Zellen eindringt.
Ein Eindmgen dureh die Spaltdffnungen wurde nicht beobaehtet. Wenn
die Eeimschlauche die Mesophyllzellen erreicht haben, verzweigen sie sich
und wachsen zwischen diese Zellen, bevor sie die Pallisadenschicht und die
Epidermis der Oberseite erreichen. Haustorien wurden gefunden und zwar
in den Stielen mehr als in den BlattzeUen. Mycosphaerella dringt dureh
die SpaltSffnungen ein. Bei den untersuchten 6 Sorten konnte eine Beziehung
zwischen Zahl der SpaltOffnungen und Eesistenz gegen Mycosphaerella
nicht festgestellt werden. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Seth, L. N., Studies in the genera Cytosporina, Pho-
mopsis and Diaporthe. V. Analysis of certain che-
mical factors influencing fungal growth in the
apple. (Annals of Botany. Vol. 48. 1934. p. 69.)

Die umfangreichen Untersuchungen des Verf.s ergaben, dafi Apfel-
s&ure, Glukose, Fruktose und Saccharose, den obengenannten Pilzen auf
ktinstlichem I^fthrsubstrat allein oder gemischt und in wechselnden Mengen
gegeben, die Wachstumsgeschwindigkeit in sehr versehiedener Weise be-
eimuSten. Einzelheiten kSimen hier nicht genannt werden. Steigende
SS.ure- und Zuckermengen hemmten allgemein das VTachstum, doch waren
auch bemerkenswerte Ausnahmen von dieser Eegel zu verzeichnen. Fiir den
sehr untersehiedliehen Befall von Apfeln dureh die genannten Pilze war da-
mit hdchstwahrseheinlich die chemische Zusanunensetzung der Apfel ver-
antwortlich. Wurden ApfeMure, Kohlehydrate und Asparagin dem Nahr-
substrat in den Mengen zugesetzt, wie sie in den Apfeln vorgefunden wurden,
ergab sich fiir die Wachstumsgeschwindigkeit der Pilze auf dem kiinstlichen
Substrat und fiir die Intensit&t des Befalls der Apfel die gleiche Eangordnni^.
Auf diesem Wege konnte auch wahrscheinlich gemaSit werden, dafi die
st^kere Anf&Oigkeit Slterer Apfel im Vergleich zu jiingeren und noch un-
reifen auf den geringeren S&uregehalt der ersteit zuriickgefuhrt werden mufi.

Engel (Berlin).

Schddigungeii der Fflanzen durch Pilze, Bakterieii und filtrierbare Vira. 219

Tiddens, B. A., tJber die Wurzelfdule der Primula ob-
eonica, verursacht durch Thiela viopsis basicola
Ferraris. (Phytopath. Zeitschr. Bd. 7. 1934. S. 223 — 230.)

Chlorotische Erscheinungen an Primula obeonica kSnnen durch
verschiedene TJrsachen entstehen. Eine der wichtigsten ist die WurzelfSule,
deren Krankheitsbild der Verf. beschreibt. Von den erkrankten Wurzeln
lafit sich der Erreger Thielaviopsis basicola leicht isolieren.
Alle Versuche, Perithezien in Kultur zu erhalten, schlugen fehl. Die Zu-
sammengehorigkeit der letzteren, die im Freiland auf kranken Wurzeln
some an Pflanzen gefunden 'wurden, die in kiinstlich mit einer Konidien-
und Chlamydosporenkultur infizierter Erde gezogen waren, konnte des-
halb nicht nachgewiesen werden. Das Temperaturoptimum fiir das Wachs-
tum des Pilzes wurde mit 24 — 25° C ermittelt. Starke Infektion erfolgte,
wenn die mittlere Temperatur zmschen 21 und 27° lag. Bei ph 6,2 entwickelte
sich der Pilz gut, bei ph 3,2 nur noch sehr langsam. Der optimale ph-Wert
fur die Wirtspflanze ist etwa 6,4. Bei ph 5,6 und 6,4 wd die Pflanze stark
angegriffen. Der Befall wird weiter begunst^ durch Pestdrficken der Erde.
Aufier P. obeonica erwies sich auch P. malacoides als anfallig.
A s BekSmpfungsmafinahme wd Bodeninfektion mit Formalin und Uspulun
10 Tage vor Bepflanzung empfohlen. Braun (Berlin-Dahlem).

Neal, R. C., and Wester, D. E., An undescribed Sclerotium
fungus prevalent in northeast Texas. (Phytopathology.
Vol. 24. 1934. p. 628—533, 4 figs.)

Verf. fand auf in der Erde faulenden Wurzeln, Stengeln und Blhttem
von BaiunwoUe einen Pilz, der sich von Phymatotrichum omni-
vor u m unterschied und als Ozonium texanum sp. nov. ein-
gehend beschrieben wird. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Young, P. A., Stem canker of hollyhock caused by Scle-
rotinia sclerotiorum. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 538
—543, 2 figs.)

Als Erreger eines Krebses bei Althaea rosea mirde S e 1 e r o -
tium sclerotiorum festgestellt. Die Erankheitssymptome werden
eingehend beschrieben. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Fitzpatrick, B.E., The life history and parasitism of
Taphrina deformans. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1934
p. 305-306.)

Trotzdem der Erreger der Blattkrauselkrankheit des P&sichs, Ta-
phrina deformans (Fcl.) Tul. schon oft Gegenstand von Dnter-
suchungen gewesen ist, ist munches in seiner Biolo^e noch nicht geklart.
Verf. hat auf 3 Fragen besonders sein Augenmerk gerichtet: die Bezi^ungen
zwischen Wittemng und Friihjahrsauftreten der Krankheit, die genauen
EntwicMungsbedii^ngen der Sporen und den Verlauf der Infektion. Sorg-
Mtige Spritzversuche zeigten, daB die Infektion im Frahjahr eintritt, ^-
mittelbar nachdem die Blattknospen sich entfaltet haben. Sommerinfektion
tritt, wenn iiberhaupt, nur selten in Niagara auf. Die Askosporen iiber-
dauem Sommer und Winter auf den Zweigen und Knospen und werden
von hier aus auf die sich Sffnenden Blattknospen durch den Fruhjahrsregen
herabgewaschen. Das Eindringen in das Blatt kann von Ober- und TJnter-

220 SdiSdiguiigen der Pflanzen durch Pilze» Bakterien und filtrierbare Vira.

seite durch die Kutikula hindurch erfolgen. Von der Kutitula aus dringt
der Pilz zvrischen den Epidermiszellen vor. Das Myzel ist anfangs sehr
diinn und ohne QuerwSnde, spSter wesentlich dicker mit zahlreichen Quer-
wanden. Die befallenen Gewebe werden hypertrophiseh. Schlie£lich werden
noch genauere Angaben iiber die VorgSnge bei der Kemteilung und die Be-
w^ng der Kerne gemacht. Ein vollstandiger Entwicklungszyklus kann von
einer einzelnen Spore seinen Ausgang nehmen und bedarf nicht der Eopula-
tion von zwei, wie es fiir Taphrina epiphylla und T. Klebahni
nachgewiesen ist. Braun (Berlin-Dahlem).

Hassebrauk, K., Die Bedeutung der Bodenf euehtigkeit
fiir das Verhalten von Puceinia graminis und
Puccinia triticina auf versehiedenen Weizen-
s 0 r t e n. (Phytopath. Zeitsehr. Bd. 7. 1934. S. 259 — 269.)

Verf. -will die linage beantworten, ob zwischen dem Feuchtigkeitsge-
halt des Bodens bzw. den Feuehtigkeitsanspriichen einer Weizensorte und
ihrem Verhalten gegen Puccinia graminis und P. triticina
Zusammenhange bestehen. Er hat Keimpflanzen infiziert, die in GefaBen
herangezogen sind, deren Erde zu 26, 50, 75% ihrer wasserhaltenden Kraft
mit Wasser gesattigt waren und konstant auf diesem Wassergehalt gehalten
■wurden. In den Inf ektionsversuchen mit P. graminis trat mit zunehmen-
dem Wassergehalt in geste^ertem Mafie Chlorose auf und war eine hbhere
Besistenz zu beobachten. Dagegen konnte keine Parallele zwischen den
Feuchtigkeitsanspruchen einer Sorte und ihrem Rostverhalten bei verschiede-
ner Bodenfeucht%keit gefunden werden. Die Ergebnisse mit P. triticina
wichen insofem hiervon ab, als hochster BeW sowohl bei geringster als
auch bei hSchster Wassersattigung gefunden wurde.

Braun (Bexlin-Dahlem).

Gafiner, G. und Eirchhotf, H., Versuche znr Bekampfung des
Weizenflugbrandes mittels Benetzungsbeize.
II. Mitteilung. (Phytopath. Zeitsehr. Bd. 7. 1934. S. 272 — 284.)

In Fortfuhrung ihrer Untersuchungen zur Bekampfung des Weizen-
flugbrandes mittels Benetzungsbeize haben die Verff. vor dem eigentlichen
Bei^ang eine Vorquellung bei gewOhnlicher Temperatur eingesehaltet. In
drei Versuchsreihen konnte festgestellt werden, dafi der Flugbrandbefall
mit zunehmender Vorquelldauer und Beizdauer abninunt, wobei sich die
Wirkungen von Vorquellung und Beizung addieren. Verlangerung der Beiz-
dauer bewirkte auch Steigerung der Beizsehaden; dagegen nahmen diese
bei gleichzeitiger ErhShung der Beizwirkuig ab, wenn dde Vorquelldauer
verlangert wurde. Die Vorquelldauer beeinfluBt also Keimverhalten und
Flugbrand in entgegengesetztem Siime. Das erklart sich, wie besondere
Erhebui^en ergeben, daraus, daB die Keimschaden dem Wassergehalt des
Embryos parallel gehen. Dieser fallt aber mit zunehmender Vorquelldauer
ab, well ^s von dem Embryo aufgenommene Wasser an das Endosperm
weitergeleitet wird. Braun (Berlin-Dahlem).

Gafiner, G. und Eirchhotf, H., Versuche zur Bekampfung des
Gerstenflugbrandes. (Phytopath. Ztschr. Bd. 7. 1934. S. 303
—314.)

Verff. haben festgestellt, daB die Bekampfungsvaiahren gegen Weizen-
Dugbrand durch Zusatz von Alkohol und durch Einfiibnmg des Warm-

Sch&digungen der Fflanzen durch Pilze» Bakierien mid filtrierbare Vira. 221

benetzungsverfahrens sieh verbessern lassen. Sie haben deshalb entsprechende
Versuche mit Friedricbswerther Berg- und Carstens zweizeiliger Winter-
gOTste zur Bekampfung des Gerstenflugbrandes durchgeftilirt. Auch in
diesem Fall konnte die Wirkung der Beizung durcb Zusatz von Alkohol zur
Beizfllissigkeit ganz ■wesentlieb gesteigert werden, und ebenso erwies sieh
das Warmbenetzungsverfahren als erfolgreieh. die Tauelibeize wird
eine dreistiind^e Behandlung mit einer 2 proz. Brennspirituslosung bei einer
durchschnittlichen Temperatur von 41—43® vorgescMagen, fiir die Warm-
benetzungsbeize einstiindige Behandlung von 60 — 52® naeh Benetzung mit
5 1 einer 3 proz. Brennspirituslosung je Zentner.

Braun (Berlin-Dahlem).

Gafiner, G. und Franke, W., tJber den EinfluB der Tempe-
ratur auf Stickstoff haushalt und Bostr esistenz
junger Getreidepflanzen. (Phytopath. Ztschr. Bd. 7. 1934.
S. 315—326.)

Zur Prufung der Frage nach der Bedeutung des Eiweifigehalts fiir die
Eesistenz gegenuba: Rost haben Verff. den Gehalt an Eiweifistickstoff und
an lOslichen Stickstoffverbindungen sowie das VerhEltnis dieser beiden
Werte zueinander an Pflanzen von 6 Weizen- und 2 Roggensorten naeh Aii-
zucht bei verschiedenen Temperaturen im gleichen Entwicklungsstadium
ermittelt. Sie konnten feststellen, daB der EiweiBgehalt mit abnehmender
Temperatur stark ansteigt, wahrend die loslichen Stickstoffverbindungen
im Durchschnitt eine unbedeutende und vielfach sehwankende, verschiedent-
lich auch liberhaupt keine Zunahme erfuhren. Da mit sinkender Tempe-
ratur auch die Anfalligkeit gegen verschiedene Rostarten steigt, kommen
sie zu dem SchluB, daB diese Resistenzanderungen mit den Yerschiebungen
des Ei-weiBgehalts in Verbindung stehen. Braun (Berlin-Dahlem).

Gafiner, G. und Straib, W., Experimentelle TJntersuchungen
zur Epidemiol ogie des Gelbrostes (Puccinia glu-
marum [Schm.] Eriks s. und Henn.). (Phytopath. Zeitsehr.
Bd. 7. 1934. S. 285—302.)

Verff. haben in friiheren Untersuchungen festgestellt, daB das Resistenz-
verhalten des Weizens gegen Gelbrost in erster Linie von den jeweili^en
Temperatmen abhangt. Sorten, die bei tiefen Temperaturen gleichm^ig
hoch anfaUig sind, zeigen sieh t^s schon bei 15®, in anderen Fallen erst bei
20® Oder bei noch hSheren Temperaturen resistent oder immnn. Da diese
Ergebnisse sieh auf die Versuche mit nur einer Rostrasse von P. glumarum
griinden, haben Varff. emeut den EinfluB der Temperatur unter Verwen-
dung von 4 Rassen (Nr. 2, 4, 7, 9) und 31 Weizensorten naehgepriift. Da-
bei haben sie wiederum feststellen kOnnen, daB die hSheren Temperaturen
bei den meisten Sorten Gelbrostresistenz auslSsen. Die einzelnen Sorten
verhaJten sieh aber versohieden. Es gibt auch solche, die auch noch
bei hohen Temperaturen starken Gelbrostbefall aufwiesen (z. B. Heines
Eolben, Carstens Diddropf V). Das dureh die Temperatur bedingte
Anste^en der Resistenz in den Sommermonaten wird als Sommer-
resistenz bezeiehnet. AuBer der Sorte ist fiir die Resistenzanderung aueh die
Rostrasse maBgebend. So vermOgen besonders die Rassen 1, 7, 9 auch
bei hohen Temperaturen Befall hervorzurufen, was bei der Bewertung
der Rostrassen neben ihrer Verbreitung zu beriicksichtigen ist.

Braun (Berlin-Dahlem).

222 Schadigmigen der Pflanzen durch Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

Greaney, P. J., Field experiments on the prevention
of cereal rusts by sulphur dusting (1930—1933). (Scien-
tific Agriculture. Vol. 14. 1934. p. 496 — 511.)

Yerf. berichtet fiber das Ergebnis dreijahriger, in den Jahren 1930 bis
1932 in "Winnipeg (Manitoba) durehgeffihrter Feldversuche fiber die Be-
kfimpfung des Getreiderostes mit staubfSrmigen Mitteln. Er kommt zu
dem Ergebnis, daB Puccinia graminis und P. triticina auf
Weizen und Hafer durch Schvefelbestaubung zur rechten Zeit und in der
richtigen Dosierung fast vollkonunen unterdrfickt werden. Die Bestfiubung
erio^^e im Abstand von 5 Tagen vShrend einer Zeitspanne von 4 — 5 Wochen
mit jedesmal etwa 34 kg ha. Am besten hat sich Kolodust bewahrt, ein
fein verteiltes Schwefelpraparat. Die Wirkung nimmt mit der Feinheit
des Schwefels zu. Es konnten Ertragssteigerungen bis zu 400% erzielt
werden. Auch die Kornqualitat erfuhr eine vesentliche Verbesserung, wie
das Gerdcht je HohlmaBeinheit zeigt. Die Behandlung Trirkte gleichzeitig
auch auf andere Krankheitserscheinungen hemmend, "wie Blatt- und Stengel-
fleckungen, Weizenschorf, Schwirze. Verf. empfiehlt diese Art der Be-
kampfung namentlich fur Versuche, Saatzuchten und in besonders gefahr-
deten Gegenden. Braun (Berlin-Dahlem).

Bird, J. N., Influence of rest injury on the vigour and
yield of thimothy. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1934. p.
550—659.)

Da die Ansichten fiber das AusmaB der durch Puccinia gra-
minis phlei-pratensis (Erikss. et Henn.) S. u. P. verursachten
Schaden stark auseinandergehen, hat Verf. Beobachtui^en an Einzel-
pflanzen von 116 verschiedenen Stammen durchgeffihrt. Zunachst fiel die
hohe Anfalligkeit der skandinavischen Herkiinfte auf. Die Mehrzahl aller
gepruften Stfimme zeigt dagegen eine deutliche Besistenz als Folge der
zfichteiischen Bearbeitung. Vollkommen frei von Befall -war freilich kein
einziger, -wie fiberhaupt auch innerhalb der einzelnen Stanune alle Befalls-
grade festzustellen waren, was Verf. auBer auf den EinfluB der AuBen-
faktoren auf unterschiedliehe Anfalligkeit der Einzelpflanzen zurfickffihrt.
Zwisehen der Entwicklung des Parasiten auf der Wirtspflanze und der Scha-
dignng dieser braucht nieht immer eine Parallele zu bestehen, was Verf.
ebenfalls genetisch erklaren mochte. Bn groBen Durchschnitt ffihrte zu-
nehmender Befall aber zu zunehmenden Ei^agsausfallen, die auf ^Ao ^/so
der gesunden Pflanzen zuruckgingen. Braun (Berlin-Dahlem).

Hniby, J., Mykologische Beitrage aus der West-Slo-
wakei. (Osterr. Botan. Ztschr. Bd. 83. 1934. S. 62.)

Verf. beobachtete folgende in der Slowakei bisher nieht festgestellte
Pflanzenschadlinge: Im inoveegebirge Puccinia constricta auf
Teucrium montanum sowie Tubureinia primulae auf
Primula pannonica; im Bajecer Gebii^ die auf Hieracium
villosum spezialisierte Form von Puccinia hieracii.

Engel (Berlin).

Hanna, W. P., and Popp, W., Bunt infection of spring wheat
by soil-borne spores. (Scientific Agriculture 1934. Vol. 14.
p. 257—258.)

Verff. koimten abermals feststellen, daB Sporen von Tilletia tri-

Schddigimgen der Pflanzen durch Pilze, Bakterien xmd filtrierbare Vira. 223

t i c i aus WeizenShren, die wahrend des Winters auf der Bodenoberflache
gelegen batten, besser keimten als die aus Ahren, die 15 cm tief eingegraben
iraren. Infektionsversuche mit Sporen, Brandbutten und BrandShren, mit
denen Freilandparzellen im Herbst verseucbt "waren, erbrachten bei Weizen,
der mit Formalin behandelt war, eine Anzahl von Brandpflanzen,

Braun (Berlin-Dahlem).

Jones, L. K., Anderson, B. J., and Burnett, 6., The latent virus
of potatoes. (Phytopath. Ztschr. Bd. 7. 1934. p. 93—119.)

Die TJntersuchungen dienten zunaohst dem Nachweis des X- oder la-
tent-Virus in norckmerikanischen Kartoffelherkiinften. Das Verfahren be-
stand darin, dafi die Blatter von jungen Tabakpflanzen der Sorte „Conneoti-
cut Havana" und der Tomatensorte „John Baer“ mit den Prefisaften von
Kartoffelblattem eingerieben wurden. Es wurden die Symptomstufen „Mott-
ling", „Ringing“ und „Spot netrosis" unterscMeden, bei den Tomatenein-
reibungen, die z. T. in Kombination mit dem gew5hnliehen Tabakmosaikvirus
Nr. 1 ausgefiihrt wurden, auBerdem noch „streak“. Das „Ringing‘‘ wurde
nach Bed^ noch in schwaches und starkes „Binging“ unterteilt. Es zeigte
sich, dafi das Virus in samtlichen gepriiften 1079 augenscheinlich gesunden
Pflanzen verschiedener Marktsorten enthalten war, auB^dem in 188 offen-
sichtlich kranken Pflanzen, die noch andere Viren enthielten. Aus den augen-
scheinlich gesunden Pflanzen wurde zumeist das weniger virulente Mosaik
gewonnen, z. T. aber auch ein starkeres, wie es ahnlich bei Abreibuu^en
von ,.rugose-mosaic“-krankem Material gefunden wird. In auleinander-
folgenden Weiterimpfungen auf Tabak wurde vielfaeh eine Verstarkung
der Sym^tome beobachtet, die von den Verff. als Virulenzsteigerung ge-
deutet wird. Solche gekraftigten Viren erzeugten bei Riickimpfung auf
Kartoffeln die Symptome des „Rugose Mosaic". Nach der Passage lurch
Nicandra physaloides, Datura stramonium, Ama-
ranthuB retroflexus und Solanum nigrum wurde das
Virus in seiner starken und schwachen Form wieder erhalten. Es zeigte sich,
daB das Virus in seiner virulenteren Form auf der Kartoffel das gleiche „ru-
gose mosaic" verursachen kann wie in Kombination mit dem Veinbanding-
(Y-)Virus. E. K Shier (Berlin-Dahlem).

Davies, W. M., Studies on aphides infesting the potato
crop. 11. Aphis survey: its bearing upon the selec-
tion of districts for seed potato production. (Ann.
Appl. Biology. Vol. 21. 1934. p. 283.)

Als tJbertrSger des BlattroU- und des T-Mosaik-Virus spielt die Blatt-
lausart Myzus persicae eine hervorragende Rolle bei der Verur-
sachung des sog. Kartoffelabbaus. Verf. imtersuchte die Verbreitung dieses
Insekts in den Jahren 1928 bis 1933 in Nord-Wales auf 5 von 16 ursprimg-
Uch zur Kartoffelpflanzgutgewiimung in Aussicht genommenen Vermehnings-
stellen. Von den 6 Stellen sollten sich 3 (D, F und G) zur Pflanzgutproduktion
als geeignet, zwei (I und J) als ungeeignet erweisen; bei den ersteren war w&h-
rend der ganzen Beobachtungszeit keine Zunahme an Viruskrankheiten
festzustellen, wShrend bei den beiden letzteren schon im dritten Jahr eine
Starke Zunahme der Virusverseuchung zu beoba(diten war. Dem entsprach
die FeststeUung, daB die Kartoffeln an den Stellen D, F und G stets nur von
wenigen LSusen beflogen wurden, wShrend an den Stellen I und J gefltigdte
L&use in groBen Mengen einfielen. Durch soi^Sltige Sjahrige quantitative

224 Schbdigungen der Pflanzen duich Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

Erhebungen wurden die Beobachtungen belegt. Okologiscbe Beobachtungen
ergaben, dafi M. p e r s i c a e als ungefliigelte Form in betrachtlichen Mengen
auf dem Winterkohl, insbesondere dem krausblSttrigen „Savoy“-Kolil iiber-
wintert. Diese Pflanze stellt in den meisten landlichen Distrikten von Nord-
Wries die Hauptqnelle der gefliigelten Friihjahrslause vor. Die Migrations-
zeit der gefliigelten Laus flllt in Kord-Wales fiir gewShnlieh auf Anfang
Juni, nur wen%e gefliigelte Lause findet man im JuU und August, und erst
Ende September beginnt die Abwanderung gefll^elter Lause von den Kar-
toffeln. E. Kohler (Berlin-Dahlem).

Pierce, W. H., Viroses of the bean. (Phytopathology. Vol. 24.

1934. p. 87-115.)

Bohnen (Phaseolus vulgaris L.) sind fiir eine Reihe von Viren
anfallig, namlich fhr „Common Bean-mosaic“, „TelloTr Bean-mosaic“, „A1-
f^a-mosaie“, „ordinary Tobacco-mosaic" und „Tobaeco ring-spot". Von
diesen ist das erstgenannte das sehadlichste und besitzt die grSfite Ver-
breitung. Verf. priifte in Infektionsversuehen 24 verscWdene Bohnensorten
auf ^ Varhalten gegeniiber den genannten Viren. Dazu -vrarden die Blatter
der jungen Pflanzen mittels Gazestiickchen, die mit dem PreBsaft von kran-
ken Pflanzen geteankt waren, eingerieben. AJs besonders empfindlich fiir
alle gepriiften Viren erwies sich die Sorte Refugee Grant, sie wurde daher
als Indikatorsorte zum Nachweis latenter InfeMonen benutzt. Gegen das
common mosaic waren immun die Sorten Corbett Refugee, Great Northern
N I Nr. 1, Robust und Wis. Hybrid Wax Nr. 536, 8 andere waren anfallig, 12
weitCTe tolerant, d. h. das Virus vermehrte sich in diesen Sorten ebenso leicht
wie m den anfalligen, ohne Jedoch starkere Symptome hervorzurufen. In
den immunen Sorten vermehrte sich das Virus augenseheinlich iiberhaupt
nicht. Gegen das Yellow mosaic erwiesen sich alle Sorten db aksllig. Auch
den Alfalfa- und Ring spot-Viren waren samtliche Sorten zuganglich, wenn-
gleich die Widerstancfefahigkeit im einzelnen verschieden war. Beim Alfalfa-
Mosaik traten nur Initi^symptome auf den eingeriebenen Blattern auf, AJl-
gemeinykr ank u n gen blieben dagegen aus. Das Tabakmosaikvirus lieB nur
M wenigen Sorten Symptome erscheinen. Die Infektionsbilder werden ttsiiAr
bychrieben. Die Gryizwerte der Infektiositat der ViruspreBsafte beim Er-
hitzen, Verdiinnen, Einwirkenlassen von Chemikalien und beim Stehenlassen
warden naher bestimmt. Die beiden eigentlichen Bohnen-Mosaikviren war-
den durch die Blattlausarten Macrosiphum solanifolii und
Illinoia pisi iibertragen, durch die letztere auch das AlfaJfarVirus.
An emem groBen Material wurde festgestellt, daB zwar das Common Bean
mosaic mit dem Samen iibertragen wird, nicht aber das Yellow Bean mosaic.

E. K Shier (Berlin-Dahlem).

Abgesehlossen am 7. Dezember 1934.

ZentraUlatt fSr Bakt. etc. n. AM. B 1 91 . No. 11 | 15 .

Ausgegeben am 30. Januar 1935.

Xaehdruek verboten*

Studies on Anaerobic Bacteria.

n. Further Extensive Uses of the Vegetable Tissue
Anaerobic System.^)

[From the Department of Agricultural Bacteriology, University of Wis-
consin, Madison.]

By L. S. McClung, Elizabeth McCoy and E. B. Fred.

It is not without knowledge of the many “new methods” for obtaining
reduced oxygen tension for surface culture of anaerobes or of novel proce-
dures for applying the old, familiar principles that this paper is written,
but rather because of them. Several years ago apology for the introduction
of new methods in anaerobic plate technique was trite; yet such continue
to be proposed. No doubt each of these possesses some advantage peculiar
to the problem in which the author is engaged; yet, in many cases, perhaps
even in the majority, the adoption of these as methods for general use, parti-
cularly in large series, is unwarranted or often impossible either because
of the special apparatus required or of expense of materials.

Some years ago a simple method (vegetable tissue jar [1]) for surface
growth of anaerobic bacteria was proposed from this laboratory but for
some reason, perhaps obscurity of reference, it has not found wide use. Be-
cause of our continued success with this method, and because of improve-
ments and extensions of its use, its re-introduction into the literature is,
in our opinion, justified. The method depends upon the fact that living
plant tissue, enclosed in a vessel, will respire and exhaust the atmosphere
of oxygen. The CO 2 liberated in the process is of itself advantageous as a
stimidant to anaerobic growth.

No special apparatus is necessary; any jar or vessel which may be sealed
will suffice. We have found tall pyrex cylinders (6 by 18 inches or 12 by
24 inches), with a square of plate glass or a glazed dinner plate sealed onto
the jar with plasticine (modeling clay), convenient and practical in routine
cultivation. These are, however, quite unnecessary for success. Small tin
cans, desiccators, Novy jars, or even inverted bell jars sealed as above, are
equally satisfactory and may be used if incubator space is not at a premium.

About one-tenth of the available space is filled with chopped (unpeeled)
Irish potatoes; plates, tubes, or bottles are stacked on wire supports above
the potatoes. The top is then sealed on and the jar set in the incubator.
No further work is necessary— no evacuation or flushing with inert gases;
no spilling of chemicals. The time of incubation should vary with the rate
of growth of the organisms. In general we have found 48 hours sufficient

1) Published with the approval of the Director of the Wisconsin Agricultural
Es^riment Station.

ZweiteAbt. Bd. 91.

15

226 L. S. Me Clung, Elizabeth McCoy and E. B. Fred,

tor colony production; for sporulation a longer period may be necessary.
Other vegetables than the potato may be used, although availability and
cost are limitations in certain cases. Carrot and cabbage tissue have been
successful in our hands: chopped green alfalfa, lettuce, and apple have not
been. The jars prepared from certain of the tissues, notably potato, have
an objectionable odor, because the plant respiration is complicated by an
active bacterial fermentation. To avoid the odor we have lately been experi-
menting with grains such as oats and barley, as a substitute for potatoes.
In these cases sufficient water is added to thoroughly moisten the grains
as for germination. This process, is, however, apparently inhibited by the
anaerobic conditions as actual sprouting has not been observed. Although
this latest improvement has not been used as extensively as the potato
tissue, the results which have been obtained indicate that it will be equally
satisfactory. It has in addition certain advantages— cleanliness, and ease
of storage and handling, absence of odor, low cost, and availability through-
out the year.

The Vegetable tissue jar is not proposed to replace all other methods
of anaerobic culture. Certain limitations at once suggest themselves. For
instance, the anaerobic conditions are not immediate: the tune required for
respiration to produce sufficiently low oxygen tension must vary with the
amount and activity of the tissue in relation to the volume of O 2 to be absor-
bed, perhaps also with the temperature of incubation. For very short incu-
bations (6 to 8 hours) other replacement or chemical absorption systems for
anaerobiosis should be used. A further objection which is cited to this meth-
od is that respiration produces considerable moisture, which may cause
spreading of surface growth. In many cases, as in mass production of cells
or long incubation for simple detection of anaerobes, this is no disadvan-
tage. In case discrete colonies are desired, one may take care of the water
easily and effectively by using porous tops to the Petri dishes (ungla-
zed porcelain covers, available at most bacteriological supply houses). If
porous tops are used, they should simply replace the glass tops, since they
may be sterilized in hot air ovens in the usual manner. Their only disadvan-
tage is in being opaque, making pouring of the plates slightly more diffi-
cult and obscuring growth during incubation. Studies of the effects of
various gases upon growth are obviously impossible in the vegetable tissue jar.

To offset these limitations the vegetable tissue jar has certain advan-
tages, which may best be illustrated by actual instances of use. One exten-
sive application, that was not mentioned in the original paper, and for which
we have found either potato or grain jars quite satisfactory, is in incubating
cultures at thermophilic temperatures. At the elevated temperatures diffi-
culty is often encountered with the use of jars requiring a grease seal because
of leakage at the seal; and gas replacement systems are undesirable due to
the occasional explosion, which occurs when the excessive expansion of
the gas is not provided for. Respiration in the vegetable tissue develops
little, if any. pressure (aside from that of change in temperature, which is
not sufficient to break the seal).

To list some of the other purposes for which we have had occasion to
employ these jars recently:

p Single colony purffication of over 100 cultures of anaerobic spore-
forming bacilli. These have included soil butyric types as Cl. pasteur-
ianum, Cl. acetobutylicum, and Cl. saccharobutyri-

Studies on Anaeiobic Bacteria. II.

227

cum, pathogenic anaerobes such as Cl. botulinum, Cl. tetani,
Cl. chauvoei. Cl. welchii and others, and a group of thermo-
philic anaerobes. It should perhaps be mentioned that it had been pre-
viously considered particularly difficult or impossible to obtain surface
cultures of the last group listed (2j. Certainly the cultures tested have in-
cluded representatives of species reported in the literature as “strict anaerobes’'.

2) Incubation jars to accommodate 200—300 plates from a laboratory
exercise in the isolation and purification of certain anaerobic species.

3) Production of antigen by surface growth for the immunization, in
total, of over 125 rabbits. Fresh antigen was used for each injection of the
majority of the animals, thus necessitating, at times, continuous series of
jars, no one of which could fail without interruption of the immunization
process. Sometimes the series were of such nature, as in the production of
large amounts of antigen for agglutinin absorption, that large tin cans (2 by
4 feet) were necessary to accommodate the 200 or more bottles to be in-
cubated at one time.

4) Production of mass quantities of cells of the proprionic acid bacteria
for enzyme studies.

5) Incubation of 2,600 tubes in differential sugar fermentation studies
in the taxonomy of certain of the above named cultures. In this case the
base medium plus the sugars did not produce a sufficiently reduced medium
for the support or growth of the cultures being tested. Similarly, the meth-
od has been used for incubation of flask fermentations in quantitative
fermentation studies.

6) Incubation of hundreds of plates necessary in studying the enzymic
system of cultures; e. g. gelatin plates (Frazier technique), starch hydro-
lysis, milk plates, blood agar plates, etc.

It is our opinion that, on the basis of the above examples, the vege-
table tissue jar represents one of the simplest and most practical methods
for the surface culture of anaerobic organisms.

Summary.

Further uses (with a discussion of the advantages and disadvantages)
of the vegetable tissue jar as a means of anaerobiosis for surface culture
are cited. It has been shown to be practical at thermophilic temperatures
as well as at mesophilic temperatures.

References.

1. Carroll, W. K., and Hastings, B. G., The use of living vegetable tis-
sue for securing a favorable gaseous environment for anaerobic bacteria. (Joum. Lab.
and Clin. Med. Vol. 11. 1926. p. 264 — 266.) — 2. Paine, P., Some observations
on thermophihc anaerobes. (Zentr^bl. f. Bakt., Abt. II. Bd. 86. 1931. S. 122 — 129.)

16*

228

L. S. McClung and Elizabeth McCoy,

Nachdrudc verboten.

Studies on Anaerobic Bacteria.

Vin. The agglutination reactions of Clostridium ther-
mo sac charolyticum.^)

[From the Department of Agricultural Bacteriology, University of Wisconsin,

Madison, Wisconsin.]

By L. S. McClung and Elizabeth McCoy.

In a previous paper of this series (McClung) the morpho-
lo^eal and physiological characteristics of a new thermophilic Clostri-
dium were presented. The 27 strains isolated were of widely different
origin but were all of the thermophilic group known as the causal agents
of the type of spoilage of non-acid canned foods known as “haxd swell”.
They possessed the same morphology, and the singular uniformity of physio-
logical characters led to the conclusion that the cultures investigated were
strains of one species. The name Clostridium thermosacch-
a r 0 1 y t i c u m was suggested as appropriate for the species. The object
of this report is to present the antigenic relations of these strains as shown
by the agglutination reaction. The motility of this species is not well pro-
nounced, at least under the conditions chosen for study; stains, however
reveal the presence of peritrichiate flagfilla.

In a preliminary experiment 5 cultures were chosen at random and anti-
sera prepared according to the methods previously reported (McClung,
1934). Following cross reactions with all stock cultures, it was observed
that on any one serum the strains were divided into two groups. The 10
cultoes of the first group reacted strongly to full titer of the serum and
m these the floes were large flakes or one loosely bound ball. In the other
group of 17 c^tures the type of floe changed to smaU granules or compact
flakes throughout the dilution range. This difference was apparently due
to the antigenic complex of the cultures (exactly the same technique was
used -mth all strains) as it persisted in different batches of anton and the
Rouping was confirmed by the reactions obtained in the 4 remaining sera
By chance, all the sera available ware of cultures of the first group. The
mtigenie identity of the strains of this group was proven by absorption tests
(rec^rocal where possible). The question then remained as to the nature
of the antigenic constitution of the second group.

Beli^ng that the observed differences might be explained by the double
receptor hjpothrais of W e i 1 and Felix, experiments were designed with
^ foUowing sera were prepared against strain 6 (typical
of the first group) and strain 22 (typical of the second group)®):

ExpeAnSt Agrionltural

+ 1 ... *.*1 ^ employed in the preparation of the sera and the teohniqne of

*^v***v' i^atiorf with those previously reported (M o C o y and M o C I u n a)
1% .glucose 10 /„ trypCe brU was^ need afthe
medium. The temperature of meubation of the cultures was 68“ C.

Studies on Anaerobic Bacteria. VIII.

229

Type

Designation

Preparation of antigen

Somatic

0

Heat treated whole cells

Flagellar

H

Clear supernatant obtained by mechani-
1 cally agitating a concentrated suspension

of whole cells and long centrifugation
to purify

Whole cell

W

1 !

Young cultures centrifuged for concentra-
tion but not washed or treated with
heat or chemicals

Routine cross reactions of the set of stock cultures in the sera thus prepared
(W antigen in W and H sera; 0 antigen in 0 sera) again revealed the pre-
sence of two groups, one of which was not able to react in degree or to full
titer comparable to the other. This relation is shown in Table 1. To con-
serve space only the reactions of strains 5 and 22 are given; these strains
are homologous with the sera and are believed to be typical of the groups
which they represent.

Table 1. Cross reactions of the W antigen of cultures 5 and 22 in the W and H sera

of these cultures.

Serum

Test

antigen

80

160

&

320

eram dilution
640 |'1280

2560

5120

10240

Saline

control

5— W

5— W

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

+±

±

22— W

4 *

±

do

—

—

—

6— H

6— W

+ + +

+++

+ + +

+ +

±

—

—

22— W

- 1 -

- 1 -

±

—

—

—

—

22— W

6— W

+ + +

+ + +

++±

H-+±

+±

—

—

—

—

22— W

+ +

+ 4-

+±

±

±

— I

1 —

—

—

22— H

6— W

+ + +

+ + -f

++-f

+

±

— 1

1 —

—

—

22— W

+

±

±

—

i

j —

—

—

In a discussion of the antigenic relations of the Salmonella group, White
(1929) pointed out that a degradation (loss of heat-labile factor) of a motile
strain majr proceed by definite stages. To Ijuote his conclusions: “first to
disappear is the power to condition coarse flocculation of the bacilli, next
the ability to absorb appreciable amounts of flagella agglutinins, and last,
the power to stimulate these i n v i v o”. In the H or W serum of culture 5
it is evident that culture 22 is deficient in the H factor of culture 6. That
culture 22 is in only the first stage of degradation is shown by the fact that
it retains the power to absorb agglutinins and by its ability to stimulate
agglutinin formation.

The latter ability is shown in the production of sera 22— W and 22— H
(Tables 1 and 2). It should be noted that culture 22 is not agglutinated
to full extent in its homologous sera even in the low dilutions. Such sera
are, however, able to condition the typical large flaking agglutination of

the culture 6 type. It is Uo led that whatever difference exists between

cultures 5 and 22 is in nature quantitative ratho: than qualitative. The
complete removal of agglutinins for both types by absorption of either
heterologous or homologous serum with either orgi^nisms indicates this con-
clusion (Table 2).

230

L. S, ^McClung and Elizabeth McCoy,

The reactions obtained in the sera produced against the heat treated
cells reveal the similarity of the somatic fractions of these cultoes (Table 3).
Eeciprocal absorption experiments with these sera indicate antigenic identity
of the heat stabile fractions as either culture is able to absorb completely all
small flaking agglutinins from either serum.

Table 2. Reactions foUowing absorption of W and H antisera with 5 — and 22 —

antigens.

1 Reaction before absorption I
Test Titer '

culture and degree |

Absorbed

by

Reaction after absorption
Test I Titer

culture 1 and degree

5 — W

5— \V

5120

5— W

5— W

l(-r-r + -^±)

22— W

—

22— "W

2560

22— W

5 — W

—

{+-±)

22— W

—

5--H

5— W

5120

6— W

6— "W

—

(4--h + “’‘db)

22— W

—

22— W

1280

22— W

5— W

—

(+-±)

22— W

—

22— W

5 — VT

1280

5— W

6— W

—

{+++->-±)

22— W

—

22— W

1280

22— W

6— W"

—

22— W"

—

22— H

0— W

1280

5— W

5— W

—

(+ + + “^±)

22— W i

—

22— W

, 1280

22— W

5— W

—

1

1

1 ^
i

22— W

—

1) ( — ) means no reaction in 1 — 80; the lowest dilution tested.

Table 3. Cross reactions of the O antigen of cultures 5 and 22 in the O sera of these

cultures.

Serum

Test

Serum dilution

Saline

antigen

80

160

320

640

1280

2560

5120

10240

control

5—0

i 5—0

-^4-

+ +

+ +

4 +

44

4

+

_

} 22—0

+

_u

d:

±

4

—

—

—

22-0

6—0

+ + 1

! --f

44

44

4

±

—

—

22—0

4

+

4

—

—

—

It is realized that in this study one may speak ■with finality about the
complete ant^enic constitution of only two cultures of the group of twenty-
seven, as sera were not produced for the remaining cultures, and complete
reciprocal absorptions were therefore not possible. It is believed, however,
that the cultures chosen are entirely typical of the groups which they rep-
resent and that further study would not tend to indicate sub-groups as
has been the case with agglutination studies of certain other elostridia, e. g..
Cl. botnlinum and Cl. tetani. In the sera available, cross reactions
and reactions of all cultures foUo'wing the absorption technique with various
heterologous strains revealed no difference in the cultures beyond that of
the original two groups. Cross reactions with related species have not been
possible as authentic representatives of these were not available. Few, if
any, such species have been described in the literature. No reaction was

Studies on Anaerobic Bacteria. VIII.

231

obtained with cultures of thermophilic bacilli dissimilar upon morphological
and physiological characteristics to the species of this paper.

Summary.

A study has been made of the antigenic constitution of strains of Clo-
stridium thermosaccharolyticum by means of the agglu-
tination reaction. The application of the technique employing stabilotropic
and labilotropic antigens revealed two groups of cultures. A strain typical
of one group was found deficient, but not lacking, in the H factor of the
‘‘master strain”, typical of the other group. Further subdivision of the strains
of this species was not indicated. Significant points revealed in this study are:

1) Demonstration of the presence of heat labile and heat stabile anti-
gens in a species not hitherto investigated. The fact that this species is an
obligate anaerobe extends the very meager list of Clostridia to which the
Weil-Felix hypothesis has been applied. It is further unique in pre-
senting, so far as is known, the first instance of this type of study of thermo-
philic organisms.

2) Successful application of the agglutination reaction in the species
identification of an anaerobic bacillus. The use of the agglutination reaction
has not generally met with success for this purpose in the study of anaerobes
as is indicated by Lehmann and Neumann (1927, p. 628), Hall
(1922), and Robertson (1929).

References.

(1) Hall, I. C., Differentiation and identification of the sporulating anaerobes.
(Joum. Infect. Diseases. Vol. 30. 1922. p. 445-~504,) — (2) Lehmann, K. B.,
and Neumann, B>. 0., Baliteriologie, insbesondere bakteriologische Diagnostik.
MUnehen (Lehmann) 1927. 7. Aufl. 876 S. — (3) M c C 1 u n g , L. S., Production of
agglutinins against thermophilic organisms. (Joum. Bact. Vol. 27. 1934. p. 64.) —
(4) M o C 1 u n g , L. S., Studies on anaerobic bacteria. IV. Taxonomy of cultures of
a thermophilic species causing *‘swe]ls’’ of canned foods. (Joum. Bact. In Press.)
— (6) McCoy, Elizabeth, and M o C 1 u n g , L. S., Studies on anaerobic bac-
teria. V. The agglutination reactions of Clostridium a c e t o b ut y 1 i o um
and related species. (Joum, Infect. Diseases. In Press.) — (6) Robertson,
M., See A System of Bacteriology in Relation to Medicine. (Gt. Britain, Medical Res.
Council. Vol. 3. 1929. p. 284.) — (7) White, P. Bruce, See A System of Bac-
teriology in Relation to Medicine. (Gt. Britain, Medical Research Council. Vol. 4.
1929. p. 103.)

232

C. S t a p p ,

Naehdruck verhoten,

Eine bakterielle FSiUle an Lactuca sativa var. capitata Lt
und Oichorinm endivia L.

{Aus der mikrobiologisch-chemisclieii Abteilung der Biologischen Keichs-
anstalt fur Land- und Forstwirtschaft, Berlin-Dahlem.]

Yon C. Stapp.

lilt 3 Abbildungen un Text.

Ende Xovember 1931 wurden der Biologischen Eeichsanstalt Kopf-
salat- und Endivienpflanzen aus Mitteldeutschland zugesehickt, die an
ciner NaBfSule litten. Die Pflanzen waxen in „kalten Fruhbeetkasten‘' ge-
zogen. Einige Blatter mancher Pflanzen waren faulig erweicht, welk und
gelb bis tief schwarz verfSrbt. bei einzelnen BlSttem zeigten sich ver-
sehieden groBe Fleeke. Bei anderen Pflanzen war bereits der grbfite Teil
der Blatter verfault als sie ankamen.

Stiickchen des Faulgewebes auf dem Objekttrager zerkleinert, mit
einem Tropfehen Wasser angefeuchtet und mit Deckglas abgedeckt, lieBen
unter dem Mikroskop eine ungeheure Menge von Bakterien in dem Faul-
material erkennen.

In welchem AusmaB die Krankheit aufgetreten ist und um welche
Sorten es sich gehandelt hat. dariiber waren Angaben nicht gemacht. Auf
eine 1933 an die gleiche Stelle geriehtete Anfrage wurde dann mitgeteilt,
„daB die Bakteriose auch im Herbst 1932 in sehr starkem Umfange auf-
getreten ist, trotzdem wir fiir weitmbgliche Beseitigung der Feuchtigkeit
durch Liiften gesorgt hatten. Solange das Herbstwetter verhaltnismaBig
hell und windig war, kam die Krankheit kaum zur Entwicklung. Mit Ein-
tritt dunkler, ruhiger und feuchter Witterung jedoch breitete sie sich sehr
sehnell aus. In diesem Jahr hat die Krankheit sich bisher noch nicht ge-
zeigt, was wir auf die verhaltnismaBig sonnige Herbstwittming zurtick-
fiilu’en. Befallen warden in erster Linie die glattblattrigen Endiviensorten
„GoIdgelber Eskariol“ und ..Griiner Eskariol". In erheblich geringerem
AusmaBe warden krausblattrige Sorten, wie z. B. „Grune Mooskrause"
und .,Goldherz‘' befallen."

Aus Material von verschiedenen Pflanzen, sowohl Kopf- als Endivien-
salat, wurde versucht, die Parasiten herauszuziichten. In aUen Fallen ent-
wiekelten sich auf den Bouillon-Agar-Platten in groBer Mehrzahl Fluores-
zenten, die, in gesunde Salatpflanzen eingeimpft, wieder die gleichen Faulnis-
erseheinungen hervorriefen; aus den deraxt kiinstlich infizierten Pflanzen
lieBen sich die Err^er reisolieren.

Damit war zwar der Beweis erbracht, daB als Ursache ein Fluoreszent
anzusehen ist. und daB es sich demnach bei der Salatkrai^eit um eine
echte Bakteriose handelte; es war aber noch die Frage zu klaren, oh die
yorli^ende Krankheit mit einer der bereits beschriebenen SalatbaMeriosen
identisch ist oder nicht. Gerade ubar die durch Bakterien verursachten
Salatkrarddieiten ist die literatur noch recht unubersiehtlich. Es sind
eine Reihe von bakteriellen NaBfaulen bei Salat bescMeben und fiir alle
etwas eingehender untersuehten wird als Erreger auch ein Fluoreszent an-
gegeben, doch diese Fluoreszenten sollen voneinander verschieden sein.

Eine baktcnelle Faille an Lactuca sativa var. capitata L, nsw.

233

■weshalb teilweise auch die Krankheiten selbst versehiedene Namen er-
hielten, ■wie z. B. Louisiana-, Sudkarolina- oder Kansas-Salatkrankheit.
Es eriibrigt sicb, bier auf das altere Schrifttum ausfiihrlicb etnzugehen,
es ist das von mir im Sorauer bereits gescheben (8). Erganzend sei
bierzu nur erwabnt, daB W. K o 1 1 e (5) im Jabre 1930 erstmaSg exaktere
Angaben bber das Auftreten einer Salatbakteriose in Deutschland gemaeht
hat, und zwar an Winter-Endivien, und ebenfalls einen Fluoreszenten fand.
den er, da Abweichungen in seinem pbysiologiscben Verbalten von den
anderen bakteriellen Salatparasiten festgestellt mirden, als -weitere neue
Spezies mit dem Eamen Pseudomonas endiviae belegt bat.
Dieser Organismus ist Gram- negativ. verfliissigt die Gelatine nicht und
bringt Milch nicht zum Gerinnen, es tritt aber spSter eine Aufhellung ein.
Yon den friiher bekannten Erregern wird Pseudomonas viridili-
V i d a Bro\m als Gram- positives, die Milch ohne vorherige Koagulation
peptonisierendes, die Gelatine langsam veriliissigendes Stabchenbakterium
beschrieben, wahrend Pseud, vitians Brown Gram- negativ sein,
die Milch erst koagulieren, dann peptonisieren soil und im Yerhalten zu
Gelatine keine Verschiedenheiten gegenuber dem vorhergenannten Parasiten
zeigen soil. Pseud, marginalis Brown wiederum ist ebenfaDs G r a m -
negativ, verfliissigt langsam Gelatine und bringt die Milch zur Gerinnung,
ohne sie spater zu peptonisieren; ihr thermaler Tdtungspunkt liegt mit 52
bis 53® C etwas hSher wie der von Pseud, vitians mit 51 — 62® C (1.
2, 3).

M a r g. S. Lacey (6) hat neuerdings einige Fluoreszenten aus Salat
isoliert und beschrieben, sie aber nicht benannt. Ihre Stamme Nr. 203.
224, 233, 238 und 248 waren bis auf einige geiinge Abweichungen einander
gleich. Die Stamme 224, 233, 238 und 248 vermochten die Milch ohne vor-
herige Koagulation zu peptonisieren, Stamm 203 koagulierte zuvor. 4 Stamme
waxen nicht in der Lage, Nitrate zu reduzieren, der funfte Stamm, 238,
reduzierte Nitrat schwach zu Nitrit.

ErankheitsbUd.

Das Krankheitsbild entspricht im allgemeinen dem, das W. Kotte
von der Endivienkrankheit gegeben hat. Ob allerdings die Herzblatter
von Endivien dem Angriff des Erregers groBere Widerstandskraft ent-
gegensetzen wie die auBeren Blatto:, kann nicht gesagt warden, denn so-
wohl die Kulturen aus Kopfsalat wie aus Endiviensalat erwiesen sieh fiir
Kopfsalat pathogen und sind nur an jungen Kopfsalatpflanzen im Gewachs-
haus gepriift worden.

E r r e g e r.

Hinsiehtlich des morphologischen, kulturellen und physiologischen Yer-
haltens des Erregers — es sei bereits bier erwahnt, daB die aus Kopfsalat
geziichteten Stamme v6llig mit denen ttbereinstimmten, die aus Endivien-
saJat isoliert waren — machten sich aus den oben dargelegten Griinden
eingehende TJntersuchungen notwendig. Die StabehengrSBe ist auf ein und
demselben Nahrsubstrat sehx versehieden. Stabchen einer 2 Tage alten’^)
BouBlon-A^kultur besitzen eine Lange von 1 — 6 n, die meisten sind aber
1,4— 2,8 lang und 0,4— 0,5 n dick. Gleichalte Stabchen von Kartoffelagar

Wezin nichts anderas angegeben ist, betnig die Bebriitungstemperatur stetB
-f 26 ® C.

234

C. S t a p p ,

sind 0,8— 3,0 lang. meist 1.0— 2,8 // lang und 0,4— 0,5 fi dick; auf MShren-
agar aind sie durchsehnittlich auch. etwas kiirzer als auf Bouillonagar, meist
1.2— 2.2 [jt lang, aber 0,5— 0,6 /< dick. An Keservestoffen wird nur in ver-
einzelten Zellen Volutin gebildet. Die Speicherung ist in Stabclien auf Bouil-
lon- und MSinrenagar sehr gering, ein ^renig besser auf Kartoffelagar. Gly-
kogen, Jogen und Fett -vraren nieht nachweisbar.

Die SclnrSrmer besitzen ein bis mehrere polare Geifieln (Abb. 1).

Auf Bouillon-Agar: 2fach 24 Std. sind die Impfstriche schon
kraftig ge-vraeksen, weifilich glanzend und transparent; dennoch heben
sick die Belage gut von ihrer Unterlage ab. Die Fluoreszenz ist, soweit die
Schragflacke reicht. deutlich. Nach 4 Tagen ist ein gleichmaBig Tiber die
Oberflacke sick kinziekender Belag entstanden und der ganze A^ar griin

fluoreszierend. Nack etwa 8 — 10 Tagen be-
0 m f giluit die Braunung des Substrates, der Be-

^ 'lag selbst bleibt unverandert.

AufKar toff el -Agar istdieEnt-

■vricklung nack 24 Std. nock sckwackerals
auf BoTiSlon-Agar, die Belage sind sckmutzig
weiBlick, schleimig, feuckt glanzend; nack
4 Tagen ist die Entwieklung kaum starker.
Das Md andert sick auck in der Folgezeit
nickt.

Auf M6kren-Agar entsprickt die
Entwicklungsstarke und das Ausseken der
Kultur nack 24 Std. denen auf Eartoffel-
Agar, wird aber spater im unteren Teil
etwas dicker schleimig, sonst macken sick
Anderungen nickt bemerkbar. Fluoreszenz
tritt weder auf Eartoffel-Agar nock auf
Mohren-Agar auf.

Auf sauremWttrze-Agar fin-
det Wachstom nickt statt.

ImBouill on - Gelatine-Stick
ist bereits nack 24 Std. bei Zimmertempe-

Abb. 1. Salatbaiterien mit poiaren ratuT eine 2—4 mm tiefe Schicht verflussigt,
Geifieln. Vergr. coofach. nach 48 Std. zeigt sich Entwicklung langs

des Stickkanals und etwa 6 mm tiefe, napf-
bis strumpffSrmige Verfliissigung; nack 9 Tagen war die Haifte der Gelatine-

saule yerfliissigt. auf der Oberflache batten sick stark faltige Haute gebildet,
ebenso zeigte sich an der Grenzzone eine dicke Bakterien-Auflage. Hack
4 Wochen war die ganze Saule verflussigt.

Auf M6kren-Scheiben zeigen die Bakterien ein anfanglipk
glasig-schleimiges Wachstum, die Belage nehmen dann ein sckmutzig-weiBes
Ausseken an, das spater mehr in gelblich libergekt. Eine Erweickung der
M6hre tritt nickt ein. DieStabcken sindversckieden lai^, Faden sindselten.

Auf Kartoffel-Stiickcken bUden sich hell- bis graubraun-
liche sckleunige Belage, mikroskopiscb zeigen sich meist mittellange schlanke
Stabcken nsit mehr oder weniger starker Neigung zur Fadenbildung.

Bouillon wird kraf% getrttbt, und es bUdet sich ein ^cker Boden-
satz sowie ein zartes Oberflachenkautchen. Die Fluoreszenz ist deutlich.

Auffallende Fonnanderungen in der Bouillon warden nickt beobachtet.

Eine bakterielle Faille an Lactuca sativa var. eapitata L. usw. 235

Milch wird koaguliert, das Kasein aber innerhalb von 12 Wochen
nicbt peptonisiert.

Lackmusmilch wird obne Umschlag in Rot koaguliert.

TJschinsky-Losung wird stark getmbt und bei ruhigem Stehen
■wird aucb ein ganz feines Hautcben gebildet.

In Fermi-LSsung ist die Hautbildung deutlieber und der Tru-
bunpgrad etwa dem in Usebinsky - Ldsung entsprecbend.

Aucb in C 0 h n - L 6 s u n g ist die Entwieklung noch gut. wenn aucb
die Trubung nicbt ganz die StSrke erreicht wie in Usebinsky- und
Fermi- Ldsung. Die Stabchen neigen hierin starker zur Fadenbildung.

Farbung nacb Gram ist negativ.

I n d 0 1 wird nicbt gebildet.

Yerhalten gegeniiber Tersehiedenen Temperatoren.

Die Versuche wurden auf BouOlon-Agar durchgefiihrt.

Bei 0 — 2,8® C ist nacb 8 Tagen sebon sehr deutliche Entwieklung auf
dem Substrat festzustellen.

Bei 2,2 — 4,5® C zeigt sicb keine wesentliebe Abweichung gegeniiber
der Entwieklung bei der niederen Temperaturstufe. Wahrend dort aber
die Fluoreszenz nur schwach war, trat sie bier schon etwas deutlieber auf.

Bei 5,5 — 7,5® C war bereits nacb 6 Tagen das Wachstum und aucb
die Fluoreszenz gut.

Bei 8,4 — 9,3® C war nacb 4 Tagen die Entwieklung deutlich und bereits
Fluoreszenz vorhanden.

Bei 11,2 — 12,2® C bob sicb der Belag nacb 4 Tagen deutlieber vom
Substrat ab als bei 8,4 — 9,3® C.

Bei 16,5 — 18,2® C liefi sicb nacb 24 Std. eine Verbreiterung der Impf-
stricbe, also Wacbstum, deutlich erkennen.

Bei 19 — 20,4® C zeigte sicb etwa das gleicbe Bild.

Bei 23,4 — 24,2® G ist sebon nacb 24 Std. ein gleichmdSiger Belag auf
der AgarsehrSgfldehe gebildet.

Bei 27,9—28,5® C desgleicben.

Bei 29,9 — 30,5® C tritt eine kaum merkliche VerzSgerung der Ent-
wicklung ein.

Bei 32,2—33,1® C Mt sicb nadi 24 Std. zwar noch ein bauebdiinner
Belag erkennen, ^e Fluoreszenz wird aber schon sebwacber.

Bei 35,9 — 36,9® C tritt Fluoreszenz uberbaupt nicbt mehr auf, es konunt
abar noch zu einer Entwieklung der Bakterien.

Bei 40® C iSiBt sicb ebenfalls noch eine geringe Yermehrung der Bak-
terien feststellen.

Bei 42® C finden sicb nacb 24 Std. zwar noch Schw§rmer im Kondens-
wasser, zu einer Weiterentwicklung kommt es aber nicbt mehr.

Das Temperaturoptimum fiir die Entwieklung liegt demnach e^
zwischen 23 und 28® C, das Maximum zwiseben 40 und 42® C und das Mni-
mum noch unterhalb 0® C.

Mikroskopiseb liefi sicb eine Wirkung der hoberen oder tieferen Tem-
peraturen auf die Fonngestaltung der Bakterien nicbt erkennen.

Der thermal e T6tungspunkt li^ zwischen 51 und 52® C.

236

C. R t a p p ,

Terhaltcn gegenuber versehiedeiien C-Verbindnngeii.

Das hier verwendete Xtosubstrat hatte folgende Zusammensetzung:
Asparagin 0.2%, iIgS 04 • 7 aO 0.03%, KCl 0.1%, KaHP 04 0,1%, Agar
1%, Lackmusl&sung 6% und je\reils 1% der zu antersuchenden C-Verbin-
dongen. Von letzteren warden Glnkose. Fruktose, Saccharose, Laktose, Mal-
tose, Eaffinose, Arabinose, Xylose, Glycerin, Erythrit, llannit, Dulcit,
Sorbit. Cellulose sowie die Xatriumsalze der Ameisen-, Essig-, Milch-. Me-
lon-, Wein- und Zitronensaure gepruft.

Zu diesen TJntersuchungen wurden auBer 3 Salatstammen zum Ver-
gleich noch eine Reihe anderer Fluoreszenten herangezogen, so ein Stanun
von Pseud, medicaginis var. phaseolieola Burkh., dem
Erreger der Fettfleckenkrankheit der Bohnen, ein Sta mm von Pseud,
t a b a c i Wo. et Fo., dem Erreger des Wildfeuers beim Tabak, ferner je
2 verschiedene Stamme von Pseud, fluorescens liquefaeiens
(Xr. 17 und 18, siehe S. 237) und non liquefaeiens (Nr. 21 und 22)
so\rie von Pseud, pyocyanea (Nr. 23 und 24), die sich bereits ein^e
Jahrzehnte in der Sammlung befanden. Gas wurde von keinem der 11
Stanune aus den verschiedenen Kohlehydraten, Alkoholen und organischen
Sauren gebUdet, Saure anfangHch von den 3 Salatstammen aus Glukose,
denn die blauviolette Agarsaule wurde voriibergehend deutlich rot, bei
acidimetrisehen Messungen nach 6 Wochen zeigte sich aber die [H'j der
KontroUen und der beimpften Glukose-Rfihrchen gleich. Starke Saure
wTjrde gebildet aus Arabinose und Xylose (ph zwischen 4,0 und 4,3). Das
Bohnenbakterium bildete nur aus Xylose stark Saure, ebenso das Tabak-
bakterium: von Pseud, fluorescens liq. zersetzt Nr. 17 nur Xylose,
Nr. 18 aber Arabinose und Xylose unter starker Saurebildung. Pseud,
fluorescens non liq. Nr. 21 verhalt sich wie Pseud, fluor.
liq. Nr. 18, w-ahrend der Stamm 22 aus diesen beiden Zuckem uberhaupt
keine Saure bildet. Die beiden Pyocyanea- Stamme endlich wirken
gleichmaBig auf Arabinose und Xylose, sie unter ebenfalls starker Saure-
bildung zersetzend, verhalten sich also in dieser Hinsicht wie die Salat-
bakterien.

Terbalten gegeniiber den verschiedenen N-Yerhindungen.

Fiir diese Versuche hatte das Nahrsubstrat die gleiche Zusammen-
setzung hinsichtlich der Mineralsalze -wie das fiir die C-Quellen-Versuche
benutzte; als C-Quelle wurde hier nur einheitlich 1% Natriumzitrat ge-
geben, ferner der Agar 2 proz. und von den N-Verbindungen jeweils sol^e
Xlengen, daB der N-Gehalt derselben demjenigen von 0,2% Asparagin ent-
sprach. Es woirden untersucht: Pepton, Asparagin, GlykokoU, Ealinm-
nitrat, Natriumnitrat, Ammoniumcluorid, Ammoniumsulfat, Ammonium-
nitrat, HMnstoff, Hexamethylentetramin, a-Alanin und Leuzin. Dabei
zeigte es sich, daB bis auf Hexamethylentetramin alle dargereichten N-Ver-
bindungen als N-Quelle verwertet werden konnten, ■wenn auch versehieden
gut. Als beste N-Quellen unter den obigen Bedingui^en erwiesen sich
Asparagin und Pepton, dann folgte GlykokoU, geringer ■war die EntwicMung
bei Ammon- und Nitratstiekstoff, a-Alanin und Leuzin, deutUch sehleehter bei
Hamstoff. Der Fettfleckenkrankheitserreger der Bohnen, Pseud, medica-
ginis var. phaseolieola, verhielt sich ahnlieh ■wie die Salatbafcte-
rien, ■wuchs aber auf den verschiedenen Substraten stets etwas sehleehter
als die letzteren. Pseud, tabaei (Stamm Mii a 4) unterschied sich vor

Eine bakterielle Faule an Lactaca sativa var. capitata L. osw.

237

allem von den anderen Bakterienarten dadurch. da6 sie unter diesen
Bedingungen^) — das muB ausdriicklicli betont verden — selbst das
Hexamet^lentetramin, wnn aucb schwaeh zu ververten imstande ■war!
Pseud, fluorescens liq. Stamm 17 und 18 sagte die Zusammen-
setzung des Nahrbodens scbeinbar nicht recbt zu. Selbst auf den Pepton-
und Asparaginsubstraten war die Entwicklung reeht schwacb und auf denen
mit Ammonsalz trat iiberhaupt kein 'Wacbstum auf. Die Stamme 21 und
22 von Pseud, fluorescens non liq. zeigten das gleiche Ver-
halten. Die Salatbakterien bildeten auBerdem in den Edhrehen mit Nitraten
Gas: ebenso verMelt sieh Pseud, pyocyanea.

Denitrifikation.

Da bei den Versuchen mit den verscbiedenen C-Quellen keine Zersetzung
unter Gasbildung beobachtet worden war, muBte das Gas in den N-Yersuchfin
aus den Mtraten stammen. Die Salatbakterien muBten denmacli ebenso
wie Pseud, pyocyanea die Fahigkeit besitzen, aus Nitraten Stickstoff
zu entbinden oder zumindest gasfOrmige N-Yerbindungen zu bilden, d. h.
also zu denitrifizieren. Urn diese Eigenscbaft bei den Salatbakterien noch-
mals sicker festzustellen und gleichzeitig zu priifen, ob aucb unter den an-
deren Fluoreszenten noch solche sind, denen vielleicht unter giinstigeren Be-
diTigimgen als den eben genannten die gleiche Eigenscbaft zukommt, -wurden
2 Serien von Mbrsubstraten beimpft. die aus Bouillonagar (den Agar bier
jedocb nur Iproz.), 1% Glukose und 0,5% Kalium- bzw. Natriumnitrat
bestanden, und bei denen durcb die entstebende Gasbildung die Agarsaulen
zerrissen werden:

Gasbildimg aus:

KNOj NaNO,

1. SaJatbakterium 1 -1- 4-

2. „ 2 -f -h

3. „ 3 -f +

4. Pseud, tabaci 0 0

5. „ medioaginisv. phaseol. .. 0 0

6. „ laohrymansa 0 0

7. „ ,, b 0 0

8. » „ 0 0 0

9. „ d 0 0

10. „ e 0 0

11. .. f 0 0

12. „ syringae a*l aus Syringa 0 0

13. „ „ 1| vulg. isoliert 0 0

14. ,, „ 1 1 aus Cbrysan- 0 0

15. „ „ 11 >the mum indie, 0 0

16. „ Ill ) isoliert 0 0

17. „ fluoresoensliq. Sanunl + +

18. „ „ B.J. L. . . . 0 0

19. „ „ „ B. a.A. . . . 0 0

20. „ „ L.A.W.B.L. . 0 0

21. ,, „ non. liq. Sanunl. . 0 0

22. ,, ,, „ „ B. J. L. . -1- +

23. „ p y o c y a n. Samml 4* +

24. „ „ B.J.L 4- -f

26. „ L. A. W. B. L 4- +

Es zeigte sich also, daB unter den stoitlichen gepruften pflaMenpatho-
genen Fluoreszenten (1 — 16) nur den Salatbakterien die denitrifizierende

Vgl. S t a p p , 0., BakterieUe Tabakkrankheiten und ibre Eneger. (An-
gew. Botanik. Bd. 12. 1930. S, 241—274.)

238

C. Stapp,

Tab. 1 . Agglutinationsversuch.

Serum-

Ter-

duimung

Salat-Baktenum

1

1 -2 13

L

p

1

seud. s

a

yrmgae

I

II

III

Pseud.

lachrym.

1

b ' d

1

1:60

+ -r--r

+ + + +

4 - + +/+ +

+ +

++/+

+

+

-^ +

++

1; 100

4-4- + +

++

++/+

0

(+)

0

+

+

1:200

+ + + +

+ + + +

+

+

0

0

0

(+)

0

1:400

+ -t-

4-

+

0

0

0

0

0

1-800

“

+ + +

4 - + + +

(+)

(+)

0

0

0

0

0

1: 1000

-++

+ 4 .^ 4 ./+ + +

0

(+)

0

0

0

0

0

1:2000

+ -+/x-r

0

0 1

0

0

0

0

0

1:3000

+ - +

— a. -H.

-r + /+

0

0

0 i

0

0

0

0

1:5000

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1:8000

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1: 10 000

1

0

0

0

0

0

0

0

0

u

Kontr.

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1) Saminlung = Stamm aus der Samznlmig der Biologischen Beichsanstalt. B. I. L. s
dem Reiehsgesundheitsamt. L. A. W. B. L. = Stamm aus der PreuB. Landesanstalt fur

FShigkeit zukam. AuBerdem denitrifizierten die Pyocyanea - Stamme,
aber auch unter den als Pseud, fluorescens liquefaciens
imd non liquefaciens bezeichneten Stajmnen befand sich je einer,
der Gas bildete.

Im allgemeinen verlauft die Zersetzung von KNO, etwas heftiger wie
die von NaNOj. Vie scbnell die Nitratzerstbrung dureh die Salatb^terien
vor sicb geht, zeigte ein Versuch in einer mineral. Nlhrlosung mit 1% Glycerin
als C-Quelle und einem Kaliumnitratgebalt von 0,2 resp. 0 , 4 %. Nacb 4 r - 6
Tagen -vraien die 0 , 2 %, nacb 14 Tagen die 0 , 4 % Mtrat der L6sung restlos
verbraueht,

Serologische rntersnchungen.

Um die verwandtschaftlichen Verhaltnisse des von mir isolierten Salat-
fauleerregers zu den ubrigen Fluoreszenten, vor allem denen, die aucb denitri-
fizierten, festzustellen, wurden Kanincben mit den Salatbakterienstammen
gespritzt und das Serum zu Agglutinations- und Prazipitationsversuchen
verwandt.

Tab. 1 entbalt die Ergebnisse der Agglutinationen. AUe Salatbakterien
wurden deutlieh agglutiniert bis zur Verdunnung 1 : 3000, nicht mehr bei
1 : 3000. Eine Mitagglutination bis zur Verdiinnung 1 : 200 ist nocb bei
einer ganzen Anzahl von Stammen festzustellen, teilweise reicht dieselbe
bis 1 : 1000; das deutet darauf bin, daB bei vielen Fluoreszenten gewisse
verwandtscbaitliche Beziebungen besteben. Die Pyoey anea-Stanune
verbielten sicb aber alle 3 vSUig negativ.

Fur die PrSzipitationsversucbe wurden neben den Salatbakterien nur
solcbe Stamme ansgewlMt, die im Agglutinationsversucb aucb Agglutination
gezeigt batten. DaB das Salatbakterium jedocb mit keinem dieser Fluores-
zenten iiberdnstinmit, ergibt sicb aus dem n^ativen AusfaU der I^azipitation
in Tab. 2; nur der Salatbakterienauszug ze^e bis zu 0,005 ccm Serum in
der Verdtinnung nocb Bii^bildung.

Erne baktenelle Faule an Lactuca sativa var. capitata L. usw.

239

Kaniiichen-Seium • Salat-Baktenum Stamm 1.

PbPud. tabaci

Pseud, med.
var. phas.

Pseud, fluor.

hq.

Ps. fluor
non liq.

Pseud

pyocyan.

U7

Mu a 4

4

VIII

QQ

H

PQ

<

6

4

Saiiim-

lung

iJ

H

ri

§ ^

c3 ^
QQ

4

H*

PQ

.4

Ik

-ttt ■^-r +

0

0

T + + /+H-

+++/++

B

t+/+

0

T

0

0

0

4-^- -^-l-

+ -r/+

0

0

++/+

++/+

0

(+)

0

(-)

0

0

0

-

{+)

0

0

(+)

-+/+

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

+

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

+

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

(+)

0

0

0

0

0

0

0

(1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0 ’

0

] Stamm aus dem Bakt. Institut der Landwirtschaftskammer Berlm. B. G. A. = Stamm ans
iWasser-, Boden- und Lufthygiene, Berlin-Dahlem.

Tab. 2. Brazipitationsverauch.
Kanmchen-Senun : Salat-Baktenum Stamm 1.

Absolute

Serum-

menge

ccm

Salat-

baktenum

2

Pseud.

syringae

III 1 a

Pseud.

tabaoi

07

Pseud,
medic,
var. phas.
4

Pseud.

fluor.

Uq.

B. J. L.

PS€

lachr

2

)ud.

(nnans

4

0,1

+

0

—

0

0

0

0

0

0

0,05

+

0

0

0

0

0

0

0

0,01

+

0

0

0

0

0

0

0

0,005

+

0

0

0

0

0

0

0

0,001

0

0

0

0

0

0

0

0

Folgerongen und InfektionsTersaebe.

Wie eingangs erwahnt. sind bei fniheren Untersuchungen uber die Ur-
sache der Salatfdulen zwar stets Fluoreszenten als Erreger festgestellt worden,
doch diese Fluoreszenten gebSrten nicht einer ein^en Bakterienart an,
sondern wurden auf Grund der VerscMedenheiten jeweils als besondere
Spezies bezeiehnet. Aueh der von mir isolierte Fluoreszent zeigte deutliche
Abweichungen in seinem Verhalten von den bisber genauer bescMe-
benen. Von Pseud, endiviae Kotte unterscheidet er sieh vor allem
durch sein Gelatineverfltissigungsvenubgen und seine Fdhigkeit, die Milcb
zu koagulieren, von Pseud, vitians Brown durch den Mangel an Pep-
tonisierungsvermdgen fur das Kasein der Milch, von Pseud, margi-
nal is Brown durch den niedrigeren thermalen Tdtungspunkt, das Wachs-
tum in Fermi- und Cohn- Lbsung und seine denitrifizierende Eigen-
schaft. Auch die von M. L a c e y isolierten 5 Fluoreszenten aus Salat miissen
von dem von mir reingezuchteten Bakterium verschieden sein, da ihnen
alien das Denitrifizierungsvermbgen fehlt. Yielleicht ist der Either iden-
tisch mit einem anCichorium intybus pathogen au%etretenen

240

C. b t a p p ,

Bakteriiim, der Phytomonas^l intybi Single fll). die auch deni-
trifiziert, die Gelatine verflus«igt und einen thermalen Totangspiinkt von
51® C hat, im ubrigen aber vollig unzureiehend beschrieben ist und von der
hinsichtlich ihrer Pathogenitdt von Swingle angegeben wird, da6 In-
fektionen an Kopfsalat ..doubtful, probably negative‘‘ waren.

Aus diesen Feststellungen ergibt sieh unzweifelhaft, daB verschiedene
lEkroorganismen a r t e n , die zwar alle derselben G a 1 1 u n g angehoren,
an Salat spontane Krankheitserscheinungen, ntolich yaBfSule, hervorrufen
bzw. hervorrufen kdnuen. Wir kennen zwar auch als Ursache der Schwarz-
beinigkeit und Knollennafif8,ule der Kartoffeln verschiedene Bakterien. die
Abweichungen voneinander sind aber derart gering — z. T. nur auf serolo-
gisehem Wege feststellbax — , daB diese Bakterien nicht als geson-
derte Arten angesprochen werden kSnnen, sondern in e i n e Gruppe,
die Bac. phytophthorus - Gruppe. zusammengefaBt werden miissen
(9). Ahnlich verhalt es sieh mit den Wurzelkropferregern, die in die Gruppe
..Pseudomonas tumefaciens‘‘ gestellt sind (7). Im iibrigen
gehdren solche Falle zu den Seltenheiten. Dagegen ist die Polyphagie ver-
haltnismaBig haufig, denn es sind eine ganze Reihe von Bakterien bekannt,
die nicht nur fiir eine bestimmte Wirtspflanze, sondern fur mehrere Pflanzen-
arten und -gattungen pathogen sein kdnnen. Wenn nun mit der Verschieden*
artigkeit der Salatbakterien gereehnet werden muB, ist auch die MSglich-
keit gegeben, daB von den im Wasser und Boden haufig vorkommenden
gewdhnUchen Fluoreszenten eine Anzahl sieh bei Salat als pathogen er-
weisen wird. Es wnrden deshalb auBer den von mir friiher isolierten phyto-
pathogenen Fluoreszenten (Xr. 1 — 16, S. 237) noch eine Reihe von Fluo-
reszenten auf ihre Virulenz fur Salat gepriift, (he teils der eigenen Sammlui^;
entnommen, teils von anderen Instituten bezogen worden waren. Es han-
delte sieh urn Reihkultmren, die meist unter der Bezeiehnung Bac. fluo-
rescens liquefaeiens, Bac. fluorescens non liquo-
f a c i e n s und Bac. pyocyaneus®) gehalten wurden (Nr. 17 — 25,
S. 237)»).

DaB (he als P s e u d. bzw. Bac. fluorescens liquefaeiens
und ebenso die als Bac. fluorescens non liquefaeiens be-
zMchneten St&mme nicht einheitlich waren, zeigte bereits das TJntersuehungs-
ergebnis hinsichtlich der Zersetzung der Zuekerarten und auch der Denitri-
hkation. Yerschiedenheiten unter solcher Bezeiehnung gehaltener Fluo-
reszenten konnten auch John-Brooks, Nain und Rhodes (4)
an einer Anzahl aus Nordamerika bezogener Eulturen auf serologischem
und biochemischen Wege nachweisen. Aus (hesem Grunde war es nStig,
alle mir zur Verfiigung stehenden Stamme zu den Pathogenitats-
prufungen heranznziehen.

An Kopfsalatpflanzen hatten samtliehe Salat-Bakterienkulturen 4 Tage
nach der Mektion mittels Nadelstich im Gewachshaus groBe seidenpapier-
art%e Flecke hervorgerufen (vgl. Abb. 2), wahrend die Adern eine braun-

Der in Amerika gebr&uchliche GattungSDame Phytomonas ist mit
dem Gattungsnamen Pseudomonas des M i g u 1 a scdien Systems uberein-
stimmend.

*) Da es sieh bei diesen 3 Fluorescenten-Arten um polar begeifielte Organismen
handelt, werden sie zweckmSifiiger, entsprechend dem M i g n I a schen System, mit
dem Gattungsnamen Pseudomonas anstatt Bacillus belegt.

*) Leider existierte die von K o 1 1 e beschriebene salatpathogene Pseud,
endiviae nicht mehr.

Erne baktenelle Faule an Lactuca sativa var. capitata L. tisw.

241

liehe Farbe angenommen batten. Auch die mit einer Bakteriensnspension
bestrichenen Blotter varen befallen, 'woraus bervorgeht, da6 der Parasit durch
die SpaltSffnungen in die gesunde, unverletzte Pflanze einziidringen ver-
mag (vgl. Abb. 3).

Ferner ervyies sieh fvir Salat pathogen Pseudomonas syringae,
und zwar zeigten diese Eigenschaft sowohl die alteren Stamme aus
Syringa yulgaris als auch die neuerlich aus Chrysanthe-
mum indicum isolierten (10). Gegeniiber den anderen pflanzen-
pathogenen Fluoreszenten (Nr. 4 — 11, S. 237) und ebenso den verschie-

Abb. 2. Abb. 3.

Abb. 2. Jtinge SaJatpflanze in dei Aufsicht. BlAtter dutch Eadelstiehe infiziert.

Abb. 3. Blatt von KopfsaJat, durch Bestreiohen der ITnterseite mit Bakterien-
aufsch'^emmung infiziert.

denen StSmmen von Pseud, fluorescens liq.. Pseud, fluo-
rescens non liquefaciens, sowie von Pseud, pyoeyanea
verhielten sich die Salatpflanzen vollkommen indifferent. In der Folgezeit
stellte sich nun heraus, dafi die 1931 von mir isolierten Salatbakterien in
ihrer Virulenz stark nachliefien, eine Beobachtung, die za der Vermutung
AnlaS gab, es konnten unter den gewohnlichen, die Gelatine verflussigenden
und nicht verflussigenden Fluoreszenten doch solche gevesen sein, die
vielleicht urspriinglich pathogene Eigenschaiten fiir Salat besessen, diese
aber im Laufe der Jahre auf dem kiinstlichen Substrat vollkommen einge-
biiBt batten. Deshalb wurde eine Eeihe von Fluoreszenten aus Berliner
und Potsdamer Wasserleitungen sowie aus mit Erde verunreinigten Wasser-

ZweitcAbt. Bd. 91. 16

242 C. S t a p p , Eine bakterielle Faule an Lactuca sativa var. capitata L. usw.

behaltern in Garten, aus denen GieBwasser entnommen wde, f r i s c li
isoliert und nnmittelbar auf ihre salatpathogenen Eigenschaften bin
gepriift. Aber auch diese Stamme waren samtlich an Salat
wirkungslos. Dennoch ■ware denkbar, dafi bei Einbeziehung von
Wasserproben aus anderen Gegenden, sich Fluoreszenten isolieren lieBen,
denen pathogene "Wirkungen in dieser Richtung zukamen.

ilehrere Fluoreszenten ■wurden aucb noch an WeiB- und Rotkobl gepriift.
Wie die Salatbakterien erwiesen sie sich fiir diese Kohlarten als apathogen.
An Bohnen (Phaseolus vulgaris) war nur Pseud, medica-
ginis var. phaseolicola virulent.

Die Salatbakterien allein wurden noch an Tabak (Nicotiana ta-
b a c u m) und an Kresse (Tropaeoluni)^ gepriift, jedoch ebenfalls
mit negativem Erfolg. femer zusammen mit einigen aus Chrysanthe-
mum isolierten StSmmen von Pseud, syringae anCichorium
intybus und zwar an gut entwickelten Freilandpflanzen im Sommer
1934. Dabei ergab sich bei Stamm 3 der Salatbakterien noch eine deutlich
pathogene Wirkung gegeniiber diesen Pflanzen. Es traten bis zu 1 cm groBe,
schneU braun Trerdende Fleeke an den Infektionsstellen auf, wShrend die
Pseudomonas syringae keinerlei Symptome an Cichorium
intybus hervorzurufen vermochte. Dieses Verhalten der Salatbakterien
und ’die starke Virulenzschwachung gegeniiber Kopfsalat im Laufe von
3 Jahren sprieht stark dafirr, dafi eine Identitat mit Pseud, intybi
Swingle vorliegt. Eine sichereEntscheidung dariiber ist
jedoch infolge der ungeniigenden Beschreibung
dieses Bakteriums durch Swingle leider nioht m5g-
lich.

BekSmptung.

Im allgemeinen treten durch Bakterien hervorgerufene Salatfaulen nur
dann in stSrkerem MaBe in Erscheinung, wenn die Luftfeuchtigkeit in den
Treibhausem bzw. den glasbedeckten Kasten zu hoeh ist. Sofern also nach
Entfemen aller kranken Blatter oder der ganzen Pflanzen und geregelter
Durchliiftung die Krankheit nicht ausgemerzt werden kaim, ist — trotzdem
von mir der Beweis nicht erbracht werden konnte, daB die gewohnlich im
"Wasser vorkommenden Fluoreszenten fiir Salat pathogen sind — zuerst
das GieBwasser zweckmaBig durch einmaliges kurzes Aufkochen und Wieder-
erkaltenlassen zu entseuchen. Da dieses, vor allem auf krausblattrigem
SaJat, leieht in Ausbuchtungen der Blattlamina sich sammelt, kann der
Erre^er von solehen Stellen aus ohne weiteres durch die Stomata in das
Blattinnere eindringen. Geniigen diese MaBnahmen nicht, dann ist die Erde
durch frische zu ersetzen oder eine wirksame Bodendesinfektion durch-
zufiihren.

Yerwendung von bakteriziden Spritzmitteln kommt, worauf schon
K 0 1 1 e bei der Endivienftule hingewiesen hat, nicht in Frage.

Zusammenfassnng.

Es wird eine Fkule an Kopfsalat (Lactuca sativa) und Endi-
vien (Cichorium endivia) besehrieben, die durch ein fluoreszie-
rendes Bakterium verursacht wurde, dem gleichzeitig stark denitiifizierende
Eigenschaften zukommen und das, da auch Virulenz gegeniiber C i c h o -

Otto A. Reinking, Soil and Fusarium Diseases. 243

rium intybus feststellbar war, sehr wahrscheinlich mit Pseudo-
monas intybi Swingle identiscb ist.

AuBer diesem Fluoreszenten erwies sicb noch Pseudomonas
syringae van Hall, der Erreger der Fliederseuehe, flir Salat pathogen.
Als vollig avirulent an Salat zeigten sich eine Reihe anderer daraufhin ge-
priifter fluoreszierender und pflanzenpathogener Bakterien, sowie in jedem
GieBwasser ftir gewohnlich vorkommende, die Gelatine verfliissigende und
nicht verfliissigende Fluoreszenten.

ZweckmSifiige Bek^mpfungsmafinahmen werden angegeben.

literatur.

1. Brown, N., A bacterial disease of lettuce. (Joum. Agric. Research. Vol.

4. 1915. p. 475 — 478.) — 2. B r o w n , N., A bacterial stem and leai disease of lettuce.
(Phytopathology. Vol. 7. 1917. p. 63.) — 3. Brown , N., Some bacterial diseases
of lettuce. (Journ. Agric. Research. Vol. 13. 1918. p. 367 — 388.) — 4. John-
Brooks, R.St., Nain, K., and Rhodes, M., The investigation of phyto-
pathogenic bacteria by serological and biochemical methods. (Joum. of Pathology
a. Bacteriology. Vol. 28. 1925. p. 203 — 209.) — 5. Kotte, W.. Eine bakterieUe
Blattfaule der Winter-Endivie (Cichorium endivia L.). (Phytopathol. Ztsohr.
Bd. 1. 1930. S. 605 — 613.) — 6, Lacey, M. S.. Studies in bacteriosis. XTX. Re-
seardbies on the group of greenfluorescent bacteria. Part 2; on some plant diseases
caused by bacteria of the greenfluorescent group, and a comparison and discussion
of various cultural characteristics of certain members of this group. (Ann. appl. Bio-
logy. Vol. 19. 1932. p. 190 — 203.) — 7. S t a p p , C., Der bakterieUe Pflanzen-
krebs und seine Beziehungen zum tierischen und menschlichen Krebs. (Ber. Dtsch.
Bot. GeseUsch. Bd. 45. 1927. S. 480 — 604.) —— 8. Stapp , C., Schizomycetes. 48.
Bakteriosen der Compositen; in Sorauer, Handbuch der Pflanzenkrankheiten.

5. Aufl. Berlin 1928. S. 286 — 293. — 9. S t a p p , C., Die Schwarzbeinigkeit und
KnoUennaOfaule der Kartoffel. (Arbeiten asr d. Biolog. Reichsanst. f. L. u. F. Bd. 16.
1928. S. 644 — 703.) — 10. S t a p p , 0., Eine Bakteriose an Chrysanthemen. (Zentralbl.
f. Bakt. Abt. II. Bd. 90. 1934. S. 320—329.) — 11. Swingle, D. B., Center
rot of ,, French Endive** or wilt of cichory (Cichorium intybus L.). (Phyto-
pathology. Vol. 16. 1926. p. 730.)

Nachdruck verboten.

Soil and Fusarimn Diseases.

By Otto A. Reinbing.

Introduction.

The environment as a factor in the inception and development of plant
diseases has received much attention during recent years. The factors most
studied have been temperature and moisture. Probably the most important
fusarium diseases of plants are the wilts and root-rots in which the plant
is primarily infected through its root system by fungi present in the soil.
Since the fungns^must pass a part of its life Jiistory in the soil, the latter
may have a &ect bearing on the development and nature of the fungus
and thereby a direct bearing on disease production. The problem relative to
the nature of the soil and the effect of different soil types on the develop-
ment and growth of disease producing fungi has not received the attention
probably that it deserves. It has been frequentiy noted that under similar
environmental conditions the severity of wilt or seedling-blight and root-
rot diseases caused by Fusaria vary distinctly according to the type of soil
upon which the plant is growing.

16 »

244

Otto A. Beinking,

The relation of soil temperature to plant disease production has been
clearly demonstrated -with the investigations of Jones and others (18,
19, 20j. It has been shovm that fusarium tvilt diseases are readily influenced
in their development by soil temperature. Since the disease curve quite
frequently closely parallels that of the vegetative development of the para-
sites, the indications are that the influence of temperature is mainly a direct
effect on the fungus. Jones, Johnson and Dickson (20), how-
ever, conclude that ‘“the associated abnormal host conditions which we
term “disease’ are the resultants of the interaction of a plastic host and a
plastic parasite under the play of environment”. The effect of soil moisture
on disease production also tas received quite considerable attention (6.
11, 24).

Correlation of Soil and Fusarium Diseases.

Apparently the factors of temperature and moisture alone cannot ac-
count for the differences noted in the severity of various diseases, on dif-
ferent soil ^es caused by Fusaria or a combination of the latter fungi with
other fungi. Investigations conducted during the past years on the im-
portant fusarium-wilts and root-rots of plants indicate that these diseases
are particularly closely correlated with the soil conditions.

Keinking and Manns (35, 36) and R e i n k i n g (31, 32, 33,
37) have shown that the soil type has a marked influence on the growth
and development of Fusaria in general and in particular with a distinctly
parasitic form. TThey found that the banana wilt organism is found in grea-
test abundance in light textured soils as compared to heavier textured
soils.

Walker and Snyder (51) found a distinct difference in severity
of pea wilt when plants were grown side by side on different soils. They
report that the wilt fungus does not readily establish itself in Superior red
clay while in Carrington and Miami silt loam it established itself verv ra-
pidly.

Cotton-wilt is reported to vary according to the soil type. Wollen-
Weber (53), Gilbert (9) and Young (54) studying in the United
States found that the disease was more severe on the lighter sandy soil.
The same condition was reported by Zaprometoff (55) in Russia.
The latter also states that on soils with a high content of common salt the
mc^ence of wilt is very slight. Fikr y (8) and B o r g (4) respectively
in Egypt and Malta, however, report the type of cotton wilt in their loca-
lity to be most destructiie on clayey and impermeable soils.

Bo 1 1 y and Manns (3) state that with "flax wilt the sandy loam soils
so well adapted to flax raising appear to be very favourable to the fungi
causing ‘ sickness”. ®

Poole (28) and H a r t eur (11) report that the season, prevalence
and severity of the stem-rot and wilt of sweet potatoes appears to be parti-
cularly closely correlated ^th the soil conditions. Poole reports the
disease to be more severe in dry seasons and in sandy soils.

Moor e (25) found that the heaviest infection in maize root and ear
rot was on the l^ht loam soils.

_j. foot-rot of cereals caused by various Fusaria and other fungi is re-
ported to vary in severity according to the soil type upon which the hosr
plant IS grown. G u y o t (10) in France states that the disease is less severe

Soil and Fosarium Diseases.

245

on clay soils and that •wheat is most susceptible on hot. fertile soils. Mo-
ritz (26, 27) in Germany reports that the liability to foot-rot caused by
Ophiobolus graminis depends in a great measure on soil factors
including biological factors. He observed a distinct connection between
the occurrence of the disease and the geological age of the soil. Foot-rot is
found only on the oldest podsol soils of the eastern and central districts,
while the geologically recent western marshes and the Island of Fehmarn
■with czernosen or black soils are exempt from the disease. He states further
that the physical structure of the soil is probably in part responsible for the
presence or absence of foot-rot.

H i 1 1 n e r (13) found snow-mould, due to F. n i v a 1 e , worse on hea'vy,
poorly worked, poorly drained, clay soil and on soils rich in humus. K o r f f
(21) also reports that snow mold was observed to be more prevalent and
severe on heavy, acid soils than on light alkaline soils. E g 1 i t s (7) on the
other hand, states that rye suffered most on light and least on heavy soil.

According to the above investigations the majority of the diseases cited
appear to be favored by light textured soils, although exceptions have been
reported.

The reasons for the better development of a pathogenic Fusarium in one
soil type as compared to that of another has not been clearly established.
Apparently many factors enter into the problem. Various soil factors have
been studied in an attempt to assign a definite cause for the differences in
severity of disease. The influence of the hydrogen-ion concentration in the
soil has been studied in an attempt to solve various disease problems.

Edgerton (6) and Scott (41) have pointed out the possible influ-
ence of the soil reaction and the application of lime on the wilt of tomato.
Sherwood (42) has reported that the highest percent of wilt uniformly
occurred in the most acid soils and decreased in almost every ease 'with a
reduction in the pH concentration. Other influential factors, however, such
as nutrition, aeration and organic matter content were recognized as play-
ing an important part in the development of the disease.

In Texas (66) it is reported that F. bulbigenumf. 1 (F.lyco-
p e r s i c i) is present on tomatoes in different soil types, upon slightly
acid or neutral to highly calcareous soils.

M c B a e and Shaw (24) state that the inoidence of infection did not
correspond 'with the amount of soil moisture and the difference of the pH
values of the soil in the various plots in investigations conducted -with the
■wilt of pigeon pea in India.

T h 0 r 0 1 d (44) reports that limed soil, giving an alkaline reaction,
increased the percentage of wilt of sunn hemp (C r o t o 1 a r i a).

Schaffnit (40) states that Calonectria graminicolam
dependent for its development on an alkaline soil reaction and that it is
unable to grow in acid soils. Bennett (1), on the other hand, found
that neither the existence nor the pathogenicity of the English strain of
the fungus is appreciably affected by the acid or alkaline condition of soils
within ordinary field ranges.

Although an apparent correlation is indicated in certain instances be-
tween the soil reaction and Fusarium diseases, attempts to change the reac-
tion of the soil and thereby decrease disease, or to select soils that have a
natural reaction unfavorable to disease production have given variable and
mostly negative practical results.

246

Otto A. Rein king.

W a k s m a n (45, 46, 47) and W a k s ni a n and Starkey (49)
point out that the soil is very complex where chemical, physical and bio-
logical factors are active. Any influence which tends to disturb this adjust-
ment in the soil conditions alters these processes. A change in soil reaction,
addition of inorganic fertilizers, introduction of organic substances, change
of temperature, moisture, pressure and air movements may affect the num-
bers and activities of micro-organisms in the soil. The composition of the
soil microbial population is, therefore, a resultant of numerous factors.

K u s s e 1 1 (38) indicated that the type of soil and its treatment exer-
cised a great influence over the number of fungi present.

Jensen (17) studied the mycoflora of one hundred different Danish
soils of widely varying character with particular reference to cultivated soils,
as well as the distribution of the fungi in relation to soil conditions and
their importance in certain biochemical soil processes. Fusarium species
were among the most common genera isolated. He reports that the largest
amount of mycelium was found in acid soils rich in organic matter. No cl^r
relationship was determined between the number of fungi and the reaction
or type of this soil, except that very heavy clay soils were poor in fungi.
The addition of lime to acid soils did not markedly depress the number of
fungi, but greatly stimulated the development of bacteria and actinomycetes.
Fertilization especially with farmyard manure, appeared to incr^se the
number of all three groups of organisms. In general the investigation indi-
cated that the actual abundance of fungi in the soil depends on many fac-
tors, among which food supply plays an important part. Most fungi were
capable of decomposing cellulose, the addition of which stimulated an abun-
dant development of fungi in both acid and alkaline soils.

Rathbun-Gravatt (30) in a study on damping-off of coni-
ferous stems is of the opinion tlmt the degree of virulence of the organisms
or the ability to maintain themselves saprophytieally in the soil is largely
dependent upon the amount and quality of the available food supply.

W a k s m a n and others (17, 43, 48, 50) have shown that the addition
of cellulose or straw to soils kept under aerobic conditions, especially in the
presence of available nitrogen, causes a very large increase in the number
and development of filamentous fungi among which are Fusaria.

Reinking and Manns (35) have shown that F. oxysporum
f. 3 is found in greatest numbers in a peat banana soil in Honduras.

Apparently the biological factor plays an important role in the growth
and development of pathogenic organisms in the soil. The study of the
foot-rot problem of cereals due to Fusaria and other fungi have indicated
that the biological factor may be important.

Moritz (26) has pointed out that the biological condition of the soil
is evidently of paramount importance in the etiology of foot-rot, the asso-
ciation of which with chemical and physical factors requires further in-
vest^ation.

Sanford and Broadfoot (39) state that the pathogenicity of
Ophiobolus graminis is more or less suppressed in the presence
of certain soil organisms including fungi and bacteria. It is possible that the
existence and pathogenicity of other fungi might be modified in the soil
by the antagonistic action of the natural micro-flora. The reduction in the
vmilenoe of the fungus was believed to be chiefly due to the toxicity of the
living microorganisms tested or of their filtrates.

Soil and Fusarimu Diseases.

247

B i s b y and others (2) in a study of soil fungi of Manitoba soils state
that the results of experiments show that Trichoderma lignorum
is capable of completely overwhelming and destroying the colonies of F.
culmorum and that this fungus possibly plays an important role in
decreasing the number of fungi in the soil.

Henry (12) in a preliminary report on testing the influence of normal
soil mycoflora on the development and pathogenicity of the fungi respon-
sible for foot and root-rots of wheat in Canada states that the results appear
to indicate that the natural mycoflora of the soil investigated has a pronounced
controlling effect on the development of Gibberella saubinetii
and Helminthosporium sativum in the soil. The suppression
of the pathogen in the soil appears to be correlated with a reduction in the
severity of their attack on wheat seedlings. It also tends to explain the agri-
cultural value of the summer bare fallow system, under which the soil
saprophytes no doubt have a considerable advantage over the pathogens
in the competition for food supplies. Where stubble is present on which the
parasites are already established, the soil saprophytes probably are unable
to overcome them as readily.

Lundegardh (23) in tests with various fusaria states that the
indications are that high concentration of COj (3 to 7%) not only exerted
no retarding influence on mycelial growth, but actually stimulated it in the
case of Gibb er ella saubinetii and F. culmorum. The growth
of seedlings under the same condition is retarded. Thus it is evident that the
fungi in question can thrive in conditions which adversely affect the deve-
lopment of seedlings. This fact may give a useful clue to the cause of the
prevalence of fungous attacks in impermeable soils. It has frequently been
observed that plentiful fertilization with organic manure especially in a
fresh condition or too late in the season favours the development and spread
of infectious diseases. On the results of these researches the author attri-
butes this to the fact that, even in moderate quantities, such manure in-
creases the COj content of the soil with the consequences described above.

Little work has been done to show the direct chemical effect of the soil
upon a plant whereby its resistance or susceptibility to a Fusarium is effected.
All accumulation of iron and aluminium in the plant may be an example.

In studies conducted on the root and stalk rot of maize caused by F.
moniliforme, Gibberella saubinetii and other fungi it
was found that the influence of certain soils increased the liability to root-
rot of some strains of maize more than others. H o f f e r and associates
(14, 15) are of the opinion that the organisms appear to be of secondary
importance in the disintegration of the nodal tissues which begins prior to
their invasion. Such plants were found to have an accumulation of iron
and aluminum. Inoculation e:^eriments with Gibberella saubi-
netii on plants growing in soil with a higher percent of aluminum oxide
resulted in a greater tendency for these plants to blight. The same strain
was relatively little affected by the fungus when grown in pots receiving
acid phosphate and calcium carbonate in addition to the aluminum sul-
phate. They conclude that the occurrence of numerous aluminium injuries
in maize plants in certain fields is an indication that the soil is deficient
in available phosphates. The application of lime and phosphates to soils
in which root-rots have developed in destructive proportions have been
decidedly beneficial in the control of these diseases. Ireland (16) how-

248

Otto A. Beiaking,

ever, found that limited applications of iron and aluminum salts not only
cause no increase of susceptibility to fungus infection, but are actually be-
neficial on clay soils, possible in the capacity of flocculents.

Banana "Wilt in Relation to Soil Type, pH concentration
and Average Number of Organisms per gram of Soil.

In banana culture it has frequently been observed that on certain soil
types the banana vrilt disease although present is not severe and does not
spread fast. Upon such „resistant'‘ soils, individual plants within an old
‘"mat” or cluster of bananas, may remain healthy and produce fruit even
though one plant within the same is diseased.Experiments have even shown
that old diseased spots, under these very favorable soil conditions may be
replanted, after lying fallow for a few years, and produce healthy plants and
fruit. In certain instances such replanted areas may aga,in show disease,
but some individuals within the new cluster of plants still produce fruit.
This interesting situation led to experimentation in an attempt to explain
the situation. Two apparent theories present themselves. One being that
the plant is made resistant to the attacks of the fungus due to some chemical
soil condition that has imparted resistant qualities to the plant. Another
being that the groAvth and multiplication of the organism is inhibited due to
some condition inherent in the particular soil.

In certain instances in alluvial deposits from the same river a spot,
sometimes only 25 to 50 feet in diameter, may have 100 percent diseased
bananas, while the surrounding bananas are healthy or with only an occa-
sional diseased plant. Spread from this diseased spot into the healthy
bananas around is very slow and cases are on record where the ba-
nana plants surrounding and adjacent to such a diseased area have remained
relatively free from disease and have produced fruit on an economic basis
for 10 to 15 years and apparently will continue to produce much longer.
Such clear cut cases of 100% disease adjacent to only slight disease upon
different soil types, deposited from the same river, with meteorological con-
ditions identical would lead one to believe that something inherent in the
soil is responsible for this difference. In former experiments attempts were
made to correct this condition by the addition of various chemicals, including
lesser elements, but in every instance negative results were obtained. Cor-
relations with pH and disease were also made but these did not hold true in
all instances. The present studies were made to prove whether or not the
soil had some influence on the development of the parasite. A count of
the number of the parasites in the different soil types with extreme diffe-
rences in disease was made (33, 36, 36). The following table summarizes
the results of the studies made on adjoining planted areas with 100% dis-
ease and with slight infection. These areas were under identical meteoro-
logical conditions and in most cases with almost like pH concentration.
They are located in the banana regions of Honduras, Costa Rica and Pa-
nama. In each instance the count of the organism in the soil area was made
about a diseased “mat”.

The two Guaymas soil type areas in Honduras are in a region where
disease spread had been severe with general abandonment within four years
from the time of planting. The soil area is composed of a mixture of out-
wash material from the nearby hills and alluvial material deposited by short.

Soil and Fusarium Diseases.

249

Banana Wilt in Relation to Soil Type, pH Concentration and Number of Organisms

per gram of Surface Soil.

Location

Honduras

Soil Type

Guaymas

Guaymas

Quebrada

Quebrada

C. 41%

c. 34 %^)

Seca

Seoa

c. 37%1)

FS

pH concentration®) . . .
Av. No. F. oxysporum f. 3

3.2

5.3

7.2

6.0

per gr. soil

a — b
80--48

640

280

750

State of Disease ....

Bearing

100%

Bearing

100%

after I

in 3 years

after

in 4 years

4 years

12 years

With high percentage of sand.

*) pH determination in Honduras made by the Quinhydrone method. Those
for Costa Rica and Panama made in the field with Soiltex.

(Continuation.)

Location

Costa Rica

Soil Type

Monte Verde

Monte Verde

Monte Cristo

Monte Cristo

C. 35—40%

c + s

CL

FS

pH concentration ....
Av. No. F. oxysporum f. 3

7.0

7.0

7.0 -f

7.0 +

per gr. soil

30

1590

200

1600

State of Disease ....

Scattered

100%

Scattered

100%

in 9 years

in 2 years

in 10 ye€u*s

in 2 years

(Continuation.)

Location

Panama

Soil Type

Changuinola

Changuinola

Sixaola

Sixaola

C. 46%

VFSL

C+ 50—65%

VFSL

pH concentration ....
Av. No. F. oxysporum f. 3

5.7— 6.1

6.0— 5.6

6.0— 5.6

5.0— 5.6

per gr. soil

50

420

60 to 120

1070

State of Disease ....

Slight

100%

Scattered

100%

in 1 year

in 2 years

in 3 years

in 2 years

small creeks (35). Within this area, with almost 100 percent disease, were spots
or islands of plants with little disease, that were still producing fruit in spite
of the severe surrounding infection. The Guaymas 41% clay area is a re-
presentative spot of the latter type within which all clusters of bananas
were still producing fruit, but witti disease in some plants. The Guaymas
34% clay area has 100% disease and adjoins the heavier clay area with little
or no disease. The pH concentration of both areas is approximately the
same, being acid, with a pH of 6.2 and 5.3 respectively. Isolations of the
parasite (Fusarium oxysporum f. 3) in the soil, in each case about
a diseased plant, within the areas showed a wide difference in the count
(36). The area sampled in the acid heavier clay spot showed a low count
of the organism in spite of the fact that it was surrounded with a 100 per-
cent infected area on lighter soils. The organism was difficult to isolate

250

Otto A Eeinking.

from the 25 different samples taken about the diseased plant and was present
in the two type areas, a and b, at the average rate of 80 and 48 respectively
per gram of soil. I^o difficulty was encountered in isolating the organism
in the acid lighter clay area, where an average count of 640 per gram of
soil was found to be present. While this latter area is classified as a light
clay it had some 46°o of sand (33) and therefore in reality is almost a sandy
clay soil.

The Quebreda Seca areas in Honduras are composed of a mixture of out-
wash material from the adjacent mountains and of alluvial deposits from the
TJlua River (35). The two areas adjoin. The fine sand area being an extreme
type and a relatively poor infertile banana soil situated on the banks of a
small creek. The adjoining clay area is further away from the river. The
latter soil is a sandy clay with some 50% of sand (35). Both areas had ap-
proximately the same pH concentration. The sandy area had 100% disease
within 4 years time and when replanted succumbed entirely to disease within
1 year, while the clay area adjoining had been producing toit for 12 years
and had little disease in spite of the heavily infected adjoining bananas.
A count of 280 per gram of soil was obtained for the organism about a disease
“mat” in the clay area while a count of 750 per gram of soil was obtained in
the soil about a diseased “mat” in the fine sand area, showing that the organism
thrives well in a sandy, alkaline soil. The two soil types examined were both
about diseased plants and only some 30 feet apart. The diseased plant in
the clay area was the first plant affected on the clay soil adjoining the sandy
area and the soil at this point contained 50% sand (35). The adjoining plants
ten feet away on a heavier clay, were all healthy and had been producing
fruit for 12 years. A correlation exists here between the count of the organ-
isms in the soil and the texture of the soil and rate of spread of disease.

The Monte Verde areas in Costa Rica are two distinctly different ad-
joining soil types made up of alluvial deposits from the Pacuare river (33).
Both areas had an alkaline reaction with a pH concentration of 7.0. The
sandy area had 100% disease vrithm two years from the time of planting and
had a count of 1590 organisms per gram of surface soil, while the adjoining
clay area had only scattered disease after 9 years of growth. In the latter
area the organism about a diseased plant could be isolated only with diffi-
culty and was present in the soil at an average rate of 50 per gram of soil.

The Monte Cristo areas in Costa Rica are two distinctly different ad-
joining soil types made up of alluvial deposits from the Reventazon River.
Both areas had an alkaline reaction with a pH concentration of over 7.0.
The fine sand area had 100% disease within 2 years, while the adjoining clay
loam area had been producing fruit for 10 years with only scattered disease
present. A distinct line of demarcation from 100% disease to no disease
or only scattered disease was present where the soil type changed. A count
of the organism showed the same to be abundant in the fine sand soil with
some 1600 per gram while in the clay loam it was present only at the rate
of 200 per gram of surface soil.

In Panama a similar situation to that present in the other two coun-
tries was found. The areas examined in Panama were all on acid soils. The
Changuinola areas were alluvial deposits from the Changuinola river. The
very fine sandy loam area with a pH of 5.0 to 5.6 succumbed to disease in
two years time and had a count of some 420 organisms per gram of soil
while the 45% clay area with a pH of 5.7 to 6.1 had only slight disease

Soil and Fusarium Diseases.

251

witMn one year and a count of only 50 organisms per gram of soil about
a diseased mat. The Si:p,ola areas snowed a similar situation. These areas
were made up of alluvial deposits from the Sixaola river. The very fine
sandy loam area had 100% disease in two years time while the heavy
clay area had only scattered disease in a three year old planting. In the
sandy soil the organism was present at the rate of 1020 per gram of soil,
while in the clay area only counts of 50 to 120 per gram of soil \sere
obtained.

Biscnssion.

The investigations conducted by the writer with banana wilt have
shown that there is a distinct difference between the severity of disease,
the prevalence of the organism in the soil and the soil type regardless of the
pH concentration of the soil. The oases examined and cited in Honduras
and Costa Rica were for adjoining different extreme soil types, deposited by
the same river system, that showed a distinct difference in disease. The
Panama areas were not side by side. In the adjoining areas examined the
disease did not gradually radiate out from the 100% diseased area into the
less diseased area, but there was a distinct line of demarcation between the
two areas in respect to disease that corresponded with the change in the soil
type. A line could be drawn between severe disease and no or slight disease
following the change in soil even in certain instances after the two areas
had been planted and showed disease for a period of over ten years. In
all extreme differences in infection on adjoining areas, it was found that the
disease was most severe on the sandy soil and less severe on the clay soil
regardless of the pH concentration. The results of the banana wilt investi-
gations in regard to disease and soil type therefore, are similar to those
noted in the literature review for some of the fusarium-wilts of other plants.

The banana investigations also showed that in each case examined
the number per gram of soil of the parasite causing the disease was always
greatest in abundance in the badly diseased areas as compared to the slightly
diseased areas even though the sampled areas were separated only by some
20 to 30 feet in distance. It was found that the organism could easily
establish itself in the sandy soil types where large numbers were always
isolated. It apparently had difficulty in establishing itself in the clay soil
types where its growth is limited to a low number per gram of soil. The
investigations conducted on banana wilt therefore, appear to show that
the number of organisms present in the soil is the determining factor in
the amount of disease and in the rate of disease spread. Apparently in hea-
vily infected soil root infections are so numerous that the plant is unable to
ward off attack, as has been shown to be possible by Wardlaw (52),
and severe disease is produced. When the organism is not present in the
soil in large numbers the infections are less and undoubtedly the plant
is capable of warding off attack to a certain degree resulting in less severe
disease. The effect of the different soil types upon the possible production
or non-production of resistance within the plant to attack by the parasite
apparently is not of such great importance. Other investigators have come
to the conclusion that the quantity of inoculum in the soil determines the
prevalence of disease.

Walker and Snyder (51) have found that the pea wilt organism
establishes itself very rapidly in Carrington and Miami silt loam areas where

252

Outo A. Bfcipking,

disease is severe and that it develops only to a slight degree in Superior
red clay where disease is slight even when plots of the different soil types
are adjacent to each other. They also state that the rate of wilting depends
upon the number of points of the root system attacked at the same time.

Porter and Melhus (29) report that with watermelon wilt the
degree of soil infection or the quantity of inoculum determines the rate of
wilting of seedlings.

Young (54) states that in cotton ■wilt there is a close relationship be-
tween the conditions promoting the rapid saprophytic development of the
fungus in the soil and the spread of the disease. It is suggested that under
normal conditions, warm well-aerated, sandy soils with sufficient organic
matter for the development of the pathogen may permit the rapid dissemi-
nation of the latter through the soil and thus facilitate attacks on the
roots. He also found that the admixture 'with the soil of comparatively
large amounts of the cotton ■wilt fungus in pure culture results in a greatly
increased incidence of infection as compared with the addition of inoculum
only to the upper two or three inches of soil. The latter condition also was
found to be true by Kulkarni and Mundkur in India (22).

E e i n k i n g (34) found banana "wilt in Dacca, India, to be severe
especially in garden plantings that had been cultivated for years about
the farm houses.

The explanation for the difference in the ability of an organism to esta-
blish itself in different soil types has not been determined. A promising line
of investigation is, herewith, left open for further investigation. Since the
soil is complex, where chemical, physical, and biological factors are active,
it is highly probably that the reason for the difference in the severity of
disease and the ability of a parasitic fungus to thrive is not only due to one
factor, but possibly to a combination of factors.

The fact that the banana disease shows a marked difference in severity
on different soil types is important in the formulation of control measures.
This is particularly true when it is necessary to plant a susceptible variety.
It has been possible to classify soils as to disease severity and to plant ac-
cordingly. The evaluation for length of life of plantings according to disease
has been found important from the standpoint of maintenance, of operation
and for the estimation of depreciation and operating costs in a commercial
enterprise. In the purchase of new lands for planting, only those with resi-
stant qualities should be selected.

The selection and planting of lands according to their resistant qualities
from a disease standpoint apparently has not received the attention it deserves.
In the absence of resistant varieties it is highly probable that severity of
disease infection can be greatly reduced in the case of most of the fusarium-
wilt diseases of plants % the selection and planting of proper soil types.

The use of sanitary measures, as destruction of diseased plants, in an
attempt to decrease the rapidity of spread should be based upon plantings
made according to the different soil types. On soil types where disease
spread is rapid and the organism is abundant in the soil, it is evident that
destruction of diseased plants by chemical means or burning would be a
waste of time and money. However, on soil types where disease spread
is slow and the organism has difficulty in establishing itself, this measure
of control would be more practical.

Soil and Fusarium Diseases.

253

Evidently the ability of the organism to exist for a period of years as
a saprophyte in the soil varies according to the soil type. In soils in which
it establishes itself with ease and in great numbers it undoubtedly is ca-
pable of existing for a longer period in the absence of its host than it is able
to do in a soil type in which it does not thrive so well. The organism has
been isolated in Costa Rica (33) from sandy soil types, within which it
thrives well, after a period of ten years in the absence of its host. It has
never been isolated from heavier soil types, in which it does not grow well,
after the same period of time. Apparently the fungus is dependent upon
its host plant for its continued existence in the soil and once the host plant
has been removed the fu^us probably gradually dies out in the soil, but
at different rates in various soil types. Based upon these deductions it
would appear that the length of time for a crop rotation is also dependent
upon the soil type.

Summary.

A study of various diseases caused by Fusaria has shown that they
apparently are closely correlated with the soil conditions.

Investigations conducted with banana wilt have shown that there is a
distinct correlation between the severity of disease, the prevalence of the or-
ganism in the soil and the soil type.

It was found that disease was most severe on the sandy soil types
and less severe on the clay soil types.

A count of the parasite in the soil about diseased plants showed that
it was always greatest in abundance in the badly diseased areas as compared
to the slightly diseased areas.

Fusarium oxysporum f. 3 establishes itself easily in sandy
soil types with large numbers per gram of soil present, while it has diffi-
culty in establishing itself in the clay soil types where its growth is limited
to a low number per gram of soil.

The investigations^ gunitteted -en Bajiana-jiaH: gypoy to show that the
number of organisms present in the soil is the determming factor in the
amount of disease and In the rate of disease spread.

The explanation for the difference in the ability of an orgOTiguv to
establish itself in different soil types has not been determined and theieby
offers a promising line of investigation.

The fact that the banana disease shows a marked difference in severity
on different soil types is important in the formulation of control mea-
sures.

It has been possible to classify soils as to disease severity and to plant
accordingly. A control based on these principles is important in the ab-
sence of a disease resistant variety that could be planted on infected soil.

The use of sanitary measures, as destruction of diseased plants, in an
attempt to decrease the rapidity of spread should be based upon plantings
made according to the different soil types.

Evidently the ability of the organism causing banana wilt to exist for
a period of years as a saprophyte in the soil varies aecordit^ to the soil
type.

Literature.

1. B 0 n n e 1 1 , F. T., Fusarium species on British cereals. Fusarium
nivale (Fr.) Oes. (= fOaloneotria graminioola FBerk. et Br.] Wr.)
(Ann. of Appl. Biol. Vol. 20. 1933. p. 272— 1/90.) — 2. Bis by, G. B., James,

254

Otto A. Rein king,

N., and T i m o n i n , M., Fungi isolated from Manitoba soil by the plate method.
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256

E. Kohler und A. Hey,

Nachdruek verhoten,

Untersuchungen an Kartoffelproben tiber die Beziehungen
zwischen Knollenpotential und Virusbefall.

[Aus der Biologischen Reiehsanstalt Berlin-DaMem.]

Von E. KShler, unter Mitwirkung von A. Hey.

Mit 1 Abbildung im Text.

Yor zwei Jahren berichtete Hey tiber die erfolgreiche Bestimmung
des Kaebbauwertes von Kartoffelproben mit einer physikalisch-chemischen
Methode, deren Anwendbarkeit fiir die vorliegenden Bedurfnisse zuerst von
Wartenberg erkannt und die dann von ihm in Gemeinschaft mit Hey
diesen Bediirfnissen in gliicklicher Weise angepafit ■werden konnte. Es
wd dabei das elektrische Potential gemessen, das an einer Platinelektrode
entsteht, die in den mit Wasser verdunnten Scbabebrei der zu prufenden
Kartoffelknolle taucht. Als BezugsgrSBe bei der Messung dient das konstante
Potential einer Kalomelelektrode, mit der die Kartoffelbreielektrode durcb
eine gesattigte ChlorkaUumbrucke in DoppelhaJbelementschaltung verbun-
den wiri Wartenberg und Hey fanden, daB sick die Schabebreie
abbaukranker und gesunder Knollen dadurch voneinander unterseheiden,
daB die ersteren ein gegenuber der Kalomelelektrode starker negatives Poten-
tial erreichen als die letzteren. Die gemessenen Werte werden in Millivolt-
zahlen ausgedruckt. Die konstanten Potentialwerte der gesunden Knollen
•wurden ungefahr im Bereicbe von — 100 bis — 140 llillivolt (mV.) an-
getroffen, ^ejenigen der abbaukranken von — 210 bis — 300 mV. Eine
„kritische Zone", in der sowohl gesunde wie abbaukranke Knollen vorkommen,
liegt etwa zwiseben — 140 und — 210 mV ^).

Das Verfabren vrurde kurzlicb von 0. Appel ausfiihrbcb bescbrieben
und gewurdigt. Ein Aufsatz von E r i e b e bericbtete ferner tiber die er-
folgreicbe Anvendung des Verfabrens bei der praktiseben Bestimmung des
Herkunftswertes von Kartoffelproben.

Es erbebt sicb die Frage, ob die von einer Eeibe von Forsebern ver-
tretene Auffassung, daB in bestimmten Viruskrankbeiten die eigentlicbe
Ursacbe des Fbrtoffelabbaues zu erblieken sei, mit den Ergebnissen der
Potentiabnessung in Einklang zu bringen ist. Wenn diese Auffassung riebtig
ist, so muB man erwarten, daB diejenigen Knollen, bei denen die stark
negativen Potentialwerte ermittelt werden, mit abbaubewirkenden Virus-
krankbeiten bebaftet sind und daB anderseits Knollen, die die am wenigsten
negativen Werte aufweisen, mit solcben Krankbeiten niebt bebaftet sind.

Die TJntersucbungen, tiber die im folgenden beriebtet wird, sollten
diesen mutmaBlicben Zusammenbang zwiscben Potentialwert und Virus-
befall zu klaren sucben und so zur tlberbrtickung der noeb bestebenden
untersebiedlicben Auffassungen tiber das Wesen des Kartoffelabbaues, ins-

Die Vorstellung ist begriindet, daB das Potential der Platinelektrode nnter
dem EinflnB von Reduktions-Oxydationssystemen des Schabebreies gebildet wird,
nnd dai3 den festgestehten Potentialunterschieden zwischen abbaukranken und ge-
sunden EjioUen Bifferenzen in Reduktions-OxydationskrSrften entsprechen; Aziditats-
dijEferenzen, welohe solche Untersehiede verursachen konnten, sind zwischen den Schabe-
breiaufschlaznznungen nicht festzustellen gewesen. (W artenberg, Vortrag vor
der Botanikerversammlung in Marburg. 1934.)

Unters. an Kartoffelproben uber die Beziehungen z>Risch?n Knollenpotential. 257

besondere auch iiber die Kolle dcr Viruskrankheiten bei dieser Erscheinung,
beitragen.

Methodik.

Das Verfahren bestand darin, dafi an jeder einzelnen Knolle eine Poten-
tialbestimmung und parallel damit eine Priifung auf etwaigen Virusbefall
vorgenommen wurde. Dazu muBten die Knollen halbiert werden. Zur
Potentialmcssung muBte die eine, zur Virusanalyse die andere HSlfte Ver-
wendung finden. Nach den vorliegenden Erfahrungen ist nun zwar mit
hoher Wahrscheinlichkeit damit zu reebnen, daB sich die beiden Hklften in
Bezug auf Virusbefall iibereinstimmend verhalten und daher vergleichbar
sind, jedoch ist durchaus nieht immer eine hundertprozentige tJberein-
stimmung zu erwarten. Es kann vorkommen, daB das Virus in den Knollen
ungleich verteilt ist, daB die cine Halfte ein Virus enthslt, das der anderen
fehlt. Es mvissen bier die diesbezuglieben Erfabrungen von Folsom und
Scbultz an ausgepflanzten Knollenbalften („Tuber units") zu Hilfe gc-
nommen werden. Unter 100 befallenen Knollen fanden sicb naeb den An-
gaben dieser Forseber teilweise kranke ICnollen (eine Halfte krank, die an-
dere gesund):

bei Mosaik (verschiedene Proben) 8; 0,3; 6,2; 0,7 Prozent
bei Spmdel tuber 2; 0,6 Prozent
bei Blattroll 16 Prozent

Die Scbwankungen sind demnacb recbt betracbtlicb. Wie sind sie zu
erklarcn? Offenbar sind teilweise kranke Knollen immer das Ergebnis von
Primarinfektionen. Hingegen sind nacb allgemeiner Erfabrung Knollen
von sekundarkranken I^anzen, also solchen, die selbst scbon von virus-
kranken Pflanzen stammen, in alien Teilen vom Virus durobsetzt. Dem
entspricht offenbar aucb die Erfabrung von Folsom und Scbultz,
daB in stark abgebauten Bestanden der Prozentsatz an teilweise kranken
Knollen nur selij gering war. Die grSBte Zabl teilweise infizierter
Knollen wird dann zu erwarten scin, wenn gesundes Pflanzgut in maBig
infektionsgefabrdeter Lage angebaut wird. In starker infektionsgefabrdeter
Lage werden sicb die Cbanccn fur das Zustandekommen unvollstMndiger
Infektionen wieder vcrringorn, weil die Durchseucbung der Pflanzen mit
der Zunabme der Infektionshaufigkeit im ganzen intensiver werden muB.
Somit ergibt sicb, daB einzolne Falle von Abweiehung im Verbalten dcr
beiden Knollenbalften nieht obne weiteres etwa einem feblerbaften Arbeiten
der Metbode zur Last gelegt werden diirfen.

Knollen der Ernte 1933 wurden der Lange nacb balbiert. Dabei wurde
Vorsorge getroffen, daB keine Virusttbertragung mit dem Wundsaft ein-
treten konnte. Um die Korkbildung an den Schnittflacben zu fordern,
wurden die geschnittenen Stiicke zunaebst im feuchten Ba\im ausgel^t. Die
PotentiaJmessung der Proben wurde in dankenswerter Weise von Herrn
Dr. A. Hey ubernommen. Die fur die Virusuntersuchung bestimmten
Halften wurden im Gewachsbaus im abgesebwaebten Liebt vorgekeimt.
War die Bildung der Keime weit genug fdrtgescbritten, so wurde aus jeder
Halfte ein Stuck ausgesebnitten, das ein kraftig keimendes Auge enthielt.
Die Stucke („Augenstecklmge“) wurden vom Februar ab auf engem Eaum
nebeneinander in Holzkasten^) gepflanzt (Abb. 1). Die EeststUeke wurden
zuruckgelegt , um im Frubjabr aui dem Feld ausgelegt zu werden.

1) Es empfieblt sioli nieht, den „Standrauin‘* der Stecklinge weiter zu bemessen,
da dann die Blattrollsymptome in der Regel mit sehr groBer Verzogerung erscheinen.

Zwelte Abt. Bd.91. 17

268

E. K o h 1 e 1 mid A. Hey,

Das Wachstum der Augenstecklinge in den Kasten wurde genau ver-
folgt und liber alle Kranklieitsersclieinungen wurden Aufzeichnungen ge-
macht. Es zeigte sich, da6 es notwendig ist, die Kasten 9 — 10 Wochen
stehen zu lassen, da die Symptome der Blattrollkrankheit wie auch des
eigentlichen Streak (Strichelkrankheit) erst nach 6 — 8 Wochen mit der er-
forderlichen Deutlichkeit hervortraten.

Im Laufe der Untersuchung stellte sich heraus, daJJ bei entsprechendor
Kenntnis der Sorte eine hinreichend sichere Beurteilimg des Pflanzwertes an
der Stecklingsprobe moglich ist, eine erheblich weniger sichere jedoch an den
Feldpflanzen, ^eil bei ihnen einerseits leichte Mosaikerkrankungen maskiert
seien, andererseits Erscheinungen auftreten konnen, die nicht viroser Natur

Abb. 1. Pnifxing von Augenstecklingon im Ge\^ achshaus. (Naheres im Text.)

sind und daher zu MiBdeutungen AnlaJJ geben. Voraussetzung ist allerdings^
dafi die^ Knollen beim Ansetzen zum Stecklingsversuch die Ruheperiode
hinter sich haben und daB den Pflanzen geniigend Licht zur Verfugung
steht. Brauchbare Ergebnisse sind daher in unseren Breiten frlihestens zu
erzielen, vrenn die Stecklingsproben Anfang Februar angesetzt werden.

Zum Nachweis der mit dem Saft ubertragbaren Mosaikviren, insbeson-
dere des Ringel- f= X) und des Streak- (= Y) Virus, wurden von den Augen-
stecklingen Ubertragungen auf junge Pflanzen der als Testpflanze bewahrten
Tabaksorte ,,Samsun‘‘ vorgenommen, wobei die bekannten Einreibemethoden
in Anwendung kamen (Holmes 1929. Samuel 1931) i). Von jeder
Stecklingspflanze wurden mindestens 2 Tabakpflanzen eingerieben. Mit
diesem Verfahren konnten freilich solche Viren, welche wie die vom Verf.

1) DiagnostiBche und methodische Einzelheiten sind der Mitteilung III (K6b -
ler, Phytop. Ztschr. 1933. Bd. 6) zu entnebmen.

TJnters. an Kartoffelproben uber die Beziehungen zwischen Knollenpotential. 259

fruher nachgewiesenen „E 8‘‘ und „E 9“ auf der Kartoffel und auf dem
Tabak latente Infektionen bilden, nur ungenau Oder gar nicbt erfafit werden.
Die Bedeutung derartiger Viren im Rahmen der Abbaufrage scheint jedoch
wegen ihrer relativen Harmlosigkeit gering zu sein, so daB sie — "wenigstens
vorlaufig — vernachlassigt werden diirfen, ohne daB dadurch eine wesent-
liche Storung des Ergebnisses zu befurchten ware.

Die t^bertragung des Blattrollvirus auf die Testpflanzen fahrte nicbt
immer zum Ziel. Zur tJbertragung wurden Blattlause der Art M y z u s
persieae verwendet, die, nachdem sie an Blattem der Stecklingspflanzen
gesogen batten, auf keimende Kartoffeln iibertragen wurden. (Zur Me-
tbodik vgl. K 6 b 1 e r , Untersuchungen II.) Das scbon im Frubsommer
einsetzende, andauernde intensive Sonnenwetter maebte die fast ununter-
brocbene Sebattierung des Gewacbsbauses erforderlicb, so daB die Symp-
tome an den Testpflanzen meist nur ungeniigend zum Vorscbein kamen.
Zum Naehweis des Blattrollvirus wurde desbalb in erster Linie das Verbalten
der Stecklingspflanze selbst berangezogen, wodurcb eine Bestimmung mit
binreiebender Sicberbeit mbglicb war.

Versuche.

1. Industrie.

Von der Sorto Industrie wurden 2 Herkiinfte der Emte 1933 untersucbt,
nSmlich eine aus Scblawe (Pommern) und eine aus Mecbow (Prignitz) stam-
mende. Die Anbauorte der Herkunft Mecbow waxen in friiberen Jabren fol-
gende gewesen: 1932 Mecbow, 1931 Scblawe, 1930 Scblawe. Die Herkunft
Scblawe batte seit 1930 ibren Anbauort nicbt gewecbselt. Demnacb war
die Herkunft Mecbow zum Unterscbied von der Herkunft Scblawe 2 Jabre
bindurch den Einflussen des Mecbower Standortes ausgesetzt gewesen. Bei
5 von den geprtiften 30 Knollen der Scblawer Herkunft konnten sichere
Potentialwerte nicbt erzielt werden, da bei der Messung keine Potential-
konstanz eintrat, desgleicben nicbt bei 8 von 30 Knollen der Mecbower
Herkunft. Das Ergebnis der Untersucbung ist in Tab. 1 niedergelegt. Links
sind die in Klassen zusammengefaBten Potentialwerte angegeben, rechts
das Virusverhalten der in die cinzelnen Wertklassen fallenden Knollen.

Fiir Scblawe ergibt sicb, daB in dem Bereicb zwiscben — 120 und
— 179 mV. insgesamt 21 virusfreie und keine einzige kranke Pflanze an-
getroffen wurde. Eine virusfreie und zwei scbwach viruskranke Knollen
fanden sicb in der Wertklasse — 180 bis — 189 mV. und eine scbwacb
viruskranke fiel in die Klasse — 200 bis — 209 mV.

Fiir Mecbow ergibt sicb folgendes:

Nur virusfreie Pflanzen (insgesamt 11) fallen in den Bereicb von — 120
bis — 169 mV. In die Klasse — 170 bis — 179 mV. fallen zwei virusfreie
und drei kranke, von letzteren sind zwei mit dem X-Mosaikvirus und eine
mit dem Y-Mosaikvirus befallen. In die Gruppe — 180 bis — 189 mV.
fallen 4 Pflanzen, von denen nur eine virusfrei ist. Von den drei kranken
ist eine mit dem X-Virus bebaftet, eine andere zeigt infolge von Miscb-
infektion mit X und Y schwere Eiankheitserscbeinungen, eine dritte er-
weist sicb als blattroUkrank. Die letztere zeigt im Stecklingsversucb krfif-
tige Antbozyanfleckung auf der Blattunterseite und leicbte chlorotiscbe
Verfarbung der Blatter. Eine Pflanze im Bereicb — 210 bis — 219 mV

17 *

260

E. Kohler und A. Hey,

ist mit dem Y Virus befallen, eine andere (im Bereicb 220 — 229 m. V.)
mit dem X-Virus. Bei beiden Herkiinften ergibt sich
demnacb eindeutig eine Zunahme der Viruserkran-
kung parallel mit dem Ansteigen der Potential-
w e r t e. Die kritische Zone, die Zone, die sowohl vitale wie abgebaute
Pflanzen umfaBt, ■wiirde nacb den vorliegenden Befunden zwischon — 175
bis — 185 mV. anzunekmen sein. Bemerkenswert ist ferner, dafi nieht nur
das T- sondern auch das X-Virus ein Ansteigen der Potentialwerte verursacht.
Es deckt sich diese Erseheinung mit der Erfahrung, daB „Industrie“ dem
X-Virus gegenuber keine so ausgesprochene Toleranz aufweist, wie vielc
andere Sorten.

Betraehten wir nun noch das Ergebnis der Virusanalyse derjenigen
Knollen, bei denen bei der Messung keine Potentialkonstanz zu erreichen
war und die deshalb in Tab. 1 nicht unterzubringen sind. Das Ergebnis
lautet fur Mechow:

vinisfrei .

X'Mosaik

Y-Mosaik

Die 5 entspreehenden Knollen der Herkunft Schlawe erwiesen sich
sSmtlich als virusfrei.

4 Knollen
2 „

2 „

Tab. 1. Industrie.

Potentialwert©
m V

Schlawe

Mechow

— 120 bis — 129

— —

— 130 „ —139

— 140 „ —149

(§)©(§)

©©

— 160 „ —169

® (§)

© © ©

— 160 .. —169

<§)©<§)

©©© © ©

— 170 „ —179

<§)®(§)©®®©( 8 )(§> 0 (§)

®® + X X

— 180 „ —189

© ^ ^

®X IT

— 190 —199

— 200 —209

❖

— 210 „ —219

+

— 220 „ —229

X

Z e ichenerkldrung: ® virusfrei ; ^ unbekanntes, halblatentes Virus;
X X-Mosaik; + Y-Mosaik; ■ Misehmosaik X + Y; y Mischmosaik X + Y und
BlattroUvirus.

Aus dem Vergleich der beiden Herkunfte l&Bt sich mit hoher Wahr-
scheinlichkeit folgern, daB sich die Kartoffeln wahrend ihres zweijahrigen
Aufenthalts in Mechow Iniektionen mit dem X- und Y-Mosaikvirus, zwei
weitverbreiteten Eartoffelviren, zugezogen haben. Annahernd die Halfte
der gepriiften Knollen erwies sich als befallen. Blattrollkrankheit wurde
nur in einem Fall angetroffen. Diese Krankheit trat in Mechower Proben
auch an anderen Sorten nur in geringer Haufigkeit auf.

2. Magnum bonum.

Sorte Magnum bonum wurden 3 Herkiinfte der Emte
W33 untersucht. Eine stammte aus Mechow, eine zweite aus Stade (ober-
halb Bamburgs) und eine dritte vom Versuchsfeld der Biologischen Beichs-

Unters. an Kaxtoffelproben uber die Beziehungen zwischen Knollenpotential. 261

anstalt in Dahlem. Jede Herkunft unifaBte 30 Knollen. Die friiheren An-
bauorte der drei Herkiinfte sind aus nachstehender ZusammensteJlung er-
sichtlich:

1933 1932 1931

Herkunft: Stade Stade -t- Klein-Boschpol

(Krs. Lauenburg i. Pommem)

,, ; Mechow Mechow 4- Klein-Boscbpol
,, : Bahlem 4- Mechow 4- Klein-Boschpol

Bei der Potentialmessung konnte bei 12 Knollen der Probe Mecho-w,
bei 5 Knollen der Probe Stade und bei 14 Knollen der Probe Dahlem keine
Konstanz erzielt werden. Alle diese Knollen fielen daher fiir die Potential-
bestimmung aus. Vermutlich riihrt die hohe Zahl der ausfallenden MeB-
versuehe daher, daB die Jahreszeit sehon etwas zu weit fortgesehiitten war'-).
Das Verhalten der iibrigen, meBbaren Knollen geht ans folgender Zusammen-
stellung (Tab. 2) hervor.

Tab. 2. Magnum bonum.

Potentialwerte

mV

Mechow

Stade

Dahlem

— 146 bis — 149

— 160 „ —164

— 166 „ —169

<§>©<§>■

— 160 „ —164

❖

— 166 „ —169

®

— 170 „ —174

®

® (§)

— 176 „ —179

T

® ® ® ®

— 180 „ —184

®

<§)(§) ® ^

— 186 „ —189

® ® ® ®® ®

TTTT

— 190 „ —194

TTTT

— 196 „ —199

TTT

— 200 „ —204

i

T

— 206 „ —209

■ T

— 210 „ —214

TT

— 216 „ —219

T

— 220 „ —224

T

— 225 „ —229

■

Zeichenerklarung: ® gesund (nidht abgebaut), nur mit X behaftet;
^ schwach krank, auSer mit X mit anderem sohwachem Virus behaftet; ■ Virus-
gemisch X + Y; V BlattroUvirus mit X-Mosaik allein oder im Gemisch mit anderen
Viren.

Bei den vorgenommenen Tabakabreibungen zeigte sich, daB das X-Yirus
in sSmtliehen 90 untersuchten Knollen der 3 Proben enthalten war. Die
Sorte ist gegen dieses Virus augenscheinlich hochtolerant, was sich auoh
darin HuBert, daB die Feldpflanzen einen vollkommen normalen, gesunden
hhndruek machen. Bei der Stecklingsprobe im Gew&chshaus traten hii^egen
an den Blatter n die typischen Symptome des X-Virus, allerdings in etwas

Wartenberg und Hey erklftren, dafi die Feststellung eines konstanten
Potentiales nur danTi mdglich ist, wenn sich die KnoUen im Zustand der Winterruhe
befinden. DaB die KnoUen einer Herkunft imd Sorte nicht genau gleiohmdBig ihre
Winterruhe beenden, daB also das Ende der Winterruhe der Individuen eines Materials
sich tiber eine gewisse Zeit verteilt, muB unter der Bertioksichtigung der fluktuierenden
Variation als wahrscheinlioh angenommen werden.

262

E. K 6 h 1 o r und A. Hey,

unterschiedlicher Starke in Erseheinimg (vgl. Kohler, Mitt. Ill, Abb. 4,
nnd Mitt. I, Abb. 1). TVeitaus am gesnndesten Avar die Herkunft Stade.
12 Knollen enthielten nur das X-Yirus. 7 Knollen enthielten aufierdem
schTrache, andersartige Yirusinfektionen, die nicht nSher bestimmt werden
konnten; das Y-Virus fehlte ganzlich nnd auch das Blattrollvirus war nur
in einem einzigen Fall vertreten. Betrachtet man die Vertcilung auf die
Potentialwerte. so findet man wieder, daB sich die gesunden Pflanzen vor-
wi^end auf die niedrigen, die kranken vorwiegend auf die hoheren Zahlcn-
werte der Potentiale verteilen. Die Korrelation ist unverkennbar. V6llig
anders verhalt sicb die Herkunft Dahlem. Die samtlichen gemessenen
Knollen enthielten das Blattrollvirus und bis auf zwei auBerdem noch das
Y-Virus. Im ganzen, einschlieBlieh der Knollen, deren Potential nicht fest-
gestellt werden konnte, traten das Y- und das Blattrollvirus in der Herkunft
Dahlem mit folgender HSufigkeit auf: Y-Mosaik 26mal, Blattroll SOmal
= 100%. Die Zahlenwerte der Potentiale liegen im Durchschnitt bedeutend
hSher als bei der Stader Herkunft. Die niedrigsten Werte liegen bei — 185
mV., der hfichste bei — 222 mV. Immerhin ist die starke tJberschneidung
im Bereich — 185 bis — 189 mV. bemerkenswert. Dieses Intervall diirfte
etwa der „kritisehen Zone" entsprechen.

Fiigen sich nun, vrie wir gesehen haben, die beiden Proben Stade und
Dahlem der Erwartung, so fallt die Probe Mechow deutlich aus dem Bahmen.
Die Streuung der Potentialwerte umfaBt hier — nach oben und unten —
einen sehr groBen Bereich, namlich von — 148 bis — 229 mV. Was die
Krankheitsfalle anbetrifft, so ist auffallend, daB auf den Bereich — 155
bis —179 mV. immerhin 3 stark abgebaute Pflanzen entfallen, namlich
zwei Y-kranke mit — 155 und — 165 mV. und eine blattrollkranke ( — 179
mV.), in Grenzen also, in denen nur gesunde, nicht jedoch abgebaute
Pflanzen zu erwarten sein sollten. Nach unseren einleitenden Ausfii&ui^en
ist es nicht ausgeschlossen, daB einzelne Abweichungen darauf beruhen,
daB die betreffenden Knollen nur teilweise krank waren. Im vorliegenden
Fall ist nun aber die Zahl der Abweichungen besonders groB und es fragt
sich, ob diese ErklSrungsmoglichkeit ausreichend ist. Nimmt man an, daB
sich in der Probe nur die drei teilweise infizierten Knollen befunden hatten,
die aus dem Bahmen fallen, so ware es ein merkwiirdiger Zufall, daB immer
gerade die infizierte Halfte fiir die Steeklingsprobe Verwendung gefunden
hatte. Nach der Wahrscheinlichkeit konnten unseren 3 Ausnahmeknollen
ebensoviele andere entsprechen, bei denen sich die Sache umgekehrt ver-
halten hatte, bei denen also die gesunde Halfte znr Steeklingsgewinnung
verwendet worden ware und die kranke zur Potentialmessung. Wir sehen
nun aber im Gegenteil eine ganz normale Verteilung der gesunden Knollen
auf die niedrigen Millivoltklassen ( — 145 bis — 189 mV.), in den hSheren
Klassen fehlen sie ganzlich. Es muB also nach einer anderen Erklarung
gesucht werden. Ohne Schwierigkeit wiirde sich der Widerspruch l6sen,
wenn etwa die Annahme zutreffen wiirde, daB diejenigen Knollen primar-
infizierter Pflanzen, in die nur wenig Virus eingedrungen ist, die Potential-
werte gesunder Knollen zeigen. Die Mechower Lage geh6rt nach alien
vorliegenden Erfahrungen offenkundig zu denen, wo aUja^lich mit einer
maBigen Verseuehung zu reohnen ist, wo also die Voraussetzungen fiir ein
haufiges Vorkommen von nur schwach primarinfizierten Knollen zutreffen.
Man kSnnte sich vorstellen, daB das Virus in soldien Knollen nicht stark
genug ist, um den Stoffwechsel pathologisch zu verandern, ^egen wiirde

XJnters. an Kartoffelproben uber die Beziebungen zwischen KnoUenpotential. 263

die aus einer solchen Knolle erwachsende Pflanze abbaukrank werden, weil
sich das Virus in ihr entsprechend vermehren und kraftigeii konnte. Die
Annahme, daB die mit einer scbwachen Dosis Virus bebafteten KnoUen bci
der Potentialmessung wie gesunde reagieren, ware demnach einleuehtend.

Vergleicht man iibrigens die Potential werte der g e s ii n d e n Knollen
bei den Herkiinften Meehow und Stade, so fslllt auf, daB die Streuung bei
den beiden Herktinften eine recht verscbiedene ist. Es ist bemerkenswert,
daB sich bei der zweifellos gesunderen Herkunft Stade diese Werte entgegen
der Erwartung auf die 'h 6 h e r e n EJassen von — 165 mV. an verteUen,
wogegen bei Meehow die niederen Klassen von — 145 bis — 164 mV.
vertreten sind. Offenbar ist die Lage und Form des Streukegels auBer vom
Virusbefall auch von anderen Einfliissen abhSngig. Unser Beispiel lehrt, daB
es unrichtig wSxe, jede Versehiebung nach der negativen Seite von vornherein
als Zeichen fiir Abbau zu werten. Offenbar konnen schwachere Verschie-
bungen, die nichts mit Abbau zu tun haben, sowohl nach oben wie nach
unten auch an gesundem Material vorkommen. Es wird eine Spezialaufgabe
sein, derartige Schwankungen auf ihre Ursachen zuriickzufiihren. Viel-
leicht gibt die Veroffentlichung des von Wartenberg und Hey be-
arbeiteten, umfangreichen Untersuchungsmateriales Anhaltspunkte fiir
weitere Aufschliisse in dieser Richtung.

Was endlich das Ergebnis der Virusanalyse bei den nicht meBbaren
Knollen anbetrifft, so wurde bei alien 3 Herkiinften festgestellt, daB sich
unter ihnen sowohl abgebaute als auch gesunde befanden. Beispielsweise
zeigten die nicht meBbaren Knollen der Mechower Probe folgenden Befall:

X-Mosaik allein 7 KnoUen

Oemisch X + Y 4 „

Gemisch X + Y + Blattroll 1 „

Der Virusfaktor ist sonaeh nicht bestimmend fiir die MeBbarkeit, eine
Tatsaehe, die auch bei anderen Proben festgestellt wurde.

3. Sorte Klein-Spiegeler Wohltmann.

Von dieser Sorte stand eine Mischprobe von 60 Knollen zur Verfiigung,
die sich aus 30 Knollen „Origmalpflanzgut“ aus Klein-Spiegel und 30 Knollen
Dahlemer Herkunft zusammensetzte. Letztere war im Vorjahre, gleichfalls
als Original, aus Klein-Spiegel bezogen worden. Bei der Messung der Poten-
tialwerte muBten wiederum 10 Knollen ausscheiden, well bei ihnen keine
Konstanz zu erzielen war. Das Verhalten der hbrigen 50 Knollen ist aus
der tJbersicht (Tab. 3) zu entnehmen. Nur 3 von &esen erwiesen sich als
virusfrei. Weitere 21 waren nur vom X- Virus befallen; diese waren prak-
tisch gesund und nicht abgebaut. Eine Knolle enthielt das Mosaikgemisch
X -)- Y (mV. = — 165), diese erwies sich als „abgebaut“. 25 Knollen waren
blattrollkrank und stark abgebaut. Von den blattrollkranken waren, was
aus der Tabelle 3 nicht zu ersehen ist, die meisten auBerdem mit anderen
Viren behaftet:

Anzahl ICnollen

Potential mV

blattroU aUein

1

(— 184)

blattroll + X-Mosaik

18

(— 163 bis — 187)

blattroll + Y-Mosaik

3

(— 148; — 167; — 172)

blattrollkrank + Y- und X-Mosaik .

(— 175: — 186; — 186)

264

E. Kohler und A. Hey,

Befall mit dem Blattrollvirus ist augenscheinlicli stets gleichbedeutend
niit ungunstigem Potentialwert; dabei ist es gleichgultig, ob neben dem
Blattrollvirus noch ein anderes zugegen ist. Dies bat sicb aucb sebon obeu
bei der Sorte Magnum bonum gezeigt.

Tab. 3. K 1. S p. W o li 1 1 m a n n (Mischprobo).

Potentialvi erte
m V

— no bis —119

— 120 „ —129

— 130 „ - 139

— 110 „ —149

— 150 „ —139

— 160 „ —109

— 170 „ —179

— 180 „ —189

XXX

® X X X X X
®X X X X X X
® X X ▼

X X X X TTT

■TTVTT

X TTYTTTVTT
▼TTTTTT

Zoichenerklarung: ® virusfrei (nicht „abficebaut) ; x mit X-Mosaik be-
haftet (nicht ,,abgebaut“); B Mischmosaik X +Y; ▼ Blattroll, allein oder ein Ge-
miseh mit anderen Viren.

Aucb bei der vorliegenden Probe erweist sicb, dafi die mit abbaubewir-
kenden Viren oder Viruskombinationen behafteten Knollen durchweg hohe
n^ative Werte aufweisen. Die kritische Zone, in der sowohl abbaukranke
Tvie niebt abbaukranke Knollen vorkommen, entspriebt etwa dem Intervall
— 140 bis — 159 mV. Unter — 140 mV. sind ^e Pflanzen niebt abbau-
krank, uber — 160 mV. sind sie, von einer Ausnahme abgesehen, abbaukrank.
Somit ergibt sicb eine reebt befriedigende tJbereinstimmung zwiseben Er-
wartung und Befund.

4. Sorte PreuBen.

Von der Sorte PreuBen wurden zwei Herkiinfte untersuebt. Die eine,
60 Knollen umfassende Probe stammte vom Versuebsfeld der Biologischen
Reicbsanstalt in Dablem, die andere, 30 Knollen umfassende, von dem
unweit Berlin gelegenen Gut Albertsbof. tJber die Standorte in fruberen
Jabren war nichts Sicheres mebr zu ermitteln. Von den Knollen „Alberts-
hof" erwiesen sicb 19 als meBbar, von den Knollen „Dahlem“ 36. Ibr Ver-
halten ist aus Tab. 4 ersicbtlicb. Betracbten wir zunfiebst die Herkunft
Albertsbof, so fallt wieder auf, daB die Zunabme der Viruserkrankung dem
Ansteigen der Zablenwerte der Potentiale parallel gebt. Die drei einzigen
virusfreien Knollen verteilen sicb auf die vier nied^ten Wertklassen von
— 120 bis — 159 mV. Diese Pflanzen erwiesen sicb niebt als abgebaut.
Niebt abgebaut waren franer die drei in die gleicben Wertklassen fallenden
Knollen, die vom Y-Virus befallen waren. Die Sorte PreuBen ist augen-
scheinlich fiir dieses Virus tolerant. Die in die hSberen Wertklassen (von
— 160 mV. ab) fallenden Pflanzen waren sSmtlicb als abgebaut anzu-
spreeben. Von ibnen zeigten 4 Befall mit dem X-Virus, 5 Befall mit dem
Virusgemiseb X + Y. 4 Weitere enthielten das X-Virus, jedoeb augen-
scbeinlich nicht rein, sondem im Gemisch mit anderen Viren, die niebt
naber bestimmt werden konnten. Das Blattrollvirus war in dieser Probe
nicht enthalten. Bemerkenswert ist, daB die Sorte PreuBen dem X-Virus
g^eniiber nicht voll tolerant ist. Noch viel schleehter schnitt die Her-

XJnters. an Kartoffelproben uber die Beziehungen ZT^isehen KnoUenpotential. 265

kunft Dahlem ab. Nicht weniger als 32 Knollen erwiesen sich als blattroll-
krank, nur 4 enthielten das Blattrollvirus nieht. Von letzteren war aber
keine einzige virusfrei. Eine von ihnen entMelt X allein, die 3 iibrigen
enthielten das Gemisch X + Y. Von den blattrollkranken Pflanzen ent-
Melt weitaus der grdBte Toil noch das Gemisch X Y.

Tab, 4. P r e 11 13 e n.

Potentialwerte

mV

Albertshof

Dahlem

— 120 bis

— 129

— 130 „

— 139

— 140 „

— 149

— 160 „

— 159

® ❖

— 160

— 169

X X ■

— 170 „

— 179

X X + + ■■

■ TTYT

— 180 „

— 189

+ ■

❖■■YTTTYTTYYTYYYYTT

— 190 „

— 199

TTTYTTY

— 200 „

— 209

■

TTY

— 210 „

— 219

+

Y

— 220 „

— 229

Y

Zeichererklarung: <§) virusfrei; ^ Y-Mosaik; x X-Mosaik; + X-Mosaik,
mischverdachtig; H Mischmosaik X + Y;T Blattrollvirus allein oder im Gemisch mit
anderen Viren,

Im ganzen, mit EinschluB der Knollen, deren Potential nicht gemessen
werden konnte, traten die 3 -wichtigsten Viren in der Dahlemer Probe mit
folgender HaMigkeit aui:

X-Mosaik 44mal

Y-Mosaik 23 ,,

Blattrollvirus mindestens 61 „

Allgemeine diagnostische Erfahruiigen.

Beziiglich dw Diagnose der 3 wichtigsten Vira (X-Mosaik, Y-Mosaik
und Blattroll) an den Augenstecklingen warden folgende Erfahrungen ge-
macht. Das X-Mosaik konnte, wenn es allein vorhanden war, an den X-tole-
ranten Sorten Magnnm bonum, Wohltmann und Erstling in der Hegel an
der typisehen Fleckung der alteren Blatter erkannt werden. Krauselungen
traten bei diesen Sorten nicht auf. Bei 'Wohltmann und M^um bonum
maehten einzelne Pflanzen insofem eine Ausnahme, als bei ihnen keine
sicheren Symptome zum Vorschein kamen. Sie enthielten das Virus in sehr
stark abgeschwachter Form, wie mit Hilfe der Tabakabreibungen fest-
gestellt wurde. Anders verhielten sich „Preu6en“ und „Industrie“. Bei
ihnen EuBerte sich das X-Virus vorwiegend an den jlingsten Blattern und
zwar mit einer meist ziemlich starken KrEuselung, die mit einer lebhaften
Griin- und Gelbscheckung verbunden war. Etwas milder waren die Er-
scheinungen bei Industrie. Infebtionen mit besonders schwachen X-Stammen
sind auch bei diesen Sorten latent. (Eine Sorte, bei der das X-Mosaik stets
latent bleibt, ist EdelweiB.)

Das Y-'^irus verursachte an den Industriesteckiingen typische Streak-
erscheinungen, bei PreuBen blieb es latent.

Die Kombinationen X-i-Y, deren Nachweis am Tabak wegen der
auffailigen Gdbstreifigkeit der Nerven nic versagt, wurde am Kartoffel-

266

E. Kohler und A. Hey, Untersuchungen an Kartoffelproben.

steckling durch starkes Krauselmosaik und allgenieine Wachstumshemmung
angezeigt.

Kam das Blattrollvirus allein oder zusammon mit dcm X-Virus vor, so
war das hervorstechendste Merkmal immer die Bildung von Anthozyan-
flecken auf der Blattunterseite. Diese traten allerdings in der Regel erst
nach 6 Wochen auf. naehdem das Wachstum des Steeklings zum Stillstand
gekommen var, so bei Wohltmann, Magnum bonum und Industrie. Dazu
kamen noch als veniger bestandige Symptome leichte Rollerscheinungen,
leichte chlorotiscbe Verfarbungen und Verbartung des Laubes. Durch
Kununenniehs und eine auffallige. charakteristische Gelbchlorose der gan-
zen Pflanze war die Kombination des Blattrollvirus mit dem Y-Mosaik oder
dem Gemisch X- + Y-Mosaik gekennzeichnet. Die Anthozyanbildung war
dabei nicht selten ganz oder fast ganz unterdriickt, so dafi in solchen Fallen
eine TJnterscheidung von der gleichfaUs bosartigen Kombination X-+Y-
Mosaik nicht in jedem Falle sicher moglieh war.

Znsammentassung.

An Kartoffelproben verschiedener Herkunft wurde die Frage gepriift,
oh eine Beziehung besteht zwischen den bei der Knollenpotentialmessung
(Methode von Wartenberg und Hey) sich ergebenden Werten und
dem Befall mit bestimmten Viruskrankheiten. Dabei wurde so vorgegangen,
dafi die Knollen halbiert wurden; die eine Halfte diente zur Potentialmessung,
die andere zur Virusbestimmung. Es zeigte sich in der Tat, dafi die ver-
mutete Beziehung vorhanden ist, indem nachgewiesen werden konnte,
dafi der Befall mit abbaubewirkenden Viren im ganzen mit einer deutlichen
Verschiebung der Potentialwerte nach der negativen Seite der MiUivoltskala
einhergeht. Nicht abbaubewirkende Viren, also seiche, gegen die die be-
treffende Sorte einen hohen Grad von Toleranz besitzt, werden hingegen
nicht durch eine solche Verschiebung angezeigt.

Die gewonnenen Ergebnisse sind eine starke Stiitze fiir die von mir
(7) friiher schon vertretene Auffassung, dafi die von Wartenberg und
Hey zuerst festgestellte PotentialverscMebung ein Symptom des Befalls
mit abbaubewirkenden Viren ist. Als die Ursache der PotentialverscMebung
ist nicht das Virus selbst anzusehen, sondem die von ihm hervorgerufenen
Veranderungen beim Stoffumsatz. Das Virus selbst macht sich, wenn es
nicht in den Stoffwechsel eingreift, bei der Potentialmessung nicht bemerk-
bar. Ist die Pathogenitat des Virus fiir die betreffende Sorte gering oder
gleich NuU, so ist dementsprechend auch der EinfluB des Virus auf die Poten-
tialhehe gering oder gleich Null. Das Potential ist somit ein
Indikator fiir wirklichen „Abbau“.

Bei einer Probe wurden zum Teil giinstigere Potentialwerte ge-
messen, als dem wirklichen Nachbauwert entsprach. Defartige Abweichungen
diirften darauf beruhen, dafi die von primarinfizierten Pflanzen stammenden
Knollen nicht selten einen zu geringen Virusgehalt aufweisen, oder dafi das
Virus in ihnen ungleich verteilt ist.

Es liegen Anhaltspunkte dafiir vor, dafi Versehiebungen geringeren
Grades, \ma zwar in beiden Richtungen der Skala, auch ohne Beteiligung
des Virusfaktors mSglich sind. Wieweit sie etwa ein Kennzeichen des sog.
5kologischen Abbaues sind, steht dahin.

Die haufigsten und wichtigsten Viren sind nach dem Ergebnis der vor-
liegenden TJntersuchimg das Blattrollvirus und die Mosaikviren der X- und

Walter Kubiena and Charles E. Bonn, Micropedological Studies. 267

Y-Gruppe (Ringmosaik- und Streakviren). Zweifellos konnen auch noch
andere Viren als die genannten in den Knollen vorkommen, fur die vorliegende
Untersuchung waren sie jedonfalls von untergeordneter Bedeutung. Als
bosartig erwiesen sich stets das Blattrollvirus und die Kombination des
X- mit dem Y-Virus; die siaxksten Potentialversehiebungcn waren in der
Regel auf dergleichen Infektionen zuriickzufiihren.

Sehriftenverzelehnls.

1. Appel, 0., Vitality and vitality determination in potatoes. (Phytopatho-
logy. 1934. Vol. 24. p. 482.) — 2. Folsom, D., and Schultz, E. S, Maine Agric.
Exp. Station. Orono. Bull. 316. 1924 und Bull. 331. 1926. — 3. F r i e b e , P., Zur
elektrometrischen Messung des „Abbaugrades“ der Pflanzkartoffel. (Pflanzenbau.
1932 /33. Bd. 9. S. 351.) — 4. H e y , A., Die Diagnose des Abbaugrades von Kartoffel-
knoUen durch elektrometrische Messung. Vorl. Mitteilung. (Arb. Biol. Reichsanst.
1932. Bd. 20. S. 79.) — 5. H o 1 m e s , F r. O., Bot. Gaz. 1929. Vol. 87. p. 39. —
Americ. Joum. Bot. 1930. Vol. 17. p. 789. — 6. El o h 1 e r , E., Untersuchungen uber
die Viruskrankheiten der Kartoffel. II. (Phytopath. Ztsdir. 1933. Bd. 6. S. 359
und III. Ebenda 1934. Bd. 7. S. 1.) — 7. Kohler, E., Kapitel „ Viruskrankheiten**
in Sorauers Handb. d. Pflanzenkrankheiten. 1934. 1. Bd. (2. Teil), 6. Aufl. —
8. Samuel, G., Ann. Appl. Biol. 1931. Vol. 18. p. 494. — 9. Wartenberg, H.,
Vortrag auf der Botanikerversammlung in Marburg. 1934.

Na^druek ‘otrbot^n.

Micropedological Studies of the hifluence of Different Organic
Compounds upon the Mioroflora of the Soil.

[Department of Soil Microbiology, New Jersey Agricultural Experiment
Station, New Brunswick, N. J., TJ. S. A.]

By Walter Kubiena and Charles E. Benn.

With 2 figures in the text and 3 plates.

I, Introduction,

It is a well known fact that the soil microflora shows specific changes
by various treatment of the soil, particularly by the addition of easily decom-
posable organic substances. These changes of the microflora of the soil
have been studied by a number of investigators. The following paper aims
at introducing a new procedure to the treatment of the matter. The chief
part of work will therefore be devoted to a test of the new method in this
direction.

Contributions to the knowledge of the effect of organic substances added to
the soil go back to Hiltner and S t 6 r m e r (6) and Engberding (5). Conn
found an increase of the development of aotinomyces as a result of the addition of cer-
tain plant material (2) and found distinct changes of the mioroflora by the application
of fresh manure (3). B a r t h e 1 and Bengtson (1) studied the decomposition of
cellulose brought into the soil in the form of stubbles and roots of different plants
(wheat, rye, barley, oats, peas and vetches). They found that the rapidity of decompo-
sition of all material except that of the leguminous plants in sandy soil, which was
very poor in nitrogen, stood in direct proportion to the nitrogen contents of the additions.
H. L. Jensen (7) stated a material increase of actinomyces by the addition of hom-
meal, particularly of Actinomyces oitreus ( Krains ky) Waksman and Curtis
and Aotinomyces 145 Waksman.

In mixing soil with certain organic substances S. Winogradsky was able to
show a distinct change of the mioroflora by his direct microscopic method. In the oonse-

268

Walter Kubiena and Charles E. Renn,

quence he developed the use of additions to his soil plate method for obtaining spontan-
eous cultures (20).

Of particular interest for this paper are the numerous investigations performed
at the New Jersey Experiment Station to which the experiments of this publication may
be looked upon as a contmuation. From the results the following may be stated. W a k s -
man and Starkey (17) found that dextrose in the soil favoured especially the de-
velopment of bacteria, cellulose that of the fungi, rye straw and alfalfa meal that of both
bacteria and fimgi, besides which dried blood favoured also that of the actinomyces.
The numbers of fungi increase more abundantly in acid soils than in those more neutral
in reaction. The addition of available nitrogen greatly increased the development of
fungi even in the case of straw which amoimt of mtrogen (about 0,7%) may be sufficient
for the needs of bacteria but not for an abundant development of fungi. The soil of
these experiments, a Sassafrass gravelly loam, was a similar soil as used for the in-
vestigations in this paper.

Starkey (16) measured the increase of the carbon dioxide evolution as a result
of the addition of organic substances. He also found an increase of the decomposition
of cellulose by the addition of available nitrogen. In 1933 W a k s m a n (18), partly
by direct microsoopic methods, demonstrated the change of the microbial life in the soil
as a result of additions. Among other examples a characteristic development of actino-
myces was shown on dried blood particles which also favoured extensive development
of bacteria and fungi in the soil. In the case of straw the sequence and types of fungi
were found differently from those occurring upon pure cellulose. The Mucorales deve-
loped first, later followed by the typical cellulose-decomposing fungi. W a k s m a n
considered as typical cellulose-decomposing fungi in the soil species of Trichoderma,
Humicola, Penioillium and Aspergillus. Of interest for the investigations in this paper
it may be quoted that W. D a s z e w s k a (4) found also two species of Verticillium
among the strongest cellulose-decomposing fungi in the soil, V. cellulosae and
V. g 1 a u c u m.

II. Methods.

Principle. The term “micropedological studies” is used in this
and in preceding papers as a shorter expression for “direct microtechnical
investigations of undisturbed, naturally developed soils”. Their goal is not
only the microscopic investigation of the microscopic elements that make
up the soil but the performance of chemical and biological operations in
this system. Since it is important to know how the separate soil constituents
are arranged and how they are combined to form the natural soil, the ob-
servation of undisturbed soils is indispensable. This method also affords
the only possible means of studying biological conditions of the soil spaces
in situ. As with the morphological features, the processes operating in the
soU are magnified so that many single activities t^ng place in the smallest
spaces become observable.

Technique. Soil samples which have lost their natural structure
or have been (feed and pulverized in the laboratory are as little like soils
in nature as piles of building-debris are like the former building. Not only
the structure of the soil has been disturbed but many jfragile constituents
of the soil are destroyed. Attempts have often been made to prepare soils
in their natural structures. The impossibility of making suitable thin sections
of soil have undoubtedly inhibited the development of a soil microscopy;
whereas, in the case of petrography the rapid development of microscopical
methods was due to the faciUty with which sections of rocks and minerals
could be made. Attempts to fix the soil with congealing liquids have little
future in soil microscopy because such preparations do not permit further
research, either microehemical or microbiological. Only the use of vertical
light microscopes with freshly opened, structurally undisturbed soils pro-
mises satisfying results. The division and opening of soil without disturb-
ing its microscopic structure may appear theoretically difficult. Cutting

Mioropedologioel Studies of the Influence etc.

269

the soil is rarely satisfactory because contusions at the planes are made
in cutting. Nevertheless, the practical solution of this question is surpris-
ingly simple. Experience shows that manipulations in breaking clods open
or splitting thin slices from compact profile walls opens the soils at their
splitting faces without disturbing the construction of the soil spaces or their
contents. Such soils opened by splitting resemble a house, one half of which
has been removed by collapse or has been carried off, the other half allow-
ing a view into its floors, corridors, and rooms with all its furniture and
inhabitants. Dividing more or less compact soils is performed best by thrust-
ing an awl-shaped needle into them.

It is easily possible to see the soil spaces with the aid of a vertical light
microscope magnified to such a size that individual treatment of the
small objects and substrates inside, as well as the microorganisms growing
on them is possible. As in micrurgy, which reached high development
in general biology, all manipulations are performed under the micro-
scope with the aid of special micro-tools, particularly micro-needles, micro-
pincers, micropipettes, micro-lances, etc. These manipulations are generally
so simple that the use of a micromanipulator and of other appliances used
in the fine work of micrurgy (glass tools instead of resterilizable metal parts)
can for the most part be dispensed with.

For further investigation of objects and for propagation of micro-
organisms, isolations and transfers to slides or artificial media must be per-
formed by means of the above mentioned naicro-tools. Details of the techni-
ques of the different methods are given m previous publications (9, 10, 11,
12, 14), since a detailed description would go beyond the bounds of this paper.

Methods used in this work. In previous microtechnical studies the
natural media in the soil have been searched out and the microorganisms growing on
them have been investigated ( 10 ). In this work artificial nutrient substrates have
been added to the soil mechanically, and their influence upon and transformation
by the microflora has been studied. The artificial substrates have been added in
the form of small particles of such size that their storage is permitted in the spaces
of the loosened soil. The diameter of these particles was smaller than the usual dia-
meters of the soil spaces so that the soil system was Uttle influenced; soil and addi-
tions have neither been mixed to a paste, nor have other decisive changes in the normal
character of the soil been made. As to the quantity of added material only that amount
was applied which was necessary to make the particles to be easily foimd in the soil
and to furnish sufficient numbers of parallel observations in every part of the soil. The
added quantities equalled 0.3 to 0 . 7 % of the weight of the soil.

Apparatus. The investigations have been carried out with the aid of the
soil microscope designed by W. K u b i e n a and manufactured by the Optical Works
of C. Reichert — Vienna. The instrument (11) is a normalized vertical light micro-
scope which can be folded together into a space of only 5 X 7^2 ^ ^ inches. In this
form it can be put together with complete field equipment into a slender leather box
in which it may be carried on excursions like a camera. It can be used on exposed
soil profiles with free hand (hand stand) or moimted on a special cross slide stand which
makes possible the attachment of the instrument directly to the profile wall and the per^
formance of more detailed investigations. In the laboratory the soil microscope can
be combined with a number of attachments for nearly every kind of vertical Ught illu-
mination (opaque illuminators, round mirror objectives, etc.). A special detaching
device on the frame making it possible to raise the tube of the microscope to a distance
of 6 inches between the objective and working plane was particularly useful for the
following investigations. With it it was possible to examine the 2 inch glass dishes used
in the eaq)eriment8, beyond the working range of the usual biological microscope.

The photographs were taken witii the micro-camera developed by Czerny
(C. Reichert — Vienna).

Concerning the investigation of soil fungi. Since loosened
soil of moderate water content was used in this work, especially good development of

270

Walter Kubiena and Charles E. Renn,

the fungi and actmomyces took place. Hence the chief part of work has been devoted
to the investigation of these groups of organisms. The observations and manipulations
upon these forms are relatively simple and particularly profitable. Micropmcers were
used extensively for the isolations of fungus mycelium. By transferring individually
selected spores and hyphae to artificial media pure cultures could be obtained dir-
ectly, without any intermediate manipulation. Generally, the following schedule of
working is advisable: (1) Photographing or drawing the species found, in situ. (2) Mea-
suring the soil spaces, noting all observations on organisms and their locations. (3) Iso-
lating mycelium and fruiting bodies on shdes for measuring and detailed investigation
with transmitted hght microscopes (soil forms). (5) Isolating the nutrient substrates,
determining the microreaction, and microehemical investigations of the locations.
(6) Investigating and measuring the organisms otbained on artificial media (culture
forms).

Artificial media used. In order to faciliate microscopic investigation
of the cultures with both vertical and transmitted light only transparent media were
used. On such media it was possible to observe all details of development and indi-
vidual selections for further work (culture forms) were easy to make. W o 1 1 j e -
agar was particularly suitable for nearly all fungi. The formula is as follows : 5 g
asparagine (in solution), 2.5 g KH 3 jP 04 , 1.26 g MgSOi, 37.5 g saccharose and 500 cc.
water, (S^/q adjusted to pH 4.5). Soil extract mannite agar

(600 cc. soil extract obtained by autoclaving 1 kg. soil; with 3% mannite and 2% agar,
pH 7) and sodium asparaginate-glycerol agar for actinomyces
(1 g Na-Asparaginate, 10 cc. glycerol, 1.5 g. agar, 100 cc. water, pH 7) were used also.

III. Arrangement of Experiment.

On the 31st of March 1933 the experimental dishes were filled with
added organic materials and soil from a ploughed field on the College Farm.
The soil was taken during a rainless pause of two days following a long
period of rainfall. It had Med to such an extent that it was just possible
to crumble it. With the microscope only a thin, glassy film of water
siUTOunding the crumbs was visible.

The moisture content of the soils taken at this time was about 15%
(or 34% of the water holding capacity). The samples were prepared under
sterile conditions. It was intended that only the native organisms of
the soil and the air of the field should be included in the system. Exper-
imental dishes and working tools were sterilized and the previously weighed
and prepared quantities of organic additions were brought into the field
in sterilized and sealed test tubes. In order to avoid chemical changes in
these only the cellulose was sterilized (lignin, zein, and gum arabic were
not treated). These latter were freshly prepared and well packed so that
they proved to be almost free from organisms in their original packages.
Special cultures mthout soil were prepared from the added materials in
order to determine the kinds of organisms which might have been present
originally in the additions.

Preparation of the soil samples: Sheets of waterproof
paper were unrolled from a sterile packet and spread on the ground. By
means of a metal spoon, sterilized over an alcohol lamp, a clod of freshly
taken soil was broken and crumbled. Then one of the glass dishes was un-
wrapped from its protecting paper, in which it had been sterilized, and fill-
ed loosely with soil. The remainder of the soil on the paper was discarded.
After having determined in this way the quantity of soil needed for filling
the dish, the soil was emptied from the Mh, placed on the paper again,
and mixed with the desired added materials. Finally the dishes were filled
once more with the mixture, covered, and labeled. One series was left without
additions. Between every filling the working tools were cleaned and rester-

Micropedological Studies of the Influence etc. 271

ilized over the alcohol lamp. Tt was intended thus to secure a soil sample
in a state corresponding to the loosened soil prepared for seeding.

Of course the original field structure of the soil had to be disturbed by the filling
of the dishes. But under the influence of the physical, chemical and biological processes
acting in it the soil is developing to a new, well-organized unit, in this case even to
a more or less compact body agam. Only the initial stage was modified, nevertheless
thoroughgoing alterations of this kind are apt to occur many times also in the field
soil by its cultivation, by big rain falls etc. A profitable investigation has to be perform-
ed by aU means (putting aside the necessity of opening the soil) at the undisturbed soil.

At the same time soil sections were cut out by micro-culture dishes
(see 10) in order to get some samples of the dense field structure given by
the earlier rain showers.

The experimental dishes. Special Pyrex glass vessels (Fig. 1)
obtained from Arthur Thomas Company, Philadelphia, were used in
this experiment. The smaller of these (diameter 70 mm. height 50 mm.,
manufactured under the name: Tanning dish. No. 4509) served to hold the

No. 6 micro. No.1

air

Fig. 1. Fig. 2.

Fig. 1. Experimental dish, a — lower part, b — cover, c — cork pieces strung on
rubber-band, d — cotton ring.

Fig. 2. Water and air conditions in the soil with dense field structure (dish No. 6
micro) and in loosened state (dish No. 1), Figures in volume percent.

soil, and the larger (diameter 80 mm., height 40mm., tradename: Crystalliz-
ing dish No. 4507) was used as the cover. By means of small brick-shaped
pieces of cork strung on rubber bands and held close to the wall of the lower
vessel it was possible to raise or lower the cover dish to any desired height.
For the greater part of the experiment the cover was adjusted to the highest
position to give an air space of about 140 cc. over the soil. When lowered
the cover permitted a microscopic investigation of the soil surface and of the
spaces opening upon it, much the same as with the micro-culture dishes.
Although only the lower magnifications (to about 150 x in some cases)
could be used it was possible to observe satisfactorily the development of
the micro-flora without opening the dish. The space between cover and
dish was filled with a strip of cotton wadding.

The micro-culture dishes, used for taking the soil in its original field structure,
have a diameter of 27 mm. and a height of 30 mm. They consist of a glass cutting
cylinder (for cutting out soil cylinders in an undisturbed condition), lying within a
slightly larger but snugly fitting culture dish, and a cover dish which can be raised
or lowered by means of a rubber band. The upper plate of the cover dish is of cover
glass thinness and optically perfect enough to allow undistorted observations of the
sou spaces opening to the sui^ace without necessitating the opening of the dish to the
air. This window is fixed to the side walls of the upper dish with heatproof and acid-
proof cement. The dishes can be obtained from C. Reichert, Vienna, or from

272

Walter Kubiena and Charles E. Renn,

Pfaltz & Bauer, New Yoik. The details of the technique foi their use will be
explained in another place.

Order of experiments. The experiments were run in parallel.
One dish of each series was temporarily opened in order to conduct isolations
and transfers of organisms to artificial media. The other dish was constantly
kept closed to avoid the influence of laboratory contamination. Besides
these regular dishes some other dishes had been filled one or two days be-
fore for the study of the organization of the experiment and the determination
of the quantity of added materials most convenient for microscopic obser-
vations. After it was established that the conditions in these dishes were
essentially the same as those in the regular ones they were added to the
experiment. In most cases the soil in these dishes became consolidated after
some time into a more or less compact cylinder. These were removed when
the experiment was half complete to perform investigations upon the inside
of the soil body. The total number of dishes, including those taken from
the preliminary experiment was: Cellulose 4 (1 micro culture dish), Lignin 3,
Zein 3 (1 mieroculture dish), and 6 without additions (4 micro culture dishes).

Soil used. The podzolic soil was a gravely Sassafrass sandy loam
bearing no vegetation at the time the samples were taken. The grain sizes
of the surface soil according to the international grain grouping scale were:
clay (< 2 /it) 8.0%, silt (2 to 20 //) 33.5%, fine sand (20 to 200 /i) 44.9%,
coarse sand (0.2 to 2 mm.) 13.0%. It contained 2.5% humus on the average,
0.137% total nitrogen, the reaction in suspension was pH 6.1.

Added materials: The cellulose used was divided into
white filaments about 20 /i in thickness. It could be observed in the soil
as small masses about 500 to 700 ft (Plate I, figs. 4, 5). Prior to application the
cellulose was sterilized. Lignin was added in the form of minute splint-
ers about 20 to 700 ft in diameter. This was not sterilized but cultures of
pure lignin in sterile tap water gave no growth of organisms. The zein, too,
was used in its unsterilized state and appeared as pure white grains about
50 ju to 1 mm. In check cultures some colonies of short rod-like bacteria
developed together with one colony of a Penicillium. These organ-
isms were not observed in the soil. The zein itself is white and practically
insoluble in water. Later, in the soil, the grains took on a yellowish color.
The gum arable used appeared as small, colorless, crystal clear, particles
about 10 to 300 ft in diameter. A check culture without soil gave in one
case a single colony of a yellow Aspergillus — not observed later in
the soil.

IT. Short description of the progress of the experiment.

The dishes were kept in the laboratory and no water was added during
the course of the experiment. All changes in the soil were observed micro-
scopically during a period of 1% month. Any newly appearing organisms
were isolated at once and transferred to artificial media.

Within one day after the beginning of the expanment the cellulose
dishes showed a stimulation of microbie activity. The small masses of cellu-
lose showed filaments of mycelium and yellow colonies of a cellulose-decom-
posing bacterium.

3rd day — The development of mycelium was h^hest in the zein
dishes. These were also distinguished by their strong earthy smell.

Micropedologioal Studies of the Influence etc.

273

4th day — Chalky white fruiti^ bodies of Gunninghamella
appeared in all zein dishes; also fruiting bodies of Hyalopus sp. The
development of colonies of Actinomyces were observed both on zein
particles and on soil particles infiltrated with soil solution. Sporadic, dense,
well formed spirals of actinomyces could be seen. Some newly developed
fungus mycelium was observed in the dishes of all series. Particularly favor-
able growth of mycelium was noted in the cellulose dishes.

5th day — The zein dishes showed luxuriant development of mycelium
and fruiting bodies, namely, Gunninghamella and Hyalopus.
The colonies of actinomyces still dominated.

7th day — It was observed that species of Actinomyces which
attacked zein particles directly consumed them quite rapidly (Plate II,
Fig. 13-14).

8th day — All gum arable dishes showed numerous conidiophores of
Penicillia which were absent in dishes of the other series. In the zein
dishes fruiting bodies of G 1 i o c 1 a d i u m sp. appeared. This species was
the third most abundant fungus there.

After 12 days — The development of fruiting bodies could be seen
also in the soil without organic additions, namely conidiophores of Y e r t i -
cillium chlamydosporium Goddard, besides conidiophores
of Gliocladium sp. Both forms appeared to a certain extent in the
dishes of all series. In the zein dishes the first fruiting bodies ofFusarium
could be observed. In the cellulose dishes the development of mycelium
exceeded that of all other dishes. However, there was scarcely any develop-
ment of fruiting bodies up to this time. Of the types of mycelium a golden
yellow form was particularly striking. It was identified later as the hyphae
of H u m i c 0 1 a sp. The major part of the other white mycelium was deter-
mined after transferring fragments of hyphae to artificial media and later
also by the development of fruiting bodies of Verticillium chlamy-
dosporium in the soil. Hematodes and mites were especially
abundant in the cellulose dishes.

20th day — The lignin dishes showed numerous colonies of actino-
myces, also colonies growing directly on large lignin particles (Plate II).
In one of the lignin dishes (No. 11) conidiophores of Botrytis cineria
could be observed.

22nd day — The conidiophores of Hyalopus were the most
abundant of all fungi in the zein dishes. Their hyalme, slimy heads began
to dry. They became white and irregular in outline, and it was possible to
distinguish single conidia in their mass. They were so numerous that all
parts of the soil were covered with them.

28th day— The first fruiting bodies were observed in the cellulose
dishes, chlamydospores of H u m i c o 1 a sp. At the surface of the soil without
additions white, wooly colonies of Actinomyces developed, especially
at the borders. The actinomyces in the lignin dishes were stiU mu^ more
abundant than in the dishes without additions.

After the 39th day— Henceforth the dishes showed only little loss
of wdght, and the soils appeared entirely dried. In the final state fruiting
bodies of Acrotheeiumsp. could be observed on dry plant roots.
In the zem dishes the conidiophores of Hyalopus, formerly very numer-
ous, had disappeared entirely. Among the most abundant species were long,
compact, dried Penicillium forms of Gliocladium sp.; colonies

Zwelte Abt. Bd. 91. 18

274

Walter Kubiena and Charles E. Benn,

of F u 8 a r i u m sp. 'which had been developed more rapidly in the last
period; and some conidiophores of Cnnninghamella ■with conidia
falling off in dryii^.

The soils of the other series showed more or less the same microbiological
composition as before.

Y. Special microbiological investigations and analyses of the locations.

A. Soil without additions.

1. Verticillium chlamydosporium Goddard.

Description of the locations. The soil in its original field
structure showed a flat, washed, smooth surface in which coarse, almost
bare sand grains free of visible colloidal films or crusts of silt were sticking
out. Often strong marginal splits caused by the shrinkage of the soil body
were formed about the larger sand grains, giving a favorable cite for the
development of fruiting bodies. The surface, in addition, contained a num-
ber of round lacunae with a diameter of about 300 to 700 fi.

TTie highest development of mycelium and fruiting bodies, however,
was foimd in the marginal split between the soil body and the side walls
of the microculture dish. All of these spaces give better conditions for fungus
development than the rather dense, smooth surface.

In spite of the dense surface the inside of the soil body was rich in spa-
ces, especially water tubes diameters of 200 to 400 fi. The walls of
these transversely irregular, winding tubes were dense, shiny, and almost
smooth. They were caused, evidently, by the subsiding of the loose soil
particles through the action of the flowing water in the tubes. (Their form-
ation can be demonstrated by letting minute drops of water drip into a
dry, sandy soil of dense structure through a small pipette.) In these tubes
some mycelium of the size and type of Verticillium chlamydo-
sporium -was always found, sometimes easily identifiable by their dev-
elopment of sparsely fruiting bodies. The hyphae originated directly from
the soil parts infiltrated 'with soil solution. The reaction of these parts was
pH 5.8— 6.0. They consisted mainly of sand grains between which silt par-
ticles were embedded to give a more or less dense structure. Under higher
magnifications it could be seen that the mineral particles were surrounded
by a very thin, light yellow colloidal film — somewhat slimy in its moisten-
ed state.

In the artificially loosened soil the soil spaces represent-
ed mainly the intervals between the small soil clods. These round clods
had a diameter of about 0,3 to 5 mm.; the variously shaped, connected spa-
ces between them, about 0.2 to 3 mm. These components were not crumbly,
but, examined half way through the experiment, showed a dense structure
■mth smooth, somewhat silvery surfaces, infiltrated 'with tiny pores. The
air conditions throughout the soil had improved at this stage. The soil in
micro-culture dish No. 6 (dense field structure) for example, showed 48%
solid parts, 20% soil solution, and 32% air by volume; that in ^sh No. 1
(loosened structure) 37.7% solid parts, 15.8% soil solution, and 49.5% air
(see Fig. 2). Yet me structure within the single clods of tbe loosened eoU
was more dense than that within the field soil, bn the numerous spaces of
the loosened soil mycelium and fruiting bodies ^ Verticillium chla-
mydosporium were found everywhere. However, in spite of the

Mieropedologioal Studies of the Influeiuie eto.

276

muclt better air conditions there was no increase in the number of species
of fungi and no particulaily great increase in the development of mycelium
as was found in the case of a number of other soils (10). The cause is evid-
ently the relatively bad nutrient condition. A slight amendment of nutrient
substances makes the spaces of this soil a perfect location for a great num-
ber of fungus species.

In the spaces opening to the surface of the soil a higher development
of mycelium and particularly of fruiting bodies were observed, as shown in
Plate I, Fig. 1. The species found here were the same as those inside the soil.

Verticillium chlamydosporium seems to be chcbracteristio also
of a number of other podzol soils of New Jersey where it was observed during the time
of this experiment and later. It was found m a forest podzol south of New Brunswick
where it was about the only species growing on soil colloids, while PeniciUium-like
conidiophores were seen on plant roots and fresh plant residues. Furthermore it w€U3
foimd m different varieties of Penn loams.

Soil forms. Fertile hyphae were always evident across the soil
spaces. They were unbranched as weU as one or two times dichotomously
branched, and when abundant, appeared as a net (Plate I). They showed
along their whole length a great number of more or less complete whorls
of side branches about 15 fj, long, each bearing at their end one single spore
— hyaline, oval, 2.6 to 5 |it long and 1.3 to 2 in diameter. No chlamydo-
spores were found in the soil.

Culture forms. Cultures were obtained by transferring conidia
as well as fragpients of mycelium from the colonies to artificial media. The
fine, cottony colonies were pure white, later cream; the reverse side yellow.
The mycelium was fine, septate, 1.3 to 2 in diameter. The conidiophores
and whorls were produced on side branches about 16 to 18 [x long. These
bore one single spore. The conidia, especially abundant in the beginning,
were oval, hyaline and 3.9 to 5.2 ju long and 1.3 to 2 ju in diameter. Besides
the conidia a great mass of chlamydospores were formed, particularly in
the later stages. These were slightly yeUow, irr^lar, 4 to 6 celled, up to
20 to 30 (i in diameter and appeared on side branches 10 to 20 fx long.

Diagnostical remarks. It may be stated only that the fungus found
very probably conforms with the form of Goddard isolated from the soil. The
question as to whether or not Verticillium chlamydosporium Goddard
can be looked upon aa a Verticillium will not be considered in this paper.

2. G1 i 0 cl a diu m sp.

Description of the locations. Gliocladium sp.
was nearly always found on little plant roots or more or less fresh residues
of plants. A little plant, mixed accidentally with the soil was covered by
conidiophores of Gliocladium sp., and showed on its white stem minute
Acrostalagmous - like conidiophores. On the green, well developed,
nitrogen rich leaf there were compact Penicillium - like conidiophores.
The Penicillium - like type dominated in the zein dishes, as will be
shown later.

Soil forms. The Acrostalagmus - like conidiophores grew
directly out of the substrate. The stem had a length of about 50 /t; the
small crystal, clear, hyaline, globose Acrostalagmus - like heads had
a diameter of 10 to 15 (i.

Culture forms. Cultures were made of the Acrostalagmus
type as well as of the Penicillium type which conformed to both.

18 *

276

Walter Kubiena and Charles E. Bonn,

The colonies were round, white, and the reverse side yellowish. In a later
stage they were greasy, mealy, formless, with brownish scabs. The conidio-
phores were verticilliately branched, the sterigmata cylindrical to slightly
flask-shaped, about 18 (i long and 3 (i wide. The conidia were irregularly
formed, more or less oval, about 6.5 to 7 /t long and 4 jtt mde. They were
accumulated generally into long, compact columns of chained conidia, but
occurred sporadically as slimy spore balls (larger than in the soil) or in tran-
sition forms of both.

3. Actinomyces sp. 5.

Description of the locations. The species was also found
in mineral soil parts infiltrated with soil solution — most abundantly and
best developed on the surface of the soil, mainly near the rim of the dish.

This zone, representing the part of highest evaporation followed by an
accumulation of the remaining inorganic and organic substances from soil
solution, showed an increase of the pH of about 0.2.

Soil forms. The colonies were very loose, consisting sometimes
only of a number of single filaments radiating out of the soil. The more
dense colonies were white and cottony. Spirals could not be observed.

Culture forms. The colonies on sodium asparaginate agar were
tender, translucent, almost C o 1 i - like, somewhat bluish or yellowish (also
in old and hardened stage). Under the microscope the surface of the gel
mass was observed to be interspersed with filaments. There was no layer
of aerial mycelium. The mycelium had a diameter of 0.9 /f, the sightly oval
spores ware about 1 by 1.2 [i.

4. Actinomyces sp. 9.

Description of the locations. The species was found in
the same locations as the preceding ones, but was more abundant in the
lignin dishes.

Soil forms. The colonies were white, cottony, round, and cushion
like. Spirals were not observed.

Culture forms. The species grew very slowly on sodium aspara-
ginate agar. The few colonies obtained were about 2 mm. in diameter, of
ochraceous color and with a smooth surface divided in sections somewhat
like a turtle shell. The mycelium was delicate and white, 0.9 to 1.0 fi in
diameter. The spores were round and about 0.8 p. in diameter. Ho spirals
were observed.

5. Acrotheciumsp.

Description of the locations. This fungus was found in
two of the mieroculture dishes containing soil in its dense field structure
(Nos. 4 and 6). It was always observed on white, more or less dry residues
of plants inside the soil during the last part of the experiment.

Soil forms. Mycelium was rather rare. Most conidiophores wotc
observed growing singly directly out of the substrate ^late I, 2 and 3). They
were quite abundant in some locations. Their color under vertical light was
blackish brown and smokey gray-brown. Under transmitted light they were
transparent. They consisted of an imbranehed stem, septate, about 80 p
long and 3 p wide, bearing a verticil of 2 to 10 elongated, barrel-shaped coni-
dia, the lower parts of which were somewhat conical, organized to form a

Micropedologioal Studies of the Influenoe etc.

277

terminal head. These were 4 to 6 celled, about 20 to 25 pi long and 8 to
9.5 pi in diameter.

Culture forms. In spite of repeated transfers no colonies could
be obtained.

6. H y a 1 0 p u s sp.

Fruiting bodies of other species of fungi were observed only sporadi-
cally i. e. H y a 1 0 p u s sp. in No. 6 (micro-culture dish). This was the same
form which appeared so abundantly in the zein dishes.

B. Soil with cellulose.

1. Hu mi col a sp.

Description of locations. Although hyphae of H u m i -
cola were also found in other locations, their occurrence on the cellulose
wads and between the filaments was so dense that they formed there a dense,
golden, glittering net (Plate I). Sometimes the cellulose was entirely wrapped
up in mycelium. The tiny cellulose masses, infiltrated with soil solution
had a pH of 5.4 to 5.6. The individual masses varied in size from 500 to
700 pi in diameter and were distributed at distances of 10 to 20 mm. or greater,
from each other. Although Humicola was the most frequent form in
all cellulose dishes, it could be seen that it preferred locations on the surface
of the soil body, on the parts facing the cover, the sides, and the bottom.
Inside of the soil its development was much restrained. It gave the im-
pression of growing only in larger soil spaces.

Soil forms. The relatively strong mycelium was so striking that
it could be identified anywhere. Under vertical light it was brilliantly ir-
ridescent. The mycelium was highly branched and of a bright yellow color.
Development of conidia was not observed (Plate 1, 4). He ehlamydospores
appeared dark green-brown and did not develop until about one month
after the beginning of the experiment.

Culture forms. He colonies obtained by transferring single frag-
ments 'of the golden yellow mycelium on W6lt j e agar and soil extract
agar were at first gray, round, radiate, and woolly with a blackish gray-green
reverse side. Later these became gray, developed dark stains on the upper
side and sliU later, became uniforrnly blackish gray-green. The bright yellow
mycelium was knobby and irregular in form, about 1.3 to 5 /u in diameter.
The cell contents were granular. The conidia were very small, round, with
a diameter of about 1 pi. They were not very numerous, therefore exact
observations of the conidiophores could not be made. Hick-walled chlamydo-
spores, round, and in a few cases oval, 10 to 16 pi in diameter were found.
These were filled with granular material and contained drops of oil. Heir
color was intense yellow, the cell walls were hyaline, 1 jtt in diameter. The
undivided branches, bearing the ehlamydospores, had a length of about 25 pi.

Diagnostical remarks. Although up to now Traaen knew only hyaline
hyphae in the case of Hyalopus, this form must be considered as belonging to the
Mucedmeae on account of its bright yellow myoehum and other characteristics.
Thus it fits well in the genus Hximicola.

2. Verticillium chlamydosporium Goddard.

Description of the location. Mycelium of V e r t i -
eillium was also strongly developed in the cellulose dishes. On the sur-
face of the soil it was less abundant than Humicola, however. Loside

278

Walter Kubiena and Charles E. Benn,

the soil the Verticillium was observed to be almost the only fungus
present, growing on cellulose, particularly in the smaller soil spaces. Here
the development of Humicola was comparatively sparse.

Soil forms. Like Humicola, Verticillium was usually
found only in the form of rather luxuriously developed mycelium (Plate I, 5).
But in some cases, especially towards the end of the experiment, conidio-
phores were seen. These generally originated directly upon the cellulose
filaments. Sometimes erect eonidiophores, containing 3 to 4 whorls of fu-
tile side-branches were observed, but no chlamydospores were found.

Cultureforms. The colonies obtained by transferring fragments
of mycelium were identical with those obtained from the soil with no organic
additions.

3. Gliocladium sp.

This fungus was also present (eonidiophores), but in the face the luxur-
iant development of the other forms it was thrown into the background.

4. H y a 1 0 p u s sp.

Some eonidiophores of this fungus were found seven days after the
be ginuTTig of the experiment in dish No. 7. It did not occur in the other
cellulose dishes.

5. Actinomyces sp. 5.

Actinomyces were observed only sporadically. In one case alone
(dish No. 7), a colony of aotinomyces was found directly on cellulose fila-
ments. It was identified with Actinomyces sp. 6, found previously
in the soil without organic additions.

6. Cellulose-decomposing bacteria.

At the banning of the experiment on the rather moist cellulose fila-
ments yellowish colonies of a cellulose-decomposing bacterium could be
seen. Since none of the dishes were opened at this time (they were investig-
ated microscopically through the glass of the cover), and since the bacteria
soon disappeared after the luxurious development of the fungi, no cultures
could be made or further investigations performed.

7. Nematodes and soil mites.

The presence of this group was particularly strikii^ in the cellulose
dishes. They were observed mainly on fungus hyphae. Nematodes were
found in great numbers even during the more dry conditions which occurred
28 days after the b^inning of the experiment.

C. Soil with lignin.

1. Actinomyces sp. 8.

Description of locations. The species was isolated from
the l%nin particle shown in Plate II, 7 and 8. This fragment was about 650 ii
long and 200 (i wide. The reaction of the particle infiltrated with soil solution
was about pH 5. Some other lignin particles not showing colonies of actino-
myees had a pH as low as 4.2. The species seemed to prefer the lignin frag-
ments themselves to the soil in the vicinity. Aotinomyces growing directly
on the soil were mainly to be found in locations at the surface, near the rim
of the dish.

Micropedologioal Studies of the Influenoe etc. 279

Soil forms. The rather thick, white mycelium was formed into
well developed coarse, cottony colonies These were well defined (Plate II, 8).
Spirals could not be observed.

Culture forms. The small colonies on sodium asparaginate agar
were elevated, button shaped, 2 to 4 nun. in diameter, and esitended deep
into the medium. The upper surface was chalky white, sometimes wrinMed
and ochraceous with chalky white rims. The reverse side was yellowish with
whitish margins. Mycelium was strong with a diameter of 1,9 to 2 and
showed faveolate structure. Sporadic, rather long, cork-screw-like spirals
were observed.

2. Actinomyces sp. 9.

Description of locations. Th^ species was found both
on nodneral soil parts infiltrated with soil solution and on lignin particles.
In most of the mineral locations minute lignin splinters were found. Act.
sp. 9, as well as similar forms were especially frequent at the surface near
the rim of the dish.

Soil forms. The colonies were similar to those found in the soil
without added organic materials.

Culture forms. The morphology of this species was about the
same as the form previously described.

3. Actinomyces sp. 7.

This species was isolated from dish Ho. 11 where it was growii^ on
lignin particles as well as on mineral soil particles infiltrated with the soil
solution. It was similar in appearance to Actinomyces sp. 8, having
a rather thick mycelium, but lacking its alveolate structure. The colonies
on sodimu-asparaginate ag;ar were dark red-brown to ochraceous brown,
wilh or without a white chalky layer. The surface varied from padded to
mesenterical appearance. The mycelium was 1.9 to 2.2 ju thick and could
be easily broken off into fragments, generally square, about 2 by 3.3 fi

4. Verticillium chlamydosporium Goddard.

Compared with the growth in the soil without organic additions the
development of mycelium and fruiting bodies was somewhat retarded. The
appearance was the same.

5. Gliocladium sp.

The occurrence of this species was more or less restricted to minute
plant roots and fragments of plant residues in the lignin dishes also. The
development was comparatively poor and the total quantity of mycelium
less. The fruiting bo(hes were always of the Acrostalagmus type.

6. Botrytis cinerea Pers.

Description of locations. It cannot be stated whether or
not the development of this fungus was favored by the addition of lignin,
since it appeared only in dish Ho. 11. Fruiting bodies and myc^um, though
luxurioudy developed, were seen only locally in spaces opening to the sur-
face. These spaces were rather large, 0.8 to 2 mm. in diameter, and extended
vertically downwards in ravine fashion. The fungus did not grow directly
upon the lignin.

280

Walter Kubiena and Charles E. Benn,

Though dish No. 11 was one of those later opened frequently, the first
opening was not performed before the appearance of this fungus.

Soil forms. The species was observed in the soil as blackish shrub-
like conidiophores with knotty branches bearing bunches of brownish-white
conidia. These occurred particularly at the knot-joints of the “twigs” (Plate I,
Fig. 6). Conidia were oval, about 6 by 10 /i.

Culture forms. The colonies which extended over the surface
were loose and brownish-gray. The conidiophores were unbranched or singly
branched, septate, and 10 to 20 fi thick. Their color was dark gray-brown,
slightly olive tinted. Towards the top they became lighter. The conidia
were arranged on fine points and warts of blunt branches. They were egg-
shaped, 9 to 11 by 6 to 7 n, and were covered with a hyaline, light brown
membrane. In a later stage the cultures developed numerous sclerotia about
90 to 180 ^ wide and 30 to 110 ix high. These were black on the surface
and dirty white on the inside. In some eases they bore newly developed
conidiophores.

D. Soil with zein.

1. Actinomyces sp. 10(chromogenous type).

Description of the locations. This species was among
the first developing organisms. They were distinguished by a strong earthy
smell which was in evidence by the second day of the experiment in all zein
dishes. It cannot be stated whether or not the species grew on the mineral
soil parts. In any case, it was the most abundant species growing on zein
particles. These were surrounded in the soil by a film of water which had
a reaction of pH 6.0. The particles, originally pure white, turned definitely
yellow a short time after the actinomyces had grown on them. Simul-
taneously they lost their opaqueness and became clear, glassy, and transparent.

Soil forms. Strongly developed, cushiony or lawn-like, cottony,
white colonies were first formed on the zein particles (Plate II, Fig. 10).
The substrate beneath became an intense yellow. Later the colonies spread
over the whole surface and finally the zein particles were entirely surround-
ed by a dense mantle of mycelium to give the appearance of chalky, white,
cottony balls (Plate II, Fig. 11). Spirals were not observed on this species
in the soil.

Culture forms. The colonies on sodium asparaginate agar were
round or irr^ular in shape with chalky, l%ht gray centers surrounded by
light brown coronas. The substrate was colored dark brown and the cultures
had a strong earthy smell. Mycelium was 0.9 to 1.5 n thick. The aerial
spores were either round or short ellipses, about 1.2 fi in diameter. Sporadic,
more or less open spirals were observed.

2. Actinomyces sp. 1.

Description of locations. The species was found both
directly upon zein particles and upon mineral soil parts infiltrated with soil
solution (which may be also mixed with minute zein particles). It could be seen
that the organism consumed the zein rather rapidly. This could be observed
particularly well where larger zein particles had been entirely embedded
in finely dispersed soil substances. After a short time aU visible parts of
the substrate were covered with mycelium, the zein particle became appre-

Mioropedologioal Studies of the lufluenoe etc.

281

ciably smaller, and a "wide space could be observed between it and the wall
of the cavity thus formed (Plate III, Fig. 13). In a later state the whole
particle was absorbed and only the cavity bearing the form of the initial
zein mass was left (Plate III, Fig. 14). The wall of this cavity was covered
with a layer of pink mycelium. Colonies of Actinomyces sp. 1, though
entirely absrat in the other dishes, were exceedingly numerous in the zein
dishes. This species, together with Actinomyces sp. 10 were the most
abundant. Both species were the only forms which could be observed attacking
the zein particles directly. Although the addition of zein brought about
luxurious development of a number of other fungi, none of these could be
found growing immediately upon the zein particles, but on mineral soil
parts infiltrated with soil solution, as though their growth was due to the
presence of soluble products or^inating from the added organic material.

Soil forms. The colonies appeared pinkish to rose-wood in color,
fine, velvety, low and dense. On the mineral soil components the colonies
were round, somewhat cushion-like. The mycelium was 1 to 1.2 in diameter.
The spores were short ovals, about 1 in diameter. Spirals were not observed.

Culture forms. The colonies on sodium-asparaginate agar were
round, sepia brown to dark sepia, up to 3 mm. in diameter and were for
the most part surrounded by a brownish white corona about 1 cm. wide,
or a narrow, intensely ochraceous-brown border.

The reverse side was dark sepia. The mycelium and spores were about
1 in diameter. Spirals were not observed.

3. Actinomyces flavus (?) Krainsky, emend.

Waksman and Curtis.

Description of locations. The species was growing on
mineral soil parts. Since it was not found in the other experimental (tishes
and was found repeatedly in the zein dishes, the addition of zein undoubtedly
mfluenced its development.

Soils forms. The species appeared in the form of white, cottony
colonies forming rather dense cushions at their bases.

Culture forms. The colonies on sodium asparaginate agar were
irregularly lobed, brown in the middle, with wide, sulfur-yellow, somewhat
brownish borders. In the center it was gray-white, with a chalky layer of
aerial mycelium. The reverse side was intense sepia in the center and
brownish yellow at the borders. The colonies were about 2 to 6 mm. in
diameter, and the substrate became brownish yellow in color. The dia-
meter of the mycelium was 0.8 to 1 n, the spores were oval, and from 0.8
to 1 ^ in diameter. Numerous coriscrew-like spirals were demonstrated
in the culture.

Diagnostical remarks. This species differed from that described by
Waksman (16) in that it typically formed numerous spirals on artificial media.
The mycelium and spores also seemed to be smaller in size than described by Krain-
sky (8).

4. Cunninghamella sp.

Description of locations. Mycelium and fruiting bodies
were in no case observed directly on zein particles but always grew on mineral
soil components infiltrated with soil solution, mostly rather distant from
the zein additions. The species was common to all zein dishes but did not

282

Walter Eubiena and Charles B. Benn,

appear in any others. Its location was limited to larger soil spaces
600 fi or more in diameter. In most cases these spaces were several milli-
meters in diameter.

Soil forms. The appearance of the species in the soil by vertical
light was very striking because of the comparatively large, chalky white
fruitii^ bodies with strongly reflecting stems (Plate II, Fig. 12). The coni-
diophores were non-septate, erect, mostly verticillately branched. Each
branch bore another whorl of branches with 7 to 20 conidial heads. The
conidia or%inated upon inflated heads on the tips of the terminal branches.
The highest conidial heads of the colonies were in some cases larger
than the others. Often tender, rhizoid-like hyphae originated at the first
whorl of branches. The conidia were oval, about 16 fi long and 12 /i
wide; they fell off comparatively early. Their walls were covered with long
spines.

Culture forms. Colonies spread completely over the surface
of the me^um and grew upwards to a height of 1 cm. In their early stages
they were white, later they became ash to brownish. The mycelium was
hyaline and had a diameter of 10 /i. It was partly septate mostly non-septate,
and in some cases showed granulation. The inflated head of the conidio-
phores was globose, somewhat drawn downwards, and varied in diameter
from 13 to 32 /j,. The conidiophores were dichotomously branched with a
larger terminal head in the center. The conidia were oval, 11 to 19 /m or longer
but averaging 14 in length. These were spined, though apparently not
so coarsely as were the soil forms. The contents were granular and the
conidia became brownish with age. The chlamydospores grew singly or in
groups directly upon the mycelium. They were brown and spiny.

Diagnostical remarks. This species seems to be quite similar to 0 u n -
ninghamella elegans Lendner, but differs from it in that the spores

are not like those drawn in L e n d n e r’s book (18).

5. H y a 1 0 p u s sp.

Description of locations. Eyalopus was found only on
mineral soil parts infiltrated with soil solution. Its development was
stro^est in the zein dishes where at one period it was the most abundant
species. It grew rather slowly and seemed to be critical of the water contents
of the substrate, the behest development occurring around the 22nd day
of the experiment, and disappearing entirely in later stages when the soil
became dner.

Soil forms. The mycelium was fragile and scanty and almost
invisible except when it was brought into relief stretched across the unillum-
inated soil cavities. The conicuophores were unbranched and awl shaped,
up to 300 ^ in length, hyaline or smoky, and bore thickened stems at their
bases. The heads were about 14 /t in diameter (Plate III, Fig. 16), h^hly
refractile, and slimy. Conidia were small and round. Contrary to most
Eyalopus forms jn the soil which are very delicate and easily destroyed
by the processes of isolation, this species was rather resistant. The lower
p^ of the conidiophore was especially tough, almost leather like, and rather
difficult to detach from its location.

Culture forms. In spite of repeated transfers to all of the prepared
media no cultures were obtained.

Micropedological Studies of the Influenoe eto.

283

6. Gliocladium sp.

Description of locations. In order of predominance it
was possible to establish three more or less distinct phases of development
and activity of organisms: anactinomyces phase, from about
the 1st till the 12th day; a Hyalopus phase, from about the 12th
till the 26th day; and a Gliocladium phase, from the 26th day
till the end of the experiment.

Gliocladium sp. which in this case was not confined to plant roots and
residues, developed abundantly in the last stage of the experiment. While
favored very strongly by zein additions, it did not grow directly upon the
zein particles. However, with Gliocladium roseum, it grew
relatively close to the zein masses. In the last period of the experiment,
when it was the dominant form in these dishes it grew especially close to
the added zein particles. The following picture could generally be seen:
in the center, a more or less decayed zein particle; about this a round, empty
space; and finally, a luxurious development of Penicillium-like coni&o-
phores, frequently in the form of a dense, re^lar ring. In other cases, as
in Plate III, 15, the ring form was only partially shown. The empty inter-
vening space due to antagonism might be 80 to 100 /i across.

Soil forms. The Acrostalagmus-like fruiting bodies, observed most
frequently in the soil without ad(htions, were seen here only sporadically,
while the Penicillium-type with chains of conidia joined in cream colored,
compact masses occurred generally.

Often the conidial chains were found in long, extended cylinders of
considerable length, with plume-like, curled upper ends. Whereas the
conidiophores in the soil without added materials grew more or less singly,
in the zein dishes they were always produced in colony-like formations.

Culture forms. Until the transfer on artificial media had been
pffljormed the identity of the fungus found in the zein dishes with the Glio-
cladium sp. previously isolated from the soil without additions could not
be established.

7. Gliocladium roseum (Link) Thom.

Description of locations. This species was found in but
one of the zein dishes (Micro 5) growing, as in the case of the preceding spe-
cies, in the immediate vicinity of the zein particles.

Soil forms. Mycelium and conidiophores appeared more or less
in colonies around zein particles. The conidiophores were pure white and
Penicillium-like.

Culture forms. The colonies on WSltje agar were white, flocose;
later pink to flamingo colored. The conidiophores were verticillately branched
and the sterigmata, flask-shaped, about 14 n long and 4 fi wide. The conidia
were hyaline, irregularly elliptical, and slightly apiculate; about 5 to 6
long and 3 to 4 wide, and bound into compact masses by means of slime.

8. Fusarium sp.

Description of locations. The fungus was not found in
any case upon the zein particles nor in their immediate vicinity. However,
it was observed in the zein dishes only. It was observed mainly on the sur-
face of the soil, although abundant conidia and some conidiophores were

284

Walter Kubiena and Charles E. Renn,

found on the bottom of the prepared and stained culture dish. Here the
conidia of Fusarium were more common than those of other fungi.

Soil forms. The species occurred only sporadically at the beginning
of the experiment but developed rather strongly towards the end. Besides
Glioeladium sp. it represented the next abundant form, though representing
a much smaller mass than Glioeladium. The conidia, small, sickle or spindle-
shaped, h^hly refractile, originated either in star-like sprays or formed
spindle-shaped heads of whorls on erect, unbranched conidiophores (Plate III,
Fig. 17). They also occurred singly on short, unbranched or diehotomously
divided side branches. Mycelium and fruiting bodies occurred singly as
well as in more or less well developed colonies.

Culture forms. The colonies on Woltje agar were pure white
with a cottony texture. On some media, as on potato agar (temporarily
used) they were yellowish. Conidiophores originated on racemous side
branches of hyphae about 5 n thick, septate, hyaline, and in some cases
yellowish. Side twigs were 30 to 80 (i long, either unbranched or diehoto-
mously branehfrig. The conidia formed heads on the tips of these side bran-
ches, varying wi&y in shape. As in the soil, the sickle-shaped conidia were
cemented together with slime to form spin^e-like heads about 22 n long
and 11 II wide. In addition cylindrical conidia about 12 jx long and 3 fx wide
were observed. These originated singly, doubly, or in larger groupings in
the form of a Cephalosporium. Sometimes large amount of slime gave them
Hyalopus characteristics. The normal, fully developed conidia were sickle
shaped and three to four celled, about 33 jx long and 5 {x wide. The chlamydo-
spores were globose, rough, toothed, and superficially divided into fields.
On the average their diameters were about 12 {x.

9. Penicillium lilacinum Thom.

Description of locations. This species was found only
in one of the zein dishes (No. 15) where it grew on tiny plant roots (Plate III,
Fig. 18).

Soil forms. The fruiting bodies were pink under vertical light.
They were vertieillately branched and about 200 ix long.

Culture forms. On Woltje agar the colonies were white in the
early st^es of growth. Later they became pale violet. The reverse side
was white to yellowish. Conidiophores were vertieillately branched and
bore dense verticils of flask-shaped sterigmata, up to 11 (x long and 4 ix wide.
The conidia were round or elliptical, about 2.6 or 2 by 2.5 {x in diameter,
and pale lilac in color.

10. Verticillium chlamy dosporium Goddard.

This fungus was present also in the zein dishes, but seemed to disappear
with the more luxuriant development of other species. Its growth did not
seem to be essentially favored in the zein dishes.

E. Soil with gum arable.

1. Penicillium sp. 1.

Description of the locations. A strikmgly strong deve-
lopinent of PeniciHia followed the addition of gum arabic. Two principal
species were observed. Penicillium sp. 1 preferred plant roots and plant resi-

Mioropedologioal Studies of the Influence etc.

285

dues as substrates which were covered with its conidiophores (Plate III, Fig. 19)
The rootlets and residues, however, were infiltrated with gum arahic solution,
demonstrated by the characteristic lustre and brownish coloration. One
small plant, consisting of a partly decayed stem and leaf part bore especially
strong developments of fruiting bodies of Penicillium sp. 1 upon the green
part of the leaf.

Soil forms. The conidiophores differed from Penicillium sp. 2 in
their size and relatively grosser structure. They were erect, 100 jj, or more
long, and originated directly from the substrate.

Culture forms. The colonies on Woltje agar were green gray
and upon the reverse side, dark green gray to dark brown. The mycelium
was hyaline, highly septate, and 5 ^ in diameter. The conidiophores were
for the greater part about 120 n long, dichotomous, and terminally verti-
cillately branched. But short stout conidiophores about 10 to 16 (i long,
both verticillately branched and unbranohed were also observed. The sterig-
mata, very numerous and densely crowded, originated at the tips of the
branches. These were slightly flask-shaped, about 10 ^ long and 3.5 fi wide.
The conidia were round to oval, and had an average diameter of 3.2 n.

2. P enicillium sp. 2.

Description of location. The species was found on mineral
soil parts infiltrated with dissolved gum arable and on undissolved residues
of gum arable particles. A particularly good growth was observed on the
marginal parts of the soil surface where evaporation was most rapid. Here
the concentration of gum arable was highest, due to the ascent of soil solution.

A large part of the gum arable added to the soil was dissolved. Un-
dissolved yellow residues of larger particles could be seen only rarely. These
grains represented favorable locations for the development of Penicillia.

The dissolved gum arable gave a darker color and a slight lustre to
the mineral soil parts that had become infiltrated with it. llie formation
of a thin, brown crust was observed on the surface of the soil, particularly
on the marginal parts and in the region of strongest growth of Penicillia.

The structure of the single soil crumbs was generally relatively dense
in these dishes — the reaction of these infiltrated crumbs upon which Peni-
cillia grew was about pH 4.6. Plate III, Fig. 20 shows a residual gum arable
particle surrounded by clay and silt particles from which fertile hyphae of
Penicillium sp. 2 are originating.

Soil forms. Residues of gum arable granules and soil particles
infiltrated with dissolved gum arable were covered with fine filaments from
which short, fragile conidiophores originated. These attained a length of
50 [I and bore a whorl of sterigmata on each tip.

Culture forms. The colonies on WSltje agar were green-gray,
the reverse side was yellowish, later brownish. The diameter of the mycelium
was 2 (i. The conidiophores were septate, unbranched, about 40 to 50 fi
lon^, and bore at their tips single verticils of cylindrical sterigmata 11 fi
long and 2.6 [i wide. The conidia were globular and 3.3 (i in diameter.

3. Yerticillium chlamy do sp orium Goddard.

The species was considerably favored by the addition of gum arabic,
so that its growth was at least quantitatively as strong as that of the Peni-
cillia. While the Penicillia were limited to the surface of the soil and to

286

Walter Kubiena and Charles E. Eenn,

wen aerated locations, Yertieilliuni was found in abundance within the soil
as weU. Here it represented, for the most part, the only species producing
fruiting bodies.

4. Gliocladium sp.

Conidiophores of this fungus were found but rather seldom.

6. Actinomyces.

The growth of this group of organisms was much restrained. Some
colonies appeared only sporadicaUy during the last period of the experiment.

TI. Besnlts and Conclusions.

A. General results. 1. The direct microtechnical method permits
the determination of the fungi and actinomyces actually growing in the
soil. In combination with the plate method it will be possible to eliminate
all species only present in the form of spores.

2. From the determination of the only active species in the soil a con-
siderable reduction of the number of species is obtained as compared with
the number brought out by the plate method.

3. The method permits not only of an easy isolation and cultivation
of the species observed but also of investigations upon their distribution,
their nncro-locations and microscopical substrates, their living conditions,
their kind and rate of activity and morphology in the soil.

4. Also by dmect investigation it coidd be found that every soil responds
more or less definitely to the addition of specific organic substances. The
relatively good conformance of repeated expaiments confirms this. The
microtechnical method of undisturbed soil in combination with the addition
method wiU be able to give information als oconcemmg the role and effic-
iency of different organisms in different soils.

5. A large number of organisms live in the soil solution, utilizing the
dissolved and dispersed organic compounds therein. The ad^tion of organic
compounds to the natural soil solution in one form or another brings about
great changes in the flora growing upon mineral substrates infiltrated with
the altered solution.

6. The number, species, and intensity of growth on the surface of the
soil differs from that inside the soil.

7. No essential differences in results could be observed between di ffbas
frequently opened to the laboratory air and those protected against labora-
tory contamination.

B. Species common to all dishes of one series.
Those species that could be observed uniformly in all dishes of any one series
of the experiment represented at the same time the most abundant forms
in that series. These are given in order of abundance and importance in
the various series in the following list. The figure in parenthesis indicates
the nuinba: of dishes examined in that series.

Soil with zein (3x): Actinomyces sp. 10 (chromogenes type).
Act. sp. 1, Act. flavus (?), Gliocladium sp., Hyalopus sp., E^sarium sp.,
Cunninghamella sp., Verticillium chlamydosporium.

Soil with cellulose (4 x): Humicola sp., Verticillium chlamydo-
sporium, Gliocladium sp., cellulose-aecomposing bacteria, nematodes, and
soil mites.

Mioropedologioal Studies of the Influence etc. 287

Soil -vrith gum arabie (2x); Penicillium sp. 2, Penicillium
sp. 1, Verticillium chlamydosporium, Gliocladium sp.

Soil with lignin (3 x): Actinomyces sp. 8, Act. sp. 9, Vrati-
cillium chlamydosporium, Gliocladium sp.

Soil without additions (4x): Verticillium chlamydo-
sporium, diverse species of actinomyces (among them Actinomyces sp. 6),
Gliocladium sp.

C. Species found sporadically. Organisms that were not
found uniformly in all experimental dishes of one series showed only local
development throughout.

Soil without additions: Acrothecium sp. (in micro 3),
Hyalopus (in micro 6).

Soil with lignin: Botrytis cineria (in No. 5).

Soil with cellulose: Hyalopus sp. (in No. 7), Actinomyces
sp. 5 (in No. 7).

Soil with zein: Gliocladium roseum (in micro 5), Penicillium
lilacinum (in No. 7).

D. Species listed according to locations.

1. On mineral soil parts infiltrated with soil solution:
Verticillium chlamydosporium, diverse species of actinomyces, among them
Act. sp. 5 (in all dishes) ; Actinomyces flavus (?), Cunninghamella sp., Hyalo-
pus sp., Gliocladium sp., Gliocladium roseum, Fusarium sp. (oidy in zein
dishes); Penicillium sp. 2 (only in gum arabie dishes).

2. On plant roots and plant residues: Gliocladium sp.,
Acrothecium sp.; Penicillium lilacinum (in micro 5 zein dish only); Peni-
cillium sp. 1 (in gum arabie dishes only).

3. On cellulose filaments: Humicola sp., Verticillium
chlamydosporium, cellulose-decomposing bacteria.

4. On lignin particles: Actinomyces sp. 8 (Act. sp. 9, Act.
sp. 7).

5. On zein particles: Actinomyces sp. 10 (chromogenes type),
Actinomyces sp. 1.

6. On gum arabie particles: Penicillium sp. 2.

7. In spaces over 600 Conidiophores of Cunninghamdla sp.

E. Micro-reactions of different locations:

Mineral soil parts infiltrated with soil solution: pH 5.8— 6.2.

Capillary water between cellulose filaments: pH 5.4— 6.6.

Water films on lignin particles: pH 4.2— 5.0.

Water films on zein particles: pH 6.0.

Water films on gum arabie residues: pH 4.6.

F. Difference between surface and interior of
the soil. For fungi and certain actinomyces the soil surface represents
a favorable location. This is not so true of the higher, more exposed parts
of the microscopic relief as of the soil spaces opening to the surface. On
these parts near the surface of the soil there is not only a generally stronger
devdopment of mycelium and fruiting bodies, but often also species that
are observably absent or rare within the interior of the soil.

Thus, in the cellulose dishes on the surface Humicola sp.
was found primarily, while Verticillium chlamydosporium
appeared relativdy scarce. In the interior of the soil Verticillium was observ-
ed to be moat abundant, while Humicola was almost entirdy absent.

288

Walter Kubiena and Charles E. Benn,

Better aeration at the surface of the soil favors the development of
fungi and actinomyces and the greater space there permits the production
of fruiting bodies. Here there is also a higher concentration of nutritive
substances brought about by the evaporation of the water from the ascend-
ing soil solution. This was particularly striking in the case of the gum
arabic dishes where the strongest growth of Penicillium took place in
locations where gum arabic was precipitated in greatest quantities from the
soil solution.

The laxger spaces inside the soil favor the growth and formation of fruiting bodies
" of fungi, this development was especially noticeable m cavities of several millimeters
or more. These locations represented better moisture conditions than that existing
at the soil surface and the variety and extent of the fungus flora often there exceeds
even that of the surface (See ref. 10, p. 521).

G. Conformity of samples from different points
of the field. The samples cut out of the natural field structure from
different parts of the field 'with microcxdture dishes indicate that the most
abundant autochtonous organisms are dispersed in the soil rather uniformly
over relatively large distances.

H. G e n e r a 1 c 0 n c 1 u s i 0 n s. (1) If we use S. W inogradsky’s
term the species of organisms found by direct investigation of the soil without
added organic materials represent the autochtonous flora of this
particular soil (19). This is understood to comprise the species growing on
all parts of the natural soil, including all of its characteristic plant and ani-
mal residues.

(2) In addition to the autochtonous flora actually capable of developing
in the natural soil, a large and more numerous latent flora can be distin-
guished. This is usually present in the form of undeveloped spores. The
addition of specific organic material activates a part of this flora which is
termed by Winogradsky as the zymogenous flora.

The change brought about by the adchtion ■will vary -with the chemical
nature of the added materials and 'with the living conditions in the soil
spaces. This use of additions corresponds to the treatment of cultivated
soil 'with different organic and inoi^anic fertilizers or other modifying
materials.

(3) Since the larger part of all organisms found in the soil free of added
organic materials and in the treated soil were able to grow on artificial media,
it may be assumed that they would have been determined by the plate me-
thod also.

(4) Since repeated attempts at transferring some species to artificial
media were not successful or 3 rielded cultures only with difficulty, it may
be anticipated that these would not have been found at all by the plate
method, or that their real role and distribution in the soil would not be re-
cognized (compare this paper V., D 6, Hyalopus sp.; see also ref. 10).

(5) Furthermore it may be taken for granted that not all microorganisms
capable of developing upon the plate will be able to develop in the soil even
if suitable nutrient conditions prevailed. This can be concluded from the
fact that under about the same food conditions more pretentious species
develop on the soil surface which are absent within the interior of the soil
because of other unfavourable living conditions (lack of space, bad aeration
etc.). They are replaced 'within the interior of the soil by more adaptable
forms (see this paper V., B, E and VI., F).

Mioropedological Studies of the Inflaence etc.

289

(6) The direct microscopic investigation shows that there are consider-
able morphological differences between the soil and the culture forms
of many organisms (see also ref. 10). It is likely that wide differences occur
also in their physiological efficiency.

(7) The preceding observations (3—5) indicate that the totality of the
organisms obtained by the plate method represent a flora comprising: 1. A
part of the autochtonous flora, and 2. the greatest part of all organisms
able to develop to zymogenous species, and 3. of species which, although
having found their way into the soil in the form of spores are either not able
to’ develop at all or if so, only on the soil surface. Since the plate method
provides a kind of summary statement of a large portion of all soil organisms
in one single convenient determination, it is likely to remain an indispensable
aid to soil microbiology.

TII. Discussion.

From the investigations of this paper it can be concluded that the direct
methods will not be able to supersede the plate and cultural methods, but
that they represent an accomplishment to the former methods which can-
not be dispensed with. The future of soil investigation will require a com-
bined application of all methods.

Because of the limited time and because of the circumstance that other
works were performed at the same time some investigations of this paper
could not be brought to an end. For the same reason a demonstration of
the method applying to the investigation of bacteria could not be carried
out. This will be achieved in a later publication. The actinomyces have
been characterized only morphologically. Since physiological investigations
are indispensable for their determination no account was taken for their
denomination.

From experience it was found advisable to work with a limited number
of series, but with a greater number of samples to each series, in each ex-
periment. If more extensive experiments are necessary it is advantageous
to work with small groups of series one after another rather than attempting
to organize them into a single experiment. Naturally, the more detailed
the observations &om a microtechnical standpoint, the more valuable the
results of the investigation become.

As to the laboratory organisms it was already observed in former in-
vestigations that they seem to have little influence upon the flora of the
experimental dishes, even when these were opened frequently (ref. 10). The
soil itself bears a great number of undeveloped spores of various types, but
few are able to develop there. Every soil seems to determine its own peculiar
flora. The chances of carrying contaminating air forms to the added organic
material in the soil are small. These matmals were finely divided, from a
few microns to 1 mm., and were added in very limited quantities so that
the individual particles were relatively widely separated — 10 to 20 mm.
from each other. The possibility of contamination by this means, then,
is limited to the chance that one germ may drop directly upon one small
particle. If such contamination occured it would involve only local develop-
ments.

TUI. Acknowledgment.

The investigations of this paper were performed in the soil microbiology
laboratory of Dr. S. A. W a k s m a n. W. K u b i e n a’s part of the work

ZweiteAbt. Bd.Sl. 19

290

Walter Kubiena and Charles E. Benn,

was subsidized by the Cook-Vorhees Research Foundation (see also ref. 12)
and C. Ren n’s assistance was made possible by appropriations from the
experiment station’s funds. W. Kubiena wishes to thank Dean
Dr. J. G. L i p m a n and Dr. S. A. W a k s m a n for their support and
the opportunity to carry on one year’s work at the New Jersey A^cultural
Experiment Station. The authors are much indebted to Dr. S. A. W a k s -
man for his kind advice in the planning and execution of the investigation.

IX. Deutsche Znsammenfassung.

1. Vorangehende Arbeit enthalt Dntersuchungen fiber den EinfluS
des Zusatzes versehiedener organischer Verbindungen (Zellulose, Lignin,
Zein und Gummi arabicum) zu einem podsoligen Boden der Yersuchsstation
des Staates New Jersey in New Brunswick, N. J., U. S. A. auf dessen Mikro-
flora.

2. Die Untersuchungen erfolgten durchweg mit Hiife „mikropedo-
logischer" Methoden, worunter „Methoden der direkten mikrotechnischen
Untersuehung unzerstfirter B8den“ verstanden werden. Sie wurden durch-
geffihrt mit dem Bodenmikroskop von "W. K u b i e n a (C. Reichert-Wien).
Ffir die Hohlraum>Aufnahmen wurde die Reichertsche Aufsatzkamera nach
Czerny verwendet.

3. Durch direkte nukrotechnische Untersuehung ist eine sichere Be-
stimmung dier im Boden tatsfichlich znrEntwieklung gelangendenPilze und
Aktinomyzeten moglich, wodurch in Verbindung mit der Plattenmethode
auch eine Bestimmung der groBen Zahl der nur in Form von Sporen im
Boden vorhandenen Aiten durchffihrbar gemacht wird.

4. Auf mikrotechnisohem W^e ist nicht nur eine leiohte Isolierung
und Kultivierung aller beobaohteten Arten moglich, sondem auch eingehende
Untersuchungen bezfiglich ihres Auftretens, ihrer Rolle und Formbildung
im Boden, der Eigenschaften und Lebensbedingungen ihrer Mikrostandorte
und mikroskopischen Substrate.

5. Da der Boden in kfinstlich gelockertem Zustande und mit mfiBigem
Wassergehalte verwendet wurde, war eine starke Begfinstigung der Pilze
und Aktinomyzeten zu beobachten. Eine zusamme^assende Liste aller
gefundenen Arten ist nach Versuchsserien geordnet in Abschnitt YI. B und C,
auf Mikrostandorte aufgeteilt in Abschnitt YI. D wiedergegeben. Abschnitt
YI. E gibt eine Liste der Reaktionen der verschiedenen mikroskopischen
Standorte, deren Werte von ph 4,2 — 6,2 schwankten.

6. Der Boden antwortete auf die Beimengung der Zusfitze in alien
FfiUen in deutlioher und eharakteristischer Weise, wobei die Ubereinstim-
mung der Ergebnisse innerhalb gleicher Yersuchsserien im all^emeinen eine
sehr gute war. Zwischen den Standorten an der Bodenoberflfiche und solchen
im mnern des Bodens zeigten sich charakteristisehe Unterschiede in der
Miyzdentwicklung und FruohtkSrperbildung, mehrfach auch im Auftreten
versehiedener Organismenarten. Wahrend an der BodenoberflSehe an-
spruchsvoUere Arten gediehen, besehrankte sich die Flora im Bodeninnem
auf jene Formen, die einer weitgehenden Anpassung an die dort herrschen-
den Standortsbedingungen fah% waren. Durch Parallelversuche konnte
festgestellt werden, _ daB der EinfluB der „Laboratoriumskeime“ auf
die Yersuehsergebnisse bei den hfiufig gefiffneten Yersuchsschalen ein
geringer war.

Micropedological Studies of the Isfluenoe etc.

291

7. Aus den in vorliegender Arbeit gemachten Untersuchungen ergibt
sich, daJB die Gesamtheit der mit der Plattenmethode ans dem Boden er-
haltenen Organismenarten sich aus folgenden Teilgruppen zusanunensetzt:
1. Aus einem Teil der autoehthonen Flora (bei der die Gefa^ eines
Zuriickgedrangtwerdens Oder Mchterfassens langsamwuchsiger oder schwer-
kultivierbarer Formen am grofiten ist); 2. aus einem GroBteile der z y mo-
g e n e n Flora — der durch organisehe Zusatze aktivierten bzw. aktivier-
baren Organismenarten (wobei das Ergebnis weitgehend von den verwen-
deten kiinstlichen Nahrbfiden abhangt); 3. aus einer Anzahl Organismen-
arten, die wohl in Form von Sporen in den Boden hineingelangten, in diesem
jedoch auch im Falle von organischen Zusatzen zufolge anderer unglinstiger
Bedingungen (Eaummangel, Luftmangel usw.) nicht oder nur an der Boden-
oberflache entwicklungsfahig sind.

8. Da die Plattenmethode imstande ist, einen Grofiteil aller im Boden
(entwickelt und unentwickelt) vorhandenen Organismenarten in einem ein-
zigen bequemen Arbeitsgange zu bestimmen, wird sie stets ein unentbehr-
liches Hilfsmittel im Dienste der mikrobiologischen Bodenuntersuohung
bleiben. Die direkten Methoden treten ihr indes als ein heute bereits unerlaB-
liches Erganzungsverfahren zur Seite.

RefereneeSs

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tralanstalt f. forsoksvasendet pd. jordbruksoznradet. Bakt. Avdeln No. 45. 8^. 1027.
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gradsky, S., Ann. de ITnst. Pasteur. T. 39. 1925. p. 299 — 366. — 20. Wino-
gradsky, S., Aim. de Tlnst. Pasteur. T. 40. 1926. p, 465 — 521.

Explanation of Olnstrations.

Plate I.

Pig. 1. Verticillium chlamydosporium. Loosened soil without
additions.

Fig. 2. A 0 r o t h e o i u m sp. on plant root. Soil in dense field structure
without additions (240 X).

Fig. 3. Acrothecium sp. seen under transmitted light (400 X).

Fig. 4. CeUulose peUet with mycelium of Humico^, sp.

Fig. 6. CeUulose peUet with mycelium of Verticillium chlamydo-
sporium.

Fig. 6. Botrytisoinereain soil with lignin (36 X ).

Plate II.

Fig. 7. Soil space containing mycelium of Verticillium ohlamydo-
p o r i u m and a HgniTi partide bearing two colonies of Actinomyces sp. 8 (36 X ).

19 *

292 Morphologic, Physiologic u. Systematik d. Mikroorgamsmcn; Virus-Unters.

Fig. 8. The lignin particle in Fig. 9 ma^ified 108 times.

Fig. 9. The bottom of the micro -culture dish prepared according to the Rossi-
Cholodny method, showing for the most part Actinomyces of the Actinomyces
sp. 10 (chromogenes) ajid Actinomyces sp. 1 types. In the lower right is a spore of Cun-
ninghamella sp..

Fig. 10. Zein particle with two colonies of Actinomyces sp. 10.

Fig. 11. Zein particle entirely encased in mycelium of Actinomyces sp. 10.

Fig. 12. Cunninghamella sp. Soil with zein (35 X).

Plate III.

Fig. IS. Zein particle encased and half digested by Actinomyces sp. 1.

Fig. 14. Zein particle almost entirely digested by Actinomyces sp. 1, leaving a
round empty space.

Fig. 15. Decayed zein particle surrounded bei Gliocladium sp.

Fig. 16. Hyalopus sp. Soil with zein.

Fig. 17. Bottom of the experimental dish with conidiophore of Fusarium sp.
and spindle shaped conidial head. Soil with zein.

Fig, 18. Penicillium lilacinum Thom growing on plant rootlets.
Soil with zein.

Fig. 19. Plant rootlet bearing conidiophores of Penicillium sp. 1. Soil with
gum arabic.

Fig. 20. Residue of a gum arabic particle with mycelium and Conidiophores
of Penicillium sp. 2.

Referate.

Morphologie, Physiologie und Systematik der Mikroorganismen;
Virusuntersuchungen.

MeEinney, B. A., The variant and filterable forms of
certain green-producing streptococci. (Joum. of Bact.
Vol. 27. 1934. p. 373—401.)

Die zu den Untersuchungen verwendeten Stanune stammten aus der
Mund-BachenhShle erkrankter Patienten. Die St9,mme wurden auf Blut-Agar
vorgezttchtet. Bei Fortzuchtung der Organismen auf optimalem JSf&hrboden
trat keine Spaltung auf. Dagegen konnten bei Fortzuchtung unter un-
gunstigen Bedingungen leicht Yariationsformen erhalten werden. Aus Eul-
turen, die unter ungiinstigen Bedingungen gealtert waxen bzw. die auf Nldir-
boden anderer physikalischer oder chemischer Zusammensetzung fortge-
zuchtet warden, konnten 3 verschiedene Varianten (nitritbildende Diplo-
kokken, diphtheroide StSibchen und spindelfSrmige StEbchen) erhalten wer-
den. Die diphtheroiden Stibchen lieBen sich durch Ziichtung aufLoeffler-
Serum und Glukose-Kalbfleisch-Lesui^ wieder in den Ausgangsformen Shn-
liche Streptokokken verwandeln. In ghnlicher Weise gelang es auch, die
Diplokokkenfonnen nach Passage iiber Blut-, Serum- und Ascites-NahrbSden
wieder in die Streptokokkenformen zu ubeifiihren. Diese Ergebnisse konn-
ten mit Hilfe von Einzell-Kulturen bestatigt werden. In Kulturen, die Diplo-
kokken enthielten and Granula-Bildung zeigten, konnten lebensfahige, fil-
trierbare Formen nachgewiesen werden. Diese wuchsen in erster Generation
sehr langsam ohne Triibang der Flussigkeit. Ausstriohe ergaben Diplokokken
angleicher Grdhe, in spateren Generationen wuchsen &plokokken abge-
platteter Form, die gramnegativ waxen. K i c h t e r (Kiel).

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-Unters. 293

Edwards, P. R., The differentiation of hemolytic strep-
tococci of human and animal origin by group pre-
cipitin tests. (Journ. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 527 — 534.)

Die Versuche wurden mit Stammen untemommen, die zur Gruppe der
wenig Saure bildpnden, Natriumhippurat nicht hydrolisierenden Gruppe
gehoren. Bereits in fruheren Arbeiten konnte Verf. eine Trennung dieser
Stamme in 3 Gruppen vornehmen, von denen 2 mit Sicherheit durch ilure
fermentative Leistung von Streptokokken mensehUchen Ursprungs getreimt
werden konnen. Bei der 3. Gruppe, dem Typus B Edwards, war dagegen
eine sichere TJnterscheidung nicht moglich. Die vorli^ende Arbeit erbringt
nunmehr den Beweis, dafi mit Hilfe der Prasdpitinreaktion eine derartige
TJnterscheidung moglich ist, wenn als Antigen salzsaure Extrakte der Orga-
nismen verwendet werden. Die Prazipitinreaktionen wurden nach der Me-
thode von Lancefield durchgefiihrt. Die 3 von Edwards aufgesteUten
Gruppen tierischer Streptokokken gehoren serologisch zu derselben Gruppe,
wahrend mensehliche Streptokokken einer anderen serologischen Gruppe
angehoren. Richter (Kiel).

Eaton, M. D., Studies on Pneumococcus variation. I.
Variants characterized by rapid lysis and ab-
sence of normal growth under the routine method
of cultivation. (Journ. of Bacter. Vol. 27. 1934. p. 271—291.)

Die vom Verf. imtersuehten Varianten der Pneumokokken zeichneten
sich dadurch aus, daB sie bei Ztichtung bei 37** einer sehr sehnellen Lyse
unterlagen, die entweder die Bildung von Kolonien auf Blutagar voUstandig
verhinderte Oder doch nur eine Bildung von kleinen, durchscheinenden
Kolonien gestattete. Die Varianten wurden daher von Verf. als Phantom-
kolonien bildend oder als P-C-Formen bezeichnet. Derartige Formen konnten
nicht nur aus Laboratoriumsstanunen, sondern auch aus frischem, klini-
schem Material gewonnen werden. Als beste Methods zur Gewinnung der
P-C-Fonnen erwies sich die Vorkultur der Pneumokokkenstamme auf Blut-
agar bei 25® bis zur Knopf chenbildung auf den Primarkolonien (3—8 Tage).
Die Knfipfchenbildung ist nach Verf. als Indikator fiir die beginnende Disso-
ziation anzusehen. Bei Weiterziichtung auf frischem Nahrboden bei 25®
treten dann die ersten Dissoziationen auf. Bei der Untersuchung des Wachs-
tums im Agar-Deckglaspraparat bei 37® zeigen die P-C-Formen normals
Entwicklung bLs zur Bildung einiger Ketten, dann beginnt eine Schwellung
der Organismen, auf die ein ZerreiBen und sehlieBlich Lyse folgt. Als tJber-
rest verbleibt ein gramnegativer Detritus. Die Erscheinung ist nicht auf
Phagenwirkung oder Autolyse zuriickzuflihren, da diurch Herabsetzung der
Oj-Tension bzw. durch Erhohung der COg-Tension die Erscheinungen voll-
standig unterdriickt werden konnen. Eine Rilckverwandlung in die Normal-
form war in vielen Fallen dadurch moglich, daB die P-C-Formen, die in
flussigen Blutnahrboden bei ph = 7,0 wachsen, allmShlich in immer alkali-
scheren NlihrbSden fortgeziiehtet wurden. Die Virulenz der P-C-Formen
war auBerordentlich versohieden, neben Stammen normaler Virulenz und
avirulenten Stammen fanden sich alle tlbergange. Richter (Eael).

Caldwell, M. E., Studies on dissociation of certain para-
typhoid bacilli. The r61e of variants in the preci-
pitation of calcium sulphite. (Journ. of Bact. Vol. 27.
1934. p. 121—162.)

294 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismenj Virus-Unters.

Bei der TJntersuchung von Stammen der Paratyphusgruppe konnten
in den Kulturen dunkle K6rper beobachtet werden, deren GroBe zwischen
5 und 15 II schvankte. Die dunkle Farbung war auf ^e Ausfallung von
Kalziumsulfit zuriickzufliliren. Vergesellschaftot mit dieson „Tliiosomen“
traten belle tocbterkolonieabnliche Gebilde auf, die als „atj^iscbe Tbiosomen“
bezeichnet werden. Es handelt sieh um Zellvarianten, die die Fabigkeit zur
Ausfallung von Kalziumsulfit besitzen. Die Varianten traten sowohl in
salzhaltigen als aueh in salzfreien Kulturen auf. Es ist moglich, daB der-
artige Varianten an der Bildung von Konkretionen bei bestimmten Erkran-
kungen des Menscben ursaeblieh beteiligt sind. Thiosomen konnten auBer
bei Paratypbusbakterien nocb bei B a e 1. 1 y p b i und B a c t. e o 1 i nacb-
gewiesen werden. E i c b t e r (Kiel).

Lemoigne, M. et Desveaux, R., Sur I’origine du defieit
d’azote des cultures mierobiennes a6robi^s. (Compt.
Rend. Aead. Sciences. Vol. 199. 1934. p. 384.)

Verf f . beobacbteten in Kulturen von Bacillus pyoeyaneus
auf Pepton als N-Quelle bemerkenswerte Verluste an Stickstoff, die weder
durch NHg-Verfliiehtigung zu erklaren waxen, noeh durch analytische Fehler
verursacht sein konnten. In den ersten Wochen nach Ansetzen der Kul-
turen blieb der N-Gehalt konstant, um dann nach Ablauf von 6 — 6 Monaten
bis zu 30% des Anfangsgebalts abzunehmen. Ohne dafiir den Beweis ge-
liefert zu baben, glauben Verff. aimehmen zu k5nnen, daB es sich um eine
Oxydation des bei der Peptonspaltung freiwerdenden Ammoniaks bis zum
Stickstoff handelt. Engel (Berlin).

Burk, D., lineweaver, H., and Homer, C. E., The specific in-
fluence of acidity on the mechanism of nitrogen
fixation by Azotobaoter. (Journ. of Bact. Vol. 27. 1934.
p. 325—340.)

Als MaBstab fiir das Wachstum wurde die Steigerung des Oa-Verbraucbs
in der Zeiteinhdt benutzt. Parallel hiermit geht die Zunahme der Triibung,
der Trockensubstanz und der Zahl der Organismen. Die Versuche ergaben,
dafi freier Ng bis zu einem pn von 5,0 als Nfthrstoff verwendet werden kann.
Die stiixkste Aufnahme ergab sich bei Ph 7,8. Eine Inaktivierung der Zellen
findet erst bei pa-Werten unter 5,0 statt. Gebundener Stickstoff kann bis
zu einer unteren Grenze von pa = 4,5 oder nocb weniger ausgenutzt werden.
Auch bier liegt das Maximum der Ausnutzbarkeit bei pa = 7,8. Die Aus-
nutzungskurven weisen jedoch typiscbe Untersehiede auf. Der Grenzwert
von Pa = 6,0 fiir die Ausnutzung von freiem Ng kann nicht versehoben
werden. Veranderungen des Ca- und Sr-Gehalts, sowie der Ng-Tension er-
wiesen sidi als wirki^slos. Die Michaelis - Konstante fur N-Fixation
ist von der Reaktion, dem Ca- und dem Sr-Gebalt unabbai^ig. Fiir das
N-bindende Enzymsystem wird der Name Azotase und fiir das fiir die Ng-
Biadung notwendige TeUenzym der Name Nitrogenase vorgeschlagen.

Richter (Kiel).

Hartsell, St, E., and Re^er, L. P., A taxonomic study of „Clo-
stridium putrifioum“ and its establisbement as
a definite entity — Clostridium 1 ent oputr esc ens ,
n 0 y. spec. (Joum. of Bact, Vol. 27. 1934. p. 497 — 517.)

Die Pkage, ob C 1. p u t r i f i c u m als Art anzuseben ist, ist neuer-
dings von Cunningham wieder aufgeworfen, der Cl. putrificum

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-Uaters. 296

als identisch mit B. cochlearis ansieht and nicht fur identisct mit
mit B. putrifieus Bienstoek halt. In der vorliegenden Arbeit wird
der Nachweis gefuhrt, daB Cl, putrificum sowohl von B. coeh-
1 e a r i s als aueh von dem von Cunningham als B. putrifieus
angesehenen Organismus verschieden ist. Von Cl. cochlearis unter-
scheidet er sich in morphologischer Beziehung durch die Sporenform und
in physiologischer Beziehung durch sein Verhalten gegenuW Kohlehydraten
sowie durch die Fahigkeit zur Proteolyse. Ein genauer Vergleich mit dem
von Bienstoek aufgestellten Typ ist nicht mSgUeh, daBienstoeks
Besehreibung zu ungenau ist, und da B. z. T. mit unreinen Stammen ge-
arbeitet hat, Es erscheint daher zweekmaBig, die Art neu zu benennen.
Als Name wd die Bezeiehnung Cl. lentoputreseens vorgesohlagen,
da die langsame Proteolyse ein hervorsteehendes Merkmal der Art bildet.

Richter (Kiel).

Sherman, J. M., and Cameron, 6. M., Lethal environmental fac-
tors ■within the natural range of gro'wth. ( Joum.
of Baet. Vol. 27. 1934. p. 341—348.)

Wahrend es bei Tieren und hSheren Pflanzen bekannt ist, daB plotz-
liche Anderungen der Umweltsfaktoren zum Tode flihren kSnnen, ist hier-
uber bei Bakterien nur ein geringes Material vorhanden. Verff. untersuchten
nun an Bact. coli, 'wie'weit plbtzliche Wechsel der TJm'weltfaktoren
auf die Lebensfahigkeit einwirken. Die bei diesen Versuchen vorgenommenen
Variationen hielten sich im Rahmen der naturlichen Wachstumsbedingungen.
Die Versuche zeigten, daB plfitzliche Sch'wanknngen der Temperatur und
Starke Veranderungen des osmotischen Druckes der NahrbSden einen groBen
Teil der Zellen abzutSten vermSgen. So starben bei einem plStzliehen Wechsel
der Ziichtungstemperatur von & auf 10® mehr als 90% der Zellen innerhalb
der ersten Stunde, wenn mit jungen Zellen gearbeitet trurde. Diese Ab-
totung konnte nicht beobachtet -werden, wenn der Wechsel langsam voll-
zogen -wurde. Andenmgen der Reaktion des Nahrmediums hatten keinen
EinfluB. Richter (Kiel).

Walker, H. H., TV^slow, C. A., Huntington, E., and Mooney, M. d.. The
physiological youth of a bacterial culture as evi-
denced by cell metabolism. (Journ. of Bact. Vol. 27. 1934.
p. 303—324.)

Die UntersuchuB^en Widen die Fortsetzung und ErgSnzung von friiheren
Versuchen der Verff., die festgestellt hatten, daB unmittelbar vor dem Bo-
ginn der Phase der logaritlunischen Vermehrung eine wesentliche Steigerung
der Zellaktivitat zu beobachten ist. Die vorliegenden Untersuehungen soil-
ten eine genauere Beurteilung dieses Problems ermSglichen. Als Test-
organismus •wurde der gleiohe Stamm von B, coli 'wie zu den frhheren
Versuchen verwendet. Als MaB fiir die Stoffwechsel-Energie diente die Be-
stimmung der gebUdeten Mengen von NHg und COj. Die Versuche ergaben,
daB am Ende der „Intobationsperiode“ und im Beginn der Phase der loga-
rithmischen Vermehrung eine erheblich stSrkere NHg- und COg-Produktion
stattfindet als zu Beginn der Versuche und wahrend der alteren Stadien
der Kultur. Die Steigerui^ der COg-Menge pro ZeUe gegeniiber der Anfangs-
produktion ist aUerdmgs nur derart, daB sie durch We GrSBenzunahme der
Einzelzellen erklart werden kann, wahrend die NHg-Produktion eine er-
heblich starkere Zunahme aufweist. Vergleicht man aber die in den ersten

296 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikrooiganismen; Virus-Unters.

Phasen der Vermehrung gebildeten Mengen mit den wShrend der Endstadien
der Vermelirung bzw. in der auf diese folgenden Ruheperiode gebildeten
Mengen, so ergibt sich fiir die Anfangsphasen fiir CO 2 eine bOfache und fur
NH 3 eine lOOfache Steigemng, trotzdem die Zellen hSchstens eine Venneh-
rung um das Zehnfacbe erfahren. R i e b t e r (Kiel).

Berry, J. A., and Magoon, C. A., Growth of microorganisms
at and below 0®C. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 780 — 786,
1 fig-)

Verff. geben zunSchst eine umfangreiche Literaturiibersicht uber Ver-
suche mit Mikroorganismen bei Temperaturen um 0® C und darunter. Bei
eigenen Versuchen zeigten bei — 4®C Pseudomonas fluorescens
und Arten von Lactobacillus, Torula, Monilia und Penicillium Wachstum.
Arten von Cladosporium und Sporotrichum wuchsen bei — 6,7® C. Da die
Eisbildung bei Versuchen unter 0® C den Organismen schadlich ist, miissen
NahrbSden gewShlt werden, die bei der Versuchstemperatur keine Eisbildung
zeigen. Bei Untersuchungen bei — 4® C konnte das durch Zusatz von 3%
NaCl zu Bouillon oder Agar erreicht werden.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Eriehel, B. M., A comparative bacteriological study of
a group of non-lactose-fermenting bacteria iso-
lated from stools of healthy foodhandlers. (Journ.
of Bact. Vol. 27. 1934. p. 357—372.)

Bei der Untersuchung von Stuhlproben von 127 Lebensmittelhandlem
fanden sich in 25 Proben Milchzucker nichtvergarende Bakterien, die auf
den ersten Platten grofie Ahnlichkeit mit pathogenen Stimmen aufwiesen.
Die genauere Untersuchung ergab, da 6 diese Stamme auf Grand ihres Ver-
gSrungsvermogens in 7 Gruppen eingeteilt werden kSnnen. Durch fort-
gesetzte Zuchtung in 5proz. Laktoselosung gelang es, den groBten Teil der
Stamme an Laktosespaltung zu gewShnen, 10 Stamme vermochten aller-
dings auch unter diesen Umstanden nur eine schwache Vergarang hervor-
zurufen. Nach Ansicht der Verf.n handelt es sich bei den untersuohten
Stammen um solche, die als Varianten des B. c 0 1 i anzusehen sind, da
sie bei der Fortzuchtung normale B. c 0 1 i abspalten. Richter (Kiel).

Mohr, W., Weitere Untersuchungen fiber den Bakte-
rienantagonismus innerhalb der gleichen Art.
(Arch. f. Hyg. u. Bakt. Bd. 111. 1934. S. 197—213.)

Der Bakterienantagonismus innerhalb einer Art konnte in vivo und
in vitro nachgewiesen werden bei den Pneumokokkentypen, Ruhrtypen,
Typhustypen und bei den Typen der Paratyphus-Enteritis-Gruppe. Der
Antagonismus aber beschrankt sich nicht auf Stamme verschiedener Typen,
sondern zeigt sich auch bei Stammen, die den gleichen Typen angehoren.
Es spielt dabei weder der quantitative Paktor der Menge noch der quali-
tative der Viralenz allein eine ausschlaggebende Rolle. Von maBgebuch^
Bedeutung scheint vielmehr ein weiterer Faktor zu sein, der vorlaufig mit
dem Begriff „KonkuiTenzfahigkeit“ umschrieben wird.

Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).
Rielsen, N., and Hartelius, V., Investigations of the growth
of Aspergillus niger at different hydrogen ion
concentrations, with and without the addition

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-TJnters. 297

of growth promoting substance B. (Comptes Rendus La-
boratoire Carlsberg. Vol. 19. 1931—1933. Nr. 15.)

Ohne Wuehsstoff lag das ph-Optimum fur das Wachstum des Filzes
bei etwa 3,0, wShrend in Gegenwart des Wuchsstoffes der optimale ph-Wert
zwischen 6,0 uud 7,0 lag. Der Anfangs-ph-Wert der NahrlSsung war fiir
die Wirkung des Wuchsstoffes von grofier Bedeutung. Je h6her dieser lag,
desto mehr Pilzmyzel wurde gebildet im Vergleich zur wuchsstofffreien Nahr-
losung. Nach StSgigem Wachstum setzte in den wuchsstofffreien Kulturen
Starke Autolyse ein. Diese blieb jedoch aus, falls der Anfangs-ph-Wert unter
2,1 lag. Auch die Konidienbildung war um so ausgeprSgter, je geringer der
anfangliche Aziditatsgrad war. Unter ph 2,1 fand keine Konidienbildung
statt. Engel (Berlin).

Hartelins, V., The occurrence of growth substance B
in urine. (Comptes Rendus Laboratoire Carlsberg. Vol. 19. 1931 —
1933. Nr. 18.)

Im Menschenharn wurden grofie Mengen des Wuchsstoffes B gefunden.
Die Mengen desselben stiegen mit dem Gehalt des Hams an Trockensubstanz.
Da6 es sich um den Wuehsstoff B handelte, zeigten die Eigenschaften des-
selben: Das Wachstum von Aspergillus niger wurde gefSrdert,
aber nur dann, wenn gleichzeitig noch ein Co-Wuchsstoff zugegen war; der
wachstumsffirdemde Stoff war thermostabil, wurde von HjOj nicht oxy-
diert und war unloslich in Ather. Da der Trockensubstanzgehalt des Urins
von der aufgenommenen Nahmngsmenge abhangig ist, und der Wuchsstoff-
mit dem Trockensubstanzgehalt parallel ging, stammte der Wuehsstoff
wahrseheinlich aus der Nahrung. Engel (Berlin).

Nielsen, N., Investigations on the assimilation of
growth substances by yeast from wort. (Comptes
Rendus Laboratoire Carlsberg. Vol. 20. 1934. Nr. 1.)

Der in Bierwurze befindliche, die Trockensubstanzbildung der Hefe
fordemde Stoff war unloslich in Ather und wurde durch Erwarmen mit HjOs
nicht zerstSrt. Er gehorte denmach der vom Verf. mit B bezeichneten Wuchs-
stoffgruppe an. Es konnte gezeigt werden, daiS die Hefe den Wuehsstoff
assimiliert. Da aber nur ein bestimmter Teil des Wuchsstoffes von der Hefe
aufgenommen wurde, wahrend ein anderer Teil in der Wiirze zuiuckblieb,
muB angenommen werden, daB es sich hier um 2 oder noch mehr Stoffe
handelt. Die Menge des von der Hefe assimilierten Wuchsstoffes war von
der Hefemenge sowie von der Einwirkungsdauer der Hefe auf die Wiirze
abhangig. Der assimilierte Anteil war kein metallischer Co-Wuchsstoff,
wie etwa angenommen werden konnte. Engel (Berlin).

Nielsen, N., and Hartelius, V., The separation of growth pro-
moting substances. (Compt. Rend. Laboratoire Carlsberg. Vol. 19.
1931—1933. Nr. 8.)

Der durch Rhizopus suinus gebildete, das Wachstum von
Hafer, Aspergillus und der Haferkoleoptile fSrdemde Wuehsstoff Rhizopin
erwies sich bei naherer Nachpriifung nicht als einheitlich. Er enthielt min-
destens zwei Stoffe: eine von Verff. mit A bezeichnete Substanz, die das
Wachstum der Haferkoleoptile fSrderte, iSslich in Ather war und durch
Oxydation leicht zerstSrt werden konnte; eine zweite Substanz B, die das

298 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-Unters.

Myzelwachstiun von Aspergillus niger forderte, unloslich in Ather
•war und nicht durch Oxydation unwlssam gemacht werden konnte. Ob
es sich bei den beiden Wuchsstoffen A und B wiedcrum um noch weiter
differenzierbare Substanzen handelt, soil ferneren Untersuchungen vor-
behalten sein. Engel (Berlin).

Nielsen, N., The effect of rhizopin on the product! oi
of matter of Aspergillus niger. (Comptes Kend. Laborar
toire Carlsberg. Vol. 19. 1931—1933. Nr. 6.)

Verf. zeigte, dafi Rhizopin, der von Rhizopus suinus gebildete
Wuchsstoff, nicht nur das Wachstum der Haferkoleoptile und der Hefe
fbrderte, sondem auch die Myzelbildung von Aspergillus niger
giinstig beetnfluBte. Je mehr Rhizopin gegeben wurde, desto besser wuchs
der Pilz, doeh war oberhalb einer gewissen Rhizopinkonzentration keine
Steigerung mehr zu erzielen. Auffallend stark war die nach Erreichung des
HSchstgewichtes einsetzende, nur in den rhizopinhaltigen Kulturen zu beob-
achtende Autolyse. Auch die Konidienbildung wurde durch den Rhizopin-
zusatz stark gefSrdert. Ob es sich bei der Forderung des Wachstums der
Hefe, des Schwarzschimmels sowie der Haferkoleoptile um ein und den-
selben Wuchsstoff handelte, muBte dahingestellt bleiben.

Engel (Berlin).

Eonokotina, A. 0., Savshinskaya, L. T., and Schultz, G. E., F a t yeast
and its practical importance. (Bull, of the State Inst,
of Agric. Microbiol. U.S.S.R. Vol. 5. 1933. p. 142 — 161.) [Russ. m. engl.
Zusfassg.]

Die schon wShrend des Krieges zum Zwecke der Fettgewinnung von
Lindner in Vorschlag gebrachte Hefe Endomyees vernalis
wurde von den russisehen Verff. u. a. auch auf gefrorenen Kartoffeln ge-
ziichtet, ebenfalls mit dem praktischen Ziel, ein neues Verfahren zur indu-
striellen Erzeugung von Fett ausfindig zu machen. Die Ausbeuten betrugen
bestenfalls 9% der trockenen Kartoffelmasse. B o r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Link, G. K. K., and Wilcox, H. W., Precipitin-ring test applied
1 0 f u n g i. n. (The Botanical Gazette. Vol. 95. 1934. p. 1.)

Es wurde der Versueh untemommen, gewisse pflanzenpathogeno As-
comyceten und Fungi imperfecti nach der serodiagnostischen
Methode zu klassifizieren. Es handelte sich vor allem um zahlreiche Ver-
treter der Gattung Fusarium und um einige nahe Verwandte, deren
Stellung noch unklar ist, die vielleicht nur Konidialstadien bestimmter Asco-
myceten sind und die nach der bekannten PrSzipitin-Ring-Methode evtl.
eingegliedert werden kSnnen. So wurden uber 20 verschiedene J^sarium-
arten gepriift, femer Cy lin dr o ear p o n album, Neurospora
tetrasperma, Sclerotinia fructicola u. a. Das Ergebnis
war nicht sehr befrie^end. In der iiberwiegenden Zahl der Falle versa^e
die Methode, d. h. die PrSzipitinreaktion war unspezifisch. Es zeigte sich
weiter, dafi die Art der Immunisierung der Versuehstiere, die Schwankungen
der H-Ionenkonzentration des Immunserums imd vor allem der Ant^en-
losungen, sowie die Schwankungen im N-Gehalt der verschiedenen Antigene
fiir das Versagen nicht verantwortlich zu machen waren.

Engel (Berlin).

Bames, B., Spore discharge in Basidiobolus ranarum
E i d a m. (Annals of Botany. Vol. 48. 1934. p. 453.)

Morphologies Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-Unters. 299

Die Versuche zeigten, daB der Pilz seine Konidien zum Lieht hin
schleudern kann, ahnlich wie der FliegenscMmmel Oder me Pilobolus. Die
Flughohe betrug bei den Versuehen des Verf.s 1 em. Der Pilz michs auf
Kartoffelextraktagar. Die gegenteiligen Beobachtungen Nowaks seheinen
damit hinfUllig zu sein und die alten Befunde E i d a m s zu Recht zu be-
stehen. Engel (Berlin).

Findlay, W. P. K., Studies in the physiology of wood-
destroying fungi. I. The effect of nitrogen con-
tent upon the rate of decay of Timber. (Annals of
Botany. Vol. 48. 1934. p. 109.)

Die Zerstbrung des Holzes von Pieea sitchensis durchTra-
metes serialis und von Fagus silvatica durch P o 1 y -
stictus versicolor konnte durch Zusatz verschiedener N-Verbin-
dungen wesentlich beschleunigt werden. Den groBten EinfluB in dieser Rich-
tung iibte Pepton aus, aber auch NH 4 NO 3 vermochte die Zersetzung des
Holzes zu fordem. Dieses Ergebnis war in Anbetracht der groBen N-iumut
der meisten Holzarten zu erwarten. Engel (Berlin).

Jorstad, Ivar, A study on Kamtchatka Uredinales. (Skrifter
Norske Videnskaps-Akad. Oslo, I. math.-naturvid. Klasse, 1933. No. 9.
Oslo 1934. 183 S., 22 Abb.)

Eine erschSpfende systematische Abhandlung des bekannten Myko-
logen iiber die auf der Halbinsel Eamtschatka bisher vorgefundenen 90 Rost-
pilWten. Von ihnen wurden angesprochen als paafische Arten 10, eurasia-
tische 23, eurasiatisch-westamerikanische 13, eurasiatisch-ostamerikanische 5,
amerikanische 1, zirkumpolare 38; insgesamt 90. — Sie verteilen sich auf
die einzelnen Typen wie folgt: Mikrofonnen 21 , Brachyformen 4, Autopsis-
fonnen 6 , Heteropsisformen 1, Auteuformen 16, Hetereuformen 36, vennut-
licheHetereufonnen4, Stellungfra^liehS. Kfihler (Berlin-Dahlem).

Birkeland, J. G., Serological studies of plant viruses.

(The Botanical Gazette. Vol. 95. 1934. p. 419.)

Es wurde der Versuch untemommen, &e an sich schwer klassifizier-
baren verschiedenen Virusarten nach der serologischen Prazipitin-Ring-
Methode zu unterscheiden. Es zeigte sich, daB das Antigen viruskranker
Pflanzen zusammengesetzter Natur ist. Es besteht aus dem Antigen nor-
maler gesunder Manzen und einer weiteren Antigenfraktion, die virus-
spesifisch ist und moglieherweise das Virus selbst ^stellt. Es gelang dem
Verf., die beiden Komponenten durch Filtration mit Seitz-Filtem mit nach-
folgenden bestimmten Reinigungsverfahren voneinander zu trennen und mit
der gereinigten Virusfraktion positive Prazipitinreaktionen zu bekommen.
Auf diese Weise erhielt er gut differenzierte Viren. HauptsSiChlich unter-
sucht wurden: das Virus der Ringfleekigkeit beim Tabak (Tobacco vi-
rus V J 0 h n s 0 n), das Virus der Mosaikkrankheit beim Tabak (To-
bacco virus I Johnson) und das Virus der “s p 0 1 necrosis"
(TobaccovirusIVJohnson). Engel (Berlin).

Duggar, B. M., and Hollaendei, A., Irradiation of plant viru-
ses and of microorganisms with monochromatic

300 Morphologio der MikrooTganismen. — Enzymologi© und Bakteriophagie,

Serratia mareescens as influenced by ultraviolet
and visible light. (Joum. of Bacter. Vol. 27. 1934. p. 219 — 240.)

Zu den Versuchen mirde als lichtquelle eine Hg-Dampflampe hoher
Energie verwendet. Die einzelnen WellenbezLrke wurden mit Hilfe eines
Monochromators aus dem gesamten Strahlengebiet gewonnen. Zur Mes-
sung der aufgenommenen Energie -wurden Differenzmessungen gegen Wasser
mit Hilfe einer hoehempfindlichen ThermosSule durchgefiihrt. Um wirk-
lich vergleichbare Werte zu erhalten, wurden die Bakterien gemeinsam mit
dem Virus in entsprechender Verdiinnung bestrahlt. Die Versuche wurden
mit 12 Wellengruppen im Bereich von 2537—6120 A durchgefuhrt. Fiir
das Virus ist eine inaktivierende Wirkung an Wellenlangen unter 3100 A
gebunden, die starkste Wirkung wurde durch Strahlen im Gebiet von 2662 A
ausgeiibt. Bei den Bakterien fiel das Maximum der Wirkung ebenfalls in
das Gebiet von 2652 A, ebenso scheint die obere Wirkungsgrenze bei 3100 A
zu liegen. Die Messungen der zur Inaktivierung bzw. zur Abtotung not-
wendigen Energiemengen zeigten, dafi die Bakterien wesentlich empfindlicher
sind als das gepriifte Virus, das VerhSltnis der notwendigen Energiemengen
betragt etwa 200 ; 1. Richter (Kiel).

Duggar, B. M., and Hollaender, A., Irradiation of plant viruses
and of microorganisms with monochromatic light.
II. R e sis t anc e to ultraviolet radiation of a plant
virus as contrasted with vegetative and spore
stages of certain bacteria. (Journ. of Bact. Vol. 27. 1934.
p. 241—256.)

Die zu den Versuchen verwendete Apparatur war gegenuber der frtiheren
etwas modifiziert, es wurde unter anderem eine neuartige Expositionszelle
v^endet und der gesamte Aufbau wesentlich vereinfacht. Ms Testorga-
nismen kamen B. subtilis (Sporen und vegetative Form) und B. me-
gatherium (Sporen) zur Anwendung. Besonderer Wert wmde auch
in dieser Arbeit auf eine mSglichst gleichmafiige Herstellung der Suspen-
sionen gelegt. Die Versuche zeigten, daB das Maximum der Wirkung bei
alien Stadien und Organismen wieder bei einer WellenlSnge von 2562 X
lag. Die Versuchebei B. subtilis ergaben ferner, daB kein groBer Unter-
schied in der Resistenz der vegetativen und der Sporenform vorhanden ist.
Die zur Erzielung einer gleichen AbtOtungs-wirkung notwendigen Energie-
mengen standen im Verhaltnis von ann^ernd 4 : 5. Die zur AbtStung
von Sporen von B. megatherium notwendige Energie war wesentlich
grSB^ als bei B. s u b t i 1 i s. Bei Wellenlangen oWhalb 3000 X war auch
bei diesen Versuchen praktiseh keine Einwirlmng mehr festzustellen. Verff.
halten jedoch i^ bisheriges Material noch nicht fiir ausreichend, um fiber
die Wirksamkeit bzw. vollstSn^e Un-wirksamkeit in diesem Gebiet siehere
Schlfisse zu ziehen. Auch bei diesen Versuchen war die Resistenz des gleich-
zei% geprfiften Virus -viel h6her als die Resistenz der Sporen, was darauf
zurfickgeffihrt wird, daB sie einer ganz anderen GrfiBenordnung angehfiren.

Richter (Eel).

Enzymoiogie und Bakteriophagie.

Stone, F. M., and Hohby, 6.L.,A coccoid form of G. diphtheriae
susceptible to bacteriophage. (Journ. of Bact. Vol. 27.
1934. p. 403- 417.)

Aus einem typischen Stamm von C. diphtheriae gelang es, durch

Enzymologie mui Bakteriophagie.

301

Fortziichtung auf Kalbfleisch-NShrlosung eine kokkeofornuge Variante zu
erhalten. Es gelang, gegen diesen Stamm und gegen 3 weitere StSiuame von
C. diphtheriae Bakteriophagea zu gewinnen. Die Bakteriophagen
konnten auBer aus Faeces von Kranken und aus Darminhalt und Peritoneal-
fliissigkeit infizierter Meerschweinchen nock aus alten Kulturen, die bei
Zimmertemperatur mehrere Wochen gestanden batten, gewoimen werden.
Als besonders empfindlich erwies sicb eine Einzell-Kultur der kokkenfdrmigen
Variante. Mit dieser Kultur gelang eine Steigerung der Empfindlichkeit
bis zur Verdiinnung 10-® fur den Baktaiophagen. Die kokkenfSrmige Va-
riante muB daber als das gegen Bakteriophagen empfindlicbe Entwieklungs-
stadium des C. dipbtberiae angeseben werden. Die kokkenfdrmige
Variante zeigte bei Meerschweincbenblut-Nabrbbden starke HSmolyse.

Richter (Kiel).

Plummer, H., The fermentation of Sorbitol and Tre-
halose by haemolytic streptococci from various
sources. (Journ. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 465 — 472.)

Gepriift wurden 328 Stamme mensehlicher und 18 Stamme tierischer
Herkunft. Von den Stammen mensehlicher Herkunft wtirden 49 nach den
bisher iiblichen Verfahren als tierischen Ursprungs angeseben werden, sie
zeichneten sieh aber samtlich dadurch aus, daB sie Trehalose, aber nicht
Sorbit vergaren koimten. In tlbereinstimmung mit den TJntersuchungen
von Edwards miissen sie daher als von mensehlicher Herknnft an-
gesprochen werden. Von den 18 Stammen tierischer Herkunft konnten 6
nicht durch die iiblichen Methoden von Stammen mensehlicher Herkunft
getrennt werden, 4 dieser Stamme stammten von Ktihen, die als TJrsaehe
epidemischer Halsentziindungen verdachtig waren. Richter (Kiel).

Collins, M. A., and Hammer, B. W., The action of certain bac-
teria on some simple tri-glycerides and natural
fats as shown by nile-blue sulphate. (Journ. of. Bact.
Vol. 27. 1934. S. 473—485.)

Die Untersuchungen sollten zeigen, ob Mlblausulfat als geeigneter
Indikator zur Erkennung der Fettspaltung von Bakterien angeseben werden
kann. Zu den Untersuchungen, die samtlich auf festem Nahrboden durch-
gefiihrt wurden, wurde ein Agar verwendet, der 0,5% Fett und 0,01% Nil-
blausulfat enthielt. Durch den Farbstoffzusatz werden die Triglyzeride
der Fettsauren rot gefarbt, die Farbung ist bei den Glyzeriden mit niedrig-
molekularen Fettsauren am intensivsten und nimmt mit zunehmendem
Schmelzpunkt mehr und mehr ab. Die freien Fettsauren werden blau ge-
farbt, auch hier ist die Farbung bei den niedrigmoleknlaren am intensivsten,
wahrend Palmitin- und Stearinsaure nur noch eine schwache Farbung auf-
weisen. Fettzersetzung durch Bakterien konnte bei Tricaprylin am leich-
testen durch ^s Verschwinden der Kiigelchen, bei hsheren Triglyzeriden
und bei natiirlichen Fetten besser durch den Farbnmschlag erkannt werden.
Glyzeride niedrig-molekularer Fettsauren wurden leichter angegriffen als
solche hsher molekularer. Richter (Kiel).

Collins, M. A., and Hammer, B. W., Types of lipolysis brought
about by bacteria as shown by nileblue sulphate.
(Journ. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 487—496.)

Zu den Versuchen wurde Bouillonagar mit Zusatz von 0,5% Butterfett
und 0,01% Mlblausulfat verwendet. Gepriift wurden insgesamt 159 Stamme,

302 Enzymologi© und Bakteriophagie. — Mikrobiologi© der Nahrungsmittel.

die aus Wasser, Milch und Molkereiprodukten stammten. Bei der Beurtei*
lung der Fettzersetzung Tvurde auBer gleichfSnniger und ungleicMermiger
Fettzersetzung (Umschlag der Farbo der Fettkiigelchen unter der Kolonie)
noeh die Frage der Diffusion der Lipase in den Nahrboden gepriift und be-
wertet. 102 Stamme verursacbten gleiehmaBige Lipolyse, der Kest ungleich-
mafiige. In beiden Gruppen fanden sieb Organismen, bei denen das Enzym
in versehiedenem MaBe in den Nahrboden diffundieren kann. Innerhalb
einer Art zeigten die einzelnen Stamme versehiedenen Typ der Zersetzung,
wahrend die Stamme stets den gleieben Zersetzungstyp aufwiesen. 113
Stamme zeicbneten sich durch Proteolyse aus, 82 wiesen sehr Starke pro-
teolytiscbe Erscheinungen auf. Bei Einimpfung in sterilen Eahm (3 com
Kultur auf 600 cem Rahm) vermochten 80 Stamme die aus dem Babm her-
gesteUte Butter ranzig zu macben, diese Stamme mesen im aUgemeinen
gleicbmaBige Fettzersetzung auf. E i c b t e r (Kiel),

Sanlelice, Fr., Der Antagonismus des Milzbrandbazillus
gegeniiber dem Bact. coli. (Archiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 110.
1933. S. 348—354.)

Die Yersucbe lassen den SchluB zu, daB die Colibakterien in Tiro und
in vitro ein Enzym zu produzieren vermogen, das eine antagonistiscbe Wirkung
g^enliber dem Milzbrandbazillus ausiibt. Das Enzym kann Porzellan-
kerzen nicbt passieren. Eodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).

Bireb-Hirscbfeld, L., Versucbe zur Analyse der Pyocya-
n a 8 e. (Ztscbr. f. Hyg. u. Inf ektionskrankb . Bd. 116. 1934. S. 304
-314.)

Die bakterizide Wirkung von Pyocyanaselfisung beraht auf ihrem Ge-
balt an bocbmolekularen Fettsauren, <b.e zum grSBten Teil in Form loslicber
Salze, zu einem nur ganz geringen Teil aucb als freie Sauren vorliegen. Die
hamolytiscbe Wirkung der Kulturlosungen ist ebenfalls an die Gegenwart
der Fettsauren gebunden. Die von Fettsauren befreite PyocyaninlSsung war
bakterizid unwirksam. — Zur schnellen Erzielung konzentrierter Pyocyanase-
Idsung erwies sicb die Kultur auf Zellopbanagar geeignet.

Eodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).

Mikrobiologie der Nahrungs-, GenuB- und Futtermittel.

Grass!, L., Die Hygiene der stadtischen Milchver-
sorgung. X. WeltkongreB f. Milchwirtsebaft Eom-Mailand 1934.
n. Sekt. B, Generalbericht.

Einleitend wird ausgefiibrt, daB die Hygiene der stadtischen MUcbver-
sorgung ein soziales Problem ist. Dieses zeigt drei grundsatzlicb
verschiedene Seiten, von denen jede auBerordentUch wicht^ ist. Sie be-
treffen; 1. Erzeugung und Transport, 2. Gesundbeit-
liebe Sicherung durch Erbitzung, 3. Vert eilung. Zu 1, Die
drd Grunddemente bygieniscber Mlcbgewinnung sind GesunSieit der Tiere
und Melker, Eeinlichkeit und Kiiblung; sie biiBen ihre Bedeutung keines-
w^ ein, wenn die Milch spater pasteurisiert wird. Zur Durchfuluui^ by-
gieniscber Mchgewinnung wird die obligatorische Kontrolle
am Gewinnungsort gefordert. Diese muB in zweierlei Weise in die
W^e gdeitet werden, namlich durch vorlaufigen Besucb zur
Festst^ung der Stallverhaitnisse usw. und durch periodische Kon-

Mikrobiologie der Nalmmgs-, GennS- und Futtermittel.

303

trollinspektion. Zu2. Auch eine hygienisch einwandfrei gewonnene
Milch bietet infolge evt. nachtraglicher Infektion keine Sieherheit gegen-
iiber Krankheitskeimen, weshalb sie durch schonende Erhitzung
in einen vom gesundheitlichen Standpunkt aus sicheren Zustand iiberzu-
fiihren ist. Hierbei sind einige Grundprinzipien festzuhaJten, die von der
italienischen Gesetzgebung vorgesehen sind; a) die Mich von der pathogenen
Flora zu befreien ohne ihren Feinaufbau zu verfindem; b) der Ortsbeh5rde
die Befiignis zuzuerkennen, die Pasteurisation der gesamten fiir die stadtische
Versorgung in Frage kommende Milchmenge als obligatorisch zu erklaren;
c) die Milch vor der Pasteurisierung auf ihren hygienischen Zustand zu
priifen; d) naeh der Pasteurisierung die bakteriologische KontroUe anszu-
fiihren, um sieh fiber die rationelle Diurchffihrung des Verfahrens zu ver-
gewissem; e) die Gesamtmenge der pasteurisierten Mich auf Flaschen ab-
zuffillen mit Ausnahme der koUektiv gelieferten Milch (Schulen, Spitfiler),
die auf Wunsch der Abnehmer in Kannen abgegeben 'werden kann; f) eine
systematische KontroUe der Pasteurisieranlage durchzuffihren, um sich fiber
deren fortwfihrend regelmfiBige Funktion zu vergewissem. Wo keine
Pasteurisierung in dem ausgefuhrten Sinne mfigUch ist, mu6 das Auf-
k 0 c h e n der Mich zuhanse empfohlen 'werden, als dem einzigen Mttel
die Gefahren abzuschwfichen, die eine Mich oft unbekannter Eerkunft in
sich bergen kann. Zu 3. Die zum Yerkauf kommende Mich kann zwei QnaU-
tfiten aufweisen: a) gewShnUche rohe Mich, ohne jede Zennzeichnung,
b) pasteurisierte Milch.

Die gewohnliche MUch soli im MaBe des hygienischen Fort-
schrittes verschwinden; bis dorthin ist daffir zu sorgen, daB wenigstens der
0 f f e n e Yerkauf mfiglichst unterbunden -wird. Ffir Se pasteurisierte
Milch kommt nur der Yerkauf in Flaschen in Frage. Besondere
Aufmerksamkeit ist auch den Milchlfiden zu schenken. Ffir deren
Zulassung mfissen folgende Yoraussetzungen erffillt sein:

a) Gfinstiger hygienischer Zustand des Yerkaufslokals;

b) gfinstiger Gesundheitszustand der mit dem Yerkauf beschfiftigten
Personen sowie deren FamiUenmil^lieder;

c) Yorhandensein aller geeigneten Mttel, um die r^elmfiBige Reinigung
und SteriUsation der ffir die Aufbewahmng und Yerteilung der Mich be-
nutzten GefaBe zu sichem;

d) Yorhandensein eines Kfihlschrankes ffir Aufbewahrui^ der Milch
bis zum Yerkauf.

Als Rohmilch soli neben pasteurisierter Mich nur die
beste und vom gesundheitUchen Standpunkt aus einwandfreieste Mich
verkauft werden. Ihre AbfuUung in Flaschen kommt nur am Orte der Er-
zeugung in Frage. Die fibrigen Bedingungen ffir die Herstellung solcher
Yorzugsmilch sind bekannt und brauchen nicht mehr gesd^dert zu
werden. Auch eine Belehrung des K o n s u m e n t e n ist notwendig, da
Milchverderbnis und Mdttion sehr oft auch im Haushalt vorkommen. 1ns-
besondere sind ihm folgende Tatsaehen zu verg^enwfirt^en: daB

a) die gewfihnliche Mich oft in infiziertem Zustand ins Haus gelangt
und daher vor dem GenuB aufgekocht werden soli;

b) (he pasteurisierte Milch vor GenuB aus difitetischen Grfinden im
Wasserbad lauwarm gemacht werden soU;

c) das fiftere Umgiefien der MUch von einem GefSB ins andere zu ver-
meiden ist und die GeffiBe bedeckt zu halten sind;

304

Mikrobiologie der Nahrangs*, GenuQ- ond Futtennittel.

d) Belichtung und namentlicli direktes Sonnenlicht die MilchTerderbiiis
erleichtert und bescUeunigt;

e) die verlUngerte Haltbarkeit der Milch durch Aufbewahrung im Dun-
keln und an kuhlem Ort erreieht wird.

Die Ausfiiluungen des Verf.s wurden zur endgiiltigen Annahme der
ScMuBsitzung des Kongresses unterbreitet, die am 6. Mai 1934 vollzogen
wurde. K. J. Demeter CWeihenstephan-Munchen).

Terwen, A. J. L-, und Quelle, H. J., (Jber die bakteriologischen
Erfolge mit dem Elektropasteur filr Milch nach
Aten. (Arehiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 112. 1934. S. 273 — 279.)

Der Apparat arbeitet in der Weise, daB die Milch unten in ein vertikales
zylinderformiges GefSfi aus Glas eingefuhrt wird, darin durch einige Sieb-
platten, die zugleieh die Elektroden sind, stromt und, vom Weehselstrom
geheizt, oben den Apparat verlaBt. Die Milch selbst ist Stromleiter, der
Widerstand, den sie dem Strom entgegensetzt, bedingt die Heizung. Die
Pasteurisierungstemperatur ist, auBei von der Stromspannung (220 oder
380 Volt), abhangig von der Anfangstemperatur der Milch und der Ge-
sehwindigkeit des Mlchstromes. Mit Sicherheit wurde Abtdtung der asporo-
genen pathogenen Bakterien erreieht bei einer Wechselspannung von 220
Volt und bei 67® in 62 Sek., bei 380 Volt infolge des rascheren Milchdurch-
flusses bei 70®, aber bereits in 26 Sek. Um jedoch auch an heiBen Tagen die
siehere Garantie zu haben, daB die erhitzte Milch 24 Std. haltbar blieb,
muBte die Temperatur auf 93® erhSht werden (bei 220 Volt). Der Pasteuri-
sierungseffekt betmg dann 99,99%, doch war schon deutlicher Kochgeschmack
bemerkbar. AuffaUig ist, daB auf 85® erhitzte Milch an heiBen Tagen haupt-
sichlich durch thermoresistente Kokken verdarb, die in „pin-point-eolonies“
wuchsen. Eodenkirchen (Kdnigsberg i. Pr.).

Grimes, M., and Hennerty, A. J., A study of the quantitative
changes in the microbiological flora of sweet-
cream salted butter of good keeping quality when
held at 16° F. for a period of two to eight months.
(Journ. of Dairy Res. Vol. 5. 1934. p. 137—143.)

Nach verschieden langer Lagerungszeit in sog. „cold storage" von
— 8,5® C wurden aus dem Inneren von 60 Pfd.-Stucken Proben steril ent-
nommen. Die Keimbestimmungen wurden nach dem Standard-Verfahren
auf Laktose-Agar durchgefuhrt, wobei dieser fiir den Nachweis der Bak-
terien einen ph von 6,8, fiir den Nachweis der Schimmel und Hefen einen
solohen von 3,5 hatte. Zur Feststellung der Verflussiger diente Gelatine.
AUe Flatten wurden 6 Tage lang bei 21® C bebriitet. Ergebnis: Wahrend
die Gesamtkeimzahl von Bakterien und Hefen in der frischen Butter allge-
mein niedrig war, zeigten die Hefen eine Zunahme mit der Lagerungsdauer,
ohne daB damit aber eine geschmackliche Verschlechterung im Aroma
verbunden gewesen ware. Die Aziditat erlitt eine leichte Zunahme.
"Was den Milohsehimmel betrifft, so war mit Fortdauer der Lagerung
ein allgemeines Zuruckgdien zu beobachten, wenn auch vereinzelt ein Gleich-
bleiben oder sogar eine Steigerung der ZaU aufgetreten war. Beztiglich der
Gdatineverfliissiger war keine Veranderung zu beobachten. Es wurde auch
die prozentuale Verschiebung innerhalb der Bakteiiengruppen wahrend rund
3 Monate dauemder „cold storage" naher untersucht.

Mikrobiologie der Kahrungs-, GenuB* und Futtemuttel. — Ciinger usw- 305

Hierbei zeigten die schwachen Saurebildner ein deutlich prozentuales
Anwachsen bei gleiehzeitiger Abnahme der Str. laetis-Formen. Die
eigentlichen Alkadibildner blieben zu % ihrer Ausgangszabl am Leben, wSh-
rend die EiweiBzersetzer unter ihnen wesentlich stSirker reduziert wurden.
Die starken Saurebildner nahmen prozentual um ungefabr die Halfte ab,
die in Lakmusmilch indifferenten Formen nabmen prozentual derart zu, daB
sie nach der Lagerung zu mehr als % die iiberlebende Flora reprasentierten.

K. J. Demeter (Weihensteplian-Munchen.)
Frarier, W. C., Sanders, 6. P., Boyer, A. J., and Long, H. P., The bacte-
riology of Swiss cheese. 1. Growth and activity
of bacteria during manufacturing processes in
the Swiss cheese kettle. (Journ. of. Bact. Vol. 27. 1934.
p. 539—549.)

Die Entwieklung der Bakterienflora wahrend des Kasungsprozesses
wurde sowohl nach der Plattenmethode als auch nach der direkten Methode
untersucht. Proben wurden gezogen: a) nach Zusatz von Reinkulturen
und Lab, b) beim Beginn des Nachwarmens und c) unmittelbar vor dem
Ausschopfen des Bruchs. Um vergleichbare Werte zu erhalten, wurden bei
den Proben nach b) und c) Bruch und Molke z. T. unter Verwendung von
ZitratlSsimg sorgfaltig gemischt und der Bakteriengehalt der Mischung
bestimmt. An Reinkulturen wurden verwendet: Str. thermophilus,
Lactobacillus easel und helveticum, L. bulgaricus
und Propionsaurebakterien. Von diesen Organismen zeigte nur Str. ther-
mophilus starkere Vermehrung wahrend des Kasungsprozesses. Von
der originaren Milchflora trat bei den Organismen der coli-aerogenes-Gruppe
nur dann eine starkere Vermehrung ein, wenn diese Organismen in groBer
Zahl in der Milch vorhanden waren. Str. lactis und andere Milchbakte-
rien zeigten nur wahrend der Einlabungsperiode Vermehrung, durch die
Nachwannung wurde dann aber die Weiterentwicklung unterbunden. Die
Verschiebung des pn-Wertes ist nach Ansicht der Verff. auf chemisch-physi-
kalische Einfliisse zurUckzufiihren. Richter (Kiel).

Mikrobiologie des DQngers, Bodens, Wassers und Abwassers.
Banov, £. V., Bernard, Y. Y., and Izrailsky, Y. P., On the manufac-
ture and use of Nitragin. (Bull, of the State Inst, of Agric.
Microbiol. U.S.S.R. Vol. 5. 1933. p. 82—97.) [Buss. m. engl. Zusfassg.]
Untersuchungen an einem mit Torf hergestellten „Nitragin“, besonders
iiber das Verhalten der KnSllchenbahterien in diesem Praparat unter dem
EinfluB verschiedener AuBenfaktoren, fuhrten zu dem Ergebnis, daB dieses
Torf-Nitragin dem gewShnlichen mit Boden hergestellten in seiner Impf-
wirkung nicht nachsteht. Geimpfte Wicken auf Moorboden lieferten hshere
Ertrage, obwohl auch die Kontrollpflanzen reichlich mit KnSUchen besetzt
waren. Veiff. schEeBen daraus auf eine geringereAktivitat der in dem Boden
naturlich vorkommenden Knbllchenbakterien.

Bortels (Berlin-Dahlem).

Eowrotseva, S., Influence of the type of soil and of moi-
sture on growth and multiplication of nodule
bacteria. (Bull, of the State Inst, of A^c. Microbiol. U.S.S.R. Vol. 5.
1933. p. 98 — 107.) [Russ. m. engl. Zusfassg.]

Um ein mSglichst wirksames Leguminosen-Zmpfpraparat herstellen zu
kSnnen, wurde der EinfluB der Bodenart, des Wassergehalts und mes Zu-

Zweite Abt. Bd. 81. 20

306

Mikrobiologie des Diingers, Bodens» Wassers und Abwassers.

satzes von Kalk und Mannit zum Boden auf die Lebensdauer und Venneh-
rung der KnSllehenbakterien untersucht. B o r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Sebeloumova, A., and Protodiakonov, 0., The rfile of Azotobacter
in the nitrogen nutrition of higher plants under
the conditions of Leningrad. (Bull, of the State Inst, of
Agrie. Microbiol. U.S.S.E. Vol. 6. 1933. p. 118 — 130.) [Enss. m. engl.
Zusfassg.]

Vegetationsversuche, die in Siidrufiland durchgefiihrt worden waren,
wurden untw den klimatisehen Bedingungen Leningrads wiederholt. Ein
sandiger podsolierter Boden wurde A. gar nieht, B. mit Tabak und C. mit
Mais bepflanzt, und zwar in 4facher Wiederholung: 1. ohne jeden Zusatz,
2. mit 'wenig und mit viel Ealk, 3. mit Azotobacter und 4. mit Ealk und
Azotobacter. In aUen Fallen ergaben die GefaBe mit Azotobacter hShere
Ertrage als die Eontrollen ohne jeden Zusatz und die mit Azotobacter und
Ealk hShere als die mit Ealk allein. In den B6den der GefaBe ohne Ealk-
gabe wurde ein geringer N-Verlust festgestellt, in denen mit Azotobacter
und Ealk dagegen ein N-Ge^winn, jedoch nur in den bepflanzten GefaBen.
Waren sie unbepflanzt, dann wurde in ihnen ein betrachtlichcr N-Verlust
beobachtet. Die Ergebnisse stehen im Einklang mit denen, die in SiidruB-
land ermittelt wurden. B o r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Sehelonmova, A., Zaitzeva, E., and Faennan-MoT, T., Duration of
the influence of Azotobacter on the yield of hig-
her plants and on the nitrogen balance. (Bull, of the
State Inst, of Agric. Microbiol. U.S.S.E. Vol. 5. 1933. p. 131—141.)
[Euss. m. engl. Zusfassg.]

Die im ersten Versuchsjahr beobaehtete ffirdemde Wirkung von Azoto-
bacter auf den Pflanzenertrag konnte auch in den folgenden Jahren wieder
festgestellt werden. Dariiber hinaus aber zeigte es sich, daB Azotobacter
sich hinsichtlich der K-Bilanz des Bodens in den verschiedenen Jahren an-
scheinend verschieden verhalten kann, zeitweilig als N-Binder und zeitweilig
als Zehrer organisch gebundenen Stickstoffs. B or t els (Berlin-Dahlem).

Porchet, B., Etude biologique d’une bactdrie du sol
fixant r azote atmosphlrique. (BuU. de la Soc. Yaudoise
des Scs. Nat. Vol. 68. 1933. No. 232. p. 1—8; No. 233. p. 93—100.)

Beobachtungen an gef&rbten Ausstrichen und wftsserigen Aufschwem-
mungen eines aus Erde isolierten Bakteriums verleiten Verf. zu den kiihnsten
Hypothesen und zur Aufstellung eines pleomorphistischen Entwicklungs-
kreislaufes, der aber offenbar in keiner einzigen seiner vielen Phasen am
Einzelobjekt fortlaufend beobachtet und auf diese Weise gesichert worden
ist. Die Zdlen nehmen unter den verschiedenen Ema,hningabftHiTi giiTig ftTi
die verschiedensten, z. T. recht absonderlichen Formen an, in denen sowohl
Sporen als auch groBere und Meinere „Gonidien“ entstehen sollen, und die
auBerdem in entwicMungsfahige Bruchstucke zerfallen kdnnen. AUe diese
Fortpflanzungskorper sollen, auf neuen N§hrboden verimpft, zu normalen
Stabchen auskeimen. Solange aber derartige Bel^uptungen nicht durch
Beobachtu^en an der Einzmelle einwandfrei bewiesen sind, haben sie fiir
die bakteriologische Wissenschaft keinen Wert. Denn BUder von Invo-
lutionsformen, wie sie Verf. in groBer Zahl bringt, sind wohl schon jedem

Mikrobiologie des DGsgers, Bodens, Wassers und Abwasseis.

307

Bakteriologen begegnet. Es ist aber nicbt angSiZigig, aus ibnen alleia und
aus Untersuchungen an ganzen Bakterienpopulationen anstatt Einzelzellen
so "weitgehende Schliisse zu ziehen. Als ebenso leichtfertig mutet es an, Trenn
Verf. lediglich auf Grund der Tatsaehe, daU das von ihm besehriebene Bak-
terium auf N-freiem Agar zu wacbsen vermag, annimint, es k6nne den Luft-
stickstoff binden. Dabei erwahnt er selbst, dafi es auf N-freiem Kieselgel-
Nahrboden schon sehr viel schlechter wacbst!

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Vandeeaveye, 8. C., and Yillanueva, B. R. Morphological rela-
tionships of soil microbes. (Journ. of Bacter. Vol. 27. 1934.
p. 267—269.)

Zu den Untersuchungen wurde Material von 2 B6den verwendet, von
denen der eine regelmafiig Stalldung erhalten hatte, wahrend der zweite
jahrelang ungedungt geblieben war. Auf dem ersten Boden war regelmafiig
Winterweizen gebaut worden, auf dem zweiten wechselten Brache und
Winterweizen ab. Gesiebte Proben beider wurden im Laboratorium bei
optimalem Feuchtigkeitsgehalt wahrend eines Zeitraums von 3 Monaten
untersucht, es wurden hierbei als MaJB fiir die Aktivitat die COj-Produktion
und als Mafi fiir die Bodenflora kokkenfSrmige und stabchenformige Bak-
terien nach der direkten Methode bestimmt. Die COg-Produktion des ge-
dungten Bodens betrug etwa das Doppelte der COg-I^oduktion des unge-
dungten. Der Gehalt an kokkenformigen Bakterien war bei dem gediingten
Boden etwa 30%, bei den stabchenfdrmigen etwa 20% hSher als bei dem
ungediingten. Nach Ablauf der Beobaehtungszeit wurden den Bodenproben
1% CaCOg bzw. 1% CaCOj -f 1% Filtrierpapier zugesetzt. Der Zusatz von
CaCOg bewirkte eine Steigemng des Gehalts an beiden Bakteriengruppen,
ohne ^6 eine starkere COg-Prod^tion eintrat. Bei den Zusatzen von Filtrier-
papier, die unter gleichzeitigem Zusatz von NaNOg erfolgten, stieg die COg-
Produktion unmittelbar nach dem Zusatz ganz erheblich an, um nach einiger
Zeit wieder auf den alten Wert abzusiidren. Im Zusammenhang hiermit
war eine Steigemng des Gehalts an stabchenformigen Bakterien zu beob-
achten, die allerdings zahlenmaOig nicht der Steigemng der GOg-Produktion
entsprach. Die kokkenfdrmigen Bakterien wurden durch den Zusatz nicht
beeinflufit. Richter (Kiel).

Mnhiddin, A., Nachprlifung der Methode von Vincent
zum Colinaohweis in Wasser. (Archiv f. Hyg. u. Bakt.
Bd. 109. 1933. S. 31—43.)

Die Vincent sche Methode ist bei Verwendung von Peptonfleiseh-
wasser zu m Nachweis sehr lebensfahiger junger Keime ebenso empfindlich
wie dieEijckmann sche Probe. Sie ist aber nicht imstande, Colikeime,
die einige Tage im Wasser verweilt haben, mit Bestimmtheit anzuze^en.

Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).
Eliewe, H. und Eindhauser, J., Uber die keimtStende Kraft
der Kohlensaure. (Archiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 110. 1933.
S. 211—213.)

Sowohl apathogene Wasserbakterien (Vibrionen) als auch pathogene
Keime der Coli-Typhus-Grappe werden von der Kohlensaure zum Absterben
gebracht, bei 37® sehr rasch, bei 18 — 20® nur sehr unvoUkommen und lang-
sam. Sporen wurden wahrend der 17tagigen Beobaehtungszeit auch bei
37® nicht abgetdtet. Man kann also klinstliche und natUrliche Mineral-

20 *

308 Schadigungan d«r Fflanzen duroh Filze, Bakterieu und filtrierbare Vint.

wSsser von nicht einwandfreier Herkunft durch 48 stand. Aufbewahrung
bei 37® von asporogenen Parasiten befreien.

Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).

SchSdigungen der Pfianzen durch Piize, Bakterien und filtrierbare Vira.

Preston, N. C., The control of club root (finger- and toe)
in cauliflowers. (Journ. of the Ministry of Agriculture. Vol. 41.
1934. p. 329—335, 2 figs.)

Die vom Verf. an verschiedenen Stellen in England ausgefUhrten Ver-
suche mit Sublimat zur BekSjnpfung der Kohlhernie bei Blumenkohl zeigten,
da6 es moglich ist, durch Anwendung von % 1 0,05proz. SublimatlSsung je
Pflanzloch auf stark mit Kohlhernie befallenen Flachen 70% marktfahige
Ware zu erhalten. Gesunde Pfianzen warden erhalten, wenn die Saatbeete
zur Zeit der Aussaat und wenn die Pfianzen etwa 6 cm hoch waren, mit
% 1 0,05proz. Sublimatlosung auf eine etna 1,5 m lange in GewachshSusern
Oder mit 1 1 auf die gleich lange Reihe im offenen Saatbeet behandelt warden.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Tingey, D. C., and Tolman, B., Inheritance of resistance to
loose smut in certain wheat crosses. (Journ. Agric.
Research. Vol. 48. 1934. p. 631—655.)

Es besteht keine Eorrelation zwischen Resistenz gegen Flugbrand
(Ustilago tritici [Pers. J Jens.) und verschiedenen mo:^hologischen
Merkmalen wie Grannenbildung, Spelzen- und Kornfarbe. Die Spaltungs-
ergebnisse werden unter der Ajnahme von 3 Resistenzfaktoren zu deuten
versucht. Die Infektionen gelingen am besten, wenn die Brandsporen un-
mittelbar auf die Narbe gebracht werden, wobei es ftir den Infektionserfolg
gleichgiiltig ist, ob die Blute noch unreif oder ob sie vollreif ist.

KShler (Berlin-Dahlem).

Yarwood, C. E., The comparative behavior of four clo-
ver-leaf parasites on excised leaves. (Phytopathology.
Vol. 24. 1934. p. 797—806, 3 figs.)

Abgeschnittene Kleebl&ttchen hielten sich sehr gut auf lOproz. Zucker-
Idsung. Sie waren auf dieser L5sung anfsiliger fur Uromyces fal-
lens und Erysiphe polygon!, weniger anfallig fur Macro-
sporium sarcinaef orme und Colletotrichum trifolii
als auf 2proz. Zuckerlosung. Blattchen, die am Nachmittag von der Pflanze
entfernt warden, waren anfSlliger fiir Uromyces und Erysiphe
and weniger anfallig fiir Macrosporium und Colletotrichum
als Blattchen, die am frtihen Morgen abgeschnitten warden. Dasselbe Ver-
haltnis wurde bei jungen und alten Blattchen beobachtet.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Stroede, W., Untersuchungen liber die geographische
Verbreitung der physiol ogischen Formen des Wei-
zenbraunrostes, Puccinia triticina Eriks s. in
D entschland. (Arb. d. Biolog. Reichsanstalt. Bd. 21. 1934.
S. 115-120.)

Von 45 untersuchten deutschen Braunrostherkiinften enthielten 13
Herkiinfte 1, 26 2 und 6 Herkiinfte 3 Rostrassen. Form XI wurde 17-, Form
XIII 8-, Form XIV 33-, Form XV 13-, Form XVI 7-, Form XX 2-, Form
XXI 1- und Form XXII Imal festgestellt. Der von Radulescu ge-

Sohadigungen der Pflanzen duroh Pike, Baktenen and filtrierbare Vira. 309

Siufierten Ansicht. daB Form XIII als Hauptrasse Europas anzusehen ist,
selilieBt sich Verf. auf Gnind seiner Untersuchungen nicht an.

Winkelmann (’Berlin-Dahlem).

Pethybridge, G. H., Snapdragon (Antirrhinum) rust. (Joum.
of the Ministry of Agriculture. Vol. 41. 1934. p. 336 — 340.)

Puecinia Antirrhini wurde zum ersten Male 1933 in Eng-
lang festgestellt. Inzwischen zei^e sich, daB der Pilz bereits weit im Osten
und Suden von England verbreitet ist und daB er bereits Devonshire im
Westen erreicht hat. In Frankreieh wurde er in 2 Fallen bisher beobachtet.
Die weite Verbreitung bringt Verf. zu der Ansicht, daB Puecinia Antir-
rhini schon langer in England ist, aber bisher noeh nicht beobachtet
wurde. Da mit den Basidiosporen keine Infektionen erzielt werden konnten,
ist anzunehmen, daB ein Zwischenwirt erforderlioh ist. Bekampfung mit
Kupferkalkbriihe hatte wenig Erfolg. Fein verteilter Schwefel wirkte, wenn
die Temperaturen hoeh genug waren, gut.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Wismer, 0. A., Inheritance of resistance to bunt and
leaf rust in wheat cross OroxTenmarq. (Phytopatho-
logy. Vol. 24. 1934. p. 762—779, 3 figs.)

Von Exeuzungen der Weizensorten Oro und Tenmarq wurden die Fj-,
F -3 und F^-Generationen auf Eesistenz gegeniiber Tilletia levis,
die F^-Generation auf die gegen Puecinia triticina untersucht.
Die hohe Anfalligkeit gegen Tilletia ist in diesen Kreuzungen rezessiv. Die
F 4 -Linien zeigten grSBere Eesistenz als das resistente Elter Oro, das deutet
darauf hin, daB das anfallige Elter Tenmarq einen oder mehrere Faktoren
fUr Eesistenz hat. Transgressive Spaltung zeigte sich bei der Priifung auf
Eostanfalligkeit. Das zeigt an, daB in beiden Eltem Faktoren fiir Eesistenz
gegen Eost vorhanden sind. Keine Beziehung wurde zwischen Steinbrand-
und Eostanfalligkeit beobachtet. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Cannin, J., Palestinian plants, their biology, diseases
and cryptogamie inhabitants. Bulletin 8. 1. A s p h o -
deus microcarpus Viv. (Acta Societatis Botanicorum Poloniae.
Vol. 10. 1933. p. 297.)

AnlaBlich der Beschreibung der in ganz Palastina sehr haufigen Pflanze
Asphodeus microearpus erwahnt Vaf. aueh die &ankheiten
derselben. Ein verbreiteter Parasit ist Puecinia asphodeli Moug.,
dessen Teleutosporenlager und Teleutosporen besehrieben werden. AuBer-
dem wurden noch zwei Erankheiten beobachtet, deren Ursachen aber noch
unbekaimt blieben. Engel (Berlin).

Tl^Uison, B. S., Peach canker investigations. I. Some
notes on incidence, contributing factors and con-
trol measures. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1933. p. 32 — 47.)

Verf. hat Studien iiber die Quellen fiir das Auftreten einer als Krebs
bezeichneten Kranl^eit der Pfirsichbaume angestellt, die auf Infektion
dutch einen Pilz, der von versehiedenen Autoren als Valsa leuco-
stoma identhliziert wird, zuriickgefiihrt wird. Die Krankheit wird gekenn-
zeichnet als mehr oder weniger ausdauemde Wunden, die zunachst als ein-
gesunkene, braune, Gummi ansscheidende Flachen erscheinen, unter denen
die Einde spaterhin zusammenschrumpft, schwarzlich wird und sich von dem

310 Soh&digTingen der Pflanzen. duroh Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

darunter liegenden Holz und der angrenzenden Einde loslost. Der sich
bildende Kailua wird wieder infiziert, so dafi durch das Absterben des sich
imiuer ■wieder neu bildendeu Kailua Binge entstehen. Verf. berichtet fiber
seine Ergebnisse an Hand eines genauen ubersichtsplanes fiber die von ihm
untersuchte Obstplantage. Er kommt zu dem Ergebnis, dafi 72% der Vor-
konunen zu etwa gleichen Teilen die Folge von Schfidigungen durch die
oiien'talisehe Pfirsiehmotte, von toten Zweigen, von Stfimpfen und von
Wunden, die nach dem Beschneiden verbleiben, sind. Weitere 24,5% gehen
zu 8,4 — 3,1% auf Abkratzw^erkzeuge, beschadigte Gabelungen der Zweige,
Wintersehaden am Wurzelhals, Wunden nach Entfemung firfibwer Krebse
und Schaden infolge von Verticillium-Welke zurfick. Die restlichen 3,5%
entfallen auf abgestorbene Knospen und Wunden, die durch Abbrechen
Oder Zersplittem von Zweigen hervorgerufen werden. Ffir untersohiedliche
Sortenanfalligkeit liegen bislang nur geringe Anzeichen vor. Eine ursach-
liche Beziehung von Sclerotinia, dem Erreger der BraunfSule zum Krebs-
auftreten, wie sie oft behauptet wird, lehnt Verf. ab. Diesw Pilz ist inso-
fem indirekt von Wiehtigkeit, ala er den Krebserregern Eintritt in die Wirts-
pflanze verschafft. Den Kulturmafinahmen ist insofem ein gewisser EinfluB
einzurSumen, ala zur Zeit des Blattabwurfs ausgereifte BSume weniger
dem Krebsbefall ausgesetzt sind. Das Beschneiden ffihrt leichter zu einer
solchen, wenn es wahrend der Ruheperiode vorgenommen wird, ala wenn
es im frfihen Frfihjahr erfolgt. Von BekampfungsmaBnahmen ist das gegen
die Braunfaule •wirksame Spritzen gegen den Krebs zwecklos. Dagegen ist
eine sorgffiltige Desinfektion namentlich von groBen Wunden wertvoll.
Weitere Ratsdilage ffir die Bekampfung sind am SchluB der Arbeit gegeben.

Braun (Berlin-Dahlem).

Trifonova, V., Die Rotfleckenkrankheit der Pflaume
Poly stigma rubrum (Pers.) D. C. (Phytopath. Ztsehr. Bd. 7.
1934. S. 73—92.)

Nach Beschreibung der Symptome der durch Polystigma ru-
brum verursachten Rotfleckenkrankheit der Pflaume beschreibt Verf.n
ausffihrlich die Morphologie des Erxegers, und zwar die Bildung des Stromas,
der Pyknidien und der Perithezien. Alle Versuche, den Pilz ktinstlich zu
kulti'vderen, schlugen fehl, so daB er als obligater Parasit angesehen werden
muB. Infektionsversuohe glfickten nur mit Askosporen, dagegen nicht mit
Pyknosporen. Infektionen durch letztere konnten auch in der Natur nicht
beobachtet werden. Stets trat die Krankheit vor der Reife der Pyknidien
auf. Die Frage nach der Funktion der Pyknosporen wird ausffihrlich er-
6rtert. In ihnen ist bestimmt keine Sommerfruchtform des Pilzes zu sehen,
viebmehr glaubt Verf.n, daB sie eine sexuelle Fruchtform des Pilzes im Sinne
der Pyknidien der Uredineen darstellen. In einem SchluBabschnitt wird
auf die BekSmpfungsmdglichkeiten kurz eingegangen. P. rubrum hat
einen natfirlichen Feind in Gloeosporium polystigmicolum,
der den ersteren Pilz in feuchten Jahreszeiten vSllig vemichten kann.

Braun (Berlin-Dahlem).

Blank, L. M., Uniformity in pathogenicity and cul-
tural behavior among strains of the cabbage-
yellows organism. (Joum. Agr. Research. Vol, 48. 1934.

p. 401—410.)

19 aus verschiedenen Gegenden stammende Isolierungen von Fu-
sarium conglutinans, dem Erreger der Yellows genannten Kohl-

Soh&digungeia der Pflaazen durch Filze, Bakterien und filtneibaie vira. {jxi

kraiikheit, 'wurden miteinander verglichen. Sie lieBen "weder in ihrer Patho-
genitSit, noch in ihrem sonstigen Verhalten TInterschiede erkennen. In In-
fektionsversuohen erwies sick eine „hoiaozygotiseh anf 8 llige“ Koklrasse
gegen alle Isolierungen als in gleichem Grade anfallig, eine andere „Iiomo-
zygotiseh resistente" Easse als in gleichem Grade resistent. Es konnte so-
nach keinerlei Spezialisierung nachgewiesen werden und es ist kaum zu
befiirchten, daB der Erfolg der Kesistenzzilchtung kunftig etwa durch das
Auftauchen von neuen biologischen Eassen in Frage gestellt werden kSnnte.

Kohler (Berlin-Dahlem).

Ledeboer, Maria S. J., Physiologische onder zo ekingen over
Ceratostomella ulmi (Schwarz) Buisman. (Physio-
logische Untersuchungen iiber Ceratostomella ulmi
(Schwarz) Buisman.) Dissertation, Hollandia Drukkerii, Baam.
88 S. 1934.

_ V^.n untersuchte die Physiologic des Erregers der TUmenkrankheit,
weil die Entdeckung neuer Tatsachen auf diesem Gebiete event. Anregui^en
geben kSnnte zu einer intensiveren Bekampfung dieses Schadlings. Bei diesen
Versuchen, welche in synthetischen Nahrlosungen ausgefuhrt wurden, wurde
der Grad der Entwicklung des Pilzes an Hand der Bestimmungen des liocken-
gewichtes zu verschiedenen Zeiten festgestellt.

1. EinfluB von Temperatur und Licht. Bei 8 %® C schon ziemliehes
Wachstum, das Optimum liegt bei 25® C, das Maximum bei ± 34® C. Kore-
mienbildung wird durch hohere Temperatur gefSrdert, ebenso durch direktes
Sonnenlicht, hefeartiges Wachstum durch niedere Temperatur.

2. EinfluB des pn- Das Minimum liegt bei einem pn von ungefahr 5,
das Optimum zwischen 6 und 7, das Maximum ungefahr bei 8 . Je nach der
angewandten NahrlSsung konnen sich die Grenzen etwas verschieben.

3. EinfluB der Nahrstoffe. Fiir die Untersuchung fiber den EinfluB ver-
schiedener ehemischen Verbindungen auf den Pilzertrag wurde von einer ab-
geanderten Stammlfisung nach Eichards Gebrauch gemacht, mit einem
Ph von 6,9. Mit Hilfe dieser StammlSsung wurde festgestellt, daB 5% Saccha-
rose als C-Quelle Vorteile hat gegenfiber 5% Glukose. Auch andere Zuckcr-
arten sind zu verwerten, dagegen ist Pepton unbrauchbar.

Als N-Verbindungen sind NH^-Verbindungen zu verwerten, ebenso As-
paragin und Pepton, dagegen nicht Hamstoff und KHO 3 .

Von den fibrigen Elementen wirken gfinstig auf den Ertrag: K (als
0,1% KHgPO^ Oder 0,001—0,01% KgSOJ, (optimale Menge 0,15%), Ca,
Zn (0,002 — 0,02% ZnSOi), weiter stimulierend in kleinen Mengen Hg, Mn
und Cu. Pe ist nicht unentbehrlioh, Na als NaCl wirkt in 0 ,lproz. Konzen-
tration sehadlich.

Aus den Versuchen konnte eine Moglichkeit zur Bekampfung mit chemi-
schen Substanzen nicht gewonnen werden, da die Konzentrationon die fiir
TJhnen hSchst zulassigen Mengen um ein Bedeutendes fibertrafen.

van Beyma thoe Kingma (Baarn).
Poole, R. F., Sweet potato ring rot caused by Pythium
ultimum. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 807—814, 3 figs.)

Die Infektion der SfiBkartoffeln mit dem Erreger der Eingfaule Py-
thium ultimum erfolgt auf dem Felde. Die grSBeren Verluste treten
aber bei der Lagerung ein. Der Pilz wfichst auf verschiedenen Nahrbfiden
und auch auf SfiBkartoffel-Abkochi^en. Die Faule beginnt 36—48 Std.
nach dem Eindringen des Pilzes in die Schale. Wmin die Luft mit Feuchtig-

312 Schfldigimgeii der Pflanzen durch Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

keit gesSittigt ist und wenn die Temperatur etwa 20° C betrS^, konnen bis
zu 6 Ringe an einer Kartoffel gebildet werden. Die Infektion kann ver-
Mndert werden, wenn die Sufikartoffeln geerntet werden, bevor Feuchtig-
keit das Wachstum des Pilzes im Boden begunstigt. Mit Bhizopus
nigricans konnte die Ringfaule nicht hervorgerufen werden.

Winkelmann (Berlin-Dablem).

Tucker, J., and Harber, E. W., Seed treatment for potato
blackleg. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1933. p. 70 — 72.)

Auf Grand bjahriger Berichte iiber die Beizung von Eartoffeln mit
Sublimat und Formalin und iiber das Auftreten der Scbwarzbeinigkeit
kommen Verff. zu dem Ergebnis, daB die Behandlung zwar das Auftreten
der Scbwarzbeinigkeit nicht hemmt, trotzdem aber die Ertragsausfalle ver-
mindert, wobei Srtliche Einflttsse sich weitgehend geltend machen. Sie
glauben, daB fiir anerkannte Saat die Kosten der Behandlung sich nicht
lohnen. Nur in vereinzelten Fallen mag eine solche zu empfehlen sein.

Braun (Berlin-Dahlem).

Clayton, E. E., Toxin produced by Bacterium tabacum
and its relation to host range. (Joum. Agric. Research.
Vol. 48. 1934. p. 411—426.)

Bacterium tabacum, der Erreger des „Wildfeuers“ der Tabak-
pflanze, scheidet ein Toxin aus, das sich durch Filtration des Kultursubstrats
durch Kollodiumfilter leieht von den Bakterien trennen laBt. Das Toxin
zeigt eine spezifisehe Wirkung auf Chlorophyllgewehe und bringt anderes,
sich entwiekelndes Gewebe zum Absterben; es ist noch in hoher Verdiinnung
wirksam. Von tierischen Exotoxinen unterscheidet es sich auBer durch seine
Thermostabilitat dadurch, daB es keine Froteinreaktion gibt und daB es
durch Schwermetallsalze nicht ausgefallt wird. Durch verdiinntes Alkali
wird es sofort inaktiviert. Zur Erzeugung von typischen Wildfeuerflecken
an Blattem geniigt es, diesen das bakterienfreie Toxin einzuimpfen. Im
Umkreis der Impfstelle bUden sich dann die typischen Lasionen, und zwar
nicht nur am Tabak, sondern auch an beliebigen anderen Pflanzen. Impft
man regular mit Bakterien, so bilden sich die Wildfeuerflecken nur beim
Tabak, der eigentlichen Wirtspflanze. Die verschiedenen Spezies legen eine
untersehiedliche Toxinempfindlichkeit an den Tag. Bei Bohnen erreichtcn
die Lasionen bis zu 1 Zoll Durchmesser, wahrend an Salatblattern nur feine
runde Fleckchen auftraten. Der Tabak selbst gehort zu den nur mafiig
empfindhchen Arten. K 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Thomas, H. £., and Ark, P. A., Nectar and rain in relation
to fire blight. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 682 — 685.)

Verff. beobachteten, daB der Nektar der Obstbaumbliiten bei trockener
Witterung ^oBere Mengen von Zueker enthait als bei feuchter. Bei Kultur-
pflanzen zeigte sich, ^B bei der Zuckerkonzentration, die dem Zucker-
gehalt des Nektars bei trockener Witterung entspricht. Bacillus amy-
1 0 V 0 r u s nicht wachst. Verff. fiihren deshalb den hSheren BefaU der
Bliite bei feuchtem Wetter mit B. amylovorus darauf zurUck, dafi
der Zuckergehalt des Nektars dann geringer ist.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Bennett, C. W., Plant-tissue relation of the sugar-beet
curly-top virus. (Joum. Agr. Research. Vol. 48. 19M. p. 665.)

Verf. konnte feststellen, daB das Virus des „Curly-top“ der Zuekerriihen

Scbadigoagnct der Fflanzen durch Pilze, Bakterien und liltri^bare Vira. 313

vorzugsweise im Phloem lokalisiert ist und auch in diesem geleitet wd.
Die Leitung erfolgt mit uberrasehender Geschwndigkeit. So legt das Viras
in den Keimblattern in 2 Min. eine Strecke von 1 Inch (= 2,54 cm) und in
den Blattern groBerer Pflanzen in 6 Min. eine Strecke von sogar 6 Inchs
zuriick. Ein Ubertritt dcs Virus von den Tracheen, in die es kiinstlich ein-
gefiihrt wurde, in das iibrige Gewebe findet nieht statt, die Pflanzen bleiben
gesund. In Ubertragungsversuehen mit Eutettix tenellus, dem
spezifischen tJhertrager der Erankheit, zeigte sich, daB diese in der Eegel
nur dann gelingen, "vrenn man die Tiere vorher an Gewebestiickchen saugen
IhBt, die Phloem enthalten, da die Tiere beim Saugen das Phloem anstechen
und hauptsSchlich daraus ihre Eahrung ziehen. Auf Nieotiana ta-
b a c u m und N. g 1 a u c a Mt sich das Virus gleichfalls durch die Eu-
tettix und durch Pfropfung iibertragen. In diesen Arten breitet sich das
Virus erheblich langsamer aus. Im Gegensatz zu N. t a b a c u m , die
deutliche Symptome zeigt, bleibt die Erankheit bei N. glauca latent.

E. E 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Thung, T. H., Bestrijding der krul- en kroepoekziekten
van tabak. [Bekampfung derErausel- und Runzel-
krankheit bei Tabak.] (Mededeeling No. 78 v. Proefstation
voor Vorstenl. Tabak, Elaten. 1934. 17 S.)

Die Erauselkrankheit des Tabaks v?ird von Insekten aus der Familie
der Aleyrodidae (wahrscheinliche Gattung Bemisia) iibertragen. Verf. hat
nun festgestellt, daB die als ,,'weiBe Fliegen“ bekannten Insekten bestimmte
TJnkrauter fiir die Eiablage bevorzugen. Sofem solche Unkrauter in der
Nahe der Tabakpflanzungen vorkommen, werden die Pflanzen stark von
der Erauselkrankheit heimgesucht. Von diesen TJnkrautem seien genannt:
Ageratum conysoides, Synedrella nodiflora und
Vernonia einerea. Durch friihzeitige Entfemung dieser Pflanzen
aus der Nahe der Tabakpflanzungen laBt sich diese Viruskrankheit sehr
wohl bekampfen. van Beyma thoe Eingma (Baam).

Price, W.C., Isolation and study of some yellow strains
of Cucumber mosaic. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 743.)

Verf. konnte die Abspaltung abweiehender Stamme des Gurkenmosaik-
virus nachweisen. Sie lieBen sich aus auffallenden, hochgelben Flecken iso-
lieren, die auf den Slattern von Tabakpflanzen nach Beimpfung mit dem
gewohnlichen griinen Gurkenmosaik auftoaten. Auch durch IsoUerung aus
nekrotischen „Primarlasionen“, wie solche beim Einrdben des Virus auf
Slattern von Vigna sinensis entstehen, konnten dorartige Varianten
mit einer eigenartigen Methods gewonnen werden. Das Verhalten der neu
aufgetretenen Stamme (Erankheitserscheinungen, Totungstemperatur, Dauer-
haftigkeit des Saftes beim Stehenlassen) wird ausfuhrlich besehrieben.

E. E 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Wellmann, F. L., Identification of celery virus 1, the
cause of southern celery mosaic. (Phytopathology.
Vol. 24. 1934. p. 695.)

Ein von dem Verf. als Celery 1-Virus beschriebenes Mosaikvirus richtet
hauptsachlich in Florida groBen Schaden an Selleriekultnren an. Verf.
weist nach, daB es sich um ein selbstandiges Virus handelt, wiewohl es mit
dem „healthy“-Virus der Itooffel und dem ring spot-Virus des Tabaks
Starke Akalichkditen aufweist. tJbertragungsversuche waren an 23 Speries

314 Sohftdigungen der Pflanzen duroh Filze, Bakterien. — Tierisohe Sohadliitge.

von 8 verschiedenen Familien erfolgreich. Darunter befand sich auch die
Monokotyle Commelina nodiflora. Das Virus wird in der Natur
durch eine Blattlausart, Aphis gossypii, verbreitet und laBt sich
„inechanisch“ (durch Einreiben der Blatter und das Nadelstichverfahren)
iibertragen. Die oberste Verdunnungsgrenze liegt bei 1 : 100 000, die T8-
tungstemperatur bei 75® (in 10 Min.). X-Korperchen wurden in den Zellen
nicht vorgefunden. Das Virus lafit sich durch Berkefeld „W“-Filter
filtrieren. Die an den verschiedenen 'Wirtspflanzen beobachteten Erank-
heitserscheinungen werden sehr ausfiihrlich geschildert.

E. K 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Tierische SchSdllnge.

Eckstein, F., Untersuchungen zur Epidemiologie und
Bekampfung von Pyrausta nubiialis Hb. und Pla-
typarea poeciloptera Schr. (Arb. physiol, u. angew. Entom.
aus Berlin-Dahlem. Bd. 1 2 . 1934 5. S. 109 — 131.)

Nach Beobachtungen bei Rastatt in Baden wird die Dauer des Falter-
fluges in einer Nacht bestimmt durch die Geschwindigkeit, mit welcher die
Temperatur unter 15® sinkt. 1st die T. hoher als 16®, so wird der Flug um
so mehr dadurch begiinstigt, je grofier die Differenz zwischen Taupunkt
und T. ist. Die fiir Rastatt optimale Differenz liegt etwa bei 5,5®. "Weitere
Mitteilungen betreffen den EinfluB von Windrichtung, Nahe eines Infektions-
herdes und Fruchtfolge auf die Starke des Befalls. Im Kaiserstuhlgebiet ist
das Auftreten des Maiszilnslers weniger stark, weil die Felder klein siud
und ihre Emteriickstande teilweise sorgfaltig beseitigt werden. Starke
Diingung fiihrt starkeren Befall herbei. PVuhsaat wird starker befallen als
Spatsaat und weit gestellte Pflanzen mehr als eng gestellte. Bekampfungs-
versuche mit Bakterien und Pilzen hatten ein negatives Ergebnis.

Die Spargelertrage in jener badischen Gegend haben in den Jahren
vor und wahrend diesen Untersuchungen (die 1929 bis 1931 stattfanden)
standig abgenommen, weil die Wirkung widriger klimatischer Verhaltnisse
zusammentraf mit Massenauftreten der Spargelfliege, die durch das Elima
der vorhergehenden Jahre 1924 und 1925 besonders begiinstigt worden war.
AuBerst wichtig ist die Beseitigung des alten Spargelstrohes im Herbst.
Fast in jedem Stengel wurde eine Fli^e gefunden. AuBerdem ist es mSglioh,
die Eiablage der Fliegen zu verhindem, indem um 3 StSckchen zusammen-
genahte groBe Zeitungen auf den Spargelbeeten aufgestellt werden. Dieses
Verfahren ist in der Praxis entstanden; die Fliegen werden dadurch auf
ungeschtitzte Felder abgelenkt; ob es auch bei aUgemeiner Anwendung helfen
wiirde, bleibt festzust^en. K. Friederichs.

Holbeit, J. R., and Flint, W. P., Chinch Bug resistance in
corn — an inherited character. (Journ. eeonom. Entom.
Vol. 271. 1934 2 . p. 121—124, 3 fig.)

Gewisse Maissorten in Illinois erwiesen sich als widerstandsfahig gegen
die Angrffie der Wanze Blissus leucopterus, und diese Wider-
standsfahigkeit ist eine erbliche E^enschait. Ereuzui^ dieser Sorten mit
and^en, die ^erwanschte Eigenschf^en anderer Art haben, erscheint an-
gezdgt. Es gibt bereits Hybriden, die ^egen gewisse Erankheiten, extreme
Temperaturen und Trockenheit gefeit sind. E. Friederichs.

Tierische SchAdlinge.

316

Malenotti, E., Esperienee contro i nemici del melo. (L’lta-
lia Agrieola. Ann. 71 1. 1934 12 . p. 21—38, 15 fig.)

_Es wd uber Experimente und Beobacbtungen bericbtet, welche be-
statigen, daB zwischen dem Abfallen der BliitenblStter des Apfelbaums
und deni Beginn des Schliipfens des Gros der ApfelwicMer aus der Puppe
ein zeitlicher Zusammenhang bestebt. Spritzen mit 0,3% Bleiarsenat hat
sich sehr wirksam gegen die Apfelmade erwiesen, wenn es yiermal vom
22. MSrz an bis zum Juni eriolgt. Aber aueh 6 Spritzungen sind noch
rentabel; die Kosten werden reiehlich wettgemacht dureh den Mehrertrag.
Zusatz von Minerals! versprieht die Wirkung des Kampfes gegen den Apfel-
•wickler noch zu verbessern. Gegen die Wanze Stephanitis pyri
hat sich 6% Schwefelkalkbruhe sehr bewalirt. Mcht ohne wirtsehaftliehe
Bedeutung ist auch die in den Blattern minierende Baupe von C e m i 0 •
stomascitella. E. Friederichs.

Janeke, 0., Der Pflaumenbohrer Euvolvulus (Rhyn-
chites) cupreus (L.). (Ztschr. ang. Ent. Bd. 21 1 . 1934 e. S. 24
—64, 23 Abb.)

Rhynchites cupreus gehort zur TJntergattung Euvol-
vulus; Verf. fand ihn nur an Pflaumen- und Kirschbaumen und bezweifelt
die Angaben liber sonstige Kahrungspflanzen. Dutch den ReifungsfraB des
iiberwinterten Riifilers werden junge Blatter, Bliitenknospen und junge
Friichte beschadigt. Die Eiablage in letztere hinein wird beschrieben; der
Blattstiel wird vorher fast ganz durchgebissen. Das Weibchen fahrt damit
7 Woehen lang fort bis Ende Juli und legt itn Durchschnitt 90 Eier ab. Die
Larve bohrt sich nach dem Yertroeknen des Fruchtfleisches in den Eern
ein. Sie ruht im Hochsommer als Puppe 1 — 3 cm tief in der Erde, meist
6^ Woehen lang; die jungen Eafer ernahren sich vor der Winterruhe an
den Blattern ihrer Wirtsbaume. Der Ausfall an Friichten kann bis zu 44%
betragen. Yersuche zur Bekampfung mit chemischen Mitteln befried%ten
nicht, man miiBte die abgebissenen ]^uchte, die nach der Eiablage abfafien,
auflesen und verniehten, auBerdem die E^er auf besonders gebaute Fai^-
schirme abschlitteln. An denselben und anderen Obstbaumen lebt Rh.
a u r a t u s , iiber den einiges mitgeteilt wird. E. Friederichs.

Janeke, 0., Der Erlenkafer (Agelastica alni L.) als
Eirschschadling. (Arb. phys. u. ang. Entomologie a. Berlin-
Dahlem. Bd. 1 1 . 1934 s. S. 79—92, 3 Abb.)

Nach FaUung eines ErlengehSlzes im Unstruttal 1931 wurden 1933
benachbarte SiiBkirschen stark vom Erlenblattkafer befallen. Die Not
hatte die Eafer auf die neue Nahrpflanze getrieben. Auch Hainbuchen
wurden stark angegriffen. Die Larven nahmen auch Apfellaub an. Eigent-
liehe FraBpflanzen sind die Eatzehentrager, insbesondere die Betulaceen.
Die Durchschnittseizahl betnig im Freien 203, im Labor 366 Stuck. Die
Entwicklung im Ei folgt bei varschiedenen Temperaturen der Eurve einer
Eettenlinie, so auch die der beiden ersten Larvenstadien. Zu weiterer Ent-
wicklung konnten die Larven nicht gebracht werden. Zur Bekampfui^
sind neben Arsenmitteln besonders Benihrungsgifte auf der Basis von Denis
und Pyrethxum gee%net. E. Friederichs.

Sutter, H., Weitere TJntersuehungen liber Eakothrij^s
robustus TJzel und Contarinia pisi Winn., sowie

316 Tieriache Sehadlinge. — Oekologie und Bekampfung tierischer Sohadlinge.

Hal. (Mitt. Schweiz. Ent. Gesellseh. Bd. 16 i. 1934. Sonderdr. 82 S.,
56 Abb.)

Bionomische, insbesondere phanologische Daten iiber die zwei an Erbsen
im St. Gallischen Bheintal schadlichen Insektenarten. Als Parasiten der
Gallniucke treten gelegentlich zwei Schlupfwespen, Inostemma bos-
e i i und Leptacis tipulae, auf, hSufiger der Eiparasit S a c t o -
gaster pisi und der Larvenparasit Pirene graminea. Letz-
terer wird sehr genau besehrieben, und seine Entwicklung und Lebens-
weise werden dargestellt. Zwei Generationen im Jahre. Diese Erzwespen
sind in starker Vermehrung im Bheintal begriffen und werden mit der Zeit
jene schadlichen Gallmucken stark vermindem. K. Friederichs.

Gilliatt, F. C., Notes on the lesser budmoth, Recurvaria
nanella Hbn. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1934. p. 466— 476.)

Recurvaria nanella Hbd. ist eine europaische Spezies, die
seit 1903 in Amerika bekannt ist und dort verschiedentlich in Obstplantagen
schwerere Schaden verursacht hat. Verf. gibt eine Darstellung ihrer Lebens-
geschichte, die weitgehend der von Spilonota ocellanaD. S.
ahnelt, die wiederholt zu vergleichenden Beobachtungen herangezogen wird.
tJber die Eier, die 7 Larvenstadien und die Puppen werden genaue Angaben
gemacht. Der Schaden zeigt sich an den Enospen und an dem Zusammen-
spinnen von Blattem und Bliiten. Er wird aber meist in der weiteren Ent-
wieklung wieder uberwachsen. Braun (Berlin-Dahlem).

Dingier, M., Die Tierwelt des Spargelfeldes. (Ztschr. angew.
Entom. Bd. 21 2 . 1934 s. S. 291—328, 6 Abb.)

Wiewohl Monokultur, enthalten die untersuchten hessischen Spargel-
felder eine reiche Fauna, besonders von Insekten, die aUerdings grdBtenteils
aus polyphagen Pflanzenfressern, Zufallsgasten, Diingerinsekten und deren
Verfolgern, nur zum kleineren Teil aus besonderen Spargelbewohnern besteht.
GroSschadlinge sind die Spargelfliege und die Spargelkafer, einige andere
Arten sind gelegentlich schadlich. Die vielen Spinnen erbeuten mehr „nutz-
liche“ als „schadliche“ Insekten. Die Parasiten der Sch3.dlinge sind in zu
geringer Zabl vorhanden, um wesentlich niitzen zu kSnnen. Verschiedene
„spargelkaferlarvenfressende“ Rhynchoten werden genannt, darunter S t i -
retus anchorage. Eine Anzahl Wirbeltiere kommt vor, von denen
das Eaninchen stellenweise empfindlichen Schaden stiftet. Zwischen den
verschiedenen Tierarten des Spargelfeldes besteht teilweise eine beachtens-
werte "Wechselwirkung. K. Friederichs.

Oekologie, biologische und chemische BekSmpfung tierischer Sehadlinge.

Schleieh, E. W., t)ber Wanderheuschrecken (Ent. Beihefte
a. Berlin-Dahlem. Bd. 1. 1934 8. S. 106—107.)

Es werden zahkeiche Beispiele fiir eine lljahrige Periode der Heu-
schreckeneinfaile beigebracht. In China sind in 1924 Jahren 173 solche
registriert worden, d. h. sie traten durchschnittlich aUe 11,1 Jahre auf.
Heuschreoken kSnnen zufolge ihrer — nSher erSrterten — klimatisehen
Anspriiche auf der nSrdlichen Erdhalfte nur bis zum 55., auf der siidlichen
bis zum 40. Breitengrad vorkommen. Sie fehlen aber dort in der tropischen
Urwaldzone und in ausgesprochenen Wiistei^ebieten. Wo sie vorkommen,
ist periodischer Regenfall ein Merkmal des Elimas.

K. Friederichs.

Oekologie, biologisohe und chemisohe Bek&mpfmig tieriscber Scbfidlinge. 317

Thiem, H., Phanographisches zur Massenverbreitung
von Scbildlausen. (Entom. Beibefte a. Berlin-Dahlem. Bd. 1.
Ber. iiber 5. Wandervers. Deut. Entom. 1934 8. S. 90—95.)

Es werden die Schwierigkeiten des tlbertragungsversuches mit ScMld-
lausen erfirtert. Damit eine Schildlaus an einer Fflanze zur Massenvenneh-
rung gelan^, mu6 diese Pflanze dazu „pradisponiert“ sein oder, wie Verf.
es nennt, sich in einem „eoccidophilen“ Zustand befinden. Wo der Befall
durch Scbildlause eine groBe Diohte hat, entwiekeln sie sich langsamer und
bringen weniger Eier hervor. Fur die Starke des Befalls einer Pflanze scheint
die Bodenbeschaffenheit einen stark bestinimenden EinfluB zu haben. —
XJnsere Schildlause sind hiernach epidemiologisch in der Hauptsache
Schwacheparasiten, aus deren Massenauftreten man einen SchluB
auf den Gesnndheitszustand der betroffenen Pflanze ziehen kaun.

K. Friederiehs.

De Fluiter, H. J., Over Nygmia phaeorrhoea Donovan,
den Bastaard satij n vlin der , en de faetoren, "welke
tijdens de winterrust de getalssterkte van dit
insect decimeeren. (Tijdschr. Plantenziekten. Jaarg. 40 1. 1934 1.
Sonderdr. 35 p., 1 pi.) [Mit engl. Zusfassg.]

Die Beobaehtungen deuten darauf hin, daB milde, feuchte Winter fur
uberwinternden Baupen des Goldafters nachteilig sind. Es finden sich
uber die aus den Winternestern hervorkommenden parasitischen
’^aaen Euptcromalus nidulans und Meteorus ver-
^^•(caVijien Hyperparasiten Monodontomerus aereus.

als regulierenden Faktors des Massenwechsels
liias Abschneiden und Vernichten der Wester
.. 1 .^,. Anwendung chemischer Mittel wird dadurch
....... , (laB die Baupen im Friihjahr ihre Wester nicht alle auf einmal,

sondem nach und nach verlassen. Die Futterpflanzen und die Anzahl der
Hautungen der Baupe werden vermerkt, auch eine tJbersieht der in Amerika
eingebtirgerten Parasiten des Goldafters gegeben. K. Friederiehs.

Wileoxon, F., Hartzell, A., and Youden, W. J., Greenhouse fumi-
gations with naphtalene solutions. (Contrib. Boyce
Thompson Institute. Vol. 5 i. 1933. p. 461—469, 3 fig.)

Bote Spinne in Gewachshausern konnte hinreichend bekampft werden,
indem WaphthalinlSsungen zur Verdampfung gebracht wurden. Die Ein-
wirkung dauerte ohne Schaden fur die Pflanzen 14 — 16 Std., obgleich sie
solche Pflanzen betraf, die als empfindlich dagegen gelten. Die Luft des
Gewachshauses passiert einen Apparat, in dem Waphthalin in MotorBl ge-
lost ist, und wird dadurch mit Waphthalin gesattigt. Bei weiteren Ver-
suchen wurden Waphthalin und Sehwefel gemiseht verwendet mit gleichem
Erfolg. K. Friederiehs.

Hamilton, 0. C., Some field tests showing the compara-
tive efficiency of Derris, Pyrethrum and Helle-
bore powders on different insects. (Joum. econom.
Entom. Vol. 27 2 . 1934 4 . p. 446—453.)

Vergleichende Versuehe im Labor mit Derris, Pyrethrum und Helle-
borus als Insectidden, wobei der Gehalt an wirksamen Bestandteilen genau
bekannt war, hatten folgende Ergebnisse: Derris-Pulver und Pyrethrum-

318 Oekologie> biologische imd chemisohe Bek&mpftmg tierischer Schadlinge.

Pulver ■wirkten hinreichend gegen Aphis spiraecola, Helleborns
nicht. Derris "wirkte als Spritzmittel stSxker, Pjrethrum starker bei Ver-
staubung. Eine Mischung beider iibertraf in der Wirtang das einzelne Mttel.
Yersuche gegen andere Fflanzenlause ergaben ahnliches. Als Streckmittel
■war den Giften neutraler Lehm zugesetzt worden. Gute Eesultate wurden
mit Derris und Pyrethrum auch gegen kleine Cicaden (Erythroneura
comes) am Weinstoek erzielt, wobei die starkere Konzentration der Gifte
sieh als starker -wirksam erwies als die schwachere. Diese Yersuche \rarden
im Weingarten ausgefuhrt. Auch die Bekampfung des Blattkafers Gale-
rucella luteola wurde direkt an den befallenen Baumen (Ulmen)
versucht und hatte guten Erfolg, der zum Teil erst nach 3—6 Tagen ein-
trat. K. Friederichs.

Janekc, 0. und BShmel, W., Beitrag zur Bekampfung der
Kirschfliege. (Arb. Biol. Eeichsanstalt Land- u. Forstwirtsch.
Bd. 204. 1933«. S. 443— 456.)

Damit die Bekampfung der Eorschfliege, Ehagoletis cerasi,
rechtzeitig einsetzt, empfiehlt sich Feststellung des Ausschltipfens der
Fliegen aus ihrem Puppenlager in der Erde vermittels Eahmen, die mit
Gaze bespannt sind und unter den Baumen ausgelegt werden; die Unterse^.
mnfi mit Eaupenleim dick bestrichen sein, an dem die Fliegen festkl'l:

Sie kdnnen 77 Tage lang leben; das Schltipfen begann bei Naumbur'

Mai, Anfang Juni. Die Fliegen sind stark negativ geotropisch; r’

nicht auf dargebotene Geruchsreize und wurden durc^ ’

mischte SiiBstoffe nicht angelockt, aber

Giftaufnahme veranlafit. Yon Lichtque.

starksten nicht die hellsten, sondern die weibesten. (jreg

lichtreizen nahm die Empfanglichkeit von der violetten zur roi beite

des Spektrums ab. Zur Bekampfung wirkte am besten Fluomatrium 1 : 250

mit Zucker oder Melasse, auch Derrisestrakt in gleicher Starke mit Melasse

Oder in Starke 1 : 500 mit Zucker. E. Friederichs.

Gdfiwald, K., tJber die Wirkung von Pyrethrum auf
Forstschadlinge. (Yerhandl. Dtseh. Ges. ang. Ent. Mitglieder-
vers. 1933. 1934. S. 49-61.)

Abhan^gkeit der Giftwirkung von der Disposition der Eaupen, Nach-
mrkungen im Puppen- und Falterstadium, Mortalitat und Absterbezeit nach
der Bestaubung in Abhangigkeit von Temperatur und Feuchtigkeit. Die
Eeizerscheinungen nach der Yergiftung mit Pyrethrum sind die eines Nerven-
muskdgiftes. Praktisch ergibt sich: Durch BerUcksichtigung der Wetter-
lage kann der Erfolg um — 60% erhSht werden. In bezug auf die Tem-
peratur fallt der Bereich des Widerstandsoptimums gegen das Gift mit dem
normalen Entwicklungsoptimum zusammen. Die Widerstandsfahigkeit steigt
mit der Lnftfeucht^eit unabhangig davon, ob das diesbeziigliche vitale
Optimum hoch oder niedrig liegt. Hohe Luftfeuehtigkeit verandert den
physiolo^schen Zustand der Eaupen in dem Sinne, daB die Giftwirkung
Idchter tiberwunden werden kann. Optimales B^ampfnngswetter ftbr Eonne,
Schwammspinner n.a.ist demnach: Temperatur fiber 24° oder mSgUchst weit
imter 16°, dazu geringe Luftfeuehtigkeit. Jfingere Eaupen eind empfind-
licher als aitere. E. Friederichs.

Oekologie, biologische Bek&mpfcmg tierisolier Schfidlinge. — Tierkrankheitien. 319

Malenotti, E., 11 fluosilicato di bario 6 micidiale anche
contro le arvicole. (II Coltiratore e Giornale Vinic. Italiano.
1933 23. Sonderdr. 6 p.)

Baryumfluorsilikat, wirksam als Insektengift und unschadlich fiir Vdgel,
gait als un-wirksam gegen Mause (Arvicola). Auf Grand von Experi-
menten im Laboratorium stellt Veri. fest, dafi dieses Gift fiir die Mause
ebenso wie Zinkphosphor todlich ist, selbst wenn nur 2% der troekenen
Nahrang beigegeben werden, und daB es sich kiinftig empfieblt, es iouner
dann anzuwenden, wenn es gilt, zu vermeiden, dafi Gefliigel Oder andere
Vogel dadurch zu Sehaden kommen. K. Friederichs.

Tierkrankheiten. Tierparasiten.

lefebvre,C.L., Penetration and development of the fun-
gus B e a u ver i a B a s siaua , in the tissues of the corn
borer. (Annals of Botany. Vol. 48. 1934. p. 441.)

Verf. suchte die Frage zu klSren, vann und wie der Befall der Eaupe von
Pyrausta nubilalis (des Maiszimslers oder Gliedwurms), einer im
Jahre 1917 nach Nordamerika verschleppten und in Europa heimischen, als
SchSidling verschiedener landwirtschaJ^licher Eulturpflanzen bekannten,
Motte vor sich geht. Zu diesem Zweck wurde der Entwicklungsgang auf
Mais als WirtspAanze genau beschrieben. Die Infektion der Baupe durch
den Pilz Beauveria Bassiana erfolgt sowohl durch den Verdau-
ungskanal, wie auch durch die Haut. Eier durchdringen Infektionshyphen
die dicke sklerotische, chitinhaltige Eautsehicht, befallen darunter zunSchst
die Fettkbrper, Driisengewebe usw., urn schlieBlich den ganzen Kbrper der
Baupe auszuhShlen. Enter giinstigen Bedingungen tritt sodann auBen
Konidienbildung ein. Der glinstigste AugenbUck, die Baupen auf ihren
WirtspAanzen mit dem Pilz zu infizieren, scheint der AugenbUck des Aus-
schliipfens aus den Eiern zu sein. Engel (Berlin).

Himmer, Der EinfluB von Bauchgasen undAbgasen in-
dustrieller Anlagen auf die Bienen. (Verhandl. Deut.
Ges. ang. Ent. Mitgliedervers. 1933. 1934. S. 115 — 126.)

In industrieller Umgebung sieehen BienenvSlker oft langsam oder plbtz-
lich dahin. Es entstand der Yerdacht, daB der Bauch der Fabrikessen Stoffe
enthMt, die fiir die Bienen giftig sind. In einigen FSllen gelang es, solche
Stoffe in den verendeten Bienen wie im Bauch nachzuweisen. In anderen
Fallen gelang dieser Nachweis nicht. Es wird fiber KAfigversuche beriehtet,
in denen die sehadliche Menge von Schwefelsfiure festgestellt wurde; sie liegt
bei Zimmertemperatur zwischen 0,01 und 0,006 VoL-%. Diese Menge wird
in den Abgasen nicht erreicht. Die darin enthaltene Salzsa>uremenge pAegt
noch geringer zu sein. Fluorsilicium sohlag^ sich alsbald nieder, wirkt daher
nur 500 — 600 m weit. Geffihrlicher sind £e festen Bestandteile des Bauchs
an BuB, Asehe, Metallverbindungen, insbesondere Arsen. Sie lagern sich
fiberall ab, und Bienensterben ist immer dann bemerkt worden, wenn einige
Tage trockenes Wetter geherrscht hatte und der Wind aus der Bichtui^
der Essen gekonunen war. In den v5llig aufgeklarten Fallen handelte es
sieh immer urn Arsenvergiftung. K. Friederichs.

0r5si-Pal, Z., tJber die Ernahrung der Acarapis-Milben
der Honigbienen. (Ent. Beihrfte a. Berlin-Dahlem. Bd. 1. 1934 s.
S. 135—138.)

320

Tierkrankheiten. Tierparasiten.

Durch Vitalfarbung des Blutes der Bienen (der Hamolymphe) wurde
festgestellt, dafi die Acarapis-Milben, sowoU A. w o o d i 'vrie externus,
sich davon ernahren. Das eingespritzte Kongorot ging auch in die Milben
iiber, die demnach das Bint gesogen batten. Man mufi sich hiernach fragen,
ob (be AuBenmilben ■wirklich harmlos sind. K. F r i e d e r i c h s.

Morgenthaler, 0., Krankheitserregende und harmlose
Arten der Bienenmilbe Acarapis, zugleich ein
Beitrag zum Speziesproblem. (Rev. Suisse de Zoologie.
T. 41 a». 1934 e. p. 429 — 446.)

Der Bienenkorper wird von drei Arten von Milben bewohnt. In den
Tracheen parasitiert Acarapis woodi (Tracheenmilbe), in der Grube
auf dem Riicken zwischen Mesoscutum und Mesoscutellum briitet Acara-
pis dorsalis (vom Verf. ncu so genannt), die demnach als „Rucken-
]nilbe“ unterschieden werden kann, und ventral in der Halsfurche haust
A. externus, dis „Halsmilbe“. Die drei Formen kSnnen an ge-wissen
Proportionen (Lange der letzten Tarsenglieder, Abstand der Stigmen von-
einander) unterschieden werden. Der strenge Beweis, daB 3 konstante Arten
vorliegen, fehlt noeh. Verf. weist auf die Bedeutung dieser Milbenformen
fur das Problem der Rassenbildung der Parasiten im ^rhaltnis zu der ihrer
Wirte hin. K. Friederichs.

Piyg, W., Beitrag zur Kenntnis der sog. „Eischwarz-
sucht“ der Bienenkbnigin (Apis mellificaL. $). (Landw.
Jahrb. Schweiz. 1934. S. 65—94, 32 Abb.)

Die „Eischwarzsucht“ der BienenkSnigin wurde bisher als eine Stoff-
wechselkrankheit angesehen. Sie besteht in einer fortschreitenden Um-
wandlung des Inhaltes der EirShren in gelbbraune bis braunschwarze k6rnige
Massen und die Konigin wird dabei steril. Ihr Hinterleib erhalt eine auffal-
lende Lange. Verf. beschreibt zunachst die normale Beschaffenheit der
Geschlechtsorgane und sodann die Ergebnisse der TJntersuchung 3 kranker
Bienenk6niginnen. Diese enthielten einen Parasiten, der vermutlich zu
den Pilzen gehort. Die Infektion beschrankt sich nicht auf die Geschlechts-
organe, sondern auch die Giftblase und der Enddarm werden befallen. Da-
her wird fiir die Krankheit der Name Melanose vorgeschlagen.

K. Fr i e d e r i c'h s.

Maurizio, A., 'Ober die Kalkbrut (Pcrieystis-Mykose) der
Bienen. (Arch. Bionenkde. Jahrg. 15 s. 1934 •>. S. 165 — 192, 12 Abb.)

Durch Infektionsversuche bestatigte sich, daB der Pilz Pericystis
alvei der Erreger der Kalkbrut ist, wiewohl man ihn sekundar auch in
Waben mit gutartiger Faulbrut, zersetzter Buckelbrut und selbst in Waben
mit gesunder, normaler Drohnenbrut findet. Auch mit solcher sekundar
auftretender Pericystis konnte Brut infiziert und die Kalkbrut hervor-
gerufen werden. Es gibt zwei morphologisch und physiologiseh verschie-
dene Form^ des Pilzes, die ndteinander steril sind. Beide kSnnen patho-
gen wirken. Der Weg der Infektion im LarvenkSrper wird gesehildert und
die Art der tJberwinterung der Krankheit. Zur Bekampfung hat sich Ein-
engen, Warmhalten, Auffiittern der befallenen Volker bewahrt. Statistisehes
tiber das Auftreten der Krankheit im Laufe des Jahres und die Verbreitung
in der Schweiz. K. Friederichs.

Abgeschlossen am 3. Januar 1935.

ZentralUatt f9r Bakt. etc. n. AliL M. 91. No. 16|2L

Ausgegeben am 28. Februar 1935.

JSachdiuck lerboten,

tiber atypiscbe Zellformen bei Bacillus amylobacter.

Ein Beitrag zur Prage des Fleomorpliismus der Bakterien.

[Aus dem Botanisehen Institut der Universitat Munster i. West!]

Von WUhelm Bucksteeg.

Mit 14 Abbildiingen im Text.

Einleitung.

Nach der Auffassung von L 6 h n i s (1921), A 1 m q u i s t (1925) u. a.
stellen die versebiedonen Zellformen einer Bakterienkultur Stufen eines
regelmafiigen Entwicklungsganges, des „life cycle", dar. Eine andere An-
sicht sieht in der Formenmannigfaltigkeit nicht ein gesetzmafiiges .,Naeli-
einander" von Formen vrie etwa beim Generationswecbsel maneher Pflanzen
und Tiere, sondern nur emen Ausdruck der groBen Variabilitat der Bakterien-
zellen; die abweichenden Formen werden zum Teil als nicbt mehr weiter
entwieklungsfabige .,Involutionsfonnen“ angesehen. Nach einer weiteren,
von Kuhn vertretenen Auffassung (1931) sind die FormyerEnderungen
dureh die Pettenkoferien. Parasiten der Bakterien, bedingt, die selbst einen
verwickelten Entwicklungskreislauf besitzen sollen, \rahrend jede Bakterien-
art „dimorph‘', d. h. in Stabehen- und in Kokkenform auftritt.

Nach zahlreiehen Angaben der Literatur tritt aueh Bac. amylo-
bacter nicht nur als typisehes Stabehen, sondern auch in anderer Ge-
stalt auf. So berichtet bereits Winogradsky (1902) uber das Auftreten
von Kokkenformen in Kulturen dieses Bazillus, ^e aber nicht mehr ent-
■wieklungsfahig sein sollen, und auch nach Haselhoff und B r e d e -
mann (1906) sind die kokkenfSrmigen Zellformen nicht weiter ziichtbar.
Diese Auffassung erfuhr spater jedoch durch Bredemann (1909) eine
Eevision, der in ausgedehnten Untersuchungen feststellen konnte, daB die
haufig auftretenden „kokkenahnlichen Zerfsdlsprodukte" sowohl aerob als
aueh anaerob beliebig lange vermehrungsfahig waren. Die .,Mikrooidien-
bildung"^) wird nach ihm durch verEnderte EuBere Bedingungen, z. B. „nicht
optim^e Temperatur" und „nicht optimale ErnEhrung" hervorgerufen.
AuBer diesen Faktoren sind aber nach seiner Ansicht fiir die Kokkenbildung
noeh weitere, unbekannte TJrsachen verantwortlich zu machen, da die Mikro-
oidien auch bei Kultur unter giinstigen Bedingungen auftraten. Sehon makro-
skopisch sind nach Bredemann diese Kokkenkolonien zu erkennen, die
im Gegensatz zu den hoch aufliegenden, etwas schleimigen, normalen Amylo-
bakterkolonien meist klein und durchsiehtig sind. Die Entstehung der
Mikrooidien geht nach ihm durch sehr reichliche und schnell erfolgende
Querteilung da: Stabehen unter weitgehender Anderung im physiologisehen

1) Der Aiisdruck „Mikrooidien“ stanunt von A. Meyer, der die kurzen,
kokkenkhnlichen Zerfallsprodukte mit diesem Namen bezeichnet.

Zweite Abt, Bd. 91.

21

322

Wilhelm Bueksteeg,

Verhalten vor sich; sie riefen keine Garung mehr hervor, bildoten dagegen
nock reichlieh SSure.

Euschmann und Bavendamxn (1925) bezweifeln den von
Bredemann behaupteten Znsammenbang zwischen Bac. amylo-
b a c t e r und den Kokken, da sie bei Isolierung dieses Bazillus ebcnfalls
Kokken beobacbteten, die sich dann aber als Streptococcus acid:
1 a c t i c i identifizieren liefien.

Sie sagen: ,,Der Kokkus, der auch bei der von uns durchgeflihrten Isolierung
des Bac. amylobacter auftrat, dessen Entstchung aus diesem aber ebenfalls
nioht beobachtet werden konnte, wurde einmal genau diagnostiziert und als in jeder
Beziehung identisch mit Streptococcus acidi lactici Gr, gefimden“
(S. 357). Und; ,,Neben Amylobacter und Hefe war noch der Kokkus ziemlich
zahlreich vertreten. Zwar kann der Einwand, es handele sich hier nur um die aus
Amylobacter entstehenden fortpflanzungsfahigen Mikrooidien, nicht ganz ent-
kraftet werden. Doch wiirde sich dann die merkwiirdige Tataache ergeben, dafi sich
diese, wie schon erwfihnt, schneller oder langsamer in einen echten Streptococcus
acidi 1. verwandeln. Es gelang uns aber, den Kokkus auch hier auszumerzen"
(S. 359).

Andererseits werden Bredemanns Beobachtungen von Cunning-
ham und Jenkings (1927) bestatigt. Sie erhielten unter Einwirkung
kleiner Sauerstoffmengen reichlieh Kokkenbildung. Zwei der abgespaltenen
Kokkenkulturen, die Pigment produzierten, sollen mit Micrococcus
aurantiaeus Cohn xibereinstimmen, die tibrigen 12 von ihnen studierten
Kokkenstamme, die keinen Fai'bstoff bildeten, mit Micrococcus can-
d i c a n s Fliigge. Demnach bezieht Cunningham die beiden oben ange-
fuhrten Kokkenarten in den Entwicklungskreis von Amylobacter ein.
SchlieBlich beschrieb Cunningham (1931) einen komplizierten Ent-
wicklungskreislauf von Bac. amylobacter, in dem neben den oben
bereits genannten Formen noch 5 weitere, teils aerobe, teils anaerobe Zell-
typen vorkommen sollen, von denen er die moisten mit in der Natur vor-
kommenden und schon unter anderen Namen beschriebenen Bakterienarten
identifizierte. Er sehlieBt sich in der Deutung der von ihm beobachteten For-
men der Theorie und Terminologie L S h n i s’ an und beschreibt Bildung
und Keimung von Endosporen, Exosporen, Mikrocysten, Gonidangien,
Gonidien, Kegenerativkorper, Auftreten von Symplasma und die Entstehung
neuer Zellen aus diesem „amorphen“ Zustand

Die Kokkenform ist auch bei anderen Bakterienarten beobachtet worden, z. B.
bei Bact. Fraenkeli Hashimoto (1899); bei einem proteusartigen „Luft-
bazillus" Matzuschita (1902); boi Bac. luteus (Garbowski, 1907); bei
Bac. anthracis Lutz (1922); bei Bac. pycnoticus (Grohmann, 1924)
u. a. m.

Aus den Ergebnissen der angefiihrten Untersuehungen ergibt sich die
Fragestellung: Handelt es sich bei den verschiedenen Zellformen in einer
Reinkultur von Bac. amylobacter um einen Entwicklungskreislauf
im Sinne L 6 h n i s’ oder um Modifikationen bzw. Dauermodifikationen oder
um Degenerationsformen? Die wichtigen Befunde Bredemanns, daB
aus einer streng anaeroben Bakterienart eine aerobe Kokkenform entstehen
kann, ^e beliebig lange ziichtbar ist, sind fiir das Problem des Bakterienpleo-
morphismus wie auch der bakteriologischen Systematik von besonderer
Bedeutung.

Aus diesem Grunde schien es mir wiinschenswert, die Kenntnis von
dCT Morphologie und Physiologie dieser Kolien zu erweitem und die Be-
dingungen ihres Entstehens genauer zu untersuchen, um so die weitgehen-

tber atypisehe ZeUformen bei Bacillus amylobaeter.

323

den theoretischen Folgerungen Cunninghams einer nSheren Priifung
unterziehen zu koimen.

Methodik.

Als Nahrhoden wurden insbesondere Pepton-Fleischextraktagar, Dex-
trose-Agar, Dextrose-Bouillon^), Bouillon, Nahrgelatine -)- Dextrose, Kar-
toffeln und Erdauszug verwendet. AuBer der Herstellung des Bodenex-
traktes (L 6 h n i s 1920) ist nach den Vorsehriften von A. M e y e r (1903)
verfahren worden. Die Eeaktion der Nahrboden war schwach alkalisch
(Ph=7,3-7,5).

In dem von Kitt (1927) angegebenen Milzbrei-Niihrvasser znr Zuchtung
von Anaarobiem bei Luftzutritt zeigte Bae. amylobaeter gutes Waehstum.
Da jedoch die von diesem sonst praktiseben Nahrboden gewonnenen Praparate ein
nmibersicbtliclies mikroskopisches Bild ergaben, wurde er bei sp&teren Unter-
suchungen nicht mehr vervrendet.

Zur anaeroben ZUchtung wurde eine Anaerobenapparatur naeh Art der
von A. Meyer und Bredemann (1909) verwendeten benutzt. Es
wax also moglich, durch versehieden starken Tlnterdruck mit verschiedenen
Sauerstoffmengen zu arbeiten. Der jeweilige Sauerstoffgehalt wurde nach
den von Bredemann ausgearbeiteten Tabellen ermittelt. AuBerdem
wurden Burrische Zwillingsrohrchen und Rohrehen mit Wright-
B u r r i schem VerschluB benutzt, aus denen der Sauerstoff entfemt wurde
mittels 3 — 5 cem alkalischer P 3 rrogallollosung, die aus gleichen Teilen einer
15proz. NaOH und einer 20proz. PyrogalloUdsung bestand. In einigen
anderen Versuchen wurde der Sauerstoff durch Wasserstoff verdrangt.

Bitter und D o r n e r (1932) auBem Bedenken gegen die An^rendung dieses
Sauerstoff absorbens’, da bei 'UbersohuB von Alkali COg-Mangel entsteht, gegen den
verschiedene Bakterien, u. a. auch Bac. amylobaeter, empfindlich sein sollen.
So fanden diese Forscher bei einem Verh&ltnis von 1 : 4 der 20proz. Losungen noch
sohwaches Wachstum, das bei groBeren Mengen NaOH g&nzlicb sistiert wurde. Aus
diesem Grunde wird von ibnen die Natronlauge durch Natriumkarbonat ersetzt. In
meinen Versuchen konnte dagegen niemals ein sichtbar sebadigender EinfluB eines
aus gleichen Teilen einer 20proz. Pyrogallollbsung ui d einer 15proz. Kalilauge bestehen-
den Gemisches festgestellt werden. Selbst ein groBer tTberschuB an NaOH verhinderte
das Wachstum von Amylobaeter nicht. DaB die Anwesenheit von NaOH
keine Waehstumshemmung von Bac. amylobaeter hervorruft, geht auch
aus den Versuchen Bredemanns hervor, der NaOH in die KulturgefaBe gab,
um „die bei der Atmung gebildete stSrende COg** zu absorbieren.

Die Lebendbeobachtungen bei Sauerstoffzutritt wurden im hangenden
Tropfen uber der Hohlung eines ausgeschliffenen Objekttragers angestellt.
Fiir die Lebendbeobachtung in sauerstofffreier Atmosphaxe wurde eine
Anaerobenkammer hergestellt. Diese bestand aus einem Ring, der auf
einem Objekttrager befestigt war und mit zwei kleinen GefaBen in Ver-
bindung stand. Von diesen enthielt das eine alkalisehe PyrogalloROsung,
das andere destilliertes Wasser, das sich gleichfalls im Ring unterhalb des
hangenden Tropfens befand. Do: von hier aus und von dem Wasserbe-
halter sich entwickelnde Wasserdampfstrom sollte das Austrocknen des
hangenden Tropfens einschranken. Mittels eines heizbaren Objekttisches
war es zudem mdglich, unter den gleichen Temperatur-Bedingungen zu
zuchten, unter denen die Kulturrbhrchen aufbewahrt wurden.

Bei der Ziichtung von Einzelzellen im hangenden .Tropfen zeigte sich
fiir den anaeroben Bac. amylobaeter eine besondere Schwierigkeit.

Dextrose-Agar und Dextrose-Bouillon werden weiterhin kurz als D-Agar imd
D-Bouillon bezeichnet.

21 *

324

Wilhelm Bucksteog,

Alle rait ihm in dieser Eichtung hin angestellten Versuche verliefen negativ.
Dies ist nicht nur den veranderten Bedingungen im hangonden Tropfen
zuzuschreiben, sondern auch der Tatsache, daB von don Amylobacter-
zellen nur ein ganz gcringer Prozentsatz — nacb D o r n e r nur 19 — 45®/(in
— wachstumsfabig ist. Auch Bredemann erwahnt, daB Kulturen
nach schwacher Impfung oft kein Waehstum zeigen. Dioser Eigenart ins-
besondere sind die negativen Resultate zuzuschreiben. Vielleicht miBlangen
auch daher die Versuche, Einzellkulturen nach B u r r i (1909) und mittels
des Mikromanipulators zu gewinnen.

Da die Versuche im hangonden Tropfen mil Bac. amylobacter
nicht gelingen wollten, mirden, um der berechtigten Forderung nach Dauer-
beobachtung von lebenden Zellen gerecht zu werden, als fur diese Zweeke
geeignetere Organismen Bac. megaterium und B a c t. c o 1 i in
den Kreis der Untersuchungen einbezogen. Bei diesen Arten treten nach
verschiedenen Angaben (Kuhn 1932, Klieneberger 1930 u. a.)
wie auch nach eigenen Beobachtungen haufig abweichende Formen auf.

Herkunft und Isolierung der Amylobacterstamme.

Von Bac. amylobacter gelangten drei als A, B und C bezeichnete
Stamme, die im Verlaufe eines halben Jahres isoliert wurden, zur Verwen-
dung. Stamm A und C entstammten dem Erdboden des Botanischen Gar-
tens, Stamm B wurde von einer Kartoffel gewonnen. Bac. megaterium
war der Institutssammlung entnommen und Bacterium coli wurde
frisch isoliert. Die 3 Stamme von Amylobacter stimmten morpho-
logisch und physiologisch weitgehend miteinander iiberein. Geringe Unter-
scMede — Stamm C speieherte kurz nach der Isolierung merklich weniger
logon als Stamm A und B, Clostridienform war bei C sehr selten — sind
vielleicht der verschieden langen Kulturdauer zuzuschreiben. Zur Weiter-
impfung wurde nicht erhitztes Ausgangsmaterial verwendet. Nur bei einigen
Versuchen wurde dasselbe 5 Min. bei 80® gehalten. Die Bakterien wurden
zunachst unter den ublichen Bedingungen kultiviert, worunter
die Ziichtung auf D-Agar mit Pepton als Stickstoffquelle (pn = 7,3 — 7,6)
unter vollstandigem Sauerstoffentzug bei 30® C zu verstehen ist. Die Ab-
weichung der kiinstlichen Kulturverhaltnisse von denjenigen der freien
Natur muB natUrlich den Wert dor experimentellen Ergebnisse oinschranken,
wenn hieraus die Frago nach einem naturlichen Entwicklungszyklus be-
antwortet werden soil. Da jedoch alle bisher in dieser Hinsicht gemachten
Beobachtungen auf solche Weise gewonnen sind, muBte zunachst unter
Verhaltmssen gearbeitet werden, die einen Vergleich mit den Ergebnissen
anderer Forscher ermSgliehten^).

Besehreibung der ,,typisehen“ Amylobaeterzellen.

Weil die oben genannten Kulturbedingui^en sich als die fiir unsere
Stamme gunstigsten erwiesen, sollen die unter diesen Verhaltnissen zu be-
obaehtenden Merkmale als „typiseh“ angegeben werden (Abb. 1 und 2).

Makroskopisch zeigten die Kulturen kompakte, weiBgraue, oft hochauf-
liegende und meist. glattrandige Kolonien. Altere Kulturen waren nicht
selten rfitlich braun gefarbt. Stets wurde Buttersaure und Gas gebildet.

Apparate tind Chemikalien vmrden dem Institut von der Notgemeinschaft
der Deutschen Wissenschaft zur Verfiigung gestellt.

Uber atypische ZelUormen bei Bacillua amylobaoter.

325

D-Nahrgelatine 'wurde nieht veriliissigt. Auf Pepton-Fleischextraktagar ohne
Dextrose war hoehstens ein sehr geringes Wachstum auf dem oberen Teile des
Schragagars zu beobachten. D-Bouillon erwies sich als sehr ganstig. Auf
Kartoffcln wuchsen alle Stamme ebensogut wie auf D-Agar in kompakten,
streng umgrenzten Kolonien. Die Angaben Bredemanns fl909) und
D 0 r n e r s (1924), daB D-Agar ein sehr gutes Kahrsubstrat darstellt, finden
soniit eine Bestatigung.

Die ZellgroBe der D-Agarkulturen variierte sehr stark, bei jungen Stab-
chen von 0,7 — 1,0 ju fiir die Breite und 4—10 [u fur die Lange. Die in
5 — 6 Tage alten Kulturen auftretenden Spindelfonnen erreichten oft sogar
eine Breite bis zu 2 //,. Die GroBe der Zellen erwies sich als abhangig von
der Art des Nahrbodens. So waxen die Zellen der D-Bouillonkulturen durch-
schnittlich kleiner und zeigten viel weniger Clostridienformen. Aueh Form
und GrSBe der Sporen variierte sehr stark, zwischen 1 — 1,5 fiir die Breite
und fiir die Lange zwischen 1 — 2.6 fi*). AuBer fast runden Sporen wurden
in meinen Versuchen ovale Formen gefunden. Nieht selten traten Sporen auf,
die noch mit einem Best der Mutterzelle versehen waren, ein Merkmal, das

Abb. 1. Abb. 2.

Abb. 1. 3 Tage alte Am y 1 o b a c t e r - Kultur. D-Agar. (TypischeAmylo-

b a c t e r - Zellen.)

Abb. 2. 3 Tage alte Amylobaoter - Kultur, D-Bouillon. (Typische A m y -

lobacter - Zellen.)

Winogradsky als charakteristisch fiir Clostr. Paste urianum
hinstellt. Da Bredemann diesen, auch als „Sporenkapsel''‘ bezeich-
neten Rest, bei alien Arten unter den verschiedensten Kulturbedingungen
beobachten konnte, so ist nach ilun dieses Merkmal nicht zur Artunterschei-
dung zu verwenden. Junge Stabchen zeigten eine sehr starke Beweglich-
keit, die bei Eintritt der Sporenbildung abnahm.

Junge Keimstabchen enthielten noch kein, altere Stabchen komig
verteiltes logen. Bei Spindelfonnen war meist die ganze Zelle bis auf
die Sporenanlage hiennit angefiillt. AuBerdem konnte in ein^en Fallen
in gut ausgebildeten Stabchen eine Blaufarbung weniger Xdmehen in ver-
diinnter Methylenblaulosui^ bei weiterer Behandlung mit 1 proz. Schwefel-
saure erzielt werden, die deshalb als Volutin mi Sinne A. Meyers zu
deuten sind. Die Vaxiabilitat der Reservestoffeinlagerung geht sehon aus
Befunden Bredemanns hervor, der 1906 bei seinem Clostr. a

1) Lehmann-Neumann (1924) fand zwischen 0,6 — 1,3 jz. schwankende
BreitenmalBe, bei 3 — Smal grafierer Lange. Bredemann, der umfangreiche
Messungen an Sporen angesiellt hat, fand je nach Art des Nahrbodens und der Stamme
Werte zwischen 1,02 — 1,32 jji fur die Breite und 1,8 — 2,4 fiir die Lange.

326

Wilhelm Bucksteeg,

Haselhioff etBr. Volutin nachweisen konnte, in spateren Unter-
suchungen (1909) an derselben Form aber nicht mehr. Gegenuber der
gleicbmafiigen Farbung mit Methylenblau zeigten altero Zellcii entsprechend
ihrer Reservestoffeinlagerung verschieden intensiv gcfarbte Bczirke. Gly-
zerinfuchsin (Lebmann-Neumann 1922) wirkte weniger gut als
Fhenolerythrosin. Ausgebildete Stabchen einer 6 Tage alten 1)-Agarkultur
■waren grampositiv, wahrend die Zellen — vielloicht tote — altercr Kulturen
haufig ganz oder zum Teil durch die Alkoholbehandlung wieder entfarbt
wrden.

Da Bredemann (1909) den sich mit Methylenblau farbenden Be-
zirk in der Sporenanlage fiir einen Kern halt, schien der Nachweis von Kern-
substanzen mit Hilfe der Feulgenfarbung (1926) wiinschensvert^). In unseren
Versuchen farbten sich junge Zellen, aber auch altere Stabchen nur schwach
und diffus, niemals distinkt, so dafi eine vom Plasma gesonderte Kernsub-
stanz nicht nachzuweisen war. Bei Zellen mit Sporenanlagen wurde manch-
mal eine deutlichere Farbung um die bereits etwas weiter ausgebildete Spore
festgestellt. Mit Pietschmann und R i p p e 1 moehte ich die inten-
siver gefarbten Bezirke um die Spore lediglich als Zeichen einer grofieren
Plasmadichte ansehen. Innerhalb der ausgereiften Spore konnte weder
eine di ffuse noch eine distinkte Farbung erzielt werden.

Um einen Vergleich der in der Literatur beschriebenen Formen mit den
von mir isolierten Stammen anstellen zu konnen, mufite das Verhalten
dieser Bakterienformen verschiedenen Kohlenstoffquellen gegenuber ge-
priift werden. Es wurden von meinen Stammen in Gegenwart von Pepton
stets Dextrose, Lavulose, Saccharose und Galaktose. weniger gut und nicht
immer dagegen Inuliu und Dextrin vergoren. Nicht angegriffen wurde
Laktose, iurabinose, Starke, Gummi, Mannit, Dulzit, Glyzerin, Salizin und
Ca-laktat. Wird der Stickstoff in Form von (NH,)iSOi als einzige Stick-
stoffquelle gegeben, so werden von all diesen Stoffen nur Dextrose, Lavulose
und manchmal auch Saccharose vergoren. Das Ergebnis dieser Versuche
erwies sich oft als abhangig von der Impfmenge.

In der Literatur werden -s'on den einzelnen Auioren die untersuchten Stamme
des Buttersaurebazillus unter den verschiedensten Namen besclirieben, ohne dal3 tiber
die im einzelnen Falle bearbeiteten Stfimme voUige Klarheit horrschte. Naohdem
schon Orafibergor und Sohatlon froh (1004) mitteilten, daQ versehiedene
T 3 rpen der Buttors&uregruppe inoinandor iiberfiihrbar sind, ist es das Verdien<?t B r o de-
ni a n n s (1909), gezeigt zu haben, dafi die Unterscheidungsmerkmale zwischen den
bis dahin gesondert aufgefiihrten Arten nicht konstant sind und folglich die ganze
Gruppe wahrscheinlich nur eine Art darstellt, die er Bac. amylobaeterA. M.
et Bredemann nannte. Der Versuch, unsere isolierten Stamme nach B o r g e y (1930)
zu identifizieren, machte Schwiorigkeiten, weil das Hauptunterscheidungsmerkmal,
das Anschwellen der Stabchen bei der Sporenbildung, nach unseren Versuchen kein
festes Merkmal darstellt.

Da jedoch die oben genannten morphologischen und physiologischen
Merkmale, wie Form und Gr6Be der vegetativen Zellen und der Sporen,
Auftreten der eharakteristischen amyloiden Substanz, Bildung von Gas
und ButtosSiUre und der SporenbildungsprozeB ganz analog denjenigen

1) Pietschmann und Kipp el (1932) ftihrten Untersuohungen mit
di^r Nuklealfarbung an verschiedenen Bakterien aus. Sie haJten die diffuse Ver-
teilung der nuklealpositiven Substanz bei Bac. myooides und den anderen unter-
su(^ten Bakterien ftir den „Nornialzustand“. Menge und Verteilungsart der nukleal-
positiven Substanz sind nach ihrer Angabe abhangig vom Nahrboden. Lithium-
chlorid und Magnesin m sul f at soUen eine Entmischung dieser Substanz herbeiftihren.

tJber atypisohe Zellformen bei Bacillus amylobaoter.

327

des von Bredemann (1909) besehriebenen Bac. amylobaeter
sind, nennen wir die isolierten Stamme B a c. a m y 1 o b a'c t e r A. M.
etBredemann^).

S V a r t s (1932) nbt Kritik an der Systematik Bredemann s. Sie teilt
seine Art in zwei Gruppen auf und zwar auf Gnind der Art der Beservestoffspeiche-
rung, des Garvermbgens und der Agglutination sreaktion. Die Organismen des ersten
Tj'pus sind nach ihr dadurch gekennzeichnet, daS sie bei einer bestimmten Beaktion
des Substrates ,,jodopliil 0 Substanz*** einlagern und die Fahigkeit besitzen, Glukose,
Lavulose, Galaktose, Mannose, Maltose. Arabinose, Saccharose, Salizin. Laktose und
Stdrke, weniger gut aueh Glyzerin zu vergaren*). Zu dicsem Typus gehbrt der von
ihr mit Clostr. butyricum jodophilum bezeichnete Organismus. Der
zweite Typus, dem z. B. Clostr. Pasteurianum angehort und der von der
ersten Gruppe scharf zu scheiden ist, vermag trotz geeigneten phAVertes des Ndhr-
bodens nicht regelm&Big „jodophile Substanz** einzulagern und weder Saccharose
noch Salizin und ,,mitunter“ auch keine Starke zu vergaren. — Nach der Bildung
jodophiler Substanz gehbrten unsere isolierten Bazillen in die erste Gruppe. Die feste
Eingliederung bietet aber trotzdem Schwierigkeiten. Nach unseren Beobachtungen
ist namlioh die Fahigkeit der regelmafiigen Beservestoffeinlagerung kein konstantes
Merkmal, was ja fiir die Bichtigkeit der S v a r t s schen Einteilung Voraussetzimg
ware. Ebenso ist nach den Ergebnissen der mit den verschiedensten Kohlenhydraten
angestellter Garversuche die Fahigkeit, einen bestimmten Stoff zu vergaren. zu un-
sicher, um diese Eigenschaft als Unterscheidungsmerkmal zu benutzen, wie schon
frtiher Bredemann in umfangreichen XJntersuchungen feststellen mufite. Be-
ziiglich der Fahigkeit der Vergarung der verschiedensten Kohlenstoffquellen kommen
meine Stamme dem Winogradsky schen Stamm Clostr. Pasteurianum
am nachsten. Sie unterscheiden sich von diesem nur insofem, als letztere nach den
Angaben Winogradskys keine Lavulose in Gegenwart yon (NH 4 ) 2 S 04 vergart,
dagegen Inulin. Der mit Clostr. Past, bestehenden Ahnli^keit nach waren
die von mir verwandten Bakterienformen in die zweite Gruppe der S v a r t s schen
Einteilung einzuordnen, wahrend, wie oben gezeigt, sie nach der Art ihrer Beserve-
stoffspeicherung der ersten Gruppe zuzuordnen waren. Dieser Umstand zeigt schon
die Schwierigkeit der S v a r t s schen Systematik.

jjAtypische^^ Zellfonnen.

Den oben erwahnten, als typisch bezeichneten Zellarten — Stabehen bei
jungen Zellen und die kurz vor oder bei der Sporenbildung auftretenden
Spindel oder spindelahnlichen Formen — konnen alle abweichend gestalteten
Bakterientypen, die in Amylobaeter kulturen auftreten konnen, als
„atypisclie“ Formen gegenlibergestellt werden. Solche atypischen Zellen,
wie kokkoide Gebilde, schwach lichtbreehende Stabchen, keulenformige Ge-
bilde, unregelmaBig geformte Zellen usw. konnten in unseren Kulturen
haufig beobachtet werden (Abb. 3, 4, 5, 6 und 7). Als haufigste Form wnr-
den kokkoide Gebilde gefunden, die Bredemanns Mikrooidien, Cun-
ninghams Kokken und Kuhns C-Formen entsprachen. Junge Kul-
turen zeigten solche abnormen Zellen verhaltnismaBig selten, wahrend ihre
Zahl mit dem Alter der Kultur zunahm. Man kann daher wohl sagen: je
alter die Kulturen, um so mehr Zellen, die sich vom „normalen‘^ Typus
unterschieden.

Um Reinkulturen kokkenformiger Zellen aus Amylobacter-
kulturen zu gewinnen, wurde zunachst gem§.B den Vorschriften Brede-
manns gearbeitet. Dieser Autor erhielt durch einfaches PlattengieBen in
ca. 75% aller Falle Kokkenkolonien, wenn er seine Kulturen bei 1 mg O 2 /I

1) Winogradsky (1926) halt aUerdings den Terminus „B a c. amylo-
b a c t e r“ fiir nicht eindeutig genug.

®) Nach brieflioher MitteUung verwandte N. S v a r t s fiir ihre Kulturen Pepton
als Stickstoffquelle.

328

Wilhelm Bucksteeg,

und einer Temperatur voe 28 ® aufbewahrte. Die mit alien Stammen
in mehrfacher Wiederholung angestellten Versuche, durch wiederholten
Plattengnfi zu Kokkenreinkulturen zu gelangen, fiihrten zu keinem Erfolg.

Abb. 3. Abb. 4.

Abb. 3. lOTagealte Amylobacter-Kultur. D-Agar. („Kokkenbilclung.“)
Abb. 4. 2 Tage alte Amylobacter - Kultur. Milz-N&.hrboden. (GroBe

kugelige Zellen.)

Abb. 5. Abb. 6.

Abb. o. 4 Wochen alto Amylobacter - Kultur. D-Agar. (Kokkenfdrmige
Zellen.)

Abb. 6. 3 Tag© alto Amylobacter - Kultur. D-Agar. (GroBe, kugelige

Zellformen.)

Abb. 7. 4 Wochen alte Amylobaoter-
Kultur. D -Bouillon. (Kokkenfdrmige ZeUen
und Fadenformen.)

Die Kulturen enthielten nebeii den
kokkoiden Gebilden noch normale,
mit Jod blau farbbare Stabchen.
Normale Zellen tratcn selbst in
solchen Kulturen auf, die aus Impf-
material stammten, das aus zahl-
reichen kokkenfSrmigen Zellen be-
stand. Wo kokkenahnlicbe Zell-
formen flberliaupt auftraten, waxen
sie in groSer A:^ahl vorhanden.

Bei genauer Durchsiclit wax es
meist leicht zu erkennen, daS diese
kokkoiden Zellen durcb Abschniining
entstanden waxen. Oft befanden

tJber atypiEche Zellfoimen bei Bacillus amylobaoter.

329

sich die rundon Zellen inmitten von Ketten normaler Stabchen (Abb. 3).
Nicht selten konnten auch streptokokkenformige Bilder beobachtet vrer-
den (Abb. 5). In anderen Eulturen ivar es mitunter schTverer zn ent-
scbeiden, ob sich die runden Zellen dxirch rasche Qnerteilnng bei gleich-
zeitiger Abrundung oder endogen gebildet batten. Nicht selten zei^en
einige Kolonien Stabchen mit hintereinander liegenden, mehx oder -vreniger
lichtbrechenden Kiigelchen. Diese kugeligen Einschlusse vraren in vielen
Fallen allein noch erkennbar, wahrend die restliche Zellmasse nur noeh
schwach sichtbar war.

Vom Auftreten ahnlicher Einschltisse bei Bac. felsineus berichten
Ruschmann und Bavendam (1925). Nach ihrer Ansicht lassen sich diese
Gebilde von Kokken schwer unterscheiden. Die von diesen Autoren angestellten mikro-
chomischen Reaktionen auf Fett und Volutin verliefen negativ. Kuhn (1931) halt
das Auftreten kugeliger Einschlusse fur den Beginn der KokkenbUdung. Die Kokken
,,-wachsen aus den Stabchen regellos heraus*' (S. 121). Xaeh seiner Ansicht entstehen
die Kokken (C-Formen) also endogen.

In anderen Fallen war die Membran ganz aiifgel6st, und die kugeligen
Einschlusse waren von den iibrigen kokkoiden Gebilden kaum zu unter-
scheiden. Solehe Bilder stimmen mit den von Cunningham (1931)
erwahnten und in Mikrophotogrammen wiedergegebenen Bildem iiberein.
Er bezeichnet diese Gebilde z. T . als Regenerativkhrper und Gonidien, ohne
jedoch irgendwelchen Beweis fiir die Berechtigung ^eser Bezeichnung bei-
gebracht zu haben.

Eine zweite Moglichkeit zur Gewinnung reiner Kokkenkulturen wurde
durch Cunninghams Beobachtung eroffnet. Dieser Forscher konnte
Kokken willkiirlieh durch jiUnvollstamuge- Anaerobiose ziichten (quanti-
tative Angaben uber die Sauerstoffmengen fehlen). Unsere Versuche iiber
das Verhalten des Bac. amylobacter gegeniiber Sauerstoff ergaben,
dafi 0 bis ca. 1 mg Sauerstoff pro liter fiir das Wachstnm unserer Stamme
am giinstigsten war, wie schon Bredemann (1909) beobachtete. Als
obere Grenze der Sauerstofftension fur die Entwicklung dieses Bacillus
wurde eine Sauerstoffmenge von ca. 30 — 35 mg Og/Liter festgestellt. Die
bei dieser Sauerstoffmenge gehaltenen Eulturen unterschieden sich in unseren
Versuchen von den anaerob gezuchteten Vergleichsrohrchen durch eine Menge
atypischer Formen. Diese bestanden meist aus kokkoiden Zellformen und
grofien kugeligen Zellen mit Inhaltskerpem. Bei Anwendung grSfierer
Mengen Sauerstoff blieben die RShrchen fast immer sterU. In ganz wenigen
Fallen fand noch Wachstum im Kondenswasser statt. In weiteren Versuchs-
reihen wurden von kokkenreichen Eulturen D-Agar-Rohrchen beimpft, die
bei ca. 50 und 100 mg OgA aufbewahrt blieben. Ein Teil der Paralleltolturen
wurde streng anaerob, der andere bei vollstandigem Luftzutritt gehalten.
Zunachst zeigten nur die anaerob gezuchteten Eulturen Wachstum; alle
anderen ROhrchen blieben steril. Wahrend diese Methode bei den Stammen A
und C zu keinem Ergebnis fiihrte, verhielt sich Stamm B etwas anders.
Auch hier zeigten die unter anaeroben Bedingungen gehaltenen Rohrchen
gutes Wachstum. Aufierdem aber liefi sich bei einigen der bei 60 und
100 mg Og/l gehaltenen Eulturen ebenfalls Wachstum, wenn auch in viel
geringerem Grade, feststellen. Es waren nicht mehr ie typisch hoehauf-
liegenden Amylobacter kolonien, sondem man beobachtete einen diin-
nen Belag auf dem Agar. In dem gleichen Mafie, wie sich das makroskopische
Bild verandert hatte, hatte sich auch das mikroskopische Aussehen vera.ndert.
Neben einer Menge kokkoider Formen fand man verkiimmerte Sta,bchen mit

330

Wilhelm Buekstoeg,

schwacher Lichtbrechung. Diese Kiimmerfonnen entbielten kein logen und
waren im Gegensatz zu normalen Stabchen junger Kulturen gramnegativ.
In oiner weiteren Versuchsreihe liefi sich dieses Ergebnis bestatigen. fiohr-
chen, die von diesen Kulturen beimpft und 1. anaerob, 2. bei verininderter
Sauerstoffspannung (100 mg 0,/l) und 3. aerob aufbcwahrt wurden, zeigten
z. T. nach 6 Tagen Wachstum, blieben teilweise aber auch steril. Die weiB-
grauen, zarten Kolonien bestandcn aus Kokken; nur gcnauerc Durchsicht
des Praparates lieB noeh einige Kummerstabchen und andere atypiscbe Zel-
len erkennen. Die kokkenformigen Zellen variierten stark in ihrer GrbBe.
Selbst in einem Kettenverbande •waren die Zellen verscbieden groB. Diese
Kokken lieBen sich zunachst auf D-Agar sowohl aerob als auch anaerob
wieder "weiter ziichten und zeigten gutes Wachstum. Je 6ftcr aber die Kul-
turen ubergeimpft "wurden, desto schwacher wurde das Wachstum, bis es
zuletzt makroskopisch nur noch eben sichtbar "war. Die Kokken nahmen
an GroBe und Lichtbrechungsvermogen ab. Nach ungefahr 6 — 6 (Jber-
impfungen war das Wachstum so kiimmerlich, daB die folgendon Versuche
iiberhaupt ohne Erfolg blieben. Dieses Kesultat konnte durch Anwendung
von verschiedenen NahrbSden nicht gebessert werden. Auch dann, wenn
von der ca. 4 Monate alten ersten Kokkenkultur abgeimpft wurde, blieben
die Kulturen selbst nach Wochen steril. Die Zuchtung dieser Kulturen ini
Vakuum und bei verminderter Sauerstoffspannung blieb ebenfalls ohne
Erfolg.

Es ist somit gelungen, durch Einwirkung schadlicher Mengen Sauerstoff
(50 — 100 mg /I) bei einem der drei untersuchten Amylobacter stamme
Kokken zu isolieren. Dieses Eesultat laBt erkennen, daB, wie in der Neigung,
Kokken abzuspalten, so auch beziiglich der Entwicklungsfahigkeit ^eser
Kokken bei den einzelnen Amylobacter stammen Unterschiode be-
stehen. Die verscbieden starke Neigung zur Kokkenabspaltung bei den
einzelnen Amylobacter stammen ist auch durch Bredemanns
Beobachtung erwiesen. Die isolierten Kokken lassen sich nur teilweise und
dann auch nur in begrenztem MaBe weiterkultivieren.

Bei Isolierung und Beobachtung der kokkoiden Zellen aller 3 Stamme
im hangenden Tropfen in einer Aeroben- und Anaerobcnkammer konnte nie-
mals Wachstum beobaehtet werden. Manche Zellen vcrloren im Laufe der
Zeit an Lichtbrechungsvermogen. Ebenfalls fuhrten die zahlreichen Ver-
suche, die Entstehung dieser kokkenformigen Zellen im hangenden Tropfen
zu bcobachten, zu keinem Erfolg. Soweit diese Ergebnisse Schliisse er-
lauben, muB hiemach angenommen werden, daB diese kokkoiden Gebilde
weder in sauerstoffhaltiger noch in sauerstofffreier Atmosphare entwicklungs-
fahig sind.

Mit dieser Annahme steht scheinbar die Beobachtung einer begrenzten
Weiterentwicklung der durch schadliche Sauerstoffmengen gewoimenen
kokkoiden Formen des gleichen Stammes in Widerspruch. Hierfur scheint
sich aber folgende Erklarui^ zu bieten: Nach dem zahlenmaBig starken
Auftreten der kokkoiden Gebilde bei Sauerstoffzutritt und in alternden
Kulturen, d. h. unter fiir diesen Organismus ungiinstigen Bedingungen, wie
auch nach der festgestellten geringen Entwicklungsfahigkeit, sind vielleicht
in den Kokken Zellen herabgesetzter Vitalitat zu sehen. Es scheint dann
v^tandlich, daB diese bereits geschwtchten Zellen den ungiinst^en Verhalt-
nissen des hai^enden Tropfens nicht mehr gewachsen sind und zugrunde
gehen. In den Fallen aber, wo Kokken sich noch weiter ziiohten lieBen,

tTbcr at3rpische Zellformen bei Bacillus amj-lobacter.

331

standen diese bei der zur Anwcndung gelangten Kulturart (Kulturrolirclieii)
an sich schon unter giinstigeren Becbngungen als der hangende Tropfen sie
bietet. Auch liefie sich die begrenzte IVeiterentwicklungsfahigkeit der Kok-
ken in diesen Fallen durch die Annahme erklaren, daC sie weniger veit-
gehend degeneriert -waren.

Die durch Einwirkung geringer Sauerstoffmengen isolierten kokken-
formigen Zellen zeigten nach der zweiten tberimpfung folgendes Yerhalten:
Auf D-Agar bildeten sie weifie, zarte Kolonien; sie waren meist klein imd
flachaufliegend, ganz analog den von Bredemann beschriebenen.
Die Grdfie der Kokken war auBerordentlich verschieden. ilan beobachtete
Zellen von 0,8 — 1,7 fi Durchmesser, die einzeln und in Verbanden zusammen-
lagen und nicht selten unregelmaBige Form besaBen. Die Kokken nahmen
leicht Anilinfarbstoffe auf, waren grampositiv und wurden durch 6 Min.
langes Erhitzen auf 80® C getotet. tJber die Hitzeresistenz liegen bei B r e d e -
m a n n keine Angaben vor. Nach Cunninghamm werden die Kokken
durch 10 Min. lange Erhitzung auf 60® C getotet.

AuBerdem wurde das morphologische und physiologische Verhalten der
Kokken nach 24 und 48 Std. auf Fleischextrakt-Pepton-Agar, Fleisch-
extrakt-Pepton-Bouillon, Nahrgelatine, D-Agar, D-Bouillon, Biomalzagar,
Blutagar^), Lackmusmolke, Maltose, Rhamnose, Saccharose, Arabinose, Xylose
und Mannit^) gepruft. Auf den meisten Nahrboden war nach 24 Std. geringes
Wachstum zu beobachten, das z. T. nach 48 Std. zugenommen hatte. Wo
Wachstum festzustellen war, bestanden die Kolonien aus Kokken; diese
lagen teils einzeln, teils in Gruppen oder Ketten. Die GroBe variierte stark,
war aber auch von der Art des Nahrbodens abhangig. Eine Sonderstellung
nahm Blutagar ein. Hier wurde ein relativ gutes Wachstum gefunden. Von
diesem Nahrboden gelangen auch noch Weiterimpfungen®). Aber auf die
Dauer blieben auch hier Weiterziichtungsversuche ohne Erfolg. In Lack-
musmolke fand Farbumschlag statt, der auf Saurebildung Mnweist. In
den verschiedensten Zuckernahrlosungen blieb das Wachstum aus.

Die Versuche haben somit ergeben, daB:

1. Kolonien, die nur aus Kokken bestanden, unter Einwirkung von
ca. 50 — 100 mg Og/l bei einem der drei Stamme entstehen,

Der Blutagar bestand aus l^o Pepton, 1% Liebigs Fleischextrakt, 0,3®o NaCl,
3% Agar imd ca. 10°o Blut.

®) Die verschiedenen Zuckern&hrbdden enthielten auBer ^^2 g <1©^ betreffenden
Zuokerart bzw. des Alkohols in 1000 g HaO: 0,5 g Na 2 HnP 04 , 1,0 g (XTHJaSOi, 2 g Na-
triumzitrat, 5 g NaCI und 0,5 g Peptor. Dem Ndhrsubstrat wurden einige Tropfen
Methylrot zugegeben.

®) Das verhfeltnismaBig gute Wachstum der Kokken auf Blutagar lieB ver-
muten, dafi sich vieUeicht unter ganz bestinunten Kulturbedingungen die kDkkoiden
Gebilde unbesohrankt vermehren. Nach AbsohluB der Hauptversuche wurden deshalb
Untersuchungen mit neu isolierten Amylobaoter - Stammen unter Beibehah
tung der fnSier benutzten Methodik angestellt. Neben dsn gebrauchlichen Nahr-
boden wie D-Agar, D-BouiUon wurden auch solche verwandt, wie sie besonders in der
medizinischen Bakteriologie benutzt werden, wie Rdstblut-Agar, Blut-Agar, Dri-
g a 1 s k y - Nahrboden und Malachitgrun-Agar nach Lentz In zahlreichen Ver-
suchen konnte i unter Einwirkung von 50 mg Oa/Liter, aber auch bei geringerer
Sauerstoffzufuhr nur in vier Fallen Kokkenkolonien beobachtet werden, und zwar
2mal auf Laktose-Agar und je Imal auf Rostblut-Agar und D-Agar. Diese Kokken,
die sowohl mikroskopisch wie makroskopisch mit den in friiheren Versuchen erhal-
tenen ubereinstimmten, lieBen sich trotz aller VorsiehtsmaBregeln und Variation der
Bedingungen nicht weiterzuchten. Dieses Ergebnis bestatigt somit die aus den friiheren
Versuchen gewonnenen Erfahrungen. Die einmal beobachtete begrenzte WeiterzUeht-
barkeit der Kokken auf Blut-Agar iat daher wohl nur als Sonderfall zu bewerteu.

332

Wilhelm Bueksteeg,

2. diesen kokkoiden Gebilden keine unbegrcnzte Entwicklungsfahig-
keit zukommt,

3. die im hangenden Tropfen sowohl unter anaeroben als auch aeroben
Bedingungen beobackteten Kokkcn keine Weiterentmcklung zeigen.

Der Stamm C untcrschicd sich von den iibrigen Stammcn dadurch,
dafi Mer neben den iibrigen atypischen Zellformen in grofiem MaBe groBere
rundliche Zellen mit Inhaltskorpern anftraten, wie sie auch von Cunning-
ham beschrieben sind (Abb. 4 u. 6). Sie entsprachen den von ihm als Gonid-
angien bzvr. Gonidien gedeuteten Formen. Entsprechend der Mengc der kok-
kenahnlichen Zellen in manchen Kulturen des Stammes B konnte man die
groBen rundlichen Zellen in Kulturen des Stammes C finden. Besonders im
Kondenswasser der D-Agarrohrchen waren diese kugeligen Zellen sehr reichlich
vorhanden. Dureh Variation der AuBenbedingungen konnten die groBen
kugeligen Zellen nieht vrillkiirlich erhalten und vorhandene nicht sicht-
bar vermehrt werden. Diese atypischen Zellen, die oft einen Durchmesser
bis zu 3,5 fjb besaBen, schlossen in ihrem Innem KSrnchen ein, die sich mit
Methylenblau intensiv farbten. Jogen und Volutin wurde von ihnen nicht
gespeichert. Die Priifung des Kondenswassers ergab eine deutlieh saure
Reaktion. Deshalb lag der Gedanke nahe, daB diese runden Gebilde dureh
Veranderung des pn-Wertes des Nahrsubstrates entstanden seien. Da jedoch
auch bei Zusatz von 1% Calziumkarbonat solche Zellformen auftraten,
kann die saure Reaktion nieht als Ursache ihrer Entstehung angesehen
■werden.

Alle anderen oben genannten atypischen Formen traten besonders
in alten Kulturen auf. Von all’ den Zelltypen zeigen die langen FSden und
die keulenformigen Zellen z. T. Jogen, -wahrend die Kiimmerstabchen sich
in unseren Versuehen mit Jod nicht blau farbten. Mit Methylenblau lieBen
sich die Kiimmerformen ebenfalls schlecht fhrben, •wahrend die anderen
Formen diesen Farbstoff gut aufnahmen. Bei verschiedener Behandlung
gleichen Bakterienmaterials ergaben sich oft verschiedene Bildcr. In solchen
gefarbten Praparaten konnten Gebilde beobachtet werden, die im lebenden
ftaparat der gleichen Kultur niemals gefunden ■wurden und deshalb als
Kunstprodukte zu gelten haben. Nicht selten zeigten die mit Anilinfarben
behandelten Praparate Bilder, ahnlich den von Cunningham wieder-
gegebenen und als RegenerativkOrper gedeuteten Formen. S t a p p und
Z y c h a (1932) zeigen an Hand von Mikrophotogrammen des B a e. my-
c 0 i d e s sehr sch6n, 'wie unterschiedlich beispielsweise ein verschieden
gefarbtes Praparat aussehen kann. Sie betonen ebenfalls den eingeschrank-
ten Wert gefarbter Praparate fiir die Beurteilung von Bakterienumwand-
lungen.

Die Lebendbeobachtungen, die mit diesen verlnderten Zellformen an-
gestellt 'wurden, ergaben keine Anhaltspunkte fiir ihr Weiterent'wicklungs-
vermSgen.

EinfluB der WasserstolGlonenkonzentration, Temperatur und chemiseher
Agenzieu auf die Bakterienformen.

Zum weiteren Studium der Abhangigkeit der Entstehung atypischer
Formen "wurde in vergleichenden Kulturen der EinfluB verschiedener AuBen-
bedingungen gepruft.

Tiber atypisohe Zellfoimon bei Bacillus amylobaoter.

333

a)Wasserstoffionenkonzentratioii.

Zunachst sollte festgestellt 'vrerden, ob zwischen der Reaktion des NShr-
bodens iind dem Auftreten der groBen kugeligen Zellgebilde Beziebtingen
bestanden. Zu diesem Zweck wurde von verscMeden alten Knltuien eine
Anzabl D-Agar und D-Bouillon-Rohrcben mit den pn-Werten 7,5; 7,0;
6,5; 6,0; 5,4; 5,0; 4,4 und 3,5 (angesauert mit HCl) beimpft. Nach 6 Tagen
zeigten alle Rohrchen, auBer denen mit einem pn-AVert von 4,4 und 3,5
makroskopiscb sichtbares Wachstum. Der mikroskopische Befimd war
folgender. Bei einem pn-Wert von 7,0— 6,5 waren Stabehen, Clostridien
mit Sporenanlagen und reiehliche Jogenbildung zu beobacliten. Erst bei
Ph = 6,0 wild die logeneinlagerung weniger intensiv, dagegen ist das Waehs-
tum im wesentlichen dasselbe wie bei den hoheren pn-Werten. Merklieh
seblechter wird es bei pn = 6,4; neben normalen Zellen findet man zahl-
reiche Kummerformen; diese kleinen, schwacb liehtbreebenden Stabchen
sind 0,6 — 0,8 [i breit und 1,2 — 1,5 (i lang, logen wird niebt gebildet. Sebr
scbwacbes Waehstum findet bei pn = 5,0 statt; bier sind fast nur Kiimmer-
stabcben zu beobachten. Bei pn = 4,4 und 3,6 wird es ganzlieb sistiert. Hier-
naeb laBt sicb die erwartete Beziehung zwiscben der Reaktion des Nabr-
bodens und dem Auftreten kugeliger Zellen niebt feststellen. Dagegen gebt
aus dem seblecbtcn Waehstum, dem Auftreten von Kummerformen und dem
Aufhoren der logenspeioherung der sebadigende EinfluB niederer pn-Werte
hervor. Dieselbe Beziehung zwiscben pn-Wert und Reservestoftbildung
wurde von S v a r t s (1932) gefunden, die darauf binwies, daB die Wasser-
stoffionenkonzentration mit zu beriicksiehtigen sei, wenn die Reservestoff-
speicherung als systematisches Merkmal benutzt werden soil.

b) Temperatur.

Der EinfluB der Temperatur gebt aus Versueben hervor, in welcben
D-Agar und D-Bouillon-Kulturen aus verscMeden altem Bakterienmaterial
bei 16°, 30° und 46° C aufbewahrt wurden.

Das beste Waehstum zeigten die bei 30° C kultivierten Rohrchen. Die
Kulturen enthielten sebr wenige oder keine atypischen Zellformen. Bei
16° C war das Waehstum im Vcrhaltnis dazu schlecht. Die mikroskopische
Untersuchung ergab neben normalen Zellen kleine, schwacb lichtbreebende
Stabchen und kokkoide Gebilde. Dagegen konnte man an einigen der bei
45° C aufbewahrten Kulturen schon makroskopiscb Veranderungen wahx-
nehmen. Die Kolonien waren niebt so kompakt wie die bei niederer Terat-
poratur gezuchteton, sondem durchsichtig und sehleimig. Der mikroskopische
Befund ergab ebenfalls ein vollig verandertes Aussehen. Neben wenigen
normalen Zellen und Zellfaden fand man die groBen Kugelformen und
kokkenabnlichon Zellen in grofier Menge. Wenn aucb niebt alle bei 45° C
geziichteten Kulturen in gleicb groBem MaBe atypisehe Zellen enthielten,
so war doch der stark verandemde EinfluB der hohen Temperatiur deut-
lich siebtbar.

Der Bedeutung des Sauerstoffs fUr die Entstebung atypiseber Formen
ist bereits bei Besprechung der kokkoiden Gebilde Erwahnung getan.

Einige Forscher glauben, daB man dureh die Wirkung chemiseher
Agenzien und spezifiseber Bedingungen ganz bestimmte Pbasen aus dem
Entwicklungskreis der Bakterien erhalten kann. (Fuhrmann 1908,

334

Wilhelm Bueksteeg,

Kuhn 1931 u. a.) In den im folgenden geschilderten Varsuchen wurde
nun die Wirkung des Phenols und Lithiumchlorids auf das Vorhalten der
Bakterien gepriift.

c) Phenol.

Naeh Kuhn (1931) soil bei B a c t. c o 1 i , p a r a t y p h i u. a.
durch Phenol und Ammoniak die Entstehung der C-Formen auf expeii-
mentellem Wege gefhrdert werdcn. Meine Versuche iiber den EinfluB von
Phenol auf Bacillus amylobacter wurden nach der von Kuhn

angegebenen Methode ausgefuhrt. Es wurde
Bakterienmaterial in PhenollSsungen von den
Konzentrationen 1 : 100, 1 : 200 und 1 : 300 auf-
geschwemmt und kurze Zeit (1 — 2 Min.) der
Wirkung dieses Stoffesausgesetzt. VondiesenAuf-
schwemmungen wurden D-Agarrhhrchen beimpft
und auf D-Agarplatten ausgespatelt^). Diemitio-
skopisehe Priifung der Kulturen ergab, daB Phe-
nol in der Konzentration 1 : 100 fiir vegetative

Abb. 8. 1 Tag alte Mega*
t e r 1 u m - Kultur. Nahragar.
(Normale Stabchen.)

Abb. 9.

Abb. 10.

Abb. 9. 2 Tage alte Megatorium- Kultur, Lithiumohlorid-Bouillon. (Fa-

denformen.)

Abb. 10. 6 Tage alte Megaterium - Kultur. Lithiumchlorid-Agar. („Ri©-

senformen**, in deren Innerii sich Fotttropfon befinden.)

Formen stark giftig war. Von den angesetzten Kulturen zeigten immer nur
wenige schwaches Waehstuni. Die Kolonien bestanden vornehmlich aus
Kiimmerformen. Wurde von solchen Kulturen auf neue NahrbQden uber-
geimpft, dann blieb meist jegliches Waehstuni aus. Dagegen zeigte Sporen-
material, das ebenso lange mit Phenol behandelt war, schon nach einigen
Tagen Kolonien, die normale Zellfonnen enthielten. Bei genauer Durch-
sicht fand man nieht mehr atypische Zellen, als sie unter den iiblichen Ver-
haJtnissen vorkommen. Die schwacheren Konzentrationen lieferten nieht
selten sterile, meist aber im Wachstum gehemmte Kulturen mit atypischen
Zellen. Alle mit Phenol angestellten Versuche zeigten eindeutig, daB der
Mpferfolg von der Menge des Ausgangs-Materials sehr abhangig war.

1) Bei der Impfung werden jedoch nocsh geringe Mengen der PhenoUbsung durch
die Platinose ataf die Agarschicht gebracht.

TQber atypisehe Zellfotmen bei Bacillus amylobaoter.

335

Wurde nur ■wenig Material iibergeimpft, so blieb das "Wachstum meist aus.
Fiir diese Erscheinung bieten sicb mekrere Erklarungsmoglichkeiten:

1. Zunachst muB bei der tJberimpfung von Zellen dor Impferfolg dann
unsicher sein, wenn das betreffende Material schon unter normalen Ver-
baltnissen geringe Keimfabigkeit besitzt.

2. Wean iiberbaupt durch die Behandlung eine Giftwkiing mit Phenol
stattfindet, \vird dadurch eine Auslese auf "vriderstandsfahige Zellen vor-
gcnoinmen. Je grSBer die Menge des Impfmaterials ist, inn so mehr nimmt
die Aussicht, resistente Zellen zu finden, zu.

Znm Vergleiche wurde in gleicher Weise Material von Bac. mega-
t e r i u m in Phenollosung derselben Konzentrationen wie bei Bac.
amylobaoter aufgesehwemmt und auf drei verschiedene Nahxbfiden,
D-Agar, Fleisehextrakt-Pepton-Agar und Bouillon geimpft und bei 32“ C ge-
ziichtet. Die TJntersuchung ergab, daB besonders die Bouillonrohrehen sich
bezuglich der Bakterienformen nicht alle gleichmaBig verhielten. Wie auf den
AgamahrbSden waren auch hier neben normalen Zellformen (Abb. 8) lange
Faden mit Inhaltskorpern und groBe aufgedunsene Formen (ahnlich Abb. 9
u. 10) htufiger zu beobaehten. Jedoeh war in den Bouillonkulturen das Ver-
haltnis oft zugunsten der atypischen Formen verschoben. In anderen Ver-
suchsreihen fielen neben Sporen, groBen runden Zellen, keulenfdrmigen
Stabchen noch unregelmaBig geformte, schleimartige Massen auf, in denen
sich mit Methylenblau farbbare Korperchen befanden. Diese Gebilde konn-
ten dem Aussehen nach mit dem von L 6 h n i s beschriebenen Symplasma
verglichen werden.

Die Beobachtung dieser atypischen Zellen im hangenden Tropfen bei
32“ C ergab keine Veranderung der Gebilde, auch nicht nach langerer Be-
obachtungszeit. Die in den kugeligen Zellen vorhandenen lichtbrechenden
Kugelchen wurden mit Sudan und GelblSsung als Fett identifiziert.

d) Lithiumchlorid.

Nach Angaben in der Literatur kommt dem Lithiumchlorid eine beson-
ders groBe Bedeutung fiir die Formveranderung der Bakterien zu. Nach
den Beobachtungen von Gamaleia (1900) — auf den die friihesten
TJntersuehungen von Lithiumchlorid auf Wachstum und Gestalt der Bak-
terien zuruckgehen — und M a a s s e n (1904) werden durch Zusatz von
Lithiumchlorid Umbildungen der Bakterien hervorgeruf en. Kuhn (1931) sieht
die Wirkung der Wirkung des Lithiumchlorids in der V er drangung der normalen
Bakterienformen und FOrderung seiner als Parasiten angesehenen A-Formen.
Klieneberger (1930) fand in ihren Versuchen an Bact. coli,
paracoli und anderen Bakterien ebenfalls eine mit wachsender Lithium-
chlorid-Konzentration zunehmende Bildung von atypischen Formen. Ober-
halb einer bestimmten Konzentrationsgrenze wird das Wachstum iiberhaupt
sistiert. Die Formveranderung, die sie als „von Zellteilung zu Zellteilung“
(S. 506) zunehmendes AnschweUen der Stabchen beobaehten konnte, fiihrt
sie auf hypertrophisehes Wachstum zuruck, das nach ihrer Ansicht durch
das in die Zellen eindringende Gift ausgelBst wird. Nach Aufhoren des Gift-
reizes sollen „die Bakterien unter Streckungen in die normale Form iiber-
gehen“ (S. 606). Klieneberger konnte ebenso wie schon friiher
M a a s s e n eine Gewohnung und bei nicht zu hohen Konzentrationen
Wachstumssteigerung feststellen. SehlieBlieh soil nach einer Mitteilung

336

Wilhelm Buck&teeg,

von Scliinidt-Kelil (1930) eine schon normalerwcise stattfindende
TJm'wandlnng von Sarcinaformen in gramnegative St§,bchen durch Litliium-
clilorid beschleunigt werden.

In unseren Yersuchen wurden D-Agar-Rohrclien, die 1%^) LiCl ent-
hielten, mit verschieden altem Amyl obactcr material beimpft und
unter sonst normalen Bedingungen gezuchtet. Selbst nacli langerer Zeit
fand auf diesem Nahi’bodon kein Waehstum statt. In Yersuchen mit nied-
rigen LiCl-Konzentrationen zeigten sich bei 0,1 und 0,3% nacli 10 Tagen
besseres Waehstum als bei 0,5%, hier waren auf dem oberen Teil des Schrag-
agars kleine, weifie Kolonien sichtbar. Diesc bestandon nach dem mikro-
skopischen Bild meist aus Kiimmerformen, die keine Reservestoffe ge-
speichert batten. Im Innern solcher schwach lichtbrechenden StSbehen
traten oft Kiigelchen auf, ahnlich den schon erwahnten Inhaltskbrperchen,
die Cunningham fiir Regenerativkorper im Sinne L 6 h n i s’ halt.
Die mit solchem Material beimpften Kulturen blieben steril. Daraus kann
man schliefien, daB die lichtbrechenden InhaltskSrper, wie auch die Kummer-
stabehen selbst, nicht mehr -vreiter entwieklungsfahig sind.

Nach diesen Yersuchen stellt die Konzentration von 0,6% LiCl die
obere Grenze fUr das Waehstum von Bac. amylobaeter auf unseren
Nahrbbden dar.

Die ZellgrOBe der unter LithiumchlorideinfluB gewachsenen Amylo-
baeter stabchen variierte sehr stark, von 1,2 — 6 p, fiir die Lange und 0,4
bis 1 ,2 fiir die Breite. Wurden Kolonien, die auf LithiumchloridnahrbSden
gewaehsen waren, •vrieder dem EinfluB des LiCl ausgesetzt, so konnte wah-
rend der Versuehsdauer ein Naehlassen der Giftwirkung festgestellt werden.
So wurde in manchen Fallen noeh bei Salzgehalten von 0,8 — 1% Waehs-
tum erhalten. Dann aber nahm, je langer ein Stamm unter LiCl-Einflufi
gezogen wurde, die Zahl der veranderten Formen ab.

Die mit Bac. megaterium und Bact. coli angestellten Versnche
ergaben eine im Vergleich zu Amylobaeter bedeutend hbhere Resi-
stenz gegen Lithiumclilorid. Selbst bei einer LiCl-Konzentration von 3,0%
wurde noch starkes Waehstum beobachtet*). Wahrend in Kulturen, die
bei 0,1, 0,3 und 0,5% LiCl-Zusatz gezogen waren, sich kein EinfluB des
Salzes auf dicse Zellformen feststellen lieB, waren bei
hbhoren Konzentrationen die Bakterienzellcn verandert.
Schon nach 24 Std. nahmen die Kolonien besonders auf
D-Agar eine schleimige Konsistenz an. AuBer groBen
kugeligen Gobilden, die nicht selten Vakuolen besaBen,
traten ganz unregelmaBige, halbmondformige Zellen und
,.Riesenformcn“ auf (Abb. 9, 10 und 11). Einige von
Abb. 11 . 14 std. aite haben Ahnlichkeit mit den von Kuhn be-

Megaterium- schriebenen Pettenkoferien. Alle diese atypischen Zell-
Kultur. Lithiumohio. fonuen besaBen in ihrem Inneren lichtbreehende KSr-
rid-Agar. (GroBe, un- perehen, die auch auBerhalb der Zellen vorkamen und
regeima&ge^ ^ ZeUge- Fettreaktion zeigten.

Durch Ausf&Uung von geringen Mengen Lithiumphosphat (oa. 7% der an-
gewandten LiCl-Menge) hifolge der in der Nahrldsung vorhandenen PhosphorsAure
sind die zur Wirkung gelangten LiCl-Mengen etwas kleiner als angegeben.

*) Dafi Bact. ooli bei diesen und selbst noch hdheren Konzentrationen
— nach Klien eberger (1930) 8% — zumindest nooh Waehstum zeigt, ist schon
durch friihere Versuche bekannt (z. B. Maassen, 1904).

"Cber atypische Zellformen bei Bacillus amylobactei*

337

Impfte man nun von einer LiCl-Kultur, die in groBer ilenge atypische
Zellcn enthielt, auf normalen Nahrboden iiber, so fand man schon nach
24 Std. gutes Wachstum. So gewonnene Kulturen bestanden aber nur aus
normalen Stabchen, nur selten konnte man daneben einen kdrnigen Rest
und andere, undefinierbare Gebilde (vielleieht tJberreste der Kugelformen)
beobachten. Wurde nun Material von diesen normalen Stabchen auf
LiCl-Nahrboden iibertragen, so zeigten sich viedor schleimige Kolonien,
die hauptsachlicli aus den groBen kugeligen Zellformen bestanden. Man
konnte das Experiment beliebig oft wiederholen, immer wieder fand man
auf LiCl-Nahrboden die atypischen Zellen und auf normalem Nahrsubstrat
normale Stabchen.

Um cine genaue Vorstellung von der Entstehung der durch LiCl be-
dingten Veranderungen, dem Wesen und der Bedeutung der atypischen
Formen zu erhalten, wurden verschiedene Dauerbeobachtungen von B a e.
m e g a t e r i u m im hangenden Tropfen ausgefiihrt. Zu Sesem Zwecke
wrden einmal normale Stabchen aus LiCl-freien Kulturen in hangende
Tropfen von D-Agar^) und Bouillon mit einem LiCl-Gehalt von 1,5% tiber-
fuhrt. In anderen Versuchen mirden atypische Formen den Kulturrohrchen
mit einem LiCl-Gehalt von 1,5% entnommen und in gleichem, jedoch LiCl-
freiem Medium aufgeschwemmt und in hangenden Tropfen, in denen in der

%

600 h 6i20h 710h 730h^ 815h

Abb. 12. Bao. megaterium. Entstehung atypischer Zeilformen. Dauer-
beobachtung. Lithiumchlorid-Agar.

Eegel nicht mehr als 2 — 3 Zellformen enthalten waren, das Verhalten dieser
ZeUen beobaehtet. Zur Wahrung moglichst gleicher Versuchsbedingungen
■wurde ein Teil der Objekte mittels eines heizbaren Objekttisclies bei einer
Temperatur von 32® C gehalten. Einige Beobaehtungen "wurden bei Zimmer-
tcmperatur ausgefuhrt. Zunachst "waren die Versuehsergebnisse verschieden,
je nachdem ob D-Agar oder Bouillon als Substrat benutzt wurde. Die auf
die diinne Agarschicht des Deckglasehens iibertragenen normalen Zellen
zeigten anfanglich ein ganz normales Wachstum; allmahlicb aber 'wurden
einigo Zellen dicker und nahmen mehr und mehr rundliche Formen an
(Abb. 12). Gleichzeitig damit gingen Veranderungen im Plasma vor sich.
Es entstanden dann in der sich verdickenden Zelle verschieden starke, licht-
brechendo Bezirke, aus welchen stark lichtbrechende Kugeln hervorgingen,
die d’urch den positiven Ausfall der Sudanreaktion sich als Fett erwiesen.
Gleichzeitig mit der Fettbildung wurde die Zelhnembran deutlicher siehtbar.
Dieser ganze Vorgang vollzog sich innerhalb von 2—3 Std. Es wurden aber
einige Zellen von einer solchen Formveranderung nicht erfafit. Bei diesen
nahm das Lichtbrechungsvermbgen immer mehr ab, schlieBlich losten sie
sich auf und lieBen kornige Reste zuriiek.

Wurden normale Megaterium stabchen in Bouillontropfen von
1,5% LiCl-Gehalt iiberfiihrt, so lieB das anfanglich lebhafte Wachstum der
Zellen bald nach. Zugleich setzten Teilungsvorgange ein, ohne daB icdoch

Bei Verwendung von Agar wurde dieser in ganz dimner Schicht auf das Deck-
gldschen gegeben.

Zweite Abt. Bd. 91.

22

338

TVilhelm Bucksteeg,

die Teiluiigsprodukte sick voneinander Ifisten. Die so entstandenen Ge-
bilde machten ganz den Eindruck von Kokkenkctten (Abb. 13). Die ge-
scbilderte Entwicklung war nach 12 — 16 Std. beendet. Naeh ea. 20 Std.
fielen einige Zellen durch starke Lichtbrechnng auf. Der positive Ausfall
der Sporenfarbung zeigte, dafi diese Erscheinung von Sporen, welche die
Zellen fast gSnzlich ausMlten, berruhrtc.

Zur Entscheidung der Frage, ob die unter dem EinfluB von Lithium-
chlorid veranderten Megaterium zellen noeh weiter entwicklungsfahig
_ sind, wurden wiederholt atypische Formon aus

Kulturen, die auf Nahrbfiden mit l,5%LiCl ge-
wachsen waren, in LiCl-freien NahrlSsungen
aufgeschwemmt und im hangenden Tropfen der
Dauerbeobachtung unterworf en (Abb. 14). Diese
Versuehe ergaben, dafi die atypischen Formen,
aber aueh die nur wenig veranderten Zellen keine
Wacbstums- und Entwieklungsvorgange melir
durchmachten. Eine Entstehung normaler Stab- <
chen liefi sich aber inamer dann beobachten,

wenn reichliches Bakterienmaterial Ubergeimpft

war. Diese normalen Stabchen entstanden aber, wie die Beobachtung
ergab, durch Keimung aus iibergeimpften, noch nicht geschadigten Sporen.

Die hier geschilderten Erfataungen fiber den formverandernden Einflufi
von LitMumchlorid stehen zum Teil mit alteren, an anderen Objekten ge-

machten Beobachtungen im EinMang (vgl. Gamaleia [1900] und M a a 6 e n
[1904]). Wie von alien frfiheren Untersuchem schon beboachtet, bewirkte
LiCl in bestimmten Konzentrationen ein Auftreten mannigfach abweichender

O Q, Q

Zellformen. Ffir die
Annahme, dafi diese
Formen parasitarem
Befall ihren Ursprung

1508h 15t5h 1520h 1530h

1540h 1605h 1615h 1630h 1705h

Abb. 14. Verhalten der durch Lithiuinchlorid geschadigten
Megaterium - Zellen in NahrbouiUon ohne Lilhiumchlo-
rid. Dauerbeobachtung.

verdanken im Sinne
Kuhns (1931), bieten
unsere Versuehe nicht
den geringsten Anhalt.
Dagegen ist der An-
sieht Klienobor-
g e r s (1930) beizu-
pflichten, dafi es sich
bei den atypischen
Formen urn durch

das Salz geschadigte und nicht weiter entwicklungsfahige Formen handelt.
Ffir diese Deutung sprieht vor allem Klienebergers Behind, dafi bei
Aufhfiren der schadigenden Einflfisse noch nicht zu weit verfinderte Formen
ihre normale Gestalt und zugleich ihr Entwicklungsvermogen wiedcrerlangen
kSnnen. Ffir Bac. megaterium konnte ich letzteres allerdings nicht
bestatigen. Die ffir andere Objekte beschriebene GewShnung an steigende
LiCl-Konzentration liefi sich auch ffir Megaterium beobachten.

Das Zustandekommen von Veranderungen der Bakterienzellen durch
Salzzusatze kfinnte auf eine spezifische Wirknng der chemischen Substanz
evtl. unter gleichzeitiger Anderung der osmotischen Verhaltnisse zurfick-
geffihrt werden. Klieneberger halt eine osmotische Bedingtheit der

tJber atypi&che Zellformen bei Bacillus amylobacter.

339

ZellverSndemngcii fiir ausgeschlossen, da nach ihrer Ansicht in einem konzen-
trierteren Medium keine Sch'wellungsvoTgaiige moglich sein kOnnen, wSh-
rend nach den Plasmoptyseversuchen A. Fischers ('1906) ZellvergrSfie-
rungen auch bei hoheren Anfienkonzentrationen mSglich sind. Fine Ent-
scheidnng, welche Ursachen iiir die beohachteten morphologischen Yer-
anderungen verantwortlich zn machen sind, lieB sich nach nnseren Yer-
snchen nicht treffen.

FiltrationsTersnche.

Fiir das Problem des Bakterienpleomorphismus ist die Frage nach dem
Vorkommen „filtrierbarer“ oder ,,iiltraTisibler“ Entwicklungsstadien von
Bedeutung. Der Terminus „filtrierbare Stadien“ ist aber nur bei ^gabe
der Qualitat des Filters und der Bakteriengrdfie smnvoU.

Die Existenz „filtrierbarer“ Bakterienformen wd vor allem von
L 6 h n i s (1921) angenommen. Fiir Bac. amylobacter glaubte
M i e h e (1923) zuerst filtrierbare Stadien festgestellt zu haben. Er be-
nutzte Membranfilter nach Zsigmondy-Bachmann, „die mit
dor Zahl 20 geeicht ■waren“, und schliefit aus seinen Beobachtungen, daB
Bac. amylobacter in einem Entwicklungsstadium dureh das Filter
gegangen sein muB, das ganz bedeutend kleiner ist als seine normale
GrhBe.

de Regel (1932) konnte in Filtiaten von Am yl ob a ct erroh-
kulturen bei Benutzung von Filtern mit 0.75 // Porengiiifie ebenfalls Wachs-
tum von Amylobacter nachveisen^).

Durch die von uns durchgefiihrten Filtrationsversuche sollte entschie-
den werden, ob bei Bac. amylobacter vermehrungsfahige Ent-
■wicklungsstadien existieren, welche Filter zu passieren vermSgen, deren
Porenbreite kleiner ist als der Durchmesser der kleinsten nonnalen
Bakterienzellen; dabei •war zunSchst die Vorfrage zu beant'worten, ob nor-
male Zellen sich ohne EinbuBe an WachsturnsvermSgen durch Filter ge-
eigneter Porengrofie filtrieren lassen.

Fiir dicse Versuche kam drei Tage bis vier Wochen altes Bakterien-
material zur Verwendung, "welches ausschlieBlich in Dextrosebouillon ge-
wachsen "war. Fiir die Filtration wurde der ganz aus Metall bestehende
Bakteriendruckfiltrationsapparat (Membranfiltergesellschaft m. b. H. Got-
tingen) da" mit PreBluft arbeitct, benutzt. Die Filtration -wurde bei einem
Uberdruck von 1—1,6 Atmospharen vorgenommen. Es -wurden geeichte
Cella-Filter mit 0.76, 1,5 und 3,0 ii PorengrOBe benutzt.

Vor jeder Filtration -wurden die zu filtrierenden Kulturen einer mikro-
skopischen Priifung unterzogen. Das Filtrat -wurde auf Agarplatten, von
denen ich bei jeder Filtration zwei ansetzte, ausgegossen. Die mit dem
Filtrat beschickten Flatten -wurden dann im Vacuum bei 30® C aufbe-wahrt
und auf Bakterien-wachstum untersucht.

Von sieben Versuchsreihen, in -welchen je drei, im ganzen also 21 Fil-

1) Wahrend der Dnicklogung meiner Arbeit erschien eine Veroffentliohung von
A. lmsenecki» ,,Stmktur imd Entwicklungsgeschidite des Granulobacter
peotinovorn m“. Verf. filtrierte Granulobacter peotinovorum-
Kulturen durch Chamberland - Kerze L, und konnte bei Impfung des Filtrats
in 5 von 34 Fallen Waehstum von Granulobacter pectinovorum, der
nach Bredemann (1009) zu Bac. amylobacter A. M. et Bredemann ge-
h6rt» beobachlen.

22*

340

Wilhelm Bucksteeg,

trationen ausgefiilirt und 42 Flatten bescMckt wurden, konnte in keinem
Falle AVachstum festgestellt •werden^j.

TJnsere Versuche ergaben also:

1. Nach Filtration durch Cellafilter von eincr Porengrofie von 0,76,
1,6 und 3,0 n lieBen sich keine „liltrierbaren“ Stadien nachweisen;

2. Auch die normalen Araylobacter zellen und Sporen passierten
nicht diese Filter, nicht einmal die von 3,0 /< PorengroBe, ein Wert, der iiber
dem des Bakteriendurchmessers der Zelle liegt.

Fiir das negative Ergebnis bieten sick verschiedene Erklaxungsmog-
lichkeiten;

Zunacbst kann der in der Literatur®) oft diskutierte EinfluB des Fil-
trationsvorganges fiir die Sterilitat des Filtrates verantwortlich gemacht
■werden. Hierbei ware u. a. an die Sieb- und Adsorptionswirkung, sowie
an die Sehiebtbildung durch eventuell in der zu filtriercnden Fliissigkeit
vorhandenen kolloidalen Teilchen zu denken, welche den Durchtritt der
Bakterienzelle erschweren oder sogar verhindem kann®).

Weiterhin besteht die MSgUchkeit, daB Araylobacter zellen
zwar diese Filter, deren Porenweite iiber dera Wert der BakteriengrfiBe
liegt, passierten, daB aber diese wenigen Zellen, die ira Filtrat vorhanden sind,
sich nicht weiter verraehrt haben.

Besonders aber kann eine Schadigung durch die relativ hohe Sauerstoff-
konzentration, die mit der Anwendung von PreBluft verbunden ist, und
die bei einer Atraosphare Druck bei Ziraraerteraperatur ca. 640 mg /I be-
tragt, stattgefunden haben'*).

Nach den Angaben D o r n e r s (1924) soli eine Schadigung der vegeta-
tiven Formen von Bac. araylobacter durch Luftsauerstoff bereits
nach 40 Min. eintreten; bei Sporen lieB sich dagegen nach drei Std. noch
keine Schadigung feststellen. Nach einer Angabe von Bredemann
(1909) behielten Sporen nach einer 16 Wochen langen Einwirkung einer
Sauerstoffkonzentration von 26 390 mg/1 — er brachte Og unter 20 Atmo-
spharen Druck — noch ihr Wachstumsverm6gen.

Nach dicsen Ergebnissen ware die Anwendung von Bberdruck fiir die
Filtration von Sporenmaterial beziiglich der SchadigungsmSglichkeit durch
Sauerstoff unbedenklich.

Urn nun zu prufen, ob eine Schadigung der vegetativen Formen durch
die verhaltnismaBig hohe Sauerstoffkonzentration stattgefunden hatte,
wurden in weiter en Versuchsreihen, welche ausschlieBlich mit jungen Kul-
turen, die noch keine Sporen enthielten, ausgefuhrt wurden, auBer don
Impfungen mit Material der Ausgangskulturen und dem Filtrate auch noch
solehe mit dem Filterriickstande vorgenommen.

1) B o b e r g konnte in noch nicht verSffentlichten Versuohen bei Impfung mit
Piltraten von Amylobacter-Azotobaoter-Rohknlturen ebenfalls kein Wachstum beob-
achten.

®) Es sei besondera anf die Ausfuhrungen von Bechold (1931) verwiesen.
Siehe auch Schatzel (1932).

Nach Bechold (1931) soil die Bakterienzelle nur dann ein Filter passieren
konnen, wenn dessen Forendurchmesser znindestens 8 — 15mal so groB ist, wie der
Langendnrchmesser der fraglichen Zelle.

•) Eine oligodjmamisdie Wirknng in den Filtraten, die Piischel (1933) bei
Verwenduug von Filtrationsapparaten fiir Seitz- Filter, die aus Kupfer mit Silber-
iiberzug bestehen, festgestellt hat. konnte in unseren Versuchen bei Gebrauch des
vemickelten, aus Phosphorbronze bestehenden Bakteriendruokfiltrations-Apparates
nicht beobachtet werden.

tJber atjpische Zellfonnen bei Bacillus amylobaoter.

341

. Es wurden wiederum Filter von 0,75, 1,5 und 3,0 // Porenveite be-
nutzt. Durch Filter von 1,5 und 3,0 fi vnxrden je zwei Filtrationen hinter-
einander durchgefuhrt.

In fiinf Versuchsreihen mit insgesamt 25 Filtrationen erwies sich das
Filtrat in alien Fallen als steril. Dagegen zeigten sowobl dio mit dem Aus-
gangsmaterial beimpften, als auch die von dem Bakterienmaterial des
Filterriickstandes beschickten Kulturen sebon nach kurzer Zeit "Wachs-
tum. Die Meraus entstandenen Kulturen verbielten sich vollig normal;
sie bildeten Gas, was an dem zerkliifteten Agar zu erkennen war; ebenfalls
lieB sich intensiver Buttersauregeruch bemerken. Das gute Wachstum
der mit deni Riickstand des Filters beimpften Kulturen erlaubt den SchluB,
daB nicht eine durch den Filtrationsvorgang bedingte Schadigung Ursache
der Sterilitat des Filtrates ist.

Zusammenfassend kann also gesagt werden, daB unsere Filtrations-
versuche k e i n e Anhaltspunkte fiir das Vorkommen „filtrierbarer’‘ Stadien
bei B a c. a m y 1 0 b a c t e r erbraoht haben.

Bespreehung der Ergebnisse.

Zur Beantwortung der Frage nach der Bedeutung der verschiedenen
Zellformen in Kulturen von Amylobacter ergeben sich einige Anhalts-
punkte aus der Kenntnis der Bedingungen, die ihr Auftreten fSrdem oder
hemmen. Diese Bedingungen fur haufigere Bildung atypischer Formen sind
das Altern der Kultur, die Einwirkung chemiseher Substanzen sowio sehad-
liche Sauerstoffkonzentration.

Wenn auch das mikroskopische Bild einer Kultur in etwa fiir den jeweils
angewandten auBeren Faktor spezifisch ist, derart, daB z. B. bei Behand-
lung mit Lithiumchlorid sich die Zusammensetzung einer Kolonie zugunsten
Oder ungunsten eines bestimmten Zelltypus andern oder auch ein besonderer
Faktor charakteristisch morphologische, sonst nicht vorkommende Ver-
anderungen hervorrufen kann, so spricht doch die Ahnlichkeit der in alien
diesen Fallen beobachteten Bilder, sowie ihr analoges Verhalten fiir die
Gleichwertigkeit der auftretenden atypischen Formen.

Die Giftigkeit von Lithiumchlorid und Phenol ergibt sich aus der Tat-
sache, daB etwas hohere als die zur starkeren Bildung atypischer Formen
fuhrenden Mengen dieser Stoffe vSlliges Zugrundegehen der Kulturen ver-
ursachen. Wir&n die schwacheren Konzentrationen auch nicht mehr t6d-
lich, so bedeutet ihro Einwirkung eine mehr oder weniger starke Schadigung
der Organismen, so daB die infolge dieses Einflusses auftretenden Formen
als geschadigte Zellen, als Degen^ationsformen aufzufassen sind. DaB
noch kleinere Mengen der gleichen Substanzen nicht giftig, sondem sogar
stimulierend zu wirken vermSgen, wie von M a a s s e n (1904) fiir Lithium-
chlorid angegeben wird, konnte in unseren Versuchen an Bac. megate-
r i u m gezeigt werden. Ebenso scheint verstandlieh, daB neben den mehr
Oder weniger gesehadigten Formen der gleichen Kultur noch normale Bak-
terien zu finden sind, da einmal nicht alle Bakterien einer Kolonie in gleicher
Weise von dem Gifte betroffen zu sein brauchen, dann aber auch die ein-
zelnen Individuen verschieden widerstandsfahig sein kSnnen. Fiir das ab-
weichende Verhalten verschiedener Stamme kann ungleiche Resistenz die
Ursache sein.

Die Schadlichkeit des Sauerstoffs ei^ibt sich schon aus der anaeroben
Lebensweise des Bac. amylobacter. In alternden Kulturen ist mit

342

Wilhelm Bucksteeg,

dem vermehrten Auftreten atypisclier Eormen eine fortschreitcnde Waehs-
tumsverminderang verbunden, wodoreh. die Deutung der atypischen Zellen
als Degenerationsformen gerechtfertigt erscheint. Dal3 ein Altern der Kultur
bzw. die AnhSufung von Stoffwecbselprodukten zu veranderton Formen
fiihren kann, wird houte in der Bakteriologie allgemein angenommen.

Aber aucb unter Verhaltnissen, die uppiges Wacbslum bewirken, treten
abweichende Formen anf, -wenn auch in geringerer Zahl. In groBeren An-
haufungen von Organismen, vor allem wenn diese auf relativ bescliranktem
Raum wacbsen, ist damit zu recbnen, daB auBer den gesunden Individuen
einige geschwachte auftreten.

Fiir die Auffassung der atypischen Zellen als Degenerationsformen
ist jedoch der Nachweis ihrer verminderten Vermehrungsfahigkeit uner-
laBlich. Unsere in dieser Hinsicht angestellten Versuche naben ergeben:

1. Im allgemeinen ist der Impferfolg um so sehlechter, je reichlicher
das Impfmaterial aus atypischen Zellen bestcht.

2. Kokkoide GebMe aus Kulturen, die bci schadlicherSauerstofftension
gehalten warden, lieBen sich gar nicht oder nur in sehr begrenztem
MaBe weiter ziichten.

3. Die den atypischen Formen des Bac. amylobacter ana-
logen Zelltypen von Bac. megaterium erwiesen sich im
hangenden Tropfen als nicht wachstumsfahig.

Impft man von Material, das neben atypischen auch noch normale
Zellen enthalt, so entstehen, wenn sich iiberhaupt Wachstum zeigt, nur
v6llig normale Kulturen, was als weiterer Hinweis auf ein vermindertes
Wachstumsvermogen der veranderten Formen angesehen werden darf. Dieses
ist durch die Annahme erklarlich, daB in solchen Fallen nur die normalen
Zellen sich vermehren, wahrend die iibrigen keine Weiterentwicklung mehr
zeigen. Wenn Klieneberger fiir ihre Objekte erne Entstehung nor-
maler Kulturen aus atypischen Zellformen als mciglich ansieht, so konnte
fiir unsere Versuche gezeigt werden, daB hier stets nur dann normale Bak-
terien erhalten wurden, wenn solche Oder Sporen im Impfmaterial enthalten
waren.

Da samtliche morphologische Gruppen der atypischen Zellen herabge-
setzte Lebensfahigkeit besitzen, diirfen sie einheitlich als Degenerations-
formen gedeutet werden; dabei besteht aber die Moglichkeit, daB ^e ein-
zelnen Formen Stufen verschiedenen Degenerationsgrades darstellen. In
einem Falle lieBen sich die kokkoiden Gebilde weiterzuchten. Das gelang
aber nur bei einem der drei untersuchten Amylobacter stamme, und
dann erwies sich die Vermehrungsfahigkeit als sehr begrenzt. Gorade die Tat-
sache, daB wahrend der funf mit ihnen durchgefiihrten Passagen die Wachs-
tumsintensitat mit der Dauer der Kultur sichtbar sich verminderte und
gleichzeitig die ZellgrBBe abnahm, rechtfertigt auch hier die Deutung dieser
Erscheinung als Degeneration.

Nach Bredemann und Haselhoff (1906) und Bredemann
(1909) wird das Auftreten abweichender Zellarten ebenfalls als Degenerations-
erscheinung gedeutet. Die von Bredemann angegebene unbegrenzte
Weiterziichtbarkeit der „Mikrooidien“ lieB sich fiir die kokkoiden Ge-
bilde der von uns benutrten Amylobacter stamme nicht nachweisen.

Die von Cunningham auf Grund der auBeren Form in starker
Anlehnung an L 6 h n i s erfolgte Deutung der atypischen Zellgebilde
als Stadien eines Entwicklungszyklus ist nicht dutch experimentelle Be-

tJber atypibche Zellfortnen bex Bacillus anxylobaeter.

343

obachtungen gestutzt. Seine morphologischen Untersuchungen wurden
vornehmlich an gefarbten Praparaten, die in zeitlichen Abstanden ange-
fertigt \rarden, ausgefuhrt und sind desbalb mit dieser Methode anhaftenden
Unsicherheiten belastet. Aucb in unseren PrSparaten waren Zellgebilde
zu beobachten, die mit den von Cunningham beschiiebenen Bildern
iibereinstimmten, doch entsprach die Cunningham sche ErklSrung
nicht der weiteren Beobachtung der Gebilde. Ebenfalls konnten wir nicht
feststellen, daB die in unseren Kulturen auftretenden Formen identiseh
waren mit ganz anderen Bakterien, die als eigene Arten beschrieben sind
und die somit nach Cunningham in den Entwicklungskreislauf von
Bac. amylobaeter einzubeziehen wSren. Unsere kokkoiden Ge-
bilde unterschieden sich von Micrococcus aurantiaeus und
Micrococcus candicans.

Dem gegenuber fiihren vielmehr die Ergebnisse unserer Versuche zu
der von vielen anderen Aiitoren, Bredemann, Winogradsky u. a.
vertretenen Auffassung. daB die in Amylobaeter kulturen auftretenden
atypischen Zellen als Degenerationsformen zu werten sind. da die atypischen
Formen vor allem unter ungiinstigen Bedingungen auftreten, mit dem Auf-
treten der atypischen Zellgebilde das Wachstum nachlS,Bt und diese ver-
anderten Zellformen selbst ganz entwicklungsunfahig sind Oder ihr Wachs-
tumsvermSgen stark eingeschrankt ist.

Obgleich vollauf anerkannt wird, daB unsere Beweisfiihrung fUr die
geschilderte Deutung der veranderten Zellen als Degenerationsformen in
einigen Punkten vielleicht noch luckenhaft ist, muB andererseits betont
werden, daB dieser Vorstellung doch wohl eine grSBere Wahrscheinlich-
keit zukommt als der dutch keine sicheren Beweise gestutzten Theorie eines
komplizierten Entwicklungskreislaufes im Sinne von LShnis u. a. oder
der Parasitentheorie Kuhns.

Zusammenfassung.

Vorstehende Untersuchungen sollten AufschluB geben fiber das Wesen
der in Kulturen von Bac. amylobaeter aiStretenden atypischen
Zellformen und die Bedingungen ihrer Entstehung, mit besonderer Be-
rfieksichtigung der kokkenfSrmigen Gebilde. Auf Grund meiner Unter-
suchungen komme ich zu folgenden Ergebnissen.

1. Unter den fiblichen Kulturbedingungen treten in Kulturen von
Bac. amylobaeter neben den normalen Zellen atypische Formen auf.

2. Das Auftreten aller atypischen Zellgestalten wird durch bestimmte
Bedingungen, z. B. supra -optimale Temperatur, schadliche Sauerstoff-
tension und EinfluB gewisser Salze, gefSrdert, auch nimmt ihre Menge mit
dem Alter der Kultur zu.

3. Durch ihre Hfiufigkeit wie durch ihre Eigenschaften fallen besonders
kokkenfSrmige Zellformen auf, die bei einem von drei isolierten StSmmen
durch Einwirkung schadlioher Mengen Sauerstoff in Eeinkultur erhalten
werden konnten; die morphologisch und physiologisch nSher untersuchten
kokkoiden Gebilde waren nur begrenzt wachstumsfaMg.

4. Die bei Bac. amylobaeter auftretenden veranderten Zell-
formen und die analogen des Bac. megaterium sind nach eingehen-
der Beobachtung im hangenden Tropfen nicht weiter entwicklui^sfahig.

5. Die Empfindlichkeit der einzelnen Bakterienarten (Bac. a m y 1 o -
bacter, Bac. megaterium und B a c t. c o 1 i) gegen LitHum-

344 Wilhelm Bucksteeg, Atypische Zellforiren bei Bacillus amylobaoter.

chlorid ist verschieden gro6. Bac. megaterium bildete unter dem
EinfluB dieses Salzes in erhohtem MaBe kleine uiid groBe kugelformige
Zellen, wahrcnd diese letztgenannten Erscheinungen bei Bac. amylo-
b a c t e r nicht auftraten.

6. Da die unter den verschiedensten Bcdingungeu auftrctenden aty-
pischon Bakterienzellen kcin unbcgrenztes Wachstum zeigten und beson-
ders haufig unter dem EinfluB von schadigenden Faktorcn auftraten, niiisson
sie als Degenerationsformen angesehen werden.

7. Fiir die Existenz besondercr Entwicklungsformen, die sich auf andere
Weise als durcb Spaltung vermehren, konnten keine Anhaltspunkte ge-
funden werden. Ebenfalls existiert cin „life cycle“ im Sinne ^ L o h n i s’,
den Cunningham fiir Bac. amylobacter annimmt, nach
unseren Untersuchungen nicht. So konnte auch das Auftreten von Micro-
coccus candicans und aurantiacus, die nach Cunning-
ham zum Entwicklungskreislauf gehoren sollen, niemals beobachtet werden.

8. Filtrationsversuche, die mit Cellafiltern von 0,76, 1,5 und 3,0 ^
PorengroBe angestellt wurden, ergaben keine Anhaltspunkte fur filtrier-
bare Stadien.

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Bd. 9. 1902. S. 43, 107.)

Nachdruck terboUn,

Beschreibung einiger neuer Pilzarten aus dem Oentraalbureau
70 or Schimmelcultures Baam (Holland).

III. Mitteilung.

Yon F. H. van Beyma thoe Kingma, Baain (Holland).

Mit 7 Abbildungen im Text.

I. Ceratostomella major nov. spec, mit Thielaviopsis
als Konidienform.

Aus dem Bakteriologischen Laboratorium der N. V. TJ n i 1 e v e r ,
Rotterdam, erhielten w u. a. die Kultur eines Pilzes, der aich bei naherer
XJntersuchung als ein unbekannter Thielaviopsis herausstellte. In den Ab-
impfungen dieser Kultur entstanden nach einiger Zeit die Fruchtkorper
einer ebenfalls unbekannten Ceratostomella, und es lag auf der Hand, zu
vermuten, daB beide Pilze zusammengehorten. In der Tat konnte mittels
Einzelspor-Kulturen der Beweis dazu erbracht werden. Wir baben beide
Formen unter dem Namen Ceratostomella major zusammen-
gefaBt nnd hier nen beschrieben.

346

F. H. van Beyma thoe Kingma,

Der erste Fall einer Ceratostomella mit Thielaviopsia als Konidienform
finden wir bei Dade^), der Ceratostomella paradoxa als
hohere Fruchttorm von Thielaviopsis paradoxa (de Seynes)
V. Hohnel entdeckte. Ohwohl unaer Pilz von dem letztgenannten vorschieden
ist, ahneln beide sick in dor Bildung eines starken Geruches nach Athyl-
azetat; im Gegensatz zu Thielaviopsis paradoxa geht jedoch
bei unserem Pilze dieser atherische Gerueh in den Kulturcn bald verloren.

Die Konidienform Thielaviopsis.

Diese bildet ein braungefarbtes Myzel, dessen Hyphen 4 — 6 fj, breit sind,
mit zahlreichen Septen. An diesem Myzel entstehen kleine, ebenfalls sep-
tierte Auswehse, welche, nachdem sie eine gewisse Grofie, etwa 50 — 60 fi,
crreicht haben, anfangen. Konidien zu erzeugen. Diese entstehen nach un-
seren Beobachtungen, im AnsehluB an die Mitteilungen Bricrleys*),
im Innern der Konidiophoren auf folgende.Weise: Im Scheitel des Konidien-
trhgers entsteht durch Querwandbildung eine terminate Zelle, ‘wS.hrend-
dessen die Membran des Tragers sich in z-wei Sehichten trennt, deren innere
die junge Konidie umgibt. Nun wd durch Wachstum von unten her die
aufiere Schicht gesprengt und die jetzt fertig-gebildetc Konidie hinausge-
schoben (Abb. 1 a). Dieselbe nimmt sclinell an GroBe zu, so daB sie den
Scheitel des Konidientragers an Grofie bald ubertrifft. Manehmal sieht es
so aus, als ruhe die Konidie jetzt in einer sehilsselformigen Aushohlung des
Scheitels, virie es Lagerberg und Melin furCadophora fasti-
g i a t a abbilden*). Inzwischen ist zuweilen eine Querwand entstanden,
wodurch die Bildung einer zweiten Konidie vorbereitet wird. Die Konidien-
ketten bildon sich sehr schnell und khnnen eine grofie Lange erreichen. Meist

Abb, 1. Thielaviopsis. a und b Vergr.
760 X . c — Vergr. 246 X . Erklarung im Text.

sehen die Ketten verschieden aus.
Einmalbestehen sie aus zahlreichen
hyalinen oder leicht gefarbten Ko-
nidien von langlich-runder Gestalt,
ohne dltropfen, an den Enden ab-
geflacht und durch kurze Disjunk-
toren miteinandcr verbunden, sog.
Mikrokonidien(Abb. lb). Die Gr6fie
dieser Konidien ist etwa 12 x 8 ,t£.
Bei iippiger Entwicklung konnen
diese Ketten cine Lange von einigen
Millimetern erreichen, wobei eine
Anzahl derselben sich zu dieken.
aufrechtstehenden coremienartigen
Saulen zusammensohliefien. Die Far-
be dieser Saulen ist dunkel-olivgriin.

Ein anderesMal warden kurze
Ketten erzeugt von Konidien ver-

i)Dade, H. A., Ceratostomella paradoxa, the perfect stage of
Thielaviopsis paradoxa (de Seynes) v. Hdhnel. (Trans. Br. Myo. Soc.
Vol. 13. 1928. p. 184.)

*)Brierley, W. B., The „Endoeonidia“ ofThielavia basioola Zopf.
(Ann. of Bot. Vol. 29. 1915. p. 483.)

8) Lagerberg, Lundberg und Melin, Biological and practical re-
searches into blueing in pine and spruce. Stockholm 1927. Fig. 61 auf S. 259.

Beschreibung einiger neuer Pilzorten ustt. III.

347

scMedener GroBe und Gestalt, im allgememenlangliplirimd oder zitronenformig
bis kugelig, sog. Makrokonidden. Diese Konidien weisen alio tJ’bergange auf
von hyalin, glatt und dann mit kornigem Inhalt bis braun, undurchsichtig
mit mehr oder wniger rauhem Exospor. Bei starker VergroBerung und
schrager Beleuchtung sieht man, daB die TJnebenheiten in mehr oder weniger
parallelen, polar verlaufenden Reihen angeordnet sind (Abb. 1 c — e). Die
heller gefarbten unter denselben messen 10—18 x 7.3—9 fi, die braunen,
welche das ReiEestadium darstellen, 22—30 [i im Durchmesser.

Es kommt vor, daB innerhalb einer Konidienkette neben hyalinen Ko-
nidien sich braune befinden, ja in einigen Fallen wurde beobaehtet, wie eine
noch innerhalb des Konidientragers sich hefindliche Konidie sehon braun
und rauh war. Das Reifen der Konidien, d. h. das braun und stachelig wer-
den, kann namlich sehr schnell vonstatten gehen, so daB sie schon vor oder
wahrend der Bildung der Konidien eintritt: im letzten Falle sieht man, wie
die braune Konidie eine bimfSrmige Gestalt angenommen hat, wobei der
schmalere Teil noch in der „Buehse‘' steckt. Wird die auBere Slembran
nicht gesprengt, sondern bleibt sie intakt, so waehst sie in demselben MaBe
mit wie die Konidienkette an GrSBe zunimmt. Deshalb sieht man in einem
Praparat dieses Pilzes stets zahlreiehe Teilstucke einer Konidienkette, von
einer zarten Membran umhiillt, wodurch sie nicht leicht in den einzelnen
Konidien zerfallen kSnnen (Abb. If).

Diese Eigentiimlichkeit kommt beiThielaviopsis paradoxa
nur verhaltnismaBig selten vor. von HShnel wies zuerst nach, daB
beide Konidienformen bei Thielaviopsis nur verschiedene Entwicklungs-
stadien darstellen^). Er auBert sich hierttber folgendermaBen: „Zwischen
beiden Sporenformen findet man alle tJbergange, indem sich aus den hya-
linen Sporen die dunklen, groBeren entwickeln konnen. Dies gesehieht aber
nicht immer. Nicht selten bleibt die ganze Kette hyalin, oft sieht man
solche Ketten, in denen ein Teil der Sporen hyalin, ein anderer duhkel ist.
Manchmal findet das Ausreifen der Sporen so rasch statt, daB man noch
in der Fruchthyphe eingeschlossene reife schwarze Sporen sieht. Die hya-
linen Sporen stellen daher keine besondere Sporenform dar, sondern nur
ein Entwicklungsstadium der braunen, auf dem diese letzten zuriickbleiben
kSnnen. Die eigentlichen fertigen reifen Sporen sind die braunen." Mit diesen
Bemerkungen sind unsere vorher genannten Bofindungen also ganz in tJber-
einstimmung. Man hat denn auch bei der Bildung von Mikro- und Makro-
konidien bei Thielaviopsis nicht mit verschiedengearteten Konidientragera
zu tun, sondern wir erblicken darin nur einen graduellen Unterschied in
der Ausreifung der Konidien. Auch die Makronidien sind urspriinglich als
Mikrokonidien entstanden, nur sind jene nicht auf dieser Stufe stehenge-
blieben wie diese.

Die Perithezien.

In den Reinkulturen entstehen innerhalb 8 Tage zahlreiehe Perithezien
(Abb. 2 a). Diese sind 320—480 fx breit und meist gedriickt-kugelig. Der
schwarze Schnabel ist an der Basis 60—80 fi breit und erreicht eine Lange
von 2 — 4 mm. Die Cilien sind septiert, an den Spitzen oft gabelfSrmig ver-
zweigt (Abb. 2 d), 20—25 an der Zahl, 250—325 n lang und 4 [x dick. Peri-
theaen mit zwei und mit drei Cilienixanzen kommen gel^entlieh vor.

‘)voii Hdlinel, Fr., Hedivigia. XLIII. S. 285 tf. — L i n d a u , Baben-
horsts Kr.-Fl. Abt. VIII. 1907. S. 767.

348

F. H. van Beyma thoe Kingma,

m

Die Asci sind sehr schwer zu beobachten, weil sie auJJcrordentlich ver-
ganglich sind. In reifen Fruchtkorpern findet man iiberhaupt keine mehr,
deshalb untersuchten Tvir unreife Fruchtkorper. Zu deni Zwecko entnahmen
wir aus einer Reinkultur auf Lupinenstengel ganz junge Perithozien, welehe
wir mittels eines DeckglSschens auf dem Objekttrager in eincm Tropfcn
Wasser zerdriickten. Die herausquellenden Asci zeigten verscliiedene Reife-
stadicn. Das jUngste Stadium zeigt gelatinose kugelige Masson mit kornigem
Inhalt in starker Brown seher Bewegung. Das nUchste Stadium kenn-
zeichnet sich dadurch, dafi schon die TJmrissc der Askosporen angedeutet
sind, welehe dann in den folgenden Stadien immer deutliehcr hervortreten.

Die halbreifen Asci haben cine keulig-zylindrischc Gestalt und besitzen
eine lang-ausgezogene Spitze (Abb. 2 b). Im weiteren Verlauf ihrer Bildung

geht aber die keulig-zylindrische Gestalt immer
mehr verloren. Die Sporen sind nSmlich in
einer sehleimigen Masse eingebettet, welehe im
Wasser aufquillt und die wirkliche Gestalt
dadurch unkenntlich macht (Abb. 2 c). Immer-
hin last sich die GroBe der reifen Asci einiger-
maBen nach derjenigen dcr unreifen abschatzen,
nambeh ungefahr 15 — 20 x 10 — 13 fi. Die
Asci enthalten 8 Sporen, anschoinend unregel-
maBig geordnet. Diese sind hyalin, einzellig
und besitzen eine halbmondfOrmige Gestalt.
Sie messen 7,3 — 8,3 x 3,7— 4,7 //, (groBte
Lange X grSBte Breite) (Abb. 2 e). Aus den
reifen PCTithezicn treten die Asci als eine
groBe weiBe Schleimkugel hervor, wobei die
Cilien des Ostiolums auseinanderspreizen.

Im G^ensatz zu Ceratostomella
paradoxa ist C. major homothallisch.
Mehrere Einsporkulturen, ausgehend von Ko-
nidien, wurden angel^t, undregelmaBigtraten
hierin nach etwa 8—10 Tagen diePerithezien auf.
Die lateinische Beschreibung des Pilzes lautet folgcndermaBon:

Abb. 2. Ceratostomella
major, a Vergr. etwa 1 % X ;
b und d Vergr. 246 X ; c und e
Vergr. 760 x . ErklArungimText.

Ceratostomella major nov. spec.

Peritheciis numerosis, fere globosis, 320—480 /i longis, collo longo et nigro,
60 — 80 jtt lato. Ciliis numero 20 — 25, 260—325 longis et 4 erassis, apice
saepe ramosis, interdum ex perithecis verticillis binis vel ternis superim-
positis. Ascis fugacissimus, late clavatis, cylindricis, circa 15 — 20 x 10—13 (i,
oetosporis, sporidiis hemidiscoideis, hyalinis, 7,3— 8,3 x 3,7 — 4,7 Forma

conidialis est Thielaviopsis. Microconi&is hyalinis, oblongo-teretibus, 12x8 /i.
Macroeonidiis pallide vel obscure brunneis, globosis, spinis obtusis obsitis,
20—30 (i. Hah. isolata ex acre (N. V. Unilever, Rotterdam).

11. Margarinomyees atrovirens nov. spec.

Aus dem Bakteriologischen Laboratorium der Unilever N.V. in Rotter-
dam erhielt das Centraalbureau u. a. zwei Pilze, welehe in Margarine schwarze
Flecke verursaehten. Der eine Pilz war als Margarinomyees Bu-
baki Laxa bezeichnet worden, der andere als eine abweieWde Form.
In der Tat wurde bei der Untersuehung festgestellt, daB hier Margarine-

Beschreibiing einiger neuer Pilzarten usw . III.

349

myces Bubaki und eine unbekaiinte zweite Art dersclbeii Gattung
vorlagen.

Margarinomyces Bubaki mirde in Zentralbl. f. Bakt. Abt. IL
Bd. 81. 1930. S. 392, von Laxa als Sohadling der Margarine be-
schrieben. Nach diesem Autor bildet der Pilz Faden, 'welche unregelmaBig
dick sind; anfangs sind aie farblos, werden dann bald sehmutzigbraun, zu-
letzt scbwarzgriin bis griinlichschwarz. Die langlichen, schwacli gekriinamten
Konidien sind etva 5 yti lang, einzellig und werden an apfel- oder birn-
fSrmigcn Gebilden abgescbnurt. Das Centraalbureau erhielt im Oktober 1930
eine Kultur dieses Pilzes. Isach unseren Beobachtungen sind die fertilen
Hyphen septiert und besitzen zahl-
reiche mehr oder weniger flaschenfSr-
mige konidientragende Aste, welche
die Konidien einzeln abschnuren. Die
Konidien sind hyalin, einzellig, lang-
lichrund, oft etwas gekrummt (wurst-
formig) und 3,3— 6,7 x 1,3 — 1,7 /i,
meist 4,7 x 1,3 fi ^ofi.

Die zweite Kultur nun hat
groBe Ahnlichkeit mit Margari-
nomyces Bubaki, weicht aber
sowohl in der Grofie und Gestalt
der Konidien als in der Farbe, welche
heller ist (schwarzgriin gegen griin-
schwarz bei M a, r g. Bubaki auf
Bierwiirze-Agar), von demselben ab.

Die Beschreibung dieses Pilzes,
den wir Margarinomyces 3 , Margarinom-yces atro-

atrovirens nennen mochten, v i r e n s , Konidiantrager und Konidien.
lautet wie folgt: Vergr. 760 X.

Margarinomyces atrovirens nov. spec.

Hyphen anfangs olivgriin, spater griinbraun bis schwarzgrun, sep-
tiert, mit zahlreichen Vakuolen, oft zu gekrauselten Strangen vereint, welche
den Kulturcn ein wolliges Aussehen verleihen konnen.

Konidientrager unregelmaBig von den H;p)hen abgehend, ein-
fach Oder mehrfach verzwoigt, oft biischelig, hell griinbraun gefarbt, die
einzelnen konidientragenden Aste mehr oder weniger flaschenfonnig und
etwa 10 X 3,3 groB, am Scheitel die Konidien einzeln abschniirend.

Konidien massenhaft, einzeln an den Tragern entstehend. nach
dem Abfallen jedoch daselbst haften bleibend und zuletzt kleine Kopfehen
von 10 — 12 jti Durchmesser bildend, leicht braun gefarbt, ellipsoidisch (mit
2 Oltropfen) oder fast kugelig bis eifSrmig (mit einem exzentrisch gelegenen
Oltropfen), 2,7— 4,7 x 2—3 /t, meist 3, 7-4, 3 x 2,3— 2,7 (i.

Eeinkultur en. Auf Bierwiirze-Agar in einer Petri-
schale nach 20 Tagen: Kolonie 6 cm, flachwollig, griin, 348—^343 (Code des
Couleurs) bis graubraun. Rand flaeh, griinweiB, 4 mm breit. Schwacher,
sauerlicher Gerueh. TJnterseite schwarz bis violettsehwarz.

Auf Eohrohen nach 14 Tagen;

Auf Bierwiirze-, Kirsch- und Kartoffel-Agar waehst
der Pilz sammetartig bis flachwollig, schwarzgrau mit grauweifiem Rande.

360

F. H- van Beynia thoe Kingma,

Auf Kartoffelstiicken eine kleinc hautige Kolonio, ganz sckvaiz-
glanzend.

Auf MOhre eine grCBere Mutige Kolonie, schwarzgrau bis grau.

Obige Rohreben sind, mit Ausnahmc der Kartoffel imd MOhrenkultur.
nur bis zur Halite bewachsen, wahrend die entsprccheiiden Rohrchen mit
Margarinomyces Bubaki ganz bewachsen und grauschwarz sind.
Auf Rohrchen mit Kartoffelstiicken und Mohre wachst M. B u b a k i ebenso
sparlich wie II. a t r o v i r c n s.

Hab. Aus schwarzen Fleckcn in Margarine (Unilever N.V., Rotter-
dam).

Lateinische Beschreibung: Caespitulis dense ag^egatis, tomentosis;
hyphis brunneis vel olivaceis, dein atrovirens, septatis. Conidiis copiosis,
acrogenis, subhyalinis continuis, ellipticis vel globoso-ellipticis,, 3,7— 4,3 x
2,3— 2,7 ix uni- vel biguttulatis.

III. Isaria cretacca nov. spec.

VonDr. H. B. Hutchinson und C.E. G r o v er , Epsom (Engl.), stammte
die Kultur eines Pilzes mit schSnen weifien Koremien. Ein Vergleich mit den be-
reits beschriebenen Arten der Stilbaeeen flihrte zu dem SchluB, dafi hier eine
unbekannte Art vorliegen miissc, vielleicht aus der Gattung Sporotrichum.
Dr. Fetch war so freundlich, den Pilz ebenfalls zu untersuchen. Nach

seinem Dafiirhalten ist es weder Sporotri-
ehum album noch Sporotrichum
isarioides, ja er glaubt uberhaupt, be-
zweifeln zu miissen, es mit einem Sporotrichum
zu tun zu haben, auf Grund der Konidien-
bildung an phialidartigen Tragem. Das weitere
Studium ergab die Richtigkeit dieser Anschau-
ung; obwohl manche Konidientrager auf Sporo*
trichum deuten kSnnten, zeigen andcre, und
zwar die meisten, Ahnlichkeit mit denjenigen
von Beauveria, und der Pilz kfinnto ganz gut
zur letztgenannten Gattung gebracht worden,
wenn nicht die typischen hin- und hergobogenen
Sterigmen gefehlt hatten, welchc fiir diesclbe
so charakteristisch sind*). Die konidientragen-
den Hyphen besitzen auBerdem nicht nur die
flaschenformigen Sterigmen, wie sic bei Beau-
veria auftreten, sondern am Seheitel weisen sie
auch noch in Reihen angeordnete HSeker auf, wie man sie mitunter bei
Sporotrichum beobachtet. Auch an diesen HOckem entstehen Konidien.
wir betrachten denn auch unseren Pilz als zwischen Sporotrichum und Beau-
veria stehend. Fetch, in seinen Veroffentlichungen ubor insektentOtende
Pilze, ist der Ansicht, daB die Gattung Isaria aufzulQsen sei in die Gattungen
Sporotrichum, Beauveria, Spicaria u. a. m., je nachdem die Erzeugung der
Konidien nach Art dieser Gattungen stattfindet, so daB die Gestalt der Ko-
remien erst an zweiter Stelle beriicksichtigt wird®). Trotzdem behalt er den

Abb. 4. Isaria oretaoea.
Vergr. 760 X.

P e 1 0 h , T., Studies in Entomogenous Fungi, VIII. Notes on
Beauveria. (Transact. Br. Myc. Soc. Vol. 10. 1924 — 26. p. 248.)

*) Petoh, T., Transact, Br. Myc. Soo. Vol. 10. 1931. p. 241.

Beschreibiing emiger neuer Pilzarten usw. III.

351

Namen Isaria fiir eine Eeihe von SpeziP'< bci, wohl ans dem Grunde, 'vreil
diese Gattung einer griindlichen Umaibeitung bodarf imd die Koremien
doch recht anffSillige Gebilde darstellen, velche sich zur Bestimmiing oder
Unterscheidung sehr gut eignen. Indeni wir einstveilen diesem Beispiel
folgen, mochten vir unseren Pilz unter dem Namen Isaria cretaeea
neu beschreiben.

Isaria cretaeea nov. spec.

Koremien gesellig, 2—6 cm lang und 3/4—114 mm dick, ki-eide-
weiB, sammetartig. hirschgeveihartig vcrzweigt. nach dem Scheitel bin gleich-
mafiig keulig anschwellend, mitunter auch daselbst glatt und breit, mit eiiier
50 n breiten, konidientragenden Schicht
bekleidet.

Fertile Hyphen entweder
mit allseitig abstehenden Sterigmen
besetzt oder mit kleinen konidien-
tragenden Hockern, meist mehreren
hintereinander, versehen.

Sterigmen einfach oder mit
einem kurzen Ast, mehr oder weniger
flaschenformig oder keulenformig, oft
am Ende umgebogen, von 10—15 /t
Lange bei einer grofiten Breite von
3—3,3 (i, am Scheitel abgerundet und
sich pletzlich verjungend zu einem
dunnen Stielchen oder 2—3 solcher
erzeugend, welche je eine Konidie
tragen.

Konidien zahlreich, hyalin,
eifbrmig, oft einerseits zugespitzt,leicht
abfalleni an den Koremien zu kleinen,

10 u dickon Haufchen zusammenge-
balit, von verschiedener GrfiBe, 3,55 /t
lang (Mittel aus 50 Konidien), meist
3,3—4 (.1 und 2,78 /t breit (Mittel aus
50 Konidien), meist 2,7 — 3 //.

Hab. Auf einem Paket Hefe.
welches einige Zeit in feuchter Um-
gebung aufbewahrt worden war (Hutchinson, Epsom).

Die lateinische Beschreibung lautet: Coremiis numerosis. 2—6 cm
longis et % — 1 % mm crassis, colore cretoso-albo. velutinis. cervinis, apicem
versus aequaliter incrassatis vel late applanatis. tectis strato conidiophoro
50 ju crasso. Hyphis fertilibus aut sterigmatibus crebris obsitis aut praeditis
parvis projecturis conidiophoris pluribiis juxtapositis. Sterigmatibus sim-
plicibus vel cum brevi ramulo lateral!, subphialeformibus vel clavatis, saepe
incurvatis, 10—15 u longis et 3—3.3 /i latis, apice subito in 1 usque 3 pedi-
culos gracilis conidiophoros exeuntibus. Gonitis crebris, hyalinis, ovoideis,
saepe uno fine acutis, saepe in capitula usque 10 /i dimensione junctis, in-
aequali inaguitudine, 3,3-— 4 x 2,7—3 fc. Hab.: ex framento condito loco
humido.

Abb. 5. Isaria oretacea v. Bejrma.

352

F. H. van Beyma thoe Kingma,

IV* Penicillin m volutinum nov. spec.

Von Dr. Meinders, Apeldoorn, erhielt das Centraalbureau cin Peni-
cillium, isoliert aus dem Sputum eines Ki*aiiken. Wir stelltcn den Pilz an-
fangs in die Nahe des Penicillin m notatum Westl., von dem er
sich jedoch durch die dunklere Farbe unterschcidet. Thom, der die Giite
hatte, dasselbe zu untersuchen, glaiibte os mit dem kiirzlich publizicrten
Penicillium CharlesiiG. Smith^) identifizieren zu konnen. Nach
unseron Erfahrungen ergcben sick aber augenfalligc Unterscliiode, so daB
wir es fur angebracht halten, dieses Penicillium unter dem Namcn P. v e -
lutinum neu zn besehreiben.

P e n. V e 1 ii t i n u m breitet sich auf Bierwiirze-Agar schnoll aus unter
Bildung groBer, flachwolliger Kolonien mit faserigem Eande. Ganz junge
Kolonien sind im Zentrum schon blaugriin und besitzen eincn griinlichweiBen,
strahlig-faserigen Rand. Das Myzel ist etwas wollig. Die Konidientrager
sind nnverzweigt oder haben eiuen Seitenast. Obwohl Metiilae meist fehlen,
sind sie dennoch mitunter anwesend; trotzdem stellen wir den Pilz in die
Gruppe Monoverticillata-Ramigena. Ein Vergloieh mit Penicillium
Waksmani Zal. einerseits und Penicillium CharlesiiG. Sm.
andererseits zeigt den Unterschied mit diesen nahestehenden Arten.

Kulturen auf Bier-wurze-Agar in Potri-Sohalen,

Anzahl

Tage

Pen. velutinum

Pen. Waksmani

Pen. Charlosii

5

Mehrere kleine Kol., bis

1 cm, stemfdrmig, im
Zentrum 397 oder tTber-
gang nach 398. Rand aus-
gefranst, grimlich - weiB.
FarbLSaum, 1 — 1% mm.
Gr6J3. Kol. im Zentrum,
wollig. Kein Geruch. Un-
terseite 263 B — 266.
Schnell sich ausbr. Kol.

Zahlreicho ganz kleine
Kolonien, bis 6 mm, wol-
lig, weiB, etwas erhaben.
Rand kurz ausgefranst.
Kein Geruch. Farbloser
Saum kaum sichtbar. Un-
terseite 228 D. Langsam
sich ausbreiiende Kolo-
nien.

Zahlreiche, ganz kleine
Kolonien, bis 3 mm, sam-
metartig, hugelartig,weiB
bis 371. Rand scharf.
Kein Geruch. Unterseite
271 — 263 A. Kaum sich
ausbreitende Kolonien.

10

Kolonien flach - wollig,
groB, bis 2 cm, 398 — 399
— 400. Rand faseng-
woUig, woiB, 2 mm. Farb-
loser Saum bis zu 4 nun.
Unterseite 203 B — 221.

Kol. sammotartig, flach -
wollig, bis 1 cm, flaoh-
hugolig, 372 Oder Farbe
z\^iRchon 372 und 367.
Rand flach, 363 U, bis

1 mm broit. Farbl. Saum

2 mm. Unterseite 228 D.
Kolonien etwas hohl.

Kol. klein, bis 1 cm,
hugolig, mit kurzen Hy-
plienbundeln bewachsen,
367—368—374. Rand
flach, weiB, Farb-

loser Saum fast ganz feh-
lend. Unterseite 228 A
bis C.

20

Kolonien groB, flach, die
ganze Schale ausfUllend,
flach-woUig, 339 — 340 —
300. tfiberwachsendes

Myzel 344. Ganz schwa-
oher Geruch. Unterseite
203 B.

Kol. sammetartig-filzig,
flach-hugolig, zum Teil
mitemander verwachsen,
die Schale nicht ganz aus-
fuUend, 372 u. Ubergang
nach 347 — 348. Kein Ge-
ruclx. Unterseite 197 —
192. Kolonien hohl.

Kol. sammetartig, nicht
liber 1 cm groB, uber der
Oberfl&che zerstreut und
diese nur zur Halfte be-
deckend, hugelig, 299 —
300. ’Gberwachsendes

Myzel 375. Unterseite
228 A— B.

1) Smith, George, Some new species of PenioiUium. (Transact. Br. Myo,
Soc. Vol, 18. 1933. p. 90.)

Beachreibung einiger neuer Pilzarten usw. III.

353

Die Beschreibung des Pikes lautet -wie folgt:

Penicillium velutiniim nov. spec.

Konidientrager von verschiedener Lange, 20 — 80 fi, meist
30 — 40 lang und 2,7 — 3 // breit. gerade, rauh, unverzweigt oder mit einem
Seitenzweig, in gewissen Abstanden von den fertilen Hyphen abgehend,
mitunter am Scheitel etwas verbreitert.

M e t u 1 a e meist fehlend, sonst nur •wenige, 3 — 4 an der Zahl, 10 — 12 /t
lang und 2,7 — 3 /i breit. gerade Oder keulenformig, glatt Oder rauh.

Sterigmen flaschenformig mit kurzem Halse. 10 — 12 ( — 18) lang

und 3 — 3,3 jw breit, 3 — 10 an der ZaJil.

Konidien kugelig, glatt. leieht gefarbt, mit Olimmersion etwas rauh
erscheinend, 2,7 — 3,3 ^ im Durehmesser, in langen divergierenden oder pa-
rallelen Ketten ohne Disjunktor. P

R e i nkul tur en. Auf Bier wiirze-
Agar in Petrischalen sehnell sich aus- W □ ,
breitende Kolonien. anfangs mit griinlich- j AJt' ri/r/

weiBen, sternformig ausstrahlenden Hyphen J\ FW Wi/

und blaugriinem Zentrum, 397. Nach O Ta- W

gen haben die Kolonien einen Durehmesser \\ " j

von 2 cm und sind sammetartig bis flach- Ca p |

wollig. Die Farbe ist 398 — 423 und 362 a 8 " )fQ —

— 368 im Zentrum, nach dem Rande hin rQ(ih

392 — 397. Rand flachwollig, ausgefranst.

2 mm breit, griinlich-weifi. Kein Geruch. ^ ^

Unterseite der Schale 253 C — D— 221 — 181. Vl/? 1

Auf Rohrchen nach 5 Tagen: I

Auf Bierwiirze- Agar: Decke
puderig-wollig, im Zentrum 393. nach dem OoO^^\l

Rande hin 423 — 397. Rand flachwollig, OoooOoU

grunlich-weiB, 1 — 2 mm. Riickseite orange- Abb. 6. Penicilliumveiu-
gelb, 161. * i “ »■ 245 X ;

Auf Kirsch-Agar: Decke puderig- ^ '

wollig, 398 — 397—393, ganz unten im Rohrchen 378 D — B.

Auf Mehre: Das Stiick ganz bewachsen mit einer sammetartigen
Decke, 367— 3780 — D — 397. Rand der Decke 261. Vereinzelte Wasser-
tropfen.

Auf Kartoffelstiicken; Die Stucke nur in der oberen Halfte
bewachsen, sammetartig-puderig, 398, nach dem Rande hin 378 D.

Auf Raulin: MSBiges Wachstum. Decke flachfilzig, gelbgriinlich
bis weiB, mit einigen Querfalten.

Auf Reis: Zur HSJfte durchwachsen, oben ergrunt und puderig, 398.

Auf Haferflocken-Agar: Impfstrich ergrunt, 398—399.

H a b. Aus Sputum eines Kranken (M e i n d e r s).

Die lateinische Beschreibung lautet: Tellure velutino, prius subcoeruleo
dein fuscoglauco. Conidiophoris inaequali longitudine. 20—80 plerumque,
30 — 40 longis et 2,7 — 3 fi latis, rectis, asperis, singulis vel cum ramnlo
laterali, apice saepe paulum dilatatis. Metulis si adsunt minime nmnerosis
(3 — 4), 10—12 fi longis et 2,7—3 f/ latis, rectis vel elavatis, levibus vel aspads.
Steri^atibus phialrformibus, coUo brevi, 10—12 ( — 18) fi longis et 3 — 3,3 fi
latis, numero 3—10. Conidiis globosis, levibus, colore pallide, per Zeiss 1/12"

Zwelte Abt. Bd. »1. 23

364 H. V a n B e y in a t h o e K i n g m a , Beschreibung einiger neuer Pilzarten.

observatis superiieiem subasperam praebentibus, 2,7— 3,3 in longis catenis
divcrgentibus vel parallelis sine disjunctore. Odore nnllo, coreniiis nullis.
Hab. : cx aputo bominis aegroti (M cinders, Apcldoorn).

V. Seopulariopsis nieotianao nov. spec.

Von Jollyman in Bristol (Engl.) stammte die Kultur eincs
unbekannten Pilzes, isoliert von einein gctrockneten Tabakblatt aus N y a s a -
land (Air.). Dio Kultur zeigte cin wciBcs, dichtverwebtes, filziges Myzel
mit gelblichem Stick, welches der Agaroberflache flach anliegt und gern
an der Glaswand hochwachst. Die jungen Hyphen besitzen viele Vakuolen.
Die fertilen Hyphen erzeugen zahlreiehe langgestreckt-flaschenfonnige Ko-
nidientrager, welche die Konidien in langen Kettcn abschniiren. Diese Ko-
nidienbildung ist aber meist sparlich und tritt erst nach cinigen Woehen auf,
mit Vorliebe an der Glaswand oder an eingetrockneten Stellen der Kultur-

rolu-chon. In Ubereinstimmung mit dem
Fundort scheint dor Pilz also auf trocke-
nen Substraten am besten zu fruktifi-
zieren.

Die Konidien sind an einer Seite
abgerundet, an der anderen Seite zuge-
spitzt und gerade abgeschnitten, ihre Ge-
stalt variicrt von stumpf - eifSrmig bis
stumpf-keilformig. Obwohl der Pilz, den
wir zur Gattung Seopulariopsis bringen,
sieh in der GroBe der Konidien S o o -
pulariopsis B1 o chii (Matr.) Vuill.
nahert^), ist der TJnterschied im Wachs-
tum zu groB, als daB diese Formen mit-
einander verwechselt werden konnten.
Seopulariopsis Blochii nam-
lieh bildet in Reinkultur cine feuchte
Haut, von der sich zahlreiehe, aus weiBen
Hyphen bestehende Hyphenbiindel er-
heben. Wir werden unseren Pilz unter
dem Namen Seopulariopsis ni-
eotianao nou beschreiben.

Abb. 7. Seopulariopsis
cotianae. a Konidiontrager. Vergr.
750 y ; b Konidien. Vergr. 1080 X
(Olitoinersion); c Fertile Hyplic.
Vergr. 245 x.

Seopulariopsis nieotianao nov. spec.

Fertile Hyphen 2,7—3 /c breit, hyalin, mit zahlreichcn, jedoch
nicht massenhaften Konidientragern, welche von den Hyphen nach alien
Seiten abgehen.

Konidientrager unverzwei^ oder mit 2—3 wagerecht stehenden
Seitenasien, langgestreckt-flaschenformig. unseptiert oder mit einer Quer-
wand, meist 16 — 30 ju lang. an der dicksten Stelle 2.3— 3,3 /i breit, nach
dem Scheitel zu sich verjungend und daselbst die Konidien in langen Ketten
abschniirend.

Konidien eiformig bis keilformig, einerseits abgerundet, mit stump-
ier, gerade abgeschnittener Spitze, hyalin, ohne Oltropfen, 3— 6 x 1.6 — 2,3 //,
meist 3,3— 3 .7 x 2 groB.

i)Vuillemin, F., Les champignons parasites et les mycoses de Thomme.
1931. p. 65—66.

W. C. Snyder and J. C. Walker, Fusanum near- wilt of Pea. 355

Reinkulturen. Auf Bierwiirze-Agar in einer Petri schale nach
10 Tagen: Kolonie 7 cm im Durchmesser. bestehend aus einer geschlossenen
Decke von hyalinen, ttber die Agar-Oberflaehe kriechenden Hyphen mit
locker-wolligem, weiBem Luftmyzel dariiber. Der Rand der Kolonie ist
gerade. Schwaeher, schver definierbarer Geruch. Unterseite der Schale
grungelblich. Roch keine Konidien.

Idem nach 3 Wochen: Kolonie unverandert. Beginneiide Bildung von
Konidien.

Hab. Von einem getrockneten Tabakblatt ans Kyasaland (Jolly-
m a n).

Die lateinische Beschreibung lautet; Hyphis fertilibus, 2,7—3 [i latis,
hyalinis cum conidiophoris crebris. Conidiophoris singulis vel ramulis latera-
libus duobus vel tribus horizontalibus, elongate phialeformibus, inseptatis
vel unosepto praeditis, plerumque 15 — 30 (i longis et 2,3 — 3.3 /< latis, apicem
versus tenuatis ibique conidia longis catenis stringentibus. Conidiis ovoideis
usque cuneatis, altero fine rotundatis. altero obtusis recta detruncatis, hya-
linis, sine guttulis oleosis, 3 — 5 x 1,6 — 2.3 /t, plerumque 3,3— 3,7 x 2 /f.
Hab.: ex folio siccato Nicotianae Tabaei ex regione Ryasa, Africa (Jolly-
man, Bristol).

Zusammenfassung.

Es vrerden 6 neue Pilzspezies beschrieben: Ceratostomella ma-
i 0 r mit Thielaviopsis als Konidienfonn, Margarinomyces atro-
virens, Isaria cretacea, Penici Ilium velutinum und
Scopulariopsis nicotianae.

Nackdntek verboten.

Fusarium near-wilt of Pea.

By W. C. Snyder^) and J. C. Walker®).

With 4 figui*es in the text.

The Fusarium disease of pea, P i s u m s a t i v u m L.. have engaged
the attention of investigators repeatedly in various parts of the world since
the beginning of the present centoy. As a result Fusariosis of pea has been
resolved gradually into several separate diseases upon the basis of cause.
Some of these have become recognized on both the continents of Europe
and America (21), but the actual distribution in most cases is not fully
known. Many factors may operate in explaining the differences in occur-
rence and economic importance of the separate diseases. No doubt seasonal
temperatures, latitude, soil character, varieties of pea cultivated, and horti-
cultural practices exert limiting influences (12, 27), once the organisms have
become distributed by means of infested seed or other agencies of transfer
(17). However the elimination of individual diseases from the disease com-

National Besearch Fellow in the biological science for the year ending De-
cember 1, 1934. Now, Junior Pathologist, Division of Plant Pathology, University
of California, Berkeley, California, U. S. A,

*) Plant Pathologist, Department of Plant Pathology, University of Wisconsin,
Madison, Wisconsin, U. S. A.

23*

356

W. C. Snyder and J. C. Walker,

plex through the development of resistant varieties of plants, or by other
practices, has revealed more clearly the remaining diseases of the complex,
both as to cause and distribution. This has been the experience with the
near-wilt disease. The importance and distribution of pea-near-wilt has
been appreciated only in the last three or four years following the wide-
spread use in America of pea varieties resistant to wilt, caused byF.ortho-
c e r a s App. et Wr. v. p i s i Linford, and which previously was the princi-
pal or only vascular Fusarium wilt of pea recognized. The present paper
describes this new wilt of pea, known as near-wilt, and the organism
causing it, F. o x y s p o r u m f. 8, n. f.

Pathological phases of the studies for the most part were made by the writers
in the Department of Plant Pathology at the University of Wisconsin, and in the Division
of Plant Pathology at the University of California. The taxonomy of the causal fungus
was studied by one of the writers^) under a fellowship appointment from the National
Research Council of America, in the laboratory of Dr. H. W. Wollenweber,
Biologische Reichsanstalt, Berlin-Dahlem, Germany. The writer wishes to express
his gratitude to the National Research Council for making the studies possible, to Direc-
tor Dr. E. R i e h m for the facilities freely provided at the Biologische Reichsanstalt
during the year 1934, and to Dr. H. W. Wollenweber for tho kindly and va-
luable suggestions generously given throughout the investigations and in the prepara-
tion of the Fusarium diagnosis. This writer also wishes to acknowledge the helpful
council of Dr. R. E. S m i t h of the Division of Plant Pathology at the University
of California. The writers are indebted to Dr. M. E. A n d e r s o n of Rogers Brothers
Seed Company, for his cooperation in the interests of tho work.

History of the disease.

In 1923 Jones (8) made a study of the Fusaria associated with di-
seased peas in the United States. As a result of his studies one active para-
site of peas was found and described under the name of F. M a r t i i App.
et Wr. V. p i s i , new var. This fungus has since been classified (20) as
F. s 0 1 a n i (Mart.) App. et Wr. v. M a r t i i (App. et Wr.) Wr. f. 2 Snyder.
Of several other Fusaria isolated and tested for pathogenicity, four belonged
to the Section Elegans: F. oxysporum; F. sclerotioides Sherb.,
later referred to synonymy witih F. oxysporum v. aurantiacum
(Lk.) Wr.; F. vasinfectum Atk.: and F. redolens Wr. However
no evidence of infection was obtained with these fungi, with the exception
of a small percentage of wilted plants grown in soil infested with J o n e s’
F. sclerotioides under certain conditions of inoculation. This was
perhaps the same disease that is known today as ncar-wilt. At that time
no importance was ascribed to the disease.

Most of the early literature dealing with a wilt-like disease of pea in
America has been linked to the wilt of pea described by Linford (11)
in 1928 as a vascular disease caused byF. orthoceras v. pisi, new
var. Since this was the only wilt disease of pea known at that time, it came
to be known as “the Fusarium wilt of pea”. When not complicated by the
presence of other diseases, wilt is distinguished by the yellowish stunted
appearance of the infected plant, by the downward and backward curl of
the leaves, and by a yellowish to reddish orange discoloration of the vas-
cular system in a root and epicotyl the cortex of which may show no macro-
scopic evidence of invasion. The fungus gains entrance to the plant through
the small rootlets and until late in the development of the disease is con-
fined lai^ely to the vascular cylinder. Economic control of this virulent

») W. 0. Snydor.

Fusarium near-wilt of Pea.

357

paxasite (19) owes itself to the existence of naturally resistant varieties of
pea (26) and to the fact that resistance is hereditary as a single dominant
Mendelian factor (25).

When it became clear that wilt could be controlled successfully through
the use of varieties known to possess resistance (26), evidence was gradually
accumulated by the writers during the 1931 and 1932 seasons that another
disease resembling wilt in its symptoms but differing principally in its para-
sitism, was present in some pea sick soils. The disease had apparently been
obscured by the closely similar wilt disease, and only after elimination of
the latter by the use of wilt resistant varieties did the new disease become
apparent. The same experience was general for the major pea growing areas
of the United States as revealed by surveys made by the writers and from
diseased material received from many states. The disease was given the
name “near-wilt” because of its close resemblance to wilt, and its distri-
bution and distinguishing characters described (18, 27).

About the same time Starr (22) had observed a wilt disease in Minne-
sota which did not agree in several important respects with the known pea wilt,
caused byF. orthocerasv. pisi. Starr’s observations upon both the
disease, and the causal organism referred by him under the number 29—300 C,
leave little doubt but that he was also dealing with the near-wilt disease.

Two years later H a r t e r (7) reported a “new wilt of pea” the descrip-
tion and occurrence of which coincided essentially with the earlier reports
of Snyder (18), Walker and Snyder (27) and Starr (22). It
was reported by Starr that his 29—300 C organism probably belonged
to the F. orthoeeras group, w'hile Harter stated that his disease
was caused by F. oxysporum v. aurantiacum and F. v a s -
infectumv. lutulatum (Sherb.) Wr.

In European literature van H a 1 T s (6) paper early called attention
to a wilt disease of pea in Holland under the name of S t. J o h n’ s disease.
Although his account of the disease and of the organism associated with it,
F. V asi nf e c t um V. pi si , new var., is brief, van Hall apparently
was dealing with a member of the form circle F. o x y s p o r u m , for rea-
sons taken up elsewhere (21), and his F. vasinfectumv. pisi has
been assigned as a synonym of F. o x y s p o r u m f. 8.

Since van Hall’s paper investigators in several countries have
demonstrated the occurrence and pathogenesis of various other Fusaria
upon peas (11, 14, 22, 24), but it is only recently that a comprehensive study
has been made (28) of any parasitic Elegans Fusarium on pea in Europe.
Went (28) in observations upon pea Fusariosis in Holland over a period
of several years found a member of the F. o x y s p o r u m group asso-
ciated with a vascular wilt of pea in the field and proved it to be parasitic
in pathogenicity tests. It is likely that this disease was the same at that
treated in the pioneer work of van Hall (6). A similar organism was
found by Snyder (21) on peas in central Europe. The disease discussed
herin under the name of near-wilt is widespread and may be found in the
pea growing regions of both America and Europe. The disease in Eimope
is referred to under the name of St. J o h n’ s wilt (21).

Symptomology.

The disease symptoms upon the above ground plant closely resemble
the wilt disease described by L i n f o r d (11). The foliage becomes yellow,

358

\V. C. Snyder and J. C. W a 1 k e i ,

the leaflets and stupules may become recurved downward pd inward in
the manner of wilt and under high temperatures quickly wither from the

base of the plant upward, as

shown in Figure 1. Prema-
ture death of the infected
pea plant follows. However
stunting of growth and the
rapid Anltiug under proper
conditions that often charac-
terizes wilt, is frequently less
pronounced vith the near-wilt
disease in which the symp-
toms may not appear until
late in the development of
the plant. The rate and cha-
racter of wilting depend in
part upon the factors influen-
cing infection, and are there-
fore variable. The unilateral
development of the disease
(Figure 1) is somewhat more
common than in wilt. In
plants in which the disease
develops rather slowly, the
organism often travels up one
side of the stem affecting
leaves and stipules in its path
from base to growing tip. This
localized effect may extend
to single leaflets or oven to
one side of the leaflet.

Symptoms of the root and

Fig. ]. Symptoms of tho near-wilt disoose of poa
upon a vaiiety lesistant to F. o r i h o c o r a s v.
p 1 s 1 , but grown upon soil naturally infesbod w ith

under ground stem ol plants
suffering from near-wilt again
resemble those of wilt infected

F. o X y s p o r u m f. 8. In a field planting upon
this same soil in 1934, spots of 100°o kiU of wilt-
resistant varieties were obtained from neai-vilt
A. Early symptoms of tho disease. Progressively
from the base of the plant upwards the leaflets

peas. The vascular system may
exhibit a brown to orange
or deep red discoloration that
sometimes extends into the

and stipules curl downward, become yeUow, wither,
and finally turn almost white and crisp. Frequently
new green shoots appear at the base of the plant as
shown here, but later may become diseased also or
fail to develop. B, Unilateral development of the

above ground stem in a man-
ner usual for other vascular
Fusarium diseases. It is some-
times possible to recover the

near-wilt disease in an advanced stage. These symp-
toms are often quite marked owing to the lelatively
slow development of the disease m comparison to
wilt. The disease has gone up the stem taking only
one stipule aU the way up the plant while it has

fungus from quite high in the
plant which is seldom the
case with wilt. Cross sections
of diseased roots reveal the

advanced out mto the leaves m the same way
taking only one leaflet m each case. The adjacent
stipules and leaflets remained perfectly green and
normal. F. oxysporum f. 8 was isolated from
this plant as far up as the sixth intemode.

presence of hyphae in the
vascular dements. Although
the small rootlets may be
bronzed showing evidence of

Fusaijuip neiir->\ilt of Pea.

359

decay, or be rotted away, the main root and toot of neai-wilt plants are
frequently free of any conspicuous decay of the cortex, when unaccompanied
bv other pea diseases. There appear to be, however, conditions of infection
which favor invasion of the cortex more than is generally true of ivilt, and
in this case symptoms of root rot attended by a slight discoloration of the
corticial tissues may be detected. Under conditions of high humidity the
near-wilt Fusarium has been observed sporulating about the lower part of
the aerial stem ot diseased plants in late stages of the disease. The same
plieiiomenon has been seen also in the case of the w'ilt disease (17).

Went (28) reported practically no external discoloration of the roots
of plants infected with the disease as it occurs in Holland, while internally
the vascular system was stained orange. These symptoms, characteristic
for near-wilt as well as for other diseases caused by Elegans Fusarium were
found by Went exclusively with F. o x y s p o r ii m and not with Fu-
saria of other sections. Similar symptoms attended the disease in Ger-
many (21).

A common expression of near-wilt in the field is the occurrence of yel-
low isolated plants which, however, may be numerous. In badly infested
soil large patches or spots of peas infected witli near-wilt may ocenr gi\ing
the impression of a wilt infestation, but snch severe infestations so far have
not become general. In such instances field symptoms are of little value
in differentiating between the two diseases (unless the field is planted to a
variety known to be wilt resistant) inasmuch as the foliage and root symp-
toms, as well as the field picture, resemble closely wilt caused by F. o r -
thoceras v. pisi, and diagnosis therefore must be supplemented by
a cultural analysis of infected specimens. As high as lOO'J'o loss from near-
wilt has been seen during the 193-1 season in plots of wilt-resistant varieties
gi’own in Wisconsin, and similar spots are known in California.

Frequently the near-wilt Fusarium and a member of the section Mar-
tiella have been found associated in a diseased plant. This is a common
experience also with other vascular wilts. The presence of the Martiella
Fusarium may produce additional symptoms of a root rot nature, not typi-
cal of the wilt disease in question. This is particularly the case when F.
solaniv. Martii f. 2 attends the near-wilt fungus inasmuch as then
both are active parasites of the pea plant, the former primarily of the cortex
and Ihe latter primarily of the vascular cylinder.

An extensive test of varieties susceptible to near-wilt has not been made
but the disease has been found with the following varieties of pea: Wisconsin
Early Sweet, Bruce, Senator. Prince of Wales, Alderman, Green Admiral,
wilt-resistont Perfection, Maryland Alaska (all of these varieties are resistant
to F. 0 r t h 0 c 0 r a s v. p i s i), Alaska, Thomas Laxton, Perfection, Surprise.
Laxton’s Progress and Hundredfold. The economic importance of near-
wilt is emphasized by the fact that in addition to being widespread, many
varieties that are either resistant or susceptible to wilt, are alike susceptible
to near-wilt.

The occurrence of near-wilt has been reported for Wisconsin, Maryland,
Delaware, New Hampshire, Massachusetts, Idaho and Montana (18). What
may be the same disease is reported by S t a r r (22) for Minnesota, and by
Harter (7) for Maryland, Ohio, l^ginia. South Carolina, Wisconsin,
Colorado, Washington and Idaho. One of the writers has observed it in.
California, and there is evidence that the disease is also present in Europe (21).

360

'W. C. S n y d e 1 emd J. C Wilkei,

Etiology.

During the past four summers a Fusarium has been consistently iso-
lated from the ^scolored vascular systems of diseased peas that showed
symptoms of near-wilt. These diseased specimens, representing a number
of varieties and including mostly those resistant to wilt, have been col-
lected or received from several pea growing regions of the United States,
from Maryland to California. Thirty five representative isolations from
near-wilt plants have been tested for pathogenicity and found parasitic
on one or more pea variety known to be resistant to wilt, and on wilt-sus-
ceptible varieties where tested. Bruce, Wisconsin Early Sweet, and Laxton’s
Progress have been among those used in the majority of tests.

The inoculation method employed was the same as has been followed
in similar studies (19) upon the wilt disease. Pure culture of the Fusaria
were grown on a sterilized mixture of equal parts of moist coinmeal and
sand and after about t^o weeks thoroughly mixed with soil. In some ex-
periments steam sterilized soil was used, in other instances natural soil that
had not been in cultivation was employed. Both have yielded positive
infection results with from 30 to 100 percent of disease. In some cases the
seeds were surface sterilized before planting. In the greenhouse disease
symptoms and death occurred about blossoming time or earlier, while the
control plants continued growth until normal maturity was reached. When
the inoculum was mixed with sterilized soil disease symptoms appeared
more rapidly upon the first crop of peas than upon those planted later.
A suitable virgin soil has generally proved more satisfactory than auto-
claved soil for testing both the wilt and near-wilt Fusaria, when large num-
bers of control plants are used in the experiment, and represents a more
natiual soil environment for the plant.

The manner in which pathogenicity tests were made is shown in the
following example using a culture from Maryland:

A half dozen six inch pots of steam sterilized soil were prepared. About
300 grams of commeal sand inoculum, prepared as explained above, was
thoroughly mixed with the soil in each of four of the pots. Ten seeds of the
Wisconsin Early Sweet variety were than planted in each of two of the ino-
culated pots and in one of the uninoculatcd pots. The others were sown
with seed of the variety Laxton’s Progress. All seeds were surface sterilized
in mercuric chloride solution prior to planting. Germination of the seed
under these conditions ranged from 70 to 100 percent. At the end of 7 weeks
two to five plants in each of the inoculated pots showed pronounced symp-
toms of disease. The foliage was yellow, the plants somewhat retarded,
and the leaflets yellow and curled. The lower leaves were withered and the
plants were dying. Other plants in the inoculation pots showed signs of
disease in comparison to the control plants which appeared healthy and
normal. At the end of the eigth week all of the Laxton’s Progress and half
of the Wisconsin Early Sweet plants were completely wilted. The severely
diseased individuals of both varieties were removed from the soil and the
roote washed. Many of the small rootlets were decayed and bronzed regions
indicating some cortical rot of the main root were found, but the macro-
scopic symptoms upon the underground part of the plants was relatively
slight and did not seem commeasurate with the disease shown in the aerial
portion. Much more severe cortical decay of the foot and root of peas para-
sitized by F. solani v. Martii f. 2 and Aphanomyces eu-

iFuserniun neai-'nilt of Pea.

361

t e i c h e s Drechsler is commonly accompanied by only minor changes in
foliage symptoms. However, upon cutting away the cortex of the foot and
root of the near-wilt plants a bright orange brown to deep red discoloration
of the vascular system revealed an invasion of the conducting tissues, which,
as in the case of wilt, could explain the aerial symptoms of disease upon
the basis of a distiibution to and accumulation in the foliage of the toxic
clonienls of fungus metabolism. Although in several instances the root of
a diseased plant showed some evidence of cortical invasion or bronzing,
the foot or epicotyl as a rule appeared white and disease free. Even in this
case the vascular discoloration extended not only from the root into the
foot, but also varying distances into the above ground stem. By cutting
away the healthy cortex with a sterile knife and plating on an acidified
agar medium the orange stele from the highest point of its detection in the
plant, pure cultures of the causal organism were obtained. These were found
to be identical ydth the original culture and therefore to be parasitic upon
the varieties Wisconsin Early Sweet and Laxton’s Progress, the former of
which is wilt-resistant and the latterwilt-susceptible.

In an experiment using virgin soil inoculated with a Wisconsin culture
of the near-wilt Fusarium, the wilt-resistant variety Bruce showed symp-
toms of the disease when 8 inches high while control plants remained healthy.
Examination of the roots and epicotyl of these plants revealed no clear
outward evidence of invasion. The cortex was quite white and sound, yet
from the lightly discolored vascular systems was cultured the near-wilt
fungus, the presence of which evidently accounted for the expression of
disease in the foliage.

There was some evidence in the pathogenicity trials of differences in
virulence between the various strains of the fungus, but all acted in produc-
ing symptoms of the near-wilt disease. This collections of tested strains of
the near-wilt Fusarium, derived in each case from a single spore, formed
the basis of the following study upon the taxonomy of the parasite.

Taxonomy.

Macroscopic Characters.

At the outset of studies with the near-wilt Fusarium it became ap-
parent that variabilily occurred at least in respect to macroscopic charac-
ters of the fungus. One of the conspicuous qualities of the organism to be
first observed, especially noted because of its usefulness in distinguishing
in culture between the near-wilt and wilt Fusaria, was the capacity to pro-
duce a typo of purple pigmentation not of typical occurrence in a collection
of strains of the wilt I^sarium (19). However other strains of the near-
wilt fungus were obtained which when first isolated produced little or no
pigment, or a flesh color, and on the same culture medium these various
strains exhibited not only a range in color extending from no pigment to a
very dark shade of purple, but differences in characters of growth.

To record all the shades of color found in strains of the near-wilt Fu-
sarium, even upon the same medium would only serve to demonstrate again
the phenomenon of pigmentation variation in single spore cultures that
has been illustrated amply in other Fusarium studies (9, 10, 19). It suf-
ficies to note that on a medium high in soluable carbohydrates pigmentation
may bo lacking, or shades of flesh, orange or lilac predominate, or the depth

362

W. C. S n y d e I and J C. AV a 1 k e r ,

of pigment may approach a blackish lavender. Pigmentation may be limited
to a ridge of plectenchyma where the agar touches the wall of the test tube
or involve the entire plectenchyma, or it may be observed in varying degrees
in the aerial mycelium, in the medium, or in both. These variations seem
to depend largely upon the stage of culture in which the fungus happens
to be, and to its age and previous cultural treatment, and environment.
Evidence in support of the view is seen in the following exporionce: Eleven
single spore cultures of Fusarium isolations from pea jdants showing near-
wilt symptoms, representative of the disease both in Europe and America
and of the cultural range of the fungus, were transferred to petri dishes con-
taining acidified potato dextrose agar. The fungi used were California cul-
tures No. 53 and 59, Idaho cultures No. 169 and 234, Wisconsih cultures
No. 178 and 184, Maryland cultures No. 6 and 70, Italian culture No. 274,
German culture No. 194, and Holland culture No. 275. In making the
transfers an attempt was made to select comparable fungus inocula irrespec-
tive of the medial source. That is, instead of seeking to obtain as widely
different colonies of the fungi as possible by transferring from different types
of cultural growth, it was intended to inoculate the plates with that type
of colony growth, common to all eleven organisms. A< the end of one mouth
the fungi showed a surprising similarity in manner of growth and pigment-
ation, in spite of the contrasts in previous culture series of an order already
described. The mycelium was predominantly white, but the zone of plecten-
chyma and medium about the point of inoculation w'as pigmented in a manner
uniform for all cultures, and varied only in intensity of the color which
approximated ramier blue^). Two subsequent plate series were run with
the same result. Differences in the relative amount of aerial mycelium were
obtained between the fungi as well as within a given strain, but this is a
normal expectation. It was possible to find some evidence of zonation in
one cultural series or another of all the Fusaria used in this test. These
characteristics as well as color are known to be variable qualities of Fu-
sarium culture (1, 3, 4, 6, 13, 15, 19, 32). It is only intended to emphasize
here that although it is relatively easy to build up violent contrasts in cul-
tural appearance, even from within one single spore clone, that in the op-
posite way it is possible to brir^ the cultural differences into ready agree-
ment. This has been shown by other work (20). To attach species or varietal
significance to such fluctuation is to invite confusion.

A summation of some of the macroscopic characters that have been
observed with a single spore, tested culture of the near-wilt Fusarium
under various conditions of culture and age, follows. Pigmentation on
oatmeal agar was approximated by the following colors: none, carmine
(acid reaction), various shades of slate-violet, ageratum violet, or ramier
blue (alkaline reaction); vinaceous pink, light ochraceous-salmon or flesh
color; invisible green and anthracene green (attending sclerotial formation),
raisin black, ana intermediate and related colors. On rice jasper pink, old
rose, eugenia red, nopal red, and carmine have been observed in the acid
condition, and madder violet or related shades of purple in the alkaline
condition. Odor on rice was sometimes evident in fresh isolations. Zonation
also was seen in petri dish cultures under certain conditions. Dark selerotia
have been ob tained in abundance but frequently were not found. On stems

1) R i d g e w a y , R., Color standards and nomenclature. Washington, D. C.

1912.

Fusarium neai-wilt ot Pea.

363

and robinia root the sclerotia were usually first pale or vliite, but later be-
came flesh color or a light ochraceous-salmon, and finally dark bluish green
or dark blue sclerotia appeared. Pionnotes and sporodoehia also occurred only
in high cultural stages of the fungus. Aerial mycelium was sometimes pro-
fuse, fine, and dense or open in its growth, while at other times it
was scant or almost lacking and extended in sheets or in strands over the
agar surface and on the walls of the test tube. In many respects the near-
wilt Fiisarium resembles F. oxysporum f. .3 (F. oxysporum
V. cubense). F. oxysporum f. 5 (F. oxysporum v. nico-
tian a) and F. o x y s p o r u ra f. 6 in its growth characters upon various
culture media (13, 31).

Microscopic Characters.

The character of spondation proved to be an additional aid in the
distinction between the wilt and near-wilt Fusaria. Linford fll) found
sporulation in the case of the wilt fungus to be generally scant and to con-
sist principally of microconidia. Macroconidia were obtained only very
rarely. The near-wilt organism on the otherhand sporulates more freely
in respect to both microconidia and macroconidia, even producing pion-
notes and sporodoehia. The presence or absence of these mode.'? of conidia
production, and the morphology of the macroconidia when produced, vary
according to the stage of culture and the environment attending the growth
of the organism.

In the isolation of the near-wilt fungus obtained directly from placing
infested plant tissue in a petri dish containing potato dextrose agar, micro-
conidia tend to predominante. Subsequently, under favorable conditions
the fungus may bo brought into high culture,* wliile under unfavorable con-
ditions a state of poor culture, in respect to intensity of sporulation, may
result. The relative abundance of the different spore forms, and their mor-
phology, largely depends upon that cultural stage into which the fungus
emerges. With high cultine sporodoehia yield short macroconidia typical
of F. oxysporum. In an Abkultur or when in a poor cultural condition,
the fungus produces no sporodoehia but may develop a scant pionnotes
or conidial slime consisting of various proportions of micro- and macro-
conidia. In this case the macroconidia are often long and narrow and not
typical of the sporodochial conidia of F. oxysporum. Scattered in
the mycelium with microconidia are frequently short macroconidia, but
this also varies.

In Figure 2 is shown some of the stages of culture obtained with a
tested single spore isolant. No. 53, from California. This Fusariiim was
isolated in the spring of 1933 and therefore was about a year old when the
present studies were begun. The fungus at this time was in poor culture.
It produced no sporodoehia when transfered to various media, exhibited
no signs of sclerotia formation, and yielded only microconidia with a scat-
tering of macroconidia, and even this sporulation was scant. In the course
of attempts to bring the organism into high culture according to the lechni-
ctue of Appel and Well enw eb er (1) the macroconidia illustrated
in Figure 2, a — g, were obtained, without sporodoehia. For the most part
those conidia were obtained principally upon agar media and were difficult
to find in appreciable quantities, although microconidia were plentiful.
However in later culture series as high as 36% of 3-septate and 5% of

Fusarimc near-wilt of Pea.

365

dochia was obtained, conidia of which are shown in Figure 2 h, and also
bluish green sclerotia. It is not unusual to obtain such morphologic variation
with a single spore culture of a Fusarium. but it is still of importance to
take the fact into consideration in making fungus determinations when
an organism of this type is in question. Studied in a single cultural stage
the fungus might be found to resemble F. orthoceras, F. vas-
infectum, F. bulbigenum, F. oxysporum, or F. oxy-
sporum V. aurantiacum, but in high culture to be in agreement
only with F. oxysporum. A similar range in conidial types has been
shown to occur in F. oxysporum f. 3. and F. oxysporum f. 5 (13).
The range in morphology of other isolations is shown in Figures 3 and 4.
Figure 3 a — c, shows another California isolation; Figure 3 d — f, an isolation
froni Wisconsin: Figure 4 a— c, from Maryland and d — f, from Wisconsin.
Conidia from a culture received from Dr. P. P. M e h r 1 i c h which he re-
ported to the writers in correspondence as being parasitic on peas in Hawaii,
are illustrated in Figure 3 g — i, and those from an isolation obtained from
peas in Germany by Snyder (21) are shown in Figure 4 g — i. Illustrations
of conidia from an Italian isolation from peas are given in another publi-
cation (21), but agree with the conidia in Figure 4d — f. The F. oxy-
sporum found parasitic on peas in Holland (28) has also been examined
and appears to be the same as the German isolation. Long spore stages
found scattered with microconidia upon the plectenchymae of other cul-
tures isolated in Idaho and Wisconsin and examined in a poor stage of cul-
ture correspond to those shown in d— f of Figure 2, and in a, e, and g of
Figure 3 and 4.

It is seen that this collection of Fusarium isolations obtained from
diseased peas in different parts of the world, and proved to cause essentially
the same symptoms in their pathogenesis, agree in their morphology within
reasonable limits, when the broad range of conidial type for any one sir^le
spore culture is taken into full consideration. According to Wollen-
w e b e r s (31) taxonomic system, based upon the high cultures of the Fu-
saria, these fungi fall into the form circle of F. oxysporum, as illu-
strated by the sporodochial conidia given in Figures 2. 3, and 4, and in the
following tabulation of spore measurements. Under some conditions cer-
tain strains border on one hand F. vasinfectum with its varieties
and forms and in the other F. oxysporum v. aurantiacum,
but the same range in conidial type may be demonstrated by the variability
in a single spore culture of a single strain, as shown in the Figures and in
the tabulation of spore measurements. Owing to the distinctive parasitism
of the near-wilt Fusarium of pea. and other minor characters, the fungus
is described in this paper as a new form, forma 8, of the species F. o x y -

Fig. 2. Yarioiis spore types of the single spore, California culture No. 63 of the
near-wilt fungus, F. o x y s p o r u m f. 8. In a — f are shown the long narrow macro-
oonidia frequently obtained in small numbers in a pionnotal slime, and in g those
found scattered in the aerial mycelium (also with abundant microconidia) of the fungus
when not in high culture. Sporodochial conidia of high culture are shown in h and
are more typieal of the fungus than the preceding long types which are usually in a
scattered ocourronoe and in old cultures, a, scattered on oatmeal agar after 19 days;
b, scattered in mycelium on robinia root after 36 days; c, scattered on oatmeal after 36
days; d, scattered on potato agar after 46 days; e, in light pionnotal slime on potato agar
after 64 days; f, scattered on oatmeal agar after 46 days; g, scattered in mycelium on
elm stem after 41 days; h, in sporodochia on robinia root after 2 months. All 1000 X .

Fusarimn near-wilt of Pea.

367

of the world treated here are also placed as F. o x y s p o r u m f. 8, although
comparative pathogenicity data is not yet compiete, since these organisms
are morphologically similar and have been shown capable of infecting peas
( 21 , 28 ).

The following tabulation contains the average measurements of macro-
conidia obtained from single spore cultures of Fusaria isolated from pea
plants showing symptoms of the near-wilt disease (St. Johns wilt in
Europe), representing growth on various media and in different stages of
culture. The use of the same medium more than once for a given fungus
indicates other culture series. All measurements through out this paper
are given in microns:

California Culture No. 52.

On potato agar after 42 days. Conidia scattered in white mycelium.

3- septate: 29.2 x 4.3 (26—34 x 3.7— 4.5)

On oatmeal agar after 33 days. Conidial masses on a bluish plectenehyma. Dark
sclerotia present and an odor detected.

3.septate: 39.6 x 3.8 (34—48 x 3.2— 4.6)

4- septate: 45.6 X 4.0 (42—49 X 3.8— 4.5)

5- soptate: 46.0 X 4.1 (43 — 50 x 3.9 — 4.3)

On elm stem after 42 days. Conidia in warm buff sporodochia. Small dark sclero-
tia present.

3- septate: 38.0 X 4.5 (31—44 X 3.8— 5.7) 90<>^>

4- septate: 40.5 x 4.5 (37—44 X 4.0— 4.8) 10%

On barley ear after 42 days. Conidia in warm buff sporodochia.

3-septate: 31.2 X 4.4 (27—37 X 4.0— 4.8)

On robinia root after 33 days. Conidia in warm buff sporodochia.

3- septate: 36.5 X 4.4 (30—42 x 4.2— 4.8) 68%

4- scptate: 36.7 X 4.3 (33—40 X 4.2— 4.5) 4%

5.septate: 37.5 X 4.5 (35—40 x 4.3— 4.7) 2%

On lupine stem after 33 days. Conidia in warm buff to sahnon color sporodochia.
Pale sclerotia forming.

3- septate: 39.3 X 4.5 (33^ — 43 X 3.8 — 5.0) 63°o

4- septate: 43.0 X 4.5 (42—45 x 4.2— 4.8) 32%

6- septaie: 44.0 X 4.2 (42—44 x 3.8— 4.4) 4%

Average of the above measurements.

3- septate: 35 X 4.3

4- septate: 41 X 4.3

5- septate: 42 X 4.3

California Culture No. 53.

On potato agar after 54 days. Conidia in a light pionnotes^).

3- SGptato: 45.8 X 3.2 (40—52 x 2.8— 3.6) 36°^

4- SQptate: 53.4 x 3.4 (44—63 X 3.3— 3.5) 1%

5- 8cptate: 57.3 X 3.4 (55 — 58 X 3.4 — 3.6) 1%

On oatmeal agar after 46 days. Conidia in a light pionnotes^).

3- septate: 46.0 x 4.0 (35 — 59 x 3.5 — 1.5)

4- septate: 55.0 x 4.0 (51 — 62 x 3.8 — 4.2)

5-septate: 64.0 x 4.2 (56—71 x 3.8— 4.5)

^) These conidia were obtained from cultures in a poor and staled condition and are
not typical of conidia from a normal high culture. Tliey are therefore given only half
weight in the average measurements for the fungus. These figures are recorded here
only that they may aid in the determination of the fungus when it is studied in a simi-
lar condition of culture.

Fig. 3. Some conidial types occurring in various strains of the nearwilt fungus,
F. oxysporum f. 8 a — c, Calif ornia culture No. 52; d — f, Wisconsin culture No. 73;
g — i, Hawaii culture No. 771. a, in spore masses on oatmeal after 27 days; b, in sporo-
dochia on barley ea» after 42 days; c, in sporodochia on lupine stem after 33 days,
d, on elm stem after 42 days; e, in light pionnotes on oatmeal agar after 70 days; f,
sporodochia on potato agar after 10 days, g, in pionnotes on potato plug after 33 days;
h, in sporodochia on robinia root after 70 days; i, sporodochia on robinia root after
33 days. All 1000 x.

368

W. 0. S n y d o r and J. C. a 1 k e r ,

Fig. 4 (Fixplanation p. 369).

Fusarium neaMilt of Pea.

369

On elm stem after 41 days. Conidia scattered in '\\hite mycelium.

3- septate; 28.6 3.6 (23—32 / 3.2— 4.2)

On robmia root after 60 days. Conidia in warm huff sporodochia. Small dark
sclerotia present.

3.septate: 32.9 y 4.1 (27—37 X 3.5— 4.6) 740^,

4- septate: 33.3 x 4.2 (31—37 X 4.0— 4.5) 5%

5- septate: 33.0 X 4.3 (31—38 X 4.0— 4.5) 2^0

Average of the above measurements.

3- septate: 35.8 X 3.8

4- septate: 43.7 X 4.0

5- septate: 46.5 X 4.1

California Culture No. 58.

On potato agar after 60 days. Conidia in light pionnotes.

3- septate; 34.4 X 4.0 (26—41 x 3.6— 4.2) 18%

4- septate; 40.0 x 4.1 1%

On potato agar after 46 days. Conidia in light pionnotes.

3- septate: 40.5 x 4.2 (28—49 x 3.8 X 4.5) 22^^

4- septate: 48.0 X 4.4 l°o

On oatmeal agar after 47 days. Conidia in light pionnotes.

3- septate: 35.5 x 4.0 (27—42 X 3.4— 4.2) 3%

4- aeptate: 42.0 X 4.2 1%

On robmia root after 35 days. Conidia m warm buff sporodochia.

3- septate: 38.6 X 3.9 (33—44 X 3.7— 4.2)

4- septate: 41.8 X 4.0 (38—44 X 3.8— 4.3) 31%

6- septate: 43.0 X 4.0 1%

Average of the above measurements.

3- septate: 37.2 X 4.0

4- septate: 42.9 x 4.2

6-septate; 43.0 X 4.0

California Culture No. 69.

On potato agar after 41 days. Conidia scattered in white mycelium.

3-septate: 31.2 X 3.8 (28—40 X 3.5— 4.0) 1 %

On elm stem after 42 days. Conidia in warm buff sporodochia.

3- septate: 33.4 x 4.2 (30—40 X 3.8— 4.6)

4- septate: 41.3 X 4.3 (39 — 45 X 4.0— 4.5)

On robinia root after 20 days. Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.
Small pale sclerotia forming.

3- septate: 35.0 X 3.9 (25—40 X 3.5 — 4.3) 62°o

4- soptate; 41.0 X 4.0 (35—45 X 3.7— 4.2) 36%

6-septate; 42.0 X 4.0 1%

On robinia root after 20 days Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.

3- septato: 34.3 X 4.0 (30—39 X 3.7— 4.6)

4- septate: 40.0 X 4.2 (38 - “' ' 4 1 X 4.0 — 4.3)

Average of the above measurements.

5- septate: 33.5 x 4.0

4-septate: 38.1 X 4.1

Massachusetts Culture No. 72.

On oatmeal agar after 27 days. Conidia in warm buff to salmon color spore mas-
ses. Plectenchyma a dark violet color.

3- septate: 32.6 x 4.1 (30 — 35 x 3.7 — 4.3)

4- septate; 35.0 X 4.3

6- septate: 33.0 X 4.3

Fig. 4. Some conidial types occurring in various strains of the near-wilt fimgus,
F. oxysporum f. 8. a — c, Maryland culture No. 5; d — Wisconsin culture No.
178; g — i, German culture No. 194. a, scattered on oatmeal agar after 50 days; b, in
sporodochia on oatmeal after 35 daya; c, scattered in mycelium on robinia root after
30 days, d, in sporodochia on barley ear after 72 days; e, in sporodochia on oatmeal
after 40 days; f, in sporodochia on robinia root after 18 days, g, in pionnotes on potato
agar after 23 days; h, in sporodochia on barley ear after 30 days; i, in sporodociia on
robinia root after 42 days. All 1000 X.

Zweite Abt. Bd. 91.

24

370

W. C. Snyder and J. C. Walker,

Wisconsin Culture No. 73.

On potato agar after ten days. Conidia in v'arm buff to isabella color spore
m asses.

3- septate: 36.7 X 3.9 (31—38 x 3.4— 4.2)

4- septato: 38.0 X 4.1 (36—40 x 3.7— 4.2) 8^0

5- septate: 40.5 X 4.2 (37—42 x 3.8— 4.5) 2^;,

On oatmeal agar after 33 days. Conidia in pionnotcs on dull bluish groon plocten-
ch3rzna.

3- septate :g36. 2 X 4.2 (33 — 43 X 3.8 — 4.6)

4- septate : 38.0 — 4.2

6- septate: 48.0 X 4.4

On oatmeal agar after 75 days. Conidia in warm buff pionnotes.

3-septato t 42.3 X 3.8 (36—44 X 3.2— 4.2)

4.aeptate: 47.0 X 3.8 (44—49 X 3.6— 4.0)

6-septate: 60.3 X 3.9 (48—52 X 3.7— 4.2)

On elm stem after 42 days. Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.
Small dark sclerotia present.

3-septate: 30.1 X 4.1 (26—35 X 3.6— 4.4)

On robinia root after 10 days. Conidia in vinaceous — cinnamon sporodochia.

3- septate: 39.5 X 4.2 (37—42 X 3.9— 4.5) 82%

4- septate: 45.5 X 4.0 16%

6-septate: 50.0 X 4.3 1%

Average of the above measurements.

3- septate: 37.3 X 4.0

4- septate: 46.0 X 3.9

5- septate: 50.0 X 4.1

Wisconsin Culture No. 177.

On robinia root after 26 days. Conidia in salmon color sporodochia. Sclerotia
present in agar cultures.

3-septate: 32.0 X 4.2 (27 — 41 x 3.6 — 4.8)

Wisconsin Culture No. 178.

On potato agar after 40 days. Conidia in light pionnotes on a dark lavender
plectenchyma.

5- septate: 32.4 X 4.6 (27^ — 37 X 4.2 — 5.4)

On oatmeal agar after 36 days. Conidia in warm buff spore masses on a dark
lavender plectenchyma. Pale to dark sclerotia present. Odor detected.

3- septate: 36.3 X 3.9 (31 — 42 x 3.2 — 4.2) 39%

4- septate: 42.2 X 4.0 (38 — 47 X 3.8— 4.3) 28%

6- aeptate; 38.0 X 4.1 5%

On oatmeal agar after 2 months. Conidia in warm buff spore masses. Small
dark sclerotia.

3- septate: 38.9 X 4.3 (26 — 62 x 3.8 — 4.8) 82^^

4- septato: 37.0 X 4.1 (30 — 47 X 4.0 — 1.2)

5- septate: 40,0 X 4.2

On barley ear after 72 days. Conidia in salmon color sporodochia. Dark sclerotia
present.

3- septate: 31.0 X 4.2 (30—39 X 3.8— 4.6) 90%

4- septate: 33.0 x 4.3 (30 — 36 X 4.2 — 4.6)

On robinia root after 30 days. Conidia in salmon color sporodochia.

3- septate: 36.0 X 4.4 (30 — 38 X 3.8 — 4.8) 94%

4- septate: 33.0 X 4.6 2%

6- septate: 40.0 X 4.5 1%

On robinia root after 18 days. Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.

3- septate; 39.2 X 4.2 (32—51 x 4.0— 4.8)

4- septate: 41.0 X 3.9 (38 — 44 X 3.7— 4.2)

d-septate: 42,7 X 4.2 (41—44 X 4.0— 4.6)

Average of the above measurements,

3- 86ptate: 35.3 X 4.2

4- septate: 37,3 X 4.2

5- septate: 40.2 X 4.2

Fusarium. near-wilt of Pea.

371

Maryland Culture Xo. />.

On potato agar after 30 days. Conidia scattered on purple plectenchyma^).

3- septate: 43.8 X 3.5 (39—52 x 3.0— 3.8)

4- septate: 49.0 X 3.4

6-septate: 49.0 X 3.4 (a single eonidium measured)

On oatmeal agar after 50 days. Conidia scattered in light pionnotes on purple
plectenchvma.

3.septate: 40.0 X 3.7 (26-48 X 3.5— 4.2) 3^0
4-septate: 51.0 X 4.3 1%

On rice after 45 days. Conidia scattered in white mycelium.

3- septate: 33.0 x 4.0

On robinia root after 15 days. Conidia in white mycelium.

3. septate: 31.0 X 4.0 (28—38 X 3.5— 4.4)

4- septate: 39.0 X 4.0

On robinia root after 30 days. Conidia in warm buff sporodochia.

3- septate: 36.4 X 4.2 (28—42 X 3.7— 4.7)

4- septate: 38.0 X 4.2 (33—42 x 3.8— 4.6)

5- septate: 42.0 X 4.3
Average of the above measurements.

3- septate: 36.6 X 3.9

4- septate: 44.2 X 4.0

5- aeptate: 44.3 X 4.0

Hawaii Culture No. 171.

On potato agar after 33 days. Conidia scattered in white mycelium.

3- septate: 37.7 X 3.9 (33—41 x 3.7— 4.2)

4- septate: 41.0 X 4.0 (38—44 x 3.8— 4.2)

On oatmeal agar after 33 days, Conidia in warm buff pionnotes on a lilac
plectenchyma.

3-septate: 43.0 x 4.3 (35—50 X 3.8— 4.6) 12%

4. septate: 63.0 X 4.5 11%

6- septate: 62.4 x 4.4 (44—67 X 3.8— 4.8)

On potato stem after 33 days. Conidia in warm buff to salmon color pionnotes.

3- septate: 36.2 X 4.2 (34 — 40 X 4.0 — 4.5) 61%

4.septate: 38.6 x 4.4 (34—44 X 4.2— 4.7) 17%

6-septate: 48.0 X 4.6 10%

On potato plug after 33 days. Conidia in salmon — ochraceous pionnotes.

5- septate: 41.0 x 4.1 (37—44 X 3.9— 4.3) 16%

4- septate: 44.0 X 4.2 (40—48 x 3.9— 4.5) 13%

5- septate: 49.5 X 4.1 (48—53 X 4.0— 4.3) 13%

On robinia root after 33 days. Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.

3- septate: 34.3 X 4.0 (32—37 X 3.9— 4.3) 30%

4- septate: 39.8 X 4.0 (33—42 x 3.7— 4.3) 38%

6- septate; 46.6 X 4.0 (37—61 X 3.8— 4.3) 32%

On robinia root ^ter 3 months. Conidia in salmon color sporodochia.

3- septate: 33.1 X 4.2 (30—35 x 3.8— 4.6)

4- septate; 37.6 X 4.2
6-septate: 42.0 X 4.2

Average of the above measurements.

3- septate: 37.4 X 4.1

4- septate: 42.6 x 4.2
6-septate: 47.6 x 4.2

In some cultural stages this fungus has closely resembled F. oxysporum
V. aurantiacum.

German Culture No. 194.

On potato agar after 23 days. Conidia in light pionnotes on purple plectenchyma^).
3-septate: 45.8 X 3.6 (38—53 X 3.2— 4.0)

4.septate: 54.2 X 3.8 (61—59 X 3.3— 4.2)

6-septate; 69.0 X 4.0 (66 — 63 x

^) See footnote ^) on page 367.

24 *

372

W. C. Snyder and J. C. Walker,

On oatmeal agar after 4 days. Conidia m salmon color sporodochial masses.
Dark selerotia present.

3- septate: 36.0 X 4.2 (33—42 y 3.8— 4.5) 70%

4- soptate: 35.2 x 4.2 (32—38 X 4.0— 4.4) 28%

5- septate: 40.3 x 4.5 (38—44 X 4.3— 4.7) 2%

On barley ear after 30 days. Conidia m salmon color sporodochia.

3- septate: 34.6 X 4.1 (30—41 X 3.7— 4.5) 93%

4- septate: 38.2 x 4.1 (34—41 x 3.8— 4.6) 6%

5- septate: 41.0 X 4.2 1%

On robinia root after 42 days. Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.

5- septate: 36.7 X 4.3 (32—38 x 4.0— 4.8) 84%

4. septate: 39.6 X 4.2 (38—44 X 4.0— 4.5) 14%

6- septate: 45.0 X 4.2

Average of the above measurements.

3- septate: 37.2 x 4.1

4- septate: 44.0 X 4.1

5- septate: 44.5 X 4.2

Holland Culture No. 275.

On potato agar after 18 days. Conidia in light salmon color pionnotes.

3-septate: 40.3 X 4.3 (34—47 X 3.8— 6.2)

5. septate: 61.3 X 4.6 (46—55 X 4.0— 6.0)

On oatmeal agar after 25 days. Conidia in pionnotes on purple pleotenchyma.

3- septate: 39.0 X 4,2 (29—47 X 3.8— 6.0) 92%

4- septate: 48.6 x 4.3 (44—52 X 4.0— 4.6) 4%

On oatmeal agar after 25 days. Conidia in pionnotes on purple plectenchyma.

3- septate: 41.0 X 3.7 (31 — 49 X 3.5— 4.3)

4- septate: 41.0 X 4.0 (38—48 X 3.8— 4.6)

Average of the above measurements.

3- septate: 40.0 X 4.1

4- septate: 46.9 X 4.2

These average measurements for the Holland culture include no measure-
ments of sporodochial conidia and are not as representative of the fungus as those
given by Went (28) for the same culture :

3-septate; 36.2 X 3.9 (28.0—43.7 X 3.6— 4.3)

6- septate: 43.5 X 4.6 (38.6—49.0 X 4.0— 4.9)

Italian Culture No. 274.

On potato agar after 12 days. Conidia in salmon color spore masses. Odor present.

3- septate; 35.9 x 4.1 (32 — 42 X 3.8 — 4 3)

4- soptate: 37.8 x 4.2 (34—42 X 4.2)

5- soptate; 42.0 x 4.2

On acidified potato agar after 20 days. Conidia in salmon color sporodochial
masses.

3- septato: 41.7 X 4.2 (36—51 X 3.8— 4.7) 82%

4- septate: 47.0 X 4.4 (46—49 X 4.4) 3%

On oatmeal agar after 3 months. Conidia in warm buff to salmon color spore
masses. Bark selerotia present and traces of purple plectenchyma.

3-septate; 41.4 X 3.7 (34—63 X 3.4— 4.3) 84%

4. septate: 49.4 X 3.7 (43—67 X 3.3— 4.2) 14%

5- septate: 49.5 X 3.9 (46—64 X 3.8— 4.0) 2%

On oatmeal agar after 66 days. Conidia in warm buff to salmon color spore mas-
ses. Small dark blue selerotia present.

3- septate; 33.2 X 4.1 (27—34 X 3.8— 4.5) 88%

4- septate: 37.6 x 4.2 (33—43 X 4.0— 4.6) 4%

On oatmeal agar after 12 days. Conidia in salmon color spore masses. Odor
present.

3- septate: 37.0 X 3.8 (33—44 X 3.7— 4.3)

4- septate: 39.0 x 4.0 (38—44 X 3.8— 4.2)

On robinia root after 30 days. Conidia in salmon color sporodochia.

5- septate: 36.1 x 4.4 (30—38 X 3.8— 4.7) 80%

4-septate: 38.3 X 4.6 (34—44 X 4.3— 4.7) 6%

5. septate: 40.0 X 4.3 1%

Fusarium near-wilt of Pea.

373

On robinia root after 14 days. Conidia in salmon color sporodochia.

3.septate: 32.7 a 3.8 (29—37 X 3.6— 4.0)

On barley ear after 3 months. Conidia in warm buff to salmon color sporodochia.
Numerous dark sclerotia present.

3- septate: 36.0 X 4.1 (30 — 50 y 3.5 — 4.5)

4- septate: 39.0 X 4.0

O'Septate: 41.0 X 4.2

Average of the above measurements.

3- septate: 36.6 X 4.0

4- 8eptate: 41.1 x 4.1

6-septate: 43.1 X 4.2

Other characteristics of this Italian culture are treated elsevhere (21).

The averages of the average measurements and the ranges of these measure-
ments, for all of the above American cultures each of which has been tested m respect
to the near -wilt disease, aie as follows:

3- septate: 35.1 x 4.0 mostly 32 — 38 X 3.8 — 4.3 (25 — 59 X 2.8— 5.0)

4- septate: 40.7 X 4.1 mostly 33—46 X 3.9— 4.3 (30—63 X 3.3— 5.0)

6-septate: 42.4 x 4.2 mostly 36—50 X 4.0— 4.3 (36—71 X 3.4— 5.0)

The averages of the average measeurments for those cultures other than from

America are as follows.

3- septate: 37.3 X 4.0

4- septate: 41.2 X 4.1

5- septate: 44.8 X 4.3.

^though these fungi were for the most part recent isolations and there-
fore in better cultural condition than most of the American cultures, the
average measurements are in agreement with those from America, and all
isolations fall within the form circle ofF. oxysporum as given by
Wollenweher (31). Owing to the fact that the fungus dealt with is
an important parasite of peas, whereas other cultures of F. oxysporum
or its forms have been found non-parasitic on peas (8), the near-wilt Fusarium
has been described by Snyder as a new form, forma 8, of this species.
Fusarium oxysporum Schleeht. f. 8 Snyder:

Aerial mycelium abundant to scant, fine and dense or loose and fluffy,
sometimes in strands, white, to orange or flesh, to lavender or lilac. Plecten-
chyma smooth to somewhat erumpent, or leathery, or lacking, colorless to
ochraceous to flesh or orange, to lavender or lilac, or dark slate. Pigmen-
tation throughout plectenchyma and aerial mycelium, or in zones, or where
the fungus comes in contact with the wall of the test tube; pigment may
or may not be diffused into the medium. Color on rice in various inten-
sities of red (in acid modification) to various intensities of purple (in alkaline
modification). Pionnotes copious, or scant, sometimes lacking; sporodochia
not always present, warm buff, orchraceous, salmon, flesh, cinnamon, to
orange. Microconidia to 100% in mycelium or pionnotes to none in sporo-
dochia, predominantly 0-septate, commonly 1-septate, less frequently 2-sep-
tate. Macroconidia to 100% in sporodochia, mostly 3-septate, commonly
4-septate, less frequently 5-septate, 6 — 7- and 1 — 2-septate rare. Average
measurements: 3-septate 36.1 x 4.0 (32—38 x 3.8— 4.3) to 100%, 4-sep-
tate 40.7 X 4.1 (33 — 46 x 3.9 — 4.3) to 38 percent. 5-septate 42.4 x 4.2
(35— j50 X 4.0 — 4.3) to 12 percent, in exceptional cases more. In sporo-
dochia macroconidia tend to be short, while in mycelium or pionnotes
especially of old or mycelial cultures, macroconidia may be of a short or
a long narrow type. Sclerotia frequently absent, sometimes abundant,
white to cream to flesh, to shades of blue or green, or blue-green; 0.6 to 2,
again 2—6 mm diam. Odor now present, now absent. Chlamydospores
common, in mycelium and in conidia, terminal and intercalary. Mycelial

374

W. C. Snyder and J. C. Walker,

chlamydosporos 4 to 14 in diameter. Habitat in the vascular system of
root and stem of pea, Pisum sativum, which it parasitizes causing
a wilt disease. Found in the United States. Germany, Italy. Holland, Hawaii,
and probably other regions in pea culture.

Latin Description.

Fusarium osysporum Schlechtcndahl forma 8 Snyder.

Syn. Fusarium vasinfeotum Atk 'v. pisi %an Hall. Die Saukt
Johanniskrankheit der Fibsen i eruisaoht durch Fusaiium vasinfeotum
Atk., Ber Dtsch. Bot. Ges. Bd. 21. 190.S. S. 2 — 6, ic. — Fusarium oxysporum
cfr. Went J. C. Fusarium Aantastingen van Eiwten Diukkeiy Hoeijembos & Co
N. V. Utrecht, 1934. — F. oxysporum v. aurantiaoum aut. var. non
(Lmk.) Wr.

A typo praesertim recedit parasitismo contra genus Pisum, familiac
Leguminosarum. Conidia 3- (4 — 5-), rarissime 1 — 2-, 6 — 7-septatis: 3-sept.
35.1 X 4 (32—38 x 3.8— 4.3): 5-sept. 42.4 X 4.2 (35—40 x 4.0— 4.5) mi-
crons, in sporodochiis vulgo brevioribus quam in pionnote et mycelio. Sele-
rotiis plusminusve frequentibus 0.5 — 2 — 5 mm diam., globosis cremeis, in-
carnatis vel coeruleo-aerugineis, interdum absentibus. Chlamydosporis
globosis vel piriformibus, terminalibus aut intercalaribus 4—14 micr. diam.

Habitat endobiotice in fasciculis fibrovascularibus caulium plantarum
flaecidarum, epibiotice ad epidermidem caulis necati Pisi sativi in
Europa et America boreali. Fungus Pisis maladiam perniciosam („St. Johns-,
St. Johannis-Krankheit, near-wilt“ dictam) affert.

Discussion.

Variability in the macroscopic characters, in the microscopic morpho-
logy, and in the physiology of members of the genus Fusarium has been
recognized frequently where intensive study of the Fusaria has been made
(1, 3, 4, 5, 8, 9, 10, 13, 15, 16, 19, 20, 30, 31, 32). Such variability may ex-
tend over a broad range as illustrated (19, 20) in the ease of the two pea
parasites F. orthoceras v. pisi and F. solani v. Martii f. 2,
or be reduced to a minimum as has been demonstrated (2) for the cabbage
yellows pathogen F. conglutinans Wr. When variability in the cha-
racters of a parasitic organism is pronounced, a number of distinct cultural
stages may be represented in a series of isolants giving the impression of
difierent identities, at least until a thorough taxonomic study of the iso-
lants has been made. This experience is not peculiar to the genus Fusarium
nor indeed to fungi. Recently Wilson (29) has encountered the same
phenomenon in the case of a bacterial parasite. He has suggested that such
variability within an organism has tended to delay progress with the disease
concerned through confusion brought about by the apparent existence of
several organisms in association with the same disease. This no doubt has
been true of the near-wilt disease of pea.

In surveying the range of variability in the macroscopic characteristics
and in the morphology of the microscopic characters of the near-wilt Fu-
sarium, F. oxysporum f. 8, that has been treated in this paper, em-
phasis is given to the variability that may be encountered within a clone
derived from a single spore. By a single spore culture ist not meant a culture
obtained by selecting an apparently si^le colony from a dilution plate,
but the isolation and transfer with the aid of the microscope of a single co-

Fusanum near-'nilt of Pea.

375

nidiuiu. The nature of the present work made it fundamental to the inter-
pretation of results that all cultures be so prepared, for it seemed at the
outset that more than one fungus might be involved.

In the study of the range in fungal characters obtained through cul-
ture manipulation of several single spore clones over the period of a year,
no logical evidence has been forth coming that the American near-wilt Fu-
saria used in this work represent more than one organism. This organism
has been described as F. o x y s p o r u m f . 8 in order to distinguish it
from other oxysporum possessing different physiologic qualities. The
size of the form circle described for forma 8 is eommeasureate with
the range in fungal characters manifest by a single spore clone from a single
strain of a pathogenic culture. This range has been obtained however from
more than one such clone and from more than one region, for example Cali-
fornia, Wisconsin, and ^Maryland. All other tested isolations from Ameri-
can near-wilt plants used in this study, have fallen within the range described
here. The European isolants from peas showing near-wilt symptoms (St.
Johns wilt in Europe) also have been found to agree morphologically with
the American fungus, and since they are capable of causing a vascular wilt
of pea have been placed also as F. oxysporum f. 8. The European
strains of the fungus show the same variability in macroscopic and micro-
scopic characters that is true of the American strains.

When first isolated, F. oxysporum f. 8 is usually in a mycelial
stage and does not produce sporodoehia unless manipulated with the pur-
pose of bringing it into high culture. In ordinary procedure mycelial trans-
fers are made and such have constituted the bulk of the cultures used in
the study dealt with in this paper. As a result the collection of near-wdlt
Fusaria was represented by various stages of culture some of which con-
vincingly gave the impression of being distinct fungi. Considerable time
and culturing was required to bring these fungi to the production of sporo-
dochia, sclerotia, and other characters. Although even sporodochial macro-
conidia from a single spore clone may vary considerably in size from one
time to another (20) they still afford a more satisfactory basis for the com-
parison of different isolants than do the miscellaneous stages of sporulation
in which a group of culture happens to be. Since in high culture fungal
characters appeared which before had not been observed, several high cul-
tures were subjected to the reverse of Appel and Wollenweber (1)
technique for securing high culture in order to get the fungus in poor cul-
ture or an old condition for comparison with the original stock cultures.
The recovery of the former fungal characters with the disappearance of
the newly acquired characteristics constituted an additional cheek upon
the identity of the culture and the range of its form circle.

Cultures not in a high condition of sporulation, particularly if they
are old, are frequently very difficult to bri:^ into sporodoehia production,
more difficult than has been encountered (20) in similar attempts with old
cidtnres of Fusaria of the section Martiella. In Figure 2 has been illustrated
a culture which for many months yielded no sporodoehia and only loiig
narrow spores of various dimensions, with of course numerous microconidia
which are almost always present. This variety of long conidial types is
pictured here owing to the fact that often these are the only macroconidia
obtained when sporodoehia are lacking, occurring in scant pionnotes,
although short small macroconidia may be found in their stead or scattered

376

W. C. Snyder and J. C. Walker,

in the mycelium; but from the taxonomic standpoint these long macro-
conidial types can not be considered typical, for the taxonomy is based
principally upon the fungus characters found in high culture, in which the
conidial characteristics of the sub-section Oxysporum predominate. These
less typical spore forms are given that they may be an aid in determination
where a high culture has not yet been developed. They are frequently en-
countered in other forms and varieties of this species under some conditions.

With the detection of near-wilt and the determination of the fungus
causing it, pea growers must contend with two known, major wilt diseases
caused by vascular Fusaria of the Section Elegans, namely wilt due to F.
orthoceras v. pisi, and near-wilt caused by F. o x y s p o r u m f. 8.
There are other so-called “wilts”. of pea but they are not primarily vascular
wilts in the usual sense of the term and have been ascribed to Fusaria of
other sections (14, 22, 23, 24, 28). It is, however, certainly a possibility
that other vascular Fusaria of the Elegans type may be discovered upon
pea or be present now. Clearly the near-wilt disease was in general occur-
rence prior to its recognition. In any event it is to he expected that F.
oxysporum f. 8, whose form circle on one hand extends to F. v a s -
infectum with its varieties and forms, and on the other hand to F.
oxysporum v. aurantiacum, when all stages of culture are
considered, may show some variation in pathogenicity. Differences in viru-
lence between strains of the pea parasites F. solani v. Martii f. 2
and F. orthoceras v. pisi are known to exist (8, 19, 20), and it
has been suggested (16) that certain strains of the watermelon wilt fungus,
F. bulbigenum Cka. et Mass. v. n i v e u m (Frw. Sm.) Wr., may
be capable of parasitizing lines of the host plant which have been proven
resistant to other strains of these fungi. Brown (4) has found differences
in virulence between the culture stages of a single spore line ofF. lateri-
t i u m Nees v. fructigenum (Fr.) Wr. With the variability that has
been shown to be the case in F. oxysporum f. 8, and with its occur-
rence in widely different environments of the world, physiological differen-
ces between various strains as expressed by parasitism would not be sur-
prising.

Until a more definite means of control for near-wilt is found, attention
may be given to the experience gained from studies of other vascular Fu-
sarium diseases. It seems desirable therefore that seed for planting be ob-
tained from disease free fields as far as is practicable and that ordinary
sanitation practices bo followed in delaying the introduction of the parasite
into healthy fields or at least, where it is already present, in preventing an
increase in the concentration of the inoculum. A suitable crop rotation also
would appear to be a means of escaping the more rapid multiplication of
a soU-borne parasite that often attends continuous cultivation of the
same crop.

Summary.

A pathologic and taxonomic account is given of the near-wilt disease
of pea, and its cause, a vascular Fusarium of the Section Elegans, F. oxy-
sporum f. 8 Snyder.

The name “near-wilt” is used to distinguish this disease from the other
major vascular Fusarium disease of pea in America which it closely resem-
bles, known as “wilt”, caused by F. orthoceras v. pisi. The Euro-

Fusarium near-wilt of Pea.

377

pean vasculax Fusarium disease, referred to as ‘’St. John’s wilt”, appears
to be the same in symptoms and cause as the American near-wilt, produced
by F. 0 X y s p 0 r u m f. 8.

S^ptoms of near-wilt are similar to those of wilt. The foliage becomes
yellowish, the leaflets and stipules tend to curl backward, and wilting of
the plant, usually beginning with a withering of the lower leaves generally
takes place about blossoming time or earlier, resulting in premature death.
The root and lower stem may or may not show slight outward signs of
disease, and even the usual orange or reddish discoloration of the vascular
system which is more typical for the disease may be lacking under certain
conditions.

The near-wilt fungus F. oxysporumf. 8, attacks pea varieties
that are 100% resistant as well as those susceptible to invasion by the wilt
organism, F. orthoceras v. pisi. This fact in addition to its wide-
spread distribution emphasizes the menace of F. oxysporum f, 8
to pea culture. Considerable damage from the American near-wilt and the
European St. John’s wilt was witnessed in the 1934 seasons.

Considerable variation in cultural behavior of F. oxysporum f. 8
was found, including kind and intensity of pigmentation, manner of growth,
and the presence or absence of sclerotia and sporodochia, depending upon
the age and condition of the culture and the environmental conditions to
which it was subjected.

Variability was encountered also in the microscopic characters of F.
oxysporum f. 8. Under certain cultural conditions long narrow macro-
eonidia were produced which might be confused readily with other species
of Fusaria, yet after brought into high sporodochial sporulation all cul-
tures fell within the form circle of F. oxysporum.

By the manipulation of several single spore strains of the fungus during
the course of a year, a range in cultural characters of each was obtained
representative of the form circle described for F. oxysporum f. 8,
which borders upon both F. vasinfectum and F. oxysporum
V. a u r a n t i a e u m. It is to be expected that differences in pathogenesis
may attend this variability in cultural behavior.

The use of seed from disease-free pea fields, ordinary sanitation prac-
tices, and the adherence to a sidtable crop rotation, are suggested as pre-
cautionary measures against the destructive establishment of the near-
wilt disease.

Literature cited.

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der Gattung Fusarinm (Link.). (Arb. Biol. Beichsanstalt f. Land- u. Forstw., Berlin-
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Jadwiga Ziemiecka, The use of a modified Rossi-Cholodny technic etc. 379

Nachdruck verboten.

The use of a modified Eossi-Oholodny technic for studying
the organisms that decompose certain organic compounds in soil.

[From the Institute of Agriculture Puiawy, Poland.]

By Jadwiga Ziemiecka.

With 13 figures in the text.

New methods for the study of the activities of soil microbes in their
natural surroundings have been developed during the last two decades by
Conn, Winogradsky and others. An index of the extent to which
the so-called “M 6 1 h o d e d i r e c t e” has been of interest in soil micro-
biology, can be gained from the numerous applications made hitherto and
from the number of modifications of it, which have been proposed. A techni-
que which may be entitled to the adjective “direct” was worked out by
Rossi (1) and also by Cholodny (2). The basis of their methods
consisted in burying a slide in soil and examining the microflora which
developed upon the slide. These methods promised to be of particular value
in the qualitative study in natural soil profiles, of the physiognomy of life
processes of the micro-organisms in their natural habitat and of mutual
relationships of micro-organisms during the course of processes of growth
and decay in the soil. The method of Cholodny („Aufwuchsplatten-
Methode") was adapted by C o n n (3) for the study of soils in laboratory
conditions. Both Cholodny and Conn attempted the examination
of unchanged soils as well as the study of decomposition of cellulose added
to soil.

The author has tried to apply the laboratory technique of Conn to
the study of the physiognomy of microbial life in soils after disturbing the
normal soil equilibrium by the addition of different single organic sub-
stances, with a view to examining their chemotactieal effect upon soil microbes.
This application of the method seemed to be a useful admtion to the well
known direct methods of Winogradsky. Thirteen substances were
chosen, such as might occur in original plant residues during the course of
decomposition. These substances were: a) Organic compounds of nitrogen:
peptone, alanine, asparagine, urea; b) non-nitrogenous substances: glu-
cose, starch, xylan, cellulose; oleic, palmitic and stearic acids; phenol, and
agar-agar; all in presence of small amounts of added nitrate.

S oils.

Only garden or arable soils were studied, they differed, however, either
in character or in treatment. Special care was given to the choice of soils
with different reactions, with pH varyi^ from 4.0 to 7.0. Most of the
samples were taken from experimental fields. Special attention was paid
to those soils which had acquired a high degree of physiological aci^ty,
and had a pH of about 4.0 — 4.6.

Technique of investigation.

Soil samples were taken from a layer of 5—10 cm depth and examined
while fresh. Glass pots were filled with soil, and, if necessary, the moisture

380

Jadwiga Ziemiocka,

Table 1. Growth of Micro-Orgajiisms on Glass Slides Treated with Different Organic Compounds

Name of Compound

1 Time of Culture at 30°

and Type of Soil

4 — 5 hours I

6 hours 1

9 hours

16 hours

1. Peptone in Garden
and in Loamy soils

A few big Rods Thick growth of
in long chains Rods in chains

Same growth,
small Rods and
Actinomycotos

Same mixed
growth

C

2. Alanine in Garden
soil

A few Cocco- More Coccobac-
bacteria and teria
Moulds

3. Asparagine,
den soil
Loamy soil

Gar-

A few long thin

Rods

None

4. Glucose 4- KNO
Garden soil

3 None

Thick growth of
Rods 2-3/0.5 ^
Thick growth of
big Rods 3 — 6
/I— 1.5 (X
A few Clostridi-
um-like forms

6. Starch + KNO 3

None

None

Garden soil

6. Stearic and

7. Palmitic acids -f
KNO3, Garden a.
Loamy soils

8. Oleic acid + KNO3,
Garden a. Loamy
soils

Very thick
growth

Thick growth of
thin Rods (1.5
— 3 (JL long); a
few Actino-
mycetos
None

None

9. Xylan + KNOj,
Garden a. Loamy
soils

lOTcSkaosoTKN^

Gard. , Loamy soils

11. Agar-Agar +
KNO3, Gard. soil

12. Urea, Garden,
Loamy soils

13. Phenol + KNO3,
Garden soil

The use of a modified Rossi-Cholodny technic for studying the organisms etc. 381
and Buried in Fertile Soils. (Garden soil with ph 7.0 and rich loamy soil with ph 6.8 — 7.0.)

in Hours and Days

24 hours

40 hours 1

48 hours

72 hours

7 days

10 — 17 days

Long chains of
spores of big
Rods domi-
nate the mixed
growth of Bact.
Actinomycetos
and Moulds

Chiefly spores;
Hyphae in de-
cay, attacked
by long-thin,
pale Bacilli

Coccobacter. mi-
xed with Ac-
tinomycet. a.
Moulds

No more specific
Bac., secondary
growth of Cocci,
small Bac. a.
many Moulds

Many Clostridi-
um-like Forms
and Rods

As at 16 hours

Thick growth of
spec. Rods a.
of Actinomy-
cetes; a few
Moulds

A few Aotino-
mycetes

More dense
growth of Ac-
tinomyoetes
(a. Moulds with
Palmit. acid)

4 days:

Masses of sporulating Ac-
tinomycetes, also many
Moulds

7 days:
Hyphae in
decay at-
tacked by
Cocci

A few Moulds

More dense
growth of
Moulds

Thick growth
of Moulds

Hyphae at-
tacked by
long pale
Rods and
Cocci

Same growth
and many
Aotinomyc.

None

Spore forming
Bacilli, a few
Moulds 1

None

Beginning
growth of
Bacteria

Thick growth of
Cytophaga a.
other Bact.
Also Moulds
a, Aotinomyc.

None

4 days:

Many Actinomycetes in
spore formation

Same

growth

None

A few long, v.
thin Rods

Medium
growth of
long Rods
and other
Bacteria

•

1

None

i

A few irre-
gular small
Rods and
sm. Fleet-
ridiumlike
forms

More small
Rods

382

Jadwiga Ziemiecka,

Table 2, Growth of Micro-Organisms on Glass Slides Treated ^itli Different Compounds and

Name of Compound

Time of Incubation at

4 — 5 hours

6 hours

16 — 17 hours

21 hours

Alanine

A few Moulds

0

1

Thick growth of
Moulds

Thick growth of spore-
forming Moulds; Ac-
tinomycetes

Peptone

None

A few Moulds

Thick growth of Acti-
nomycetes a. Moulds;
few big Rods (chains)

Asparagine ....

None

Thick growth
of Moulds

Thick growth of Moulds

Starch

None

Chiefly Actinomycetes
and Moulds; a few
pointed Rods

Xylan

—

—

—

Cellulose

None

Stearic acid ....

None

Palmitic acid . . .

None

Oleic acid

—

" 1

1

—

None

Urea

—

—

—

None

Phenol

—

—

—

—

content of the soil was adjusted with sterile water. Previously well cleaned
and sterile microscope slides were smeared with solutions or suspensions
of one of the compounds listed above, and carefully, dried. The compound
was applied on the surface of about 2 cm® of the slide, and the quantity of
it on each was about 10—20 mg. Cellulose was given, as powder or as sheets
of filter paper or as cellophane. This last proved to be specially appropriate
for the microscopical study of the development of colonics of microorganisms
attached to its surface. The stimulating influence of compounds, which
are practically insoluble in water, could be still better demonstrated when
the compounds were applied as a row of small spots along tlic middle of the
slides. For every nutrient a separate pot was used, each pot containing
a set of six or more coated slides. The slides were covered with soil and kept
.in a vertical position. All the laboratory series have been investigated at
30® C, with the exception of a thermophilic incubation, which was kept at
60—65" C. The time-factor was considered here as indicator of the ability
of different soils to break down the incorporated substances. At intervals
of time the slides were taken out of the soil, care being taken not to disturb
the growth adherent to their surface. The slides were dried at 50® C, stained
with phenol-erythrosine for 15 minutes and examined under a magnification
of 1000. A good deal of data have been already furnished by Wino-
g r a d s k y (4, 5), r^arding the growth rates of different soil microorganisms,

The use of a modified Rossi -Cholodny technic for studying the organisms etc. 383

Bulled in Poor Acid Soils. (Two poor sandy acid soils with ph 4.0 — 4.5 and 4.5 — 5.0.)

3U® C in Hours and Days

40 hours

48 hours

72 hours

7 days

10 days

Same growth as at
21 hours

—

—

—

Chiefly Moulds and
Actinomycetes

—

Moulds and Acti-
nomyoetes

—

—

—

Thick mixed growth
of pointed Rods;
Actinomycetes a.
Moulds

Moulds

—

—

—

Thick growth of
Moulds and Acti-
nomyoetes

Sporulatmg

Moulds

Sporulatmg
Moulds a. Ac-
tinomyoetes

Sporulat. Moulds
and Actinomyce-
tes

Sporul. Moulds
and Aotino-
mycetes

—

Sporulating

Moulds

—

—

—

None

—

A few long thin
Rods

A few Rods and
other Bacteria

—

—

None

None

None

None

in his studies on microbial activity, ■which ■were carried out on elective sUica-
jelly cultures. In Winogradsky’s opinion (5), seven or eight hours
suffice to give abundant gro^wth of peptone and asparagine destroying or-
ganisms; decomposition of cellulose is visible after three or four days, but
ten days or more are required to get a noticeable gro'wth of phenol-decom-
posing organisms, even in a very fertile soil. To study the stimulating power
of different compounds on soil microflora after long and uniform terms of
incubation, may thus lead to erroneous interpretation.

Investigations and Results.

Two fertile and t^wo poor soils were chosen for experiments under labora-
tory conditions with the organic substances listed above. IMHneral nitrogen
was added to the non-nitrogenous range in the form of nitrate. The fertile
soils w'ere; a garden soil rich in humus and in mineral nitrogen, pH 7.0, and
a rich arable loamy soil, pH 6.8 — 7.0. The poor soils were sandy "with a
pH of 4.0— 4.5 and about 6.0 respectively. Results of the examination of
these soils are given in tables 1 and 2.

No differences have been noted between the two acid soils in respect
of the gro^wth of microbes ■with the whole set of compounds. A difference
between the garden and the loamy soil was observed only in case of aspara-
gine. The results in Table 1 and 2 are arranged in the order of decreasing

384

Jadwiga Ziemieeka,

speed of development of the specific microbes nourished by the various com-
pounds added upon the slides. The tables contain a brief description of the
consecutive development of micro-organisms on the slides, and they are
illustrated by photographs of the most characteristic groupings of growth
on the variously coated slides.

Nitrogenous substances.

Peptone. The onset of micro-organic attack was particularly rapid
in the case of peptone. In gai'den soil (Table 1) its stimulating effect was
so quick, that after only
4 — 5 hours of culture at
30® C examination of the
slides showed the presence
of characteristic nests
of bacteria, composed

fy

I’ig. 1.

Fig. 2.

Fig. 3. Fig. 4.

Fig. 1 — 3. Growth of Micro-organisms on slides with Peptone:

Fig. 1. Big rods in loamy soil with pH 6.8 — 7.0, after 6 hours at 30® C.

Fig. 2. Chains of rods develop round rests of peptone. Rods begin to form
spores. 21 hours old culture in garden soil with pH 7.0.

Fig. 3. Chains of spores of the big rods and beginning growth of Actino-
mycetes, in loamy soil after 24 hours of culture.

Fig. 4. Growth on slides with Asparagine. Big rods with granular structure after
6 hours of culture in loamy soil,

(AU the photographs are magnified X 800.)

The use of a modified Rossi-Cholodiiy technic for studymg the organisms etc. 385

exclusively of seemingly rapidly multiplying large bacilli as shown in Fig. 1.
Six hours’ culture was long enough to cover the whole peptone area on the
slides with a dense growth of these same organisms. After only 9 hours of
culture, a secondary growth was to be noted on the slides, which was com-
posed of pale small bacilli and of the mycelia of actinomycetes.
In 24 hours the large bacilli altered their arrangement to chains of spores
(Fig. 2 and 3); the secondary growth grew in importance and was joined
by moulds. In 40 hours’ time the whole process of peptone decomposition
seemed to be finished: a few spores were left and decaying hyphae were
attacked by groups of pale thin bacilli
(compare with Fig. 9). This visual obser-
vation of the decomposition of fungi by
bacteria is of interest in view of the
work of J e n s e n (6). In the infertile
acid soils (Table 2) peptone seemed to
be attacked first by moulds. Their growth
was not so rapid by far as was the growth
of the specific bacilli in garden soil. The
maximum development of moulds was
reached in both the acid soils investigated
here after 16 hours and was accompanied
or closely follow'ed by the development
of actinomycetes. Specific bacilli
were found first after 24 hours of culture.

It may be that their germs were con-
taminants, or they may be present in
the soils in a reduced
number and in a tem-
porary inactive form,
and that they could
develop only when the
biochemical action of
moulds on peptone
had ^neutralised the
soils to a suitable de-
gree. This question
was studied further
by means both of the
“Aufwuchsplatten”
method and in “spon-
taneous” cultures with peptonised soil, as shown in Table 3.

Alanine. Coccobacteria were found after a few hours of
culture on slides with garden soil, and they were accompanied by a few
moulds. After 24 hours the coccobacteria still predominated
(Fig. 6), but moulds and actinomycetes were also abundant.

In acid soils, only moulds developed in the first hours of culture. After
24 hours actinomycetes were also to be noted. Fig. 6 shows charao-
teristic conidia formation of moulds, a picture very common in acid soils
after 24 hours of culture with alanine.

Asparagine. Asparagine was also among the first compounds
to be decomposed, and, just as were peptone and alanine, it was attacked

Fig. 5. Coccobacteria, after
24 hours of culture in garden soil.

#««

Fig. 6, Fructification of moulds, after 24 hours of culture
in sandy soil with pH 4.5 — 5.0.

Fig. 5 — 6. Growth on slides with Alanine.

386

Jad\\iga Ziemiecka,

by bacteria] agents in garden and in loamy soil, while, in acid soils, moulds
aione or associated with actinoraycetes, were the agents of its
initial destruction. Among the bacterial agents, two different forms have
been found: in garden soil thin, pointed rods invaded the whole asparagine
slide after 6 hours of culture and in loamy soil the corresponding giowth
consisted of big, sharply granulated rods in chains (Fig. 4).

Urea. This compound seemed to be decomposed very slowly in all
the soils studied. In neutral soils a moderate gi’owth was noticeable only after
2 — 3 days of culture; after a similar time growth was still very weak in acid
soils. In both the neutral and acid soils the growth was composed only of
bacteria, among which long and thin rods seemed to be the most abun-
dant forms.

Non nitrogenous Substances.

To the non-mtrogenous compounds mmeral nitrogen was added in the foim of
a few mg. of potassium nitrate on each shde.

Glucose. This was the most readily attacked of the non-nitrogenous
substances. In garden soil, rich in mineral nitrogen, growth was noted after
6 hours. After 24 hours an abundant growth of Clostridium-like forms was
to be seen. No investigations were made in the loamy and in acid soils.

Starch. Of the substances tested, starch was second only to glucose
in attractiveness for the soil micro-organisms. In garden soil, chiefly long
and thin bacilli developed after 16 hours, and the secondary growth consisted
of actinomycetes and of moulds. In sandy acid soils the chief agents
of destruction were actinomycetes, accompanied by moulds and
by a poorly developed bacillary growth (Fig. 7).

Stearic, palmitic and oleic acids. These higher fatty
acids have been used here as free acids, and comparative trials with their
salts have not yet been made. In the cases of stearic and palmitic acids, the
agents of decomposition in neutral soils have been chiefly actinomyce-
tes (Fig. 8). The maximum development of the actinomycetes
was reached on the fourth day of incubation. Moulds developed too, but no
bacteria. These two acids seemed therefore to be valuable means for the
study of actinomycetes directly in the soil.

In poor acid soils (Table 2) neither palmitic nor stearic acid was at-
tacked as rapidly as in the fertile soils, and the agents of destruction were
chiefly moulds, among which sporulating penicillia-like moulds were fre-
quently to be noted. The only unsaturated fatty acid tried — oleic —
was attacked first by moulds both in acid and in neutral soils. After some
seven days of culture actinomycetes were to be found, and they
gew in importance after 10 — 17 days of culture.

Instructive associations, similar to those found by Conn (3), have
been observed on both stearic and on oleic acid slides after one week in
garden soil: the disintegrating hyphae of moulds attacked by characteristic
long and pale bacilli and by smal cocci (Fig. 9 and 10). With all the soils
investigated, oleic acid showed itself to be a very good reagent for the direct
study of moulds in the soil. The hyphae of moulds bound the soil tightly
to the microscopic slide, and their ^owth was so thick, that it could be
seen with the naked eye.

Xylan. Xylan was chosen from among the pentosans as being per-
haps the most common in plant material. In about 2 days of incubation,
both in neutral and in acid soils, it gave rise to a noticeable growth. The

The use of a modified Rossi-Cholodnj^ technic foi 'studying the organisms etc. 387

growth consisted, in the neutral soils, chiefly of hig spoiophoiic bacilli, and
in the acid boils, of moulds and a c t i n o ni y c e t e s.

Aear-Aaar. The readiness of its debtructioii in soils ■was studied

only in gaiden soil. Actinomy-
c e t e s "vrere found to develop very
abundantly in it after some days of
culture.

Phenol. The quantity of it
on the slides amounted to about
20 mg. As \\as to be expected, the
growth of micro-organisms on it was
very slow. Though growth was noted
already after two or three days, it
grew more dense only after seven
days in garden soil. No growth could
be found on phenolised slides in acid
soils during ten days of incubation.
The growth in garden soil consisted
of small irregular rods and of Plec-
t r i d i u m - like forms. No moulds
or actinomyeetes were developed by
the presence of phenol in either of
these soils.

Fig. 7. Shdes with Starch: Germmating
Actinomyeetes and Moulds m sandy
soil with pH 4.5 after 21 hours of culture.

Fig. 8. Fig. 9.

Fig. 8 — 9. Shdes with Stearic acid:

Fig. 8. Actinomyeetes m garden soil after 4 days of culture.

Fig. 9. Secondary growth of thin pale rods and cocci on decaying hyphae of
moulds after 7 days of culture m sandy acid soil (pH 4 — 4.5).

Many of the micro-organisms found here have aJready been described
by Winogradsky (6), as specific agents of organic matter decompo-
sition. Among others the same specific microorganisms seemed engaged in
the decomposition of peptone, cellulose and higher fatty acids, both in the
fertile soils of the region of Brie (studied on elective silica-ielly plates) and in
our soils studied here by means of the “Aufwuchsplatten” method. However,
our results were different, when poor acid soils were investigated instead

388

Jadwiga Ziemiecka,

of rich neutral soils. In acid soils the quantity of bacteria seemed to be
greatly reduced, and in their place, moulds and also actinomycetcs
spontaneously developed in contact with the organic substances. It should
be borne in mind, however, that the soils chosen for oixr investigations have
been exceptionally acid.

In order to see how frequent is a dominance of moulds in acid soils, a
special set of soils was tried again with peptone. This new peptone series
was also investigated with the help of "Winogradsky’s original tech-
nique (4) of “c u 1 1 u r e s p o n t a n 6 e” in the soil. The comparison enabled
an idea to be obtained, as to how far the results obtained with the technique
ofCholodny may be representative for each soil, instead of being simply
casual. For repeated trials with peptone, four acid soils were chosen with
a pH of 4.0 — 5.0, and two neutral soils. Investigations with the method
ofCholodny were carried out in the same way as those already described.

The “direct method”

Fig. 10. Secondary growth of Actinomyoetes and
thin Rods on decaying hyphae after 7 days of culture
with Oleic acid in garden soil.

(Culture spon-
tan6e) of Wino-
gradsky was applied
to all these soils, by
mixing them with 0.25%
of their weight with
peptone and incubating
them in Petri dishes
at 30® C. Investigations
have been carried out
with both these techni-
ques simultaneously.
From the soil mixed
with peptone and kept
in P e t r i dishes, water
suspensions and centri-
fugates were prepared
lege artis (Wino-

gradsky, 4) and examined in erythrosine-stained preparations at the

same time as the “Aufwuchsplatten”. The results obtained with both

these methods are given in Table 3.

Both the neutral soils gave the same uniform and rapid development

of large spore-forming bacilli in chains, as was found in the first experiment
(Table 1). Already after six hours its growth was marked, as found both
in suspensions of soil, with which peptone had been mixed, and on the pep-
tone-coated slides. Noticeable quantities of free ammonia were evolved
from the soil containing peptone, in fact sufficient to change the colour of
moist red litmus paper. The four acid soils proved to be much less active
in peptone decomposition. Free ammonia was noticed in one of them (No. 3,
with a pH of 4.8 — 5.0), after 24 hours of incubation and after 48 hours in
the rest of the acid soils (Nos. 4, 5, 6 in Table 3). The following microbial
cells were found in acid soils^^):

Soil No. 3 (Table 3) gave in the first stages of culture a mixed growth
of the specific peptone bacilli, some Azotobaeter - like cells, which

It should be noted that these findings refer equally to the peptone slides and
to microscopic preparations from Petri dishes with peptonised soils.

390

Jad'niga Ziemiceka,

were very similar to those found in the soils by Dianova and Voro-
e h i 1 0 V a (7), and moulds. In the other three acid soils (Nos. 4, 5, 6,
same table), growth of moulds was the first to be noticed. The bacterial
growth and also actinomycetes were to be found only after 24
or more hours of culture. The big sporeformer, so typical for the fertile
neutral soils, was seemingly replaced by other bacillary forms in the very
acid soils. The results obtained with this set of trials with peptone confii-
med, in general, the previous results summaiised in Tables 1 and 2. That
is: in very acid soils the attack on peptone was due to moulds and the nu-
merically small or temporarily inactive bacterial agents developed in acid
soils only as secondary growth, for which the action of moulds had evi-
dently created appropriate conditions.

A still more extensive study with different soils and compounds would
be needed, to show in detail, how far the soils reaction affects the special
activities of different groups of micro-organisms in the soil.

Fig. 11. Fig. 12.

Fig 11 — 12. Thermophilic culture ’with Peptone at 60 — 66® C. :

Fig. 11. Thin granulated rods, after 5 hours of cultuie in garden soil

Fig. 12 Big Clostridium - like rods after 11 houis of culture m same gar-
den soil.

Peptone has also been employed by the author to survey the possi-
bility of applying the Rossi-Cholodny technique to a study of an-
aerobic and thermophilic micro-organisms present in the soil or in organic
manures.

Anaerobic peptone decomposition in soils.

For this study slides with peptone were inserted in a pot with garden
soil, which was totally saturated with water and kept at 30® C in a vacuum
desiccator, on the bottom of which was an alkaline solution of pyrogallol
(Fig. 14). The peptone slides used here for the study of the corresponding
anaerobic mieroflora in garden soil, revealed the presence of the big spore-
forming bacillus in chains, which had been found also in aerobic conditions
(cf. Figs. 1—3). After five hours its growth was very slight; after 24 hours
at 30® C long chains were found interspersed with various small rods. The
slides had an intense smell of typical putrefaction.

The U'se of a modified Rossi-Cholodny technic for studying the organisms etc. 391

Thermophilic micro-organipms of peptone decom-
position.

Investigations on the presence and nature of thermophilic microorgan-
isms in the soils ha^e been made only ^ith peptone and only in garden soil.
A soil sample of about 50 gm was mixed with 0.25% of its weight of peptone,
and slides smeared with peptone were inserted in it, the whole being kept
in Petri dishes and in a moist chamber at a temperature of 60—65® C.
Litmus and silver nitrate papers were suspended above the dishes to indi-
cate the commencement of peptone decomposition under thermophilic con-
ditions. After only three hours of incubation the silver nitrate paper dar-
kened, owing to evolution of HaS, and in five hours free ammonia affected
the litmus paper.

Microscopical examinations were made after 5, 7 and 11 hours of culture.
The heated soil smelt very much like fermenting farmyard manure. The
growth of the micro-organisms was vigorous after five hours of culture.

Fig. 13. Fig. 14.

Fig. 13. Plant residue after 3 weeks of culture in garden soil: heavy growth of
Actinomycetes with sporulatmg threads.

Fig. 14. Apparatus for Anaerobic culture

It consisted of long and thin, sharply granulated rods in pairs or in threads
(Fig. 11) and of rods with terminal spores. The growth was extremely vigo-
rous during the whole time of culture. A common finding in one microscope
field was the presence of all of the following: germinating spores, vegetative
rods, rods with spores, and pale shadows of already destroyed vegetative
rods, all mixed together (Fig. 11). Big Clostridium-like rods deve-
loped after 11 hours (Fig. 12). The method seems to be valuable for the
qualitative study of the mixed thermophilic organisms present in soil. It
may be also applied, with appropriate modifications, to the study of the
thermophilic agents in organic manures.

A further application of Eossi-Cholodny technique was made
as a means of study of the microbial flora ei^aged in the decomposition
of actual plant fragments, added to the soil. For this trial fresh plant leaves
were finely shredded and attached by their own juice to the glass slides.
The slides were put, as usual, in covered glass pots with soil, and kept at

392

Jadtiiga Ziemiecka,

30° C. The study was not followed systematically here, but a few interesting
results may be reported. In the first few hours of incubation, initial growth
was provided by the big rods in chains so characteristic for decomposition
of peptone, and by some smaller rods. More bacteria and a thick growth
of moulds followed in the next stages of the plant decomposition, whilst
actinomycetes were the last to develop and assumed an increasing
importance with the advance of the decomposition processes. After 2 — 3
weeks of culture at 30° C, bacteria were found mostly in the form of spores;
vegetative hyphae of moulds were still present, but the greater part of the
microbial flora consisted of actinomycetes, which were accumu-
lated in heaps of sporulating threads (Fig. 13).

As far as undisturbed soil profiles are to be studied in regard to the
aspect of the microbial development in them, the laboratory technique of
the “Aufwuchsplatten” needs to be still further improved. For the purposes
outlined in this study some additional experiments in laboratory conditions
have been carried out, using, as far as possible, undisturbed soil profiles.
Soil samples were taken as whole soil blocks, in special tins (Fig. 15). Each

soil block was cut in half with a
very thin and sharp knife, so as to
keep their original structure possibly
undisturbed. Coated slides were
pressed between the two halves of
the soil blocks, and the whole was
inserted in a crystalliser. The cry-
stallisers were covered with glass
plates, so as to leave some free space
above the soil for aeration (Fig. 16).
After a period of incubation the sli-
des were very carefully removed from
the soil, and were examined, first at
low powers without any staining or
otherwise disturbing the structure of the soil particles on the slides. The
development of the myeclia could be observed well in this way. For in-
vestigations carried out at higher magnifications, the bigger soil particles
were carefully removed from the slides, and the preparations wore fixed
with alcohol and stained with phenol-crythrosine. Only a few trials have
been made in this way, but they seemed worth while reporting already
here. The growth on peptone slides was very characteristic: colonies were
formed with the shape of radiant stars, which consisted of long chains
of the typical big rods. The chains spread in different directions, through
narrow free spaces, which are left between the soil particles. This technique
does not seem easy of application to light, friable soils.

Discussion and conclusions.

All the results which are grouped in Tables 2 and 3, or shown in the
Figures, may be considered as a qualitative demonstration of the activities
of microbial factors engaged in decomposition of the organic matter, in rela-
tion to:

1. The nature of the organic matter itself.

2. The character of the soils (their composition, reaction, etc.).

Fig 15. Tin box for soil sampling and a
culture m crystalliser, containing a soil
sample ’v^ith undisturbed soil structure.

The use of a modified Rossi-Cholodny todinic foi studying the oiganisms etc. 393

3. The environment conditions (moisture content of soils, tempera-
ture, etc.).

The Rossi-Pholodny-Conn technique applied to this study,
■wholly confiimcd the dominant role of bacteria in the decomposition pro-
cesses of some of the commoner organic compounds, in non-acid and fertile
soils. It confirmed also the specific character of difleient groups of micro-
organisms — especially of the bacteria — in relation to their ability to
break down organic compounds in the soil, which had been so brilliantly
demonstrated by W i n o g r a d s k y (4, 5). The distinctly different cha-
racter of four groups of bacteria, engaged: one in peptone, another in alanine,
and the third and fourth in asparagine decomposition (Fig. 1 — 5), may
serve as a characteristic example of the elective value of different nutrients
in soil microbial activity.

Actinomycetes and moulds have been noted, as organisms
well adapted for the direct assimilation of higher fatty acids and of agar-agar.
They also occurred, with many of the specific bacteria, as secondary growth
in processes of decomposition or reassimilation. The actinomycetes
seemed to play a very marked role in the ultimate decomposition stages
of plant residue, after the action of moulds and bacteria had finished. As
shown by this method, the type, and, more especially, the reaction of soils
play a very important part in defining their microbial activity. In fertile
soils and in soils not acid, the decomposition processes are far more
rapid than in poor acid soils. In the case of the fertile soils the chief
agents of organic matter destruction have been found to be groups of
bacteria, whereas in the acid soils investigated here bacterial activity was
substituted by that of moulds either alone or in association with a e t i -
nomycetes (Table 2). These remarks hold good a*s a rule for the
whole set of non-nitrogenous organic compounds in presence of potassium
nitrate. With the amino-acids, like asparagine or peptone, the question
was not so clear. However it seemed, that the action of bacteria on these
compounds in acid soils, became possible only when the first attack of moulds
on them had neutralised the acidity to a degree suitable for the specific
bacterial agents. Urea was an exceptional compound in our series. It was
attacked only by bacterial agents, in spite of the different characters of the
soils, in which it was tried.

With most of the compounds investigated and in all of the studied soils
the actinomycetes occurred, as a rule, as a secondary growth, after
the first attack of specific micro-organisms on the given compounds was
over. Among the secondary growth some specific groups of bacteria com-
monly were present, feeding on the decaying micro-organisms. This picture
had already been noted by workers, who used the original methods in the
study of microbial associations in untreated soils.

The influence of external conditions on the nature of soil microbial
agents, engaged in decomposition processes can be checked by the same me-
thod, as shown by the results obtained by the author in cultures, when kept
at different temperatures, or at a different state of aeration.

The method of the “Aufwuchsplatten” applied to the study of the effect
on soil micro-organisms of different organic compounds or of actual ]^lant
structures, ought to be improved by additional laboratory investigations.
When care is taken not to disturb the structmes on the microscope slides,
the picture of the growth and disposition of microbial colonies and of the

394 Jadwiga Ziomiocka, The use of a modified Rossi-Oholodny etc.

interrelationships between their different groups can be followed very clo-
sely. In the author’s trials, no qualitative differences have been noted bet-
ween this method of “coated slides” and the “culture spontanec” of W i n o -
gradsky, in respect of the morphological nature of the microbial agents,
which developed in the presence in the soil of different organic compounds.
However, in cases of treated as well as untreated soils, much care must be
taken in order to avoid false interpretation from what may be purely casual
results. In any case, the author considers the direct study of the “physiogno-
my” of different life processes in the soil, to be a notable addition to those
methods already outlined by W i n o g r a d s k y , for the study of the
nature and biochemical activity of soil micro-organisms. Valuable in-
formation respecting bacterial life in the soil might also be obtained by
considering results derived from the “Aufwuchsplatten”-technique in con-
junction with direct counts of soil bacteria by the method of Thornton
and Gray (8).

Summary.

The laboratory modification of the direct method of Rossi and
Cholodny, as introduced by Conn, was applied here to the study
of the stimulating influence of twelve organic substances on the activity
of different groups of soil micro-organisms.

Good illustrations of the changing “physiognomy” of the microscopic life
of the soil were obtained in relation to:

1. The chemical nature of the organic substance.

2. The soil’s character. (Fertile or poor; neutral or acid.)

3. The external conditions. (Temperature; oxygen content of atmo-
sphere.)

Trials were made to improve the laboratory method, in particular, in
relation to the study of the microbiology of soil profiles.

The writei*s best thanks are due to professor S. Winogradsky for reading
the manuscript, to Mr. H, N i c o 1 , M. Sc. from the Rothamatod Experimental Sta-
tion for his help in rearranging its English form, and to Dr. M. L a t y s z e w s k i for
his assistance in making the i^hotographs.

References.

1. R o b s i , Cl., Febtschrift 70. Cloburtstag J. Stoklasa. Berlin 1030. — 2. C h o -
lodny, N., Arch. f. Mikrobiologio. T. 1. 1930. S, 620. — 3. Conn, H. J., Zon-
tralbl. f. Bakt. Abt. II. Bd. 87. 1932. S. 233. — 4. W i n o g r a d s k y , kS., Annales
Pasteur. T. 39. 1925. — 6. Winogradski, S., Annales Pasteur. T. 48. 1932. —
6. J e n s e n , H. L., Journ. Agr, Sci. T. 22. 1932. p. 1, — 7. D i a n o w a , E., and
Worosch ilowa. A., Obi, f. Bakt. II. T. 48. 1931. — 8. r a y , I». H. H.,
and Thornton, H. Q., Nature. 1928. p. 400.

W. Sch-wartz und Erwin Looser, Bakterionwachstum und Verdunstung, 395

Naehdntck verbaten.

Bakterienwaohstum und Verdunstung auf Kiihlfleisoh in
ruhender und bewegter Luft.

[Aus dem Botatiischen und dem Kaltetechnischen Institut
der Tochnischen Hoehschule Karlsruhe.]

Von W. Schwartz und Erwin Loesor.

Mit 8 Abbildungen im Text.

1. Einleituni?.

Die vorliegende Arbeit ist eine Erganzung und Portsetzung der Unter-
suchungen, die unternonunen wurden, urn die gunstigsten Lagerbedingungen
fur gekiihltes Pleisch zu ermitteln.

Es sollten die in einer fruheren Arbeit (Schwartz und Schmid,
1931) bei Kiihlung in ruhender Luft gewonnenen Ergebnisse mit einer ver-
besserten Methode uberpriift und durch Versuche in bewegter Luft erweitert
werden. Mit Rucksicht auf die Praxis war es erforderlich, Versuchsstucke
mit versehiedenem Verhaltnis von OberflSche : Gewioht (= F/G) zu ver-
wenden.

Da fur das Bakterienwachs'tum nicht der Zustand der Luft unmittelbar
maBgebend ist, vielmehr der vom Luftzustand sowie von der Herkunft,
Beschaffenheit, Gr66e und Gestalt der Versuchskorper abhangige Ober-
flaehenzustand des Fleisches, wurde parallel mit den mikrobiologischen
Untersuchungen an den gleichen VersuchskSrpem der Verlauf der Verdun-
stung bei den verschiedenen Luftzustanden bestimmt. Dadurch gelang es,
den mit der Erzielung einer bestimmten Haltbarkeit (Lagerdauer) des ge-
kUhlten Fleisches verbundenen „Mindostgewichtverlust“ zu ermitteln, der
fttr die Wirtsohaftlichkeit des Kiihlverfahrons wichtig ist.

11. Mothodo.

1. Allgemeines. Die Komponenten, die den physikalisehen Zu-
stand der Luft definieron, wurden im AnsohluB an friihere Arbeiten so ge-
wahlt, daB sie sich innorhalb dor in der Kuhlhaustechnik iiblichen Grenzen
bewegen: Tcmperaturbereich ±0 bis -f 6® C; relative Feuchtigkeit 70—
100% in Intervallen von 5—10%; Luftgeschwindigkeit 0—0,1 m/see.

Als Vorsuchsmaterial diente fettfreies Rindfleisch, das stets vom gleichen
Muskel des Hinterviertels 2—3 Std. nach der Schlachtui^ entnommen
wurde. Da das in der Praxis iibliche Verhaltnis von Oberflache (F) zu Ge-
wieht (G) wegen dor Zostspieligkoit der hierzu erforderliehen Apparatur und
auch aus anaeren Grunden nicht angewandt werden konnte, benutzten wir
Modellzylinder von versehiedenem F/G, bei denen stets der Durchmesser
(d) gleich der H6he (h) war, namlich:

= h = 40 mm

F/G = 0,14 qm/kg

= b = 30 „

F/G = 0,187 „

= h = 20 „

F/G = 0,28 „

Die Versuchsstiioke wurden mit Hilfe von Hohlzylindem unter An-
wendung der Iiblichen VorsichtsmaBregeln aus dem Muskel ausgestanzt.

396

W. Schwartz und Erwin Loeser,

Dio Feuchtigkeitsoinstelhing iniierhalb dor mit Vaseline abgodich-
teton und jo mit oinem Fleischstiick beschicktcn GlasgofaBe erfolgte durch
Salzlosungen vorschiedener Dichto.

Da die bakteriologischon Untersuclmngon der Floischoborflacho und
dor Kiihlhausluft koine spezifisohon Bakterienarton orgobon batten, sondern
nur die libliche Flora^), uborliefien wir die VersucbsstUcko dor Luflinfoktion
und bestimmten in jedor Versuchsroiho an oinigon Kontrollstucken don
„Anfangskoimgehalt“. Die Zahlung der Koiino orfolgto im wosontlichcn
wie boi Schwartz und Schmid (1931), nur muBton wogon der Ver-
wendung groBerer Fleischstiicke die Dimensionon der HilfsgcfaBo zur Her-
stellung der Verdiinnungen gcandort worden. Zur Vertoilung der Keime in
der Aufschwemmung diente eino Schiittelmaschine.

2. Apparatur fur ruhendo L\ilt (stille Kiihlung).
Verwandt wurde ein umgebauter Kiihlschrank der Elektrolux-Gosellschaft,
bei dem zur Erzielung einer konstantcn Temperatur die Absorptions-Kalte-
maschine standig ktihlte und die nach Abzug dos Einstrahlungsverlustes
noch iiberschiissige Kalteleistung des Verdampfors durch eino gesteuerto
elektrische Widerstandsheizung kompensiort wurde.

Die automatische Regelung bestand aus eincm Stouorkreis (Kontaktthorniometor
mit paraUel geschaltetem Blockkondensator, Klingeltransformator und Magnetspule
des Cutax-Relais) und einem Heizkreis (Sehaltrohro des Cuiax-Rclais und elektrische
Heizung).

Wird die im Kontaktthormometer eingestelJto Temperatur unter&chritten, so
offnet sich der Steuerkreis, und in der Sehaltrohro dos Cutax-Rolais wird dor Heiz-
Strom geschlossen. Die elektrische Heizung im Schrank dauert so lango, bis im Kon-
taktthermometcr der Steuerkreis wieder geschlossen und damit die Hoizung ausge-
Bchaltet wird. Der im Kuhlschrank hofindlicho, ununterbroelion laufondo Ventilator
sorgt fiir einen raschen Temperatur-Ausgleich im Vorsuchsraum, so daS die zeitlichen
und ortlichen Temperaturschwankungen im Kuhlschrank nicht tiberschreiten

und die Temperatur innerhalb der VersuchsgefaBe als praktisch konstant an-
genommen weiden kann.

3. Apparatur fiir Kiihlung in bewegter Luft. Die
cxakte Kegelung und Konstanthaltung der Lufttcniporatur undLuftfcuchtig-
keit gestalten sieh bci bewegter Kiihlung viel schwieriger als bei stiller Kiib-
lung (vgl. Linge 1933). In den gewerblichen KUhlraumen lindet man
bestenfalls eine vollautoniatische Regelung der Temperatur. Auf eine ent-
sprechendc Regelung dcr Luftfeuehtigkeit wird verzichtet, so dafi starko
Sehwankungen je nach Art der Beschickung, der Konstruktion und der
Botriebszeit des KUhlraumes unvenneidlich sind.

Die fiir unscre Versuche crfordcriiche Konstanz von Temperatur und
Feuebtigkeit Me6 sich am einfachsten orreichen, wenn die gesamte, auf
einen bestimmten Feuehtigkeitsgehalt eingestellte Slromungsapparatur gas-
dicht abgeschlossen und von auBen auf konstante Temperatur gcbracht
wurde. Zu den Vorversuchon diente ein GlasgefaJJ von etwa 40 1 Rauni-
inhalt mit fest schlieBendem Deckel, in dem sieh die SalzlBsung zur Erzielung
einer bestimmten relativen Feuchtigkeit und ein Ventilator befanden. Die
Versnchsstucke hingen in einem Windkanal, in den der Ventilator eingebaut
war. Aus der Drehungszahl des Ventilators lieB sieh die im Windkanal
herrschende Luftgesehwindigkeit ermitteln. Durch Eintauchen der ganzen

1) Es faudeu sich unter anderem Bac. subtilis, Bad, fluoresoens
imd besonders Micrococcus luteus. Luit-Analysen in einer Klihlanlage
brachten bei einer Exposition von 10 Min. kaum mehr als 10 — 20 Kolonien pro Petri-
schale.

Bakterienwaohstum u. Verdunstung auf Kuhlfleisch in ruhender u. bewegter Luft. 397

Apparatur in eincn gckuhlten Solethermostaten •vrardc die Temperatur im
Innenraum konstant gehalten. Fur die Hauptversuche benutzten wir zuerst
eine im Keller dos Institutes aufgestelltc groBdimensionierte gcsehlossene
Strdmungsapparatur, bestehend aus den nach stromungstechnischen Ge-
sichtspunkten konstruierten Versuchskammorn, dem Luftkiihler^), der
KSltemaschine*) mit Solebebalter®) und Verdampfer und dem GcblSse. Die
gcsamto Apparatur war durch sorgfaltige Isolation mit Seidenzopf vor Wdr-
mevorlusten geschiitzt.

Die Regelung der Tem-
peratur in den Versuchs-
kammern erfolgte von der
zur Luftkiililung benutzten
Sole aus, dieibrerseits dutch
den Verdampfer der dauernd
arbeitcnden Kaltemaschine
und dutch eine gesteuerte
Tauchheizung auf konstan-
ter Temperatur gehalten
wurde. Die relative Feuch-
tigkeit in den Versuchs-
kammern war abhangig von
der Konzentration der Sole,
die endgultige Einstellung
erfolgte dutch nachtragliches
Einblasen von Wasserdampf
und wurde durch besonders
konstruierte Psychrometer
an jeder Versuchskammer
kontrolliert. ZurMessung der
Luftgeschvrindigkeit dienten
Normalstaurander, die sich
hintorjederVersuchskammer
befanden.

Da sich bei der Durch-
fiihrung vonDauerversuchen
im vollautomatischen Betrieb

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Lagerzeit ii

1 Tagen-*

.+6”C

-lO^C

10

Abb. 1®). EinfluS der Lagertemperatur auf das Bak-
terienwachstum bei verschiedenen relativen Feuchtig-
keiten der Luft, F/G = 0,28; t = + 6® und i 0®C;
(p = 70, 80, 90, 100%.

mancherlei Schwierigkeiten ergaben^), und
auBerdem die Herstellung von Luftfeuchtigkeiten in der NShe des Satti-
gungsgrados nicht mSglich war, setzten wir die Versuche in einer kleincren,
in einen Elektrolux-Kiihlschrank eingebauten Anlage fort (vgl. K a e B
und Schwartz, 1934).

in. Tersuchsergebnisse.

1. Das Bakterienwaohstum in Abhangigkeit
von den AuBenbedingungen.
a) Bei ruhender Luft. Da gegeniiber friiheren Versuchen die
GrSBe der Fleisehstttcke geandert war und die Konstanz der Versuchsbedin-

NalBluftkObler. *) Zweizylindriger SOj-Koxnpressor der Firma Wahl-Balingen.
®) 600 1 Fassungsraum. *) Aus diesem Grunde seben wir auoh davon ab, die Ver-
suohsanlage mit alien Einzelheiten bekanntzugeben. ®) Naoh neueron, nooh nicht
verdffentlichten Versuchen bei gleiohem Anfangskeimgehalt muO die Kurve bei 0® C
und 70% rel. Feuohtigkeit beim Boginn der Lagerung etwas flaoher vorlaufen, was
sich zwanglos mit den eingetragenen Versuohspxinkten vereinbaren l&Ot.

398

W. Sch\!i di 1 7 unci Erwiu Loeser,

gungen vorbessez’t werden konnte, war es erforderlich, auch in riihendcr
Luft einige Versuchsreihen ausziifiiliren, die als Vcrgleichsmaterial fur dip
Versuche bei bewegter Luft iind zngleich zur Konlrolle der friihor (1933)
erzielten Kesultate dienen solltea.

Luf ttemperatur. Die Wirkung dcr Tpniperatur konmit zwi-
sehen 3 und 6“ C fast nur in einer zcitliclien Hcmniuiig (vgl. E s t o r , 1922)
im Verlauf der Wacbstiiniskurve zinn Ausdruck. Bei eiiior Senkung der Teni-
peratur auf 0® C wird die Verzdgerung so stark, daB ein Wendepunkt er-
scheint. Wahrend bei 3 und 6® C infolge der gunstigeren Wachstunisbedin-
gungen nur der zweite und dritte Abschnitt der Wachstumskui’ve erfaBt

■werden konnten, tritt bei 0®C
auch der erste Abschnitt in
Erscheinung (Abb. 1). Die ab-
solute Ent-wicklungshemmung
dureh Temperatzrrsenkung ist
zwisehen 6 und 3® C gering,
bei 0®, wenn man auf die im
Versuch nicht erfaBten End-
werte extrapoliert, vielleicht
etwas starker.

Luftfeuchti g keit
(Abb. 2). Wahrend die Hohe
der Temperatur in erster
Linie daruber entscheidet,
welche Abschnitte der Wachs-
tumskurve innerhalb einer
bestimmten Vcrsuchsdauer er-
fafit werden, bestimmt die
relative Feuchtigkeit der Luft
den Abstand der Kurve von
der Abszisse und die Hbhe
des unter gegebenen Versuehs-
bedingungen erreiehbaren
70 a oRai Feuch iigkeit^oo % 100 Endwertps. in den eraten

tS°c Tagen ist der Ilntersehied

Abb. 2. EinfluB tier LuEtfeuchtigkeit auf das Bak- zwiscliendeil eUlZellien Kcuch-
teriouwacbbtum bei vorachiedencn Lagertomporatu- tigkeitcn nicllt SChr groU dio
reu. p/o = 0,28: t ^ 4 - 0 und ± o» 0. Oborflachenverhaltnisse der
Fleisohstucken sind noch ziemlich gleichartig, da trotz starkcrer Verdun-
stung bei den niederen Feuehtigkeiten dureh die sofort darauf einsetzeude
Diffusion von Wasser aus dem Inneren der Feuchtigkeitszustand in der
Grenzschicht nicht -wesentlich verandert wird. Die in den ersten Tagen
mit grOBter Intensitat einsetzendo Bakterienvermehrung oilt gewisser-
maBen dem Dampfspannungsausgleieh voraus. Erst naeh mehreren Tagen
maeht sieh eine allmS.hliehe Abtrocknung der Obcrfl3,ehe bemerkbar und
zwar bei 70% schon so deutlich, daB das Fleisch nach 8 Tagen weniger
dureh die infolge der Bakterientatigkeit hervorgerufenen als dureh die von
der Verdunstung bedingten OberflSchenveranderungen unbrauchbar ge-
macht wird. Bei 90 — 100% sind die Wachstumsuntersehiede nicht sehr groB
infolge der nicht allzu verschiedenen OberflSchenzustande.

Im Gegensatz zur Temperatur, bei der nach orfolgtcr AbkUhlung Ober-

Baktenenwachstum u. Verdunstung auf Kuhlfieisch in luhender u. bewegter Luft. 399

flaclie und Ge'wiclit des Kiihlgiites ohne Bedeutung sind, wird der Quotient
F/G hinsichtlich der relativen Luftfeuchtigkeit von grofiercr Bedeutung
sein, da ja die Beeinflussung des Bakteiien'«achstunis indirekt uber den
Zustand der Substrat-Oberflache erfolgt.

Bei der in unscren VerRuehsgefSCen noch ziilasRigen GroBe der Fleisch-
stiicke bestanden allerdings zwsehcn Stiieken von F/G = 0,14 und F/G =
0,28 nur geringe Unterscliiede in der Bakterienent’n’icklung. deutlicher
waren die TJntei-schiede bei den Verdunstungsversuchen (vgl. S. 402).

Vergleicbt man die Kesultate uber den EinfluB von Temperatur
und Luftfeuchtigkeit mit den fruher erhaltenen (vgl. Schwartz und
Schmid 1931), so zeigt sich, dafi die "Wachstumskimven bei den hSheren
Temperaturen im allgemeinen ubereinstimmen. GroBere Abweichungen
bestehen dagegen bei 0®. Ob sie ausschlieBlich auf Verschiedenheiten des
Quotienten F/G (jetzt: 0,14^0.28; fruher: etwa 0,56) zuruckgefuhrt werden
kdnnen, erscheint zweifelhaft. Von der frbher angewandten Umreehnung
auf „Idealkurven“ sind "wir abgekommen, da die Verbesserung der Versuchs-
bedingungen einon direkten Vergleich der einzelnen Eeihen ermdglicht.
Dies gilt besonders fiir Diagramme mit der relativen Feuchtigkeit als Ab-
szisse.

Versuehe in feuchten Kammern. Die Versuche mit
Fleischzylindern, die sich an die Verhaltnisse im praktischen Kiihlbetrieb
anlehnen, kdnnen natiirlich keine genauen Zahlen uber die wahre Begren-
zung des Bakterienwachstums durch die relative Feuchtigkeit liefern, weil
das Gloichgewicht zwischen den Konzentrationsvcrhaltnissen an der Fleisch-
oberflache und der relativen Feuchtigkeit des umgebenden Luftraumes.
von einzelnen Ausnahmen abgesehen, innerhalb der Versuehsdauer nicht
erreicht wird.

Es wird bei Versuchsbeginn unmittelbar an der Fleischoberflache ver-
mutlich eine relative Dampfspannung von etwa 99,2% herrschen, wenn man
von der Konzentration des Fleischsaftes ausgeht, aus dessen Gefriertemperatur
den Dampfdruck berechnet und zum Sattigungsdruck iiber Wasser in
Beziehung setzt (H e i B 1933).

1st die relative Feucht^koit der umgebenden Luft geringer, so wird
zwar durch Verdunstung ein Ausgleich angestrebt, der aber durch Diffusion
von Fliissigkeit aus dem Fleischinnern an die Oberflache verzbgert wird.
Erst nach langcrer Zeit und bei starkcn Dampfdruokdifferenzen tritt eine
Konzentrierung und Austrocknxing in den Oberflachenschichten ein, was
zum Teil auf Ei’schopfung des Vorratcs an leicht beweglichem Wasser im
Ihnem, zum anderen wahrseheinlieh auf eine irreversible Entquellung in
den zunachst fiir das Bakterienwachstum in Frage kommenden Rand-
schichten zuruckzufUhren sein wird (vgl. S. 403).

Zur Erganzung dor Versuche an Fleischzylindern dienton Versuehe in
feuchten Kammern mit Fleischwassergelatine.' Der verflussigte Nahrboden
(Fleischbouillongelatine) wurde vor dem Ausstreichen auf dasDeckglas der
feuchten Kammer mit einer stark verdunnten Aufschwemmung von Fleisch-
bakterien (Mikrokokkus-Stamm) geimpft. Die Versuchstemperatur betrug 18® C
(± 0,5® C). ZurVermeidung von Kondensationenmufiten die Deckglasor durch
Auflegen eines Wajmc-isolierenden Deckels vor Temporaturschwankungen
gesehiitzt werden. Die Messung des Bakterienwachstums erfolgte in der Woise,
oaB der UmriB einzelner Kolonien an aufeinanderfolgonden Tagen bei stets
gleieher VergrOBerung mit dem Zeichenapparat festgelegt und der um-

400

\V. Sch'n drtz und Erwin Looser,

schlossene Flacheninhalt planimetrisch bcstimint wurdc (Abb. 3). Infolge
der geringon Schichtdicke dos Substrates bei relativ sehr groBcr Oberflache
war anzunehmen, dafi der Ausgleich der Feuchtigkeiton sehr rasch erfolgen
muBte. Mit abnehmender relativer Feuchtigkcit ist das Flachenwachstum
durch zunehmende Steigerung des osmotisclien Druckos und diirch Plasma-
cntquellung stark gehenimt. Auch die endgiiltigo GroBo der Kolonie niTnmt
mehr nnd mehr ab (vgl. Ripp el 1925). In der Nahe des untcren Grenz-
wertes koinint es zur Ausbildung zahlreichcr InvolutionsEormcii.

Ob das optimale Waehstum mit dem Hochstwert der rolativen Feuchtig-
keit (100%) zusammenfallt, lieB sich mit dieser Methode nicht feststellen,
da schon bei 99% relativer Feuchtigkeit das Waehstum so rasch vor sich geht,
daB es zu keiner eigentlichen Koloniebildung mehr kommt, vielmehr bereits
nach ungefahr 48 Std. das Nahrsubstrat verfliissigt ist.

Die niedrige Lage des unteren Grenzwertes bei ungefahr 93% relativer
Feuchtigkeit steht in Widerspruch zu dem von Walter (1924, 1926) ge-
fundenen Wert von 96—97%, der sich auf verschiedene Luftbakterien
(Bact. prodigiosum. Micrococcus rose us) bezieht. Ein

I \ ^ I ,,,,, , direkter Vergleich mit

den Werten anderer

10 ^ — — = Forschor (L o h nis 1913,

Fiache — ^ ^ Schlitzler 1905,

cm 2 ^ Spickermann und

] / Bremer 1902, W e i -

yc _ ^ go rt 1904, Wolf 1899)

4 — ■ ist nicht moglieh. weil

moistens nur die Wachs-
2 — ======== tumsintensitat in Ab-

’ M L___ hangigkeit vom prozen-

° 2 4 8 10 12 zatTlgi ' -^iB 20 Wassergchalt des

Abb. 3. Flachenwachstum von Bakterienkolonien in Ab- ^ StratoS angOgC en
hangigkeit von der relativen Feuchtigkeit. Wiru UnU WOli trotz

gleiehor Wasscrgehalte

die Dampfdrucko an der Oberflache ganz versehieden sein kiinnen.

Der Untersehied zwisehen den von Walter nnd von uns fcstgestell-
ten unteren Grenzwerten kann mit der Verwendung versehiedencr Baktericn-
arten zusammenhangen. AuBerdem muB lolgendes erwogen •werden:

Walter laBt das Nahrsubstrat antrocknen, bevor or os dor gc-

Triinschten relativen Feuchtigkeit aber Schwefelsaurc-Wassor-Gemisehen
aussetzt. In dieser MaBnahme li^t mOglichcrweise ein Fehlcr, Aus Ver-
suchen von Tomkins (1928. 1929) an Schimmelpilzon geht hervor, daB
die Werte fttr das Waehstum der Kolonie bei Verwendung von vorgotroek-
netem Agar unter sonst gleiehen Bedingungen niedriger liegen als auf nicht
vorgetrocknetem Agar. Die Erscheinung ist vermutlich so zu erklaren,
daB die Wasseraufnahme des vorgetrockneten QuellkOrpcrs sehr langsam
vonstatten geht, so daB sich an seiner Oberflache zur Zoit der Wachstums-

messung nooh nicht die gewunschte relative Feuchtigkeit eingestellt hatte.
Auch bei Walters Versuchen kSnnte dies der Fall gewesen sein. Auf
der anderen Seite ware es ebenso mSglioh, daB bei unseren Versuchen, bei
denen sich die Gleiehgewichtseinstellung von der anderen Seite her durch
Entquellni]^ des Substrates abspielt, in den unteren Feuchtigkeiton von
92 und 94% auch.noch kein vollkommener Ausgleich stattgef unden hat,

Baktorien-naohRtum u. Verdiinstung auf Ktihlfleisch in ruhender u. bewegter Luft. 401

daB also an der Substratoberflache eine hSbere relative Fencbtigkeit berrschte
als die Solekonzentration angibt, mithin das Wachstum in Wirkliebkeit
bei bSheren Feuchtigkeitswerten bestimmt wurde. DaB der Ausgleich der
Dampfspannungen von Substratoberflacbe und Salzlosung selbst in den
feuchten Kanxmern noch sehr langsam vor sicli gelit, zeigt das Schwinden
der Kolonieflaeheu nach einiger Zeit bei Feuohtigkeiten unterhalb 96%,
das wahrscheinlich auf eine allmahliehe Sehrumpfung von Substrat und
Kolonie zuriickzufuhren ist.

Auffallig bleibt allerdings, daB selbst bei einer relativen Feuchtigkeit von
92% ein Wachstum in Gang kommt, das nach einer Versuchsdauer von
6 Tagen meBbare Werte er- lemp+coc Rei Feuchiigkeits85%u90%

reicht. 'o'°

Eine endgtiltige Klarung
vrird hierwie bei derFrage
nach dem Verhalten der
Schimmelpilze in der ITahe ' 0 °
des Sattigungswertes (vgl.

Schwartz und KaeB io^

1934) erst bei Verwendung
einer anderen Versuchsteeh- iqs
nik zu erwarten sein.

b) Bei bewegter ,g 5
Luft. Es war zu erwarten,
daB sich der EinfluB der ^

Luftbewegung auf das Bak-
terienwachstum weniger in ^
einer unmittelbaren Beein-
flussung als auf dem Weg
liber die Veranderung der
Verdunstungsvorgange^) an
der Fleischoberflacho be- io
merkbar machen wtirde.

Im Bereich bis 85% o
relativer Feuchtigkeit auf-
warts findot man dieso Er-

Temp +60C Rel Feuchligkeit=85% u 90%

wartung bestatigt (Abb. 4). der Lnftbewegung auf das Baktenen-

90% an aufwarts bei auf-

gezwungener Stromung sogar eine fSrdemde "Wirkung der Luftbewegung.
Wir vermogen uns diese Ersoheinung nur so zu erklaren, daB die Be-
Ittftung zu einer besseren Sauerstoffversoi^ng der in den ersten Absehnitten
der Fleischzersetzung vorherrsehenden aeroben Bakterien fuhrt. Auch bei
verdunstungsfreier Lagerung in wasserdampfgesattigter Luft ist diese "Wirkung
der Luftbewegung vorhanden. Die Unterschiede gegenuber gleichzeitig an-
gestellten Kontrollen mit ruhender Luft sind aUerdings goring. Es laBt
sich iimerhalb des gepriiften Bereichs auch keine eindeutige Beziehui^ zur
Luftgeschwindigkeit finden.

1) Abgesehen von Versuehen mit 100% relativer Feuchtigkeit wird die Ver-
dunstung erhdht, die Obesrflache trooknet also rasoher ab und die Bakterienentwicklung
sollte rasoher gehemmt werden.

Z^weite Abt. Bd. 91.

26

402

W. Schwartz und Erwin Looser,

2. Die Verdunstung in Abhangigkeit von den AuBen-

bedingungen.

Die schon bekannten MeBwerte von Gewichtsverlusten an Kiihl-
fleisch sind zahlenmaBig nicht ausreiehend und aul die bier vorliegenden
Verhaltnisse (Modellkorper aus reinem Muskel ohne Fett und Bindegewebe)
nicht ubertragbar. Sie konnten daher zu den mikrobiologischen Versuchen
nicht in Beziehung gesetzt werden.

. +0°C +3‘C +6°C

S verdunstete Wassermenge in 5< des Ursorunosaewichtes

Unsere Versuche erstreckten sich auf den EinfluB der Temperatur, der
relativen Feuchtigkeit, der Luftbewegung und des F/G-Quotienten. Als
MaBstab diente der infolge der Verdunstung sich einstellende Gewichts-
verlust, bezogen auf das AusgangsgeTOcht der Modellkorper (Abb. 6, 6).

In den ersten Tagen ergibt sich bei ruhender Luft, besonders bei den
hbheren Peuchtigkeiten und bei kleinem F/G ein nahezu geradliniger Vcr-

Bakterienwachstum u. Verdunstung auf Ktihlfleiseh in ruhender u. bewegter Luft. 403

lauf der Verdunstungskurven. Spater tritt bei groBem F/G und bei geringer
relativer Feuchtigkeit eine Verzbgeriing der Verdunstung ein. Ein grofier Teil
des im Fleisch enthaltenen Wassers wird offenbar nur sehr locker festgehalten
und daher leicht abgegeben, wahrend der Rest nur schwer verdunstet^).

Es zeigt sich, daB vor allem die relative Feuchtigkeit und das Verhaltnis
von Oberflache zu Gewicht, die Verdunstung beeinflussen. Die unmittel-
bare Wirkung der Temperatur ist in dem hier gepriiften Bereich sehr gering.
Liiftbewegung wirkt bei sonst gleichen Bedingungen beschleunigend mit
zunehmender Luftgeschwindigkeit.

3. Lagerzeit, Bakterienentwicklung
und Gewichtsverlust.

Die durch die Bakterientatigkeit hervorgerufenen Veranderungen im
Aussehen, Geruch und in der chemischen Zusammensetzung des Kiihl-
fleischcs, kdnnen an-
nahernd proportional
der Zahl der Organismen
gesetzt "werden. Einige
Tausend Keimo je qcm
verursachen noch keine
wahrnehmbare Quali-
tatsvorschlechterung,
erst bei in die Millionen
gehenden Bakterien-
zahlen tritt auch eine
makroskopisch sicht-
bare Abweichung von
der urspriinglichen Be-
schaffenheit derFleisch-
oberflache in Erschei-
nung.

Die ersten Anzei-
chen der am Aussehen
und am Geruch fest-
stellbar en W ertminde-
rung fUhrten zur Fest-

Abb. 6. Gewichtsverluste nach einer Versuchsdauer von
10 Tagen in Abhdngigkeit von der Luftgeschwindigkeit
bei verschiedenen relativon Fouchtigkeiten der L\5t.

setzung der oberen Haltbarkeitsgrenze (maximale Lagerdauer), der eino
tJbergangszono vorausgeht. Dio Haltbarkeitsgrenze liegt bei Keimgehalten
zwischen 10 und 100 Millionen Keimen je qcm Oberflache und ist in den
graphischen Darstellungen als strichpunktierte Linie eingezeichnet (sieho
Abb. 1, 2, 4). Die maximalen Lagerzeiten fiir die einzelnen Luftzust&ndo

Es kann sich bei diesona Rest um „gebundenes Wasser“ (vgl. Hill 1930,
ferner Walter 1931) handeln. Es ware aber auoh denkbar, dai3 die Diffusions-
gesdhwindigkeit der Fl\5ssigkeit vom Innern an die Randzone goringor ist als die Ver-
dunstungsgeschwindigkeit und somit allmS.hlich eine Abtrocknung der Oberflacshe er-
folgt. Daduroh wird der Filtrationswiderstand erhCht und der KE^sohub von Wasser
aus dem Innem erschwert. Ein bei niedriger Luftfeuchtigkeit und hoher Luftgeschwin-
digkeit aufbewahrter Fleischzylinder (F/G = 0,14) zeigte nach mehrtagiger Lagerang
einen Wasserverlust von 60%. Eine getronnte Bestimmung des Wassergehaltes in
der soharf abgegrenzten, etwa 2 mm dicken, eingetrockneten Randzone und in der
mittleren Zone ergab dort einen Wasserverlust von 42%, hier einen solchen von 5%.

26 *

404

W. Schwartz und Erwin Loeser,

werden sich alsdann als Sclmittpuiikte der Vermelmingskurveii mit dieser
Grenzlinie ergeben (Abb. 7).

Hieraus erweist sieh der EinfluB der Temperatur als in erster Linie ent-

scheidend, dcmge-
gcniiber jcner der

V \ \ V=o° tigtoit etwas zu-

I t=+^ \ \ \ rucktritt, wenig-

r

£ technik ublichen

I \ Bcreichen. Dies

■|80 kommt besonders

X. bei hohen Tempe-

T — raturen zum Aus-

I ^^1 ” ~ druck, bei dcnen

2 4 6 8 10 12 14 16 die anfangliche

— Tags bis zur Erreiohung des Grenzwerts Wachstumsinten-

Abb. 7. Maximale Lagerdauer bei verschiedenen relativen Feuoh- sitSit SO gro6 ist,
tigkeiten und Temperaturen und bei ruhender und bewegtor Luft (Jjg Wirkung
(Luftgeadhwindigkeit: 0,1 m/sek.). relativen

6 8 10 12 14

• Tage bis zur Eireichung des Grenzwerts

Feuchtigkeit gar nicht zur
Geltung kommt.

Dagegen ist dor EinfluB
der Luftbcwegung in unseren
Versuchen gering zu bewerten.
In der Praxis liegen die Ver-
hSiltnisse insofern anders, als
duroh Lnf tumwalzung im Kiihl-
raum die Bildung von Zonen
hdlierer Luftfeuchtigkeit in to-
ten Winkeln verhiitet wd.

Wollteman einen Gewichts-
vorlust •wahrend dor Lagerung
Yollstandig ausschlioBen. so
miiBto man einc relative Fouch-
tigkeit von otwa 99,3% in den
Lagerraumcu oinbalten. Mit
Elicksicht an! das Baktericn-
wachstum ist jedoch eine so
hohe Feuchtigkeit nicht zu-
iSssig, ein bcstimmter Gowiehts-
verlust also unvermeidbar. Die

9orbi Feuohiigkeii 80 70 mikrobiologische Untcrsuchung

Abb. 8. Mindestgewidhtsverluste bei F/Q = 0,28 hat ergebon, wie die Zustands-
m Abhtog^keit von Temp^tw und wiativer g^gfien der Luft beschaffen sein
Feuchtigkeit. Die Zahleu an den Kurven geben die ®

Irreichte Lagerdauer in Tagen al ?a'lSSen, Wenu eme bestote

Lagerdauer des Ktihlgutes ge-
wahrleistet sein soil (vgl. Abb. 7). Aus den Verdunstungsmessungen geht
hervor. 'welcher Gevdchtsverlust bei dem betreffenden Luftzustand zu er-

TTarten ist (vgl. Abb. 5). Dieser Gewichtsverlust muB unter den gegebenen

Baktericnwachstum u. Verdunstimg aiif Ktihlfleisch in ruhender u. bewegter Luft. 405

Versuchsbedingungen als .jMindestgewichtsverlust" angesehen werden. Die
maximale Lagerdauer (Haltbarkeit) l8J3t sich also als Parameter in Ab-
hangigkeit vom MindestgeTOchtsverlust und von der relativen Fenchtigkeit
darstellen (Abb. 8).

Beispiel: Bei + 3® C und einer relativen Fenchtigkeit von 90% ergibt
sich eine hSchste Lagerdauer von 5,9 Tagen (vgl. Abb. 7). TJnter den gleichen
Bedingungen entsteht ein Gewichtsverlust (Mindestgewichtsverlust) von
11,2% (vgl. Abb. 5, F/G = 0,28).

Vergleicht man die fiir die maximalen Lagerzeiten und fiir die Ge-
vfichtsverluste ermittelten Werte mit den bei der praktischen Kiihllagerung
gemachten Erfahrungen, so ergibt sich, daB in beiden Eichtungen die Ver-
haltnisse in der Praxis im allgemeinen als giinstiger bezeichnet 'werden. Die
Ursache hierfiir liegt vielleicht in da: GrSBe und Beschaffenheit unserer
Versuchsstiicken, denn auBer einem kleineren Quotienten von F/G muB
auch beriicksichtigt werden, daB wir im Experiment mit allseitig freien Muskel-
oberflachen gearbeitet haben, wahrend bei den Tierhalften der Praxis groBe
Teile _der Oberflache durch Fett und Bindegewebe geschiitzt sind.

tJber Versuche in gewerblichen Kuhlraumen mit dem Ziel, die Labo-
ratoriumsversuche zu den Verhaltnissen in der Praxis in Beziehung zu setzen,
wird der eine von uns (Looser) an anderer Stelle berichten^).

lY. Znsammenfassung.

1. Bakterienwachstum und Yerdunstung lassen sich durch Begelung
des Luftzustandes innerhalb der bei der EiMlagerung zulEssigen Grenzen
nicht verhindem.

2. Da die Entwicklung der Baktericn mit sinkender Temperatur stark
gehemmt wird, ist es zweclmaBig, die Temperatur m5glichst weit zu senken.
Mit Riicksicht auf den bei ungefahr — 1® C liegenden Gefrierpunkt des
Fleisches und eine fiir Schwankungen vorgesehene Toleranz wird die Tem-
peratur am besten auf ± 0® C festgesetzt.

3. Die Fenchtigkeit soil so weit erhOht werden, wie es auf Grund der
Zusammenhange zwischcn Bakterienwachstum und relativer Fenchtigkeit
noch zulassig ist. Bei den iiblichen Lagerzeiten ergibt sich als obere Grenze
ein Wert von etwa 90%. Die unter diesen Bedingungen auftretenden Gewichts-
verluste sind „Mindestgewichtsverluste“, die sich nicht vermeiden lassen,

4. Die Luftbewegung hat fiir den eigentlichen Lagerungsvorgang nur
eine untergeordnete Bedeutung. Sie soli in erster Linie eine gleichmaBige
Einhaltung des Luftzustandes in alien Teilen des Lagerraumes gewShr-
leisten.

Iitteratuverzelelinls.

£ s t o r , W., Zentralbl. f. Bakt. Abt. II. Bd. 72. 1922. S. 411. — H e i s s » B.,
„Die W&rme**. (Ztschr. f. Dampfkessel- u. Maschinenbetrieb. Bd. 66. 1933. S. 72.) —
H i 1 1 , A. V., Proc. Boyal Soc. 1930. 106, B, 477. — K a e B , G., xmd Schwartz,
W., Arch. f. Mikxobiol. Bd. 6. 1934. S. 443. — Lingo, K., Beihefte z. Ztschr.
f. d. ges. Kftlteindiistrie. Beiho 2. H. 7. 1983. — L 5 h n i s , Yorlosungen tlber
Landwirtschaftliche Bakteriologie. 1913. — B i p p e 1 , A., Wachstmnsgesetze bei
hOheren tind niederen Pflanzen. Miinohen -Freising 1925. — Schlitzler, Dies.

Haltbarkeit von Fleisch in gewerblichen Ktkhlr&umen. (Ztschr. V.D.J. 1935
im Druck; femer Deutsche Sohlachthofzeitschrift, 1935 im Druck.)

406

Ludwig Niemeyer,

Wurzburg 1906. — Schwartz, W., und K a e 13 , G., Arch. f. Mikrobiol. Bd. 6.
1934. S. 167. — Schwartz, W., und Schmid, W., Ibid. Bd. 2. 1931. S. 368. —
Spieokermann und Bremer,. Landw. Jahrb. Bd. 31. 1902. S. 81. —
Tomkins, R. G., Report of the Food Investigation Board 1928. 1929. — Wal-
ter, H., Die Hydratur der Pflanze. Jena 1931. — Walter, H., Ztschr. f. Bot.
Bd. 16. 1924. S. 363; Ztschr. f. Pflanzenemahrung. Ted A. Bd. 6. 1926. S. 65. —
Weigert, Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Bd. 36. 1904. S. 112. — Wolf, Arch,
f. Hyg. Bd. 34. 1899. S. 200.

^achdruck verboten.

Untersuchiingen ilber Zusammenhange zwischen Vorkommen
von Azotobaoter, Wachstumszustand der Reben und Unkraut-
flora im Weinbaugebiet der Mosel, Saar und Ruwer.

[Aus der Zweigstelle der Biologisehen Keichsanstalt in Berncastel-Cues a. d. M.

Leiter: Regierungsrat Dr. Zillig.]

Von Ludwig Memeyer.

Es ist bekannt, da6 das Vorkommen von Azotobaoter im Boden in
bohem Ma6e von der physikalischen und cbemischen Beschaffenheit dieses
Bodens abhangig ist. Daher wird das Fehlen bzw. die HSufigkeit des Bak-
teriums im Aekerboden bei der Beurteilung seines Dungungs- und Kultur-
zustandes mit verwertet und nach dem heute allerdings nicht mehr haufig
benutzten Azotobacter-Verfahren kann auf solche Weise ein vielfach aus-
reichendes Bild iiber den Gehalt des Bodens an bestimmten Ndhrstoffen
gewonnen werden (1, 4).

WeinbergsbSden aus dem Gebiet der Mosel, Saar und Ruwer wurden
von Zillig und Herschler (9) untersuebt. Kalkbedurftig in der
Oberkrume (untersuebt nacb Sebeibler) waren an der Untermosel
etwa 64, an der Mittelmosel, Saar und Ruwer etwa 36% der Boden, Mangel
an Pbospborsaure (untersuebt nacb Lemmermann) zeigten 40 — 45
bzw. 15%. Die nacb dem verglcicbsweise angewendeten Azotobacter-Ver-
fabren gefundenen Zablen der kalk- bzw. pbospborsburebediirftigen Boden
lagen noeb bober. Die auf versebiedenen Wegen gefundenen Werte stimmen
fiir Kalk zu etwa 61, fiir Pbospborsaure zu etwa 60% gut iiberein. Fost-
stellungen iiber die naturlicbe Verbreitung des Bakteriums im Gebiet lagon
bisber niebt vor. In den Jabren 1930 — 1933 wurden dcsbalb bauptsScblicb
im Frtibjabr aus versebiedenen Weinbergen an Mosel, Saar und Ruwer
Bodenproben gesammelt und auf das Vorkommen von Azotobaoter gepriift.

Das Ziel der Arbeit war also zunSebst, ein Bild von dor Verbreitung
des Bakteriums in diesem Gebiet zu gewinnen. Auilerdem sollte gepriift
werden, ob GesetzmSBigkeiten zwiseben dem Azotobacter-Vorkommen und
dem Wacbstumszustand der Reben einerseits und der TJnkrautflora anderseits
besteben und AufsebluB iiber den Diingungszustand der Weinberge geben.

Der Nacbweis des Azotobaoter erfolgte in Fliissigkeitskulturen in 100-
cem - Erlenmeyer kolben aus Jenaer Glas, die jeweils 25 com folgender
Nabridsungen entbielten:

1. Leitungswasser . . . 1000 II. Ldsung I mit CaCO, ... 5

Mannit 20

KjHPO. 0,2

Na,SO. 0,2

Untersuchungen tiber Zusammenhange zwischen Vorkommen von Azotobacter usw. 407

Die Kolben wurden mit Wattestopfen verschlossen und im Autoklaven
20 Min. bei 1,6 Atm. sterilisiert. Die Hohe der Flussigkeitsschicbt betrug
etwa 1 cm. Dber Brauchbarkeit und Vorziige der Elektivkultur in Nahrlosung
zum Nachweis von Azotobacter wurde neuerdings von W e n z 1 (7) be-
richtet.

Ein Zusatz von 0,02% NaijS 04 zu der B e i j o r i n c k schcn Nahrlosung
(Nahrlosung I) ergab in Kulturen von 26 verschiedenen Bodenproben nach
der bekannten Bewertung der Azotobaeterhaut mit Zahlen 0 bis 4 einen
Durchschnittswert von 3 gegeniiber 1,8 ohne Na^SO^, in der Nahrlosung II
3,2 gegeniiber 2,2. Zusatze von 0,04 und 0,08% NagS 04 hatten in Ver-
gleichsMturen mit denselben Boden keine bessere Wirkui^ als 0,02%.
Bei dieser Konzentration ging die Azotobacterentwicklung in kiirzester
Zeit vor sich.

Nahrlosung II erhielt den CaCOg-Zusatz, well dureh die Tatigkeit der
Mikroflora mancher Baden die Beaktion der Nahrlosung I so schnell un-
giinstig geandert wird, da6 Azotobacter sich nicht mehr entwickelt.

Bei der Entnahme der Bodenproben wurde mit einer kleinen Hacke ein
etwa 20 — 26 cm tiefes Loch gescmagen, dessen eine Langsseite eine Bruch-
flache bildcte, die mit der Hacke selbst nicht in Bertihrung gekommen war
und von der mit einem sterilisierten Praparatenglase von 16 cm Lange und
2,6 cm Durchmesser ohne Gefahr der Infektion eine Bodenprobe entnommen
werden konnte. Die Glaser waren mit einem Wattebausch verschlossen und
zu etwa % ihror Lange mit einer fest darumgerollten, oben geschlossenen
Papierhiille bedeckt und so im Trockenschrank 20 Min. lang auf 120® er-
hitzt worden. HUlle und Wattestopfen wurden unmittelbar vor der Probe-
entnahme abgezogen und danach sogleich wieder aufgesetzt. Da die Wein-
bei^boden durchschnittlich 66, ja bis 82% Steingehalt aufweisen (9), war
das Einholen der Proben hier ungleich schwieriger als auf AckerbSden,
aber bei einiger Vorsicht doch durchfiihrbar.

MSglichst am Tage nach der Entnahme wurden von den Bodenproben
je 5 g in die wic oben angegeben mit NahrlSsung I und II vorbereiteten
Erlenmeyer kolben gegeben und im Brutschrank bei dr 28® aufgestellt.

Die Bewertung der Azotobacter-Vegetation erfolgte taglich vom 2. bis
zum 6. Tage. Bildete sich keine Azotobaoter-Haut, so wurde die mehr oder
weniger getriibte NalirlSsung mikroskopisch auf Azotobacter untersueht.

Tab. 1. Herkunft der Bodenproben und Mittelwerte der Azotobacter-Entwicklung.

G ebietsabschnitt

Anzahl der

Prozentzahl der Weinbergslagen 1

Boden-

Lagen

mit aen Mitteiwerten

proben

0

1

2

4

Untermosel (Koblenz —

Alf/Bullay)

269

37

8

16

35

30

11

Mittelmosel (Alf/Bullay —
Trier)

678

69

32

25

19

10

14

Saar

148

10

20

60

20

10

0

Biuwer

60

6

0

0

33

60

17

Obermosel (oberh. Trier)

34

2

0

0

0

100

0

Aus einer Weinbergslage bzw. einzelnen Parzellen einer Lage wurden
je nach der Grdfie bis zu 53 Proben entnommen. In manchen FSillen handelte
es sich dabei um dicht beieinanderliegende Parzellen in gutem und schlechtem

408

Ludwig Niemeyer,

Zustand. Meistens stammten aus eincr Parzelle etwa 10 Proben von ver-
scliiedenen Stellen. Aus den Ergebnissen dieser Einzelproben wurde ein
Mittelwert errechnet.

Die Herkunft der untersuchten Proben aus den Abschnitton des Weinbau-
gebietes an Mosel, Saar und Euwer geht aus dor folgendon Zusammen-
stellung bervor. AuBerdem ist angegeben, wievicl Prozent der Weinbergs-
lagen me Mittelwerte 0 bis 4 crreicht haben (Tab. 3).

Aus dem Gebiet der TJntennosel, wo die Rcben hauptsHchlich an steilen,
steinigen Hangen aus langsam verwittemden Grauwackenschielem und
Quarziten des Unterdevon wachsen, wiesen 3 Lagen (= 8%) den Wert 0
auf, waren aber nach der mikroskopiscben Untersuchung der Einzelkulturen
doch niobt ganz frei von Azotobacter.

An der Mittelmosel, Saar und Ruwer stehen die Eebstocke zumeist auf
Verwitterungsschutt aus Hunsriickscbiefer des Unterdevon. Von den unter-
suchten Weinbergslagen erhielten 24 (= 28%) den Mittelwert 0, cnthielten
aber bis auf einige mit stark sauren, z. T. auch frisch gerodeten Bdden doch
mehr oder weniger viele Azotobacterflocken in den Kulturen.

Aus den auf KalkverwitterungsbOden der Trias stehenden Weinbergen
der Obermoscl konnten infolge umfangreicher Reblaus-Verseuchung nur zwci
Lagen mit dem Mittelwert 3 untersucht warden.

Der Hdehstwert der Azotobacter-Entwicklung wurde unter den im
ganzen untersuchten 124 Weinbergslagen nur 15mal (= 12%) erreel^et.
Die meisten (82 = 66%) ergaben die Werte 1, 2 und 3.

Die Untersuchung von 1179 Bodenprobcn aus 124 Weinbergslagen der
Mosel, Saar und Ruwer zei^ also, daB Azotobacter nur in seltencn Fallen
im Boden fehlt, aber auch nicht oft zu uppiger Entwicklung kommt, sondem
meist in mittleren Mengen vorhanden ist. Als Hauptursache hicrfiir wird
man die von Zillig und Herschler (9) neben Phosphorsaurc- und
Humusmangel vielfach festgestellte, durch Kalkarmut bedingte, saure Re-
aktion des Bodens anzusehen haben. In einigen nicht bearbeiteten, sehr
festen Weinbergsbaden war auch die Durchliiftung (3, 6) unzureichend.
Die Nachweiskulturen der betreffenden Parzellen blieben ohne Azotobacter-
Vegetation, wahrend nach Beimpfung mit eincr Azotobacter-Rohkultur in
den Nahrlosungen I und II die Mittelwerte 3 bzw. 4 erreicht warden. Bei
normaler Bearbeitung des Erdrcichs ist jedoch in den steinigen Dcvon-
baden cine mangelhafte Durchliiftung nicht zu befUrchtcn, eher schon in
den schweren bindigen Triaskalkbadcn der Obermosel.

Tab. 2 . WaohstumszuBtand der Beben und Mittelwerte der Azotobacter - Vegetation.

Anzabl
der Lagen

Von 100 erreichten
den Mittelwert

2

L_L_i

Eine Zusarrmenstellung der La»gen nach dem Wachstumszustand der
Reben enthslt die Tab. 2. In manchen FSllen muBten mehrere untersuchte
Parzellen einer Lage gesondert bewertet werden, well sie durch guten bzw.
schlechten Stand der Reben auffielen. Die Anzahl der Lagen oder Parzellen

Uniersuchimgen uber Zusaiimieiihfi,nge zwischen Vorkoiamen von Azotobacter usw. 409

ist bei der Angabe der Mittelwerte zum besseron Vergleich in Prozent aus-
gedriickt.

Unter den Lagen bzw. Parzellen, die einen guten Wachstumszustand der
Eeben anfwiesen, hatte ein groBer Teil (23%) den Mittelwert 0, nicht wesent-
lich weniger als unter den Parzellen mit schlechtem Eebmichs (27%). Die
Pi'ozentzablen der mit 4 bewerteten Lagen mit gutem und sehlcchtem Eeb-
stand zeigen, daB gute Lebensbedingungen fiir Eeben und Azotobacter nur
vorhaltnismaBig selten zusammentreffen, in einzelnen Fallen aber auch
reichlich Azotobacter bei schleebtem Eebstand vorkommt. Each der Tab. 2
haben sowohl gut wie sehleeht stehende Weinberge meistens eine geringe bis
mittlere Azotobacter-Vegetation, "wahrend bei mittelmaBigem Eebstand die
Mehrzahl der Parzellen etwas Tiber dem MittelmaB steht. Die Gesamtdurch-
scbnittsTiFerte ergeben ein gleichartiges Bild: die im Eebstand schlechten
Weinberge zeigen mit 1,6 den geringsten Mittelwert, die guten mit 1,8 einen
etwas baheren, wahrend die mittelmaBigen bis auf 2,2 kommen.

Aus den Ergebnissen kann gefolgert warden, daB Nahrstoffmangel nicht
sehr oft die Ursaehe fiir schlechte Azotobacter-Vegetation im Weinbergs-
boden ist, da die Eebe selbst in dieser Beziehung hohe Anforderungen stellt.
Anders liegen die Verhaltnisse beziiglich der Bodenreaktion. Wahrend die
Sorte Eiesling der edlen Weinrebe (Vitis vinifera) optimales Wachs-
tum bei etwa pn 6 zeigt (9), liegt das Optimum der Azotobacter-Entwicklung
nahe bei ps 7 (6). Aus Zeitmangel konnten die pn-Werte der Bodenproben
nicht festgestellt werden.

An den untersuchten BSden war keine eindeutige Beziehung zwischen
Wachstumszustand der Eeben und Azotobacter-Vorkommen zu erkennen.

Die Zahl der typischen Weihbergsunkrauter, die beim Einsammeln
der Bodenproben in niehr oder weniger dichten und reinen Bestanden an-
getroffen warden, war verhaltnismaBig klein. Trotzdem soil gepriitt werden,
ob Beziehungen zwischen Unkrautflora, Vorkommen von Azotobacter und
Wachstumszustand der Eeben bestehen (Tab. 3).

Tab, 3. Unkraut, Azotobaotor-Vorkommen und Wachstumszustand der Beben.

Hauptunkraut

Anzabl der
untersucht.

%-Zahl der Parzell.
mit d. Bebstand

%-Zahl der Parzellen
mit dem Mittelwert

Ges.

Mittel-

Parzellen

gut

mittel

sehleeht

0

Li

2

3

, i ....

wert

Stellaria media
Banunculus re-

30

67

13

13

27

23

2,0

pens ....

16

66

6

38

13

18

13

1,2

Seneoio vulgaris {

60

40

■El

30

Eli

2,1

Allium vineale.
Lamium purpu-

9

67

22

11

11

33

44

2,8

reum ....

8

13

63

26

60

0

13

25

13

1,6

Gramineen . .
Valerianella oli-

$

76

13

13

63

13

26

1,2

toria ....

6

m

33

17

33

17

33

17

■1

1,2

Das in den Bodenlagen der Mosel, Saar und Euwer am hauiigsten anzu-
treff ende Unkraut ist S t e 1 1 a r i a media, die in manchon Friihjahren
bereits vom Januar ab den Boden mit einem dichten griinen Teppich uber-
zieht. Each v. L i n s t o w (2) gehSrt Stellaria media zu den Am-
moniak- und Salpeterpflanzen. Sie wflchst als solche haupts&chlich in gut mit
Stallmist gediin^en Weinbergen und wurde in reiuem Bestand in 7 Par-

410

Ludwig Niemeyer, Vorkommen von Azotobactor usw.

zellen angetroffen. In alien anderen Fallen waren auch gleichzeitig andere
TJnkrauter in rnehr oder weniger groBer Anzahl vorhanden. Eine Zusammen-
stellung der Parzellen, in denen Stellaria in groficrcr Menge wuchs, lieB
zwischen ihr nnd dem Vorkommen von Azotobactor koine stronge Gcsetz-
mafiigkeit erkennen. Immerhin cnthicltcn rund 90% der von Stellaria be-
waehsenen Boden Azotobaeter.

Nach Tab. 3 wachst das Unkraut cincrseits auf Biidon, die das Baktorium
in groBer Menge enthalten und fur soin Gedoilien giinstig sind, andcrseits
aber auch in solchen, die bei Zusatz einer eloktiven NahrlOsung koine oder
nur eine schwache Azotobacter-Vegetation liefern. Die haufigsten Begloit-
nnkrauter waren Kanunculus repens, Lamium purpureum,
Senecio vulgaris und Allium vineale.

Kanunculus repens wurde in reinem Bestand oder als Kaupt-
unkraut neben Stellaria in 16 Parzellen festgestellt. Die iibrige Unkraut-
flora war in ihrer Zusammensetzung stark wechselnd. Nach v. Linstow
(2) enthalt Kanunculus repens in den Parcnehymzellcn der Stiele
und Blatter groBe Mengen I6slicher Phosphate. Die Mehrzahl der Parzellen
befand sich nach dem Wuchs der Keben in gutem Dungungszustand, wah-
rend die Azotobacter-Vegetation sehr schlecht war.

Senecio vulgaris kam in groBeren Mengen in 10 Parzellen vor,
davon in zweien in reinem Bestand, sonst mehr oder weniger stark vcrmischt
mit Kanunculus, Allium und anderen Unkrautern. Das Azotobacter-Vor-
kommen in diesen Parzellen erreiehtc mit 2,1 einen verhaltnismaBig hohen
Mittelwert. Das Wachstum der Keben war gut oder mittelmaBig und nur
in einem Falle schlecht zu nennen.

Allium vineale bildete den Hauptunkrautbestand in 9 Wein-
bergen und wurde zumeist von Stellaria, Kanunculus und Senecio bcgleitet.
Die Parzellen erreichten von alien vernnkrauteten mit 2,8 den h6chsten
Mittelwert. Der Wachstumszustand der Keben war auch besser als in den
meisten anderen Gruppen.

Lamium purpureum wuchs in groBeren Mengen in 8 Parzellen
mit Stellaria, Kanunculus und verschiedenen anderen Unkrautern ziemlich
stark vermischt. Der Rebstand war in den betreffenden Parzellen, die zu denen
mit der geringsten Azotobactcr-Mcnge gehorten, am schlechtesten.

Versehicdene Gramineen mit Stellaria, l^nunculus und anderen Un-
krautern gemischt, standen in groBeren Mermen in 8 Parzellen. Im Mittel
lieferten diese neben anderen die gcringstc Azotobacter-Vegetation, Fatten
aber den bosten Rebstand aufzuweisen.

Valerianella olitoria wuchs zahlreich mit Stellaria, Lamium,
Sonchus, Kanunculus und anderen Unkrautern in 0 Weinbergen, die bei
einer etwas anderen Verteilung dor Mittelwerte dassclbo Gesamtmittel lie-
ferten, wie die vorhergehende Gruppe.

Die vorliegenden Ergebnisse lassen Beziehungen zwischen Unkrautflora,
Azotobacter-Vorkommen und Wachstumszustand der Keben in den unter-
suchten Bbden nieht mit Sicherheit erkennen. Ob dutch eine grSBere Zahl
von Untersuchungen ilberhaupt praktisch verwertbare Beziehungen fest-
gestellt werden kSnnen, erscheint fraglich.

Literatur.

1. B e 0 k e r , E., Vergleioheiide TJntersaohungen und Versuohe mit versohie-
denen Methoden flir ^eti mmung des ITfihrstoffbedt^nisses der Boden an Fhosphor-
sSiUre und ElalL (Pfianzenem&hnuig u. Dtbagung. A. Bd. 13. 1929. 3. 274 — 294.) —

Bticher, Institutsberiohte usw.

411

2. Lin stow, O. v., Bodenanzeigende Pflanzen. Berlin 1929. 246 S. — S.Nie-
m e y e r , L., Azotobacter-Studien. (Botanisches Archiv. Bd, 7. 1924. S. 347 —
374.) — 4. Niklas, H., Ptirckhauer, B., und Posohenrieder, H.,
Beziehungen zwisdien pflanzenaufnehmbarer (wnrzelloslioher) Phosphorsanre und geo-
logischer Bildung des Bodens. (Pflanzenorn&hrung u. Dtingung. A. Bd. 9. 1927. S.
136 — 160.) — 6. Niklas, H., t^^ber die Verbreitung des Azotobakters im Boden
unter Benicksicbtigung der dabei maOgebenden Verhaltnisse. (Stoklasa-Festschrift.
Berlin 1928. S. 279 — 288.) — 6. Stapp, C., und Busohmann, G-., Zur Bio-
logie von Azotobacter. (Arb. a. d. Biol. Beichsanst. Bd. 13. 1925. S. 305 — 368.) —
7. W o n z 1 , H., Zur Methodik der Keimzablbestimmung von Azotobacter im Boden.
(Zentralbl. f. Bakt. II. Abt. Bd. 90. 1934. S. 289—314.) — 8. Zillig, H., Die
Weinbergsunkrauter an Mosel, Saar und Buwer. (Weinmarkt. Trier 1923. Bd. 43.
S. 129 — 131.) — 9. Zillig, H., und Herschler, A., Bodenuntersuchungen zur
Klarung von Waohstumsstorungen im Weinbaugebiet der Mosel, Saar und Buwer.
(Arb. Biol. Beichsanst. Bd. 18. 1931. S. 507—581.)

Referate.

Bucher, institutsberlchte usw.

Bagaller, Franz, Dor Abba u. Eine entwicklungsgeschicbt-
liehe Studie zumSenilitS>t8-und Fortpflanzungs-
problem. Jena 1934. 85 S. Verlag Gustav Fischer. Preis brosch.
6,60 EM.

Die vorliegende, rein theoretisch-spekulative Abhandlung bringt wieder
einmal den Versueh, die Erscheinung, die der Landwirt bei der Eartoffel
als Abbau bezeichnet, im Eahmen allgemeinerer biologischer Vorstellungen,
gleichsam von hSherer Warte aus, zu behandeln. Im Anschlufi an M o r -
statt (1925) gliedert Verf. seine AusfUhrungen in vier Abschnitte, nam-
lich: 1. Abbau und Degeneration (2 Seiten), 2. Abbau und Altern (66 Seiten),
3. Abbau und Anpassung (6 Seiten), 4. Abbau und Krankheiten (5 Seiten).
Als wichtigstes Ergebnis seiner gelehrten Betraehtungen ist -wohl die Fest-
stellung anzusehen, daB bei der Kartoffel eine „Altersdegeneration“ bei
entspreehender Einwirkung der Umwelt, also „aus Skologischen Grunden“
eintreten konne. Dabei soil es sicb um eine Verhinderung der Verjiingung
handeln. Man wundort sich besonders iiber den geringen Umfang des 4. Ab-
schnitts (Abbau und Krankheiten), zumal bekanntlich bestimmte Virus-
krankheitcn, also Infektionskrankheiten, von einer Eeihe von ernsthaften
Forsehern (u.a.Quanjer,Murphy,S6hultz,Folsom,White-
head, R. N. S a 1 a m a n , K, M. Smith, die allerdings mit Ausnahme
von Q u a n j e r nicht zitiert worden) als wichtiger Faktor wenn nicht als
die eigentlieho TJrsache des Abbaues in Anspruch genommen werden. Wer
also glaubt, in der Sohrift eine Stellungnahme zu der in der Pflanzenpatho-
logie herrschonden „Virustheorie“ des Kartoffelabbaus zu finden, wird ent-
t&uscht sein. Diese Auseinandersetzung soil spateren Abhandlungen vorbe-
halten bleiben, in denen Verf. auch seine eigenen Versuehe und Beobach-
tungen zu schildem gedenkt. Kohler (Berlin-Dahlem).

Tsehftlnitz, H., Strahlenforschung im Dienste der Bio-
logie;mit einemGeleitwort von Jul. Stoklasa. 62 S.
Leipzig (R. M. Rohrer) 1934. Preis 2.50 RM.

Eine fiir jeden Biologen interessante Lektiire. In 4 Abschnitten —
JahrEundertwende und Weltbildwechsel, Strablen als Lebenserwecker,
Strahlen als Lebenserhalter, Strahlen aus Tiefen und HShen — wird dargetan,

412 Bucher, Institutsbenchte usw. — Allgemeines und MethodiBohes.

daJ3 die Strahlenforschung als unentbehrliche Mittlerin fiir die Erkenntnis
biologischer Ablaufe anzusehen sei. In fessclnder Wcise and imt guter Kritik
werden die modernen Arbeiton auf dem Gebiete der Radiologic in Boziehung
gebraeht zum gesamten Leben in und auf dor Erde, und es wird anderseits nicht
verfeblt, auch auf gefahrliche Auswiichse in dieser Richtung hinzuwcisen.
So heifit es S. 47: „Zahlen die . . . von P o h 1 behandelten Erdstrahlen zu
den angsterweckenden Fiktionen, so sind es anderseits die von Georges
Lakhovsky (Paris) angegebenen Sekwingungskreise, die den Schwindel
auf flinke Beine stellen“ und Verf. ist nur beizustimmen, wenn er sagt:
„Es ist . . . verstandlich, dafi wir das Moment des Gehoimnisvollon, Mysti-
schen, Metaphysischen niemals ganzlicb aus unserem Denken ausschalten
kdnnen. Beim kunstlerisch tatigen Menschen ist es ja sogar der Urquell
seines Sebaffens; in der „exakten“ Wissenschaft aber diirfte es, mSgen In-
tuition und Phantasie gevdB auch hier befruchtend wirken, nicht zu absurd-
haltlosen Spekulationen verleiten.“ S t a p p.

Fischer, R., WatzL, 0. und Reran, F., Der Pflanzenarzt im
Schreber- und Hansgarten. Loipzig-Wien-Berlin (Steyrer-
miihl-Verlag). 223 S. 1.80 RM.

Ein fiir den Praktiker recht brauchbares Biichloin, das diesem die not-
wendigen Eenntnisse iiber Pflanzenkrankheiten und Schadlinge und ihre
wirksame Bekampfung in knapper und klarer Form vermittelt.

S t a p p.

Allgemeines und Methodisches.

EoUath, W. und Bittner, E., Eine einfache Methode, das
Schwarmen des Proteus zu verhindern. (Zentralbl.
f. Bakt. Abt. I. Grig. Bd. 132. 1934. S. 181—183.)

Behandelt man die Oberflache der gebrauchlichen Nahrboden 2 Min.
mit 96proz. Alkohol und lafit man die Flatten dann 5 — 15 Min. bei 37®
trocknen, so wird die Mehrzahl der Proteusstamme im Schvrarmen gehindert,
und andere Bakterien kdnnen bequem isoliert werden. Fiir die Tronnung
der Typhus-Ruhr-Gruppe von Proteus auf Endoplatton miiBto das Ver-
fahren weiter ausgebaut werden, da die Proteusbakterien auf Endo bekannt-
lich ebenfalls farblos wachsen. Rodenkirchen (Kdnigsberg i. Pr.).

David, H., Uber ein einfaches und sichcres Vorfahren
zur GeiJJeldarstellung. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig.
Bd, 132. 1934. S. 240-243.)

Die Methode stellt eine Kombination dor Verfahron nach Gray und
Z e 1 1 n 0 w dar. Die Praparate werden nach Gray gebeizt und hernach
nach Z e 1 1 n 0 w versilbert. Was diese Methode besonders auszeichnet,
ist der in der Regel glasklar erscheinende Dntergrund, wenn auch die Bak-
teriengeiBeln mem braun und nicht so ausgesprochen schwarz ersebeinen
wie in guten, aber bedeutend schwieriger herzustellenden „Z o 1 1 n o w -
praparaten“. Der Gang der Methodik mu6 wegen der vielen genau zu
beachtenden Einzelheiten im Original eingesehen werden.

Rodenkirchen (Kfinipberg i, Pr.).
Eonrich, F., tJber Keimgehalt und Entkeimung von
Alkohol. (Arbeiten a. d. Eeichsgesundbeitsamt. Bd. 67. 1934. S.
271—276.)

Da: Handelsalkohol ist in verschiedenem Grade, durchgehend aber

AUgemeines imd Methodisches.

413

ziemlich stark niit Keimen versetzt. Einzelne der untersuchten Proben ent-
hielten bereits in jedem Kubikzentimeter mindestens einen Keim, in 5 com
alle Proben. Es handelte sich dabei um Stabchen, moistens mit Sporen;
Kokken wurden niemals gefunden. Die Entwicklungsfakigkeit der Keime
war durchaus gut, am ersten oder zweiten Tage war meist bereits Wachstum
eingetreten. Zum Keimfreimacken stehen zwei Wege of fen: die Destination
und die keimfreie Filtration. Erstere ist zu umstandlich, ihre sterile Durch-
fiihrung nicht immer gewabrleistet. Die keimfreie Filtration dagegen ist
einfach und sebr zuverlassig. Am zweckmaBigsten baben sich, insbesondere
fiir grOBere Flussigkeitsmengen, die E. K.-Filter (Seitz) erwiesen. Die
im Beginn einmal sterilisierte Scheibe kann langere Zeit ohne neue Sterili-
sation benutzt werden. Die Sterilitat blieb z. B. erhalten bei taglicher Be-
nutzung wahrend einer Woche und nach weiteren 1 — 2 Wochen Stehenlassen
ohne Benutzung. Ein Durchwachsen der Keime durch die Filterscheibe,
wie das bei Wasser der Fall sein kdnnte, findet bei Alkohol nicht statt.

Rodenkirchen (Kdnigsberg i. Pr.).
Fembaeh, H., Ein neuer Ultrafiltrationsapparat. (Zen-
tralbl. f. Bakt. Abt. J. Orig. Bd. 132. 1934. S. 249-266.)

Eingehende Beschreibung einer Methode, aus Eollodium TJltrafilter in
Sackchenforrn von beliebiger GrSBe und Festigkeit serienweise herzustellen.
AuBerdem wird eine Apparatur angegeben, die bei Verwendung dieser Filter
die Ultrafiltration groBer Mengen, femer mehrere TJltrafiltrationen ver-
schiedcner Stoffe nebeneinander in gleicher Zeit und bei gleiehem Dmck
erlaubt. Das zur Ultrafiltration notige Vakuum kann durch jede Saugpumpe
bei Anbringung von Regulations- und Unterbrechungsvorrichtungen her-
gestellt werden. Die enteprechenden Vorrichtungen bei Benutzung einer
Olpumpe und bei gleichzeitiger Absaugung an mehreren Apparaten durch
eine Vakuumleitung werden naher beschrieben.

Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).
Bold, H. und Leusden, P., Neuartige Arbeitstische fiir bak-
teriologische Kurse. (Zentralbl. f . Bakt. Abt. L Orig. Bd.
132. 1934. S. 126— 128.)

Es handelt sich um Tische in Form regelmaBiger Vielecke mit zentraler
Beleuchtung und zentraler Wasser-, Gas und AbfluBleitung. Sie haben
sich im Gebrauch sehr bewahrt. Rodenkirchen (K6nigsberg i. Pr.).

Bodenbeok, H., Uber die thermische Sterilisation was-
serfreier Stoffe und die Resistenz einiger Bak-
terien bei Erhitzung in solchen Stoffe n. (Archiv f .
Hyg. u. Bakt. Bd. 109. 1933. S. 67-83.)

Die Sterilisation der wasserfreien Stoffe (Ol, Fett, Paraffin, Glyzerin
und Cumol) kann entweder iiber offenem Feuer bei Temperaturen von 140
— 200® wahrend 6—45 Min. erfolgen oder besser (wegen Erhaltung ihrer
urspriinglichen Beschaffenheit) bei niedrigeren Temperaturen im Autoklav.
Hierzu ist allerdings ein geringer Wasserzusatz notig. Man sterilisiert: Fett,
Ol und Paraffin mit 0,1% Wasserzusatz entweder 30 Min. bei 120® oder
10 Min. bei 130®; Glyzerin mit 12% Wassergehalt 1 Std. bei 130®, bei hSherem
Wasserzusatz kiirzere Zeit. Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).

Helly, K., VerschluBringe fur Fornetsche Kultur-
rShrchen. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 132. 1934. S. 248
—249.)

414

Allgemeines mid Methodisohes.

Die von F o r n e t angegebenen Kult\irr6hrchen mit Glaskappen-
verschluB an Stelle dcs sonst iiblichen Wattebausches haben sich Verf. aus-
gezeichnet bewalirt. 1st schon die Ersparnis an Arbeitszeit und Material
bei der Herstellung zur Gebrauchsfertigkeit cine crbebliehe, so wird diese
Ersparnis noch dadurch erboht, daB durch langere Zeit fortgeziicliteten
Baktericnstamme ein viel selteneres tJberimpfen bendtigen, weil iufolge dor
sohr geringen Verdunstung dcr Nahrbodenfeuchtigkeil die Kiilturen viel
linger lebensfahig bleiben. Kloinere Rdhrchen, etwa von der GroBe der
Wassermann rohrchen, eignen sieh schr gut zur Abfullung vorrStig
zu haltender Nabrbodenzusatze, me Blut, Serum, Gallo. Fiir Dauerkulturen
Oder Kulturen, die wie bei der Zilchtung von Tuberkelbazillen gowdhnlieli mit
Siogellack oder Paraffinbausch verschlossen worden, werden luftdichte Ver-
scblusse erzielt durch 4 — 5 cm lange Schlauche aus Paragummi von gleichem
Durchmesser wie die verwendeten Kulturrohrchen. Die Gummiringe werden
bis zum Gebrauch zwecks Keimfreihaltung in reinem Glyzerin auibewahrt
und dann iiber den unteren Glaskappenrand und iiber das Rohrchen ge-
zogen. Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).

Pels Lensden, F., Gefahren beim Hanticron mit hoch-
evakuierten GefdBen und ihre Verhiitung. (Arch,
f. Hyg. u. Bakt. Bd. 110. 1933. S. 61—63.)

W'enn hochcvakuierte grdBero GlasgefaBe, wie sie zur Ziichtung von
Anaerobiern verwendet werden, zu Boden fallen und platzen, kOnncn, wie
praktische Versuehe ergaben, Personen durch umhergeschleuderte Splitter
verletzt werden, wozu moglicherweise eine Infektion durch gefahrliches
Material kommt. Diese Gefahren kdnnen praktisch dadurch beseitigt wer-
den, daB man hochevakiiierte GefaBe nur in einem Beutel aus festem Segel-
tuch transportiert. Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).

Damm, H., t)ber eine neue Wasserprobenahmeflasche
fur die periodisehe Kontrolle des Molkerei-
gebrauchswassers. (Archiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 109. 1933.
S. 366—367.)

Aus einer groBen Anzahl von Wasseruntersuchungen, deron Entnahme
mittels des beschricbenen Apparates erfolgt war, ergab sich, daB boi sach-
gcmaBer Probenahme und Eisfiillung die Untcrschiede zwischcn der Koim-
zahlbestimmung an Ort und Stelle und derjenigen nach etwa 24 Std. im
Institut unwesentlich waren. Insbesonderc "war dies bei verhaltnismaBig
kcimarmen Probon festzustellen. Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.)

Protodiakonow, 0. P., Materialion zur Untersuchung dcr
Zitronensaureorzeugung. (Bull, of the State Inst, of Agric.
Microbiol. USSR. Vol. 6. 1933. p. 231 — 258.) [Russ. m. dcutsch. Zusfassg.]

Das mikrobiologische Verfahren zur Gewinnung von Zitronensaure
nach S. Kostytschew wurde mit halb-fabrikmaBigen Apparaturen
im Laboratorium gepruft. Ein bestimmter Typus soleher Apparaturen mit
flaehen durch RiJhren miteinander verbundenen Garkiivetten ergab sehr
gute Ausbeuten, so daB die Versuehe mit diesem Apparat in halb-fabrik-
maBige Bedingungen Ubertragen werden kSnnen.

B 0 r t e 1 s (Berlin-Dahlem).

Cohn, M. 1., The antiseptic effect upon tubercle ba-
cilli of certain recently-advocated compounds.
(Joum. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 517—526.)

AUgemeines imd Methodiflches.

415

Die iibliclien Methoden zur Feststellung der antiseptischen Wirkung
versagen bei der Priifung von Tuberkelbakterien, da dieso durch ihr langsames
Wachstum und durch ihre Anspruche an die Nahrboden sich von fast alien
anderen Bakterienarten nnterscheiden. Fiir die Priifung vnirde deshalb eine
neue Methodik ausgearbeitot, die eine cinwandfreie Bestimmung der Hem-
mungs- und TStungswerte, sowie die Bestimmung der bakteriziden Wirkung
bei Gegenwart von Blut gcstattet. Als Nahrboden fiir die Ziichtung nach
der Priifung wurden Kristallviolett-Kartoffelnahrboden verwendet. Im
Gegensatz zu friiheren Untersuehungen vrar es mit der neuen Methodik
moglich, auch mit relativ geringen Bakterienmengen einwandfreie Ergeb-
nisse zu erhalten. „Merthiolat“ und „Metaphen“ erwiesen sich auch bei
Anwesenheit von Blut als auBerordentlich -wirksam, wahrend Di-Hydranol
und Hexylresorzin sich unter diesen Bedingungen als weitgehend unwksam
zeigten, obgleich sie bei Abwesenheit von Blut sehr gute AbtStungsvirkung
besafien. Richter (Kiel^

Thiele, H., Neuartiges GefaB zur einwandfreien Ent-
nahme und BefSrderung von Wasser und anderen
FI u s sigk eit s pr 0 b e n fiir die b ak t er i ol o gis ch e Un-
to rs u c h u n g. (Archiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 112. 1934. S. 260— 262.)

Die Unplanglichkeiten der gebrauchlichen EntnahmegefSBe (gewohnliche
Flaschen mit eingeschliffenem, flachen Glasstopfen) vermeidet das im Kieler
Hygienischen Institut vervrendete Gefafi mit sog. „Kappenstopfen“. Der
Stopfen besitzt cine angeschmolzene Kappe, die ein Stiiek fiber Hals und
Stopfen der Flasche fibergreift. Damit sind die gefakrdeten Teile vor un-
beabsichtigter Berfihrung und Verunreinigung geschiltzt. Um fiir die Ent-
nahme die Flasche zu bffnen, braucht man nun nicht mehr mit spitzen
Fingern unter groBter Vorsicht den Stopfen abzunehmen, sondern kann ohne
■weiteres mit der ganzen Hand die Kappe fest umfassen und den Kappenstopfen
abnehmen. Wie Versuche zeigten, wd beim Offnen, Ffillen, SchlieBen und
Verpacken dieses GefaBes auch bei ganz sorgloser Bdhandlung durch Un-
kundige weder Stopfen noch Hals berfihrt und verunreinigt — wenn nicht
geradezu hose Absicht vorlicgt. Dagegcn war frfiher beim Offnen des GefaBes,
besondors durch Hande, die grbbere Arbeit gewShnt sind, immer die Gefahr
vorhanden, daB die Finger fiber den Stopfen hinfibergriffen und Stopfen-
teil und Hals berfihrten. Fiir kurze Zeit kann der Stopfen mit der Kappen-
seite nach unten auch aus der Hand und auf den Tisch gelegt werden. Mit
den bisher gebrauchlichen Stopfen war dies kaum moglich. Dm zu verhindern,
daB der Stopfen bei der Beforderung sich von der Flasche lost, ist am Flaschen-
hals ein Glaswulst anbringbar. Diuch leicht zu befestigende Motallklammem
odor -federn, oder auch durch tJberstreifen einer Hfilse aus Papier usw. und
Verschnfiren am Flaschenhals in der Vertiefung zwischen Wulst und Flaschen-
kfirper laBt sich der Stopfen fest auf der Flasche halten. Nicht imwichtig
ist. daB die Herstellung des Kappenstopfens nicht schwieriger ist als die der
fiblichen Flachstopfen und dementsprechend die Anschaffungskosten nicht
wesentlieh hSher. Das Remigen bereitet keinerlei Schwierigkeiten. — Fla-
schen mit Griffstopfen nach D a m ra sind in bezug auf eine mfigliche Berfih-
rung und dadurch bedingte Verunreinigung noch ungfinstiger als die ge-
wfihnlichen flachen Stopfen. Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).
Jennison, M. W., A note on the Richards-Jahn photo-
electric nephelometor. (Journ. of Bacter. Bd. 28. 1934.
p. 107—109.)

416 Allgemeines tmd Methodisches. — Morphologie, Ph 3 r&iologie usw.

Bei der Verwendung des photoelektrischen Nephelometers ist auBer den
Abweichungen, die durch die wechselnde GroBe der Teilchcn hervorgerufen
werden, zu beachten, daB die Lichtabsorption nicht bei alien Dichten einor
Bakterienaufschwemraung der Zabl der Organisnicn direkt proportional
ist. Verf. konnte bei seinen TJntersuchungen fcststellon, daB dicse einfache
Beziehung nur bei Keimzahlen bis zn 100 000 000 Keiinen im Kubikzonti-
meter Geltung hatte. Diesor Fehler laBt sich durch Anwendung eincs Kor-
rektionsfaktors ausschalten. E i c h t e r (Kiel).

Morphologie, Physiologie und Systematik der Mikroorganismen;

Virus-Untersuchungen.

Dieekmann, H., Neuere TJntersuchungen liber den Oj-
verbrauch von Mikroorganismen. (Arbciten aus dem
Keichsgesundheitsamt. Bd. 67. 1934. S. 333 — 351.)

Eine Eigenart des bakteriellen Stoffumsatzes bosteht darin, daB die
als Energiequellen festgestellten chemischen Verbindungen (Zucker, Alkohol,
organische Sauren, ihre AbbaustuTen oder ihncn sonst nahestehonde Sub-
stanzen) den bakteriellen Stoffumsatz vielfach erheblich zu steigem vermogen.
Dies ■widerspricht dem K u b n e r schen Gesetz von dor spezifisch-dyna-
mischen Wirkung der EiweiBstoffe und ihrer Abbauprodukte, der Amino-
sauren. Nach diesem Gesetz wird der nicht verwertete UberschuB an auf-
genommenen Kohlehydraten und Fetten in den Gewebszellen abgelagert,
ohne eine erhebliche Wirkung auf den Stoffwechsel auszuubcn, wahrend
stickstoffhaltigen Verbindungen eine solche Wirkung, im Sinne einer all-
gemeinen Stoffwechselsteigerung, in hohem Grade zukommt. Manns-
f e 1 d und Horn deuten zwar eine bei ihren TJntersuchungen an MSuse-
typhusbazillen beobachtete Erscheinung als mit dem Gesetz der spezifisch-
dynamischen Wirkung irgendwie in Beziehung stehend, ihre Versuche sind
jedoch nicht uberzeugend. Kodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).

Yamagntchi, S., Vber die Beeinflussung der Sauerstoff-
atmung von ver s chie d e n e n Bakteiien durch Blau-
sSure und Kohlenoxyd. BeitrSge zur Atmungs-
physiologic der Bakterien. I. (Acta Phytochim. Vol. 8.
1934. No. 1. p. 157—172.)

Verf. untorsuchte den EinfluB von Blausaure und Kohlenmonoxyd auf
die Atmung verschiedener Bakterien, um die einzelnon Cytoehromtypen
und Vorgange bei der Atmung miteinander zu vergleichen und ihre Zu-
sammenhange aufzudecken. Zu diesem Zwooke benutzte er 25 aerobe bzrw.
fakultativ anaerobe Bakterienarton. Im Warburg - Manometer "vnirden
Oa-Verbrauch, COa-Abgabe, Blausaure- und Kohlenoxydhemmung gemessen,
auBerdem Bestrahlungsversuche mit einer 100-Watt-Lampe gemaoht. Durch
ihr verschiedenes Verhalten gegen HCN und CO ermittelte Verf. 4 Gruppen:
1. Beide Stoffe waren ohne nachteiligen EinfluB auf die Atmung. Hierzu
gehSrten z. B. Micrococcus ochraceus und Sarcina lutea,
Bakterien, die auffallende Farbstoffbildung zeigten; die Atmung war sogar
gesteigert. 2. Die Atmung wurde nur durch HCN (in ^/asoo niol- L6s.) ge-
hemmt. Hierher gehorten u. a. Micrococcus agilis, Sarcina
aurantiaea, Bac. pyocyaneus und Bac. fluorescens
liquefaeiens me auch alba. 3. Beide Gase mrkten hemmend
auf die Atmung, •wobei diejenigo durch CO mittels Belichtung nicht riick-

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroopganismeji; Virus-Unters. 417

gangig gemacht werden konnte. Zu dieser Gruppe zahlten u. a. B a e t.
coli comm., Bac. myc., Bae. prot. vulg., Azotobacter
chroococc. 4. Die CO-Hemmung konnte durch Belichtung wieder
ruckgangig gemacht werden, z. B. bei S t a p h y 1 o c c,, B a c. m e s. u. a.
Yerf. schliefit ans diesen Tatsachen, dalB das Cytochrom a mit CO eine photo-
chemisch leicht zersetzbare Verbindung eingeht, z. B. bei Gruppe 4; daB
die b-Komponente sich sowohl mit HCN wie auch mit CO verbindet (Gruppe
3), wobei die CO-Verbindung photoehemisch nur schwer angreifbar ist; und
schlieBlich, daB die C-Komponente sich wohl mit HCN, aber nicht mit CO
verbindet (Gruppe 2). Skallau (Berlin),

Mohr, TV., Untersuchungen iiber antagonistische Vor-
gange zwischen Yarianten desselben Stammes.
(Ztsehr. f. Hyg. u. Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 289 — 294.)

Es wurde bei einer Reihe von Bakterien untersucht, ob sich antago-
nistisehe Yorgange zwischen Yarianten abspielen, die von demselben Stamm
ausgehen. Keine gegenseitige Beeinflussung zei^en die rot waohsende tmd
die farblos waohsende Yariante eines Prodigiosus-Stammes. Bei einem
Typhusstamm erwies sich die unbegeiBelte Form der begeiBelten uberlegen.
Besondere Aufmerksamkeit wurde Yersuchen mit Glatt- und Rauhformen
geschenkt, da es von Wiehtigkeit ist, ob die Konkurrenzfahigkeit der Keime
im Nahrboden in Beziehung steht zur Wuchsform. Im allgemeinen zeigte
sich, daB die Glattformen die antagonistisch wirksameren sind. Eine be-
sonders bemerkenswerte Abweichung stellt die Rauhfonn eines Stammes
aus der Paratyphusgruppe dar, die sowohl den homologen wie auch den
heterologen Glattformen deutlich uberlegen war. Es kann demnach, wie
bereits N e u f e 1 d und Kuhn betont haben, Yirulenz und antago-
nistische Wirksamkeit nicht gleieh gesetzt werden.

Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).
lohmann, B., Manometrische Untersuchungen fiber
Stoffwechsel und Waehstum von Bakterien unter
dem EinfluB von ultraviolettem Licht und unter
den Bedingungen der Entziindung. (Klin. Wochenschr.
Jahrg. 13. 1934. S. 1112—1116.)

Stoffwechsel und Waehstum von Bakterien werden durch die Einwir-
kung kSrperfremder und korpereigener Faktoren weitgehend verandert, und
unter bestimmten Bedingungen horen die Bakterien sogar vollstandig auf
zu atmen und zu spalten. Aber nicht alle Keime, die eine bestimmte Zeitlang
keinen Stoffwechsel gehabt haben, sind auch im biologischen Sinne end-
giiltig abgestorben; sie kSnnen im Zustand einer vita minima, sozusagen
in einem Scheintod uberdauem. Sogar ans einem so abgekapselten Milieu
wie dem verkalkter tuberkulSser Driisen gelingt es, virulente Tuberkel-
bazillen zu kultivieren. Wie ein soleher Scheintod eines Bakteriums bei
volliger Abwesenheit jeder energieliefemden Reaktion mSglich ist, ist noch
ratselhaft. — Ultraviolette Strahlen haben gegeniiber Bakterienwachstum
und -stoffwechsel verschiedenartige Wirkung. Die energieliefemden Re-
aktionen bleiben bei einer bestimmten Strahlungsintensitat unbeeinfluBt,
wahrend das Waehstum aufhSrt. Der Stoff, der das Waehstum der Zelle be-
dingt, ist also nicht identisch mit den Stoffen, die Atmung und Garung be-
wkken, sondern ist erne Substanz, die ultraviolettes Licht anders absorbiert
als das Atmungs- und Gamigsferment. So ist es mSglich, intra vitam diesen

ZweiteAbt. Bd.91. 27

418 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-XJnters.

Wachstumsstoff von den beiden Stottwechselferinenten zu isolieren. Da
die Bakterienzelle den Wachstumsstoff immer vdeder von neuem aufbaut,
so b^innt das Wachstunx stets wieder nach kiirzerer Oder langerer Zeit, je
nach der Dauer der Strableneinwirkung.

Rodenkirchen (KSnigsbcrg i. Pr.).
Hoffstadt, R. B., and Yonmans, G. P., The genetic significance
of the dissociants of Staphylococcus aureus. (Joum.
of Bact. VoL 27. 1934. p. 561—660.)

Zu den Versuchen ■wurden 2 Stamme von St. a 1 b u s und 4 StSmine
von St. aureus verwendet. SSmtliehe Stamme "wurdcn vor Versuchs-
beginn sorgfaltig auf ihre Reinheit gepriift. Als NShrboden wurde LiCl-
NShrboden und gewShnliche Bouillon von einem pn = 7,8 benutzt. Die
tlberimpfung fand tdglich statt. ebenso "wurde taglich durch Agar-Ausstriche
auf das Auftreten von Dissoziationsformen gepriift. Bei der Prlifung zeigte
eine der St. alb u s- Kulturen Abspaltung von G-Fonnen, ebenso gelang
es, bei samtlichen St. aureus - Stammen Aufspaltung zu erzielen. Die
Spaltungsfonnen unterschieden sieh durch ihr Farbstoffbildungs- und ihr
GarvermSgen von den Ausgangsformen und stellten stabilisierte Endfonnen
dar. Mit der Zunahme des GarvennSgens ging eine Abnahme der Virulenz
parallel. Richter (Kiel).

5aidu, P. M. li., Zur Hamolyse der Staphylokokken in
Schafblutagarplatten. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig.
Bd. 132. 1934. S. 47—56.)

Pathogene Staphylokokken lessen sich naeh ihrem Wachstum auf
6proz. Schafblutagarplatten in 6 verschiedene T^en einteilen. Von Be-
deutung ist, daB Stamme gleicher Herkunft hinsichtlich ihres Verhaltens
auf der gewahlten Blutplatte weitgehende tlbereinstimniung zeigten. Es
besteht also die Mdglichkeit, mit I^e der Blutplatte eine Unterscheidung
der verschiedenen Staphylokokken nach ihrer Herkunft durchzufiihren,
was morphologisch und kiilturell bekanntlich nicht gelingt.

Rodenkirchen (KSnigsberg i, Pr.).
Edwards, P. E., and Broh-Eahn, B., A note on the hydrolysis
of sodium hipp urate by the hemolytic strepto-
cocci. (Joum. of. Bact. Vol. 27. 1934. 535—638.)

Die Frage, ob hdmolytischo Streptokokken durch ihr SpaltungsvermOgen
gegeniiber hippursaurem Natrium in StSmme mcnschlichen und tierischen
Ursprungs getrennt werden kdnnen, war auf Grund der bisherigen Unter-
suehungen nicht mit Sicherheit zu entscheiden. Verff. unterzogen eine Reihe
von StUmmen menschlichen und tierischen Ursprungs der Prmng auf Ver-
garungsvermSgen unter Verwendung der von Klimmor und Haupt
ang^ebenen Methodik. Es zeigte sich hierbei, daB auf Grund des Yer-
garungsvermSgens eine Trennung beidm- Gruppen nicht mfiglich ist, da in
beiden Gruppen sieh Stamme nsit und ohne VergarungsvermSgen gegen
hippursaures Natrium finden. Von Klimmer zur Verfiigung gesteUte
Stamme besaflen VergarungsvermSgen, gehSrten aber nicht in die Gruppe
der schwach sduemden Streptokokken. Richter (Kiel).

GroBmann, H., Zur Frage der experimentollen Ab-
wandlung („Degradation“) von AngehSrigen der
Streptokokkengruppe. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig. Bd.
1932. 1934. S. 40—47.)

Morphologies Physiologie u. Systematik d. Mikrooiganismen; Virus-TJnters. 419

Die Dauerzuchtung von 3 Pneumokokkenstammcn, einer fraglichen
Pneumokokkenvaiiante und 3 Stammen von Streptococcus viri-
dans auf fliisslgen l^ahrboden verschiedener Zusanunensetzung liber
6^13 Monate ergab friiber oder spater das Auftreten atypischer Keime,
die gegenuber dem Ausgangsstanun Veranderui^en in kulturellcr, bio-
ebemischer, morphologischer und pathogenetiscber Beziehung aufwiesen.
Diesc Eeime werden als sapropbytare Varianten des Ausgangsstammes
gedeutet, es kommen ihnen Eigenschaften zu, me sie bei Enterokokken
bekannt sind. Danach ist es nicht unmOglich, da3 ein Teil der „natiirlichen“
Enterokokken seine Entstebung solcben Vorgangen verdankt. Zur Ver-
meidung dieser Abwandlung erwies sicb besonders geeignet die Symbiose
mit Bact. alcaligenes in Bouillon mit einem Gebalt von 5% Pepton,
wobei die bauptsacblichsten biologiscben Eigenschaften uber langere Zeit
erhalten blieben. Bodenkircben (Konigsberg i. Pr.).

Lange, B., AbtStungsfestigkeit und Entwicklungs-
festigkeit. . Experimentelle Untersuchungen an
in vitro gegen Optocbin gefestigten Pneumo-
k 0 k k e n. (Ztsebr. f. Hyg. u. Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 225
—240.)

Die Divergenz der abtStenden und entwicklungsbenunenden Wirkung
der verschiedenen Desinfektionsmittel (es gibt Mittel, die in verhaitnismaSig
kurzer Zeit in bestimmten Konzentrationen Mikroorganismen abtoten, in
schwacberen Konzentrationen aber die Vermebrungsfabigkeit auch bei
langer Einwkung nicbt aufzuheben vermOgen, wabrend im Gegensatz
hierzu andere Mittel noch in sdir starken Verdiinnungen entwicklungs-
bemmend wirken, aber in starkeren Konzentrationen nur mangelhaft eine
Abt5tung herbeifiibren) hat zu der Auffassung gefiibrt, dab EntwicMui^-
hemmung und AbtStung Vorgange der Bakterienschadigung sind, die sidi
nicbt nur quantitativ, sondem aucb qualitativ voneinander unterscbeiden.
Experimentell scbien diese Annahme, wenigstens in quantitativer Hin-
sicbt eine Bestatigung gefunden zu baben durcb Kappus, derzu dem
Ergebnis kam, dail Colistamme, deren Entwicklungsfestigkeit gegen Malacbit-
grlin ktinstlich stark erbsbt war, sicb diesem Mittel gegenbber im AbtStungs-
versucb wie die Ausgangsstamme verbielten. Wie aber Verf. an Pneumo-
kokken zeigen konnte, &e gegen Optocbin gefestigt wnrden, bestebt docb
ein allerdings nur unter ganz bestimmten Yersuchsbedingungen deutlicb
werdender Parallolismus zwischen Entwicklungsfestigkeit und AbtStungs-
festigkeit. Noch ungelSst bleibt die Frage iiber Gleichartigkeit oder TJngloieb-
artigkeit der der Entwicklungshemmung und der AbtStnng zugrunde liegen-
den cbencdsch-physikalischen Vorgange.

Bodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).
Tatum, E. L., Peterson, W. H., and Fred, £. B., An unknown factor
stimulating the formation of butyl alcohol by
certain butyric acid bacteria. (Joum. of Bacter. Vol. 27.
1934. p. 207—217.)

Das Vorbandensein von Wachstumsfaktoren in den verscbiedensten
organiscben Materialien flir Bakterien und Hefen ist bekannt, die Art und
Verbreitung der einzelnen Faktoren ist d^egen bisber nur wenig untersucbt
worden. Durcb friihere Untersuchungen ist z. B. bekaimt, daS Buttersdure-
bakterien auf Kartoffelbrei besser wachsen und mehr Garungsprodukte bil-

27*

420 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen; Virus-Unters.

den als aul RoggennShrbSden. Verff. stellten sich die Aufgabe, zu unter-
sucben, auf welchen Faktor dioser Unterschied zuriickzufuhren ist und in
weleben Naturprodukten dieser Faktor sick findot. Zu den Untersuehungen
wurden 8 Stamme von Buttersaurebaktorien vcrwendet. Orientierende Ver-
suche ergaben, daJ3 die begiinstigendc Wirkung des Kartoffelbreics sich nur
auf die Bildung von Butylalkohol erstreckto, und da6 sie nicht bei alien
Stammen in gleichem MaBe vorhanden war. Der unbekannte Faktor findet
sich im eiweifi- und kohlehydratfreien Saft und ist hitzcresistent. AuBer in
Eji<rtoffeln konnte or in Yams, Orangen, Salat, Kohl, Luzerne, Sojabohnen,
Weizen und Malzkeimen in verschiedener Menge nachgewiesen werden.
Durch den Faktor wird die Ausnutzung der Starke begiinstigt und die Aus-
beute an Butylalkohol z. T. auf das Zehnfache gesteigort.

Richter (Kiel).

Flynn, C. S., and Rettger, L. F., Variation and filterability
Studies on Bac. mesentericus and vulgatus. (Journ.
of Bact. Vol. 28. 1934. p. 1.)

Die Untersuehungen wurden mit 9 Stammen verschiedener Herkunft
durchgefuhit. Es gelang, durch Auswahl verschiedener Kolonietypen und
standige Fortzuchtung derselben in 24 stiind. Intervallen bei alien Stammen
4 Typen zu gewinnen, die als S-, rS-, sR- und R-Formen zu bezeichnen sind.
Als normals Kolonietype muB die rS-Typo angesehen werden. Die Ersehei-
nungsformen der Kolonietypen werden kurz angegoben. Samtliche 4 Typen
erwiesen sich zwar als ausreichend stabil, doch wurdc ihre Stabilitat weit-
gehend von der Art des Nahrbodens beeinfluBt. Am stabilsten waren die
rS und die sR-Typen. Durch Ziichtung auf Nahrbbden mit 0,6 proz. LiCl-
Zusatz konnten die Hadley schen „(j-Kolonien“ erhalten werden, doch
verliefen Versuche, hieraus filtrierbare Formen zu gewinnen, negativ. Das
gleiche negative Ergebnis batten Versuche, filtrierbare Formen unter dem
EinfluB von Phagen zu erhalten. Verff. vertreten den Standpunkt, daB
filtrierbare Formen bei den Stammen nicht vorkommen, und daB in vielen
Fallen eine mangelhafte Versuchstechnik das Vorkommen filtrierbarer
Formen vorgetauscht hat. Richter (Kiel).

Bizzi, J., Untersuehungen iiber die antagonistische
Wirkung von Colibazillen verschiedener Her-
kunft. (Ztschr. f. Immunitatsforsch. u. oxper. Therapie. Bd. 82. 1934.
S. 380—385.)

Hochwertige Stamme vorausgosetzt, vermSgen Colibazillen in vitro
die vieUache Mzahl an Milzbrandbazillen zu vemichten. Typhusbazillen
erwiesen sich etwas weniger empfindlich als Milzbrandbazillen. Der Anta-
gonismus macht sich von dem Zeitpunkt an geltend, zu dem die eingeimpften
Colibazillen sich zu vermehren beginnen. Naeh der Herkunft am starksten
antagonistisch zeigten sich Colibazillen von gesunden erwachsenen Personen,
erheblich schwachor wirkten Coli, die von Sauglingen oder Kranken stammten.

Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).
Sehmidt-Eehl, L., Uber Filtrierbarkeit und GrSBe des
Bacterium coli. (Arch. f. Hyg. u. Bakt. Bd. 111. 1934. S. 307
—316.)

Es ^bt vermehrungsfahige Colikeime, die an der Grenze der Sichtbar-
keit und nach Berechnungen wohl aucb noch danmter liegen. Solche sehr
kleine Colikeime finden sich auch in Kulturen, die von einer groBen

Morphologic, Physiologie u. S^tematik d. Mikroorgamsmen; 'Vinis-Unters. 421

Zelle abstammen, wie auch umgekehrt tou e i n e r kleinen Zelle ausgebende
Zuebten sehr groBe Formen entbalten. Zur Aureichening der klemen Fonnen
hat sieh die -wiederholte Ausschleuderung bewahrt. Geht man von sehr
dichten Aufsehwemmungen aus, so erhalt man schon durch zvei Ausschleu-
derungen eine Suspension, die in der ganz iiberwiegenden Zahl da: Ver-
suche durch Berkefeld filter von 2,7 — 4,5 ii Porenweite geht (bei einem
etwa 5 Min. wahrenden Quecksilberdruck von 200 mm). Die filtrablen
Formen zeigen nicht die geringsten biologischen Abweichungen von ge-
wbhnliehem Goli. Ein keimdichtes Filter fiir Keime von der GrbBenordnui^
des B a c t. c o 1 i muB also eine Porenweite unter 2 (i haben, um sicher
keimdicht zu sein. Bei der Bestimmung der Porenweite muB die Kittstelle
des Filters mit gejjriift werden. Es zeigte sich hier ■wiederholt eine erheblich
groBere Durchlassigkeit. Rodenkirchen (Kbnigsberg i. Pr.).

Denecke, Experimentelle Versuche ttber versehiedene
Giftigkeit von normalen und anormalen Coli-
stammen nach der Methode Catel und Pallaske.
(Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig. Bd. 132. 1934. S. 163—166.)

Es konnten im Gegensatz zu anderen Verff. keine deutlichen graduellen
Untersehiede in der Wirkung verschiedenartiger Colistamme auf den Darm
lebender Meerschveinchen festgestellt werden. Vor allem war mit dieser
Methode keine besonders starke Pathogenitat der Dyspepsiecoli naehweis-
bar. Der unphysiologische Znstand, in den das Tier versetzt wird, das Trauma
der Operation sehadigen das Tier mehr und fiihren zu grbBeren nekrobio-
tischen, in ihrer Art unkontrollierbaren Veranderungen, als die durch die
injizierten Colikeime verursachten, so daB feinere Untersehiede verschieden-
artiger Pathogenitat, falls vorhanden, bei der angewandten kurzen Ein-
wirbingszeit nicht zur Geltung kommen.

Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).
Castro, U. T., Dber das Vorkommen von Gelbkeimen
des sogenannten Bact. typhi flavum in der Um-
welt. (Dtsch. med. Wochenschr. Jahrg. 60. 1934. S. 1014— 1016.)

Gelbkeime, nach Art des sog. „B a c t. typhi f 1 a v u m“, konnten
auf einer grSBeren Zahl (bei 29 von 60 Proben) pflanzlicher Nahrungsmittel
(Salat, Fruehte, Gemiise) nachgewiesen werden. Auch auf Slattern von
Baumen, Strauchorn und Blumen, sowie auf Pflanzenbluten, die vorhCT
nicht vom Menschen beruhrt worden waren, sind Gelbkeime recht haufig
(von 29 Proben 10 positiv). Mit RegelmlBigkeit (bei samtliehen untersuehten
38 Proben) lieBen sich typische Gelbkeime im Heu naehwcisen, und zwar
in groBer Menge. Dieses reichliche Vorkommen von saprophytischen Gelb-
keimen in der Natur und die vielseitigen AufnahmemSglichkeiten durch
den Menschen machen eine besonders kntisebe Beurteilung des Gelbkeim-
vorkommens beim Menschen notwendig. Eine Umwandlung in eehte Typhus-
bakterien trat wahrend der Untersuchung von 76 frisch isolierten Gelb-
stammen in keinem Falle ein. Rodenkirchen (K5nigsberg i. Pr.).

Castro, TJ. T., tJber das Verhalten von Gelbkeimen vom
Typus des sogenannten Bacterium typhi flavum.
(Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 132. 1934. S. 1—4.)

Die ausgesprochene Empfindlichkeit der Gelbkeimstamme, von denen
103 gepriift wurden, gegeniiber Galle ist ein vrichtiges und anscheinend

422 Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Mikroorganismen ; Virus-XJntors.

konstantes Merkmal dieser Saprophyten. Sie unterscheiden sich auoh Merin
grundlegend von echten Typnusbaktericn.

Rodenkirckon (Kdnigsberg i. Pr.).
Castro, U. T., Variantenabspaltung von Gelbkeim-
bakterien in Bindergalle. Golb - und blaBwachsonde
Gelbkeimvarianton ohne S chi oim bil du ng s v or m 6 -
gen. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. 1. Grig, Bd. 132. 1934. S. 4— 8.)

Bei versehiedenen Gelbkeimstammen tralen untcr dem Einflufi von
Galle Varianten anf. In Abimpfungen aus gelbkeimboimpfter Bindergalle
auf Glyzerinagar mit 5% Glyzeiin) -wuchsen nobeneinander: groBe gelbe
und blasse, seb: iippige schleitnige Kolonien, kleine gelbo und blasse n i c h t -
schleimige Kolonien. Letztere blieben auch in -weiteren 30 Glyzerin-
agarpassagen schleimlos. Mit dem Vorkommen soleher, anf Glyzerinagar
schleimlos wachsender gelber oder blasser Varianten der Gelbkeime ist anch
i n der Natur zu rechnen, namentlich wohl nach Passagen durch Menseh
Oder Tier. Das „FlieBphanomen“ nach Sonnenschein (enorme
Schloimbildung auf Glyzerinagar durch Gelbkeime) ist also kein absolutes
TJnterscheidungsmerkmal zwischen Gelbkeimen und Typhusstammen (letz-
tere niehtschleimige Kolonien bildend). Im iibrigen aber ist das Schleitn-
bildungsvermSgen der Gelbkeime auf Glyzerinagar nicht etwa cine chemisch-
physikalische Bedingtheit durch den Glyzeringehalt dcs NShrbodens, sondem
erne biologische Funktion des Bakteriums, die durch Variation geSndert
Oder verloren werden kann. Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).

Babe, P., Weitero TJntersuchungen iiber das Vorkom-
men der Dold-Granula in Diphtherie- und Pseudo-
diphtheriebazillen. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Grig. Bd. 132.
1934. S. 167—176.)

Nach Untersuchungen an 68 Diphtherie- und 63 Pseudodiphteriestammen
scheinen die von D o 1 d beschriebenen Granula (grune Kfimchen in gelb-
gefarbten Stabchen bei Anwendung der sog. D o 1 d - Farbung) nur (odor
ganz vorwiegend) bei Diphtheriebazillen nnd atypischen Pseudodiphtherie-
bazillen (tTbergangsstammen?) vorzukommen, nicht aber (oder nur selten)
bei don echten, d. h. in alien Merkmalen tj^pischen Pseudodiphleriebazillen-
stammen. Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).

Allison, E. F., and Hoover, S. R., An accessory Factor for Le-
gume Nodule Bacteria. Sources and Activity. (Journ.
of Bact. Vol. 27. 1934. p. 561—581.)

Boreits in fruheren Arboiten konnte von Allison u. M. nachge-
wiesen werden, daB fiir die Entwicklung von Knollchenbakterion in mine-
ralischen NahrlSsungen oin zur Gruppe der Co-Enzyme gehSri^cr Faktor
notwendig ist. Durch die vorliogende Arbeit konnte dor Beweis erbracht
werden, daB dieser Faktor in relativ hohor Konzentration auBer in JEefe
noch in Zuckerrohrmelasse, Humussauren und Eier-Albumin vorkommt. In
geringer Mei^e findet er sich in Handels-Raffinade. Er laBt sich in An-
reicherung durch alkoholische Extraktion aus Zucker und getrockneter Me-
lasse gewinnen. Zusatz einer sehr geringen Menge einos derartigen Konzen-
trates ermSglicht den KnSUchenbakterien gutes Wachstum in rein mine-
ralischen NahrbSden. Richter (Eel).

Bernstein, A., and Morton, H. E., A new thermophilic Actino-
myces. (Journ. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 625—628.)

Morphologie, Physiologie u. Systematik d. Milsroorgamsmeii; Virus-Unters. 423

Im Laufe von bakteriologischen Untersuchungen an Schmelzkase wurde
von Bernstein haufiger ein thermophiler Aktinomycet beobachtet, der
durch seine bohe Hitzeresistenz bemerkenswert schien. Nach den in der
vorliegenden Arbeit durchgefiihrten Untersuchungen ist der Organismus mit
keinor der bekannten Arten aus der Gattung Actinomyces identisch, er wd
daher als A c t. c a s e i nov. spec, bezeichnet. Aiisgezeichnet ist er besonders
durch fehlende Mtratreduktion some durch sein Gelatine-Verflussigungsver-
mogen. Starke wird nicht hydrolisiert. Grenztemperaturen fiir das Wachs-
tum sind 40 — 60® C. Richter (Kiel).

Aref, H., and Cruess, W. V., An Investigation on the ther-
mal death point of Saccharomyces ellipsoideus.

(Journ. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 443—462.)

Die Versuche wurden mit einem Stamm von Saccharomyces
ellipsoideus von Weintrauben durchgefiihrt, teilweise in Trauben-
most, teilweise in Phosphatpufferldsung. Es ergab sich, daB die Resistenz
im pH-Gebiet 3,8 — 4,0 am grSBten ist, doch sind die Unterschiede gegen-
iiber anderen Reaktionsbereichen nur verhaltnismaBig gering. Durch Nj und
COg wird bei einem Druck von 5 bis 25 engl. Pfund pro Quadratzoll eine
dcutliche Resistenzverminderung bewirkt, die bei Ng etwas ausgepragter
war als bei COg. Als ausreichende Pasteurisierungstemperatur wird von
den Verff. eine Temperatur von 54,5 — 55® C angegeben, falls es sich urn
die Pasteurisierung von Eruchtsaften handelt. Richter (Kiel).

Fabian, F. W., and MeCdDough, N. B., Dissociation in Yeasts.

(Journ. of Bact. Vol. 27. 1934. p. 583—623.)

Die Untersuchungen wurden an folgenden Hefearten durchgefiihrt:
Saccharomyces cerevisiae, Rasse Erohberg und Rasse Saaz,
Saccharomyces ellipsoideus, Willia anomala und Zy-
gosaccharomyees mandshurieus. Als Ausgangskulturen dien-
ten Einzell-Kulturen, die von der S-Eorm angelegt waren. Eiir die Spal-
tungsversuche wurden die Kulturen in LiCl-Nahrboden, Brillanlgriln-Nahr-
boden und in Nahrldsungen mit orhohtem Alkobolgehalt weitergezilchtet
bzw. gealtert, daneben kamen verschiedene Temperaturen als Ziichtungs-
temperaturen zur Anwendung. Bei alien Stammen gelang es Verff., Spal-
tung in drei verschiedene morphologischen Typen zu erreichen, die ent-
sprechend den fiir Bakterion iiblichen Bezeichnungen als S-, R- und G-Eormon
bezeichnet werden; bei einzelnen Stammen konnte neben diesen Eormen
noch eine sog. T-Eorm beobachtet werden. Die erzielten Spaltformen konn-
ten durch langere Eortziichtung unter giinstigen Bedingungen wieder in die
Ausgangsform zuriickverwandelt werden. Als S-Eorm wird von Verff. die
normale, glanzende, glattrandige Eorm bezeichnet, die R-Eorm unterscheidet
sich von ihr durch stumpfe Kolonien, deren Rand bei schwacher VergroBe-
rung nicht gesehlossen ist, sondern an Schimmelmyzel erinnert. Die Zellen
der R-Eorm sind im allgemeinen langlieher. Die G-Form ist bakterienahnlich,
ihre GrSBe betragt nur etwa 1—2 [x, sie wachst zuerst schlecht auf den iib-
lichen Nahrbdden, bildet aber nach GewOhnung stumpfe, ausgebreitete,
dttnne Kolonien, die die Kolonien der beiden anderen Eormen hEufig in
Hirer ElEchenausdehnung iibertreffen. Physiologisch unterscheidet sich die
G-Form von den beiden physiologisch gleichen R- und S-Formen dadurch,
daB bei ihr an SteUe der nonnalen alkoholischen GErung eine Sauregarunf

424 Morphologie, Physiologic u. Systematik d. MikTOorganismen; Virus-XJnters.

getreten ist. Die T-Form bildete vereinzelt die Ausgangsform liir die G-Form,
ilu-e Zellen sind durch besonders starke Lichtbrechung ausgezeielmet, eine
Kultur dieser Formeii gelang nicht, vielmehr gingen sie sofort in die G-Form
iiber. Verlf. glauben, daB manche Betriebsatorungen in GSiungsbetrieben,
die bisher anf Infektionen zuruckgefiibrt wordcn, auf eine Aufspaltung in
G-Formen zuruckzufiihren sind. Richter (Kiel).

Yamagata, S., Uber die elomentare Zusammensctzung
des SchimmelpilzkSrpers. (Acta Phytochimica. Vol. 8 . 1934.
No. 1. p. 107—116.)

Fiir die spSteren Untersuchungen des Energieumsatzes analysierte Verf.
eine Reihe von Schimmelpilzen: Aspergillus oryzae, Asp. ni-
ger und Asp. melleus. Diese wurden auf verschiedenen Stickstoff-
und KohlenstoffnSihrlSsungen als Pilzdecken gezuchtet. AIs C-Quclle hat
Verf. Glukose, Mannit, Glyzerin, Athylalkohol, Zuekersaure und Saccharose
verwandt, als N-Quelle benutzte er NH^Cl, KNO 3 , KNO 2 , NH 4 NO 3 . Die
Ergebnisse wurden nach den ublichen Methoden gcwonnen (Pregl, Du-
mas). Auf Grund seiner Versuche schlieBt Verf., daB die verschiedenen
C- und N-Verbindungen auf den Gesamtkohlenstoffgchalt des Pilzkorpers
keinen EinfluB haben, dagegen wohl den N-Gehalt stark verandern, je nach
Art und Menge in der Kulturlosung. Bei grofier N-Gabe und geringer
C-Konzentration (Athylalkohol) ist auch der N-Gehalt im PilzkSrper hoch.
Im Gegensatz zu Terroine, Wurmser und Montana land Verf.,
daB ein Ersatz von Ammonsulfat durch Nitrat ein Sinken des N-Gehaltes
im Pilz hervorruft, unabhangig von der gleichzeitig anwesenden C-Quelle.
Ferner sollen sich besonders bzgl. des N-Gehaltes Schwankungen in der
Zusammensetzung des PilzkSrpers zeigen, je nach der untersuehten Art.
Verf. hat dann noch gefunden, daB der H-Gehalt bei den Sporen kleiner als
bei den Myzelien ist, und der Mineralstoffgehalt weitgohend von den Wachs-
tumsbedingungen abhangt. Skallau (Berlin).

Yamagata, S., tJber den EinfluB der Stickstoffquelle
auf den Gaswechsel des Schimmelpilzcs. Beit rage
zur Physiologie der Nitratassimilation. I. (Acta
Phytochim. Vol. 8 . 1934. No. 1. p. 117—156.)

Verf. machte sich zur Aufgabe, dreierlei zu untersuchen: 1 . Ob die Thcorie
von Tamiya allgemein giiltig ist, 2 . ob die N-Quellc den Gaswechsel
der Pilzkultur beeinfluBt, 3. den Wirkungsgrad dor Oa-Atmungsenergio bei
Zugabe von Nitrat mit dem bei Zugabe von Ammoniumsalz zu vergleichen.
Er nimmt die Theorie des respiratorischen Atmungsquotienten von Tamiya
— biologische Oxydoreduktion — zum Ausgangspunkt seiner Arbeit. Nach
ihr ist dOT (RQ)-Wert cine Funktion der Atmungs- und WachstumsgrSBe.
Verf. schlieBt daraus, daB das Verhaltnis WaohstumsgroBe zu AtmungsgrSBe
an bedingender Faktor fiir die GrSBe des Atmungsquotienten ist. F^ die
Versuche wurden Deckenkulturen von Aspergillus oryzae ver-
wandt. In Atmungszylindern nach Tamiya, die verschieden zusammen-
gesetzte NahrlSsungen enthielten, wurden die Pilzdecken, die vor dem Ver-
such 12 Std. auf PufferlSsungen mit pn = 6,6 hungern muBten, in ein Stick-
stoff-Sauerstoff-Gemisch 1 : 4 gebracht und 24 Std. darin belassen. Als
N-Quelle benutzte Verf. die LSsungen von NH 4 CI, KNOs und KN 02 ; als
G-Quelle Glukonshure, St&rke, Saccharose, Mannose, Glukose, Galaktose,

Morphologic, Physiologic, Systematik usw. — Mikrobiologie der Nahrungsmittel. 426

Arabinose, Dioxyazeton, Mannit, Sorbit, Adonit, Erythrit, Glyzerin, AzelaJta-
saure, Sebacinsaure und Athylalkohol. Auf Grand seiner Versuehsdaten
hat Verf. die TJntersuchnngen von Warburg und Negelein, ferner
von K u h 1 a n d und Ulrich bestatigt gefunden, namlieh dafi der (RQ)-
Wert der Mtratkultur erheblich hoher liegt als derjenige der Anunonkultur,
die Werte fiir die Mtritkultur liegen zwischen beiden. Im Gegensatz zu
T a m i y a stellte er eine Mtratreduktion bei der Zugabe von Zuckeralkoholen,
Glyzerin usw. fest, wenn NH 4 NO 3 als N-Quelle gegeben wurde. Im ubrigen
findet er die Theorie von Tamiya bestatigt: Der Atmungsquotient ist
groBer als der Verbrennungsquotient der angewandten C-Quelle, falls dieser
wiederum groBer ist als der (CQ)-Wert des PilzkSrpers. Bei N-freien Kulturen
hat der respiratoiische Quotient dieselbe GrfiBe wie der (EQ)-NH 4 -Wert,
unabhangig von ^er C-Quelle. Verf. berechnete den (RQ)-Wert der 3 ver-
schiedcn geziichteten Aspergilluskulturen: Ammonium-, Nitrat- und Mtrit-
kultur als Funktion des trophischen Og-bzw. COg-Koeffizienten unter Zuhilfe-
nahme der Bruttoformel des Pilzk 6 rpers, seines Verbrennungsquotienten und
des „Molekulargewiehtes“. Beim Vergleich der voraus berechneten theore-
tischen Werte von (RQ) mit den experimentell ermittelten kam er zur Fest-
stellung, daB beide Zahlenreihen gut ubereinstimmen. Abweichungen, die
bei Verwendung von Saccharose und llannose als C-Quelle entstehen, werden
durch Eintreten einer aeroben Garung erklart. Bei der Mtratkultur wird
die Berechnung durch das Auftreten der Extrakohlensaure der Oxydoreduk-
tion kompliziert. Durch die bilanzmaBige Betrachtung dieses Systems je-
doch war es Verf. mfiglich, die Extra-COg auch in den wachsenden Zellen
quantitativ zu bestimmen und dadurch die (EQ-)Werte theoretisch voraus
zu berechnen. Zum SchluB untersuchte Verf. das Verhaltnis: Waehstums-
grSBe zu Og-AtmungsgrSBe (Aufbauquotient Tamiyas). Er kommt auf
Grund seiner Ergebnisse zu der Tatsache, daB die (AQ)-Werte (Aufbau-
quotient) der Mtratkultur ebenso groB oder kleiner sind als die der Ammo-
niumkultur. Der bei der gekoppelten Oxydoreduktion entstehende Nutz-
effekt von 30% geht als Warme verloren, die wachsenden Zellen der Mtrat-
kultur miissen zusatzliche Arbeit leisten. S k a 1 1 a u (Berlin).

Mikrobiologie der Nahrungs-, GenuB- und Futtermittei.

Gutsehmid, H., Uber die bakteriologischen und ther-
mischen Grundlagen fiir die Herstellung von
Fleischkonserven bei verschiedenen Tempera-
ture n. (Arbeiten aus dem Reichsgesimdheitsamt. Bd. 67. 1934. S. 213
—232.)

Die Tetungskraft des Dampfes gegeniiber Sporen nimmt mit steigendor
Dampfwarme erheblich zu, gleichgiilt^, ob die Sporen geschiitzt (EiweiB-
oder Fetthiille) oder ungeschiitzt sind. Das Optimum liegt bei 134® (= 2 Atii.),
bei welcher Temperatur das geschiitzte Testmaterial bereits in 5 Min. zu-
grunde geht. H 6 here Dampftemperaturen bringen praktisch keinen Ge-
winn. AuBer giinstigerer AbtStungszeit ergibt die Verwendung hSherer
Temperaturen raschere Durchwarmungszeit: der Doseninhalt (400 ecm,
H 6 he der Doson 74 mm, Durchmesser 85 mm) erreichte bei 120® in seiner
Gesamtheit diese Temperatur in 70 Min., dagegen bei 134® in 60 Min. (1%
bis 2 Std. vorgokochtes Fleisch mit Briihe erzielte die Sterilisierungstempe-
ratur 10—15 Min. friiher als roh eingebiichstes. Der Zusatz von Briihe
schafftwesentlichbessereBedingungen fiir dieWarmeleitung im Doseninhalt.)

426

Mikrobiologie der Nahrungs-, GenuB- und Futtermittel.

Die Betriebszeit, die sich aus Abtbtungszeit und Durchwarmungszeit ergibt,
stellt sich info^e da" doppelten Zeitersparais bei 134® nur auf 65 Min., gegen-
aber 90 Min. bei 120®. AuBerdem verlauft der Temperaturgang in den
Biichsen bei 134® gleiehmafiiger als bei 120®, mithin geringere ,,'Warme-
streuung” und erhShte storilisatorisehe Sicherheit. Von nicht zu vernach-
iSssigender Bedeutung ist sehlieBlich, daB sich die bei 134® sterilisierten
Fleisehtonserven geschmacklich den bei niedrigerer Terapcratur hergestellten
uberlegen erwiesen. Yon 53 Vcrsuchspersonen entsehicd sich die Mehrzahl
fur die bei 134® sfceriKsierten Konserven. Ob sich diese Bcobachtungon fiber
bakteriologische und thennische Vorgfingo bei dor Hcrstollung von Fleiseh-
konserven auch ffir anderes Konservengut nutzbringend verwenden lassen,
muB besonderen Yersuohen anheimgestellt werdon, ebonso <he Frage, in-
"wieweit die obigen Laboratoriumserfahrungen ffir die Praxis verwertbar
sind. Rodenkirchen (KSnigsborg i. Pr.).

Shonoan, J. M., and Stark, F., The differentiation of Strepto-
coccus lactis from Streptococcus fecalis. (Journ.
of Dairy Science. Vol. 17. 1934. p. 525—526.)

Verff . untersuchton 27 St r. lactis - Stamme aus Milch und Molkerei-
produktcn und 14 Vertreter der Fecalis-Gruppe, zu der Verff. auch den S t r.
glyeerinaceus rechnen. Folgende vier Proben gcstatten nach ihren
Untersuchungen eine Unterscheidung des S t r. lactis vom S t r. f e -
calis: 1. Die Maximaltemperatur; keiner der lactis-Stamme konnte bei
45® C vachsen, die fecalis-Stfimme gediehen jedoch bei dicser Temperatur
fippig mit einem Maximum zwischen 48—52® C. 2. Die tSdliche Temperatur
war in steriler Magermilch ffir alle lactis-Stfimme 65® bei 80 Min. dauernder
Einwkung, ffir the Ffikalstfimme genfigte sie jedoch nicht; auch blieben
diese bei tieferen Temperaturen immer in hSheren Prozentsfitzon am Leben
als die Milchstfimme. 3. S t r. f e c a 1 i s ist gegenfiber alkalischer Eeak-
tion widerstandsffihiger als Str. lactis; dieser wfichst nicht mehr bei
pH 9,6. 4. Der Str. fecalis besitzt eine groBere Salztoleranz. Er kann
gut 6,6% NaCl ertragen, wahrend der Str. lactis kaum mehr bei 5,5%
gedeilion kann. Auf Grund dieser Bcfunde glauben Verff. im Gi^cnsatz zu
den Anschauungen von D o m e t c r und andcron don Str. lactis und
Str. fecalis als zwoi vcrsehiodcno Artcn auffassen zu mfisscn.

K. J. D e m e 1 0 r (Weihonstephan).

Wohlfoil, T., Hber Entorokokken als Krankhoitsorreger
und Saprophyte n. (Archiv f. Hyg. u. Bakt. Bd. 111. 1933.
S. 11-22.)

An der pathogenctischen Bedeutung dor Entorokokken kann koin Zweifel
mehr bestohen. Ffir die Manifestierung einer Enterokokkonerkrankung scheint
aber wegen der gcringen Virulenz eine besondere zoitliche und lokale Emp-
fanglichkeit der befaJlenen Mensehen unbedingt notwendig zu sein. — In
Milch (Vorzugsmilch und Markenmilch) konnten in 10% der Proben echte
Enterotokken gefunden werden. Wenn K. Meyer beinahe in der Halfte
aller untersuchten Milchproben Entorokokken nachwies, so hat es sich dabei
mit groBter Wahrscheinlichkeit um stfirkar sekundfir (durch Kot- und Speichel-
trdpfehen) verunreinigte Milchproben gehandelt.

Rodenkirchen (Kfinigsberg i. Pr.).
Tracy, P. H., Ramsey, R. J., and Rueho, H. A., Certain biological
factors related to tallowiness in milk and cream.

Mikrobiologie der Nahnmgsmittel. — Mikrobiologie des Dungers, Bodeus usw. 427

(Agr. Exp. Sta. of TJrbana. Bull. 389. 1933. Abstr. Tbe Milk Dealer. Vol.
23. 1934. 38—39.)

Die bei Betriebsbeginii dnrch die Molkereiapparate laufende Milcb
zeigte mebr Tendenz zum Febler „Talgigkeit“ als die nacMolgende und
zwar "wegen Abspiilung der wahrend Betriebsrube gebildeten Metalloxyde.
Solche Mich wax bei den Versuchen der Verff. wahiend der Wintennonate
bereits nach 24 Std. talgig, wenn bei 4,4® C aufbewahrt; wurde sie aber zu-
erst einige Stunden bei Zimmertemperatur steben gelassen und dann erst
gekiiblt, trat der Febler nicbt oder in nur sebr geringfugigem Mafie auf.
Absicbtlicb mit Kupfersalz versotzte Milcb verbielt sicb abnlicb. Im Winter
war die Anfalligkeit der Milcb fiir diesen Febler eine viel grSBere als im
Sommer. Vermutlicb spielt bierbei die groBere biologiscbe Aktivitat wabrend
der wanneren Jabreszeit eine bedeutende Rolle. Wurde Milcb vor Erbitzui^
auf 61,1® C in zwei Halften geteilt und die eine Torber 3 Std. lang bei 4,4® C,
die andere bei 26,6® C aufbewabrt, so zeigte die letztere eine wesentlicbe
Venninderung des ungiinstigen MetalleMusses. Wurden Milcben ver-
scbiedener Herkunft mit gleicben Mengen Kupfersalz versetzt, war das
Auftreten der Talgigkeit unterscbiedlicb. — Wurde Milcb obne Druck durch
die Homogenisiennascbine getrieben, trat der Febler wie ublicb auf, nicbt
Jedocb, wenn Druck angewendet wurde. Vermutlicb spielt die bierdurcb
geanderte pbysikaliscbe Konstitution der Milcb eine entscbeidendere BoUe
in der aJlgemeinen Beeinflussung des Gescbmacks als eine evtl. docb auf-
getretene Oxydation. — Eine praktiscbe Anwendung konnte beim Buttern
von Rabm gemacbt werden, der mebrere Tage bei Zimmertemperatur mit
Kupferionen „infiziert“ worden war, im Vergleicb zu einem Eabm, der
ebenfalls infiziert wax, aber obne langere AVEbewahrung gleieb gebuttert
wurde. Die aus diesem Eabm bergestellte Butter fiel in der Qualitat gegen-
tiber der ersteren ab. — Die wirksamen Faktoren wurden auch an Hand
der Bestimmung des Bedoxpotentials untersucbt. Das Kupfer erbbbt das
Potential und schafft sondt giinstigere Oxydationsbedingungen, wabrend
die in MUcb wacbsenden Bakterien das Bedoxpotential senken.

K. J. Demeter (Weibenstephan).

Mikrobiologie dee DQngers, Bodens, Waseers und Abwassers.

Perotti, B., c Teiona, 0., Prime note batteriologiebe sui
terreni della Maremma. [Erste bakteriologisehe
BeitrSge liber die B6den der Maremma.] (Mem. Lab.
patol. e batteriol. B. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 1. 1926. 20 p.,
1 Kartc, 1 Taf.)

Die aerobe Mikroflora der BSden der Gegend von Grossoto wurde quan-
titativ und qualitativ untersucbt, wobei sicb ein grSBerer Beicbtum bei den
SumpfbSden orgab, auf welcbe die alten AlluvialbSden folgen; dagegen
sind die flacben Ufer der rezenten Alluvionen des Ombrone die keuaHrmsten
von alien. Qualitativ ist die Mikroflora recbt einformig und normal. Eine
neue Axt mit oligonitropbilem Verbalten, Bacterium maremma-
n u m Per. et Ver. wird bescbrieben. Morstatt (Berlin-Dablem).

Perotti, B., e Mastalli, F., Studi microbiologici sui terreni
della Bassa Maremma di Val di Cecina. [Mikro-
biologiscbe Studien liber die BSden der Bassa
Maremma im Tal von Cecina.] (Mem. Lab. patol. e batte-
riol. B. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 10. 1927. 42 p., 4 Taf., 1 Earte.)

428

Mikrobiologie des Diingers, Bodens, Wassers imd Abwassers.

Es ergab sich, da6 sich die Mikroflora Cecineser BSden naeh den 6rt-
lichen pedologischen Verhaltnisson quantitativ in sehr engon Grenzen be-
vegt. Trotz der Neignng des Bodens zu saurem Charakter herrschen Bak-
tcrienformen vor Pilzen vor. Die Verbreitung der Mikroflora ist qualitativ
recht einfonnig. AuBer der Feststellung einiger gemeincr For men wcrden
als neue Artcn beschrieben: Micrococcus cecinensis und Bac-
terium miniaceum, stark ammonifizierend; Bacterium ce-
c i n e n s e und Bacterium microkclvolum, schwaeh deni-
trifizierend. Morstatt (Bcrlin-Dahlem).

Terona, 0., Bonaventura, 6., Fenoglio, L. S., Ale uni reperti batte-
riologici sui terreni di Libia. [Einige bakteriolo-
gische Beobaehtungen fiber die Boden Lybiens.]
(Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 13.
1928. 12 p., 1 Taf.)

"Walirend einer Studienreise in Lybien warden einige Bodenproben ffir
bakteriologische Untersuehung entnommen. Es ergab sich, daB die Bdden
unter natfirlichen Verhaltnissen arm an Keimcn sind, wenn auch nieht so
sehr, als man gewohnlich annimmt. Die Anzahl nimmt mit der Eultur, deren
Mdglichkeit nachgewiesen wird, zu. Die Zusammensetzung dor Mikroflora
ist recht einfdrmig bei einem Vorherrsehen der Schizomyzeton gegenfiber
den Actinomyceten und Pilzen. Beschrieben wird Bacterium libi-
cumn. sp. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Ferotti, B., e Verona, 0., Seconda nota sulla batteriologia
dei terreni della Maremma Grossetana. [ZweiterBei-
trag fiber die Bakteriologie der BCden der Ma-
remma von Grosseto.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit.
sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 16. 1928. 39 p., 4 Taf.)

Im Verfolg der vorhergehenden Untersuchungen (vergl. Mem. Nr. 1)
wurde der N-Stoffwechsel der Bodenbakterien im Verlaufe des Sommers
untersucht. Ihre Zahl nimmt gegenfiber dem Frfihjabr und Winter zu und
bedingt zugleich mit ihror stlirkercn Aktivitat das Vorhandensoin befrie-
digendcr mikrobiologisoher Verhaltnisso der Gcgend im Gegensatz zur bis-
herigon Vermutung. Als neue Arten werdon beschrieben: Bacterium
candicans, B. stoklasianum, B. pallesccns, B. Ra-
vonnae, B. Ussanii und Bacillus ammonificans.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Studi microbiologiei sui torreni della
CampagnaPisana. [MikrobiologisoheStudien fiber
die B6den der Campagna von Pisa.] (Mem. Lab. patol.
e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 16. 1928. 38 p., 2 Taf.)

In einigen Voruntersuchungen warden die klimatischen VerhSltnisse
und die physikalisch-chemische Beschaffenheit der BSden in der Ebene von
Pisa fesigestellt. Die bakteriologische Untersuehung ergab an einigen Orten
einen verhaltnismaBigen Reiehtum an Keimen, insbesondere im Sommer,
und entspreehende landwirtschaftliche Eignung. Beschrieben wird eine neue
Art: Bacterium pisanum. M o r s t a 1 1 (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., e Del Tredici, A., Ulterior! contribuzioni alia
conoscenza della microbiologia doi torreni della

Mikrobiologie des Dungers, Bodens, Wassers usw. — Pflanzenkrankheiten, 429

Bassa Val di C e c i n a. [W eit er e B ei t r ag e zurKennt-
nis der B o d enmikr o b iol o gi e des unteren Val di
C e c i n a.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2.
Nr. 37. 1930. 36 S., 1 Taf.)

Bei den weiteren Untersuchungen (vgl. Mem. Nr. 10) wurden u. a. zwei
neue Bakterien gefunden, die als Bacterium Danielii und B a c t.
flavum non liquefaeiens beschrieben werden.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Horwood, M. P., and Heifetz, A., A comparative study of
certain media used in presumptive tests for
Bact. coli. (Journ. of Bacter. Vol. 28. 1934. p. 199 — 211.)

Fiir die Durchfiihrung der Wasseruntersuchung auf Bact. coli sind
eine Reihe der verscMedensten Nahrbfiden in Verwendung. Es erscMen
zweckmaBig, durcb eine vergleichende Untersuchung zu priifen, welche
Nahrbodcn fiir diesen Zweck sicb am besten eignen. Die Priifung, die mit
Wasser verschiedener Herkunft und mit Reinkulturen vorgenommen wurde,
ergab, dafi die besten Ergebnisse mit Milchzucker-Bouillon und BriUant-
grlin-Galle-Milchzucker-Losung erhalten werden. Die Brillantgriin-NShr-
losung war der Milchzucker-Bouillon etwas liberlegen, da sie einen hbheren
Anteil vollstand^er Colinachweise ergab, doch glauben Verff., dafi durch
Anderung der Bebriitungszeit und der Pufferung fiir die Milchzucker-Bouillon
gleich gute Ergebnisso erzielt werden konnen. Richter (Kiel).

Mikrobiologie von Holz usw.

Stolz, S., Verfahren zur Gewinnung verspinnbarer
Fasern aus faserfiihrenden Pflanzen. (D.R.P. Nr. 673468,
vom 1. 4. 1933.)

Bei den natiirlichen Rottungsverfahren kommen auch Mikroben auf,
die eine teilweise ZerstSrung der Faser selbst bewirken. Zur Vermeidung
dessen wird im vorliegenden Verfahren die Naturrotte ersetzt durch eine
Rottung mit Reinkulturen pektinlosender Bakterien und durch eine Nach-
behandlung mit ammoniakalischer Seifenlbsung unter Zusatz von Reduktions-
mitteln. Die zur Rottung erforderlichen Bakterien werden wie folgt ge-
wonnen: Man lafit Pflanzenteile, wie einheimische Friiohte, Palmfriichte
Oder deren Samon, andere fleischige Pflanzenorgane u. (%1. in Wasser liegen
und kultiviert die daraus isolierten Pektinvergaxer auf Nahragar, das mit
einer Abkochung von Steinnufiabfallen, Tragant u. dgl. versetzt ist. Diese
Stoffe enthalten in ihrer Interzellularsubstanz besonders leicht abbaufahige,
fiir pektinvergarende Bakterien vorziiglich geeignete Stoffe.

Limbach (Leipzig).

Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz im ailgemeinen.

Appel, 0., Vitality and vitality determination in po-
tatoes. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 437.)

Die Beuxteilung des Pflanzwertes von Kartonelproben war bisher nicht
mSglich, da sich gesunde, „vitale“, und kranke, „abgebaute“, Kartoffel-
knollen morphologisch in der Regel in nichts voneinander unterscheiden.
Verf. berichtet fiber die auf den Nachweis physiologischer Unterschiede ge-
richteten Bemfihnngen der letzten Jahre. Er beschreibt zunachst die Me-
thode von Bechhold und E r b e , die darin besteht, dafi ein Stiick
Kupferblech in die Knolle getrieben wird. Bei der Vitalknollo zoigt sich

430

Pflanz&nkraiikheiten tind Fflanzenschutz im allgemeiixen.

nach wenigen Tagen bei entsprechender Bebandlung eine von dem Kupfer
ausgehende Braun- oder Graufarbung des Fleisches, wabrend bei der Abbau-
knolle die Verfarbung unterbleibt. Die Ausdehnung dor Verfarbung im
Fleiscb gibt ein MaB fiir den Grad des Abbaues. Die Nachpriifung hat leider
gezeigt, dafi das Zustandekommen oder Ausblciben der Verfarbung nocli
von anderen unkontrollierbaren Faktoren abhangig ist, so daB das Vcrfahren
z. Z. nicht als brauchbar bezeichnet werden kann. Als brauchbar hat sieh
hingegen das von Wartenberg und Hey angewandto potentio-
metrische Verfahren erwiesen. Es TOrd daboi das elektrometrische Potential
gemessen, das an einer Platinelektrode entsteht, die in den Schabebrei der
zu priifenden Kartoffelknolle taucht. Als BezugsgrBBe bei der Messung dient
das konstante Potential einer Kalomelelektrode, mit die Kartoffelbrei-
elektrode in Doppel-Halbelementsehaltung vcrbunden wird. Wartenberg
und Hey fanden, daB sich die Schabebreie abbaukranker und vitalorKnoUen
dadurch voneinander unterscheiden, dafi die ersteren in der Regol ein gegen-
ilber der Kalomelelektrode stftrker negatives Potential erreichen als die
letzteren. Den festgestellten Potentialunterschieden diirften Differenzen in
den Reduktions- und Oxydationskraften der Schabebreie entspreehen. Fiir
die Beurteilung einer Herkunftsprobe sind 100 — 120 KnoUen erforderlich.
Bei starker abgebauten Proben geniigt es, 80 Knollen zu messen.

K 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Sanford, G. B., Some soil microbiological aspects of
plant pathology. (Scient. Agriculture. Vol. 13. 1933. p. 638
—641.)

Verf. weist kurz auf eine Reihe noch zu klaxender Fragen hin, die sich
fiir die Phytopathologie aus der Beobachtung liber das 'wechselnde Auftreten
verschiedener, durch boden-bewohnende Parasiten verursachter Krankheiten
ergeben. tJber die hierfiir mafigebenden Bedingui^en wissen wir in vielen
Fallen bisher sehr wenig. Als Beispiele Trerden angefuhrt die FuBkrankheiten
des Getreides, der Schorf und die Ehizoctonia-Krankheit dor Ehitoffel. Die
Vorgange, die in einem Fall zn einem t3berhandnehmen der Krankheit, im
anderen zu ihrem fast vdlligen Erldschen fiihren, sind uns meist noch vSUig
unbekannt. Braun (Berlin-Dahlem).

Perotti, B., Patologia da concimazioni “ad alta dose”
particolarmento di nitrato. [Pathologie hoher
Diingergaben, insbesondero von Nitrato n.] (Mem.
Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 8. 1927.

21 p.)

Durch Gefafiversuche wurde eine theoretische optimale Konzentration
von KaliumnitratlSsung fiir Weizen, Mais und Luzerne ermittclt. Diese
verursadit aber unter praktischen Verhaltnisscn erhebliche physiologische
StSrungen der Pflanzen und erhSht die Anfalligkeit fiir pflanzliche und
tierische Parasiten; auch werden die Kosten durch die Ertragssteigerung
bei weitem nicht ausgegliehen. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Peroiti, B., e Adler, S., SulP impiego del carbone e di al-
cuni suoi preparati negli speciali riguardi fito-
patologioi. [tber die A nwendung von Eohle und
einigen Praparaten daraus, insbesondere in phy-
topathologischer Hinsicht.] (Mem. Lab. patol. o batteriol.
E. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 9. 1927. 49 p., 5 Abb.)

POaozenkrankheiteu und Pflanzensohutz im aUgemeinen.

431

Bei Untersuchung der Wirkung einiger Handelspraparate aus Holzkohle
auf die Pflanzen ergab sich, daB diesen Substanzen entgegen den vorliegen-
den Behauptungen keine Desinfektions’wirkung auf Bakterien und Klze
zukommt, sondern daB sie deren Entwicklung und die hauptsachlicbsten
mikrobioehemischen Wirkungen des Bodens mehr oder Tifeniger begiinstigen.
Die Wirkung der reinen Koble auf die Vegetation von Algen und Phaneroga-
men (Leguminosen und Cerealien) war im allgemeinen derjenigen der Han-
delspraparato iiberlegen; sie erklart sieh mit der Absorbtion fliissiger oder
im Boden gelOster Stoffe. In phytopathologischer Hinsicht haben die unter-
suchten Koblepraparate kein Diteresse; weitere Untersucbungen dariiber
sind in Mem. 23, 1928 beschrieben. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, R., Note fitopatologiche per gli anni 1925 — 1927.
[Phytopathologische Angaben zu den Jahren 1925
— 1927.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1.
Nr. 12. 1927. 18 p., 3 Abb.)

Das Auftreten von Pflanzenkrankbeiten in den Provinzen Pisa und
Livorno wird an Beispielen erlautert und mit dem Witterungsverlauf dieser
Jahre verglichen. Auf die Tatigkeit der Kgl. Beobaehtungsstelle fttr Pflan-
zenkrankbeiten beim Hdheren Landwirtschaftsinstitut in Pisa seit 1926
wird hingewiesen und der Stand der Yersuchstatigkeit und der techniscben
Einrichtungen der Laboratorien beschrieben.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, B'j N ote fitopatologiche per gli anni 192 7 — 1929
[Phytopathologische Bemerkungen zu den Jahren
19 2 7—1 9 2 9.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Instit. sup. Agar., Pisa.
Vol. 2. Nr. 29. 1930. 13 p.)

Wie im vorhergehenden Bericht (Mem. Nr. 12) werden die Witterungs-
verhaltnisse der Berichtsiahre in den Provinzen Pisa, Livorno und Grosseto
kurz zusammengefaBt und eine Anzahl von aufgetretenen Pflanzenkrank-
heiten erwahnt. Den SchluB bilden Zahlen fiber die Tatigkeit des ph3rto-
pathologischen Dienstes und Angaben fiber den Ausbau der Einrichtungen
der Laboratorien. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Le basse temperature dei mesi di gennaio-
febraio 1929 in relazione al determinismo di al-
cunifenomeni biologic i. [Die niederen Tempera-
turen im Januar und Februar 1929 und einige
durch sie bedingte biologische Erscheinungen.]
(Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 32.
1929.)

Nach Angabe der auBergewdhnlichen Ealtegrade in den ersten Monaten
des Jahres 1929 werden die an einer groBen Anzahl von Pflanzen verur-
sachten Sch&den geschildert. Bei dieser Gelegenheit wurden Beobachtungen
fiber die Entstehung von Frostsch&den insbesondere durch niedere Boden-
temperaturen, die auch die Mikroflora des Bodens merklich zu sch9.digen
schienen, angestellt. Morstatt (Berlin-Dahlem).

BSttcher, Bienenzucht und HederichbekSpmpfung. (Ver-
handl. Deut. Ges. ang. Ent. Mitgliedervers. 1933. 1934. S. 113—115.)

Versuche im EMg und im FreUand ergaben, daB die Anwendung der

432 Pflanzenkrankheiten und Pflanzensohutz. — Pilze, Bakterien usw.

kupferhaltigen Praparate Eaphanit, Obranit und HeMnol zur Hederich-
bekampfung keino Gefabr fiir die Bienen niit sieh bringt, wahrend arsen-
haltige Mttel wie Mcritol, Uraniagrun, Nosprasit 0 erwiesonermaBen in
dioser Hinsicht scbadlicb sind. K. Fricdcrichs.

Trappmann, W. und Mtscho, G., M o t h o d c n z ii r PrUfung von
Pflanzensehutzmittoln. VII. Eine cin taebo Dosic-
rungsvorriebtung fiir Spritziuittel in Laborato-
riumsversuchon. (Nachriehtenblatt f. d. Dtsch. Pflanzenschutz-
dienst. Jahrg. 14. 1934. S. 51 — 52.)

Verff. beschreiben einen Dosierungsapparat fur Spritzmittel, den sie
aus einer Laboratoriumswaago hergostellt haben, indent sio eine Waage-
schale naeb auBen verlagerten. Als Wageflache zum Auflegcn der zu be-
spritzenden Blatter wablten sie eine dureh Ilolzrahmen gestutzte Zelluloid-
platte. Der iibrige Teil der Waage wird durcb eine Blechplatte vor Vor-
unreinigung durcb die Spritzflussigkeit gesebiitzt. Die Vorriebtung ermSg-
licbt die genaue Dosierung von Spritzflussigkeitsmengon je Flacbeneinbeit
nur bei Blattern, die der Zelluloidplatte dicht anliegen und sicb iiicbt iiber-
deeken. G o f t a r t (Kitzeborg b. Kiel).

SchSdigungen der Pfianzen durch Piize, Bakterien und filtrierbare Vira.

Singh, U. B., Studies on Cereospora indica, n. sp. para-
sitic on Cajanus indicus Sprung. (Indian. Journ. of Agric.
Sc. Vol. 4, 2. 1934. p. 343-360.)

Verf. konnte von an Blattflccken orkrankten Cajanus indicus-
Pflanzen 2 Stanune oiner neuen Cereospora, die in Indien baufig
auftritt, isolieren. Er nennt sie Cereospora indica. Die beiden
Stamme untersebeiden sicb besonders durcb ibr Yerbalten gegeniiber klinst-
licben Nabrsubstraten. Wecbsel von Hell und Dunkel, sowie bobe relative
Luftfeuebtigkeit (47 — 100%) sind filr das Wachstum dieses Pilzes von giin-
stigem EinfluB. Die Kardinalpunkto fur das Wachstum liegon bei don Tem-
peraturen 5,5, 27,5 und 37,5® C. Von SpczialnahrbOden hat sicb am besten
Coons Agar mit Maltose goeignot, wabrend Asparagin-, Magnesiumsulfat-
Kalium- und Pbospborsaurezusatzo weniger vortoilhatt waren. Fiir die
Sporenbildung liogen die optinialon Temperaturen zwischon 20 und 25° C,
ebenso ist die Lange und Septierung der Sporon bei diosen Temperaturen
am groBten. C. i n d i c a verandert das Substrat nach der sauren Seite und
vertragt eine pn-Spanno von pn 2,9— 7,1, woboi dor optimale pn-Wert
bei 6,7 liegt. Kiinstlieho Infoktion gelang nur mit Hilfo von Sporen. Die
besten Resultate gaben auch bier Temperaturen von 20—25° C.

B a r n e r (Bcrlin-Dablem).

Dastor, J. F., Cotton anthracnose in the Central Pro-
vinces. (Indian Journ. of A^e. Sc. Vol. 4, 1. 1934. S. 100—120.)

Im Oktober 1931 trat in In&en an Baumwollsamen und -samlingen,
begiinstigt durcb die bobe Luftfeuebtigkeit, epidemisch eine Antbraknose
auf. Die Erankbeit ist niebt identiseb mit der bekannten Antbraknose, die
durcb Glomerella gossypii (Souths.) Edg. hervorgerufen wird.
Die Hyphen wurden innerbalb der Samensebale getoden, -wohin sie durcb
den Funiculus einzudringen vermSgen. Befallene Samen besitzen geringe
Keimfabigkeit und die aus Samen gezogenen Pfianzen kSnnen durcb den
Pilz abgetotet werden. Auf Grand seiner TJntersucbungen bezeichnet Verf.

Soh&digungen der Pflanzen durch Filze, Bakterien und filtrierbare Vira. 433

vorlSufig den Pilz mit Colletotrichum indicum Dast. Zur
Bekampfiing werden Trennung des gesunden und kranken Saatgutes and
Behandeln der Samen mit TJspulun, Kupferkarbonat usw. vorgeschlagen.

B a r n e r (Berlin-DaUem).

Jaeot, A. P., Acarina as possible vectors of the dutch
elm disease. (Journ. econom. Entom. Vol. 27 4. 1934 s. p. 858
—859.)

Es sind von der Ulmenkrankheit befallene Ulmen gefunden worden,
die der als tJbertrager der Krankheit geltende Borkenkafer Scolytus
multistriatus nicht angegriffen hatte. Es mag neben diesem EMier
andere tJbertrager geben, etwadieMilben,diesichinihremWanderstadiuman
Insekten anheften und so von diesen, etwa dem Borkenkafer, zu anderen
Orten befSrdert werden; man hat sie an diesem gefunden. Sie kommen
haufi^ in den Coremien des Erregers des TJbnensterbens, Ceratosto-
mella ulmi, vor. Mehrere andere Milbenarten, die man an Ulmen
antrifft, kommen aus verschiedenen Grunden als tJbertrager weniger in
Fra^e. K. Friederiehs.

Perotti, R., Dermatosi, micosi e suberosi dei frutti
di Susino. [Dermatose, Mykose und Suberose von
Pflaumenfruchten.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. B. Istit. sup.
Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 27. 1928. 8 p., 2 Taf.)

Aus AnlaS des Vorkommens einer „Dermatose“ im Ausfnhrhandel
werden vorschiedene Formen von Krankheiten der Oberhaut von Pflaumen,
die in der Umgebung von Pisa vorkommen, beschrieben. Bei der als Mykose
bezeichneten Krankheit handelt es sich um Bildung stark eingesunkener,
zu Beginn der Fruchtfarbung entstehender Flecke, wobei in den Anfangs-
stadien ein M u c o r in den Geweben gefunden wurde. Der Befall ist an
bestimmte Sorten gebunden und ist wenig von auBeren Einfliissen, z. B.
Regen, abhangig. Unter der Bezeichnung „dermatosi“ kommen auch Flecke
vor, die als Sonnenbrandflecke („maecHa di sole“) durch Linsenwirkung
von Wassertropfen oder durch Reibung entstehen. Andere, die besser als
„subcrosi“, Korkbildung, bezeiehnet werden, sind durch plotzliche Tem-
peraturwechsel verursachte vernarbte Besehadigungen.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., e Bagnoli, £., Aspergillosi delle Cariossidi di
Mais. [As p er gill u s b ef all der M ais k 5 r n er.] (Mem. Lab.
patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 42. 1931. 17 p.,
3 Abb., 1 Farbtaf.)

An frisch eingelagertem Mais wurde ein starkers Auftreten einer sehwarz-
lichen, staubenden Pilzvegetation beobachtet, die als Aspergillus ni-
ger V. Tieghem bestimmt wurde. Nach Bemerkungen uber andere
am Mais beobachtete Schimmelpilze und ihre Beziehungen zur Pellagra
werden Kultur- und Infektionsversuehe mit dem Pilz beschrieben, die zur
FeststeUung der Bedii^ngen des Befalles angestellt warden und ergaben,
daB weniger die Ernahrungsverhaitnisse, als vielmehr Feuchtigkeit und
Temperatur den Befall begttnstigen. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Marciume di frutti di pomodoro dovuto a
„Rhizopus nigricans" Ehr. [Rh. nigricans als Er-
reger einer Fruchtfaule der Tomate.] (Mem. Lab.

Zweite Abt. Bd. 91. 28

434 Sohfldiguiigen der Pflanzen duroh Pilze, Bakterien und filtiriepbare Vira.

patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 48. 1930. 7 p.,
1 Farbtaf.)

An Tomaten murde ein teilweiser Befall mit dichtem, schwarzlichem
Schimmel von Rh. nigricans beobachtet, dor zu rascher Fjlulc fiihrte
und auch aul benachbarto Friichte iiberging. Als GegenmaBnabmen werden
das Abernten vor vblliger Reife und Vemichtung der bofallenen Tomaten
empfohlen. Dio JKultur dos Pilzos ergab, daB sein Wachstum durch Zucker
begUnstigt und dureb Sauren gehemmt vdrd.

Morstalt (Berlin-Dahlem).

Perotti, B.j e Bonavontura, G., Attacchi di Botrytis cinerea,
Pers., su infruttescenzi di Ricino. [Befall der
Fruchtstande von Rizinus dureb B. einerea.] (Mem.
Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 5. 1927. 10 p.)

Als neu an Rizinus wird ein bemerkenswerter parasitarer Befall der
Frticbte durch Botrytis einerea beschrieben, der untcr besonderen
Umweltverhaltnissen eintritt. Aus diesem AnlaB wurde die Wirksamkeit
einer angesauerten KupfersulfatlSsung ( 1 % H 2 SO 4 + 1 % CUSO 4 ) gegen
die resistenten Konidien des Pilzes gepriift, deren praktische Verwendung
mSglicb ware in Fallen, in denen das Laub der bcfallonen Pflanzen geniigend
widerstandsfahig ist. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Sallans, B. J., Methods of inoculation of wheat with
Helminthosporium sativum P. K. and B. (Scient. Agri-
culture. Vol. 13. 1933. p. 615—527.)

Um gute Infektionsergebnisse mit Helminthosporium sa-
tivum an jungen Pflanzen zu erzielen, hat Verf. Untersuchungen mit
verschiedenen Vmahren durchgefuhrt. Am besten bewahrte sieh die Ver-
wendung einer Sporensuspension, mit der die Samen behandelt werden.
AnschlieBend werden sie 1^24 Std. bei 24® C aufbewahrt. Die Aussaat soil
in abgetrocknetem Zustand erfolgen. Bei der Verwendung von Kulturen auf
festen NalubCden (Vim = fein gemahlene Haferspelzen), die bei einem
Alter von 2 Wochen auch gute Ergebnisse zeit^en, envies sich die gleich-
artige Behandlung der Eontrollen als schwierig. In nicht sterilisiertem
Bodon fiihrte das Einbringen sterilen Nahrbodens zu starkem Befall der
Eontrollpflanzen, da die im Boden vorhandenon Mikroorganismon sich auf
dem Nahimedium iippig entwickclten. Braun (Berlin-Dahlem).

Stakman, £. C., Levine, M. N., Cotter, B. U., and Hines, L., Relation
of barberry to the origin and persistence of phy-
siologic forms of Puccinia graminis. (Joum. Agric.
Research. Vol. 48. 1934. p. 953.)

Ein umfassender Bericht iiber den Nachweis der verschiedenen biolo-
gischen Rassen des Schwarzrostpilzes (Puceiniagraminis)auf ihrem
Azidienwirt (Berberis vulgaris) einerseits und ihren Uredowirten
anderseits, und iiber ihre Verbreitung in den nSrdlichen Vereinigten Staaten.
Von den im Laule der letzten 13 Jahre gesammelten 675 Azidienproben
konnten mit 281 an Uredowirten Infektionen erhalten werden. Davon ge-
hiirten 34,2% zur Varietat tritici, 63,7% zur Varietat secalis und nur 2 , 1 %
zur Varietat avenae. Was die Varietat Puccinia graminis tri-
tici anbetrifft, so betrug die Zahl der vorgefundenen biologischen Rassen
26. Am haufigsten waren die Rassen Nr. 36 und 38. 4 Rassen, nEmlich
Nr. 62, 102, 104 und 105, konnten nur von der Berberitze, nicht jedoch von

Soh&digimgen der Fflanzen durch Klze, Bakterien and filtrierbare Vira. 436

einem der Uredowirte isoliert werden. 71 in der Nahe von rostbefallenen
Berberitzen gesammelte TJredoproben umfaBten 19 verscbiedene biolo-
gische Rassen. Analoge Feststellungen an kleinerem Material wurden bei
Puceinia graminis secalis und P. gr. avenae gemacbt.

Die Ergebnisse, deren Einzelheiten im Original einzusehen sind, lebren
jedenfalls, die Berberitze in der Natur nicht nur das Fortbesteben des
Getreidescbwarzrostes, sondern aueh die Neubildnng von biologischen Rassen
durch die auf ihr sich abspielenden Bastardierungen ermoglicht.

E. Kohler (Berlin-Dahlem).

Neatby, K. W., The type of infection of wheat seedlings
by Puceinia graminis tritici in the greenhouse
house as a measure of the percentage infection in
the field. (Scient. Agriculture. Vol. 13. 1933. 626—636.)

Fiir die Immunitatszuchtung ist die friihzeitige Eliminierung a^SUiger
Rassen von groBer Bedeutung. Wiederholt ist fiber Widersprfiche im Vw-
halten von Sorten im Gewfichshaus und im Freiland gegenfiber Puceinia
graminis tritici berichtet worden. Verf. hat daraufhin F^- und
Fg-Pflanzen der Kreuzungen Marquillo x Reward, Garnet x Marquillo und
Garnet x Double Cross untersucht. In der Mehrzahl der FSlle hat er die
Form 21 des Erregers benutzt. Er hat gefunden, daB zwischen dem Ver-
halten im Gewfichshaus und im Freiland weitgehende tJbereinstimmung
besteht und daB die Vererbung des Freilandverhaltens offenbar durch die
gleichen Faktoren wie diejenige des Laboratoriumsverhaltens bestimmt
wiri Demnach besteht kein Anzeichen daffir, daB Marqupo und Double
Cross bei zunehmender Reife zunehmende Resistenz aufweisen.

Braun (Berlin-Dahlem).

Sanford, 6. B., and Broadfoot, W. C., The relative susceptibi-
lity of cultivated and native hosts in Alberta to
stripe rust. (Scient. Agriculture. Vol. 13. 1933. p. 714r— 721.)

Nachdem Verff. bereits frfiher auf die Bedeutung von H o r d e u m
i u b a t u m fUr die Verbreitung von Puceinia glumarum hin-
gewiesen haben, haben sie ihre diesbezfigliehen Untersuchungen auf andere
Wild- wie auch auf Kulturpflanzenarten ausgedehnt. Die in Alberta jetzt
meist gebauten Weizensorten, insbesondere Marquis, Reward und Garnet,
erwiesen sich als hoch resistent. Von den wilden Wirtspflanzen spielt H.
i u b a t u m die wichtigste Rolle. Dann folgen Agropyron dasy-
stachyum und A. Griffithsii. Als neue Wirtspflanzen werden
angeffihrt A. repens, A. elongatum, A. dagnae, A. pungens.
Weiter wird das Verhalten von A. Richardsoni, A. Smithii,
A. tenorum und Bromus oiliatus besprochen.

Braun (Berlin-Dahlem).

Luthra, J. Ch., and Sattar, A., Some experiments on the con-
trol of loose smut, TJstilago tritici (Pers.) Jens.,
of wheat. (Indian Joum. of Agile. Sc. Vol. 4, 1. 1934. S. 177 — 198.)

Ustilago tritici ist besonders in Punjab hauiig anzuteeffen
und kann einen Ernteausfall von mehr als 20% bewirken. Verscbiedene
ffir Indien auBerst billige Bekampfungsmethoden durch Behandeln des
Saatgutes mit erwarmtem Wasser wurden ausprobiert. Die Erwarmung ge-
schieht unter Ausnutzung der Sonnenhitze in besonderen Apparaturen.
Wassertemperaturen bis ea. 66® C kamen zur Anwendung.

B a r n e r (Berlin-Dahlem).

28 *

436 Schadigungen der Pflanzen duroh Pilze, Bakterien imd filtrierbare Vira.

Hanna, W. F., and Popp, W., The overwintering of bunt
spores in Western Canada. (Scient. Agriculture. Vol. 13.
1933. p. 636—637.)

An 6 verschiedenen Versuchsstationen ist die Keimfahigkcit von Sporen
von Tilletia tritici gepriift worden, die Ahron dcs Mindum-Weizens
entstammen, welehe uber Winter auf der Bodonoborflache im Freiland
gelegen batten. Im allgemeinen wurde reiehliche Kcimung festgestellt.
Waren die Ahrcn dagegon otwa 15 cm tief eingcgraben, so war die Keim-
fAhigkcit der diesen entnommenen Sporen fast orloschon.

Braun (Berlin-Dahlem).

Yerona, 0., Urocystis occulta (Wallr.) su frumento.
[TJ. occulta auf Weizen.] (Mem. Lab. patol. e batleriol. K.
Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 7. 1927. 5 p., 1 Abb.)

Auf die Beschreibung eines Befalles von Weizen in Mittelitalien durch
Urocystis occulta folgen Erdrterungen uber die systomatischen
Beziehungen der verschiedenen Urocystisarten, von denen auf Gramineen
e i n e Spezies angenommen wird, bei der aber physiologische Rassen unter-
schieden werdon konnen. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Qualche osservazione colturalc sul „Tri-
chothecium roseum“ Link. [Einige Beobachtungen
an Kulturen von T. roseum.] (Mem. Lab. patol. e batteriol.
R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 47. 1930. 7 p.)

Der Pilz verursacht eino charakteristische Bitterfa,ule an zahlreichen
Pruchten, besonders Apfeln und Birnen. Die Versuehe iiber seine Entwicklung
bei verschiedenem Zucker- und S9,uregehalt der N9.hrb6den erklarton, wie der
Befall der ^tichte mit der Reife, d. h. mit der Abnahme der SSrUre zunimmt.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Osservazioni sul Parassitismo della „Phyl-
losticta camellia e“ West. [Beobachtungen uber
den Parasitismus von Ph. camellia e.] (Mem. Lab. patol.
e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 21. 1929. 5 p., 2 Taf.)

An einer Slteren Pflanze von Camellia japoniea im Garten
des Institutes wurde im Friihjahr 1927 cin Befall der Blatter durch P h y 1 -
losticta camelliao beobachtot, der, wonn auch nicht ernstWt
schadlich, doch cinon SchSnheitsfehler dor Eamelien bedoulot. Das Krank-
heitsbild wird mit einigon Angabcn uber die Befallsbedingungen bcschricben.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, B., e Bonaventura, 6., Riccrcho cd osservazioni sulla
biologia ed in ispecie sul parassitismo della Tu-
bercularia vulgaris, Tode. [Untorsuchungen und
Beobachtungen iiber die Biologieund insbeson-
dere den Parasitismus von T. vulgaris.) (Mem. Lab.
patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 2. 1926. 17 p.,
6 Abb., 1 Farbtaf.)

AnlaBlich der Untersuehung eines von T. vulgaris (=Noclria
cinnabarina) befaUenen Lindenastes werden einige morphologische und
physiologische Beobachtungen uber den Pilz beschrieben, wobei festgestellt
wird, daB in den Konidienlagern stets ein Bacterium sp. vom Typus B.
fluorescens vorhanden ist, das in ein synergetisches Verhaltnis zum Pilz
tritt und seine parasit9re Wirkung begunstigt. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Schadigungen der Pfleuizen durch Pilze, Bakiierien und liltrierbare Vira. 437

Perotti, B., e Yerona, 0., Indagini sui rapporti tra sviluppo
della Fumaggine negliolivi e trattemcnti dachi-
cidi. [TJntersuchungen iiber dieBeziehungenzwi-
schen der Entwicklung des Rufitaues an Oliven
und der Anwendung von Mitteln gegen die Oli-
venfliege.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa.
Vol. 2. Nr. 34. 1929. 21 S., 1 Taf.)

Infolge von Klagen der Olivenbauer, die eine Starke Ausbreitung der
RuBtaupilze der Anwendung von melassehaltigen Arsenbriiben zuschrieben,
wurden besondere Untersuchungen iiber den EinfluB der Arsensalze auf die
ruBtaubildenden Myzelien angestellt. Unter den versehiedenen beteiligten
Pilzen herrseht eine derAlternaria tenuis mehr oder weniger nahe-
stehende Form vor; hSufig tritt dabei aucb Gladosporium ber-
b a r u m auf. Es ergab sich, daB die Arsensalze und besonders die Arsenite
bei nicht zu geringer Konzentration giftig auf die Pilze wirken und daB da-
her fiir das tats§«hlicb beobachtete Xtimmern der Olb&ume eine andere Ur-
sache angenommen werden muB. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Yerona, 0., Di alcuni casipatologiciesaminatiprcsso
il R. Osservatorio Regionale di Fitopatologia di
Pisa. [Einige von der Kgl. phytopathologisehen
B e 0 b a c b t u ng s s t a ti 0 n in Pi s a u nt er s u cb t e patbo-
logiscbe Fillle.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup.
Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 39. 1930. 16 p., 9 Abb.)

Kurz gescbildert werden u. a. ein Bakterienkrebs an Zweigen und Wur-
zeln des Mandelbaumes, eine Bakterienfaule an Kobl, ein Krebs von N e c -
tria ditissima anRapbiolepis japonica, ein Krebs an
Robinie, Pbyllosticta ceratoniae Berk, an BlEttern aus
Sizilien, Puecinia buxi D.C. anBuxus sempervirens, eine
anscheinend bakterielle Vergilbung von Weizenblattern und MiBbildungen
an Cucurbita pepo. Morstatt (Berlin-Dablem).

Perotti, B., 6 Bonaventura, 6., Mico-batteriosi dei frutti di
Nerium Oleander L. [Eine Myko-Bakteriose der
Frucbte des Oleanders.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R.
Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 17. 1928. 5 p., 1 Abb.)

Es wird ein neuer Fall von „myko-bakterieller Synergese" bescbrieben,
welcbe recht baufig Nekrosen und Hypertropbien an den Fruebten von
Oleander erzeugt und nicbt mit der „rogna“ (Bakterienkrebs) identisch
ist. Beteiligt sind Bacillus oleae und Alternaria tenuis,
deren Zusammenwirken nSber verfolgt wurde.

Morstatt (BerUn-Dablem).

Perotti, B., e Ponteeorvo, G., Ulteriori ricercbe sulla mico-
batteriosi fiorale e dei frutti dell’ oleandro.
[Weitere Untersuchungen tiber die Myko-Bak-
teriose der Bliiten und Frucbte des Oleanders.]
(Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 25.
1929. 11 p., 1 Taf.)

Die spateren Untersuchungen (vgl. Mem. Nr. 17), bei denen die Mit-
wirkung saurebildender Bakterien beim Zustandekommen der Krankheit
bestatigt wurde, ergaben, daB auBer der Alternaria tenuis aucb

438 Soh&diguztgen der Pflanzen duroh Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

ein Fusarium beteiligt ist und zwar scWen das letztere eine energischere
pathogene Wirkung auszuiiben als die Alternaria.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Terona, 0., e Franchini, R., II „F u s a r i u m M a r t i i“ A p p. e W r.
nella Mioobatteriosi dell’ Oleandro. [Das Fusa-
rium Martii bei der Mykobakteriose dos Olean-
ders.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2.
Nr. 36. 1930. 14 S., 1 Taf.)

In Fortsetzung der fruberon Studien (vgl. Mem. Nr. 2 und Nr. 25) wurde
festgestellt, daB das beteiligte Fusarium zur Sect. Martiella gehSrt
und als F. M a r t i i , var. minus zu bezeichnen ist. Von dem B a k t e -
r i u m sp. wird die Morphologie und das Verhalten in Fultur (mit Abb.)
beschrieben. Bei Infektionsyersuehen an Oleander ergab sich die AbhSngig-
keit der Infektion von SpuBeren Umstanden, insbesondere vonFeuchtigkeit.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, R., Le Mieo-batteriosi. [Die Myko-Bakteriosen.]
(Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 60.
1931. 3 p.)

Im AnschluB an die vom Verf. beschriebenen (Mem. Nr. 2, 17, 25, 36)
und einige andere bekannte Falle wird der Begriff der „Myko-Bakteriose“
kurz erfirtert. Die Anwesenheit der Bakterien kann dabci nicht wie bisher
als bloBe Begleiterscheinung gedeutet werden, sondern es handelt sich um
eine neuo Form der Pathogenese, die zu den Mykosen und den Bakteriosen
hinzukommt und in einem Zusammenwirken (Synergese) von Pilzen und
Bakterien besteht. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., e Sbrana, 6., Alcune osservazioni sulla „Soab-
bia“ 0 „Sehorf“ dei tuberi di patata. [Einige Be-
obachtungen iibcr den Schorf der Kartoffel-
k n 0 1 1 e n.] (Mom. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2.
Nr. 38. 1930. 15 p., 2 Abb.)

Naoh einer tJborsicht der Literatur iiber Nomenklatur und Erreger des
Eartoffelschoifes werden Beobachtungen an aus Deutschland eingefiihrten
Saatkartoffeln beschrieben, aus denen geschlossen wird, daB es sich nicht
um oinen spezifischon Erreger, sondern um verschiedene, nicht miteinandor
verwandto Organismon handelt. Die Bodonboschaffonheit wirkt daboi nur
indirekt mit, indem sio Entwicklung oder Viruleuz dor Mikroorganismen be-
gunstigt. Zur Verhhtung wird u. a. Verwendung widerstandsfahiger Sorten
emplohlen. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, R., e Verona, 0., La rogna del cotogno (Pirus cy-
d 0 n i a , L.). [Der Quittenkrebs.] (Mem. Lab. patol. e batte-
riol. R Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 3. 1927. 6 p., 1 Taf.)

Enter diesem Namen wird eine neue Erankheit der Quitte beschrieben,
die in krebsartigen Wucherungen der Rinde besteht. Als Erreger wurde
ein Bakterium festgestellt, von dem eine kurze Diagnose (ohne Namen)
gegeben wird. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, R., e Verona, 0., Ancora sulla rogna del Cotogno.
II Bacterium Cydoniae, n. sp. [Weiteres fiber den
Quittenkrebs.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr.,
Pisa. Vol. 1. Nr. 20. 1928. 9 p.)

SohSdiguzigen der Pflanzen diirch Pilze, Bakterien und filtrierbaFe Vira. 439

Der im Mem. Nr. 3 beschriebene Quittenkrebs wurde weiter untersucbt.
Dabei wird auBer kurzen Angaben iiber die Bekampfung der Erreger B a c t.
cydoniae als neue Art genau besehrieben und eine vollstandige diagnosti-
sche Tafel davon beigegeben. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Eunkel, L. 0., Studies on acquired immunity with to-
bacco and aucuba mosaics. (Phytopathology. Vol. 24. 1934.
p. 437.)

Verf. weist nach, daB Tabakpflanzen (Nicotiana silvestris),
die mit einem abgeschwachten Stamm des Aucuba-Mosaikvirus infiziert sind,
damit „immun“ geworden sind gegen starkere StSmme desselben Virus so-
wie gegen das gewbhnliche Tabakmosaik. Umgekehrt sind mit dem Tabak-
mosaik infizierte Pflanzen gegen Aucuba und gegen andere St4mme des
Tabakmosaiks „immun“. Eine Ausnahme maehen nur die jungsten Blatter,
diese sind noch aufnahmefahig. Die „Immunitat“ erstreckt sieh offenbar
nur auf solche Teile, die bereits von dem immunisierenden Virus durchsetzt
sind. Die hnmunisierende Wirkung wird nur gegeniiber einem dem immuni-
sierenden Virus nahe verwandten Virus beobachtet, nicht jedoeh gegeniiber
iremden Viren (tobacco ring-spot, Gurkenmosaik). Ref. sieht seine eigenen
Untersuchungen an Kartoffelmosaikviren (Phytop. Ztschr. Bd. 7. 1934.
S. 1) durch vorliegende Arbeit vollauf bestatigt. Das Verhalten der Varianten
des Tabakmosaikvirus (wozu aueh das sog. Aucuba-Mosaik gehort) entspricht
durchaus dem Verhalten der vom Ref. studierten Varianten („homologen
Vira“) des Ringmosaik (X-Virus) der Kartoffel. Verf. deutet auch zwei
ErklarungsmSglichkeiten an: Das immunisierende Virus kSnnte eine Er-
schSpfung des Nahrsubstrats herbeifuhren, so daB dem zweiten Virus die
MbgHchkeit zur Vermehrung genommen ist, oder aber es kbnnten die infi-
zierten Zellen die Bildung von spezifischen Immunstoffen veranlassen.

E. K 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Hobnes, Fr. 0., A masced strain of tobacco-mosaic virus.
(Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 845.)

Stengelstiicke von Tomaten, die zuvor mit einem starken Stamm des
gewShnlichen Tabakmosaikvirus infMert worden waren, wurden, in Glas-
rbhren verschlossen, 16 Tage im Wasserbad bei 34,6® C gehalten. Die Behand-
lung hatte die Abspaltung von Mosaikstammen zur Folge, die keine oder
fast keine Symptome auf dem turkischen Tabak mehr erkennen lieBcn. Ein
solcher „maskierter“ Stamm wurde mit dem starken Ausgangsstamm und
einem mittelstarken Stamm des gleichen Virus verglichen. In vieler Hin-
sicht herrschte voUkommene oder doch annahemde tibereinstimmung
zwischen den drei Stammen. So war das Verhalten der Safte bei der Fest-
stellung der TStungstemperatur, der Verdiinnungsgrenze und der Dauer-
haftigkeit beim Stehenlassen iibOTeinBtimmend. Auf Nicotiana Langsdorffii
erschienen auf den eingeriebenen Blattem bei alien drei Stammen die gleichen
nekrotischen MtiaMecken, die Ableitung der Starke aus den Blattem wax,
wie die Jodprobe erkennen lieB, in gleicher Weise gehemmt. Die Dnter-
schiede bestehen in der Hauptsache in folgendem: Erstens ist der maskierte
Stamm noch gut befahigt, sich im Gewebe zu vermehren bei Temperaturen,
die so hoch sind, daB sie die Vermehrung des starken Ausgangsstammes
v6ll% sistieren. Zweitens driogt der schwache Stamm bedeutend langsamer
in die jungen, noch wachsenden Organe vor als die starkeren Stamme.

E. E Shier (Berlin-Dahlem).

440 Sch&digimgen der Pflanzen dutch Pilze, Bakterien und filtrierbare Vita.

Berkeley, G. H., and Madden, G. 0., Transmission of streak
and mosaic diseases of tomato through seed. Nr. 11.
(Seient. Agriculture. Vol. 13. 1933. p. 456 — 467.)

Verff. bringen woitere Beweise fur die Ubortragbarkeit des Tomaten-
mosaiks durch die Samen. Sic haben an gesunden Pflanzen mit Hilfe von
zerquetschten Embryonen von kranken die Krankheit hervorgerufen. Ebenso
erwuchsen aus Samen von kranken Pflanzen wiederum solchc. Allerdings
wird die Krankheit keineswegs durch samtliche Samen einer kranken Pflanze
iibertragen. Das infektidse Agens ist in den Samen sowohl griiner wic reifer
Friichle. Zur Verhiitung des Auftretens der Krankheit vrird die Gowinnung
der Samen von nur gesunden Pflanzen empfohlen.

Braun (Berlin-Dahlem).

White, P. R., Multiplication of the viruses of tobacco
and aucuba mosaics in growing excised tomato
root tips. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 1003.)

Die Kultur von Pflanzenviren war bisher nur durch tiberimpfen von
Pflanze zu Pflanze mdglich. Das Yerfahren beansprucht sehr viel Platz,
und aufierdem sind die Pflanzen in den GewSchshausern leicht der Gefahr der
Infektion mit anderen Viren ausgesetzt, wodurch das kultiviertc Virus dann
verunreinigt wird. Diese Nachteile liefien sich dadurch iiberwinden, dafi
als Virustrager an Stelle von ganzen Pflanzen isolierte Tomatenwurzeln
verwendet wurden, die in einer geeigneten NShrlosung gezogen werden
kSnnen. Die Wurzeln wachsen darin unbegrenzt woiter und dem Wachstum
geht, wie Verf. zeigt, eine entsprechende Vermehrung des Virus im Wurzel-
gewebe parallel. Das Verfahren hat sich bisher bei zwei nahe verwandten
Viren, dem gewfihnlichen Tabakmosaik und dem Aucubamosaik bewhhrt.

E. Kohler (Berlin-Dahlem).

Holmes, F. 0., Inheritance of ability to localize to-
bacco-mosaic virus. (Phytopath. Bd. 24. 1934. p. 984.)

"Wenn man unter Anwendung der Blatteinreibemethode Pflanzen von
Nicotiana tabacum mit dem Virus des gewOhnlichcn Tabakmosaiks
beimpft, so breitet sich dieses von den Stollen dos Eindringens ungehindert
aus und dringt schlielBlich unter standigor Vermehrung in alle Toile der Pflanze
vor. Bei manehen anderen Solanaccen wird ein abwcichcndes Vcrhalten
beobachtet. So dringt bei gewissen Eassen von Capsicum frutes-
c e n s das Virus zwar ein und vermohrt sich zunachst im Umkreis der Ein-
trittsstellen, es blcibt jedoch auf dieso Stcllcn beschrankt, wobei in der Folge
diese Stellen absterben, so daJJ auf dem Blatt zahlrciche kleine nekrotischo
Eleeke entstehen. Die beimpften Blatter lOscn sich ferner ab und im iibrigen
bleibt die Pflanze bis zur Reife gesund und virusfrei. Die vom Verf. an Kreu-
zungen versehiedener Eassen von Capsicum frutescens vorge-
nommene l&banalyse zeigt, daS das abwcichendc Verhalten liber das „nor-
male“ dominiert und daB seine Vererbung anscheinend dem einfachen mono-
hybriden Mendelschema folgt. An einer Keihe von Kreuzungen versehiedener
Nicotiana-Arten konnten diese Erfahrungen im Prinzip bestatigt werden.

E. Kohler (Berlin-Dahlem).

Rawlins, T. E., and Parker, K. G., Influence of rootstocks on
the susceptibility of sweet cherry to the bucks-
kin. (Phytopathol. Vol. 24. 1934. p. 1929.)

Verff. machten in Kalifornien die Beobachtung, daB Sufikirschen (P r u -
nus avium) eine erhOhte Rosistenz gegen die „Buckskin“ genannte Virus-

Sohftdigungen der BQanzen diuch Fflze. — Tierisehe Sch&dlinge.

441

krankheit zeigten, ■wenn sie auf P r u n u s m a h a 1 e b als Unterlage waohsen.
Wenn einzelne auf dieser Unterlage stebende Baume dennocb erkrankten,
so lag das daran, daB sie selbstandig Wurzeln von oberhalb der Pfropfstelle
gebildet batten. Merkwurdig war jedocb, daB die Entfernung solcber Wurzeln
in drei Jabren keine Gesundung zur Folge batte. Die Obstziiebter maeben
sieb in der geftbrdeten Gegend jetzt die Scbutzwirkung der Mabalebunter-
lage bei alien Neupflanzungen zunutze. Um der Erscbeinung auf den Grund
zu kommen, infizierten Verff. kiinstlicb (durcb Okulieren) Baume der Sorte
Napoleon, die auf Mabalebunterlage standen. Im allgemeinen reagierten
diese Baume mit einer auffalligen Cblorose, die sonst filr die Eiankbeit nicht
kennzeicbnend ist, nur in zwei von 10 Fallen traten typisebe Krankbeits-
erscbeinungen auf, und diese bescbrankten sieb auf den okulierten Ast selbst.
Junge kranke Napoleonreiser, die auf Mabalebsamlinge gepfropft wurden,
warden cblorotiscb und fingen an abzusterben. Ein Eintritt des Virus in
die Mabalebunterlage scbeint nicbt stattgefunden zu baben.

Kohler (Berlin-Dahlem).

Tierisehe SchSdIinge.

Newton, W., and Bosher, J. E., The tomato root-knot disease.
(Scient. Agriculture. Vol. 13. 1933, S. 594 — 695.)

Da sieb in vielen Fallen eine Dampfsterilisation des Bodens in Gewaebs-
hausern zur Bekampfung der durcb Heterodera radieicola (Geef)
Muller bervorgerufenen Tomatenerkrankung nicbt durcbfnhren laBt, baben
Verf. Versuebe mit Formalinbehandlung durchgefiihrt. Eine 1 proz. For-
malinlSsung (== 0,4% Formaldebyd) erwies sieb als wirksam bei ansebeinend
gleichzeitig ^nstigem EinfluB auf die Entwicklung der Pflanzen. Kon-
zentrationen von 0,6 und 0,25% reichten nicht aus. Erforderlich sind etwa
280 1 LSsung auf 1 cbm Boden. Braun (Berlin-Dahlem).

Behlen, W., Die Erbsenlaus (Macrosiphon onobrychis
B.d.F.), ein auBerst gefahrlicber Luzernescbadling.
(Nachricbtenblatt f. d. Dtsch. Pflanzenschutzdienst. Jabrg. 14. 1934.
S. 48—51.)

Verf. berichtet uber einAuftreten der Erbsenlaus, die in Nieder- und
Oberschlesien im Mai 1933 auf einzelnen Luzemefeldem in verheerendem
MaBe sieb zeigte. Die Pflanzen wurden in wenigen Tagen bis zum Verdorren
ausgesogen. Die Ursacbe fiir das plStzliehe Massenauftreten durfte in der
fur Blattlause giinstigen Witterung der Jahre 1932 und 1933 liegen. Hinzu
kommt noch die geschiitzte Lage der befallenen Felder. Natttrlicbe Feinde,
besonders Marienkafer, konnton der Massenvermebrung keinen Abbruch tun.
Am zweekmaB^ten wirkte sieb sofortiges Abmahen der befallenen Scblage
aus, da die Blattlause in diesem Falle wegen Nahrungsmangel verbungern.
Es besteht daim aucb noch die MOglicbkeit, die Anlage fiir eine spatere
Nutzung zu retten. Erne mimittelbare Bekampfung scbeint nur bei den
an den Stoppeln sitzenden ungeschutzten Lausen mSglicb zu sein. Gewisse
Erfolge konnten auf meebanisebem Wege erreicht werden, indem sieb auf
mit Lebmbrei bestricbenen und uber die Stoppeln gezogenen Brettem in
kurzer Zeit so viel Lause ansammelten, daB sie, abgekehrt, eimerweise ver-
niebtet werden konnten. Vorversuche mit Blattiaus-Bekampfungsmitteln in
fliissiger Form brachten kein befriedigendes Ergebnis.

G 0 f f a r t (Kitzeberg b. Kiel).

442

Tieiisohe Soh&dlinge.

Speyer, W., Wanzen (Heteroptera) an ObstbSumen.
11. Mitt. (Ztschr. Pflanzentonkh. Bd. 44 4. 1934. S. 122 — 150, 161 — 183,
29 Abb.)

Die Untorsucbung bezog sich hauptsachlich axxf die Wanzen am Apfel-
baum. Das Material wurde durch rcgelmaBig mcderholte Klopffange ge-
wonnen. Es wird eine Bestimmnngstabelle dor am Aplelbaura gcfangenen
Capsidenlarven gegeben. Die Beschadigunpn an Friichten und Blattern
werden beschrieben und abgebildet. Im niederelbischen Obstbau sind als
Eaubvanzen ntttzlich die Gattungen Anthocoris, Lyetoco-
r i 8 und Triphleps, harmlos alle Arton, die erst vom Juli an als
Larven oder Imagines auf den Apfelbaumen anzutreffen sind (weil die Scha-
den vor der Bildung des Johannistriebes verursaebt werden). Verdachtig
sind zunachst alle im IViihjalir auftretenden Wanzen (auBer don Anthoeoriden).
Als mrklieh scbadlich erwies sich Lygus pabulinus, Srtlich auch
Plesiocoris rugicollis. Erstere Art wandert auf krautige Pflanzen
ab und erzeugt an diesen eine zweite Generation. Daher ist die Nahe der ver-
sehiedenen, dafiir in Betracht kommendon Pflanzen neben dem Mangel
sorgfaltiger Spritzung mit Carbolinoum im Winter von Einflufi auf die
Starke des Befalls der Apfclbaume im folgendcn Jahre.

K. Friederiehs.

Oettingen, H. von, Zwei neue Schadlinge an Futter-
pflanzen. (Nachrichlenblatt f. d. Dtsch. Pflanzenschutzdienst. Jahrg.
14. 1934. S. 65-66.)

Es werden zwei ftir Deutschland neue Dipterenlarven beschrieben, von
denen die eine, Ghortophila dissceta, frith gesate MaiskSmer
ausfriSt, die andere, Lauxania aenea, in Eleestocken gefunden
worden ist. Die von Ch. dissceta befallencn K6mer zeigten eine oder
mehrere runde Offnungen von knapp 1 mm Durchmesser. Die weiSlichen
Larven haben im erwachsenen Zustand eine Lange von 7 — 8 mm und ein
von oben her abgeschragtes Abdomen-Ende. Das Kopf-Ende der Larven
ist leicht zugespitzt, die schwarzen Mundhaken in ihrem mittleren Drittel
sind fein gezahnt. Frisch gesater Mais wird starker befallen als spat gesater.
Die Larven von Lauxania aenea sind schlank, hell-zitronengelb,
von 4.5 mm Lange. Charakteristisch sind ftir sio vior fast stachelfSrmige
Auswtichse am Abdomen-Ende. Da die Mundhaken verbaltnismaiiig schwach
gekrtimmt, broit und glattrandig sind, bostcht die MSglichkeit, dafi die Larven
mehr an verwesendem als an frisehem pflanzlichom Gewebo lebou.

G 0 f f a r t (Kitzoberg b. Kiel).

Meyer, E., tJber eine sehwere Schadigung von Eunkeln
durch die Capside Calocoris norwegieus Gmel.
(Nachrichtenblatt f. d. Dtsch. Pflanzenschutzdienst. Jahrg. 14. 1934.
S. 57—59.)

Calocoris n o r w e g i c u s Gmel. trat Anfang Mai 1933 auf einer
mit Runkektiben besteUten 1 — 1^ ha groBen Flache schwer schadigend auf.
Beschadigt warden vorwiegend die dem Herzen benachbarten gerade aus-
treibenden Blatter, wahrend ausgewachsene fast vSllig unverletzt waren.
Die jungen Blatter waren durch die Stiche meist vSll% abgestorben, ge-
sehwarzt und vertrocknet. Infektionsversuche ftihrten nur bei Eunkeln zu
Schadigungen, wtihrend Getreide so gut wie gar nioht angegriffen wurde,
Kartoffeln, Saubohnen und Erbsen nur schwache, firtlich b^enzto Schwar-
zungen aufwiesen. Einige Beobachtungen lassen das Auftreton von 2 Gene-

Oekobgie, biologisohe und ohemische Bekkmpfung tierischer Soh&dlinge. 443

rationen statt einer Generation, wie bisher angenonunen Tmrde, als mSglieh
erscheinen. G o f f a r t (Kitzeberg b. Kiel).

Oekologie, biologische und chemische Bek^mpAing tierischer SchSdlinge.

Jancke, 0., ttber den EinfluB der Kalidiingung auf die
Anf §.lligkeit der Apfelb&ume gegen Blutlaus,
Blattlaus und Mebltau. (Arb. Biolog. Beicbsanstalt Land-
u. Forstwirtsch. Bd. 20 3. 1933 4. S. 291—302.)

Es ist bfter bebauptet worden, daB Kalidiingung einen hindemden
EinfluB gegen Blattlausbefall babe. Yersucbe in Naumburg ergaben, daB
bei gemssen Apfelsorten die Anfalligkeit fiir die Blutlaus durcb Kalidiingung
nicbt beeinfluBt mirde. Auch der Befall durcb die Apfelblattlaus stand in
keiner Beziebung zur Kalidiingung, und der Mebltaubefall der Versuebs-
baumcben wurde durcb Kali nicbt verringert. K. Friederiebs.
Bipper, W., Die feldmaBige Bekampfung der Riiben-
blattlaus. (Neuheiten a. d. Gebiete d. Fflanzenscbutzes. Jabrg. 27 s.
19347. S. 55-68.)

Mit der bisher iiblichen Metbode, befallene Eiibenblatter zu beseitigen,
konnte die starke Verlausung dieses Jabres nicbt aufgehalten werden. Es
gelang dagegen im Feldversuch, bei Anwendung von 2 proz. Schmierseifen-
Idsung die Lause vbllig zu beseitigen, wenn der Arbeiter kniend das ein-
zelne Biibenblatt mit der linken Hand bait und mit der rechten eine Batterie-
spritze in Anwendung bringt. Dies muB propbylaktisch, d. h. vor starkem
Befall gescheben. Femer wurde das amerDraniscbe „Nikotindust“-Verfahren
ausgebaut. Die Herstellung des „Niko8taubes“ aus Nikotinsulfat nebst
Scblemmkreide (6 : 95) oder Staubkalk, wird geschildert. Die Anwendung
erfolgte mit einem Motbrverstauber, der mit einer besonderen, das Arbeiten
aucb bei Wind gestattenden Vorriehtung verseben war. — Die tagliche
Leistung bei der ersteren Metbode ist natiirlich sehr gering.

K. Friederiebs.

Pfefter, A., Massenbafte Yermehrung der Forleule im
Westen der Slowakei und ibre Bekampfung. (Bapport
de rinstitut pour la protect, des forbts des Instituts des reebercbes
forest, a Frague. Prag 1933. 54 p., 7 Abb.) pdit dtsch. Zusfassg.]

Die Forleule ist 1930—1932 in der Slowakei verheerend aufgetreten.
Die Jahre 1929 — 1932 batten daselbst sehr trockene und warme Fruhlings-
monate. Es bandelt sich urn sparlieb bestockte, gleichaltrige Kiefernbestande.
Die auf dem schleebtesten Boden wachsenden wurden zuerst befallen, spater
deWe sich der lYaB auf alle umliegenden aus. Die in Masse auftretenden
natUrlichen Feinde aus der Insektenwelt und die Eyperparasiten werden
aufgefiihrt. Wildschweine, Dachse und Wiihlmause halfen mit, bier und
da auch die Pilze Empusa aulicae und Isaria farinosa.
Ein Teil des befallenen Areals wurde mit Beriihru^sgiften, ein anderer
mit Calciumarseniat bestaubt. Die ersteren Mittel wirkten besser. Borken-
kaferiraB als Folge des BaupenfraBes trat nur sporadiscb auf, well die ab-
sterbenden Baume daiiir zu schnell austrockneten. Die vielen Borkenkafer-
arten, die beteiligt waren — insbesondere an liegenden Baumen — werden
namentlich bezeichnet. K. Friederiebs.

Winning, E. v., Der Stand derAusbreitung des Kartof-
felkafers in Frankreicb im Herbst 1933. (Nachriebten-
blatt f. d. Dtsch. Pflanzensehutzdienst. Jabrg. 14. 1934. S. 47 — 48.)

444 Oekologie, Bek&mpfung tierischer Sch&dlinge. — Tierkrankheiten. Tierparasiten.

Die Befallsstarke hat in den meisten Gebieten sehr zugcnommen. 1933
•wurden 636 ganze Kantons und 640 einzelne Gemeinden als verseucht bc-
zeichnet gegeniiber 569 ganzen Kantons und 534 Gemeinden im Jahre 1932
und 340 ganzen Kantons und 546 einzclnen Gemeinden im Jahre 1931.

G 0 f f a r t (Kitzeberg b. Kiel).

Subhlev, W., Die Bekampfung der Drahtwiirmer. (Eine
tJbersicht iiber die Literatur.) (Nachrichtenblatt f. d. Dtsch. Pflanzen-
schutzdienst. Jahrg. 14. 1934. S. 52 — 53.)

Die verschiedenen MSglichkeiten der Drahtwurmbekampfung werden
kurz gestreift. Von physikaUschen Mitteln kommt lediglich dem Einsammeln
von Larven mit der Hand eine gewisse Bedeutung zu. KSdermittel scheinen
bei rechtzeitiger Anwendung manehmal erlolgreich zu sein. Chemische Mittel
haben dagegen noch keine durchgreifenden Erfolge gcbracht; ebenso sind
Mittel zur Saatgut-Desinfektion in ihrer Wirkung fraglich. Die Bedingungen,
unter denen kiinstliche Diingemittel zu einem Erfolg fiihron, stehen noch
nicht hinreichend fest. Manehe Boden-Desinlektionsmittel haben sieh als
hochgiftig ermesen, doch diirfte ihr Anwendungsgebiet begrenzt bleiben.
Pflanzenbauliche Mahnahmcn, wie Bodenpflege und Fruehtfolge, tragen zur
tlberwindung von Drahtvurmschaden wesentlich bei. In dor biologischen
Bekampfung stehen insektenfressende Vogel an erster Stolle. Andere Feinde
spielen ebenso "wie die Endoparasiten hiergegen eine untergeordnete Bolle.
Abschliefiend wird festgestellt, daB von alien zurzeit in Betracht kommen-
den BekampfungsmSglichkeiten nicht eine ist, die man als durchschlagcnd,
billig und zuverlassig bezeichnen konnte. G o ! f a r t (Kitzeberg b. Kiel).

Langenbuch, R. und Subklew, W., Zur Frage dor Drahtwurm-
bekampfung mit Kalisalzen. (NachricWnblatt f. d. Dtsch.
Pflanzenschutzdienst. Jahrg. 14. 1934. S. 21 — 22.)

Eine Bekampfung von Larven verschiedener Elateriden-Arten mit Kainit
■wirkte sich nach Befunden Langenbuchs in Mitteldeutschland giinstig
aus, wahrend S u b k 1 e w eine Abnahme dor FraBtatigkeit in kainitge-
dungtem Boden unter Beriicksichtigung verschiedener Bodenarten und
weehselnder Bodenfeuchtigkeit nicht beobachten konnte. Eine gemcinsame
Nachprufung der Evgebnisso ergab nun, daB die untersehiedliche Wirkung
durch die vcrschiedene Herkunft der Larvon mit ungleichen physiologischen
Eigenschaften bestimmt vrird. Goff art (Kitzeberg b. Kiel).

Tierkrankheiten. Tierparasiten.

Burnside, C. E., Studies on the bacteria associated with
European foulbrood. (Journ. econom. Entom. Vol. 27 3.
1934 6. p. 656—668.)

Die Atiologie der europaischen Faulbrut ist ein ungolSstcs Problem.
Mehrere motphologisch verschiedene Bakterienformen treten mehr oder we-
niger regelmaBig dabei auf . Es hat sich gezeigt, daB der Bacillus alvei
in verschiedenen Formen auftreten kann. Verf. begrundet seine Meinung,
daB Streptococcus apis und Bacillus pluton identisch
sind und als Varianten oder Stadien zu B. alvei gehOren u. a. damit,
daB Varianten, die B. pluton gleichen, in Reinkulturen von B. alvei
und (selten) sporogene Formen von B. alvei in Kulturen von C. apis
auftreten. Er urteilt, dafi nach dem jetzigen Stand der Kenntnis die An-
nahme eines pleomorphen Organismus als Erreger dioser Krankheit mehr

Tierkrankheiten. Tierparasiten. — • Verschiedenes.

445

Wahrscheinliehkeit fiir sich habe, als Whites Theorie von den seknn-
daren Organismen. K. Friederichs.

Verbesserungs- Vorschlage fiir die Frow-Behand-
1 u n g. I. Prow, R. W., Die Frow-Behandlung gegen
Milbenkrankheit. 11. Morgenthaler, 0., Die Frow-Be-
handlung in der Schweiz. (Schweiz. Bienenztg. Jahrg. 1933.
Sonderdr. 9 S.)

Trotz im allgemeinen recht guter Besultate bei Behandlung zuilben-
kranker BienenvSlker mit dem F r o w schen Mittel haben sich dabei doch
auch groBe Verluste eingestellt, die F r o w auf folgende 4 Ursachen zuriick-
fiihrt: 1. Anwendung bei zu stark infizierten VSlkern, die zu wenig gesunde
Bienen enthielten, um einen normalen Haushalt aufrechterhalten zn konnen.
2. Verhungem infolge Rauberei, die unter dem EinfluB der Behandlung
auftreten kann. 3. Mangelhafte Ventilation bei und nach der Behandlung.
4. Komplikationen durch Nosema u. a. Aber es gibt Verluste, die auf keiner
dieser Ursachen beruhen konnen. Verf. hat daher die Anwendung und
Dosierung des Heilmittels emeut gepriift und beschreibt, in welcher Art
sie in England durchzufuhren sei. Man miisse fiir jedes Eastensystem, fiir
jede Bienenrasse und fiir jedes Elima die Methode selbst ausprobicren.

Morgenthaler macht fiir die Schweiz folgende Vorschlage : Keine
Behandlung von Dezember bis Marz. Ghnstigste Zeit: Ende Oktober, An-
fang November. Gegen Rauberei: EinsehlieBen der Volker iiber Tag. Sieben-
malige Anwendung des Mittels in kleinen Dosen. Angebliche Schaden durch
die F r 0 w - Behandlung im Waadtland und Unterwallis seien auf Futter-
mangel oder unrichtige Einwinterung zuriickzufiihren gewesen.

K. Friederichs.

Verschiedenes.

Eunert, H., Verkiirzung der Betriebszeit bei der Dampf-
sterilisation mit Luftabscheider. (Ztschr. f. Eyg. u.
Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 296 — 303.)

Das Frinzip der Apparate mit Luftabscheider besteht darin, daB zu-
naehst, wie bei dor „Str6mungsmethode“, die Hauptmenge der im Sterili-
sierraum befindlichen Luft durch stromenden Wasserdampf von 100® in die
freie Atmosphare, dann ein weiterer Toil der Luft durch Wasserdampf, dessen
Temperatur allmahlich auf 120® ansteigt, in eine kiinstliche Atmosphare
(Luftabscheider) aus^etrieben wird. Der Dampf tritt zweokmaBig von
oben her in den Sterilisierraum ein, die Austrittsoffnung befindet sich am
unteron Ende des Sterilisierraumes. Durch diese Anordnung schichtet sich
der Wasserdampf Uber die spezifisch sohwerere Luft, treibt sie vor sich her
und, ohne daB Vermischung erforderlieh ware, mit geringem Dampfverbrauch
schnell aus dem Sterilisierraum. In t^ereinstimmung mit E o n r i c h laBt
sich der besondere Vorzug dieser Apparate dahin zusammenfassen, daB
die Sieherheit des Sterilisiererfolges durch den Luftabscheider auf den
h6chstm6glichen Grad gebracht wird, weil die Einfachheit des Verfahrons
einen fehlerhaften Verlauf des Sterilisiervorganges praktisoh unmSglich
macht. Rodenkirchen (ESnigsberg i. Pr.).

Meyer, P., Der tJbergang von Bakteriensporen in das
Destillat bei der Wasserdestillation. (Zentralbl. f.
Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 132. 1934. S. 102-110.)

446

Verschiedenes.

Ein Destillat ist nicht unter alien Umstanden als steril zu betrachten.
Beim Platzen der an die Oberflaohe einer siedenden Fliissigkeit aufsteigenden
Blasen werden kleinste Trbpfohen hocbgesclileudert, die dann von dem
abziehenden Dampfstrom mitgerisscn werden. Sind in einem Destilliergut
Sporen vorhanden, so kSnnen sie mit diesen kloinsten Tr6pfchon auf diese
Weise in das Destillat gelangen. Auch kompliziert gobaute Apparaturen
und die bekannten Destillierauf- und -einsatze vernafigcn das Itbordestillieren
lebensfahiger Sporen nicht zu verhindern. Ein mindostens 6 cm starker
Wattebausch halt die Sporen mit Sieherheit zurtck. Durch Abgabe von
Stoffen aiis der Watte an den Dampf wird jedoch das Destillat unbrauchbar
gemaeht. In gleicher Weise verwendete Glaswolle zeigte sich in 3 von 10
Fallen als nicht imstande, Sporen zuriickzuhalten. Das Versagen wird auf
die Unregelmafiigkeit bei der Lagerung des Materials zunickgefiihrt. Allen
Anforderungen genugend erwies sich Quarzsand, in der glcichen Weise wie
Watte und Glaswolle verwendet. Bei 12 Versuchen wurde vollige Keimfreiheit
des Destillates erzielt. Dio Gronzon der Leistungsfahigkeit des Filters sind
erreicht, wenn zweimal nacheinander ohne dazwischenliegcnde Sterilisierung
des Filters von einer Aufschwemmung, die etwa 3 Milliarden Sporen in
750 ccm enthalt, je 90 Min. lang abdestilliert wird.

Rodonkirchcn (K6nigsberg i. Pr.).
Hanne, B., Thermoeloktrische Warmemessungen mit
dem „Dromotherm“ und „W armegangmosse r“. (Zen-
tralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 132. 1934. S. 246—247.)

Der „Dromotherm“ ist vorzuglich fiir wissenschaftliehe Untersuchungen
geeignet. bei denen es auf die Temperaturfeststellung an sehr violen Punkten
gleichzeitig ankonunt. In der Praxis kommt man mit weniger MeBstellen
aus und wird den „Warmegangmesser“ vorziehen. Auf jeden Fall ist die
Kontrolle der Sterilisatoren auf thermoelcktrisehcm Wege eine Eotwendig-
keit, da die Desinfektionsapparate nicht immcr im Innem so arbeiten, wie
es aufierlich nach der Thermometeranzeige und nach dem Stand des Mano-
meters scheint. Eodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).

Terona, 0., c Bologna, L., Contribuzioni alia conosccnza
della batterioriza della „Diplotaxis eruooides“
D. C. [Beitragc zur JKcnntnis der Wurzelbakterien
von D. orucoides.) (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup.
Agr., Pisa. Vol. 1. Nr. 22. 1929. 13 p.)

Die schon frliher beobachtete Bakterionsymbiose der Wurzeln von
Diplotaxis wurde nSher untersucht, wobei sich zwei none Formon ergaben,
die unter der Bezeichnung A und B genau besehrieben wurden. Vollstfindige
diagnostische Tafeln (nach R. P e r o 1 1 i) sind beigogeben.

Morstatt (Berlin-Dablem).

Sdinlz,E.G., Neuartige B e s c h §> dign ngen an Braugersten.
(Wochenschr. f. Brauerei. Bd. 51. 1934. S. 42 — 46.)

Die sog. „Koi^ss%keit“ entsteht vermutlich durch Spannungsdiffe-
renzen im Kom, die durch Temperatureinwirkungen hervorgerufen werden
kSnnen. Unter UmstSnden kann vielleicht auch ein unbekannter, tierischer
Schadling als Primarursache betrachtet werden. Die „Komverf8xbung“
wird durch eine eigenartige Farbstoffablagerung in der Testa hervorgerufen,
die abet nicht auf die Wirkung von Mikroorganismen zurtickzufiihren ist.

Heufi (Berlin).

VerscMedenes.

447

lockemann, G. und Ulrich, W., tJber die bakterizide Eigen-
schaft einiger Chry soidin-Derivate, zugleich ein
Beitrag zur Kombination von D e sinf ektio nsmit -
t e 1 n. (Dtsch. med. Wochenschr. Jahrg. 60. 1934. S. 396 — 397.)

Ahnlich "wie bei den friiher untersuchten Alkohol-Sauregemischen ein
sich gegenseitig steigemder Einflufi der Komponenten bemerkbar war, so
liefi sich anch die Wirkung gewisser Chrysoidinderivate verstarken durch
Zusatz von Alkohol, evtl. zusanunen mit Jodwasserstoffsaure.

Rodenkirchen (Duisburg).

Nenberg, C. und Eobel, M., tiber Darstellung und Bedeutung
der Glyzerinsaure-mono-phosphorsaure. (Ztsohr. f.
angew. Chemie. Bd. 46. 1933. S. 711 — 713.)

Die Glyzarinsaure-monophosphorsaure ist eine biologisch wichtige Sub-
stanz, die man aus frischer Unterhefe, Troekenhefen oder daraus gewonnenen
Mazerationssaften darstellen kann. Sie wird von Fermenten angegriffen;
bei solchen, die ein zymatdsches System eioschlieBen, schreitet (Re Reak-
tion weiter fort als eine einfache Hydrolyse, indem Brenztraubensaure und
— unter anderen Bedingungen — deren Umwandlungsprodukte Azetaldehyd
und Eohlendioxyd bzw. Acetoin gebildet werden. Bei Verwendimg von Ba-
zUlen, insbesondere von Milchsaurebakterien, gelangt man ebemalls von
der Phosphorglyzerinsaure zur Brenztraubensaure; sie bleibt in diesem Fall
unverandert, da den Erregern die Eaxboxylase fehlt.

Die 3-Glyzerinaldehy£nonophosphor8aure vergart als RazemkSrper zur
Haute. In Gegenwart von NaF kann sie ohne P-Abspaltung dismutiert
werden und ergibt Phosphoglyzerinsaure. Dies ist bemerkenswert, weil der
Glyzerinaldehyd selbst nicht oder kaum von Hefe angegriffen wird.

HeuB (Berlin).

Bsehmann,E., Pilz-, Tier- und Scheingallen auf Fleoh-
t e n (Fortsetzung). (Arch. Protistenkde. Bd. 82 1. 1934. S. 1—22,
19 Abb.)

Verf., der schon fruher Pilz-, Tier- und Scheingallen auf Flechten be-
schrieben hat, kennzeiehnet weitere auf solchen gefundene Gallen, und zwar
1. Pilzgallen auf Ramalina fraxinea, 2. Tiergallen auf P e r t u -
saria pertusa. Der Erreger ist nicht bekannt. 3. Scheingallen auf
Gyrophora vellea. Diese unterscheiden sich von den eehten Tier-
gaUen ^durch, da3 sie nicht als Wohnort flir die (unbekannten) Erreger
dienen, denn sie entstehen erst, nachdem die Here den Ort, wo sie ^s
gonidienhaltige Gewebe abweideten, verlassen haben. Auch wird die Flechte
nicht in ihrem Wachstum gefSrdert; es findet keine Vermehrung der Goni-
dien statt, iiberhaupt besteht kein symbiotisches Verhaltnis. — Es wird
zugleich eine kurzeUebersicht der bereits bekannten Flechtengallen gegeben.

K. Friederichs.

Heymons, B. und H., Pass al us und seine intestinale
Flora. (Biol. Zentralbl. Bd. 64. 1934. S. 40— 61, 5 Abb.)

Schon 1^3 hat L ei d y die Flora des Darms von Passalus be-
schrieben, aber dieses vielleicht alteste Beispiel ftir regelm9.Biges Yorkommen
lebenderPflanzenimlnsektenkSrpergerietinVergessei^eit. Die Passalus,
groBe, duster gefSxbte ESier, werden familienweiseinmoderndenBaumst&tnmen
tropiseher Lander angetroffen, ohne daJ3 aber dieAltersstufen in sozialenBe-
ziehungen zueinander standen. In ihrem ESrper sindWohnsitz pflanzlicher Or-
gam'smengewisse Teile des Darmkanals. Der ziemlich kurzeEnddarm hat eine

448

Versohiedenes.

sphinktcraortig eingoschnurte Stelle. Davor liegt ein trichterf6rraiger Toil, da-
hinter ein saekformiger. Letzterorist mit Langsreihonklciner sackartiger Diver-
tikel besetzt. Dieser Darmteil ist standig der Sitz einer merkwUrdigen Vege-
tation, die stellenweise als dichtor Eason seine Inncnwand bodeckt. „Man
kann den Coecaldarm der Passalus kafer als cine Art Gewachshaus
bozeiehnen, als einen groBcn, von der AuBenwelt abgetrenntcn, geschiitzt
im Korpcrinneren gclcgenon Garten, in dem aber nicht nur oine Sorte von
Pflanzen gedeiht, sondcrn verschicdcnc Gcwaehsc nobcnoinandcr und durch-
oinander sprieBen.“ Es gehSren dazu auch Phycomyccten. Der groBte und
auffallendste Pilz gebort zur Gattung Entorobryus. „Es ist jeden-
falls cine ganze Lebensgemcinschaft, die im Inncrn des P a s s a 1 u s darmes
haust und namentlioh vom botanischen Standpunkt aus dringend einer ge-
naueren Durcbarbeitung bedarf.“ Bei den Larven ist dieso Vegetation
scbwacher. Verf. erblickt in den Pflanzen des Darmes Commensalen. Bei
der Verpuppung und beim Schlupfen der Imago wird das gebautete Tier
jedesmal von seinen Commensalen befreit. Diese sehoinon in dem Holz,
von dem die Passalus leben, niebt vorzukommcn, cs soi denn als Keime;
das Zusammonleben dor Passalus begunstigt die Infektion.

K. Friedoriebs.

Weineck, E., Dio Celluloscverdauung bei don Giliaten
des Wiederkauermagens. (Arcb. Protistenkdo. Bd. 82 1 .
1934. S. 169—202, 16 Abb.)

Die mit cinem auBerordcntlicb komplizierton Verdauungsapparat aus-
gerusteten Opbryoscoloeiden sind wesentlicb an der Verdauung der Eoble-
bydrate im Wiederkauermagen beteiligt. Es bat sicb bestatigt, daB Starke
und Zucker von den Giliaten aufgenommen werden und daB bei der Um-
wandlung der korrodierton StarkekSmer die Zmschenprodukte Erythro-
deztrin, Achroodestrin und Maltose entstehen und zuletzt Glykogen bzw.
Paraglykogen.

Die morpbologiscb bekannte Verdauung dor Zcllulose wurde chemisch
untersucht. Eindcutige Mikroreaktionen zeigten, welebe Umwandlungen
eintreten. Es konnte allerdings niebt fostgestollt werden, ob Zellnlose als
Umwandlungsstufe auftritt, wobl aber gelang der Nachweis dor Glukose,
des Endprodukts, in 600 Mikroreaktionen. Ein Toil davon wird sofort als
Nahrung von don Giliaten vorbrauebt; ein andorcr Toil wird zu Speicber-
stoflen (Paraglykogen) umgowandclt und in Hunger periodon verbraucht.
Die Frage, ob die Infusorion EiwoiB in wosentlichcr Mongo fbr den Stoff-
wecbscl der Wiederkaucr lieforn, bloibt off on, aber dio Autfassung, daB es
sicb urn symbiotisobo Bczicbui^en handolt, ist gorochtrortigt.

K. P' r i e d 0 r i c h s.

Ferotti, R., I Laboratori di Patologia o Batteriologia
del R. Istituto Superiore Agrario di Pisa o I’an-
nesso R. Osservatorio Rogionale di Pitopatologia.
(Mom. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 30.
18 S., 12 Taf.)

Ein mit zablreicben Abbildui^en und Pl3.nen ausgostatteter Bericbt
fiber die Organisation und die Einriebtungon des Lehrstuhles fur Pflanzen-
patbologie und landwirtscbattlicbo Baktoriologie am R^l. bbberen Land-
wirtsebafts-Institut in Pisa mit einem Verzoiobnis der wiebtigsten Vor-
bffentlicbungen der bisberi^on 4 Jabro. Morstatt (Berlin-Dablem).

Abgescblossen am 9. Februar 1935.

Zentrallilatt fDr BakL etc. H AtL Bi 9L No. 22|26.

Ausgegeben am 6. April IQS').

Ifachdruok vsrboten,

St. John's Disease of Pea in Europe.

By William C. Snyder,

National Besearch Fellow in the Biological Sciences for the year ending December 1.
1934, stationed at the Biologische Beiehsanstalt. Berlin-Dahlem, Germany. Not^,
Junior Pathologist, Division of Plant Pathology, IJni\ersity of California, Berkeley,

California, U. S. A.

With 2 figures in the text.

A limited survey of the Fusariosis of pea, P i s u m s a t i v u ni L.,
•was made in central Europe during the summer of 1934. The purposes of
this survey were principally two. First, it was sought to determine what
organisms are associated •with the failure of peas kno'wn in Europe as “St.
John’s disease”, the cause of which has been attributed earlier to F u s a -
rium vasinfectum Atk. v. p i s i van Hall (4). Second, it "was in-
tended to observe the occurrence and distribution in Europe of the major
Fusarium diseases of pea found in the United States, namely rootrot, cau-
sed by F. s 0 1 a n i (Mart.) App. et Wt. v. M a r t i i (App. et Wr.) Wr. f. 2
Snyder (5, 12), wilt, caused byF. orthoceras App. et Wr. v. p i s i
Linford (6), and near'-wilt, caused byF. oxysporum Schlecht. f. 8
Snyder (13). The results obtained are reported herein with the hope
that they may contribute to the mutual understanding of pea Fusarioses in
Europe and America^).

In 1903 V a n H a 1 1 (4) applied the name St. John’s disease to a trouble
of peas found in the southwestern part of Holland that occurred at the end
of June, approximately coincident with St. John’s day (June 24). From
diseased plants a Fusarium was isolated which he tested for parasitism
upon a few peas grown in water culture. This fungus, named F. v a s i n -
feetum v. pisi n. var. without description, has been the commonly
reported cause of St. John’s disease since. Although van Hall’s brief
sketches of the fungus indicate that it is a member of the Section Elegans,
many uncertainties remain as to just which member of this section he was
dealing "with. The writer has been unable to obtain an authentic culture
of F. vasinfectum v. pisi for purposes of study. In spite of the
fact that no culture of the organism has been available and the fungus remains
without a description, European literature contains frequent references to
the occurrence of this Fusarium upon peas.

Other opinions as to the cause of St. John’s disease have also been re-

1) The writer expresses his appreciation to the National Research Council of
America for making possible the study reported here, to Director Dr. E. R i e h m
of the Biologische Beiehsanstalt for the facilities used in the work, and to Dr. 0. A p p e 1
for his helpful suggestion in planning the study. The writer is deeply grateM to
Dr. H. W. Wollenweber in whose laboratory the isolation and identification
work was done, and whose great kindness and generous donation of time enabled the
completion of the study.

ZwelteAbt. Bd. 91.

29

450

William C. S n y d p r ,

corded, a summary of which literature has been published recently by W e u t
(17). Among the Fusaria that have been reported associated with the E u r o -
pean disease are F. redolens Wr. (21); F. f a 1 c a i lira (8), now F.
eqiiiscti (Cda.) Sacc.; F. su hula turn (1), new F. herb arum
(Cda.) Fr. v. a v e n a c e ii m (Fr.) Wr.-, F. v i t i c o I a (14), now F. h e r -
barum v. viticola (Thiini.) Wr.; F. Marlii, now F. solani
V. Martii and F'. oxysporiim Schlecht. (18).

In a study of St. John’s disease in Holland, completed by W en t (17)
in 1934, several species of Fnsaria were isolated from diseased plants and
found by her to be parasitic under greenhouse conditions. The most viru-
lent of these were F. solani v. striatum (Shorb.) Wr., F. solani
V. Martii, and F. o x y s p o r u ni. Of less importance were F. solani
v. medium Wr., F. eqniscti, F. anguioides Sherb., and F.
c u 1 m 0 r u m (W. G. Sm.l Sacc. All Fusaria reported to be pathogenic, and
all varieties of pea tested were found susceptible in some degree. In no case
was F. vasinfectuni v. pisi encountered, although isolations were
made from fields in the same pea region in which v a n 11 a 1 1 (4) had pre-
viously worked. It was Wen t’s conclusion that several species of Fusaria
my cause the trouble known in Holland as the St. John’s disease of pea.

Plan of Survey.

The temtory covered by the present survey was principally central
Europe, Gcnnany in particular. Some collections were also made of speci-
mens received from Italy and Sweden. Most emphasis was given to central
and northern Germany however, for considerable trouble from St. John’s
disease has been reported from this region in recent years, and here are
located major vegetable centers of the country as well as extensive acreages
of large seed companies.

The survey for the most part was timed to coincide with the height
of the occurrence of the St. John’s disease, namely the end of June.

Soon after beginning the survey it became apparent that the name
St. John’s disease was applied more in a general than in a sj)eci[ic sense.
The term was being used to indicate a pea disease complex characterized
by a yellowing of the leaves and dying of the plant usually accompanied
by some root symptoms. Field examinations of „typical“ diseased plants
suggested that more than one agency was opi'rating to produce the trouble.
In some case the symptoms agreed with Fusarium root rot (f)) in showing a
dark brownish cortical decay of fool and root, attended in advanced stages
by a deep reddish discoloration of the vascular system some distance above
the external signs of rot. A wilt-like condition was observed in other in-
stances in which no serious decay of the foot or root was apparent and which
was sometimes not oven attended by the more typical discoloration of the vas-
cular system ranging from tan tho deep rod. These symptoms agreed in many
respects with the near-wilt disease (13). However this disease as well as
wilt (16) is difficult to diagnose by field symptoms alone.

In addition to what appeared to be Fusarium diseases, other known dis-
eases of pea were sometimes alluded to under tho inclusive terra of St. John’s
disease. The Ascochyta footrots were frequently encountered in such dis-
eased fields. Another important disease frequently found was pea. virosis.
Mosaic and other symptoms attending the vims diseases of pea (11) were
often inconspicuous, other than a general appearance of decline, but could

St. John’s Dibeaso of Poa in Europe.

451

be seen on close examinatioTi. A symptom frequently attending the virus
infected plants was a brownish to reddish discoloration associated with the
vascular system, which might readily be confused as evidence that a Fusa-
rium was present. Such discoloration was frequently high in the plant,
and was generally found sterile wdien cultured. Discolored tissue of the
inner root and epicolyl of these plants also generally yielded no organisms
when cultured on agar media, although occasionally F. redolens or
F. s 0 1 a n i v. M a r t i i were recovered.

Owing to the broadly inclusive usage of the name St. John’s disease,
it was necessary to select with some care the diseased plants to bo used for
the purposes of the survey as have been already expressed. An attempt was
made to gather specimens representative of the diseased condition in each
field visited, where the cause was not already clearly due to virus or some
other recognized agent. Especial attention was given to wilt symptoms,
particularly when attended to vascular discoloration, both because this
seemed most characteristic of the more obscure trouble in the disease com-
plex, and for purposes of comparison with the American wilt diseases. Atten-
tion w^as also given to the root rot of peas, with and without vascular dis-
coloration where it was evident Ascochyta footrots were not the prime
cause.

Plants representative of the disease of each field visited were removed
to the laboratory and cultured upon acidified potato dextrose agar. After
thorough washing the vascular cylinder of the diseased specimen was removed
to the plate by cutting away the cortex with a sterile knife. An attempt
was made to isolate only from the innermost and uppermost extremities of
the diseased tissues. A separate Petri dish was devoted to each plant,
and upon the uniform appearance of Fusarium growth from the agar-imbedded
tissue transfers were made to other media and dilution plates poured of
type cultures for a check upon th^ir purity. The Fusaria were then identi-
fied, the results of which are given in Table L

Illustrations of the Fusaria isolated are shown in Fig. 1. Average nioa-
sureinents of representative inacroconidia are as follows:

s n I 1 u m r o U <> Ions

:jr).o .5.0 (27.0—43.0 x 4.4— (J.r>)').

42.0 / 5.2 (38.0—40.0 X 4.8— 5.4)
u H H r I u in s o 1 a n i v. M a r i i i f. 2.

3- soptal(^: 10.0 ^ 4.0 (31.0 50.0 . 4.5— 5.5)

4- soptaio: 47.0 5.0 (38.0 — 54.0 x 4.5 — 5.5)

5- Mrpittlo: 52.0 X 5.2 (45.0—02.0 x 4.7— 0.0)

s a r i u m o x y m p o i u ni f. 8.

3. st‘ptate: 35.5 ' 4.1 (28.0—42.0 X 3.8— 4.3)

4- soi>ittlo: 30.0 X 4.2 (30.0—44.0 x 3.0— 4.0)

5- boptato: 41.1 X 4.3 (30.0—48.0 X 4.0— 4.8)

Fusarium horbarum v, avonaoeum.

3-&optalo: 40.0 x 3.0 (38.0—53.0 X 2.5— 3.3)

4. soptato: 60.0 X 3.4 (40.0—77.0 x 2.7— 4.5)

5-soptato; 67.6 x 3.4 (51.0—80.0 x 2 8—4.8)

O-soptato: 70,0 x 3.3 (68.0—72.0 x 3,1— 3.5)

Fusarium c u 1 m o v u m.

5. soplato: 30.0 x 5.2 (33.0—40.0 x 4.7— 5.7)

*) All mcaHuromonlH aio i^iv(‘n in microns 1bn)u^;h()ul this paper.

29*

Sb. Joha’s Disoa«ie of Pea in Europe.

453

Table 1. Fiequcno^ of \ariouB Fusaria isolated from peas suffering from SI, John’s
disease in Europe dming the summer of 1934.

1

CO

a

1

1 1

g

Locality

No. of
fields

o 2

6 §

|Z5 ft

S

s

ft ^

§.00

O

ft‘

i §

ft‘ ;

ft’

[Kiel . . . .

1

5

4

Berlin

2

14

6

8

6

2

—

Maikoo

2

14

9

6

4

—

—

Crcimany

Halle . . .

2

12

3

—

8

2

—

Calbo

1

10

8

2

2

—

—

Haclmeislobon

2

6

1

4

1

—

—

Aschcrslebcn . . .

4

23

16

2

3

—

Italy

Rome

2

3

—

—

3

—

—

1 Stockholm ....

j Lund^)

( VarbiiTg . ...

1

3

—

2

1

Swoclon

1

2

—

2

1

—

—

1

2

—

—

—

—

1

Total .

" 19 “

94

42

29

28

4

2

From the coitox of a plant obtained from this locality F. equiseti was
isolated in ono instance.

The ekssilication of those fungi is based upon the descriptions given
iiy W 0 1 1 e n w 0 b 0 r.

Pathogenicity of F. solani v. Martii f. 2.

Pathogenicity tests with F. solani v. Martii f. 2 wore made in
the following way. A spore suspension was prepared from fresh cultures of
the fungus isolated in Germany from root rot infected peas, and distributed
near the base of healthy pea plants in a garden plot in Berlin. The inocula-
tion was made June 30 at a time when the plants were 4 to 6 inches high.
Three rows, totaling 28 plants were inoculated and several rows left as controls.
Five to six weeks late over 00% of the inoculated plants exhibited a reddish
brown to almost black cortical decay of the foot and root, typical of na-
tural infections of the disease found in the European survey and in America.
In several instances the decay had penetrated to the vascular system which
was discolored a deep red for some distance above the zone of cortical rot.
F. R 0 1 a n i v. M a r t i i f. 2 was re-isolated from these plants. The con-
trol rows were free of any root disease with the exception of two plants out
of 30 which bore spontaneous infection, one suffering from Ascochyta blight
and the other Pkaarium root rot. At the same time, and also later, pathogeni-
city tests on the same organism were made in the greenhouse by growing
peas in inoculated soil. In these trials the cortex was decayed in a shorter
period, while the control showed no infection. These results leave no doubt
that the Fusarium root rot of pea in Europe and America are the same
disease caused by the same organism (12).

It is interesting to note that in the first culture series of the root rot
Fusarium, made immediately upon the isolation of the fungus, the conidia
were generally in complete agreement with F. solani v. Martii, as
shown by the preceding average measurements. Two or three months later,
however, these same cultures had begun to decline from a condition of
high culture to a point where the spore averages and septation frequencies

464

\V 1 1 ] 1 G m 0. S u y cl 0 r ,

wore lower, approaching the measurements given by .1 (j n o s (5) in the
original description of the fungus in America. This experience is in agree-
ment with recent taxonomic studies in which Snyder (12) showed that
the j)ea root Fusariura, when brought into high culture, is morphologically
the same as F. s o 1 a n i v. M a r I i i and therefore must be considered as
a physiologic form, forma 2, of this fungus on tlie basis of its patho-
genesis for pea.

Cross Inoculation T(‘st.

In connection with the above pathogenicity trials a cross inoculation
experiment on pea, and bean (Phaseolus vulgaris L.), was made
using an isolation of the pea root rot fungus, F. s o 1 a n i v. DI a r t i i f . 2,
from Aschersleben, Germany, and a fresh isolation of the bean root rot orga-
nism, supplied by Dr. W.

% I 11. P i c r c e from Idaho,

/ • U. S. A. The procedure was

as follows:

I A lot of well mixed

' soil was divided into three

a b c <l

Fiftiiio 2. TUustiation of tlio physiologic spocialiKatlon
of F. s o 1 a n 1 » V. M a T t 1 1 f. 2 and F. h o I a n i v.
Marti! f. 3 for thoir rowpootivo (a) and (c)

Boprosent poa and boan plant'* grown bido by &ido m
soil inoculated with the bean pathogen, for in a 3.
Tlie peas remained licalthy while the beans developed
severe root rot symptoms, (b) and (d) Boprosent poa
and bean plants grown side by side in soil inoculated
with the pea parasite, £ o r m a 2. In this case the
peas became badly diseased while the beans remained
healthy. The pea and bean seeds were all planted at
the same time, and the results shown here wore obtai-
ned five weeks later.

portions. One portion was
inoculated with F. s ol a ji i
V. Eartii f. 2, another
with P. s 0 1 a n y V. M a r -
t i i f. 3, and the third was
left untreated. These three
soils were placed in the
greenhouse and on Septem-
ber 4, 1934, each soil was
planted with a mixture of
pea (Alaska variety) and
bean (wax bush type) seeds.
Five weeks later, on Octo-
ber 9, 1934, symptoms of
disease were apparent on
certain of the plants in the
inoeiilaied soils, and all
plants were dug for exa-
mination.

The results were con-
vincing in demonstrating
tho physiologic speciali-
zation of these two forms
of F. s 0 1 a ni v. M a r -
til. In tho soil inocu-
lated with the pea parasite,
forma 2, a dark bro^m

cortical decay was con-
spicuous upon the foot and root ol all pea plants, while the boan plants
in this soil remained healthy, as shown in Kg. 2, b and d. On the other hand,
the peas grown in the soil inoculated with the bean pathogen, forma 3,
were all sound, while the bean plants in this same soil were so severely dis-

St. John’s Disease of Pea in Europe.

455

oased that the leaves were already yellowish and somewhat wilted and the
entire underground part of the plant marked by a dark reddish brown cortical
decay, illustrated in Fig. 2, a and c. Both the pea and bean plants grown
in the untreated soil developed free of diseases.

Although morphologically the same (12), the pea root rot organism
F. s 0 1 a n i v. M a r t i i f. 2 is again shown by this experiment to be distinct
physiologically as measured by pathogenesis, from F. solan i v.Mar-
tiif. 3(:i).‘

Pathogenicity of F. o x y s p o r ii m f . 8.

A preliminary pathogenicity trial was made with a culture of F. o x y -
s p 0 r u m isolated from diseased pea plants grown in the vicinity of Rome,
Italy. A row of ten healthy plants of the variety Early May, growing in the
same garden plot as used in a previously described test of F. s o 1 a n i v.
M a r t i i f. 2, were inoculated June 30 when the peas were 4 to 6 inches
high by pourmg a spore suspension of the organism near the base of the
plants. Six weeks later three of the ten plants were dead and a pinkish spo-
rulation had appeared on the lower portion of the stem under the condi-
tions of high humidity prevailing. Pure cultures of the original F. o x y -
.s p 0 r u m used in the inoculations were recovered from these plants, and
the morphology of the ,sj)ores on the stem surfaces agreed with that of the
fungus when grown in pure culture. No instance of infection with F. oxy-
s p 0 r u m was found in the check rows, in fact these three plants in the
inoculated row were the only cases in which an Elegans Fiisarium was isolated
from this plot during the entire season. The scope of the experiment is
small, and miust bo supplemented by further work, but the results were po-
sitive and appear significant at this time.

Upon culturing the 3 original diseased plants, obtained in the vicinity
of Romo, Italy (Table 1), striking pure cultures of the same fungus were
obtained in each case. The colonies on acidified potato dextrose agar in
Petri dishes were slightly zonate, the medium showed a purple pigmen-
tation, and a light, salmon colored pionnotes appeared on the agar surface
attended by only scant mycelial growth. Dilution plates of the spores were
poured for a cheek upon tlie purity of the fungus and several single spore cul-
tures made. Observations were mad(‘ upon this Fusarium over a period of
about three months in several transfer aeries and on a number of media.
A broad range in cultural behavior was exhibited during this period of a
type previously reported (10) for another fungus of Section Elegans. The
morphological range of the fungus is seen in the conidial measurements.
The same pure culture, under ordinary cultural treatment, varied consi-
derable although no more than was observed in the case of certain Mar-
tiella Fusaria (12). Three-septate conidia from sporodochia at one time aver-
aged 37 X 3.8. The color on rice was red, a distinct odor was discernible
and no sclerotia were observed on the various media. These observations in
addition to those already noted suggested that it might be a member of the
form circle ofF. vasinfectum. At another time the same fungus in
another transfer series but on the same medium agreed more closely with
F. oxysporum v. aurantiacum in color, sclorotia, and in average
measurements of 3-septa te a,nd 5-soptate conidia from sporodochia, which
were 38 X 4.3. and 44 x 4.3, respectively. In still other series best agrec*-
ment was obtained in a comparison with F. oxysporum as seen by the

466

William C. Snyder,

following spore averages: S-septate: .‘>4x4.1, .'3-boplato: .‘57 x 4.2. An
average of the average measurements obtained from the different series
and various media closely approximated W o 1 1 o n w o b e r’s fl S) figures for
oxysporum, and the fungus has been so classified.

The range in pigmentation of the sauK* jnire culture was perhaps more
striking than the morphologic variation and paralleled that observed viith
F. orthoceraa v. pi si (10). It has been well demonstrated in the
past that the manner in which transfers of Fusariuni cultures are made
largely determined both the amount and kind of sporiiiation, and the macro-
scopic characters including pigmentation of the new transfer. Wo 11 en-
web er (17) described and illustrated the phenomenon with a colored plate
in connection with F. b u 1 b i g e n u m Clce. et Mass. v. b a t a t a s Wr.
(F. batatas). Brown (2) also showed that mycelial or jiionnotal, or
sclerotial strains could be obtained from the same culture of Fusariuni
depending upon whether mycclia, conidia, or sclerotia were selected in mak-
ing transfers. A comparable range in fungus variability was obtained by
Snyder (10) with still another Fusariuni, through the use of single spore
isolations. In view of these experiences a number of transfers were made
of the culture of F. oxysporum under consideration, using white
myeelia, colored mycelia, conidia, and sclerotia for the various transfer
inocula. The differences were large. Rice eultures varied from pale flesh
eolor^) to jasper pink, to nopal red or carmine. On oatmeal eiutain transfers
yielded cultures eharaeterized by pionnotes but no pigmentation of the
medium whatever, while in other transfers the jilectenehyma and medium
were stained a deep vinaccous lavender to dark slatc-piupli' to dull pur-
plish black. Some cultures were almost entirety pionnotal, othi'rs almost
wholly mycelial, while some produced sclerotia abundantly and others none.
The previous cultural history and age of the pure culture seemed to have
an important hearing upon the phenomenon, for a transfer of pionnotal
conidia from a non: pigmented subculture. Several factors appear to operate
in the determination of these variable fungus characters, as shown by
Brown (2), and his experience that zonation sometinu's may be a variable
and undependable character was also made by Ihe writer in tills instance.
Identification of the fungus has therelore been based upon the morpholo-
gical characters described by IV o 1 1 <' ii w e 1) e r (20) under tlu* name
F. 0 X y s p 0 r u m.

A preliminary pathogimicity test willi an isolat ion of F. o x y s j) o r u m
from diseased peas in (Ti'rniany also gave evidence of parasilisin, as has
already been reported (17) for the Holland culture. Since Ihese cultures
of F. oxysporum from various parts of Kurope are parasitic upon
pea and agree morphologically with the near-wilt Fusarinm of America (Kl),
they have been identified as F. o x y s p o r ii m f. 8.

'Discussion.

The foregoing observations upon the 8t. John’s disease confirm
"W e n t’s (17) conclusion that this expression has been used to refer to a
pea disease coniplex and not to a specific disease. 'With a few' exceptions
the same Fusaria were found associated with the disease that Went has
recorded for Holland. The most conspicuous exception is in the case of

*) Color standards and nomonclaturo. R. Ridgoway , Washington, I>. C. 1912.

St. John’s Disease of Pea m Europe.

467

F. rc dole ns. This fungus ’was among those most frequently isolated
in Germany but is not recorded in the Holland survey.

Through pathogenicity tests the 'writer has segregated the root rot
disease, caused by h\ solani v. Martii f. 2, from the disease com-
plex, and identified it mth the American root rot of pea. In Holland Went
(17) reports that F. s o 1 a n i v. striatum (Sherb.) Wr. and F. s o -
laniv. Martii were the most vinilent Marticlla Fusaria on pea. A
culture of the former was obtained from Dr. Went and found to agree
with both German and American isolations of F. s o 1 a n i v. M a r t i i f. 2.
Zonation, which has been the chief basis of its differentiation from F. s o -
1 a n i V. Martii, is frequently found in both American and European
cultures of the pea root rot Fusarium under certain conditions, and does
not appear in this case to justify varietal value. W c n t’s parasitic form
ofF. solani v. Martii also may be considered a synonym of F. s o -
1 a n i V. M a r t i i f. 2. The other member of Section Marticlla found
parasitic in the Holland study was reported as F. solani v. medium.
In occasional instances the writer encountered cultures of the root rot Fu-
sarium which in young cultural stages on most media yielded broad conidia
of a type that have been described for F. solani v. medium, but
these same cultures later produced only conidia normal for F. solani
\ . M a r t i i f. 2. The average width for abnormal macroeonidia of the root
rot Fusarium has ranged from 5.6 to 6.5, approximately that recorded for
F. solani v. medium, instead of the normal 4.5 to 5.6. J o n e s (5) has
reported a variation in virulence among different isolations of the root rot Fu-
sarium from pea in America, which also may bo expected in Europe and which
might account for the differences in vinilence observed in this connection.

Pathogenicity tests with isolations of F. o x y s p o r u m obtained
in the survey have not been completed, but preliminary trials 'with the
German and Italian cultures indicate that they, like the Holland isolant (17),
are parasitic upon peas under the conditions of the experiments. Upon
1;he basis of this capacity for parasitism, and also a study of their morpho-
logy, these European isolations from pea are classified asF. oxysporum
f. 8, cause of the near-wilt disease of pea in America. Since the Holland
observations as well as those reported here have shown that the name St.
.John’s disease has come to stand for a pea disease complex, the name St.
.John’s wilt is proposed to designate that specific disease of the complex
caused by F. oxysporum f. 8. The European SI. .John’s wilt and the
American near-wilt are treated in this paper as one disease, caused by F.
oxysporum f. 8 (synonym F. v a s i n f e c t u m v. p i s i).

Two of the major Fusarium diseases of pea in America then, namely
root rot and near-wilt, have been identified with the corresponding Euro-
pean diseases. 1’he third major Fusarium disease, caused by F. ortho-
c c r a 8 V. p i s i , has not as yet been definitely linked with any European
disease of pea. Why this disease has not been encountered in Europe is not
clear. The soil temperature could hardly be considered a limiting factor
especially in view of the widespread infection by F. solani v. Martii
which is favored by slightly higher temperature than -wilt (5, 6). Factors
which might be concerned with the apparent absence of wilt in Europe are
the use of varieties resistant to wilt (15), and soil incompatibility (7, 16).
Since the wilt disease is seed borne (9) it may be assumed that the fungus
has been introduced into Europe.

458

William C. S n y d o r.

Preliminary inoculation tests witli F. r c d o 1 e n s have yielded so
far no positive evidence of parasitism, although plants grown in inoculated
soil have produced poorer growth in comparison with un-inoeiilated con-
trols. However the fact that F. r c d o 1 e n s has becm isolated in some
cases from within the roots of plants grown in inoculated soil, indicates
that the fungus may sometimes be a factor in pea disease.

No organism, isolated by cither Went (17) or the writer from peas
showing the general symptoms of St. John’s disease in Kuroiie, has be(*n
identified as F. v a s i n f e c t u m v. p i s i. The r(>ddish pigmentation
on certain culture media, the presence of terminal <-hlaniydospores, and
shape of the macroconidia given very briefly by van Hall fJ) is evi-
dence that the fungus he dealt with is a member of the Section Klegans.
In view of the fact that F. o x y s p o r u m f. 8 is very close to F. v a s -
infect um morphologically, and since K. oxysporum f. 8 has
frequently been isolated from diseased peas in t.he present survey and by
Went in Holland, to the exclusion of all other Elegans Fusaria with the
exception otF. redolens, which is not usually red in culture iuid which
has a distinct morphology, it seems most logically concluded that v. JI all’s
F. V a s i n f e e t u m v. p i s i is but a synonym of F. o x y s j) o r u m
f. 8. It can not be F. or t hoc eras pisi because van Hall ment-
ions the appearance of macroconidia in very young culture's and s))orodochia.
This synonym is further supported by the fact that strains of F. oxyo-
s p 0 r II in f. 8 have been isolated wdiich exhibit a wide range of morpho-
logic and macroscopic characters and which in certain cultural stages might
have been described under the name of F. v a s 1 n f c c t u m. Such iso-
lations have been made from fields jiointed out as being badly diseased by
F. V a s i n f e e t u ra v. pisi.

Summary.

An analysis of the Fusaria associated with the so called St. John’s
disease of pea is reported on the basis of a survey made in Central Europe
dining the summer of 1934.

Tile name St. John’s disease, although originally applii'd to a single
disease attributed to F. vasinfectum v. pisi, has come to stand
for a pea disease complex characterized by the general symptoms of yidlow-
ing and premature death. Diseases otlier than those eiiusi'd by Fusarium
have been found under this name, incluiling Ascochyta footrots and virosis
of pea.

The following Fusaria were isolated from peas showing symptoms of
disease: F. redolens, F. s o 1 a n i v. M a r t i i f. 2, F. o x y s po-
r u m f. 8, F. h e r b a r u m v. a v e n a c o u ni , and F. c u I in o r u in.

By njeans of inoculation experiments the foot and root rot of pea,
caused by F. s o 1 a n i v. M a r t i i f. 2, was found to be syiiiptomolog-
i^lly and etiologieally identical with the Fusarium root rot of pea in Ame-
rica. The F. solani v. striatum, reported parasitic on peas in
Holland, is classified as a synonym of F. solani v. M a r t i i f. 2.

Evidence is given showing that the isolations of F. oxysporum
from diseased peas in Europe agree with F. o x y s p o r u m E. 8, the cause
of near-wilt of pea in America. The name “St. John’s wilt” is used to
distinguish this disease from the group of pea diseases usually indicated

St. John's Disoasc of Poa in Europe.

459

by the term “St. John's disease”. St. John's ^v^lt and near-wilt are con-
sidered to be the same disease.

The American pea wilt, caused by F. o r t h o c c r a s v. p i s i , so
far has not been found in Hurope.

Although the other Fusaria isolated, namely F. redolens, F. her-
b a r u m v. a v c n a c e u in , and F. c u 1 ra o r u m have not been tested
adequately for parasitism by the writer, evidence given by other workers
indicates that these may be factors in disease under certain conditions of
pea culture.

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1932. S. 577—819.

460

Erwin Reimpseh,

Nachdruck verbottn,

ZurFrage der quantitatiYenBestimmung vonMikroorganismen
nebst einer neuen diesbeziigliohen, aUgemeinen
Bestimmiingsmethode.

[Aus (1pm Institiit fUr allgpmpine Botanik iiiul Pflanzonphysiologip,
Univcrsitat Cluj (Klausenburg). |

Von Erwin Rpimi'seli.

Mit 1 Abbiltlniig im Toxt.

Die grofien Untersehiede mid WidersprUcho in den Ergebnissen der
Wachstumforschnng von Mikroorganismon lassen sieh fast alle auf die Un-
zweekniaBigkeit bzw. FchlerliaJtigkeit der jewpila verwendpten quantitativen
Bestimmnngsmethode zuruckfUhren. Auch gpstatten dipsp Ergebnissp nur
ungefSihre gegonseitige Vergleichp, da sie Mothodpn entstanimpn, dpnpn
verschiedcnc quantitative Bcstimmiuigsprinzipien zugrunde Hc^gpn. Es
ware demnach aueli schon aus dipseni (Irunde angpzpigt, bei glpiehgerich-
teten Untersuehungen iiber Mikroorganismpnwachstum pine fur alle Mikro-
organismen gultigp und anwendbarp Bestimnmngsmpthodp zu benutzen.

Im Bestreben, cine dipsbpziigliebo allgemeinp, einlipitlichp, quantitative
Bestimmung&methode zu schaffen, erprobte ich die brauchbarsten bekannten
Methoden bei versehiedensten Miki'oorganismpn und stellte test, daB bei
Verwendung verschiedener Methoden bei der glcichen Mikroorganismen-
aufscliwemmung die Ergebnissp bedeutend variierten, urn wieviel grOBer
miissen diese Untersehiede dann erst bei morphologisch verschiedenen
Mikroorganismen sein. Eino allgemeinp quantitative Be-
stimraungsmethode muBte demnach in erst or J^inie
dor auBeren Morphologie und dem spezifischen
Gewicht der Mikroorganismen Reehnung tragen.
Wie wenig aber diese Forderung berucksichtigt wird, kann man aus der
Leichtfertigkeit ersehen, mit der die verschiedenen Alethoden zur quanti-
tativen Bestimniung von morphologisch und gewichlsspezifisch ganz un-
geeigneten Mikroorganismen verwendet werden. Zur quanlilalivcm He-
stinimung von spczicllen Mikroorganismen mogen sich diese einzednon Bc-
stimmung8nu‘thod(>n - von ihren oft groBen Fehlergrpnzen abgc'sehen -
sieher rccht gut eignen, fiir eine allgemeine Bestimniungsmethode konirat
indes nur die auf dem Sedimentierpr inzip (lurch Zentrifugieren fuB('nde Me-
thode in Betraeht. Diese Methodo erinftglicht es allein, die gewichtsspi'zifi-
schen Untersehiede der verschiedenen Mikroorganismeu (lurch Anderung der
Zentrifugiergeschwindigkeit Oder -dauer, bei VernachlSssigung ihrer auBeren
Form, bequem zu berilcksichtigon. Bei der so oft angewandten Zahlmothode
der Mikroorganismen mittels Zahlbammern und -platten ist diese Boruck-
sichtigung iinmoglich oder doch wenigstens sohr erschwert, vor allcm aber
nic durchgefiihrt worden! Es ware naralich die Moglichkeit gegeben, die
bei der Zahlkammermethode so stdrend empfundene rascho Sodimentier-
tendenz der spezifisch schweren Mikroorganismon. durch Zugabo spczifisch
sehwerer Fliiss^keiten, wie Glyzerin z. B., zur normalen Snspensionsflussig-
keit der Probe teilweise zu beheben. Wahrend aber der zweite Faktor —
die auBere Form der Mikroorganismen — bei der Zentrifugiermethode nicht

Zur Fra go dor quantitativeii Bestimmung von Mikroorganismen usw. 461

■wcsentlicli von Belang ist, fallt ihm bei der Zahlmethode auaschlaggebcndc
Bcdcutnng zu und ist ein unuberwindbarcs Iliiidernis fiir die Ausgestaltung
dieser Mcthode zii ciner allgemcinen, fiir alle Mikroorganismen giiltigen
qnantitativcn Bestunm ungsmethodc.

Die fUr die Blutkdrpcrchenzahlung gcscbaflenen, verschiedcncn Zahl-
kammern (1) cignon sich auch ganz gut zur zahlcnmaBig quantitativeii Be-
atimmung von in Form und spezifischem Gorncht den Blutkdrperclien nahc-
konimenden Mikroorganismen, doeh Mikroorganismen, die wesentlich von
einer isodiametriscben Gestalt abweichcn, odor eino gewisse GrbBe erreichen,
Oder andcre die Zahlung stdrende Eigentiimlichkeiten, wie Gruppen-, Knauel-,
Faden- u. a. -bildung zeigen, mit der Zalilkammer zahlenmaBig genau zu
erfassen ist wenig aussichtsrcich, vrenn nicht gar unmoglich. Svanberg{2)
schatzt die Genauigkeit der Zahlmethode schon bei dem relativ giinstigen
Objekt der Bierhefe auf 4%, bei dem schon weniger giinstigen Objekt der
cinzelligcn GrUnalge Stichoeoccus minor stellte ich als wahr-
seheinlichen Fehler der Zahlungen 7,4% test. Bei morphologisch noch un-
geeignetoren Objekten niUBte mit einer Fehlergrenze von weit iiber 10%
gerechnot werden. Ebensowenig kommen bei solchen morphologisch ungiin-
stigcn Mikroorganismen zahlenniaBige Bestimmungsmethoden in Betracht,
Tvie sie bei Baktorien oft erfolgreich angewendet werden, so das N a u -
mannsche Flatten- (3) und das Lindnersche Trdpfchenkulturver-
fahren (4) Oder die Zahlung mittels der L a f a r schon Zahlplatte (5) und
mit dem Ultramikroskop (6).

Quantitative Bestimmungsmethoden fUr Mikroorganismen, denen quanti-
tative Bestimmungen ihrer Abbau- bzw. Aufbauprodukte zugrundo liegen,
mogon in besonderen Fallen wohl angezeigt sein, allgomein sind sie jedoch
auch nicht anwendbar, da die vcrschiedencn physiologischen Prozesse von
vielcn Faktoren abhangig sind und diese in den vcrschiedencn Versuchen
nicht immer glcich sein miissen. Aus der Quantitat der Stoffwechselprodukte
laBt sich denmach immer nur ein ungetahrcr SchluB auf die Quantitat dcr
in einer Kultur befindlichen Mikroorganismen ziehen und die physiologischen
Prozesse sind demnach kein ausschlicBlicher Ausdruck der Zellbildung (7).
Somit gibt auch die in der Braupraxis oft angewandte Methodc. durch Be-
stimnien dea spezifischen Gewiehtos der Bierwurzo bzw. deren Alkoholgehalt
auf den Waehstnmsverlauf der llefe zu schlieBeii, auch nur annahernd ge-
nauc Daten. Von diesein Standpunkt aus betraehtet eignen sich auch ne-
phelometriacho Melliodeu nicht immer zur quantitativeii Bestimmung von
Mikroorganismen, obzwar sie in besonderen Fallen Vcrgleichswertc fiir die
einzelnen Proben eines Versuches reeht gut zulassen. Aus der Inteiiaitat
der Griiiifarbung z. B. von Kulturen einzelliger Griinalgen auf deren Zelleii-
zahl zu schlieBen ist nur fiir grobe Orientierungen zulassig, fiir genauere
Bestimmungen kommt eine diesbezUgliehc Methodc auch nicht in Bi'tracht
schon intolge der leichten Bceinflussung der Algenchromatophorcn durch
innero und auBere Faktoren.

Wenn jedc der erwahnten Methoden ihre Vorteile fiir die quantitative
Bestimmung der entspreehenden Mikroorganismen. fiir die sie gcschalfen
wurdc, auch haben mag, so ist die auf volumetrischer Erfassung und doch
zahlenmafiiger Wiedergabe der Mikroorganismen aufgebautc P r a z i p i -
tiormethodc zum Ausbau einer allgemoin giiltigen, quantitativen Be-
stimmungsmethode fiir Mikroorganismen am geeignetsten. Auch in bezug
auf Schnelligkcit und Einfachheit der AusfUhrung sowie Zuverlassigkeit ist

462

E r i n R e i m e s c h ,

sie alien anderen ilethoden uberlegen. 'nenn es aneh nicht von der Hand
zu Tis'eisen ist, daB auch diese iletliode ihre Xachteile besitzt. Einmal er-
fordert sie eine ■weitaus groBere Apparatur als die Zahlkamniermethode
und ZTS'eitens miissen die zur Yervendung kommeiiden Prazipitometer un-
geniein sorgfaltig nnd gleicMorniig hergestellt sein, und trotzdem ■v\ird es
infolge Sedimentiening eines Teiles der Hikroorganisnien an der trichter-
formigen Wandung der t^ergangsstelle zwischen breitereni und schmalerem
Teil des PrSzipitometers nie zu einer vollkonimen quautitativen Erfassung
der ilikroorganismen in der betreffenden Probe kommen. Ich beobaehtete,
daB sugar bei peinliehst genau gearbeiteten und ausgesucht einwandfreien
Prazipitonietern naeb mehnnaligeni vorsicbtigen Auhvirbeln mittels eines
feinen Pinsels und nachtraglichem Umpipettieren der iiber dem Niederschlag
der bereits zentrifugierten Probe befincUichen Fliissigkeit in andere PrSzipito-
meter und entsprechendcm Zentrifugieren oft iiber 5% der Gesamtmikro-
organisnienmasse im kritiscben PrSzipitonieterteil zuriickbleiben. Dieser
Fehler kann leider nicht als konstanter Fehlerfaktor in Eeehnung gebracht
werden. da er von PrSzipitometer zu Prazipitometer wechselt, von der
auBeren Form der suspendierten HKkroorganismen, der Suspensionskonzen-
tration der Mikroorganismenaufschwemmung und schlieBlich von der Zen-
trifugiergeschwindigkeit abhangt, Faktoren, die von Fall zu Fall wechseln.
Dieser Fehler ist beim Zentrifugieren von mehr isodiametrischen Mikr n-
organismen verhaltnismaBig kleiner als bei solehen mit groBen Achsenunter-
schieden. soz. B. bei Saceharomyces cerevisiae 2,4, bei S t i -
choeoceus mirabilis dagegen schon 5,7%. Ein „Entlangrollen“
isodiametrischer Formen unter der ‘Wirkung der Zentrifugalkraft an der
triohterformigen GefaB'W'and der Prazipitometer ist demnach hinsichtlich
quantitativer Sedimentierung einem „Entlanggleiten“ nichtisodiametriseher
Formen uberlegen. In schoner und eindringlicher Weise konnte diese Tat-
sache unter dem ]dikroskop beobachtet werden in Yersuchen auf Objekt-
tragem mit verschiedenen Mikroorganismen-x\ufschwemmungen, ■wobei die
Zentrifugalkraft dureh die horizontal vrirkende Saugkraft eines seitlichen
Filtrier-Papierstreifens und die Reibung der Mkroorganismen an der trichter-
formigen Prazipitometerwand dureh die unter Zusanunenuirkung von Schwer-
kraft und Saugkraft entstehende Reibung der Mikroorganismen am Objekt-
trager wiedergegeben •wui-den. Die von C a r d o t und R i c h e t (8) bei
ihien llilchsaurebakterien-Yersuehen some von Schweitzer (9) bei
seinen Hefewachstums-Untersuchungen beobachteten groBen Unterschiede
ini Ergebnis der Einzelproben eines Versuches, beruhen meiner Ansicht nach
viel mehr auf dieser und ahnlichen technischen Unzulanglichkeiten dor ver-
wendeten Methods als auf Individualitats-Unterschieden der einzelnen Zellen.
Krueger (10) gibt als mittleren Fehler in seinen auch auf dem Sedimentier-
prinzip aufgebauten quantitativen Bestiminungsmethode 1% bei dichten
und 4% bei weniger konzentrierten Hefesuspensionen an, wahrend er bei
der Zahlmethode 2 bzw. 5% Fehler feststellte.

In der Apparatur der neuen allgemeinen quantitativen Bestimmungs-
methode flir Mikroorganismen wurde die bei den verschiedenen Prazipito-
metem so storend empfundene trichterformige tJbergangsstelle dureh Ver-
wendung von Prazipitometem mit nur paralleler Wandung vermieden. Das
bei anderen Zentrifugiermethoden gleiehzeitige Nebeneinanderlaufen von Sedi-
mentierung und Dosierung wurde in der neuen Methods in ein getrenntes
Kacheinanderlaufen aufgelhst. Der daraus sich ergebende Zeitverlust wird

Zur Frage der quantitativen Bestiinmmig von Mikroorganismen nsw. 463

cladiirch wettgemacht. daC die Form der neucu Prazipitier- und Dosierrolrrchen
das Zentrifugieren von nicht nnr 4, sondern von gleich 16 Proben in einer
gewohnlichen 4-annigen Eccozentrifuge znlaBt. Die Dosierrohrcben
sind ungradiert, jedoch beziiglich Gleicliheit ihres Fassnngsranmes genau
kontrolliert. Die Ablesnng der Sedimenthohe wd weder niit Kathetometer
nocb Lupe. sondern mit einem Horizontalmikroskop und M i -
krometerokular vorgenommen, vrodurch die kostspielige Gradierimg
der Prazipitometer iiberflussig und die Ablesung genauer nird. Die Proben
werden aus den KulturgefaBen niittels sterilen. mit ' mo ccm Graduierung
versehenen Pipetten sofort nach dem Aufschiitteln der Kultiu-en entnommen.
Bei vielen Versuchen auf dem Gebiete der Mikroorganismenphysiologie kann
ein Aufschiitteln der Proben bei jeder Probeentnahme oft von grofier Be-
deutung und Effektauslbsung sein, ^e z. B. bei Bestimmungen des Endver-
garangsgrades von Hefen (11). bei Untersuchungen iiber den Einflufi des
Sauerstoffs (12) oder der Lageverhaltnisse des Hefesedimentes auf die Ga-
ining (13), u. a. In solchen Fallen, \ro eine Sauerstoffzumischung durch
Sehutteln der Proben vermieden werden soil, ist es angezeigt, die Eein-
kulturen des Versuches nicht in einem GefaB anzulegen, sondern in mehreren
ill), die durch ein entsprechendes Stativ, -was die auBeren Faktoren an-
betrifft, in voUkommen gleieher Lage gehalten \rerden. Zu jeder Probe-
entnahme wird ein neues KulturgefaB genommen, dessen Sediment dann
durch Sehutteln in Suspension gcbraeht 'vrerden kann. Das Anlegen der
Versuchsproben in mehreren Ideineren GefaBen ist auch schon aus prakti-
sehen Griinden anzuempfehlen, da bei einer mehrmaligen Probeentnahme
aus einem GefaB nur zu leicht Fremdinfektion eintreten kann und dadurch
der ganze Versuch in Frage gestellt wd. Der Konzentration der Suspension
entsprechend entnimmt man pro Probe 0.6 — 2 ccm der Mikroorganismen-
aufschwemmung und pipettiert gleich in die bereitstehenden paraffi-
nierten Zentrifugierrohrehen uber. Dieses sind einfache,
stumpf endigende Kohrehen von 11,5 cm Lange und 2 ccm Fassungsraum.
Die Paraffinierung ist zvecks Yermeidung von Verlusten durch Wand-
benetzung erforderlich und wird zvreckmaBig in der Art ausgefuhrt, daB
man die trockenen, erhitzten Ebhrchen mit einem an einem starken Draht
befestigten und heiBem, geschmolzenem Paraffin vollgesogenen TVattebausch-
chen einige Male durchstSBt und sie dann sofort in kaltes "Wasser hangt.
Nach ein^er Ubung kann leicht eine einvandfreie, gleichmaBige Parafti-
nierung erzielt werden. Das AusgieBen der Eohrehen mit heiBem Paraffin
ist "weniger gut. da es immer zu Streifen- und Wulstbildung konomt, ^vie
schnell auch immer gearbeitet vird. Ob die Proben mit oder ohne Zugabe
von Formalin, NaOH-Losung u. a. zentrifugiert ■werden, richtet sich nach
der Art der Mikroorganismen; bei Garungsmikroorganismen ist er cntschieden
angezeigt, urn ein etwaiges Aufwirbeln des Mederschlages durch aufsteigende
Gasblaschen zu vermeiden. Bei solchen oder ahnlichen Zugaben muB dem
Endverdiinnungskoeffizient der Probe immer Eechnung getragen ■werden und
die Gleichheit dieses ungemein wichtigen Faktors in alien Proben eines Yer-
suches durch entsprechendes Variieren der Zugabeflussigkeitskonzentration
ge^wahrt bleiben. Abgesehen davon, daB die Sedimentiergesch^windigkeit der
Mikroorganismen von der Konzentration der Suspensionsflussigkeit gnmd-
legend beeinfluBt ■wird, bedingen Formalin u. a. Zugaben die verschiedensten
chemischen und physikalischen Umwandlungen an der MikroorganismenzeUe,
die sich nur zu oft auch auf die Komprimierbarkeit des zentrifugierten Sedi-

464

Er-nin Reimeseh,

ineiites auy’ss’irken und dadurch die Niederschlagshdhe beeinflussen konnen.
Wenn nielit unbedingt niitig. sollen solehe ZusStze nach MSglichkeit ver-
mieden werden.

Ich fand nach Zugabe von 1 ccm einer 25proz. Olyzerinlosung zu 1 ccm einer
Iproz. Hefeaufschwemniung gegenuber Proben mit 1 ccm destillierten Wasserzusatz,
bei gleicher Zentrifugierdauer und -geschwindigkeit Unterschiede bis zu 7°o in der
Hohe des Hefesedimentes. Um aueh in den Proben mit dem Glyzerinzusatz eine
quantitative Sedimentierung und die Sedimenthohe wie in den Proben mit Wasser-
zusatz zu erhalten, mufiten diese noch erheblieh langer zentrifugiert werden, ein Be-
weis filr die Beeinfliissung der Sedimentiergesehwindigkeit durch die Diehte der Sus-
pensionsfliissigkeit .

Die zur quantitativen Sedimentierung von Mikroorganismen notwendige
Zentrifugiergeschvindigkeit und -dauer ist auch noch von Form und spe-
zifischem Ge'vricht der suspendierten Organismen abhangig. Um moglichst
wenig Zeit zu verlieren, ist ein kurzes Zentrifugieren der PrazipitierrShrchen
bei hoher Umdrehungsgesch\rindigkeit empfehlenswert. Mit 15 Min. Zentri-
fugieren bei 2000 — 2500 Umdrehungen pro Minute ist aueh bei den kleinsten
und spezifisch leichtesten Mikroorganismen eine quantitative Sedimentierung
zu erreichen. Durch mikroskopische Priifung der iiberstehenden Fliissigkeit
auf etwa noch vorhandene Mikroorganismen ist eine sichere Handhabe ge-
geben. den Zeitpunkt der quantitativen Sedimentierung festzustellen. Nach
dem Zentrifugieren der Prazipitierrohrchen wird die iiberstehende Fliissig-
keit nun mittels lang und diinn ausgezogener Pipetten vorsichtig abpipettiert,
T\-obei sich die seitlich angebrachte PipettenOffnung immer knapp iiber dem
Mikroorganismensediment befindet. Der letzte Tropfen der Suspensions-
fliissigkeit verbleibt im Prazipitierrohrchen. Es ist zweckmaBig, zwischen
Mund bzw. Saugball mit Ventil und Pipette einen 0,5 m langen, diinnen
Gummischlauch einzuschalten, ■was das Manipulieren mit der Pipette un-
gemein erleichtert. Durch Schutteln der Prazipitierrohrchen wird das Sedi-
ment im letzten Tropfen der Suspensionsfliissigkeit wieder aufgeschwemmt
und dieser dann durch eine drehende Bewegung der nach unten geneigten
Rohrchen an deren Rand gebracht.

Die eigentliche Dosierung des Mikroorganismensedimentes geschieht in
besonderen DosierrShrchen.

Dieses sind starkwandige 11,5 cm lange und 6,3 mm dicke Glasr6hrchen mit
genau gleichem Fassungsraum und Durchmesser im Lichten. Am unteren Ende sind
sie 1 cm hoch konisch geschliffen und blank poliert zwecks Erleichterung der Auf-
nahme des die Mikroorganismen einer Probe enthaltenden Tropfens vom Bande der
paraffinierten Prazipitierrohrchen. Durch einfaches Beruhren des Ti’opfens mit den
Dosierrohrehen und entsprechendes Neigen wird dieser, dank der Kapillarkraft, quanti-
tativ in die Dosierrohrehen libergeftihrt. Im AnschluB daran wird an die Offnimg des
DosierrShrehens mittels eines Glasstabes ein Tropfehen E u g e n o 1 gebracht und
dieses ungefahr 1 cm weit in das Bdhrchen einlaufen gelassen, so daB sich imter der
FltissigkeitssJLule mit den suspendierten Mikroorganismen eine Eugenolflttssigkeits-
sfiule befindet (s. Abb.).

Der Zweek dieser Manipulation, die einfaeh und rasch durehfiihrbar ist,
liegt in verschiedenen sich daraus ergebenden Toiteilen. Vor allem erhalt
man dadurch dank der UnlSslichkeit des Eugenols in Wasser und seines
spezifischen Gewichtes von 1,027 einen ebenen, glatten Grenz-
spiegel zvrischen den beiden FlussigkeitssSulen.
auf den sich die Mikroorganismen nach dem Zen-
trifugieren absetzen, wodurch das Sediment seharf
abgegrenzt erscheint, was flir die Genauigkeit der
Ablesung der NiederschlagshShe von groBer Bedeu-

Zur Frage dar quantitativen Bestixoniuiig von !^^i]rr oorg qn^|aTn ftn us\r. 465

tung ist. Weiter konnen Ablesungen aueh bei ganz geringen Nieder-
scblligeii vorgenommen 'werden, was bei gewShnlichen PriLzipitometem mit
rund zugeschmolzenem Ende nicbt moglich ist, da Werte, die unter dem
ersten Gradationsstricb liegen, nur abgeschatzt werden kOnnen.

Die Dosierrohrchen werden mit einem schmalen Gummiband, das fiir Eugenol
fast undurchlassig ist, abgeschlossen. Eine Durchdiffundierung konnte bei Eugenol
uberhaupt nur nach 24 Std. in Spuren festgestellt werden, w&hrend andere Fltissigkeiten
mit einem spezifischen Gewicht iiber 1, wie Tetrachlorkohlen-
stoff, verschiedene 4.therische Ole u. a. bereits wkhrend des
Zentrifugierens merklieh durchdiffundieren oder Gummi gar
losen. Auch besitzen diese Fltiss^keiten gegenuber Eugenol
noch den Nachteil, da(3 sie bei Uberachichtung mit Wasser
infolge ihres sehi* hohen Brechungsexponentes nicht eine
dilnne, belle Beruhrungslinie zeigen, sondem eine dicke. dunkle
Linie, was die Ablesung beeintr&chtigt. Der VerschluB mittels
Eugenol tmd Gummi gew&hrleistet weiter eine liberaus leichte
Reinigung der Dosierrohrchen, was bei zugeschmolzenen Prii-
zipitometem oft recht schwierig ist. Die Dosierrohrchen
werden mit einer an einem RoBhaar befestigten Jrleinen
Ellammer senkrecht aufgehangen, wobei ein unnotig langes
Pendeln durch eine einfaohe Bremsvorrichtung auf
ein Minimum abgekurzt wird. Als Widerstandsmedium dient
Quecksilber, woven sioh einige Kubikzentimeter in einem
Porzellanschalchen unter dem Dosierrahrehen befinden und
in welches dieses 1 — 2 mm tief hineinhangt. Die Beleuehtung
des Objektes wird am besten durch eine Mikroskopierlampe,
die in einem Holzkasten mit vorgesohaltetem Wasserfilter
eingebaiit ist, vorgenommen. Die ganze Apparatur wird zweok-
maBig auf einem stabilen Wandtisch, wie er bei analytischen
Waagen zTir Anwendung kommt, aufgebaut, um Brschiitte-
rungen imd somit auch die minimalsten Sehwingungen der
Dosierrahrehen auszuschalten. Die kraftige Durchleuohtung
des Objektes ermaglicht es, den Beriihnmgsspiegel zwischen
Mikroorganismen>Sediment und Eugenol und zwis^en Nieder-
schlag und der tiberstehenden Suspensionsfltissigkeit auf Eben-
heit, die Suspensionsfltissigkeit auf quantitative Sedimentie-
rung sowie den Niederschlag auf fehlerlose Schichtung zu
kontroUieren. Praktisch genommen wird den Dosierrahrehen
wohl immer eine senkrechte Lage gegeben werden, grdBere
Abweichtmgen von der Senkrechten werden llbrigens imMikro-
skop sofort erkannt. Wie wenig eine nicht ex^t senkrechte
Lage der Dosierrahrehen die Bichtigkeit der tatsachliohen
Niederschlagshdhe bei der Ablesung beeinfluBt, geht aus der

mathematis^en 'Cberlegung hervor, daB bei dem gegebenen Abb. 1. A. Dosierrahr-
Verhaltnis zwischen Objekt und Entfernung des Okular- c}xQn im Langsschnitt :
mikrometers vom Objekt und bei dem mioimalen Ab- ^ Gummiband, b Sus-
weichungswinkel der Dosierrahrehen von der Senkrechten pensionsfliissigkeit, cMi-
prakti8<£ genommen die Horizontalprojektion der Sediment- kroorganismensediment,
hahe mit deren wahrer Lange zusammexifallt. Eine diesbeztig- ^ Eugenol. B. Dosier-
liche Eehlerquelle ist demnach voUkommen auBer acht zu rahrchenimQuersehnitt.
lassen.

Wenn beim Zentrifugieren der Prazipitierrohrehen nur auf quantitative
Sedimentierung der suspendierten Mikroorganismen geachtet werden muB
und ein Cberzentrifugieren, was Dauer und Umdrebungsgescbwindigkeit an-
betrifft, Mer niciht nachteil% ins Gewiebt fSUt, muB beim Zentrifugieren
der DosierrShrehen eine gewisse Vorsicht beachtet werden. Ein zu langes
Zentrifugieren kaim sich Mer beziiglich Genauigkeit der Ablesung oft un-
angenehm auswirken. In Yergleichsversuchen beobachtete icb, d^ Mikro-
organismenniederschlbge, die 10 Min. bindurch bei 1000 Umdrebun|en pro
Mnute zentrifugiert waren, dureb weiteres Zentrifugieren und Steigerung

Zwelte Abt. Bd. 91. 30

466

Erwin Reimesoh,

der Zentrifugiergeschwindigkeit wohl verdichtet werden kfinnen, die Kon-
stanz ihrer Ilohe darunter jedoek ungeniein leidet. In solclien, eine Stiinde
lang bei einer Umdrehungsgeseh'win^gkeit von 2500 Touren pro Minute
zenVifugierten Proben mit auBerst komprimierten Mederschlagen nabm die
MedersehlagshShe nacb Einstellen des Zentrifugierens in Form einer kubi-
schen Parabel zu. Tim solche aus dem Ausdehnungsbestreben eines jeden
iibermafiig zentrifugierten, komprimierbaren Niedersehlages entstekende
Differenzen auszusckalten, die ganz besonders im Anfang gleieh nach Auf-
horen der Zentrifugalkraftwirkung recht groB sind, ist es empfehlenswert,
Ablesungen solcher Niederschlage nickt sofort naek dem Zentrifugieren,
sondern erst nack einer gewissen Zeit vorzunekmcn, bis diese Tendenz der
Sedimentpartikelchen beendet bzw. soweit fortgeschiitten ist, daB die schon
auf dem assymptotischen Teil der Kurve liegenden Wcrte vernachlassigt
werden konnen. Allenfalls ist ein zu langes und kraftiges
Zentrifugieren der DosierrShrchen zu vermeiden.
Es stellte sick keraus, dafi in Proben mit gleieken Mikroorganismen, jedoch
mit doppelter Suspensionskonzentration, die Niederschlagshoke nach dem
Zentrifugieren nickt genau doppelt so groB war wie in Proben mit einfacher
Suspensionskonzentration. Dieses traf ganz besonders bei voluminosen
Mikroorganismen zu und bei Yerwendung koker Umdrekungsgeschwindig-
keiten beim Zentrifugieren. Die Tatsache ist dadurch erklarlich, daB in diesen
Kiederschlagen mit relativ groBen Zwisehenraumen unter den Sediment-
partikelcken der Komprimierkoeffizient ein relativ grSBerer ist als bei Nieder-
schlagen kleinerer Mikroorganismen, die verhaltnismaBig dickt aneinander
schlieBen. So stellten sick beiStichococcus minor - Eeinkulturen
mit doppelter Suspensionskonzentration Unterschiede ein, die nur 2,1%
unter der doppelten MedersehlagshShe einfach konzentrierter Suspensionen
standen, bei 5faekem Konzentrationsunterschied stieg der Untersehied
schon auf 10,6%, bei grofien Mikroorganismen wieProtocoeeus viri-
d i s fand ich als entsprechende Unterschiede 3,7 und 16,2%. Ditse durch
die Konzentrationsunterschiede der Suspensionen bedingten Fekler konnen,
wie Versucke zeigten, erkeblich herabgedriickt werden bei Beachtung der
schon vorker ausgedriickten Forderung. daB Mikroorganismen nur so lange
zentrifugiert werden sollen und auch das bei einer moglichst niedrigen Um-
drehungsgeschwind^keit als zu ihrer quantitativen Sedimentierung un-
bedingt erforderlich ist. Proben von Stichococcus mirabilis-
Aufsckwemmungen, die 1 Std. lang bei 3000 Umdrehungen pro Min. zen-
trifugiert wurden und bei doppelter Konzentration in der Niederscklags-
kohe Unterschiede von 2,8% aufwiesen, konnten so im Feklerergebnis auf
0,70% verbessert werden. Bei ganz genauen Untorsuehungen ist naturlieh
auch dieser Fekler unerwiinscht und dann ist als letzte Moglichkeit, diese
Feklerquelle iiberkaupt auszusckalten, nock die Handhabe gegeben, eine
jede Probe bzw. eine jede Versucksserie in einem Vorversuek auf ungefakre
Suspensionskonzentration zu priifen, um dann evtl. groBere Unterschiede
durck entsprechende Verdttnnungen auszugleicken. Diesen Verdiinnungen
wird selbstredend dann im Endergebnis Rechnung getragen.

Die Angabe des Gesamtkubikinhaltes von Mikroorganismen
in einer Kidtur, wie dieses durck die Zentrifugiermethoden gesckiekt, ist
der einfaoken zahlemnaBigen Angabe der Zaklmethoden nickt nur an Ge-
nauigkeit, sondem auch an wissenschaftlichem und praktischem Wert weit
iiberlegen, da die Masse der Mikroorganismen nickt blofi eine Funktion der

Zur Frage der quant itathcn Bestimmung \on Mikroorganismen usw. 467

Anzahl, sondern auch ihrer Grofie ist. Da mir die Zentrifugiermetliode die
Hauptfaktoren des Massenausdnickes. Anzahl iind GroBe der Miki’oorganismen
gleichzeitig beriicksichtigt, wird erst durch das Ergebnis dieser ilethode
eine richtigc Beurteilung der verschiedenen Fiinktionon bei Mikroorganismen
ermoglicht, da letzten Endes dicse doch eine direkte Funktion der tats^cli-
lichen Protoplasmamenge sind imd nur in zTV^eiter Reihe von dor Zahl ab-
hangen, auf die sich diese Protoplasmamenge verteilt. Beiirteilungen von
physiologischen Prozessen bei ilikroorganismen, die sich nur auf zahlen-
inaBiger Angabe dieser in einer Kiiltur stiitzen, kdnnen ganz besonders in
Vergleichsversuchen mit anderen, morphologisch verschiedenen ilikro-
organismen infolge Nichtberiicksichtigung der MikroorganismengroBe zu
groBen Fehlschliissen ftihren.

Um die Anzahl der auf einen Teilstrich des Okularmikrometers kommen-
den Mikroorganismen bei der Sedimentablesung zu bestimmen, venvendet
man oft durchgozahlte, zahlenmaBig genau bestimmte Aufschwemmungen
der betreffenden Mikroorganismen. Es ist von groBer Wichtigkeit, dazu
frische und unter moglichst normalen Bedingungen gezuchtete Rein-
kulturen zu verwenden unter genauester Beriicksichtigung der morpholo-
gischen GroBenmaBe sowie etwaiger morphologischer Eigentiimlichkeiten,
die sich auf die Sedimentierung auswirken konnten. Bei alien quantitativen
Bestimmungen desselben Mikroorganismus werden dann nur noch die mor-
phologischen GroBenmaBe kontrolliert und der Gesamtkubikinhalt der
betreffenden Probe, der selbstredend auch als solcher allein verwendbar ist,
kann sofort durch eine einfache Proportionalrechnung auf die ZoUenzahl
umgerechnet werden.

Der Zuverlassigkeits- und Genauigkeitsgrad der Methode viirden in der
Art bestimmt, daB verschiedenen Mikroorganismen-Reinkulturen mehrmals
je 16 Proben entnommen und deren Gesamtkubikinhalt an Mikroorganismen
bestimmt wurde. Es mirde darauf geachtet, die Konzentration der Mikro-
organismenaufschwemmungen in moglichst normalen Grenzen zu halten,
so daB 2 ccm Suspension ungefahr 0,5 — 1 mm Sediment im Dosierrohrchen
entsprachen. Bei der Probonentnahme wurde auf vollkommene Homo-
genitat der Aufschwemmung durch ausgiebiges Schiitteln und naehtrag-
liches Filtrieren dieser durch lockere Watte, bei Vermeidung jeder Fremd-
infektion, Gewicht gelegt. Nach den G a u 6 schen Formeln ergab sich bei
der Genauigkeitsberechnung der Methode als mittlerer Fehler des
Gesamtergebnisses 0,85% und als wahrseheinlicher
Fehler 0,57% bei der quantitativen Bestimmung morphologisch glin-
stiger Mikroorganismen. Bei Saccharomyces cerevisiae wurde
die Fehlergrenze dieser quantitativen Bestimmungsmethode auch noch auf
physiologischem Wege kontrolliert durch Bestimmung der Kohlensaure-
entwicklung in der Zeiteinheit der verwendeten Proben mittels Reimesch-
schem Garungssaccharometer (15), wobei die Unterschiede in den Einzel-
proben in den Bereich der dieser Kohlensaure-Dosierungsmethode eigenen
geringen Fehlergrenze fielen.

Zum Schlusse danke ich Herrn Prof. J. G r i n t z e s c o fiir die For-
derung dieser Arbeit.

Zusammenfassung.

Von sSmtlichen bisher verwendeten Methoden zur quantitativen Be-
stimmung von Mikroorganismen eignet sich am besten die Zentrifugier-
methode zum Ausbau einer allgemeinen diesbeziiglichen Methode. Die bei der

30 *

468 Horowitz - Wlassowa und N. W. N o v o t e 1 n o w ,

Zentrifugiermethode so stdrend wirkende trichterformige tJbergangsstelle der
Prazipitometer wurde durch Verwendung von Dosierrohrchen mit nur pa-
rallelen Wanden und durch Trennung der Dosierung von der Sedimentierung
behoben. Das Mkroorganismensediment wird auf einen geraden, ebenen
Fliissigkeitsspiegel abgesetzt und die Niedersehlagshdhe in den ungradierten
Dosierrohrchen mit Horizontalmikroskop und Okularmikrometer abgelesen.
Die Methods eignet sich zur quantitativen Bestimmung aller Mikroorganismen,
ist einfach und schnell durchfuhrbar und gewahrleistet durch ihre geringe
Fehlergrenze ein HdchstmaB von Genauigkeit.

Literatur.

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Gesundheitsamt, Bern. Bd. 11. S. 199. 1920.) — 10. Krueger, A method for the
quant, estim. of bact. in suspens. (Joum. gener. Physiol. Vol. 13. 1930. p. 553 ff.) —
11. Lindner, P., Handb. d. biolog. Arbeitsmeth. Abderh. Abt. &I. Teil I.
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stoffs auf den Verlauf der alkoholisohen Zuckerspaltung. (Bioohem. Ztsc^. Bd. 174.
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wesen. Bd. 29. 1906. S. Iff.; Rahn, Zentralbl. f. Bakt. Abt. 11. Bd. 32. 1912.
S. 376 ff. — 13. R e i m e s c h , E., Die Bedeutung der Hefeverteilung im Nfthr-
medium fur den Garungsverlauf. (Ibid. Bd. 90. 1934. S. 218 ff.) — 14. L u d w i g , 0.,
Uber den Wachstumsverlauf von Hefe in Wiirze. (Biochem. Ztsehr. Bd. 167. 1926.
S. 388.) — 16. Reimesch, E., Ein neuer Garungssaccharometer. (Zentralbl. f.
Bakt. Abt. II. Bd. 88. 1933. S. 307 ff.)

Sachdruck verboten.

Zur Frage der Zersetzung der Pentosane und der Pentosen
durch Mikroorganismen.

Von L. M. Horowitz-Wlassowa und ST. W. Novotelnow (Leningrad).

Die Frage der Wirkung der Slikroorganismen auf Pentosane mirde
in der Literatur kaum bertihrt, obgleich sie, wegen der groBen Verbrei-
tung der Pentosane in der pflandichen Welt, eine ebenso groBe praktisebe
vie tbeoretische Bedeutung hat — theoretisch soil sie unsere Kenntnisse
liber die Umwandlui^en des Kohlenstoffes erg9.nzen, praktiseh dlirften diese
Stoffe schon fregen inrer riesengroBen Beserven in der Nator im Falle ihrer
indnstrieUen Verwertung von Wichtigkeit sein.

In der Tab. 1 haben 'vdr einige A^aben uber den Gehalt an Pentosanen
in versehiedenen Pflanzen und PflanzenteUen verein^.

Als Pentosane werden bdranntlich hshere Eohlenwasserstoffe
bezeiehnet, die durch die FShigkeit, bei der Hydrolyse Pentosen zu bUden,
charakterisiert sind. £s sind amorphe, hochmolekxilare Stoffe (mit un-
bekanntem Molekulargewieht); ihre empirische Formel ist 02 Hg 04 . Die

Zur Frage der Zersetzung der Pentosane und der Pentosen durch Mikroorganismen. 469

Vorgange der Azetylierung und der Nitrierung sollen zeigen. daB sie Hydroxyl-
Gruppen enthalten; Aldehyd-Grappen dagegen feUen (keine reduzierenden
Eigenschaften !). Pentosane sind in Alkalien iSslich und werden aus den
LSsungen mit Alkohol, mit Salzen der Sch-vrermetalle, aueh mit dem Reagens
von F e li 1 i n g gefallt. Im letzteren Falle entsteht aus dem Pentosan,
Kupfer und Alkali eine neue Verbindung, die sich im tJberschuB des Rea-
genses wieder lost. Einige Forscher (H e u s e r) sind der Meinung, da6
Pentosane in Pflanzen sich aus der Zellulose bilden, andere (Tollens)
haben ihre Bildung aus der StSxke beobachtet. Pentosane sind haufig in
sog. Hemizellulosen vorhanden, die nach H e u s e r nichts anderes als ein
Gemisch von depolymerisierter Zellulose, Pentosanen und Hexosanen sind;
sie 'wurden auch in Pektinen gefunden (komplexe Stoffe, die auch in die
Gruppe der Furfuroide gehoren, d. h. Furfurol bei der Hydrolyse ergeben).
Am meisten sind 2 Pentosane-Arten in der AuBen-welt verbreitet, namlich
Araban und Xylan.

Tabelle L

Pflanzen-

material

Gehalt an
Pentosan.

Namen

derXJnter-

sucher

Pflanzen-

material

Gehalt an
Pentosan,
in %

Namen
der TJnter-
sucher

1. Tanne ....

9,93

10. Kleie d. Baum-

2. Fichte ....

6,26

1 Schori-

wollsamen . .

30—33

Mackley

3. Eiche ....

23,7

I ghin

11. ErdnuB-Prefi-

kuohen . . .

17

4. Birke ....

23,6

12. Moosbeeren-

PreBniokstand.

3,1

Nowotehiow

6. Buohe ....

27,0

13. Hiils. V. Sonnen-

blumensamen

19,38

Nowotelnow

6. Weizenstroh .

26,55

Ssadikow

7. Roggenstroh .

26,0

14. Algen ....

7,96

35Towotelnow

8. Haferspreu

32—35

15. Torf ....

2,13

9. Grtin-Mais . .

12

Harding

16. Humus . . .

17. Braun-Kohl .

0,15

0,3— 0,4

Xylan ist ein weiBes Pulver, das im "Wasser eine opaleszierende Losung
mit dem DrehungsvermSgen 1 70 — 90® ergibt, fiir Araban ist der entsprechende
Wert 83®.

Bei der Hydrolyse dutch Sauren entsteht aus Xylan bis 36% 1-Xylose.
1-Xylose (Brutto-Formel C5H10O5) ist eine Aldopentose mit der folgenden
Konfigurationsf ormel :

COH

I

H— C— OH

I

H — C — OH

II

H — C— OH

I

CH,OH

Sie kristallisiert in Prismen, deren Schmdzpunkt 143® betragt; sie ist
siiBlich, ■wasserloslieh, rechtsdrehend. Beim Eeduzieren ergibt sie den
Alkohol-Xylit, bei der Oxydation anfangs die Xylonsaure (die sich von der
Xylose dutch eine Karboxylgruppe an Stelle einer Aldehydgruppe unter-

470 L. Horo'witz-Wlasso'na mid N. W. No \ oteltiow,

Bcheidet) ; spater bildet sich die Trioxyglutarsaure, die noch eine Karboxyl-
gruppe an Stelle der zweiten Aldehy(^mppe besitzt.

1-Arabinose, die sich bei der Hydi'olyse des xYrabans bildet, ist isomer
der 1-Xylose, ihr Schmelzpunkt ist 160®, sie ist wasserloslich, rechtsdrehend,
und hat ebenfalls sufien Geschmack. Ihre Konfigurationsformel unter-
scheidet sich von der der 1-Xylose dadnrch, da6 die mit dem vierten C ver-
bundene OH-Gruppe nicht rechts, sondern links liegt. Andere Pentosane.
die seltener in der Xatur vorkonunen, lassen ■wk liier beiseite.

Es sei hier bemerkt, dafi die Konfigurationsformel der Pentosen (nach
To lie ns) folgendermafien geschrieben verden soil:

CH, • CH • OH • CH • OH • CH • OH • CH • OH

l-J O 1

Bei Xylose und Arabinose fallen alle Reaktionen, die den Hexosen eigen
sind, positiv aus, vie die Reaktionen von Fehling, Nylander.
Molisch, Fischer u. a.; dabei auch einige Reaktionen, die mit
Hexosen negativ ausfallen. vie die Bildung des Fmfurols bei der Hydrolyse
mit HCl; diese letztere Reaktion verlauft nach der folgenden Gleichung:

CH,OH (CH • OH), • COH 3 H^ -|- HC CH

HC C • COH
\ /

O

Furfurol (oder Furol oder Furolaldehyd) ist eine farblose Flussigkeit,
die bei 162° siedet und einen angenehmen, dem Roggenbrot ahnlichen Ge-
nich hat; sie gibt alle typischen Aldehydreaktionen (Reaktion von S c h if f
Oder Fellenberg, die Reaktion von Fehling, sogar ohne Er-
warmen u. a.). Dieser Stoff vdrd auch durch die Eigenschaft gekennzeichnet,
mit Phlorogluzin einen roten Niederschlag zu bilden — eine Eigenschaft,
auf vrelcher die quantitative Pentosenbestimmung nach Tollens beruht:
Furfurol wird abdestilliert und im Destillate durch Phlorogluzin-Salzsaure
gefallt; der ausgewaschene und getrocknete Niederschlag wird gewogen;
spezielle Tabellen ermoglichen, das Gevicht der Arabinose oder der Xylose
aus den erhaltenen "Werten zu berechnen.

Fiir den Nachweis des Furfurols empfiehlt es sich auch, das Destillat
mit dem Essigsaureanilin zu versetzen; ist Furfurol vorhanden, so farbt sich
die Flussigkeit hellrot; das mit dem Essigsaureanilin befeuchtete Papier
erlaubt also zu kontrollieren, ob die Destination des Furfurols zu Ende ist.
Diese letztere Reaktion kann auch zur quantitativen Bestimmung angevendet
werden. P. und Z. S s i 1 i n (1) namentlich haben vorgeschlagen, die Menge
der Pentosane kolorimetrisch nach der Furfurolmenge zu bestimmen. Dazu
wird die Skala aus dem frisch abdestillierten Furfurol mit dem Gehalt von
0,4 — 0,004 g dieses Stoff es in 5 ccm Wasser angefertigt; dann werden in
alle RShrchen der Skala, ebenso vie in Rohrehen mit 5 ccm verschiedener
Verdtinnungen des zu priifenden Destillates 4,5 ccm der L6sung des Essig-
saureanilins eingefuhrt; nach 10 Min. (Aufbewahren im Dunkeln!) verden
die Resultate beobachtet. Der erhaltene Wert wird mit 1,375 multipliziert
(Verhaltnis des Molekulargewichts der Pentosane zu dem des Furfurols),
unter Beriicksiehtigung der Tatsache, daB die Ausbeute des Furfurols ea.
79,4% der theoretischen M!enge betr^.

Diese Methode beruht auf demselben Prinzip wie die von T o 1 m a n ,
die aber nadi Angaben von Ssadikow (3), der sie nachgeprlift hat,

Zur Frage der Zersetzung der Penlosane und der Pentosen durch Mikroorganisinen. 471

nicht als genau angesehen werden darf, da sie im allgemeinen niedrigere
TVerte als die Methoden von Tollens, Kullgren. Tyden ergibt.
Wir miissen dieser Meinung beistimmen, da vir bei den Parallel-Bestim-
mungen nach Tollens und nacb S s i 1 i n im letzteren Falle stets Werte
erhielten, die um 2,6% und mehr niedriger 'waren als im ersteren.

Unter anderen Reaktionen, die fiir Pentosen typisch sind. soli auch.
die Eeaktion von Rial genannt werden: Griinfarbung beim Kochen
pentosenhaltiger Losungen mit der Losung von Orzin und FeCla in HCl.

Die Frage der Ausnutzung pentosanreicher Rohstoffe auf biocbemischem
Wege, d. h. durch die Tatigkeit der Mikroben, ist in der Literatur wenig
gewurdigt. In alteren Arbeiten von Hoppe-Seyler. Omelianski,
Herbert liegen sparliche Erwahnungen uber die Hethangarung des
Baumgummis und des Strobes vor; im letzteren Falle handelt es sich um
die thermophile Mikroflora des Mistes, die wahrend 3 Monaten die Zer-
legung von 5,33 g aus insgesamt 10 g Xylan bewirkt hat.

In den meisten Handbiichern linden wir nur kurze Bemerkungen, daB
Pentosane gegen die Angriffe durch Mikroben sehr widerstandsfahig sind.
Die Frage der Wirkung der Mikroben auf Pentosane ist insbesondere lur das
Problem der Umwandlungen des C in der Xatur mchtig: was industrielle
Zwecke anbetrifft, so lassen sich Pentosane leicht mittels Hydrolyse mit
Sauren in Pentosen uberfiihren, die viel leiehter als Pentosane vergart werden
konnen. Es sei hier darauf hingewiesen, daB die Moglichkeit, die alkoholische
Garung der Pentosen hervorzurufen, in der Literatur mehrmals bestritten
wurde. In einer alten Arbeit von Grass, Beran und Smith (4)
finden wir die Behauptung, dafi bei der nicht ausreiehenden Emahrung
bis 75% von vorhandenen Pentosen vergart werden kfinnen. A n d e r -
s 0 n (5) hat uber die Gewinnung von Alkohol aus Xylose durch die Tatig-
keit von Fusarium lini berichtet. M. G. White und W i 1 1 a -
man (6) haben bei der Ziichtung dieser Art in einem mineralischen Xahr-
medium (0,25% MgSO„ 0,5% KHaPO,, 1% HHiKOg) mit 4% Pentose die
Bildung von Alkohol konstatiert, dessen Menge bis 9,9% der Menge der zu-
gesetzten Arabinose erreichte; fiir die Xylose stieg der entspreehende Weit
bis 44,5%. Abbot (7) hat 1926 fiber die Zerlegung der Arabinose durch
Saceharomyces ellipsoideus, S. cerevisiae, S. api-
c u 1 a t u s berichtet. Delaphine G. Rose, S. B. Fred und
W. H. P e t e r s 0 n (8) konnten bei der Zuchtung verschiedener Hefen
und Schtmmelpilze (Torula, Mycoderma, Dematium, Mo-
nilia, Endomyces) im Hefewasser mit Zusatz von Xylose oder
Arabinose die GSrung unter Bildung von Alkohol und COa beobachten. —
Endomyces und Torula zerlegten in diesen Versuchen 39 bis
58% Xylose, ohne Arabinose zu vergaren; einige Arten, wie Mycoderma,
Monilia, Dematium, zerlegten 66 — 98% beider Pentosen ; die
Ausbeute an Alkohol aber stieg dabei nicht iiber 10% (fiir die Glukose
betragt der entspreehende Wert 26 — 40%).

Plewako und Altowskala (8) berichten iiber die Alkohol-
garung der Xylose durch Oospora 208, die sie aus den Algen von Murmansk
geziichtet hatten in einem, nach Entfemung der Starke und des Zuekers
brauchbarem Hefewasser mit Zusatz von Xylose — die Ausbeute von Alko-
hol betnig ca. 10% des Gewichtes der Xylose. 1926 wurde die Frage der
Garung der Pentosen durch die Tatigkeit von Saceharomyces cere-
visiae nochmals von Castellani und Taylor (10) gewiirdigt.

472 M!* Horowitz - Wlassowa und K". W. Novotelnow,

Gottsohalk (11) meint. daB die Helen nicht imstande seien, Pentosen
zu vergSren und spricht den beobachteten Effekt deni B. c o 1 i zu, der
haufig die Praparate kiinstlicher Helen veranreinigt. tJberhaupt herrscht
die Ansicht vor, daB die liblichen Erreger der Alkoholgarung Pentosen nicht
vergaren; so ist z. B. im Handbuch von Kruse f„Allgenieine Mikro-
biologie“, S. 250) kurz gesagt: Pentosen sind nicht garlahig“; dasselbe
linden vdr in einer Anzahl von Leitladen der organischen Chemie [Relor-
m at ski, S. 241 (russischl; Tehitchibabin, S. 300 (russisch)
u. a.]. — Was nun andere Arten der Gamng anbetriift, so linden -vrir in
der Literatur zahlreiehe Hinweise aul die Fahigkeit verschiedener Bakterien-
gruppen (Coli-Aerogenes, Milchsaurebildner, Essig- und Butter-
saurebakterien), die Pentosen zu vergaren. Jedenlalls soil diese Fahigkeit
in der Bakterienwelt viel seltener sein als die Fahigkeit, Garung der Hexosen
hervorzurulen. Aus der alten Literatur miissen die Angaben von G r i m -
b e r t (12) beriieksichtigt werden. der in Kulturen des B. pneumoniae
im xylosehaltigen Nahrmedium bis 0.9% Alkohol, 23,4% Essigsaure, 19,9%
Bernsteinsaure und Spuren von Milchsaure erhalten hat. Aus der Arabinose
bildete diese Art bis 49,9% Milchsaure und 36,1% Essigsaure.

Es liegen in der Literatur weiter Hinweise vor, daB die Eigenschalt,
Pentosen zu vergaren, auch den ililchsaurebildnem, wie Str. laeticus,
Str. pyogenes, zukomme (zitiert nach K o 1 1 e) ; dasselbe soil auch
liir B. c 0 1 i und B. t y p h i zutrellen (Seguin, Jensen, zitiert
nach Kruse. S. 174). Nach Schattenlroh und Grassberger
■werden die Pentosen durch Clostridium butyricum anaerob
vergoren unter BUdung von Buttersaure, COj, Hj, Spuren von Ethyl- und
Butylalkohol, Propion- und Ameisensaure.

1930 haben M. Foote, E. B. Fred und W. H. Peterson (13)
in ihren Untersuchungen mit 20 Stammen der Propionsaurebakterien, die
von Freudenreich, Orla-Jensen und Troili-Peterson
gezuchtet "worden. •waren. konstatiert, daB 13, darunter die Arabinose, die
Xylose, unter Bildung lluchtiger (Essig-, Propionsaure) und niehtlliichtiger
(llilch-. Bernsteinsaure) Produkte vergarten. B en dix (14) berichtet 1900
uber Bakterien aus Exkrementen des Menschen und der Kuh, die ^e Xylose
vergaren. Emmerling (15) will die Fahigkeit, die Arabinose unter Saure-
bildung zu vergaren, beim B. mycoldes beobachtet haben. Foote,
Peterson und Fred haben die Vergarung der Xylose in Kulturen
von KnSllchenbakterien beobachtet; Fred. Peterson, Daven-
port (16, 17) in Kulturen von Mistbakterien; als Garungsprodukte wurden
Milch-, Essigsaure, COj und Alkohol in Spuren genannt. 1933 haben Fred,
Peterson und Anderson (18) eine Anzahl von Laktobazillen be-
sohrieben, die die Xylose vergaren; die beiden ersten Verff. haben sieh sogar
ihr Verfahren (Vergarung der Pentosen durch B. pentacetiei) paten-
tieren lessen.

Experimentelles.

Fur unsere Versuche haben wir 2 Arten von pentosanreichen Stoffen
benutzt, die zweifelsohne ein betrachtliches Interesse fiir unsere Industrie
haben, da sie sich in groBen Mengen in Olmiihlen ansammeln: die Hulsen
der Sonnenblumensamen und die des Baumwollsamen.

In unseren Untersuchungen bemiihten wir uns, folgende Fragen experi-
mentell zu beantworten: 1. Wie soil die Hydrolyse unserer Rohstoffe aus-
gdiihrt werden, um die nonnale Ausbeute der Pentosen zu sichern? 2. Wie

Zur Frage der Zersetzung der Pentosane iind der Pentosan durch Mikroorganisxnen. 473

geht die Vennehrung unserer GSxungserreger in diesen Hydrolysaten vor
sich? 3. Welche Garungsvorgange verlaufen dabei? 4 . Tst es mdglich, die
Hydrolyse durch Sauren durch die Mkrobentatigkeit zu ersetzen? Da wir
in beiden Fallen mit Pentosen zu tun haben, die ihrerseits vergart ■werden
sollen, war es notig, zu erdrtern. welche Mikrobenarten diese letztere Auf-
gabe am besten erfiillen kSnnen; um diese letztere Rage zu beantworten,
haben wir 27 Arten gepriift. — 6 Hefenarten, namentlich T o r u 1 a ,
Saccharomyces eerevisiae, S. cerevisiae acido-
philus, S. oxycocci, Hefe Enza, femer 12 Bakterienarten:
B. lactis aerogenes, B. cloacae, B. proteus vulgaris,
B. viscosus saechari, B. prodigiosus, B. esterifi-
cans. Clostridium butyric um, Pectinobakter amylo-
philus (Makrinow), B. implexus, SMilchsaurebHdner: B. Leich-
manni, B. Delbriicki, Lactobacillus sporogenesn. sp.,
femer B. acetosus und 5 Schimmelpilzarten: Monilia, Dema-
tium, Penicillium, Aspergillus niger, A. oryzae.
Pentosen (Arabinose oder Xylose) wurden zum mineralischen Nahrmedium
(0,2% KH 2 PO 4 , 0,1% NHiCl, 0,005% oder zur 25proz. Fleisch-

peptonbouillon zugesetzt. Der ph des Nahrmediums betrug 6,5 — 7,0 fiir
die Aerobakter - Gruppe, 6,0 fiir Hefen und Schimmelpilze, 5,0 fiir
Milchsaurebildner.

Fiir alle Hefearten blieb die Gasbildung wahrend einer Beobachtungs-
zeit von 7 Tagen aus, und zwar fand auch im mineralischen Nahrmedium
die Entwicklung statt. Die Resultate fielen auch fiir die Milchsaurebildner
und den Pectinobakter amylophilum negativ aus. In den
Kulturen von B. lactis aerogenes, Clostridium butyri-
cum, B. esterificans und — in sehwaeherem Grade — von B.
cloacae, Proteus vulgaris und B. viscosus saechari
kam dagegen die Gasbildung sehon nach 1 — 2 Tagen zur Beobachtung.
Was die Schimmelpilze anbetrifft, so vermehrten sich alle genannten Arten
im mineralischen Nahnnedium mit 1 % Xylose recht iippig; einige, darunter
Aspergillus oryzae, Penicillium glaucum. Monilia,
bewirkten wahrend der 7 Tage die vollige ZerstSrung der vorhandenen
Xylose.

Wir haben fiir eii^ehendere Versuche mit unseren Hydrolysaten 2 Arten
gewahlt, namlich den B. lactis aerogenes, als Bilc^er der Mileh-
und der Essigsaure und den B. esterificans, den wir aus dem Boden
reu^eziichtet batten und dessen Kulturen in unseren Nahrsubstraten mit
Xylose einen starken Ananasgeruch aufwiesen. Was nun den B. implexus
betrifft, den wir (Hor owitz-Wlassowa und Kodionowa,
liber die Azetoii^arung. Zentralbl. f. Bakt., Abt. II. Bd. 87. 1933) als
den Eireger der .^etolngarung in den Kartoffelnahrmedien benutzt batten,
so gab diese Art die Reaktion von Voges-Proscauer in Bouillon
mit Arabinose erst nach 2 Woehen: in den Kulturen dieser Art in Nahr-
medien mit Xylose blieb sie wochenlang negativ; es folgt daraus, dafi
Pentosen fiir die Azetofi^arang kaum zuverlassig sind.

Versuche mit Baumwollsamen-Hy drolysaten.

Die Methodik der Bearbeitung der Baumwollsamen in Amerika, wo
jahrlich Xylose aus 1 — 1,5 Mill, t &eses Stoffes gewonnen wird, ist die fol-
gende: Der Samen (der aus dem Kem und der behaarten Schale besteht)

474 L. M. H o r o 1 1 z - W 1 a s s o w a und N. W. N o v o t e 1 n o w ,

wird mittels JEaschinen in Kern und Schale getrennt und die HSrchen wer-
den entfernt. Der Eest entlialt nach M a c k 1 e y 30 — 35% Pentosane.
ist also an diesen Stoffen reicher als jeder andere bis jetzt untersuchte pflanz-
liche Stoff. Im Laboratoriuni miifiten wir an Stelle dcr maschinellen Be-
arbeitung die Yerreibung im Mdrser und das Durcbsieben anwenden; auf
die Entfernung der Harohen muBten 'svir, wegen deren Schmerigkeit. vcr-
zichten. Die Hydrolyse des auf diese "Weise vorbereiteten Samens wrade
nach der amerikanischen Methode ausgefiihrt: die Maisclie wurde liall-
stundenlang mit der n 2 H^SO^ z\^ecks Auswaschens der Salze bearbeitct,
dann mit fliefiendem, kaltem IVasser gewaschen, scbliefilich mit 2 % H^SO^
gekocht. Um den optimalen Zeitraum fiir die Hydrolyse (d. h. den Zeit-
raum, der die sthrkste Ausbeute an Pentosen ermoglicht) zu bestimmen.

liaben wir eine Anzahl von Yersuchen (2, 4. 8 , 12 Std. langes Koehen dcr

Pentosenlosung mit 2% H 2 SO 4 ) angestellt; es war nStig zu erortern, wie
rasch bei der Hydrolyse die Zerstdrung der neugebildeten Pentose selb&t
vor sich geht. Es erwies sich tatsdchiich, daB beim Koehen der 5 proz. Xylosc-
Idsung mit der 2 proz. H 2 SO 4 . die Menge der zerstorten Xylose nach 8 Std.

1,27% der ursprunglichen Menge betrug; nach 12 Std. stieg sie bis 9,6°o-

Die farblose Ldsung wurde dabei braun und schied einen grobflockigen.
braunschwhrzlichen Niederschlag aus, der folgende Eigenschaften besaB:
er loste sich in Alkalien, wurde aus alkalischen Ldsungen durch starke
SSuren gefhllt, gab die Reaktion von F e h 1 i n g , sogar nach dem 2 Std.
langen Koehen mit der 2proz. H 2 SO 4 nicht; die Furfurobreaktionen mit
dem Essigsam-e-Anilin, auch mit Phlorogluzin fielen ebenfalls negativ aus.
Es geht daraus hervor, daB der neugebildete Stoff sich betrachtlieh von
der Xylose sowohl wie vom Furfurol unterseheidet; es ist wahrscheinlich,
daB er infolge der Gegenwirkung der Xylose selbst und des sich bei der
Hydrolyse bildenden Furfurols entsteht (nach 8 Std. betrhgt die Menge
von Furfurol 144 mg, nach 12 Std. 409 mg). Diese Vermutung scheint durch
unsere Yersuche gestiitzt zu werden, wo Xyloselosung mit der 2 proz. HsjSOj
unter Zusatz von Furfurol gekocht wurde; der Ausfall des Mederschlages
mit den obigen Eigenschaften begann schon nach 1 Std.. wahrend er in der
Probe ohne Zusatz von Furfurol erst nach 6 Std. — augenscheinlich als die
Menge des abgespalteten Furfurols sich als ausreichend erwies — zur Be-
obachtung kam. Die nach Bertrand bestimmte Xylosemenge im
Sstiind. Hydrolysate der Baumwollsamen betrug 10,48%, im 12 stund. Hydro-
lysate nur 9,96%; es folgt daraus, dafi die Xylose wirklich bei der langeren
Hydrolyse zerstort wird, und zwar rascher, als sie sich aus Pentosanen bildet.
Da das Furfurol ebenfalls die Reaktion von Fehling gibt, war es er-
forderlich, Parallelbestimmungen nach Tollens auszuftihren, die in
4r, 8 -, 12- und IGstiind. Hydrolysaten 6,4%, 9,16%, 9,52% und 8,96%
Pentosen ergaben; da das bei der Hydrolyse neugebildete Furfurol wegen
seiner Fluehtigkeit rasch aus der FlussigWt entweicht, Pentosane schon
nach 8 Std. feUen (negative Probe mit dem Alkohol I), sind wir berechtigt,
diese Werte ausschlieBlieh als Pentosen zu berechnen. Es scheint also, daB
die 8 Std. lange Hydrolyse am zweckmaBigsten ist; demgemSB warden in
alien spateren Yersuchen Baumwollsamen wahrend 8 Std. hydrolysiert.
Fiir Yersuche wurden Hydrolysate mit 25 g Baumwollsamen in 100 ccm
Wasser mit Zusatz von 0,5% NHjPOg genommen und anfangs auf die spon-
tane Gamn^ (resp. Vorhandensein entsprechender Erreger) gepriift; da sie
nicht eintrat, wurden sie nach der Sterilisation mit dem B. lactis aero-

Zur Frage der Zersetzung der Pentosane ur»d der Pontosen durch Mikroorganisnien. 475

genes, ein anderer Teil mit B. esterificans geimpft. Die Ent-
Tvicklung, insbesondere in zveifach verdunnten Hydrolysaten. \var reeht
gut; der Zusatz von (NH),P 03 forderte das Wachstum in nicbt unbetracht-
licbem MaBe. Um die Frage iiber das evtl. Yorbandensein anderer ver-
garbarer Stoffe in unseren Hydrolysaten zu Idsen, beimpften vrir diese mit
Hefen (Saech. Oxy cocci), die sicb gut darin vermehrten, ohne
jedoch Gasbildung hervorzurufen. Wurde 1% Glukose zugesetzt, so trat
sofort energische Garung ein: es ist damit bevuesen, daB Hexosen in un-
seren Hydrolysaten fehlten; mit anderen Worten, die Garung verlief auf
Kosten der Pentosen allein.

Die Tab. 2 ergibt die Resultate der Yersuche mit dem B. lactis
aerogenes und B. esterificans in Hydrolysaten der Baumwoll-
samen. Keinkulturen dieser Arten 'vrurden in dem 2 fach verdunnten Hydro-
lysat mit Zusatz von 0.5% (NH 4 ) 4 PO. geimpft, und die Kulturen blieben
2 T^e bei 37° stehen. Die sicb bildenden Sauren wurden alle 2 Tage mit
bestimmten Mengen der sterilen SodalOsung neutralisiert (der Zixsatz von
CaCOs ist nicbt zu empfeblen, da er die Bestimmung des gesamten Saure-
gebaltes bindert). Die Zablen in der Tabelle bezeicbnen die Zabl von Kubik-
zentimetern der n,'10 NaOH, die erforderlicb sind, um die Samemenge in
100 cem der Flussigkeit zu neutralisieren. Der Gehalt an flucbtigen Sauren
wurde nach D u c 1 a u x bestimmt, die Katur der Sauren qualitativ nach-
gewiesen. Nach 7 Tagen wurden die flucbtigen Sauren abdestilliert, und die
in der Flussigkeit gebliebenen Sauren (hauptsacblicb Milehsaure) im Scbiittel-
apparat 16 Std. lang mit Ather extrahiert; dann wurde der Ather in dem
Scheidetricbter abgetrennt, der Rest mit Wasser versetzt und, nacb dem
Erwarmen auf dem TVasserbade (um den Atber vollig zu entfemen) mit
n/10 NaOH austitriert; die enthaltenen Werte, mit 9 multipliziert. ergaben
die Zabl der Milligramm der Milcbsaure in 100 ccm. Der Alkobol wurde
in einem zweiten Destillat der mit dem Alkali versetzten Flussigkeit gewonnen
und in iiblicber Weise bestimmt. Bei den durch dieB. lactis aero-
genes- Kulturen gebildeten Sauren handelt es sicb hauptsacblicb um
Milch- und Essigsaure; bei den Kulturen desB. esterificans kommt
insbesondere die Buttersaure in Betracht.

Tab. 2. Versuch mit BaumwoUsamen,

g

.SPS

Keduzierende
Stoffe als Xylose
berechnet

Fliichtige Sfturen
als Essigsaure
berechnet in %

Nicht fliichtige
Skuren als Mileh-
saure berechn. i. *^0

fl 0

i*

0

vP OQ

0

.S|x4

6 s

0'S

des

Trorken-

gewiohtes

h §

• S

§1

H bo

0

SO

X

Kontrolle ....

1,17

—

—

—

—

Versucb mit B.

i

lactis aerog.

mm

mSm

4,68

30,9

2,19

14.7

—

31

Versuch mit dem

1

B. esterificans

74,5

74,4

In ahnlicher Weise wurden Versuche mit den Hydrolysaten der Hiilsen
der Helianthussamen angestellt; zuerst wurde ebenfalls die optimale Dauer

476 L. Horowitz - Wlassowa und N. W. Novotelnow,

der Hydrolyse festgestellt, die auch 8 Std. betrug, ■wie das aus der Tab. 3
ersichtlich ist; nach 8 Std. geht der Vorgang der Zerstdrung der neugebil-
deten Xylose rascher als ihre Bildung aus deni Pentosan — demgemSfi
■rnirden fur Garungsversuehe 8 Std.-Hydrolysate verwendet, die ebenso
vorbereitet und niit denselben Arten beimpft wurden vie nben.

Tabelle 3.

Dauer der
Hydrolyse
in Stunden

Zucker nach Bertrand
bestimmt nnd als
Xylose berechnet in

% der Xylose
nach Tollens

2

3,11

4

6,9

4,7

8 '

9,5

5,78

12

6,25

5,37

Es geht aus der Tab. 4bervor. dafi: 1. die Garungsrorgange, die in Hydro-
lysaten beider Arten dureh B. lactis aerogenes be'virkt werden,
untereinander ahnlieh sind: 2. es mdglich ist, aus Hiilsen der Helianthus-
samen mittels BakterientStigkeit Milch-, Essig-, Buttersaure und den Alkohol
2 U gevinnen.

Tab. 4. Versuch mit

g

QQ

FltichtigeJ

Sduren

Beduzierende
Stoffe als Xylose
berechnet

Flhchtige Skuren
als Essigs&ure
berechnet in %

Nicht fliichtige
Sauren in %
berechnet

•Si

oM
'§ ^

^ s

o

d ^

8|

^ §>

o

S.2
•0 !».

X

des

Trocken-

gewichts

XI

KontroUe . . .

14,5

0,77

_

_

Versuch mit dem

B. lactis aerog.

73,2

44,4

—

3,02

26,4

1.12

10,2

29,3

Versuch mit dem

B. esterificans

6,33|

51,0

0,09

5,1 !

56,07

—

—

8.2

12,3

Versuche fiber dieWirkung derMikroben auf Pentosan e.

In dieser Versuchsserie haben vir ausseblieBlicb Pentosane der Hiilsen
der Sonnenblumensamen benutzt, die vegen der leichteren Bearbeitung unter
Laboratoriumsverhaltnissen hierzu geeigneter sind, als Pentosane der Baum-
vollsamen. Die Herstellung der „Eohpentosane“ geschah nach Sal-
k 0 V s k i: Die Hiilsen vurden 3 Std. mit 3% NaOH gekocht, dann vurde
die Flfissigkeit filtriert, dem Filtrat ein Drittel der Menge Fehlings
Reagens zugesetzt; der sicb dabei bildende braune floekenartige Meder-
schlag abfiltriert und vorsichtig in 2proz. HGl vieder gelfist — die HCl
muB in kleinen Portionen langsam bis zur neutralen Reaktion zugesetzt ver-
den. Die neutrale Lfisui^ vird nun mit der 4 fachen Alkoholmenge gefallt,
der ausgescHedene amorphe Mederschlag vird viederum abfiltriert, mit
Alkohol ge^schen und bei 100® getrocknet. Das erhaltene braune Pulver
ist in Alkalien iSslich und gibt veder die Reaktionen des Furfurols, noch die

Zur Frage der Zersetzimg der Pentosane und der Fentosen durch Mikroorganisixien. 477

Reaktion nach F e h 1 i n g (die erstere fallt erst nach der Hvdrolyse posi-
tiv aus). Die Bestinunung der Pentosane nach Toll e ns ergibt 65,4%,
der Gehalt an Mineralstoffen in diesem PrUparat betragt 27,12%. Es wird
vermutet, daB der hohe Gehalt an mineralischen Salzen in diesem PrSparat
von der Bildung der komplexen Kupferverbindungen (die bei der FaUung
mit dem Fehlingschen Reagens entstehen) abhangt: einerseits l 6 st
sich die Asche in der HCl, die dabei blEulieh wird, anderseits gelang es uns.
im Praparat, das durch Fallung mit der 10 proz. HCl (d. h. ohne die F e h -
lingsche Ldsung) hergestellt worden war, den Gehalt an Mineralsalzen
bis 11,7% sinken zu lassen. In diesem letzteren Falle wurde der Alkali-
extrakt des Rohstoffes mit 10 proz. HCl gefallt, der Mederschlag wiedemm
in Wasser gelost, mehrmals mit der 4 faehen Alkoholmenge gefallt, schlieB-
lich in Wasser gelSst und bei 80 — 90® getrocknet; der Gehalt an Pento-
sanen betrug 66 %.

Was nun die Natnr der Beimengungen in unseren Praparaten anbe-
trifft, so war sie fur unsere Zweeke ohne Belang, daSalkowski. der
auf diese Weise Pentosane aus dem Holz und dem Stroh gewonnen hatte,
festgestellt hat, dafi die nach seinem Verfahren hergestellten Praparate
hexosan- und pektinfrei sind.

Um die Frage zu erOrtern, oh es mSglich ist, Pentosane auf biochemischem
Wege, d. h. ohne die vorherige Hydrolyse mit Saiiren zui Garung zu bringen,
wurden die Versuche mit einer Anzahl von Arten angestellt, die eine von
uns (Hor owitz- Wlassowa)^) mit Erfolg fiir die Zerlegung der
Zellulose angewendet hatte.

Es wurde das Nahrmedium von Me Beth (0,1% K 2 HPO 4 , 0,2%
(NH 4 ) 2 S 04 , 0,17% MgS 04 ) mit Zusatz von 1 % unserer ,,Rohpentosane“,
als einzige Kohlenstoffquelle hergestellt und 4 Portionen dieses Nahr-
mediums mit folgenden Arten beimpft : 1. Micrococcus flavus
eellulosae n. sp., 2 . Clostridium cellulosae n. sp., 3.Clo-
stridium aerobicum, 4. Sterigmatoeystis. Esseibe-
merkt, dafi die erstere Art in obenerwahnten Versuchen die Zerstfirung
von 0,3 g Zellulose, die zweite von 0,48 g wahrend 36 Tagen bewirkt hatte;
fiir Sterigmatoeystis betrugen die betreffenden Werte nach 40
Tagen 1,947 g, nach 100 Tagen 3,246 g (das grofie Stuck Filtrierpapier war
vollkommen aus dem Kolben verschwunden). In Kulturen der 3 ersteren
Arten in unserem Nahrmedium mit Rohpentosanen blieb deren Menge
nach 7 Tagen unverandert, und die Fehlingsche Reaktion war negativ.
In der Probe mit Sterigmatoeystis dagegen, wo der Pilz ttppig
gedieh, konnten wir die Abnahme der Pentosanenmenge und das Auf-
treten der Fehling schen Reaktion beobachten. Die Tab. 6 ergibt die
Resultate dieses Versuchs.

TabeUe 5.

KontroUe

Versuch

ph

6,6

4,6

SiLuregehalt

—

8,0

Pentosane na,ch Tollens . .

0,9976

0,7876

Bedtizieirende Stoffe als Xy-
lose berechnet

—

0,28

Die Arbeit liegt druckfertig vor.

478 Horowitz - Wlassowa und N. W. N o v o t e 1 n o w ,

Es geht aus diesen Angaben hervor, daB diese Art tatsSchlieb Pentosane
unter Bildvmg von Pcntosen zerlegt und die "weitere VergSrung der gebil-
delen Pentosen bevirkt.

Um die Cberzeugung zu gewinnen, daB die gebildeten reduzierenden
Stoffe tatsSchlicb Pentosen (namentlich Xylose) sind, haben wir den bio-
logiscben Xaeh'weis zu fiihren versncht. Es 'wurde dabei folgendermaBcn
verfabren: Die nicbt zerstdrten Pentosane vmrden durch Fallung mit Alkohol
entfernt, die filtrierte Fliissigkeit 6faeh durch Eindampfen auf deni Wasser-
bad konzentriert, mit der Fleischpeptonbruhe zu gleiclien Teilen versetzt,
und die 3 Portionen des auf diese Weise hergestellten Xahrmediums mit
den 3 folgenden Mikroorganismenarten beimpft: 1. Saecharomyces
osycoeci der Xylose und Arabinose nicht vergSrt: 2. B. lactis
aerogenes, der dagegen die beiden Pentosen zur Garung bringt, 3. eine
Buttersaurebakterienart, die nur die Arabinose, nicht aber die Xylose ver-
gart. Die Gasbildung trat nur in der Portion mit dem B. lactis aero-
genes auf — es scheint damit bevriesen zu sein. daB der in unseren S t e -
rigmatocystis - Kulturen aus .,Eohpentosanen‘' gebildete Zucker tat-
sachlich die Xylose ist.

Um eine Vorstellung Tiber die Geschuindigkeit dieser Vorgange zu
haben, verfolgten wir sie wahrend 3 Wochcn — die Tab. 6 ergibt die Ke-
sultate dieser Analysen. TTie aus ihr ersiehtlich ist, warden wahrend 3 Wo-
chen 73.53o der vorhandenen Pentosane unter Bildung von Pentosen zer-
legt; die entstandenen Pentosen warden ihrerseits energisch unter Saure-
bildung vergoren. Bei naherer Betrachtung der Tabelle sehen wir, daB die
beiden Vorgange — Hydrolyse der Pentosane und Garung der Pentosen —
gleichzeitig verlaufen; aber bei der Alterung der Kulturen, d. h. mit der
Abnahme der Pentosanenmenge und umgekehrt, mit der Zunahme der
Pentosen, tritt der letztere Yorgang in den Vordergrund.

Tabelle 6.

FaUung mit
Fehlmgscher
Reagens

FaUung mit
Alkohol

ph

Sauregeh.
in cem der
VioNaOH
f. 100 c. e.

Reduz.
Stoffe als
Xylose
bereehnet

Pentosane

nach

ToUens

KontroUe . . .

1

grobfloekiger Niedersehlag

6,6

2,0

0,54

1

1. Woehe . .

kein Nieder-
sehlag

kleinfloekig.

Niedersehlag

5.6

4,0

0,210

0,295

1

2. Woehe . .

dasselbe

Opaleszenz

4,5

8,0

0,280

0,182

13. Woehe . .

dasselbe

kaum siehtb.
Opaleszenz

4,0

10,0

0,165

0,143

Es sei bemerkt, daB unsere Sterigmatocystis art, bei Imp-
fung in das Xahrmedium nach M c B e t h mit Zusatz von 1% Xylose, die
letztere innerhalb von 3 Tagen ganzlich vergarte (die Reafction nach F eh-
1 i n g war negativ, ph 5,5 anstatt 6,5 in der KontroUe). Ahnliche Resultate
haben wir mit anderen Pilzarten, wie Aspergillus niger, Asper-
gillus oryzae, Dematium, Penicillium, Slonilia, er-
halten — diese Pilze mUssen also eine wichtige Rolle in den Umwandlungen
der Pentosane in der Umwelt spielen.

Ziir Frage der Zersetzung der Pentosane und der Pentosan duroh Mikroorganismen. 479

Nacliweis des Pentosane vergarenden Fermentes
(..Pentosanase") in Pilzen.

Es lolinte sich. zu erSrtern, ob die Pentosanasc in die Gruppe der Endo-
fermente (wie die zuckervergSrenden Fermente) oder der Ektofermente
(ttde proteolytische, aniylolytische u. a. Fermente) gehort. Dazu wurde
das Mpel der im Nahrsubstrat von Me Beth mit Xylose gezuchteten
Sterigmatocystis nach 5 Tagen des Wachstums mit sterilem TVasser
gewaschen (bis das Wasekvasser keine F e h 1 i n g sche Reaktion mehr gab),
sorgfaltig auf dem Filtrierpapier bei 37® getrocknet und mit Sand verrieben
05 g Sand fUr 0,752 des trockenen Myzels). Das gesamte Pulver wurde
in 100 cem sterilen Kahrsubstrates von McBeth mit 1,05 g Pentosan
(1.6 g „Rohpentosan‘‘) eingeschiittet. Die Fliissigkeit, deren ph 6,5 betrag.
wui’de in Kontroll- und Versuchsportionen verteilt. Die Kontrolle 'snirde
sofort analysiert: die Analyse der Versuchsportion, die mit Toluol versetzt
und 8 Tage bei 37® aufbevahrt -vrurde, geschah nach 2, 5 und 8 Tagen.
Die Tab. 7 gibt die Zusammenfassung dieser Yersuche.

Tabelle 7.

ph

i

Reaktion

nach

Fehling

Fallung

mit

Alkohol

Pentosane

nach

ToUens

Zucker
als Xylose
berechnet

Kontrolle

. ' 6,3

+ + +

1,054

Versuche na,ch:

' 1

[ 1

1

2 Tagen

6,0

4- 1

' -f i

1 0,53

0,294

5 Tagen ....

0,3

1

i 1

0J69 1

1 0,635

8 Tagen

.5,0

1

1

1

0,143 1

1 0,694

Tabelle 8.

Alkohol- 1
probe 1

Xylose

KontroUe

+++ j

Aspergillus oryzae . . . . ■

+

0.07

Aspergillus niger

+ ,

0,03o

Penicillium

+ '

0,06

Dematium

0,065

Monilia

0,05

Sterigmatocystis

+

0.07

Die Tabelle zeigt, daB das Myzel eine energische YergErung der Pento-
sane (bis 77,3% der Gesamtmenge innerhalb von 8 Tagen) bewkt hat,
die sich sogar intensiver als in lebenden Kulturen erwies; die YergSrung
der gebildeten Xylose verlief dagegen viel langsamer, so daB ihre Menge
immer stieg. Die Tab. 8 zeigt, daB das in derselben Weise bearbeitete Myzel
mehrerer Schimmelpilze ebenfalls die Pentosanase enthalt. Was nun die
Frage nach der LSslichkeit des Fermentes betrifft, so mufi sie negativ be-
antwortet werden, ■wie aus folgenden Yersuchen hervorgeht. Es wurde eine
2 Wochen alte Kultur derSterigmatocystis im Nfthrmedium von
McBeth mit Pentosanen durch die Kerze filtriert, und 5 ecm des Filtrates
(das die F e h 1 i n g sche Reaktion nicht ergab) mit 5 cem des sterilen Nahr-

480

L. M. Horowitz-Wlasso%%a \ind N. W. Xo\otelnow,

mediums von M c B p t h und 1 % Pentosane aus den Hiilsen der Helianthus-
samen gemiseht — nach 6 Tagen des Aufbewahrens bei 37® "war die Re-
aktion von F e h 1 i n g immer noch negativ und die Alkoliolprobe un-
verandert.

Versuche zur Gewinnung von ZitronensSure und
Osalsaure aus Pentosanen der Helianthussamen-

s cb al e n.

Es lag der Gedanke nahe, daB es moglicb ware, die Zitronensaure (die
bekanntlicb zur Zeit aus Glukose Oder Saccharose durch die Tatigkeit der
Pilze im groBen MaBstab hergestellt wd) auch aus Pentosen zu gewinnen.
Solche Angaben fehlen in der Literatur: wir finden nur kurze Erwahnungen,
daB etnige organische Sauren, vde Apfel- und Bernsteinsaure. sich in Kul-
turen des Aerobakters aus Pentosen bilden konnen. In unseren
Sterigmatocystis - Kulturen mit 1% Pentosanen konnten wir
mittels qualitativer Reaktionen (19) Zitronen- und Oxalsaure nachweisen.
Es wurden deswegen zwei Versuchsserien angesetzt: 1 . mit den Saurehydro-
lysaten des Alkaliextraktes der Helianthussamenhiilsen, 2. mit demselben
Alkaliextrakt, der zuvor der Wirkui^ unserer Pentosanase (bei ph 6,5)
unterworfen worden war. Wir fuhren das Protokoll des Versuches mit dem
Saurehydrolysat an. 450 g des Hydrolysats mit 1,89 g Xylose, die aus Pen-
tosanen gebildet ■wurde. werden 2 g Kreide zugesetzt, und die Flussigkeit
wird mit Sterigmatocystis beimpft, die in folgendem Nahrsubstrat
geziichtet worden ist: Xylose 15%, KH 2 P 04 0,15%, ]^S 04 • 7H200,07%,
FeClj 0 , 001 %, ZnS 04 0,0012%. Nach 10 Tagen ist ^e F e hi i n g sche Re-
aktion negativ; dann wird die Kreide durch Zusatz von 10% HCl gelost,
dabei werden alle organischen Ca-Salze ebenfalls gelost. Durch Zusatz von
Natriumazetat wird Ca-Oxalat gefallt, der Niederschlag wird abfiltriert,
gewaschen und getrocknet; die Ausbeute betrug 0,2657 g Oxalsaure, d. h.
14,06% der vergorenen Xylose. Es sei hinzugefugt, daB das Austitrieren der
L 6 sung mit Klln 04 den annahemden Wert der Oxalsaure ergab. Nach
der Abfiltrierung des Ca-Oxalats wird die siedende saure Fltissi^keit mit
NH 4 OH versetzt, bis sie s c h w a c h sauer wird — dann fallt der charak-
teristische schwere weiBe kristallinisehe Niederschlag des zitronensauren
Ca aus, der sich in kaltem Wasser Idst, in heiBem dagegen wrieder ausgefallt
wird; der abfiltrierte, gewaschene und getroeknete Niederschlag wird ge-
wogen. Es erweist sich, daB die Menge der Zitronensaure 0,5548 g betragt,
was 29,36% der vergorenen Xylose entspricht.

Nun folgt das Protokoll des Versuches mit dem Fermentlysat. In 450 ccm
des AlkoholextraJrtes der Helianthussamen wurde das oben beschriebene
Praparat des Sterigmatocystis - Myzels eingefiihrt. Die F e h -
ling sche Reaktion erschien sehon am 2. Tage und die Zuekermenge, immer
steigend, hat nach 7 Tagen 1,63 g erreicht; dann wurde dieses Ferment-
lysat — nach Entfemung des Toluols durch Kochen — mit Ejeide versetzt
und mit dem im Nahrmedium von Butke witch gezuchteten S t e rig-
matocystis-Myzel liberschichtet, wie das bei der Herstellung der
Zitronensaure iiblieh ist. Nach 12 Tagen wird das Myzel entfemt und die
Fldssigkeit analysiert. Die Menge der Oxalsaure betragt 10,3% der Xylose-
maige, fiir die Zitronensaure betragt der entsprechende Wert 21,7%.

ZuT 5Vag© der Zersetzung der Pentosane und der Fentosen durch Mikroorganisinezi. 481

Zasammenfassimg.

1. Die FShigkeit, Pentosane zu hydrolysieren, ist vorzugsweise den
ScMmmelpilzen, wie A s p e r g i 1 1 u s , Penicillium, Dematium
u. a. eigen.

2. Die in beiden Fallen gebildeten Pentosen konnen von ein^en Pilzen,
■wie Sterigmatocystis, unter Bildung organiscber Sauren, wie
Zitronen- und Oxalsaure, vergoren werden.

3. Die Hefen scheinen nicht imstande zu sein. Pentosen zu vergaren;
bis Jetzt verSffentliehte Angaben scheinen nicht einwandfrei zu sein.

4. AuBer den Pilzen sind verschiedene Bakteriengruppen, ■wie Aero-
b a k t e r , Faulnisbakterien, Buttersaurebildner, fahig, Pentosen zu ver-
garen.

5. Nach unseren Angaben vergart B. lactis aerogenes die
Saurehydrolysate der Baum'wollsamen und der Hulsen der Sonnenblumen-
samen unter Bildung von Milchsaure, Essigsaure und COj.

6. Dasselbe gilt fiir den B. esterificans, der hauptsachlieh
Buttersaure und COj ergibt.

7. Die von uns gepriiften PreBriickstande aus den Olmiihlen konnen,
■wegen ihres hohen Gehaltes an Pentosanen, ftir die Gewinnung verschie-
dener organiscber Sauren (Essig-, Milch-, Butter-, Zitronen-, Oxalsaure)
benutzt werden.

Die Frage der Verwendung anderer pentosanreieher und weitverbrei-
teter Stoffe zu diesem Zwecke, wie Mais-, Weizen-, Boggen-, Haferstroh
u. a. beansprucht ebenfalls groBes Interesse.

LUeratarverzelehnis.

1. F. M. Ssilin und Z. A. Ssilina, Kolorimetrische Bestimmung der
Fentosen und der Fentosane. (Garungsindustrie. Bd. 8. 1982.) [Kussisdi.] — 2. T o 1 -
man, Joum. Amer. Chem. 1906. p. 1629. — 8. Ssadikow und Bjelikow,
tJlser das titrimetrische Verfahren fur die Bestimmung des Furfurols in Fentosen und
Fentosanen. (Arb. a. d. 'wissensohaftl. Inst, der Lebensmitteblndustrie. Bd. 3. H. 8.)
[Russiscb.] — 4. Cross, Bevan and Smith, Jotim. Chem. Soc. Transact.
Vol. 71. Fart II. p, 1000. — 6. Anderson, Studies in the Biological Science.
Vol. 6. — 6. White and Willaman, Fermentation of pentoses by Fusarium
lini. (The Biochem. Joum. Vol. 22. H. 2. 1928.) — 7. A b b o t , Missouri Agr.
Exp. Stat. Res. BuU. 86. 1926. — 8. Delaphine, G., Rose, E, B., Fred,
and W. H. Peterson, A biochemical Study of growth of the yeasts and yeast-like
Organisms on Pentose - Sugars. (Ztschr. f. Bakt. Abt. II. Bd. 9. 1929. S. 8.) —

9. Flewako und Altowskala, Ausnutrung der Fentosen durch Hefe. Oospora
203. (Arb. a. d. wissenschaftl. Inst, der Lebensmittel-Industrie. H. 5. 1982. p. 18.)
[Russisch.] — 10. Castellani and Taylor, Joum. of American Medical Asso-
ciation. No. 8. 1926. — 11. Gottschalk, Azetaldehyd als Zwischenstufe bei der
Fentosenverganmg durch infizierte Hefe. (Ztschr. f. physik. Ohemie. Bd. 163. 1927.
S. 136.) — 12. G r i m p e r t , C. R. Seances de la Soc. de Biol. T. 48. 1896.

p. 191 — 192. — 13. Foote, Peterson und Fred, ZentralbL f. Bakt. Abt. II.
Bd. 82. 1930. S. 379. — 14. B e n d i x , Ztschr. fur di&tetische u. physikal. Therapie.
Bd. 3. 1900. S. 687. — 16. Emmerling, Ber. d. Chem. Bd. 30. 1897. S. 1869
— 1870. — 16. Fred, Peterson and Davenport, Joum. BioL Chem.
Vol. 39. 1919. p. 247 — 284. — 17. Fred, Peterson and Davenport, Joum.
Biol. Chem. Vol. 42. 1920. p. 176. — 18. Fred, Peterson and Anderson,
Joum. Biol. Chem. Vol. 53. 1923, p. 111. — 19. Filossofow, Naohr. d. For-
schungsinst. d. Zucker-Industrie. M. 4. H. 7. 1927. [Russisch,]

ZweiteAbt. Bd.91.

31

482

Bticher, Institutsberidite usw.

Referate.

BQcher, Institutsberichte usw,

Oppenheimer, C., Handbuch der Biocbemie des Menschen
und der Tiere. 2. Aufl. Erganzungswerk; II. Band; Erganzung
zu Band IV— VI des Hauptwerkes. XVIII + 961 S., mit 41 Abb. im
Text. Jena (Gustav Fiseber) 1934. Preis brosch. 71 EM., geb. 78 EM.

Was in dieser Zeitsehrift, Bd. 89. 1934. S. 402, anlafilich der Bespre-
ehung des ersten Bandes dieses Erganzu^swerkes gesagt ist, gilt in vollem
Mafie auch fur den nunmehr fertig vorliegenden zweiten Band.

Er enthalt die neuesten Ergebnisse iiber die Chemie der Gewebe und
Organe, iiber Sekretion und Sekrete, Verdauung, Eesorption und Exkretion,
Emahrung, Gaswechsel und Gesamtstoffvrechsel. Die Aufteilung des Stofies
unter die zahlreichen fiir das jeweilige Gebiet sachverstandigen Mitarbeiter
blirgt fiir erscbSpfende, klare und zugleich kritische DarsteUimg, wobei der
Fortschritt der wissenscbaftliclien Erkenntnisse zuweilen eine Korrektur
bisber geltender Anscbauungen notwendig gemacbt bat.

Dieser zweite Band diirfte u. a. aucb dem Mikrobiologen \rie-
derum eine solcbe Unsumme von Neuem und Wissenswertem bieten, daS
seine Anscbaifnng sicb im Hinblick auf den im Verbaltnis zu Umfang und
Inbalt billigen Preis unbedingt lobnt. S t a p p.

EordatzM, W., Tascbenbueb der praktiscben pg-Mes-
sung fiir wissenscbaf tlicbe Laboratorien und
tecbnisobe Betriebe. 231 S., 65 Abb. Miincben (Verlag
E. Miiller & Steinicke) 1934. Preis broscb. 6,90 EM., geb. 8 EM.

Entsprecbend dem Titel versucbt Verf. in diesem Handbucblein Me-
tboden und Hilfsmittel der praktiscben Durebfiibrung von pn-Messungen
Mar und aucb fiir pbysikaliscb-cbemiscb weniger Gescbulte verstandbcb
darzulegen. Dabei kann natiirlicb nicbt auf die wissenscbaftlicben Grund-
lagen dieses Gebietes ganz verzicbtet w^den, die in den ersten beiden Teilen
auf rund 54 Seiten abgebandelt sind. Das Wesentbche hieriiber ist in kurzen
und pragnanten Satzen jev'eils nocb als „Vorbbck“ an den Anfang gesteUt.
Im dritten umfassendsten Teil finden sicb die Anweisungen fiir die prak-
tischen Messungen unter einfacben und ersebwerteren Verbaltnissen mit
einer |r66eren Eeihe von Apparaten, deren Eignung Verf. selbst erprobt
bat. Der vierte Absebnitt gibt einen ‘Oberblick uber den Verwendungs-
bereicb der Messungen in Wissenscbaft und Praxis, wobei die einzelnen
Wissenscbafts- und Industriezweige gesondert Beriieksiobtigung finden und
hinter Jedem Teilgebiet die bauptsacblicbste Literatur genannt ist.

Die verstandlicbe und anscbaulicbe Darstellung, unterstiitzt durcb
zahlreicbe Abbildungen, sowie der niedrige Preis diiriten dem Biicblein
einen sicberen Erfolg gewabrleisten. S t a p p.

Lneteeh, Fr., Die Virusformen. „Filtrierbare Infek-
tionserrege r“, „Ultraviru s“. Mit einem Anbang iiber die
sanitatspolizeilicben Vorscbriften, betreffend die „ViruBkrankbeiten“ in
der TscbecboslowaMscben Eepublik von Ministerialrat Priv.-Doz. Dr,
E u d. Z i e 1. 230 S., mit zabir. Textabb. und 3 farb. Taf. Prag (I. G.
Calvesobe Dniversitatsbucbbandlung Eob. Lercbe) 1934. Preis 5 EM.

Da das Bucb in erster Linie fiir Mediziner gescbrieben ist, werden vor
allem Atiologie und Pathologie derjenigen XraiMeitra des Menseben und

BtLcher, Institutsberichte usw.

483

der Tiere ausfiihrlich erortert, die durch unsichtbare Erreger verursacht
■werden. Pflanzliche Virosen werden nur insoweit, als sie fur die aJl^emeine
Pathologie von Bedeutung sind, berucksichtigt und auch Mer nur sdir un-
vollkommen.

Unter „Virus“ will Verf. jeden Krankheitserreger verstanden vnssen,
„der weder zu den Bakterien, noch zu den Protozoen geb6rt“. Von diesem
Wort gibt es „ini klassischen Latein keinen Plural, wir mussen denselben
daher unter Zuhilfenahme deutseher Worte wie ,Fornien‘ oder ,Arten‘
bilden. . . (Warum so umstandlich? Geffillt Verf. die Mehrzahl „Vira“
Oder „Viren“ niebt, die zumeist in Deutschland gebrSuchlich ist? d. Kef.)
Sie werden in 3 Gruppen unterteilt: 1. Solche, „die wir ohne weiteres als
selbstSndige Lebewesen werden ansprechen k6nnen“; 2. solche, „von denen
wir glauben, sagen zu kSnnen, daB es bestimmt keine selbstandigen Lebe-
wesen sind“ und 3. solche, „die nicht mit vollstandiger Sicherheit naeh der
einen oder der anderen Bichtung hin gedeutet werden k6nnen“.

In die 2. Gruppe stellt Verf. u. a. das Virus der Pflanzen und den Bak-
teriophagen. Da diese ,,augenscheinlieh auf gewisse Eeize hin innerhalb
der Zelle“ entstehen, nicht sichtbar zu machen und filtrierbar sind, femer
nur innerhalb von lebenden Zellen zur Vermehrung gebraeht werden konnen,
schlagt Verf. hierfiir den Bamen „Viru8enzynie“ vor, eiae Wortkombination,
die die Nomenklatur nicht vereinfachen, sondem unnotig komplizieren
dlirfte.

Verf. halt nicht nur das Auftreten filtrierbarer Fonnen (Kfimchen)
von Tuberkelbakterien, Lepra- und Diphtheriebazillen fiir gesichert, son-
dern will auch bei Aktinomyzeten solche Meinsten, filtrierbaren und wieder
regenerationsfahigen Fonnen beobachtet haben. S t a p p.

Dorfl, P., Die Eisenorganismen. Systematik und Mor-
phologie. Heft 16 der Pflanzenforschung. Herausgeber B. Xolk-
witz. 62 S., mit 40 Textabb. Jena (Gustav Fischer) 1934. Preis 3,60 BM.

In Anlelmung an die Formulierung E. Baumanns faBt Verf. als
„Eisenorganismen“ alle die Lebewesen auf, die sich merklich an der Aus-
failungvonEisenverbindungen„beteiligen“,wobei es gleichgiiltig ist, oh diese
Organismen das Eisen „speichem“ oder es frei abscheiden. Da nicht nur
Bakterien eine solche Fahigkeit zukommt, sondem auch anderen Orga-
nismen aus dem Pflanzen- und dem Tierreich, zahlen nach Verf. alle
diese hierher. Es wird die engbegrenzte Grappe der „Anorgoxydanten“
Winogradskys abgelehnt. Die Eisen bakterien werden syste-
matisch in 17 Gattungen mit 42 Arten unterteilt, von denen 9 Gattungen
mit 22 Arten zu den Haplobakterien, 7 Gattungen mit 18 Arten zu den
Trichobakterien und 2 Arten zu den Aktinomyceten gerechnet werden.
7 Arten warden neu aufgefunden. 10 bekaimte Arten warden umbenannt
und im System entsprechend umgestellt. Aus Prioritatsgrilnden wurde u. a.
der Gattungsname Ghlamydothrix Migula durch Leptothrix
Kiitzing ersetzt.

Von den nichtbakterieUen Eisenorganismen sind die wichtigsten die
Cyanophyceen. Bei den Desmidiaceen ist eine Membranvererzung, bei
anderen A^engruppen wie den Chlorophyeeen und Bhodophyceen Gallert-
vererzung nac%ewiesen. Auch bei bestimmten Pilzen, einigen Archegoniaten
und Phanerogamen ist Eisenspeicherung als regelmSBig vorkommend festge-
steUt worden. Im Anhang finden tierische EisenfSller Erwahnung.

31 *

484 Morphologie, Physiologie imd Systematik der Mikroorgajoisineii; Virus-Unters,

Ein voUstSaidiges Literaturverzeielmis bildet den ScbluB der dankens-
verten und grundlichen Bearbeitung dieses ebenso mchtigen wie inter-
essanten Gebietes. Stapp.

Morphologie, Physiologie und Systematik der Mikroorganismen ;

Vfrusuntersuchungen.

Bahn, 0., The disagreement in mitogenetic experi-
ments, a problem in bacterial physiology. (Journ.
of Bacter. Vol. 28. 1934. p. 153—158.)

Verf. weist in seiner Arbeit darauf hin, daJlJ abweichende Ergebnisse
bei mitogenetischen Versuchen nieht gegen die Existenz der noitogenetischen
Strahlung sprechen, sondern zum groBten Teil auf verschiedene Versuchs-
bedingungen bei den einzelnen Versuchsanstellern zuruckzufuhren sind.
Er betont, daB z. B. bei Hefen eine mitogenetische Einwirkung nur in der
der log. Phase der Vermehrung vorausgehenden Phase zu beobachten ist,
daB also die Wahl des geeigneten Versuchsobjektes in der geei^eten physio-
logisehen Verfassung wichtig ist. Ebenso macht er auf gewisse wenig be-
kannte Fehlerquellen auftnerksam, z. B. auf die Tatsache, daB Bunsen-
brenner Strahlen aussenden, die in ihrer Wirkung der mitogenetischen Strah-
lung gleichen, die also die Yersuchsergebnisse Mschen konnen. Zu beruek-
sichtigen ist weiter, daB es sieh um ein neues Gebiet der Forschung handelt,
und daB vur nicht alle Bedingungen fiir das Eintreten der mitogenetischen
Wirkung kennen. Richter (Kiel).

Greares, J. Greaves, J. D., and Hickman, I., The growth and
metabolism of mixed cultures of ammonia-pro-
ducing microorganism. (Journ. of Bacter. Vol. 28. 1934.
p. 159—167.)

Verff. untersuchten die Ammoniakbildung von 3 natiirlichen ausge-
lai^en. 7 kiinstlich hergestellten ausgelaugten und 1 natiirlichen nicht
alkalihaltigen Boden bei Einimpfung in Feptonl5sung. Sie konnten fest-
steUen, daB die Ammoniakbildung entsprechend der von Pearl und Reed
aufgestellten Formel vor sich geht. In alkalihaltigen Boden war ein hSherer
Gehalt an Organismen vorhanden, die in Peptonlosung zu wachsen und
Ammoniak zu bilden vermSgen. Richter (Kiel).

Lewis, I. M., Cell inclusions and endospore formation
in Bacillus mycoides. (Journ. of Bacter. Vol. 28. 1934. p. 133
—144.)

t)ber die Art der Sporenentstehung und insbesondere iiber die Rolle,
die die vor der Sporenbildung in der Zelle vorkommenden Granula bei der
Sporenbildung spielen, herrschen zur Zeit noch verschiedene Ansichten.
Verf. hielt es daW fiir notwendig, die Art der Sporenbildung bei B. my-
e 0 i d e s noch einmal einer genauen Untersuchung zu unterziehen. Seine
Beobachtun^en ergaben, daB sich die Sporenbildung in der von P r e i s z
beschriebenen Art vollzieht. In der Zelle entwickelt sich zuerst eine Mem-
bran, die die Vorspore von der Zellmasse abtrennt, innerhalb der Vorspore,
die durch ein stSrkeres PlasmabildungsvermSgen gekennzeiehnet ist, diffe-
renzieren sich 2 Schichten, die vom Verf. als Endosporium (sp&terer Sporen-
korper) und Exosporium (hyaline AuBensohicht) bezei(^et werden. Das
Endosporium bildet die eigentliche Sporenmembran aus, w&hrend bei der

Morpliologie, Physiologie und Systematik der Mikroorganismen; Virus-XJnters. 486

reifen Spore Reste des Exosporiums als anhangende Plasmareste beobachtet
werden kSnnen. Die vor der Sporenbildnng in der Bakterienzelle vortan-
denen Granula beteiligen sich nicht direkt an der Sporenbildung, nach den
Untersuchungen des Verf.s miissen sie als tote, fettartige Stoffe aufgefafit
werden, die vielleicht als Reservestoffe zu deuten sind. Die Endosporen
stellen nach Ansicht des Verf.s ungeschlechtliche Reproduktionsorgane dar,
die den Sporen der Pilze gleichznstellen sind. Richter (Kiel).

Kritschewski, I. L., and Ponomarewa, I. W., On thepleomorphism
of bacteria. I. On the pleomorphism of B. para-
typhi B. (Joum. of Bacter. Vol. 28. 1934. p. 111—126.)

Die Untersuchungen wurden unter Anwendung der von Pokrovskaja
angegebenen Methodik an Agar-Deckglaspraparaten unter Verwendung
der Giemsa-Farbung durchgefiihrt. Als Nahrboden wiffde Nahragar mit
1 — 2% Raffinose-Zusatz verwendet, da die Organismen auf diesem NShr-
boden regelma,Jlig SekundSrkolonien bilden. Das Untersuehungsmaterial
wurde den Sekund3xkolonien entnommen. FarbeprSparate, die zu ver-
schiedenen Zeiten entnommen wurden, zeigten eine aufierordentliche Mannig-
faltigkeit in den morphologischen Erscheinungsformen; neben den normalen
Stabchen traten KugelzeUen, Trypanosomen-Shnliche Formen, Faden-
formen, Spindelformen usw. auf, die zum Teil wesentlich grofier waren als
die normalen Stabchen. In einem Teil dieser Formen konnten die von Po-
krovskaja als Kerne gedeuteten Gebilde nachgewiesen werden. Auf
Ausstrichpraparaten, die zum Vergleich angelegt waren, konnten diese ab-
weichenden Formen nicht oder wenigstens nur angedeutet nachgewiesen
werden; Yerff. erklaren diese Tatsache dadurch, daB bei dem Ausstreichen
die Formen so stark beschadigt werden, daB sie nicht mehr mit Sicherheit
nachgewiesen werden kSnnen. Eine Deutung der Formen als teratologische,
bzw. Involutions-Formen wird von Verff. abgelehnt, die Formen werden
vielmehr als Beweis fur einen echten Pleomorphismus angesehen, ohne daB
allerdings Schliisse im Sinne einer Cyclogenie gezogen werden. Die der Arbeit
beigegebenen Mikrophotographien zeigen, daB es sich Tun die gleichen For-
men handelt, die von Kuhn als „Pettenkoferien“ bezeichnet wurden,
und die von anderen Autoren als teratologische Formen gedeutet werden
konnten. Da von den Verff. nur Beobachtungen an Farbepraparaten durch-
gefuhrt wurden, ohne daB die Entwicklungsfahigkeit direkt geprfift wurde,
glaubt Ref. berechtigt zu sein, aueh diese Formen als teratologische Formen
auffassen zu diirfen und vor zu wei^ehenden Schliissen warnen zu miissen.

Richter (Kiel).

Thompson, R., An organism with transverse capsule.
(Journ. of Bacter. Vol. 28. 1934. p. 41—43.)

Aus der Amnion-Flussigkeit von Rindern konnte von Verf. ein zur
Gattung Aerobacter gehSriger Organismus isoliert werden, der durch Bil-
dung einer deutlichen Querkapsel ausgezeichnet ist. Fiir den Organismus
wird der Name Aerobacter transcapsulatus vorgeschlagen.

Richter (Kiel).

Smith, D. E., and Joffe, E. W., Variations in theelectopho-
retic mobilities of the Brucella groups. (Journ. of
Bacter. Vol. 28. 1934. p. 127—121.)

Es ist bekannt, daB im kataphoretischen Verhalten zwischen S- und
R-Formen bei Bakterien teilweise Untersehiede vorhanden sind. Verff.

486 Morphologie, Physiologie iind Systematik der Mikroorganismen; Virus-Unters#

Helten es deshalb fiir mSglich, da6 auch bei der Gruppe Brucella derartige
Unterschiede auftreten kSnnten, die eiae Differenzierung gestatten wurden.
Die von ihnen durchgefiihrten Versucbe ergaben, daB den einzelnen St&m-
men eine erhebliebe Variationsbreite bei der Kataphorese zukommt, die
die Festlegung von Gruppen auBerordentlich erscb'wert. Sie konnten war
feststellen, daB ^e bovinen Stamme i. a. die geringste kataphoretisehe
Wanderung aufwiesen, wEbrend die caprinen StEmme die stErkste besaBen,
dock ist es auf Grund ihrer Versucbe nicbt mSglicb, eine einwandfreie Diffe-
renzierung naeh dem kataphoretiscben Verbalten vorzunebmen.

Eichter (Kiel).

Hegarfy, C. P., and Eahn, 0., Growth retardation by freshly
distilled water. (Journ. of Bact. Vol. 28. 1934. p. 21 — 30.)

Die Untersuchui^en umfaBten 3 verschiedene Wassersorten: Frisch
destilliertes Wasser (reich an Monobydrol) ; altes Wasser (reich an Dihydrol)
und friscbes Eiswasser (reich an Trihydrol). Zu je 60 ccm dieser 3 Wasser-
sorten wurde 1 ccm konz. NEhrlSsung gegeben und die Misohungen gleich-
mEBig beimpft, als Testorganismus wurde B. c o 1 i verwendet. Es zeigte
sioh eine Wachstumshenunung bei frisch destilliertem Wasser, die auch
noch festgestellt werden konnte, wenn das Wasser 4 Std. gealtert war. Die
Eatalase- und Pepsin- Wirkung wurde dureh die 3 Wasserarten nicbt behindert,
ebenso zeigte das Fermentsystem der alkoholischen GSrung keine Beein-
flussung. Nach Ansicht der Verff. wird durch die Wassersorten direkt die
Synthese der organischen Substanz beeinfluBt. Eichter (Kiel).

Priea, M., tJber die bactericide Wirkung einiger kol-
loidaler LSsungen und ihre hygienische Bedeu-
tung. (Ztschr. f. Hyg. u. Infektionskrankh. Bd. 116. 1934. S. 386
—396.)

Destilliertes Wasser, in das feinkSmiger Kieselsand gegeben wurde,
zeigte nach einigen Monaten Stehen bei Zimmertemperato eine starke
bakterizide Wirkung (Bakteriolyse) gegeniiber Bact. ooli, Bact. pa-
ratyphi B und Staph, pyogenes aureus, also sowohl gegen-
Uber gramnegativen als auch gegeniiber grampositiven Bakterien. Die
bakterizide Kraft war besonders stark bei 37°. Als Ursache der Bakterizidie
wurde die kolloidal gelSste KieselsEure ermittelt. In 1 1 Wasser konnten
0,073 g kolloidal geldste KieselsEure festgestellt werden. Mit Entfemung
der koUoidal gelSsten KieselsEure (dureh Ultrafiltration durch Ultrafilter
nach B e c h 0 1 d , durch Zusatz von Garbo anunalis und Bolus alba
als auch von Salzen) ging die bakterizide Kraft verloren. Damit wurde
ein nener, bisher unbekannter Faktor nachgewiesen, der wahrscheinlich
neben anderen schon bekannten Momenten eine wichtige EoUe bei der
natlirlichen Selbstreinigung des Wassers spielen kann. Kiinstlich zubereitete
kolloidale KieselsEure (E e y d e n) wirkte auch bakterizid. Besonders stark
aber wirkten Verdiinnungen von Eaeselsandwasser und von kolloidaler
KieselsEurel5sung, die mit destUliertem Wasser in einer Verdunnung von
1 : 20 und 1 : 60 hergesteUt waren. Noch bei einer Menge von 0,000 001 476 g
kolloitM gelSster KieselsEure war sehr starke Wirkung zu beobachten. Starke
B^erMdie zeigten schlieBlioh die koUoidale TonerddSsung und die kol-
loidale EisenhydroxydlSsung (Hey den). Es soheint, daB auch diese
bmdmi kolloidalen LSsungen bei der Selbstreinigung des Wassers mitwirken
kSunen. Eodenkirohen (Kdnigsberg i. Pr.).

Moiphologie, Phyaiologie uad S^stomatik der Mikrooigaiueanen; Virus-Unteis. 487

Schroder, E., Broimer, B. und Hampe, B., Pseudomonas Lind-
ner i- Kluyv er. (Termobakterium mobile Lindner.)
III. Mitt.: Die Stoffwechselbilanz seiner aeroben
und anaeroben GUrung in organischen NShr-
medien. (Wochenschr. f. Brauerei. Bd. 61. 1934. S. 241—245 u.
249-253.)

Bei der Stoffweehselbilanz anaerober und aerober Gftrung des Bak-
teriums in zuckerhalt^er anorganischer NdhrliSsung ergab sich gute gevdchts-
maBige tJbereinstimmung zwischen den der GSrung zugefuhrten und durch
sie erhaltenen Stoffen. Plir die Bestimmung des Sauerstoffs und des Alko-
hols neben Azetaldehyd wurden geeignete Verfahren ausgearbeitet, zim
Bestimmung der bei den Stoffwechselversuchen auftretenden Gewichts-
veranderungen der Bakterienmasse wurde eine Filtrationsapparatur unter
ZuMlfenabme vorbehandelter Entkeimungsfilter geschatfen. Beim Vergleich
der AssimilationsgroBe zwischen den anaeroben und maBig geliifteten
aeroben Versuchen wurde diese fast gleich, mitunter bei ersteren etwas heher
gefunden. Bei Steigerung der Luftungsintensitat bei den aeroben Versuchen
wurde die erwartete Steigerung der Assimilation nicht beobachtet, diese
war viebnehr weit geringer als bei den maBig gelafteten aeroben Versuchen.
Bei den aeroben Versuchen mit von Anfang an zugesetztem Alkohol konnte
eine Alkoholassimilation nur bei den schwaoh geliifteten festgestellt werden,
wahrend bei den starker geliifteten schon bei einer solchen Liiftungsinten-
sitat Assimilationshemmung eintrat, bei welcher die gewShnliohen aeroben
Versuche in der Assimilation kaum Oder nur sehr wenig gehemmt ersehienen.
Diese Assimilationshemmung wurde vor aUem der mit der Liiftui^ steigen-
den wazetaldehydbildung zugeschrieben, was durch besondere Versuche
bestatigt werden konnte. Neben der Assimilationshemmung wurde bei
diesen starker geliifteten aeroben Versuchen auch eine Verminderung der
Garungsintensitat beobachtet, die sogar bis zum Steckenbleiben der Garung
fuhren kann. Bei den starker geliifteten Versuchen mit geringer Assimilation
wurden immer hohe Azetalhedyd- und Azetylmethylkarbinol- und niedrige
Essigsaurewerte gefunden. Die Essigsaurebildung der aeroben Garung
scheint zum groBen Toil auf Dismutation des Azetaldehyds zuriickzufiihren
zu sein. Bei starkerer Liiftung wird diese Dismutation offenbar gestdrt.
Der Sauerstoff, der bei den aeroben Versuchen aufgenommen wird, wird zum
grdBten Teil fiir die Bildung von Aldehyd und Essigsaure verbraueht, der
weitaus kleinere Teil dient zur Atmung und evtl. Assimilation von Alkohol.

HeuB (Berlin).

Ingraham, M. A. und Baumann, C. A., The relation of micro-
organisms to carotenoids and vitamin A. I. The
occurrence of carotene in bacteria. (Journ. of Bacter.
Vol. 28. 1934. p. 31—40.)

Die TJntersuchui^en der VerflE. ergaben, daB Carotin in sehr vielen Bak-
terien vorkommt. Es wurde in fast alien Organismen nachgewiesen, die
orange Farbstoffe bilden. Bei einer Oi^anismenart wurde eine Menge von
0,58 mg pro Gramm Bakterientrockensubstanz nachgewiesen, also ein wesent-
lich hbhero: Gehalt als in Wurzeln. Der Garotingehalt steigt w&hrend der
Entwieklung bis zu einem MaTriTnnm an, um spSter wieder abzusinken, ebenso
orgab sich eine Abh&ngigkmt von der Art des Nfihrbodens.

Richter (Mel).

488 Morphologie, Ph 3 ?«iologie imd S 3 ?steinatik der Mikroorganismen; Virus-Unters.

Stoekhausen, F., tJber Rassenveranderlichkeit derHefe
und Erfahrungen uber Behandlung der Hefe in
der Praxis und bei der Hefereinzuoht. (Tagesztg. f .
Brauerei. Bd. 32. 1934. S. 697.)

Eine bestinunte Heferasse kann sich in ihren Eigenschaften in ver-
scHedenen Betrieben in ganz entgegengesetztem Sinne verhalten. Aus-
gesproehene Bruchhefen werden zu Staubhefen, untCTgSjige Hefen nehmen
obergSrige Eigenschaften an. Letztere Eigenschaft zeigt sich zuweilen sogar
bei der aus einer Zelle stammenden Beinkultur im Beinzuchtapparat, so
da6 der !^ssebegriff nicht etwas unbedingt Feststehendes zu sein scheint.
Anderseits ist nicht zu tibersehen, da£ das Abwerfen alter Eigenschaften
eine voriibergehende Erscheinung ist, die durch die SuBeren, besonders die
Emahrungsbe^ngungen beeinfluBt wd, die sich durch verschiedene Ande-
rungen der technischen Verfahren gegenuber frtiher in mancher Hinsicht
geandert haben. Wichtig fiir die Eigenschaften einer Hefe ist das Ver-
haltnis, in dem Albumosen. Amid- und FormoleiweiB in der Wurze vor-
handen sind. Steigt der Gehalt an Amid- und FormoleiveiB iiber zwei
Drittel, dann wird eine hochvergarende Hefe gartrage. Auch der Gummi-
gehalt scheint eharakteristisch zu sein: hochstvergarende Bassen haben
den niedrigstenr, niedrigvergarende den hSchsten Gummigehalt. Hefen-
gummi ist im Gegensatz zu Glykogen kein Reservekohlehydrat und wird
bei Nahrungsmangel nicht verbraucht, es nimmt -wahrend der Garung standig
zu und ist 'wichtig fiir Yollmundigkeit und Schaumhaltigkeit des Bieres.
Wenn Hefe von einem Betrieb in einen anderen gebracht wird, dann ent-
artet sie durch den Wechsel der Emahrungsbedmgungen haufig. So k5nnen
beispielsweise die aus kalkhaltigen Wurzen stammenden Miinchener Hefen
in den kalkarmen Wurzen von Pilsen nur wenige Male gefiihrt werden. Die
Aufbewahrung der Hefe muB in mSglichst kaltem Wasser erfolgen und darf
nicht zu lange dauem. Bei Heuzlichtungen von Hefe empfiehlt es sich,
eine grSBere Anzahl von Einzellkulturen zu machen und dann die Hach-
kommen von 5 — 6 gleichartigen Zellen zu einem Stamm zu vereinigen. Ein
solcher Stamm steUt ein Gemisch dar, von dem auch unter veranderten
Emahrungsbedingungen beste Leistungen erwartet werden khnnen.

HeuB (Berlin).

May, 0. E., and Herrick, H. T., Some practical and theoreti-
cal aspects of mold metabolism. (Journ. of Bacter. Yol. 28.
1934. p. 145—151.)

Yerff. geben an Hand einer Literaturubersicht einen tJberblick uber
die praktische Ausnutzung und uber die theoretische Deutung bestimmter
Stoffwechselvorgange bei Schimmelpilzen. Bei den Sauregarungen werden
besonders die Zitronensauregarung und die mit ihr zusammei^angenden
Bildungsvorgange ftir Fumar- und Bernstetnsaure behandelt. Bei der Be-
sprechung der Gluconsaurebildung weisen sie darauf hin, daB die Glucon-
saure wahrscheinlieh durch direkte Oxydation bzw. Dehydrierung aus Glukose
entsteht. Bichter (Kiel).

Skinner, C. E., The synthesis of aromatic amino acids
from inorganic nitrogen by molds and the value
of mold proteins in diets. (Journ. of Bact. Yol. 28. 1934.
p. 95—106.)

In der EMeitung weist Yerf. darauf hin, daB die Frage, ob Schimmdpilze

Morpbologie, Physiologie; Viros-Unters. — Emymologie a. Bakteriophagie. 489

axomatisehe Amiuosauren aus anorganischem Material zu bilden vermSgen,
nicht eindeutig gelSst ist, und dafi ^eses Problem fiir die Ernahrung
u. U. praktiscbe Bedeutung erhalten kaan. Durch seine Untersucbungen
will er erreichen, daB diese Frage erneut in Angriff genommen wird. Als
Nahrboden wurde von ihm ein mineralischer Nahrboden mit 2% Glucose
verwendet, auf dem die gepruften Organismen gutes Wachstum zeigten.
Mycel und Sporemnaterial wurden nach Bebrutung und Erhitzung auf 100°
von der Nahrfliissigkeil getrennt und das so gewonnene Material z. T. zu
cbemischen Untersucbungen, z. T. zu Futterungsversuehen verwendet. Als
Versuchstiere kamen Batten zur Anwendung. Die ehemische Untersuchung
ergab, daB von den gepruften Scbimmelpilzen sowohl Tyrosin als auch
Tryptophan gebildet wurden. Als EiweiBquelle war bei sonst ausreichender
Nabrung das SehimmeleiweiB anderen EiweiBarten unterlegen, erst bei hoher
Gabe vermochte es normales Wachstum zu bewirken. Durch „gepaarte
Fiitterungsversuche" nach Mitchell und Beadles konnte festge-
stellt werden, daB Cystin im SehimmeleiweiB nur in so geringer Menge vor-
handen ist, dafi hierdurch das Wachstum beschrankt wird. Aus den Ver-
suchen iSBt sich der SchluB ziehen, daB alle fiir die Ernahrang hSherer Tiere
notwendigen Aminosauren gebildet werden. E i c h t e r (Kiel.)

Enzymologie und Bakteriophagle.

Weidenhagen, B., tJber die Anreicherung von ;5-h-Fruk-
tosidase (Invertase) in untergariger Bierhefe.
(Ztschr. f. angew. Chemio. Bd. 49. 1934. S. 581—582.)

Die Frage nach dem Wirkungsmechanismus, der Enzyme und Sub-
strate beherrseht, ist noch keineswegs geklart und wird vielleieht erst ge-
klart werden kOnnen, wenn die ehemische Kennzeichnung eines kohlehydrat-
spaltenden Enzymes einmal gelungen ist. Die Spezifitatsforschung bei den
!ltobohydrasen hat das Ratsel nieht gel6st, es erscheint damit das Problem
der Isolierung der aktiven Substanz vdeder mehr in den Vordergrund ge-
rUekt. Fiir derartige Versuche besonders geeignet scheint die rohizueker-
spaltende Invertase der untergarigen Bierhefe, weil sie durch eine auBer-
ordentliche Bestandigkeit ausgezeichnet ist und sich in idealer Weise von
der lebenden Substanz trennen laBt, auBerdem ist die 'Wrksamkeitsbestim-
mung des Enzyms einfach durchzufiihren.

Zur erfol^eichen Durchfiihrung der Versuche wurde ein Verfahren
ausgearbeitet, bei dem die notwendigen groBen Hefemengen unter Neu-
bildung des Enzyms zum Umsatz gebracht werden konnten. Es bestand in
einer Kombination starker Liiftung und Garung bei J^imaler Zucker-
konzentration. Dadurch wurde eine so weitgehende Verkiirzung des Stimu-
lationsvorgangs erreicht, daB innerhalb eines Zeitraumes von 8—10 Std.
in einem einzigen Arbeitsgang die Anreicherung der /J-h-Fruktosidase auf
das 10 — 15fache ste%t. Der Stimulationsgrad hangt stark von dem ur-
spriii^lichen Enzymgehalt der Hefe ab, am besten lassen sich enzymarme
Hefen stimulieren. Fiir die einzelnen Faktoren dw Stimulationsgarung:
Luftmenge, Temperatur, Aziditat und Zuekermei^e gibt es stets ein charak-
teristisches Optimum, ^e Stickstoffgabe scheint daneben ziemlich bedeu-
tungslos. Es scheint, als ob fiir die erste Neubildung von Invertase der
wendige Stickstoff von der Hefe aus eigenem Vorrat gedeckt wird. Die
Priifung verschiedener Kohlenstoffquellen d^egen zeitigte intaressante
Ergebnisse. Eine spezifische Wirkung zeigte sich namheh nur bei Verwen-

490

Enzyznologie und Bakteriophagie.

<^iiTig von Zucker, von denen Saccharose und Fruktose die hSchsten Werte
lieferten. Nichtzuckerartige Kohlenstoffquellen erwiesen sich nur in man-
chen Fallen und auch nur in geringem TJmfang als Energielieferanten bei
der Lttitungsstimulation. Zur Untersuehung der Frage, welche physio-
logische Wirkung die Luftwirkung bei der Enzymbildung spielt, stellte man
besondere Versuche mit Stickstoff und reinem Sauerstoff an. Mit boiden
Gasen wurde ein geringerer Stimulationsgrad als mit Luft erzielt, deren
spezifische Wirkung damit erwiesen ist, die jedoch keinesfalls nur in einem
sehneUeren Fortfuhren der bei der Garung entstehenden Stoffwechselpro-
dukte besteht. H e u fi (Berlin).

Weidenhagen, R., Carbohydrasen. (Ztschr. f . angew. Chemie. Bd. 47.
1934. S. 451—456.)

Karbohydrasen sind diejenigen Enzyme, welche die hydrolytischen
SpaJtungen in der Kohlenhydratreihe be'wirken. Sie spalten Glykoside in
Zucker und Aglykon sowie Oligo- und Polysaccharide in die einfachen Zucker-
bausteine. Dieser Tatigkeit entsprechend sind sie in tierisehen und pflanz-
lichen Zellen weit verbreitet. Hre Erforschung hat von jeher eine besondere
Pflege erfahren, weil einmal die Isolierui^ der aktiven Substanz in diesem
Fall in idealer Weise moglich ist, zum andwen, weil die analytische Verfol-
gung ihrer Wirkung auf polarimetrischem Wege oder durch Reduktions-
bestimmung der auftretenden Zuckerspaltstiicke gegentiber Fehling-
scher Losui^ besonders einfach ist. AuWdem hat man durch die Zucker-
chemie eine genaue Eenntnis der durch diese Enzymgruppe zum Umsatz
kommenden Substrate, deren konstitutionelle und konfigurative Beschaffen-
heit fiir die Charakterisierung der Enzyme so wichtig ist.

In seiner tJbersicht, welche die Fortschritte der physiologischen Chemie
auf dem Enzymgebiet umreifit, behandelt Yerf. Spezifit&t und Wirkungs-
bereich der Karbohydrasen, die enzymatische Spaltung des Bohrzuckers,
die enzymatische Spaltung von Baffinose und Melezitose, die Spezifit&t des
Emulsins, die enzymatische Spaltung der Polysaccharide und schlieSlidh
die Mdglichkeiten der Anreicherung der aktiven Enzymsubstanz nach dem
neuesten Stand unserer Erkenntnisse. H e u 3 (Berlin).

Menon, E., Studies in the Physiology of Parasitism.
XTV. Comparison of Enzymatic Extracts Obtained
from Various Parasitic Fungi. (Annals of Botany. Vol. 48.
1934. p. 187—210.)

Verf. will in der Hauptsache die Frage klSren, ob die Pektinase, die
man von verschiedenen Pilzen erhslt, gleiche Eigenschaften aufweist.
Gleichzeitig soUte festgestellt werden, ob die Ergebnisse von C h o n a
riditig sind. Zu diesem Zwecke gebrauchte Yerf. J^inkulturen von Bo-
trytis cinerea. Monilia fructigena, Pythium de Ba-
ryanum, Phytophthora erythr oseptica, Pusarium
fructigenum, Gloeosporium fruetigenum. Die Pilze
wurden auf weiBen Bliben, Kartoffeln, Apfeln und einer synthetischen KShr-
Idsung gezogen.

Die Enzyme warden durdh Extraktion gewonnen^ teilweise warden sie auch nooh
durch mehrfache Ansffillung mit Alkohol gereinigt. Zunfiohst wurde der Einflufi der
Wasaerstoifionenkonzentration auf die Aktivit&t des unter den verschiedensten Be-
dingangen hergestellten Enzyms von Botrytis festgestellt. Endo- und Exoenzyme,
die Bowohl aus gekeimten Sporen wie aus den Myzelien gewonnen waren, beide auf

En^Tmologie and Bakteriophagie.

491

flfissigon sowohl wie auf fastan Substiatan gawat^sazii zaigtan bazUglidi 1 ^^**^* Aktivit&ii
im Prmzip dan gleiohan Varlaof: Scbwacha Aktivit&t im alkaJisohen* sahr starka im
sauran Gabiat, besondars zwisohan dan pb-Werten 3 and 4. Untar sich wicben dia
ainzabian Datan jado<^ stark voneinander ab. Teilwaisa &bnli(^ lagan dia Verb&ltnisse
bai Monilia, Varf. bakam ainznal ain Optimunr, dairn abar ancb Unskahmng der Var-
b4ltnissa von Botrytis: Scbwaobes Arbaitan im sauran und starkes im alkalisoban
Gabiat. Uiesas latztgenannta Verbaltan wiesan auch die viar ubrigan Pilza auf. ^
Um dan BmfluJS von Pflanzens&rftan auf die anzymatiscba T&tigkait zu untarsucban.
verdiinnte Varf. die versobiedenen Bnzymlosungen mit Kartoffel-, Apfel- und Bbben-
saft. Im allgameinen zaigtan dia ainzalnen Lbsungan eine Verzbgerung, Wasser wirkta
bai alien am scbwdcbsten. Im Ubrigan war auob bier die Scbwaebung der AktivitSt
im ainzalnen sebr versobieden, je naob der Art der Aufzucbt der Pilza und der Her-
stellung das Enzyms.

Aul Gnind seiner Untersiichungen findet Verf. die Ergebnisse von
C b 0 n a besttltigt, konimt jedoeb zu einer anderen Deutung. Er ninunt
im Gegensatz zu C h o n a fiir alle Pilze dasselbe Enzym an und erklSrt die
Unterschiede im Verhalten der AktivitSjt gegen die versobiedenen pb-Werte
der Lbsungen aus der Metbodik der Gewinnung. Es kommen Begleitsubstan-
zen vor, die Bestandteile der NSbrlbsung oder Stoffweebselprodukte sein
kbnnten, die vielleicbt adsorptiv gebunden sind. Als spezifisch verzbgemd
wirkende Stoffe nimmt Verf. SSuren und Salze an, man braucbt sicb niebt
erst Dekokte berzustellen. Fiir ]M^S 04 und KjPOj bat er das aucb experi-
mentell bewiesen. Endoenzyme waren viel empfindlieber als Exoenzyme.
Mcbt nur die Eigensebaften der Enzyme, sondem auob ^e Bildung als solebe
waren von der Art der Nabrlbsung abbSngig. Pytbium und Pbytopbtbora
bildeten in Dekokten keine Pektinase, dagegen wobl auf pflanzlichem Ge-
webe. Damit in tJbereinstimmung steht die Tatsache von Harter und
Weimer, diebeiBbizopus tritici die Bildung von Peetinase
auslbsen konnten, wenn sie die Glukose der G z a p e k schen NSbrlbsung
durob Ibslicbes Pektin ersetzten. S k a 1 1 a u (Berlin).

V. Yagedes, K. und Gildemeister, E., Yergleiohende Unter-
suchungen liber den Nacbweis von Bakteriopbagen
in Wasserproben. (Zentralbl. f. Bakt. Abt. I. Orig. Bd. 131.
1934. S. 414r-419.)

Der Bakteriophagennaohweis naob dem Anreicberungsverfabren von
Nyberg ist eine insbesondere zur Beurteilung von Trinkwasserproben
geeignete Metbode. Ibre Brauebbarkeit fiir die Praxis ist durob die vorliegen-
den Dntersucbungen erneut bestdti^t worden. Die Sioberbeit des Hacb-
weises von Bakteriopbagen steigt mit der Zabl der zur Anreieberung ver-
wendeten Kultoren. Vor allem empfieblt es siob, auJBer geeigneten Coli-
st&mmen auob geeignete Sbigakultnren beranzuzieben. Die besondere Emp-
fSnglicbkeit von Sbigabakterien fiir Bakteriopbagen ist ja seit d’H e r e 1 1 e
bekannt, und au3erdem konnte Scblofimann gerade bei fakalen Ver-
unreinigui^en des Wassers in erster Linie Bakteriopbagen gegen RubrbazUlen
feststellen. Wenn bisber mebr oder weniger aussobliefilicb Colistflmme zur
Anwendung gelangten, so gescbab das in der von H y b e r g zuerst ge3.u£erten
Annabme, da6 bestimmten Bakterien auob bestimmte Bakteriopbagen
entspr&cben. Diese Wesenseigenbeit der Bakteriopbagen sobeint jedoeb,
wenigstens fiir die Lysine im Wasser, fiir Coli- und Rubrstamme naob den
Erfabrungen der Yerff. niebt zuzutreffen. Denn bei zablreieben Beimpfungen
mit Einzelstanunen hat siob gezei^, daS die aufgefundenen Bakteriopbagen
ebenso wirksam gegen andere Goli- und Sbigakulturen waren wie gegen den
znr Anreieberung benutzten Stamm, ja, da6 niebt selten die Wirkimg gegen

492 Enzymologie iind Bakteriophagie. — Mikrobiologie der Nahrungsmittel.

die Anreicherangskultur versagte, gegen andere St&mme jedoch stark zu-
tage trat. "Wenii somit aueli die hervorragende^ Eignung der Shigabatoerien
fur den Lysinnachweis auBer Frage steht, so ist doch anderseits bei einer
Eeihe Ton Wasserproben die Anreicherung mittels Colibakterien die allein
■wirksame gewesen. — Fiir die Art der DurcMuhrung der Untersuchungen
werden Eichtlinien gegeben. Eodenkircben (KSnigsberg i. Pr.).

den Booren de Jong, L. E., Studien tiber Bakteriophagie.
IV. Mitt.: tJber Bacillus mycoides und den darin
enthaltenen Bakteriophagen. (Zentralbl. f . Bakt. Abt. I.
Orig. Bd. 131. 1934. S. 401-410.)

Autophagieerscheinungen, bereits bei Vibrionen von G a j z a g 6 und
bei Kruse-Sonne-Stammen von Klieneberger beobachtet, zeigten
sieb auch bei bestimmten Stammen von Bac. mycoides und B a c.
undulatus. Es wird auf die Irrtiimer hingewiesen, die diese Erschei-
nung beim Phagennaehweis im allgemeinen veranlassen kann. Daher ist es
notwendig, bei derartigen Priifungen immer einen Blankoausstrieh (ohne
Filtrat) zuzidiigen. — Bakteriophagen, die aus Kulturfliissigkeiten erhalten
wurden durch Beimpfung mit Sporen bestimmter Bazillenarten nach der
Erhitzung auf eine fiir den Phagen in vitro vemiehtende Temperatur, zeigten
eine derartige Selektivitat, daB es nie gelang, mit ihnen Lyse zu erregen in
MutDaten von Sporenbildnern, die zu einer anderen Art gehorten als die, von
der der Phage herstammte. Der Angriff eines Mycoidesmutilates durch einen
Undulatusphagen diirfte als Beweis gelten fiir die Identitat von B a c. my-
coides und Bac. undulatus. Der zweite Beweis besteht darin,
daB der Bakteriophage von Bac. mycoides Phagie in den Sporen von
Bac. undulatus zu induzieren vermochte und umgekehrt. Auch die
Induktion eines Phagen ist nur in den Sporen eines homologen BaziUus
moglich. — Die Tatsache, daB Bakteriophagen aus den Sporen korrespon-
dierender Bazillenarten erhalten werden konnen nach sorgfaltiger Pasteuri-
sation bei Temperaturen, die fiir die Phagen in vitro vemichtend sind, wird
als sicherer Beweis dafiir angesehen, daB der Phage nicht eine autonome
Ultramikrobe, sondem ein Produkt d^ lebenden Bakterienzelle ist.

V. Mitt.: tJber das ungleiche Verhalten von Bak-
teriophagen, die aus p a s t euri si er t en Sporen und
solchen, die mittels der iiblichen Anr eich er ungs-
methoden gewonnen werden. (Ebenda, S. 411—413.)

Es wird auf die UnzuverlSssigkeit jener Phagen hingewiesen, die auf
andere Weise als aus erhitzten Sporen erhalten sind. Phagen, die z. B. durch
Ameicherung mit Gartenerde erzielt wurden, wirkten nicht mehr spezifisoh,
sondem griffen auch heterologe Bazillenarten an.

Eodenkirchen (Kdnigsberg i. Pr.).

Mikrobiologie der Nabrungs-, GenuB- und Futtermittel.
Halveisen, W. V., Cherrington, V. A., and Hansen, H. C., Laboratory
methods for the detection of milk from cows in-
fected with mastitis. (Journ. of Dairy Sci. Vol. 17. 1934.
p. 281—296.)

Es soUten einfache Methoden gefunden werden, die geniigend sicher
sind, bei der gewShnlichen MilchkontroUe im Laboratorium angewendet zu
werden. Es wurden folgende ausprobiert: Bestimmung der Leukozytenzahl

Mikrobiologie der Kahrungs-, und Futtermittel*

493

durch direkte mikroskopiselie Zfihlung, Katalaseprobe nack Orla-Jen-
s e n , ph-Bestimmung mit der Ckinhydronelektrode und der Bromkresol-
purpur-Methode von Baker und van Slyke, Chlorbestimmung nach
der Schnellmethode von Hayden. Keimzahlbestiramung nach der Platten-
methode (sowohl auf Standard- vrie auch Glukose-Pferdeblutagar) und Be-
stiimnung der Gerinnselfestigkeit. Ergebnisse: Wahrend die akute Ma-
stitis durchweg leicht zu erkennen ist, kann dagegen die chronische
Mastitis so mild verlaufen, daS man sie kaum nachweisen kann. Sie
ist die haufigste Form. Auf gewShnlichem Agar tritt keine auBergewShnlieh
hohe Keimzahl auf, wohl aber auf Glukose-Pferdeblutagar. Der Leukozyten-
gehalt ist hoher als 100 000 pro cem und die Katalaseprobe ergibt mehr
als 2,5 com Gas nach der angewendeten Methods. Die Wasserstoffzahl ist
nur leicht ins Alkalische verschoben, der Chlorgehalt normal und die Fahigkeit
zur Gerinnung herabgesetzt. Als am zuverlassigsten zur Erkennung von
chronischer Mastitis glauben Verff. die Katalaseprobe und die B e -
stimmung der Leukozytenzahl angeben zu kSnnen.

K. J. Demeter (Miinchen-Weihenstephan).
Hansen, H. G., Thcophilus, D. B., Atkeson, F. W., and Gildow, £. M., In-
fluence mastitis on the curd tension of milk.
(Joum. of Dairy Sci. Vol. 17. 1934. p. 257—264.)

Zum Vergleich mit dem Ausfall der Gerinnselprobe ■vnirden auch Keim-
zahlbestimmung auf Standard- und Blutagar, Leukozytenz&hlung, schwarze
Seihtuchprobe und physische Untersuchung des Enters durchgefuhrt. Die
durch Streptokokken verursachte Mastitis liefi durchweg eine Herabsetzung
der Gerinnselfestigkeit der Milch erkennen, wahrend dies bei Staphylokokken-
mastitis nieht der Fall war. Die schwarze Seihtuchprobe erwies sich als ein
vorzugliches Mittel zur Entdeckung von Streptokokkenmastitis, versagte
aber bei Staphylokokkeninfektion. Zwischen dem Befund der klinischen
Untersuchung und dem Ausfall der Gerinnselprobe konnte jedoch keine
Beziehung gefunden werden.

K. J. Demeter (Miinchen-Weihenstephan).
Stockmayer, W., Kulturelle Untersuehungen Tiber die
Aussoheidung von Bangbazillen mit der Milch.
(Arbeiten aus dem Eeichsgesundheitsamte. Bd. 66. 1933. S. 301 — 320.)

Beim Studium iiber den Verlauf der Aussoheidung von Bau^-Bazillen
nach kiinstlicher Infektion einer Beihe von Versuchskiihen wurden bei
taglicher Kontrolle groBe Unterschiede bei den einzelnen Tieren festgestellt
(xmter Verwendung eines Elektivnahrbodens aus Leber-_ oder Serumagar
mit Gentianaviolott- oder Brillantgriinzusatz). Auch bei demselben Tier
bestanden zwischen den Befnnden an den einzelnen Tagen betraehtliche
Verschiedenheiten. Der Brucella-Keimgehalt in 1 ccm Milch schwankte
zwischen 0 und 10 000, im Eutersekret imd in der Kolostralmilch stieg er
bis auf 50 000 und vereinzelt daruber. Eine sichere Entsoheidung iiber die
Aussoheidung von Bang-Bazillen mit der Milch kann somit nur durch
mehrmalige Untersuchung erlangt werden; ein einmaliger negativer Befimd
ist fiir das Fehlen einer Aussoheidung nicht beweisend. Der Gehalt der
Milch an Bang-Bakterien nach dem Kalben konnte an 2 Kiihen vw-
folgt werden. Bei dem einen Tier waren die Bang-Bakterien bereits
vom 6. Tage p. p. an nicht mehr in der Milch nachweisbar, bei dem anderen
Tier dagegen monatelang in betrSrchtlieher Zahl. Ob es nach der gebrSueh-
lichen, aktiven Immunisierung schon infizierter Kiihe zu einer vermehrten

494

MikFobiologie der Nahrangs-» QenuB- imd Fatterznittel.

Ausscheidung von Bang-Bakterien mit der Milch kommt, liefi sich nicht
sicher entscheiden. — Quantitative Untersuehungen iiber die Moglichkeit
einer Anreieherung dureh Zentrifugieren ergaben, dafi die grOBte Zahl der
Bang-Bakterien zum Bodensatz geht und nur eine geringe Menge zum
'RaTiiti- Beim natiirliehen Aufrahmungsprozefi enthalt der Bahm die meisten
Bang- Bakterien. Rodenkirchen (Konigsberg i. Pr.).

Terona, 0., e Maecari, C., Sulla fermentazione del mosto
di “Kaki”. [tJber die GSrung des Mostes von Dio-
spyros Kaki.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr.,
Pisa. Vol. 3. No. 54. 1931. 22 p., 1 pi.)

Nach einleitenden allgemeinen Angaben uber Kaki und die Gewinnung
des Fruchtsaftes wird eine regelmSfiig darin vorkommende Hefe, Sac-
charomyces Diospyri n. sp., ausf uhrlieh beschrieben und ab-
gebildet. Diese ergibt aber bei reiner GSrung keinen brauchbaren Obst-
wein, da u. a. der Alkoholgehalt zu gering bleibt. Sehr gute Ergebnisse
braehte aber ein Zusatz von 1 Teil Traubenmost auf 3 Teile Kakimost.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Liese, W., Bakteriologisehe u.nd biologische Versuche
mit Benzoesaure und Benzoes§.ure-Derivaten. (Ar-
beiten aus dem Reiehsgesundheitsamt. Bd. 66. 1933. S. 646 — 654.)

Es Trird bestatigt, da6 das Natriumbenzoat ganz erheblich geringere
entwicklungshemmende Kraft besitzt als die BenzoesSure selbst. Sowohl
in eiweifihaltigem ■wie in eivreififreiem Material muB damit gerechnet wer-
den, daB das Benzoat nicht halb so stark wkt wie die freie SSure. Material
das infolge seiner chemischen Beschaffenheit Benzoesaure zu einem Teil
in Benzoat umzuwandeln vermag, kann deshalb auch durch Benzoes9,ure
nicht mit Sicherheit haltbar gemacht werden.

Neben diesen Umsetzungsmdgliohkeiten spielen Ldsungsprozesse eine Belle.
Die schwer wasserlosliche S&iire besitzt ganz ansgezeichnete LbsUchkeit in Chloroform
(was mit Fett> bzw. Lipoidlbsliohkeit identisch ist), w&hrend umgekehrt das vorziiglioh
in Wasser Ibsliche Natriumsalz in Chloroform praktisch unlbslioh ist. Das Natrium-
benzoat ist deshalb — zum mindesten, wenn es sich um das Haltbarmachen von
Lebensmitteln mit hbherem Lipoidgehalt handelt — vom konserventechnischen Stand-
punkt aus gtlnstiger zu beurteilen als die Benzoes&uxe; denn diese kann bei ihrerge-
ringen Wasserloslichkeit, ihrer guten Fett- und Lipoidloslichkeit und durch die bei
ihr bestehenden chemischen Umsetzungsmoglichkeiten unter XJmstanden nicht un-
erhebliohe Unsicherheitsfaktoren mit sich briagen. Ftir beide Verbindtmgen (S&ure
und Benzoat) gilt sohlieJSlich noch, dai3 sie gelegentlioh (in der Praxis allerdings wohl
&ui3erst selten) als Kohlenstoffquelle im Yerwendungsstoffwechsel der Mikroben Be-
deutung haben kdnnten. Sohimmelpilze z. B. vermbgen mit Benzoesaure bis zu einem
Gehalt von 0,1% als einziger Kohlenstoff quelle recht gut zu gedeihen. Ebenso ver-
halten sich wahrscheinlich manche Bakterienarten. — Von den Benzoesaure-Derivaten
ddrften filr die Lebensmittelkonservierung lediglich die Ester (in erster Linie Propyl-
tmd Athylester} in Frage kommen.

Fur das GeUngen einer Konservierung sind die Art und der Umfang der
Infektion oder Yerunreinigung des haltbar zu machenden Materials von
griifiter Widitigkeit. In wirtschaftlicher Einsicht sind wohl die Hden-
und Schimmelpilzinfektionen die unangenehmsten. Dabei ist nun ni(^t
gleichgiiltig, ob es sich um geringftig^e Zufallsinfektionen handelt, die etwa
wShrend der Yerarbeitung hineingelangen, oder ob die Infektion info^e
unsauberen Arheitens sehr massiv ist, oder ob gar ein von vomherein stark
verunreinigtes Ausgangsmaterial vorli^. Die naheliegende und bequeme
LSsung, immer den ungtinstigsten Fall anzunehmen und dementspreehend

Mikrobiologie der Nahrungs-, Genufi- und Futtermitteh

495

ia3glicb.st hohe Konzentratioiieii anzuwenden, iSfit sich. mit den berechtigten
Forderangen der Hygiene keinesyegs in Einklang bringen. Eine seiche
Einstellung kann man 'wohl fiir die Ivonservierung tecbnischer Erzeugnisse
(wie Leim- und Gummifabrikate) zugestehen, nicht aber fiir die Konser-
vierung von Lebensmitteln. Mit mSglichst geringen Konzentrationen aus-
zukommen, helBt fiir den Hersteller zugleich den Beweis fiir eine hygienisch
einwandfreie Verarbeitung zu erbringen.

Rodenkirchen (KSnigsberg i. Pr.).
Fuchs, L, Uber die Beeinflussung des Wachstums von
Biersarzinen. (Tagesztg. f . Brauerei. Bd. 32. 1934. S. 788—789
und 796.)

Biere mit einem Gehalt an Sarzina wurden in je zwei sterile FlSschchen
abgegossen, das eine vrarde stets nur halb gefifllt und mit Watte verschlossen,
das andere wurde ganz gefiillt und luftdicht verschlossen. Das Bier der
halbgefiiUten FlS.schchen blieb blank, das Bier der ganzgefiillten wrde
sarzmatriib. Die Ursache der Triibung konnte nicht obligat-anaerobes Wachs-
tum der Sarzina sein, denn diese gedieh in ammoni^liseher Wiirze bei
Luftzutritt sehr gut. Da in den durch Sarzina getriibten Proben der Anteil
an toten Zellen weit grCBer war, wurde angenommen, daB neben besonderen,
durch den LuftabschluB fiir den Stoffwechsel der Eefe verursaehten Be-
dingungen die Autolysate der Hefe an dem Aufkommen der Sarzina wesent-
lich mitbeteiligt waren. Man impfte in Haltbarkeitsflhschchen etwas vom
Bodensatz eines sarzinahaltigen h^en Bieres ein und gab spEter etwas Hefen-
autolysat zu und erzielte damit Sarzinatriibung. Das gleiche war der Fall,
wenn man in den VersuchsMschchen die Hefe entweder durch Warme oder
durch Nahrungsmangel zum Autolysieren brachte. Die BoUe der Autolysate
bei der Sarzinatriibung war damit esperimentell bewiesen.

Zu anderen Versuehen vergor man eine heUe Wiirze zu zwei verschie-
denen Bieren, das eine hatte einen scheinbaren Vergarungsgrad von 66,5%,
das andere von 83,2%. Wenn man diese Biere in verschlossenen Flftschehen
mit Hefe und Sarzina versetzte, die in den damit befallenen Bieren keine Tril-
bung verursacht hatte, so trat bei dem stark vergorenen Bier Sarzinaschleier
auf, wahrend das sehwachvergorene Bier durch die weiterschreitende Ga-
rung davor bewahrt blieb. In dem hochvergorenen Bier iibte die Hefe keine
Gartatigkeit mehr aus, ein Teil der Zellen starb ab, ihre Autolysate kamen
der Sarzina zugute. Die gleichen Resultate erzielte man mit verschieden
hoch vergorenen dunklen Wiirzen. Die Versuche bewiesen die Eiehtigkeit
der bekannten These, daB kraftige Garung das beste Eampfmittel gegen
die Sarzina ist. H e u B (Berlin).

Eaehn, H. und Leopold, H., t)ber die Beeinflussung der
Hefeautolyse durch Antiseptika. (Woohenschr. f. Braue-
rei. Bd. 51. 1934. S. 353—356.)

Die nach dem Tode dw Hefe eintretende Selbstauflosung der Zelle,
die Autolyse, wird durch verschiedene Enzyme bewirkt, deren Eeaktions-
geschwin(%keit von verschiedenen Faktoren, wie Temperatur und ph ab-
hai^ ist. Bei kiinstlicher Autolyse bedient man sich zur Sicherung der Ste-
rilitat verschiedener Antiseptiea, die ihrerseits wieder einen EinfluB auf
die Enzymsysteme ausliben und je nach dem Zweck, den man bei der Auto-
lyse verfolgt, ausgewahlt werden mussen. Dm hier Klarheit zu s^affen,
haben Verff. die bekanntesten dieser Mittel in ihrer Wirkung auf bei 50 bis

496

Mikrobiologie der Nahrungs-^ Qenofi* und Futtennittel.

52® C darchgefiihrte Autolysen studiert. Es wurden Toluol, Chlorofom
und Ess^ester geTT^lilt; die Esterversuche konnten allerdings nicht immer
zum Vergleich herai^ezogen werden, da sich durcli Verseifung des Esters mit
Hefeesterase oder durch allgemeine Hydrolyse der SSurewert nach oben
verschob.

EinfluB der Antiseptika auf die Bildung von
S a u r e n. Das pk verschiebt sich bei alien Autolysen nach der sauren Seite,
die Verschiebung vrar — allerdings erhoht durch die Spaltung des Esters —
am grofiten bei dem Versuch mit Essigester (E). Die Versuche mit Toluol
(T) und Chloroform (C) zeigten nur eino sehr kleine Verschiebung, wShrend
die'normale Autolyse W eine weit grofiere Abweichung aufwies. Fiir die
Bildung von fliichtigen SSuren fand man die gleiche Reihenfolge. Die grSfite
Menge PhosphorsSure entstand bei den Versuchen W und T, Chloroform
und Essigester seheinen die Phosphatasen in ihrer Wirkung zu hemmen.

EinfluB der Antiseptika auf den EiweiBabbau.
Die Versuche C und E ergaben bedeutend weniger Verdauungsprodukte als
die Versuche W und T. Chloroform und Essigester verzogerten also den
Abbau durch proteolytische Enzyme erheblich. Beim Essigester wirkt
schon der reine Ester hemmend, die hemmende Wirkung wd durch die im
nicht gereinigten Ester vorhandene Essigskure noch verstarkt.

Autolysen im alkalischen Medium. Wie nur mit To-
luol vergleichsweise durchgefuhrte Versuche zeigten, iibt dieses Antisepti-
kum eine geringe hemmende Wirkung aus.

Nach beendeter Autolyse war im Normalversuch aller Hefen Phosphor
in Losung gegangen. Der gelfiste Phosphor aber ist nur zu 60 — 80% in an-
organisehe Saure ubergegangen. Die Bildung von Formolstiekstoff war
erwartungsgemaB in den normalen Ansatzen am starksten, da ja die Dipepti-
dase durch starkeres Alkali gehemmt wird. E e u B (Berlin).

Mendlik, F., Oxydations-Beduktionspotentialeim Bier.

(Wochenschr. f. Brauerei. Bd. 51. 1934. S. 305 — 307.)

Zwischen dem rh und Hefetrtibungen bestehen gewisse Zusammen-
hange. Wenn eine Bierprobe zugesetztes Methylenblau am 4. Tag noch nicht
entfarbt hatte, so war an diesem Tag moistens auch schon eine Hefetriibui^
zu sehen, umgekehrt aber konnte man auch manchmal am 5. oder 6. Tag
Hefetriibungen in Bierproben sehen, die Methylenblau entfarbt batten.
Die Tatsache der Entfarbung von Methylenblau schlieBt also die Gefahr
der Hefetrubung nicht aus, sondern verringert sie nur. Das rh allein ist
ja auch nicht der einzige Faktor fiir die Hefetrubung. Man kann sich die
Sachlage so vorstellen, daB die Hefe fiir den Aufbau ihrer ZeUen Energie
braucht und diese Energie aus der Garung, also der Umwandlung von Zucker
in Alkohol und Kohlensaure, bezieht, wenn geniigend vergarbarer Zucker
vorhanden ist ; das rh des Milieus kann dabei nie(Mg sein, die Hefe wachst trotz-
dem ganz gut. Wenn aber keine nennenswerten Menken vergarbarer Zucker
mehr anwesend sind, so hat diese Ener^equeUe aufgehSrt zu bestehen,
und die Hefe kann die notwendige Energie nur noch durch Atmung oder
besser gesagt durch Ozydation oxydabler Korper erlangen; wenn nun aber
das rh, also das Oxydationspotential niedrig ist, so fallt auch diese Energie-
quelle fort und die Vermehrung wird gehemmt. Wenn deClerck bei
semen Untersuchungen zu dem SehluB kam, daB niedriges rh die Gefahr
einer Hefetrubung ausschlieBt, so hat er vermutlich mit Bieren von hohem

Mikrobiologie der K^ahrungsmittcL — — Mikrobiologio dos Duzigors, Codons* 497

Vergarangs^ad gearbeitet, die praktisch keinen vergarbaren Zuoker mehr
entMelten, in diesem Fall wird dann das rb das Ma%ebende sein. Zur Ver-
hinderung von Trubungen durcb nachtragliches 'Wacbstum der Hefe sind also
zwei Punkte zu beachten: niedrigster Gehalt an vergarbarem Zucker und
■weitgehende Beschrankung der BeliiftungsmSglichkeiten, da Bier gegen
Luft iiberaus empfindlich ist. H e u 6 (Berlin).

Haebn, H., Atmung und Garun g. (W oebenscbr. f. Brauerei. Bd. 61.

1934. S. 313—316.)

Bei der eigentlichen Sauerstoffatmung wd nicbt das Zuekermolekul
als solcbes angegriffen, sondern erst die durcb anaeroben Abbau entstandenen
Zwiscbenprodukte. Der Atmung gebt also eine Garung voraus, mit anderen
Worten: Die Garung ist als Vorstufe der Atmung aufzufassen. Atmung und
Garung sind keine verscbiedenen Beaktionen, sondem die Komponenten des
einen groBenDissimilationsprozesses, der dieSubstrate in erster Linie zumZweck
der Energiegewinnung spaltet. Die beiden in Korrelation stebenden Prozesse
dienen also der Energieversorgung der Zelle, wobei der Abbau des Meta-
boliten in eiu und derselben Zellart fiir Atmung und Garung derselbe ist.
Fiir den AtmungsprozeB gebt der Weg also nicbt direkt vom Substrat zu den
Endprodukten, es sind Zwischenkatalysatoren notwendig, deren Bedeutung
in der Begelung der Redoxpotentiale zu liegen scheint. Es muB erst fiir den
Substratwasserstoff ein Potential gescbaffen werden, das mit dem Atmungs-
cnzym barmoniert. Die verscbiedenen Heferassen baben bei normalem
Wacbstum ein Potentialniveau, das dem natUrlicben Verbaltnis von Atmung
zu Garung entspricbt. Da sie sicb im Gar- und AtmungsvermSgen unter-
scbeiden, baben sie aucb verscbieden bobe Potentiale, man kann desbalb
auch aus dem auftretenden Potentialniveau einer Hefe auf ibren Stoff-
wecbseltypus, d. b. auf das Verbaltnis von Atmung zu Garung scblieBen.
Die Zmscbenkatalysatoren, mit deren Eille die U^adung des Potentials
erfolgt, sind von grSBter Wiebt^keit, feblen sie, so muB im ganzen Stoff-
wecbsel eine heftige StSrung auftreten. Als Zmscbenkatalysatoren fnn-
gieren die Vitamine und die natiirlichen ZellfarbstoflPe, z. B. das Cytocbrom
der atmenden Zelle Oder andere Farbstoffe, me sie verscbiedentlich aus
Mkroorganismen isoliert mirden. Der genetische Zusammenbai^ zwiscben
Atmung und Garung ist damit erwiesen, die Klarung des Chemismus dagegen
erfordert nocb umfangreiche Studien. H e u B (Berlin).

Mikrobiologie des Dungers, Bodens, Wassers und Abwassers.

Bodenbeimer, F. S. und Reich, K., Studies on soil protozoa.

(Soil Science. Vol. 38. 1934. p. 259—265.)

Untersucbt wurde der Boden eines Weizenfeldes auf dem Mount Scopus
m der Nahe von Jerusalem. Es bandelte sicb um einen gelbbraunen, bumus-
freien, von zaMreicben Kalksteinfragmenten durcbsetzten Boden von scbwaeb
alkaliscber Reaktion. Der primitiv bearbeitete, ohne jede Dtingung geblie-
bene, diirftige Boden war sehr arm an ProtozoMi, sowobl was die Zahl der
Arten als aucb die Gesamtmenge anbelai^t. Es wurden im Durcbscbnitt
nur etwa 11 — 12 Arten angetroffen: 1 Ciliate, 4 Fl^ellaten und 6 Bbizo-
poden. In den Begenmonaten war naturgemaB die Zabl der Protozoen
am bSebsten, in der Trockenzeit sehr geru^. Die Metbode von Cutler
zur Unterscbeidung von Cysten und afeven Individuen, naob der die Be-
bandlung des Bodens mit 2 proz. HCl nur die Cysten lebensfabig laBt, die

498

Mikrobiologie des Ddiigwa. Bodens, Wasseis tind Abwassers.

aktiven Zellen dagegen abtStet, erwies sich als unbrauchbar. Es zeigte
sich, daU Merbei £e Menge der beobaehteten Cysten in hohein MaBe von
der Temperatur abhSingig war, bei der die SalzeSure einwirkte, indena z. B.
bei 25® C oft nur ein Bruebteil der Cystenmenge bei 10® C gezShlt wurde.
Weitere Versuebe zeigten, daB aueh der Grad der Austrocknung des Bodens
fiir die Tbennotoleranz der Cysten von entscheidender Bedeutung sein
kann. Im 2 Monate lufttroeken gelagerten Boden starben die Cysten bei
80 — 85® C ab, in feuchtem Boden aber schon bei 50 — 65®.

Engel (Berlin).

PerrettijC., C 0 p ertur a d el terr en 0 e attivit i batteriche.
[Bodenbedeckung nnd BakterientStigkeit.] (Mem.
Lab. patol. e batteriol. E. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 51. 1931.
26 p., 2 pi.)

Naeh Erwahnung versehiedener Methoden zur Erhaltung der Boden-
feucbtigkeit, 'wie mulching und dry-farming, wird iiber Ver-
suche mit Bodenbedeckung durch Asphaltpappe berichtet. Dabei wurden
Eeuchtigkeit, Temperatur und Bakterienzaul bestimmt; es zeigte sich, daB
der Bakteriengehalt in 5 cm Tiefe auf das Vierfache gestiegen war, wab-end
bei 20 cm kein merklicher TJnterschied mehr herrschte, und daB die Stick-
stoffbindung dementsprechend zugenommen hatte. Bei einer Anzahl von
praktischen Kulturversuehen ergab sich bei Obstbaumen keine Ertrags-
steigerung gegenllber Ijahrigen Eulturen, bei denen die Eentabilitat der
Methods nachzuweisen war. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, B., Attivazione fisiologica od inoculazione di
forme nel terreno eoltivabile? (Nota complemen-
tare.) [Physiologische Aktivierung oder Impfung
von KulturbSden.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup.
Agr., Pisa. Vol. 3. 1933. No. 75. 6 p.)

In Fortsetzung fruherer Versuche wurde die fiir die Bodenbakteriologie
grundlegende Frage untersucht, ob die Bodenimpfung mit spezifischen Or-
ganismen oder die FSrderung des Wachstums der normalerweise vorhan-
denen zur Steigerung der Organismenwirkung zweckmaBiger ist. Die Nahr-
stoffzufuhr wurde durch TJnteigraben von Nichtleguminosen mit fleischiger
Wurzel und raschem Wachstum, die zweekmaBig in den Fruchtwechsel
eingeschaltet werden, gegeben. Diese Zwischenfrucht wurde tells abgeemtet,
teils ganz untergegraben und im folgenden Jahre Weizen auf den Parzellen
gezogen. Der Bktrag desselben entsprach direkt dem Ergebnis der wieder-
holt durchgeftihrten Bestimmungen des Mikroorganismengehaltes des Bodens
und bestatigte die tJberlegenheit einer WachstumsfSrderung der Boden-
organismen gegenllber d^ Bodenimpfung. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Omstein, 6., Erfahrungen mit der Chlorbehandlung
von Brauereiwasser. (Tagesztg. f. Branerei. Bd. 32. 1934.
S. 669—673.)

Die Entkeimung des Wassers durch Ghloigas mit HUfe der Chlorator-
apparaturen wird in vielen Brauereien mit Erfolg durchgefhhrt. Die Anl^en
warden mit Chloigas aus Stahlflaschen, die handelsmaBiges, verflllssi^^es
Chlor enthalten, gespeist, der Chlorzusatz kann genau reguliert werden.
Far _Wasch- und %>iilzwecke ist es vorteOhaft, das Wasser zu iiberohloren,
damit es antiseptisch wirkt, also mit einem ChloruberschuB zn arbeiten.

Mikrobiologie der Nahrtings-, QeniiB- und Futterznittel. — P-f lfi.Tiy^nkTn.nk'hft if.An , 499

der kolorimetriscli leicht kontroUiert werden kann. Bei Trinkwasser reclinet
man fiir gewohnlick mit einem gesclimacklicli nicht mehx erkennbaren Chlor-
tiberschuB von 0,02 — 0,1 mg/1, im Brauereibetrieb ist ein hoherer Chlor-
iiberscbuB von Vorteil, well die Brauereischadlinge g^en Chlor inder-
standsMhiger sind als die bei der Trinkwassersterilisation in erster Linie ab-
zutStenden pathogenen Keime. So benotigen Sarzinen einen Cbloriiber-
schuB von mindestens 0,2 mg/l, Stabchen 0,2 — 0,3 mg,! und Schimmelpilze
etwa 0,3 mg/l.

Bei ordnungsmaBiger CMorung -werden die Brauereischadlinge — Sar-
zinen, Stabchen, Kokken, wilde Hefen — zuverlassig abget6tet, ohne daB
nachteilige Einfliisse in Erscheinung treten, auch bei der Hefewasche und
Flaschenreinigung wird chloriertes Wasser mit Erfolg verwendet. Weitere
Anwendungsgebiete sind in der Behandlung der Kuhl-vrasserkondensatoren
— evtl. zur Verstarkung der Wirkung mit Kupfer kombiniert — zur Ver-
hinderung der Algenbildung und bei der Eisbereitung gegeben.

Heufi (Berlin).

Eiby, W., Eeinigung von Abwasser der PreBhefefabri-
k a t i 0 n. (Chemiker-Ztg. Bd. 58. 1934. S. 600 — 603.)

Verf. beschreibt eine Abwasserreinigungsanlage, die nach dem Verfahren
der „Aktieselskabet Dansk Gaeringsindustri“ in Kopenhagen arbeitet und
das ganze Abwasser einer FreBhefefabrik so reinigt, daB es frei von Faulnis-
und abbaufahigen Stoffen als klare, noch braunliche Fliissigkeit die Elaranlage
verlaBt und dem Vorfluter zuflieBt. An Stelle der bisher in solchen Fallen
iiblichen biologischen Eeinigung auf aerober Grundlage wird bei diesem
Verfahren eine anaerob verlaufende Vergarung der im Abwasser gelSsten
Verunreinigungen dureh Bakterien angewendet, die enzymatisch besser
ausgeriistet sind als Hefenpilze, so daB sie die von der Hefe begonnene Mlue-
ralisierung der organischen Bestandteile der Melasse weiterfuhren kdnnen.
Es entstehen betraohtliche Mengen Gas von hohem Brennwert, dagegen nur
wenig Schlamm. Das Verfahren arbeitet in drei Teilen. In Abteilung 1
-wird das Abwasser aerob mittels geeigneter Bakterien gereinigt. In Ab-
teilung 2 stehen eine Eeihe von Becken, die eine Art uber^ngsglied zur
nachfolgenden aeroben Behandlimg in biologischen Filtem bilden. In Ab-
teilung 3 sind Berieselungsfilter tatig, in denen die Eeinigung aerob zu Ende
gefuhrt -wird. H e u B (Berlin).

PfIanzenkrankheKen und Pflanzenschutz fm allgemeinen.

PerotB, B., Note f it o p a t ol o gich e per gli anni 1929—1931.
[Phytopathologische Bemerkungen zu den Jahren
1929 — 1931.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. E. Istit. sup. Agr., Pisa.
Vol. 3. No. 60. 1932. 35 p., 4 figs.)

Each einleitender kurzer Witterungslibersicht werden erwahnt: Getreide-
krankheiten, insbesondere Eost- und Brandpilze; Erankheiten von Gemiise,
Obst, Oliven, Weinreben und Zierpflanzen. AuBerdem -wird liber die Untw-
suchxmg von Pflanzenschutzmitteln (Schwefel, koHoidalra Aluminium, Beiz-
mittel) und fiber cde Tatigkeit des Pflanzenschutzdienstes mit Angabe der
erschienenen VerSffentlichungen beriehtet. Ein gr86erer Teil der erwahnten
Arbeiten ist schon ausfuhrlidier in frfiheren Heften der „Memorie“ ver-
fiffentlicht. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Conspectus mycetum agri pisani. (Mem. Lab.
patol. e batteriol. E. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 62. 1932. 50 p.)

32 *

500

PflftTi qtfvn irrftnTcVi ftitAn TUid Pflcuizeiiscliutz im all g enneineiii.

Systematisehe Liste von 534 Pilzen der Umgebnng von Pisa mit An-
gaben liber das Vorkommen und Registern der 'Wirtspflanzen und der
Gattungen. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Terona, 0., Note myeologicbe sulle Pandanacee. (Mem.
Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 63. 1932.
32 p., 9 figs.)

Eine systematisehe Liste der bisher an Pandanaceen beobaehteten
Pilze. Unter den 90 aufgefiihrten Arten verden als neue nach Material aus
der Sudsee beschrieben und abgebildet: Metasphaeria Christo-
phersenii, Dimer osporium Pandani, Phoma fruc-
tus-Pandani, Phoma Martellii, Ceuthospora Pan-
dani, Coniothyrium Perottianum. Gloeosporium
Pandani, Pestalozzia Pandani und PestalozziaPey-
ronelii. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., e Brusehi, G., Su di aleuni nuovi prodotti anti-
crittogamici a base di mercuric e tannini sin-
tetici. [tlber einige neue antikryptogame Mittel
mit Quecksilber und synthetischen Tannine n.]
(Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 59.
1932. 21 p.)

Eine Anzahl von Praparaten, die auf Veranlassung von Prof. C a s a -
buri hergestellt waren und die — ohne genaue Angabe der Zusammen-
setzung — Quecksilber, Kupfer, Eisen, Arsen und Paradichlorbenzol ent-
hielten, wurde auf ihre Wirkung als Fungizide und als Beizmittel gepriift.
Es ergab sich keine wesentliche VerEnderung der KeimfShigkeit und keine
praktisch wichtige Wirkung auf Bakterien, dagegen bei einigen eine ent-
schiedene Wirkung gegen TiUetia und Ustilago im Laboratoriums- und
Feldversuch und auch eine leicht stimulierende Wirkung. Ein verbessertes
Praparat. das hauptsachlich Eg, Cu, Fe und synthetische Tannine (Methylen-
dinaphtholsulfone) in Emulsion mit Cerofob-Para (Dray-Tan) cnthalt, mirde
darauf von Casaburi unter dem Namen „TJni-Dea“ hergestellt.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Baldacci, E., Studi sulla fitoimmunita acquisita attiva.
[Studien uber erworbene aktive Immunitat bei
Pflanzen.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa.
Vol. 3. No. 66. 1932. 13 p., 5 pi.)

Die Arbeit ist ein Beitrag zur Elarung der Frage nach dem Mechanis-
mns der erworbenen aktiven Immunitat. Nach Haumann sollte das
Ausbleiben der Ihfektion nicht durch eine histogene Reaktion der Pflanze,
sondem einfach durch die aufgenommene Kulturflussigkeit bedii^ sein.
Demgegenttber hatte J a r a c h (Phytopathol. Ztschr. Bd. 4. 1932. S. 315
bis 326) aus seinen Versuchen mit Botrytis cinerea an Bohnen-
keimpflanzen gesdilossen, da£ die vakzinale Immunitat eng an das Leben
der Pflanze gebunden und histogener Natur sei. Verf. arbeitete mit A c r o -
stalagmus oeph al o sp or i oi d es , Macrosporium com-
mune, Aspergillus niger und Botrytis cinerea, die
in Ntol6sung kultiviert ■wurden, und verwendete als „Vakzine“ Chamber-
landfUtrat der Eulturflussigkeit, Filtrat nach Verreiben des Myzels mit
Sand und den Riickstand des Myzels mit Sand. Darin lie6 er Samen von

Sch&digungeii dei Fflanzen durcfa Pilze, Bakteriea tmd filtrierbare Vila. 501

Gentil-rosso-Weizen, Luzerne und Klee keimen. Nur die nach der ersten
Methode her^estelltp Vakzine verzogerten die Ketmung; Verdiinnung der
Impffliiss^keit verringerte die Keimverzdgerung. Auch in Wasser gekeimte
Weizenkeimlinge wuchsen nach tJbertragung in das Filtrat von Botrytis
sehr langsam, konnten aber spSter in frischer K n o p seher LSsung \rieder
mit Ausnahme der in unverdiinnter oder in mit gleicher Menge Wasser ver-
diinnter Vakzine gewachsenen zu lebhaftem Wachstum gebracht verden.
Nach 14 Tagen wurden sie dann mit einer jungen Kultur von Botrytis
geitnpft, wobei alle erkrankten. Ahnliche Ergebnisse batten die Versuche
mit Acrostalagmus und Maerosporium. Somit ist die An-
nahme einer spezifisehen erworbenen Tmmunitat nicht bestatigt worden.

Morstatt (Berlin-DaMem).

Schadigungen der Pfianzen durch Pilze, Bakterien und fiitrierbare Vira.

Verona, 0., Sul cosidetto “vaiolo” del Cavolfiore. [Ober
die sogenannten „Poeken“ des Blumenkohles.] (Mem.
Lab. patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 64. 1932.
8 p., 1 pi.)

Es handelt sich um kleine, runde oder nmdliche schwarze Flecke am
Kopf des Blumenkohls, die im weiteren Verlauf zu einer Faule ftthren und
ihn schon in leichten Fallen zur Ausfuhr unhrauchbar machen. Die Krank-
heit, die besser „nerume“ (Schwarze) zu nennen wire, scheint uberwiegend
von Altemarien verursacht zu sein; sie kann aber auch von anderen Pilzen
wie Aspergillus niger, Maerosporium commune,
Cladosporium herbarum hervorgerufen werden. Zum Ver-
gleich wird eine Anzahl von anderen Krankheiten erSrtert, bei denen eben-
falls gleiche Symptome von versehiedenen Pilzen verursacht werden.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Perotti, B., e BonuecUi, G., Rapporti tra involuzionismo e
virulenza nei riguardi del’ „Macrosporium com-
mune" Rabh. [Berichte iiber Involutionsformen
und Virulenz bei M. commune.] (Mem. Lab. patol. e batte-
riol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 2. Nr. 28. 1929. 21 p., 3 Tab.)

Die Beziehungen zwischen Involution und pathogener FShigkeit bei
Formen von Maerosporium werden dargelegt, wobei die letztere
bei den Involutionsformen gegeniiber den normalen vermindert ist. Die
Verminderung zeigt sich in der Verlangsamung des parasitaren Angriffs,
der aber dennoch im Verlauf der Entwicklung der Wirtspflanze bis zum
Absterben derselben ftthren kann. Die Involutionsformen des Pilzes ver-
loren ihre Wirkung in den untersuehten Fallen nicht, wogegen die Resistenz
der Pflanze je nach ihrem Alter wechselt und in den letzten Entwieklungs-
stadien geringer, wahrend der Hauptwachstumszeit aber grefier ist. Nach
der ursprttnglichen Verminderung des parasitaren Angriffs tritt bei gleich-
bleibenden Aufienbedingungen in der Regel eine allmahliche Steigerung der
Virulenz ein. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Leach, L. D., and Borthwiek, H. A., Distribution of downy
mildew in spinach fruits. (Phytopathology. Vol. 24. 1934.
p. 1021—1026, 2 figs.)

Verff. untersuehten die Verteilung des Myzels von Peronospora
e f f u s a in den iSlichten von Spinacia oleracea. Hyphen warden

502 Sch&diguiigen der Pflanzen durch Pilze, Bakterien und fUtrierbare Vira.

im Kelchgrund, im Funiculus, im Integument und im Nucellus gefunden.
Das Myzel dringt in die Samenanlage durch den Funiculus in das Integu-
ment ein. In dem Nucellus wachst das Myzel durch die Chalaza. Obwohl
Myzel in der Samenanlage naehgewiesen wurde, kann nicht gesagt 'werden,
oh die Krankheit durch den Samen iibertragen wird, da infizierte Samen
gesunde SSmlinge brachten. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Bonneeelli, 0., Circa il presunto valore antimicr obico
dei composti di alluminio colloidal i. [tJber die
angebliche fungizide Wirkung von Mitteln mit
kolloidalem Aluminium.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. R.
Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 58. 1931. p. 26, 6 figs.)

Als Mittel gegen Peronospora an Stelle von Kupferkalkbriihe war ein
Praparat mit kolloidalem Aluminium unter dem Namen „Italia“ in den
Handel gebracht worden. Es besteht aus einer kiinstlich gefarbten Paste,
die 12 — 14% AljOj, 12% CaO und 21% Cl enthalt. Schon bei den ersten
Versttchen zur Peronospora-Bekampfung ergab sich ein gleich starker Be-
fall wie bei der unbehandelten Kontrolle, wahrend die Krankheit bei gleich-
zeitig angewandter Kupferkalkbriihe nur in Spuren auftrat. Dasselbe Er-
gebnis hatten auch anderwarts angestellte Versuche. AnschlieBende TJnter-
suchungen an Bakterien- und Pilzkulturen zeigten ebenfalls die Wirkungs-
losigkeit des Praparates. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Yerona, 0., Sul marciume del colletto dei Garofani.
[tlber die FuBkrankheit der Nelken.] (Mem. Lab. patol.
e batteriol. E. Istit. sup. j^., Pisa. Vol. 3. No. 65. 1932. 7 p.)

Bei der Untersuchung dieser Fusariose, die seit einigen Jahren in den
Nelkenkulturen erheblich zugenommen hat, ergab sich als Erreger nicht
das bekannte und sonst beobachtete Fusarium Dianthi, sondem
F. herbarum (Cda.) Fr. Zur Bekampfung wird nach L i n d e g g
empfohlen, den FuB der Pflanzen mit einer Mischung von gleichen Teilen
Eisensulfat und Atzkalk zu bestreuen und die organische Dlingung ein-
zuschranken. Morstatt (Berlin-Dahlem).

Verona, 0., Nuovi micromiceti su Pandanacee. [Neue
Pilze auf Pandanacee n.] (Mem. Lab. patol. e batteriol. E.
Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 56. 1931. 4 p., 3 figs.)

Es w^den beschrieben und abgebildet : Phomatospora Pan-
da n i n. sp. auf trockenen BlUttem von Pandanus peduncu-
latus R.Br.var. Stradbro okeana Martelli aus Siidaustralien;
Phoma Pandani n. sp. auf trockenen BlSittem von P. o d o r a -
tissimus L. von der Insel NukuMwa (Marquesas-Inseln); Macro-
phoma Pandani (L6v.) Berl. et Vogl. auf trockenen JViichten von
P. 0 doratissimus L. und Freycinetia Dalmasiana Mart,
derselben Herkunft. Morstatt (Berlin-Dahlem).

WoimaldjH., The development of scab in stored apples.
(Joum. Min. Agriculture London. Vol. 41. 1934. p. 561—556.)

Sehorfbefall zeigt sich manchmal an Apfeln im Winterlager, obwohl
bm der Emte keinerlei Mektion festzustellen war. Verf. beiichtet liber
einen besonders schweren Fall an Apfeln der Sorte Bismarck. Im Aussehen

Scshadigungen der Pflanzen durch Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira. 503

weisen die am Baum und im Winterlager dureh Venturia inaequa-
lis verursacliten Flecken bedeutende UnterscMede auf, so dafi oft eine
falscbe Diagnose gestellt wd. Verf. beschreibt ihre Form eingehend an
Hand guter Abbildungen. Untor der Lupe sind die Pusteln mit den Koni-
dien des Pilzes meist unschwer zu finden. Zur Vermeidui^ des Lagerschorfs
wird eine mSglichst spate Spritzung empfohlen some AusschluB feuohter
Apfel von der Lagerung. Braun (Berlin-Dahlem),

Koch, K. W., Investigations on black knot of plums
and cherries. I. Development and discharge of
spores and experiments in control. (Scientific Aari-
culture. Vol. 13. 1933. p. 576—590.)

Da in Ontario Askosporen die mch^ste Quelle der primaren Infektion
von Obstbaumen durch Dibotryon morbosum (Schw.) T. et S.
zu sein scheinen, hat Verf. 4 Jahre hindurch eingehende Untersuchungen
uber ihre Entwicklung und Verbreibing durchgefiihrt. Die erste Entleerung
der Askosporen auf Prunus domestica erfolgte im Freiland zwischen
dem 23. 3. und 6. 4. und weiterhin in Abstanden bis zum 6. 6. Peritheziai,
die ins Laboratorium gebracht mirden, entleerten die Askosporen 1^ Monate
friiher, solche, die von Prunus Pennsylvania stammten, sogar
schon am 20. 11. Im Freiland scheinen in erster Linie ode Mederschllge
mafigebend zu sein. Ein Absinken der Temperatur auf unter 4,5® C seheint
die Entleerung zu mindern; reichlich wurde sie im Laboratorium zwischen
10 und 22® C beobachtet. Die Verbreitung der Askosporen geschieht durch
den Wittd. Fiir die Konidien seheint daneben die Feuchtigkeit noeh von
Bedeutung. Sie wurden den ganzen Sommer hindurch auf den seWarzen
Enoten dor Baume gefunden. Die Krankheit konnte erfolgreich bekampft
werden dureh einmaliges Spritzen mit Sehwefelkalk 1 : 8 Oder Bordeaux-
Olemulsion (3%) wahrend der Winterruhe und weiteres zweimaliges Spritzen
mit Schwefel^Uc 1 : 40. Gute Erfolge werden auch mit Auss(meiden der
Enoten erzielt. Braun (Berlin-Dahlem).

Meyer-Hermann, E., Die Tomatenfaule und ihre Bekamp-
fung. (Dtsch. Landw. Presse. Bd. 61. 1934. S. 141 — 142.)

Bei Tomatenpflanzen, die von der durch Didymella lyeoper-
sici verursachten Stengelfaule befallen waren, konnte die EranMieit,
wenn sie sich unmittelbar fiber dem Boden zei^e, dureh Bepinseln mit
1 proz. Uspulunl5sung und Anhaufeln mit feuchter Erde bis fiber die kranke
Stelle, wenn sie an anderen Stellen der Pflanze auftrat, durch Bepinseln
mit 1 proz. Uspulunl5sung und durch Bestreichen mit Lehmbrei, dem 1%
Uspulun zugesetzt war, wenigstens zunickgehalten werden. Bei Pflanzen,
die noch gesund erschienen, trat nach Bepinseln des unteren Stengelteiles
mit Uspulun die Erankheit nieht auf. Wahrend die Sorte „LukuIlus“ und
eine Lokalsorte sehr stark befallen wurde, blieb die Sorte „Westlandia“ von
der Erankheit verschont. Verf. empfiehlt zur Bekampfung der Kiankheit
folgende MaBnahmen:

Beizen des Sam eua mit Uspulun oder Geresan (Beizung mit Uspulun ist
nicht anzuraten, da dieses Mittel leicht Eeimschaden verursacht! D.Ref.).
Gesunde oder desmfizierte Anzuchterde verwenden. Eintancben der Wurzeln
bei Verpflanzen in 0,25 proz. UspulunlSsung. Wiederholtes Bepinseln der
mittleren und unteren Stengelteile mit Iproz. Uspulunldsung. Bel den

504 Schadigungen der Pflanzen durch Pilze, Bakterien und filtrierbare Vira.

ersten Anzeichen der Krankheit befallene Stellen nut Uspulun bepinseln
and anhSiTifeln oder mit Lehmbrei bestreichen. Reichliehe Liiftung, am
besten unterirdische BewSiSsemng. Anbau nicht anfalliger Sorten. Aaf-
zucht an Drabten statt an Pfahlen. Winkelmann (Berlin-Dablem).

NMkado, T., Matsumoto, H., and Yamauti, E., Studies on a new Ce-
p bal 0 s p or i nm , which causes the stripe disease of
wheat. (Berichte des Ohara Instituts f. landw. Forschungen. Bd. 6.
1934. S. 276—306, 18 Abb.)

Verff. berichten iiber eine Streifenkrankheit des "Weizens, bei der sieh
ahnlich wie bei der Streifenkran^eit der Gerste Ende Marz bis Anfang April
auf den Blattern und Blattscheiden gelbe oder gelbbraune Streifen zeigp.
Ende Mai beginnen die kranken Pflanzen abzusterben. Als Erreger wird
Cephalosporium gramineum Nisikado et Ikata beschrieben.
Der Pilz wachst gut auf verschiedenen NahrbSden. Die optimale Temperatur
ist 20 — 24® C, die maximaie 29 — 30® C, die minimale 6® C. Wachstum wurde
beobachtet bei ph 4 bis pb 9. Die tJbertragung erfolgt hauptsachlich durch
das Stroh und die Stoppeln, zum geringsten Teil durch das Saatgut und den
Boden. Friihe Aussaat im Herbst begiinstigt das Auftreten der Krankheit.
Die Konidien des Erregers sind selm widerstandsfahig gegen Hitze. Sie
werden durch Sublimat 1 : 8000 1 Std. tauehen, Uspulun mit Germisan
1 : 400 % Std. tauehen, abgetStet. Ziemlich unempfindlich sind sie gegen
Kupfersufiat und Formalin. AuBer Weizen wurde auch Gerste, Wildhafer
und andere Gramineen befallen. Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Dennis, K. W. 6., A new species of Pestalotia on Podo-
carpus. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 1026 — 1028, 1 fig.)

Verf. beobachtete im Herbst 1932 im Glasgower Botanischen Garten
Blattflecken auf Podocarpus elongata. Der Erreger wird als
Pestalotia Podocarpi sp. nov. beschrieben.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Snyder, W. C., A leaf, stem and pod spot of pea caused
by a species of Cladosporium. (Phytopathology. Vol. 24.
1934. p. 890-905, 3 figs.)

Yerf. beschreibt eine in Kalifornien h§,ufige Krankheit anPisum sa-
tivum, die an Blattern braunliche, durch eine schwarzbraune Linie be-
grenzte Mecken hervorruft. An den befaUenen Stengeln zeigen sich braune
bis sehwarze Flecke von verschiedener Gr66e. Auf den Hiilsen auBert sich
die Krankheit in dunkelbraunen bis schwarzen erhabenen Flecken. Als Er-
reger wird Cladosporium pisicolum n. sp. beschrieben. Bei
hoher Luftfeuchtigkeit und maBiger Temperatur wird die Krankheit 3 — 7
Tage nach der Infektion sichtbar. Anfal% sind nur die wachsenden jungen
Gewebe. Alle 29 gepriiften Sorten von Pisum sativum erwiesen sich
als anfailig, wenn auch in verschiedenem MaBe. Nicht befallen wurden
Vigna sinensis, Lathyrus odoratus und Vicia fab a.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Guba, E. F., Control of the Verticillium wilt of egg-
plant. phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 906 — 916, 2 figs.)

G^en die Verticillium-Welke der Eierpflanze (Solanum melon-
gen a) zeigte keine vom Verf. untersuehte Sorte Resistenz. Der Erreger
wird nicht mit dem Saatgut Ubertragen. Der geringste Befall wurde bei

Sdiadigungen der Pflanzen duroh Pilze, Bakterien nnd fUtrierbare Vira- 505

Anban auf altem Basen mit eiuem ph unter 5 beobachtet. Der Anbau von
neuen Flachen in jedem Jahr auf altem Rasen ist nach Ansieht des Verf.s
die einzige Moglichkeit, die Krankheit zu bekSmpfen. Im Gewacbshaus
hatte die Anwendung von Aluminiumsulfat oder Sehwefel Erfolg. Die An-
■vrendung dieser Mittel im Freiland batte jedoeb keinen Wert.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Walter, J. M., The mode of entrance of TJstilago zeae
into corn. (Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 1012—1020, 2 figs.)
Verf. gibl zunSchst an, dafi der Verlust durch Beulenbrand in den
Vereinigten Staaten jahrlich 2% der gesamten Maisernte betrSgt. Verf.
untersuchte das Eindringen von TJstilago zeae in die Hlanze. So-
•wohl Chlamydosporen wie aueh Sporidien durchdringen mit ihren Keim-
schlauchen die Epidermis des jungen Gewebes. Die Untersuehungs- und
Farbemethoden sind eingehend beschrieben.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Gafiner, G. und Hassehrauk, K., tiber Spargelrost und seine
Bekampfung. (Dtsch. Landw. Presse. Bd. 61. 1934. S. 215—216,
2 Abb.)

Verff. konnten durch Bespritzen bzw. Bestauben mit kupferhaltigen
Mittcln keinc nennenswerte Herabsetzung des Spargelrostes erzielen. Da
sieh in den letzten Jahren aueh geze^t hat, daB rostfeste Sorten noch nicht
vorhanden sind, ist die Beseitigung des Spargelkrautes immer noch die
wichtigste MaBnahme zur Einschranknng von Spargelrostepidemien.

Winkelmann (Berlin-Dahlem).

Fraser, W. P., and Lcdingham, G. A., Studies of the crown rust,
Puccinia coronata Cord a. (Scientific Agriculture. Vol. 13.
1933. p. 313—323.)

Auf Grund umfangreicher Versuche kommen Verff. zu dem Sehlufi,
daB es in Kanada vier speziaJisierte Formen von Puccinia coro-
nata gibt, die sie als Avena, Calamagrostis, Bromus und Elaeagnus be-
zeichnen. Die Azidien treten auf Ehamnus cathartica bzw.
Bhamnus alnifolia bzw. Lepargyraea canadensis
bzw. Elaeagnus auf, die TJredo- und Teleutosporen auf Kulturformen von
Avena und A. f a t u a bzw. auf Calamagrostis und Scolochloa festu-
c a c e a bzw. hauptsSichlich auf Bromus ciliatns, B. lati-
glumis, B. porteri bzw. auf Calamagrostis elongata.

Braun (Berlin-Dahlem).

Greanoy, F. E., Experiments on the control of oat rusts
by sulphur dust. (Scientific Agriculture. Vol. 13. 1933. p. 426 — 434.)
Verf. hat in don Jahren 1929 und 1930 mehr oder weniger stark mit
Puccinia graminis avenae Erikss. et Henn. und P. coro-
nata avenae Erikss. et Henn. befallene Haferbestande erfolgreich
mit Sehwefel bestaubt. 1930 ist der Befall kiinstlich im Freiland hervor-
gerufen worden und fiel auBerordentlich stark aus. Die Bestaubungen war-
den wSchentlich oder aJle 2 — 3 — 4 Tage durchgefuhrt mit je 17 oder 34 oder
50 kg je ha. Die Ertragssteigerung betrug bis zu 153%. Weitere Feststel-
lungen ergaben, daB einem Bostbefall von 10% ein Ertragsausfall von etwa
7% entspracL Braun (Berlin-Dahlem).

Gordon, W. 1., A study of the relation of environment
to the development of the uredinal and telial

506 Sohadigungen der Pflanzea dureh Pilze, Bakterien tmd fUtrierbare Vira.

stages of the physiologic forms of Puocinia gra-
minis avenae Eriks s. et Henn. (Scientific Agriculture. Vol. 14.
1933. p. 184-237.)

Ein kurzer tJberbliek iiber die Spezialisierung von Puccinia gra-
minis avenae Erikss. et Henn. zeigt, dafi bislang in Eanada 9 physio-
logische Fonnen (Nr. 1 — 9) bekannt sind. von denen die Formen 1, 2 und 6
bei weitem vorherrschen (96,6% von 1257 Isolierungen). Eine geographische
Skizze iSfit die Verbreitung der Fonnen erkennen. Die verschiedenen In-
fektionstypen auf dem Standardsortiment werden im Bilde vorgcfiihrt.
Verf. berichtet dann in erster Linie iiber den EinfluB der Temperatur auf
denInfektionstyp,der einerseits durch dieIJredo-, anderseits durch die Teleuto-
sporen verursacht wird, wobei Temperaturen von 12—28® C zm Anwendung
gelangten. Die Sorten Victory White Russian und Richland lieBen keinerlei
Anderung im Infektionstypus der Uredosporen aller 9 Fonnen durch die
Temperatur erkennen. Flir die Sorte Joanette Strain traf dies nur fiir die
Formen 2 und 6—9 zu, wahrend bei den Formen 1 und 3 — 5 eine deutliehe
Beeinflussung festzusteUen war, indem die Sorte bei niedriger Temperatur
ihnen gegenOber resistent war, bei hoher aber anfallig. Teleutosporen wer-
den von alien Fonnen bei hohen Temperaturen schneller gebildet als bei
niedrigen. Innerhalb der Formen besteht noch insofern ein Unterschied,
als die Bildung bei 1, 2 und 5 langsamer erfolgt als bei den anderen, die
virulenter sind. Das seltenere Auftreten dieser wird mit der fruhen Ent-
wicklung der Teleutosporen und der nur verhaltnismafiig geringen Bildung
von Uredosporen und damit von Infektionsstoff in Verbindung gebracht.
Ein EinfluB des Entwicklungszustandes der Wirtspflanze auf die Teleuto-
sporfflabildung konnte nicht beobachtet werden. Dagegen wurde diese auf
jungen Pflanzen durch hohe, auf reifen durch niedrige Luftfeuchtigkeit
begiinstigt. Ultraviolette Strahlen iibten weder auf die Uredo-, noch auf
die Teleutosporenbildung einen Einflufi aus. Braun (Berlin-DaMem).

Johnson, T., Newton, M., and Brown, A. M., Further studies of
the inheritance of spore colour and pathogeni-
city in crosses between physiologic forms of Puc-
cinia graminis tritici Erikss. et Henn. (Scientific
Agricultiure. Vol. 14. 1934. p. 360—373.)

Verff. haben die Vererbung einerseits der PathogenitSt, anderseits der
Uredosporenfarbe von Puccinia graminis tritici zu klSren
gesucht. Die Uredospore enthalt zwei Kgmente, ein orange im Zytoplasma
und ein dunkler gefSrbtes in der Sporenwand, durch deren Zusammen-
wirku^ die rote F^arbe entsteht. Das Auftreten von 3 Formen, bei denen
das Pigment in der Sporenwand (9 a) oder im Zytoplasma (36, 62) fehlte,
gab Veranlassung zu Bastardierungsversuchen. Nach Selbstung von F^-
Bastarden wurden in der Fj verschiedene neue physiologisohe Formen er-
halten, darunter aber auch die Ausgangsformen. Zwischen den einzelnen
Nachkommenschaften konnten UnterscMede in der Zahl der Fonnen ge-
funden werden. Manche F 2 -Formen erwiesen sich als homozygot, die Mehr-
zahl aber ^s heterozygot. Die letzteren enthielten in ihrer Nachkommen-
Bchaft weniger physiologische Formen als die Pi-Bastarde. Es ergaben sich
eineut Anzeichen fiir plasmatische Vererbung der Pathogenit&t, so daB keine
rein mendelistische anzunehmen zu sein sdieint. Dagegen wird diese fUr
die Vererbung der Sporenfarbe angenommen. Rote Sporenfarbe wird auf

Schftdigungen der Pflanssen duidi Pilze, Bakterien u&d filtrierbare Viia. 507

die Anwesenheit von zwei dominanten Faktoren fiir Orange (Y) und Grau-
braun (G) zuriickgefuhrt, weifie auf die Anwesenheit ihrer rezessiven Allelo-
morphe. Der Erbgang scheint dem des Rosen-Erbsen-Kamms der HUhnor
analog zu sein. Braun (Berlin-Dahlem).

Yerona, 0., Une observation sur I’action pathog^ne
du Bact. tumefaciens Smith et Townsend. (Mem.
Labor, patol. e batteriol. R. Istit. sup. Agr., Pisa. Vol. 3. No. 73. 1933.

1 p.i

Einer Anzahl von Pflanzen von Vicia Faba, die in Wasserkultur
(K n 0 p sober Losung) gezogen waren, wurde eine virulente Eultur von
B. tumefaciens zugesetzt. Bei lebhafter Entwicklung bildeten sich
bald groBe, mehr oder weniger an den Wurzeln haftende Floeken und nach
einigen Tagen entstand erst an den Seitenwurzeln, dann an der Haupt-
wurzel eine BraunfSxbung, die sich allm!lhlich auf den Wurzelhals und daim
auf Stengel, Zweige und Blattnerven ausdehnte. Das Bakterium war also
in die Pflanze eingedrui^en und hatte Verstopfung der GefSfie und Nekrose
der Gewebe verursacht. Da es im Boden vorkommt, erscheint die Tat-
saohe, daB es nicht nur die bekannten Tumore, sondem auch GefEBnekrosen
hervorruft, von theoretischer und praktischer Bedeutung.

Morstatt (Berlin-Dahlem).

Sanford, G. B., On treating seed potatoes for the con-
trol of common scab. (Scientific Agriculture. Vol. 13. 1933.
p. 364-373.)

Verf. hat die im allgemeinen zur Desinfektion von schorfigen Kar-
toffoln empfohlenen Behandlungen mit heiBem und kaltem Formaldehyd,
Sublimat, Bayer Nr. 649 und Sehwefel einer emeuten Priifung unterzogen
und kommt zu dem Ergebnis, daB sie das Auftreten des Schorfes nicht
nennenswert mildern. Ebenso hatte das Auspflanzen von imbehandelten,
stark schorfigen Enollen kein verstSrktes Auftreten des Schorfes zur Folge.
Das ist durchaus verstdndlich, wenn man bedenkt, daB Actinomyces
scabies innerhalb 2 — 3 Monaten, wie Verf. emeut nachgewiesen hat,
nur 2 mm wdchst. Bei Infektion des Fflanzguts mit dem Erreger waren
nur wenige dor Tochterknollen infiziert, und zwar nur die, welche in un-
mittelbarer Nachbarschaft der Mutterknolle gewachsen waren. Beim Aus-
pflanzen in eine Erdkultur von A. scabies wurde nur der Toil der Knol-
len schorfig, der in dioser Kultur wuchs. Verf. lehnt deshalb die Beizui^
der Enollen gegen Schorf ab. Braun (Berlin-Dahlem).

Smith, £. M., The mosaic disease of sugar beet and
related plants. (Journ. Min. Agric. London. Vol. 41. 1934.
p. 269-274.)

Verf. beschreibt die Symptome der Mosaikkrankheit auf Zuckerrube,
Mangold und verwandten Pflanzen, von der sich eine charakteristische
Chlorose durch ganz gleichfSrmige Fleckung ohne jede Differenziemng in
den Flecken imterscheidet. Von hS,ufigeren Unkrautarten, auf denen die
Mosaittrankheit der Riibe vorkommt, werden Chenopodium al-
bum, Amaranthus retroflexus und Sonchus arven-
sis genannt. Die tJbertragung ist bisher experimentell durch Myzus
persicae und Aphis rumicis erwiesen, fiber die n&here Ai^aben
gemacht werden. Verf. ist auch, im Gegensatz zu anderen Autoren, die

508 Sohadigtmgen d. Pflanzen dtiroh Pike, Bakterien usw, — Tierische Schadlinge.

Mektion dureli Einreiben mit Sait kraiiker Pflanzen gegliickt. Den Be-
scUuB bilden Angaben Uber Ertragsmindening durch die Krankheit nnd
BekampfungsmaBnahmen. Braun (Berlin-Dahlem).

Stanley, W. M., Chemical studies on the virus of tobacco
mosaic. L Some effects of trypsin. (Phytopatholoev
Vol. 24. 1934. p. 1055.)

Verf. -weist nach, daB Trypsin die Infektiositat des gewohnlichen Tabat-
mosaikvirus aufzuheben vermag. Dabei macht es im Prinzip keinen Unter-
schied, ob das Trypsin der Infektionsflussigkeit selbst zugesetzt wird oder
ob die zu infizierenden Blatter vor der Beimpfung (Einreibemethode) mit
dem Trypsin benetzt werden. Das Trypsin wirkt sogar noch, wenn es erst
nach der Viruseinreibung auf das Blatt gebracht wd. In diesem Fall ist
es noch 30 Min. nach der Viruseinreibung wirksam. Die Versuche des Verf.s
tun dM, daB nieht etwa das Viras durch das Trypsin alteriert wird, son-
dem die Zellen, in die das Virus eindringt. Durch die Wirkung des Trypsins
auf die Zelle wird die Mektion verhindert. Die gleichen Folgen wurden
auch bei Infektionsyersuchen mit einer Reihe anderer Vira beobachtet.
Die Zellen von Nicotiana glutinosa smd gegen die Trypsin-
wirkung offenbar weniger empfindlich als die anderer .&ten.

E. E 5 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Takahashi, W. N., and Bawlins, T. E., Rod-shaped particles in
tobacco mosaic virus demonstrated by stream
double refraction. (Science. Vol. 77. 1933. p. 26.)

— ) — (Application of stream double refraction in
the identification of streak diseases of Tomato.
(Phytopathology. Vol. 24. 1934. p. 1111.)

Es wird gezeig^, daB der in Stromung versetzte Saft von Tabakpflanzen,
die mit dem gewohnlichen Tabakmosaik infiziert sind, bei Beobachtung
durch gekreuzte Nikols die Erscheinung der „Str6mungsdoppelbrechung“
(Freundlich, Kapillarehemie) zeigt. Saft von gesunden Pflanzen be-
sitzt diese Eigenschaft nur in geringem MaBe oder iiberhaupt nicht. Das
Verfahren envies sich als brauchbar zur TJnterscheidung von zwei einander
ahnlichen Viruskrankheiten der Tomaten. Die eine als „combination streak“
bezeichnete Krankheit entsteht aus der kombinierten Mektion des oben
eiwSihnten Tabakmosaikvirus mit dem auf Eartoffeln hSiufig auftretenden
Ringmosaik(-X)-Virus. Am Saft von solchen Pflanzen macht sich die Tabak-
mosaikkomponente gleichfalls durch Doppclbrechung bemerkbar. Bei der
anderen als „diebaGk streak" bezeichneten Krankheit ist das nicht der Fall,
da an ihrem Zustandekommen das gewohnliche Tabakmosaik nicht be-
teiligt ist. Die Frage, ob die Doppelbrechung auf die Teilehen des Tabak-
mosaikvirus selbst zuriickzufiihren ist, die demnach langgestreckte Form
besitzen miiBten, oder auf ebensolche Begleitkfirperchen, ist noch ungeklSrt.

E. K 6 h 1 e r (Berlin-Dahlem).

Tierische SchSdiinge.

einer Himbeerpflanzung durch die
®®®^S®^^™®®^®(L8'®ioptera rubi Heeg. Dipt. Ce-

r. f. d. Dtsch. Pflanzenschutzdienst. Jahrg. 14.

1934. S. 45 — 47.)

• Ti^^* fiber em Autoeten von Lasioptera rubi, die
m Deutschland als S ch ft dlin g bisher kaum in Erscheinung getreten war.

Tieiisohe SchiMllinge.

509

und an Himbeeren Stei^elgallen erzeugt. Die vergallten Ruten sterben
im Laufe des zweiten Sommers ab oder ergeben zumindest einen geringen
Emteertrag. Der Lebenslauf der Miicke wird beschrieben.

G 0 1 f a r t (Etzeberg b. Kiel).

Sehaeffer, C., Onderzoek over de Karwijmot (Depres-
saria nervosa Hw.) en haar bestrijding. (Verslagen
en Mededeel. Plantenziektenkund. Dienst, Wageningen. 1934 1 . No. 74.
28 p., 4 pi.) ..

Nach einer Ubersicbt iiber den Anbau des Kiimmels wird iiber fruheres
Auftreten der Kiimmelmotte berichtet, die in Deutschland sehon 1760 als
sehadlich gemeldet worden ist. In_ Groningen (Holland) hat sie 1931 und
1932 viel Schaden angerichtet. tiberwinterung als Imago, Eiablage im
April (grSBtenteils). Junge Eaupen von Anfang Mai ab, Verpuppung (im
Stengel) von Anfang Juni ab. Nur eine Generation. Es wnrde Vemiehtung
der Eier mit 3 versohiedenen Dlemulsionen versucht: Volck, Parasekt und
Shell (1, 2, 2%). Die Ergebnisse seheinen gut gewesen zu sein. Der Erfolg
chemiseher Bekampfung der Eaupen wird in Tabellenform dargestellt.
Empfohlen wird der Praxis vorlaufig; 1. Durch Fangglaser den Flug der
Motike zu iiberwachen. 2. Mit der Bekampfung 4 Wochen nach dem Hauptflug
anzufangen und sie innerhalb 14 Tagen zu beendigen. 3. Die Behandlung
nach 7 — 10 Tagen zu wiederholen. 4. Als die besten Mittel sind vorlau%
Natrium- und Bariumfluorsilikat zu bezeichnen, verspiitzt oder verstaubt.
4. Es mu6 viel davon auf die Pflanzen und zwar „in das Gewachs“ ge-
bracht werden. K. Friederichs.

Schwencke, E. H., Ein neuer Sisalschaden in Ostafrika.
(Der Tropenpflanzer. Jahrg. 37 8. 1934 8. S. 322 — 326.)

Ein 1931 zuerst beobaehteter Schaden an Sisalagaven in Ostafrika er-
wies sich als durch den Eiisselkafer Scyphophorus acupuneta-
t u s verursacht, obgleich er nicht mit demjenigen SchadensbUd uberein-
stimmt, das Morstatt 1921 nach der ersten Feststellung von 1914
beschrieben hat. Danach drang der Eafer von unten her in das Herz
der Agave ein und legte Eier ab. Die Larven fraBen sich dann bis zur
Spitze des Herzens durch. Jetzt werden die SuBeren Herzblatter der
Agave an der AuBenseite der Hander von vielen nadelstichartigen LSohern
durehbohrt, und diese Stellen vertrocknen. Die Fasern verfarben sich und
werden von der Maschine ausgeblirstet. Seine Eier legt der Kafer jetzt nur
in totem Gewebe, etwa abgeschlagenen Striinken, ab, und man kann ihn
durch Auslegen von Spaltstiicken soleher mit Erfo^ kodern. Im iibrigen
wird das Pramiensystem angewendet. Verbrennen der alten Strttnke, ehe
sie ganz trocken sind, gelingt nicht vollig; die Kaferlarven bleiben in ihrem
Inneren am Leben; nach dem volligen Vertrocknen aber haben sie die Pflanze
verlassen. Diese Kafer treten auf den Pflanzungen in bedrohlicher Menge auf.

K. Friederichs.

de Gryse, J. J., and Sehede, K., An account of the eastern
hemlock looper, Ellopia fiscellaria Gr., on hem-
lock, with notes on allied species. (Scientific Agriculture.
Vol. 14. 1934. p. B23— 539.)

Verff. haben 1928 und 1929 ein Massenauftreten von Ellopia fis-
eellaria Gn. in der G^end der Muskoka-Seen in der Provinz Ontario
(Eanada) beobachten kSnnen. Sie geben eine ausftihrliche Zusammen-

510

Tierisohe SohSdlizige.

stellung der bisher bekannt gewordenen Mitteilungen iiber das Auftreten
dieses Schadlings und verwandter Arten. Kurze Angaben iiber systema-
tiscbe Stellung und die Hauptmerkmale der Spezies folgen. Bemerkungen
iiber die Biologie, Topographie und die Waldtypen geben ein Bild von dem
Seuchenberd, dessen Ausdebnung und Starke kurz gekennzeicbnet wird.
Die Biologie des Schadlings und die Moglicbkeiten der Bekampfung werden
besprocben. Am starksten wurde Tsuga canadensis befallen.
Andere Pflanzen wurden niu: angegriff en, wenn sie in Bestanden der Hemlocks-
tanne standen. Nur Taxus canadensis Marshall blieb verscbont.
Der Parasitismus des Scbadlings war ziemlicb verbreitet: von 800 Proben
waxen 20,12% parasitiert. Fiir die Bekampfung kommt in erster Linie
Bestauben mit Arsen in Frage. AuBerdem ist der iimbau von Miscbbestanden
zu empfehlen. Braun (Berlin-Dablem).

Baleh, B. B., Tbe balsam wooly apbid, Adelges piceae
(Ratz.) in Canada. (Scientific Agriculture. Vol. 14. 1934.

p. 374-383.)

Es wird ein kurzer Uberblick iiber die Biologie von Adelges pi-
ceae (Ratz.), der Erregerin der Giebtkrankheit von Abies balsa-
ms a (L.) Miiller gegeben, nacbdem einige Angaben iiber ibre Gescbicbte
in Europa und Nordamerika gemacht worden sind. Die Hauptverbreitung
erfolgt durch Verwehen der eben aus dem Ei gescbliipften Junglarven. Die
Scbadenwiikung am einzelnen Baum sowie im ganzen Waldbestand wird
erdrtert. Fiir natiirliche und kiinstliche Bekampfung werden Ratscblage
erteilt. Braun (Berlin-Dablem).

Watson, E. B., An account of tbe eastern hemlock loo-
per, Ellopia fiscellaria Gn., on balsam fir. (Scien-
tific Agriculture. Vol. 14. 1934. p. 669 — 678.)

Y&d. gibt zunacbst einen tJberblick iiber das Auftreten von Ello-
pia fiscellaria Gn. in Quebec und Nova Scotia. Noch vor 1928 ist
dieser Schadling auf Papierholz in Eanada unbekannt gewesen. In diesem
Jahre wurde erstmal% schwerer Befall von Abies balsamea fest-
gestellt. Das Schadbild bei starkem Auftreten wird gescluldert. Es erinnert
an die dmcb Harmologa fumiferana bcrvorgerufenen Schadi-
gungen. Die Biologie des Insekts wird eingehend beschrieben. Bevorzugte
Futterpflanze ist Abies balsamea, wahrend die Hemlokstanne in
den verseuehten Gebieten nieht vorkommt. Aucb WeiB- und Schwarztanne
werden befallen. Im allgemeinen waxen die Schaden in Reinbestanden von
Abies balsamea am starksten; aber aucb in Miscbbestanden mit
45% Tanne waren sie teilweise scbwer. tJber den Ursprung der Epidemie
last sich nicbts sagen. Eii^eben der Baume im Winter ist nur bei vSlligem
Verlust der Nadem zu befiirehten. tJber den Verlust des Dickenzuwachs
werden Zahlenangaben gebracht. SekundEres Auftreten anderer Insekten
wurde nur seltmi beobacbtet. In einem SchluSabschnitt werden BekSmp-
fungsmaSnahmen ai^egeben. Braun (Berlin-Dahlem).

Zattler, F., Die rote Spinnmilbe als Hopf ens cbadling
und Erfahrungen bei ibrer Bekampfung. (Allgem.
Brauer- u, Hopfenztg. Bd. 74. 1934. S. 486^489.)

Die rote Spinnmilbe, Tetranyebus (TJntergattung Epitetrany-
chus Zacb.) altbaeae v. Hanst., befEllt auSer Hopfen, an dem sie den

Oekologie, biologisohe und chemisohe Bekampfung tieiiacher Sch&dlinge. 511

sog. Kupferbrand hervomift, noch eine groBe Anzahl anderer Kultur-
pflanzen. Der Schadling befSllt nur Pflanzen, die dureh andere Einfliisse
bereits geschw§,cht sind. Abnorme Trockenheit, einseitige Diingung mit
Stallinist, Jauche oder FSkalmist, stauende Ktsse, Schwaehung der Hopfen-
stScke dnrch Abschneiden der Eeben bei der Emte, Vemaehlassigung der
Bodenpflege, begiinstigen den Befall. Die Spinnmilbe bildet auf der Blatt-
unterseite, bei starkem Anftreten aueb an den Dolden, ein feines Gespinst,
das sie gegen die Witterung schiitzt und unter dessen Schutz das Weibchen
ihxe Eier ablegt. Die Zahl der Generationen hangt vom Elima ab, sie
sehwankt zwischen 5 und 9. Die tJberwinterung erfo^ in den Ritzen der
Hopfenstangen und anderen gesehtitzten Schlupfwinkeln, im Fruhjahr be-
ginnt dann der Befall der Stoeke von der Bodennahe aus. Zur Bekampfni^
sind die befaUenen Blatter sorgfalt% zu entfemen. Die Vemichtung des
Gespinstes mit Insassen und Eiem gelingt durcb Bespritzen mit Schwefel-
kalkbriibe und zwar bis langstens zum Beginn der Doldenbildung. Schwefel-
kalkbrtihe reagiert namlich mit Kupferkalkbrizhe, auf deren Anwendung man
auch wahrend der Ausdoldung der Peronospora wegen nicht verzichten kann,
und gibt unansehnliehe Flecken, die den Handelswert des Hopfens stark
heruntersetzen. An anderen Bekampfungsmitteln konunen in Betracht:
Scbmierseifen-Tabakextrafctbriihe, Erysit und Cbrysantol. H e u 6 (Berlin).

Oekologie, bioiogieche und chemisohe Bek&mpfung iierischer Schfidiinge.

Langenbnch, R., tJber dieVerbreitung von Erbsenvickler-
arten in Deutschland. (Nachrichtenblatt f . d. Dtsch. Pflanzen-
schutzdienst. Jahrg. 14. 1934. S. 23.)

Verf. konnte auf Gmnd zahlreicher Einsendungen feststellen, daS als
Erbsenwiokler in Deutschland fast ausschliefilich Laspeyresia ni-
g r i c a n a Steph. in Betracht kommt, wahrend L. d o r s a n a F., vielleicht
von eiuigen brtlichen Ausnahmen abgesehen, in bedeutend geringerer Zahl
auftritt. L. nebritanalr. scheint dagegen -weder in Nord- noch Mttel-
deutschland und wahrscheinlich auch nicht in Siiddeutschland vorzukommen.

G 0 f f a r t (Eltzeberg b. Eiel).

Winning, E. v., Der Stand derAusbreitung derBisam-
ratte in Deutschland. (Nachrichtenblatt f . d. Dtsch. Pflanzen-
schutzdienst. Jahrg. 14. 19^. S. 24 — 26.)

Der Aufsatz gibt einen tjberblick iiber den Stand der Bisamratten-
bekampfung in den Provinzen Brandenburg, Hannover, Grenzmark, Nieder-
schlesien, Oberschlesien und Sachsen, ferner in Bayern, Wtirttemberg, Baden,
Sachsen, Thiiringen, Anhalt und Hamburg. In Schlesien some in Bayern
und Wiirttemberg sind die Grenzen des Befall^ebietes erheblich nach Nor-
den vorgeschoben worden. Weiterhin hat sich die Bisamratte an zwei SteUen
der TJnterelbe gezeigt. Ebenso wurden in der Provinz Brandenburg und
in Anhalt ein starkeres Vordringen des Schadlings beobachtet.

Goff art (Kitzeberg b. Kiel).

Fencht, W., Vorzuge und Nachteile einigervom Deut-
BchenPflanzenschutzdienst geprufterFeldmause-
bekampfungsmittel. (Nachrichtenblatt f. d. Dtsch. Pflanzen-
schutzdienst. Jahrg. 14. 1934. S. 33 — 3B.)

Geprtift mirden Rauchermittel, Gifigetreide, Phosphor- und Bakterien-
praparate. Unter den Bauchermitteln hat sich das „HorarRaucherverfahren“
als das zuverlassigste und gleichzei^ preiswerteste Verfahren bewahrt. Das
„Delicia“-Verfahren steht hinsichtlich der Wirksamkeit etwas zurUck. Die

512 Oekologie, biologische und ohemische Bekfcmpfung tierischer Sohfidlinge.

Versuche mit „Lepit“ befriedigten wegen zu geringer Wirksamkeit nickt
ausreichend. Vom Giftgetreide haben sieb die „ZeIio“-K6riier am besten
bewahrt. Leider steht der allgemeinen Anwendung des Mittds der hohe
Preis (6 EM. jekg) gegenuber. Gleich gute Erfolge wurden mit ,.Delieia“-
MSiUselatwerge und „Rumetan“ erzielt. Mit „Delieia“-Mauselatwerge wird
sich 'wabrscheinlich etwas billiger arbeiten lassen als mit dem im Verbraueh
allerdings etwas billigeren „Kiimetan“. Balrterionpraparate haben bci leid-
lich gutem Wetter einen guten Erfolg gezeitigt. Abgesehen von der Vor-
und Zubereitung des Mittels sind Bakterien das billigste Mausevertilgungs-
mittel. G 0 f f a r t (Kitzeberg b. Kiel).

Trappmann, W. und Mtsehe, G., Versuehe mit Giftgetreide
gegen MSuse. (Naohrichtenblatt f. d. Dtsch. Pflanzenschutzdienst.
Jahrg. 14. 1934. S. 35-36.)

Zur Bewertung der einzelnen GiftgetreideprSparate fiihrten Verff. Fiitte-
rungsversuehe durch. Es zeigte sieb dabei, dafi Strychningetreide nur wenig,
Phosphorpraparate maBig stark aufgenommen wurden, wahrend der BVaB
an Tballium-K5mern an den FraB von unbehandeltem Getreide herankam.
Am wirksamsten waren StrycbninkSrner, dann Phosphorpraparate und
schlieBlieh ThalKum-KSmer, bei denen noch ein bedeutender NachfraB von
unvergiftetem Getreide zu verzeiehnen war. Bevorzugt wurden aber nachst
dem unbehandelten Getreide Thallium-Korner, dann folgen Phosphorprapa-
rate und Strychningetreide. Es empfiehlt sich also, Strychningetreide in
erster Linie dort zu verwenden, wo die natiirliche Nahrung der Mause knapp
ist. Thallium-ESmer diirfen bei starkem Mauseauftreten nicht zu sparsam
ausgelegt werden. Zwischen beiden stehen die Phosphorpraparate, die bei
guter Giftwirkung aueh in ausreichendem MaBe von den Mausen angenommen
wurden. G o f f a r t (Kitzeberg b. Kiel).

Hartzell, A., Histopathology of insect nerve lesions
caused by insecticides. (Contrib. Boyce Thompson Inst. Vol. 6.
1934. p. 211—223.)

Um histologische Veranderungen im Nervengewebe von Insekten, die
durch auBerliche Anwendung von Pyrethrum getstet waren, festzustellen,
wurden die Organe mit Toluidin-Blau gefarbt nach einer in der Medizin
zur Diagnostizierang von Paralyse iiblichen Technik. Die Versuehstiere
waren Mehlwiirmer und Heuschrecken (Melanoplus femur-ru-
brum). Es wurden Schadigungen im Centralnervensystem, im Gehim,
im Unterschlundganglion, den Mcken- und Bauehganglien festgestellt.
Bei Insekten, die durch Pyrethrin getotet sind, glaubt Verf. aus dem histo-
pathologischen Bild schlieBen zu miissen, daB der Tod durch Zerst5rung
der Zellen des Centralnervensystems und daraus entstehende Paralyse ein-
getreten war. Bei Mehlwurmern, die mit Triorthocresylphosphat behandelt
wurden, trat Schadigung der Bauehganglien ein. Bei Anwendung von Ro-
tenon wurden keine den vorgenannten vergleiohbare Veranderungen des
Hervengewebes gefunden.

Wahrend friihere Untersuoher die tSdliehe Wirkung von Badium-
bestrahlung der entstehenden Hitze zuschrieben, fand Verf. ungleiehe Wir-
knngen von Badium und Hitze. AnschlieBend wurde die pharmakologische
Wirkui^ da: Einspritzung von Pyrethrin auf Muskeln des l^osehes unter-
suoht. K Friederichs.

Abgeschlossen am 21. Februar 1935.

inhaltsverzeichnis

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221

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— , Der Erlenk&fer (Agelastica alni L.) als
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— , tyber den EinfluB der Kalidtingung
auf die AnfAlligkeit der Apfelb&ume
gegen Blutlaus, Blattlaus und Mehltau.

443

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die Himbeergallmucke (Lasioptera rubi
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Janke, A., Sekera, F. und Szilvinyi, A.,
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196

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des V-Faktors. II. Mitteilung : tJber die
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— , P,, Der Obergang von Bakteriensporen
in das Destillat bei der Wasserdestil-
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— , R., Beitr&ge zur Kenntnis der Cellu-
losezersetzung unter niedriger Sauer-
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den Bakterienantagonismus innerhalb
der gleichen Art. 296

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zenverwandtsohaft. 47

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harmlose Arten der Bienenmilbe Acara-
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in der Schweiz. 446

Morstatt, H., Uber die Frage der Zunahme
der Pflanzenkrankheiten. 60

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biologische Dosimetrie des Radiums. 202
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len auf die Amylase. 65

Naldn, P. M. K., Zur Hd.molyse der Staphy-
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the field. 435

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— , Investigations on the effect of age
upon the nitrogen content of yeast. 202
— , Investigations on the assimilation of
growth substances by yeast from wort.

297

— , The effect of rhizopin on the produc-
tion of matter of AspergillTis niger. 298
— , and Hartellus, V., Investigations of
the growth of Aspergillus niger at dif-
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with and without the addition of growth
promoting substance B. 296

Nielsen, N., and Hartelius, V., The se-
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Niemeyer, Ludwig, Untersuchungen Tiber
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der Reben Tmd Unkrautflora im Wein-
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Ontschukowa, M., s. Issatschenko, B.
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mie des Menschen tmd der Tiere. 2. Aufl.
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zu Band IV — ^VI des Hauptwerkes. 482
Orla-Jensen, S., Hitherto unknown acti-
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Ornstein, G., Erfahrungen mit der Chlor-
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Pels Leusden, F., Gefahren beim Hantieren
mit hochevakuierten GefABen tmd ihre
VerhUtung. 414

Perotti, R., Patologia da concimazioni “ad
alta dose” pajrticolarmento di nitrato.
(Pbatologie hoher Dilngergaben, insbe-
sondere von Nitraten.) 430

— , Note fitopatologische per gli auni

1926 — 1927. (Phytopathologische An-
gaben zu den Jahren 1926 — 1927.) 431

— , Note fitopatologische per gli anni

1927 — 1929. (Phytopathologische Be-
merkungen zu den Jahren 1927 — 1929.)

431

— , Dermatosi, mioosi e suberosi dei frutti
di Susino. (Dermatose, Mykose tmd
Suberose von Pflaumenfriichten.) 433
— , ]> Mieo-batteriosi. (Die Myko-Bak-
teriosen.) 438

Register.

621

Perotti, R., I Laboratory di Patologia e
Batteriologia del R. Istituto Superiore
Agrario di Pisa e Tannesso R. Osserva-
torio Regional© di Fitopatologia. 448
— , Attivazione fisiologica od moculazione
di forme n©l terreno coltivabile? (Nota
complementare.) (Physiologische Akti-
vierung oder Impfung von Kulturboden.)

498

— , Note fitopatologiche per gli anni 1929
— 1931. (Phytopathologische Bemer-

kungen zu den Jahren 1929 — 1931.) 499
— , e Adler^ S., Sull’ impiego del csarbone
e di alcuni suoi preparati negli speciali
riguardi fitopatologici. (timber die An-
wendung von Kohle und einigen Prfi,-
paraten daraus, insbesondere in phyto-
pathologischer Hinsicht.) 430

— , e Bonaventura, G., Attaccbi di Botry-
tis einerea, Pers., su infruttescenzi di
Ricino. (Befall der Fruchtst&nde von
Rizinus durch B. cinerca.) 434

— , — , Ricerche ed osservazioni sulla bio-
logia ed in ispecie sul parassitismo della
Tubercularia vulgaris, Tode. (XJnter-
suchungen und Beobachtungen iiber die
Biologic und insbesondere den Parasitia-
mus von T. vulgaris.) 436

— , — , Mioo-batteriosi dei frutti di Ne-
rium Oleander L. (Bine Myko-Bakte-
riose der Priichte des Oleanders.) 437
— , e BonucelU, G., Rapporti tra involu-
zionismo e virulenza nei riguardi del*
“Macrosporium commune” Rabh. (Be-
richte liber Involutionsformen und Viru-
lenz bei M. oommime.) 501

— , e Mastalli, P., Studi microbiologici sui
terenni della Bassa Maremma di Val di
Cedina. (Hikrobiologische Studien Uber
die Baden der Bassa Maremma im Tal
von Cecina.) 427

— , e PontecorvOy G., Ulteriori ricerche
sulla mioobatteriosi fiorale e dei frutti
dell’ oleandro. (Weitere Untersuchun-
gen iiber die Myko-Bakteriose der Blli-
ten und Friiehte des Oleanders.) 437
— , e Verona» 0,, Prime not© batterio-
logiche sui terreni della Maremma.
(Erste bakteriologische Beitrftge liber
^e Baden der Maremma.) 427

— , — , Seconda nota sulla batteriologia
dei terreni della Maremma Grossetana.
(Zweiter Beitrag liber die Bakteriologie
der Baden der Maremma von Grosseto.)

428

— , — , Ihdagmi sui rapporti tra sviluppo
della Fumaggine negli olivi e tratte-
menti dachicidi. (Untersuohungen liber
die Beziehungen zwischen der ^twick-
lung des RuStaues an Oliven und der
Anwendung von Mitteln gegen die 01i>
venfliege.) 437

— , — , La rogna del cotogno (Pirus cy-
donia, L.) (Der Quittenkrebs.) 438

Perotti, R., e Verona^ 0., Ancora sulla
rogna del Cotogno. II Bacterium Cy-
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tung fiir Spritzmittel in Laboratoriums-
versuchen. 432

, Versuche mit Giftgetreide gegen

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reni della Campagna Pisana. (Mikro-
biologische Studien iiber die Boden der
Campagna von Pisa.) 428

— , Le basse temperature dei mesi di
gennaiofebraio 1929 in relazione al de-
terminismo di alcuni fenomeni biolo-
gici. (Die niederen Temperaturen im
Januan und Fobruar 1929 und einige
durch sie bedingte biologische Erschei-
nungen.) 431

— , Marciume di frutti di pomodoro do-
vuto a ,,Rl^izopu8 nigricans** Ehr. (Rh,
nigricans als Erreger einer Fruchtf&ule
der Tomate.) 433

— , Urocystis occulta (Wallr.) su fru-
mento. (C. occulta auf Weizen.) 436
— , Qualche osservazione colturale sul
„Trichothecium roseum** Link. (Einige
Beobachtungen an Kulturen von T. ro-
seum.) 436

— , Osservazioni sul Parassitismo della
„Phyllosticta camelliae** West. (Beob-
achtungen fiber den Parasitismus von
Ph. camelliae.) 436

— , Di alcuni casi patologici esaminati
presso il R. Osservatorio Regionale di
Fitopatologia di Pisa. (Einige von der
Kgl. phytopathologischen Beobachtungs-
station in Pisa untersuchte pathologische
Falle.) 437

— , Conspectus mycetum agri pisani. 499
— , Note mycologiche suHe Pandanacee.

500

— , Sul cosidetto „vaiolo‘* del Cavolfiore.
(Dber die sogenannten „Pocken*‘ des
Blumenkohlcs.) 501

— , Sul marciume del colletto dei Garo-
fani. (Dber die FuBkrankheit der Nel-
ken.) 502

— , Nuovi microraiceti su Pandanacee.

(Neue Pilze auf Pandanaceen.) 502
— , line observation sur Taction patho-
gen© du Bact. tumefaciens Smith et
Townsend. 507

— , e Bagnoli, E,, Aspergillosi delle Ca-
riossidi di Mais. (Aspergillusbefall der
Maiskamer.) 433

— , e Bologna, L., Contribuzioni alia
conoBcenza della battei^ioriza della „Di-
plotaxis erucoides** D. C. (Beitrd.ge zur
Kenntnis der Wurzelbakterien von D.
erucoides.) 446

— , Bonaventura, G., e Fenogllo, L. S.,
Alcuni reperti batteriologici sui terreni
di Libia. (Einige bakteriologische Be-
oba^tungen fiber die Baden Lybiens.)

428

— , e Brusehi, G., Su di alcuni nuovi
prodotti anticrittogomici a base di mer-
curio e tannini sintetioi. (Dber einige
neue antikryptogame Mittel mit Queck-
silber imd S3mthetisch6n Tanninen.) 500
— , © Del Trediei, A., Ulterior! oontri-

Register.

625

buzioni alia conosoenza della zuioro-
biologia dei terreni della. Bassa Val di
Ceoina. (Weitere Beitr&ge zur Kenntnis
der Bodenmikrobiologie des unteren Val
di Cecina.) 428

Verona^ 0.» e Franchini, R., II ,,Fusarium
Martii'* App. e Wr. nella Micobatte-
riosi dell’ Oleandro. (Das Fusarium
Martii bei der Mykobakteriose des Ole-
anders.) 438

— , e Maccari^ C., Sulla fermentazione del
mosto di „Kaki“. (t)’ber die GArung
des Mostes von Diospyros Kaki.) 494
— , e Sbrana, G., Aloune osservazioni suUa
„Scabbia“ o ,,Schorf“ dei tuberi di
patata. (Einige Beobachtungen tiber
den Schorf der Kartoffelknollen.) 438
— , s. Perotti, R.

Viebl, Karl und Meifiner, Bernhard, t)'ber
den Einflufi der Temperatur und der
Jahreszeit auf die biologische Abwasser-
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Yamagutchi, S., Uber die Beeinflussung
der Sauerstoffatmung von verschiedenen
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n. Namen- und Sachyerzeichnis.

(Stichworte, die auf Originalarbeiten hinweisen, sind durch ein * gekennzeichnet.)

Abbau,entwicklung8g6sohichtlicheStudie.

411

— , Kartoffel-, Vitalitatsbestimmung. 429
Abies balsamea, Gichtkrankheit durch
Adelges piceae. 610

, Sohadigung durch Massenauftre-

ten von Ellopia fiscellaria. 510

Abwasser, Bakteriophagengehalt, Bedeu-
tung ftir die Keinigung. 60

♦ — , Reinigung, biologische, Einflufi von
Temperatur und Jahreszeit. 14

— , Reinigungsanlage. 499

Acarapis dorsalis, Rlickenmilbe der Biene,
Neubeschreibung, Bedeutung. 320

— extemus, Halsmilbe der Biene, Be-
deutung, Em&hrung. 320

— woodi, Tracheenmilbe der Biene, Be-
deutung, EmAhrung. 320

Acaulium, Wachstum auf gekiihltem
Fleisch. 156

^Acineta grandis im Belebtschlamm, Ein-
fluO der Jahreszeit. 37

Acremoniella, Wachstum auf Butter, Ver-
f&rbung. 209

Acrostalagmus, Wachstum auf Butter,
Verf&rbung. 209

— cephalosporioides, ImmunitAtsver-

suche. 500

♦Acrothecium, Vorkommen im Boden,
mikropedologische Untersuchung. 276
Actinomyces, RoUe bei der Selbsterhit-
zung des Gotreides. 158

* — , Vorkommen im Boden, mikropedo-
logisohe Untersuchung. 276

— Alni, WurzelkndUchenbildung an Al-

nus, Stickstoffbindung. 50

— casei, Neubeschreibung, Vorkommen

in SchmelzkAse. 423

— Elaeagni, WurzelkndUchenbildung an

Elaeagnus und Hippophae, Stickstoff-
bindung. 50

* — flavus, Vorkommen im Boden, mikro-
pedologische Untersuchung. 281

— scabies, Kartoffelschorf , Enollenbei-

zung. 607

Adelges piceae, Gichtkrankheit an Abies
balsamea, Biologie. 510

Aerobaoter transoapsulatus, Neubeschrei-
bung, Querkapselbildung. 485

Agelastica alni, Befall von StUlkirsche,
Bek&mpfung. 315

Ageratum conysoides, Wirtspflanze ftir
Tabak-KrAuselvirus. 313

Agriotes mancus, KartoffelschAdling, Be-
k&mpfung durch Fruchtfolge. 64
Agropyrum-Arten, Wirtspflanzen ftirPuc-
cinia glumarum in Alberta. 435

♦Aktinomyzeten, Boden-, Untersuchung
nach Rossi-Cholodny-Conn. 379

* — , Keimgehalt verschiedener Stallmist-
arten. 87

— , Keimzahlen im Boden. 169

Aleyrodidae, 'Gbertragung der Tabak-
Kr&uselkrankheit, Wirtsimkrftuter. 313
Alkohol, Keimgehalt und Entkeimung. 41 2
♦Allium vineale, Vorkommen in Wein-
bergen, Beziehungen zu Rebenwachs-
turn. 409

Alnus, Erreger der WurzelknSllchen, Un-
tersuchungen. 49

Altemaria, Giftwirkung von Arsen. 437
— , Wachstum auf Butter, Verf&rbung.

209

Arten, Apfelfaule, physiologische Un-

tersuchungen. 218

— tenuis, Synergese mit Bakterien an

Oleander. 437

Althaea rosea, Stengelkrebs durch Sclero-
tinia sclerotiorum. 219

Aluminium, kolloidales, angebliohe fungi-
zide Wirkung. 602

Amaranthus retroflexus, Wirt ftir Zucker-
rtibenmosaikvirus. 607

AminosAuren, aromatische, Bildung durch
Schimmelpilze. 488

Ammoniak, Bedeutung ftir das Chlor-
bindungsvermdgen des Wassers. 212
— , Mikroanalyse. 196

♦Amoeba-Arten im Belebtschlamm, Ein-
fluO der Jahreszeit. 36

♦ , — der Temperatur. 24

♦Amphileptus im Belebtschlamm, EinfluO

der Jahreszeit. 36

♦Amphimonas im Belebtschlamm, Einflufi
der Jahreszeit. 36

♦ ^ — der Temperatur. 24

Anaerobenkulturen, Metallexsikkator ftir

48

Antagonismus artgleicher Bakterien. 296,

417

— bei Bakterien (Coli- und Milzbrand

bakterien). 30’

Register.

527

Antagonismus der Golibakterien. 420
— , direkter, von Bakterien. 52

Anthocoris, Raubwanze, niitzlich im
Obstbau. 442

Antirrhinum, Rost, Verbreitung in Eng-
land, Bekampfung. 309

Apfel, Bek&mpfung von Schtdlingen. 315
— , „Bitter pit“, Viruskrankheit ? 63

— , Fruchtfkule durch Pilze. 218

— , Lagerschorf. 502

— , Sch&dlingsbefall, EinfluB von Kali-

dUngung. 443

Apfelwickler, Bek&mpfung. 315

Aphis gossypii, “Cbertrager der Sellerie-
mosaikkrankheit. 63, 314

— rumicis, tJbertrager von Zuckerrtiben-

mosaikvirus. 507

— spiraeoola, Bekampfung mit Derris

und Py rethrum. 318

Apis mellifica s. Bienen.

*Arcella vulgaris im Belebtschlamm, Ein-
fluB der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

Arsen, Giftwirkung auf Pilze. 437

— , Vergiftung von Bienen. 319

Ascophanus aurora, Entwicklung und
Zytologie. 203

Aspergillus, Kugelzellbildung durch
Schwermetallwirkung. 53

— , RoUe bei der Selbsterhitzimg des
Getreides. 158

— , Waohstum auf Butter, Verfftrbung.

209

Arten, Gaswechsel, EinfluB der Stick-

Azidophilus-Milch, EinfluB auf den Stuhl.

207

Azoligase, Stiekstoffbindung in Legu-
minosensamen. 205

Azotase, Stiekstoffbindung durch Azoto-
bacter. 294

*Azotobacter, Gehalt der Weinbergsboden,
Beziehungen zu Rebenwachstum. 406

— , Stiekstoffbindung, p^-EinfluB, Azo-
tase, Nitrogenase. 294

— , — , Wirkung auf hohere Pflanzen.

306

— agile, Physiologie. 49

— chroocoocum, Physiologie. 49

, Stiekstoffbindung durch Enzyme.

55

, Wachstumsgrenze im alkalischen

Bereich. 153

Bacillus-Arten im Boden des Lunzer
Gebiets. 59

— alvei, Pleomorphismus. 444

— ammonificans, Neubeschreibung, Vor-
konunen in italienischen Bdden. 428

♦ — amylobacter, Bedeutung ftlr StaJlmist-
rotte. 75

, Pectinzersetzung. 210

* , Pleomorphismus. 321

— amylovorus, Infektionsbeeinflusaung
durch Bliltennektar und Regen. 312

♦ — anthracoides, Biologie der Kolonien.

185

— asterosporus, Pectinzersetzung. 210
♦ — cellulosae dissolvens, Zellulosezerset-

stoffquelle. 424

* , Hydrolyse von Pentosanen. 473

, Pectinzersetzung. 210

, unterschiedliche elementare Zu-

sammensetzung. 424

— niger, EinfluB von N&hrbodenazidit&t
und Wuchsstoff. 297

, Erreger von BlumenkohlschwArze.

501

, Immunitatsversuche, 500

, Schadigung von Mais. 433

, Ureasebildung. 55

, Wuchsstoff- (Rhizopin-) Wirkung,

297, 298

, Zitronensaurebildung. 201

Asphodelus microcarpus, Befall durch
Puccinia asphodel!. 309

’'‘Aspidisca im Belebtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

zung in Stallmist. 78

* — co^learius, Bedeutung ftir Stallmist-
rotte. 74

, Unterscheidung von Clostridium

putrificum. 295

— fluorescens liquefaciens, Pectinzerset-
zung. 210

— mesentericus, Pectinzersetzimg. 210
, Variation und Filtrierbarkeit. 420

* — mycoides, Biologie der Kolonien. 186

, Femwirkung von Metallen auf

Entwicklung. 51

, Phagengehalt, Identitat mit B.

undulatus. 492

, Sporenbildung, ZeUeinschlilsse. 484

— oleae, Synergese mit Altemaria tenuis

an Oleander. 437

— oligocaxbophiluB, Begleiter nitrifizie-

render Bakterien. 199

* , — der Temperatur. 24

Assimilation, Nitrat-, bei Schimmelpilzen.

424

*Astrosiga im Belebtschla.mm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

Aucubamosaikvirus, Kultur in isolierten
Tomatenwurzeln. 440

Aziditat, Boden-, mikrobiologisoh be-
dingte SchwaoJeungen. 211

— pluton, Identitat mit B. alvei und
StreptoTOCOus apis. 444

» — prodigiosus, Biologie der Kolonien.

185

, Fettbildung. 150

* — putrificus, Bedeutung fiir Stallmist-
rotte. 73

, Unterscheidung von Clostridium

putrificum. 295

♦ — putrificus tenuis, Bedeutung far StoU-
mistrotte. 7”

528

Register.

^Bacilliis putrificus verrucosus, Bedeu-
tung fiir Stallmistrotte. 72

— pyocyaneus, Stickstoffverluste. 294
♦ — saccharobutyrious, Bedeutung ftir

Stalbnistrotte. 75

♦ — sphenoides, Bedeutung fiir Stallmist-
rotte. 76

— subtilis, Abtdtung durch ultraviolette

und andere Lichtstrahlen. 300

, Peotinzersetzung. 210

♦ — tetanomorphus, Bedeutung ftir Stall-
mistrotte. 76

— undulatus, Identitat mit B. mycoides.

492

— vulgatus, Variation und Filtrierbar-

keit. 420

Bacterium-Arten im Boden des Lunzer
Grebiets. 59

— candicans, Neubeschreibung, Vorkom-
men in italienischen B5den. 428

— ceoinense, Neubeschreibung, Denitri-
fikation in italienischen Bdden. 428

— coli, Abtatung durch Umweltande-

rungen. 295

, Aktivitatssteigerung der Zollen.

295

, Antagonismus. 420

^ — gegentiber Milzbrandbazillus.

302

, Bakteriolyse durch kolloidale L5-

sungen. 486

* , Biologie der Kolonien. 185

, Filtrierbarkeit. 420

, Giftigkeit normaJer und anorma-

ler Stanune. 421

, Keimzahlbestimmung in Wasser.

429

, Mischkulturen mit Bact. para-
typhi B, Dextroseabbau. 52

, Nachweis in Wasser. 307

* , Pleomorphismus. 324

, ThiosomenbUdung. 294

, Varianten. 296

, Wachstumshemmung durch frisch

destilliertes Wasser. 486

— cydoniae, Neubeschreibung, Krebs an

Quitte. 438

— Danielii, Neubeschreibung, Vorkom-
men in itaUenisohen Boden. 429

— flavum non liquefaoiens, Neubeschrei-

bung, Vorkommen in italienischen
Bdden. 429

— Friediander, Superinfektionen. 155

— libicxim, Neubeschreibung, Vorkom-
men in italienischen Bdden. 428

— naaremmanum, Neubeschreibung, Vor-
kommen in italienischen Bdden. 427

— megaterium, Abtdtung durch ultra-
violette und andere Lichtstrahlen. 300

* , Pleomorphismus. 324

— miorohelvolum, Neubeschreibung, De-
nitrifikation in italienischen Bdden. 428

— miniaceum, Neubeschreibung, Am-
monifikation in italienischen Bdden. 428

Bacterium nitrosovorum, Neubeschrei-
bung, Dcnitrifikation. I54

— paUescens, Neubeschreibung, Vor-
kommen in italienischen Bdden. 428

— paratyphi, Thiosomenbildung. 294

— paratyphi B, Bakteriolyse durch kol-
loidale Losungen. 486

, Mischkulturen mit Bact. coli,

Dextroseabbau. 62

, Pleomorphismus. 485

— pisanum, Neubeschreibung, Vorkom-
men in italienischen Bdden. 428

— proteus, Verhinderung des Schw&r-

mens. 412

♦ — pyocyaneum, Biologie der Kolonien.

185

— Ravennae, Neubeschreibung, Vorkom-
men in italienischen Bdden. 428

— stoklasianum, Neubeschreibung, Vor-
kommen in italienischen Bdden. 428

— tabacum, Toxinbildung. 312

— tuberculosis piscium, Dissoziation

durch Rdntgenstrahlen, Kupfer und
Gold. 50

, Rassenbildung durch ultra-
violette Bestrahlung. 50

— tumefaciens, GefaBnekrose an Vicia

Faba. 507

— turanicum, Neubeschreibung, Denitri-

fikation. 154

— typhi, Thiosomenbildung. 294

— typhi flavum, Umztichtung in Typhus

imd ParatyphusbaziUen. 149

Unterscheidung von Typhus-

bakterien. 421

, Variantenbildung in Galle. 422

, Vorkommen, Umwandlung in

Typhusbakterien. 421

— Ussanii, Neubeschreibung, Vorkom-
men in italienischen Bdden. 428

* — vulgare, Biologie der Kolonien. 185

Bakterien, Abtdtung durch Kohlensdure.

307

— , ultraviolette und andere Licht-
strahlen. 300

Umweltanderungen. 295

Abtdtungsfestigkeit und Entwick-
lungsfestigkeit. 419

Abwasser-, Empfindlichkeit gegen
Bakteriophagenwirkung. 60

Aktivitatssteigerungen der Zellen.

295

anaerobe, bei Stallmistrotte. 65
— , Kultur in Gefafien mit Pflanzen-
gewebe. 225

— , Wirkung von Fleischpdkelldsxmg
auf. 1, 135

Antagonismus. 151

— der CoK-. 420

— , direkter. 52

— innerhalb einer Art. 296, 417

— zwisehen Coli- und Milzbrand-

bakterien. 302

— , Atmungsphysiologie, Beitrage. 416

Begister.

529

*Bakterien, Beta-, Untersuohungen, Vor-
kozmnen. 106

* — , Biologie der Kolonien. 184

— , Blattvergilbung an Weizen. 437
— , Boden-, Beziehung zu Bodenatmung.

169

— , — , EinfluB von Bodenbedeokung.

498

— , — , — von Biingung. 307

— , — , Flora im Lnnzer Gebiet. 59
— , — , in Italien. 427, 428

— , — , Keimzahlen. 159

— , — , Pleomorphismus, Stickstoffbin-
dung? 306

* — , — , Untersuchung naoh Bossi*Cho>
lodny-CJonn. 379

— , Buttersaure-, Butylalkobolbildung,
EinfluB des N&hrmediums. 419

— , Carotingehalt. 487

— , Coli-, Nachweis in Wasser. 307
— , — , Vorkommen auf griinen Pflan-
zen, Eigenschaften. 153

— , denit]^izierende. 164

— , Diphtherie-, Dold-Farbung. 422
— , — , Keimvermehrung, chemische und
physiologische Untersuchungen. 166
— , EinfluB von Holzkohle. 431

— , Eisen-, Systematik und Morphologie.

483

— , Farbemethode zur Bifferenzierung
lebender und toter Zellen. 197

— , Faide an KohL 437

— , Fettbildung. 160

— , Fettspaltung, Nachweis duroh Nil-
blausulfat. 301

— , Filtrierbarkeit von Colikeimen. 420
* — , Flora auf Kuhlfleisch, LufteinfluB.

396

— , — des Schweizerkases. 305

— , Fiiediander-, Superinfektionen. 155
— , GeiBelfarbung, einfaches Verfahion*

412

— , Gewinnung fiir Enthaarungszwecke.

48

— , Giftwirkung koUoidaler Ldsungen.

486

— , hamophile, Biologie. 160

* — im Belebtsohlamm, EinfluB der Tern-
peratur. 26

— , Influenza-, Biologie. 150

— , isoelektrischer Pmikt. 199

— , IsoHerungsmethode, Schwannverhin-
derung des Proteus. 412

— , kataphoretisohes Verhalten. 485
— , Keimvermehrung, chemische und
physiologische Untersuchungen. 166
— , ]^6llchen-, Co-Enzym, Vorkommen.

422

— , — , EinfluB von Bodenart, Wcutser-
gehalt u. dgl. 306

— , — , physiologische Untersuohungen.

49

— , — , Pleomorphismus. 148

— > — Wirkung von Torf-KTitragin. 305

ZweiteiLbt.

Bakterien, Krebs an Zweigen und Wur-
zeln des Mandelbaumes. 437

‘ — , Lipoidbildung. 150

— , MUchsaure-, Hefeextrakt als Akti-
vator ftir Zuekervergarung. 199

* — , — , Vorkommen im Menseh imd Tier,
Ansiedlungsversuche. 102

— , Mischkulturen, Dextroseabbau. 52
— , — , Kohlehydratstoffwechsel. 62
— , nitrifizierende, Untersuchungen. 198
— , Pectinzersetzung. 210

* — , Pleomorphismus. 321, 444, 485
— , Pseudodiphtherie-, Dold-Farbung. 422
— , psychrophile. 296

— , Pyocyanin und Atmung, 165

— , Sauerstoffatmung, EinfluB von Blau-
saure und Kohlenoxyd. 416

— , Sauerstoffverbrauch,BubnerschesGe-
setz. 416

— , Schwefel-, Besohreibung neuer Arten.

200

— , Stickstoffbindung durch Enzyme. 65
— , Stickstoffverluste in Kulturen. 294
— , Stoffwechsel imd Wachstum, mano-
metrische Untersuchungen. 417

* — , Strepto-, Untersuohungen, Vorkom-
men. 106

— , Synergese mit Pilzen. 436, 437, 438
* — , ITiermo-, Untersuchungen, Vorkom-
men. 106

— , thermophile, BoUe bei der Selbst-
erhitzung des Getreides. 168

— , Thiosomenbildung. 294

— , Tibi-Garung, Untersuchungen. 39
— , Tuberkel-, Prtifung von Antiseptika.

415

— , — , Vrrusform. 160

— , Tuberkulose-, der Fische, Dissozia-
tion durch Bdntgenstrahlen, Kupfer
und Gold. 50

— , , Bassenbildung durch ul-

traviolette IBestrahlung. 60

— , Typhus-, Entstehung aus Gelbstam-
men. 149

— , Ubergang von Sporen bei Wasser-
destillation. 445

— , Varianten bei G^lbkeimen. 422
— , — , filtrierbare Stadien. 292, 420
— , — , saprophytare, expenmenteUe Er-
zeugung. 418

* — , Vergarung von Pentosen. 473

— , Vorkommen und Bedeutung in Kon-
serven. 158

— , Wachstum unter 0®. 296

destilliertes Wasser. 486

— , Wurzelsymbionten von Diplotaads eru-
coides. 446

* — , Zellulose zersetzende, im Boden,
mikropedologisohe Untersuchun g . 278
Bakteriolysate, Aktivitat bei Kohle-
hydratzersetzung. 62

Bakteriolyse durch koUoidale Ldsongen.

486

84

530

Begxster*

Bakteriophagen, Aktivitat der Bakterio-
lysate bei Kohlehydratzersetzung. 52

— des Abwassers, Bedeutung fiir die

Reinigung. 60

— gegen C. diphtheriae aus Faeces und

Darminhalt. 300

— , Gewinnung aus Bacillus mycoides.

492

— , Nachweis in Wasserproben. 491
♦Balantiophorus im Belebtschlamm, Ein-
flufi der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

*Banane, Fusaxium-Welke, Beziehungen
zum Boden. 248

Bang-Bazillen, Ausscheidung mit der
Milch. 493

Infektion der Milch und Leukozyten-

Gehalt. 208

Baryumfluorsilikat, Giftigkeit fiir Mkuse.

319

Basidiobolus ranarum, Sporenabwurf . 298
BaumwoUe, Anthraknose durch Oolleto-
trichum indicum n. sp. 432

Beauveria Bassiana, Befall des Maisziins-
lers, Infektionsvorgang. 319

Beggiatoa alba, Beschreibung. 200
— arachnoidea, Beschreibung. 200
Beize, Benetzungs-, gegen Weizenflug-
brand. 220

— , Trocken-, anormale Keimung bei
Weizen. 213

Beizmittel, Quecksilber>, neue. 500
’‘‘Belebtschlamm, Mikroorganismengehalt,
EinfluO der Jahreszeit. 34

* — , — , — der Temperatur. 22

Bemisia, 'C'bertragung der Tabak-Kr&usel-
krankheit, Wirtsunkr3,uter. 313

Benzoesaure, biologische Versuche. 494
Berberitze, Bedeutung fiir Sohwarzrost-
auftreten, Bastardierungsmoglichkeit.

434

’‘‘Betabakterien, Bntersuchungen, Vorkom-
men. 106

Beulenbrand des Maises, Infektionsvor-
gang. 505

Bienen, Acarapis-Milben, Em&hrung, ver-
schiedene Arten, Bedeutung. 320
— , Arsenvergiftungen. 319

— , Eischwarzsucht (Melanose) der Ed-
nigin. 320

— , Faulbrut, europaische. 444

— , Frow-BehandliinggegenMilbenkrank-
heit. 445

— , KaJkbrut (Pericystis-Mykose). 320
— , Bauchschaden. 319

Bienenzuoht und Hederichbekampfung.

431

Bier, Hefetriibung. 496

— , Oxydatlons-Beduktionspotentiale.

496

— , Sarzina-Trtibung. 495

Biochemie des Menschen und der Tiere,
Handbuch. 482

Bime, „Bitter pit“, Viruskrankheit. 63

Bisamratte, Ausbreitung in Deutschland.

511

Biscirus lapidarius, Bekampfung von
Sminthurus viridis durch. 63

Bitter pit, Viruskrankheit ( ?) der Apfel
und Bimen. 63

BlasenzoUbildung bei Aspergillus durch
Schwermotallwirkung. 53

Blattlaus, Rlibon-, Bekampfung. 443
Blausauro, Einflufi auf Bakterienatmung.

416

Blissus loucopterus, Maisbefall, resistente
Sorten. 314

Blumenkohl, KohUiemie - Bekampfung
durch Sublimat. 303

— , Schwarze, durch verschiedene Pilze
verursacht. 601

BlutlausbofaH, EinfluO von Kalidiingung.

443

Boden, Aziditatsschwankimgen, mikro-
biologisoh bedingte. 211

— , Azotobacter-Zusatz, Wirkung auf
hdhere Pflanzen. 306

— , Bakterienflora im Limzer Gebiet. 59
— , Bedeckung, EinfluB auf Bakterien-
gehalt und Stickstoffbindung. 498
♦ — , Beziehungen zum Auftreten von Fu-
sariumkrankhoiten. 243

— , Energieumsatz der Mikroorganismen.

212

— , Impfung. 498

— , Keimzahlbestimmung durch ph-Mes-
sung. 211

— , mikrobiologische XJntersuchungen im
Lunzer Gebiet. 58, 59

— , Mikrofauna mid -Flora, Eeimzah-
len. 159

— , Mikroflora, Ammoniak bildende. 484
— , — , EinfluB von Diingung. 307
— , — in Italien. 427, 428

— , — , mikropedologischeUntersuohung.

267

— , — , parasitisohe, wechselndes Auf-
treten. 430

— , — , Schadigung durch Frost. 431
* — , — , Untorsuchung nach Rossi-Gho-
lodny-Conn. 379

— , Moor-, mikrobiologische Untersu-
chung in Italien. 60

— , physiologische Aktivierung. 498
— , Protozoenfauna. 497

— , Schwankung der Atmung, Beziehung
zu Bakteriengehalt. 159

— , Weinbergs-, Azotobacter-Gehalt, Un-
kraubflora tmd Rebenwachstum. 406
* — , Zersetzung organischer Substanz, mi-
krobiologisdie Untersuchung. 379
♦Bohne, F^krankheit durch Fusarium
solani var. Martii f. 3. 174

— , Viruskrankheiten. 224

Bohnen, Konserven-, mikrobiologische
Untersuchung. 158

Bor, Mangelsch&den an Tabak (Top-
ziekte). 214

Kegister.

531

Bor, Soh^en an Gerste (Blattflecken).

215

— , Wirkung in Dilngemitteln, Wasser-
kulturversuche. 210

Botrytis cinerea, Befall der Fruchtstande
von Kicinus. 434

, Enzymuntersuchungen. 490

, Immunitatsversuche. 500

* , Vorkommen im Boden, mikro-

pedologische Untersuchungen. 279
Brand, Beulen-, des Maises, Infektions-
vorgang. 605

— , Gerstenflug-, Benetzungsbeize. 220
— , Weizenflug-, Benetzungsbeize. 220
— , — , Emteschaden und Bekampfung
in Indien. 435

— , — , Resistenzzuchtung, 308

— , Weizenstein-, Bodeni^ektion. 222
— , — , Keimfahigkeit der Sporen. 436
— , — , Kesistenzztichtung. 309

— , Weizenstengel-, physiologische Ras-
sen. 436

Brauerei, Wasserentkeimung duroh Chlor.

498

Bromus-Arten, Befall durch Puccinia co-
ronata. 505

— ciliatus, Wirtspflanze fiir Puccinia
glumarum in Alberta. 435

Buche, Holzzerstorung durch Polystiotus
versicolor, physiologische Untersuchun-
gen. 299

Buokskin-Yirus an StiBkirschen, EinfluB
der Unterlage. 440

Butter, Befall durch Schimmelpilze, Ver-
farbung. 209

— , mikrobiologisohe Analyse, Keimzahl-
bestiznmung. 208

— , Ktihllagerung, EinfluB auf Mikro-
flora. 304

Buttersaurebakterien, Butylalkoholbil-
dung, EinfluB des Nahnnediums. 419
Butyla^ohol, Bildung durch Bakterien,
EinfluB des Nahnnediums. 419

Buxus sempervirens. Befall durch Puc-
cinia buxi. 437

Oacoecia fumiferana, Schadwirkung in
Waldem. 214

Cajanus indicus, Blattflecke duroh Cerco-
spora indica n. sp. 432

Calamagrostis elongate. Befall duroh Puc-
cinia coronata. 505

Oalocoris norwegicus, Schadigung an
RunkelrOben. 442

Camellia japonica. Befall durch Phyllo-
stiota camelliae. 436

Capsicum frutescens, LohaJisierung von
Tabakmosaikvirus, Vererbung. 440
Carbohydrasen, Wirkungsbereich. 490
^Cardbesium im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

Carotin, Vorkommen in Bakterien. 487
Cemiostoma scitella, Bekampfung. 315

Cephalosporium, Wachstum auf Butter,
Verfarbung. 209

— gramineum, neue Art, Streifenkrank-

heit an Weizen und anderen Grami-
neen. 504

*Ceratostomella major, Neubeschreibimg.

345

— \ilmi, physiologische Untersuchungen.

201, 311

, Ubertragung durch Milben? 433

Cercospora indica, Neubeschreibung,
Blattflecke an Cajanus indicus. 432
Ceresan, anormale Keimung bei Weizen
nadb Trockenbeize. 213

Cereus schottii, Befall durch Fusarium
oxysporum. 216

Ceuthospora Pandani, neue Art em Pan-
danaceen. 500

Chemie, Pflanzen-, Beziehung zu Pflan-
zenverwandtschaft. 47

Chenopodium album, Wirt ftir Zucker-
riibenmosaikvirus. 507

Chilesalpeter, Vergleich mit Natronsal-
peter, Wasserkulturversuche. 210
*Chilodon-Arten im Belebtschlamm, Ein-
fluB der Jahreszeit. 36

♦ , — der Temperatur. 24

Chilomonas paramaecium, Stoffwechsel.

54

Chinosol, fungizide Wirkung. 213

Chlor, AtzschSden an Blattorganen. 61
— , bakterizide Wirkung, Bindungsver-
mdgen des Wassers, EinfluB von Am-
moniak, 212

Chortophila dissecta, Sch&digung an
Mais. 442

Chromatium gracile, Beschreibung. 200

— minus, Beschreibung. 200

— sphaeroides, Neubeschreibung. 200
Chrysoidin-Derviate, bakterizide Eigen-

schaften. 447

^Cichorium endivia, bakterielle F&ule. 232
Ciliaten, Bodenfauna. 497

— , Zelluloseverdauung im Wiederkauer-
magen. 448

*Cinotochilum im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

♦ , — der Temperatur. 24

Cladosporium, Pektinzersetzung. 210
— , Wachstum unter 0®. 296

— herbarum, Erreger von Blumenkohl-

schw5.rze. 501

, Giftwirkung von Arsen. 437

, Wachstum auf gekOhltem Fleisch.

156

— pisicolum, neue Art, Blatt-, Stengel-
und Hiilsenflecken €in Erbse. 504

Clostridiom-Arten, Stickstoffbmdung in
Laubkompost . 211

♦ , Wirkung von Fleisehp6kell6sung

(gemischte) auf 136

♦ ^ (Natrium-Nitrit) auf 1

♦ — aerobicum. Hydrolyse von Pentosa-

nen. 477

34 *

532

Register.

♦Clostridium cellulosae, neue Art, Hy-
drolyse von Pentosanen. 477

— lentoputresoens,Neubeschreibung. 294

— putrificum*, systematisohe Unter-

suchung. 294

* — thermosaccharolyticum, Agglutina-
tion-Keaktionen. 228

Colletotrichum indicum, Neubeschrei-
bung, Antbraknose an Baumwolle. 432

— trifolii, Anf&Uigkeit abgeschnittener

Kleebl&tter. 308

♦Colpidium im Belebtsohlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

Oommelina nudiflora, Wirtspflanze fiir
Selleriemosaik. 62, 314

Coniophora cerebella, TemperatureinfluB
auf Wachstum. 205

Coniothyrium Perottianum, neue Art an
Pandanaceen. 600

Gontarinia pisi. Befall von Erbsen, Para-
siten. 315

♦CoraJina virgata, Vergleich mit Bakte-
rienkolonien. 194

Cryptocoocus fagi, Sohadwirkung in Wfil-
dern. 214

Guourbita pepo, MiBbildungen. 437
Gumol» Sterilisation. 413

♦Cunninghamella, Vorkommen im Boden,
mikropedologische Untersuchung. 281
Curly-top der Zuckerrube, Biologie des
Virus. 312

Cylbdrooarpon album, Serodiagnostik.

298

Gythophaga Hutchinsoni, Entwioklungs-
zyklus. 153

Gytosporina, Apfelf&ule, physiologische
Untersuchungen. 218

♦Bactylosphaerium im Belebtsohlamm,
EinfluB der Jahreszeit. 36

♦ , — der Temperatur. 24

Daedalea quercina, TomperatureinfluB
auf Wachstum. 205

♦Dematium, Hydrolyse von Pentosanen.

473

Denitrifikation durch Zusammenwirken
zweier Bakterienarten. 154

Dentroctonus piceaperda, Sohadwirkimg
in W&ldem. 214

Bepressaria nervosa, Sch&digung an
Ktlmmel, Biologie, Bek&mpfung. 509
Berris, Bek&mpfung der Hirschfruoht-
fliege. 318

— , — von Erlenblattkafer. 315

— , Insektenbek&mpfungsversuohe. 317
Besinfektion von Kom und Malz in der
Spiritusindustrie. 57

Nahrungsmitteln, Verfahren. 66

Besinfektionsmittel, Hombination. 447
iDiaporthe, Apfelf&tde, physiologische Un-
tersuchungen. 218

Bibotryonmorbosum, Erregerd. Schwarz-
knotigkeit von P^aumen und 3Bar-
schen, Bekfimpfung. 503

♦Bidinium im Belebtsohlamm, EinfluB der
Jahreszeit.

♦ , — der Temperatur. 24

Didymella lyoopersici, Tomatenstengel-

faule, Bek&mpfung. 603

Didymium nigripes, Sesmalvorgang. 200
Dimerosporium Pandani, neue Art an
Pandanaceen. 500

♦Dinobryon im Belebtsohlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 30

Diospyros Eaki, Mostgarung. 494

Diphtheriebakterien, Bold-Farbung. 422
— , Heimvermehrung, chemische und
physiologische Untersuchimgen, 166
Diplocarpon carliana, Infektionsvorgang.

218

Biplokokken, Varianten, filtrierbare Sta-
dien. 292

Diplotaxis erucoides, Bakteriensymbion-
ten in den Wurzeln. 446

Biprion polytomum, Schadwirkung in
Waldern. 214

Bold-F&rbung bei Biphtherie- und Pseudo-
diphtheriebakterien. 422

Brahtwurm, Bek&mpfung. 444

— , Kartoffelsoh&digung, Bek&mpfung
durch Fruchtfolge. 64

Breyfusia piceae, Schadwirkung in W&l-
dern. 214

Bromotherm, Apparat fUr Sterilisations-
kontrolle. 446

Biingung, Kali-, EinfluB auf Sch&dlings-
befcdl der Apfelb&ume. 443

— , Stiokstoff-, schadliohe. 430

♦Bysteria im Belebtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

♦Edelmist, Rotte, Anaeroben-Flora. 82
Eierfrucht, Vertioillium-Welke, Bek&mp-
fung. 215, 504

Eisohwarzsucht (Melanose) der Bienen-
kdnigin. 320

♦Eisen, EinfluB auf HefegSrung. 161
Eisenorganismen, Systematik und Mor-
phologie. 483

EiweiB, Schimmelpilz-, Ftltterungsver-
suche. 489

♦EiweiBzersetzung, anaerobe, im Stallmist.

69

Elaeagnus, Azidienwirt ftlr Pucciaia ooro-
nata in Kanada. 505

— , Erreger der Wurzelkndllohen, Unter-
suohungen. 49

EUopia fiscellaria, Schadwirkung in W&l-
dem. 214

, Sch&digung von Abies baJsamea,

Massenauftreten, Biologie. 510

, — von Tsuga canadensis, Massen-
auftreten, Biologie. 509

Empusa auHoae, Apftreten bei Forleulen-
kalamit&t. 443

♦Enohelys im Belebtsohlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

Begister.

633

Endomyees vernalis, Fettgewinnung aus
Kartoffeln, Versuche. 298

Enterobryus, Vorkommen im Earm von
Fassalus. 448

Enterokokken, Krankheitserreger nnd
Saprophyten. 426

Enzyme, Aktivit&tsbestimmung, MikTo<
methode. 196, 207

— , proteolytische, Untersuchungen. 206
♦Epistylis im Belebtschlamm, Ei^tiO der
Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

Erbse, Befall durch Thrips und GaU-

mticken. 315

— , Blatt-, Stengel- und Hiilsenflecke
durch Cladosporium pisioolum n. sp.

604

— , Fusarium-Befall, St. Johanniskrank-
heit. 217

* — j FuBkrankheit durch Fusarium solani
var. Matii f. 2. 165

* — , St. Johanniskrankheit in Europa. 449
♦ — , Welkekrankheit (near-wilt) durch Fu-
sarium oxysporum f. 8. 365

— , Wickler-Befall, Verbreitung in
Deutschland. 511

Erionema aureuxn, Sexualvorgang. 200
Erie, Erreger der WiirzelknSllohen, Unter-
suchungen. 49

Erlenblattkafer, Befall von Silfikirsche,
Bek&mpfung. 315

Erysiphe polygoni, Anf&Uigkeit abge-
schnittener Kleebl&tter. 308

Erythroneura comes, Bek&mpfung durch
Derris und Pyrethrum. 318

♦Euglena im Belebtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

*Euplotes-Arten im Belebtschlamm, Ein-

fluB der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

Eupteromalus nidulans, Parasit des Gold-

aftors. 317

Eutettix tenellus, 'Orbertragung des Curly-
top-Virus. 313

Euvolvulus cupreus, Befall von Pflaume
imd Kirsche, Biologic. 316

F&rbegestell, Serien-, kippbares. 148
Faser, spinnbare, Rottungsverfahren. 429
Fett, Gewinnung aus Kartoffeln durc^
Endomyees vernalis, Versuche. 298
— , Snaltuncr durch Bakterien, Naehweis.
^ ^ ^ 301

— , Sterilisation. ^^3

Fichtenwald, Rauchgasfilterwirkimg. 213
Filter, Kontrast-, ein- und zweifarbige,
fOr Mikroskopie.

Filtration, Ultra-, neuer Apparat. 413
Fire bhght, Abh&ngigkeitvonBlatennek-
tar und Regen. 312

Flagellaten, Bodenfauna. 169, 497

Fledat en gftllftn , Neubeschreibxmgen. 447

Fleisch, Keimzahlbestimmung. 167
* — , Kiihl-, Bakterienwachstum und Ver-
dunstung. 396

— , — , Wachstum von Schimmelpilzen.

156

Fleischkonserven, Herstellung, bakterio-
logische und thermische Giundlagen.

425

*Fleischp6kell6sung, Wirkung auf anaero-
be Bakterien. 1, 135

Fleischwaren, Bakterioskopie. 157

Flugbrand, Gersten-, Benetzungsbeize.

220

— , Weizen-, Benetzungsbeize. 220

— , — , Emteschaden und Bekampfimg
in Indien. 436

— , — , Resistenzziichtung. 308

Fluomatrium, Bek&mpfimg der Kirsch-
fruchtfliege. 318

Fomes-Arten, TemperatureinfluB auf
Wachstum. 205

Forleule, Massenvermehrung in der Slo-
wakei, Bekfimpfung. 443

Formaldehyd, Bekampfung von Hetero-
dera radicicola. 441

— , Kartoffelbeizung gegen Schwarzbei-
nigkeit. 312

Freesia, Wurzel- imd KnoUenf&ule durch
Fusarium- Arten. 217

Frostschaden in Italien. 431

Frow-Behandlung der Bienen gegen Mil-
benkrankheit. 446

Fruchts&fte, Pasteurisienmg, thermaler
Tdtungspunkt fOr Hefe. 423

Fruktose, DarsteUung auf enzymatischem
Wege, Verfahren. 48

Fuligo septica, Sexualvorgang. 200
Fusarium, Serodiagnostik. 293

* — , Vorkommen im Boden, mikropedo-
logische Untersuchung. 283

— , Welkekrankheit der Kartoffel. be-
dingende Faktoren. 216

* Arten, Beziehungen zur St. Johan-

niskrankheit der Erbse. 449

♦ , pathogene, Beziehungen zum Bo-

den. 243

— anguioides, Erbsenwelke. 217

— bulbigenum, Wurzel- und BlnoUen-
faule an Freesia und Gladiolus. 217

— conglutinans, Kohlwelke, Resistenz-

ztichtung. 310

— equiseti, Erbsenwelke. 217

— fructigenum, Apfelfaule, physiologi-

sche Untersuchungen. 218

, Enzymuntersuchimgen. 490

— herbarum, Erbsenwelke. 217

, FuBkrankheit der Nelken. 602

yqx * viticola, Erbsenwelke. 217

— Martii var. minus, Synergese mit Bak-
terien an Oleander. 438

, Wurzel- und KnoUenf&ule

an Freesia, Gladiolus imd Allium. 217

— moniliforme, Wurzel- und KnoUen-
f&ule an Freesia und Gkkdiolus. 217

534

Register.

Fusarium oxysporum. Befall vonCereiis

schottii. 216

, Erbsenwelke. 217

* f. 3, Bananenwelke, Beziehungen

zum Boden. 249

♦ f. 8, Erbsenwelke. 466

♦ f. 8, Welke (near-wilt) an Erbsen.

365

— solani, Wurzel- und Knollenf&ule an
Freesia, Gladiolus und Allium. 217

* var. eumartii, Erreger von Knol-

len-, Wurzel- und Stengelf&ule der
Kartoffel. 179

var. Martii» Erbsenwelke. 217

* f. 2, Erbsenfuflkrankheit.

165, 463

♦ f. 3, Erreger von Bohnen-

fuBkrankheit. 174

— solani var. medium, Erbsenwelke. 217
var. striatum, Erbsenwelke. 217

♦G&rung, Alkohol-, Einflufi von Fe'* und

Fe-. 161

— ak Vorstufe der Atmung. 497

— , Milchsaure-, BEefeextrakt als Akti-
vator. 199

♦ — , Tibi-, Untersuchungen. 39

Galerucella luteola, Bekampfung durch
Derris und Pyrethrum. 318

Gallen, Flechten-, Neubeschreibungen.

447

Ganoderma applanatum, Temperaturein-
flu6 auf Wachatum. 205

Geii3elfarbung bei Bakterien, einfaches
Verfahren. 412

Gelbkeime, IJmzuchtung in Typhus- und
Paratyphusbazillen. 149

— , Unterscheidung von Typhusbakte-
rien. 421

— , Variantenbildung in Galle. 422
— , Vorkommen, Umwandlung in Typhus-
bakterien. 421

Gerste, Brau-, Komrissigkeit und Korn-
verfarbung. 446

— , Flugbrandbekampfung durch Be-
netzungsbeize. 220

— , Gelbrost, biologische Kassen. 203

— , niohtparasitare Blattfleckon. 215

— , Selbsterhitzung. 168

— , Streifenkrankheit durch Gephalospo-
rium gramineum n. sp. 504

— , Zwergrost, biologische Rassen. 203
Getreide, Rostbekampfung durch Schwe-
felbestaubung. 222

— , Rostresistenz und Stickstoffhaushalt,
TemperatureinflulB. 221

— , Selbsterhitzung. 158

Gladiolus, KnoUenfaule durch Fusarium-
Arten. 217

^Glaucoma im Belebtschlamm, Einflufi der
Jahreszeit. 36

* ^ — der Temperatur. 24

^Gliocladium, Vorkommen im Boden,
mikropedologische Untersuchung. 274

♦Gliocladium roseum, Vorkommen im Bo-
den, mikropedologisohe Untersuchung.

283

, Wurzelfaule an Hafer. 216

Gloeosporium fructigenum, Enzymunter-
suchungen. 490

— Pandani, neue Art an Pandanaceen.

600

— polystigmicolum, Parasit auf Poly-

stigma rubrum. 310

Glyzerin, Sterilisation. 413

Glyzerinsaure-monophosphorsaure, Her-
stellung aus Hefe, Bedeutung. 447
Gold, Dissoziation von Bacterium tuber-
culosis piscium. 50

Goldafter, Uberwinterung, Parasiten, Be-
kampfung. 317

Gramineen, Streifenkrankheit durch Ce-
phalosporium gramineum n. sp. 604
Granulobacter pectinovorum, Pectinzer-
setzung. 210

Graphium ulmi, physiologische Unter-
suchungen. 201, 311

, ‘Ohertragimg durch Milben? 433

Griinfutter, Konservienmgsverfahren.

67, 58

Gurke, Mosaikvirus, abweichende Stam-
me. 313

Gyrophora vellea, Scheingallen. 447

Hafer, Kronenrost, spezialisierte Formen
in Kanada. 505

— , Rost, Bekampfung durch Schwefel-
bestaubung. 222

— , — , Emteschaden, Bekampfung. 605
— , — , spezialisierte Formen, Umwelt-
einfltisse. 506

— , Wuohsstoff-(Rhizopin-) Wirkung. 297
— , Wurzelfaule (Gliocladium roseum).

216

Haploptilia laricella, Schadwirkung in
Waldern. 214

Hoderichbekampfung und Bienenzucht.

431

Hefe, Alter der Zellen und Stickstoff-
gehalt. 202

— , Aufspaltung in verschiodene Typen.

423

Autolyse. 64

— , Beeinflussung durch Antiseptika.

, 495

Behandlung in der Praxis und Rein-
zucht. 488

Bier-, Invertasebestimmung. 489
Einflufi mitogenetischer Strahlen,
Fehlerquellen. 484

— ultravioletter Strahlen. 205

— von Fe** und Fe**’ auf den Gar-

prozefi. 161

Radiumstrahlen. 202

Wuchsstoff aus BierwOrze. 297

Fettgewinnung aus Kartoffeln durch
Endomyces vernalis, Versuohe. 298
Heimzahlbestimmung in Butter. 208

’•‘Hefe, PreB-, Vorkommen von Isaria ore-
tacea n. sp. 350

— , Bassenver&nderlichkeit. 488

— , Sedimentiergeschwindigkeit, Bestim-
mungsmethode. 198

* — , Tibi-GArung, Untersuchungen. 39
♦HeiBmist, Botte, Anaeroben-Flora. 82
Helleborus-Pulver,Insektenbekfimpfungs-
versuche. 317

Helminthosporium sativum, Infektions-
methode an Weizen. 434

Herz- und Trockenfgule der BUben, Bor-
und Chilesalpeterwirkung in Wasser-
kulturen. 210

Heterodera radicicola, Befall von Toma-
ten, Bek&mpfung durch Formalin. 441
Heuschrecke, Wander-, Massenauftreten,
Lebensbedingungen. 316

Hieracium villosum, Befall durch Puo-
cinia hieracii in der Slowakei. 222
Himbeere, Sch&digung durch GaUmucke.

608

Hippophae, Erreger der WurzelknSllchen,
Untersuchungen. 49

Holz, Zersetzung durch Pilze, physio-
logische Untersuchungen. 299

Hol^ohle, Wirkung auf Pflanzen. 431
Honig-Agar, Kl&rungsverfahren. 197
Hopfen, Sch&digung durch Bote Spinne,
]^k&mpfung. 510

Hordeum jubatum, Wirtspflanze ftir Puc-
oinia glumarum in Alberta. 435
Hormodendrum, Wachstum auf Butter,
Verfarbxmg. 209

*B[umioola, Vorkommen im Boden, mikro-
pedologische Untersuchung. 277

^Hyalodiscus im Belebtsohlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

♦Hyalopus, Vorkommen im Boden, nukro-
pedologische Untersuchung. 277
Hyphomierobium vulgare, Begleiter nitri-
fizierender Bakterien. 199

lUinoia pisi, Virusubertragung an Bohno.

224

Immunitat, erworbene, der Pflanzen. 600
Immunitatsziichtung gegen Weizenrost,
Gewaohshaus- und Freilandinfektion.

435

Influenzabazillus, Biologie. 150

Inostemma boscii, Parasit der Erbsen-
gallmUcke. 316

Insekten, Massenvermehrungen, bedin-
gende Faktoren. 214

— , Wirkung von Pyrethrum, histologi-
sohe Untersuchung. 512

Insektenschaden als Ursache filr Ver-
anderungen in Waldbestanden. 213
Inulin, enzymatische Spaltung in Fruk-
tose, Verfahren. 48

’‘‘Isaria cretacea, Neubesohreibung. 350
— farinosa, Auftreten bei Forleulenkala-
mitat, 443

♦Jahreszeit, EinfluB auf biologische Ab-
wasserreinigung. 14

Kase, Schmelz-, Vorkommen von ther-
mophilem Actinomyces casei n. sp. 423
— , Schweizer-, Bakterienflora. 305
Kaki, Mostgarung. 494

Kakothrips robustus, Schadigung von
Erbsen. 315

Kalidtingung, EinfluB auf Schadlings-
befall der Apfelbaume. 443

Kalisalze, Brahtwurmbekampfung. 444
Kalkbrut (Pericystis-Mykose) der Bienen.

320

Kalomel, Samenbeize gegen Kohl- und
Zwiebelfliege. 64

*Kaltmist, Botte, Anaeroben-Flora. 82
Kanindien, Schadigung in Spargelfeldem.

316

Kartoffel, Blattroll- und Y-Mosaik-Virus,
Blattlaustibertragung. 223

— , DrahtwurmfraB, Bekampfung. 64
— , Fusariumwelke, bedingende Fakto-
ren. 216

* — , Knollenpotential imd Virusbefall. 256
* — , Knollen-, Wurzel- und Stengelfaule
durch Fusarium solani var. eumartii.

179

— , Latentvirusbefall, Bugose Mosaik.

223

— , Sohorf, bedingende Faktoren. 216
— , — , Beobachtungen in Italien. 438
— , — , Knollenbeizung. 507

— , Sohwarzbeinigkeit, Saatgutbeizung.

312

— , Viruskrankheiten der Mosaikgruppe.

61

— , Vitalitatsbestimmung. 429

Kartoffelkafer, Ausbreitimg in Frank-
reich. 443

Kiefer, Forleulenkaleunitat in der Slo-
wakei, Bekampfung. 443

Kieselsaure, kolloidal geldste, bakterizide
Wirkung. 486

Kirsche, Befall durch Erlenblattkafer,
Bekampfung. 315

— , Rhynchites cupreus, Biologie.

315

— , Buckskin-Virus, EinfluB der Unter-
lage. 440

— , Schwarzknotigkeit durch Dibotryon
morbosum, Bekampfung. 603

Kirschfruohtfliege, Bekampfung. 318
Klee, Pilzanfalligkeit abgeschiuttener
Blatter. 308

— , Schadigung durch Lauxania aenea.

442

Kndllchenbakterien, Co-Enzym, Vorkom-
men. 422

— , EinfluB von Bodenart, Wassergehalt
u. dgl. 305

— , physiologische Untersuchungen. 49
— , Pleomorphismus. 148

— , Wirkung von Torf-Nitragin. 305

536

Begister*

Kohl, Bakterienf&iile. 437

— , Blumen-, Schwarze, durch versohie-
dene Pilze vemrsaoht. 601

— , Fusarium-Welke, Resistenzztichtung.

310

— , Holz-, Wirkung anf Pflanzen. 431
^Kohlehydratzersetzung, anaerobe, im
Stalh^st. 69

Kohlenoxyd, Einflufi anf Bakterienat-
znung« 416

Kohlensaure, bakterizide Wirkung. 307
Kohlfliege, l^kampfung duroh Kalomel-
Samenbeize. 64

Kohlhemie, BekAmpfung duroh Sublixnat.

308

KoUoide, bakterizide Wirkung. 486
Konserven, Bohnen-, mikrobiologisohe
Untersuohungen. 168

Konservierung durdti Benzoesaure und
Derivate, biologische Versuohe. 494
— , Eleisch-i bakteriologische und ther-
miftnhA Grundlagen. 425

^Kopfsalat, bakterielle Faule. 232

Krauselkrankheit des Tabaks, t^bertra-
gung, Wirtsunkrauter. 313

Krebfi an Eobinia. 437

— , Bakterien-, an Quitte. 438

— , — , an Zweigen und Wurzeln des
Mandelbaumes. 437

— , Neotria-, an Baphiolepia japonioa.

437

— , Kirsioh-, Untersuohungen. 309
Kresol, fungizide Wirkung. 213

*Kilhlfleisch, BakterienwachstumundVer-
dunstung. 395

KOhllagerung, Butter-, EinflulB auf Mi-
kroflora. 304

Kiiminelmotte, Bekampfung, Biologie.

509

Kugelzellbildung bei Aspergillus durdi
Sohwennetallwirkung. 53

Kultuirdhrchen, GlaskappenverschluO.

414

Kupfer, EinfluB auf Milch, Talgigkeit.

427

Kupfersulfat, Dissoziation von Bacte-
rium tuberoulosis piscium. 50

Lactobacillus, Wcuihstum unter 0°. 296
*Lactuoa sativa var. oapitata, bakterielle
Faule. 232

♦Lamium puipureum, Vorkommen in
Weinbergen, Beziehungen zu Beben-
wachstum. 409

Lasioptera rubi, Sdhadigung von Him-
beeren. 608

Laspeyresia - Arten , Verbreitung in
Deutschland. 611

Laubkompost, Stiokstoffbindung. 211
Lauxania aenea, Schadigung an ^ee. 442
Leguminosen, StiokstoiSbindung der Sa-
men. 206

Lentinus lepideus, TemperatuieinfluiS auf
Waohstum. 205

Lenziies-Arten, TemperatureinfluB auf
Waohstum. 206

Lepargyraea canadensis, Azidienwirt fttr
Puccinia coronata in Kanada. 505
Leptacis tipulae, Parasit der Erbsengall-
miicke. 316

Leukozyten, Gehalt der Milch, Mastitis-
Diagnose. 492

— , und Bang-Infektion. 208

♦Lionotus-Arten im Belebtschlamm, Ein-
fluB der Jahreszeit, 36

♦ , — der Temperatur. 24

♦Loxophyllum im Belebtschlamm, Einflufi
der Jahreszeit. 36

Luzerne, Soh&digung duroh Erbsenlaus.

441

Lyctocoris, Baubwanze, niitzlich im
Obstbau. 442

Lygaeonematus erichsoni, Schadwirkung
in Waldem. 214

Lygus pabulinus, sch&dlich im Obstbau.

442

Maorophoma Pandani, an Pandanus odo-
ratissimus und Freycinetia Dahnasiana.

602

Maorosiphum onobrychis, Soh&digung von
Luzerne. 441

— solanifolii, Virusiibertragung an Boh-

ne. 224

Maorosporium commune, Erreger von
Blumenkohlschw&rze. 501

, Immunit&tsversuohe. 600

^ Viralenz, Involutionsformen. 601

— sarcinaeforme,Anf&lligkeitabge8chnit-

tener Kleebl&tter. 308

M&use, Bek&mpfung duroh Baryum-
fluorsilikat. 319

— , Feld-, Bek&mpfungsmittel. 511
— , — , ]^k&mpfung duroh Giftgetreide,
Bewertung versohiedener Mittel. 612
Mais, Befall duroh Blissus leucopterus,
resistente Borten. 314

— , Beulenbrand, Infekiionsvorgang. 505
— , Borwirkung in Wasserkulturen. 210
— , Soh&digung duroh Aspergillus niger.

433

— , Chortophila disseota. 442

Maisziinsler, Befall duroh Beauveria Bas-
siana, Infektionsvorgang. 319

— , Epidemiologic. 314

Malac^tgrOn, fungizide Wirkung. 213
Malz, Desinfektion in der Spiritusindu-
strie. 67

— , Enzymuntersuchungen. 206

Mandel, Bakteriexdsrebs an Zweigen und
Wurzeln. 437

^Margarine, Schwarzfleokigkeit duroh Mar-
garinomyces atrovirens n. sp. 348
’*Margarinomyo6S atrovirens, Neubesbbrei-
bung. 848

'*‘Mastigophoren im Belebtschlamm, Ein-
flufi der Jahreszeit. 36

♦ ^ — der Temperatur. 24

Register.

637

Mastitis, EinflulB auf Gerinnselfestigkeit
der Milch. 493

— , Milchuntersuchung, Methoden. 492
Mehltau, Apfel-, EinfluB von Kali>
dtingung. 443

Melanose (Eischwarzsucht) der Bienen-
konigin. 320

Merulius-Arten, TemperatureinfluO auf
Waohstum. 205

Metalle, Femwirkuug auf Entwicklung
von Bsicillus myooides. 51

Metasphaeria Christophersenii, neue Art
an Pandanaceen. 500

Meteorus versicolor, Parasit des Gold-
afters. 317

*Metopu8 im Belebtschlamm, EinfluQ der
Jahreszeit. 36

Micrococcus-Arten im Boden des Lunzer
Gebiets. 59

Micrococcus cecinensis, Neubeschreibung,
Ammonifikation in italienischen Bdden.

428

* — « flavus cellulosae, neue Art, Hydrolyse
von Pentosanen. 477

Mikroorganismen, Ammoniak bildende,
im Boden. 484

— , anaerobe, Kultur in Metallexsikkator.

48

— , Boden-, Fauna und Flora, Keim-
zahlen. 159

— , Boden-, in Italien. 427, 428

♦ — ^ , mikropedologische XJntersuohung

267

— , — , pai»sitisohe, wechselndes Auf-
treten. 430

— — , Soh&digung durch Frost. 431
♦ — , — , Untersuchung naoh Rossi-Cho-
lodny-Conn, 379

— , — , Wacbstumsfdrderung. 498

— , Carotingehalt. 487

— , Einflufi mitogenetischer Strahlen,
Fehlerquellen. 484

— , Energieumsatz im Boden. 212

— , Flora der Butter, EinfluB der Ktthl-
lagerung. 304

— , — des Bodens, EinfluB von Diin-
gung. 307

— , Gewinnung ftir Enthaarungszwecke.

48

* — im Belebtsbhlainm, EinfluB der Jah-
reszeit. 34

♦ ^ — der Temperatur, 22

— , Keimzahlbestimmung in Butter. 208
— , Keiznzahlen bei der Selbsterhitzung
des Getreides. 158

— , nitrifizierende, EinfluB von Thallium-
sulfat. 212

— , psyohrophile. 296

* — , quantitative Bestimmung. 460
— , Sauerstoffatmung, EinfluB von Blau-
s&ure und Kohlenozyd. 416

— , Sau©rstoffverbrauch,RubnerschesGe-
setz. 416

— , Waohstum unter 0®. 296

^Mikroorganismen, Zersetzung von Pen-
tosanen und Pentosen, Gewinnimg or-
ganischer S^uren. 468

Mlkroskopie, ein- und zweifarbige Kon-
trastfilter. 197

Milben, Ghertragung des Ulmensterbens?

433

Milbenkrankheit der Bienen, Frow-Be-
handlung. 445

Milch, antirachitische, Herstellungsver-
fahren. 56

— , Azidophilus-, EinfluB auf den Stuhl.

207

— , Bang-Bazillen-Gehalt. 493

— , Enterokokkengehalt. 426

— , Entkeimungsverfahren. 56

— , Gerinnselfestigkeit bei Mastitisinfek-

tion. 493

— , Keimzahlbestimmung ftir Coli-aero-
genes-Vertreter. 167

— , Leukozytengehalt und Bang-Infek-
tion. 208

— , Mastitisbestimmung, Methoden. 492
— , Pasteurisierung durc^ Elektropasteur

304

— , st&dtische Versorgung, hygienische
MaBnahmen. 302

— , Talgigkeit, Ursaohen. 427

Milzbrandbazillus, Antagonismus gegen-
tiber Colibakterien. 302

MiBbildungen an Cucurbita pepo. 437
♦Mist, Kalt-, Edel-, HeiB-, Rotte, An-
aeroben-Flora. 82

* — , Stall-, Rotte, Anaeroben-Flora. 65
Molkerei, Wasserprobenahmeflasche, neue

414

♦Monilia, Hydrolyse von Pentosanen. 473
— , Wachstum auf Butter, VerfArbung.

209

— , — unter 0®. 296

— fruotigena, Enzymuntersuchungen.

490

Monodontomerus aereus, Hyperpaxasit
des Goldafters. 317

Mosaikkrankheit der Zuckerriibe, Wirts-
unkr&uter, GbertrAger. 507

— des Sellerie in Florida. 62

Mosaikviren der Kartoffel, Infektions-

versuehe. 61

Mosaikvirus, Aucuba-, Kultxir in isolier-
ten Tomatenwurzeln. 440

— , Gurken-, abweidiende StAmme. 313
— , Sellerie-, Biologie. 313

— , Tabak-, Jmmunisierung gegen. 439
— , — , Kultur in isolierten Tomatenwur-
zeln. 440

— , — , maskierte StAmme. 439

— , Tomaten-, Samentibertragnng. 440
Muoor, Fleokenbildung an Pdaumen-
frOchten. 433

— , Waohstum auf Butter, VerfArbung.

209

— racemosus, Wachstum auf gektShltem

Fleisch. 156

638

Register.

Mucor stolonifer, Pectinzersetzung. 210
*Musa, Fusarium-Welke, Beziehungen zum
Boden. 248

♦Mycobaoterium pellegrini, Biologie dor
Kolonien. 194

* — poikilothermorum, Biologie der Kolo-
nien. 188

* — smegmatis, Biologie der Kolonien.

194

Mycosphaerella fragariae, Infektionavor-
gang. 218

Myko-Bakteriose an Bliiten und Pnichten
des Oleanders. 437, 438

Linde. 436

, Begriffsdefinition. 438

Myzus persicae, tTbertrager von Zucker-
rubenmosaikvirus. 607

, Virusubertragiing an Kartoffel.

223

Nfthrboden fiir Knltnr unter 0®. 296

— , Honig-Agar-, Kiarungsverfahren. 197
— , Pflanzen-, f iir bakteriologische Z weoke.

148

— , Spezial-, zur Keimzahlbestimmiing in
Batter. 208

Kahrungsmittel, Entkeimungsverfahren.

66

Kaphthalin, Bekampfung der Roten
Spinne. 317

*Katriam-Nitrit, Wirkung auf anaerobe
Bakterien. 1

*Near-wilt (Erbsenwelke) durcjh Fusarium
oxysponim f. 8. 365

Nectria oinnabarina, Biologie und Para-
sitismus. 436

— ditissima, Krebs an Raphiolepis ja-

ponioa. 437

Nelke, FoOkrankheit durdi Fusarium
herbarum. 602

♦Nematoden im Belebtschlamm, EinfluQ
der Jahreszeit. 37

* , — der Temperatur. 24

* Boden, mikropedologischo XJnter-

suchung. 278

Kepbelometer, photoelektrisches, Fehlor-
quellen. 416

Keurospora sitophila, Perithezienbildung,
EinfluB von Temperatur und Sauer-
stoff. 204

— tetrasperma, Serodiagnostik. 298
Kezara viridula, Untersuohungen in Neu-

SOdwales. 63

Nilblausulfat, Kachweis von Fettspal-
tung duroh Bakterien. 301

Nitragin, Torf-, Wirkung. 306

Nitratassimilation bei Schimmelpilzen.

424

Nitrobacter, Untersuchungen. 198

Nitrogenase, Stickstoffbindung duroh
Azotobacter. 294

Nitrosocystis, Identit&t mit Nitrosomo-
nas. 198

Nitrosomonas, Untersuchungen. 198

Nonne, Bekfimpfung duroh Pyrethrum.

318

Obstbaume, Fire blight, Infektionsbedin-
gungen. 312

— , Schadigung duroh Recurvaria na-
nella. 316

— , Wanzenfauna, niitzliche und sohad-
liche Arten. 442

Cl, Sterilisation. 413

Clweido, Erreger der WurzelknOllchen,
Untersuchungen. 49

Oleander, Myko-Bakteriose an Bliiten
und Fruchten. 437, 438

♦Ohgochaeten im Belebtschlamm, Einflufl
der Jahreszeit. 37

* , — der Temperatur. 24

Olive, RuBtau, Beziehimg zu melasse-

haltigen Arsenbruhen. 437

Oospora, Wachstum auf Butter, Verfar-
bung. 209

♦Opercularia im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

’^‘Oxalsaure, Herstellung aus Sonnenblu-

mensamenschalen. 480

Oxydations - Reduktionspotentiale des
Bieres. 496

, Monographie. 46

♦Oxytrioha im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

* ^ — der Temperatur. 24

Ozonium texanum, Neubeschreibung an

Baumwolle. 219

Pandanaceen, Pilzflora, neue Arten. 600,

602

Paraffin, Sterilisation. 413

♦Paramaecium-Arten im Belebtschlamm,
EinfluB der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

Parasitologie, wirtschaftliche Bedeutung.

214

Passalus, Darmflora. 447

Pastourisiorung, Milch-, durch Elektro-
pasteur. 304

— von Fruchtsaften, thermaler Tdtungs-

punkt fiir Hefo. 423

Paxillus panuoides, TemperatureinfluB
auf Wachstum. 205

Pectin, Zersetzung durch Bakterien und
Pilze. 210

♦Pectinobacter amylophilum, Bedeutung
fiir Stallmistrotte. 77

*Penicillium, Hydrolyse von Pentosanen.

473

★ — , Vorkommen im Boden, mikropedo-
logisohe Untersuchungen. 284

— , Wachstum auf Butter, Verfarbung.

209

— , — unter 0°. 296

— flavoglaucum, Wachstum auf gekiihl-

tem Fleisch. 166

Register.

539

♦Penicillium lilacinum, Vorkommen im
Boden, mikropodologischo Untersu-
chung. 284

rufulus, Wachstum auf goktihltem

Fleisch. 156

♦ velutinum, Neubeschroibung. 362

♦Pentosane, Zorsotzung dutch Mikroorga-

nismen. ^5®

♦Pentoson, Zorsotzung dutch Mikrootga-
nismen. 458

Peptidase, Bostandigkeit, Untersuchun-
gen. 206

♦Peranema im Bolobtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

♦ , — der Temporatnr 24

Pericystis alvoi, Kalkbrut der Bienen. 320
Peronea variana, Schadwirkung in Wfil-

dem. ^ 214

Peronospora effusa, Myzelnachwois im
Spinatsamen. 501

Pertusaria pertusa, Tiergallen. 447
Pestalozzia Pandani, neuo Art an Pan-
danacoen. 500

— Pevronelii, neuo Art an Pandanaceen.

600

— Podocarpi, neue Art an Podocarpus

elongate. ^ 504

Pfiraich, Krausolkrankhoit (Taphrina de-
formans). 219

— , Krebs, Uutorsuchungen- 309

Pflanzen, Giftwirkung von Thalliumsul-
fat. 212

— , Immunit&t, erworbeno. 600

Pflanzenchomie, Beziehung zu Pflanzon-
verwandtschaft. ^ 47

Pflanzonkrankheiten, Auftreten in Ita-
lian. 431

— , Bemerkungen zu don Jahren 1929 —
1931. 499

— , Frage der Zunahme. 50

Pflanzensohutzdienst, italienisoher, Be-
richt. 431

Pflanzonsohutzmittel, Priifung, Dosie-
rungsvorrichtung. 432

— , Wirkung auf Bionen. 432

Pflanzonverwandtsohaft, Beziohung zu
Chemismus. 47

Pflaume, Befall dutch Rhynchites cu-
prous, Biologic. 315

— , Rotfleckenkrankhoit (Polystigma),
Biologic, Bekampfung. 310

— , Schalenkrankhoiten der Friichte. 433
— , Schwarzknotigkeit dutch Dibotryon
morbosum, Bekfimpfung. ^ 503

^Phaseolus vulgaris, FuBkrankheit dutch
Fusarium solani var. Martii f. 3. 174
Phenol, fungizide Wirkung. 213

Phoma, Wachstum auf Butter, Verfar-
bung. 209

— fructus-Pandani, neue Art an Panaa-

naceen. 500

— Martellii, neue Art an Pandanaceen.600

— pandani, neue Art auf Pandanus odo-

ratissimus. 502

Phomatospora Pandani, neue Art auf
Pandanus pedunculatus var. Strad-
brookeana. 602

Phomopsis, Apfelfaule, physiologische
Untersuchungen. 218

Phycomyceten, Barmflora von Passalus.

448

Phyllosticta camelliae, Sch&digung von
Camellia japonica. 436

— coratoniae, Blattflecke. 437

Physalis lagascae, Wirtspflanze filr Sel-
loriemosaik. 63

Physarum crateriforme, Sexualvorgang.

200

Phytophthora er 3 rbhroseptica, Enzym-
untersuchungen. 490

Picea sitchensis, HolzzerstOrung dutch
Trametes serialis, physiologische Unter-
suchungen. 299

*Pilze, Boden-, mikropedologische Unter-
suchung. 267

— , Barmflora von Passalus. 447

— , EinfluB von Holzkohle. 431

— , Enzymuntersuchungen. 490

— , Flora £kn Pandanaceen, neue Arten.

600, 602

— , — italienisoher BOden. 428

— , — von Pisa und Umgebung. 600
— , holzzerstdrende, physiologische Un-
tersuchimgen. 299

— , — , TemperatureinfluB anf Wachs-
tum. 206

— , Keimzahlen im Boden. 159

— , psychrophile. 296

— , Rost-, Flora von Kamtschatka. 299
— , Schixmnel-, Abtdtung dutch Chlor.

499

— , — , als EiweiBquelle, Fiitterungsver-
suche. 489

— , — , Bildung aromatischer Aminosftu-
ren. 488

— , — , Geuswechsel, EinfluB der Stick-
stoff quelle. 424

♦ — ^ , Hydrolyse von Pentosanen. 473

— , — , Keimzahlbestimmung in Butter.

208

— , — , Pectinzersetzung. 210

— , — , Stoffwechsel, praktische Nutzung
und theoretische Beutung. 488

— , — , unterschiedliche elementare Zu-
sammensetzung. 424

— , — , Wachstum auf Butter, Verfftr-
bung. 209

— , — , gekilhltem Fleisch. 166

— , Sohleim-, Sexualvorgang. 200

, Serodiagnostik. 298

— , Synergese mit BaJeterien. 436, 437,

438

— , Wachstum unter 0®. 296

Pilzgallen auf Flechten. 447

Pipette ftir kleine Fliissigkeitsmengen.

148

Pirene graminea, Parasit der Erbsengall-
miioke. 316

540

Begister.

Platyparea poeciloptera, Epidemiologie.

314

Pleospora-Arten, Apfelf&ule, physiologi-
sche Untersuchiingen. 218

Plesiocoris rugioollis, sch&dlidh izn Obst-
bau. 442

Pleiirotus ostreatus, TeznperatureinfluiB
au£ Waohstum. 205

Pneumokokken, Abtotungsfestigkeit und
Entwioklung^estigkeit. 419

— , Varianten, Dissoziation. 293

Podoccurpus elongatus, Blattflecken durch
Pestalozzia Podooarpi. 504

*Podophrya im Belebtscblamm, EinfluB
der Jahreszeit. 37

* , — der Temperatur. 24

Polyporus-Arten, TemperatureinfluO auf

Wachstum. 205

Polystictus versicolor, Holzzersetzimg,
physiologische TJntersuchungen. 299
, Temperaturemflufi auf Wachs-
tum. 205

Polystigma rubrum. Befall von Pflaumen,
Biologie, Bekftmpfung. 310

Poria vaporaria, TemperatureinfluB auf
Wachstum. 205

Primula obconica, Wurzelffi-ule durch
Thielaviopsis basicola. 219

— pannonioa. Befall durch Tuburcinia

primulae. 222

♦Prorodon im Belebtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

♦ , — der Temperatur. 24

Protozoen, Bodenfauna. 497

— , — , kilnstliche Ztichtung. 169

Pseudodiphtheriebakterien, Dold - Fftr-

bung. 422

Pseudomonas-Arten im Boden des Lun-
zer Gebiets. 59

Pseudomonas fluorescens, Wachstum un-
ter 0®. 296

* — intybi, Erreger von Salat- und Ci-
ohorienf&ule. 242

— Lindneri, Stoffwechselimtersuchungen

487

* — S3rringae, Erreger von Salatf&ule. 241
Puccinia antirrhini, Verbreitung in Eng-
land, Bek&mpfung. 309

— asphodeli. Befall von Asphodelus

microcarpus. 309

— buxi, Befall von Buxus sempervirens.

437

— oonstricta, Befall von Teuorium mon-

tanum in der Slowakei. 222

— coronata, spezialisierte Formen in

Kanada, Wirtspflanzen. 505

avencbe, Eknteschaden, Bekftmp-

fung. 505

— glumarum, biologisdie Bassen. 203
^ — , LiohteinfluB auf ITredoentwiok-

lung. 204

, Wirtspflanzen in Alberta. 436

— graminis. Befall des Weiz6ns,Abh&ngig-
keit von der Bodenfeuchtigkeit. 2^

Puccinia graminis, Bekfimpfung durch
Schwefelbestaubung. 222

, Variet&ten, biologische Bassen,

Bastardierung. 434

avenae, Emteschaden, BekSmp-

fung. 606

, spezialisierte Formen, Um-

welteinfliisse. 606

phlei-pratensis, Sch&den an Thi-

motheegras. 222

tritici, Immimitatszuchtung, Ge-

w&chshaus- und Freilandinfektion. 436
, Vererbungsversuche. 606

— hieracii, Befall von Hieracium villo-

sum in der Slowakei. 222

— simplex, Plasmolyse und Vitalfarbung

bei Sporen. 204

— triticina, Befall des Weizens, Abhan-
gigkeit von der Bodenfeuchtigkeit. 220

, Bekampfung durch Sdiwefelbe-

staubung. 222

, physiologische Formen, geogra-

phische Verbreitung. 308

, Besistenzztichtung. 309

Pyocyanase,Analyse,bakterizideWirkung,

302

Pyooyanin, EinfluB auf Bakterienatmung

165

Pyrausta nubilalis, Befall dtiroh Beau-
veria Bassiana, Infektionsvorgang. 319

, Epidemiologie. 314

Pyrethrum, Bekampfung von Erlenblatt-
kafern. 316

— ^ Forstschadlingen, Bedingtheit

der Giftwirkung. 318

— , Insektenbekampfungsversuche. 317
— , Wirkxmg auf Insekten, histologische
XJntersuchung. 512

Pythium de Baryanum, Enzymunter-
suchungen. 490

— ultimum, Ringfaule der StiBkartoffel.

311

Quecke, Gelbrost, biologische Bassen. 203
Quitte, Krebs durch Bacterium cydoniae
n. sp. 438

Badiumemanation, EinfluB auf Zygo-
saocharomyces mandschuricus. 155
Badiumstrahlen, EinfluB auf Amylase. 65

— , Hefe. 202

Bamalina fraxinea, Pilzgallen. 447
*Banunoulus repens, Vorkommen in Wein-
bergen, Beziehungen zu Bebenwachs-
tum. 409

Baphiolepis japonioa, Elrebs durch Neo«
tria ditissima. 437

Bauchschaden an Bienen. 319

Blattorganen. 61

— , Filterwirkung eines Fichtenbestan-
des. 213

Becurvaria nanella, Schadigung in Obst-
plantagen, Biologie. 316

Kegister.

541

Besistenz, Flugbraad>, des Weizens,
Ztichtung. 308

— , Boat-, der Getreide, Einflufi von
Stickstoffhausbalt und Temperatnr.

221

— , — , des Weizens, EinfluB von Boden-
feuchtigkeit. 220

— , — , , TemperatxireinfluB. 221

— , — , , Ziichtung. 309

— , Steinbrand-, des Weizens, Ztichtung.

309

— von Maissorten gegen Blissus leuco-

pterus. 314

— , Welke-, des Kohls, Ztichtung. 310
Bhagoletis cerasi, Bektimpfung. 318
Bhaznnus-Arten, Aezidienwirte ftir Puc-
cinia ooronata in Kanada. 505

Bhizobium leguminosarum, physiologi-
sche Untersuchungen. 49

Bhizopin, Wuchsstoff, Wirkung. 297, 298
Bhizopoden, Bodenfauna. 159, 497
Bhizopus nigricans, Tonxatenfruchtftiule.

433

— speziosus, Wachstum auf Butter, Ver-

f&rbung. 209

— suinus, Wuchsstoffbildung. 297
Bhizothamnienbildung an Alnus, Elae-

agnus und Hippophae, Erreger. 49
Bhodospirillum gracUe, Keubeschreibung.

200

Bh 3 mchites cupreus, Befall von Pflaume
und Kirsche, Biologie. 315

Bingelviren der Kartoffel, Infektions-
versuche. 61

Bizinus, Sch&digung der Fruchtst&nde
durch Botrytis cinerea. 434

Bobinia, Krebs. 437

Bdntgenstrahlen, Dissoziation von Bac-
terium tuberculosis piscium. 50

— , EinfluB auf Amylase. 55

— , Sarzinen. 61

Boggen, Ertragssteigerung durch Chile-
salpeter, Wasserkulturversuche. 210
— , ^Ibsterhitzung, 168

*Bossi-Cholodny-Conn-Methode, Unter-
suohung von Bodenmikroorganismen.

379

Bost, Buchsbaum-, in Italian. 437
— , Gerstenzwerg-, biologische Bassen.

203

— , Getreide-, Bektimpfung durch Schwe-
felbest&ubung. 222

— , — , Plasmolyse und Vitalf&rbung bei
Sporen. 204

— , — , Besistenzgrad und Stiokstoff-
hauj^alt, TemperatureinfluB. 221
— , Hafer-, Bmteschaden, Bek&mpfung.

605

— , — , spezialisierte Foimen, Umwelt-
einfltisse. 506

— , Haferkronen-, spezialisierte Formen
in Kanada. 505

— , Ltiwenmaul-, Verbreitung in Eng-
land, Bek&mpfung. 309

Bost, Schwarz-, Variettiten, biologische
Bassen, Bastardierung. 434

— , Spargel-, Bektimpfung. 605

— , Weizen-, Abhftngigkeit von der Bo-
denfeuchtigkeit. 220

— , — , Immunitatsztiohtung, Gewachs-
haus- und Freilandinfektion. 436
— , — , Vererbungsversuche. 606

— , — , Wirtspflanzen in Alberta. 435
— , Weizenbraun-, physiologische For-
men, geog^aphische Verbreitung. 308
— , — , Resistenzztichtung. 309

— , Weizengelb-, biologische Bassen. 203
— , — , LichteinfluB auf Uredoentwick-
lung. 204

— , — , TemperatureinfluB auf Resistenz.

221

Bostpilze, Flora von Kamtschatka. 299
^Botatorien im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 37

♦ ^ — der Temperatur. 24

Bote Spinne, Bek&mpfung durch Naph-

thalin. 317

, Schadigung an Hopfen, Biologie,

Bek&mpfung. 610

Btibe, Blattlausbefall, Bek&mpfung. 443
— , Futter- und Zucker-, Wirkung von
Bor und Chilesalpeter in Wasserkul-
turen. 210

— , Bunkel-, Sch&digung durch CaJocoris
norwegicus. 442

— , Zucker-, Curly-top, Biologie des
Virus. 312

— , — , Mosaikkrankheit, Wirtsunkr&u-
ter, tTbertr&ger. 607

Bunzelkrankheit des Tabaks, t)hertra-
gung, Wirtsunkr&uter. 313

BuBtau an Oliven, Beziehung zu melasse-
haltigen Arsenbrtihen. 437

Sacoharomyces cerevisiae, Auf^altung in
verschiedene Typen. 423

* , Biologie der Kolonien. 194

, EinfluB von Badiumstrahlen. 202

— Dio^yri, Neubeschreibung, Kakimost-

g&rung. 494

— ellipsoideus, Aufspaltung in verschie-
dene Typen. 423

, thermaler Tdtungspunkt. 423

Sactogaster pisi, Parasit der Erbsengall-
mticke. 316

♦Salat, Kopf-, bakterielle Fftule. 232
Salzs&ure, Atzsch&den an Blattorganen.

61

Sanddom, Erreger der WurzelknSllchen,
Untersuchungen. 49

Sanokrisin, Dissoziation von Bacterium
tuberculosis piscium. 50

Saroina, Abtdtung durch Chlor. 499
— , Trttbung des Biers. 496

Arten, EinfluB von ultravioletten

und Bdntgenstrahlen. 51

im Bsden des Lunzer Gebiets. 59

♦ — lutea, Biologie der Kolonien. 186

542

Begister.

Scheingallen auf Flochten. 447

Schildlaus, Massenauftreten, Predisposi-
tion der Wirtspflanze. 317

Schimmelpilze, AbtStung durch Chlor.

499

— als EiweiSquello, Futterungsversuche.

489

— , Bildung aromatischer Aminosauron.

488

— , Gaswechsel, EinfluB der Stickstoff-
quelle. 424

* — , Hydrolyse von Pentosanen. 473
— , Keimzahlbestimmung in Butter. 208
— , Pectinzersetzung. 210

— , Stoffwechsel, praktiscbe Nutzung und
theoretische Deutung. 488

— , unterschiedliche, elementare Zusam-
mensetzung. 424

— , Wachstum auf Butter, Verfarbung.

209

Sohizophylluxn commune, Temperatur-
einfluB auf Wachstum. 205

’^‘Schlamm, Belebt-, Mikroorganismenge-
halt, EinfluB der Jahreszeit. 34
* — , — , — , — der Temperatur. 22
Schleimpilze, Sexual vorgang. 200

Schorf, Kartoffel-, bedingende Faktoren.

216

— , — , Beobachtungen in Italien. 438
— , — , Knollenbeizung. 507

— , Lager-, an Apfel. 502

Schwammspinner, Bekampfung durch
Pyrethrum. 318

Sohwarzbeinigkeit der Kartoffel, Saat-
gutbeizung. 312

Schwefel, Haferrostbekampfung. 505
Schwefelsaure, Atzschaden an Blattorga-
nen. 61

Sclerotinia fructigena, Serodiagnostik.

298

— sclerotiorum, Stengelkrebs an Althaea

rosea. 219

Scolochloa festucae. Befall durch Puc-
cinia coronata. 505

’^‘Scopulariopsis nicotianae, Neubeschrei-
bung. 354

— rufulus, Wachstum auf gekOhltem

Fleisch. 156

Scyphophorus acupunctatus, Sch&digung
an Sisalagave, Biologie. 509

Selbsterhitzimg des Getreides. 168

Sellerie, Mosa&krankheit in Florida. 62
— , Mosaikvirus, Biologie. 313

*Senecio vulgaris, Vorkommen in Wein-
bergen, Beziehungen zu Bebenwachs-
tum. 409

Senilitatsproblem, entwioklungsgeschicht-
liche Studie. 411

Silofutter, Konservierungsverfahren. 57,

68

Sisalagave, Schadigung durch Scypho-
phorus acupunctatus. 509

Sxi^thurus viridis, biologische Bekamp-
fung durch Biscirus lapidarius. 63

Solanum melongena, Verticillium-Welke,
Bekampfung. 215, 604

Sonchus arvensis, Wirt fiir Zuckerriiben-
mosaikvirus. 507

Sonnenbrandflecke an Pflaumenfriichten.

433

Spargel, Fauna der Plantagen, Wechsel-
wirkung der Tierarten, 316

— , Bost, Bekampfung. 606

Spargelf liege, Epidemiologie. 314

— , GroBschadling in Spargelf eldern. 316
Spargelkafer, GroBschadling in Spaxgel-
feldern, Parasiten. 316

♦Spathidium im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

*Sphaerotilus im Belebtschlamm, EinfluB

der Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

Spioaria, Wachstum auf Butter, Ver-

farbung. 209

Spilonota ocellana, Vergleich mit Becur-
varia nanella. 316

Spinat, Peronospora-Myzel im Samen.

501

*Spirostomum im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

Sporotrichum, Wachstum auf Butter,
Verfarbung. 209

— , — unter 0®. 296

♦Sputum, Isolierung von Penicillium velu-
tinum n. sp. 352

Starke, Herstellxmg, biologisches Ver-
fahren. 48

♦Stallmist, Botte, Anaeroben-Flora. 65
Staphylococcus pyogenes aureus, Bak-
teriolyse durch kolloidale Losimgen.

486

Staphylokokken, Dissoziationsformen.

418

— , Mischkulturen mit Typhusbazillen,
Kohlehydratstoffwechsel. 52

— , Unterscheidung nach Herkunft auf
Schafblutagarplatten. 418

Steinbrand, Weizeii-, Keimfahigkeit der
Sporen. 436

— , — , Besistenzziichtung. 309

♦Stellaria media, Vorkommen in Wein-
bergen, Beziehungen zu Rebenwachs-
tum. 409

Stemonitis fusca, Sexualvorgang. 200
Stemphylium, Wachstum auf Butter,
Verfarbung. 209

Stengelbrand an Weizen, physiologische
Bassen. 436

♦Stentor-Arten im Belebtschlamm, Ein-
fluB der Jahreszeit. 36

Stephanitis pyri, Bekampfung. 316
Stereum-Arten, TemperatureinfluB auf
Wanhstum. 205

♦Sterigmatocystis, Hydrolyse von Pento-
sanen. 477

* — , Oxal- und Zitronensaurebildung aus
Sonnenblumensamenschalen. 480

Kogister.

543

Sterilisation, Dampf-, mit Luftabsohei-
der. 445

— , — , thermoelektrische Kontrolle. 446

— wasserfreier Stoffe. 413

Sterilisationsapparate, Priifung mit Ther-

moelementen. 47

Stickstoffbindung (Ammoniakbildung) im
Boden. 484

— durch Actinomyces in Symbiose mit

Alnus und Elaeagnaceen. 50

Azotobacter, ph-EinfliiB, Azotase,

Nitrogenase. 294

, Wirkung auf hdhere Pflanzen.

306

Bakterienenzyme. 54

Bodenbakterium. 306

Leguminosensamen. 205

— im Boden, EmfluB von Bodenbedek-

kung. 498

— in Laubkompost. 211

Stickstoffdungrmg, schadliche. 430
Stickstoffverluste in Bakterienkulturen.

294

Stiretus anchorago, Eeind des Spargel-
k&fers. 316

*St. Johanniskrankheit der Erbse in Eu-
ropa. 449

Strahlen, Licht-, EinfluB auf Bakterien
und Viren. 300

— , mitogenetische, EinfluB auf Mikro-
organismen, Eehlerquellen. 484

indium-, EinfluB auf Amylase. 55
— , — auf Hefe. 202

Rontgen-, Dissoziation von Bacte-
rium tuberculosis piscium. 50

— , EinfluB auf Amylase. 55

— , — auf Sarzinen. 51

ultrarote, Milchentkeimung. 56
ultraviolette, EinfluB auf Amylase. 55
— , — auf Bakterien und Viren. 300
— , — auf Bacterium tuberculosis
piscium. 50

— , — auf Hefe. 205

— , — auf Sarzinen. 51

— , — auf Stoffwechsel und Wachs-
tum von Bakterien. 417

— , — , Milchentkeimung. 56

Strahlenforschung, im Dienste der Bio-
logie. 411

*Streptobakterien, Untersuchungen, Vor-
kommen. 106

Streptocoocus-Arten im Boden des Lrmzer
Qebiets. 59

— apis, Identit&t mit Bacillus pluton

und B. alvei. 444

— fecalis, Untersoheidung von Str. lao-

tis. 426

— lactis, Untersoheidung von Str. feca-
lis. 426

Streptokokken, Biologie, Einteilung, Anti-
viruswirkung. 151

— , hamolytisSie, Verhalten gegen hip-
pursaures Natriiun. 418

Streptokokken, menschliche und tieri-
sche, Untersoheidung. 301

— , , — durch Pr&zipitinreak-

tion. 293

— , Varianten, filtrierbare Stadien. 292
— , — , saprophytare, experimentelle Er-
zeugung. 418

♦Strombidium im Belebtschlamm, EinfluB
der Temperatur. 24

*Stylonichia im Belebtschlamm, EinfluB
der Jahreszeit. 36

, — der Temperatur. 24

Sublimat, Kartoffelbeizung geg. Schwarz-
beinigkeit. 312

— , Kohlhemiebek&mpfung. 308

StlBkartoffel, Ringfaule durch Pythium
ultimum. 311

Symbiose, Bakterien-, in Wurzeln von
Diplotaxis erucoides. 446

SynedreUa nodiflora, Wirtspflanze fur
Tabak-KrS.U8elvirus. 313

Tabak, Bonnangel („Topziekte“). 214
— , Curly-top-Virus. 313

— , Er&uselkrankh., Ubertragung, Wirts-
unkr&uter. 313

— , Mosaikvirus, chemische Untersuchun-
gen. 508

— , — , Immunisierung. 439

— , — , maskierte StAmme. 439

— , — , Strdmungsdoppelbrechung. 508
— , Tjemara-Krankheit, physiologische
Ursachen. 61

— , Viruskrankheiten, serologische Unter-
suchungen. 299

♦ — , Vorkommen von Scopulariopsis nico-
tianae n. sp. an trockenem Blatt. 354
— , Wildfeuer,Toxinbildungde8Erregers.

312

Talgigkeit der Milch, Ursachen. 427
Taphrina deformans, Entwicklungsgang,
Parasitismus. 219

Termobacterium mobile, Stoffwechsel-
untersuchungen. 487

Tetranychus althaeae, Sch&digung an
Hopfen, Biologie, BekSmpfung. 510
Teucrium montanum, Befall durch Puo-
cinia constricta in der Slowakei. 222
Thalliumsulfat, Wirkung auf hohere
Pflanzen und Mikroorganismen. 212
♦Thermobakterien, Untersuchungen, Vor-
kommen. 106

Thermoelements, Pr9fung von Sterili-
sationsapparaten mit. 47

♦Thielaviopsis, neue Art, zu Ceratosto-
mella gehdrend. 345

— basicola, Wurzelffiule an Primula ob-
conioa. 219

Thimotheegras, Sch&den durch Rost-
befall. 222

Thiosomenbildimg bei Bakterien. 294
Thiospira propera, Neubeschieibung. 200
Thiospirillum coecineum, Neubeschrei-
bung. 200

544

Register.

Thiospirillum orassum, Keubeschreibung.

200

*Tibi-G&rung, XJntersuchungen, 39

Tiergallen auf Flecbten. 447

Tilletia, neue Queoksilberbeizmittel. 600

— laevis, Kesistenzztlclitung. 309

— tritici, Bodeninfektion. 222

, Keimfahigkeit der Sporen. 436

Tjemara-Krankheit des Tabaks, physio-

logische Ursachen. 61

*Tokophrya im Belebtschlamm, Einflufi
der Jahreszeit. 37

* , — der Temperatur. 24

Tomate, Fruchtfaule durch Rhizopus ni-
gricans. 433

— , Mosaikvirus, Sameniibertragung. 440
— , Stengelf&ule durch Didymella lyoo-
persici, Bekampfung. 503

— , Viru^ultur in isolierten Wurzeln. 440
— , WlirzelnematodenjBek&mpfungdnrch
Formalin. 441

Topziekte, Bormangel bei Tabak. 214
Torula, Wachstum unter 0®. 296

Trametes-Arten, TemperattireinfluB anf
Wtichstum. 205

— serialis, Holzzersetzung, physiologi-

sche XJntersuchnngen. 299

Trichoderma, Wachatnm auf Butter, Ver-
f&rbung. 209

Trichothecium, Wachstum auf Butter,
Verfftrbung. 209

— roseum, physiologische Untersuchun-

gen. 436

Triphleps, Baubwanze, ntitzlioh im Obst-
bau. 442

Trockenbeize, anormale Keimung bei
Weizen. 213

Tsuga canadensis, Sch&digxmg durch Mas-
senauf treten von Ellopia fiscellaria. 509
Tubercularia vulgaris, Biologie und Para-
sitismus. 436

Tuberkelbakterien, Priifung von Anti-
septika. 415

Tuberkulose, Frage des Ultravirus. 160
Tuburcinia primulae, Befall von Primula
pannonioa in der Slowakei. 222

Typhusbakterien, Entstehung aus Gelb-
st&mmen. 149

— , Misohkulturen mit Staphylokokken,
Kohlehydratstoffwechsel. 52

Ulmensterben, physiologische Untersu-
ohungen tlber den Erreger. 311

— , Ubertragong durch INldben? 433
Unkraut, c^emische Bek&mpfung und
Bienenzucht. 431

♦Unkrautflora in Weinbergen, Beziehun-
gen zu Bebenwachstum. 406

Urease, Bildung durch Aspergillus niger.

56

Uredinales, Flora von Kamts<diatka. 299
XJrooystis occulta, Weizenbefall, physio-
logisbhe Rassen. 436

Uromyces fallens, Anffilligkeit abge-
schnittener Kleebldtter. 308

Ustilago, neue Queoksilberbeizmittel. 500

— tritici, Emteschaden und Bekampfung

in Indien. 435

, Resistenzziiohtung gegen. 308

— zeae, Boulenbrand des M^es, Infek-

tionsvorgang. 506

♦Valerianella olitoria, Vorkommen in
Weinbergen, Beziehungen zu Reben-
wachstum. 409

Venturis inaequalis, Lagersohorf an Apfel.

502

Vemonia cinerea, Wirtspflanze ftir Ta-
bak-Krauselvirus. 313

Verticillium, Welkekrankheit der Eier-
fruoht, Bek&mpfung. 504

— dahliae, Eierfruchtwelke, biologische

Bek&mpfimg. 215

♦ — chlamydosporium, Vorkommen im
Boden, mikropedologische Untersu-
ohung. 274

Vibrionen, Variabilit&t. 149

Vicia, Wirkung von Torf-Nitragin auf
Moorboden. 305

— Faba, Gef&Onekrose durch Bacterium

tumefaoiens. 507

Vigna sinensis, Gurkenmosaikvirus, Iso-
herung abweichender St&mme. 313
Viktoriablau, Ffirbung von filtrierbarem
Virus. 49

Virulenz, Untersuchungen an Macrospo-
rium commune. 501

Virus, Aucubamosaik-, Kultur in isolier-
ten Tomatenvnirzeln. 440

— , BlattroU-, der Kartoffel, Blattlaus-
Ubertragung. 223

— , Buck^in-, an SiiJBkirsohen, EinfluB
der Unterlage. 440

— , Curly-top-, d. Zuckerriibe, Biologie.312
— , filtrierbares, der Tuberkxdose. 160
— , — , F&rbuug durch Viktoriablau. 49
— , Gurkenmosaik-, abweichende Stftm-
me. 313

— , Inaktivierung durch ultraviolette und
andere Liohtstrahlon. 300

— , Latent-, der Kartoffel. 223

— , Mosaik-, der Kartoffel, Infektions-
versuohe. 61

— , Ringel-, der Kartoffel, Infektions-
versuohe. 61

— , Sellerie-Mosaik-, Biologie. 313

— , Tabakmosaik-, chemisohe Untersu-
chungen. 508

— , — , Immunisierung gegen. 439
— , — , Kultur in isolierten Tomaten-
wurzeln. 440

— , — , Lokalisierung in Capsicum, Ver-
erbung. 440

— , — , maskierte St&mme. 439

— , — , Strdmungsdoppelbreohung. 608
— , Tomatenmosaik-,Sameniiber1^gung.

440

Begister.

545

Virus, Y-Mosaik-, der Kartoffel, Blatt-
lausiibertragung. 223

— , Zuckerriibezimosaik Wirtsunkr&u-
ter, tTbertrager. 507

Virusformen, Handbuch. 482

Viruskrankheiten an Bohne. 224

Kartoffel, Infektionsversuohe. 61

* und Knollenpotential. 266

Tabak, serologische Untersuchun-

gen. 299

Vitalfarbung bei Rostpilzsporen. 204

*Vorticella im Belebtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

* , — der Temperatur. 24

W&rmegangmesser, Sterilisationskontrol>
le. 446

Wald, Bestandsveranderungen duroh Tn-
sektensch&den. 213

Wanderheuschreoke, Maasenauftreten,
I/ebensbedingungen. 316

Waeser, Ab-, Bakteriophagengehalt, Be-
deutung ftir die Reinigung. 60

— , — , dhlorierung. 212

— , — , Reinigungsanlage. 499

— , Bakteriophagennaehweis. 491

— , Brauerei-, Entkeimung duroh Chlor.

498

— , Chlorbindungsverindgen, EinfluB von
Ammoniak. 212

— , Coli*Qehalt, Keimzahibestixnmung.

429

— , Destination, "Dbergang von Bak-
teriensporen. 445

— , frisch destilliertes, Wachstumshem-
mung bei Bact. coli. 486

— , Nachweis von Colibakterien. 307
— , Probenahmeflasche fiir Molkereien.

414

Wasserstoffionenkonzentration,Mes3ung,
Tasohenbuch. 482

Weizen, anormaleKeimung nachTrocken-
beize. 213

— , bakterielle Blattvergilbung. 437
— , Befall duroh Hehninthosporium sati-
vum, ktinstliohe Infektionsmethode*

434

— , Borwirkung in Wasserkulturen. 210
— , Braunrost, physiologische Formen,

geographische Verbreitung. 308

— , — , Resistenzziichtung. 309

— , Flugbrandbefall, Emteschfiden und
Bek&mpfimg in liidien. 435

— , Flugbrandbekftmpfung duroh Be-

netzungsbeize. 220

— , Gelbrost, biologisohe Bassen. 203

— , Gelbrostresistenz, TemperatureinlluB.

221

Weizen, Immunitatszti(3htung gegen Rost,
GewSohshaus- u. Freilandinfektion. 435
— , Resistenzziichtung gegen Flugbrand.

308

— , Bostbefall, Abh&ngigkeit von der
Bodenfeuchtigkeit. 220

— , Rostbekfimpfung duroh Sohwefel-
best&ubung. 222

— , Steinbrand, Bodeninfektion. 222
— , — , Resistenzziichtung. 309

— , Stengelbrand (Urocystis), physiolo-
gische Bassen. 436

— , Streifenkrankheit duroh Cephalospo-
rium gramineum n. sp. 504

Wildfeuer des Tabaks, Toxinbildung des
Erregers. 312

Willia anomala, Aufspaltung in verschie-
dene Typen. 423

Wuchsstoff, BUdung duroh Rhizopus
suinus, Wirkung, Zusammensetzung.

297

— , EinfluB auf Aspergillus niger. 297
— , Vorkommen im Menschenham. 297
— , — in Bierwlirze, EinfluB auf Hefe. 297
Wurzelkndllchen an Erie, Olweide und
Sanddom, Erreger. 49

Zelluloseverdauung im Wiederk&uerma-
gen. 448

"^Zellulosezersetzung, anaerobe, im Stall-
mist. 69

— bei niedriger Sauerstoffspannung. 152
— , Entwicklungszyklus von Cythophaga
Hutchinsoni. 153

Ziliaten, Fauna des Bodens. 159

Zitronen85.ure, Bildung duroh Aspergillus
niger. 201

* — , Herstellung aus Sonnenblumensamen-
schalen. 480

— , mikrobiologische Gewinnung, Appa-
ratur. 414

*Zoogloeen im Belebtschlamm, EinfluB der
Jahreszeit. 36

* ^ — der Temperatur. 24

Zuoker, Mikroanalyse. 196

Zuckerrlibe, Curly-top, Biologie des Virus.

312

— , Mosaikkrankheit, Wirtsunkr&uter.*
Ubertrager. 507

— , Wirkung von Bor und Ohilesalpeter
in Wasserkulturen. 210

Zwiebel, Speise-, Fusarium-Faule. 217
Zwiebelfliege. Bekampfung durch Kalo-
mel-Samenbeize. 64

Zygosacdharomyoes mandschuricus, Auf-
fipaltung in verschiedene I'ypen. 423
, Ei^uB von Badiumeznanation.

155

ZweiteAbt. Bd. 91.

35

Itntralhlatt fur Bakteriologie 11 AM Bd gi

G lathe, Ueber die Rotte des Sialldun^ers

Veriag von Gustav Fischer in Jena

Verlag von Gustav Fischer in Jena