Full text of "Zeitschrift fr wissenschaftliche Mikroskopie und fr mikroskopische Technik"

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ZEITSCHRIFT 

FÜR 

WISSENSCHAFTLICHE 



MIKROSKOPIE 

UND FÜR 

MIKROSKOPISCHE TECHNIK 

BEGRÜNDET VON W. J. BEHRENS 



Unter besonderer Mitwirkung 

von 

Prof. Dr. Paul Schieflferdecker und Prof. Dr. E. Sommerfeltlt 

in Bonn in Tübingen 



herausgegeben 



von 



Dr. ernst KÜSTER 

in Halle a. S. 



Band XXIV librar\ 

NEW YORK 

liOTANlCAL 

QARDEN. 



(Jahrgavg 1907) 



Mit 88 Textabbildungen 



LEIPZIG 



Verlag von S. Hirzel 



1907 



6d. . 'i.^ 



Alle Rechte vorbehalten. 



InhaltsYerzeichnis. 



I. Abhandlungen. 



Seite 

Ambronn , H. , Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie und 

deren Aufgaben 1 

Andre, E., Sur la fixation et la preparation des Nemathelminthes . 278 
Broek, A. J. P. v. d., Ein einfaches Mikrotom für Serienschnitte . 268 
Edinger, L., Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren . . 26 
Gebhardt, W., Über neue leicht sichtbare Mikrometerteilungen . . 366 

— , — . Aus optischen und mechanischen Werkstätten I 396 

Gudernatsch, J. F., Zur Technik der Wasserauf klebung von Paraftin- 

schnitten 357 

Harvey, H. W., A Dust-excluding Histological Reagent Bottle . . 280 

Heimstädt, O., Neuerungen an Spiegelkondensoren 233 

— , — , Neuer großer Projektionsapparat der Firma C. Reichert in 

Wien 370 

Henneberg, Hilfsapparate zum Mikrotom 274 

Hinterberger, A., Wie kann man absolut reine oder auch beschickte 

Deckgläser transportieren? 145 

Kappers, Ariens C. ü. , Auf welchem Grund beruht es, daß die 
schnelle Abkühlung des Paraffins für histologische Einbet- 
tungen günstig ist? 254 

Köhler, A., Swingles Einstellverfahren für die Mikrophotographie 

mit ultraviolettem Licht 360 

Mayer, F., Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden . . 128 

— , — , Zur Bleichtechnik 353 

Molisch, H. , Über die Brownsche Molekularbewegung in Gasen, 

sichtbar gemacht durch ein gewöhnliches Mikroskop .... 97 
Neumayer, L., Ein Beitrag zur Technik der Plattenmodelliermethode 140 
Röthig, P., Wechselbeziehung zwischen metachromatischer Kern- und 
Protoplasmafärbung der Ganglienzelle und dem Wassergehalt 

alkoholischer Hämatoxylinlösungen 109 

Rubenthaler , G. , Methode generale de fixation ayant pour but de 

restreindre les artefacts 133 



ly Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Rudnew, WL, Über gleichzeitiges Fixieren, Entwässern und nach- 
folgendes Einbetten histologischer Objekte in einer cäther- 
alkoholischen Celloidinlösung und über die Anwendung dieser 
Methode für das Studium des Nervensystems 243 

Schouten, S. L., Methode zur Anfertigung der gläsernen Isolier- 
nadeln, gehörend zu dem Isolierapparat für Mikroorganismen 258 

Siedentopf, H., Dunkelfeldbeleuchtung und Ultramikroskopie ... 13 

— , — , Paraboloid- Kondensor, eine neue Methode für Dunkelfeld- 
beleuchtung zur Sichtbarmachung und zur Moment -Mikro- 
photographie lebender Bakterien etc. (insbesondere auch für 
Spirochaete pallida) 104 

— , — , Die Vorgeschichte der Spiegelkondensoren 382 

Sommerfeldt , E., Eine einfache Methode zur Justierung der Nikols 

am mineralogischen Mikroskop 24 

Sonntag , P. , Der Orlean , ein neues Mittel zur Färbung der ver- 
korkten und cuticularisierten Membran 21 

Studnicka, F. K., Wie kann man im Sehfelde des Mikroskopes zwei 
verschiedene Präparate gleichzeitig zu sehen bekommen und 
gleichzeitig projizieren? 34 

Thoma, R., Pikrinsäurekarmin 139 



II. Referate. 

Achard, Ch., et Aynaud, M., Sur l'impregnation histologique par les 

precipites colores 156 

Allen, B. M., The origin of the sex-cells of Chrysemys 448 

Arbeit, E., Die neuen Leitz sehen Mikrosummare ....... 41 

Arnold, J. , Zur Morphologie und Biologie der Mastzellen, Leuko- 

cyten und Lymphocyten 176 

Aßmann, G., Über eine neue Methode der Blut- und Gewebsfärbung 

mit dem eosinsauren Methylenblau 174 

Auche, A. , et Tribondeau, L. , Application d'un nouveau flacon 

compte-gouttes ä la technique histologique 430 

Auerbach, L. , Über den Einfluß physikalischer Faktoren auf die 

primäre Färbbarkeit des Nervengewebes 290 

Auerbach, F., Das ZEiss-Werk und die Carl ZEiss-Stiftung in Jena, 
ihre wissenschaftliche, technische und soziale Entwicklung 
und Bedeutung 423 

Bachmanow, A. W., Zur Frage über die Färbung der Neurofibrillen 316 

Bang, O., Einige vergleichende Untersuchungen über die Einwirkung 
der Säugetier- und der Geflügeltuberkelbazillen auf die Reak- 
tion des Substrates in Bouillonkulturen 199 

Barrat, J. O. W., The staining act; an investigation into the nature 

of methylenblue-eosin staining 433 



Inhaltsverzeichnis. V 

Seite 

Bartels, B. , Über die Lymphgefäße des Pankreas. IL Das feinere 
Verhalten der lympliatischen Verbindungen zwischen Pankreas 

und Duodenum 309 

Basse, A., Beiträge zur Kenntnis des Baues der Tardigraden . . . .5.") 
Beitzke, H. , Taschenbuch der pathologisch -histologischen Unter- 
suchungsmethoden 425 

Bellieni, Methode pratique et simplitiee de microphotographie ... 40 
Bergsten, C, Wie beschafft man sich leicht zwei der interessantesten 

Gärungserreger, öchizosaccharomyces Pombe und octosporus ? 338 
Berner, O., Histologische Untersuchungen der Organe bei Fett- 

gewebsnekrose 439 

Bernthsen, A., Über die chemische Natur des Methylenazurs . . . 433 
Bertkau, F., Ein Beitrag zur Anatomie und Physiologie der Milch- 
drüse 314 

Besta, C. , Sulla struttura della guaina mielinica delle fibre nervosa 

periferiche 185 

Bidder, A., Osteobiologie 64 

Billet, A., Modification ä la methode de coloration de Romanowsky- 

GiEMSA 432 

Bisserie , Procede simple et rapide de preparation des milieux 

geloses et gelatines 203 

Bonney, V., Eine neue und leicht auszuführende dreifache Färbung 
für Zellen und Gewebsschnitte nach Flemmings Dreifach- 
behandlung 155 

Bormans, A., II carciofo in batteriologia 197 

Botezat, E., Die fibrilläre Struktur von Nervenendapparaten in Haut- 
gebilden 319 

Brand, F., Über charakteristische Algentinktionen, sowie über eine 

Gongrosira und eine Coleochaete aus dem Würmsee .... 459 
Braus, H., Ist die Bildung des Skelettes von den Muskelanlagen ab- 
hängig? Eine experimentelle Untersuchung an der Brustflosse 

von Haiembryonen 307 

Brissaud et Bauer, Recherches sur les voies de la circulation 
veineuse intra-hepatique ä l'aide des injections de masses 

gelatineuses colorees 303 

Brissy, G., La congelation des pieces en histologie par l'air liquide 427 
Bürger, O., Die Brutpflege von Rhinoderma Darwinii D. B. . . . 72 
Burri , R. , Eine einfache Methode zur Reinzüchtung von Bakterien 
unter mikroskopischer Kontrolle des Ausgangs von der ein- 
zelnen Zelle 454 

Cajal, S. R. , Über die Polychromie mikroskopischer Metallkörnchen 215 

— , — , Las celulas del gran simpatico del hombre adulto 184 

— , — , Las celulas estrelladas de la capa molecular del cerebelo y 
algunos hechos contrarios ä la funciön exclusivamente con- 

ductriz de las neurofibrillas . 183 

Camaniti, R. , Untersuchungen über die Lymphgefäße der mensch- 
lichen Prostata 17G 



VI Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Cesäro, G., Contribution ä l'etude optique des cristaux en lumiere 

convergente 217 

— , — , Sur les lignes incolores que presentent les lames cristallines 

en lumiere convergente 216, 218 

— , — , Etüde de la rotation iiuprimee au plan de Polarisation du 
faisceau lumineux venant du polarisateur, par les lentilles du 
microscope ä lumiere convergente 216 

Chamberlain , Ch, J. , The ovule and female gametophyte of Dioon 80 

Cholodkovsky, N., Über den Bau des Dipterenhodens 55 

Chubb, G. C, The Growth of the Oocyte in Antedon: a morpholo- 

gical Study in the Cell-MetaboHsm 167 

Ciaccio, C, Rapporti istogenetici fra il simpatico e le cellule cromaf- 

fini. Ricerche istologiche 190 

Coca, A. F., Die Bedeutung der „Fibroglia"-iMbrillen. Eine embryo- 
logische Studie 317 

Cohoe, B. A. , The finer structure of the glandula submaxillaris of 

the rabbit 310 

Collin, R. , Recherches cytologiques sur le developpement de la 

cellule nerveuse 320 

— , — , Coloration de la substance chromatique de la cellule nerveuse 
dans des pieces prealablement traitees par la methode de 
S. R. Cajal 181 

Combes , R. , Sur un nouveau groupe de reactions de la lignine et 

des membranes lignifiees 339, 461 

Cornu , F. , Über Pleochroismus , erzeugt durch orientierten Druck 

am blauen Steinsalz und Sylvin 212 

Coupin, H., Nouveau dispositif pour la coloration des coupes . . . 209 

Coyne et Cavalie , Sur la structure de la pulpe dentaire. Presence 
d'un muscle lisse dans la pulpe des premieres et deuxiemes 
grosses molaires 179 

Curtis, F., Un nouveau colorant nucleaire : La safranine base . . . 294 

Dechant, E. , Beitrag zur Kenntnis des peripheren Nervensystems 

des Regenwurms 52 

Deetjen, H., Teilung der Leukocyten des Menschen außerhalb des 

Körpers. Bewegungen der Lymphocyten 299 

Delamare, G., Melange tetrachrome (coloration elective et simultanee 
des noyaux cellulaires, des fibres conjonctives, elastiques et 
musculaires) 44 

DöUken, Beiträge zur Entwicklung des Säugergehirns. Lage und 

Ausdehnung des Bewegungszentrums der Maus 321 

Dogiel, A. S., Die Endigungen der sensiblen Nerven in den Augen- 
muskeln und deren Sehnen beim Menschen und den Säuge- 
tieren ß8 

Dohi, Sh., Über das Vorkommen der Spirochaete pallida im Gewebe, 
nebst einigen Bemerkungen über Spirochätenfärbung und die 
Kernfärbung mit Silber imprägnierter Präparate 455 



Inhaltsverzeichnig. VII 

Seite 

Dreyling, L., Die wachsbereitenden Organe bei den gesellig leben- 
den Bienen 54 

Dunbar, Zur Frage der Stellung der Bakterien, Hefen und Schimmel- 
pilze im System. Die Entstehung von Bakterien, Hefen und 
Schimmelpilzen aus Algenzellen 336 

Edinger, L., Ein Hirnmakrotom 322 

Einstein, A., Zur Theorie der Brown sehen Bewegung 456 

Enderlein, G., Monographie der Coniopterygiden 56 

Esser, Blut- und Knochenmark nach Ausfall der Schilddrüsenfunk- 
tion 441 

Evans, B. P., The cereal rusts. I. The development of their Uredo 

mycelia 461 

Ewing, J. A., The molecular structure of metals 215 

Fahr, Über die muskuläre Verbindung zwischen Vorhof und Ventrikel 
(das Hissche Bündel) im normalen Herzen und beim Adams- 
Stokes sehen Symptomkomplex 446 

Faure-Fremiet, E., Sur une secretion interne chez le Cochliopodium 

pellucidum 161 

Pederici, F., Un nuovo metodo per la colorazione specifica delle 

Mastzellen 177 

Ferrata, A., Über die plasmosomischen Körper und über eine meta- 
chromatische Färbung des Protoplasmas der uninukleären 
Leukocyten im Blut und in den blutbildenden Organen . . 445 

Fischer, A., Über Plasmoptyse der Bakterien 330 

Foix et MaHein, Procede d'acceleration des colorations lentes par 
le courant electrique. Application au spirochete avec colora- 
tion en cinq ä dix minutes par le Giemsa sur frottis . . . 456 

Forest, M., Beitrag zur Morphologie der Spirochaete pallida [Trepo- 
nema pallidum Schaudinn] 76 

Fran^ois-Franck, Ch. A., Microphotographie en couleur des pieces 

histologiques avec les plaques autochromes de A. L. LuMifeRE 426 

Friedberger, E., u. Doepner, H., Über den Einfluß von Schimmel- 
pilzen auf die Lichtintensität in Leuchtbakterienkulturen, 
nebst Mitteilung einer Methode zur vergleichenden photo- 
metrischen Messung der Lichtintensität der Leuchtbakterien- 
kulturen 196 

Fuchs, H., Bemerkungen über den Bau der Markscheide am Wirbel- 
tiernerven 451 

Fuß, S., Die Bildung der elastischen Faser 304 

Gaidukov, N., Über die ultramikroskopische Untersuchung der Bak- 
terien und über die Ultramikroorganismen 334 

GamborofF, G., Untersuchungen über hämatogene Siderosis der Leber, 

ein Beitrag zur Arnold sehen Granulalehre 447 

Gemelli, A. , Sopra le neurofibrille delle cellule nervöse dei vermi 

secondo un nuovo metodo di dimostrazione 168 

Georgevitch , P. M. , Cytologische Studien an den geotropisch ge- 
reizten Wurzeln von Lupinus albus 209 



VIII Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Gerould, J. H., The Development of Phascolosoma. Studies on the 

Embryology of the Sipunculidae II 29G 

Gieson, J. V., Eine sichere und einfache Methode für Nervensystem- 
studien, hauptsächlich ihre Anwendung in der Diagnose und 
Untersuchung der NEGRischen Körperchen 182 

Giolitti, F., SuU'impiego di depositi metallici nell'analisi micrografica 

delle leghe 214 

Glasenapp, M., Über Änderungen des Kleingefüges der Tone durch 

Einwirkung hoher Hitzegrade 463 

Goppelsroeder, Fr., Anregung zum Studium der auf Kapillaritäts- 
und Adsorptionserscheinungen beruhenden Kapillaranalyse . 39 

Grüß, J., Abhandlungen über Enzymwirkungen 205 

Gueguen, F., Preparation instantanee de Solutions colorantes lim- 

pides 430 

Guieysse, A., Coloration elective des plateaux en brosse par le vert 

lumiere dans la triple coloration de Prenant 433 

Guignard, A., Beitrag zum mikroskopischen Nachweis der Tuberkel- 
bazillen im Sputum und Urin 197 

Guilliermond, A., Sur les graines d'aleurone des Graminees . . . 460 

— , — , Nouvelles recherches sur la Cytologie des graines de Gra- 
minees 460 

— , — , Remarques sur la structure de la graine d'aleurone des Gra- 
minees 460 

Gutherz, S., Zur Kenntnis der Heterochromosomen 169 

Hamm, A., Beobachtungen über Bakterienkapseln auf Grund der 

Weldenreich sehen Fixationsmethode 73 

Harvey, B. C. H. , A study of the structure of the gastric glands 
of the dog and of the changes which they undergo after 
gastroenterostomy and occlusion of the pylorus 311 

Havet, J., L'origine des nucleoles vrais ou plasmosomes des cellules 

nerveuses 323 

Heidenhain, M., Plasma und Zelle 422 

Herxheimer, G., Über Pankreascirrhose (bei Diabetes) 448 

Heyn, E. , Über Nutzanwendung der Metallographie in der Eisen- 
industrie 215 

Höber, R., Physikalische Chemie der Zelle und der Gewebe ... 39 

Hölling, A., Spirillum giganteum und Spirochaeta Balbianii .... 331 

Hoppe, F., Zur Technik der Weigert sehen Gliafärbung 323 

Huß, H., Eine Abänderung des Mayer sehen Chlorentwicklungsappa- 
rates zum Aufhellen von Pflanz en?toflfen für die mikrosko- 
pische Untersuchung 82 

Jolly, M. , Recherches sur la formation des globules rouges des 

mammiferes 42 

Jores, L., Über die feineren Vorgänge bei der Bildung und Wieder- 
bildung des elastischen Bindegewebes 439 

Jost, L., Über die Selbststerilität einiger Blüten ........ 207 



Inlialtsverzeiclmis. IX 

Seite 
Jiiel, H. O., Studien über die Entwicklungsgesciiichte von Saxifraga 

^^ranulata 339 

Karpow, W., Isssledowanija o prjamom dclenii kletok [Untersuchungen 

über die direkte Zellteilung] 297 

Kayser, H. , Eine Fixierungsmethode für die Darstellung von Bak- 
terienkapseln 72 

Kjer-Petersen, Ein „Objektträgerkorb" zum Färben von zwölf Objekt- 
trägern auf einmal 335 

Klemm, G., Über ein Vorkommen dünner, zur Justierung der Nicol- 
schen Prismen der Polarisationsmikroskope geeigneter Quarz- 

nädelclien 464 

Knauthe, K. , Das Süßwasser. Chemische, biologische und bakterio- 
logische Untersuchungsmethoden unter besonderer Berück- 
sichtigung der Biologie und der fischereiwirtschaftlichen Praxis 425 
Koch, A., Jahresbericht über die Fortschritte in der Lehre von den 

Gärungsorganismen 193 

Kohl , F. G. , Über das Glykogen und einige Erscheinungen bei der 

Sporulation der Hefe 79 

Kopsch, F., Kleinere Mitteilungen zur mikroskopischen Technik . . 71 
Korff, K. V., Die Analogie in der Entwicklung der Knochen- und 
Zahnbeingrundsubstanz der Säugetiere nebst kritischen Be- 
merkungen über die Osteoblasten- und Odontoblastentheorie 180 

Kose, W., Die Paraganglien bei den Vögeln 70 

Krassin , P, , Zur Frage der Regeneration der peripheren Nerven . 189 
Kühl, H., Über die Empfindlichkeit einiger in der Bakteriologie ver- 
wendeter Reagentien 332 

Küster, E., Anleitung zur Kultur der Mikroorganismen 281 

Kupelwieser, H,, Untersuchungen über den feineren Bau und die 

Metamorphose des Cyphonautes 54 

Laignel - Lavastine , Application de l'impregnation argentique de 

Cajal ä l'etude histo-chimique de la cellule medullo-surrenale 186 

Landau, E., Versuche über Hitzefixation 292 

Landsteiner, K., u. Mucha, V,, Zur Technik der Spirochätenunter- 
suchung 76 

Langeron, Note sur l'emploi du lactophenol de Amann pour le 

montage des Nematodes 53 

Lee, A. B., u. Mayer, P., Grundzüge der mikroskopischen Technik 

für Zoologen und Anatomen 148 

Lehmann, O., Die scheinbar lebenden Kristalle 211 

Lenhossek, M. v., Zur Kenntnis der Spinalganglienzellen .... 187 
Lentz, O., Ein Beitrag zur Färbung der Negri sehen Körperchen . 435 
Liesegang, R. E., Über die Schichtungen bei Diffusionen .... 426 
Lobenhoffer, W., Über die Ergebnisse der Altmanx-Schridde sehen 

Färbemethode beim Zentralnervensystem 44 

Loeb , L. , Über den Einfluß des Lichtes auf die Färbung und die 
Entwicklung von Eiern von Asterias in Lösungen verschie- 
dener Farbstoffe 431 



X Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Loeff 1er, F., Neue Verfahren zur Schnellfärbung von Mikroorganismen, 
insbesondere der Blutparasiten, Spirochäten, Gonokokken und 

Diphtheriebazillen 201 

— , — , Zur Gram sehen Färbungsmethode 157 

Löwe, F., Ein Meßmikroskop für Negative 43 

Loewenthal, N., Zur Kenntnis der Knorpelzellen 307 

Lugaro, E., Sur la technique de la methode de Nissl 183 

Lunghetti, B., Konformation, Struktur und Entwicklung der Bürzel- 
drüse bei verschiedenen Vogelarten 314 

Manouelian, De l'emploi de l'acide picrique comme diflerenciateur 

dans les colorations ä l'hematoxyline 42 

Marcus, H., Ei und Samenreife bei Ascaris canis (Werner) [Asc.mystax] 51 

Marpmann, Praktische Notizen 200 

Marrassini, A. , Sopra la minuta struttura dei vari elementi delle 

capsule soprarenali e sul loro probabile valore funzionale . . 313 
Maximow, A., Experimentelle Untersuchungen zur postfötalen Histo- 

genese des myeloiden Gewebes 437 

May, R., Eine neue Methode der RoMANOWSKY-Färbung 158 

McGill, G. , The structure of smooth muscle of the intestine in the 

contracted condition 445 

Meek, W. J., A study of the choroid Plexus 447 

Menneking, F., Über die Anordnung der Schuppen und das Kanal- 
system bei Stachyodes ambigua [Stud.] , Caligorgia flabellum 
[Ehrbg.], CalyptrophoraAgassizii [Stud.], Amphilaphis abietina 

[Stud.] und Thonarella variabilis [Stud.] 50 

Merton , H. , Über ein intrazelluläres Netzwerk der Ganglienzellen 

von Tethys leporina 449 

Meves, F., Zur Kenntnis der Thrombocyten des Salamanderblutes 

und ihres Verhaltens bei der Gerinnung 62 

— , — , Eine weitere Methode zur Darstellung der Quermembranen 

des Randreifens in den Erythrocyten des Salamanders . . . 175 
Meyer, A., Erstes mikroskopisches Praktikum. Eine Einführung in 
den Gebrauch des Mikroskops und in die Anatomie der höheren 

Pflanzen 79 

Michaelis, L. , Über das ültramikroskop und seine Anwendung in 

der Chemie 42 

Miehe, H., Die Bakterien und ihre Bedeutung im praktischen Leben 336 
Molisch, H., Über die Sichtbarmachung der Bewegung mikroskopisch 

kleinster Teilchen für das freie Auge 287 

— , — , Die Purpurbakterien nach neuen Untersuchungen 194 

Morax, V., Manifestations oculaires au cours des Trypanosomiases . 49 
Moreno, M., Las terminaciones nerviosas en las ventosas de algunos 

cefalopodos 164 

Mühlens, P. , Untersuchungen über Spirochaete pallida und einige 

andere Spirochätenarten, insbesondere in Schnitten .... 200 
Müller, 0., Mikroskopisches und physiologisches Praktikum der Bo- 
tanik für Lehrer 208 



Inlialtaverzeichnis. XI 

Seite 
3Iusgrave, W. E., a. Clegg, M. T., The cultivation and pathogenesis 

of Amoebae 49 

Xeuer luikrophotographisclier Universalapparat von E. Leitz ... 40 

Neuhauß, R., Ijchrbuch der Mikrophotographie 284 

Neumann, A. , Zum Wesen der Rojianowsky-Nocht sehen Färbung 

[rehitive Metachromasie] 160 

Noack, Über die Entwicklung des Mittelohres von Emys europaea 

nebst Bemerkungen zur Neurologie dieser Schildkröte . . . 327 
Novy, Fr. G., a. McNeal, W. J., On the trypanosomes of birds . . 48 
Oeder, R., Die Entstehung der Munddrüsen und der Zahnleiste der 

Anuren 68 

Olive, E. W. , Cytological studies on the Entomophthoreae. I. The 

morphology and development of Empusa 81 

Orsös, F., Über das elastische Gerüst der normalen und der emphyse- 

matösen Lunge 440 

Papin , L, , Sur le reveteraent corne de l'epithelium pharyngo-oeso- 

phagien chez le cobaj^e 179 

Pellegrini, E., Contributo allo studio della morfologia dell'organo 

parasimpatico dello Zuckerkandl 188 

Perusini, G., Über die Veränderungen des Achsenzylinders und der 

Markscheide im Rückenmark bei der Formolfixierung . . . 190 
Pfuhl, E., Die Züchtung anaerober Bakterien in Leberbouillon, sowie 

in Zuckerbouillon und in gewöhnlicher Bouillon mit einem Zu- 
satz von Platinschwamm oder Hepin unter Luftzutritt . . . 333 
Pinoy, E., Nouvel appareil de microphotographie: possibilite d'obtenir 

meme ä de forts grossissements, une Image donnant l'idee de 

la structure d'objet presentant une certaine epaisseur . . . 287 
— , — , Sur la coh)ration des Oospores pathogenes dans les coupes 

de tissus d'organes 339 

— , — , Role des bacteries dans le developpement de certains myxo- 

mycetes 337 

Plaut, H. C, Über die Geißeln bei fusiformen Bazillen 334 

Polara, G. , Sulla secrezione interna delle cellule peritoneali della 

gonade del Phyllophorus urna [Grube] 437 

Poscharissky , J. , Über die histologischen Vorgänge an den peri- 
pherischen Nerven nach Kontinuitätstrennung 449 

Prowazek, S. v. , Taschenbuch der mikroskopischen Technik der 

Protistenuntersuchung 149 

Quidor, A., et Nachet, A., Sur un nouveau microscope et ses appli- 

cations ä la microphotographie stereoscopique 425 

Ramsch, A., Die weiblichen Geschlechtsorgane von Cypridina medi- 

terranea Costa 325 

Rautlier, M., Beiträge zur Kenntnis von Mermis albicans v. Sieb., mit 

besonderer Berücksichtigung des Haut-Nerven-Muskelsystems 52 

Rawitz, B., Lehrbuch der mikroskopischen Technik 424 

Recueil de l'Institut botanique [Universite de Bruxelles] public par 

L. Errera 204 



XII Inhaltsverzeichnis, 

Seite 

Reichensp erger, A., Zur Anatomie von Pentacrinus decorus Wy. Th. 296 
Reichert, C. , Über einen neuen Spiegelliondensor zur Sichtbar- 
machung ultramikroskopischer Teilchen 289 

Retterer, Ed., Technique pour l'etude du tissu osseux rougi par 

l'alimentation garancee 65 

— , — , Des colorations intra-vitales et post-vitales du tissu osseux . 65 

Richter, O., Die Bedeutung der Reinkultur 282 

Rieder, R., Carl Weigert und seine Bedeutung für die medizinische 

Wissenschaft unserer Zeit 424 

Rimaun, E., Über kalzitführenden Granit im Riesengebirge .... 212 
Ritchic, The wax of tubercle bacilli in relation to their acid resistance 77 
Rochon - Duvigneau , Recherches sur la fovea de la retine humaine 

et particulierement sur le bouquet des cönes centraux . . . 452 
Röhler, E., Beiträge zur Kenntnis der Sinnesorgane der Insekten . 169 
Rößler, O., Ein einfaches Verfahren, Deckgläschen zu reinigen . . 152 
Romanow , A. W. , Ob okontschanii nerwow w parietalnoi i wis- 
szeralnoi plewre u nekotorych mlekopitajuschtschich [Über 
die Endigung der Nerven in der parietalen und visceralen 

Pleura bei einigen Säugetieren] 323 

Roosen - Runge , Über die Verwendung des Natrium glykocholicum 

für Blutuntersuchungen bei Tj^phuskranken 200 

Rosam, A., Poröse Kulturkammern 455 

Rossi, E., La structure intime des cellules nerveuses humaines . . 183 
Rubaschkin, W., Eine neue Methode zur Herstellung von Celloidin- 

serien 428 

Ruhland, W. , Eine cytologische Methode zur Erkennung von Haus- 

schwamm-Mycelien 461 

Sachs - Müke, Ein einfacher Apparat zur Wiederauffindung bestimmter 

Stellen in mikroskopischen Präparaten 160 

Schaaf, H., Zur Kenntnis der Kopfanlage der Cysticerken, insbesondere 

des Cysticercus Taeniae solii 50 

Schaffner, J. H. , Chromosome reduction in the microsporocytes of 

Lilium tigrinum 81 

Schmidt, H. , Über die Entwicklung der Blüten und Blütenstände 

von Euphorbia L. und Diplocyathium n. g 210 

Schmorl, G., Die pathologisch-histologischen Untersuchungsmethoden 424 
Schridde, H., Die Knochenmarks-Riesenzellen des Menschen . . . 440 
Schridde, H., u. Fricke, A., Über gleichzeitige Fixierung und Durch- 
färbung von Gewebsstücken 294 

Schrötter, H. v, , Beitrag zur Mikrophotographie mit ultraviolettem 

Lichte nach Kühler 150 

Schürhof, Pipettenglas für mikroskopische Technik 41 

Schultze, O., Über den frühesten Nachweis der Markscheidenbildung 

im Nervensystem 324 

Schuster, A., Einführung in die theoretische Optik 282 

Schwabe, J. , Beiträge zur Morphologie und Histologie der tympa- 

nalen Sinnesapparate der Orthopteren 58 



Inhaltsverzeichnis. XIII 

Seite 

Scliwarzmann, M., Sammlungsraikroskope und Mineraliensammlungen 462 
Seligmunn, Die Vorbereitung des Gehörorgans für die mikrosltopisch- 

patliologische Untersuchung 325 

Siedentopf, H., Mikroskopokular mit Quarzkeil-Kompensator ... 85 
Siedentopf, H., u. Sommerfeldt , E. , Über die Anfertigung kine- 
matographischer Mikrophotographien der Kristallisationserschei- 
nungen 213 

Simons, E. B., A morpholugical study of Sargassum filipendula . . 81 
Sjövall , E. , Über Spinalganglienzellen und Markscheiden. Zugleich 
ein Versuch,, die Wirkungsweise der Osmiumsäure zu analy- 
sieren 152 

Smirnow, A. E. v.. Die prolongierte Osmiummethode nach Fr. Kopsch 
als ein Mittel zur Darstellung einiger Strukturen in den Ery- 

throcyten des Siredon pisciformis 303 

— , — , Über die Mitochondrien und den Golgi sehen Bildungen 
analoge Strukturen in einigen Zellen von Hyacinthus orien- 

talis 338 

Smith, C. F. H., Eine verbesserte Form des Refraktometers ... 84 
Smoluchowsky, M., Zur kinetischen Theorie der Brown sehen Mole- 
kularbewegung 465 

Solla, R. , Über den mikrochemischen Nachweis des Phosphors in 

den Geweben 294 

Sommerfeldt, E. , Physikalische Kristallographie vom Standpunkt 

der Strukturtheorie 82 

Sorgo, Über die Verwendbarkeit des Formaldehyds zur Anreicherung 

der Tuberkelbazillen im Sputum 75 

Spengler, C, Zur Formaldehyd-Abtötung und -Züchtung der Tuberkel- 

und anderer säurefester Bazillen 74 

— , — , Die Sprengzüchtung der Tuberkelbazillen aus Sputum ... 74 
Stauffacher, H., Zur Kenntnis des statischen Organs bei Phylloxera 

vastatrix Pl 55 

Stenta, M., Über ein drüsiges Organ der Pinna 53 

Sticker, G., Organabdrücke. Ein Ersatz für Organschnitte .... 78 

Stopi)el, R., Eremascus fertilis nov. spec 210 

Strasbiirger, E., Apogamie bei Marsilia 209 

Strong, O. S., The mode of connection of the meduUated nerve fibre 

with its cell body 451 

Struckmann, Ch., Eibildung, Samenbildung und Befruchtung von 

Strongylus filario 51 

Stschastnyi, S. M. , Über die Histogenese der eosinophilen Granula- 
tion im Zusammenhang mit der Hämolyse 45 

Swellengrebel, N. H. , Zur Kenntnis der Cytologie von Bacillus 

maximus buccalis [Miller] 327 

— , — , Sur la Cytologie comparee des Spirochetes et des Spirilles . 330 

— , — , Zur Kenntnis der Cytologie der Bakterien 330 

Szaboky, J. v. , Ein Beitrag zur Kenntnis der kulturellen Eigen- 
schaften der Tuberkelbazillen 198 



XIV Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Tappeiner, H. v., u. Jodlbauer, A., Die sensibilisierende Wirkung 

fluoreszierender Substanzen 292 

Tello, F., Terminaciönes sensitivas en los pelos y otros örganos . . 184 

— , — , Terminaciönes en los müsculos estriados 185 

Tröndle, A., Über die Kopulation und Keimung von Spirogyra . . 459 
Trojan, E., Ein Beitrag zur Morphologie des Tiefseefischgehirns . . 192 

Tschirwinsky, VV., Über Podolit, ein neues Mineral 212 

Tsujitani, Über eine Methode, die Infusorien rein zu kultivieren . . 48 

Urban, F., Kalifornische Kalkschwämme 163 

Uyeda, Ein neuer Nährboden für Bakterienkulturen 78 

Vallet, G., Note sur un procede simple de coloration des plaquettes 

du sang ou hematoblastes chez l'homme 60 

— , — , Deuxieme note sur la coloration des plaquettes du sang . . 61 

Vannod, Th., Contributions ä l'etude du gonocoque 199 

Vecchi, Bindo de, La fotossilina sciolta in alcool metilico come 

mezzo d'inclusione 151 

Vejdowsky, F., Zur Hämocöltheorie 60 

Veneziani, A. , Colorazione positiva delle fibre nervöse degenerate 

nel nervo tentacolare di Helix pomatia 166 

Vincent, M. H. , Recherches sur les microbes anaerobies des eaux. 

Contribution ä l'etude bacteriologique des eaux potables . . 77 
Vles, F., Sur la structure et les affinites de Trypanosoma Balbiani 162 
Volkmann, W. , Ein objektiver Beugungsversuch zur Abbe sehen 

Theorie des Mikroskopes 434 

Volpino, G., u. Fontana, A., Einige Voruntersuchungen über künst- 
liche Kultivierung der Spirochaete pallida [Schaud.] .... 75 
Wallart, J. , Über gleichzeitige Darstellung von Fettkörnern, eisen- 
haltigem Pigment und Zellkernen in Gefrierschnitten . . . 292 
Warfwinge , E. , Beiträge zur Kenntnis der spinalen und sympathi- 
schen Ganglienzellen des Frosches [Rana temporaria] ... 69 
Weidenreich , F. , Eine neue einfache Methode zur Darstellung von 
Bluttrockenpräparaten mit vollständiger Erhaltung der nor- 
malen Form der Blutelemente 170 

— , — , Studien über das Blut und die blutbildenden und -zer- 
störenden Organe. Weitere Mitteilungen über rote Blutkör- 
perchen 172 

• — , — , Eine neue einfache Methode zur Darstellung von Bluttrocken- 
präparaten 301 

Weißenburg, R., Über die Onocyten von Torymus nigricornis Boh. 

mit besonderer Berücksichtigung der Metamorphose .... 57 
Wiegel, H., Die Verwitterungserscheinungen des basaltischen Olivins, 
insbesondere das rote Mineral und einige Verwachsungen von 

rhombischem mit monoklinem Augit 463 

W^iemann, H. L. , The relation between the cyto-reticuium and the 

fibril bundles in the heart muscle cell of the chick .... 808 
Williams, H. AV. , u. Lowden, M. C. , Die Ätiologie und Diagnose 

der Wut 198 



Inhaltsverzeichnis. XV 

Seite 

Wimmer, A., Über Neurogliafärbung 192 

Winkelmann, A. , Zur Demonstration der Abbe sehen Theorie des 

Mikroskopes 288 

Winkler, F., Über den färberischen Nachweis des Gonokokken- 

bodens 457 

— , — , Der Nachweis von Oxydase in den Leukocyten mittels der 

Dimethyliiarapheny]endiamin-«-Naphtholreaktion 457 

— , — , Die Oxydasenreaktion im gonorrhoischen Eiter 457 

Wood, R. W., Abnormal Polarization and Colour of Light scattered 

by small absorbing Particles 213 

Worthmann , F. , Beiträge zur Kenntnis der Nervenausbreitung in 

Clitoris und Vagina 69 

Wright, J. H., Die Entstehung der Blutplättchen 300 

Wrzosek, A., Beobachtungen über die Bedingungen des Wachstums 

der obligatorischen Anaeroben in aerober Weise 196 

Yamanouchi, Sh,, The life history of Polysiphonia violacea ... 81 

Zacharias, 0., Das Süßwasser- Plankton 161 

Zelikow, J. , Quantitative Bestimmung der Bakterialmasse durch die 

kolorimetrische Methode 335 

Zirkel, F., Lava vom neuesten Ausbruch des Sawaii-Vulkans [Samoa- 

Archipel] 214 

Zsigmondy, Über amikroskopische Goldkeime 83 



Verzeichnis der Mitarbeiter 

an Band XXIY. 



Prof. H. Ambroiin in Jena. 

Dr. E. Andre in Genf. 

Dr. C. U. Ariens Kappers in Frankfurt a. M. 

Dr. E. A, Bessey in Miami (Florida). 

Dr. L. Edinger in Frankfurt a. M. 

Prof. P. Eisler in Halle a. S. 

Dr. H. Freund in Halle a. S. 

Prof. W. Gebhardt in Halle a. S. 

J. F. Gudernatsch in New York. 

W. H. Harvey in Cambridge. 

Dr. 0. Heimstädt in Wien. 

Dr. 0. Henker in Jena. 

Prof. Henneberg in Gießen. 

Dr. A. Hinterberger in Wien. 

Dr. A, Köhler in Jena. 

Dr. E. Küster in Halle a. S. 

Prof. P. Mayer in Neapel. 

Prof. H. Molisch in Prag. 

Dr. L. Neumayer in München. 

Dr. S. V. Prowazek in Hamburg. 

Dr. P. Röthig in Berlin. 

Dr. G. Rubenthaler in St. Mihiel. 

Dr. Wl. Rudnew in Moskau. 

Prof. Dr. P. Schiefferdecker in Bonn. 

Dr. E. Schoebel in Neapel. 

Dr. S. L. Schonten in Utrecht. 

Dr. H. Siedentopf in Jena. 

Prof. Dr. E. Sommerfeldt in Tübingen. 

Dr. P. Sonntag in Danzig. 

Prof. Dr. E. Tboma in Heidelberg. 

Dr. F. K. Studnicka in Brunn. 



ZEITSCHRIFT 

FÜR 

WISSENSCHAFTLICHE 

MIKROSKOPIE 

UND FÜR 

MIKROSKOPISCHE TECHNIK 

BEGRÜNDET VON W. J. BEHRENS 

Unter besonderer Mitwirkunij 

Ton 

Prof. Dr. Paul Schieflferdecker und Prof. Dr. E. Soramerfeldt 

in Bonn in Tübingen 

herausgegeben 

I 

ron 

Dr. ernst Küster 

in Halle a. d. Saale 

Batul XXIV, Heft 1 

Hefl 93 
Ausgegehen am 14. Mai 1907 



Mit 6 Textabbildungen 



LEIPZIG 

Königsstrasae 2 

VERLAG VON S. HIRZEL 
1907 



Alle Sendungen von Beiträgen für die Zeitschrift erbittet man an den Heraus- 
geber, Herrn Dr. Ernst Kitster in Halle a. d. Saale; die Sendungen 
von Drucksachen durch die Post an denselben oder auf Bnrhhä>idlerrvege 
durch die Verlagsbuchha7idlung S. Hirzel in Leipzig. 



Inhalt. 



Seite 

Anibronn, H., Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie und 

deren Aufgaben 1 

Siedentopf, H., Dunkelfeklbeleuchtung und Ultra.mikroskopie ... 13 
Sonntag, P., Der Orlean, ein neues Mittel zur Färbung der verkorkten 

und cuticularisierten Membran 21 

Sonimerfeldt , E., Eine einfache Methode zur Justierung der Nikols 

am mineralogischen Mikroskop 24 

Edinger, Dr. L. , Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren 26 
Studnicka, Dr. F. K. , Wie kann man im Sehfelde des Mikroskopes 
zwei verschiedene Präparate gleichzeitig zu sehen bekommen und 
gleichzeitig projizieren? 34 

Referate 39 

1. Lehr- und Handbücher S. 39. — 2. Mikrophotographie und Pro- 
jektion S. 40. — 3. Präparationsmethoden im allgemeinen S. 41. — 

4. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A. Niedere Tiere S. 48. 
— B. Wirbeltiere S. 60. — C. Bakterien S. 72. — D. Botanisches 

5. 79. — E. Mineralogisch - Petrographisches S. 82. 

(Autoren register auf der dritten Seite des Umschlags.) 
NeueLiteratur 86 



Nachdruck verboten. Übersetznngsrecht vorbehalten. 

Etwaiger Nachdruck aus dieser Zeitschrift findet ohne Krlaubnis 
und ohne Wissen von Herausgeber und Verleger statt. 



Das vorliegende Heft enthält Beilagen von der Aktien -Gesellschaft 
für Anilin -Fabrikation in Berlin, betreffend „Agfa", K. Friedländer & 
Sohn in Berlin, botreffend „Grundzüge der mikroskopischen Technik", Carl 
Zeiß in Jena, betreffend „Ferienkurse über -Ä'issenschaftliche Mikroskopie" 
und „Dunkelfeld -Beleuchtung durch Ablenkung im Immersions-Kondensor", 
auf die hiermit besonders verwiesen wird. 



Band XXIV. Heft 1. 



Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie 
und deren Aufgaben. 

Von ^'«'^^*^ 

NEW YORK 

H. Ambronn botanical 

iu Jeua. ÜAKUEN. 

Was in den mikroskopischen Übungen der naturwissenscliaft- 
lichen und medizinischen Institute von der richtigen Handhabung des 
Mikroskops und seiner Nebenapparate gelehrt werden kann, ist nur 
das Allernotwendigste ; denn die Zeit, die für diese Übungen zur Ver- 
fügung steht, gestattet gar nicht, außer der Hauptaufgabe noch andere 
Dinge zu behandeln. Wenn die Praktikanten nur lernen , ein Prä- 
parat richtig einzustellen und sich über das Gesehene klar zu werden, 
d. h. also einen Einblick in die Elemente der Zellen- und Gewebe- 
lehre erhalten, so ist im wesentlichen das Ziel solcher Übungen er- 
reicht. Dabei nimmt meist die eigentliche Mikrotechnik , also die 
Herstellung geeigneter Präparate, den größeren Teil der Zeit in An- 
spruch. Die Demonstration wichtiger Nebenapparate, wie der Zeichen- 
apparate , Meßapparate usw. kann , wenn sie überhaupt stattfindet, 
nur ganz kursorisch durchgenommen werden. 

Solange es sich nur um die Untersuchung gröberer Struktur- 
verhältnisse handelt, wie dies ja in den praktischen Kursen für An- 
fänger fast stets der Fall ist, genügt es ohne Zweifel auch, wenn 
die Studierenden in dieser Weise mit der Herstellung einfacher Prä- 
parate und deren Untersuchung im Mikroskop vertraut gemacht 
CD werden. Wenn es sich aber später um wirklich wissenschaftliche Be- 
2? obachtungen handelt, wie sie in den Kursen für Fortgeschrittene zu 
• lehren sind, so wird eine eingehendere Kenntnis des Strahlengauges 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 1. 1 

-3 



2 Ambronn: Über Institute für wissenschnftliche Mikroskopie. XXIV, 1. 

im Mikroskop und der Entstehung der mikroskopischen Bilder schon 
deshalb dringend nötig, weil nur durch die Einführung in diese Ge- 
biete die Grundlage für eine richtige Beurteilung des im Mikroskop 
Gesehenen gewonnen werden kann. Daß gerade bei der Unter- 
suchung aller feineren Strukturen erst eine scharfe und wissenschaft- 
liclie Kritik den Beobachtungsergebnissen einen bleibenden Wert gibt, 
ist nach den Untersuchungen Abbes über das Zustandekommen der 
mikroskopischen Bilder immer allgemeiner anerkannt worden, wenn 
es auch lange gedauert hat, bis die Kenntnis der für die praktische 
Mikroskopie so außerordentlich wichtigen Beziehungen zwischen Ob- 
jekt und Bild in weitere Kreise gedrungen ist^. 

Es geht auch nicht an, die 'Studierenden in dieser Hinsicht auf 
die Übungen in den physikalischen Instituten zu verweisen. Zwar 
wird erfreulicherweise in diesen Übungen neuerdings eingehender als 
früher auf das Zustandekommen der Bilder nicht selbstleuchtender 
Objekte Rücksicht genommen, aber derartige Übungen sind doch in 
erster Linie für Physiker, Chemiker und Mineralogen bestimmt, und 
nicht für Biologen und Mediziner, denen das Mikroskop ein fast täg- 
lich zu benutzendes Werkzeug der Forschung werden soll. Es wäre 
auch ganz widersinnig, wenn man den an sich schon sehr umfang- 
reichen Unterricht in den physikalischen Übungen noch die Anleitung 
zur richtigen Handhabung des Mikroskops und seiner Nebenapparate 
zuweisen wollte; ganz abgesehen davon, daß den physikalischen In- 
stituten in der Regel doch nur eine sehr beschränkte Anzahl von 
Mikroskopen zur Verfügung steht, und daß diejenigen, denen die 
Leitung des Unterrichts obliegt, nur in den seltensten Fällen mit den 
Bedürfnissen der praktischen Mikroskopie vertraut sind. Ebenso wie 
man schon seit einiger Zeit an mehreren Hochschulen den Unterricht 
in der angewandten Physik, besonders in der Elektrotechnik, ganz 
berechtigterweise in besondere für diese Zwecke eingerichtete Institute 
verwiesen hat, so sollte auch der Unterricht in der wissenschaftlichen 
Mikroskopie in besonderen Instituten stattfinden. 

Nachdem gerade in den letzten Jahrzehnten die Methoden der 
mikroskopischen Forschung eine ungewöhnlich rasche Weiterentwick- 
lung erfahren haben, deren Bedeutung keineswegs nur innerhalb der 
Grenzen der biologischen und medizinischen Wissenschaften bleibt, 
sondern vielmehr noch auf die Gebiete der allgemeinen Physik und 



^) Vgl. mein Referat über Abbe, E., Gesammelte Abhandl. Bd. I; diese 
Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 327—339. 



XXIV, 1. Ambionn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. 3 

Chemie, sowie auf zahlreiclie aus den Bedürfnissen der Großindustrie 
sich ergebenden Fragen übergreift, ist ein zusammenfassender Unter- 
richt ein dringendes Erfordernis geworden. Soll aber ein solcher 
ünterriclit wirklich nutzbringend und den verschiedensten Problemen 
angepaßt sein, so ist er auch von dem Standpunkt der allgemeinen 
Mikroskopie aus zu erteilen und nicht Instituten zuzuweisen, deren 
Aufgabe in erster Linie die Einführung in SpezialWissenschaften ist. 
Die Berechtigung einer solchen Forderung ist eigentlich so selbst- 
verständlich , daß jede weitere Begründung überflüssig erscheinen 
müßte, wenn es sich eben nicht um die Einfülirung und Verteidigung 
einer Neuerung handelte. Es dürfte deshalb wohl nicht überflüssig 
sein, noch etwas näher auf die große Mannigfaltigkeit der Aufgaben 
einzugehen, die zurzeit an einen sachgemäßen Unterricht in der wissen- 
schaftlichen Mikroskopie zu stellen wären. 

Soweit es sich um die subjektive mikroskopische Beobachtung 
handelt, ist es vor allem nötig, die Frage zu erörtern, inwieweit den 
mikroskopischen Bildern eine Ähnlichkeit mit dem Objekt zukommt, 
welche wiclitige Rolle dabei die Art der Beleuchtung spielt, und 
innerhalb welcher Grenzen man überhaupt noch von einer Objekt- 
ähnliclikeit sprechen kann. Über diese Dinge vermag nur eine mit 
instruktiven Demonstrationen verbundene Übung am Mikroskop für 
den praktischen Mikroskopiker Aufschluß zu geben ; ein paar richtig 
angestellte Versuche geben in dieser Hinsicht rasch und bequem die 
nötige Kenntnis der tatsächlichen Verhältnisse, ohne daß dabei irgend- 
ein tieferes Eingehen auf Fragen der theoretischen Optik oder gar 
auf mathematische Deduktionen erforderlich wäre. Ganz in derselben 
Weise lassen sich durch einfache Versuche die Methoden für die 
Prüfung der Objektive, die Einwirkung der verschiedenen Tubuslänge, 
der verschiedenen Deckglasdicke, die richtige Handhabung der Kor- 
rektionsfassungen, überhaupt die richtige Ausnutzung der Leistungs- 
fähigkeit der Systeme lehren. Jeder Unbefangene, der solche Übungen 
einmal durchgemacht hat, wird zugeben müssen, daß selbst sehr ge- 
übte Mikrosko})iker in diesen Dingen noch Fehler machen, durch die 
die Güte der Bilder gerade bei den besten Objektiven oft schwer 
beeinträchtigt wird. 

Welche großen Vorteile der Abbe sehe Beleuchtungsapparat für 
die Untersuchung feiner und feinster Strukturen, sowie überhaupt für 
die Beobachtung mit stärkeren Objektiven bietet, ist zwar zur (ienüge 
bekannt, aber die sachgemäße Handhabung dieses Apparates, die 
jene Vorteile auch wirklich in vollem Umfange nutzbar macht, wird 

1* 



4 Ambronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. XXIV, 1. 

meist nur durch einfaches Probieren erlernt. Selbst wenn dies an 
der Hand einer guten Gebrauchsanweisung geschieht, so erfordert es 
oft längere Zeit, bis eine gewisse Vertrautlaeit mit den verschiedenen 
Einrichtungen erreicht ist. Eine solche, für alle feineren Unter- 
suchungen dringend notwendige Vertrautheit mit dem Apparat kann 
aber durch wenige instruktive Übungen unter sachkundiger Leitung 
leicht erworben werden, wie die Erfahrung genugsam bewiesen hat. 

Die Benutzung der zahlreichen imd zum Teil recht komplizierten 
Nebenapparate erfordert oft ein sehr zeitraubendes Studium; Miß- 
erfolge bei der Anwendung lassen sich gar nicht vermeiden, wie ein 
jeder bestätigen wird, der sich einmal mit feineren Meßapparaten, 
mikrospektroskopischen Einrichtungen , Polarisationsapparaten , Vor- 
richtungen zur Erzielung der Dunkelfeldbeleuchtung usw. vertraut 
machen mußte. Klar geschriebene Gebrauchsanweisungen sind ja 
auch hierbei ohne Zweifel ein dringendes Bedürfnis, aber selbst die 
besten können gegenüber der praktischen, mit geeigneten Übungen 
verbundenen Anleitung nur als eine Art Notbehelf angesehen werden. 

Zu den Methoden der subjektiven Beobachtung gehören auch 
die von den gewöhnlichen wesentlich abweichenden ultramikrosko- 
pischen , wie sie im Laufe der letzten fünf Jahre von Siedentopp 
und ZsiGMONDY ausgebildet worden sind^. Die zahlreichen Anwen- 
dungen , die diese Methoden bereits gefunden haben — besonders 
auch auf Gebieten, auf denen die Benutzung des Mikroskops kaum 
irgendeinen Erfolg versprach — haben deutlich genug gezeigt, daß 
eine richtige Handhabung der Einrichtungen für die Ultramikroskopie 
nicht bloß für die biologischen und medizinischen W^issenschaften, 
sondern fast mehr noch für das Gebiet der Molekularphysik wert- 
volle Aufschlüsse erwarten läßt. Soll aber in diesen Richtungen er- 
folgreich weitergearbeitet werden, so ist gerade hier ein sachkundiger 
Unterricht unbedingt notwendig. Dieser hätte jedoch nicht bloß die 
Demonstration der Methoden zu umfassen, sondern auch an instruk- 
tiven Beispielen in die kritische Beurteilung der Beobachtungsergeb- 
nisse einzuführen. Gebrauchsanweisungen können dabei nur wenig 
nutzen, und das Selbststudium muß stets, abgesehen von dem damit 
verbundenen Zeitaufwand , Veranlassung zu zahlreichen Mißerfolgen 
geben. Teils sind es zu hoch gespannte Erwartungen hinsichtlich 
der Leistungsfähigkeit der Methoden, teils auch ist es eine unrichtige 



') Vgl. SiEDBNTOPF, H., Ultramikroskopische Literatur in Zeitschr. f. 
Chemie u. Industrie d. Kolloide Bd. I, 1906, Heft 6 u. 1907, Heft 9. 



XXIV, 1. Ambronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. 5 

Auswalil unter den verschiedenen Arten der Dunkelfeldbeleuchtung, 
die solche Mißerfolge herbeiführen. Gerade der letztere Umstand 
hat, wie die Erfahrung lehrte, schon oft eine ganz ungerechtfertigte 
Beurteilung der Leistungsfähigkeit der Ultramikroskopie veranlaßt. 
Es muß daher als eine der wichtigsten Aufgaben eines Instituts für 
wissenschaftliche Mikroskopie betrachtet werden, durch praktische 
Kurse die Grundlagen für eine gedeihliche Weiterentwicklung dieser 
Untersuchungsmethoden zu schaffen. 

Die angeführten Beispiele mögen genügen, um zu zeigen, welche 
Ziele bei der Anleitung zu subjektiven Beobachtungsmethoden zu ver- 
folgen wären. Ganz ähnlich liegen nun die Dinge bei der Mikro- 
photographie und Projektion. Wenn auch auf diesen Gebieten die 
Kenntnis der Handhabung der Apparate weiter verbreitet zu sein 
scheint, so ist doch nicht zu leugnen, daß gerade hier noch eine An- 
zahl tief eingewurzelter Fehler besteht; teils sind sie auf die jedem 
Selbststudium anhaftenden Mängel , teils aber auch auf unrichtige 
Anweisungen in manchen Lehrbüchern zurückzuführen. Trotzdem 
die Mikrophotographie in den letzten Jahrzehnten ganz bedeutende 
Fortschritte zu verzeichnen hat und die Vervollkommnung der Appa- 
rate auf einer hohen Stufe angelangt ist, so ist sie doch auch heute 
noch vielfach eine Art Kunst, für deren Ausübung recht schwankende 
und meist nicht auf theoretischer Grundlage gewonnene Regeln be- 
stehen. Es ist in erster Linie die Kenntnis des richtigen Verfahrens der 
Beleuchtung, die viel zeitraubendes und oft ganz erfolgloses Herum- 
probieren erspart. Fast noch mehr als für die Ausführung ultra- 
mikroskopischer Beobachtungen gilt für mikrophotograpliische Arbeiten, 
daß auch die beste Gebrauchsanweisung nicht viel nutzt, wenn nicht 
eine praktische Einübung unter sachkundiger Leitung vorausgegangen 
ist. Die richtige Auswahl unter den verschiedenen in Betracht 
kommenden Beleuchtungsarten, die exakte Zentrierung der optischen 
Teile, die experimentelle Bestimmung der geeigneten Expositionszeit 
und andere Dinge, die für das Gelingen mikrophotographischer Auf- 
nahmen von der größten Wichtigkeit sind, lassen sich in verhältnis- 
mäßig kurzer Zeit in einem mikrophotographischeu Praktikum er- 
lernen. Niemand, der sich autodidaktisch mit den Methoden der 
Mikrophotographie vertraut machen mußte, wird leugnen, daß solche 
Übungen für die Weiterentwicklung der wissenschaftlichen Mikro- 
photographie von großem Vorteil seien. 

Auch bei der Projektion mikroskopischer Präparate, die zweifel- 
los für den Unterricht außerordentlichen Nutzen bietet, ist die genaue 



Q Ambronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. XXIV, 1. 

Kenntnis der richtigen Beleuchtungsmethoden unerläßlich. Gerade 
auf diesem Gebiet haben sich recht sonderbare Ansichten oder viel- 
mehr Vorurteile gebildet. Man glaubt vielfach, unter Berufung auf 
Äußerungen von autoritativer Seite, daß der Mikroprojektion ver- 
hältnismäßig enge Sehranken gesetzt seien , daß sie eigentlich nur 
bei schwachen Vergrößerungen mit Vorteil anzuw^enden wäre. Frei- 
lich , wenn man sich die früher geübten Methoden genauer ansah, 
war eine solche Ansicht wohl begreiflich. Daß man aber bei völliger 
Ausnutzung der zur Verfügung stehenden Lichtquellen zu ganz 
anderen Resultaten gelangt und — vorausgesetzt, daß die Präparate 
kontrastreich gefärbt sind — selbst bei Benutzung homogener Im- 
mersionen noch genügend scharfe Bilder erhalten kann, haben in über- 
zeugender Weise die Arbeiten A. Köhlers gezeigt \ auf die hier 
nur kurz verwiesen werden kann. 

Es genügt für diesen Zweck schon eine gewöhnliche 20 Ampere- 
lampe , um unter Anwendung der sogenannten lichtstarken Sammel- 
linsen z. B. bakteriologische Präparate mit den stärksten Objektiven 
zu projizieren. Bei der Konstruktion jener Beleuchtungseinrichtung 
sind die Lichtverluste in den einzelnen Linsen genau berücksichtigt 
und auf ein möglichst geringes Maß gebracht worden. Außerdem 
braucht dabei stets nur das wirklich zu projizierende objektive Seh- 
feld beleuchtet zu werden , wodurch eine unnötige und beim Proji- 
zieren sehr lästige Erwärmung der Präparate vermieden werden kann. 
Gute Erfolge sind aber auch hierbei natürlich nur dann zu erzielen, 
wenn derjenige, der die Projektionen auszuführen hat, mit der rich- 
tigen Handhabung der Apparate völlig vertraut ist. 

Ganz besondere Übungen erfordern auch die Mikroprojektionen 
im polarisierten Licht. Sowohl wenn es sich um die Darstellung der 
Erscheinungen im mikroskopischen Bilde des Objekts als auch wenn 
es sich um Projektion von Achsenbildern handelt, ist eine genaue Kennt- 
nis der verschiedenen Beleuchtungsmethoden unbedingt notwendig. Wie 
außerordentlich lehrreich die Projektion der im mikroskopischen Präparat 
sich abspielenden Vorgänge ist, haben die auf der Naturforscher- 
versammlung in Stuttgart vorgeführten Versuche gezeigt, die die 
Wirkung hoher Temperaturen und rascher Temperaturänderungen 
einem größeren Zuhörerkreis zu demonstrieren gestatteten. Die Pro- 
jektionen konnten sowohl im natürlichen wie auch im polarisierten 



^) Köhler, A., Ein lichtstarkes Sammellinsensystem für Mikroprojek- 
tion. Diese Zeitschr. Bd. XIX, 1903. p. 417—429. 



XXIV, 1. Ambronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. 7 

Lieht mittels des von Siedentopf auf Anregung von 0. Lehmann 
konstruierten Heizmikroskops ausgeführt werden ^. Die erfolgreiche 
Handhabung der Einrichtungen dieses Heizmikroskops nicht bloß 
bei den Projektionen, sondern auch bei der subjektiven Beobachtung, 
kann natürlich auch am besten durch praktische Übungen unter sach- 
kundiger Leitung erlernt werden. 

Eine weitere wichtige Aufgabe für den Unterricht in Instituten 
für Mikroskopie wäre die Anleitung zur Mikrophotographie im ultra- 
violetten Licht. Die von A. Köhler ausgearbeiteten Methoden "', 
deren richtige Anwendung die Leistungsfähigkeit des Mikroskops so 
bedeutend gesteigert hat, lassen nur bei vollständiger V^ertrautheit 
mit den Apparaten ein erfolgreiches Arbeiten erwarten. Auch hier 
hat bereits die Erfahrung genugsam gelehrt, daß die Bedeutung dieses 
so wichtigen Fortschritts der mikroskopischen Forschung leicht unter- 
schätzt wird , wenn unzureichende Kenntnis der Apparate die volle 
Ausnutzung ihrer Leistungsfähigkeit verhindert. 

Nachdem im vorstehenden an einigen Beispielen gezeigt werden 
konnte, welche Aufgaben dem Unterricht in den Instituten für Mikro- 
skopie gestellt werden müssten, soll nun noch die Frage erörtert 
werden, wie solche Institute einzurichten wären und welche Gliede- 
rung der den einzelnen Aufgaben entsprechende Unterricht zu er- 
fahren hätte , d. h. wie die Vorlesungen und Übungen am zweck- 
mäßigsten aneinander zu reihen wären. Es wird dabei von Vorteil 
sein, daß wir von den Erfahrungen Gebrauch machen können, die 
in dem einzigen zurzeit bestehenden Institut dieser Art gewonnen 
wurden. Einige kurze Bemerkungen über die Entstehungsgeschichte 
dieses Instituts mögen vorausgeschickt werden. Ich hatte in Leipzig 
fast zehn Jahre hindurch regelmäßig Vorlesungen über die Theorie 
des Mikroskops und über die Benutzung des Polarisationsmikroskops 
für histologische Untersuchungen abgehalten , wobei mir allerdings 
nur eine ganz bescheidene Anzahl von brauchbaren Instrumenten für 
die notwendigsten Demonstrationen zur Verfügung stand. Meine Be- 
mühungen , den Lehrplan zu erweitern , blieben ohne Erfolg ; jede 
Unterstützung wurde versagt, mit der Begründung, daß ja gar 
kein Bedürfnis vorhanden sei , einen speziell für die Zwecke der 
wissenschaftlichen Mikroskopie bestimmten Unterricht zu schaften. 



^) Siedentopf, H., Zeitschr. f. Elektrochemie, 1900, p. 593—5%. 
2) Köhler, A., Mikruphotographische Untersuchungen mit ultra vi« ilettera 
Licht. Diese Zeitschr. Bd. XXI, 1904, p. 129— 1G5, 243—304. 



8 Ambronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. XXIV, 1. 

Schon bald nach meiner Übersiedlung nach Jena konnte ich zu 
meiner großen Freude den lange gehegten Plan verwirklichen. Pro- 
fessor Abbe billigte die Errichtung eines besonderen Instituts für 
solche Zwecke, und die Carl ZEiss-Stiftung stellte die Mittel zur Ver- 
fügung. Es wurde im Jahre 1902 ein Anbau an ein anderes Uni- 
versitätsinstitut errichtet, in dem vier Zimmer und zwei Kellerräiime 
für den mikroskopischen Unterricht bestimmt waren. Zwei Zimmer 
im Erdgeschoß sind für die Vorlesungen und Übnngen in der Mikro- 
photographie und Projektion eingerichtet ; die elektrischen Lampen 
werden durch eine im Keller aufgestellte Akkumulatorenbatterie ge- 
speist. Die Zimmer im ersten Stock sind für acht Arbeitsplätze ein- 
gerichtet; hier werden in jedem Semester praktische Kurse in der 
Handhabung des Mikroskops und seiner Nebenapparate abgehalten. 
Das größere Zimmer dient zugleich als Hörsaal für die Vorlesungen 
über Mikroskopie. Die übrigen Kurse , die sich auf die subjektive 
Beobachtung mit dem Mikroskop beziehen, werden ebenfalls in diesen 
Räumen abgehalten. Die gesamte Ausrüstung des Instituts mit 
Mikroskopen und anderen Apparaten ist von der Zeiss sehen Werk- 
stätte besorgt worden, die auch die Zusage gegeben hat, die jeweils 
notwendige Ergänzung des Instrumentariums zu übernehmen. In- 
sofern lagen allerdings in Jena die Verhältnisse sehr günstig, als 
wir hier die Gewähr hatten, daß es immer leicht möglich sein würde, 
die Besucher des Instituts mit allen wichtigen Neuerungen bekannt 
zu machen, und daß für die Übungen jederzeit leistungsfähige Appa- 
rate zur Verfügung stehen. 

Das Institut wurde zuerst im Sommersemester 1903 in Be- 
nutzung genommen und hat sich in den vier Jahren seines Bestehens 
eines regen Besuchs zu erfreuen gehabt, so daß bereits mehrere Se- 
mester hindurch für die mikroskopischen Übungen Parallelkurse ab- 
gehalten werden mußten. Wenn es sich demnach schon bald heraus- 
gestellt hat, daß die Räume etwas beschränkt sind, so hat sieb doch 
die ganze Einrichtung im wesentlichen bewährt; und es ist wohl 
auch zu hotfen, daß in nicht allzulanger Zeit die Carl ZEiss-Stiftung 
die Mittel zur Errichtung eines größeren Instituts gewähren wird. 

Bisher wurden Vorlesungen und Übungen nur während der Se- 
mester abgehalten, doch sind für die Zukunft auch noch Ferienkurse 
in Aussicht genommen, und zwar wird damit bereits im Herbst dieses 
Jahres begonnen werden. Diese Kurse sollen dazu dienen, solchen 
Besuchern, die während der Semester verhindert sind, in etwa acht 
oder vierzehn Tagen die Handhabung der verschiedenen Apparate 



XXIV, 1. Auibronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. 9 

für Mikrophotographie , Projektion , Ultramikroskopie sowie für sub- 
jektive Beobachtung vorzuführen. Durcli solche Ferienkurse wird, 
wie man annehmen darf, einem Bedürfnis entsprochen werden, das 
wohl schon viele empfunden haben werden , denen die Leitung der 
Praktika in den naturwissenscliaftlichen und medizinischen Instituten 
obliegt , oder die sich für ilire eigenen wissenschaftlichen Unter- 
suchungen orientieren wollen. 

Später sollen diese Kurse auch auf die mannigfachen Fragen 
Rücksicht nehmen, die in den letzten Jahren in verschiedenen Industrie- 
zweigen für die mikroskopische Forschung von Bedeutung geworden 
sind. Dahin gehören vor allem die für alle Hütten und ähnliclien 
Werke dringend notwendigen Metalluntersuchungen. Auch die Textil- 
und Papierindustrie, die Färbereien und Gerbereien, viele chemische 
Fabriken, ferner die Brauereien, die Anstalten für Hefezüchtung, die 
Molkereien u, a. ni. sind bei zahlreichen Fragen auf mikroskopische 
Untersuchungen angewiesen ; und es ist mit Sicherheit anzunehmen, 
daß eine größere Vertrautheit mit den mikroskopischen Beobachtungs- 
methoden in allen diesen Fällen von Nutzen sein wird. Gerade die 
Anwendung der neuen Metlioden der Ultramikroskopie und der Mikro- 
photographie im ultravioletten Licht lassen besonders interessante 
Ergebnisse erhoffen. 

Um nun auch noch einen Überblick darüber zu geben , was in 
den einzelnen bisher regelmäßig abgehaltenen Vorlesungen und 
Übungen geboten worden ist, will ich zum Schluß eine kurze Zu- 
sammenstellung der behandelten Themata anfügen. 

Die Titel der Vorlesungen und Übungen waren folgende : 
I. Einleitung in die Theorie des Mikroskops und seiner Neben- 
apparate, zweistündig, im Wintersemester. 
IL Übungen in der Handhabung des Mikroskops und seiner 
Nebenapparate, zwei- oder vierstündig, im Sommer- und 
Wintersemester. 

III. Untersuchungen im polarisierten Licht, mit Übungen, ein- 
oder zweistündig, im Sommersemester. 

IV. Einleitung in die Theorie der Apparate für Mikrophoto- 
graphie und Projektion , zweistündig , im Sommersemester. 

V. Übungen in der Handhabung der Apparate für Mikrophoto- 
graphie und Projektion, zweistündig, im Wintersemester. 

VI. Die Grenzen der mikroskopischen Wahrnehmung und deren 
Erweiterung durch die Mikrophotographie, einstündig, im 
Wintersemester. 



10 Arabronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. XXIV, 1. 

In der unter I. aufgeführten Vorlesung werden die einzelnen 
Aufgaben in nachstehender Reihenfolge behandelt : 

A. Elementare geometrische Optik mit besonderer Berücksichti- 
gung des Strahlenganges im zusammengesetzten Mikroskop. Theorie 
der Beleuchtungsapparate. Lichtstärke in optischen Instrumenten. 
Bedeutung der Apertur- und Sehfeldblenden. Lage der Pupillen, ihr 
Zusammenhang mit der Fokustiefe und der Genauigkeit der Messungen 
(telezentrischer Strahlengang). Lage der Kardinalpunkte beim Ob- 
jektiv, Okular und ganzen Mikroskop. Elementare Darstellung der 
sphärischen und chromatischen Aberrationen. Einfache Beispiele für 
die Hebung dieser Fehler. Verschiedenheit der Forderung für die 
Korrektion bei Objektiv und Okular. Aplanatismus und Siuus- 
bedingung. Bedeutung der Deckglasdicke und der Tubuslänge. 
Öffnungswiukel der Objektive ; numerische Apertur ; Bedeutung der 
Totalreflexion für die Beschränkung der numerischen Apertur und 
für die Dunkelfeldbeleuchtung. Bestimmung der Brechungsexponenten 
mikroskopischer Objekte. 

B. Abbe sehe Theorie der mikroskopischen Bilderzeugung. Ele- 
mentare Darstellung der Beugungserscheinungen , soweit sie für das 
Mikroskop in Betracht kommen. Auflösungs- und Definitionsvermögen. 
Objekte mit absorbierenden Struktureinzelheiten und solche, bei denen 
die Struktureinzelheiten nur durch Abweichungen im Brechungs- 
vermögen abgebildet werden können ; darauf beruhende Verschieden- 
heit in den Bildern. Erweiterung der Grenzen der mikroskopischen 
Wahrnehmung. Ähnlichkeit von Objekt und Bild. 

C. Besprechung der wichtigsten Nebenapparate : Zeichen-, Meß-, 
Zählapparate ; Spektralapparate für mikroskopische Beobachtungen. 
Apparate zur Prüfung des Mikroskops, Testplatte, Apertometer. Ein- 
richtungen zur Herstellung der Dunkelfeldbeleuchtung. Binokulare 
Mikroskope. 

An diese mehr theoretische Vorlesung schließen sich die unter IL 
angeführten Übungen an. Nach Erläuterung der mechanischen Teile 
am Modell (Mikrometerbewegung, Zahn- und Triebbewegung, Objektiv- 
wechsler, bewegliche Objekttische usw.) wird die Handhabung der 
einzelnen Apparate etwa in folgender Reihe geübt : 

1) Beleuchtungsapparate für durchfallendes Licht, richtige Wahl 
der Öffnung und Richtung der Beleuchtungskegel. 2) Zeichenappa- 
rate , verschiedene Methoden des Zeichnens ; Bestimmung der Ver- 
größerung mittels der Zeichenapparate. .3) Meßapparate , Okular- 
und Objektmikrometer; Dickenmessung mittels der Mikrometerschraube. 



XXIV, 1. Aiubronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie, n 

4) Zählapparate , mit besonderer Berücksichtigung der Zählung von 
Blutkörperchen , Hefezellen , Bakterien , Fettkörperchen in Emul- 
sionen u. dergl. , sowie der bei der Zählung zu beachtenden Fehler- 
quellen. 5) Apparate zur Prüfung der Objektive auf ihren Korrek- 
tionszustand (Achromasie, Apochromasie, chromatische Differenz der 
sphärischen Aberration). Prüfung des Aplanatismus. Wirkung der 
Deckglasdicke und der Tubuslänge. Messung der Aperturen und 
der Brennweiten der Objektive. Bestimmung der Lage der Brenn- 
punkte. 6) Übungen am Abbe sehen Diffraktionsapparat, sowie an 
Objekten mit periodischer Struktur (Diatomeen) ; Bestimmung von 
Streifendistanzen durch Messung der Abstände der Beugungsspektren 
in der Austrittspupille des Objektivs. 7) Benutzung der Spektral- 
apparate für die Okularbeobachtung und Übungen mit dem Engel- 
mann sehen Mikrospektralobjektiv. 8) Beleuchtung mittels auffallenden 
Lichts ; Benutzung des Vertikalilluminators für die Untersuchung 
opaker Objekte, wie Metalle, Gesteine u. dergl. 9) Demonstration 
der Einrichtungen für die Herstellung der Dunkelfeldbeleuchtung, 
unter besonderen Hinweis auf die Methoden der Ultramikroskopie. 
10) Stereoskopische Einrichtungen ; Arbeiten mit den binokularen 
Mikroskopen ; orthoskopische und pseudoskopische Effekte beim Abbe- 
schen stereoskopischen Okular. 11) Einrichtungen zur Bildumkehrung. 
Demonstrationen über die Lage der verschiedenen Zwischenbilder; 
Berücksichtigung der katadioptrischen Bilder. 12) Demonstrationen 
über die Lagen der Apertur- und Sehfeldblenden, der Iris und 
Pupillen. 

In älmlicher Weise werden in der Vorlesung IV. und in den 
Übungen V. der Strahlengang und die Bilderzeugung bei der Mikro- 
photographie und Projektion besprochen , nur mit dem Unterschied, 
daß hier die sehr verschiedenen Beleuchtungseinrichtungen eine 
wesentlich eingehendere Behandlung erfahren und das Hauptgewicht 
auf die möglichst mannigfaltigen Demonstrationen gelegt wird. 

Der Inhalt der Vorlesung HL läßt sich etwa folgendermaßen 
einteilen: 

1) Elementare Darstellung der Entstehung der Interferenzfarben 
zwischen gekreuzten Nicols mit besonderer Berücksichtigung der Er- 
scheinungen an Tier- und Ptlanzengeweben sowie an gespannten 
Kolloiden. 2) Ausführliche Besprechung der akzidentellen Doppel- 
brechung an Kolloiden, Glas, Kristallen, Kristallpulvern (BREWSTEUsche 
Versuche). .".) Künstlicher Dichroismus , Färbungen von Fasern, 
Kolloiden, Kristallen. 4) t'bungen im Bestimmen der Lage der op- 



12 Ambronn: Über Institute für wissenschaftliche Mikroskopie. XXIV, 1. 

tischen Symmetrieachsen, Beziehungen dieser Achsen zu den Haupt- 
quellungsachsen ; Veränderung der Doppelbrechung bei eintretender 
Quellung. 5) Umkehr des Charakters der Doppelbrechung nach Er- 
wärmung oder bei Einwirkung verschiedener Reagentien (Versuche 
von V. Ebner). 6) Beobachtung der Achsenbilder an Membranen 
und Kolloiden. 7) Bestimmung der Brechungsexponenten doppel- 
brechender mikroskopischer Objekte ; Benutzung der Kompensator- 
okulare. 8) Beobachtungen mittels des Spektropolarisators. 9) Ano- 
malien bei der akzidentellen Doppelbrechung in verschiedenen Gummi- 
arten, Guttapercha und einigen Flintgläsern. 

In Zusammenhang mit diesen Übungen stehen die Demonstrationen 
in den Vorlesungen IV. und V. am Projektionsapparat mittels pola- 
risierten Lichts, und die Makro- und Mikrophotographie verschiedener 
Interferenzerscheinungen. 

In der mehr theoretischen Vorlesung VI. wird zunächst eine 
ausführliche Darstellung der Abbe sehen Theorie mit instruktiven 
Demonstrationen am Projektionsapparat gegeben. Im Anschluß hieran 
werden die Bedingungen für die Mikrophotographie im ultravioletten 
Licht erörtert und die zugehörigen Apparate demonstriert. Ferner 
wird ein Überblick über die verschiedenen Abbildungstheorien (Abbe, 
Helmholtz, Lord Rayleigh) gegeben. 

Für die Zukunft sind noch Vorlesungen über die historische 
Entwicklung des Mikroskops sowie über die neueren Fortschritte der 
wissenschaftlichen Mikroskopie in Aussicht genommen. Außerdem 
soll auf die bereits oben erwähnten Ferienkurse besonderes Gewicht 
gelegt werden. 

[Eingegangen am 7. März 1907.'] 



XXIV, 1. Sieden topf: Dnnkelfeldbeleuchtung und Ultramikroskopie. 13 



Dunkel feldbeleuchtung und ültramikroskopie. 

Von 
H. Siedentopf 

in Jena. 

Die Aufgaben der ültramikroskopie sind gerade in ärztlichen 
Kreisen vielfach mißverstanden worden. Auf eine Periode über- 
schwenglicher Hotfnungen, die sich an eine schwer auszurottende 
Verwechslung zwischen verbesserter Sichtbarmachung und gesteigertem 
Auflösungsvermögen knüpfte , folgte ein Rückschlag , der für medi- 
zinische Zwecke die Verwendung des Ultramikroskops zu vermindern 
drohte. Zum Teil erklärt sich diese Entwicklung aus der geringen 
Berücksichtigung, die die eigentliche wissenschaftliche Theorie der 
mikroskopischen Bilderzeugung im akademischen Unterricht findet, 
anderseits aber auch dadurch, daß in relativ kurzer Zeit zwei ver- 
schiedenartige neue mikroskopische Methoden, nämlich die der ültra- 
mikroskopie^ und die der Mikrophotograpie mit ultraviolettem Lichte^ 
aufeinander folgten, und daß ferner bei der ültramikroskopie für 
verschiedene Zwecke eine ganze Anzahl verschiedener Methoden 
bekannt wurden. Das letztere ist nun ganz besonders noch geeignet, 
eine größere Verwirrung zu stiften , so daß es geboten erscheint, 
die verschiedenen ultramikroskopischen Methoden nach den zu unter- 
suchenden Objekten zu ordnen und sie in den folgenden Zeilen in 
möglichster Kürze auseinanderzusetzen unter Fortlassung des für die 
Praxis Unwesentlichen. 

Die Ultramikroskopie beruht auf einer vollkommenen Ausnützung 
der Dunkelfeldbeleuchtung, welche gestattet die mikroskopischen 
Objekte hell auf dunklem Grunde abzubilden, wodurch die Sicht- 
barkeitsbedingungen erhöht werden. Aber eine Dunkelfeldbeleuch- 
tungsmethode ist nicht auch stets eine rein ultramikroskopische. Das 



^) Eine Übersicht über die ultramikroskopische Literatur findet sich 
in Zeitschr. für Chemie und Industrie der Kolloide, Bd. I, 190(3, lieft ti u. 
1907, Heft 9. 

2) KÖHLER, A., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk., Bd. XXI, 1904, p. 129—165 
u. 273-304. 



14 S i e d e n 1 p f : Dunkelfeldbeleuchtung und Ultramikroskopie. XXIV, 1. 

gilt insbesondere von derjenigen Dunkelfeldbeleuchtungsmethode, auf 
welche aufmerksam zu machen der Hauptzweck dieser Zeilen ist und 
welche nach längeren Erfahrungen für die Sichtbarmachung lebender 
Bakterien z. B. des Syphiliserregers die bequemste Einrichtung dar- 
stellt, die sich außer durch ihre relative Billigkeit, noch durch 
ihre für diesen Fall ganz besondere Leistungsfähigkeit auszeichnet. 

1) Einfache mikroskopi sehe Einrichtung für Dunkel- 
feldbeleuchtung, vornehmlich zur Blutuntersuchung 
und zur bequemen Aufsuchung lebender Bakterien, 
z.B. Spirochaete pallida. (Abbiendung im Immersionskon- 
densor.) 

Die Bakterien sind in der Regel wenigstens in der Längs- 
dimensiou nicht ultramikroskopisch. Da nur bei Teilchen, die nach 
allen Dimensionen hin ultramikroskopisch , d. h. kleiner sind als 
etwa 0*2 jj, (Ultramikronen) es notwendig ist, spezifisch helle Licht- 
quellen, wie Sonnen- oder Bogenlicht zu verwenden, kann man hier 
von diesen kostspieligen künstlichen Lichtquellen absehen. Immerhin 
sind die Bakterien im allgemeinen zu klein, als daß das gewöhnliche 
Tageslicht ausreichte. Grasglühlicht, insbesondere wenn es, was sehr 
zu empfehlen ist, durch eine einfache Schusterkugel gesammelt wird, 
reicht jedoch in Verbindung mit den im folgenden näher beschriebenen 
Einrichtungen auch bei schwieriger sichtbar zu machenden Bakterien, 
wie bei der lebenden Spirochaete pallida meist aus. 

Die eigentliche Dunkelfeldbeleuchtung realisiert man mittels 
einer 24 mm großen Zentralblende, welche man unter dem Kondensor 
des Mikroskops in den Diaphragmenträger des Abbe sehen Beleuch- 
tungsapparats einlegt, unter Verwendung eines gewöhnlichen drei- 
linsigen Kondensors von der Apertur 1'4. Kondensoren von schwächerer 
Apertur sind für diese Zwecke bei Anwendung von Gasglühlicht 
nicht brauchbar. Wendet man allerdings elektrisches Bogen- oder 
Sonnenlicht an, so kann man, wie Troester^ angibt, auch solche 
schwächere Kondensoren benutzen. Man muß dann kleinere Blenden 
im Kondensor einlegen und mit Büscheln von schwächerer Apertur 
als 1 beleuchten, etwa von der Apertur 0*7 bis 1*0. Dann sind 
zur Beobachtung aber nur Mikroskopsysteme von schwächerer Apertur 
als 0'7 verwendbar, oder es wird wenigstens notwendig, stärkere 
Systeme bis auf diese Apertur abzublenden, während bei den Immer- 

^) Trübster, C, Zentralbl, für Bakteriol. , Abt. 2, Bd. XIV, 1905, 
p. 511—512. 



XXIV, 1. Siedentopf: Dunkelfeldbeleuchtung und Ultramikroskopie. 15 

sionskondensoren von der num. Apertur 1*4 die stärksten Trocken- 
systeme wie Acliromat F^ oder noch besser Apochromat 3 mm von 
Zeiss zu benutzen sind. Man erkennt die Immersionskondensoren 
von höherer Apertur als 1 daran, daß man den Kondensor aus der 
Schiebhülse herausnimmt, mit der Frontlinse gegen den Himmel 
richtet und im Abstände der deutlichen Sehweite auf die etwa 30 mm 
große Hinterlinse schaut. Daselbst erscheint bei Iramersionskonden- 
soren nur in der Mitte Licht, umgeben von einem relativ breiten, 
dunklen Ringe. Dies rührt daher, daß von vorn nur Büschel von 
einer Apertur , kleiner als 1 aus Luft auf die Frontlinse fallen, die 
nur einen beschränkten Lichtkreis in der hinteren Brennebene des 
Immersionskondensors liefern können. 

Der Kondensor ist vollständig nach oben zu kurbeln , so daß 
er mit der Tischfläche des Mikroskops etwa abschneidet. Die plane 
Seite des Mikroskopspiegels muß gleichmäßig mit weißem Licht 
vollkommen erfüllt sein. Der Objektträger von mittlerer Dicke 
(l'O bis 1*5 mm) wird mittelst Zedernholzöl blasenfrei aufgelegt. 
Vergisst man die Immersion zwischen Objektträger und Kondensor 
herzustellen, so erleiden die sämtlichen beleuchtenden Strahlen an 
der oberen Plaufläche des Kondensors Totalreflexion, und das Objekt 
bleibt überhaupt unbeleuchtet. Das Objekt muß in Wasser oder 
einer anderen Flüssigkeit von höherem Brechungsexponenten als 1 
liegen, es darf sich also nicht in Luft befinden, und ist außerdem 
mit möglichs reinen Deckgläschen zu bedecken. Die beleuchtenden 
Strahlenbüschel von höherer num. Apertur als 1 werden jetzt an 
der oberen Deckglasseite, wenn sie an Luft grenzt, total reflektiert. 
Büschel von geringerer Apertur als 1 treten gar nicht in den Kon- 
densor , sondern werden durch dessen zentrale Blende abgehalten. 
Beobachtet man, wie es für Bakterien wünschenswert ist, mit einem 
starken Trockensystem, so erscheinen alle Objekte im Präparat 
infolge der an ihnen abgebeugten Lichtstrahlen, welche allein die 
Abbildung bewirken, hell auf dunklem Grunde. Immersions- 
objektive sind nicht anwendbar, weil die Totalreflexion am Deck- 
glas nicht eintreten würde. Man könnte zwar die Immersions- 
objektive auf eine Apertur kleiner als 1 abblenden; doch verliert 
man dann ihr höheres Auflösungsvermögen. 

Diese im Prinzip nicht neue (Gebhardt, Troester*), aber für 



1) Gebhardt, W., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. , Bd. XV, 1898, p. 289 
bis 299; Troester, C, loc cit. 



16 Siedentopf: Dunkelfeldbeleuchtung und Ultramikroskopie. XXIV, 1. 

diesen besonderen Zweck der Siclitbarmacliimg lebender Bakterien 
bisher meines Wissens nicht prägnant genug empfohlene spezielle 
Dunkelfeldbeleuchtung mittels Immersionskondensor setzt als 
Akzessorium nur die oben beschriebene Blende voraus, die zum ge- 
ringen Preise^ herstellbar ist. 

Nach dieser Methode der Blende unter dem Immersionskondensor 
ist es leicht , die lebenden Bakterien in Kürze aufzufinden , die man 
sonst bei der Abbildung dunkel auf hellem Grunde oft stundenlang 
suchen mußte und es ist zu hoffen, daß sich dieses einfache Ver- 
fahren bald allgemein einbürgern wird. 

Der Vollständigkeit halber sei noch erwähnt, daß der früher 
empfohlene Spiegelkondensor ^ mitParaboloidfläche, das Spiegelprisma'' 
von CoTTON und Mouton und der neuerdings von Reichert* emp- 
fohlene Spiegelkondensor sich auch für die Sichtbarmachung der 
lebenden Bakterien bei Anwendung von Bogen- oder Sonnenlicht 
eignen. Da man aber mit der oben beschriebenen einfachen Ein- 
richtung der Einlegblende im Immersionskondensor dasselbe fast 
ebensogut erreicht, so kann man von den oft teuereren Spiegel- 
kondensoreu in vielen Fällen absehen. 

Wie bereits ausdrücklich bemerkt, ist es vollkommen unnötig, 
die Untersuchungen mit den Immersionskondensoren etwa bei elek- 
trischem Bogenlicht zu machen ; wenn man aber dennoch etwa mit 
Hilfe einer Projektionseinrichtung das Bakterienbild bei Bogenlicht 
zu betrachten wünscht , so empfiehlt sich , vor die Bogenlampe eine 
der für die Projektion benutzten Beleuchtungslinseu zu setzen und 
mit dieser den Krater der Bogenlampe auf dem planen Mikroskop- 
spiegel abzubilden , aber so , daß dieser vollkommen mit weißem 
Liclit bedeckt wird. Die übrige Dunkelfeldbeleuchtung bleibt dieselbe 
wie bei der oben gegebenen Beschreibung. Der Abstand des Mikro- 
skops von der Linse soll etwa 80 cm betragen. Damit das Licht 
von der Bogenlampe passend schräg nach unten fällt, was bei ver- 
tikalem Mikroskopstativ notwendig ist , muß man die Beleuchtungs- 
linse etwas nach unten rücken. Zur Abhaltung zu großer Wärme 
ist es empfehlenswert, eine Wasserkammer zwischen Linse und 



^) Bei Zeiss, Jena, Mark 1,50, nebst genauer Gebrauchsanweisung. 
^) Siedentopf, H., Berliner klin. Wochenschr. 1904, No. 32. 
ä) CoTTON, A. , u. Mouton, H. , Les Ultramicroscopes et les objets 
ultramicroscopiques, Paris 1906. 

*) Reichert, C, Österr. Chemiker- Zeitung, Bd. X, 1907, p. 5— 7. 



XXIV, 1. Siedentopf: Dunkelfeldbeleuchtung und Ultraraikroskopie. 17 

Mikroskopspiegel «aufzustellen. Die Sichtbarmachung der Bakterien 
gelingt natürlich noch leichter als mit Gasglühlicht. 

Wenn man sich zur Beobachtung solcher Mikroskopobjektive 
bedient, welche zur Untersuchung unbedeckter Objekte korrigiert 
sind, so ist diese unter 1) beschriebene Methode auch für minera- 
logische Zwecke zur Feststellung latenter Ätzfiguren geeignet. 

2) Untersuchung der Ultramikronen in Zellen usw. 
So leistungsfähig die eben beschriebene einfache Einrichtung für die 
bequeme Sichtbarmachung lebender Bakterien ist, so versagt sie 
doch bei eigentlichen Ultramikronen , insbesondere , wenn es sich 
darum handelt, das Vorhandensein und die in vielen Fällen von der 
Brown sehen Bewegung auffällig abweichende Bewegung von Ultra- 
mikronen in Blutkörperchen oder im Zellplasma bei nicht zu dicken 
Präparaten (unter 100 ju Dicke) zu studieren, oder um Auflösung 
von Schaum- oder Fibrillenstrukturen in Ultramikronen nach Gai- 
DUKOv^. Diese Ultramikronen verlangen zu ihrer Sichtbarmachung 
nicht allein, wie bereits oben gesagt, elektrisches Bogen- oder Sonnen- 
licht , sondern es ist im allgemeinen auch unumgänglich nötig, 
für die präziseste Strahlenvereinigung der beleuchtenden Strahlen an 
der im Präparate zu untersuchenden Stelle zu sorgen. Eine solche 
präzise Strahleuvereinigung ist nun mit den Spiegelkondensoren, ab- 
gesehen vom Spiegelprisma von Cotton und Mouton, nicht zu er- 
reichen. Bei dem sphärischen Spiegelkondensor wird diese Strahlen- 
vereinigung durch den beträchtlichen Astigmatismus vereitelt, welcher 
durch die schiefe Rettexion an der Kugelttäche entsteht und Schnitt- 
weitendifferenzen der gesammelten Strahlen von der Größenordnung 
der Brennweite des Spiegelkondensors hervorruft. Auch bei dem in 
dieser Beziehung besseren Spiegelkondensor mit Paraboloidttäche ver- 
bleibt noch die sehr merkliche sphärische Differenz der Vergrößerung. 
Außerdem wäre bei beiden eine Einhaltung der Objektträgerdicke 
auf etwa O'OOl mm notwendig, um das Maximum der Beleuchtung 
zu erzielen. Bei den unachromatischen Kondensoren ist natürlich 
ebenfalls keine präzise Strahlenvereinigung zu erreichen. 

Infolgedessen bleibt man darauf beschränkt , ein scharfes Bild 
der Lichtquelle mit Hilfe eines geeigneten Mikroskopobjektivs im 
Präparat zu entwerfen. Zur Kealisierung der Dunkelfeldbeleuchtung 
blendet man zweckmäßig nach dem Vorschlage von Abbe die Front- 



>) Gaiduküv, N., Berichte der Deutschen Botan. Ges., Bd. XXIV, 
1906, p. 581—590. 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 1. 2 



18 Siedentopf: Dunkelfeldbeleuchtung und Ultraiuikroskopie. XXIV, 1. 

linse des Beobachtungsobjektivs (Apochromat 2 und 4 mm oder 
Achromat D von Zeiss) soweit ab, als die Apertur der be- 
leuchtenden Strahlen bezw. des beleuchtenden Mikroskopobjektivs be- 
trägt. Um an Auflösung nicht zu viel einzubüßen, empfiehlt es sich, 
hier die Apertur der Beleuchtung nicht über 0*2 zu steigern (Ob- 
jektiv A von Zeiss zur Beleuchtung). Man kann entweder ein solches 
Objektiv A statt des Kondensors mit einem einfachen Ring in die 
Schiebhülse unter dem Mikroskoptisch einschieben oder sich eines 
vollkommeneren Wechselkondensors von Zeiss bedienen, welcher einen 
bequemen Übergang von gewöhnlicher zur Dimkelfeldbeleuchtung 
nach dieser Methode ohne Änderung der Einstellung ermöglicht. Statt 
durch die feste Blende am Beobachtungsobjektiv kann man auch 
durch eine Einhänge--^ oder Einschraubblende über dem Objektiv 
einen Strahlengang diaphragmieren , allein man nimmt hierbei die 
vielen Reflexe zwischen den Linsen des abbildenden Objektivs in den 
Kauf und muß zudem, wie die Erfahrung lehrt, die Apertur beinahe 
doppelt soweit abblenden, als wie es an der Frontlinse notwendig 
wird. Die Folge wird ein sehr viel stärkeres Hervortreten zahl- 
reicher Nebenbeugungsbilder und ein merkliches Aufhellen des Unter- 
grundes. 

Mit dieser intensiven Präzisions -Dunkelfeldbeleuchtung kann man 
natürlich auch lebende Bakterien gut sichtbar machen, zumal man das 
höhere Auflösungsvermögen der Immersionsobjektive benutzen kann, 
was bei der sub 1 beschriebenen Methode ausgeschlossen ist. Für 
diese Zwecke ist aber dennoch die unter 1 empfohlene Methode vor- 
zuziehen , weil man mit der Abbiendung im Kondensor infolge der 
schwächeren und zudem ringförmig angeordneten Beleuchtung keine 
Nebenbeugungsbilder erhält, während bei der Abbiendung im Objektiv, 
insbesondere in unreinen Präparaten, die größeren Epithelzellen, Blut- 
körperchen und dergl. soviel relativ helle sekundäre Beugungsfächer 
von allen unregelmäßigen Stellen der Konturen ausstrahlen , daß in 
diesen Strahlen die lichtschwächeren Bakterien sehr oft verschwinden. 
Außerdem hat für die Bakterienuntersuchung die Methode der Ab- 
biendung im Immersionskondensor den schon oben hervorgehobenen 
Vorteil, die Benutzung von Gasglühlicht zu gestatten. 

Wird ein Objektiv mit fester Blende an der Frontlinse zu ge- 



^) Vgl. Prospekte von Carl Zeiss, Jena, über ultramikroskopische 
Apparate, ferner C. Metz, Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXII, 1905, 
p. 114—118. 



XXIV, 1. Siedentopf: Dunkeiteidbeleuchtung und Ultramikroskopie. 19 

wölmlichen Beobachtungen ohne Dunkelfeldbeleuchtung benutzt, so 
stört die feste Blende nur in den wenigen Fällen, wo es auf Be- 
leuchtung mit absolut genau zentralen engen Büscheln ankommt. 
Für solche Zwecke muß man die Frontlinse behutsam gegen eine 
unabgeblendete auswechseln. Meistens wird es hier jedoch genügen, 
die Irisblende im Abbe sehen Beleuchtungsapparat ein wenig exzen- 
trisch zu stellen , ohne daß die abgeblendete P>ontlinse eine merk- 
liche Beeinflussung des Bildes herbeiführt. 

3) Untersuchung kolloidaler Lösungen, Serum und 
Trinkwasser. Bei den kolloidalen Lösungen haben die unter 1 
und 2 beschriebenen Untersuchungsmethoden, nach welchen die Ob- 
jekte zwischen Objektträger und Deckglas eingeschlossen werden, 
den erheblichen Nachteil mit in den Kauf zu nehmen, daß durch die 
kräftige Adsorptionswirkung von unterer Deckglas- und oberer Ob- 
jektträgerfläche ein großer Teil der Ultramikronen aus der Lösung 
herausgenommen wird und an diesen Flächen kleben bleibt. Hier- 
durch entstehen störende Konzentrationsveränderungen und trübe 
Flächen in der Nähe der einzustellenden Schicht , welche es um so 
unmöglicher machten, ein deutliches Bild von der Struktur der kolloi- 
dalen Lösungen zu erhalten , je kleiner deren Ultramikronen sind. 
Wie ein Schleier liegt die Diffraktionswirkung an diesen notwendiger- 
weise mit beleuchtenden Flächen infolge ihrer extra- oder intra- 
fokalen Einstellung auf dem mikroskopischen Bild der eingestellten 
Schicht. Diese Nachteile der Konzentrationsveränderungen und Bild- 
verschleierungen sind vermieden in der ursprünglichen ultramikro- 
skopischen Anordnung nach Siedentopf und Zsigmondy, bei welcher 
durch die orthogonale Anordnung von Beleuchtungs- und Beobachtungs- 
richtung, ferner durch die mikrometrisch veränderliche Beleuchtungs- 
tiefe im Präparat und deren Anpassung an die Sehtiefe des Be- 
obachtungsobjektivs und die reichliche Dimensionierung der Küvetten 
für die Flüssigkeiten die vorerwähnten Nachteile beseitigt sind. Nach 
dieser Anordnung gelingt die Auflösung der Strukturen kolloidaler 
Lösungen , welche nach den sub 1 und 2 skizzierten Methoden oft 
resultatlos untersucht werden. Das beste Testobjekt für diese Methode 
nach Siedentopf und Zsigmondy sind die nach des letzteren Vor- 
schrift ^ hergestellten hochroten kolloidalen Goldlösungeu, deren grüne 



^) Zsigmondy, R., Zur Erkenntnis der Kolloide: über irreversible 
Ilydrosole und Ultraraikroskopie. Jena, Fischek, 1905. 

Zsigmondy, Über Kolloidchemie, Leipzig, Bauth, 1907; enthält eine 

2* 



20 Siedentopf: Dunkelfeldbeleuchtung und Ultraraikroskopie. XXIV, 1. 

Teilchen am besten bei der Beobachtung mit einer stärkeren Wasser- 
immersion von großem Fokalabstande (Wasserimmersion D* von Zeiss) 
und starker Okularvergrößerung (am besten Kompensationsokular 12 
oder auch 18 von Zeiss) leuchtend auf hellem Grunde erscheinen. 
Für die Untersuchung von Ultramikronen innerhalb von festen 
Körpern, Gläsern und Kristallen \ ist diese Methode allein brauch- 
bar. Die Methoden sub 1 und 2 würden die Anfertigung von sehr 
feinen Dünnschliffen voraussetzen , deren Untersuchung sich aber in 
praxi als unvorteilhaft herausstellt, da die vielen Polierfehler der 
Dünnschliffe an der Oberfläche bei der Dunkelfeldbeleuchtung fast 
alles andere Detail überstrahlen. Es ist mir z. B. nie gelungen, 
an Dünnschliffen von Goldrubingläsern die Goldteilchen fest- 
zustellen. Dagegen lassen sich Untersuchungen von feinsten Ätz- 
figuren etc. an freien Oberflächen sehr vorteilhaft nach der sub 1 
beschriebenen Methode der Abbiendung im Immersionskondensor 
anstellen. 



Anzahl sehr instruktiver im Dreifarbendruck hergestellter Bilder der ultra- 
mikroskopischen Strukturen einer Reihe von Goldhydrosolen mit abnehmen- 
der Teilchengröße. 

*) Siedentopf, H., Ultramikroskopische Untersuchungen über Stein- 
salzfärbungen ; Physikal. Zeitschr. Bd. VI, 1905, p. 855—866 (enthält eben- 
falls mehrere farbige Bilder der ultramikroskopischen Struktur dieser Fär- 
bungen). 

[Eingegangen am 11. März 1907.] 



XXIV, 1. Sonntag: Der Orlean, ein neues Mittel zur Färbung von Kork. 21 



Der Orlean, ein neues Mittel zur Färbung der 
verkoi'kten und cuticularisierten Membran. 

Von 

P. Sonntag 

in Daiizig. 

Die äußere Schicht der Samenschale von Bixa Orellana, eines 
im tropischen Amerika einheimischen Strauches , enthält den unter 
dem Namen „Orlean" oder „Annatto" bekannten Farbstoif, welcher 
zum Orangegelbfärben von Wollen- und Seidenzeugen, sowie zum 
Butter- und Käsefärben dient. Auch Firnis, Lack und Wachs lassen 
sich gut mit Orlean färben (vgl. Warburg, Bixaceen in Engler-Prantl 
Pflanzeufam. Bd. III, 6, p. 311). Es ist mir nicht bekannt geworden, 
daß dieser Farbstoff jemals Verwendung in der botanisch-mikroskopi- 
schen Technik gefunden hat und es dürfte daher die Mitteilung von 
Interesse sein, daß derselbe, wie ich mich durch vergleichende Ver- 
suche überzeugt habe , eines der vorzüglichsten Färbemittel für ver- 
korkte und cuticularisierte Membranen ist. 

In neuerer Zeit sind zur Färbung dieser Membranen eine ganze 
Reihe von Farbstoffen in Vorschlag gebracht worden. So führte 
CoRRENs den Gebrauch der alkoholischen Chlorophylltinktur ein, 
Alkannin ist ebenfalls vielfach verwandt worden zu diesem Zwecke. -"^ 
Die größte Verwendung findet in allen neueren Arbeiten über Kork- 
gewebe das von Buscalioni^ zuerst empfohlene Sudan III in Alkohol 
und Glyzerin gelöst. Weniger eingebürgert haben sich bisher die 
von G. Lagerheim '^ empfohlenen Färbungen mit Fettblau, Buttergelb, 
Meyers Gelb und Scharlach R. Die Anwendung der Chlorophyll- 
tinktur nach CoRRENS zur Unterscheidung verholzter und verkorkter 



^) Vgl. Zimmermann, Botan. Mikrotechnik. Tübingen 1892, p. 149. 

^) BusCALiONi, Der Sudan III und seine Verwendung in der botan. 
Mikrotechnik (Botan Zentralbl. Bd. IV, 1898, p. 398—399 u. Strasburger, 
Botan. Prakt. 4. Aufl. 1902, p. 275). 

'') Lageriieim, G. , Nagra nya Korkreagens (Swensk Farmaceutisk 
Tidskrift 1902, no. 20; Ref. in der Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XIX, 
1902, p. 525—526). 



22 Sonntag: Der Orlean, ein neues Mittel zur Färbung von Kork. XXIV, 1. 

Zellwände hat allerdings ihre Schattenseiten. Sie muß frisch her- 
gestellt sein, was in der kalten Jahreszeit umständlich ist, auch muß 
sie im Dunkeln angewendet werden und die Präparate sind nicht 
haltbar. Die Alkanninfärbung ist oft nicht sehr intensiv, aber immerhin 
brauchbar. Am besten hat sich Sudan III bewährt, aber die Färbung 
mit Orlean gibt mindestens ebensogute Resultate wie dieses Farbmittel 
und dürfte bei der Einfachheit ihrer Anwendung bei allen Unter- 
suchungen von Kork und Cuticula zu empfehlen sein. 

Eine Reihe von vergleichenden Untersuchungen ergab mir folgende 
Resultate. Man verwendet als Reagenz eine Lösung des Orlean- 
extrakts (Extract.-Orleanae spirit. spiss), wie man ihn bei E. Merck, 
Darmstadt, beziehen kann, in starkem Alkohol gelöst und eventuell 
filtriert. Läßt man diese gelbbraune Lösung eine halbe bis eine Stunde 
auf Astquerschnitte von Cytisus Laburnum einwirken, wäscht dann 
kurze Zeit mit Alkohol aus und bringt die Schnitte in Wasser oder 
Glyzerin , so sind die Korkzellagen sehr schön orangegelb gefärbt 
und heben sich kontrastreich von den hellweißen Zellwänden des 
Rindenparenchyras scharf begrenzt ab. Der Hartbast bleibt ungefärbt 
ebenso das Holz und alle übrigen Zellwände. 

Um sich von der färbenden Kraft des Farbmittels zu überzeugen, 
darf man natürlich nicht zu alte Aststücke benutzen , da an diesen 
der Kork schon von Natur aus gelbbraun ist, jüngere Aste zeigen 
ihn noch farblos. Periderm von Betula wird schon durch viertel- 
stündige Einwirkung schön goldgelb gefärbt, bei längerer Wirkung 
erhält man noch intensivere Farben bis dunkelbraun. Kork von 
Quercus Suber, Sambucus und Ribes in dünnen Schnitten zeigt sich 
nach 24stündiger Einwirkung stets gut gefärbt und behält nach der 
bisherigen , auf mehrere Monate sich erstreckenden Erfahrung die 
Farbe unverändert in Glyzerin. Die Wurzel von Chlorophytum (Li- 
liaceae) gab mit Orlean behandelt bessere Bilder der verkorkten 
Schutzscheide, als man sie mit Sudan III erhalten kann. Auch die 
Stereiden und das Holzparenchym innerhalb der Scheide nehmen hier 
eine gelbe Farbe an , wie sie auch mit Sudan III entsprechend rot 
werden, allerdings ist die Färbung schwächer als die der Endodermis 
mit ihren einseitigen Verdickungen. Da sonst die typischen verholzten 
Membranen weder durch Sudan III noch Orlean gefärbt werden 
(Libriform , Gefäße von Betula , Tracheiden von Pinus und Picea 
bleiben farblos), so könnte man hier Einlagerung verkorkter Lamellen 
vermuten. Übrigens zeigen ein gleiches Verhalten (leichte Färbung 
mit Orlean , Sudan III , Chlorophyll) auch die Stereiden der Kokos- 



XXIV", 1. Sonntag: Der Orlean, ein neues Mittel zur Färbung von Kork. 28 

nußfaser und des Blattes von Agave americana, die sich alle auch 
mit Chlorophylltinktur schwach grün färben lassen. Sie sind aber 
trotzdem nicht <als verkorkt anzusehen, da sie sich in konzentrierter 
Schwefelsäure lösen, auch die Cerinsäurereaktion und die Verseifung 
mit KOH nicht zu erhalten ist, wie ich wenigstens "für Kokosfasern 
konstatierte. Es scheinen demnach einige Monocotylen, wie schon von 
BuscALioNi für Orchideen angegeben , ihre mechanischen Zellen mit 
Sudan und Orlean zu färben, ohne verkorkt zu sein. 

Von cuticularisierteu Objekten, die sich zur Demonstration der 
Orleanfärbung eignen, sei die Apfelschalen-Cuticula empfohlen, welche 
sich prachtvoll goldgelb präsentiert schon nach kurzer Einwirkung 
des Farbmittels. Auch Sudan III gibt hier sehr schöne Resultate. 
Ferner sei erwähnt die Cuticula des Agaveblattes, sowie des Blattes 
von Dianthus Car., wo die Färbung immer an dünnen Schnitten am 
besten hervortritt. An dem Querschnitt einer Kiefernnadel zeigt die 
Färbung auf das deutlichste , wie die cuticularisierte Außenschicht 
der Epidermis, schön gelbbraun gefärbt, sich als Mittellamelle zwischen 
die stark verdickten hellgelben Epidermiszellen hineinzieht und sie 
auch nach innen umschließt. Die Harzgänge der Nadel werden, da 
der Alkohol lösend wirkt, dagegen nicht gefärbt. Ti'otzdem ist Or- 
lean auch zur Harzfärbung zu benutzen , wenn man nämlich eine 
Lösung des Farbstoifes in Essigsäure benutzt. In diesem Falle 
werden die Harzmassen der Kanäle hellgelb gefärbt , und auch die 
sezernierenden Zellen, die den Harzkanal umschließen, sind meist 
gelb. Die Öltropfen in Rapssamen werden hellgelb gefärbt, und ein 
gleiches ist von den Öltropfen zu sagen, die aus Schnitten vom Endo- 
sperm von Ricinus heraustreten. Bemerkenswert ist ferner die Fär- 
bung des Inhalts der Markstrahlenzellen, die mit Orlean ebenso ein- 
tritt wie mit Sudan III. Auch hier sind es ()ltropfen , die als 
Reservestoff neben Stärke abgelagert werden , welche die Färbung 
bedingen. 

Was die chemische Natur des Orleans betrifft, so ist schon von 
Chevreul angegeben, daß derselbe zwei Farbstoffe enthält, von denen 
der eine, das Bixin , von gelber Farbe in Alkohol und Wasser lös- 
lich ist, während der andere von roter Farbe sich leicht in Alkohol, 
aber nicht in Wasser löst. Letzterer hat nach Piccard die Formel 
CgHgO^. C. Etti hat für das „Bixin" die Formel BjgHg^Og auf- 
gestellt (Über das Bixin, Ber. d. d. ehem. Ges. Bd. XI, 1878). In 
dem alkoholischen Extrakt sind also jedenfalls beide Farbstoffe vor- 
handen, Bixin und Orellin. Für die praktische Anwendung des 



24 Sommerfeldt: Einfache Methode zur Justierung der Nikols. XXIV, 1. 

Orleanextrakts in der mikroskopischen Technik kommt es übrigens 
wenig- darauf an, die Zusammensetzung näher zu kennen, zumal seine 
chemische Konstitution noch nicht aufgeklärt ist (vgl. dazu Beilstein, 
Handb. d. org. Chem. 3. Aufl. Bd. III, p. 651). 

Die Orleanfärbimg des Korkes bildet neben den Färbungen mit 
Chlorophyll, Alkannin und Sudan ein weiteres Glied in der Reihe der 
Färbungen, welche die fettartige Natur der Korkstoife und des Cutins 
bestätigen. 



'»^ 



[Eingegangen am 22. März 1907.] 



Eine einfache Methode zur Justierung der Nikols 
am mineralogischen Mikroskop. 

Von 

Ernst Sommerfeldt 

in Tübingen. 

Um zu prüfen, ob die Nikols eines mineralogischen Mikroskops 
dann wirklich in genau gekreuzter Stellung sich befinden, wenn die 
an ihren Hülsen meist angebrachten Teilkreise oder Markierungen 
auf gekreuzte Stellung weisen , benutzt man gewisse Hilfspräparate, 
welche meist aus besonders geschlitfenen Platten bestehen. Ab- 
gesehen von dem ziemlich hohen Preise derartiger Präparate ge- 
währen sie aber doch nicht volle Sicherheit für eine vollkommen 
genaue Korrektion der Justierung, da bei der Herstellung der Prä- 
parate stets kleine Fehler sich einschleichen können. 

Sicherer und billiger ist ein Verfahren, welches sich geeigneter 
Spaltungsblättchen bedient, da dieses Präparate sind, welche keinerlei 
künstliche Bearbeitung bei ihrer Anwendung zur Justierung der 
Nikols erfordern. Bisher benutzte man meist Spaltungsblättchen von 
Anhydrit für den genannten Zweck , aber wegen der Stärke der 
Doppelbrechung ist es schwierig so dünne Blättchen, wie sie zu einer 
exakten Ausführung der Justierung erforderlich sind, in genügender 
Größe zu erhalten , und das Beobachten der Interferenzfarben und 
Auslöschungslage ist bei dieser Substanz nicht sonderlich genau. 



XXIV, 1. Soiumerfeldt: Einfache Methode zur Justierung der Nikols. 25 

Wohl aus diesem Grunde liat bereits Weinschenk (Zeitschr, f. 
Krist. 24,581, 1895) die Anwendung des Anhydrits zur Justierung 
der Nikols aufgegeben und empfiehlt Quarznadeln , welche indessen 
nur im Riesengrund von der notwendigen äußersten Dünne vor- 
kommen und jetzt nicht mehr zu haben sind , wie auch WtJLFFiNG 
in seiner mikroskopischen Physiographie (RosENBUscH-WtJLFFiNG, 
Bd. I, Teil 1, p. 284) angibt. Daher ist auch diese Methode Wein- 
schenk s in der Praxis wohl nur ausnahmsweise anwendbar. 

Als Ersatz , welcher aber eine noch größere Genauigkeit ge- 
stattet, schlage ich die Benutzung eines Spaltungsstückes von einem 
Gipszwilling vor. Es sind äußerst billig Gipskristalle, welche die 
Zwillingsgrenze als vollkommen gerade Linie enthalten, käuflich und 
da für genaue Beobachtungen die nach der Hauptspaltungsfläche 
(der Symmetrieebene) abzuspaltenden Stücke recht dünn sein müssen, 
so reicht ein solcher Kristall zu einer großen Anzahl von solchen 
Kontrollpräparaten aus. Wegen der Vollkommenheit der Spaltbarkeit 
beim Gips ist es übrigens äußerst leicht die Spaltungsstücke in der 
erforderlichen Dünne herzustellen. 

Man wendet nun eine solche Zwillingsplatte in der Weise an, 
daß man durch Drehen des Objekttisches diejenige Lage aufsucht, 
in welcher die beiden Individuen des Zwillings gleich hell erscheinen, 
in einer solchen Lage fällt die Zwillingsgrenze genau mit einem 
Faden des Fadenkreuzes zusammen, falls das Mikroskop richtig justiert 
ist, und man muß die Justierung andernfalls so lange korrigieren, 
bis diese Bedingung wirklich erfüllt ist. Dreht man das Präparat 
von einer Lage gleicher Helligkeit ausgehend um 45^ in seiner 
Ebene, so wird eine zweite Lage gleicher Helligkeit der Individuen 
erreicht ; es kann diese Eigenschaft dazu dienen die Frage zu ent- 
scheiden, ob die beiden Marken (oder Einkerbungen), welche an dem 
Tubus besserer mineralogischer Mikroskope das Fadenkreuz einer- 
seits quer und längs, anderseits diagonal im Gesichtsfeld einzustellen 
gestatten, wirklich den erforderlichen Winkel von 45** miteinander 
bilden. 

[Eingegangen am 28. Februar 1907.] 



26 Edinger: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. XXIV, 1. 



[Aus dem Dr. Senckenberg sehen Neurologischen Institute in Frankfurt a. M.] 

Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. 

Von 

Dr. L. Edinger 

in Frankfurt ii. M. 



Hierzu fünf Holzs chnitt e. 



In Band VIII dieser Zeischrift habe ich 1891 einen Apparat 
beschrieben, der damals zuerst das Prinzip praktisch verwirklichte, 
die Bilder mikroskopischer Objekte direkt auf eine horizontale Zeichen- 
fläche zu werfen, wo sie dann leicht nachgefahren werden konnten. 
Dieser kleine , in den Katalogen der Firma E. Leitz abgebildete 
Apparat hat, wie ich weiß, weite Verbreitung gefunden, weil es viel 
bequemer ist, ein solches objektives Bild einfach nachzufahren, als 
mittels der Zeichenprismen zu arbeiten. Der Apparat mit seiner 
schwachen Lichtquelle war nur für geringe Vergrößerungen — bis 
zu 30 etwa — - brauchbar und auch nur dafür bestimmt. Solche sind 
in der Rekonstruktionstechnik und bei neurologischen Arbeiten am 
häufigsten nötig. 

Immerhin war und blieb Bedarf nach einem Apparate, der, in 
gleicher Weise gedacht, höhere Vergrößerungen ermöglichte. Schon 
deshalb , weil das Zeichnen solcher mit den Prismen immer durch 
die Schwierigkeit, gleiehhelle Gesichtsfelder im Mikroskop und auf 
dem Papier zu bekommen, beeinträchtigt wird und ermüdend wirkt. 

Die einfachste Lösung der Aufgabe läßt sich erreichen, wenn 
man beliebig starke Lichtquellen zur Verfügung hat. Dann genügt 
es , den Strahl aus einer 20 Amperelampe direkt auf den Spiegel 
eines um 45 Grad geneigten Mikroskopes fallen zu lassen, und über 
dessen Okular einen kleinen, ebensoviel geneigten Spiegel anzubringen, 
um ein prachtvolles Bild direkt auf den Tisch, zwischen Mikroskop 
und Beschauer zu bekommen. Dieses kann natürlich nachgezeichnet 
oder photographiert werden. Bis zu Vergrößerungen von ca. 400 



XXIV, 1. Edinger: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. 27 

bleibt es bei zweckmäßiger Anordnung lichtstark genug. Da man 
nur einen Teil des Lichtbogens ausnutzt, ist die Erwärmung nie 




1. 



störend. Ich habe nachträglich erfahren, daß diese Anordnung schon 
von Hammauberg benutzt wurde , der die Zellen in der Hirnrinde 
derart zählte, daß er ihr Bild ganz ebenso, wie es oben geschildert 



28 Edinger: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. XXIV, 1. 

wurde, auf kariertes Papier warf. Stellt man das Mikroskop senk- 
recht, so wirft der Spiegel über dem Okular das Bild an die Wand, 




wo es, bis zu einem metergroßen Kreise gebracht, als gutes Demon- 
strationsmittel für kleine Auditorien dienen kann. Jedenfalls lassen 
sich damit sehr hohe Vergrößerungen noch leicht projizieren , und 



XXIV, 1. Edinser: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. 29 

bedarf es nicht der bislier dazu gebrauchten komplizierten Apparate. 
Ein Mikroskop mit Spiegel und eine 20 An)i)erelampe in Gehäuse 
genügen. Ks ist nicht der kleinste Vorteil dieser einfachen Anord- 
nung, daß sie die Betrachtung des mikroskopischen Bildes mit zwei 
Augen und seine Besprechung mit einem Anderen ermöglicht. Wer 
sich die Sache aufbauen kann, wird mir sofort beistimmen. 

Ein allgemein zugänglicher Apparat konnte aber erst entstehen, 
wenn es gelang , eine Bogenlampe zu finden , die , an jeden Steck- 
kontakt anschließbar , mit geringem Stromverbrauch arbeitete. Die 
Firma E, Leitz, der ich für ihre Mitarbeit hier meinen besten Dank 
ausspreche , schlug nach mancherlei anderen Versuchen eine Art 
Liliputbogenlampe mit Handbetrieb vor, und mit dieser gelang dann 
in der Tat die Herstellung eines Apparates , der in jedem Labora- 
torium für die mannigfachsten Zwecke sich praktisch erweisen dürfte. 
Er ermöglicht nämlich nicht nur das Projizieren von Zeichnungen 
auf eine horizontale Tischfläche in den Vergrößerungen von 4 bis 
ca. 600 und mehr, je nach der Durchlässigkeit des Präi)arates, son- 
dern auch das Projizieren derselben au eine senkrechte Wand, so 
daß er für kleine Auditorien ganz gut als Lehrmittel dienen kann. 
Außerdem sind Einrichtungen getroffen, die das Photographieren des 
mikroskopischen Bildes und auch das Photographieren opaker Sachen 
in auffallendem Lichte ermöglichen. So spart dieser eine 
Apparat, wenn man auf a 1 1 z u s t a r k e Vergrößerungen 
verzichtet — und das wird für die meisten Fälle mög- 
lich sein — die Anschaffung mehrerer E inz elinstr u- 
mente für das Laboratorium. 

Der Apparat selbst besteht aus einer gußeisernen Säule S (Fig. 1), 
welche an einem Rahmen montiert ist. In diesen Rahmen wird das 
Zeichenbrett Z eingeschoben. Längs der Säule S läßt sich die op- 
tische Bank B mit samt der Lampe und den optischen Teilen, nach 
Lösen der Schraube i^, nach oben oder unten bewegen. Dadurch 
wird der Abstand zwischen Okular und Zeichenbrett verändert und 
entsprechend ändern sich natürlich auch die Vergrößerungen. 

Das Prinzip des Apparates erfordert ein in der optischen Achse 
gut zentrierbares Licht, das von oben nach unten fallend durch 
Präparat und optischen Apparat hindurchgeht. Diese Anforderung 
wird durch die gewählte kleine , einfach und sicher konstruierte 
Lampe L erfüllt. Sie ist durch einen umklappbaren — Wechseln 
der Kohlen ! — Schirm gedeckt und sendet ein Licht nach unten 
auf den mit ihr fest verbunden Kondensor K^. Diese Lampe wird 



30 Edinger: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. XXIV, 1. 

für Gleichstrom und Wechselstrom geliefert. Sie verbraucht 4 Am- 
pere und kann mittels beigegebenem Vorschaltwiderstand an jeden 
Steckkontakt angeschlossen werden. 

Die Regulierung geschieht mit der Hand, der Bequemlichkeit 
wegen mit Hilfe eines Ferneinstellers , wie aus Figg. 1 und 3 er- 
sichtlich ist. Die Schraube b dient dazu, die Kohlen aneinander zu 
bringen, und die beiden Schrauben a a geben die Möglichkeit, den 
Krater genau in die optische Achse zu bringen. Bei der Gleich- 
stromlampe liegt die positive Kohle in der optischen Achse, wodurch 
der Krater freigelegt und eine Lichtvermehrung um ca. 30 Prozent 
erzielt wird. 

Lampe und Kondensor lassen sich mit Hilfe des Hebels O auf- 
und abwärts bewegen. Die aus K^ austretenden Strahlen werden 
durch den Kondensor K^ in das entsprechende Objektiv gesammelt. 
Der Kondensor K^ besteht aus 2 Linsen, von denen jede einzeln an- 
gewandt werden kann, je nach dem zu verwendenden Objektiv. 

Die Präparate werden auf den Objekttisch gelegt. Unter 
ihm ist auf der optischen Bank die feste Platte des Objektiv- 
trägers H angebracht. Sie ist durch grobe und feine Einstellung 
verschiebbar. Eine einfache Schlitteneinrichtung gestattet, entweder 
die projizierenden Lupen resp. photographischen Mikrosummare mit 
großem Gesichtsfeld und relativ geringer Vergrößerung (Vergr. 30 
bis 40) oder einen gewöhnlichen dreiteiligen Mikroskoprevolver mit 
Objektiven Nr. 2 — 6 einzuschieben. In letzterem Falle hat man dann 
unter dem Objektivtische noch den beigegebenen Mikroskoptubus M 
mit Okular einzuschieben. So werden bei kleinerem Gesichtsfelde 
die höheren Vergrößerungen erreicht. 

Natürlich ist durch Auf- und Abschieben der optischen Bank, 
dann durch die Wahl verschiedener Linsen eine weitgehende Varia- 
tion in der Vergrößerungsmöglichkeit vorhanden. Für viele Fälle aber 
empfiehlt es sich, mit dem Zeichenbrett noch weiter von der Okular- 
linse abzugehen, als die optische Bank es ermöglicht. Die Bilder 
werden dann größer , ohne daß man die immer Licht schluckenden 
höheren Linsen bedarf. Deshalb kann dem Apparate noch ein Spezial- 
tisch beigegeben werden, der nach Wegnehmen des Zeichenbrettes Z 
den Lichtstrahlen einen weiteren Weg zu einer tieferstehenden Platte 
ermöglicht (Fig. 3). 

Sowohl an dem Okulare wie an den Mikrosummaren kann mittels 
lichtdichtem Stutzen das Balgende der photographischen Kamera 
angesetzt werden. Die scharfe Einstellung des photographischen 



XXIV, 1. Edinger: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. 31 




Der Zeichentisch. 



Bildes ist viel leichter als bei Anwendung der Mattscheibe, weil man 
an Stelle der Kassette zunächst ein Blatt weißes Papier für das Bild 



32 Edinger: Ein neuer Apparat zum Zeichnen und Projizieren. XXIV, 1. 




Einrichtung zum Photographieren. 



einlegen kann. Um es beobachten zu können , ist der Balg , wie 
Fig. 4 zeigt, abhebbar gemacht. Die Einrichtung ist so getroffen, 



XXIV, 1. E ding er: Ein neuer Apparat zum Zeiclinen und Projizieren. 33 

daß die nachher bloßzulegende photographische I'latte genau in die 
gleiche Ebene kommt. Die Kassette vermag Platten in verschiedenen 
Größen bis zu 24 bis 30 cm aufzunehmen. Zum Photographieren opaker 
Gegenstände in auffallendem Lichte — Embryonen etc. — benutzt 
man die gleiche optische Bank , an der dann nur die Kamera mit 
nach aufwärts gerichtetem Objektive eingesetzt wird. Natürlich muß 
man sich in diesem Falle statt der Papierscheibe einer Mattscheibe 




Anordnung zur Mikroprojekticm. 



bedienen. Zur Einstellung befindet sich am unteren Rande der 
Kamera ein Zahnbetrieb. 

Soll der Apparat zum Projizieren gebraucht werden, so kann 
man entweder das Bild einfach mit einem Spiegel an die Wand re- 
tlektieren oder, das wird sich immer als vorteilhafter erweisen , die 
ganze optische Bank samt Lichtquelle und Mikroskop in die liorizon- 
tale Richtung drehen (s. Fig. .5). 

Gerade für die Projektion erweist sich die Zugabe des Zeichen- 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 1. 3 



34 Studnicka: Wie kann man zwei Pr.äparate gleichzeitig sehen etc. XXIV,1. 

tisches Fig. 3 als vorteilhaft, weil dann das Ganze viel höher und 
bequemer steht. 

Der Apparat steht seit einiger Zeit zur Prüfung in unserem 
Laboratorium. Dort wird er zum Zeichnen von mikroskopischen Prä- 
paraten, aber auch zum Photographieren von bakteriologischen Kul- 
turen in Petrischalen etc. verwendet, wozu er sich auch gut eignet. 

Wir arbeiten im unverdunkelten Kaume. Um den Ring k ist 
an einer Spange ein lichtdichtes Tuch kegelförmig geschlossen an- 
gebracht, das über den Arbeitstisch herunterhängt und durch einen 
Schlitz in seiner ganzen Länge vorn bequemen Zugang hat. 

[Eingegangen am 26. Januar 1907.] 



Wie kann man im Sehfelde des Mikroskope« 

zwei verschiedene Präparate gleichzeitig zu sehen 

bekommen und gleichzeitig projizieren? 

Von 

Dr. F. K. Studnicka 

in Brunn. 

Vor einiger Zeit habe ich in dieser Zeitschrift darauf aufmerk- 
sam gemacht, daß man mit der Hilfe des Abbe sehen Kondensors, 
resp. eines an dessen Stelle mit der Frontlinse nach oben befestigten 
achromatischen Objektives schwache Vergrößerungen bekommen kann, 
die sich durch Entfernen des Objektes von dem Systeme, resp. durch 
Annähern an dasselbe leicht abstufen lassen, und die besonders für 
denjenigen in Betracht kommen, der bei schwachen Vergrößerungen 
zeichnen will.^ Da dabei die Bilder in der richtigen Lage und nicht 
umgekehrt , wie beim einfachen Kompositum erscheinen , kann man 
ein so kompliziertes Mikroskop in gewissen Grenzen auch als einen 



^) „Über die Anwendung des Abbe sehen Kondensors als eines Ob- 
jektives" und „Das pankratische Präpariermikroskop". Beide Abhand- 
lungen im Bd. XXI, 1905, dieser Zeitschr., p. 432 flf. 



XXI V,l. Studnicka: Wie kann man zwei Präparate gleichzeitig sehen etc. 35 

Ersatz für ein Präpariermikroskop anwenden. Selbstverständlich können 
die Bilder, die man dabei erhält, niemals so klar sein, wie diejenigen, 
die man auf die gewöhnliche Weise bekommt, doch sie genügen zu 
den oben angegebenen Zwecken und auch den meisten von denen, 
auf die ich in jener Abliandlung aufmerksam gemacht habe ^, voll- 
kommen. 

Diesmal will ich auf eine andere Anwendungsweise dieses 
„pankratischen" Mikroskopes aufmerksam machen : 

Das mit der Frontlinse nach oben gewendete achromatische 
Objektiv (der Kondensor des Abbe sehen Beleuchtungsapparates kommt 
hier erst in zweiter Reihe in Betracht) dient, wie ich in jener Ab- 
handlung gezeigt habe, als ein Projektionssystem. Oberhalb seiner 
Frontiinse, nicht weit vom Niveau des Mikroskoptisches entsteht ein 
verkleinertes umgekehrtes Bild des an einem besonderen Tische 
unterhalb des Mikroskopes befestigten Präparates , und dieses erst 
wird durch die am Tubus des Mikroskopes befestigten Linsensysteme 
beobachtet. Nun kann man die Sache so einrichten , daß man mit 
demselben Mikroskope gleiclizeitig ein anderes Präparat beobachtet, 
welches sich an der gewöhnlichen Stelle, am Mikroskoptische befindet. 
Durch passende Annäherung des unteren Objekttisches und des da- 
selbst befestigten Präparates kann man , wenn man dabei noch mit 
dem Zahn und Trieb des Beleuchtungsapparates etwas nachhilft, sehr 
leicht das reale Bild des unteren Präparates in dasselbe Niveau mit 
dem oberen bringen, und so sieht man jetzt beide gleichzeitig im 
Sehfelde des Mikroskopes. Falls es sich um kleinere, nur einen Teil 
des Sehfeldes einnehmende Objekte handelt, kann man dieselben ohne 
weiteres direkt miteinander vergleichen, nicht so, wenn das eine von 
ihnen oder beide zu groß sind und das Sehfeld vollkommen ein- 
nehmen. Auch in diesem Falle kann man in vielen Fällen unseren 
Apparat zum Vergleichen von solchen Präparaten anwenden, nur darf 
man sie selbstverständlich nicht gleichzeitig sichtbar machen. Man 
projiziert das Bild des unteren Objektes auf ein etwas tieferes Niveau, 



') Zu den an den oben erwähnten Stellen enthaltenen Angaben über 
die Anwendungen der hier in Betracht kommenden Linsenkombination füge 
ich jetzt noch hinzu, daß man, vorausgesetzt, daß sich solche genügend 
weit vom Mikroskope befinden, Abbildungen auch in jeder behebigen 
Richtung verkürzen kann, und zwar mit einem ganz unbedeutenden Fehler. 
Man stellt die Abbildung, um welche es sich handelt, einfach schief zu der 
ihre Mitte mit derjenigen des reflektierenden Mikroskopspiegels verbinden- 
den Linie. 

3* 



36 Studnicka: Wie kann man zwei Präparate gleichzeitig sehen etc. XXIV, 1. 

als dasjenige des oberen Präparates ist , nnd zwar so , damit man 
durch eine einfache Senkung des Tubus gleich nach dem des oberen 
das Bild des unteren zu sehen bekommt. Das letztere ist jetzt natür- 
lich nicht ganz klar, man kann sich jedoch sehr einfach durch Ver- 
schieben des oberen Präparates helfen. Bei zu undurchsichtigen und 
zu großen Präparaten ist jedenfalls auch "eine solche Vergleichung 
unmöglich. 

Die Vergrößerung des oberen Präparates ist bei der von mir 
in dem oben zitierten Artikel empfohlenen Anordnung nicht dieselbe, 
wie diejenige des unteren. Mit dem Okular No. 1 und dem Ob- 
jektive No. 3 von Reichert bekommt man z. B. eine öOfäche Ver- 
größerung des oberen, und wenn man zur Projektion das Objektiv No. 2 
derselben Firma wählt, z. B. eine etwa 25fache, und wenn das Ob- 
jekt tiefer liegt, noch schwächere Vergrößerimg des unteren Objektes. 
Bei einer anderen Auswahl von Objektiven könnte man jedenfalls 
gleiche Vergrößerungen bekommen, doch es würden wieder andere 
Nachteile entstehen. Ganz schwache Objektive, mit denen man jeden- 
falls eine stärkere Vergrößerung des unteren Objektes erzielen würde, 
eignen sich wegen ihrer bedeutend großen Fokaldistanz sehr wenig 
zu unseren Zwecken. Der Umstand, daß man da zwei verschiedene 
Vergrößerungen zugleich bekommt, hat übrigens, wie wir unten zeigen 
werden , gewisse Vorteile für sich. Um die Fehler des einen der 
Bilder möglichst wenig hervortreten zu lassen, muß man ganz schwache 
Okulare anwenden und nicht zu intensiv beleuchten. Zum Beleuchten 
kann der vom Mikroskope so wie so beseitigte Spiegel (Planspiegel) 
dienen. Falls man den Abbe sehen Kondensor benutzt, schließt man 
möglichst dessen Irisblende. Auf diese Weise kann man Bilder er- 
halten , die sich , was ihre Deutlichkeit betrifft , nicht zu auffallend 
voneinander unterscheiden. 

Die eben erwähnte Anordnung des pankratischen Mikroskopes 
kann, obzwar bei ihr nur verhältnismäßig schwache Vergrößerungen 
in Betracht kommen ^, auf ziemlich mannigfache Weise benutzt werden. 
Die Sache, um die es sich handelt, kann sowohl bei wissenschaft- 
lichen Untersuchungen, wie auch, und dies besonders bei Demonstra- 
tionen zu Unterrichtszwecken in Betracht kommen. Das direkte 
Vergleichen von zwei Objekten im Sehfelde desselben Mikroskopes 



*) Es werden somit durch dieselbe die auf der Anwendung von 
Prismen begründeten besonderen Apparate [z. B. der „Komparoskop" von 
AsHE-FiNLAYSon — Journ. Roy. Micr. Soc. 1905] nur zum Teil ersetzt! 



XXIV, 1. Studnicka: Wie kann nianzweiPräparategleichzeitigsehen etc. 37 

kann sowohl einem Systematiker beim Bestimmen von Organismen 
oder iliren Teilen, wie auch dem Histologen beim Vergleichen von 
verschieden gefärbten Präparaten und endlicli dem Embryologen beim 
Vergleichen seiner Mikrotomschnitte nützlich sein. Der Umstand, daß 
das eine der Objekte, die man so untersuchen will, stärker ver- 
größert erscheint als das andere , kann besonders im zuletzt an- 
geführten F'alle nützlich sein. Man kann z. B. Schnitte durch ältere 
und deshalb auch größere Embryonen leichter mit jüngeren und klei- 
neren vergleichen, als wenn beide gleich stark vergrößert wären. Die 
Rolle, welche die auf die von uns angedeutete Weise benutzte Linsen- 
kombination bei Demonstrationen zu Unterrichtszwecken spielen könnte, 
ist jedenfalls eine viel wichtigere. Man kann dem Schüler im Seh- 
felde desselben Mikroskopes zwei verschiedene Objekte demonstrieren 
und auf ihre Unterschiede auf diese Weise besser aufmerksam machen, 
als wenn mau dazu zwei Mikroskope benutzt, man kann jedoch auch, 
und dies ist nicht unwichtig, zwei Präparate desselben Objektes, das 
eine bei stärkerer, das andere bei schwächerer Vergrößerung gleich- 
zeitig demonstrieren. Besonders in letzterem Falle, in dem es sich 
nicht um Details des Bildes handelt, leistet der Abbe sehe Kondensor, 
mit dem man , als mit einem verhältnismäßig starken Projektions- 
systeme, schwache Vergrößerungen erhalten kann, ganz gute Dienste. 
Die Präparate , die man bei der oben angegebenen Anordnung 
mittels des umgekehrten Objektives resp. des Kondensors untersucht, 
müssen an einem besonderen, leicht beweglichen Tische unterhalb 
des Mikroskopes befestigt werden. Die Beschreibung eines solchen 
ist in einer der anfangs erwähnten Abhandlungen enthalten. Später 
habe ich die Konstruktion des Tisches insoweit verbessert, daß ich 
die den verschiebbaren Tisch tragende drehrunde Stange mittels eines 
Scharnieres an einem schweren liufeisenförmigen Fuße befestigte, 
dessen innere Lichtung bedeutend breiter ist als die Breite des 
Mikroskopfußes beträgt. Die Stange lehnt sich jetzt nur leicht an 
die vordere Kante des Mikroskoptisches an, und ein besonderer, eben- 
falls verschiebbarer Zeiger dient dazu , dieselbe senkrecht zu der 
Obertläche des Tisches und somit den unteren Tisch parallel mit 
dem oberen zu orientieren. Die Bewegung des Tisches, bei geneigtem 
Oberteil des Mikroskopes jedenfalls nur diejenige in der Pachtung 
von reclits nach links , geschieht jetzt durch Bewegung des ganzen 
Tisches samt seinem Fuße. Der Tisch hängt auf diese Weise mit 
dem Mikroskope nicht zusammen und läßt sich jederzeit leicht zu 
ihm hinstellen und wieder von ihm entfernen. 



38 Studnicka: Wie kann man zwei Präparate gleichzeitig sehen etc. XXI V, 1 . 

Bisher hatten wir in dieser Mitteilung nur die Anwendung des 
„ D p p e 1 - M i k r s k p e s " zu subjektiven Untersuchungen im Sinne 
gehabt, doch die ganze Anordnung läßt sich ganz gut auch zur 
Mikrophotographie und, w^as wieder für Unterrichtszwecke sehr wichtig 
ist, zu Projektionen benutzen. Falls die Präparate kontrastreich und 
die Beleuchtung passend ist, sind beide im objektiven Sehfelde des 
Projektionsapparates kaum voneinander zu unterscheiden. Die An- 
wendung der von uns vorgeschlagenen Linseukombinatiou hat im letz- 
teren Falle außer den bisher angeführten noch denjenigen Vorteil, 
daß man im Projektionsapparate, wenn dieser, wie es eben hier der 
Fall ist , mit zwei Tischen versehen ist , die Präparate schneller 
wechseln kann. Wie ich mich bei Versuchen, die ich im physika- 
lischen Institute der hiesigen böhmischen technischen Hochschule ^ 
gemacht habe , überzeugen konnte , könnte man auch den gewöhn- 
lichen Abbe sehen Kondensor zur Projektion anwenden und gibt der- 
selbe ganz scharfe Bilder, doch machen sich bei ihm, wenn man ohne 
Okular projiziert, die Fehler seiner Linsen am Rande des Projektions- 
feldes sehr bemerkbar. Die Konstruktion besonderer Projektions- 
systeme für den zuletzt angegebenen Fall , die sich leicht gegen- 
einander auswechseln ließen, wäre wünschenswert. 



^) Dem Vorstand des Institutes , Herrn Prof. Dr. V. Noväk , spreche 
ich hiemit für die Erlaubnis zu den betreffenden Versuchen meinen besten 
Dank aus. 

Brunn, am 12. März 1907. 

[Eingegangen am 18. März 1907.] 



XXIV, 1. Referate. 39 



Referate. 



1. Lehr- und Handbücher. 

Höber , ß., Physikalische Chemie der Zelle und der 
Gewebe. 2., neubearb. Aufl. Leipzig (W. Engelmaun) 
1906; 460 pp. m. 38 Figg. Geb. 14 M. 

Es ist sehr zu begrüßen, daß für das vortreft'liche HöBERSche 
Werk schon nach so kurzer Zeit eine neue Auflage notwendig ge- 
worden ist. Sie beweist uns, daß die physikalische Chemie bei den 
Biologen das wohlverdiente Interesse ündet, und sie gibt dem Autor 
Gelegenheit, für die Interessen der Biologen auch das in der jüngsten 
Zeit Neuerforschte zu berücksichtigen. Die „Physiologie der Salze'', 
die Lehre von den Elektrolytkombinationen u. a. , hat eine durch- 
greifende Neubearbeitung erfahren. Das anregende Buch sei zum 
Studium bestens empfohlen. Küster [Halle a. S.). 



ö 



Goppelsroeder , Fr., Anregung zum Studium der auf 
KapiUaritäts- und Adsorptionserscheinungen 
beruhenden Kapillaranalyse. Basel (Helbing & 
Lichtenhalm) 1906; 239 pp. 6 M. 

Der V^erf., der seit Jahren sich mit dem Studium der Kapillar- 
analyse beschäftigt,^ will mit dem vorliegenden Buche zum Studium 
dieser Methode anleiten. Es läßt sich nicht leugnen, daß der Verf. 



^) Man vergleiche besonders die ausführlichen Werke : Kapillaranalyse 
beruhend auf KapiUaritäts- und Adsorptionserscheinungen. (Mit einem 
Schlußkapitel: Emporsteigen der Farbstoffe in den Pflanzen.) Basel 1901, 
— sowie Studien über die Anwendung der Kapillaranalyse: I. bei Harn- 
untersuchungen, II. bei vitalen Tinktionsversuchen. 



40 Referate. XXIV, 1. 

seinem Verfahren eine erstaunlich vielseitige Verwendbarkeit zu geben 
gewußt hat, und es kann ebensowenig zweifelhaft sein, daß auch 
auf manchem andern, vom Verf.' noch nicht genannten Felde der 
Forschung die Kapillaranalyse sich wird verwerten lassen. Ich ver- 
weise besonders auf Kapitel V und VI: Anwendung der Kapillar- 
analyse zur Prüfung der Nahrungs- und Genußmittel — sowie An- 
wendung der Kapillaranalyse in der Pliysiologie (Nachweis von 
Pflanzenfarbstoffen, tierischen Pigmenten, Harnuntersuchungen etc.). 
Verf. untersucht Trinkwasser auf seine Verunreinigungen, Eisen- 
mineralwasser, Bier auf künstliche Färbmittel, desgleichen Rotweine, 
ferner Bier und Wein auf Konservierungsmittel wie Salicylsäure, 
Milch u. V. a. Küster {Halle a. S.). 



2. Mikrophotographie und Projektion. 

Neuer mikrophotograp bischer Universalapparat. Von 
E. Leitz. [Mitteilung aus der optischen Werkstätte des- 
selben.] (Eders Jahrb. f. Photogr. u. Reproduktionstechnik 
1906, p. 100—106 m. 3 Figg.) 
Die Firma Leitz bringt einen in vertikaler und auch in horizon- 
taler Lage anwendbaren mikrophotographischen Apparat in den Handel, 
welcher auch stereoskopische Aufnahmen zuläßt, was dadurch erreicht 
wird, daß die Fußplatte des Mikroskops bezw. der auf sie anschraub- 
bare Aufsatztisch horizontal verschiebbar ist. Man hat zur Gewinnung 
zweier zusammengehöriger stereskopischer Teilbilder nach der ersten 
Aufnahme soweit zu verschieben , daß ein ursprünglich in der Mitte 
abgebildeter Punkt des Objekts bei der zweiten Aufnahme ungefähr 
um den Augenabstand (64 bis 70 mm) vom Mittelpunkt absteht. 

Eine besondere Stereoskopkassette , welche für diesen Apparat 
konstruiert wird, gestattet beide Aufnahmen auf einer einzigen Platte 
zu machen. Als Objektive werden die kürzlich von der Firma Leitz 
konstruierten Mikrosummare empfohlen. 

E. Sommerfeldt (Tnbhigeti). 

Bellieili, Methode pratique et simplifiee de micro- 
photographie (CR. Soc. Biol. Paris t. LVIIl, 1905, no. 7, 
p. 339—343 av. 2 flg.). 
Verf. empfiehlt das Verfahren bei der Photographie mikrosko- 



XXIV, 1. Referate. 41 

pischer Bilder, welches bis jetzt immer sebr kostbar und kompliziert 
ist , dadurch , daß man teure Apparate benutzen muß, und dadurch, 
daß es sehr schwer ist, auf der matten Platte genau einzustellen, in 
folgender Weise erheblich zu verbilligen und zu vereinfachen. Man 
stellt diejenigen Teile des Präparates, welche man zu photographiereu 
wünscht, möglichst scharf ein. Die aus dem Okulare des Mikroskopes 
ausfallenden Strahlen sind dann als parallelverlaufend anzusehen, 
also als von einem unendlich weit entfernten Punkte herkommend. 
Jetzt bringt mau einen gewöhnlichen photographischen Apparat, den 
man vorher genau auf unendliche Entfernung eingestellt hat , senk- 
recht über dem Mikroskope an. Verf. bedient sich hierzu eines ein- 
fachen Holzgerüstes, welches er abbildet; man kann sich ein solches 
auch aus jeder alten Kiste eventuell herstellen. Man hat jetzt nur 
nötig, die Platte einzuführen und das Bild aufzunehmen, denn die 
Einstellung ist genau. Schieferdecker {Bonn). 

Arbeit, E., Die neuen LsiTzschen Mikro summar e. (Eders 
Jahrb. d. Photographie 1906, p. 97 — 100 m. 3 Figg.) 
Die optische Werkstätte von E. Leitz bringt unter der Bezeich- 
nung Mikrosummar einen speziell für mikrophotographische Zwecke 
berechneten Objektivtypus in den Handel. Die Mikrosummare sind 
symmetrisch gebaut , und jede Hälfte besteht aus einer verkitteten 
Linse und einem freistehenden Meniskus , und zwar sind nur zwei 
verschiedene Glassorten für das gesamte Objektiv verwertet. Außer 
der Abwesenheit von chromatischer und sphärischer Aberration sowie 
hoher Lichtstärke wird noch besonders die anastigmatische Bildfeld- 
ebnung und die vollkommene Randschärfe der von den neuen Objek- 
tiven gelieferten Bilder gerühmt. E. Sommerfeldt {Tübingen). 



3. Präparationsmethoden im allgemeinen. 

Schürhof, Pipettenglas für mikroskopische Technik 
(Pharmaz. Zeitg. Bd. LI, 1006, p. 931). 
Der Verf. hat ein Pipettenglas konstruiert, welches im Vergleich zu 
den bisherigen derartigen Apparaten widerstandsfähiger gegen Reagentieu 
ist. An Stelle des sonst üblichen wenig dauerhaften Gunimischlauches 
benutzt der Verf. zum Ansaugen und Ausdrücken der Flüssigkeit ein 



42 Referate. XXIV, 1. 

Glasrobr, welches in einen schmalen Gummiring luftdicht eingesteckt 
ist. Durch Heben und Senken dieses Glasrohrs wird eine Verdünnung 
resp. Kompression der Luft an der Pipettenspitze hervorgebracht und 
so kann der Ein- oder Austritt von Flüssigkeit an der Pipette regu- 
liert werden. E. Sommerfeldt {Tübingen). 

Michaelis, L., Über das Ultra mikroskop und seine An- 
wendung in der Chemie (Zeitschr. f. angew. Chemie 
Bd. XIX, 1906, p. 948—953). 
Außer der gewöhnlichen Konstruktion des Ultramikroskops, wie 
sie ZsiGMONDY und Siedentopf einführten, beschreibt der Verf. noch 
eine modifizierte Anordnung, welche sich von der vorigen durch ein 
zentral abgeblendetes Objektiv unterscheidet. Sodann wird eine 
Klassifikation der Farbstoffe hinsichtlich ihres ultramikroskopischen 
Verhaltens geliefert, und zwar empfiehlt sich folgende Einteilung : 

1) Farbstoffe, deren einzelne Körnchen auf dunklem Grunde gefärbt 
und meist komplementär erscheinen (so verhält sich auch Goldlösung). 

2) Farbstoft'lösungen , welche sich ultramikroskopisch nicht in Körn- 
chen auflösen, es sind dieses die fluoreszierenden Farbstoffe. 3) Farb- 
stoffe, bei welchen nur ein Teil der Körnchen ultramikroskopisch auf- 
lösbar ist, der andere Teil aber eine optisch nicht auflösbare Phase 
bildet. In diesem Falle kann man durch Zusätze von Fremdkörpern 
das Mengenverhältnis der beiderlei Anteile variieren. Es kann daher 
von einem Gleichgewichtszustand zwischen dem suspendierten und 
dem echt gelösten Anteil gesprochen werden, sowie von einer Ver- 
schiebung dieses Gleichgewichtszustandes unter der Wirkung von 
Zusätzen. 

Das Färbevermögen ist in diesem Falle weniger durch die sus- 
pendierten Teilchen als durch die in Lösung befindlichen, also ultra- 
mikroskopisch unauflösbaren Teilchen bedingt. 

E. Sommerfeldt {Tübingen). 

Manoueliail , De l'emploi de l'acide picrique comme 

differenciateur dans les colorations a l'hema- 

toxyline (C. R. Soc. Biol. Paris t. LVIII, 1905, no. 13, 

p. 620—621). 

Bekanntlich hat man seit langer Zeit schon die Pikrinsäure in 

wässeriger Lösung als Gegenfärbung gegen Hämatoxylin verwendet. 

Nach den Versuchen der Verfi*. ist es vorteilhafter, die Pikrinsäure 

nur zur Diff'erenzierung zu benutzen und sodann ganz aus dem Prä- 



XXIV, 1. Referate. 43 

parate zu entfernen. Methode: 1) Färbung mit Hämatoxylin 
(BoEHMER, Delafield, IIhklich USW.) 5 bis 10 Minuten und länger ; 
2) Auswaschen in Wasser, bis die Schnitte keinen Farbstoff mehr 
abgeben ; H) Behandlung der Schnitte mit einer gesättigten wässerigen 
Pikrinsäurelösung 2 bis 10 Minuten und länger ; 4) Auswaschen der 
Schnitte mit Brunnenwasser. Dieselben verlieren sofort ihre gelbe 
Färbung und werden blau. Man warte ab, bis die Pikrinsäure völlig 
ausgezogen ist; 5) Absoluter Alkohol, Bergamottöl, Xylol und Kanada- 
balsara. Ist die Färbung in der richtigen Weise gelungen, so er- 
scheinen die Zellkerne schön blau , das Protoplasma ungefärbt. An 
Stelle einer wässerigen kann man auch eine alkoholische (90grädiger 
Alkohol) gesättigte Pikrinsäurelösung verwenden. Die Differenzierung 
geht dann noch schneller vor sich als in der wässerigen Lösung. 
Die Schnitte dürfen daher auch nur halb so lange in der alkoholischen 
Lösung verbleiben. Präparate nach Fixierung mit Chromsalzlösungen, 
Sublimat, Formol eignen sich gut für diese Behandlung. Besonders 
geeignet sind Celloidinschnitte : selbst auf sehr dicken Schnitten wird 
das Celloi'din vollkommen farblos und nur die Kerne treten gefärbt hervor. 
Oft ist es nützlich, eine Kontrastfärbung auszuführen. Man kann die 
von Pikrinsäure gut befreiten Schnitte mit einer Mischung von Eosin 
und Orange zu gleichen Teilen in schwacher wässeriger Lösung ver- 
wenden. Der Verf. empfiehlt die folgende Mischung: 

Rubin S, gesättigte wässerige Lösung . . . . 10 cc 

Orange G, gesättigte wässerige Lösung . . . 15 „ 

Alkohol, 90grädig 50 ,, 

Glyzerin 7 ,, 

Man färbt die Schnitte hierin einige Minuten lang , wäscht in 90- 
grädigem Alkohol aus (nicht in Wasser!) und hebt auf in Balsam. 
Man erhält so eine sehr schöne elektive Färbung. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Löwe, F., Ein Meßmikroskop für Negative (Zeitschr. f. 
wiss. Photographie Bd. IV, 1906, p. 204—206 m. 2 Figg.). 
Um Photographien von Spektren, Interferenzerscheinungen u. dgl. 
auszumessen , empfiehlt der Verf. ein Mikroskop , welches in einer 
Schlittenführung beweglich ist und nacheinander auf die beiden Enden 
der auszumessenden Strecke eingestellt wird. An einem in der 
Zeiss sehen Werkstätte hergestellten derartigen Instrument können 
Längen von 20 mm auf 0*01 mm genau abgelesen werden. Auch 
ist der Oberteil des Instruments auf ein Laboratoriumstativ und auf 



44 Referate. XXIV, 1. 

eine optische Bank aufsetzbar, so daß dieses Mikroskopmodell einer 
vielseitigen Anwendung fähig erscheint. 

E. Sommerfeldt {Tübingen). 

Lobeuhoffer, W., Über die Ergebnisse der Altmann- 
ScHRiDDESchen Färbemethode beim Zentral- 
nervensystem (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 
190(5, p. 491—500 m. 1 Tfl.). 
Verf. konnte mittels der von Schridde für die Untersuchung 
der Zellkörnelung angegebenen Methode (vgl. diese Zeitschr. Bd. XXII, 
1905, p. 550) in Rückenmark, Gehirn und Retina von Hund, Katze 
u. a., sowohl in den Nervenzellen als auch außerhalb derselben Gra- 
nula nachweisen. Für eine klare Darstellung derselben ist es hier 
ebenso wie bei anderen Geweben nötig, daß das Material lebenswarm 
in das Gemisch aus Formol und Müller scher Flüssigkeit eingelegt 
wird. Die Stücke werden nach 24stündigem Verweilen in der auf 
35^ C. gehaltenen Fixierungsflüssigkeit, ebensolange in fließendem 
Wasser ausgewaschen, dann in Alkohol steigender Konzentration ge- 
härtet und nach Behandlung mit Chloroform in Paraffin eingebettet. 
Die Osmierung nahm Verf. erst an den aufgeklebten Schnitten vor 
und der Altmann- Schridde sehen Färbung ließ er vielfach eine 
solche mit verschiedenen Methylenblaulösungeu oder mit Toluidin 
folgen, um einen Kontrast mit den übrigen Protoplasmabestandteilen, 
besonders den Tigroidschollen zu erhalten. Zur Kontrolle der ge- 
wonnenen Resultate wurden übrigens eine Reihe anderer Fixierungen 
und Färbungen vorgenommen. E. Schoebel {Neayel). 

Delamare, G., Melange tetrachrome (coloration elec- 

tive et simultanee des noyaux cellulaires, des 

fibres conjonctives, elastiques et musculaires 

(C. R. Soc. Biol. Paris t. LVIII, 1905, no. 18, p. 828 

—829). 

Verf. empfiehlt eine Methode, durch welche gleichzeitig Kerne, 

Bindegewebsfibrillen , elastische Fasern und Muskelfasern gefärbt 

werden sollen. Man bereite sich die folgende Lösung: 

Orcein (Grübler) lg 

Salzsäure 1 cc 

Absoluter Alkohol 50 „ 

Ferner die folgende Lösung: 



XXIV, 1. Referate. 45 

Hämatoxjiinlösung, sauer, nach Ehrlich ... 2 cc 
Säurefuchsin (Guübler) , gesättigte , wässerige 

Lösung 1 „ 

Pikrinsäure, heißgesättigte, wässerige Lösung . 200 „ 

Man mische die beiden Farbraischuiigen zu gleichen Teilen. Diese 
Lösung hält sich wenigstens eine Woche. Fixierung mit 90grädigem 
Alkohol oder Formol lOprozentig oder mit der Plüssigkeit von Bouin. 
Paraffineinbettung, Aufkleben der Schnitte mit Wasser. Entfernung 
des Paraffins. Die Schnitte werden leicht angesäuert (Eintauchen in 
leicht angesäuertes Wasser) und dann in die Farblösung gebracht 
(bei 45 ^). Nach 20 bis 30 Minuten Auswaschen der Schnitte einen 
Augenblick in dem angesäuerten Wasser (4 bis 5 Tropfen Salzsäure 
auf 100 cc Wasser). Kurzer Aufenthalt in Leitungswasser, um Blau- 
färbung des Hämatoxylins zu erhalten, dann Entwässerung in Alkohol, 
Xylol , Balsam. Kerne violett, Muskelfasern und Protoplasma gelb, 
Bindegewebsfibrillen rot, elastische Fasern schwarz. Keine Nieder- 
schläge. Schnitte von 3 bis 6 /^ geben immer weit bessere Resul- 
tate als Schnitte von 10 //. Schiefferdecker {Bonn). 

Stschastnyi , S. M., Über die Histogenese der eosino- 
philen Granulation im Zusammenhang mit der 
Hämolyse (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. 
Bd. XXXVm, 1905, H. 3, p. 456—509 m. 2 Tfln.). 
Versuchstiere waren fast ausschließlich Meerschweinchen , nur 
wenige Kaninchen, Katzen und Zieselmäuse. Nachdem Verf. zuerst 
Kaninchen benutzt hatte, ging er bald zu Meerschweinchen über, da 
die polynukleären Leukocyten der Kaninchen eine ziemlich grobe, 
acidophile, in schwacher Essigsäure lösliche Körnelung aufweisen 
(pseudoeosinophile Granulation von Kurlow) und die Zahl der echten 
eosinophilen Zellen beim Kaninchen gering ist (etwa 0*2 Prozent). 
So konnten also bei diesem Tiere leicht Fehler eintreten. Bei dem 
Meerschweinchen dagegen nnterscheiden sich die pseudoeosinoplülen 
Leukocyten durch die Größe der Körnchen beträchtlich von den echten ; 
so ist eine Unterscheidung schon bei gewöhnlicher Färbung möglich, 
und man kann die Zählmethode von Zappert anwenden, bei der nur 
die echten eosinophilen Zellen gefärbt werden und sich deutlich von 
allen anderen Formelementen abheben. Die Zahl der echten eosino- 
philen Zellen ist ferner beim Meerschweinchen sowolii im Blute wie 
auch in den anderen Geweben und in den Exsudaten recht beträcht- 
lich, so daß man für dieses Tier ganz besonders günstige Bedingungen 



46 Referate. XXIV, 1. 

für die Bildung von eosinophilen Zellen annehmen kann, Verf. unter- 
suchte die qualitativen und Zahlenverhältnisse des Peritonealexsudates 
und des Blutes der Meerschweinchen, nachdem er diesen andersartige 
oder gleichartige Erythrocyten eingespritzt hatte. Diese wurden durch 
Spülung in 0*9prozentiger Kochsalzlösung vom Serum und von evtl. 
anhaftenden Leukocyten befreit , stammten von Gans, Katze, Kanin- 
chen, Hund oder Meerschweinchen und wurden, auf o7^ erwärmt, in 
gleicher Menge injiziert. Das Exsudat wurde in verschiedenen 
Zwischenräumen nach der Einspritzung mit einer gewöhnlichen kapil- 
lären Pipette aseptisch der Bauchhöhle entnommen und entweder frisch 
untersucht oder durch Ausstreichen auf einem Deckgläschen fein ver- 
teilt, fixiert und gefärbt. Färbungen an lebenden Tieren wurden 
vorgenommen mit Neutralrot und Brillantkresylblau nach Lewaditi. 
Die Färbung eines fixierten hängenden Tropfens mit Eosin wurde in 
folgender Weise ausgeführt: Ein Tropfen des Exsudates wurde auf 
einem Deckgläschen mit einer schwachen Eosinlösung in ü'9prozen- 
tiger Kochsalzlösung oder mit einer entsprechenden Lösung von Bril- 
lantkresylblau gemischt (zuweilen nach dem Verfahren von Lewaditi: 
ein Deckglas wird mit schwacher alkoholischer Lösung von Brillant- 
kresylblau überdeckt und auf die ausgetrocknete Oberfläche der Farbe 
das P^xsudat aufgetragen), dann wurde auf den Boden der Vertiefung 
der feuchten Kammer ein kleines Tröpfchen von einprozentiger Os- 
miurasäure gebracht und dann das mit Öl umrandete Deckgläschen 
mit dem Exsudattropfen so auf die Vertiefung gelegt, daß das Ex- 
sudat nicht den Osmiumsäuretropfen berührte. So wurde der Ex- 
sudattropfen durch die Dämpfe der Osmiumsäure schnell fixiert und 
nahm den Ton der Farbe an. Die Trockenpräparate wurden aus- 
schließlich durch Wärme fixiert (15 Minuten bis 2 Stunden bei 110 
bis 120^). Gefärbt wurden sie mit der Triacidlösung für neutro- 
phile Granula nach Ehrlich; mit der Ehrlich sehen Dreifarben- 
mischung für eosinophile Granula ; mit der Willebrand sehen Farbe ; 
mit Eosin und Azur getrennt oder dem Gemische dieser nach Giemsa. 
Über die Färbung nach Willebrand bemerkt Verf. das Folgende : 
Das Gemisch dieses besteht aus gleichen Teilen einer gesättigten 
wässerigen Lösung von Methylenblau und einer 0"5prozentigen Lö- 
sung von Eosin in TOgrädigem Alkohol ; auf 50 cc dieser Mischung 
kommen 10 bis 15 Tropfen einer einprozentigen Essigsäurelösung. 
Da die Mengen des Methylenblaues und der Essigsäure sehr ungenau 
angegeben sind, gelang es dem Verf. lange nicht, eine gut wirkende 
Mischung herzustellen. Er hat schließlich durch seine Versuche ein 



XXIV, 1. Referate. 47 

Rezept gefunden , das immer gleiclimäßige Resultate ergab. Diese 
Mischung besteht aus : 

Methylenblau medic. pur. (1-4 g -. 110 cc dest. 

Wassers) 25-0 cc 

Eosin (OSprozentige Lösung von reinem 

französ. Eosin in TOgrädigem Alkohol) 25-0 „ 
Essigsäure (einprozentige wässerige Lösung) 10 Tropfen 

Diese Mischung wird vor dem Gebrauche filtriert und die Fär- 
bung wird unter Erwärmen binnen 10 bis 15 Minuten bis zum Er- 
scheinen eines metallischen Häutchens auf der Oberfläche der Farb- 
flüssigkeit ausgeführt. — Die Bestimmung der absoluten Menge der 
eosinophilen Zellen im Blute und dem P^xsudate hat Verf. nach der 
Methode von Zappert ausgeführt: das der Bauchhöhle entnommene 
Exsudat wurde schnell auf ein ührglas geblasen und von da sofort 
mit dem Schüttelmischer von Potain bis zur Marke 0"5 aufgesogen, 
welcher dann sogleich bis zur halben Höhe der Ausbuchtung mit Os- 
miumsäure (einprozentige wässerige Lösung) und bis zur oberen Marke 
mit einem Gemische von 17'0 einer einprozentigeii wässerigen Eosin- 
lösung, 45'0 Glyzerin und 55'0 dest. Wassers gefüllt wurde. Der 
Schüttelmischer wurde dann gründlich geschwenkt, und dann wurde 
nach den bekannten Regeln ein Tropfen des Gemisches auf die Zähl- 
kammer gebracht. Als solche diente die Kammer von Breuer mit 
9 großen Quadraten mit einem Flächeninhalte von je einem Quadrat- 
millimeter. Es gelang nicht infmer, eine genügende Menge Exsudat 
zu erhalten , um die absolute Anzahl der eosinophilen Zellen fest- 
zustellen; in solchen Fällen mußte sich Verf. auf die Bestimmung 
der prozentualen Verhältnisse der verschiedenen Elemente in den 
gefärbten Trockenpräparaten beschränken, was nach seiner Meinung 
keine genauen Resultate ergibt. — Die Organe wurden aufschnitten 
untersucht; Fixierung: 1) 24 Stunden lang in einer lOprozentigeu 
Formollösung, der eine geringe Menge von einer einprozentigeu Os- 
miumsäurelösung hinzugefügt wurde, mit nachfolgender 24stündiger 
Spülung in Wasser und allmählicher Härtung in Alkohol; 2) in einer 
gesättigten Lösung von Sublimat in 0"9 prozentiger Kochsalzlösung. 
Färbung: in Hämatoxylin-Eosin, dem Gemische von Willebrand, 
nacli BioNDi- Ehrlich -Heidenhain. Ferner weist Verf. auf folgendes 
Verfahren zur Färbung der eosinophilen Zellen in den Geweben hin : 
die mit Hämatoxylin gefärbten Präparate kommen auf 24 Stunden 
in eine stark verdünnte Lösung von Eosin (3 bis 5 Tropfen einer 
0*5 prozentigen Eosinlösung in TOgrädigem Alkohol auf 100 cc dest. 



48 Referate. XXIV, 1. 

Wassers), dann 3- bis 6 stündiges gründliches Abspülen in Alkohol, 
wodurch das Eosin aus allen Geweben mit Ausnahme der Erythro- 
cyten und der eosinophilen Granulationen entfernt wird. Bei einer 
solchen langsamen Färbung mit einer außerordentlich schwachen Lö- 
sung von Eosin erhält man stets sehr leicht erkennbare eosinophile 
Zellen, die sich durch eine ungewöhnlich leuchtende rote Färbung 
ihrer Körnchen auszeichnen, während die Erythrocyten schwach rosa 
(nach Sublimat) oder gelblich (nach der Mischung von lOprozentiger 
Formollösung und einprozentiger Osmiumsäurelösung) gefärbt erscheinen. 
Sehr gute Resultate ergibt die oben beschriebene Methode von Wille- 
brand , besonders nach Sublimat. Von Organen wurden hauptsäch- 
lich untersucht : Netz, Milz, Meseuterialdrüsen, Lungen und Knochen- 
mark. Schiefferdecl^er {Bonn). 



4. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 

A, Niedere Tiere, 

Tsujitani, Über eine Methode die Infusorien rein zu 
kultivieren (Mitteil. d. med. Gesellsch. z. Tokio Bd. XVIII, 
1904, No. 4; Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. 
Bd. XXXVI, 1905, p. 514). 
Als Nährboden wurde ein Gemisch von Strohdekokt 20*0: 1000*0 
mit 50*0 Bouillon nnd 5"0 Agar benutzt. Man läßt dies in Reagenz- 
gläsern schief erstarren und ritzt dann die Oberfläche des Nähr- 
bodens. Bringt man die Infusorien in das Kondenswasser, so steigen 
sie in den Ritzen hinauf. Beigemischte Amöben bleiben unten und 
können so leicht entfernt werden. Die Infusorien müssen mit toten 
oder lebenden Bakterien gefüttert werden. Auf Plattenkulturen läßt 
sich das Wachstum der Infusorien mit schwacher Vergrößerung ver- 
folgen. Freund {Halle a. S.). 

NOTy, Fr. G., a. McNeal, W. J. , On the trypanosomes 

of birds (Journ. of infections Diseares vol. II, 1905, 

p. 256—308; Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. 

Bd. XXXVI, 1905, p. 767). 

Nach Verff. gelingt der Nachweis von Trypanosomen im Blute 

von Vögeln sicherer durch Kulturanlagen als durch mikroskopische 



XXIV, 1. Referate. 49 

Untersiicliiuig-. Hei ilireii Arbeiten untersucliten Verff. entweder frische 
oder mit Romanowski- Nocht scher Färbelösung behandelte Präparate. 
Zur Züchtung benutzten sie folgenden Nährboden : 120 g Kaninchen- 
oder RindHeisch, 1000 g destilliertes Wasser, 2 Prozent Pepton (Witte), 
0"5 Prozent Kochsalz, 2 Prozent Agar, 10 cc Normal-Natroncarbonicum 
lösung. Nach Kulturmerkmalen ließen sich die 29 Trypanosomen- 
rassen, die von 29 Vögeln gewonnen und länger als 6 Monate auf 
künstlichen Nährboden gezüchtet wurden , in 4 Typen mit 4 Unter- 
typen einteilen. Freund {Halle a. S.). 

Morax, T., Manifestations oculaires au cours des Try- 
panosomiases (Ann. de l'Inst. Pasteuk, t. XXI, 1907, 
p. 47). 
Zum Nachweis von Trypanosomen in Schnitten durch Augäpfel 
geimpfter Hunde verfuhr Verf. in folgender Weise. Nachdem die 
Schnitte ^/o Stunde in einer wässerigen Lösung von Eosin -Orange ge- 
legen haben, werden sie in Wasser gewaschen und ^/^ Stunde lang 
in wässeriger Toluidinblaulösung gefärbt. Darauf erfolgt rasche 
Differenzierung in 90 prozentigem Alkohol, dem einige Tropfen ünna- 
scher Glyzerinäther zugesetzt werden. Darauf Alkohol, Xylol, Balsam. 
Nach einigen Wochen verblassen die gefärbten Trypanosomen. 

Freund {Halle a. S.). 

Musgrave, W. E., a. Clegg, M. T. , The cultivation and 
pathogenesis of Araoebae (The Philippine Journ. of 
Sc. vol. I, 1906, p. 909). 
Es gelang Verff. nur, Amöben von Bakterien und anderen Or- 
ganismen zu reinigen, nicht aber die so gewonnenen reinen Amöben 
in sterilen Kulturen ohne andere Organismen weiter zu züchten. Bak- 
terienfreie Amöben kann man nach Verff. entweder dadurch ge- 
winnen , daß man die Kulturen so lange stehen läßt , bis die Bak- 
terien absterben und in den Kulturen bakterienfreie Amöbenzysten 
zurückbleiben, oder man kann, wenn enzystierte Kulturen vorliegen, 
die Begleitbakterien durch Hitze oder andere Mittel (Chloroform, 
Formalin usw.) vernichten, während die Amöben ihre Vitalität behalten. 
Auch mit Hilfe von Plattenkulturen kann man bakterienfreie 
Amöben gewinnen. Man impft Agarplatten ringfttrmig mit Bakterien 
und tötet darauf durch Hitze die Bakterien wieder. Wird jetzt das 
Zentrum der Platte mit verunreinigten Amöben geimpft, so wandern 
die Amöben über den Ring der toten Bakterien hinweg, wobei sie 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 1. 4 



50 Referate. XXIV, 1. 

die lebenden Bakterien innerhalb dieses Ringes zurücklassen. Außerhalb 
des Ringes enzystieren sich die Amöben frei von Bakterien. Außer- 
dem kann man auch dadurch zum Ziel gelangen, daß man Affen in die 
Leber oder subkutan Mischkulturen einimpft und wartet bis man einen 
Abszeß erhält, der frei von Bakterien ist. Freund [Halle a. 8.). 

Schaaf, H., Zur Kenntnis der Kopfanlage der Cysti- 
cerken, insbesondere des Cysticercus Taeniae 
solii (Zool. Jahrb. Abt. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XXII, 
1905, p. 435—476 m. 13 Figg. u. 2 Tfln.). 
Das Untersuchsmaterial war teils in Alkohol, teils Sublimatlösung, 
Pikrinsublimat, Perenyi scher Flüssigkeit, Formol u. a. fixiert und be- 
sonders letzteres erwies sich als recht gut. Um die Blase der Finnen 
beim Einbetten möglichst prall zu erhalten, empfahl es sich, dieselbe vor- 
her anzustechen. Außerdem wurde auch durch Verwendung von Chloro- 
form als Vorharz dem Schrumpfen des Objektes merklich vorgebeugt. 
Zur Kernfiirbung diente Delafields oder gelegentlich auch Böhmers 
Hämatoyxlin, ferner Hämalaun und verschiedene Karmine, zur Plasma- 
färbung Lichtgrün oder Pikrinsäure oder beide zusammen, und bis- 
weilen Orange. Im allgemeinen wurde langsam und in der Regel 
übergefärbt und nach gründlichem Auswaschen in fließendem Wasser 
mit Alaunlösung oder Salzsäurealkohol differenziert. Schließlich emp- 
fiehlt Verf. noch die Schnitte solcher gut durchsichtigen, farblosen Ob- 
jekte, die der leichteren Orientierung im Paraffin wegen nicht in toto 
vor der Einbettung gefärbt werden sollten, mit destilliertem Wasser 
aufzukleben, dem einige Tropfen Eosin zugesetzt sind, da sich dann 
die Schnitte mit Ausschluß des Paraffins schön rot färben und so 
ein sofortiges Durchmustern ermöglichen. Es ist dies gerade bei 
Cysticercus taeniae solii von einigem Nutzen, da er in recht vielen 
Fällen in ungeeigneter Schnittrichtung getroffen wird und dann schon 
frühzeitig von einer weiteren Behandlung Abstand genommen werden 
kann, E. Schoebel {Neapel). 

Menueking, F., Über die Anordnung der Schuppen und 
das Kanalsystem bei Stachyodes ambigua 
[Stud.], Caligorgia flabellum [Ehrbg.], Calyp- 
trophora Agassizii [Stüd.], Amphilaphis abie- 
tina [Stud.] und Thonarella variabilis [Stud.] 
(Arch. f. Naturgesch. Jahrg. LXI, Bd. 1, 1905, p. 245 
—266 m. 2 Tfln.). 



XXIV, 1. Referate. 51 

Zur Kiitkalkimg- fand Verf. weder konzentrierte Salpetersäure, 
nocli konzentrierte Salzsäure tauglich. Auch verdünnte Salzsäure 
oder ein Gemisch, von 48 Teilen TOprozentigen Alkohol und 2pro- 
zentige Salpetersäure sind nicht viel besser. Gleichfalls gab die von 
Heider empfohlene Entkalkung mit Chromsäure nur mangelhafte Re- 
sultate. Der beste Erfolg wurde noch mit schwefliger Säure in 
gesättigter Lösung erzielt , welche eine ruhige und langsame Gas- 
entwicklung erzeugt , so daß das Gewebe der Koralle nur geringe 
oder überhaupt keine Veränderungen erleidet. Die Einbettung ge- 
schah in Paraffin oder nach der von Schönemann für Knochen emp- 
fohlenen Methode in Celloidin (vgl. diese Zeitschr. Bd. XIX, 1902, 
p. 3). E. Schochel (Neapel). 

Marcus, H., Ei und Saraenreife bei Ascaris canis (Wer- 
ner) [Asc. mystax] (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 
1906, p. 441—490 m. 10 Figg. u. 2 Tfln.). 
Fixiert wurde viel mit der von Petrunkewitsch modifizierten 
GiEsoNschen Flüssigkeit, die sich durch rasches Eindringen aus- 
zeichnet. Für spätere Stadien ist auch Pikrinessigsäure sehr gut zu 
gebrauchen. Ferner erhält man gute Präparate auch mit Flemming- 
scher, Hermann scher und Zenker scher Fixierung. Immer ist aber 
bis zu einem gewissen Grade die Fixierung ebenso wie bei Ascaris 
megalocephala launenhaft. Gefärbt wurde mit Boraxkarmin , Dela- 
FiELDS Hämatoxylin, Eisenhämatoxylin (kombiniert mit verschiedenen 
Vorfärbungen), ferner mit Methylgrün-Säurefuchsin und Safranin. 

E. Schoebel (Neapel). 

Striickmanu, Ch. , Eibildung, Samenbildung und Be- 
fruchtung von Strongylus f ilaria (Zool. Jahrb. Abt. 
f. Anat. u. Outogen. Bd. XXII, 1905, p. 577—628 m. 
18 Figg. u. 3 Tfln.). 
Die den möglichst frischen Schaflungen entnommenen Würmer 
wurden sofort in toto in die Fixierungsflüssigkeit gebracht. Als 
solche kam Alkohol verschiedener Stärke (70-, 80-, 96prozentiger), 
Essigsäure-Alkohol (70 bis SOprozentiger), Essigsäure-Kochsalzlösung, 
Pikrinsalpetersäure, Pikrinessigsäure, Chrom-Osmium-Essigsäure und 
lOprozentiges Formol zur Verwendung. Alle gaben gute Resultate 
und beeinflußten anscheinend nur die P^ärbung in etwas verschiedener 
Weise. Großer Wert wurde auf ein vorsichtiges Einbetten gelegt. 
Sobald die Würmer aus der Fixierungsflüssigkeit bis in absoluten 

4* 



52 Referate. XXIV, 1. 

Alkohol gebracht waren, wurden sie in 4 bis 6 mm lange Stücke 
zerschnitten und erst dann allmählich in Xylol übergeführt. Als sehr 
wichtig erwies sich ein längeres Verweilen in Xylol-Paraffin bei einer 
Temperatur von zirka 35° C. Zu diesem Zweck wurde das in Xylol 
befindliche Material oben auf den Wärmeschrank gesetzt und, ent- 
sprechend der Menge des verdunsteten Xylols , Paraffin -Xylol von 
steigendem Paraffingehalt hinzugefügt. Erst nach 6 bis 8 Stunden 
wurden die so vorbereiteten Stücke in reines Paraffin (Schmelzpunkt 
58 — 60^0.) gebracht, in welchem sie dann noch 2 bis 4 Stunden 
blieben. Die Schnitte wurden mit Delafields oder Heidenhains 
Hämatoxylin gefärbt. Eine Nachfärbung mit Safranin oder p]osin 
erwies sich nicht als besonders vorteilhaft, bessere Resultate gab 
Nachbehandlung mit in Xylol gelöster Pikrinsäure. 

E. Schoebel (Neapel). 

Rautlier, M.„ Beiträge zur Kenntnis von Mermis albicans 
V. Sieb., mit besonderer Berücksichtigung des 
Haut-Nerven -Muskelsystems (Zool. Jahrb., Abt. f. 
Anat. u. Ontogen. Bd. XXHI, 1906, p. 1 — 76 m. 3 Tfln.). 
Die aus Chrysomela populi erlialtenen Würmer wurden in Subli- 
mat mit Eisessig oder heiß mit Alkohol fixiert. Formol und Kalium- 
bichromat-Eisessig erwies sich als ungünstig ; nach solcher Fixierung 
ließ Erhaltung der Strukturen und Färbbarkeit viel zu wünschen übrig. 
Gefärbt wurde meist mit Eisen-Hämatoxylin nach Heidenhain, wo- 
durch neben der Kernfärbung eine scharfe Differenzierung der kon- 
traktilen Elemente, ferner der Stütz- und gelegentlich auch der Neuro- 
fibrillen erzielt wurde. JE. Schoebel (Neapel). 

Dechant, E., Beitrag zur Kenntnis des peripheren Ner- 
vensystems des Regenwurms (Arb. a. d. Zool. Inst, 
d. Univ. Wien, Tom. XVI, 1906, p. 361—380, m. 2 Figg. 
11. 2 Tfln.). 
Als Untersuchsmethode diente die sogenannte vitale Methylen- 
blaufärbung. Dieselbe läßt sich nicht ohne weiteres auf den ganzen 
Wurm anwenden, da einerseits bei Injektion des FarbstotFes der dicke 
Hautmuskelschlauch das Durchtreten derselben in das Epithel sehr 
erschwert, anderseits bei der Imbibitionsmethode sich die Färbung 
auf das Epithel beschränkt und dann die hier so reichlich vorhan- 
denen Drüsenzellen bevorzugt , so daß eine Entwirrung behufs der 
weiteren Differenzierung mit Wasserstoffsuperoxyd meist unmöglich 



XXIV, 1. Referate. 53 

wird. Am günstigsten ist zur Untersuchung das Vorderende, da liier 
Muskel und Driisonzellen an Ausdehnung zurücktreten , gleichzeitig 
aber die nervösen Elemente viel dichter angeordnet sind als in den 
regulären Körpersegmenten, und so die Mängel einer elektiven Fär- 
bung, wie Ehrlich s Metliylenblau ist, sich nicht so fühlbar machen. 
Es wurde eine ziemlich starke Methylenblaulösung (gerade noch durch- 
scheinend in der Glasröhre der Injektionsspritze) durch die neutrale 
Körperwand des Wurmes injiziert , und zwar soviel , bis sich durcli 
den Druck der Injektionsflüssigkeit die Mundhöhle vorstülpt. Nach 
5 bis 10 Minuten werden dann die vordersten Segmente abgeschnitten 
und die Haut auf einem Objektträger ausgespannt. Sobald Sinnes- 
zellen gefärbt waren, wurde das Präparat in die feuchte Kammer 
gegeben, mehrfach kontri)lliert und bei eingetretenem Optimum der 
Färbung, was an den dunkelstahlblauen Sinneszellen zu erkennen ist, 
in Ammoniummolybdänat fixiert. Man kann auch schw^ächere Me- 
thyleublaulösungen verwenden , erhält dann aber erst nach längerer 
Zeit gute Färbung. Den Zeitpunkt des Optimums in diesem Falle 
zu trefl^"en, ist viel schwerer, und der Erfolg bleibt häufig aus. Das 
Hinterende färbt man am besten nach der Imbibitionsmethode. Am 
schwierigsten sind in den regulären Körpersegmenten die nervösen 
Elemente zu färben. E. Schoebel {Neapel). 

Steiita, M., Über ein drüsiges Organ der Pinna (Arb. a. 

d. zool. Inst. d. Univ. Wien tom. XVI, 1906, p. 407—436, 

m. 1 Fig. u. 1 Tfl.). 
Das zur histologischen Untersuchung dienende Material , das 
teils mit starkem Alkohol, teils mit Sublimat oder Perexyi scher 
Flüssigkeit fixiert war, wurde in der üblichen Weise in Paraffin ein- 
gebettet und geschnitten. Zur Färbung diente meist Karmin, Dela- 
FiELDS Hämatoxylin allein und kombiniert mit Orange G und Eisen- 
hämatoxylin nach Heidenhain. Außerdem kam noch gelegentlich zur 
Verwendung Eosin , Thionin , Neutralrot , Methylenblau , Safranin, 
Methylgrün und Bismarckbraun. E. Schoebel {Neapel). 

Langeron , Note s u r 1' e ra p 1 i du 1 a c t o p h e n 1 de A m a n n 
pour le montage des Nematodes fCompt. Rend de 
la Soc. de Biol. t. LVIII , 1905, p. 749 — 750; Ref. im 
Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1907, p. 222). 
Um auch solche Nematoden, die sich am stärksten zusammen- 
ziehen , zu konservieren , tötet Verf. die Würmer in 5 prozentigem 



54 Referate. XXIV, 1. 

Formol, das er nach und nach durch Amanns Lactophenol (kristalli- 
sierte Karbolsäure 20 g, Acid. lactic. syrupos. 20 g, Glyzerin 40 g, 
Aq. dest. 20 g) ersetzt. In der gleichen Flüssigkeit werden die 
Präparate aufbewahrt. Freund (Halle a. S.). 

Kupel wieser , H. , Untersuchungen über den feineren 
Bau und die Metamorphose des Cyphonautes 
(Zoologica Heft 47, 1906, 50 pp. m. 8 Figg u. 5 Tfln.). 
Die Larven wurden mit Flemming scher oder Hermann scher 
Flüssigkeit fixiert und fast ausschließlich mit Heidenhains Eisen- 
hämatoxylin gefärbt. Schwierigkeiten machte es , die Objekte vor 
der Fixierung zu betäuben, was noch am besten durch tropfenweisen 
Zusatz von Chloralhydrat zum Seewasser, in dem sich die Tiere be- 
finden , erreicht wurde. Von den festgesetzten Stadien vermochte 
Verf. Material zum Schneiden zunächst auf die Weise zu erhalten, 
daß er die Larven sich auf Posidonien festsetzen ließ und dann Larve 
samt Unterlage konservierte. Diese Methode erwies sich aber in 
der Folge als ungünstig , da sich gerade Posidonia gar nicht zum 
Schneiden eignet. Dafür leistete ein von Prouha angegebenes Ver- 
fahren ungleich bessere Dienste. Nach diesem bringt man die Larven 
in vorher mit Kollodium ausgegossene Gefäße, läßt sie sich festsetzen 
und schneidet dann aus dem Kollodium Blättchen heraus, mit denen 
zusammen man die Tiere bequem weiter behandeln und schließlich 
schneiden kann. Direkt auf das Glas festgesetzte Stadien ließen 
sich, auch wenn sie genügend gehärtet waren, meist nicht ohne Ver- 
letzung loslösen. E. Schoehel {Neapel). 

Dreylilig, L., Die wachs bereitenden Organe bei den ge- 
sellig lebenden Bienen (Zool. Jahrb. Abt. f. Anat. u. 
Ontogen. Bd. XXII, 1905, p. 289—330 m. 1 Fig. u. 2 Tfln.J. 
Zur Fixierung des Materials diente vorwiegend Zenker sehe 
Flüssigkeit, und zur Färbung der Schnitte gewöhnliches Hämatoxyliu. 
Da beim Erweichen der Chitinteile durch Kalilauge oder Eau de 
Javelle die angrenzenden Zellpartien nicht unversehrt bleiben, mußte 
von diesen Prozeduren zum Teil Abstand genommen werden. Es 
empfahl sich dann bei der Einbettung nach der Hoffmann sehen 
Methode zu verfahren, wobei die Objekte vor der Einbettung in 
Paraffin erst in Nelkenöl, dann in eine Mischung von gleichen 
Teilen Nelkenöl und Collodium gebracht wurden. 

E. Sdwebel {Neapel). 



XXIV, 1. Referate. 55 

Stauffacher, H. , Zur Kenntnis des statischen Organs 
bei Pliylloxera vastatrix Pl, (Zeitsclir. f. wiss. Zool. 
Bd. LXXXII, 1905, p. 379—388 m. 1 Tfl.). 
Als Fixierungstiüssigkeit wurde mit gutem Erfolg absoluter Al- 
kohol und ein von Apathy empfohlenes Gemisch, bestehend aus 
3 bis 4 g Sublimat, ^j^ g Kochsalz, 100 cc öOprozentigem Alkohol ver- 
wendet. Andere versuchte Mittel benetzten schwer und lieferten nicht 
besonders gute Fixierungen. Tingierte Präparate konnten zum 
Studium der interessierenden Fragen : Feststellung der genauen Lage 
des statischen Organs und der Orientierung desselben am Körper 
des Insektes , nicht benutzt werden. Die Objekte wurden nur in 
Xylol aufgehellt und dann in Kanadabalsam eingeschlossen. 

E. ScJioebel (Neapel). 

Cholodkovsky, N. , Über den Bau des Dipterenhodens 
(Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXXII, 1905, p. 389—410 
m. 2 Tfln.). 
Die Testikel wurden möglichst rasch in physiologischer Koch- 
salzlösung herauspräpariert und sogleich fixiert. Hierzu wurde ge- 
braucht: heiße gesättigte Lösung von Sublimat in Wasser mit Zusatz 
von etwa 0*005 Prozent Eisessig, Alkohol mit Essigsäure nach 
Carnoy (Eisessig ein Teil , absoluter Alkohol 3 Teile) , ferner die 
PERENYische Flüssigkeit, heiße LuGOLsche Jodjodkaliumlösung und 
starkes FLEMMiKGSches Gemisch. Alle diese Fixierungsmittel erwiesen 
sich als brauchbar. Nach Fixierung in Flemming scher Flüssigkeit 
wurden die Schnitte mit Safranin gefärbt und mit Pikrinsäure-Alkohol 
(absoluter Alkohol mit Zusatz von ein bis 2 Tropfen starker wässe- 
riger Lösung von Pikrinsäure) differenziert , nach den übrigen Fixie- 
rungen wurden die Objekte meist in toto mit Boraxkarmin oder 
Ilämalaun fingiert. E. Schoehel {Neapel). 

Basse, A., Beiträge zur Kenntnis des Baues der Tar- 
digraden (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXX, 1905, p. 259 
— 281 m. 1 Fig. u. 2 Tfln.). 
Behufs der Materialbeschaffung wurden die zerkrümelten Moos- 
teile in einem Standzylinder mit viel Wasser übergössen, durch- 
einandergerührt und nach längerem Stehenlassen die am Boden ab- 
gesetzten Teile gesammelt. Durch Abgießen der oben schwimmenden 
vegetabilen Beständteile und mehrmalige Wiederholung des Auf- 
schwemmens fanden sich schließlich in dem geringen Restschlamm 



56 Referate. XXIV, 1. 

der größte Teil der Lebewesen , Tardigraden , Rotatorien , Nema- 
toden II. a. m. Die reichste Ausbeute gab Sedumrasen. Um die 
Tardigraden zunächst in einen Zustand der Asphyxie zu versetzen, 
wurden sie in Röhrchen mit ausgekochtem Wasser gebracht und 
durch eine aufgegossene Ölschicht vollständig von der Luft abge- 
schlossen. Die besten Fixierungsresultate ergab heißer Sublimat- 
alkohol. Ferner kam noch mit gutem Erfolg Zenker sehe Flüssigkeit 
und Hermann sches Gemisch zur Verwendung. Gefärbt wurde mit 
Hämatoxylin, Eosin, beides zusammen, oder ersteres mit Pikrinsäure, 
ferner mit Eiseuhämatoxylin nach Heidenhain. Die Totalpräparate 
wurden mit Pikrokarmin oder Boraxkarmin gefärbt oder als un- 
gefärbte Glyzerinpräparate untersucht. Beim Überführen der Tiere 
von Xylol in Nelkenöl ist die Senkmethode zu empfehlen. Um die 
eingebetteten Tiere besser orientieren zu können, wurde die Hoffmann- 
sche Methode (vgl. diese Zeitschr. Bd. XVH, p. 443), angewandt. 

E. Schoebel (Neapel). 

Enderlein, G., Monographie der Coniopterygiden (Zool. 

Jahrb. Abt. f. Syst. Bd. XXHI , 1906, p. 173—242 m. 

3 Figg. u. 6 Tfln.). 
Neben in Alkohol konservierten Stücken sind trocken auf Minu- 
tienstifte präparierte Exemplare recht wichtig, weil im Alkohol die 
feine Bestäubung des Körpers und der Flügel dem Auge völlig ver- 
schwindet, meist auch abfällt. Von trocknen Exemplaren verwendet 
man am besten das eine Flügelpaar zu einem Kanadabalsampräparat, 
während man das andere trocken einschließt. Den ganzen übrigen 
Körper behandelt man am besten in folgender Weise: Man bringt 
das Insekt vorsichtig in ein Gemisch von einem Teil mäßig starker 
Kalilauge und etwa 8 bis 10 Teilen Wasser, geflügelte am besten 
nach der Entfernung der Flügel, da diese zuweilen leiden. Will man 
bei ganz zarten Tieren die Flügel nicht entfernen , so nimmt man 
besser noch schwächere Kalilauge. Je nach Größe und Zartheit des 
Objektes bleibt es 10 Minuten bis einige Stunden darin , bis es an- 
nähernd die natürliche Gestalt wieder erlangt hat, worauf es in 
Wasser gebracht wird, bis es anfängt zu quellen. Mit einem feinen 
Pinsel drückt man nun die größeren Luftblasen vorsichtig aus und 
legt das Objekt dann eventuell nochmals in die verdünnte Kalilauge. 
Hier bleibt es nach Bedarf kürzere oder längere Zeit. Findet sich 
am Objekt schwarz- oder dunkelpigmeutiertes Chitin, so muß man es 
oft viele Tage darin lassen , wenn man das Pigment völlig zerstört 



XXIV, 1. Referate. 57 

haben will. Nachdem man es schließlich mit Wasser gut ausgewaschen 
hat, führt man es allmählich in Alkohol über, wo auch leicht die 
kleinereu Luftblasen entfernt werden können. In 96 prozentigem Al- 
kohol kann dann das Tier aufbewahrt werden, und es behält die in 
der Kalilauge wieder angenommene natürliche Gestalt. Soll ein mikro- 
skopisches Dauerpräparat hergestellt werden, entfernt man durch Druck 
mit einem feinen Pinsel möglichst allen Körperinhalt, bringt das Ob- 
jekt in eine geeignete Lage und führt es durch absoluten Alkohol 
dann am besten in Zedernholzöl über und schließt in Kanadabalsam 
ein. Zedernholzöl ist Nelkenöl , Xylol oder Benzol wesentlich vor- 
zuziehen, weil es nicht nur den letzten Rest Wasser wegnimmt, son- 
dern auch viel weniger Schrumpfungen veranlaßt. Da aber bei sehr 
dünnhäutigem Chitin trotzdem im Kanadabalsam Schrumpfungen nicht 
zu vermeiden sind — wie z. B. bei den äußerst zarten Wandungen 
des Abdomens — so ist in vielen Fällen vorzuziehen , das Objekt 
aus Wasser in Glyzerin überzuführen und in solches einzuschließen. 
Das Zerlegen und Zerzupfen ist immer erst im Kanadabalsam resp. 
Glyzerin vorzunehmen. Ein Erhitzen der verdünnten Kalilauge ist 
bei zarten Objekten keinesfalls anzuraten, da dann häutig das Chitin 
aufgeweicht wird oder sich in eine zähe Masse verwandelt, die an 
der Präpariernadel haften bleibt. E. Schoebel (Neapel). 

Weißeul)urg, ß., Über dieöuocyten vonTorymus nigri- 
cornis Boh. mit besonderer Berücksichtigung 
der Metamorphose (Zool. Jahrb. Abt. f. Morph. Bd. XXIII, 
1906, p. 2.31—268 m. 1 Tfl.). 
Bei der Fixierung wurden für den vorliegenden Zweck die besten 
Resultate erhalten, wenn die Tiere nach Betäubung mit Chloroform 
etwa 45 Sekunden in 70 bis 80^ C. heißes Wasser und dann nach 
Anstich der Cuticula in die kalte Fixierungsflüssigkeit gebracht wurden. 
Als solche kamen zur Verwendung das CARNOvsche Gemisch aus 
Alkohol, Chloroform und Eisessig, ferner Sublimatlösung nach Gilsox 
mit der von Petruxkewitsch angegebenen Modifikation. Die Haupt- 
wirkung bei dieser Methode dürfte nach Ansicht des Verf. jedenfalls 
die Hitze leisten. Man erhält dabei jedenfalls, was Feinheiten der 
Kernstruktur anbetrifl't, gröbere Bilder als etwa durch die direkte 
Einwirkung des CARNOvschen Gemisches. Die Methode war aber im 
gegebenen Falle deshalb unentbehrlich, weil durch sie eine voll- 
kommene Gerinnung der Körperflüssigkeit und somit eine gute Fi- 
xierung der in ihr enthaltenen Zellen in ihrer topographischen Lage 



58 Referate. XXIV, 1. 

erzielt wurde. Auch war es, da es sich zum Teil um Zellen von 
veränderlicher Gestalt handelte, wichtig, ein augenblicklich fixierendes 
Mittel zu besitzen. Gefärbt wurde in den meisten Fällen nur mit 
Delafields Hämatoxylin. Die absichtlich überfärbten Objekte wurden 
hierauf mit salzsaurem Alkohol differenziert und dann zur Wieder- 
herstellung des blauen Farbtones mit Ammoniak- oder Lithi(mkarbonat- 
lösung behandelt. Das Hämatoxylin nehmen die Önocyten in vielen 
Stadien auch im Plasma begierig an. Stets treten sie aber dadurch 
deutlich hervor , daß die Eiweißkügelchen der Fettzellen , die z. B. 
bei Färbung mit Hämatoxylin-VAN Gieson ein äußerst buntes Bild 
darbieten, bei bloßer Hämatoxylinfärbung gänzlich ungefärbt bleiben. 
Beim Schneiden wurde bei Stadien mit hartem Chitin mit gutem Er- 
folg die Mastix -Kollodiummethode angewandt. Frische Präparate 
wurden entweder in physiologischer Kochsalzlösung oder im Körper- 
saft des Objektes selbst untersucht. E. Scltoehel (Neapel). 

Schwabe, J., B e i t r ä g e zur Morphologie und Histologie der 
tympanalen Sinnesap parate der Orthopteren 
(Zoologica Heft 50, 1906, 154 pp. m. 17 Figg. u. 5 Tfln.j. 
Wegen der Undurchlässigkeit des Chitins für die Fixierungs- 
mittel ist es ganz unzweckmäßig ganze Tiere in dieselben einzulegen, 
vielmehr unbedingt erforderlich vorher sämtliche überflüssigen Teile 
zu entfernen. Bei den Acridiodeen trennt man am besten das Abdomen 
im 2. Abdominalsegment und den Thorax zwischen dem 2. und 
y. Beinpaare ab. Von dem so erhaltenen, das Tympanalorgan bergenden 
Mittelstück wurden dann Flügel- und Sprungbeine dicht am Körper 
abgeschnitten, ferner Darm- und Geschlechtsorgane mit einer Pinzette 
herausgezogen und hierauf das Objekt in die Fixierungsflüssigkeit 
befördert. Das Tibialorgan der Locustiden und der Grillen ist sehr 
leicht zu isolieren, indem man einen Schnitt unmittelbar oberhalb des 
Knies durch den Femur und einen anderen unter dem Organ durch 
die Tibia macht. Störend bei der Fixierung ist die Luft, welche in 
den Tracheen zurückbleibt. Aus den Tibiapräparaten läßt sie sich 
leicht entfernen , indem man den Femurstumpf in der Fixierungs- 
flüssigkeit mit einer Pinzette zusammenpreßt und das am anderen 
Ende heraustretende Bläschen mit einem Pinsel aufnimmt. Von einer 
ähnlichen Behandlung der Acridierpräparate ist abzuraten , da das 
Organ bei Verletzung der Tracheenblasen leicht gezerrt und verlagert 
wird. Hier genügt es auch, die auf der Fixierungsflüssigkeit schwim- 
menden Objekte mit Hilfe eines Wattebäuschchens unterzutauchen. 



XXIV, 1. Referate. 59 

Speziell für Uiitersuchmigen der vorliegenden Art hält es Verf. für 
zweckmäßig, die Präparate so schnell wie möglich in Paraffin (Schmelz- 
punkt 58*^) zu bringen. Dadurch wird einmal vermieden, daß bei 
längerem Verweilen im Alkohol histologische Feinheiten durch Schrump- 
fung verloren gehen, anderseits konnte aber noch die Erfahrung ge- 
macht werden, daß bei Objekten, die längere Zeit im Alkohol blieben, 
das Chitin sehr spröde wird. Aus diesem Grunde ist anzuraten, diese 
Objekte möglichst bald in Paraffin einzubetten und so bis zur Unter- 
suchung aufzuheben. Um vollständig intakte Schnitte zu erhalten, 
sind zwei Punkte besonders zu beachten: man muß ein äußerst scharfes 
Messer verwenden und dann jeden einzelnen Schnitt vorsichtig mit 
dem Pinsel auffangen. Larven und frisch gehäutete Tiere bieten 
dem Messer überhaupt keine Schwierigkeiten. Erweichen des Chitins 
mit Eau de Javelle, Eau de Labarraque oder erwärmter Kalilauge 
hält Verf. nicht nur für unnötig, sondern auch für schädlich. Mehr 
Schwierigkeit als das Schneiden macht das sichere Aufkleben der 
Schnitte auf den Objektträger. Zu empfehlen ist nach den Angaben 
Hesse s die Schnittserien mit einer ^j^- bis ^/2prozentiger Lösung von 
Photoxylin in einem Gemisch aus gleichen Teilen absoluten Alkohol 
und Äther zu überziehen. Bei dünneren Schnitten kann man diese 
Prozedur nach der Befreiung der Schnitte von Paraffin vornehmen, 
bei dickeren ist es aber rätlich dieselbe schon vorher auszuführen. 
Die Entfernung des Photoxylinüberzuges ist unnötig, weil er beim Diffe- 
renzieren wieder vollständig entfärbt wird. Wenn es sich im zweiten 
Fall ereignet, daß bei der Paraffinbefreiung in Xylol eine weißliche 
Trübung auftritt, wodurch jene erschwert oder verhindert wird, so 
muß der Objektträger für einen Augenblick in absoluten Alkohol 
gebracht werden. Das Paraffin wird dann trotz des Photoxylin- 
überzuges fast ebenso schnell gelöst wie ohne denselben. Was die 
Fixierung des Materials betrifft, so wurde zum Teil in starker 
Flemming scher Flüssigkeit oder HERMANxNschem Gemisch fixiert (Ein- 
wirkungszeit 24 Stunden, dann Wässern 12 bis 24 Stunden) zum Teil 
aber auch mit sehr gutem Erfolg in Formol -Chrom -Essigsäure und 
Formol-Alkohol-Essigsäure bei einer Einwirkung von 6 bis 8 Stunden. 
Einfache wässerige Formollösung erwies sich als unbrauchbar. Zum 
Färben diente für Schnitte bis zu 10 ju Dicke Heidenhains Eisen- 
hämatoxylin, mit dem man nacii Fixierung in FLEMMiNoscher Flüssig- 
keit übrigens gute Neurofibrillenbilder erhält. Für dicke Schnitte 
und Totalpräparate leistete Ehrlich s alkoholische Hämatoxylinlösung 
gute Dienste. E. Sclioebel {Neapel). 



e 



60 Referate. XXIV, 1. 

Vejdowsky, F., Zur Hämocöltheorie (Zeitschr. f. wiss. Zool. 
Bd. LXXXII, 1905, p. 80—170 m. 5 Tfln.). 
Für die vorliegenden Untersuchungen dienten vornehmlich einige 
Oligochäten und Hirudineen. Zur Fixierung der Objekte diente fast 
ausschließlich „Chromsublimatmischung (1 pro mille)". [Was Verf. 
darunter versteht, ist kaum zu raten, vielleicht konzentrierte wässerige 
Sublimatlösung mit Zusatz von 1 pro mille Chromsäure. Diese un- 
genaue Angabe ist um so bedauerlicher, als die betreffende Mischung 
„sich vorzüglich zu den histologischen Untersuchungen des Gefäß- 
baues" eignen soll und weil alle Resultate, zu welchen Verf. bezüg- 
lich der feinsten Bauverhältnisse der Gefäßwandungen gelangt ist, 
nur dieser Fixierungsmethode zu verdanken waren. Ref.] Der Vor- 
teil der Methode liegt darin, daß die Objekte sich nur sehr wenig 
kontrahieren, der Körper meist gestreckt bleibt und eine Blutkoaku- 
lierung nicht eintritt. Die Objekte müssen aber wenigstens 24 Stunden 
in der Mischung bleiben, dann 24 Stunden in TOprozentigen Alkohol 
gelegt werden, um erst dann mit jodhaltigem 90prozentigen Alkohol 
behandelt zu werden. Von den Färbungsmitteln gab Eisenhämatoxylin 
und Eosin, Lichtgrün und Orange die besten Resultate. Bei guter 
Fixierung gab aber auch Pikrokarmin gute Färbungen. Die alveoläre 
Struktur der kontraktilen Substanz der Muskelfibrillen tritt aber ent- 
schieden am überzeugendsten nach der Färbung mit Eisenhäma- 
toxylin auf. E. ScJioebel (Neapel). 



B. Wirheitiere. 

Tallet, G., Note sur un procede simple de coloration 
des plaquettes du sang ou hematoblastes chez 
r hemme (C. R. Soc. Biol. Paris t. LX , 1906, no. 1, 
p. 12—23). 
Verf. macht darauf aufmerksam , daß man mit der Färbungs- 
methode von GiEJMSA , sowie mit dem Bleu de Marino und wahr- 
scheinlich auch mit den anderen Farbstoffen, welche zur Untersuchung 
der Trypanosomen und der Spirochaete der Syphilis empfohlen worden 
sind , auch die Blutplättchen gut zu färben vermag. Mit der Fär- 
bung von GiEMSA soll man auch den Kern dieser kleinen Gebilde 
gut darstellen können. 



XXIV, 1. Referate. 61 

Methode: Man breitet in dünner Schicht auf einem mit Äther 
gereinigten Deckgläschen das ans einer Stichwunde des Fingers aus- 
tretende Bhit aus , trocknet schnell, ohne stark zu erhitzen , fixiert 
mit absolutem Alkohol (1 Stunde), bringt dann auf das Gläschen 
eine hinreichende Quantität des Farbstoffes (10 Tropfen der Farb- 
lösung nach GiEMSA, bezogen von GntiBLER, auf 10 cc Wasser). Die 
Färbung geht schnell vor sich, so daß man nach einer Viertelstunde 
schon die Blutplättchen wahrnehmen kann , besser ist es aber, 
2 Stunden lang zu färben. Dann Auswaschen in fließendem Wasser, 
Abtrocknen mit Fließpapier und Untersuchung mit Immersionssystem 
(Vergrößerung von 1000 bis 1100 mit gutem Objektiv). Nach Verf. 
sind die erhaltenen Resultate genügend, auch wenn man sie mit Prä- 
paraten vergleicht, welche in Osmiumsäure fixiert worden sind. 

Seh ie ff erdecke r (Bonn). 

Yallet , G., Deuxifeme note sur la coloration despla- 
quettes du sang (CR. Soc. Biol. Paris t. LX, 1906, 
no. 3, p. 132—134). 
In einer früheren Mitteilung hat Verf. angegeben, daß die Giemsa- 
sehe Färbemethode eine Färbung der Blutplättchen erlaubt, bei der 
bestimmte Feinheiten ihres Baues hervortreten. In der vorliegenden 
Arbeit fügt Verf. noch die folgenden Beobachtungen zu. Bei der 
von ihm angegebenen Methode zeigen sich die Blutplättchen zahlreich 
und gut konserviert. Nun wird allgemein angegeben, daß den Blut- 
plättchen gerade die Eigenschaft zukommt, außerordentlich schnell zu 
zu zerfallen, sobald das Blut die Gefäße verlassen hat. Verf. meint, 
daß diese Ansicht deshalb entstanden sei, weil die bisherigen Färbe- 
methoden die Blutplättchen nicht genügend hervortreten ließen. Be- 
sonders ungünstig war dabei die Verwendung des Eosins als Grund- 
färbung, da dieses in einer etwas konzentrierten Lösung die Eigenschaft 
besitzt , die Färbung, welche die Blutplättchen durch die Kernfarb- 
stoffe (z. B. das Hämatein) erhalten, zum Verschwinden zu bringen. 
Man kann diesen Prozeß leicht unter dem Mikroskope verfolgen, selbst 
bei Kernen, welche nach Giemsa stark gefärbt worden sind. Um zu 
zeigen , wie widerstandsfähig die Blutplättchen sind , führt Verf. an, 
daß, wenn mau einen Blutstropfen und einen Wassertropfen mischt, 
man nach der Färbung noch die Blutplättchen erkennbar vorfindet 
inmitten der unkenntlich gewordenen roten Blutkörperchen. Die Blut- 
plättchen sind also leichter veränderlich als die Leukocyten , aber 
nicht so veränderlich , wie man geglaubt hat. Dasselbe gilt bis zu 



62 Referate. XXIV, 1. 

einem gewissen Grade für ihre Fälligkeit, sich zusammenzulegen. 
In den Präparaten von menschlichem Blute sind die meisten Blut- 
plättchen isoliert, nur selten findet man 2 oder 3 zusammenliegend. 
Ihre dritte interessante Eigenschaft ist ihre „Adhäsivität". Wenn 
man, ohne ihn auszubreiten, einen Blutstropfen auf einen Objektträger 
bringt und dann einen Wasserstrom über ihn hingehen läßt, so werden 
die Blutelemente fortgeschwemmt , mit Ausnahme der Blutplättchen, 
die man später fixieren und färben kann. Man findet sie später in 
großer Menge ziemlich regelmäßig verteilt in der Gegend, die mit 
dem Blute in Berührung gewesen ist. Alle die genannten Beobach- 
tungen können mit der vom Verf. angegebenen klinischen Methode 
ausgeführt werden. Verwendet man Osmiumsäure, so wird die Fär- 
bung der roten Blutkörperchen eine andere : an Stelle der hellgelben 
Färbung bei der Methode von Giemsa färben sie sich stark blau, 
während die Blutplättchen ihre gewöhnliche Färbung behalten. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Meves, F. , Zur Kenntnis der T h r o m b o c y t e n des Sala- 
manderblutes und ihres Verhaltens bei der Ge- 
rinnung (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 1906, 
p. 311—358 m. 6 Figg. u. 4 Tfln.). 
Die Veränderungen, die die Spindelzellen des Blutes außerhalb 
der Gefäße so außerordentlich rasch eingehen, lassen sich bekanntlich 
durch sogenannte indifferente Flüssigkeiten lange hintanhalten bezw. 
stark verlangsamen. Verf. wendet 0"8prozentige, d. i, mit dem 
Salamanderblut isotonische Kochsalzlösung (nach Dekkuuzen) in 
folgender Weise an: Er schneidet einem Salamander die Schwanz- 
spitze ab und spült den blutenden Stumpf kurz in einem Gefäß mit 
0*8prozentiger Kochsalzlösung ab. Die Lösung, welche der Wund- 
fläche nach dem Herausziehen des Stumpfes anhaften bleibt, ver- 
mischt sich sofort mit dem vorquellenden Blut und wird mit diesem 
zusammen auf einen Objektträger abgetupft und eingedeckt. Um 
die Spindelzellen in unverändertem Zustand zu fixieren, kann man 
dem Blute die von Hayem empfohlene PAciNische Flüssigkeit und 
Osmiumsäure zusetzen. Gute Fixierung und gleichzeitige Färbung 
erzielt man aber auch durch das von Dekkuuzen angegebene Osmium- 
Essigsäuregemisch , welches 6 Prozent kaltgesättigte, wässerige 
Methylenblaulösung (und etwas Säurefuchsin) enthält. Um Balsam- 
präparate gut erhaltener Spindelzellen zu gewinnen, breitet Verf. 
einen Tropfen Blut durch Schleuderbewegung auf dem Objektträger 



XXIV, l. 



Referate. 



63 



aus und stellt letzteren sofort in ein mit Fixierungsflüssigkeit gefülltes 
Glas. Die Veränderungen, welche an den Spindelzellen und in ihrer 
Umgebung im extravasierten Blut auftreten, wurden teils an frischen, 
mit Paraffin umrandeten, teils an fixierten Präparaten studiert. 
Letztere wurden in der Weise hergestellt, daß etwas Blut in nicht 
zu dünner Schicht auf einem Objektträger ausgestrichen und dieser 
sofort in eine feuchte Kammer für verschieden lange Zeit (einige 
Minuten bis zu mehreren Stunden) gebracht wurde, um dann sofort 
eventuell nach mehrmaligem Umherschwenken in der Luft, behufs 
Beschleunigung des Antrocknens der Ränder der geronnenen Blut- 
schicht in die Fixierungsflüssigkeit gestellt zu werden. Im einzelnen 
ist zur Technik dieser Untersuchung noch folgendes zu bemerken : 
In die feuchte Kammer kommt nicht Wasser, sondern die mit dem 
Blut isotonische O'Sprozentige Kochsalzlösung, welche den gleichen 




Dampfdruck wie jenes hat. Nimmt man Wasser, so muß das Blut 
Wasserdampf anziehen und absorbieren. Als feuchte Kammer hat 
Verf. zuerst eine Glasglocke verwandt, die innen mit Fließpapier aus- 
gekleidet war. Da aber nach dem Wiederaufsetzen der abgehobenen 
Glocke immer einige Zeit vergehen muß, bis der Luftraum mit 
Feuchtigkeit gesättigt ist, hat er sich später folgender Einrichtung 
bedient (s. Fig.). Ein Blechkasten von 14 cm Länge, 7'5 cm Breite 
und 5'5 cm Höhe trägt an einer der beiden langen Seitenwände 
eine dicke Metallplatte angelötet. Seitenwand und Metallplatte sind 
in halber Höhe des Kastens von einem horizontalen, 8'5 cm langen 
und zirka 4 mm hohen Spalt durchsetzt. In diesen ist ein Metall- 
balken, der an seiner unteren Seite eine horizontale, durchlöcherte, 
kreisförmige Scheibe trägt, möglichst genau, so daß mit Vaselin luft- 
dichter Abschluß zu erzielen ist, eingepasst. Metallbalken samt 
Scheibe sind um eine durch ihre Mitte gehende, senkrechte Achse 



64 Referate. XXIV, 1. 

drehbar. Der Kasten , welcher oben offen ist , wird , nachdem 
O'Sprozentige Kochsalszlösung bis zu zirka 1 cm Höhe eingefüllt ist, 
durch eine Glasplatte mit Hilfe von Vaselin luftdicht geschlossen 
und ist dann, sobald Feuchtigkeits-Sättigung im Innern eingetreten 
ist, zur Verwendung fertig. Man legt den mit frisch ausgestrichener 
Blutschicht versehenen Objektträger (Verf. benutzt das Gießener 
Format) auf die außerhalb des Kastens befindliche Hälfte der Scheibe 
(der Scheibenbalken schließt hierbei den Wandschlitz) und bringt 
diese dann mitsamt dem Objektträger durch eine Drehung um 180^ 
in das dampfgesättigte Innere. Die ganze Manipulation läßt sich 
sehr schnell vornehmen, so daß der Luftwechsel im Innern der 
Kammer nur sehr gering ist. Als Fixierungsflüssigkeit verwandte 
Verf. vorwiegend einprozentige Sublimatlösung oder das schwache 
FLEMMiNGSche Chromosuiiumessigsäuregemisch, beide mit Zusatz von 
1 Prozent Kochsalz. Nach Subliraatfixierung wurde meist mit Ehrlich- 
BiONDi scher Lösung gefärbt, nach Fixierung mit FLEMMiNGSchem Ge- 
misch mit Safranin kombiniert mit DELAFiELDSchem Hämatoxylin 
oder mit der Flemming sehen Safranin-Gentiana-Orange-Methode. Bei 
mit Chromosmiumessigsäure fixierten Präparaten ist es rätlich, nach 
der Färbung und Entwässerung in absolutem Alkohol nicht direkt in 
reines Xylol zu übertragen, sondern vorher in ein Gemisch von 
absolutem Alkohol und Xylol zu gleichen T«ilen. Auf diese Weise 
werden Zerreißungen der fixierten Blutschicht, welche sonst auf- 
treten, verhindert. Ein Vergleich der auf verschiedene Weise her- 
gestellten Präparate lehrt, daß Sublimat starke Schrumpfung bewirkt, 
im übrigen aber den wirklichen Zustand ziemlich getreu konserviert, 
während das Flemming sehe Gemisch meistens eine Quellung der 
Protoplasmafortsätze bewirkt, die im extravasierten Blut an den 
Spindelzellen auftreten. E. Schoebel (Neapel). 

Biclder, A., Osteobiologie (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 
1906, p. 137—21.3 m. 5 Tfln.). 
Die Skeletteile wurden sofort nach der Tötung der Tiere 
(Kaninchen, Meerschweinchen, Katze) in 4prozentiger Formalinlösung 
fixiert und nach gehöriger Auswässerung in 5- bis lOprozentiger 
Trichloressigsäure entkalkt, dann nach der üblichen Vorbereitung 
mit Celloidin behandelt und schließlich in Paraffin eingebettet. Die 
Schnitte wurden nach Entfettung entweder doppelt mit Böhmers 
Hämatoxylin und van Gieson scher Mischung oder einfach mit Borax- 
Carmin gefärbt. E. Schoebel (Neapel). 



XXIV, 1. Referate. , 65 

Retterer, Ed., Teclmuiue pour Tetude du tissu üöscux 
rougi par ralimentation garancee(C. R. Soc. Biol. 
Paris, t. LX, 1906, no. 2, p. 46—49). 
Verf. gibt die folgende Methode an, um dauerhafte Präparate 
von den Organen nacli Krappfärbuug zu erhalten. Nach dem Tode 
des Tieres werden die Membranen auf einem Objektträger ausgebreitet, 
schnell mit Alkohol entwässert, dann in trocknem Balsam aufgehoben. 
Die weichen Gewebe oder die Drüsen werden zerzupft oder aus freier 
Hand geschnitten. Die Sehnen, die Knorpel oder die noch nicht ver- 
kalkten Knochen können zwischen zwei Stücken von Holundermark 
geschnitten werden. Von verkalktem Knochen werden entweder dünne 
Schnitte mit dem Skalpell entnommen oder Sägeschnitte auf dem Stein 
geschliifen. Die Schnitte etc. werden rasch entwässert , dann in 
trocknem Kanadabalsam eingeschlossen : ein Stück Kanadabalsam wird 
auf dem Deckgläschen bis zum Auftreten von Luftblasen erhitzt; 
dann wird dieses mit einer Pinzette umgedreht und auf den Objekt- 
träger mit dem entwässerten Objekt gelegt, leicht angedrückt und 
rasch abgekühlt. Sckiefferdecker (Bonn). 

Betterer, Ed., Des colorations intra-vitales et post- 
vitales du tissu osseux (CR. Soc. Biol. Paris t. LX, 
1906, no. 3, p. 106—109). 
Außer mit Krapp hat Verf. mit Neutralrot, Methylenblau und 
Indigkarmin versucht, intravitale Färbung des Knochengewebes zu 
erhalten. Weiter hat er dieselben Farbstoffe auf den absterbenden 
Knochen und auf den frisch durch Reagentien fixierten einwirken 
lassen. L Intravitale Färbung. Verf. hat das Neutralrot und 
Methylenblau geradeso wie den Krapp den Meerschweinchen in der 
Kleie verfüttert. Weiter hat er das Methylenblau und den Indig- 
karmin auf den Schädelknochen des lebenden Meerschweinchens wirken 
lassen. Das Neutralrot wirkt wie der Krapp : der die Blutgefäße 
berührende Knochen wird rot. Die Knochenelemente , welche sich 
rot färben, sind: 1) die amorphe Substanz des Knochens; 2) das 
homogene Cytoplasma der Zellen; .3) das Hyaloplasma des Kerns. 
Die geformten Elemente des Knochens werden wenig oder gar nicht 
gefärbt. Das Methylenblau und der Indigkarmin verhalten sich anders. 
Sie färben die amorphe Knochensubstanz kaum. Das Methylenblau 
verleiht den geformten Elementen der Knocheuzelle einen dunkelblauen 
Ton, ebenso der Kapsel und den Fortsätzen derselben. Die amorphe 
Substanz des Knochens erscheint so durchsetzt von einem blauen 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 1. 5 



66 Referate. XXIV, 1. 

Netzwerk. Der Indigkarmin unter die Galea injiziert wird von dem 
Schädelknochen resorbiert und gibt die folgende Färbung : die amorphe 
Knochensubstanz wird orangegelb ; die Knochenzelle zeigt denselben 
Farbenton mit dunkelblaugrüner Punktierung oder einem dunkelblau- 
grünen Netze ; die Kapsel und die Fortsätze dieser erscheinen in 
einem sehr dunklen , zwischen blau und grün liegenden Tone. (In- 
jiziert mau Indigkarmin in den Lymphsack des Frosches, so ist die 
intravitale Färbung der Zellenfortsätze, der Kapsel und der Fortsätze 
dieser im Knochen ebenso deutlich.) Daß dieses wirklich intravitale 
Färbungen sind , geht daraus hervor , daß sie sofort verschwinden, 
wenn man mit der Zufuhr des Farbstoffes aufhört, ohne daß deshalb 
eine Nekrose des Knochens eintritt. Es geht aus den Untersuchungen 
des Verf. also hervor, daß alle Teile des Knochens als „lebend" 
anzusehen sind, M^enn auch in verschiedenem Grade. Die geformten 
Elemente (des Zellkernes, der Zelle und der Knochensubstanz) zeigen 
mehr Elektivität gegenüber dem Methylenblau und dem Indigkarmin, 
während die amorphen Substanzen (das Kernplasma, das Hyaloplasma 
der Zelle und die amorphe Knochensubstanz) mehr Affinität haben 
zu dem Krapp und dem Neutralrot. Nach Pfeffer liegt die Sache 
bei den Pflanzenzellen ebenso: die meisten Anilinfarben färben das 
lebende Cytoplasma ; das Methylenblau dagegen färbt das Cytoplasma 
nicht, solange dieses lebend ist, und färbt nur den Zellsaft. Weiter 
kann man aus den Untersuchungen ableiten , daß die intra vitalen 
Färbungen des Knochens einen Unterschied ergeben zwischen den 
Eigenschaften des Kernplasmas und denen der gef(U'mten Elemente 
des Kernes : das Hyaloplasma des Kernes verhält sich dem Krapp 
und dem Neutralrot gegenüber, wie das homogene Protoplasma der 
Zelle und die amorphe Knochensubstanz, während die Fäden und das 
Netz des Kernes das Methylenblau und den Indigkarmin nach Art 
der geformten Knochenelemente annehmen. — II. Postvitale Fär- 
bungen. Serres und Doyehe haben seinerzeit in die Brustmuskeln 
einer Taube, welche mit Krapp gefüttert wurde, Stücke von totem 
Knochen eingebracht. Am nächsten Tage herausgenommen erschienen 
diese Stücke an manchen Stellen ebenso rot gefärbt, wie das Skelett 
des Vogels. Sie schlössen daraus , daß in beiden Fällen die rote 
Farbe des Knochens von der Färbung herrührte. Um die Unter- 
schiede zwischen der Färbung des lebenden und des toten Knochens 
festzustellen, hat Verf. die folgenden Versuche angestellt: A. Ab- 
sterbendes Knochengewebe. Knochen von eben getöteten 
Tieren werden 24 Stunden lang gefärbt : 1) in einer mit Lithion ver- 



XXIV, 1. Referate. CT 

setzten Krapplösuiij;- ; 2) lli einer wässerigen Lösung- von Neutralrot; 
o) in einer wässerigen Lösung von jMetliylenbhiu. LTnter diesen Um- 
ständen färbt der Krapp , postvital , die amorphe Knocliensubstanz 
rot, ebenso wie das Hyaloplasma des Kernes und der Knoclienzelle. 
Die Kapsel und ihre Fortsätze bleiben ungefärbt. Das Neutralrot 
färbt die amorphe Knochensubstanz blaßrosa ; die Zelle und den Kern 
lebhaft rot; die Kapsel ist wenig deutlich, aber von jedem Ende 
derselben geht ein dunkelroter Fortsatz aus, der stärker gefärbt ist, 
als die amorphe Substanz. Das Methylenblau ergibt dieselbe Fär- 
bung wie die, welche Verf. erhalten hat nach Fixierung des frischen 
Knochens mit darauffolgender Färbung mittels Thionins und des To- 
luidinblaues fJourn. de TAnat. 1905 p. 569, tigg. 2 u. 8). B. Frischer 
Knochen fixiert in Alkohol. Das Neutralrot färbt die Knochen- 
zellen, die Kapsel und die Fortsätze dieser lebhaft rot. während die 
amorphe Knochensubstanz rosa oder orangerot wird. Krapplösung 
mit Lithionzusatz färbt die Zellen und die amorphe Knochensubstanz 
dunkelrotbraun , wobei die Kapsel und ihre Fortsätze noch etwas 
dunkler erscheinen. Das Methylenblau färbt den durch Alkohol 
taxierten Knochen so, wie den absterbenden Knochen. C. Frisch 
fixierter, dann entkalkter Knochen. Verf. liat schon in 
seiner oben zitierten Arbeit, p. 565, gezeigt, daß eine gute Fixierung 
mit darauffolgender progressiver oder regressiver Färbung die ge- 
formten Teile des Knochens hervortreten läßt und sie deutlich gegen 
die amorphen abhebt. Die so erhaltenen Bilder entsprechen in allen 
Punkten denen, welche die intravitalen Färbungen liefern. Diese 
Feststellung ist wichtig, da A. Fischer u. a. die verschiedenen Proto- 
plasmastrukturen auf die Einwirkung der Reagentien haben zurück- 
führen wollen. Man hat die geformten Elemente des Kernes als 
..Chromatin" bezeichnet wegen ihrer Aftinität zu r'arbstotfen. Aus 
demselben Grunde hat Verf. die geformten Elemente des Cytoplasmas 
als „chromophile Elemente" bezeichnet, um sie von dem homogenen 
Protoplasma zu unterscheiden. So geeignet diese Ausdrücke auch 
sind, um die Elemente bei den postvitalen Färbungen zu unterscheiden, 
so Avenig passen sie doch, nach dem oben Gesagten, für die intra- 
vitalen Färbungen, da sich bei diesen auch die amorphen Teile der 
Zelle und des Kernes färben. Man wird daher die Terminologie so 
ändern müssen, daß sie sownhl für die intravitalen wie für die post- 
vitalen Färbungen gilt. 

Schiefferdecker {Bonn). 



68 Referate. XXIV, 1. 

Oeder, R. , Die Entstehung der Munddrüsen und der 
Zahnleiste der Anuren (Zeitschr. f. Naturw. Bd . XLI, 
1906, p. 505—548 m. 14 Figg. u. 2 Tfln.). 
Zur Untersuchung dienten Larven von Bufo und Rana. Das 
Material wurde teils in Sublimat- Alkohol , teils in lOprozentiger 
Formollösung, teils in Flemming scher Flüssigkeit fixiert. Zur Ent- 
kalkung der mit Sublimat oder Formol fixierten Objekte kam bei 
jungen Tieren salzsaurer Alkohol, bei älteren schweflige Säure zur 
Verwendung. Stückfärbung wurde mit Boraxkarmin vorgenommen, 
Schnittfärbung, die übrigens den Vorzug erhielt, mit Hämatoxylin als 
Kern- und Eosin als Plasmafarben. Der Nachweis der ersten Spuren 
einer Differenzierung in den Zahnanlagen gelang gut durch Färbung 
mit Ammoniumrubinpikrat ; die Zahnbeingrundsubstanz nimmt dabei 
eine hochrote Färbung an, das Bindegewebe eine mehr blaurote. 

E. Schoebel {Neapel). 

Dogiel , A. S. , Die Endigungen der sensiblen Nerven 
in den Augenmuskeln und deren Sehnen beim 
Menschen und den Säugetieren (Arch. f. mikrosk. 
Anat. Bd. LXVIII, 1906, p. 501—524 m. 3 Tfln.). 
Die Darstellung der Nervenendigungen geschah in folgender 
Weise: Der Augapfel wurde mit sämtlichen Muskeln (bis dicht an 
ihre Anheftung an die Sehne des N. opticus) und dem umgebenden 
Fettgewebe aus der Orbita herauspräpariert. Nach sorgfältiger Ent- 
fernung des Fettgewebes von den Muskeln wurde das Auge je nach 
der Größe in eine mehr oder weniger tiefe Schale derart gelagert, 
..daß die geraden Augenmuskeln mit den an die Sklera sich an- 
heftenden Sehnen mehr oder weniger gespannt waren". Die äußere 
Oberfläche einer der geraden Muskeln und seiner Sehne wurde dann 
mit einer ^/g- bis ^/^^prozentigen Methylenblaulösung befeuchtet. Dar- 
auf wurde die Schale zugedeckt und für 1^/^ bis höchstens 2 Stunden 
in den Thermostaten von 36 bis 37^ C, gestellt. Während dieser 
Zeit müssen die Muskeln mehrere Male mit Methylenblaulösung be- 
feuchtet werden. Nach Ablauf der Färbezeit wurden die Muskeln 
mit den Sehnen abgeschnitten und für 24 Stunden in eine 5- oder 
Tprozentige Lösung von molybdänsaurem Ammonium eingelegt, dann 
3 bis 4 Stunden in destilliertem Wasser ausgewaschen. Dann wurden 
von der inneren Fläche der Muskeln vorsichtig kleine Stücke ab- 
geschnitten, sorgfältig ausgebreitet und mit Nadeln auf Kartonstücke 
gespannt, um so in absolutem Alkohol entwässert und nach Xylol- 



XXIV, 1. Referate. 69 

beliancllung- in Xylol - üamarhick oder Xylol- Kaiuidabalsam eiu- 
geschlosseii zu werden. E. Schoebel {Neapel). 

Warfwiug'e, E., Beiträge zur Kenntnis der spinalen und 
sympathischen Ganglienzellen des Frosches 
(Kana temporaria) (Arch. f. mikros. Anat. Bd. LXVIII, 
1906, p. 4:32—440 m. 1 Tri.). 
Zur Untersuchung- diente die neue Ramöx y CAjALsche Silber- 
niethode. Ein Teil der Ganglien wurde mit 96prozentigem , ein 
anderer mit 40prozentigem ammoniakalischem (2proz.) Alkohol fixiert. 
Zur Nachbehandlung wurde anfangs 7'5prozentige Silbernitratlösung 
während 6 bis 12 Tagen angewandt und dann mit Hydrochinon 
reduziert, und zwar bei einem Teil des Materials versuchsweise unter 
Zusatz von Soda und Natriumsulfit, wodurch eine wesentlich voll- 
ständige Reduktion erzielt wurde. Die mit 40prozentigem Alkohol 
fixierten Ganglien zeigten im allgemeinen günstigere Färbung als 
jene mit 96prozentigem fixierten. Ein weiterer Versuch mit Ver- 
stärkung der Silberuitratlösung auf 3 Prozent gab recht befriedigende 
Resultate, indem vollständigere und schärfere Färbung resultierte. 
Die Schnitte wurden schließlich mit Thiazinrot nachgefärbt, um deut- 
lich die protoplasmatischen Teile des Zellkörpers abzugrenzen und 
dadurch die Lage der Neurofibrillen innerhalb der Zelle sicher be- 
stimmen zu können. E. Schoebel (Neapel). 



Worthinauu, F., Beiträge zur Kenntnis der Nerve n- 
ausbreitung in Clitoris und Vagina (Arch. f. 
mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 1906, p. 122—136 m. 2 Tfln.). 
Das Untersuchsmaterial wurde meist von frischgeschlachteten 
Tieren, hauptsächlich Schweinen und Pferden genommen und der 
vitalen Methylenblaufärbung unterworfen. Die betreftenden Haut- 
stücke wurden zwischen Holundermark möglichst dünn geschnitten, 
und die Schnitte auf einem mit ganz schwacher, meist aus einer 
einprozentigen Stammlösung jedesmal, nach vorherigem Erwärmen 
derselben, frisch hergestellten ^/.^prozentigen Lösung von Methylen- 
blau in physiologischer Kochsalzlösung eben nur benetzten Objekt- 
träger ausgebreitet und dann für etwa 10 Minuten in den auf zirka 
35" C. gehaltenen Thermostaten gebracht. Falls dann die zwischen 
zwei Objektträgern mäßig breitgedrückten Schnitte bei schwacher 
Vergrößerung eine gute Färbung der dickeren Nervenstämme zeigten, 
wurden sie in eine 7*5prozentige wässerige Lösung von molybdän- 



70 Referate. XXIV, 1. 

saurem Ammonium eingelegt, andernfalls die Färbung noch 5 bis 
10 Minuten fortgesetzt. Ist auch dann noch nicht mit schwacher 
Vergrößerung eine Färbung zu sehen, so sind die Schnitte unbrauch- 
bar. Nach der 6- bis 8 stündigen Ammoniummolybdatbehandlung 
wurden die Schnitte 2 bis 4 Stunden in öfters gewechseltem destillierten 
Wasser gewaschen, dann möglichst rasch durch absoluten Alkohol 
entwässert, mit Xylol aufgehellt und in Canadabalsam eingeschlossen. 

E. ScJioebel (Neapel). 

Kose, W. , Die Paraganglien bei den Vögeln (Arch. f. 

mikrosk. Anat. Bd. LXIX, 1907, p. 56.3— 66.3 m. 1 Fig. 

u. 3 Tfln.). 
Die Erzielung einer deutlichen Gelbfärbung der chromaftinen 
Zellen ist zum Studium ihrer Verbreitung im Körper durchaus not- 
wendig. Deshalb wurde das ' meiste Material in Chromatlösungen 
taxiert. Die besten Resultate gab stets ein Gemisch von 9 Teilen 
MtJLLERSche Flüssigkeit und einem Teil käuflichen Formols, und fast 
ebensogute ein solches aus 9 Teilen einer Sprozentigen Kalium- 
bichromatlösung und einem Teil Formol. Erst in zweiter Linie sind zu 
nennen MüLLERSche Flüssigkeit -Eisessig (20:1), Kaliumbichromat- 
Eisessig (20:1), ZENicERsche Flüssigkeit, Sublimat -Kochsalzlösung 
und schließlich Cauxoys und Flemmings Gemisch. Reine Müli.eh- 
sche Flüssigkeit tixiert übrigens die chromaftinen Zellen auch nicht 
schlecht, reine Sprozentige Kaliumbichromatlösung dagegen gibt schon 
recht merkliche Schrumpfungen. Abgesehen davon , daß die Zell- 
formen in MüLLERScher Flüssigkeit -|- Formol am besten erhalten 
werden, verdient dieses Gemisch auch noch deshalb vorgezogen zu 
werden , weil erstens ein längeres Verweilen der Präparate in ihm 
— es wurde meist 3 bis 10 Tage darin fixiert — nicht schadet 
und zweitens sämtliche Färbungen nachher gut gelingen. Kalium- 
bichromat - Formol verhält sich diesbezüglich ähnlich. Die Fixation 
mit Sublimat -Kochsalz oder absolutem Alkohol vereitelt oft voll- 
ständig jede Bindegewebsfärbung. Ein Nachteil aller Essigsäure ent- 
haltenden Mischungen, die sich aber zum Studium der Plasmastruk- 
turen manchmal recht vorteilhaft erweisen, ist die dabei auftretende 
vollkommene oder doch fast vollkommene F'arblosigkeit der chromaffineu 
Zellen. Sämtliche Präparate wurden während der ganzen Behand- 
lung bis zum Einlegen in Paraffin in vollständiger Dunkelheit ge- 
halten. Zum Durchfärben der ganzen Stücke kam im wesentlichen 
entweder Alaunkochenille oder verdünntes Hämalaun (2 bis 3 Teile 



XXIV, 1. Referate. 7 j 

Farbe, eiu Teil destilliertes Wasser) zur Verweiulung, zur P'ärbung 
einzelner Schnitte für allgemeine Orientierung Hämatoxylin-pjOsin 
oder Hämatoxylin- Pikrinsäure. Außerdem wurden noch ausgiebig 
für spezielle Zwecke typische Kern- und Plasniafarbstorte , ferner 
spezilische J^ärbungen für Bindegewebe und elastische Fasern und 
die vitale Methylenblautinktion benutzt. Fixierung der letzteren für 
ParafHneinbettung gelang nie. Zur Vervollständigung der angewandten 
Untersuchsmethoden wurden auch Verdaungsversuche mit Pankreatin- 
glyzerin und Pepsinglyzerin von (iuüBLEK angestellt. Beide Lösungen 
wurden mit O'Sprozentiger Soda- oder Salzsäurelösung verdünnt. Die 
Paraganglia suprarenalia, von denen die zur Verdauung bestimmten 
Schnitte stammten , waren entweder in absolutem Alkohol , O"0:!i)ro- 
zentiger Chromsäurelösung, Sublimat -Kochsalzlösung, oder in Mülleu- 
scher Flüssigkeit -j- Formol fixiert. Die mit Eiweißglyzerin oder 
Wasser aufgeklebten Schnitte wurden zunächst in Benzin zweimal 
24 Stunden im Thermostat bei einer Temperatur von 40^ C. ent- 
fettet und dann erst in die Verdauungsflüssigkeit im Thermostat von 
;!7 bis 40*^ C. für ein- oder zweimal 24, seltner dreimal 24 Stunden 
eingelegt. Die nachfolgende Färbung dieser Schnitte erfolgte ent- 
weder mit Eisenhämatoxylin und mit verschieden spezitischen Binde- 
gewebsfärbmethoden. E. Schoebel (Neapel). 

Kopsch, F., Kleinere Mitteilungen zur mikroskopischen 
Technik (Intern. Monatsschr. f. Anat. u. Phys. Bd. XXIII, 
1906, p. 359—360). 
1) Die Färbung der Thrombocy tenkerne des Men- 
schenblutes im Bluttrockenprä parat. Dieselbe gelingt 
leicht bei übrigens recht bequemer Ausfülirung mittels Thionin und 
man erhält damit auch recht übersichtliche Bilder, wenn man mit 
Pikrinsäure nachfärbt. Die Herstellung der Präparate geht in fol- 
gender Weise vor sich : Das auf irgendeine Art fixierte Bluttrocken- 
präparat kommt auf kurze Zeit in konzentrierte wässerige Thionin- 
lösung. Der Überschuß der Farbe wird durch Abspülen des Prä- 
parates in Wasser entfernt ; dann erfolgt Färbung in halbgesättigter 
Losung von Pikrinsäure, erneutes Abspülen in Wasser, Trocknen, 
Einschluß in Kanadabalsam. Die Kerne der Leukocyten sind schwarz- 
blau, die der Thrombocyten hellblau gefärbt, die Erythrocyten , der 
Zelleib der Leukocyten und Thrombocyten sind gelb. Was die Halt- 
barkeit betrifft , ist zu erwähnen , daß 2 Jahre alte Präparate noch 
nichts an Intensität der Färbung eingebüßt zu haben scheinen. 



72 Referate. XXI Y, 1. 

2) Herstellung von Kurspräparaten aus ver- 
silberter Lunge. Hierbei gestaltet sich das Verfahren folgender- 
maßen: Ein kleines Tier wird durch Kopfabschneiden getötet. Die 
Lunge wird herausgenommen, durch die Trachea mit 0"25prozentiger 
Silbernitratlösung gefüllt und in eine entsprechende Menge derselben 
Silberlösung auf 12 bis 24 Stunden im Dunkeln eingelegt. Nach 
dieser Zeit legt man die ganze Lunge oder einzelne Teile in eine 
dünne Formollösuug, nämlich 3 bis 5 cc des käuflichen Formols auf 
100 Wasser. In diese diffundiert die noch nicht verbrauchte Silber- 
lösung und wird vom Formol reduziert. Die dadurch trübe ge- 
wordene Lösung wird nach einer Stunde abgegossen und durch 
frische Lösung ersetzt, in welcher die Objekte 12 bis 24 Stunden 
und länger bleiben. Danach werden mit dem Gefriermikrotoni 
Schnitte angefertigt und diese zur definitiven Reduktion des Silber- 
albuminates in destilliertem Wasser ans Licht gestellt. Zum Schluß 
werden die Schnitte auf dem Objektträger entwässert, aufgehellt und 
in Kanadabalsam eingeschlossen. E. Schoehel {Neapel). 

Bürger, 0., Die Brutpflege von Rhino derma Darwinii 
D. B. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXXH, 1905, p. 230 
—251 m. 3 Tfln.). 
Das Material war teils in Alkohol konserviert , teils wurde es 
mit siedendem Wasser zur Erstarrung gebracht, und zwar „litt durch 
dieses Verfahren die innere Blutzirkulatiou nicht". Ein Teil so be- 
handelter Frösche wurde schließlich in einprozentiger Platinchlorid- 
lösung fixiert. Rhinoderma läßt sich im allgemeinen mit dem Mikro- 
tom verarbeiten, ohne daß eine Entkalkung nötig wäre. 

E. Schoehel {Neapel). 



C. JBakterien, 

Kayser , H., Eine Fixier ungsmethode für die Darstel- 
lung von Bakterienkapseln (Zentralbl. f. Bakteriol. 
Abt. 1, Orig. Bd. XLI, 1906, p. 138). 
Verf. beschreibt folgende von Weidenreich vorgeschlagene Fixie- 
rungsmethode. Die zu untersuchenden Bakterien werden auf Objekt- 
träger ausgestrichen und zur Fixierung Dämpfen einer einprozentigen 
Osmiumsäurelösung, der Eisessig zugefügt ist (10 Tropfen Eisessig 



XXIV, 1. Referate. 73 

auf o cc Säure), ausgesetzt. Nach 2 bis 3 läßt man die Präparate 
lufttrockeu werden, bedeckt sie dann 1 Minute lang mit einer sehr 
dünnen, wässrigen Kaliumpermanganatlösung und spült darauf in 
Wasser ab. Nun folgt die Färbung der Kapseln. Vor dem Belegen 
der Objektträger werden diese eine Zeitlang den Osmiumsäuredämpfen 
ausgesetzt. Freund (Halle a. S.). 

Uaillii), A., Beobachtungen über Bakterienkapseln auf 
Grund der \Ve iDENREicHSchen Fixationsmethode 
(Zeutralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLIII , 1907, 
p. 287). 

Verf. empfiehlt, sich zur Darstellung von Bakterienkapseln der 
Weidenreich sehen Fixationsmethode (vgl. das vorige Referat) in folgen- 
der Abänderung zu bedienen. Verf. fixiert nur mit reinen Osmium- 
säuredämpfen ohne Zusatz von Essigsäure. Ein Abspülen mit Kalium 
hypermanganicum ist bei nur 30 bis 40 Minuten währender Fixation 
unnötig. Ferner weist Verf. darauf hin , daß eine Vorbehandlung 
der Gläser mit Osmiumsäure „nur dann Zweck hat, wenn das Unter- 
suchungsmaterial (Blut) sofort darauf ausgestrichen und fixiert werden 
kann". Muß das Material erst auf dem Deckglas selbst verteilt 
werden, so ist von einer Osmierung abzusehen. 

Als Behälter für die Osmiumsäuredämpfe benutzte Verf. die von 
Levy modifizierten Petrischalen, welche doppelt so hocli sind wie 
gewöhnliche Petrischalen und die durch einen Gummiring seitlich 
luftdicht verschlossen werden können. Als Fixationsgefäß eignet sich 
auch folgende „Fixationsröhre", die aus einem Glasrohr besteht, 
welches an der einen Seite eine abgesetzte Kuppe besitzt und an der 
anderen durch einen eingeschlitfenen Glasstöpsel verschließbar ist. 
Die Kuppe wird mit Watte gefüllt , welche mit einer Lösung von 
Osmiumtetroxyd in einprozentiger Chromsäure getränkt wird. Die be- 
queme Handhabung dürfte die Röhre für Blutuntersuchungen am 
Krankenbett geeignet machen. 

Als Ausstrichmedium beim Belegen der Gläser benutzte Verf. 
Ascites-Flüssigkeit oder Blutserum. Für die Färbung der Kapseln 
bewährte sich besonders die GiEiisAsche Farblösung (10 bis 15 
Minuten laug einen Tropfen Stamralösung Grübler auf 1 cc Wasser), 
während der letzten 3 bis 5 Minuten leichtes Erwärmen. 

Um auch in ungefärbtem Zustande die Kapseln beobachten zu 
können, verteilte Verf. Kulturmaterial in einen Tropfen 10 prozentige 
CoUargoUösung. Hervorzuheben ist noch, daß Verf. betont, daß es 



74 Referate. XX n, 1. 

sich in den Fällen, wo Kapseln mit Hilfe der Boni sehen Methode 
(vg'l, diese Zeitschr. Bd. XVIII) nachgewiesen werden , um Kunst- 
produkte, hervorgerufen durch Quellung des Ektoplasmas, nicht aber 
um echte Kapseln handelt. Freund (Halle a. S.). 

Spengler, C, Z u r F o r m a 1 d e h y d - A b t ö t u n g u n d - Z ü c h t u n g 

der Tuberkel- und anderer säurefester Bazillen. 

Anti kr i tis ch e Bemerkungen zu Prof. Keichen- 

BACHS Arbeit: „Die Leistungen der Formal- 

deh yddesinf e ktion" (Zeitschr. f. Hygiene u. Infektions- 

krankh. Bd. LI, 1905, p. 335;. 

Speili^Ier, C, Die S p r e n g z ü c h t u n g der T u b e r k e 1 b a z i 1 1 e n 

aus Sputum (Ibid. p. 339; Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol, 

Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1906, p. 22). 

Verf. emptiehlt zur Reinzüchtung von Tuberkelbazillen und 

anderen säurefesten Bazillen die Eigenschaft dieser Organismen, gegen 

Formaldehyd resistenter als andere Bakterien zu sein , zu benutzen. 

„Wenn man 10 Tropfen Formalin (0*5 g) vom Sclialendeckel einer 

Petrischale aus ^/^ Stunde bei 20^ auf das in der unteren Schale 

befindliche Sputum einwirken läßt , so entwickeln sich ausnahmslos 

zugemengte Tuberkel- oder Perlsucht- oder Smegmabazillen in den 

Kulturen; alle übrigen Bakterien aber im Sputum sind abgetötet.'' 

Handelt es sich um Züchtung der Tuberkelbazillen aus geballten 

Phthisikersputa, so empHehlt es sich, die Begleitbakterien durch Hitze 

zu zerstören. 

Für dünnflüssige, schleimige oder blutige Sputa ist die zuerst 
angeführte Züchtungsmethode vorzuziehen. Freund {Halle a. S.). 

Zelikow, J., Quantitative Bestimmung der Bakterial- 
m a s s e durch die k o 1 o r i m e t r i s c h e Methode 
(Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLII, 1906, 
p. 476). 
Verf. schlägt vor, zur quantitativen Bestimmung einer Bakterien- 
menge den Umstand zu verwerten , daß durch die Absorption der 
Farbe aus einer Farbstofflösung seitens der Bakterien die Konzen- 
tration der Farblösung in der Weise verändert wird , daß „bei ge- 
nügender Dauer der Durchfärbung und gleicher Konzentration der 
Farbstofflösung die Menge des absorbierten Farbstoffes der Menge 
der Bakterienkörper, d. h. der Bakterialmasse proportional sein muß". 
Mit Hilfe eines Kolorimeters (Verf. benutzte das Kolorimeter von 



XXIV, 1. Kcfcrate. 



<i> 



DüBOSc) läßt sich der Unterschied zwischen der Intensität der Farbe 
einer bakterienenthultenden und derselben bakterienfreien Lösung fest- 
stellen , und aus der Differenz kann man auf die Bakterienmenge 
schließen. Natürlich müssen in beiden Flüssigkeiten gleiche Farb- 
stotfmengen gelöst werden. Freund {Halle a. S.). 

SorgO , Über die Verwendbarkeit des F o r ni a 1 d e h y d s 

zur Anreicherung der T u b e r k e 1 b a z i 1 1 e n im 

Sputum (Zeitschr. f. Tuberkulose Bd. VI. Heft 6: Kef. 

im Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 190G, 

p. 71). 

Nach Verf. ist „die Spengler sehe Formalinbehandlung nicht 

geeignet, eine sichere Anreicherung der Tuberkelbazillen, geschweige 

denn eine Reinkultivierung derselben zu ermöglichen". 

Freund (Halle a. S). 

A'olpino, G., u. Foutana, A., Einige Voruntersuchungen 

über künstliche Kultivierung der S p i r o c h a e t e 

pallida [Schaud.] (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. 

Bd. XLII, 1906, p. 666). 

Die Vorversucne über künstliche Kultur der Spirochaete pallida, 

die Vertf. mitteilen, dürften auf weitgehendes Interesse stoßen. Vertf. 

konnten dadurch eine reichliche Vermehrung der Spirochäten in 

kranken Gewebsstücken künstlich erzielen, daß sie kleine Stücke von 

feuchten Papeln oder von Primäratfekten von lebenden Individuen 

ausschnitten und in verschiedene Flüssigkeiten (steriles menschliches 

Blut, steriles menschliches Blut mit Zusatz von Xatronzitratlösung, 

Blutserum, Ascites-Flüssigkeit, Ascites -Flüssigkeit mit 20prozentigem 

Fischleim versetzt, durch Kochen von Kalbsfüßen erhaltene Gelatine, 

mit Traubenzucker versetzte Kalbsgelatine j in einen Brutofen bei o~i^ 

brachten. Die gleichzeitige starke Entwicklung anderer, die Haut 

bewohnender Organismen konnte weder die Spirochäten schädigen, 

noch ihre Anreicherung hemmen. 

Durch derartige Kultur (Ascites-Flüssigkeit mit und ohne Gelatine) 
gelaug es den Verff., auch in solchen Gewebsstücken i feuchte Papeln, 
Initialsklerosen), in denen sich durch mehrfache mikroskopische l'nter- 
suchung keine Spirochäten nachweisen ließen, die Entwicklung dieser 
Organismen anzuregen, so daß nach einigen Tagen auch in diesen 
Gewebsstücken Spirochäten gefunden wurden. 

Es sei hervorgehoben, daß in einigen wenigen Fällen Vertl". auch 



76 Referate. XXIV, 1. 

eine Übertragung der Spirochäten von kranken auf danebenliegende 
gesunde Gewebsschnitzel beobachteten. Weitere Übertragungsversuche 
schhigen fehl. 

Zum Nachweis der Spirochäten wandten Vertf. neben anderen 
bekannten Methoden noch folgende Abänderung der Nicolle-Morax- 
schen Methode zur Darstellung der Bakterienzilien an. „Auf die in 
der gewöhnlichen Weise vorbereiteten Deckgläschen gießt man 
einen Tropfen einer 20 prozentigen wässrigen Lösung von Weinsäure, 
erwärmt durch 2 bis 3 Minuten bis zur Entwicklung von Dämpfen, 
gießt die Säure ab, wäscht rasch und färbt mit ZiEHLschem Fuchsin 
unter Erwärmen durch weitere 2 bis 3 Minuten. Man wäscht, trocknet 
und schließt in Kanadabalsam ein. Freund (Halle a. S.). 

Forest, M., Beitrag zur Morphologie der Spirochaete 
pallida [Treponema pallidum Schaudinn] (Zentralbl. 
f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLII, 1906, p. 608). 
Verf. empfiehlt, bei der Giemsa- Färbung von Spirochaete pallida 
folgendermaßen zu verfahren. Nachdem man feucht die Ausstrich- 
präparate in Osmium- oder Formalindämpfeu nach Weidenreich 
fixiert hat, wird mit GiEMSA-Lösuug (10 bis 15 Tropfen auf 10 cc 
dest. Wassers) 12 bis 16 Stunden lang gefärbt. „Nötig ist nun, 
daß während der letzten halben Stunde die Farbflüssigkeit gerade 
bis zum Dampfen erwärmt wird ; darauf folgt Abspülung in fließendem 
Wasser gute 2 Minuten lang. Aufkochen der Farblösung verdirbt 
die Präparate vollständig." Der Vorteil der angegebenen Methodik 
soll darin bestehen , daß eine allgemein intensivere Färbung als in 
gewöhnlichen Giemsa- Präparaten erzielt wird. Die Spirochaete 
pallida, die bei Giemsa- Färbung nur einen blassen Ton annimmt, 
wird intensiv rot gefärbt. Auch die Geißeln werden deutlich sichtbar. 
Bei Unsichei'heit in der Diagnose scheint es Verf. zweckmäßig, 
„neben den Giemsa -Präparaten ein Präparat mit verdünntem Karbol- 
fuchsin oder Gentianaviolett in der Kälte etwa eine Minute zu färben. 
Dann färben sich die anderen in Betracht kommenden Spirochäten 
besser wde mit Giemsa, die Pallida verschwindet." 

Freund (Halle a. S.). 

Laiidsteiner, K., u. Mucha, V., Zur Technik der Spirochäteu- 

untersuchung (Wiener klin. Wochenschr. 1906, No. 45). 

Nach Verff. ist für die Untersuchung auf Spirochaete pallida 

die Beobachtung bei Dunkelfeldbeleuchtung von besonderem Wert. 



XXIV, 1. Referate. 



Verff. verwandten bei ihren Arbeiten einen von Reicheut in Wien 
hergestellten Kondensor. Als Lichtquelle wurde eine 2() Ampere- 
Bogenlampe benutzt. „Als zweckmiißigste Linsenkombination erwies 
sich die Verwendung eines mittelstarken Trockenobjektivs (Reichert 
No. 5) in Verbindung mit einem Kompensationsokular No. 18." Das 
Sekret, welches untersucht werden soll, wird in dünner Schicht 
zwischen Deckglas und Objektträger ausgebreitet und vor Aus- 
trocknung geschützt. Die Spirochäten erscheinen in ihrer charakte- 
ristischen Form hell beleuchtet neben den sehr hellen größeren Ge- 
websbestandteilen und neben vielen z. T. ultramikroskopischen sich 
lebhaft bewegenden Teilchen. Freund {Halle a. S.). 

Ritcliic, The w a x o f t u b e r c 1 e b a c i 1 1 i in r e 1 a t i o n t o t h e i r 
acid resistance (Journ. of pathol. a. bacteriol. vol. X, 
1905, p. 334; Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. 
Bd. XXXIX, 1906, p. 13). 
In Tuberkelbazillen, einigen säurefesten und in einigen nicht 
säurefesten Bakterien, besonders Diphtherie- und Milzbrandbazillen 
ließen sich fett- oder wachsartige Substanzen durch Osmiumsäure, 
Sudan III und Scharlach -Rot nachweisen. Die Tuberkelbazillen, die 
sich besonders reich an Fett zeigten, färbten sich nur in Kulturen, 
nicht in Ausstrichpräparaten. Kulturen von Microc. pyog. aureus, 
Microc. tetragenus , Bac. subtilis u. B. necrosus nahmen keine Fär- 
bung an. Die Tuberkelbazillen verlieren ihre Säurefestigkeit nach 
Behandlung mit kochendem Xylol oder Toluol und nach längerer 
Einwirkung von kochendem Benzol und kochender ARONSONScher 
Mischung (Ale. abs. 25 cc , Äther 225 cc, HCl 1 cc). Behandlung 
mit kochendem Äther, Chloroform oder Chloroforraäther und mit Alkohol 
und Chloralhydrat beeinflußt die Säurebeständigkeit dieser Bazillen 
nicht, ebensowenig das Behandeln mit Eau de Javelle oder aOprozen- 
tiger Liq. Sodae. Freund {Halle a. S.). 

Yiiicent, M. H., Recherches sur lesmicrobesanaerobies 
des e a u X. C o n t r i b u t i o n a T e t u d e b a c t e r i o 1 o - 
gique des eaux potables (Ann. de ITnst. Pasteuu, 
t. XXI, 1907, p. 62). 
Zur Züchtung der Anaerobenbakterien des Wassers benutzt 
Verf. folgendes Medium: Gelatine 50 bis 75 g, Glykose 5 g, Gly- 
zerin 5 g, Pepton- Bouillon 500 cc (neutralisieren). 

Nachdem der Nährboden mit dem zu untersuchenden Wasser 



78 Referate. XXIV, 1. 

versetzt ist , wird er in feine Glasröhrchen eingesaugt. Vorm Ge- 
brauch ist dem Nährmedium eine genügende Menge Indigokarmin 
zuzufügen. Zur Isolierung anaerober Bakterien der Gattung T^yro- 
thrix (DuCLAux) ist außerdem 15 bis 20 Prozent abgerahmte Milch 
zuzusetzen. Der vom Verf. empfohlene Nährboden bietet den Vorteil 
dar, daß er die Unterscheidung von typischen und fakultativen Anae- 
roben leicht und schon bei der ersten Kultur ermöglicht. Während 
die fakultativen Anaeroben, undurchsichtige weiße oder graue, scharf 
konturierte Kolonien bilden , sind die Kolonien der typischen Anae- 
roben nicht scharf begrenzt, leicht, wolkig und flockig. Einige Anae- 
roben liefern kaum sichtbare Kolonien und sind nur infolge der 
schwachen Entfärbung der Gelatine zu erkennen. 

Freund (Halle a. S.). 

Sticker, G., Organabdrücke. Ein Ersatz für Organ- 
schnitte (Zeutralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLIII, 
1907, p. 206). 

In Fällen, wo eine schnelle Prüfung von Organstücken auf Bak- 
terien nötig und eine Herstellung von Organschnitten zu umständlich 
ist , empfiehlt Verf. Abdrücke von Organen zu nehmen. Nachdem 
man sich eine glatte Schnittfläche an den Organen hergestellt hat, 
wird ein Objektträger ohne Verschiebung leicht auf die Fläche auf- 
gedrückt. Die Abdrücke gelingen gut , wenn die Organe nicht zu 
feucht sind, sonst muß man die Schnittfläche durch Eintrocknen oder 
durch Einlegen in Alkohol oder Formol erst vorbereiten. Das Blut- 
färbungsverfahren von May und Gruxwald (vgl. diese Zeitschr. 
Bd. XXI, 1904, p. 361) hat sich bei der Färbung solcher Organ- 
abdrücke bewährt. Bei Anwendung anderer Färbemethoden muß 
natürlich vorher fixiert werden. 

Die Anordnung der Gewebselemente und der Mikroben auf den 
Abdrücken entspricht der Anordnung in den Organen. 

Freimd (Halle a. S.). 

Uy etla , Ein neuer Nährboden für B a k t e r i e n k u 1 1 u r e n 
(Bull, of the Imp. centr. agr. exp. stat. Japan vol. 1, 1906. 
p. 59 ; Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1 , Ref. Bd. 
XXXIX, 1907, p. 300). 
Verf. machte mit Mannan, das aus den Wurzeln der Konjaku- 
pflanze (Conophallus Konjak) gewonnen wird, als Nährboden für Bak- 
terien gute Erfahrungen. „Die Konjakutafeln werden entweder ganz 



XXIV, 1. Referate. 79 

sterilisiert und wie Kartotielsclieiben verwandt, oder aber das Maiinan 
wird in üblicher Weise als Erstarrungsmittel zu Bouillon etc. hinzu- 
gegeben," Freund {Halle a. S.). 



D. Botanisches. 

3Ieyer, A., Erstes mikroskopisches Praktikum. Eine 
E i n f ü li r u n g in den Gebrauch des Mikroskop .s 
und in die Anatomie der h ö h e r e n Pflanzen. 
Zum Gebrauche in den botanischen Laboratorien und zum 
Selbstunterrichte. Für Botaniker, Chemiker, Pharmazeuten, 
Studirende des höheren Lehramtes, Zoologen. 2., um- 
gearbeitete Auflage; 82 Abb. Jena (G. Fischer) 1907; 
221 pp. 5 M., geb. G M. 

Die zweite Auflage des MEYERSchcn Praktikums, auf deren Er- 
scheinen hier aufmerksam zu machen ist , leitet mit unverkennbarer 
Gründlichkeit zum mikroskopischen .Sehen, zum Anfertigen und wissen- 
schaftlichen Verständnis botanisch-mikroskopischer Objekte an. Neben 
der Zellen- und Gewebemorphologie kommt auch die Mikrochemie 
zu ihrem Recht. Dabei wählt Verf. vielfach Objekte für seine Be- 
sprechungen, die nicht zu den allgemein üblichen gehi>ren, und das 
Repertoire der in den Laboratorien gebräuchlichen erweitern helfen. 
Da sich Verf. auf die „Anatomie der höheren Pflanzen" be- 
schränkt , bleiben nicht nur die Kryptogamen , sondern auch die 
Gymnospermen aus dem Spiele : über die Struktur des Gymnospermen- 
holzes, über Harzgänge u. a. m. gibt das Buch dalier keine Auskunft. 
Die Kürze mancher Abschnitte rechtfertigt sich durch die Auf- 
gabe des Buches, vor allem den Anfänger in die botanische Wissen- 
schaft einzuführen : in den Anmerkungen kommt Verf. mit größerer 
Ausführlichkeit, als sie dem Anfänger im allgemeinen erwünscht sein 
wird, auf einige Spezialfragen zu sprechen. 

Küster [Halle a. S.). 

Kohl, F. G. , i'ber das Glykogen und einige Erschei- 
nungen bei der S p r u 1 a t i o n der Hefe (Ber. d . d . 
botau. Ges. P,d. XXV, 1907, H. 2, p. 74). 
Der Kern der Hefezelle ist an ungefärbtem Material schwer 

wahrzunehmen. Behandelt man Hefezellen mit .Todjodkalilösung, so 



80 Referate. XXIV, 1. 

wird er sofort siclitbar: liegt er im optischen Querscluütt, „so ragt 
er mit elegantem Kontur in den braunen Vakuoleninhalt als farb- 
lose, glasklare Masse hinein; liegt er an der oberen oder unteren 
Seite der Zelle , so sieht man den Kern als meist runden oder 
elliptischen, weißen Fleck die braune Färbung unterbrechen". Das 
geübte Auge findet auch die Einschlüsse des Zellkernes leicht, den 
Nukleolus und 1 bis 2 Eiweißkrystalloide. — Nach Zusatz von Jod- 
jodkalium erweisen sich oft nicht alle Vakuolen einer Zelle, sondern 
nur eine oder mehrere als Glykogen-haltig. 

Die Sporenmutterzellen haben nach Kohl vor der Sporulation 
einen hohen Fettgehalt : während der Sporulation erscheint auch ein 
wenig Fett in den jungen Sporen. Außerdem sind die Sporenmutter- 
zellen reich an Glykogen , welches aber während der Sporenbildung 
verschwindet. Mit Sudan III läßt sich der Fettgehalt der Sporen- 
mutterzellen leicht nachweisen. Wendet man gleichzeitig noch Löfflers 
Methylenblau an, so nehmen die Eiweißkristalloide häufig eine violette 
Färbung an, während die Fetttropfen orangerot bleiben. Bei der 
Sporenbildung breitet sich nach Verf. das Fett über den jungen 
Sporen aus, so daß diese in einer Fettschicht eingehüllt sind. ^ erf. 
vermutet hierin den Grund für die auffallend ungleiche Tinktions- 
fähigkeit der Sporen ; selbst die Sporen einer Hefezelle können sich 
den angewandten Färbemitteln gegenüber ganz verschieden verhalten. 
Vorbehandlung mit Chloroform vermindert die Ungleichheit in der 
Färbbarkeit der Sporen merklich , vermag sie aber nicht ganz zu 
beseitigen. 

Für die Kernfärbung bevorzugt Kohl die Eisenammoniakalaun- 
Hämatoxylin- , sowie die Säurefuchsinmethode ; doch ist auch das 
Gram sehe Verfahren für viele Zwecke nicht zu entbehren. 

Küster {Halle a. S.). 

Chamberlaiu, Cli. J., The o v u 1 e and f e m a 1 e g a m e t o p h y t e 
of Dioon (Bot. Gaz. vol. XLII, p. 321 — 358, 9 Textfiguren, 
pls. 13—15, November 1906). 
Zum Fixieren hat Verf. meistens Chroniessigsäure mit oder ohne 
Zusatz von Osmiumsäure angewandt. Für Pollenschläuche imd junge 
Samenknospen wurde folgende Lösung gebraucht : Chromsäure 1 g, 
Eisessig 4 cc, einprozentige Osmiumsäurelösung 2 cc, Wasser 100 cc. 
Diese Lösung dringt in die Mikrosporangien nicht ein und ihr Ge- 
brauch ist für ältere Samenknospen nicht zu empfehlen wegen der 
Plasmolysierung der Zellen und der Härtung des Endosperms. Dafür 



XXIV, 1. Referate. 81 

wurde folgende Lösung empfohlen: öOprozentiger Alkohol 100 cc, 
käufliches (40prozentiges) Formalin 6 cc (nach der Formel von 
Dr. Lynde Jones). Diese dringt schnell ein und fixiert gut. Nach 
ihrer Anwendung kann man durch Eisenalaunhämatoxylin sehr gut, 
mit Safranin-Geutianaviolett-Orange nicht so gut wie nach Fixieren mit 
chromsäurelialtigen Lösungen färben. Magdalarot mit Anilinblau färben 
den Pollenschlauch gut. Ernst A. Bessey {Miami). 

Simons, E. B. , A morphological study of Sargassum 
filipendula (Bot. Gaz. vol.XLI, p. 161— 182, pls. 10— 11, 
März 1906). 
Fixiert wurde mit folgender Lösung: einprozentige Chromsäure- 

lüsung 25 cc , einprozentige Essigsäurelösung 10 cc, Wasser 65 cc. 

Gefärbt wurde mit Eisenalaunhämatoxylin sowie mit Safranin - Gen- 

tianaviolett. Ernst Ä. Bessey {Miami). 

Schaffner, J. H., Chromosome reduction in the micro- 
sporocytes of Lilium tigrinum (Bot. Gaz. vol. XLI, 
p. 183—191, pls. 12—13, März 1906). 
Die üntersuchungsobjekte wurden mit Chromsäure 0'3 g, Eis- 
essig 0*7 cc, Wasser 99 cc fixiert. Das Chromatinnetz und die 
Chromatinkörner wurden am besten durch DELAFiELDSches Häma- 
toxyliu, die extra- und intranuclearen Nucleolen am besten mit Safranin- 
Gentianaviolett-Orange gefärbt. Ernst A. Bessey {Miami). 

Olive, E. W., Cytological studies on the Entomophtho- 
reae. L The morphology and development of 
Empusa (Bot. Gaz. vol. XLI, p. 192—208, pls. 14—15, 
März 1906). 
Die befallenen Insekten wurden durchgeschnitten oder durch- 
gestochen, um das Eindringen der Fixierungslösung zu ermöglichen, 
und mit Flemming scher Lösung fixiert. Die Schnitte wurden nach 
Flemming scher Dreifarbenmethode oder mit HAiDENHEixschem Häma- 
toxylin gefärbt. Ernst A. Bessey {Miami). 

Yamauouehi, Shiges, The life history of Polysiphonia 

violacea (Bot. Gaz. vol. XLI, p. 425 — 433, Juni 1906). 

Verschiedene Fixierungslösungen wurden probiert. Am besten 

hat sich die verdünnte Flemming sehe Lösung bewährt. Bei der 

Untersuchung der Spermatogenese und Keimung der Karpo- und 

Zeitscbr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 1. 6 



82 Referate. XXIY, 1. 

Tetrasporen wurde folgende Lösung angewandt: einprozentige Chrom- 
säurelösung 25 cc, einprozentiger p]isessig 10 cc, Meereswasser 65 cc. 
Das Fixieren dauert 5 bis 45 Minuten. Das Waschen geschieht in 
einem Strom von Meereswasser. Die Schnitte wurden mit Safranin- 
Gentianaviolett oder mit Eisenalaunhämatoxylin (mit oder ohne nach- 
herige Nachbeliandhmg mit Orange G, Bordeauxrot, Kongorot oder 
Safranin) gefärbt. Ernst A. Bessey {Miami). 

Huß, H., Eine Abänderung des MAYERSchen Chlorent- 
wicklungsapparates zum Aufhellen von Pflanzen- 
stoffen für die mikroskopische Untersuchung 
(Zeitschr. f. Unters, v. Nahrungs- u. Genußmitteln Bd. XII, 
1906, p. 221—223). 
Den Mayer sehen Apparat zum Aufhellen der PflanzenstolFe für 
die mikroskopische Untersuchung hat der Verf. dadurch wesentlich 
verbessert, daß er bequemere Vorrichtungen zum erneuten Füllen des 
andauernd gebrauchten Apparates angebracht hat, so daß diese Ope- 
ration weniger gesundheitsschädlich ist. Es kann nämlich mittels 
eines Hahnes das Gasentwicklungsgefäß von dem Säuregefäß bei dem 
neuen Apparat getrennt werden. Außerdem kann der Gasstrom be- 
quemer als früher reguliert werden. E. Sommerfeldt (Tübingen). 



JE, Mineralogisch - Petrographisches. 

Sommerfeldt, E. , Physikalische Kristallographie vom 

Standpunkt der Struk tur theor ie 5 VII -{- 131 pp., 

11 Tfln., 122 Figg. Leipzig (Chr. H. Tauchnitz Verl.) 1907. 

Preis 6 M. geb. 

Während der Verf. in seinem früheren Buche „Geometrische 

Kristallographie" (vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIII, p. 119) die äußere 

Gestalt der Kristalle behandelt hatte , geht derselbe jetzt zu den 

Erklärungsarten der Kristallformen durch Annahmen über die 

innere Struktur der Kristalle über, es kann daher das vorliegende 

Buch als ein zweiter Teil des oben genannten bezeichnet werden. 

Am ausführlichsten wird die Strukturtheorie Sohnckes behandelt 
und es werden die 65 Punktsysteme dieses Forschers einzeln be- 
sprochen und durch Abbildungen erläutert, hierbei verleiht die Voran- 



XXIV, 1. Referate. 83 

Stellung- des Begriffes „Fundamentalbereicli", sowie die Anwendung 
des Begriffes Meroedrie auf die Erzeugung regelmäßig im Räume 
verteilter Gruppierungen der Darstellungsform ein neues Gepräge. 
Auch führt der Begriff des Fundamentalbereichs (d. h. eines Raumes 
von molekularer Größenordnung, welcher dem einzelnen Kristallbau- 
stein als Spielraum zugewiesen werden kann) in einfachster Weise 
von der speziellen Theorie Sohnckes zu der verallgemeinerten, welche 
in einem besonderen Kapitel behandelt wird. 

In dem darauf folgenden Kapitel über Anwendungen der Struktur- 
theorie beanspruchen namentlich die Auffassungen des Verf. über Ätz- 
figuren für die Mikroskopie ein spezielles Interesse ; es wird die häufig 
abnorme Ausbildung dieser mikroskopischen Gebilde durch die An- 
nahme erklärt, daß eine schraubenförmige Struktur den betreffenden 
Kristallen zugrunde liegt. 

Die 230 Fälle von Punktsystemen, welche sich aus den Struktur- 
theorien von Schönflies, Fedorow und Barlow ergeben, werden aus 
den 65 Sohncke sehen Punktsystemen abgeleitet, auch werden die 
strukturtheoretischen Ansichten von Bravais und Wulff vor Besprechung 
der Sohncke sehen Theorien behandelt. 

E. Sommerfeldt {Tübingen). 

Zsigmondy, Über amikroskopische Goldkeime (Zeitschr. 
f. physik. Chem. Bd. XLVI, 1906, p. 65—76). 

Der Verf. zeigt, daß die in kolloidalen Goldlösungen enthalteneu 
Goldteilchen nach Art der kleinsten Kriställchen als Keime wirken, 
welche Übersättigungen der kristalloiden Metallösung aufheben und 
ganz so wie die Kristallkeime in übersättigten Kristalloidlösungen zu 
größeren Gebilden heranwachsen. Für diese Versuche wird das Gold 
durch Reduktion mittels Formaldehyds aus einer Goldchloridlösung er- 
zeugt , und außerdem werden kolloidale Goldlösungen , welche auf 
verschiedene Arten (in drei Versuchsreihen) hergestellt sind, als Kata- 
lysatoren zum Auslösen der Übersättigung benutzt. 

Durch die Versuche hält der Verf. es zwar noch nicht für sicher 
bewiesen, aber doch für einigermaßen wahrscheinlich gemacht, daß 
sich solche kristalloide , sehr goldarme wässerige Lösungen metal- 
lischen Goldes bilden können, welche trotz ihres geringen Goldgehalts 
übersättigt sind und dann, sobald die nötige Anzahl von Goldkeimen 
spontan gebildet oder zur Flüssigkeit zugefügt wird, sich in eine 
kolloidale Lösung verwandeln. 



'O 



E. Sommerfeldt {Tübingen). 

6* 



84 Referate. XXIV, 1. 

Smitli, C. F. H., Eine verbesserte Form des Refrakto- 
meters (Zeitschr. f. Krist. Bd. XLII, 1906, p. 232 — 235 
m. 2 Figg.). 
Die Verbesserung besteht in einer Vereinfachung der Korrektions- 
linse , welche das ursprünglich sphärische Gebiet , innerhalb dessen 
die Grenzen der Totalreflexion scharf erscheinen, in ein ebenes um- 
wandelt. Dadurch wird es möglich, unter Umgehung von Teilkreisen 
an einer ebenen Skala diese Grenze und damit auch den Brechungs- 
exponenten unmittelbar abzulesen. Der Verf. gibt an, daß bei einem 
Durchmesser der Halbkugel von 1 cm und bei einem Brechungs- 
exponenten der Glassorte von 1*7938 (für die D-Linie) eine Konvex- 
linse aus Crownglas mit einer Brennweite von 13 mm die befriedi- 
gendsten Resultate ergibt und mit ihrer stärker gekrümmten Seite 
nahezu in Berühnmg mit der Halbkugel gebracht werden muß. Das 
Instrument ist verwendbar für Brechungsexponenten von 1'41 bis 1'76. 

E. Sommerfeldt {Tühingen). 

Lincio, G., Das neue Lei tz sehe mineralogische Mikro- 
skopmodell A (Neues Jahrb. f. Mineral., Geol. u. Paläont. 
Beil. Bd. XVIII, 1906, p. 163—186 m. 10 Figg. u. 6 Ste- 
reoskop. Tfln.). 
Der Verf. liefert eine äußerst eingehende Beschreibung des 
mineralogischen Mikroskopes, welches die LEiTzsche Werkstätte aus- 
gearbeitet hat. An dem Instrument ist hervorzuheben : die bequeme 
Justier- und Arretiervorrichtung des Polarisators, die gegenüber den 
früheren Konstruktionen verbesserte Feineinstellung, die gleichfalls 
verbesserte Umlegevorrichtung zur Horizontal- und Schrägestellung 
des Tubus. 

Auf die Verbindung des Instruments mit mikrophotographischen 
Apparaten ist besondere Rücksicht genommen, auch wird beschrieben, 
wie man stereoskopisch wirkende Mikrophotographien mit dem Instru- 
ment ausführen kann. Das hierbei angewandte Verfahren entspricht 
dem im vor. Ref. bereits beschriebenen. Die sechs beigefügten stereo- 
skopischen Tafeln stellen teils Proben von Mikrophotographien, teils 
von Aufnahmen mit schwächerer Vergrößerung an mineralogisch in- 
struktiven Beispielen dar und zeigen die hohe Leistungsfähigkeit so- 
wie die vielseitige Anwendbarkeit des neuen Instruments. 

E. Sommerfeldt {Tübingen). 



XXIY, 1. Referate. 85 

Siedeutopf, H., Mikroskopokular mit Quar zke i 1 -Kom- 
pensator (Zentralbl. f. Mineral., Geol. u. Paläont. 1906, 
p. 745—747 m. 2 Figg.). 
Der Verf. hat ein Okular mit verschiebbarem Quarzkeil kon- 
struiert, welches dem von .). Amann beschriebenen ähnlich ist (vgl. 
diese Zeitschr. Bd. XI, 1894, p. 440) ; jedoch ist der allgemeineren 
Anwendbarkeit wegen der Quarzkeil auswechselbar gegen einen solchen 
(resp. mehrere) von anderer Dicke , so daß das jetzige Instrument 
ebenso ausgiebige Messungen gestattet, als wenn es mit einem äußerst 
langen Quarzkeil ausgestattet wäre. Es können Gangunterschiede 
von der Ordnung bis 39 hervorgebracht werden. Die Teilung der 
Keile erfolgt derart , daß in der Ordnung bis 8 der Gangunter- 
schiede jeder Skalenteil O'l ^ bedeutet; in der Ordnung 8 bis 39 
hingegen schreitet die Skala der Keile nach Gangunterschieden von 
0*2 i^i fort. Das für die grüne Quecksilberlinie l = 546 [xt.i ge- 
eichte Instrument kann von der Firma C. Zeiss bezogen werden; 

E. So7nmerfeldt {Tübingen). 



86 Neue Literatur. XXIV, 1. 



Neue Literatur. 



1. Lehr- und Handbücher. 

Goppelsroeder, Fr., Anregung zum Studium der auf Kapillaritätserschei- 
nungen beruhenden Kapillaranalyse. Basel (Helbing & Lichtenhahn) 
1906 ; 239 pp. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 39.) 

Höber, R., Physikalische Chemie der Zelle und der Gewebe. 2., neubearb. 
Aufl. Leipzig (W. Engelmann) 1906; 460 pp. (Vgl. diese Zeitschr. 
Bd. XXIV 1907, p. 39.) 

Lee, A. B. , u. Mayer, P. , Grundzüge der mikroskopischen Technik für 
Zoologen und Anatomen. 3. Aufl. Berlin (R. Friedländer & Sohn) 1907 ; 
VII + 522 pp. 15 M. 

Wright, E. E. , Frinciples of Microscopy. London (A. Constable a. Co.) 
1906; XXII u. 250 pp. 



2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. 



a. Neue Mikroskope. 

Fabre, Ch., Les nouveaux microscopes (Mem. Acad. Sc. Toulouse vol. V, 

1905, p. 289). 
Watson's Junior Metallurgical Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, 

pt. 6, p. 716; vgl. Watson and Sons' special Catalogue 1906). 
Zeiss' Measuring Microscopes (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 716). 



XXIV, 1. Neue Literatur. gY 



b. Lupen. 

Präpariersysteme, Lupen, Präparierstative, Lupenstative. Katalog vun 
ZEiss-Jena. 



c, Beleuchtungsapparate. 



Heimstädt, O., Spiegelkondensor für ultramikroskopische Beobachtungen 

(Zeitschr. f. Chemie u. Industrie d. Kolloide Jahrg. I, 1907, H. 9). 
Reichert, C, Über einen neuen Spiegelkondensor zur Sichtbarmachung 

ultramikroskopischer Teilchen (München, med. Wochensclir. Bd. LIIl, 

1906, No. 51, p. 2531). 
(Stolze,) Simple Photometer (Journ. R. Microsc. See. 1906, pt. 6, p. 719; 

vgl. Engl. Mech. vol. LXXXIV, 1906, p. 299). 
Watson's hall-hearing sliding Bar (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, jjt. 6, 

p. 719). 



d. Verschiedenes. 



(Bradley, H. C. ,) Microchemical test tbr Zinc (Journ. R. Microsc. Soc. 
1906, pt. 6, p. 738; vgl. Americ. Journ. Sc. vol. XXII, 1906, p. 327). 

Braß, A., Über die Doppelbrechung (Zeitschr. f. Opt. u. Mech. Bd. XXVIl, 
1906, p. 192). 

Hartl, H. , Ein Modell zur Erläuterung der Zerlegung eines linear polari- 
sierten Liclitstrahls bei der Doppelbrechung (Zeitschr. f. Unterricht 
Bd. XIX, 1906, p. 175). 

Koerber, F., Ein Freihandversuch zur Bestimmung der Brechungsexpo- 
nenten des Glases (Zeitschr. f. Unterricht Bd. XIX, 1906, p. 167). 

(Neumayer, V. L.,) Hardening of organs with formalin (Journ. R. Microsc. 
Soc. 1906, pt. 6, p. 739 ; vgl. Ber. d. d. Chem. Ges. Bd. XXXIX, 1906, 
p. 2376). 

Granger's Pocket microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 715). 

Immersion oil bottle (Journ. R. Microsc. Soc. 190(5, pt. 6, p. 738). 

Old portable microscope by Dollond' (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt, 6, 
p. 713). 

Watson's „Facile" Turntable with hall-hearing (Journ. R. Microsc. Soc. 
1906, pt. 6, p. 738). 



88 Neue Literatur. XXIV, 1. 



3. Mikrophotographie und Projektion. 

Arbeit, E., Die neuen Leitz sehen Mikrosummare (Eders Jahrb. d. Photo- 
graphie 1906, p. 97—100 in. 3 Figg.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 
1907, p. 41). 

Bellieni, Methode pratique et simplifiee de microphotographie (C. R. Soc. 
Biol. Paris t. LVIII, 1905, no. 7, p. 339—343 av. 2 flg.; vgl. diese 
Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 40). 

Dieck , W. , Das Photomikroskop für ultraviolette Strahlen und seine Be- 
deutung für die histologische Untersuchung (Sitzber. Ges. Naturf.- 
Freunde Berlin 1906, No. 1—5). 

Dollmann, W. P. , Eine einfache Methode zur Herstellung von Stereo- 
mikrophotographien (Zeitschr. f. angew. Mikrosk. Bd. XII, 1906, p. 209). 

Harting, H. , Über die zweckmäßige Auswahl von photographischen Ob- 
jektiven und Kameras (in Voigtländer & Sohns Katalog f. photo- 
graphische Apparate 1907). 

Keßler , H. , Lehrbuch der praktischen Photographie. 6. Aufl. Leipzig 
(J. J. Weber) 1906. 

Löwenstein, E., Versuche über Dreifarbenmikroskopie (Zeitschr. f. Tuberk. 
Bd. X, 1906, H. 1, p. 34). 

Taverner, H., Über eine einfache Methode zur Herstellung von stereo- 
mikrophotographischen Aufnahmen (Zeitschr. f. angew. Mikrosk. Bd. XII, 
1906, p. 210). 

Bericht über Liesegangs Universal -Projektionsapparat (Ed. Liesegang, 
Düsseldorf, Liste No. 316, 1906). 

Neuer mikrophotographischer Universalapparat. Von E. Leitz. [Mitteilung 
aus der optischen Werkstätte desselben.] (Eders Jahrb. f. Photogr. 
u. Eeproduktionstechnik 1906, p. 100—106 m. 3 Figg.; vgl. diese Zeitschr. 
Bd. XXIV, 1907, p. 40.) 

Universal-Projektionsapparat nach Dr. Berghoff (Ed. Liesegang, Düssel- 
dorf, Liste No. 316 a, 1906). 



4. Präparationsmethoden im allgemeinen. 

Comes , S. , Süll' attendibilitä del metodo Pollacci per la ricerca micro- 
chimica del fosforo nei tessuti animali: nota di tecnica (BoU. Accad. 
Gioenia Sc. nat. Catania, fasc. 90, maggio 1906, 12 pp.). 

Comes, S., Ancora del metodo di G. Pollacci e delle obiezioni mosse 
dal Dott. A. Arcangeli a questo metodo come reattivo microchimico 
del fosforo nei tessuti animali (Monit. Zool. ital. Anno XVII, no. 10, 
p. 299—308). 



XXIV, 1. Neue Literatur. 89 

Delamare, G., Melange tetrachrome (coloration elective et simultanee des 

noyaux cellulaires , des fibres conjonctives, elastlques et musculaires 

(C. R. Soc. Biol. Paris t. LVIII, 1905, no. 18, p. 828—829; vgl. diese 

Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 44). 
Lobenlioffer, W. , Über die Ergebnisse der Ältmann-Schridde sehen 

Färbemethode beim Zentralnervensystem (Arch. f. mikrosk. Anat. 

Bd. LXVIII, 190G, p. 491—500 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitsclir. Bd. XXIV, 

1907, p. 44). 
Löwe, F., Ein Meßmikroskop für Negative (Zeitschr. f. wiss. Photographie 

Bd. IV, 1906, p. 204—206; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 43). 
Manoueliau , De l'emploi de l'acide picrique comme diflferenciateur dans 

los colorations ä l'hematoxyline (C. S. Soc. Biol. Paris t. LVIII, 1905, 

no. 13, p. 620—621; vgl diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 44). 
Michaelis, L., Über das Ultramikroskop und seine Anwendung in der 

Chemie (Zeitschr. f. angew. Chemie Bd. XIX, 1906, p. 948—953; vgl. 

diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 44). 
Schürhof, Pipettenglas für mikroskopische Technik (Pharmaz. Zeitg. Bd. LI, 

1906, p. 931; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 41). 
Stschatnyi, S. M. , Über die Histogenese der eosinophilen Granulation im 

Zusammenhang mit der Hämolyse (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. 

PathoL Bd. XXXVIII, 1905, H. 3, p. 456—509 m. 2 Tfln. ; vgl diese 

Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 45). 
Vecchi , Bindo de , La fotossolina sciolta in alcool metihco come mezzo 

d'inclusione. Nota di tecnica istologica (Monit. Zool. ital. Anno XVII, 

no. 8, p. 248; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIII, 1906, p. 312). 
AVatters, W. H., The gelatin method of preserving specimens (Med. Record 

vol. LXX, 1906, no. 25, p. 985). 
Cathcart-Darlaston Microtome (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 734). 
Darlaston Section Cutter (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 735). 



5. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 



a. Niedere Tiere. 

Basse, A., Beiträge zur Kenntnis des Baues der Tardigraden (Zeitschr. f. 

wiss. Zool. Bd. LXXX, 1905, p. 259 — 281 m. 1 Fig. u. 2 Tfln.; vgl 

diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 55). 
(Beaucliamp, P. M. de,) Intra-vitam staining of the Retrocentral apparatus 

of Rotifers (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 735; vgl. Compt. 

Rend. Acad. Sc. Paris t. CXLIII, 1906, p. 249). 
Cholodkovsky, N., Über den Bau des Dipterenhodens (Zeitschr. f. wiss. 

Zool. Bd. LXXXII, 1905, p. 389—410 m. 2 Tfln. : vgl. diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 55). 



90 Neue Literatur. XXIV, 1. 

Dechant, E., Beitrag zur Kenntnis des peripheren Nervensystems des Regen- 
wurms (Arb. a. d. Zool. Inst. d. Univ. Wien, Tom. XVI, 1906, p. 361 
— 3.S0, m. 2 Figg. u. 2 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1906, p. 52). 

Dreyling, L., Die wachsbereitenden Organe bei den gesellig lebenden 
Bienen (Zool. Jahrb. Abt. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XXII, 1905, p. 289 
—330 m. 1 Fig. u. 2 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 54). 

Enderlein, G., Monographie der Coniopterygiden (Zool. Jahrb. Abt. f. Syst. 
Bd. XXIII, 1906, p. 173—242 m. 3 Figg. u. 6 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. 
Bd. XXIV, 1907, p. 56). 

Kupelwieser, H., Untersuchungen über den feineren Bau und die Meta- 
morphose des Cyphonautes (Zoologica Heft 47, 1906, 50 pp. m. 8 Figg. 
u. 5 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 54). 

Langeron, Note sur l'emploi du lactophenol de Ajiann pour le montage 
des Nematodes (Compt. Rend. de la See. de Biol. t. LVIII, 1905, p. 749 
—750; Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1907, 
p. 222; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 53). 

Marcus, H., Ei und Samenreife bei Ascaris canis (Werner) [Asc. mystax] 
(Arch. f. mikr. Anat. Bd. LXVIII, 1906, p. 441—490; vgl. diese Zeitschr. 
Bd. XXIV, 1907, p. 51). 

Menneking, F., Über die Anordnung der Schuppen und das Kanalsystem 
bei Stachyodes ambigua [Stud.], Caligorgia flabellum [Ehrbg.], Calyp- 
trophora Agassizii [Stud.], Amphilaphis abietina [Stud.] und Thonarella 
variabilis [Stud.] (Arch. f. Naturgesch. Jahrg. LXI, Bd. 1, 1905, p. 245 
—266 m. 2 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 50). 

Morax, V., Manifestations oculaires au cours des Trypanosomiases (Ann. 
de ITnst. Pasteur t. XXI, 1907, p. 47; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 
1907, p. 49). 

Musgrave W. E., a Clegg, M. T., The cultivation and pathogenesis of 
Amoebae (The Philippine Journ. of Sc. vol. I, 1906, p. 909; vgl. diese 
Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 49). 

Novy, Fr. G., a. McNeal, Ward. J., On the trypanosomes of birds (Journ. 
of infections Diseases vol. II, 1905, p. 256—308 ; vgl. Zentralbl. f. Bak- 
teriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXVI, 1905, p. 767; diese Zeitschr. Bd. XXIV, 
1907, p. 48). 

(Perez, C, , a. Gendre, E. ,) Staining Neuroglia in Ichthyobdella (Journ. 
R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 736; vgl. Proc. Verb. Soc. Sc. Phys. 
et Natur. Bordeaux 1904—1905, p. 50). 

Rauther, M., Beiträge zur Kenntnis von Mermis albicans v. Sieb., mit be- 
sonderer Berücksichtigung des Haut- Nerven -Muskelsystems (Zool. 
Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XXIII, 1906, p. 1—76 m. 3 Tfln. ; 
vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 52). 

Schaaf, H., Zur Kenntnis der Kopfanlage der Cysticerken, insbesondere 
des Cysticercus Taeniae solii (Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontogen. 
Bd. XXII, 1905, p. 435—476 m. 13 Figg. u. 2 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. 
Bd. XXIV, 1907, p. 50). 

Schwabe, J,, Beiträge zur Morphologie und Histologie der tympanalen 
Sinnesapparate der Orthopteren (Zoologica Heft 50, 1906, 154 pp. m. 
17 Figg. u. 5 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 58). 



XXIV, 1. Nene Literatur. «Jl 

Stauffacher, H., Zur Kenntnis des statischen Organs bei Phylloxera vasta- 

trix Pl. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXXII, 1905, p. 379—388 m. 1 Tti.: 

vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 55). 
Stenta, M., Über ein drüsiges Organ der Pinna (Arb. a. d. zool. Inst. d. 

Univ. Wien tom. XVI, 1906, p. 407—436 m. 1 Fig. u. 1 Tfl. : vgl. diese 

Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 53). 
Stryckmann, Ch., Eibildung, Saiuenbildung und Befruchtung von Stron- 

gylus tilario (Zool. Jahrb., Abt. f. Anat. u. Ontog. Bd. XXII, 1905, p.577; 

vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 51). 
Tsujitani, Über eine Methode die Infusorien rein zu kultivieren (Mitteil. d. 

med. Gesellsch. z. Tokio Bd. XVIII, 1904, No. 4; vgl. Zentralbl. f. 

Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXVI, 1905, p. 514; diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 48). 
Vejdowsky, F,, Zur Hämocöltheorie (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXXXII, 

1905, p. 80—170 m. 5 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 60). 
Weißenburg, R., Über die Onocj^ten von Torymus nigricornis Boh. mit 

besonderer Berücksichtigung der Metamorphose (Zool. Jahrb., Abt. f. 

Morph. Bd. XXIII, 1906, p. 231 — 268 m. 1 Tfl.; vgl. diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 57). 



b. Wirbeltiere. 



Bidder, A., Osteobiologie (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd, LXVIII, 1906, 

p. 137—213 m. 5 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 64). 
Bürger, O., Die Brutpflege von Rhinoderma Darwinii D. B. (Zeitschr. f. 

wiss. Zool. Bd. LXXXII, 1905, p. 230 — 251 m. 3 Tfln.; vgl. diese 

Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 72). 
Dogiel, A. S., Die Endigungen der sensiblen Nerven in den Augenmuskeln 

und deren Sehnen beim Menschen und den Säugetieren (Arch. f. mikrosk. 

Anat. Bd. LXVIII, 1906, p. 501—524 m. 3 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 68). 
Fusari , R. , ün metodo semplice di colorazione elettiva dei granuli delle 

cellulo del Paneth nell'intestino umano (Giorn. Accad. Med. Torino 

Anno LXIX, 1906, no. 6—7, p. 298). 
Kopsch, F., Kleinere Mitteilungen zur mikroskopischen Technik (Intern. 

Monatsschr. f. Anat. u. Phys. Bd. XXIII, 1906, p. 359—360: vgl. diese 

Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 71). 
Kose, W., Die Paraganglien bei den Vögeln (Arch. f. mikrosk. Anat. 

Bd. LXIX, 1907, p. 563—663 m. 1 Fig. u. 3 Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 70). 
Meves, F., Zur Kenntnis der Thrombocyten des Salamanderblutes und ihres 

Verhaltens bei der Gerinnung (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 

1906, p. 311—358 m. 6 Figg. u. 4 Tfln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 

1907, p. 71). 



92 Neue Literatur. XXIV, 1. 

Murgia, E., Su un nuovo metodo di diagnosi microchimica dello sperma 
[reazione del Barberio] (Clinica modeina Anno XII, 1906, no. 14, p. 157). 

Oeder, R., Die Entstehung der Munddrüsen und der Zahnleiste der Anuren 
(Zeitschr. f. Naturw. Bd. XLI, 1906, p. 505—548 m. 14 Figg. u. 2 Tfln.; 
vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 68). 

Retterer, Ed., Des colorations intra-vitales et post-vitales du tissu osseux 
(C. R. Soc. Biol. Paris t. LX, 1906, no. 3, p. 106—109; vgl. diese Zeit- 
schr. Bd. XXIV, 1907, p. 65). 

Retterer, Ed., Technique pour l'etude du tissu osseux rougi par l'alimen- 
tation garancee (C. R. Soc. Biol. Paris t. LX, 1906, no. 2, p. 46—49; 
vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 65). 

Simon , Ch. E. , A new counting chfwnber for the enumeration of blood 
corpuscles (Journ. Americ. Med. assoc. vol. XLVII, 1906, p. 1737). 

Steinitz, W. , Beiträge zur Kenntnis der Nervenendigungen in den quer- 
gestreiften Muskeln der Säugetiere (Diss. Berlin 1905). 

Vallet, G,, Note sur un procede simple de coloration des plaquettes du 
sang ou hematoblastes chez Thomnie (C. R. Soc. Biol. Paris t. LX, 1906, 
no. 1, p. 21—23 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 60). 

Vallet, G., Deuxieme note sur la coloration des plaquettes du sang (C. R. 
Soc. Biol. Paris t. LX, 1906, p. 132; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 
1907, p. 61). 

Warfwinge, E., Beiträge zur Kenntnis der spinalen und sympathischen 
Ganglienzellen des Frosches (Rana temporaria) (Arch. f. mikrosk. Anat. 
Bd. LXVIII, 1906, p. 432—440 m. 1 Tfl. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 
1907, p. 69). 

Worthmaun, F., Beiträge zur Kenntnis der Nervenausbreitung in Clitoris 
und Vagina (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVIII, 1906, p. 122 — 136 
m. 2 Ttln.; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 69). 



c. Bakterien. 

Bernstein, E. P., a. Epstein, A. A., A simple method of sterilizing blood 
for cultural purposes (Journ. of inf. dis. vol. III, 1906, no. 5, p. 772). 

Ei)steiu, A. A., A simple method for staining the polar bodies of diphtheria 
bacilli (Journ. of inf. dis. vol. III, 1905, no. 5, p. 770). 

Forest, M., Beitrag zur Morphologie der Spirochaete pallida [Treponema 
pallidum Schaudinn] (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLII, 
1906, p. 608; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 76). 

Hamm, A., Beobachtungen über Bakterienkapseln auf Grund der Weiden- 
reich sehen Fixationsmethode (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. 
Bd. XLIII, 1907, p. 287; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 73). 

Kayser, H., Eine Fixierungsmethode für die Darstellung von Bakterien- 
kapseln (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLI, 1906, p. 138; 
vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 72). 



XXIV, 1. Neue Literatur. 93 

Kuhn , G. , Zum Nachweis von Tuberkelbazillen in Versandrailch, Konser- 
vierung der Versandproben mit 0-5prozentiger Borsäure (Zeitschr. f. 

Infektionskrankh. d. Haustiere Bd. II, 190G, p. 58). 
Landsteiner, K., u. Mucha, V., Zur Technik der Spirochätenuntersucliung 

(Wiener klin. Wochenschr. 1906, No. 45; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 

1907, p. 76). 
Ritchic, The wax of tubercle bacilli in relation to their acid resistance 

(Journ. of pathol. a. bacteriol. vol. X, 1905, p. 334-, vgl. Zentralbl. f. 

Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1906, p. 13; diese Zeitschr. Bd. 

XXIV, 1907, p. 77). 
Rosenthal, G., La culture en culot de gelatine (tube Liborius) des anae- 

robies liquefiants, nouveau procede d'aerobisation (Compt. Rend. Soc. 

Biol. Paris t. LXI, 1906, no. 30, p. 326). 
Ruzicka, S., Eine neue einfache Methode zur Herstellung sauerstoft'freier 

Luftatmosphäre [als Methode zur einfachen verläßlichen Züchtung von 

strengen Anaerobenj (Arch. f. Hyg. Bd. LVIII, 190G, p. 327). 
(Schädel , A. ,) Method of staining encapsuled microorganisms (Journ. R. 

Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 736; vgl. Lancet vol. II, 1906, p. 190). 
Sorgo, Über die Verwendbarkeit des Formaldehyds zur Anreicherung der 

Tuberkelbazillen im Sputum (Zeitschr. f. Tuberkulose Bd. VI, Heft 6; 

vgl. Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1906, p. 71; 

diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 75). 
Spengler, C, Zur Formaldehyd -Abtötung und -Züchtung der Tuberkel- 

und anderer säurefester Bazillen (Zeitschr. f. Hyg. Bd. LI, 1905, p. 335; 

vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 74). 
Spengler, C, Die Sprengzüchtung der Tuberkelbazillen aus Sputum (Ibid. 

p. 339; vgl. Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1906, 

p. 22; diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 74). 
Sticker, G., Organabdrücke. Ein Ersatz für Organschnitte (Zentralbl. f. 

Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLIII, 1907, p. 206; vgl. diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 78). 
Uyeda, Ein neuer Nährboden für Bakterienkulturen (Bull, of the Imp. centr. 

agr. exp. stat. Japan vol. I, 1906, p. 59; vgl. Zentralbl. f. Bakteriol. 

Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1907, p. 300; diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, 

p. 78). 
Vincent, M. H. , Recherches sur les microbes anaerobies des eaux. Con- 

tribution ä l'etude bacteriologique des eaux potables (Ann. de Tlnst. 

Pasteur, t. XXI, 1907, p. 62; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, 

p. 77). 
(Williams, A. W. , a. Lowden, M. M.,) Demonstrating the presence ot 

Negri's bodies in Hydrophobia (Journ. R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, 

p. 737; vgl. Journ. inf. dis. vol. III, 1906, p. 452). 
Zelikow, J., Quantitative Bestimmung der Bakterialmasse durch die kolo- 

rimetrische Methode (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XLII. 

1906, p. 476; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 74). 



94 Neue Literatur. XXIV, 1. 



d. Botanisches. 

Beauverie, J., Etudes sur les corpuscules metachromatiques des graines 

(Compt. Rend. Soc. Biol. Paris t. LXI, 1906, p. 376—378). 
Celakovsky, L. , Beiträge zur Fortpflanzungsphysiologie der Pilze. Prag 

(Eivnäc) 1906; 86 pp. 
Chamberlain, Ch. J., The ovule and female gametophyte of Dioon (Bot. 

Gaz. vol. XLII, p. 321—358, 9 Textfiguren, pls. 13—15, November 1906; 

vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 80). 
Combes, R., Sur un nouveau groupe de reactions de la lignine et des 

membranes lignifiees (Bull. Soc. pharmacol. t. XIII, 1906, p. 293—296, 

470—474-, vgl. Bot. Zentralbl. Bd. CIV, 1907, No. 16, p. 408). 
D, R., Zur Prüfung und Beurteilung des gemahlenen schwarzen Pfeifers 

(Zeitschr. f. angew. Mikrosk. Bd. XII, 1906, p. 189). 
Elfving, F., Botanisk Mikroskoperbok för studentes. Helsingfors, Helios 

1905; 125 pp. 
Errera, L., Cours pratique de microchimie vegetale fait au doctorat es 

sciences botaniques ä l'universite de Bruxelles. Bruges 1906. 24 pp. 16". 
Gastine, G., Sur l'emploi de la lumiere polarisee pour la recherche micro- 

scopique des amidons composes du riz et du mais dans la farine de 

froment (Compt. Rend. Acad. Sc. Paris t. CXLIV, 1907, No. 1, p. 35 

Geneau de Lamarliere, L., Sur les membranes cutinisees des plantes 
aquatiques (Rev. gen. de Bot. t. XVIII, 1906, p. 289). 

Geneau de Lamarliere, L. , Sur l'epiderme des plantes aeriennes (Rev. 
gen. de Bot. t. XVIII, 1906, p. 372). 

Hedgcock, G. G., a. Spaulding, P., A new method of mounting fungi 
grown in cultures for the herbarium (Journ. of Mycol. vol. XII, 1906, 
p. 147; vgl. Botan. Zentralbl. Bd. CIV, 1907, No. 13, p. 336; Journ. 
R. Microsc. Soc. 1906, pt. 6, p. 737). 

Hedlund, T., Über den Zuwachsverlauf bei kugeligen Algen während des 
Wachstums (Botan. Studier tillägnade (F. R. Kjellman) 1906). 

Hnß, H., Eine Abänderung des Mayer sehen Chlorentwicklungsapparates 
zum Aufhellen von Pflanzenstotfen für die mikroskopische Untersuchung 
(Zeitschr. f. Unters, v. Nahrungs- u. Genußmitteln Bd. XII, 1906, p. 221 
—223; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 82). 

Jannonius, H. H. , Mikrographie des Holzes der auf Java vorkommenden 
Baumarten. Im Auftrage des Kolonialministeriums unter Leitung von 
Dr. J. W. Moll bearbeitet. 1. Lief., 44 Figg. Leiden (Brill). 1906. 

Köhler, P., Beiträge zur Kenntnis der Reproduktions- und Regenerations- 
vorgänge bei Pilzen und der Bedingungen des Absterbens myze- 
lialer Zellen von Aspergillus niger (Flora Bd. XLVII, 1907, H. 2, p. 216 
—226). 

König, S., Fürstenberg, A., u. Murdfleid, R., Die Zellmembran und ihre 
Bestandteile in chemischer und physiologischer Hinsicht (Landwirtsch. 
Versuchsstat. Bd. LXV, 1906, p. 55—111). 



XXIV, 1. Neue Literatur. 95 

Kohl, F. G., Über das Glykogen und einige Ersclieinungen bei der öporu- 
lation der Hefe (Ber. d. d. botan. Ges. Bd. XXV, 1907, H. 2, p. 74; 
vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 79). 

Lawson, A. A., The gametopliytes, fertihzation and embryo of Cephalotaxus 
dnipacea (Ann. of Bot. vol. XXI, 1907, p. 1). 

Meyer, A., Erstes mikroskopisches Praktikum. Eine Einführung in don 
Gebrauch des Mikroskops und in die Anatomie der höheren Pflanzen. 
Zum Gebrauche in den botanischen Laboratorien und zum Selbstunter- 
richte. Für Botaniker, Chemiker, Pharmazeuten, Studierende des höhe- 
ren Lehramtes, Zoologen. 2., umgearbeitete Auflage; 82 Abb. Jena 
(G. Fischer) 1907 ; 221 pp. (vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 79). 

5 M., geb. 6 M. 

Okamiira, K., On the microchemical examination of Gelidium in reference 
to „Kanten" (Seawed-gelatine) manufacture (Rep. Fish. Inelit. vol. 111, 
[japanisch]). 

Olive, E. W., Cytological studies on the Entomophthoreae. I. The mor- 
phology and development of Empusa (Bot. Gaz. vol. XLI , p. 192 
—208, pls. 14—15, März 1906; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, 
p. 81). 

Saget, P., Etüde botanique et chimique du Rumex crispus et de ses prin- 
cipes ferrugineux (Paris 1906; 40 pp., 1 pl.). 

SchalFner, J. H., Chromosome reduction in the microsporocytes of Lilium 
tigrinum (Bot. Gaz. vol. XLI, p. 183—191, pls. 12—13, März 1906; vgl. 
diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 81). 

Simons, E. B., A morphological study of Sargassum filipendula (Bot. Gaz. 
vol. XLI, p. 161 — 182, pls. 10—11, März 1906; vgl. diese Zeitschr- 
Bd. XXIV, 1907, p. 81). 

Strasburger, E., Apogamie bei Marsilia (Flora Bd. XCVII, 1907, H. 2, 
p. 123—191. 

Toni, de B.-G., Sul reagente di Schweizer (Atti Istit. veneto Sc. Lett ed 
arti vol. LXV, 1906, no. 2, p. 593). 

Yamanouchi, Shiges, The llfe history of Polysiphonia violacea (Bot. Gaz. 
vol. XLI, p. 425—433, Juni 1906; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907. 
p. 81). 

Zimmermann, C, Microscopia vegetal (Broteria vol. V, 1906, fasc. 4). 



e. Mineralogisch - Petrographisches. 

Lincio, G., Das neue LEiTzsche raineralogische Mikroskopmodell A (Neues 
Jahrb. f. Mineral., Geol. u. Paläont. Beil. Bd. XVIIl, 1906, p. 163—186 
m. 10 Figg. u. 6 Stereoskop. Tfln. ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIA', 1907, 
p. 84). 



96 Neue Literatur. XXIV, 1. 

Siedentopf, H., Mikroskopokular mit Quarzkeil-Kompensator (Zentralbl. f. 

Mineral, Geol. u. Paläont. 1906, p. 745 — 747 m. 2 Figg. ; vgl. diese 

Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 85). 
Smith, C. F. H., Eine verbesserte Form des Refraktometers (Zeitschr. f. 

Krist. Bd. XLII, 1906, p. 232 — 235 m. 2 Figg.; vgl. diese Zeitschr. 

Bd. XXIV, 1907, p. 84). 
Sommerfeldt , E. , Physikalische Kristallographie vom Standpunkt der 

Strukturtheorie; VII + 131 pp., 11 Tfln., 122 Figg. Leipzig (Chr. IL 

Tauchnitz Verl.) 1907 (vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 82). 

6 M. geb. 
Zsigmondy, Über amikroskopische Goldkeime (Zeitschr. f. physik. Chem. 

Bd. XLVI, 1906, p. 65—76 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 83). 



Autarenregister. 



Das vorliegende Heft (XXIV, 1) enthält Referate über die Arbeiten 



folgender Autoren: 

Arbeit, E. 41. 

Basse, A. 55. 
Bellieni 40. 
Hidder, A. 64. 
Bürger, 0. 72. 

Charaberlain, Cli. J. 

80. 
Cholodkovsky, N. .55. 
Clegg, M. T. 4i). 

Dechant, E. 52. 
Delamare, G. 44, 
Dogiel, A. S. 68. 
Dreyling, L. 54. 

Enderlein, G. 56. 

Fontana, A. 75. 
Forest, M. 76. 

Goppelsroeder , Fr. 
39. 

Hamm, A. 73. 
Höber, R. 39. 
Huß, H. 82. 

Kayser, H, 72, 
Kohl, F, G. 79. 
Kopsch, F. 71. 



Kose, W. 70. 
Kupelwieser, H. 54. 

Landsteiner, K. 76. 
Langeron 53. 
Lincio, G. 84. 
Lobenhofifer, W. 44. 
Löwe, F. 43. 

Manouelian 42. 
Marcus, IL 51. 
McNeal, W. J. 48. 
Menneking, F. 50. 
Meves, F, 62. 
Meyer, A. 79. 
Michaelis, L. 42. 
Morax, V, 49. 
Mucha, V. 76. 
Musgrave, W. E. 49. 

Novy, Fr. G. 48. 

Oeder, R. 68. 
Olive, E. W. 81. 

Rauther, M, 52. 
Retter er, Ed. 65. 
Ritchic 77. 

Schaaf, H. 50. 
Schaffner, .1. H. 81. 



Schürhof 41. 
Schwabe, J. 58. 
Siedentopf, H. 85. 
Simons, E. B. 81. 
Smith, C. F. H. 84. 
Sommerfeldt, E. 83. 
Sorgo 75. 
Spengler, C. 74. 
Stauffacher, IL 55. 
Stenta, M, 53. 
Sticker, G. 78. 
Struckmann, Ch. 51. 
Stschastnyi, S. M. 45. 

Tsujitani 48. 

Uyeda 78, 

Vallet, G. 60, 61. 
Vejdowsk:^, F, 60. 
Vincent, M. H. 77. 
Volpino, Cr. 76. 

Warfwinge, E. 69. 
Weißenburg, R. 57. 
Worthmann, F. 69. 

Yamanouchi, S. 82. 

Zelikow, J. 74. 
Zsigmondy 83. 



Verlag von S. Hirzel in Leipzig 



Soeben ist erschienen 



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DER 



MIKROPHOTOGRAPHIE 



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Mit 63 Abbildungen in Holzschnitt, 
1 Autotypietafel, 1 Tafel in Lichtdruck und 1 Heliogravüre 



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Preis geheftet 9 Mark, gebunden 10 Mark. 



Inhaltsverzeichnis 



1. Der mikrophotographische 
Apparat. 

2. Objektive und Okulare. 

3. Die Lichtquelle. 



5. Vorrichtungen für beson- 
dere Zwecke. 

6. Das negative Bild. 

7. Das positive Bild 



4. Die Beleuchtung. i 8. Verschiedenes. 



Druck von Fischer & Wittig in Leipzig. 



ZEITSCHRIFT 

FÜR 

WISSENSCHAFTLICHE 



JilKROSKOPIE 

UND FÜR 

MIKROSKOPISCHE TECHNIK 

BEGRÜNDET VON W. J. BEHRENS 



Unter besonderer Mitwirkung 

■von 

Prof. Dt. Paul Schiefferdecker und Prof. Dr. E. Sommerfeldt 

in Bonn in Tübingen 

herausgegeben 

von 

Db. ernst Küster 

in Halle a. d. Saale 

Band XXIV, Heft 2 

Heft 94 

Ausgegeben am 15. August 1907 



Mit 11 Textabbildungen 



LEIPZIG 

Königsstrasse 2 

VERLAG VON S. HIRZEL 
1907 



Alle Sendungen von Beiträgen für die Zeitschrift erbittet man an den Heraus- 
geber, Jlerrn Dr. Ernst Küster in Halle a. d. Saale; die Sendungen 
von Drucksachen durch die Post an denselben oder auf Buchhändlerwege 
durch die Verlagsbuchhandlung S. Hirzel in Leipzig. - 



Inhalt. 



Seit» 

Molisch, Prof. Dr. H., Über die Brownsche Molekularbewegung in 

Gasen, sichtbar gemacht durch ein gewöhnliches Mikroskop . . 97 
Siedentopf, H., Paraboloid-Kondensor, eine neue Methode für Dunkel- 
feldbeleuchtung zur Sichtbarmachung und zur Moment -Mikro- 
photographie lebender Bakterien etc. (insbesondere auch für 

Spirochaete pallida) 104 

Böthig, Dr. P., Wechselbeziehung zwischen metachromatischer Kern- 
und Protoplasmafärbung der Ganglienzelle und dem Wassergehalt 

alkoholischer Hämatoxylinlösungen 109 

Mayer, P., Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden . . 128 
Bubeiithaler , Doct. Gr., Methode generale de fixation ayant pour 

but de restreindre les artefacts 133 

Thoma, Prof. Dr. R., Pikrinsäurekarmin 139 

Neumayer, L., Ein Beitrag zur Technik der Plattenmodelliermethode 140 
Hinterberger, Dr. Alex., Wie kann man absolut reine oder auch 

beschickte Deckgläser transportieren? 145 

Referate 148 

1. Lehr- und Handbücher S. 148. — 2. Mikrophotographie und Pro- 
jektion S. 150. — 3. Präparationsmethoden im allgemeinen S. 151. — 

4. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A. Niedere Tiere S. 161. 
— B. Wirbeltiere S. 170. — C. Bakterien S. 193. — D. Botanisches 

5. 204. — E. Mineralogisch - Petrographisches S. 211. 

(Autorenregister auf der dritten Seite des Umschlags.) 
Neue Literatur 219 



Nachdruck verboten. Übersetzungsrecht vorbehalten. 

Etwaiger Nachdruck aus dieser Zeitschrift findet ohne Erlaubnis 
und ohne Wissen von Herausgeber und Verleger statt. 



Dieses Heft enthält eine Beilage von B. Gr. Teubuer in Leipzig, be- 
treffend: „Schuster, Einführung in die theoretische Optik", auf die 
hiermit besonders verwiesen wird. 



Band XXIV. Heft 2. 



Über die Brownsche Molekularbewegung 
in Gasen, sichtbar gemacht durch ein gewöhn- 
liches Mikroskop. 

Von 
Prof. Dr. Hans Molisch LIBRARY 

in Prag. NEW YORK 

BOTANICAL 



Hierzu zwei Holzschnitte. CiARDEN 



lu einer interessanten vorläufigen Mitteilung liat Ehrenhaft-^ 
gezeigt , daß eine der Brown sehen Molekularbewegung analoge Er- 
scheinung in Gasen durch ultramikroskopische Beobachtungsmethode 
in folgender Weise sichtbar zu machen ist: „Vor das ZEisssche 
Mikroskopobjektiv C wurde eine Kuvette gebracht und bei abgeho- 
bener oberer Quarzplatte unmittelbar an die Frontlinse gekittet. Der 
Gasstrom wurde durch einen Aspirator langsam angesaugt und durch 
Sperren von Hähnen vor und nach der Kuvette zur Ruhe gebracht. — 
Die Dämpfe der Metalle Ag, Au, Pt, im galvanischen Lichtbogen in 
atmosphärischer Luft verdampft , kondensieren zu kleinen , in der 
Luft schwebenden Partikeln , deren mittlere Dimension , aus der In- 
tensität der im Ultramikroskope sichtbar werdenden Beugungsscheib- 
chen oder Punkte beurteilt, einen kleinen Bruchteil der mittleren 
Wellenlänge des Lichtes beträgt, jedenfalls eben zum Teile weit 



^) Ehrenhaft, F., Die Brown sehe Molekularbewegung in Gasen 
(Sitzungsanzeiger d. Kais. Akad. d. Wiss. in Wien, mathem. -naturw. Kl., 
4. Febr. 1907, p. 72). 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 7 



98 Molisch: Über die Brownsche Molekularbewegung in Gasen. XXIV,2. 

unter der Größenordnung 10~^ cm liegt. Es handelt sich also bei 
diesen Beobachtungen um Teilchen, deren Dimensionen unter der 
Größe der mittleren Weglänge der umgebenden Gasmoleküle liegen, 
so daß man die Partikeln als Indices der regellos erfolgenden Be- 
wegung der Gasmoleküle bei ihren Zusammenstößen mit diesen be- 
trachten kann. — Es gelingt dabei, das der Brown sehen Molekular- 
bewegung in Flüssigkeiten, etwa in kolloidalen Metallen, entsprechende 
Analogon in Gasen in noch größerer Lebhaftigkeit zu beobachten. — 
Auch die ultramikroskopischen Teilchen des Zinkoxyddampfes, erzeugt 
durch oszillierende Entladung zwischen Zinkkugeln, des Salmiakdampfes 
oder Zigarettenrauches zeigen die Erscheinung sehr lebhaft, während 
nur bei größeren mikroskopisch sichtbaren Teilchen das Phänomen 
durch die Fallbewegung beeinflußt zu werden scheint." — — 

Seit längerer Zeit mit ähnlichen Erscheinungen beschäftigt, habe 
ich gefunden, daß es in vielen Fällen gelingt, mit einem 




gewöhnlichen Mikroskope, also ohneültramikroskop, 
unter Zuhilfenahme schwacher Objektive das Brown- 
sche Phänomen sogar bei gewöhnlicher Beleuchtung 
in Gasen sichtbar zu machen. 

Zu diesem Zwecke verfahre ich in folgender Weise : Auf einen 
gewöhnlichen Objektträger, wie er zur Beobachtung mikroskopischer 
Präparate dient, wird ein Glasring von etwa 12 mm innerer Weite 
und .3 bis 5 mm Höhe aufgekittet. Auf die Unterseite des Objekt- 
trägers wird genau im Mittelpunkte des Glasringes ein schwarzer 
Tuschepunkt (sehr vorteilhaft erwies sich die käufliche flüssige Perl- 
tusche von G. Wagner) von 1 bis 3 mm Durchmesser gemacht, wo- 
mit bei mikroskopischer Beobachtung eine für unsere Zwecke aus- 
reichende Dunkelfeldbeleuchtung erzielt wird (Fig. 1). 

Hierauf wird von Reichert s Mikroskop mit Objektiv o und 
Okular 2, das eine Vergrößerung von etwa 50 bis 76 gewährt, 



XXIV,2. Molisch: Über die Brownsclie Molekularbewegimg in Gasen. 99 

Scbiebliiilse und Blende vollends entfernt und der scbwarze Punkt 
des Objektträgers genau auf die Mitte der Blendenöffnung eingestellt. 
Sodann bläst man langsam Tabakrauch in die vom Objektträger und 
Glasring gebildete Kammer und bedeckt sogleich mit einem Deck- 
glas (Fig. 2). 

Bei richtiger Einstellung sieht man im direkten Sonnenlichte bei 
möglichst schiefer Beleuchtung die Rauchteilchen auf dunklem Grunde 
als zahllose weiße Pünktchen, die sich in einer wimmelnden, tan- 
zenden oder zitternden Bewegung befinden, genau wie kleine Teil- 
chen in einer Flüssigkeit bei der Brown sehen Molekularbewegung. 
Je mehr die Lichtquelle in ihrer Intensität gesteigert wird, desto besser 
sind die Teilchen zu sehen, weil sie dann infolge der Beugungs- 
scheibchen relativ groß erscheinen. Am besten treten sie im direkten- 
Sonnen- oder Bogenlichte hervor, sie sind aber auch im Lichte eines 
Auerbrenners, einer starken Glühlampe, ja sogar im diffusen Lichte 
eines trüben Himmels recht gut wahrzunehmen. 




2. 



Die Größe des die Dunkelfeldbeleuchtung vermittelnden schwarzen 
Punktes muß selbstverständlich dem verwendeten Objektiv und der 
Entfernung der optischen Ebene von dem Punkte angepaßt sein, ich 
bemerke jedoch, daß man auch ohne diese Art der Dunkelfeldblende 
auskommt , ja zum mindesten ebenso schöne Bilder erhält , wenn 
man alles so beläßt wie früher, die Dunkelfeldbeleuchtung aber da- 
durch hervorruft, daß man bei möglichst schiefer und greller Be- 
leuchtung auf die untere Hälfte des Spiegels Zeige- und Mittelfinger 
oder ein Stück schwarzes Papier hält. Man kann dann oft im 
ganzen Gesichtsfeld die Rauchteilchen in der Luft herumwimmeln 
sehen, ein herrlicher Anblick, der an den nächtlichen Sternenhimmel 
erinnert. — 

Ausgezeichnet kann das Brown sehe Phänomen auch im auffallen- 
den Sonnenlichte gesehen werden. Zu diesem Zwecke bedeckt man 
die ganze Blendenöffnung mit einem schwarzen Papier oder noch 
besser mit einer durch Tusche geschwärzten Glasplatte, bringt unter 



100 Molisch: Über die Brownsche Molekularbewegung in Gasen. XXIV, 2. 

das Objektiv (Reichert 3) die Rauclikammer, vor das Objektiv einen 
undurchsichtigen schwarzen Schirm, der in passender Höhe ein kleines 
(5 mm) breites Loch zum Durchtritt des direkten Sonnenlichtes besitzt, 
welches durch eine Beleuchtungslinse konzentriert wird. 

Im auffallenden Lichte hat bereits Bodaszewsky -^ die Teilchen 
im aufgefangenen Rauch von brennendem Papier , Holz oder einer 
Zigarre sichtbar gemacht. Er betrachtete auf diese Weise auch den 
Chlorammoniumnebel, ferner Dämpfe der Salpetersäure, Schwefelsäure, 
Phosphorsäure und des Schwefels, wobei er die Dämpfe unter dem 
Mikroskope durch einen galvanisch glühenden Platindraht erzeugte. 
In den Dämpfen sah er sich bewegende Teilchen. 

Ein ausgezeichnetes , ungemein bequemes Objekt für derartige 
Studien lernte ich im Phosphor kennen. Wenn man ein kleines, etwa 
hanfsamengroßes Stück Phosphor aus dem Wasser nimmt , in die 
Kammer legt und mit dem Deckglas bedeckt, so bilden sich alsbald 
die bekannten Nebel und schon bei gewöhnlichem Tageslichte sieht 
man bei Anwendung der von mir angegebeneu Versuchsanstellung 
zahllose schwebende Teilchen, die in weißer Farbe erscheinen und 
sich in Brown scher Molekularbewegung befinden. 

Nebenbei können noch besondere Faktoren die Bewegungen der 
Teilchen influieren, so z. B. die ungleiche Erwärmung der Luftteilchen 
in der Nebelkammer , intensive Beleuchtung und ferner die Schwer- 
kraft. Jedes Teilchen schwebt eine Zeitlang, aber man kann bei 
mikroskopischer Beobachtung deutlich sehen , wie es sich nach und 
nach infolge der Schwerkraft langsam senkt. Bei Verwendung von 
Rauch muß man daher nach einigen Minuten (5 bis 10), falls man 
das Phänomen weiter beobachten will, den Versuch wieder erneuern 
und neuen Rauch in die Kammer einblasen. Bei dem Phosplior- 
experiment ist dies nicht nötig, weil sich der Nebel durch viele 
Stunden, ja durch Tage hindurch von selbst erneuert. Auf die Par- 
tikelchen im Phosphornebel wirkt ebenso wie auf die des Rauchs 
die Schwerkraft, ohne aber die Brown sehe Molekularbewegung zu 
verdecken , recht stark ein , wie man schon mit freiem Auge fest- 
stellen kann. Denn wenn das Phosphorstückcheu an die Unterseite 
des Deckglases angeheftet wird, so sieht man den entstehenden Nebel 
gleich einer Säule ziemlich rasch nach abwärts sinken. 



') BoDASZEWSKY, L. J. , Rauch und Dampf unter dem Mikroskop 
(Dinglers polytechn. Journal Bd. CCXXXIX, Jg. 1881, p. 325; vgl. auch 
WiEDEMANNs Beiblätter z. den Ann. d. Physik u. Chemie Bd. VIII, 1884, 
p. 488; ferner: Lehmann, 0., Molekularphysik etc. Bd. II, 1889, p. 5). 



XXIV,2. Molisch: Über die Brownsche Molekularbewegung in Gasen. lOl 

Auch im Puriii'tiiulampf kann man die Teilciien wahrneliincn. .Sehr 
scliön auch im Nebel von Chlorammonium , essigsaurem Amnion etc. 

Nach Ehrenhaft betragen. die kondensierten Teilchen der Metall- 
dämpfe von Silber, Gold und Platin einen kleineu Bruchteil der mitt- 
leren Wellenlänge des Lichtes, jedenfalls sollen sie, aus der Intensität 
der im Ultramikroskope sichtbar werdenden Beugungsscheibchen oder 
Punkte beurteilt, zum Teile weit unter der Größenordnung 10~^ cm liegen. 

Auch die Teilchen des Zinkoxyd-, des Salmiak- oder Zigaretten- 
dampfes bezeichnet Ehrenhaft als ultramikroskopisch , und da er 
seine Beobachtungen überhaupt nur mit dem Ultramikroskop an- 
gestellt hat, so könnte man daraus leicht folgern, daß alle diese ge- 
sehenen Teilchen jenseits der Grenze der gewöhnlichen mikrosko- 
pischen Wahrnehmung sind . Dies ist nun sicherlich all- 
gemein nicht d e r F a 1 1. Bezüglich der Metalldämpfe habe ich 
keine eigenen Erfahrungen , aber bei allen anderen von mir 
beobachteten Objekten handelt es sich um mikrosko- 
pische Teilchen, die schon bei relativ schw^achen 
Vergrößerungen sogar ohne Dunkelfei dbeleuchtung 
zu sehen sind. 

Die Teilchen des Rauchs hat schon Bodaszewsky „als äußerst 
kleine , kaum wahrzunehmende schwarze Punkte" gesehen , deren 
Größe er bei den Rauchpartikelchen näherungsweise auf 0"0002 bis 
O'OOOS [J, schätzt. Sie stünden daher nach dieser Schätzung gerade 
an der Grenze der mikroskopischen Wahrnehmung. Gewiß kommen 
so kleine Teilchen vor, vielleicht auch noch kleinere, aber im Durch- 
schnitt müssen sie wohl größer sein, da man sie ja schon bei ,50facher 
Vergrößerung im durchfallenden Lichte als dunkle Punkte 
sielit und da auch die direkte Messung viel größere Werte angibt. 

Ein bestimmteres Urteil über die wirkliche Größe der Teilchen, 
ihr Aussehen und ihren Aggregatzustand gewinnt man erst, wenn 
man sie in Ruhe betrachtet. Um dies zu ermöglichen, ging ich in 
der Weise vor, daß ich auf einen wohl gereinigten Objektträger 
einen Glasring legte, in diesen Tabakrauch einblies und rasch mit 
einem sauberen Deckglas bedeckte. Die den Rauch zusammensetzen- 
den , einige Minuten schwebenden Partikelchen fallen , der Schwer- 
kraft folgend, schließlich auf die Fläche des Objektträgers und bleiben 
hier haften. Allmählich sammeln sich , besonders beim öfteren Ein- 
blasen von Rauch, so viele Teilchen an, daß der Objektträger inner- 
halb des Glasringes eine deutliche Trübung aufweist. Nach Entfernung 
des Glasringes zeigt sich dann bei stärkeren Vergrößerungen zunächst. 



102 Molisch: Über die Brownsche Molekularbewegiing in Gasen. XXIV, 2. 

daß Kohleteilchen fast ganz oder ganz fehlen , und daß sich die 
Teilchen als mehr minder große, sehr deutlich sichtbare, farblose 
Tröpfchen einer zähflüssigen Substanz präsentieren, die bei gewöhn- 
licher Temperatur wenigstens nach mehreren Tagen sich nicht ver- 
flüchtigt. Fährt man mit einer Nadelspitze durch den niedergeschlagenen 
Belag, so vereinigen sich die zusammengeschobenen Tröpfchen zu einer 
zähflüssigen Masse. 

Derartige Tröpfchen sind der Form nach nicht für den Tabak- 
rauch spezifisch, denn sie finden sich auch im niedergeschlagenen 
Rauch des brennenden Holzes, des Papiers, des Feuerschwamms etc. 
Der Form nach ähnliche Niederschläge bilden auch die schwebenden 
Teilchen des durcli Phosphor erzeugten Nebels. 

Die zur Ruhe gekommenen , am Glase haftenden und als 
tropf chenförmige oder unregelmäßig geformte Körperchen erscheinen- 
den Teilchen besitzen , wenn sie sich noch nicht durch Interferenz 
zu größeren Tröpfchen vereinigt haben, verschiedene Größe, die nach 
Messungen mit dem Mikrometer durchschnittlich 2 bis 0*3 // be- 
tragen. Doch ist dabei zu bedenken, daß solche Teilchen, wenn sie 
als Tröpfchen in der Luft schweben , einen kleineren Durchmesser 
aufweisen werden als auf dem Glase, wo sie sich ja nach Tropfen- 
art verbreitern. Wie es auch immer mit ihrer wahren Größe be- 
stellt sein mag, jedenfalls sind sie großenteils sicher nicht ultra- 
mikroskopisch , was ja auch unter anderem schon daraus hervor- 
geht, daß man sie schon bei öOfacher Vergrößerung im durchfallenden 
Lichte schweben sieht. Ja, noch mehr. Ich^ habe vor kurzem 
gezeigt, daß man die Brown sehe Molekular bewegung in Flüssig- 
keiten, die man bisher nur mit dem Mikroskope gesehen hat, auch 
mit freiem Auge oder mit einer guten Lupe zur Anschauung bringen 
kann, wofür man passende mikroskopische Präparate (Milchsaft von 
Euphorbia splendens, Tusche etc.) im direkten Sonnenlichte betrachtet. 
Dasselbe läßt sich nun auch mit Tabakrauch und dem durch Phos- 
phor erzeugten Nebel zeigen, falls man den Rauch oder den Nebel 
in meiner Glaskammer im direkten Sonnenlichte bei klarem Himmel 
mit einer starken Lupe betrachtet. Man sieht dann zahllose, außer- 
ordentlich kleine, weiße Teilchen in der Luft schweben, die allmäh- 
lich zu Boden sinken. 



^) Molisch, Hans, Über die Sichtbarmachung der Bewegung mikro- 
skopisch kleinster Teilchen für das freie Auge (Sitzber. d. Kais. Akad. d. 
Wiss. in Wien, mathem.-naturw. KL, Bd. XCVI, Jg. 1907, Abt. I, p. 67). 



XXIV,2. Molisch: Über die Brownsche Molekularbewegung in Gasen. 103 

Über den chemisclien Charakter der in Brown scher Bewegung 
befindiiclien Partikelchen läßt sich derzeit nichts Bestimmtes aus- 
sagen, weder beim Tabakraucli noch beim Phosphornebel. Die Chemie 
des ersteren ist eine so komplizierte und die des letzteren eine viel- 
fach so strittige, daß es überaus schwierig ist, sich ein sicheres 
Urteil über die chemische Natur der schwebenden Teilchen zu bilden. 
Vielleicht bestehen sie beim Phosphornebel aus einem Phosphoroxyd 
mit oder ohne Wasserhüllen. 

Kehren wir nun zu der eigentümlichen Bewegung der schweben- 
den Teilchen zurück, so möchte ich in historischer Beziehung be- 
merken, daß bereits Bodaszewsky (1. c.) in dieser Bewegung „ein 
angenähertes Bild der hypothetischen Bewegung der Gasmoleküle 
nach der kinetischen Gastheorie" wahrzunehmen geglaubt hat. In 
jüngster Zeit hat auch v. Smoluchowski^ unter kritischer Würdigung 
der über das Brown sehe Phänomen bekannt gewordenen Tatsachen 
der kinetischen Natur der Brown sehen Molekularbewegung in Flüssig- 
keiten das Wort geredet und in, wie mir scheint, überzeugender 
Weise dargetan , daß die Bewegung der in B. Molekularbewegung 
befindlichen Teilchen durch die Bewegungsantriebe seitens der Flüssig- 
keitsmoleküle hervorgerufen wird, und daß wir die Brown sehe Er- 
scheinung als einen Beweis unserer molekular-kinetischen Hypothesen 
betrachten dürfen. 

Er hat auch bereits aut Grund von theoretischen Erwägungen 
geschlossen, daß es auch in Gasen eine Molekularbewegung nach 
Art des BROWNSchen Phänomens, und zwar mit noch größerer Ge- 
schwindigkeit als in Flüssigkeiten geben muß. 

Die Beobachtungen Ehrenhaft s mit dem Ultramikroskop und 
die meinigen mit dem gewöhnlichen Mikroskop erheben die v. Smo- 
LUCHOwsKische Vermutung zur Gewißheit. — 



^) Smoluchowski , M. v. , Zur kinetischen Theorie der Brown sehen 
Molekularbewegung und der Suspensionen (Annalen d. Physik, 4. Folge, 
Bd. CCXI, 1906, p, 756). 

Prag, am 20. April 1907. 

K. K. Pflanzenphysiologisches Institut 
der deutschen Universität. 

[Eingegangen am 23. April 1907.] 



104 Siedentopf: Paraboloid- Kondensor. XXIV, 2. 



Paraboloid - Kondensor, 

eine neue Methode für Dunkelfeldbeleuchtung zur Sicht- 
barmachung und zur Moment -Mikrophotographie lebender 
Bakterien etc. (insbesondere auch für Spirochaete palhda). 

Von 

H. Siedentopf 

in Jena. 



Hierzu eine Textfigur. 



Vom optischen Standpunkt ist für die Spirochaete pallida weniger 
ihre geschlängelte Form charakteristisch , als ihre außerordentliche 
Dünne, welche meist unter der Auflösbarkeitsgrenze der Mikroskop- 
Objektive liegt, also ultramikroskopisch ist. Infolgedessen empfehlen 
sich zu ihrer bequemen Sichtbarmachung im lebenden, ungefärbten 
Zustande die Methoden der Dunkelfeldbeleuchtung in Verbindung mit 
spezifisch hellen, künstlichen Lichtquellen, weil hierbei durch den 
größeren Kontrast bessere Bedingungen für die Sichtbarmachung ge- 
schaffen werden. Natürlich soll hiermit nicht gesagt sein, daß man 
die lebenden Spirochäten wenigstens in größeren Individuen bei der 
üblichen mikroskopischen Abbildung dunkel auf hellem Grunde unter 
Verwendung enger, zentraler Beleuchtungskegel und starker Objektive 
nicht auch sehen kann. Es setzt dies aber einen sehr geübten 
Mikroskopiker voraus und auch ihm werden noch die meisten nltra- 
mikroskopischen Gebilde entgehen, welche die Dunkelfeldbeleuchtung 
auch dem weniger Geübten leicht offenbart. Dazu kommt die emp- 
findliche Störung durch die sogen, mouches volantes, welche bei 
engen Beleuchtungskegeln eine unangenehme Beigabe darstellen, zu- 
mal wenn auf hellem Grunde nur schwach differenzierte Objekte 
beobachtet werden. Sie bleiben unmerklich bei Dunkelfeldbeleuchtung. 
Von praktischer Wichtigkeit ist, daß die Mikroskop - Objektive bei 
Dunkelfeldbeleuchtung infolge des höheren Kontrastes eine größere 
Sehtiefe als sonst besitzen. Ferner ist bei Dunkelfeldanordnungen 
mit schiefer Beleuchtung von hoher Apertur das Auflösungsvermögen 



XXIV,2. Sied en t opf : Paraboloid- Kondensor. 105 

höher, so daß man sich meist mit mittelstarken Systemen von 7 bis 4 mm 
Brennweite begnügen kann : auch das ermöglicht eine größere Seh- 
tiefe und ausgedehnteres Gesichtsfeld, als wenn man mit den stärk- 
sten kurzbrennweitigen Objektiven zu suchen gezwungen ist. 

Diesen Vorzügen der Dunkelfeldbeleuchtung steht der Nachteil 
gegenüber, daß man auf die Reinheit der Präparate viel mehr zu 
achten hat. Denn außer vielem unbekannten Detail enthüllt die 
Methode auch alle Oberlläehenfehler der Deckgläser und Objekt- 
träger und die Unreinlichkeiten in der zu untersuchenden Substanz. 
Freilich ist das kein ernster Nachteil, auch beim gewöhnlichen Mikro- 
skopieren soll man die nötige Sorgfalt in der Anfertigung reiner 
Präparate nicht außer acht lassen. Eine der Dunkelfeldbeleuchtung 
spezifische Störung entsteht aber durch den ultramikroskopischen 
Staub der Luft und es erfordert schon besondere Achtsamkeit, sich 
davon möglichst frei zu machen. Die Wirkung dieses überall vor- 
handenen, feinsten Staubes tritt besonders deutlich in Erscheinung, 
wenn man ein sonst sehr gutes und reines Präparat etwa eine halbe 
Stunde lang unter dem Mikroskop bei Dunkelfeldbeleuchtung stehen 
läßt. Dann hat sich auf das vorher gut gereinigt gewesene Deck- 
glas bereits so viel von diesem Staub gelegt, daß durch seine ver- 
schleiernde Wirkung die Dunkelfeldbeleuchtung meist verdorben ist. 
Durcli vorsichtiges Abstäuben oder Abschwemmen von der Ober- 
fläche des Deckglases läßt sich dieser störende Staub meist leicht 
beseitigen. 

Für die Sichtbarmachung lebender Bakterien kommt die von 
mir in Gemeinschaft mit R. Zsigmondy ausgearbeitete , besondere 
ultramikroskopische Methode nicht in Betracht. Dieselbe hat wesent- 
lich Bedeutung für die Untersuchung von kolloidalen, flüssigen und 
festen Lösungen oder zur Feststellung feinster Trübungen bei Präzi- 
pitinen u. dgl. Dagegen ist die ultramikroskopische Methode der 
Abbleudung an der Frontlinse des Objektivs in Verbindimg mit dem 
Wechselkondensor von Zeiss^ hierfür geeignet. Ihr Vorzug besteht 
darin, die Anwendung der stärksten Immersionsobjektive zu gestatten, 
ihr Nachteil in dem starken Hervortreten farbiger Diff'raktionssäume. 

Eine andere, äußerst einfache Dunkelfeldbeleuchtung ^ verlangt 
nur das Einlegen einer Blende von 24 mm Durchmesser unter dem 
Immersionskondensor von 1*4 num. Apertur. Der Objektträger wird 



1) Siedentopf, H., Journ. Roy. Micr. Soc. (1903), p. 573—578. 

2) Siedentopf, H., Zeitschr. f. wiss. Mikr. Bd. XXIV, 1907, p. 13—20. 



106 Siedentopf: Paraboloid -Kondensor. XXIV, 2, 

hierbei durch Zedernholzöl mit dem Kondensor verbunden. Infolge 
der Totalreflexion am Deckglase tritt bei Anwendung von Trocken- 
systemen eine sehr brauchbare Duukelfeldbeleuchtung ein. 

In der allgemeinen Leistungsfähigkeit, wie auch im Preise 
zwischen diesen beiden Anordnungen steht die recht eigentlich für 
die Untersuchung kleinster, lebender Bakterien (wenn auch natürlich 
nicht allein hierfür) geeignete Methode der Dunkelfeldbeleuchtung 
mittels Paraboloid -Kondensor von Zeiss (Preis 40 Mk.). Die Methode 
ist schon früher angegeben^ und verwendet worden. 

Von Wenham und Stephenson ist bereits noch viel früher ein 
solches Paraboloid angegeben. Die Wirkung wurde aber nicht recht 
erkannt, indem fälschlich angenommen wurde, daß durch die Total- 
reflexion am Deckglase eine Beleuchtung von oben her stattfände 
und hierdurch das Objekt sichtbar würde. Zu jenen Zeiten war 
eben von Beugung des Lichtes an mikroskopischen und ultramikro- 
skopischen Objekten noch nichts bekannt. Von C. Reichert (Österr. 
Chem. Zeitg. Jg. X, 1907, p. 5 — 7) ist die Paraboloidfläche durch 
eine sphärische ersetzt. Infolge des großen Astigmatismus entsteht 
dadurch eine erhebliche Helligkeitsverminderung gegenüber dem 
Paraboloide. 

Ich habe neuerdings dafür Sorge getragen, daß diese Para- 
boloide in einer wesentlich gegen früher verbesserte Form her- 
gestellt werden, wodurch ihre Leistungsfähigkeit erheblich gestiegen 
ist. Der Paraboloid- Kondensor läßt sich an jedem Mikroskop ohne 
weiteres anbringen, welches eine Kondensor-Schiebhülse von üblicher 
Weite (36 '8 mm) besitzt. Er wird an Stelle des Kondensors soweit 
eingeschoben, bis seine Oberfläche ungefähr in Tischhöhe liegt. 
Hierauf wird mit Zederuholzöl eine möglichst blasenfreie Verbin- 
dung zwischen der Unterseite des Objektträgers (von 1"0 bis 1'5 mm 
Dicke) und dem Kondensor hergestellt. Der Kondeusortrieb wird 
zur Regulierung der Beleuchtung nicht betätigt. Die beleuchtenden 
Strahlen haben eine numerische Apertur von etwa 1*1 bis 1*4; sie 
werden an der Oberfläche des Deckglases total reflektiert, wenn sich 
Luft darüber befindet. Gegenüber der einfachen Abbiendung im 
Immersionskondensor besitzt das Paraboloid den Vorteil der weitaus 
besseren sphärischen Korrektion, aber vor allem bestehen keine 
Farbenfehler, weil die Strahlen im Glasparaboloid durch Spiegelung, 



1) Siedentopf, H. , Berliner klin. Wochenschr. 1904, Nr. 32. — Gai- 
DUKOv, N., Verhandl. d. D. Zoolog. Ges. (1906), p. 250—258. 



XXIV, 2. 



Siedentopf: Paraboloid - Kondensor. 



107 



statt durch Brechung gesammelt werden. Zur Beobachtung werden 
mittelstarke Trockensysteme benutzt ; am besten ist hier das Ob- 
jektiv DD mit Korrektionsfassung von Zeiss. Die besten Resultate 
werden erzielt, wenn dieses Objektiv mittels einer kleinen Zentrier- 
vorrichtung am Tubus angeschraubt wird, denn mit Hilfe dieser 
kann der Fokus des Paraboloids mit dem des Objektivs zusammen- 
gebracht werden. 

Starke Kompensationsokulare (Nr. 12 oder 18) vervollständigen 
die optische Ausrüstung. Als Lichtquellen sind nur künstliche zu 
empfehlen: Gas- Spiritus -Glühlicht, Nernst- Licht oder am besten 
elektrisches Bogenlicht. Mittels einer sogen. Schusterkugel, welche 
in je 15 cm Abstand zwischen Lichtquelle und Mikroskopspiegel 




steht, wird auf letzterem ein Bild der Lichtquelle entworfen und 
gleichzeitig für die Abhaltung schädlicher Wärme vom Präparat ge- 
sorgt. Praktische Demonstrationen an frischem Spirochätenmaterial 
haben die Zweckmäßigkeit dieser Methode dargetan. 

Bei Anwendung von Sonnenlicht oder von elektrischem Bogenlicht 
und vorteilhaft unter Benutzung des früher^ angegebenen Mikroskop- 
aufsatzes für gleichzeitige subjektive und objektive Beobachtung ist 
die Beleuchtung mit diesem Paraboloid -Kondensor intensiv genug, 
um die Herstellung von Momentmikrophotographien lebender Bakterien 
zu gestatten. 



p. 325. 



1) Siedentopf, H., Zeitschr. f. Elektrochemie (1906), p. 593 und (1907), 



108 Siedentopf: Paraboloid- Kondensor. XXIV, 2. 

Der Strahlengang im Paraboloide ist ans vorherstehender Figur 
ersichtlich. Die beleuchtenden Strahlen sind ausgezogen, die im 
Objekt abgebeugten gestrichelt. P ist der plankonvexe Glaskörper, 
dessen konvexe Krümmung ein genaues Rotations-Paraboloid darstellt. 
B ist die Zentralblende, welche Strahlen von der Apertur bis l'l 
abhält. Um eine Erwärmung dieser Blende zu verhüten, ist sie mit 
Spiegelbelag versehen. In der Oberfläche des Objektträgers liegt 
der Fokus des Paraboloids. 

Bei der einfachen Methode der Abbiendung im Immersions- 
Kondensor und auch beim Paraboloid -Kondensor treten infolge der 
ringförmigen Seitenbeleuchtung Beugungssäume im Bilde vollkommen 
zurück. Sie erscheinen nur bei exzentrischer Beleuchtung, wenn 
dadurch einzelne Teile des beleuchtenden Ringes ausgeschaltet werden. 
Verstellt man bei sonst gut zentrischer Beleuchtung den Mikroskop- 
spiegel aus der Stellung für gleichmäßige Bildhelligkeit, so bemerkt 
man leicht, daß die Spirochäten ganz verschieden abgebildet werden 
können, je nach der relativen Stellung ihrer im Räume gekrümmten 
Linienelemente gegen die zur Geltung kommenden , beleuchtenden 
Strahlen. Die Zickzacklinie erscheint unterbrochen , so daß je nur 
die einen oder die anderen der unter sich parallelen Striche auf- 
treten. Oder es erscheint jeder der Striche in zwei getrennte Punkte 
aufgelöst. Auf diese Weise können fünf typisch verschiedene, mikro- 
skopische Bilder derselben Spirochäte , je nach der Spiegelstellung, 
erzielt werden. Diese Erscheimmg beruht darauf, daß kleine mikro- 
skopische Linienelemente von ultramikroskopischer Breite bei seit- 
licher Beleuchtung am stärksten Licht abbeugen, wenn ihre Längs- 
richtung senkrecht steht zur Hauptachse der beleuchtenden Strahlen 
und wenn zugleich bei elliptischem Querschnitt des beleuchtenden 
Büschels dieses Linienelement parallel der längeren Achse der El- 
lipse liegt. 

[Eingegangen am 4. Juli 1907.] 



XXIV, 2. Röthig: Kern- u. Protoplasra;ifärbung der Ganglienzelle etc. 109 



Wechselbeziehung zwischen metachromatischer 
Kern- und Protoplasmafärbung der Ganglienzelle 
und dem Wassergehalt alkoholischer Hämatoxvlin- 



lösungen. 



Zweite und dritte Mitteilung 



von 



Dr. Paul Röthig 

in Berlin. 



Hierzu eine Textfigur. 



IL 

Im dritten Hefte des XXIII. Bandes der Zeitschrift für wissen- 
schaftliclie Mikroskopie veröffentliclite ich unter dem gleichen Titel 
eine Untersuchung, aus der hervorging, daß während einerseits eine 
einprozentige alkoholische Häraatoxylinlösuug unter gewissen Be- 
dingungen das Protoplasma der Ganglienzellen und den Nucleolus rot 
färbt, den Kern dagegen ungefärbt läßt, anderseits eine konzentrierte 
wässerige Hämatoxylinlösung alles, Protoplasma, Nucleolus und Kern, 
braunrot oder gelblichrot tingiert, die metachromatische Blaufärbung 
des Kernes (mit Ausnahme seines Nucleolus) und die Stärke seiner 
Färbung in Abhängigkeit steht von dem Wassergehalt der Häma- 
toxylinlösung. Es mußte sich nun die Frage nach dem Grunde dieser 
Erscheinung erheben ; von Herrn Privatdozenten Dr. L. Spiegel in 
Berlin wurde ich darauf aufmerksam gemacht , daß vielleicht durch 
den Wasserzusatz in der alkoholischen Hämatoxylinlösung Dissozia- 
tionen hervorgerufen würden, die ihren Ausdruck fänden in der 
Änderung der Färbungsfähigkeit der alkoholischen Hämatoxylinlösung. 
Ich wurde so dazu geführt, die Leitfähigkeit für den elektrischen 
Strom, für die alkoholische und wässerige Hämatoxylinlösung, sowie 
für eine große Anzahl ihrer Alkoholwassergemische zu bestimmen 



110 Röthig: Kern- u. Protoplasmafiirbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 

und zu prüfen , ob sich vielleicht eine Änderung der Leitfähigkeit 
analog der Änderung der Färbeeigenschaft nachweisen ließ. 



A. Physikalischer Teil. 

Diese Versuche wurden in dem chemischen Laboratorium von 
Prof. Rosenheim und Dr. Meyer, Berlin, Chausseestr. 2 e angestellt ; 
ich bin Herrn Prof. Rosenheim und Herrn Dr. Meyer für die Er- 
laubnis , in ihrem Laboratorium arbeiten zu dürfen , sowie für die 
Bereitwilligkeit, mit der mir die Mittel des Institutes zur Verfügung 
gestellt wurden , und die so häufig gewährte Belehrung und Unter- 
stützung zum tiefsten Danke verpflichtet. Es ist mir ein Bedürfnis, 
denselben den genannten Herren, sowie auch Herrn Dr. Koppel auch 
an dieser Stelle auszusprechen. 

Zur Bestimmung der Leitfähigkeit diente mir die Kohlrausch sehe 
Widerstandsbrücke 5 die Stromlosigkeit derselben wurde durch ein 
Telephon konstatiert. Die Berechnung der Versuchsergebnisse er- 
folgte nach den Formeln: 

K, 



1 


• w, 


^2 


w 


2^2 = 


= C 




W, = 


_ R • bd 
ad 


C- 


ad 





^^~~ R.bd 

Hierbei ist Kx = der gesuchten Leitfähigkeit; C = der Kapa- 
zität des Meßgefäßes ; ad und bd = den ablesbaren Drahtlängen der 
Widerstandsbrücke ; R = dem Vergleichswiderstand. [Vgl. hierzu 
Ostwald -Luther: Hand- und Hilfsbuch zur Ausf��hrung physiko- 
chemischer Messungen, 2. Aufl. Leipzig 1902; p. 396 u. 407.] 

Die Kapazität (C) wurde gleich 0*202 bestimmt, als Vergleichs- 
widerstand (R) 10000 Ohm gewählt, so daß die Berechnung der 
Leitfähigkeit (K) zu erfolgen hat nach der Formel 

0-202 • ad 



10000 • bd 



XXIV, 2. Rüthig: Kern- u. Protoplasmafiirbung der Ganglienzelle etc. 1 1 1 

Es wurden im allgemeinen stets zwei Vergleichsmessungen un- 
mittelbar nacheinander ausgeführt ; in den folgenden Tabellen sind 
sowohl diese Werte als auch die aus ihnen berechneten Mittelwerte 
aufgeführt. 

I. 

Leitfähigkeit (K) O'lprozentiger alkoholischer 
Hämatoxylinlösungen. 

1) Die Lösung wurde am 30. X. 06 durch Schütteln hergestellt ; 
Farbe derselben dunkelrot; Bestimmung der Leitfähigkeit am 1.XL06, 
also 48'^ nach der Anfertigung der Lösung, während welcher die 
Lösung im Dunkeln stand. 



Messung 1 



K = 0-000001 IG 



Messung 2 
K = 0-00000117 



Mittelwert 
K = 0-00000117 = M7 x !0-6 



2) Diese selbe Lösung nach 24 stündigem Stehen im Lichte. 



Messung am 2. XL 06. 



Messung 1 
K = 0-00000103 



Messung 2 
K = 0-00000107 



Mittelwert 
K = 0-00000105 = 1-05 x 10-« 



3) Lösung, die lange, mehrere Wochen, im Licht gestanden hat. 



Messung 1 
K = 0-00000179 



Messung 2 
K = 0-00000222 



Mittelwert 
K = 0-00000201 = 
K = 2-01 X 10-6 



Aus diesen drei Tabellen geht hervor, daß die Leitfähigkeit 
einer O'lprozentigen alkoholischen Ilämatoxylinlösung mit längerer 
Aufenthaltsdauer im Tageslicht zunimmt, in unserem speziellen Falle 
von 1-17X10-^ auf 2-01 X 10"^. Ob diese Zunahme in gleicher 
Weise allmählich erfolgt , müssen spezielle auf diesen Punkt ge- 
richtete Untersuchungen ermitteln , die ich mir für einen späteren 
Zeitpunkt vorbehalte; über den Wert der Tabelle I^ gebe ich vor 
der Hand kein Urteil ab , da er bei dem geringen Unterschied 
gegen Wert der Tabelle P vielleicht auf einem Beobachtungsfehler 
beruht. 



112 Röthig: Kern- u. Protoplasmafärbung- der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 



II. 

Leitfähigkeit (K) einer O'l proz entigen wässerigen 
Hämatoxylinlösung, die 8 Tage im Tageslichte ge- 
standen hat und deren Farbe strohgelb ist. 

1) Messung am 30. X. 06. 



Messung- 1 
K = 0-0000302 



Messung 2 
K = 0-0000328 



Mittelwert 
K = 0-0000315 = 
K = 315 X 10-5 



2) Messung am 31. X. 06. 



Messung 1 
K = 0-0000239 



Messung 2 
K = 0-0000231 



Mittelwert 
K = 0-0000235 =■ 
K = 2-35 X 10-5 



Messung 3 
K = 0-0000273 



Messung 4 
K = 0-0000282 



Mittelwert 
K = 0-0000278 = 
K = 2-78 X 10-5 



Mit welchen labilen Verhältnissen man aber bei den unter I. 
Tlnd II. erwähnten Messungen und, wie ich gleich hervorheben will, 
auch bei den folgenden Untersuchungen zu rechnen hat, geht daraus 
hervor, daß im Gegensatz zu den unter I. und II. gefundenen Werten 
die spezifische Leitfähigkeit (K) einer O'lprozentigen wässerigen 
Hämatoxylinlösung, die gleich nach der Herstellung der Lösung am 
8. V. 07 bestimmt wurde, im Mittel von drei Messungen 0"00000937 
betrug; die spezifische Leitfähigkeit einer ebenfalls frisch bereiteten 
O'lprozentigen alkoholischen Hämatoxylinlösung war am 8. V. 07 
auch im Mittel aus drei Messungen 0'000000458. Beide Werte 
differieren von den unter I. und IL aufgeführten ganz beträchtlich ; 
da gröbere Beobachtungsfehler mit Sicherheit auszuschließen sind^ 
spielen vorläufig noch unbekannte Faktoren in der Beeinflussung der 
Untersuchungsergebnisse eine große Rolle ; sie nötigen uns aber auch, 
in der Verwertung unserer Resultate so vorsichtig wie möglich 
zu sein. 



XXIV, 2. Röthig: Kern- u. Protoplasraafärbung der Ganglienzelle etc. 113 



III. 



Leit ftiliigk eit (K) des Alkohols, der zur Herstellung 
der iu I^ und II- erwähnten 0*1 proz entigen alkoholi- 
schen Hämatoxylinlösung diente (Messung am 2. XI. 06). 



Messung 1 
K = 0-000000444 



Messung 2 ■ 
K = 0-000000444 



Messung 3 
K = 0-0000004(56 



Mittelwert 
K = 0-000000451 
K = 4-51x10- 7 



IV. 

Leitfähigkeit (K) des Wassers, mit dem die in II. er- 
wähnte O'lprozentige wässerige Hämatoxylinlösung 
hergestellt wurde (Messung am 2. XL 06). 

Es wurden sechs Messungen gemacht, deren Werte einen kon- 
stanten allmählichen Anstieg zeigen, nämlich : 

Messung 1. K = 0-0000131 = 1-31x10-5 

„ 2. K = 0-0000159 = 1-59x10-5 

3. K = 0-0000173 = 1-73x10-5 

4. K = 0-0000188 = 1-88x10-5 

5. K = 00000195 = 1-95x10-5 
„ 6. K = 0-0000204 = 2-04x10-5 

Vergleicht man nun die Tabellen I und III, II und IV mitein- 
ander, so sieht man, daß das Häraatoxylin die Leitfähigkeit des 
Wassers iu stärkerem Grade als die des Alkohols erhöht. 



Leitfähigkeit (K) der Gemische von 0*1 prozentiger 

alkoholischer Hämatoxylinlösung mit O'lprozentige r 

wässeriger Hämatoxylinlösung. 

Die alkoholische Hämatoxylinlösung ist die in der Tabelle I"' 
erwähnte, von dunkelroter Farbe ; die wässerige diejenige der Tabelle IL 
Messung am 30. X. 06. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 



8 



114 Röthig: Kern- u. Protoplasmafärbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 



Mischungsverhältnis Messung 1 



1) HjO -Lösung 
Alkohol-Lösg. 

2) HoO- Lösung 
Alkohol-Lösg. 

3) HgO -Lösung 
Alkohol-Lösg. 

4) H2O- Lösung 
Mischung 3) 

5) H2O- Lösung 
Mischung 4) 

6) H2O -Lösung 
Mischung 5) 

7) H2O -Lösung 
Mischung 6) 

8) HgO- Lösung 
Mischung 7) 

9) H2O -Lösung 
Mischung 8) 

10) H2O- Lösung 
Mischung 9) 



Itni 
10 


s 
cc 


40 


)) 


20 


V 


30 


n 


25 


» 


25 


7) 


25 


n 


25 


n 


25 


)) 


25 


)) 


25 


» 


25 


» 


25 


n 


25 


n 


25 


V 


25 


n 


25 


)) 


25 


» 


25 


)) 


25 


n 



K = 0-00000283 
K = 0-00000531 
K = 0-00000614 
K = 0-00000965 
K = 0-0000118 
K = 0-0000129 
K = 0-0000142 
K = 0-0000139 
K = 0-0000150 
K = 0-0000159 



Messung 2 
K = 0-00000294 

K = 0-00000548 

K = 0-00000616 

K = 0-00000983 

K = 00000124 

K = 0-0000133 

K = 0-0000147 

K = 0-0000145 

K = 0-0000155 

K = 0-0000166 



Mittelwert 

K = 0-00000289 = 
K = 2-89x10-6 

K = 0-00000540 = 
K = 5-40 X 10-« 

K = 0-00000615 = 
K:= 6-15x10-6 

K = 0-00000974 = 
K = 9-74x10-6 

K = 0-0000121 = 
K = l-21xl0-''> 
K = 00000131 = 
K = l-31xl0-s 

K = 00000145 = 
K = 1-45x10-5 

K = 0-0000142 = 
K = 1-42x10-5 

K = 0-0000153 = 
K = 1-53 X 10-5 

K = 0-0000163 = 
K = 1-63 X 10-5 



Zu vorstehender Tabelle ist zu bemerken, daß bei 8) augen- 
scheinlich ein Beobachtungsfehler vorliegt ; der Vollständigkeit wegen 
wurden aber die Werte trotzdem aufgenommen. Schaltet man sie 
aus und stellt die für K erhaltenen Mittelwerte unter Berücksich- 
tigung des Prozentgehaltes an Alkohol der jeweiligen Mischung zu- 



sammen, so 

1) 
2) 
3) 
4) 
5) 
6) 
7) 
9) 
10) 



ergibt sich folgende Reihe : 



80 Prozent Alkohol 

60 

50 „ 

25 „ „ 

12-5 „ 

6-25 „ 

3- 125 „ 

0-78 „ 

0-39 „ 



K = 0-00000289 : 
K = 0-00000540 : 
K = 0-00000615 : 
K = 0-00000974 
K = 0-0000121 : 
K = 0-0000131 : 
K = 0-0000145 : 
K = 0-0000153 : 
K = 0-0000163 : 



2-89x10-6 
5-40x10-6 
615x10-6 
9-74x10-6 
1-21x10-5 
1-31x10-5 
1-45x10-5 
1-53x10-5 
1-63x10-5 



Diese Werte , als Kurve aufgezeichnet , ergeben die Kurve 1 
(Kj = -f-). Abweichende Werte ergaben für die spezifische Leit- 
fähigkeit die Mischungen der am 8. V. 07 angefertigten, O'lprozen- 



XXIV, 2. Rüthig: Kern- u. Protoplasmafiirbimo' der Ganglienzelle etc. 115 



tigen wässerigen und O'lprozentigen alkoholischen Hämatoxylinlösung ; 
man erhielt für 



1) 
2) 
3) 
4) 
5) 
6) 
7) 



90 Prozent Alkohol 

80 

70 

60 

50 

40 

30 



K = 0-0000()0G92 
K ^ 0-000000749 
K = 0-000000961 
K == 0-00000176 
K = 0-00000197 
K = 0-00000195 
K = 0-00000243 



Stellt man diese Werte in Form einer Kurve dar , so erhält 
man die Kurve 2 (K^ = O). 

Die in umgekehrter Reihenfolge angefertigten Mischungen der 
in II erwähnten wässerigen Hämatoxylinlösung mit der alkoholischen 
Hämatoxylinlösung der Tabelle P ergeben folgende Werte: 



Messung 1 



Mischungsverhältnis 

1) Alkohol-Lüsg. 25 cc K = 0-00000435 
HoO- Lösung 25 „ 



2) Alkohül-Lösg. 25 „ 
Mischung 1) 25 „ 

3) Alkohol-Lösg. 25 „ 
Mischung 2) 25 „ 

4) Alkohol-Lösg. 25 „ 
Mischung 3) 25 „ 



K = 0-00000176 



K = 0-00000135 



K = 0-00000116 



Messung 2 
K = 0-00000447 



Mittelwert 

K = 0-00000441 = 
K = 4-41x10-6 

K = 0-00000186 K = 000000181 = 
K^ 1-81x10-6 

K = 0-00000139 K = 0-00000137 = 
|k 3= 1-37x10-« 

K = 0-00000120 j K z= 0-00000118 = 
K = 1-18x10-6 



1) 


50 Prozent H2O 


2) 


25 „ 


3) 


12-5 „ 


4) 


Ö-25 „ 



Stellt man jetzt die Mittelwerte dieser Tabelle nach dem Prozent- 
gehalt an Wasser zusammen, so ergibt sich folgende Reihe : 



K = 0-00000441 =4-41x10-6 
K = 0-00000181 = 1-81x10-6 
K = 0-00000137 = 1-37 x 10-6 
K = 0-00000118 = 1-18 X 10-6 



Diese Werte, in Kurvenform geschrieben, ergeben die Kurve 3 
(K3 = X). 

Ich habe nun schließlich, um Vergleichswerte und Vergleichs- 
kurven zu den aus den Mischungen der alkoholischen und wässerigen 
Hämatoxylinlösungen erhaltenen Leitfähigkeitswerten zu bekommen, 
die entsprechenden Mischungen lediglich aus dem Alkoliol und dem 
Wasser der Hämatoxylinlösungen hergestellt und deren Leitfähigkeit 

8* 



116 Röthig: Kern- u. Protoplasmafiirbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2 



bestimmt. Die erhaltenen Werte (also für reine Alkohol -Wasser- 
gemische) sind die folgenden (Messung am 2. XI. 06) : 



Mischungsverhältnis 

1) Alkohol 25 cc 
H,0 25 „ 

2) H^O 25 „ 
Mischung 1) 25 „ 

3) H,0 25 „ 
Mischung 2) 25 „ 

4) H,0 25 „ 
Mischung 3) 25 „ 

5) 11,0 25 „ 
Mischung 4) 25 „ 

6) H^O 25 „ 
Mischung 5) 25 „ 

7) H,0 25 „ 
Mischung 6) 25 „ 

8) H.2O 25 „ 
Mischung 7) 25 „ 

9) H2O 25 „ 
Mischung 8) 25 „ 



Messung 1 
K = 0-0Ü000280 

K = 0-00000513 

K = 000000643 

K = 0-00000762 

K = 0-00000780 

K = 0-00000919 

K = 0-0000102 

K = 0-0000106 

K = 0-0000112 



Messung 2 
K = 0-00000280 

K = 0-00000518 

K = 0-00000669 

K = 0.00000802 

K = 0-00000888 

K = 0-00000972 

K = 0-0000105 

K = 0-0000110 

K = 0-0000116 



Mittelwert 

K = 0-00000280 = 
K= 2-80x10-« 

K = 0-00000516 = 
K = 5-16xlO-« 

K = 0-00000656 = 
K = 6-56x10-« 
K = 0-00000782 = 
K = 7-82x10-« 
K = 0-0000087;) = 
K = 8-79x10-« 
K = 0-00000946 = 
K = 9-46x10-« 
K = 0-0000104 = 
K-- 104x10-'» 
K = 0-0000108 = 
K = l-08xl0--> 
K = 0-0000114 = 
K = l-14xl0— > 



Stellt man nun wieder die Mittelwerte obiger Tabelle nach dem 
Prozentgehalt der Mischungen an Alkohol zusammen , so ergibt sich 
folgende Reihe : 



1) 
2) 
3) 
4) 
5) 
6) 
7) 
8) 
9) 



50 Prozent Alkohol 

25 „ 

12-5 „ 

6-25 „ 

3-13 „ 

1-57 „ 

0-79 „ 

0-40 „ 

0-20 „ 



K = 0-00000280 : 
K = 0-00000516 : 
K = 0-00000656 
K = 0-00000782 



2-80x10-6 
5-16x10-6 
6-56x10-6 
7-82x10-6 



K = 0-00000879 = 8-79x10-6 
K = 0-00000946 = 9-46x10-6 
K = 0-0000104 =1-04x10-5 
K = 0-0000108 =108x10-5 
K = 0-0000114 =114x10-5 



Diese Werte ergeben die Kurve 4 (K^ 



')• 



Da bei den Färbungsversuchen meiner ersten Mitteilung auf die 
durch den Wasserzusatz hervorgerufene Konzentrationsänderung keine 
Rücksicht genommen war, habe ich in folgender Tabelle die Leit- 
fähigkeit ähnlicher Mischungen bestimmt, d. h. von Mischungen der 



XXIV, 2. Rütliig: Kern- u. Protoplasniafürbung der Ganglienzelle etc. 117 



O'lprozentigen alkoljolischen Hämatoxylinlösung der Tabelle P mit 
destilliertem Wasser. 



3 

SS 

1 



acoooi 




lOOA 

ow 



HOA 
lOVf 



80A 
20 W 



70A 
30\V 



00 A 

40 W 



A ' Alkolud 



50A 

50vr 

W- WasscT 



VOA 
60W 



snA 
low 



20A 
80W 



WA 
90W 



UA 
100W 



Mischungsverhältnis 
1) Alkohol-Lösg. 40 cc 



H.,0 



10 



2) Alkohol-Lösg. 30 „ 
H,0 20 „ 

3) Alkohol-Lösg. 25 „ 
H.,0 25 „ 



Messung 1 
K = 0-00000153 

K = 0-00000364 

K = ()-00000290 



Messung 2 
K = 0-00000153 

K = 0-00000360 

K = 0-00000288 



Mittelwert 

K = 0-00000153 = 
K = l-53xl0-<! 
K = 0-00000362 = 
K-= 3-62x10-« 

K = 0-00000289 = 
K = 2-89xlO-« 



118 Röthig: Kern- u. Protoplasmafävbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 



Mischungsverhältnis 


M 


essung 1 


Messung 2 


4) Mischung 3) 


25 cc 


K.= 


= 0-00000552 


K = 000000557 


H,0 


25 „ 








5) Mischung 4) 


25 „ 


K = 


= 0-00000680 


K = 0-00000694 


H,0 


25 „ 








6) Mischung 5) 


25 „ 


K = 


= 0-00000774 


K = 0-00000806 


HoO 


25 „ 








7) Mischung 6) 


25 „ 


K = 


-- 0-00000881 


K = 0-00000905 


ILO 


25 „ 








8) Mischung 7) 


25 „ 


K = 


-- 0-00000935 


K = 0-00000960 


H^O 


25 „ 








9) Mischung 8) 


25 „ 


K = 


= 0-00000989 


K = 0-0000102 


H2O 


25 „ 









Mittelwert 

K = 0-00000555 = 
K = 5-55x10-6 

K = 0-00000687 = 
K = 6-87x10-6 

K = 0-00000790 = 
K = 7-90x10-6 

K = 0-00000893 = 
K = 8-93x10-6 

K = 0-00000948 = 
K = 9-48x10-6 

K = 0-0000101 = 
K = 1-01x10-5 



Wenn wir nun die Kurven 1 bis 4 miteinander vergleichen, so 
können wir zu folgenden Anschauungen kommen: Die Kurve 4, d. h. 
die Kurve der reinen Wasser -Alkoholgemische, verläuft gleichmäßig 
und stetig ; ziemlich gleichmäßig und stetig verläuft auch die Kurve 3, 
und zwar parallel dem Anfangsteil der Kurve 1. Die Kurven 1 
und 2 haben das Glemeinsame, daß sie im Gebiete der 60-, 50- und 
40 prozentigen alkoholischen Hämatoxylinlösung einen abweichenden 
Verlauf, eine Änderung der Verlaufsrichtung, zeigen. Wenn mau bei 
den Versuchen meiner ersten Mitteilung die durch den Wasserzusatz 
zur alkoholischen Hämatoxylinlösung erfolgte Konzentrationsänderuug 
außer acht läßt und nur den Gehalt an Alkohol in der zur Färbung 
verwandten Lösung im Auge behält, so ergibt sich die interessante 
Tatsache, daß die metachromatische Blaufärbung des Kernes gemäß 
den Versuchen 5 und 6 meiner ersten Publikation am ausgesprochensten 
war bei einer 60- und 40 prozentigen alkoholischen Hämatoxylin- 
lösung, d. h. bei einem Prozentgehalt an Alkohol in der Lösung, 
bei dem man auch in den Kurven 1 und 2 eine Verlaufsänderung 
bemerkt, so daß man, bei voller Würdigung aller Fehlerquellen, 
welche in dem hohen Vergleichswiderstand von 10 000 Ohm und in 
der fehlenden chemischen Eindeutigkeit der vorhandenen Hämatoxylin- 
präparate liegen, doch zu dem Schlüsse kommen kann, daß bei den 
Wasser-Alkoholgemischen des Hämatoxylins eine Dissoziation statt- 
findet, die parallel geht mit der in meiner ersten Mitteilung er- 
wähnten Änderung des Färbeeifekts. 



XXIV, 2. Röthig: Kern- u. Protoplasmafärbung der Ganglienzelle etc. 119 



B. Mikroskopischer Teil.^ 

Da ich im Teil A. meiner Arbeit mit gleichkonzentrierten alko- 
holischen und wässerigen Hämatoxylinlösungen gearbeitet habe (vergl. 
Tabelle V und Kurve 1 u. 2), die Färbungsergebnisse meiner ersten 
Mitteilung sich aber auf Mischungen alkoholischer Hämatoxylinlösungen 
mit reinem Wasser bezogen, habe ich nunmehr auch die Mischungen 
von O'lprozentiger alkoholischer und O'lprozentiger wässeriger Häma- 
toxylinlösung auf ihr färberisches Verhalten hin geprüft. Es er- 
gaben sich dabei folgende Resultate bei einer 24stündigen Färbe- 
dauer im Zimmer: 



Mischung 

1) O'lproz. alkoholische Häma- 

toxylinlösung allein. 

2) Olproz. Wässer. Hämatoxylin- 

lösung allein. 

3) OTproz. Wässer. Hämat.-Lösg. 2 
0-1 „ alkohol. „ „ 48 

4) O'lproz. Wässer. Hämat.-Lösg. 4 
0-1 „ alkohol. „ ,, 46 

5) O'lproz. Wässer. Hämat.-Lösg. 8 
0-1 „ alkohol. „ „ 42 

6) O'lproz. Wässer. Hämat.-Lösg. 12 
0-1 ,, alkohol. „ „ 38 

7) O'lproz. Wässer. Hämat.-Lösg. 20 
0-1 „ alkohol. „ „ 30 

8j O'lproz. Wässer. Hämat.-Lösg. 30 

0-1 „ alkohol. „ „ 20 



Färbeeffekt 

Protoplasma und Nucleolus rötlich, 

Kern ungefärbt. 
Protoplasma u. Nucleolus rot, Kern 

leicht blau. 
Protoplasma und Nucleolus rötlich, 

Kern ungefärbt. 

dgl. 

Protoplasma u. Nucleolus rot, Kern 
nur an einigen wenigen Stellen 
leicht blau gefärbt. 

dgl. 

Protoplasma und Nucleolus rot. Kern 
blau. 

dgl. 



Aus dieser Tabelle ergibt sich das interessante Resultat, daß 
die Blaufärbung des Kernes um so stärker und deutlicher auftritt, 
je größer der Gehalt der Mischung an Avässeriger Hämatoxyliulösung 



^) Die mikroskopischen Untersuchungen sind angestellt worden im 
physiologischen Institut der Tierärztlichen Hochschule (Geh. -Rat H. Muxk 
in BerUn ; auch bei dieser Gelegenheit spreche ich Herrn Geh. -Rat H. Munk 
für die Überlassung des Arbeitsplatzes meinen ehrerbietigsten Dank aus. 



120 Röthig: Kern- u. Protoplasmafärbimg der Gang'lienzelle etc. XXIV, 2. 

ist, und daß dementsprecbend auch eiue O'lprozentige wässerige 
Hämatoxyliulösung allein die Metachromasie der Fcärbung: Proto- 
plasma und Nucleolus rot, Kern blau zeigt. In meiner ersten Mit- 
teilung hatte sich nun ergeben, daß eine konzentrierte Hämatoxylin- 
lösung, kalt angewandt, alles, Protoplasma, Nucleolus und Kern, 
braunrot oder gelblichrot tingiert. Diese konzentrierte Hämatoxylin- 
lösung war seinerzeit durch Kochen hergestellt worden, und es erhob 
sich nun die Frage, ob Verdünnungen dieser Lösung mit Wasser 
diese metachromatische Blaufärbung zeigen würden. Dies war nicht 
der Fall; bei der stufenweisen Verdünnung mit Wasser blieben 
Protoplasma und Nucleolus braunrot oder gelblich- 
braun gefärbt, während der Kern allmählich anFärb- 
barkeit verlor, niemals aber auch nur den leisesten 
Stic hinsBl auezeigte. 

Aus diesem ganzen Verhalten konnte man nun den Schluß 
ziehen, daß unterschiede vorliegen müssen bei der Einwirkung einer 
heiß und einer kalt bereiteten Hämatoxylinlösung ; es ergab sich da- 
her die Notwendigkeit eine kalt konzentrierte Hämatoxylinlösung und 
ihre Verdünnungen mit Wasser zu prüfen. Da ich nirgends Angaben 
über die maximale Löslichkeit des Hämatoxylins in Wasser fand, 
so bestimmte ich dieselbe und fand , daß sich unter Schütteln bei 
Zimmertemperatur in 100 ccm H.^O 0*71776 g Hämatoxylin (Gebr. 
Muencke) lösen ; dabei ist notwendig , daß das Wasser vollkommen 
frei von Ammoniak ist, da auch bei einer ganz geringen Menge 
desselben ein dunkler, wolkiger Niederschlag in der Hämatoxylin- 
lösung entsteht. 

Bei der Prüfung dieser kalt konzentrierten Hämatoxylinlösung 
von 0'71776 Prozent Hämatoxylin (Gebr. Müencke) ergab sich nun, 
daß, wenn die Gefrierschnitte aus dem lOprozentigen Formalin auf 
2x24 Stunden in Aq. dest., das einmal gewechselt wurde, und dann 
auf 24 Stunden bei Zimmertemperatur in die Hämatoxylinlösung oder 
in ihre Verdünnungen mit aq. dest. kamen, daß dann in allen 
Fällen eine Rotfärbung von Protoplasma und Nu- 
cleolus und eine Blaufärbung des Kernes eintrat. Not- 
wendig ist aber der 48 stüudige Aufenthalt der Schnitte in einmal 
gewechseltem Aq. dest. vor der Färbung und die dadurch erzielte 
vollständige Entfernung überschüssigen Formalins. Die Verdünnungen 
der Hämatoxylinlösung wurden so bereitet, daß ausgehend von 20 ccm 
der kalt konzentrierten Hämatoxylinlösung jede Verdünnung um 2 ccm 
an Wasser zunahm, also 18 + 2, 16-f 4, 14-f 6, 12-f 8, 10 + 10 



XXIV, 2. Rötliig: Kern- u. Protoplasraafäibung der Ganglienzelle etc. ]2l 

und so fort. Hervorzuheben ist aber ferner , daß eine kalt kon- 
zentrierte Hämatoxyliulösung nach einiger Zeit, selbst beim Stehen 
im Dunkeln, die eben erwähnte färberische Eigenschaft verliert. 

Fassen wir die Ergebnisse unserer ersten Mitteilung und die 
im Teil B. der vorliegenden Arbeit bisher erhaltenen zusammen, so 
können wir sagen: 

Den metachromatischen Färbeeffekt, nämlich die Rotfärbung von 
Protoplasma und Nucleolus, die Blaufärbung des Kernes weisen auf 
1) eine kalt konzentrierte wässerige Hämatoxylinlösung, 2) bestimmte 
Mischungen O'lprozentiger wässeriger und O'lprozentiger alkoho- 
lischer Hämatoxylinlösungen, 3) bestimmte Mischungen von Wasser 
mit einprozentiger alkoholischer Hämatoxylinlösung ; es zeigen dagegen 
diesen Färbeeffekt nicht: 1) eine heiß konzentrierte wässerige Häma- 
toxylinlösung, 2) die Verdünnungen derselben mit Wasser, .3) eine 
einprozentige alkoholische Hämatoxylinlösung allein. 

Durch Herrn Privatdozenten Dr. L. Spiegel wurde ich darauf 
aufmerksam gemacht, daß die Bedingimgen, unter denen der meta- 
chromatische Effekt verschwindet, an die Lactonbildung aus Oxy- 
säuren erinnern. Es sollten demgemäß aus nicht metachromatischen 
Lösimgen metachromatische zu erhalten sein unter Bedingungen, die 
eine Aufspaltung des Lactouringes herbeizuführen pflegen; auf seinen 
Rat hin habe ich daher zur Prüfung dieser Frage noch folgende Ver- 
suche angestellt. 

1) In 100 ccm H.^O werden 0*7 178 g Hämatoxylin pur. (Gebr. 
Muencke) heiß gelöst ; die Lösung wird , wie oben die kalt kon- 
zentrierte Hämatoxylinlösung, stufenweise mit H2O verdünnt ; aus diesen 
Versuchen ergab sich, daß in dem färberischen Verhalten einer kalt 
konzentrierten und heiß bereiteten Hämatoxylinlösung von dem gleichen 
Prozentgehalt an Hämatoxylin keine nennenswerten Unterschiede vor- 
handen sind, und daß auch bei beiden der Färbeeffekt mit der Ver- 
dünnung mit H2O an Intensität gewinnt. 

2) Wenn man eine heiß konzentrierte Hämatoxylinlösung, die, 
wie gesagt. Kern, Protoplasma und Nucleolus braunrot fingiert, mit 
Natronlauge alkalisch, dann durch Salzsäure wieder neutral macht, 
und nun entweder sofort oder nach 48stündigem Stehen mit dieser neu- 
tralen Lösung auf 24 Stunden oder 48 Stunden die gut ausgewaschenen 
Schnitte färbt, so erhält man als ständiges Resultat eine Rot- 
färbung von Protoplasma und Nucleolus; der Kern weist meist 
auch eine rote Färbung auf, bleibt aber oft ungefärbt. Nur einmal 
erhielt ich bei 48 stündiger Färbung mit der neutralen Lösung stellen- 



122 Röthig: Kern- u. Protoplasraafärbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 

weise eine bläulieb -schwarze Färbung des Kernes neben der Rot- 
färbung von Nucleolus und Protoplasma. Während also in betreff des 
Kernes die Ergebnisse vielleicht nicht absolut klar und eindeutig 
sind, so konnte man doch mit Sicherheit bei dem Nucleolus und 
dem Protoplasma den gesuchten Färbeeffekt durch die erwähnte Vor- 
behandlung auch bei einer heiß konzentrierten Hämatoxyliulösung 
erzielen. 

3) Versetzt man eine frisch bereitete, heiß konzentrierte, wäs- 
serige Lösung von Hämatoxyliu (Gebr. Muencke) in der Kälte mit 
Natriumbikarbonat im Überschuß und filtriert nach einiger Zeit ab, so 
hat die vorher gelbe Lösung eine tiefe dunkelrote Farbe angenommen. 
Diese färbt bei einer Färbungszeit von einer bis 2 Stunden (im Zimmer) 
im Gegensatz zu der ursprünglichen heiß konzentrierten Hämatoxyliu- 
lösung das Mark der Rückenmarkschnitte schon makroskopisch tief 
blau; bei mikroskopischer Besichtigung, die durch ausgeschiedene 
Hämatoxylinkristalle etwas erschwert ist, bemerkt mau eine leichte 
Rotfärbimg von Protoplasma und Nucleolus und eine stärkere Blau- 
färbung des Kernes — alo einen Farbeeffekt, ähnlich dem in meiner 
ersten Mitteilung beschriebenen. Der Unterschied liegt nur darin, 
daß hier die Färbung im Xylol und im Xylol- Balsam sehr schnell 
verloren geht. 

4) Die heiß konzentrierte wässerige Hämatoxyliulösung, die, wie 
erwähnt, den metachromatischen Färbeeffekt nicht zeigt, wird stark 
mit H2O verdünnt (5 ccm der unverdünnten Lösung auf 50 ccm H^O) 
und im Rückflußkühler gekocht; nach 10 Minuten nimmt die ur- 
sprünglich gelbe Lösung einen roten Farbeuton an, der mit längerem 
Kochen immer intensiver und dunkler wird. Unterbricht man das 
Kochen nach 10 Minuten und läßt die Lösung langsam bei Zimmer- 
temperatur abkühlen, so schlägt die Farbe mehr ins Braune um ; die 
so erhaltene Lösung färbt bei 24 stündiger Färbung Protoplasma und 
Nucleolus rötlich (mit einem leichten Stich ins Braune), den Kern zum 
Teil violett, zum Teil tief dunkelblau-schwarz. Setzt man das Kochen 
der verdünnten, heiß konzentrierten, wässerigen Hämatoxylinlösimg 
15 Minuten lang fort und kühlt dann sofort für 5 Minuten in Eis- 
wasser ab, so wird auch diese ursprünglich rote Lösung braun, ist aber 
nach weiterem 24 stündigen Stehen wieder deutlich rot gefärbt. Sie 
fingiert Protoplasma und Nucleolus rötlich, den Kern blau. Nach 
2 stündigem Kochen mit Unterbrechungen und daran sich an- 
schließendem 3- bis 4stüudigen ununterbrochenem Kochen ist sowohl 
nach sofortigem Abkühlen in Eiswasser wie bei langsamem Erkalten- 



XXIV, 2. Roth ig: Kern- u. Protoplasiuafärbung der Ganglicnzelle etc. 123 

lassen im Zimmer die Farbe der Lösung auch noch nach 24 stün- 
digem Stehen tief rot. Diese Flüssigkeit färbt Protoplasma, Kern 
und Nucleohis braunrot, zeigt aber nicht den metacliroraatischen 
FärbeefFekt. Verdünnt man diese rote Lösung mit dest. Wasser, so 
erhält man zuerst eine Braunfärbung der Flüssigkeit, nach 24 stün- 
digem Stehen aber wieder eine Rotfärbung; diese Lösung färbt im 
Gegensatz zu der unverdünnten Protoplasma und Nucleolus rot. Kern 
blau, weist also den metachromatischen FärbeefFekt auf. Die heiß 
konzentrierte wässerige Hämatoxylinlösung hat, wie bereits oben ge- 
sagt, in ihren Verdünnungen dieses Färbevermögen nicht. Es hat 
sich also gezeigt, daß man die verdünnte, heiß kon- 
zentrierte, wässerige Hämatoxylinlösung durch 
Kochen im Rückflußkühler in eine Lösung umwandeln 
kann, die sich in ihrem Färbungsvermögen dem be- 
schriebenen metachroma tischen Färbeeffekt nähert, 
ihn unter gewissen Bedingungen sogar in typischer 
Weise hervorruft. 

5) Eine gewisse Menge Hämatoxylin wird zur Entfernung seines 
Kristallwassers bis zur Gewichtskonstanz erst bei 120*^, dann bei 
130^ getrocknet, dann unter Schütteln in dest. Wasser gelöst. Ich 
erhielt so eine Lösung, die in 100 ccm Wasser 0'6920 g getrocknetes 
Hämatoxylin enthielt. Diese Lösung färbt unverdünnt Protoplasma, 
Kern und Kernkörperchen braunrot, nach Verdünnung mit H^O aber 
(unverdünnte Lösung und Wasser a'a) Protoplasma und Nucleolus rot, 
Kern violett. Während also eine kalt konzentrierte, 
wässerige Lösung gewöhnlichen Hämatoxylin s den 
metachromatischen Färbeeffekt hat, zeigt ihn eine 
nahezu konzentrierte wässerige Lösung bis zur Ge- 
wichtskonstanz getrockneten Hämatoxylins nicht, ge- 
winnt ihn aber nach erfolgter Verdünnung mit Wasser. 

Nach Richter: Organische Chemie, 5. Aufl. 1888, S. 342 sind 
„Lactone" Verbindungen, die sich von den Oxysäuren durch Austritt 
von H.,0 im Innern eines und desselben Moleküls herleiten. Dabei 
finden zwischen beiden Vei'bindungen Wechselbeziehungen statt. So 
sagt Meyer- Jacobsohn , Organische Chemie Bd. I, S. 762: „Wie die 
Oxysäuren beim Kochen ihrer wässerigen Lösungen durch Wasser- 
abspaltung Lactone liefern, so gehen umgekehrt die Lactone beim 
Kochen mit Wasser teilweise in Oxysäuren über ; zwischen beiden 
Verbindungen stellt sich ein Gleichgewichtszustand her." Um ein 
weiteres Beispiel anzuführen, so zerfällt die wässerige Lösung der 



124 Röthig: Kern- u. Protoplasmafärbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 

Cantharidinsäiire beim Erwärmen auf 60 bis 70^ in Wasser und 
Cantharidin (Homolka, Ber. d. D. Chem. Ges., Bd. XIX, S. 1083); das 
Cantharidiu kann als ein Lacton angesehen werden ; beim Erhitzen 
mit Alkalien wird es aufgespalten zu den Salzen der Cantharidin- 
säure ; werden diese in heißer Lösung mit Säuren versetzt, so scheidet 
sich wieder Cantharidin aus. 

Nehmen wir nun an, daß der nicht-metachromatische Färbeeffekt 
dadurch veranlaßt ist, daß hierbei das Hämatoxylin in Form eines 
Lactons vorhanden ist, so haben die unter 1 bis 5 oben erwähnten 
Versuche dargetan, daß man den metachromatischen Färbeetfekt 
durch dieselben Bedingimgen hervorrufen kann, die nach den Er- 
fahrungen der Chemie eine Aufspaltung dieses hypothetischen Lacton- 
ringes herbeizuführen geeignet sind. Die oben erwähnte Vermutung 
scheint also durch diese Versuche bestätigt zu werden. Man ist also 
meines Erachtens nach berechtigt, als Schlußfolgerungen sowohl des 
Teiles A. wie des Teiles B. der vorliegenden Arbeit auszusprechen, 
daß den von mir in meiner ersten und der vorliegenden 
Mitteilung angegebenen Färbeerscheinungen Um- 
lagerungen imHämatoxylin zugrunde liegen, die ihren 
Ausdruck finden in einer Richtungsänderung der 
Leitfähigkeitskurve und die in Analogie zu setzen 
sind mit den Vorgängen bei der sogenannten Lacton- 
b i 1 d u n g. 

Als Strukturformeln werden nach Beilstein, Handb. d. Org. 
Chemie, Erg.-H. zur .3. Aufl. Bd. III, 1904, S. 489 die folgenden 
angesehen : 



1) 



HO 



HO- 







CH 

COH 
CH.CHaCeHgCOH).,^.^ 



•2) 




XXIV, 2. Röthif^-: Kern- u. Protoplasmafärbung der Gunglienzelle etc. 125 

Beide Formeln sind nur hypothetische ; sie geben für die Bildung 
und Aufspaltung eines Lactonringes keine Erklärung. 

Es erhebt sich daher die Frage, wie weit auf Grund der mit- 
geteilten Beobachtungen an eine Revision dieser Formeln gedacht 
werden muß. Sie wird von chemischer Seite erörtert werden. 

Die angeführten Färbungserscheinungen müssen aber auch noch 
Veranlassung zu folgenden Überlegungen geben. Die gewöhnliche 
Ansicht in betreff der Färbung des Hämatoxylins ist diejenige, welcher 
Hansen (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. 1905, S. 46/47) folgende Worte 
leiht, indem er auf die grundlegende Arbeit von Erdmann zurück- 
greift: „Das Hämatoxylin färbt nur, wenn es durch Oxydation in 
Hämatein resp. Hämateinverbindungen oder in noch höhere Oxydations- 
stufen übergeführt wird." Mit dieser Anschauung stimmen aber die 
Beobachtungen schlecht überein, wonach das Hämatoxylin in kalt kon- 
zentrierter Lösung metachromatisch färbt, in heiß konzentrierter aber 
nicht, und wonach auch eine heiß konzentrierte wässerige Hämatoxylin- 
lösung durch Kochen im Rückflußkühler metachromatische Färbeeigen- 
schaften erhält. Ferner äußert in der Zeitsch. f. wiss. Mikrosk., Bd. XVI. 
1899, S. 198, Paul Mayer die folgende Ansicht : „Tierische Gewebe 
färben sich übrigens mit Hämatoxylin allein nur sehr wenig und speziell 
die Kerne darin wohl nie, falls sie nicht etwa aus den Fixiermitteln die 
nötigen Basen bereits aufgenommen haben", und die gleiche An- 
schauung wird auch in der neuesten Auflage der „Grundzüge der 
mikroskopischen Technik" von Lee und Mayer (1907) vertreten. Dem- 
gegenüber zeigen meine Befunde, daß die Mayer sehe Meinung wenigstens 
in dieser Exklusivität nicht richtig sein kann; mau müßte denn an- 
nehmen, daß die Gewebe durch die Formalinbehandlung allein bereits 
„die nötigen Basen" aufgenommen haben und diese auch bei einer 
48stündigen Auswaschung der Schnitte in Aq. dest. festhalten — 
was keinesfalls angängig ist. Ich halte es demgemäß für richtiger, 
auch schon dem Hämatoxylin allein, ohne Einschränkung, die Fähig- 
keit zuzuerkennen, tierisches Gewebe zu färben. 

Ich mijchte diese Arbeit nicht schließen, ohne Herrn Privatdoz. 
Dr. L. Spiegel noch besonders meinen herzlichsten Dank zum Aus- 
druck zu bringen für die vielfachen Ratschläge nnd die häutige 
Unterstützung, deren ich mich gerade von seiner Seite zu erfreuen 
gehabt habe. 



126 Röthig: Kern- u. Protoplasraafärbung der Ganglienzelle etc. XXIV, 2. 



III. 

In der vorangehenden Mitteilung sind an einem und demselben 
Materiale, nämlich dem Rückenmark einer 76 Tage alten Katze, das 
seit 7 Jahren in lOprozentigem Formalin liegt, die Färbeflüssigkeiten 
variiert und auf Grund der erhaltenen Befunde die Bedingungen für 
den Eintritt der metachromatischen Färbung erörtert und die Art 
derselben wahrscheinlich gemacht worden. Es hatte sich dabei im 
Verlaufe der Versuche u. a. gezeigt, daß, während eine heiß kon- 
konzentrierte wässerige Hämatoxylinlösung den metachromatischen 
Effekt nicht hat, ihn eine kalt konzentrierte wässerige Lösung auf- 
weist. Da die Technik der Färbung lediglich darin besteht, daß die 
Schnitte nach einem 24stündigen oder eventuell längeren Aufenthalt 
in der Hämatoxylinlösung in absoluten Alkohol und Xylol, dann in 
Balsam kommen, so war hierdurch ein einwandfreies Verfahren zur 
Prüfung der Frage gegeben, ob verschieden geartetes Ganglienzellen- 
material Änderungen in der metachromatischen Färbung zeigt. Zu 
diesem Zwecke habe ich in der vorliegenden Arbeit nicht die Färbe- 
flüssigkeit, wohl aber das Material variiert. Die Färbeflüssigkeit war 
eine durch Schütteln bei Zimmertemperatur bereitete Lösung von 
Hämatoxylin (Gebr. MuENCKE-Berlin), die in 100 ccm H^O 0*7 178 g 
Hämatoxylin pur. enthielt, resp. eine Verdünnung dieser Lösung. Das 
Material war wieder Gehirn und Rückenmark der Katze ; ein Teil 
war vor 7 Jahren in lOprozentigem Formalin fixiert worden und 
umfaßt das Gehirn und Rückenmark eines 19 und 76 Tage alten 
Tieres ; der andere Teil liegt erst seit 8 Wochen in der Fixierungs- 
flüssigkeit und ist das Zentralnervensystem einer jungen Katze un- 
bekannten Alters sowie von Katzen, die man mit Strychnin vergiftete 
oder deren Rückenmark auf elektrischem Wege gereizt wurde. Bei 
dem letzteren Versuch wurde nur eine Seite des Leudenmarkes in 
Tätigkeit versetzt, so daß man Tetanus nur der rechten hinteren 
Extremität (und des Schwanzes) erhielt. Die Strychnindosen waren 
1'8 und 3 mg. Die Krämpfe dauerten im ersten Falle 35 Minuten, 
im letzten 15 Minuten. Gehirn und Rückenmark wurden unmittel- 
bar nach der Reizung resp. dem erfolgten Tode fixiert. 

Die Färbungen ergaben nun einen Unterschied zwischen dem 
alten und dem neuen Formalinmateriale insofern, als bei dem ersteren 
der metachromatische Effekt mit aller wünschenswerten Deutlichkeit 
eintrat, während er bei dem letzteren zwar vorhanden aber nicht so 



XXIV, 2. Köthig: Kern- u. Protoplasmafärbung der Ganglienzcllc etc. 127 

prägnant war. Daran wurde auch nichts geändert, wenn man bei 
dem neuen Formalinmaterial die Färbezeit auf das Dreifaclic (3X24 
Stunden) erhöhte ; wohl aber trat bei ihm die Rotfärbung von Nu- 
cleolus und Protoplasma, die Blaufärbung des Kernes ebenfalls in aus- 
gesprochener Weise ein, wenn man die Hämatoxylinlösung auf die 
Hälfte mit Aq. dest. verdünnte und ihr eine Spur Alkali zufügte. 
Das letztere, der Alkali-Zusatz, trat zufällig bei den Versuchen da- 
durch ein, daß an den Deckeln der frisch gekauften Glasdosen nach 
der Berührung mit der Hämatoxylinlösung Tropfen dunkelbläuliclirot 
gefärbten Hämatoxylins in die Färbeflüssigkeit gerieten, ein Zeichen, 
daß letztere etwas Alkali vom Glasdeckel aufgenommen hatte ; die 
Gesamtfarbe der Lösung wurde dadurch aber nicht geändert, sie 
wurde nur um eine Nuance dunkeler rot. Nach den Erfahrungen 
in der vorangehenden Mitteilung, wonach die Wasserverdünnungen der 
kalt konzentrierten wässerigen Hämatoxylinlösung auch bei dem alten 
Material schon allein den metachromatischen Färbeetfekt etwas aus- 
gesprochener hervorriefen, scheint dieser Alkalizusatz freilich nicht 
notwendig zu sein. Doch sollen speziell darauf gerichtete Versuche 
bei dem neuen Formalinmateriale angestellt werden. Ferner wird 
es nunmehr Aufgabe sein, zu prüfen, ob auch das neue Formalin- 
material nach einem längeren Aufenthalt in der Fixierungsflüssigkeit 
die metachromatische Färbung in gleicher Intensität aufweist wie das 
alte Material. Freilich ist es auch möglich, daß die beobachteten 
Intensitätsunterschiede in der Färbung zwischen altem und neuem 
Materiale auf Unterschieden im Funktionszustande der Ganglienzellen 
sich gründen. Ich werde zu dieser Annahme durch folgende Be- 
obachtungen geführt: Von dem, der jetzigen Mitteilung zugrunde liegen- 
dem alten Materiale stammt, wie erwähnt, das eine Gehirn und Rücken- 
mark von einer 76, das andere von einer 19 Tage alten Katze. In 
beiden Fällen ist der metachromatische FärbeeÖekt eingetreten, aber 
bei der jüngeren Katze viel schwächer als bei der älteren. Im Ver- 
gleich mit der nicht vorbehandelten, sog. normalen Katze zeigt ferner 
das Lendenmark der „gereizten" Katze eine bei weitem deutlichere 
Reaktion. Bei der Katze, die nach der Strychnininjektion 35 Minuten 
lang Krämpfe hatte, ist die Reaktion ausgesprochener als bei der- 
jenigen, die nur 15 Minuten lang Krämpfe aufwies. Auch bei einem 
und demselben Zentralnervensystem zeigen die verschiedenen Zellen 
verschiedene Reaktion. Abgesehen davon, daß sie bei dem alten und 
neuen Formalinmateriale den Ependymzellen und Gliazellen fehlt, 
während sie bei den Ganglienzellen vorhanden ist, war bei der Katze, 



128 Mayer: Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden. XXIY, 2. 

die uacli 35 Minuten langen Krämpfen der Strycbninvergiftnng erlag, 
die metacbromatiscbe Reaktion im Rückenmark, der Halsanscbwellung, 
an den Oliven- und Pyramidenzellen und dem Kleinbirn ausge- 
sprochener als im Lendenmark und Großbiru. Bei der „gereizten" 
Katze ist die Reaktion weniger deutlicb im Rückenmark, als im 
Lendenmark und der Halsanscbwellung. Äbnlicbe Intensitätsuuter- 
scbiede in der Färbimg der verscbiedenen Ganglienzellen bemerkt 
man aucb bei dem Zentralnervensystem der normalen Katze bei dem 
alten Formalinmaterial. Wenn daher der Funktionszustand der Ganglien- 
zellen aucb die metacbromatiscbe Färbung als solcbe nicbt ändert, 
so ist docb nach dem Gesagten die Annahme möglieb, daß er die 
Intensität der metachromatiscben Reaktion beeinflußt. 

Charlottenburg-Berlin, den 15. Juni 1907. 
[Eingegangen am 17. Juli 1907.] 



Über die Einbettung kleiner Objekte zum 

Schneiden. 

Von 
Paul 3Iayer. 



Hierzu 5 Textabbildungen. 



Vor einigen Jahren hat Lefevre ^ einen Apparat zum Einbetten 
kleiner Objekte in Paraffin angegeben. Es ist ein ziemlich flaches 
Salznäpfchen mit einer parallelepipedischen Vertiefung in der Mitte 
(Fig. 1 u. 2). Beim Gebrauche bestreicht man die ganze Innenfläche 
sorgfältig und dünn mit Glyzerin, füllt den Napf mit dem geschmol- 
zenen Paraffin, das zur Einbettung dienen soll, holt mit einer er- 
wärmten Pipette die Objekte (Eier, Embryonen etc.) aus dem Röhr- 
eben heraus, in dem sie die Vorstadien der Einbettung durchgemacht 
hatten, und läßt sie vorsichtig in die vierkantige Vertiefung gelangen, 



^) Lefevre, G., A new method of embedding small objects (Journ. 
appHed micr. ßochester vol. V, 1903, p. 2080—2081 w. 5 figg.). 



XXIV, 2. Mayer: Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden. 129 

wo sie, wenn alles gut geht, aucli ruhig liegen bleiben. Ist dann 
der Block durch Abkühlung unter Wasser hart geworden, so läßt er 
sich in der Regel mit einiger Nachhilfe unbeschädigt aus dem Napfe 
herausnehmen und zum Schneiden fertig machen (Fig. 3 u. 4). 

Diese Methode ist, wie man sieht, brauchbar, hat aber den 
Nachteil, daß man just an die Form der Vertiefung im Napfe ge- 




1. 







4. 




Zweiteilige Messingform in nat. Größe 
(25 X 25 X 2 mm). 



bunden ist. Auch sind die Näpfe nicht gerade billig und werden 
einstweilen nur in Amerika fabriziert. Mir gab die praktische Be- 
kanntschaft mit ihr — ich verdanke sie der Freundlichkeit von 
Prof. M. M. Metcalf — den Anstoß , der Einbettung kleiner Ob- 
jekte überhaupt näher zu treten, um sie bequemer und einfacher 
zu gestalten , als sie nach den zahlreichen bisher angegebenen 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 9 



130 Mayer: Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden. XXIV, 2. 

Methoden^ zu sein scheint. Es haben sich mir da mehrere Wege 
dargeboten. 

Zunächst der eine, Lefevres GLasform durch eine Matrize 
aus Metall zu ersetzen. Dies hat nicht die geringsten Schwierig- 
keiten: auf eine mit Glyzerin bestrichene Glasplatte wird die Form, 
die aus zwei Stücken besteht (Fig. 5) und natürlich von jedem Me- 
chaniker in allen Größen leicht und billig herstellbar ist, aufgelegt; 
die Objekte bringt man mit der Pipette in den Hohlraum, gießt 
dann rasch aus dem Vorratgefäße eine dünne Schicht Paraffin über 
die Form hin nnd legt das Ganze zur Abkühlung in Wasser. Bei 
dieser Modifikation resultieren kleine Blöcke mit absolut scharfen 
Kanten, von denen nach dem Aufkitten auf einen Paraffinblock ohne 
weiteres mit dem Quermesser Bänder geschnitten werden können, 
während mit Lefevres Apparat die Kanten nicht ganz so scharf 
ausfallen. 

Den beiden bisher erwähnten Methoden haftet der Übelstand an, 
daß die Objekte vorher für sich in Paraffin gebracht und von da 
mit einer warmen Pipette in die Form übertragen werden müssen. 
Das ist bei den harten Paraffinsorten lästig, und man verliert auch 
leicht einen Teil des Materials, also sind beide für seltene Objekte 
nicht ratsam. Zwar sagt Lefevre : „The wliole process may be per- 
formed in the dish by keeping the objects in the groove and making 
the change of liquids with a pipette", aber verfährt man so, dann 
läuft man leicht Gefahr, daß sich zu guter Letzt der fertige Block 
nicht unbeschädigt aus dem Näpfchen herausholen läßt, denn das 
Glyzerin kann ja beim Wechseln des Alkohols nicht mehr am Glase 
adhärieren. Dagegen ist bei meiner 

zweiten Methode dieser Nachteil völlig ausgeschlossen : ich 
benutze zur Überführung der Objekte ans dem starken (90 — lOOpro- 
zentigen) Alkohol in das definitive Paraffin höchst einfach eine der 
überall käuflichen Gelatinekapseln, und zwar in der Regel 
solche von etwa 20 mm Länge und 7 mm Durchmesser. Da sie 
einen gewölbten Boden haben, so stecke ich sie, damit sie nicht um- 
fallen, in ein dazu passendes Loch in einer Korkscheibe. Die Kapseln^ 



^) S. die Erörterung in Lee u. MAver, Grundzüge etc. 3. Aufl. 
Berlin 1907 , § 139. Dort sind 7 Methoden kurz besprochen ; bei der von 
Lefevre habe ich die Vertiefung irrtümlich als würfelförmig bezeichnet. 

'-) Der weit übergreifende Deckel kann, wenn man sparen will, separat 
ebenfalls als Kapsel dienen. Aber die Kapseln sind so bülig , daß dies 
kaum nötig wird. 



XXIV, 2. Mayer: Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden. 131 

sind völlig resistent gegen starken Alkohol, alle gebräuchlichen Inter- 
medien und Paraffin; man darf also den Alkoliol durch ]>enzol oder 
Chloroform ersetzen , Paraffin darin lösen , etc. , kurz die Objekte 
definitiv darin einbetten , ohne daß trotz allen diesen Prozeduren 
auch nur eins verloren zu gehen braucht. Zum Schluß läßt man 
die Kapsel samt dem nun soliden Inhalte einige Zeit in Wasser 
liegen: die Gelatine quillt auf, ist mit einer Pinzette bequem zu 
entfernen, und der Paraffinblock kommt so sauber zuin Vorschein, 
wie man es nur verlangen kann. 

In diesen kleinen Blöcken sind die Objekte natürlich in P'orm 
einer Calotte angehäuft, da ja der Boden der Kapsel gewölbt ist. 
Nun lassen sich zwar, Avenn es sein muß, ohne sonderliche Schwierig- 
keiten Kapseln mit flachen Böden herstellen: man schneidet die 
Wölbung fort und kittet den übrig bleibenden Zylinder mit etwas 
Gummi auf einen Streifen Gelatineblatt, wie solches von den Litho- 
graphen benutzt wird, oder einen Objektträger fest. Aber Kapseln 
von rechteckigem Querschnitte und ganz flachem Boden sich selber 
anzufertigen ist kaum möglich, mir wenigstens bisher nicht gelungen, 
auch scheinen solche Kapseln aus guten Gründen nicht im großen 
fabriziei't zu werden. Indessen auch für den Fall, daß man, ohne 
von den Objekten das geringste einzubüßen, Schnitt- 
bänder von den runden Blöcken machen will oder muß, liegt die 
Hilfe nahe : man gießt nachträglich um den Block so viel Paraffin 
herum , daß er die gewünschte rechtwinklige Form erhält ! Hierzu 
mag man die Messingstreifen nehmen, die gewöhnlich zum Einbetten 
gebraucht werden ; man setzt sie auf die mit Glyzerin bestrichene 
Glasplatte, bringt den Block in die Mitte und befördert mit einer 
warmen Pipette so viel geschmolzenes Paraffin hinein, daß der Block 
völlig bedeckt wird. Dabei ist es aber nötig, Seitenwände und Basis 
der temporären Form vorher anzuwärmen, sonst erstarrt das Paraffin 
zu rasch und verbindet sich nicht innig genug mit dem Block. Ob 
man dazu Paraffin von demselben Schmelzpunkte nimmt wie das des 
Blockes, oder ein etwas weicheres, ist für das Gelingen der Operation 
nebensächlich und wird sich wohl nach der Dicke der Schnitte 
richten, die man herstellen will: je dünner diese werden sollen, 
desto härter muß man das Paraffin wählen. 

Wie mir scheint, läßt obige Methode an Einfachheit und Sicher- 
heit kaum etwas zu wünschen übrig. Ich habe aber, während ich 
mit ihrer Ausarbeitung beschäftigt war, einige Parallelversuche mit 
der Einbettung in C e 1 1 i d i n und Paraffin gemacht und 



132 Mayer: Über die Einbettung kleiner Objekte zum Schneiden. XXIV, 2. 

bin auch hier zu einem brauchbaren Resultate gelangt. Allerdings 
ist die doppelte Einbettung immer etwas umständlicher und dauert 
länger als die einfache in Paraffin, aber sie gewährt später die 
Sicherheit, daß die zahllosen kleineu Objekte vom Celloidin zusammen- 
gehalten werden, und das mag unter Umständen von Wert sein. 
Zur Erzielung sauberer vierkantiger Celloidin stücke von 
beliebiger Fläche und Dicke mache ich einfach in ein Stück des 
später zur Einbettung nötigen Paraffins mit einer leicht mit Glyzerin 
bestrichenen und erwärmten metallenen Patrize ^ eine Vertiefung von 
der gewünschten Form, bringe in diese die noch in flüssigem Cel- 
loidin (von 8 Proz.) befindlichen Objekte, lasse die freie Oberfläche 
sich an der Luft etwas verhärten und übertrage nun das Ganze in 
Chloroform oder Benzol : während das Intermedium den Ätheralkohol 
aus dem Celloidin auszieht und dieses härtet, löst es zugleich das 
Paraffin auf, und es resultiert ein tadelloser Celloidinblock, der nun 
direkt mit der Paraffinlösung im Thermostaten weiter behandelt 
werden kann. 

Über die Verwendung der Gelatinekapseln zum Aufbewahren 
und Verschicken zarter Objekte in Alkohol soll an anderer Stelle 
berichtet werden. 



^) Man feilt sie sich ohne Mühe aus Messing zurecht und lötet als 
Handhabe einen dicken Draht darauf. 

Neapel, Zoologische Station, Ende Mai 1907. 



^ 



[Eingegangen am 23. Mai 1907.] 



XXIV, 2. Rubenthaler: Methode generale de fixation. 133 



Methode generale de fixation 
ayant pour but de restreindre les artefacts. 

Par le 

Docteur G. Rubenthaler, 

M^decin- Major de rarmee francaise au 29^ Bataillon de chasseurs a pied 

i St-Mihiel. 



Apres Fischer, c'est une banalite de declarer qiie la fixatiou, 
dans l'etat actuel de la technique histologiqiie , laisse eucore beau- 
coiip :\ desirer au point de vue de la conservation de rintegrite 
stnicturale des tissus. 

La methode des fixations convergentes „de Renaut" qni pre- 
conise pour l'etude d'un meme tissu Temploi du plus grand nombre 
possible de fixateurs est la cousecration de la suspicion legitime qui 
pese sur chaque procede pris en particulier. Depuis, un grand nombre 
de formules fixatrices nouvelles ont ete proposees, comme pour tenter 
une Solution chimique du probleme de fixation. On a ainsi obtenu 
une adaptation meilleure de certains melanges a certains tissus, dont 
un exemple est celle du liquide de Bouin aux structures glandulaires ; 
mais, plus ou moins attenues dans certains cas particuliers, les arte- 
facts de fixation persistent dans l'ensemble comme par le passe. Si 
Ton ajoute ce fait caracteristique que le meme fixateur employe avec 
le meme tissu ne donne pas forcement des resultats comparables a 
eux-memes , on est en droit de penser qu'une fixation fidele ä la 
nature ne peut etre resolue par des moyens purement cbimiques. 

Les moyens pbysiques proposes pour ameliorer la fixation con- 
sistent dans l'emploi de l'isotonie et de la cbaleur. 

Sjöbring a insiste sur l'importance de l'isotonie du fixateur et 
du Protoplasma, mais chacun admettra qu'au cas meme oü cette isotonie 
pourrait etre realisee pour les differents sucs cellulaires, eile cesserait 
dejä d'exister des le premier contact du liquide fixateur avec le tissu 
ä fixer , du fait meme de la modificatiou des couches peripheriques. 

La cbaleur a ete employee par divers tecbniciens, moins souvent 
pour respecter les conditions normales de la vie que pour abreger 
la duree de la fixation. 



134 Ru benthal er: Methode generale de fixation. XXIV, 2. 

En resiime, la pratique generale des laboratoires cousiste aujour- 
d'hui dans limmersion pure et simple de l'objet ä fixer dans le fixa- 
teur de clioix, que ce dernier soit employe ou non sons certaines 
conditious d'isotonie et de temperature. 

Cette maniere de proceder, pour peii qn'on reflechisse ä la 
complexite de la vie, beurte l'esprit parce qu'elle a de sommaire, 
vüire meme de brutal. Peu soucieuse du principe eternellement vrai 
de Leibnitz : „Natura non facit saltus", faisant table rase de la 
sensibilite de la matiere vivante et des reactious qu'elle oppose aux 
agents exterieurs, cette methode de fixation, si metbode il y a, inflige 
en realite a la cellule vivante le cbangement de condition le plus 
violent, le plus ignore de la nature, qu'on puisse imaginer. Malgre 
cette violence, ancun trouble structural ne pourrait se produire si la 
fixation etait assez puissante pour tuer instantanement les tissus , y 
empechant tonte modification des l'instant precis du contact. En 
fait, cette condition est realisee par le procede reellement privilegie 
des injections interstitielles qui dissocie les Clements sur lesquels 
il agit, les baignant en meme temps par tous les points de leur sur- 
face ; mais , c'est la une exception et un procede inapplicable a la 
majorite des materiaux qu'on doit etudier sous une epaisseur deter- 
minee et dans les rapports normaux de leurs Clements. 

De lä, ces inegales valeurs de la fixation que tous les bisto- 
logistes ont remarquees dans les differentes coucbes des pieces et 
qu'entre autres, le Dr. B. Vasoin de Padoue Signale pour la moelle. 
(Voir Zeitscbr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, p. 420.) Une autre preuve 
de l'incapacite de la fixation a realiser la Suspension instantanee des 
pbenomenes vitaux nous est fournie par Fautodigestion des cellules 
glandulaires a grains de secretion qui se poursuit au sein meme 
des liquides fixateurs. (Voir Borrel, An. de l'Institut Pasteur 
vol. XV, 1901). 

II est donc bien etabli que, dans la majorite des cas, la fixa- 
tion ne peut pas etre instantanee. Des lors , entre l'instant du 
contact et celui de la fixation, il s'ecoule un temps variable durant 
le quel se produit le cboc brutal dont nous parlions plus haut et 
s'engage une lutte entre les Clements des tissus et le fixateur. Ce 
temps est le fauteur de la totalite des artefacts de fixation dont 
l'elimination la plus complete possible reste la condition essentielle 
et la base tecbnique de la Cytologie normale et pathologique. 

Cette pbase de la fixation est donc decisive, et puisqu'on ne 
peut l'eviter, il parait rationnel de cbercher, pour diminuer les degäts 



XXIV, 2. R üben thaler: Methode generale de fixation. 135 

daus les tissus, k atteuuer la reaction cellulaire au raoment du coii- 
tact. Engage dans cette voie, nous n'avons entrevu 
d ' a u t r e m o y e u dans c e b u t q u e c e 1 u i de d i m i n u e r les 
forces en presence, du cote de la cellule par l'aiiest- 
liesie, du cote du fixateur par uue gradatiou con- 
ve nable de son emploi sous forme de dilutions suc- 
cessives de densite croissante. 

Les Premiers resultats obtenus n'out pas ete encourageants. 
Apres avoir multiplie en vain les essais sur differeuts tissus traites 
des I'instaut precis de leur prelevement sur Tanimal vivant, modifiant 
tantöt la Solution anesthesique daus laquelle ils etaient places tout 
d'abord, tantöt la concentration des dilutions fixatrices initiales, nous 
sommes restes convaincus que nous nous beurtions ä deux ecueils : 
le Premier et le moius grave provenait de l'anesthesie elle-meme ; le 
second, plus important, resultait de la lenteur exageree de la fixation 
laissant a des alterations du type cadaverique le temps de s'inter- 
poser (degenerescence trouble de l'epitbelium des tubes du rein, 
rapetissement du noyau dans tous les tissus, etc.). 

L'anesthesie etait pratiquee au debut de nos essais par l'immer- 
siou direete des tissus dans une Solution de chlorhydrate de cocaine 
ou d'hydrate de chloral. — Cette derniere substance fut vite eli- 
minee comme produisant elle-meme la fixation. Quant a la cocaine, 
eile parut avoir sur les cellules caliciformes des epitheliuras traites 
vivants une action nettemeut excito-secretoire avec tendance au de- 
placement des grains de secretion et ä la vacuolisation des cellules. 
Cette action fut diminuee par reduction de la Solution au titre 
du centieme et disparut en appliquant ä son mode d'emploi un 
procede comparable k celui de la dilution. L'objet ä traiter etait 
place dans uu milieii conservateur auquel on ajoutait des quantites 
progressivement croissantes de la Solution de cocaine faite dans le 
meme milieu. 

Restait Fobstacle beaucoup plus serieux oppose par la lenteur 
de la fixation. Apres une serie de recberches touchaut les moyens 
de le resoudre avec efficacite , nous nous sommes arrete aux deux 
suivants : 

1^ Accelerer la fixation, non pas en augmeutaut 
la concentration des dilutions, mais en restreignant 
les pieces :x un volume tres faible, de quelques milli- 
metres cubes au plus, ce volume reduit permettant 
aux dilutions de se succeder plus rapidement. 



136 Rubenthaler: Methode generale de fixation. XXIV, 2. 

2^ Employer simultan ement deux moyeus dejä 
connus: l'isotonie et risothermie, mais dans le but 
special de prolonger la vie des Clements jusqu'a une 
phase aussi rapprochee que possible de l'action effi- 
cace du fixateur. 

C'est ainsi que les tissus h l'instant precis de leur preleveraent 
etaient regus dans un milieu isotonique maiutenu ä l'etuve ä la 
temperature normale du tissu. L'isothermie avait pour but d'eviter 
toute deperdition d'energie calorifique. L'isotonie devait* contribuer 
egalement a prolonger la vie en evitant les echanges avec le milieu 
et la perte des materiaux cellulaires. Toutefois cette derniere con- 
dition, impossible ä realiser exactement, se reduisait dans la pratique 
au clioix d'un milieu conservateur naturel adapte au tissu. C'est 
ainsi que, par exemple, le muscle etait place daus le serum sanguin 
de l'animal, le tissu nerveux dans le liquide cephalo-rachidien , les 
embryons de mamraiferes dans le liquide aramotique , les tissus 
vegetaux dans la seve ou le suc de la plante exprime au pres- 
soir, etc. 

Les resultats nous parurent alors de plus en plus satisfaisants 
et, au für et ä mesure des moditications qui ont abouti k la tech- 
nique dont on va lire le detail, les gouttes sarcodiques sont devenues 
extremement rares, nous n'avons plus constate l'expulsion de grains 
de secretion, ni les retractions du protoplasma, ni aucune lacune 
endocellulaire ; en meme temps , nous obtenions une excellente fixa- 
tion de la karyokinese tant pour le iioyau que pour les filaments 
directeurs, une eonservation parfaite des cils vibratiles, de tous les 
details de structure de la membrane d'enveloppe , de la striation 
musculaire, etc. 

Toutefois , nous ne nous abusons pas au point de croire le 
Probleme de la fixation resolu. Nul doute qu'en perseverant dans 
cette voie ou dans toute autre ayant pour but de respecter la sen- 
sibilite des Clements , et cela avec des moyens plus complets que 
ceux qu'ont pu nous oifrir nos ressources personnelles dans une 
petite ville de garnison, on parvienne k des resultats plus complets. 

C'est pourquoi, sur le conseil de Mr. le Professeur Prenant et 
dans l'espoir que plus d'un tecbnicien s'interessera au perfectionne- 
meut de ce procede , nous avons voulu en faire connaitre l'esprit 
et la teclinique. 



XXIV, 2. llubenthalcr: Methode g'cnerale de fixation. 137 



Teclinique detaillee. 

Commencer par reunir le materiel et les produits necessaires, 
savoir : 

1^ Milieu isotonique ou conservateur approprie ä l'objet 
d'etude. — On en recueillera cent fois le volume de l'objet. Comme 
ce volume ne dolt pas d6passer quelques millimetres cubes, la quan- 
tite de liquide isotonique ne sera jamais au-dessus de nos ressources. 
Sur ces cent volumes , cinquante seront mis de cote pour faire la 
Solution anesthesique. 

2^ Solution anesthesique. — P^lle sera preparee en dissolvant 
dans le liquide isotonique un centifeme de son poids de cblorhydrate 
de cocaine. L'bydrate de chloral est inferieur ä la cocaine. 

3*^ Dilutions üxatrices. — II suffit d'en adopter quatre, la der- 
niere etant representee par le fixateur normal. Leur mode de pre- 
paration est le meme, quel que soit le fixateur employe : 

La dilution No. I se compose de ^/^ fixateur normal ^/^ eau 

II 1/ 1/ 

T) 55 55 ^^ 55 T) T) 1 2 75 55 12 55 

III '^1 1/ 

55 55 55 ^^^ 55 55 55 U 55 55 /i 55 

4^ Un petit vase ä precipite, pourvu d'un bec, d'une capa- 
cite de 125 cm cubes environ pour y mettre le liquide isotonique et 
y faire la Substitution des liquides. 

5*^ Une eprouvette graduee de 50 cm cubes pour y placer le 
liquide anesthesique. 

6" Quatre tubes de Borrel etiquetes de 1 ji 4, renfermant les 
dilutions correspondantes et remplis aux trois quarts. Ces tubes etant 
de forme cylindrique, il sera aise , saus graduation, d'utiliser leur 
contenu par tiers successifs. 

7^ Etuve. — Elle pourra etre d'un modele quelconque pourvu 
qu'elle permette un reglage satisfaisant et dispose d'une capacite In- 
terieure süffisante. 

Detail des manipulations : Preparation de l'etuve: Mettre 
dans l'etuve au fond et a gauche le vase a precipite renfermant le 
milieu isotonique, ä gauche et en avant l'eprouvette contenant le li- 
quide anesthesique. 

A droite, on mettra les tubes de Boruel, le No. 4 etant place le 
premier au fond, puis, successivement, les No. 3, 2, et 1 de maniere 
que ce dernier soit sous la main. L'etuve est alors allumee et 



138 Rüben thaler: Methode generale de fixation. XXIV, 2. 

portee a la temperature reqnise. (II reste bien compris que l'emploi 
de I'etuve est commande par la temperature normale des tissus. 
Poiir les vegetaiix et les animaux ä sang froid les Operations seront 
executees ä l'air libre. Si nous siipposons ici l'emploi de I'etuve, 
c'est daus le but de douner a la teclinique son developpement le 
plus complet.) 

Anesthesie. — L'objet n'est preleve que lorsque I'etuve fonc- 
tionne regulierement. Porte dans le milieu isotonique et isotliermique 
il va etre soumis aussitöt :\ l'anestbesie, Celle-ci debute par addi- 
tion au milieu isotonique de un tiers de la Solution de cocaine. Au 
beut de dix minutes, un tiers du melange est rejete, puis, un nouveau 
tiers de la Solution anestbesique est ajoute, et ainsi de suite jusqu'ji 
epuisement de cette derniere. L'anestbesie est acbevee en une demi- 
heure. L'eprouvette devenue inutile est retiree de I'etuve. 

Fixation progressive. — La dilution No. 1 est substituee p a r 
tiers de dix minutes en dix minutes au milieu anestbesique. Les 
dilutions elles-memes se succedent l'une ä l'autre dans l'ordre de leur 
numero, de la meme fagon, un tiers ajoute pour un tiers rejete. 
Les tubes de Borrel sont retires de I'etuve au für et Ji mesure 
qu'ils deviennent inutiles, et on a soin de fermer, cbaque fois qu'il 
le faut , la porte de I'etuve. On arrive ainsi en deux beures ä 
l'emploi du fixateur normal. A I'etuve, aux environs de 37^, la 
duree normale de l'emploi de ce dernier est reduite de moitie. A 
froid, il faut le laisser agir pendant la duree normale de la fixation. 

Conflrmation de la fixation: Lorsque la piece doit subir l'in- 
clusion ä la pai'affine, il est bon d'aecentuer la fixation. 

Si cette derniere a eu lieu ä froid, on la prolongera une fois 
terminee, dans I'etuve, en elevant graduellement la temperature d'en- 
viron 5° d'beure en heure jusqu'ji ce qu'elle atteigne 40'^. 

Si la fixation a dejä eu lieu h cbaud , la stabilite voulue est 
acquise d'emblee. 

Cependant, pour les inclusions au delä de 55^, il est bon 
dans les deux cas , d'elever la temperature du milieu fixateur jus- 
qu'a 45*^. 

[Eingegangen am 29. Mai 1907.] 



XXIV, 2. Thoma: PikrinStäurekarmin. I39 



Pikrinsäurekarmin. 

Von 
Prof. I)r. R. Thoma 

in Heidelberg. 

Zu Doppelfärbungen mit Karmin und Pikrinsäure , zu Kern- 
färbungeu und zu Karmiufärbungen von entkalktem Knochengewebe 
eignet sich in hohem Grade ein Farbstoff, den ich als Pikrinsäure- 
karmin bezeichnen möchte. 

1"0 g kristallisierte Pikrinsäure wird in 100 ccm destilliertem 
Wasser unter leichtem Erwärmen gelöst und Avarm filtriert. Zu dem 
noch warmen Filtrat setze man 0'5 g rotes Karminpulver und er- 
wärme langsam unter stetigem Umschütteln bis zu einmaligem Sieden. 
(Man kann auch die Mischung im Dampfkochtopf erwärmen und 
eine Viertelstunde bei 100^ C. erhalten. Doch soll wiederholt um- 
geschüttelt werden.) Sodann wird die Flüssigkeit zum langsamen 
Abkühlen gestellt und im Laufe der nächsten Stunde noch einige 
Male umgeschüttelt. 24 Stunden später kann durch angefeuchtetes 
Filtrierpapier filtriert werden. 

Das Filtrat : Pikrinsäurekarmin färbt Schnitte in etwa 20 Mi- 
nuten. Die Schnitte werden mit Brunnenwasser ausgewaschen und 
mit einer einprozentigeu Pikrinsäurelösung differentiiert. Nach aber- 
maligem Auswaschen in Brunnenwasser kann in Grlyzerin untersucht 
werden oder man entwässert in 96prozentigen Alkohol und Origa- 
numöl und untersucht in Kanadabalsam. — Vor dem Entwässern 
kann man die Pikrinsäure durch SOprozentigen Alkohol ziemlich voll- 
ständig entfernen. — Celloidineinbettungsmassen verlieren bei der 
Differentiierung ihre Farbe vollständig oder, bei schwächerer Diffe- 
rentiierung, nahezu vollständig. 

Die färbende Substanz des Pikrinsäurekarmins ist wohl dieselbe 
wie diejenige von Ranvier s Pikrokarmin , doch fehlt der Ammon- 
gehalt des letzteren. Vor allem aber empfiehlt sich das Pikrinsäure- 
karmin durch die einfache und sichere Herstellung und demgemäß 
durch eine gleichmäßigere Wirkung. Außerdem ist die Färbung 
durch das Differentiierungsverfahren genauer zu beherrschen. 

[Eingegangen am 11. Juni 1907.] 



140 Neumayer: Beitrag z. Technik der Plattenmodelliermethode. XXIV, 2. 



Ein Beitrag 
zur Technik der Plattenmodelliermethode. 

Von 
L. Neumayer 

in München. 

1. Eine Methode zur Konsolidierung von Wachsplatten- 

modellen. 

Mehrfach hatte ich bei der Herstellung von Wachsplattenmodellen 
den Übelstand schwer empfunden , daß die bisher gebräuchlichen 
Methoden der Konsolidierung der Modelle nach dem Aufeinander- 
kleben der ausgeschnittenen Platten und deren Glättung bei kom- 
plizierteren zarten Objekten keine befriedigenden Resultate ergaben. 

Alle die Rekonstruktiousmethoden behandelnden technischen Leit- 
faden, wie das von A. A. Böhm herausgegebene „Taschenbuch der 
mikroskopischen Technik", die „Enzyklopädie der mikroskopischen 
Technik" und die von K. Peter bearbeitete Spezialabhandlung „Die 
Methoden der Rekonstruktion" bringen über das vorliegende Thema 
keine Angaben. Pollard empfiehlt meines Wissens als erster die 
fertiggestellten Modelle mit einem Kupfermantel auf galvanischem 
Wege zu überziehen. Ura die Oberfläche der zu festigenden Modelle 
leitend zu machen , werden dieselben mit einem Graphitbelag ver- 
sehen und in zweckentsprechender Weise in der Kupferlösung auf- 
gehängt. Die Dicke des zu erzielenden Kupferüberzuges kann in 
beliebiger Weise durch Änderung der Konzentration, der Kupfer- 
lösung, der Dauer des Galvanisierungsprozesses und der Stromstärke 
reguliert werden. Auf diese Weise kann das ganze Modell oder 
nur bestimmte Teile mit einem Kupferüberzug versehen werden, der 
dem Objekte eine außerordentliche Haltbarkeit verleiht. 

Andere Methoden erfüllen die an sie zu stellenden Forde- 
rungen nicht in vollem Maße. Wo es sich um Festigung voluminöser 
Objekte handelt, leistet die Methode des Einfügens von Metallstäben 
oder -drahten bei der Einfachheit und Leichtigkeit ihrer Ausführung 
gute Dienste. Wo aber dicke Wandungen fehlen und vor allem da. 



XXIV, 2. Neumayer»: Beitrag z. Technik der Plattenmodellierraethode. 141 

wo feine, dünne, stabförmige Gebilde einer Festigung bedürfen, ver- 
sagt sie. Auch der Versuch , in solchen Fällen Stücke von feinem 
Kupfer, Messing oder Zinkdraht der Oberfläche solcher Präparate 
ein- oder aufzuschmelzen , ergab keine befriedigenden Resultate , da 
mit dem Erwärmen des Drahtes meist auch die dünnen Wachsstäbe 
schmelzen, abbrechen oder verbogen werden. 

Auch die Methode der galvanischen Verkupferung hat Nach- 
teile, die ihre Anwendung in manchen Fällen nicht ratsam erscheinen 
lassen. Vor allem ist es die ungleichmäßige Dickenauflagerung des 
beim Galvanisieren verwandten Metalles , die sehr störende , unrich- 
tige Größenverhältnisse bewirken kann. Diese Erscheinung kann be- 
dingt sein durch ungleiche Verteilung oder gänzliches Fehlen des 
Graphitbelages an bestimmten Stellen des Modelies oder , und das 
scheint die Regel zu sein, durch zu langes Verweilen der Elektroden 
an einer Stelle , wodurch gerade an diesen Partien ein quantitativ 
größerer Metallniederschlag produziert wird , als an entfernteren 
Punkten. Bei relativ großen Objekten bedingen jedoch diese un- 
gleichmäßigen Auflagerungen keine zu großen Abweichungen von der 
Norm: sie können als innerhalb der Fehlergrenze liegend betrachtet 
werden. Handelt es sich aber um kleinere, kompliziertere Objekte, 
wo die Räume zwischen den einzelnen Gebilden auf kleine Spalten, 
Löcher etc. reduziert sind , so kann durch eventuellen Verschluß 
dieser Räume durch dazwischen eingelagertes Metall ein vollkommen 
falsches Bild des Objektes hervorgerufen werden. 

Alle diese Übelstände suchte ich durch Verwendung eines Ma- 
teriales zu umgehen, das in "beliebiger Dicke an jeder gewünschten 
Stelle dem Modell unmittelbar aufgetragen werden konnte und zu- 
gleich eine genügende Festigung gewährleistete. Nach mannigfachen 
Versuchen fand ich in dem Knochenleim ein obigen Anforderungen 
entsprechendes Präparat , das erwärmt zuerst direkt dem Objekt 
aufgetragen wurde. Es erwies sich späterhin vorteilhaft, die Ober- 
fläche des Wachsmodells zuerst mit Alkohol abzuwaschen und dann 
mit einer dünnen Schellacklösung zu bestreichen. Dadurch wird auf 
die meist terpentingetränkte Oberfläche des Objektes der in Wasser 
gelöste Knochenleim nicht direkt aufgetragen, so daß ein festeres 
Anhaften des letzteren erzielt wird. Auf diese Weise läßt sich ein 
genügend fester Überzug über das ganze Modell oder einzelne Teile 
desselben herstellen, der nach Übermalen mit Ölfarben auch gegen 
Feuchtigkeit beständig gemacht werden kann. 

An Stelle des Leimes verwende ich auch mit Vorteil einen 



142 Neumayer: Beitrag z. Technik der Plattenmodelliermethode. XXIV,2. 

Emaillack — Blundell s Petrifying Liquid, Spence and Co. Limited in 
Hnll, der dem Modelle öfter aufgetragen — Trocknen des vorhergehen- 
den Anstriches vor Auftragen eines neuen ist notwendig — einen festen 
und zugleich wasserbeständigen Überzug verleiht. An den Stellen, 
wo Drahtbrücken, Scharniere u. s. f. in das Wachs eingesetzt sind, 
empfiehlt es sich , zu stärkerer Festigung die betreffenden Stellen 
und deren Umgebung mit einer Mischung von Gummi arabicum und 
Gips — einem Klebemittel , das in paläontologischen Laboratorien 
zur Vereinigung fossiler Knochen verwendet wird — zu bestreichen, 
resp. die Einsatzstellen damit auszufüttern. 



2. Eine Modifikation der Richtlinienherstellung an Paraffln- 

und Celloidinblöeken. 

Ich bediene mich in jüngster Zeit zur Herstellung der Rich- 
tungslinien an Paraffinblöcken einer Methode , die mir im Vereine 
mit leichter und schneller Ausführungsmöglichkeit vorzügliche Resultate 
bei der Rekonstruktion auch der kompliziertesten Modelle ergeben 
hat. Es finden hierbei, wie das schon vielfach geübt wurde, in 
Osmiumsäure geschwärzte markhaltige Nerven Verwendung. Der 
Gang der Methode ist nun folgender : Die markhaltigen Nerven — 
ich verwende ausschließlich den Ischiadicus oder Stämme des Plexus 
lumbalis vom Frosche — werden möglichst gerade gestreckt an 
beiden Enden auf Hölzchen festgebunden und für 12 Stunden in 
einprozentiger Osmiumsäure behandelt. Nach dem Auswaschen in 
Aqua destillata — 12 Stvmden lang — wird ein Teil durch abso- 
luten Alkohol in Paraffinum liquidum übergeführt und der Länge 
nach mit zwei Präpariernadeln gezupft, wobei besonderes Augenmerk 
darauf zu richten ist, daß die Teilstücke möglichst geradegestreckt 
bleiben. Die so vorbereiteten Nerven , die nun einen Durchmesser 
von O'l mm nicht überschreiten sollen, können dann für spätere Ver- 
wendung beliebig lange im Paraffinum liquidum aufbewahrt werden. 

Eine zweite Partie der osmierten Nerven wird in Paraffin ein- 
gebettet und dann der Länge nach auf dem Mikrotom so zugeschnitten, 
daß der Durchmesser der Nervenstämme O'l — 0'2 mm beträgt. Diese 
Paraffinschnitte lege ich zwischen zwei Blätter Glanzpapier , um sie 
stets zum Gebrauch bereit zu haben. 

Das zu rekonstruierende Objekt wird in Paraffin eingebettet 
und auf drei Seiten mit einem der gebräuchlichen Ritzer mit Rillen 



XXIV,2. Neumayer: Beitrag z. Technik der riattenmodelliermetiiode. 143 

versehen. Der Länge dieser Rillen entsprechend werden nun die 
vorbereiteten Merveu zugeschnitten und in folgender Weise verwendet. 
Die in Paraffinum liquidum aufbewahrten und gezupften Xerven- 
stämme lege ich für etwa eine halbe Stunde in reines Paraffin (Schmelz- 
punkt 52*^). Von hier werden sie mit zwei leicht erwärmten mikro- 
skopischen Pinzetten an beiden Enden gefaßt, aus dem Paraffin so 
entnommen, daß keine Verbiegung in der Längsrichtung erfolgt und 
möglichst rasch in eine der in den Paraftinblock geritzten Piillen ge- 
legt. Diese Prozedur wird so lange wiederholt , bis alle Rillen der 
drei Seiten des Paraffinblockes mit Nervenstämmen beschickt sind. 
Nach dem Einlegen in die Rillen oder schon während des Über- 
führens aus dem flüssigen Paraffin in dieselben ist das an den Nerven 
anhaftende Paraffin erstarrt ; um nun die Nerven ganz in die Tiefe 
der Rillen lagern zu können, bediene ich mich eines Spatels, dessen 
Schneide etwa einen halben Millimeter breit abgeschliffen ist. Das 
Instrument wird erwärmt und mit demselben die in die Rillen ein- 
gelegten Nerven auf den Boden derselben angedrückt. Zum Schluß 
verstreicht man mit dem warmen Spatel die Rillen, so daß die Nerven 
von Paraffin vollständig bedeckt im Paraffinblock eingeschlossen liegen 
lind dieser eine vollkommen glatte Oberfläche zeigt. Sind die für 
die Herstellung der Richtlinien präparierten Nerven, wie oben aus- 
geführt , in Paraffin eingebettet und geschnitten worden , so werden 
die Schnitte in die Rillen eingelegt und beim Einschmelzen derselben 
genau so verfahren, wie eben angegeben wurde. 

Auf diese Weise vorbereitete Paraffinblöcke schneiden sich mit 
den eingeschlossenen Nerven tadellos und können leicht in Bänder 
zerlegt werden, wenn zum Einschmelzen der Nerven und Glätten 
der Oberfläche der Paraffinblöcke weiches Paraffin verwendet wird. 
Ein Ausfallen der quergeschnittenen Nerven habe ich bei exakter 
Ausführung der Methode niemals bemerkt ; zum Aufkleben der 
Paraffinschnitte verwendet man am besten P. Mayers Eiweiß- 
glyzerin oder die japanische Klebemethode. Das angegebene Ver- 
fahren ist mit entsprechender Modifikation auch bei Celloidinblöcken 
verwendbar. Ich verfahre hierbei in folgender Weise : Das durch 
die Celloidinlösungen in gewöhnlicher Weise geführte Stück wird am 
Schlüsse des Einbettungsverfahrens mit dem dicken Celloidin in eine 
viereckige Papierschachtel ausgegossen und zum Erhärten der Ein- 
wirkung von Chloroformdämpfen ausgesetzt. Ist das Celloidin in ge- 
nügender Weise erhärtet, wird nach Abnahme der Papierumhüllung 
der Block mit dickem Celloidin auf ein Stabilitplättchen aufgeklebt, 



144 Neumayer: Beitrag z. Technik der Plattenmodelliermetliode, XXIV, 2. 

wie solche speziell von Jung für die zum Celloidinschneiden be- 
stimmten Metallzylinder angefertigt werden. Der Celloidinblock wird 
nun an seinen vier Seiten zugeschnitten und je nach Bedarf an einer 
oder an allen mit Richtlinien versehen. Ich bediene mich hierzu 
meist des von Keibel angegebenen Ritzers ; auch der von Alexan- 
der angegebene Apparat leistet gute Dienste. Es empfiehlt sich, 
die mit dem Ritzer hergestellten Rillen noch mit einem scharfen Skal- 
pell keilförmig auszuschneiden, wobei der parallele Verlauf der Rillen 
gewahrt werden muß. In diese Furchen werden nun etwa -^/^ mm 
im Durchmesser messende osmierte Nerven eingelegt, die in ge- 
wöhnlicher Weise in Celloidin eingebettet direkt der letzten Celloidin- 
lösung entnommen werden. Der Celloidinblock kann vor dem Ein- 
fügen der Nervenstämme in absoluten Alkohol oder besser in eine 
Mischung von Alkohol absol. und Äther ää getaucht werden, doch ist 
diese Prozedur nicht absolut notwendig , da der Block nach seiner 
Entnahme aus den Chloroformdämpfen an der Oberfläche trocken ist 
und die in die Furchen eingelegten Nervenstämme mit dem dicken 
Celloidin gut ankleben. Der in dieser Weise vorbereitete Celloidin- 
block wird nun 15 bis 20 Minuten Chloroformdämpfen ausgesetzt, um 
die eingelegten Nerven in ihrer Lage zu fixieren. Er wird dann 
zur Glättung der Flächen in eine mitteldicke Celloidinlösung ein- 
getaucht und in Chloroform nachgehärtet. Nach 1 bis 2 Stunden 
lege ich den Block in 70- bis 80 prozentigen Alkohol, wo er bis zum 
Schneiden aufbewahrt wird. 

Die auf diese Weise erzielten Orieutierungsmarken ergeben so- 
wohl für Paraffin- wie Celloidinserieu ausgezeichnete Resultate, Die 
Methode erfordert , wenn osmierte Nerven immer in Vorrat gehalten 
werden, nicht mehr Zeit als das Anbringen von Orientierungsmarken 
durch Bestreichen mit Lampenschwarz und Collodium oder Zapon- 
lack und hat bei Paraffinschnitten den Vorzug, daß die Orientie- 
rungsmarken niemals abfallen oder losgelöste Partikel des Farb- 
stoffes in das Präparat verschleppt werden. Versuche, an Stelle der 
osmierten Nerven ein gefügigeres und plastischeres Metall, z. B. 
Streifen von koaguliertem und gefärbtem Eiweiß zu verwenden, sind 
noch nicht genügend erprobt und soll darüber seinerzeit berichtet 
werden. 

[Eingegangen am 19. Mai 1907,] 



XXIY, 2. Ilinterberger: Wie kann man Deckgläser trcansportieren ? I4ö 



[Aus der Prosektiir des Kaiser Franz Josef- Spitales in Wien. 
Vorstand: Prof. Dr. Kretz.] 



Wie kann man absolut reine oder auch bescliickte 
Declvgläser transi)ortieren ? 

Von 
Dr. Alexander Hinterberger 

in Wien. 



Hierzu zwei Holzschnitte. 



Für schwierigere Färbinigsverfahren sind absolut reine Deckgläser 
vorteilhaft, für Geißelfärbungen u. dergl. sind sie unbedingtes Er- 
fordernis. Man kann absolut reine Deckgläser entweder durch Ab- 
brennen oder besser durch das Verfahren von van Ermexgem^ 
erhalten. Gerade solche reine Deckgläser kann man aber leichter ver- 
unreinigen, als die nach gewöhnlichen Methoden gereinigten Deckgläser, 
weil letztere meistens etwas Fett und ähnliche, deckende Überzüge 
haben. Deshalb sind solche reine Deckgläser in den gewöhnlichen 
Holzschachteln sicher nicht besonders gut transportierbar. 

Es kann der Fall eintreten, daß man von einer Kultur etc. 
Aufstriche auf ganz reine Deckgläser machen will und diese Deck- 
gläser dann an einem anderen Orte zu fixieren und zu färben wünscht. 

Es war mir diese Aufgabe gestellt. Ich konnte sie dadurch 
lösen , daß ich mir einen gläsernen Färbetrog etAvas abschneiden 
ließ, den Färbetrog gut reinigte und in dieses Glasgefäß die für die 
verfügbare Breite zugesclmittenen Deckgläschen einstellte , wie das 
Bild zeigt. Ein zwischengelegtes Glasplättchen ermöglichte mir zwei 
Reihen von Deckgläsern übereinander aufzustellen. Die Deckgläschen 
blieben trotz Wagenfahrt, Eisenbahnfahrt und zu F'uß gehen mit dem 



1) Ref. Zentralbl. f. Bakteriol. Bd. XV, p. 969 und weiteres auch 
HixTERBERGER , Zentralbl. f. Bakteriol., 1. Abt., Bd. XXX, p. 420, Aniu. 
und Bd. XXXVI, p. 481, Abs. 4 u. 5. 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 10 



146 Hinterberger: Wie kann man Deckgläser transportieren ? XXIV, 2. 

in Papier gewickelten Gefäß in der Tasche vollkommen rein, ja sie 
konnten auch, nachdem sie über ein halbes Jahr nach einem solchen 
Transport im Kasten gestanden hatten, zu Geißelfärbungen u. dergl. 
tadellos verwendet werden. 

Ich will hierzu noch bemerken, daß ich, falls ich Glasgefäße 
ganz rein haben will, diese nach vorläufiger Reinigung in gewöhn- 




licher Weise (mit Wasser, Seife, eventuell Salzsäure) dann auf etwa 
24 Stunden oder länger in Wasser einlege, dem ich etwas von der 
von VAN Ermengem angegebenen Kaliumbichromatlösung zusetze. Die 
Gläser werden dann mit Wasser gut abgespült und an der Luft zur 
Trocknung aufgestellt. 

Im Falle ich von mehreren Kulturen Deckglasaufstriche zu 
färben habe, verwende ich in Form länglicher Vierecke geschnittene 
Deckgläser, an denen eine oder drei Ecken abgekappt sind. 




2. 



Wenn n^an diese Figuren auf ein Blatt Papier zeichnet und da- 
neben die Reihenfolge der verschiedenen Aufstriche notiert , kann 
man auf ein Deckglas von 20:30 mm Größe bis zu 10 verschiedene 
Aufstriche in zwei Reihen unterbringen und zugleich färben. Das 



XX1V,2. Hint erber ger: Wie kann man Deckgläser transportieren? 147 

ist eine enorme Zeitersparnis und sehr vorteilhaft bei vergleichen- 
den Studien. 

Wenn man mehr als zwei Arten von beschickten Deckgläsern 
sich vorbereiten will, so genügen zur Bezeichnung der verschiedenen 
Deckgläser Punkte oder Striche mit Nährboden. Man tupft einfach 
mit der heißen Nadel in den Agar, und dann ein oder mehrere Male 
auf die eine Ecke des Deckglases. Dieser Punkt oder Strich wird 
dann mitfixiert und mitgefärbt und man kann an der Hand seiner 
Aufzeichnungen genau wissen , was für Organismen z. B. auf dem 
dritten oberen Aufstrich des Deckgläschens mit einer abgeschrägten 
Ecke und zwei Punkten an der erhaltenen Ecke zu sehen sind. 

Man kann in einem solchen Färbetrog eine ganze Bakterien- 
sammlung in Form beschickter Deckgläser zur Fixierung und Färbung 
sich ins Laboratorium tragen oder senden, ohne fürchten zu müssen, 
daß ein Deckglas auch nur im geringsten verunreinigt werde oder 
ein Irrtum sich einschleiche. 

[Eingegangen am 27. Juni 1907.] 



10^ 



148 Referate. XXIV, 2. 



Referate. 



1. Lehr- und Handbücher. 

Lee, A. B., u. Mayer, P., Grundzüge der mikroskopisclien 
Technik für Zoologen und Anatomen. 3. Aufl. 
Berlin (R. Friedländer & Sohn) 1907. 15 M. 

Die neue Auflage unterscheidet sich von ihrer Vorgängerin im 
wesentlichen durch die kürzere Fassung mancher Paragraphen ; diese 
war geboten , sollte nicht durch die vielen Änderungen und Zusätze 
der Umfang des Buches stark vergrößert werden. Während unter 
anderem die 2. Auflage als neu einen Überblick über die Methoden 
der plastischen Rekonstruktionen und der sogenannten physiologischen 
Injektion , ferner übersichtlichere Anordnung der Materie in den 
Fixierungs- und Härtemittel behandelnden Kapiteln und starke Ab- 
änderung der Abschnitte der Teerfarbstoffe gebracht hatte, alles Ver- 
besserungen, die natürlich auch in die neue Auflage übergegangen 
sind , enthält diese als neu einen kurzen Abriß der Beobachtung- 
lebender Tiere oder ihrer überlebenden Teile , und geht wesentlich 
ausführlicher als früher auf die Färbung der Blutparasiten ein. Im 
Einklang mit der 6. Auflage des englischen Vade-Mecum (1905) 
sind die Abschnitte , welche allgemeines über das Färben und all- 
gemeines über Teerfarbstoffe enthalten, miteinander verschmolzen und 
die Kapitel vom Nervensystem nicht nur anders gruppiert sondern 
auch durch ausführlichere Darstelhmg der neueren Methoden be- 
deutend erweitert. Dafür hat anderseits das Kapitel über Kitte 
und Firnisse eine noch stärkere Kürzung erfahren. So ist denn trotz 
dem vielen Neuen , das das Buch bringen mußte , um ein getreues 
Abbild der hauptsächlichsten Strömungen im Gebiete der animaleu 



XXIV, 2. Referate. 149 

Mikrotechnik zu bleiben der Text immer noch um einige Seiten kürzer 
als der frühere. Das alphabetische Register freilich , dem ebenso 
wie den zahlreichen Verweisungen im Text wiederum ganz besondere 
Sorgfalt zugewandt wurde, ist infolge der Menge des neu hinzu- 
gekommenen Stoffes um nicht weniger als 11 Seiten länger geworden. 
Auch bei Bearbeitung dieser neuen Auflage machte es sicli fühlbar, 
wie sehr das alte Monitum der leidigen Art nicht weniger Autoren, 
ihre Technik entweder gar nicht oder nur unvollkommen anzugeben, 
noch zu Recht besteht. Die zitierten abschreckenden Beispiele solch 
ungenügender technischer Angaben: „Das Gemisch von 2 Teilen Jod- 
grün auf ein Teil Säurefuchsin in lOprozentigem Glyzerin gelöst", 
ferner „die 43prozentige alkoholische Alaunkarmiulösung", und „die 
konzentrierte wässerige Lösung von einem Teil Quecksilberchlorid, 
2 Teilen absolutem Alkohol und etwa ^/^prozentiger Essigsäure" be- 
rechtigen gewiß zu der beigefügten Mahnung „es wäre wirklich an 
der Zeit, daß die Vorsteher von Instituten den unter ihnen arbeitenden 
Anfängern nicht nur die Methoden der Forschung, sondern auch die 
Art, ihre Resultate klar und doch kurz zu veröffentlichen, beibrächten". 

E. Schoebel {Neapel). 

Prowazek , S. T., Taschenbuch der mikroskopischen 
Technik der P r o t i s t e n u n t e r s u c h u n g. Leipzig (Job. 
Ambr. Barth) 1907. 2 M. 

Das kleine Büchlein will dem immer mehr steigenden Interesse, 
das die Mediziner dem Studium der Protisten entgegenzubringen ge- 
nötigt sind, entgegenkommen und stellt alles zur Einführung in die 
Protistenkunde Notwendige übersichtlich zusammen. Nach einigen 
einleitenden Bemerkungen über die mikroskopische Beobachtung der 
Protisten folgt ein Abschnitt über sogenannte Vitalfarbstofte — be- 
sonders ausführlich wird das vielseitig verwendbare Neutralrot be- 
handelt — , sowie Bemerkungen über die „Darstellung der Kern- 
substanzen". Hiernach werden der Reihe nach die Rhizopoden 
(Dysenterieamöben u. a.), Mastigophoren, Trypanosomen (einschließlich 
der Spirochäten), Sporozoen (insbesondere die Malariaparasiten) und 
die Ciliateu behandelt. j^^y^^^^. (^^^^^g ^ ^ )_ 



150 Referate. XXIV, 2. 



2. Mikrophotographie und Projektion. 

Schrötter , H. V. , Beitrag zur Mikrophotographie mit 
ultraviolettem Lichte nach Köhler (Virchows 
Arch. Bd. CLXXXIII, 1906, H. 3, p. 343—376 m. 3 Tfln.). 
Die interessante Arbeit des Verf. läßt sich kaum referieren. 
Sie enthält eine Anzahl von Untersuchungen und Ideen über die Be- 
nutzung der ultravioletten Strahlen, und über eventuelle Färbbarkeit 
der Objekte , derentwegen auf das Original verwiesen werden muß. 
Bei der Untersuchung der Veränderungen bei der myleogenen Leu- 
kämie zeigte sich, daß die Substanz der neutrophileu (und basophilen) 
Granula das kurzwellige Licht in hohem Maße absorbiert, während 
sich die eosinophilen Einlagerungen durchlässig erwiesen. Es geht 
daraus also hervor, daß die Granulierung des Zellprotoplasmas der 
weißen Blutelemente auch bei ultraviolettem Licht zu Recht besteht 
und kein Kuustprodukt darstellt 5 der gekörnte , wabenartige Bau 
kommt in rein optischer Differenzierung zum Ausdrucke. Wie sich 
die lebende Zelle verhält, könnte durch die ultraviolette Photographie 
noch dadurch festgestellt werden, daß man die Aufnahmen nach Ver- 
dünnung des Blutes mittels physiologischer Kochsalzlösung auf dem 
erwärmten Objektträger vornimmt. Weiter ergab sich eine deutliche 
Beziehung zwischen dem Grade der Intensität der Färbungsfähigkeit 
mit Kernfärbemitteln und der Undurchlässigkeit der Kernstruktur 
für ultraviolettes Licht, so daß man sagen kann, daß die Dichte des 
Chromatins der Durchlässigkeit für ultraviolettes Licht (ungefähr) 
umgekehrt proportional ist. Die eosinophilen Granula, welche bei 
langwelliger Durchleuchtung starken Lichtreflex zeigen oder bei Dunkel- 
feldbeleuchtung mit koaxialer Anordnung als hellglitzernde Gebilde 
im Präparate hervortreten, haben sich für ultraviolettes Licht sehr 
durchlässig erwiesen. Verf. kommt zu der Annahme , daß die Ab- 
sorption für ultraviolettes Licht mit dem Nucleingehalte des Gewebes 
oder der einzelnen Strukturen zunimmt. Die Kernsubstanz, besonders 
das Mitoplasma, erwies sich als nahezu undurchlässig für kurzwellige 
Strahlen. Die Nucleoproteide bezw. das Nucleohistou der Lympho- 
cyten scheinen sonach durch ein Maximum der Absorption für Ultra- 
violett charakterisiert zu sein. Daß den Eiweißsubstanzen die Eigen- 
schaft zukommt , die kurzwelligen Strahlen des Spektrums in hohem 
Maße zu absorbieren, ist zuerst von Soret (1879) gezeigt worden. 



XXIV, 2. Referate. 151 

und zwar fand er, daß es nicht etwa kristallinische, dialysabele 
Stoffe sind, welche das Ultraviolett absorbieren, sondern daß dieses 
Verhalten in der Tat mit der chemischen Konstitution der Protein- 
körper zusammenhängt und allen Eiweißderivaten gemeinsam ist. In 
seiner letzten Arbeit (1883) unterzieht Soret schon die verschiedenen 
Eiweißarten bezw. Eiweißderivate der spektroskopischen Untersuchung 5 
alle zeigen hohe Werte der Absorption für die kurzwellige Strahlung. 
Die Kurve der Alkalialbuminate weicht von jener der Acidalbumi- 
nate deutlich ab, während die letztere mit der des unveränderten 
Eiweißes übereinstimmt ; durch Zusatz eines Alkalis scheint der Eiweiß- 
körper viel eingreifender modifiziert zu werden als durch Säuren etc. 
Die Darstellung des leukämischen Blutes hat dem Verf. ein inter- 
essantes Beispiel dafür gegeben , wie die bei Tageslicht ungefärbten 
Präparate unter ultravioletter Bestrahlung infolge der verschiedenen 
Durchlässigkeit der einzelnen Zellbestandteile gefärbt und differenziert 
erscheinen. So kann das neue Verfahren ein wertvolles Ersatzmittel 
für manche künstliche Färbungen werden. Neue Strukturen sind 
bei Bakterien und bei Blutpräparaten noch nicht beobachtet worden, 
allerdings sind die stärksten Vergrößerungen noch nicht benutzt 
worden. Diese neue Untersuchungsmethode erweitert das objektive 
Verfahren der Mikrophotographie bedeutend. Im Wege der Er- 
langung optischer Durchschnitte gestattet es, die feinsten Struktur- 
elemente bis zu einer Größenordnung von 0*25 fx zur Darstellung zu 
bringen. Verf. geht dann schließlich noch auf die nächsten Ziele 
dieser neuen Untersuchungsmethode ein. Schieferdecker {Bonn). 



3. Präparationsmethoden im allgemeinen. 

Biudo de Yecchi, La fotossilina sciolta in alcool meti- 
lico come mezzo d'inclusione (Monitore zool. ital., 
anno XVII, 1906, p. 248—251). 
Verf. glaubt in der Lösung von „Photoxylin" in Methylalkohol 
ein wesentlich besseres Einbettungsmittel für das Mikrotomschueiden 
gefunden zu haben als es die Lösung von „Celloidin" im Alkohol- 
Äthergemisch ist und scheint dabei der Ansicht zu sein, daß Photo- 
xylin und Celloidin zwei wesentlich verschiedene Stoffe sind. Die 
einzubettenden Stücke bringt man zunächst 24 Stunden in absoluten 



152 Referate. XXIV, 2. 

Methylalkohol, dann für 24 Stunden bis mehrere Tage, je nach Art 
der Gewebe und Größe der Stücke , in eine einprozentige Lösung 
von Photoxylin in Methylalkohol, dann für etwa ebensolange Zeit in 
eine öprozentige. Um den Stücken die notwendige Schnittfähigkeit 
zu geben , läßt man zunächst den Methylalkohol soweit verdunsten, 
bis die Oberfläche hart genug geworden ist, um das Zurechtschneiden 
des Blockes mit einem Skalpell zu erlauben. Der Block wird dann 
mit dicker Gelatinelösung auf ein entsprechendes Holzstück, zum 
Einspannen in die Zange des Mikrotoms, aufgeklebt und für etwa 
eine Stunde unter eine Glasglocke gelegt. Schließlich legt man das 
Ganze für 24 Stunden oder besser noch länger in 85 bis 90prozentigen 
gewöhnlichen Alkohol , wobei das Photoxylin vollständig transparent 
wird und so gute Schnittfähigkeit erhält, daß bequem auch dünnere 
Schnitte herzustellen sind , gleichzeitig wird auch die Gelatine , mit 
der der Block auf dem Holzstück befestigt ist , so hart , daß ein 
Loslösen beim Schneiden ausgeschlossen ist. 

E. Schocbel {Neapel). 



^O' 



RÖßler, 0., Ein einfaches Verfahren, Deckgläschen zu 
reinigen (Apotheker-Zeitg. Bd. XXI, 1906, p. 488). 
Der Verf. empfiehlt zum Eeinigen der Deckgläschen das Ein- 
legen in Sublimatlösung, dem ein Erhitzen in schwach mit Schwefel- 
säure angesäuertem Wasser zu folgen hat. Sobald die Flüssigkeit 
zu sieden anfängt, sind einige Tropfen Kaliumpermanganatlösung zuzu- 
setzen. Die so behandelten Gläschen lassen durch einfaches Abreiben 
mit einem Tuch sich stets säubern ; falls Ölimmersiou angewandt 
worden war, muß ein Abreiben des Zedernöls der chemischen Be- 
handlung vorausgehen. E. Sommerfeldt {Tu bh igen). 

Sjövall, E., Über Spinalganglienzellen und Markscheiden. 

Zugleich ein Versuch, die Wirkungsweise der 

Osmiumsäure zu analysieren (Anat. Hefte, H. 91, 

[Bd. XXX, H. 2] 1905, p. 261—391 m. 5 Tfln.). 

Um das Verhalten der Trophospongien während der Entwicklung 

in den Spinalganglienzellen zu untersuchen, hat Verf. das Hühnchen 

gewählt und die Methode von Kopsch, welche er sehr rühmt. Er 

hebt dabei den großen Einfluß hervor, den die Temperatur auf die 

Zeitdauer ausübt, bis die Osmiumfärbung eintritt. Behandelt man 

die Präparate bei 35*^, so tritt die Färbung schon nach 2 bis 3 Tagen 

ein und nach 5 bis 6 Tagen sind sämtliche Zellen ganz undurch- 



XXIV, 2. Referate. I53 

sichtig scliwarz gefärbt. Bei einer Temperatur von 2;5^ erhalt man 
nach 7 bis 10 Tagen schöne F'ärbungen. Bei weiter sinkender 
Temperatur verlängert sich die Zeitdauer außerordentlich, so daß 
Verf. während der Wintermonate, wo die Temperatur im Laboratorium 
naclits meist unter 15*^ fiel, die Osmiumsäure oft 30 bis 40 Tage 
einwirken lassen mußte und doch nur recht dürftige Färbungen er- 
hielt. Bei einer Temperatur von 7 bis 5^ entstehen auch nach 
2^/2 Monaten noch keine Netzfärbungen. Verf. empfiehlt daher, die 
Osmiumsäure bei konstanter Temperatur einwirken zu lassen; er liat 
eine solche von 2.3^ gewählt, da man bei dieser eine Überfärbung 
leichter vermeiden kann als bei einer höheren. Weiter ist noch zu 
beachten, daß man, wenigstens während der ersten Tage der Ein- 
wirkung der Osmiumsäurelösung, diese nicht „schlecht" werden lassen 
darf. Nach Verlauf von ein paar Tagen hat Verf. von einer solchen 
Abschwächung der Lösung jedoch keinen anderen Einfluß beobachten 
können als den, daß die Osmiumschwärzung des Netzes, nach Über- 
führung der Präparate in eine neue Lösung, augenscheinlich schneller 
eintritt, als wenn die Präparate während der ganzen Zeit in einer 
Lösung von unverminderter Stärke bleiben. Nach der Osmiumsäure- 
behandlung werden die Ganglien in fließendem Wasser ausgewaschen, 
in Paraffin eingebettet und dann in Serien von 5 /t dicken Schnitten 
zerlegt. Gute Resultate hat Verf. weiter erhalten mit der Modifikation 
der GoLGi sehen Methode nach Veratti. Mit der HoLMGRENSchen 
Trichlormilchsäure-Resorzin-Fuchsin-Methode hat Verf. dagegen keinen 
Erfolg gehabt. Er hat nachweisen können, daß die Vollständigkeit 
der Färbung und die Verschiedenheit der morphologischen Bilder in 
direktem Zusammenhange mit dem Konzentrationsgrade stehen, in 
welchem die Osraiumsäure die Zellen triß't, und zwar so, daß eine 
zweiprozentige Lösung überhaupt nichts oder in einzelnen Fällen feine, 
difl'use Körnchen färbt, während bei sinkender Konzentration der 
Osmiumsäurelösung die ganze Serie durchlaufen wird (feine Körnchen, 
Körnchenreihen, unvollständige und vollständigere Netze mit gleich- 
dicken Fäden, Netze mit tropfenförmigen Verdickungen in den 
Maschen, Tropfen von steigender Plumpheit mit mehr oder weiiiger 
deutlich ausgesprochenen Verbindungsfäden und schließlich sehr große 
Tropfen mit vollständig diffuser Verteilung, ohne eine Spur von 
Netzanordnung), bis schließlich bei einer Konzentration von O'l ^/^ 
eben die großen Tropfen ohne Netzbildung auftreten. In sichtlichem 
Zusammenhange mit den gefärbten und nicht gefärbten Zellzonen in 
einem Ganglion steht auch eine Verschiedenheit im Aussehen der 



154 Referate. XXIV, 2. 

Markscheide. In der periplieren Zone der ungefärbten Zellen zeigt 
nämlich das Nervenmark in vereinzelten Fällen eine LANTERMANSche 
Einkerbung, hat aber im übrigen ebene Konturen und erscheint 
homogen; ungefähr gleichzeitig mit der Zellfärbung tritt auch eine 
deutliche Zerteilung des Nervenmarkes in gröbere oder feinere 
Körnchen ein. Bei der Einwirkimg der Osmiumsäurelösung auf die 
Spinalganglienzellen und die Markscheiden muß man die Einwirkung 
der Osmiurasäure und des Wassers auseinander halten. Bei Be- 
handlung mit einer zweiprozentigen Osmiumsäurelösung ist es die 
periphere Schicht ungefärbter Ganglienzellen und gleichförmig kontu- 
rierter, homogen gefärbter Markscheiden, die ihr natürliches Aussehen 
am besten konserviert erhalten haben, und zwar deswegen, weil die 
Osmiumsäure hier eine so kräftige Wirkung zu erzeugen vermocht 
hat, daß das Wasser seinen Einfluß nicht geltend machen konnte. 
Das Auftreten von osmiumgeschwärzten Netzen in den Ganglienzellen 
und die Zerteilung des Nervenmarkes in Körnchen ist dagegen der 
Ausdruck einer Wasserbeeinflussung. Diese Erscheinungen linden 
sich zunächst im Zentrum der Ganglien. Diese Wasserbeeinflussung 
kommt auf zwei verschiedenen Wegen zustande, welche beide in dem 
schlechten Diff"usionsvermögen der Osmiumsäure ihren Ursprung haben, 
Teils nämlich gelingt es der Osmiumsäure nicht so schnell, wie dem 
Wasser, in die zentralen Teile des Ganglions einzudringen, und das 
Wasser vermag daher eine gewisse Zeit lang zuerst einzuwirken, 
teils ist die Osmiumsäurelösung, wenn sie durch die Diftusion ge- 
schwächt ist, nicht mehr, wie zuerst, imstande, den Einfluß zu ver- 
hindern, den das Wasser auch in den von der Osmiumsäure beein- 
flußten Zellen auszuüben stets bestrebt ist. Dieser Einfluß des 
Wassers bewirkt eine Anschwellung. Das Netz in den Zellen wird 
also erst sichtbar bei Osmiumeinwirkung, wenn dasselbe künstlich 
durch eine Wassereinwirkung gequollen ist. Diese Ansicht des Verf. 
wurde auf das schönste bestätigt durch Versuche mit Formaldehyd. 
(Es wurde teils das „Formalin" von Schering, teils das „Formalde- 
hydum solutum" von Merck benutzt, und auf Grund seiner Er- 
fahrungen muß Verf. dem letzteren einen kleinen, aber bestimmten 
Vorzug einräumen hinsichtlich der Fähigkeit die morphologischen 
Charaktere der Netze zu konservieren.) Diese Versuche führten zu 
einer Methode, welche osmiumgeschwärzte, morphologisch gut kon- 
servierte Netze überall, wo solche zu finden sind, d. h. in sämtlichen 
Ganglienzellen eines Spinalgauglions, schnell, sicher und vollständig 
darzustellen erlaubt. Diese Methode besteht in einer Primärbehand- 



XXIV, 2. Referate, I55 

lung mit einer Formaldehydlösung-, Auswaschen mit Wasser und 
Nachbeliandlung mit einer zweiprozentigen wässerigen Lösung von 
Osmiumsäure. Die spezielle Methode, die bei den Entwicklungs- 
stadien der Spinalganglien des Hühnchens die schnellsten und schönsten 
Resultate ergeben hat, ist die folgende: a. lOprozentige Formal- 
dehydlösung (d. h. ein Teil des käuflichen Formalins auf 3 Teile 
destillierten Wassers) bei 5 bis 7^ 8 Stunden lang. b. Auswaschen 
in Wasser eine Stunde lang. c. 2prozentige Osmiumsäurelösung bei 
35^ zwei Tage lang. Bei andersartigem Material muß natürlich die 
Methode modifiziert werden, um die besten Resultate zu erhalten. 
So hat Verf. z. B. in den Spinalganglien von Kaninchen erst durch 
Primärbehandlung mit 40prozeutiger Formaldehydlösung (d. h. dem 
unverdünnten käuflichen Formaline) und mehrstündiges Auswaschen 
sämtliche Netze gefärbt erhalten. Man muß also für jeden Fall 
Versuche anstellen. Wichtig ist für diese Methode, daß das Formaliu 
frisch ist und im Dunkeln einwirkt. Schieferdecker {Bonn). 

Bonuey, V., Eine neue und leicht auszuführende drei- 
fache Färbung für Zellen und Gewebsschnitte 
nach Flemmings Dreifachbehandlung (Virchows 
Arch. Bd. CLXXXV, H. 2, 1906, p. 359—361 m. 1 Tfl.). 
Verf. hat die im ganzen als unsicher geltende FLEMMiNGSche 
Dreifachfärbung so modifiziert, daß man wirklich schnell und sicher 
eine dreifache Färbung erreicht: 1) Fixieren kleiner Gewebsstücke in 
Alkohol-Eisessig (einen Teil Eisessig, 2 Teile absoluter Alkohol). Nach 
5 bis 15 Minuten, je nach der Größe, kommt das Stück in mehrmals 
zu wechselnden absoluten Alkohol. Fixierung in Hermann scher oder 
Flmming scher Flüssigkeit ist ebenfalls erlaubt, sonstige Fixierungs- 
mittel nicht. 2) Einbetten, Schneiden und Aufkleben der Schnitte in 
üblicher Weise. 3) Einstündige Färbung in gesättigter wässeriger 
Safraninlösung. 4) Auswaschen in Wasser. 5) Färbung in gesättigter 
wässeriger Methylviolettlösung, 15 Minuten. 6) Man wasche den 
Objektträger mit Ausnahme des vom Schnitte eingenommenen Teiles 
in Wasser ab und mische ihn trocken. 7) Man übergieße den 
Objektträger mit der folgenden Lösung, die in einer Tropfflasche 
vorrätig gehalten wird: Zu 20 cc Aceton wird tropfenweise eine ge- 
sättigte wässerige Lösung von Orange G zugesetzt, bis der flockige 
Niederschlag, der zuerst auftritt, bei weiterem Zusätze der wässerigen 
Lösung wieder aufgelöst ist; dann filtrieren. Nach dem Übergießen 
kommt sofort eine Farbwolke aus dem Schnitte heraus und macht 



156 Referate. XXIV, 2. 

ihn unsichtbar. 8) Absaugen der Farbe mit Fließpapier und von 
neuem Übergießen mit der Lösung. Wird die austretende Farbwolke 
dünner, so wird der Schnitt wieder sichtbar. 9) Man hört mit dem 
Zusätze der Lösung auf, wenn der Schnitt eine bräunlich-rosa Farbe 
bekommt. 10) Wenige Sekunden in Aceton auswaschen. Dieses 
ist in einem kleinen Glasgefäße aufzubewahren, es ist sehr flüchtig 
und man muß aufpassen, daß der Schnitt nicht trocken wird. 
11) Übertragen in Xylol, dann bei schwacher Vergrößerung nach- 
sehen, ob das gewünschte Resultat erreicht ist. Das Xylol noch 
zweimal wechseln. 12) Einschluß in Kanadabalsam. Resultat: 
alles Chromatin, Kernkörperchen, sowie die Kerne der multinukleären 
Leukocyten sind tief violett gefärbt , die Chromosomen besonders 
deutlich. Die achromatischen Spindeln der Kernteilungsfiguren sind 
blaßrosa; das Protoplasma ist rosarot, das interstitielle Gewebe blaß- 
gelb. Verf. macht noch die folgenden Bemerkungen: Das Gelingen 
der Färbung scheint von einer Auswahlwirkung des Aceton-Orange 
auf Safranin und Methylviolett abzuhängen. Der wichtigste Faktor 
bei der ganzen Prozedur ist die Orange-Aceton-Lösung: wirkt sie zu 
lange ein, so wird das ganze Präparat gleichmäßig gelb; wirkt sie 
nicht lange genug, so wird das Präparat fleckig, da Methylviolett im 
Protoplasma zurückbleibt. Die Wirkungsdauer des Safranin und 
Methylviolett muß, je nach der Besonderheit der Gewebe, verschieden 
lang sein, die von dem Verf. angegebenen Zeiten stellen den mittleren 
Durchschnitt dar. Ergibt die Untersuchung mit schwacher Ver- 
größerung, daß die Farbe aus dem Präparate nicht genügend ent- 
fernt ist, so ist von neuem Orange-Aceton hinzuzusetzen; ist dagegen 
zu stark entfärbt worden, dann muß das Präparat aus Xylol durch 
Aceton in Wasser zurückgebracht werden und der Prozeß muß von 
neuem beginnen. Schiefferdecker {Bonn). 

Achard, Ch., et Aynaud, M., Sur l'impregnation histo- 

logique par les precipites colores (C. R. Soc. 

Biol. Paris, t. LXI, 1906, no. 26, p. 74—75). 

Achard und Atn^^ud heben hervor, daß die Imi^rägnierung der 

Kittsubstanz zwischen den Zellen mit Silber in der Weise vor sich 

geht, daß sich ein Niederschlag bildet, der die schwarze sichtbare 

Linie ergibt. Auf diese Weise würde man auch mit anderen Mitteln 

Färbungen erzeugen können. So haben die Verff. die Kittlinien 

zwischen den Endothelien der serösen Häute deutlich gemacht, indem 

sie das Gewebe in eine Lösung von rotem Blutlaugensalz brachten 



XXIV, 2. Referate. I57 

und dann in eine Lösung von Eisensulfat. Ferner liaben sie eine 
Imprägnation mit Palladiumjodid erhalten. Man durchtränkt das 
Stück mit Jodkalium und bringt es dann in eine Lösung von Palla- 
diumchlorid : die Konturen der Endothelien färbten sich schwarz. 
Ahnlich entsteht ein Niederschlag von Eisentaunat: zuerst eine einpro- 
zentige Tanninlösung, dann eine ^/^prozentige Eisensulfatl()sung. Auch 
durch Behandlung eines Stückes einer serösen Haut mit Osmium- 
dämpfeu und darauf mit einer einprozentigen Tanninlösung kann man 
die Grenzen der Endothelien färben. Alle diese Methoden sind 
übrigens nicht besser als die Silberimprägnation. Die Verff. machen 
aber darauf aufmerksam, mit welcher Leichtigkeit die Kittsubstanzen 
die verschiedenen Substanzen aufnehmen. Scliiefferdeclier (Bonn). 

LoefFler, F., ZurGRAMSchenFärbungsmethod e (Deutsch. med. 
Wochenschr., .Talirg. XXXII, 1906, Nr. 31, p. 124.3—1244). 
Verf. hebt hervor, daß die ausgezeichnete GRAMSche Methode 
auch in den zahlreichen Modifikationen, die seither versucht worden 
sind, noch immer einige Schwierigkeiten bei der Färbung ergab. Er 
hat daher die sämtlichen im Handel vorkommenden Violetts in bezug 
auf ihre Brauchbarkeit für die GramscIic Färbung einer vergleichenden 
Untersuchung unterzogen, da die verschiedenen Resultate wahrschein- 
lich durch die Beschafienheit der verwendeten Farbstotfe bedingt 
waren. P^ine solche Untersuchung erschien um so mehr geboten, als 
bei den verschiedenen Darstellungsmethoden des Methylvioletts kein 
chemisch reiner Farbstoff, sondern ein Gemenge verschiedener Farb- 
stoffe entsteht. Von sämtlichen zu untersuchenden Farbstoffen (es 
wurden im ganzen 17 untersucht) wurden zunächst gesättigte alko- 
holische Lösungen hergestellt. Zur Verdünnung dienten Anilinwasser 
und Karbolwasser in verschiedenen Konzentrationen, zur Entfärbung 
Alkohol ohne und mit Zusatz von .Sprozentiger Salzsäure, 5prozeutiger 
Schwefelsäure, 5prozentiger Salpetersäure und Acetonalkohol in ver- 
schiedenen Konzentrationen. Zur Prüfung wurden verwendet Schnitte 
von in Alkohol gehärteten Organen von 20 bis 30 u Dicke mit 
Milzbrandbazillen, Mäusesepticämiebazillen, Pneumokokken, Strepto- 
kokken, Tuberkelbazillen, Aktinomyces und Oidium. Die besten 
Färbungen wurden erzielt mit Methylviolett 6 B und Methylviolett B N 
im Verhältnisse von 1:10 gelöst in ein- bis 2 ^/gprozentigem Karbol- 
.wasser. Die Schnitte kamen aus dem Alkohol direkt in die Farb- 
lösung für 2 bis 10 Minuten; gründliches Abspülen mit Wasser: 
GRAMSche Jodjodkaliumlösung 2 Minuten; .5prozentige wässerige 



158 Referate. XXIV, 2. 

Salpetersäure oder Schwefelsäure eine Minute oder Sprozentiger Salz- 
säurealkohol 10 Sekunden, absoluter Alkohol oder SOprozentiger 
Acetonalkohol bis zur vollständigen Entfärbung, Bei Anwendung des 
ÜNNASchen Jodkalium- Wasserstoffsuperoxyd-Gemisches zur Entfärbung 
schien dieses schneller vor sich zu gehen, auch waren störende 
Kristallbildungen auf den Schnitten nie bemerkbar. Verf. zieht daher 
die Unna sehe Entfärbungsflüssigkeit der Gram sehen vor. Aus dem 
Alkohol kamen die Schnitte in Xylol, dann in Kanadabalsam. Eine 
sehr schöne Färbung wurde erzielt, wenn zu 10 cc der Karbol- 
Methylviolett 6 B-Lösung 1 cc alkoholischer Methylenblaulösung zu- 
gefügt wurde. Das Methylenblau scheint als Beize zu wirken. Bei 
Zusatz von 1 cc alkoholischer Fuchsinlösung zu der Violettlösung war 
die Färbung ebenfalls sehr gut, die Sclinitte erschienen rot gefärbt. 
Zur Erzielung einer Doppelfärbung war es besser, die Schnitte nach 
der Entfärbung kurze Zeit in eine verdünnte Fuchsinlösung zu bringen 
und dann durch Alkohol zu entwässern. Das Methylviolett 6 B war 
allen anderen Violetts überlegen bei den meisten Mikroorganismen, 
nur für die Pneumokokken war Methylviolett B N besser. Die Zu- 
sammensetzung dieses Farbstoffes ist Fabrikgeheimnis. Frisches 
Material färbte sich stets am besten. Die zu der Bereitung der 
Farblösung nötige Karbolsäurelösung muß jedesmal frisch dargestellt 
werden, da sich ältere Lösungen leicht verändern. Auf Vorschlag 
des Verf. ist das Methylviolett 6 B für die Gram sehe Färbung in 
die Anleitung für die bakteriologische Feststellung der Pest auf- 
genommen worden. Schiefferdecker (Bonn). 

May, R. , Eine neue Methode der Romanowsky - F ä r b u n g 
(Münchener med. Wochenschr. Jahrg. LIII, Nr. 8, 1906, 
p. 358—359). 
Verf. veröffentlicht eine Vereinfachung der Romanowsky - Fär- 
bung. Aus den Versuchen früherer Autoren geht hervor, daß zum 
Zustandekommen dieser Färbung die folgenden drei Farben notwendig 
sind : Reines (unverändertes) Methylenblau, Methylenazur, Eosin. Die 
übrigen in der ursprünglichen alkalioxydierten Methylenblaulösung 
enthaltenen Oxydationsstufen sind weniger belangreich, ja zum Teile 
stören sie das Zustandekommen der spezifischen Färbung. Die Me- 
thode des Verf. besteht kurz gesagt in einer Umwandlung der mit 
eosinsaurem Methylenblau vorgefärbten Präparate in Romanowsky- 
Präparate. Man erreicht dies sehr einfach, indem man die Präparate 
nachträglich mit Methylenazur behandelt. Am geeignetsten erscheint 



XXIV, 2. Referate. I59 

hierzu das nach dem Verfahren von Giemsa dargestellte GutJBLEKSche 
Methylenazur, doch erweisen sich auch alle sogenannten Komanowskv- 
Stammlösungen, wenn anders sie nur genügende Mengen von Metliylen- 
azur enthalten, brauchbar. Für manche Detailforschungen erscheinen 
solche Methylenoxydatiousprodukte verschiedener Art enthaltende 
Lösungen sogar noch zweckmäßiger. Verfahren: Man färbt die 
Blutpräparate zunächst in einer etwa 0'25prozentigen metliylalkoho- 
lischen Lösung von eosinsaurem Methylenblau. Dann stellt man sie 
auf eine Minute in destilliertes Wasser, nimmt sie heraus und läßt, 
ohne sie vorher abzutrocknen , einen Tropfen einer z. B. O'öprozen- 
tigen Lösung von Methylenazur zufließen , für dessen gleichmäßige 
Verteilung man durch Hin- und Herbewegen des Präparates sorgt. 
Unter der Einwirkung des Methylenazurs blassen die blauen Kern- 
färbungen zunächst ab, um dann von neuem, aber in dem charakte- 
ristischen roten Farbentone aufzutreten. Man kann den ganzen Prozeß, 
der sich in 2 bis 4 Minuten vollzieht , unter dem Mikroskope ver- 
folgen. Ist der gewünschte Farbenton erreicht, so trocknet man die 
Präparate einfach ab , man kann sie auch vorher unter fließendem 
Wasser abspülen , doch ist das nicht unbedingt nötig. Die spezi- 
fische Färbung vollzieht sich am schnellsten an der Chromatinsubstanz 
der Blutplättchen, es folgen die Kerne der Lymphocyteu, den Schluß 
bilden die Kerne bezw. die Granula der polymorphkernigen Leuko- 
cyten. Zu hüten hat man sich vor der Anwendung zu konzentrierter 
Azurlösung. Ebenso muß man dafür sorgen, daß nach der Diff"eren- 
zierung in destilliertem Wasser kein ausgefallenes eosinsaures Methylen- 
blau den Präparaten anhaftet, was durch sauberes Arbeiten, nament- 
lich bei häufigem Wechsel des destillierten Wassers oder ganz be- 
sonders durch Zugießen von destilliertem Wasser bis zum Überfließen 
leicht gelingt. Unter diesen Kautelen liefert die Methode absolut 
niederschlagsfreie Bilder. Kerne und Granula, auch die sogenannten 
Lymphocytengranula, leuchtend rot (eine Ausnahme machen die eosino- 
philen Granula, welche in grauem Tone, und die Mastzellengranula, 
welche in glänzend rot-violettem Tone erscheinen) ; Protoplasma der 
Lymphocyteu bläulich 5 bei Malariapräparaten lassen sich Tüpfel usw. 
in charakteristischer Weise darstellen. Die roten Blutkörperchen 
bleiben bei Anwendung reinen Methylenazurs rötlich gefärbt , bei 
Nachbehandlung mit RoMANOwsKY-Stammlösungen werden sie, je nach 
dem Alkaligehalte derselben, mehr oder wenig grünlich gefärbt. Die 
Methode eignet sich zur Bakterienfärbung und insbesondere auch zu 
der der Spirochaete pallida. Schiefferdecker {Bonn). 



160 Referate. XXIV, 2. 

Neumann, A., Z u m W e s e n der R o m a n o w s k y - N o c h t s c h e u 
Färbung [relative Metachromasie] (Zentralbl. f. 
Bakteriol., Abt. 1, Orig. Bd. XLIII, 1907, p. 746). 

Auf Grund der Tatsache, daß gewisse saure Substanzen (Pikrin- 
säure 1:10000, polychromes Methylenblau -[-konzentrierte Tannin- 
lösung und ein saurer Farbstoff, den Verf. aus Methylenblau erhielt) 
einen Umschlag der blauen Färbung von Präparaten, die mit Me- 
thylenblau vorbehandelt sind , in rot veranlassen , äußert sich Verf. 
hinsichtlich des Wesens der Romanowsky- Färbung mit Methylenblau- 
Eosin folgendermaßen. 

Verf. meint, daß von dem Gemisch zunächst das Methylenblau 
zur Wirkung komme, und daß die nachfolgende Annahme des Eosin- 
tones erst die Wirkung eines sauren Farbstoffes auf das Methylen- 
blau ist, der als Verunreinigung in gewissen Methylenblaupräparaten 
enthalten ist und im Überschuß in Lösung bleibt, wenn die Farb- 
salze zum größten Teile ausgefallen sind. Ebenso ist die Karmin- 
färbung nach Eosinzusatz zu Präparaten , die mit Azur vorgefärbt 
sind, auch auf einen Farbumschlag des Azurs zurückzuführen. 

Freund {Halle a. S.). 

Sachs-Müke, Ein einfacher Apparat zur Wieder auf fin- 
dung bestimmter Stellen in mikroskopischen 
Präparaten (München, med. Wochenschr. Jahrg. LIII, 
1906, No. 26, p. 1258—1259 m. 1 Abb.). 
Um eine bestimmte Stelle in einem mikroskopischen Präparate 
schnell wieder auffinden zu können, hat Verf. einen neuen kleinen 
Apparat konstruiert, der, am Objektiv befestigt, an einem Querbalken 
zwei unten spitz zulaufende Stifte trägt, die nach Einstellung des 
Linsensystems auf den zu beiden Seiten des Präparates mit Papier, 
Glanzkarton oder dergleichen beklebten Objektträger herabgeschraubt 
werden und dort bleibende Eindrücke hinterlassen. Man hat dann 
später nur nötig, den Objektträger wieder so auf den Objekttisch 
aufzulegen, daß die Spitzen der beiden Stifte auf die früher ge- 
machten Marken eingestellt werden. Hergestellt wird dieser „Ob- 
jektfinder" von der Firma Gebr. Mittelstrass , Magdeburg ; Ge- 
brauchsmuster No. 267219, Preis 15 Mark. 

Schiefferdecker [Bonn). 



XXIV, 2. Referate. 161 



4. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. 

A. Niedere Tiere. 

Zacharias, 0., Das Süßwasser- Plankton. Aus Natur u. 
Geistoswelt. Leipzig (B. G. Teubner) 1907. 1'25 M. 

In seinem Büchlein gibt Verf. einen guten und allgemein ver- 
ständlichen Einblick in die Welt der freischwimmenden Organismen 
unserer süßen Gewässer. Das Interesse dieser Zeitschrift wird be- 
rührt in dem Kapitel, das über das Plankton im allgemeinen und 
über die Methoden zu seinem Fang und seiner Konservierung handelt. 
Beschrieben und abgebildet wird das gewiJhnliche Planktonnetz. Ferner 
wird das Schließnetz , welches dazu dient , das Plankton aus be- 
stimmten Wasserschichten aufzufangen , dargestellt und seine Hand- 
habung beschrieben. Von Methoden zur Konservierung des Planktons 
nennt Verf. die Behandlung mit Chromessigsäure , Sublimat und Al- 
kohol. An der Hand einer Anzahl von Abbildungen führt uns Verf. 
die verschiedenen Klassen von Organismen vor , die das Plankton 
zusammensetzen. Einigen interessanten Erscheinungen, wie dem Ver- 
halten der Planktonkrebse zum Licht , der Periodizität im Planktou- 
wesen, der gegenseitigen Beziehung der Tiere und Pflanzen des 
Planktons etc. werden besondere Abschnitte gewidmet. Auch die 
Verschiedenheiten der einzelneu Planktonarten, wie See-, Teich- und 
Flußplankton werden kurz erörtert. Ferner spricht Verf. über das 
Verhältnis der Hydrobiologie zum Fischereiwesen und über das Plankton 
als Gegenstand eines zeitgemäßen , biologischen Unterrichts , weist 
auf die biologische Station zu Plön hin und schließt seine Darstellung 
mit einem kurzen Blick auf das ozeanische Plankton. 

Freund {Halle a. S.). 

Faure-Fremiet , E., Sur une secretion interne chez le 
C c h 1 i p d i u m p e 1 1 u c i d u m (C. R. Sog, Biol. Paris 
t. LVIH, 1!»05, no. 19, p. 905—907). 
Bei den Amöben entstehen durch innere Sekretion Stoffe, welche 
als Fermente dienen können und welche sich als Körner oder Va- 
kuolen ablagern. Ähnliches geschieht ja auch in den Drüsenzelleu 
der höheren Tiere. Verf. hat eine Varietät des Cochliopodium pellu- 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 11 



162 Referate. XXIV, 2. 

cidum unter dem Namen putrinum a beschrieben und hat bei diesem 
perinukleäre Körnchen gefunden mit alkalischer Reaktion und während 
des Lebens färbbar. Er hat jetzt noch eine neue Varietät putri- 
num ß beobachtet. Die perinukleären Granulationen sind bei diesem 
Wesen während des Lebens durch Dahlia und Brillantkresylblau in 
violetter Farbe darstellbar (alkalische Reaktion) ; Neutralrot färbt sie 
nicht. Nach dem Tode haben sie eine starke Afünität zu Fuchsin 
und sind unempfindlich gegen basische Farben; behandelt man sie 
aber einige Augenblicke mit Essigsäure , so können sie sich stark 
und elektiv mit Methylgrüu färben. Diese Körnchen können sich auch 
sonst im Cytoplasma finden; man darf sie hier nicht verwechseln mit 
jenen plasmatischen Kügelchen, die nach bestimmten Fixierungsflüssig- 
keiten sehr deutlich hervortreten. Fixiert man ein Cochliopodium 
mit Flemming scher Flüssigkeit, behandelt es dann mit Fuchsin, Essig- 
säure und Methylgrün und endlich mit Flemming scher Flüssigkeit 
während 20 bis 30 Minuten und mit Pyrogallol, so erhält man eine 
sehr schöne Diiferenzierung : die perinukleären Körnchen und die 
sonst im Plasma liegenden sind stark dunkelviolett gefärbt, während 
die plasmatischen Kügelchen (spherules plasmatiques : spherules de 
Künstler) sich grau gefärbt von dem übrigen kaum gefärbten Cyto-' 
plasma abheben. — Wenn die perinukleären Körnchen von Cochlio- 
podium wirklich Sekretkörncheu sind , so müssen Stofie , welche auf 
die Sekretion einwirken, auch auf die Körnchen wirken. Legt man 
einen kleinen Kristall von Pilokarpin in ein ührgläschen, das etwas 
Wasser mit Cochliopodien enthält, so sieht man nach 12 bis 24 Stun- 
den, daß die Sekretkörner bedeutend voluminöser geworden sind und 
als Kügelchen erscheinen. Ist die Einwirkung zu heftig oder zu 
lange dauernd gewesen , so treten tiefere Veränderungen ein : der 
Kern wird von einer scharf begrenzten, ziemlich stark färbbaren, 
plasmatischen Kugel umgeben mit fein netzförmigem oder alveolärem' 
Inhalte, in dem sich fuchsinophile Körner finden, die von der Ober- 
fläche des Kernes stammen; andere ähnliche Kugeln, mehr oder 
weniger zahlreich, mehr oder weniger groß und mitunter stark färb- 
bar mit Dahlia oder Fuchsin finden sich im Cytoplasma. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Yles, F., Sur la structure et les affinites de Trypano- 
soma Balbiani (Compt. Rend. Soc. Biol. Paris, tome LXI, 
1906, p. 408—410 m. 6 Figg.). 
Die Fixation der Ausstrichpräparate vom Kristallstiel infizierter 



XXIV, 2. Referate. 163 

Austern erfolgte mit absolutem Alkohol , die Färbung mit einer ge- 
sättigten Lösung von Gentianaviolett in TOprozentigem Alkohol mit 
3- bis 4 Prozent Formolzusatz. E. Schocbel {Neapel). 

Urbail, F., Kalifornische Kalkschwämme (Arch. f. Xatur- 
gesch. 22. Jahrg. Bd. I, 1906, p. 33—76 m. 4 Tfln.). 
Das Material war mit 95prozentigem Alkohol fixiert worden und 
zeigte sich teilweise als recht gut erhalten. Was zunächst die an- 
gewandten Tinktionsverfahren betrifft, so bewährte sich zur Durch- 
färbung ganzer , oft ziemlich großer Stücke eine etwa halb kon- 
zentrierte wässerige Lösung von Anilinblau recht gut. Je größer die 
Stücke sind, desto weniger konzentriert soll die Lösung sein. Nach 
ö bis 6 Stunden , wenn die Stücke deutlich überfärbt sind , bringt 
man sie nach flüchtigem Auswaschen in Wasser behufs Differenzie- 
rung für längere Zeit in öOprozentigen Alkohol. Wesentlich ist, die- 
selbe durch Überführung der Stücke in absoluten Alkohol im richtigen 
Moment zu unterbrechen. Doppelfärbung mit Kongorot und Anilin- 
blau gibt, wenn sie gelingt, recht schöne Bilder, leider ist sie aber 
nicht verläßlich ; auch Färbung mit Delafields Hämatoxylin oder 
Pikrokarmin ist zu empfehlen. Die Entkalkung vor der Einbettung 
vorzunehmen kann Verf. nicht empfehlen, vorzuziehen ist immer, die- 
selbe nach dem Schneiden auf dem Objektträger vorzunehmen, zumal 
sich die Stücke trotz der Nadeln mit einem scharfen Messer gut 
schneiden lassen und sogar 3 /^t dicke Schnitte ohne Zerreißungen 
herzustellen sind. Dabei ist nur die eine Vorsichtsmaßregel zu ge- 
brauchen, vor jedem Schnitt den Block mit einer dünnen Schicht von 
Paraffin zu bestreichen. Zum Aufkleben der Schnitte zeigte sich nur 
das ScHÄLLiBAUMSche Nelkenölkollodiuni brauchbar, das übrigens recht 
gut auch Schnittfärbung erlaubt. Zur Herstellung des Aufklebmittels 
empfiehlt es sich , einen Teil Nelkenöl und drei Teile Kollodium zu 
mischen, die Mischung dann in einer Tube einen bis 2 Tage offen im 
Thermostaten und dann noch 2 bis 3 Tage zugestöpselt stehen zu 
lassen. Das Aufkleben der Schnitte ist in folgender AVeise vor- 
zunehmen : Auf den sehr gut gereinigten und dann erhitzten Objekt- 
träger wird ein Tropfen Nelkenölkollodium aufgetragen und dieser 
dann mit der in absolutem Alkohol gereinigten Fingerbeere verrieben. 
Der Objektträger soll so lieiß sein, daß es der Finger kaum erträgt. 
Dann werden die Schnitte rasch aufgelegt, wobei Luftblasen zwischen 
Schnitt und Glas zu vermeiden sind, was aber nur gelingt, wenn der 
Objektträger noch so warm ist, daß die Ptänder des Schnittes beinahe 

11* 



164 Referate. XXIV, 2. 

zu schmelzen beginnen. Hat man zahlreiche Schnitte aufzulegen, so 
ist es besser, den Objektträger auf ein Wasserbad von entsprechen- 
der Temperatur zu legen und die Schnitte eventuell leicht anzudrücken. 
Zur Entfernung des Paraffins wird der Objektträger so weit erwärmt, 
bis das Paraffin oben zu schmelzen beginnt, und dann rasch in Xylol 
gebracht. Zur Färbung der Schnitte wurde öfters die Heidenhain sehe 
Eisenhämatoxylinmethode benutzt. Dieselbe hat noch den Vorteil, 
daß die Eisenalaimbeize sehr gut entkalkt. Die Schnitte müssen so 
lange in derselben belassen werden, bis eine gleichmäßige weingelbe 
Färbung die vollständige Entfernung des Kalkes anzeigt. Übrigens 
ist die Heidenhain sehe Methode auch für ganze Askonenröhren an- 
wendbar, wenn man sie aufgeschnitten wie einen Schnitt behandelt. 
Auch kleine, etwa einen Kubikzentimeter große Stücke der Askonen- 
kolonie lassen sich damit vor der Einbettung färben , nur muß man 
die Differenzierung etwas früher als gewöhnlich unterbrechen. Zur 
Isolierung der Nadeln ist Eau de Javelle der Kalilauge bei weitem 
vorzuziehen, da sie viel reinlicher und rascher arbeitet. 

E. Schoebel (Neapel). 

Moreno , M., Las terminaciones nerviosas en las ven- 
tosas de algunos cefalopodos (Rev. R. Acad. de 
Ciencias exact., fisic. y nat. Madrid t. HI, 1905, no. 3, 
15 pp. m. 3 Tfln.). 
Verf. hat Versuche gemacht, die Silberfärbung von Cajal nach 
verschiedeneu Richtungen hin zu verbessern. Er hat die Gewebs- 
stücke in steigendem Alkohol, von TOprozentigem an, gehärtet und 
hat dann dem absoluten Alkohol, nach Vorschlag nach Cajal, einige 
Tropfen von Ammoniak zugesetzt, um der Versilberung günstigere 
Bedingungen zu geben. Das Ammoniak wird von den Chemikern als 
Sensibilisator empfohlen. Verf. hat nun statt des Ammoniaks dem ab- 
soluten Alkohol einige Tropfen einer einprozentigen alkoholischen Lösung 
von Eosin oder Erythrosin mit gutem Erfolge zugesetzt. Aus dem am- 
moniakalischeu absoluten Alkoliol kommen die Präparate zunächst in 
dest. Wasser , in dem sie kurz abgewaschen werden , und dann in 
ein Röhrchen mit einer l"5prozentigen Lösung von Silberuitrat. Die 
von dem Verf. benutzten Röhrchen waren 6 cm lang und 2 cm breit, 
mit Korkstopen. Dieser letztere wurde in der Mitte durchbohrt, und 
in diese Durchbohrung wurde ein Röhrchen mit Radiumbromid ein- 
geführt. Da der Durchmesser dieser Röhrchen je nach der Anzahl 
der Aktivitäten wechselt, so muß man Pfropfen mit verschiedener ent- 



XXIV, 2. Referate. 165 

sprechender Durchbolinmg- vorrätig- haben. Die Menge der Silber- 
uitratlösung, welche in das Röhrchen liineingebracht wird, beträgt nur 
etwa 5 bis 10 cc, wenn die Dicke der Gewebsstückchen nur wenige 
Millimeter beträgt. Das Radiumröhrchen wird so angebracht, daß 
es mit seinem unteren Ende die Mitte des Bodens des Röhrchens, in 
welches es eingeführt ist , berührt , so daß das Radiumbroraid ganz 
von der Silberlösung eingeschlossen wird , damit seine Strahlungen 
und Emanationen sich gleichmäßig überallhin verteilen und ihre Wir- 
kung auf die Gewebsstückchen ausüben können, welche rings um das 
Radiumröhrchen herumliegen. So angeordnet werden die Röhrchen 
in senkrechter Stellung in eine Dunkelkammer oder in einen ringsum 
festverschlossenen Kasten gebracht, bei Zimmertemperatur für im all- 
gemeinen 24 Stunden, da man auf diese Weise in sehr viel kürzerer 
Zeit dieselbe Wirkung erzielt, als wenn man die Präparate sonst für 
5 oder mehr Tage in einem Ofen bei 37 '^ hält. Es kam nun darauf 
an, festzustellen, in welcher Zeit die verschieden hohen Aktivitäten 
der Radiumröhrchen wirkten. Verf. hatte zur Verfügung Radiumröhr- 
chen von 40, 240, 1000, 3000, 10 000 und 100 000 Aktivitäten (be- 
zogen von der Societe de Produits chimiques , Paris). Mitunter hat 
Verf. auch sowohl Radiumwirkung wie Wärmewirkung gleichzeitig 
angewendet. Aus den Versuchen des Verf. geht hervor , daß man 
mit einem Röhrchen von 3000 Aktivitäten eine genügende Reaktion 
erhält innerhalb von 48 Stunden ; mit einem Röhrchen von 10 000 
Aktivitäten innerhalb von 24 Stunden; in noch kürzerer Zeit mit einem 
solchen von 100 000. Nach leichtem Auswaschen in Wasser kommen 
die Präparate für 24 Stunden in den Entwickler. Hierzu benutzte 
Verf. zunächst nach dem Vorschlage von Cajal das Pyrogallol. Die- 
selben Resultate ergab das Hydrochinon, wie die Photographen es 
verwenden: auf 10 cc dest. Wassers 3 bis 5 Tropfen. Sehr bequem 
ist auch das Adurol. Bei der schon oben erwähnten Verwendung von 
Eosin oder Erythrosin (einige Tropfen einer einprozentigen alkoholi- 
schen Lösung werden dem absoluten Alkohol zugesetzt), dann schnelles 
Auswaschen in dest. Wasser, l"5prozentige Silberlösung im Ofen bei 
37^ 3 bis 4 Tage laug, werden sehr interessante Präparate erhalten: 
reiche , schwarze Fibrillenplexus auf rötlichbraunem Grunde , wobei 
sich auch andere Elemente , wie Blutkörperchen und Leukocyten, in 
rosa Farbe abheben. Man kann die Präparate auch gleich von vorn- 
herein in einem Alkohol fixieren , der durch Zusatz von Eosin oder 
Erythrosin einen rosa Farbenton bekommen hat. Endlich hat Verf. das 
Silbernitrat ersetzt durch das Silberlactat („Actol'' Crede). Die Ge- 



166 Referate. XXIV, 2. 

websstücke kommen wieder in steigenden Alkohol, von TOprozentigem 
bis zu absolutem, werden dabei hinreichend klein geschnitten (höchstens 
5 mm Durchmesser) und kommen schließlich in ammoniakalischen 
Alkohol (2 bis 3 Tropfen Ammoniak) oder in den Erythrosinalkohol. 
In dem Alkohol können die Stücke beliebig lange bleiben. So hat 
Verf. Präparate benutzt von Seetieren (Octopus vulgaris und Nereis), 
welche schon in Alkohol in der Sammlung aufbewahrt waren. Aus 
dem Alkohol wieder zu kurzem Auswaschen iu dest. Wasser, dann 
in ein Röhrchen mit einer 2prozentigen Lösung von Silberlactat. Ein- 
führung eines Radiumröhrchens von 3000 Aktivitäten, 48 Stunden 
lang in der Dunkelkammer bei Zimmertemperatur oder auch im Ofen 
bei 37*^. Mau kann auch eine l"5prozentige Lösung von Silberlactat 
nehmen, dann weiter wie oben. Einschluß in Celloidin oder Paraffin, 
im ersten Falle durch Zedernholzöl, im letzteren durch Kreosot. Verf. 
hat so die Nerven der Cephalopoden gut darstellen können. 

■ichieff'erdecker (Bonn). 



Sc 



Veneziani, A., Colorazione positiva delle fibre ner- 
vöse degenerate nel nervo tentacolare diHelix 
pomatia (Anat. Anz. Bd. XXIX, 1906, Nr. 9, 10, 
p. 241 — 248 m. 5 Figg.). 
Bei 5 Tieren wurden die großen Fühler, während sie völlig 
ausgestreckt waren, mit einem raschen Scherenschnitte durchtrennt, 
dann in Sublimat oder in Müller scher Flüssigkeit fixiert, eingebettet 
in Paraffin oder Celloidin und zum Teile mit Thionin-Eosin, zum Teile 
mit der Methode von Donaggio gefärbt. Bei den übrigen 40 Tieren 
wurden die Spitzen der beiden großen Fühler mit einem sehr feinen 
Faden abgebunden; es entstand infolgedessen eine Nekrose, die 
Spitzen der Fühler fielen nach wenigen Tagen ab und die in dem 
proximalen Stücke enthaltenen Nerven (Tentakelnerv und Opticus) 
degenerierten. Die Tiere wurden nach 21 Stunden, 46 Stunden, 
4 Tagen und 8 Tagen getötet. Vor der Tötung wurden die Tiere 
durch mechanischen Reiz oder durch Eintauchen in Wasser veranlaßt, 
ihre langen Fühler völlig auszustrecken, worauf dieselben mit einem 
raschen Scherenschnitte abgetrennt und in Müller sehe Flüssigkeit 
gebracht wurden. Man muß hierbei geschickt verfahren, da die 
Fühler sehr leicht eingezogen werden. Zuerst ziehen sich die Fühler 
in der Müller sehen Flüssigkeit sehr stark zusammen, oft aber dehnen 
sie sich allmählich wieder aus. Nach einer Fixation von 24 Stunden 
werden die Fühler nach der dritten Methode von Donaggio gefärbt: 



XXIV, 2. Referate. 167 

1) Der fixierte Fiililer kommt nicht in Wasser, sondern in TOgrädigcn 
Allioliol für .") Stunden und dann in absoluten Alkohol. 2) Dann suc- 
cessives Einlegen in Alkohol und Äther zu gleichen Teilen (15 Min.); 
in 2prozentige Celloidinlösung (2 Tage); in 4prozentige Celloidinlösung 
flTag); in 8prozentige Celloidinl(>sung(2 Tage); Einschluß und Härtung 
in Alkohol von 80 Grad (2 Tage). .3) Schnitte von .30 bis 40 ^. 
4) Färbung der Schnitte, ohne Aufkleben auf den Objektträger in einer 
einprozentigen Hämatoxylinlösung (20 Min.j. 5) Wenige Sekunden 
dauernde Entfärbung in einer löprozentigen wässerigen Lösung von 
Ferrum sesquichloratum. 6) Schnelles Abwaschen in angesäuertem 
Alkohol (auf 100 Teile von absolutem Alkohol 0'75 Salzsäure). 7) Über- 
tragen in absoluten Alkohol, oder wenn die Schnitte aus einzelnen Stück- 
chen bestehen, die sich trennen würden, wenn man das Celloidin löst, 
in 95prozentigen Alkohol. 8) Xylol oder Zedernholzöl. 9) Einschluß 
in dem neutralen Balsam von GrIjeler. Schicfferdecker {Bonn). 

Chubb, G. C, The Growth of the Oocyte in Antedon: 
a morphological Study in the Cell-Metabolism 
(Phil. Trans, of the R. Soc. London, ser.B, vol. CLXXXXVIII, 
1906, p. 447—505 w. 3 plts.). 
Die Untersuchungen wurden ausschließlich an Schnitten aus- 
geführt. Da Verf. der Ansicht ist, daß das verschiedene Verhalten 
der einzelnen Zellstrukturen gegenüber verschiedenen Fixierungs- 
flüssigkeiten eine sicherere Basis zu ihrer Unterscheidung abgibt als 
komplizierte Färbemethoden, wandte er eine größere Reihe von Fi- 
xierungsflüssigkeiten an bei nur einer einzigen Färbemethode. Neben 
einfacher gesättigter Sublimatlösung kam solche mit 5 Prozent Essig- 
säurezusatz, ferner Sprozentige Kaliumbichromatlösung mit gleichem 
Essigsäuregehalt, ferner Hermanns Flüssigkeit und schließlich ein 
Gemisch, das Kaliumbichromat, Natriumsulfit und Salpeter- und Os- 
miumsäure enthielt (nähere Angaben über die Menge der einzelnen 
Bestandteile fehlen, Ref.), zur Verwendung. Letzteres gab zwar im 
allgemeinen eine mangelhafte Fixierung der Gewebe , leistete aber 
doch recht Brauchbares zur Differenzierung gewisser Strukturen des 
Nucleolus. Gefärbt wurde mit Heidenhains Eisenhämatoxylin mit 
oder ohne Plasmagegenfarbe. Nach Sublimat-Essigsäure und Kalium- 
bichromat-Essigsäure war eine weitere Entkalkung des Materials nicht 
nötig, nach den übrigen Fixierungen wurde aber mit Phorogluzin 
und Salpetersäure (siehe diese Zeitsehr. Bd. H, 1885, p. 375, 539) 
entkalkt. E. Schoebel (Neapel). 



168 Referate. XXIV, 2. 

Gemelli, A., Sopra le neurofibrilledelle cell ule nervöse 
deivermi secondo un iiuovometodo di dimostra- 
zione (Aiiat. Anz. Bd. XXVII, 1905, No. 18, 19, p. 449— 462 
m. 6 Figg.). 
Verf. bat die Neurofibrillen bei Würmern untersucht (Lumbricus 
agr. ; Nereis regia ; Serpula contortupl. und Arenicola ma.). Er hat 
schon früher nach dieser Richtung Untersuchungen angestellt mit der 
GoLGischen Methode (auch mit der Modifikation von Veratti), ferner 
mit der Methode von Apathy, welche für die Hirudineen brillante 
Bilder ergaben, mit der Methode von Bethe und schließlich mit den 
Methoden von Donaggio und von Cajal. Die Resultate befriedigten 
ihn aber nicht vollständig. Er hat daher jetzt die folgenden Metho- 
den angewendet: A. Er brachte die Organstücke zuerst in eine 
Mischung von : 

Doppeltchromsaures Kalium, Sproz. Lösung . . 1 Teil 

Osmiumsäure, einproz. Lösung 8 „ 

Rhodankalium, einproz. Lösung .... 5 — 10 Tropfen 
auf je 20 cc Mischung. 

Hierin verbleiben die etwa 1 cm großen Stücke etwa eine -^/o Stunde 
und werden herausgenommen, wenn sie sozusagen durchsichtig sind. 
Dann kommen sie in die gewöhnliche Osmium-Bichromatmischung und 
werden nach 48 bis 56 Stunden oder noch besser nach 65 bis 
72 Stunden in die Silberlösung übertragen. Die besten Präparate 
erhielt Verf. durch eine Wiederholung des Prozesses (processo di 
ringiovanimenti), indem er die Präparate dann in der Mischung eine 
Anzahl von Monaten beließ, wobei die Osmium-Bichromatmischung 
leicht mit Ameisensäure angesäuert war. B. Weiter hat Verf. die 
von Kaplan angegebene Färbungsmethode für den Achsenzylinder 
für seine Zwecke verwendet (Benutzung der Leonhardi sehen Tinte). 
Die Organstücke werden zuerst so wie bei der Methode von 
Weigert- Pal behandelt, die nach Celloidineinbettung gewonnenen 
Schnitte werden anstatt in die Hämatoxylinlösung 24 Stunden bei 
25^ in der Leonhardi sehen Tinte belassen. Die weitere Differen- 
zierung erfolgt wie bei der Methode von Weigert- Pal, doch muß 
man eine sehr verdünnte Differenzierungsflüssigkeit verwenden und 
die Differenzierung direkt unter dem Mikroskope verfolgen. Haben 
die Präparate eine schwach bläuliche Färbung bekommen , so muß 
man mit der Entfärbung aufhören und in gewöhnlicher Weise 
montieren. Praktisch ist eine Gegenfärbung mit Eosin : auf einem 



XXIV, 2. Referate. 169 

hellrosa Grunde heben sich die tiefblau gefärbten Fibrillen sehr 
scharf ab. Schiefferdecker (Bonn). 

ßöhler, E., Beiträge zur Kenntnis der Sinnesorgane 
der Insekten (Zool. Jahrb. Abt. f. Anat. u. Ontogen. 
Bd. XXII, 1905, p. 225—288 m. 1 Fig. u. 2 Tfln.). 
Zur Untersuchung kam Tryxalis nasuta und Musca vomitoria. 
Fixiert wurde mit 95prozentigem Alkohol, ferner mit Sublimat in 
alkoholischer und wässeriger Lösung, mit einem heißen Gemisch aus 
gleichen Teilen konzentrierter wässeriger Sublimatlösung und 95pro- 
zentigem Alkohol, mit Alkohol-Äther, Pikrinsalpetersäure etc. Letztere 
lieferte insofern besonders gute Resultate, als das Pigment zwischen 
Chitin und Hypodermis erhalten blieb. Die besten Färbungen wurden 
mit Heidenhains und Delafields Hämatoxylin, beide kombiniert mit 
Eosin, erhalten. Zum Zählen der Sinnesorgane werden die Antennen 
bis zur vollständigen Durchsichtigkeit mit Kalilauge behandelt. Man 
hat sich hierbei nur davor zu hüten, daß keine allzu starken Schrump- 
fungen eintreten, da das Zählen sonst sehr schwierig, wenn nicht 
ganz unmöglich wird. E. Schoebel (Neapel). 

Gutherz, S. , Zur Kenntnis der Heterochromosomen 
(Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXIX, 1907, p. 491—514 m. 
12 Figg.). 
Untersucht wurden hauptsächlich männliche und weibliche Ge- 
schlechtsdrüsen von Gryllus domesticus L., mit besonderer Berück- 
sichtigung jüngerer Larven, so daß sich auch die Gelegenheit zur 
Beobachtung von somatischen Mitosen bot. Das Material wurde in 
den Monaten von Januar bis April gesammelt. Als Fixierungsmittel 
kam hauptsächlich das starke FLEMinNGSche Gemisch zur Verwendung 
bei einer Einwirkungsdauer von 24 Stunden, daneben unter anderem 
aber auch Zenkers Flüssigkeit. Von Färbungsmethoden leisteten 
neben der häufig verwandten Eisenhämatoxylinmethode nach Heiden- 
hain, die FLEMMiNGSche Dreifachfärbung (nach Fixierung in Flemmings 
Flüssigkeit) und das BiONDische Gemisch (nach Fixierung in Zenker- 
scher Flüssigkeit) ganz besonders gute Dienste. 

E. Schoebel (Neapel). 



170 Referate. XXIV, 2. 



B. Wirheitiere» 

Weidenreich, F., Eine neue einfache Methode zur Dar- 
stellung von Bluttrockenpräparaten mit voll- 
ständiger Erhaltung der normalen Form der 
Blutelemente (Naturwiss.-Med. Ver. zu Straßburg, Med. 
Sekt., 8. Dez. 1905; Ref. in Münch. med. Wochenschr. 
Jahrg. LIII, 1906, Nr. 8, p. 384). 
Die bisher allgemein im Gebrauche befindliche Trockenmethode 
von Ehrlich hat den Nachteil , daß sie erstens , um gute Resultate 
zu liefern , eine sorgfältige Ausbreitung des Bluttropfens verlangt, 
was wieder besondere Deckgläser, besondere Pinzette und besondere 
Reinigung der Gläschen nötig macht; zweitens mißglückt sie leicht, 
wenn nämlich die Eintrocknung des Blutes nicht schnell genug er- 
folgt ist; drittens wird die jeweilige Form der roten Blutkörperchen 
überhaupt nicht oder doch nur ungenügend erhalten, und zerdrückte oder 
sonstwie veränderte Zellen sind ein häufiger Befund. Diese Mängel 
können allerdings durch die Übung auf ein Minimum reduziert werden, 
aber trotzdem wird manches Präparat nicht ganz gelingen. Bei der 
Ehrlich sehen Trockenmethode hängt der Erhaltungszustand der Blut- 
elemente besonders vom Eintrocknen ab, die nachfolgende Fixierung 
durch Hitze oder chemische Reagentien kann an diesem Zustande 
nichts mehr ändern , sondern ihn nur erhalten. Die neue Methode 
beruht auf einem ganz anderen Prinzipe als die Ehrlich sehe: sie 
fixiert die Blutelemente vor dem Eintrocknen, vor dem Ausbreiten 
auf dem Objektträger bezw. dem Deckgläschen; die Fixierung ge- 
schieht durch Dämpfe. Verfahren: Man bringt 5 cc einer ein- 
prozentigen Überosmiumsäurelösung in eine flache Glasschale , setzt 
dazu 15 Tropfen Eisessig, auf die Schale legt man die gereinigten 
Objektträger und bedeckt das Ganze mit einer nicht zu hohen Glas- 
glocke. Nachdem die Dämpfe 2 bis 3 Minuten eingewirkt haben, 
sticht man zur Blutentnahme in den Finger oder das Ohrläppchen, 
der hervorquellende , nicht zu große Bluttropfen wird so rasch wie 
möglich durch Abtupfen fohne Berührung der Haut) auf die den 
Dämpfen ausgesetzt gewesene Seite des Objektträgers gebracht und 
etwa 30 Sekimden au dem Objektträger hängend den Dämpfen aus- 
gesetzt ; dann streicht man mit der Kante eines größeren Deckglases 



XXIV, 2. Referate. 171 

rasch den Tropfen aus und läßt die Schicht, wieder über den Dämpfen, 
eintrocknen. Dauert dies zu lange, da die Vorrichtung wie eine 
feuchte Kammer wirkt , so nimmt man den Objektträger fort , und 
läßt an der Luft trocknen. Das trockene Präparat wird dreimal 
rasch durch eine Bunsenflamme gezogen und nacli dem Abkühlen für 
etwa eine Minute mit einer sehr schwachen Lösung von Kalium- 
hypermanganat Übergossen (von einer einprozentigen Stammlösung so 
viele Tropfen in gewöhnliches Wasser, bis eine rosa Färbung ent- 
steht; das genaue Einhalten einer bestimmten Konzentration ist un- 
nötig) , dann Abwaschen in gewöhnlichem Wasser. Das Präparat 
wird mit Filtrierpapier abgetrocknet und kann dann mit jeder be- 
liebigen Farbe (Triacid, Eosin, Gentianaviolett, Methylenblau, Häma- 
toxylin bezw. Hämatein) gefärbt werden. Die Präparate gelingen 
ohne weiteres. Die roten Blutkörperchen zeigen in besonders schöner 
Weise ihre normale Napf- oder Glockenform fbikonkave Scheiben, 
Geldrollen, Maulbeeren lassen sich darstellen, wenn man diese Ver- 
änderungen im Bluttropfen abwartet , bevor man ihn auf den vor- 
behandelten Objektträger bringt). Die weißen Blutkörperchen lassen 
bei entsprechender Färbung die Granulationen der Kerne und den 
Zelleib außerordentlich scharf erkennen (besonders deutlich treten 
auch die neutrophilen und basophilen Granulationen hervor); bei 
rascher Manipulation werden sie im Zustande amöboider Bewegung 
fixiert. Sehr schön werden auch die Blutplättchen erhalten, sie 
kleben nicht zusammen und man erkennt in ihnen ohne weiteres den 
als Kern beschriebenen zentralen Körper und die amöboiden Fort- 
sätze. Kernhaltige rote Blutkörperchen, Ausstrich- oder Ausquetsch- 
präparate von Organen, Sauropsidenblut usw. können in der gleichen 
Weise dargestellt werden. Da die Methode stets gelingt, keine be- 
sondere Manipulation als Fertigkeit erfordert, und die Blutelemente 
in denkbar bestem Zustande erhalten werden , endlich jede weitere 
Färbebehandlung möglich ist, ist ihr vor der einfachen P^hrlich scheu 
Trockenmethode der Vorzug zu geben; sie eignet sich für jeden 
Anfängerkurs. An Stelle der teuren Osmiumsäure, die übrigens stets 
wieder verwendbar ist, kann man auch Formoldämpfe benutzen (10 cc 
Formol mit Zusatz von 10 Tropfen Eisessig) , was für klinische 
Zwecke durchaus genügt. Anwendung wie oben, nur die Behandlung 
mit Kaliumhypermanganat fällt fort. Kommt es nur auf eine Unter- 
suchung der Foruien der roten Blutkörperchen an und kann mau 
sich mit einer weniger vollständigen und dünnen Ausbreitung des 
Blutes begnügen, so genügt es, den austretenden Bluttropfen einfach 



172 Referate. XXIV, 2. 

mit dem Finger auf dem vorbehandelten Objektträger rasch aus- 
zustreichen. — Die Methode eignet sich auch für bakteriologische 
Zwecke , und zwar besonders für die Darstellung der Kapseln der 
Bakterien. Schiefferdecker {Bonn). 

Weidenreich, F., Studien über das Blut und die blut- 
bildenden und -zerstörenden Organe. Weitere 
Mitteilungen über rote Blutkörperchen (Arch. f. 
mikrosk. Anat. Bd. LXIX, 1906, p. 389��438 m. 2 Tfln.). 
Nach einer kurzen Kritik der bisherigen Methodik des Blut- 
trockenpräparates, die im wesentlichen auf den Angaben Ehrlichs 
beruht , kommt Verf. zu dem Schluß , daß , sobald man den Wert 
einer Methode nach der Erhaltung des morphologischen Bildes be- 
urteilt, der Hitzefixation vor der mit chemischen Mitteln kein Vorzug 
gegeben werden kann. Was speziell die roten Blutkörperchen be- 
trifft, so gibt die einfache Trockenmethode keine richtige Vorstellung 
von der Form derselben, sie erscheinen mehr oder weniger als platt- 
gedrückte Scheiben, und nur in den bestgelungenen Präparaten tritt 
die zentrale Depression einigermaßen deutlich hervor; Kantenansichten, 
Geldrollen- oder Maulbeerformen erhält man nur sehr gelegentlich 
und unvollkommen als ein Produkt des Zufalls ; dazu kommt , daß 
nur solche Präparatstellen brauchbar sind, an denen die Erythrocyten 
in einfach ausgebreiteter Schicht liegen, während an dickeren Stellen 
die Blutkörperchen zusammensintern. Das Verfahren, das Verf. an- 
wendet, vermeidet nicht nur diese Übelstände, sondern erhält auch 
die natürliche Napfform der Erythrocyten, gibt stets reichliche Kan- 
tenansichten und gestattet Geldrollen- und Maulbeerformen absicht- 
lich darzustellen und als gefärbtes Dauerpräparat zu fixieren. Bei 
alledem ist die Methode noch sicherer und einfacher als die Ehr- 
LiCHSche , von der sie gerade ein entgegengesetztes Prinzip befolgt. 
Um jede Alteration der Blutelemente zu verhindern , läßt Ehrlich 
das Blut rasch antrocknen und fixiert erst dann. Verf. verfährt um- 
gekehrt, er fixiert vor dem Antrocknen und benutzt letzteres nur, um 
die korpuskularen Bestandteile des Blutes in bequemer Form auf dem 
Deckglase, bezw. Objektträger der weiteren Behandlung zugänglich 
zu machen. Nach zahlreichen Versuchen stellte sich dann heraus, 
daß die einfache Dampffixation die einzig brauchbare , aber auch 
weitgehenden Ansprüchen genügende Methode ist. Dadurch wird 
natürlich die Zahl der zur Verfügung stehenden Reagentien eine sehr 
beschränkte, zumal absoluter Alkohol und Äther noch versagen. Da- 



XXIV, 2. Referate. I73 

gegen erweisen sich in liervorragendem Maße Osmiunisäure und 
Formol brnuclibar. Das Verfahren gestaltet sich folgendermaßen. 
Man bringt in eine niedrige Glasschale einige Kubikzentimeter einer 
einprozentigen Lösung von Osmiumsäure und setzt die Objektträger, 
indem man sie über die Öffnung der Schale legt, eine Minute den 
Dämpfen aus. Dann sticht man in die gut gereinigte Fingerbeere 
ein und streicht den austretenden Bluttropfen mit dem Finger rasch 
auf der den Osraiumsäuredärapfcn ausgesetzt gewesenen Seite des 
Objektträgers in möglichst dünner Schicht aus, wobei man allerdings 
den Finger nicht zu sehr aufdrücken darf, um die Blutkörperchen 
nicht platt zu pressen. Ebenso rasch bringt man den Objektträger, 
die Blutschicht den Dämpfen zugekehrt, wieder auf die Glasdose und 
beläßt sie dort ^j^ bis ^/^ Miimte , aber ja nicht länger, gleichviel 
ob das Blut getrocknet ist oder nicht; im letzteren, dem häufigeren 
Falle, läßt man einfach an der Luft vollends trocknen. Ist das ge- 
schehen, so ist eigentlich das Präparat schon fertig, denn es eignet 
sich so vollständig für das Studium der Form der Blutkörperchen, 
Man hat nämlich nur nötig, einen Tropfen Wasser und ein Deckglas 
auf den Objektträger zu bringen; die roten Blutkörperchen erscheinen 
dann in gleicher Form und Farbe wie im frischen Blutpräparat. Will 
man ein derartiges Präparat als Dauerpräparat aufbewahren , so 
braucht man nur das Deckglas wieder abzunehmen und mit Filtrier- 
papier abzutrocknen ; die auf dem Glase haftende fixierte Blutschicht 
hält sich dauernd. Soll aber in Balsam eingebettet werden, so muß 
man zuvor färben, da die natürliche Farbe gegenüber dem stark 
lichtbrechenden Balsam nicht ausreicht. Als Farbstoffe lassen sich 
alle die verwenden, die man auch sonst für rote Blutkörperchen ge- 
braucht, also besonders Eosin, Methylviolett oder Gentianaviolett ; 
weiter ist aber auch mit sehr gutem Erfolg Ehrlich s Triacid und 
die GiEMSAsche Farblösung für Romanowski -Färbung zu gebrauchen. 
Mit Triacid färbt man ^/^ Stunde, mit der verdünnten GiEjisAschen 
Lösung dagegen eine Stunde und länger. Da die Osmiumsäure, 
namentlich nach längerer Einwirkung, die Empfänglichkeit für die 
Tinktionsmittel vermindert, kann man die Präparate vor dem Färben 
mit einer sehr schwachen nur hellroten Lösung von Kaliumpermanganat 
für einen Augenblick übergießen. Dieser Behelf wird indes unnötig, 
wenn man die oben angegebene Fixationszeit nicht überschreitet. 
Nach beendeter P'ärbung spült man mit Wasser ab , trocknet mit 
Filtrierpapier und schließt in Balsam ein. An Stelle der Osmium- 
säure läßt sich auch unverdünntes käufliches Formol verwenden. Da 



174 Referate. XXIV, 2. 

die Dampffixation das getreue Aiigenblicksbild darstellt, wie es gerade 
das frische Bliitpräparat zeigt , bat man also ein Mittel , passagere 
Formen, die als Veränderungen in dem sich selbst überlassenen Blute 
auftreten, dauernd festzuhalten und genauer zu studieren. Um solche 
Bilder zu bekommen, hat man nur nötig, den Bluttropfeu auf einem 
Objektträger auszustreichen , der nicht vorher den Osmiumdämpfen 
ausgesetzt war, und das Blut eine entsprechende Zeit sich selbst zu 
überlassen. E. ScJwebel {Neapel). 

Assmanil, G., Über eine neue Methode der Blut- und 
Gewebsfärbung mit dem eosinsauren Methylen- 
blau (Münch. med. Wochenschr. 1906, Nr. 28). 
Das neutrale eosinsaure Methylenblau hat sich bisher wenig ein- 
gebürgert, da der Farbstoff schwer und langsam herzustellen war, 
und da auch der von Orltbler in Leipzig in den Handel gebrachte 
ungleichmäßige Resultate ergab. Die Gründe für diesen letzteren 
Umstand sind nach Verf. die folgenden: 1) Bedienen sich die Autoren 
bei der Färbung einer Lösung des Farbstoffes in absolutem Methyl- 
alkohol und spülen danach nur kurze Zeit in destilliertem Wasser 
ab, die eigentliche Färbung kommt aber erst in überwiegend wässeriger 
Lösung zustande, die man sich, da der Farbstoff in Wasser unlöslich 
ist, nach dem Vorbilde der chemisch analogen Malariablutfärbungen 
von Reuter und Giemsa durch starke wässerige Verdünnung der 
methylalkoholischen Farblösung für eine zur Färbung hinreichende 
Zeitdauer herstellen kann. 2) Gibt nach den Erfahrungen des Verf. 
der reine neutrale Farbstoff überhaupt ganz unberechenbare Färbungs- 
resultate, indem bald die saure, bald die basische Färbungskompo- 
nente zu Ungunsten der anderen überwiegt, und zwar bleibt bei 
Bluttrockenpräparaten das Methylenblau , bei Gewebsschnitten das 
Eosin an Intensität erheblich zurück. Verf. macht nun eine durch 
lange Versuche als durchaus zuverlässig erprobte Färbungsmethode 
bekannt, die nicht nur für Trockenpräparate von Blut, Eiter, Sputum, 
Harnsediment etc., sondern auch für Gewebsschnitte (nicht dicker als 
5 [x) anwendbar ist. Verf. verwandte ausschließlich das von GRtJBLER 
in Leipzig hergestellte Eosin-Methyleublau, und zwar die fertig be- 
zogene, längere Zeit haltbare methylalkoholische Lösung desselben. 
Er bemerkt dabei noch besonders, daß die in dem Zentralblatte für 
Bakteriologie, Bd. XL, Heft 3, p. 430 empfohlenen Farbstoffe nach 
Jenner bez. MAY-GntiNWALD, sowie auch der in Sahlis Lehrbuch der 
klinischen Untersuchuugsmethoden, 4. Auflage, als dem Grübler sehen 



XXIV, 2. Referate. 175 

überlegen bezeichnete JENNEUsclie Farbstoff von Baird und Tatlock 
in London nachweislieh mit dem Gklbleu sehen Eosin-Methylenblau 
identisch sind. Methode: A. für T r o c k e n p r ä p a r a t e. 1 ) Ein- 
legen des mit dem zu färbenden un fix i e rt en Objekte beschickten 
Objektträgers in eine saubere Petrischale und Übergießen desselben 
mit 40 Tropfen der methylalkoholischen Farblösung derart, daß die 
letztere nicht über den Rand des Objektträgers überläuft; Dauer der 
Fixation 3 Minuten. 2) Übergießen mit 20 cc destillierten Wassers, 
denen zuvor 5 Tropfen einer einpromilligen Kaliumcarbonicum-Lösung 
unter kräftigem Schütteln beigemischt wurden, und Umschüttelu der 
Schale so lange, bis eine gleichmäßig klare, von Niederschlägen freie, 
hellviolette, überwiegend wässerige Farblösung entstanden ist; Dauer 
der Färbung 5 Minuten. 3) Herausnehmen und unmittelbares Abtrocknen 
des Präparates ohne weitere Abspülung. B. für G e webs schnitt e. 
1) Wie bei A., nur kann hier, da die Fixierung entbehrlich ist, 
Teil 2 ohne Verzug angeschlossen werden. 2) Ebenfalls wie bei A., 
nur füge mau statt der alkalischen Kaliumcarbonicum-Lösung 5 Tropfen 
einer einpromilligen Essigsäurelösung hinzu und färbe statt 5 Minuten 
1 5 Minuten. 3) Herausnehmen , kurzes Abspülen in absolutem 
Alkohol, Abspülen in Xylol, Einbetten in neutralen Kanadabalsam. 
Der verwendete Alkohol muß durch einen ständigen Bodensatz von 
ausgeglühtem Kupfersulfat streng wasserfrei erhalten werden. Die 
Resultate sind bei Trockenpräparaten denen der Jexner scheu und 
May-Grünwald sehen Färbung ähnlich, doch ist die Färbung der 
neutrophilen Granula zuverlässiger und schärfer, die Kernfärbung 
wesentlich intensiver, die Umrisse sämtlicher Blutelemente besonders 
scharf, die Erythrocyten zeigen durch die stärkere Betonung der 
basischen Komponente einen Schein ins Violette. Bei Gewebs- 
schnitten (Paraffineinbettung) erkennt man ebenfalls sämtliche 
Leukocytengranula sowie alle Arten von Bakterien, ebenso wie bei 
Trockenpräparaten von Eiter, Sputum etc. Pneumokokken zeigen 
zuweilen eine leichte Rosafärbung ihrer Kapseln. 

Schiefferdecker (Bo?tn). 

3IeTes, F., Eine weitere Methode zur Darstellung der 
Quermembranen des Randreifens in den Ery- 
throcyten des Salamanders (Anat. Anz. Bd. XXVHI, 
1906, Nr. 17, 18, p. 444—447 m. 2 Figg.). 
Verf. teilt eine neue Methode zum Studium der Quermembranen 

mit, welche Dauerpräparate liefert. Er hat Salamanderblut in dünner 



176 Referate. XXIV, -2. 

Schicht auf dem Objektträger aiis^^ebreitet in einer feuchten Kammer 
verschieden lange Zeit (einige Minuten bis zu einer halben Stunde) 
sich selbst überlassen und dann mit der schwachen Flemming sehen 
Mischung (Chromsäure, einprozentige Lösung 25 cc ; Osmiumsäure, 
einprozentige Lösung 10 cc; Essigsäure, einprozentige Lösung 10 cc ; 
destilliertes Wasser 55 cc), der ein Prozent Kochsalz zugesetzt war, 
fixiert. Nach Auswaschen der Präparate in fließendem Wasser wurden 
diese teils mit einer Doppelfärbung von Safranin und Hämatoxylin 
(Delafield), teils mit der Flemming sehen Dreifachbehandlung (Safranin- 
Gentiaua-Orange) gefärbt. Bei der ersteren Färbung wirkte zunächst 
eine einprozentige , wässerige Safraninlösung etwa 24 Stunden ein, 
dann Ausziehen mit neutralem Alkohol und schließlich eine 6- bis 
12stündige Nachfärbung mit stark verdünntem Hämatoxylin (Dela- 
field). Die Flemming sehe Dreifachbehandlung wurde im wesent- 
lichen nach der von Flemming angegebenen Vorschrift ausgeführt, 
doch wurde vor dem Einschlüsse in Kanadabalsam stets noch erst 
etwa eine halbe Stunde lang mit Nelkenöl differenziert. Der Rand- 
reifen ist an diesen Präparaten im allgemeinen nirgends wahrnehmbar, 
dagegen treten die Quermembranen nach beiden Färbungen am ganzen 
Rande deutlich hervor, dunkel nach der ersten, hell nach der zweiten 
Färbung. Schiefferdecker {Bonn]. 

Arnold , J. , Zur Morphologie und Biologie der M a s t - 
Zellen, Leukocyten und Lymphocyteu (München, 
med. Wochenschr. Jahrg. LIII, 1906, Nr. 13, p. 585—589). 
Verf. hebt hervor, daß für die Erforschung des Aufbaues und 
der Lebensäußerungen der Zellen die Methode der vitalen und supra- 
vitalen Granulafärbung nicht nur eine der bedeutungsvollsten, sondern 
auch eine der unentbehrlichsten ist. Verf. wünscht daher sehr, daß 
die Morphologen und Biologen dieser Methode mehr Beachtung schenken 
möchten. Er gibt sodann eine Übersicht über die Technik , derent- 
wegen auf das Original verwiesen wird. Schiefferdecker {Bonn). 

Caminiti, R. , Untersuchungen über die Lymphgefäße 
der menschlichen Prostata (Anat. Anz. Bd. XXIX, 
1906, Nr. 7, 8, p. 172—185 m. 4 Figg.). 
Verf. bespricht die bisher zur Darstellung der Lymphgefäße 
angewendeten Methoden und kritisiert ihren Wert; es wird deshalb 
auf das Original verwiesen. Er selbst hat eine wässerige Silber- 
nitratlösung von 0,5 bis 1 ^/^ angewendet. Technik: Die Prostata 



XXIV, 2. Referate. I77 

wurde bei Hundeu oder bei Leichen von jungen Leuten exstirpiert, 
wobei darauf gesehen wurde, daß die eigentliche Drüsenkapsel nicht 
verletzt wurde; nachdem die beiden Ureter- und Blasenraündungen 
mittels eines Seidenfadens geschlossen waren, wurde die Silberlösung 
mit einer gewöhnlichen, womöglich mit einer Platinnadel versehenen 
Pravaz sehen Spritze injiziert. Die Nadel wurde in allen möglichen 
Richtungen eingeführt, bald oberflächlich, bald tief, ebenso auf allen 
Seiten der Drüse, bis diese infolge des Flüssigkeitsgehaltes strotzend 
geworden war. Dann ein einige Minuten währendes Abwaschen in 
destilliertem Wasser und Übertragen des ganzen Stückes in absoluten 
Alkohol. Hierin verblieb es entweder, während der Alkohol bis zur 
vollständigen Erhärtung häufig erneuert wurde, oder noch besser, 
nachdem das Stück einige Stunden lang in Alkohol verweilt hatte, 
wurden einige Millimeter dicke Schnitte ausgeführt, die wieder bis 
zur vollständigen Erhärtung in Alkohol kamen. Dann machte Verf. 
etwas dickere Schnitte aus freier Hand oder nach Paraffineinschluß, 
die dann, nachdem sie durch Xylol vom Paraffin befreit waren, 
wieder in absoluten Alkohol gebracht wurden, in dem sie einige 
Minuten hindurch dem Sonnenlichte ausgesetzt wurden unter Kontrolle 
mittels des Mikroskops. Hatten sie die nötige Schwärzung erreicht, 
so kamen sie in eine ^/o- bis Iprozentige Lösung von Natriumthiosulfat 
in verdünntem Alkohol und wurden hierin aufmerksam überwacht. 
Dann wiederholte Waschungen in absolutem Alkohol, Bergamottöl 
(einige Stunden lang), Xylol, Xyiolbalsam. Um gute Resultate zu 
erhalten, muß man stets schwache Silbernitratlösungen verwenden. 
Sind die Schnitte zu sehr geschwärzt worden, so hellt man sie auf 
durch Waschung in einer 3- bis 5prozentigen Lösung von Kaliumjodid 
in 95prozentigem Alkohol (man löst das Jodid vorher in etwas Wasser 
und verdünnt es dann mit Alkohol). Nach dieser Waschung bringt 
man die Schnitte in 95prozentigen reinen Alkohol, dann in Natrium- 
hyposulfit, wodurch eine weitere Schwärzung verhindert wird. Verf. 
hat auch doppelte Injektionen gemacht: Injektion von Berliner Blau 
in die Aorta abdominalis oder in eine Iliaca und Injektion der 
Lymphgefäße mit Silbernitrat. Die letztere gelang in diesem Falle 
nicht so gut, wahrscheinlich infolge des durch die Injektion der Blut- 
gefäße vermehrten Druckes. Schiefferdecker {Bonn). 

Feclerici , F. , Un nuovo metodo per la colorazione spe- 
cifica delle Mastzellen (Auat. Anz. Bd. XXIX, 1906, 
Nr. 13, 14, p. 357—361). 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 12 



178 Referate. XXIV, 2. 

Verf. hat versucht in der hypertrophischen Schleimhaut der 
unteren Nasenmuschel, die außerordentlich reich an Mastzellen in 
allen Stadien der Entwicklung ist, diese mit den gebräuchlichen 
Methoden darzustellen. Keine indessen erwies sich als genügend. 
Er hat darauf die folgende Methode durch vielfache Versuche ge- 
funden : Man bereite sich eine in der Wärme gesättigte , wässerige 
L(3sung von Safranin von Grübler und eine ebensolche Lösung 
von Lichtgrün ; man mische sie in dem Verhältnisse von 60 cc der 
ersteren mit 20 cc der letzteren. Man erhält einen sehr feinen 
Niederschlag und filtriert: das Filtrat bildet die Lösung A. Der 
Niederschlag wird auf dem Filter 2- bis 3mal mit destilliertem Wasser 
ausgewaschen und dann in 50 cc gewöhnlichen Alkohols gelöst : 
Lösung B. Die definitive Farblösung besteht aus der folgenden 
Mischung : 

Hämalaun (Mayer) 40 cc 

Lösung A 40 ,, 

Lösung B 20 •„ 

Die Schnitte kommen aus Wasser in diese Mischung für eine 
bis 3 Stunden ; intensive Violettfärbung. Dann einige Sekunden Aus- 
waschen in einer einprozentigen Lösung von P^isenalaun, dann in 
destilliertes Wasser, dann direkt in absoluten Alkohol. Hierin zeigen 
sich Wolken von Safranin und die Schnitte werden allmählich hell- 
grün. Wenn diese Färbung völlig eingetreten ist , durchschnittlich 
nach 20 bis 30 Sekunden, ist die Differenzierung vollständig ; Berga- 
mottöl , Xylol , Balsam : Kerne hämalaunblau , Bindegewebsfasern 
glänzend grün, Zellprotoplasma blaugrünlich , Protoplasma der Mast- 
zellen rosa , die Körnung stark rot , Muzin rosarot (dasselbe wird 
leichter entfärbt als die Körner) ; die Übergangsstadien der Mast- 
zellen treten hervor. Zur Fixierung sind geeignet Alkohol, Sublimat, 
Flüssigkeit von Tellyesniczky, von Zenker, von Carnoy. Noch bessere 
Iiesultate ergab die Fixierung in lOprozentiger Formollösung und 
besonders in einer Mischung von lOprozentiger Formollösung und 
MtJLLERScher Flüssigkeit zu gleichen Teilen. Was die Plasmazellen 
anlangt, so sind sie bei dieser Färbung leicht erkennbar. Bei der 
ausgebildeten Form (Marschalko) hat der Kern die charakteristische 
Anordnung, das Protoplasma erscheint blaugrünlich oder auch glänzend 
grün ; bei manchen Zellen können auch zahlreiche , feine , grünliche 
Körnchen auftreten. — In manchen Fällen von Hypertrophie der 
Nasenschleimhaut zeigen sich auch sehr zahlreiche , große verästelte 



XXIV, 2. Referate. I79 

Zellen mit grüngelblichem Protoplasma und zahlreichen rotbraunen 
Körnern , die von denen der Mastzellen deutlich verschieden sind. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Papiii, L., Sur le revetement corne de repithelium 
pharyngo-cesophagien chez le cobaye (C. R. Soc. 
Biol. Paris, t. LXI, no. 27, p. 157 — 159). 
Verf. hebt hervor, daß ihm das Epithel des Rachens und der 
Speiseröhre des Meerschweinchens, welches als verhornt anzusehen 
ist, dieselben Farbreaktionen ergeben hat, wie die Hornschicht der 
Haut. Die Osmiumsäure ergab dieselbe Schwarzfärbung der Kon- 
turen der verhornten Elemente, Wenn man Schnitte mit 40prozentiger 
Natronlauge oder Kalilauge behandelt oder mit flüssigem Ammoniak 
und dann mit RAN\^iERSchem Pikrokarmiu färbt, so treten die einzelnen 
Hornschichten der Zellen deutlich isoliert hervor, ihr Kern ist ver- 
schwunden, mitunter sieht man im Inneren der verhornten Elemente 
rotgefärbte Flecke oder Körnchen. Verf. betont daher die zelluläre 
Zusammensetzung der Hornschicht gegenüber Joris. Untersucht man 
die nächst tiefer liegende Epithelschicht, so findet man in den Zellen 
meist rundliche Körnchen, die sich mit Hämatoxylin violett, mit 
Karmin rosa, mit RANViERSchen Pikrokarmin rot färben. Kalkwasser 
und Essigsäure erhöhen noch die Deutlichkeit dieser letzten Reaktion; 
mit Safranin färben sie sich lebhaft rot, mit Thionin und dem Blau 
von Unxa violett. Sie sind löslich in Salzsäure und Salpetersäure 
in der Wärme, unlöslich in Wasser, Alkohol, Äther, Ammoniak, 
Terpentinöl, Chloroform. Sie sind nicht löslich in lOprozentiger 
Kochsalzlösung, in Essigsäure, im Glyzerinauszug des Magens. Kurz, 
sie zeigen die Reaktionen des Eleidins der Haut. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Coyne et Cavalie, Sur la structure de la pulpe dentaire. 

Presence d'un muscle lisse dans la pulpe des 

premieres et deuxieraes grosses molaires (C. R. 

Soc. Biol. Paris t. LVIII, 1905, no. 7, p. 320—321). 

Die Verff. haben in dem ersten und zweiten Molarzahne des 

Menschen innerhalb der Pulpa glatte Muskeln nachweisen können. 

Entkalkung mit der Flüssigkeit von v. Ebxer, mit einer 5prozentigen 

wässerigen Lösung von Schwefelsäure oder mit einer Lösung von 

Salpetersäure in Drittelalkohol. Paraffineinschluß , Schnitte von 3 jj. 

12* 



180 Referate. XXIV, 2. 

Dicke, Färbung mit Safranin, Toluidinblaii, mit dem Blau von Unna, 
mit Hämatoxylin und Eosin oder Säurefuclisiu. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Korff, K. V., Die Analogie in der Entwicklung der 
Knochen- und Zahnbeingrundsubstanz der Säuge- 
tiere nebst kritischen Bemerkungen über die 
Osteoblasten- und Odontoblastentheorie (Arch. 
f. mikrosk. Anat. Bd. LXIX, 1907, p. 515—543 m. ITA.). 
Zur Untersuchung dienten die in Entwicklung begriffenen 
Bindegewebsknochen von Säugetieren , vor allem die in lockerem 
embryonalen Bindegewebe gelegenen Knochenbälkchen des Unter- und 
Oberkiefers und des Palatinums (Schwein, Hund, Meerschweinchen), 
dann die Deckknochen an der Dorsalseite des Schädels (Katze), die 
aus dem Periost hervorgehenden Knochenbälkchen der langen Röhren- 
knochen (Hund, Mensch, Meerschweinchen) und schließlich der Stirn- 
beinhöcker vom neugeborenen Kalb. Die noch wenig Kalksalze ent- 
haltenden Knochen wurden meist schon von den verwandten Fixierungs- 
mitteln genügend entkalkt. Als solche wurden gewählt: FLEMMiNGSches 
Gemisch, Sublimat -Alkohol -Eisessig, Zenker sehe Flüssigkeit oder 
Sublimat. Vor der Fixierung wurden die Objekte in möglichst dünne 
Scheiben zerlegt , so daß ein schnelles Eindringen der Flüssigkeiten 
möglich war. — Die angewandten Färbemethoden waren folgende : 
1) Eisenhämatoxylinfärbung mit nachfolgender Bindegewebsfärbung. 
Hierbei werden die aufgeklebten Schnitte zunächst in der von Heidenhain 
angegebenen Weise 24 Stunden gefärbt, dann mit Eiseualaunlösung 
differenziert , bis sich die bereits verkalkt gewesenen Stellen der 
Grundsubstanz, die sich immer am intensivsten färben, zu entfärben 
anfangen ; zum Färben der fibrillären Grundsubstauz kommen dann 
die Schnitte nach 15 Minuten langem Waschen in fließendem Wasser, 
zunächst in 95prozentigen Alkohol, dann auf 10^-15 Minuten in sehr 
dünne alkoholische Lösung von Rubin S (etwa 0*25 Rubin S auf 500 
bis 1000 Alkohol, oder in Lösungen der von Heidenhain eingeführten 
Farbstoffe für Bindegewebe , der Chromotropen. Die Osteoblasten, 
Knochenzellen , Odontoblasten färben sich stärker schwarz als die 
Bindegewebszellen ; die Ausläufer von Osteoblasten , Knochenzellen 
und weichen Zahnfasern werden homogen blaßgrau, die unverkalkten 
Stellen der Grund Substanz diflerenzieren sich als rot gefärbtes Flecht- 
werk von Fibrillen ; die verkalkt gewesenen Stellen färben sich 
homogen tiefschwarz. 2) Färbung mit einem Rubin-Orange-Gemisch. 



XXIV, 2. Referate. 181 

Dasselbe, das regelmäßig nach chromsäurehaltigen Fixierungsflüssig- 
keiteu zur Anwendung kam, besteht aus 2 Teilen Kubin S einem Teil 
Orange G, 7 Teilen Glyzerin und 100 Teilen destilliertem Wasser. Die 
Färbung hiermit vollzieht sich sehr rasch , eine halbe Minute Ein- 
wirkungsdauer genügt. Die überschüssige Farbe wird mit 95pro- 
zentigem Alkohol ausgezogen. Im fertigen Präparat sind dann die 
Osteoblasten , Knochenzellen und Odontoblasten orange , wenn auch 
weniger scharf, ebenso ihre homogenen Ausläufer, die Fibrillen der 
unverkalkten Grundsubstanzen und die in sie übergehenden Fibrillen- 
bündel deutlich rot, die verkalkt gewesenen Stellen der Grund- 
substanzen orange oder gelb in verschiedenen Nuancierungen. Die 
Chromotropen färben die Bindegewebsfibrilleu ebenso deutlich wie 
Rubin S und sind letzterem wegen größerer Beständigkeit der damit 
erzielten Färbungen im Kanadabalsam vorzuziehen. Die von vielen 
Autoren angewandte Färbung mit Hämatoxylin und Eosin erwies sich 
als unzweckmäßig, da Eosin die Fibrillen nicht genügend scharf 
differenziert. E. Schoebel {Neapel). 

Collin, R., Coloration de la substance chromatique de 
la cellule nerveuse dans des pieces prealable- 
ment traitees par la methode de S. R. Cajal (C. 
R. Soc. Biol. Paris t. LX, 1906, no. 3, p. 155—157). 
Verf. hebt hervor, daß die Silberfärbung von Cajal besonders 
günstige Eigenschaften für die gute Fixierung der Zellelemente be- 
sitzt. Das direkt angewendete Silbernitrat ergibt eine Fixierung des 
Kernes und des Cytoplasmas, die wenigstens ebensogut, wenn nicht 
besser ist als die der besten sonstigen Fixierungsmittel. Außer dem 
Fibrilleunetze wird auch die chromophile Substanz sehr genau fixiert. 
Verf. hat diese letztere Eigentümlichkeit benutzt, um nacheinander, 
in demselben Präparate, das Fibrillennetz und die NissL-Körper zu 
färben. Methode: Man behandelt zuerst das Objekt nach der 
Methode von Cajal, z. B. mit einer Silberlösung von 1*5 : 100 etc. 
An den so gewonnenen Schnitten kann man , wenn man will , die 
Anordnung der Neurofibrillen studieren, mit der Zeichenkammer eine 
genaue Skizze von dem achromatischen Netzwerke entwerfen etc. 
Um die chromophilen Elemente zu färben, demontiert man die Schnitte 
und bringt sie für einige Augenblicke in eine Lösung von gelbem 
Blutlaugensalze (ferricyanure de potassium). Die Schnitte werden 
rasch blaß, und man kann unter dem Mikroskope das Fortschreiten 
der Entfärbung verfolgen. Ist dieselbe genügend, so wäscht man die 



182 Referate. XXIV, 2. 

Schnitte sorgfältig iu fließendem Wasser aus. Jetzt kann man die 
NissL- Substanz mit einer basischen Anilinfarbe färben. Verf. ver- 
wendet meist die Lösung von Held (bleu de Nissl und eine Aceton- 
lösung von 1 : 20 zu gleichen Teilen). Differenzierung in absolutem 
Alkohol, Aufheben in neutralem Kanadabalsam. Diese zweite Fär- 
bung erlaubt, mit der Zeichenkammer das positive Bild der chromo- 
philen Substanz in das Neurofibrillenbild einzutragen. Man kann also 
auf diese sehr einfache Weise von einer und derselben Nervenzelle 
zwei genau komplementäre Bilder erhalten und so die Beziehungen 
der in der Zelle befindlichen Teile zueinander studieren. Man kann 
sogar, bei richtiger Abwägung der Entfärbung und der Färbung, 
gleichzeitig eine Färbung der Neurofibrillen und der Nissl -Substanz 
erhalten. Auch die Gewebsstücke , welche zuerst in absolutem Al- 
kohol fixiert und dann mit Silber behandelt worden sind, können ein 
solches doppeltes Bild der Nervenzelle liefern. 

Schiefferdecker {Bo7in). 

Oieson, J. T., Eine sichere und einfache Methode für 
Nervensystemstudien, hauptsächlich ihre An- 
wendung in der Diagnose und Untersuchung 
der NEGRischen Körperchen (Zentralbl. f. Bakteriol. 
Abt. 1, Orig. Bd. XLIII, 1907, p. 205). 
Zur mikroskopischen Untersuchung von Nervensubstanz empfiehlt 
Verf., nicht Ausstriche auf dieselbe Weise wie Blutausstriche zu 
machen, sondern folgendermaßen zu verfahren: „Ein kleines Stück- 
chen der grauen Nervensubstanz , ungefähr halb so groß wie eine 
Erbse, wird auf den Objektträger gebracht, mit einem Deckgläscheu 
bedeckt und dann mit sanftem Drucke zerquetscht. Darauf wird das 
Deckgläschen langsam über den Objektträger gestrichen , wodurch 
dann ein schönes Präparat erzielt wird , in welchem viele Nerven- 
zellen ihre Integrität bewahren." Derartige Ausstrichpräparate sind 
besonders vorteilhaft bei Wutdiagnose zu verwenden. In diesem Fall 
werden sie einige Sekunden getrocknet oder in Methylalkohol fixiert, 
ehe sie in folgende Farblösung gebracht werden : Gesättigte alkoho- 
lische Lösung von Rosanilinviolett 2 Tropfen , gesättigte wässrige 
Lösung von Methylenblau 1 Tropfen, destilliertes Wasser 10 cc. Die 
Präparate werden mit dieser Lösung bedeckt und „über der Flamme 
leicht bis zur Dampfeutwicklung erhitzt". Nach 1 bis 2 Minuten Ab- 
spülen in Wasser und Trocknen. 

„Die NEGRischen Körperchen färben sich charakteristisch inten- 



XXIV, 2. Referate. 183 

siv rot, deren Chromatinkörnclicn blau." — Es muß immer frische, 
unter Umständen doppelt so starke Farblösung zur Verwendung ge- 
langen. Freund {Halle a. S.). 

Liigaro , E., Sur la teebnique de la methode de Nissl 
(Monitore Zool. Ital. ; Ref. in Arch. Ital. Biol. t. XLIV, 
1905, fasc. 1, p. 113). 
Mit einer sehr einfachen Methode hat Nissl eine außerordentlich 
elektive Färbung erhalten. Fixierung der Stücke in Alkohol mit 
Zusatz von 5 Prozent reiner Salpetersäure 24 Stunden lang. Die 
mit Wasser auf dem Objektträger festgeklebten Schnitte werden 
einige Stunden lang in einer wässerigen Lösung von Toluidinblau 
(1 : 2000 bis 1 : 3000) gefärbt; Abspülen in Wasser während einiger 
Sekunden , dann 2 bis 3 Minuten lang in eine 4prozentige Lösung 
von Ammoniumraolybdat, erneutes Auswaschen, Entwässerung, Xylol, 
Balsam. Die Färbung ist so elektiv, daß man vollkommen identische 
Bilder erhält , wenn man die Schnitte eine halbe Stunde lang oder 
einen ganzen Tag in der Farblösung gelassen hat. Das Methylen- 
blau und das Thiouin bieten keinen Vorteil vor dem Toluidin. Mit 
diesem letzteren Farbstoffe färben sich nur die NissL-Körperchen blau ; 
die interstitiellen Kerne der Neuroglia , des Bindegewebes und der 
Gefäßendothelien nehmen einen violetten Ton an. 

Schiefferdeclier {Bonn). 

Rossi , E. , La structure intime des cellules uerveuses 
humaines (Le Nevraxe vol. VI, 1904, fasc. 3). 
Frische Stücke von Nervengewebe, 3 bis 4 mm dick , kommen 
zuerst für 24 bis 48 Stunden in eine 2prozentige Lösung von Platin- 
nitrat, dann in eine O'öprozentige Lösung von Goldchlorid und nach 
kurzem Auswaschen in destilliertem Wasser in eine Anieisensäure- 
lösung (24 Stunden im Dunklen). Dann Auswaschen in destilliertem 
Wasser, steigender Alkohol, Paraffineinschluß. Die Methode soll 
stets gute Resultate ergeben : Netzbilder der Neurofibrillen. 

Schiefferdecker {Bonn). 

Cajal, S. Ramon y, Las celulas estrelladas de la capa 
molecular del cerebelo y algunos heehos con- 
trarius ä la funciön exclusivamente conductriz 
de las neurofibrillas (Trab. Labor. luvestig. Biol. Univ. 
Madrid t. IV. Fasc. 1, 2, 1905, p. 37—47). 



184 Referate. XXIV, 2. 

Die Sternzellen der Kleinhirnrinde sind mit allen Fibrillen- 
methoden nur äußerst schwer darzustellen. Verf. hat sie mit seiner 
Silbermethode dargestellt (mit vorhergehender Fixierung in Alkohol), 
hat aber gefunden, daß es sehr darauf ankommt, bei welchem Tiere 
man diese Gebilde untersucht. Während sie bei Kaninchen , Katze 
und Mensch kaum darstellbar sind , erhält man sie sehr leicht und 
gut beim Hunde, imd zwar sowohl bei dem gesunden wie bei dem 
kranken Tiere. Auch bei Vögeln sind sie ziemlich gut darstellbar. 

Schiefferdecker {Bomi). 

Cajal, S. Ramön y, Las celulas del gran simpatico del 
hombre adulto (Trab. Labor. Investig. Biol. Univ. Madrid 
t. IV, 1905, fasc. 1, 2, p. 79—104 c. 14 figg.). 
Die Präparate werden fixiert entweder in steigendem Alkohol 
oder in solchem mit Zusatz von Ammoniak (auf je 50 cc Alkohol 
3 bis 4 Tropfen Ammoniak •, der Zusatz muß schon bei dem schwäch- 
sten Alkohol erfolgen). Im Ofen verbleiben die Präparate in der 
Silberlösung 5 Tage bei 36 '^ bis 38^ oder 6 Tage bei 28^ bis 32*'. 
Der Zusatz von Ammoniak zu dem Alkohol ist nicht nötig, um gute 
und starke Färbungen zu erhalten, er scheint aber die Färbung der 
Nervenfasern zu erleichtern , außerdem wird jedenfalls der Silber- 
niederschlag ein feinerer. Da die sympathischen Ganglien oft ziem- 
lich groß sind , so ist es nötig , sie vor dem Übertragen in das 
Reduktionsbad in Scheiben zu zerlegen , die am besten nicht dicker 
sind als 1^/^ mm, wenigstens bei Anwendung des Pyrogallols. Man 
ist dann sicher, daß auch die Mitte dieser Scheiben nicht besonders 
hell ist. Schiefferdecker (Bonn). 

Tello , F., Terminaciönes sensitivas en los pelos y 
otros örganos (Trab. Labor. Investig. Biol. Univ. Madrid 
t. IV, fasc. 1, 2, 1905, p. 49—77, 10 Fig.). 
Untersucht wurden die Nervenendigungen an den Tasthaaren 
von Kaninchen, der grauen Ratte, der weißen Ratte, dem erwachsenen 
Hunde, von wenige Tage alten Mäusen, an den gewöhnlichen Haaren 
der Schnauze dieser Tiere, an den Augenwimpern des Menschen, in 
der Haut der Fingerspitze und im Praeputium des Menschen und 
im Schnabel verschiedener Vögel. Die Stücke wurden vor der Silber- 
färbung 24 Stunden in Alkohol gehärtet und mit Ammoniakzusatz 
(auf je 50 cc Alkohol 2 bis 3 Tropfen Ammoniak). Es kommt 
sehr auf das Mengenverhältnis zwischen den eingelegten Stückchen 



XXIV, 2. Referate. 185 

und der Menge des Alkohols , sowie der der Silberlösung an ; man 
darf nicht mehr als vier bis fünf kleine Hautstückchen auf 50 cc 
nehmen. Schief f er decker {Bonn). 

Tello, F., Termin aciones en los müsculos estriados 
(Trab. Labor. Investig. Biol. Univ. Madrid t. IV, 1905, 
fasc. 1, 2, p. 105—114 c. 12 figg.). 
Für die Untersuchung der motorischen Nervenendigungen in den 
quergestreiften Muskeln mittels der Silbermethode von Cajal ver- 
wendet man am besten die Fixierung in ammoniakalischem Alkohol 
(auf je 50 cc 2 bis 3 Tropfen Ammoniak), sonst die von Cajal* 
angegebene Methode. Verf. hat bis jetzt untersucht die Muskeln der 
Froschpfote ; die der Pfote , der Zunge , der Lippe und der Inter- 
costalräume vom Kaninchen ; die der Pfote und der Schnauze beim 
Hunde und endlich die des Augenlides beim erwachsenen Menschen 
und dem Kinde. Schiefferdecker {Bonn). 

Besta, C, Sulla struttura deUa guaina mielinica deUe 
fibre nervöse periferiche (Riv. sperim. Freniatria 
t. XXXI, 1905, Ref. in Neurol. Zentralbl. Jahrg. 25, 1906, 
Nr. 4, p. 174). 
Verf. gibt eine neue Methode an zur Darstellung der Mark- 
scheiden der peripheren Nervenfasern zugleich mit Achsenzylinder 
und ScHWANNScher Scheide. In den gelungenen Präparaten findet 
man die Markscheide von einem feinmaschigen Netze durchsetzt, das 
nach Verf. der Ausdruck eines alveolären Baues ist. Lanterman- 
sche Einkerbungen sind nicht darstellbar. Verf. hält die gewonnenen 
Bilder der Markscheide nicht für Kunstprodukte, da das Fixierungs- 
mittel sehr schonend wirke. Methode: Fixierung in folgender 
Mischung 



'ö 



Chlorammoniakalisches Zinn (Merck) .... 4-0 g 

Formol 25*0 cc 

Dest. Wasser 100-0 „ 

Dauer für feine und embryonale Nerven 20 bis 24 Stunden, für 
größere Nerven 2 bis 3 Tage. Abspülen in Wasser 2 bis 3 Minuten, 
Härtung in TOprozentigem Alkohol und in absolutem Alkohol je 



^) Cajal, Algunos metodos de coloracion etc. (Trab. Labor. Investig. 
Biol. Madrid t. III. 1904, fasc. 1). 



186 Referate. XXIV, 2. 

12 Stunden. Einschluß in Paraffin. Scbnittdicke 6 bis 7 j^i. Fär- 
bung nach verschiedenen Methoden 5 am besten bewährte sich Häma- 
toxyliufärbung nach Mallory 24 Stunden laug mit nachfolgender 
Differenzierung in Jod-Jodkalium, bis die Schnitte eine leichte blau- 
grüne Färbung annehmen. Unterbrechung der Differenzierung durch 
TOprozentigen Alkohol, dann reichliches Auswaschen in demselben. 
Eine zweite Methode der Färbung besteht in der Anwendung von 
sehr verdünntem Hämatoxjdin nach Delafield (2 bis 3 Tropfen in 
50 cc Wasser) , kurzes Ausspülen in Wasser, Nachfärbung in essig- 
saurem Erythrosin (Held) eine Minute lang, Auswaschen in 70pro- 
zentigem Alkohol. Wünscht man die Schwann sehe Scheide elektiv 
zu färben , so färbt man die , wie eben beschrieben , gefärbten Prä- 
parate noch in folgender Lösung: 

Hämatoxylinlösung, einprozentig 25 cc 

Ammoniummolybdat, 4prozentige Lösung . . . 25 „ 
Eisessig 3 Tropfen. 

Hierin verbleiben die Schnitte mehrere Stunden ; dann Auswaschen 
in 90prozentigem Alkohol. Schieff'erdecker (Bonn). 

Laignel-LaA'^astine, Application de l'impregnation ar- 
gen tique de Cajal a l'etude histo-chimique de 
la cellule medullo-snrr e nale (CR. Soc. Biol. Paris 
t LVm, 1905, no. 14, p. 661—663). 
Bei seinen Studien über das Nervensystem mit der Silber- 
methode von Cajal fand Verf. , daß diese Methode sich auch sehr 
gut dafür eignet, um die großen zylindrischen Zellen des Markes 
der Nebennieren von Hund , Kaninchen und Meerschweinchen dar- 
zustellen. Schon mit bloßem Auge kann man die schwarzgefärbte 
Marksubstanz von der hellgelben Rinde deutlich unterscheiden. Mit 
Immersion erkennt man , daß die dunklen Markzellen mit schwarz- 
braunen Körnern erfüllt sind, die in der Mitte den hellen Kern frei 
lassen. Man legt am besten Stücke der frischen Nebenniere von 2 
bis 4 mm Durchmesser in eine 3prozentige wässerige Lösung von 
Silbernitrat, läßt sie im Ofen 6 Tage bei 37^, wäscht mit destil- 
liertem Wasser aus , fixiert mit der Pyrogallol - Formolmischung 
24 Stunden, wäscht aus, entwässert in Alkohol und schließt in 
Paraffin ein. Im Reagenzglase reduziert ein Tropfen einer Adrenalin- 
lösung von 1 : 1000 in eine Silbernitratlösung gebracht das Silber in 
Form von schwarzen Körnchen, die unter dem Mikroskope deutlich 



XXIV, 2. Referate. 187 

sichtbar sind. Die soeben angegebene Reaktion ist eine weitere, um 
die Körnung der Markzellen der Nebennieren deutlicli zu machen. 
Grynfeltt^ und Mulox' haben angegeben, daß diese Körnchen sich 
mit Osmium schwärzen. Bei Behandlung mit Chromsäure und clirom- 
sauren Salzen werden die Körnchen schnell braun („chromophil" 
nach Stilling, „chromaftin" nach Kohx). Ciaccio und Mulox haben 
die Körnchen graugrün gefärbt mit Ferrum sesquichloratum und haben 
gezeigt , daß sie es sind , auf welchen die makroskopische Reaktion 
von VuLPiAx^ beruht. Von diesen drei Reaktionen ist nur die von 
VuLPiAX charakteristisch für das Adrenalin, jenes spezifische Produkt 
der Markzellen der Nebenniere. Die anderen beiden Reaktionen sind 
nicht direkt spezifisch, dasselbe gilt auch von der hier angegebenen 
Silberreaktion : sie ist elektiv, aber nicht spezifisch. Das Silber im- 
prägniert die in dem Cytoplasma liegenden Körnchen der Markzellen 
der Nebennieren dunkel , weil diese Körnchen reduzierend wirken ; 
sie wirken reduzierend infolge des in ihnen enthaltenen Adrenalins, 
das auf das Silbernitrat stark reduzierend wirkt. In Anbetracht der 
nahen Verwandtschaft der sympathischen Nervenzellen und der 
chromaffinen Zellen ist Verf. der Meinung, daß seine Methode von 
Wert sein könne für das Auffinden von sympathischen Paraganglieu. 

Schiefferdccker {Bonn). 

Lenhossek, M. V., Zur Kenntnis der Spinalganglien- 
zellen (Arch. f. mikrosk. Auat. Bd. LXIX , 1906, p. 245 
—263, m. 2 Tfln.). 
Als Hauptuntersuchsobjekt dienten die Spinalganglien des er- 
wachseneu Menschen ; daneben wurden noch untersucht die des Neu- 
geborenen, der Katze, des Hundes, des Pferdes und des Rindes. Als 
Untersuchsmethode kam ausschließlich die neue Silbermethode von 
Ramon y Cajal zur Anwendung. Speziell für die Spinalganglien 
empfiehlt sich folgender Modus procedendi. Kleinere Spinalganglieu 
können in toto behandelt werden , bei größeren ist es zweckmäßig, 
dieselben der Länge nach zu durchschneiden. Die Stücke kommen 
zunächst auf 24 Stunden in 96prozentigen Alkohol, dem ^/^ Prozent 
Ammoniak zugefügt ist. Nach 24 Stunden werden sie flüchtig in 
destilliertem Wasser abgespült und dann 3 Tage im Thermostaten von 



1) These doct. sc. Paris, 1902. 

'-) Soc. de Biol. 4 avril 1903 und Arch. gen. de Med. 1904, p. 32G5. 

^) G, Delamare, Glandes sur renales. 



188 Referate. XXIV, 2. 

35 ^ C. mit 2 prozentiger Silberuitratlösung behandelt. Nach Ablauf 
dieser Zeit wäscht man die Stücke wieder in destilliertem Wasser 
ab und überträgt sie bei Tageslicht und Zimmertemperatur zur Re- 
duktion auf 24 Stunden in eine Mischung von 1,5 Teilen Pyrogallus- 
säure, 100 Teilen Wasser, 5 Teilen käuflichen Formol. Hierauf folgt 
Entwässerung, Einbettung in Paraffin und Zerlegen in Schnitte nicht 
allzugroßer Dünne. Die Schnitte werden mit Glyzerineiweiß in ge- 
wöhnlicher Weise auf den Objektträger aufgeklebt. Unentbehrlich 
ist nach den Erfahrungen des Verf. das Vergolden. Zu diesem Zweck 
werden die von Paraffin befreiten Schnitte durch Alkohol in destilliertes 
Wasser übergeführt und dann mit einer dünnen Goldlösung behandelt, 
die man erhält, wenn man zu 150 cc destilliertem Wasser 4 cc einer 
einprozentigen Goldchloridlösung zusetzt. Darin bleiben sie 10 Mi- 
nuten bis eine Stunde, so lange nämlich, bis alles Silber durch Gold 
ersetzt ist. Dies erkennt man mit bloßem Auge daran, daß die an- 
fangs braune Farbe der Schnitte in ein blasses Stahlgrau übergegangen 
ist. Noch sicherer läßt sich der richtige Zeitpunkt zur Beendigung 
der Goldbehandlung unter dem Mikroskop konstatieren, die Zellfort- 
sätze und Nervenfasern des Ganglions müssen nämlich intensiv dunkel 
erscheinen , und die Zellkörper dürfen nirgends mehr die von der 
Silberbehandlung herrührende braune oder gelbe Färbung erkennen 
lassen. Hierauf bringt man die Präparate für einige Minuten in 
eine 5 prozentige Lösung von unterschwefligsaurem Natron und wäscht 
sie dann gründlich in fließendem Wasser aus. Als letzte wichtige 
Operation ist schließlich noch eine Nachfärbung der Zellkerne vor- 
zunehmen. Man benutzt wegen des Kontrastes hierzu am besten 
Karmin, und als recht gut geeignet ist das MAYERSche Karmalaun 
zu empfehlen, in dem nach 5, spätestens 10 Minuten eine sehr schöne 
Färbung erreicht ist. Nur an solchen nachgefärbten Schnitten lassen 
sich die Mantelzellen, die die Spinalganglienzellen umgeben, in allen 
ihren Verhältnissen genügend gut studieren. 

E. Schoebel {Neapel). 

Pellegrini, E., Contributo allo studio della morfologia 

dell'organo parasimpatico dello Zucke rkandl 

(Monitore zool. ital., anno XVH, 1906, p. 254—263). 

Die mit dem umgebenden Gewebe ausgeschnittenen Nebenorgaue 

des Sympathicus wurden hauptsächlich in einem Gemisch aus 

100 Teilen einer 3prozentigen Lösung von doppeltchromsaurem Kali 

und 10 Teilen käuflichen Formols 10 bis 15 Tage fixiert. Bei Ma- 



XXIV, 2. Referate. 189 

terial vom Menschen waren nach etwa 2 Tagen die interessierenden 
Organe deutlich erkennbar und leicht zu isolieren, bei Tieren (Hund, 
Katze, Meerschweinchen usw.) bereits nach wenigen Stunden. Außer- 
dem kamen noch eine Reihe anderer Fixierungsmittel zur Verwendung, 
unter anderen konzentrierte Sublimatlösung, absoluter Alkohol, Müller- 
sche Flüssigkeit allein oder gemischt mit gleichen Teilen Formol oder 
Sprozentiger Chromsäurelösung, ferner HERjiAxxsche und Flemmixg- 
sche Flüssigkeit und andere mehr. Zur Färbung diente Hämalauu, 
DELAFiELDsHämatoxylin, Eisenhämatoxylin, Eosin, Orange, Hämatein [?] 
und Satfranin. E. Schoebel (Neapel). 

lirassin , P. , Zur Frage der Regeneration der p e r i - 
pheren Nerven (Anat. Anz. Bd.XXVIII, 1906, Nr. 17, 18, 
p. 449—453). 
Die Untersuchungen wurden angestellt an Hunden, Katzen, Ka- 
ninchen, Meerschweinchen, weißen Ratten und Mäusen, Fröschen. Die 
Methylenblaufärbung wurde erzielt entweder durch Injektion einer 
einprozentigen Lösung des Farbstoffes in physiologischer Kochsalz- 
lösung in die Blutgefäße des Tieres oder durch Eintauchen der Prä- 
parate für einige Zeit in O'l- bis 0"06prozentige Lösung des Farb- 
stoffes. Fixierung durch eine gesättigte , wässerige Lösung von 
pikrinsaurem Ammoniak oder durch eine 5- bis lOprozentige, wässerige 
Lösung von molybdäusaurem Ammoniak. Um das Verhalten der 
Achsenzylinder zur Schwann sehen Scheide und zur Markscheide besser 
feststellen zu können, fügte Verf. der Lösung von pikrinsaurem Am- 
moniak in einigen Fällen zur Kernfärbung eine Pikrokarminlösung 
zu und ebenso wurde zur Markscheidenfärbung etwas Osmiumsäure 
zugesetzt. Sehr geeignet sind zur Untersuchung der Degeneration und 
Regeneration der Nerven die Ohrenhaut und die Haut des Schwanzes 
weißer Mäuse und Ratten (besonders junger Tiere). Durchschneidet 
man die Haut des äußeren Ohres bis auf den Knorpel in querer 
Richtung, oder macht man einen Zirkulärschnitt durch die Haut des 
Schwanzes, so gelingt es in der Regel, sämtliche Verzweigungen der 
in den betreffenden Hautgebieten verlaufenden Nervenstämmchen von 
den zentralen Abschnitten zu trennen, und so wird jede Möglichkeit 
des Vorhandenseins uudurchschnitten gebliebener, kollateraler Nerven- 
fasern in den peripheren Abschnitten ausgeschlossen. Außerdem ist 
die Haut der genannten Körperteile so dünn , daß man , besonders 
nach vollständiger Entfernung des durch das pikriusaure Ammoniak 
macerierten Epithels sehr durchsichtige Flächenpräparate erhält, die 



190 Referate. XXIV, 2. 

gestatten, den Verlauf des Prozesses sowohl in den zentralen wie in 
den peripheren Abschnitten der Nervenfaser bis zu deren Endver- 
zweig'ungen hin zu verfolgen. Schiefferdecker {Bo7in). 

Perusini , G., Über die Veränderungen des Achse n- 
zylinders und der Markscheide im Rückenmark 
bei der Formol fixierung (Zeitschr. f. Heilk. Bd. XXVII, 
1906, H. 7, p. 193—218 m. 1 Tfl.). 
Verf. macht zuerst Mitteilungen über die kadaverösen Ver- 
änderungen, welche an den markhaltigen Fasern des Rückenmarkes 
beim Menschen auftreten. Er geht sodann über zu den Verände- 
rungen, welche bei Fixierung in verschieden starken FormoUösungeu 
entstehen. Er nahm Lösungen, die zwischen 10 und 100 ''/q Formalin 
lagen. Gefärbt wurde für die Markscheiden mit der WEiGERTSchen 
Methode, für die Achsenzylinder mit der von Schmaus-Chilesotti. 
Zwischen den AVEiGERx-Präparaten von in lOprozentiger und 20pro- 
zentiger Lösung fixierten Stücken bestand kein deutlicher Unterschied; 
die letzteren diffenzierten sich etwas laugsamer. Deutlicher sind die 
Unterschiede an den CHiLESOTTi-Präparaten: an den in 20prozentiger 
Liisung fixierten Stücken haben die Achsenzylinder einen deutlich 
zickzackförmigen Verlauf, an den in lOprozentiger Lösimg fixierten 
einen sehr lang ausgezogenen spiraligen. Kolossal sind dagegen die 
Unterschiede zwischen den in lOOprozentiger Lösung fixierten Stücken 
und den bisher besprochenen. Die Schnitte brauchten ungefähr das 
Dreifache der Zeit zur Differenzierung als die in lOprozentiger 
Lösung fixierten, sie sind sehr wenig widerstandsfähig und lassen 
sich nicht genau differenzieren. Die Markscheide sieht pulverig aus, 
als ob sie aus lauter Körnern bestände. Die Achsenzylinder erscheinen 
zickzackförmig, ihre Konturen sind stärker mit kleinen Hervorragungen 
und Einbuchtungen besetzt und auch die Anschwellungen im ganzen 
erscheinen größer. Wegen des Details wird auf das Original ver- 
wiesen. Schiefferdecker {Bonn). 

Ciaccio, C, Rapporti istogenetici fra il simpatico e le 
cellule crom äff ini. Ricerche istologiche (Arch. 
Ital. Anat. e Embriol. vol. V, 1906, fasc. 2, p. 256—267 
c. 1 tav.). 
Die Untersuchungen wurden ausgeführt an Elasmobrancliiern 
(Scyllium catulus), Nebennieren; Amphibien (Rana, Bufo) , Neben- 
nieren , sympathische Ganglien ; Reptilien (Eidechse) , Nebennieren ; 



XXIV, 2. Referate. 191 

Vögeln (Huhn , Taube) , Nebennieren , Ganglien des Sympatliicus 5 
Säugetieren ( Meerschweinchen , Kaninchen , Katze , Mensch) , Neben- 
nieren und sympathische Ganglien des Erwachsenen und von reifen 
Früchten. Die besten Resultate wurden von den folgenden Me- 
thoden ergeben. 1) Fixierung in der Flüssigkeit von Bouin (Formol- 
Pikrinsiiure- Essigsäure -Mischung): sehr schöne Fixierung der Zell- 
struktur und die Möglichkeit der verschiedensten Färbungen. Von 
den letzteren waren die besten : a. Eisenhämatoxylin nach Heidenhain 
mit Säurefuchsin; b. P'ärbung in Eosin oder Erythrosin in wässeriger 
einprozentiger Lösung 30 bis 60 Minuten lang, Auswaschen in Wasser, 
Färbung in Thionin oder Toluidinblau in schwacher, wässeriger Lösung 
wenige Minuten lang, neues Auswaschen in Wasser, Alkohol, Xylol, 
Balsam, c. Ausgezeichnete Resultate wurden mit einer Methode er- 
halten , die Ähnlichkeit mit der von Galeotti hat : halbstündige 
Färbung in der folgenden Mischung : 

Säurefuchsin 5 g 

Absoluter Alkohol 10 „ 

Wasser 100 „ 

Übertragen für einige Minuten in die folgende Mischung: 

Gesättigte, wässerige Lösung von Pikrinsäure . 1 Tl. 
Absoluter Alkohol 1 „ 

Auswaschen in TOgrädigem Alkohol und Übertragen für eine 
bis 2 Minuten in die folgende Mischung: 

Jodgrün lg 

Absoluter Alkohol 10 



Wasser 100 



n 



n 



Die Färbung b. läßt die chromatophile Körnung der Ganglieu- 
zelle gut hervortreten und färbt die chromaftinen Körnchen violett, die 
Färbung c. färbt die chromafiinen Körnchen rot-violett. — 2) Stücke 
von der Nebenniere der Taube wurden auch mit der neuen Silber- 
methode von Cajal behandelt, wodurch außer den Neurofibrillen der 
Nervenzellen in einem Falle auch intrazelluläre Kanälchen gefärbt 
wurden. — 3) Endlich muß man eine Fixierung in einer chrom- 
haltigen Flüssigkeit verwenden, um die chromaftinen Zellen sicher 
hervortreten zu lassen. Die MüLLERSche Flüssigkeit jedoch und die 
sonst von den Autoren angewendeten Mischungen sind für den histo- 
logischen Verbrauch nicht verwendbar. Verf. hat daher die folgende 



192 Referate. XXIV, 2. 

Methode angewendet. Fixierung kleiner Stücke, 24 Stunden laug, 
in der folgenden Mischung: 



Kaliumbichromat 5 g 

Destilliertes Wasser 100 cc 

Formalin 10 „ 

Ameisensäure, rein 4 — 5 Tropfen. 

Man kann die Ameisensäure auch durch Essigsäure ersetzen, 
im Verhältnisse von 4 bis 5 cc auf 100 cc der Flüssigkeit. Dann 
Auswaschen in fortwährend erneuertem destilliertem Wasser 24 Stun- 
den ; Einschluß in Paraffin in gewöhnlicher Weise ; Färbung mit 
Eosin und Thionin oder Toluidinblau, oder Hämatoxylin nach Apäthy 
oder mit Eisenhämatoxylin von Heidenhain und Säurefuchsin. 

Schie/f er decke r (Bonn). 

Trojan, E. , Ein Beitrag zur Morphologie des Tiefsee- 
fischgehirns (Mem. of the Mus. of Comp. Zool. at Har- 
vard Coli., vol. XXX, 1906, p. 219—255 m. 6 Tfln.). 
Das Untersuchsmaterial bestand in je einem Exemplare von 
Leucicorus lusciosus, Mixonus caudalis und Bassozetus nasus und ent- 
stammte der „Albatroß"-Expedition. Die Fixierung der Tiere, seiner- 
zeit mit Alkohol vorgenommen , ließ manches zu wünschen übrig. 
Der kleinste der drei Fische , Bassozetus , wurde entkalkt. Obgleich 
dazu nur eine einprozentige Salpetersäure benutzt wurde, dauerte der 
Prozeß nicht lange , da das Skelett dieses Tiefseefisches vorwiegend 
aus Knorpel besteht. Von den beiden anderen, größeren Fischen 
wurde nach Öffnen der Cranialhöhle und eines Teils des Rücken- 
markskanales das Gehirn aus der Schädelhöhle herausgehoben, aller- 
dings mit teilweisem Verlust des Pinealapparates. Alle Gehirne 
wurden in Celloidin eingebettet und in Querschnittserien zerlegt. Ge- 
färbt wurde teils in toto, teils im Schnitt, und zwar mit Delafields 
Hämatoxylin. • E. ScJioebel {Neapel). 

Wimmer, A., Über Neurogliafärbung (Zentralbl. f. allgem. 

Pathol. u.pathol. Anat. Bd. XVH, 1906, Nr. 14, p. 566— 568 

m. 2 Figg. im Text). 

Verf. hat die wertvolle aber sehr launenhafte Weigert sehe Glia- 

färbemethode derartig modifiziert, daß sie zuverlässiger geworden ist 

und außerdem schneller geht. Verfahren: 1) Härten der kleinen 

Stücke in 96prozentigem Alkohol; Paraffineinbettung (schnell); Schnitte 



XXIV, 2. Referate. 193 

8 bis 10 ju. 2) Beizung der von Paraffin befreiten Schnitte mit 
Weigeuts Gliabeize 12 bis 24 Stunden oben auf dem Paraffinofen. 
3) Nach schnellem Abspülen mit destilliertem Wasser Reduktion für 
etwa .5 Minuten mit ^/gprozentiger Lösung von übermangansaurem 
Kalium; schnelles Abspülen; Nachreduktion 4 bis 6 Stunden in 2pro- 
zentiger Resorzinlösung oben auf dem Paraffinofen. Nach schnellem 
Abspülen mit destilliertem Wasser erfolgt 3) die Färbung, wie von 
Weigert angegeben, d. h. alkoholische Methylviolettlösung, Jod-Jod- 
kaliumlösung, Ditlerenzierung mit Anilin-Xylol zu gleichen Teilen, 
Xylol, Kanadabalsam. Einer der Schwerpunkte aller Gliafärbe- 
methoden liegt in der Differenzierung. Verf. fährt, selbst wenn der 
Schnitt keine gröberen Farbwolken mehr abgibt, doch mit der Diffe- 
renzierung fort, bis der Schnitt einen schwach grauvioletten Ton 
angenommen hat; bei dem nachfolgenden Auswaschen mit Xylol ändert 
sich dieser Ton in einen mehr rein violetten. Gliafasern stark blau 
resp. blauviolett. Kerne violett, Protoplasma ganz schwach violett, 
aber gut erkennbar. Von den übrigen Elementen der Rinde erhält 
man nur eine Violettfärbung der Kerne. Ganz sicher ist diese 
Modifikation auch nicht, am leichtesten tritt eine fleckweise 
Färbung ein. Schieferdecker (Botin). 



C. Bakterien. 

Koch, A., Jahresbericht über die Fortschritte in der 
Lehre von den Gärungsorganismen. 15. Jahrg. 
1904. Leipzig (S. Hirzel), 1907. 20 M. 

Die Stoffeinteilung, die sich in den früheren Bänden des Koch- 
schen Jahresberichts bewährt hat, ist auch für den neuen Jahrgang 
beibehalten worden. Mitteilungen über Kultur- und Untersuchungs- 
methodeu sind im zweiten Abschnitt zusammengefaßt worden. Die 
Referate betreffen Abhandlungen , über welche auch in dieser Zeit- 
schrift zumeist schon berichtet worden ist; von den bisher unberück- 
sichtigt gebliebenen möchte ich folgende erwähnen. 

Tarozzis Arbeit (Über ein leicht in aerober Weise ausführbares 
Kulturmittel von einigen bis jetzt für strenge Anaerobeu gehaltenen 
Keimen, Zentralbl. f. Bakteriol., Orig., Bd. XXXVIII, 1. Abt., p. 619, 
1907) schildert eine neue Methode für Anaerobenkultur: der Näbr- 

Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXIV, 2. 13 



194 Referate. XXIV, 2. 

bouillon oder dem Nähragar werden aseptisch entnommene Gewebs- 
stückchen aus Leber, Milz oder Nieren eines frisch getöteten Tieres 
zugefügt. 

Nach Thesings Methode der Sporenfärbung (Arch. f. Hyg. Bd. L, 
p. 254, 1904) wird das am Deckglas aufgetrocknete und durch die 
Flamme gezogene Material mit einer einproz. Platinchlorid lösung 
bedeckt und diese über der kleinen Bunsenflamme bis zum einmaligen 
Aufkochen erhitzt; hiernach Abspülen mit Wasser, Abtrocknen 
zwischen Fließpapier, Auftröpfeln der Färbeflüssigkeit in reichlicher 
Menge (Karbol-Fuchsin oder Löpflers Methylenblau) , schnelles Er- 
hitzen bis zu einmaligem Aufkochen, Abgießen der Farbe, Spülen 
mit 33prozentigem Alkohol, hiernach mit Leitungswasser, an der Luft 
trocknen oder zwischen Filtrierpapier, Betröpfeln mit der Kontrast- 
farbe (Methylenblau resp. Safranin, Vesuvin, Fuchsin), die 3 Minuten 
kalt zu wirken hat, dann schwaches Erwärmen, Abgießen der Farbe, 
Spülen , Trocknen , Kanadabalsam. Ähnlich wie Platinchlorid , nur 
schwächer, wirken auch Kupfersulfat und Kollargol auf den Färbungs- 
vorgang ein. Kästet^ (Halle a. S.j. 

Molisch, H,, Die Purpur bakterien nach neuen Unter- 
suchungen. Jena (Gust. Fischer) 1907. 93 pp. mit 
4 Tfln. 5 M. 

Purpurbakterien verschafft man sich leicht, indem man Sumpf- 
oder Flußwasser auf Heu , frischen Rinderknochen , Regenwürmern 
oder Schnecken u. dergl. ansetzt; für die Entwicklung der Purpur- 
bakterien wichtig ist, daß der Sauerstoffzutritt erschwert wird, und 
die Kulturen kräftig belichtet werden. Man fülle daher die Gefäße 
bis obenhin, bedecke sie mit einer Glasplatte und überlasse die 
Kulturen an einem hellen Fenster der weiteren Entwicklung. Im 
Sommer treten schon nach einigen Tagen oder Wochen reichliche 
Mengen Purpurbakterien auf. Auf ähnliche Weise erhält man marine 
P'ormen, indem man auf faulendes Seegras oder Tierreste Meer- 
wasser gießt. 

Zur Reinkultur geht Verf. von folgenden Nährböden aus : 

1000 g Wasser 
0-5 „ MgSO^ 1000 g Fluß-(Moldau-)Walk 

0-5 „ K2HPO4 ^jjjgj. 18 ,, Agar (bezw. 100 g Gelatine) 
Spur FeSO^ 5 ,, Pepton 

10 g Pepton 5 „ Dextrin oder Glyzerin. 

18 „ Agar 



XXIV, 2. Referate. I95 

Aus einer durch Purpurbakterien rot gefärbten Rohkultur über- 
trägt man einen Tropfen auf die genannten Nährböden (Keagens- 
gläser) und fertigt Schüttelkulturen an, die an Südfenstern dem 
Sonnenlicht ausgesetzt werden. Je nach dem Sauerstoffbedürfnis der 
verschiedenen Arten entwickeln sich die Bakterien in größerem oder 
geringerem Abstand von der Oberfläche des Nährbodens. Sind in 
diesem rote Kolonien sichtbar geworden, so zertrümmert man die 
Röhrchen und impft auf Petrischalen ab. 

Gute Resultate gab die Methode, unter dem Deckglas bei Luft- 
abschluß zu kultivieren. Man impft eine Pepton-Dextrin-Agarkultur, ver- 
dünnt durch Überimpfen und gibt einen bis 3 Tropfen auf einen großen 
sterilisierten Objektträger und verschließt mit Terpentinharz. Letzteres 
wendet der Verf. derart an, daß dickflüssiger, käuflicher, venezia- 
nischer Terpentin in einer Porzellanschale auf dem Sandbade 2 bis 
3 Tage eingedickt wird , bis das kalt gewordene Harz bei Zimmer- 
temperatur dem Druck des Fingers nicht mehr nachgibt. Ein zum 
Dreieck geformter, mit Holzgriff" versehener Draht wird erhitzt und 
mit ihm das noch flüssige Harz der Reihe nach auf die vier Kanten 
des Deckglases aufgetragen. Diese Art Präparate zu verschließen, 
eignet sich auch für Präparate jeder beliebigen anderen Art vor- 
züglich. — 

Neben dem Bakteriopurpurin findet Verf. in den Purpurbakterien 
noch einen zweiten grünen Farbstoff, das Bakteriochlorin. Der mikro- 
chemische Nachweis der beiden Pigmente gelingt leicht, wenn man 
eine möglichst intensiv gefärbte Flocke aus einer Kultur von Rhodo- 
bacillus palustris auf dem Objektträger eintrocknen läßt imd mit einem 
Deckglas bedeckt ; den kapillaren Raum unter diesem füllt mau mit 
absolutem Alkohol. Dabei ist es vorteilhaft, das Deckglas auf der 
einen Seite durch ein feines Glaskapillarröhrchen zu stützen, damit 
der Flüssigkeitsraum keilförmig wird und der vom Alkohol gelöste 
Farbstoff beim Verdunsten des Lösungsmediums sich an der Schmal- 
seite des Raumes ansammeln kann. Bei Anwendung von absolutem 
Alkohol scheidet sich am Deckglasrand das Bakteriochlorin in grünen 
Tropfen aus, daneben kann sich auch etwas Bakteriopurpurin in Form 
von Tröpfchen oder kleinen roten Kriställchen absondern. Nimmt 
man Chloroform statt des Alkohols, so treten fast nur rote Tropfen 
auf, die beim Verdampfen oft Hunderte von roten Kristallen oder 
Kristallaggregaten liefern. — Sind die bei der mikrochemischen 
Prüfung verwendeten Bakterienmassen von Schleim oder von der 
Gelatine umgeben , so setzt man vor der Behandlung mit Alkohol 

13* 



196 Referate. XXIV, 2. 

etwas Wasser zu. — Der grüne Farbstoff der Purpiirbakterien ist 
mit Chlorophyll nicht identisch, der rote steht den Karolinen nahe. 

Küster {Halle a. S.). 

Wrzosek, A., Beobachtungen über die Bedingungendes 
Wachstums der obligatorischen An aeroben in 
aerober Weise (Zentralbl. f. Bakteriol. , Abt. 1 , Orig. 
Bd. XLIII, 1906, p. 17). 

Verf. nimmt bezug auf die Befunde von Tarozzi, ^ dem es da- 
durch gelang, obligatorische Anaeroben in aerober Weise zu züchten, 
daß er in den Nährboden ein frisches Stück tierischer Organe, wie 
Niere, Milz oder Leber brachte. Während Tarozzi keine Anaeroben- 
kulturen erhielt, wenn die Orgaustücke vorher sterilisiert waren, 
konnte Verf. zeigen, daß auch nach Sterilisation bei 120^ im Auto- 
klaven die Kultur gelingt, vorausgesetzt nur, daß das in den Nähr- 
boden eingebrachte Organstück nicht zu klein ist. 

Ebenso konnte Verf. Wachstum anaerober Bakterien bei freiem 
Sauerstoffzutritt erreichen, wenn er gewisse pflanzliche Gewebsstücke 
zu den Kulturen gab. Regelmäßig entwickelten sich die Anaeroben 
in üppiger Weise, wenn die Nährbouillon mit den Pflanzenstücken 
15 Minuten lang bei 120^ sterilisiert worden war. Auch hier hängt 
das Gelingen besonders davon ab , daß die Pflanzenstücke im Ver- 
hältnis zur Menge des Nährbodens nicht zu klein sind (nicht weniger 
.als 0*4 g Pflanzenstück auf 10 cc Bouillon). Verf. arbeitete be- 
sonders mit Kartoffelstücken. Ähnliche Resultate erzielte er mit 
Rüben und Kohlrabi , während Rettich- , Apfel- und Orangenstücke 
erfolglos angewandt wurden. 

Erwähnt sei ferner, daß ein Zusatz von Hühnereigelb oder -eiweiß 
dieselben Dienste tut. Daß die Gewebsstücke frisch sind , ist nicht 
notwendig. 

Die Untersuchungen wurden vom Verf. mit B. botulinus , dem 
Rauschbrandbazillus und B. oedematis maligni vorgenommen. 

Freund {Halle a. S.). 

Friedberger, E., u. Doepner, H., Über den Einfluß von 
Schimmelpilzen auf die Lichtintensität in 
Leuchtbakterienkulturen, nebst Mitteilung ei- 
ner Methode zur vergleichenden photometri- 



1) s. o. p. 193. 



XXIV, 2. Referate. 197 

sehen Messungder Lichtintensitiit der Leiicht- 

bakterienkulturen (Zentralbl. f. Bakteriol. , Abt. 1 , 

Orig. Bd. XLIII, 1906, p. 1). 

Besonders stark leuchtende Bakterien erzielten Verff. durch 

Kultur auf dem bekannten von Molisch angegebenen Nährboden für 

Leuchtbakterien, dem sie geringe Mengen eines Filtrates von Bouillon 

zusetzten, auf dem vorher Schimmelpilze gewachsen waren. Kochen 

des Filtrates setzte seine Wirksamkeit herab. 

Zur vergleichenden Messung der Lichtintensität der Leucht- 
bakterienkulturen benutzten Verff. die Fähigkeit dieses Lichtes, Brom- 
silberplatten zu schwärzen. Der Apparat, den Verff. verwandten, 
„besteht aus einer in ein Stativ vertikal einzustellenden, geschwärzten 
Metallplatte , in deren Mitte sich ein 4 mm breiter Spalt befindet. 
Auf der Rückseite trägt diese Metallplatte oben und unten einen 
Falz, in den die mit der lichtempfindlichen Platte beladene Kassette 
verschiebbar einzufügen ist". Der Grad der Schwärzung wurde 
zahlenmäßig dann mit Hilfe eines Marxens sehen Apparates zur Be- 
stimmung der Schwärzung photographischer Platten ermittelt, 

Freund {Halle a. S.). 

Guignard , A. , Beitrag zum mikroskopischen Nachweis 
der Tuberkelbazillen im Sputum und Urin 
(Inaug. - Diss. Zürich, Aarau 1905; Ref. im Zentralbl. f. 
Bakteriol., Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1907, p. 579). 
Verf. empfiehlt bei der Färbung von Tuberkelbazillen mit Karbol- 
fuchsin, nicht einfach bis zum Sieden zu erhitzen, sondern 5 Minuten 
lang gelinde bis zur Dampfentwicklung zu erwärmen. Befriedigende 
Resultate ergab die Methode von Spengler, ungleich waren die Er- 
folge bei Anwendung der Methode von Biedert. Trevethicks, 
Strasburgers und Dilgs Verfahren wurden nicht mit Vorteil an- 
gewandt. Freund {Halle a. S.). 

Boriuans, A. , II carciofo in batteriologia (Rivista d'igiene 

e di sanitii pubbl. 1905, no. 22; Ref. im Zentralbl. f. 

Bakteriol., Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 1907, p. 577). 

Die Beobachtungen Rogers, nach welcher gekochte Artischokeu 

infolge des Wachstums gewisser Bakterien grün gefärbt werden, ver- 

anlaßten Verf. dazu, die Verwertbarkeit von Artischokennährböden 

für die Differentialdiagnose von Typhusbazillen und B. coli zu prüfen. 

Die genannten Bakterien färben zwar Artischokenagar ebenfalls grün, 



198 Referate. XXIV, 2. 

zeichnen sich aber durch besondere Eigentümlichkeiten ans, die jeden 
Irrtum ausschließen sollen (safrangelbe Sarcina oder Kartoffelbazillus). 
Artischokenagar darf nicht älter als 3 Monate sein. 

Freund {Halle a. S.). 

Williams, A. W., u. Lowden, M. C. , Die Ätiologie und 

Diagnose der Wut (Journ, of Inf. Dis. vol. III, no. 3; 

Ref. im Zentralbl. f. Bakteriol. , Abt. 1, Ref. Bd. XXXIX, 

1907, p. 492). 

Zur Untersuchung der Negri sehen Körperchen halten Verff. die 

Ausstrichmethode für weit vorteilhafter als andere Verfahren. Ein 

kleines Stück der zu untersuchenden Nervensubstanz wird auf dem 

Objektträger mit dem Deckglas sanft breitgedrückt und dann streicht 

man mit dem Deckglas der Länge nach über den Objektträger. Die 

Ausstrichpräparate werden in Alkohol fixiert und dann in Giemsa- 

Lösung oder mit einer neuen Lösung nach van Gieson gefärbt, oder 

es erfolgt nach Fixierung in Zenker scher P'lüssigkeit Färbung in 

Eosin -Methylenblau nach Mallory. 

Schnittpräparate lassen Verff. nur 3 Stunden in Zenker fixieren, 
ohne sie hinterher in Wasser abzuwaschen. 

Freund {Halle a. S.). 

Szaböky , J. v. , Ein Beitrag zur Kenntnis der kul- 
turellen Eigenschaften der Tuberkelbazillen 
(Zentralbl, f. Bakteriol., Abt. 1, Orig. Bd. XLIII, 1907, 
p. 651). 
In der Arbeit finden wir eine Reihe von Rezepten, die sich b^i 
der Kultur von Tuberkelbazillen bewährt haben. Die besten Kulturen 
erzielte Verf. auf Lungenagar, den er sich auf folgende Weise her- 
stellt: 1 kg Lungen werden in 2 Liter Wasser gekocht, 10 g Agar, 
10 g NaCl, 20 g Pepton (Witte), 100 g Glyzerin, 10 g Trauben- 
zucker. Kochen, Filtrieren, Einstellen auf Lakmusneutralität. 

Auch Sputumagar nach Ficker, Sputum - Lungen - Glyzerinagar 
(50 g Lungenagar, 50 g bazillenreiches Sputum, 3 g Agar, 0'5 g 
NaCl, 0*5 g Traubenzucker, 12 g Glyzerin, 1 g Pepton und 200 g 
Wasser) und Tuberkulose -Lungenagar (sterilisierte und neutralisierte 
Tuberkelbazillenkulturen auf lAmgenagar) ergaben gute Resultate. 

Auf Eiernährböden und Somatoseagar wuchsen die Bazillen 
weniger gut. Freund {Halle a. S.). 



XXIV, 2. Referate. I99 

Taunod , Th. , Contributions k l'etude du gonocoque 
(Zentralbl. f. Bakteriol, , Abt. 1, Orig. Bd. XLIV, 1907, 
p. 10). 

Zu Beginn seiner Arbeit bespricht Verf. alle bisher empfohlenen 
Methoden zur Züchtung von Gonokokken. Besonders eingehend wird 
über die drei gebräuchlichsten Nährböden in dieser Hinsicht : Ascites- 
agar nach Kiefer -Weutheim, Schweineserumagar nach Wassermann 
und Ochsenalbuminagar nach Lipschütz gehandelt. Von diesen An- 
gaben sei hier nur die vom Verf. empfohlene Modilikation in der 
Herstellung des Wassermann sehen Schweineserumagars mitgeteilt: 
Anstatt 30 bis 35 cc Wasser mit 15 cc Serum zu vermischen, ver- 
dünnt Verf. 15 cc Serum mit 40 bis 50 Teilen Wasser. Zur Mischung 
werden nach Umschütteln 3 cc Glyzerin und 1 cc Nutrose gegeben 
und dann kocht man das Ganze auf. 

Auch auf gewöhnlichem l'5prozentigem Agar hat Verf. Gono- 
kokkenkulturen erhalten. Von Wichtigkeit hierbei ist, daß der Agar 
die richtige Alkaleszenz erhält, die Verf. durch Zusatz von lOpro- 
zentiger Sodalösung bis zur schwachen alkalischen Reaktion von 
L a k m u s papier erzielt. 

Von flüssigen Gonokokken -Nährmedien empfiehlt Verf. besonders 
die Christmas sehe Nährflüssigkeit (einen Teil nicht peptouisierte, 
konzentrierte Kalbsbouillon und 3 Teile Ascitesflüssigkeit). 

Freund {Halle a. 8.). 

Bang, 0., Einige vergleichende Untersuchungen über 
die Einwirkung der Säugetier- und der Ge- 
flügeltuberkelbazillen auf die Reaktion des 
Substrates in Bouillonkulturen (Zentralbl. f. Bak- 
teriol., Abt. 1, Orig. Bd. XLIII, 1906, p. 34). 
Zu seinen Untersuchungen kultivierte Verf. die Tuberkelbazillen 
auf eine Weise , die es leicht gestattete , während des Wachstums 
Kulturproben zu entnehmen , ohne daß dabei Keime von außen in 
die großen Kulturen gelangen konnten. Da unter Umständen bei 
einer wiederholten mikroskopischen Untersuchung ein und derselben 
größeren Kultur diese Vorrichtung mit Vorteil Verwendung finden 
dürfte, so sei sie hier mitgeteilt. 

Der die Nährbouillon enthaltende Kolben wurde mit einem zwei- 
mal durchbohrten Gummistopfen fest verschlossen. In der einen 
Durchbohrung „bringt mau eine Glasröhre mit Wattepfropfen, in der 
anderen einen aus einer gebogenen dickwandigen Glasröhre ver- 



200 Referate. XXIV, 2. 

fertigten Heber an. Letztere Röhre wurde mittels eines dickwan- 
digen Gummischlauches mit einer dünneu Glasröhre in Verbindung 
gesetzt, die an einem Ende in ein Kapillarröhrchen ausgezogen war, 
welches nach Füllung des Hebers mit Flüssigkeit zugeschmolzen wurde. 
Das Kapillarröhrchen wird durch eine Glasröhre beschützt , die von 
unten über den unteren Teil des Gummischlauches geschoben wird." 
Wenn man zur Kulturentnahme .die Kapillarröhre durchschneidet und 
wenn man sie wieder zuschmilzt, bringt man eine Klemme am Gummi- 
schlauch an, um Infektion von außen zu vermeiden. 

Freund {Halle a. S). 

Mühlens, P., Untersuchungen über Spirochaete pallida 
und einige andere Spirochäten arten, insbeson- 
dere in Schnitten (Zentralbl. f. Bakteriol., Abt. 1, Orig. 
Bd. XLHI, 1907, p. 586). 
Wenn die Präparate bei künstlichem Licht unter freiem Zutritt 
des Tageslichtes untersucht wurden, so wurden die Spirochäten in 
bedeutend geringerer Zahl gefunden, als wenn die Besichtigung unter 
Abschluß des Tageslichtes vorgenommen wurde. Infolge des stören- 
den Neben(-Tages-)lichtes wurden viele Spirochäten übersehen. 

Freund {Halle a. S.). 

ßoosen- Runge, Über die Verwendung des Natrium 
glykocholicum fürBlutuntersucbungen bei Ty- 
phuskranken (Zentralbl. f. Bakteriol., Abt. 1, Orig. 
Bd. XLIII, 1907, p. 520). 
Verf. empfiehlt zu Blutuntersuchungen einen einprozentigen gly- 
kocholsauren Natriumagar von folgender Zusammensetzung : 1 Liter 
Bouillon von 0'5 kg Ochsenfleisch, 20 g Agar, 10 g Pepton, 5 g 
NaCl, 10 g Natrium glykocholicum (Merck), schwach alkalisch. Im 
übrigen wird nach der bekannten ScHOTXMtiLLER sehen Methode ver- 
fahren. Freund {Halle a. S.). 

Marpmanil , Praktische Notizen (Zeitschr. f. angew. Mikrosk. 
Bd. XIII, 1907, p. 21). 
Agar, der nicht ausschwitzt, erhält Verf. durch Bei- 
gabe von etwas Traganth zum Agar. Man kocht Agarpulver (20 g) 
mit 1'5 Liter Fleischbrühe (hierzu 30 g Gl Na und 50 g Glyzerin); 
nach der Lösung des Agars setzt man 10 g Traganthpulver in 100 g 
80prozentigem Alkohol gelöst zu, schüttelt die Mischung, kocht auf 



XXIV, 2. Referate. 201 

freiem Feuer einmal auf und verfährt im übi-igen wie gewöhn- 
lich. — 

Weiterhin macht Verf. Mitteilung über Entwässern von Mikrotom- 
präparaten in Aceton und Durchtränkung mit Acetonlösungen von 
Paraffin oder Celloidin, sowie über den Einfluß von Kohlensäure 
(Selterswasser) auf Mikroorganismen. Küster {Halle a. S.). 

LoefFIer , F. , Neue Verfahren zur Schnell färbung von 
Mikroorganismen, insbesondere der Blutpara- 
siten, Spirochäten, Gonokokken und Diphthe- 
riebazillen (Deutsche med. Wochenschr. Bd. XXXIII, 
1907, p. 169). 
Um Trypanosomen (Nagana) zu färben, verfährt Verf. folgender- 
maßen. Von der käuflichen Giemsa - Lösung setzt man einen bis 
2 Tropfen zu einem cc destillierten Wassers ; ein Blutausstrichpräparat 
läßt man eine halbe bis eine Stunde auf der Lösung schwimmen, — 
die Blutkörperchen werden alsdann rosa, die Parasiten schwach bläu- 
lich gefärbt. In letzteren „erkennt man das intensiv schwach rot- 
gefärbte Körnchen in der Nähe des stumpfen Körperendes, in der 
Mitte den großen eiförmigen , rotgefärbten Chromatinkörper. Läßt 
man die Lösung stundenlang auf das Präparat einwirken, so erscheint 
auch der Saum der undulierenden Membran, der von dem Chromatin- 
körnchen des hinteren Körperendes ausgeht und in das spitze Körper- 
ende ausläuft, intensiv rotgefärbt". Verf. suchte die zuletzt erwähnte 
Färbung sicher und schnell zu erreichen und bediente sich verschie- 
dener Beizen; geeignet erwies sich von diesen Azoblau, welches 
für violette Farbstoffe als Beize wirkt. Naganapräparate werden 
mit wässeriger Azoblaulösung behandelt , leicht erwärmt und mit 
Methylviolett BN-Lösung (einen Teil der alkoholischen Lösung 4- 9 Teile 
Wassers) nachgefärbt. Läßt man einprozentige Azoblaulösung 20 Se- 
kunden und hierauf die Giemsa sehe Lösung 25 Minuten bis eine 
halbe Stunde wirken, so werden die Blutkörperchen schwach rosa, 
die Parasiten in toto intensiv rot: Azoblau wirkt somit auch für 
Giemsa sehe Lösung als Beize. 

Ausführlich äußert sich Verf. über seine Versuche mit „Malachit- 
grünkristalle-Chlorzinkdoppelsalz" (Höchster Farbwerke) und Natrium 
arsenicosum. „Versetzt man eine Malachitgrünlösung mit steigenden 
Mengen eines alkalisch reagierenden Körpers , so erfolgt bei einem 
gewissen Zusätze eine Ausfällung und Entfärbung des Grüns. Setzt 
man weniger davon hinzu, so erfolgt die Ausfällung und Entfärbung 



202 Referate. XXIV, 2. 



laugsamer. Es stellt sich dann zimächst der Zustand der sogen. 
Schwebefällung- ein, in dem die Färbelösungen am intensivsten färben. 
Durch eingehende Versuche stellte ich fest, daß man die intensivsten 
Färbungen erhält, wenn man 3 Teile der -^/gprozeutigen Lösung von 
Natrium arsenicosum mit einem Teil der -^/oprozentigen Malachitgrüu- 
lösung vermischt. Bringt man diese frisch hergestellte Mischung auf 
ein Naganadeckglaspräparat und erwärmt sie auf demselben über 
der Flamme bis zur Dampf bildung , so sind nach einer Minute die 
Blutkörperchen und auch die Naganaparasiten intensiv grün gefärbt." 
Spült man unter der Wasserleitung sorgfältig ab und behandelt mit 
GiEMSA-Lösung, so erhält man sehr intensive Färbung der Parasiten 
(Chromatinkörper tief dunkelrot , undulierende Membran intensiv rot, 
Leibessubstanz grünlich, Blutkörperchen hellgrün). Vorbedingung für 
gute Färbung ist , daß das Blut möglichst dünn ausgestrichen und 
mit Alkoholäther gut fixiert ist. Von allen alkalischen Mitteln , mit 
welchen Verf. seine Malachitgrünlösung behandelte , bewährte sich 
das Natrium arsenicosum am besten ; dieses wirkt nicht nur für 
Malachitgrün, sondern auch für GiEMSA-Lösung als gute Beize ; aller- 
dings bleiben bei Anwendung der letzteren die Chromatinbestandteile 
der Trypanosomenkerue schwach gefärbt oder ganz ungefärbt. 

Setzt man einen Tropfen der käuflichen GiEMSA-Lösung zu 1 cc 
destillierten Wassers, so tritt ebenfalls ein der Schwebefällung ähn- 
licher, allerdings schon weit vorgeschrittener Zustand ein. Bei wieder- 
holtem Aufkochen gehen die kleinen kristallinischen Niederschlags- 
partikelchen übrigens wieder in Lösung. Trägt man die Lösung 
heiß aufs Präparat auf, so kommt sie bei der nachfolgenden Ab- 
kühlung in den Zustand der Schwebefällung , in welchem sie schon 
nach einer bis 2 Minuten die Parasiten vortrefflich färbt. Sehr 
empfehlenswert ist ferner ^j^- bis einprozentige Lösung der Giemsa- 
Farbe in Glyzerin. — Das vom Verf. empfohlene Verfahren erfordert 

1) Präparate, dünn ausgestrichen und mit Alkoholäther gut 

fixiert. 

2) 0"5prozentige Lösung von Malachitgrünkristalle-Chlorzink- 

doppelsalz. 

3) O'öprozentige Lösung von Natrium arsenicosum. 

4) 0"5prozentige Lösung von reinem Glyzerin. 

5) GiEMSA-Lösung. 

Auf das Präparat 3 Tropfen der Arsenlösung und 1 Tropfen Malachitgrün- 
lösung, erwärmen bis zur Dampf bildung, eine Minute färben; kräftig ab- 
spülen. Im Reagenzglas 5 cc der Glyzerinlöaung und 5 bis 10 Tropfen 



XXIV, 2. Referate. 203 

GiEMSA-Lösung (Grübler), zum Sieden gebracht und heiß aufs Deckglas 
aufgetragen. Nach einer bis 5 Minuten ist die Lösung abzugießen; mit 

Wasser spülen. 

Mit Hilfe dieses Verfahrens konnte Verf. die Veränderungen 
der Trypanosomen bei der Teilung genau verfolgen. Dieselbe Methode 
gestattet Fcärbung der Recurrensspirochäten und der Sp. pallida. 

Blutparasiten jeder Art färbt Verf. folgendermaßen : Zu 4 Teilen 
Borax (2"5proz.) nebst Methylenblau (einproz.) kommt ein Teil poly- 
chromes Methylenblau (nach Unna, von GutJELER), zu der Mischung 
gleiches Volumen einer 0*05prozentigen Bromeosiulösung (B. extra 
oder extra A. G. , Höchst). Stehen ältere gereifte Boraxmethylen- 
blaulösungen zur Verfügung, so nimmt man besser nur O'Oöpromilliges 
Bromeosin. — Mit dieser Lösung wird das Präparat unter leichtem 
Erwärmen etwa eine Minute und hiernach in 

Tropaeolin 00 (konz. wässerige Lösung) . . 5 Vol. 

Essigsäure 0'5 „ 

Wasser .100 „ 

gebracht; Abspülen mit Wasser. Will man langsamer entfärben, so 
nimmt man 5- bis lOfache Verdünnung der Tropaeolinlösung. Die 
Parasiten sind in den Präparaten gut erkennbar ; besonders gut färben 
sich die Polkörner der Diphtheriebazillen (Erwärmung der Farblösung 
zur Färbung dieser letzteren nicht erforderlich). Weiterhin sind nach 
derselben Methode Rotz-, Pest-, Influenzabazillen und Gonokokken 
leicht färbbar. Für Untersuchung der letzteren nimmt Verf. Prä- 
parate, die mit Alkoholäther fixiert sind ; zur Entfärbung eignet sich 
eine Mischung von 

177 Teilen Alkohol 
20 „ einpromilliges Bromeosin 
3 „ Essigsäure, 

welche die Kerne der Zellen stark entfärbt, aber die Gonokokken 
gefärbt läßt. Küster {Halle a. 8.). 

Bisserie , Procede simple et rapide de preparation des 
milieux geloses et gelatines (Ann. de ITnst. Pasteur 
t. XXI, 1907, p. 235). 
Insbesondere bei der Bereitung des Agars dürfte es sich emp- 
fehlen, mit dem Verf. die flüssige Masse in ein Becherglas oder dgl. 
zu füllen und mit der Halsöifnung nach unten einen leeren Erleu- 
meyer in sie zu setzen, dessen Otfnung mit zwei Lagen Leinwand 



204 Referate. XXIV, 2. 

und (zwischen diesen) einer Lage Filtrierpapier gut zugebunden ist. 
Die Gefäße werden in den Autoklav gesetzt, und beim Anheizen des 
letzteren wird dafür gesorgt, daß alle Luft aus dem Apparat ent- 
weichen kann : Der Erlenmeyerkolben ist dann ebenfalls luftleer und 
nur mit Wasserdampf gefüllt. Nach dem Erkalten, wenn das Mano- 
meter auf Null gesunken ist, öftuet man ein wenig den Hahn des 
Autoklaven und läßt allmählich Luft zutreten; hierbei filtriert die 
tlüssige Agarmasse schnell in den Kolben hinein. 

Küster {Halle a. S.). 



X). Botanisches. 

Recueil de l'Institut botanique [Universite de Bru- 
X e 1 1 e s ] p u b 1 i e p a r L. E r r e r a. T. I et IL Bruxelles 
1906. 

Durch den Neuabdruck der aus dem Errera sehen Institut her- 
vorgegangenen Arbeiten wird die Aufmerksamkeit des botanischen 
Publikums auf eine Reihe tüchtiger Arbeiten gelenkt , von welchen 
nur einige bei ihrem ersten Erscheinen in dieser Zeitschrift Berück- 
sichtigung gefunden haben. 

Errera (Coloration des noyaux par la nigrosine, 1881) färbt 
Schnitte mit einer wässerigen Lösung von Nigrosin und wäscht in 
destilliertem Wasser so lange aus , bis von dem Schnitt kein Farb- 
stoff mehr an die Flüssigkeit abgegeben wird ; Glyzerin, Glyzerin- 
gelatine bezw. Alkohol , Nelkenöl , Kanadabalsam. Die Kerne sind 
kräftig gefärbt, alle anderen Teile des Präparates farblos. — Der- 
selbe Autor behandelt Schnitte mit Kanarinlösung (Sur l'emploi de 
la canarine, 1884), das in Gegenwart von Ätzkali seine färberische 
Wirkung betätigt. 

Bei seinen Untersuchungen „Sur la distinction microchimique 
des alcaloides et des matieres proteiques" (1889) geht Errera von 
der bekannten Tatsache aus, daß die mit den üblichen Mitteln zum 
Nachweis der Alkaloide erzielten Niederschläge ebensosehr Eiweiß- 
stoffe wie Alkaloide nachweisen. Unterschiede werden nach Vor- 
behandlung mit weinsaurem Alkohol möglich. Schnitte von Geweben, 
in welchen die üblichen Alkaloidreagentien (Jodjodkali , Phosphor- 
molybdänsäure etc.) Niederschläge hervorrufen, werden frisch in 
absoluten Alkohol übertragen, in dem man kristallisierte Weinsäure 



XXIV, 2. Referate. 205 

(1 g auf 20 cc) gelöst hat ; Sclinitte durch dünnwandige Gewebe 
bleiben eine halbe bis eine Stunde im Alkohol, dickwandige bis 
24 Stunden. Von Zeit zu Zeit entnimmt man dem Alkohol einen 
Schnitt , wäscht ihn in destilliertem Wasser und behandelt ihn mit 
den bekannten Alkaloidreagentieu : Tritt auch nach der Vorbehand- 
lung mit Alkohol noch Fällung ein, so sind die vor der Alkohol- 
behandlung gewonnenen Niederschläge auf Eiweißverbindungen, nicht 
auf Alkaloide zurückzuführen. Statt „alcool tartrique" benutzte Errera 
auch absoluten Alkohol ohne Säurezusatz, der sehr gut den Nach- 
weis von Pepton gestattet (in Spirogyren, die eine Zeitlang in Pepton- 
lösung sich aufgehalten haben). 

Marchal (Sur un procede de Sterilisation a cent degres des 
Solutions d'albumine , 1892) findet, daß man Lösungen von Hühner- 
eiweiß auf 100^ und selbst bis 130^ erhitzen kann, ohne daß Nieder- 
schläge entstehen, wenn man zu einem Liter 0*05 g eine 2- bis 
öprozentige Boraxlösung oder O'OOl bis 0*006 g einer 2- bis 5pro- 
zentigen Eiseusulfatlösung oder 4 bis 5 g lOprozentiges Harnstotf- 
nitrat zusetzt. Küster {Halle a. 8.). 

Orüß, J., Abhandlungen über Enzymwirkungen (Zeitschr. 
f. Pflanzenkrankh. Bd. XVII, 1907, p. 65). 

Um in Pflanzengeweben Oxydase nachzuweisen , verfährt man 
bekanntlich in der Weise, daß man Schnittflächen der betreftendeu 
Organe mit einer frisch hergestellten , alkoholischen Lösung von 
Guajak behandelt. Wenn nach dem Abdunsten des Alkohols die 
Blaufärbung ausbleibt , so kann man etwa vorhandene Peroxydasen 
nach weiterem Zusatz von Wasserstoffsuperoxyd erkennen, welcher 
die charakteristische Blaufärbung hervorruft. Enthält ein Objekt 
Oxydasen und Peroxydasen nebeneinander, so gelingt es häufig, durch 
Erhitzen in Alkohol die Oxydase zu zerstören: Die Peroxydase bleibt 
erhalten und durch Guajak und Wasserstoffsuperoxyd nachweisbar; 
ist die Peroxydase nur in geringen Mengen vorhanden , so kann 
allerdings auch nach Zusatz von Wasserstoffsuperoxyd die Reaktion 
ausbleiben, da jene durch die Oxydation des vom Wasserstoffsuper- 
oxyd abgehaltenen Sauerstoffs zerstört werden kann. 

Die Guajakreaktion tritt in derselben Weise ein , gleichviel ob 
der molekulare Luftsauerstoff, der durch Oxydasen an Guajak über- 
tragen wird, oder der von HgO.j abgespaltene atomistische Sauerstoff 
wirksam wird. Verf. nennt das Ursol als ein Reagens, das diesem 
und jenem gegenüber durch unterschiedliches Verhalten sich aus- 



206 Referate. XXIV, 2. 

zeichnet. Mit Wasserstoffsuperoxyd zusammen läßt sich Ursol nicht 
zum Nachweis der Peroxydasen brauchen , da es zu schnell und zu 
intensiv reagiert. Verf. empfiehlt weinsaures Ursol. 

„Mau stellt mit dem im Handel vorkommenden Ursol eine ge- 
sättigte, alkoholische Lösung her und gießt sie in eine gleichfalls 
gesättigte, alkoholische Weinsäurelösung, wodurch ein weißer Nieder- 
schlag von Ursoltartarat ausfällt, der mit Alkohol ausgewaschen 
wird. Letzterer wird schließlich durch Äther ersetzt, der dann ab- 
gedunstet wird. 

Vor jedem Versuch löst man eine kleine Menge in Wasser auf 
und setzt etwas Wasserstoffsuperoxyd hinzu. Mit dieser Lösung kann 
man z. B. einen mikroskopischen Schnitt behandeln. Sobald dieselbe 
in eine Peroxydase-haltige Zelle eingedrungen ist, entsteht eine grüne 
Färbung, die bald in Blau und schließlich in Schieferfarben über- 
geht. Man kann auch den Schnitt mit einer Lösung von Ursoltartarat 
tränken und dann die verdünnte Wasserstoffsuperoxydlösung hinzu- 
fließen lassen. Nachdem der Farbenwechsel eingetreten ist, hat man 
den Schnitt mit Wasser auszuwaschen , da sich die Lösung langsam 
gelbbraun färbt." 

Daß die Farbenänderung in diesem Falle durch den atomistischen 
Sauerstoff bewirkt wird, macht Verf. durch folgenden Versuch wahr- 
scheinlich : Läßt mau eine Lösung von Ursoltartarat mit oder ohne 
Wasserstoffsuperoxyd an der Luft stehen, so wird die Lösung gelb, 
gelbbraun und dunkelbraun, ohne daß der geschilderte Farbenwechsel 
eintritt; wird dagegen etwas ausgekochtes Platinmohr zugesetzt, so 
tritt der Farbenwechsel ein. — 

Zum Nachweis der Oxydasen , die den molekularen Luftsauer- 
stoff auf ein Chromogen übertragen , eignen sich am besten Guajak 
und Tetramethylparaphenylendiaminchlorid, ersteres in alkoholischer, 
letzteres in wässeriger Lösung, die verschiedenen Oxydasen verhalten 
sich hinsichtlich der Intensität der Farbenreaktion, sowie der Wider- 
standsfähigkeit hohen Temperaturen gegenüber verschieden : Das in 
den Phellogen- und Subphellogenzellen der Kartoffeln wirksame oxy- 
dierende Enzym gibt kräftigere Färbung als das im Zellsaft der 
stärkehaltigen Parenchymzellen befindliche. Zur Untersuchung werden 
möglichst große Schnitte einer ruhenden Kartoflelknolle fortgesetzt 
in absolutem Alkohol entwässert. „Wird eine solche Scheibe eine 
Minute in Alkohol bei Siedetemperatur gehalten vmd nach dem Ab- 
dunsten des Alkohols in eine Lösung von Ursoltartarat gelegt, der 
einige Tropfen HoOg hinzugefügt sind , so zeigt sich augenblicklich 



XXIV, 2. Referate. 207 

der Farbenwechsel in der Rindenschiclit und in den Leitbündeln; 
etwas später färbt sich auch das übrige Gewebe. AVird ein gleicher 
Schnitt mit einer Lösung von Tetramethylparaphenylendiamin gleich- 
mäßig befeuchtet , so wird das Rindengewebe bald intensiv violett, 
während das Pareuchym rein weiß bleibt oder nur allmählich eine 
schwache Färbung zeigt." 

„Durch länger andauerndes Erhitzen kann man erreichen, daß 
in den Parenchymzellen die erwähnte Peroxydasereaktion völlig aus- 
bleibt. So wurde z. B. ein Schnitt 10 Minuten in Alkohol erhitzt 
(auf Siedetemperatur), in Ursoltartaratlösung -\- Ü^O^^ gebracht und 
nach dem Farbenwechsel, um das Nachdunkeln durch Autoxydation 
zu verhindern, in Wasser abgespült ; darauf traten auf hellem Grunde 
die Rinde und die Leitbündel intensiv gefärbt hervor. Mit Tetra- 
methylparaphenylendiaminchlorid färbte sich erst nach einiger Zeit 
das Rindengewebe. Der Eintritt dieser letzteren durch molekularen 
Sauerstoö' bewirkten Färbung wird noch mehr beim Erhitzen von 
20 Minuten verzögert; auch die Intensität hat sehr abgenommen. 
Dagegen war anscheinend die Wirkung von Ursoltartarat -\- JI^O^ 
mit unverminderter Stärke eingetreten. Indessen lassen sich die 
beiden Wirkungen bei dieser Art der Anordnung kaum vergleichen, 
denn die Verstärkung der Färbung hängt nur innerhalb gewisser 
Grenzen von der Menge des aus dem HgO.^ entbundenen Sauer- 
stofl's ab." Küster (Halle a. S.). 

Jost , L., Über die Selbststerilität einiger Blüten (Bot. 
Zeitg. Bd. LXV, 1907, Abt. 1, p. 77). 
Verf. stellte mannigfaltig variierte Untersucliungen an, welche 
über, das Wachstum der Pollen schlauche auf künst- 
lichen Nährböden Aufschluß geben. Besonders empfehlenswert und 
für PoUenköruer der verschiedensten Art brauchbar ist einprozentiger 
Agar mit 1 Prozent Rohrzucker. Andere Zuckerarten , auch z. B. 
Glukose , gaben keineswegs so befriedigende Resultate wie Rohr- 
zucker. Pollenschläuche von Lilium Martagon werden durch Zusatz 
von Zitronensäure (Agar -)- O'Olprozentige Zitronensäure) sehr ge- 
fördert, die von Rhododendron wachsen vorzüglich auf einprozentigem 
Agar, 5prozentigem Zucker nebst O'Olprozentiger Zitronensäure. Ge- 
latine ist weniger zu empfehlen. Alle Versuche mit Agar stellte 
Verf. in der Weise an , daß die Kulturtropfen in einer Ausdehnung 
von etwa 4 cm auf lange Objektträger und die Pollenkörner quer 
durch die Mitte des erstarrten Tropfens als Impfstrich aufgetragen 



208 Referate. XXIV, 2. 

wurden. Nach der Aussaat kommen die Objektträger in die feuchte 
Kammer; das Wachstum der Pollenschläuche, welche beiderseits senk- 
recht vom Impfstrich in annähernd parallelen Linien ausstrahlen, läßt 
sich bequem mit unbewaffnetem Auge und mit dem Maßstab ver- 
folgen. — Die Pollenkörner mancher Pflanzen — z. ß. der Grami- 
neen, von Corydalis cava — sind gegen allzu reichlich gebotene 
Flüssigkeit sehr empfindlich und gehen in Wasser und Zuckerlösungen 
u. dgl. zugrunde. Verf. säet solche Pollenkörner auf Pergament- 
papier oder auf unbenetzten Objektträgern aus und stellt die Kulturen 
in die feuchte Kammer. 

Der mikroskopische Nachweis der Pollenschläuche im 
Gewebe der Narbe und des Griffels ist oft auch ohne An- 
wendung des Mikrotoms möglich. Bei Corydalis cava gelingt es, 
längsgespaltene Nai'ben — am besten nach Vorbehandlung mit Äther 
— in Eau de Javelle hinreichend aufzuhellen ; die Präparate wurden 
dann mit Essigsäure angesäuert und mit wässeriger Anilinblaulösung 
gefärbt. Außer den Gefäßen werden von dieser nur die Kallose- 
wände gefärbt; läßt man freilich die Eau de Javelle nicht lange 
genug einwirken , so bleibt Cytoplasma erhalten , das sich ebenfalls 
färbt und die Präparate unübersichtlich macht ; behandelt man zu lange, 
so verändert sich auch die Kailose imd kann dann nicht mehr so 
gut gefärbt werden. Bei richtig getroffener Einwirkungsdauer der 
Eau de Javelle treten die gefärbten Pollenschläuche überraschend 
deutlich hervor : Die Kailose beschränkt sich nicht nur auf die Kallus- 
pfropfen der Schläuche^ sondern bildet auch die innerste Lamelle der 
Schlauehwand. 

Bei Seeale cereale tat dieselbe Methode zuweilen gute Dienste ; 
wenigstens unmittelbar nach ihrem Austritt aus dem Pollenkorn haben 
die Pollenschläuche gut färbbare Kailoseschichten. Im dickeren Ge- 
webe der aufgehellten Narbe gelingt aber ihr Nachweis mit Hilfe 
des Aniliublaus nicht. Verf. macht sich den Stärkegehalt der Pollen- 
schläuche zunutze. Küster {Halle a. S.). 

Müller, Ct., Mikroskopisches und physiologisches Prak- 
tikum der Botanik für Lehrer. Leipzig und Berlin 
(B. G. Teubner), 1907. 224 pp. 235 Figg. 4*80 M. 

Die vorliegende Anleitung zum Studium der Pflanzenanatomie 
an selbstgefertigten Präparaten und zu den wichtigsten pflanzen- 
physiologischen Versuchen ist in allen Stücken mit Sachkenntnis und 
großer Sorgfalt zusammengestellt. Der Verf. will mit seinem Buch 



XXIY, 2. Referate. 209 

Lehrer dazu anregeu , von den Resultaten der wissenscliaftlichen 
Forschung- durch eigene Anschauung Kenntnis zu nehmen und sie 
durch eigenes Nachdenken zu verarbeiten, und diese Aufgabe wird 
sein Praktikum zweifellos gut erfüllen. Neben den allerwärts üblichen 
Untersuchungsobjekten werden hie und da auch einige minder oft 
untersuchte namhaft gemacht. Küster {Halle a. S.). 

Conpin , H. , Nouveau dispositif pour la coloration des 
coupes (Kev. gen. de Bot. t. VIII, 1896, p. 71). 
Verf. nimmt Glasröhrchen von etwa 5 cm Länge und 2*5 cm 
Breite, deren Rand wenigstens an dem einen Ende vorteilhafterweise 
ein wenig umgebogen ist ; über diesen legt man ein Stückchen zartes 
poröses Papier („Papier Joseph") und benetzt es , so daß es sich 
dem Glasröhrchen anschmiegt und an ihm haften bleibt. Schnitte 
durch Pflanzengewebe färbt Verf. in der Weise, daß er die Schnitte 
in das mit Papier verschlossene Röhrchen bringt und dieses mit dem 
pap