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Full text of "Toxine und Antitoxine"

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TOXINE UND ANTITOXINE 



von 



Dr. phil. et med. Carl Oppenheimer 

Assistent am tierphys. Institute d. Landw. Hochschule, Berlin. 





Jena 

Verlag von Gustav Fischer 

1904. 



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i 



Vorwort. 



Der Plan dieses Baches, das gewissermaßen eine Ergänzung zn den 
»Fermenten« darstellen sollte, war bei mir schon lange vorhanden, als 
mir von selten der Heransgeber des »Handbuches der pathogenen Mikro- 
organismen«, den Herren ProflF. Kolle und Wassermann, der höchst 
ehrenvolle Auftrag zuteil wurde, für dieses Werk das Kapitel »Bak- 
teriengifte« zu bearbeiten. 

Dank dem außerordentlich liebenswürdigen Entgegenkommen dieser 
Herren und des Verlagshauses ließ es sich ermöglichen, beide Pläne zu 
vereinbaren. So ist denn der »Allgemeine Teil« dieses Buches, von 
einigen Aenderungen abgesehen, bereits im I. Bande des »Handbuches« 
erschienen (1902), das auch vielleicht noch einige Bruchstücke des spe- 
ziellen Teiles übernehmen wird. 

Der Plan des Werkes war, alles uns bisher Bekannte über Toxine 
irgend welcher Herkunft zusammenzufassen, wobei der BegriflF des Toxins 
ganz unabhängig von der Quelle des Giftes chemisch und auf der Basis 
der Seitenkettentheorie fundiert wurde. 

Daraus folgt, dass dieses Buch zwar in einer Beziehung einheitlich 
werden, nämlich thatsächlich zusammenhängend eine Darstellung aller 
Toxine geben konnte. Andererseits aber lag es nicht in meinem 
Plane, alle zweifelhaften Giftstoffe der Pflanzen und Tiere zu 
besprechen. So sind denn manche tierischen und pflanzlichen Gifte, 
deren Toxinnatur in Zweifel steht, ganz aphoristisch (Fischgifte), 
andere (z. B. Bienengift, das wahrscheinlich basischer Natur ist) gar 
nicht besprochen. 



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— IV — 

Für den Versuch, die Toxine selbst und ihre Antitoxine genau zu 
beschreiben, standen mir größere litterarische Vorarbeiten so gut wie 
gar nicht zu Gebote. 

So habe ich, soweit irgend möglich, nur aus den Originalarbeiten 
geschöpft. Ich muss leider fürchten, dass trotzdem das Buch ein Torso 
bleibt, denn die Angaben über die Toxine sind so zerstreut und manch- 
mal iu Arbeiten scheinbar anderen Zieles versteckt, dass wohl manche 
Thatsache mir entgangen sein mag. 

Berlin, Dezember 1903. 

Carl Oppenheimer. 



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Inhaltsverzeiclmis. 



Allgemeiner Teil. 



Seite 



Einleitung: Begriffsbestimmung des »Toxins« chemisch, physio- 
logisch und theoretisch. Seitenkettentheorie. Art ihrer Entstehung. 
Nährböden. Mittel zur Steigerung der T- Produktion. Filtration. 
Keinigung. Chemische Natur. Verhalten gegen äußere Faktoren 
Oxydationsmittel, Gifte). Schicksale im Organismus. Antitoxin- 
bildung. Immunität. Schicksale im Digestionstractus. Wirkungsart 
der Toxine, Spezifizität, Inkubationszeit. Konstitution der Toxine, 
physiologische Wirkung. ToxoYde und Toxone. Allgemeines über 
Antitoxine 1 — 26 

Verhalten der Toxine zu den Antitoxinen. Haptophore und toxo- 
phore Gruppen. Spezifische Bindung. Maßeinheiten. ToxoYdbildung;. 
Lo und Lf. Die Grüße >D« als Maß der Toxone. Unvollkommene 
Absättigung. Die Zahl »200«. Giftspectra. Physikalisch-chemische 
Messungen. Reaktionsgeschwindigkeit. Gleichgewichte. Wärme- 
tönung der Toxin-Antitoxinbindung 26—56 

Die Endotoxine und die BakterienproteYne 55 — 61 

Spezieller Teil. 
I. Die echten Toxine. 

Diphtherietoxin: Sekretion. Nährböden. Luftzufuhr. Konservierung. 
Reinigung. Eigenschaften. Wirkungen. ToxoYde und Toxone. 
Diphtherieantitoxin: Produktion, Aufbewahrung des Serums, 
Konzentrierung des A. Chemische Natur. Bindung an die Eiweiß- 
stoffe des Serums 61—92 

Tetanustoxin: Nährböden, Eigenschaften, Konzentrier ung. Wirksam- 
keit Beziehungen zum Zentralnervensystem. Fermenttheorie. Te- 
tanusantitoxin 92—111 

Botulismustoxin, Pyocyaneustoxin 111—116 

Bakterienhämolysine: Tetanolysin, Pyocyaneolysin , Colilysin, Sta- 

phylolysin, andere Lysine. Leukocidin der Staphylokokken . . . 116—126 

n. Die Endotoxine und andere Bakteriengifte. 

Choleragift: Dargestellte Giftstoffe. Echtes Toxin, an die Zellen ge- 
bunden (?). Antitoxin {?). 

Typhusgift, Bacterium coli, Ruhr, Pesttoxin, Pneumotoxin, Gonotoxin, 
Streptotoxin. 



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— VI — 

Seite 

Gifte des Tuberkelbacillus: Tuberkulin. Tuberkelgifte v. Beh- 
rings. MalleYn. 

Milzbrandgift, Hogcholera, Malignes Oedem, Kauschbrand, Schweine- 
seuche, Vibrio Metschnikoff 127—161 

in. Die pflanzlichen Toxine (Phytotoxine). 

Ricin: Darstellung, Chemische Natur, Wirkungen. Blutwirkung. Ricin- 

immunität. Antiricin. 
Abrin, Krotin, Robin 161—181 

IV. Die tierischen Toxine (Zootoxine). 

Schlangentoxine: Darstellung. Eigenschaften , Wirkungsart , Neuro- 
toxin, Hämorrhagin, ToxoYde. Schlangengifthäinolysine, komplexe 
Natur, AVirkung. Lecithin als Komplement, Lecithide. Immunität. 
Antitoxine. 

KrOtengift (Phrynolysin), Salamandergift, Spinnengift (Arachnolysin), 
Skorpionengift. 

Fischgifte (Trachinusgift) : Ichthyotoxin . 181—214 



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Allgemeiner Teil. 

Einleitung. 

Schon kurze Zeit, nachdem der Bakteriologie durch Robert Koch 
feste Wege gewiesen waren, drang die Ueberzeugung durch, dass we- 
niger die Bakterien selbst es sind, die die verheerenden Wirkungen der 
Infektionskrankheiten hervorrufen; man erkannte bald, dass die kleinen 
Lebewesen meist nur mittelbar schädlich sind; dass es ihre chemischen 
Produkte sein müssen, die die eigentliche Noxe darstellen. 

Besonders Brieqee war es, der schon sehr frühzeitig darauf hinwies, 
dass man nach den spezifischenGiften der Bakterien suchen müsse, 
und der selbst bestrebt war, diese supponierten Gifte aufzusuchen und 
darzustellen. 

Er isolierte zuerst aus den Kultursubstraten, die durch das Wachstum 
der Bakterien verändert waren, besonders aus Fäulnisgemischen, eine 
Reihe von wohlcharakterisierten chemischen Substanzen, die Ptomaine, 
stickstoflFhaltige Basen, die zum Teil eminent toxisch waren. Indessen 
erwiesen sich diese Stoflfe nicht als die eigentlichen Bakterien- 
gifte. Diese Gifte stellen nicht die Waffe der Parasiten im leben- 
den Körper dar; die spezifischen Bakteriengifte, die zuerst den 
Namen »Toxine« als Sammelbegriflf erhielten, sind es nicht. Allmäh- 
lich hat dann der BegrifT des Toxins naturgemäß jene Spezialisierung 
erfahren, die ihn aus dem BegriiBf des aus Bakterien oder aus der von 
Bakterien belebten Zersetzungsmasse isolierten Giftstoffes umzumodeln 
bestrebt war in den Begriff des spezifischen, die spezifische Erkrankung 
hervorrufenden Bakteriengiftes. Dahin ging die Tendenz der Differen- 
zierung jenes Begriffes, ohne dass diese Tendenz immer klar zum Be- 
wusstsein, geschweige denn zum Ausdruck gekommen wäre. Zur Er- 
höhung der Begriffsverwirrung trug noch bei, dass man eine Reihe von 
Bakteriengiften, die den Eiweißkörpern nahezustehen schienen, mit 
dem Namen der Toxalbumine bezeichnete. Darunter verstand man 
zum Teil die Gifte, die wir heute als echte Toxine anzusehen haben, 
aber auch andere, die mit ihnen nichts weiter gemein haben als ihre 
scheinbar eiweißartige Natur. 

Andererseits aber war eine prinzipiell sehr wichtige und weittragende 
Folge dieser Arbeiten die Parallelsetzung dieser Bakterientoxalbumine 

OppeDheim«r, Toxine und Antitoxine. X 



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mit anderen Toxalbnminen des Tier- und Pflanzenreiches, nämlich den 
Schlangengiften und ähnlichen Toxalbnminen einerseits und den von 
KoBERT und seinen Schülern zuerst genauer bearbeiteten giftigen Pflanzen- 
eiweißen Ricin, Abrin und Krotin andererseits. Die wichtigste Kon- 
sequenz dieser Anschauung wurde erst später, besonders von Ehrlich, 
Calmette u. a. gezogen, dass nämlich thatsächlich die spezifischen 
Bakteriengifte in einer fundamentalen Eigenschaft sich mit den er- 
wähnten Zellprodukten höherer Organismen treflFen, nämlich in der Bil- 
dung spezifischer »Antikörper« im Organismus des angegriffenen 
Tieres, so dass für ihre Wirksamkeit ganz allgemein die EHRLiCHsche 
Seitenkettentheorie herangezogen werden kann. Diese Gifte sind im 
EHRLiCHSchen Sinne »Haptine« und es ist prinzipiell von geringerer 
Bedeutung, welches ihre Provenienz ist. Brieqers großes Verdienst ist 
es, zuerst die Bakterientoxine in Beziehung zu anderen bekannten Gift- 
stoflTen gebracht zu haben. Daneben ist es nicht sehr wesentlich, wenn 
Brieqers Ansichten, und zwar nicht zum mindesten durch seine eigenen 
Arbeiten, in zwei Punkten eine Modifikation erleiden mussten. Zunächst 
gelten diese festgestellten Beziehungen zu den anderen Toxalbnminen 
nicht f Ur alle von Brieger dargestellten Bakteriengifte : eine große Zahl 
derselben sind Stoflfe von nicht spezifischer Natur, nicht vergleichbar 
dem Ricin u. s. W., weil sie keine Haptine sind; es bleiben im wesent- 
lichen eigentlich nur die Gifte der Diphtherie, des Tetanus, Bac. Botu- 
linus und Pyocyaneus als Typen der echten Toxine (sowie das 
Tetanolysin, Staphylolysin und Staphyloleukocidin, wahrscheinlich auch 
die blutlösenden Gifte anderer Bakterien), zu denen sich noch einige 
andere, wahrscheinlich hierher gehörige gesellen, z. B. Cholera und 
Typhus; außerdem aber hat Brieger selbst später seinem Diphtherie- 
toxin die Eiweißnatur abgesprochen, ebenso ist sie fttr das Ricin sehr 
zweifelhaft geworden, während die Schlangengifte auch nach dem heu- 
tigen Stande unserer Kenntnisse Proteine zu sein scheinen. Indessen 
ist das prinzipiell ebenso untergeordnet, wie wir bei den so ähnlichen 
Fermenten vermutlich neben wirklichen Proteinen (Trypsin, Diastase [?]) 
auch hochmolekulare Stoff'e anderer Art (Pepsin, Invertase) finden. Der 
Begriff des eigentlichen »Toxins« ist danach für die Bakteriengifte in 
folgender Weise zu entwickeln. 

Alle Bakterien erzeugen in den sie beherbergenden Medien irgend 
welche chemische Substanzen. 

Wenn auch viele der auf verschiedenste Weise dargestellten Bakterien- 
stoflfe Produkte sekundärer Umwandlungen durch zu eingreifende che- 
mische Manipulationen sind, so ist doch sicherlich ein Teil derselben 
ein primäres Produkt des bakteriellen Stoffwechsels. 

Diese StoflFwechselprodukte sind zum Teil mehr oder weniger heftige 
Gifte. Darin unterscheiden sich generell die pathogenen Mikroben nicht 
von den für die Krankheitsentstehung gleichgiltigen. 



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— 3 — 

Wenn also auch derartige Stofife giftig sind, so haben sie doch sicher- 
lieh mit der Vergiftung des Organismus bei einer Invasion der Bak- 
terien nichts zu schaffen, auch wenn sie durch pathogene Mikroben er- 
zeugt sind. Jene Gifte, wie z. B. das Neurin, haben ihre eigenartige 
Wirkung, ob sie durch Bakterien oder rein chemisch hergestellt sind. 
Sie sind also zuerst von dem Begriff des »Toxins« abzusondern. 

Zum zweiten hat man aus den Leibern zahlreicher pathogener Mi- 
kroben durch verschiedenartige Prozeduren eine Reihe von Stoffen herge- 
stellt, die eiweißähnliche Natur besitzen, wie die Bakterienproteine Büch- 
ners, und mehr oder minder giftig sind. Aber diese giftigen Wirkungen 
sind nur sehr wenig verschieden nach der Provenienz ihrer Träger, sie 
tragen nicht den Charakter des Spezifischen, rufen niemals Erscheinungen 
hervor, die der spezifischen Erkrankung ähnlich sehen. Femer enthalten 
noch viele Bakterien in ihrem Zellprotoplasma giftig wirkende Ei- 
weißstoffe, die von dem Protein nicht zu isolieren, und auch größten- 
teils nicht spezifisch sind. 

Was bleibt nun schließlich zur Füllung des Begriffes Toxin übrig? 
Einige pathogene Bakterien erzeugen, wenn man sie in Keinkultur züchtet, 
in den Kulturflüssigkeiten gelöste Gifte, die nur durch sehr schonendes 
Vorgehen in unverändertem und konzentriertem, wenn auch nicht in 
reinem Zustand gewonnen werden können, Stoffe, die keine Ptomaine 
und keine Eiweißkörper sind (s. unten). Derartige Stoffe sind be- 
sonders aus den Reinkulturen von Diphtherie- und Tetanusbazillen 
gewonnen worden und sie sind die echten Bakterientoxine im 
engeren Sinne. In ganz analoger Weise muss man alle chemisch näher 
bestimmbaren giftigen Stoffe, die von den Zellen höherer Pflanzen und 
Tiere gebildet werden, von den Toxinen lostrennen. 

Diese bilden eine Klasse von Substanzen, die unbeschadet ihrer Her- 
kunft in ihrer Natur und eigentümlichen Wirkungsart ihre Definition finden. 

Die Toxine sind charakterisiert zunächst durch eine Summe äuß erer 
Merkmale: Sie sind von völlig unbekannter chemischer Struktur, außer- 
ordentlich labil, sehr empfindlich schon gegen geringfügige chemische 
Eingriffe, besonders aber gegen Erwärmen. Sie sind keine Eiweiß- 
körper, also keine Toxalbumine. Sie zeigen eine außerordentlich 
weitgehende Analogie mit den Fermenten. 

Physiologisch sind sie charakterisiert durch eine unter geeigneten 
Umständen außerordentlich hohe Giftigkeit, die alle anderen bekannten 
Gifte weit hinter sich lässt. Fast alle Toxine zeigen fernerhin die Eigen- 
tümlichkeit, dass sie nicht sofort wirken, sondern erst nach einer ge- 
wissen Latenzperiode , einer Inkubationszeit, ganz analog der Ver- 
giftung mit lebenden Bakterien. Sie zeigen trotz ihrer für manche Tiere 
enormen Giftigkeit, die selbst die der energischsten einfachen Gifte, wie 
der Blausäure, übertrifft, nur in wenigen Fällen (z. B. Schlangengift) die 
oudroyante Wirkung, die diesen oft eigen ist. Sie sind ferner vor allem 

1* 



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— 4 — 

charakterisiert durch die strenge Spezifizität ihrer Wirkung. Die 
Toxine zeigen eigentümliche, für ihre Gruppe charakteristische Wir- 
kungen, auf die wir unten zurückkommen werden. Daneben hat jedes 
Toxin noch eine besondere Wirkungsart, die bei den Bakterien toxinen 
einen engen Zusammenhang mit der durch ihre Mutterzelle erzeugten 
Krankheit zeigt, und beim Tetanusgift bis zur völligen Analogie wird. Sie 
sind auch in anderem Sinne streng spezifisch, d. h. sie vermögen nur ge- 
wisse Lebewesen zu schädigen, während sie andere, zum Teil eng ver- 
wandte, völlig unbeeinflusst lassen, wodurch sie in wichtige, funda- 
mental bedeutsame Beziehungen zur natürlichen Immunität treten; 
nicht minder wichtig sind ihre Beziehungen zur erworbenen Immu- 
nität dadurch, da<5S es eine grundlegende Eigenschaft der Toxine ist, 
im angegriffenen Organismus Gegengifte streng spezifischer Natur zu 
bilden, die die Gifte in vivo unschädlich machen und die, vom er- 
zeugenden Organismus losgetrennt, auch in vitro ihre spezifische, neu- 
tralisierende Wirkung auf ihr zugehöriges Toxin und nur auf dieses 
entfalten. Zu jedem echten Toxin gehört also auch ein echtes 
Antitoxin. 

Andererseits sind bisher alle Versuche, gegen einfache krystalloVde Gifte 
wahrhafte Antitoxine zu erzeugen, fehlgeschlagen. Auch die letzte dies- 
bezügliche Behauptung von Hirschlaff ^), der ein Antimorphinserum hergestellt 
haben wollte, ist von Morgenboth 2) als völlig unbewiesen und auf mangelnder 
Genauigkeit in der Einstellung der Dosis letalis minima beruhend nach- 
gewiesen worden. 

Doch nicht nur chemisch und physiologisch haben wir jetzt das 
Material in der Hand, um absolut scharf den Begriff des Toxins zu be- 
grenzen, wir haben auch noch eine willkommene Ergänzung dieser 
Definition in der theoretischen Fundierung. Ein Toxin ist ein 
Gift, das nach der EHRLiCHschen Seitenkettentheorie minde- 
stens zwei spezifische Atomgruppen besitzt, eine hapto- 
phore, die die Verknüpfung mit der anzugreifenden Zelle 
besorgt und eine toxophore, die die deletäre, die Giftwirkung 
vollzieht. Jeder Stoff, der zu bestimmten Protoplasmakomplexen eine 
spezifische Affinität, eine passende haptophore Gruppe besitzt, ist ein 
Haptin, und jedes giftige Haptin, das also noch eine toxophore 
Gruppe besitzt, ist ein Toxin. 

Wir müssen also in dieser Weise die Definition des Toxins fassen, 
und jeden giftigen Stoff, der kein Haptin ist, kein Antitoxin erzeugt, 
streng von den Toxinen sondern. 

Bei den tierischen und pflanzlichen Toxinen ist das viel leichter ge- 
schehen ; niemandem wird es einfallen, die Alkaloide u. s. w. der Pflanzen 



1) Hirschlaff, Antimorphinserum. Berl. klin. Woch., 1902. 

2 Morgen ROTH, Zur Frage d. Antimorphinserums. Berl. klin. Woch., 1903, 21. 



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— 5 — 

und die wenigen ans tierischen Sekreten und Organen zu erhaltenden 
giftigen kristalloüden Stoffe, wie z. B. die Alkaloide der Krötenhaut, 
das Adrenalin u. s. w. den Toxinen im engeren Sinne beizuordnen. 

Sehr viel wichtiger aber ist es, mit Hilfe dieser scharfen Definition 
auf dem Gebiet der Bakteriengifte Ordnung zu schaffen. 

Wir müssen zunächst alle aus Bakterien etwa zu erhaltenden, nicht 
spezifischen Stoffe, wie oben auseinandergesetzt, davon trennen. 

Was aber die Sachlage noch mehr kompliziert, ist der Umstand, dass 
es wahrscheinlich spezifische Bakteriengifte giebt, die nur von be- 
stimmten Bakteriengruppen erzeugt, spezifische Wirkungen auslösen, die 
aber, weil sie keine Haptine sind und keine Antikörper bilden, keine 
Toxine sind. Derartige Gifte scheinen z. B. bei der Tuberkulose eine 
Rolle zu spielen. Wir werden diese Gifte im speziellen Teil kurz er- 
wähnen. Außer ihnen giebt es dann noch eine ganze Reihe von sehr 
ungenügend bekannten Bakteriengiften, deren Spezifizität sowohl wie ihre 
toxinähnliche Natur noch starken Zweifeln begegnet. 

Am schwierigsten ist die Frage der Gifte, die von einigen Bakterien, 
besonders der Cholera und des Typhus erzeugt werden. Ihre Toxine 
sind in freiem Zustande kaum bekannt, die von ihnen sezernierten 
Gifte scheinen auch nicht die eigentlichen Toxine zu sein; dagegen finden 
wir bei ihnen einen anderen Typus, nämlich fest an die lebende Zelle 
gebundene Endotoxine, vergleichbar den Endoenzymen der Hefe und 
der tierischen Organe, die einer näheren Untersuchung große Schwierig- 
keiten bereiten. Wir werden darauf unten näher zurückkommen. 



Allgemeines über Toxine. 

Die echten Toxine, wie wir sie oben definiert haben, sind, um es 
nochmals zu rekapitulieren, charakterisiert durch eine Summe physi- 
kalischer und chemischer Merkmale, die wir des näheren zu besprechen 
haben werden, sowie durch die fundamentale Eigenschaft, in geeigneten 
Organismen eine Abstoßung freier haptophorer Seitenketten zu veran- 
lassen, Antitoxine zu erzeugen. 

Wenn auch jedes einzelne Toxin für sich eigene Kennzeichen besitzt, 
denen wir erst im speziellen Teil gerecht werden können, so zeigen 
doch alle echten Toxine eine Reihe gemeinsamer Eigenschaften, die es 
rechtfertigen, zusammenfassend besprochen zu werden. 

Diese Eigenschaften teilen die Bakterientoxine mit den übrigen uns 
bekannten Toxinen, den Schlangengiften, dem Gift des Aal- und 
Muränenblutes, dem Spinnen- und Krötengift, dem Ricin, 
Abrin, Krotin u. s. w. 

Gemeinschaftlich ist den Bakterientoxinen zunächst die Art ihrer 
Entstehung. Man hat sie aufzufassen nicht etwa als Produkte der 
durch die bakterielle Invasion veränderten Kulturmedien, sondern, wie 



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— 6 — 

auch Büchner^) hervorhebt, als wirkliche echte Produkte des Zell- 
protoplasmas, als Sekretionsprodukte der Bakterienzelle; gerade so wie 
die Pankreasdrtisenzelle ihrTrypsin, die Kleberzelle des Weizenendo- 
sperms dieDiastase produziert und sezemiert, so sezemieren die Bak- 
terienzellen ihre spezifischen Toxine. Dass diese bei gewissen Mikroben 
unter Umständen recht fest an dem Protoplasma haften wie bei Cho- 
lera u. s. w., ist auch durchaus nicht ohne Analogie bei den Fer- 
menten, wo sich bei den Hefenenzymen ganz dieselben Verhältnisse 
finden. 

Auf den ihnen zusagenden Nährböden bilden diejenigen pathogenen 
Mikroben, die Toxinerzeuger sind, ihre charakteristischen Gifte gewöhnlich 
schon nach sehr kurzer Zeit. Spronck^) erhielt schon nach 48 Stunden 
sehr wirksames Diphtherietoxin. 

Doch nimmt die Toxizität mit dem Alter der Kultur zu. Roux & 
Yersin^) fanden, dass dieselbe Diphtheriekultur filtriert nach 7 Tagen 
ein Kaninchen in 6 Tagen tötete, die in einem Alter von 42 Tagen in 
gleicher Dosis weit früher letal wirkte. Sproncks Diphtherietoxin hatte 
nach 5 — 6 Tagen die zehnfache Giftigkeit des 48stUndigen. Doch erreicht 
nach einer gewissen Zeit die Giftigkeit ihr Maximum. Dann beginnt 
sie, durch Zerfall des gebildeten Toxins, wieder abzunehmen (s. u. 
»Toxoide«), so dass alte Kulturen wieder weniger giftig sind. Nach 
einer ziemlich langen Zeit bleibt dann meist der Giftwert konstant. 

Die Art des Nährbodens ist naturgemäß von großem Einfluss auf 
die Entstehung des Giftes. 

Im allgemeinen werden Bouillonkulturen verwendet, meist unter 
Zusatz von etwas Pepton, auch Kulturen auf Fleischextrakten, auf Hefe- 
extrakten u. s. w. werden vielfach benutzt. 

Agar und andere Nährböden sind kaum mit Nutzen anwendbar. 
Interessant sind die Versuche, auf eiweißfreien Nährböden Toxine 
zu erzielen, so auf Asparaginlösung mit geeigneten Salzen (Armand & 
Charrin^), auf dialysiertem Harn); doch sind zufriedenstellende Resultate 
bisher damit nicht erzielt (Güinochet^), Uschinsky«). Zinno^) erklärt die 
scheinbar erfolgreichen Versuche, auf solchen eiweißfreien Nährböden 



1) Büchner, Die Bedeutung der aktiven löBlichen Zellprodukte etc. Münch. 
med. Wooh., 1897, 12. 

2) Spronck, Pr6par. de la tox. dipht. Ann. Pasteur, XII, 701, 1898. 

3) Eoux & Yersin, Contribution ä l'ötude de la diphthörie. Ibid., III, 273, 
1889; IV, 38Ö, 1890. 

*) Armand & Charrin, Transfonnation de la mattere organique axot6 etc. 
Bnll. m6d., 1891, 356; 1892, 957; ref. Centralbl. f. Bakt. XI, 248 (1892); a. a. 
Buchner, Bakteriengifte nnd Gegengifte, Müncb. med. Woch., 1893, 449. 

5) GuiNOCHET, Contrib. a T^tude de la toxine du bacille de la diphth^rie. Arcb. 
d. m6d. exp6rim., 1892, 487. 

ö) ÜSCHINSKY, Les poisons de la dipbth6rie et du chol6ra. Ibd., 1893, 293. 

7) ZiNNO, Beitr. z. Stud. d. Entstehung der Toxine. C. f. Bakt, 31, 42 (1902). 



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— 7 — 

Toxine zu erzielen, damit, dass schon sehr geringe Mengen Eiweiß aus- 
reichen, um nachweisbare Giftmengen zu produzieren. Thatsächlich 
sind die so erhaltenen Toxinmengen äußerst gering. Er selbst folgert 
aus seinen Versuchen, dass geringe Mengen Eiweiß unumgänglich 
notwendig sind. 

Im allgemeinen ist gerade dieser Faktor je nach der Art des Toxins 
so verschieden, dass wir hier auf den speziellen Teil verweisen müssen, 
wo die verschiedenen Kulturmedien, die man zur Gewinnung möglichst 
großer Toxinmengen benutzt hat, ausführlich gewürdigt werden sollen. 

Hier wollen wir nur kurz darauf hindeuten, dass eine zu große 
Acidität wie eine zu große Alkalinität des Mediums durchaus vermieden 
werden muss, und dass ganz im allgemeinen dieselben Bedingungen in 
Bezug auf Temperatur u. s. w. festgehalten werden müssen, die bei der 
Züchtung möglichst lebenskräftiger und virulenter Bakterien üblich sind. 

Ein Punkt ist aber hier noch von besonderem Interesse. Es geht 
nämlich durchaus nicht die Erzielung eines sehr lebhaften Wachstums 
und die einer sehr hochgradigen Virulenz der Bakterien stets parallel 
mit der Gewinnung sehr energisch toxischer Kulturen. 

Einerseits scheint nämlich an sich die Giftproduktion der Bakterien 
nicht eine direkte Funktion einer lebhaften Vermehrung oder eines hohen 
Virulenzgrades zusein. Giebt es doch bei der Diphtherie sogar sehr 
energisch wachsende Stämme, die völlig atoxisch und avirulent sind 

(LüBOWSKI 1). 

Auch bei den pflanzlichen und tierischen Toxinen hängt die Gift- 
produktion von den mannigfachsten physiologischen Bedingungen, dem 
Alter, der Ernährung u. s. w. ab, worauf wir im speziellen Teil des 
näheren eingehen werden. 

Andererseits aber giebt es zweifellos Mittel, die zwar das Wachstum 
und event. auch die Virulenz der Bakterien steigern, die Ausbeute an 
Toxin aber herabsetzen. Dies geschieht dadurch, dass sie das bereits 
gebildete Toxin teilweise wieder zerstören. Selbst wenn also derartige 
Mittel zugleich mit der Wachstumsenergie der Bakterien auch ihre 
Toxinproduktion steigern, so wird doch durch ihre zu energische 
Anwendung mehr Toxin zerstört als mehr neugebildet wird und das End- 
resultat ist eine Verminderung der Toxinmenge. Bei derartigen Hilfs- 
mitteln, wie es z. B. die Luftzufuhr bei Diphtheriekulturen ist, kann 
man also eine Kurve der Toxinmenge konstruieren, deren Abszisse die 
steigende Anwendung des Mittels, deren Ordinate die schließlich resul- 
tierende Toxinmenge darstellt. So lange z. B. die Luftzufuhr die Di- 
phtheriebazillen reichlicher Toxin produzieren lässt, die entgegenlaufende 
Zerstörung des fertigen Toxins durch den Luftstrom sich in geringeren 



*; LüBOWSKI, üeber einen atoxischen und avirulenten DiphtherieBtamm. Z. f. 
Hyg., 35, 87 (1900). 



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— 8 — 

Grenzen hält, wird die Kurve steigen; allmählich aber tiberwiegt der 
zerstörende Einfluss der Luft den günstigen anf die Produktion: die 
Kurve sinkt wieder. Dazwischen liegt also ein Maximum der resultieren- 
den Toxinmenge bei einer bestimmten Intensität der Luftzufuhr, dessen 
Lage natürlich von mannigfachen Bedingungen abhängig ist, wie die 
Art der Kultur, Nährboden, Temperatur u. s. w. In praxi wird sich 
dieses Optimum nur schwer realisieren lassen: die Folge sind vrider- 
sprechende Angaben über Förderung resp. Schädigung durch dieselben 
Agentien, wie wir später sehen werden. 

Aehnlich wie Luftzufuhr mögen auch andere Faktoren wirken; nament- 
lich Erhöhung der Temperatur könnte einerseits die Toxinproduktion, 
anderseits aber auch den Toxinzerfall in ganz ähnlicher Weise beein- 
flussen. Andererseits scheint es thatsächlich eine Eeihe von Mitteln zu 
geben, die die schließliche Ausbeute an Toxin beträchtlich steigern; in 
diesen Versuchen, durch geeignete Wahl der Nährböden, der Tempera- 
tur, durch besondere Zusätze u. s. w. die Toxinmenge zu erhöhen, ist 
eine beträchtliche Arbeit aufgehäuft; man kann jetzt für die wichtigsten 
Toxine höchst giftige Kulturen erzielen; doch sind diese Methoden ganz 
spezieller Natur. Eine prinzipiell für alle Toxine wichtige Methode 
ist wohl kaum vorhanden, die an dieser Stelle Erwähnung verlangte. 

Dagegen soll schon an dieser Stelle kurz darauf hingewiesen werden, 
dass die Toxinlösungen durchaus nicht immer einen einheitlichen 
Wert besitzen. Besonders zeigt sich dieser Umstand beim Tetanus- 
gift. Ganz abgesehen davon, dass der NicoLAiERSche Bacillus zwei ganz 
verschiedene Gifte, nämlich neben dem eigentlichen Krampfgift noch 
das Tetanolysin (s. d.) produziert, so zeigen außerdem einzelne Gift- 
lösungen in Bezug auf ihre spezifische Wirksamkeit sehr große Diffe- 
renzen. Während das Tetanusgift im allgemeinen ftlr Meerschweinchen 
beträchtlich toxischer ist als für Kaninchen, giebt es auch einzelne Gift- 
proben, die für Kaninchen ungefähr ebenso giftig (Tizzoni) sind als 
für Meerschweinchen. 

Behring hat für das TizzoNische Gift diese Thatsache bestätigt und 
auch in eigenen Kulturen Anteile gefunden, die ftlr Kaninchen relativ 
sehr giftig waren. Man muss also annehmen, dass das Tetanospasmin 
auch keine einheitliche Substanz darstellt, sondern aus verschieden 
wirksamen Anteilen besteht. Auch bei Diphtheriegiftien kommen ähnliche 
Verhältnisse vor. Es giebt überneutralisierte Gifte, die ftlr Meerschweinchen 
absolut indifferent, ftlr Kaninchen noch giftig sind.*) 

Sind also nun in den Kulturen der lebenden Mikroben reichliche 
Toxinmengen vorhanden, so muss es sich darum handeln, die Wirkung 
der lebenden Zellen auszuschalten, um die Gifte an sich studieren zu 



*) Näheres s. b. Ehrlich, Münch. med. Woch., 1903, 33. 



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— 9 — 

können. Dazu kann man nun entweder die Bakterien töten, oder man 
muBS versuchen, die Leiber von den Giften ganz zu trennen. 

Die erstere Methode, die also die toten Zellen nicht entfernt, kann 
uns nicht über die Wirkung des Giftes an sich Aufschluss geben, da 
auch die toten Leiber noch bestimmte chemische und physiologische Wir- 
kungen haben, die das Bild trüben müssen. Glücklicherweise ist ftlr 
die echten Toxine diese früher angewandte Methode zu entbehren, und 
thatsächlich völlig außer Gebrauch gekommen. 

Es gelingt nämlich, die echten Toxine von ihren Mutterzellen mittelst 
Filtration durch bakteriendichte Filter zu trennen. Hauptsäch- 
lich benutzt man dazu Porzellanfilter oder CHAMBERLANDSche Kerzen, 
auch Infusorienerde und Ealk. 

Es geht dabei bei Filtration größerer Mengen das Toxin restlos in 
das Filtrat über; die zurückbleibenden Zellen haben nur noch so viel 
Giftiwert, als der Menge des ihnen mechanisch anhaftenden Toxins ent- 
spricht, von dem sie durch Waschen mit physiologischer Kochsalzlösung 
befreit werden können. In ihren Leibern enthalten sie dagegen kein 
echtes Toxin mehr, das ihnen etwa durch Zerstörung ihrer Körperlichkeit 
(Aufquellen in Alkalien) entzogen werden könnte, wie das z. B. H.Kossel^) 
bei Diphtheriebazillen zeigen konnte. Wohl aber können diese toten 
Leiber noch Gifte ganz anderer Art, Bakterienprote'ine enthalten, die 
indessen mit der spezifischen Gift Wirkung nichts zu thun haben 
(s. unten). 

Die Phytotoxine finden sich in den verschiedensten Organen, be- 
sonders den Samen, aus denen sie durch Extraktion mit verdünnten 
Salzlösungen gewonnen werden können. 

Die Zootoxine finden sich in den Sekreten und im Blute der 
Tiere vor. 

Es folgt aus alledem, dass die typischen Toxine freie Sekrete 
sind; Stoffe, die physiologisch von den Zellen in die umgebenden Medien 
hinein abgeschieden werden. Sie folgen denselben Normen wie die 
echten Enzyme; in derselben Art, wie die Pankreasdrüsen das Tryp- 
sin, die drüsigen Zellgebilde der Kleberschicht die Diastase absondern, 
so sondert die Zelle des Diphtherieerregers das Diphtherietoxin ab. 

Freilich gilt das mit Sicherheit nur ftlr die typischen Toxine, be- 
sonders der Diphtherie und des Tetanus. Bei anderen liegen die Ver- 
hältnisse sehr viel unklarer. 

Wie wir später sehen werden, ist es z. B. bei Cholera und Typhus 
überhaupt noch fraglich, ob sie echte Toxine im Sinne unserer Definition 
bilden. Wenn dies aber der Fall ist, so werden sie sicherlich nicht in 
beträchtlicher Menge frei sezerniert, sondern haften zum mindesten der 
lebenden Zelle fest an. Nur beim Zerfall der Zelle nach dem Absterben 



1) H. KossEL, Zur Kenntnis des Diphtheriegiftes. C. f. Bakt, XIX, 977 (1898). 

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— 10 — 

werden sie in beschränkter Menge frei, ebenso in alternden Enltnren; 
dabei werden aber die Giftstoffe schon stark verändert, in sekundäre, 
beständigere Produkte übergeführt, die nicht mehr die Charaktere eines 
echten Haptines zeigen. Wir werden darauf später zurückkommen. 

Ein derartiges Festhaften von aktiven Stoffen in der lebenden Zelle 
ist ganz analog wie bei gewissen Fermenten *). Wir wissen, dass die 
Hefezelle außer der von ihr in geringer Menge frei sezernierten Dia- 
stase noch eine Reihe von anderen Enzymen, Invertase, Maltase u. s. w., 
enthält, die nur nach Abtötung oder Lähmui^g des Zellprotoplasmas oder 
nach Zermalmung ihrer Wand, wie die Zymase, austreten können, 
und wir wissen femer, dass die Monilia Candida ihre Invertase überhaupt 
nicht in die umgebenden Medien abgiebt. 

Hat man nun durch Filtration der Kulturen oder analoge oberfläch- 
liche Manipulationen, Extraktion der Samen u. s. w. Toxinlösungen er- 
halten, so kann man entweder die Lösung, die mit zahlreichen an- 
deren Substanzen verunreinigt ist, direkt zu physiologischen Versuchen 
verwenden. Einige ganz rohe Versuche in Bezug auf das Verhalten des 
Toxins gegen physikalische und chemische Faktoren gestattet außerdem 
auch dieses Gemisch schon. 

Zur bequemeren Aufbewahrung kann man femer diese Lösung unter 
Anwendung verschiedener Vorsichtsmaßregeln konzentrieren, ja sogar 
zur Trockne bringen, ohne das Toxin wesentlich zu schädigen. Die 
Hauptsache dabei ist Vermeidung von Temperaturen über 45^, weshalb 
man am besten im Vacuum arbeitet, femer die Abschwächung etwaiger 
Säuren oder starker Basen. 

Zur genauem Untersuchung der Toxine bedarf es hingegen umständ- 
licher Reinigungsprozesse, um sie möglichst von allen Beimengungen 
zu befreien. Das einfachste Verfahren ist die Dialyse, die indessen 
das Toxin nur von den der Lösung beigemengten Salzen und Peptonen 
befreit, die Eiweißstoffe dagegen nicht absondert. So musste man denn 
kompliziertere Methoden ersinnen, um eine möglichst weitgehende Iso- 
lierung der Toxine zu erzielen. Angewendet werden vor allem die Aus- 
fällung mittelst Ammonium- oder Magnesiumsulfat mit nachfolgender 
Dialyse und ferner die Ausfällung mittelst Schwermetallsalzen und nach- 
folgender Zerlegung der entstandenen Doppelverbindungen. Führt die 
erstere Methode nur zu festen, konzentrierteren, aber auch im ent- 
femtesten noch nicht reinen Toxinpräparaten, die praktischen Zwecken 
nutzbar gemacht werden können, so ist die zweite Methode die einzige, 
die zu einigermaßen reinen Toxinpräparaten fUhrt. Ihre Details, die 
besonders von Brieger und seinen Schülem ausgearbeitet sind, werden 
uns im speziellen Teil näher beschäftigen. Es sind außerordentlich müh- 
selige und große Sorgfalt erheischende Methoden, die im wesentlichen 



1) Oppenheimer, Die Fermente und ihre Wirkungen. IL Aufl., Leipzig, 1903. 

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— 11 — 

auf der Fällung mit Zink-, Blei- oder Quecksilbersalzen beruhen. Es 
fallen dann Doppelverbindungen der Toxine mit diesen Salzen aus, die 
nun, sei es durch Schwefelwasserstoff, sei es mit Hilfe von kohlen- 
sauren oder phosphorsauren Alkalisalzen, wieder zerlegt werden. Durch 
Filtration oder Dialyse erhält man dann Lösungen, aus denen durch 
Eindampfen im Vacuum Präparate gewonnen werden, die im günstig- 
sten Falle an Toxin sehr reich sind. Immer jedoch enthalten sie noch 
beträchtliche Mengen von Beimengungen, sei es anorganischer (Asche) 
oder organischer Natur (EiweißstofFe). Ein reines Toxin ist bis heute 
gerade so wenig bekannt, wie ein reines Enzym, und es ist auch für 
die nächste Zukunft; kaum zu erwarten, dass seine Gewinnung glücken 
wird. Selbst von ihren noch nicht reinen, wenn gleich relativ sehr 
wenig Beimengungen enthaltenden Präparaten erhielten Brieger und 
BoER so winzige Mengen, dass an eine weitere Reinigung gar nicht 
gedacht werden konnte. Auch die Versuche, auf eiweißfreien Nähr- 
böden zu reinen Toxinen zu gelangen (Uschinsky, 1. c), haben sehr 
wenig befriedigende Resultate ergeben. 

So ist denn über die chemische Natur der Toxine so gut wie 
nichts bekannt. Gerade wie die Enzyme, mit denen sie ja in engen 
Beziehungen stehen, hielt man sie zunächst für Eiweißkörper und 
nannte sie Toxalbumine. Je intensiver man sich indessen bemühte 
sie zu reinigen, desto mehr kam man zu der Ansicht, dass die Eiweiß- 
substanzen nur allerdings sehr schwer zu entfernende Beimengungen 
sind, dass aber die reinen Toxine höchstwahrscheinlich nicht Eiweiß- 
körper im gewöhnlichen Sinne sind. Und Brieger selbst, der den 
BegriflF der Toxalbumine geschaffen hatte, gelang es, Toxinpräparate 
herzustellen, die die gewöhnlichen Eiweißreaktionen nicht mehr zeigten 
(s. b. Tetanusgift); ebensowenig gaben die auf eiweißfreien Nährböden 
erzeugten Toxine diese Reaktionen. 

Auch bei anderen Toxinen hat man erfolgreiche Versuche angestellt, 
um wenigstens die mitgeführten Eiweißstoflfe sehr stark zu vermindern. 

Jacoby ^) gelang es, durch Trypsinverdauung ein so gut wie eiweiß- 
freies Ricinpräparat herzustellen. Das aktive Prinzip selbst ist gegen 
dies Verdauungsferment beständig, während dies die mitgeführten Eiweiß- 
stoffe spaltet. Da nun diese Spaltprodukte, sowie das Trypsin selbst 
bei einer Sättigung mit 50proz. Ammonsulfat nicht ausfallen, das Ricin 
aber bei dieser Konzentration schon ausgesalzen wird, so kann man 
auf diese Weise aus dem Verdauungsgemisch ein Ricinpräparat gewinnen, 
das keine Eiweißreaktionen mehr giebt. 

Das ist die einzige — negative — Kenntnis, die man von der Kon- 
stitution der Toxine hat; sonst muss man sich damit begnügen anzu- 



1) Jacoby, Die chemische Natur des Ricins. Arch. exp. Path., 46, 28 (1901;. 
üeber Klein immnnitEt Hofm. Beitr., I, 51 (1901). 



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nehmen, dass es hochmolekulare Körper sind, den EiweißstoflFen wahr- 
scheinlich verwandt, mit ihnen in gewissen Eigenschaften korrespon- 
dierend, besonders nahestehend aber den ebenfalls in ihrer Konstitution 
noch völlig rätselhaften Fermenten, mit deren Eigenschaften sie in ihren 
Reaktionen und ihrer Wirksamkeit die weitgehendsten Analogieen zeigen. 

Diese Analogieen treten besonders dann ins hellste Licht, wenn man 
die Beeinflussung der bakteriellen Toxine durch äußere Faktoren mit 
dem Verhalten der Fermente in gleicher Hinsicht vergleicht. Es ist 
fast bis in alle Einzelheiten dasselbe Bild. 

Besonders charakteristisch für die Toxine ist ihre ungemeine Empfind- 
lichkeit, zumal gegen Erwärmen. In ihrer natürlichen Lösung gehen 
sie bei Temperaturen von über 50° bald zu Grunde; 80° vernichtet 
ihre Wirksamkeit sofort, doch schon bei 45° werden sie langsam zer- 
stört. Dabei sind die Unterschiede zwischen den einzelnen Toxinen 
gering. Trockene Hitze ertragen sie dagegen gut. Feste Präparate 
können bis über 100° erhitzt werden, ohne Schaden zu erleiden; 150° 
dagegen scheint auch sie zu vernichten. 

Interessant ist, dass sie auch in wasserfreien Flüssigkeiten, z. B. 
Amylalkohol bis weit über 80° erhitzt werden können, und dass auch 
manche Salze, wie z. B. Natriumsulfat, ihre Resistenz gegen Erwärmen 
erhöhen (Büchner *). 

Tiefe Temperaturen lähmen zwar ihre Wirksamkeit, schädigen sie 
selbst aber nicht. 

Sie sind in geringem Maße durch Pergament diffusibel, nicht aber 
durch Kollodium (Bodet & Güechofp^) und durch tierische Mem- 
branen, wie Oesophagus, Blase, Dickdarm, wohl aber durch Dünndarm 
(Chassin & Moussü^). 

Alles dies ist genau wie bei den Fermenten. 

Noch empfindlicher als die Fermente sind die Toxine gegen Licht. 
In wässeriger Lösung wird sowohl Diphtherie- wie Tetanusgift vom 
Sonnenlicht wie auch vom diflFusen Tageslicht sehr bald zerstört. (Tetanus- 
gift nach KiTASATO^) in 18 Stunden). Trocken oder in Suspension in 
wasserfreien Flüssigkeiten sind sie unempfindlich gegen Licht. 

Auch der elektrische Strom kann den Toxinen schädlich sein, 
doch sind es nur Gleichströme, während hochgespannte Wechselströme 
dem Tetanusgift gar nichts schaden (Marmier^). 

Selbst das bloße Stehenlassen in Lösung, unter allen Eautelen, im 
Dunkeln, führt zur langsamen Abschwächung der Gifte, die, wenigstens 
bei der Diphtherie und einigen anderen Giften, in Toxo'ide zerfallen (s. u.). 



1) Buchner, Bakteriengifte und Gegengifte. Münch. med. Woch., 1893, 449. 

2) EoDET & GuECHOFF, Soc. Biol., 52, 965 (1900). 

3) Chassin & Moussu, Influence de la dialyse etc. Soc. Biol., 52, 694 (1900). 
*) KiTASATO, Exper. ünt. üb. d.Tet. Gift Zeitschr. f. Hyg., X, 287 (1891). 

5) Marmier, Les toxines et l'^lectricitö. Ann. Fast, X, 469 (1896). 



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— 13 — 

Bei anderen Giften ist die Existenz von Toxoiden nicht sicher nach- 
gewiesen. 

Gegen fast alle chemischen Agentien sind die Toxine sehr em- 
pfindlich. 

Sauerstoff, auch so verdünnt wie in der Luft, wirkt eminent schäd- 
lich. An der Luft, besonders bei gleichzeitiger Belichtung, verlieren die 
Toxine schnell ihre Giftigkeit, besonders das Tetanospasmin, das 
schon beim Filtrieren sehr geschwächt wird. 

Im allgemeinen sind alle Oxydationsmittel sehr schädlich, auch 
Wasserstoffsuperoxyd. Sieber^) fand, dass Calciumsuperoxyd Di- 
phtherie- und Tetanusgift vollkommen entgiftet (1000 letale Dosen in 
wenigen Stunden), ebenso Abrin (5000 let. D. durch 0^5 g Ca02). Er 
fand ferner die Oxydasen der tierischen Gewebe auf bakterielle 
Toxine wirksam, auf Abrin aber nicht. Auch bei gleichzeitiger Injek- 
tion von Oxydase und Toxin blieb das Versuchstier gesund. Auch eine 
pflanzliche Oxydase (aus der Schwarzwurzel) erwies sich als wirksam, 
die Peroxydasen, die nur bei Gegenwart von Hydroperoxyd Guajak 
bläuen, dagegen nicht. Interessant ist seine Angabe, dass Fibrin aus 
dem Blute hochimmuner Pferde eine das Diphtheriegift zerstörende 
Oxydase enthalten soll, gewöhnliches Fibrin nicht. Ob das nicht 
eher noch anhaftendes Antitoxin gewesen ist, lässt sich dabei aber 
nicht ausschließen. 

Ueber die Wirkung anderer chemischer Stoffe ist einiges wenige 
bekannt. Starke Basen und Säuren wirken natürlich vernichtend, schwache 
Basen schädlich, sehr schwache Säuren, besonders die organischen, wahr- 
scheinlich fördernd. Ueber den Einfluss von Neutralsalzen und zahl- 
reichen anderen Stoffen speziell auf Tetanusgift haben Fermi & 
Pebnossi^) Untersuchungen angestellt. Sie wirken bald im guten, bald 
im schlechten Sinne auf die Toxizität. 

Indifferente Gase, wie CO2, H, CO, sind ohne Einfluss. Nur vom 
H2S beobachtete Brieger^) eine schädigende Einwirkung auf Tetanus- 
toxin, wenn er es 4 Tage damit im verschlossenen Rohr digerierte. 

Protoplasmagifte, wie Karbol, Chloroform u. s. w. sind ohne wesent- 
lich schädigende Bedeutung. Alkohol ist sehr schädlich. Nach Sal- 
KOWSKi*) ist besonders Salicylaldehyd ein energisch schädigendes Mittel, 
femer aber auch Chloroform und Formalin. 

Jod und Schwefelkohlenstoff haben wahrscheinlich eine ganz be- 



1) SiEBBR, Ueber die Entgiftung der Toxine durch die Superoxyde. Z. phyBiol. 
Gh., 32, 673 (1901). 

2) Fermi & Pernossi, üeber das^Tetanusgift. Zeitschr. f. Hyg., XVI, 385 (1894,. 

3) Bribger, Weitere Erfahrungen über Bakteriengifte. Ebd., XIX, 111 (1895). 
4} Salkowski, Ueber die Wirkung der Antiseptica auf Toxine. Berl. klin. 

Woch., 1898, Ö45 (Nr. 25). 



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sondere Wirkung, insofern sie nur die toxophore Gruppe anzugreifen 
und zur Toxoidbildung zu fuhren scheinen (Ehrlich i) ; ähnlich scheint 
Thymusextrakt zu wirken (Brieger, Kitasato & Wassermann 2). 

Schicksale der Toxine im Organismus. 

Nach Einführung von Toxinen in die Blutbahn empfänglicher Tiere 
verschwinden sie ziemlich schnell. Nach kurzer Zeit ist das Blut einer- 
seits völlig toxinfrei, wie die Versuche von Bomstein, Croly, Brunner 
am Diphtheriegift (s. d.) darthun, und andererseits ist das Gift bereits 
irgendwo fest gebunden, im Latenzstadium seiner Wirkung, wie die 
Arbeiten von Dönitz^) u. a. beweisen. Dönitz konnte vergiftete Tiere 
schon nach wenigen Minuten durch Antitoxininjektionen nicht mehr 
retten, da das Gift dem Gegengift nicht mehr frei gegenübertrat. Nur 
durch sehr große Dosen lässt sich noch binnen einer gewissen Zeit die 
Bindung Toxin-Körperzelle zerreißen, die also latent bereits vorhandene 
Intoxikation heilen; doch hat auch dies eine zeitliche Grenze; beson- 
ders beim Tetanus können nach Ablauf einer bestimmten Frist selbst 
ungeheuere Dosen Antitoxin nicht mehr retten. Hierin liegt eine der 
Ursachen für die mangelhaften therapeutischen Erfolge in der Heil- 
serumtherapie des Tetanus. Nach den neueren Ansichten über den 
Tetanus kann das Antitoxin dem Toxin nicht in die Nervenbahnen 
hinein folgen. (Näh. s. b. Tetanus.) 

Das Toxin als solches entzieht sich im Körper den Nachforschungen, 
wenn man geringe Dosen einführt. Injiziert man empfänglichen Tieren 
eine einfach letale Dosis oder ein geringes Multiplum dieser Menge, so 
verschwindet das Gift rasch aus dem Blute und lässt sich auch in den 
Organen mittelst des Tierversuches nicht mehr nachweisen*). Das Gift 
ist dann also an die spezifisch empfänglichen Organe fest gebunden. 
Auch durch den Harn wird es nicht ausgeschieden (Goldberg ^). 

Bei sehr großen Dosen dauert das Verschwinden einige Zeit, es kann 
dann auch im Harn auftreten^). Es ist dies auch ganz erklärlich; auf 
so plötzliche Ueberschwemmung mit gewaltigen Giftmengen sind die 
Rezeptoren nicht eingerichtet, so dass dann auch ein kleiner Teil des 

1) Ehrlich, Die Wertbemeßsnng des Diphteriebeilßernms. Klin. Jahrbuch, Vf. 

2) Brieger, Kitasato & Wassermann, Immunität u. Giftfeatigung. Z. f. Hyg., 
XII, 137 (1892). 

3) DÖNITZ, üeber das Tetanusantitoxin. Deutsche med. Wochenschr., 1897, 428. 
^) Die Angabe von Salter, The elimination of bacterial toxins, Lancet, 1898, 

I, 152, dass Toxine in den Schweiß tibergehen sollen, ist wohl nicht genügend 
gestützt 

^) Goldberg, Ueber Ausscheidung des Tetannsgiftes durch die Nieren Sekretion. 
Centralbl. f. Bakt, 26, 647 (1899), vergl. aber Cobbett, Excretion of Dipht. Tox. 
in the urine, Brit. med. journ., 1900, I, 21, der es im Harn aufgefunden hat. 

^) S. bes. Brunner, Z. Kenntnis d. Tetanusgiftes. Zeitschr. f. klin. Med., 31, 
367 (1897) (Litteratur). 



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— 15 — 

Toxins die Nierenbarriere durchbricht und im Harn erscheint. Die That- 
sache des Verschwindens des Toxins gab einen der Gründe für die 
Aufstellung der sog. »Fermenttheorie« des Tetanus ab: Das echte 
Toxin soll erst sekundär im Organismus ein anderes Gift abspalten, auf 
das die Antikörper nicht mehr reagieren (darum soll der Tetanus nach 
der Vergiftung nicht heilbar sein [s. o.]), und das ohne Inkubationszeit 
schnell, alkaloidähnlich, wie Strychnin wirken soll. Coürmont^) u.a. 
wollen bisweilen ein solches Gift in den Organen von Tetanusleichen 
gefunden haben. Wir werden an geeigneter Stelle diese Theorie ein- 
gehend prüfen und zu zeigen versuchen, dass sie zum mindesten 
überflüssig ist; das Verschwinden der Toxine einerseits und die Nicht- 
heilbarkeit andererseits folgen ohne Hilfshypothesen aus der Seiten- 
kettentheorie ganz ohne Zwang. 

Dies gilt aber alles nur für die giftempfindlichen Tiere. Wesentlich 
anders gestaltet sich das Schicksal der Toxine, wenn sie in die Blut- 
bahn refraktärer, von Natur immuner Tiere gelangen. 

Die natürliche Immunität ist eine durchaus noch nicht in allen Einzel- 
heiten aufgeklärte Frage. Sie ist aber sicherlich ein außerordentlich 
komplexes Phänomen, gründlich verschieden besonders sind ihre Er- 
scheinungsformen und ihre Ursachen in Bezug auf die natürliche Im- 
munität gegen Gifte einerseits und gegen lebende Bakterien andererseits. 
Bei den Toxinen kommt nur die natürliche antitoxische Immunität 
in Frage. 

Diese kann a priori zwei Ursachen haben. Entweder finden sich 
im Körper des natürlich immunen Tieres Gegengifte, die das einge- 
drungene Gift paralysieren, oder die Zellen des Tieres sind gegen das 
Gift immun: es ist für sie ein völlig indifiFerenter StoflF. 

Beides kommt vor; wir werden später sehen, dass normale Sera, 
speziell Pferdeserum, Antitoxine enthalten, die gegen kleine Toxindosen 
schützen; interessant ist vor allem, dass nach Wassermann ^j ca. 80 
bis 8b ß^ aller Menschen nicht unbedeutende Mengen Antitoxin gegen 
Diphtheriegift in ihrem Serum enthalten. Jedoch sind diese Thatsachen 
nicht allein geeignet, die natürliche antitoxische Immunität zu erklären, 
denn solche Antitoxine finden sich ausschließlich in den Seris empfäng- 
licher Lebewesen. Dagegen enthalten gerade die normalen Sera 
der refraktären Tiere keine Spur von Antitoxinen. 

Diese Thatsache war schwer verständlich, bis es Ehrlich gelang, 
sie durch seine Seitenkettentheorie nicht nur zu erklären, sondern sie 
geradezu zu einer der festesten Stützen seiner Anschauung zu machen. 
Wo keine passenden Rezeptoren (empfindliche Gruppen in den Körper- 



*) S. dar. V. Leyden-Blümenthal, Der Tetanus. Nothnagels Handb., Wien 1901. 
2} Wassermann , üeber die persönliche Disposition u. Prophylaxe gegen Di- 
phtherie. Z. f Hyg., XIX, 408 (1895). 



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Zellen) sind, kann kein Toxin angreifen; es besteht also Giftfestigkeit; 
ebensowenig kann aber in solchen Fällen eine Abspaltung von Seiten- 
ketten, eine Antitoxinbildung eintreten. Das Blut absolut refrak- 
tärer Tiere darf also nach dieser Anschauung keine Antitoxine enthalten. 

Interessant aber ist die Frage, wie sich in solchem Organismus 
die in die Blutbahn eingefllhrten Toxine verhalten. Es war durchaus 
möglich, dass diese leicht zersetzlichen, so außerordentlich empfindlichen 
Substanzen in der Blutbahn schnell zerstört werden könnten, auch ohne 
ihre schädlichen Wirkungen ausgeübt zu haben, oder dass sie sehr 
schnell durch die Exkrete wieder aus dem Körper herausgeschafft werden 
würden. 

Beides ist nicht der Fall. Wir finden das sonderbare Schauspiel, 
dass diese so äußerst aktiven Substanzen, die unter günstigen Bedingungen 
Wirkungen von geradezu staunenerregender Energie entfalten, im Blute 
der refraktären Tiere wie die harmlosesten, indifferentesten chemischen 
Stoffe relativ lange Zeit unverändert bleiben, bis sie schließlich lang- 
sam in den Stoffwechsel hineingezogen und allmählich restlos verbrannt 
werden. 

Es geht daraus hervor, dass bei diesen Tieren die Avidität zwi- 
schen Gift und Körperzelle eine viel geringere sein muss, als bei 
empfänglichen. Zwischen empfänglichen und refraktären Tieren herrscht 
aber kein absoluter Unterschied, sondern nur ein gradueller; die Avi- 
dität der Körperzellen (Rezeptoren) nimmt allmählich ab vom hoch- 
empfänglichen bis zum äußerst wenig empfänglichen Tier. So kreist 
bei der Taube das Tetanusgift in einer für Mäuse vielhundertfach töd- 
lichen Dosis unverändert im Blute. Giebt man aber noch höhere Dosen, 
so erkrankt die Taube. Es liegt hier also keine völlige Immunität vor, 
sondern nur eine sehr geringe Avidität der Rezeptoren. Noch geringere 
Avidität besitzen nach Metschnikoff ^) und Fermi & Pernossi (1. c.) 
einige poikilotherme Tiere. 

Metschnikoff fand, dass bei Fischen, Schildkröten, Alliga- 
toren sowie Arthropoden sich das Toxin unverändert im Blut erhält, 
ohne Antitoxin zu erzeugen; nur bei Alligatoren erhielt er nach langer 
Einwirkung (58 Tage) etwas Antitoxin, ebenso bei alten Kaimans, bei 
denen er durch Erwärmen der Tiere auf 30° diese Antitoxinbildung in 
wenigen Tagen erzielen konnte. 

Irgend welche Krankheitserscheinungen konnte er dabei nicht beob- 
achten. Ganz ähnliche Verhältnisse fanden Fermi & Pernossi bei 
Schlangen, Tritonen und Turteltauben. 

Metschnikoff fand auch bei Skorpionen, bei denen weder Vergif- 
tung noch Antitoxinbildung eintrat, das Tetanustoxin noch nach einem 
Monat in der Leber wirksam wieder. 

1) Metschnikoff, Influence de rorganigme sur las toxines. Ann. Fast, XI, 1897, 
801; Xir, 1898, 81. — Der 8., Iramnnität, deutsch v. Meyer, Jena 1902, S. 264. 



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— 17 — 

Mit besonderem Eifer hat man das Huhn als Versuchstier für Tetanus- 
gift benutzt, weil es zwar sehr widerstandsföhig, aber doch nicht völlig 
refraktär gegen Tetanus ist. Metschnikoff giebt an, dass man bei 
Hühnern das Toxin im Blut und den Ovarien wiederfinden kann, und 
dass sich später geringe Antitoxinmengen zeigen; Asakawa^) fand, dass 
Htihnerblut das eingeführte Toxin bis zum 7. Tage fast unvermindert 
aufbewahrt, und dass es dann langsam verschwindet, ohne ausgeschieden 
zu werden. 

AsAKAWA fand im Htihnergehim und Rückenmark gar kein Toxin, 
während er es sonst in allen Geweben fand; das liegt wohl vor allem 
daran, dass in den anderen Geweben das darin enthaltene Blut Toxin- 
gehalt vortäuschte, während im Zentralnervensystem nur wenig Blut vor- 
handen ist; andererseits ist es aber auch sehr wahrscheinlich, dass ge- 
ringe Toxinmengen doch dort durch Bindung an einzelne Rezeptoren 
verschwinden; denn absolut refraktär ist eben das Huhn gegen Tetanus 
nicht; und man kann auch geringe antitoxische Wirkung des Hühner- 
gehirnbreies u. s. w. konstatieren. Dafür spricht auch, dass das Huhn 
bei direkter intercerebraler Einführung von Tetanusgift an Tetanus 
erkrankt. 

Nach der Anschauung von Ehelich und Wassermann ist also die 
mangelnde Avidität zwischen Toxin und Körperzelle (Receptor) 
die Hauptursache der natürlichen antitoxischen Immunität. 
Wo das Gift frei kreist und von den Rezeptoren gar nicht oder nur in 
geringen Mengen gebunden wird, kann die toxophore Gruppe nicht ener- 
gisch in Wirksamkeit treten; eine schwere Schädigung bleibt also aus. 

Indessen ist auch die mangelnde Avidität nicht immer der Grund 
der natürlichen Immunität. So fand Mokgenroth 2) beim Frosch, dass 
das Tetanusgift schon in der Kälte fest gebunden ist, ohne dass das Tier 
erkrankt; hier ist also die toxophore Gruppe im wirksam; ihre Wirkung 
tritt aber sofort hervor, sobald man den Frosch auf ca. 30° erwärmt. 

Diese Anschauungen über die Avidität des Giftes zur lebenden Zelle 
und die spezifische Bindung werden gestützt durch experimentelle Be- 
funde. Wassermann 3) fand, dass frische Zentralnervensystemsubstanz 
empfänglicher Tiere beträchtliche Mengen Tetanusgift bindet. Ueber- 
einstimmend damit fanden Metschnikoff und Asakawa, dass das Ge- 
hirn u. s. w. wenig empfänglicher Tiere wenig bindet, um so weniger, 
je weniger empfänglich das Tier ist. So bindet Hühnergehim schwach. 



^) Asakawa, Die Basis der natürl. Immun, des Hahnes gegen Tetanas. Centralbl. 
f. Bakt, 24, 166 (1898). 

3) MoRGENROTH, ZoT Kenntnis des Tetanas des Frosches. Arch. intemat. d. 
Pharmacodyn.,VII, 266 (1900). S.A. 

^ Wassermann &TAKAEi, lieber tetanasantitoxische Eigenschaften des Central- 
neryensystems. Berl. klin. Wochenschr., 1898, S. 5. — Wassermann, Weitere Mitteil, 
über Seitenkettenimmanität, ebd., 1898, 209. 

Oppenheimer, Toxine and Antitoxine. 2 



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— 18 — 

Sehildkrötengehim gar nicht. Eine weitere Unterstützung dieser An- 
schauung liefern Versuche, die darthnn, dass bei denjenigen Tieren, bei 
denen sich das Tetanusgift intra vitam auch an Rezeptoren bindet, die 
nicht an Zellen des Zentralnervensystems haften, wie z. B. bei Ka- 
ninchen, auch die Emulsionen anderer Organe, z. B. der Milz, Tetanus- 
gift binden. (Wassermann.) 

Es ist überhaupt nicht generell der Fall, dass sich Rezeptoren nur 
in den Organen finden, in denen das Gift seine deletären Wirkungen 
entfaltet. Es ist häufig, dass auch in anderen Organen Bindung und 
Antitoxinbildung statthat, wo das Toxin wenig schädigend wirkt. Giffc- 
wirkung und Antikörperbildung sind zwei verschiedene Prozesse, die 
unter Umständen auch räumlich getrennt verlaufen können. 



Schicksale der Toxine im Digestionstractus. 

Besonderes Interesse bot die Frage, was aus den Toxinen wird, 
wenn sie vom Magen oder Darmkanal aus eingeführt werden. Alle 
Beobachter sind darin einig, dass alle Toxine, auch Schlangengift u. s. w., 
mit alleiniger Ausnahme des Ricins, vom Magen aus überhaupt un- 
wirksam sind. Dass diese Toxine auch vom Mastdarm aus nicht wirken, 
zeigte GibierI). Charkin & C assin 2) gaben an, dass vom Darm aus 
Toxine resorbiert werden, wenn die Schleimhaut lädiert wird. 

Nencki & ScHOüMOW-SiMANOWSKi^) fanden, dass selbst große Dosen 
von keinem Teil des Verdauungstractus aus resorbiert werden, dass nur 
bei ungeheueren, mehr als 100000 fach letalen Dosen schließlich Ver- 
giftungserscheinungen auftreten. 

Im großen und ganzen werden also Toxine vom normalen Intestinal- 
tractus aus nicht resorbiert. Sie müssen also entweder unverändert 
passieren und sich im Kote wiederfinden, oder sie werden restlos zer- 
stört. Das erstere nahm für Tetanus Ransom^) an, doch haben alle 
Nachuntersucher, besonders Nencki & Schoümow-Simanowski (1. c.) 
und ÜARRifiRE«^) selbst bei sehr großen Gaben (100000 fach letale Dosis) 
keine Spur im Kote wiederfinden können, ebensowenig fand Carriäre 
irgend welche antitoxische Funktion des Serums nach Einführung des 

i) GiBiER, Effets prodaits par 1. toxines etc. injeot^es dans le rectam. Sem. 
m6d., 1896, 202. (Ref.) 

2) Gharrik & Cassin, Fonctions protectrices actives de la maqueuse intesti- 
nale. Ibid., 1895, 54Ö. 

3) Nencki & Schoumow-Simanowski, Die Entgiftung der Toxine durch die 
VerdaunngsBäfte. Centralbl. f. Bakt., 23, 840 (1898). 

4) Ransom, Das Schicksal des Tet. Giftes nach seiner intestinalen Einverlei- 
bung. Deutsche med. Woch., 1898, 117. 

5) CARRiijEE, Toxines et digestion. Ann. Fast, XIII, 435, 1899 (dort Litterator- 
übersicht). — Ders., Du sort de la toxine t^taniqne introdnit dans le tube digestif. 
Soc. Biol., 51, 179 (1899). 



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— 19 — 

Toxins per 08. Repin^) fand zwar Abrin, aber weder Diphtheriegift 
noch Cobragift in den Faeces wieder. 

Es wird also zerstört. Dafür können drei Faktoren in Betracht 
kommen: Die lebende Darmwand, die Darmbakterien (Feemi & 
Peenossi) nnd die Sekrete des Darmes. 

Nach den übereinstimmenden Resultaten der an PAWLOWschen Hunden 
ausgeführten Versuche von Nencki (1. c.j und den von C abrühre (1. c.) 
mit Fermentpräparaten angestellten, sind es unzweifelhaft die Ver- 
dauungsfermente als solche, die die Toxine entgiften. Carbi£be 
fand schon die Speicheldiastase schädlich, Pepsin nicht sehr wirk- 
sam, Trypsin schon eher, besonders aber die Galle. Nencki erzielte 
mit seinen reinen sterilen Fistelsäften folgende Ergebnisse: Pepsin an 
sich zerstört Bakteriengifte (Abrin nicht). Die Säure ist dabei gleich- 
giltig, da nach fast völliger Neutralisierung das Resultat das gleiche 
war, wie auch schon Charrin^) 3) gefunden hatte. Pankreassaft allein 
zerstört Diphtherietoxin besser als Tetanustoxin. Dieses ist besonders 
gegen eine Mischung von 3 Teilen Pankreassaft und 1 Teil Galle 
empfindlich. 

Eine Immunisierung durch gleichzeitige Einführung von Galle gelang 
nicht. Charrin & Lbvaditi^) injizierten Diphtheriegift (100 letale 
Dosen) in frisch herausgenommenes Pankreas und fanden es nach 22 
Stunden völlig zerstört Muskelplasma oder auf 70° erwärmtes Pankreas 
waren wirkungslos. Die Darmschleimhaut und die Bakterien des Darmes 
sind nach Carri^re nicht anzuschuldigen. 

Auch Baldwin & Levene«^) fanden, dass Pepsin, Trypsin und Papa- 
yotin das Diphtherietoxin zerstören. 

Trotzdem nimmt wieder Caxo-Brüsso ^) an, dass es doch der Schleim- 
haut selbst zuzuschreiben ist, dass das Tetanusgift im Darm zerstört wird. 

Wirkungsart der Toxine. 

Die Toxine wirken, wie oben bereits auseinandergesetzt, vom Ver- 
dauungskanal ans absolut nicht. Man muss sie also dem Organismus auf 
anderen Wegen zuführen. Die gebräuchlichste Methode ist die sub- 



1) R^piN, SoT rabsorption de Tabrine par les maqueuses. Ann. Fast, IX, 517 
:1895). 

^ Charrik, Action des bucs digestifs sur les polBons microbiens. Arch. de 
phyB., 1898, 67. 

3) Charrin & LEFivRE, Action de la pepsine bot la toxine dipht. See. BioL, 
49, 830 (1897), Sem. m6d., 1897, 296. 

4) Charrin & Levaditi, Action du pancr^as but la toxine dipht. See. Biol., 
51, 215 (1899). 

5) Baldwin & Levene, Einw. proteolyt. Fenn, auf Bakterientoxine. Jonm. oi 
med. reBearch., VI, 120; Maly Jb., 1901, 953. 

«) Cano-Brüsso, Untergang d. Tetannsgiftes im Darm. Maly Jb., 1901, 914. 

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— 20 — 

kutane Injektion, gerade wie bei der Vergiftung mit lebenden 
Bakterien. 

Noch wirksamer sind die Einführungen direkt in die Blutbahn (intra- 
venös) femer intraperitoneal nnd intercerebral, resp. subdural, wie man 
sie namentlich bei Tetanus- und Gonokokkengiften angewendet hat, und 
die bisweilen angewendete Einspritzung in die Nerven nach Homän. 

Die intercerebrale Injektion ist besonders dort von Bedeutung, wo 
entweder das Gift auf seiner Verbreitung im Körper von Rezeptoren 
anderer, weniger empfindlicher Organe abgefangen wird (Tetanus des 
Kaninchens) oder wo die Rezeptoren im Gehirn nicht sehr zahlreich 
sind, so dass nur konzentriertes Toxin eine schwere Schädigung be- 
dingen kann (Tetanus des Huhnes). 

Bei der Wirksamkeit der Toxine sind namentlich zwei Punkte von 
grundlegender Wichtigkeit: die Spezifizitätund die Inkubationszeit. 

Die Spezifizität ist eine der hervorstechendsten Eigenschaften der echten 
Toxine. Zwar findet man auch mehr oder weniger weitgehende Gift- 
festigkeit gegen krystallo'ide Gifte: bekannt sind die relative Unschäd- 
lichkeit des Kantharidins fttr den Igel, des Atropins für Tauben. Doch 
sind das nur Abschwächungen des Giftwertes, keine absoluten Resistenzen. 
Die Bakterientoxine aber sind zum Teil völlig unschädlich für refraktäre 
Tiere, während sie auf empfindliche sehr energische Wirkungen ausüben. 

Das Wichtigste aber dabei ist, dass die refraktären Tiere das Gift 
nicht etwa zerstören, sondern dass es als vollkommen gleichgiltiger 
Stoff unverändert in ihrem Blute kreist 

So entsteht das paradoxe Phänomen, das wir soeben ausftlhrlich 
geschildert haben, dass man mit dem Blute eines anscheinend völlig 
gesunden Huhnes, dem man große Dosen Tetanusgift injiziert hat, Mäuse 
mit tödlichem Tetanus vergiften kann. Wo eben das Toxin keine 
passenden Rezeptoren findet, da kann es nicht eingreifen : die toxophore 
Gruppe tritt gar nicht in Wirksamkeit, infolgedessen ist das Toxin ein 
vollkommen indifferenter Körper, den der Körper so wenig beachtet, 
dass er ihn nicht einmal schnell zu zerstören versucht. Auch diese 
Erscheinung ist wohl aus der Seitenkettentheorie zn erklären; alle 
Nahrungsstoffe, soweit sie nicht einfach chemisch durch die Säfte und 
ihre Fermente zerlegt werden, sollen ja nach Ehrlich als Haptine ge- 
bunden und so in den Machtbereich der destruktiven imd assimilato- 
rischen Kräfte des Protoplasmas gebracht werden. Da aber das Toxin 
überhaupt nicht gebunden wird, wird es auch gar nicht zerstört, nicht 
einmal den Nährstoffen gleich behandelt. 

Die Spezifizität der echten Toxine fällt völlig mit der der lebenden 
Bakterien zusammen. 

Charakteristisch ist feruer für die meisten bisher bekannten Toxine, 
dass sie nicht momentan oder nach ganz kurzer Zeit, wie die meisten 
einfachen kristalloiden Gifte ihre Wirkungen entfalten, sondern dass 



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— 21 — 

ihre Toxizität sich erst nach Ablauf einer bestimmten Zeit, der In- 
kubationszeit kundgiebt. Auch darin gleichen die Bakterientoxine 
völlig der Wirksamkeit ihrer lebenden Mutterzellen. Die Inkubationszeit 
schwankt nicht nur mit der Natur der Toxine, sondern ist auch von 
anderen Faktoren, der zugeflihrten Dosis, der Körpertemperatur n. s. w. 
abhängig. Doch hat die Abhängigkeit speziell von der Dosis eine 
Grenze; es verhält sich nicht etwa die Inkubationszeit umgekehrt pro- 
portional der Toxinmenge; selbst bei vielfach tödlichen Dosen bleibt eine 
gewisse Inkubationszeit bestehen, die dann durch keine weitere Erhöhung 
der Dosis mehr verkürzt werden kann. Nach Courmont & Doyon^) ist 
z. B. bei Meerschweinchen die Inkubationszeit für Diphtherietoxin bei 
der einfachen Dos. let 15 Stunden, lässt sich aber durch die größten 
Dosen (90000 fach Dos. let.) nicht unter 12 Stunden herabdrücken. Ein 
sehr interessantes Phänomen ist hierbei, dass man beim Tetanus des 
Frosches durch Abkühlen die Inkubationszeit beliebig verlängern kann; 
wenn man einen Frosch nach der Einführung des Giftes dauernd bei 
8 — 10® hält, erkrankt er überhaupt nicht, bei 30° tritt dagegen nach 
einer bestimmten Zeit der tödliche Tetanus ein; unterbricht man nun 
das Erwärmen, so kann man den Frosch beliebig lange bei 8° be- 
wahren; bei steigender Temperatur tritt dann nach Ablauf des Restes 
der Inkubationszeit der Starrkrampf auf (Morgenroth). 

Bei einigen anderen Toxinen, besonders beim Schlangengift fehlt 
diese Inkubationszeit indessen. Sie wirken außerordentlich schnell. 



Konstitution der Toxine. 

Das Charakteristische für jedes Toxin ist, dass es ein Haptin ist, das 
heißt eine haptophore und eine toxophore Gruppe enthält. 

Die Konstitution der meisten Bakterientoxine ist damit festgestellt; 
sie sind nach der EnRLiCHschen Terminologie einfache Haptine 
erster Ordnung. 

Andere sind aber komplizierter gebaut. So hat das Ricin und das 
Abrin außer seiner toxischen Eigenschaft noch die weitere Fähigkeit, 
rote Blutkörperchen zu agglutinieren. 

Es bestand nun die Frage, ob diese zweite Eigenschaft etwa einem 
eigenen, in den gewöhnlichen Eicinpräparaten stets mit vorhandenen 
aktiven Prinzip zuzuschreiben sei, oder ob das Ricin selbst diese Doppel- 
fähigkeit besitzt. Dass die toxische Eigenschaft von der agglutinieren- 
den trennbar ist, lässt sich u. a. dadurch erweisen, dass Verdauung durch 
Pepsinsalzsäure die toxische Eigenschaft bald vernichtet, die aggluti- 



1) Citiert nach Deutsch & Feistmantel, Die Impfstoffe und Sera. Leipzig 
1903, S. 40. 



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— 22 — 

nierende aber bestehen lässt (Jacoby^), Michaelis & Oppenheimer ^), 
Es war also möglich, dass Ricinustoxiii nnd Ricinnsagglutinin geradeso 
getrennte Substanzen wären, wie Tetanospasmin und Tetanolysin, zwei 
verschiedene Gifte der Tetanuskulturen. 

Während sich aber bei diesen nachweisen ließ, dass sie getrennte 
Substanzen sind, die in verschiedenen Kulturen in ganz verschiedenem 
Verhältnis sich vorfinden, und zwei voneinander verschiedene 
Antikörper geben, stellte sich beim Ricin durch ähnliche Versuche 
das G^enteil heraus. Das Toxin wie das Agglutinin besitzen die- 
selbe haptophore Gruppe, da sie nur ein Antiricin bilden (Jacoby). 

Das Ricin hat also eine kompliziertere Struktur. Er hat neben einer 
haptophoren zwei ergophore Gruppen, eine toxische und eine agglu- 
tinierende, ist also ein komplexes Haptin erster Ordnung. (Näheres s. 
b. Ricin.) 

Noch komplizierter und unklarer liegen die Verhältnisse bei anderen 
Toxinen. Auch hier finden sich sehr häufig außer der toxischen noch 
andere Wirkungen, besonders hämolytische, so namentlich beim Aalblut 
und beim Schlangentoxin. Hier ist noch nicht mit Sicherheit entschieden, 
ob die lytischen Prinzipien eigene Stoffe sind. Doch ist es z. B. beim 
Schlangengift wahrscheinlich. Und hier entsteht nun die weitere Frage, 
ob die Lysine wie die Toxine Haptine erster Ordnung sind, d. h. an 
einem Komplex haptophore und ergophore Gruppen enthalten; oder ob 
sie sich in ihrer Konstitution nicht mehr den Haptinen zweiter Ordnung 
nähern, wie es die Hämolysine der normalen und der Immunsera sind. 
Diese enthalten haptophore und ergophore Gruppen nicht an einem Kom- 
plex; sondern sie besitzen einen Amboceptor mit zwei haptophoren 
Gruppen und ein Komplement, das sich an den mit dem Receptor 
der Zellen verbundenen Amboceptor an dessen komplementophile Gruppe 
haftet, und dadurch erst die hämolytische Wirkung herbeiftlhrt. 

Die letzten Befunde am Cobrahämolysin weisen darauf hin, dass 
dieses Gift thatsächlich eine so komplexe Form besitzt, dass es einen 
Amboceptor hat, der einerseits durch ein in den roten Blutkörperchen 
selbst sich findendes Endkomplement, andererseits aber auch durch 
Lecithin komplettiert und wirksam gemacht wird (Kyes und Sachs). 
Wir werden beim Schlangengift darauf zurückkommen. 



Physiologische Aktion der Toxine. 

Zwar zeigen die Bakterientoxine vor allem ihre spezifischen Wir- 
kungen auf den Organismus, die wir im speziellen Teil genauer zu be- 
ll Jacoby, üeb. Ricinimmunität. Hofm. Beitr. z. ehem. PhysioL, I, ö7 (1901). 
2) Michaelis & Oppenheimer, üeb. Immnnität geg. Eiweißkörper. EngelmannB 
Arch., 1902, Suppl.-H. 



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— 23 — 

handeln haben werden, doch sind ihnen auch einige Allgemeinreaktionen 
gemeinsam, die wir wenigstens kurz erwähnen wollen. 

Sie wirken vor allem anf das Allgemeinbefinden, indem sie Schwäche, 
Prostation und schließlich Kollaps hervorrufen. Diesen Erscheinungen 
liegt wohl hauptsächlich eine deletäre Wirkung auf die Herzaktion 
zu Grunde, die sich in Sinken des Blutdruckes, verbunden häufig mit 
einer Verminderung der Schlagfolge und schließlich Lähmung des Herzens 
äußert Doch sind die Herzwirkungen bei den einzelnen Toxinen nach 
der vergleichenden Untersuchung von Bardier^) verschieden. 

Eine fast regelmäßige Erscheinung ist eine Hypothermie, mit oder 
ohne vorhergehendes Fieber. 

In der Haut und dem Unterhautzellgewebe erzeugen sie bei sub- 
kutaner Injektion vielfach Infiltrationen, Abszesse und Nekrosen. Aus- 
fall der Haare wird häufig beobachtet. 

Auch innere Organe, zum Beispiel der Darmtractus wird meist 
geschädigt (Durchfälle u. s. w.) 

Auch die Leber bleibt nicht unbeteiligt, wie speziell Teissier & 
GüiNARD^) genauer untersucht haben. Claude J^) hat Blutungen der Gallen- 
blase beobachtet. Nach Padoa*) wirkt die Leber verschieden auf die 
Toxine. Während sie Diphtherietoxin bindet, so dass es bei Einführung 
in die Pfortader weniger giftig ist, lässt sie Typhustoxin passieren; dies 
soll sogar auf diesem Wege noch giftiger wirken, als subkutan oder intra- 
venös. Ebenso findet man degenerative Veränderungen an den Nieren. 

Veränderungen des Blutes (Hämoglobinämie) und der Gefäße 
sind ebenfalls häufig. Viele Toxine scheinen blutkörperchenlösend zu 
wirken. Nach Karfunkel *) setzen sie die Blutalkaleszenz herab, doch 
lässt sich durch künstliche Ueberhitzung diese Wirkung teilweise paraly- 
sieren. Schließlich wird noch meist das Nervensystem, besonders 
das Zentralorgan angegriflFen, jedoch in recht verschiedener Weise ; darauf 
werden wir im speziellen Teil ausführlicher zurückkommen. 

Eine eigentümliche Wirkung des Diphtherotoxins will Consiglio ®) be- 
obachtet haben. Er fand, dass es die Gärungsprozesse in kleinen Dosen 
fördert, in größeren hemmt, dass es andererseits aber stets einen sehr 
ungünstigen Einfluss auf Eeimungsprozesse der Samen ausübt. 



1) Bardier, Toxine et coeur. Soc. Bio!., 49, 311 (1897). 

^ Teissier & Gthnard, Effets des toxines microbiennes. Aich. m^d. exp6r., 
IX, 994 (1897). 

3) Claude, Deux cas d'h^morrhagie de la v^sic. biliaire etc. Soc. Biol, 1896, 
169; Sem. m6d., 1896, 62. 

*} Padoa, üeb. d. verschied. Wirkung, des Diphtherie- u. Typhustoxins. Riform. 
med., 1899, Nr. 26; Malys Jb., 1899, 921. 

^) Karfunkel, Schwankungen des Blntalkaleszenzgehaltes nach Einverleibung 
von Toxinen u.s.w. Zeitschr. f. Hyg., 32, 149 (1899). 

«) CoNSiGLio, Azione di alcune tossine etc. Arch. di Fann., VI, Nr. 3 (1898). 
Malys Jb., 1898, 634. 



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— 24 



Toxoide und Toxone. 

Nach der Seitenkettentheorie mUssen wir die Toxine ansehen als 
Körper, die zwei sterisch bestimmte Gruppen enthalten; die hapto- 
phore Gruppe und die toxop höre Gruppe. Wenn wir uns nun 
vorstellen dürfen, dass unter gewissen Umständen die toxophore 
Gruppe so verändert wird, dass ihre charakteristische Wirkungs- 
energie verloren geht, die haptophore dagegen ungeändert bleibt, so 
würden Stoffe resultieren, die zwar noch die Fähigkeit haben, sich an 
Rezeptoren, seien es freie (Antitoxine) oder gebundene (Körperzellen) zu 
binden, ohne aber giftig zu sein. Solche Stoffe hat nun Ehrlich beim 
Diphtherietoxin genauer untersucht und ihre große Bedeutung für 
den toxischen Wert der Giftlösungen und die Einstellung der Heilsera 
festgestellt, worauf wir im nächsten Kapitel ausführlich eingehen wer- 
den. Diese »Toxoide« sind also ungiftige, aber sich noch spezifisch 
bindende Haptine. Sind sie sekundäre Umwandlungsprodukte der 
echten Toxine, so bezeichnet man sie als Toxoide im engeren Sinne; 
es giebt aber auch primäre Bakterienprodukte, die dieselbe haptophore 
Gruppe binden können wie das Toxin, die aber eine andere, sehr viel 
schwächer wirkende toxophore Gruppe besitzen, geringe Wirkungen 
eigener Art auslösen, wie sie Ehrlich und Madsen bei der Diphtherie 
festgestellt haben; man bezeichnet diese primären Stoffe, die also 
ein zweites Sekretionsprodukt der Bakterien darstellen, als 
Toxone. 

Die Toxone sind nicht ganz ungiftig, sie erzeugen vielmehr späte 
Lähmungen u. s. w., kurz Vergiftungserscheinungen, die qualitativ 
von der Wirkung kleiner Toxinmengen durchaus verschieden sind. 

Toxoide sind mit Sicherheit bekannt von der Diphtherie (Ehrlich) 
vom Tetanolysin (s. d.) (Mausen) und vom Staphylotoxin (Neisser 
& Wechsberg, s. d.), für das Ricin von Jacoby (1. c.) sehr wahrschein- 
lich gemacht. 

Indessen spricht doch sehr vieles dafür, dass auch die anderen 
Bakteriengifte zum Teil die Fähigkeit der sekundären Toxoidbildung 
haben, z. B. Tetanus, worauf wir im speziellen Teil zurückkommen 
werden. 

Irgend welche näheren Kenntnisse über die Toxoide und Toxone be- 
sitzen wir nicht. Da sie auch spezifische Haptine sind, erzeugen sie 
auch Antitoxine, wie Mausen & Dreyer^) an den Diphtherietoxonen 
zeigen konnten. 

Madsen & Dreyer konnten auch zeigen, dass es Toxone giebt, 
die für Meerschweinchen indifferent, für Kaninchen noch giftig sind. 

1) Madsen & Dreter, Ueb. Imman. mit den Toxonen d. Diphtheriegiftes. Z. 
f. Hyg., 37, 249 (1901). 



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— 25 — 

200 
Ein Gift war bei ^qq- Sättigung für Meerschweinchen neutral, für Kanin- 

240 
chen erst bei -^^- . Ehrlich hat diese Giftabarten als Toxonoide 

bezeichnet. 

Allgemeines über Antitoxine. 

lieber die Antitoxine sind unsere positiven Kenntnisse noch geringer 
wie über die Toxine. 

Sie finden sich in den KörperflUssigkeiten, besonders im Blutserum 
und der Milch immunisierter Tiere. Geringere Mengen finden sich auch 
sehr häufig in normalen Seris, namentlich Diphtherieantitoxin beim 
Pferde (bei ca. 30^). Auch andere Antikörper sind in den normalen 
Seris ja sehr häufig, besonders auch Antifermente u. s. w. Aus den 
KörperflUssigkeiten können sie mit Hilfe ähnlicher Fällungsmethoden wie 
die Toxine konzentriert werden. 

Ausfällen mit Alaun und Ammoniak (Abonson), Magnesiumsulfat 
(TizzONi) und mit festem Chlomatrium und Chlorkalium (Brieger und 
Boer) liefern nach Reinigung feste Antitoxinpräparate. 

Die Natur der Antitoxine ist unbekannt; dass sie EiweißstoflFe sind, 
ist zwar wahrscheinlich, aber nicht sicher entschieden. Dagegen spricht 
ihre beträchtliche Resistenz gegen Trypsin, während sie gegen Pepsin- 
salzsäure empfindlich sind. Versuche, das Diphtherieantitoxin als Eiweiß- 
körper näher zu charakterisieren, resp. festzustellen, mit welchem Eiweiß- 
anteil des Blutes es zusammenhängt haben noch zu keinem abschließenden 
Resultat geftihrt. 

Sie sind auch empfindlich, wie die Toxine, gegen Erwärmen, gegen 
Säuren u. s. w., besitzen aber doch im allgemeinen eine weitaus größere 
Resistenz (s. b. Diphtherie). Camus ^) konnte Antischlangengift und Anti- 
diphteriegift V2 1 auf 120° und 1/4 h aiif 140° ohne Schaden erhitzen, 
wenn sie bei niederer Temperatur getrocknet und dann erst bei 100° 
im Luftstrom erwärmt waren. 

Die Antitoxine sind nach Ehrlich normale Zellenbestandteile, los- 
gerissene Rezeptoren, und als solche physiologisch und chemisch ziem- 
lich inaktiv. Sie werden durchaus nicht immer in den Organen ge- 
bildet, wo das Gift seine spezifische Wirkung entfaltet, sondern auch 
aus anderen Zellgruppen. Besonders scheint dies beim Tetanus des 
Kaninchens der Fall zu sein (s. dort). Sie werden unter dem Reiz 
der haptophoren Gruppe sezerniert. Ehrlich fasst sie als „einfache 
Unizeptoren" auf, d. h. als Stoffe mit nur einer haptophoren Gruppe, 
die der entsprechenden des Toxins konform ist. Nichts ist also ver- 



1} Camus, BesiBtance aux temp^r. ^iev^e des vaccinB dessdcb^B. Soc. Bio!., 50, 

23Ö (1898). 



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— 26 — 

kehrter, als auch den Antitoxinen eine Aktivität zuzuschreiben, wie den 
Toxinen, sie etwa auch als »fermentähnliche Stoffe« hinzustellen. 
Es ist dies eine gedankenlose Uebertragung von den Toxinen her, für 
die jede greifbare Unterlage fehlt, und die nur geeignet wäre, der An- 
schauung zu schaden, dass die Toxine den Fermenten nahestehen. 
Die Toxine, wahrscheinlich auch einige Fermente haben eine haptophore 
und mindestens eine „ergophore** Gruppe, sie können nicht nur 
binden, sondern auch angreifen; letzteres ist den Antitoxinen nicht ver- 
liehen; sie können nur binden und dadurch die toxophore Gruppe von 
der bedrohten Zelle fernhalten, nicht aber sie schädigen. Deuten 
doch Versuche von Wassermann beim Pyocyaneus und von Calmette 
beim Schlangengift darauf hin, dass in dem Toxin- Antitoxingemisch das 
Toxin intakt bleibt, und nach einer Zerstörung des Antitoxins die Gift- 
wirkung wieder manifest vnrd (s. u.). Die Antitoxine sind also keine 
aktiven StoflFe, keine «Fermente». Die Antitoxine sind also als solche 
physiologisch völlig neutral, sie können keine toxischen Wirkungen 
auslösen. 

Dies gilt aber natürlich nur für die Antitoxine an sich, nicht für 
die Sera, in denen sie enthalten sind. Man kann zwar einem Pferde 
unbegrenzte Mengen antitoxinhaltigen Pferdeserums injizieren, ohne 
irgend welche Nebenvdrkungen. Dagegen sind körperfremde EiweißstoflFe 
stets in gewissem Sinne toxisch; sie erzeugen ja auch Abwehrstoffe, 
die von Myers u. s. w. beschriebenen Präzipitine.^) Es ist also ein- 
leuchtend, dass man durchaus nicht einer anderen Tierspecies unbegrenzte 
Mengen Pferdeserums injizieren darf. Man hat ja auch thatsächlich 
mehrfach beim Diphtherieheilserum solche Störungen beobachtet (s. dort). 
Nur ist dafür nicht das Antitoxin an sich, sondern vielmehr das 
Serum verantwortlich zu machen. 

Zweifellos hängt mit dem Bestreben des Organismus, fremde Eiweiß- 
stofPe zu eliminieren, auch die Beobachtung von Knorr^) zusammen, dass 
Antitoxine, die mit körperfremden Seris injiziert werden, sehr bald ver- 
schwinden, während Antitoxine in Seris gleicher Species eingeführt, 
sich sehr lange im Organismus erhalten. 



Verhalten der Toxine zu den Antitoxinen. 

Wir haben schon in der Einleitung es als eine zur BegriflFsbestimmung 
des Toxins ganz wesentliche Eigenschaft desselben hingestellt, dass die 
echten Toxine im Körper des angegriffenen Wesens ein spezifisches 



1) Näheres üb. Präzipitine u. Litteratur s. b. Michaelis & Oppenheimer, üeb. 
Immunität geg. Eiweißkörper. Engelmanns Arch., 1902, Snppl.-H. 

^ Knorr, Das Tetannsgift n. s. Bezieh, zum tier. Organismus. Münch. med. 
Woch., 1898, 321, 362. 



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— 27 — 

Gegengift, ein Antitoxin erzengen. Diese Thatsache, anf die znerst 
Ehrlich^) bei seinen grundlegenden Versnoben über ein den Bakterien- 
toxinen nabestehendes pflanzlicbes Gift, das Ricin, gestoßen ist, ist heute 
80 fest fundiert, dass wir eben die Antitoxinbildung als eine integrierende 
Eigenschaft des echten Toxins ansehen mttssen. Die Bedeutung dieser 
Antitoxinbildung im Organismus ftlr den Ablauf der Infektionskrank- 
heiten, für das Zustandekommen der erworbenen Immunität und die 
Verwertung dieser Beziehungen in der monumentalen Seitenkettentheorie 
können an dieser Stelle nicht abgehandelt werden. 

Hier sollen nur empirisch die Beziehungen zwischen dem Antitoxin 
und seinem Toxin so genau besprochen werden, als sich dieses schwie- 
rige Gebiet nach dem heutigen Stande unserer Kenntnisse, die wir den 
unermttdlichen, klassischen Arbeiten Ehrlichs zum größten Teil ver- 
danken, präzisieren lässt. 

Nach der Seitenkettentheorie können nur solche Gifte als echte 
Toxine wirken, die zu bestimmten Zellen eine spezifische Affinität be- 
sitzen. Ehrlich nimmt zur Veranschaulichung dieser spezifischen Affi- 
nität an, dass beide Teile, das Toxin einerseits und die anzugreifende 
Zelle andererseits je eine Atomgruppe in ihrem Protoplasma besitzen, 
die gegenseitig aufeinander angepasst sind, sich darum binden und so 
das Toxin durch diese Bindung in den unmittelbaren Bereich der Zellen 
bringen. Als erster Akt der Toxinwirkung vollzieht sich 
also eine Anlagerung des Giftes an die Zelle vermittelst 
der beiderseitigen »haptophoren« Gruppen. Durch diese An- 
lagerung wird nun die Zelle in den Wirkungskreis des Toxins gebracht 
und nun vollzieht sich als zweite Phase die spezifische Einwir- 
kung des Giftes auf die Zelle, eine Funktion einer zweiten spezi- 
fischen Gruppe, der »toxophoren« Gruppe^). 

Die Toxine binden also die haptophoren Gruppen der Zellen, die an 
ihren »Seitenketten« wirksam sind. Werden nun, wie bei der künst- 
lichen Immunisierung, derartige mit haptophoren Gruppen ausgerüstete 
Seitenketten im Uebermaß produziert und frei in die Körpersäfte, 
speziell das Blutserum abgeschieden, so behalten diese haptophoren 
Gruppen ihre Fähigkeit, die entsprechenden haptophoren Gruppen des 
Toxins zu binden, bei. Diese abgestoßenen Seitenketten stellen also das 
spezifische Antitoxin gegen das Toxin dar. 



i; Ehrlich, Experimentelle Unters, über Immunität. Deutsche med. Woch., 
1891, 976, 1218. — Ders., Zur Kenntnis der Antitoxin Wirkung. Fortschr. d. Med., 
1897, 41. 

2) Nor von Atomgruppen in einer Substanz ist die Rede, niemals aber hat 
Ehrlich behauptet, dass ein Toxin ans zwei Substanzen, einer haptophoren 
und einer toxophoren, besteht, wie ihm dies Danysz (Ann. Fast, 1899, 581) unter- 
schiebt D., der die Vorgänge bei der Plasmatolyse mit der Toxinwirkung zu- 
sammenwirft, hat Ehrlich missverstanden. 



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— 28 — 

Aus dieser Vorstellung ergeben sich nun ohne weiteres zwei sehr 
wichtige Gesichtspunkte fUr das gegenseitige Verhältnis des Toxins zum 
Antitoxin. Es werden nämlich dadurch zwei naheliegende Möglichkeiten 
einer Beeinflussung des Giftes durch seinen spezifischen Antikörper von 
vornherein ausgeschlossen, nämlich eine direkte Zerstörung des Gift- 
stoflFes im ganzen, wie er etwa durch eine starke Säure zerstört werden 
möchte; und femer auch ein Einfluss des Antitoxins auf die spezifisch 
schädliche, die toxophore Gruppe des Giftes, sowie etwa die Giftig- 
keit des Anilins durch Einführung von Essigsäure in seine giftwirkende 
Aminogruppe wesentlich herabgesetzt wird. Beides ist mit der Seiten- 
kettentheorie unvereinbar, es kann sich um eine Beeinflussung nur in 
dem Sinne handeln, dass das Antitoxin die haptophore Gruppe des 
Toxins absättigt und es dadurch nur an der Möglichkeit hindert, 
seine toxophore Gruppe durch Anheften an die Zelle zur Wirksamkeit 
gelangen zu lassen, während sie in Wirklichkeit in ihrer giftigen Kraft 
unverändert bleibt. 

Während wir hier diese grundlegende Anschauung als Konsequenz 
der von uns als heuristisches Prinzip angenonmienen Seitenkettentheorie 
gezogen haben, ist in Wirklichkeit natürlich die Entwicklung umge- 
kehrt gewesen. Man hat in mühevollen Versuchen zuerst sich zur 
Ueberzeugung von der Richtigkeit dieser Thatsache durchzuarbeiten 
gesucht, um sie dann als wichtige Stütze für die Theorie zu ver- 
wenden. Ehrlich und Behring sind zuerst der Ansicht gewesen, dass 
das Toxin in seiner Gift Wirkung durch das Antitoxin beeinträchtigt 
wird; erst später sind sie zu der Ueberzeugung gelangt, dass hier eine 
einfache Bindung vorliegt. 

Die Thatsachen, die zu dieser heute allgemein acceptierten Annahme 
geführt haben, waren verschiedener Art. 

Zunächst war man allgemein der Ansicht, dass das Antitoxin nur 
indirekt wirkt, indem es den Organismus gegen das Toxin > festmacht«. 

Diese Vorstellung wurde später aufgegeben, als man fand, dass 
Antitoxin und Toxin sich nach streng zahlenmäßigen Gesetzen binden 
(Gesetz der Multipla), worauf wir später näher eingehen werden. Be- 
sonders wichtig aber war es, dass man Vorgänge näher studierte, bei 
denen eine Intervention des lebenden Organismus sich überhaupt aus- 
schließen ließ, bei denen deutlich sichtbare Vorgänge im Reagenzglas 
als Indikatoren der Beeinflussung der Toxine durch das Antitoxin be- 
nutzt wurden. 

Die ersten waren die berühmten Versuche Ehrlichs ^) über die agglu- 
tinierende Wirkung des Ri eins auf rote Blutkörper, bei den sich streng 
zahlenmäßige Beziehungen zwischen Ricin und Antiricin fanden, indem 
die Blutwirkung bestimmter Ricindosen stets durch die entsprechende 



*) Ehrlich, Zur Kenntn. d. Antitoxinwirkg. Fortschr. d. Med., 1897, 41. 



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— 29 — 

Dosis Antiserum gerade noch aufgehoben wurde. In analoger Weise 
vollzieht sich die Hemmung anderer Hämolysine, wie des Schlangen- 
giftes (Kanthack), des Aalblutes (Kossel), des Tetanolysins (Ehr- 
lich) u. s. w. 

So waren also direkte Beziehungen zwischen Toxin und Antitoxin 
nachgewiesen. Doch konnten diese immer noch auf einer direkten 
Zerstörung des Giftes durch das Gegengift beruhen. Doch zeigten 
die Thatsachen, dass auch dies nicht der Fall ist, sondern dass eine 
einfache Bindung beider Komponenten vorliegt 

Besonders der Umstand, dass es Mittel giebt, diese Bindung, wenn 
sie erst kurze Zeit besteht, in der Weise zu lösen, dass die ur- 
sprüngliche Giftwirkung wieder hervortritt, ist für die An- 
nahme einer lockeren Verbindung von ausschlaggebender Bedeutung 
gewesen. Dies ist mit völliger Sicherheit zuerst Calmette an einem 
tierischen Toxin, dem Schlangengift, gelungen, dessen Antitoxin 
viel leichter zersetzlich ist, als das Toxin. 

Auch beim Pyocyaneustoxin hat Wassermann das Antitoxin 
leichter zerstörbar geftmden, als das Toxin (s. d.), so dass man auch für 
die Bakterientoxine eine einfache Bindung anzunehmen berechtigt ist. 

Die Versuche benihen darauf, dass eine neutrale Mischung von 
Toxin- Antitoxin durch Erwärmen einen großen Teil ihrer ursprünglichen 
Giftigkeit wiedergewann, weil das Antitoxin als leichter angreifbarer 
Anteil der lotjkeren Verbindung durch die höhere Temperatur zerstört 
wurde. Doch darf die Mischung beider Komponenten nur kurze Zeit 
gedauert haben, da sonst die Trennung der Verbindung nicht mehr 
möglich ist. Die Trennung beider Komponenten gelang beim Schlangen- 
gift auch durch Diffusion, wobei das Toxin schneller diflFundierte, als 
das Antitoxin (Martin und Cherry) (s. b. Schlangengift). 

Dagegen sind ähnliche Versuche beim Diphtheriegift fehlgeschlagen 
(DziEBZGOWSKi ^). Nun liegen hier die Verhältnisse freilich ganz anders. 
Zunächst ist, wie Ehrlich gezeigt hat, die Bindung hier eine sehr feste. 
Aber abgesehen davon ist hier das Toxin das leichter zerstörbare Element, 
so dass beim Erwärmen des Gemisches nicht dieses, sondern das freie Anti- 
toxin regeneriert werden müsste. Dass dies nicht gelingen kann, ist aber 
a priori klar; denn bei der Umwandlung des Toxins durch Erwärmen ver- 
schwindet das Gift ja gar nicht, sondern geht nur in Toxolfde über, die 
Bindung aber bleibt bestehen, so dass freies Antitoxin nicht in die Erschei- 
nung treten kann. Diese negativen Versuche beweisen also nichts, da ihr 
Resultat von vornherein sich theoretisch mit großer Wahrscheinlichkeit vor- 
hersagen ließ. 



1) Dzierzgowski, Zur Frage über die Beziehungen zwiBchen dem antidipbth. 
Heilsernm u. d. Diphtherietoxin. Arch. intemat. de pharmacodyn., V, 1. (1898); 
8. andererseits auch Marenohi, Ueb. d. gegens. Wirkg. antidipbth. Serums und des 
Diphth.-ToxinB. Centralbl. f. Bakt, 22, 520 (1897). 



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— 30 — 

Diese Bindung ist eine ehemische Reaktion und unterliegt als solche 
den Gesetzen der chemischen Kinetik. Sowohl die Festigkeit dieser 
Verbindung, als auch die Reaktionszeit können sehr verschieden sein. 
So hat das Diphtherieantitoxin eine viel höhere Verwandtschaft zu 
seinem Toxin und vereinigt sich viel schneller (in 5 — 10') als das Tetanus- 
antitoxin mit dem seinen (Ehrlich). 

Die Avidität der gegenseitigen Absättigung und damit die Reaktions- 
geschwindigkeit hängt aber außerdem noch sehr erheblich ab von der 
Temperatur, mit deren Steigen sie größer wird, und auch von der 
Konzentration (Ehrlich, Knorr^). In konzentrierten Lösungen geht 
die Bindung erheblich schneller vor sich. 

Auf die Frage der Gleichgewichtszustände zwischen Toxin und Anti- 
toxin können wir erst später eingehen. 

Die Ansicht, dass die Antitoxine sich nicht in zahlenmäßig festen 
Verhältnissen an die Toxine binden, sondern dass ihre Wirkung auf 
einer schützenden Kraft den Zellen gegenüber beruht, ist trotz aller 
Widerlegungen noch nicht überall aus dem Wege geräumt. Besonders 
hat man diesen Schluss daraus zu ziehen gesucht, dass bei Verviel- 
fachung der Toxindosis nicht das gleiche Multiplum an Antitoxin aus- 
reichen soll, d. h. dass diese »schützende« Kraft gegenüber großen 
Giftdosen versagt. Diese Ansicht hat in neuerer Zeit z. B. wieder 
BoMSTEiN vertreten. Aber abgesehen davon, dass die EHRLiCErachen 
Ricinversuche, sowie die ganz analogen Resultate von Calmette 
mit Schlangengift und Camus, Kossel u. a. mit Aalblutgift und 
viele andere an Erythrocyten jede Intervention des Organismus aus- 
schließen lassen, und nur durch eine direkte Bindung des Giftes durch 
das Antitoxin zu erklären sind, ist auch die Behauptung, dass die zahlen- 
mäßigen Bindungsverhältnisse nicht stimmen sollen, auf sehr schwache 
Füße gestellt. 

Cobbett & Kanthack 2 konnten zeigen, dass die Multipla sich 
genau der Theorie entsprechend verhalten, wenn man gleich anfangs ein 
Mehrfaches der tödlichen Dosis zum Versuch anwendet. 

Sie zeigen durch eine einfache üeberlegung, dass, besonders bei 
Anwendung kleiner, der einfach letalen Dosis nahestehender Giftmengen 
mit großer Wahrscheinlichkeit sich beim Vervielfachen eine Giftwirkung 
zeigen muss. Denn wenn man eine einfach letale Dosis neutralisiert, 
so kann ein kleiner Giftüberschuss in der Mischung unbemerkt bleiben, 
da er nicht einmal die einfach krankmachende Dosis erreichen mag; 
verzehnfacht man nun aber Giftmenge und Antitoxinmenge, so verzehn- 
facht sich auch der Giftüberschuss — und die giftige Wirkung der 



1) Enorr, Die Entstehung des Tetannsantitoxins. Fortschr. d. Med., 1897, 657. 
2} Cobbett & Kanthack, Ueb. das Schicksal d. Diphtherietoxins im Tierorga- 
nismus. Centralbl. f. Bakt, 24, 129 [1898). 



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— 31 — 

Mischung ist evident. Mit solchen Waffen ist also ein Kampf gegen 
Ehrlichs Ansicht nicht erfolgreich zu führen. 

Nach alledem sind wir jetzt, auf praktische Erfahrungen und die 
Theorie gestützt, berechtigt anzunehmen, dass der Wirkung des 
Antitoxins auf das Toxin eine gegenseitige Bindung zweier 
mit spezifischer Affinität begabten Gruppen zu Grunde 
liegt 

Daraus folgt nun ohne weiteres die fundamentale Thatsache, dass 
die gegenseitige Einwirkung beider Stoffe den Gesetzen folgen muss, 
die bei der gegenseitigen Absättigung zweier mit spezifisch aufeinander 
eingestellten Atomgruppen versehener einfacher chemischer Stoffe Gel- 
tung besitzen, nämlich nach festen quantitativen Verhältnissen, 
So gut die gleiche Menge reines Natriumhydrat stets die gleiche Menge 
reiner Salzsäure zur Neutralisation braucht, so gut muss das gegen- 
seitige Verhältnis einer bestimmten Toxindosis zu der Menge Antitoxin, 
die sie gerade »neutralisiert«, ein absolut konstantes sein. Eine 
gegebene Quantität reinen Toxins muss stets unabänderlich die gleiche 
Menge reinen Antitoxins verbrauchen, um in seiner Wirksamkeit gerade 
noch gehemmt zu werden, vorausgesetzt, dass die Bindung eine feste 
ist, und nicht zu dissoziierten Gleichgewichtszuständen führt, 
eine Frage, auf die wir erst später eingehen können. 

Zwei Umstände sind es, die die Konstatierung dieser so ungemein 
wichtigen Thatsache außerordentlich 'erschweren. 

Zunächst kennen wir weder Toxine noch Antitoxine in reinem Zu- 
stande. Es handelt sich hier nicht um chemisch isolierbare, gegebene 
Stoffe, denen wir mit der Wage nähertreten könnten, um zu kon- 
statieren, dass X g Diphtherieantitoxin stets y g Diphtherietoxin neu- 
tralisieren: die einzige Dosierung, die bei diesen giftigen Stoffen an- 
wendbar ist, ist die physiologische, die Feststellung der »einfachen 
letalen Dosis«, die man als Grundeinheit für die Messung der Toxin- 
mengen anzunehmen gezwungen ist, resp. beim Studium der Hämo- 
lysine die Messung des Grades der lösenden Wirkung. 

Indessen wäre dieser Uebelstand nicht sehr schwerwiegend, wenn 
wir wenigstens zwischen jeder Giftlösung von einer gegebenen Stärke, 
die wir also dann auf eine als Einheit anzunehmende Giftlösung von 
bestimmter Toxizität für 1 cm^ (Normalgift) leicht umrechnen könnten, 
eine konstante Beziehung mit einer gegebenen Antitoxinlösung kon- 
statieren könnten, so dass schließlich jeder »einfachen letalen Dosis« 
des Giftes eine bestimmte Menge »Antitoxineinheiten« entspräche. 
Doch auch dies ist leider nicht der Fall. Fast jede Giftlösung zeigt 
ein anderes Verhältnis zu der Menge Antitoxinlösung, die sie zu ihrer 
Neutralisation braucht, wenn man das Verhältnis einer »letalen Dosis« 
zu der Menge von »Antitoxineinheiten« berechnet. 



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— 32 — 

Wir stoßen hier auf ganz außerordentlich komplizierte Verhältnisse, 
deren Verworrenheit durch die mühevollen Arbeiten von Ehrlich*) 
zwar zum größten Teil aufgehellt ist, ohne dass aber alle Unklarheiten 
und Schwierigkeiten gänzlich geschwunden sind. Zunächst hängt die 
Schnelligkeit, mit der sich Toxin und Antitoxin binden, nicht nur von der 
Art, sondern auch sehr von der Konzentration der beiden Komponenten 
ab (s.o.). Vor allem findet man aber, dass jede Diphtheriegiftbouillon außer 
dem spezifisch wirksamen Toxin noch andere Stoflfe in wechselnden Ver- 
hältnissen enthält, die zwar nicht die toxophore, wohl aber die haptophore 
Gruppe des echten Toxins besitzen, und die infolgedessen die letale 
Dosis, die Giftwirkung nicht beeinflussen, wohl aber das Anti- 
toxin ebensogut in Anspruch nehmen, wie das Toxin selbst. 
Diese Stoflfe entziehen sich also der Beobachtung, wenn man in einer 
Giftlösung die einzige Maßeinheit, die einfach letale Dosis, bestimmt; 
sie treten aber sofort in die Erscheinung, sobald man die zur Neutra- 
lisierung dieser einfachen letalen Dosis nötige Menge einer bestimmten 
Antitoxinlösung feststellen will. 

Wenn eine reine Giftlösung eine gewisse Menge von cm^ einer be- 
stimmten Antitoxinlösung verbrauchen würde, so wird diese Zahl um so 
beträchtlicher erhöht, je mehr dieser nicht giftigen, aber Antitoxin 
bindenden Stoflfe in der unreinen Giftlösung vorhanden sind. Die an 
Menge wechselnde Anwesenheit dieser Stoflfe in jeder Giftlösung er- 
schwert also die Konstatierung der absoluten Konstanz der Bindungs- 
verhältnisse, wie sie die Seitenkettentheorie voraussagt, ganz ungemein; 
und noch ist es nicht völlig gelungen, dieser Schwierigkeiten in jedem 
Falle Herr zu werden. 

Um uns über die näheren Einzelheiten dieser Frage zu orientieren, 
müssen wir auf die physiologischen Maßeinheiten zurückgreifen, die 
Behring und Ehrlich für das Studium der Antitoxin Wirkung ge- 
schaffen haben. Die zahlenmäßigen Grundlagen, die für das Di- 
phtheriegift festgelegt sind, sind folgende: 

Als einfach letale Dosis bezeichnet Ehrlich diejenige Gift- 
menge, ausgedrückt in cm^ der Giftlösung bezw. in g des festen Giftes, 
die gerade hinreicht, um ein Meerschweinchen von 250 g (ein Tier von 
ca. 6 Wochen) im Laufe von 4 — 5 Tagen zu töten. Diese Dosis ist die 
physiologische Gifteinheit. 

Als Normalgift nahm v. Behring eine Giftlösung an, die in 
einem cm^ 100 letale Dosen enthielt. Dieses »Normalgift« be- 
zeichnete V. Behring kurz als DTN^M^so (Diphtherietoxin normal ein- 
fach, Meerschweinchen von 250 g). 



*) Ehrlich, Die Wertbemessung des Diphtherieserums. Klin. Jahrb., VI., 299 
(1899). — Deiß., lieber die Const. des Diphtheriegifteß. Deutsch, med. Woch., 
1898, 597. 



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— 33 — 

Auf diese mllkürliche Gifteinheit sind nun die Antitoxinlösnngen 
eingestellt worden. Ein * einfaches« Serum ist ein solches, von dem 
1 cm^ einen cm^ des Nonnalgiftes, also hundert Gifteinheiten neutrali- 
siert. Diese Größe, also 1 cm^ des einfachen Serums, ist die Einheit 
des Antitoxins, die sogenannte Immunitätseinheit, die man kurz als 
I. E. schreibt*), und ist als solche, empirisch festgestellt, aufbewahrt 
worden (s. u.). 

Wenn man nun zuerst gegen ein frisches Gift ein Serum eingestellt 
hat, so ist bei sämtlichen zu gleicher Zeit angestellten Versuchen das 
Verhältnis Giftlösung zu Antitoxinlösung in cm^ ausgedrückt völlig kon- 
stant. Da nun femer in diesem frischen Gift stets das Verhältnis von 
Giflwirkung zur angewandten Menge von cm^ konstant bleibt, so ist 
schließlich auch das Verhältnis Giftwirkung zu Antitoxinmenge 
konstant, d. h. jeder letalen Dosis entspricht stets genau die- 
selbe Menge Antitoxinlösung, ausgedrückt in cm^ 

Lässt man dagegen dieses Gift einige Zeit ablagern, und stellt es 
dann von neuem gegen Serum ein, so haben sich die quantitativen 
Bindungsverhältnisse in einer Beziehung ganz wesentlich geändert. Das 
Verhältnis Giftlösung zu Antitoxinlösung, in cm^ ausgedrückt, ist zwar 
konstant geblieben, d. h. man braucht zu jedem cm^ der Giftlösung die- 
selbe Menge von Antitoxinlösung, wie beim frischen Gift, aber diese in 
cm^ ausdrUckbare Quantität der Giftlösung übt eine beträchtlich ge- 
ringere Giftwirkung aus, als die gleiche Menge des frischen Giftes. 
Bestimmt man andererseits, wieviel Antitoxin man zur Sättigung einer 
Gifteinheit braucht, so findet man naturgemäß eine beträchtlich 
größere Menge als notwendig, wie sie für das frische Gift [erforder- 
lich war. 

Daraus folgt, dass die Giftlösung durch das Ablagern schwächer, 
dass bei einem Teile des Toxins die toxophore Gruppe unwirksam 
geworden ist; daraus aber, dass die gleiche Anzahl von cm^ der 
Giftlösung nach wie vor die gleiche Anzahl von cm^ des Serums zur 
Neutralisation brauchen, geht klar hervor, dass bei diesem Abschwä- 
chungsprozess die haptop hören Gruppen intakt geblieben sind. 
Daraus folgt weiter, ^ass in diesen abgeschwächten Giftlösungen sich 
StöflFe vorfinden müssen, die zwar durch Verlust ihrer toxophoren Gruppe 
ungiftig geworden sind, die aber wegen des Besitzes intakter hapto- 
phorer Gruppen vor wie nach imstande sind, Antitoxin an sich zu 
binden. 



*) Madsen, »Constitution da poison dipht«, Ann. Fast, XIII, 568 (1899) fuhrt 
noch mehrere praktische Abkürzungen ein. T =» Toxineinheit, (T) die Menge Gift- 
bouillon in cm^, die T enthält (einfach letale Dosis), I = Immnnitätseinheit (bei uns 
I.E. geschrieben) und (I) die Menge Serums in cm^, die eine I enthält Wir werden 
diese Abkürzungen bisweilen benutzen. 

Oppenheiroer, Toxine und Antitoxine. 3 



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— 34 — 

Diese Stoflfe bezeichnet Ehelich als Toxoide*). 

Zum näheren quantitativen Studium dieser Verhältnisse hat Ehrlich 
zwei Grenzwerte eingeführt, die er als L© (limes »Null«) und L^ (limes 
»Tod«) bezeichnet. Die zahlenmäßige Bedeutung dieser BegriflFe ist 
folgende: 

Lq ist diejenige Menge der zu prüfenden Giftlösung, ausgedrückt in 
Gifteinheiten (letalen Dosen), die, mit einer Immunitätseinheit vermischt, 
von dieser völlig neutralisiert wird; so neutralisiert, dass gar keine 
Giftwirkungen in die Erscheinung treten. Dieses Gemisch einer Im- 
munitätseinheit mit dem Maximum der Giftlösung versetzt, so dass eben 
noch keine physiologische, toxische Wirksamkeit erfolgt, ist physiolo- 
gisch neutral. 

Der Punkt Lo ist nicht leicht einwandsfrei zu bestimmen, da es 
schwer mit absoluter Sicherheit festzustellen ist, ob eine Giftlösung 
gerade noch eine schwache Wirkung ausübt, oder gar keine mehr. In- 
folgedessen hat Ehrlich noch einen zweiten Wert eingeflihrt: Lf ist 
diejenige Menge der zu prüfenden Giftlösung in Gifteinheiten (letalen 
Dosen), die zu einer Antitoxineinheit zugesetzt gerade noch hinreicht, 
um ein Meerschweinchen von 250 g in 4—5 Tagen zu töten. Diese 
Mischung enthält dann eine letale Dosis in freiem Zustande. Dieser 
Punkt ist leicht und einwandsfrei bestimmbar. Die Differenz Lf — L© 
nennt Ehrlich D. Sie mUsste, wie ersichtlich, bei reinen Giften = 
1 letalen Dosis sein, ist aber in Wirklichkeit stets höher, was 
von großer Bedeutung flir die Erforschung der Konstitution der Gifte 
ist (s. u.) 

Diese Schwellenwerte sind nun, abgesehen von ihrer praktischen 
Bedeutung für die Serumprüfung, von ungemeinem Werte flir die 
Untersuchung der Konstitution der Giftlösungen, besonders des Diphthe- 
riegiftes geworden. Denn mit ihrer Hilfe ist es Ehrlich gelungen, 
die Zusammensetzung der Giftbouillon in Bezug auf Toxine und Toxoide 
festzustellen. Er hat dabei Verhältnisse von sehr großer Kompliziert- 
heit gefunden, deren letzte Rätsel wohl noch die nächste Generation 
beschäftigen werden. 

Die Bedeutung dieser Schwellenwerte flir die Bestimmung des Ge- 
haltes der Giftlösungen an Toxin und Toxo'iden geht aus folgenden 
Befunden hervor: 

Die Antitoxineinheit ist eine nach einem bestimmten Gift einge- 
stellte Größe, die vorläufig nicht wieder reproduzierbar ist, sondern nur 
dadurch festgelegt worden ist, dass Ehrlich ein einmal titriertes Serum 
von 1700 facher Stärke unter besonderen Kautelen (Vacuum, Dunkel- 



"') Auf die Existenz derartiger angiftiger, aber immunisierender Bakterien- 
produkte haben schon vorher u. a. Fränkel (cit. n. Ehrlich, D. m. W., 1891, 978) 
und Arokson (Berl. kl. Woch., 1893, 625) hingedeutet. 



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— 35 — 

heit, Eis, Trockenheit) aufbewahrt hat, und an diesem Serum nach 
zweckmäßiger Verdünnung neue Testgifte einstellt, die dann wieder zur 
Prüfling neuer Sera dienen. Bei dem ursprünglichen Normalgift ent- 
sprach eine Antitoxineinheit 100 letalen Dosen, zu einer Neutralisation 
einer Immunitätseinheit also würden von diesem BEHRiNGschen Nor- 
malgift 100 letale Dosen gehören, d. h. L© ist gleich 100. Es ist 
diese zahlenmäßige Beziehung aber durchaus nicht für alle Gifte not- 
wendig, es könnten auch Gifte existieren, bei denen ein größerer Teil 
der Immunitätseinheit von nichtgiftigen Haptinen, von Toxoiden in 
Anspruch genommen würde, so dass nur noch ein geringerer Teil von 
wirklichem Toxin, dessen Menge sich in den Gifteinheiten ausdrückt, 
gebunden wird, d.h. I^ wird dann kleiner als hundert. Beiden 
meisten frischen Giften ist dies aber nicht der Fall, L^ ist bei ihnen 
wirklich bei 100, d. h. diese flischen Giftie sind thatsächlich gleich dem 
Normalgift Behrings konstituiert. 

Anders aber gestaltet sich die Bestimmung bei älteren Giftlösungen, 
wie wir bereits oben angedeutet haben; hier ist ein Teil des Toxins in 
Toxoüde übergeführt, d. h. L© wird kleiner; es genügen weniger 
Gifteinheiten bei gleicher Menge in Raummaß, um die Neutralisations- 
stufe zu erreichen. Andererseits giebt es aber auch Gifte, deren Relativ- 
gehalt an echtem Toxin höher ist, als der des BEHRiNGschen Normal- 
giftes, so dass wir zu der folgenschweren Annahme gezwungen sind, 
dass auch schon die frischen Gifte nicht nur giftige Haptine, 
Toxine enthalten, sondern auch relativ ungiftige, die Ehrlich von den 
erst sekundär entstehenden Toxoiden unter dem BegriflF der Toxone 
abgetrennt hat. Die Bestimmung von L© führt also zu folgendem 
Resultat: 

Jede Giftlösung enthält schon in frischem Zustande neben dem 
echten Toxin ungiftige Haptine, Toxone, die bei den meisten frischen 
Giften in einem so konstanten Verhältnis zu den echten Toxinen stehen, 
dass ftlr die meisten frischen Gifte Lo = 100 ist. Bei' einigen Gift- 
lösungen finden sich indessen auch relativ mehr oder weniger Toxone, 
so dass Lo schon bei frischen Giften bisweilen größer oder kleiner 
als 100 sein kann. Bei allen Giften aber entstehen dann sekundär 
beim Ablagern der Gifte aus dem Toxin Toxoide, die dann unter allen 
Umständen Lq herabdrücken. 

Auf die Art und Weise, wie die Toxine sich in Toxoide verwandeln, 
und vor allem die quantitativen Verhältnisse dieser Umwandlung werden 
wir erst später eingehen können; jetzt soll uns zunächst die Bedeutung 
des Lt- Grenzwertes beschäftigen. Während nämlich die sekundär 
entstehenden Toxoide auf die Größe der Lo-Dosis entscheidenden 
Einfluss haben, sind sie, wie Ehrlich festgestellt hat, für Lt und 
damit auch D ohne Einfluss. 

Es sind nämlich a priori drei Arten von Toxoiden denkbar: Zunächst 

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— 36 — 

solche, die eine höhere Affinität zum Antitoxin besitzen als das Toxin, 
also sich zuerst, vor dem Toxin, an das Antitoxin binden, und even- 
tuell imstande sind, schon bestehende Bindungen zwischen Toxin und 
Antitoxin wieder zu ihren Gunsten zu lösen. Dies sind die Pro- 
toxoide. 

Eine zweite Kategorie sind die Syntoxoide, die die gleiche Affi- 
nität zum Antitoxin besitzen, wie das Toxin, also Bindungen unbeein- 
flusst lassen und in ihrer Bindung mit dem Antitoxin vom Toxin eben- 
falls unbeeinflusst bleiben; schließlich kann es noch Epitoxoüde geben, 
die schwächere Affinität zum Antitoxin besitzen und von dem Toxin 
aus dieser Bindung wieder in Freiheit gesetzt werden können. Der- 
artige Epitoxoide entstehen nun, wie Ehrlich feststellen konnte, 
nicht sekundär, sondern finden sich schon in den frischen Gift- 
lösungen: sie sind identisch mit den oben erwähnten Toxonen. 

Aus dieser Erwägung ergeben sich für die Bedeutung der ToxoYde 
und Toxone für Lf resp. D folgende Gesichtspunkte: 

Die sekundär entstehenden Toxoide, also Pro- und Syntoxoide 
sind auf Lf ohne jeden Einfluss, wie eine sehr einfache Ueber- 
legung zeigt. 

Gesetzt, wir hätten ein neutrales Gemisch von Antitoxin einer- 
seits, von Toxin und Protoxoid andererseits, so können wir diesen 
Gleichgewichtszustand durch eine Formel wie folgt, bildlich ausdrücken : 

90 Toxin - Antitoxin + 10 Protoxoid - Antitoxin = physiologisch 
neutral (Lo). Nun fügt man, um L^. zu suchen, neue Giftmengen des- 
selben Giftes zu. Es können dabei keine Veränderungen in den bereits 
vorhandenen Bindungen zwischen Toxin und Antitoxin, sowie Protoxoid 
und Antitoxin eintreten, die etwa noch zugesetzte Toxindosen neu 
binden, also für L^ verschwinden machen: d. h. sobald die zugesetzte 
Giftmenge noch eine letale Dosis dem neutralen Gemisch zuführt, ist 
hf erreicht, wie es die Theorie für reine Gifte fordert; bildlich ließe 
sich das so ausdrücken 

90 T-A + 10 P-A + 1 Toxin = Lf 

Das Vorhandensein von Protoxol'den kann also nicht be- 
wirken, dass Lf — Lo (D) größer als eine letale Dosis wird. 

Ebensowenig können die Syntoxoide darauf Einfluss haben, D zu 
erhöhen. Auch sie werden in ihrer Bindung durch Toxinzusatz nicht 
beeinflusst, der Zusatz von neuem Giftgemisch bewirkt L+, sobald zu 
Lo eine letale Dosis zugefügt wird. 

Sämtliche sekundären Toxoide sind also auf D ohne 
Einfluss. 

Ganz anders aber gestaltet sich das Bild, wenn wir die Toxone 
daraufhin untersuchen. 

Lassen wir jetzt die für diese Frage gleichgiltigen Toxoide beiseite 



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— 37 — 

und bezeichnen wir ein neutrales Gemisch von Toxin und Toxon mit 
Antitoxin (Lo) folgendermaßen: 

90 T-A -h 10 Toxon-A = L«. 

Jetzt setzen wir neue Giftmengen hinzu. 

Setzen wir zunächst eine Quantität hinzu, die gerade eine Toxin- 
einheit enthält, so finden wir, dass dadurch noch keineswegs Lf erreicht 
werden kann; denn das Toxin setzt eine Toxoneinheit aus ihrer 
Bindung mit dem Antitoxin in Freiheit; an Stelle des zugesetzten 
freien Toxins finden wir ein freies Toxon nach folgendem Schema: 

90 T-A 4- 10 Toxon-A + 1 Toxin= 

91 T-A + 9 Toxon-A 4- 1 Toxon (frei) = W- 

So geht es fort bis sämtliche Toxone frei sind. Dann erst er- 
zeugt die nächste Toxineinheit Lf : 

100 T-A + 10 Toxone (frei) = Lo 

100 T-A + 10 Toxone + 1 Toxin = Lt ! 

Wir hätten also bei diesem Schema nicht eine, sondern elf Gift- 
einheiten zu Lo zuzufügen, ehe Lt eintritt, D ist also = 11! 

Wir sehen also, dass die Toxone die Eigenschaft haben, 
die Differenz D über die theoretisch für reine Gifte gefor- 
derte Größe »Eins« hinaus zu vergrößern. 

Die Relativmenge derartiger Toxone schwankt sehr beträchtlich, in- 
folgedessen ist auch D eine sehr wechselnde Größe: Ehrlich fand sie 
bei elf Giften zwischen 1,7 und 28 Gifteinheiten schwankend. 

Die Zahl D ist also nach Abzug der schließlich definitiv 
wirksamen einen Gifteinheit (D — 1) das Maß ftlr die Menge der 
in den Giftlösungen vorhandenen Toxone. Dadurch, dass diese Ab- 
weichungen der Zahl D schon bei frischen Giften vorkommen, und sie 
sich beim Aelterwerden des Giftes nicht ändert, wenn sich Lo ver- 
kleinert, lässt sich erweisen, dass die Toxone nicht sekundär entstehende 
2ierfallsprodukte des Toxins, sondern primäre Bakterienprodukte, un- 
giftige Haptine sind. 

üebrigens sind sie physiologisch nicht ganz unwirksam; ihre Wirkungen 
kann man in der von Ehblich so genannten »Differentialzone« studieren, 
d. h. zwischen Lo und L+, wo nach seiner Anschauung freie Toxone vor- 
handen sind. Sie zeigen geringe, von den Wirkungen kleiner, nicht tödlicher 
Toxindosen wesentlich abweichende Giftwirkungen, auf die wir noch zurück- 
kommen werden. 

Besonders wichtig sind die Entdeckungen von Madsen, dass man mit 
Giftgemischen in der Diflferentialzone, die also nur noch Toxone frei enthalten, 
eine antitoxische Immunität herbeiführen kann, worauf wir an geeigneter 
Stelle näher eingehen werden (s. im speziellen Teil b. Diphtheriegift). 

Ehrlich hat dann weiterhin durch unendlich mühevolle und schwie- 
rige Arbeiten noch Klarheit über die quantitativen Verhältnisse der 



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— 38 — 

Gifte lind die zahlenmäßigeD Bedingungen ihres Zerfalls zu schaffen 
gesucht. Es ergaben sich dabei Verhältnisse von ungemeiner Kom- 
pliziertheit, auf die wir hier nur kurz eingehen wollen. 

Ehrlich setzt zunächst für ein jedes beliebige Gift die Formel fest. 
Es besteht aus 

X Toxoid -h y Toxin + z Toxon. 

y ist durch physiologische Wertbestimmung (Feststellung der letalen 
Dosis) zu konstatieren, und ist dann = a; z, die Toxonzahl, ist eine 
Funktion (F) der ebenfalls zahlenmäßig auszudrückenden Größe D — 1, 
die Ehrlich als ß bezeichnet. Die Formelist also für jede bestimmte 
Giftlösung zu schreiben: 

X Toxoid + a Toxin + F {ß) Toxon. 

Die Entstehung der Toxol'de illustriert folgender Versuch: 
Die meisten Gifte haben, wie bereits erwähnt, in frischem Zu- 
stand die Dosis L© = 100. 

So fand Ehrlich, dass eines seiner frischen Diphtheriegifte so be- 
schaffen war, dass eine I. E. 0,31 cm^ Gift sättigte. Demnach musste 

31 
das Gift eine letale Dosis von *wj^ = 0,0031 cm^ besitzen, was that- 

sächlich der Fall war. Also war auch bei diesem Gift Lo = 100. Nach 
dreiviertel Jahren zeigte dasselbe Gift dieselbe Neutralisations- 
menge in cm^ aber die einfach letale Dosis war auf 0,009 ge- 
stiegen, Lo war also gleich ca. 33, d. h. schon 33 Gifteinheiten 
(in 0,31 cm-^ enthalten) entsprachen der Dosis L©; dann blieb Giftwert 
und Lo-Dosis konstant. 

Andere Gifte zerfallen so, dass L© = 50 wird, wieder andere zeigen 
eine schließlich konstante Lo-Dosis von 25 u. s. w. 

Es scheint also, als ob die Toxine entweder so zerfallen, dass die 
Hälfte unwirksam wird, oder dass sie sich trichotomisch verändern, 
so dass 2 Teile Toxoid und 1 Teil beständiges Toxin sich bilden. 

Vor allem hat Ehrlich versucht, die absolute Bedeutung einer 
L E. zu ergründen, d. h. zu entscheiden, wievielen Sättigungsein- 
heiten die L E. in den aus Toxinen, Toxonen und Toxolden beste- 
henden Giften entspricht, wieviel haptophore Gruppen, um es ganz 
roh auszudrücken, der Anzahl in einer I. E. entsprechen. Er ist sehr 
geneigt, dafür die Zahl 200 anzunehmen. Er gelangt zu dieser Zahl 
aus folgenden Erwägungen. 

Die frischen Gifte zeigen meist Lo = 100, sie zerfallen nachher so, 
dass ihre Lo-Zahlen mit 100 in sehr einfachem Verhältnis stehen; daraus 
schließt er, dass die absolute Bindungskraft ebenfalls mit der Zahl 100 
sehr einfach verwandt sein müsse. Nun hat man aber nie ein Gift 
gefanden, trotz aller Reinigungsversuche, dessen Lo- Zahl höher als 200 
gewesen wäre; die höchste Lo-Dosis beträgt sogar bei einem sicher 



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— 39 — 

noch nicht reinen Gift 160 (Madsen). Aus alledem schließt er, dass 
jede Giftboaillon 2U0 Sättignngseinheiten enthalten müsse; dass also 
L£. = 200 Sättignngseinheiten ist. Ein absolut reines Gift (ohne 
Toxone) würde also in frischem Zustand (also ohne Toxoide) eine Lq- 
Zahl voA 200, eine Lf-Zahl von 201 aufweisen. 

Dann ist also in der oben aufgestellten allgemeinen Formel x + y + z 
= 200, daraus lässt sich dann auch die Menge der Toxone mit Benutzung 
der Größen a und ß berechnen, wobei a die Menge der Gifteinheiten, ß die 
Größe D — 1 ist. Wenn z die Menge der Toxone ist, so ist bei der An- 
nahme von 200 Bindungseinheiten die Menge der Toxine und Toxoide 
200 — z. Die Formel jedes Giftgemisches bei Lq ist dann Lo = (200 — z) 
Toxin-Toxo'id+z Toxon, alles an Antitoxin gebunden. Um also ein Toxon 

in Freiheit zu setzen, braucht man Zusatz von tct^^ , wovon 757^^ ^ 

' 200 — z' 200 — z 

der Toxinanteil ist. Um also z Toxone in Freiheit zu setzen, braucht 

fW 

man ™c a. Dies ist also die Menge von Giftlösung, ausgedrückt 

in Gifteinheiten, die man zu (I.E.) + Lo zusetzen muss, um ein Gemisch 
zu erzielen, in dem sämtliche Toxone frei sind, in dem also eine jetzt 

noch zugesetzte Gifteinheit Lf herbeiftlhrt, die Menge ^^ a ist 

also = D — l=ß. Wir haben also um z, die Toxonmenge einer Gift- 
bouillon zu finden, eine Gleichung mit einer Unbekannten: 

'^=200^^7^' 
woraus folgt 

200/9 *) 

""- « + /? ' 

Bechnet er mit Hilfe dieser Formel die Toxonzahlen ftir die von ihm 
untersuchten Giftie aus, so findet er auch für die Toxone Zahlen, die 
mit 100 sehr einfach verwandt sind, z. B. 100, 50, 25, oder 33, 66 u. s. w. 
Nach diesen einfachen Beziehungen ist es möglich, durch Feststellung 
von a und ß jederzeit auf Grund der Annahme von 200 Sättigungsein- 
heiten die Immunitätseinheit, die vorher nur eine empirische Maßein- 
heit war, zu reproduzieren, da es möglich ist, dadurch den Toxinanteil 
und den Toxonanteil zu bestimmen, d. h. bei frischen Giften, die Toxoide 
nicht enthalten, die gesamte Konstitution klarzulegen. Die meisten 
Gifte scheinen in frischem Zustande aus 100 Teilen Toxin und 100 Teilen 
Toxon zu bestehen. 



♦) /9(200--z) = az; 200^9 — i9z=- az; az-{-ßz = 2Q0ß; 

200 jg 



z(a + /J)«200/J; z = 



a + ß 



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— 40 — 

Die Umwandlung des Toxins in Toxolde wird zumeist durch einfaches 
Lagern der Gifte erreicht; hierbei bleibt dann gewöhnlich die Lq-DosIs nach 
einiger Zeit konstant, die Umwandlung macht bei einer bestimmten Grenze 
Halt und neue Toxolde entstehen nicht mehr*). Doch scheint diese Eegel 
nicht ohne Ausnahme, wenigstens hat Madsen^j, der in seiner Arbeit eine 
völlige Bestätigung der EHiiLiCEschen Untersuchungen gegeben hat, ein Gift 
beschrieben, dessen Entgiftung dauernd fortzuschreiten scheint. Er fand bei 
der letzten Bestimmung Lq schon auf 10, L^ auf 15 herabgesunken, so dass 
er es ffli* möglich hält, dass die Bouillon allmählich völlig ungiftig werden 
und nur noch Toxolde enthalten möge. 

Interessant ist femer, dass auch die Toxone nicht unverändert bleiben, 
wie sowohl Ehklich als auch Mausen fanden. Bei ihnen leidet die hap to- 
phöre Gruppe, es tritt Toxonoirdbildung auf, dies drückt sich dadurch 
aus, das Lo sich erhöht, denn wenn aus einem Gemisch von 100 Toxin : 
100 Toxon ein Teil der Antitoxin bindenden Toxone sich an der haptophoren 
Gruppe ändert und so durch Bindung nicht mehr nachweisen lässt, so wird 
natui'gemäß der Toxinanteil an den 200 Sättigungseinheiten größer als 100. 
Dass man Lo-Werte von z. B. 133, den Mausen bei einem Gifte fand, schon 
in frischen Giften konstatieren kann, führt er als wahrscheinlich darauf zurück, 
dass Toxonoidbildung schon in der allerersten Zeit während der Toxinpro- 
duktion vor sich gehen möge. 

Das Licht wirkt nach Madsen auf beide Gruppen, sowohl die haptophore 
als die toxophore, schädigend; er fand bei einem dem Sonnenlicht ausgesetzten 
Giftgemisch, dass zwar die Toxizität stark abnahm, gleichzeitig aber Lq und 
Lf zunahmen; das Toxin verschwindet schließlich in seiner Spezifität ganz, 
aber das Gemisch bleibt darum doch giftig; die Tiere sterben an Kachexieen, 
man findet aber bei der Sektion nichts für das Diphtheriegift Charakteristi- 
sches; es bilden sich also unter dem Einfluss des Lichtes, sit venia verbo, 
giftige Toxolde. 

Ehrlich hat sich mit allen diesen mühevollen Untersuchungen, durch 
wiederholte Bestimmungen der L©- und L+- Dosis Aufschluss über die 
Konstitution des Diphtheriegiftes zu gewinnen, nicht begnügt; er ist durch 
Anwendung einer zweiten, noch scharfsinnigeren Methode weiter in ihre 
Geheimnisse eingedrungen. 

Wenn man die Hypothese zu Grunde legt, dass die Toxoide, Toxine 
und Toxone verschiedene Avidität zum Antitoxin besitzen, so ergiebt 
sich das Postulat, dass sie sich auch nicht in gleicher Verteilung an 
eine gegebene Menge Antitoxin binden. Das ist schon durch die Be- 
stimmung der Lf- Dosis wahrscheinlich gemacht; bewiesen kann es erst 
durch eine direkte quantitative Untersuchung der verschiedenen Avidität. 



*) Dieser Standpunkt pflegt nach einem Jahr meist erreicht zu sein. Infolge- 
dessen werden zur Serumprüfang nur solche Gifte verwendet, die in größeren 
Quantitäten (4—5 1 Bouillon] unter einer hohen Toluolschicht 1 Jahr lang gelagert 
sind. (DÖNiTZ^ Ber. üb. die Thätigkeit des Egl. Instituts f Seramforschung u.s.w. 
S. A. a. d. »Klin. Jahrbuch* Vn (1899). 

>) Madsen, Constitution du poison diphth^riqtie. Ann. Fast, XIII, 668, 1899. 



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— 41 — 

Dies hat Ehrlich und nach ihm Madsen (1. c.) in folgender Weise be- 
werkstelligt: Wenn man zu 200 Sättigungseinheiten (bei frischen Giften 
also 100 Gifteinheiten) eine Immunitätseinheit zusetzt, so ist das Ge- 
misch physiologisch völlig neutral (Lo). Vennindert man nun die Menge 
der zu derselben Giftmenge zugesetzten Antitoxinmenge, setzt man ge- 
messene Bruchteile von 1 1. E. (200 Bindungseinheiten) hinzu , so wird 
allmählich die Giftigkeit wieder in die Erscheinung treten, es wird freies 
Toxin übrigbleiben. Bestände die Giftbouillon aus reinem Toxin, so 
würde sofort bei einer Verminderung um 1 Bindungseinheit Antitoxin 
eine Gifteinheit freiwerden, bei 2 B. E. 2 T u. s. w. bis die 200 T sämt- 
lich freigeworden sind. Enthielte die Giftbouillon außer dem Toxin nur 
noch ungiftige Haptine von gleicher Avidität, so würde jede Vermin- 
derung um 1 B. E. einen Bruchteil einer Gifteinheit freisetzen, aber 
diese Erscheinimg würde sich ganz gleichmäßig vollziehen, so dass, 
wenn eine Verminderung um 20 B. E. 10 T in Freiheit ließe , eine 
solche um 100 B. E. 50 T freilassen würde. Ganz anders aber ge- 
staltet sich die Sache, wenn hier StoflFe von verschiedener Affinität 
vorhanden sind. Dann werden bei eintretender Verminderung von B.-E. 
zuerst die Haptine freigemacht, die die geringste Affinität besitzen, 
(die Toxone), dann die von mittlerer Avidität (die Toxine und Syn- 
toxoide), und erst ganz zum Schluss die mit der größten Verwandt- 
schaft ausgestatteten (Protoxo'ide). Oder anders ausgedrückt, wenn man 
eine gegebene Giftmischung mit steigenden Antitoxindosen sättigt, so 
werden sich erst die Protoxo'ide, dann die Toxine und zum Schluss erst 
die Toxone absättigen. 

Diese von der Theorie geforderten Verhältnisse lassen sich nun 
experimentell erweisen. Wenn man von 200 : 200 herabgeht, so treten 
bis zu einer gewissen Grenze keine Toxinwirkungen, sondern nur die 
oben erwähnten, andersartigen Toxon Wirkungen auf (Zone der freien 
Toxone.) Geht man unter diese Grenze herunter, so sind die Verhält- 
nisse verschieden, je nachdem das Gift nur noch Toxine enthält 
(frische Gifte) oder aber auch noch Syntoxoide und Protoxo'ide. 

Im ersteren, einfacheren Fall bringt dannjede Verminderung 

um ^jy^ I. E. (eine B. E.) eine letale Dosis in Freiheit und dies 

100 
setzt sich bis zu Ende fort. Meist wird diese Grenze bei öqq liegen. 

Dann hätte man also: 

200 
X ccm Gift (100 letale Dosen) -f- gg^ I. E. = 

150 
X ccm Gift -f- g^ = Toxonwirkung 

^ ^.^ 100 

X ccm Gift + gjY) == ^^' 



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— 42 — 

V n-Ä. . 99 IToxinwirkung 

X ccm Gift + cinFT = /i 1 X 1 T^ • \ 

* 200 (1 letale Dosis) 

70 
X ccm Gift + 2ÖÖ = 30 let. D. 

X ccm Gift + 2ÖÖ ^ '^*- ^ ^' ®- ^• 

Das »Spectram« (Ehrlich) dieses denkbar einfachsten Giftes würde 
sich also so gestalten: 




TOXOTV 



töo 



ISpecCnun eines fHschetv üi/tes. 



So einfach liegen nun die Verhältnisse wohl niemals. Erstens sind 
die Toxine an sich wiedemm nicht einheitlich in ihrer Ayidität, woranf 
wir noch zurückkommen werden, zweitens bilden sich sehr bald Pro- 
toxoMe, die die Kurve verändern. Nehmen wir z. B. folgende Zahlen- 
reihe: 

XGift + ^ = 

180 
X Gift + 200 = '^^^^^ ^^^^ 

160 
X Gift + 200^ = Toxon frei 

100 
XGift + gg=60Tfrei 

P>0 

X Gift + ^ = 100 T frei 
Nun stoßen wir auf die ungiftigen Protoxol'de: 
XGift + ^= 100 T frei 

X Gift + c^= 100 T frei 

X Gift + 2^ = 100 T frei 



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— 43 



Das Spectrum würde aussehen: 



ProtoxoUl 




^ W i» M 99 S9 M ' 1Ö0 

£.Spectru/n/ eines Oi/les im ProiacoidsCacUum. 

Eine weitere Komplikation ist die Bildung der Syntoxo'ide (Hemi- 
toxinbildnng). 

Gesetzt, das Toxin zerfällt in gleiche Teile Toxin und Syntoxoüd, 
so gestaltet sich die Absättigung folgendermaßen: 



ccm 


200 
Gift + ^- = 


do. 




do. 


+ ^_lTfi:ei 


do. 


+ -^g = 2Tfrei 


do. 


100 
+ ivv^ = 30Tfreiu.8.w 



Das Spectrum (des gleichen Giftes) nach Syntoxoüdbildung würde so 
aussehen: 




Mßasselie ßi/t im Ife/nitoxinsCadäim. 

In Wirklichkeit gestaltet sich aber das Bild noch viel komplizierter. Ich 
will hier auf die Bilder der einzelnen Giftspectra, die Ehrlich und Mausen 
publiziert haben, nicht speziell eingehen; ich wollte nur die Prinzipien dieser 
Methode erwähnen, und kann mich nun damit begnügen, einfach die Resul- 
tate, die sie aus diesen Analysen gezogen haben, mitzuteilen. 

Die quantitative Umsetzung von Giften beim Lagern gestaltet sich dem- 
gemäß folgendermaßen: Zunächst sind nur Toxine und Toxone vorhanden. 
Die Toxine bestehen aus drei verschiedenen Unterarten, die verschiedene 
Affinität zum Antitoxin haben, dem Proto-, Deutero- und Tritotoxin. 



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— 44 — 

Letzteres steht den Toxonen am nächsten. Ferner besteht jede dieser Toxin- 
abarten ans zwei Modifikationen, dem a- nnd /!?- Toxin, und zwar zu glei- 
chen Teilen. Die cr-Modifikation aller drei Toxine zerfällt sehr schnell unter 
Verlust der toxophoren Gruppen: Bildung von Syntoxolfden, Ausbildung des 
oben erwähnten Hemitoxinstadiums. 

Dann beginnt, schon früh, die Zerstörung der toxophoren Oruppe des 
/^-Tritotoxins, die aber nie bis zur völligen Ersetzung des Toxins durch 
Toxoi'd fortschreitet, es bleiben stets geringe Toxinmengen in dieser Zone 
zurück, z. B. 3:7, 2:8, oder 1 : 9 Toxold, was sich in den Spektren daran 
zu erkennen giebt, dass hier noch Giftwirkungen eintreten, dass z. B. bei 
1 : 9 eine Verminderung um 10 . B. E. 1 letale Dose freimacht. 

Später erst verschwindet auch das /^-Prototoxin (Ausbildung der Pro- 
toxol'dzone). Schließlich bleibt also neben einer kleinen Menge /üf-Trito- 
toxins nur noch das /:f-Deuterotoxin bestehen; und damit pflegt dann ge- 
wöhnlich der Zerfall Halt zu machen; in dieser Form bleibt das Gift durch 
lange Zeiten unverändert. 

Von diesen Kegeln scheint es bisweilen Ausnahmen zu geben. Sowohl 
Ehblich als auch Madsen haben Spectra angegeben, wo schon bei sehr 
frischen Giften eine Ausbildung der Protoxoldzone nachweisbar ist, ob- 
gleich selbst das or-Deuterotoxin noch intakt ist, so dass noch eine Zone 
Volltoxin vorhanden ist. 

Doch glaubt Madsen (1. c.) aus der oben erwähnten fortdauernden Ver- 
minderung der Toxizität seines reinen Giftes den Schluss ziehen zu müssen, 
dass auch das /9-Deuterotoxin nicht gleichmäßig ist, sondern leichter zersetz- 
bare Anteile hat, die zu dem Tritotoxin überleiten. 

Sehr interessant ist eine Bestätigung dieser außerordentlich kompli- 
zierten Verhältnisse dadurch, dass es Madsen (1. c.) mehrfach gelang, 

200 S 
die nach der oben angegebenen Formel z =- ^ berechneten Toxon- 

a + /^ 

mengen in diesen Spektren mit aller wünschenswerten Genauigkeit 
wiederzufinden. 

So ergab sich ihm einmal eine berechnete Toxonzahl z = 33,33, 

170 
und er fand, dass bei ^^ die Tiere sämtlich am Leben blieben, bei 

160 

20^ dagegen starben, so dass die Toxonzahl darnach zwischen 30 nnd 

40 liegen mnss. 

Es erhellt des weiteren, dass ein völliges Umbilden gewisser den Toxonen 
nahestehender Teile des Tritotoxins die Toxonzone vergrößern muss, denn 
die Tritotoxoltde sind dort, wo sie rein auftreten, wo also nicht mehr ein, 
wenn auch noch so kleiner Toxinanteil nachzuweisen ist, infolge ihrer den 
Toxonen gleichstehenden geringeren Avidität sowohl bei der L+ -Bestimmung 
nicht mehr zu erkennen, als auch verschmelzen sie mit den Toxonen, ihrer 
völligen Ungiftigkeit halber, bei der Aufstellung der Spectra. So ist also 
eine scheinbare Vermehrung der Toxone gegenüber ihrer Menge im frischen 



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— 45 — 

Gift, die Ehelich nicht anerkannt hat, die aher Mausen (1. c. pag. 819) 
gefunden hat, zn erklären. 

Eine absolut scharfe Grenze zwischen den einzelnen Bezirken ist 
nicht zu konstatieren. Es scheinen vielmehr Uebergänge stattzufinden, 
sowohl zwischen Toxonen und Toxinen, wie zwischen diesen nnd Pro- 
toxoiden, soweit man nicht solche unscharfe Uebergänge mit Madsen 
auf den Einfluss verschiedener Konzentrations- nnd Temperaturverhält- 
nisse zurttckftihren will, die die quantitativen Bindungsverhältnisse woh 
in geringem Maße zu beeinflussen imstande sind. 



Die Toxine und Antitoxine im Lichte der 
physikalischen Chemie. 

Die moderne physikalische Chemie, die unsere Ansichten ttber das 
Wesen der chemischen Vorgänge so tiefgreifend reformiert hat, beginnt 
seit kurzem auch die physiologisch -chemischen Prozesse zu studieren. 
Von wie großem Einfluss diese Vorstellungen und Methoden auf die 
Lehre von den Fermenten gewesen sind, habe ich an anderer Stelle^) 
auseinandergesetzt. In neuester Zeit beginnt man nun auch die Vor- 
gänge, die der Wirkung der Toxine und Antitoxine zu Grunde liegen, 
mit Hilfe der kinetischen Vorstellungen der physikalischen Chemie zu 
untersuchen. Man kann der Hoffnung Raum geben, dass es auf diesem 
Wege gelingen möge, das, was uns Ehrlich durch seine geniale An- 
schauungsart vorstellbar gemacht hat, nun auch zahlenmäßig, in mathe- 
matischem Ausdruck zu fassen. Vorläufig stehen diese Bestrebungen 
allerdings noch im allerersten Anfang. 

Die Vorgänge, die sich bei der Bindung der Toxine an die Rezep- 
toren der lebenden Zellen vollziehen, sind dieser Untersuchungs- 
methode wohl für alle Zeit unzugänglich. So hat man denn naturgemäß 
bei denjenigen Prozessen den Hebel angesetzt, wo wir den Ablauf und 
das Resultat in vitro verfolgen können, bei der Hämolyse. Auch 
hier haben wir es Ehrlich zu verdanken, dass wir für diese Prozesse 
im Besitz exakter Messungsmethoden sind. 

So behandelt denn die erste wichtige Arbeit auf diesem neuen Gebiet 
die Hämolyse einerseits unter dem Einfluss einfacher Blutgifte, anderer- 
seits spezifischer blutlösender Haptine, nämlich des Tetanolysins. 

Arrheniusä Madsen 2) untersuchen den Verlauf der Hämolyse durch 
NH3, KaOH und Tetanolysin. 

Als Testobjekt für die Hämolyse wurde eine 2,5 proz. , vom Serum 
gut ausgewaschene Emulsion von Pferdeblutkörperchen benutzt, je nach 



1) Oppenheimer, Die Fermente und ihre Wirkungen. 2. Aufl. Leipzig 1903. 

2) Arrheniüs & Madsen, Anwendg. d. physik. Ch. auf d. Stud. der Toxine u. 
Antitoxine. Z. pbysik. Ch., 44, 1 (1903). 



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— 46 — 

Bedarf in isotonischer ClNa- oder Rohrzuckerlösung. Die Messung des 
Grades der Hämolyse geschah kolorimetrisch durch Vergleichung mit 
Pferdeblutlösungen, indem sie die Farbstärke einer Lösung von 2,5 ccm 
Blut in 100 ccm dest. Wasser = 100 setzten und durch entsprechende 
Verdünnung eine Farbskala herstellten. 

Für Vergleiche ist bei gleichbleibender Blutmenge (stets 10 ccm der 
obigen Aufschwemmung) nur dasjenige verhältnismäßig enge Intervall 
geeignet, bei dessen unterer Grenze die Hämolyse gerade beginnt und 
bei dessen oberer Grenze sie komplett ist. 

Als erstes Resultat ergab sich dann, dass mit zunehmender Toxin- 
menge*) die Hämolyse sehr schnell zunimmt, und zwar in grober An- 
näherung so, dass sie proportional ist dem Quadrat der Toxin- 
konzentration. 

Die »Konzentration« des lösenden Agens ist nun nicht ohne 
weiteres der zugesetzten Menge entsprechend. Bei NH3 und NaOH 
wird nämlich eine gewisse Menge an die Blutkörper gebunden, die in 
der Konzentration nicht mitspricht. Beim Tetanolysin ist diese Biur 
düng so schwach, dass diese Zahlen Keiner Korrektur bedürfen. 

Aus diesem Grunde lässt sich für NH3 und NaOH eine untere Grenze 
finden, wo die Hämolyse ganz ausbleibt, für Tetanolysin nicht. 

Es wurden nun Versuchsreihen angestellt, in denen einerseits der 
Prozentgehalt an Blutkörperchen, andererseits die Menge des »Toxins« 
(in obigem Sinne) variiert wurde. Der einfachste Fall ist der, dass das 
Toxin in einem derartigen Ueberschuss vorhanden ist, dass stets kom- 
plete Hämolyse eintritt. Trägt man in diesem Fall den Prozentgehalt 
des Blutes auf die Abszisse, den Grad der Hämolyse als Ordinaten auf, 
so bildet das Ordinatensystem naturgemäß eine ansteigende gerade Linie. 
Ist aber die Menge des Toxins geringer, so stellt nur der Anfangsteil 
der Kurve eine gerade Linie dar, solange nämlich die Blutmengen noch 
so gering sind, dass die Hämolyse komplet ist. 

Wächst aber die Blutkonzentration weiter, so tritt nach kurzem 
Ansteigen der Punkt ein, wo das gesamte »Toxin« (NH3 später als 
NaOH) gebunden ist, und die Kurve wieder absinkt. Die Form dieses 
Maximums ist bald spitzer, bald flacher, was von der verschiedenen 
Festigkeit der Bindung an die Blutkörperchen abhängt. Diese Details 
über die Wirkung verschiedener anorganischer einfacher »Toxine« in- 
teressieren uns hier nicht. 

Sehr wichtig ist nun aber, dass dieses Maximum beim Tetanolysin 
fast völlig fehlt, resp. nicht sicher erkennbar ist. Andererseits liegt 



^) Arrhenius & Madsen benennen die blntlösenden Agentien mit dem Sammel- 
namen »Toxine«, während sie das spezifische Haptin »Lysin« nennen. Diese 
Anwendung des Begriffes Toxin, die der jetzt glücklich erreichten Beschränkung 
auf Haptine nicht folgt, ist leider geeignet, Verwirrung zu stiften. 



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— 47 — 

dieses schwache Maximum schon bei einer viel geringeren Blutkonzen- 
tration als bei NHs u. s. w. Daraus folgt einerseits, dass die Bindung 
des Tetanolysins an die Blutkörperchen eine sehr viel schwächere ist, 
als die der anorganischen Agentien, dass sie aber andererseits so lang- 
sam eintritt, dass auch noch der Anteil wirksam ist, der noch verankert 
werden könnte, während bei den Bindungen von NHa u. s. w. die An- 
kuppelung so schnell erfolgt, dass eben nur der thatsächliche üeber- 
schuss an »Toxin« zur Wirkung gelangt. 

Dieses Ergebnis, dass das Tetanolysin zu den Rezeptoren der Ery- 
throcyten eine so schwache Affinität besitzt, könnte man als Waffe gegen 
die allgemeine Lehre der spezifischen Bindung benutzen. 

Wir werden auf diese Frage der schwachen Bindung bei der Dis- 
kussion der Beziehungen zum Antitetanolysin zurückkommen. 

Beaktionsgesohwindigkeit der Eämolyse. 

Die Messung der Reaktionsgeschwindigkeit ist eines der wichtigsten 
Mittel, um näheren Aufschluss über das innere Wesen chemischer Vor- 
gänge zu gewinnen. Abrhenius & Madsen maßen die Zeit, innerhalb 
deren die Hämolyse bis zu einem bestimmten Punkte vorschreitet. 

Zu diesem Zwecke ließen sie einen üeberschuss von »Toxin« eine 
bestimmte Zeit auf gleiche Blutmengen (die gleich 100 gesetzt werden) 
einwirken; durch Abkühlen wurde die Hämolyse unterbrochen, zentri- 
fugiert und der Grad der Hämolyse bestimmt. Da die Menge der ge- 
lösten Blutkörper in der Zeiteinheit abhängig ist von der Zahl der noch 
vorhandenen (100 — x) ungelösten, so gilt folgende Gleichung: 



oder integriert 



1. || = K(100-x) 



2- '"'^=K"'-''' 



Der Versuch zeigte nun, dass K nicht konstant ist, sondern während 
der Dauer des Versuchs sehr rasch anwächst. Das wird daraus erklärt, 
dass die Membranen der Blutkörperchen zunächst dem Eindringen des 
Toxins einen Widerstand entgegensetzen, welcher mit der Zerstörung 
der Membran immer kleiner wird. 

Es werden zunächst ttberhaupt keine Blutkörper angegriffen, sondern 
die Hämolyse tritt erst dann in die Erscheinung, wenn die ersten, am 
wenigsten widerstandsfähigen Membranen nachgeben. Es ist also eine 
aus dieser Widerstandsfähigkeit folgende »Induktionszeit« der Hä- 
molyse notwendig, die hier in diesen Fällen sehr leicht erklärlich ist. 

Diese Methode gab deshalb keine zuverlässigen Werte. Die Ver- 
fasser prüften deshalb, ob die doppelte Menge »Toxin« in der halben 



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— 48 — 

Zeit dieselbe Wirkung hat, wie die halbe in der doppelten Zeit. Es 
ergab sich, dass, nach Anbringung der nötigen Korrekturen für Ver- 
änderung des Volums, dieses Verhältnis annähernd existiert, d. h. 
dass die Reaktionsgeschwindigkeiten proportional den Toxin- 
konzentrationen sind. Das gilt fttr NH3, NaOH, und Tetanolysin. 
Für die Menge umgewandelter Blutkörperchen ergiebt sich wenigstens 
für geringe Grade (wo x also klein ist) die Beziehung (a = Toxinmenge) 

nach Integration 

Vx = 2Kat 

in Worten : die hämolysierte Menge Blut ist nicht nur dem Quadrat der 
Reaktionszeit, sondern auch dem Quadrat der Toxinmenge proportional, 
eine bereits ganz oben empirisch festgestellte Thatsache. 

Die Zunahme der Reaktionsgeschwindigkeit mit der Erhöhung 
der Temperatur beträgt für 10^ bei NH3 und bei NaOH 2,76:1, 
bei Tetanolysin 3,04 : 1. Die relative Reaktionsgeschwindigkeit von 
NHs : NaOH beträgt 2,24 : 1. Sie ist also durchaus imabhängig von der 
Konzentration der OH-Ionen. Es sind also nicht die OH-Ionen, die 
das eigentlich wirksame Agens der Hämolyse darstellen. 

Neutralsalze der Alkalien hemmen die Wirkung der zugehörigen 
Basen stark. Die Wirkung des Salzes wächst ungefähr entsprechend 
der Kubikwurzel aus seiner Menge. Besonders stark wirken Ammonium- 
salze hemmend. Auf die Wirkung des Tetanolysins haben Salze (nur 
in größeren Mengen) einen verstärkenden Einfluss. Normales Blutserum 
und Eieralbumin hemmt die Wirkung der »Toxine«, besonders stark 
aber die des Tetanolysins. Wir haben also auch hier die Hemmung der 
aktiven StoflFe durch das normale Blutserum, die bei den Fermenten 
eine so große Rolle spielt. Es wird sich wohl auch hier um das Vor- 
kommen von normalen Rezeptoren als Antikörper handeln. 



Beziehungen zwischen Toxin und Antitoxin. 

Diese Versuche wurden von Arrhenius & Madsen am Tetanolysin 
angestellt. Die Methode ist eine Erweiterung der oben geschilderten 
EHRLiCHSchen Methode der inkompletten Sättigung. 

Die Verfasser setzten zu einer stets gleichbleibenden Toxinmenge 
(2 cm 3 einer 2 proz. Tetanolysinlösung) steigende Mengen Antitoxin (in 
0,0025 proz. Lösung) und prüften die Toxizität dieser Mischung, d. h. 
die Menge, die zu 10 cm^ 2,5 proz. Pferdeblut zugesetzt einen bestimmten 
Grad der Hämolyse bewirkt. Unter Berücksichtigung der Volumverhält- 
nisse ist die Formel für die Toxizität 



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G = 



- 49 — 
1 10 + x 



X 10 

wenn x die beobachtete toxische Menge ist. 

Dabei stellt sich zunächst durch Beobachtung heraus, dass mit 
zunehmender Antitoxinmenge die nötige Menge x stetig wächst, 
und dementsprechend G stetig abnimmt. Es liegt also beim Tetano- 
lysin kein Grund vor ein treppenförmiges »Giftspectrum« 
(siehe oben) anzunehmen. Im Gegenteil folgen die Beziehungen zwi- 
schen Toxin und Antitoxin einer stetigen Kurve. Diese Kurve ist 
sehr ähnlich der, die das Gleichgewicht zwischen einem teilweise 
dissoziierten Körper imd seinen Dissoziationsprodukten darstellt. Es 
besteht also zwischen freiem Toxin und Antitoxin einerseits und ihrer 
Verbindung andererseits ein Gleichgewichtszustand, so dass alle 
drei Komponenten vorhanden sind. Dies weicht von der EHRLiCHschen 
Grundanschauung gerade so ab, wie wir es oben für die Bindung Lysin — 
Zelle angeführt haben. Denn Ehrlich nimmt für das Diphtheriegift 
eine feste Bindung Toxin —Antitoxin an, so dass nur der reelle Ueber- 
schuss der einen Komponente wirksam sein soll Wir werden darauf 
unten zurückkommen. 

Arrheniüs & Maosen haben diese Beobachtungen auch noch durch 
eine theoretische Berechnung von und x ergänzt. G folgt aus dem Ansatz: 

Freies Toxin Freies Antitoxin /Toxin — Antitoxinverbindung \2 

' m Yöi. "■ \ VÖL / * 

Die Menge des dreien und des gebundenen Toxins lässt sich auf einem kompli- 
zierteren Wege berechnen : Als Einheit der Toxinmenge wird die angenommen, 
die in 1 cm' einer Iproz. Lösung enthalten ist. Nun enthalte die ursprüng- 
liche Mischung von Toxin mit 10 cm' Blut (ohne Antitoxin) pro cm' 
0,23 : 10,23 Einheiten. In einem Versuch mit Antitoxin müssen x cm' zu- 
gesetzt werden um dieselbe Farbennuance zu erhalten, d. h. um zu bewirken, 
dass dieselbe Menge freies Lysin vorhanden ist. Dann ist das vom Anti- 
toxin gebundene Toxin gleich der Differenz zwischen zugefügtem und 
freiem Toxin = x : (10 -f- x) — 0,23 : 10,23 und ebensogroß natürlich die 
gebundene Antitoxinmenge. Die Menge des zugesetzten Antitoxins (n) ist 
auf 4 cm' Lysinlösung verteilt, jeder Einheit des Toxins entspricht also 

-- cm' Antitoxin. Ist nun die Relation von Antitoxin zu Toxin in cm' = p, 

d. h. sättigt 1 cm' Antitoxin p cm' 1 ßi Lysinlösung ab, so ist 

4 X 

— .^ . • P die Antitoxinmenge pro cm' . 

n 10 + X 

Davon ist die bekannte gebundene Antitoxinmenge abzuziehen, wenn man 
das wirksame freie Toxin berechnen will. Es ergiebt sich also in die Glei- 
chung 1. eingesetzt: 

Oppenheimer, Toxine and Antitoxine. 4 



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— 50 — 

• 10,23 U 10 + x*^ \10 + x 10,22 /J \10 + x 10,23/ * 

K und p lassen sich aus den Durchschnittszahlen der Sättigungsversuche 
annähernd berechnen, und zwar ist nach 12 Versuchen 

K = 0,115 p = 14,55 , 

d. h. 1 cm^ des gebrauchten 0,0025 proz. Antitoxins neutralisieren 14,55 cm^ 
der willkttrlichen Toxineinheit, oder diese Einheit entspricht 0,069 cm^ Anti- 
toxin. 

Wenn man aus dieser Gleichung G und x berechnet, findet man eine 
sehr gute üebereinstimmnng mit den beobachteten Werten. 

Das Gleichgewicht zwischen Toxin und Antitoxin wird 
bei großen Antitoxinmengen sehr langsam erreicht. Gleich- 
zeitig tritt dann eine Schwächung des Toxins ein, so dass x größer wird. 

In derselben Weise gestaltete sich der entsprechende Versuch, bei 
dem das Toxin durch Ammoniak, das Antitoxin durch Borsäure ersetzt 
wurde. Auch hier trat die neutralisierende Wirkung der Borsäure in 
dem Grade ein, dass das Gesetz galt: 

(freies NH3) (freie Borsäure) = K (gebundene Borsäure)^, 

Aus diesen Versuchen folgt also, dass f Ur das Tetanolysin und seine 
Absättigung durch sein Antitoxin ganz ähnliche Gesetze gelten, wie 
sie beim Absättigen von Basen mit schwachen Säuren gelten. 
Es bleiben stets Anteile der freien Komponenten übrig. 

Daraus werden nun Angriffe auf die EHRLiCHsche Lehre von den 
Giftspektren abgeleitet. 

Wenn man die Kurve der Absättigung von Ammoniak durch Bor- 
säure konstruiert, so findet man, dass die erste zugesetzte Menge 1 
50^ NH3, die zweite Menge 1 nur noch 16,7^, die dritte Menge 1 
noch 8,3 X des Ammoniaks absättigt und könnte daraus den Schluss 
ziehen, dass die erste Absättigungsquote ein sehr viel toxischeres NH3 
trifft als die späteren; d. h. das Ammoniak bestände aus verschieden 
toxischen Anteilen, die mit verschiedener Avidität gebunden werden, 
und deren Avidität in einfachen Verhältnissen steht. Man sieht, dass 
hiermit die EHRLiCHSchen Ausfuhrungen über Proto-, Deutero- u.s.w. 
Toxine getroffen werden. 

Man darf also nach M. u. A. für das Tetanolysin nicht die Verhältnisse 
als Analogieen benutzen, die sich bei Absättigung starker Basen und 
Säuren herstellen, wie dies Ehrlich für das Diphtheriegift gethan hat. 
Bei starken Säuren und Basen ist die Menge der freien Komponenten 
außerordentlich klein, es ist praktisch nur die Verbindung und 
der Ueberschuss der einen Komponenten in Wirksamkeit. An diesem 
Maßstab gemessen, weicht also die Sättigungskurve des Diphtheriegiftes, 
wie Ehrlich gezeigt hat, sehr beträchtlich von der einfachen Kurve 



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— 51 — 

der Säure-Base-Säktigung ab und legt die Existenz verschieden giftiger 
Anteile nahe. Nimmt man aber die bei schwacher Avidität eintretenden 
Gleichgewichtszustände zum Maßstab, wie sie beim Tetanolysin 
vorhanden sind, so sind diese scheinbaren Aviditäts Verschiedenheiten 
ohne Annahme verschiedener Toxinzonen auf Grund des Massen- 
gesetzes zu erklären. Es braucht nur ein Toxin und nur ein Anti- 
toxin zu existieren, die bei ihrer gegenseitigen Absättigung verschiedene 
Gleichgewichtszustände durchmachen, die hinreichen, um die zahlen- 
mäßigen Bindungsverhältnisse zu erklären, zu erklären, warum die 
Menge des Antitoxins nicht stets der gleichen antitoxisch wirken- 
den Energie entspricht. 

Diese Ausführungen würden, wenn sie auch für andere Gifte als das 
Tetanolysin Geltung fänden, zwar einen nicht sehr erheblichen Teil der 
EHRLiCHschen Anschauungen reformieren, aber gleichzeitig und auf exakt 
wissenschaftlichem Wege in der Kenntnis dieser außerordentlich wich- 
tigen Vorgänge weiterftlhren. Neben diesen Angriflfen auf die Ehrlich- 
schen Anschauungen sind nun fast gleichzeitig noch andere Stimmen 
laut geworden, die gegen fast dieselben Ideen Ehrlichs Front machen. 

Vor allem ist hier die kürzlich erschienene Arbeit Bordets^) zu 
nennen, der auf Grund theoretischer Vorstellungen auch dahin gelangt, 
eine Art von Gleichgewichten zwischen Toxin und Antitoxin anzu- 
nehmen. 

Freilich stützen sich diese Ideen nicht auf exakte physikalisch- 
chemische Messungen, sondern sind rein spekulativ. Die Beziehungen 
zwischen Toxin — Antitoxin sollten entweder gewisse Analogieen mit 
den Vorgängen bei der Färbung (Insorption u. s. w.) zeigen, die er 
aber gar nicht näher präzisiert — direkte Identitätsbeziehungen lehnt er 
geradezu ab — ; oder aber es sollten sich komplexe Verbindungen von 
einem Toxinmolekül mit mehreren Antitoxinmolekülen ausbilden. Das 
Antitoxin soll sich so über die ganze Toxinmenge verteilen, dass je ein 
Teil jedes Toxinmoleküls abgesättigt und seiner Giftigkeit beraubt er- 
scheint Im großen und ganzen sind diese Spekulationen, die nicht auf neuen 
Thatsachen beruhen, theoretisch ebenso, wenn nicht schwieriger vor- 
zustellen, als die EHRLiCHSchen Spectra, die wenigstens auf Grund 
einer, wenn auch komplizierten, Hypothese alle Thatsachen erklären. 

Im übrigen will die BoRDETsche Annahme eines »teilneutralisierten« 
Toxins absolut nicht einleuchten, wenn man nicht auf die alte, glücklich 
abgethane »Zerstörung« der Giftigkeit zurückgreifen will. 

So wird denn wohl der BoRDETSche Angriff auch nicht geeignet sein, 
die EHBLiCHSche Lehre von der Pluralität der Gifte zu stürzen. 

Noch weniger haben die verschiedenen AngriflFe Grubers die Ehrlich- 



*) BoRDET, Snr ie mode de raction des antitoxines am lea toxinea. Ann. Fast. 
XVII, 161 (1903). S. A. 

4* 



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— 52 — 

sehe Position erschüttern können, obwohl sie nichts weniger als den 
Sturz der gesamten Seitenkettentheorie beabsichtigten. Sie haben von 
Ehrlich 1) eine so gründliche Widerlegung und Abfertigung gefunden, 
dass wir an dieser Stelle darauf verzichten können, sie einzeln durch- 
zusprechen. 

Viel wichtiger erscheinen auf den ersten Blick die auf einwandfreie 
Versuche gestützten Einwände von Aerhenius & Madsen gegen 
Ehrlichs Annahme von der Vielfältigkeit des Diphtheriegiftes. 

Indessen zeigt sich auch hier, dass man auf dem Gebiet der Toxin- 
lehre sich vor nichts mehr hüten muss, als vor zu schnellen Verall- 
gemeinerungen. 

Ehrlichs 2) Erwiderung auf die ARRHENius-MADSENSche Arbeit, die 
soeben erschienen ist, hält seine Position durchaus aufrecht. 

Ehrlich giebt natürlich die Richtigkeit der gegnerischen Befunde 
ohne weiteres zu, aber eben nur fllr das Tetanolysin, dessen Un- 
beständigkeit und langsame Bindung er selbst schon vor Jahren erkannt 
hat. Er führt einen Versuch an, nach dem die Antitoxinwirkung nach 
2 Stunden 40mal so groß war, als unmittelbar nach der Mischung. 

Ehrlich bestreitet aber, dass die Feststellungen an diesem unbe- 
ständigen und langsam bindenden Gift auf das sehr intensiv und schnell, 
nach wenigen Minuten sich an das Antitoxin bindende Diphtheriegift 
tibertragen werden dürfen, für das allein seine Spectra aufgestellt 
sind. 

Er wiederholt in seiner Entgegnung mit großer Eindringlichkeit 
nochmals die Gründe, die ihn zur Entwicklung seiner Auffassung von 
der komplexen Struktur des Diphtheriegiftes geführt haben, unter An- 
führung zahlreicher, zum Teil bisher unveröflfentlichter Einzelthatsachen. 

Es würde daher zu weit führen, alle seine Gründe nochmals zu be- 
sprechen, da wir fast unsere gesamten Ausführungen über Toxoide und 
Toxone wiederholen müssten. So sei nur weniges daraus hervorge- 
hoben: 

Die Annahme von Toxoiden verschiedener Avidität folgt mit Not- 
wendigkeit aus dem allmählichen Absinken der Toxizität unter kon- 
stantem Erhaltenbleiben der Sättigungsgröße gegen Antitoxin. Ehrlich 
zeigt an dem einfachen Beispiel der Absättigung eines Gemisches zweier 
verschiedener Alkaloide, z. B. Chinin und Codem, die verschiedene 
Avidität gegen Salzsäure haben, dass hier ganz analoge Sättigungsgrenzen 
eintreten, wie sie Arrheniüs & Madsen als Gleichgewichte zwischen 
schwachen Basen und Säuren auffassen. Die Kurve kann bei richtiger 
Mischung der Alkaloide eine ganz ähnliche Form annehmen. 



1) Ehrlich, Toxin und Antitoxin. Münch. med. Woch., 1903, Nr. 33/34. S. A. 

2) Ehrlich, üeb. d. Giftkomponenten des Diphtherietoxins. Berliner klin. 
Woch., 1903, Nr. 35, S. A. 



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— 53 — 

Die Protoxolde lassen auch Arrheniüs d Madsen gelten, 
Ehrlich zeigt aber zahlenmäßig, dass auch andere Toxoide existieren 
müssen. 

Eis gelangt ihm ferner, an einem bestimmten Gift durch die Berechnung 
der Lt-Dosis nachzuweisen, dass hier die Absättigung Toxin: Antitoxin 
genau so erfolgt, wie die einer starken Base durch eine starke Säure, 
d. h. dass der Verlauf durch eine grade Linie dargestellt werden muss. 
An demselben Gift ließ sich auch der Nachweis fahren, dass in den 
weniger aviden Teilen des Toxines eine Tritotoxoidausbildung stattge- 
funden haben muss. 

Des weiteren lässt sich durch einfache Ueberlegungen der Beweis 
führen, dass bei der Umwandlung von Toxin in ToxoKd keine Aviditäts- 
änderung statthaben kann. 

Da aber nun nach erfolgter Emstellung des Giftes im ßuhestadium 
verschiedene Aviditäten vorhanden sind, so müssen diese schon im 
frischen Gift, im Toxinstadium vorhanden gewesen sein, womit die 
Pluralität der Gifte erwiesen erscheint. 

Ehrlich hält also durchaus daran fest, dass schon im frischen 
Diphtheriegift Giftvarietäten verschiedener Avidität vorhanden sind, 
die nachher zum Teil in Toxoide verschiedener Avidität übergehen. 

Auch die Existenz der Toxone als primärer Nebenprodukte der 
Thätigkeit des Diphtheriebacillus, die Arrheniüs & Madsen ange- 
zweifelt hatten, hält Ehrlich durchaus aufrecht. Besonders zeigt der 
Fall eines Giftes ohne Toxone, dass es sich hier nicht um einen »nicht 
abgesättigten Giftrest« handeln kann, sondern um meist vorhandene, 
selbständige Stoffe mit geringer Avidität zum Antitoxin; denn wenn es 
sich um Gleichgewichte handelte, müssten diese bei allen Giften vor- 
kommen. Abgesehen von diesem wichtigen Grenzfall ohne Toxone 
spricht dagegen auch die ungeheuer große Amplitude in der relativen 
Menge der Toxone, die von — 300^ variieren kann. 

Für ihre reale Existenz spricht ferner das häufige Abnehmen der 
Toxone, die »Toxono'idbildung«, sowie ihre durchaus verschiedene 
physiologische Wirksamkeit (s. o.). 

Ehrlich schließt aus seinen Ausführungen, dass das Diphtheriegift 
aus mindestens drei Giftvarietäten besteht: 

1. das Toxin, 

2. das Toxon (das Kaninchen akut, Meerschweinchen unter Läh- 
mungen tötet), 

3. Toxono'ide (bei Kaninchen Lähmungen erzeugend, für Meer- 
schweinchen unschädlich). 

Ferner hält er aufrecht, dass die Avidität des Diphtherietoxins 
zu seinem Antitoxin eine hohe ist, so dass die Absättigungs- 
kurve des Reintoxins eine gerade Linie darstellen würde; 
die Abweichungen sind nur durch Annahme verschieden avi- 



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— 54 — 

der Anteile zu erklären. Diese verschieden aviden Anteile 
sind im Gifte präformiert. 

Sehr nahestehend den anf ihre experimentellen Befände gestützten 
Annahmen von Arrhenius & Madsen sind die theoretischen Erörte- 
rungen von EisEXBERQ^). Auch er neigt dazu, die Neutralisation von Gift 
und Gegengift als Herbeiführung eines Gleichgewichtszustandes zu er- 
klären, bei dem außer der festen neutralen Verbmdung noch ein lieber- 
schuss jeder der beiden aktiven Komponenten vorhanden ist. Er hoflft, 
mit dieser Annahme die Schwierigkeiten beseitigen zu können, die bei 
dem Vorhandensein nur der Verbindung mit dem üeberschuss einer 
Komponente sich ergeben. Indessen beruht seine Argumentation eben- 
falls auf den Verhältnissen anderer Gifte wie der Diphtherie, so des 
Tetanusgiftes, der hämolytischen Komplemente und vor allem der 
Agglutinine. Dass bei diesen Stoffen lockere Verbindungen mit disso- 
ziierten Gleichgewichtszuständen vorhanden sein können, ist sehr wahr- 
scheinlich. Aber für das Diphtheriegift scheinen nur die Bindungs- 
verhältnisse in Kraft zu sein, die auch Eisenberg als möglich voraus- 
setzt, dass nämlich die Menge der freien, dissoziierten Komponenten 
sehr gering ist, wie es eben bei festen Verbindungen erforderlich ist. 
So gelten Ebrlichs Auseinandersetzungen auch in Bezug auf diese 
Verallgemeinerungen, die sich eben auf das Diphtheriegift nicht beziehen. 

Es sind darum bei anderen Giften die Verhältnisse durchaus nicht 
im vornherein klargestellt: die Frage der Bedeutung der etwa vorhan- 
denen Dissoziationen, der quantitativen Beziehungen zwischen Toxin — 
Antitoxin muss an jedem einzelnen Gift aufs neue geprüft werden. 
Vermutlich wird sich eine ganze Skala von Aviditäten ergeben, die von 
ganz lockeren, stark dissoziierten Verbindungen, wie sie beim Tetanolysin 
vorhanden zu sein scheinen, zum Diphtheriegift führen. In diesem Sinne 
sei noch erwähnt, dass auch beim Ricin scheinbar Gleichgewichts- 
zustände vorhanden sind, bei denen in der Nähe des völligen Neutra- 
litätszustandes freies Toxin neben freiem Antitoxin sich findet, wie sie 
Danyscz^) beschrieben hat, der daran allerdings ganz unhaltbare, den 
BoRDETschen ähnliche Spekulationen geknüpft hat. Auf die Thatsachen 
werden wir beim Ricin zurückkommen. Man darf aber, wie Ehrlich 
immer wieder mit vollem Recht betont, nie vergessen, dass gerade bei 
diesen schwachen Bindungen einerseits die Konzentration, andererseits 
aber auch die Zeit der gegenseitigen Berührung eine sehr gewichtige 
Rolle spielt. Durch eine zu kurz bemessene Reaktionszeit kann also 
bei langsam sich verbindenden Komponenten ein zu hoher Dissoziations- 



«) M. Eisenberg, D. Bindungsverh. zwischen Toxin und Antitoxin. C. f. Bakt, 
34, 259 (1903). 

2) Danyscz, Contr. ä l'etude des propr. des melanges des toxines avec leurs 
antitox. Ann. Fast., XVI, 331 (1902). 



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— 55 — ^ 

grad vorgetäuscht werden. Wenn Eisenberg also als Beweismittel die 
Dissoziation von Schlangengift- Antitoxin bei höherer Temperatur anführt, 
so sei daran erinnert, dass nach Martin und Cherry eben diese Disso- 
ziation, die zur sekundären Zerstörung des Antitoxins führt, nur sehr 
kurze Zeit nach der Mischung noch möglich ist. 

Zum Schluss sei noch erwähnt, dass auch in Bezug auf andere 
Haptine die Massengesetzüberschätzung nicht zu weit getrieben werden 
darf. Im Gegensatz zu £isenbero, der für Agglutinine und Präzipitine 
dissoziierte Gleichgewichtszustände als Regel annimmt, weist v. Düngern i) 
nach, dass solche Zustände ganz inkonstante Ausnahmen sind, und dass 
im allgemeinen die Verbindung Präzipitin — präzipitable Substanz eine 
komplette, feste ist. Zur Erklärung der quantitativen Verhältnisse nimmt 
er, ganz analog den EHRLiCHschen Ansichten, eine Pluralität der 
Präzipitine an. 



Wärmetönung der Toxin-Antitoxinwirkung. 

Mit Hilfe der van x'HoFFSchen Formel 

dlognatK _ W 
dt ~ 1,99T2 

konnten Arrheniüs & Madsen aus der Aenderung der Dissoziationskon- 
stante K die Wärmetönuüg berechnen, die bei der Bindung von 1 Gramm- 
molekül Toxin mit 1 Grammmolekül Antitoxin in Freiheit gesetzt wird. 

Diese Zahl ist = 6600 Cal (mit einer Unsicherheit von 600 Cal). 

Diese Wärmeentwicklung ist fast halb so groß wie die bei der 
Absättigung einer starken Base mit einer starken Säure. 



Die Endotoxine und die Bakterienproteine. 

Die Endotoxine. 

Während die Produktion und Wirkungsart der echtenToxine, wie 
sie Diphtherie- und Tetanusbazillen bilden, genauer bekannt sind, liegen 
die Dinge bei einer großen Reihe von Krankheitserregern, als deren 
Hauptvertreter wir die Bakterien der Cholera, des Typhus und den 
Bac. pyocyaneus zu bezeichnen haben, wesentlich anders und komplizierter. 

Filtriert man eine nur wenige Tage gewachsene Cholerakultur durch 
Bakterienfilter, so ist das Filtrat nur in sehr schwachem Maße toxisch. 
Es bedarf mehrerer cm^ intraperitoneal, um ein Tier zu töten, und 
selbst in diesen Mengen sind die Filtrate nicht für alle Tiere tödlich. 



1] V. Dungern, Bindungsverh. bei d. Präcipitinreaktion. C.f.Bakt, 34, 3öö 1903]. 



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- 56 _ 

Nimmt man aber den Rückstand des Filtrats, also die abfiltrierten Bak- 
terienkörper, und tötet diese durch gelinde Desinfektionsmittel, z. B. 
Chloroform, ab, so zeigt sich, dass diese abgetöteten Bazillenleiber eine 
hochgradige Toxizität besitzen. Einige Milligramme dieser Bakterien- 
leiber genügen, um ein Tier bei intraperitonealer Einverleibung akut 
zu töten, unter schweren Kollapserscheinungen. Es ist also hier das 
Verhalten umgekehrt wie bei den Diphtheriebazillen, indem in die 
Lösung anfangs weniger Gift übergeht, dagegen die toten Bakterienleiber 
sehr stark giftig sind. Nimmt man nicht ganz frische, sondern alte 
Bouillonkulturen, die mehrere Wochen lang im Brutschrank gestanden 
haben, so zeigt sich eine beträchtliche Zunahme der Giftigkeit an den 
keimfreien Filtraten. Schon kleinere Dosen genügen, um die Versuchs- 
tiere zu töten. Doch erreicht auch unter diesen Umständen die Giftig- 
keit dieser Filtrate niemals ähnliche Werte, wie sie bei Diphtherie- 
und Tetanusgift vorkommen, wo schon Bruchteile von Milligrammen 
tödlich wirken können. 

Die Deutung dieser experimentellen Ergebnisse bietet keine Schwierig- 
keiten: offenbar haben die Cholerabazillen u. s. w. den größten Teil 
ihres Giftes in ihrer Leibessubstanz aufgespeichert. Dieser Teil wird 
nur frei, wenn die Bakterien zerstört, aufgelöst werden, wie es im Tier- 
körper durch die Säfte geschieht und bei älteren Kulturen spontan vor- 
kommt, indem hier eine Menge von Bazillenleibem durch die alkalischen 
und sonstigen Produkte der alten Kulturen aufgelöst werden; daher 
kommt die oben erwähnte Thatsache, dass in alten Kulturen das Filtrat 
viel toxischer wird, eben infolge dieses Auslaugungsprozesses, als bei 
jungen Kulturen. 

Fragen wir uns nun, welche Stellung diese Gifte nach unserer De- 
finition einnehmen: ob sie echteToxine sind, gegen die der Organis- 
mus Antitoxine bildet, so ist dabei folgendes festzustellen: 

Gegen die in den Bazillenleibem enthaltenen Gifte, die Endo tox ine, 
ist es bisher nicht gelungen, ein echtes Antitoxin zu erzeugen. Dem- 
gemäß müssen wir bis auf weiteres diesen Giften eine eigenartige Stel- 
lung einräumen. Sie lassen sich ausschließlich charakterisieren eben 
durch ihre hohe Giftigkeit im Tierversuch. Der flir ihre Zugehörigkeit 
zu den echten Toxinen ausschlaggebende Nachweis dagegen, dass sie 
getrennte haptophore und toxophore Gruppen besitzen, ist bisher nicht zu 
erbringen gewesen. 

Anders steht es mit den Gifl;en, die beim Filtrieren in das Filtrat 
tibergehen. Für diese ist es gelungen, ein echtes antitoxisches Serum zu 
gewinnen, und zwar Ransom, sowie Roux und Metschnikoff für die 
Cholera, A. Wassermann fllr den Pyocyaneus (s. dort). Es geschah 
dies in der allgemeinen üblichen Weise durch Vorbehandlung der Ver- 
suchstiere mit steigenden Dosen der giftigen Filtrate. So erhielt man 



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— 57 — 

Sera, die die mehrfach tödliche DosiB der giftigen Filtrate sicher zu neu- 
tralisieren vermochten. 

Demnach ist bei diesen Bakterienarten auf Grund der bisherigen 
Versuchsergebnisse das Verhältnis ein derartiges, dass der Hauptteil der 
giftigen Substanz in den Bazillenleibem fest haftet und nicht in die 
Lösungen tibergeht. Dies sind die Endotoxine, vergleichbar den 
Endoenzymen der Hefe und der Bakterien selbst. 

Außerdem treten geringe Mengen eines echten Toxins auf, die in 
das Filtrat tibergehen. 

Die weitere Frage ist nun die, ob wir berechtigt sind, aus diesen 
Versuchen zu folgern, dass auch unter natürlichen Verhältnissen, also im 
Organismus, die Giftproduktion in derselben Weise sich gestaltet. 

Das scheint mit ziemlicher Sicherheit zu verneinen zu sein. 

Vielmehr ist es sehr wahrscheinlich, dass die geringen Spuren des 
Giftes, welche wir in diesen Kulturfiltraten finden, und die, wie wir 
sahen, bei zunehmender Auslaugung in alten Kulturen an Menge etwas 
zunehmen, nicht das primäre Gift der Erreger darstellen, das wir 
in der Pathologie dieser Infektionskrankheiten beim Menschen in Wirk- 
samkeit treten sehen. Der Auslaugungsprozess, wie er sich spontan in 
alten Kulturen vollzieht, ist durchaus nicht ein in die Konstitution 
dieser labilen Körper wenig eingreifender. In derartigen alten Kulturen 
kommen plötzliche starke Veränderungen der Reaktion von Säure zu 
starkem AJkali vor: es bilden sich Ammoniakverbindungen und andere 
chemische Stoffe, von denen wir wissen, dass sie auf die Bakteriengifte 
ändernd und zerstörend einwirken. Demnach dtirfen wir annehmen, dass 
selbst diese in die Lösungen tibergehenden geringen Mengen des Cholera- 
giftes U.S.W., gegen die man ein Antitoxin erzeugen kann, be- 
reits nicht mehr die primären Gifte dieser Mikroben darstellen, die sie 
sicher im menschlichen Organismus bilden, sondern vielmehr eine sekun- 
däre und beständigere Modifikation, und zwar grtinden wir uns dabei 
darauf, dass, wie Wassermann beim Pyocyaneus fand, man gegen dieses 
gelöste Gift zwar sicher Antitoxin erzeugen kann; dass aber dieses Anti- 
toxin sich doch anders verhält wie bei der Diphtherie. Denn diese 
Antitoxine neutralisieren die entsprechende Toxinmenge in beliebig ver- 
vielfachten Dosen, wenn man ihre eigene Quantität in derselben Weise 
vervielfältigt. Wenn also 10 Dosen Diphtherieantitoxin 10 Dosen Toxin 
absättigen, so sättigen 1000 Dosen 1000 Dosen Toxin. Beim Pyocyaneus 
gilt dieses »Gesetz der Multipla« nur innerhalb sehr enger Grenzen, 
bis etwa zu der 8 — 10 fachen Dosis letalis. Dartiber hinaus geht die 
Neutralisierung nicht: die Tiere sterben trotz großer Antitoxindosen. 

Demnach mtissen wir dahin restimieren, dass es tiberhaupt zweifel- 
haft ist, ob wir das primäre, echte Toxin der Cholera u. s. w. bei 
der Verwendung unserer bisherigen Kulturmedien tiberhaupt in Händen 
gehabt haben; es dtirfte eine Frage der geeigneten Nährsubstanzen sein. 



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— 58 — 

und weiterer systematischer Arbeiten bedürfen, um diesem wichtigen 
Ziel näher zu kommen. Einen wie gewaltigen Einfluss die geeignete 
Kulturflüssigkeit für die Produktion des echten Giftes in künstlichen 
Nährmedien besitzt, zeigt das Beispiel des Diphtheriegiftes, von dem 
nach den ersten Versuchen von Roux und Yersin 30 — 36 cm^ erforder- 
lich waren, um ein Tier typisch akut zu töten, und bei welchen man 
durch systematisch genaues Studium der Nährböden und Auswahl ge- 
eigneter Kulturen heute dazu gelangt ist, dass 1 — 2 mg ausreichen. 
Demgemäß betrachten wir die Frage des Choleragiftes und der ähnlichen 
Gifte als eine in vielen Punkten noch offene und nicht gelöste. 

Wir wollen indessen nicht verfehlen, darauf hinzuweisen, dass ein 
experimentell und praktisch in dem Wesen der Cholerainfektion so er- 
fahrener Autor wie R. Pfeiffer den Standpunkt einnimmt, dass auch 
die bei der spontanen Cholerainfektion des Menschen so auffällig in die 
Erscheinung tretende 'Intoxikation hervorgerufen werde durch die 
Resorption von infolge Auflösung des Choleravibrio in Freiheit gesetzten 
Giften, den Endotoxinen. Nach seiner Ansicht sind also die Endo- 
toxine das ausschlaggebende Gift bei der Cholera und den analog sich 
verhaltenden Infektionskrankheiten, wie Typhus u.s. w. Für diese An- 
sicht, dass bei diesen Infektionskrankheiten nur die Bakterien als solche 
und das in ihrem Leibe enthaltene Gift in Frage kommen, nicht aber 
ein wie bei Diphtherie u. s. w. von ihrem Leibe abtrennbares lösliches 
Gift, dessen Anwesenheit wir andererseits im Menschen, wie oben er- 
sichtlich, nicht völlig in Abrede stellen können, für diese Ansicht 
sprechen die Erscheinungen, die beim Ablauf dieser Krankheiten und 
beim Immunisieren gegen diese Bakterien vor sich gehen, und die Stoffe, 
die sich dabei im Serum vorfinden. Wir sahen nämlich, dass bei 
Cholera u. s.w. ausschließlich baktericide Stoffe auftreten; solche 
ausschließlich baktericide Stoffe treten aber, wie Wassermann am 
Pyocyaneus zeigen konnte, nur bei der Resorption körperlicher 
Bestandteile der Bakterien auf, während die Toxine stets gleichzeitig 
antitoxisch und baktericid wirkende spezifische Stoffe im Serum er- 
zeugen. 

Anhang: Sie Bakterienproteine. 

Wenn man diejenigen Bakterien, die lösliche Gifte produzieren, von 
diesen möglichst völlig befreit, so bleiben noch die dem Zellleib an- 
gehörigen Stoffe zurück. Diese Stoffe haben nun auch noch eine phy- 
siologische Wirksamkeit, indem sie an der Applikationsstelle Entzün- 
dungen, aseptische Eiterungen und Nekrosen, außerdem geringfügige 
Allgemeinerscheinungen, wie Fieber, Mattigkeit, Kopfschmerzen u. s. w. 
erzeugen. 

Dieselben Wirkungen haben auch die mit chemischen Methoden aus 
diesen Bakterienleibem dargestellten eiweißähnlichen Körper, die man 



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— 59 — 

nach dem Vorgang von Buchner als Bakterienproteine bezeichnet. 
Sie werden nach verschiedenen Methoden dargestellt. 

Hauptsächlich benutzt man dazu das Extrahieren mit überhitztem 
Wasser im Autoklaven, daseinfache Auskochen mit Wasser, und das 
Extrahieren mit verdünnten Alkalien. In neuer Zeit kamen dann jene 
Methoden dazu, die nach dem Vorgange Kochs und Buchners die Bak- 
terien erst zermalmten, und zwar in feuchtem oder getrocknetem Zu- 
stande, um dann ihren Inhalt, zum Teil mit Zuhilfenahme hydraulischer 
Pressen, zu gewinnen. 

So erhielt man eine große Reihe von Bakterienproteinen, die zwar in 
Einzelheiten verschieden, im Grunde doch ähnliche Wirkungen zeigten. 
Wir werden ihnen im speziellen Teil noch häufig begegnen, wo auch 
die Hauptarbeiten auf diesem Gebiet citiert sind. 

Es erübrigt sich, hier auf diese Proteine im Detail einzugehen, 
denn durch die Arbeiten von Römer, Büchner, Schattenfroh, Klem- 
PERER^) und vieler anderer ist zweifellos erwiesen, dass zum mindesten 
die aus unzerkleinerten Mikroben durch gewaltsame Extraktion isolierten 
eiweißähnlichen Stoflfe absolut keine spezifische Wirkung haben, also 
als Krankheitsursachen sui generis nicht in Betracht kommen. 

Dies gilt aber nur fllr die aus den Leibern dargestellten Eiweiß- 
stoffe an sich in idealer Reinheit. Sie so zu isolieren ist aber in den 
seltensten Fällen möglich, und zwar nur dann, wenn die Bakterien nur 
frei lösliche spezifische Gifte produzieren, von denen ihre Leiber völlig 
getrennt werden können, wie es Kossel bei den Diphtheriebazillen 
gethan hat. Dann bleiben die Proteine ohne spezifische Wirkungen zu- 
rück, wie man sie ganz ähnlich aus den harmlosesten Bakterien ge- 
winnen kann,* und wie auch andere körperfremde Eiweißstoffe 
sich verhalten, die ja ebenfalls sterile Abszesse u.s.w. erzeugen. 

Meist aber ist eine radikale Trennung dieser Proteine im engeren 
Sinne von den Giften nicht möglich. Bei den meisten Bakterien haften 
an den Proteinpräparaten noch Reste der spezifischen Giftstoffe oder 
ihrer sekundären Produkte, besonders der Endotoxine und ihrer Deri- 
vate, so dass dann auch die Proteinpräparate noch charakteristische 
Giftwirkungen zeigen, wie es bei Cholera, Typhus, Tuberkulose der 
Fall ist (s. im speziellen Teil). Hier lässt sich also die reine Protein- 
Wirkung nicht demonstrieren, sondern nur theoretisch konstruieren. 

Ganz zu trennen von diesen Giftwirkungen sind die immunisa- 
torischen Vorgänge, die durch die Zellsubstanzen der Bakterien, sei 
es der unzerkleinerten Leiber oder chemischer Präparate ausgelöst 
werden, die Probleme der baktericiden Immunität, die durch die 



1) Lit. B. b. Elemperer, Die Beziebg. verschied. B.-G. zur Immunität u. Heilung. 
Z. f. klin. Med., XX, 166 (1892). 



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Arbeiten von Pfeiffer & Wassermann für Cholera, Pfeiffer & Kolle 
für Typhus, Koch fllr die Tuberkulose völlig aufgeklärt sind. 

Diese Vorgänge haben mit der toxischen Wirkung der Zellproteine 
gar nichts zu thun; hier handelt es sich um Einführung von passenden 
Rezeptoren, die die baktericiden Schutzkräfte, die Lysine, Präzipitine 
und Agglutinine wachrufen; um Vorgänge, die von der feinen steri- 
schen Konfiguration der Frotemmoleküle abhängig sind. 

Vorläufig kann man mit Sicherheit derartige Rezeptoren nur in den 
unveränderten Bakterienzellen annehmen, die wie Choleravibrio, Pneumo- 
coccus U.S.W, in toto jene destruktiven Prozesse auslösen; andererseits kann 
man ziemlich sicher sagen, dass gewaltsame Extraktion, also Darstellung 
chemischer Proteinpräparate meist jene zarte Atomgruppierung so ver- 
ändert, dass keine oder sehr schwache baktericide Reaktion ihrer Ein- 
führung folgt, dass vielmehr diese Eiweißstoffe nur dieselben Reaktionen 
auslösen wie jeder körperfremde Eiweißstoff, d. h. die Bildung spe- 
zifischer Präzipitine^), die mit den Agglutininen allerdings wohl 
sehr nahe verwandt sind; sehr wahrscheinlich ist es dagegen, dass bei 
den etwas schonender dargestellten, wie Kochs Tuberkulin (s. d.) und 
bei den BüCHNERSchen Piasminen, z. B. des Choleravibrio und des 
Tuberkelbacillus, sich die spezifischen Rezeptoren erhalten, so dass diese 
Präparate baktericide, immunisatorische Prozesse auslösen. 



Zusammenfassung. 

1. Eine Gruppe von Bakterien erzeugt als freie Sekrete echte 
Toxine. Nach Abzug dieser löslichen extrahierbaren Gifte bleibt ein 
reines unspezifisches Bakterienprotein zurück. Typus: Diphtherie. 

2. Eine andere große Gruppe bildet scheinbar nur Endotoxine: 
echte Toxine, die an die lebende Zelle mehr oder minder fest gebunden 
sind, also nur in sehr geringem Maße, in unverändertem Zustande viel- 
leicht außerhalb des Körpers gar nicht, sezerniert werden; beim 
Absterben der Zelle werden sie teilweise frei, teilweise bleiben sie 
gebunden, oder gehen in sekundäre, giftige Modifikationen nicht mehr 
toxinartiger Natur über. Bei dieser Gruppe sind also die toten Zellleiber 
nicht restlos von anderen Giften zu befreien; das reine Protein ist 
nicht in ungetrübter Wirksamkeit zu erkennen. Mit diesen Vorbehalten 
sind jedoch die Proteinwirkungen nachzuweisen. Typus: Cholera, 
Typhus, Pneumococcus. 

3. Eine dritte Gruppe bildet vielleicht gar keine echten Toxine, 
auch nicht intraplasmatisch. Das Zellplasma enthält Gifte anderer Art, 
die das Bild der Proteinwirkung trüben. Typus: Milzbrand, Tuber- 



1) Näheres üb. Präzipitine b. Michaelis & Oppenheimer, Immunität gegen 
Eiweißstoffe. Engelmanns Aroh., 1902, Snppl.-Bd. 



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kulose. Möglicherweise hat man bei fortschreitender Erkenntnis Gruppe 
2 mit 3 zu vereinigen. 

4. Allen Bakterien gemeinschaftlich ist die pyogene Wirkung ihrer 
Proteine, die vorwiegend auf ihrer Eigenart als körperfremden Eiweiß- 
stoflFen beruht und die sich in ganz ähnlicher Weise auch durch körper- 
fremde EiweißstoflFe nichtbakterieller Herkunft erzielen lässt. 

Dass jeder fremde EiweißstoflF ein Schädling für den Organismus ist, 
den er zu bekämpfen sucht, zeigen jene spezifischen Fällungsfermente, 
die Präzipitine, die nach Einführung jedes fremden EiweiBstoffes im 
Organismus auftreten. Wie nach der EHRLiCHSchen Anschauung alle 
Nährstoife Rezeptoren finden müssen, um assimiliert zu werden, so 
werden, und besonders bei abnormer, d. h. subkutaner resp. intravenöser 
Einführung, jene Rezeptoren gegen die fremden Proteüie mobil gemacht, 
um sie anzugreifen und unschädlich zu machen. 

Dabei tritt dann häufig eine Allgemeinreaktion, Fieber u. s. w., auf 
Und hierin liegt der Schlüssel auch für die Wirkung der Bakterien- 
prote'lne in idealer Reinheit, abgesehen von etwaigen spezifischen, toxi- 
schen Beimengungen. 



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Spezieller Teil. 
L Die echten Toxine. 

Das Diphtherietoxin. 

Sowohl an theoretischer Bedeutung, wie auch besonders durch seine 
Beziehungen zur künstlichen Immunität und Heilserumtherapie ist das 
Diphtherietoxin das wichtigste unter allen Bakteriengiften. Es reprä- 
sentiert flir uns so recht den Grundtypus des echten Toxins; an ihm 
sind zum größten Teile die Untersuchungen angestellt worden, die Licht 
über die Wirkungsart der Toxine, ihre Beziehungen ^ur Krankheit und 
die Bildung von Antitoxinen verbreitet haben. Das Diphtherietoxin ist 
ein streng spezifisches Gift, das an Tieren genau die gleichen Erkran- 
kungserscheinungen hervorruft, wie die Infektion mit lebenden Di- 
phtheriebazillen sie erzeugt. 

Die Erkenntnis, dass die Diphtheriebazillen selbst sich nicht im 
Körper verbreiten, sondern nur in den Pseudomembranen, resp. an der 
Impfstelle sich finden, hat schon frühzeitig den Gedanken wachgerufen, 
dass es lösliche Gifte sind, die die Allgemeinerkrankung erzeugen. 
Schon in seiner ersten Arbeit hat Löffler^) auf die Existenz eines sol- 
chen spezifischen Giftes hingewiesen und es später aus Glycerinextrakten 
isoliert, indem er sie mit Alkohol fällte. Roux & Yersin^J gelang dann 
sein unwiderleglicher Nachweis. 

Roux & Yersin fanden, dass eine durch Porzellan filtrierte Kalbs- 
bouillonkultur des Diphtheriebacillus von sieben Tagen, die sich als 
völlig klar und steril erwies, allerdings erst in ziemlich großen Dosen 
(35 cm^), typische Intoxikationserscheinungen hervorrief; besonders bei 
intraperitonealer Injektion. Mit zunehmendem Alter der Kultur stieg 
ihre Giftigkeit. Eine 42tägige Kultur tötet ein Kaninchen bei gleicher 
Dosis (35 cm^) in 5—6 Stunden, gegen einen Zeitraum von 6 Tagen bei 
der Ttägigen Kultur, unter Erscheinungen, die der schweren toxischen 
Diphtherie analog verlaufen. Gleiche Erscheinungen, gleiche Skala der 
Empfindlichkeit wie bei der Einimpfung lebender Kulturen zeichnen 



1) LÖFFLER, Unters, üb. d. Bedentg. der Mikroorg. f. d. Entatehg. d. Diphtb. 
Mitt. Kais. Ges.-Amt, II, 1884. — Ders., Der gegenw. Stand der Frage nacb der 
Entsteh, d. Dipbtb. Deotscbe med. Wocb., 1890, 81. 

2) Roux & Yersin, Contribution ä F^tnde de la diphtherie. Ann. Past., III^ 
273 (1889); IV, 385 (1890). 



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auch das Gift ans. Ihre Befunde wurden von Kolisko & Paltaüf^) 
völlig bestätigt. Sie erhielten Vergiftungen mit Filtraten einer 14tägigen 
Bouillonkultur. Roux beobachtete schon die Vernichtung des Giftes 
durch Erwärmen und hält es für den Enzymen nahestehend. Als solches 
sollte es ein Sekretionsprodukt der Diphtheriebazillen sein, von ihnen 
in die umgebenden Medien hinausproduziert werden. Dem schien nun 
allerdings entgegenzustehen, dass gerade junge, lebensfrische Kulturen 
relativ wenig Toxin produzieren, während ältere reichere Giftausbeute 
lieferten. Daraus zog dann Gamale'ia^) den Schluss, dass das Diphtherie- 
gift nicht ein Sekretionsprodukt der Bazillen, sondern ein Bestand- 
teil ihres Zellleibes sei, der von gesunden Bazillen nicht abgegeben 
würde, sondern erst beim Aelterwerden der Kultur, beim Absterben 
zahlreicher Bazillen, durch Auslaugung aus ihrem zerfallenden ZelUeib 
extrahiert würde. Dieser Anschauung ist aber vielfach mit Erfolg ent- 
gegengetreten worden. Besonders H. Kossel^) führte den Nachweis, dass 
das Toxin ein Sekretionsprodukt, nicht ein Zerfallprodukt ist, dadurch, 
dass er einerseits schon bei ganz jungen, zweitägigen Kulturen bei ge- 
eigneten Züchtungsmethoden sehr reichliche Giftproduktion fand, die 
sogar nach fünf Tagen bereits anfing schwächer zu werden, und dass 
er andererseits zeigt, dass in den Bazillenleibem selbst nur sehr wenig 
Toxin vorhanden ist. 

Er züchtete Diphtheriebazillen auf einer möglichst großen Oberfläche, in- 
dem er von der Oberflächenhaut einer eintägigen Kultur abimpfte; nach einigen 
Tagen stellten die Bazillen eine zusammenhängende Haut dar, von der er 
die Bouillon abgoss. Die Bazillenleiber wurden mehrfach mit destilliertem 
Wasser gewaschen und zentrifugiert, bis das ablaufende Wasser keine Biuret- 
reaktion mehr gab; dann wurden sie mit schwach alkalischem Wasser aus- 
gelaugt. Die Giftigkeit dieses Extraktes war gering. Abonson^) erhielt 
allerdings aus den Bazillenleibem nach sorgfältigem Zermahlen und Ausziehen 
mit Aether- Alkohol (4:1) durch Extraktion mit einer O,lproz. Lösung von 
Aethylendiamin giftige Extrakte, aus denen er durch Essigsäure das Gift 
ausföllen konnte. Daneben bleibt freilich den ausgelaugten Leibern nach 
Bbiegeb & BoER*) eine bedeutende Giftigkeit, die sich aber ganz anders 
äußert als die des Toxins, keine Immunität erzeugt u. s. w. 

Das Diphtherietoxin ist also nicht ein Bestandteil des Bazillenleibes, 
sondern ein Stoffwechselprodukt. Was die Darstellung des 



1) KoLiSKO & Paltauf, Zum Wesen des Croup und der Diphtherie. Wiener 
klin. Woch., 1889, Nr. 8. 

2) GamaleYa, Les poisons bact^rieoa. Arch. de m6d. exp^r., 1892. 

3J H. KossEL, Zur Kenntnis d. Diphtheriegiftes. Centralbl. f. Bakt, XIX, 977 
(1898). 

*) Aronson, Zur Biologie und Chemie der Diphtheriebazillen. Arch. f. Einder- 
heilkunde, 30, 23 (1900). S. A. 

5) Brieger & BoER, Ueb. d. Toxine d. Diphtherie u. 8. w. Deutsche med. Woch., 
1896, 783. 



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Diphtheriegiftes betrifft, so sind zwei Dinge scharf voneinander zu tren- 
nen: einerseits die Auswahl der Methoden, um eine möglichst reiche 
Produktion von Gift zu erzielen, andererseits die Versuche, die man 
gemacht hat, aus der Giftbouillon die spezifischen Körper zu isolieren, 
und ihrer Natur nachzuforschen, allerdings auch dabei mit dem prak- 
tischen Hintergrund, ein möglichst reines Gift im trockenen Zustande 
zu erlangen, für die Zwecke der Immunisierung und Serumtherapie. 
Bei der Gewinnung giftreicher Flüssigkeiten mussten die Methoden sich 
auf zwei Kardinalpunkte richten, einerseits eine Lösung mit möglichst 
hohem Giftgehalt zu erzielen, zweitens diesen Giftgehalt bei der Sterili- 
sierung resp. Trennung von den Bazillen möglichst restlos in die keim- 
freie Bouillon mitzubekommen. 

Für die Produktion des Toxins ist zunächst die Wahl des Nähr- 
bodens von großer Bedeutung. Koux & Yersin (1. c.) und Löpfler (1. c.) 
haben ihre Bazillen auf einfacher Fleischbrühe gezüchtet, und dabei aller- 
dings, besonders im Jugendstadium der Kulturen, relativ schwache Gift- 
lösungen erhalten. Später wandte man dann ganz allgemein den Zusatz 
von 2% Pepton an. Die Art dieses Peptons ist nach H. Kossel (1. c.) 
nicht gleichgiltig; er verwendet mit großem Vorteil das Pepton von 
Dr. Aschmann aus der Luxemburger A.-G. für physiologische Präparate. 
Auch das Pepton Chapoteaut hat sich als vorzügliches Zusatzmittel er- 
wiesen. Außerdem setzt man allgemein noch 0,5^ Kochsalz hinzu. 
V. Dungern i) verwendete mit Vorteil Zusatz von Ascitesflüssigkeit oder 
kultivierte die Bazillen auf reinem Ascites. 

Auch auf eiweißfreien Nährböden soll nach Guinochet 2) Diphtherie- 
toxin entstehen ; er züchtete sie mit gutem Erfolge auf schwach alkalisch 
gemachtem Harn, ebenso Uschinskt, worauf wir noch zurückkommen 
werden. 

Die Wahl des Nährbodens ist besonders in Bezug auf die Reaktion 
von großer Wichtigkeit. In gewöhnlicher Bouillon ist die Reaktion 
zuerst schwach alkalisch, wird dann schwach sauer, um zuletzt wieder 
alkalisch zu werden. Während der Zeit der sauren Reaktion leidet die 
Giftproduktion sehr erheblich, oder ist ganz sistiert. Deshalb suchte 
man nach Mitteln, um diese schädliche Säuerung hintanzuhalten. Etwas 
bessernd wirkt schon der erwähnte Zusatz von 2^ Pepton; doch ist 
dieser allein nicht hinreichend. Park & Williams 3) haben ganz einfach 
der 2— 4proz. Peptonbouillon durch Zusatz einer gemessenen Menge 
Natronlauge eine größere Alkalinität verliehen. Sie neutralisierten ihre 

1) V. Düngern, Steigerung d. Gifitproduktion d. Di.-B. Centr. f. Bakt, XIX, 
137 (1896). 

2) Guinochet, Contribation 4 i'^tode de la toxine des bacilies de la dipbth^rie. 
Arch. de m^d. exp6r., 1892, 487. 

3) Park & Williams, The produetion of diphteria toxin. Joam. of exper. med., 
1, 164 (1896). 



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frische Bouillon genau (mit Curoumapapier als Indicator) und setzten 
dann zu jedem Liter 7 cm^ Normalnatronlauge hinzu, das Gemisch muss 
dann aufPhenolphtalein noch sauer reagieren. Sie selbst, femer Spronck i) 
und VAN TüRENHOUT^) fanden, dass die Anwesenheit von Glukose und 
Glycerin in zu frischem Fleisch die Säuerung mitbedinge, und empfahlen 
deshalb zunächst von dem glykogenreichen Pferdefleisch abzusehen, und 
Spronck, das Fleisch in leicht gefaultem Zustande anzuwenden. Durch 
künstlichen Zusatz von Glukose konnte er die Toxinproduktion ein- 
schränken. Dies entspricht Versuchen von Blümenthal^), der ebenfalls 
fand, dass auf zuckerhaltigen Nährböden, sobald sie mehr als Ißi Zucker 
enthalten, kein Toxin entsteht. Auch auf reinen Eiweißlösungen, sowie 
reinen Peptonlösungen erzielte er keine Toxine. Smith 4) dagegen hält 
einen geringen Glukosegehalt geradezu für notwendig (0,2^) und will 
nur die schädliche Säuerung ausschließen, was auch Rüete^) durch Zusatz 
von Marmorstücken zu der Kultur herbeiführen will. Im Gegensatz zu 
Spronck hatte Nicolle«) ganz frisches Fleisch empfohlen. Martin ^j be- 
nutzte mit gutem Erfolg eine Mischung von Extrakt aus Ochsen- oder 
besser Kalbfleisch und einem Extrakt aus Schweinemagen zu gleichen 
Teilen. 

Er giebt folgende Rezepte: 

1. Extrakt aus Schweinemagen. 
Fünf Schweinemagen werden fein zerhackt oder zerquetscht, dann Mucosa 
und Muscularis je 200 g mit 10 g reiner Salzsäure (20^) und 1000 g 
Wasser 24 Stunden bei 50*^ stehen gelassen. Dann wird aufgekocht, durch 
lockere Baumwolle filtriert, 0,2^ Essigsäure zugesetzt und noch heiß mit 
Natronlauge neutralisiert, dann wird durch Papier filtriert und im Autoklaven 
auf 120^ erhitzt. Letzteres kann man auch durch mehrmaliges Erhitzen auf 
100", sorgfältiges Entfernen des Eiweißschaumes und Fettes und eventuell 
Klären mit Chlorcalcium und Natriumphosphat (Bildung eines die Eiweiß- 
trttbung mitreißenden Calciumphosphatniederschlages) ersetzen. 

2. Fleischextrakt. 
Ganz frisches Kalbfleisch 20 Stunden bei 35° stehen lassen, dann 500 g 
mit 1000 g Wasser 20 Stunden bei 35° stehen lassen, auspressen, Zusatz 



^) Spronck, Snr les conditions, dont dopend la produetion d. poisons dans les 
cnltures dipht^riques. Ann. Fast, IX, 769 (1895). 

2) VAN ToüRBNHOüT, OvcT de bereidiug van diphteriegif. Utrecht 1895. Ref. 
CentralbL f. Bakt, XVIII, 295 (1S95). 

3) Blumenthal, Ueb. d. Möglicbk. d. Bildg. von Diphtberietoxin ans Eiweiß- 
körpem und auf Zucker enthaltenden Nährböden. D. med. Woch., 1897, Nr. 24. 

*) Smith, The relation of dextrose to the produetion of toxine. Joum. of exper. 
med., IV, 373 (1899). 

5) RuETE, Ueb. Herstellg. d. Dl.-Heilßerums. Münch. med. Woch., 1897, 213. 
ß) NicoLLE, Pr6paration de la toxine dipht^rique. Ann. Fast, X, 333 (1896). 
7) Martin, Produetion de la toxine dipht^r. Ibid., XH, 26 (1898). 

Oppenheimer, Toxine and Antitoxioe. 5 



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von 5 g NaCl und 20 g Pepton, neatralisieren , noch 7 ccm Normalnatron- 
lauge znsetzen, bei 120^ sterilisieren. 

Ein Gemisch beider Extrakte zu gleichen Teilen, nochmals auf 70° er- 
wärmt, filtriert und durch Chamberlandkerzen sterilisiert, giebt einen vortreff- 
lichen, nicht säuernden Nährboden, auf dem bald sehr wirksame Toxine sich 
bilden, nach 30 Stunden letale Dosis 0,1, nach 6 — 7 Tagen 0,002 ccm. 

Madbek^) lässt 2 — 3 Tage altes, fettarmes Kalbfleisch, fein gehackt, 
15 Stunden mit dem doppelten Gewicht Wasser stehen, kocht dann 15 Mi- 
nuten und seiht durch. Dann setzt er 1^ Wittepepton, 1% NaCJl zu, 
macht schwach alkalisch , ' kocht % Stunde , filtriert und verteilt die so ge- 
wonnene Nährbouillon zu je 1 Liter in EELENMETER-Kolben, die er dann 
15 Minuten bei 120° im Autoklaven sterilisiert. Er bestimmt die Reaktion 
mit Laokmuspapier, bestimmt aber außerdem den »Titer« der Bouillon, d. h. 
die nötige Menge Normalnatronlauge, um eine deutliche Rotreaktion mit 
Phenolpthalel'n zu erzielen. Das Verhältnis beider Messungen ist derart, 
dass Nährlösungen mit einem Titer von über 20 ccm deutlich sauer auf 
Lackmus reagieren, bei 16 ccm amphoter und unter 10 ccm alkalisch. Das 
Alter des Fleisches ist nach seinen Erfahrungen nicht von wesentlichem Ein- 
fluss. Zusatz von Calciumkarbonat, den Spronck (1. c.) und van Türen- 
HOUT (1. c.) empfohlen haben, hält zwar die Reaktion dauernd alkalisch, be- 
fördert aber trotzdem die Toxinbildung nicht wesentlich. 

Spronck 2) hat später den Fleischextrakt verlassen und seine Bazillen 
auf Hefedekokt kultiviert, wobei er sehr wirksame Giftlösungen erhielt, 
(Nach 48 Stunden letale Dosis 0,05, nach 5—6 Tagen 0,005 ccm). 

Er kocht 1 Teil Handelshefe mit 20 Teilen Wasser 20 Minuten unter 
Umrühren. Nach dem Absetzenlassen dekantiert er die Flüssigkeit, setzt 
Kochsalz und Wittepepton (direkt aus Rostock bezogen) hinzu, neutralisiert 
und giebt 7 ccm per Liter Normalnatronlauge zu. Erhitzen, filtrieren, bei 
120° sterilisieren. 

Es ergiebt sich ans diesen Versuchen, dass die Produktion der 
Toxine von der Alkaleszenz des Mediums abhängt, und wie schon Boux 
& Yebsin fanden, mit steigender Alkaleszenz zunimmt. Doch fand 
Madsen (1. c), dass nicht immer der Toxingehalt der Alkaleszenz pro- 
portional ist. 

Ein zweites Mittel, um die Toxinmenge zu vermehren, ist die Zufuhr 
von Luft. Schon Roux & Yersin fanden, dass Luftdurchleitung die 
Giftproduktion fördert, allerdings ist nach Martin (1. c.) und Park 3) diese 
Förderung nicht sehr wesentlich, wenn man sonst gute Nährböden an- 
wendet, nach Madsen sogar in diesem Falle direkt schädlich, weil bei 
reichlicher Toxinproduktion die Luft mehr Gift zerstört, als sie die 
Produktion fördert. Auch Spronck neigt zu der Ansicht, dass zwar 



1) Madsen, Zur Biologie des Diphtiieriebacillus. Z. f. Hyg., 26, 157 (1897). 

2) Spronck, Pr^paration de la toxine dipht^rique. Ann. Fast., XII, 701 (1898). 

3) Park, The preparation of Diphteria-Antitoxin. Med. Record, 47, 484 (1895). 



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das Wachstum der Bazillen bei Luftzatritt reichlicher wird und damit 
die absolute Toxinproduktion; dass aber die relative Toxinproduktion 
einer gegebenen Bazillenmenge durch Luftzutritt eher geschwächt, als 
gehoben wird, van Türenhoüt (1. c.) glaubt, dass Luftzufuhr die Oxy- 
dation der stickstoffhaltigen Stoffe und dadurch das Aufhören der sauren 
Beaktion beschleunige, aber auch Oift zerstöre. Abonson^) hat mit 
großem Erfolge die Luftdurchleitung dadurch ersetzt, dass er die Bak- 
terien in Oberflächenkulturen, die der Luft eine große Oberfläche 
darbieten, gezüchtet hat. Schierbeck 2) empfiehlt Behandlung mit Kohlen- 
säure. 

Zuviel Luft und reiner Sauerstoff, besonders bei Bruttemperatur 
schädigen das Gift ganz erheblich (Roux & Yersin, Martin, Madsen). 

Wenn man auf diese Weise die Kulturen in möglichster Rücksicht- 
nahme auf energische Toxinwirkung anlegt, so erhält man meist recht 
bald sehr wirksame Toxine. Schon nach 30—48 Stunden sind sie deut- 
lich vorhanden. Vom 7. bis ca. 20. Tage erreicht die Giftigkeit ihr 
Maximum, dann beginnt sehr langsam eine Abnahme, die auf eine gleich- 
zeitige Verminderung der Produktion der alternden Kultur und auf den 
Beginn der Toxoidbildung zu beziehen ist. Umzüchtung der Kulturen 
stellt die toxigene Kraft wieder her (Roux & Yersin). Im allgemeinen 
wird man also zur Prüfung der primären Gifte Kulturen, die nicht älter 
als 3 Wochen sind, anwenden (Madsen 1. c). Zur Lnmunisierung kann 
man allerdings oft gerade ältere Gifte ohne Nachteil benutzen, da auch 
die in ihnen enthaltenen Toxoide immunisierend wirken. 

Die Heranzüchtung einer möglichst intensiven Giftbouillon fällt durch- 
aus nicht immer mit der einer besonders virulenten lebenden Kultur 
zusammen, es können mitunter wenig virulente Bazillen recht kräftig 
Toxine bilden (Martin 1. c). 

Andererseits giebt es auch Diphtheriebazillenstämme, die weder Viru- 
lenz noch toxigene Kraft besitzen. Lübowski*) hat einen derartigen Fall 
beschrieben. Ein vom Menschen stammender Bacillus bildete gar keine 
wirksamen Toxine. Das Serum des Kindes war hoch antitoxisch. Daraus 
ergiebt sich, dass der Bacillus sehr toxigen gewesen war, aber seine 
Kraft völlig eingebüßt hatte. 

Die Giftproduktion weist überhaupt außerordentliche Schwankungen 
auf, und ist selbst bei gleicher Kultur im gleichen Nährboden nicht im 
voraus zu bestimmen. Madsen hat vergeblich versucht, diese Schwan- 



^) Aronson, ImmuniBiemngs- und Heilversache bei der Diphtherie. Wien. med. 
Woch., 1894, 1966. 

2) ScraBRBECK, üeb. d. Einfluss der CO2 auf das Wachstum der Diphth.-B. Arch. 
f. Hyg., 27, 339 (1896). 

9) LuBOWSKi, Ueb. einen atoxidohen und avirulenten Diphtheriestamm. Ztschr- 
f. Hyg., 35, 87 (1900). 

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kungen aufzuklären; die Beschaflfenheit der Kolben, die Sterilisation des 
Nährbodens sind ohne Einfluss. 

Man ist in der Giftproduktion der Diphtheriebazillen so vorgeschritten, 
dass wir jetzt zur Lnmunisierung nur Gifte verwenden, von denen 
0,02 cm3 ein Meerschweinchen von 250 g akut töten. 

Das Wesentliche zur Giftproduktion ist: 

1. geeignete Kultur, welche Oberflächenwachstum zeigt, d. h. auf 
der Bouillon in Form einer Haut wächst; 

2. Alkaleszenz der Bouillon; 

3. das geeignete Pepton, am besten Chapoteaut 2^; 

4. genügende Luftzufuhr, also die Kolben nur zu etwa ein Drittel 
füllen; 

5. nicht zu kurz und nicht zu lange bei 37° wachsen lassen; — 
es hängt dies von der Kultur ab und muss bei jedem einzelnen 
Stamme ausprobiert werden, wann das Maximum der Gift- 
produktion erreicht ist. Gewöhnlich nach ca. 10 Tagen bis 
3 Wochen. 

Schließlich hat man auch nach Mitteln gesucht, um eine Giftlösung zu 
erhalten, die zwar möglichst schnell immunisiert, aber trotzdem wenig 
giftig ist, und dadurch das Leben der Versuchstiere auch bei größeren 
Dosen wenig gefährdet. Brieger, Kitasato & Wassermann ^) fanden, 
dass Diphtheriekulturen, auf Thymusbouillon gezüchtet, zwar ihre 
toxigene, aber wenig ihre immunisierende Kraft einbüßen. Hier bilden 
sich also vermutlich immunisierende Toxo'ide. 

In neuester Zeit ist es dann Mausen gelangen, mit den Toxonen der 
Diphtherie zu immunisieren, worauf wir bei diesen zurückkommen werden. 

Hat man so giftreiche Flüssigkeiten, so gilt es jetzt, sie zu sterili- 
sieren. Die Methoden sind auch hier die allgemein üblichen: Erwärmen, 
Zusatz von Antisepticis und Filtration durch Bakterienfilter. 

Roux & Yersin fanden, dass die Giftlösungen bei 58^ in wenigen Minuten 
entgiftet wurden, dass aber trockenes Gift länger als 1 Stunde auf 98^ 
erhitzt werden kann. 

Fbankel2) versuchte, die Kulturen durch eiustttndiges Erhitzen auf 65 
bis 70° zu sterilisieren, Briegeb & Frankel») erhitzten kleine Mengen 3 bis 
5 Stunden auf 50°, wodurch sie sicher sterilisiert wurden, über 60° ging 
das Gift bald zu Grunde. 

BEHBiNa & Webnicke ^) erzeugten in den Kulturen einen Niederschlag 
von phosphorsaurem Kalk (Zusatz von Ohlorcalcium), den sie dann nach dem 



1) Brieger, Eitasato & Wassermann, Ueb. Immunität u. GiftfeBtigung. Z. f 
Hyg., XII, 137 (1892). 

2) Fränkel, ImmunisieruDgBveTsuche bei Diphth. Berl. klin. Woch., 1890, 1133. 

3) Brieger & Fränkel, lieber Bakteriengifte. Ebd., 1890, 241. 

*) Behring & Wernicke, Ueb. Immunisier, u. Heilung von VerBucbstieren b. d. 
Diphth. Zeitschr. f. Hyg., XII, 10 (1892). 



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Trocknen dnroh Erhitzen anf 77^ sterilisierten, wobei das mitgerissene Toxin 
nicht wesentlich geschädigt wnrde. 

Von chemischen Mitteln , die gleichzeitig tötend auf die lebenden 
Bazillen und konservierend anf die OifÜösnng wirken, die also auch 
nur zu letzterem Zweck nach der Filtration zugesetzt werden, sind 
verwendet worden: 

Jodtrichlorid, ICI3, von Behring & Wernicke, 
Trikresol in 0,3proz. Lösung von Aronson (1. c), 
Phenol ebenfalls 0,3proz. (Spronck 1. c). 

Toluol benutzt Ehrlich, der seine Gifte unter Toluol bei 15° im 
Dunklen aufbewahrt. Nach Abba *) hält sich Diphtherietoxin unter Toluol 
2 Jahre lang im Dunklen und in der Kälte. 

Die beste und bequemste Darstellung und Konservierung des Di- 
phtheriegiftes für praktische Immunisierungszwecke ist folgende von 
Ehrlich & Wassermann angegebene. Die in oben beschriebener Weise 
bereiteten Bouillonkulturen werden durch ein doppeltes Papierfilter fil- 
triert, so dass die groben Bakterienhäute zurückgehalten werden. — Das 
abfließende Filtrat wird etwa zwei Finger breit mit Toluol ttberschichtet, 
das Ganze tüchtig öfters während zweier Tage durchgeschüttelt. Dann 
sind alle lebenden Keime abgetötet und die Flüssigkeit enthält nur mehr 
die 6ift;e. Zum Gebrauche wird mittelst einer Pipette stets das Gift 
unter der obenschwimmenden und konservierenden Toluolschicht hervor- 
geholt. Das Gift soll kühl und besonders vor Licht geschützt, in 
schwarzen oder mit Papier überzogenen Flaschen aufbewahrt werden. 
In dieser Art werden die Gifte bei der preußischen Kontrollstation be- 
reitet und aufbewahrt. 

Für feinere biologische und chemische Untersuchungen genügt diese 
grobe Filtration nicht, sondern hier muss die Flüssigkeit durch richtige 
Bakterienfilter ganz von Bazillenkörpern befreit und sterilisiert werden. 

Yersuche zur Beindarstelluiig des Diphtherietoxins. 

Versuche, das Diphtherietoxin in reinem oder wenigstens kon- 
zentriertem Zustande zu gewinnen, sind schon in der allerersten Zeit der 
Diphtheriebazillenforschung gemacht worden. 

Löppler2) fand, dass beim Eindampfen, oder beim Ausschütteln mit 
Aether keine wirksamen Gifte erhalten würden; dagegen bekam er durch 
Glycerinextraktion aus infiziertem Fleischbrei eine schwach toxisch wirk- 
same Substanz, die durch Alkohol gefällt werden konnte. Er nannte 
sie bereits ein »Elnzymc. 



^) Abba, Ueb. d. Daner des toxisch. Vermögens beim D.-T. u. Antit. C. f. Bakt. 
23, 934 (1898). 

^ LÖFFLEB, Der gegenw. Stand d. Frage a. d. Entsteh, d. Diphtherie. Deutsche 
med. Woch., 1890, Nr. ö/6. 



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— 70 — 

Später warden von Roux & Yersin, Madsen u. a. durch Fällmigen 
mit Alkohol, darch Sättigen mit Ammonsnlfat und durch Ausfällen 
mittelst Galciumphosphat wirksame Trockenpräparate des Toxins ge- 
wonnen, die allerdings auf Reinheit keinen Anspruch machten. Als das 
Wesentlichste dieser Versuche ist zu bezeichnen, dass das Diphtheriegift 
von einem in seiner Lösung erzeugten voluminösen Niederschlag z. B. 
Galciumphosphat mechanisch mit niedergerissen wird. 

Systematisch und grflndlich wurden diese Arbeiten erst von Bbieger 
aufgenommen. Zuerst suchte er in Oemeinschaft mit C. Fbänkel ^) nach 
Ptomainen in den Diphtheriekulturen, musste aber bald sich überzeugen, 
dafis fltlchtige Basen hier absolut nicht vorhanden sind. Bmeger hat 
infolgedessen seme Ansichten über die Bedeutung der Ptomaine wesent- 
lich modifiziert. Er erhielt nun aus den Bakterienkulturen, nicht nur 
der Diphtherie, sondern auch zahlreicher anderer Bakterien, eiweißartige, 
giftige Stoffe, die er als Toxalbumine bezeichnete. 

Bbteqeb & Fränkel gelangten zu ihrem Toxalbumin der Diphtherie 
folgendermaßen: 

Man kann zunächst aus der Bouillon durch Sättigen mit Magnesiumsulfat 
bei 30^ die Globuline abscheiden. Es giebt dann eine geringe Fällung, die 
völlig ungiftig ist 

Aus der so vorbehandelten, oder ebensogut der frischen Bouillon, kann 
man dann die giftigen EiweiBstoffe durch Ammonsulfat oder Natrium- 
sulfat fällen, oder auch mit einem großen üeberschuss von Alkohol. Da 
die Ammonsulfatfällung nach dem Wiederauflösen erst nicht ohne Verlust 
dialysiert werden muss, so fällt man am besten mit Alkohol. 

Man dampft die Bouillon bei 30^ auf ein Drittel ihres Volumens ein und 
versetzt sie mit dem zehnfachen Volumen absoluten Alkohols, am besten 
unter Zusatz von einigen Tropfen Essigsäure. Nach 12stttndigem Stehen im 
Eisschrank wird filtriert, mit Wasser aufgenommen, wieder mit Alkohol ge- 
fällt und dies 6 — 8 mal wiederholt, bis die Lösung des Präzipitates in Wasser 
ganz klar ist. Dann wii'd das Präparat dialysiert und im Vacuum bei 40^ 
getrocknet. 

Man erhält so ein schneeweißes Pulver, das in wässeriger Lösung 
beim Kochen nicht koaguliert. Na2S04, NaCl, MgS04, HNOs, Bleiacetat 
geben keinen Niederschlag, wohl aber Eohlendioxyd in den gesättigten 
Lösungen, femer alle übrigen Eiweißreagentien. Der Stoff ist also den 
Albumosen verwandt, er giebt eine Benzoyl-, aber keine Phenyl- 
hydrazinverbindung. Trockenes Erhitzen auf 70° verträgt er ohne 
Schaden. Er ist giftig: 2,5 mg pro Kilo sind sicher tödlich. Es ist also 
nicht sehr giftig, ein Teil des Toxins scheint zerstört zu sein. 

Wassermann & Proskaüer^) haben dies Verfahren modifiziert: 



1) Bmeger & Frankel, üeber Bakteriengifte. Bert. klin. Woch., 1890, 241. 

2) Wassermann & Proskauer, üeb. die von d. Diphtheriebacülen ereeugten 
Toxalbumine. Dentache med. Woch., 1891, ö85. 



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— 71 — 

Sie dampfen die Bouillon, die dnrch Zusatz von 10 — 12 cm^ Normal- 
natronlange ialkaliaiert nnd durch EiTASATO-Kerzen sterilisiert war, im Va- 
euum bei 27 — 30^ auf ein Zehntel ihres Volumens ein. Dann wird bei 
niederer Temperatur dreimal gegen fließendes Wasser dialysiert Dadurch gehen 
die Salze und Peptone heraus und die Globuline werden teilweise gefUlt 
Letztere sind ungiftig. Der Dialysatorinhalt wird, was wichtig, bis zur 
Klarheit filtriert Dann gießt man ihn in das zehnfache Volumen 60 — 70proz. 
Alkohols, der mit einigen Tropfen Essigsäure angesäuert war, und lässt 
24 Stunden stehen. Der hierbei entstandene Niederschlag wird abfiltriert, 
das Filtrat fällt tropfenweise in absoluten Alkohol. Der hierbei entstehende 
neue Niederschlag wird ebenfalls abfiltriert, beide in wenig Wasser gelöst und 
mit der doppelten Menge gesättigter Ammonsulfatlösung gefällt. Wieder ge- 
löst, bis zum Verschwinden der Schwefelsäurereaktion dialysiert, nochmals in 
Ale. absol. eingetragen und das Verfahren wiederholt, bis die wässerige 
Lösung völlig klar ist. Dann werden die Präparate bei 37^ im Vacuum ge- 
trocknet. Sie ergaben alle Albumosenreaktionen. Nur der schon durch 60 % 
Alkohol ausgefällte Niederschlag ist giftig, der andere gar nicht, so dass 
also auf diesem Wege eine weitere Trennung des Toxins von der Menge der 
mitgefällten Eiweißkörper möglich ist. Sie erhielten auf demselben Wege diese 
Produkte aus Glycerin und Kochsalzextrakten von Organen diphtheriekranker 
Menschen. Doch sind alle diese Präparate sehr wenig giftig. Um ein 
Kaninchen in 3—4 Tagen zu töten, brauchte man 10 mg. Durch 3 mg wurde 
der Tod erst in 8 Wochen herbeigeführt. 

Giftigere Produkte erhielten Wassermann & Proskaüer aus den 
Organen vergifteter Kaninchen durch Glycerinextraktion. Es ergab sich 
ein weißes Pulver, das in einer Dosis von 0,2 mg intravenös ein Kar 
ninchen in 6 — 14 Tagen tötet. 

Die Befreiung des eigentlichen Toxins von dem anhaftenden Eiweiß- 
ballast und damit die Erkenntnis, dass das wirksame Prinzip kein 
Protein ist, verdanken wir ebenfalls Brieger % der mit Boer das Toxin 
in ziemlicher Reinheit dargestellt hat. 

Brieger & Boer benutzten zu diesem Zwecke die Ausfällung des Toxins 
als Zinkdoppelsalz. Die Fällung ist so gut wie quantitativ, wenigstens beim 
Diphtheriegift; desto schwieriger aber ist es, das Toxin vom Zink zu trennen, 
besonders da Schwefelwasserstoff, der sonst sehr bequem anzuwenden wäre, 
die Toxine schnell zerstört. Nach langen, mühevollen Versuchen gelang ihnen 
die Trennung folgendermaßen: 

Die Giftbouillon (sie benutzten auch Blutserum mit gutem Erfolge als 
Kulturj9flssigkeit) wird mit dem doppelten Volumen Iproz. Zinkchloridlösung 
gefällt Der entstehende Niederschlag reichlich mit Wasser gewaschen. Dann 
wird er kräftig mit einer 3 — 6proz. Ammoniumkarbonatlösung geschttttelt. 
Dann setzt man soviel Ammoniumphosphatlösung hinzu, bis der ganze Nieder- 
schlag in Lösung gegangen ist und nur eine feine Trübung von abgeschiedenem 



1) Brieger & Boer, üeb. d. Toxine d. Diphth. u. d. Tetanus. Deutsche med. 
Woch., 1896, 783. Zeitschr. f. Hyg., 21, 2ö9 (1896). 



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— 72 — 

Zinkphosphat besteht. Diese wird durch gehärtete Filter abfiltriert, nachdem 
sie sich ordentlich abgesetzt hat, und das Filter mit viel Wasser ausgewaschen. 
Dann wird das Filtrat mit festem Ammonsulfat gesättigt^ nochmals in Wasser 
gelöst und mit Katriumsulfat in Substanz ge&Ut. Dabei bleiben Peptone in 
Lösung. 

Das so dargestellte Toxin zeigt keine Eiweißreaktionen mehr. Die 
Zinkyerbindung giebt ebenfalls keine Eiweißreaktionen, ist optisch in- 
aktiv, färbt sich beim Kochen mit Eisenchloridlösung rot. 

Alkohol, Aether, Aceton, Säuren und schwache Oxydationsmittel zer- 
stören das Gift schnell, schwache Alkalien und Beduktionsmittel sind 
indiflferent 

Auch aus dialysiertem Harn, also einem eiweißfreien Nährboden 
(GüiNOCHET 1. c), und aus anderen derartigen Nährlösungen (Uschinsky ^) 
kann man, allerdings nur sehr geringe Mengen Diphtherotoxin gewin- 
nen. Uschinsky benutzte eine Nährlösung von folgender Zusammensetzung: 
Glycerin 40 — 50, NaCl 5 — 7, Ammonium lacticum 10, CaClj 0,1, 
MgS04 0,2, K2HPO4 1 auf 1000 Wasser. Das Gift zeigte nicht die 
üblichen Eiweißreaktionen. 

Eigenschaften des Diphtherietoxins. 

Das Gift ist in chemisch reinem Zustande nicht bekannt. Was man 
also von seinen Eigenschaften angeben kann, bezieht sich auf diejenigen 
Präparate, die es neben anderen Beimischungen enthalten. Seine wesent- 
lichsten Eigenschaften sind bereits von Roux & Tersin mitgeteilt worden. 

Es ist wahrscheinlich kein Eiweißkörper, da die reinsten Präpa- 
rate (siehe oben) keine dementsprechenden Reaktionen mehr zeigen. Ein 
Versuch von Arrhenius & Madsen^) das Molekulargewicht mit Hilfe der 
Diflfusionsschnelligkeit in Gelatine zu ermitteln, hat vorläufig nur zu 
dem Resultat geführt, dass die Toxine jedenfalls ein viel kleineres 
Molekulargewicht haben als die Antitoxine. 

Gegen äußere Einflüsse ist es sehr empfindlich. Das eigentliche 
Toxin wird durch Kochen sehr schnell, bei ca. 60^ ziemlich schnell zer- 
stört, doch behält die erhitzte Lösung eine gewisse Giftigkeit bei, die 
bei den Versuchstieren zur Abmagerung und Spätlähmungen, häufig noch 
zum Tode führt Aehnlich scheint das Gift im Organismus verändert 
zu werden. Roux & Yersin haben aus den Organen und dem Harn 
von Kindern, die an schwerer Diphtherie litten, giftige StoflFe von ganz 
analogen Eigenschaften dargestellt. Sie zeigen ähnliche toxische Wir- 
kungen wie die Toxone (siehe unten). 

1) Uschinsky, üeber Diphtheriekulturen auf eiweißfreier Nährlösung. Centralbl. 
f. Bakt, 21, 146 (1897). — Ders., Les Poisons de la Diphtherie et du Cholera. 
Arch. de m6d. exp^r., 1893, 293. 

S) Arrhenius & Madsen, On tbe molecoiar weight of Di.-T. Festschrift des 
Statens Serum Institut, Kopenhagen 1902. 



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— 73 — 

Saaerstoffzafnhr und BelichtaDg schädigen im Verein das Diphtherie- 
toxin sehr schnell, viel weniger beide Faktoren einzeln. 

Nach Piazza^) wirkt diffuses Tageslicht sehr langsam, nach 23 Tagen ist 
eine dentliche Abnahme zn konstatieren, die erst nach 96 Tagen betrachtlich 
wird. Direktes Sonnenlicht wirkt bei Sanerstoffznfuhr sehr energisch. Nur 
die beiden Enden des Spectmms, die Wärme- und aktinischen Strahlen (rot 
und violett) wirken dabei, die Mitte (gelb) ist gänzlich unwirksam. 

Auch durch Säuren wird das Toxin unwirksam. Nach Roux & 
Yersin bewirkt eine Ansäuerung der Giftlösung mit Milchsäure oder 
Weinsäure fast völlige Entgiftung; in geringerem Maße schädigen Phenol, 
Borsäure und Borax. Neutralisierung stellt die Wirksamkeit zum Teil 
wieder her. 

Nach Brieger & Boer ist es außerordentlich empfindlich gegen 
oxydierende Substanzen, wenig dagegen gegen Reduktionsmittel in 
schwach alkalischer Lösung. So lässt es sich erklären, dass es in den 
schwach alkalischen, reduzierenden Körpersäften sein bestes Medium 
findet. Nach DfiLiARDE*) wird es durch Antipyrin ungiftig gemacht. 
Auch durch Antiseptica in größerer Konzentration wird es zerstört, 
auch durch Salicylaldehyd (Salkowski*). Hefe schwächt das Toxin ab 

(NOBiCOURT^). 

Höchst wahrscheinlich ist überhaupt die Art der umgebenden Medien 
von Einfluss auf den Bestand und die Wirkung des Toxins, doch geht 
es viel zu weit, und steht mit der zweifellos nachweisbaren Veränderung 
des Giftes selbst in Widerspruch, wenn Dantscz^) jede Veränderung der 
Wirkung auf Veränderung der umgebenden Medien zurückführen will. 
Auch die anderen äußeren Eigenschaften sind ganz analog den für alle 
Enzyme giltigen. 

Die Diffusion durch Pergament ist deutlich nachweisbar. Von 
5 cm^ giftiger Bouillon diffundierte gegen 12 cm^ Wasser durchschnittlich 
in 24 Stunden eine für Meerschweinchen letale Dosis (Roux & Yersin). 
Dagegen diffundiert es nicht durch Membranen, die aus tierischen 
Organen gebildet werden, z. B. Oesophagus, Dickdarm, Gallenblase, 
außer Dünndarm (Chassin & Moussü«), Auch durch Kollodium geht es 
nicht (Rodet & Güächoff'). 



1) Piazza, Influenza della luce solare sulla tossina difter. Ann. d'Igiene aper im. 
Nuova ßer. V, 621 (1805), ref. C. f. Bakt, 19, 914 (1896). 

2] D^L^AiiDE, Rech, exp^r. snr les propri^t^s etc. de rantipyrine. Arch. de m6d. 
exp6r., 1897, 786. 

3j Salkowski, üeb. d. Wirkg. d. Antiseptica auf Toxine. Berl. klin. Woch., 
1898,545. 

*) NoBjfecoüRT, Action des levures etc. Soc. BioL, 52, 753 (1900). 

S) Danyscz, Constitution des toxines. Ann. Fast, XIII, 581 (1899). 

0) Chassin & Moussü, Influence de la dialyse etc. Soc. BioL, 52, 694 (1900). 

7) EoDET & GüÄCHOPP, Soc. BioL, 52, 965 (1900). 



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— 74 — 

In reinem Alkohol ist es Yöllig unlöslich, doch wird es langsam durch 
ihn zerstört (Wassermann & Pkoskaüeb 1. c), ebenso durch Aether und 
Aceton (Beieger & Boeb 1. c). Durch die Verdauungsfermente im Magen 
und Darm wird es zerstört (Paltschikowski i). 

Wie auch die Enzyme wird es aus seinen Lösungen durch fallende 
Niederschläge mitgerissen. Bei fraktionierter Fällung mit Ghlorcalcium- 
lösung reißt der entstehende Galciumphosphatniederschlag einen großen 
Teil des Toxins mit; am giftigsten ist der zweite Niederschlag; doch 
ist die Fällung nie ganz vollständig, noch weniger mit Aluminium- 
phosphat. Besonders die eigenartigen, späte Lähmungen erzeugenden 
Gifte bleiben zum großen Teil in Lösung. Dieser Galciumphosphat- 
niederschlag kann ungestraft lange auf 70® erhitzt werden, und erträgt 
100° 20 Minuten lang ohne merkliche Schädigung. Er giebt subkutan 
eingeführt sein Gift langsam ab, erzeugt außerdem Entzündungsvorgänge 
(Fibrinausscheidung, falsche Membranen), scheint also den lebenden Ba- 
zillen ganz ähnlich zu wirken. Auch durch Nukleohiston und Nuklein- 
säure wird es ausgefällt (Freund & Grosz^). Durch Dialyse kann man 
aus dem wässerigen Auszug dieses Niederschlages, oder aus der Alkohol- 
fällung fast aschefreie Toxine herstellen. 

Besonderes Literesse hat eine Zeitlang die Reaktion der Diphtherie- 
giftlösungen auf elektrische Ströme erweckt. Zuerst hatten Smirnow 3) 
und ErOoer^) konstante Ströme geringer Intensität auf die Toxine ein- 
wirken lassen. Sie fanden dabei, dass bei einer vorsichtigen Anwendung 
des Stromes zunächst an der Anode eine leichte Acidität eintritt. Wenn 
diese so beschaffen ist, dass 1 cm^ ca. 1,2 cm^ Normalnatronlauge neu- 
tralisiert, soll der Strom unterbrochen werden. Dann fanden sie, dass 
der Giftwert ganz beträchtlich herabgesetzt ist, der Immunisierungs- 
wert indessen nicht. Ganz ähnliche Resultate fanden d'Arsonval & 
Charrin*) bei Anwendung von hochgespannten Wechselströmen von großer 
Wechselzahl. Es knüpften sich daran theoretisch unhaltbare, sehr weit- 
ausschauende Spekulationen über die Bildung von »künstlichem Heil- 
serum« ohne Tier u. s. w.; wozu noch bei d'Arsonval & Gharrin die 
phantastische Idee kam, die Infektion im Körper selbst durch solche 
hochgespannte Ströme zu bekämpfen, die ja bekanntlich ohne jede 
Einwirkung auf den Menschen sind. 

1) Paltschikowski, üeb. d. Veränderungen der diphtheritischen Toxine in den 
NahrungBwegen. Ref. Centralbl. f. Bakt, 25, 843 (1899). S. dar. auch d. AUg. Teil. 

^ FREum> & Grosz, üeb. d. Bez. zw. Gerinnung u. d. Wirkg. d. Antitoxine. 
Centralbl. f. inn. Med., 1895, 613, 637. 

3] Smirnow, üeb. d. Behandlung der Diphtherie. Berl. klin. Woch., 1894, 683; 
1895, 645, 675. 

4) Krüger, üeb. die ehem. Wirkg. d. Elektriz. auf toxische und immuniB. Bak- 
terienanbatanzen. Deutsche med. Woch., 1895, 331. 

t>) d'Arsonval & Charrin, Action des coorants i haute frequence sur les toxi- 
nes bact^riennes. Compt. rend. de Tacad., 122, 280 (1896). 



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— 75 — 

Alle diese etwas mystischen Yorstellimgen ttber den Einflnss der 
Elektrizität sind indessen durch MarmiebI) geklärt worden. MA RMncit 
wies nach, dass bei der Elektrolyse mit konstanten Strömen oxydierende 
Substanzen entstehen, besonders Hypochlorite und freies Chlor aus dem 
stets Yorhandenen Kochsalz, die diuin, also sekundär, auf die toxophore 
Gruppe des Giftes einwirken. 

Fttr die Wechselströme konnte Marmier zeigen, dass trotz Eisktthlung 
eine so intensive Erwärmung eintritt, dass diese allein hinreicht, um die 
Abschwächung des Giftes zu erklären. Als er diese durch sinnreiche 
Vorkehrungen ausschaltete, blieb jede erkennbare Wirkung auf das 
Toxin sowohl bei Diphtherie wie Tetanus aus. 

Es handelt sich hier also um sekundäre Veränderungen unter dem 
EUnfluss des elektrischen Stromes^ die augenscheinlich zu einer schnelleren 
Toxol'dbildung unter 2ier8törung der toxophoren Gruppe führen. 

Physiologische Wirksamkeit des Diphtherietozins. 

Das Diphtherietoxin ist fttr manche Tiere von außerordentlicher 
Giftigkeit. Soux & Yersik schätzen die einfach tödliche Dosis fttr 
ein Meerschweinchen auf ca. 0,05 mg, fttr Kaninchen auf 0,1 mg der 
organischen, aschefreien Substanz, die also nur einen, vielleicht sehr 
geringen Bruchteil reinen Toxins enthält. Auf poikilotherme Tiere soll 
es nach Galabrese ^Zagari^) überhaupt nicht wirken, doch beobach- 
teten CoüRMONT, DoYON & Paviot^) bei erwärmten Fröschen Paralyse 
imd Abmagerung. Die Wirksamkeit des Toxins fällt in allen wesent- 
lichen Punkten mit der Allgemeinwirkimg der lebenden Bazillen zu- 
sammen. Es kann also hier nicht unsere Aufgabe sein, diese Erschei- 
nungen genau zu schildern. Wir werden uns vielmehr mit einem ganz 
flüchtigen Ueberblick begnttgen müssen, da die Erkrankungserschei- 
nungen der Diphtherie an zahlreichen Stellen bis ins Detail geschil- 
dert sind. 

Von allgemeinen Wirkungen des Diphtheriegiftes hat man fol- 
gendes berichtet: 

Eine der hervorstechendsten Eigenschaften ist die erhebliche Er- 
weiterung der GefäBe, die nach einer gewissen Inkubationszeit eintritt 
(siehe unten). 

Die Temperatur steigt zunächst und geht dann unter die Norm 
(bis auf 25°), nach Arloing & Laulaniä *) infolge des Sinkens der Lebens- 



1) Marmier, Les tozines et T^lectricit^. Ann. Fast, 469 

^ Galabrese & Zaoari, Bicerche solla tossina ed antitoasina difter. (Giorn. 
intemaz. di Scienze mediche, 1895, Nr. 4, 19—21). Baumgartens Jahrb., 1895, 215. 

^ CouRMONT, DoTON & Payiot, Aotlon de la toxine dipht^riqne bot le Systeme 
neryenx de la grenouille etc. Soc. Biol, 47, 210 (1895). 

4) Abloino & Laulani^, it exp^r. sor les troubles imprim6s . . . par les toxines 
diphth. Soc. BioL, 47, 433 (1895). 



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— 76 — 

energie und der oxydativen Vorgänge. Bei sehr großen Dosen kann 
die Hypothermie ausbleiben (Coürmont & DotonI). 

Den gesamten Stoffwechsel von Tieren nach Vergiftung mit Diphtherie- 
toxin in Bezug auf Cl und N hat u. a. Pace^) beobachtet. Zum Schluss 
tritt ausgedehnter Eiweißzerfall in die Erscheinung. 

Besonderes Interesse bot die Frage, ob das Diphtherietoxin eine 
direkte Schädigung der Herzaktion bewirkt oder nicht. Schließlich 
tritt freilich Herzkollaps ein und das Herz bleibt in Diastole stehn; aber 
es ist noch nicht entschieden, ob dies nicht die sekundäre Folge einer 
primären Lähmung der Vasomotoren ist. 

Enkiquez & Hallion 5) fanden, dass der Blutdruck erst nach längerer 
Zeit zu sinken beginnt; Bbck & Slapa^) bestätigen dies; sie fanden ein 
beträchtliches Sinken des Blutdruckes sogar erst kurz vor dem Tode. 

Umfangreiche experimentelle Untersuchungen über das Verhalten der 
Herzaktion bei der Vergiftung mit Diphtherietoxin stellten Romberg, 
Pässler, Bruhns & Müller (^) an, als deren Resultat sie angeben, dass 
eine primäre Herzwirkung nicht vorliegt, sondern die Vasomotorenlähmung 
die einzige direkte Wirkung sei. Erst sekundär wird das Herz infolge 
der mangelhaften Durchblutang geschädigt. An diesen Resultaten hat 
nun Stejskal^) scharfe Kritik geübt, und nimmt auf Grimd seiner an- 
geblich genaueren Versuche eme direkte Schädigung des Herzens durch 
Diphtheriegift an. 

Nach einer ganz kurzen Anstachelung der Herzkraft tritt eine kurze 
Zeit dauernde Schwächung ein ; es folgt wieder eine Zeit der Steigerung, 
die schließlich von der definitiven Verschlechterung der Herzarbeit ab- 
gelöst wird, die früher zur Lähmung des Herzens als der Vasomotoren 
führen kann. 

Eine Unterstützung finden diese Ergebnisse in den Arbeiten von 
Fenyvesst^) und Sharp »), die am isolierten Froschherz ebenfalls direkte 
Wirkungen des Diphtheriegiftes konstatieren konnten. Nach dem Tode 



1) CouRMONT & DoYON, Marcho de la temp^rat dans rintoxication diphth. Arch. 
de phyBioL, 27, 252 (1895). 

3) Face, Inflaenza della tosBlne difter. II Policlinico, 7. Baomg. Jb., 1900, 180. 

3) Enriquez & Hallion, Sor les effets physiol. de la toxine diphth. Arch. de 
phys., 27, ölö (18^). 

4) Beck & Slapa, Ueb. den Einfl. des D.-G. auf den Ereiftlanf. Wien. klin. 
Woch., 1895, 333. 

^} RoMBERO, Passler, Bruhns & Müller, Unters, üb. d. allg. Patholog. der 
KreislanfBtöning bei aknten Infektionskrankh. Arch. f. klin. Med., 64, 652 (1899). 

^) Stejskal, EritiBch-experim. Unt. üb. d. Herztod infolge von Diphth.-Toxin. 
Z. f. klin. Med., 44, 367 (1902). 

7) Fenyvessy, Ueb. d. Wirkg. d. D.-T. a. Antit auf das FroBchherz. Jahrb. f. 
Kinderh., N. F., 43, 216 (1896). 

8] Sharp, The action of the producte of the organiBm of dipht on the heart 
of the firog. Joom. of anat. and phyBioL, 31, 199 (1897). 



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— 77 — 

fanden Mollard & Regaux^) myokarditische Veränderungen am Herzen, 
die yielleicht auch im Sinne einer direkten Schädigung zu deuten sind. 

Eppinger^) beobachtete ebenfalls ziemlich schwere Veränderungen 
am Herzmuskel, die er als Myoljse bezeichnet. Er nimmt geradezu 
an, dass das Toxin sich direkt gegen den Muskel wendet, sich in ihm 
verankert, und ihn so schädigt. 

Von einzelnen Organen werden betroffen: 

Darm: Coürmont, Doyon & Paviot^) fanden im Dünndarm von 
Hunden Exsudationen und Enteritis membranacea. 

Leber: Coürmont, Doyon & Paviot^) beobachteten an Hunden bei 
intravenöser Injektion eine Hepatitis parenchymatosa mit Hyperämie 
und interstitiellen Blutungen. Baldassari*) fand trttbe Schwellung und 
ähnliche Veränderungen, wie sie bei Phosphor- und Arsenvergiftung 
vorkommen. An den Nieren fand Baldassari*) Epithelveränderungen. 

Lokale Läsionen des Auges, vergleichbar den diphtheritischen, fanden 
MoRAX & Elmassian«). Auch ÖATri^ hat durch direkte Berührung der 
Netzhaut mit Diphtherietoxin Schädigungen beobachtet, die zu einer 
Quellung des Gewebes mit Erhaltung der Kerne und der Ganglien- 
zellen führen. 

Vor allem aber setzt es ebenfalls schwere Störungen am Zentral- 
nervensystem, deren genauere Untersuchungen uns hier nicht näher 
beschäftigen können. 

Untersuchungen dieser Art liegen vor von Enriquez & Hallion®). 
Crocq fils»), Thomas ^ö)^ Mürawjewi^) u. a. 

Indessen ist es gerade bei den Läsionen des Nervensystems sehr 
fraglich, ob man sie allein dem Diphtherietoxin als solchem zuschreiben 



^ Mollard & Regaux, L^bIohs du myocarde dans Tintox. aigtte par la t d. 
Ann. Fast, XI, 97 (1897). 

2j EppmoER, Die toxiBcbe Myolyse des Herzens bei Di. Deutsche med. Woch., 
1903, Nr. 16/16. 

8) Coürmont, Doyon & Paviot, L^sions intestinales dans Tintoxic. dipbth. 
Arch. de pbys., 27, 484 (1895). 

*) Coürmont, Doyon & Paviot, L^sions b6patiques engendr^s par la t. d. Arcb. 
d. pbys., 27, 687 (1895). 

5) Baldassari, üeb. d. Wirkg. d. D.-T. auf den Zellkern. C. f. allg. Patbol., 
VII, 625 (1896). 

^ MoRAx & Elmassian, Action de la toxine d. snr les maqueuses. Ann. Past., 
XII, 210 (1898). 

T) Gatti, L'azione dl alcnne tossine battericbe sopra gli elementi della retina. 
Autoreferat i. Biocb. Centr., I, Nr. 775 (1903). 

8) Enriqübz & Hallion, Myelite exp6r. par t. d. Soc. Biol., 46, 312 (1894). 

^ Crocq, S. 1. alt^rat da syst, nervenx dans 1. paralys. dipbtb. Arcb. ni6d. 
exp^r., VII, 603 (1895). 

*0] Thomas, Boston med. and snrg. jonrn., Nr. 4 ff., 1898. 

") MuRAWJEW, Das D.-T. u. Antit in ibrer Wecbselwirkg. auf das Nervensystem 
d. Meerscbw. Fortscbr. d. Med., 1898, 93. 



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— 78 — 

darf. Soweit diese Yeränd.erangen mit den diphtherischen Spätlähmongen 
zu thun haben, fallen sie wahrscheinlich den Toxonen zur Last. Ob 
auch das reine Toxin die Spätlähmnngen erzeugen kann, oder ob dies 
nur eine spezifische Funktion der Toxone ist, lässt sich vorderhand 
nicht sicher sagen, wahrscheinlich ist hingegen das letztere. Die All- 
gemeinyergiftnng verläuft völlig analog der mit lebenden Bazillen, so 
dass man anzunehmen berechtigt ist, dass diese nur durch ihr produ- 
ziertes Toxin so deletär wirken. 

Meerschv^einchen zeigen nach der Vergiftung mit Diphtherietoxin den 
typischen Sektionsbefund der bazillären Erkrankung. 

Flexker 1) hat mit größter Sorgfalt den Sektionsbefund nach Diphtherie- 
toxinvergiftung angegeben: Oedeme, DrttsenschweUung, Eongestion 
und Hämorrhagieen der Nebennieren, sonst wenig Charakteristi- 
sches, auch mikroskopisch nicht. Auch Coüncilman, Mallory & Peaece^) 
haben ebenfalls ausgedehnte Studien über diese Beftmde augesteUt 

Roux & Yersin konnten mit Diphtheriegift eine typische Pseudo- 
membranbildung bei der Einimpfung auf Trachea und Vagina bei Meer- 
schweinchen erzeugen. 

Das empfindlichste Tier ist das Meerschweinchen, doch zeigen 
sich bei ihm nach Ehrlich auch Rassenunterschiede in der Empfäng- 
lichkeit. Pferde, Ziegen und Schafe sind sehr empfindlich. Ka- 
ninchen weniger, noch weniger Mäuse, die fast refraktär sind. 

Nach der Einführung auf subkutanem oder intravenösem Wege ver- 
schwindet es außerordentlich schnell aus der Blutbahn, indem es von 
den Rezeptoren der Gewebe an sich gerissen und gebunden wird. Man 
kann dies daran erkennen, dass Antitoxinmengen, die nach der In- 
jektion von Gift eingeführt werden, mit Zunahme der Zeitdifferenz 
außerordentlich schnell jede Wirkung einbüßen. 

DÖNiTZ^) fand, dass eine einfach neutralisierende Antitoxinmenge 
schon 15 Minuten nach der Zufuhr einer siebenfach tödlichen Dosis das 
Tier nicht mehr retten kann, und dass nach IY2 Stunden selbst sehr 
große Dosen dazu nicht mehr imstande waren. 

Andererseits hat man aber auch direkt die Toxizität des Blutes 
nach Injektion von Diphtherietoxin untersucht. Bomstein*) injizierte 
Kaninchen die für ein Meerschweinchen zweifach tödliche Dosis pro 
cm^ Blut des Kaninchens. Nach einer Stunde war noch 0,5, nach 



1) Flexner, The pathology of tozalbnmin intoxication. Johns Hopkins Hosp. 
Record, VI, 259 (1897). S. A. 

2) Coüncilman, Mallort & Pearce, Diphtheria. — A study of bacteriology etc., 
1901, ausführlich cit. in Vaüghan & Novy, The ceUnlar toxins, 1902, p.7öff. 

8) DöNirz, üeb. d. Grenzen d. Wirksamkeit d. Diphtherieheilsenuns. Arch. 
internat d. Pharmacodyn., V, 426 (1899). 

4) BoMSTEiN, Ueb. d. Schicksal der Diphth.-T. im Tierorganismns. C. f. Bakt, 
23, 785 (1898). 



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— 79 — 

3 Stunden 0,25, nach 12 Stunden 0,12 davon yorhanden. Die Abnahme 
wird also immer geringer und die letzten Spuren scheinen sehr langsam 
zu verschwinden. 

Aehnliche Hesultate erzielte Grolt^}. Nach 5 Minuten fand er das 
Toxin noch unverändert, nach 2 Stunden höchstens die Hälfte. 

In den Organen ist das Gift dann auch nicht nachzuweisen, ebenso- 
wenig wird es durch den Urin oder den Darmsaft ausgeschieden 
(BoMSTEiN),nur Bexjnnee^) fand es im Muskelsaft wieder, und Saltee^) 
im Schweiß (?). 

Vom Magen und dem gesamten Darm aus wirkt es gar nicht. Es 
wird von den Yerdauungssäften gleich allen anderen Toxinen zerstört, 
besonders von Pankreasfistelsaft, weniger von Magensaft. Bei sehr 
großen Dosen tritt eine gewisse Wirkung ein (Nencki, Siebeb & Schoü- 
MANOWSKi ^), ebenso wenn die Schleimhaut künstlich lädiert wird (siehe 
auch im Allgem. Teil). 

Eine eigentttmliche Wirkimg des Diphtherietoxins will Consiglig*) be- 
obachtet haben. Er fand, dass es die Gärungsprozesse in kleinen Dosen 
fordert, in größeren hemmt; dass es andererseits aber stets einen sehr un- 
gttnstigen Einfluss auf Keimungsprozesse der Samen ausübt. 

Toxolde und Tozone. 

Von den Eigenschaften der ToxoKde, die sich in älteren Kulturen 
vorfinden (siehe im Allg. Teil), ist uns gar nichts bekannt. Von dem 
chemischen Vorgang, der zu der supponierten Unwirksammachung der 
toxophoren Gruppe führt, haben wir nicht die geringste Vorstellung. 
Ebensowenig kann man angeben, ob sie in freiem Zustande physiologisch 
völlig indifferent sind, oder noch eine geringe Giftigkeit besitzen, obwohl 
letzteres nach den zahlenmäßigen Ergebnissen, den scharfen Zahlen bei 
der Veränderung des Giftes nicht gerade wahrscheinlich ist. 

Der einzige Hinweis darauf, dass sich in abgeschwächten Kulturen an- 
dere Stoffe vorfinden, ist die Bemerkung von Bbiegeb & Fränkel (1. c), 
dass sie ans solchen Kulturen einen ungiftigen, in verdünntem Alkohol 
etwas löslichen Stoff fanden, der sich von dem Toxin auch chemisch, z. B. 
durch Bildung einer Phenylhydrazinverbindung , unterscheidet. Diesen Stoff 



1) Cboly, Sor 1. disparition de la tox. dipht inject^e dans le sang. Arch. Inter- 
nat, de pbannacodynamie, III. 

2) Brunner, ünt üb. die Wirk, von Bakterien- u. Pflanzengiften. Ref C. f 
Bakt, 24, 184 (1896). 

3) Salter, The elimination of bacterial toxins. Lancet, 1898, 1, 162. Vergl. a. 
Walsh, ibid., 362. 

*) Nencki, Sieber & Schoumanowski, Die Entgiftung der Toxine. C. f Bakt, 
23, 840 (1898). 

5) CoNSiGLio, Azione di alcnne tossine etc. Arcb. di Farm., VI, Nr. 3 (1898). 
Malys Jb., 1898, 634. 



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- 80 — 

fanden anch Wassebbiann & Pboskauer (1. c.) in abgeschwächten Kaltaren 
sehr reichlich. Ob er mit den Toxoiden etwas zu. thun hat, sei dahingestellt 

Dagegen wissen wir von den freien Toxonen, die ein zweites primäres 
Produkt darstellen, und die wir ja in der Diflferentialzone mit Sicherheit 
stadieren können, dass sie ganz bestimmte Giftwirkungen entfalten. 
Ehrlich 1) hat leichte Oedeme nnd spät auftretende Lähmungen beob- 
achtet. Madsen2) fand, dass sie Oedeme erzeugen, jedoch keine Ne- 
krosen und Alopecieen. Die Lähmungen treten vom 13. — 33. Tage 
ein und führen bei großen Dosen stets zum Tode. Er beobachtete auch 
Verschiedenheiten in der Wirkung verschiedener Kulturen. Besonders 
bei stark abgeschwächten Giften, wo also zwischen Lo und Lf viel freie 
Toxone vorhanden sind, treten häufiger späte Todesfälle ein. Anderer- 
seits ist sehr auffallend, dass Kaninchen von den Toxonen sehr akut 
getötet werden (Ehrlich). 

Die Toxonfrage bietet aber femer noch ein großes theoretisches 
Interesse. Wenn wirklich die Toxone echte Haptine sind, d. h. Stoflfe 
die ebenfalls haptophore Gruppen, identisch oder nahe verwandt mit 
den haptophoren Gruppen des echten Toxins, haben, so müssen sie, wenn 
die EHRLiCHSche Seitenkettentheorie zn Hecht besteht, auch Bezeptoren 
abspalten, d. h. immnnisieren können. 

Diese sehr interessante Frage ist von Madsen & Dreyer^) experi- 
mentell geprüft und bejaht worden. Es gelang ihnen bei mehreren 
Giften, die so weit durch Antitoxin neutralisiert waren (siehe oben), dass 
nur noch die Toxone in Freiheit waren, bei Meerschweinchen, Kaninchen, 
Ziegen und Pferden eine ziemlich hochwertige Immunität zn erzielen. 
Das Serum der so vorbehandelten Tiere enthielt ziemlich beträchtliche, 
freilich stark wechselnde Mengen Antitoxins, bei einem Pferd bis fast 
400 I.-E. pro cm3. Sie waren dann auch gegen große Dosen voll- 
giftigen Toxins immun, woraus man auf eine weitgehende Ueberein- 
stimmung der haptophoren Gruppen der Toxone mit denen des echten 
Toxins schließen darf. 

Eine Ausnahmestellung nahm das Kaninchen ein. Zunächst erwies 
sich das Tier als äußerst empfindlich. Mischungen, welche für Meer- 
schweinchen nur noch Toxonwirkungen zeigten, weisen bei ihm noch 
akute Wirkungen auf; andererseits gingen den Forschem auch bei sol- 
chen Mischungen, die sicher nur noch Toxone frei enthielten, die meisten 
Tiere an den Spätlähmungen zu Grunde. Ein Tier indessen blieb am 
Leben und vertrug dann sehr große Toxonmengen, später auch mehr- 
fache Multipla der tödlichen Toxindosis ohne Schaden : aber sein Serum 



1) Ehrlich, Zur Wertbemessung des Dipbtherieheilsernms. Elin. Jahrb., VI. 

2) Madsen, Constit da poison diphth^rique. Ann. Fast, XIII, 568 (1899). 

3) Madsen & Dreyer, üeb. Immanisiening mit d. Toxonen d. Diphtheriegiftes. 
Z. f. Hyg., 37, 249 {1901). 



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— 81 — 

zeigte niemals auch nur die geringste Spur eines Antitoxin- 
gehaltes. 

Eine Erklärung dieses merkwürdigen Phänomens ist bisher nicht zu 
geben; wenn man nicht zu der Annahme greifen will, dass zwar durch 
die aktive Immunisierung die Neubildung von schützenden Seitenketten 
angeregt, diese aber nicht frei in die Blutbahn abgestoßen werden 
(»sessile Rezeptoren« nach Ehrlich). 

Infolge der geringeren Avidität des Diphtherietoxins wird es sehr 
viel langsamer von den Rezeptoren des Organismus verankert, d. h. es 
verschwindet nicht so rapide aus der Blutbahn wie das Toxin. Wir 
haben oben gezeigt, dass schon 15 Minuten nach einer Injektion der 
siebenfachen tödlichen Dosis Dönitz die Tiere durch eine das Gift in 
vitro genau neutralisierende Antitoxinmenge nicht mehr retten konnte. 

Dreyeb*) hat nun entsprechende Versuche mit den Toxonen angestellt. 

Nach 2 Stunden genügte die neutralisierende Menge Antitoxins 
noch stets, um eine sonst sicher nach 12 — 18 Tagen tödliche Toxondosis, 
beides bei Kaninchen intravenös appliziert, völlig unschädlich zu machen; 
bei 5 Stunden ZeitdiflFerenz zeigen sich die ersten Paresen, bei 10 Stunden 
treten sie stets auf, jedoch erst in 20—22 Tagen, bei 16 — 24 Stunden 
Zeitdifferenz ist das Antitoxin völlig machtlos. 

Ein ähnliches Bild gaben Heilungsversuche, die Dreyer mit 
großen Antitoxinmengen in subkutaner Einführung beider Stoffe am 
Meerschweinchen angestellt hat. 24 Stunden nach der Injektion einer 
sicher nach 12 — 18 Tagen tödlichen Toxondosis genügte die fünffache 
Dosis, um den Tod zu verhüten, nicht stets die Paresen. 

Von sieben Tieren, die nach 48 Stunden eine 5000 — lOOOOmal neu- 
tralisierende Antitoxindosis bekamen, bekam eins keine Paresen, die 
' anderen leichte mit Ausgang in Heilung nach 18 — 25 Tagen. 

4 X 24 Stunden und 21 000 fache Antitoxin dosis ergab zwei tödliche 
Paresen, eine geheilte nach 18—21 Tagen. 5 X 24 Stunden, ebenfalls 
21 000 fache Antitoxindosis: nach 16 — 29 Tagen drei letale, zwei geheilte 
Paresen. Das Toxon wird also relativ sehr langsam gebunden, und 
kann noch lange vom Antitoxin wieder beeinflusst, wahrscheinlich auch 
viel leichter als das Toxin aus der schon bestehenden Verbindung mit 
dem Receptor losgerissen werden. 



Das Diphtherieantitoxin. 

Das Diphtherotoxin erzeugt im Körper des Versuchstieres das ihm 
entsprechende Gegengift, das Antitoxin. Das Antitoxin, das also ein 
normales, nur im Ueberschuss produziertes Produkt des Körpers ist. 



1) Dreyer, Ueber die Grenzen d. Wirkung d. DiphtherieheilBernms gegenüber 
d. Toxonen. Z. f: Hyg., 37, 267 (1901). 

Oppenheimer, Toxine nnd Antitoxine. 6 



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— 82 — 

iSüdet sich demzufolge bei Individuen, die Diphtherie überstanden haben, 
oder bei künstlich immunisierten Tieren in den Gewebssäften und Se- 
kreten. Die Art der Antitoxinproduktion und seine Beziehungen zur 
künstlichen Immunität und zur Heilserumtherapie können uns hier nicht 
beschäftigen; nur dasjenige, was wir über das Diphtherieantitoxin als 
solches wissen, kann hier geschildert werden. 

Die beiden Hanptquellen zur künstlichen Gewinnung des Antitoxins 
sind das Blutserum und die Milch immunisierter Tiere. Je höher 
das Tier aktiv immunisiert ist, desto reicher ist der Gehalt dieser Flüssig- 
keiten an Antitoxin, desto größer die Aussicht, das Antitoxin, wenn auch 
nicht rein, so doch in konzentriertem Zustande ans ihnen zu gewinnen. 

Das Antitoxin findet sich in größeren Mengen nur im Serum künst- 
lich immunisierter Tiere, jedoch hat man es natürlich auch, wenn auch 
weniger reichlich, im Blute von Diphtherierekonvaleszenten gefunden. 

Besonders interessant ist aber, dass auch das normale Serum vieler 
Tierarten Diphtherieantitoxin enthält, dass also auch normalerweise 
haptophore Seitenketten sich in der Blntbahn vorfinden. A. Wassermann^) 
hat als der erste bei 85^ der Erwachsenen und 60))^ der Kinder 
Antitoxin gefunden. Auch im Pferdeserum hat man öfters Antitoxin 
gefunden, so z. B. DieüdonniS*) und Cobbett^). 

Sehr wichtig zur Erklärung der Thatsache, dass Säuglinge seltener 
an Diphtherie erkranken, ist der im Anschluss an Wassermann erhobene 
Befund von Fischl & v. Wünschheim*), dass bereits das Serum gesunder 
Säuglinge ziemlich reichliche Mengen Diphtherieantitoxin enthält; sie 
fanden es bei 83^ aller untersuchten Kinder. Die Uebereinstimmung 
mit den von A. Wassermann gefundenen Zahlen weist darauf hin, dass 
es sich hier um eine Uebertragung des Antitoxins auf den Säugling 
mittels des Placentablutes und der Milch seitens der Mutter handelt. 

Wie bei dem Toxin muss man hier zwei Bestrebungen unterscheiden: 
diejenigen, die nur zu praktischen Zwecken eine Konservierung und Kon- 
zentrierung des Antitoxins anstreben, mit oder ohne Gewinnung eines 
festen Produktes; andererseits die Versuche, die man gemacht hat, 
durch sorgfältigere Untersuchungen einen Einblick in die Konstitntion 
des Antitoxins an sich zu gewinnen, durch Prüfung seines Zusammen- 
hangs mit den verschiedenen EiweißstoflFen seiner Mutterflüssigkeiten 
und durch möglichste Isolierung des wirksamen Prinzips. 



1) A. Wassermann, Üeb. d. pera. Prophylaxe geg. Diphth. Z. f. Hyg., XIX, 408 
(1895). 

2) DiEUDONN^, Ueb. Dipbtberiegift neutralis. Wirkung d. Semmgloboline. Arb. 
a. d. Kais. GeB.-Amt, XIII, 293 (1897). 

8) CoBBETT, Enthält das normale Pferdeflerum Antitoxin? C. f. Bakt, 26, 468 
(1899), ß. a. Lancet, 1899, II, 332. 

*) Fischl & v. Wünschheim, üeb. Scbutzkörper im Blute der Neageborenen. 
Prager med. Wocb., 1895, Nr. 46flf. 



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— 83 — 

Die Aafbewahnmg des Seroins. 

Die erste Forderung ist die Konservierung des Serums unter Ver- 
meidung von Zersetzungen und unter Erhaltung seines Gehaltes an Anti- 
toxin. Das Serum bleibt ziemlich lange beständig, wenn man es vor 
Luft, Licht und bakterieller Verunreinigung schützt. Da das Serum ein 
guter Nährboden für Bakterien ist, so muss man es unter streng asep- 
tischen Kautelen gewinnen und aufbewahren. Außerdem setzt man meist 
noch ein Antisepticum, z. B. Phenol bis zu 0,5proz. Lösung zu. 

Sterilisierung durch Filtration ist nach Di Martini i) unzweckmäßig, 
da ein sehr beträchtlicher Teil des Antitoxins im CnAMBERLAND-Filter 
zurückgehalten wird. Dies ist von Dzierzgowski*) rundweg geleugnet 
worden. Cobbett^) hat diese praktisch ungemein wichtige Frage gründ- 
lich studiert und giebt an, dass eine solche Retention, besonders bei 
Berkefeld- oder MARXiN-Filter häufig vorkommt und recht beträchtlich 
werden kann, zumal dann, wenn die Poren des Filters anfangen ver- 
stopft zu werden. Man soll also die Filtration nicht forcieren; wenn sie 
nicht leicht, ohne hohen Druck von statten geht, ist sie sehr spärlich. 
Durch Gelatinefilter wird das Antitoxin zurückgehalten (Brodie*). 

Durch Erhitzen bis zum Sieden wird das Antitoxin rasch zerstört. 
Schon 60—70° sind schädlich (van de Velde*). Das getrocknete Anti- 
toxin dagegen verträgt 110° eine halbe Stunde, 140° eine viertel 
Stunde (Camus«). 

Niedere Temperaturen verträgt es einigermaßen. Spronck') hat es auf 
59° behufs Sterilisierung erwärmt, ohne dass seine antitoxische Kraft 
wesentlich geschwächt wurde. Temperaturen bis 36° sind gleichgiltig 
(Palmirski & Orlowski^), nach Müller*) jedoch in längeren Zeiträumen 
(2 Monate) sehr schädlich. 

Gegen tiefe Temperaturen scheint es unempfindlich zu sein (Büjwid ^% 

1) DI Martini, Snl comportamento del siero antidifiterico filtrato. Bif. med.. 
1896, Nr. 266; ref. C. f. Bakt, 24, 861 (1898). 

2) DziERZGOWSKi, Z. Frage: >üeb. die Verluste des Diphth.-Heils. bei der Fil- 
tration«. C. f. Bakt, 21, 333 (1897). 

3) CoBBETT, Der Einflnaa der Filtration auf das Dipbth.- Antitoxin. C. f. Bakt., 
24, 386 (1898). 

*) Brodie, Joum. of pathoL, 1897, 460. Cit n. Martin & Cherry, The anta- 
gonism between toxins and antitox. Proc. Boy. Soc, 63, 420 (1898). 

S) YAN DE Yelde, BeitT. z. Kenntnis der antitox. Kraft d. antidiphtb. Serams. 
C. f. Bakt., 22, 627. 

0) Camus, Besistance anx temp. ^l^v^es des vaccins dess^cb^es. Soc. BioL, 50, 
236 (1898). 

T) Spronck, GbanflElage du s^mm antidipbtb^riqne. Ann. Fast., XII, 696 (1898). 

8) Palmirski & Orlowski, Medycyna 23. Eef. C. f. Bakt, 19, 916. 

9) Müller, Ueber d. Besistenz d. Dipbtberiebeilsenuns gegenüber verscbiedenen 
Einflüssen. C. f. Bakt, 24, 261 (1898). 

^) Büjwm, Ueb. e. Metbode d. Concentrat d. dipbtb. Heils, mittelst Ansfrieren. 
C. f. Bakt, 22, 287 (1897). 

6* 



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— 84 — 

Direktes Sonnenlicht und vermehrte Luftzufuhr (langes Schütteln) sind 
schädlich (Palmibski & Orlowski 1. c). Müller (1. c.) fand gelbes und 
rotes Licht selbst bei monatelanger Einwirkung unschädlich, blaues und 
grünes dagegen sehr schädlich, ebenso Tageslicht bei langer Einwirkung, 
während es Marenghi^) bei kurzer Dauer gleichgiltig fand. Alle Gase 
fand Müller auf die Dauer sehr schädlich, so dass er empfiehlt, die 
Röhrchen möglichst voll ohne größere Gasmengen aufzubewahren. Am 
besten wird es also im Dunklen, auf Eis, unter Luftabschluss und 
vor Verunreinigung geschützt, aufbewahrt. Die festen Antitoxinpräparate 
werden nach Ehrlich außerdem noch durch Phosphorsäureanhydrid 
vor Feuchtigkeit im Vacuum bewahrt und sind dann durch Jahre hin- 
durch haltbar. 

Spronck*) giebt an, dass Diphtherieheilserum, das auf 58° erwärmt 
und zwanzig Minuten bei dieser Temperatur gehalten wird, nicht mehr 
die Eigenschaft hat, unangenehme urticariaähnliche Erytheme zu er- 
zeugen, wie es das nicht erwärmte Serum häufig thut. 

Im Verdauungskanal scheint es zerstört zu werden. Dzierzgowski^) 
fand, dass eine Immunisierung durch Zuführung von Antitoxin per os 
nicht zu erzielen ist Nur bei Kaninchen kann man durch Eingießung 
in den leeren Magen eine geringe Resorption konstatieren. 

Besonders schädlich wirkt die Salzsäure; dagegen sind neutrali- 
siertes Pepsin, auch Pankreas und Galle ziemlich unschädlich. Trotzdem 
wird es vom Darm aus nicht resorbiert. 

Es muss wohl doch allmählich unter dem Einflüsse der Verdauungs- 
fermente langsam zerstört werden, denn absolut ist seine Resistenz gegen 
Trypsin nicht. Wenigstens fand Pick (1. c), dass nach neuntägiger 
Trypsinverdauung das Antitoxin doch schon beträchtlich zerstört war, 
nämlich fast zu V3. 

Auch bei subkutaner Injektion verschwindet es bald aus dem Blute, 
wie Passini*) zeigte, der eine teilweise Bindung in den Geweben zur 
Erklärung annimmt. 

BoMSTEiN '^) hat sich mit der Frage nach dem Verbleib des Antitoxins 
beschäftigt Nach einmaliger Einführung einer Quantität Heilserum ver- 
schwindet es bald wieder aus dem Blute. 

Wo es verbleibt, ist nicht anzugeben, es scheint aber zerstört zu 



1) Marenohi, Ueb. die gegenseitige Wirkung des antidiphth. Serums und des 
Diphth-Toxins. C. f. Bakt, 22, 620 (1897). 

2) Spronck, Chanffage du s^ram antidipbth. Ann. Fast., XII, 697 (1898). 

3) DziERZGtowsKi, Die Bezieh, d. Verdauungsfermente zum Anttdiphtherieeerum. 
Arch. d. ßciences biolog., VII, 337. (Malys Jb., 1899, 967.) 

^) Passiki, Vers, ttber die Dauer d. antidiphth. Schutzimpfung. Wien. klin. 
Woch., 1896, S. 1111. 

^) BoMSTEm, Z. Frage der passiven Immunität bei Diphtherie. C. f. Bakt, 22, 
Ö87 (1897). 



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— 85 — 

werden, denn der Harn enthielt nnr in den ersten Tagen geringe Spnren; 
ebensowenig lässt es sich sicher in den Organen nachweisen. 

Interessant ist eine Beobachtung von Mürawjew^), dass das Heilsemm 
durchaus nicht indifferent ist, sondern ziemlich schwere Schädigungen der 
Zellen des Rückenmarkes beim Meerschweinchen hervorruft. Er warnt des- 
halb davor, zu große Dosen auf einmal zu geben. 

Doch ist dies zweifellos auf Rechnung des Serums der fremden Tierart, 
nicht auf die des Antitoxins zu setzen, da auch normales Serum ähnliche 
Schädigungen bewirkt, wenn auch die Annahme von Linossieb & Lemoine^), 
dass schon ganz kleine Mengen normales Pferdeserum bei Kaninchen schwere 
Erkrankungen, langdauemde Albuminurie hervorruft, nach meinen Erfahrungen 
zweifellos falsch ist. 

Eonzentrierong des Antitoxins. 

Bald nach der Gewinnung der ersten wirksamen Antitoxinsera hat 
man dann auch angefangen, Versuche zur Isolierung des Antitoxins zu 
machen. 

Zunächst handelte es sich rein praktisch um die Gewinnung fester 
Stoffe, die die spezifische Fähigkeit des Antitoxins nicht verloren hatten. 
Zu diesem Zwecke schlug man meist einfach das Antitoxin mit den 
Eiweißkörpem des Serums zusammen nieder, z. B. durch konzentriertes 
Ammoniumsulfat, und trocknete diese Niederschläge bei niederer 
Temperatur im Vacuum. So erzielte man ziemlich wirksam gebliebene 
Trockenpräparate des Antitoxins, ans denen man dann durch Aus- 
schütteln mit ganz schwachen Alkalien Lösungen des Antitoxins von bis 
hundertfacher Stärke gegenüber dem einfachen Senim gewann. 

Aeonson^) verfuhr z. B. folgendermaßen: 

Zu 100 cm^ des Serums wurden 100 cm^ Wasser und 70 cm^ einer 
lOproz. Aluminiumsulfatlösung zugesetzt. Dann wurde mit Ammoniak ge- 
fällt, so dass die Reaktion gerade noch schwach sauer war. Es entsteht ein 
Kiederschlag, der mit 150 — 200 cm^ kalten Wassers gewaschen wird. Er 
enthält bis 96% des Antitoxins. Aehnliche Niederschläge kann man durch 
Zinksulfat und Ferrocyankalium , Eisenchlorid und Ammoniak gewinnen. 
Diese Niederschläge werden mit dem hundersten Teil (auf das ursprüngliche 
Serum) ganz schwacher Alkalien, die eben Lackmuspapier blau färben, im 
Schüttelapparat längere Zeit und mehrfach wiederholt geschüttelt. 

BujwiD^) lässt das Serum gefrieren, wobei sich zunächst reines 
Wasser in Erystallen abscheidet, während eine sehr antitoxinreiche, 



>) MuBAWJBW, Das Dipbtherietoxin u. -Antitoxin in ihrer Wechselwirkung auf 
das Nervensystem d. Meerschweinchens. Fortschr. d. Med., 1898, 93. 

3} LiKOSSiER & Lemoine, Actlou nephrotoxique des inj. d. s^rnms nonnanx. Soc. 
Biol., 55, 515 (1903). 

3) Aronson, Weit Unters, über Diphtherie. Berl. klin. Woch., 1894, 425. 

4) BujwiD, Ueb. e. Methode z. Goncentr. d. Diphtherieheils, mittelst Ausfrieren. 
C. f. Bakt, 22, 287. 



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— Be- 
trübe Lösung zurückbleibt. Man kann dann entweder abcentrifugieren 
oder langsam auftauen, wobei zwei Schichten resultieren, so dass man 
die obere, reines Wasser enthaltende Schicht abheben kann. Zu ganz 
analogen Resultaten gelangten gleichzeitig Ernst, Coolidge & Cook ^). 
Brieger & BoER^) fänden, dass zur Isolierung von Diphtherieantitoxin 
der Niederschlag von phosphorsaurem Kalk und von Schwermetall- 
hydraten unbrauchbar ist. Auch die Methode, nach der Tizzoni sein 
Tetanusantitoxin isoliert hat (s. d.), nämlich Aussalzen mit festem Mag- 
nesiumsulfat bei 30®, erzielte eine Ausbeute von höchstens 50^. 
Brieger & Boer erzielten dagegen mit folgendem Verfahren eine quan- 
titative Ausbeute: 

Zu 10 cm^ Immunserum setzt man 10 cm^ destilliertes Wasser, femer 4 g 
trockenes Chlorkalium und 4 — ö g fein zerriebenes Chlornatrinm und 
lässt dies Gemisch 18 — 20 Stunden im Brutschrank stehen. Dann löst man 
in Wasser und dialysiert. Manchmal ballt sich der Niederschlag beim An- 
rtlhren mit Wasser fest zusammen und giebt kein Antitoxin an dasselbe ab. 
Dann kann man es nur mit schwachem Alkali ausziehen. Eine nähere Er- 
klärung dieser Anomalie ist nicht zu geben. Nach dem Wiederanflösen setzt 
man das gleiche Volumen fein zerriebenes Magnesiumsulfat zu und lässt noch- 
mals 2 — 3 Stunden im Brutschrank stehen. Dadurch wird das Antitoxin 
quantitativ ausgefällt. Sie erhielten so aus 10 cm^ 0,2 g wirksame Trocken- 
substanz. 

Brieger & Boer haben femer versucht, durch Fällung mit Schwer- 
metallsalzen das Antitoxin zu konzentrieren. Besonders Zinksalze er- 
wiesen sich als geeignet. 

Das Serum wurde mit der fünffachen Menge Wasser verdünnt und der 
doppelten Menge Iproz. Zinksulfat oder Zinkchloridlösung gefällt, der Nieder- 
schlag mit Wasser gewaschen. Dann mit V400 N. Alkalilauge in Lösung ge- 
bracht, das Zink durch Einleiten von Eohlendioxyd gefällt. Dabei stellte es 
sich heraus, dass bei der Fällung mit Zinksulfat das Antitoxin mit dem Zink 
ansfiel, bei Zinkchlorid dagegen in Lösung blieb. Der das Antitoxin ent- 
haltende Anteil wird im Exsiccator getrocknet. Dabei werden die Zink- 
albuminate etwas in Wasser löslich, das Zinkantitoxin nicht. Es wird also 
wieder in verdünntem Alkali gelöst und das Zink wieder mit Kohlensäure 
ausgeschieden. Eine völlige Trennung vom Zink ist dadurch nicht zu erzielen. 

Aus der Mil ch immunisierter Tiere haben zuerst Brieger & Ehrlich ^j 
wirksame Trockenpräparate mittelst Ammonsulfat gewonnen. Sie er- 
hielten ein Präparat, das 14^ Ammonsulfat enthielt und 400 — 600 mal 
so wirksam als die ursprüngliche Milch war. 



1) Ernst, Coolidge & Cook, The efifeet of freezing npon the antidipht semm. 
Journal Boston med. soc, 11, 166. Banmgartens Jb., 1898, 242. 

^ Brieger & Boer, Ueber Antitoxine und Toxine. Z. f. Hyg., 21, 259. 

3} Brieger & Ehrlich, Beitr. z. Eenntn. d. Milch immuner Tiere. Z. f. Hyg., 
Xin, 336 (1893). 



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— 87 — 

Wassermann^] hat diese Methode etwas modifiziert. Er benutzte 
folgendes Verfahren: 

Die steril aufgefangene Milch wird mit ca. 20 cm^ Normalsalzsaure per Liter 
versetzt, durch Labferment möglichst schnell znm Gerinnen gebracht, nnd 
das ausgeschiedene Parakaseln abfiltriert. Die Molke wird dann kräftig mit 
Chloroform geschüttelt. Das mit Chloroform imbibierte Fett und die Bak- 
terienleiber der Milch setzen sich ab und die Flüssigkeit wird davon dekan- 
tiert Dann werden je 5 Liter der Molke mit der durch einen Vorversuch 
gefundenen, berechneten Menge 30 — 33proz. Ammonsulfatlösung gefällt, der 
Niederschlag auf Thon im Vacuum bei 35° getrocknet, vom festen Ammon- 
sulfat möglichst getrennt, und in Wasser zu der gewünschten Konzentration 
gelöst. Eine Dialyse ist nicht erforderlich, da die dann noch vorhandenen 
geringen Mengen Ammonsulfat in der Verdünnung indifierent sind. 

Die Versuche, aus dem flüssigen Serum Antitoxinpräparate zu ge- 
winnen, sind heute insofern praktisch ziemlich v^ertlos gev^orden, als 
man es heute vorzieht, die Tiere so hoch zu immunisieren, dass das 
Serum der Tiere selbst so viel Antitoxineinheiten im Kubikcentimeter 
enthält, dass eine Konzentrierung unnötig ist. 

Dagegen hat man mit gleichem Literesse die wissenschaftliche Seite 
der Frage weiter behandelt und hat versucht, das Antitoxin als solches 
möglichst zu isolieren und zu konstatieren, ob es als eigener Stoff dar- 
zustellen ist und an welchen Eiweißkörpem des Serums es gebunden 
ist Außerdem hat man sich bemüht, Unterschiede zwischen dem ein- 
fachen und dem antitoxinhaltigen Serum aufzufinden. 

SzONTAGH & Wellmann ^) haben das normale und das antitoxische 
Pferdeserum einer Vergleichung unterzogen. Sie fanden in beiden kein 
Nukleoalbumin, der Globulingehalt war derselbe, ebenso Aschen- 
und Chlorgehalt und spezifisches Gewicht. Als einzigen Unterschied 
fanden sie, dass das Heilserum durchschnittlich ca. 0,25^ mehr Gesamt- 
eiweiß enthält als das normale; sie schreiben indessen mit Recht diesem 
Unterschiede keine wesentliche Bedeutung zu. Dagegen glauben sie ge- 
funden zu haben, dass das Heilserum eine Abnahme der Gefrierpunkts- 
emiedrigung und der elektrischen Leitfähigkeit zeigt, die anscheinend 
proportional dem Antitoxingehalt ist. Feeünd & Sternbeeg^) haben 
versucht, das Antitoxin möglichst zu isolieren. 

Das Heilserum wird mit Kaliumalaun gefällt und dialysiert. Zinksalze 
gaben im Dialysat keinen Niederschlag. Durch Zusatz von kohlensaurem 
oder phosphorsaurem Alkali wird das Antitoxin mit dem entstehenden Zink- 



1) Wassermann, üeb. Concentrierung v. Antitoxin aas Milch. Z. f. Hyg., XVIII, 
286 (1894). 

^ SzoNTAQH & Wellmann, Vergleichende ehem. Unters, üb. d. normale Pferde- 
sernm und das DiphtherieheilBerum. D. med. Woch., 18d8, 421. 

S) Freund & Sternberg, Ueber Darstellung des Heilkörpers aus d. Diphtherie- 
heilserum. Z. f. Hyg., 31, 429 (1899). 



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— 88 — 

niederschlage nicht mitgefällt, wohl aber durch Langenznsatz mit dem Zink- 
hydroxyd. Aas diesem lässt es sich durch schwaches Alkali im Ueberschuss, 
so dasa gerade PhenolphtaleYn gefärbt wird, ausziehen. Barytlösung ist nicht 
anwendbar, da sie das Antitoxin zerstört. Auch mit Eisensalzen ist kein 
befriedigendes Resultat zu erzielen. Dann wird mit Magnesiumsulfat bei 
Zimmertemperatur gesättigt, wodurch das Antitoxin quantitativ gefällt wird. 
Kach erneutem Ausziehen mit Alkali und Dialyse wird es im Vacuum ge- 
trocknet. 

Oder aber sie verfahren mit noch besserem Resultate folgendermaßen: 
Das Serum wird zunächst mit dem dritten Teile seines Volumens 5proz. 
Ealiumalaunlösung versetzt. Dabei fallen die Albumine aus, das Antitoxin 
bleibt vollkommen in der Lösung. Nach dem Filtrieren wird die Lösung 
dialysiert Aus dem Dialysat werden die Globuline und mit ihnen das 
Antitoxin durch Halbsättigung mit Ammonsulfat ausgeschieden und mit halb- 
gesättigter Ammonsulfatlösung gewaschen. Dann wird der Niederschlag wieder 
in Wasser gelöst und dialysiert, im Vacuum eingeengt und filtriert. 

Sie erhielten so aus 600 cm^ Serum 9 g Trockensubstanz in Gestalt einer 
braunroten, leimähnlichen Masse. Sie löst sich langsam in Wasser (4,7 g in 
16 cm^) zu einer syrupösen, braunroten Flüssigkeit, die leicht getrübt erscheint 
und langsam filtriert. Sie enthält dann das Antitoxin gegenüber dem un- 
filtrierten Präparat in unveränderter Menge. Zusatz von Karbolsäure ist un- 
schädlich. Es verhält sich ähnlich wie ein Globulin. 

AsTBOS & RiETSCH ^) woUcn das Antitoxin fast quantitativ aus dem 
Serum gewonnen haben. 

Sie verdünnen das Heilserum auf das Fünffache, setzen dann soviel Chlor- 
natrium und Chlorkalium zu, dass die Lösung 20prozentig wird und lassen 
bei 33° unter Zusatz von 0,5^ Phenol 24 Stunden stehen. 

Von praktischer Bedeutung können vielleicht die theoretisch wichtigen 
Versuche von Pick werden, der zeigte, dass man durch ca. Vs Sättigung 
mit Ammonsulfat einen Teil der Globuline ohne Heilwert abscheiden 
kann, während der wirksame Antikörper bei 38—46^ fällt. Er erzielt 
damit eine Konzentrierung um das 10 — 15 fache. Wir werden auf die 
Bedeutung dieser Arbeit unten zurückkommen. 

Ebenfalls praktische Bedeutung nehmen die Bemühungen von 
Pröscher2) in Anspruch, der mit Hilfe der Trypsinverdauung das 
Antitoxin von überflüssigem Eiweißballast befreit haben will. 

Besonderes Literesse bereitet die Frage, ob das Antitoxin als eigener 
StoflF im Blute kreist, ob es als solcher ein Eiweißkörper ist oder 
nicht, oder ob es an einen bestimmten Eiweißkörper des Blutes ge- 
bunden ist. Damit im Zusammenhang steht die Frage, ob seine Aus- 
fällung mit fallenden Eiweißniederschlägen ein einfaches Mitreißen ist, 
oder ob hier chemische Fällungsreaktionen spezifischer Natur stattfinden. 



>j AsTBOS & RiETSCH, Essais d'extraction de Tantitox. diphth. Soc. Biol, 52, 
337 (1900). 

2) Pröscher, Patentanmeldung F. 13766 (20. VI. 1902,. 



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— 89 — 

A priori ist es wohl sehr wahrscheinlich, dass das Antitoxin ein 
Eiweiß körper ist, da es ja nach der Theorie ein Bestandteil des Zell- 
protoplasmas ist Es liegt hier auch nicht wie bei den Toxinen irgend 
ein Grand vor, das Antitoxin als ein fermentähnliches Agens anzu- 
sprechen. Es wirkt ja im Gegenteil an sich absolut nicht, weder 
toxisch noch fermentativ, es bindet nur das toxische Ferment der 
Bakterien, und es ist eine ganz unbegründete Verallgemeinerung, die 
Fermentnatur der Toxine ohne weiteres auf ihre spezifischen Gegengifte 
zu übertragen. Dem Antitoxin fehlt, um im Bilde zu bleiben, jede 
spezifische Gruppe außer der haptophoren, es hat weder eine toxo- 
phore noch eine zymophore Gruppe; es ist zwar ein Haptin, aber nur 
mit einer, der haptophoren Gruppe. In der That spricht vieles gegen 
die Fermentnatur des Antitoxins. DafUr kann man eigentlich nur an- 
führen, dass es bei 100^ unwirksam wird, doch ist das kein genügender 
Grund. Dagegen aber und im gleichen Sinne dafür, dass es ein spe- 
zifischer Eiweißkörper ist, spricht die Thatsache, dass es nicht wie 
die Fermente von Niederschlägen einfach mitgerissen wird, sondern 
dass es wohlcharakterisierte Fällungsreaktionen zeigt. Wie schon 
Brieger & BoER (1. c.) fanden, wird das Antitoxin mit kohlensaurem 
Zink nur dann mitgerissen, wenn es vorher durch Zinksulfat gefällt 
war, nicht aber, wenn Zinkchlorid zu diesem Zwecke benutzt war. 
Ebenso konnten Freund & Sternberg zeigen, dass von dem massigen 
Niederschlage, den man mittelst Ealiumalaun in dem Serum erzeugen 
kann, und der alle Albumine herausfällt, das Antitoxin nicht mitge- 
rissen wird. 

Anscheinend ist also das Antitoxin an einen der Eiweißstoffe des 
Blutes entweder wirklich gebunden oder wir müssen annehmen, dass 
der E^weißstoff selbst, der das Antitoxin darstellt, sich in seinen Reak- 
tionen so eng an einen Eiweißkörper des Serums anschließt, dass man 
ihn nur sehr schwer davon unterscheiden kann. 

In neuerer Zeit hat allerdings Fröscher (1. c.) angegeben, ein 
Diphtherieantitoxin hergestellt zu haben, das keinerlei Eiweißreaktionen 
mehr zeigt. Man wird der weiteren Entwicklung dieser Frage mit leb- 
haftem Interesse entgegensehen. Die weitere Frage, mit welchen Eiweiß- 
körpem des Serums das Antitoxin zusammenhängt, ist zu Gunsten der 
Globuline entschieden worden. 

Belfanti & Carbone^) fanden zuerst, dass das Antitoxin von den Glo- 
bulinen mitgefällt wird, wenn man sie durch Ammonium- oder Magnesium- 
sulfat ausfällt, nicht aber durch Essigsäure. Ebenso fand Smirnow^j das 
Antitoxin in dem durch Magnesiumsnlfat ausgeschiedenen GlobuUnniederschlag. 



1) Belfanti & Carbone, Contributo alla conoBcenza deir antitOBsina difterica. 
Arch. per le scienze med., 22, Nr. 2. Bef. C. t Bakt, 23, 1896. 

^ Smirkow, Note sur la d^termin. da ponvoir antitoziqne da s^ram antidiphth6- 
rique. Arch. d. scienc. biolog. de St. Pötersboarg, IV, Nr. 3 (1S95). 



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— 90 — 

Dagegen fand Dieudonn:^^) die Globaline, die er durch Essigsftare 
und Kohlensäure abgeschieden hatte, völlig wirkungslos. Bei der Dialyse 
zeigten die abgeschiedenen Globuline nur sehr wenig schützende Kraft, das 
meiste blieb im Filtrat. Fällte er dagegen mit Magnesiumsulfat, so blieb 
das ganze Antitoxin im Niederschlag. Ganz ähnlich verhielten sich die Glo- 
buline des normalen Serums, das auch eine geringe antitoxische Kraft besaß. 

Andererseits fanden wieder Hiss & Atkinson^), sowie Atkinson^), dass 
das Antitoxin quantitativ durch Magnesiumsulfat mitgef^llt wird, und dass 
das Immunserum einen reichlicheren Niederschlag ergiebt, als normales Serum. 

Ibe & Lemaibe^) geben an, dass das Antitoxin bei einer Sättigung von 
28 — 44^ Ammonsulfat mit ausfällt. 

Diese scheinbaren Widersprüche in Bezug auf die Rolle der Globu- 
line hat Seng^) befriedigend aufgeklärt. 

Er konnte nämlich zeigen, dass es im Heilserum zwei Arten von 
Globulinen giebt, wie gleichzeitig mit ihm Marcus«) für das normale 
Serum zeigte, nämlich unlösliche Globuline, die durch Essigsäure, 
Kohlensäure, Verdünnen mit Wasser und Dialyse fiülbar sind, während 
eine zweite Kategorie, die löslichen Globuline, nur durch die übrigen 
Globulinreagentien, besonders Ammonium- nnd Magnesiumsulfat fällbar 
sind. An diese letzteren ausschließlich ist das Antitoxin gebunden, so 
dass es bei der Fällung durch Dialyse, Kohlensäure u. s. w. im Filtrat 
bleibt; dadurch sind die Widersprüche in den Arbeiten von Belpanti 
& Carbone und Dieudonne erklärt. 

Seng verfährt bei der Isolierung seiner »löslichen Globuline« folgender- 
maßen: 

Aus dem Serum werden zunächst durch fünfprozentige Kaliumalaunlösung 
die Albumine abgeschieden, die gar kein Antitoxin binden. Das Filtrat 
(feuchte Faltenfilter) wird dialysiert. Dabei fallen geringe Mengen unlös- 
licher Globuline aus, die ebenfalls kein Antitoxin enthdten (Vn — V2S ^^^ 
gesamten Globulinmenge). Dieser Niederschlag wird durch feuchte Faltenfilter 
filtriert und mit Wasser ausgewaschen. Das Filtrat darf mit einem großen 
Ueberschuss von destilliertem Wasser keine Trübung ergeben, sowie keine 
Schwefelsäurereaktion. Nun wird mit Magnesiumsulfat bei 30° oder durch 
Halbsättigung mit Ammonsulfat das Globulin gefällt, wieder gelöst und nach 
den üblichen Methoden (s. 0.) weiter behandelt. Es enthält etwas mehr Asche 



1) DiEUDONN^, Ueb. Dipbtheriegift neutraHsier. Wirkg. der Serumglobuline. Arb. 
a. d. kaiserl Ges.-Amt, XIII, 293 (1897). 

2) Hiss & Atkikson, Serumglobulin and Diphteric antitoxin. Joum. of exper. 
med., V, 47 (1901). 

3) Atkinson, The fractional preclpitation of the globulins and albumins of normal 
horse serum and diphteric antitoxic serum. Journ. of exper. med., V, 67 (1901). 

^) Ide & Lemaire, it s. 1. repartition de Tantitoxine dipbt. etc. Areb. Internat 
d. Pharmacodyn., VI, 477. 

s) Seng, Ueb. d. qnalit u. quantit VerbSltnlBse d. EiweißkOrper im Diphtherie- 
heilserum. Z. f. Hyg., 31, 613 (1899). 

^ Marcus, Ueb. in Wasser lOsl. Serumglobulin. Z. f. phjs. Gh., 28, 559 (1899). 



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— 91 — 

als die direkt ans dem 8eram mit Ammonsulfat gefällten Globuline, besonders 
Sparen von Alomininm. 

Die Menge dieser lösliehen Globuline gegenüber dem normalen Serum 
scheint sich auf Kosten der unlöslichen Globuline etwas vermehrt zu 
haben, doch ließ sich das nicht einwandsfrei erweisen. 

Seng hat sich auch der sehr wichtigen Frage angenommen, ob sich zwi- 
schen dem so gewonnenen löslichen Globulin des Heilserums und dem auf 
demselben Wege dargesteUten des normalen Serums chemische Unterschiede 
nachweisen lassen. Mit absoluter Sicherheit ist ihm dies, wie vorauszusehen, 
nicht gelungen, doch hat es den Anschein, als ob allerdings zwei wichtige 
Eonstanten, nämlich die spezifische Drehung und die Eoagulations- 
temperatur beim Antitoxinglobulin höher sind als beim Normalglobulin. 
Seng bemerkt selbst mit vollem Recht, dass die physiologische Breite aller 
dieser Faktoren viel zu groß ist, um sichere Differenzen zwischen den Seris 
verschiedener Tiere aufzufinden; man mttsste das Serum eines Tieres vor, 
während und nach der Immunisierung untersuchen. Dann könnte man viel- 
leicht zu einem Resultat gelangen. 

Diese Fragen sind inzwischen durch eine Reihe von Arbeiten der 
HopMEiSTERSchen Schule weiteren gründlichen Untersuchungen unter- 
zogen worden. 

Durch fraktionierte AusfäUnng mit Ammonsulfat gelingt es nämlich, 
aus dem Blutserum drei verschiedene Arten von Globulinen zu 
trennen. Zunächst fällt bei einer Sättigung bis zu 2l,ö Volumprozent 
Ammonsulfat das Fibrinoglobulin; bei einer Sättigung von 28 bis 
36 Volumprozent fallen nach Fuld & Spiro i) die von Hofmeister so 
genannten Euglobuline, bei 36 — 44 Volumprozent die Pseudo- 
globuline. Die Pseudoglobuline, die sich in Wasser klar lösen, 
entsprechen den »löslichen Globulinen« Marcus' & Sengs. 

Pick ^) konnte nun nachweisen, dass weder das Fibrinoglobulin, noch 
diejenigen Eiweißmengen, die bei weiterem Zusatz von gesättigter Ammon- 
sulfatlösung bis zu 36^ ausfallen, bei ihrer Abscheidung aus Diphtherie- 
heilserum vom Pferde irgend welche antitoxische Wirkung besitzen. 

Nur der Anteil, der bei einer höheren Sättigung, von 38^ 
ab, ausfällt; enthält das Antitoxin. 

Die wässrige Lösung dieses Stoffes gab bei einem Gehalt von 3,6 ^ ge- 
sättigter Ammonsulfatlösung nur eine minimale Trübung, bei SS^ schied 
sich ein dichter Niederschlag ab, der Y3 — Y4 des gesamten Antitoxingehaltes 
enthielt, bei 42^ enthielt der Niederschlag schon ^/e, bei 46 )J^ den voUen 
Betrag des Antitoxins. Das Filtrat, das nur noch Serumalbumin enthält, 
schützt gar nicht 



1) Fuld & Spiro, Ueb. labende n. labhemmende Wirkung 'd. Blutes. Z. f. phys. 
Ch., 31, 132, (1900). 

^ Pick, Z. Kenntnis d. Immunkörper. Hoün. Beitr. z. ehem. Phys., I, S.A. (1902). 



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— 92 — 

Es ist also beim Immunsernm des Pferdes das Antitoxin an das 
Psendoglobnlin gebunden. Dagegen ist es im Ziegenimmnnsernm 
an das Englobulin gebunden, ebenso in der Ziegenmilch, wo die 
Schutzstoflfe, wie oben schon erwähnt, bei einer Sättigung mit 27—30^ 
Ammonsnlfat bereits ausfallen. 

Es sei hier nochmals dai*auf hingewiesen, dass die Euglobuline wasser- 
unlöslich smd, also bei der Dialyse ausfallen; daher rflhren die gi'oßen Ver- 
luste, die Wassermann und B&iegeb &: Cohk bei ihren Versuchen hatten, 
durch Anunonsulfat und darauffolgende Dialyse das Antitoxin aus der Ziegen- 
milch zu konzentrieren (s. o.)* 



Das Tetanustoxin. 

Das spezifische krampferregende Gift, das die NicoLAiERSchen 
Bazillen des Tetanus in ihren Kulturen bilden, ist nicht das einzige 
Toxin dieser Mikroben. Sie produzieren außer dem Tetanusgift im 
engeren Sinne noch ein anderes echtes Toxin, das auf Blutkörperchen 
lösend wirkt, das Tetanolysin, das uns später näher beschäftigen 
wird, sowie möglicherweise noch andere Gifte nicht toxinähnlicher Natur. 

Hier interessiert uns zunächst nur das eigentliche, krampferzeugende 
Gift, das Tetanospasmin. Es ist zweifellos ein echtes Toxin mit 
haptophoren und toxophoren Gruppen, in seinen wesentlichsten Eigen- 
schaften dem Diphterotoxin sehr nahestehend, und wie dieses für 
unsere theoretischen Auffassungen sehr wertvoll. 

Das spezifische krampferzeugende Gift des Tetanus ist schon frühzeitig 
aus den Kulturen nach denselben Methoden isoliert worden, wie das 
Diphtheriegift. Fast gleichzeitig Kitasato & Weyl^) und Beieger & 
Fränkel (1. c.) stellten aus den Kulturen ihr Toxalbumin her, das sie 
als spezifisches, im Wasser lösliches Gift erkannten. Durch Filtration 
aus den noch nicht reinen Kulturen erhielt zuerst Faber ^j ein wirksames 
Gift, an dem er bereits die wesentlichsten Eigenschaften des Tetanus- 
toxins erkannte. 

Dann wurden nähere Angaben ttber das Tetanustoxin von Tizzoni 
& Cattani^), Kjtasato*), Vaillard*^) und seinen Mitarbeitern ge- 
macht. 



1) Kitasato & Weyl, Zur Kenntniß der Anae'roben. Zeitschr. f. Hyg., VIII, 
404 (1890). 

2) Faber, Die Pathogenese des Tetanus. Berl. klin. Woch., 1890, 717. 

8) Tizzoni & Cattani, Sut le poison du t^tanos. Aroh. ital. d. biolog., XIV, 
101 (1890). 

*) Bjtasato, Exper. Unters, über das Tetanusgift. Z. f. Hyg., X, 287 (1891. 

5) Vaillard, Sut Timmunit^ contre le t6tanoß. Soc. Biol., 43, 147 (1891). — 
Vaillard & Vincent, Contrib. ä T^tude du t^tanos. Ann. Fast., V, 1 (1891). — 
Vaillard & Roüget, do., ibid., 385. — Vaillard, Sut quelques points concer- 
nant rimmnnit^ contre le t^tanoe. Ann. Fast, VI, 224 (1892). 



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— 93 — 

Die Bakterien liefern anf einfacher Bouillon nnd auf Blutserum bei 
ana^robem Wachstum sehr giftige Toxine. Besonders wirksame Gift- 
lösungen erhielten Vaillaed & Vincent, wenn sie erst eine Kultur 
18 Tage lang auf einem Nährboden wachsen ließen und dann filtrierten. 
Neue Aussaat auf diesem Nährboden ist unfruchtbar; setzt man aber 
etwas neue Nährflüssigkeit zu, so erzeugt eine neue Aussaat sehr wirk- 
same Toxine. Später verwendete Vaillard schwach alkalisierte 
Bouillon mit etwas Peptonzusatz; Kitasato empfiehlt, sie jedesmal 
frisch zu bereiten. Fermi & Pernossi^) fanden, dass Agarkulturen 
am giftigsten sind, und diese wieder in einer Stick Stoffatmosphäre. 

Brieger & CoHN*) fanden, dass die Giftigkeit der Kulturen erhöht 
werden kann, wenn man den Nährböden die Alkoholfällung alter Typhus- 
kulturen oder von gefaultem Fleisch zusetzt. Wladimiroff ^j züchtete 
die Bazillen in mit Wasserstoff gefüllten ERLENMEYER-Kolben, indem er 
nach 7 Tagen 0,5)^ Karbol zusetzte. Er leitete den Wasserstoff durch 
Bohren ein, die durch einen doppelt durchbohrten Kautschukstopfen 
gingen und die er dann zuschmolz. Debrand^) giebt an, dass Tetanus- 
bazillen in Symbiose mit Bac. subtilis sehr gut wachsen und kräftige 
Toxine bilden. Auch hier wieder muss man konstatieren, dass die 
Beichlichkeit des Wachstums nicht immer mit der Giftigkeit parallel geht. 

RüPPEL & Ransom^) fanden, dass bei der Entstehung von Toxin der 
Gefrierpunkt der Bouillon etwas herabgesetzt wird, es tritt also eine 
Neubildung von Molekülen ein, bei der Abschwächung soll er sich 
wieder etwas erhöhen. 

UscHiNSKY*) züchtete Tetanusbazillen auf einem eiweißfreien Nährboden 
von folgender Zusammensetzung: 



Wasser 


10 


00,0 


Glycerin 




30—40 


NaCl 




5—7 


CaClj 




0,1 


Mg804 




0,2—0,4 


K2HPO4 




2—2,5 


Amnion. 


lactic. 


6—7 


Natrinm 


asparaginic. 


3,4 


am besten mit Zusatz von 1— 


■2^ Tranbenzncker. 


mittelst flflssigen Paraffins ab. 







Die Luft schließt er 



1) Fermi & Pernossi, üeber das Tetanusgift Z. f. Hyg., XVI, 386 (1894). 

2) Brieger & Cohn, Unters, üb. d. Tetanusgift. Z. f. Hyg., XV, 1 (1893). 

3) Wladimirofp, Antitoxinerzeug, d. Tet-Giftes. Z. f. Hyg., XV, 405 (1893). 
*•) Debrand, Sur an nouvean proc^d6 de cnltnre du baoille da t^tanos. Ann. 

Pastear, XIV, 757 (1900;. 

^) RuPFEL & Ransom, Ueb. Molekalarverhältnisse von TetanaBgiftlöBungen. 
Z. f. phys. Ch., 27, 109 (1899). 

6) UscHiNSKY, lieber eine eiweißfreie Näbrlüsang f. patbog. Bakt. Centralbl. 
f. Bakt, XIV, 316 (1893). 



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— 94 — 

Die Sterilisiemngsmittel sind die üblichen; besonders das Filtrieren 
durch CHAMBERLAND-Filter und das Erwärmen auf 60®. 

Das Tetanustoxin ist gegen physikalische und chemische Einflüsse 
außerordentlich empfindlich. Nach Behring & Enobr^) verliert es beim 
Aufbewahren manchmal sehr schnell einen beträchtlichen Teil seiner 
Giftigkeit; in wenigen Tagen ist es oft schon auf den hundertsten Teil 
der ursprünglichen Toxizität abgeschwächt. 

Besonders schädlich wirkt der Sauerstoff der Luft auf das Toxin, 
so dass es z. B. beim langsamen Filtrieren sehr schnell geschwächt 
wird, und zwar besonders in alkalischer Lösung und im Licht, das 
allein nicht sehr schädlich ist. Eitasato fand, dass Sonnenlicht in 
15—18 St. das Gift zerstört; Fermi & Pernossi geben die Zeit von acht 
Stunden an, und dass es trocken oder in Benzol gegen Sonnenlicht 
nicht empfindlich ist. 

Ein Strom von 0,5 Amp. soll es nach Fermi <& Perkossi in 2 Stunden 
vernichten, doch sind hochgespannte Wechselströme bei Vermeidung 
des Erhitzens ohne jeden Einfluss (Marmier^). 

Sehr empfindlich ist es auch gegen Erwärmen. Nach Vaillard 
wird es bei 65^ schon zum größten Teil zerstört, ganz jedoch noch 
nicht einmal bei 80° Nach Kitasato wird es bei 60® in 20 Min., bei 55° 
in IV2 St., bei 35 — 37° allmählich zerstört. Namentlich bei Zusatz von 
NaCl von mehr als 5 «^ wirkt Bruttemperatur schnell schädlich. Trocken 
wird es bei 150° in 30 Min. zerstört, in Amylalkohol und Benzol kann man 
es 1 St. auf 80° erhitzen (Fermi äPernossi). Nach Morax & Marie 3) hält 
es 154° ca. 15 Min. aus. Alkohol zerstört es (Tizzoni & Cattani). 
Ofißi Karbol schadet nichts, auch Chloroform ist ziemlich indifferent. 

Gase, wie CO2, CO, H und H2S fanden Fermi & Pernossi ohne 
Einwirkung. 

Nach Roux & Vaillard*) wirken femer vor allem oxydierende 
Substanzen, z. B. sehr verdünnte Ealiumpermanganatlösung, schädlich, 
sowie auch Kohlensäure unter Druck. 

Auch andere Säuren sind schädlich, Weinsäure kaum, schwache 
Milchsäure wirkt günstig (Briegeri^). Eine umfassende Arbeit über 
die Einwirkung der verschiedensten Substanzen ist die von Fermi & 
Pernossi (1. c). 

Auch Jodtrichlorid wirkt sehr intensiv schädigend. Sehr eigentümlich 
wirkt verdünnte (1:500) Jodlösung. Sie entgiftet das Toxin sehr 

1} Behring & Knorr, Ueb. den Immnnlaierangswert des Tetanosheilsenims. 
Z. f. Hyg., XIII, 407 (1893). 

2) Marmier, Lös toxines et r^lectricit^. Ann. Fast, X, 469 (1896). 

3) Morax & Marie, Action de la chalenr sSohe but la tox. t6t. Ann. Fast., 
XVI, 418 (1902). 

*) Roux & Vaillard, Contrib. k F^tude du t^tanos. Ann. Fast, VU, 65 (1893 . 
») Brieoer, Weitere Erfahrungen über Bakteriengifte. Z. f. Hyg., XIX, 101 
(1895). 



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— 95 — 

schnell schon in geringen Mengen, lässt aher die immunisierende Eigen- 
schaft des Toxins angeschädigt. Ganz ähnliche Resultate erzielte 
Ehrlich mit Schwefelkohlenstoff. Es ist wohl unzweifelhaft, 
dass hier eine schnelle Zerstörung der toxophoren Gruppe unter Scho- 
nung der haptophoren Gruppe vorliegt, also eine Toxoüdbildung. 
Aehnlich scheint nach Brieger, Kitasato & Wassermann (1. c.) das 
Wachsen auf Thymusextrakt zu wirken. 

Gegen Fäulnis scheint es sehr resistent zu sein; wenigstens fand 
Symanski 1) in gefaulten Kadavern noch nach 48 Tagen Tetanusgift. 
Ob das indessen echtes Tetanusgift war, ist wohl nicht ttber jeden 
Zweifel erhaben. 

Eonzentrierung des Toxins. 

Versuche zur Isolierung des wirksamen Prinzipes aus Tetanuskulturen 
sind schon frühzeitig gemacht worden. 

Brieger & FrInkel stellten mit der von ihnen angegebenen Methode ein 
>Toxalbumin« her. Vaillard erhielt durch Verdunsten der Giftlösung bei 
Zimmertemperatur im Vacuum einen braunen Rückstand, der in Alkohol un- 
löslich war und langsam dialysierte. 

TizzoNi & Cattani ließen entweder die Kulturen einfach eintrocknen 
und dialysierten dann, oder sie fällten mit Ammonsulfat, extrahierten 
mit Wasser und dialysierten. Sie gelangten dann durch Eindunsten im 
Vacuum zu festen Toxinen. 

Brieger d GoHN^) fällten die Kulturen zunächst mit Ammonsulfat. 
Der Niederschlag wurde in Wasser gelöst und mit sehr kleinen Mengen 
basischen Bleiacetats und Ammoniak ein Teil der Eiweißkörper abge- 
schieden. Von dem Bleiniederschlag wurde abfiltriert und durch Dialyse 
Salze, Aminosäuren und Peptone entfernt. Sie erhielten so eine etwas 
linksdrehende Lösung des Toxins, das keinen Schwefel enthielt und 
keine Eiweißreaktionen zeigte. Sie erhielten es auch auf eiweißfreien 
Nährböden nach Uschinsky (s. o.). 

Brieger 3) fand dann später, dass sehr giftige Kulturen, die keine 
Albamosen mehr enthalten, das Gift nicht mehr durch Ammonsulfat aus- 
füllen lassen. Er versuchte es, durch Ausfällen mittelst Uranacetat und 
Zerlegen mit Metaphosphorsäure oder Bleiacetat weiter zu reinigen und 
bekam Präparate, die keine Biuretreaktion mehr zeigten. 

Brieger & Boer (1. c.) haben dann weiterhin noch Versuche zur 
reineren Darstellung mittelst der beim Diphtherietoxin besprochenen 
Zinkmethode gemacht. Oder sie fällen mit Ammonsulfat, lösen den 
Niederschlag und fällen mit der gleichen Menge 0,05 proz. Quecksilber- 
chloridlösung, filtrieren, waschen aus und behandeln den Niederschlag 



1) Symanski, Sitzungsbericht. DtBch. med. Woch., 1901, 318 (Vereinflbeil.). 

2) Brieger & Cohn, Unters, üb. d. Tetanusgift. Z. f. Hyg., XV, 1 (1893). 

3] Brieger, Weit Erfahrung, üb. Bakteriengifte. Z. f. Hyg., XIX, 101 (1895). 



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— 96 — 

in der angegebenen Weise mit Ammoniumkarbonat. HayashiI) hat mit 
einer etwas modifizierten Methode (Fällnng erst mit Ammonsnlfat, dann 
mit Zinkchlorid) Präparate erhalten, die nach seiner Ansicht keine 
ungiftigen Albumosen mehr enthalten. Infolgedessen hält er, da diese 
Präparate immer noch mit Ammonsulfat ausfallen und die Biuret- und 
MiLLOKsche Reaktion geben, das Tetanusgift selbst flir eine Albumose. 
Infolge der großen Giftigkeit, welche das Tetanustoxin selbst in 
kleinsten Dosen für einige Tierarten besitzt, ist man grade beim Tetanus- 
toxin mit besonderem Nachdruck auf die Analogie mit den Fermenten 
hingedrängt worden. In der That spricht sehr vieles daftlr. Vaillard 
nennt es ohne weiteres ein Ferment, auch die übrigen Autoren, wie 
TizzoNi, Brieger u. s. w. neigen sich dieser Ansicht zu, die eigentlich, 
und mit nicht gerade kräftigen Waffen, nur von Fermi in seinen ver- 
schiedenen Arbeiten bekämpft wird. Meines Erachtens ist man be- 
rechtigt, eine weitgehende Analogie der Toxine, sowie einiger anderer 
Haptine mit den Fermenten anzunehmen, und ich habe dieser Anschau- 
ung mehrfach Ausdruck gegeben 2). Das Labferment lässt sich bereits 
mit völliger Sicherheit den Haptinen zuzählen, und für die anderen 
Fermente sind nahe Beziehungen nicht von der Hand zu weisen. Es 
ist aber freilich nicht gerechtfertigt, nun im Tetanustoxin an sich eine 
fermentativ spaltende Aktion in einer der bekannten Arten zu suchen, 
das Tetanustoxin ist ein Ferment in der Art, aber nicht im Ziel seiner 
Wirkung. Es übt keine der üblichen Enzymwirkungen weder auf Stärke 
noch auf Rohrzucker u. s. w. aus. Neben ihm fand Vaillard in viru- 
lenten Kulturen allerdings ein gelatineverflüssigendes Enzym. 
Solche proteolytischen und andere Enzyme bilden aber viele, auch nicht 
pathogene Mikroben. 

Tozolde und Tozone. 

Die Frage nach dem Vorhandensein derartiger ungifliger Haptine 
ist beim Tetanus noch kaum zielbewusst untersucht worden. Bei der 
so außerordentlich schnellen Abschwächung frischer Grifte scheint sich 
auch die haptophore Gruppe mit zu verändern; jedenfalls ist noch nie- 
mals mit Klarheit festgestellt worden, dass bei gleichbleibender 
Sättigungsgröße eine Verminderung der Giftwirkung eintritt. Freilich 
haben alle Beobachter Differenzen zwischen dem direkten Giftwerte 
und dem indirekten, d. h. den zur Neutralisierung einer entsprechenden 
Antitoxinmenge nötigen gefunden, die auf die Existenz von ungiftigen 
Haptinen hindeuten. 



^) Hayashi, lieber die chemische Natur des TetanuBtozinB. Arch. f. exp. 
Pathol, 47, 9, und Chem. Centralbl, 1901, I, 411. 

2) Oppbnheimbr, Toxine u. Sohutzstoffe. Biol. Centralbl., 1899, 799. — DerB., 
»Die Fermente u. ihre Wirkungen«. II. Aufl. Leipzig 1903. — Ders., Zur Theorie 
der FermentprozesBe. Münch. med. Woch , 1901. 



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Besonders Behring^) hat auf diesen Umstand hingewiesen. Er fand 
bei frischen Giften den direkten Giftwert gleich dem indirekten (mit 
Yi 000 Antitoxineinheit gemessen); diese nannte er daher »Gleichgifte«. 
Bei älteren Enlturen dagegen fand er stets den direkten Giftwert geringer, 
d. h. es hatten sich offensichtlich Toxo'fde gebildet, die bei der Absättigong 
das Antitoxin in Anspruch nehmen, so dass man also weniger Giftein- 
heiten zusetzen muss, als bei frischen nur toxinhaltigen Giften, um 
Lo zu erreichen. Solche toxoldhaltigen Gifte eignen sich, wie Behring 
angiebt, und wie leicht erklärlich, gut zum Immunisieren. Die Toxoide 
scheinen ftlr verschiedene Tiere verschiedene Toxizität zu besitzen, 
wenigstens verschiebt sich die Giftigkeitsskala ftlr die einzelnen Arten 
sehr gegen die der Gleichgifte (s. o.). 

Die Existenz von Toxonen machen Versuche von BInobr*) wahr- 
scheinlich, der z. B. fand, dass bei annähernder Sättigung mit Antitoxin 
(also in der »Differentialzone«) eine zugesetzte Giftmenge einen wesent- 
lich kleineren Giftwert repräsentiert, als ihr im direkten Giftwert zu- 
käme, gerade wie beim Diphtheriegift weit mehr als eine letale Dosis 
nötig ist, um von Lo zu Lf zu ftlhren. Er selbst scheint allerdings diese 
Annahme abzulehnen und deutet die Thatsache in anderer Weise. 

Physiologische Wirksamkeit des TetanustozinB. 

Das Tetanospasmin ist von sehr wechselnder Giftigkeit für die ver- 
schiedenen Tierarten, besonders bei subkutaner Injektion. 

Fttr sehr empfängliche Tiere ist seine Giftigkeit bei der üblichen 
subkutanen Einftlhrnng eine ganz enorme. Vaillard erhielt eine 
Losung, von der 0,001 cm* ein Meerschweinchen tötete. Diese Dosis 
enthielt ca. 0,000025 g organische Substanz, also davon nur einen ge- 
ringen Bruchteil reines Toxin. Für eine Maus genügen 0,000000025 g 
oi^anische Substanz. Nach Brieger d Gohn (1. c.) ist die tödliche Dosis 
eines durchaus noch nicht reinen Toxins für die Maus ca. 0,0000005 g, 
für den Menschen 0,00023 g, doch sind bisweilen noch giftigere Prä- 
parate erhalten worden. Auch sind die individuellen Schwankungen 
außerordentlich groß. Nach Behring & Enorr ist die sicher tödliche 
Dosis für Mäuse ca. 6mal so groß als diejenige, bei der gerade noch 
keine Maus stirbt. Noch viel größer aber sind die Schwankungen der 
Toxizität nach der Empfänglichkeit der Tierarten. 

Knorr^) giebt in seiner Arbeit eine Skala der Empfindlichkeit gegen 
Tetanusgift. Nach ihm ist das empfindlichste Tier das Pferd. Nimmt 
man die Dosis, die 1 g Pferd tötet, als Einheit, so braucht 

1) BEHBiNa, Ueber Tetannsgiftmodifikationen. Fortschr. d. Med., XVII, 601 
(1899). 

^ Enorr, Die Entstehung des Tetanns-Antitoxins. Fortschr. d. Med., 1897, 667. 

3) Enorr, Das Tetannsgift und seine Beziehg. znm tier. Organismus. Mttnch. 
med. Wooh., 1898, 321, 362. 

Oppenheim er, Toxine and Antitoxine. 7 



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98 — 



1 g Meerschweinchen 


2x 


1 g Ziege 


4x 


Maus 


13 X 


Kaninchen 


2000 X 



Huhn 200000 x 

so viel Gift. 

Behking*) giebt fllr frische Gifte, die keine Verschiebung zwischen 
direktem und indirektem Giftwert aufweisen (Gleichgifte), folgende 
Skala: 

1 letale Dosis für 1 g Maus (+Ms) tötet 
12 g Pferd, 
6 g Meerschwein, 
0,2 g Ziege, 
Vi 50 g Kaninchen, 
Viooo g Gans, 
Vsoooo S Huhn. 

Die Zahlen stimmen also ziemlich gut überein. Bei alten Giften, wo 
nach Behring der direkte Giftwert {+ Ms) viel geringer ist als der 
indirekte (+ ms), das heißt die Menge, die nach Absättigxmg von 
Vioüo Antitoxineinheit noch tödlich wirkt (Viooo AE = —40000 Ms), liegen 
die Relativzahlen ganz unregelmäßig. Ebenso schwanken die Beziehungen 
zwischen der geringsten krankmachenden und der geringsten tödlichen 
Dosis mit der Tierart sehr stark. 

Die Toxizität wird gewöhnlich erheblich erhöht, wenn man das Gift 
subdural resp. intercerebral einführt. So ist z.B. das sonst ziem- 
lich refraktäre Huhn bei intercerebraler Injektion von Tetanusgift ziem- 
lich leicht zu vergiften. Auf die wahrscheinlichen Ursachen dieser Er- 
scheinung werden wir später zurückkommen. 

Bei intravenöser Injektion sind die Erscheinungen die normalen; 
nur die Inkubationszeit ist etwas verlängert. 

Vom Magen aus wirkt Tetannsgift so gut wie gar nicht giftig. 
Ransom^) nahm an, dass es unverändert den Darm passiert und glaubte 
es in den Faeces wiedergefunden zu haben; doch fand Carri&re und 
zahlreiche andere Untersucher dort nach Eingabe großer Dosen von 
Toxin per os kein Toxin. Carri^ire^) prüfte infolgedessen, wo das 
Tetanustoxin unschädlich gemacht wird. Er fand, dass das Gift schon 
von der Speicheldiastase angegriffen wird, dass Pepsin weniger 
schädlich, Trypsin beträchtlich, Galle in größeren Mengen völlig zer- 
störend wirkt. Den Einfluss der Darmschleimhaut und der Darm- 



1) Behrino, Ueber Tetanusgiftmodifikationen. Fortschr. d. Med., XVII, 501 (1899). 

^ Ransom, Das Schicksal d. Tetannsgiftes nach seiner intestinalen Einver- 
leibung. Dtsch. med. Woch., 1898, 117. 

8) GARRiiiRE, Toxines et digestion. Ann. Fast, XIII, 435 (1899). (Dort die 
Litteratur über diese Frage.) (Vgl. auch d. Allg. Teil). 



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— 99 — 

bakterien auf das Gift konnte er ausschließen, den Fermi d Pernossi 
als aosBchlaggebend angenommen hatten. Nencki & Schoumow-Sima- 
NOWSKi^) geben an, dass Verdauungssäfte es völlig entgiften, besonders 
Galle mit Pankreasfistelsaft, weniger Trypsin allein, Pepsin eher. 
ViNCENZi^) giebt andererseits an, dass normale Galle kaum entgiftend 
wirkt, wohl aber Galle tetanischer Tiere, jedoch nur schwach und unter 
bestimmten Bedingungen; der Tod muss z. B. nach drei bis vier Tagen 
erfolgt sein, wenn die Galle wirksam sein soll. Dagegen wird das Gift 
durch die Oxydase der Leukocyten etwas geschwächt, nach Siebee^) 
durch Milzoxydase völlig zerstört 

Es wird bei subkutaner Injektion sehr schnell resorbiert. Durch 
vielfache Versuche ist es erhärtet, dass eine Ratte, der man Toxin in 
den Schwanz injiziert hat, schon nach 2 — 3 Stunden nicht mehr zu 
retten ist, wenn man den Schwanz amputiert. 

Dabei zeigt das Tetanusgift ein deutliches Inkubationsstadium. 
Bei Meerschweinchen treten nach Coürmont & Do von ^) die Erschei- 
nungen frühestens nach 12 St. auf, (bei Mäusen nach 6—8 St Bei 
mittleren Dosen beträgt das Latenzstadium ftlr Mäuse 2 — 3 Tage, Meer- 
schweinchen 2 Tage, Kaninchen 2—4 Tage, Esel 4 Tage, Pferd 5 Tage. 
Beim Menschen schwankt es zwischen 1 Tag und 60 Tagen. Schneller 
geht die Wirkung bei der subduralen (Blümenthal & Jacob*) und inter- 
cerebralen Vergiftung (Rocx & Borrel<^), sowie der direkten Injektion 
ins Bückenmark (Meter & Eansom^). 

Nach einer von Meyer & Bansom gegebenen Tabelle ist die In- 
kubationszeit für subkutane Injektion bei 

Maus 8 — 12 Stunden 

Meerschweinchen 13 — 18 > 



Kaninchen 


18-36 


Katze 


28—70 


Hand 


36—48 


Mensch 


4 Tage 


Esel 


4 . 


Pferd 


5 . 



^) Nencki & Schoumow-Simanowski, Ueber die Entgiftung der Toxine durch 
die VerdauungBBSfte. C. f. Bakt., 23, 840. Vgl. Dzierzoowski & Sieber, Archiv, 
des Bciences biol. de St. P^tersb., YIIL 

2) ViNCENZi, Ueb. antitoxiBche EigeuBchafiten der Galle tetanisierter Tiere. 
Dtsch. med. Woch., 1898, 634. 

3) SiEBER, Ueb. d. Eutgiftimg der Toxine durch die Superoxyde u. b. w. Z. 
f. phyB. Gh., 32, 673 (1901). 

*) COÜKMONT & DOYON, 8. U. 

s) Blümenthal & Jacob, Zur Serumtherapie des Tetanus. BerL klin. Woch., 
1898, 1079. 

«) Roux & BoRREL, T6tonoB c6r6bral. Ann. Fast, Xu, 1898. 

T) Meteb & Bansom, Unters, üb. d. Tetanus. Arcb. exp. Path., 49, 369 (1903). 

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— 100 - 

Sie nimmt also mit der KOrpergrOBe zu, was mit der Langsamkeit des 
Gifttransportes zusammenhängt (s. u.). 

Die Inkubationszeit nimmt mit der Vergrößerung der Dosis ab, doch 
nicht proportional und bleibt auch bei den größten Dosen bestehen. Bei 
Mäusen sinkt sie nie unter 8 Stunden. Sie betrug ftlr Mäuse z. B. in 
einem Versuch: 



Dos. lei 13 


36 Stünden 


. > 100 


24 . 


> > 333 


20 » 


. . 1300 


14 


* . 3600 


12 . 



Das Tetanusgift wird also schnell aufgenommen, ohne dass seine 
Wirkung schon sichtbar wird. Trotzdem ist schon kurze Zeit nach der 
Vergiftung von empfänglichen Tieren im Organismus kein freies Toxin 
mehr aufzufinden. Es ist vielmehr zum allergrößten Teil an die 
Rezeptoren gebunden. Nur im Blut und in der Lymphe, in dieser 
weniger als im Blut, findet man nach der Injektion Toxin (Ransom^), 
in der Lymphe am meisten etwa 1 St. nach der Iiyektion. 

Sonst aber fehlt es in allen Organen und Sekreten (Marie >}. Nur 
Brusschbttini^) will es in den Nieren aufgefunden haben, durch die es 
ausgeschieden werden soll. 

Dementsprechend haben es verschiedene Untersucher im Harn ge- 
funden. Brunner ^) fand es im Harn von Versuchstieren, nicht in dem 
kranker Menschen, ebenso Behring^]. Eartüus<^) im Harn nur bei 
sehr großen Dosen. Im Harn tetanischer Menschen ist es allgemein 
vergeblich gesucht worden, nur Vülpiüs^) fand nach dem Tode den 
in der Blase enthaltenen Harn so giftig, dass 2 cm^ ein Meerschwein- 
chen schnell vergifteten. 

Bei refraktären Tieren kreist, wie wir im Allg. Teil besprochen 
haben, das Tetanustoxin lange Zeit in der Blutbahn, ohne von den 
Organen gebunden zu werden, bis es schließlich langsam verschwindet. 

Neben der ausgesprochenen Verwandtschaft zum Zentralnervensystem, 
die das Erankheitsbild der Tetanusvergiftung völlig beherrscht, und die 
uns unten ausführlich beschäftigen wird, zeigt das Tetanospasmin noch 

*) Bansom, Die Lymphe nach intravenÖBer Inj. von T.-T. Z. f. phys. Ch., 29, 
349 (1900). 

2) Marie, Bech. b. 1. toxines t^tanique. Ann. Fast. XI, 591 (1897). 

3) Brüsschettini cit n. Brunner 1. c. 

<) Brunner, Klin. und exp. Stud. üb. Tat Beitr. z. klin. Chirurg., IX— XII 
(1892/94). 

s) Behring, Die Blutsemmtherapie, Leipzig, III, 1892, S. 54. 

^ Eartulis, UnterB. über das Verhalten deB Tet-GifteB im EOrper. DisB., 
BerUn 1892 (Dec). 

7) VuLPius, üeb. einen Fall von WnndBtarrkrampf m. Tiervers. Dtseh. med. 
Woch., 1893, 992. 



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— 101 — 

einige Allgemeinwirkungen, die wir kurz streifen wollen, da das eigent- 
liche Erankheitsbild des Tetanus zu schildern hier nicht unsere Auf- 
gabe sein kann. 

Der Blutdruck bleibt, wie Hans Meyer & Halset i) im Gegensatz 
zu früheren Untersuchen! fanden, unverändert, wodurch sich das Ver- 
giftungsbild Yon der sonst so ähnlichen Strychninyergiftung unterscheidet 
Die Tiere sterben schließlich unter starkem Absiiü^en der Temperatur 
und erheblicher Inanition [Habnack d Hochheim ^). 

Beziehungen zum Zentralnervensystem. 

Hit Ausnahme dieser wenig markanten Allgemeinerscheinungen ver- 
läuft der Tetanus und damit auch die völlig identische Vergiftung mit 
dem Tetano spasmin bei den meisten Tieren völlig unter dem Vor- 
wiegen von Symptomen, die auf einer Aflfektion des Zentratoerven- 
systems beruhen. Es scheinen also hier nur in den nervösen Oiganen 
die Rezeptoren zu finden zu sein, die das Gift verankern und so die 
Erkrankung herbeiführen. Nur wenige Befunde sprechen daftir, dass 
der nervöse Apparat doch nicht ganz ausschließlich der empfindliche 
Angriffispunkt des Giftes ist. So will Vaillabd mit sehr kleinen Toxin- 
dosen eine lokale Vergiftung der benachbarten Muskelgruppen er- 
zielt haben. Eine Ausnahmestellung nimmt femer das Kaninchen ein, 
bei dem das Gift unter Umständen in ttberwiegendem Maße anderweitig 
gebunden werden kann, so dass das Tier am »Tetanus sine tetano« 
(DöNiTz) stirbt. Es ist dies ein besonders markanter Fall der häufiger 
gemachten Beobachtung, dass das Gift sich an Rezeptoren binden kann, 
die an wenig lebenswichtigen Organen sitzen, so dass der Giftbindung 
keine hervorstechende Erkrankung folgt. Wir werden auf diese Er- 
scheinung noch zurückkommen. 

Die direkten Beziehungen, die Bindung des Giftes an die Substanz 
des Zentralnervensystems, sind zuerst von Shakespeare^) undVERHOOGEN 
d Baebt beobachtet worden, die Tiere durch subdurale Einftihrung der 
Zentralnervensubstanz tetanischer Tiere vergifteten. 

Besredka^) wiederholte diesen Versuch, indem er normales Meer- 
schweinchengehirn mit einem großen Toxinquantum längere Zeit (bis 
6 Tage) im Eisschrank stehen ließ und ttberschüssiges freies Toxin durch 

ij Hans Meter & Halset, Tetanusstadien. Festschr. f. Jäff±, Braanschweig 
1901. 

^ Harnack & Hochheim, Ueb. Wirk. d. Briegerschen Tet-G. Z. f. klin. Med., 
25, 46 (1894). 

^ Shakespeare, Preliminary report of exper. researcheB conoeming the in- 
fectioiiB nature of tranmatio tetanos. C. f. Bakt, II, 641 (1887). 

4) Yerhoogen & Baert, Premi^res recherches sur la nature du t^tanos. 
Banmg. Jahresber., 1890, 198. 

^) Be»redka, De la fixation de la tox. t^t. par le cerveau. Ann. Fast, XVII, 
138 (1903). 



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— 102 — 

sorgfältiges Waschen entfernte. Mit diesem Brei konnte er bei Mäusen 
Tetanas erzeugen. Auch Pasqüini*) fand das Zentralnervensystem giftig. 

GoLDSCHEiDER & Flataü^), Joükowsky^) u.a. haben die Wirkung des 
Tetanustoxins auf die Ganglienzellen, speziell der Vorderhömer, direkt 
unter dem Mikroskop demonstrieren können. Besonders lebhaft wurde 
die Frage diskutiert, ob das Nervensystem allein der Angriffspunkt des 
Giftes ist; und femer, ob es nur das zentrale Nervensystem ist. 

Die Frage scheint durch die Arbeiten von Gumprecht*) mit Sicher- 
heit dahin entschieden zu sein, dass es ausschließlich das Zentralnerven- 
system, vor allem das Bückenmark ist, das von dem Gift angegriffen 
wird, und dass alle weiteren Erscheinungen auf diese primäre zurück-- 
gehen. Gourmont & Doton<^) nehmen allerdings an, dass das ganze 
sensible Neuron primär angegriffen werden kann. 

Dass das Gift primär nur das Zentralnervensystem angreifen soll, 
ließ sich nun scheinbar schlecht vereinbaren mit der Thatsache des 
>lokalen Tetanus«. Sie lässt sich nur dann damit in Einklang brin- 
gen, wenn man einen direkten Transport des Giftes im Nerven von der 
Infektionsstelle zum Bückenmark annimmt. Diese Annahme ist zuerst 
von Brüsschettini «) gemacht worden, der das Gift im Nervensystem 
selbst nachweisen konnte, während andere blutfreie Organe es nicht 
enthalten, auch nicht die Muskeln an der Infektionsstelle. 

Durch besonders umfangreiche Versuche ist diese Ansicht neuerdings 
von Hans Meyer & Bansom^) gestützt worden. Ihre Ergebnisse sind 
folgende: Nach subkutaner Impfung mit Tetanusgift lässt sich das Gift 
im Nerven nachweisen. Dieser wichtigste Befund wurde gleichzeitig von 
Marie & Morax^) bestätigt, die das Gift im Ischiadicus des infizierten 
Beins, nach Ausbruch des allgemeinen Tetanus auch in dem anderen 
fanden, femer besonders im Nerven des Masseter, dagegen aber gar 
nicht im N. opticus, der ja ein Gehirnanhängsel ist. Es sind motorische, 
sensible und sympathische Nerven nach Morax & Marie gleichmäßig 
dazu befähigt, und zwar ist nach Meter & Bansom ausschließlich der 

^) Pasquiki, Sulla presenza del yeleno tetanico negli organi. Bif. med., 1902, 
22/23. Eef. C. f Bakt, 31, 117. 

2) GrOLDSCHEiDER & Flatau, Uebor die Ziele der modernen Nervenzellen- 
forschung. Dtsch. med. Woch., 1898, 166. 

3) JouKOWSKT, De Tinfluence de la toxine t^tan. sur le Systeme nerveux. Ann. 
Fast, XIV, 464 (1900). 

*) GuMPRECHT, Zur Pathog. d. Tetanas. Dtsch. med. Woch., 1894, 646. — Ders., 
Vers, über d. physiol., Wirk, des Tetanußgiftes. Pflügere Arch., 59, 105 (1895) 
(Litteratur). 

t>) CouRMONT & DoYON, Le T^tanoB. Paris, Bailli^re, 1899. 

6) Brusschettini, Bif. med., 1892. Cit. n. Brunner. 

^) Hans Meyer & Ransom, Unters, ttb. d. Tetanus, Arch. exp. Path., 49, 369 
(1903). 

8) Marie & Morax, Rech, sur Tabsorption de la tox. t6t. Ann. Past, XVI, 
818 (1902), XVII, 336 (1903). 



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— 103 — 

normale Achsencylinder der Träger des Giftes, das nur durch die 
Mnskelendapparate, nicht durch die Blutbahn in ihn hineingelangt. Das 
Gift wandert nur centripetal. Meyer & Ransom fanden femer, dass 
außer Durchschneidung des Nerven auch Injektion von Antitoxin 
in den Nerven dem Gifte den Weg zum Rückenmark sperrt. Dies ge- 
lingt sicher bei lokaler (subkutaner), manchmal auch bei intravenöser 
Vergiftung. Die zu dem geschützten Nerven gehörigen Zentren bleiben 
frei, während das Tier dem allgemeinen Tetanus erliegt Auch im 
Rückenmark selbst lässt sich durch Durchschneiden das Weiterwandem 
des Giftes ausschalten. Bei solchen Tieren erfolgte keine Vergiftung 
des Gehirns; die Tiere lagen bis 3 Wochen im dauernden Tetanus und 
gingen schließlich anscheinend an Erschöpfung zu Grunde. Der Trans- 
port direkt durch die Nerven wird auch dadurch plausibler, dass das 
Gift bei direkter Injektion in die Nerven erheblich (ca. lOmal) inten- 
siver wirkt. Dabei wurden die Gifimengen, die etwa bei der Injektion 
nebenher in die Lymphdrüsen und die Blutbahn gelangen, jedesmal 
durch große Antitoxinmengen ausgeschaltet. Die Inkubationszeit ist er- 
heblich abgekürzt und wird bei direkter Injektion in das Lumbaimark 
auf wenige Stunden reduziert, wie dies schon aus den Versuchen von 
Roux & BoRREL^) über den Kopftetanus bekannt ist. Der langsame 
Transport durch die Nerven erklärt die verschieden lange Inkubations- 
zeit (s. 0.). 

Es folgt aus diesen Versuehen, dass das Gift zuerst ausschließlich 
durch die Nerven selbst zu den Rückenmarkszentren geftlhrt wird, 
und von diesen aus die spezifischen Erscheinungen ausgelöst werden. 
Ergreift das Gift ausschließlich die sensiblen Zentren, so entsteht ein 
reiner Tetanus dolorosus ohne Krämpfe. Auch aus dieser strengen 
Scheidung folgt, dass das Gift nicht durch Blut oder Lymphbahnen 
an das Rückenmark gelangt. Das Gift gelangt normalerweise nur 
durch das motorische Neuron an die motorischen Ganglien und erzeugt 
hier einen Zustand der üebererregbarkeit gegen die gewöhnlich 
latent bleibenden Reize, die von den sensiblen Neuronen ausgehen. Näher 
auf die Theorie des Tetanus selbst einzugehen, ist hier nicht der Ort. 

Der gewöhnliche AngriflFspunkt des Tetanusgiftes und damit der Er- 
krankung ist also das Rückenmark. 

Aber ganz ausschließlich ist es nicht das Rückenmark, das dem 
Tetanustoxin passende haptophore Gruppen darbietet. Roux & BorrelI) 
konnten z. B. nachweisen, dass bei subduraler Einführung in die 
Schädeldecke das Gift sich ausschließlich an die Gehirnzellen bindet 
und einen cerebralen Tetanus erzeugt. Und schließlich deuten Versuche 
von DöNiTz^) am Kaninchen und Miyamoto^) darauf hin, dass das 

i) Roux & Borrel, T^tanos cerebral. Ann. Paßt, Xu, 225 (1898). 

2) DöNiTZ, lieber das TetanuBantitoxin. Dtsch. med. Woch., 1897, 428. 

3) MrsTAMOTO, Beiträge zur Tetanußvergiftung. Dtßoh. med. Woch., 1900, 479. 



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— 104 — 

Toxin unter Umständen von anderen haptophoren, nicht dem Zentral- 
nervensystem angehörigen Gmppen so schnell gebunden werden kann, 
dass das Tier ohne Krämpfe an einem »Tetanus sine tetano« zu Grunde 
geht Beim Kaninchen beruht auf dieser Bindung des Giftes an weniger 
lebenswichtige Organe, die es vom Zentrahiervensystem ableiten, sicher 
zum Teil seine geringere Empfindlichkeit. Bei intercerebraler Injektion 
wenigstens, wo also das Gift direkt mit dem Zentralnervensystem in 
Berührung kommt, konnten Boux & Bobrel Kaninchen sehr viel 
leichter vergiften, als bei subkutaner, was bei Meerschweinchen nicht 
der Fall ist. Auch das sonst so wenig empfängliche Huhn lässt sich 
durch intercerebrale Injektion vergiften. Unter noch nicht näher be- 
kannten Umständen scheinen danach manche Gifte (Miyamoto ver- 
wendete ein sehr altes Gift) die vorwiegende Affinität zum Zentral- 
nervensystem zu verlieren. Man geht wohl nicht fehl, wenn man vor- 
läufig annimmt, dass sich hier Stoffe aus dem ursprünglichen Toxin ge- 
bildet haben, die zwar noch giftig sind, aber ihre eigenartige toxische 
Wirkung auf das Zentralnervensystem verloren haben, vielleicht eine 
Toxol'dbildung in eigenartigem Sinne. Bei refraktären Tieren, z. B. 
Alligatoren, aber auch den nicht völlig refraktären Hühnern, fand 
andererseits Metschnikoff (s. u.) eine geringftlgige Antitoxinbildung 
ohne vorhergegangene Krankheitserscheinungen, die wohl auch durch 
eine Bindung an zerstreute einzelne Rezeptoren zu deuten ist 

Den aus dem Studium der Krankheitserscheinungen gezogenen 
Schluss, dass die Substanz des Zentralnervensystems das Tetanusgift 
bindet, konnte man auch experimentell bestätigen. 

Fast gleichzeitig zeigten Wasserbiann & Takaki^), sowie Ransom^), 
dass eine Emulsion aus frischem Meerschweinchengehim eine gewisse 
Quantität Tetanustoxin binden und entgiften kann. Freilich ist die 
Bindungsfllhigkeit nicht sehr bedeutend; nach Palt auf*) kann 1 cm* 
Emulsion höchstens 100 letale Dosen binden, ein Punkt, den man nicht 
aus dem Auge lassen darf, wenn man die Diskussion ttber diese Frage 
richtig beurteilen will. 

Dass es die Zellen des Gehirnes sind, die binden, zeigten Blumen- 
THAL*) und Milchner*), die fanden, dass nach dem Aboentrifiigieren 
die Flüssigkeit frei von Toxin ist. 



1) Wassermann & Takaki, lieber tetannsantitoxiBche EigenBchaften des Gen- 
tralnervensystems. Berl. klin. Woch., 1898, S. 6. — Wassermann, Weitere Mitt 
ttber Seitenkettenimmunität Ebd., 209. 

2) Ransom, oit. n. Behrino, D. med. Woch., 1898, 68. 

3) Paltauf, DiskuBBion zu dem Vortrag von Grubbr. Wien. klin. Woch., 
1901, 61. 

*) Blumenthal, Ueber die Veränderungen des TetannBgiftes im Tierkörper. 
Dtsch. med. Woch., 1898, 185. 

5) Milchner, Nachweis der chemiBchen Bindong von T.-G. dorch Nervenaub- 
Btanz. Berl. klin. Woch., 1898, 369. 



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— 105 — 

Auch Ransom^) konnte zeigen, dass bei Injektion von Tetannsgift in 
den sabarachnoMalen Baum die Nervensubstanz mehr Gift bindet, als 
dem in ihr enthaltenen Blute zugeschrieben werden kann, dass es aber 
nicht restlos gebunden wird, sondern ein Teil auch bei diesem Ein- 
fiihmngswege in die Blutbahn gelangt. Die Gerebrospinalflttssigkeit da- 
gegen fand Meyer wie vor ihm Blümenthal & Jacob 2) und Schultze*) 
frei von Toxin. 

Wassermann fasste diese Ergebnisse des Versuchs als eine experi- 
mentelle Bestätigung der Seitenkettentheorie auf. Dieselben Rezeptoren, 
die im Gehimbrei und auch im lebendem Gehirn das Gift zu binden im- 
stande sind, sind es auch, die als freie Rezeptoren im Blute kreisen, 
so dass Wassermann mit Recht den Begriff der Seitenketten- 
immunität aus diesen Versuchen herleitete. 

Gegen die Deutung seiner Versuche sind nun von verschiedenen 
Seiten, besonders der MBTSCHNiKOFFschen Schule^) und von BEHRma & 
KiTASHiMA^), Einwände erhoben worden. Auf die ganze Streitfrage hier 
einzugehen, wttrde uns zu weit von unserem Thema abfuhren; ich 
begnüge mich damit, auf die Arbeit von Marx^) hinzuweisen, der die 
ganze Frage nochmal aufgerollt hat. 

Marx fand bei mehr als 200 Versuchen an Mäusen, dass die anti- 
toxische Wirkung des Gehirnes so ist, dass sie durch Zusatz von Serum 
einfach ergänzt wird, dass nicht, wie Eitashima (1. c.) bei Anwendung 
sehr großer Giftmengen gefunden hatte, die Gehimwirkung die Anti- 
toxinwirkung stört. 

Marx bestätigt also Wassermanns Ansicht, dass die gebundenen 
Rezeptoren des Gehirnes qualitativ und quantitativ analog wirken wie 
die freien Rezeptoren, die im Antitoxinserum enthalten sind. 

Damit ist die EHRLiCHSche Anschauung, dass das Gift sich nur an 
passende Rezeptoren binden kann, und dass diese Rezeptoren, wenn 
losgerissen, giflmeutralisierend, im Verband der lebenden Zellen aber 
giftzuftLhrend wirken, aufs neue gestützt. 

Unverständlich ist der anfangs gegen diese Versuche gemachte Ein- 



1) Raksom, Die Injektion von Tetannstoxin bezw. Antitoxin in den snbarach- 
noidalen Raum. Z. f. phys. Gh., 31, 282, 1900/01. 

^ Blumenthal & Jacob, Zur Sernmtherapie des Tetanos. Berl. klin. Woch., 
1898, 1079. 

3) ScHüLTZE, Spinalpnnktion n. Einspritz. v. Antitoxinsenim bei Tet tran- 
matieuB. Mitt. örenzgeb. d. Med. u. Chir., V, 169 (1900). 

*) Metsohnikopp, Immunität Dentsch v. Meter. Jena 1902. — Ferner 
speziell: Metsohmikoff , Inflnence de Torganisme sur les toxines. Ann. Fast, 
XI, 801; XII, 81 (1897—98). — Makie, Fropriet6 antit^tanique des centres nerveux. 
Ibid., XII, 91 (1898). — Besredka, De la fixation de la toxine tet Ibid., XVII, 
139 (1903). 

») Behring, Allg. Ther. d. Infekt-Kr., I, 1038. 

«) Marx, Die Tet.-G. neutralis. Eigensch. d. Gehirns. Z. f. Hjg., 40, 231 (1902). 



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— 106 — 

wand, dass das Gehirn wenig empfänglicher Tiere, wie Hühner u. s. w., 
nicht schützt, denn selbstverständlich für den, der auf dem Boden der 
EHRLiCHSchen Theorie steht, kann nur diejenige Nervensubstanz schützen, 
die das Tetanustoxin wirklich bindet, die eben ihm adäquate hapto- 
phore Gruppen besitzt. Und solche haptophoren Gruppen weisen natür- 
lich nur die Gehirne u. s. w. derjenigen Tiere auf, die eben gegen Tetanus 
nicht refraktär, nicht natürlich immun sind. Es ist doch eine der 
schönsten Eonsequenzen der EHRLiCHSchen Theorie, dass sie das einst 
so schwierige Problem der natürlichen Immunität mit einem Schlage in 
das hellste Licht rückt. Sowohl die Infektion, als auch die relative 
Bildung von Antikörpern kann nur da stattfinden, wo haptophore 
Gruppen sich gegenseitig binden. Wo diese fehlen, bleiben sowohl In- 
fektion als auch Neutralisierung des Giftes völlig aus. 

Freilich ist das Zentralnervensystem durchaus nicht notwendigerweise 
der einzige Produktionsort des Antitoxins. Wie wir oben erwähnt haben, 
finden sich giftbindende Rezeptoren auch an anderen Stellen, wo die 
Giftbindung gar keine schädlichen Folgen hat, z. B. im Bindegewebe u. s. w. 
Wo aber Rezeptoren vorhanden sind, kann auch Antitoxin- 
bildung auftreten. Die Antitoxinbildung, eine Funktion der hapto- 
phoren Gruppe, hat mit der Giftwirkung an sich gar nichts zu thun. 
So muss nach Ehrlich -Wassermann zwar das Zentralnervensystem 
schützend wirken, aber nicht, weil es der toxophoren Gruppe als An- 
grifispunkt dient, sondern weil es Rezeptoren enthält, die auch anderen 
Geweben zukommen können. 

Gegen diese Ansicht erhob Metschnikoff den Einwand, dass auch 
das Gehirn der Frösche gar nicht schützt. Frösche sind zwar in der 
Kälte absolut unempfindlich gegen Tetanus, bei über 20^ dagegen außer- 
ordentlich empfindlich, wie das in geringerem Maße von anderen Am- 
phibien und Reptilien gilt, sowie auch von Murmeltieren (Billinger*), 
die im Winterschlaf, also bei niederer Temperatur, nicht sterben, sondern 
erst nach dem Erwachen. Auch Fledermäuse zeigen in der Kälte, so- 
lange sie schlafen, eine erhebliche Resistenz (Meyer & Halset 1. c). 
Das Gehirn der Frösche zeigt nun keinerlei bindende oder schützende 
Wirkung gegenüber dem Tetanustoxin, und ebenso tritt im Körper der 
Frösche bei Tetanusvergiftung nie ein Antitoxin auf. So zweifellos 
richtig diese Thatsache ist und so wenig das Ausfallen der Abstoßung 
und Freibewegung der haptophoren Gruppen bis jetzt erklärt ist, so ist 
doch die Auslegung, die Metschnikoff dieser Erscheinung giebt, dass 
nämlich das Zentralnervensystem des Frosches das Tetanustoxin über- 
haupt nicht binde, sicher nicht richtig. In einer sehr interessanten Arbeit 
konnte Morgenroth 2) nachweisen, dass das Tetanusgift sich auch in 

1) BiLLiNGEB, Winterschlaf und Infektion. Wien. klin. Woch., 1896, 769. 
^ Morgenroth, Znr Kenntnis des Tetanos des Frosches. Arch. intemat d. 
Pharmacodynamie, YIII (1900), 255, S. A. 



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— 107 — 

der Kälte, zwar langsamer, aber doch sicher an das Zentralnervensystem 
des Frosches bindet, dass aber die toxophore Gruppe unwirksam ist. 
Diese tritt sofort in Funktion, wenn man die Temperatur erhöht. 

Die Bindung des Toxins an das Nervensystem geschieht bei Ein- 
führung in die Blutbahn sehr schnell. Decrolt & Bonsse i) zeigten, 
dass bei Kaninchen nach intravenöser Injektion einer tödlichen Dosis 
Tetanusgift das Blut schon nach einer Minute ungiftig ist. So schnell 
verschwindet das Toxin aus dem Blute 2). Aus dieser außerordentlich 
großen Verwandtschaft des Giftes zum Nervensystem folgen nun prak- 
tisch sehr wichtige Konsequenzen. So leicht es ist, das Tetanusgift, 
bevor es in die Nervenbahnen eintritt, durch Antikörper unschädlich zu 
machen, so viel schwerer gelingt es, die einmal vorhandene Bindung zu 
zerreißen, das Toxin vom Receptor loszumachen, den Tetanus zu heilen. 
Mit jeder Stunde wird die Bindung des Toxins fester und die Wirksam- 
keit des Serums geringer. Wie schnell diese Beeinträchtigung eintritt, 
hat DöNiTZ») gezeigt. Dieselbe Antitoxinmenge, die bei gleichzeitiger 
Injektion ein Kaninchen vor einer vielfach letalen Dosis schützte, ver- 
sagte völlig, wenn sie vier Minuten nach dem Toxin eingespritzt wurde 
(beides bei intravenöser Injektion). Nach einer Stunde war schon die 
40 fache Antitoxinmenge nötig. Nach Ablauf von 5 Stunden versagten 
selbst kolossale Dosen, z. B. das 600fache der einfach wirkenden Dosis. 
Ganz ähnlich, nur langsamer verschiebt sich diese Wirkung des Serums 
zu seinen Ungunsten nach Morgenroth beim Frosche. Bei den Heil- 
versuchen am Menschen hat es sich vielfach gezeigt, dass nach Ausbruch 
der tetanischen Symptome, also nach Ablauf der Inkubationszeit, selbst 
kolossale Dosen Immunserum meist nichts mehr nützen. 

Ich bin auf diese Frage, deren genauere Ausführung nicht an diese 
Stelle gehört, nur deswegen eingegangen, weil man aus diesen That- 
sachen, und zugleich aus dem Vorhandensein einer mehr minder langen 
Inkubationszeit (s. o.), Schlflsse über die Veränderungen des Tetanus- 
giftes selbst im menschlichen Organismus ziehen wollte. 

Einige Autoren haben nämlich angenommen (z. B. Coürmont & Doyon*), 

1) Decroly & RoNSSE, Pouvoir toxique et antltoxique du sang etc. Arch. 
intemat de pharmacodyn., VI, 211 (1899). 

^ AllerdingB nimmt Dönitz (b. o.) an, dass beim Kaninchen auch in anderen 
Organen Rezeptoren vorhanden sind, nm das außerordentlich schnelle Verschwinden 
zn erklären; bei Meerschweinschen und Maus kreist es länger im Blute. Auf die 
Wichtigkeit solcher zerstreuter Rezeptoren habe ich schon mehrfach hinzuweisen 
Gelegenheit gehabt. 

3) DÖNITZ, Ueber das Tetanusantitoxin. Dtsch. med. Woch., 1897, 428. 

*] CouRMONT & DoYON, n. a., a] Mecanisme de prodnction des contractnres 
da t^tanoB. Arch. de phys., 1893, 64. — b) La snbstance toxiqne qui engendre le 
t^tanos. Sem. m6d., 1893, 122. — c) Du t6t. de la grenouille. Ibid., 1893, 302. — 
d) De la prod. d. t. chez la poule. Ibid., 1893, 486. S. a. d. bereits citierten Ar- 
beiten, sowie ihr Werk: Le T^tanos, Paris 1899. (Andere Arbeiten s. bei Blumen- 
thal 1. c.) 



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— 108 — 

dass das Gift, das Bchließlich den Aasbrach des Tetanus herbei- 
führt, nicht das primäre Toxin der Kdturen ist Dieses soll nur 
als ein Ferment wirken, das unter den geeigneten Bedingungen aus 
dem Protoplasma der angegriffenen Zelle das eigentliche Krampfgift 
abspaltet, das nun ohne Inkubationszeit yergiftet Die Grttnde, die die 
Autoren ftlr diese Anschauung ins Feld ftlhren, sind folgende: 

Was zunächst die Inkubationszeit betrifft, so wird angenommen, 
dass während dieser Zeit das eigentliche Gift erst entsteht und dann 
erst wirkt Nötig ist hierftlr diese komplizierte Anschauung nicht, denn 
durch eine langsame Wirkung der toxophoren Gruppe und die verschieden 
lange Wanderung in der Nervenbahn nach Meyer & Raksom (s. o.) ist 
sie mindestens ebenso einleuchtend erklärt. Auch spricht nicht dafttr, 
dass die Inkubationszeit um so kürzer wird, je mehr Toxin dem Tiere 
zugeftihrt wird, wenn auch, wie bei jedem Toxin, diese Verkürzung der 
Inkubationszeit durch größere Dosen ihre Grenze hat. 

Auch das komplizierte Verhalten der Inkubationszeit beim Frosch, 
das man speziell als Grund ftlr diese Annahme ins Feld geftihrt hat, 
ist einfacher zu erklären. Mobgenboth konnte zeigen, dass durch Er- 
wärmen zunächst nur eine sehr schnelle und feste Bindung des Toxins 
herbeigeführt wird, keine Gifliwirkung. Denn bringt man den Frosch 
nach 24 Stunden Verweilens bei 32° wieder in den Eisschrank, so bleibt 
er dauernd gesund, stirbt aber nach einer um 24 Stunden ge- 
kürzten Inkubationszeit trotz Anwendung kolossaler Antitoxinmengen, 
wenn man ihn nun wieder auf 32° bringt. Würde durch die Erwärmung, 
wie CoüBMONT & DoYON annahmen, eine sekundäre Veränderung des 
Giftes eintreten, so dürfte der Frosch auch im Eisschrank nicht dauernd 
gesund bleiben. Die Wärme hat hier nur eine außerordentlich feste 
Bindung herbeigefllhrt, die erst bei neuer Erwärmung durch Einwirkung 
der toxophoren Gruppe zum Tode fllhrt Dass nach eingetretener 
Bindung das Antitoxin mehr oder minder völlig versagt, eine That- 
sache, die besonders ftlr die Theorie des sekundären Giftes ausgebeutet 
worden ist, giebt ihr meines Erachtens gar keine Waffe. Die Ueber- 
legenheit des im Blute kreisenden Antitoxins dem Toxin gegenüber, die 
es verhütet, dass es sich an das Zentralnervensystem bindet, beruht nur 
darauf, dass es eben im Blute kreist, das Toxin also sofort beim Ein- 
tritt in die Blutbahn auffängt und mechanisch von den bedrohten G^ 
weben abhält, nicht aber etwa in einer größeren Affinität dem Toxin 
gegenüber. Es ist nur wenig imstande, und nur bei Massenwirkung 
wenn sehr viel Antitoxin angewendet wird, die einmal geschaffene 
Bindung Nervenzelle — Toxin zu zerreißen. Es ist also ohne weiteres 
klar, dass das Antitoxin eine Zeitlang nach der Vergiftimg, um wie 
viel mehr erst nach dem Ausbrechen der Symptome, unwirksam sein 
muss, und wir brauchen dazu durchaus nicht die Annahme der Existenz 
eines neuen, dem Antitoxin nicht verwandten Giftes anzunehmen. Eben- 



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— 109 — 

sowenig kann es daftlr von Bedeutung sein, dass anch das Gehirn von 
Tieren, die am Tetanns gestorben sind, noch Gift bindet. 

Wenn aber diese Ausführungen die Frage naeh der Nichtbeein- 
flussung des Toxins durch das Antitoxin nach einer gewissen Zeit noch 
nicht durchaus erklären, so giebt der Nachweis von Meyer & Ransom 
(1. c), dass das Tetanusantitoxin dem Gift auf seinem Wege in die 
Nervenbahn nicht folgen kann, eine restlose Aufklärung dieser 
Verhältnisse. Damit ist die Wirkungslosigkeit des Antitoxins völlig er- 
klärt, und man braucht nicht mehr die Hilfshypothese eines sekundären 
Giftes zu machen. 

Indessen ist es damit auch noch nicht definitiv widerlegt. 

Einen experimentellen Beweis versuchten Coürmont & Doyon da- 
durch, dass sie zeigten, dass die Transfusion des Blutes von einem 
tetanischen Hund bei einem anderen sofort tetanusähnliche Symptome 
auslöste. Auch Ebaus^) konnte Mäuse mit dem Blutserum einer teta- 
nischen rapide vei^ften, wie vor ihm Nissen*). Hier sollte also das 
sekundäre Gift wirksam sein. Dies wollte man nun mehrfach in Or- 
ganen gefunden haben. 

Bluhenthal') stellte aus den Organen von am Tetanus gestorbenen 
Tiere ein Gift dar, das ohne Inkubationszeit in einer Dosis von 0,35 cm^ in 
17 Min. unter Krämpfen tötete und demgegenüber das Antitoxin wirkungs- 
los war. Auch Buschke & Oergel^) haben aus Leber, Milz und 
Bückenmark eines Tetanischen ein augenblicklich wirksames Krampf- 
gift darstellen können, ebenso Tauber^) aus Rückenmark, Gehirn und 
Leber in geringer Menge. Solchen Befunden von Giften aus Leichen- 
organen gegenüber muss man sehr skeptisch sein; man kann absolut 
nicht wissen, was man da eigentlich herausextrahiert, und was ftlr 
giftige Stoffe sich während des Krankheitsprozesses mit seinen Ver- 
änderungen im Protoplasma gebildet haben können, die mit dem Te- 
tanustoxin überhaupt nichts zu thun haben, und gegen die das Anti- 
toxin machtlos ist. Auch Blumenthal selbst, sowie in neuerer Zeit 
CouRMONT & Doyon deuten jetzt diese Befunde sehr vorsichtig und 
lassen es dahingestellt, wie weit dieses Organgift mit dem wirklichen 
Tetanusgift zusammenhängt. Blümenthal hält es ftlr eine Verbindung 
des eigentlichen Giftes mit Zellsubstanz. Ein Beweis lässt sich jedoch 
mit solchen Mitteln nicht fähren. Um es zu rekapitulieren, die Cour- 



1) Kraus, Beitrag zur Klinik des Tetanus. Z. f. klin. Med., 37, 247 
2] Nissen , Ueb. den Nachweis von Toxin im Blute u. b. w. D. med. Woch. 
1891, 775. 

3) Blümenthal, Weit. Beitr. z. Kenntn. des Tet.-G. Z. f. klin. Med., 32, 326 
(1S97). — Ders., üeber die Veränderungen des Tetanusgiftes im TierkOrper. Dtsch. 
med. Woch., 1898, ISö. 

4) Buschke & Oergel, Beitrag zur Kenntnis des Tetanus. D. med. Woch., 
1893, 149. 

5} Tauber, Ein Beitr. z. Kenntnis d. Tetanus. Wien. klin. Woch., 1898, 747. 



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— 110 — 

MONTSche Fermenttheorie des Tetanostoxins ist bisher nicht erwiesen, 
nnd sie ist bisher zu entbehren. Ob sie nicht trotzdem richtig ist, ist 
bis jetzt nicht zu entscheiden. Aber man thnt gut, dieses so eminent 
schwierige Gebiet nicht noch durch Hypothesen zu verdunkeln, solange 
man nicht sicherere Stützen dafür hat. 



Das Tetanusantitoxin. 

Das Antitoxin des Tetanus verhält sich zu dem Toxin im wesent- 
lichen ganz analog wie das der Diphtherie, d. h. seine antitoxische 
Kraft lässt sich nach genauen zahlenmäßigen Verhältnissen zum Toxin 
feststellen. Beide binden einander und eine spätere Trennung ist nicht 
mehr möglich. Jedoch tritt die Bindung nicht so schnell ein, so dass 
man nach Dönttz^) '/4 Stunden bei der Prüfung warten soll; außerdem 
ist der Grad der Absättigung abhängig von der Konzentration: bei 
größerer ist die Bindung schneller und vollkommener, so dass man stets 
möglichst gleiche Konzentrationen vergleichen muss. Für die quantita- 
tiven Verhältnisse gelten annähernd dieselben Beziehungen wie bei der 
Diphtherie. Jedoch ist die Aufklärung hier nicht so weit voigeschritten. 
was insbesondere der außerordentlichen Labilität des Toxins zuzuschreiben 
ist. Die Bindung scheint femer eine sehr viel weniger feste zu sein 
und eher zu Gleichgewichtszuständen zu flihren (über diese s. im Allg. 
Teil). Das Serum lässt sich unter Zusatz von 1^ Chloroform oder 
0,6 X Karbol im Dunkeln und kühl lange aufbewahren. Es verträgt 
auch einen Zusatz von 1^ Karbol. Alkohol und destilliertes Wasser 
sind unschädlich (Behring^). 

Roux & Vaillard (1. c.) ließen Kuhserum im Vacuum ohne Verlust 
trocknen und lösten es zum Gebrauch in der sechsfachen Menge Wasser. 

Auch die Milch immunisierter Tiere enthält das Antitoxin. Nach 
Brieger & CoHN^) kann es daraus in folgender Weise konzentriert 
werden. 

Man fällt die Milch analog wie bei der Gewinnung des Diphtherieantitoxins 
durch Labferment. Die filtrierte Molke wird durch Chloroform geschüttelt, 
absitzen gelassen und dekantiert. Dann fällt man durch Sättigung auf 32 ßi 
Ammonsulfat Der Niederschlag wird wieder aufgelöst, mit basischem Bleiacetat 
in geringer Menge gefällt, und mit ganz schwach alkalischem Wasser aus- 
gewaschen. Filtrat und Waschwasser werden mit Ammonsulfat gesättigt 
Der Niederschlag wird von dem überschüssigen festen Ammonsulfat durch 
Aufschlemmen in reinem Chloroform mechanisch getrennt. Die Salze setzen 



1) DöNiTZ, Bericht üb. d. Thätigkeit des Egl. Instituts l Serumforsch. u.b.w. 
S. A- aus dem »Klin. Jahrb.«, VII, 1899. 

2) Behring, Die Blntsemmtherapie. IIL Leipzig 1892. 

3) Brieger & Cohn, Beitr. z. Concentr. d. geg. Wundstarrkrampf schützenden 
Substanz. Z. f Hyg., XV, 439 (1893). 



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— 111 — 

sich ab, der leichte Antikörperniedersclilag schwimmt oben und wird abge- 
hoben. Es ließ sich so eine Konzentriening auf das 300 — 400 fache der 
ursprünglichen in der Milch erreichen. Noch weiter lässt sich das Antitoxin 
reinigen, wenn man das entbleite Filtrat nicht mit Ammonsulfat, sondern erst 
mit NaCl, dann mit phosphorsaurem Natrium fällt. Während der Kochsalz- 
niederschlag fast nichts von dem Antitoxin mitfällt, wird es von dem Natrium- 
phosphat zum größten Teile mitgerissen. 

Mit den Eigenschaften des Antitoxins hat man sich natürlich viel be- 
schäftigt. Es unterscheidet sich nicht wesentlich von dem Diphtherie- 
antitoxin. 

Bei 68^ wird es zerstört, aber selbst bei 80*^ nicht völlig. Ebenso 
wirken Säuren (Salzsäure bei 1 : 15 Antitoxin, Milchsäure) zerstörend. 

Ganz schwache Alkalien sind unschädlich, stärkere zerstören es schnell. 

Es widersteht der Fäulnis (Behring). 

Es dialysiert nicht und wird zum Teil in Chamberland- Kerzen 
zurückgehalten. Tizzoni & CattaniI) schreiben ihm Fermentnatur zu, 
wozu meiner Meinung nach gar keine Veranlassung vorliegt (s. b. Di- 
phtherie). Sie schließen dies daraus, dass es durch Alkohol fällbar ist 
und sich, allerdings sehr langsam, aus den Niederschlägen mit Glycerin 
extrahieren lässt. Es wird wohl auch ein den Globulinen nahestehender 
Körper sein, wie das Diphtherieantitoxin. 

Dass es durch Magnesiumsulfat ausfällt, fanden Tizzoni & Gattani 
bereits. Sie machten auch schon die Beobachtung, dass die Globuline, die 
durch schwache Säuren (Essigsäure, Kohlensäure) ausgefällt werden, oder 
die man durch Dialyse erhält, das Antitoxin nicht mitfuhren, sondern 
nur die durch festes Magnesiumsulfat bei 30** gefällten Globuline. 

Pick (1. c.) konnte mit Hilfe seiner feineren Methoden diese Angaben 
bestätigen. Danach ist das Tetanusantitoxin genau so verteilt wie das 
Diphtherieantitoxin; er fand es im Pferdeserum ebenfalls ausschließlich 
an das Pseudoglobulin gebunden. 

Die Berechnung des Wertes des Tetanusantitoxins geschah nach 
Behring folgendermaßen: Ein »einfaches« Serum soll 1 gTier gegen 
die sichere Dosis letalis schützen. So schützt ein cm' Serum von 
1 : 1 Million 50000 Mäuse von je 20 g, also eine Maus braucht 
V50000 cm' oder 0,00002 cm', ein Schaf von 50 kg also 0,05 cm', ein 
Pferd von 400 kg also 0,4 cm'^). 



1) Tizzoni & Cattani, Sur les propriet^s de Tantitoxine du t^tanos. Arch. 
ital. de biolog., XVI, 394 (1891). (Bef.) — Ueber d. Eigenschaften des Tetanus- 
Antitoxins. G. f. Bakt, IX, 685 (1891). — Fernere Unters, üb. das Tetanus-Anti- 
toxin. Ebd., X, 33 (1891). — Tizzoni, üeb. d. experim. Immunität gegen Tetanus. 
Festschrift für Virchow. Berlin 1892, III, 29. 

3) Die Zahlen, die Behring (Die Blutserumtherapie , II, S. 20) giebt, stimmen 
nicht genau. Wenn ein cm' öOCKX) Mäuse schützt, so braucht eine Haus nicht 
0,00005, sondern 0,00002 cm», ebenso ein Pferd von 400 kg nicht 0,25, sondern 
0,4 cm'. _ 

»NIVER3ITY // r^ T 

OF JJ Digitizedby VjOOQiC 



— 112 — 

Neuerdings aber wird im Egl. Institut ftar Seramforscbnng und 
Senunprtifnng das Serum genau so geprüft wie das Diphtherieserum. 
An einem unveränderlich aufbewahrten Testserum werden Testgifte ein- 
gestellt und an diesen die zu prüfenden Sera gemessen. 

Sehr wichtig ftlr die Beurteilung der Wirkung des Antitoxins im 
Organismus ist die Feststellung von Hans Meyer & Ransom (1. c), dass 
das Antitoxin im Gegensatz zum Toxin nicht imstande ist, in den 
Achsencylinder einzudringen. Infolgedessen ist das Antitoxin gegenüber 
dem einmal in den Nerven befindlichen Gift völlig machtios. Auch 
in die Zentren selbst mit Hilfe der Lymph- und Blutbahn kann es nicht 
eindringen. So kann es nur die überschüssigen Giftmengen der Ge- 
webe neutralisieren. Auch hoch immunisierte Tiere erliegen deshalb 
der Vergiflimg, wenn das Gift direkt in die Nerven gebracht wird. 
Meter & Bansom hoffen, durch direkte Injektion von Antitoxin 
in die Nerven Heilerfolge erzielen zu können. 

Das Botulismustoxin. 

Ein drittes echtes Toxin ist das wirksame Prinzip vieler Fälle von 
Fleischvergiftung, 

Auf die bis dahin ziemliche rätselhaflie Aetiologie des Botulismus 
warf die Entdeckung van Ermengems ^) ein helles Licht, der aus einem 
giftigen Schinken einen saprophytischen Bacillus botulinus isolierte, 
den schon er selbst als den Erzeuger eines spezifischen, ungemein wirk- 
samen Toxins erkannte. Nach Kempner ist er auch in den Schweine- 
faeces aufzufinden und Schneidemühle) hält ihn auch für den Erreger 
der sog. Geburtsparalyse bei Rindern. Zwar hatte man schon früher 
aus giftigen Fleischproben Stoffe isoliert und als Träger der Vergiftung 
angesprochen, so das von v. Anrep*) aus Störfleisch gewonnene, doch 
erst das Botulismustoxin erwies sich als das spezifische Gift der 
Fleischvergiftung und als ein echtes Toxin. 

VAN Ermengem erhielt es durch Filtration der Kulturen seines 
Bacillus botulinus. Es ist ungemein giftig. Für den Menschen 
stellen 0,035 mg die tödliche Dosis dar. Schon dadurch reiht es sich 
den wirklichen Toxinen an. Ebenso femer durch die Spezifizität seiner 
Wirkung, die völlig dem Ej'ankheitsbilde des Botulismus entspricht 

Es erzeugt dieselben Augensymptome, Aphonie, Obstipation, Urin- 
retention. Fieber tritt nicht ein. Schließlich führt es unter Erschei- 
nungen, die der Bulbärparalyse ähnlich sind, zum Tode. 



1) VAN Ermengem, Ueber einen neuen anaSroben Bacülus n. s. Bezieh. 
BotulismuB. Z. f. Hyg., 26, 1 (1897). 

2) ScHNEmEMÜHL, Ueb. BotnliBrnns beim Menschen und die sog. Geburts- 
paralyse bei Bindern. C. f. Bakt., 24, 619 (1898). 

3) V. Anrep, Intoxication par les ptomaines. Arch. slavea de bioL, 1886, I, 
341, cit. n. V. Ermengem 1. c. 



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— 113 — 

Seine Wirkung tritt erst nach einer gewissen Inkubationszeit ein. 

Nach FoBSSHAN^) ist die Art der EinfUhmng nicht gleichgiltig; zwar 
tritt bei intracerebraler Einführung keine eigene Erkrankongsform nnd 
Intensität auf, Terglichen mit der subkutanen, wohl aber bei intraperi- 
tonealer und vor allem intrapulmonaler Injektion. Dann ist das 
Vergiftungsbild durch heftige Dyspnoe beherrscht. Auch ist bei intra- 
pleuraler Injektion das Gift 5 — 9 mal giftiger, die Inkubationszeit bei 
der einfachen Dos. let. jedoch länger. Andererseits ist aber die Minimal- 
inkubation (bei massiven Dosen) bei subkutaner Injektion 6 St., bei intra- 
pulmonaler 4 St. 

Wie alle echten Toxine ist es sehr empfindlich. Luft und Licht 
schwächen es schnell, desgleichen Temperaturerhöhung schon auf 58° 
durch 3 Stunden. Auch Alkohol, Aether, oxydierende Substanzen ver- 
nichten es schnell, während Reduktionsmittel relativ wenig schädlich 
sind. Dagegen ist es merkwürdigerweise vom Darmkanal aus wirksam, 
wie schon van Ermengem fand und Forssman bestätigte. Magen- und 
Dünndarmsaft schaden ihm nicht, wohl aber wird es durch Diekdarm- 
inhalt schnell zerstört. 

Brieger & Kempner^) haben nach der BRiEGERSchen Methode das 
Toxin in konzentriertem Zustande dargestellt. 

Das keimfreie Filtrat der Kulturen wird mit Ammoniak etwas abgestumpft 
und mit dem doppelten Volumen einer 3proz. Chlorzinklösung geMlt. Der 
Niederschlag wird sorgfältig gewaschen. Dann setzt man vorsichtig eine 
Iproz. Lösung von Ammoniumbikarbonat zu, bis die Mischung eben äußerst 
schwach alkalisch reagiert, zersetzt mit Ammoniumphosphat, filtriert vom aus- 
geschiedenen Zinkphosphat ab und Mit das Toxin mit Ammonsulfat aus. 

Sie erhielten so sehr geringe Mengen festen Toxins in quantitativer 
Ausbeute. 

Das Botulismustoxin ist ein spezifisches Nervengift. 

Kempner & Pollack 3) und gleichzeitig Marinesco*) haben seine 
Wirkung anatomisch studiert, besonders die Veränderungen derVorder- 
homzellen, Destruktion, Chromatolyse und Zerfall der NissLschen Granula, 
worauf ich hier nicht eingehen kann. 

Sehr wichtig ist aber, dass das Botulismusgift infolge dieser starken 
Affinität zur Substanz des Zentralnervensystems ganz analog dem 
Tetanusgift von ihr gebunden und unschädlich gemacht wird. Eempner 



1) Forssman, Beitr. z. Eenntn. d. Bakt. d. Botnlismus. Antoref. G. f. Bakt, 
29, 641 (1901). 

2) Brieger & Kempner, Beitrag z. Lehre v. d. Fleischvergiftung. Dtsch. med. 
Woch., 1897, 621. 

9) Kempner & Pollack, Die Wirkung des Botuliemustoxins auf die Nerven- 
zellen. Dtsch. med. Woch., 1897, 605. 

^) Marinesco, L6sionB des centres nervenx prodaites par la toxine du bac. 
botnlinns. Soc. Bioi.. 48, 31 (1896); Sem. m^d., 1896, 488. 

Oppenheimer, Toxine und Antitoxine. g 



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— 114 — 

& ScHEPiLEWSKi^) fanden^ dass Gehirn und Rückenmark beträchtliche 
Mengen Gift zn binden vermögen, und dass sich diese Eigenschaft anch 
sowohl zn Präventivinjektionen von Gehimsnbstanz, als anch zur Be- 
seitigung bereits in den Körper eingeführten Toxins bis 12 Stunden 
nachher verwenden lässt. Diese letzteren Fähigkeiten unterscheiden die 
Substanz des Zentralnervensystems von der Wirkung einiger einfacherer 
chemischen Stoffe, die zwar ebenfalls in vitro Botulismusgift binden, 
denen aber die immunisierende und heilende Kraft völlig abgeht; solche 
Stoffe sind z. B. Lecithin und Cholesterin, nicht Cerebrin. Die 
Fähigkeit der Gehimsubstanz wird durch Kochen zerstört. 

Nach Charrin & Bardier^) wirkt es auch als Herzgift. Es ver- 
langsamt die Herzaktion, und zwar schneller als Diphtheriegift. 

KempnerS] stellte dann auch ein antitoxisches Serum gegen das 
Botulotoxin her, indem er Ziegen immunisierte. Das Antitoxin wirkt 
nach dem Gesetz der Multipla. Eine Therapie kann auch hier aber nur 
binnen 12 St. einen Erfolg haben; besonders die dyspnoische Form ist 
nach FoRSSMAN der Therapie unzugänglich. Die praktische Wirksamkeit 
ist demnach hier so zweifelhaft wie beim Tetanus. 



Das Pyooyaneustoxin. 

Der Bacillus pyocyaneus, der ftlr viele Tiere sehr stark pathogen 
ist, produziert ebenfalls ein echtes Toxin. Die giftige Wirkung dieses 
Bacillus ist vielfach untersucht worden, nicht minder auch die Immunitäts- 
erscheinungen , die bei seiner Einftlhrung in den Tierkörper eintreten. 
Auch fanden sich in der Literatur zahlreiche Arbeiten über die > Giftig- 
keit« des Bacillus pyocyaneus, wobei natürlich die Giftigkeit der Leiber 
und der Filtrate nicht getrennt wurde*). Im wesentlichen ist jedoch die 
Immunität gegen Pyocyaneus eine bactericide; nicht gegen das Gift 
des Bakteriums wird im immunen Körper ein Gegengift produziert, 
sondern die Bazillen selbst gehen durch ein spezifisch auf sie einge- 
stelltes Agens zu Grunde. Wir finden also hier ähnliche Verhältnisse, 
wie bei Typhus und Cholera, auf die wir unten eingehen werden. 

Indessen liegt die Frage in einem wesentlichen Punkte anders wie 
bei der Cholera. Während nämlich hier, wie wir unten sehen werden, 
das supponierte Toxin nur sehr spärlich von den Vibrionen abgegeben 



1) Eempner & ScHEPHiEWSKi, Ueb. antitoxlBohe Substanzen geg. d. Botolismas- 
gift Z. f. Hyg., 27, 213 (1898). 

S) Ghabbin & Bardier, Action cardiaque, propri6t6 speciale de la botoline. 
See. Biol., 50, 60 (1898). 

8) Kehpneb, Weit. Beitr. zur Lehre von der FleischvergiftuDg. Z. f. Hyg., 
26, 481 (1897). 

4) Die wichtigste Litteratnr darüber s. Bretmann, Ueb. Stoffwechselprod. des 
Bac. pyocyaneus. C. f. Bakt, 31, 841 (1902). 



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— 115 — 

wird, yielmehr im wesentlichen in den Leibern selbst haftet, lässt es 
sich beim Pyocyanens fast restlos von den Leibern trennen, so dass hier 
ähnliche, sekretorische Vorgänge anzunehmen sind, wie beim Diphtherie- 
toxin. 

Wie Wassermann ^) zeigen konnte, verhält sich der Pyocyanens sehr 
eigenartig. Hänfig vermehrt er sich im Tierkörper, wirkt also infektiös, 
nnd dann treten vorwiegend die bakterioiden Schatzkräfte in Aktion. 

Andererseits aber produziert er in seinen Enltnren ein echtes Toxin, 
das sich von seiner Leibessabstanz trennen lässt, und das im Organismus 
ein echtes Antitoxin erzeugt. 

Der Pyocyaneus nimmt also eine sehr interessante Mittelstellung 
zwischen dem rein toxischen Diphtheriebacillus einerseits und den Bak- 
terien vom Choleratypus andererseits ein, bei denen auch die Immunität 
vorwiegend eine baktericide, nicht antitoxische ist, während die 
supponierten Endotoxine sich in freiem Zustande bisher nicht haben 
darstellen lassen. 

Wassermann konnte zeigen, dass sich dieses Gift fast restlos von 
den Bazillen trennen lässt, so dass die Leiber, gerade wie bei der Di- 
phtherie, so gut wie gar kein Toxin mehr enthalten ; er zeigte aber vor 
allem, dass man mit lebenden Bazillen in geringer, steigender Dosis 
eine Immunität erzielt, die sich ausschließlich auf die Bazillen selbst 
richtete, gegen das Gift ohne jeden Einfluss war. 

Andererseits gelang es ihm aber, mit dem löslichen Gift eine echte 
antitoxische Kraft zu erzeugen. Dabei war das Serum in vitro gar 
nicht baktericid; trotzdem aber war das giftfest gemachte Tier auch 
gegen die lebenden Bazillen immun, gerade wie bei der Diphtherie; 
denn die ihrer schärfsten WaflFe, der Giftwirkung, beraubten Bazillen 
sind im giftfesten Organismus harmlose Gäste, die bald zu Grunde gehen, 
ohne Schaden zu stiften. 

Wassermann zeigte damit, dass der Pyocyaneus ein echtesToxin 
produziert, das sich somit unzweifelhaft an das Diphtherie- und Tetanus- 
toxin anschließt. Es ist etwas beständiger als diese, besonders gegen 
Erhitzen. Selbst durch Kochen wird es nicht gänzlich zerstört. 

Infolgedessen zeigte sich beim Pyocyaneus eine theoretisch wichtige 
Thatsache. 

Es gelingt nämlich, aus einem neutralen Gemisch von Pyocyaneus- 
toxin und Antitoxin durch Erwärmen das Antitoxin zu eliminieren, so 
dass das vorher neutrale Serum nunmehr wieder giftig ist. Daraus er- 
hellt mit völliger Sicherheit, dass auch bei den Bakterientoxinen, wie 
Calmette schon vorher für die Schlangengifte gezeigt hatte, nicht etwa 
eine Zerstörung des Giftes durch das Antitoxin eintritt, sondern dass es 
sich nur um eine einfache Bindung handelt, die das Toxin unfähig 

1) Wassermann, Unters, ttb. einige theoret Punkte d. Immnnitätslehre. Z. 
f. Hyg., 22, 263 (1896). 

8* 



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— 116 — 

macht, sich mit seiner haptophoren Gruppe an die IZelle zn heften und 
sie zn vergiften. 

Wassermann erhielt sein Toxin durch Züchten von Pyocyaneus auf 
Rindfleischbonillon mit 2% Peptonznsatz und Sterilisieren mit Tolnol. 
Nähere Untersnchnngen des Giftes nnd seines Antitoxins stehen noch 
ans. Insbesondere besteht noch die Frage, ob das toxische Prinzip mit dem 
Pyocyaneolysin, anf das wir später eingehen werden, identisch ist, oder 
ob der Pyocyaneus, wie wahrscheinlich, wie der Tetanusbaoillus zwei 
selbständige aktive Stofife, ein Toxin und ein Lysin bildet. 

Es lässt sich durch Filtration mit CHAMBERLAND-Eerzen isolieren. 
Seme Giftigkeit lässt sich bis jetzt wenigstens mit der des Tetanustoxins 
z. B. nicht vergleichen. Wassermann fwd die Dosis letalis ftlr Meer- 
schweinchen zu 0,5 cm^. 

Die quantitativen Beziehungen zwischen Pyocyaneustoxin und Anti- 
toxin zeigen eine sehr wichtige Besonderheit. 

Das Gesetz der Multipla stimmt hier nämlich nur bis zu etwa der 
10 fach tödlichen Dosis. Darüber hinaus schützen selbst große Antitoxin- 
dosen nicht mehr. 

Wie Wassermann wohl mit Recht annimmt, folgt sowohl aus der 
relativ geringen Giftigkeit, als aus dieser begrenzten Antitoxinbildung, 
dass das Pyocyaneustoxin sekundäre, aus dem Toxin entstandene, 
nicht mehr haptoide Gifte entiiält, wie solche bei Cholera und 
Typhus bisher allein außerhalb des Tierkörpers gewonnen sind. Auch 
in dieser Beziehung würde also der Pyocyaneus eine Mittelstellung ein- 
nehmen zwischen dem relativ beständigere, echte Toxine produzieren- 
den Diphtheriebacillus und den Cholera- und Typhusbakterien. 

Die Bakterienhämolysine. 

An die echten Toxine schließen sich ganz eng diejenigen Bakterien- 
stoffe an, die eine spezifische Wirkxmg auf die roten Blutkörperchen 
entfalten, indem sie ihr Plasma so verändern, dass das Hämoglobin aus- 
tritt: das Blut also lackfarben wird. Sie sind aber von einem Blutgift 
gewöhnlicher Art, wie z. B. Phenylhydrazin n. s. w., dadurch prinzipiell 
unterschieden, dass sie physiologisch als echte Toxine imponieren, d. h. 
im Organismus Antikörper, Antilysine erzeugen. Sie schließen sich 
also einerseits an die echten Toxine, andererseits aber an die anderen 
hämolytischen Haptine: Bicin u.s.w., sowie die spezifischen Hämo- 
lysine an, die bei der Einftlhmng körperfremder Erythrocyten und in 
normalen Seris auftreten. Ob diese Lysine einfache Haptine sind oder 
vielmehr aus Amboceptor und Komplement bestehen, ist nicht sicher 
entschieden, doch spricht bis jetzt wenigstens beim Staphylolysin alles 
dafbr, dass es einfache Haptine sind (Bobdet, Ehrlich & Morgen- 
koth). 



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— 117 — 

Man kennt dieser bakteriellen Hämolysine bis jetzt genauer zwei, 
das Tetanolysin und das Staphy lolysin. Ancb andere Bak- 
terien zeigen bämolytisohe Wirkungen, doch ist es noch nicht völlig 
sicher, ob diese auf spezifische Lysine zarttckznführen sind, obgleich 
allerdings z. B. beim Colilysin Antikörper bekannt geworden sind. 
Aber es spricht gegen ihre toxinähnliche Natur vor allem die Angabe, 
dass sie bis 120^ thermostabil sind. 

Interessant ist noch der Umstand, dass die Resistenz der Blutkörper 
verschiedener Spedes gegen die verschiedenen Lysine eine auBerordent- 
lich verschiedene ist, und dass gegen jedes von ihnen die Erythrocyten 
einiger Arten eine natürliche mehr oder minder vollständige Immunität 
besitzen. 

Tetanolysin. 

Das Tetanolysin wurde von Ehrlich^) in den Kulturen des 
Tetanusbacillus aufgefunden. 

Dass es sich hierbei um ein von dem eigentlichen Tetanusgifte, dem 
krampferzeugenden Tetanospasmin verschiedenes Gift handelt, erwies 
Ehrlich durch folgende Gründe: 

Das Tetanolysin findet sich in den Kulturen und den daraus her- 
gestellten Präparaten nicht in konstantem Verhältnis zum Tetano- 
spasmin. Es giebt Giftlösungen, die reich an ersterem, relativ arm an 
letzterem sind, und umgekehrt. 

Das Tetanolysin ist gegen äußere Einwirkungen empfindlicher als 
das eigentliche Toxin. 

Das Tetanolysin bindet sich an die Erythrocyten, während das 
Ej'ampfgift von ihnen in der Lösung gelassen wird. 

In dem Maße, wie der Gehalt der Giftlösung an beiden Giften ver- 
schieden ist, enthält auch das mit diesen Giften gewonnene Antiserum 
verschiedene Relativmengen der entsprechenden Antikörper, so dass 
es bald mehr antitoxisch, bald mehr antilytisch wirkt. 

Die Untersuchung des Tetanolysins ist dann von Madsen*) im 
EHKLiCHschen Institut in gründlicher Weise vorgenommen worden, dessen 
Resultate von Kraus & Claibmont^) bestätigt wurden. 

Madsen stellte sich durch Ausfällen mit Ammonsulfat aus einer 
Tetanusbouillonkultur ein Präparat her, von dem 0,000001 g die Dosis 
letalis ftlr eine Maus darstellte. 

Dieses Gift löst die Blutkörperchen vieler Tiere; besonders empfind- 
lich ist Kaninchenblut, das zu den Versuchen in 5proz. Aufschwemmung 
in physiologischer Kochsalzlösung benutzt wurde. 



i) Ehrlich, Ges. d. Charit6ärzte, 3. II. 1898. Berl. klin. Woch., 1898, Nr. 12. 
2j Mausen, lieber Tetanolyßin. Z. t Hyg., 32, 214 (1899). 
') Kraus & Glairmont, Ueber Hämolysine und AntihSmolysine. Wien. klin. 
Woch., 1900, S. 49. 



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— 118 — 

Das Grad der Lösung wird mit Hilfe einer bekannten Blatlösnng 
kolorimetrisch gemessen. Er ist ceteris paribns abhängig von der Menge 
des zugesetzten Giftes. 

Doch sind die einzelnen Blntkörperchen verschieden empfindlich, 
auch wirkt das Tetanolysin in der Kälte viel schwächer als in der 
Bruttemperatur y während andere hämolytische Gifte diese Eigenschaft 
nicht haben. 

Das Tetanolysin ist außerordentlich empfindlich. Schon bei Zimmer- 
temperatur wird es, besonders in verdünnten Lösungen in weniger als 
einer Stunde erheblich schwächer, aber auch konzentriertere Lösungen 
verlieren bald einen Teil ihrer hämolytischen Kraft. Höhere Tempera- 
turen, schon 50^ wirken stark schädigend. Auf Eis lässt es sich 
24 Stunden unzersetzt aufbewahren, das trockene Präparat ist durch- 
aus haltbar. 

Besonders interessant ist es nun, dass es Madsen gelang, diese Ab- 
schwächung auf eine Toxoidbildung zurttckzuftlhren. 

Er verftihr bei diesen Untersuchungen genau nach den Methoden, die 
Ehrlich bei der Aufhellung der Konstitution der Diphtheriegifte 
angegeben hat, d. h. er prtiflie die Bindungsverhältnisse mit dem 
spezifischen Antikörper des Tetanolysins. Dieses Antilysin ist in den 
Antitoxinpräparaten gegen Tetanus enthalten. Madsen stellte nun zu- 
nächst eine Einheit der Giftwirkung und eine Einheit der antilytischen 
Kraft des Antikörpers fest, nach den EnBLiCHschen Methoden, wobei 
natürlich an Stelle des Tierexperimentes der Beagenzglasversuch, die 
Feststellung der blutlösenden Elraft, treten musste. 

Untersuchte er dann die Verhältnisse, wie sie sich bei der partiellen 
Sättigung des Giftes mit Antitoxin gestalten, so fand er, dass ganz 
analog wie beim Diphtherietoxin sich die Absättigung nicht gleichmäßig 
über die ganze Giftmenge erstreckt, sondern dass sich hier Zonen ver- 
schiedener Bindungskraft gegenüber dem Antilysin nachweisen lassen. 

Ein Zusatz von nur Vi3 der gesamten zur Sättigung der Gifteinheit 
nötigen Antitoxinmenge setzt die hämolytische Wirkung bereits auf die 
Hälfte herab; ein Zusatz von Y5 neutralisiert bereits '/lo des Giftes, 
von der Hälfte bereits •Vioo- 

Es folgt daraus, dass derjenige Teil des Giftes, der die größte 
Affinität zum Antilysin hat, auch der Träger der wesentlichsten Wirkung 
ist, dass dann eine zweite und dritte Zone geringerer Affinität folgt, die 
auch geringere ly tische Ej'aft hat, und dass schließlich eine Zone ge- 
ringer Affinität mit geringer Giftwirkung das Spectrum des Tetanolysins 
abschließt. 

Wir haben hier also, um uns der ftlr das Diphtheriegift aufgestellten 
Terminologie zu bedienen, eine Zone höchst wirksamen Prototoxins, 
der dann eine starke Zone weniger wirksamen Deuterotoxins (Hemi- 
toxin?) folgt, dann folgt die Zone des Tritotoxins und schließlich die 



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— 119 — 

Toxone, die nur noch auf einzelne, besonders empfindliche Erythro- 
cyten wirken und auch viel schwächer und langsamer an sie gebunden 
werden. 

In der Kälte wirken überhaupt nur Proto- und Deuter otoxin 
(Madsen 1). Neutralisiert man ein Gift so weit mit Antilysin, dass diese 
beiden Gruppen inaktiv gemacht sind, so bringt das noch frei gebliebene 
Tritotoxin selbst in den größten Mengen bei 8® keine Spur von 
Lösung hervor. 

Wie Madsen zeigt, liegt das daran, dass bei dieser Temperatur die 
toxophore Gruppe des Tritotoxins unwirksam ist, denn gebunden 
wird es auch bei dieser Temperatur an die Erythrocyten, so dass nach 
dem Abcentrifugieren einer solchen Mischung und Erwärmen eine Lösung 
eintritt. Aehnliche Verhältnisse hat Morgenroth fUr den Tetanus des 
Frosches nachweisen können (s. S. 108). 

Die Analogie mit dem Diphtheriegift zeigt sich auch weiterhin in 
der Art der Toxoidbildung. Es schwächt sich nämlich das Tetano- 
lysin sehr schnell ab, und zwar hauptsächlich wie beim Diphtheriegift 
auf Kosten der Prototoxinzone. Die Deuterotoxinzone ist relativ 
beständiger. 

Wie das Tetanusgift braucht auch das Tetanolysin, im Gegensatz 
zum Diphtheriegift, einige Zeit, und zwar mehrere Stunden, um sich mit 
dem Antitoxin zu binden. 

Seine Wirkung auf die Erythrocyten tritt ebenfalls nicht sofort ein, 
sondern erst nach einer gewissen Inkubationszeit, die mit der zunehmen- 
den Menge des Giftes abnimmt. 

Arrhenius & Madsen (L c.) haben diese Inkubationszeit genauer 
untersucht und auf die Hemmung durch die Membran zurückgeführt 
(s. im Allg. Teil). 

Nach Arrhenius & Madsen ist nun die Annahme von Giftspektren 
für das Tetanolysin in der eben ausgeführten Weise nicht unbedingt 
nötig, es lassen sich vielmehr, wie wir im Allg. Teil ausftihrlich ge- 
schildert haben, die quantitativen Beziehungen unter Annahme disso- 
ziierter Gleichgewichtszustände erklären. Ich habe trotzdem die 
MADSENSchen Untersuchungen auch in ihrer ursprünglichen Deutung^ in 
der Beziehung zu den EHRUCHSchen Spektren, referiert, weil die Frage, 
ob hier thatsächlich keine Pluralität der Gifte vorliegt, noch nicht un- 
bedingt entschieden ist. 

Dass auch die Toxoide immunisierend wirken können, wie bei der 
Diphtherie, lässt sich aus Beftinden von Tizzoni & Centanni^) schließen, 
die fanden, dass man durch Tetanospasmin, das scheinbar kein 
Lysin enthält, auch einen Antikörper gegen das Lysin bekommt. 

1) Madsen cit. n. Drbybr, Z. f. Hyg., 37, 274 (1901). 

^ TizzoKi & Centakni, Real. Accad. Bologna 1900, cit. n. Neisser & Wecbs- 
BERG 1. c. 



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— 120 — 

Sehr interessant und auch für die Frage nach der Heilwirkung 
der Antitoxine, d. h. ihrer Fähigkeit, bereits gebundenes Gift 
wieder von der angegriffenen Zelle loszureiBen, von großer Bedeutung 
sind weitere Versuche, die Madsen^) mit dem Tetanolysin angestellt 
hat; Er fand, dass durch Zusatz von Antilysin auch die bereits im 
Blutkörperchen verankerten Lysinmengen wieder losgerissen, das bereits 
angegriffene Blutscheibchen also >geheilt< werden kann. Nur wächst, 
wie bei Diphtheriegift und Tetanospasmin, die nötige Dosis sehr schnell. 
Nach 5 Min. ist bereits die doppelte, nach 15 Min. die dreifache und 
nach 30 Min. die fünffache Menge der einfach schlitzenden Dosis notwendig. 
Darüber hinaus sind genaue Messungen nicht möglich, da dann schon 
vor dem Zusatz von Antilysin eine so starke Auflösung eintritt, dass die 
Farbennuance sich nicht mehr mit Sicherheit feststellen lässt. 

Pyooyanolyain. 

Ein ähnliches blutlösendes Bakteriengift haben Bulloch & Hunter <) 
aus Pyocyaneuskulturen gewonnen. 

Sie fanden es in 8 verschiedenen Kulturen mit »fast konstantem 
Erfolg«. 

Die hämolytische Wirkung wurde auf die Blutkörperchen der ver- 
schiedensten Tierarten ausgeübt und zwar meist in Dosen von 0,5 cm' 
der nicht filtrierten, in Dosen von 1,5—2 cm* der durch Chamberland- 
Kerzen filtrierten Kultur. Kaninchenblut zeigte sich etwas resistenter. 

In sehr jungen Kulturen ist sehr wenig Pyocyanolysin vorhanden, 
das Filtrat ist so gut wie frei davon. Bei 3—4 Wochen alten Kulturen 
findet sich auch im Filtrat das Lysin, doch stets in verminderter Menge 
gegenüber der Gesamtkultur. 

Bulloch & Hunteb schließen daraus, dass das Lysin in den Leibern 
der Bazillen verankert ist und erst in älteren Kulturen frei wird. In- 
folge der Bindung an die Zellen ist es etwas vor der Zerstörung durch 
Erhitzen geschützt, sodass die Gesamtkulturen ein kurzes (15 Min.) Erhitzen 
auf 100° vertragen, während in den Filtraten das Gift durch Kochen 
schnell zerstört wird. Das Antilysin ist noch nicht nachgewiesen. 

Diese Befunde sind unmittelbar darauf von Weingeroff ^j im wesent- 
lichen bestätigt worden. Er erhielt indessen das Lysin auch durch 
Filtration der Kulturen. Marg. Breymann^) hat dann das Lysin nur 
in den Filtraten gefunden, auch bei jungen Kulturen. 

Weingeroff konnte dann direkt nachweisen, dass das Lysin sich an 

1} Madsen, Ueber Heil^ersache im Beagenzglas. Z. t Hyg., 82, 239 (1899}. 

2) Bulloch & Hunter, Ueber Pyocyanolysin. C. f. Bakt, 28, 866 (1900). 

3} Weingeroff, Znr Kenntnis des Hämolysins des Bac. pyocyan. G. f. Bakt 
29, Nr. 20 (1901). 

^) M. Brbtmann, Ueb. Stoffwechselprod. d. Bac. pyocyaneas. C. f. Bakt., 31, 
481 (1902). 



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— 121 — 

Blatkörperchen bindet, während das in derselben Lösnng befindliche Toxin 
freibKeb. Damit wäre die Verschiedenheit des Lysins vom Toxin erwiesen. 

LuBENAU^] fand ebenfalls, dass eine alte (21 Monate) Pyocyanens- 
knltor sehr intensiv hämolysierte; sie erwies sich als stark alkalisch; 
beim Neutralisieren wnrde die hämolytische Kraft merklich geschwächt, 
blieb aber erhalten. 

LoEW & EozAi^) fanden, dass Luftzutritt und Zusatz von Zucker die 
Bildung des Pyocyanolysins fördern. 

Nach Beetmann soll das Lysin thermostabil sein. 

Golilysin. 

Ein hitzebeständiges Blutkörperchen angreifendes Prinzip in den 
Kulturen des B. coli fand Kayseb^). 

Es bildet sich bei ganz schwach saurer Reaktion. Es wirkt am 
stärksten auf Hundeblut, dann folgt Pferd, Rind, Kaninchen, fast gar 
nicht wirkt es bei Mensch, Meerschwein, Schaf und bei Gans und Taube. 
Die Wirksamkeitsreihe ist von der des Staphylolysins verschieden. 

Das Gift ist in den filtrierten Kulturen vom 3. Tage an enthalten, 
nicht in den Leibern. Der Hämolyse geht keine Agglutination voraus. 
Nentralisierung der alkalischen Ktütur schwächt die Hämolyse. 

Das Lysin erträgt 120^ Vs Stunde lang ohne Schaden. Es bindet 
sich an die Erythrocyten in der Kälte wie ein echtes Toxin, beim Er- 
wärmen tritt Lösung auf Die Haltbarkeit beim Aufbewahren ist eine 
sehr wechselnde. 

Bei subkutaner Injektion entsteht im Organismus ein Antilysin, 
das bei 56° beständig ist. Auch »Heilungsversuche«, d. h. Hemmung 
bereits eingetretener Hämolyse, kann durch Antilysinzusatz erreicht 
werden (vgl. bei Tetanolysin). Auch normales Serum, besonders des 
Pferdes enthält Antilysin. 

Das Staphylolysin. 
Die Geschichte der Untersuchung der Staphylokokkengifte und ihrer 
Bedeutung weist im allgemeinen dieselben Irrgänge auf, wie die der 
Bakterientoxine in der Regel. Glücklicherweise ist hier im Gegensatz 
z. B. zu den Streptokokken durch die letzten Arbeiten Klarheit ge- 
schaffen worden. 

Von den filteren Ai'beiten haben eigentlich nur drei größere Bedeutung. 
Rodet & Coxtbmgnt^) fanden in Staphylokokkenkulturen eine durch Alkohol 



1) LuBENAu, Hämolyt. Fähigkeiten einzelner pathog. Schizomyceten. C. t 
Bakt, 30, 356. 

2) LoEw & KozAi, üeb. d. Bild, des PyooyanolysinB. Malys Jb., 31, 912 (1901). 
8) Kaysbr, üeb. Bakterienhämolysine, bes. d. CoIUysin. Z. f. Hyg., 42, 118 (1903). 
4) BonsT & CouRMOMT, De Texistence . . . dans des caltnres da staphylocoqne 

d'une snbstance vaccinante. Compt rend. de I'Acad., 113, 432 (1891). 



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— 122 — 

ftllbare immimisierende Substanz. Genauer hat sich Reichel ^) mit dem Problem 
befasst. Er konnte durch Filtration von Aureuskulturen ein spezifisches 
Gift erzielen, das freilich nicht stark toxisch war und gegen das sich Immu- 
nität erlangen ließ. 

MosNT & Mabcano 2) fanden, dass Staphylokokkenfiltrate schwach toxisch 
sind und bei Injektion ein Antitoxin erzeugen. 

Jetzt wissen wir, dass der Staphylococcus pyogenes aureus zwei 
spezifische Gifte bildet, von denen eins auf Leukocyten giftig wirkt, das 
Leukocidin, das andere ein Lysin für die roten Blutscheibchen ist. 

Auf die Existenz eines auf die roten Blutscheibchen wirkenden 
Staphylotoxins neben dem Leukocidin haben zuerst van de Velde^) 
und sodann Kraus & Clairmont^) kurz hingewiesen. Systematisch 
wurde indessen dieses Lysin erst im EHRUCHSchen Institut yon Neisser 
& Wechsberg *^) untersucht. 

Der Staphylococcus pyogenes aureus' bildet ein blutkörperchen- 
lösendes Toxin, das in Bouillonkulturen vom 3. — 4. Tage an nachweis- 
bar ist, während das Optimum ca. am 10. — 14. Tage liegt. Es entsteht 
am wirksamsten bei noch schwach saurer Reaktion der Bouillon, wenn 
Vs — V2 der zur völligen Neutralisierung notwendigen Menge Normal- 
alkali der Bouillon zugesetzt waren. Es lässt sich durch Filtration 
abscheiden. 

Die Produktionskraft der einzelnen Staphylokokkenstämme an Lysin 
ist sehr verschieden und scheint, wie auch bei den echten Toxinen, in 
keinem direkten Zusammenhang mit der Virulenz fbr den Menschen zu 
stehen. Die echten pyogenen Albus- und Aureusstämme bilden es 
zwar ausnahmslos; daneben giebt es aber zahlreiche andere nicht 
pathogene Stämme, die kein Lysin produzieren. Die Menge des ge- 
bildeten Lysins ist je nach den einzelnen Stämmen sehr verschieden, 
ebenso der Zeitpunkt, bei dem das Maximum der Lysinproduktion ein- 
tritt; nach LuBENAU^^) schwankt sie beträchtlich innerhalb weniger 
Stunden. Bei Traubenzuckerzusatz zu den Kulturen wird die Lysin- 
bildung herabgesetzt (Kayser^). 

^] Reichel, Ueb. Immunität gegen das Virus von Eiterkokken. Arch. f. klin. 
Chirurg., 42, 237 (1891). 

^ MosNT & Marcano, De Paction de la toxine du staphyL pyog. Sem. m^d., 
IS^, 544. 

8) * VAN DE Velde, ]6tude 8. 1. m^canisme de virulence du staphylococque pyo- 
göne. La cellule, X. — Ders., Contribntion a Timmunit^ des lapins contre le 
stapbylocoque. Ann. Fast, X, 580 (1896). 

4) Kraus & Clairmont, Ueber Hämolysine u. Antibämolysine. Wien. klin. 
Woch., 1900, S. 49. 

5) Neisser & Wechsberg, Ueber das Staphyiotoxin. Z. f. Hyg., 36, 299 (1901). 
0) LuBBNAü, Hämolytische Fähigkeit einiger pathogener Sohizomyceten. C. 

f. Bakt, 30, 356 (1901). 

T) Katser, Einw. d. Traubenzuckers auf Staphylococcus. Z. f. Hyg., 40, 21 
(1902). 



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— 123 — 

Das Staphylolysin entspricht den echten Toxinen in seiner Beein- 
flnssnng durch äuBere Faktoren. Während es im Eisschrank hei Earbol- 
znsatz sich meist lange Zeit unverändert hält, wird es bei 56® in 
20 Minuten zerstört, bei 48® geschädigt und verliert schon im Brut- 
schrank in wenigen Wochen seine Wirksamkeit. 

Gegen Alkalien, Säuren und Kochsalz ist es in ziemlich weiten 
Grenzen beständig; doch wirkt namentlich bei Bruttemperatur stärkere 
Alkalinität schädlich. 

Die Blutkörperchen verschiedener Tiere sind gegen dasselbe Lysin 
beträchtlich verschieden empfindlich; am empfindlichsten scheinen die 
Erythrocyten des Kaninchens zu sein, während die des Menschen, der 
Ziege, besonders aber der Gans, viel resistenter sind. Kompliziert 
werden die Verhältnisse noch durch den Umstand, dass das normale 
Serum der meisten Tierarten eine mehr oder minder ausgesprochene 
Schutzkraft gegen das Lysin ausübt, so dass man, um vergleichbare 
Werte zu erhalten, mit gewaschenen Blutscheibchen operieren muss. 
Kaninchenblut ist auch abgesehen von seiner besonderen Empfindlichkeit 
das beste Testobjekt, da das normale Kaninchenserum nur eine ganz 
minimale Schutzkraft besitzt. Auch bei demselben Blut ist wie beim 
Tetano lysin eine verschiedene Empfindlichkeit der Erythrocyten zu 
konstatieren, so dass schon schwache Lysinlösungen einige Blutkörperchen 
auflösen, während man zur völligen Lösung beträchtlich stärkere 
Giftlösungen anwenden muss. 

Das Antistaphylolyain. 

Die Schutzkraft, welche einzelne normale Sera in verschieden hohem 
Grade gegen Staphylolysin besitzen, ist auf die Gegenwart eines nur auf 
das Staphylolysin gerichteten spezifischen Antikörpers zurückzufbhren. 
Besonders das normale Pferdeserum enthält ihn bisweilen in so reich- 
licher Menge, dass schon 0,01 cm' gegen eine kompakt lösende 
Staphylolysindosis schützen« 

Das normale Pferdesemm schützt häufig auch gegen Tetanolysin. Daraus 
haben Kraus & Clairmont (1. c.) Rückschlüsse auf die Identität beider 
Lysine und ihrer Antikörper gezogen. Neisseb & Wechsbebg konnten aber 
zeigen, dass einerseits Immunsera, die gegen Staphylolysin schützen, auf 
Tetanolysin ohne jede Wirkung sind, und dass andererseits Tetanussera, die 
gegen Tetanolysin energisch schützen, unter Umständen sogar wesentlich 
schwächer gegen Staphylolysin schützen, als normales Pferdeserum. 

Das Staphylolysin zeigt sich also auch insofern als echtes Toxin, als 
es einen spezifischen Antikörper besitzt, der schon in manchen normalen 
Seris, auch im Meuschenserum, in verschiedener Menge vorhanden ist, 
und der regelmäßig sich bildet, wenn man ein Tier gegen das Lysin 
immunisiert. Man erreicht dies durch zwei- bis dreimalige Injektion von 



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— 124 — 

kleinen Dosen, bei Ziegen oder Kaninchen, subkutan oder intravenös, 
nicht intraperitoneal. 

Sehr interessant ist der Schutz, den das Lysin durch seine Bindung 
an den Antikörper findet Obwohl nämlich sein Antikörper gegen Tem- 
peraturen von 58° resistent ist, bei denen das Lysin bald zerfällt, ge- 
lingt es nicht, aus einem normalen Gemisch durch Erhitzen das Toxin 
zu entfernen, so dass freies Antitoxin zurückbleibt. 

Alle Lysine verschiedener Herkunft geben dasselbe, gegen alle wirk- 
same Antilysin, so dass es sich wohl um ein einheitliches Haptin handelt. 
Wie oben erwähnt, findet sich das Antistaphylolysin konstant im mensch- 
lichen Serum, wenn auch in sehr verschiedener Quantität. Ob es sich 
hier um Produkte der Thätigkeit von Staphylokokken oder um sensu 
strictiori normale Seitenketten handelt, ist vor der Hand nicht zu ent- 
scheiden. Doch ist das Vorkommen von Antikörpern der verschiedensten 
Art im normalen Serum etwas so häufiges, dass es den Anschein ge- 
winnt, als ob thatsächlich normale Rezeptoren eine Affinität zu den 
betreffenden Giften besitzen können, die in diesem Falle vielleicht freie, 
den Blutkörperrezeptoren ähnliche Ambozeptoren darstellen. 

Die Konstitution des Staphylolysins. 

Das Staphylolysin zeigt in seiner Konstitution groBe Analogieen mit 
dem Tetanolysin. Es ist nicht nach dem Typus der Bordet- 
EHRLiCHSchen Hämolysine gebaut; d. h. es besteht nicht aus zwei 
Teilstücken, dem »Amboceptor« und dem »Komplement« wie jene; 
denn es ist nach dem Erwärmen auf 56^, wo es inaktiviert wird, 
durch kein normales Serum und durch kein anderes Mittel zu aktivieren; 
ebensowenig erzeugt dies inaktivierte Lysin noch einen Antikörper, wie 
es bei den Hämolysinen die wärmebeständigen Zwischenkörper thun. 
Es ist also nach dem Schema des einfachen Toxins gebaut: an 
einem Kern sitzen die haptophore und die toxophore Gruppe. 
Wie bei jenen vermag sich die haptophore Gruppe schon in der Kälte 
zu verankern, ohne dass wegen der Unwirksamkeit der toxo- 
phoren Gruppe Lösung eintritt. Behandelt man Kaninchenerythro- 
cyten bei 0° einige Stunden mit Staphylolysin, so tritt keine Lösung 
ein; wäscht man nun die Erythrocyten sorgfältig ab und erwärmt dann 
auf 37^, so tritt Lösung ein. Ganz analoge Bindungs- und Wirkungs- 
verhältnisse haben Morgeneoth (1. c.) beim Tetanus des Frosches, 
Madsen beim Tetanolysin nachgewiesen. Das Staphylolysin schließt 
sich also eng an die echten Toxine an. 

Diese Analogie geht noch weiter. Auf Grund der EHEUCHschen 
Methode zur Aufstellung der Giftkonstitutionen haben Neisser & Wechs- 
BERG eine bestimmte Toxinmenge mit steigenden Bruchteilen der Anti- 
toxineinheit versetzt und so Spectra erhalten, die viele Aehnliohkeiten 



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— 125 — 

mit denen des Diphtherietoxins und des Tetanolysins zeigen. Genauer 
auf diese Details an dieser Stelle einzugehen, dttrfte sich erübrigen. 

Auch von anderen Bakterien sind Hämolysine dargestellt worden, so 
z. B. von LuBENAu (1. c.) und Kraus & Clairmont (1. c.). U. a. finden 
sich hlutlösende Agentien bei Cholera- und choleraähnlichen Vibrionen. 
Levt^) erhielt ein Lysin aus Typhuskulturen, das am besten auf 
Hxmdeblut wirkte. 

Durch Immunisieren mit Typhnskulturen konnte er ein antilytiscbes 
Serum erhalten. Das Typhuslysin ist ebenfalls wärmebeständig. Ein 
ziemlich wärmebeständiges Streptolysin hat Besr&dka ^) beschrieben. 

Es findet sich nur in jüngeren Kulturen und zeigt je nach der Art 
des Nährbodens verschiedene Eigenschaften. Es wird erst bei 70° in 
2 Stunden zerstört und ist indiffusibel. 

Es bildet unter keinen Umständen einen Antikörper, scheint also 
überhaupt kein Haptin zu sein. Aus diesem Grunde gehe ich hier 
nicht näher darauf ein. 

Ein Hämolysin aus den Kulturen des Pneumococcus ist von Casa- 
GRANDi^) beschrieben worden. Eigentümlich ist dabei, dass nur die 
nichtpathogenen Spielarten dieses Diplococcus ein Lysin bilden sollen. 
Es ist den anderen Toxinen. analog konstituiert und bildet einen Anti- 
körper. Außerdem sollen einige Stämme noch ein spezifisches Leuko- 
cidin produzieren. 

SchlieBlich sind neuerdings von Kraus & Ludwig^) spezifische 
Hämagglutinine aus Bakterienfiltraten beschrieben worden, z.B. aus 
Staphylococcus und verschiedenen Vibrionen. Sie werden bei 58° zer- 
stört und bilden spezifische Antikörper. Von den spezifischen Hämo- 
lysinen sollen sie ganz getrennt werden. 

Das Lenkocidin der Staphylokokken. 
Ganz parallel mit der Produktion von Lysin geht bei den typischen 
pyogenen Staphylococcus-Arten die Bildung eines löslichen zweiten 
Toxins, desLeukocidins, das ebenfalls von van de Velde (1. c.) ent- 
deckt und von Bail^), Neisser & Wechsberg •) genauer untersucht 
wurde. Es richtet seine spezifische Wirkung hauptsächlich auf Leuko- 
cyten, die es tötet und auflöst, sowie auch einige andere Zellen, wie 



1) E. & P. Levy, üeber die Hämolysine des Ty.-B. C. f. Bakt., 30, 405 (190J). 

2) Besbedka, De rh^molysine streptococcique. Ann. Fast, XV, 880 (1901). 

3) Casagrandi, UEmolisina e la Leucolisina Diplococcica. Bnll. Soc. Lancis. 
Born 27, 2. Bioch. Centr. I, 402 (1903). 

*) Kraus&Ludwig, üeb. Bakteriohämagglutinine. Wien. klin. Woch., 1902, 120. 

^) Bail, Ueber lenkocide Substanzen in den Stofifwechselprodnkten d. Staph. 
pyog. aureus. Arch. f. Hyg., 32, 133 (1898). 

0) Neisser & Wechsberg, Ueber eine neue einfache Methode z. Beob. von 
Schädigungen leb. Zellen und Organismen. Münch. med. Woch., 1900, 1261. 



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— 126 — 

Hämatoblasten, Ganglienzellen u. 8. w. Dadurch, dass es die Leukocyten 
auch im lebenden Organismus zu yemichten scheint, erzeugt es Nieren- 
infarkte und ähnliche Nierenveränderungen. Eine spezifische Wirkung 
auf das Nierenepithel scheint es dagegen nicht zu besitzen. Neisser & 
Wechsberg prüften seine Wirksamkeit mit Hilfe ihrer »bioskopischen 
Methode«, indem sie die reduzierende Kraft der Leukocyten als Maß 
für ihre Lebensfähigkeit benutzten. Als Loidicator diente yerdttnnte 
Methylenblaulösung. War das Leukocidin wirksam, so blieb die Ent- 
färbung des Methylenblaus aus. Dabei muss natürlich die Menge der 
vorhandenen Leukocyten mit in Rechnung gezogen werden; dies wurde 
dadurch erreicht, dass für jedes Exsudat an den lebenden Zellen die 
einfach reduzierende Dosis Lr vorherbestimmt und auf Grund dieser 
Feststellung gearbeitet wurde. 

Das Leukocidin bildet sich in Bouillonkulturen ca. vom 4. Tage 
an und erreicht etwa am 8. Tage sein Maximum. In Bezug auf den Ein- 
fluss der Alkalinität der NährbouUlon scheinen für das Leukocidin un- 
gefähr dieselben Bedingungen zu herrschen, wie für das Staphylolysin. 

Das Leukocidin tritt stets mit dem Lysin verbunden auf. Dieselben 
Stämme, die Lysin bilden, erzeugen auch Leukocidin, wenn auch durch- 
aus nicht immer in korrespondierender Quantität. Wie beim Lysin 
steigern Tierpassagen die Giftproduktion. Trotzdem ist es ein von 
dem Lysin zweifellos verschiedenes spezifisches Toxin, 
das eigene haptophore und toxophore Gruppen besitzt Das Lysin bindet 
sich nicht an Leukocyten. Es geht in die sterilen Filtrate über, 
ist also ein lösliches Gift. 

Es ist etwas empfindlicher als das Lysin. Bei 50*^ wird es in 
20 Minuten zerstört, bei 58° in 10 Minuten. Beim Aufbewahren mit 
Karbol im Eisschrank schwächt es sich sehr schnell ab, nach 16 Tagen 
um das 25 fache bis 60 fache. Schließlich wird es ganz unwirksam. 

Es wirkt ziemlich langsam, so dass man die Beobachtung auf 
2 Stunden ausdehnen muss. Dass es ein echtes Toxin ist, zeigt seine 
Fähigkeit, ein Antitoxin zu bilden. Denys & vak de Velde *) hatten 
zuerst durch Injektionen von Eultnrfiltraten ein Antileuko eidin er- 
halten. Neisser & Wechsberg fanden zunächst Autileukocidin im nor- 
malen Pferde- und Menscheuserum, nicht aber in dem des Kaninchens; 
ebenso erhielten sie durch Lnmunisierung von Kaninchen und Ziegen 
stets ein einheitliches Autileukocidin. 

Wir haben also in dem Leukocidin der Staphylokokken ein echtes, 
spezifisch auf Leukocyten wirkendes Toxin vor uns, das in seiner 
eigenartigen Wirkung bisher ein Analogon nur in dem von Casa- 
GRANDi (1. c.) aufgefundenen Leukocidin des Pneumococcus hat (s. oben). 



^) Dents & VAN DB Velde, Sur la prodaction d'ane antileucocidine etc. La 
cellnle, XI, cit n. Neisser & Weohsbero. 



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— 127 



IL Die Endotoxine. 

Das Gholeragift. 

Die Frage nach der Natur des Gholeragiftes und seiner Stellang zu 
den echten Toxinen ist noch weit davon entfernt, zn einer definitiven 
Klärung gekommen zu sein. Abgesehen von den direkten Wider- 
sprüchen in den experimentellen Resultaten, denen wir leider begegnen, 
erschwert den Ueberblick über diese Frage und vieler ganz ähnlicher, 
wie die nach dem Gift des Typhus, des Pneumococcus u. s. w., ein sehr 
wichtiger Umstand. Die früheren Forschungen über Immunität konnten 
noch nicht den fundamentalen Unterschied zwischen der antitoxischen 
und der baktericiden Immunität machen, und so hat man denn anfangs 
nie zielbewusst nach der Existenz eines Choleratoxins und -antitoxins 
gesucht. Aber auch jetzt noch ist das sehr erschwert, da zweifellos 
die Choleraimmunität im wesentlichen eine baktericide ist, und die 
antitoxische, wenn sie überhaupt existiert, außerordentlich dagegen in 
den Hintergrund tritt. Auch bei der Einimpfung toter Leiber tritt 
augenscheinlich eine rein antibakterielle Immunität ein. 

Die Geschichte des Choleragiftes beginnt mit K Koch ^), der bereits 
die Cholera als eine Intoxikationskrankheit ansah, doch gelang es ihm 
erst nach mühevollen Versuchen, eine schnelle Intoxikation, aber auch 
nur mit lebenden Bazillen zu erzielen. Dagegen erhielten Nicati & 
RiETSCH^) giftige Filtrate ohne spezifische Wirksamkeit, ebenso van 
E^MENGEM^). Dann folgten, wie überall, die Untersuchungen der aus 
den Kulturen gewonnenen löslichen, krystalloMen Stofife ptoma'inartiger 
Natur, die aber bald als nicht verantwortlich ftlr die toxische Wirkung 
der Vibrionen erkannt wurden. Auch die Toxalbumine, die Brieger & 
Fränkbl nach ihrer Methode aus Cholerakulturen isolierten, ervnesen 
sich ihnen selbst bereits als nur in geringem Maße giftig wirkende, aber 
keine spezifischen Wirkungen hervorrufende Stoffe. Speziell war 
ihr Choleratoxalbumin in Wasser unlöslich und ftlr Kaninchen ungiftig. 

Der erste Erfolg, ein giftiges und annähernd spezifisch wirksames 
Produkt aus dem Vibrio Koch zu isolieren, war Petri^) vergönnt. Er 
fand in den Peptonkulturen ein lösliches Gift, das, allerdings in ziem- 
lich großen Dosen (2cm3), Meerschweinchen unter Hypothermie und 



i) E.KOCH, Vortr. über die Cholera. Berl. klin. Woch., 1884, S. 498. — Ders., 
Zweite Conferenz z. Er ort d. Cboleraftage. Ebd., 1895, 37», S. 8. 

^ Nicati & Bibtsch, Effets toxiqnes des produitB etc. Compt. rend. de Tacad., 
99, 929 (1884). 

^ VAN Ermenoem, Sur rinocnlation des prodnits de coltiire du bacille virgnle. 
Bali Acad. m6d. belg., III, 18, 1221 (1884). 

«) Petri, UnteiB. üb. die d. d. Wachstum der Cholerabakt entstehenden che- 
mischen Umsetzungen. Arb. Kais. Ges.-Amt, VI, 374 (1890). 



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— 128 — 

anderen Erscheinnngen der Choleraintoxikation tötete. Freilich weicht 
sein »Toxopepton« insofern stark yon den echten Toxinen ab, als 
es das Kochen verträgt. Er bestätigte auch die weittragende Be- 
obachtung, die zuerst Cantani ^) gemacht hatte, dass die abgetöteten 
Leiber stets noch reichlich Gifte enthalten, so dass die filtrierte Eoltnr 
niemals die Giftigkeit der sterilisierten Gesamtkaltor aufwies. S^lempebeb^) 
fand auch, dass die toten Leiber noch giftig nnd bei Abstampfdng der 
Magensänre und Bnhigstellung des Darmes auch per os wirksam sind. 

Es folgen dann Versuche von Hijeppe^) und Scholl^) aus ana€roben Kul- 
turen in Eiern und Fällung mit Alkohol ein »Toxin« zu erhalten, die aber 
von Gbübeb & WiBNEB*^), Wesbbook«) und Dönitz') widerlegt wurden, die 
wirksame, spezifische Gifte auf diesem Wege nicht erhalten konnten. 

GamaleU^) nahm eine Duplizität von Gholeragifl;en an. Er kulti- 
vierte die Vibrionen 15 Tage m Bouillon aus Kalbsfllßen und sterilisierte 
bei 120^. Das so erhaltene Gift tötet unter starkem Temperatnrabfall 
und Lähmungen, sowie Hyperämieen der Bauchorgane. Eine Gewöhnung 
an dieses Gift tritt absolut nicht ein. Es stammt aus den Leibern 
der Vibrionen und ist nukle'inähnlich. Die Kulturen enthalten aber 
außerdem ein wärmelabiles Gift, ein Nukleoalbumin, das in den bei 
58^ sterilisierten Kulturen sich findet, während die Filtrate sehr wenig 
toxisch sind. Es bewirkt sehr heftige Durchfälle und andere cholera- 
ähnliche Symptome. 

Wassermann») fand, dass die toten Leiber in der 8 — 12 fachen 
Menge wie die lebenden Vibrionen ein Meerschweinchen unter typischen 
Erscheinungen töten. Durch Eindampfen der Kulturen und Ausfällen 
mit Alkohol erhielt er ein Gift, das in einer Dosis von 0,02 g töd- 
lich auf Meerschweinchen wirkte, aber keine antitoxische Immunität aus- 
löste. Pfeiffer & Wassermann ^ö) und Jssaepp^^) geben an, dass das 

i) Cantani, Giftigkeit der CholerabaKillen. D. med. Woch., 1886, 789. 

2) Klemperer, Ueb. kttuBtlichen Impfschutz gegen Choleraintoxikation. Berl. 
klln. Woch., 1892, 789. 

3) HuEPPB, Ueb. d. Aetiologie u. Toxikologie der Cholera asiatica. D. med. 
Woch., 1891, 417. 

4} Scholl, Unters, üb. giftige Eiweißkörper bei Cholera asiatica. Arch. f. 
Hyg., 172 (1892). 

S) Gruber & Wiener, Ueb. d. intraperiton. Cholerainfektion. Wien. klin. 
Woch., 1892, 643. 

») Wesbrook, Contrib. & T^tude d. toxines du Cholera. Ann. Fast., VIII, 318 
(1894). 

7) DÖNiTZ, Ueb. d. Verhalten d. ChoL-Vibr. im Hühnerei. Z. f. Hyg., 20, 31 (1895). 

8) GamaleYa, Becherches exp6r. snr les poisons dn chol^ra. Arch. de m^d. 
exp^r., 1892, 173. 

9} Wassermann, Unt üb. Immnn. geg, Chol, asiatica. Z. f. Hyg., XIV, 36 (1893). 

10) Pfeiffer & Wassermann, Unt üb. das Wesen d. Choleraimmnnität Z. f. 
Hyg., XIV, 46 (1893). 

11) IssAEFF, Unt. üb. d. künstl. Imm. geg, Cholera. Z. f. Hyg., XV, 287 (1894). 



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— 129 — 

Serum immnner Tiere keine Antitoxinimmunität überträgt. Elemperer^) 
fand die filtrierten Eoltoren schwacli giftig. 

Wesbrook hat dann die Frage einer weiteren Untersuchung unter- 
zogen. Er züchtete die Vibrionen auf Alkalialbuminat, das keine Biuret- 
reaktion gab. Nach 3 Wochen trat deutliche Biuretreaktion auf. 
Das durch Porzellan filtrierte Gift hatte eine ftlr Meerschweinchen töd- 
liche Dosis von 0,5 — 1,5 cm' und immunisierende Kraft. 

Er versuchte es dadurch zu isolieren, dass er das Alkalialbuminat 
durch Neutralisieren mit HCl fällte, bei 40^ das Filtrat im Vacuum 
eindampfte und unter Zusatz von etwas Alkohol dialysierte. Sowohl 
das geftUlte Albuminat, als auch die im Filtrat gebliebene Albumose 
waren toxisch. 

Auch auf eiweißfreien Nährböden nach Uschinskt erhielt er bei 
Zusatz von etwas NaOH bei reichlichem Wachstum ein Gift, das nach 
oberflächlicher Reinigung eine braune Substanz ergab, die keine Biuret-, 
nur schwache XanÜioprotelinreaktion zeigte. Sie wirkte giftig und 
immunisierend. Er schließt daraus, dass das Choleragift an die 
Eiweißstoffe nur gebunden ist, selbst aber kein EiweißkOrper ist. 

Immerhin aber fand sich dieses Gift nur spärlich in den Kulturen 
und war zudem von sehr geringer Toxizität im Vergleich zu Diphtherie- 
und Tetanustoxin, so dass Pfeiffer^} ftlr das Choleragift eine ganz 
andere Natur und Entstehungsweise proklamierte, wie fttr diese echten 
Toxine. Er vertritt nämlich die Auftassung, dass das Choleragift 
nicht ein Sekretionsprodukt der Vibrionen ist, sondern ein im 
normalen Zustand innerhalb der Leiber festgebundener Stoff (ein 
»Endotoxin«), der nur dann den Bakterienleib verlässt, wenn die Zelle 
abstirbt. So erklärt sich die relativ geringe Toxizität filtrierter Kul- 
turen gegenüber der hohen Giftigkeit der lebenden und auch, wie 
Pfeiffee nachwies, der toten Bazillen. 

Pfeiffer führt zur Bekräftigung seiner Ansicht folgende von ihm 
geftmdene Thatsachen ins Feld: 

Das keimfreie Filtrat der Bouillonkulturen ist nur etwa halb so giftig 
als die gesamte Kultur nach dem Kochen. Filtriert man die gekochten 
Kulturen, so ist das keimfreie Filtrat giftiger als vor dem Kochen. 
Kocht man dagegen das Filtrat der unveränderten Kulturen, so geht 
die Giftigkeit verloren. 

Tötet man die Vibrionen durch Chloroform oder Thymol, so bleibt 
die Giftigkeit erhalten, dagegen wirkt Alkohol und Ausfällen mit Ammon- 
sulfat schädlich. Lässt man die Vibrionen langsam eintrocknen, wobei 
sie absterben, so bleibt ihre Giftigkeit erhalten. Erhitzt man sie dann und 



1) Klemperer, Schutzimpf. d. Menschen geg. asiat. Cholera. Berl. klin. Woch., 
1892, 970. 

2) Pfeiffer, ünterfl. üb. d. Choleragia Z. f. Hyg., XI, 393 (1892). 

Oppenheiiner, Toxine and Antitoxine. 9 



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— 130 — 

filtriert die Aufschwemmnng durch Chamberland- Filter, so ist das 
Filtrat ungiftig, ebensowenig lässt es sich durch Glycerin aus den Leibern 
extrahieren. Pfeiffer nimmt ein primäres, sehr empfindliches Gift 
an*), das durch Erhitzen in ein zwar ähnlich wirkendes, aber 10 — 20mal 
schwächeres übergeftlhrt wird, das sekundäre Gift, wie es Scholl 
u. a. dargestellt haben. Aehnlich sollen sich Vibrio MetschnikoflF und 
andere Vibrionen verhalten. 

Pfeiffer 3} hält auch an seiner Auffassung fest, nachdem Ran- 
SOM^) angegeben hat, ein stark wirksames immunisierendes Cho- 
leragift aus den Kulturen dargestellt zu haben, und vorher schon 
SoBERNHEiM^) aus altcu, in ausgiebigem Zerfall begriffenen Kul- 
turen ein auch per os wirkendes Gift durch Filtration gewonnen hatte, 
das auch Immunität erzengt. Ransom selbst hatte nähere Details über 
die Bereitung seines Giftes nicht gegeben, doch hat Behring^) später 
angegeben, dass dies RANSOMSche Gift aus 6 — lOtägigen Kulturen durch 
kurzea Erhitzen auf 100°, Filtration durch PüKALL-Filter und Fällung 
mit Alkohol gewonnen wurde. 

Dieses feste Gift soll die Versuchstiere unter heftigen, choleraähn- 
lichen Erscheinungen töten. Es soll im Organismus des Versuchstieres 
eine geringe Antitoxinbildung (Festigung gegen die 4 — 6fache Dosis 
letalis) auslösen, und wäre demzufolge als echtes Toxin anzusehen. 
Dagegen spricht die Beständigkeit gegen Erhitzen, die ihm nach Ransom 
innewohnt und seine relativ geringe Giftigkeit (0,07 g des festen Giftes 
sind flir Meerschweinchen tödlich). Pfeiffer hielt demgemäß das Ran- 
soMSche Gift ftir ein sekundäres Produkt, und meint, die antitoxi- 
schen Fähigkeiten, die es auslösen soll, seien nicht höher als die des 
normalen Serums. 

Metschnikoff, Roüx & Taürelli-Salimbeni«) bekämpfen die 
PFEiFFERSche Annahme mit folgenden interessanten Versuchen: 

Sie bringen in sterile Kollodiumsäckchen 3 — 4 cm' einer Pepton- 
lösung, die sie zum Teil mit lebenden, zum Teil mit durch Chloroform 
abgetöteten Vibrionen beschickt haben, schließen die Säckchen herme- 
tisch zu und bringen sie in die Bauchhöhle von Meerschweinchen. Das 
mit toten Vibrionen auf diese Weise behandelte Tier erkrankt leicht, 

1) S. 8. Pfeiffer, Studien zar Cbolera-Aetiologie. Z. f: Hyg., XV, 268 (1894). 

2) Pfeiffer, üeber die epezifischen Antikörper der Cholera. Z. f. Hyg., 20 
217 (1895). — Derß., Ein neues Grundgesetz der Immunität D. med. Woch., 1896, 
Nr. 7 und 8. 

3) Raksom, Choleragift u. Choleraantitoxin. D. med. Woch., 1895, 457. 

4) SoBERNHEiM, Experim. Unters, üb. Choleragift nnd Choleraschatz. Z. f. 
Hyg., XIV, 485 (1893). 

^) Behring, Untersuch. Bansoms ttb. die Agglutination der Choleravibrionen. 
D. med. Woch.. 1898, 294. 

ö) Meschnikoff, Roux & Taurelli-Salimbeni, Toxine et Antitoxine chol6- 
rique. Ann. Past, X, 267 (1896,. 



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— 131 — 

während das mit lebenden vergiftete nach 3 — 5 Tagen unter typischen 
Choleraerscheinongen zu Grunde geht Die Sektion ergiebt die der 
Cholera zukommenden Veränderungen, aber in keinem Organ finden 
sich Vibrionen, wohl aber lebend in dem Säckchen. 

Einige der Tiere blieben am Leben, und zeigten nun eine erhöhte 
Resistenz. 

Das eindeutige Resultat dieser Versuche ist folgendes: 
In den Kulturen, die dieses abgeschlossene Säckchen enthält, das 
gewissermaßen das Modell einer Darmschlinge darstellt, bildet sich ein 
lösliches, durch die Kollodiumwand hindurchdiffundierendes Gift, das 
entstanden ist, während die Vibrionen in dem Säckchen kräftig ge- 
deihen. Dagegen spaltet sich aus den toten Leibern nur wenig Gift 
ab, gerade genug, um eine leichte Erkrankung hervorzurufen. 

In den Säckchen wachsen die Vibrionen zuerst vorzflglich, nehmen aber 
bald andere Formen an und vermehren sich nicht mehr; sie sind aber 
nicht abgestorben, sondern wachsen auch nach Monaten noch auf Nährböden. 
Passagen durch Tierkörper nach intraperitonealer Injektion liefern wieder 
Kulturen von hoher Virulenz. 

Sie versuchten nun auch dieses Gift aus den Kulturen der so viru- 
lent gemachten Vibrionen zu erhalten. Alte Kulturen sind relativ wenig 
giftig, sie benutzten deshalb ganz junge, von 2 — 48 Stunden bis 3 bis 
4 Tagen. 

Sie waren, filtriert, giftig mit einer Toxizität von durchschnittlich 0,3 cm^ 
pro 100 g Tier. Zusatz von Serum zur Nährflttssigkeit steigert die Toxi- 
zität, ebenso das Wachstum auf der Kultur einer Tornlaart. 

Auch das so von ihnen dargestellte Gift ist unempfindlich gegen 
Kochen, wird dagegen durch Luft und Licht bald unwirksam. Her- 
metisch abgeschlossen hält es sich lange. Alkohol und Ammonsulfat 
ftUlen es aus. Es ist ganz analog dem RANSOMSchen Gift. Durch In- 
jektion steigender Dosen kann man eine antitoxische Immunität 
herbeiftlhren, die allerdings größer ist als die des normalen Serums, 
aber doch äußerst geringwertig im Verhältnis zu Diphtherie- und 
Tetanusantitoxin. Im günstigsten Fall neutralisierte 1 cm^ die 6 fache 
tödliche Dosis! Es steht im Gegensatz zu dem baktericiden Antiserum 
Pfeiffers, das man durch Immunisierung mit toten Vibrionenleibem 
erhält, und das ohne jede neutralisierende Wirkung auf das Toxin ist. 
Das spricht dagegen, dass die toten Leiber nennenswerte Mengen des 
immunisierenden Toxins freigeben, denn sonst mtisste dies beim Frei- 
werden auch seine antitoxinbildende Kraft beweisen. 

Auch CoüRMONT & DoYON*) erhielten lösliche filtrierbare Gifte von 
freilich geringer Toxizität (4 cm» (!) Dosis letalis ftlr ein Kaninchen). Es 



1) CouRMONT & DoYON, Effets de la toxine chol6r. Aroh. de phys., 28, 785 (1896). 

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— 132 — 

bewirkt Hypothennie und Hämorhagieen sowie schlaffe Lähmungen und 
peripherische Neuritis. Es ist äußerst empfindlich gegen Licht und 
Luft. Bei 53^ sterilisierte Kulturen erwiesen sich als etwas giftiger. 

Hahn^) dagegen erhielt nach Buchiyer aus lebensfrischen Eultnren mit 
Hilfe der Zermalmung und Auspressung bei 4 — 500 Atmosphären Druck ein 
C holer aplasmin, in Gestalt einer gelbbraunen Flüssigkeit, das in Dosen 
von 0,5 — 0,6 cm* Meerschweinchen nach 8 Tagen gegen die zehnfache Dosis 
letalis schützte. Besonders interessant dabei ist, dass erstens diese Piasmine 
sehr wenig toxisch sind, und dass die von ihnen verliehene Immunität 
scheinbar eine echt baktericide ist; es ist nicht von der Hand zu weisen, 
dass hier Stoffe aus der Zelle ausgepresst und wirksam sind, welche die Ent- 
stehung von baktericiden Zwischenkörpem auslösen. Diese Frage ist prinzipiell 
von großer Wichtigkeit und wird ans besonders beim Tuberkulin (siehe 
dieses) beschäftigen. Für die Frage nach den Giften und Antitoxinen der 
Cholera sind die BucHNBBSchen Piasmine nicht zu verwerten. 

Es ist nicht ganz leicht, aus diesen scheinbar widersprechenden Ver- 
Suchsresultaten ein geschlossenes Bild von der Art und Wirksamkeit 
des Gholeragiftes zu entwerfen. 

Dazu muss zunächst die Fragestellung im Sinne unserer theoretischen 
Vorstellungen über die bakteriellen Toxine in anderer, schärferer Weise 
präzisiert werden. 

Es heißt nicht mehr: »Produzieren die Vibrionen ein lösliches 
Gift, das choleraähnliche Erscheinungen auslöst«, sondern man muss 
fragen, ob sie ein Toxin produzieren, das heißt ein Gift, das sich 
spezifisch bindet und eventuell spezifische, antitoxische Immunität 
erzeugt. 

Wenn vrir die Frage so stellen, so scheint sich aus den Resultaten 
mit einiger Wahrscheinlichkeit folgender Schluss ziehen zu lassen. 

Die Vibrionen scheinen thatsächlich ein echtes Toxin zu produ- 
zieren, das sehr empfindlich gegen alle Einflüsse ist und schon beim 
Altem der Kulturen sich weiter umwandelt in noch näher zu unter- 
suchender Weise. Jedoch zeigt dieses Toxin insofern eine wesentliche 
Abweichung von dem Diphtherietypns, als es nicht wie die Toxine 
dieser Art frei und £EU3t restlos von den Vibrionen sezerniert wird, 
sondern intra vitam von ihnen energisch festgehalten zu werden scheint 
Es liegen danach hier ganz ähnliche Eigentümlichkeiten vor, wie sie 
sich bei den echten Fermenten finden. Während z. B. die Hefezelle nur 
ein Enzym, die Hefendiastase sezerniert, enthält sie außerdem noch 
andere, z. B. die Invertase und die Maltase, die aus der lebenden 
Hefezelle nicht herausgehen, sondern erst nach dem Abtöten derselben 
oder nach der Zerreißung ihrer Membran durch Glaspulver extrahier- 
bar sind. 



^) Hahn, ImmuniBierungs- u. Heilversuche mit den plasmat Zellsäftien u. s. w. 
Münch. med. Woch., 1897, 1344. 



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— 133 — 

Außerdem enthält die Hefezelle noch die Zymase E. Büchners, 
die erst nach einer ganz gewaltigen Einwirkung durch Zerreiben und 
Auspressen mittelst hoher Drucke freigemacht werden kann. 

Ganz ähnlich yerhält sich auch das invertierende Enzym der Monilia 
Candida, das auch bei Toluolzusatz wirksam ist, aber bisher auf keine 
Weise aus dem Zellleib des Pilzes herauszubringen ist^). 

Dass auch gerade der Choleravibrio solche fest gebundenen, aber 
doch durch eingreifende Mittel isolierbaren Fermente in sich birgt, haben 
Geret und Hahn durch die Isolierung eines proteolytischen Fermentes 
bewiesen. In ähnlicher Weise scheint nun auch das Toxin fest an 
die lebende Zelle gebunden, ein Endotoxin im Sinne der Endoenzyme 
zu sein. Nach dem Absterben derselben tritt es dagegen, zum Teil 
wenigstens, gerade wie bei der Hefeninvertase in die Medien über, so 
dass, wie Pfeiffer gezeigt hat, durch Thymol u. s. w. oder Austrocknen 
getötete Kulturen ihre volle Giftigkeit kund geben ; dass das Toxin aber 
beim Absterben der Vibrionen wirklich frei, in dem Medium gelöst 
und difihindierbar wird, das zeigen wieder die Versuche von Metsch- 
NiKOFF, Roüx & Taurelli-Salimbeni, dass sie aus den mit lebenden 
Vibrionen beschickten EoUodiumsäckchen heraus ihre Giftwirkung ent- 
falten. Denn zweifellos wird bei dieser Versuchsanordnung, dem üppigen 
Wachstum auf beschränktem Nährboden, dem Neubildungsprozess von 
Vibrionen ein Absterbungs- und Zerfallsprozess parallel gehen. Und 
da nun hier das Toxin sofort nach dem Entstehen, geschützt vor jeder 
schädlichen Einwirkung, seine Wirksamkeit auf den Organismus ent- 
falten kann, so werden wir in diesem Fall eine Wirkung des primären, 
echten Choleratoxins mit einiger Wahrscheinlichkeit annehmen können. 
Wahrscheinlich wird dieses supponierte echte Toxin auch bei der wirk- 
lichen Choleravergiftnng im lebenden Organismus wirksam sein. Und 
dieses Toxin soll dementsprechend auch eine antitoxische Reaktion 
im Organismus auslösen. Dass diese so geringftlgig ist, darf nicht 
wundernehmen, denn erstens kann die Menge des so frei gewordenen 
Toxins nur sehr gering sein, so dass ein hoher Immunisierungsgrad 
nicht zu erwarten ist, und außerdem misst man diesen Grad der anti- 
toxischen Wirkung dann an einem fertigen Gift; das sekundär verändert 
ist, und wie wir unten sehen werden, wahrscheinlich viele Toxoüde ent- 
hält, so dass die antitoxische Kraft des Serums dadurch als zu klein 
erscheinen muss. Beim Absterben und Zerfallen geben also die Cho- 
leravibrionen einen Teil ihres Endotoxins an die Medien ab; dass sie 
aber einen anderen, größeren Teil auch dann noch festhalten, wie die 
Hefe die Zjnmase, ist sehr wahrscheinlich. 



1) Näheres über dieie »Endoenzyme« siehe in meinem Bache: »Die Fermente 
und ihre Wirkungen«, II. Aufl., Leipzig 1903. 



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— 134 — 

Vielleicht gelingt es nach dem Verfahren von Conbadi^), das dieser 
an Typhusbazillen erprobt hat, nämlich dnrch die aseptische 
Autolyse, das primäre Gholeragift darzustellen. 

Dieses primäre Gift, ein echtes Toxin, ist außerordentlich sensibel, 
auch darin der Zymase gleichend, und deshalb nur unter so günstigen 
Bedingungen in voller Wirksamkeit zu demonstrieren, wie es Mbtsch- 
NiKOFF u. s. w. in dem oben geschilderten Versuche gethan haben. 

Sonst entzieht es sich der Beobachtung: abgetötete Kulturen werden 
nur noch sehr wenig davon enthalten, und so erklärt sich der Miss- 
erfolg, es als chemischen Stoff zu isolieren und auch die nur geringe 
Giftwirkung der mit toten Leibern beschickten Eollodiumsäckchen. 

Mit der Schwächung der Vitalität der Zelle schwächt sich auch ihr 
Gehalt an echtem Toxin sehr schnell, und so findet man denn in ab- 
getöteten, oder in alten Kulturen fast nur noch jenes sekundäre, 
hitzebeständige Gift, das die verschiedenen Autoren beschrieben 
haben. Dies ist sicherlich kein echtes Toxin mehr, da es das Kochen 
verträgt und relativ wenig giftig ist. Auch dieses Gift wird nur wenig 
sezemiert, aber es ist wenigstens so beständig, dass man es wirklich 
darstellen kann, getrennt von dem Zellleib der Vibrionen. Er hat eben, 
falls noch eine geringe antitoxinbildende Kraft; es zeigt also alle 
Charaktere, die den EHRLiCHschen Toxoiden zukommen: stark ver- 
minderte Giftigkeit, größere Beständigkeit und Fähigkeit, 
Antitoxin zu bilden und zu binden. 

So können wir aus dem Gesagten mit einiger Wahrscheinlich- 
keit den Schluss ziehen, dass der Choleravibrio primär ein echtes 
Toxin und zwar ein der Hefeninvertase vergleichbares Endotoxin, 
das er intra vitam kaum in die umgebenden Medien sezemiert, er- 
zeugt, dass dieses Toxin außerordentlich labil ist und sehr leicht in 
eine sekundäre toxo'idreiche Giftmischung übergeht. 

Daneben ist es freilich sehr wahrscheinlich, dass auch der Cholera- 
vibrio außer diesen, von ihm sehr widerwillig sezemierten Giften noch 
in seinem Protoplasma, wie wohl alle Bakterien, ein einfaches, nicht 
spezifisches Bakterienprote'in enthält, das entzündungserregend 
wirkt, wie auch das z.B. des Diphtheriebacillus. Nur kann man 
hier die enzymatischen Gifte nicht so quantitativ entfernen, wie bei der 
Diphtherie, so dass eine objektive Entscheidung, ob hier neben den 
spezifischen Giften noch ein solches giftiges Protein enthalten ist, schwer 
zu erbringen ist. 

Das Gholeraantitoxin. 

Wir haben in dem eben Gesagten auseinandergesetzt, dass es wahr- 
scheinlich ein in geringer Menge antitoxinerzeugendes Choleratoxin giebt 

1) CoNRADi, Ueber lösliche, durch Antolyse erhaltene Giftstoffe. D. med. 
Woch., 1903, Nr. 2. 



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— 135 — 

Freilieb ist der hierfUr ausschlaggebende Nacbweis, dass das Serum 
der Versuebstiere eine antitoxiscb wirksame Substanz entbält, durch- 
aus nicht einwandsfrei erbracht. Solange aber das Choleraantitoxin in 
den Eörperflüssigkeiten nicht wirklich nachgewiesen ist, muss die ganze 
Frage, ob der Vibrio Koch ein echtes Toxin produziert, als eine offene 
angesehen werden. 

Die Frage, ob das Serum der Versuchstiere antitoxische Immunität 
verleiht, fällt nicht unbedingt mit der theoretisch allein wichtigen 
zusammen, ob es nicht doch Antitoxin enthält. Dieses Antitoxin 
könnte einerseits sehr unbeständig sein, es könnte andererseits bei seiner 
geringen Menge und der großen Verdiinnung bei der Einflthrung in den 
Tierkörper unwirksam sein. So sind die negativen Resultate, die 
Pfeiffer, Kolle, Wassermann, Issaepf u. a. an Versuchstieren, 
Lazarus^) an Cholerarekonvaleszenten erhielt, auch dann noch zu ver- 
stehen, wenn es wirklich ein Choleraantitoxin giebt, wofür ein Beweis 
bisher allerdings nicht erbracht ist 

Das Typhusgift. 

Fast genau dasselbe, wie beim Choleragift, hätten wir vom Typhus 
zu berichten, nur ist das experimentelle Material hier weitaus geringer 
und die Frage nach der Existenz eines Toxins und Antitoxins noch nicht 
über die ersten Anfänge hinaus. 

Sicher ist nur, dass der Typhus unter Umständen eine echte In- 
toxikationskrankheit sein kann, dass also die Bakterien ein wirksames 
Gift produzieren müssen. Andererseits ist es aber ebenso sicher, dass 
die Immunität gegen Typhusbazillen im wesentlichen gerade wie bei 
der Cholera nicht eine antitoxische, sondern eine baktericide ist, 
und eine antitoxische Immunität, wenn überhaupt, nur in geringer Be- 
deutung existiert. 

Auch hier beginnt die Geschichte der Giftforschung mit den Arbeiten 
BniEGEBS, der zuerst das Typhotoxin^j und späterhin sein Toxalbumin 
darstellte. 

Diese und ähnliche Präparate sind nicht das spezifische Typhnsgift. 

Dagegen sind, wie zuerst Beümer & Peiper^], dann Chantemesse & 
WiDAL*) fanden, die bei 100 bis 120° un Autoklaven sterilisierten Kul- 
turen giftig, und zwar in der 5 — 6 fachen Dosis der lebenden; sie sind 
um so giftiger, je älter sie sind. 

1) Lazarus, Ueb. antitoxische WirkBamkeit des BlntBemms. Berl. klin. Woch., 
1892, 43/44. 

^ Brieoer, Weiteres über Ptomaine. Berlin 1885. 

3) Beümer & Peiper, Bakt Stud. üb. Typhusbaz. Z. f. Hyg., II, 110 (1887). 

^) Chantemesse & Widal, L'immanit^ contre le virus de la fi^vre typhoide. 
Ann. Fast, II, 1888, 54. — Der s., it. exp^rim. etc. de Tinfection typhiqne. Ibid., 
VI, 765 {1892). 



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— 136 — 

Lösliche Gifte haben Brieger, Kitasato & Wassermann (1. c.) durch 
Erhitzen auf 80 — 90° und Fällen mit Alkohol erhalten, ebenso beim 
Einengen der Kulturen bei 37° und Fällen mit Alkohol. Es wirkte 
schwach toxisch und immunisierend. Filtrate erwiesen sich als absolut 
unwirksam. SmonNiN^) erzielte ein spezifisch (?) wirksames Gift 
durch Filtration, was von Pfeiffer & Kolle*) durchaus geleugnet 
wird. Bitter 3) durch Extraktion mittels konz. Glycerins und Ein- 
dampfen im Vacuum bei 36°. 

Sanarblu^) hat sehr giftige Typhuskulturen, die mehrfach durch 
intraperitoneale Einimpfung in Mäuse giftiger gemacht waren, auf Gly- 
cerinbouillon einen Monat bei 37° gezüchtet und sterilisiert; aus ihnen 
erhielt er durch mehrtägige Mazeration bei 60° ein sehr schwaches, 
beim Meerschweinchen und Affen spezifisch auf die Schleimhäute 
besonders des Darms wirksames lösliches Gift Die tödliche Dosis ftlr 
Kaninchen betrug 10 cm^ pro kg. Die Erscheinungen boten aber 
bei diesem Tier nichts Spezifisches. 

Rodet '^j fand in filtrierten Typhuskulturen eine geringe Toxizität 
mit Temperatursteigerung und lokalen Nekroseerscheinungen ; die Leiber 
sollten kaum mehr giftig sein. Besonders wichtig sind die Angaben 
von Chantemesse®), der auf einem Milzextrakt, der durch Pepsin 
angedaut und wieder neutralisiert war, ein sehr energisch wirksames 
Typhustoxin erhielt, das sich an der Luft schnell zersetzt. Auch hier 
finden wir wieder dieselbe Angabe wie bei der Cholera, dass das Gift 
bei 100° nicht völlig zerstört, d. h. also wohl in eine weniger giftige, 
aber beständigere Modifikation übergefiihrt wird. Möglicherweise handelt 
es sich auch hier um Toxolde. 

Es bewirkt bei empftlnglichen Tieren Erschlaffung, Lähmungen, ferner 
besonders bei intravenöser Injektion Pulsbesdüeunigung und Sinken des 
Blutdruckes. 

Per OS ist es unschädlich. 

Hühner und Tauben sind fast refraktär, andere Tiere sehr verschieden 
empfänglich. Kaninchen sind dreimal empfindlicher als Meerschweinchen. 

Auch Martin^) fand in filtrierten Typhuskulturen lösliche Gift«; er 



1) SmoTiNiN, Die üebertrag. von Typhusbazillen auf Versuchstiere. Z. f. Hyg., 
I, 465 (1886). 

2) Pfeiffer & Rolle, Ueb. d. spez. Reaktion d. Typhusbasillen. Z. f. Hyg., 
21, 203 (1896). 

8) Bitter, üeb. Festig, v. Versuchstieren geg, d. Intoxikation durch Typhus- 
baziUen. Z. f. Hyg., XII, 298 (1892). 

^) Sanarelli, :ätudeB sur la fiövre typhoide exp^rim. Ann. Fast., VIII, 193 (1894). 

^) EoDET, Sur les propriet^s toxiques des cultures des baciUes d'Ebert. Soc. 
Bio!., 50, 774 (1898). 

0) Chantemessb, Toxine typhoide soluble. Frogr. m6d., 1898, 245. — Ders., 
Lösliches Typhustoxin. Wien. med. Blätter, 1898, 18flf. 

7) Martin, Die ehem. Frod. path. Bakt. Wien. med. Blätter, 1898, Nr. 25£ 



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— 137 — 

nimmt an, dass das in den Leibern haftende mit diesem identisch ist. 
Er züchtet die Bazillen anf einer Alkalialbaminat enthaltenden Bouillon, 
die er auch zum Teil ans Milzextrakten gewann. 

Die Kollodiumsäckchenmethode ist mit sehr geringem Erfolg von 
Rodet & Güächopp*) angewendet worden. 

CoNBADi^) erhielt Typhusgift durch aseptische Autolyse der Ba- 
zillen, indem er dieselben in 0,8 proz. Na Gl aufschwemmte und höchstens 
48 St. in den Brutschrank stellte. Er gewann auf diese Weise ein ge- 
löstes, zellfreies Gift, das in einer Dosis von 0,2 cm' ein Meerschwein- 
chen in 24 St. tötete. 

Diese Methode und auch die von Macfadten & Bowland ') bieten 
ftlr die zukünftige Entwicklung großes Interesse. Macfadten zerreibt 
die Bakterien bei der Temperatur der flüssigen Luft und erhält so 
akut wirkende Gifte, die nach seiner vorläufigen Angabe auch anti- 
toxische Immunität verleihen. 

Ob nun diese löslichen Gifte echte Toxine resp. Toxoide sind, d. h. 
ob sie Antitoxine im Körper bilden, ist noch zweifelhafter wie bei der 
Cholera. Pfeiffer & Kolle leugnen die Sekretion eines frei gelösten 
Toxins und die Antitoxinbildung völlig, Bitter nimmt eine geringe 
Antitoxinerzeugung an. Dagegen fand Ghantemesse eine deutliche und 
energische Antitoxinproduktion nach Injektion seines Typhustoxins, 
speziell beim Pferde. 

Wir haben also wie bei der Cholera ein sehr fest an die Bazillen- 
leiber gebundenes Gift, das schwer herauszubringen ist Die theore- 
tischen Vorstellungen müssen sich also mit allem Vorbehalt denen, die 
wir beim Choleragift gegeben haben, nähern, dass also ein Typhus- 
endotoxin vielleicht existiert, aber kaum frei sezemiert wird, und dass 
die dargestellten Gifte stark veränderte sekundäre Gifte sind. 

Bacterium coli. 

Angaben, dass der Colibacillus ein Toxin produziert, sind scheinbar 
nur die von Babba-Morrihy^), die mir nur in dem sehr kurzen Referat 
zugänglich waren, wo über die Natur des Giftes gar nichts angegeben ist ; 
und die von Rodet, der sie gleichzeitig auch beim Typhus fand 
(s. dort). Nach den Angaben von Martin (1. c.) scheinen sich der 



1) BoDET, A. & G. Gu^CHOFF, Versuche, die Methode der KoilodiomBäckchen 
auf die Eenntnis der toxlBchen Produkte des Eberthschen BaciUaB und des B. 
coli anzuwenden. Soc. Bio!., 52, 962, 966 (1900). 

3) GoNRADi, Ueber IMiche, dnrch aseptische Autolyse erhaltene Giftstoffe. D. 
med. Woch., 1903, Nr. 2. 

3) Macfadten & Bowlakd, An intracellolar toxin of the typhoid-baciUoB. 
Proc. Boy. Soc, 71, 77 (1902), femer C. f. Bakt, 34, 618 (1903). 

*) Barba-Mobriht, Baurogartens Jb., 1897, 4ßß, 



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— 138 — 

Colibacillus und ebenso der BacilluB enteritidis Gärtner in ihrer 
Giftproduktion ganz analog dem Typhasbacillas zn erhalten. 

Aus dem Zellkörper erhielt durch Erhitzen mit 1 ^ HjS04 Vaughan^) 
einen giftigen Stoff, der aber jedenfalls kein Toxin ist 

üeber das Colilysin s. o. 

Euhr. 

Die Methode der aseptischen Autolyse hat Conradi (1. c.) die 
Darstellung eines löslichen Rnhrgiftes ermöglicht. 

Durch 18 sttindige Autolyse erhielt er Gifte, die zu 0,1 cm^ intravenös 
große Kaninchen töteten. 

Es trat heftiger Durchfall ein, dann Kollaps, Lähmungen, Temperatur- 
abfall u. s. w. 

Bei chronischer Vergiftung durch kleinere Dosen traten auch Darm- 
geschwüre und das ganze pathologisch-anatomische Bild der Ruhr auf. 

Das Festtozin. 

Auch der Pestbacillus bildet lösliche Gifte, deren Zugehörigkeit zu 
den echten Toxinen noch zweifelhaft, aber wahrscheinlich ist. 

Die Filtrate ganz junger Kulturen sind nach den übereinstimmenden 
Angaben der Deutschen Kommission 2), Webnicke'), Albrecht & 
Ghon*) ohne toxische Wirkung. 

Dagegen tritt bei älteren Kulturen (schon vom fünften Tage ab) 
Giftwirkung auf, die mit dem Alter zunimmt. Der Tod erfolgt unter Ab- 
magerung und Degenerationserscheinungen an der Leber, sowie Herz- 
schwäche. Am ausführlichsten hat Markl das Pesttoxin untersucht 

Mabkl^) fand zunächst auch mit Chloroform abgetötete Bazillenleiber 
sehr toxisch, ging dann aber dazu über, Filtrate von Bouillonkulturen 
zu verwenden, die sich sämtlich als giftig erwiesen. 

Die Giftigkeit war besonders in alten Kulturen eine hochgradige, 
wenn dieselben bei niederer Temperatur gewachsen waren (ca. 20°), und 
nahm bis ungefähr zum zweiten Monat zu, um dann nicht mehr zu 
steigen, dann abzunehmen, bis schließlich das Toxin verschwindet Sehr 
nötig ist reichliche Lüftung der Kulturen. 

Bruttemperatur wirkt schädlich auf die Toxine. 

Die Dosis letalis der wirksamsten Gifte betrug für Mäuse 0,006— 
0,01 cm»; für Ratten ca. 0,1 cm». 



^) VauohaN) The intracellnlar tozins of some of the pathogenic baet Joum. 
Amer. med. asBOC., 1903, p. 828. Bloch. Gentr., I, Nr. 1056. 

3) Bericht der deutschen Pest-Comm. Arb. Kais. Ges.-Amt, 16 (1899). 

3) Webmicke, Ueb. Immun. Vera. b. d. Benlenpest C. f. Bakt, 24 (1898). 

4) Albrecht & Ghon, Bakt Unters, ttb. d. Pestbao. Wiener Akad., 66 (1898). 
^) Markl, Beitrag z. Kenntnis der Pesttoxine. 0. f. Bakt, 24, Nr. 18/20, 1898. 

(Utteratnr). — Ders., Weit. Unters, üb. Pesttoxine. Z. f. Hyg., 37, 401 (1901). 



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— 139 — 

Bei diesen Tieren verläuft die Vergiftung schnell unter EoUapser- 
seheinungen ohne anatomischen Beftind, außer fettiger Metamorphose der 
Leber; bei Kaninchen und Meerschweinchen verläuft sie nur bei sehr 
großen Dosen ähnlich, sonst mehr protrahiert, in mehreren Wochen; es 
bildet sich zuweilen ein Milztumor und Pigmentatrophie der Leber aus. 
Bei einer Katze beobachtete er neben Marasmus Ausfallen der Haare 
und ausgedehnte Hautnekrosen. Bei Meerschweinchen Schüttelfrost und 
enormes Sinken der Temperatur (25°). 

Das Gift ist sehr empfindlich. Schon bei gewöhnlicher Temperatur 
verlieren die Lösungen schnell an Giftwert, rascher bei hoher Sommer- 
temperatur (25°), sofort bei 70°. Zwar bleiben die so erhitzten Filtrate 
für Meerschweinchen und Kaninchen in großen Dosen toxisch, doch in 
ganz anderer Weise, wohl durch Toxoi'dbildung. 

Markl hat auch versucht, das Pesttoxin zu reinigen, doch sind seine 
Versuche (Alkoholfällung) nicht über die allerersten Anfänge hinaus- 
gelangt. Er fand, dass es, wie alle echten Toxine, an den Eiweißstofifen 
hängt. 

Es dürfte sich hauptsächlich um sekundäre Gifte handeln, welche in 
solchen alten Kulturen vorhanden sind. Sie zeigen eine wenn auch 
geringe Antitoxinbildung. 

Auch KossEL & VERBECK 1) konnten mit Kulturfiltraten, die auf 60° 
erwärmt waren, eine Immunität erzielen. 

Das Fneumotoxin. 

Sehr ähnlich, wie bei Cholera und Typhus, scheinen die Dinge bei 
dem Pneumococcus , dem Erreger der krupösen Pneumonie zu liegen. 

Die ersten wichtigen Versuche, uns über das Gift dieses Diplococcus 
zu informieren, haben die Gebrüder Klemperer^) angestellt. 

Sie haben zwar auch mit abgeschwächten oder getöteten Kulturen, 
die aber die Leiber der Kokken noch enthielten, experimentiert, um 
Immunität zu erzielen; sie haben aber auch keimfreie Lösungen dazu 
benutzt. 

Dazu dienten ihnen einerseits einfache Kulturfiltrate, femer aber auch 
ein eitriges Pleuraexsudat, das durch den Pneumococcus veranlasst, aber 
bei der Aussaat keimfrei war, sowie erhitztes pneumonisches Sputum 
und Glycerinextrakte von Agarkulturen , die keimfrei filtriert wurden. 

Sie erhielten dabei ziemlich schwach wirksame Giftstofife, die keine 
spezifische Wirksamkeit ausübten; durch Erwärmen auf 60° konnten 



1] KossEL & OvERBECK, BaktOF. Unters, über Pest. Arb. Eaiserl. Ges.- Amt, 
18 (1901). 

^ G. & F. EIlempeber, Vers, über Immanisiening n. Heilung bei der Pneumo- 
kokkeninfektion. BerL klin. Woch., 1891, Nr. 34/35. — G. Elemperer, Die Bezieh, 
versch. Bakteriengifte z. Immunität n. Heilnng. Z. f. klin. Med., 20, 165 (1892). 



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— 140 — 

sie die Giftigkeit fast ganz beseitigen, ohne die immunisierende Kraft 
aufznheben ; das Serum der Versuchstiere enthielt ein spezifisches Anti- 
toxin, das in vitro und bei vorheriger Injektion das gelöste Gift paraly- 
sierte. Toxizität und Antitoxinbildung bleiben freilich in geringen Grenzen. 

Ganz ähnlich sind die fast gleichzeitigen Resultate von Foa & Cab- 
BONE^) ond ScABiA^), die ebenfalls mit keimfreien Filtraten und mit 
Glycerinextrakten des pneumonischen Blutes antitoxische Immunität er- 
zeugen konnten. Auch Belpanti*) erzielte mit keimfrei filtriertem Aus- 
wurf eine freilich sehr geringe Immunität. 

Fol gelang es auch, durch Fällung mit Alkohol oder mit Ammon- 
sulfat das immunisierende Prinzip abzuscheiden. 

Pake 4) fand die filtrierten Kulturen sehr schwach giftig. Wash- 
BOURN ^) giebt an, dass er mit filtrierten Kulturen ebenfalls immunisieren 
konnte. 

Isaepp «) fand, dass Pneumokokken auf den gewöhnlichen Nährböden 
nur wenig toxische Produkte bilden, wohl aber kann durch häufige, 
mindestens zwölftnalige, Passagen durch Kaninchen die Toxizität be- 
trächtlich erhöht werden. Aus dem Herzblut solcher Kaninchen erhielt 
er durch Zusatz von 1 % Glycerin und etwas Natriumkarbonat und Fil- 
tration durch CHAMBERLAND-Filter ein Gift, das zu 1^ des Körperge- 
wichtes Kaninchen tötet, bei 70° stark geschwächt, bei 100° vernichtet 
wird. Durch Erhitzen sterilisierte Peritonealflttssigkeit solcher Tiere 
wirkt stark toxisch^ aber nicht tödlich. Obwohl auch er durch keim- 
freie Filtrate etwas Immunität erzielte, giebt er doch an, dass er absolut 
keine antitoxische Immunität beobachten konnte, sondern ausschließ- 
lich eine antibakterielle. 

Mennes^) erhielt Toxine, die in großen Dosen unter Fieber, Diarrhöen 
und Gewichtsabnahme zum Tode ftlhrten; durch Einimpfung von bei 
56° geschwächten Kulturen vnll er eine antitoxische Immunität erzielt 
haben; das Serum soll in vitro das Toxin neutralisieren. 

Caenot®) konnte durch intrapulmonale Injektion von 2 — 6 Tropfen 
Pneumotoxins eine typische krupöse Pneumonie um die Injektions- 



1) FoA & Carbonb, SoUa immunitä verso il diplococco pneumonico. Gazz. med. 
di Torino, 1891, 1. (C. f. Bakt, X, 768.) 

2} FoA & ScABiA, Sulla immnnit& della puhnonite. Ibid., 1S92, 13/15. C. f. Bakt, 
XI, 616. 

3) Belfakti, Sulla immuniBazione per mezzo di filtrati di spnto pneamonico. 
Rif. med., 1892, 126. C f. Bakt, XII, 401. 

4) Pake, üeber d. Heilkraft d. antipneumon. Serums. C. f. Bakt., 21, 664 1897}. 
&) Washbourn, Experiments with the pnenmococcnB. Joum. of path., III, 142. 

Banmg. Jahresb., 1895, 62. 

6) IssAEFP, L'immnnit^ contra le pneumocoqne. Ann. Fast., VII, 259 (1893. 

"7) Menkes, Das Antipneumokokkeniernm. Z. f. Hyg., 25, 413 (1897). 

8) Carnot, Reprod. exp^rim. de la pneumonie fibiinense. Soc. Biol., 51, 927 
(1899). 



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— 141 — 

stelle erzeugen. Carnot & Foubnier^) konDten Pneumokokken lange 
lebend and virulent erhalten, wenn sie als Nährboden Blut, Serum, oder 
noch besser frische Gehimsubstanz, weniger gut daraus hergestellte 
sterilisierte Nährböden verwendeten. Sie ließen die gebildeten Toxine 
sofort abdialysieren, und bekamen so toxische Dialysate, die sie durch 
Einengen im Vacuum oder durch Ausfällen mittelst Calciumphosphat 
in statu nascendi konzentrierten. Die Erscheinungen waren der Ver- 
giftung mit lebenden Kokken ähnlich. Dieselben >) fanden bei ihrem 
Gift eine sehr intensive Wirkung auf die Muskulatur des Herzens und 
der Gefäße; es treten schon nach kleinen Dosen sehr intensive Ent- 
zündungen und Rupturen auf 

Nach alledem ist die Existaiz eines sezemierten echten Pneumotoxins 
nicht sicher festgestellt. 

Das Qonokokkengifk. 

Auch der Gonococcus erzeugt ein Gift, das sich an die Gruppe 
der Cholera-Typhusgifte insofern anzuschließen scheint, als es nur wenig 
in die Eulturflttssigkeiten übergeht, vielmehr im wesentlichen an die 
Zellen gebunden bleibt, und wahrscheinlich erst bei ihrem Zerfall in 
geringer Menge in die flüssigen Medien gelangt. Die ersten Mitteilungen 
über dieses Gift machte A. Wassermann ^j. 

Es gelang ihm, die Gonokokken auf einem Nährboden zu züchten, 
der Peptone und Serumalbumin als notwendige Bestandteile enthielt, 
und den er unter Zusatz von 2 ^ Nutrose aus Schweineserum herstellte. 

Während er nun konstatierte, dass der lebende Gonococcus, in phy- 
siologischer Kochsalzlösung aufgeschwemmt, gar keine Virulenz für die 
Versuchstiere besitzt, zeigte die sterilisierte Kultur eine ziemlich ener- 
gische Giftwirkung, die bei intraperitonealer Einverleibung die Tiere 
durch Peritonitis tötete, aber auch z. B. an den Augen Hypopyonkera- 
titis u. s. w. erzeugte. 

Das Filtrat soll sehr wenig toxisch sein. Man nimmt daher an, dass 
das Gift ganz analog wie bei der Cholera sich in den Leibern vorfindet. 

Auch die Resistenz gegen Erhitzen, selbst zum Sieden teilt es mit 
den sogenannten Choleragiften. 

Ganz ähnliche Befunde erhob unabhängig von Wassermann Nico- 
LAYSEN'^), der durch sterilisierte, nicht filtrierte Kulturen eine purulente 
Gonitis bei den Versuchstieren erzeugen konnte. 

1) Gabnot & Fourmier, Sor le pneomocoque et ses toxines. Aroh. m^d. exp6r., 
1900, 357. 

2] Carnot & Fournier, L^bIoiib oardiaques et moBcalaireB par la toxine 
pnenmon. Soc. BioL, 52, 143 (1900). 

3) A. Wassermann, Gonokokkenkoltur und Gonokokkengift Berl. klin. Woch., 
1897, 685. — Weitere Mitteilongen über do. Z. t Hyg., 27, 298 (1896). 

4) Nicolatsen, Zur Pathogenität und Giftigkeit der Gonokokken. C. f. Bakt, 
22, 305 (1897). 



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— 142 — 

Er fand die tödliche Dosis fttr die Maus zu 0,3 cm'. Aach er ist 
der Ansicht, dass das Gift in den Leibern festsitzt. Er konnte es durch 
Auslaugnng mittelst destilliertem Wasser oder schwacher Natronlauge 
nicht daraus extrahieren. 

Fast gleichzeitig gelang es Schäffer^) aus einer viertägigen, auf 
Ascites-Fleischwasser gezüchteten Kultur ein Gift zu gewinnen, das 
nach Filtration durch Porzellanfilter auf der ürethralschleimhaut 
heftige eitrige Entzündungen erzeugt, die schnell vorübergehen. Zu der- 
selben Zeit hat sich Chmstmas*) mit der Frage des Gonotoxins be- 
schäftigt. Er gewann aus 10—15 Tage alten Ascites-Bouillonkulturen 
durch keimfreie Filtration ein Gift, das er durch Ausfällen mit Alkohol 
konzentrieren konnte. Auch durch Eindampfen der Kultur mit Glycerin 
bei 50° gewann er ein Gift. 

Es ist bei 50—70° beständig, und lässt sich im Dunklen durch 
6 Monate lang aufbewahren. Es wirkt heftig toxisch auf Versuchstiere, 
indem es außer lokaler Entzündungserregung durch Kachexieen zum Tode 
ftlhrt. Auf die ürethralschleimhaut wirkt es nur beim Menschen. 

Christmas 3) hat später die Frage von neuem aufgenommen. Die 
lebenden Gonokokken enthalten Gift, dagegen liefern die toten Leiber 
bei der Mazeration bei 20° kein Gift. Er züchtete die Gonokokken auf 
einem Nährboden von 75 ^ Ascites und 25 % Bouillon. Dann filtriert 
er durch Talk auf Filtern oder durch Infusorienerde, da Porzellanfilter 
das Gift zurückhalten. Am 20. Tage ist das Maximum der Giftigkeit 
erreicht. Er fällt dann mit Alkohol oder Ammonsulfat. Dialysiert man 
darauf, so nimmt zwar die Vergiftung andere Formen an, aber die letale 
Dosis bleibt unverändert. 

Das Gift wird bei 75—80° völlig zerstört, erträgt dagegen 60° 

Seine Wirkung ist subkutan recht schwach. Die letale Dosis ist 
für Meerschweinchen 5—10 cm^. Dagegen wirkt es, intercerebral ein- 
geführt, sehr energisch, erzeugt Krämpfe und Dyspnoe und tötet bereits 
in einer Dosis von 0,002 cm^ ein Meerschweinchen in 6 Stunden. 

Intercerebral wirkt es angeblich kräftig immunisierend, bis zu 
einer hundertfachen Giftfestigkeit, subkutan sehr viel schlechter. Diese 
antitoxische Immunität ist von den anderen Untersuchem völlig 
vermisst worden. 

Moltschanoff ^) gewann ein Toxin auf Hydrocelenflüssigkeit und 
Hefepeptonbouillon. Er arbeitete mit nicht filtrierten Kulturen, die er 
bei 70° sterilisierte. Er hat besonders die Wirkungen des Giftes auf 



1) ScHÄFFER, Beitr. z. Frage d. Gonokokkentoxine. Fortachr. d. Med., 1897, 813. 

2) Christmas, Le Gonocoque et ses toxines. Ann. Fast, XI, 609 (1897). 

3) Christmas, Contrib. k Tötude du Gonococcuß. Ann. Fast, XIV, 331 (1900). 
^) MoLTSCHANOFF, üebsr das Gonokokkentoxin und seine Wirkung auf das 

Centralnervensystem. Münch. med. Woch., 1899, 1013. 



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— 143 — 

das Zentralnervensystem untersucht, worauf ich hier nicht näher 
eingehen kann. 

Grosz & Kraus 1) und Scholtz^) leugnen überhaupt die Spezifizität 
des Gonotoxins, sprechen es yielmehr einfach als nicht spezifisches, eiter- 
erregendes BakterienproteKn an; zum mindesten soll die Urethritis 
Schaffers auch durch lebende oder tote Leiber anderer Bakterien 
(Pyocyaneus, Coli u. s. w.) entstehen. 

Es gelten demnach ftlr das Gonokokkengift wiederum dieselben Er- 
wägungen. Die Existenz eines spezifischen antitoxinbildenden Gono- 
toxins ist nicht erwiesen. 

Das Streptotoxin. 

Dieselben Unklarheiten wie bei dem Gonotoxin treten uns auch bei 
den Stoffwechselprodukten der Streptokokken entgegen; die Existenz 
eines echten, antitoxinbildenden Toxins ist auch hier noch nicht zur Evi- 
denz nachgewiesen. 

Einige Autoren leugnen überhaupt jede Bildung eines spezifischen 
Giftes durch die Streptokokken. 

Aronson^) fand nicht nur die sterilen Filtrate von Streptokokken- 
kulturen ohne toxische Wirkung, sondern er konnte auch in den durch 
Chloroform getöteten, sedimentierten Leibern der Kokken keine Gifte 
nachweisen ; nur lokale Infiltrate waren das Ergebnis seiner Impftmgen. 
Auch DE GiAXA & Pane^) leugnen die Existenz eines Streptokokken- 
giftes vollkommen. 

Indessen haben doch eine so große Anzahl von Untersuchen! wenig- 
stens Gifte in den Streptokokkenkulturen geftmden, dass man diese 
radikale Anschauung doch nicht ohne weiteres acceptieren kann. 

Eins der allerersten Gifte überhaupt, das in filtrierten Kulturen 
sich demonstrieren ließ, fanden Manfredi & Traversa^} in Erysipel- 
Streptokokkenkulturen , am besten bei 28—30®. Sie beschreiben es 
als ein leicht oxydables, an der Luft bald verschwindendes Gift, das 
Krämpfe und Lähmungen erzeugte. Ebenfalls giftige Streptokokken- 
stoffwechselprodukte in filtrierten Kulturen fanden Roger«), Marmo- 



1) Grosz & Kraus, Bakteriol. Stadien über den GonococonB. Arch. f. DermatoL, 
49, 3 (1^. 

^ ScHOLTZ, Beitr. z. Biologie d. Gonococcns. Arch. f. Dermatol., 49, 3 (1899). 

^ Arokson, Ueber AntiBtreptokokkensemm. Berl. klin. Woch., 1896, 717. 

*) DE GiAZA & Pake, Gontribnto alle cognizione Bnlla immnniB. contra la infez. 
da Btreptococco. Riform. med., 12, 4, p. 5 (Baumgart Jb. , 1896, 23). 

5) ^Manfbedi&Trayebsa, Soll* azione dei prodotti di cnltnra dello Btrepto- 
cocco. Giom. intern, delle Bcienze mediche, 1888. 

^ Roger, Action des prodnits solnbles du Btreptocoqne d'eryBipöle. Soc. 
Bio!., 43, 638 (1891). 



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— 144 — 

BEKi), HoMÄN^), Friedrich 3), Laitinen^), Claude*), Parascandalo«), 
Schenk 7). 

lieber die Art des Giftes aber ist noch so gut wie nichts bekannt 
Roger hat sein Gift aus den Kulturen mit dem zehnfachen Volum Alko- 
hol gefällt, dann in Kochsalzlösung wieder gelöst, nnd in diesem alko- 
holunlöslichen Präparat die typischen Allgemeinwirkungen der lebenden 
Kulturen wiederfinden wollen; doch war sein »Gift« sehr wenig toxisch 
(13— 20 cm 3 pro kg Körpergewicht!), bei 104° wurde es nur sehr ge- 
schwächt, aber nicht vernichtet. 

Die meisten aber haben sich einfach begnügt, die Toxizität an fil- 
trierten Kulturen oder nach Sterilisierung bei 65—70° oder mit 
0,5^ Karbol zu untersuchen. 

Nur Schenk (1. c.) hat sich bemüht, durch Ausfällen mit Zinkchlorid 
(Iproz. Lösung) und Verarbeiten nach Brieger zu einem reineren Prä- 
parate zu gelangen. 

Marmorek giebt an, dass das Toxin schon bei 58° geschwächt wird. 
Die Hauptfrage aber besonders, ob das so erzeugte Gift, das supponierte 
Toxin eine antitoxische Immunität gegen den Streptococcus bewirkt, ist 
noch gar nicht sicher entschieden. 

Roger (1. c.) fand, dass sein Gift nicht nur keine Immunität bewirkt, 
sondern sogar die Empfänglichkeit gegen die Infektion erhöht 

SiEBER-ScHOüMOWA») hat mit filtrierten Kulturen keine Immunität 
erzielen können. 

Dagegen konnte Laitinen (1. c.) aus seinen Streptokokkenkulturen 
auf einer 5proz. Pepton-Bouillon, die er noch mit 2^ Glycerin und 
0,3^ Kochsalz versetzte, und die eine Alkalinität von 2— 20%q haben 
muss, duch Ammonsulfat oder Amylalkohol Toxinpräparate gewinnen, 
die intraperitoneal zu 0,1 — 0,4, in die Nerven direkt eingespritzt schon 
zu 0,01 große Kaninchen töteten, und die eine gewisse Immunität gegen 
eine Infektion gewährten. 

Mit besonderem Nachdruck aber betont Parascandalo (1. c), dass 

1) Marmobbk, Le streptocoqae et le B^nim antiBtreptoooecique. Ann. Fast, 
IX, Ö93 (18%). 

2) HoM^N, De Taction da streptocoqae et de ses toxines aar les nerft. Sem. 
m6d., 1896, 211. (Soc. Biol, 1896, 23. V.) 

^ Friedrich, Beobacht üb. d. Wirkang von sabkatan einverleibten Strepto- 
kokken-Toxinen a. 8. w. Berl. klin. Woch., 1895, 1065. 

4) Laitikex, Das Streptokokkentoxin a. seine Wirkang auf das Nervensystem. 
C. f. allg. Pathol, 1896, 368. 

5) Claude, Myelite aYgae par toxines streptocoq. Soo. Biol., 48, 122 (1896). 
^ Parascandalo, E. neae Versaohsreihe ttb. d. Serotherapie bei Infektionen 

mit pyogenen Mikroorg. Wiener klin. Woch., 1897, 861. 

T) Schenk, Ueb. Streptok.-Seram and Streptok.-Toxine. Wien. klin. Woch., 
1897, 937. 

S) Sieber -ScHOUMOWA, Les s^rams th^rapeatiqaes antioocciqaes. Arch. des 
Sciences biol., IV (1896), 416. 



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— 145 — 

man mit löslichen Toxinen am allerbesten gegen Streptokokken immu- 
nisieren könne. 

Er zttchtet sie auf Znckerbonillon, und sterilisiert erst mit 0,5^ Karbol- 
Zusatz, um dann naob 24 Stunden durch Papier zu filtrieren. Er hatte näm- 
lich gefanden, dass das einfache Filtrieren durch Porzellanfilter nicht alle 
lebenden Keime entfernt, ebensowenig das Erwärmen auf 60 — 70°. Erwärmt 
man aber höher, wird das Toxin geschädigt. Indem er erst die Filtrate junger, 
noch wenig toxischer Kulturen einimpfte, konnte er die Versuchstiere all- 
mählich auch gegen große Dosen alter, sehr giftiger Kulturen immunisieren, 
und erhielt auch auf diese Weise ein wirksames Heilserum. 

Doch sind auch seine Resultate schon deshalb zweifelhaft, weil 
Schenk (1. c.) fand, dass 0,5 % Karbol auch nicht hinreicht, um alle 
Keime zu töten. Er fand zwar die Kulturen dann steril, doch im Herz- 
blut der vergifteten Tiere einzelne lebende Keime, so dass es sehr 
möglich ist, dass Parascandalo mit vereinzelten, abgeschwächten, aber 
doch lebenden Erregem immunisiert hat. Auch das Streptotoxin ist 
also bisher nicht nachgewiesen, die Diuge liegen ganz ähnlich wie beim 
Gonotoxin. 

Die Qifte des Taberkelbacillos. 

Die giftigen StoflFe, die der Tuberkelbacillus produziert, verlangen 
eine gesonderte Besprechung, und zwar aus folgendem Grunde : Bei den 
anderen giffcproduzierenden Bakterien sind die echten Toxine resp. die- 
jenigen spezifischen Gifte, die man mit mehr oder minder großer Sicher- 
heit als toxinähnliche zu bezeichnen in der Lage ist, einer gesonderten 
Besprechung zugänglich und von den nach Abzug dieser produzierten 
Gifte im Bazillenleib selbst zurückbleibenden sog. Bakterienprote- 
i'nen im weiteren Sinne zu scheiden. Diese scharfe Trennung ist aus 
historischen Gründen bei der Tuberkulose nicht angängig, denn seitdem 
man sich ernstlich mit den Giften des Tuberkelbacillus beschäftigt, hat 
man fast stets diese beiden Arten von Giften, ohne sie zu trennen, 
untersucht. 

Die ersten Tuberkelgiftpräparate, so vor allem das Tuberkulin von 
R. Koch waren also Gemenge aller spezifischen und unspezifischen 
Giftstoffe dieses Bakteriums, und die Frage nach der Existenz eines 
echten Toxins wurde gar nicht geprüft. In jener Zeit war auch eine 
derartig präzise Fragestellung noch gar nicht möglich, da die Definition 
des echten Toxins und der mit ihm zusammenhängenden echten anti- 
toxischen Immunität noch nicht in genügender Schärfe gegeben war. 

Diese Giftpräparate bestehen also zum Teil aus den mehr oder 
weniger veränderten Stoffen des Zellleibes selbst. 

Daneben enthalten sie indessen wohl noch andere Giftstoffe, die man 
zum Teil vielleicht als primäre Sekretionsprodukte, eventuell als echte 
Toxine aufzufassen hätte, zum Teil als sekundäre Produkte einfacherer 
Natur, die uns ebenfalls später beschäftigen werden. 

Oppenheimer, Toxine and Antitoxine. 10 



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— 146 — 

Hier soll zunächst die Frage geprüft werden, ob es ein echtes 
Tuberkulosetoxin giebt. 

Bis auf die jüngste Zeit waren es eigentlich nur die von Maragli- 
ANO 1) dargestellten Präparate, die nach dieser Richtung Prüfung fanden. 
Er erhielt durch keimfreie Filtration von frischen bei Zimmertemperatur 
gewachsenen Kulturen eine giftige Bouillon, die in großen Dosen unter 
Hypothermie und Schweißerregung durch Kollaps tötete. Bei 100° wird 
das Gift zerstört. In analoger Weise erhielt Bernheim 2) ähnliche ge- 
ringfügige Resultate in durch KiTASATO-Filter filtrierten Kulturen. 

Maragliano und seine Schüler erhielten auch Heilsera und Anti- 
toxine gegen die Tuberkulose, doch nimmt er selbst an, dass das Anti- 
toxin nicht direkt auf das »Toxin« neutralisierend wirkt, sondern nur 
als Stimulans anderer Heilkräfte, womit sein »Antitoxin« für uns jedes 
Interesse verliert. 

Diese Versuche schienen von großer Wichtigkeit und wurden nament- 
lich ihre Resultate in therapeutischer Beziehung sehr eingehend geprüft, 
ohne dass man wesentlichen Erfolg davon gesehen hätte. Aber die 
Toxinfrage selbst wurde wenig dadurch gefördert. 

Außerdem fanden Ledoux & Lebard ^) in ihren Kulturen nach Filtration 
durch CHAMBERLAND-Filter zwar Stoffe, die bei intraperitonealer Einverleibung 
pyrogen und toxisch, zumal bei tuberkulösen Meerschweinchen, wirkten, jedoch 
so schwach, dass sie die Wirkungen ausschließlich auf das Kulturmedium 
zurückführen wollten. 

Nun liegt aus neuerer Zeit eine Arbeit von Frenkel & Bronstein^) 
vor, die sich mit dem Tuberkulosetoxin befasst. Sie züchten Tuberkel- 
bazillen auf einer fünfprozentigen Glycerinbouillon und erhalten durch 
keimfreie Filtration eine Giftlösung, von der 1,5 — 2 cm^ ein Meer- 
schweinchen nach wenigen Tagen töten. 

Das Gift wird durch Licht und Luft schnell geschwächt. Sie erhielten 
es durch Alkoholfällung in konzentriertem Zustande. 

Durch Impfung mit diesem Gift wollen sie eine Immunität erzielt 
haben, und zwar wieder gegen alle Tuberkelgifte, auch gegen die 
Proteine. 

Gegen die Ergebnisse dieser Arbeiten macht vor allem der Umstand 
skeptisch, dass die Filtrate der Kulturen so wenig giftig wirken. Im 
wesentlichen hatten die Autoren doch nichts weiteres, als das Tuber- 



1) Maragliano, Heilang d. Liingentnberkiilose durch HeilBernmtherapie. Berl. 
klin. Woch., 1895, 689. — DeiB., üeber das tuberkulöse Heilserum u. seine Anti- 
toxine. Ebd., 1896, 773. — Ders., üeb. d. Tuberkelantitoxin. Malys Jb., 1900, 1044. 

2) Bernheim, Immun, tuberc. et sörumth^rapie. See. Biol., 48, 291 (1896). 

s) Ledoux & Lebakd, De raction sur la temp^r. du bouillon des cultures 
tubero. Arch. d. m6d. exp6r., X, 601 (1898). 

^) Frenkel & Bronstein, lieber Tuberkulosetoxin und Antitoxine. Berl. klin. 
Woch., 1901, 861. 



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— 147 — 

knlin vor sich, das aber ziemlich giftig ist bei gleicher Anwendnngs- 
weise. Keiner der Autoren hat geprüft, ob man ein spezifisches Toxin 
vor sich hat, das im Organismas ein Antitoxin erzeugt, und zwar nur 
gegen das Toxin selbst. Eine antitoxische Immunität gegen die Proteine 
ist a priori kaum denkbar, kann aber jedenfalls nicht durch das suppo^ 
nierte echte Toxin erzeugt werden, und gerade diese Omnipotenz der 
»Antikörper« dieser Heilsera macht gegen die Richtigkeit der Befunde 
überhaupt die schwersten Zweifel rege. Es ist zweifellos durch diese 
Arbeiten die Existenz eines echten haptophoren Toxins des Tuberkel- 
bacillus nicht erwiesen. 

Im Gegenteil gewinnt es immer mehr den Anschein, als ob die 
Tuberkelbazillen ein wahrhaftes echtes Toxin im Sinne unserer Defini- 
tion überhaupt nicht erzeugen. Infolgedessen können wir das Thema 
der Tuberkelgifte trotz seiner an sich sehr großen Wichtigkeit an dieser 
Stelle nur sehr kurz behandeln. 

Das Tuberkulin. 

Unter diesem Namen fasst man Präparate verschiedener Art zu- 
sammen, deren gemeinsame Eigentümlichkeit es ist, dass sie aus Kulturen 
der Tuberkelbazillen gewonnen sind, und deren Leibessubstanz in wenig 
verändertem Zustande enthalten. 

Diese Stoffe sind wahrscheinlich zum größten Teil keine echten 
Toxine. Es sind nach der Art ihrer Darstellung hitzebeständige Eiweiß- 
stoffe, den Albumosen sehr nahestehend, die vielleicht eine irgendwie 
spezifische physiologische Wirksamkeit besitzen. Ihre chemische Natur und 
ihre Beziehungen zu den Albumosen sind eingehend von Kühne ^) unter- 
sucht worden. Für den gesunden Organismus sind sie sehr wenig toxisch ; 
dagegen erzeugen sie beträchtliche Reaktionen im tuberkulös erkrankten. 

Das alte Tuberkulin von Robert Koch wird hergestellt ans einer 
Kultur von Tuberkelbazillen bei möglichstem Luftzutritt und 38°, (Ober- 
flächenkultur) , auf 4proz. Glycerinbouillon, die nach 6 — 8 Wochen auf 
i/io ihres Volums eingedampft, und durch Thonfilter filtriert wird. Der 
so hergestellte 40 ^ Glycerin enthaltende Extrakt ist sehr beständig. 

Auf eine weitere Reinigung hat Koch nach vielen frachtlosen Versuchen 
verzichtet. Sein Verfahren ist mannigfach modifiziert worden. Nocabd^) er- 
hitzte die Kultaren erst auf 110°, um sie dami in derselben Weise weiter zu 
behandeln; er begnügt sich mit Papierfiltration, da seine Präparate naturgemäß 



i) Kühne, Erfahrongen über Albumosen u. Peptone. Z. f. BioL, 29, 24 (1892), 
30, 220 (1894). 

^ R. Koch, Mitt. über ein Heilmittel gegen Tnberk. Deutsche med. Woch., 
1891, 101, 1189. 

3) NocAKD, Des injections rev^latrioes de la tnbercoline. Recneuil de m^d. 
v6ter., 72, 369. Baumg. Jb., 1895, 706. 

10* 



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— 148 — 

schon steril sind. Makagliano^) nnd nach ihm Fseneel & Bronstein (L c.) 
benutzten Kochen mit Wasser, eventnell im Autoklaven, zur Darstellung ihrer 
dem Tuberkulin sehr ähnlichen Präparate. 

Behring^] hat aus dem Tuberkulin durch Sodalösung einen mucin- 
ähnlichen Stoff, durch Aether Fette extrahiert; dadurch hat er angeblich 
ein etwa 20mal giftigeres Präparat erhalten. 

Auch Niemann ^) hat sich, freilich ohne besonderen Erfolg, bemtiht, hoch- 
wertige Tuberkulinpräparate durch AlkoholfäUung zu gewinnen. 

Ueber den Giftwert dieser Präparate haben außer diesen Autoren 
noch Gramatschikoff*) gearbeitet, der das Tuberkulin als Blutgift 
nachweist, und v. Lingelsheim*), der vorschlägt, durch intercerebrale 
Injektionen eine Normaleinheit der Giftwirkung zu erzielen. 

Carriäre«) hat nach Tuberkulinii\jektion ziemlich wesentliche Ver- 
änderungen der Leber und der Nieren gefunden. 

E p ER^) fand es bei Nichttuberkulösen zwar erheblich pyrogen, aber 
nur schwach toxisch. Selbst Dosen von 0,01 g erzeugten nur unbedeu- 
tende Symptome, wie Kopfschmerzen, Gliederschmerzen u. s. w. 

Auf eine neue Basis wurden alle diese Versuche dadurch gestellt, 
dass man davon absah, aus den Tuberkelbazillen in unveränderter Form 
Giftstoffe zu extrahieren, vielmehr dazu überging, die Bazillen selbst zu 
verarbeiten. 

Koch ®) ging von der Beobachtung aus, dass abgestorbene Tuberkel- 
bazillen sehr lange im Körper unzerstört bleiben, und infolgedessen nicht 
resorbiert werden. Solange sie aber ihre Form behalten, ist nach Koch 
eine Immunität gegen die Bazillen nicht zu erzielen; erst bei ihrem 
Zerfall tritt, aber fUr eine heilsame Wirkung zu spät, eine geringe bak- 
tericide Immunität ein. Koch versuchte nun durch Zermalmen der 
Bazillen und Einverleibung der Emulsion ihrer Zellbestandteile dem 
Ziele näher zu kommen. Zu diesem Zwecke trocknete er erst die Ba- 
zillen scharf und zermalmte sie dann mechanisch. Diese Massen werden 
in destilliertem Wasser aufgeschwemmt und mehrfach centrifugiert. Das 
erste Gentrifugat ist in Glycerin löslich, zwar ungiftig, aber auch ohne 



1) Maragliano, Extrait aqueux des bacilles de la tnberc. Soc. Biol., 50, 94 
(1898). 

^ Behring, Bekämpfung der Tuberkulose. Münch. med. Woch., 1898, 580. 

3} Niemann, Ueber Tuberkuloseheilserum. Münch. med. Woch., 1897, 59. 

*) Gramatschikopf, Ueber einige physiolog. Wirk, des EocHschen Tuberkulins. 
Arb. patholog. Inst. Tübingen, I, 287. Baumg. Jahrb., 1897, 548. 

s) V. LiNGELSHEDf, Ueber die Wertbestimmung der Tbo.-Giftpräparate. Dtsoh. 
med. Woch., 1898, 583. 

^ CARRiiiRE, £tude exp^r. des alt^rations histolog. du foie etc. Areh. m^d. 
exp6r., IX, 65 (1891). 

"7) Peiper, Ueber die Wirkung des Kocnschen Mittels auf Gesunde. Deutsche 
med. Woch., 1891, 160. 

^) R. Koch, Ueb. neue Tuberkulinpräparate. Deutsche med. Woch., 1897, 209. 



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Immnnisieningswert (TO). Erst die zweiten and folgenden Gentrifogate 
enthalten die spezifisch wirksame Substanz. Diese Präparate bezeichnet 
Koch als TR. Sie sollen ohne besondere Toxizität, insbesondere ohne 
Abszess- und Infiltratbildnng immunisierend und heilend wirken. Man 
soll junge Kulturen verwenden, im Vacuum trocknen, und möglichst 
die Präparate vor Licht schtttzen. 

H. Buchner 1) hat dann selbst und mit Hahn>) mit Hilfe der Methode 
von E. Büchner durch Anwendung gewaltiger Drucke aus den Bazillen 
Presssäfte isoliert, »Piasmine«, mit denen er spezifische Wirkungen 
erzielen wollte, obwohl er selbst die Frage noch nicht für abgeschlossen 
erklärte. 

Behring <) erwähnt ein aus zerkleinerten entfetteten Bakterien durch 
Glycerinwasser bei 150° gewonnenes Gift, von dem 1 g 1250 Mäuse 
töten soll. Es wird durch das Serum einer geheilten tuberkulösen Kuh 
neutralisiert (Antitoxinbildung?). 

Landmann 4) will eia wirksames Tuberkelgift, das in eiaer Dosis von 0,1 
eui Meerschweinchen von 250 g tötet, in seuiem »Tuberkulol« gefunden 
haben. 

Er mazeriert Tuberkelbazillen längere Zeit bei 40° mit physiologischer 
Kochsalzlösung, destilliertem Wasser und Glycerin; dann dekantiert er die 
Flüssigkeit ab und behandelt die Bazillen in derselben Weise nacheinander bei 
50^, 60^ u. 8. w. bis 100^. Dann vereinigt er sämtliche Flüssigkeiten, auch 
die Eulturflflssigkeit, dampft sie (37^) im Vacuum ein und filtriert durch 
Thonzellen. Auf diese Weise erhält er ein Gemisch sämtlicher Produkte des 
Tuberkelbacillus, sowohl eventuelle wärmelabile Toxine, wie die Helßwasser- 
extrakte mit den Proteinen. Damit will er nun therapeutische Effekte erzielt 
haben. 

Zur Förderung unserer theoretischen Kenntnisse können diese Gemische 
natürlich nicht dienen. 

In einer späteren Arbeit hat dann Koch'^) ein neues Verfahren zur 
Darstellung von Tuberkulinpräparaten angegeben. 

Er verreibt 0,1 g staubtrockene TuberkelbaziUen im Achatmörsier mit einer 
Lösung von 0,5 Elarbolsäure und 0,85 NaCl in 100 Wasser, erst mit wenigen 
Tropfen, dann mit Zusatz von mehr Flüssigkeit, bis zu 100 cm'. Dann wird 
6 Miauten centrifugiert, vom Bodensatz abgegossen und mit der zehnfachen 



1) H. Buchner, Zu R. Kochs Mitt über neue Taberknlinpräparate. Berl. klin. 
Woch., 1897, 322. — Ders., Die Bedeutung d. aktiven lösl. Zellprodokte u. b. w. 
Münch. med. Woch., 1897, 12. 

^ Hahn, Immania. n. Heilungsvers. mit den plasmat Zellsäften. MUnch. med. 
Woch., 1897, 1344. 

9) Behring, Autoreferat Über den Vortrag in Madrid. Deutsche med. Woch., 
1896, 293. 

^) Landmann, Ueb. eine neue Meth. der Taberknlosetoxin-Behandlung. Hyg. 
RundBchan, X, Nr. 8. G. f. Bakt., 27, 870 (1900). 

&) Koch, Ueb. d. Aggiutinat. d. Tuberkelbazillen. D. med. Woch., 1901, 829. 



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Menge der LöBung verdünnt, so dass schließlich die Flüssigkeit in einem 
Liter das Extrakt von 0,1 g Tnberkelbazillen enthält. 

Diese Flüssigkeit wird durch Znsatz von agglutinierendem Serum getrübt 
Sie dient an sich nur diagnostischen Zwecken. 

Von RüPPEL*) ist die Frage nach der Natur der Gifte des Tuberkel- 
bacilluB genau untersucht worden. Er fand zunächst die Filtrate 
absolut unspezifisch, konnte außer Albumosen, hauptsächlich 
Deuteroalbumose, nichts Toxisches in ihnen auffinden. Ebenso gelang 
es ihm nicht, aus den unveränderten Bazillen durch Extraktion irgend 
ein spezifisches Gift zu isolieren. Damit ist eigentlich die Frage nach 
einem löslichen, spezifischen Toxin nach der Art des Diphtherietoxins 
definitiv als negativ entschieden. 

Dagegen hat er aus den zermalmten Bazillen einerseits eine Nuklein- 
säure mit 9,42^ Phosphor, die Tuberkulinsäure, und andererseits 
ein Protamin, das er durch Fällen mit Pikrinsäure als solches erkannt 
hat, als giftigen Stoff isoliert, dem er den Namen Tuberkulosamin 
gab. Von zerkleinerten Bazillen lösten sich beim Centrifugieren 50^; 
die Lfösung gab keine Eiweißreaktion und enthielt augenscheinlich nur 
eine Verbindung der Nukleinsäure mit dem Protamin. Nach Neüpeld *) 
ist aber die Tuberkulosaminwirkung durchaus unspezifisch, und die 
V. LmGELSHEiMsche Methode der Wertbestimmung (s. o.) unbrauchbar. 

Kuppel & Kitishima«) haben die Tuberkulinsäure näher untersucht 
Sie ist 3V2 — 4:mal so giftig als trockenes Alttuberkulin. Intercerebral 
ist sie sehr viel giftiger, besonders ftlr tuberkulöse Meerschweinchen 
(1 g tötet 40000 kg). Andere Nukleinsäuren sind weniger giftig. 
Stellt man die Tuberkulinsäure nach der älteren, etwas eingreifenderen 
Methode Kossels her, so ist sie 5 mal weniger giftig. Rüppel & Kitishima 
haben dann aus Tuberkulinsäure weiterhin nach der EossELSchen 
Methode eine der Thyminsäure ähnliche Substanz, die Tuberkulo- 
thyminsäure, abgespalten, »die in 1 g so viel spezifisches Gift fllr 
tuberkulöse Individuen enthält wie 20 cm^ KocHsches Tuberkulin« 
(Behring), sowie einen noch einfacheren Giftstoff bisher unbekannter 
Natur, das Tuberkulosin, das in 1 g 25 — 30 cm' KocHschen Tuber- 
kulins entspricht. 

Nach Behhing soll dies der »Gift kern« sein, um den sich dann 
irgendwie andere Stoffe gruppieren, und ohne den ein Gift mit der spe- 
zifischen Tuberkulinwirkung nicht existieren kann. 

So wichtig diese Arbeiten für die Giftwirkung der Tuberkelbazillen 
sind, so können sie uns doch hier weniger beschäftigen, da es sich bei 

1) RuppEL, Zur Chemie der Tuberkelbazillen. Z. f. phys. Gh., 26, 218 (1898). 

S) Neufeld, Zur Wertbestimmuog der Tuberkulosegiftpräparate. Deutsche med. 
Woch., 1899, 13. 

3) Behring, Die Diphtherie. Berlin 1901, S. 91. — S. a. Behring, Ueber die 
spez. giftigen Eigensch. d. Tuberkalinsäure. Berl. klin. Woch., 1899, 537. 



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— 151 — 

diesen durch eingreifende chemische Methoden gewonnenen StoflFen 
zweifellos nicht um echte Toxine handeln kann. 

Infolgedessen sind Vergleiche dieser Gifte mit dem Diphtheriegift 
nm so weniger zu ziehen, als diese Stoffe, für den gesunden Organismus 
wenigstens, relativ wenig giftig sind. 

Eine Antitoxin bildung findet bei diesen Giften niemals statt. 

Das Tuberkulin ist tür den gesunden Organismus überhaupt wenig 
toxisch, und diese Toxizität kann unbeschadet der spezifischen Wirk- 
samkeit durch Reinigungsprozesse noch vermindert werden. 

Andererseits hat man mehrfach (Römern, Buchner ^ u. a.) die Wirk- 
samkeit des Tuberkulins in toxischer Beziehung als nicht spezifisch 
nachgewiesen. Man konnte diese pyrogenen und lokal entzündungs- 
erregenden Wirkungen auch mit den auf analoge Weise dargestellten 
Proteinen anderer Mikroben (Pyocyaneus, Prodigiosus, Pneumobacillus) 
in derselben Qualität und Quantität erzeugen. 

An eine spezifische toxische Wirkung der alten Tuberkulin- 
präparate ist also kaum zu denken. 

Ihre spezifische schützende Wirksamkeit ist also auch wohl kaum 
auf antitoxische Prozesse zurückzuftlhren. Es scheint sich vielmehr um 
Auslösung spezifisch bactericid'^r Schutzkräfte durch diese spezifischen 
Eiweißkörper zu handeln, sei es in dem Sinne, dass durch diese Be- 
handlung ähnliche Stoffe frei werden und angewendet werden können, 
wie sie die spezifisch bakteriolytischen Vorgänge bei der Cholera u.s. w. 
auslösen, also die Rezeptoren der Bakterien, die auf die Zwischen- 
körper im Sinne Ehrlichs eingestellt sind; oder aber es handelt sich 
um spezifische Eiweißkörper, eingestellt auf die Präzipitine resp. 
Agglutinine, die auf die Bazillen wirken, und im erkrankten Or- 
ganismus spezifische Reaktionen schützender resp. heilender Art auslösen 
könnten. Dass im Serum Tuberkulöser spezifische Agglutinine sich 
finden, ist ja durch Arloing & Coürmont bekannt geworden und neuer- 
dings von Koch auf anderem Wege bestätigt worden (s. o.). Es wäre 
also denkbar, dass* hier durch aus den Bazillen herausextrahierte Stoffe 
ähnliche bakteriolytische Vorgänge ausgelöst werden konnten, wie sie 
bei Cholera, Typhus, Rinderpest u. s. w. durch ganze Bakterien hervor- 
gerufen werden. Bei diesen Immunisierungsmaßnahmen hat man bisher 
keine rechte Veranlassung gehabt, von der Einimpfung unzerkleinerter 
Mikroben Abstand zu nehmen, da diese zarten Gebilde leicht resorbiert 
werden und bei ihrem Zerfall im Organismus die heilungbringenden 
Iramunisierungövorgänge auslösen. Und die einzigen Versuche, bei der 
Cholera mit »Piasminen« zu immunisieren (Hahn 1. c), sprechen auch 

1) RÖMER, üeb. d. formativen Reiz d. ProteYno Büchkbrs. Berl. klin. Woch., 
1891, 886. — Tuberkulinreaktion d. BaziUenextrakte. Wien. klin. Woch., 1891, 836. 

2) BucHKER, Tnberkulinreakt. d. Proteine nicht spezifischer Bakt. Münch. med. 
Woch., 1891, 841. 



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— 152 — 

dafür, dass hier nicht antitoxische, sondern baktericide Phänomene eine 
ausschlaggebende KoUe spielen. Die derben, durch eine dichte HttUe 
von fettähnlichen Substanzen (s. b. Ruppel 1. c] geschützten Tuberkel- 
bazillen dagegen werden, wie Koch zeigte, gar nicht oder sehr schwer 
im Organismus angegriffen, können also auch keine baktericiden 
Immunisierungsvorgänge auslösen. Dass aber andererseits bei ihrem 
schließlichen Zerfall geringe Erscheinungen baktericider Immunität ein- 
treten, hat, wie wir oben bemerkten, Koch gezeigt. Es scheint nun, 
als ob durch eingreifende Maßnahmen, besonders die mechanische Zer- 
malmung der Bazillen und Einführung der daraus gewonnenen Extrakte, 
Stoffe frei werden, die schneller zur Ausbildung einer antibakteriellen 
Immunität führen. Noch wirksamer ist das Zermalmen der Bazillen und 
das Auspressen ihres Zellinhaltes, bei dem dann in noch reichlicherer 
Menge jene spezifischen Rezeptoren frei werden, um ihre spezifischen 
Reaktionen im Organismus zu entfalten. Diese Zwischenkörper sind ja 
wärmebeständig, können also wohl hohe Temperaturen aushalten, bei 
denen ein echtes Toxin, das also antitoxische Immunität auslöst, sicher 
zerstört werden würde. 

Wenn wir diese Annahme machen, so hätte die spezifische Tuberkulin- 
wirkung beim tuberkulösen Menschen als eine Reaktion baktericider 
Natur mit der toxisch-pyrogenen beim gesunden Menschen nichts zu 
schaffen; diese giftigen Prinzipien wären nur störende Beimengungen, 
und wir sehen ja auch in der That, dass Koch und andere mit Erfolg 
bemüht waren, ein fast atoxisches und doch spezifisch wirk- 
sames Tuberkulin darzustellen. Auch die neuesten Arbeiten von 
Koch (1. c), aus denen hervorgeht, dass das Serum Tuberkidöser mit 
seinem neuen Tuberkulinpräparat einen Niederschlag giebt, scheinen 
diese Annahme spezifisch wirksamer Eiweißstoffe und ihrer Präzipitine 
zu unterstützen. Mit dieser Annahme, dass es freigewordene spezifische 
Ambozeptoren sind, die die Tuberkulinwirkung in ihrer neuesten Form 
bedingen, sind die Probleme wesentlich geklärt und vereinfacht. Das 
Tuberkulin scheidet, wie Büchner es will, aus der Reihe der 
spezifischen Bakteriengifte aus und bleibt doch als spezi- 
fisches Heil- und Immunisierungsmittel zu Recht bestehen, 
so gut wie jene toten Zellleiber, die die antibakterielle Immunität bei 
Cholera u. s. w. veranlassen. 

Daneben muss natürlich die Frage nach den Tuberkelgiften weiter 
verfolgt werden. Es ist mit dieser Annahme über die Tuberkulinwirkung 
dafür noch gar nichts vorweggenommen; es kann sogar nebenher, wie 
bei den anderen Bakterien, ein echtes Toxin existieren, das auch spe- 
zifische antitoxische Immunität auslöst. 

Dass ein solches Toxin bisher nicht aufgefunden worden ist, liegt 
vielleicht an der Methode; es ist aber andererseits, wie bereits oben er- 
wähnt, nicht unwahrscheinlich, dass die Tuberkelbazillen ein echtes 



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— 153 — 

Toxin überhaupt nicht produzieren. Sie bilden vielleieht zwar 
nicht toxinartige, aber doch spezifische Gifte anderer Natur. 

Darauf weisen ja die Resultate der BEHEiNGSchen Schule über die 
Erzeugung sehr toxischer Taberkelgifte hin, und dafür ist auch als 
schätzenswertes Material die Auffindung des Tuberkulosamin resp. 
seiner Verbindung mit der Nuklernsäure zu acceptieren, obwohl hier 
sicherlich nicht die spezifischen Gifte des Tuberkelbacillus vorliegen. 
Denn Rufpel nimmt selbst an, dass wir hier Abkömmlinge des Zell- 
kernes vor uns haben. Diese sind sicher nicht die spezifischen Bak- 
teriengifte, die wir doch als protoplasmatische resp. paraplasmatische 
Produkte aufzufassen haben. Es ist nicht unwahrscheinlich, dass man 
ganz analoge Substanzen auch aus den Zellkernen resp. Leibern anderer 
Bakterien wird auffinden können. 

Dagegen kann man als die spezifischen Gifte die Produkte von Aüclaib^j 
nicht anerkennen, der durch Aetherextrakt der Kulturen ein Gift erhalten 
haben will, das intratracheal eingeführt käsige Degeneration der Lungen; durch 
Chloroformextrakt ein zweites, das fibröse Pneumonie erzeugen soll. 

So muss man denn leider konstatieren, dass die Frage nach einem 
spezifischen Tuberkelgift noch nicht entschieden ist, selbst dann, wenn 
man die Tuberkulinwirkung im oben angedeuteten Sinne ganz von dieser 
Diskussion ausschließt. 

Das Malleln. 

Das MalleKn enhält in ähnlicher Weise die Zellbestandteile der Rotz- 
bazillen, wie das alte Tuberkulin die der Tuberkelbazillen. Die 
Malle'mfrage ist fast ausschließlich von Tierärzten zu praktischen Zwecken 
bearbeitet worden, so dass wissenschaftlich für eine Erkenntnis des 
Wesens des Malleüns so gut wie nichts bekannt ist. Bis auf weiteres 
wird man wohl gut thun, für das Mallem ähnliche Erwägungen gelten 
zu lassen, wie für das alte Tuberkulin. 

Helman^) stellte zuerst im Jahre 1890 ein Extrakt aus Rotzkidturen 
her, nach ihm Ealkino, der die Reinkulturen im Autoklaven mehrfach 
mit Wasser kochte und durch CHAMBERLAND-Kerzen filtrierte. Peeüsse 
und nach ihm Pbeisz verwendeten Glycerinextrakte von Kart off Öl- 
kulturen. 

Johne & Pearson verwandten zuerst Bouillon als Kulturmedium, in- 
dem sie 14tägige Kulturen bei 37^ filtrierten, dann sterilisierten; oder 
erst bei 80° eindampften und dann filtrierten (Pearson). 

Roüx sterilisierte sehr virulente Bouillonkulturen bei 110°, dampfte 
ein und filtrierte. 



^ AucLAiR, La Scl^rose polmonaire etc. Arch. de m^d. exp^r., 1900, 189. — 
S. a. Banmg. Jahr., 1898, 476, 476. 

^ Ich schöpfe alle diese mir im Original kaum zngänglichen ÄDgaben ans der 
Arbeit von Foth, Das Malletn n. s. w. Fortschr. d. Med., 1895, 637. 



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— 154 — 

Ganz ähnlich verfuhr Foth (1. c). Er lässt Kotzbazillen mehrfach 
durch Tiere passieren, um ihnen höchste Virulenz zu verleihen. Er 
züchtete sie 20 Tage als Oberflächenkultur auf 4,5 proz. LöFFLERScher 
Fleischbrühe; dann wurde bei 80^ auf Vio eingedampft und filtriert. 
Dnrch Fällen mit dem 30 fachen Volumen Alkohol erhielt er einen 
weißen Niederschlag, der sich im Vacuum über Ghlorcalcium zu einer 
nicht hygroskopischen weißen Masse trocknen ließ. 

GüiNABDi) hat die toxische Wirkung des Malleins genauer studiert 
Er findet, dass nach vorangehender Anregung des Herzens die Herzkraft 
sinkt, und dass ebenso die nervösen Organe erst gereizt, dann gehemmt 
werden. Femer beobachtete er Schweißabsonderung. 

ScHATTENFROH^) hält andererseits das Mal lein ftir durchaus un- 
spezifisch wirkend. 

Die Frage nach einer spezifisch toxischen Wirkung des Mallel'ns 
ist ebensowenig entschieden, wie die des Tuberkulins. Es handelt sich 
möglicherweise auch hier ausschließlich um nichtspezifische Symptome, 
wie sie die körperfremden Proteine stets hervorbringen. 

Das Milzbrandgifk. 

Die Frage nach der Existenz eines echten Milzbrandtoxins ist auch 
noch durchaus nicht gelöst. Wie überall, so wird auch die Beantwor- 
tung dieser Frage außerordentlich erschwert dadurch, dass vielen Unter- 
suchen! es nur darauf ankam, gegen den Milzbrandbacillus zu immu- 
nisieren, gleichviel auf welchem Wege, dass sie also mit lebenden 
Bazillen resp. Bazillenleibem arbeiteten, ohne sich um die Existenz eines 
etwaigen spezifischen, antitoxinbildenden Giftes zu kümmern. In der 
ersten Zeit konnte eine so präzise Problemstellung gar nicht erwartet 
werden; und auch für viele spätere Autoren überwog die praktische 
Frage der Immunisierung durchaus; sie suchten, wie auch Sobebnheim 
in seinen Arbeiten über Milzbrandimmunisiernng, mit allen Mitteln nach 
dem ersehnten Impfschutz, ohne zu untersuchen, ob dieser Schutz auf 
einer wirklichen antitoxischen Immunität beruhe. Dieses erschwerende 
Moment finden wir auch bei allen anderen Untersuchungen über weniger 
bekannte Gifte; nirgends allerdings ist das Toxinproblem so versteckt 
geblieben, die Resultate so widerspruchsvoll, wie hier. Ich muss mich 
deshalb begnügen, die wichtigsten Arbeiten, die sich mit dem suppo- 
nierten Toxin in mehr oder minder ausgesprochener Absicht beschäftigt 
haben, zu besprechen, wobei mir die ungemein sorgfältige Litteratur- 
zusammenstellung bei Cokradi^) naturgemäß wertvolle Dienste leistete. 

1) GuiNARD, Efifets phyBiolog. da malleYne. Jonm. m^d. v^t, 46, 464. Baumg. 
Jb., 1895, 311. 

«) SoHATTBKFROH, üebör die Wirkung von Bakterien-ProteYnen. Z. f. Hyg., 
XVni, 466 (1894). 

8) CoMRADi, Z. Frage d. Toxinbild. bei d. Milsbrandbakt Z. f. Hyg., 37, 287 (1899;. 



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— 155 — 

Die ersten Versuche, aus Milzbrandkulturen durch Filtration Gifte 
zu isolieren, «teilte Pasteür^) mit völlig negativem Ergebnis an. Die 
Filtrate waren völlig indififerent, die von W. Koch^) erzeugten nur 
Temperatursteigerung und Dyspnoe. 

Die erste Angabe ttber eine aus Milzbrandkulturen gewonnene Substanz, 
die schützend wirken soll, machte Wooldridge 5). Er züchtete Milzbrand- 
bazillen auf einer Bouillon von Thymus oder Hodenextrakt 2 — 3 Tage bei 
37^. Die so erhaltene Flüssigkeit wirkt nach dem Filtrieren nicht toxisch, 
aber immunisierend. Er machte auch ganz analoge Versuche^) mit einer durch 
Kochen sterilisierten Lösung seines Gewebsfibrinogens, die aus Hoden u. s. w. 
dargestellt war und nur schwach alkalisch reagieren durfte; denn in stark 
alkalischen Lösungen gaben die sehr lebhaft wachsenden Pilze gar kein Gift 
oder Immuuisierungsstoff an die Lösung ab. Wohl aber enthielten die Filtrate 
der auf schwach alkalischen Gewebsfibrinogenlösungen wachsenden Kulturen 
einen immunisierenden nicht toxischen Stoff, der nur bei intravenöser Injektion 
schützt Doch giebt er fast analoge Resultate an, wenn er den Versuchstieren 
einfach seine Lösung ohne vorherige Züchtung von Milzbrand injizierte; es 
soll einfach das Gewebsfibrinogen auch gegen Anthrax schützen. Dadurch 
wird der Gesamtwert seiner Arbeit für die Aufsuchung eines eventuellen Toxins 
völlig wertlos. 

Ebenso ist der theoretische Hinweis von Chauveau^), dass Milzbrandgifte 
in löslichem Zustand existieren müssten, da die bakteriendichte Placenta keine 
Bazillen durchließe und doch der Embryo milzbrandkranker Schafe immun 
sei, ohne Belang gewesen, besonders da in seltenen Fällen doch Anthraxbazilien 
die Placenta durchbrechen können. 

Hankin hat in einer Reihe von Arbeiten«) seine Milzbrandalbumosen 
als Hauptgiftprinzip hinzustellen versucht. Er züchtete Bazillen auf einer 
Bouillon mit Voo Flßiö<^textrakt und reichlichem Fibrinzusatz (10—50^). 
Nach dem Sterilisieren wird geimpft und 8 Tage stehen gelassen. Dann 
wird filtriert und mit Ammonsulfat gefällt; darauf bei 42^ dialysiert, 
im Yacuum eingedampft oder mit Alkohol gefällt. Es resultiert eine 
Albumose, die abgeschwächte Bakterien nicht geben sollen. Von 
dieser Substanz sollen nun bestimmte, sehr kleine Dosen, 1:1 Million pro 
Kilo bei Mäusen, sofort gegen Anthrax immunisieren, größere Dosen aber 
nicht, die nur toxisch, aber nicht immunisierend wirken. 

ij Pasteur & JouBERT, J^tudo Bur la maladie oharbonnenBe. Gomptes renduB 
de racadto., 84, 900 (1877). 

2) W. Koch, Milzbrand und Ranschbrand. Stuttgart 1886. Cit n. Conradi (1. c). 

8) WoOLDRiDöE, Note on the protection in Anthrax. Proc. Roy. Soc, 42, 312 
(1887). 

^) WooLDRiDGE, Vors. ti. Sohutzimpfhug auf chemiBchem Wege. Du BoIb 
Arch., 1888, 527. 

S) Chauveau, Sur le m^oaniBme de Timmun. Ann. Pasteur, III, 66 (1888). 

0) Haneik, On immunity ]>roduced by an albumose isolated from Anthrax cul- 
tnres. Brit. med. Joum., 1889, II, 66. — DerB., On the confliot between the or- 
ganism and the.miorobe. Ibid., 1890, n, 810. — Hankin & Wesbrook, AlbumoBes 
et toxalbumines du baoilie charbonnenx. Ann. Pastenr, VI, 633 (1892). 



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— 156 — 

Ebenfalls toxische Albomosen ans Anthraxknltaren und ans Organen 
gewannen fast zn gleicher Zeit Martin^) und Bbiboeb & Fbankel^), die 
eine gewisse Aehnlichkeit mit der Vergiftung durch lebende Bazillen zeigten. 
Doch sind die definitiven Resultate aUer dieser Toxalbuminforschungen'] sehr 
gering geblieben, wie es ja mit allen Toxalbuminen schließlich ging. Die 
MABTiKsche Albumose z. B. musste in Dosen von 0,3 g pro Maus (!) gegeben 
werden, um tödlich zu wirken. 

Dass hier keine Toxinwirkung vorliegen kann, ist nach unseren 
heutigen Begriffen sicher. Die Anthraxbazillen haben natürlich die Ei- 
weiBkörper der Nährböden zersetzt nnd an den entstandenen Albumosen 
sind entweder Spuren von Gift hängen geblieben, oder die entstandenen 
körperfremden Eiweißkörper haben an sich schwach toxische Wirkungen, 
wie andere auch. 

Jedenfalls konnte Petermann ^) bei einer Nachprüfung der Hankin- 
schen Arbeiten an seiner Albumose keine Spur einer toxischen oder 
immuniBierenden Wirkung entdecken, während Hankin & Wesbrook 
(1. c.) unter Angabe genauerer Yersuchsbedingungen, besonders Vermei- 
dung von Temperaturen über 20°, weiter daran festhielten und auch 
weiterhin zwar nicht inmier, aber doch manchmal kurzdauernde Immu- 
nisierung erzielten. 

Wichtig ist an der Petermann sehen Arbeit noch der Hinweis darauf, 
dass Milzbrandkulturen, einfach filtriert, eine schwache und vorüber- 
gehende, aber deutliche antitoxische Immunität bewirken; das spräche 
für ein wirkliches Toxin, das freilich in sehr geringer Menge vorhanden 
sein müsste. 

Ganz entsprechend sind gleichzeitige Befunde von Arloing^): er 
ließ Milzbrandbouillonkulturen einfach abstehen, heberte dann von der 
verfilzten Bakterienmasse mehrfach ab und erzielte ein keimfreies Filtrat, 
in dem allerdings die möglicherweise sehr beträchtliche Zurückhaltung 
des Giftes in den sonst verwendeten Filtern ausgeschlossen war. Anderer- 
seits konnte sich aber wieder bei dem langen Stehen das Toxin sehr 
leicht zersetzen. Er erhielt ein Filtrat, das in großen Dosen immuni- 
sierend wirkte. 



^ Martin, The chemical producta of the growtb of baoiUus authracis. Proc 
Royal Soc, 22, V, 1890. 

2} Brieger & Fräneel, Untersuch, über Bakteriengifte. Berl. klin. Wocb., 
1890, 11/12. 

S) Aehnlicbe Arbeiten mit ebenso spärlichen Resultaten sind auch von anderen 
um dieselbe Zeit gemacht worden, so von Balp & Garbone (1891), Lakdi (1891), 
G. Elemperer (1891), Maltzew (1891); ich kann ihretwegen mich hegnUgen, auf 
(yONRABi (L c.) zu verweisen. 

^) Petermakn, Rechercbes sur Timmun. contre le charbon au moyen des albu- 
moses extraites des oultures. Ann. Pasteur, VI, 32 (1892). 

3) Arloino, Sur la pr^sence de la substance pbylacogöne dans les liquides 
du bac. anthr. BuU. m^dic, 1892, 1038. Cit. n. C. f. Bakt, 13, 661 (1892). 



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~ 157 — 

Dann liegen noch Befände vor von Sclavo^) und Mabchoux^), die mit 
lebenden Bazillen eine Immunität erzielen, die aber, wie es scheint, mit der 
Toxinfrage nichts zu thnn hat. Wenigstens giebt Mabchoux an, dass sein 
Serum durch Phagocytose wirkt 

Ernsthaft nach dem Toxin gesucht hat dann erst wieder Marmier^) 
der auf Pepton-Glycerinkulturen (1 Liter Wasser, 40 g Pepton 16 NaCl, 
40 Glyzerin 0,5 Na2HS04 0,2 K2HSO4), am besten bei 20^ einen Stoff 
erhielt, den er durch Fällen mit Ammonsulfat und Dialyse oder Extrak-i 
tion mit Glycerin und Fällung mit Alkohol als pulFrige, braune Masse 
darstellen konnte, die weder Eiweiß- noch AlkaloKdreaktionen zeigte und 
keine Enzymwirkung darbot. 

Es war bei 0,08 pro kg Tier toxisch, (doch nicht konstant) unter 
Temperatursteigerung, Diarrhöe, Abmagerung, Ei^ünpfen, verlangsamter 
Atmung und Erstickung. 0,2 g pro kg wirkten unbedingt tödlich. 
Die Erscheinungen sind nach Marmier denen der Infektion mit lebenden 
Bakterien ähnlich genug, um hier ein spezifisches Milzbrandgift an- 
zunehmen. 

Zwei Dinge sind es jedoch, die der Annahme, dass hier ein wirk- 
liches echtes Toxin yorliegt, widerstreiten, ganz abgesehen davon, dass 
die tödliche Dosis doch ein wenig zu hoch ftlr echtes Toxin ist: 

Erstens bleibt nach Marmier das Gift beim Kochen stundenlang un- 
verändert, kann selbst 5 Min. auf 120^ erhitzt werden, kann also kein echtes 
Toxin sein. Goldchlorid, Platinchlorid und Chlorkalk schwächen das Gift. 

Zweitens aber scheint es nur sehr geringe, und nicht immer erreich- 
bare Immunisierung zu erzielen. Jedenfalls ist es also kein etwa ab- 
geschwächtes Toxoid, da hier bei geringerer Toxizität eine um so 
energischere Immunisierung eintreten mttsste. 

GoNRADi (1. c.) hat neuerdings nochmals die Frage geprüft, ob die 
Anthraxbazillen ein lösliches diffusibles Gift bilden und ist, um es vor- 
wegzunehmen, zu einem durchaus negativen Besultat gelangt. Er 
geht von dem Standpunkt aus, dass grade die Mannigfaltigkeit der Nähr- 
snbstrate, die von den bisherigen Untersuchem angewendet wurden, zu 
den vielfach sich diametral widerstreitenden Angaben geführt habe. 
Infolgedessen entschloss er sich, das Milzbrandgift im Tierkörper zu 
suchen. Er verwandte das Peritonealexsudat und die Organextrakte 
(Leber und Milz) vergifteter Tiere, die er durch KiTASATO-Filter resp. 
durch Chamberland-E erzen keimfrei filtrierte und fand beide stets 
ohne jeden giftigen Effekt. 

Femer führte er Meerschweinchen virulente Bouillonkulturen in die 
Bauchhöhle ein, die er in keimdichte Säckchen aus den inneren Membranen 

^) ScLAvo, lieber d. Bereitung des SemmB gegen den Milzbrand. G. f. Bakt., 
18, 744 (1895). 

2) Marchoux, S^ram anticharbonneux. Ann. Paateur, IX, 9 (1895). 

3] Marmier, Sur la toxine charbonnense. Ann. Paetenr, IX, 633 (1895). 



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— 158 — 

von Schilf blättern (Phragmites communis) eingeschlossen hatte, und sah 
auch hier das Ausbleiben jeder Giftwirkung. 

Gegen die Conbadi sehen Befunde kann man zwei Einwände erheben. 

Die Schilfsackversuche beweisen nur, dass kein lösliches und di f f u- 
sibles Gift des Milzbrandes existiert, schließen aber das Vorhandensein 
eines indiffusiblen Toxins nicht aus; auch andere Haptine, z. B. einige 
Fermente sind nicht diffusionsfähig. Und grade die Angaben von 
Arloing (s. 0.), dass er in nicht filtrierten Kulturen ein Gift fand, dass 
aber andererseits die meisten Untersucher in filtrierten Kulturen nichts 
fanden, machen es nicht unwahrscheinlich, dass das Milzbrandgift leicht 
durch Filter und Membranen zurückgehalten werden könnte. 

Wichtiger scheint mir der zweite Einwand. Grade wenn ein echtes 
haptophores Toxin des Milzbrandes existierte, könnte es unter Umständen 
in den Organen und Säften des vergifteten Körpers empfänglicher 
Tiere nicht wiedergefunden werden, da es von den Rezeptoren fest ge- 
bunden wird; auch Tetanusgift und Diphtheriegift kann man ja normaler- 
weise im Blut und den Organen vergifteter Tiere nur nach Einftlhrung 
großer Dosen wiederfinden. 

Allerdings waren ja in den Exsudaten lebende Keime vorhanden, 
jedoch hatten sie ihre toxinerzeugende Kraft in ihnen erstens nicht lange 
entfalten können, und außerdem wtlrden in diesen Exsudaten entstandene 
Toxine doch wieder in den Stoffwechsel gelangen und von den Rezep- 
toren gebunden werden, so dass nur sehr geringe Mengen in ihnen 
zurückbleiben dürften. Außerdem würden in diesem Falle die Exsudate 
zweifellos Antitoxine enthalten, die das Bild noch mehr trüben würden. 
Vielleicht aber ließen sich solche Exsudate als gleichmäßige, natur- 
gemäße Nährböden verwenden, auf denen sich eventuell Toxine nach- 
weisen ließen. 

Jedenfalls lässt sich aus diesen Versuchen Conradis kein Rückschluss 
auf die Nichtexistenz grade eines echten Toxines ziehen. Ueberhaupt 
sind solche Versuche nicht geeignet, die Frage der Giflproduktion eines 
Bakteriums zu entscheiden; denn auch anders geartete Gifte einfacherer 
Natur können sehr wohl nach Ausübung ihrer Schädigungen oder grade 
durch ihre physiologische Aktion so verändert resp. zerstört werden, 
dass eine nachweisbare Quantität in den Gewebssäften nicht zurück- 
bleibt. Selbst manche Alkalo'ide, wie das Cytisin verschwinden spur- 
los im Organismus. Es ist nicht sicher, bei den mannigfachen Angriffen, 
denen ein Gift im Körper ausgesetzt ist, negative Schlüsse zu ziehen 
auf die Nichtexistenz dieses Giftes; hier wären nur positive Resultate 
beweisend. So tragen denn auch die Versuche von Cokradi nur nega- 
tiv zur Entscheidung der Frage bei: wieder ein Weg zur Auffindung 
des hypothetischen Giftes hat sich als ungangbar erwiesen : ob es nicht 
doch existiert, bleibt dabei offen. Und dabei darf nicht unbeachtet 
bleiben, dass eigentlich das Milzbrandgift ein ätiologisches Postulat 



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— 159 — 

ist; denn es giebt viele Fälle von Milzbrand mit tödlichem Ansgaiage, 
wo eine bazilläre Allgemeininfektion auszuschließen ist, wo es nur mit 
Muhe oder gar nicht gelingt, lebende Bazillen in den Organen zu finden. 
Solche Fälle kann man doch nur als Intoxikations fälle erklären. 
Das Gift muss also trotz Conradi weiter gesucht werden. 

Einwandfrei sind dagegen die Versuche, die Conradi angestellt hat, 
um zu erfahren, ob der Milzbrandbacillus etwa spezifische Endotoxine 
bildet, die er erst beim Absterben und Zerfallen der Zellen, analog'der 
Hefeninvertase und Zymase bildet. Er tötete die Bazillen mit Toluol 
oder darch Erfrieren, oder er zermalmte sie nach der Buchner sehen 
Methode. In allen Fällen war das Resultat völlig negativ. AuchTox- 
albumine aus den Organen konnte er weder mit Hilfe der Brieger- 
FRÄNKELschen, noch der MARMiERschen Methode erhalten. 

Es liegt also die Sache heute folgendermaßen: 

Ein einwandsfreier Beweis für die Existenz eines echten Toxins, 
sei es eines freien Sekretes oder eines an die Zellen gehefteten Endo- 
toxins, ist für den Milzbrand nicht erbracht, letzteres so gut wie aus- 
geschlossen. Außer geringen pyrogenen Wirkungen, die von den Bak- 
terienproteinen des Zellleibes selbst ausgehen, wie bei allen — pathogenen 
und harmlosen — Bakterien sind Milzbrandgifte nicht bekannt. Es ist 
wohl anzunehmen, dass sich Gifte bilden, die die Elrankheitserscheinungen 
auslösen; doch scheinen diese so subtiler Natur zu sein, und sich bei 
dem fortdauernden Wachstum der Bazillen im angriffenen Körper jeweils 
nur in so geringer Menge zu bilden, dass sie sich dem Nachweis ent- 
ziehen. Conradi hat über Immunisierung mit seinen sterilen Filtraten 
keine Versuche gemacht; es wäre denkbar, dass sie Toxoide enthielten 
an Stelle des äußerst empfindlichen Toxins, die nicht mehr toxisch, 
aber immunisierend wirken und dadurch Hanrins Befunde möglicher- 
weise erklären. Lauter Fragezeichen, die einer Antwort harren. 

Sonstige lösliche Bakteriengifte vielleicht toxinähnlicher Natur. 

Sind schon die Forschungen nach den spezifischen Giften bei einigen 
der wichtigsten pathogenen Mikroben meist noch in den Anfängen, 
so werden wir uns nicht wundem, wenn wir über lösliche Toxine anderer 
weniger wichtiger Bakterien nur recht spärliche Angaben finden, die 
ich hier nur ganz kurz referieren will. Es ist sehr gut möglich, dass 
man hier bei genauerer Untersuchung noch ein oder das andere echte 
Toxin finden möge, doch sind sichere Anzeichen dafür bisher nicht 
vorhanden. 

Für die Mehrzahl dieser infektiösen Mikroben, die sich im Orga- 
nismus vermehren, wird wohl dasselbe gelten, was wir fllr Cholera, 
Streptokokken u. s. w. annehmen können, dass die Zellen, wenn über-, 
haupt, echte Toxine nur in ganz geringen Mengen sezemieren, dass 
diese außerdem äußerst zersetzlich sind, dass dagegen die Gifte vor- 




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— 160 — 

wiegend als festhaftende Endotoxine aufzufassen sind. Die Immunität 
wird bei allen infektiösen Mikroben ganz vorwiegend durch bakterio- 
lytische Prozesse bewirkt, eine eventnelle Antitoxinbildnng ist unbe- 
deutend und tritt praktisch und theoretisch stark in den Hintergrund. 

Hogcholera. 

Metschnikoff ^) fand wie Selandeb^) steriles Blut erkrankter Tiere 
sehr giftig. Gegen die Bakterien ist außerordentlich leicht zu immuni- 
sieren, doch ist dadurch die Resistenz gegen das sterile Gift nicht er- 
höht. Die Eokkobazillen wachsen im Immunserum, aber ihre 
Virulenz ist schwächer, wird aber bei ümimpfung auf frische Bouillon 
regeneriert. Danach scheint das Serum doch Antitoxin zu enthalten, 
das die Toxinproduktion des wachsenden Bakteriums neutralisiert 

Malignes Oedem. 
Roüx & Chamberland*) fanden keimfreie Kulturen des Vibrio sep- 
tique schwach giftig, keimfreie Peritonealflttssigkeit stark giftig und 
immunisierend. Indessen erhielten sie auch bei 110 — 120° noch sehr 
schwache, etwas immunisierende > Gifte«. AuchBESSON*) erhielt schwache 
Gifte in filtrierten Kulturen (6 — 10 cm^ für Meerschweinchen tödlich), 
besonders auf Fleisch. 

Baoschbrand. 

Roux^) erhielt durch Filtration der Kulturen und aus Muskelsaft ein 
schwaches, nicht tödlich wirkendes, immunisierendes Gift, das aber auch 
teilweise noch bei 115° erhalten bleiben soll. 

DuBNSCHMANN<^) züchtetc RauschbrandbaziUcn auf Fleischmazeration 
oder Rinderserum unter Luftabschluss und erhielt nach 7 Tagen im 
Filtrat ein spezifisch wirkendes Gift, das in Dosen von 5—6 cm^ Meer- 
schweinchen tötet. Es wirkt gegen lebende Bazillen nicht schützend. 

Seitdem scheint über ein eventuelles Rauschbrandtoxin nicht mehr 
gearbeitet worden zu sein. Auch Arloing^) in seinen letzten Arbeiten 
über Immunisierung gegen Bauschbrand erwähnt kein Wort über ein 
Gift desselben. 



1) METScmaKOFF, Zur ImmanitätBlehre. Gongr. f. inn. Med., 1892, 282. — 
Etudes Bur rimmunit6 V. Ann. Fast., VI, 289 (1892). 

^) Selander, La maladie infectiense des porcs. Ann. Fast, IV, 545 (1890;. 

3} Roux & Chamberland, Immunit^ contre la septic^mie. Ann. Fast, II, 
561 (1887). 

*) Besson, Contribut ä F^tude du vibrion s^ptique. Ann. Fast, IX, 179 (1895). 

^) Roux, Immnnit^ contre le charbon symptomatique. Ann. Fast, II, 49 (1888;. 

6) DüENSCHMANN, l^tüde exp^rim. but le charbon symptomatique. Ann. Fast, 
Vm, 403 (1894). 

T) Arloing, Seroth^rapie du charbon symptomatique. Compt rend. Acad. d. 
sciences, 130, 548 (1900), 131, 319 (1900). 



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161 



Schweineseuche. 

SiLBEBSCHMiDT ^) fand ein schwaches Gift im Filtrat der Kulturen, 
das spezifisch wirkt; bei 120° wird es nicht völlig zerstört, aber schon 
bei 60° langsam angegriflfen. Die Filtrate erzeugen Immunität. 

Selbebg^) fand in Schweineseuchenbazillen wenig spezifische Gift- 
stoffe, die an die Leiber gebunden sind. 

Vibrio Metsohnikoff. 

Ueber diesen Vibrio liegt eine sehr interessante Arbeit von Sana- 
BELLi^) vor. Er wächst nach anfänglichem scheinbaren Absterben 
kräftig auf Immunserum, ist aber dann völlig atoxisch, erlangt jedoch 
seine Giftigkeit beim Umzttchten auf frische Bouillon wieder. Ebenso 
kann man aus dem immunen Tier heraus Vibrionen züchten. Nimmt 
man das vibrionenhaltige Serum infizierter Tiere und entfernt das Serum 
von den Vibrionen, so sind sie viel virulenter als mit dem Serum. 

Daraus folgt: Der Vibrio an sich ist imstande, sich im Tierkörper zu 
vermehren. Er bildet dort aber Toxine, die schädlich sind. Im immunen 
Tier aber oder im Immunserum und auch im Serum des erkrankten 
Tieres sind Antitoxine, die das Gift binden, den Vibrio unschädlich 
machen, der sich dann im immunen Tier weiter vermehrt. Entfernt 
man das Antitoxin, tritt wieder Giflrwirkung ein, ebenso bei Umzüch- 
tung auf neuen Nährböden. 

Sanabelli hat nur leider gar nicht versucht, das hier wahrschein- 
lich vorhandene Toxin durch Filtration zu finden. Er hat nur ge- 
tötete Kulturen (bei 60^ und bei 120^) giftig befunden, und natürlich 
gegen das sekundäre Gift, das er bei 120^ erhielt, keinerlei antitoxische 
Immunität erzielen können. Das ist sicher kein Toxin, wohl aber scheint 
hier ein wirkliches Toxin gebildet zu werden, das man vielleicht durch 
vorsichtiges Arbeiten demonstrieren kann. 



III. Die pflanzliohen Toxine (Phytotoxine). 

Das Bicin. 

In den Samen der Bicinuspflanze, Bicinus communis, ist ein außer- 
ordentlich heftiges Gift vorgebildet, das sich in jeder Weise eng an 
die Bakterientoxine anschließt. Es ist enthalten im Embryo und Endo- 

1) Silberschmidt, Contrib. k T^tnde de la swine plague. Ann. Fast., IX, 65, 
(1895). 

2) Selberg, Beitr. z. Eeuntn. d. Giftwirkung d. Schweinesenchenbakterien u.b.w. 
Diss., Berlin 1896. 

3) Sanabelli, Defense de rorganlBme contre las microbes. Ann. Pasteur^ 
VI, 226 (1892). 

Oppenheimer, Toxine und Antitoxine. H 



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— 162 — 

sperm, nicht in der Schale (Werner). Ein ganz analog wirkendes 
Gift findet sich nach Stillmark i) noch in 10 anderen Bicinnsarten, 
nämlich sangninens, africanns, gnyanensis nanus, altissimns, communis 
maior, philippinensis , brasiliensis, borboniensis arborens, spectabilis, 
jamaicensis. Auch die Samen von Jatropha Curcas, einer westindischen 
Enphorbiacee, die man als Pulgueranüsse oder Barbados seeds be- 
zeichnet, liefern ein vielleicht mit dem Eicin identisches toxisches Pro- 
dukt (Stillmark). 

Das Ricin wurde zuerst von Dixson^) untersucht. Er stellte ein 
giftiges Präparat her, durch Extraktion der Samen entweder mit Salz- 
säure und Fällung mit Sodalösung, oder durch Fällung des wässrigen 
Auszuges mit Alkohol. In reinerem Zustande erlangte er es, indem er 
den Wasserauszug mit Bleiessig und Ammoniak fällte, in Wasser sus- 
pendierte, mit HjS entbleite und dann mit Alkohol fällte. Daneben 
fand er im Samen noch ein ungiftiges Glukosid. 

Genauer beschäftigte sich dann mit dem Bicin, dem er auch den 
Namen gab, Stillmark ^) unter Leitung' Budolf Roberts. Er ex- 
trahierte den Samen mit lOproz. Kochsalzlösung, fällte dann mit 
Natrium- oder Magnesiumsulfat und entfernte die Salze mittelst Dialyse. 
Die Ausbeute betrug 2,8 % der enthülsten, lufttrocknen Samen. 

Cruz 3) wäscht die zerriebenen Samen mit Chloroform und Alkohol, 
trocknet, löst in Wasser und fUllt mit Alkohol. 

Ein großes theoretisches Interesse gewann das Bicin, als Ehrlich^) 
es zum Ausgangspunkt seiner grundlegenden Arbeiten über die anti- 
toxische Immunität machte. Er gewann es ebenfalls aus den Samen 
mit lOproz. Chlomatriumlösung und reinigte es genau wie Stillmark. 
Das MBRCKSche Präparat ist aus der Kochsalzlösung mit Ammonsulfat 
gefönt. 

Chemisohe Natur des Bioins. 

Während die älteren Untersucher das Bicin für einen Eiweißkörper 
hielten, scheint siqh auch beim Bicin der bei den Bakterientoxinen ge- 
schilderte Entwicklungsgang zu wiederholen, dass man mit fortschrei- 
tender Genauigkeit der Untersuchungen immer mehr zu der Ueberzeu- 
gung gelangt, dass auch dieses Toxin zwar ein hochmolekularer Körper, 
aber kein Eiweißkörper im engeren Sinne ist. 

Stillmark hielt ihn nach der Darstellung für ein Globulin. Cüshny*^) 
hat viele mühevolle Untersuchungen angestellt, um das Bicin entweder 



ij Stillmark, Ueb. Ricin. Arb. pharm. Inst. Dorpat III, (Stuttgart, £nke\ 
S. 59 (1889). (Dort die ganze ältere Litterator über die RicinuBpflanze.) 

2 DixsoN, Australian Med. Gaz., 1887, lö6, cit n. Cushny s. u. 

3 Cruz, La ricine. Ann. d'bygi^ne publique, 40, 344 (1898). 

4) Ehrlich, Exper. Unters, über Immunität. Dtfich. med. Woch., 1891, 976, 
1218. — Zur Kenntnis d. Antitoxinwirkg. Fortschr. d. Med., 1897, 41. 
5; Cushny, Ueb. das Ricinusgift. Arch. exper. Pathol., 41, 439 (1898). 



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— 163 — 

wirklich als Eiweißkörper zu demonstrieren oder es von den verunreini- 
genden Eiweißsubstanzen zu befreien, ohne dass er sichere Resultate 
erzielt hätte. Die Trennung des wirksamen Prinzipes von den Eiweiß- 
stoflFen gelingt nach den gewöhnlichen Methoden durchaus nicht, ent- 
weder weil die Fällungs- und Wiederlösungsbedingungen die gleichen 
sindy oder wahrscheinlicher, weil das Bicin, wie so viele kolloide Sub- 
stanzen, von manchen fallenden Niederschlägen, besonders aber Eiweiß- 
koagulaten u. s. w. mitgerissen wird. 

Schließlich erwies sich die Besistenz des Ricins gegen Tryp sin als 
ein Mittel, um wenigstens mit großer Wahrscheinlichkeit die Eiweiß- 
natur von ihm abzustreifen. Von Stillmark geleugnet, von Cüshny 
und Müller^) nachgewiesen, diente sie den schönen Versuchen von 
Jacoby^} wieder als Ausgangspunkt. 

Er wies zunächst nach, dass selbst wochenlange Digestion mit Tryp- 
sin den Giftwert des Ricins unverändert lässt, ebenso mit Papain. 
Daraus allein will er nun allerdings noch keinen bindenden Schluss 
ziehen, da ja auch Eiweißkörper möglicherweise gegen Trypsin resistent 
sein könnten. In sehr eleganter Weise modifizierte er nun aber seinen 
Versuch. 

Ricin fällt bereits aus, wenn die Lösung zu 60 ^ mit Ammon- 
sulfat gesättigt ist, während das wirksame Prinzip des Trypsins erst 
bei voller Sättigung mit Ammonsulfat ausgeschieden wird. Jacoby 
entfernte nun durch fraktionierte Ammonsulfatfällung aus einem Pan- 
kreasextrakt die bei 60 ^ fällbaren Eiweißkörper, und mit diesem ge- 
reinigten Trypsinpräparat digerierte er Ricin, das bei einer Sättigung 
unter 60° gewonnen war. 

Nun hatte diese Mischung vor der Einwirkung des Trypsins fol- 
gende Zusammensetzung: 

bei 60^ fällbar: Ricin und die damit verbundenen Eiweiß- 

körper, 
bei 100 % fällbar: Trypsin. 

Nach der Einwirkung des Verdauungsfermentes aber sieht es anders 
aus: die dem Ricin beigemengten Eiweißkörper werden durch das Tryp- 
sin verdaut, also jedenfalls schwerer, vielleicht gar nicht mehr durch 
Ammonsulfat fällbar; dann ist das Schema also: 

bei 60^ fällbar: Ricin, 

bei 100 X fällbar: Trypsin und ein Teil der angedauten Proteide. 

Unter diesen Bedingungen also muss die Fällung bei 60 % theoretisch 
ein reines Ricin ergeben. 

In der That erhielt Jacoby nach fUnfwöchentlicher Verdauung bei 



1) Müller, Beiträge z. Toxikol. des Ricins. Arch. exper. PathoL, 42, 302 (1899). 

2) Jacoby, üeb. d. ehem. Natur des Ricins. Arch. exper. Pathol, 46, 28. S. A. 

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— 164 — 

60^ nur einen sehr geringen Niederschlag, den er durch Umfallen 
reinigte. 

Die Eiweißreaktionen waren verschwunden, die Giftigkeit quantitativ 
erhalten. Damit ist also der Beweis geführt, dass das reine Ricin kein 
Eiweißkörper ist. Es ist also wieder eines der letzten »Toxalbumine« 
verschwunden, und damit dürfte wohl dieser Begriff auch nur noch 
historisches Interesse haben. Er hat in der Entwicklung dieser Fragen 
seine große Bedeutung gehabt, besonders indem er zuerst darauf hin- 
wies, dass diesen Giften ganz andere Eigenschaften zukommen, als den 
krystallolfden Giften; aber nun dürfte es wohl an der Zeit sein, ihm ein 
ehrenvolles Begräbnis zu bereiten, da er jetzt nur noch Verwirrung 
stiften kann. An seine Stelle soll ganz allgemein der Begriff »Toxin« 
in seiner präzisen Fassung treten, wie wir ihn aufgestellt, und der alle 
Beziehungen dieser eigenartigen Eörperklasse umfasst. 

Eigenschaften des Bicins. 

Das Ricin zeigt, gerade wie die Bakteriengifte, eine sehr weit- 
gehende Analogie mit den Enzymen, so dass es schon von Stillhark 
diesen zugeschrieben wurde, obwohl es wirkliche fermentative Prozesse 
(Diastase- u.s.w. Wirkung) nicht ausübt. Zu diesen Analogieen gehört 
die schon erwähnte Fällbarkeit durch alle möglichen Niederschläge; be- 
sonders leicht wird es durch fallende Eiweißstoffe mitgerissen. Auf ein 
Mitreißen, nicht aber auf eine eigenartige Reaktion des Ricins selbst, 
dürfte wohl auch die Fällbarkeit durch Nukleinsäure zu beziehen 
sein, die Tichomiroff *) am Ricin, wie an anderen Toxinen, ge- 
funden hat. 

Mit den Enzymen teilt es auch seine Empfindlichkeit gegen physi- 
kalische und chemische Einflüsse. 

Siedetemperatur schädigt intensiv, hebt allerdings nach Jacoby 
die Giftigkeit nicht ganz auf, bei dem gereinigten Gift noch weniger 
als bei dem mit Eiweiß vermengten. Jacoby scheint es ^eilich nicht 
für ausgeschlossen zu halten, dass beim Kochen ein qualitativ verschie- 
dener Giftstoff entsteht, vielleicht ein Toxoid. Gegen trockene Hitze 
(110°) ist es unempfindlich (Stillmark). Gegen Pepsinsalzsäure ist das 
toxische Prinzip fast unempfindlich (Müller). 

Das Verhalten gegen Trypsin haben wir bereits besprochen; sehr 
interessant ist dabei die Feststellung von Jacoby, dass sein reines 
Ricin durch Trypsin schnell zerstört wird, dass dies dagegen 
nicht eintritt, wenn man zu dem verdauten Gemisch des ungereinigten 
Ricins neue Trypsinmengen zusetzt. Es scheinen also die Eiweißspal- 
tungsprodukte hier eine schützende Wirkung auszuüben. 



^ TiCHOMiROFF, Ueber die Fällg. v. Toxalbuminen durch NnkleYnsäure. Z. f. 
physioL Gh., 21, 90 (1895). 



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— 165 — 

Hydroperoxyd wirkt auf das reine Ricin energisch, auf das un- 
gereinigte nur schwacli schädlich ein. 

Alkohol löst Bicin nicht und ist unschädlich. 

Das Ricin scheint absolut indiffusibel zu sein, wie schon Still- 
MABK feststellte. 

Wirkungen des Bieins. 

Das Ricin zeigt zwei der wichtigsten Eigenschaften der Toxine: die 
außerordentlich große Wirksamkeit und die Inkubationszeit. Da- 
gegen ist die strenge Spezifizität nicht vorhanden; bis jetzt kennt 
man kein Tier, das gegen Ricin völlig immun ist: die Empfindlichkeit 
ist zwar nicht bei allen untersuchten Tieren die gleiche: indessen > sind 
die Differenzen nicht größer, als man sie auch bei krystalloiden Giften 
beobachtet. 

Die Toxizität ist eine ganz enorme. Nach Ehelich ist subkutan 
0,03 mg pro kg tödlich ; 0,18 g per os wtlrden die fttr den erwach- 
senen Menschen tödliche Dosis darstellen. 1 g würde subkutan ca. 
IV2 Millionen Meerschweinchen töten, jedoch schwankt die Dosis letalis 
minima etwas. Mäuse sind weniger empfindlich, Kaninchen etwas mehr. 
Zur Messung der Toxizität bedient sich Ehrlich stets der Injektion 
von 1 cm3 ftlr 20 g Körpersubstanz; dann wäre eine Verdünnung von 
1 : 200000 für Mäuse sicher tödlich. 

Aehnlich fand Cushny die Dosis letalis zu 0,04 mg pro kg bei 
Kaninchen. Jacob y findet fUr MEBCKSches Ricin 0,5 mg als Dosis 
letalis für 1 kg Kaninchen. 

Mit den Toxinen teilt es auch die Eigenschaft vom Verdauungskanal 
aus viel schwächer zu wirken. Immerhin aber ist seine Wirkung auch 
auf diesem Wege deutlich zu erweisen; nur bedarf man hundertfach 
größerer Dosen (Stillmark p. 133). Es liegt diese Eigenschaft an der 
viel beträchtlicheren Resistenz gegen Verdauungsfermente, die die Bak- 
terientoxine nicht aufweisen. 

Die Wirkungen des Ricins lassen sich in vier Gruppen sondern : die 
lokale Wirkung an der Applikationsstelle, die Allgemeinwirkung, 
die Wirkung auf die Conjunctiva und schließlich auf die Blut- 
körperchen. 

Das Ricin erzeugt wie viele Bakterientoxine an der Impfstelle häufig 
schwere Indurationen, Entzündungen, Abszesse und Nekrosen. Ob diese 
pathologischen Veränderungen dem Ricin selbst oder aber Beimengungen 
zuzuschreiben sind, ist noch nicht sicher zu entscheiden; es spricht in- 
dessen einiges dafUr, dass es vielleicht nur die mitgeftlhrten körper- 
fremden EiweißstoflFe sind, die diese Erscheinungen hier wie auch sonst 
häufig auslösen. 

Die allgemeinen Veränderungen bei der Ricinvergiftung haben auch 



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— 166 — 

schon die älteren Autoren, dann aber speziell Flexner^) und Franz 
Müller (I. c.) untersucht. 

Das erste Symptom ist eine Steigerung der Temperatur und rapide 
Abnahme des Körpergewichts, während sonst in den ersten 24 Stunden 
keine abnormen Erscheinungen zu beobachten sind. 

Die Abnahme des Gewichts ist viel größer, als dass sie einfach durch 
den Hungerzustand zu erklären wäre. Hungernde Kaninchen verlieren 
in 24 Stunden nur ca. Vi 4 ihres Gesamtgewichtes, nach 48 Stunden Vg? 
nach 72 Stunden Y;, während Kicinkaninchen schon nach 24 Stunden 
V: — Ys ihres Gewichtes verlieren. Auch durch erhöhten Eiweißzerfall 
allein ist die Abnahme nicht zu erklären. Nach Müller sind die Ver- 
hältnisse ganz ähnlich wie beim fiebernden Tier. Blutige Stühle und 
Eiweiß, manchmal auch Blut im Harn treten auf. 

Nach 24 — 30 Stunden zeigen sich ganz plötzlich die tödlichen Ver- 
giftungserscheinungen. Sie beginnen mit klonischen Krämpfen, Flucht- 
bewegungen, Abschwächung der Reflexe. Dann tritt eine schlaffe Läh- 
mung auf; nach 15 Minuten wiederholen sich die Krämpfe und unter 
Dyspnoe und krankhafter Inspiration erfolgt ca. Y2 Stunde nach dem 
ersten Anfall der Exitus. 

Die Krämpfe fehlen bisweilen. Eine Erhöhung der Dosis ändert 
das Bild nicht; nur die Inkubationszeit wird verkürzt. 

Zum Schluss treten schwere zentrale Störungen der Medulla ob- 
longata auf: Vasomotoren- und schließlich Respirationslähmung. Der 
Blutdruck sinkt erst ganz zum Schluss ; dann ist das tödliche Ende nah. 
Auf das Herz ist Ricin ohne Einfluss. 

Der Sektionsbefund ist sehr charakteristisch. Schwellung und 
Rötung der subkutanen Lymphdrüsen, starke Stauung im Gebiet der 
Bauchgefäße; starke Vergrößerung und fleckige Rötung der mesente- 
rialen Lymphdrüsen und der PEYERschen Plaques, zahlreiche Ekchy- 
mosen im Darm, keine ülzerationen. Milz stark geschwollen, weich. 
Histologisch ergeben sich charakteristische Veränderungen des Blutes, 
besonders starke Leukocytose, Zellzerfall im Knochenmark und nekro- 
tische Herde in zahlreichen Organen, besonders der Leber. Thrombosen 
sind nicht aufzufinden. Der Herzmuskel ist meist fettig degeneriert. 

Cruz (1. c.) fand besonders schwere Veränderungen in den Nieren, 
doch konnte Stepanoff 2) es im Harn nicht auffinden. Charakteristisch 
sind auch die Hämorrhagieen der Nebennieren. 

DerRicintod erfolgt also in erster Linie auf Grund der zentralen 
Lähmungen, daneben sind aber auch lokale Reizerscheinungen des 
Giftes durch die Zellnekrosen evident; auch die Darmekchymosen u. s. w. 
sind dadurch zu erklären, da Stepanoff 2) die Ausscheidung des Ricins 

1) Flexner, The pathology of toxalbumin intoxication. Johns Hopkins Hos- 
pital Record, 1897. S. A. 

2) Stepanoff, l^tudes sur la ricine et Fantiricine. Ann. Fast, X, 663 (1896). 



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— 167 — 

in den Darm gezeigt hat, und Cüshny (1. c), dass bei Fröschen Ricin 
einen Blutergnss in den Magen hervorruft, der das Gift enthält. 

Auf das isolierte Froschherz, auf den Nerven ist Ricin ohne jeden 
Einfiuss, auf den Muskel wirkt es schwach lähmend (Stillhark). 

Eine charakteristische Wirkung hat das Ricin auf die Bindehaut 
des Auges. Es erzeugt schwere Conjunctivitis, ähnlich der durch 
Abrin (s. d.) bedingten, auch häufig zu dauernden Störungen der Horn- 
haut führend. Auch Panophthalmitis ist nicht selten. 

Die Wirkung des Bioins auf das Blut. 

Das Ricin hat eine ganz eigenartige Wirkung auf die roten Blut- 
körperchen, die schon von Kobert und Stillmark (1. o.) beobachtet 
wurde. Sie ist sowohl am frischen Blut, wie an den mehrfach ge- 
waschenen Erythrocyten erkennbar. Die Erythrocyten ballen sich unter 
dem Einfluss des Ricins zusammen, und sinken als zusammenhängende, 
fiockige Masse zu Boden, dem Blutkuchen sehr ähnlich, so dass das 
Serum klar darübersteht. 

Nach Kobert^) entsteht eine Verbindung des Agglutinins mit dem 
Arterin des Blutes; diese Verbindung ist klebrig; deshalb die Verklum- 
pung. Die Wirkung ist sehr intensiv, noch eine 600 000 fache Verdün- 
nung soll sie erkennen lassen. Jedenfalls hat diese Agglutination mit 
dem Hämoglobin nichts zu thun, da sie auch mit gelösten Blutkörperchen 
resp. dem Stroma allein vor sich geht. Im Serum scheinen Stoffe 
vorhanden zu sein, die einen hemmenden Einfluss auf die Ricinwirkung 
ausüben; wenigstens ist sie im verdünnten Blut energischer. 

Diese Ricingerinnung ist von der echten Blutgerinnung ganz ver- 
schieden. Dass es etwa eine einfache Gerinnung sein könnte, ist ja 
schon dadurch ausgeschlossen, dass sie an defibriniertem Blute zu er- 
kennen ist; aber auch der Vorgang an sich ist dadurch von der Ge- 
rinnung unterschieden, dass er durch Kochsalz, Kaliumnitrit und chlor- 
saures Kalium nicht beeinflusst wird. Die Fibringerinnüng wird 
sogar durch Ricin verlangsamt. Auch ist das sog. Ricinfibrin, d. h. die 
farblos gewaschene RicinMlung von echtem Fibrin durchaus verschieden. 

Bei größeren Ricindosen folgt auf die Agglutination ein Austreten 
des Blutfarbstoffes, das Ricin wirkt dann also auch hämolytisch. 
Diese Hämolyse ist nach Jacoby nur eine gesteigerte Form der Agglu- 
tination, nicht eine besondere Wirkung. 

Die agglutinierende Wirkung beschränkt sich nicht auf das Blut. 
Lau fand, dass Ricin auch Eiterzellen und Organzellen konglutiniert, 
Milch zum Gerinnen bringt, in Hühnereiweiß- und Plasmonlösungen Ge- 
rinnsel bildet, Myosinlösungen und Menschenserum dagegen nicht be- 



1) KoBERT, lieber vegetabilische Blntagglutinine. Sitzungsb. d. naturf Ges., 
Rostock, 26. V. 1900. S. A. 



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— 168 — 

einflusst, während Stillmakk bei den Seris von Hund, Katze, Bind und 
Halm einen Niederschlag durch Ricin beobachtet hat. 

Die Blutkörperchen verschiedener Arten zeigen, wie bei den bakte- 
riellen Lysinen, eine verschiedene Empfindlichkeit. 

Das Blut hochimmuner Tiere, z. B. Ziegen, ist gegen ßicin noch 
vollständig empfindlich, eine Immunität durch Rezeptorenmangel, ver- 
gleichbar der natürlichen, tritt also nicht ein. 

Lau*) hatte für die Blutkörperchen der Fische eine vollständige 
Resistenz gegen Ricin gefunden, doch zeigte Fbänkel^), dass diese 
nur relativ ist, dass aber bei größeren Ricindosen auch das Barbenblut 
(Barbus fluviatilis) agglutiniert wird. Es liegt diese Resistenz an dem 
Vorhandensein eines normalen Antikörpers im Fischserum. Auch Ricin- 
antitoxin aus Ziegenserum hat schützende Wirkung. Dagegen hat um- 
gekehrt das normale Barbenserum keine antitoxische Wirkung gegen 
die Ricinwirkung auf Katzenblut. 

Sehr interessant ist nun die Frage, inwieweit diese Blutwirkung in 
vitro eine Bedeutung fUr das Zustandekommen der allgemeinen Ri- 
cinvergiftung hat. Die älteren Beobachter, speziell Stillmark 
neigten dazu, die Hämorrhagieen und Nekrosen durch einen ähnlichen 
Gerinnungsvorgang innerhalb der Gefäßbahn zu erklären. Nun hat man 
aber einerseits Thrombosen nie gefunden; andererseits sind, wie oben 
gezeigt, diese Erscheinungen auch als Reizwirkungen des Giftes in loco 
zu deuten. Ebensowenig sprechen die zentralen Symptome etwa für 
eine Verstopfung der Himarterien. 

Vor allem aber wird diese Annahme, dass die Blutwirkung des Ri- 
cins als Todesursache verantwortlich gemacht werden könnte, dadurch 
hinfällig, dass Müller zeigen konnte, dass diese Konglutination im 
lebenden Blut überhaupt nicht eintritt. Ferner machte er darauf auf- 
merksam, dass Pepsinsalzsäure zwar die Giftwirkung nicht tangiert, 
die Blutwirkung aber aufhebt, was allerdings von [Lau wieder ge- 
leugnet wird, andererseits aber von Jacobt (s. u.) doch zur Evidenz 
nachgewiesen ist. 

Diese Frage ist deshalb von besonderer Wichtigkeit, weil damit ein 
Argument für die Entscheidung gegeben werden soll, ob das Ricin ein 
einheitlicher Stoff ist, oder ob man die Blutwirkung völlig von der 
toxischen zu trennen hat, in der Weise, dass es zwei verschiedene Be- 
standteile des Ricinussamens sind, die hier in verschiedener Weise 
wirksam sind, ein Standpunkt, der z. B. von Cushny und Müller ver- 
treten wird. 

Indessen ist es sehr wahrscheinlich, dass diese Fragestellung keine 
präzise ist. Es ist nach der EHRLiCHSchen Theorie durchaus denkbar, 

1) Lau, Ueb. vegetabil. Blntagglntinine. Dias. Rostock, 1901. 

2) Prankel, Ueb. d. Wirkg. d. RicinB auf Fischblut HofoQ. Beitr., IV, 224 
(1903). 



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— 169 — 

dass das Rioin ein etwas komplizierter gebauter Receptor zweiter Ord- 
nung ist, der zwar nur eine haptophore, aber zwei ergophore Gruppen 
besitzt: nämlich eine toxophore, die die Giftwirkung, und eine andere, 
die die Agglutination auslöst, und für die man den Terminus: »agglu- 
tinophore« Gruppe gebildet hat. 

Mit dieser Annahme lässt es sich leicht vereinigen, dass diese bei- 
den ergophoren Gruppen yerschieden leicht zerstörbar sind, wie es bei 
der Pepsin-HCl-Verdauung thatsächlich geschieht, so dass auch dann 
eine Trennung in zwei Substanzen nicht nötig ist 

Andererseits ist aber doch eine größere Mannigfaltigkeit der Ricingifte 
nicht von der Hand zu weisen. Wie Frankel zeigte, ist das Antitoxin des 
normalen Barbenserums ohne schützende Kraft einerseits gegen die Wirkung 
des Ricins auf Eatzenblut, andererseits aber auch gegen die toxische Wir- 
kung auf Kaninchen und auf die Barben selbst, so dass hier ein Hinweis 
auf ein eigenes Fischblutagglutinin und Fischgift gegeben ist. 

Wir können diese Frage erst dann genauer besprechen, wenn wir 
die Berechtigung, die Ricinwirkung mit Hilfe der Seitenkettentheorie zu 
bewerten, dargethan haben. 

Wie bei den echten Toxinen sind es stets vier Punkte, die die 
Zusammengehörigkeit zu den Haptinen in sich schließen: 

Die niedrige letale Dosis, die Inkubationszeit und das abweichende 
toxikologische Verhalten haben wir bereits gestreift. Aber die Haupt- 
sache ist die Antitoxinbildung im Organismus, das Auftreten einer 
aktiven und passiven erworbenen Immunität. 

Auch in dieser Hinsicht schließt sich das Ricin vollkommen den 
Bakterientoxinen an. Sind es doch gerade Versuche mit Ricin, die 
Ehrlich zu seinen epochemachenden Arbeiten über die antitoxische 
Immunität geführt haben. 

Bioinimmunitat« 
Ehrlich 1) gelang es, weiße Mäuse und Kaninchen gegen Ricin zu 
immunisieren, indem er ihnen erst kleine Dosen per os gab (Kaninchen 
auch vom Konjunktivalsack aus), und dann, wenn eine gewisse Immunität 
erreicht war, durch vorsichtige Steigerung der Dosen bei subkutaner 
Injektion die Immunität ziemlich hoch treiben konnte, was ca. 4 Monate 
dauert. Nach 8 Wochen vertrugen auf diese Weise vorbehandelte Mäuse 
die tödliche Dosis für den Menschen. Während für Kontrolltiere 1 cm^ 
per 20 g Körpergewicht bei einer Verdünnung von 1 : 200000 sicher 
tödlich war, konnte Ehruch bei immunisierten Tieren auf 1 : 500, ja 
sogar 1 : 250 heraufgehen, so dass eine 400 — 800 fache Immunisierung 
erzielt wurde. Die Erzeugung von Panophthalmitis war bei immunen 



>) Ehrlich, Exper. Unters, üb. Immunität Dtsch. med. Woch., 1891, 976, 1218. 
— Zur Kenntnia d. antitox. Wirkg. Fortschr. d. Med., 1897, 41. 



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— 170 — 

Tieren selbst durch große Dosen nicht mehr zu bewirken, dagegen traten 
die lokalen Nekrosen auch bei diesen noch häufig ein. 

Das Serum dieser immunisierten Tiere enthält nun ein Antiricin, 
welches genau wie die Bakterienantitoxine das Eicin in vitro in der 
Weise zu binden vermag, dass sowohl die toxische, als auch die agglu- 
tinierende Wirkung nach bestimmten zahlenmäßigen Verhältnissen auf- 
gehoben wird. Besonders wichtig ist dabei die ebenfalls schon von 
Ehrlich aufgefundene Thatsache, dass die gleiche Serummenge in 
gleicher Weise beide Wirkungen beeinflusst. Dass auch hier eine 
einfache Bindung von Toxin mit Antitoxin vorliegt, dafür hat 
Danyscz^) noch den Grund angeführt, dass man aus einem neutralen 
Eicin -Antiricingemisch durch proteolytische Fermente das Antitoxin 
zerstören kann, so dass die Toxizität wieder hervortritt; Tiere, denen 
rein neutrale Mischung per os gegeben wird, sterben an typischer Eicin- 
vergiftung. 

Die EHRLiCHSchen grundlegenden Versuche sind nun in neuester 
Zeit von M. Jacob y 2) in einer sehr exakten und theoretisch weittragenden 
Arbeit bestätigt und ausgebaut worden. 

Jacoby nimmt mit Ehrlich an, dass bei der Einwirkung von 
Antiricin auf Eicin eine wirkliche quantitative Bindung eintritt, und 
dass das Antiricin aus abgestoßenen normalen Eezeptoren besteht. 

Eine sehr interessante Abweichung von dem Verhalten der Bakterien- 
toxine hat er hierbei beobachtet. Bringt man nämlich wirksames Immun- 
serum mit Eicinlösungen zusammen, so entsteht ein deutlicher Nieder- 
schlag, ebenso wenn man gereinigte Antiricinlösungen (s. u.) verwendet 
Er bleibt dagegen ebenso aus, wenn man wirksames Eicin mit normalem 
Serum, oder mit zerstörtem Antiricin, wie wenn man durch Kochen 
inaktiviertes Eicin mit Antiricin zusammenbringt. 

Danyscz ^) hat gleichzeitig diesen Niederschlag beobachtet und giebt an, dass 
es stets ein Optimum der Mischung giebt, wo die Fällung am stärksten ist. 
Auf die Schlüsse, die er daraus zieht, kommen wir unten zurück. 

Wie Jacoby wohl mit Eecht annimmt, ist hierbei die Bindung 
Eicin- Antiricin das Primäre. Der entstandene neutrale Doppelkörper 
ist nun aber in diesem Falle schwer löslich und bewirkt einen Nieder- 
schlag, in den nun auch, wie üblich, andere Eiweißstoflfe des Serums 
mit hineingerissen werden; denn nur dadurch ist die Menge des 
Niederschlags zu erklären. Es handelt sich aber nicht etwa um eine 
Ausfällung der Eiweißstoflfe an sich durch ein etwa entstandenes Präzi- 
pitin, die nun sekundär das Eicin -Antiricingemisch mitreißt; denn 
auch eiweißfreies Eicin erzeugt im Organismus ein Serum, das diese 
Eeaktion giebt. Außerdem spricht die strenge quantitative Bindung 

1) Danyscz. M^langes des toxines avec les antitox. Ann. Fast., XVI, 331 (1902 . 

2) Jacoby, lieber Ricinimmunität Hofm. Beitr. z. Cham. Physiol. u. PathoL, 
I, öl (1901). 



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— 171 — 

gegen die Auffassung, dass etwa das Ricin nur durch Adsorption bei 
einer Mitausf äliung der Eiweißstoffe entgiftet würde, denn die auf andere 
Weise, z. B. durch NukleKnsäure (s. o.) erzeugten ricinhaltigen Eiweiß- 
fäUnngen sind giftig, dieser Niederschlag aber nicht. Sobald dagegen 
etwas Ricin im Ueberschuss vorhanden war, blieb das Filtrat gerade 
so giftig, wie es dem Ueberschuss entsprach. Eine so quantitativ 
geregelte Entgiftung kann durch eine Adsorption nicht erklärt werden. 

Ein scheinbar paradoxes Phänomen findet durch die Theorie eine 
einfache Erklärung. Es sind nämlich die gewaschenen Erythrocjten 
hochimmuner Tiere mindestens so empfindlich, ja scheinbar noch 
empfindlicher, als normale. Theoretisch ist denkbar, dass die Rezeptoren- 
bildung sich zeitweise erschöpfen kann, so dass die Erythrocyten nur 
wenig oder gar keine enthalten, so dass ihre Empfindlichkeit sehr 
gering oder Null sein könnte; das scheint beim Aalblut (s. d.) häufig 
einzutreten. 

Umgekehrt lässt die Theorie aber auch den Fall voraussehen, dass 
die Erythrocyten grade in einer sehr lebhaften Bildung von Rezeptoren 
begriffen sind, dass sie also mehr als die normale Zahl enthalten; und 
dass deshalb ihre Empfindlichkeit deutlich gesteigert ist. 

Andererseits ist es selbstverständlich, und ist durch die Thatsachen 
bestätigt, dass die Erythrocyten immuner Tiere in ihrem natürlichen 
Serum durch den Gehalt dieses Serums an Antikörper ganz beträchtlich 
geschützt werden. Jacoby brauchte bei einem Versuch die zehnfache 
Menge zur maximalen Agglutination, wie bei normalem Blut. 

Diese Erscheinung, dass die Haptine sich überall lieber an freie 
Seitenketten, als an gebundene anhaften, ist für alle Toxine beob- 
achtet. Die freien Rezeptoren scheinen fast durchweg eine größere 
Avidität zu besitzen wie die an den Zellen sitzenden. 

Diese Thatsache ist die Grundlage für jede »Heilung« einer In- 
toxikation, d. h. Zerreißung der bereits eingetretenen Bindung an 
die Zelle durch das Antitoxin. Dass diese Heilung bei Diphtherie und 
besonders beim Tetanus nur noch sehr kurze Zeit nach der Bindung 
möglich ist, haben wir gegebenen Ortes gezeigt; ganz ähnlich liegen 
auch bei den Blutgiften die Dinge, indem Madsen beim Tetano- 
lysin (s. d.) und Jacoby beim Ricin ein Sistieren der Agglutination 
durch nachträglichen Zusatz von Antiricin beobachten konnte. 

Trotz der geringeren Avidität bindet sich aber die haptophore Gruppe 
des Ricins bei Abwesenheit von freien ebenso quantitativ an die an 
den Erythrocyten festhaftenden Rezeptoren; gerade wie Tetanusgift 
vom Zentralnervensystem, so wird durch Erythrocyten das Ricin quan- 
titativ verankert, das Gemisch wird gegenüber einer neuen Blutprobe 
wirkungslos. 

Die agglutinierende Wirkung wird also dadurch völlig paralysiert, 
dass ihr Prinzip sich restlos an die Erythrocyten bindet. Man musste 



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— 172 — 

nun a priori annehmen, dass in dem Fall der Einheitlichkeit des Ricins 
anch die toxische Wirkung solcher Mischnngen aufgehoben ist. Das 
ist aber nicht der Fall. Müller fand die Filtrate von durch Ricin 
hervorgerufenen Niederschlägen zwar ohne agglutinierende Kraft, aber 
toxisch, wenn auch in erheblich abgeschwächtem Maße und mit nicht 
ganz typischem Sektionsbefiind. 

Diese Versuche hält Jacoby nicht für völlig einwandsfrei. Er hält 
es für möglich, dass in dem Ricinblutniederschlag sich noch mechanisch 
mitgerissenes Ricin befindet, das bei der langsamen Filtration wieder 
frei wird^). Aber auch die Versuche von Jacoby selbst, die er mit 
ungerinnbar gemachten, nicht filtriertem Blut anstellte, gaben das gleiche 
Resultat Das Gemisch war von quantitativ gleicher Giftigkeit Er macht 
sich indessen selbst den sehr wichtigen Einwand, dass auf diese Weise 
zwar das Gift in gebundener Form an die Gewebszellen gelangt; dass 
diese aber wohl die Fähigkeit besitzen können, diese Bindung zu zerreißen 
und zu ihrem eigenen Unheil das Gift an sich zu ziehen. Denn ebenso 
wie die freien Rezeptoren, so können auch die Gewebsrezeptoren 
eine größere Avidität zum Toxin besitzen, als die der Erythrocyten, 
wenngleich die ihre wieder geringer sein muss, als die der freien Re- 
zeptoren; sonst könnte ja eine Immunität gegen die toxische Wirkung 
nicht zustande kommen. 

Diese Ansicht wird übrigens meines Erachtens durch einen von Jacoby 
übersehenen Grund gestützt. Wenn wir nämlich annehmen, dass die Gewebs- 
rezeptoren die haptophore Gruppe des Ricins leichter binden, als dies die Re- 
zeptoren der Blutkörperchen thun, so ließe sich damit erklären, warum bei 
der Vergiftung mit Ricin im lebenden Tier die Bluterscheinungen gegenüber 
der Allgemeinwirkung so in den Hintergrund treten, eine Thatsache, die sonst 
kaum zu erklären ist. 

Auch durch diese Versuche ist also die Frage, ob das Ricin aus 
zwei getrennten Körpern besteht, nicht zu entscheiden. 

Jacoby hat dann in einer weiteren Arbeit 2) die EmtLiCHSche Tren- 
nungsmethode für Hämolysine derart angewendet, dass er Mischungen 
von Ricin mit Blutkörperchen centrifdgierte. Die agglutinierende Wir- 
kung war aus der centrifugierten Flüssigkeit stets verschwunden, 
dagegen schwankte der Giftgehalt zwischen 25 und 90)|^ des ur- 
sprünglichen. Jedenfalls war das Gift nie quantitativ an die Rezep- 
toren der Blutkörper verankert. Die Giflrwirkung war auch qualitativ 
unverändert 

Mit diesem vom Agglutinin befreiten Gift hat dann Jacoby Tiere 
immunisiert. Das erhaltene Immunserum zeigte nicht nur an ti toxische, 



1) 1. c. S. 68. So wenigstens glaube ich den Sinn des Satzes , der etwas gar 
zu kurz aosgesprochen ist, verstanden zu haben. 

2) Jacoby, üeb. Ricinimmunität Hofm. Beitr., II, 635 (1902). 



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— 173 — 

sondern auch antiagglntinierende Wirkung, jedoch braucht das 
agglutininfreie Plasmagift erheblich weniger Antitoxin, als das gewöhn- 
liche fiicin. 

Genau so verhielt sich fiicin, das mit Pepsin- HCl vorbehandelt 
war. Auch dieses agglutininfreie Gift erzeugte ein Antitoxin gegen 
beide Funktionen des fiicins. Die Wirkung der Pepsin- HCl auf Ricin 
hatte Jacobt schon in seiner ersten Arbeit studiert. Zwar konnte er 
den Beftind Müllers bestätigen: thatsächlich nahm die Agglutinations- 
kraft ganz beträchtlich ab, und zwar bis auf V^o- 

Aber es war nach wie vor die gleiche Antitoxinmenge nötig, 
um die stark verminderte Agglutinationswirkung, wie die unverändert 
gebliebene toxische Wirkung aufzuheben. 1 cm^ Antitoxin neutralisierte 
die an sich außerordentlich geringe agglutinierende Kraft von 5 cm^ 
Pepsinricin; dieselbe Menge reichte aber auch hin, um die toxische 
Wirkung derselben Menge, entsprechend mindestens 15 mg Ricin (30 letale 
Dosen) zu paralysieren. Aber auch darüber hinaus kann man noch 
enorme Giftmengen zusetzen , bis zu 8 cm^ Pepsinricin ; die Tiere ma- 
gerten zwar ab, starben aber nicht. 

Man wird bei diesen Dingen lebhaft an die Verhältnisse bei Bak- 
teriengiften, speziell Tetanus- und Diphtheriegift erinnert Auch hier 
fand Ehrlich, dass man zu völlig neutralen Gemischen (L^) viel mehr 
als die einfache letale Dosis zusetzen muss, um Lf zu erzielen (s. die 
Größe D im Allg. Teil). 

Noch ein sehr interessantes Ergebnis haben die jACOBYSchen Ver- 
suche gezeigt. Während nämlich vor der Pepsinbehandlung 1 cm^ 
Antitoxin 0,26 cm^ der Ricinlösung neutralisierte, war diese Menge 
nach der Wirkung fUr 5 cm* ausreichend. Dabei war die Giftigkeit an 
sich unverändert geblieben, so dass an eine Zerstörung von Ricinmole- 
ktQen in toto nicht zu denken ist. 

Wohl aber geht aus diesen Versuchen hervor, dass eine ganze Menge 
von haptophoren Gruppen verschwunden ist, die sich in dem 
unbehandelten Ricin an die Rezeptoren des Serums gebunden hatten, 
nun aber keine Ansprüche mehr an das Antiricin stellen. Diesen hapto- 
phoren Gruppen können aber toxophore nicht entsprochen haben, da 
die Giftwirkung unverändert geblieben ist. Wir werden also mit Not- 
wendigkeit zu dem Schluss gedrängt, dass in dem Rohricin ungiftige, 
haptophore Komplexe vorhanden sein müssen. Jacoby formuliert 
also mit Recht seine Ansicht, dass es Ricintoxo'lde giebt, die durch 
Pepsinsalzsäure zerstört werden. Und zwar müssen es Syn- 
oder Protoxo'ide sein, da sie bei der Neutralisation mit abgesättigt 
werden. 

Umgekehrt liegen die Verhältnisse bei der agglutinierenden Funk- 
tion. Hier nimmt zwar auch die Menge der haptophoren Gruppen ab, 
aber noch mehr die der ergophoren. 



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— 174 — 

Nehmen wir nun an, dass die haptophoren Gruppen die gleichen 
sind, so bilden sich hier also wahrscheinlich neue, eigenartige 
Toxoide, die nur noch aus haptophorer und toxophorer Gruppe 
bestehen, die agglutinophore dagegen verloren haben. 

Und dass die haptophoren Gruppen thatsächlich identisch sind, dass 
das Bicin also ein einheitliches, aber kompliziert gebautes Haptin ist, 
dafür spricht vor allem das völlige Gleichbleiben der antitoxischen und 
antiagglutinierenden Wirkung nach der Pepsinbehandlung und das Er- 
gebnis der Immunisierungsversuche mit agglutininfreiem Bicin (s. o.). 
Bei sicher verschiedenen Haptinen, wie z. B. Tetanospasmin und 
Tetanolysin konnte Ehrlich von einem derartigen Parallelismus nichts 
bemerken. 

Jedoch spricht, wie wir oben sahen, auch manches gegen eine 
Identität, so dass die Frage noch nicht als definitiv geklärt zu gelten 
hat. Nehmen wir aber die Identität an, so besteht das käufliche 
Bicin aus Vollkomplexen: 

toxophore ^W^^"^ agglutinophore 



T 



der Form / 7 gebildet. 



.haptophore 

sowie aus Toxoiden entweder ohne jede ergophore Gruppe ^), oder nur 

mit der agglutinierenden, also: uj Diese werden durch Pepsin 

beseitigt und dabei möglicherweise noch aus Vollkomplexen Toxoide von 

Das frische Bicin scheint wie das Diphtheriegift weniger Toxoide zu 
enthalten, denn wie Jacoby angiebt, nimmt das MERCKSche Präparat 
allmählich an Wirksamkeit ab. 

Außer diesen notwendigerweise als Pro- resp. Syntoxoide aufeu- 
fassenden Körpern scheint es aber auch, worauf Jacoby nicht hinweist, 
Toxone des Bicins zu geben; darauf lassen wenigstens die oben an- 
gegebenen Verhältnisse von D (L^. — Lo) schließen, die djirchaus an die 
Verhältnisse beim Diphtheriegift erinnern. 

Aehnlich wie bei den Bakteriengiften hat man jetzt auch beim Bicin 
in Zweifel gezogen, ob nicht hier auch dissoziierte Gleichgewichtszustände 
vorkommen. Danyscz (1. e.) fand thatsächlich sehr auffallende Verhält- 



1 



Dies ist eigentlich wahrscheinlicher; dass es ToxoYde gerade mit der so 
empfindlichen aggintinophorcn Grappe geben sollte, ist schwer vorzostellen. Diese 
Frage ist im übrigen von ganz sekundärer Bedeutung. 



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— 175 — 

nis8e. Dass die Stärke des NiederBchlags bei der Mischung (s. o.) ein 
Optimum hat, ist wohl nur ziemlich gewaltsam so zu deuten; wichtiger 
ist aber, dass es eine absolut neutrale Mischung nach Danyscz Über- 
haupt nicht giebt. Er fand, dass diese Gemische stets gleichzeitig 
toxische und antitoxische Wirkung besitzen: d. h. zwar selbst 
schwach giftig wirken, aber doch bei Zusatz einer vollen letalen Dosis den 
Tod verzögern oder ganz hindern. Seine darauf basierten Spekulationen 
sind ganz ähnlich denjenigen Bordets (s. im AUg. Teil). In Wirklich- 
keit durfte es sich hier wahrscheinlich um dissoziierte Gleichgewichte 
nach Art der von Madsen & Arrhenius am Tetanolysin gefundenen 
handeln. 

Das Antiricin. 

Jacobt hat auch Versuche zur Isolierung des Antiricins angestellt 
Von vornherein sei bemerkt, dass eine Trennung etwa eines Antitoxins 
von einem Antiagglutinin in keiner Weise möglich ist, und dass wir 
also unbeschadet der theoretischen, oben behandelten Fragestellung mit 
einem einheitlichen Stoffe zu rechnen haben. 

Das Antiricin geht beim Aussalzen mit Ammonsulfat quantitativ in 
die Fraktion über, die bei V4 — Vs Sättigung ausfällt. Dadurch konnte 
es schon von einem großen Teile der anderen Kolloide getrennt werden. 

Versuche mit Trypsin, die in derselben Weise, wie oben beim 
Ricin geschildert, durchgeführt wurden, zeigten eine völlige Resistenz 
gegen dieses Ferment. 

Zweistündiges Erhitzen auf 60°, halbstündige Digestion mit gleichen 
Teilen Yio Normalschwefelsäure und Yio Normalnatronlauge bei 37°, 
Pepsinsalzsäure während einer Stunde bei 35° ließen das Antiricin un- 
verändert. Dagegen wird es durch Säuren bei 60° zerstört. 

Das Antiricin scheint also ein ähnlich beständiger Körper zu sein, 
wie die bakteriellen Antitoxine; es ist ein einfacher Receptor erster 
Ordnung; nur mit einer haptophoren Gruppe versehen. 

Stepanofp (1. c.) konnte 24 Stunden nach Injektion von antiricin- 
haltigem Serum noch Antitoxin im Blut von Kaninchen finden. Nach 
7 Tagen war das Antitoxin und auch die Giftfestigkeit verschwunden. 
Er fand es weder im Harn noch im Darmkanal, seine Ausscheidung ist 
also nicht nachweisbar; es wird vermutlich verbrannt. 

Das Abrin. 

Das Abrin ist ein dem Ricin sehr ähnliches Toxin aus dem Jequirity- 
samen, dem Samen von Abrus precatorius, einer in Ostindien, vielleicht 
auch in Brasilien heimischen Papilionacee. Es findet sich fast in der 
ganzen Pflanze (Hexseval*) 



1) Henseval, L'abrine. La Cellule, XVII, 139. Malys Jb., 31*, 910. 



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— 176 — 

Es wurde von Britxlants & Vennemann^) entdeckt, die zuerst an- 
gaben, dass das wirkende Prinzip der Jequiritysamen nichts mit Bak- 
terien zu schaffen habe, sondern ein Enzym, ein toxischer Eiweißstoff 
sei. Zu denselben Resultaten gelangten Warden & Waddell ^) unter 
Robert Kochs Leitung in Calcutta. Sidney Martin 5) konnte zeigen, 
dass das Abrin aus einem Globulin und einer Albumose besteht. Die 
Albumose wirkt ähnlich, aber viel schwächer als das Globulin ; d. h. 
nach unsrer heutigen Anschauung bindet sich mehr Gift an das Glo- 
bulin als an die Albumose, von denen beiden das eigentlich toxische 
Prinzip verschieden ist. 

Seine hämolytische Ejraft fand Eobert 1889 und ließ sie durch 
seinen Schüler Hellin ^) genauer untersuchen. 

Seine Wirkung ist der des Ricins so ähnlich, dass Ehrlich (1. c.) 
es nochmals für notwendig erachtete, seine Sonderexistenz zu prüfen. 
Es sind thatsächlich einige Unterschiede zu konstatieren, die es un- 
zweifelhaft machen, dass das Abrin ein zwar dem Ricin sehr ähn- 
licher, aber doch selbständiger Stoff ist. 

Es ist viel weniger toxisch als das Ricin, zumal per os. Ehrlich 
fand, dass dieselbe Verdünnung (1 : 100000) subkutan in 6 Tagen Mäuse 
tötete, die beim Ricin schon nach 60 St. zum Exitus führte. Dagegen 
fand Calmette (s. u.) für Kaninchen 0,5 mg pro kg in 48 St tödlich, 
bei Mäusen 0,001 mg pro Tier. Römer** fand für 1 g Maus die Dos. let. 
zu 0,0005 mg. 

InlSltrationen treten zwar ebenfalls auf, doch sind Nekrosen selten. 
Dagegen ist es eine spezifische Wirkung des Abrins, dass es um die 
Injektionsstelle herum einen starken Haarausfall, bis zur völligen 
Eahlheit bewirkt. 

Der Sektionsbefund ist fast derselbe wie beim Ricin; außerdem 
findet sich eine eigentümliche hydropische Degeneration des Herzmuskels 
(Werhofsky «). Es wirkt im Gegensatz zu Ricin auch in kleinen Dosen 
auf Fischblut (Lau 1. c). 

Entscheidend aber ist der Umstand, dass sich gegen das Abrin eben- 
falls eine Immunität erzeugen lässt, die gegen Ricin nicht schützt; 
ebenso sind ricinfeste Tiere gegen Abrin nicht immun. 



*) Brüylants & Yennehann, Le Jequirity. Bull. acad. m6d. Belgiqne, IH, 
18, 147 (1884). 

2) * Warden & Waddell, Non-bacillar nature of Abrus poison. Calcutta 1884. 

3) Martix, The proteids of the seeds of Abrus. Proc. Roy. Soc., 42, 331 (1887). 
— Martin & Wolfbnden, Physiolog. action of the seeds of Abrus prec. Ibid., 46, 
94 (1889/90). — Martin, The toxic action of the albumose ftom seeds of Abrus 
prec. Ibid., 46, 100 (1889/90). 

«) Hellin, Der giftige Eiweißkörper Abrin. Diss. Dorpat, 1891. 
^) Römer, Ueber Abrinimmunität. Arch. f. Ophthalm., 52, 90 (1901). 
ö) Werhofsky, Beitr. z. pathol. Anat. der Abrinvergiftung. Zieglers Beitr. z. 
pathol. Anat, XVIII, S. 116 (1895). 



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-^ 177 — 

Wirkung auf das Auge. 

Die Wirkung auf die CoDJunctiva ist viel energischer als die des 
Eicins: es treten nach AbriniDJektionen auch dauernde schwere Schä- 
digungen der Cornea oder Panophthalmitis auf. Infolge der energisch 
reizenden Wirkung wird das Abrin bisweilen in der Augenheilkunde 
angewendet; die heftige Entzündung bringt häufig Gefäßbildungen 
und Narben in der Hornhaut zum Schwinden. Die therapeutisch zu- 
lässige Anfangsdosis ist nach Römern] für Kaninchen ca. 0,01 mg. 

Man kann nach Ehrlich die Abrinwirkung dadurch regulieren, dass 
man die Conjunctiva selbst mit steigenden Dosen immunisiert; Eöm£R^) 
hat zu praktischen Zwecken diese Immunisierung sehr hoch getrieben, 
da man dadurch schwerere Erscheinungen vermeiden kann, ohne die 
therapeutische Wirkung zu beeinträchtigen. Dabei bildet sich in der 
Conjunctiva selbst Antitoxin. 

Ein Teil des Giftes wird femer von dort aus resorbiert und erzeugt 
eine allgemeine Antitoxinbildnng und Immunität, wenn auch nicht so ener- 
gisch, wie bei der subkutanen Injektion. Es wurde höchstens 500 A.E. 
erreicht, die lokale Immunität tritt schneller ein als die allgemeine. 
Passive Immunisierung der Bindehaut mit Antiabrinserum schützt nur so 
langC; als das Antitoxin selbst noch vorhanden ist. Dagegen ist bei subku- 
taner Einführung reichlicher Mengen Antitoxin auch das Auge geschützt. 
Eine ausgebrochene Abrinophthalmie kann mit Heilserum lokal bekämpft 
werden, selbst in sehr schweren Fällen. Auch subkutane Anwendung 
großer Dosen wirkt heilend. 

Eigenschaften des Abrins. 

Versuche, über die Konstitution des Abrins eine Aufklärung zu 
erlangen, sind von Hausmann 2) angestellt worden, der die Jacob vsche 
Methodik für das Ricin (s. dort) auf das Abrin übertrug. 

Abrin fällt bei 60proz. Sättigung mit Ammonsulfat, und lässt sich 
durch mehrfaches Umfallen von einem Teil des beigemengten Eiweißes 
befreien. Das so gereinigte Abrin wirkt sehr intensiv toxisch, häufig 
so schnell, dass die Tiere sterben, ehe es zu Nekrosen und Darm- 
erscheinungen kommt. 

Dem Trypsin gegenüber ist Abrin wie Ricin beständig. Infolgedessen 
gelang es wie beim Ricin, ein Präparat zu gewinnen, das bei sehr 
hoher Giftigkeit keine Biuretreaktion mehr zeigte. 

Dagegen ist die agglutinierende Wirkung gegen Pepsin- HCl sehr 
viel resistenter als die des Ricins (s. d.), bei energischer Einwirkung 
verschwinden schließlich die toxische und die agglutinierende Funktion 
fast gleichmäßig. 



1) Römer, üeber Abrinimmunität. Arch. f. Ophthalm., 52, 72 (1901). 

2) Hausmann, Zur Kenntnis des Abrins. Hofm. Beitr., II, 134 (1901). 

Oppenheimer, Toxine und Antitoxine. 12 



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— 178 — 

Sonst ist Über die chemische Natur des Abrins noch nichts Spezielles 
auszusagen; soweit man weiß, verhält es sich in diesen Beziehungen 
genau wie Kicin. Nach Calmette^) wird es durch Jodtinktur, Gold- 
ehlorid und Hypochlorite unwirksam. 

Es scheint wenig empfindlich gegen Verdauungssäfte zu sein. Nur 
Hellin fand, dass es durch die Fermente des Darms zerstört wird. 
Dagegen ist nach Nencki & Schoumow-Simanowski*) Pepsin auf 
Abrin ohne Einfluss. 

Ebenso fand Repin^), dass die verdünnten Verdauungssäfte und auch 
die lebende Schleimhaut des Magens und Darmes, sowie die Darm- 
bakterien unwirksam sind. Er nimmt vielmehr an, dass die geringere 
Schädlichkeit bei Darreichung per os, die nach Henseval (1. c.) 200 bis 
250mal kleiner ist als subkutan, dadurch bedingt ist, dass das Abrin 
einerseits sehr empfindlich gegen Säuren ist, also wohl im Magen zum 
Teil zerstört wird; andrerseits aber ist es außerordentlich schwer diflFu- 
sibel. Er fand, dass nach 48 St. noch nicht 1 : 250 gegen Wasser 
herausdialysiert war. Es bleibt also deshalb im Darme, und er konnte 
es in den Faeces wiederfinden. Doch giebt Henseval (1. c.) an, dass 
es von Dttnndarm und Rectum auch absorbiert wird, sowie von der Blase 
und dem Peritoneum. 

Calmette & D^l^arde haben die Ausscheidung des Abrins unter- 
sucht. Das Herzblut der vergifteten Tiere erwies sich nach großen 
Dosen (10 mg intravenös) als toxisch; der Harn dagegen als völlig frei. 
Andererseits aber fanden sie, dass das Abrin unverändert im Darmtractus 
wiedererscheint, wenn man es Kaninchen intravenös giebt. Sowohl 
Herzblut wie Darminhalt immunisierter Tiere enthielt das eingeführte 
Gift nicht. 

Interessant ist, dass Calmette^) mit Hilfe der spezifischen Antitoxine 
nachweisen konnte, dass die vergifteten Holzspänchen, mit denen die Inder 
aus böswilliger Absicht Haustiere vergiften, mit Jequiritykömchen gespickt 
sind; auch mit Schlangengift imprägnierte Lappen, die Rindern in das Rectum 
gestopft werden und sie so vergiften, konnten auf diesem Wege als solche 
erkannt werden. 

Einige Versuche über das Antiabrinserum, die Calmette & Del]£ardb 
angestellt haben, mögen hier noch erwähnt werden. 

Das Antiabrin verliert bei 58" seine Wirksamkeit. Chlorkalk und 
Goldchlorid sind ohne Wirkung. 

Nach Hausmann (1. c.) wird durch sehr geringe Antiabrindosen die 



^] Calmette & Delearde, Sur les toxines non microbiennes. Ann. Fast, X, 
675 (1896). 

2) Nencki & Schoumow-Simanowski, Die Entgiftung d. Toxine d. d. Ver- 
dauungskanal. C. f. Bakt, 23, 840 (1898). 

3) Repin, Sur TabBorption de Tabrine par les muqueuBes. Ann. Fast, IX, 617 (1895). 

4) Calmette, Sur le s^rum antiv^nimeux. Compt. rend. de TAc, 122, 203 (1896). 



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— 179 — 

Agglutinienmg erheblich beschleunigt, was wohl durch die Beseitigung 
hindernder, an sich unwirksamer Proagglutinoide (Protoxoide) zu er- 
klären ist. 

Bei der Mischung von Abrin und Antiabrin entsteht wie beim Ricin 
ein starker Niederschlag, auch wenn man biuretfreies Abrin verwendet 

Das Erotin. 

Ein drittes, dem ßicin nahestehendes Toxin findet sich in den 
Samen von Groton tiglium, einer ostindischen Euphorbiacee, aus denen 
das Krotonöl, das stärkste uns bekannte Drasticum dargestellt wird. 

Stillmarck (1. c.) hat zuerst mit analogen Methoden wie zur Ricin- 
bereitung das toxische Prinzip dieser Samen dargestellt. 

Einer genaueren Untersuchung wurde das Krotin von Elfstrand i) 
unterzogen. Er extrahierte die mit Alkohol und Aether entölten Samen 
mit Wasser, lOproz. Kochsalzlösung oder Glycerin, fällte den wirksamen 
Bestandteil mit Alkohol oder Ammonsulfat, und reinigte ihn durch 
Dialyse. 

Es zeigt eine weitgehende Analogie mit den anderen Toxinen. Bei 
70° wird es in Lösung zerstört, die trockenen Samen bei 110® ent- 
giftet. Pepsinsalzsäure soll es zerstören. 

Toxische Wirkungen des Kretins. 

Für Frösche fand Elfstrand die letale Dosis zu etwa 0,23 g pro 
kg. Die Tiere starben unter progressiver Lähmung, Abnahme der 
Reflexerregbarkeit und der faradischen Erregbarkeit, die erst das Gehirn, 
dann Rückenmark, Nerven und schließlich auch die Muskeln befällt. 
Hyperämie und Ekchymosen der Darmschleimhaut finden sich auch 
hier wieder. Auf das Herz hat auch das Erotin nur geringen Einfluss, 
auch die Endorgane der motorischen und sensiblen Nerven werden 
nicht beeinträchtigt. 

Hechte sterben nach 0,04—0,1 pro kg unter Dyspnoe und 
Lähmung. 

Bei Warmblütern (Kaninchen, Hunde, Katzen, Ratten, Hühner 
u. s. w.) treten lokale Infiltrationen und Nekrosen auch beim Krotin auf, 
wenn auch geringfügiger Natur. Es ist weit weniger giftig als Ricin 
und Abrin (letale Dosis ca. 0,05 — 0,1 pro kg), und auch wieder per os 
sehr viel weniger wirksam. 

Die Allgemeinwirkungen sind denen des Ricins sehr ähnlich: Krämpfe, 
Sinken des Blutdruckes, Herabsetzung der Temperatur, Respirations- 
lähmung u. s.w. Auch eine geringe Augenwirkung ist nachzuweisen. 

Der Sektionsbefund ist ebenfalls ganz ähnlich. 



*) Elfstrand, üeber blutkörperchenagglutinierende Eiweiße. Görbersdorfer 
Veröffentlichungen, herausg. von R. Kobert. Stuttgart, F. Enke, 1898, 1. 

12* 



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180 



Die Wirkung auf das Blut. 

Elfstrand fand, dass Erotin auf das Blut von Rindern, Schafen, 
Schweinen, Hechten und Fröschen agglutinierend wirkt, sehr wenig auf 
das Blut von Katzen, fast gar nicht auf Menschenblut, gar nicht auf 
das Blut von Hunden, Meerschweinchen, Ratten, Huhnem, Gänsen und 
Tauben. 

Lau (1. c.) ergänzte diese Befunde insofern, als er Agglutination beim 
Barschblut, keine dagegen bei der Katze und dem Igel fand. Beide 
fanden beim Kaninchenblut keine agglutinierende, sondern eine 
hämolytische Wirkung. Die präzipitierende Wirkung auf Serum soll 
beim Krotin fehlen. Auf gewaschene Erythrocyten und Stromata wirkt 
es ebenfalls agglutinierend. Sauerstoff soll die Krotinwirkung befördern, 
dagegen im Serum antitoxische Stoffe vorhanden sein, die die Wirkung 
hemmen. Auf Eiterzellen und andere Zellen hat es gar keinen oder 
einen viel geringeren Einfluss als Ricin, dagegen koaguliert es Milch. 
Mit der modernen Methodik der Hämoljsinforschung haben Ehrlich & 
Morgenroth ^) sowie Jacoby^) die Wirkungsart des Krotinhämolysins 
genauer untersucht 

Morgenroth stellte fest, dass das Krotin ein Haptin ist, da er bei 
Ziegen ein Immunserum erzielen konnte. 

Jacobt fand für die Zusammensetzung des Krotinolysins aus Am- 
boceptor und Komplement keine Anhaltspunkte, neigt vielmehr dazu, 
es als Haptin erster Ordnung wie das Ricin aufzufassen. 

Nach seinen Versuchen mit partieller Absättigung (vergl. im Allg. 
Teil) konstatierte er, dass das Krotin eine ähnlich komplexe Natur be- 
sitzen muss, wie das Diphtherietoxin, nur ist zu bemerken, dass minimale 
Dosen von Antitoxin die Giftwirkung in geringfügiger Weise steigern, 
also gänzlich ungiftige Prototoxoide fortschaffen, die einen Teil der 
Zellrezeptoren in Anspruch nehmen, und dadurch die Giftigkeit sogar 
verringern. Dann wird sehr schnell bei steigenden Antitoxindosen 
der Hauptteil des Giftes neutralisiert und dann folgt eine breite Zone 
sehr geringer Avidität, also Toxone, die nicht mehr zur kompletten 
Hämolyse führen, mit denen Jacoby aber immunisieren konnte. 

Wie bei anderen Blutgiften (s. z. B. b. Arachnolysin) geht auch hier 
die Unempfindlichkeit mit der Unfähigkeit, Gift zu binden, parallel. 
Hunde und Meerschweinblutscheiben binden fast gar kein Krotin. 

Ein thermostabiles Antikrotin, das scheinbar nach quantitativen Gesetzen 
die Krotinwirkung henmit, fand Jacoby in dem Extrakte von Magenschleim- 
haut. 



1) Ehrlich, Verb. Ges. Charit^-Aerzte , Febr. 1898. Berl. klin. Woeb., 1898, 
Nr. 12. 

2} Jacoby, lieber Crotin-Immunität Hofm. Beitr., IV, 212 (1903). 



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— 181 — 

Das Bobiü. 

Ein viertes, dem Ricin ähnliches pflanzliches Toxin, das zuerst von 
Power & Gambier^ 1890 entdeckt und als Phytalbumose beschrieben 
wurde, ist das Robin. Seine blutagglutinierende Eigenschaft wurde 
ebenfalls von Robert aufgefunden. Es findet sich in der Rinde der 
sog. Akazie, Robinia pseudacacia. 

Seine Giftigkeit hat schon häufig zu Vergiftungen bei Menschen und 
Tieren geftihrt, wofür Lau (1. c.) mehrfache Daten angiebt. 

Es wirkt auf das Blut ganz analog wie das Ricin, nur ist die 
Wirkung beträchtlich schwächer, und versagt bei Hunde-, Katzen- und 
Menschenblut ganz. 

Ebenso ist seine Toxizität ungleich geringftlgiger als die des Ricins 
und Abrins. Erst die durch Ferrocyankalium von Beimengungen be- 
freite, und mit Essigsäure wieder ausgefällte gereinigte Masse von 10 g 
Robin (käufl. Merck.) tötet ein 1-Kilo-Kaninchen in 4 Tagen. Sektions- 
befund: Nephritis, sonst nichtp Besonderes. 

Ehrlich gelang es, gegen Ro bin zu immunisieren, und er fand die 
Thatsache, dass hochimmunisierte Tiere auch gegen Ricin festwerden; 
er neigt also dem Gedanken zu, dass das Robin ein Toxoüd des 
Ricins ist; dass derartige Ricintoxoide existieren, hat ja, wie wir sahen, 
Jacoby wahrscheinlich gemacht. 

Eine genauere Untersuchung des Robins wäre dringend zu wünschen, 
da diese Frage von größter prinzipieller Wichtigkeit ist. 



IV. Die tierischen Toxine (Zootoxine). 

Die Schlangentoxine. 

So lange auch die Giftschlangen schon in den breitesten Volks- 
schichten Furcht und Interesse erweckt haben, so jung ist die Geschichte 
der Erforschung ihrer Gifte. Merkwürdigerweise, muss man woh 
sagen, denn eigentlich hätte doch wohl kaum etwas den Gelehrten näher- 
liegen sollen, als die neugefundenen Erkenntnisse auf dem Gebiet der 
Giftlehre, speziell der alkaloidähnlichen Pflanzengifte nun auf das Stu- 
dium dieser ftlr den Forscher ebenso interessanten, wie ftlr die Volks- 
hygiene wichtigen Gifte zu tibertragen. Sterben doch allein in Indien 
über 20000 Menschen jährlich durch den Riss der Naja tripudians, der 
Brillenschlange. Und trotzdem blieb dies Gebiet fast völlig unbe- 
kannt, bis durch die Arbeiten ttber die Gifte der Bakterien, die be- 
sonders von Metschnikopf, Roüx und Yersin inauguriert wurden, sich 
das Interesse auf diese Stoffe, die eine ähnliche märchenhafte Giftigkeit 



1) Power & Cambier, Pharmac. Journal , 1890, 711. Pharm. Rdach., Febr 
1890, S. 30. 



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— 182 — 

besitzen, lenken musste. Dazu kamen noch äußere Gründe. Das Ma- 
terial für diese Arbeiten ist, soweit es wenigstens die wichtigsten Gift- 
schlangen betrifft, kaum in Europa zu erhalten gewesen; erst als einer- 
seits die amerikanische Medizin ihren gewaltigen Entwicklungsgang be- 
gann, und andererseits das Aufblühen der Tropenmedizin mit der 
Gründung der modernen Kolonialreiche einsetzte, trat auch das Studium 
der tropischen Giftschlangen in den Vordergrund. Damit soll natürlich 
nicht gesagt werden, dass nicht die Giftigkeit des Schlangengiftes viel- 
fach untersucht wurde; dies ist namentlich an den südeuropäischen 
Vipern geschehen, und wir werden diese älteren Arbeiten gelegentlich 
streifen. Aber eine zielbewusste chemische und pharmakologische Unter- 
suchung der eigentlichen Giftstoffe setzte erst relativ spät ein, als durch 
die Bakteriengifte ganz neue Horizonte erschlossen wurden. Von den 
älteren Arbeiten seien vor allem die von Fontana^), Faybeb & Brünton^) 
und Wall 5) erwähnt, deren einzelne Angaben uns noch beschäftigen 
werden. 

Natürlich richtete sich, wie fast überall in der Geschichte der Toxine, 
die Aufmerksamkeit zunächst auf alkaloYdähnliche, den Ptomalnen vergleich- 
bai-e Stoffe. So stellte dann zuerst Gautiee 1881 aus dem Gift von Naja 
einerseits und Trigonocephalus (der amerikanischen Lanzettschlange) zwei 
alkak)][dähnliche Stoffe her, das Nalfn und Elaphin; er musste indessen 
selbst erkennen, dass diese Stoffe relativ harmlos sind ; und so blieb hier der 
Wissenschaft die Enttäuschung erspart, die sonst fast überall der anfänglichen 
üeberschätzung der Ptomalne folgte. 

Gaütieb erklärt demzufolge, dass das »wirklich wirksame Prinzip 
des Schlangengiftes zwar stickstoffhaltig, aber nicht alkalo'idähnlich« ist. 

Um dieselbe Zeit nahmen in Amerika Weib Mitchell & Reichebt*) 
das genauere Studium der Schlangengifte auf 

Etwas intensiver hatte man sich schon früher mit den Giften der 
europäischen Vipern (Pelias berus) beschäftigt (Fontana, Valentin*) 
u. a.}. Mit diesen Arbeiten beginnt das eigentliche Entwicklnngsstadium 
dieses neuen Zweiges der Biologie. Es folgen dann die grundlegenden 
Arbeiten von Calmette, denen wir neben Mabtin, Fbaseb und Phisalex, 
sowie den ganz modernen Untersuchungen von Flexneb, Eyes und 
Sachs, fast alles Wesentliche verdanken. 



1) ♦Fontana, Trattado del veleno deUa vipera 1787. 

^ Faybeb & Bbunton, On the Natnre of the Poison of Naja tripudians etc. 
Proc. Roy. Soc, 22, 68 (1874). 

^ Wall, On the poisons of certain species of Indian snakes. Proc. Boy. 
Soc, 32, 333 (1881). 

^) Weir Mitchell & Reichert , Researches upon the venoms of poisoneons 
serpents. Smithsonian Contrib., Nr. 647. Philadelphia 1885. Washington 1886. 
Cit. n. Flexner 1. c. 

s) Valentin, Einige Beobachtg. tib. d. Wirkg. des Vipemgiftes. Z. f. BioL, 
Xni, 80 (1877). 



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~ 183 — 

Durch einen glttcklichen Zufall bekam Calbiette i), damals Chef des 
bakteriologischen Instituts zu Saigon, im Oktober 1891 22 frische 
Giftdrüsen der Brillenschlange in die Hand, und er nahm diesen Um- 
stand als Ausgangspunkt seiner klassischen Untersuchungen. 

Die eigentliche Giftquelle sind die den Speicheldrüsen ähnlich ge- 
bauten Giftdrüsen der Schlangen; indessen fand Galmette 2) auch 
das Blut der Cobra ziemlich giftig. 2 cm^ töteten ein 1500 g schweres 
Kaninchen intravenös in 3 Minuten. Leber und Galle dagegen sind 
nicht giftig. Auch das Blut sonst ungefährlicher Sehlangen (Tropidonotus) 
ist nach Phisalix & Bertrand ^j giftig. Dieses Blutgift zeigt einige 
Eigentümlichkeiten, auf die wir noch zurückkommen werden. 

Die Giftdrüse der Naja entleert beim Ausdrucken ca. 3 g eines 
durchscheinenden fadenziehenden Saftes, der sich an der Luft zu Klum- 
pen zusammenballt. Calmette*) behandelte nun diese Drüsen mit Gly- 
cerin, mit destilliertem Wasser und mit lOproz. Kochsalzlösung und er- 
hielt stets Extrakte von sehr groBer Giftigkeit. Am energischsten wirkt 
das Toxin direkt intravenös injiziert, weniger subkutan, von dem Peri- 
toneum und der Trachea; vom Darm aus wirkt es gar nicht. 

Die Menge des sezernierten giftigen Speichels fand Calmette (1895) 
durchschnittlich zu 0,135 g , entsprechend ca. 30 — 45 mg Trockensub- 
stanz, wenn er 8 — 14 Tage zwischen den einzelnen Bissen verstreichen 
ließ. Nach 2 Monaten dagegen lieferte jeder Biss bis ca. 0,22 g Spei- 
chel. Die größte Menge, die er aus 2 Giftdrüsen eines toten Tieres 
extrahieren konnte, war 1,136 g = 0,48 Trockensubstanz. Aehnliche 
Zahlen ergaben Untersuchungen anderer Giftschlangen. 

Es findet also durchwegs eine beträchtliche Erhöhung der sezernier- 
ten Menge und damit der Gefahr eines Bisses statt, wenn die Schlange 
längere Zeit nicht gebissen hat. Bei winterschlafenden Schlangen, z. B. 
den europäischen Vipern ist also im Frülyahr der Biss am gefährlichsten. 

Darstelliing des giftigen Prinzips. 

In auch nur annähernd reinem Zustande sind Schlangentoxine nicht 
dargestellt. Die Methoden der Eonzentrierung sind stets dieselben wie 
bei allen Toxinen und Enzymen. 

Wässrige, Kochsalz- oder Glycerinextrakte enthalten das giftige 
Prinzip, das nun durch verschiedene Fällungen, Dialyse u. s. w. gereinigt 
wird. 

Martin konnte einen Teil des inaktiven Ballastes durch fraktionierte 
Koagulation entfernen, da aus seinem in0,9proz. NaCl-Lösung gelösten 



^) Calmette, l^tude exp^rimentale da venin de niga tripudians. Ann. Fast, 
VI, 160 (1892). 

2) Calhette, Snr la toxieit^ da sang de cobra. Soc. Biol., 46, 11 (1894). 

3) PmsALix & Bertrand, S. 1. pr^Bence des glandes yenimeases ohez les coa- 
leuvres. Soc. Biol., 46, 8 (1899). 



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— 184 — 

Hoplocephalusgift bei 85® ein fremder Bestandteil sich ausschied, 
während das eigentliche Gift bei 90° noch wirksam blieb. 

Calmette^) verfährt neuerdings zur Gewinnung eines beständigen, 
ziemlich von Eiweißstoflfen befreiten Giftes folgendermaßen: Er filtriert 
eine Lösung von 1 g Cobragift in 100 Teilen Wasser durch sterilisiertes 
Filtrierpapier, schließt luftdicht in ein Glasrohr ein und erhitzt ^/^ Stunde 
auf 75*^, nach 24 Stunden auf 80°, dann filtriert er durch Papier die 
ausgeschiedenen Stoffe ab und dialysiert. So erhielt er 42 mg eines 
trockenen Rückstandes, der noch Biuret- und MiLLOxsche Reaktion 
giebt, sonst aber keine Eiweißreaktionen. Das Gift passiert glatt durch 

CHAMBERLAND-Filter. 

Chemische Natur des Toxins. 
Nachdem die Alkalo'ide sich als unwirksam erwiesen hatten, kam 
nun, wie überall, die Periode der Toxalbumine, die bei den Bakte- 
riengiflien heute so gut wie überwunden ist. Auch die Schlangengifte 
sind wahrscheinlich keine Eiweißkörper im engeren Sinne und so haben 
denn die Versuche, die mit ihnen verbundenen Eiweißstoffe näher zu 
untersuchen, vorwiegend nur noch historisches Interesse. 

Weib Mitchell fand im Gift von Crotalus durissus (Klapperschlange) 
Albumine, Wolfenden 2) verschiedene Eiweißstoffe (Globuline, Albumin, Al- 
bumosen) bei Naja und Daboia, kein Pepton. Kanthack 3] hält das Gift 
fttr eine Protalbumose. Mabtin & Smith ^ fanden bei Pseudechis porphy- 
riacus und Hoplocephalus curtus ein ungiftiges Albumin, kein Pepton, aber 
zwei giftige Albumosen, eine Hetero- und eine Protalbumose. 

lieber die Konstitution der Toxine selbst ist noch nichts bekannt. 

Eigenschaften des Toxins* 

Das Schlangengift zeigt alle Eigenschaften, welche den noch nicht 
reinen Toxinen zukommen, in Bezug auf Fällbarkeit u. s. w. Nur soll 
das Cobragift nach Calmette nicht mit fi'isch gefälltem Calciumphos- 
phat mitgerissen werden, was sonst eine allgemeine Eigenschaft aller 
dieser Kolloide ist. Es ftlUt auch nicht mit Magnesiumsulfat, enthält 
also keine Globuline. 

Es dialysirt langsam, aber merklich. Vipemgift wird beim Passieren 
durch Porzellanfilter geschwächt (Phisalix*). Gegen Erwärmen ist es 
weniger empfindlich als die anderen Haptine. Cobragift lässt sich 



1) Galmetie, Sar le yenin des serpents etc. Ann. Fast, XI, 214 (1897;. 

2) Wolfenden, The venom of the indian cobra. Jonrn. of phys., VII, 327 
(1886. — Der 8., The venom of the indian viper (Daboia). Ibid., 367. 

3) Kanthack, The Nature of Cobra poiaon. Jonrn. of phys., XIII, 272 vl893). 
^) Martin & Smith, The venom of the anstralian black snake. Proc. B. S. 

New-South- Wales, 1892, 240. Malys Jb., 1894, 404. 
5) Phisalix, Soc. BioL, 48, 233, 666 (1896). 



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— 185 — 

eine Stunde lang anf 90° erhitzen und tagelang auf 38°, wird bei 
97° in einer halben Stunde wenig geschädigt, yerliert aber bei 98° in 
Y2 Stunde völlig seine Wirkung. Dagegen ist gereinigtes Gift 
{Calmette 1897) schon gegen 80° recht empfindlich, in destilliertem noch 
mehr als in kochsalzhaltigem oder Glycerinwasser. Diese Erscheinung 
findet sich auch bei allen Haptinen wieder. Wichtig ist, dass das 
Blutgift der Cobra beträchtlich empfindlicher ist als das Speichelgift, 
da es schon bei 68° in 10 Minuten zerstört wird (Calmette & D6- 

LEARDE^). 

Faradische Ströme sind einflusslos, dagegen wirken in Kochsalz- 
lösung konstante Ströme durch Elektrolyse und Chlorerzeugung 
schädlich. Viperngift soll dagegen darch Ströme hoher Spannung 
geschädigt werden (Phisalix). 

Es erscheint resistent gegen: schwache Karbolsäure, Sublimat 1 : 1000, 
Kupfersulfat, Jod, Jodkalium, Alkohol, Aether, Chloroform, ätherische 
Oele. Ammoniak schädigt selbst in großen Dosen erst nach längerer 
Zeit (Kanthack). Dieses vielgepriesene Heilmittel hat also wenigstens 
auf das Gift selbst gar keine Wirkung. Gift von Vipera aspis hielt 
sich 20 Jahre lang in einem Spiritusexemplar der Schlange (Maison- 

NEÜVE^). 

Dagegen erwies sich Permanganatlösung (Iproz.) als schädlich für 
das Gift und rettete die Tiere auch noch bei unmittelbar nach der 
Vergiftung an derselben Stelle vorgenommener Injektion fast stets; 
aber schon nach ganz kurzer Zeit war die Injektion erfolglos, ebenso 
bei Einführung an anderer Stelle, auch intravenös oder in nächster 
Nachbarschaft der Intoxikationsstelle. Auch Chlorkalk wirkt schäd- 
lich (Phisalix & Bertrand ^j. Noch intensiver wirkt Goldchlorid, 
während Platinchlorid wirkungslos ist. 

Eine Iproz. Goldchloridlösung vernichtet schon in geringer Menge die 
Wirksamkeit des Giftes. Es schützt auch bei Einführung an anderen Stellen, 
auch gegen ziemlich große Dosen, und auch noch kurze Zeit nach der Ver- 
giftung. Calmette wollte diese Eigenschaft des Goldchlorids zu therapeu- 
tischen Zwecken benutzen, doch sind diese Versuche durch seine eigenen Ent- 
deckungen einer wirksamen Immunisierung und Serumtherapie bedeutungslos 
geworden. 

Sehr interessant sind Versuchsreihen, die eine große Empfindlichkeit 
der Schlangengifte gegen einige an sich völlig indiflferente Stoffe er- 



^) Calmette & Del^arde, Sur les toxines non microbiennes. Ann. Fast, 
X, 676 (1896). 

^ Maisonkeuve, Longue couBervation de la yimlence du venin des SerpentB. 
Compt. rend. de PAcad., 123, 513 (1896). 

3) Phisalix & Bertrakd, Soc. Biol, 47, 443 (1895). 



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— 186 — 

weisen, auf die besonders von Phisalix^) in mehreren Arbeiten hin- 
gewiesen wurde. 

Als solche erwiesen sich Tyrosin und Cholesterin. 

Auch Pilzextrakte mit Chloroformwasser sollen schützen, die auch 
bei vorheriger Injektion immunisierend wirken , und zwar bis 
25 Tage lang, beginnend 24 Stunden nach der Einführung, speziell 
gegen Viperngift. 

Eine Unwirksammachung giftiger Haptine durch diese Stoflfe, die 
auf einer Bindung des giftigen Prinzips beruht, ist auch bei manchen 
anderen Toxinen (Tetanus, Botulotoxin) berichtet worden. 

Wirkung von Organextrakten und Sekreten. 

Ausgehend von der Thatsache der Resistenz der Schlangen, auch 
der harmlosen, suchte man femer nach Gegengiften gegen die Schlangen- 
toxine in Organextrakten. 

Besonders die Galle ist in vitro ein wirksames Antitoxin. Wie die 
Bakteriengifte, so werden auch im allgemeinen die Schlangengifte durch 
Galle angegriflfen. Ob die Galle nur einfach zerstörend wirkt, wie z. B. 
auf Diphtherietoxin, oder auch ein spezifisches Antigift enthält, ist noch 
nicht sicher; wir werden darauf noch zurückkommen. Eine rein che- 
mische Beeinflussung ist indessen anzunehmen, denn nach Calmette^ 
wirkt auch das glykocholsaure Natrium derartig, so dass man wohl die 
allgemeine Gallenwirkung darauf zurückführen kann. Diese Eigen- 
schaft behält die Galle auch nach dem Erhitzen auf 100°, verliert sie 
dagegen bei 120°. 

Bezugnehmend auf die Seitenkettenimmunität beim Tetanus suchte 
Myers^) nach einer anti toxischen Funktion der Organe, fand aber eine 
solche nur im Extrakt der Nebennieren. Auch dieser soll aber nur 
in vivo resistenzsteigemd , nicht aber spezifisch antitoxisch wirken. 
Auch Calmette^) fand, dass Nervensubstanz nicht bindet, ebensowenig 
Leberextrakt. 

Flexner & NoGüCHi^) haben verschiedene Organe auf ihren Neu- 
tralisationswert gegenüber einer dreifach tödlichen Dosis von Copper- 
headgift geprüft, die das Kontrollmeerschwein in 45 Minuten tötete. 



*) Phisalix, La tyrosine Vaccine cbimiqne du venia du vip^re. Compt rend. 
de TAcad., 126, 431. — Ders., Lee sncB de Champignons vaccinent contre le venin 
de vip6re. Ibid., 127, 1036 (1898). 

2) Calmette, Sor le m^canisme de rimmunisation contre les venins. Ann. 
Paßt, XII, 343 (1898). 

3) Myers, Cobra poison in relation to Wassermanns new theory of immunity. 
Lancet, 1898, II, 23. 

*) Flexner & Noguchi, Snake venom in relation to haemolysis etc. Journ. 
of exper. med., VI, 277, (1902). S. A. 



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— 187 — 

Nur das Gehirn zeigte eine energisch schützende Wirkung. Das Tier 
starb erst nach 19 Stunden und ein anderes überlebte die zweifache 
Dos. let, die das Kontrolltier in 5 Stunden tötete. Die anderen Organ- 
breie bewirkten nur erhebliche Verzögerungen. 
Das Hämolysin wird gar nicht gebunden. 

WirkungBart der Schlangengifte. 

Wie wir später ausführlich zeigen werden, bestehen die Schlangen- 
gifte neben den beiden spezifischen auf Blutkörperchen wirkenden 
Agentien, die gesondert besprochen werden sollen, ans zwei giftigen 
Komponenten, dem Neurotoxin und dem Hämorrhagin. Da letzteres 
hauptsächlich beiCrotalns eine Rolle spielt, bei der Cobra fast ganz 
fehlt, so beziehen sich die folgenden Angaben zunächst auf das Neuro- 
toxin der Cobra und anderer Schlangen. 

Dieses Gift ist von ungeheurer Wirkungskraft. Calmettes erstes 
Glycerinextrakt tötete in einer Dosis von einem Tropfen Satten und 
Tauben in weniger als einer Stunde, Hühner und Kaninchen in wenig 
mehr Zeit. 

Maetin^j fand bei Hoplocephalus curtus (Tigerschlange) die Dosis 
letalis für 1 kg Kaninchen zu 0,03 mg. Dies Gift soll das wirksamste 
sein. Valentin fand bei der Vipera aspis = ca. 0,5 mg für den Frosch. 
Flexneb & NoGüCHi (1. c.) bei der Copperheadschlange (Ancistrodon con- 
tortrix) für Meerschweinchen zu 0,3 mg. 

Calmette^) giebt an, dass bei einer Naja, die während 8 Monaten 
keinerlei Nahrung zu sich nahm, das Gift sich in seiner Wirksamkeit 
beträchtlich steigerte. Töteten zuerst 0,7 mg trockenen Gfiftes ein 
Kaninchen Ton 1700 g, so genügten nach 2 Monaten 0,25 mg und nach 
dem Tode des Tieres 0,1 mg (für ein Kaninchen von 2000 g). Aehn- 
liches beobachtete er bei einer andereren Cobra während 3 Monaten. 

Eine vergleichende Bestimmung der Giftigkeit ergab folgende Tabelle: 





Dos. let. Kaninchen 


do. Meerecbwein 




3—4 Stunden 






1600—2000 g 


460— ßöOg 


Naja tripudians (1—3) 


0,3—0,6 mg 


0,05 mg 


Naja haje (4—6) 


0,3-0,7 > 


0,07 . 


Cerastes (Homviper) (7—8) 


1,5 2,0 . 


0,1 » 


Crotalus 


3,5 > 


0,3 . 


Trigonocephalus 


2,5 > 


0,2 . 


Hoplocephalus 


2,5 » 




Acantophis (Todesschlange) 


1,0 . 


0,08 . 



1) Martin & Cherrt, Tbe natura of the antagonism between toxins and anti- 
toxin. Proc. Roy. See, 63, 420 (1898). — Martin, Relation of tbe toxin and anti- 
toxin of snake yenom. Ibid., 6i, 88 (1899). 

2j Calmbtte, Contrib. ä Pötude des venine. Ann. Past, IX, 226 (1895). 



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— 188 — 

Das Meerschweinchen ist also ca. doppelt so empfindlich wie das 
Kaninchen. Der Hund ist noch weniger empfindlich. Das Schwein, 
der Igel nnd die Manguste, (Herpestes) eine kleine Viverridee der An- 
tillen, sind fast refraktär. Eine Mangaste starb erst nach 8 mg Cobra- 
gift. Der Igel ist wenigstens gegen den Biss der Viper wenig empfind- 
lich. Nach Phisalix & Bertrand i) braucht man die 40fache für 
Meerschwein tödliche Dosis. Das Blut des Igels ist dann selbst giftig, 
diese Giftigkeit verschwindet beim Erwärmen. 

Fast refraktär, aber auch nicht absolut, sind die Schlangen selbst, 
seien es Giftschlangen oder harmlose, wie die Ringelnatter (Dos. letalis 
0,03 g) (Fräser 2), Phisalix & Bertrand*}. 

Auch Fische, Eidechsen, Würmer sind nicht völlig refraktär. 

Die meisten Schlangengifte erzeugen zunächst wie andere Toxine 
auch schwere Lokalerscheinungen. Heftige Entzündung, Oedeme, Hä- 
morrhagieen, selbst Nekrosen treten auf. 

Jedoch scheinen diese lokalen entzündungserregenden Wirkungen 
des Schlangentoxins kein integrierender Bestandteil der Gesamtwirkung 
zu sein, wie wir es ganz analog bei den anderen Toxinen gefunden 
haben. So wird nach Calmette (1895) die lokale Wirkung durch Er- 
wärmen auf 80° sehr geschwächt, die allgemein toxische nicht. Nach 
Kaufmann 3) wirken Chromsäure und Permanganat ganz ähnlich. 

Sie sind femer bei den Schlangengiften verschiedener Herkunft 
sehr verschieden intensiv. Cobragift zeigt sie wenig, Crotalus sehr 
heftig. Wie schon Mitchell «Sc Reichert annehmen, und die neueren 
Arbeiten (s. u.) stützen, sind diese pyrogenen StoflFe von dem eigentlichen 
neurotoxischen Prinzip durchaus zu trennen. Wohl aber hängt 
ihre Wirkung mit dem zweiten Hauptbestandteil, dem Hämorrhagin 
(s. u.) zusammen. 

Die Resorption des Giftes ist eine ungeheuer rasche. Eine an der 
Schwanzspitze geimpfte Ratte ist nach einer Minute durch Amputation 
nicht mehr zu retten (Calmette 1. c), und stirbt bei einer DiflFerenz 
von 5 Min. zu gleicher Zeit wie das Versuchstier. 

Die Vergiftung verläuft auch beim Menschen höchst akut 

Das gebissene Glied schwillt an, es folgt Zusammenziehung des 
Mundes, Zusammenpressen der Zähne, Ohnmächten, der Tod erfolgt im 
tiefsten Koma. 

Die Mortalität schwankt zwischen 25 und 45 j^. Sie ist sehr abhängig 
von der Menge des eingeftlhrten Giftes. Hat die Schlange kurz vorher 
gebissen oder wirken Kleidungsstücke schützend, so ist der Biss relativ 



1} Phisalix & Bertrand, Glandes venimeuses cbez les conleuvres. Soo. Bio!., 
46, 8 (1894); 47, 639 (1895). 

2) Fräser, Immanity against Buake poiBon. Brit med. joam., 1895, I, 1309. 

3) Kaupmann, Sur le venin de la vip^re. Soc. Bio!., 46, 113 (1894). 



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— 189 — 

ungefährlich; furchtbar dagegen, wenn er eine gefäßreiche Stelle trifft. 
Eine Injektion in die Venen ist fast stets tödlich. 

Die AUgemeinerscheinnngen setzen ein mit Schwäche, Erbrechen, 
Atemnot, Ptosis. Verlust der faradischen Erregbarkeit der Muskeln. 
Unter Stillstand der Respiration erfolgt der Tod. Infolgedessen sind 
Frösche, die die Lungenatmung länger entbehren können, eine Zeit- 
lang zu erhalten (bis 30 St.). 

Aehnlich wie bei der Cobra ist die Giftwirkung des Speichels von 
Vipern (Vipera ßedii u. s. w.). A. Mosso^) fand beim Hund nach In- 
jektion von 0,0077 g pro kg intravenös Steigerung der Atemfrequenz 
mit bald darauffolgender (15Min.) Inspirationslähmung. Verminderung der 
Herzaktion, die nach Aufhören der Atmung fortdauert. Durch künst- 
liche Respiration lässt sich das Leben noch ca. 2 St. erhalten; auch 
spontane Atmung stellt sich wieder ein; schließlich erlischt sie wieder 
und das Tier stirbt ruhig nach leichten Kontraktionen. 

Nach Phisalix & Bertrand^) töten 0,3 mg des Giftes von Vipera 
aspis ein Meerschweinchen unter Hypothermie, Gefäßdilatation und 
Hämorrhagieen. 

Valentin fand eine Herabsetzung der SauerstoflFaufnahme. 

Das Herz wird direkt nicht tangiert. Bei Naja egiziana stellten 
schon Panceri & Gasco^) fest, dass das entblößte Herz eines Axolotl 
in ihrem Gift unverändert weiterschlägt. 

Der Blutdruck ändert sich bei künstlicher Atmung nicht. Sonst 
allerdings tritt nach anfänglicher Steigerung ein Fallen des Blutdruckes 
auf, wie schon Albertoni ^) angiebt. Auch Kaufmann'^) fand für Pelias 
berus Herabsetzung. 

Valentin«) beobachtete beim Frosch eine nach fünf Stunden mani- 
feste Unerregbarkeit der Muskeln und Nerven. Das zentrale Nerven- 
system wird früher unerregbar, als das Htiftgeflecht. 

Es handelt sich also bei der Allgemeinvergiftung mit Schlangen- 
toxinen vorwiegend um eine Wirkung auf das Zentralnervensystem, 
und zwar vor allem auf die motorischen Kerne der MeduUa. Die peri- 
pherischen Nerven dagegen sind beim Frosch wenigstens unempfind- 
lich (Calmette). Bei dieser Wirkung tritt hauptsächlich die neuro- 

1) A. Mosso, Die giftige Wirkung des Serum der Moreniden. Arcb. f. exper. 
Path., 25, 111 (1888). 

2) Phisalix & Bertrand, Toxicit6 du sang de la vip^re. Compt. rend. de 
TAcad., 117, 1099 (1893). 

3) Panceri & Gasco, Agli effetti del veleno della naja egiziana. Atti Acad. 
Reale Napoli, 1873, p. 73. Cit n. Mosso 1. c. 

^] Albertoni, Sali* azione del veleno della vipera. Lo eperimentale , 1879. 
Cit n. Mosso. 

5) Kaupmann, Soc. Biol., 48, 860 (1896). 

«) Valentin, Einige Beobachtungen über die Wirkungen dea Vipemgiftes. 
Z. f. Biol., XIII, 80 (1877). 



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— 190 — 

toxische Komponente in Aktion. Wir werden unten sehen, dass dies 
nicht bei allen Schlangengiften so ist, vor allem nicht bei Crotalns, wo 
die hämorrhagisch wirkende Komponente das Vergiftungsbild beherrscht. 
Die hämolytische Komponente bleibt dabei ganz außer Betracht und 
wird gesondert besprochen werden. 

Da es sich bei dem Neurotoxin um ein spezifisches Gift ftlr das 
Zentralnervensystem handelt, das nirgend wo anders gebunden wird, 
monotrop nach Ehrlich*) ist, so ist seine intercerebrale Injektion 
nicht wirksamer als die anderweitige. 

Cobragift, das frei von Hämolysin und Hämorrhagin war, wurde 
von Flexneb & Nogüchi (1. c.) intercerebral injiziert. Die Dos. let. war 
nicht kleiner als bei subkutaner Injektion. 

Ganz anders verhielt sich Crotalusgift, bei dem die Dos. let. 20 mal ge- 
ringer war, wenn intercerebral injiziert wurde. Dieses Gift enthält nur wenig 
Neurotoxin, es wird hauptsächlich anderweitig verankert. Die große Wirk- 
samkeit der intracerebralen Injektion beruht hier thatsächlich auch nur auf der 
hämorrhagischen Wirkung des Crotalusgiftes, und verschwindet deshalb mit 
dem Erwärmen auf 75^, wobei das Hämon'hagin zerstört wird. Mokassin- 
gift und das von Ancistrodon stehen in der Mitte, da bei ihnen beide Kom- 
ponenten reichlich vorhanden sind. 

Auf die Conjunctiva hat das frische Cobragift eine sehr heftige 
Wirkung, ähnlich wie das Abrin. Jedoch lässt sich dem Gift diese 
Eigenschaft durch Erwärmen auf 90° nehmen, ohne die Toxizität 
wesentlich zu beeinträchtigen. 

Eine Resorption von dieser Stelle aus scheint nicht stattzufinden, 
wie sie andererseits beim Ricin beobachtet wird. Ganz dasselbe hatte 
Valentin beim Vipemgift gefunden. 

Die zwischen der Wirkung der einzelnen Schlangentoxine aufge- 
fundenen Differenzen lassen sich zum allergrößten Teil auf den ver- 
schiedenen Gehalt an den einzelnen Komponenten zurückfuhren, indem 
bald das Neurotoxin, bald das Hämorrhagin tiberwiegt. Mitunter spielt 
wohl noch das hämolytische Prinzip eine toxigene Rolle. 

Besonders in Bezug auf die lokalen Erscheinungen (Oedeme, Nek- 
rosen u. s. w.) unterscheidet sich das Gift der Crotalus, Trigonocephalus, 
Cerastes durch eine viel erheblichere Wirksamkeit als das Cobragift. 

Während man femer nach Calmette durch Erwärmen dem Cobragift 
seine lokal reizende Wirkung ganz nehmen kann, geht beim Crotalusgift 
nach Mc Farland^) bei gleichem Verfahren auch die Toxizität zum 
großen Teile verloren. Farland konnte infolge der enormen Sehädi- 



^) Ehrlich, Ueb. d. Bezieh, von cbemiacber Konetitution, Verteilg. u. pharm. 
Wirkg. Festschr. f. Leyden, 1902. S. A. 

2) Mc Farland, Immunization of animals to rattle-snake venom. Ref. C f. 
Bakt, 29, 496 (1901;. 



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- 191 — 

gnogen subkutan überhaupt nicht immunisieren, sondern gelangte nur 
durch intrayenöse Injektionen zum Ziel. 

Wie Flexner & Nogüchi fanden, ist nämlich bei den Krota- 
liden das eigentliche Gift ausschließlich das Hämorrhagin, die 
nenrotoxische Komponente tritt gänzlich zurtlck, während sie beim Cobra- 
gift das Bild völlig beherrscht. Mokassinschlange und Gopperhead (An- 
cistrodon) enthalten beide Komponenten. 

So kommt es, dass das Crotalnsgift und anderer verwandter 
Schlangen (Pseudechis u.s.w.)Hämorrhagieen verursacht, die beim Cobra- 
gift fehlen, worauf schon Mitchell & Reichert näher eingegangen 
sind. Das Hämorrhagieen erzeugende Gift wird bei 75° zerstört und 
damit ein Teil der Giftigkeit, so dass erst 10—20 Dos. let. unter Er- 
scheinungen zum Tode führen, die der Vergiftung mit Cobragift ähneln, 
also dem Neurotoxin zuzuschreiben sind. 

Man könnte danach zunächst daran denken, dass hier das Hämolysin 
die allgemeine Toxizität bedingt. 

Nun kann man aber das Hämolysin, auf das wir sogleich näher 
eingehen werden, durch Bindung an empfängliche Erythrocyten ent- 
fernen: dabei bleibt aber die allgemeine Giftigkeit erhalten. 

Daraus geht hervor, dass das Hämorrhagieen erzeugende Gift auch 
nicht mit dem eigentlichen Hämolysin identisch ist, ebenso- 
wenig wie mit dem Neurotoxin, sondern dass hier ein drittes selb- 
ständiges Gift vorhanden ist, dem Flexner & Nogüchi den Namen 
Hämorrhagin gegeben haben. 

Dieses Gift ist auch im Cobragift enthalten, jedoch in lOfach ge- 
ringerer Menge als bei der Mokassinschlauge und in hundertfach ge- 
ringerer als bei der Klapperschlange. 

Infolge des sehr verschiedenen Gehaltes der einzelnen Gifte an den 
drei Komponenten Neurotoxin, Hämolysin und Hämorrhagin ist auch 
das Verhältnis der letalen Dosis zu der gerade noch nachweisbaren 
Hämorrhagindosis ein sehr wechselndes. So entspricht bei der Cobra 
die Dos. let. (0,1 mg) einer hämorrhagischen Dosis, bei der Mokassin- 
schlange (0,2) : 20, bei der Gopperhead 60 und bei der Klapperschlange 
(1,0) der tausendfachen Dosis. 

Die histologischen Veränderungen, die das Hämorrhagin an den 
Gefäßen verursacht, sind von Flexner & Nogüchi genauer unter- 
sucht worden. 

Es handelt sich nicht um Diapedesis, sondern um Risse in der 
Wand der Gefäße, die geradezu Löcher bekommen. Dabei tritt Stase in 
den Gefäßen auf, femer Riesenzellen, die die kleinen Gefäße verstopfen. 
Rote und weiße Blutkörper wandern gleichmäßig aus. 

Sie fllhren diese Durchlöcherung der Gefäßwände zurück auf ein 
spezifisches Cytolysin ftlr die Endothelien der Gefäßwand. 

Andererseits findet Wall (1. c.) zwischen dem Gift der Colubridee 



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~ 192 — 

Cobra und der Viperidee Daboia Ilusseli doch recht beträchtliche 
DiflFerenzen, die durch den verschiedenen Gehalt an den Einzelkompo- 
nenten nicht ohne weiteres erklärt sind. 

Das Daboiagift erzeugt sehr schnell heftige Konvulsionen, während deren 
häufig der Tod eintritt, dann folgt erst Paralyse, die aber nicht, wie bei dem 
Cobragift, speziell die Atmungswerkzeuge lähmt. Ueberhaupt wu-kt das 
Daboiagift nicht so schnell auf die Atmung. Es bewirkt konstant Mydriasis, 
dagegen fehlt die fttr Cobragift charakteristische Salivation. Cobragift erzeugt 
nie, Daboiagift stets Albuminurie. Letzteres ist ein sehr heftiges Blutgift; 
infolgedessen sind die Vergifteten auch dann noch in großer Gefahr, wenn 
sie das erste Stadium der Konvulsionen und Paralysen überstanden haben; 
wähi'end bei der Cobravergiftung die Entscheidung über Leben und Tod in 
wenigen Stunden fällt, sterben bei der Daboia die Gebissenen noch bis zum 
Ende der zweiten Woche. 

In der That konnte Lamb^) für das Hämolysin der Daboia nach- 
weisen, dass es einen von dem des Cobrahämolysins durchaus ver- 
schiedenen Amboceptor besitzt (s. u.]. 

Tozoide des Sohlangentoxins. 

Die Existenz von ungiftigen resp. schwächer giftigen, aber immuni- 
sierenden Toxo^den des Schlangentoxins ist zwar nicht sichergestellt, 
aber wahrscheinlich. 

Phisalix & Bertrand 2) beobachteten, dass das giftige Serum der 
Viper und Natter beim 15 Min. langen Erwärmen auf 58*^ zwar seine toxische, 
aber nicht seine immunisierende Kraft einbüßt, ähnlich auch das Gift 
von Vipera aspis nach einigen Minuten langem Erwärmen auf 75 — 90°. 
Dieselben fanden, dass durch hochgespannte Ströme geschwächtes Gift 
(s. 0.) noch immunisiert. 

Auf Grund genauerer quantitativer Untersuchungen nach der Ehr- 
LiCHschen Methodik hat Myers^) für das Cobrahämolysin Toxoide 
nachgewiesen. 

Flexner & NoGUCHi (1. c.) fanden unverkennbare Toxo^dbildung beim 
Stehenlassen von Cobragift während drei Wochen. Die Dos. lei stieg 
von 0,1 auf 0,4 mg, ohne dass die neutralisierende Antitoxindosis merk- 
lich geringer vnirde, wenn 4 letale Dosen als Testgift benutzt wurden; 
es bilden sich also Protoxoi'de aus. Noch schneller ging derselbe Prozess 
im Brutschrank vor sich, wobei in 19 Tagen die Dos. let. auf das Zehn- 
fache stieg, wobei allerdings außer Toxoidbildung auch eine partielle 



1) Cit. n. Kyes, Berl. klin. Woch., 1903, Nr. 43. 

2) Phisalix & Bertrand, Att^nnation da venin de vipere par la chaleur. 
Compt. rend. de FAcad., 118, 288 (1894). 

3) Myers, The interaction of toxin and antitoxin. Joum. of pathol., VI, 415 
(190O). 



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— 193 — 

Zerstörung eintritt. Dagegen zerstören Pepsin und Papain das Gift ohne 
Toxoldbildung ganz. 

Aehnlich verhält sieh Cobrahämolysin. Dagegen ist das Hä- 
morrhagin der Crotalus viel beständiger, während auch hier Neuro- 
toxin und Hämolysin in Toxoide übergehen. 

Das Hämolysin der Schlangengifte. 

Die Analogie der Schlangengifte mit den pflanzlichen Toxinen und 
femer besonders mit dem Gift des Aalblutes zeigt sich auch in seiner 
in vitro wirksamen hämolytischen Funktion. 

Auch fehlt bei vielen Schlangengiften die Wirkung in vivo nicht, 
indem schon Fontana bei intravenöser Infektion von Vipemgift bei 
Kaninchen Koagulationen u. s. w. beobachtet hatte, und andererseits das 
Blut gestorbener Tiere ungerinnbar wird, wie Fayrer & Laüder- 
Brünton^), Albertoni (1. c.) u. a. fanden, und Mosso (L c.) für das 
Vipemgift bestätigte. 

Beim Viperngift tritt als sekundäre Erscheinung, auf der Wirkung 
einer Oxydase beruhend, Methämoglobinbüdung ein, die beim Cobra- 
hämolysin fehlt (Phisalix2). 

Die Blutwirkung der Schlangengifte ist dann von Flexner & Nogüchi^) 
eines genaueren Studiums gewtlrdigt worden. 

Sie arbeiteten mit den Giften von Naja tripudians, Crotalus adaman- 
teus (Klapperschlange), Ancistrodon piscivorus (Mokassinschlange) und 
Ancistrodon contortrix, die nur geringe Unterschiede zeigten. 

Angewendet wurde Blut vom Hund, Kaninchen, Meerschwein, Schaf, 
Rind, Schwein, Necturus und Frosch. Die B. K. wurden gewaschen; 
dann trat reine Agglutination ohne Hämolyse auf. Am empfindlichsten 
zeigte sich Kaninchen, dann Meerschwein, Hund, Schaf, Schwein und 
Rind. 

Die in defibriniertem Blute zu beobachtende Hämolyse steht in keinem 
konstanten Verhältnis zur Agglutination der gewaschenen B. K. Bei 0*^ 
lassen sich die Hämolyse und die Agglutination getrennt beobachten, 
da diese letztere von der Temperatur nicht abhängt. 

Bei der Hämolyse ist Cobragift das stärkste, das der Klapper- 
schlange das schwächste Agens. Hundeblut ist am empfindlichsten, 
Rinderblut am wenigsten, wenn man von dem fast absolut refraktären 
Froschblut absieht. 

Die Hämolysine sind gegen Erwärmen recht beständig. 70 — 80° 
schaden gar nichts, selbst 100° in 15 Min. wirken nur schwach schädigend. 



*) Fayrer & Lauder-Brünton , On the Natare of the Poiacn of Naja tripu- 
dians etc. Proc. Roy. See, 21, 371 (1873), 22, 68 (1874). 

2) PmsALix, Action du venin de vip6re. Soo. Biol, 54, Nr. 27, 1902. 

3) Flexner & Noouchi, Snake venom in relation to baemolysis. Joum. of 
exper. Med., VI, 277 (1902). S. A. 

Oppenheimer, Toxine und Antitoxine. 13 



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— 194 — 

Sie erinnern also an die wännebeständigen Bakterienlysine, dagegen 
werden die Agglutinine bei 75— 80 in 30 Min. zerstört. Anch mit Vi g Norm. 
HCl kann man das Hämolysin V2 St. auf 100° erhitzen. Dagegen wird 
das Lysin durch dieselben chemischen Einflüsse wie die toxische Eom- 
ponente zerstört (Ktes & Sachs s. n.). 

Das hämolytische Prinzip ist von dem eigentlichen Nervengift durch- 
aus verschieden. Die durch Gehimbrei atoxisch gemachte Giftlösung 
hat alle lytischen Eigenschaften behalten und wirkt dadurch noch giMg. 
Behandelt man es dann noch mit B. K., so wird es bei der Cobra, wo 
kaum Hämorrhagin vorhanden ist, fast völlig entgiftet. Bei der Immu- 
nisierung entsteht aber neben dem Antitoxin auch das Antilysin, so dass 
AntiSchlangenserum auch die Hämolyse aufhebt. 

Die Hämolyse tritt nur bei Gegenwart von frischem Serum auf, 
dies ist auch fiir das Hämolysin des Viperngiftes von Phisalix*) be- 
stätigt worden. Das Serum enthält ein Komplement, das Schlangen- 
gift einen (hitzebeständigen) Amboceptor. Das Schlangenhämolysin 
ist also kein einfaches Lysin, wie Ricin, Staphylotoxin u. s. w., sondern 
ein Haptin zweiter Ordnung. 

Es enthält eine Reihe verschiedener Ambozeptoren, die sich an ver- 
schiedene B. K., nach der EHRLiCHschen Methodik, binden, aber niemals 
wird das Gift dadurch gänzlich erschöpft. Diese Ambozeptoren zeigen 
wieder verschiedene Affinität gegen verschiedene normale Komplemente, 
so dass die mannigfachsten Kombinationen bald voll, bald schwach oder 
gar nicht wirksam sind. 

Wird das Blut erst durch Ricin agglutiniert, so wirkt das Schlangengift 
doch hämolytisch, indem die farblosen Stromata agglutiniei*t bleiben. 

Das Gift hat femer noch die Eigenschaft, die baktericide Funktion der 
normalen Sera aufzuheben, wenn Y20 °^g &^f 1 cm^ Serum kommen. Nur 
beim Nectnrusserum ist diese Wirkung inkonstant, die beruht auf einer In- 
anspruchnahme der Komplemente, die beim Nectnms sich nicht stets binden. 

In einer späteren Arbeit haben dann Flexner & Nogüchi^) das 
Studium des Schlangenhämolysins fortgesetzt. Das frische Schlangen- 
gift selbst enthält kein Komplement, es bewirkt also bei gewaschenen 
B. K. nur Agglutination, nie Hämolyse. 

Wohl aber enthalten die Schlangensera selbst bisweilen passende 
Komplemente. Die Schlangengifte enthalten verschiedenartige Ambozep- 
toren, die bald mehr Verwandtschaft zum Komplement des eigenen, bald zu 
denen fremder Sera haben. Sie sind verwandt mit den Ambozeptoren der 
Schlangensera, doch nicht stets identisch; letztere sind u. a. stets isokom- 
plementophil. 



1) Phisalix, Action du venin de vip^re etc. Soc. Biol., 54, Nr. 27 (1902). 

2) Flexner & Noguchi, The Constitution of snake venom and enake sera. 
üniv. of Pennaylv. Med. Bull., Nov. 1902. S. A. 



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— 195 — 

Während also die andern Gifte nnr mit Hilfe der Semmkomplemente 
lösen, bewirktCobragift stets, auch nach noch so sorgfältigem Waschen, 
teilweise Lysis. Dieser Umstand nnd femer, dass Cobragift auch von 
erwärmten, also komplementfreiem Serum aktiviert wird, führte zu der 
Annahme eines in den B. E. selbst sich befindenden Endokomple- 
mentes für das Cobragift. Diese Annahme ist gleichzeitig vouEyes*) 
und Kyes & Sachs 2) im EnRucHschen Institut bestätigt, und es sind 
dabei außerordentlich interessante neue Beziehungen des Schlangengiftes 
zu chemischen Stoffen der Blutkörper aufgefunden worden. Etes fand 
zunächst, dass es zwei Arten von B. E. giebt, nämlich einerseits solche, 
die an sich von Cobragift gelöst werden, wie z. B. Meerschwein, Hund, 
Mensch, Eaninchen, Pferd, und andere, die nur unter Beihilfe eines 
Eomplements gelöst werden, wie Rind, Hammel, Ziege. Für diese fand 
nun Eyes passende Eomplemente und konnte so Flexners Annahme 
einer komplexen Struktur des Cobralysins bestätigen. 

Für die an sich löslichen konnte Etes die Annahme eines einfachen 
Lysins nach dem Schema des Bicins dadurch ausschließen, dass in konz. 
Giftlösungen die Hämolyse ausblieb, während sie in verdünnten eintrat, 
was bei einfachen Giften natürlich ausgeschlossen ist. Eine derartige 
Abnahme der Wirkung überschüssiger Gifte ist eben nur durch die An- 
nahme der Eomplementablenkung durch überschüssige Ambo- 
zeptoren zu erklären, wie sie zuerst von Neisser & Wechsberg*) ge- 
zeigt worden ist. 

Es zeigte sich, dass die B. E. selbst ein Eomplement enthalten, 
das von überschüssigen Ambozeptoren gebunden und abgelenkt werden 
kann. Dieses Endokomplement geht beim Auflösen der B. E. in Wasser 
über und dann sind auch die an sich nicht lösbaren B. E. dem Cobra- 
gift zugänglich. 

Dieses Endokomplement wird bei 62° in VaSt. zerstört. Bisweilen 
lässt es sich auch durch phys. NaCl zum großen Teil aus den B. E. 
auswaschen. Die Feststellung solcher Eomplemente in roten B. E. ist 
sehr interessant im Hinblick auf die Ansichten der französischen Schule, 
dass stets die Leukocyten die Quelle der Eomplemente sind. 

Eyes versuchte femer die Thatsache zu erklären, warum erhitztes 
Serum doch noch aktiviert, wo also von Eomplementen keine Rede ist; 
sogar stundenlanges Eochen schadet nichts. Dieser aktivierende 
Stoff ist Lecithin, das auch in methylalkoholischer Lösung als 
»Eomplement« für das Cobragift fungiert. Beide binden sich so fest 

1) Kyes, üeb. d. WirkuDgsweise des Cobragiftes. Berl. klin. Woch., 1902^ 
Nr. 38/39. S.A. 

2) Kyes & Sachs, Zur Kenntn. d. Cobragift aktivierenden Sahst. Berl. klin. 
Woch., 1903, Nr. 2—4. S. A. 

3) Neisser & Wechsberg, Ueb. d. Wirkungsart baktericider Sera. Miinch. 
med. Woch., 1901, Nr. 18. S.A. 

13* 



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— 196 — 

miteinander, dass zugesetzter Aether fast kein Lecithin anfiiimmt. Diese 
Verbindung wirkt intensiv hämolytisch schon bei 0^ Das Lecithin der 
Sera ist mehr oder weniger fest an Eiweiß gebunden, so dass man 
verschieden lange erhitzen muss, um wirksames freies Lecithin za 
erhalten. Mit dem eigentlichen thermolabilen Komplement der Sera hat 
das Lecithin gar nichts zu thün, wie Etes & Sachs noch ausführlicher 
beweisen. 

Sie fanden z. B. das eigentliche Komplement als durch Papaün und 
Aether zerstörbar; femer zeigen aktive komplettierende Sera hemmende 
Aktion gegen Lecithin. 

Wohl aber sind die sogenannten Endokomplemente auch nichts 
weiter als Lecithin, dessen Thermolabilität in den B. K. durch Bindung 
an das Hämoglobin vorgetäuscht wird; Ausschwemmungen aus hämoglobin- 
befreiten Stromata zeigen die Labilität nicht. 

Durch ihren Lecithingehalt wirken auch Galle und erhitzte Milch aktivie- 
rend, femer das ähnliche Kephalin. An sich wirken beide Stoffe sehr 
schwach hämolytisch. Wahrscheinlich ist der Fettsäurerest die schließlich 
wirkende, hämolytische Gruppe. 

Als Gegenmittel gegen die Lecithinaktivierang erwies sich das Cho- 
lesterin, das auch in den normalen Seris schützend wirkt, und das, 
wie oben erwähnt, auch die toxische Komponente des Schlangengiftes 
beeinträchtigt (Phisalix). Es wirkt also ähnlich antihämolytisch wie 
gegen Saponin (Ransom^). 

Dagegen hat das Cholesterin keine Wirkung auf die echten Kom- 
plemente der aktivierenden Sera. 

Die Ambozeptoren des Cobragiftes und das Lecithin binden sich nach 
quantitativen Gesetzen. 

Die von FIexner & NoGUCm angegebene Nichtauflösung aller ge- 
waschenen B. K. scheint auf einer Ausschwemmung des Lecithins durch zu 
reichliches Waschen zu bemhen. 

Kyes2) gelang es sogar, diese »Lecithide* der Cobraambozeptoren 
zu isolieren. 

Die Iproz. Lösung des Cobragiftes wurde mit einer Lösung von 
reinstem Lecithin in Chloroform 2 Stunden geschüttelt. Wird dann die 
Chloroformschicht scharf abcentrifugiert, und die Lecithinlösung mit Aether 
versetzt, so fällt das Cobragiftlecithid aus, während das Lecithin in 
Aether löslich bleibt. 

An dieses Lecithid ist nun die hämolytische Funktion des Cobragiftes 
quantitativ gebunden, während die neurotoxische dadurch nicht im ge- 



1) Ransom, Saponin und sein Gegengift. Dtsch. med. Woch., 1901, 194. 
2] Kyes , üeber die iBoiierung von Schlangengiftlecithiden. Berl. klin. Wocb., 
1903, Nr. 42/43. 



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- 197 — 

ringsten beeinflusst wird. Das Lecithid hat nnr hämolytische Funktion, 
während das zurückbleibende Gift ausschließlich die neurotoxische 
Kraft behalten hat. 

Das Lecithid ist unlöslich im Aeiher und Aceton, löslich in Chloro- 
form, Alkohol und Toluol, sowie sehr leicht in Wasser. Es unterscheidet 
sich also auf das schärfste von den Eigenschaften der beiden Kompo- 
nenten. Beim Stehenlassen der Wasserlösung wird es allmählich un- 
löslich, ohne seine hämolytische Kraft zu verlieren. In warmem Wasser 
bleibt es löslich. Es giebt keine Biuretreaktion. Das Lecithid löst 
alle B. K. gleichmäßig, und zwar ohne Inkubationszeit, im Gegen- 
satz zu der Wirkung des Giftes selbst. Das Lecithid ist gegen 100° 
fast unempfindlich. Cholesterin hemmt seine Wirkung gerade wie die 
des frischen Giftes. Ganz analoge Lecithide ergaben sämtliche unter- 
suchten hämolytischen Schlangengifte, u. a. Bothrops, Naja Haje, Bun- 
garus, Trimeresurus und Crotalus. Es findet sich also überall die gleiche 
lecithinophile Gruppe, wenn auch sonst die Ambozeptoren verschieden 
sein mögen. 

Leukooidin der Schlangengifte. 

Sterile Exsudate, die 20 — 2b ßü Lymphocyten enthielten, wurden 
durch intrapleurale Injektion von abgetöteten Leibern von Bac. Mega- 
therium erhalten (Flexner & Noguchi). 

Cobragift wirkt bei 0,002^, die anderen schwächer. Die Beweg- 
lichkeit der Leukocyten hört auf; dann zerfallen die Zellen, am letzten 
die Lymphocyten. Bei gewaschenen Leukocyten tritt wieder fast nur 
Agglutination auf. Die Agglutinine sind, wie Flexner & Noguchi aus 
Bindungsversuchen entnehmen, identisch, die Lysine verschieden von 
den entsprechenden Agentien der roten B. K. Auch das Leukolysin ist 
komplex gebaut. 

Zusammenfassung. 

Wir haben also in den Schlangengiften 4 unabhängige, an Menge 
stark wechselnde aktive Prinzipien. 

1. Hämagglutinine. Durch 0,2 j^ HCl in 24 St., durch Erwärmen 
auf 75° in kurzer Zeit zu zerstören. 

2. Hämorrhagin (hauptsächlich bei Crotalus). Erst durch 2^ 
HCl und Pepsin-HCl nach ca. 2 Tagen zerstört, im Brutschrank beständig. 

3. Hämolysin. 0,3 j^ HCl zerstört sehr langsam, Pepsin-HCl schnell 
Brutschranktemperatur zerstört ca. 80 j^. 

4. Neurotoxin. Gegen HCl bis 3^, gegen Pepsin und PapaXn 
ziemlich beständig; beim einfachen Stehenlassen in 19 Tagen zu 90 j^ 
entgiftet 

Das Hämagglutinin und Hämolysin greifen ausschließlich die Blut- 
körperchen an, das Hämorrhagin die Endothelien der GefUßwände, das 
Neurotoxin die Zellen des Zentralnervensystems. 



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— 198 — 
Die Immunisierung gegen Sohlangentozin. 

Das Antischlangentoxin. 

Die enge Zusammengehörigkeit der Schlangentoxine mit den echten 
Toxinen zeigt sich vor allem in der Fähigkeit, ein Antitoxin zu er- 
zeugen. Die erste Angabe über eine Immunisierung gegen Schlangen- 
gift rührt von Sewall*) her, der mit Crotalusgift immunisierte. 

Calmette konnte zeigen, dass schon nach der einmaligen Injektion 
von Y2 Dosis letalis das Serum der Tiere eine deutliche antitoxische 
Wirkung in vitro hat. Auch Fräser 2) gelang die Erzeugung von Anti- 
toxin gegen die Gifte der Cobra, Crotalus, Diemeuia (Sttdaustralien) und 
Sepedon (Afrika). Er erhielt Resistenz bis gegen die 50 fach tödliche 
Dosis. 

Calmettes Verfahren war ungefähr folgendes: 

Man beginnt mit ca. V20 der tödlichen Dosis und giebt dann alle 
2—3 Tage ganz langsam steigende Dosen (bis Vio)j unter sorgfältiger 
Eontrolle des Gewichtes. Sobald die Tiere abmagern, muss man die 
Injektionen suspendieren. Auch mit chemisch geschwächten Giften 
(durch Goldchlorid oder Chlorkalk) gelingt es (Calmette «). 

Nach 4 — 5 Wochen vertragen die Tiere die doppelte Dosis letalis. 
Nun kann man ihnen alle 8 — 10 Tage größere Dosen applizieren. So 
kann man die Immunität recht hoch treiben. Calmette hat in einem 
Jahre ein Kaninchen so weit gebracht, dass es 80 tödliche Dosen 
(40 mg) Cobragift ohne jede Reaktion vertrug. Das Serum dieses Tieres 
war so reich an Antitoxin, dass 5 Tropfen (ca. 0,25 cm^) 1 mg Cobra- 
gift neutralisierten. Ein Esel bekam 0,2 g Cobragift in 3 Monaten, 
ein andrer 0,16 in 2 Monaten. Das Serum neutralisierte zu 0,5 cm^ 
1 mg Gift. 

4 cm^ dieses Serums schützten bei Injektion 4 Stunden vorher gegen 
die doppelte tödliche Dosis. Nach Phisalix & Berttand*) ist das 
Antitoxin dagegen (beim Vipemgift) erst 36 — 48 St. nach der Einführung 
in den Körper wirksam. Wenn man eine sicher tödliche Menge injiziert 
und 1 Stunde darauf 4—5 cm^ dieses Serums, bleibt das Tier in der Regel 
leben, jedoch ist IV2 Stunde das Maximum der Zeit, wenn die Heilung 
einigermaßen sicher sein soll. 

Dieses Anticobraserum schützt nun aber auch in derselben 
Weise gegen die neurotoxische Komponente der anderen 



^) Sewall, Exper. on the preventive inoculation of rattle-snake venom. Journ. 
of PhyB., VIII, 203 (1887). 

2) Fräser, Immnnity agaiBst snake poison. Brit. Med. Jonrn., 1895, I, 1309. 

3) Calmette, Propri^t^s da s^rom des animanx immunis^B contre le venin 
dOB Berpents. Compt. rend. de PAcad., 118, p.l20, 1004 (1894). 

*) Phisalix & Bbrtrand, Snr la propriöt^ antitoxiqae da sang des animaax 
vaeoin^B contre le venin de vipere. Compt rend. de FAcad., 118, 356 (1894). 



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— 199 — 

Schlangen, außerdem aach gegen das Skorpionengift und das 
Aalblut, sowie etwas gegen Abrin, ist unwirksam dagegen gegen 
Bicin, Diphtherie- und Tetanusgift. 

Das Serum wirkt wohl gerade so antitoxisch, wie die echten 
Antitoxine, doch beobachtete andererseits Chatenay (cit. n. Calm£tt£ 
1. c.) eine Hyperleukocytose bei Einführung des Giftes in immunisierte 
Tiere, während bei Kontrolltieren eine Hypoleukocytose zu konsta- 
tieren ist. 

Diese Beobachtungen wurden von Oalmette und D^earde bestätigt. 
Sie fanden, dass mit Abrin vergiftete Tierkohle, in die Peritonealhöhle ein- 
geführt, bei immunen Tieren massenhaft von Leukocyten aufgenommen wird, 
bei Kontrolltieren so gut wie gar nicht. Sie nehmen an, dass die Leukocyten 
Antitoxin bilden und aufspeichern. 

Nach PfflSALix & Bertrand 1) sollen außer dem Kaninchen auch 
Meerschweinchen, Pferd, Igel normale Antisera geben, das Huhn da- 
gegen nicht. 

Die passive Immunität verschwindet schnell, die aktive um so lang- 
samer, je höher sie war. Die Immunität ist vererbbar. 

Jede der drei Giftkomponenten (Hämolysin, Neurotoxin, Hämorrha- 
gin) erzeugt bei der Immunisierung seinen spezifischen Antikörper. In- 
folgedessen sind die verschiedenen Antisera sehr verschieden wirksam. 

Dass es gegen das Hämolysin Antisera giebt, resp. dass die ge- 
wöhnlichen Antisera auch Antihämolysine enthalten, fanden Stephens & 
Myers^), doch sind auch hier noch nach Flexner & Nogüchi (1. c.) 
die Antisera verschieden wirksam, da die Hämolysine noch wieder ver- 
schiedenartige Ambozeptoren besitzen und das Antigift durch Antiambo- 
zeptoren wirkt. 

Das Anticobragift enthält Antitoxin gegen das Neurotoxin, und zwar 
das Neurotoxin der verschiedensten Schlangengifte (Mc Farland*), 
und das Hämolysin, dagegen fehlt ihm der Antikörper gegen das Hä- 
morrhagin der Crotalus völlig; da nun das Crotalusgift hauptsäch- 
lich dadurch wirkt (s. o.), so ist Calmettes Antivenin gegen Crotalus- 
gift machtlos. 

Umgekehrt enthält dementsprechend das Anticrotalusserum haupt- 
sächlich Antihämolysin und Antihämorrhagin, kein Antineurotoxin ; dem- 
zufolge hebt es zwar die hämolytische, nicht die neurotoxische Funktion 
des Cobragiftes, also nicht seine allgemeine Giftigkeit auf. 

Bei denjenigen Giften, die beide giftige Hauptkomponenten ent- 
halten, wie die Mokassin- und Copperheadschlange, enthalten nattlrlich 
auch die Antisera beide spezifische Antikörper. 

i) Phisalix & Bertrand, Soc. Bio!., 48, 3% (1896). 

2) Stephens & Myers, Proc Patb. Soc. Lancet, 1898, I, 644. 

3) Mc Farland , Some investigationB npon antivenene. Joom. Amer. Med. 
Association, Dec. 1901. Ref C. f. Hakt, 31, 792. 



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— 200 — 

Das Antischlangengiftserum scheint, nach allem, was darüber bekannt 
geworden ist, ganz analog den anderen Antitoxinen zu wirken, d. h. 
es bindet, neutralisiert das Gift, ohne es zu zerstören. Einen sehr 
interessanten Beleg für diese Annahme liefert der schon im allgemeinen 
Teil gestreifte Versuch von Calmette (1895). Er fand nämlich, dass 
aus einem physiologisch neutralen Gemisch von Schlangentoxin und 
Antitoxin durch Erwärmen auf 68° das Antitoxin fortgenonunen werden 
kann, ohne das Toxin zu schädigen, so dass die ursprüngliche Gift- 
wirkung wieder hervortritt. Nach dem Erwärmen verhielten sich die 
Gemische völlig gleich toxisch, ob er Antiserum oder normales Serum 
zugesetzt hatte. Umgekehrt konnte er in dem Gemisch durch Chlorkalk 
das Toxin entfernen, so dass das vorher neutrale Serum wieder schützend 
wirkte (1896). Diese Thatsachen, die eine große theoretische Bedeutung 
besitzen, sind von Martin & CherbyI) bedingt bestätigt worden, die 
durch Erwärmen auf 68° eine Trennung des Giftes von Hoplocephalus 
curtus von dem Antitoxin unter bestimmten Bedingungen erzielen konnten. 

Wenn man nämlich das Gemisch nur kurze Zeit aufeinander wirken 
lässt, oder relativ viel Gift anwendet, dann ist Calmettes Versuch 
richtig; das Antitoxin wird zerstört, die Giftwirkung stellt sich beim 
Erwärmen wieder her. Nach 15 Minuten indessen ist die Bindung schon 
so fest, dass sie sich nicht mehr trennen lässt. Dagegen lässt sich eine 
Trennung durch Filtration durch Gelatinefilter unter Druck, die sonst 
das freie Toxin, nicht aber das Antitoxin passieren lassen, nicht er- 
zielen, da aus dem Gemisch nichts hindurchfiltriert. 

Die Annahme einer einfachen Bindung wird auch dadurch nicht be- 
einträchtigt, dass nach Martin die Dosis, die in vitro eine bestimmte 
Menge Schlangengift bindet, viel geringer ist als diejenige, die man zur 
vorherigen Immunisierung braucht, wenn man subkutan injiziert. Die 
Menge ist beträchtlich größer, einmal sogar war die tausendfache Menge 
erforderlich. Dagegen ist bei intravenöser Injektion nur etwa die- 
selbe Menge erforderlich. 

Martin führt dies darauf zurück, dass bei subkutaner Einftlhrung 
das Antitoxin viel langsamer diffundiert, als das Toxin, das auch bei 
unterbundenen Lymphwegen sich sehr schnell im Körper verbreitet. 

Merkwürdig sind die Angaben von Calmette (1895), dass auch 
Antitetanustoxin und Antiabrin eine gewisse Wirkung auf das Schlangen- 
toxin ausüben, so dass das Serum also nicht absolut spezifisch wäre. 
Dagegen erwiesen sich die Sera von Tieren, die mit Strychnin, Curare 
und verschiedenen Bakterien behandelt waren, als absolut machtlos 
gegenüber dem Gift, ebenso normales Menschenserum. 

Das Antischlangengiftserum wird erst bei 68° unwirksam. Chlor- 

3) Martin & Cherry, The natnre of antagonism between toxins and antitoxiiiB. 
Proc. Roy. Soc, 63, 420. — Martin, Relation of the toxin and antitoxin of snake- 
venom. Ibid., 64, 88 (1899). 



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— 201 — 

kalk und Goldchlorid beeinträchtigen seine schützende Wirkung nicht. 
Es ist auch ohne Fhenolzusatz lange haltbar. 

Calmette^) hat für die Wertbestimmung des Schlangenserums fol- 
gende Methode vorgeschlagen: 

Das Gift wird getrocknet, in destilliertem Wasser gelöst; die Dosis 
letalis für ein kg Kaninchen bestimmt. Dann giebt man einem 2 kg 
schweren Kaninchen steigende Mengen des zu prüfenden Serums und 
bestimmt die schützende Dosis gegen die einfache Dosis letalis. Als 
Einheit gilt ein Serum, von dem 1 cm^ lg Tier gegen die einfache 
Dosis letalis schützt. Schützt 1 cm^ also 2 kg, so ist das Sernm also 
ein 2000faches. Das mindeste muss nach Calmette 1000 fach sein; 
für die Tropen wird mindestens 4000faches angewendet. 

Diese echte antitoxische Eigenschaft des Immunserums hat nichts zu 
thun mit der Unschädlichmachung des Toxins durch Tyrosin, Chole- 
sterin, Galle u. s. w., denn alle diese Stoflfe wirken genau wie beim 
Tetanustoxin nur in vitro giftbindend, niemals aber immunisierend. 
Sie haben also mit dem echten Antitoxin nichts zu thun. 

Etwas anders ist die Frage, ob nicht vielleicht das Serum und die 
Galle der Giftschlangen Antitoxin enthält. Wie Fräser 2) fand, ist es 
ja besonders die Galle der Cobra, aber auch der Klapperschlange u.s. w., 
die ganz unvergleichlich größere giftzerstörende Kraft besitzt, als die 
Galle anderer Tiere; aber auch die Galle ungiftiger Schlangen besitzt 
immer noch eine stärkere Schutzkraft. Auch Alkoholfällungen dieser 
Gallen besitzen noch die Schutzwirkung. Andererseits ist jedoch zu 
bedenken, dass, wie Fräser 5) selbst fand, das Antigift nicht gerade 
spezifisch ist, sondern auch auf Bakterientoxine wirkt. 

Wir finden auch andererseits häufig, dass die Galle auf Toxine 
gerade so einfach zerstörend einwirkt, wie die anderen Verdauungs- 
säfte, so dass die Frage, ob die Galle ein echtes Antitoxin enthält, noch 
nicht entschieden ist. 

Deshalb kann man wohl auch kaum die Resistenz der Schlangen 
auf diese Funktion allein beziehen. Es wäre ja denkbar, dass die 
natürliche Immunität dieser Tiere auf einer konstanten Neubildung 
reichlicher Antitoxinmengen beruht, als einer ständigen Reaktion auf 
resorbierte Giftmengen. Im wesentlichen wird dieser Zustand aber doch 
wohl auf angeborenen Mangel an Rezeptoren beruhen; denn wir sehen 
ja, dass auch das Blut der Giftschlangen toxisch ist. 



1) Calmette, Snr le venin des serpents. Ann. Fast., XI, 214 (1897]. 

^ Fräser, The treatment of snake poiBoning with antivenene. Brit. Med. 
Joum., 1895, II, 417. — AntivenemouB properties of the bile of serpents. Ibid., 
1897, II, 12Ö. 

3) Fräser, Antitoxic qnalities of the bile of serpents. Brit Med. Joorn., 
1897, II, 596. 



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— 202 — 

Auch der Igel, der ja einigermaßen refraktär ist, scheint dies 
hauptsächlich dadurch zu sein, dass er wenig Rezeptoren besitzt; auch 
sein Blut ist nach Gifteinfuhr toxisch. Beim Igel liegen hier die 
Dinge ähnlich, wie für den Alligator beim Tetanus; denn der Igel, ob- 
gleich wenig empfänglich, bildet doch ziemlich beträchtliche Mengen 
Antitoxins. Er scheint also zwar Rezeptoren zu besitzen, aber wohl 
zum groBen Teil an minder lebenswichtigen Organen. Andererseits fand 
Calmette (1895), dass das Serum des Schweines und das der Man- 
guste äußerst wenig Antitoxin enthält, obgleich beide Tiere fast völlig 
refraktär gegen Schlangengift sind. 

So wird denn wohl auch bei den Schlangen selbst die Sachlage sein. 
Die Hauptursache ihres refraktären Verhaltens dürfte angeborener Re- 
zeptorenmangel, resp. Vorhandensein zerstreuter Rezeptoren sein; da- 
neben ist es allerdings nicht unwahrscheinlich, dass sie auch Anti- 
toxin produzieren, und dies mit der Galle ausscheiden. 

Das Krötentoxin (Phrynolysin), 

Einige Kröten enthalten in ihrer Haut und im Blute neben den ge- 
nauer bekannten alkaloidähnlichen Giften (Bufotalin u. s. w.) noch ein 
anscheinend echtes hämolytisch wirkendes Toxin. 

Phisalix & Berteand^) haben wohl zuerst auf das Vorhandensein 
eines zweiten GiftstojGFes hingewiesen und Pügliese^) hat die Hämolyse 
beobachtet. 

Genauer untersucht wurde das »Phrynolysin* von Pröscher^). 

Pröscher benutzte vor allem Extrakte aus der Haut der Feuer- 
kröte, Bombinator igneus, daneben auch die Gartenkröte, Bufo cinereus. 

Das Phrynolysin zeigt alle Eigenschaften der Toxine, besonders ihre 
große Empfindlichkeit, und dialysiert nicht. Es wird ziemlich schnell 
unwirksam. 

Es hämolysiert, und zwar in neutraler und ganz schwach saurer 
Lösung gleichmäßig, am besten Hammelblut, dann folgt Ziege, Kanin- 
chen, Hund, Ochse, Huhn, Meerschweinchen, während es auf Taube, 
Frosch und Kröte fast gar nicht wirkt. 

Bei Hammelblut genügen ca. 0,3 mg um einen Liter komplett zu 
lösen. 

Ein Grund, flir das Phrynolysin eine komplexe Struktur anzunehmen^ 
liegt bisher nicht vor. 

Normale Sera enthalten keinen Antikörper. Durch Immunisierung 
lässt sich hingegen ein Antilysin erzeugen, das in einer Dosis von 
0,025 cm 3 gegen die für 1 cm^ 5 ^ Hammelblut lösende Dosis schützt. 

1} Phisalix & Bertrano, Becherch. b. la toxicit6 da sang du crapaud commun. 
Arch. d. phye., 25, Ö17 (1893). 

2) PüQLiESE, Arch. d. farm., 1898. Cit n. 

3) Pröscher, Zur Kenntnis des Erötengiftes. Hofm. Beitr., I, 675 (1901). 



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- 203 — 

Salamandergift. 

Einen antitoxinbildenden GiftstoJOT fand Phisalix^) auch in dem 
japanischen Salamander (Sieboldia maxima), und zwar ebenfalls in der 
Rttckenhaut. 

Das Gift ist in Wasser mid Glycerin löslich, mid sehr wenig be- 
ständig. Bei 60® wird es in 20 Min. komplett zerstört, ebenso durch 
Alkohol. 

Seine Wirkungen am Frosch sind Oedeme, Hämorrhagieen, bei 
Warmblütern auch Nekrosen. Ferner treten Lähmungen ein, die Reiz- 
barkeit erlischt langsam; unter Bespirationslähmung tritt der Tod ein. 

Durch Erwärmen auf 50° wird das Gift geschwächt, behält aber 
seine immunisierende Kraft. Die so behandelten Tiere vertragen dann 
weit größere Dosen des Giftes, aber auch von Vipergift und Aalgift 
(Phisalix^), woraus auf eine gewisse Verwandtschaft dieser Toxine ge- 
schlossen werden darf. 

Das Spinnengift. 

Die giftigen Spinnen spielen in dem Volksglauben eine große Rolle. 
Eine große Anzahl von Spinnen ist der Giftigkeit angeklagt worden, so 
besonders die Tarantel u. a. 

Dagegen war wissenschaftlich über die Spinnengifte bis auf die um- 
fassende Monographie von Kobert^) nur wenig bekannt. 

KoBEBT konnte nachweisen, dass grade den am meisten beschuldigten 
Spinnen, besonders den Taranteln, kein spezifisches Gift zukommt. 
Es fanden sich eigentlich nur in zwei Spinnengattungen wirkliche Gifte, 
und zwar in Lathrodectes und Epeira (Kreuzspinne). 

Die Lathrodectes sind über den ganzen Erdball verbreitet. Am 
wichtigsten sind die Arten von Italien (L. tredecimgattatus, Malmignatte) 
und von Südrussland (L. Erebus, Karakurte), sowie Neuseeland (L. scelio 
und Hasseltii, Katipo), und Südamerika (L. mactans). Die Giftigkeit 
der Malmignatte ist schon 1765 von Valmont de Bomabe beschrieben, 
und seitdem häufig beobachtet worden. Auch Tierversuche wurden 
angestellt. 

Ueber die russische Spinne stellt Kobekt eine Reihe von Berichten 
zusammen, aus denen hervorgeht, dass die Lathrodectes nicht nur bei 
Rindern, Pferden und Kamelen viel Schaden stiftet, sondern auch 
Menschen tötet. Die Erscheinungen sind sehr schwere: heftige 



^ PuiSALix, Act phys. du venin du Salamandre. See. Bio!., 49, 723 (1897). 

2) PmsALix, Propr. ImmunisanteB da venin du Salamandre. See. Biol, 49, 
823 (1897). 

3) KoBERT, Beitr. z. Kenntn. d. Giftspinnen. Stattgart 1901. (Dort die ganze 
ältere Litteratur von den frühesten Zeiten ab.) Und: Giebt es für den Menschen 
gefahrliche Spinnen? Die Medic. Woche, 1902, S. 154. 



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— 204 — 

Schmerzen, Priapismus, Schlaflosigkeit, große Prostration, kalter Schweiß, 
Fieber, Dyspnoe. Die Erscheinungen ähneln im großen und ganzen sehr 
denen der Vergiftung durch Bakterientoxine. An der Bissstelle finden 
sich keine auffallenden Veränderungen. Die Rekonvaleszenz dauert 
sehr lange. Todesfälle sind immerhin selten. 

KoBERT hat mit Auszügen von taurischen Katakurten eigene Ver- 
suche angestellt. 

Er benutzte dazu wässrige Extrakte teils frischer, teils schonend ge- 
trockneter Tiere. 

Die Extrakte erwiesen sich als sehr giftig; die Wirkung entsprach 
genau der an Menschen beobachteten. Einige mg pro kg organischer 
Substanz intravenös führten bei Hunden und Katzen schnellen Tod her- 
bei, unter Dyspnoe, Konvulsionen, Lähmung der Respiration und des 
Herzens. Auch Kaninchen, Ratten und Vögel sind zu vergiften. Der 
Igel ist etwas resistenter. Auch Frösche und Blutegel sind empfindlich. 
Vorder- und Hinterteilextrakte wirken ziemlich gleichmäßig. Neuge- 
borene Spinnen sind giftiger als ausgewachsene, auch die Eier sind 
giftig. Auf das isolierte Froschherz wirkt das Gift schon bei 
1 : 100000 deletär. 

KoBERT konnte femer bei seinen Versuchstieren bei vorsichtiger 
Eingabe eine Immunität erzielen, so dass das Karakurtengift that- 
sächlich ein Toxin zu sein scheint. Kochen macht das Gift völlig 
unwirksam, ebenso Alkohol. Per os ist es wirkungslos. Das 
Gift wirkt auch hämolytisch und gerinnungsbefördemd. 

Die Lathrodectes enthält demnach ein echtes Toxin, das auf 
Herz und Zentralnervensystem manchmal erst erregend, dann 
jedenfalls lähmend einwirkt. 

AraohnolyBin. 

Von einheimischen Spinnen scheint Chiracanthium nutrix ein Gift zu 
enthalten, das aber noch nicht untersucht ist. 

Dagegen fand Kobert in der gewöhnlichen Kreuzspinne, Epeira 
diadema, ein dem Lathrodectesgift völlig anologes Toxin, das ebenfalls 
sehr giftig ist, und gegen das man immunisieren kann. Es ist etwas 
weniger wirksam, aber beständiger als das Karakurtengift. 

Die Extrakte anderer einheimischer Spinnen sind wirkungslos. 

Das Gift der Kreuzspinne hat nach Kobert auch hämolytische 
Eigenschaften, die von Hans Sachs i) dann mittelst der EHRLiCHschen 
Methodik genauer studiert worden sind. 

Das Arachnolysin löst sehr schnell und intensiv, doch sind 
die B. K. der einzelnen Tierarten sehr verschieden resistent. Am em- 
pfindlichsten ist Ratten- und Kaninchenblut. 0,028 mg lösen 0,05 cm^ 

^} Sachs, Zar Kenntnis des Erenzspinnengiftes. Hofm. Beitr., II, 125 (1902). 

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— 205 — 

Blut komplett. Dagegen sind Meerschwein, Pferd, Hammel und Rind 
völlig resistent. 

B. E. ganz junger Hühner sind nach Sachs ^) infolge totalen Rezep- 
torenmangels völlig unempfindlich. Erst wenn diese ersten B. K. all- 
mählich verschwinden, tritt Wirkung ein, bis nach 2 — 4 Wochen die 
normale Empfindlichkeit des Hühnerblutes erreicht ist. 

Das Toxin ist gegen Erwärmen nicht sehr empfindlich, wird erst bei 
70° in 40 Min. zerstört. 

Die unempfindlichen B. K. binden das Gift nicht, so dass dieses 
Lysin sich durchaus den anderen Haptinen anschließt. Damit stimmt 
ttberein, dass das Arachnolysin von den Stromata empfindlicher 
B. K. gebunden wird. Durch Immunisierung von Meerschweinchen und 
Kaninchen konnte Sachs ein hochwertiges antitoxisches Serum her- 
stellen, das bei Mischung mit dem Gift auch die Hämolyse hindert. 
Da nun Meerschweinchenblut unempfindlich ist, keine Rezeptoren ent- 
hält, so muss das Antiarachnolysin aus anderen Rezeptoren gebildet 
sein. Da es trotzdem auch antilytisch wirkt, so gelten fllr seine Kon- 
stitution vermutlich dieselben Erwägungen, wie für das Ri ein (s. d.), mit 
dem es große Aehnlichkeit besitzt. 

Skorpionengift. 

Valentin^) untersuchte 1874 einen tunesischen Skorpion (Androctonus 
occitanus Claus) auf die Giftigkeit seines Schwanzendes. 

Kleinere Frösche starben meist an dem Stich, größere nicht. Es 
traten tetanische Krämpfe auf, femer fibrilläre Zuckungen, allmählich 
schwindet die Reflexerregbarkeit von hinten nach vom. 

Später liegen u. a. Befunde von Bert 3) vor, die ganz ähnliche Be- 
obachtungen über das Gift enthalten. 

Calmette fand (1895) bei Scorpio afer im Schwanzsegment ein 
Gift, das er aus den zerriebenen Leibern mit Wasser extrahierte und im 
Vacuum eintrocknete. 

Das Gift tötet Mäuse zu 0,05, Meerschweinchen zu 0,5 unter ganz 
ähnlichen Erscheinungen wie das Schlangengift. 

Es verhält sich auch in jeder anderen Beziehung, besonders aber 
auch gegen das Antitoxin so völlig analog dem Schlangentoxin, dass 
man wohl anzunehmen berechtigt ist, dass das Skorpionengift sich nicht 
anders von den Schlangengiften unterscheidet, wie diese untereinander, 
dass es also wohl auch das Neurotoxin der Schlangen neben gering- 
fllgigen fremden Beimengungen enthält, wie die verschiedenen Schlangen- 



1} Sachs, lieber Differenzen der BlntbeBchaffenheit in verschied. Lebensaltern. 
C. f. Bakt, 34, 686 (1903). S. A. 

2} Valentin, üeb. d. Giftw. d. nordafrik. Skorpiones. Z. f.Biol, XII, 170 (1876;. 
3] Bert, Soc. Biol, 37, Ö74 (1885). 



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— 206 — 

gifte. Dies wird auch dadurch noch gestützt, dass Eyes (1. c.) aus dem 
Skorpioueugift ein ganz analoges sofort blutlösend wirkendes Lecithid 
isolieren konnte, wie aus Gobragift. Für den Menschen ist der Skor- 
pionenbiss nur deshalb wenig gefährlich, weil die Menge bei dem 
Einzelbiss zu gering ist. 

Fischgifke. 

Ein anderes scheinbar echtes Toxin aus der Giftdrüse des T ra- 
chin us draco (Petennännchen) hat Briot^) isoliert, dessen Existenz 
schon vorher bekannt war. Er extrahierte die Giftdrüse mittelst 
chloroformhaltigen Glycerins und filtrierte die neutrale Lösung. 

Das Gift wirkt auf Frösche unter Erregung von Krämpfen und 
Lähmungen, der Tod tritt unter Prostration auf (Geessin, Bottard, das 
Herz wird auch direkt schwer geschädigt (Pohl*). 

Auf Meerschweinchen wirkt es, besonders bei intraperitonealer In- 
jektion, ganz ähnlich energisch, wie auch Phisalix bei Trachinus 
vipera gefunden hatte, auf Kaninchen weniger heftig. Charakteristisch 
ist die rapide Lähmung der injizierten Extremität. Bei intravenöser 
Injektion tritt der Tod fast momentan ein, bei schwächeren Dosen er- 
holt sich das Tier sehr schnell. Das Gift macht bei subkutaner Injek- 
tion auch schwere Lokalerscheinungen. 

Erhitzen zerstört das Toxin, bei 100^ in Yj St., ebenso Chlorkalk 
und Goldchlorid. 

Das Gift wirkt auch hämolytisch. Normales Serum vom Pferde 
enthält wie gegen Schlangenhämolysin, auch ein Antihämolysin gegen 
das Trachinuslysin, das bei 50° zerstört wird. Das Lysin ist bei 100^ 
kurze Zeit (20 Min.) beständig. 

Das Trachinusgift ist vom Schlangengift verschieden, da es anders 
wirkt und da ein Antischlangengiftaernm weder auf die toxische, noch 
auf die lytische Funktion einen hindernden Einfluss besitzt. 

Man kann Kaninchen gegen das Gift immunisieren, am besten, wenn 
man mit dem Serum bereits immuner Tiere gemischtes Gift vorsichtig 
injiziert. 

Das Serum enthält ein spezifisches Antitoxin, das allerdings gegen 
die lokalen Erscheinungen nicht konstant schützt. 



ij Briot, Stades aar le venin de la vive (Trachinns draco). Jonrn. de phjB. 
et pathol., 1903, 271. S. A. 

Briot giebt dort folgende Qnellen über giftige Fische: 

Gressik, Contrib. k T^tade de Tappareil k venin chez les pofsons dn genre 
vive. Th6se Paris, 1884. 

Bottard, Les poisons v^nimeux. Thdse Paris, 1884. 

Phisalix, Ball, du maseum d'histoire natar., 1899. 

CoNTiÄRE, Les poisons y^nimenx. Th^se Paris, 

Weiteres s. b. Robert, 1. c. 
2) Pohl, Prager med. Woch., 1893, S. 31. 



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— 207 — 

Es scheinen anch noch andere Fische toxinähnliche Gifte zn enthalten, 
die noch nicht untersucht sind, z. B. Neunaugen (Petromyzon), 
Meersau (Scorpaena), Pterois, Serranus (Schriftbarsch), Plotosus, Synanceia 
u. a. (Koberti). 

Ob hier wirkliche Toxine eine Rolle spielen, muss späteren Unter- 
suchungen vorbehalten bleiben. 

Bei anderen giftigen Fischen, z. B. bei den japanischen Tetrodon- 
arten (Fugu) scheinen die giftigen Protamine die entscheidende Rolle 
zu spielen. Näheres über die Giftfische im allgemeinen mitzuteilen, 
liegt nicht im Plane dieses Buches ^j. 

Das Qift des Aalblutes (Ichthjotoxin). 

Eine eigentümliche Sonderstellung nimmt ein giftiger Stoff ein, der 
sich in dem Serum des Aales und einiger verwandter Fische (Muraena, 
Conger) vorfindet. Durch sein Vorkommen als normales Produkt des 
tierischen Lebens schließt es sich einerseits an die Schlangengifte an, 
die sich ja auch im Blute der Giftschlangen vorfinden; andererseits 
aber erinnert es durch das Hervortreten der hämolytischen Wirkung 
auch an die agglutinierenden Toxine des Pflanzenreiches und zeigt 
drittens in dieser Eigenschaft auch eine gewisse Verwandtschaft mit 
den Hämolysinen der normalen Sera verschiedener Tiere, die nach 
Ehrlich ja auch nicht einfache >Alexine«, sondern Rezeptoren zweiter 
Ordnung, mit Amboceptor und Komplement, darstellen. 

Wohin also das Ichthyotoxin schließlich zu stellen ist, lässt sich 
vorderhand noch nicht entscheiden. Aus äußeren Gründen ist es vor- 
läufig wohl am zweckmäßigsten, es im Anschluss an die anderen Zoo- 
toxine zu besprechen. 

Ein ähnliches Gift scheinen die Seeaale (Muraena) auch in ihren 
Giftdrüsen zu enthalten, doch ist darüber wenig bekannt^). 

Die Giftigkeit des Aalblutes ist von A. Mosso*) entdeckt worden, 
der die toxischen Wirkungen genauer untersuchte. Er fand auch, dass 
das Blut der vergifteten Tiere seine Gerinnungsfähigkeit einbüßt, was 
von Delezenne*^) bestätigt wurde, der seine Wirkung mit der der Pro- 
Peptone verglich. U. Mosso*) hat dann die Eigenschaften dieses Gifties 
näher untersucht. 



1) KoBERT, lieber Giftfische n. Fiscbgifte. Vortrag i. Bostocker Fischereiverein, 
1902. Die Med. Woche, 1902. 

2} Man findet Näheres außer bei Robert noch bei Yaughan & Novv, 1. c, 
p. 188flf. 

3) Anatomische und toxikologische Daten s. b. Robert (1. c). 

4] A. Mosso, Die giftige Wirkung des Semms der Mnreniden. Arch. f. exper. 
Pathol, 25, 111 (1889). 

^) Delezenne, Action du s^rum d'angnille snr la coagnl. du sang. Arch. d. 
phys., 29, 646 (1897). 

0) U. Mosso, Recherches snr la natnre du venin, qni se tronve dans le sang 
de Tanguille. Arch. ital. d. Biol., XII, 229 



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— 208 — 

Dann waren es vor allem Kossel^) und Camus & Gley^), die sieh 
mit dem Aalblutgifk beschäftigten, seine blutlösende Wirkung entdeckten 
und zeigten, dass man dagegen immunisieren kann, dass es ein Anti- 
toxin bildet. 

Darstellung und Eigensohaften des Qiftes. 

Camus & Gley gewinnen das giftige Serum, indem sie das Blut 
mittelst sterilisierter Pipette aus der Aorta des Aales entnehmen und in 
sterilisierte Glasgefäße bringen. Dann lässt man entweder einfach ab- 
setzen oder centrifugiert. Sie gewinnen so etwa 0,6 com Serum auf 
100 g Tier. 

Das Serum hat eine schwach grünliche Färbung, manchmal gelblich. 
Es hält sich lange unverändert, wenn man es vor Licht schützt. 

Eine Reindarstellung des toxischen Prinzips aus dem Serum ist noch 
nicht versucht worden. 

U. Mosso stellte fest, dass es genau dieselben physikalischen und 
chemischen Eigenschaften hat, wie alle Toxine; dass es durch Hitze, 
Säuren, Alkalien u. s. w. zerstört wird, dagegen das Trocknen im Va- 
cuum verträgt, sowie schließlich, dass es nicht dialysiert. In 90proz. 
Alkohol ist es unlöslich. 

Wirkungen des Aalblutes. 

Das Serum verschiedener Aale zeigt häufig beträchtliche Schwan- 
kungen im Giftwert, wobei außer der Herkunft der Fische auch die 
Jahreszeit eine Rolle spielt, wie wir dies auch bei den Schlangengiften 
finden (Wehrmann 3). 

Der Flussaal der Ostseeküste enthält nach Springfeld*) ein sehr 
viel schwächer giftiges Serum. 

Auch die einzelnen Tierarten sind bei gleicher Art der Einführung 
(intravenös) verschieden empfindlich. Hunde scheinen am empfänglich- 
sten zu sein (Dosis letalis nach Mosso 0,02 cm^ pro kg). Der Igel 
ist fast refraktär. Vom Magen aus wirkt es nach A. Mosso gar nicht, 
wohl aber bei Injektion in den Dünndarm. Doch soll nach Pennavauia^} 
ein schwerer Vergiftungsfall beim Menschen nach Genuss des Aalblutes 



1) KossEL, Zur Kenntnis der Antitoxinwirkung. Berl. klin. Woch., 1898, 7. 

2) Camus & Gley vor allem: Recherchea sur Taction physiolog. de s^rum 
d'anguille. Arch. Internat, de pharmacodynamie, V, 247 (1898:. S. A. 

Ferner: De la toxicit^ du s^rum d^an^uille pour des animaux des especes 
differents. Soc. BioL, 1898, 129. 
Immunis. contre Taction globulicide etc. Compt. rend., 126, 428 (1898). 
Nouvelles recherches sur rimmanit6 contre le s^rum d'angnille. Ann. 
Fast, XIII, 779 (1899). 

3) Wehrmann, Sur les propr. toxiques du sang etc. Ann. Fast, XI, 810 (1897). 
*) Springpeld, üeb. d. gift. Wirkung des Blutserums des Flussaals. Diss. 

Greifswald 1889. 

5) Fennavaria, Farmacista italiano, XII, 1888, p. 328. Cit. n. Kobert, 1. c. 



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— 209 — 

Yorgekommen sein. Subkutane Injektionen machen Nekrosen und Abs- 
zesse. Die Vergiftung verläuft je nach der Dosis in zwei verschiedenen 
Formen. Kaninchen, die 0,1 cm^ pro kg eines sehr wirksamen Serums 
erhalten, sterben in wenigen Minuten unter Krämpfen, die bisweilen von 
Speichelfluss und Blut im Urin begleitet sind. Miosis fehlt fast nie, 
bisweilen tritt Exophthalmus auf. 

Es lassen sich die Erscheinungen nach Mosso auf eine einer vor- 
übergehenden Reizung folgende Vagusparalyse zurttckführen. 

Bei kleinen Dosen oder schwachen Giften bilden sich dagegen 
Lähmungszustände aus, mit fibrillären Zuckungen, Anästhesieen, Dyspnoe, 
Speichelfluss, Schreien u. s. w., die erst in Stunden oder gar Tagen 
(Kossel), dann unter starkem Gewichtsverlust zum Tode führen. Aehn- 
lich verhalten sich Meerschweinchen. Bei letzteren tritt bei sehr großen 
Dosen der Tod so schnell ein, dass mitunter sogar die Krämpfe fehlen. 

Im ersteren Fall treten also die bulbären Symptome, besonders 
schnelle Lähmung des Atmungscentrums, im zweiten die spinalen 
mehr in den Vordergrund. Die peripherischen Nerven der Atmung 
bleiben reizbar. 

Beim Frosch konnte A. Mosso zeigen, dass die Beizbarkeit der 
Nerven und Muskeln schnell abnimmt; es schwindet die Sensibilität, 
besonders der hinteren Gliedmaßen, vor der Motilität, wahrscheinlich 
durch Störung der Leitungsbahnen vom Rückenmark zum Gehirn. Das 
isolierte Froschherz wird nicht tangiert. 

Beim Warmblüter steigt der Blutdruck gleich nach der Injektion 
an, um dann zu sinken. Die Herzaktion verlangsamt sich und wird 
unregelmäßig; das Herz schlägt aber nach dem Tode noch fort (Bab- 
DiER ^). Bei sehr großen Dosen aber fand A. Mosso, dass das Tier sehr 
schnell an Herzlähmung stirbt, während die Atmung noch minutenlang 
fortdauert. Auch bei künstlicher Atmung sterben die Tiere (Hunde) an 
Herzlähmung. Die Autopsie ergiebt Kongestion des Darmtractus, der 
Lungen, der Nebennieren; schwere Nierenläsionen selbst bei rapidem 
Tode (Pettit^); hyaline Degeneration, Aufquellung der Zellen. 

In der Blase findet sich blutiger Harn. 

Am Nervensystem fand Westphal«) mit Hilfe der NissLschen Me- 
thode schwere Veränderungen, denen beim Tetanus sehr ähnlich. 

Wir sehen also, dass im großen und ganzen die Vergiftung ähnlich 
der mit Bicin, Schlangengift u. s. w. verläuft. 

Erhitztes Serum (58^) wirkt in sehr großen Dosen (lOOfach der sonst 
tödlichen) noch schwach auf die Tiere ein, die bedeutend an Gewicht verlieren. 



1) Baroier, Action oardiluiue dn s^ram d^angnille. See. Biol, 50, 548 (1896]. 
2; Pettit, Alt^rations renales cons^cntives k Finjection du s^min d'angville. 
Soc. Biol, 50, 320 (1808). 
3) Cit bei Kossel (1. c). 

Oppenheimer, Toxine and Antitoxine. 14 



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— 210 — 

Wirkung auf das Blut. 

Das Aalblut übt schon im Körper eine energische hämolytische 
Funktion aus (Camus & Gley). Die Iris färbt sich rot; es bilden sich 
Hämorrhagieen, blutige Exsudate im Peritoneum, Erythrocyten und Hämo- 
globin treten im Harn auf. Das arterielle Blut enthält Hämoglobin. 
Die Resistenz der Erythrocyten wurde durch Zusatz von Viooo — Vioooo 
Aalserum meist so geschwächt, dass sie noch an 0,7^ NaCl -Lösung 
ihr Hämoglobin abgaben, während normale Kaninchenblutkörperchen erst 
bei 0,48 — 0,50 nachgeben. Aehnlich verhielten sich Meerschweinchen, 
während die Erythrocyten des Igels sich als refraktär erwiesen, ebenso 
die der Hühner und Tauben, Schildkröten, Frösche, Kröten, Fledermäuse. 
Besonders interessant ist der Umstand, dass nach H. Sachs neugeborene 
Kaninchen eine hohe relative Widerstandsfähigkeit zeigen, und sich erst 
später passende Rezeptoren in größerer Menge bilden (vergl. dazu auch 
bei Arachnolysin). Die Eigenschaft des Aalserums wird durch vor- 
sichtige Neutralisierung mit Salzsäure nicht tangiert. 

Durch Zusatz anderer Sera wird sie ebenfalls nicht beeinflusst, da- 
gegen durch Erwärmen auf 55" vernichtet. Bei 0° geht die Auflösung 
nicht vor sich, bei 23° sehr gut. 

Nach Wendelstadt*) wird die Hämolyse durch Zusatz kleiner 
Mengen Glykogen beeinträchtigt. 

Immunisierung gegen das Aalblut. 

Das Gift des Aalblutes zeigt sich auch insofern als echtes Toxin, 
als man empfängliche Tiere damit immunisieren kann. 

Nach KossEL, Camus & Gley, Wehrmann und Tchistovitch 2) be- 
nutzt man dazu am vorteilhaftesten Kaninchen. Man injiziert zuerst 
0,05 — 0,1 cm^ subkutan oder intravenös; die Tiere vertragen diese Dosis 
meist gut, und sind dann leicht höher zu immunisieren. Meerschwein- 
chen sind schwer zu immunisieren, da sie meist eingehen; Hunde ver- 
tragen die Behandlung gut, geben aber nur schwache Antisera. Ziegen 
scheinen sich dagegen gut zu eignen. Hühner und Tauben geben nur 
Spuren von Antikörpern, und auch nur gegen die blutlösende Wirkung 
in vitro. Tauben sind sehr empfindlich gegen das Gift., obwohl ihre 
Erythrocyten fast gar nicht vom Aalserum angegriJGFen werden. 

Die Antitoxinbildung geht sehr schnell vor sich, schon nach 3 — 4 
Injektionen erhält man ein Serum von etwa Vio — V20 Stärke; d. h. man 
braucht 10 — 20 cm^ Serum, um Icm^ Aalserum zu neutralisieren. 

Tchistovitch bestimmt den Wert seines Serums in folgender Weise: 

1) Wendelstadt, Einw. v. Glykogen a. hämolyt. Vorgänge. C. f. Bskt.. 34, 
831 (1903). 

2) TcmsTOviTCH, lätndes snr rimmunisation contre le s^rnm d'angnüle. Ann. 
Fast. XIII, 406 (1899). 



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— 211 — 

5 Tropfen Aalblut (1 : 10 7%o NaCl) werden mit steigenden Antitoxin- 
dosen behandelt. Als Reagens dienten einige cm^ Kaninchenblnt auf 
20 cm^ verdünnt, sowie die Prüfung der toxischen Wirkung. Beide 
Reihen liefen gewöhnlich parallel. Hierbei stellten sich jedoch eigen- 
tümliche Ergebnisse heraus. 

Während nämlich die Kaninchen selbst immer resistenter wurden, 
immer größere Giftmengen vertrugen, nahm der Antitoxingehalt ihres 
Serums nicht in derselben Weise zu; er wurde im Gegenteil immer 
geringer. 

Gleichzeitig zeigten auch die Erythrocyten dieser Tiere besondere 
Eigenarten. 

KossEL, Camus & Gley hatten gleichzeitig darauf aufmerksam ge- 
macht, dass die Erythrocyten immunisierter Tiere unter Umständen an 
sich (d. h. gründlich vom Serum befreit) refraktär gegen die Hämo- 
lyse durch Aalblut sind. Tchistovitch fand nun, dass die Blut- 
körperchen an sich grade dann besonders leicht löslich sind, wenn 
der Antitoxingehalt des Serums hoch ist; dass sie dagegen mehr 
oder minder refraktär sind, wenn sich der Antitoxingehalt des Serums 
vermindert. 

Es zeigt sich hier ein gewisser Parallelismus der Erscheinungen, der, 
die Richtigkeit der Thatsachen vorausgesetzt, auf ein Versiegen der 
Rezeptoren für das Aaltoxin sowohl in den Körperzellen, als auch in 
den Erythrocyten hinzudeuten scheint. Wenn wir annehmen, dass 
toxisches und hämolytisches Prinzip des Aalserums identisch sind, so 
müssen wir auch passende Rezeptoren dafür sowohl in den Körperzellen, 
wie in den Erythrocyten annehmen; ein Versiegen der Rezeptoren- 
bildung unter dem Einfluss der Immunisierung würde dann thatsächlich 
eine Giftfestigung trotz verminderter Antitoxinbilduug einerseits, eine 
Unempfindlichkeit der Erythrocyten andererseits erklären. 

Es ist nun allerdings die Frage, ob beide Prinzipien wirklich iden- 
tisch sind. Wir stoßen hier auf dieselben Schwierigkeiten wie beim 
Ricin. Auch dort lässt sich die Blutwirkung leicht aufheben, ohne die 
toxische zu vernichten; auch dort ist unter normalen Bedingungen der 
schützende Einfluss auf die Erythrocyten das Mass auch für die anti- 
toxische Kraft. Und doch ist auch hier, wie wir oben sahen, die Frage, 
ob das Ricin zwei aktive Stoflfe enthält, noch nicht abgethan; wenn auch 
freilich viel ftlr die JACOBYSche Ansicht, dass es sich um einen ver- 
zweigten Receptor handeln möge (s. d.), spricht. 

Beim Aalblut liegt die Sache noch etwas anders. 

Hier ist die Frage, ob nicht die blutlösende Wirkung des Serums 
insofern ganz von der toxischen zu trennen ist, als es sich hier um ganz 
analoge hämolytische Vorgänge handeln kann, wie sie zahlreiche andere 
normale Sera auf fremde Erythrocyten ausüben. Wie Ehrlich und 
Morgenroth in zahlreichen Arbeiten nachwiesen, handelt es sich hier 

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— 212 — 

um Reihen von eigenen Haptinen mit yersebiedenen spezifischen Ambo- 
zeptoren und Komplementen. 

Nachgewiesen ist bis jetzt freilich nicht, dass nicht doch auch hier, 
wie Jacoby für das Ricin annimmt, an einem Amboceptor zwei ver- 
schiedene ergophore Gruppen sitzen, deren eine hämolytisch, die 
andere toxisch wirkt. 

Dagegen spricht auch nicht der von TcmsTOviTCH hervorgehobene 
Umstand, dass Erwärmen auf 55° die hämolytische Fähigkeit ver- 
nichtet, ohne die spezifisch toxische zu zerstören (was übrigens von 
Camus & Gley strikte geleugnet wird), und dass das so partiell in- 
aktivierte Aalserum nach wie vor Antitoxin erzeugt. Alle diese That- 
sachen lassen sich ebensogut durch eine partielle Toxoüdbildung, wie 
durch die Annahme zweier spezifischer Haptine mit verschiedenen 
haptophoren Gruppen erklären. 

Hier könnten allenfalls nur exakte Bindungsversuche nach der 
EHRLiCHSchen Methodik Klarheit schaffen. Man müsste zu entscheiden 
versuchen, ob das Aalserum noch dann seine toxische Kraft behält, 
wenn man die für Blutkörperchen passenden Rezeptoren durch spezi- 
fische Bindung entfernt hat. 



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Nachtrag. 

Von den zahlreichen Arbeiten, die während der Drucklegung er- 
schienen sind, und nicht mehr berücksichtigt werden konnten, sei doch 
die Monographie von Grassbeeger & Schattenfroh (lieber das Raasch- 
brandgift, Franz Deuticke, 1904) referiert, da sie ein sonst kaum be- 
kanntes Gift ausführlich behandelt. 

Nach den Darlegungen der Verfasser handelt es sich beim Rausch- 
brandbacillus um ein echtes Toxin, das aber durch die bisherigen 
Arbeiten nicht recht bekannt geworden war. Grassberger & Schatten- 
froh führen nun aus, dass die Toxinbildung des Rauschbrandbacillus 
nur unter ganz bestimmten Kulturbedingangen vor sich geht, nämlich 
besonders dann, wenn sich der Bacillus als typischer Buttersäurebacillus 
erweist. Dazu ist vor allem die Anwesenheit von gärfähigem Zucker 
oder noch besser von milchsaurem Kalk in der Eulturflüssigkeit not- 
wendig. Sehr häufig versagt die Toxinbildung ganz; die > denaturierten« 
Stämme vermögen die Milchsäure nicht mehr zu vergären und erzeugen 
gar kein Toxin; die Sporulationsfähigkeit kann dabei eingeschränkt 
oder lebhaft erhalten sein. 

Dagegen tritt nun bei einer stillen Nachgärung, bei der vorwiegend 
die Milchsäure zersetzt wird, energische Toxinbildung auf, die während 
der ersten stürmischen Gärung fehlen kann, und dementsprechend auch 
bei Aussaat aufzuckerfreien, Milchsäure enthaltenden Kulturen. Von 
weiterer ausschlaggebender Bedeutung ist die Reinheit der Kulturen, 
da andere Bakterien das sehr labile Gift anscheinend schädigen. Femer 
ist eine Temperatur von ca. 37° zur Toxinbildung notwendig. 

Die Toxinbildung durch den Rauschbrandbacillus ist eine echte, 
freie Sekretion. 

Die keimfreie Filtration gelang durch Verwendung von Klärpulvern, 
da feste Filter zuviel Toxin absorbieren. 

Die Wirkung bei Meerschweinchen ist der Rauschbrandinfektion 
ähnlich: Oedeme, Hämorrhagieen, Temperaturabfall, Lungenödem, also 
eigentlich ganz das allgemeine Bild der Toxinvergiftung. Die Inkuba- 
tionszeit beträgt nur wenige Stunden , die Krankheitsdauer 2 — 4 Tage, 
bei massiven Dosen 6 — 7 Stunden. 

Als Einheit wurde eine Giftlösung gewählt, von der 0,01 cm^ sub- 
kutan ein Meerschweinchen von 200 — 300 g tötete. Bei Kaninchen 
tritt nach intravenöser Injektion der Tod auch bei 1000 let. Doe. erst 

Oppenheimer, Toxine und Antitoxine. 15 



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— 214 — 

nach einer Stunde ein, für sie ist subkutan 0,1 — 0,2 Nonnalgift die 
tödliche Dosis. Aehnliche Mengen p. K. töten auch Aflfen, Hunde, Igel, 
Mäuse, Hühner, Tauben, Schafe und Rinder. Für ein Jungrind war 
40 cm^ Normalgift die Dos. let, bei Schafen ca 2 cm^ Frösche sind 
refraktär, bewahren aber das Gift in ihrem Körper auf 

Das Gift passiert sehr schwer Thonfilter, besonders Pukall, und 
dialysiert kaum. Gegen Einfrieren und Auftauen ist es beständig, Licht 
schädigt wenig, wohl aber Erwärmen schon auf 30°; dagegen lässt es 
sich in der Kälte im Vacuum eintrocknen. 50° in 1 Stunde zerstört es 
fast völlig, so dass nur bei großen Dosen (7 — 10 cm^ bei Meerschwein- 
chen) noch Schwellungen auftreten. Auch bei luftdichtem Aufbewahren 
wird es schnell geschwächt, noch schneller an der Luft. 

Permanganat zerstört bei 1,5 ^/oo, Phenol bei Ißij auch Formaldehyd 
(l%o)} sowie Aussalzen mit Ammonsulfat und Fällen mit Alkohol und 
Aether schädigen erheblich. Chloroform ist völlig indifferent. 

Das Rauschbrandgift zeigt sich als echtes Toxin auch dadurch, 
dass man ein Antitoxin erzeugen kann. Bei Meerschweinchen gelingt 
es nicht, da sie überempfindlich werden, leicht aber bei Kaninchen 
und Rindern. Namentlich letztere sind sehr leicht zu immunisieren 
und ergeben hochwertige Sera (bis 400 fach), während selbst hoch- 
immune Kaninchen nur schwach antitoxinhaltige Sera ergeben. Die 
Beziehungen zwischen Toxin und Antitoxin zeigen ganz analoge Zahlen- 
erscheinungen wie z. B. beim Diphtherietoxin (ausgesprochener Wechsel 
der Größe D, Schwellungen bei Injektion von Mischungen in der DifiFe- 
rentialzone u. s. w.), die also auf Toxone deuten. Dagegen scheint 
Toxoi'dbildung nicht einzutreten, da mit der Abnahme der Giftigkeit 
auch das Bindungsvermögen parallel abnimmt. Die Bindung scheint 
femer eine sehr langsame zu sein. 

Das Antitoxin scheint sehr beständig zu sein (Aufbewahrung durch 
2 Jahre); es ist nicht dialyeierbar, lässt sich zur Trockne bringen und 
verträgt 60—65° eine Stunde lang. 

Bei Meerschweinchen sind übemeutralisierte Toxin- Antitoxingemische 
häufig noch giftig, andere Tiere lassen sich damit immunisieren, so dass 
auch hier Gleichgewichtszustände um den neutralen Punkt herum zu 
existieren scheinen, die näherer Untersuchung bedtlrfen. 



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Alphabetisches Litteraturverzeichnis 

zugleich Namenregister. 

Die knrsiy gesetzten Zahlen bedeuten die Seitenzahlen. Die mit * bezeichneten 
Citate habe ich nicht im Original eingesehen. 



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Sachregister. 



Aalblut^ft 207 
Abrin 17ö 
Antiricin 175 
AntiBoblangentoxin 198 
AntiBtapbylotoxin 125 
Antitoxin 4 
Antitoxine 26 
Antitoxineinheiten 31 
Arachnolysin 204 

BakterienproteYne 58 
Bindung, spezifische 28 
Botnlismnstoxin 112 

Choleragift 127 
Choleralysin 125 
Coligift 137 
Colilysin 121 

Diphtherieantitoxin 81 
Diphtherietoxin 62 

Endokomplemente 195 
Endotoxine 5. 55 
Epeira 203 

FiBchgifte 206 

Gebnrtsparalyse 112 
Gesetz der Maltipla 30 
Giftspectra 41 
Gleichgewichte 49 
Globuline 90 
GU)notoxin 141 

Hämagglutinine d. Bakt. 

125 
Hämolyse (Messung) 45 
Hämorrhagin d. Schlangen 

187 
Haptine 21 



I haptophore Gruppe 27 
I Hogcholera 160 

I Ichtbyotoxin 207 

Immunität, antitoxische 16 
' Inkubationszeit 3. 21 
I Inkubationszeit (Tetanus) 

! 99 

Jequirity 175 

Krötengift 202 
Krotin 179 

Lathrodectes 203 

Lecithide d. Schlangen- 
gifte 1% 

Leukocidin 125 

Leukocidin d. Schlangen- 
gifte 197 

MaUeYn 153 
Maßeinheiten 32 
Milzbrandgift 154 

Nährböden 6 

Nährböden f Diphtherie 64 
Neurotoxin d. Schlangen 
187 

Oedem, malignes 160 

Pestgift 138 
Phrynolysin 202 
Pneumotoxin 139 
ProtoxoMe 36 
Pyocyaneuslysin 120 
I^ocyaneustoxin 114 

Rauschbrand 160. 213 
Receptor 16 
Ricin 161 



Robin 181 
Ruhrgift 138 

Salamandergift 203 
Schlangengifte 181 
Schlangenhämolysin 193 
Schweineseuche 161 
Seitenkettentheorie 4 
Skorpionengift 205 
Spezifizität 4 
Spinnengift 203 
Staphylotoxin 121 
Streptolysin 125 
Streptotoxin 143 
SyntoxoYde 36 

Tetanolysin 117 

Tetanusantitoxin 110 

Tetanustoxin 92 

Toxalbumine 11 

Toxin 3 

Toxine, Allgemeinwir- 
kung 22 

Toxine, Schicksal im Or- 
ganismus 14 

Toxine , Zerstörung d. 
äußere Einflüsse 12 

ToxoTfde 24. 35 

Toxone 24. 36 

toxophore Gruppe 27 

Trachinusgift 206 

Tuberkelnfte 145 

Tuberkulin 147 

Tuberkulinsäure 150 

Tuberkulosamin 150 

Thymusbouillon 68 

Typhusgift 135 

Typhuslysin 125 

Vibrio Metschnikofif 161 
Wärmetönnng 55 




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