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47

BOLETÍN

SOCIEDAD ESPAÑOLA

BIOLOGIA

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ANO V = TOMO IV

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MADRID
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ÍNDICE DEL TOMO IV

LALDODIDILD

Págs.

Alday Redonnet. — Importancia de la determinación de la pepsina
PUE VEAnOs DIGIOdOS ras a lejos Che Alpe a are

Alomar (véase Turród).

Alvarez de Toledo.— A propósito de la reacción colorante de la san-

gre, recientemente propuesta por Baecchil...................
— Sobre el valor de la reacción anafiláctica en el diagnóstico
médico-leg al del esperma un co. oa la po rra

— La reacción colorante de la sangre por la tintura de aloína...
— Investigaciones acerca de la docimasia hepática...............
— Utilidad de la reacción anafiláctica en el reconocimiento mé-
O A E MS A A
Cajal. — Variaciones fisiológicas del retículo de Golgi en algunos ele-
mentos epiteliales y mesodérmicos..........ooooomoomommoo...
— Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica
yiltogbnea delaparato de GOÍBL. conan ea dino a coa ea

— Plan fundamental de la retina de los insectos..................
— Significación probable de la morfología de las neuronas es los

¡AVeOrtebrados;. tinas dara lao de RS ES CM o a los
Coca (F.).—Modificaciones que sufren las células epiteliales del cuello
del útero humano cultivadas «in vitr0>».........oooooooo.....
Fernández Martinez (F.). — Hallazgo de la «amaeba histolytica» pro-
tozoo parásito de la disentería tropical en España...........
Gavilán Bofill (véase Lecha- Marzo).
Lafora (G. R.). —Hemorragias del lóbulo anterior de la hipófisis.....
— Las lesiones en el sistema nervioso y en la hipófisis de un caso
AS pseudo ACONATOPIASIA ac a acia bea e laa aa
Lecha-Marzo y Piga.—Sobre una nueva reacción de la urea y su va-
lor en Pplnica y .enmedicina lr oa aaa
— Todavía nuevos métodos para obtener los cristales de hemo-
ER a O O ER A IA E A O e
Lecha- Marzo y Gavilán Bofill.— Más observaciones sobre los surcos
de la cara interna de la escama del occipital................

Lecha- Marzo (véase Maestre).

Madinaveitia (A.).— La determinación de la alcalinidad de las aguas
A A A E O AS IA

Madinaveitia y Varillas.— La determinación microquímica de la urea
AOL COSMTICALO DS AmMbArd oo cameo o a a

Maestre, Tena Sicilia y Lecha-Marzo.— Observaciones sobre los sur-
cos de la cara interna de la escama occipital................

53939

117

79
19

25
105

144
132
126

15

122

A BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Págs.

Marañón (G.).—Glucosuria consecutiva á la ingestión de adrenalina.
— Acción del extracto hipofisario sobre la glucosuria adrena-
e AA E EA EE A

— Acción del extracto hipofisario total en ingestión sobre la po-
lmría de da diabetes. 00 died melo ao laa sida die cua o EN

— Sobre la fórmula leucocitaria en la enfermedad de Addison...

Mayora! (P.). —¿Es posible el diagnóstico del embarazo por cuti- -

POCIÓN e o aaa Ea O IO Eo ce AN

— Observaciones sobre la tuberculosis y su bacilo ...............
Piga (A.) (véase Lecha- Marzo). .

Río (P. del). — Alteraciones renales en un caso de enfermedad bron-

A A A A A A A A
Sayé. — Nuevo procedimiento para la coloración del bacilo de Koch
EROS TRIOS ¿acoja ARRE ac 8 Ta la ato 8 A BS JC PE

Tena Sicilia (véase Maestre).

Turró (R.) y J. Alomar.— Atenuación del bacilo de Koch en el caldo
de patata: da Holanda Des de: 2180 Y ps deals cla ala TORES

Varillas (P.) (véase Madinavettia).

Villaverde.—La apreciación de pesos en niños normales y anormales.

60

116
143

62

95

134

35

17

140

AO

SESIÓN DEL 26 DE MARZO DE 1915

Á propósito de la reacción colorante de la sangre, recientemente... GILA);

propuesta por Baecchi Ñ SI ES E

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R. ÁLVAREZ DE TOLEDO ¡EA a. /2n

El Dr. Baecchi proponía no hace mucho tiempo (1) un nuevo método
de diagnóstico médico-legal de las manchas de sangre por el azul de ali-
zarina S.; y aunque todos los métodos colorantes de aquélla hoy conoci-
dos no son más que reacciones de posibilidad, creemos que no se deben
despreciar las tentativas de los médicos legistas que buscan una reacción
de esa clase, que con certeza sea específica del líquido sanguíneo. Sería,
si se consiguiese, un nuevo elemento que añadir á los métodos funda-
mentales utilizados al presente en los laboratorios de Medicina legal para
el diagnóstico genérico de las manchas de sangre.

He investigado la interesante reacción de Baecchi, y las conclusiones
que hoy publico son el resultado de ese trabajo experimental.

La técnica empleada ha sido la misma del autor, de la cual he aquí un
breve resumen:

En una probetita se colocan unos 2 cent. cúb. de una solución acuosa
de azul de alizarina S. (2), lo suficientemente diluída para que tenga un
color amarillo obscuro, á cuya solución se añade próximamente la mitad
de agua oxigenada al 3 por 100, agitando un poco y deslizando por las
paredes de la probeta la solución de la sangre ó el líquido sospechoso de
serlo. Si efectivamente se trata de ella, en la parte más alta de la mezcla
líquida formada aparece un hermoso color azul turquí, que al cabo de va-
rios minutos pasa á heliotropo, desprendiéndose durante toda la reacción
abundantes burbujas de oxígeno, tanto más numerosas cuanto más con-
centrada es la disolución de la hemoglobina. Si la cantidad de líquido

(1) Archives internationales de Méd. Leg., pág. 163 et suivantes, Mai 1918.
(2) Este reactivo no se conserva bien; debe, pues, prepararse siempre que se de-

- see utilizar.
1

2 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

sanguíneo ó el tamaño de la mancha de sangre son muy pequeños, se
puede practicar la reacción en un tubito de vidrio, casi capilar, en el que
se colocan los reactivos en el orden precedentemente indicado.

Nosotros hemos dirigido nuestras investigaciones á comprobar los tres
puntos siguientes: 1.”, sensibilidad del método; 2.*, su especificidad;
3.2, mecanismo de la reacción.

I. Por lo que se refiere á la sensibilidad del método de Baecchi, cree-
mos que si la disolución de la sangre está muy concentrada, la reacción
no es tan elegante como cuando está bastante diluída, porque el activo
desprendimiento de oxígeno producido por la acción catalizadora de la
sangre enmascara el color azul que caracteriza á aquélla.

Consideramos el de 1/500 ó, en todo caso, el de 1/1.000, el mejor título
de la disolución de la sangre. De ese modo la aparición del bello color
azul de alizarina es bien evidente.

Baecchi califica la sensibilidad de esta reacción como de 1 < 20,000.
Pero empleando azul de alizarina S. de la casa Grúbler no hemos obtenido
reacciones positivas nada más que hasta el 1/6.000, es decir, que á par-
tir de esta concentración de la disolución de la sangre no se produce el
citado color azul, sino un tinte amatista, que en las reacciones verdade-
ramente positivas sustituye, después de algunos minutos, al color azul
que primero se produce y que con el autor consideramos como funda-
mental en esta reacción.

IT. En cuanto á la especificidad del método de que hablamos, hemos
tratado de comprobarla resolviendo las dos cuestiones siguientes: 1.* El
azul de alizarina S. ¿produce la misma reacción con todos los derivados
de la hemoglobina? 2.? ¿Hay algunas substancias capaces de producir
una reacción idéntica á la de la hemoglobina?

Por lo que se refiere á los derivados de la hemoglobina, nuestros resul-

tados coinciden enteramente con los de Baecchi: la hematina, obtenida
por el procedimiento de Hamsik (1), ha producido una reacción idéntica
á la del pigmennto colorante de la sangre; lo mismo sucede con la hema-
toporfirina ácida, extraída por el alcohol clorhídrico, después de preci-

(1) Nos parece oportuno recordar aquí la técnica de dicho autor para preparar
este derivado de la hemoglobina : á 100 cent. cúb. de sangre se agrega 50 centí-
metros de lejía de sosa al 40 por 100; ebullición por tres á cinco horas en cápsula
de porcelana, reponiendo el agua de evaporación, y al final adicionando la canti-
dad suficiente para obtener el volumen primitivo. Filtración en frío por lana de
vidrio y al filtrado agregación de ácido sulfúrico diluido hasta reacción débil-
mente ácida. Diluyendo suficientemente (para 100 cent. cúb. de sangre 800-1.000
cent. cúb. de agua), toda la substancia colorante se precipita en seguida Separa-
ción del precipitado por decantación, lavado amplio con agua destilada caliente
(hasta que el agua del lavado deje de precipitar con el BaCls); desecación en baño
maria; pulverizamiento.

Ni ii a A

LA REACCIÓN COLORANTE DE LA SANGRE 3

pitada con el agua destilada. Hemos de reconocer, sin embargo, que la
coloración azul originada por la hematoporfirina es un poco diferente de
la determinada por la hemoglobina, y que lo mismo que la de la hemati-
na, tarda un poco más en aparecer que la del pigmento normal.

En armonía con esto, y coincidimos también con Baecchi en este pun-
to, si la mancha de sangre ha sufrido alteraciones importantes (sumisión
de la mancha á una temperatura de 150-170 durante media hora, acción
del tiempo, etc.), se puede obtener una reacción francamente positiva
mediante la extracción del derivado de la hemoglobina por el alcohol
clorhídrico.

Para investigar si hay substancias que produzcan la misma reacción
que la sangre hemos practicado ensayos con 170 cuerpos, y de ellos la
mayor parte las han originado negativas y algunos más ó menos po-
sitivas.

He aquí las substancias que han dado reacciones negativas :

Acido acético, ácido arsénico, ácido arsenioso, ácido oxálico, ácido
tártrico, ácido pícrico, ácido nítrico, ácido fosfo-túngstico, ácido fosfo-
molíbdico, ácido clorhídrico, agua regia, ácido sulfúrico, ácido yodhí-
drico, solución yodo-yodurada de Lugol, agua de bromo, agua de cloro,
tintura de yodo, tintura de agallas, yoduro de cadmio, bromuro de pota-
sio, cloruro mercúrico, cloruro estannoso, cloruro estánnico, ferrocianuro
potásico, ferricianuro de potasio, sulfocianuro potásico, nitrato de calcio,
sulfato de zinc, sulfato de cobre, sulfato magnésico, bisulfato potásico,
formiato sódico, nitrato bárico, cloruro potásico, clorato potásico, nitra-
to de uranilo, sulfato cálcico, sulfato aluminico-potásico, nitrato de po-
tasio, minio, citrato de hierro, tartrato fenico-potásico, nitrato de cobal-
to, cloruro de magnesio, cloruro de bario, formol, fenol, alcohol etílico,
reactivo de Giinsburg, solución alcohólica de fenolptaleina, reactivo de
Esbach; los productos de la maceración de las patatas, de los ajos, de
las cebollas, de las lechugas, de los limones, de los tomates, de los pi-
mientos, de las remolachas, de las escarolas, de las coles, de las naran-
jas; orina, orina albuminosa, esperma humano, pus, moco nasal, espu-
tos, heces fecales. Extractos flúidos de hojas de sen, de moras, de raíz de
ratania, de raíz de ipecacuana, de nuez de kola, de rábanos, de yemas
de abeto, de rosas rojas, de semillas de felandrio, de Kawa-Kawa, de
espino cerval, de gelsemio, de raíz de altea, de hojas de digital, de pun-
tas de espárragos, de corteza de quebracho blanco, de raíz de granado,
de acanttea virilis, de grosellas, de pino del Canadá, de quina, de esci-
la, de fumaria, de polígala, de adormideras, de valeriana oficinal, de
tusilago, de boldo, de raíz de cimicifuga racemosa, de raíz de colombo,
de cáscara sagrada, de piscidia erythryna, de viburno, de damiana, de

4 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

cáñamo indiano, de condurango, de hidrastis del Canadá, de hammame-
lis de Virginia, de drosera rotundifolia, de alquitrán, de bálsamo de
Tolú y de rizoma de tormentila. Tiosinamina, estovaína, clorhidrato de
heroína, sulfato de eserina, clorhidrato de cocaína, novocaína, clorhidra-
to de morfina, dionina, sulfato de atropina, nitrato de policarpina, cua-
sina, antipirina, cotoína, paracotoína, sulfato de quinina, sulfato de es-
parteína, papaína, aconitina amorfa, pioctanina, yoduro de sodio, bro-
muro de amonio, lactosa, salol, salicilato sódico, subacetato de plomo,
nitrato de plata, nitrato de bismuto, nitrato mercurioso, helmitol, nu-
cleína y cubebina.

De los cuerpos siguientes unos han producido reacciones semejantes á
las de la sangre, y otros reacciones que se parecen, al menos un poco, á
la de ésta.

1. Acido. crómico.......... Con la solución de alizarina sola produce un color
azul sucio, virando á verdoso. Con la solución de
alizarina más agua oxigenada, color azul muy
bello y muy intenso, transformándose pronto en
heliotropo.

2. Bicromato potásico...... Con la solución de alizarina sin agua oxigenada no
hay cambio de color, y con ella tinte azul muy in-
tenso, virando á amatista de tal modo, que en el
tubo de ensayo en que practicamos la reacción hay
de abajo arriba los siguientes colores: primero,
amarillo de la solución de alizarina; segundo, co-
lor azul turquí; tercero, color morado, y cuarto,
color amatista.

3. Cromato potásiCO....... Color ligeramente verdoso, teniendo ó no agua 0xl-
genada la solución de alizarina.
4, Yoduro potásicO........ Color, primero azul sucio, convirtiéndose bien pronto

en verde oliva; al mismo tiempo hay un intenso
desprendimiento de oxígeno.

5. Acido yódiCO........... Color azul intenso.
6. Nitrato mercúrico....... Color primero ligeramente verde, que después pasa
á tinte rosado.
1. Hidrato sÓdiCO .<..v.... Color verde intenso gue poco á poco pasa á azul tur-
quí persistente. ;
8. Hidrato potásico........ Igual reacción que el anterior.
9. Hidrato cálcico......... Id. id. 1d de
10. Hidrato básico...... cn A id. 1d Ada
11. Hidrato estróncico...... Id. id. 1d. - 1d.
12. AmoONÍCI e dde Id. id. 1d. 1d:
13. Sulfhidrato amónico..... 1d. id. id... ; 1d
14. Cianuro potásico........ Id. id. 1d. 1d.
15. Carbonato sódico....... Id. id. 1d? 1d
16. Bicarbonato amónico.... 1d. id. 1 AA

VE Arrid id. eb

LA REACCIÓN COLORANTE DE LA SANGRE 5

18, Arseniato sódico....... . Color verde intenso, que después se transforma en
azul turquí persistente.

19. Perhidrol de magnesio... Idéntica reacción que los cuerpos anteriores.

.

20. Perborato sódico........ Id. id. 1d 1d. 1d.

21. Cacodilato sódico...... . La misma reacción que los cuerpos anteriores, pero
mucho más lenta en producirse.

22. Permanganato sódico.... Color azul verdoso, que vira á pardo verdoso, des-

prendiéndose oxígeno. En conjunto la reacción es
bastante semejante á la de la sangre.

23. Fosfato sódico.......... Color ligeramente verdoso.

24. Cloruro féntco........ .. Color verdoso obscuro.

25. Hiposulfito sódico....... Color verde.

26. Acetato de 2ínC......... Color violeta obscuro que se precipita.

27. Permanganato potásico.. Igual reacción que el permanganato de sodio.
28. Permanganato de zinc... ld. 1d. id id. id.

De los cuerpos precedentes hay que eliminar, porque la reacción no es
igual á la que la sangre produce, los siguientes: eromato potásico, yodu-
ro potásico, fosfato sódico, cloruro férrico, acetato de zinc é hiposulfito
sódico.

Los otros, al contrario, sí producen reacciones que recuerdan mucho á
lo que con el azul de alizarina S. produce; aun así y todo, creemos que
se pueden establecer fácilmente diferencias.

De todos esos cuerpos, aquellos cuyas reacciones guardan más simili-
tud con la del líquido hemático son el ácido crómico y el bicromato po-
tásico; pero en puridad de verdad hay algunas desemejanzas, por ejem-
plo: el color que primero aparece es violeta amatista y después azul,
Por otra parte, en el supuesto, con seguridad improbable, de que una
mancha de bicromato ó ácido crómico pudiera confundirse con una de
sangre, hay una reacción muy sencilla que nos permitirá establecer el
diagnóstico: la reacción es ésta: tratando el producto de la maceración
de la mancha por unas cuantas gotas de ácido sulfúrico y un poco de
agua oxigenada, si la mancha es de sangre, nada pasa; mas si es de
ácido crómico ó de bicromato se produce en seguida un bellísimo color
azul turquí.

Los permanganatos, como hemos indicado, producen con el azul de
alizarina S. reacción que recuerda á la de la sangre; nos parece que no
es del todo idéntica. De todos modos, en el supuesto que pudieran con-
fundirse, no olvidaremos que el producto de la maceración de la mancha
de un permanganato sometido á la acción del ácido sulfúrico y de un
reductor (SO,, sulfito sódico, sulfato fenoso, etc.) se decolora, y al de
una mancha de sangre nada le sucede.

Finalmente, los demás cuerpos que van apuntados en la lista que an-
tecede son de reacción francamente alcalina; y si bien es cierto que pro-

6 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

ducen un color azul como el que la sangre determina, no olvidaremos
que es precedido por un intenso color verde y no es seguido de heliotro-
po, como en el caso del líquido hemático, aparte que no es posible que
cuerpos casi todos blancos puedan hacer pensar en la hemoglobina,

III. En cuanto al mecanismo de esta reacción, estamos de acuerdo
con Baecchi. El distinguido médico legista italiano afirma que la apari-
ción del color azul que se produce al añadir la disolución acuosa de san-
gre á la mezcla de azul de alizarina y agua oxigenada se debería á una
separación de los dos componentes de azul de alizarina S., descomposi-
ción debida á la acción del oxígeno del agua oxigenada, desprendido
por la influencia catalizadora de la sangre.

Esta es, en efecto, también nuestra opinión, que creemos confirmada
por las consideraciones siguientes :

Del azul de alizarina propiamente dicho, cuerpo insoluble en el agua,
se obtiene el azul de alizarina soluble (azul de alizarina S.), por medio
de la adición de dos moléculas de sulfito ácido de sodio.

Desprendiéndose el oxígeno naciente del agua oxigenada por la in-
fluencia catalizadora de la sangre, las dos moléculas de bisulfito sódico,
insertadas en la de azul de alizarina insoluble, se separan, oxidadas y
transformadas en sulfato sódico.

Al final de la reacción, se produce azul de alizarina insoluble + sulfato
sódico + agua.

Pero como el azul de alizarina es insoluble en el agua, es presumible
que en ella permanezca disuelta en el método de Baecchi,-ya porque la
sangre le comunique esta propiedad, ya porque continuando la acción
oxidante del oxígeno se transforme en seguida en diversos derivados so-
lubles, pues en verdad el color azul persiste bien poco tiempo y es re-
emplazado, según afirmamos en párrafos precedentes, por tintes diversos
que cambian del azul al amatista pálido.

La experiencia siguiente nos parece confirmar la opinión expuesta
acerca del mecanismo de la reacción de Baecchi. Después de someter el
azul de alizarina S. á la acción de un agente alcalino ó á la sangre, más
el agua: oxigenada, y filtrando repetidas veces, en el filtrado se puede
reconocer la presencia de un sulfato por medio de una sal soluble de
bario, que produce en seguida un precipitado blanco, insoluble en el
ácido clorhídrico, que, como es natural, es de sulfato bárico. Apresuré-
monos á indicar que la sal de bario, en cuestión, no precipita con la solu-
ción acuosa de azul de alizarina $.

IV. La reacción de Baecchi tiene también aplicaciones á la clínica.
Hasta el presente sólo hemos podido emplearla en la demostración de la
hemina en el jugo gástrico, sometiendo el residuo de éste, que queda

ARA

DIAGNÓSTICO MÉDICO-LEGAL DEL ESPERMA 7

después de filtrarlo, á la acción extractiva del alcohol clorhídrico, y con
esta previa filtración, practicando el reconocimiento, siendo el resultado
idéntico al obtenido con la hematina preparada por el procedimiento de
Hamsik.

En resumen, podemos afirmar que, aunque la reacción de Baecchi no
es de una decidida especificidad, porque el ácido crómico y el bicromato
potásico prodúcenla muy parecida, es de gran utilidad, porque las re-
acciones de esos dos cuerpos pueden diferenciarse muy bien de la de la
sangre, según indicamos en párrafos anteriores y, además, porque es de
una técnica en extremo sencilla. Recordemos también que ninguna de
las otras reacciones colorantes de la sangre tienen tan pocos motivos de
error. Afirmemos, pues, que la reacción propuesta por Baecchi merece ser
colocada á la cabeza de las de su clase.

(Trabajo del Laboratorio de Medicina legal de la Universidad
de Granada. Prof. Lecha-Marzo).

———— HRSÉ ———_———

Sobre el valor de la reacción anafiláctica en el diagnóstico médico-legal
del esperma (1)

POR

R. ÁLVAREZ DE TOLEDO

Al escribir estas notas, basadas en experiencias personales, nos ha
movido el propósito de contribuir con nuestro modesto trabajo, además
de aumentar la literatura española sobre este problema de la anafilaxia
para el esperma, también la investigación de dos puntos importantes:
la especificidad de la reacción y la posibilidad de aplicarla al diagnóstico
individual del líquido espermático.

Con el objeto de estudiar el asunto de manera metódica, sucesivamen-
te trataremos de los tres puntos siguientes :

1. ¿El esperma está dotado de la propiedad de producir la reacción
anafiláctica ?

2.” Especificidad de la reacción.

3.” ¿Es posible el diagnóstico individual del esperma por medio de la
reacción de anafilaxia ?

I. ¿El esperma es susceptible de producir la reacción anafiláctica ?

(1) Trabajo del Laboratorio de Medicina legal de Granada.

8 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Pfeiffer (1), después de estudios detenidos acerca de la anafilaxia para
el esperma, sienta la afirmación de que la albúmina de aquél goza de un
poder sensibilizante muy escaso, y que por este motivo cree que no es
susceptible de ser aplicado dicho método biológico al reconocimiento de
ese líquido orgánico.

A pesar de la afirmación del sabio alemán, otros autores han demos-
trado que el esperma goza de poder sensibilizante adecuado para que la
reacción merezca tener aplicaciones á la medicina forense.

Ya Dungern y Hirschfel demostraron que el fenómeno de Arthus se
producía por medio de la inyección de una emulsión del testículo del
buey ó del conejo en el tejido conjuntivo subcutáneo de la oreja de un
cavia sensibilizado con esa misma*emulsión varios días antes. J. Minet
y J. Leclercq (2), de una serie de experiencias muy bien conducidas,
concluyen que :

«El esperma humano inyectado á cobayas á la dosis de */, de centíme-
tro cúbico las sensibiliza al cabo de una quincena de días con respecto á
una segunda inyección del mismo líquido.

»La inyección desencadenante necesita para producir accidentes ana-
filácticos típicos una dosis mínima de 0'5 cent. cúb. de esperma; la dosis
óptima parece ser de 1 cent. cúb.».

Nosotros hemos realizado algunas experiencias para dilucidar el mis-
mo punto, y he aquí la técnica empleada y los resultados conseguidos:

Técnica.— Tratándose de fenómenos de anafilaxia han de intervenir,
naturalmente, dos inyecciones: una primera, la denominada «sensibili-
zante », «preparante» ó «anafilactizante», y una segunda, la llamada
«tóxica» Ó «desencadenante ».

La primera inyección la hemos practicado siempre por vía subcutánea
en la región abdominal. :

A varios de los conejillos de Indias (animal al que hemos dado la pre-
ferencia con respecto á los demás utilizados en los Laboratorios, especial-
mente á los ratones blancos, palomas y gallinas) les hemos inyectado
0'25 cent. cúb. de esperma humano +0'75 de suero artificial isotónico.

En todos ellos la inyección desencadenante ha originado fenómenos
típicos de anafilaxia. Parece, pues, que la dosis indicada, es decir, 1 cen-
tímetro cúbico de esperma diluído al cuarto, es suficiente para originar
la hipersensibilidad.

Después de un período de incubación, que ha oscilado entre quince y
veinte días, hemos practicado la segunda inyección, utilizando para ello

(1) Pfeiffer: Zur organspezifitát der Uferempfidlindlich Keit (Zeitsch r. f. Inmmu-
nitatsforschr. Bd. VITI, Het. 3, 1911).
(2) Comptes rendus de la Soc. de Biologie, tomo XX, pág. 506, Abril 1911.

o

DIAGNÓSTICO MÉDICO-LEGAL DEL ESPERMA 9

de 0'80 á 1 cent. cúb. de esperma humano no diluído y sirviéndonos de
la vía intracardíaca.

Los síntomas observados han sido los clásicos del shock anafiláctico,
y aquí, como en todas las experiencias de anafilaxia, hemos encontrado
desde la forma ligera, con escaso número de síntomas (convulsiones clá-
sicas pequeñas, micción, defecación y, sobre todo, descenso pronunciado
de temperatura), hasta la forma mortal, con sus tres variedades: fulmi-
nante, aguda y rápida, pasando por la forma muy grave, no mortal, en
la que el cuadro sintomático es intermedio entre las de las otras dos for-
mas extremas indicadas (descenso muy pronunciado de temperatura,
leucopenia notable, convulsiones generalizadas, vértigos, micciones y
defecaciones repetidas, lagrimeo, tos, etc., y restablecimiento final).

Las lesiones que las necropsias de los conejillos muertos de shock ana-
filáctico por el esperma han permitido encontrar, coinciden con las obser-
vadas en todas las demás experiencias de ese orden. Allí, como aquí,
hemos visto que los pulmones están enfisematosos y fuertemente dilata-
dos; que su observación microscópica nos ha permitido confirmar el hecho
ya apuntado por otros investigadores de que los alvéolos pulmonares
están fuertemente dilatados y hasta desgarrados en muchos puntos; que
el miocardio puede estar ya anémico y pálido en unos casos, ya más
frecuentemente hemorrágico y edematoso, etc., etc.

Nuestras experiencias han sido realizadas en 21 conejillos de Indias,
que hemos distribuído en tres grupos, cada uno de los cuales ha sido de-
dicado á dilucidar uno de los tres puntos, de que en el presente artículo
nos ocupamos.

El primer grupo de seis nos ha proporcionado los resultados que indi.-
camos en el cuadro siguiente :

á, Período

Z 1 DOSIS

E | PESO DOSIS SENSIBILIZANTE 0 A RESULTADOS
E incubación. | TÓXICA

[co] .

1 ¡230 gs./0'25 esp. hum.” -0'75 suero artif.119 días|1 c. c.esp.|Forma ligera: Des-
censo t. hasta 37”.

AN COS AAA 15 días| 0'80 » [Shock muy grave:
Desc.*t. hasta 36".
A A 15 días| 0'80 » |Muerteen3 minutos
A A 15 días|1 c. c. » [Muerte en 1 hora.
A NAO 20 días|1 e. c. » [Muerte en 1 hora.
17 [400 gs.|Idem id...... AL ....M6días|l c. e. »> |[Muerteen 8 minutos

10 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Vemos, pues, que de 6 cobayas sensibilizados con esperma han muer-
to 2 fulminantemente al desencadenarlos con el mismo medio albumi-
noideo ó sean el 33'34 por 100; otros 2 han muerto en una hora, lo que
supone una proporción procentual también de 33'33 por 100; uno ha pre-
sentado un shock muy grave (16'67 por 100) y otro sólo ha estado ligera-
mente indispuesto (16'66 por 100).

En resumen, podemos afirmar que el esperma presenta un notable po-
der sensibilizante, dado que en la mayoría de los casos se produce la
muerte, pues éstos representan un 66'67 por 100 de las observaciones re-
cogidas y el resto, 33'33 por 100, corresponde á los que no fallecieron,
aunque presentaron un shock anafiláctico típico.

Afirmemos, pues, que la reacción anafiláctica puede ser aplicada al
líquido seminal de idéntico modo que á la sangre.

II, Especificidad de la reacción.

Una vez demostrado que el esperma goza de poder anafilactizante, era
necesario saber si la anafilaxia para el esperma es específica, es decir,
como preguntan Dervieux y Leclerq, si el esperma de un animal sensi-
biliza con respecto al de otro y si el esperma de un individuo sensibiliza
para la sangre del mismo ó de otro.

Para averiguar lo primero, aunque fuera sólo en esbozo (pues en bio-

logía para sentar una afirmación son precisas numerosísimas afirmacio-.

nes que la confirmen) hemos utilizado tres cobayas, en los que hemos ex-
perimentado del modo siguiente:

1.2 Cavia núm. 5, peso 305 gramos, sensibilizado con 1 centímetro
cúbico de emulsión de testículo de carnero, en la que la observación
microscópica confirmó la riqueza de espermatozoides; á los veinte días
es desencadenado con 1 cent. cúb. de esperma humano no diluído,
sin que experimente el más leve trastorno, ni aun descenso de tempe-
ratura.

2. Cavia núm. 18, peso 309 gramos, sensibilizado con testículo de
toro, es desencadenado con esperma humano, sin que experimente tras-
torno de ningún género.

2 Cavia núm. 19, peso 425 gramos, CC RibsaaS con 1 cent. cúb. de
oa de testículo de macho cabrío, rico en espermatozoides, es des-
encadenado á los dieciocho días con 1 cent. cúb, de esperma humano no
diluído, y este cavia, del mismo modo que los dos anteriores, no sufre
ningún síntoma de shock anafiláctico.

Nuestra limitada experiencia en este asunto nos permite afirmar que
por lo menos para el esperma humano no sensibiliza á los cobayas ni el
esperma de toro, ni el de carnero, ni el de macho cabrío. De suponer es

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DIAGNÓSTICO MÉDICO-LEGAL DEL ESPERMA 11

que el hecho puede hacerse extensivo á las demás variedades del es-
perma (1).

Pero la demostración de la especificidad de la anafilaxia para el esper-
ma no debe limitarse á lo apuntado, sino que, como decimos al principio
de este parágrafo, hay que averiguar también si es posible ó no la sensi-
bilización para el esperma por medio de la sangre del mismo animal á
quien aquél pertenece, y conviene no olvidar que en la anafilaxia, lo
mismo que en la precipitación, pueden ocurrir tres casos: que coincida
con una especificidad orgánica una especificidad genérica, que exista una
especificidad orgánica absoluta y falte completamente la especificidad
genérica, y que exista una especificidad genérica, pero sin coincidir con
una especificidad orgánica.

Dervieux y Leclerq (2), al ocuparse de este asunto, dicen lo siguiente:

«Los animales preparados para el esperma humano permanecen indi-
ferentes á la inyección intracardíaca de líquido testicular de conejo, de
cobaya, de toro, de la misma manera que á la inyección extracardíaca
de 1 cent. cúb. de suero sanguíneo humano, dosis siempre suficiente para
desencadenar la anafilaxia en animales sensibilizados para la sangre.

» Estas experiencias responden suficientemente á las objeciones de
ciertos autores, según las cuales la anafilaxia, como, por lo demás, todos
los procedimientos biológicos, puede únicamente servir para determinar
el origen animal de una albúmina, pero es totalmente incapaz de dife-
renciar dos albúminas procedentes del mismo animal».

Nuestras experiencias (véase más adelante) no coinciden ciertamente
con las de los autores franceses, y nosotros de ella inducimos que la san-
gre humana sensibiliza para el esperma también humano y, viceversa,
que el esperma sensibiliza para la sangre humana.

No olvidamos, por otra parte, sin embargo, que J. Minet y L. Bru-
yant (3) han demostrado, siguiendo una táctica especial, que la anafila-
xia para los extractos de órganos es diferente específicamente de la ana-
filaxia sérica; pero aparte que esto necesita la comprobación de las ex-
periencias de contraste, nosotros, que por escasez de medios, no hemos
podido utilizar las técnicas de esos autores, sino que nos hemos tenido
que limitar al empleo de las técnicas clásicas, hemos logrado resultados
que, como acabamos de afirmar, son en un todo opuestos á los consegui-

(1) Claro es que lo mismo que en las otras clases de albúminas, en el esperma
se cumple el hecho de que la anafilaxia, como los otros procedimientos biológicos,
no permite distinguir uno de otro el procedente de animales de grupos zoológi-
cos muy inmediatos y, por lo tanto, que no podremos, por ejemplo, averiguar si
el esperma es de hombre ó de antropoide, etc.

(2) Le diagnostic des taches en Medicine légale. París, 1912.

(3) C. R. Soc. de Biología, tomo LXXI, pág. 166, 22 Julio 1911,

192 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

dos por Minet, Leclercq y Dervieux en las investigaciones de que en lí-
neas precedentes hemos hecho mención.

III. ¿Es posible el diagnóstico individual del esperma por medio de la
reacción anafiláctica ?

T. Maestre y A. Lecha-Marzo (1) tuvieron los primeros la original idea
de ensayar un método de reconocimiento individual del esperma, basado
en la reacción de anafilaxia.

Sus experiencias, muy interesantes, consistieron, según ellos dicen,
en lo siguiente: «En nuestra primera nota, publicada en Julio de 1913,
declarábamos que tal vez se pudiese ir más allá del diagnóstico de espe-
cie, é invitábamos á que se ensayase el método siguiente para la dife-
renciación del esperma :

«Inyectamos á un conejo de Indias por vía intracardíaca sangre hu-
mana, y empleamos como desencadenante la inyección intracardíaca de
esperma, también humano. Se produce un choque anafiláctico típico si
la sangre preparante y el esperma desencadenante corresponden al mis-
mo individuo. |

» Cuando la sangre y el esperma pertenecen á individuos distintos, la
anafilaxia no tiene lugar.

» Ahora hemos pensado invertir la experiencia : á dos series de coba-
yas hemos inyectado por vía intracardíaca esperma humano (0'25 centí-
metros cúbicos), y pasados quince días inyectamos el suero en cantidad
de 1 cent. cúb. La anafilaxia se produjo en los animales inyectados las
dos veces, con material procedente del mismo individuo.

» En unos casos se ha producido la muerte súbita, en otros el shock
grave ó un descenso de temperatura ».

Poco después el Dr. Mayoral, de Madrid, repetía estos experimentos.
En una serie coincidieron con los de T. Maestre y A. Lecha-Marzo. En
otra serie, por el contrario, los resultados fueron dudosos.

Nosotros también hemos reproducido estos experimentos, y á ese efec-
to hemos utilizado dos series de cobayas, en número de seis cada una.
La primera fué sensibilizada con esperma humano y desencadenada con
sangre del mismo individuo que había proporcionado el esperma y con
sangre de individuos diferentes; la segunda fué anafilactizada con san-
gre de sujetos diversos y desencadenada con esperma de un mismo su-
jeto. Los resultados conseguidos fueron los siguientes :

(1) Gaceta Médica del Sur, 1913, y Arius de l'Institut de Ciencies. Barcelona, 1914.

15

DIAGNÓSTICO MÉDICO-LEGAL DEL ESPERMA

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14 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Analizando los datos precedentemente enumerados podemos ver que
nuestras experiencias, como las de T. Maestre y A. Lecha- Marzo, son
opuestas á las de Minet y Leclerq; pero no coinciden con las de los pro-
fesores españoles en lo que respecta al diagnóstico individual del es-
perma.

En efecto, de los seis cobayas sensibilizados con esperma, los cuatro
que fueron desencadenados con sangre del mismo individuo que propor-
cionó el esperma, uno sólo (25 por 100) murió, otro (25 por 100) presentó
un shock anafiláctico muy grave, pero no mortal, y dos (50 por 100) pa-
decieron un shock ligero. De los otro dos cobayas desencadenados con
sangre de sujetos diferentes al que dió el esperma, uno murió y el otro
presentó un shock anafiláctico muy grave. Los resultados, pues, son sen-
siblemente iguales en uno y otro caso. Apresurémonos á indicar que en
los casos de muerte la autopsia no reveló defecto alguno de técnica.

En la otra serie de cobayas sensibilizados con sangre y desencadena-
dos con esperma, de los tres conejillos sensibilizados con sangre del mis-
mo individuo que proporcionó el esperma, dos murieron (66'67 por 100) y
uno (33'33 por 100) tuvo un shock anafiláctico muy intenso (33'33 por
100). Vemos, pues, que en los dos grupos de nuestra segunda serie de
experiencias, los resultados coincidieron entre sí y coincidieron igual-
mente con los obtenidos en la primera serie, pero no con las conclusio-
nes conseguidas con su original € interesante procedimiento por T. Maes-
tre y A. Lecha-Marzo, sin que afirmemos definitivamente que las invali-
den, pues opinamos, volvemos á repetirlo, que para asentar una afirma-
ción en biología se necesita un verdadero acúmulo de hechos que hablen
en tal sentido.

Podemos inducir de lo apuntado en todos los párrafos precedentes que
el método de la anafilaxia sirve muy bien para el reconocimiento del ori-
gen de las manchas del esperma, tanto más cuanto las conocidas expe-
riencias de Rosenau y Anderson han demostrado que los agentes quími-
cos y físicos habituales no modifican las propiedades preparantes de
aquél. En cuanto á la técnica 4 seguir, es la de sensibilizar los cobayas
con 1 cent. cúb. de la maceración en suero artificial de una mancha de
esperma, desencadenándolos á los quince ó veinte días con 1 cent. cúb.
de esperma humano diluído.

Y para terminar: el hecho observado por Schenk Dumbar, Gráfenberg y
Tiers, de que los peces y las hembras de los conejos y cavias están hiper-
sensibilizados á los espermatozoides de los machos de la misma especie,
bemos podido confirmar que es un poco más general, pues hemos visto que
la inyección del esperma humano á los cavias machos nada les produce
y, en cambio, á las hembras les origina un shock anafiláctico evidente,

HEMORRAGIAS DEL LÓBULO ANTERIOR DE LA HIPÓFISIS 15

no muy intenso, con algunas convulsiones clónicas, erizamiento de pelos
y, sobre todo, descenso de temperatura, que casi siempre llegó de 37%, 64
38%, Nosotros no sacamos consecuencia ninguna del hecho; no hacemos
más que apuntarlo, brindándoselo á los tocólogos.

DISCUSIÓN

El Dr. Lecha=Marzo declara que los trabajos experimentales de Alvarez de To-
ledo confirman el hecho de que con la sangre y el esperma humanos empleados res-
pectivamente como preparantes y desencadenantes (y viceversa) se pueden observar
los fenómenos de anafilaxia, y que estos experimentos hacen perder por el momento

-la esperanza de que la Medicina legal posea un método que permita la diferencia-

ción individual del esperma. Deberían hacerse otros experimentos, empleando para
el desencadenamiento menores cantidades de esperma.

Sin embargo, esta primera tentativa, hecha en un laboratorio español, ha sido re-
cogida ya en los laboratorios extranjeros. De Dominicis (de Milán) envía al Instituto
de Medicina legal de la Universidad de Madrid una comunicación sobre las «Indi-
caciones individuales de las manchas de esperma».

——— ÉL ——

Hemorragias del lóbulo anterior de la hipófisis

POR

GONZALO R. LAFORA

Las hemorragias de la hipófisis son muy raras. Más frecuentes son los
procesos embólicos. Según Simmonds (1), éstos se producen en el lóbulo
anterior y en la neurohipófisis ó lóbulo posterior.

Para estudiar estas hemorragias, conviene conocer la irrigación san-
guínea de la hipófisis. El primer estudio de esta vascularización fué
hecho por Luschka (2), según el cual, el lóbulo anterior de la hipófisis es
irrigado por tres clases de arteriolas, á saber: ramitas procedentes de la
carótida durante su curso en el seno cavernoso; una ramita que nace de
la carótida, va al infundíbulum y de aquí envía ramas á la hipófisis; y,
finalmente, ramitas finas de la red pial que rodea al infundíbulum.

Sabemos, pues, desde Luschka, que la hipófisis tiene una abundante

(1) Simmonds: Embolische Prozesse in der Hypohyisis. Virchow's Archiv., t. 217,
fascículo 2, 1914.
(2) Der Hirnanhang und die Steissdrusse, pág. 46. Berlín, 1860.

16 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

red vascular, principalmente en su lóbulo anterior. Sin embargo, su es-
tudio fué poco completo.

Más detallado es el trabajo de Herring (1), pero se redujo á la hipófisis
de los gatos, distinguiendo entre la irrigación vascular del lóbulo an-
terior y del posterior. Posteriormente, Dandy y Goetsch (2) han descrito
detalladamente la irrigación vascular de la hipófisis en los perros. Según
ellos, la parte anterior recibe unos 18 ó 20 pequeños vasos, que con-
vergen á ella desde el círculo de Willis, y los cuales abocan á canales si-
nuosos y dilatados, próximos á las células glandulares. La sangre pasa
de estos canales á las venas del tallo hipofisario, que desembocan en un
círculo venoso situado por encima del círculo de Willis y que termina en
la vena magna de Galeno. La parte intermedia recibe sus vasos del tallo,
del lóbulo posterior y del cerebro (vasos piales de la base). El lóbulo pos-
terior (neurohipófisis) recibe su irrigación de un vaso medio formado por
la unión de dos laterales procedentes de cada carótida interna.

Benda (3), que ha hecho numerosas investigaciones en la hipófisis hu-
mana, considera que la irrigación del lóbulo anterior está principalmente
provista por dos vasos. Son dos arterias que nacen de la carótida interna
en su trayecto por dentro del seno cavernoso, y entran en la glándula
por detrás, abajo y afuera y ascienden entre el lóbulo anterior y el pos-
terior, y, después de emitir pequeñas ramillas, termina en una gruesa
rama que se hunde en el medio de la glándula. Benda la denomina arte-
riola propia hypophyseos. Simmonds cree cierta esta descripción de Ben-
da, que explica el que las embolias arteriales del lóbulo anterior produz-
can reblandecimientos que comprenden casi todo este lóbulo. Para
Simmonds, en el lóbulo anterior faltan las anastomosis suficientes entre
las ramificaciones vasculares, y son, por tanto, arterias terminales fun-
cionalmente, lo contrario de lo que sucede en el lóbulo posterior. Por eso
en las embolias bacterianas de los vasos del lóbulo anterior, ó no produ-
cen reacción ó dan lugar á un infarto anémico igual que el que producen
las embolias no bacterianas, mientras que las embolias bacterianas del
lóbulo posterior producen pequeños focos hemorrágicos ó abscesos.

Esta naturaleza terminal de los vasos del lóbulo anterior, semejante á
la de los vasos terminales de la corteza cerebral y de los núcleos grises,
vasos tan estudiados por Duret y Heubner, hace que los mismos sufran
íntegramente los cambios bruscos en la presión sanguínea. De aquí que

(1) Herring: The histological appearances of the mammalian pituitary body.
Quarterly Journ. of exper. Physio!l., pág. 154, 1908,

(2) Dandy y Goetsch: The blood supply of the pituitary body. Amer, Journal of
Anatomy, vol. 11, pág. 137, 1910-1911.

(3) Citado por Simmonds en su trabajo ya mencionado.

Gonzato R. Larora: Hemorragias del lóbulo anterior de la hipófisis.

Fig, 1. — Hemorragia de la parte superior del lóbulo anterior ó glandular
de la hipófisis.

A, lóbulo anterior ó glandular.

B, hemorragia.

C, lóbulo posterior ó parte nerviosa (neurohipófisis).
D, tallo de la hipófisis doblado.

A AS
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A A e e

ES

BACILO DE KOCH EN' EL CALDO DE PATATA DE HOLANDA 17

sea más fácil en ellos las hemorragias que en los del lóbulo posterior.

Son, sin embargo, muy raros los casos de éstas que se conocen. Mara-

ñión (1) ha descrito uno en un hombre de cuarenta años con síndrome de
Fróhlich. Posteriormente, Falta ha descrito otro.

En nuestro caso se trataba de una mujer aparentemente normal, pero
convaleciente de una fiebre tifoidea, y que hallándose cuidando en el
hospital á una hija enferma de sarampión, se puso mala y murió súbita-
mente. Hecha la autopsia se encontró una hemorragia extensa de la base
del cerebro, en el lóbulo izquierdo, y otra hemorragia que comprendía la
mitad superior del lóbulo anterior de la hipófisis.

La misma causa desconocida (¿tóxica?) que habia dado origen á una
fragilidad excesiva de los vasos terminales del cerebro, y por tanto, á su
rotura al aumentarse la presión sanguínea, originó en este caso un pro-
ceso semejante en las otras arterias terminales, al menos funcionalmen-
te, ó sea en las arterias del lóbulo anterior de la hipófisis.

El caso presente tiene, pues, interés, por confirmar la hipótesis de
Simmonds sobre el carácter terminal de dichas arterias.

(Del Laboratorio de Medicina Legal de la Universidad de Madrid).

HUYE

Atenuación del bacilo de Koch en el caldo de patata de Holanda

POR

R. TURRÓ Y J. ALOMAR

Y

En nuestra comunicación á la Société de Biologie (2) hacíamos constar
que el bacilo tuberculoso, cultivado en caldo de patata de Holanda, era
de una germinación más precoz que en los medios hasta entonces em-
pleados; formaba un ligerísimo velo sumamente frágil y, además, que

los bacilos podían fácilmente homogeneizarse por no encostrarse los
unos con los otros, lo cual facilitaba los ensayos de la reacción agluti-

nante. Hacíamos constar también que en ese medio, exento de materia
albuminoidea, podían obtenerse las tubereulinas en mejores condiciones
que en los ordinarios.

Un hecho inesperado se nos puso de manifiesto respecto del bacilo tu-
berculoso, cultivado en esta forma: su virulencia se atenúa rápidamente,
trátese del bovino ó trátese del humano. Entre el tercero y cuarto paso

(1) Marañón: Lesiones de la hipófisis en un caso de obesidad é hipoplasia geni-

A tal. BoLerín DE LA SocieDaD EsPAñoLA DE BroLoGía, núm. 4, Mayo 1911.

(2) Seance 15 Mai 1912. Presentada por el Profesor E. Gléy. Paris.

18 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑÓLA DE BIOLOGÍA

el fenómeno ya se acusa de una manera ostensible, sin que los bacilos
pierdan sus caracteres morfológicos y sus propiedades ácido-resistentes.
Inoculados por la vía subcutánea á la dosis de 2 á 5 miligramos, deter-
mina una infección local muy cireunscripta las más de las veces, y
mientras los cobayos testigos mueren en plazos algo variables, un gran
número de los primeros resisten á la generalización de la infección, que-
dando con lesiones esclerósicas, que perduran, al parecer, indefinida-
mente. Si la inoculación de la misma dosis de cultivo se practica por la
vía intravenosa, el cobayo pierde de buenas á primeras en peso, pero se
rehace luego, restableciéndose completamente. Sacrificados estos anima-
les entre las tres y cuatro semanas, acusan una tuberculosis microscópi-
ca acantonada en el hígado, y en el pulmón más principalmente, ó en
los riñones; mas si son sacrificados entre los dos y tres meses no se ob-
servan más que lesiones cicatriciales, y el animal ó parece curado ó
muere con notable retraso respecto de los testigos. No reproducimos las
cifras del dietario del Laboratorio de todas estas observaciones por acu-
sar una gran variabilidad en los plazos; lo único que resulta claro de
su conjunto es que la muerte de los animales infectados con estos culti-
vos de tercer paso se retrasa respecto de los testigos que lo fueron con
los ordinarios, ó bien que no mueren, ya porque la infección reviste una
forma crónica, ya porque se curen.

En vista de los hechos apuntados, era natural creer que, á partir del
tercer paso, el de bacilo tuberculoso se atenúa en los caldos glicerinados
de patata de Holanda. La atenuación completa no pudo obtenerse hasta
llegar al sexto y séptimo paso. Su inoculación subcutánea en los coneji-
llos de Indias ó en los conejos no determina más que la formación de un
nódulo local, sin que por la palpación ó por la necropsia pueda apreciar-
se la infección de los ganglios inmediatos; la inoculación por la vía in-
travenosa no determina ningún efecto ostensible. Es de advertir que es-
tos cultivos presentan los caracteres típicos del bacilo de Koch; nadie
diría que son inofensivos vistos en la platina del microscopio.'

Un lote de seis conejos inoculados con 2 miligramos de cultivo del
quinto paso por la vía intravenosa fué reinoculado con bacilo tuberculo-

so virulento al cabo de dos meses, con los testigos correspondientes. En
general, hay un retardo en la muerte de los primeros con respecto á la
de los segundos; pero en dos de ellos (cinco y ocho días) es tan poco
acusado y las lesiones necrópsicas son entre,unos y otros tan semejan-
tes, que no es posible sacar del experimento ninguna conclusión positi-
va. El fracaso nos movió á repetirlo en un lote de conejos, á los que re-
vacunamos al cabo de dos meses y al cabo de cuatro, y cuando esperá-
bamos terminase el plazo para la cuarta revacunación, estos conejos, con

oa Es Ñ
A MAA

VARIACIONES FISIOLÓGICAS DEL RETÍCULO DE GOLGI 19

otros muchos, nos fueron robados. Ahora procedemos de nuevo á la re-
petición del experimento.

La pérdida de la virulencia de estos cultivos es simultánea, como es
natural, con la pérdida de la toxicidad de las tuberculinas que de ellos
se obtienen. Su ensayo en la clínica demuestra que no producen la re-
acción febril que determinan las demás aun en el caso de forzarse la do-
sis hasta 0'50 y 1 cent. cúb. De las observaciones clínicas hasta hoy re-
cogidas parece desprenderse que producen en la mayoría de los enfer-
mos á quienes se aplican un aumento de peso y, además, un sentimiento
de euforia, ó siquiera sea de bienestar, que no se observa en las demás;
mas respecto á la modificación favorable de las lesiones, las opiniones
discrepan mucho y, en general, son pesimistas. La eficacia curativa de
estas nuevas tuberculinas dista mucho de estar probada.

(Trabajo del Laboratorio Bacteriológico Municipal de Barcelona).

AQÉ

Variaciones fisiológicas del reticulo de Golgi en algunos elementos
epiteliales y mesodérmicos

PUR

3 ? S. R. CAJAL

Láminas l y Il.

Variaciones en las células glandulares. — La posibilidad de que las cé-
lulas glandulares experimenten cambios relacionados con las fases del
acto secretorio ha sido indicada para el páncreas y glándulas salivares
por Negri, si bien confesando no haber logrado sorprender mutaciones
evidentes correlativas de los diversos momentos fisiológicos. Más afortu-
- nado, Tello (1) reconoce, en las glándulas sebáceas y la mamaria huma-
nas, variaciones morfológicas positivamente relacionadas con la función
- secretora. Así, en la mama encuentra el retículo en dos estados sucesi-
vos: en fase de hipertrofia y en fase de desagregación y dispersión á im-
pulsos de las gotas grasientas. En fin, recientemente Kolster (2) ha ob-
- servado dislocaciones y metamorfosis de dicho órgano reticular en las
, - células caliciformes del estómago y en corpúsculos de ciertas glándulas.

(1) Tello: El retículo de Golgi en las células de algunos tumores y en el granu-
loma experimental producido por el Kieselgur. Trab. del Lab. de Invest. biol.,
tomo XI, 1913.

(2) Kolster: Verhandl. der anat. Gesellsch. Versaml. in Greifswald, 10-13 Mai 1913.

20 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Creencia general es, sin embargo, que no existe conexión etiológica nin-
guna entre el retículo de Golgi y la génesis de los fermentos, bien al

YI

contrario de las mitocondrias, las cuales cooperarían directamente en las

síntesis químicas de las glándulas.

Dejando por ahora la cuestión de si el aparato de Golgi colabora en la
función glandular, expongamos algún ejemplo en que parece indudable
la existencia de variaciones cuantitativas de dicho aparato, correlativas
del grado de actividad del protoplasma.

a) Células caliciformes del intestino delgado. — El aparato reticular de

las células epiteliales caliciformes, las primeras noticias relativas á su
aparato reticular interno las debemos á Golgi (1), que consiguió demos-
trarlo claramente en las mucosas gástrica é intestinal de diversos verte-
brados (conejo, cobaya, rata, et8.), singularmente en la de la rana. De
las observaciones del sabio de Pavía resulta que en lo más hondo de las

fosetas gástricas, allí donde la metamorfosis mucosa de las células llega

al sumo, el aparato reticular aparece empequeñecido y confinado por

fuera del núcleo, entre éste y lo profundo del cáliz; mientras que en las

porciones culminantes de los repliegues epiteliales, allí donde las célu-
las, de volumen mucho mayor, alcanzan fase secretoria menos adelanta-

da, el aparato en cuestión no es sólo más robusto, sino que se disloca

envolviendo al núcleo y aun descendiéndose parcialmente hasta el polo
subnuclear del corpúsculo caliciforme. «La explicación de estas modifi-
caciones — dice Golgi — puede ser puramente mecánica, es decir, puede
suponerse que ellas son efecto de la metamorfosis mucosa; la mucina
elaborada por el protoplasma celular profundamente situado, podría em-

pujar gradualmente el aparato reticular hacia la periferia, determinando

su gradual emigración. Sin embargo, no existe fundamento alguno para
afirmar ó excluir que todo se reduzca á un hecho mecánico ó que el fe-
nómeno en cuestión no esté ligado á procesos vitales de otra natura-
leza ».

En nuestros preparados del intestino delgado del conejo, cobaya y gato
de pocos días, la posición esencial del aparato reticular de Golgi varía
poco, cualquiera que sea el estado de la metamorfosis mucosa; pero, en
cambio, adviértense modificaciones interesantes en cuanto á la dotación
de su masa argentófila y disposición estructural.

Prescindiendo por ahora de la cuestión del origen de los corpúsculos

caliciformes es incuestionable que una vez diferenciados, pasan, según
demostraron Majewsky y Oppel, en el intestino del gato envenenado con

(1) C. Golgi: Sur une fine particularité de structure de l'epithelium de la mu-
queuse gastrique et intestinale de quelques vertebrés. Arch. ital. de biol., to-
mo LI, 1909.

VARIACIONES FISIOLÓGICAS DEL RETÍCULO DE GOLGI 21

pilocarpina (1) y Heidenhain (2) en la salamandra, por dos estados fisio-
lógicos: el de reposo, durante el cual la célula vacía y adelgazada rege-

nera sus gránulos; y el de secreción, durante el cual el protoplasma se

ahueca y rellena de glóbulos de mucina. Este concepto acerca de la
rotación fisiológica de los elementos caliciformes, según el cual regresa-
rían, una vez expulsada la mucina, á la fase de corpúsculos delgados ó
macizos, ha sido tambien recientemente confirmado por Mollendorff (3).

Por lo que toca al aparato de Golgi, he aquí las principales modifica-
ciones que ofrece en relación con dichos estados (lám. I, fig. 1).

1. Fase de marchitamiento ó descanso. — Expulsada la secreción, cae
la célula en un estado de atrofia, mostrando un soma macizo, delgado,
fusiforme y apuntado hacia afuera, sin llegar, sin embargo, hasta el
plano de las chapas. Este estado corresponde á las schmale Zellen (célu-
las delgadas) de Majewsky y Oppel, y á los tipos alargados macizos, con
finos granos inferiores, descriptos por M. Heidenhain. En tal situación
el aparato reticular es diminuto, pobrísimo en material, quedando redu-
cido á dos ó más grumos ó gránulos sueltos, alojados en la vecindad del
núcleo (fig. 1, 1, a).

2. Estado progresivo.—El soma aumenta en volumen, tornándose fina-

- mente granuloso y ganando terreno hacia la chapa. La red de Golgi en-

riquece el caudal de sus grumos, que se modelan en asas y lobulillos. Al
final de esta fase el soma adquiere forma ovoidea, y el citado aparato
endocelular, de cada vez más voluminoso, comienza á disponerse en red,
donde dominan los trabéculos longitudinales (fig. 1, 2 y 3). Confírmase,
pues, aquí la fase hipertrófica hallada por Tello en la glándula ma-
maria.

3. Estado de secreción ó de producción de finas esférulas. — El soma,

_dilatado en vientre voluminoso por encima del núcleo, se abre paso hasta

la superficie libre, entreabriendo la casi cerrada juntura de las chapas;
mientras que el protoplasma supranuclear aparece relleno de multitud
de esférulas, verosímilmente idénticas á las granulaciones primitivas
glandulares de Heidenhain (gránulos finos, coloreables por la hematoxi-
lina ferruginosa). En cuanto á la red de Golgi, continúa creciendo en
masa y complicación, y dilata las dimensiones transversales de la célula,
hasta producir en algunos corpúsculos cierto abultamiento fusiforme, si-
tuado inmediatamente por debajo del cáliz secretorio (fig. 1, 4 y 5).

(1) Majewsky y Oppel: Schlund und Darm, obra citada por Heidenhain, que
copia una figura muy expresiva.

(2) Heidenhain: Plasma u. Zelle. Bd. 1, pág. 359, 107.

(3) Mollendor/f: Ueber Vitalfáirbung des Granula in den Schleimzellen des Sán-
gerdarmes. Abhandl. der anat. Gesellsch. auf der Versamlung in Creifswald, 10-13
Mai 1313.

22 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

4. Fase de las gruesas masas de mucina y desagregación del retículo.
—El vientre del cáliz adquiere notable amplitud, apareciendo relleno de
gruesas y medianas esferas, algunas intensamente coloreables por la
plata. Rechazado hacia el polo profundo ó nutritivo, el núcleo se empe-
queñece y adopta contorno triangular. Parte del material segregado, di-
latando la cripta superficial, es al fin expulsado. A consecuencia de ello,
el aparato de Golgi, que alcanza en este momento el máximo de su hiper-
trofia, queda descubicrto en el fondo del cáliz. En fin, en algunos ele-
mentos reconócese con evidencia la disgregación del retículo y su entre-
mezclamiento con el producto segregado (6). A las masas de mucina y
otras substancias júntanse, pues, los grumos ó esferas resultantes de la
fragmentación de la mencionada red. A

Faltos de datos suficientes, no discutiremos aquí la cuestión de saber
si, positivamente, el aparato de Golgi produce algún fermento ó material
destinado á mezclarse con la secreción mucosa. Es muy posible que la
disgregación y eliminación de la materia argentófila constituya un hecho
accidental, mera consecuencia de la profunda y casi total desorganiza-
ción sobrevenida en el protoplasma; pero lo que parece indudable es
que, además de los fenómenos mecánicos á que aluden Golgi y Kolster,
en las caliciformes del intestino de los mamíferos efectúase un incremen-
to notable de la substancia argentófila, al compás del progreso del proce- :
so secretor, alternando con otro proceso de atrofia, correspondiente á la
fase de inactividad ó de reposo. De pensar es que, durante este período
de agotamiento y regeneración de los elementos caliciformes, las reli-
quias del retículo destruído restauren, por vía asimilativa y divisoria de
sus unidades ultramicroscópicas, el nuevo aparato de Golgi.

b) Hipertrofia del retículo durante la fase secretoria de odontoblastos y
osteoblastos. — Los corpúsculos conectivos representan, en realidad, glán- |
dulas difusas, activas durante el desarrollo ontogénico y encargadas
de elaborar ciertas substancias estables (la osteína, la colágena, etcé-
tera), factores mecánicos permanentes de las construcciones (dientes,
huesos, tejido conectivo, etc.). Pasada la época de actividad, el elemento
secretor cae en el sedentarismo y en la atrofia, de que logran, empero,
sacarle eventualmente ciertos procesos patológicos.

Odontoblasto.—No es difícil reconocer el aparato de Golgi de este tipo
mesodérmico, aprovechando al efecto las fases más tempranas del diente
en evolución (perro de un mes, conejo de pocos días, etc.), es decir, cuando'
el germen dentario se halla en sus comienzos y la capa de dentina afecta
tal delgadez que puede cortarse relativamente bien con una navaja de
filo duro. Para que el fijador penetre y la impregnación de la red se ob-
tenga, será condición indispensable seccionar la raíz dentaria á lo largo.

A. Mi ISA
A

o

VARIACIONES FISIOLÓGICAS DEL RETÍCULO DE GOLGI 23

Según mostramos en la figura 2, b, lám. I, los odontoblastos basales jó-
venes é inmaturos, simple diferenciación de los corpúsculos conectivos,
exhiben un aparato reticular de pequeña dimensión, apenas polarizado y
como disperso (b); mas en cuanto, creciendo en longitud, forman parte
de la empalizada principal para iniciar la fase secretoria (odontoblasto
propiamente dicho), surge en ellos (B) robustísimo aparato de (Grolgi. La
forma general de éste es ovoidea, más ó menos alargada; yace entre el
núcleo y la superficie libre de la célula, es decir, en el polo secretor, y
en su composición entran numerosos grumos y cordones tan apretados,
que es difícil precisar su verdadera disposición.

Cuando la producción del marfil está casi acabada, el aparato de Gol-
gi comienza á marchitarse. Días antes de que el reposo secretorio sea
completo, es ya difícil de teñir, pareciendo como que cambia de compo-
sición química. Demanda este punto, sin embargo, nuevas investigacio-
nes; porque, dicho sea de pasada, cuando el diente acaba su evolución,
las maniobras de extracción de la pulpa, preliminares indispensables de
la aplicación del método argéntico (los agentes decalcificantes no pueden
usarse) dificultan la reacción ó la impiden por completo.

Retengamos, de todos modos, de la presente observación este hecho :
el máximo de la actividad secretoria del odontoblasto coincide con el
máximo desenvolvimiento del aparato de Golgi; éste reside siempre en
el polo secretor del protoplasma. :

Relaciones entre la función secretora del osteoblasto y el aparato de
Golgi.—El retículo intraprotoplásmico de estos elementos, como el de
los odontoblastos, parece haber escapado á la exploración de los autores.
Déineka no lo presenta en su reciente trabajo.

Tengo para mí que el nuevo método de Golgi, al formol-ácido arsenio-
so, usado por Deineka, ó el modo de empleo preferido por este sabio
(fijación por una ó dos horas), no impregna el aparato reticular. Algo de
esto ocurre también con el proceder del formol-urano: á veces no se
consigue reacción, siendo necesario acudir á una de las fórmulas del ni-

_trato de plata reducido (fijación en formol; alcohol después; nitrato de

plata, etc.), según dejamos apuntado más atrás. Sin embargo, escogien-
do recientemente al efecto los huesos del cráneo del conejo de pocos
días, la fórmula al urano se nos ha mostrado francamente propicia.
Como mostramos en las figuras 3 y 4, el aparato en cuestión hállase per-
fectamente diferenciado y localizado en todos los osteoblastos de las lagu-
nas medulares, cualquiera que sea su fase evolutiva. Tampoco falta en
ninguno de los elementos periósticos. Estudiándole comparativamente
en todas las capas celulares del pericondrio, apréciase fácilmente que la
red crece en robustez é importancia, conforme el corpúsculo conectivo :

24 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

joyen ocupa un plano más próximo al vecino muro cartilaginoso. Natu-
ralmente, el aparato más diferenciado y robusto habita en la fila de los
osteoblastos que inician el proceso secretor (osteoblastos de Gegenbaur).
Este contraste llega al sumo en los embriones de pollo de doce á dieci-
séis díds, en cuyos huesos periósticos los osteoblastos á punto de ser en-
globados en la materia fundamental poseen un aparato dos ó tres veces
más grande y compacto que el de los osteoblastos embrionarios,. y ade-
más mucho más vigorosamente coloreable por la plata. En la figura 4.
aparece muy claramente esta hipertrofia gradual del aparato reticular
conforme el osteoblasto se prepara para el ejercicio de su función.

Acerca de la situación, densidad y estructura de la red, dan testimo-
nio las figuras 3 y 4. Nótese que ésta radica junto al núcleo, en el terri-
torio central del protoplasma (el núcleo yace siempre más ó menos tan-
gencial); frecuentemente se orienta hacia la substancia Ósea en vías de
formación (hay excepciones). Consta el citado aparato de grumos y cor-
dones finos, muy próximos, ya sueltos, ya anastomosados, entremezcla--:
dos por gránulos delicados. El conjunto constituye un conglomerado
más ó menos circular. En el centro se dibuja casi siempre un paraje cla-
ro, que corresponde, á no dudar, á la esfera atractiva y centrosoma,
bien presentados por Deineka. El resto del protoplasma hállase limpio
de grumos argentófilos, dejando extenso territorio para albergar el apa-
rato mitocondrial, invisible en nuestros preparados.

Si de la hilera de los osteoblastos en fase secretoria pasamos á la de
aquellos que acaban de ser empotrados en la substancia fundamental,
pocas mudanzas echaremos de ver. Observaremos, empero, que el apa-
rato reticular, el cual suele ocupar posición profunda con relación al nú-
eleo, comienza á empequeñecerse, y, además, que sus grumos y cordo-
nes se funden progresivamente, acabando al fin por constituir un bloque
diminuto, homogéneo y en vías de degeneración (fig. 4, C).

Hipertrofia del retículo de las células de Schwann en tránsito de prolifera-
ción. (Lám. II). —Cuando, tres á cuatro días después de la sección, del ciá-
tico, se explora el cabo periférico impregnado con la fórmula de formol-
urano, percíbense con toda claridad interesantes modificaciones del apara-
to reticular de las células de Sehwann, según se aprecia en la figura 5, a,b.
En general, la materia argentófila se ha enriquecido, constituyendo nu-
merosos grumos y cordones, que suelen rodear completamente al núcleo
y se extienden por casi todo el espesor de la fibra nerviosa. Además, el
conjunto del aparato parece estirado en dirección axial y sus filamentos
se disponen á menudo en líneas paralelas. Hacia los polos celulares, las
masas argentófilas concéntranse, generando un cuadrilátero bruscamente
limitado exteriormente por la curva del próximo elipsoide de mielina,

S. R. Casan: Variaciones fisiológicas del retículo de Golgi en algunos elementos
epiteliales y mesodérmicos.

LÁMINA I

Fig. 1.— Diversas fases funcionales de las células caliciformes del intestino. Gato jo-
ven. Proceder del urano -formol.— 1, fase de descanso; 2 y 3, fase de regeneración
incipiente; 4 y 5, fases de secreción; 6, fase terminal ó de excreción; a, aparato de
Golgi atrófico; b, aparato de Golgi hipertrófico.

VO E

Fig. 3. — Trozo de un metacarpiano del co-
nejo recién nacido. Osteoblastos Jóvenes
situados en un espacio medular junto al
cartílago.— a, aparato de Golgi con hueco
para la esfera; bh, trabécula cartilaginosa
directriz.

L

Fig. 2.—Corte de la papila dentaria del perro
de dos meses (diente en vías de formación).
—A, fibras de Tomes penetrantes en el
marfil; B, aparato de Golgi de los odonto-
blastos; C, núcleo de éstos; D, corpúsculos
conectivos de la pulpa; a, haces colágenos
penetrantes en el marfil; b, odontoblastos
germinales; C, aparato de Golgi de un ele-
mento conectivo.

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S. R. Casan: Variaciones fisiológicas del retículo de Golgi en algunos elementos
epiteliales y mesodérmicos.

LÁMINA Il

Fig. 4.— Trozo de hueso perióstico del cráneo del conejo de pocos días. — A, hilera
de osteoblastos jóvenes; B, osteoblastos recién englobados en la materia funda-
mental; C, células óseas donde aparece el aparato de Golgi más ó menos alterado
y homogéneo.

100

Fig. 5.— Células de Schwann del cabo periférico ó degenerado del nervio ciático del
conejo de un mes tres días después de la sección. — b, c, e, disposición del aparato
de Golgi en núcleos en descanso; a, d, retículo en células en vías de partición.

Éz

EN A

POLARIZACIÓN ONTOGÉNICA Y FILOGÉNICA DEL APARATO DE GOLGI 25

En algunas células de Sehwann, la reticulación parece descompuesta en
series de granos ó de pequeños bacilos paralelos. En fin, cuando, confor-
me reproducimos en la figura 5, a, dicho corpúsculo aparece en fase di-
visoria, la materia argentófila se disemina, distribuyéndose en tres mon -
tones: uno ecuatorial, compuesto de cordones que se dirigen de un nú-
eleo al otro, y dos polares, especialmente densos, terminados en el co-
mienzo de los elipsoides. En los casos en que los núcleos se apartan bas-
tante, el conjunto de las masas argentófilas constituye largo acúmulo
fusiforme, desapareciendo progresivamente de la región ecuatorial los
restos del aparato. Noftemos que, durante estas evoluciones, los nueleo-
los adquieren desusado espesor, mostrándose constituídos por varias ro-
bustas esferas adheridas en bloque (fig. 5, d).

——— 8

Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica y filogénica
del aparato de Golgi

POR

S. R. CAJAL

Láminas III, IV, V, VI y VII

Desde el punto de vista de la orientación, posición y conexiones del
aparato de Golgi, todos los tejidos de vertebrados é invertebrados pueden
clasificarse en dos categorías: 1.*, células y tejidos sedentarios, esto es,
que no emigraron ni alteraron esencialmente, en el eurso de la evolución,
su orientación polar y sus conexiones con el mundo interior y exterior;

y 2.*, células y tejidos emigrantes, es decir, que durante sus fases onto-
génicas y filogénicas, modificaron su orientación y conexiones intrínse-
- cas y extrínsecas.

1) Tejidos no emigrantes y sedentarios. — Las recientes investigacio-
nes de Fañanás y nuestras recaídas en el embrión de pollo; las ya anti-
guas efectuadas por nosotros, Holmgren y Sánchez en diversos inverte-
brados; las verificadas en los epitelios de revestimiento y glandulares
por numerosos autores (Holmgren, Negri, Pensa, Bergen, Marcora, Tello,
Sánchez, Fañanás, Kolster, Weigl, Deineka, nosotros, ete.), han apor-
tado un hecho general interesante, á saber: que el aparato de Golgi de
los epitelios y demás tejidos sedentarios de tipo epitelial ocupa constan-
temente en los metazoarios el polo celular que mira al mundo exterior,
entendiendo por tal la dirección opuesta al mesénquima ó mundo inte-

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26 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

rior, En tales tejidos, el aparato reticular con la esfera constituyen, pues,
inequívoco signo distintivo del polo mundial. Bastará, por tanto, averi-
guar su posición en una célula adulta para inferir inmediatamente hacia
dónde cae ó caía la cavidad del repliegue ecto ó entodérmico, antigua-
mente limitado por el epitelio.

Para evitar perífrasis, designaremos en adelante al polo celular porta-
dor de la esfera y aparato de Golgi, polo mundial ó de relación exterior,
y el que mira hacia la sangre y plasmas nutritivos, polo hemal, orgánico
ó de relación interior. ,

Aunque de valor menos general, no hay inconveniente en emplear tam-
bién la nomenclatura usada por los autores para calificar los cabos del
protoplasma glandular : el usualmente llamado polo nutritivo correspon-
de al polo hemal, y el polo funcional ó secretorio coincide con el mundial.
Porque, en efecto, según veremos luego, el segmento protoplásmico,
portador del aparato de Golgi y de la esfera, constituye el foco principal
de las actividades profesionales de la célula; mientras que el segmento
contrapuesto representa más bien el camino aferente del plasma nu-
tritivo.

En los tejidos sedentarios ó de revestimiento, la expresión polo mun-
dial no es simple metáfora. Este segmento celular miraba positivamente
al mundo exterior en las etapas de la evolución filogénica (colentereados,
crustáceos, vermes, etc.). Lo mismo sucede en el embrión durante aque-
llas fases primordiales, en que consta tan sólo de las tres hojas blasto-
dérmicas, puesto que las células del ectodermo y entodermo, según resul-
ta de nuestras investigaciones, exhiben el aparato de Golgi vuelto cons-
tantemente hacia el exterior, es decir, en dirección opuesta al intersticio
en que se diferencia el mesodermo, representante virtual del interior del
futuro organismo. Pero conforme progresa el desarrollo ontogénico y filo-
génico y las hojas primordiales producen replegamientos intramesenqui-
matosos ó cavidades cerradas, la dirección ó polarización primitiva se
pierde en cuanto á su relación espacial, aunque no por lo que afecta á su
relación dinamico-química con el ambiente interior y exterior. Por ejem-
plo: las células glandulares del intestino, del páncreas, etc., envían el polo
mundial ó portador del aparato de Golgi hacia la cavidad glandular, es
decir, en la dirección del espacio intestinal comunicante con el ambiente
exterior (primitivamente orientado en el embrión hacia el medio cósmi-
co); mientras el polo hemal ó nutritivo conserva sus conexiones con el
medio plasmático interior. Reprodúcese el mismo hecho con los replega-
mientos glandulares del ectodermo (glándulas mamarias, sudoríparas, et-
cétera). Importa notar que, en los epitelios pavimentosos, sólo la zona
profunda ó germinal suele permanecer fiel á este principio; las demás

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POLARIZACIÓN ONTOGÉNICA Y FILOGÉNICA DEL APARATO DE GOLGI 27

hileras epidérmicas deben estimarse como elementos en degeneración,
más ó menos dislocados y turbados, en virtud de condiciones mecánicas
y químicas. En la figura 1 presentamos esquemáticamente la posición del
aparato de Golgi en las tres hojas blastodérmicas, media, externa é in-
terna, del embrión de pollo (región bulbar y faríngea).

Excusado es decir que la orientación mundial del aparato de Golgi
debe considerarse, no como ley absoluta y obligatoria, sino cual tenden-
cia ideal que puede, en casos raros, ser contrariada y hasta vencida por
influencias mecánicas (crecimiento excesivo de células limítrofes, presión
de materias segregadas, arrastres protoplásmicos por resbalamiento, et-
cétera). Así se explican ciertos ejemplos relatados por Golgi (células ca-
liciformes del estómago) y por d'Agata, Kolster, Boteselle, 'etc., en los
cuales el retículo tiende á.envolver el núcleo y hasta á descender más ó
menos hasta el polo hemal. Del mismo modo quedan también esclareci-
das las dislocaciones notadas por nosotros en el epitelio del cardias some-
tido á la presión intermitente del esfínter. Así, en fin, se comprenden las
alteraciones de posición, observadas y dibujadas por Tello en los adeno-
mas y carcinomas glandulares, en donde la despolarización del aparato
reticular guarda relación con el grado de atipia mostrado por la neo-
plasia.

Por seguro estimamos que una de las condiciones determinantes de la
polarización celular de los tejidos epiteliales ó sedentarios consiste en
que, en tales elementos, el plano de partición del protoplasma es siempre
perpendicular á la superficie de la formación epitelial. De donde resulta
necesariamente que, al separarse las células hijas después de la mitosis,
las posiciones de los polos mundial y hemal del protoplasma mantiénen-
se paralelas á sí mismas, ocupando, por tanto, la esfera y aparato de
Golgi idéntica posición relativa que en el corpúsculo progenitor.

Puesto que durante la mitosis la esfera y el retículo de Golgi se divor-
cian entre sí y además se dislocan perdiendo su posición y simbiosis ori-
ginarias, es preciso considerar los polos mundial y hemal cual territo-
rios protoplásmicos diferenciados, de composición estructural y química
algo diferente, lo bastante contrastada para que uno de ellos, el mundial,

y . . . .
sea poderoso á ejercer sobre la esfera y los dictiosomas de Perroncito

tropismos restauradores de su primitiva situación polar. En efecto; aca-
bada la mitosis, obsérvase cómo la esfera se reintegra al polo mundial,
siguiendo después los dictiosomas, que acaban por fundirse entre sí y
generar un retículo.

En las figuras 1, 2, 3 y 4, láms. III y IV damos ejemplos de la orienta-
ción mundial del aparato de Golgi, en los tejidos del embrión de pollo,

" explorados desde la treinta y cuatro hora de la incubación. Nótese (figu-

e

28 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

ra 2) cómo en la hilera profunda de los elementos ectodérmicos dicho
aparato mira hacia afuera; mientras que en la figura 3, que representa
un replegamiento entodérmico (placa cutánea), y en la 1, A, que copia
el epitelio primitivo del canal medular, mira hacia el interior del replie-
gue, es decir, en dirección de la cavidad que, antes del replegamiento,
se continuaba con la superficie libre del rudimento embrionario.

2) Células y tejidos emigrantes. —La característica de tales elemen-
tos (células conectivas, embrionarias, musculares, eritrocitos jóvenes,
osteoblastos, condroblastos, elementos de las glándulas endocrinas, en-
dotelios y, en fin, buen contingente de las neuronas, ete.) consiste en
que, al emigrar hacia los territorios mesenquimatosos y construir órga-
nos especiales, perdieron su primitiva orientación con el mundo exterior.
A consecuencia de ello, aquella región protoplásmica especial que atrae
el aparato de Golgi y la esfera, es decir, el polo mundial, mira indiferen-
te á cualquiera dirección del espacio, pudiendo variar, en cada elemento
congregado de la trama emigrante, no sólo á causa de la separación
de ésta de la hoja blastodérmica originaria, sino en virtud del sinnúmero
de dislocaciones sufridas por cada individuo de la colonia emigrante. En
la figura 5, donde reproducimos un corte del tejido conectivo embriona-
rio (embrión de pollo del quinto día), se ABrcola bien esta variación topo-
gráfica del aparato de Golgi.

Aparte las perturbaciones provocadas por los incidentes del camino,
la desorientación obedece quizás también á los cambios sucesivos de di-

rección del plano divisorio con relación al eje principal del corpúsculo,
aunque, naturalmente, bastaría la primera condición.

Que dicho plano puede cambiar es cosa demostrada por los autores en
muchas células emigrantes de origen ecto y mesodérmico. Aquí nos limi-

taremos á recordar que una de las causas de la despolarización espacial

de los elementos neuróglicos consiste en que la división primitivamente
radial (médula, cerebro, etc.) se torna después transversal.

No todos los tejidos emigrantes han perdido por completo su polariza-
ción espacial. Existen gradaciones dignas de notarse, importando dis-
tinguir, por lo menos, tres categorías celulares: 1.*, colonias ecto ó ento-
dérmicas, cuyos individuos emigraron en bloque, conservando sus rela-
ciones recíprocas, aunque rompiendo definitivamente sus vínculos con la

hoja blastodérmica correspondiente; 2.*, células ó colonias de parecido ;

abolengo, las cuales conservan parcialmente, es decir, por grupos, reli-
quias de la polarización ontogénica; 3.*, en fin, tejidos de diversas pro-
cedencias, sobre todo de estirpe mesodérmica, cuyos elementos perdie-
ron todo resto de la antigua polarización espacial y hasta de centraliza-
ción funcional ó profesional.

POLARIZACIÓN ONTOGÉNICA Y FILOGÉNICA DEL APARATO DE GOLGI 29

Ejemplos típicos de colonias emigrantes de la primera categoría nos
ofrecen el eristalino (lám. V, fig. 6, A) y el cuerpo tiroides, en cuyos
elementos, tanto'en el animal joven como en la fase fetal, el aparato de
Golgi mira al interior de las primitivas y ya desaparecidas cavidades
(cristalino) ó á los huecos persistentes (cuerpo tiroides), etc.

Casos notables de la segunda clase de colonias emigrantes son los
islotes de Langerhans del páncreas (conejo joven), donde en ocasiones
(no siempre) los polos mundiales de las células son reconocibles por diri-
girse en algunos islotes hacia el centro de los mismos, lugar ideal del
hueco glandular desvanecido (lám. V, fig. 7, B). En fin, con menos regu-
laridad percíbense también, á veces, polarizaciones en el lóbulo glandu-
lar de la hipófisis (Tello) y en la cápsula suprarrenal. En esta última
carecen de orientación polar los elementos integrantes de los tractos de
la substancia medular; mas, en cambio, aprécianse todavía, acá y allá,
en los lobulillos corticales, reliquias de la vieja polarización ontogénica.

En fin, á la tercera categoría, formada por células ó colonias errantes
que perdieron, durante el desarrollo, toda polarización espacial, aunque
conservando un polo ó región que ejerce atracción sobre el aparato de
Golgi, pertenecen los leucocitos, diversos tipos de células conectivas, los
leucoblastos y demás elementos de los ganglios y médula ósea, los osteo-
blastos y condroblastos, las células musculares lisas y estriadas y, en fin,
la mayoría de las neuronas adultas.

Transformación del primitivo foco mundial en centro de superiores
actividades químicas. — Apuntado dejamos que, en los epitelios seden-
tarios, el polo mundial corresponde al funcional. En las glándulas coin-
cide con el segmento secretor, y en las vellosidades intestinales con el
polo de absorción. Pero desaparecida en: los tejidos emigrantes toda
orientación espacial uniforme, el polo ó región portadora de la esfera y
aparato de Golgi, adquiere exclusivamente caracteres de centro de su-
periores actividades químicas. En cuanto al polo hemal, ha desaparecido,
ó más bien está ahora representado por toda la periferia protoplásmica.
En este caso se hallan las células conectivas, los osteoblastos, los cor-
púsculos cartilaginosos, los elementos musculares y, singularmente, las
neuronas y células neuróglicas, eon excepciones que luego señalaremos.

Un indicio más de que positivamente en las células desorientadas,
como en las orientadas, la región portadora del retículo de Golgi repre-
senta un foco de superior actividad química, nos lo ofrecen las neuronas
jóvenes, en donde el citado aparato ocupa precisamente el paraje del
máximo crecimiento protoplásmico. Muchos ejemplos pudiéramos citar
en apoyo de la influencia trófica del segmento ó región provista del ci- -
tado aparato. Limitémonos, por ahora, á estos tres casos típicos: a, insta-

30 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

lación del retículo, durante la ontogenia (fig. 11, D), en el origen de la ex-
pansión externa ó eferente de las células ganglionares sensitivas, es decir,
en el apéndice grueso, donde los fenómenos de crecimiento son más acti-
vos; b, preferencias del mismo por el arranque del tallo radial de las neu-
ronas de Purkinje (lám. VI, fig. 9); c, en fin, la repetición de igual parti-
cularidad en todas las pirámides jóvenes del cerebro (lam. VII, fig. 10),
células ganglionares de la retina, corpúsculos mitrales del bulbo olfato-
rio, ete. (1). Mencionemos aún las células de la médula espinal embriona-
ria (fase de neuroblasto), cuyo arranque axónico, punto de brote de las
dendritas, exhibe el aparato de Golgi (lám. IV, fig. 4). Por lo.demás, acer-
ca de las evoluciones sufridas por el aparato de Golgi de las neuronas
jóvenes, consúltese la figura 11, donde se ve que, por consecuencia de
la inversión del centro protoplásmico, el retículo endocelular, todavía |
rudimentario, de central que era se torna sucesivamente periférico, es
decir, que se disloca hacia el paraje de origen de las gruesas dendritas.
Relaciones entre la polarización funcional general y la polarización
dinámica de las neuronas. — Consignado dejamos que en algunas célu-
las nerviosas el aparato de Golgi, signo de la dirección mundial, aparece
concentrado, tanto en el embrión como en el adulto, en la expansión pe-
riférica ó celulípeta. Coinciden, pues, en tales elementos las dos princi-
pales características del polo mundial: colecta de energías exteriores y
centro de máxima actividad química (crecimiento, etc.). :
Transcurrida la época fetal y juvenil, en la mayoría de tales elemen-
tos (sensitivos de los ganglios, células simpáticas, multipolares del cere-
bro y médula, etc.), sólo subsiste una polarización : la polarización diná-
mica ó funcional. Recuérdese que, según defendimos hace tiempo Van
Gehuchten y nosotros, el soma y dendritas representan el polo aferente
ó de corrientes celulípetas, y el axon el polo eferente, emisivo ó de eo-
rrientes celulífugas. Repárese, pues, que, á pesar de la pérdida de la
primitiva orientación espacial, la posición del aparato de Golgi en todo
el protoplasma somático, y hacia el arranque de las gruesas dendritas,
continúa señalando un territorio dotado, en el orden químico, de activi-
dades especiales (paraje donde residen los husos de Nissl, etc.), y, en el
orden dinámico, corresponde á un paraje, por donde, como en las épo-
cas ancestrales, la célula recibe las conmociones nacidas en el mundo ex-
terior (ondas nerviosas aferentes, sensitivas 6 sensoriales, de primero,

(1) Es curioso notar que en la capa de las células polimorfas del cerebro del
conejo de pocos dias, las neuronas invertidas, esto es, las que ofrecen el tallo
principal vuelto hacia la substancia blanca, invierten también la posición del
retículo de Golgi, el cual mira por consiguiente hacia abajo, extendiéndose á lo
largo de la dendrita. :

+
POLARIZACIÓN ONPOGÉNICA Y FILOGÉNICA DEL APARATO DE GOLGI 31

segundo ó tercer orden). En cuanto al axon ó expansión celulífuga, re-
presenta el polo hemal, despojado ciertamente de toda especialización
nutritiva, pero conservando, empero, la característica funcional del seg-
mento orgánico ó profundo de los corpúsculos epiteliales primitivos (on-
togenia y filogenia), que consistía en transmitir al interior del soma del
animal las excitaciones recogidas por el contrapuesto polo.

Claro es que en muchas neuronas del cerebro, del cerebelo y de la mé-
dula espinal las expansiones celulípetas no absorben directamente im-
pulsos llegados del mundo exterior, pero las reciben de las neuronas sen-
sitivas y sensoriales (de primero, segundo y tercer orden), fronterizas de
la piel y de los repliegues acústico, visual, etc., del ectodermo, en per-
petuo conflicto con las energías cósmicas.

La concepción que acabamos de exponer ¿debe estimarse como una
especulación teórica, desprovista de todo valor práctico? Sinceramente
creemos que, no obstante sus lagunas y obscuridades, si se la aplica con
las cautelas oportunas, pudiera resultar de algún provecho, como regla
interpretativa de ciertas disposiciones histológicas.

Sin duda que adolece del grave defecto de apoyarse, no solamente en
hechos de observación demostrados, sino en algunos postulados no rigu-
rosamente evidentes, aunque harto probables, tales como: la polariza-
ción anatomo-funcional de las células en los metozoarios más sencillos; la
persistencia de esta polarización, por impulso hereditario, en los anima-
les superiores y durante las fases primeras de la ontogenta; y en fin, la
disimetría ó especificidad quimica de cada uno de los segmentos ó míita-
des interior y exterior del protoplasma epitelial. Pero valorando la cita-
da hipótesis de un modo pragmático, la creemos susceptible, repetimos,

_de esclarecer algunos puntos dudosos de la organogénesis, de fortalecer

con nueyos argumentos concepciones aún contravertidas acerca del ori-
gen de las neoplasias patológicas, y de corroborar, en fin, por lo que toca
al sistema nervioso, la vieja doctrina de la polarización dinámica. De al-
gunos beneficios interpretativos hemos hecho ya mención en páginas an-
teriores. Aquí nos limitaremos á recordar brevemente los principales.

a) Dada una formación embrionaria, determinar si sobrevino por
emigración ó por replegamiento. — Por ejemplo: se ha discutido mucho
el mecanismo de origen del mesodermo, manteniéndose por algunos au-
tores la hipótesis emigratoria de Kólliker. Sin embargo, la disposición
polarizada de las primeras formaciones mesodérmicas (cuerda dorsal,
placa cutánea, ete.) comprueba que, en las aves y mamíferos, dicha
membrana se produce por replegamientos entodérmicos, conforme hace
tiempo señaló Hatschek en el anfioxus y defienden modernamente Hu-

32 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

brech y Bonnet para los vertebrados superiores (placa protocordal del'
entodermo de Hubrech y Erganzungs plate de Bonnet).

b) Señalamiento de cavidades epiteliales desaparecidas. — Merced al
eriterio de la polarización, cabe determinar en los islotes de Langerhans
del páncreas, el ióbulo glandular de la hipófisis (parte intermedia sobre
todo), la glándula suprarrenal (porción cortical), ete., el paraje donde
existió la primitiva cavidad; por donde se fortalecen y confirman las
ideas corrientes sobre el desarrollo de las glándulas endocrinas.

e) Confirmación de la teoría epitelial del carcinoma. — Según ha de-
mostrado Tello, el carcinoma glandular de la mama, en sus producciones
más jóvenes y menos atípicas, imita perfectamente, en cuanto á la posi-
ción del aparato de Golgi, la arquitectura típica de la glándula mamaria
normal. En cuanto las cavidades se borran y la atipia se inicia, piérdese
la polarización uniforme, dándose transiciones que demuestran el pri-
mitivo carácter glanduloide de la neoplasia.

d) La ausencia de polarización regular indica el carácter emigratorio
del tejido (tejidos conjuntivos, endotelios, sangre, etc.).

e) Ampliación y generalización de la teoría de la polarización dind-
mica de las neuronas. — Merced al nuevo criterio, cabe precisar, gracias
al examen de una célula nerviosa durante sus fases embrionarias, la po-
sición de su polo celulípeto. Lógrase, además, la ventaja de hacer entrar
la diferenciación funcional de las neuronas en el concepto más general
de la polarización originaria de las formaciones epiteliales, subordinando
de este modo la ontogenia á la filogenia. ;

Con todo eso, importa no exagerar el valor del principio de la polari-
zación. Dejamos más atrás consignadas posibles excepciones del mismo
y recomendadas prudentes cautelas en su aplicación. Tengamos en
cuenta, sobre todo, que aun en los tejidos epiteliales, la norma interpre-
tativa (posición en el polo mundial de la esfera y aparato de Golgi)
representa mera tendencia ideal, satisfecha casi siempre, pero suscepti-
ble también de ser vencida ó alterada, tanto por las violencias mecánicas
(presiones, estiramientos, etc.), como por el establecimiento ulterior de
poderosos tropismos perturbadores. Tampoco debe olvidarse que, ade-
más de la polarización histórica ó congénita, pueden darse en los tejidos
emigrantes retornos, por acomodación topográfica y funcional, á la pris-
tina polarización. Así, en los osteoclastos y, aunque no constantemente,
en los osteoblastos, el polo portador de la esfera y aparato de Golgi aló-
jase, en virtud quizás de un tropismo recíproco, en el segmento celular
teatro de la mayor actividad sintética del protoplasma.

S. R. Casa: Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica y filogénica
del aparato de Golgi.

LÁMINA III

Fig. 1.— Esquema de la posición del aparato de Golgi en la región bulbar de un em-
brión de pollo de treinta y cuatro horas. —A, bulbo raquídeo; B, faringe; C, noto-
corda; D, arcos aórticos; E, foseta acústica de la piel; F, aparato de Golgi del epi-
dermis cutáneo; 4, aparato de Golgi de las células conectivas.

Fig. 2, — Células del ectodermo en el embrión de pollo de las treinta y cuatro horas.
a, corpúsculos basales alargados; b, células aplastadas superficiales.

Fig. 3. —Placa cutánea del embrión de pollo de las treinta y cuatro horas de la incu-
bación.—A, placa cutánea; B, prolongación ventral de que se formará el esqueleto;
a, cavidad primordial del mesodermo paraxial.

S. R. Casan: Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica y filogénica
del aparato de Golgi.

LÁMINA IV

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A!

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: A : fe
MA e AA

Fig. 4.—Trozo del bulbo raquídeo del embrión de pollo de las cuarenta y cuatro horas
de la incubación. Coloración simultánea del aparato de Golgi y las neurofibrillas.

Fig. 5.— Células mesodérmicas del embrión de pollo de las cuarenta y cuatro horas
de la incubación,

S. R. Casan: Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica y filogénica
del aparato de Golgi.

LÁMINA V

Fig. 6.—Corte de la vesícula ocular y rudimento del cristalino de un embrión de pollo
de las cuarenta y cuatro horas de la incubación.— A, cristalino; B, piel; C, retina;
F, capa pigmentaria de ésta; D, ganglio oftálmico.

Fig. 7. —Células de los islotes de Langerhans del conejo de un mes. — A, condro-

contes de las citadas células; B, aparato de Golgi de los elementos integrantes
de un islote.

S.R. Casan: Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica y filogénica
del aparato de Golgi.

LÁMINA VI

Fig. 8.— Células bipolares del ganglio de Gasserio en el embrión de pollo del 5.” día
de la incubación.— A, expansión periférica portadora del aparato de Golgi; a, ex-
pansión interna.

Fig. 9.— Células de Purkinje del cerebelo del perro de pocos días.— A, retículo de
Golgi; a, corpúsculos epitélicos; b, célula de cesta; c, granos. — Nótese que el apa-
rato de Golgi se concentra en el polo protoplásmico ó aferente.

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S. R. Casan: Consideraciones generales sobre la polarización ontogénica y filogénica
del aparato de Golgi.

LÁMINA VII

Fig. 10. — Capa de las pequeñas y medianas pirámides de la corteza cerebral del co-
nejo de quince días. —a, formas más sencillas del aparato de Golgi localizado en la
Sión radial; b,c, d, retículos más complicados con tendencia á envolver el
núcleo.

Fig. 11.— Esquema de la evolución del aparato de Golgi en las células motrices de
la médula y bulbo raquídeo.— A, célula germinal en fase de mitosis; B, célula ger-
minal en descanso y en vías de emigración; C, neuroblasto bipolar; D, neuroblasto
monopolar; E y F, células nerviosas jóvenes.

Nota: Entre la fase B y C hemos hallado recientemente transiciones traducidas
pa posición interna ó profunda del aparato de Golgi y su figura más ó menos
ovoidea.

DESPACHO ORDINARIO Y MOVIMIENTO DE SOCIOS

Terminada la sesión científica, el Dr. Pittaluga propuso, y la Junta
acordó por unanimidad, que conste en acta el sentimiento producido por
la noticia del fallecimiento de dos sabios ilustres, el Dr. A. van Gehuch-
ten, Catedrático de la Facultad de Medicina de la Universidad de Lo-
vaína, y el Dr. von Prowazek, este último muerto en la campaña actual.

Con tal motivo, nuestro ilustre Presidente, Dr. R. Cajal, pronunció
un breve y sentido discurso, en que puso de relieve las excelentes dotes
de hábil investigador que adornaban al sabio Profesor de Lovaína, á
quien, desde hace muchos años, le unían lazos de amistad y simpatía,
originados quizá por la circunstancia de haber seguido con frecuencia
análogas corrientes en el campo de la investigación científica. A este
propósito manifestó que en una época, ya algo remota, en que los dos
estudiaban simultáneamente la estructura del tejido muscular, el doctor
Cajal hubo de manifestarle su creencia de que las exploraciones relacio-
nadas con el sistema nervioso podían ofrecer frutos más copiosos y su
propósito de modificar su rumbo en este sentido, aquél le siguió inme-
diatamente convencido de la realidad del aserto, y en este nuevo campo
trabajó con entusiasmo, confirmando primero numerosos descubrimien-
tos del sabio español y dando después á la ciencia un buen contingente
de hechos de propia observación.

Fueron admitidos como socios los señores siguientes: D. Roberto
Novoa, de Santiago; D. Abelardo Gallego, de íd.; D. Juan Varela
Gil, de íd.; D. Pedro Pena Pérez, de íd.; D. José Dieulofeu, de íd.,
y D. Antonio Ferrán, de Madrid.

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SESIÓN DEL 21 DE MAYO DE 1915 A A

En

Nuevo procedimiento para la coloración del bacilo de Koch en los tejidos

POR

LUIS SAYÉ

4

Los procedimientos propuestos hasta hoy para colorear el bacilo de
Koch en los tejidos, desde el primitivo de Koch hasta los de Ziehl, Neel-
sen, Friedmann, Schmorl, ete., permiten obtener excelentes y duraderas
coloraciones del bacilo; pero la estructura histológica no se distingue de
un modo perfecto, y á este fin, para obtener preparaciones que me per-
mitieran reconocer de un modo detallado las alteraciones texturales es-
pecíficas al mismo tiempo que el bacilo, he practicado varios ensayos,
logrando obtener imágenes muy demostrativas. El procedimiento emplea-
do es el siguiente:

Fijación de las piezas veinticuatro horas en formol al 10 por 100 (1).
Lavado en agua corriente veinticuatro horas. Inclusión en parafina (2).
Cortes de 5 á 10 micras.

Coloración durante quince minutos con la solución de hematoxilina fé-
rrica de Weigert (partes iguales mezcladas en el momento del ensayo de
una solución alcohólica de hematoxilina en alcohol de 95% al 1 por 100
y de la mezcla de pereloruro de hierro). Solución normal, 4 cent. cúb.; áci-

- do clorhídrico, 1 cent. cúb.; agua, 100 cent. cúb. Lavado abundante
en agua.

(1) Friedmann, en Enziclopedie der Mikroskopischen Technik, artículo « Coloración
del bacilo tuberculoso », recomienda con insistencia el empleo del alcohol de 95
para la fijación de las piezas en cuyos cortes se ha de investigar la presencia del
- bacilo de Koch, y dice que el formol no es aconsejable para este objeto. Sin em-
- bargo, mis preparaciones son muy demostrativas y no permiten suscribir esta
- afirmación.

(2) También pueden hacerse los cortes con congelación, y en este caso no es ne-
- cesario lavar las piezas véinticuatro horas, sino trasladarlas del fijador al micro-
- tomo, previo un ligero lavado, como se hace ordinariamente. Yo he utilizado
- preferentemente la inclusión en parafina por permitirme obtener cortes más
delgados.

3

36 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Coloración durante diez minutos á 37% en baño maría con la solución

ce fuchina anilinada de Ehrlich (11 cent. cúb. de solución alcohólica de
fuchina en 100 de agua anilinada al 4 por 100 y filtrada en papel de filtro
húmedo). y
Decoloración con la solución de Guhnter (ácido clorhídrico, 3; alcohol
absoluto, 100), hasta que el corte quede de color rosa pálido. A
abundante en agua. y : ; :
Coloración durante tres 4 cinco minutos en solución de picro- FabIaRa

acética recomendada por Cajal (solución acuosa saturada de ácido píeri-

co, 30 cent. cúb.; solución de fuchina al 2 por 100, 2 cent. cúb.; solución
de ácido acético al 1 por 100, VII gotas). Lavado rapidísimo en agua;
paso breve por los alcoholes flojos; alcohol absoluto, xilol, montaje en
bálsamo neutro.

Las preparaciones así obtenidas, examinadas á pequeño aumento, pre-
sentan el aspecto ordinario de las obtenidas con la hematoxilina férrica
y la mezcla de picro-fuchina-acética, quedando los núcleos teñidos en
negro, los protoplasmas en amarillo y el tejido conjuntivo en rosa ó rojo
intenso, según el tiempo de coloración, que aconsejo sea el mínimo.
Observando las preparaciones á inmersión, aparecen los bacilos intensa-

mente teñidos en rojo, destacando en el fondo amarillo de las zonas ca-

seosas y en el protoplasma de las células, también teñido de este color.
Aparte de permitir diferenciar histológicamente las preparaciones, este
procedimiento tiene la ventaja de su rapidez y de utilizar colorantes y
reactivos, todos de preparación extemporánea. Tengo preparaciones
obtenidas hace tres meses y conservan el color como el primer día.

Sobre una nueva reacción de la urea y su valor en clínica
y. en medicina legal

POR

A. LECHA-MARZO Y A. PIGA

Recientemente Hugouneuqg y Morel (1) han aplicado para la dosifica-
ción de la urea en diversos líquidos orgánicos el método de precipitación
descubierto por Fosse en 1907. Este nuevo método presenta indudables

(1) L. Hugouneuq y A. Morel: Sur le dosage d'urée dans le sang et les diverses
liquides de l'organisme par l'emploi du reactif de Fosse. La Presse medicale, 25 Ju-
nio 1913. j

A O A a E

-

SOBRE UNA NUEVA REACCIÓN DE LA UREA 3

ventajas sobre los ya conocidos (métodos que utilizan la transforma-
ción de la urea en carbonato amónico bajo la influencia del agua entre
150 y 1800 y dosifican el amoníaco por la técnica de Sehlesing; métodos
que utilizan la aceión oxidante del reactivo de Millon y determinan la
urea en función del ácido carbónico y del nitrógeno desprendidos).

Esta precipitación de la urea en solución alcohólica tiene lugar por la
acción del xantidrol ó difenopiranol, formándose un cuerpo cristalizado
casi insoluble en el alcohol y los disolventes habituales. Aun cuando di-
versas amidas son susceptibles de combinarse con el xantidrol, Fosse ha
demostrado que estas combinaciones no se producen en presencia del
alcohol ó son solubles desde el momento en que se forman. El ácido úri-
co, la guanidina, creatina, creatinina, asparagima, no reaccionan con el
reactivo. '

Hugouneuq y Morel han extendido sus investigaciones á cuerpos orgá-
nicos cuya presencia es frecuente en los procedentes del metabolismo de
las materias protéicas. La glicocola, alanina, valina, leucina, tirosina,
fenilalanina, ácido glutámico, cistina, lisina, histidina, triptofano, no dan
la reacción. Los péptidos naturales (peptonas) y artificiales (glicil-glicina,
diacipiperazina) no dan la reacción.

Convencidos nosotros del valor clínico de este método, hemos tratado
también de comprobar si la reacción era aplicable á la medicina legal, á
la determinación de las manchas de orina, como lo ha sostenido recien-
temente Policard (1). |

He aquí la técnica que propone dicho autor: Con unas tijeras finas se
corta al nivel de la mancha un cuadrado de unos dos milímetros de lado
próximamente. Se lleva á un porta-objetos y se disocia en seco con ayu-
da de agujas. Sobre estas fibrillas, perfectamente disociadas, vierte una

6 dos gotas de reactivo, preparado siempre momentos antes de usarlo y
después aplica el cubre-objetos y lo rodea con parafina, operación esta
última que impide toda evaporación.

Siempre que se proceda á los ensayos debemos preparar el reactivo: se
disuelven 25 centigramos de xantidrol en 25 cent. cúb. de alcohol de 93%;
después se agregan 25 cent. cúb. de ácido acético cristalizable.

Además del preparado que obtenemos con la mancha sospechosa se
obtiene otro testigo con un pedazo de tela tomado de una zona limpia.
Se abandonan las dos preparaciones durante una hora y al cabo de este
tiempo se hace el examen microscópico. Donde hay urea, es decir, ori-
na—dice Policard—se forman bellas agrupaciones en estrella, alojadas
en los espacios situados entre las fibras del tejido, algodón, lana, lino ó

(1) Policard: Emploi de la réaction de la dixantilylurée pour caracteriser les
taches d'urine en médecine legale. Arch. d' Anthrop. crim., 1914.

38 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

seda, ó insertadas sobre las fibras mismas. Donde no hay urea, ningún
cristal se produce. Y considera negativa la reacción después de un tiem-
po de unas quince horas próximamente.

Por nuestra parte, y nos aproximamos en esto á la opinión de Policard,
no consideramos de interés en un examen médico-legal más que los eris-
tales en agujas y las agrupaciones en estrellas, y no los cristales en ta-
bletas rectangulares, que Hugouneuq y Morel han dibujado en su tra-
bajo, y que nosotros hemos obtenido con manchas que no eran de orina.

Para formarnos opinión exacta del valor médico-legal de la nueva re-
acción hemos procedido á numerosos ensayos. Hemos obtenido los eris-
tales de dixantilurea de la urea tratada directamente en el porta-obje-
tos por el reactivo de Fosse, preparado siempre momentos antes de
usarle. Se obtienen agujas muy largas.

Con una gota de orina, sin desecarla previamente, se obhcnaR tam-
bién, agregando otra de reactivo, cristales en agujas, sueltos ó agrupa-
dos en estrellas.

Si se comparan los resultados que se obtienen en estas condiciones con
los que se obtienen con una mancha de orina en la técnica de Policard,
se nota que no hay-una gran semejanza. La gota de orina no reacciona
con el reactivo de idéntica manera que la mancha desecada.

Debemos consignar que cuando tratamos unas fibrillas de la zona lim-
pia por el reactivo de Fosse y observamos después de una hora, encon-
tramos una cristalización diferente de la que se obtiene con la mancha
de orina. vea

Proponemos una técnica muy sencilla, más rápida y de mejores resul-
tados. El cuadrado de mancha sospechosa, llevado al porta objetos y di-
vidido en varios fragmentos (no hay necesidad de una desfibración com-
pleta), es exprimido con una gota de agua destilada, ayudándonos de
pequeñas presiones con el cubre-objetos; aplicamos éste y hacemos pa-
sar entre las dos láminas de cristal una gota del reactivo. La reacción es
rápida, y á los pocos minutos se observan campos microscópicos, muy
semejantes á los que se obtienen con una gota de orina. Nos hemos
aproximado á las condiciones de este último experimento. . ;

Numerosos ensayos nos han convencido del valor de la nueva prueba
microquímica. ra

Ni el meconio, ni el esperma, saliva, leche y sangre humanos dan e
reacción. Obtuvimos también resultados negativos con la creatina, crea-
tinina, leucina, tirosina, xantina, cistina y guanidina. Negativos igual-
mente con jugos de frutas (naranja, cereza, albaricoque, ciruela, etc.).

No dan la reacción infinidad de alcaloides y glucósidos : atropina, ve-
ratrina, daturipa, solanina, solanidina, papaverina, narceína, estricnina,

8
AA

SURCOS DE LA CARA INTERNA DE LA ESCAMA OCCIPITAL 39

aconitina, hidrastina, muscarina, cinconina, santonina, elaterina, colchi-
cina, cafeína, fisostigmina, morfina, codeína, digitalina, emetina y otros.

Creemos por esto que de lo que antecede se puede concluir : 1.*, el
método de precipitación de la urea por el xantidrol permite la dosifica-
ción de la misma en los líquidos orgánicos y resulta de fácil aplicación
para los fines de la clínica, y 2.”, las manchas de orina, regeneradas con
agua destilada, dan lugar con el mismo reactivo á una cristalización tí-
pica, que permite diagnosticarlas en medicina forense.

—— 3 KK

Observaciones sobre los surcos-de la cara interna de la escama occipital

POR

T. MAESTRE, J. TENA-SICILIA y A. LECHA-MARZO

La cuestión de las anomalías morfológicas interesa cada día más á los
médicos legistas, á los psiquiatras y á los cultivadores de la Antropología
criminal. No se discuten ya en Psiquiatría (hablando en términos gene-
rales). No se niegan en Antropología criminal. La opinión de Lacassagne
y Martin (1) no puede parecernos sospechosa: «Esto sólo puede negarse
cerrando los ojos ante una labor científica que merece grandísima aten-
ción, Lo que podrán variar son las opiniones acerca de la interpretación
que debe darse á los fenómenos y acerca de las teorías que se han idea-
do para explicar su encadenamiento». Nos interesa á los médicos legis-
tas conocer la frecuencia con que se observan ciertas anomalías en los
normales para contar así con términos de comparación tuando hacemos
análogas pesquisas en locos y criminales.

Para demostrar nosotros que pensamos como algunos de nuestros cole-
gas extranjeros, recordaremos que el Dr. Persiani, en la Sociedad de Me-
dicina legal de Roma, sesión del 7 de Mayo de 1904, presentaba una co-
municación «Sui basioccipitale in 150 crani della Morgue di Roma». Este
autor estudiaba en su comunicación el basio-occipital de cráneos de nor-

males.
Recordemos también los estudios tan importantes aparecidos en estos

últimos años (Ell. Smith, Tedeschi, Lattes) sobre asimetrías craneanas y

su relación con las asimetrías cerebrales, y que estas asimetrías han sido

(1) 4. Lacassagne y E Martin: Etat actuel de nos conaissances pour servir
á létude analytique des travaux nouveaux sur l'anatomie, la psicologie et la
sociologie des criminels. Année Psichologique, de Binet, 1905.

40 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

señaladas en la región occipital. Por esto, estudios como el que hoy em-
pezamos pueden servir algún día de áyuda en la aclaración de diversos
problemas.

Por otra parte, todavía interesa á la Anatomía descriptiva conocer lo
más exactamente posible los canales de la cara endocraneana de la esca-
ma occipital, canales que, como sabemos, contienen los senos posteriores
de la dura-madre. La cuestión no es estudiada en los Tratados de Anato»
mía. Sólo han sido dedicadas á la misma algunas raras monografías, que
nosotros resumiremos en este esiudio.

Los tratadistas clásicos de Anatomía figuran de muy distinta manera
la conformación de estos surcos de la cara interna del occipital. Así, los
Tratados de Anatomía de Morel y Duval y en el artículo Cráne de Pozzi,
en el Dict. encycloped. des sciences med., tomo XXII, pág. 380, París,
1879, representan estos surcos por uno longitudinal y medio, que se divi-
de en dos ramas iguales que se unen á los surcos transversales. Por el
contrario, en las obras de Sappey y de Leidy el surco longitudinal se une
con un surco transversal izquierdo; en la de Poirier con el surco trans-
versal derecho.

Otra de las cosas que nos han animado á estas pesquisas, es la comu-
nicación que un laborioso investigador cubano, Israel Castellanos, ha
dirigido al Instituto de Medicina Legal sobre el cráneo de un criminal
cubano, que presenta al nivel de la protuberancia occipital interna y del
surco derecho una enorme fosa torcular de 10 milímetros de profundi-
dad, 25 milímetros de longitud y 26 de latitud. En esta observación de
Castellanos, más que de una fosa cerebelosa se trata de un caso de fosa
torcular; por lo menos así resulta de las observaciones que nosotros
hemos realizado. : AE

Nuestras pesquisas han recaído sobre 300 cráneos del Museo Anatómi-
co de la Facultad de Medicina de Madrid (1). Hemos tratado de compro-
bar la exactitud de las clasificaciones de Le Double y Manno; además,

estudiar si era posible dar una clasificación que, reuniendo todas las for-.

mas, fuese más didáctica que las de estos autores; señalar la frecuencia
de las diversas variedades (cosa que no había sido hecha), y estudiar las
asimetrías,

Le Double ha dado una clasificación de los surcos de la cara interna de
la escama occipital, admitiendo cuatro tipos é incluyendo en un quinto
grupo las anomalías que no pueden incluirse en los otros: cuatro grupos.

Para su clasificación, Le Double considera principalmente la dirección

(1) Nos es muy grato expresar á su Director, Sr. Castro, nuestras más sentidas
manifestaciones de agradecimiento por la liberalidad con que ha puesto á nuestra
disposición este tan útil material.

a

SURCOS DE LA CARA INTERNA DE LA ESCAMA OCCIPITAL 41

y situación del surco sagital. En el primer tipo de Le Double la porción
longitudinal es sencilla, media, rectilínea y se incurva continuándose
con el surco lateral derecho, más largo que el lateral izquierdo. En el
segundo tipo de este autor el surco longitudinal es sencillo, medio, recti-
líneo y se continúa incurvándose con el lateral izquierdo, más largo que
el surco lateral derecho. En el tercer tipo el surco medio se divide en dos
ramas; la más larga va al surco lateral derecho. En el cuarto tipo el sur-
co medio se divide también en dos ramas, pero la más larga va al surco
lateral izquierdo. Le Double coloca entre los tipos excepcionales todos
los restantes. En otros casos el surco medio es sencillo, rectilíneo y se
divide en dos ramas iguales que van á los surcos laterales correspondien-
tes; otras veces el surco medio está situado un poco á la derecha ó un
poco á la izquierda, pero casi siempre á la derecha, y se continúa con el
surco transverso del mismo lado; recibe ó no un surco el mismo lado de
la cresta occipital interna. En otros ejemplares el surco medio es doble y
cada surco se continúa con el surco transverso correspondiente y recibe
ó no el surco que costea la cresta occipital interna.

Tal es la clasificación de Le Double, según la resume Viviani en su
trabajo (véase más adelante). Seguramente este autor ha consultado el
primer trabajo que Le Double (1) ha dedicado á esta cuestión.

Le Double, en su obra «Traité de variations des os du cráne de l'hom-
me », París, Vigot, 1903, da una clasificación distinta; admite cinco tipos:

Primer tipo. — Falta el surco longitudinal y está sustituido por una
cresta que se extiende desde el lambda hasta la protuberancia occipital
interna ó hasta el opistio; separa algunas veces los dos canales transver-
sales, de dimensiones iguales ó desiguales.

Segundo tipo. — El surco longitudinal es sencillo, medio rectilíneo, y
se continúa unas veces en la foseta cerebelosa media, comunicando con
los surcos transversales, bifurcándose ó no al nivel de la protuberancia
occipital interna.

- Otras veces este surco sagital y medio se une en ángulo recto con los
surcos transversos, que se continúan el uno con el otro. Otras veces el
surco sagital se continúa con el lateral derecho, más desarrollado que el
izquierdo. Esta variedad es la que se observa con más frecuencia. En

- Otros ejemplares se incurva hacia afuera, continuándose con el surco la-
-teral izquierdo. Esta variedad, según Le Double, se observa más frecuen-

temente después de la anterior. Otra variedad perteneciente á este tipo

4

- (1) F. Le Double: ¿Quel est la mode de conformation le plus habituel des gout-
tiéres de la table endocrannienne de Vecaille de l'occipital humain qui con-
tiennent les sinus posterieures de la dure-mére? (Bibliographie anatomique, revue
des travaux en langue francaise, tome IX, 1901).

nd

42 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

es la siguiente: el surco sagital se divide en dos ramas, de la cual la más
larga se continúa con el surco lateral derecho. Es la variedad más fre- ,
cuente, según Hunauld y Morganni. 4

En otros casos, la rama más larga se continúa con el surco lateral iz-
quierdo; esta variedad, por-su frecuencia, ocupa, según Le Double, el
cuarto lugar. Otra variedad: el surco sagital se divide en dos ramas de
igual longitud, y cada una se une al surco transversal correspondiente.

Tercer tipo. — El surco longitudinal es sencillo y se extiende desde el
lambda á la protuberancia occipital interna, y su parte media se incur-
va á derecha ó á izquierda. Se puede continuar con el transverso dere- /
cho ó izquierdo. »

Cuarto tipo. — El surco longitudinal es sencillo, rectilíneo, situado fue-
ra de la línea media, á derecha ó 4 izquierda, y se continúa con el surco
lateral derecho ó con el izquierdo.

Quinto tipo. — El surco longitudinal es doble; los dos surcos están se-
parados por una cresta vertical, y cada uno se eontinúa con el surco
transversal correspondiente. Estos surcos pueden recibir ó no dos surcos
que hay á los lados de la cresta occipital interna.

Manno (1) ha hecho una clasificación mucho más sencilla. Admite sólo
dos tipos, y ha tenido en cuenta el modo de convergencia de los surcos
y las crestas en la protuberancia occipital interna. En el primer tipo de
Manno, del lambda á la porción media de la escama occipital en la línea
media, se extiende una cresta, más ó menos obtusa, que se continúa con la -
protuberancia occipital interna. Lateralmente, y á la derecha de esta cres-
ta, está excavada la porción del sureo sagital, que al nivel de la protube-
rancia occipital interna se desvía á la derecha y se continúa con el surco
lateral derecho. El surco lateral izquierdo parte del lado izquierdo de la
protuberancia occipital interna y es menos profundo que el derecho. La
protuberancia occipital interna merece en estos casos el nombre de emi-
nencía cruzada, pues en ella convergen cuatro crestas longitudinales: la
cresta sagital superior y la cresta occipital interna, y dos transversales:
el borde inferior del surco lateral derecho y la porción inicial del surco
lateral izquierdo.

En el tipo segundo de Manno, el surco sagital está en la línea media y
se extiende desde el lambda hasta el nivel de la protuberancia occipital
interna, aplanada ó en fosa, donde se divide en dos surcos transversos
de dimensiones iguales. El borde superior de cada surco transverso es la
continuación de los bordes laterales (derecho é izquierdo respectivamen-
te) del surco sagital medio; los bordes inferiores parecen ramos de bifur-
cación de la cresta occipital interna. -

(1) Citado;por Viviani.

SURCOS DE LA CARA INTERNA. DE LA ESCAMA OCCIPITAL 43

Ya Speriro (1) había observado la variedad, en la cual el surco longitu-
_ dinal se desvía hacia la derecha y se continúa con el surco lateral dere-
recho, 269 veces en 512 cráneos. Riidinger (2) señaló ya en 1888 el mayor
desarrollo del surco transversal derecho, en relación con el izquierdo. Le
Double confirmó en 200 cráneos, encontrando 137 veces la continuidad
del surco longitudinal y del surco lateral derecho, las antiguas observa-
ciones de Sperino.

Nuestro amigo U. Viviani (3) ha descripto en una demente epiléptica
una variedad poco frecuente. El surco superior está situado á la derecha
de la línea media y se continúa con el lateral del mismo lado; su rareza
consiste en el gran desnivel existente entre este surco lateral derecho y
la cresta lateral izquierda. Viviani describe este caso como una nueva
prueba de la frecuencia con que se encuentran notables asimetrías en el
cráneo de los dementes epilépticos.

En nuestra opinión, la clasificación de Le Double, resumida en el ar-
tículo de Viviani, resulta incompleta por varios motivos. El tercero y
cuarto tipos son uno mismo, pues sólo les diferencia la longitud de las
ramas en que se divide el surco medio, y, además, en el quinto tipo, de
casos excepcionales, coloca á aquéllos en que el surco medio se divide en
dos ramas laterales que van á los surcos laterales correspondientes.

¿Estos tres tipos, que podríamos llamar en Y, no se pueden agrupar en
uno? Además, ciertas variedades de Le Double, que coloca en su tipo
quinto, deberían incluirse en su tipo primero y segundo, pues él las dife-
rencia únicamente por la situación media ó un poco lateral del surco sa-
-_gital. Sería más sencillo incluir estas variedades del tipo guinto en los
tipos primero y segundo. Se sabe, por otra parte, en antropología, que los *
puntos antropológicos medios no se encuentran exactamente en el plano
sagital, sino separados á un lado ó á otro. Además, en esta clasificación
de Le Double no se encuentran incluídas todas las variedades de surcos
y crestas que puede presentar la escama del occipital.

La segunda clasificación de Le Double se presta á los mismos repro-
ches. El primer tipo de esta su segunda clasificación se da con muy poca
frecuencia (7 veces en 300 casos). En el-segundo tipo incluye Le Double
formas muy diferentes. Tampoco el tercer tipo tiene una importancia de-
cisiva. El cuarto tipo puede ser incluído en dos de las formas del segun-
do. Además, en esta clasificación no están incluídos los tipos en crestas.

(1) Sperino: Rapporte fra la circolazione endo et extracraniana avuta riguardo
alla applicazione pratiche, pág. 23. Turín, 1884.

(2) Rudinger: Des Hirnschlagadern, etc. Arch. f. Anat., 1888.

(8) U. Viviani: Notevole asimmetria e non frequente disposizione dei solchi
e delle creste che convergono nella «protuberantia occipitalis interna » nel cranio

di una demente epilepptica. /! Cesalpino, año LXXX VIII, Septiembre 1906.

44 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

La clasificación de Manno es sencilla, pero al mismo tiempo muy in-
completa. No comprende los casos en que el surco sagital se continúa con
el surco transversal izquierdo, ni aquellos otros en los que se observan
dos surcos longitudinales que se continúan con los transversales corres-
pondientes, ni los tipos en cresta, etc.

La frecuencia con que nosotros hemos observado las diversas confor-
maciones de los surcos de la cara interna de la escama occipital en los
300 cráneos examinados nos han permitido llegar á una clasificación más
exacta, más fácil de recordar, y en la cual pueden agruparse todas las
formas por raras que ellas sean.

Nosotros admitimos cuatro tipos :

Primer tipo.—Le podemos llamar curvo derecho: el sureo longitudinal,
situado en la línea media ó un poco á la derecha, se continúa hacia abajo
con el surco transversal derecho. El surco transversal izquierdo es inde-
pendiente. Esta disposición la hemos encontrado 117 veces en 300 erá-
neos. En un tercio de los casos el surco transversal izquierdo está muy
atenuado. La protuberancia occipital interna puede estar muy desarro-
llada ó faltar ó ser sustituida por una depresión (fosilla torcular de Zoja),
en esta variedad cualquiera de los surcos transversales puede recibir el
surco del seno occipital. En uno de nuestros cráneos esta disposición iba
acompañada de foseta vermiana. En nuestro tipo primero como en el se-
gundo el surco transversal que contribuye á tormar el arco puede recibir
un surco que procede de la parte superior de la escama. El tipo curyo de-
recho lo hemos encontrado también en el cráneo del gorila.

Segundo tipo. Curvo izquierdo. — El surco longitudinal se une con el
surco transversal izquierdo; el derecho es menos largo. Se observan las
mismas variedades que en el tipo primero; lo hemos encontrado con mu-
cha menos frecuencia 27 veces. y

Tercer tipo. Curvo doble. —Un surco longitudinal derecho se continúa
con un surco transversal derecho y otro izquierdo, con sus correspon-
dientes; 25 casos.

Cuarto tipo.— Podemos llamarlo angular, y admitir las variedades si-
guientes: el surco longitudinal se divide en dos ramas, iguales ó desigua-
les, que se continúan con los surcos transversos correspondientes; esta
variedad es la forma de transición entre el tipo angular y los tipos cur-
vos; la hemos encontrado 28 veces. En otros ejemplares hemos encon-
trado dos crestas y un surco: surco longitudinal y dos crestas transver-
sales, un caso ; cresta vertical, cresta transversal izquierda y surco trans-
versal derecho, ocho casos; cresta vertical, cresta transversal derecha y
surco transversal izquierdo, nueve casos; cresta vertical y dos surcos
transversales, siete casos.

ESMAS"

SURCOS DE LA CARA INTERNA DE LA ESCAMA OCCIPITAL 45

Hemos encontrado 53 cráneos, que representaban cuatro crestas en vez
de surcos. Á veces estas crestas eran atenuadas, interrumpidas ó coinci-
diendo con fosilla torcular. En cinco casos la escama occipital era casi
lisa en su cara interna.

Nosotros dedicaremos una nota al estudio de la protuberancia occipital
interna; por el momento nos contentaremos con decir que en algunos
eráneos la protuberancia interna y externa no están al mismo nivel; que
en otros casos estaba sustituida por una superficie lisa ó una depresión :
por la llamada fosilla torcular. Hasta 1903, en que Le Double publicó su
Tratado, no habían sido descriptos más que seis casos de fosilla torcu-
lar; cuatro de Zoja; dos de Le Double.

También se trata de un caso de fosilla torcular en la observación de
Castellanos. Nosotros la hemos observado con relativa frecuencia; unas
veces ocupa la región central y otras es, más ó menos, lateral.

Estos surcos del occipital corresponden á los senos venosos del mismo
nombre; están formados por el obstáculo, por la dificultad que los vasos
oponen al crecimiento de los huesos en el sitio en que se ponen en con-
tacto con ellos. Los autores que han estudiado las distintas variedades
que se pueden observar en los senos venosos posteriores de la dura-madre
señalan tipos análogos á los que nosotros hemos descripto al estudiar los
surcos de la escama occipital. Precisamente Dumont (1) describe como
variedad más frecuente la comunicación del seno longitudinal con el seno
lateral derecho.

F, Regnaul, en el Congreso Anatómico de Lyon (1901), sostenía que
los surcos correspondientes á los senos venosos dependen del peso del ce-
rebro. Es evidente, agrega Le Double, que á medida que los senos son
más comprimidos por delante son más rechazados hacia atrás y dificultan
el crecimiento del tejido óseo á consecuencia del aumento de presión que
ejerce sobre el mismo.

e"

Por relacionarse con esta cuestión de los surcos de la cara interna de
la escama occipital; y porque durante nuestras pesquisas hemos encon-
trado algunos casos de esta anomalía, estudiaremos en esta nota la lla-
mada foseta cerebelosa media. No sólo los que cultivan la antropología
criminal declaran en sus entusiasmos que en la sombría mañana de in-
vierno en que Lombroso disecaba en la Morgue de la cárcel de Pavía y
encontraba en el cráneo del ladrón calabrés Vilella uno de los primeros
casos de foseta cerebelosa media, el problema del atavismo del crimen le
aparecía tan claro como apatece el horizonte en una llanura inflamada,

(1) Dumont: Les sinus posterieurs de la dure-mére, pág. 50. Nancy, 1894,

46 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA
sino que también los mismos anatómicos declaran «que es preciso reco-
nocer que es el autor del Uomo delinguente al que debemos atribuir el
honor de haber llamado la atención de los naturalistas y eriminalistas de
una manera muy especial sobre esta variación del occipital humano (Le
Double)». Esta foseta, señalada por Verga, después por Lombroso (1), ha
sido estudiada después por una glóriosa falange de investigadores. En
1908 (2) uno de nosotros publicó dos de los primeros casos observados en
España. E ;

La fosa cerebelosa media tiene, ordinariamente, la forma de un trián-

gulo isósceles, cuya base corresponde al contorno posterior del agujero.

occipital, su vértice al origen de la cresta occipital interna y sus bordes
laterales 4 los dos labios desdoblados de esta cresta. En algunos casos en
que no se observa fosa cerebelosa media la cresta occipital interna al ni-
vel del agujero occipital está sustituído por un pequeño espacio triangu-
lar, liso, el triángulo post-opistiaco. Es preciso no confundirlo con la fo-
silla, pues en estos casos, mucho más frecuentes, no se observa depresión
alguna. En vez de fosilla vermiana se puede ver un verdadero surco post-
opistiaco, que se extiende desde la protuberancia occipital interna hasta

el borde posterior del agujero occipital. Este canal está limitado por dos

crestas occipitales internas. Con este trabajo presentamos un cráneo que
muestra muy bien esta anomalía.

Algunos autores (D'Ajatulo, Le Double) agregan que en estos casos de
surco post-opistiaco y fosilla cerebelosa media la hoz del cerebelo se bi--
furca para continuar las dos crestas occipitales internas; á veces esta hoz
del cerebelo bifurcada se fusiona en la parte inferior de la fosilla En los
casos de fosilla cerebelosa media publicados por Lecha-Marzo en 1908 ha-
bía dos y tres hoces del cerebelo independientes en todo su trayecto.

Es muy rara una variedad de fosa cerebelosa media estudiada por Al-
brecht. Se extiende desde la protuberancia occipital interna hasta el bor-
de del agujero occipital, y está dividida en dos fosillas secundarias por
una cresta transversal: una superior ó epistafilina, y una inferior ó esta-
filina. Se marcaba en la cara externa de la escama occipital por un abul-
tamiento. .:

En uno de los casos que nosotros hemos estudiado y fotografiado de
foseta cerebelosa media, la cresta derecha de esta fosa presenta un sa-
liente, una especie de apófisis. Nosotros creemos que se trata de una osi-
ficación de una parte de la hoz del cerebelo. Sabemos que la hoz del ce-

(1) C. Lombroso: Esistenza di una fossa ocdipitale mediana nel cranio di un de-
linguente. Notta letta adunanza del Real Istituto Lombordo di science et let-

tere. 12 Enero 1871.
(2) Lecha- Marzo; El cerebro de los criminales, Moya, editor. Madrid, 1908.

SURCOS DE LA CARA INTERNA DE LA ESCAMA OCCIPITAL 47

rebelo es una dependencia de la dura-madre; que la dura-madre se com-
pone de dos hojas, y una es un verdadero periostio interno que preside
la nutrición del tejido óseo, y por lo tanto, á su reparación; nos explica-
mos así cómo la hoz del cerebelo puede sufrir un proceso de osificación.
Creemos que es el primer caso que se menciona de osificación de la hoz
del cerebelo. En el hombre se había señalado, especialmente en viejos y
alienados, osificaciones parciales de la hoz del cerebro. Y en los Ateles
está osificada la tienda del cerebelo.

La mayoría de los autores citados atribuyen la aparición de esta fosa
cerebelosa media al desarrollo excesivo del vermis inferior (1). Según
Albrecht, es al desarrollo excesivo de esta parte del cerebelo humano la
única causa á que se debe atribuir la fosilla. Lombroso y Romiti agregan,
además, la ausencia ó desarrollo rudimentario del huesecillo de Kerc-
kring, que precisamente aparecen hacia el tercer mes de la vida intra-
uterina en esta parte de la escama occipital. Rossi, en 1891, dió á conocer
un caso de fosa cerebelósa media con ausencia del lóbulo medio, que sin
invalidar la primera explicación, puede reforzar aquellas otras que expli-
can la aparición de la foseta cerebelosa media por la ausencia ó por el ex-
ceso de desarrollo del huesecillo de Kerckring. En las observaciones que
se han hecho sobre fetos casi nunca se ha podido ver de una manera cla-
ra, aislado, este huesecillo, y muchos lo consideran simplemente como
una prolongación media del endocráneo. Falta en muchos casos. No pa-
rece existir en los animales (Bianchi, Debierre, Le Double). Tratándose,

- por lo tanto, de un núcleo de osificación que no es constante en el hom-

bre, no se pueden explicar por su ausencia los casos de fosilla cerebelosa
media. Además, tampoco es viable, en nuestra opinión, aquella otra de
Chiarugi, que atribuye la fosilla cerebelosa media á un exceso de des-
arrollo del huesecillo de Kerckring, pues precisamente falta en los carní-
voros y en los roedores que presentan una gran fosa cerebelosa media.
Benedikt, y á su opinión se asocia Le Double, piensa que la fosa cere-
belosa media es producida por los senos occipitales posteriores, muy des-
arrollados en estos casos, que están reunidos en la línea media, más ó me-
nos confundidos. Las distintas variedades con que pueden presentarse
estos senos venosos nos ayudarían á explicarnos las distintas variedades

de fosa cerebelosa media. Nosotros consideramos inaceptable esta opi-

nión. En dos casos que nosotros hemos autopsiado, y en los cuales hemos

(1) Sabemos que los modernos trabajos de Fisiología (Bolk, van Rymberk,
Fano, Adankievicz), han revelado la existencia de centros motores en el cere-
belo, y desde el punto de vista histológico hemos demostrado nosotros que la cé-
lula de Purkinje es la célula piramidal de la corteza cerebelosa. (Lecha- Marzo:
Sulla somiglianza della corteza cerebrale e cerebellare. Archivio di Psichiatria,
Turin, 1909).

48 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

encontrado la fosa cerebelosa media, los senos occipitales posteriores no

contribuyen á su formación.

Lombroso ha estudiado en distintas ocasiones la frecuencia de esta fosa
cerebelosa media en los normales, en los locos y en los delincuentes. In-
dicaremos primero los trabajos de este autor y de otros que le siguieron
en el estudio de la cuestión, que concluyen en la mayor frecuencia de la
fosilla cerebelosa media en los delincuentes y en los locos.

En 1871 decía Lombroso que esta anomalía se encuentra en el 23 por
100 de los delincuentes, en el 20 por 100 de los epilépticos, en el 14 por
100 de los alienados, en el 4'5 por 100 de los sujetos no criminales.

Más tarde sostiene que se encuentra en el 16 por 100 de los criminales
italianos, en mucha menos proporción en las mujeres criminales y en el
5 por 100 de los normales. Sus observaciones y las de Bomidt dan para
los locos una frecuencia de 10 á 12 por 100.

Encontró también la anomalía más frecuente en los cráneos de razas
salvajes que en los cráneos europeos. á

Marimó (1) confirmó estos resultados encontrándola en el 4'9 por 100 de
los cráneos de europeos y en el 13 por 100 de cráneos de er iminales. Ma-
rimó y Gambara han notado esta anomalía asociada á los huesos del pte-
rion en los criminales con más frecuencia que en los normales. Verga ha
encontrado la fosilla cerebelosa media en un 23 por 100 en los delincuen-
tes; Tamassia (2) en un 24 por 100; Ottolenghi y Roncoroni (3) 11 veces

en 100 cráneos de criminales; Roncoroni y Ardu (4) 3 veces en 43 cráneos

de criminales; Fusari (5) 10 veces en 104; Corre (6) 4 veces en 29 cráneos
de criminales asiáticos. Romiti (7) la encontró en el 5 por 100 de los crá-
neos de sujetos normales, y en un 12 por 100 en los locos; Morselli (8) la
encontró len los locos en un 14 por 100 de los casos. Mingazzini (9) da
para los locos cifras más elevadas, 22 por 100; para los epilépticos en 38

por 100. Vergonzoli, Zoja, Tenchini, Verdelli, Bizzozero, Foa, Calori, Tiz-

zoni, Amadei, Paoli, Conguet, Bono y Frigerio (citados por Le Double)

(1) F. Marimó: Contributo allo studio della fossetta occipitale. Arch, p. l'antrop.
e la etr , 1887; Arch. di Psichiatria, 1889.— F. Marimó y L. Gambara: Contributions
a Vétude des anomalies du pterion. Arch per l'antrop , XIX, 1889.

(2) Tamassia: Arch. per l'antrop., 1V, 1874.

(3) Ottolenghi y Roncoroni: Anomalies recontrées á l'autopsie de 100 criminels.
Turin, 1891. '

(4) Roncoroni y Ardu: Arch. di Psichiatria, X1I, 1891.

(5) R. Fusari: Catalogue de l'Institut EN de l'Universitó de Mes-

sine, pág. 17.
(6) Corre: Les criminels, pág. 18. París, 1888.
(7) Romiti: Cervelli de delinquente. Siena, 1880.
(8) Morselli: Riv. sperim, de Fren., tome XVI, 1890. >
(9) Mingazzini: Atti della R. Acad. di Roma, 1886-1887; Riv. sperim. di Fren,, 1888,

3
|

%

SURCOS DE LA CARA INTERNA DE LA ESCAMA OCCIPITAL 49

han encontrado también la fosilla cerebelosa media más frecuentemente
en los locos y en los criminales que en los normales.

Más recientemente, Mondio (1) la ha encontrado en los criminales en la
proporción del 8'8 por 100; en los criminales en un 25 por 100, y Marag-

nani (2) la encuentra en los criminales en un 33 por 100; en los epilépti-
cos en un 22 por 100, y en los locos en un 18 por 100, siendo la media
total 21'7 por 100.

Hay algunos trabajos que parecen contradecir los resultados anterio- |
res. Mientras Lombroso encuentra la fosa cerebelosa en el 4'5 por 100 de
los sujetos normales, Marimó en el 4'9 por 100, Romiti en el 5 por 100,
Mondio en el 8 por 100, Debierre en el 2'8 por 100, nosotros en el 3 por
100, Lucy las señala en el 10 por 100, Debierre (3) ha criticado estos re-
sultados de Lucy, pues este autor juzga como fosilla cerebelosa media el
triángulo post-epistiaco, y eliminando estos casos habría encontrado la
fosilla cerebelosa media en un 44 5 por 100 de cráneos de sujetos nor-
males. Seguramente esta crítica puede hacerse también á bastantes casos
de fosilla cerebelosa media señaladas en cráneos de criminales.

Féré (4) niega también la mayor frecuencia de la fosa cerebelosa media
en el cráneo de los criminales. Debierre la ha encontrado con más fre-
cuencia en los anormales, pero la diferencia es mucho menor que en las
observaciones italianas.

Sin embargo, como se ve en estas observaciones, son mucho menos nu-
merosas, y un espíritu científico é imparcial nos inclina á admitir como
un hecho probado que la fosa cerebelosa media es más frecuente en los
cráneos de criminales y alienados que en los de sujetos normales.

Esta conclusión no debe inclinarnos á pensar superficialmente que la
presencia de una fosilla cerebelosa media nos puede servir para remon-
tarnos al pasado psíquico de un sujeto, ni aun simplemente á observación
alguna sobre su morfología encefálica.

Una anomalía es un indicio, cuyo valor aumenta cuando se encuentra
reunida á otras muchas. De una nota no se obtiene un acorde.

Por esto no nos explicamos nunca estas admiraciones que hace Le Dou-
ble: «¡Qué importa que el ágil ladrón calabrés Vilella tenga una fosa ver-
miana si esta fosa se encuentra en la persona más honorable!». Recuerda
también que Dante y Pericles tenían el cráneo asimétrico; que Bichat te-
nía un hemisferio más pequeño que otro, y agregamos nosotros, que á pe-

(1) G. Mondio: Studio supra duocente techi-messinesi, 180 appartinenti a sani,
20 a delinquenti. 1897.

(2) Maragnani: 11 Museo Craniologico dell Manicomio di Alessandria. Archivio
di Psichiatria, vol, XXXIII, 1912.

(8) Debierre: Lo cráne des criminels, pág. 127. Lyon, 1895.
(4) Féré: Dégénérescence et criminalité, pág. 73, 1888,

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50 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

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sar de esto, siempre seguimos pensando que las graves asimetrías cranea-

les y cerebrales son más frecuentes en los locos y criminales que en los
normales, aun cuando la asimetría cerebral y craneal se observen en los
normales y sea casi hasta la normalidad.

En los casos de foseta cerebelosa media que nosotros hemos estudiado,
en los cuales la fosa es típica, bastante profunda, no se manifiesta en la
cara externa del occipital por una eminencia, y así sucede con las obser-
vaciones recogidas en el extranjero. En algunos casos en el hombre se
manifestaba por una eminencia, y observando en la cara externa apare-
ce un abultamiento medio, correspondiente á la fosa cerebelosa media, y
dos laterales, correspondientes á las fosas cerebelosas laterales separa-
das de aquélla por una pequeña depresión ó surco. Esta es la disposición
que se observa en un gran número de mamíferos. Falta la fosa cerebelo-
sa media en el orangután, en el chimpancé y en el gorila; Morselli (1) la
encontró en los cercopítecos (C. albogulari), semnopítecos (S. cristatus,
nasalis, larvatus), en los macacos y en otros monos. Está muy desarro-
llada en los roedores (herizo, rata y conejo) y en los carniceros (zorro,
gato). Se encuentra también en los cetáceos (delfines) y en los marsu-
piales. :

Decíamos antes, que en gran número de mamíferos no se observa sólo
la fosa cerebelosa media, sino el abombamiento medio en la cara externa
que corresponde á esta fosa y los dos abombamientos laterales que co-

+

rresponden á las fosas cerebelosas laterales. Esta disposición es muy rara
en el hombre, que presenta siempre una escama occipital convexa, rugo-
sa, pero sin estos abultamientos. El cerdo joven la presenta, pero en el
cerdo adulto desaparece y «su escama no es ya convexa hacia afuera,
sino fuertemente cóncava». Esta disposición no ha sido señalada en el
hombre. Nosotros presentamos al Instituto de Medicina Legal de la Uni-
versidad de Madrid, un cráneo con fosa cerebelosa media, no muy pro-
funda, y, examinado el occipital por su cara externa, presenta entre el
borde posterior del agujero occipital y la protuberancia externa, dos ex-
cavaciones profundas separadas por una cresta occipital externa. Estas
dos fosas las podemos denominar fosas pot-opistiacas externas.

CONCLUSIONES

/
En espera de un nuevo trabajo en que extenderemos nuestros estudios
á mayor número de cráneos, de las observaciones (300) hechas ahora po-
demos hacer las conclusiones siguientes:
1.* Los surcos de la cara interna de la escama occipital pueden redu-

(1) Morselli: Atti della Soc. Ligustica di sc. natur. Génova, 189; Arch. di Psich., 1890,

MarsTrE, Tena -Srornia Y Leoma-Marzo: Surcos de la cara interna de la escama
occipital.

Fig. 2, — Tipo curvo izquierdo.

MaesTRE, TENA -Siornia Y Lecua - Marzo: Surcos de la cara interna de la escama
occipital.

Fig. 4.—Tipo en crestas.

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MaestrE, Tena-SicinIa Y Lecua- Marzo: Surcos de la cara interna de la escama
occipital,

Fig. 5.— Foseta cerebelosa media.

MarstrE, Teya-Siciia y Lecha- Marzo: Surcos de la cara interna de la escama
occipital.

Fig. 6.—Surco post-opistiaco.

MarzsTRE, TeNA -SiciLia Y Leona - Marzo: Surcos de la cara interna de la escama
occipital.

Fig. 7.—Foseta cerebelosa media con desarrollo muy pronunciado de una de las cres-
tas que la limitan,

f

REACCIÓN COLORANTE DE LA SANGRE POR LA TINTURA DE ALOÍNA 51

cirse á cuatro tipos principales: curvo derecho, curvo izquierdo, curvo
doble y nuestro tipo angular.

2.? La fosilla cerebelosa media no debe ser considerada como el surco
correspondiente á los senos occipitales más ó menos fusionados. Tiene
un significado atávico, y es más frecuente en los anormales que en los
normales. Nosotros le hemos encontrado en los normales españoles con
menos frecuencia que otros autores en normales de otros países.

3.2 El cráneo humano puede. presentar fosillas post-opistiacas externas
(que nosotros (?) somos los primeros-en señalar), anomalía que no se ob-
serva tampoco en los animales.

4,2 Este estudio puede relacionarse con la cuestión de las asimetrías
eraneanas y cerebrales en los normales, en los locos y en los criminales.

(Instituto de Medicina Legal de la Universidad de Madrid. Prof. Maestre).

; IES

La reacción colorante de la sangre por la tintura de aloína
La ' : : POR

R. ÁLVAREZ DE TOLEDO

Las reacciones colorantes de la sangre gozaron de gran boga en Me-
dicina legal, y durante largo tiempo los esfuerzos y trabajos de los mé-
dicos legistas encamináronse á buscar una que con seguridad fuese es-
pecífica del líquido hemático.

Esos esfuerzos estaban justificados, desde luego, por la relativa senci-

. lez de las técnicas utilizadas y por el reducido instrumental necesario.
Mas, á pesar de todo, las reacciones colorantes de la sangre hasta el día
conocidas no son especificas de ellas; en todas hay igualdad ó semejanza
muy marcada, con las que otros cuerpos con idénticos reactivos produ-
cen, de tal manera, que por muchos autores son consideradas como reac-
ciones de posibilidad solamente.

Ya se comprenderá, pues, que no dando certidumbre de que una man-
cha sea de sangre, no han de gozar de gran favor entre los expertos ac-
tuales, y que no es exagerada la frase de Otto Leers, de que «la mejor
investigación preliminar de las manchas de sangre, es hecha, sobre todo,

con una buena lupa y un ojo perfectamente ejercitado ».

, Nosotros hemos realizado algunas investigaciones de comprobación

- con varios de los métodos colorantes del líquido sanguíneo. Hoy publi-

el

e

52 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

camos las que se refieren á la reacción por la tintura de aloína, que en
Medicina forense y en Patología general ha sido y es muy empleada.

En 1900, Schoer (1) proponía la reacción de la sangre, que voy á des-
cribir, y algo más tarde, Rossel (2) publicaba un completo estudio de la
misma. b i

Si á una disolución alcohólica concentrada de aloína se agregan unas
cuantas gotas de un cuerpo oxidante (esencia de trementina ozonizada,
agua oxigenada) y después la disolución acuosa de la hemoglobina, se
produce al mismo tiempo que un desprendimiento de oxígeno, una bella
coloración cereza, que tarde en aparecer de uno á tres minutos, según
sea más ó menos concentrada la disolución sanguínea.

Es, pues, esta reacción de mecanismo idéntico á la clásica prueba de
Van Deen con la esencia de trementina ozonizada y la tintura de guaya-
co; la única diferencia consiste en que el color que se produce es azul
con este reactivo, y rojo, según hemos indicado, con la aloína. Una y otra
reacción pertenecen al grupo de los métodos colorantes de la sangre, en
que el fenómeno reaccional se produce por la acción catalizadora de la
hemoglobina (3), con respecto al O de la esencia de trementina ozoniza-
da, ó el del agua oxigenada, que libre, oxida la aloína ó el ácido guaya-
cónico de la tintura de guayaco. | :

I. Prepárase el reactivo, disolviendo de 44 5 gramos de aloína pura
en 100 cent. cúb. de alcohol de 90%, cuya disolución tiene un eolor ama-
rillo no muy subido. Algunos autores disuelven la aloína en la propor-
ción de 2 por 100 en una solución alcohólica de hidrato de cloral muy
concentrada; esto es, al 75 por 100. Esta modificación tiene la ventaja
sobre el procedimiento primitivo de que es mucho más sensible, y, por
lo tanto, es la reacción más evidente. ;

El cuerpo oxidante es, según hemos indicado, el agua oxigenada, la
esencia de tremehtina ozonizada ó la mezcla oxidante de Hiihnerfeld,
cuya fórmula es ;

Alcohol 2 da ve IEA AR ALA A IS A :
GloTOfON MO desir o e a A a 1 AA Te
Esencia de trementina........ ....... NN ES ARE
Agua destilada............ E A A IE LA.
Ácido acético glacial........... TEN E e A

De todos estos cuerpos, sin duda alguna el preferible es el bióxido de
hidrógeno, por hacer más sensible y más clara la reacción.

(1) Arch. pharm., pág. 288, 1900. >
(2) Schveiz. Wochenschr. Chen. pharm., pág. 557, 1901.
(3) Llamada por Schoembein elemento transporta - oxigeno,

o, pe ; pi

REACCIÓN COLORANTE DE LA SANGRE POR LA TINTURA DE ALOÍNA 53

El Feactivo ha de prepararse cada vez que sea preciso utilizarlo, por-
que se oxida espontáneamente al aire, volviéndose rojo.

Para practicar la reacción se comienza por ensayar los reactivos y,
una vez comprobado que por ellos no hay motivo de error, se colocan en
un tubo de ensayo 1 cent. cúb. de la disolución alcohólica de aloína,
1 cent. cúb. de la disolución acuosa de la mancha sospechosa y algunas
gotas del cuerpo oxidante; se agita la mezcla varias veces y si la reac-
ción es positiva sé produce, según hemos indicado antes, de uno á tres
minutos después, el color rojo-cereza, que persiste largo tiempo.

Por lo que respecta al modo de aplicar la reacción que estudiamos al
diagnóstico genérico de las manchas de sangre, haremos las indicaciones
siguientes:

Si la mancha es reciente y no ha sido sometida á la acción modificado-
ra de ningún agente, se macerará en el agua destilada y con el líquido
resultarte se practicará la investigación.

Si la mancha es vieja ó está alterada, pueden utilizarse las técnicas de
Weber, 'de Willenz y de Siefert, de las cuales he aquí la descripción:

La primera consiste en añadir al producto de la maceración de la man-
cha, en el agua destilada, la mitad de su volumen de ácido acético gla-
cial, y de someter después el todo á la acción extractiva del éter, prac-
ticando la reacción con éste, el que se separa en capa distinta del agua,
previo reposo de la mezcla. ]

En la segunda, de resultados excelentes, se agota la mancha sospecho-
sa con ácido acético glacial y una solución al 80 por 100 de hidrato de
eloral en éter; después se agrega agua destilada, se expulsa el éter por
el calor y se neutraliza con lejía de jaboneros. El cloroformo resultante
es eliminado por el calor y la' materia colorante de la sangre se precipita.
Recogida y sometida á la acción de una mezcla de ácido acético y éter,
se disuelve, y con el producto que de ello resulta se practica la reacción.

La tercera, finalmente, es más complicada que las precedentes. La
mancha sospechosa es extraída por medio de la mezcla siguiente:

Alcohol de DP. .oooooooocorcocororonorooca no. 1 cent. cúb.
ACI AOIMTICO: cara olas X gotas.

El líquido resultante se evapora al baño maría y el residuo se alcali-

- niza con potasa, se filtra repetidas veces y se mezcla, finalmente, con una
- solución concentrada de cloruro cálcico, estando el producto que se ob-
- fiene en condiciones de practicar la reacción. '

II. El reactivo de Schoer no es muy sensible. Sin compararlo, ni mu-
cho menos, con los límites de extraordinaria sensibilidad de la fenolpta-

54 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

lina, que según Dervieux y Leclercq (1) descubre á la hemoglobina di-
luída hasta 1 por 1.000.000, podemos afirma1*que la sensibilidad del mé-
todo colorante de la sangre por la tintura de aloína es sólo de 1 por 2,000
cuando este glucósido hállase diluído en el alcohol; pero si se le emplea
con la disolución alcohólica de hidrato de cloral, su sensibilidad se am-
plía hasta 1 por 3.000.

Si, como cuerpo oxidante, se Puno la mezcla de Hibnerfeld, la sen-
sibilidad es aún menor. :

III. La especificidad de este método la hemos estudiado ensayándola
con 160 cuerpos diferentes de la sangre y con diversos derivados de la
hemoglobina. ,

De aquéllos nos han producido reacción negativa los siguientes: sulfa-
to de níquel, nitrato mercúrico, cloruro de oro, barita, ácido pícrico,
cloruro mercúrico, ácido fosfotúngstico, ácido láctico, acetona, hidrato
potásico, reactivo de Linossier, ácido fénico, amoníaco, percloruro de
hierro, cloroformo, nitrato de urano, tartrato sodico-potásico, nitrato ar-
géntico, sulfato cúprico, ácido acético, perborato sódico, perbidrol de
magnesio, ácido nítrico, ácido clorhídrico, átido fosfórico, ácido sulfúri-
co, agua de eloro, orange, xilol, ácido sulfanílico, oxalato amónico, sul-
fato aluminico-potásico, éter sulfúrico, hiposulfito sódico, sal de Mobr,
acetato de zinc, esencia de salvia, paraldehído, nitrato sódico, nitrato

¿ potásico, formol, ácido oxálico, bromuro sódico, lactosa, salol, salicilato
sódico, bromuro potásico, antipirina, salicilato de litio, benzoato de litio,
terpina, extractos fiúidos de hojas de sen, de moras, de rábanos, de ye-
mas de abeto, de rosas rojas, de raíz de granado, de felandrio, de pino
de Canadá, de espino cerval, de grosellas, de acanthea viridis, de lactu-
cario, de espárragos, de hojas de digital, de fumaria, de hammamelis
virginica, de cáñamo indiano, de tormentila, de anís, de cidra y de li- :

món, clorhidrato de fenocola, criogenina, citrófeno, helmitol, salófeno,

nueleína, citrato sódico, cacodilato de hierro, guayacol, eucaliptol, terpi-
.nol, ulmareno, cotoína, para-cotoína, clorhidrato de cocaína, sulfato de
quinina, aconitina amorfa, sulfato de esparteína, pioctanina, Ccuasina,
adrenalina, trinitrina, clorhidrato de morfina, nitrato de pilocarpina,
sulfato de atropina, novocaína, dionina y estovaína.

El número de cuerpos que han originado reacción idéntica á la de E

sangre es bastante crecido. He aquí la lista: nitrato de cobalto, ferricia-
nuro potásico, sulfocianato potásico, cloruro de platino, sulfhidrato amó-
nico, cromato potásico, solución yodo-yodurada, hematoxilina, yoduro
de cadmio, yoduro potásico, yoduro sódico, yoduro amónico, ácido yod-

) » p
(1) Nosotros sólo hemos encontrado positiva esta reacción hasta 1 por 600.000.

LS

REACCIÓN COLORANTE DE LA SANGRE POR LA TINTURA DE ALOÍNA 55

hídrico, biceromato potásico (1), ácido crómico; extractos flúidos de ipe-
cacuana, de ratania, de quina, de escila, de altea, de quebracho, de gel-
semium, de viburnum y de boldo; piramidón, cacodilato sódico, arrhe-
nal, nitrito sódico, acetatos sódico y de teocina, urotropina, codeína y
heroína.

Reacción positiva, aunque más lenta en aparecer que con la sangre,
producen también el extracto flúido de nuez de kola, el de kawa-kawa
y el de hidrastis; el bromo, molibdato amónico, el cloruro sódico, el ácido
fosfo-molíbdico y el nitroprusiato sódico.

Vemos, pues, que de 160 substancias ensayadas, el reactivo de Schoer
ha producido reacción positiva con 43, lo que supone una proporción de
un 26'87 por 100 de motivos de error, que no puede de ninguna manera
“ser despreciada. ,

Necesitamos advertir, además, que el acetato de plomo produce un
color rojo intenso, con precipitado del mismo color y activo desprendi-
miento de oxígeno; que el subacetato de plomo origina color rojo, con
precipitado que pasa á verde intenso, y desprendimiento grande de gas,
y que el nitrato mercúrico determina la producción de un bello precipi-
tado de color rosa, quedando el líquido intensamente rojo.

Con los derivados de la hemoglobina hemos obtenido los resultados si-
guientes:

La hematina, preparada por la técnica de Hamsik, ha producido reac-
ción francamente positiva, aun cuando el color rojo va desapareciendo
poco á poco; añadamos que la mezcla de Hiihnerfeld no da resultado po-
sitivo con este derivado del pigmento sanguíneo.

La disolución de la hemoglobina en la lejía de sosa tarda en producir
la reacción muchos minutos, y el hemocromógeno preparado con la diso-
lución de hidrato sódico y el sulfhidrato amónico no da resultado positivo.

Por el contrario, la disolución de la hemoglobina en el ácido acético
produce una reacción francamente positiva. En cuanto á las hematopor-
firinas ácida y alealina, no hemos obtenido resultado positivo.

IV. Como la reacción de Van Deen, la de Schoer ha tenido aplicación
en la Clínica para descubrir la presencia de sangre en los diversos ex-
creta de nuestra economía.

Como el líquido hemático en esos medios se modifica de diversa ma-
nera por la distinta naturaleza de los mismos, no se puede hacer la re-
acción sino sometiéndolos á diversos procedimientos extractivos, ya des-

critos en párrafos precedentes y que llevan los nombres de Weber, de

Willenz y de Siefert.

(1) Este cuerpo produce primero un color pardo, que desaparece en seguida
para ser sustituido por el rojo-cereza.

56 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Ahora bien; los múltiples motivos de error que la reacción por la tin-
tura de aloína tiene en medicina legal existen también en Clínica, y,
por lo tanto, los resultados con aquélla conseguidos no dan más que se-
guridades bien limitadas acerca de la presencia de la sangre en los pro-
ductos excrementicios de nuestro organismo.

En resumen, la reacción por la tintura de aloína no es más que un mé-
todo de posibilidad por lo que se refiere á las,manchas de sangre. Indi-
cados quedan los numerosos cuerpos que reaccionan con aquélla del mis-
mo modo que lo hace la hemoglobina. Debe, pues, desecharse este método
en medicina forense y en clínica general, porque, á más de no dar segu-
ridades en sus resultados, hace perder tiempo con sus diversas manipu-
laciones, no siempre sencillas, y hace destruir una buena parte del ma-
terial teñido de sangre, que, muy reducido en algunos casos, puede ser
necesario para ser sometido á los métodos llamados de: certeza en la in-
vestigación de las manchas por aquélla producidas.

(Laboratorio de Medicina legal de la Universidad de Granada).
A A

Todavía nuevos métodos para obtener los cristales
de hemocromógeno ácido

POR

A. LECHA- MARZO Y A. PIGA

.

En trabajos anteriores hemos estudiado las técnicas muy numerosas(Do-
nogany, De Dominicis, Cevidalli, Lecha-Marzo, y modificaciones de Sarda,
Obregón, Rossi y otros), que han sido propuestas para la obtención de eris-
tales de hemocromógeno, especialmente el hemocromógeno que llamaría-
mos alcalino, puesto que la obtención de sus cristales y demostración de
su espectro está fundada en la reducción de la hematina alcalina (trata-
miento de la sangre por piridina, sulfato de hidrazina y sosa, sulfuro de
amonio, etc.). Dilling (1), que ha estudiado brillantemente la cuestión,
sostiene que estos cristales obtenidos con substancias básicas y alcalinas
están constituidos por una combinación eteriforme, en la cual el hemo-

cromógeno funcionaría como ácido, pudiéndose obtener tantas varieda- -

des de hemocromógeno como son las bases con que se combina.

(1) W. J. Dilling: Atlas der Kristallformen, und der Absorptionsbánder der Há-
mochromogene, F. Enke. Stuttgart, 1911,

o

Archives internacionales de Medicine legale, 1912.

A

“ MÉTODOS PARA OBTENER LOS CRISTALES DE HEMOCROMÓGENO ÁCIDO 57

Esta noción de las variedades de hemocromógeno se ve reforzada por
los resultados de nuestras investigaciones. Al lado de estas variedades
de hemocromógeno, que se forman en medio alcalino, hay otro hemocro-
mógeno ácido. Por primera vez, uno de nosotros (1), en 1907, anunciaba
que el tratamiento de la sangre por piridina y ácido pirogálico permitía
la obtención de cristales de hemocromógeno, de propiedades bastante
diferentes que las del hemocromógeno obtenido simplemente por la
acción de substancias reductoras y alcalinas.

Estos resultados fueron aceptados por algunos colegas extranjeros,
como hemos consignado en una reciente comunicación (Lecha - Marzo:
«Sobre el hemocromógeno ácido»), presentada en la Sociedad Española
de Biología, 1914. : |

Hemos pensado que se podían aún ampliar estas experiencias sobre la
obtención de los cristales de hemocromógeno ácido, y dedicamos esta
nota á resumir nuestros últimos resultados (por consiguiente, inéditos).

Se deseca una gota de sangre ó de material sanguíneo sobre el porta-
objetos y se lleva con una varilla de cristal una gota de piridina y otra
menor de ácido pirogálico (varios cristales de ácido pirogálico disueltos
en unos centímetros cúbicos de agua destilada), aplicamos el cubre-obje-
tos y sometemos el preparado á la acción del calor, no muy intenso, sin
esperar á la evaporación del reactivo. El examen microscópico demues-
tra la existencia de largas tabletas, agujas sueltas ó agrupadas en ha»
ces y rosetas, todas de color rojo anaranjado característico.

Una vez obtenidos los cristales, levantamos el cubre-objetos, dejamos
evaporar la mezela, aclaramos el preparado con una gota de xilol y con-
servamos indefinidamente los cristales en bálsamo del Canadá. Se sabe
que los cristales obtenidos por los métodos propuestos anteriormente no
se conservan, ni pueden montarse los preparados en el bálsamo del

Canadá.
Estudiando este método con el profesor Welsch (de Lieja) en algunos

preparados, observábamos zonas en las que el ácido pirogálico y la piri-

dina no habían originado cristales; hicimos pasar una gota de ácido acé-
tico en todos ellos y asistimos á nueva cristalización. Una de las micro-
fotografías publicadas con Welsch (2) muestran muy bien los grandes
cristales ovoidales que se obtienen en estas condiciones.

Lattes presentó una comunicación á la Real Academia de Medicina de

(1) Lecha-Marzo: Obtención de cristales permanentes de hemocromógeno. El
Progreso Médico, Octubre 1907. Sobre los nuevos y seguros procedimientos para
obtener los cristales de homatina. Archiv, de Psich. Med. legal. Turín, 1909.

* (2) Welsch y Lecha-Marzo: Com. á la Soc. de Méd. lég. de Belgique, Enero 1912,

58 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA
'

Turín sobre la «Preparazione del piridin-emocromogeno in mezzo acido»,
en la sesión del 12 de Julio de 1912, confirmando los resultados expues-
tos : «Ordinariamente con piridina, ácido acético y pirogálico, la preci-
pitación es casi completa con sangre fresca, y se puede decir que toda la
substancia colorante se encuentra transformada en cristales». Piensa
también que es la acidez del medio la que permite obtener los. cristales
más estables y el predominio de las formas ovoidales. En el experimento
anterior disuelve el ácido pirogálico no en agua, sino en amoníaco, y se
obtienen cristales de hemocromógeno aciculares, poco estables, y en un
todo análogos al hemocromógeno ordinario. : p>

Lattes, acidificando la piridina con ácido clorhídrico ó fórmico, ha obte-

nido una cristalización análoga, pero «menos regular».

El mismo autor (1), en un segundo trabajo, elogia los resultados que
se obtienen con las mezclas de piridina y solución de sulfato de hidrazi-
na acidificadas en varias proporciones con ácido acético. Actuando sobre
la sangre disociada en el porta-objetos, dan origen inmediatamente á
hemocromógeno demostrable con el micro-espectrosecopio. Muy raras ve-

ces se obtienen los cristales en frío; aparecen después que se ha elevado

un poco la temperatura del porta-objetos. Y describe dos formas de cris-
tales: «una, representada por agujas alargadas, sutilísimas y regulares;
la otra, análoga á la que se obtiene con la piridina pirogálica y ácido
acético, es biconvexa, lenticular y se parece o á los glóbulos
rojos de rana». -

Todavía en una publicación reciente De Dominicis (2) ha defendido su
antiguo método, que se funda en el tratamiento de la sangre por la piri-
dina, la solución saturada de sulfato de hidrazina y la potasa al tercio,
que considera superior al reactivo ácido.

Ha sido en este momento cuando nosotros hemos varado de ampliar y
conocer mejor estos métodos para la obtención de los cristales de hemo-
cromógeno en medio ácido y ver si era posible encontrar otros nuevos.

“Los resultados pueden resumirse brevemente. Con otros ácidos y Otros
reductores hemos obtenido la cristalización.

He aquí los nuevos métodos que hemos puesto en ensayo con resul-
tado positivo: t

1.2 Tratamiento de la sangre por piridina é 'hidroquinona (en agua).
Cristalización abundante y rápida.

2, Idem por piridina, hidroquinona y ácido acético. Bellos cristales,

(1) Lattes: Contributio alla diagnosi generica del sangue per mezzo dell' emo-
cromogeno. Archiv. di Psich. Med. legale, de Turín, 1913.

(2) De Dominicis: Diescopia de emocromogeno. Archives Intern. de Med. Dd Ene-
ro 191n:

v

MÉTODOS PARA OBTENER LOS CRISTALES DE HEMOCROMÓGENO ÁCIDO 59

aplanados, alargados, simulando hojas y E IAIonaS algunos agrupa-

dos en estrellas. ó
3.2 Idem por piridina, hidroquinona y ácido fórmico. Cristalización
rápida en frío. E

4. Idem por la piridina, hidroquinona y Cuco Resultados parecidos
á los del método núm. 3. Cristales grandes. La reacción puede conside-
rarse sólo algo menos sensible.

5.2 Idem por la piridina, hidroquinona y ácido cítrico.

6.2 Idem por la piridina, hidroquinona y el ácido oxálico.

7.2 Idem por la piridina y el ácido cítrico.

8.2 Idem por la piridina y el ácido oxálico. Se obtienen bellas rosetas
de cristales ovoidales.

9. Piridina y ácido tánico. Reclama, como otros métodos, la acción del
calor, pero se consigue obtener una cristalización abundante.

10. Idem por la piridina, ácido tánico y ácido acético.

11. Idem por la piridina y el nitrato de piridina (en agua destilada).

12, Idem por la piridina, el nitrato de piridina y el ácido pirogálico.
La cristalización puede obtenerse sin la ayuda de una fuente calorífica.

Podemos afirmar que en todos estos métodos hay siempre tendencia á
la producción de cristales ovoidales alargados, más ó menos aplanados,
sueltos ó agrupados en estrellas, medias estrellas, simulando vegetacio-
nes, etc., lo que no excluye que se observen agujas muy características
también, con agrupaciones diversas. 4

Los reactivos que se ensayan, incorporados al agua destilada, los
aconsejamos preparar en el momento de la experiencia.

Algunos de estos métodos merecerían mención especial.

Hemos estudiado principalmente los cristales que se obtienen con el
método de la piridina hidroquinona-fórmica (hemos presentado á la So-
ciedad las figuras de tres cámpos microscópicos tomados al azar). Los

- Cristales son de un color rojo púrpura muy puro, abundante, y tan

voluminosos ó más que los que se obtienen con los otros métodos.

La técnica seguida para obtenerlos es la siguiente : desecamos la san-
gre sobre el porta-objetos, llevamos una gota de los tres reactivos (se
prepara en el momento la hidroquinona, agitando unos cristales en 16
2 cent. cúb. del reactivo), aplicamos elfcubre-objetos y lo rodeamos con
parafina. El examen microscópico á los pocos minutos demuestra ya el
comienzo de la cristalización. Se hacen varias observaciones y una últi-
ma á las veinticuatro horas. Nos hemos evitado la acción del calor, causa
de muchos fracasos.

No hay que decir que todos estos métodos no excluyen la investiga-
ción micro-espectroscópica;del hemocromógeno,

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60 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Y la mayoría de ellos, no disolviendo el material sanguíneo, permiten
su ensayo, aun cuando sólo disponemos de mínimas cantidades de mate-
rial sospechoso. d

Finalmente, aunque no pertenece ya este hecho á la cuestión que he-
mos estudiado, debemos consignar que en estos ensayos, tratando la
sangre por la piridina y el yoduro de potasio y cadmio (solución de Mar-
mé para análisis de los alcaloides), hemos obtenido la cristalización del
hemocromógeno. Se sabe que la piridina empleada sola no permite estos
resultados. Leers, fundado en otras experiencias nuestras, habla ya del
yodo-hemocromógeno. Ziemke, en el libro de Lochte (1), se ha pasado
también á nuestro lado, frente 4 Puppe y Kiúrbitz. Nuestra antigua dis-
cusión nace con nuevos hechos.

Expresamos nuestro agradecimiento al interno Sr. León Trilla, que ha
colaborado en nuestros trabajos hechos en el Laboratorio de Medicina
legal del profesor Lecha-Martínez (Universidad de Valladolid).

—— 160? —
Glucosuria consecutiva á la ingestión de adrenalina

POR

G. MARAÑÓN

o

- De todos es conocido el fondniená descubierto por Blum de la glucosu-
ria adrenalínica; esto es, de que la introducción de la adrenalina en el
organismo determina una glucosuria más ó menos intensa y, desde lue-
go, pasajera. e

Las condiciones, dosis, marcha de la glucosuria, etc., han sido bien
fijadas por diversos autores (2), y hoy se sabe que es condición indis-
pensable que la adrenalina sea administrada en inyección (intravenosa,
intramuscular, peritoneal ó subcutánea) para que sea eficaz. Adminis-
trada por la boca, en cambio, no determina elucosuria, sino en circuns-
tancias tan excepcionales, que las observaciones de glucosuria adrena-
línica por ingestión merecen una mención aparte. $

Herter y Wackemann (3) refieren el caso de un perro de 8 kilogramos

(1) Lochte: Gerichtsárztliche und polizeiárzliche Technik, Wiesbaden. Berg-

mann, 1914.

(2) Véase últimamente nuestra monografía Las glándulas de secreción interna y
las enfermedades de la nutrición. Madrid, 1914, pág. 31 y siguientes.

(8) Herter und Wackemann: Archiv. d. Anat. und Physiol., 1902. Bd. CLXIX.

me

ic:

GLUCOSURIA CONSECUTIVA Á LA INGESTIÓN DE ADRENALINA 61

de peso, que ingerió 30.cent. cúb. de una solución de adrenalina al 1 por
10.000, en el que sobrevino una glucosuria bastante acentuada (1 por
100). Otro perro, de un peso análogo, bebió 20 cent. cúb. de la misma

solución de adrenalina, y no tuvo glucosuria.

Experimentalmente, ésta es la única observación de glucosuria adre-
nalínica por ingestión que registra la literatura. En la patología huma-
na no he encontrado más que otra observación de N. Pende (1), refe-
rente á una mujer de cuarenta y siete años, con síntomas diagnosticados
de «Basedow frustrado» y, por dicho autor, de «distrofia endocrino-
simpática»; á los pocos días de ingerir cuotidianamente 10 gotas de la
solución de adrenalina al milésimo (Parke-Davis), apareció una glucosu-
ria ligera, pero indudable, acompañada de cefalea y taquicardia leve;
esta glucosuria desapareció en cuanto fué suspendida la administración
de adrenalina.

Nada más refieren los numerosos documentos revisados á este respec-
to. Yo, en gran número de enfermos sometidos á curas de adrenalina,

_he analizado constantemente la orina y jamás he encontrado glucosa,

salvo en la siguiente observación (2):

Se trata de una señora de cincuenta y un años, con reumatismo cróni-
co deformante y signos de insuficiencia tiroidea, á la que en diferentes
ocasiones le fué analizada la orina, sin que nunca acusase glucosa. Du-
rante tres años fué sometida á un tratamiento tiroideo, á dosis débiles;
glucosuria, siempre negativa.

Como al cabo de este tiempo empezase la enferma á quejarse de aste-
nia, cada vez más intensa, acompañada de cierta pigmentación obscura

del dorso de las manos, le fué prescrita la adrenalina á la dosis de 10 go-

tas de la solución al milésimo. A los veinticinco ó treinta días se exami-
nó la orina y presentaba una fuerte reacción de Fehling. Suprimida la
nalina, desaparece definitivamente la glucosuria.

Presenta este caso algunas circunstancias interesantes, que le hacen
digno de su publicación y de estos comentarios:

1.2 La rareza misma de esta glncosuria, debida nada lamentó á la

ingestión de la adrenalina, ya que apareció al poco de tomarla y desapa-

reció al ser suprimida.
2.2 La circunstancia de tratarse dé una enferma sometida de antema-

no á la cura tiroidea. Se sabe, en efecto, que el tiroides interviene en el

(1) Pende: Sistema nervioso simpático e glandole a secrezione interne. 11 Tom-
mosi, 1909.

(2) Durante la impresión de esta nota, me comunica el Dr. S. Botella otro caso
interesante de glucosuria adrenalínica por ingestión: una señora, con vómitos
gravídicos, es sometida á la cura por la adrenalina, per os, observándose á poco
una glucosuria ligera, que desapareció al suspender la adrenalina,

1

62 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

metabolismo de los hidratos de carbono en el mismo sentido que la
adrenalina; y así, Falta, Newburg y Nobel (1) han observado que en
sujetos en los que la inyección de adrenalina no es capaz de provocar
glucosuria puede lograrse este fenómeno tratándoles previamente por
los preparados de tiroides; en el hipertiroidismo espontáneo la gluco-
suria adrenalínica por inyección se consigue con tanta facilidad, que
Aschner proponía esta reacción para diagnosticar los ¡casos dudosos de
hipertiroidismo (2). Por el contrario, la extirpación del tiroides diñculta
la producción de la glucosuria adrenalínica (3).
. El caso que hoy presentamos es un argumento más en pro de la de-
_mostración de esta correlación tiro-adrenalínica en la producción de la
glucosuria, cuya importancia en ciertos estados glucosúricos espontáneos
del hombre, seguramente es muy grande. |
Indudablemente la tiroidina produce una sensibilización del sistema
eromafino-simpático (tal vez ya predispuesto por condiciones individua-
les), á la que se debe que la corta dosis de adrenalina ingerida origine
la hiperglucemia y la glucosuria observadas. ñ

——— HE

+ 2

¿Es posible el diagnóstico del embarazo por cuti-reacción?

POR
P. MAYORAL

CON LA COLABORACIÓN CLÍNICA DEL DR. CHACÓN (HIJO) (4)

y ( e

Siendo un hecho que durante el embarazo se encuentran en el suero
sanguíneo anticuerpos originados por la penetración en el medio interno
de la madre, de antígenos procedentes del feto y sus anejos, la atención
de los investigadores se ha orientado en el sentido de encontrar técnicas
que permitan el diagnóstico del embarazo por reacciones específicas, :

(1) Falta, Newburg und Nobel : Zeits. f. A Med., 1911.

(2) Nosotros hemos demostrado que esa ooopEd adrenalínica se presenta
exclusivamente en los casos de hipertiroidismo de tipó simpaticolónico y no en los
vagotónicos (1. c., pág. 40).

(3) Eppinger, Falta y Rubdinger: Zeits. f. klin. Med., 1908-1909, y otros autores han
demostrado también que la hipertiroidización eepaliantal (en el animal) favo-
rece la glucosuria adrenalínica, hecho comprobado también por nuestras expe-
riencias. BOLETÍN DE LA SocieDAD EsPañoLa Dx BronoGía, año IV, pág. 94.

(4) Este trábajo fué presentado en la sesión del 20 de Noviembre de 1914.

o

¿ES POSIBLE EL DIAGNÓSTICO DEL EMBARAZO POR CUTI-REACCIÓN? 63

La reacción que en unión del Dr. M. Jiménez G. de la Serrana dimos
á conocer hace tres años, sólo puede tener valor médico-legal. La re-
acción de Abderhaiden es de técnica algo compleja y tiene numerosas
causas de error; no es, pues, de extrañar que se haya intentado alcan-
zar el fin por otros caminos. $

7 Los Sres. E. Engelhorn y Wintz (1) dicen haber resuelto el problema
del modo más sencillo y práctico que pueda imaginarse; por una cuti-
reacción hecha empleando la técnica habitual para la tuberculosis y un
extracto de placenta, que llaman «placentina », y cuyo modo de prepa-
ración se reservan.

Los citados señores dicen que la reacción fué positiva en 70 embaraza-
das de dos á nueve meses, y negativa en 53 mujeres no embarazadas,
de 54 que se examinaron.

La estadística no puede ser más sugestiva; y como los fundamentos
teóricos del método son ciertos, decidimos estudiarlo en el terreno expe-
rimental, sin esperar á que los autores den á conocer la técnica de pre-
paración de su «placentina» ó lancen al comercio este producto, pues las
circunstancias actuales hacen suponer que una y otra cosa han de tardar.

Nosotros hemos preparado y ensayado cuatro extractos de placenta,
con objeto de colocarnos en las mejores condiciones de experimentación.
En los extractos números 1 y 2 se ha procurado no alterar, ó alterar lo
menos posible la composición de los antígenos placentarios, y en los nú-
meros 3 y 4 deliberadamente hemos obtenido la degradación hidrolísica
de las albúminas de la placenta, teniendo en cuenta que la tubercu-
lina de A. T. de Koch, que es la que más seguramente y con mayor in-
tensidad produce la cuti-reacción en los tuberculosos, es también un pro-
_ducto de degradación hidrolísica de los antígenos bacilares.

La preparación de nuestros extractos se ha hecho del siguiente modo:

Núm. 1. — Cien gramos de placenta recientemente expulsada y bien
lavada para quitarle los coágulos de sangre, se trituraron con el aparato
de Latapie y se dejaron en maceración durante siete días, con 200 centí-
metros cúbicos de glicerina. Se centrifugó la maceración, y la parte lí-
quida fué envasada en ampollas de vidrio que se cerraron á la lámpara.

El contenido de varias ampollas fué sembrado de caldo de cultivo, que
se colocó en la estufa á 37%, y no se desarrolló ningún germen.

Núm. 2.—Cien gramos de placenta reciente y lavada se trituraron con

el aparato de Latapie y se dejaron macerar durante siete días con 100

gramos de disolución fisiológica de cloruro sódico y 2 cent. cúb. de elo-
-roformo. La maceración fué centrifugada y se separó la mitad superior,

a

(1) Munch. Med. Wochenschr., 13 Marzo 1914,

3 Y 5 Pe, MA ADO
3

64 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

que contenía el agua y pequeñísimos fragmentos de placenta que, por
agitación, formaban con el líquido una suspensión homogénea.

Núm. 3. — Cien gramos de placenta triturada se mezclaron con 200
centímetros cúbicos de agua que contenía 1 cent. cúb. de ácido sulfúrico;
esta mezcla se colocó en el autoclave y se sometió á 120% durante cuaren-
ta minutos. Después se filtró y se repartió en tubos, que se esterilizaron
á 110% en el autoclave. ; y

Núm. 4.—A 100 gramos de placenta triturada se añadió 150 cent. cúb.
de agua que contenía en disolución 1 gramo de potasa. Se sometió á 120%
durante cuarenta minutos, se filtró sobre papel y el líquido obtenido fué
envasado en tubos, que se esterilizaron á 110%,

Con estos extractos de placenta hemos practicado la cuti-reacción en
10 mujeres, embarazadas de ocho y nueve meses, en la Clínica de Obste-
tricia de la Facultad de Medicina de Madrid, con arreglo á la siguiente
técnica.

La parte media y externa de uno de los brazos se limpiaba con un
trozo de algodón, impregnado de alcohol; cuando se secaba el alcohol,
practicábamos, con una plumilla de vacunar, tres grupos de escarificacio-
nes, separados entre sí por un espacio de 3ó 4 centímetros, y AP
como los ángulos de un triángulo equilátero.

La escarificación superior se practicaba con una plumilla nueva y ser-
vía de testigo; las otras dos se practicaban con plumillas impregnadas
cada una con una clase de extracto. Después de practicar las escarifica-
ciones, hacíamos que las mujeres mantuvieran el brazo en posición hori-
- zontal durante cuatro ó cinco minutos y cubríamos las lesiones con un
algodón, que sujetábamos con una venda.

Las mujeres se observaban á las diez, veinticuatro, cuarenta y ocho y
setenta y dos horas y anotábamos cuidadosamente el estado de las esca-
rificaciones y las molestias que las mujeres experimentaban.

Los resultados que hemos obtenido son completamente negativos; nin-
guna embarazada ha presentado tumefacción y enrojecimiento intenso
de las zonas en que se había depositado el extracto de placenta. Lo más
que hemos observado es un ligero enrojecimiento y prurito, pero esto de
un modo tan inconstante y poco acentuado, que no puede servir para
fundamentar un diagnóstico. Les ,

No sabemos lo que ocurrirá en los comienzos del embarazo, pues las
enfermas observadas por nosotros estaban, por lo menos, en el octavo
mes. Quizá no hayamos sido afortunados en el modo de preparar pues-
tros extractos, y por ello no podemos negar en absoluto la posibilidad de
diagnosticar el embarazo por cuti-reacción, pero los resultados obtenidos
nos autorizan para suspender nuestras investigaciones y esperar que-

L

EFI A

LA DETERMINACIÓN MICROQUÍMICA DE LA UREA 65

aparezcan nuevos trabajos sobre este tema ó que se publique la técnica
de preparación de la «placentina».

De todos modos, nos parece que la cuti-reacción del embarazo no pre-
senta visos de utilidad práctica, pues alguno de los extractos que hemos
empleado debiera haber producido reacción positiva si las condiciones de
la, inmunidad de la gestación fueran similares á las de la tuberculosis.

E NAR

La determinación microquímica: de la urea y del coeficiente de Ambard

POR

A. MADINAVEITIA Y P. VARILLAS

La determinación del coeficiente de Ambard ha adquirido una enorme
importancia en la clínica. Su determinación por los métodos clásicos,
fundados en la valoración de la urea por el nitrógeno desprendido con
hipobromito, presentan varios inconvenientes: hay que hacer una san-
gría de bastante importancia, y la valoración con las operaciones prepa-
ratorias para ella llevan mucho tiempo.

Recientemente se ha publicado un método (1) microquímico para valo-
rar la urea en el suero sanguíneo que nos ha dado muy buenos resulta-
dos y que hemos empleado con ventaja para la determinación de la cons-
tante de Ambard. :

El fundamento del método consiste en la hidrolisis de la urea á carbo-
_nato amónico, producida por la ureasa extraída de la semilla de soja

- (glicinia hispida), y valoración del carbonato amónico, formado por el

A
;
:
A
]
,

aumento de la alcalinidad apreciado por yodimetría; la gran sensibilidad
- de las volumetrías con yodo permite valorar cantidades muy pequeñas de

urea.

Para la determinación de la constante de Ambard hacemos por este

método la valoración de urea en el suero y aplicamos un método análogo

vda

á la valoración de la urea en la orina.
Reactivos necesarios:
- Ureasa. — Se puede preparar con facilidad extrayendo polvo de semi-

lla de soja con diez veces su peso de agua durante una hora á la tempe-

ratura de la habitación; se añade después un volumen de ácido clorhí-

(1) Hahn: Deutsche Medizinische Wochenschrift, núm. 41, pág. 135, 1915,

66 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

drico decinormal y después de calentar unos minutos á 35" se filtra; esta

solución se precipita por alcohol y el precipitado se recoge sobre un filtro,
se lava con alcohol y éter y se seca (1). El producto, ya preparado, puede
adquirirse en el Handkreuz-Laboratorium de Charlottenburg.

Solución decinormal de hiposulfito sódico. — Se prepara por uno cual-
quiera de los métodos corrientes; por ejemplo, por valoración con solución
de bicromato potásico (véase Casares, Análisis químico, II, pág. 156).

Solución centinormal de hiposulfito sódico. — Se prepara diluyendo la
anterior á diez volúmenes con agua destilada; esta solución no se conser-
va mucho tiempo, pero aunque disminuya de valor no importa para la
valoración puesto que ésta se hace por diferencia.

Solución decinormal de ácido clorhídrico. — Puede prepararse por
cualquiera dé los métodos corrientes; nosotros la valoramos por yodime-
tría con la solución decinormal de hiposulfito, ya preparada.

Sobre una solución de unos 2 gramos de yoduro potásico en 10 centí-
metros cúbicos de solución de yodato potásico neutro, al 2 por 100, se
añaden 25 cent. cúb. del ácido clorhídrico, aproximadamente, decinor-

mal (preparado por dilución de 114 gramos de ácido clorhídrico concen-

trado en 1.100 de agua) y la solución de yodo producida se valora con la
solución de hiposulfito decinormal, efectuando después las diluciones
convenientes. y i :

Solución centinormal de ácido clorhidrico.— Se prepara diluyendo con
agua destilada á diez veces su volumen un volumen medido de la solu-
ción decinormal de ácido clorhídrico.

Solución centinormal de yodo. — Se prepara poniendo en un matraz
aforado de 50 cent. cúb. 5 cent. cúb. de solución al 2 por 100 de yodato
potásico y 1 gramo de yoduro potásico; á esta solución se añaden 5 cen-
tímetros cúbicos de solución decinormal de ácido clorhídrico, y después
de unos minutos se llena el matraz hasta la marca con agua destilada.
Esta solución se conserva poco tiempo y es conveniente emplearla re-
ciente.

Solución de yodato potásico al 2 por 100.

Solución de almidón. — La preparamos disolviendo á la ebullición 1 '

gramo de almidón,.soluble en */, litro de solución saturada de cloruro
sódico; la solución preparada en estas condiciones se conserva mucho
tiempo sin alteración. ,

Para la determinación de la constante de Ambard empezamos por va-
ciar la vejiga del enfermo, haciéndole orinar de pie todo lo que pueda
(el sondar sólo es necesario en aquellos enfermos que tienen retención).

i

(1) Marshall: Journ, of biol. Chem, núm. 14, pág. 283.—A. Hahn y J. Saphra: Deuts-

che Medizinische Wochenschrift, núm. 9, pág. 480, 1914,

si

LA DETERMINACIÓN MICROQUÍMICA DE LA UREA 67

Después de un tiempo que puede oscilar entre media y una hora se vuel-
ve á vaciar la vejiga, midiendo la cantidad de orina eliminada y el tiem-
po que ha durado la experiencia. Hacia la mitad de la experiencia se
procede á hacer la sangría, sacando 5 á 6 cent. cúb. de sangre de la vena
del pliegue del codo. De la sangre obtenida se puede obtener el suero,
dejándola coagular y centrifugando ó desfibrinándola previamente y lue-
go centrifugando; nosotros preferimos el primer procedimiento (convie-
ne operar con cuidado para que por evaporación no se concentre el sue-
ro). En la orina y en el suero obtenidos se valora la urea.

En cuatro frascos de 75 cent. cúb., provistos de buenos tapones, se
pone en cada uno 20 cent. cúb. de agua destilada; á los dos primeros se

les añade 1 cent. cúb. de suero á cada uno, á uno se añade una pequeña

cantidad (hacia 0'01 gramo) del preparado de ureasa, y á los dos 3 gotas
de toluol; á los otros dos se añade á cada uno 1 cent. cúb. de la orina
diluída al 1: 10, y se pone, como en los anteriores, en uno un poco de
ureasa, y 3 gotas de toluol á cada uno. Los frascos así preparados, y per-

. fectamente cerrados, se conservan á temperatura del Laboratorio. Al

cabo de diez horas la reacción ha terminado, pero puede prolongarse,
sin inconveniente, el tiempo de reacción hasta veinticuatro ó cuarenta y
ocho horas. >

Después de este tiempo se añaden á todos los frascos 10 cent. cúb. de
ácido clorhídrico centinormal; después de agitar bien, se añade á cada
frasco un granito de yoduro potásico puro y 1 cent. cúb. de la solución
de yodato potásico. Se agrega después 10 cent. cúb. de hiposnulfito centi-
normal á cada frasco y, después de algunos minutos, se valora el exceso
de hiposulfito, añadiendo unas gotas de solución de almidón como indi-
cador y haciendo caer desde una bureta la solución centinormal de yodo
hasta que todo el líquido se tiñe de azul, anotando el número de centí-
metros cúbicos gastados.

En el suero, lo mismo que en la orina, de la diferencia de centímetros
cúbicos de solución decinormal de yodo gastado en el frasco que tiene
ureasa y en el que no la tiene, se calcula el número de miligramos de
urea existente en el centímetro cúbico empleado, multiplicando esta di-
ferencia en centímetros cúbicos por 03,

Por ejemplo, supongamos que en dos matraces con 1 cent. cúb. de
suero cada uno, se gasta en el matraz que no tiene ureasa 2'1, y en el
que la tiene 2'8 cent. cúb. de solución de yodo decinormal. La diferen-

cia 0'7 cent. cúb., multiplicada por 0'3, nos dará 0'21 miligramos de

urea en 1 cent. cúb. de suero, 6 021 gramos de urea por litro de sangre.

3 En la orina se hará el cálculo del mismo modo, teniendo en cuenta que

se ha diluído á diez veces.

68 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Conociendo estos datos y la cantidad de orina producida durante el
tiempo de la experiencia, se puede calcular la constante de Ambard.

El método descrito nos ha proporcionado muy buenos resultados; es
muy cómodo y muy rápido de practicar, y tiene la ventaja de ser muy
pequeña la cantidad de sangre que se necesita.

Los números obtenidos son exactos, porque en el método no entran
muchas de las causas de error del método del hipobromito. Hemos com-
parado en alguna ocasión los dos métodos, y hemos obtenido números
concordantes con los que el hipobromito da, si se valora el volumen de
nitrógeno, con una solución pesada de urea. ;

En la Clínica hemos empleado este método, obteniendo excelentes re-
sultados, de los cuales citaremos algunos:

Tres nefríticos agudos, con diagnóstico confirmado por la autopsia,
han dado: Ur. 1'45, K. 0'12; Ur. 1'08, K. 0'14, y Ur. 0'81, K. 0'43. )

Tres individuos normales: Ur. 0'18, K. 0'06; Ur. 0'18, K. 0'095, y
Ur. 018, K. 0067.

Continuamos actualmente empleando este método para estudios sobre
la fisiología del riñón.

(Laboratorio de Quimica Biológica de la Junta para ampliación
y de estudios. Madrid).

—— 2 —

| La determinación de la alcalinidad de las aguas potables

POR

A. MADINAVEITIA '

—

La corrección de las turbias de las aguas potables es hoy un problema
de química coloide que se puede resolver precipitando la solución coloi-
de por un coagulante apropiado. Para el empleo de estos coagulantes es

necesario, entre otros datos, el conocimiento de la alcalinidad virtual

del agua, es decir, de la cantidad de ácido que puede neutralizar.

La determinación de la alcalinidad en las aguas duras es operación
fácil de realizar, pues se hace por una simple alcalimetría, con una solu-
ción decinormal de ácido, empleando uno de los muchos indicadores que

se han recomendado para este objeto. En las aguas muy blandas la deter- -

minación efectuada así no es lo suficientemente exacta, y éste ha sido el
motivo que me ha movido á tratar de hacer la valoración por yodimetría.

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4
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ALCALINIDAD DE LAS AGUAS POTABLES 69

Empleo soluciones centinormales y esto me permite hacer las determi-
naciones con una exactitud mucho mayor.

Coloco en un matraz de vidrio de Jena, perfectamente limpia, 100 cen-
tímetros cúbicos del agua á analizar y le añado 5 cent. cúb. de ácido
clorhídrico centinormal (la cantidad de ácido que hay que añadir depen-
de, naturalmente, de la alcalinidad del agua; tiene que quedar ácido en
exceso); después de agitar bien, añado un granito de yoduro potásico y
unas gotas de solución de yodato potásico neutro. La solución de yodo
producida por la acción del ácido clorhídrico libre sobre el yoduro y el
yodato se pudiera valorar ya directamente con solución centinormal de
hiposulfito; pero el color del almidón se ve mucho mejor añadiendo un
exceso de hiposulfito y valorando éste con solución de yodo. Añado á la
solución 5 cent. cúb. de hiposulfito, y después de algún tiempo unas go-
tas de engrudo de almidón, y dejo caer desde una bureta la solución cen-
tinormal de yodo, preparada en fresco, poniendo 2 gramos de yoduro
potásico y 5 cent. cúb. de solución de yodato potásico al 2 por 100 en un
matraz aforado de 50 cent. cúb., añadiendo 5 cent. cúb. de ácido clorhí-
drico decinormal y llenando hasta la marca el matraz, hasta que todo el
líquido se tiña de azul.

-Empleando ácido clorhídrico é hiposulfito exactamente centinormal,
la cantidad de yodo gastada indicaría la alcalinidad; pero dada la poca
estabilidad de la solución tan diluída de hiposulfito, resulta mucho más
cómodo el hacer una contraprueba con 100 cent. cúb. de agua recién
destilada con un refrigerante de vidrio de Jena.

De la diferencia de centímetros cúbicos de solución de yodo gastada
con el agua á analizar y el agua destilada se tendrá la alcalinidad
del agua. :

Esta alcalinidad puede expresarse en centímetros cúbicos de ácido ó
en grados hidrotimétricos de dureza temporal, como recomienda Win-
kler, puesto que en las aguas potables los bicarbonatos cálcico y mag-
nésico son las únicas sales que producen alcalinidad. Para expresar los
resultados en grados franceses, bastaría multiplicar por 0'5 el número de
centímetros cúbicos de yodo gastados.

El método lo he comprobado con soluciones valoradas de álcalis fijos,
obteniendo números buenos.

Lo he comprobado repetidas veces con el agua del Lozoya y la del
Manzanares, tal ¿omo llegan á Madrid, obteniendo números muy cons-
tantes y concordantes con los obtenidos por otros procedimientos.

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70 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Investigaciones acerca de la docimasia hepática

”

POR y

R. ÁLVAREZ DE TOLEDO

A

Se entiende por docimasia hepática la prueba proporcionada por el

examen del hígado de los cadáveres para la demostración de la muerte
brusca ó de la muerte precedida de agonía.

Este interesante método fué ideado por los médicos legistas de la Es-
cuela de Lyon, A. Lacassagne y E. Martin, fundándose en anteriores in-
vestigaciones del profesor del Colegio de Francia, Claudio Bernard, acer-
ca de la presencia del glicógeno en el hígado.

El método consiste, en resumen, en demostrar la presencia ó la ausen-
cia del glicózeno en la glándula hepática. En el primer caso se afirma
que la docimasia hepática es positiva, y en el segundo se dice que es ne-
gativa, revelando la primera la muerte brusca del sujeto y demostrando
la segunda que el fallecimiento fué precedido de agonía.

Este método, que fué comunicado por vez primera por sus autores en

1897 al Congreso de Medicina de Moscou, ha dado origen á multitud de
publicaciones de comprobación, pues de ser ciertas las conclusiones del
trabajo de los autores lioneses suponían que el médico legista tenía entre
sus manos un excelente procedimiento que permitiría demostrar, por
ejemplo, en el caso en que se encontrara el cadáver de un desconocido,
si el sujeto en cuestión había muerto bruscamente ó, por el contrario,
previa una agonía más ó menos larga.

Nosotros hemos recogido 50 observaciones acerca de este asunto, aún
no definitivamente resuelto. -

I. Se admiten dos clases de docimasia hepática: la llamada química,

que consiste en demostrar la presencia ó ausencia del glicógeno en el hí-
gado por medio de reactivos, y la denominada histológica, que trata de
revelar la existencia del glicógeno en las células hepáticas mediante la
inspección microscópica de cortes finos del hígado, previamente teñidos
por procedimientos especiales. E 4

Una y otra variedad de docimasia las hemos utilizado en cada una de

nuestras observaciones y he aquí un breve resumen de las técnicas en-

sayadas:
a) Docimasia química. —A la técnica primitiva de Lacassagne y E.

INVESTIGACIONES ACERCA DE LA DOCIMASIA HEPÁTICA 71

—

Martín introdujeron modificaciones Módica (1900) y Corbey (1903); pero
nosotros únicamente hemos empleado el procedimiento clásico.

Consiste en dividir en finos pedazos un trozo de hígado de unos 100
gramos aproximadamente que, mezclados á doble cantidad de agua des-
_tilada, se llevan á una cápsula de porcelana, en donde se mantienen en
ebtillición por espacio de varios minutos. Transcurridos éstos se filtra el
líquido, que previamente habremos acidulado con ácido acético para pre-
cipitar las peptonas. El líquido procedente de la filtración podrá presen-
tar dos aspectos distintos ó tener un color blanco turbio ó amarillo y del
todo transparente. Í

En el primer caso contiene glicógeno.

En el segundo puede tener glucosa ó no tenerla; pero desde luego no
glicógeno.

Este se pone en evidencia con sus reactivos bien conocidos y á ese
efecto, ó bien añadimos á 25 cent. cúb. del líquido que contiene el glicó-
geno 2 cent. cúb. de alcohol de 90%, con lo cual aquél precipitará en pe-
queños copos blancos que, con el Lugol ó el Gram, se tiñen de pardo
caoba, ó bien utilizamos la propiedad que de reducir el líquido de Fehling
posee aquel cuerpo. En uno y otro caso afirmaremos que la docimasia
hepática es positiva. |

El segundo se somete también á la acción del líquido de Fehling en
caliente y si la docimasia es asimismo positiva, se produce la precipita-
ción del oxídulo de cobre. Cuando esto no tiene lugar se dice que la
docimasia es negativa.

b) Docimasia histológica. — Se propone, como su nombre indica y
conforme hemos dicho más arriba, demostrar la presencia ó la ausencia
del glicógeno en las células hepáticas mediante la obtención de prepara-
ciones micrográficas. ez

La dificultad de la obtención de esas preparaciones se halla precisa-
mente en el glicógeno mismo, que no es fácil de revelar; por eso han
- sido propuestos diversos procedimientos, de los cuales he aquí una indi-
cación.

: Fijación. — La fijación de los trozos del hígado debe hacerse siempre
por medio del alcohol absoluto. El formol al 10 por 100, que es un exce-
lente fijador histológico, no nos sirve en nuestro caso porque el glicóge-
no se disuelve en el agua en que aquél está diluído y en realidad no po-
dremos descubrirlo en las preparaciones, aunque la docimasia química
haya sido positiva. Y formulamos esta conclusión después de haber hecho
- preparaciones de todos los casos con bloques fijados en uno y otro de
ambos tijadores.

Los bloques, después de fijados en el aleohol, se incluirán en celoidina.

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lo

792 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA
Algunos autores, para ahorrarse las manipulaciones de esa inclusión,
recomiendan practicar los cortes por congelación con el CO, , sin fijación
previa en ningún líquido, pasándolos en seguida al alcohol de 96%, pro-
cedimiento defectuoso porque los cortes, al deshidratarse enérgicamente,
se arrugan en tales términos que las preparaciones obtenidas son muy
defectuosas. y

Una vez practicados los cortes se procede á su coloración, para lo cual
se utiliza de preferencia uno de estos dos métodos:

1.2 Método de Brault. — Los cortes recién obtenidos se extienden eni-

dosamente sobre el porta-objetos, colocando sobre ellos unas cuantas
gotas de la solución siguiente:

OO: UN te EOL Rd is ANS Iacala y, cre AS 1 gramo,
V:OdDTO POTÁSICO S Taco eos jo do e PU 10 gramos.
Arun destilada. et daialós 2 o gio le nba ro O a 30 —
Goma de consistencia SITUPOSA....... «o... ..... 200 —
Disuélvase. pde

que se dejan secar, y á las veinticuatro horas se deposita una nueva
gota de la solución y se cubre con la laminilla. El glucógeno aparece te-
ñido de rojo parduzco, en forma de bloques incluídos en las células, no
siendo muy bellas las preparaciones por no resultar bien diferenciadas
aquéllas, por lo cual considero preferibles los métodos de coloración pro-
piamente dichos, como es el siguiente: :

2. Método de P. Best. — Como el glucógeno es muy soluble en el
agua, hay que manejar con mucho cuidado los cortes no sumergiéndolos
en agua sola, y precisamente el método de que voy á ocuparme tiene en
cuenta este inconveniente, consiguiendo preparaciones muy bellas é ins-
tructivas.

Una vez obtenidos los cortes finos, se colorean primero con hematoxi-
lina de Boehmer ó hemateína de Mayer, durante cineo ó diez minutos, y
después con una mezcla de 2 partes de solución amonico-litinica de car-
mín (1), 3 partes de licor amoniacal cáustico y 6 partes de alcohol metí-
lico absoluto, de cuya mezcla á las dos horas se trasladan para su deco-
loración, durante varios minutos, á otra compuesta de

2 partes de alcohol metílico absoluto,
5 íd. de alcohol etílico absoluto
y5 íd. de agua destilada.

Con el empleo de uno y otro método pueden suceder dos cosas: ó que
no se descubra glicógeno en las células hepáticas, en cuyo caso afirma-
(1) La solución de carmin tiene la fórmula siguiente: carmín, 1 gramo; cloruro

amónico, 2 gramos, y carbonato de litio, 0'50 gramos. Hágase hervir en 50 gra»
mos de H:20 destilada y añádase 20 cent. cúb. de amoniaco.

MEA

>.

>

ed

Ñ INVESTIGACIONES ACERCA DE LA DOCIMASIA HEPÁTICA 73

remos que la docimasia hepática histológica es negativa, ó que sí se des-
cubra, en cuyas circunstancias afirmaremos que es positiva.

En el caso en que la docimasia histológica sea positiva, el aspecto de
los cortes es bien característico: las células hepáticas muestran el glicó-
geno en su interior en forma de esferitas incoloras más ó menos gran-
des, y de las cuales puede haber, ó una sola, que llena por completo el
protoplasma y empuja al núcleo hacia la periferia, Ó varias, pequeñas,
apelotonadas.

En el caso en que sea negativa la prueba, no se ven esas esferitas, y el
protoplasma aparece uniformemente teñido y ligeramente granuloso.

Ahora bien, dos motivos de error hacen insegura en la práctica á la
docimasia histológica. Es el uno, que en los casos en que la docimasia
química es fuertemente positiva con líquido claro, es decir, cuando hay
glucosa en el hígado, pero no glicógeno (cosa que sucede cuando el pe-
riodo digestivo está ya avanzado), el aspecto de los cortes es idéntico al
que ofrecen los de docimasia negativa; y es el otro, que en observacio-
nes en que la docimasia química fué negativa, no es infrecuente el hecho
de que la docimasia histológica no sea negativa del todo, es decir, que
se observen, al lado de células uniformemente teñidas, otras con las es-
feritas de glicógeno. |

Por estas razones no se puede conceder valor nada más que á los casos
en que las preparaciones sean positivas ó negativas del todo, y, por es-
tas razones también, que hemos visto repetidas con no escasa frecuencia
en más de 200 preparaciones observadas, y las lentitudes, no exentas de
dificultades, que anejas lleva la docimasia histológica, nos hacen conce-
derle menos importancia que á la docimasia química, cuyos resultados
están muy en armonía con las indicaciones de la práctica y cuya técni-
ca, según hemos indicado más arriba, es en extremo sencilla,

II. Hemos investigado los hígados de 50 cadáveres, que hemos divi-
dido en dos grupos: en el primero, de 18, se trataba de sujetos muertos
súbitamente en medio de un estado de salud más ó menos perfecto, ha-
biendo sido la causa de la muerte una acción traumática (disparos, pre-
cipitaciones, puñaladas, envenenamiento por la bencina, etc., etc.), de
origen ya accidental, ya criminal, ya, por último, suicida; en el segun-
do, de 32, estaban incluídos todos aquellos en que la muerte ocurrió en
el curso de una enfermedad, ya como un accidente que venía á inte-
rrumpirle súbitamente, ya precedido de una agonía más ó menos larga.

Con el objeto de no hacer interminable esta comunicación, resumiré
todos los casos en el siguiente cuadro, é indicaré después todos aquellos
en que el resultado hizo excepción á la regla general, y advertiremos
además que en las observaciones del segundo grupo (muertes en el curso

74 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

FAA >__ —_-—_— _->-- -»-_—_—————
de una enfermedad) hemos procurado recoger detenidamente los datos
referentes á la duración de la agonía y á la toma del último alimento.

h

E
OBSERVACIONES Docimasia | Proporción Docimasia Proporción
, positiva. por 100. | negativa. | por 100

A A PS PA

18 Muertes súbitas producidas por un
agente traumático (disparos de ar-
ma de fuego, puñaladas, precipi-
tación, atropellamiento por carros,
envenenamiento), que actuó sobre
un sujeto en estado de salud más
Óó menos bueno, y producidas en
otros casos por un proceso patoló-
gico latente, determinándose la
muerte, desde instantáneamente

hasta siete horas como máximum. 16 88'8 62 : 112
6 Muertes súbitas sobrevenidas en el
'curso de un proceso patológico... 6 100 0 0

26 Muertes precedidas de agonía más
-—Ó menos larga y cuya duración os- | E
ciló entre doce horas y cuatro días. 9 346 17 65'4

Veamos ahora cuáles han sido las excepciones, en cada grupo de casos,
á la regla general.

Si bien es cierto que, conforme afirman Lacassagne y E. Martin, en las
muertes súbitas que sorprenden á un individuo en estado de salud la do-
cimasia hepática ha sido positiva, pero no en todos los casos, sino sola-
mente en el 88'8 por 100 de ellos, exceptuándose el 11'2 por: 100 (2 obser-
vaciones), que se refieren á los dos cadáveres siguientes :

Observación 7.* — Mujer de cuarenta y siete años. Murió de una tre-
menda hemorragia por sección de la arteria tibial anterior de la pierna
izquierda, producida por un navajazo que la dió su marido. Esta mujer
tardó siete horas en morir y no se la pudo prestar asistencia porque el
parricida la dejó encerrada en la casa y se marchó á la calle. Docimasias
química é histológica negativas.

Observación 10. — Mujer de treinta y dos años. Suicidio por ahoga»
miento. Docimasias química é histológica negativas. |

Vemos, pues, que las dos excepciones han sido de una hemorragia y de
una muerte por submersión. Apresurémonos á recordar que una de las

objeciones de más fundamento que se han hecho á la docimasia hepática

se debe 4 Wacholz-(1903) y se refería precisamente á las muertes por he-
morragia, En cuanto á la de la muerte por ahogamiento, hemos tratado de

É 5 o ¿ "
A A a e cid

Le

INVESTIGACIONES ACERCA DE LA DOCIMASIA HEPÁTICA 75

confirmar el hecho ahogando cuatro gatitos recién nacidos é investigando
el glicógeno en el hígado, pero en todos ellos la docimasia ha sido po-
sitiva.

En todos los casos en que la muerte se produjo súbitamente en el curso
de una enfermedad la docimasia fué positiva; no invalidó, pues, ninguno'
de ellos la regla general.

En el último grupo, de 26 observaciones, es donde han existido más
excepciones á la regla general. Tratándose en todas ellas de muertes pre-
cedidas de agonía más ó menos larga, debieron todas dar una docimasia

' negativa en armonía con las conclusiones de los autores del método, y,
sin embargo, no ha sido así. Veamos cuáles son esos casos de excepción.

Observación 26. — Mujer de sesenta y cuatro años. Quemaduras por el
calor. La agonía duró cuatro días, aunque á la enferma se la podía hacer
tomar alimento en pequeñas cantidades. Docimasia hepática, positiva in-
tensa.

Observación 32. — Mujer de veintiocho años. Septicemia puerperal. Pe-
ríodo agónico de tres días. Docimasia hepática, positiva no intensa.

Observación 37. — Hombre de cuarenta y cinco años. Flemón urinoso.
Agonía de tres días. Docimasia hepática, positiva intensa.

Observación 38. — Hombre de diecinueve años. Tuberculosis pulmonar.
Agonía de dieciocho horas. Docimasia hepática, positiva.

Observación 43. — Hombre de setenta años. Muerte por septicemia uri-
nosa. Agonía de cuarenta y ocho horas. Docimasia hepática, positiva.

Observación 45. — Feto de siete meses. Aborto por sífilis. No respiró :
estaba muy macerado. Docimasia hepática, positiva.

Observación 46.—Feto de siete meses. Aborto por sífilis. No estaba tan
macerado como el anterior. Docimasia, positiva.

Observación 47. — Feto de cinco meses y medio. Muerto también por
sífilis. Docimasia, positiva.

Observación 49. — Mujer de treinta años. Tuyo durante varios días una
disentería intensa, en el decurso de la cual dió á luz un feto, que falleció

4 poco de nacer, y la madre á los dos días. Docimasia hepática, positiva.

Tal es el Fesultado de nuestras investigaciones acerca del interesante

- asunto de la docimasia hepática.

Creemos, después de analizadas imparcialmente las 50 observaciones
que hemos conseguido recoger, que en líneas generales permite sólo dis-
tinguir las muertes súbitas (salvo los casos de hemorragias intensas) de
las muertes precedidas de una agonía y esto sólo con ciertas restriccio-
nes. Creemos, además, que el método no merece ni las acerbas censuras
que sus detractores le han dirigido, ni las alabanzas exageradas de sus
partidarios, y opinamos con Thoinot que el haber originado una tan fe-

e
'

76 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

cunda labor de investigación merece ser tenida muy en cuenta al apre-
ciar el valor de este procedimiento.

(Trabajo del Laboratorio de Medicina legal de la Universidad de Granada).

DISCUSIÓN
El Sr. Lecha=Marzo: Considero muy importante la comunicación del profesor
Alvarez de Toledo, favorable á las conclusiones y estudios de Lacassagne y Mar-
tin. La docimasia hepática había sido ya estudiada en España por el profesor de
Peset, de Sevilla. Nosotros la estudiamos en el Instituto Médico-Legal de Lieja.
En cadáveres de ahogados hemos encontrado siempre el glicógeno hepático. Alva-
rez de Toledo señala, como Wachholz, que en casos de muerte por hemorragia, y,

por lo tanto, de muerte rápida, se puede obtener docimasia hepática negativa. Tal

- vez tenga razón Martin cuando asegura que en estos casos de hemorragia mortal
en que la docimasia hepática es negativa, coexiste una intoxicación crónica del or-
ganismo, por lo cual estos casos que parecían raros entran en las leyes establecidas
precedentemente para fijar las variaciones del glicógeno y de la glucosa en el hígado
de los cadáveres. ; |

Las observaciones favorables de Alvarez de Toledo contrarrestan las excepciones
que había señalado un discípulo de Corin, el Dr. Corbey, y más recientemente
Brault en la Academia de Medicina de París, 1911.

Quizá la docimasia histológica ha sido aún poco estudiada por los autores. Con-
vendría confirmar los trabajos de Meixner (Beitrúge zun gerichtlichen Medizin de
Kolisko, 1911), sobre la repartición del glicógeno en el interior de las células hepá-
ticas, en los vasos sanguíneos y especialmente en los espacios linfáticos pericapilares.

—— HQ

|

Más observaciones sobre los surcos de la cara interna
de la escama del occipital

POR

A. LECHA-MARZO y M. GAVILÁN BOFILL

En una comunicación á la Sociedad Española de Biología, Abril de 1915,
Maestre, Tena-Sicilia y Lecha-Marzo han estudiado los surcos y fosas de
Ja cara interna de la escama del occipital humano, señalando las dispo-
-siciones más frecuentes y varias raras anomalías. Recomendamos al lec-

tor el estudio de dicha comunicación, donde se expone además el interés

que desde varios puntos de vista ofrece el conocimiento de estos surcos.
Los autores españoles refieren al detalle los estudios de Le Double y
proponen una clasificación de los surcos que nosotros hemos aceptado en

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10

SURCOS DE LA CARA INTERNA DE LA ESCAMA DEL OCCIPITAL 17

nuestras observaciones. En un primer tipo, llamado curvo derecho, el
surco longitudinal se continúa hacia abajo con el surco transversal de-
recho; el surco transversal izquierdo es independiente (pronunciado unas
veces, poco marcado en otras). En el segundo tipo, curvo izquierdo, el
surco longitudinal se une con el transversal izquierdo; el surco transver-
sal derecho es independiente. En el tipo tercero hay dos surcos longitu-
dinales; uno se continúa con el transversal derecho y otro con el trans-
versal izquierdo, y en fin, en un cuarto tipo, angular, se agrupan distin-
tas variedades: en una, el surco longitudinal se divide en dos ramas
iguales ó desiguales que se continúan con los surcos transversales corres-
pondientes, variedad que es la forma de transición entre el tipo angular
y los tipos curvos; en otras variedades se observa sólo uno de los tres
surcos, el longitudinal ó uno de los dos transversales acompañados de
dos crestas; también dos surcos transversales y una cresta longitudinal.

Finalmente, pueden faltar todos los surcos y estar sustituídos por
crestas salientes ó borradas (tipo en crestas).

En 300 cráneos, los autores citados han encontrado el primer tipo 117
veces; el segundo, 27; el tercero, 25; la variedad de transición entre el
tercero y el cuarto, 28 veces; el tipo en crestas, en 53 cráneos.

Han estudiado también en su comunicación la foseta cerebelosa media
ó foseta de Lombroso, no considerándola como el surco correspondiente
á los senos occipitales más ó menos fusionados; la han encontrado muy
pronunciada en un 2 por 100 de los casos. ye

Dedicamos esta nota á referir otras observaciones, recaídas en 115 crá-
neos del Departamento del Museo Anatómico de la Universidad de Valla-
dolid. Hemos encontrado algunas formas raras, que hemos fotografiado.

El tipo curvo derecho lo hemos observado en 47 cráneos; el curvo iz»
quierdo, en 9; el doble curvo, en 5; la variedad angular de un surco me-
dio que se continúa con dos transversales, 9 veces; dos surcos transver-
sales, en 8 casos; un surco transversal derecho, en 8; sólo un surco trans-
versal izquierdo en 7 casos; en tres cráneos, sólo un surco sagital (pre-
sentamos la fotografía de un caso muy pronunciado); en uno, un surco
sagital derecho y transversal izquierdo, sin reunirse; en otro un surco
sagital izquierdo y transversal derecho, que se continúa deprimiendo la
protuberancia occipital interna (ésta se puede considerar una variedad
curva); en otro cráneo un surco transversal izquierdo y sagital izquierdo,
que no se encuentran; otro con dos transversales y un sagital, que no se
unen. En fin, el tipo en crestas, 14 veces.

Presentamos la fotografía de un occipital que muestra muy claro uno
de los surcos correspondientes á uno de los senos venosos occipitales
posteriores.

78 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Otra de las fotografías es un caso de curvo derecho muy desplazado,
tan interesante como otro caso de asimetría observado en el cráneo de
una demente epiléptica, por Viviani.

Presentamos también la fotografía de una foseta cerebelosa media un
poco lateralizada, porque se conserva la cresta occipital interna .y el
triángulo post-opistiaco. Por otra parte, esta fosa cerebelosa media, co-
locada en la parte central é inferior de la escama, la hemos encontrado
en el 4 por 100 de los casos. Por los exámenes que hemos hecho en fres-
co, concluimos también que no se debe atribuir su presencia á los senos
venosos, como suponían equivocadamente Benedikt y Le Double.

El estudio que hemos hecho de estas fosetas occipitales nos inclinan á
admitir las denominaciones que Israel Castellanos (1) las asigna en un
trabajo publicado en estos mismos días. Este investigador llama foseta
vermiana á las originadas por el lóbulo medio del cerebelo (vermis); ce-
rebelosa, álas determinadas por lóbulos marginales ó porciones laterales
del cerebelo; mediana ó central (foseta torcular) (?), á las localizadas en
- la parte superior en que concurren las crestas laterales y superiores.

Además, debemos consignar que en cráneos que no tienen depresiones
producidas por senos venosos, es decir, que presentan el tipo en crestas,
hemos encontrado, en varios ejemplares, la fosa torcular ó central al ni-
vel de la protuberancia occipital interna. y

(Departamento anatómico de la Universidad de Valladolid.

% Director: Profesor $. Sierra).

(1) Israel Castellanos: Sobre una nueva variedad de la foseta occipital. Vida

Nueva, vol. VII, núm. 3. Habana, 1915.

—_——— HDL ———

DESPACHO ORDINARIO Y MOVIMIENTO DE SOCIOS

Sesión del 21 de Mays de 1915,

Terminada la sesión científica, el Secretario, Sr. Sánchez, presentó

para socio de número al Dr. D. Antonio Piga, que era socio corres-

ponsal.

Lc

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Dd

SESIÓN DEL 18 DE JUNIO DE 1915

Utilidad de la reacción anafiláctica en el reconocimiento médico -legal
de la sangre

POR

RAMÓN ÁLVAREZ DE TOLEDO

Con el objeto de hacer este estudio del modo lo más sistematizado po-
sible, trataremos sucesivamente los puntos siguientes:

1, Animal preferible para las experiencias de anafilaxia.

2.2 Sensibilización.

3. Período de incubación.

4, Reinyección.

5. Fenómenos de anafilaxia en los animales reinyectados.

6.2 Resultados obtenidos.

7.2 Especificidad de la reacción.

8. Técnica del método en la práctica médico-legal.

I. El animal preferible para las reacciones de anafilaxia es el cobaya,
y á él, como es natural, hemos recurrido en nuestras experiencias del
diagnóstico de las manchas de sangre.

Lo hemos preferido al perro, porque ya Kraus, Biedl y Arthus, sensi-
bilizándolo con dosis grandes de suero de caballo (de 3 á 5 cent. cúb,), y
reinyectándolo con dosis también grandes (de 10 á 30 cent. cúb.), demos-

- traron que jamás se producía su muerte, fenómeno que guarda relación,

según opina Friedberger, con el hecho de que los perros son muy malos
formadores de precipitinas.

Lo hemos preferido al conejo ordinario, porque si bien éste es sensible
á los fenómenos de anafilaxia, las investigaciones de Arthus, Artoch y
Armit, han demostrado que la muerte aguda por el shock no se producía
nunca en él, y las de Friedberger prueban que, en efecto, si bien se ori-
gina á veces, no es con tanta regularidad como en los cavias. Ñ

No hemos utilizado al ratón blanco (en el que los síntomas de anafi-

6

80 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

laxia son iguales á los que presenta el conejillo de Indias), porque no nos
ha sido posible adquirirlos.

No olvidamos, sin embargo, que los estudios de Artoch, de Friedber-
ger y de Joachimoglu, han evidenciado que las palomas, las gallinas y
los patos son animales tan sensibles á la reacción anafiláctica como los
cavias.

HT. Para sensibilizar al cobaya con respecto á la sangre, se puede uti-
lizar, bien la sangre completa, bien el suero sólo. No olvidemos que los
antígenos que gozan de propiedad de sensibilizar á los animales de ello
susceptibles, con respecto á la anafilaxia, son de naturaleza albuminoi-
dea, y que, tratándose de la sangre, la albúmina de su suero es el factor
que tal propiedad debe poseer.

La inyección preparante ó sensibilizante puede practicarse ya en el te-
jido conjuntivo subcutáneo, ya en la cavidad peritoneal, bien en una
vena, bien en el corazón, bien, finalmente, en el cerebro ó en el conduc-
to raquídeo.

Las vías preferibles, porque sensibilizan á los conejillos con dosis me-
nores de sangre, son las cuatro últimas, y de todas ellas consideramos
como muy cruenta la cerebral, un poco larga y complicada, sobre todo
para el que no tiene mucha costumbre de disecar cavias, la intravenosa
y muy fácil y expedita la cardíaca; por eso hemos preferido en una gran
mayoría de nuestras experiencias esta última. Su frecuentísimo empleo
en todos los laboratorios, la hacen muy conocida; por eso nos abstene-
mos de describir su técnica.

Sí advertiremos, sin embargo, que es condición precisa para que la pun-
ción esté bien hecha el que salga la sangre por el pabellón de la cánula,
pues no basta que ésta, como en una experiencia de akidopeirastia á lo
Mideeldoorf, indique con sus movimientos oscilatorios rápidos que se
halla clavada en el músculo cardíaco.

La inyección intracerebral puede practicarse de dos maneras: bien tre-
panando la región superior del cráneo é introduciendo la aguja por el
orificio producido, bien hundiendo aquélla en la órbita á lo largo de su
pared interna, un poco oblicuamente hacia adentro, hasta. que se sienta
penetrar á través del agujero óptico, cosa que se advierte porque desapa-
rece la resistencia que antes se notaba (procedimiento de Parker-Gay).
Como he dicho antes, me parece muy cruento este procedimiento y algu-
nas veces se mueren los cobayas al cabo de varios días. De los que yo he
utilizado en mis experimentos, sensibilicé á dos por esta vía y ambos mu-
rieron; el uno á los trece días y el otro á los catorce de la inyección pre-
parante. Mi corta experiencia es, pues, en principio, bastante contraria
á la vía intracerebral.

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UTILIDAD DE LA REACCIÓN ANAFILÁCTICA 81

La dosis á inyectar varía, como es lógico pensarlo, según la vía elegi-
da. Habiendo preferido la cardíaca, y para relatar sólo los hechos obser-
vados, á ella sólo me he de referir.

La dosis óptima es de 1 cent. cúb. de disolución de sangre al 50 por 100
en suero salino isotónico, es decir, sangre, 0'50 cent. cúb. + suero artifi-
cial, 0'50 cent. cúb.

Una mayor dilución sensibiliza también á los cobayas, pero el shock
no es mortal con tanta frecuencia; así, por ejemplo, el conejillo núm. 24
no recibió nada más que 0'40 cent. cúb. de sangre y 0'60 cent. cúb. de
suero artificial y murió en tres minutos. En cambio, los cobayas núme-
ros 34 y 35 fueron sensibilizados cada uno con 0'20 cent. cúb. de sangre
humana y 0'30 cent. cúb. de suero artificial, y de ellos el primero murió
en siete minutos con shock anafiláctico típico y el otro presentó un shock
grave, pero no mortal.

El calentamiento de la sangre por debajo de 150% durante media hora
parece que no modifica sus propiedades sensibilizantes. Con manchas de
sangre calentadas en la estufa durante media hora á 100" C. sensibilicé
los cobayas núms. 28 y 31, 4 los cuales, á los quince días, intoxiqué con
sangre humana desfibrinada y no alterada, y de ellos el núm. 28 murió
en cinco minutos con shock anafiláctico típico y el 31 en el espacio de
una hora, no demostrando la autopsia, como es natural, que la muerte se
debiera á error ninguno de técnica.

Para acercarme á las circunstancias que en la práctica suelen presen-
tarse por lo que respecta á los tratamientos á que suelen someter los eri-
minales las manchas de sangre para hacer desaparecer las huellas del de-
lito, hubiéramos deseado sensibilizar conejillos por medio de la macera-
ción de manchas de sangre sometidas á la acción del formol, del subli-
mado, de lejías, de hipoclorito, de hiposulfilto, pero no hemos podido
disponer de número suficiente de cobayas, y advertiremos que Leclerq y
Minet han obtenido una mortalidad elevadísima en los cavias así prepa-
rados (uno por cada dos, muerto).

Agreguemos, además, que los mismos autores han conseguido sensibi-
lizar conejillos empleando sangre desecada de una momia de cuatro mil
años de antigiedad; que Ublenhut y Hándel también han sensibilizado
cobayas con sangre de una momia egipcia; que Pick y Yamanouchi, Ro-
senau y Anderson han comprobado que los ácidos concentrados, el ácido

- butírico, el citrato cálcico, el cloroformo, la invertina, la mirosina, la

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emulsina, las sales de magnesio, las de amonio, el aldehído fórmico, el
agua oxigenada, etc., no destruyen las propiedades sensibilizantes de la
sangre.

II. Según es sabido, entre la inyección preparante y la desencade-

E
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E

82 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

nante debe mediar un cierto intervalo de tiempo, el llamado período de
incubación; que sepamos nosotros no existe estudio sistemático suficiente-
mente amplio acerca de este asunto y en las experiencias de anafilaxia
se considera como clásico en valorar ese período en dos ó tres semanas.

Nosotros, siguiendo las indicaciones de los otros autores que de esto se
han ocupado, hemos reinyectado nuestros cobayas entre los quince y los
dieciocho días después de practicada la inyección sensibilizante, conside-
rando que realizar en serie y en días diferentes la inyección tóxica, á fin
de estudiar con exactitud la mínima duración del período incubador, hu-
biera sido sacrificar un número crecido de cobayas para satisfacer una
curiosidad científica, probablemente ya resuelta con los datos hasta el
día recogidos, aunque, como hemos afirmado, quizás no se haya publica-
do hasta hoy ningún trabajo especialmente encaminado á resolver este
punto, y sí tan sólo las numerosas citas esparcidas por la abundante bi-
bliografía que estudia la anafilaxia, y que, como dice Friedberger, «tam-
poco son aún lo bastante sistemáticos... para que resulte posible formar
un juicio definitivo acerca de tan importante problema»; palabras auto-
rizadas que confirman nuestra afirmación anterior.

IV. La inyección desencadenante la hemos practicado en la fecha que
queda indicada en las líneas que anteceden, y en cuanto á la dosis nece-
saria para producir el shock anafiláctico por vía intracardíaca, la óptima
parece ser un poco mayor á la de la inyección preparante é igual á 1 cen-
tímetro cúbico de sangre pura, es decir, no diluída.

127 "ILOR cobayas núms. 23, 29, 30 y 33 recibieron 1 cent. cúb. de sangre
humana no diluída, y el shock anafiláctico fué mortal y muy rápido.

Los cobayas núms. 25, 26 y 27 murieron rápidamente después de la in-
yección desencadenante de 1 cent. cúb. de sangre no diluída de toro, de
carnero y de cabra respectivamente.

Al conejillo núm. 19 le reinyecté sólo 0'80 cent. cúb. de sangre huma-
na, y el shock anafiláctico, aunque muy grave, no fué mortal.

En cambio, el cavia núm. 18 recibió también como inyección desenca-
denante 0'80 gramos de sangre humana no diluída, y el shock, mortal,

-duró cinco minutos. Asimismo el cavia núm. 34, que había sido sensibi-
lizado con 020 cent. cúb. de sangre humana diluída en 0'30 cent. cúb. de
suero artificial, fué desencadenado con 0'50 cent. cúb. de sangre huma-
na no diluída y murió en siete minutos.

V. La sintomatología de la reacción de anafilaxia es bien característi-
ca, y además, como es sabido, específica de la reacción en general, aun-
que no de cada antígeno en particular.

Clásico es describir en las monografías que de anafilaxia se ocupan las
tres formas fundamentales del shock anafiláctico, bien estudiadas por

3

TE Ls

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- UN día (cobayas núms. 10 y 21).

UTILIDAD DE LA REACCIÓN ANAFILÁCTICA 83

-Alexandrescu y Cinca: la forma mortal, la forma muy grave y la forma
ligera.

A) En la primera forma, inmediatamente después de practicada la in-
yección desencadenante, el animal se muestra muy inquieto, se le erizan
los pelos, estornuda, se rasca la nariz y brinca. En seguida cae de uno de
los flancos y muestra convulsiones clónicas muy acentuadas, emite mate-
rias fecales y orina: á veces, antes de caer, corre como alocado de un
sitio para otro, chocando con los objetos que encuentra en su camino,
Los movimientos respiratorios son profundos, agónicos y cada vez más

raros, hasta que el animal muere, quedando rígido su tórax y presentan-

do el conjunto sintomático de la asfixia.

Según el tiempo en que el precedente cuadro tarda en evolucionar, se
han descripto, siguiendo á Otto, tres variedades de la forma mortal del
shock anafiláctico:

La forma fulminante.

La forma aguda, y :

La forma tardía.

En la primera, todo transcurre en uno ó tres minutos; el animalito,
apenas recibió la segunda inyección, cae de costado como herido por el
rayo, presenta algunas convulsiones, emite orina y heces fecales, hace
algunos movimientos inspiratorios profundos y muere. Los cobayas nú-
meros 18, 21, 23, 24, 29, 30, 33, 25, 26, 27, 28, 8, 9, 11, 20 y 34 han muer-
to de ese modo.

En la segunda, todo evoluciona en menos de una hora; el conejillo,
bamboleándose, va de un punto á otro chocando, como dijimos antes, con
los objetos que encuentra á su paso y mostrando todo el cuadro que he-
mos ya deserito con dos aspectos, ó bien el animal, tumbado de uno de
sus flancos, tiene de vez en cuando algunas convulsiones, y así se va ex-
tinguiendo su vida con movimientos respiratorios, cada vez menos fre-
cuentes, ó bien después de haber tenido algunas convulsiones inicia-
les se hace un ovillo, con sus pelos erizados, y lentamente, sin nada apa-
ratoso, deja de existir.

El cobaya núm. 31 de nuestras observaciones, reaccionó á la inyección
desencadenante de este modo.

En la tercera variedad tienen al principio, como en la segunda moda-
lidad de la precedente variedad, algunas convulsiones, emiten orina y
heces fecales, al principio sólidas y más tarde líquidas, se rascan el ho-

-cico, tienen subsaltos de tendones y, acurrucados en un rincón, dejan de
existir al cabo de varias horas, que pueden prolongarse hasta cerca de

e

Recordaremos de paso, y hacemos esta cita solamente para completar

84 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

la descripción de los síntomas presentados por los cavias en que hemos
experimentado, que Gay, Auer, Lewis y Southard, afirman que en el
shock anafiláctico fulminante los conejillos mueren por asfixia; hecho que
demuestran los síntomas y las lesiones comprobadas en las necropsias.

En los casos de shock lento, la muerte, opina Pfeiffer, deberíase á una
parálisis vascular periférica y al descenso de la presión sanguínea que á
ella sigue.

B) La forma muy grave es bastante parecida á la anterior; los coba-
yas tienen todos los síntomas que hemos descrito en precedentes párra-
fos, pero no mueren. Por lo tanto, en: ellos se comprueba disnea muy
penosa, movimientos giratorios, convulsiones clónicas, hipersecreción
lagrimal y salival, emisión de heces fecales y de orina abundantes, cuya
escena, en sus momentos más culminantes, la representa á veces el coba-
ya tendido de uno de sus lados. El animal poco á poco se restablece, y á
los tres cuartos de hora está ya completamente bien.

C) En la forma benigna ó ligera no hay más que prurito nasal muy
acentuado, pocas convulsiones y, además, á veces, saltos bastante pro-
nunciados.

Pero hay un sintoma en todas las variedades de shock anafiláctico y
que en la última, en donde tan pocos síntomas hay, tiene una importan-
cia extraordinaria, que es considerada por Pfeiffer y Mita como específi-
co, como característico de la anafilaxia: ese síntoma es el descenso de
temperatura.

Ese descenso de temperatura, que puede ser de 7 á 9% C, en los anima-
les que se reaniman y de 11 á 13 en los que mueren, ha sido admirable-
mente estudiado por Pfeiffer y Mita, ya citados, y por Friedberger y
Braum, pero sobre todo por los dos primeros, á los cuales corresponde el
elevado mérito de habernos proporcionado, como dice Friedberger, «la
demostración de la absoluta, de la matemática exactitud de las relacio-
nes termométricas y, merced á ella, la justa medida de la evolución de
los procesos anafilácticos en los animales y, sobre todo, en los conejillos
de Indias».

No procederá, pues, como buen experimentador aquel que se limite, en
las reacciones de anafilaxia, á contemplar con ánimo, más ó menos triste-
mente emocionado, los fenómenos del shock anafiláctico. Es preciso, pues,
proceder siempre á obtener repetidas temperaturas rectales hasta que el
animal muera ó se restablezca, y después, con ellas y con el tiempo que
dure el shock, hacer una gráfica en la que las líneas, más ó menos obli-
cuas, del descenso de temperatura inicial y del ascenso terminal hasta el
restablecimiento del animal por un lado y por otro la línea horizontal del
tiempo constituyen un triángulo, cuya área expresará matemáticamente

UTILIDAD DE LA REACCIÓN ANAFILÁCTICA 85

la gravedad del shock, y como el área de un triángulo es igual á la mitad
del producto de la base (tiempo que expresa la duración del shock en
nuestro caso) por la altura (máximo descenso de temperatura en nuestro
ejemplo), podremos representarla por una fórmula que no es más que una
ecuación.

Esa fórmula es doble: una para el caso en que el animal se restablece,
shock de reanimación, y otra para aquél en que el animal muere.

La primera es la siguiente :

at

2

Esto es, shock de reanimación igual á descenso de la temperatura, et-
cétera, multiplicado por el tiempo que duran los fenómenos anafilácticos
y divididos por dos. Apresurémonos á indicar que la unidad admitida
para el descenso de temperatura es 0%,1 C. y la del tiempo un minuto.

La segunda fórmula propuesta por Mita consta de un término (S +) fun-
dado en el hecho de que 30.000 unidades, calculadas con arreglo á la fór-
mula del shock de reanimación, representan el término medio entre la
reanimación y la muerte y 20.000 el número que se obtiene con la fórmula
del Sr en los casos mortales, suprimiendo el término de la reanimación y
substituyéndole con el de la muerte del conejillo; esa fórmula es la si-
guiente :
dt+T+

2

esto es, unidades intermedias entre la reanimación y la muerte, más uni-
dades en los casos de muerte, menos la fórmula del shock de reani-
mación.

A continuación insertamos la gráfica del valor del shock presentado por
uno de nuestros conejillos, y en el cuadro-resúmen que después escribi-
mos van los descensos de temperatura obtenidos.

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BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

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UTILIDAD DE LA REACCIÓN ANAFILÁCTICA 89

Pero nosotros no hemos hecho más que referir la sintomatología pre-
sentada por nuestros conejillos, en todos los cuales utilizamos la vía
intracardíaca para la inyección tóxica; debemos, sin embargo, recordar
que, cuando se emplea la vía subcutánea para realizar aquélla, se pro-
duce un edema duro que en las anafilaxias graves se hace hemorrágico
y que acaba por necrosarse, produciéndose una úlcera de bordes claros
que cicatriza en varios días, á lo cual, como es sabido, se denomina fenó-
meno de Arthus.

Recordemos también que cuando la reinyección se hace utilizando
dosis muy pequeñas de antígeno, en lugar de producirse el descenso de
temperatura de que ya nos hemos ocupado, origínase, al contrario, una
elevación de ella, á veces muy notable fenómeno que se ha tratado de
utilizarlo para la explicación de la fiebre en las enfermedades infec-
ciosas.

Queda, pues, con todo esto descrita la variada sintomatología del shock
anafiláctico; resumirémoslo diciendo que en los conejillos de Indias, em-
pleando dosis á propósito, se puede producir una triada sintomática en
perfecta armonía con las dosis inyectadas. Esa triada está constituída
por el shock (reinyección de grandes dosis), casi siempre mortal; por el
efecto psicrógeno (dosis media) y por el efecto pirógeno (dosis mínima).

Con arreglo á esto, en las observaciones recogidas nosotros procede-
mos de la siguiente manera:

Una vez practicada la reinyección, observamos el síndrome presen-
tado por el conejillo; si la muerte se produce en los cinco primeros mi-
nutos, considerámosla como hecho suficientemente expresivo para con-
tentarnos con él en la interpretación de los resultados. Si la muerte no
se produce en ese intervalo, tomamos la temperatura rectal ó axilar y la
observación la repetimos cada diez ó quince minutos hasta el restableci-
miento completo del animal ó hasta su muerte. Próximamente á las tres
ó cuatro horas el conejillo ha readquirido la temperatura inicial.

Pero si el análisis detenido del cuadro sintomático por los cobayas
presentado es fundamental, pues nos permite restablecer el diagnóstico -
de la reacción anafiláctica, no lo es menos la necropsia de los cavias
muertos en el shock, dado que por medio de ella encontraremos en mu-
chos casos la explicación de la muerte y nos servirá á veces para demos-
trarnos que la reinyección no estuvo bien practicada, pues es preciso no
cargar en la cuenta de los fenómenos anafilácticos los errores de técnica
que nosotros seamos capaces de cometer.

Si nosotros hemos afirmado en párrafos anteriores que no experimenta
bien aquel que no comprueba termométricamente en las reacciones de
anafilaxia el efecto psicrógeno, asimismo aseguramos que no emplea téc-

90 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

nica seria quien no practica sistemáticamente la necropsia á todos los
animales en quienes se produjo la muerte por sus experiencias.

Los resultados del examen necrópsico en la muerte rápida por shock
anafiláctico se hallan hasta ahora de acuerdo con los síntomas. Las
observaciones de Gay, Auer, Lewis y Southard, han demostrado que los
pulmones no están retraídos, sino, al contrario, enfisematosos y fuerte-
mente dilatados, hasta el punto que se produce la desviación del corazón.

El examen microscópico comprueba lo que la simple inspección enseña
al demostrar que los alvéolos se hallan extraordinariamente dilatados,
hasta el punto que sus paredes están desgarradas (hecho que hemos po-
dido comprobar en nuestras preparaciones histopatológicas). Esa notable
dilatación de los alvéolos contrasta casi siempre con la contracción de los
bronquios, en los que la mucosa está plegada, debido sin duda á la con-
tracción de los músculos bronquiales. Existe, por último, á veces un li-
gero edema intersticial.

El miocardio puede mostrar aspectos varios y en esto, lo mismo que
en las alteraciones de los pulmones, nuestras observaciones confirman
las de otros autores: ya se presenta anémico y pálido en unos casos; ya
hemorrágico y edematoso en otros.

La docimasia hepática que cuidadosamente hemos practicado en todos
los cobayas, ya por el procedimiento histológico, ya por el químico, ha
sido siempre positiva.

La sangre tiene la coagulabilidad disminuída; es muy pobre en com-
plemento y muestra una leucopenia bastante acentuada que nos parece
muy relacionada con la intensidad del shock. Los dos ejemplos siguien-
tes, elegidos al azar entre nuestras observaciones, nos demostrarán la
precedente afirmación.

Cobaya núm. 35. — Shock anafiláctico mediano. Este cobaya tiene in-
mediatamente antes de la inyección desencadenante 28.000 leucocitos
por milímetro cúbico; quince minutos después de aquélla presenta tam-
bién 28,000 glóbulos blancos por milímetro de sangre, y veinticinco mi-
nhutos después de la inyección tóxica el recuento globular demuestra que
la cifra leucocítica ha descendido á 19.424 glóbulos por milímetro cúbico.

Cobaya núm. 34. — Momentos antes de la inyección tóxica este cone-
jillo tiene 50.720 leucocitos por milímetro cúbico, y cinco minutos des-
pués de ella, es decir, dos minutos antes de la muerte, aquel número ha
descendido á 32,400. |

Vemos, pues, que, como afirmábamos, la leucopenia es directamente
proporcional al shock; pues el cobaya núm. 35, que no murió, sufrió en
su riqueza leucocítica un menor descenso que el número 34, que murió á
los siete minutos de la inyección desencadenante, 2

UTILIDAD DE LA REACCIÓN ANAFILÁCTICA 91

De otra parte, siempre hemos comprobado esta leucopenia en todos los
casos en que la hemos investigado, que han sido en la mayor parte de
nuestras observaciones. Concedemos, pues, á este signo un gran valor y
creemos que, al mismo tiempo que el efecto psicróxeno, debe investi-
garse sistemáticamente en todas las experiencias de anafilaxia.

Las observaciones de Ucke, por último, han demostrado en las cápsu-
las suprarrenales lesiones que permitirfan aventurar la hipótesis de que
el descenso de presión sanguínea y el de temperatura, deberíanse á la
fijación de la adrenalina por las células pleocromas.

Creemos, con Friedberger, que sin demostrar la riqueza de la sangre
en adrenalina antes y después de la inyección tóxica, es algo aventura-
do y prematuro formular una tal hipótesis.

En el caso que la muerte se produzca de una ó varias horas después de
la inyección desencadenante, la necropsia no comprueba las lesiones que
refiriéndonos á la muerte súbita por shock anafiláctico acabamos de des-
cribir, lo cual viene á comprobar la explicación que Pfeiffer da de la
muerte en estos casos, y que nosotros hemos formulado en líneas ante-
riores. Encuéntranse muy hiperemiadas y equimóticas á veces las sero-
sas, así como la mucosa intestinal.

VI. Hemos utilizado para nuestras experiencias una serie de 30 coba-
yas, además de otros cuatro que se nos han muerto dos ó tres días antes
de la inyección, impidiéndonos terminar en ellos nuestro estudio, y des-
contando otros tres en quienes la autopsia demostró una gran hemorra-
gia cardíaca por imperfección en la técnica.

Los hemos dividido en cuatro lotes: uno, primero, de trece, dedicado á
demostrar los fenómenos de anafilaxia, sensibilizando á once con sangre
humana y tres cada uno con sangre procedente de animales diversos
(toro, cabra y carnero), y de todos los cuales once murieron de dos á cin-
co minutos y dos (sensibilizados y reinyectados con sangre humana) no
fallecieron, pero mostraron síntomas de shock muy grave el uno y de
sohck ligero el otro. Obteniendo el porcentaje vemos que en el 100 por
100 de los casos la reacción fué positiva, y de ello el 84'6 por 100 mortal
y el 15'4 por 100 no mortal.

El segundo ¡ote, de quince, lo destiné á demostrar la especificidad de
la reacción, reinyectándoles sangre de especie distinta á aquella con que
habían sido sensibilizados, ó sensibilizándolos con esperma y desencade-
nándolos con sangre y viceversa. De los primeros, ninguno, ó sea el 100
por 100, presentó síntomas de anafilaxia, y en cuanto á los segundos, ya
nos ocuparemos dentro de un momento con más detención, cuando ha-
blemos de la especificidad de la reacción.

El último lote, de cinco, lo dedicaba á averiguar la aplicación de la

92 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

reación anafiláctica á la práctica forense, sensibilizándolos con sangre al-
terada en diversas condiciones, ya calentada á 100%, ya sometida á la ac-
ción del formol, de la potasa, del jabón y del ácido clorhídrico.

Todos los cobayas, excepto los preparados con sangre calentada á
100% (1), 4 los pocos días unos, á las pocas horas otros de hecha la inyec-
ción preparante murieron, impidiéndome averiguar punto tan interesan-
te, ya que mi corral no era tan extraordinariamente rico en cavias.

VII. ¿Es específica la reacción anafiláctica de la sangre? He aquí el pun-
to principal de la cuestión que venimos tratando. Su importancia nos obli-
ga á detenernos un poco en él.

Determinados autores (Friedberger y otros) han sostenido que la anafi-
laxia para la sangre no es específica, que es imposible distinguir la del
hombre de la del asno, caballo, monos, cabras y carneros. Nosotros, sin
poder hacer tan extensas nuestras investigaciones, hemos conseguido de-
mostrar, no obstante, que por lo menos se pueden distinguir las de car-
nero y toro de las del hombre. Nos atrevemos á afirmar que se puede
hacer otro tanto con las demás, y que, salvo determinadas restricciones,
la reacción de anafilaxia es esp=cífica. Sin extendernos al estudio de esta
cuestión, con respecto á todos los antígenos posibles, y quedándonos cir-
eunscritos á la sangre, diremos que, si bien Arthus no había admitido que
la anafilaxia sérica fuese específica para el conejo ordinario, animal me-
nos sensible que el cavia, Rosenau y Anderson, Otto, Uhlenhut, Richet,
Thomsen, Yamanouchi, etc., han comprobado, como consecuencia de in-
vestigaciones innumerables, que la reacción anafiláctica es específica ex-
cepto para los animales de grupo zoológico muy inmediato: así, por ejem-
plo, que el cobaya sensibilizado para el suero de cabra reacciona al sue-
ro de carnero, y ambos pertenecen á la familia de los óvidos. El conejillo
sensibilizado para la sangre de rata reacciona con la de ratón, pues am-
bos pertenecen al género Mus (de la familia de los múridos, del orden de
los roedores). El cavia sensibilizado para el suero humano reacciona por
la influencia del de Jos monos superiores, es decir, que se demuestra por
estos hechos la gran semejanza de textura molecular entre las albúminas
de los animales de grupos taxonómicos inmediatos, y como esto sucede
precisamente en todas las reacciones biológicas en que antígenos albumi.-
noideos intervienen, gran número de autores lo recogen y lo esgrimen
como argumento en pro de la doctrina transformista.

Ch. Richet, por el contrario, ha ido muy lejos en el estudio de la especi-
ficidad de la anafilaxia. «No hay solamente, dice, diferencias específicas;
hay también diferencias individuales, de suerte que el suero de un indi-

(1) El adjunto cuadro resume lo que acabamos de decir.

o

UTILIDAD DE LA REACCIÓN ANAFILÁCTICA 93

viduo es, en una cierta medida, heterógeno para otro individuo, aunque
la especie sea la misma. Yo he tratado de dilucidar esta cuestión. Es muy
interesante, pues introduciría en la ciencia lo que no ha sido aún (6 ape-
nas) abordado hasta el presente, la fisiología individual, y debo decir que
los resultados han sido casi nulos ».

Pero el estudio de la especificidad de la reacción anafiláctica no debe
comprender sólo la determinación de cada clase animal de albúmina (es-
pecificidad genérica), sino la averiguación de cada especie de órganos
(especificidad orgánica), es decir, si la albúmina de la sangre sensibiliza
Ó no para las demás albúminas del mismo animal.

Ocupándose de este asunto Dervieux y Leclerq (1) dicen lo siguiente:
«Los animales preparados para el esperma humano permanecen indife-
rentes á la inyección intracardíaca de líquido testicular de conejo, de co-
baya, de toro: de la misma manera que á la inyección intracardíaca de
1 cent. cúb. de suero sanguíneo humano, dosis siempre suficiente para
desencadenar la anafilaxia en animales sensibilizados para la sangre».

«Estas experiencias responden suficientemente á las objeciones de
ciertos autores, según los cuales la anafilaxia, como todos los procedi-
mientos biológicos por otra parte, pueden únicamente servir para deter-
minar el origen animal de una albúmina, pero es totalmente incapaz de
diferenciar dos albúminas procedentes del mismo animal ».

Pero nosotros, en contraposición á lo que en las líneas precedentes los
expertos parisinos afirman, hemos demostrado en un trabajo reciente (2)
que la sangre humana sensibiliza, para el esperma también humano y vi-
ceversa, que el esperma sensibiliza para la sangre humana, resultados
que, por otra parte, coinciden con los obtenidos anteriormente por
T. Maestre y A. Lecha-Marzo.

VII. Indicado queda cuanto se refiere á la anafilaxia para la sangre :
únicamente me resta decir unas breves palabras que nos ilustren acerca
de la técnica á emplear en un caso de peritaje médico-legal.

Supongamos que tenemos ya demostrado que las manchas que se pre-
sentan á nuestra consideración son de sangre. No resta más que averi-
guar si esa sangre es ó no humana, y para ello tratamos de utilizar la
reacción anafiláctica.

Creemos preferible sensibilizar los cobayas con las manchas objeto de
nuestro peritaje á emplearlas para la inyección tóxica, porque si bien es
cierto que así gastaremos una cantidad del material disponible en sensi.-
bilizar varios cobayas, nos evitaremos el peligro de que las manchas hu-
biesen sido alteradas por el criminal mediante el empleo de productos
tóxicos, que al ser introducidas con la inyección desencadenante en el

(1) Le diagnostic des taches en Médecine légale, págs. 234 y 285. París, 1912,
(2) Maestre y Lecha- Marzo: Gaceta Médica del Sur, Enero 1915.

94 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA
cobaya podrían matarle, dando origen á un error de interpretación por
nuestra parte, pues sería fácil creer que la muerte de él ó de los coneji-
llos era debida al shock anafiláctico.

Sea de ello lo que quiera, disolveremos el producto sanguíneo (1) en
una pequeña cantidad de solución fisiológica de cloruro de sodio esterili-
zada, á la que añadiremos unas cuantas gotas de solución diluída de sosa
hasta reacción débilmente alcalina y, si es preciso, por temor á infección
de la misma, la esterilizaremos á 100%, y con el producto de la disolución
sensibilizaremos una serie de cobayas, inyectándoles por vía cardíaca ó
intracerebral 1 cent. cúb. de aquélla.

Si la cantidad de material sospechoso es pequeña, preferiremos la vía
intravenosa (yugular ó crural) por tener menos peligros que las otras.

Una vez pasado el período de incubación que ya conocemos, practica-
remos la inyección tóxica á los cobayas anteriores inyectando por vía
intracardíaca : á uno, 1 cent. cúb. de sangre humana no diluída; á otro,
1 cent. cúb. de sangre de caballo; á otro, 1 cent. cúb. de sangre de toro,

etcétera, etc.
El cavia que presente fenómenos anafilácticos típicos nos indicará si la

inyección preparante fué de sangre humana; desechamos en la práctica,
al menos en nuestros climas, la posibilidad de que fuera de antropoide,
único motivo de error en la anafilaxia para la sangre humana. Indicada
queda, in extenso, en páginas anteriores, la marcha á seguir en el análi-
sis de los síntomas que los conejillos presentan.

Si el shock termina por la muerte, la autopsia será inmediatamente
practicada, y sólo en el caso en que.no nos demostrase que aquélla era de-
bida á una falta de técnica operatoria, podremos atribuirla á la anafilaxia.

Se comprenderá, pues, habida cuenta de todo lo que antecede, que la
Medicina legal posee en la anafilaxia un método de reconocimiento del
origen de las manchas de sangre de indiscutibles ventajas, que sólo pue-
den ser equiparadas á las que posee la reacción de las precipitinas y que
son : especificidad casi absoluta, claridad y rapidez del resultado de la

reacción y débil cantidad del producto, necesaria para sensibilizar los
cobayas que hayan de servir para la experiencia. Aparte de esto, en los
casos en que el líquido resultante de la disolución de la mancha fuese
muy turbio ó estuviese alterado por productos químicos diversos, la re-
acción de precipitación es inaplicable: la anafilaxia la substituye admi-

rablemente.

1) Si es una mancha sobre tela cortaremos un trozo de 1 centímetro cuadrado
que maceraremos en 10 cm de solución salina isotónica é inyectaremos de 1
á2cm3,

(Trabajo de la Cátedra de Medicina legal de la Universidad
de Granada : Prof. Lecha-Marzo).

PY

EE e ESE

OBSERVACIONES SOBRE LA TUBERCULOSIS Y SU BACILO 95

Observaciones sobre la tuberculosis y su bacilo

- POR

P. MAYORAL

En el núm. 30 del BoLeETÍN de esta Sociedad, correspondiente al mes
de Marzo del presente año, y aparecido en los primeros días de Junio,
leímos la importante comunicación de los Sres. R. Turró y J. Alomar,
titulada «Atenuación del bacilo de Koch en el caldo de patata de Ho-
landa ».

Gran satisfacción nos ha producido ver comprobados por personas de
tanto prestigio, hechos que ya habíamos publicado bajo otro punto de
vista. Por ello creemos necesario hacer hoy una comunicación, transceri-
biendo algunos fragmentos de nuestras publicaciones y adelantando he-
chos posteriormente observados, que se expondrán y estudiarán con
mayor extensión en un trabajo que estamos preparando.

En la comunicación hecha á esta Sociedad en la sesión del 23 de Enero
de 1914, que oportunamente apareció en el BoLETÍN y en el núm. 14 de
la excelente Revista valenciana Policlínica, decíamos en forma de con-
clusiones:

«La vacuna tuberculosa viva y la muerta carecen de toxicidad para el
cobaya tuberculoso; este hecho establece profunda separación entre los
productos preparados por nosotros y las tuberculinas conocidas hasta
el día.

» La vacuna tuberculosa viva produce abscesos en los sitios en que se
inyecta, abscesos que se curan solos, y no sólo no se tuberculiza el ani-
mal, sino que provoca en él una inmunidad utilizable en terapéutica ».

El 28 de Septiembre de 1914 tuvo lugar en el Laboratorio municipal de
Madrid, bajo la presidencia del Sr. Alcalde, una reunión de los Directo-
res de los Dispensarios antituberculosos y algunos clínicos eminentes en
cuestiones de tuberculosis; en dicha reunión dimos á conocer los estu-
dios que con nuestra vacuna tuberculosa muerta habíamos realizado en
el hombre, en unión de los Dres. Isidro y José Sánchez Covisa, y solici-
tamos que se estudiara ampliamente. Desde entonces, para facilitar el
empleo de la vacuna, con ella entregamos una nota - resumen de los prin-
cipales datos que habíamos recogido en nuestros estudios, y que á la
letra dice:

Su ¡LIBRARY

E La,

96 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

«LABORATORIO MUNICIPAL DE MADRID. — Vacuna tuberculosa muer-
ta. — No estando todavía demostrada la utilidad profiláctica y terapén-
tica de este producto en la tuberculosis humana, se requiere un minu-
cioso estudio por parte de personas competentes.

» La vacuna tuberculosa muerta del Laboratorio Municipal de Madrid,
ó, por abreviar, la v. t. m., es una mezcla de cultivos puros, homogé-
neos, de bacilos de la tuberculosis humana, desarrollados en caldo de
patata (Turró y Alomar) y caldo A. de placenta (Forns y Mayoral). Estos
cultivos han sido muertos por la acción del cloroformo, fenol y del calor,
de modo que no se produzca en ellos grandes cambios de composición.

» La v. t. m. inyectada en el tejido celular subcutáneo de cobayas tuber-
culosos, á la dosis de 4 cent. cúb., no produce de momento ninguna alte-
ración; sólo después de tres á cuatro semanas se forma un absceso que
se abre y cura espontáneamente. Los efectos sobre el cobaya sano son
idénticos.

» La v. t. m. inyectada en la vena marginal de la oreja de un conejo
sano, de 1 kilogramo de peso, á la dosis de 1 cent. cúb. no produce nin-
guna alteración ostensible. |

»Con la v. t. m. se han obtenido buenos efectos profilácticos y tera-
péuticos en la tuberculosis experimental del cobaya.

» En el hombre tuberculoso la v. t. m. no produce reacción local, gene-
ral ni focal. Cuando se inyectan desde el principio del tratamiento dosis
de 0'1á 1 y 2 cent. cúb., se producen abscesos que se abren y curan
solos, sin dejar lesiones específicas. Para evitar la formación de abscesos,
se impone el inyectar cantidades pequeñísimas, que progresivamente se
irán aumentando. dd

» La acción terapéutica de la v. t. m. deberá estudiarse en todo caso de
tuberculosis que no sea agudísima (meningitis, tifobacilosis, etc.); en los
casos graves seguramente nada se conseguirá; pero son los más útiles
para demostrar la inocuidad de la v. t. m.

» La hemoptisis contraindica el empleo de la v. t. m.; pero en cuanto los
esputos se expulsen sin sangre, puede comenzarse ó reanudarse el trata-
miento.

» Sería muy conveniente estudiar la acción de la v. t. m. en la profi-
laxis de la tuberculosis humana; en los individuos pertenecientes á fami-
lias tuberculosas; en los sospechosos de tuberculosis que reaccionan á la
tuberculina sería útil hacer un tratamiento de 20 inyecciones.

» Proponemos la siguiente pauta general de tratamiento, que podrá mo-
dificar el buen juicio de quien la emplee.

» Las inyecciones se practicarán en el tejido celular subcutáneo de
modo que queden bastante separadas entre sí; el adjunto esquema indica

DASS, A

OBSERVACIONES SOBRE LA TUBERCULOSIS Y SU BACILO 97

la topografía de cada inyección en los casos en que hasta ahora.se ha
empleado. Es muy conveniente seguir este esquema ú otro parecido, pues
si se produjera algún absceso, se sabría cuál fué la dosis que lo provocó
y el tiempo que tardó en aparecer.

» Las inyecciones se practicarán cada cinco á siete días, hasta alcanzar
las dosis de 0'1 cent. cúb. y superiores, en cuyo caso se dejarán transcu-
rrir diez ó más días entre una y otra inyección.

» Es indispensable llevar exactamente la gráfica del peso y de la tem-
peratura; el ascenso de la temperatura y la progresiva disminución del
peso son síntomas de intoxicación que obligan á no aumentar las dosis ó
suspender temporal ó definitivamente el tratamiento.

» La marcha progresiva de la inmunización, que se ha seguido sin pro-
ducir ningún trastorno en graves casos de tuberculosis pulmonar, es la
siguiente : :

1.? inyección 0'00004 cent. cúb. 11.? inyección 0'01 cent, cúb,

E y 000006 Aia: 0*02 »

RADO 0'0001 er D 004 »

4.2 » 00002 Pe UI 006 »

5.” » 00004 15.* » 01 »

6.2 » 00006 16.* » 041

73 » 0*001 O. 015 »

añ » 0*002 18.* » 0'2

as » 0004 195 » 0'3

LO 0006 20 td 0'4 »

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Y

Y YY Y3s3yYuYvYs“yY
Y

» No creemos conveniente pasar de la dosis de 0'5 cent. cúb., pues aun
con éstas es de temer la formación de abscesos. Si después de una inyec-
ción se observa un aumento de más de 0%,5 de temperatura, no se aumen-
tará la dosis de la siguiente.

» Para emplear la v. t. m. á las dosis que aconsejamos, hay que diluirla
en disolución fisiológica de cloruro sódico, con 0'5 por 100 de fenol. La
dilución al */,, de v. t. m. en la solución fisiológica fenicada se conserva
mucho tiempo si las manipulaciones se hicieron asépticamente; las dilu-
ciones superiores al */,, no se conservarán más de dos ó tres días.

» Estando la v. t. m. en período de estudio, no se facilita al público ni
á los médicos en general y sí únicamente á los especializados en el estu-
dio de la tuberculosis. A éstos se ruega encarecidamente que lleven mi-
nuciosa historia de cada enfermo y,'á ser posible, con fotografías y radio-
grafías, para que el Laboratorio Municipal de Madrid pueda conocer los
resultados.

» El Laboratorio Municipal de Madrid no cree háber resuelto el pro-
blema de la curación y profilaxis de la tuberculosis con la preparación

98 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

de v.t. m., y espera de la experimentación de los demás una sanción
autorizada sobre su utilidad ».

En la comunicación de los Sres. R. Turró y J. Alomar, no se expresa
la naturaleza del producto que han empleado en el tratamiento de los
tuberculosos. Con los cultivos en velo ú homogéneos obtenidos en su
caldo de patata, que, como se indica en la nota transcrita, hemos adop-
tado convencidos de las ventajas que sus autores le asignan, puede ob-
tenerse: 1. Nuestra v. t. m., ó sea un cultivo homogéneo muerto, cuyos

gérmenes hayan sufrido la mínima alteración posible. 2.2? Una emulsión

de bacilos triturados hasta conseguir que sus fragmentos no sean reco-
nocibles microscópicamente, previa tinción por el Ziehl, que sería la B. E.
de Koch. 3. Un extracto glicérico de los bacilos calentados á 100%, ó
sea la A. T. de Koch.

Claro es que podrían obtenerse infinidad de tuberculinas y emulsiones
bacilares distintas de las citadas; pero los tres tipos expuestos son los
fundamentales, pues á ellos son referibles, por su constitución y modo de
obrar sobre el organismo, cuantos productos puedan prepararse sin pro-
ducir una alteración tan honda que los haga inaptos para la antigenote-
rapia.

Será muy conveniente que en ulteriores publicaciones indiquen la na-
turaleza del producto que han empleado para poder precisar y unificar
los resultados obtenidos.

Los cultivos homogéneos en caldo de patata de Turró y Alomar se 0b-
tienen lo mismo, cualquiera que sea la clase de patata empleada; no es
condición indispensable que sea de Holanda. Estos cultivos «no sirven
para el diagnóstico de la tuberculosis por la reacción de aglutinación ».

Nosotros hemos observado intensas aglutinaciones con sueros de perso-

nas no tuberculosas y resultados negativos con suero de tuberculosos
pulmonares en distintos períodos, algunos en excelentes condiciones para
que en su suero se encontraran aglutininas.

Los Sres. Turró y Alomar han demostrado con sus estudios que aquella
débil virulencia que habíamos observado en los cultivos vivos homogé-

“neos hechos en su caldo de patata se debe al pase repetido por dicho
medio. Podemos añadir que basta el pase de la patata ordinaria gliceri-
nada para que la atenuación de la virulencia se produzca, pues nuestros
primeros trabajos se hicieron con cultivos que sólo habían pasado tres
veces por el citado medio sólido.

La débil toxicidad de nuestra vacuna tuberculosa; el hecho de no pro-
ducir reacciones locales, focales y generales en el hombre y animales tu-
berculosos, que habífmos anunciado en la comunicación á esta Sociedad
y en la nota que entregamos con la vacuna, ha sido confirmado por gran

4 > e e a E ;
A A a A ia se

OBSERVACIONES SOBRE LA TUBERCULOSIS Y SU BACILO 99

número de clínicos que la han empleado; pero la demostración más nota-
ble ha sido hecha por el Dr. R. Vila Barberá, Profesor auxiliar de la Fa-
cultad de Medicina de Valencia.

El Dr. Vila ha inyectado por dos veces, en las venas de un tuberculoso
en último período, 1 cent. cúb. de vacuna sin producir reacción focal;
una de las inyecciones produjo fiebre de 39 y la otra sólo un acceso de
dispnea. El enfermo ha mejorado, pues ha desaparecido la fiebre.

Cuando por primera vez observamos la falta de reacciones locales, ge-
nerales y focales en el hombre y los animales tuberculosos inyectados
con nuestra vacuna, viva ó muerta, creímos, como los Sres. Turró y
Alomar, que este hecho dependía de la naturaleza del medio de cultivo
que habíamos empleado.

Pronto vimos que la vacuna obtenida exclusivamente en caldo de pla-
centa glicerinado, con semillas que no habían pasado por el caldo de pa-
tata, es tan poco tóxica como la que se produce con el caldo de patata de
dichos autores, y de aquí que continuáramos elaborando nuestra v. t.m.
con una mezcla de cultivos en caldo de patata y de placenta.

Un hecho de la mayor importancia creemos haber demostrado con
nuestros estudios experimentales sobre la tuberculosis y su bacilo; y es
que «la toxicidad de las tuberculinas, emulsiones bacilares, vacunas tu-
berculosas, etc., su aptitud para producir reacciones locales, generales y
focales en los tuberculosos están en razón directa del grado de destruc-
ción y degradación molecular que se ha hecho sufrir al bacilo y produc-
tos resultantes de su vida; los tuberculosos no son hipersensibles al ba-
cilo de Koch íntegro, sino á los productos de lisis de éste ».

Las siguientes observaciones comprueban la afirmación que hemos
hecho.

Tres cobayas de 250 4 300 gramos de peso se inoculan con la misma
cantidad de producto tuberculoso; pasado un mes se inyecta á uno 0'5
centímetros cúbicos de A. T. de Koch, á otro 1 cent. cúb. de B. E. y al
tercero 5 cent. cúb. de v. t. m. El animal inyectado con A. T. muere en
veinticuatro ó cuarenta y ocho horas y los que se inyectaron con B. E.

y v.t. m. no sufren aparentemente, sobre todo el que se inyectó con
o. MM.

Si en un tuberculoso se practica la cutirreacción simultáneamente y en
la misma forma en un reducido espacio de piel, haciendo cuatro grupos
de escarificaciones: uno con lanceta limpia, que sirve de testigo; otro con
lanceta cargada con tuberculina antigua de Koch (A. T.); un tercero con
emulsión bacilar de Koch (B. E.), y el cuarto con v. t. m., observando
- diariamente al enfermo veremos que en la inmensa mayoría de los casos
ocurre lo siguiente:

-

100 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Pasadas veinticuatro Óó cuarenta y ocho horas, la reacción es fuerte-
mente positiva en la escarificación impregnada con A. T.; débilmente po-

sitiva, en la que se depositó la B. E., y negativa, con igual aspecto que

la escarificación testigo, aquella que se hizo con v. t. m. Pasados diez ó
quince días, cuando los signos reaccionales casi han desaparecido de las
escarificaciones impregnadas con A. T. y B. E., se presenta en aquella
en que se depositó la v. t. m., y que parecía haber cicatrizado, una pápu-

la que se transforma en pústula y se recubre después con una costra que
tarda mucho tiempo en desaparecer. Esta evolución de la lesión produci-
da con la v. t. m. es idéntica á la que describe Maragliano en las perso-
nas vacunadas contra la tuberculosis por su procedimiento, que consiste
en inocular con una aguja una pequeñísima fracción de un cultivo de
bacilo de Koch, muerto por la acción del calor, de modo que no sufra
gran alteración.

Si en vez de emplear A. T. pura, se emplea diluída al décimo en la cu-
tirreacción, el resultado es el mismo, pues aunque la reacción no es tan.
intensa lo es más que en los puntos en que se escarifica con B. E.Ó0. t. m.

El hecho de que el tuberculoso no sea hipersensible al bacilo de Koch,
sino á los productos resultantes de la alteración de éste, lo interpretamos
nosotros del siguiente modo. El bacilo de Koch no se hidroliza fácilmente,
es de penosa digestión para los anticuerpos que el medio interno pueda
elaborar, lo mismo que ocurre á nuestro aparato digestivo con la celulosa
y la cera de las abejas, substancias que son digeridas por otras es-
pecies.

Este hecho se impone cuando se tiene cierta experiencia en las inyec-
ciones de diversas bacterias en los animales y en el hombre. El vírgula
colérico, los bacilos tíficos, paratificos, coli, pneumobacilo, bacilos del
grupo del diftérico, estafilococos, diplococos diversos, estreptococo, etcé-

tera, inyectados á dosis quíntuples por el número de gérmenes que las de.

bacilo de Koch, producen reacción general ó local más ó menos intensa,
pero inmediata, y los gérmenes son rápidamente destruídos. El bacilo de

Koch no produce reacción general ni local inmediata, pero persiste en el

sitio en que se inyectó, pudiendo reconocérsele intransformado meses
después en el pus que se forma en el sitio en que se depositó.

No pudiendo el organismo librarse del germen por destrucción digesti-
va, en los casos más favorables edifica el tubérculo, órgano linfoide en
que acantona el germen; las células del tubérculo tienen por misión trans-
formar, hacer homoemáticas las substancias procedentes de la vida y de
la muerte y autolisis del bacilo.

Mientras el bacilo vive y se multiplica, el tubérculo no desaparece, es-

tableciéndose una simbiosis imperfecta, y si las células que lo constitu-

rs

PE.

OBSERVACIONES SOBRE LA TUBERCULOSIS Y SU BACILO 101

yen flaquean en su papel por exceso de trabajo ó debilidad del total orga-
nismo, éste se intoxica por insuficiencia funcional del tejido tuberculoso.

Como el paso á la sangre de substancias procedentes del bacilo es va-
riable en cantidad y discontinuo en los primeros tiempos de la enferme-
dad, se establece para ellas anafilaxia; en cambio, no se establece para
el bacilo íntegro, porque pasa menos veces á la sangre, y este paso siem-
pre breve, pues pronto se acantona en ganglios ó vísceras, ó es fagocitado,
aunque no muerto, es insuficiente para engendrar anticuerpos; á ello se
une la dificultad que el organismo tiene para formarlos contra él, depen-
diente de su composición, y que es la razón de producción del tejido tu-
berculoso, nuevo órgano que el organismo crea por adaptación.

La dificultad que existe para demostrar en los plasmas de los tubercu-
losos anticuerpos del bacilo de Koch íntegro, es un argumento á favor de
la hipótesis expuesta; también lo es el hecho de que tuberculosos que ha-
bían reaccionado débilmente con la escarificación hecha con v. t. m., re-
accionaron con intensidad y rapidez después de un tratamiento inmuni-
zador hecho con nuestra vacuna.

La defensa del organismo contra el bacilo de Koch flaquea en su parte
fundamental, pues difícilmente elabora anticuerpos que lo destruyan,
como hace con otras bacterias, y la terapéutica debe esforzarse en adies-
trarle, educarle para que produzca anticuerpos capaces de digerirlo, úni-
co medio de librarse de él y curar. Esto sólo puede conseguirse inyectán-
dole á dosis crecientes, pero no disgregado, artificialmente digerido, sino
tal cual es, con la mínima alteración compatible con la pérdida de su vi-
talidad. Este tratamiento con vacunas tuberculosas tiene la ventaja de
inmunizar también contra la intoxicación tuberculosa, como lo hace el
tratamiento con tuberculinas, pues la lisis del germen en el interior del
organismo ocasiona la producción lenta y, por lo tanto, inofensiva de
éstas. :

En nuestros estudios de inmunización contra la tuberculosis humana
hemos encontrado gran número de casos en los que es inútil intentar la
inmunización terapéutica activa, por estar el organismo intoxicado por
insuficiencia funcional del tejido tuberculoso ó por pululación del bacilo

- que ni siquiera ha podido acantonarle en los tubérculos; para estos casos
hemos obtenido un producto que permite realizar la inmunización pasiva.

| Teniendo en cuenta los trabajos de numerosos autores y en especial
A los de Spengler, hemos preparado una sangre antituberculosa para obte-
ner junto con los anticuerpos del suero los contenidos en los hematíes y
a leucocitos. Este producto es sangre desfibrinada de conejo, al que repeti-
damente se ha inyectado en las venas y en el tejido celular subcutáneo
dosis crecientes de v. t. m. Para obtener la citolisis de los elementos de

102 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

la sangre se mezcla ésta con un volumen y medio de glicerina y agua;
para hacer menos dolorosas las inyecciones de esta sangre, añadimos
ahora, para obtener la citolisis, agua destilada sin mezclarla con gli-
cerina.

Los conejos inmunizados soportan perfectamente dosis de 2 cent. cúb.
de v. t. m. en las venas; y si la elevación de dosis es paulatina, no en-
flaquecen ni se producen tubérculos viscerales macroscópicos. Esto de-
muestra la posibilidad de inmunizar perfectamente al organismo contra
el bacilo de Koch; la dificultad innata que el hombre y los animales do-
mésticos tienen para la digestión intraorgánica del bacilo tuberculoso,
puede vencerse con método y paciencia, y esto es una legítima esperanza
de que podemos prevenir específicamente la tuberculosis y curarla cuando
el organismo tiene tiempo y capacidad suficiente para reaccionar.

Nuestra sangre antituberculosa, inyectada al cobaya tuberculoso á la
dosis de 4 cent. cúb., no produce trastorno apreciable; en el hombre he-
mos llegado 4 inyectar de una sola vez 5 cent. cúb., observándose única-
mente dolor en el sitio de inyección, pero sin ocasionar reacciones gene-
rales ni focales...

Es de notar que nuestro preparado debe contener los anticuerpos que
Spengler llama I. K. Este autor aconseja que estos cuerpos inmunizan-
tes se empleen á dosis débiles y progresivas, como si en vez de anticuer-
pos fuera un antígeno lo que se inyecta; esto hace pensar que los I. K.,
al obrar sobre los antígenos tuberculosos existentes en el organismo,
ocasionan la producción de otras substancias Rincon, y de aquí la nece-
sidad de proceder con cautela.

Pues bien: así procedimos nosotros en nuestras primeras inyecciones,
pero hemos visto que nuestra sangre antituberculosa nunca produce nin-
gún perjuicio, inyectada á dosis enormemente superiores á las que acon-
seja Spengler. |

El número de observaciones recogidas no es suficiente para formar
juicio definitivo sobre el valor terapéutico de la sangre antituberculosa ;
por ahora podemos afirmar: 1.”, que es inofensiva á dosis de 1 á 5 centí-
metros cúbicos, aunque se repitan muchas veces; 2.%, que en bastantes
casos se ha observado una acción antitérmica indudable, en otros ha yu-
gulado síntomas como la diarrea é inapetencia, y en otros ha sido com-
pletamente ineficaz.

Por último, creemos conveniente consignar algunas particularidades
que hemos anotado como resultado del gran número de inoculaciones
que hemos realizado en el cobaya durante estos últimos años, y que se
separan de lo que en las obras clásicas de bacteriología se dice de la tu-
berculosis experimental del cobaya: si

A EI

PA

ACCIÓN DEL EXTRACTO HIPOFISARIO 103

1.2? Algunos animales inyectados con orina tuberculosa y líquido ce-
falorraquídeo en el tejido conjuntivo subcutáneo del muslo, se tubercu-
lizan sin presentar la ulceración tuberculosa en el sitio de la inyección,
ni tumefacción de los ganglios de la región.

2.2 La úlcera de inoculación hecha con esputo tuberculoso ó bacilos
procedentes de cultivo puede cicatrizar, y no obstante seguir la enfer-
medad su progresiva marcha invasora.

3.? Algunos cobayas inoculados con esputo tuberculoso tardan en mo-
rir de su infección seis, siete y diez meses.

Los trabajos que sirven de fundamento á esta comnnicación están he-
chos con la colaboración de los profesores de la Sección Sres. D. Ramón
Lobo, D. Julián Olano y D. Juan Chicote.

(Laboratorio Municipal de Madrid. Sección de Vacunas
bacterianas y Epidemiología).

CI

Acción del extracto hipofisario sobre la glucosuria adrenalínica
POR

G. MARAÑÓN

Falta y Priestley afirman que la inyección de adrenalina determina
una glucosuria mucho mayor en los animales tratados previamente por
el extracto hipofisario que en los animales testigos. Estos resultados, muy

de acuerdo con la teoría, no han sido en modo alguno confirmados en la

práctica. Por el contrario, la experimentación nos demuestra el hecho
paradójico de que el extracto pituitario, inyectado en unión de la adre-
nalina, en lugar de determinar un efecto glucosúrico, producto de la ac-
ción de cada una de dichas dos substancias, da un resultado glucosúri-
camente negativo. Este curioso fenómeno fué notado por Stenstróm
(Biochem. Zeit., Agosto 1913), que observó que, en animales tratados por
la pituitrina, la adrenalina no determinaba glucosuria. Poco tiempo
después publiqué yo mis resultados previos en este mismo sentido
(BOLETÍN DE LA SOCIEDAD EsPAÑOLA DE BIOLOGÍA, Abril 1914). Entonces
aún no había leído el trabajo de Stenstróm, y además, la inhibición de la
glucosuria la observé yo inyectando á la vez las dos substancias (pitui-

104 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

trina y adrenalina), mezcladas in vitro. Después, prosiguiendo la expe-
rimentación, he confirmado por completo mis primeros resultados. Copio
sólo algunas de las experiencias (con ligeras variantes son todas iguales):

I

a) Un conejo de 1.000 gramos de peso, inyectado con 0'00025 gramos de adrena-
lina: glucosuria positiva (reacción de Fehling claramente positiva; polarímetro, 0'5

gramos).
b) Un conejo de 970 gramos, inyectado con 0'00025 gramos de adrenalina, 0'50
gramos de pituitrina Parke Davis: glucosuria negativa.

AU

c) Un conejo de 1.050 gramos, inyectado con 0'00025 gramos de adrenalina: glu-

cosuria débilmente positiva (reducción de Fehling poco intensa, pero indudable).
d) Un conejo de 1.000 gramos, inyectado con 0'00025 gramos de adrenalina, 0'50
gramos de pituitrina: glucosuria negativa.

1081

e) Un conejo de 1.000 gramos, inyectado con 00005 gramos de adrenalina: gluco-
guria positiva (Fehling fuertemente positivo).

f) Un conejo de 1.000 gramos, inyectado con 0'0005 gramos de adrenalina, 0'50
gramos de pituitrina: glucosuria débilmente positiva.

IV

g) Un conejo de 505 gramos, inyectado con 1 cent. cúb. de pituitrina: glucosuria

negativa.
h) Un conejo de 510 gramos, inyectado con 0'00025 gramos de adrenalina: gluco-

suria negativa,
¿) Un conejo de 500 gramos, inyectado con 0' 00025 gramos de adrenalina, 0'50

gramos de pituitrina: glucosuria negativa.

Ny;

) Un conejo de 830 gramos, inyectado con 0'00025 gramos de adrenalina: gluco-

suria levemente positiva.
) Un conejo de 790 gramos, inyectado con 0'00025 gramos de adrenalina, 0'50

gramos de pituitrina: glucosuria negativa.
1) Un conejo de 810 gramos, inyectado con 0'0005 de adrenalina, 0'50 gramos de
pituitrina: glucosuria muy positiva (polarímetro, 07 gramos).

Veremos, pues, que dosis de 0'00025 gramos y 0'0005 gramos de adre-
nalina, que en el animal normal producen glucosuria, pierden esta pro-

PLAN FUNDAMENTAL DE LA RETINA DE LOS INSECTOS 105

piedad cuando se unen á dosis medias de extracto hipofisario; solamente
el caso 1) de la experiencia V ha hecho excepción á la regla .

Por el momento, no se nos ocurre ninguna hipótesis racional que ex-
plicase estos fenómenos. Ellos, por otra parte, nos dan cuenta de hasta
dónde alcanza la complejidad en el modo de acción de los diversos fac-
tores endocrinos que intervienen en el metabolismo hidrocarbonado.

Posteriormente á estos trabajos han publicado datos en el mismo sen-
tido Garnier y Scholmann (C.. R. de la Soc. de Biol. de Parts, Julio 1914).

(Trabajo del Instituto de Medicina Legal de Madrid. Profesor Maestre).
O

SESIÓN DEL 19 DE NOVIEMBRE DE 1915

Plan fundamental de la retina de los insectos
POR

S. R. CAJAL

I

Sabido es que el insecto, por excepción entre los invertebrados, posee
un aparato visual muy diferenciado y perfecto, y comparable en princi-
pio al de los vertebrados. Probable parece que muchos de éstos (ciertos
peces y batracios) gozan de potencia visual inferior á la de la libelula, el
caballito del diablo ó la mosca azul. En este caso, como en otros muchos,

“la masa no es sinónimo de excelencia, como no son tampoco igualmente

excelentes un tosco reloj de pared y una exquisita saboneta.
Ciertamente, el principio de la visión en mosaico (córneas y cristalinos
múltiples en cada ojo) ha impuesto al aparato ocular de los articulados
algunas importantes variaciones de plan arquitectónico; pero estas va-
riaciones, acaecidas por acomodación al mecanismo físico de la forma-
ción de la imagen, han recaído casi por completo en el aparato dióptrico
y en la capa de los bastones ú ommatidias (retina periférica); las demás
formaciones retinianas, correspondientes á lo que los naturalistas desig-
naron lóbulo óptico, coinciden esencialmente, en cuanto á su constitución
anatómica, con las zonas correspondientes de la membrana visual de los
vertebrados. Así lo reconocieron ya hace tiempo Kenyon y Radl, y en

106 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

época más reciente, Vigier, Cajal, Jonescu y Zawarzin. Las recientes
observaciones efectuadas por el Dr. Sánchez y nosotros (1) sobre el apa-
rato visual de gran número de insectos, corroboran la citada homología,
fortaleciéndola y ampliándola con numerosos detalles anatómicos, en
cuyo examen cireunstanciado no podemos entrar aquí. Quien desee co-
nocerlos menudamente consultará la extensa Monografía, en vías de im-
presión, destinada á Trab. del Lab. de Investig. biol., tomo XIII, 1915.

Por ahora nos concretaremos á formular algunas consideraciones so-
bre las mencionadas concordancias anatómicas entre la retina de los ar-
ticulados superiores y la de los vertebrados, y á exponer algunas hipó-
tesis sobre la probable significación de ciertas disposiciones neuronales
específicas ó notablemente desarrolladas en los insectos dotados de gran
capacidad visual. :

Consta la retina ó aparato visual de los insectos de tres formaciones
gangliónicas concéntricas, separadas por ciertas fajas de fibras ópticas
entrecruzadas llamadas kiasmas. Estas tres masas celulares sucesivas co-

rresponden á ciertas zonas concéntricas de la retina de los vertebrados,

y han recibido de los autores nombres muy variados. Nosotros las dis-
tinguiremos, atendiendo á su situación en la ruta de la impresión visual:
retina superficial, retina intermediaria y retina profunda (véase la fi-
gura 1).

Retina periférica. — Prescindiendo del aparato dióptico, que no estudia-
remos ahora, esta importante formación retiniana comprende las zonas
siguientes:

1.* Zona de los bastones ó corpúsculos fotosensibles.—Esta primera es-
tratificación engloba la llamada en los vertebrados zona de los granos
externos, la cual, por excepción, no aparece deslindada en los insectos
(figura 2, 1).

2.” Zona limitante ó basal de la retina periférica. — Corresponde á la
limitante externa de los vertebrados (fig. 2, IT).

Retina intermediaria. — Corresponde al ganglio designado por los auto-
res periopticon (Hickson), lámina ganglionar externa (Viallanes), pri-
mer ganglio óptico (Kenyon, Zawarzin, etc.), y consta de las siguientes
capas:

3.* Capa de las células visuales intermediarias Ó corpúsculos mono-
polares gigantes. —Es homóloga de la de los elementos bipolares de los
vertebrados, ó, más exactamente, de una porción de la capa de los gra-
nos internos (fig. 2, V).

(1) 8. R. Cajal y D. Sánchez: Contribución al conocimiento de los centros ner-

viosos de los insectos. Parte T: Retina y centros ópticos. Trab. del Lab. de Invest.
biol., tomo XIII, 1916,

A A A A

j

A e o

PLAN FUNDAMENTAL DE LA RETINA DE LOS INSECTOS 107

4,? Capa plexiforme externa (neuromatidias de Viallanes) (fig. 2, 1V).—
Representa, como en los vertebrados, la estación de enlace ó de articu-
lación entre la expansión descendente de los bastoncitos y el penacho
dendrítico (aquí lateral y no externo) de las células visuales interme-
diarias.

5. Zona del kiasma intermediario (kiasma externo de Berger, nervio
óptico de Bellonci). — Modélase esta capa en cordón, en forma de reloj
de arena, más ó menos prolongado según los insectos examinados, y
consta de gran caudal de conductores robustos ascendentes y descen-
dentes (fig. 2, IV).

Constituye el kiasma intermediario una de las originalidades más sor-
prendentes de la retina de los articulados, pareciendo asociarse necesa -
riamente á todo ojo de visión en mosaico.

En efecto, tan curioso entrecruzamiento se encuentra también en
los crustáceos y falta en los ojos de tipo lenticular (protocordados, cefa-
lópodos, vertebrados, ocelos de insectos y arácnidos, etc.). En los verte-
brados, semejante formación—sin kiasma, naturalmente—parece corres-
ponder á los segmentos internos ó fibras descendentes de las células bi-
polares, los cuales sólo cerca de la fovea se disponen en estrato especial.

Retina profunda.—Forma un órgano voluminoso, de sección semilunar y
tan perfectamente separado de la retina intermediaria, que se justifica,
en cierto modo, el nombre de lóbulo óptico con que lo designan algunos
naturalistas. Comprende tres zonas importantes.

6. Capa de las células gangliónicas y amacrinas (ganglio en cuña y
coronario) (fig. 2, VII).

71.2 Capa plexiforme interna (fig. 2, VIT).

8.2 Capa de las fibras ópticas ó kiasma interno (fig. 2, N O).

Las precedentes estratificaciones corresponden á las homónimas de la
retina de los vertebrados (z0na plexiforme interna, zona de las células
gangliónicas y zona de las fibras del nervio óptico): sólo que la capa de
los corpúsculos gangliónicos se muestra dislocada; en vez de residir por
debajo de la plexiforme interna coro en los vertebrados, se extiende por
encima de ésta, invadiendo el terreno de las células amacrinas ó espon-
gioblastos (£g. 2, h). Por lo demás, estas emigraciones del núcleo y proto-
plasma somático son comunes en los mismos vertebrados, según proba-
ron hace tiempo Dogiel, para las células gangliónicas, y Cajal, para las

amacrinas y diversos tipos de bipolares,

En los esquemas de las figuras 1 y 2 ponemos enfrente, para más cómo-
da comparación, las capas homólogas de la retina de un vertebrado y la
de un insecto (mosca), señalándolas con los mismos números. En tales
imágenes se verá que ciertas cifras de la retina del insecto han alterado

108 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

su posición correlativa, y que el desplazamiento consiste en una emigra-

ción de los núcleos hacia la periferia. En dichas figuras, las células ho-
mólogas han sido marcadas por iguales letras.

Hemos dicho ya que estas curiosas emigraciones de los somas no son

cosa exclusiva de los articulados y cefalópodos. En la figura 3, que copia

esquemáticamente la retina de un reptil, se advierten también disloca-

ciones hacia fuera de los núcleos, que parecen un recuerdo filogénico,

algo así como.efecto de la inercia plástica de la neurona, rebelde ó recal- -

citrante al progreso morfológico. En este ejemplo, los elementos perezo-
sos ó retardatarios, empeñados en mantener la forma tradicional, son las
células bipolares (bipolares dislocadas) y las neuronas ganglionares.

No haremos aquí una comparación minuciosa de la retina del verte-
brado con la de los insectos. Remitimos al lector al examen de las figu-
ras 1 y 2, donde advertirá las notables coincidencias de morfología y
posición de las tres neuronas integrantes de la cadena visual. Porque en
realidad, la retina del vertebrado como la del insecto, redúcese, descar-
tando disposiciones accesorias, á una triple empalizada neuronal, á sa-
ber: la del cono ó bastoncito, la de las células bipolares, y, en fin, la
formada por los corpúsculos gangliónicos. Dos series de articulaciones
emplazadas al nivel de las capas plexiforme interna y externa, vinculan
entre sí estos tres pisos concéntricos de neuronas.

No deja de ser sorprendente la coincidencia estructural entre seres tan
alejados filogénicamente entre sí como el vertebrado y el insecto. Natu-
rales y lógicas fueran estas concordancias si los vertebrados procedieran
delos articulados. Mas, con gran aparato de pruebas, sostienen los biólogos
naturalistas que los vertebrados derivan de los gusanos, singularmente
de los protocordados, sin pasar por la fase de los cefalópodos y articula-
dos, seres que vendrían á representar ramas antiguas terminales, tempra-
namente desgajadas del tronco filogénico común y que vegetaron aparte,
adaptándose rigurosamente al medio, refractarias á todo proceso de di-
ferenciación progresiva. De donde resulta que la vida, al encontrarse de
nuevo, con ocasión del modelamiento de los más sencillos vertebrados,
con el problema visual, que había sido resuelto ya satisfactoriamente en
los insectos y cefalópodos, utilizó, por extraña coincidencia, para atacarlo
otra vez, precisamente los mismos resortes nerviosos y dióptricos de que
se sirviera en lejanas edades para organizar el aparato óptico de aquellos
invertebrados. En esta reedición hubo, sin duda, según dejamos apunta-
do, abandonos y correcciones. En todo caso, el principio de la lente única
y de la retina continua, ya ensayado tímidamente en los insectos (ocelos)
y algunos gusanos, resueltamente adoptado en los cefalópodos, fué pro-
gresivamente perfeccionado en los peces, abandonando como un callejón

id

PLAN FUNDAMENTAL DE LA RETINA DE LOS INSECTOS 109

sin salida el principio de las lentes múltiples y de las retinas plurales,
tan fastuosamente aprovechado en el ojo de ciertos insectos (libelula,
agrión, aeschna, etc.). Pero, repetimos, por lo que se refiere á la organi-
zación nerviosa, el plan esencial se mantuvo, con leves variantes y reto-
ques de adaptación.

Con lo cual no pretendemos negar las grandes originalidades que la
retina de los articulados ostenta por comparación con la de la de los ani-
males superiores y aun con la de ciertos moluscos, singularmente bien
dotados bajo este aspecto: los moluscos cefalópodos.

Una de las características más notables, compartida también por otros
invertebrados, consiste en la morfología de las neuronas.

Según descubrió Retzius para los crustáceos, moluscos y vermes, Len-
hossék para el lumbricus y Kenyon para los insectos, dicho corpúsculo
afecta comunmente forma en pera, con una sola expansión ramificada.
De esta robusta prolongación, penetrante en la Punktsubstanz ó en los
plexos de conexión intercelular, brotan dos órdenes de apéndices: unos
iniciales, ramificados, terminados inmediatamente en la referida subs-
tancia y que poseen los rasgos morfológicos y fisiológicos de las dendri-
tas; otros terminales, distribuídos en otros centros nerviosos ó en te-
rritorios alejados de un mismo centro, ó en fin, en tejidos musculares y
epiteliales. Estas últimas proyecciones considéranse homólogas, según
dictamen de muchos sabios, de las ramificaciones nerviosas propiamente
dichas.

Con razón, Retzius, Lenhossék y Kenyon prestaron á los apéndices
iniciales el carácter de aparato de absorción de corrientes (conducción
axtpeta, según la expresión de Cajal); mientras que atribuyeron á las
ramificaciones nerviosas alejadas el papel de aparato de emisión ó de
distribución de las corrientes recibidas (conducción somatófuga, de
Cajal).

En los articulados, resulta muy probable, según significamos nosotros,
fundándonos en consideraciones morfológicas, y afirmó más tarde
A. Bethe, sobre la base de experimentos fisiológicos, que el soma neu-
ronal no toma parte ó puede no intervenir en la propagación del impulso
nervioso. En este caso, pues, la fórmula de la polarización dinámica,
enunciada primitivamente por Van Gehuchten y Cajal, debe ser reempla-
zada por la nueva fórmula de la polarización axtípeta, imaginada por
nosotros (1897), y aplicable, según es sabido, á la totalidad de los verte-

brados é invertebrados.
Que el soma de las neuronas de los insectos carece de función conduc-

triz lo persuaden, aparte razones generales hace tiempo expuestas por
nosotros con ocasión de la formulación del principio de la polarización

110 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

axtpeta (1), algunos hechos de observación inconciliables ó difícilmente
comprensibles con la vieja teoría de la polarización dinámica.

He aquí los más importantes:

a) La total ausencia de nidos y arborizaciones nerviosas en las zonas
de granos de los insectos. Esta falta constante de impregnación es tanto
más significativa, cuanto que en tales articulados el cromato de plata
tiñe 4 menudo, de manera exclusiva, las ramificaciones nerviosas, y tan-
to más fácilmente cuanto más finas son.

b) La sutilidad extremada del mango, correlativa de un proceso atró-
fico (por economía de espacio y protoplasma), en contraste con el poten-
te desarrollo del tallo desde el paraje en que surgen las dendritas.

c) En fin, la longitud, indiferencia de posición y orientación del man-
go, en contraste con la fijeza de posición y orientación espacial del tallo
y de las expansiones dendríticas y nerviosas de las neuronas retinianas.

La disposición monopolar de las neuronas característica de vermes,
moluscos y crustáceos, se exagera, en cierto modo, en los insectos, en el
sentido de que los apéndices de conducción axípeta Ó aferente brotan,
en ocasiones, á extraordinaria distancia del soma, creándose de este
modo largo y fino pedículo intercalar. 4

Tan intensa resulta en algunas neuronas retinianas esta porción fina ini-
cial del tallo (fig. 4, B, C), que si poseyera actividad transmisora duplica-
ría y aun triplicaría á veces el tiempo de propagación del impulso ner-
vioso, cuya velocidad, según resulta de las medidas de algunos fisiólo-
gos, es en los articulados harto menos grande que en los vertebrados.

Este largo trozo expansional de los corpúsculos monopolares de los
insectos reside, en su mayor parte, dentro de los conglomerados corti-
cales de somas nerviosos, y no ha recibido nombre especial. Provisional-
mente, y para no prejuzgar su fisiologismo, nosotros le designaremos:
mango neuronal ó segmento intercalar indiferente.

Modalidades morfológicas de las células retinianas. — Como indicamos en
las figs. 4 y 5, se dan en la retina de los insectos tres tipos diversos de
neuronas. Pe

1. La variedad más sencilla en un todo comparable con la célula ama-
crina de los vertebrados consta de soma piriforme, largo mango y una
sola arborización terminal (fig.5, A). Semejantes elementos, señalados por
nosotros en la mosca azul (calliphora vomitoria), han sido confirmados
por Zawarzin, que los designa células locales.

2. La segunda modalidad (fig. 5, B, y 4, B, C), comunísima en los in-
vertebrados, caracterízase por exhibir, aparte del soma piriforme y del,

(1) Cajal: Las leyes de la morfología y el dinamismo de las células nerviosas.
Rev. trim, microgr., tomo I, 1897.

S. R. Casan: Plan fundamental de la retina de los insectos.

Fig. 1. — Esquema de la retina de un ver-
tebrado.— 1, capa de los conos y bas-
toncitos; 2, limitante externa; 3, zona
de los granos externos; 4, zona plexi-
forme externa; 5, capa de los granos
internos (células bipolares); 6, zona de
los elementos amacrinos; 7, zona ple-
xiforme interna; 8, zona de las células
gangliónicas; 9, zona limitante inter-
na; NO, nervio óptico; L,lóbulo óptico.

Fig. 2. — Esquema de las capas de la re-

tina de un insecto (muscido). Los núme-
ros de orden señalan las zonas homólo-
gas de las constitutivas de la retina de
los vertebrados.—a, bastoncitos; b, gra-
nos externos; c, corpúsculo monopolar
(segunda neurona visual); d, centrífuga
corta; f, célula amacrina; h, corpúscu-
lo gangliónico (tercera neurona visual);
¿, 2, células centrífugas; NO, región del
kiasma interno ó nervio óptico; L, ló-
bulo óptico.

S. R. Casan: Plan fundamental de la retina de los insectos.

Fig. 3. — Células de la retina de un rep-
til. — A, bastoncito; B, célula bipolar
dislocada, que recuerda ya la corres-
pondiente á la retina de los insectos;
C, célula ganglionar dislocada; D, neu-
rona ganglionar ordinaria.

Fig. 4. — Esquema de la marcha de las co-

rrientes al través de la retina de un in-
secto (abeja). — A, bastoncitos; B, mo-
nopolar; n, penacho terminal de los
bastones; C, célula ganglionar; a, h»,
articulación entre el penacho de la neu-
rona monopolar gigante y las ramas
colaterales de una gangliónica; f, £,
dendritas basales destinadas á recibir
impulsos de centrífugas; e, fibra centrí-
fuga larga; s, células en T; D, d, cen-
trífugas cortas para la retina interme-
diaria.

S. R. Casan: Plan fundamental de la retina de los insectos.

Fig. 5. — Esquema de los diversos tipos neuronales del sistema nervioso de los in-
sectos. — A, tipo primero ó célula amacrina; B! y B?2, tipo tercero ó corpúsculo pro-
visto de dos clases de apéndices; C, tipo segundo ó corpúsculo en T;'D, neurona
con dendritas somáticas rudimentarias.

PLAN FUNDAMENTAL DE LA RETINA DE LOS INSECTOS 111

mango más ó menos estirado, un largo tallo provisto, cerca de su co-
mienzo, de ramas iniciales ó dendritas (aparato receptor), y hacia su
cabo profundo, de un ramaje ó fronda comparable á la arborización final
de los axones. (aparato de emisión de corrientes).

3. En fin, la tercera modalidad está representada por las células en T,
neuronas cuyo mango se divide, en ángulo recto, en dos ramas de direc-
ción contrapuesta: una externa con la representación fisiológica de den-
drita ó expansión axípeta; otra interna, homóloga del axon ó expansión
somatófuga (fig. 5, C).

Notemos aquí una particularidad morfológica que no ha sido observa-
da, que sepamos, en ningún vertebrado ó invertebrado. Las células de la
segunda modalidad ofrecen en los insectos dos clases de dendritas ó
apéndices de conducción axípeta: las dendritas iniciales ó principales
que se conexionan con el ramaje de fibras sensoriales ó centrípetas (den-
dritas sensoriales); y las basales ó secundarias, articuladas con fibras cen-
trífugas, es decir, con las frondas terminales de neuronas situadas en
estratos más profundos. Por ejemplo, según mostramos en la figura 4, y,
la célula monopolar de la retina intermediaria (homóloga de la bipolar
de la retina de los vertebrados) se articula en la abeja mediante las den-
dritas iniciales (c), con la extremidad inferior de los bastoncitos, y me-
diante las basales, con las arborizaciones de células de expansión centrí-
fuga, situadas por debajo del kiasma externo (fig. 4, y). Una doble co-
nexión semejante se repite en las células gangliónicas (tercera neurona
visual), según mostramos en la figura 4,f, h.

Las tres mencionadas modalidades neuronales, ¿á qué neuronas de la
retina de los vertebrados corresponden ?

Acerca de la modalidad segunda ó principal, ninguna duda es posible.
Conforme mostramos en los esquemas de las figuras 2 y 4, y se deduce
de todo lo expuesto, esta variedad está representada en los vertebrados
por los dos principales anillos nerviosos: el corpúsculo bipolar y el cor-
púsculo gangliónico. Las incertidumbres conciernen solamente á la ho-
mología y significación de los tipos 1 y 3.

Séanos lícito formular aquí algunas hipótesis. En nuestro sentir, la
variedad cuyo tallo se descompone en una sola fronda ó ramaje termi-
nal, corresponde á las células amacrinas ó espongioblastos de la retina
de los vertebrados, células que habitan también, según reconoció v. Len-
hossék, hace tiempo, en la retina de los cefalópodos. Pero en los insec-
tos, las amacrinas (células locales de Zawarzin) son mucho más nume-
rosas, habiéndolas no sólo destinadas 4 la zona plexiforme interna, sino
ramificadas también en la plexiforme externa (pertóptico ó retina inter-
mediaria). Como es natural, la posición externa del campo de distribu-

8

112 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA
ción ha motivado que gran número de tales elementos dirijan sus pena-
chos hacia la periferia y merezcan la designación de neuronas de axon
centrífugo. Semejantes elementos localizan el soma, según mostramos en
la figura 2, d, e, y 4, d, en la zona de los granos internos, es decir, por
encima de la capa plexiforme interna.

En cuanto á las neuronas de la tercera variedad ó células en T, nos
parecen corresponder, por'lo menos en parte, á algunas células de axon
corto de la retina de los vertebrados, singularmente á ciertos corpúscu-
los no muy frecuentes, que asocian entre sí las zonas plexiforme interna
y externa. Por ejemplo: en la retina de la perca descubrimos nosotros
hace tiempo, en la zona de los granos internos, ciertas amacrinas asteri-
formes, provistas de expansiones ascendentes para la capa plexiforme ex-
terna y descendente para la plexiforme interna (fig. 1,e). Células análogas
encontramos también en los batracios (véase la fig. 3, lám. II, h, 1) (1).
Estos elementos, representantes de un género numerosísimo en los insec-
tos, disminuyen mucho y acaso se extinguen del todo en muchos verte-
brados superiores. Posible parece que los elementos en T de la retina de
los insectos se hayan convertido en las células de axon corto de los ma-
míiferos.

En el terreno fisiológico, las amacrinas y las células congéneres de
axon centrífugo de la retina de los insectos, plantean un problema muy
arduo. Atendiendo á que semejantes elementos adendríticos (que parecen
disposición representativa de los órganos nerviosos sensoriales) hállanse
hasta en el bulbo olfatorio (granos del bulbo); que existen, además, indi-
cios para sospechar que muchos tipos sencillos de axon corto de los ver-
tebrados no son otra cosa que etapas morfológicas superiores de amacri-

has, no estará demás hacer aquí algunas reflexiones sobre la significa-
ción fisiológica posible de tan enigmáticos elementos.

En la época en que nosotros señalamos la existencia de fibras centri-
fugas en la membrana visual de las aves y mamiferos, la cuestión de las
amacrinas pareció aproximarse á la solución. Averiguado entonces el
modo de terminar de las referidas fibras, todo quedaba reducido á supo-
ner que el impulso aportado por éstas desde los centros se transmite des-
de luego al soma de las amacrinas, y después, corriendo á lo largo del
tallo de éstas, hasta la articulación establecida en la zona plexiforme
interna, entre el penacho de las bipolares y el ramaje dendrítico de las
neuronas ganglionares. A mayor abundamiento, pusimos tiempos des-
pués (2) de manifiesto la existencia, en las aves, de ciertas amacrinas de

(1) Cajal: La retine des vertebrés : La Cellule, 1892.
(2) Idem: Nouvelles contributions á l'étude histologique de la retine, etc. Jour-
nal de l' Anat. el de la Physiologie, núm. 5, 1896.

PLAN FUNDAMENTAL DE LA RETINA DE LOS INSECTOS 113

asociación, cuyo soma y dendritas cortas iniciales entran positivamente en
contacto con nidos terminales de fibras centrífugas, mientras que la fron-
da axónica parece conexionarse con el tallo de las amacrinas comunes.

Mas esta disposición (cadena neuronal formada por tres elementos:
fibra centrífuga, amacrina de asociación y amacrina común) sólo se ha
encontrado, de modo claro hasta hoy, en la retina aviaria. En los mamí-
feros, reptiles, batracios y peces, la inmensa mayoría de las amacrinas
están desprovistas de relación central. Sus únicas conexiones se estable-
cen, mediante su ramaje final, con los dos elementos integrantes de la ar-
ticulación visual principal (el penacho descendente de las bipolares y el
ramaje protoplásmico de las gangliónicas). Recordemos, además, entre
otros casos refractarios ó difíciles para la explicación precedente, la pre-
sencia de amacrinas dislocadas, células descubiertas hace muchos años
por nosotros en la zona de los corpúsculos gangliónicos (peces, batracios,
reptiles, aves y mamiferos), en un terreno donde jamás se vieron arbo-
rizarse legítimas fibras centrífugas, ni expansión nerviosa de ninguna
clase. En fin, en los insectos donde las amacrinas dislocadas constituyen
legión formidable, todos nuestros esfuerzos para encontrar arborizacio-
nes en contacto con el soma amacrino han fracasado.

En vista de estos hechos negativos, demasiado constantes y generales
para que sean achacables á defectos de técnica, creemos que es llegada la
hora de revisar la primera hipótesis formulada. En nuestro sentir, los
corpúseulos amacrinos de vertebrados é invertebrados (exceptuadas las
amacrinas de asociación de la retina de las aves) no forman parte de la
cadena neuronal del impulso sensorial aferente, sino que representan
vías accesorias ó colaterales intercaladas á las articulaciones principales,
con la mira quizás de concentrar en ellas, con ocasión del paso de la onda
sensorial, alguna forma de energía indispensable para la propagación
nerviosa y, acaso, para la producción del acto perceptivo mismo. Como
la conflagración de la pólvora á la llegada de la chispa, el arribo de la
onda sensorial á neuronas intercaladas transformaría la energía poten-
cial almacenada en el protoplasma de tales corpúsculos en energía actual,
utilizable en el trabajo de propagación y sensación.

A fin de solidarizarse con las vías sensoriales anejas y verter en ellas
sus reservas dinámicas, la arborización terminal de las amacrinas—único
segmento dotado, al parecer, de capacidad conductriz—se interpondría
entre la arborización nerviosa de un anillo neuronal y la dendrítica ini-
cial del anillo subsiguiente.

Este papel de acumular algún modo de energía potencial en torno de
las articulaciones de la cadena neuronal principal ó aferente, podría atri-
buirse también á los elementos de axon corto de los vertebrados, tan

114 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

abundantísimos en el cerebelo y corteza cerebral humana, como que su-
peran con mucho en caudal á los elementos de axon largo. Hay indicios
para pensar que, según decíamos antes, el corpúsculo de axon corto re-
presenta el término de la evolución morfológica de las amacricas. Encuén-
transe células en la capa plexiforme primera del cerebro y cerebelo, en
la substancia de Rolando de la médula espinal, en la retina de peces,
aves y batracios (algunos tipos de corpúsculos horizontales y de células
interzonales), en las cuales cuesta ímprobo trabajo diferenciar la expan-
sión funcional, cortísima y como rudimentaria, de los apéndices dendríti-
cos ó protoplásmicos propiamente dichos.

Ciertamente, en más de una ocasión se ha afirmado la idea de que los
elementos de axon corto representarian neuronas de asociación. Median-
te el soma y dendritas recibirían el impulso sensorial (de primera ó se-
guuda mano), traído por arborizaciones nerviosas, y, á favor del axon, lo
transmitirían al soma y tallos de células de axon largo ó de proyección
más ó menos cercanas.

No negamos nosotros la realidad de este papel asociativo, que nos pa-
rece incuestionable para ciertos elementos del cerebro y cerebelo; pero
dudamos de que semejante vía conectiva intercalar no tenga otra signi-

ficación que la de solidarizar dinámicamente las unidades de un grupo :

neuronal. Entre un alambre conductor unitivo de dos estaciones telefó-
nicas y las pilas intercaladas generadoras de corriente, y al través de las
cuales circula también la energía eléctrica, se dan diferencias esenciales.
Sila función principal de tales elementos consistiera en propagar pasiva-
mente la onda recibida, repartiéndola entre varias estaciones, sin influir-
la cualitativa ó cuantitavamente, la significación de muchas células de
axon corto permanecería completamente enigmática. Es más, admitiendo
pura y exclusivamente la hipótesis asociacionista, ciertas disposiciones de
la retina y bulbo olfativo de los vertebrados parecen superflas. Citemos
tres ejemplos típicos:

a) Las células horizontales de la retina. Con la hipótesis asociacionista
el impulso visual recolectado por los conos y bastones de un sector re-
tiniano sería transmitido á las células bipolares de otro sector; por donde
resultarían gravemente perturbados la agudeza visual y el carácter espa-
cial y congruencia de la imagen. Además, esta intercalación neuronal
resulta innecesaria, por entrar ya directamente en contacto los conos y
bastones, de un lado, con las bipolares, de otro.

b) Células de axon corto del bulbo olfatorio. Asociando al parecer
los glomérulos de este centro, encuéntrase, según demostró Blanes (1)

(1) Blanes Viale: Sobre algunos puntos dudosos de la estructura del bulbo olfa-
torio. Rev. trim. microgr., tomo III, 1898,

PLAN FUNDAMENTAL DE LA RETINA DE LOS INSECTOS 115

hace tiempo y hemos confirmado muchos autores, innumerables células
diminutas de axon corto transversalmente dirigido. Dado el carácter in-
espacial y difuso de la impresión odorífera, holgaba por completo un sis-
tema asociativo transversal ó tangencial de los glomérulos, ya que en
éstos existen amplias articulaciones directas entre los penachos de las
células mitrales y las arborizaciones de las fibras olfatorias.

c) Corpúsculos pequeños de axon corto. Es común sorprender en el ce-
rebro humano elementos de esta clase, cuyo cilindro-eje es tan breve y
tan cortas sus ramillas nerviosas, que son superados en extensión y difu-
sión por las dendritas. En caso tal, la intercalación de una neurona aso-
ciativa entre el aparato dendrítico de las pirámides y los axones llegados
de la substancia blanca, se nos aparece como algo absolutamente su-
perfluo; dado que las extensísimas arborizaciones nerviosas de las fibras
centrípetas tocan en muchos puntos el soma, tallo y copa final de las cé-
lulas piramidales.

En suma; atribuyendo á las células de axon corto mero papel asocia-
tivo, la inmensa mayoría de ellas se nos presentan como ruedas inútiles
ó perjudiciales en el mecanismo de la propagación del impulso nervioso
al través de la substancia gris.

Claro es que la concepción á que nos inclinamos no pasa de ser, hoy
por hoy, una hipótesis necesitada de confirmacion. En todo caso, ínterin
se esclarece el papel de los elementos amacrinos y de axon corto, tiene
la ventaja de sugerir, en orden al dinamismo nervioso, ideas complemen-
tarias del asociacionismo. Ella nos lleva á sospechar que, en la organi-
zación de los centros nerviosos y vías sensoriales, con ser grande y de-
cisiva la importancia del factor asociativo, hay algo más que se le agre-
ga, compenetrándose íntimamente con él. Pudiera ocurrir muy bien que,
al modo de las oficinas eléctricas, donde en combinación con hilos con-
ductores funcionan también pilas, acumuladores y dinamos, los centros
nerviosos y vías sensoriales de invertebrados y vertebrados encerrarán,
junto á las vías y asociaciones de vías, aparatos específicos destinados á
acumular energía durante la fase de reposo para cederla súbitamente al
primer requerimiento de los estímulos exteriores.

¿eL

116 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

o 5 5

Acción del extracto hipofisario total en ingestión sobre la poliuria
de la diabetes insípida

POR

G. MARAÑÓN

La patogenia hipofisaria de ciertas diabetes insípidas es un hecho in-
controversible en la patología actual y se funda en dos grupos de hechos
fundamentales, que no hemos de detallar ahora : el hallazgo de lesiones
de la hipófisis en el mayor número de las autopsias de casos de este sín-
drome, realizadas en estos últimos años; y la acción oligúrica que, en
tales casos, determinan los extractos hipofisarios (1).

La mayor parte de los autores que han comprobado esta acción oligú-
rica, insisten en el hecho de que es preciso administrar la substancia hi-
pofisaria en inyección. Sin embargo, yo puedo presentar un caso en el
que el extracto hipofisario total, administrado per os, fué completamente
eficaz.

Se trataba de un muchacho de diecinueve años, afecto de una diabetes
insípida típica. Se le sometió á la ingestión de cuatro tabletas diarias de
la «hypophisis cerebri» de Merck.

Desde los primeros días de la medicación empieza á descender rápida-
mente la cantidad de orina. En quince días se hace completamente nor-
mal. He aquí, comparativamente, el análisis, antes y después del trata-
miento:

Antes del tratamiento. Normal. Después del tratamiento.
Cantidad. osmeea st 7.300 grs.| 1.000 á 2.000 grs. 1.800 grs.
Dolor As Incolora. | Amarillo ambarino. Amarillo normal.
Densidad........... 1.002 >» 1.017 >» 1,010 >»
Extracto seco.......- 6'09 » 45452 » 4173 »
UA A o. NE 1'87 >» 18422 » 19'09 »
Nitrógeno total..... 0'09 » 13» 10 >»
CIOLUEOS 2.200 00d 180 » 54775 66 »

AA PA AAA AA AAA

(1) Véase historia y literatura sobre la cuestión, en nuestro libro «Las glándu-
las de secreción interna y las enfermedades de la nutrición», 2.* edición, 1916.

ACCIÓN DEL EXTRACTO HIPOFISARIO 117

La acción del extracto hipofisario total sobre la diuresis y la concentra-
ción total de la orina fué, pues, extraordinariamente eficaz y verdadera-
mente específica, ya que la poliuria no había sido modificada ni espontá-
neamente ni por ninguno de los tratamientos anteriores.

Poco tiempo después, el curso de la enfermedad tomó un rumbo des-
- graciado, que no es del caso relatar aquí. Pero la orina siguió siendo
normal.

¿O

Importancia de la determinación de la pepsina por varios métodos
POR

T. ALDAY REDONNET

Después de repetidas observaciones practicadas por indicación del pro-
fesor Dr. Hernando, y bajo su dirección, respecto á la determinación de la
pepsina en el jugo gástrico, hemos sacado en consecuencia que un solo
. método no puede servirnos para valuar su poder proteolítico con exacti-
tud, pues hay jugos gástricos que dan, empleando un método, resultados
erróneos, lo que no sucede si lo determinamos por varios.

Expondremos á continuación los casos en que, empleando el método de
Mett, Fuld y Levison ó Hammerschlag, separadamente, se obtienen estos
resultados inseguros.

El método de Mett, que consideramos como el más preciso y de técnica
más sencilla, puede dar resultados inexactos en los siguientes casos :

1.2 Con jugos gástricos hipoácidos, debido á que el medio en que actúa
la pepsina no contiene la cantidad necesaria de iones hidrógeno para que
ésta produzca su acción óptima. Si se añade á estos jugos cierta cantidad
de CIH hasta que la pepsina se encuentre en un medio de acidez adecua-
do, los resultados son buenos. Mas no se puede añadir sistemáticamente
este ácido á todos los jugos gástricos hipoclorhídricos, pues en aquéllos
en que la cantidad de pepsina está disminuída, puede ésta, aun con pe-
queña acidez, desarrollar una acción enérgica, siendo la adición innece-
saria y algunas veces perjudicial. Por consiguiente, sólo emplearemos
esta acidificación en aquellos casos en los que, empleando otro método,
nos demuestre la existencia de bastante cantidad de pepsina en un jugo
gástrico hipoclorhídrico. También evita este error la modificación pro-
puesta por Nierenstein y Schiff, mas no tiene gran aplicación á la clínica
debido á sus errores.

118 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

2.2 Cuando el jugo gástrico contiene bastante cantidad de moco, pues
éste dificulta la difusión de las peptonas producidas en el interior del
tubo. La dilución del jugo gástrico evita, en. parte, este error. Nieren-
stein y Schiff aconsejan diluirlo en ácido clorhídrico N/20 en la propor-

ción de 1 por 16. Nosotros creemos más apropiado diluirlo en un volumen
» igual, pues el error que resulta al medir la cantidad de albúmina digeri-
da habrá que multiplicarlo sólo por 2 en lugar de por 16, como haría falta

empleando el método indicado por estos autores.

RESULTADOS OBTENIDOS POR EL MÉTODO DE METT
1.2 En jugos gástricos hipoácidos.

a) En hiperpepsicos ó normales.

Unidades Mett

Observación Acidez libre Unidades Mett | Unidades Fuld que corresponden

número por 1.000. obtenidas. obtenidas. E;
46. J. P. 0'97 32 64
63. C. G. 090 27 64 ,
64. J. C. 0:80 18 pe RSE
75. M. R. 020 16 64
86. E. $. 042 16 32
65.8. G. , 0'90 6 32 De 20 á 35.
83. L. G. 054 A) 32

caro dE. PA 070 36 64 ¡Se corresponden ambos
47, E. G. 0'95 - 42 64 | métodos.

|

b) En hipopépsicos.

Unidades Mett

"Observación Acidez libre Unidades Mett | Unidades Fuld que corresponden

número por 1.000. obtenidas. obtenidas. á éstas.
7P.R 050 16 16
41.P.G 0'30 12 16 " ¿De9á20.
61.X. X 0:60 12 10 0d
; ' Nosecorresponden am-
34. M. M. 0:20 ñ pl bos métodos. .
|

DETERMINACIÓN DE LA PEPSINA POR VARIOS MÉTODOS 119

2.2 En jugos gástricos que contienen gran cantidad de moco.

a) En hiperclorhidricos normales.

AA AL A A DAS A AAA AAA

Unidades Mett

Observación Acidez libre Unidades Mett | Unidades Fuld
que corresponden

número por 1.000. obtenidas. obtenidas. A olas:
IS BI 100 25 64
31. M. G. 1920 25 64 ¡ E
MBE, 1:20 20 64 A
48. P. C. 130 28 64
21. M.C. 1*00 dt Y! Es |De 20 á 35.
16. E, R. 1:80 36 64 Se corresponden ambos
JACA Eo, 140 P 4l 64 métodos.

j

b) En hipoclorhidricos.

Unidades Mett

Observación Acidez libre Unidades Mett | Unidades Fuld
que corresponden

número por 1.000. obtenidas. obtenidas. $ Gotas;
65. $. G. 009 6 32 De 20 á 35.
34, M. M. 02 1 16 De 9 á 20.

En estos dos casos influye también la poca acidez.

El método de Fuld y Levislon, de gran aplicación á la clínica, produ-
ce resultados erróneos solamente en aquellos jugos gástricos que aun ha-
biendo digerido la edestona (que se emplea para este método), se entur-
bian al añadir la disolución de cloruro sódico, por contener substancias
que producen enturbiamiento en presencia de este reactivo. Hay ocasio-
nes en las que no se evita este error aun empleando la modificación pro-
puesta recientemente por I. W. M. Indemans (1911) de precipitar la edes-
tona, no digerida, por medio del amoníaco. Estos jugos se observan con
bastante frecuencia; sin embargo, el enturbiamiento no es siempre causa
de error, pues como sólo se produce en los tubos que contienen 1 ó '/, cen-
tímetro cúbico de jugo gástrico, encontrándose claros los siguientes hasta.
aquel en el que la edestona no esté digerida por completo, solamente se
prestan á confusión aquellos casos en que la cantidad de pepsina esté
- muy disminuida.

120 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

RESULTADOS OBTENIDOS POR EL MÉTODO DE FULD

Observación | Acidez libre | Unidades Mett | Unidades Fuld AN
número por 1.000 obtenidas. obtenidas. 1 4 éstas.
132. V. 8 9 22

El método de Hammerschlag, que consideramos poco exacto, aunque
de técnica sencilla, contiene, además de los errores conocidos por todos
los que le han practicado, otro, el cual consiste en que la albúmina que
contiene el jugo gástrico (4 veces en cantidad tan considerable que ha
servido á Wolff y Junghans para su método de diferenciación de las
aquilias benignas de las cancerosas), precipitada al añadir el reactivo de
Esbach, se suma á la no digerida. La modificación de este método, pro-
puesta por Bettman y Schróder, que evita algunas causas de error, no
modifica la que acabamos de exponer. Nosotros hemos introducido una
modificación en este último método para evitarlo, que describiremos en
otra ocasión.

RESULTADOS OBTENIDOS POR EL MÉTODO DE HAMMERSCHLAG

Unidades Mett
que corresponden
á éstas.

—_—_—_ ——_— —_—_—__—_— _>o _ _A>————>>>>>>>>—<K—K—KXKS2O _X A —e——— AAA A II > AMMMMMMM<M«MMMNNNNNNNN

Observación Acidez libre Unidades Mett | Unidades Fuld
número por 1.000 obtenidas. obtenidas.

Por el método de Hammerschlag obtuvimos en el tubo testigo 11 de
precipitado, mientras que en el tubo que contenía este jugo gástrico ob-
tuvimos 12.

CONCLUSIONES

De lo expuesto deducimos :

1.2 Que un solo método, aun practicado cuidadosamente, no puede
servirnos para medir con exactitud la cantidad de pepsina de un jugo
gástrico. ,

2.2 Aconsejamos el empleo del método de Mett asociado á otro (Fuld,

Hammerschlag, etc.), en el que la albúmina que ha de digerirse lleve :

consigo la concentración de iones hidrógeno necesaria para que la pep-
sina desarrolle su acción óptima.

DETERMINACIÓN DE LA PEPSINA POR VARIOS MÉTODOS 121

DISCUSIÓN

El Dr. Medina: Felicito al Dr. Alday por su trabajo, que, como aportación de
hechos, tiene indudable utilidad. Ahora bien; voy á permitirme hacer algunas ob-
servaciones que me veo obligado á exponer, por ser el asunto tratado uno de los que
durante largo tiempo entretuvieron mi atención.

Yo creo que ninguno de los métodos actuales nos dan la cifra de pepsina que en
un jugo gástrico existe; á lo más, proporcionan una idea aproximada de la actividad
proteolítica del producto ensayado. Por todos es sabido que la actividad de la pep-
sina está íntimamente relacionada con el cloro que en su molécula encierra y con la
proporción de CIH que exista en el medio que ha de actuar y que cantidades idén-
ticas de pepsina poseen actividades muy distintas, según la proporción de ácidos
que en el líquido de digestión se encuentran. Así es que al intentar con cualquier
método una digestión artificial que por su intensidad nos indique el valor real de la
pepsina, podemos encontrarnos con cifras muy distintas de la realidad. Para con-
vencerse de ello, basta acidificar distintamente un jugo gástrico y ver la gran dife-
rencia de resultados obtenidos.

Y esta causa de error no es privativa del método de Mett: lo es de todos los em-
pleados, razón por la cual es necesario hacer varias partes del jugo gástrico á ensa-
yar, agregarles cantidades crecientes de CIH y buscar el máximum de actividades,
con lo cual se daría á los resultados valores directamente comparables por lo que se
relaciona á cantidad de pepsina, pues no todas las pepsinas necesitan de idéntica
acidez para desarrollar su acción máxima, ni la misma pepsina obra siempre con
idéntica actividad en un medio de acidez uniforme, pues la cantidad de clorhídrico
y la de fermento, para conseguir la acción más enérgica, han de estar en determi-
nada relación, pudiendo darse el caso de concluir que un jugo gástrico tiene poca
pepsina, cuando en realidad sólo peca por exceso ó defecto de acidez.

Por otra parte, el método de Mett tiene graves inconvenientes, entre los que hay
que señalar la diferente digestibilidad de la albúmina, según cual sea la temperatura
á que se efectuó su coagulación y el tiempo transcurrido entre ésta y su utiliza-
ción : la frecuente presencia de burbujas de aire y el tallado en bisel de la superficie
de albúmina digerida. Además, en tubos de tan reducido diámetro, los productos
resultantes de la hidrolisis permanecen dentro de ellos mucho tiempo, impidiendo
la acción del fermento y determinando, en ocasiones, su acción reversible con for-
mación de plasteina.

Yo creo que lo mismo este método que el de Hammerschlag darían más exactos
resultados si en su lectura se emplearan las pesadas.

(Trabajo del Laboratorio de Terapéutica y eonsulta de enfermedades
del aparato digestivo de la Facultad de Medicina de Madrid).

LS NI

122 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Las lesiones en el sistema nervioso y en la hipófisis
de un caso de pseudo -acondroplasia

POR

GONZALO R. LAFORA

El caso que hemos tenido ocasión de estudiar clínicamente en unión de
los Dres. Marañón y Goyanes es de sintomatología especial, que no coin-
cide ni con la clásica acondroplasia, ni con la condrodistrofia congénita,
ni con el cretinismo, de aquí el que lo designemos provisionalmente con
aste nombre.

Brevemente diré que la enfermedad empezó á los dos años y se carac-
terizó por una mezcla de acondroplasia con hipotiroidismo, hipogenitalis-
mo y síntomas de estado tímico-linfático. Como este caso, en unión de
otros hermanos (pues se trataba de cinco hermanos), han de ser objeto de
un estudio detenido por parte de Marañón, sólo me referiré aquí á los
síntomas nerviosos.

La inteligencia de estos niños permanece intacta hasta la muerte; pero
merced á las alteraciones en los huesos del cráneo, se desarrollaron en
todos, síntomas nerviosos de patogenia mecánica clara.

Como es sabido, el cráneo se desarrolla en su base por osificación en-
docondral, mientras que su bóveda lo hace por osificación perióstica. La
alteración principal en estos casos consiste en la perturbación de la pri-
mera, y esto da lugar á que todas las modificaciones en la forma craneal
se produzcan á costa de la base, que se ensancha considerablemente, y
se obstruyen ó estrechan algunos de sus orificios óseos (agujero occipital
muy aplastado en sentido antero-posterior, deformaciones del agujero
óptico y de la silla turca, etc.). En la bóveda suele haber adelgazamien-
to, extremo á veces, del diploe y láminas. | :

La compresión que sobre el bulbo determina la deformación del agu-
jero occipital ocasiona un estancamiento del líquido cefalorraquídeo y
una hidrocefalia interna y externa que dilata el cráneo por su base (punto
vulnerable). Esta hidrocefalia determina en los enfermos violentas cefa-
lalgias y estados transitorios de obnubilación y amodorramiento. A la
vez se observa la salida cotidiana de gran cantidad de líquido cefalorra-
quídeo por la nariz, á través de la lámina cribosa del etmoides y de la
mucosa pituitaria. Cuando por un coriza se inflamaba esta mucosa en los
enfermos, cesaba de salir el líquido, y consecuentemente se presentaban
los sintomas de compresión cerebral (somnolencia, dolor de cabeza, vó-

: LESIONES EN UN CASO DE PSEUDO-ACONDROPLASIA 123

mitos, pulso lento, ete.), los cuales ponían á la enferma en estado grave.
A su vez esta hidrocefalia interna y externa determinaba, por infiltra-
ción del nervio óptico, la amaurosis con atrofia papilar y el exoftalmos
marcadísimo de todos los hermanos afectados.

La muerte parece haber sucedido en unos hermanos con síntomas de
compresión bulbar y cerebral, y en otros en estado tímico-linfático.

Por eso las lesiones radican principalmente en el bulbo, donde hay
fenómenos reactivos y esclerósicos. Las lesiones de las meninges son de-
pendientes de la penetración de los gérmenes nasales (en los corizas), á
través de la lámina cribosa del etmoides en el interior del cráneo, origi-
nándose pequeñas meningitis sin gran importancia.

La hipertrofia del timo y las lesiones atróficas de tiroides, cápsulas su-
prarrenales y ovarios en esta enferma, que explican muchos de los otros
síntomas, serán tratados en detalle por Marañón en otro trabajo.

Queremos sólo mencionar aquí la esclerosis de la porción glandular de
la hipófisis y las hemorragias é infiltraciones de las cubiertas durales de
la misma, que hemos podido observar y que quizá hayan contribuido al
desarrollo de este proceso pluriglandular, ya que según el reciente tra-
bajo de Vaglio (1) parece esta glándula contribuir por su hipofunción al
desarrollo de la acondroplasia, principalmente en su forma hiper-
plásica.

Expondremos la autopsia del caso en cuestión para tratar luego de las
lesiones histológicas.

AUTOPSIA (hecha por los Dres. Goyanes, Marañón y Lafora).—Edad.—
Dieciséis años, sexo femenino.

Hábito exterior. — Hernia umbilical. Falta de mamas. Gran desarrollo
de los labios menores, que semejan á un pequeño escroto (falso herma-
froditismo). Vello grueso en el dorso y extremidades; muy poco en el
pubis y ninguno en las axilas. Pelo corto, duro y grueso.

Tamaño. — Cabeza, 52 centímetros de perímetro. Cuello, muy corto.
Tronco, 41 centímetros de longitud. Brazo, 23 centímetros. Antebrazo,
16 centímetros. Mano, 13 centímetros. Dedo medio, 6 centímetros. Muslo,
21 centímetros. Pierna, 29 centímetros. Pie, 16 centímetros.

Cráneo. — Suturas craneales, borradas. Bóveda craneal, muy delgada
por muchas partes. Agujeros de Pachioni, muy grandes y casi perforan-
do la bóveda. Las granulaciones de Pachioni, extremadamente promi-
nentes por la presión exagerada del líquido cefalorraquídeo. No hay nin-
guna endostosis ósea.

La duramadre está aparentemente normal.

(1) Su di un caso di acondroplasia a tipo iperplastico. La Pediatria, Julio, 1915.

124 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

La piamadre algo engrosada, especialmente en la base, donde hay una
zona amarillenta y gruesa, como meningítica. y

El cerebro aparece procidente y como comprimido dentro del cráneo.
Al extraerlo sale mucho líquido cefalorraquídeo. La masa cerebral está
húmeda, edematosa, blanduzca. Al seccionarlo se observa una gran di-
latación de los ventrículos. Esta dilatación es muy marcada en el ventrí-
culo medio, cuyo infundibulum es el doble de su tamaño normal. La co-
misura blanda está muy estirada por dicha dilatación. Los plexos coroi-
deos no presentan degeneración quística, sino que aparecen normales.
El cuarto ventrículo no está casi dilatado y comunica bien con el tercero
por el acueducto de Silvio. Indudablemente esto es debido á la deforma-
ción enorme del agujero occipital, que comprime al bulbo y no permite.
la dilatación del cuarto ventrículo.

El agujero occipital está muy aplastado de delante á atrás (distancia
5 milímetros), no dejando casi espacio para el bulbo.

La silla turca está muy agrandada, pero no á expensas de la hipófisis
(cuyo tamaño es normal y no ocupa más que el fondo), sino de la dilata-
ción del infundibulum, producida á su vez por la fuerte hidrocefalia in-
terna. | d

La glándula pineal tiene tamaño normal.

El cerebelo está normal; sólo en su parte posterior aparece algo de-
formado.

Los nervios olfatorios aparecen sumamente atrofiados por la compre-
sión del cerebro.

Los nervios ópticos no están comprimidos por el canal óseo, en el cual
no hay endostosis alguna. El quiasma está comprimido por el cerebro di-
latado.

Cuello. — El tiroides está aplastado. Su peso es de 8'5 gramos. Los pa-
ratiroides son muy pequeños.

Tórax. — Pulmones normales. El corazón muestra un engrosamiento
esclerósico de la válvula mitral. El timo es de gran tamaño. Su peso es
29 gramos.

Abdomen.—Estómago é intestinos, macroscópicamense normales. Bazo
é hígado, también normales. Los riñones presentan congestión pasiva y
esclerosis. Su peso es de 93 gramos. Las suprarrenales son pequeñas y
delgadas; atrofia marcada. Peso, 5'25 gramos con la grasa. El ovario está
blando y con degeneración quística. Peso, 6 gramos. El útero, pequeño.
Peso, 10 gramos.

EXAMEN ANATOMO-PATOLÓGICO.-—Cerebro. — Se observa degeneración
grasienta (con el método de Fischer Herxheimer) de las células nervio-
sas y gran cantidad de grasa en los vasos.

LESIONES EN UN CASO DE PSEUDO-ACONDROPLASIA 125

La neuroglia está algo hipertrofiada (método de Cajal). Hay algunas
células amiboides (método de Achúcarro).

La piamadre está muy engrosada, con meningitis crónica. Se obser-
van en ella acúmulos de leucocitos polinucleares, y en otras regiones
grandes fibroblastos cargados de granulaciones finísimas, y otros con
gruesas granulaciones. También son abundantes los macrógrafos con
restos de polinucleares en sus vacuolas.

Cerebelo. — Las células de Purkinje están algo atrofiadas; pero sus
prolongaciones protoplasmáticas aparecen teñidas más extensamente de
lo normal. También está aquí engrosada é infiltrada la piamadre, como
en el cerebro.

Bulbo. — Hipertrofia del tejido conectivo adventicial, de los capilares,
que presentan numerosos puentes de unión. Los vasos parecen estar
ahora en regresión después de una fase probable de actividad formativa.
Asimismo, obsérvase una hipertrofia de la neuroglia, apareciendo nu-
merosas células monstruos (Monsterzellen de Alzheimer) de la neuroglia
fibrosa. Igualmente sorpréndense bastantes células amiboides neuró-
elicas.

Todas estas alteraciones del bulbo son, á no dudarlo, de naturaleza
reactiva y provocadas por la compresión experimentada por el bulbo á
consecuencia de la deformación del agujero occipital.

Hipófisis. — Hemorragia en la parte inferior de la cápsula, la cual con-
tiene abundantes células cebadas y alguna célula pseudoplasmática.

La parte central de la glándula está algo esclerosada.

Los demás órganos serán examinados por el Dr. Marañón.

DISCUSIÓN

El Dr. Achúcarro: Como el Dr. Lafora sabe, por haber observado algunas de
mis preparaciones, yo he estudiado histológicamente el sistema nervioso del otro
caso de la misma afección en la misma familia, muerto, como ha sido mencionado,
en estado timico- linfático,

La piamadre en este caso se halla hiperplásica y se observan gran número de cé-
lulas conteniendo acúmulos de granulaciones de intensa basiofilia.

Es general, como en el caso presentado hoy, la abundancia de productos grasos
de derribo, coloreables con el método de Alzheimer, y éstos eran excepcionalmente
abundantes en la cisura calcarina. En el cerebelo estudiado por el Dr. Arcaute (es-
tudio comunicado á esta Sociedad) se encontraban dilataciones enormes en zurrón
de las prolongaciones protoplásmicas de las células de Purkinje. Estos sacos se ha-
llaban rellenos de granulaciones y recordaban enteramente á las dilataciones ampu-
liformes descritas en el idiotismo amaurótico.

Las lesiones más interesantes fueron las encontradas en el bulbo. La hipertrofia
neuróglica es aquí muy grande con enorme producción de fibrillas, dando á todo un
aspecto esclerósico.

126 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Del mismo modo que en mis preparaciones, el Dr. Lafora ha encontrado numero-
sos vasos, puentes de unión y redes adventiciales. Yo estimo que el aspecto de los
puentes vasculares y de las redes conectivas es aquí francamente regresivo y de nin-
gún modo semejante á las redes encontradas por Snessarew, por mí mismo, Jakob,
Río Hortega, que son de carácter progresivo.

Como yo he observado en los reblandecimientos cerebrales y en la esclerosis lobar,
los tractus conectivos presentan aquí deshilachamientos que acreditan su naturaleza
regresiva consecutiva á la hiperplasia neuróglica.

Es interesante consignar estos datos, que dan valoral nuevo caso de esta afección,
pues los hallazgos histológicos de este primer caso son exactamente los mismos que
ha confirmado la investigación histológica del Dr. Lafora.

TSE

SESIÓN DEL 17 DE DICIEMBRE DE 1915

Hallazgo de la «amaeba histolytica», protozoo parásito
de la disentería tropical en España

POR %

FIDEL FERNÁNDEZ MARTÍNEZ

Las prolijas investigaciones que al estudiar la patología endémica de
la Andalucía oriental, con motivo de nuestros trabajos sobre el botón de
Oriente y el kala-azar infantil, venimos practicando desde los últimos
meses de 1912, dábannos con frecuencia noticias referentes á estados di-
sentéricos, en alguno de los cuales sospechábamos la posibilidad de una
etiología amebiana, deduciéndola de la marcha clínica y de la evolución
sintomática del cuadro patológico.

Alguna observación recogida con detalles, aunque no aclarada por
ningún género de investigación parasitológica; varios casos de abscesos
hepáticos, consecutivos á diarreas no definidas, y el resultado, verdade-
ramente maravilloso, obtenido con el clorhidrato de emetina en sujetos
afectos de colitis disenteriformes, rebeldes á los tratamientos más diver-
sos, dieron sólido fundamento á nuestras suposiciones anteriores, y nos
indujeron á redoblar los entusiasmos que á nuestra labor inquisitiva ve-
níamos dedicando.

Y estábamos tan convencidos de la realidad de nuestra opinión, que en

HALLAZGO DE LA «AMAEBA HISTOLYTICA» , 127

uno de nuestros últimos trabajos (1), al insistir en la necesidad de divul-
gar entre los médicos el conocimiento de determinadas afecciones, para
que fueran capaces de descubrirlas allí donde se encuentran, no vacila-
mos en dar publicidad á nuestras sospechas, y en afirmar, sin reservas,
que la disentería tropical, como el botón de Oriente y el kala-azar infan-
til, son afecciones endémicas de la costa granadina, y no tienen de
EXÓTICAS más que el calificativo con que las distinguen los autores de
Patología.

Faltaba, empero, la prueba definitiva que confirmara, sin dejar lugar
á dudas, las presunciones que abrigábamos, y esa prueba nos fué sumi-
nistrada por un labriego de cincuenta y cuatro años, natural de la villa
de Albondón (Granada, Alpujarras), que ingresó en la sala de San Joa-
quín del Hospital clínico de Granada el día 7 de Junio del año actual.

Un segundo caso, recogido muy poco después, en un albañil de vein-
tiocho años, domiciliado en la calle del Trabuco, de Granada; otro, en
un niño de ocho años, natural del vecino pueblo de Chauchina (Grana-
da); otro, en un artesano de Motril, y otro, que actualmente estudiamos
en el Hospital granadino, son ya casos bastantes para afirmar que la di-
sentería amebiana reina endémicamente en las comarcas granadinas.

Ninguno de nuestros enfermos ha abandonado nunca el terreno en que :
nació, ni ha estado expuesto en ningún momento á contaminaciones por
sujetos inmigrados de países disentéricos. Er ba

El primero de ellos, sometido desde su infancia á las labores agrícolas
compatibles con su pie zambo congénito, no ha abandonado nunca el
solar alpujarreño, ni ha salido, hasta su venida al Hospital, del circulo
de pocas leguas que comprende la jurisdicción de su pueblo natal.

Carece en absoluto de antecedentes morbosos; nunca prodigó los sa-
crificios á Venus, ni abusó de los placeres de Ceres ni de Baco; alimen-
tóse siempre como la mayoría de los labriegos de su pueblo, y llevó vida
morigerada y saludable. :

Nacido y criado en la parte más meridional de las Alpujarras; al pie
de la Contraviesa, que las recorre de Este á Oeste, en la taa ó distrito de
los Ceheles, nunca abandonó la demarcación judicial del partido de Al-
buñol, en cuya villa de Albondón viera las primeras luces, y entre cu-
yos 2.800 habitantes — que, aislados del resto del mundo, han de reco-
rrer un largo camino de herradura para llegar á la carretera de Albu-
ñol, única vía que los pone en comunicación con la metrópoli granadina,

(1) «Tres casos de botón de Oriente recogidos en la provincia de Granada».
Comunicación á la Sociedad Española de Pediatría. Madrid, 1914. Publicada en
la Gaceta Médica Catalana, Barcelona, 1915, y en la Revista de Pediatría, Ma-
drid, 1915.

9

128 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

de la que la separan 15 leguas de intransitable camino — ha vivido sin
interrupción hasta el momento actual.

Las prolijas investigaciones que llevamos practicadas nos permiten
afirmar, casi con seguridad, que ningún individuo extraño al país ni
procedente de regiones disentéricas, ha vivido recientemente en las in-
mediaciones de Albondón, pueblo lo suficientemente pequeño para que
la presencia de un extraño no pasase desapercibida, y lo bastante ais-
lado de las vías de comunicación para que no quepa: pensar en viajeros
que pasasen por él con rumbo á otros destinos.

No hemos podido, contra lo que hubiéramos deseado, realizar una ins-
pección ocular de los terrenos sospechosos; pero nos dicen que el agua
es tenida por sana, y que si bien en algunos sitios puede ser objeto de
contaminaciones, no corresponden aquéllos á los últimamente habitados
por el enfermo.

Nada Jeducimos, pues, de la parte hídrica de su alimentación. Las
aguas que bebía eran, según nos dice, absolutamente puras; procedían
de manantiales próximos y eran guiadas por acequias de rápida corrien-
te, sin que en ningún punto estuvieran expuestas á probables infeccio-
nes ní á remansos peligrosos.

Pero desde los primeros días del mes de Abril, y por exigencias de
determinadas faenas agricolas que en las sierras de su pueblo le estaban
encomendadas, siguió nuestro enfermo un régimen dietético completa-
mente desacertado, puesto que, alejado de toda vivienda habitada, vióse
obligado á no comer sino fiambres y alimentos crudos durante varias se-
manas.

Durante todo el mes de Abril y primeros días de Mayo, sólo substan-
cias frías, pescados en conserva, frutas y legumbres crudas, queso, al-
gún embutido de fabricación casera y otros materiales nutritivos del
mismo orden, constituyeron toda su alimentación, sin que ningún plato
caliente interrumpiera la monotonía de sus comidas fiambres.

En estas condiciones, y después de varios días de malestar indefinido,
pesadez, cansancio, inapetencia, molestias vagas de vientre y sed exa-
gerada, fué atacado súbitamente, el día 15 de Mayo, por una diarrea
abundante, que con dolores abdominales, ligero tenesmo y sensación de
embarazo gástrico, le obligó 4 abandonar su residencia actual y á bus-
car en la cercana villa el remedio á su dolencia. :

Todo el arte terapéutico de los parientes femeninos del enfermo fué
agotado. Las evacuaciones ventrales, verdosas 6 amarillentas, la lengua
saburral y los signos generales no cedieron tampoco al tratamiento pres-
crito por el facultativo que lo asistiera; antes al contrario, agraváronse
los últimos, presentáronse pujos y tenesmo, apareció sangre en las depo-

HALLAZGO DE LA «AMAEBA HISTOLYTICA» 129

siciones, que se repetían diez ó doce veces en cada veinticuatro horas y
se acentuó el enflaquecimiento, que adquirió proporciones alarmantes.

. Bien pronto comenzó á expulsar con las heces madejas de mucosida-
des; secóse la piel, que tomó aspecto apergaminado, instalóse la caquexia
con todo su cortejo y desaparecieron las fuerzas en tal grado, que la fa-
milia, agotados ya los recursos pecuniarios que le habían proporcionado
habitación y alimento durante la primera etapa de la dolencia, tuvo que
recurrir á la caridad oficial, y lo ingresó, sponte suo, en nuestra Clínica,
donde los síntomas nos pusieron sobre aviso, induciéndonos á recurrir al
Laboratorio, merced al que averiguamos la existencia de la amaeba his-
tolytica en sus heces fecales, comprobando nuestra observación por la
inoculación al gato y por los resultados, verdaderamente maravillosos,
obtenidos con el empleo de las inyecciones de clorhidrato de emetina,
que provocaron la curación absoluta en dos ó tres días.

El segundo caso, acaecido en un albañil de veintiocho años, fué tan
típico como el anterior. Se trataba de un sujeto joven, robusto y sano,
dedicado á las faenas propias de su profesión, que nunca abandonó, ni.
siquiera transitoriamente, la demarcación municipal de Granada, y que
padece desde hace seis meses un estado gastro-intestinal que, con ligeras
remitencias, ha llegado á constituir un síndrome disentérico tan alarman-
te que, pocos horas antes de nuestra intervención profesional, requirió
con caracteres de urgencia la administración de los auxilios espirituales.

También en él comprobamos las amebas por observación directa y por
inoculación experimental, y también logramos un éxito evidente inyec-
tándole fuertes dosis de emetina, que produjeron una verdadera resurrec-
ción y determinaron en muy pocos días la curación completa del en-
fermo. :

El tercero era un niño muy pequeño, natural de la vecina aldea de
Chauchina. Sus padres acudieron á nuestra consulta hospitalaria, des-
pués de agotar todos los astringentes de la farmacopea, sin lograr á pe-
sar de ellos la curación del enfermito, que presentaba desde dos meses
antes un síndrome disentérico altamente hemorrágico, que puso en gra-
ve peligro la vida.

Procedimos con iguales precauciones diagnósticas que en los casos an-
teriores, y obtuvimos análoga curación con las sales solubles de emetina.

El cuarto es un adulto de Motril, con sintomatología y manifestacio-
nes análogas á los anteriores, y el quinto, en fin, es otro enfermo del
mismo orden, cuyo estudio clínico hacemos en la actualidad.

El origen indígena de nuestros casos no nos produce duda. Todos
ellos se han presentado en sujetos que no habían vivido nunca fuera de
la región en que nacieron; nunca hemos podido encontrar, á pesar de las

130 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

gestiones que en tal sentido venimos practicando, un motivo de contagio
directo, una razón que justifique la contaminación de hombre á hombre,
ni un dato que nos induzca á pensar en la importación reciente y directa
de la ameba desde alguna de las regiones en que habitualmente vive.

Parece, además, según nos cuentan muchos de los médicos rurales á
quienes hemos consultado, que los estados diarréicos con síndrome disen-
térico grave no son raros en muchos puntos del reino granadino; pero la
idea de que la disentería emebiana era enfermedad exótica y tropical,
constituía un dogma contra el que nunca osaron rebelarse; y su diag-
nóstico fué siempre hecho por analogía con otras diarreas no específicas,
sin que un examen biológico lo confirmara en ningún caso.

Esos estados, muchos de los cuales son recordados con todo detalle
por nuestros informantes, conducen frecuentemente á la caquexia y ála
muerte; evolucionan con todo el síndrome de la amebiasis intestinal y
dan lugar muchas veces á la formación de abscesos hepáticos, cuya
abundancia en Granada — donde la disentería tropical no era sospecha-
da — llamaba poderosamente la atención de nuestro sabio y querido
maestro de operaciones, Dr. Escribano, quien más de una vez nos habló
de ello, animándonos á averiguar el por qué de esa frecuencia, no ex-
plicable en un país donde la ameba no había sido señalada.

Por todo ello; por los informes de nuestros colegas; por la frecuencia
de los abscesos del higado, en cuyo pus nunca se hallaron gérmenes pió-
genos; por los muchos casos que ya conocemos y por la imposibilidad de
explicarlos por importación del parásito desde otros países infectados,
nosotros afirmamos rotundamente que existe endémicamente en Granada
— y por consiguiente en España — la disentería llamada tropical y el
absceso hepático de los países cálidos, y que es huésped permanente de la
Andalucta oriental el protozoo denominado ENTAMAEBA HISTOLYTICA le
Schaudinn. :

DISCUSIÓN

El Dr. P. Mayoral: La comunicación del Dr. Fidel Fernández da ocasión para
relatar un caso observado durante estos días, procedente de Tetuán (Africa).

El Dr. Piñerúa ha asistido un enfermo en el que hemos investigado la existencia
de amebas en las deyecciones, pues los sintomas hacían presumir una disentería
amebiana. El resultado del examen microscópico de las deyecciones frescas fué nega-
tivo; pero teniendo en cuenta que este dato no es suficiente para negar la existencia
de dicha enfermedad, nuestro compañero el Sr. Piñerúa le sometió al tratamiento
específico por la emetina y los resultados obtenidos confirman el diagnóstico clínico.

La nota clínica facilitada por el Dr. Piñerúa dice:

«Enfermo D. J. F. de la P., Oficial de Infantería.

Un día de los primeros de Octubre, hallándose en Tetuán (Africa), observó que

HALLAZGO DE LA «AMAEBA HISTOLYTICA>» ; 131

la deposición habitual fué al principio flúida y después de la consistencia ordinaria.
Al siguiente día aumentó el número de deposiciones hasta cuatro ú cinco, idénticas
á la del día anterior; pero, transcurridos unos días en esta forma, se tornaron flúidas
las deposiciones y con gran cantidad de mucosidades, al mismo tiempo que el en-
fermo comenzó á sentir dolor á la presión en la fosa ilíaca izquierda; á tener gran
tenesmo y dolores, cólicos con mayor dolorimiento á nivel de la $ ilíaca; pero irra-
diados á todo el abdomen.

Las deyecciones aumentaron en número y algunas contenían sangre en no muy
grande cantidad. Al mismo tiempo se presentó fiebre precedida de escalofríos, que
llegó á 38”,5. Le prescribieron quinina, que le hizo descender la temperatura hasta
desaparecer. Más tarde tomó calomelanos dos días consecutivos, y á continuación
fué sometido al tratamiento por la ipecacuana. Experimentó ligera mejoría en los
primeros días de este tratamiento; pero volvió á sufrir nuevas molestias, aumentan-
do el número de deposiciones y agudizándose los dolores.

Imposibilitado para ejercer el cargo oficial que desempeñaba, le fué concedida li-
cencia para Madrid, donde llegó el 6 de Diciembre.

Fué visto por mí el día 9.

Presentaba tez pálida y aspecto enfermizo. Me dijo que había adelgazado bastante
desde el comienzo de su enfermedad y había perdido muchas fuerzas. Tenía de 14
á 16 deposiciones diarias, de color amarillento y con abundantes mucosidades. En
fin, gran tenesmo y dolores al comenzar á defecar, dolores que desaparecían después
de cada deposición. ?

Vientre dilatado, gran timpanismo, dolorosa á la percusión la región hepática y
el territorio de la S ilíaca.

Teniendo en cuenta el país de donde procedía este enfermo, el comienzo y evolu-
ción de la enfermedad y la acción de la ipecacuana, supuse que me encontraba ante
un caso de disentería por amebos ó disentería endémica, según Kartulie. En su con-
secuencia, ordené recoger una porción de la deyección para someterla al examen mi-
croscópico y prescribí desde luego solución isotónica clorurado-sódica de clorhidrato
de emetina al 2 por 100 en ampollas de 2 cent. cúb., considerando que cualquiera
que fuese el resultado de la observación microscópica, no ofrecía inconveniente al-
guno este tratamiento; antes al contrario, podría servir como reactivo de diagnós-
tico de la supuesta enfermedad, puesto que este medicamento se ha recomendado
como específico.

El resultado de la observación microscópica fué negativo; pero debo advertir que
no fué recogida la materia objeto de examen de modo conveniente.

El día 10 inyecté por primera vez al enfermo 1 cent. cúb. (2 centigramos de eme-
tina) de la solución. Al siguiente día (11 de Diciembre), sin que hubiera experimen-
tado ninguna mejoría, inyecté otro centímetro cúbico que disminuyó el número de
deposiciones hasta nueve en las veinticuatro horas, lo que animó al enfermo é hizo
tener fe en el tratamiento que se seguía.

Día 12: Nueva inyección de 1 cent. cúb. (2 centigramos:de emetina); y como la
mejoría no fuese muy manifiesta, el día 13 inyecté 3 centigramos (1 '/, cent. cúb. de
la solución), descansando cuarenta y ocho horas, en las que disminuyeron á tres dia-
rias las deposiciones. El enfermo se encontraba más animado, más fuerte; iba re-
apareciendo el buen color de su rostro y adquiría fuerzas.

Día 15: Inyección de 2 cent. cúb. (4 centigramos de emetina) y cuarenta y ocho
horas de descanso, Mejoría notable. Desaparición completa de dolores en región he-
pática, en Silíaca y el tenesmo.

132 . BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Día 17: Nueva inyección de 4 centigramos de emetina; las deposiciones, eu nú-
. mero de dos diarias, de consistencia normal y sin molestia de ningún género.

El régimen alimenticio al que ha estado sometido el enfermo en los seis primeros
días ha sido dieta láctea, y después, purés vegetales y leche».

La observación del Dr. Piñerúa tiene gran importancia, pues demuestra la exis-
tencia de la disentería amebiana en la zona española de Marruecos; teniendo en
cuenta que esta enfermedad pueden transmitirla los enfermos por contagio directo
en países en los que no es endémica (casos observados en Francia), hay que congi-
derar como sospechosos los enfermos con síndrome disentérico procedentes de Afri-
ca y tratarlos convenientemente por la emetina, tomando las necesarias precaucio»
nes para que no contagien á las personas que con ellos conviven.

Con mayor motivo había que vigilar á los disentéricos procedentes de Africa que
se establezcan en el Sur de España, donde, según el Dr. Fidel Fernández, la ameba
de la disentería encuentra buenas condiciones de vida.

RE

Modificaciones que sufren las células epiteliales del cuello
del útero humano cultivadas «in vitro»

La presente comunicación constituye un desglose de una serie de tra-
bajos experimentales sobre cito culturas, de algunos de los cuales hemos
hecho ligera reseña en otros trabajos, y principalmente en la Memoria,
que vimos honrada con el premio de la Academia Medico- Quirúrgica.

Tiene esta experiencia la particularidad de demostrar la posibilidad de
cultivar las células humanas en plasma de conejo al modo mismo como,
según habíamos demostrado en una serie de experiencias anteriores y
que fueron objeto de una comunicación á la Sociedad Francesa de Bio-
logía, se cultivan las células animales en plasma de especies diferentes.

Confesemos que nuestro objeto, al disponer la experiencia, era cultivar
células neoplásicas humanas, como ya habíamos hecho con las de tumo-
res experimentales del ratón, pero el azar lo dispuso de modo distinto.

Habíamos estudiado en el Laboratorio un trozo biopsado de un tumor
que, en forma de pólipo, tenía la base de implantación cerca de la por-
ción superior del cuello del útero y el extremo terminal, algo abultado,
pendía en la parte inferior del cuello sin asomar al exterior.

Este tumor tenía la estructura de un carcinoma, en el cual se veían
células epiteliales verdaderamente gigantes, de núcleo ovoideo 6 esférico,

MODIFICACIONES QUE SUFREN LAS CÉLULAS 133

pobre en cromatina é hipertrofiada; muchas de estas células se mostra-
ban en diversas fases de multiplicación y algunas mitosis eran anorma-
les. La diferenciación neoplásica tenía lugar en el epitelio de las glándu-

las, conservándose en algunas vidas de células aún el recuerdo de la luz
de la glándula, relleno de mucina como si las células mucosas se hubie-
sen desprendido al comienzo de la diferenciación de la parte de citoplas-
ma en que se acumula el mucus en la célula funcional.

En algunos puntos del tumor existen lesiones de necrosis, revelables
por la infiltración leucocitaria; pequeñas hemorragias intersticiales; va-
sos llenos de leucocitos polinucleados que infiltran sus paredes, y las cé-
lulas epiteliales neoplásicas, situadas en esta vecindad, pueden verse que
son de forma y estructura atípica.

En virtud del informe del Laboratorio, fué decidida la histerectomía, y
mientras ésta era realizada por el Dr. Pozzi, nosotros preparábamos el
plasma, é inmediatamente que el útero fué extirpado vino al Laboratorio.

De él tomamos los trocitos de tejido para cultivar, eligiendo para ello,
huyendo de la infección, el punto que correspondía á la base de implan-
tación del pólipo. El estudio del resto del tumor nos demostró que el car-
cinoma había sido, casi en su totalidad, extirpado con la biopsia y que
en el resto la estructura histológica era de adenoma.

En los trocitos cultivados el epitelio glandular era normal y las modi-
ficaciones que en éste se observan desde el primero al sexto día de culti-
vo son dependientes de la cultura y en todo semejante á las observadas
en otras células animales.

En las primeras veinticuatro horas las células se hacen bajas y cúbicas,
desprendiéndose de la parte de citoplasma que encierra el mucus; el
núcleo pierde los caracteres tintoriales característicos de la célula muco-
sa, y cambia de forma haciéndose ovoideo ó esférico.

Al tercer día las células han aumentado de tamaño considerablemente
y algunas se ven en fase de multiplicación mitósica. Los espacios dejados
por algunas células muertas que se han descamado son recubiertos por
las vecinas, que conservan su vitalidad y ya transformadas tomando el
aspecto y forma de las células del epitelio pavimentoso.

Al sexto día algunas células han caído al plasma y allí han seguido
viviendo y transformándose, constituyendo elementos gigantes esféricos
ú ovoideos, de núcleos en la misma forma, de gran tamaño y en fases de
multiplicación.

Estas células epiteliales, desdiferenciadas en las culturas, tienen una
gran semejanza morfológica y estructural con las carcinomatosas de la
porción biopsiada del pólipo.

134 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

DISCUSIÓN

El Dr. P. Mayoral: El año 1914 fuí encargado de dictaminar sobre las Memo-
rias presentadas en el concurso de premios de la Academia Medico-Quirúrgica Es-
pañola y aconsejé que se premiara la que fragmentariamente nos presenta hoy el
Dr. F. Coca.

Consideré que la Memoria era digna del premio porque su autor demostraba co-
nocer y practicar el método de los cultivos celulares in vitro, y estos trabajos sin di-
recta aplicación práctica deben siempre ser recompensados.

Hice notar que, todo cuanto en dicha Memoria se decía, había ya sido expuesto por
el Dr. Christian Champy en La Presse Médicale, en el número de 31 de Enero
de 1914, y en los Archives de Zoologie experimentale, año 1914. Esta noche el doctor
Coca repite parte de lo que en su citada Memoria dijo, y siento tener que recordarle
otra vez que ha omitido decir los antecedentes de la cuestión que ha desarrollado y
ni aun ha mencionado el nombre del Dr. Champy, en cuyo Laboratorio ha realizado
sus trabajos, y que ha sido el primero en publicar los hechos en que se apoyan las
conclusiones que deduce el Sr. Coca en su trabajo.

Yo felicito al Sr. Coca por su excelente trabajo de comprobación.

(Trabajo realizado ton el Dr. Champy en el Laboratorio de la Clínica
Ginecológica de la Facultad de Medicina de Paris).

A da ROA TER

Alteraciones renales en un caso de enfermedad bronceada
POR

P. DEL RÍO HORTEGA

Son bien conocidas las lesiones de las cápsulas suprarrenales en la en-
fermedad de Addison; pero no ocurre lo mismo con las alteraciones del
riñón, que suelen omitirse así en monografías como en Tratados de Me-
dicina. Ello es debido, acaso, á que la correlación funcional entre la
elándula renal y la suprarrenal no es tan grande que forzosamente haya
de determinar alteraciones simpáticas, y acaso también á- que si tal su-
frimiento simpático existe, no alcanza intensidad suficiente para que
pueda ser fácilmente advertido, y las lesiones que determina, de poca
monta, escapan á los investigadores. Lo cierto es que hemos husmeado
un poco por la literatura y no nos ha sido posible encontrar dato alguno
acerca de las alteraciones renales en la enfermedad bronceada.

Por esta razón, y principalmente por la importancia de las lesiones
renales del caso que vamos á exponer, nos ha parecido de algún interés
traer esta nota, en la que vamos á prescindir de toda disquisición de ca-

ALTERACIONES RENALES EN LA ENFERMEDAD BRONCEADA 135

rácter especulativo para limitarnos á describir el estado histopatológico
de los riñones.

Conviene que señalemos previamente el hecho, de que las cápsulas su-
prarrenales no se encontraron en la autopsia (efectuada cuidadosamen-
te por el Dr. Morales, de Valladolid) y que en su lugar y tan sólo en
uno de los lados existía una masa fibrosa muy densa formada exclusi-
vamente de manojos conectivos, sin vestigio alguno de estructura glan-
dular.

Ambos riñones merecen un estudio separado, puesto que ni macroscó-

pica ni microscópicamente muestran las menores analogías.
- El riñón derecho es grande, aunque algo menor de lo normal; tume-
facto, como ingurgitado de sangre y de color negro apizarrado, que se
atenúa un poco visto á través de la cápsula, la cual es espesa, blanque-
cina y de difícil separación. Al corte eruje el escalpelo y la superficie de
sección es áspera á la vista y suave al tacto, y de color rojo obscuro. Por
raspado se obtiene una pulpa de todo punto comparable á la pulpa esplé-
nica. Este riñón ofrece, pues, caracteres anatómicos casi iguales á los
del bazo.

El riñón.izquierdo es pequeño, mucho menor que una nuez, blanco
amarillento y de superficie desigual. En ella se observan pequeñas emi-
nencias y surcos, alguno de los cuales, más profundo, divide al riñón en
lóbulos. Este órgano, pues, ha perdido en absoluto los caracteres del ri-
ñón humano. p

Veamos el aspecto histológico:

Riñón grande. — Los caracteres esplenoideos que macroscópicamente
presenta, coinciden con grandes semejanzas histológicas con el bazo.
Estas son tales, que el observador puede fácilmente creerse en presencia
de un corte de bazo. Y esto ocurre no sólo en exámenes á débil aumento
y con métodos vulgares de coloración, sino también con mayores aumen-
tos y métodos específicos del tejido adenoideo.

En esquema hállase este riñón constituído por una espesa cápsula
fibrosa, de la que se desprenden gruesas prolongaciones ó septos ramifi-
cados, los cuales, llegando al último grado de disociación fibrilar y des-
pués de infinitas anastomosis, dan origen á un sistema reticular de estre-

chas mallas, en las que se amontona muchedumbre de elementos ce-
-lulares (fig. 1).

Alguno de los septos capsulares forma espesísimo cordón, que luego de
bifurcarse ó trifurcarse termina bruscamente en pleno tejido reticular.

Los caracteres de éste en nada difieren de los del tejido conectivo pro-
pio del bazo y demás órganos linfoides, y como en ellos parece constituí-
do, no por haces colágenos tingibles por la fuchina y el índigo-carmín,

136 BOLETÍN DE La SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

sino por reticulina que, como se sabe, tan sólo el método de Achúcarro
colorea en su totalidad.

Una observación detenida permite discernir, salpicados por la trama,
algunos espacios más amplios y redondeados, que recuerdan algo al mol-
de de los tubos uriníferos ausentes; pero no se percibe el manguito mem-
braniforme que, en cireunstancias normales, rodea á los tubos renales.

Al desaparecer la estructura secretora de este riñón se ha modificado
la arquitectura de la trama conectiva, cuyos hilos, en vez de modelar
tubos (que ya no existen), se han dispersado, formando un tejido de ma-
llas flojas ó Gitterfasern (Oppel.

Los elementos celulares que rellenan los espacios de esta trama son
(figura 2): 1.2, células pequeñas con núcleo rico en cromatina (linfocitos);
2.”, plasmazellen; 3.”, células de protoplasma pálido y núcleo claro, de
aspecto epitelial, las cuales representan verosímilmente células renales
diseminadas; 4.”, hematíes deformados y en disgregación.

Todas estas células, que son abundantísimas, se extienden de una
manera difusa y solamente se ordenan circularmente en torno de algu-
nos alvéolos.

Los núcleos de linfocitos y células plasmáticas exhiben las más varia-
das figuras cariorécticas (lobulaciones, gibosidades, rosetas, mórulas,
granulaciones, etc.), con lo que simulan todos los tipos celulares que
existen en el bazo.

En algunas zonas los hematíes hállanse apenas alterados, mas en otras
han originado abundante pigmento fino, cuya particularidad de hallarse
situado exclusivamente en las trabéculas conectivas y bordeando los al-
véolos que ocupaban los tubos renales es el principal carácter que per-
- mite reconocer en algunos puntos la estructura renal.

Aquí y allá obsérvase un vaso transversal, oblicua ó longitudinal-
mente seccionado, en el que existe notable espesamiento de sus túnicas
y en alguno la obstrucción completa. En tal caso forman los vasos cor-
dones muy espesos, que pueden ser confundidos con los cordones capsu-
lares precedentemente mencionados, pero los vestigios de luz vascular
que á veces presentan alejan dudas á este respecto.

No son raros los acúmulos de linfocitos y plasmazellen en la vecindad
de los vasos, ni son raros tampoco los manguitos de infiltración perivas-
cular en los que no se observan verdaderas granulaciones ni células gi-
gantes. Sin embargo, la naturaleza tuberculosa de estas formaciones no
es dudosa, por cuanto en el hígado se presenta claramente.

Riñón pequeño (fig. 3). —Posee una cápsula poco espesa que envía tabi-
ques al interior, los cuales, por regla general delgados, son á veces muy
espesos y dividen la masa glandular en lóbulos perfectamente indepen-

ALTERACIONES RENALES EN LA ENFERMEDAD BRONCEADA 137

dientes, que corresponden á los que macroscópicamente presenta el
órgano.

Ramificaciones secundarias de estos septos dan origen á lobulillos, á
su vez perfectamente individualizados.

En general, el tejido conectivo está bastante más desarrollado que en
ei riñón normal, y las fibras que separan á los tubos renales están mucho
más apretadas, lo que se observa sobre todo en los estuches que modelan
á los tubos, los cuales forman casi una verdadera membrana fenestrada
á causa del número enorme de alii tenuísimas, entrecruzadas, de
que están formados.

Existe, pues, un proceso de esclerosis difusa; mas de trecho en trecho
vése una placa conectiva más ó menos extensa y siempre irregular. Los
vasos, grandes y pequeños, hállanse envueltos por abundante conectivo,
tan denso como el de las túnicas vasculares.

Los caracteres del parénquima renal difieren mucho de los normales.
No existe distinción clara entre porción cortical y porción medular, pues-
to que todos los tubos ofrecen semejante aspecto y faltan además glomé-
rulos de Malpigio verdaderos.

En general, vistas con los métodos corrientes, todas las áfilad tienen
igual forma redondeada, de contornos más ó menos visibles. Un carácter
muy interesante es, que en vez de alinearse circularmente formando
tubos se disponen en cordones macizos,-en los que excepcionalmente exis-
te un vestigio de luz glandular. Excepto al nivel de las pirámides de
Malpigio, donde existen conductos verdaderos con caracteres casi nor-
males, el parénquima renal tiene aspecto de glándula cerrada.

El método de Heidenhain permite ver, en parte, importantes detalles
texturales, que el método de Achúcarro revela con la mayor claridad.
Distínguense con ellos dos clases de acini: unos profundos, donde las cé-
lulas poseen un núcleo rico en cromatina y un protoplasma turgente,
finísimamente granuloso, y otros superficiales, cuyos elementos, de igual
riqueza cromática nuclear, poseen un grueso protoplasma cargado de
granulaciones glandulares. Estas son, en algunas células, muy diminutas,
pero en la mayoría ofrecen grandes dimensiones y llenan totalmente á la
célula, la cual se muestra de tal modo repleta, que parece próxima á es-
tallar. Todos estos granos de secreción ocupan la parte axial de la célula
y rechazan al núcleo hacia la parte basal, en la que no se discierne la
estriación característica formada por los filamentos ergastoplásmicos.

No existen en este riñón glomérulos de Malpigio. Con frecuencia se
observa una fusión de varios cordones celulares que forman gruesos acú-
mulos, cuya forma, dimensiones y situación hace pensar en formas em-
brionarias de los glomérulos, de las que, sin embargo, difieren bastante,

138 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPANOLA DE BIOLOGÍA

Por otra parte, las formaciones que verosímilmente representan á los
glomérulos sólo se parecen á ellos por su forma redondeada y por hallar-
se rodeadas de un espacio claro, en el que alguna célula de núcleo alar-
gado recuerda á las que constituyen la cápsula de Bowmann. El pelotón
vascular ha sido reemplazado por tejido conectivo, de aspecto reticular,
con algunos núcleos diseminados.

Los vasos poseen todas sus túnicas muy engrosadas y se rodean de es-
peso estroma conectivo.

Algunos de los lobulillos en que, como dijimos al principio, aparece
dividida la masa renal, se hallan en degeneración grasienta, que hemos
estudiado con el método de Fischer y Rosenthal. Las células muestran
gotitas de grasa abundantes y muchas de ellas aparecen completamente
destruídas y desprovistas de núcleo.

En estos lobulillos y en general en toda la superficie del riñón, inme-
diatamente por debajo de la cápsula, existen tres ó cuatro filas de acini,
cuyas células en degeneración granulo-grasienta exhiben, con el método
tano-argéntico, curiosas alteraciones de las granulaciones glandulares.
Estas, á través de un proceso de hinchazón y vacuolización, forman ani-
llos de contorno neto, perfectamente coloreado por la plata, los cuales
aparecen de plano perfectamente circulares, oblicuamente de forma
ovoidea y de canto en forma bacilar. En las células que conservan un
resto de núcleo alterado, tales anillos se agrupan á su alrededor y le en-
vuelven casi completamente, pero cuando el núcleo falta forman acú-
mulos irregulares ó se separan difusamente al mismo tiempo que dis-
minuyen en número. En las células llegadas al último grado de destruc-
ción escasean tales anillitos y su contorno es más delicado. Por lo gene-
ral, las dimensiones de estos anillos son sensiblemente iguales, pero en
alguna célula alcanzan dimensiones mayores, como las de un hematie, á
cuyo elemento se parecen mucho (1).

Ya en algunas células en plena actividad secretora y repletas de gra-
nulaciones se distingue algún filamento ergastoplásmico flexuoso, más ó
menos cercano al núcleo. En ciertas células, que se distinguen por su
forma redonda ú oval, por su contorno neto y de gran relieve, por su pro-

(1) Sabido es que Retzius, al estudiar las modificaciones secretorias de las cé-
lulas renales, ha descrito mamelones protoplásmicos que se pediculizan y des-
prenden en esferas hialinas semisólidas, las cuales poco á poco desaparecen por
disolución, Algo se parece esto á lo que nosotros hemos observado, cuya relación
con los granos de secreción esindudable. Pero con lo que ofrece las mayores ana»
logias es con los anillos vistos por Meves en los espermatocitos del paludina vivi-
para, por Heidenhain en la salamandra y recientemente por nosotros en las cólu-
las nerviosas de los hirudíneos. En condiciones patológicas no tenemos noticia de
que hayan sido observados.

P. Den Rio HortTEGA: Alteraciones renales en un caso de enfermedad bronceada.

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Fig. 1.— Riñón derecho. Retículo conectivo en cuyas mallas se alojan células. —
A, vaso obstruido que forma un cordón fibroso; B, vaso en fibrosis evanzada (mé-

todo de Achúcarro).

P. DeL Río HortEGA: Alteraciones renales en un caso de enfermedad bronceada,

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Fig. 2.—Riñón derecho. Contenido celular de las mallas conectivas.— A, trabéculas
conectivas donde se ha depositado pigmento hemático; B, hematíes; C, células epi-
teliales del riñón; D, células plasmáticas; E, mononucleares grandes; F, G, linfo-
citos; casi todas estas células ostentan figuras carioréxicas; H, cápsula del riñón.

P. peL Río HorteGA: Alteraciones renales en un caso de enfermedad bronceada.

Fig. 3.— Riñón izquierdo.—A, cápsula; B, tubuli en degeneración, donde las granula-
ciones glandulares se han convertido en anillos y pequeños discos; en C, estos discos
—más grandes— semejan hematíes; D, filamentos de ergastoplasma; E, tubuli
donde los anillitos rodean á los restos nucleares; F, células donde las granulaciones
glandulares comienzan á formar anillos; G, H, pequeños y grandes gránulos de se-
creción, típicos; 1, células ovoideas con granitos, filamentos y anillos; J, tejido co-
nectivo intersticial; K, grueso esfero-cristal (método de Achúcarro).

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A ANS EN

E py)

ALTERACIONES RENALES EN LA ENFERMEDAD BRONCEADA 139

toplasma obscuro y con escasas granulaciones, se distingue también al-
guno de estos filamentos junto con anillos; pero donde estos hilos abun-
dan, sobre todo, es en las células más destruídas, donde los anillos son
también numerosos. En ellas se disponen en torno de los restos nucleares
ó se extienden por la masa granulosa resultante de la degeneración de
varias células (1)..

Una última formación digna de mencionarse es la presencia de grue,
sos esferocristales de naturaleza desconocida. Se sitúan unas veces en
los espacios conectivos cerca de los vasos, donde forman series alinea-
das, ó bien ocupan el pleno parénquima renal, donde se hallan envuel-
tos por cordones celulares. Estos esferocristales ofrecen las dimensiones
de un glomérulo de Malpigio y parecen formados de dos partes: una pe-
riférica, amorfa, tingible por la eosina, y otra central de aspecto acicu-
lar. Son generalmente huecos y en su cavidad encierran abundantes agu-
_ Jitas de color amarillo, de las cuales existen también acúmulos en oque-
dades especiales del estroma renal.

En parte, se parecen estas masas amorfas y cristalinas á las forma-
ciones uráticas renales que constituyen el infaretus urático de los recién
nacidos; pero no podemos asegurar su naturaleza urática.

En resumen, los riñones que hemos descrito, se caracterizan: el pri-
mero, por su aspecto esplenoide macro y microscópico originado por un
triple proceso; de esclerosis crónica con formación de una red conettiva
cerrada; de infiltración tuberculosa principalmente perivascular, y de
hemorragia intersticial con derrumbamiento de los elementos nobles.

Este riñón era funcionalmente inútil.

El segundo se caracteriza por su aspecto atrófico aparente y por la
hiperactividad secretoría de sus células. Su falta de glomérulos y su as-
pecto de glándula cerrada autorizan á creer que su papel como órgano
de excreción urinaria era muy restringido, por no decir que nulo.

De este estudio surge una observación en forma de pregunta: ¿Cómo
pudo vivir este enfermo cuyos riñones eran inútiles? Por nuestra parte,
nos hemos limitado á la observación de las lesiones y no podemos entrar

(1) Garnier, en un trabajo titulado «Considerations générales sur l'ergastoplas-
me, protoplasme superieur des cellules glandulaires. La place qu'il doit occuper
en pathologie cellulaire» (Journ. de Physiol. el de path. gen., tomo II, 1900), llama
la atención sobre la parte que puede tomar el ergastoplasma en la patología celu-
lar; admite, como Bouin, Demoor, Lukjanow y otros, la posibilidad de que este
protoplasma superior pueda alterarse con independencia de las demás partes de
la célula, y estudiando el páncreas en la intoxicación urémica encuentra en sus
células formaciones paranucleares basiófilas y acidófilas, análogas á las denomi-
nadas Nebenkerne por los autores, pero diferentes de los anillitos observados por '
nosotros.

140 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

en terreno clínico, que de lleno corresponde al Dr. Morales, cuyo era el .

caso que amablemente nos proporcionó.

DISCUSIÓN

El Dr. Arredondo: En la comunicación del Dr. Del Río sería muy interesante
conocer el estudio clínico del sujeto para establecer las debidas relaciones entre él y
las lesiones encontradas en la autopsia y entre las lesiones propias de la enfermedad
de Addison y las renales que han constituído el objeto de su estudio, y para deter-
minar también en el síndrome lo perteneciente propiamente á las lesiones capsula-
res y los trastornos que dependieran de una insuficiencia renal tan considerable como
supone el estado anatómico de los riñones,

Este interés depende también de la interpretación que se dé al caso; para lo que
es indispensable la parte clínica, pues no tiene la misma importancia el caso si se
tratara de lesiones renales dependientes de la enfermedad de Addison, que entonces
sería muy grande, ó si se tratara de una mera coincidencia, en cuyo caso no pasaria
de una curiosidad. Sin este estudio no se está autorizado para hablar de las lesiones
renales de la enfermedad de Addison, sino de unas lesiones renales encontradas en
un caso de tal enfermedad, sin más relación entre ésta y aquéllas que la de simple
coexistencia, lo cual es totalmente distinto por la diversa transcendencia que para
la Patología y la Clínica ofrecería.

El Dr. Del Rio: Estoy de todo punto dontorme con el Dr. Arredondo en cuanto
al interés clínico de este caso de enfermedad bronceada, cuyo diagnóstico no fué
erróneo; pero habiéndome yo limitado al estudio anatomopatológico de las piezas
recogidas en la autopsia, no puedo hacer otra cosa sino dar cuenta de mis hallazgos
en aquel sentido, por juzgarlos de algún interés. He presentado el caso desde el
punto de vista de «lesiones renales» de una intensidad extraordinaria y con curiosas
particularidades, y ha sido para mí cosa secundaria el que dichos órganos perteneciesen
á un enfermo del mal bronceado. Respecto á la parte clínica, tan sólo me es factible
invitar al Dr. Morales á que presente su estudio á esta Sociedad, para que los clíni-
cos que hay en ella puedan satisfacer su curiosidad y juzgar de la relación entre las
lesiones renales y la enfermedad bronceada.

La apreciación de pesos en niños normales y anormales

POR EL

DR. VILLAVERDE

En el curso de los estudios que sobre la inteligencia de niños anorma-
les estamos realizando con el método de Binet, nos ha llamado la aten-
ción algunas particularidades que hemos observado en el test de ordena-
ción de cinco pesos.

Como es sabido, este test es resuelto por el 50 por 100 de niños norma-
les, cuya edad oscila entre nueve y diez años, y ha sido propuesto entre

x

es
A o aiii

LA APRECIACIÓN DE PESOS EN NIÑOS 141

los tests para niños de nueve años en la escala de Binet, 1908, y en las
modificaciones de Bobertag y de Terman-Childs, y para niños de diez
años en la serie graduada de Binet de 1911.

El test consiste en la ordenación de cinco pesos, cuyo tamaño es el
mismo, pero cuyo peso es de 3, 6, 9, 12 y 15 gramos. Al niño, después de
explicarle lo que se le pide, se hace que los ordene en serie gradual. La
modificación de Whipple ordena que se haga al niño ejecutar el test tres
veces, una después de otra, y se anota el número total de transposicio-
nes ó equivocaciones que realiza al ordenarlos en serie. Tiene esta ma-
nera de proceder el inconveniente que á veces, al realizar el niño el test
por tercera vez, está ya fatigado y otras veces ya cuesta hacerle fijar la
atención. Todos los autores emplean para este test cinco pequeños cubos,
pintados del mismo color y cuyo peso varía, siendo el de cada cubo el
indicado anteriormente, pero nosotros hemos siempre empleado con exce-
lente resultado cinco sobres del mismo tamaño, pero de diferente peso.
Estos sobres, iguales á los usados por el profesor americano Bradfort
Titchener para la demostración de la ley de Weber, tienen la ventaja de
que el niño puede cogerlos para apreciar su peso en forma que no puede
hacer con los cubos y que facilita la apreciación del peso; por tanto, en
los casos en que el niño no resuelve el test, tiene el resultado más valor
que operando con los cubos, ya que se ha facilitado la apreciación de los
pesos.

Psicológicamente considerado, el test se reduce á una serie de juicios
que hace el niño comparando dos á dos todos los pesos entre sí. Las di-
ferencias que tiene el niño que apreciar son */,, '/,, '/, y '/,. En un adulto
la diferencia apreciable, pudiendo coger el peso en cualquier forma y
realizar el juicio como mejor le parezca, es, por lo menos, de ios Pero
para los niños á los nueve ó diez años sólo es */, el umbral de la diferen-
cia apreciable.

Siendo este test como todos los del método de Binet de los llamados al-
ternativos, esto es, de aquellos cuyos resultados se expresan por los sig-
nos + ó —, según resuelvan ó no resuelvan el test, no tiene importancia
para la expresión general del resultado ya que vamos á hablar de algu-
nas particularidades dentro de las que no resuelven el test, pero aunque
el número de observaciones que hoy aportamos no son lo que nosotros
deseáramos y pensamos continuarlas, creemos es de interés hacerlas
aquí.

Dentro de los niños normales y anormales que no resuelven el test se-
gún lo que ordenan todos los que trabajan con el método de Binet, hay
algunas diferencias que vamos á exponer.

En doce niños, dos de siete años (casi de ocho), cinco de ocho años,

142 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

tres de nueve, uno de diez y uno de once, algunos de ellos con un cocien-
te de inteligencia superior á uno, y todos ellos normales con Strenung-
breite pequeño, pertenecientes algunos á clases acomodadas, que habían
demostrado aplicación é inteligencia en sus estudios y que ninguno re-
solvia el test de los cinco pesos, observamos lo siguiente: La manera
cómo ordenaban los pesos era 3, 6, 9, 12, 156 3, 6, 9, 15, 12; como el re-
sultado dudoso se refería á la ordenación de los últimos pesos, esto es,
que lo que no sabíamos era si apreciaban '*/, de diferencia,»repetimos en
ellos la experiencia de otra manera: mostrándoles los dos pesos separa:
dos de 12 y 15 gramos, les invitamos á que nos dijeran cuál de los dos
pesaba más y le hicimos repetir la experiencia diez veces; después de
esto con los resultados obtenidos nos convencimos que la diferencia de
1), no era apreciada por ninguno de estos niños, ya que el número de ve-
ces que se equivocaban era tan grande, si no superior al número de
veces que acertaban.

Los anormales, en los que hemos estudiado estas particularidades en
la ordenación de pesos, en total quince, se descomponen en la siguiente
forma : Seis con un nivel intelectual igual á siete (todos ellos pertenecían
á grados no muy fuertes de imbecilidad); siete con un nivel igual á ocho
(también estos correspondían á grupos no muy fuertes de imbecilidad y
á débiles mentales), y dos con un nivel mental que se aproximaba á nue-
ve (estos caían dentro del gran grupo de las psicopatías, dentro del que
se los podría clasificar, á uno en el subgrupo de moral insanity, y al
otro como inestable con pseudología fantástica). La edad de estos indivi-
duos oscilaba entre los doce y diecinueve años, y no hay que decir que la
cifra expresadora de su nivel mental puede ya considerarse como de
estado definitivo de su inteligencia. Esta cifra se obtenía con un Strenung-
breiíte muy amplio, como ocurre con todos los anormales. En ninguno de
ellos había síntomas somáticos, reveladores de una lesión del cerebelo.
Hago constar esto por la gran importancia que este órgano tiene, según
estudios recientes (Lotmar, Kurt, Goldstein), en la apreciación de pesos.
Ninguno de estos niños resolvía el test de los cinco pesos y los resultados
obtenidos eran los siguientes: El tiempo que empleaban en ordenar los
pesos era mucho mayor que en los niños normales. Pasaban los pesos
de una á otra mano muchas más veces que los normales y al ordenar-
los lo hacían equivocándose, no sólo en la diferencia de '/,, sino en la
de '/, y á veces en algunos imbéciles con nivel mental igual á siete en
la diferencia de *'/,. En estos últimos á veces la manera de ordenar los
pesos era extraña sobremanera, confundiéndolos todos y poniéndolos en

cualquier orden.
La sola excepción á esto, hasta ahora, sólo la hemos hallado en un

FÓRMULA LEUCOCITARIA EN LA ENFERMEDAD DE ADDISON 143

chico mixedematoso, de once años y medio, con un nivel mental igual á
7'80, el cual se equivocaba sólo en la apreciación de */, de la diferencia.

Hoy por hoy tan sólo exponemos los resultados obtenidos sin sacar
ninguna deducción por el pequeño número de observaciones. Tampoco
queremos exponer una hipótesis que explique el resultado obtenido en
niños anormales, pero no será aventurado anticipar que, visto lo que á
veces nos ha costado hacer que se fijen y hacerles comprender el test, la
poca atención que ponen á veces al realizar el test sea en gran parte
responsable de los resultados.

En dos niños normales menores de siete años los resultados que hemos
obtenido son muy dudosos.

Si nuestras observaciones nos dan un resultado como el obtenido hasta
aquí, será otra diferencia de índole cualitativa entre niños normales y
anormales con un nivel mental parecido.

2

Sobre la fórmula leucocitaria en la enfermedad de Addison

POR

G. MARAÑÓN

Hace cuatro años publicamos (1) un trabajo sobre la fórmula leucoci-
taria en la enfermedad de Addison, demostrando, por el estudio de los
casos de esta enfermedad publicados por otros autores, con análisis de
sangre, y por seis estudiados por nosotros, que en dicha enfermedad se
encuentra frecuentemente una linfocitosis relativa, análoga á la descrita
por Kocher en el hipertiroidismo y por otros autores en distintos estados
patológicos dependientes de perturbaciones endocrinas (2).

Desde aquella época hemos extendido nuestra observación hasta 13 ca-
sos típicos del mal addisoniano, obteniendo los siguientes resultados,
que exponemos en resumen, reservando para una Memoria que prepara-
mos sobre diferentes aspectos hematológicos de la insuficiencia supra-
renal, la publicación detallada de nuestros datos.

De los 13 casos de enfermedad de Addison examinados, en uno había
leucopenia no muy acentuada (4.200); en cinco, leucocitosis normal
(5 4 8.000); en tres, ligera hiperleucocitosis (9 á 13.000); en uno, gran

(1) Marañón: Revista Médica Española, núm. 1, 1911,
(2) Véase nuestra comunicación á esta Sociedad : «Significación de la linfocito-
sis en las afecciones endocrinas», 18 Octubre 1912.

10

144 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

hiperleucocitosis (30.100); se trataba de una enferma en estado de coma,
pocas horas antes de morir. En tres casos no se obtuvo el número total
de leucocitos. :

En tres casos había mononucleosis moderada (35 á 40 por 100); en seis
casos, fuerte mononucleosis (40 á 50 por 100); en cuatro casos, mononu-
cleosis acentuadisima (50 á 60 por 100). Esta mononucleosis no parece
guardar relación con la gravedad del proceso.

Generalmente, la mononucleosís se hace á expensas de los linfocitos ;

en ciertos casos hay mononucleosis propiamente dicha, de grandes mono-
nucleares, sin que se pueda establecer ninguna relación entre estas va-
riedades hematológicas y los datos clínicos correspondientes.

No hemos encontrado aumento característico de las células eosinófilas
ni presencia de elementos anormales de la sangre. :

———- JO ———-

Significación probable de la morfología de las neuronas
de los invertebrados

POR

S. R. CAJAL

En la comunicación anterior hemos tratado de las analogías y diferen-
cias existentes entre la retina de los insectos y la de los vertebrados, y
hemos insistido particularmente sobre la necesidad de admitir, en conso-
nancia con el principio de la polarización axtpeta formulada por nosotros
hace tiempo (1897), que el soma y mango de las neuronas piriformes de
los articulados carecen de función conductriz. El impulso nervioso óptico
recorrería solamente, en cada célula, el protoplasma mediante entre las
dendritas (inclusive) y la arborización nerviosa terminal. De esta suerte,
las vías de conducción resultan notablemente abreviadas; el impulso, lle-
gado del mundo exterior, se propaga constantemente en idéntica direc-
ción, sin retrocesos ni interferencias, y, en fin, se mantiene incólume en
cada conductor retiniano el signo espacial característico.

Pero esta concepción de la inconductibilidad del soma y mango neuro-
nales plantea otro problema muy arduo: el de la significación fisiológica
de la dislocación del núcleo y de la posición inevitablemente periférica
del cuerpo neuronal.

Sobre esta interesante cuestión deseo manifestar algunas reflexiones,

MORFOLOGÍA DE LAS NEURONAS 145

fundadas en la comparación de la posición del núcleo en las neuronas de
diversos vertebrados é invertebrados.

Comencemos por recordar que, en la inmensa mayoría de los tejidos de
los animales, el órgano nuclear, cuya actividad trófica sobre el protoplas-
ma es incuestionable (todo protoplasma despojado del núcleo muere rá-
pidamente), ocupa, sobre poco más ó menos, el centro morfológico del
soma. Esta centralización obsérvase corrientemente en las células del
embrión, así como en los hematíes y leucocitos, células epiteliales y me-
sodérmicas, en los corpúsculos glandulares del adulto, etc. Semejante po-
sición central, raramente cedida por el núcleo al centrosoma, debe esti-
marse como el puesto estratégico más favorable para atender á las nece-
sidades tróficas de la unidad fisiológica.

Esta regla arquitectónica se cumple también en las células dotadas de
largas expansiones. Así, cuando la masa protoplásmica á regir es muy
grande, por ejemplo, en la fibra muscular lisa y en los prismas del cris-
talino, el núclo, más ó menos estirado en bastoncito, escoge cuidadosa-
mente el promedio de las dos largas prolongaciones. En fin; en la célula
nerviosa de los vertebrados, el órgano nuclear ocupa casi siempre el punto
de unión entre los dos ramajes, aferente y eferente, esto es, el paraje
donde la corriente aportada al soma por las dendritas deriva hacia el
axon ó expansión celulífuga. Gracias á esta situación privilegiada, la in-
fluencia trófica del núcleo y demás organitos encerrados en el soma (hu-
sos de Nissl, mitocondrias, aparato de Golgi, etc.) puede ejercerse fácil
y rápidamente en dirección de las dos clases de apéndices neuronales.

La ley de la centralización nuclear quiebra solamente en la fibra mus-
cular estriada de los vertebrados. Concurre en esta célula una circuns-
tancia singular, que puede servir con otros datos ofrecidos por la histolo-
gía comparada para rastrear la solución del problema planteado. Sabido
es que la célula contráctil posee talla colosal y encierra diferenciaciones
protoplásmicas específicas de carácter profesional (fibrillas primitivas),
que exigían amplio espacio y libertad de actitudes. Dada la cuantiosa

masa protoplásmica de estos elementos, la posición central de los núcleos
hubiera colocado á éstos en malas condiciones nutritivas. He aquí por qué
en el hombre y mamíferos, cuyos corpúsculos musculares alcanzan gran
dimensión, los núcleos yacen bajo el sarcolema. Sólo en los corpúscu-
los cardíacos, en las delgadas fibras musculares de los vertebrados infe-
riores y de los invertebrados, ó en los elementos contráctiles volumino-
sos, pero recortados por amplias hendiduras plasmáticas (músculos de
las alas de ciertos insectos, etc.), los núcleos se presentan francamente
centralizados ó habitando capas más ó menos profundas de la materia
estriada (batracios).

146 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

Esta tendencia del núcleo de las células colosales á preferir posiciones
vecinas de las fuentes plasmáticas para mejor servir su cometido trófico,
arroja, como luego veremos, un rayo de luz sobre el obscuro problema
que nos ocupa. Todo hace pensar, en efecto, que la dislocación perigan-
glionar del núcleo en las neuronas de los articulados obedece también á
móviles nutritivos.

Persigamos un poco más de cerca la cuestión, recordando las condicio-
nes en que se opera la irrigación plasmática en los insectos y crustáceos.

Dejamos expuesto en nuestra comunicación anterior que las neuronas
de los articulados afectan, como nos enseñaron hace tiempo numerosos
histólogos (Retzius, Lenhossék, Kenyon, Apathy, Bethe, etc.), forma
monopolar, con un soma piriforme situado en la periferia ganglionar y
robusta expansión sumergida en las formaciones plexiformes del ganglio.
De este grueso apéndice arrancan primeramente las dendritas ó aparato
de conducción aferente, y luego el axon y apéndices nerviosos, es decir,
el aparato de conducción eferente ó somatófugo. Las figuras 1 y 6 mues-
tran bien esta morfología, con la marcha del impulso nervioso á lo largo
de las ramas de la prolongación neuronal originariamente única. El ci-
tado plan morfológico y dinámico se repite en todos los invertebrados
cuyas neuronas se agrupan en focos ganglionares considerables (molus-
cos, vermes, crustáceos é insectos).

Debe existir, pues, en estos animales causa general y profunda para
que, de tan constante manera y al través de grupos Zoológicos tan diver-
sos, se conserve semejante disposición. Ahora bien, un plan fundamental
de organización tenazmente reproducido, á despecho de la infinita varie-
dad de las condiciones del medio y de la forma del animal, no se man-
tiene sin provecho positivo.

Esta utilidad, digámoslo desde luego, no puede afectar ni poco ni mu-
cho á la perfección ó rapidez de la conducción nerviosa. Puesto que,
según dejamos expuesto, ni el soma ni el mango conducen, su alejamien-
to de las expansiones, es decir, de aquel privilegiado punto de encuentro
entre el aparato dendrítico y el nervioso, constituye seria imperfección.
Aunque no implique rodeos en la propagación de la onda nerviosa, su-
pone, por lo menos, derroche incomprensible de protoplasma. Las leyes
económicas de materia y espacio, de que tan celosa se muestra la vida en
otros casos, quedan aquí deplorablemente olvidadas.

Ciertamente, el insecto, como si fuera consciente de esta imperfección,
ha adelgazado, hasta el límite mínimo compatible con la propagación del
influjo trófico nuclear, el espesor del mango y la zona de protoplasma
somático; de este modo ha conseguido economía nada despreciable de
protoplasma nervioso y elaborado una máquina conductriz, portento de

MORFOLOGÍA DE LAS NEURONAS 147

—_————-

sutilidad y de ingeniosa ligereza; pero no ha logrado eliminar del todo
el mango, accesorio superfluo, acaso porque su conservación le ha sido
impuesta por otros motivos más apremiantes y primordiales.

Si desde el terreno económico la posición periférica del núcleo parece
poco favorable; si, además, según dejamos dicho, este órgano con los
granos de Nissl y aparato de Golgi cumplen más rápida y eficazmente
sus actividades, situándose como en los vertebrados, en el segmento pro-
toplásmico donde concurren las corrientes aferentes y eferentes, ¿cuál ha
podido ser el móvil utilitario perseguido por el organismo al situar el nú-
eleo en la periferia ganglionar?

Declaremos paladinamente nuestro pensamiento. Sólo las exigencias
alimenticias del soma y núcleo, muy superiores á las de las expansiones
dendríticas y nerviosas, han motivado tan singular emigración. Expon-
gamos aquí algunos antecedentes necesarios para autorizar semejante
interpretación.

Sabido es que el cuerpo de la célula nerviosa posee dos actividades de
muy distinta índole: la función trófica (1), de carácter dinámico quizás
(Heidenhain, Cajal), localizada verosímilmente en el núcleo y acaso tam-
bién en el aparato de Golgi; y la función profesional ó conductriz del
impulso nervioso, localizada en el neuroplasma del soma y de las expan-
siones. En los vertebrados, el soma asume á la vez los dos órdenes de ac-
tividad. Y esta coincidencia topográfica de la capacidad conductora axí-
peta y de la actividad trófica (función del núcleo) es posible, porque
adscripto al cuerpo celular existe constantemente en los vertebrados uno
ó varios capilares sanguíneos encargados de la alimentación in situ del
núcleo y demás factores tróficos del protoplasma.

La naturaleza ha podido, pues, sin inconveniente, antes bien con po-
sitiva ventaja, emplazar el núcleo en el paraje estratégico de que hablá.-
bamos antes, evitando así el derroche de protoplasma. Mas en los inver-
tebrados dotados de ganglios de gran volumen, los capilares intranervio-
sos no han aparecido todavía. Por consiguiente, la masa neuronal debe
nutrirse por imbibición en el seno de extensa cavidad linfática, desagua-
dero general de los grandes vasos. No olvidemos que las exigencias ali-
menticias del soma son superiores á las de las expansiones. Y precisa-
mente á causa de la aglomeración de muchas neuronas en un ganglio,
las partes centrales de éste están menos favorablemente colocadas que
las periféricas para un cambio rápido de materia con el ambiente.

Acomodándose, pues, á esta situación marginal de la fuente circulato-
ria, el soma necesita, si ha de cumplir con sus actividades tróficas, emi-

(1) Cajal: Estudios sobre la degeneración y regeneración del sistema nervioso,
tomo I, pág. 386, 1913.

148 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

grar hacia la gran laguna nutritiva, abandonando aquella posición pri-
vilegiada ocupada en los invertebrados más inferiores, cuando la centra-
lización ganglionar se había apenas iniciado (morfología bipolar y mul-
tipolar común en las planarias, colenterados, etc.). De todo ello resultó
una disociación topográfica de las dos mencionadas funciones.

La actividad trófica concentróse en el soma emigrado, que perdió por
compensación su actividad propagatriz: mientras que las dendritas y
axon conservaron y perfeccionaron el oficio conductor. En fin, para no
estorbar el establecimiento de vías nerviosas en los lugares adecuados y
mantener la necesaria unión entre el segmento conductor y el segmento
trófico, creóse un largo mango, de posición y dirección indiferentes, ca-
paz de propagar el influjo trófico, pero refractario á la conducción del
impulso nervioso.

Aparte las razones referidas, he aquí algunos hechos singularmente
favorables á la hipótesis que acabamos de enunciar:

a) En los vertebrados, cuyo sistema nervioso posee, como sabemos,
irrigación sanguínea directa, la substancia gris, región de los centros
donde habitan los somas con sus núcleos, ofrece una riqueza de capila- -
res notablemente superior á la de la substancia blanca, donde se agrupan
las fibras nerviosas, ó que los nervios mismos, simples haces de conduc-
tores. Esta particularidad, bien conocida de antiguo, denota que las exi-
gencias nutritivas del núcleo y demás componentes del soma sobrepujan
á las del axon, tesis por otra parte bien probada por los experimentos é
inducciones de la fisiología.

b) La monopolaridad es fenómeno secundario, posterior siempre á la
disposición primitiva de la célula. En reálidad, la morfología primordial,
el tipo ¿deal, digámoslo así, á que propende toda neurona que crece y se
nutre con cierta libertad, quiero decir, aisladamente y en un medio uni-
formemente favorable, es el bipolar. Pruébanlo concordantemente los he-
chos relativos á la ontogenia y filogenia.

En el embrión de vertebrado, según señalamos nosotros hace tiem-
po (1), y ha comprobado Held (2), la fase de bipolaridad es anterior á la
de monopolaridad ó de neuroblasto de His. La forma, empero, con sola
una expansión, representa fenómeno secundario y fugaz, especie de re-
cuerdo de la fase correspondiente de las neuronas adultas de la ascidia
y del anfioxus, etc.

(1) Cajal: A quelle epoque apparaissent les espansions des cellules nerveuses de
la moelle epiniére, etc. .Inal. Anzeiger. Bd. V, núms. 21 y 22, 1890. — Nouvelles ob-
servations sur les neuroblastes, etc. Anat. Anzeiger. Trad. du Lab de Rech. biol.,
tomo V, 1907.

(2) A. Held: Zur Histogenese der Nervenleitung. X* Versamml. d. Anat. Gesellsch.
zu Rostock. Anat. Anz., 1906.

MORFOLOGÍA DE LAS NEURONAS 149

Y en la serie filogénica, la bipolaridad y hasta la multipolaridad pre-
ceden por lo común á la monopolaridad. Por ejemplo: en las planarias
Rina Monti describe células nerviosas bipolares y multipolares disemina-
das por el mesodermo é inmediaciones epiteliales. En la actinia, Havet,
Wolff y otros observadores señalan asimismo profusión de neuronas bi-
polares y multipolares libres. Parecidas formas ha sorprendido Havet en
el sistema nervioso rudimentario de los trematodos, etc.

Ello es perfectamente comprensible, recordando que, en los tados
animales, las células nerviosas viven en las lagunas linfáticas del meso-
dermo y disponen de un medio alimenticio uniforme, renovable y rico
en oxígeno.

En suma; la monopolaridad, como hecho constante, aparece solamente
cuando las neuronas se congregan en ganglios apretados, esto es, en los
vermes, moluscos, crustáceos é insectos. Cabe, pues, afirmar que la mo-
nopolaridad es función de la concentración ganglionar.

c) Cuando no se trata de focos nerviosos grandes, sino de neuronas di.
seminadas (ó6 reunidas en pequeños grupos) bajo la piel ó entre los mús-
culos (células sensitivas y simpáticas), y bañadas por todos sus lados en
las lagunas nutritivas del animal, también en los crustáceos, moluscos,
vermes é insectos, adoptan dichas células la configuración bipolar ó
multipolar. Recuérdense los corpúsculos sensitivos del hirudo (Apathy,
Cajal, ete.), del lumbricus (Lenhossék, Retzius, etc.), del astacus (Retzius,
Bethe, etc.), las células multipolares y bipolares simpáticas del hirudo
(Apathy, Azoulay, Cajal, Sánchez, ete.), las neuronas multipolares de las
fibras musculares de las alas de los ¿insectos (Cajal, Rina Monti, etc.).

d) En aquellos invertebrados donde existen ya capilares intranervio-
sos (retina de los cefalópodos, etc.), las formas multipolares abundan,
aun cuando aparezcan todavía en ciertos centros algunos elementos mo-
delados de acuerdo con el viejo tipo morfológico, por recuerdo quizás de
etapas evolutivas anteriores. Las neuronas multipolares de la retina de
estos moluscos, descritas hace tiempo por y. Lenhossék y Kopsch, han
sido recientemente confirmadas por nosotros en los ganglios visuales y
periesofágico de la gibia.

e) En el anfioxus, cuya médula espinal carece aún de capilares, la ma-
yoría de las neuronas afectan disposición piriforme, yaciendo en la super-
ficie de la rendija ependimal, bañado el soma por el plasma ambiente en
comunicación con el circulante por los intersticios del mesodermo.

Es curioso notar en las interesantes figuras dadas por Retzius (fig. 2),
de las neuronas de la médula espinal de dicho vertebrado, cómo las den-
dritas proceden, al modo de los articulados y vermes del trayecto inicial
de la expansión única, y de qué modo ciertas células voluminosas motri-

150 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

ces ó cordonales ensayan tímidamente la emisión de cortos y delgados
apéndices somáticos (b), rudimento de las futuras expansiones protoplás-
micas, genuinas de los vertebrados superiores. En cambio, en la mixina,
donde los capilares existen, las neuronas son francamente multipolares.

f) En las larvas de batracio (rana, salamandra, gallipato, etc.), y en
los peces y reptiles muy jóvenes, la médula espinal carece todavía de
vasos, al modo del anfioxus. Por compensación, ofrécese en el interior del
eje cerebro-raquídeo amplia cavidad ependimal llena de líquido nutriti-
vo y comparable al plasma intersticial de los invertebrados. En torno de
este exquisito plasma de cultivo, en cuya composición colaboran sin
duda los corpúsculos epiteliales, reúnense en muro' apretado las neuro-
nas jóvenes, las cuales ostentan forma francamente monopolar con la
expansión única (de que parten axon y dendritas) vuelta á la periferia.

Sólo más adelante, cuando los capilares invaden las masas de neuro-
nas piriformes, emigra el núcleo hacia fuera y la monopolaridad se trans-
forma parcial ó totalmente en multipolaridad ó bipolaridad.

_ Y este proceso de concentración inicial periependimal reconócese tam-
bién en el cerebelo, lóbulo óptico y cerebro de los peces, batracios y
reptiles jóvenes.

9) Durante el desarrollo embrionario de los vertebrados superiores
(aves y mamíferos), se da igualmente una relación estrecha entre la po-
sición y forma de las neuronas y la aparición de los capilares sanguí-
neos. En el embrión de pollo, al cual se refieren especialmente nuestras
recientes observaciones (figs. 3 y 4), los capilares penetran tardíamente en
la médula espinal. Los primeramente diferenciados sorpréndense desde
los tres días y medio á los cinco días de la incubación; penetran por los
lados del surco anterior, invaden la porción intermediaria del muro de
neuroblastos y células nerviosas jóvenes y generan una red sencilla y
aplanada de anchas mallas de dirección dominante longitudinal, de que '
brotan en días sucesivos hacia fuera puntas de crecimiento (figs. 3 y 4, b).
La llegada de los capilares y la creación con ellos de nueva fuente nutri-
tiva, marca el comienzo de la emigración de los neuroblastos hacia la peri-
feria, y por tanto, del tránsito de la monopolaridad á la multipolaridad.
Correlativamente, el conducto ependimal se estrecha, por no ser ya tan
necesario el terreno de cultivo preparado por el epitelio.

h) Lo que dejamos expuesto acerca de la emigración de las neuronas
resulta en gran parte aplicable á los corpúsculos neuróglicos. Mientras
las cavidades ependimales son anchurosas (embriones de mamífero,
peces, batracios y reptiles adultos), casi toda la neuroglia posee carácter
epitelial radiado, emplazando sus núcleos y somas junto á la fuente nutri-
tiva, El aspecto del epéndimo en tal caso es, según pensamiento de

MORFOLOGÍA DE LAS NEURONAS 151

Achúcarro, el de una enorme glándula monotubular que elabora el jugo
ependimal donde han de nutrirse las neuronas. Pero en cuanto los vasos
aparecen, la mayoría de los corpúsculos epitélicos emigra, según demos-
tramos nosotros hace tiempo, para dirigirse hacia los capilares, nutrirse
de ellos (recuérdense los pies chupadores) y convertirse en células neuró-
glicas. De esta suerte, la glándula vascular sanguínea tubular, amplia-
mente abierta en el mesodermo, se ha convertido en la glándula vascular
sanguínea intersticial de que nos habla Achúcarro. A consecuencia de
esta emigración del epitelio en los animales superiores adultos, el epén-
dimo se ha transformado en angosto conducto, rodeado de un reyesti-
miento glandular atrófico. En suma: la célula epitelial sigue siempre en
sus emigraciones á la neurona joven, á la que debe preparar ambiente
químico apropiado. eos

1) La emigración del núcleo á su lugar adecuado y el consiguiente paso
de la monopolaridad á la multipolaridad definitiva, no se efectúa en los
vertebrados súbitamente: existen transiciones suaves que parecen deno-
tar cierta resistencia tenaz del protoplasma nervioso á abandonar el mol-
de típico adoptado durante los enormes períodos filogénicos. En sorpren-
dente concordancia con la concepción que nos ocupa, resulta curioso no-
tar que la fidelidad con que ciertos centros conservan las referidas formas
ancestrales asóciase casi siempre en los vertebrados inferiores á la persis-
tencia de grandes lagunas ó espacios nutritivos en la inmediación de la
trama nerviosa. Por ejemplo, en el lóbulo óptico de los peces, batracios y
reptiles, donde existe un ancho ventrículo lleno de plasma, es común ha-
llar neuronas francamente piriformes cuyo soma reside, al modo del an-
fioxus, en la proximidad del epéndimo. Las investigaciones de mi her-
mano en el lóbulo óptico de peces, batracios y reptiles, nos han revelado
para ciertos tipos neuronales todas las transiciones de posición de las
dendritas: desde el pez, en donde nacen á cierta distancia del arranque
del tallo (fig. 5, A), pasando por'el batracio, en que brotan ya de la proxi-
midad del soma ó del soma mismo (fig. 5, B), hasta el reptil, en que apa-
recen legítimas dendritas somáticas polares (C). En la figura 5, donde re-
producimos estos curiosos tipos celulares de aves, reptiles, batracios y pe-
ces, adviértese también que, conforme nos elevamos en la escala animal,
el soma abandona sucesivamente la frontera ependimal, ocupando por
etapas planos de cada vez más profundos en el espesor del cerebro medio.
El curioso tipo neuronal en cayado de las aves (D) representa la última
fase de esta curiosa evolución, ostentando todavía un axon arciforme,
brotado del tallo dendrítico á gran distancia del soma.

Importa, desde nuestro punto de vista, notar que la citada emigración
del soma y su tránsito desde el tipo piriforme al multipolar ó bipolar co-

152 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DK BIOLOGÍA

rre parejas con la progresiva riqueza del cerebro medio en vasos capila-
res y con la gradual disminución de la capacidad ventricular (que en
los mamíferos se convierte en el angosto acueducto de Silvio). En los peces
y batracios, la pobreza capilar es tal, que todavía la mejor fuente nutri-
tiva para el soma de las neuronas profundas está representada por el lí-
quido ependimal (cerebelo, cerebro, lóbulo óptico, etc.).

Aplicando esta concepción á la explicación de la estructura de la retina
de los insectos, muchas disposiciones morfológicas difíciles acaban por
justificarse teleológicamente. Compréndese el por qué utilitario de la seg-
mentación retiniana, la posición periférica de los somas, la longitud des-
medida de los mangos, la posición insólita de las dendritas, etc. Es más:

á la luz de este principio, la analogía percibida entre la retina del insecto

y la del vertebrado acentúase notablemente, perdiendo todo lo que á pri-
mera vista pudiera parecer artificioso y forzado. En efecto, si del órgano
visnal del insecto descontamos el hecho fatal de la dislocación del soma
por exigencias nutritivas; si imaginamos que, á semejanza del vertebra-
do, la retina cuenta con abundante provisión de capilares y los núcleos
neuronales consiguen ocupar libremente su puesto estratégico, la analo-
gía entre ambos aparatos visuales conviértese casi en identidad. Y toda-
vía este parecido se acentuaría si prescindiéramos de los dos cruces intra-
retinianos que constituyen, como es sabido, una de las mayores origina-
lidades de la retina de los articulados.

En la figura 6 damos un esquema donde se aprecia hasta qué punto el
principio de la emigración trófica del núcleo ha alterado — sin variación
esencial del orden y posición de las vías nerviosas y articulación de los
tres anillos neuronales — la fisonomía estratigráfica de la retina de los
insectos. Al lado de esta figura, dibujamos la retina ideal de este animal,
es decir, lo que fuera este órgano si el desarrollo de capilares propios hu-
biera consentido que el soma y núcleo ocuparan dentro de la célula su
lugar adecuado (fig. 7).

¿Han quedado en el hombre y mamíferos adultos reliquias morfológi-
cas del viejo estado monopolar de los articulados y de las disposiciones
primitivas de la ontogenia y filogenia de los vertebrados superiores?

Pocas son las neuronas que han logrado mantener en los mamíferos la
antigua morfología; merecen, empero, recordarse porque, además de re-
velarnos que la evolución neuronal no ha cumplido enteramente su pro-
grama, ni aun en el hombre, sugieren algunas ideas acerca de los resor-
tes posibles de la conservación y desarrollo de las formas de adaptación
conseguidas tempranamente, Acerca de este punto, la naturaleza parece

vd

eo.

MORFOLOGÍA DE LAS NEURONAS 153

hacer gala de cierta flexibilidad de conducta y de un oportunismo exqui.-
sito, para sacar el mejor partido posible de las circunstancias actuales,
Asi, cuando la disposición (adoptada durante las primeras fases de la
filogenia, por responder, dentro de su relativa imperfección, á urgentes
é inaplazables necesidades), resulta, por azar, adornada de alguna exce-
lencia funcional, la antigua adaptación se conserva fielmente, y aun se la
desarrolla y perfecciona en ciertos casos. Tal parece haber ocurrido con
la monopolaridad secundaria de los corpúsculos sensitivos y con la con-
figuración piriforme característica de las neuronas del foco motor descen-
dente del trigémino.

Digamos algo de estos singulares ejemplos de persistencia de viejas
disposiciones.

La monopolaridad en el hombre, mamíferos, aves, reptiles y batracios
de los corpúsculos ganglionares sensitivos, raquídeos y craneales (fig. 8)
constituye arduo problema morfogenético, sobre el cual diversos autores
y nosotros mismos hemos discurrido ahincadamente, sin llegar, no obs-
tante, á una solución completa y plenamente satisfactoria. La dificultad
brota, sobre todo, del hecho singular de que la monopolaridad aparece
después de la bipolaridad, casi sin antecedentes filogénicos, y como mar-
cando el término de una evolución progresiva. Porque importa recor-
dar que, en los invertebrados, las células sensitivas son bipolares, mor-
fología adoptada también por los elementos congéneres de los peces más
inferiores y del estado larvar temprano de los batracios.

Cuando, hace ya muchos años, Ehrlich, Dogiel y nosotros demostramos
la existencia en torno del soma de los corpúsculos ganglionares raquí-
deos (mamíferos, batracios, etc.) de plexos nerviosos especiales (nidos
y ovillos pericelulares), el problema pareció cercano á la solución. En
efecto, de acuerdo con el principio de la polarización axípeta, el soma
se nos presentaba como un aparato receptor de corrientes. Por consi-
guiente, el estiramiento del pedículo y la emigración del cuerpo celular
hacia la periferia, resultaban efecto de adaptaciones encaminadas á
establecer y ampliar superficies de contacto con arborizaciones nerviosas
aplicadas sobre la región cortical de la célula. Además, añadíamos nos-'
otros, merced á esta emigración, cabe establecer en el centro ganglió-
nico (substancia blanca) una vía conductriz directa, rectilínea, entre la
dendrita ó expansión periférica del corpúsculo sensitivo y el axon Ó ex-
pansión central, con evidente ahorro de tiempo de propagación del im-
pulso aferente. ,

Esta segunda razón, motivadora, según criterio utilitario, de la mono-
polaridad secundaria, conserva todavía, á nuestro juicio, toda su fuerza;
pero es preciso confesar que la otra (producción de extensa superficie de

154 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA
contacto para nidos nerviosos) resulta difícilmente sostenible, después de
la aplicación al estudio de los ganglios raquídeos del proceder del nitra-
to de plata reducido. Según es sabido, los estudios memorables de Na-
geotte, confirmados en principio por Marinesco, nosotros, Rossi, Dustin,
Guido Sala, etc., prestan gran verosimilitud á la idea de que los consa-
bidos nidos pericelulares, señalados en la rana por Ehrlich y en los ma-
miíferos por nosotros y Dogiel, representan disposiciones anormales y,
en todo caso, resultado fortuito de procesos lentos de regeneración es-
pontánea recaídos en las neuronas sensitivas (1).

Dejando á un lado por ahora la tarea de esclarecer el móvil utilitario
perseguido por el organismo al organizar tan superfluas y extemporá-
neas regeneraciones normales de fibras nerviosas, es lo cierto que, con
el carácter eventual de los nidos, la hipótesis explicativa de la emigración
del soma, al objeto de ofrecer amplias superficies de conexión nerviosa
(tanto en el soma como en el glomérulo), ha perdido casi toda su fuerza.

Menester es, por tanto, dar otro rumbo á las hipótesis explicativas.
Sin duda que, en este caso, ha sido parte á la definitiva adopción de la
configuración monopolar la ventaja incuestionable ya mentada más atrás
de la creación de vías directas intragangliónicas. Pero, ¿no podría inter-
venir también aquí, al modo de lo ocurrido en los invertebrados con la
mayoría de las neuronas sensoriales, motivos de orden alimenticio?

Para tratar de responder á esta pregunta, hemos explorado todas nues-
tras ya antiguas preparaciones de los ganglios raquídeos de larvas de
batracio y de los embriones de pollo y conejo (método de Golgi, del ni-
trato de plata reducido, procederes comunes, etc.), al objeto de cercio-
rarnos de si existe alguna relación etiológica entre la aparición de los
vasos y la morfología del referido corpúsculo sensitivo. Y el resultado ha
sido el siguiente:

Durante la ontogenia, los ganglios sensitivos raquídeos y cefálicos se
desarrollan como los nervios, vegetando en una gran laguna mesodér-
mica y sin el concurso de capilares. En las larvas de batracio y en los
peces jóvenes bastante adelantados en evolución, sólo se exhibe en sus
ganglios tal cual vaso pericapsular. Todavía en el embrión de pollo del
octavo y noveno día de la incubación, los únicos vasos sanguíneos vi-
sibles yacen por fuera del ganglio, sobre la cubierta mesodérmica en
vías de organización, y esto en una época en que la médula y el bulbo
contienen ya abundantes redes capilares.

Cuando estos conductos asaltan la porción cortical del ganglio, casi

(1) A quien interese conocer las opiniones expuestas acerca de este singular
proceso de regeneración inmotivada, consulte nuestra obra: Estudio sobre la dege-
neración y regeneración del sistema nervioso. Dos volúmenes, 19183 y 1914.

MORFOLOGÍA DE LAS NEURONAS 105

todas las neuronas sensitivas gruesas, á impulsos quizás del ansia de
oxigeno y de materiales reparadores (el ganglio resulta harto grueso
para vivir parásitamente en pleno mesodermo), tienden á emigrar á las
regiones periféricas, estirando su pedículo y convirtiéndose de bipolares
en monopolares. Cuanto más voluminoso es el ganglio, más general y
temprano acaece el éxodo de los somas. Por ejemplo: los pequeños focos
sensitivos de las larvas de batracio y los ganglios diminutos de la región
lumbar del embrión de ave, etc., mantienen la morfología bipolar mucho
más tiempo que los focos voluminosos (ganglio del trigémino, por
ejemplo). En general, cabe afirmar que, cuanto más gruesa y adelantada
en el crecimiento de sus apéndices se muestra la neurona sensitiva, más
ansia de oxígeno y plasma renovado revela y más pronto se instala en
la región cortical del ganglio.

Hasta en los mamiferos adultos, los ganglios sensitivos de pequeña
dimensión ó los que, como los acústicos, se presentan recortados por gol-
fos ó dispuestos en masas aplastadas, pueden mantener el tipo mortfoló-
gico primitivo. En el hombre mismo, el plexo gangliforme del vago, que
- constituye, como es sabido, largo y delgado ganglio, encierra bastantes
células fusiformes. Consolidada ya la configuración monopolar y conse-
guidas con ella ventajas dinámicas no despreciables, aquélla no cambia,
á despecho del tardío arribo de capilares nutritivos.

El otro ejemplo citado de células piriformes persistentes es el foco mo-
tor accesorio ó descendente del trigémino. Los elementos de este ganglio
mesocefálico reproducen de exquisita manera la morfología neuronal de
los articulados, ya que poseen soma monopolar, expansión única ó man-
go larguísimo, aparato dendrítico inicial (1) en conexión con arboriza-
ciones sensitivas de vías reflejas y, en fin, axon robusto, mera continua-
ción de la prolongación principal, distribuído en los músculos del velo
del paladar.

¿A qué atribuiremos tan singular caso de supervivencia en los verte-
brados adultos, y hasta en el hombre, de morfología tan primitiva ?

Ciertamente, la interpretación no es cosa llana. De cualquier modo,
y en armonía con lo expuesto más atrás, resulta curioso comprobar tam-
bién en este ejemplo la relación tantas veces mentada entre la configu-
ración piriforme y la posición yuxtaventricular del soma y núcleo.
En efecto, según demostró hace tiempo mi hermano (2), tales elementos
habitan en los batracios el suelo del ventrículo mesocefálico, desde donde

(1) Cajal: Textura del sistema nervioso del hombre y de los vertebrados,
tomo II, pág. 208, 1904,

(2) P. Ramón: Origen del nervio masticador en las aves, reptiles y batracios.
Trabajos del Lab. de Invest. biol., tomo III, 1904.

156 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA

parte larga expansión que, incorporada al foco motor principal, emerge
con las radiculares del quinto par. A la manera de lo ocurrido en los
ganglios de los invertebrados, las dendritas de los citados elementos
brotan muy lejos del soma, en pleno foco principal (fig. 9) (1).

Parecida posición y morfología adoptan las neuronas del foco accesorio
en los reptiles y aves, donde, según mostramos en la figura 10, habitan
tanto en la zona supraventricular del techo óptico como en plena válvula
de Vieussens, muy cerca, por tanto, del plasma ependimal.

En fin, en los mamíferos conservan todavía estos elementos el núcleo
vecino del acueducto de Silvio; pero no habitan tan próximas al líquido
ependimal como en los batracios, reptiles y aves. A consecuencia de ello
surgen, si no de todas, de algunas neuronas relativamente apartadas de
la cavidad central, finas y breves dendritas somáticas.

Resulta, pues, que en los mamíferos el progresivo apartamiento de los
somas neuronales del hueco ventricular y la colonización en región rica
en capilares influyen de modo principal (no excluimos otras condiciones)
en la dislocación sucesiva del aparato dendrítico. Lo que se ignora toda-
vía es la causa en cuya virtud las susodichas células motrices del trigé=
mino han sido las más perezosas y recalcitrantes en adoptar la forma tí-
pica multipolar, característica de los vertebrados superiores.

CONCLUSIÓN

De todo lo expuesto se desprende un concepto morfogenético, sobre el
cual importa insistir, á saber: que la posición del núcleo y la conforma-
ción del soma neuronal (y aun osaríamos decir de toda célula), obedece
en cada fase del desarrollo, no sólo á adaptaciones funcionales en orden
á la asociación y conducción, conforme diversos autores hemos sugerido
en muchas ocasiones, sino también á exigencias y preocupaciones neta-
mente nutritivas. En toda neurona, la forma y posición actual, con rela-
ción á otros elementos, representa, pues, el resultado de la acción com-
binada de estos dos órdenes de factores causales. Ambos pueden, en úl-
timo término, subordinarse al influjo de estímulos físicos y químicos,
singularmente de estos últimos, liberados en la atmósfera neuronal bajo
la forma de materias reclamos ó fermentos neurotrópicos.

(1) Aun cuando la cuestión de si estas ramas iniciales deben estimarse por den-
dritas ó por colaterales nerviosas no puede darse por resuelta, nosotros, en vista
de los nuevos hechos de observación, nos inclinamos en el presente ejemplo en
favor de la opinión de Lenhossék, que las estimó como un aparato celulipeto (hoy
diríamos axípeto) homólogo de las expansiones iniciales de las neuronas de los
vermes y articulados.

¡n.d

VE
A

MORFOLOCÍA DE LAS NEURONAS 157

Ciertas substancias, que gozarían de propiedades nutritivas genéricas
(oxígeno, proteínas?, etc.), atraerían especialmente el núcleo y la por-
ción protoplásmica perinuclear portadora del aparato de Golgi; otras ma-
terias, de carácter nutritivo específico, actuarían especialmente sobre el
protoplasma, atrayendo y modelando, según determinadas formas y di-
recciones, las expansiones protoplásmica y nerviosa.

En la preparación del ambiente nutritivo genérico, que durante la épo-
ca embrionaria baña los somas neuronales (líquido ependimal de los ver-
tebrados, líquido perinervioso de los invertebrados), intervendría activa-
mente la que Achúcarro llama glándula ependimal. Este papel nutritivo
estaría reservado en el adulto (mamíferos y aves) tanto á los corpúsculos
neuróglicos como al plasma exudado de los capilares. Recordemos que la
neuroglia asteriforme representa un epitelio ependimal emigrado y trans-
formado, reproductor quizás, en torno de las neuronas adultas, de aquel
exquisito ambiente reparador, formado en otra época por el epitelio en
las cavidades centrales del eje cerebro-raquídeo. En los articulados,

“y singularmente en los insectos, el epitelio y neuroglia actuarían quizás

análogamente que en los vertebrados; sólo que en vez de habitar el cen-
tro ganglionar y los plexos nerviosos, morarían respectivamente en la
periferia de los focos y en las fronteras de la substancia puntiforme, ne-
cesitados también, al modo de los somas neuronales, de una situación
privilegiada desde el punto de vista alimenticio, para cumplir mejor con
su papel de preparadores del ambiente neuronal.

Te A

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AA:

GRA,

S. R. Casan: Significación probable de la morfología de las neuronas
de los invertebrados.

Fig. 1. — Esquema destinado á mostrar
la marcha probable de las corrientes
en la retina de la abeja.—A, baston-
citos; B, segunda neurona visual (mono-
polar gigante); C, corpúsculo ganglió-
nico (tercera neurona visual); b, c, cen-
trífugas cortas; m, s, célula en T ó de
conexión interzonal; f, g, dendritas ba-
sales destinadas á articularse con fibras
centrífugas.

Cel pio AS

Fig. 2.— Médula espinal del anfioxus. —

A, sección á lo largo, donde se descu-
bren, fronterizas del conducto central,
neuronas piriformes que recuerdan las
de los vermes é insectos; a, epéndimo;
b, dendritas; e, axon. (Figura compues-
ta con datos tomados de Retzius).

B, corte transversal de la médula espinal

del anfioxus, según Róhde; a, epéndi-
mo en comunicación con el exterior;
f, , neuronas,

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S. R. Casan: Significación probable de la morfología de las neuronas
de los invertebrados,

? de ?
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Fig. 3. — Corte de la médula espinal del
embrión de pollo de cuatro días y medio
de incubación; e, epéndimo; b, Cc, puntas
vasculares de crecimiento; A, rudi-
mento del cordón posterior; C, vaso san-
guíneo neoformado; f, neuroblasto.

Fig. 4. — Corte de la médula espinal del

pollo á los cinco días y medio de incu-
bación. El aparato vascular hállase más
desarrollado, y las neuronas afectan
forma multipolar, salvo las más poste-
riores (c) que mantienen la monopolar;
a, punta de crecimiento; C, vaso san-
guíneo.

Fig. 5.— Esquema destinado á mostrar la dislocación ependimal sucesiva y el cambio
de forma de las neuronas del techo óptico de algunos vertebrados (figura arreglada
con dibujos de P. Ramón).—A, lóbulo óptico de un pez; B, de la rana; C, de la lagar-
tija; D, de un pájaro; a, axon arciforme; b, soma.

S. R. Casar: Significación probable de la morfología de las neuronas
de los invertebrados.

a

L
3

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EE ER 2 a a

Fig. 6. — Esquema de las tres empaliza-
das neuronales de la retina de un insec-
to. Los somas aparecen en su posición
natural. — a, bastoncito; b, núcleo del
bastón; Cc, segunda neurona visual;
h, tercera neurona visual; NO, nervio
óptico; L, lóbulo óptico.

Fig. 7.— Esquema de las tres empaliza-

das neuronales de la retina de un insec-
to. Para que la comparación con la re-
tina de los vertebrados sea más fácil, se
ha rectificado la posición de los núcleos,
emplazándolos en los parajes donde ha-
bitan en los vertebrados. Las letras
marcan los mismos elementos que en la
figura precedente.

S. R. Casan: Significación probable de la morfología de las neuronas
de los invertebrados.

Fig. 8. —Sección de la corteza de un ganglio raquídeo
del embrión de pollo á los trece días de incubación.
Paso de la forma bipolar á la monopolar. — A, vaso
sanguíneo perigangliónico; B, célula sensitiva mono-
polar; D, corpúsculos centrales bipolares ó retar-
dados en su evolución (figura semiesquemática).

Fig. 9.—Corte de lóbulo óptico de la rana, según P. Ramón.— A, células
monopolares del foco motor descendente del trigémino.

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S. R. Casan: Significación probable de la morfología de las neuronas
de los invertebrados.

Fig. 10.—Corte horizontal de la válvula de Vieussens de un pájaro. —a, células mono-
polares de la raíz motríz descendente del V par; b, aparición de las neuronas bi-
polares.

¡CA A qm Ab
SUMARIO PA
Sesión del 26 de Marzo. R. Turró y J. Alomar.— Atenuación
Ñ del bacilo de Koch en el caldo de
R. Alvarez de Toledo. — A propósito patata de Holanda... 0. ...0mm.... 17
de la reacción colorante de la
Os recientemente BROPROcYa S. R. Cajal.— Variaciones fisiológi-
EE Basuehi A AE AP CNO 1 cas del retículo de Golgi en algu-
R. Alvarez de Toledo. — Sobre el va- nos elementos epiteliales y meso-
lor de la reacción anafiláctica en ATICO mt NN Onda 19
el diagnóstico médico-legal del
4
POBPDOEIÍA - ofaoorno a cdo ooo jojojo a as 7 S, R, Cajal.—Consideraciones gene-
Gonzalo R. Lafora. — Hemorragias rales sobre la polarización onto-
- del lóbulo anterior de la hipó- génica y filogénica del aparato
a a aaa E alejo ooo eS e jad 15 EA a TO 25
MADRID

BIOLOGÍA £;z-

DE LA

SOCIEDAD E

DE

IMPRENTA DE HIJOS DE NICOLÁS MOYA
Garcilaso, 6, y Carretas, 8.

1915

SPAÑOLA

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Advertencias importantes.

Con objeto de evitar retrasos en la entrega de los originales Ó comu-
nicaciones hechas en la Sociedad, sé ruega á los Sres. Socios, los cuales
hayan de tomar parte en una sesión, que lleven consigo el original escri-
to y lo entreguen al Secretario después de su lectura. Sin esta condición
no se permitirá el presentar la comunicación.

A cada comunicante le serán entregados 50 ejemplares de su comuni-.
cación, recortados del BoLETÍN; el que desee una tirada aparte en regla,
lo advertirá al entregar el manuscrito y abonará los gastos que ocasione.

La correspondencia relacionada con la publicación de! BoLETÍN, debe
dirigirse al Secretario, D. Domingo Sánchez, Laboratorio de Investi-
gaciones biológicas, Paseo de Atocha, 13, Madrid.

ODOPIDILDODDIDIDSIDIDILDDIDI II

El precio de suscripción al BOLETÍN es 12 pesetas al año en España
y 13 francos en el extranjero.

Año V. Abril-Mayo, 1915. + Núm. 31.

COLOR LS-S IA

| - BOLETÍN

DE LA

SOCIEDAD ESPAÑOLA

DE

BIOLOGÍA — Els

A le ACI ls bala $
Sí e Ne E y
e $e =>
SUMARIO 3
-Sesión del 24 de Mayo. G. Marañón. — Glucosuria consecu-

Ie, tiva á la 1 tión de ina.
Luis Sayé. — Nuevo procedimiento A a

para la coloración del bacilo de P. Mayoral — ¿Es posible el diagnós-
Koch en los tejidos............. 0 do tico del embarazo por cuti-re-
A: Lecha-Marzo y A. Piga. — Sobre acción?.... nera ranas 62
cd reacción de la ao A. Madinaveitia y P. Varillas. — La
su valor en clínica y en medicina determinación microquímica de la
A legal... erre na ninio NES y 36 urea y del coeficiente de Ambard. 65
eee d: Aa e A. Madinaveitia.—La determinación
| Marzo.— Observaciones sobre los Pr
y de la alcalinidad de las aguas po-
- surcos de la cara interna de la es-
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-—R. Álvarez de Toledo. — La reacción KR. Alvarez de Toledo. — Investiga-
: colorante de la sangre por la tin- ciones acerca de la docimasia he-
Mitura de aloína.::oococóno copos 51 PÁÑICA cococococcrcono rro ALAS 70
A. Lecha-Marzo y A. Piga. - Todavía A. Lecha-Marzo y M. Gavilán Bofill.
+ nuevos métodos para obtener los Más observaciones sobre los sur-
; - cristalos de hemocromógeno cos de la cara interna de la es-
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IMPRENTA DE HIJOS DE NICOLÁS MOYA
Garcilaso, 6, y Carretas, 8.

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. Advertencias importantes.

Con objeto de evitar retrasos en la entrega de los originales ó comu-
nicaciones hechas en la Sociedad, se ruega á los Sres. Socios, los cuales
hayan de tomar parte en una sesión, que lleven consigo el original escri-
to y lo entreguen al Secretario después de su lectura. Sin esta condición
no se permitirá el presentar la comunicación.

A cada comunicante le serán entregados 50 ejemplares de su comuni-
cación, recortados del BoLETÍN; el que desee una tirada aparte en regla,
lo advertirá al entregar el manuscrito y abonará los gastos que ocasione.

La correspondencia relacionada con la publicación del BoLETÍN, debe
dirigirse al Secretario, D. Domingo Sánchez, Laboratorio de Investi-
gaciones biológicas, Paseo de Atocha, 13, Madrid.

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El precio de suscripción al BoLEerÍN es 12 pesetas al año en España
y 13 francos en el extranjero.

| ; Año V.=Junio-Noviembre-Diciembre, 1915.=Núm. 32.

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——R. Alvarez de Toledo.—Utilidad de Fidel. F. Martínez.— Hallazgo de la . >
+S la reacción anafiláctica en el re- «amaeba histolytica», protozoo
o: conocimiento médico-legal de la parásito de la disentería tropi-
MAY Oro 79 cal en España........ AAA 126
: RP, Mayoral.— Observaciones sobre FO Moda y
la tuberculosis y su bacilo...... 95 E pon O Eo
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a. Marañón. Acción del Oguracto cuello del útero humano cultiva-
- hipofisario sobre la glucosuria CA 182
—adrenalinica................ A DI
Sesión del 19 de Noviembre. e do ce oi
8.R. Cajal.—Plan fundamental de d e ves a ee
la retina de los insectos...... o 105 A A 134
. Marañón.—- Acción del extracto Villaverde.— La apreciación de pe- e
hipofisario total en ingestión so- sos en niños normales y anorma-
bre la poliuria dela diabetes.... 116 |. les..............comoommorcccro...o 140
, Alday Redonnet. — Importancia
de la determinación de la pepsi- l G. Marañón. — Sobre la fórmula o
na por varios métodos......... 117 leucocitaria en la enfermedad de
y MURIO: tea taa Rao 143
Gonzalo R. Lafora. — Las lesiones
en el sistema nervioso y en la hi- 1-8. R. Cajal. —Significación proba-
pófisis de un caso de pseudo-: ¡| ble de la morfología de las neu-
acondroplasia....... IES Ao 122 | ronas de los invertebrados..... 144
MADRID e

IMPRENTA DE HIJOS DE NICOLÁS MOYA
Garcilaso, 6, y Carretas, 8.

1915

Advertencias importantes.

Con objeto de evitar retrasos en la entrega de los originales ó comu-
nicaciones hechas en la Sociedad, se ruega á los Sres. Socios, los cuales
hayan de tomar parte en una sesión, que lleven consigo el original escri-
to y lo entreguen al Secretario después de su lectura. Sin esta condición
no se permitirá el presentar la comunicación.

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A cada comunicante le serán entregados 50 ejemplares de su comuni-
cación, recortados del BoLETÍN; el que desee una tirada aparte en regla,
lo advertirá al entregar el manuscrito y abonará los gastos que ocasione.

La correspondencia relacionada con la publicación del BoLETÍN, debe
dirigirse al Secretario, D. Gregorio Marañón, Lista, 11, Madrid.

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El precio de suscripción al BOLETÍN es 12 pesetas al año en España
y 13 francos en el extranjero.

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