■>.>f, VA* ^^^■^W \ !,■.*.■■•-. ! mi „-J-"^ _.'.'.> *'-^^:-- MARINE BIOLOGIGAL LABORATORY. Received Accession No. Given by Place, %*rlo book op pamptilet is to be pemoved fpom the üab- opatopy tuichout the permission of tbe Tpustees. ZEITSCHRIFT FÜR WISSENSCHAFTLICHE MIKROSKOPIE UND FÜR MIKROSKOPISCHE TECHNIK. Unter besonderer Mitwirkung von Prof. Dr. Leop. Dippel Prof. Dr. Max Flesch in Darmstadt in Frankfurt a. M. Prof. Dr. P. Schiefferdecker PrQf. Dr. Arth. AVichmaiin in Bonn in Utrecht heraiisgege1)en von Dr WILH. JUL. BEHRENS in Göttinnen. Band VIII, (Jahrgang 1891). Mit 49 Holzschnitten. BRAÜNSCHWEIG HARALD BRUHN Verlagsbuchhandlung fiir Naturwissenschaft und Medicin 1891. Alle Rechte vorbehalten. 1 (c b I n h a 1 1 s \ e r z e i c h n i s s. I. Original-Abhandlungen. Seite Apäth.Vj St., Pleurosigma angulatum und das Licmh.VIic Mikioskop . 43:5 Behrens, W., Gläser zum Aufbewahren von Immersionsül 184 Bernhard, W., Eine neue Modification des AiusK'schen Zeichenapparates 291 — , — , Kleiner Tropfapparat für Mikrotome 305 Bi'auer, Fr., Rf.khkkt's neuer Zeichenapparat 451 Busse, W., Die Anwendung der Celloidin- Einbettung in der Pflanzen- anatomie . . . • 462 Ciagliüski, A., Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik bei der Unter- suchung des Rückenmarks und der peripheren Nerven .... 19 Czapski, S., Die voraussichtlichen Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops 145 Dogiel, A, S. , Ein Beitrag zur Farbentixirung von mit Methylenblau tingirten Präparaten 15 Edinger, L., Ein neuer Apparat zum Zeichnen schwacher Vergrösserungen 179 Feist, B., Zur Technik der Mikroskopie des Centralnervensystems . . 492 Fick, R., Zur Technik der GoLoi'schen Färbung 168 Hang, R., Die gebräuchlichsten Entkalkungsmethoden. Eine technisch- histologische Studie 1 — , — , Einige empfehlenswerthe Farbstofifcompositionen 51 — , — , Winke zur Darstellung von Präparaten von intra vitam mit Aiiilin- farbstoffen injicirten Geschwulstparthien 11 Henking-, H., Methoden bei entwicklungsgeschichtlicheu Untersuchungen an Insecteneiern 156 — , — , WixKEi-'s neuer Zeichenapparat 295 Koch, A., Apparat zum Filtriren bacterienhaltiger Flüssigkeiten . . . 186 Lendl, A., Eine neue Construction für Mikroskope ... .... 281 Martinotti, G., L'ematossilina, l'emateina ed il carminio 488 Mayer, P., und Schoebel, E. , Einfache Vorrichtung zum Heben des Objectes am JuNa'schen Mikrotom 303 Neuhauss, R., Das Magnesium-Blitzlicht in der Mikrophotographie . . 181 IV Inhaltsverzeiciiniss. Seite Nikifoi-off, 31., Mikroskopisch-technische Notizen 188 Pfeiffer R. von Wellheim, F., Mittheilungen über die Anwendbarkeit des venetianischen Terpentins bei botanischen Dauerpräparaten . 29 Schaifer, J., Fromme's Patentmikrotom ohne Schlittenführung und eine neue Präparatenklammer 298 Schiefferdecker, P., Nachtrag zu meiner Mittheilung über die Kochs- Woi.z'sche Mikroskopirlampe 53 Schilling, A. J., Kleine Beiträge zur Technik der Flagellatenforschung 314 Schroeder van der Kolk, J. L. C, lieber die Vortheile schiefer Be- leuchtung bei der Untersuchung von Dünnschliffen im parallelen polarisirten Lichte 456 — ^ — , üeber eine Methode zur Beobachtung der optischen Interferenz- erscheinungen im convei'genten polarisirten Lichte, insbesondere in Gestein sschliß'en 459 Stoss, A., Construction eines Kühlmessers 310 Tlioma, R., Eine Entkalkungsmethode 191 Unna, P. G., Ueber die Reifung unserer Farbstoffe 475 Vinassa, E., Beiträge zur pharmakognotischen Mikroskopie 34 Zimmermann, A. , Eine einfache Einstellungsmethode des mikroskopi- schen Bcleuchtungsapparates 454 II. Referirte Literatur. Albarracin, T. , Mikrophotogramme nach Präparaten des normalen Gehörorgans 196 AUis, E. Pli., The anatomy and development ot the lateral Jine System in Amia calva 512 Altmann, P., Thermoregulator neuer Construction 335 Apäthy, S. , Die LAxc.'schen leeren Ringe, besonders bei Hirudo niedi- cinalis 81 d'Arsonval, A., Appareils ä temperature tixe pour embryologie et cul- tures niicrobiennes 102 — , — , Emploi de l'acide carbonique liquetie pour ia tiltration et la Steri- lisation rapides des liquides organiques 236 Balbiani, E. G., Sur la structure intime du noyau du Loxophylktm me- leagris 77 Rallowitz, F., Weitere Beobachtungen über den feineren Bau der Sänge- thierspermatozoen 515 Bang, B., Ueber Rothlauf-Endocarditis bei Schweinen 407 Barfurth, D., Ueber Zellbrücken glatter Muskelfasern 382 — , — , Versuche zur functionellen Anpassung 221 — , — , Zur Regeneration der Gewebe . . 222 jBastit , E. , Recherches anatomiques et physiologiques sur la tige et la feuille des mousses 410 Backe, E., Unterscheidung von Quarz und Feldspathen mittels Färbung 547 luhaltsverzeichniss. V Seite Behrens, H., Reactionen fiir mikrochemische Mineralanalysqn .... 126 Behrens, W., Leitfaden der botanischen Mikroskopie 194 Behring, Ueber Desinfection, Desinfectionsmittel und Desinfectionsme- thoden 111 Belowsky, M., Ueber die Aenderungen, welche die optischen Verhält- nisse der gemeinen Hornblende beim Glühen erfahren .... 548 Benda, C, Neue Mittheilungen über die Entwicklung der Genitaldrüsen und über die Metamorphose der Samenzellen 516 Bergh, R. S., Neue Beiträge zur Embryologie der Anneliden. I. Zur Entwicklung und Differenzirung des Keimstreifens von Lumbricus 81 Beyerink, M. W., Die Capillarhebermikroskopirtropfenflasche .... 336 — , — . Verfahren zum Nachweis der Säureabsonderung bei Mikrobien . 404 Blücher, H., Eine Methode zur Plattencultur anaerober Bacterien . . 232 Böhmig, L,, Untersuchungen über rhabdocöle Turbellarien. 11. Plagiosto- mina und Cylindrostomina Gkaff 212 Bömer, A., Beiträge zur Kenntnis des Quarzes 548 Botkin, S,, Eine einfache Methode zur Isolirung anaerober Bacterien . 399 Braem, F., Untersuchungen über die Bryozoen des süssen Wassers . . 206 Brauer, A., Ueber die Entwicklung von Hydra 509 Brauns, R., Die optischen Anomalien der Krystalle 541 — , — , Krystallographisch - optische Beobachtungen an Chlor- und Brom- zimmtaldehyd 263 Bredow, H., Beiträge zur Kenntniss der Chromatophoren 411 Brefeld, O., Untersuchungen aus dem Gesammtgebiete der Mykologie . 246 Brnnnee, R., Ueber eine neue Vorrichtung für Mikroskope zum Zwecke eines schnellen Uebergangs von parallelem zu convergentem Licht 335 Bujwid, (>., Eine einfache Filtrirvorrichtung zum Filtriren sterilisirter Flüssigkeiten 104 Camerano, L., I primi momenti della evoluzione dei Gordii 80 Carlier, W., The fate of the notochord and development of the inter- vertebral disc in the sheep, with observations on the structure of the adult tissues in these animals 231 Cerfontaine, F., Recherches sur le Systeme cutane et sur le Systeme musculaire du Lombric terrestre 210 Chauveaud, L. G., Recherches embryogeniques sur l'appareil lactifere des Euphorbiacees, Urticacees, Apocynees et Asclepiadees . . . 413 Coggi, A., A proposito di spostamenti del carioplasma e del nucleolo neue cellule nervöse 90 Cohen, E., und Weinschenk, E., Meteoreisen-Studieu 550 Cori, C. J., Untersuchungen über die Anatomie und Histologie der Gattung Phoronis 214 Crety, C, Ricerche anatomiche ed istologiche sul genere Solenophorus (Creplin) 366 Crosa, F., Di un modo di conservare le lan-e dei lepidotteri col loro coloro 86 Cross, Ch. W., Constitution and origin of spherulites in acid eruptive rocks 544 yj Inhaltsverzeichniss. Seite Czaplewsky, K., Die Untersuchung des Auswurfs auf Tuberkelbacillen 242 Czapski, S., Mikroskope von Carl Zeisss ir Jena für krystallographische und petrographische Untersuchungen 330 Dangeard, P. A., Recherches histologiques sur les Champignons . . . 409 Daremberg, (i., Sur le pouvoir globulicide du s^rum sanguin .... 514 Davenport, C. B., Cristatella; the origin and development of tlic in- dividual in the colony 209 Deiidy, A., Studies on the comparative anatomy of sponges. IV. ()n the flagellated Chambers and ova of Halichondria panicea .... 362 Dewitz, H., Einige Beobachtungen, betreffend das geschlossene Tracheen- system bei Insectenlarven 83 Disse, J., Ueber die Lymphbahnen der Säugethierleber 95 Dogiel, A. S., Die Nervenendkörperchen (Endkolben, W. Krausk) in der Cornea und Conjunctiva bulbi des Menschen 519 — , — , Die Nervenendigung in Tastkörperchen 520 Dubois, R., Sur les proprietes des principes colorants naturels de la soie jaune et sur leur analogie avec celle de la Carotine vegetale . . 85 Eberdt, O., Beiträge zur Entstehungsgeschichte der Stärke 540 Eberth, C. J., Zur Untersuchung des Auswurfs auf Tuberkelbacillen . 109 Eder, J. M., Photographie des Netzhautbildes im Insectenaugc ... 198 Edinger, L., Untersuchungen über die vergleichende Anatomie des Ge- hirns. I. Das Vorderhirn 98 Ehlers, E., Zur Kenntniss der Pedicellinen 208 Eisenberg, J., Bacteriologische Diagnostik. Hilfstabellen zum Gebrauch beim praktischen Arbeiten. 3. umgearb. und verm. Aufl. Nebst einem Anhange: Bacteriologische Technik 100 Eismond, J., Eine einfache Untersuchungsmethode für lebende Infusorien 77 Emery, C, Due nuovi apparecchi per studi entomologici 497 Enderlen, E., Fasern im Knochenmarke 385 — , — . Primäre infectiöse Pyelo-Nephritis beim Rind 245 Erlanger, R. v., Ueber den Blastoporus der anuren Amphibien, sein Schicksal und seine Beziehungen zum bleibenden After .... 219 Etzold, F., Die Entwicklung der Testikel von Fringilla domestica von der Winterruhe bis zum Eintritt der Brunft 369 Faniinzin, A., Beitrag zur Smybiose von Algen und Thieren .... 351 Felix, W., Die erste Anlage des Excretionssystems des Hühnchens . . 368 Ferrari, G. C, Sull'uso dell'acido lattico per lo studio dei vasi capil- lari nel cervello . 385 Ficalbi, E., Sulla architettura istologica di alcuni peli degli uccelli con considerazioni sulla filogenia dei peli e delle penne 89 Fiedler, K., Entwicklungsmechanische Studien an Echinodermeneiern . 362 Fleniming, W., Neue Beiträge zur Kenntniss der Zelle. IL Theil . . 343 — , — , Ueber Theilung und Kernformen bei Leukocyten und über deren Attractionssphären 223 Forel, A., Ueber das Verhältniss der experimentellen Atrophie und Degenerationsmethode zur Anatomie und Histologie des Central- nervensystems 38G Inhaltsverzeiclmiss. VII Seite Fi'iedel, G., Sur la melanophlogite 262 Fusari, R., e Paiiasci, A., Sülle terminazione nervöse nella mucosa e nelle ghiandole sierose della lingua dei raammiferi 99 Gabi'itschewsky, G., Zur Technik der bacteriologischen Untersuchungen 521 Gilson, E., La suberine et les cellules du liege 116 Giltay, E., Hoofdzaken uit de leer van het zien door den microscop, met behulp van zeven objecten. A. u. d. T. : Sept objets regardes au microscope. Expose de quelques principes de la microscopie . 193 Golgi, C, La rete nervosa diiFusa degli organi centrali del systema nervosa. Suo signiticato fisiologico 388 Grandis, V., Sülle modificazioni degli epitelii ghiandolari durante la secrezione -. . 86 Grassi, B., e Castronovo, A., Dimostrazione di alcuni preparati fatti col metodo di Golgi 214 Graziani, A., Des reactifs utilises pour l'ätude microscopique des Cham- pignons 409 Griffiths, A. B., A method of demonstrating the presence of uric acid in the contractile vacuoles of some lower organisms 359 Gkimm's Mikrophotographien 199 Günther, C, Einführung in das Studium der Bacteriologie mit besonderer Berücksichtigung der mikroskopischen Technik 101 Hamann, O., Monographie der Acanthocephalen [Echinorrhyncben] . . 209 Hansemann, D., Ueber pathologische Mitosen 204 Hansen, E. Chr., Qu'est-ce que la levure pure de M. Pasteur? Une recherche experimentale 534 — , — , Recherches sur la physiologie et la morphologie des ferments alcooliques. VIII. Sur la germination des spores chez les Sac- charomyces 539 Heider, A., Ueber die Wirksamkeit von Desinfectionsraitteln bei höherer Temperatur 112 Heinricher, E., Ueber massenhaftes Auftreten von Krystalloiden in Laubtrieben der Kartoffelpflanze 541 Henchman, A. P., The origin and development of the central nervous System in Limax maximus 216 Hermann, F., Beitrag zur Lehre von der Entstehung der karyokineti- schen Spindel 367 Hertwig, O., Experimentelle Studien am thierischen Ei, vor, während und nach der Befruchtung 78 Hieronymus, G., Ueber Dicranochaete reniformis Hieron. eine neue Protococcacee des Süsswassers 247 Holt, W. L., Observations upon the development of the teleostean brain, •with special reference to that of Clupea harengus 218 Honegger, J., Vergleichend-anatomische Untersuchungen über den Fornix und die zu ihm in Beziehung gebrachten Gebilde im Gehirn des Menschen und der Säugethiere 99 Hoyer, H., Ueber den Nachweis des Mucins in Geweben mittels der Färbemethode 67 yjjl Inhaltsverzeichniss. Seite Huniphrey, J. E., Notes on technique II 408 Ihering, H. v., lieber die zoologisch-systematische Bedeutung der Ge- hörorgane der Teleostier 512 Jäkel, O., Ueber mikroskopische Untersuchungen im Gebiet der Paläon- tologie 123 Jarisch, Zur Anatomie und Herkunft des Oberhaut- und Haarpigmentes beim Menschen und den Säugethieren 516 Jungengel, M., Die Hauttransplantation nach Tihkusch 378 Kaes, Th., Die Anwendung der WoLXKii'schen Methode auf die feinen Fasern der Hirnrinde 388 Kamen, L., Ein neues Culturgefäss 232 Kartnlis, Einiges über die Pathogenese der Dysenterieamöbeu .... 361 Kastschenko, N., Ueber den Reifungsprocess des Selachiereies ... 88 Katz, L., Mikrophotographischer Atlas der normalen und pathologischen Anatomie des Ohres. I. Theil 196 Kaufmann, P., Ueber einen neuen Nährboden für Bacterien .... 400 Kaiser, J., Beiträge zur Kenntniss der Anatomie, Histologie und Ent- wicklungsgeschichte der Acanthocephalen 363 Klebahn, H., Studien über Zygoten. I. Die Keimung von Closterium und Cosmarium 251 Klebs, E., Zur vergleichenden Anatomie der Placenta 227 Klein, C, Krystallographisch- optische Untersuchungen. Ueber Construc- tion und Verwendung von Drehapparaten zur optischen Unter- suchung von Krystalien in Medien ähnlicher Brechbarkeit . . . 256 Kowalevsky, A., Ein Beitrag zur Kenntniss der Excretionsorgane . . 347 Krause, R., Entwicklungsgeschichte der häutigen Bogengänge ... 90 Kromayer, E., Zur pathologischen Anatomie der Psoriasis nebst einigen Bemerkungen über den Verhornungsprocess und die Structur der Stachelzelle . . . . • 91 Kühne, W., Kieselsäure als Nährboden für Organismen 238 Kuczynski, A., Beitrag zur Histologie der BmiNNER'schen Drüsen . . 225 Lachi, P., Contributo alla istogenesi della nevroglia nel midoUo spinale del pollo 391 Lamounette, B., Recherches sur l'origine morphologique du über interne 254 Lee, A. B., On a little-known sense-organ in Salpa 511 Lehmann, O., Einige Verbesserungen des Krystallisationsmikroskops . 255 Lemberg, J., Zur mikrochemischen Untersuchung einiger Minerale . . 258 Lewoff, B., Ueber die Entwicklung der Fibrillen des Bindegewebes . 382 Litten, M., Die Centrifuge im Dienste der klinischen Medicin .... 499 Lo Bianco, S., Metodi usati nella Stazione zoologica per la conservazione degli animali marini 54 Lode, A., Untersuchungen über die Zahlen- und Regenerationsverhält- nisse der Spermatozoiden bei Hund und Mensch 369 Löwit, M., Ueber Neubildung und Beschaffenheit der weissen Butkörper- chen. Ein Beitrag zur Zellenlehre 371 Loewy, J., Beiträge zur Anatomie und Physiologie der Oberhaut . . 222 Ludwig, H., Entwicklungsgeschichte der Holothurien. 2. Mittheilung . 363 Inhaltsverzeichniss. IX Seite Maas, O., Ueber die Entwicklung des Süsswasserschwammes .... 205 Magini, G., Ancora sulla ubicazione del iiucleolo nclla cellula nervosa motoria 512 Mallory, F. B., Phospho-molybdic acid htematoxylin 341 Mangln, L., Sur la structure des Peronospor^es 112 Maragliano, E., e Castellino, P., Sülle moditicazioni degenerative dei globuli rossi ^6 Marktanner-Turneretscher, G., Die Mikrophotographie als Hilfsmittel naturwissenschaftlicher Forschung 324 — , — , Fortschrift auf dem Gebiete der Mikrophotographie 200 Marpmann, Mittheilungen aus der Praxis 403 Martens, A., Die mikrophotographische Ausrüstung der königlichen mechanisch-technischen Versuchsanstalt zu Berlin 504 Mayer, P., Ueber das Färben mit Hämatoxylin 337 Mazzarelli, G. F., Ricerche sulla morfologia e fisiologia dell'apparato riproduttore nelle Aplysiae del Golfo di Napoli 511 McMnrrich, J. P., The Actinaria of the Bahama Islands, W. J. . . . 508 Meves, Fr., Ueber amitotische Kerntheilung in den Spermatogonicn des Salamanders und Verhalten der Attractionssphäre bei derselben 513 Meyer, H., Die Entwicklung der Urnieren beim. Menschen 95 Michel-Levy, A., et Lacioix, A., Tableaux des mineraux des roches . 123 Mihäjlovits, N., Ein neues Verfahren zur Färbung und Aufbewahrung der rothen Blutzellen 377 Mills, F. W., Photography applied to the microscope 506 Miquel, P., Nouveaux regulateurs bases sur la dilatation des metaux solides 104 — , — , Siu" un mode particulier de prelevement du liquide des cultures . 105 3Iöller, J. D., Lichtdrucktafeln hervorragend schöner und vollständiger MöLi.ER'scher Diatomaceen-Präparate 502 Molisch, H., Grundriss einer Histochemie der pflanzlichen Genussmittel 119 Mügge, O., Ueber den Krystallbau der pyrogenen Quarze 549 Nathusius, W. v., Untersuchungen über H.\KTiNG'sche Körperchen . . 221 Naue, H., Ueber Bau und Entwicklung der Kiemen der Froschlarven . 89 Naumoff, M., Ueber einige pathologisch- anatomische Veränderungen im Augengrunde bei neugeborenen Kindern 93 Neiihauss, R., Lehrbuch der Mikrophotographie 324 Nikiforoff, M., Ein Beitrag zu den Culturmethoden der Anaeroben . . 234 Nouiewicz, E., Ueber die innere Construction des Bacillus diphtheriae und des Bacillus mailei, und über verbesserte Färbungsmethode der Rotzbacillen in den Geweben 109 Nuel et Cornil, De l'endothelium de la chambre anterieur de rneil, particulierement de celui de la cornee 228 Obregia, A., Fixirungsmethode der GoLci'schen Präparate des Central- nervensystems 97 — , — , Ueber die Nervenendigungen in den glatten Muskelfasern des Darms beim Hunde 395 Ortdi, R., e Rossi, U., Sul decorso delle vie afferenti del midoUo spinale studiate col metodo delle degenerazioni 521 X Inhaltsverzeichniss. Seite Oppel, A., Ueber Gitterfasern der menschlichen Leber und Milz . . . 224 — , — , Ueber Vorderkopfsomiten und die Kopfhöhle von Anguis fragilis 220 Osann, A., Ueber Zwillingsbildung an Quarzeinsprenglingen aus lipariti- schen Gesteinen des Cabo de Gata 549 van Overbeck de Meyer, Ueber die Bereitung des Nähragars . . . 106 Overton, E., Beiträge zur Histologie und Physiologie der Characeen 114 Pansini, S., Sulla costituzione della cartilagine e sulla origine delle fibre elastiche nella cartilagine reticolata od elastica 383 Parker, G. H., The eyes in blind crayfislies 215 — , — , The eyes in sorpions 82 — , — , The histology and development of the eye in the lobster [Homarus] 82 Petri, R. J., Ein neuer Apparat zum Steiülisiren mit strömendem Wasser- dampf, von Atmosphärendruck 237 Pfeffer, W., Zur Kenntniss der Plasmahaut und der Vacuolen nebst Bemerkungen über den Aggregatzustand des Protoplasmas und über osmotische Vorgänge 70 Pfeiffer, L., Die Protozoen als Krankheitserreger, sowie der Zellen- und Zellkernparasitismus derselben bei nicht-bacteriellen Infections- krankheiten des Menschen 355 Plehn, F., Aetiologische und klinische Malaria- Studien 359 Plessen, J. v., u. Rabinovicz, J., Die Kopfnerven von Salamandra maculata im vorgerückten Embryonalstadium 390 Poxilsen, V. A., Note sur la preparation des grains d'aleuron .... 254 Prausnitz, W., Kleinere Mittheilungen zur bacteriologischen Technik . 395 vom Ratli, O., Ueber die Bedeutung der amitotischen Kerntheilung im Hoden H • ... 510 ■ — , — , Ueber eine eigenartige polycentrische Anordnung des Chromatins 509 Reinitzer, F., Ueber die wahre Natur des Gummifermentes .... 117 Renard, A. F., Notice sur les cristaux de phillipsite des Sediments du centre de l'ocean pacifique 130 Renard, R., Les concretions de phosphate de chaux draguees au large du Cap de Bonne-Esperance 417 Retzius, G., Muskelfibrille und Sarkoplasma 201 ■ — , — , Ueber die Ganglienzellen der Cerebrospinalganglien und über sub- cutane Ganglienzellen bei Myxine glutinosa 229 — , — , Zur Kenntniss des Nervensystems der Crustaceen 215 Rhumbler, L., Beiträge zur Kenntniss der Rbizopoden I 508 Ribbert, Ueber die Regeneration der Mamilla nebst Bemerkungen über ihre Entwicklung 226 Riese, H., Die feinsten Nervenfasern und ihre Endigungen im Ovarium der Säugethiere und des Menschen 517 Rinne, F., Ueber eine einfache Methode, den Charakter der Doppel- brechung im convergenten polarisirten Lichte zu bestimmen . . 416 Ritter, R., Die Entwicklung der Geschlechtsorgane und des Darmes bei Chironomus 87 Ritter, VV. E., The parietal eye in some lizards from the Western United States 220 Inhalts verzeichniss. XI Seite Rohde, E., Histologiscbc Untersuchungen über das Nervensystem der Hirudineen -^6;) Rollet, A., Ueber die Streifen N (Nebenscheiben), das Sarkoplasma und die Contraction der quergestreiften Muskelfasern 380 Rosenthal, J., Ueber die taulnisswidrige Wirkung des Chinolins . . . 342 Rossi, U., II nucleo nelle uova dello Spelerpes fuscus o Geotriton fuscus iJ13 Rothert, W., Die Entwicklung der Sporangien bei den Saprolegnieen . 252 Ronx, Gr., Quelques remarques ä propos de la colorabilite du bacille de la tuberculose 405 Rnssel, H. L., Apparat zur Entnahme von Wasser aus einer bestimmten Tiefe 498 — , — , Apparat zur Gewinnung von Schlammproben 490 Sala, L., Zur feineren Anatomie des grossen Seepferdefusses .... 389 SchaflFer, J., Die Färbung der menschlichen Retina mit Essigsäurehäma- toxylin 227 Schaffer, K., Vergleichend - anatomische Untersuchungen über Rücken- marksfaserung 392 Schantyr, J., Untersuchungen über Mikroorganismen der Hundestaupe 530 Scheurlen, Zusatz zu dem Aufsatze ,,Eine Methode der Blutentnahme beim Menschen" 239 Schill, Beiträge zur bacteriologischen Technik 522 Schmaus, Technische Notizen zur Färbung der Achsencylinder im Rücken- mark 230 Schmidt, F., Studien zur Entwicklungsgeschichte der Pulmonaten. I. Die Entwicklung des Nervensystems 366 Schmor], G., Ueber ein pathogenes Fadenbacterium [Streptothrix cuniculi] 242 Schneider, C. C, Untersuchungen über die Zelle 346 Schoebel, E., Zur postembryonalen Entwicklung des Auges der Amphibien 219 Schottlaender, J., Beitrag zur Kenntniss der FoUikelatresie nebst einigen Bemerkungen über die unveränderten Follikel in den Eierstöcken der Säugethiere 227 Schuberg, A., Zur Kenntniss des Stentor coeruleus 206 Schultz, N. K., Zur Frage von der Bereitung einiger Nährsubstrate . 401 Seiler, R. v., Ueber die Zungendrüsen von Anguis, Pseudopus und La- certa . . 379 van Senus, A. H. C, Bijdrage tot de kennis der cellulosegisting . . 240 Smith, Th., Einige Bemerkungen über Säure- und Alkali - Bildung bei Bacterien 107 — , — , Einige Bemerkungen zu dem Aufsatze , Eine Methode der Blut- entnahme beim Menschen" 239 Spaink, P. F., Ueber die Einwirkung reinen Alkohols auf den Organis- mus und insbesondere auf das peripherische Nervensystem . . . 518 Spengel, .1. W., Beitrag zur Kenntniss der Kiemen des Amphioxus . . 218 Stefanowska, M., La disposition histologique du pigment dans les yeux des arthropodes sous l'influence de la lumiere directe et de l'ob- scurit^ complete 83 XII Inhaltsverzeichniss. Seite Stevenson, W. F., u. Bruce, D., Eine neue Methode, Plüssigkeiten in die Bauchhöhle der Versuchsthiere einzuspritzen 398 Stiiiing, AV., Some recent and some new histological methods . . . 66 Stöhr, Ph., Die Entwicklung des adenoiden Gewebes, der Zungenbälge und der Mandeln des Menschen ... ■ 379 van der Stricht, Division mitosique des erythroblastes et des leucoblastes ä l'interieur du foie embryonnaire des mammiferes 514 Stnhlmann, F., Zur Kenntniss des Ovariums der Aalmutter. [Zoarces vivi- parus Cuv.] 88 Suchannek, H., Beiträge zur feineren normalen Anatomie des mensch- lichen Geruchsorganes 227 Tenscher, P., Ueber Degeneration am normalen peripheren Nerven 230 Tischutkin, N., Eine vereinfachte Methode der Bereitung von Fleisch- peptonagar 107 Tumänzew u. Dogiel, J., Zur Lehre über das Nervensystem des Herzens 228 Unna, P. G., Der Dampftrichter 397 — , — , Die Färbung der Mikroorganismen im Horngewebe 524 — , — , Eine neue Färbemethode für Lepra- und Tuberkelbacillen . . . 405 Valenti, G., e d'Abundo, G., Sulla vascolarizzazione cerebrale di alcuni mammiferi in varie epoche della vita embrionale ed estrauterina 97 Verworn, M., Biologische Protisten-Studien II 77 Wagner, F. v.. Zur Kenntniss der ungeschlechtlichen Fortpflanzung von Microstoma 213 Wakker, J. H., Ein neuer Inhaltskörper der Pflanzenzelle 412 Webster, J. (\, An improved method ofpreparing large sectious of tis- sues for microscopic examination 202 Weigert, C, Die Markscheidenfärbung 392 Weinland, E., Ueber die Schwinger (Halteren) der Dipteren .... 217 Wheeler, W. M., The embryology of ßlatta germanica and Doryphora decemlineata 510 White, T. Gh., A new method of infiltrating osseous and dental tissues 501 Wiedersheim, R., Beiträge zur Entwicklungsgeschichte von Salamandra atra 219 Wilderaan, E. de, Premieres recherches au sujet de l'influence de la temperature sur la marche, la duree et la frequence de la caryo- cinese dans le regne vegetal 533 Wilson, H. V., On the development of Manicina areolata 509 Wistinghausen, C. v., Ueber Tracheenendigungen in den Sericterien der Raupen 84 Wolf, M., u. Israel, J., Ueber Reincultur des Actinomyces und seine Ueber tragbarkeit auf Thiere 507 Woodworth, W. M., Contribution to the morphology of the Turbellaria. 1. On the structure of Phagocyta gracilis Leidy 213 Wolters, M., Zur Kenntniss der Grundsubstanz und der Saftbahnen des Knorpels 383 Wrzesniowski, A., Ueber drei unterirdische Gammariden 216 Inhaltsverzeicbniss. XIII Seit« Wyroiiboff, G., Sur un noiiveau microscope propre aux observatioiis ä haute temperatiire 495 Ziehen, Th., Eine neue Färbungsmethode für das Centralnervensystem 385 Zimmermann, K. W., Ueber die Theibmg der Pigmentzellen, speciell der verästelten intraepitlielialen 223 Zoja, L. e R., Intorno ai plastiduli fucsinofili (bioblasti dell'Ai,TMA.\N) . 515 Zoth, O., Versuche über die beugende Structur der quergestreiften Muskel- fasern 200 Verzeichniss der Herreii Mitarbeiter an Band VIII. Prof. Dr. St. Apäthy in Klauseuburg. Prof. Dr. P. Baumgarten in Tübingen. Dr. W. Behrens in Gottingen. Dr. W. Bernhard in Braunschweig. Dr. Böhmig in Graz. Dr. G. Brandes in Halle a. S. Prof. Dr. Brauer in Wien. W. Busse in Freiburg i. B. Dr. A. Ciagliiiski in Warschau. Dr. E. Czaplewski in Tübingen. Dr. S. Czapski in Jena. Prof. Dr. A. S. Dogiel in Tomsk (Sibirien). Dr. L. Edinger in Frankfurt a. M. Dr. B. Feist in Eichberg i. Rheingau. Prosector Dr. Fick in Würzburg. Dr. K. Fiedler in Zürich. Dr. R. Hang in München. Prof, Dr. E. Heiuricher in Innsbruck. Dr. H. He^nking in Göttingen. Prof. Dr. L. Klein in Karlsruhe. Dr. A. Koch in Göttingen. Dr. A. Lendl in Budapest. Dr. Lindau in Münster i. W. Prof. Dr. G. Martinotti in Siena. Prof. Dr. P. Mayer in Neapel. Dr. R. Neuhauss in Berlin. Dr. C. Nörner in Dorotheenthal. xv Dr. M, Nikiforoff in Moskau. Dr. J. Petruschky iu Berlin. F. Pfeiffer R. von Wellheim in Wien. Dr. F. Rinne in Berlin. Dr. J. Schaffer iu Wien. Prof. Dr. P. Schiefferdecker iu Bonn. Dr. P. Schiemenz in Neapel. Dr. J. A. Schilling in Marburg. Dr. E. Schoebel in Neapel. Dr. J. L. C. Schroeder van der Kolk iu Leiden, Prosector A. Stoss iu München. Prof. Dr. R. Thoma in Dorpat. Dr. P. G. Unna iu Hamburg. Dr. E. Viuassa in Lugano. Prof. Dr. A. Wichmaun in Utrecht. Dr. A. Zimmermann in Tübingen. BandVm. Heft 1. Die o-ebräucliliclisten Entkalkuno-smethoden. Eine technisch -histologische Skizze. Von Docent Dr. R. Haüg in München. Seit die histologische Untersuchung der Gewebe des thierischen Körpers dem Auge des Forschers durch immer mehr sich verbessernde Methoden eine Fülle neuer Thatsachen erstehen Hess, hat sich das Be- streben gezeigt, auf möglichst einfache oder schnelle Weise die festesten und härtesten Gewebe des Wirbelthierkörpers , die Knochen in einen Zustand zu versetzen , der ihnen die Möglichkeit der mikroskopischen Untersuchbarkeit verlieh. Für eine Reihe von Untersuchungen konnte es genügen, sich von den. Knochen mühsam dünne Schliffe zu verschaffen; aber dabei stellten sich mancherlei Misslichkeiten ein. Man trachtete deshalb nach Ver- fahren, die auf anderem Wege dies Ziel, vielleicht noch besser, er- reichen konnten. Das Wie dieser Verfahren konnte ja verhältnissmässig viel leichter als in anderen Gebieten der Technik eruirt werden an der Hand der chemisch-physiologischen Daten. Es war bekannt, dass die Knochen einen hohen Procentsatz anor- ganischer Substanz enthielten, die sich hauptsächlich als phosphorsaurer und kohlensaurer Kalk repräsentirt ; man musste also versuchen, die anorganische Substanz von der organischen zu trennen, was durch Einwirkung verschiedener Säuren ganz leicht erreicht werden kann. Durch Behandlung mit Säuren werden die Knochensalze gelöst, es treten an ihre Stelle in Alkohol resp. Wasser lösliche Substitutionspro- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIH, 1. 1 2 Hang: Die gebräuchlichsten Entkalkiingsmethoden. VIII, 1. ducte, und es bleibt der organische Bestandtheil übrig , der sogenannte Knocbenknorpel, welchem, da er biegsam, elastisch, durchscheinend und in dünnen Schichten durchsichtig ist , alle cliarakteristischen Merkmale des Knochens erhalten bleiben in einer der Untersuchung zugänglichen Form. Auf dieser chemisch - physiologischen Grundlage sind alle Entkal- kungsmethoden aufgebaut, und es soll nun der Zweck der folgenden Zeilen sein, die gebräuchlichsten Arten der Entkalkung zusammenfassend vor Augen zu führen, ihre Wirkung sowohl in Bezug auf die jeweilige Dauer und den Modus (ob schonend oder nicht) des Processes als auch bezüglich des zu verwendenden Knochenmateriales (ob fötal, jugendlich oder älter) zu erörtern au der Hand langjähriger, praktischer persön- licher ^ Erfahrung in dieser Hinsicht. Als für alle Entkalkungsarten wohl so ziemlich gleichmässig gültig dürfte, wie ja allgemein bekannt, vorausgesandt werden, dass wir (falls nicht absichtlich ganz frische Objecte untersucht werden sollen für ge- wisse Zwecke) in der Regel die Präparate erst einer Fixations-, eveutuell Härtungsmethode unterwerfen müssen; erst das fixirte Präparat kann, sofern das mikroskopische Bild ein anschauliches, schönes und deut- liches werden soll, dem Entkalkungsprocess überantwortet werden. Allerdings können ja, wie wir bald sehen werden, diese beiden Postu- late durch eine in der geeigneten Weise componirte Flüssigkeit erfüllt werden. Ebenso ist für alle Methoden gleich gültig, dass, sobald die Kalk- salze dem Knochen entzogen sind, und er somit seine schnittfähige Con- sistenz erlangt hat, das nun entkalkte Präparat, da es in Folge des mehr oder weniger langen Verweilens in der betreffenden Flüssigkeit völlig mit dieser imprägnirt, also meist stark angesäuert, manchmal auch noch dazu gefärbt ist (Pikrin, Phloroglucin) , sofort in Wasser, wenn irgend möglich (d. h. wenn es die Zartheit des Präparates zu- lässt) in fliessendem Wasser durch längere Zeit (einen bis zwei Tage) ausgewaschen werden muss, da es sonst für die weiteren Manipulationen, besonders für die gute Aufnahme von Farbstoffen , ungeeignet bleiben würde. Erst wenn die Säure etc. völlig entfernt ist, können wir einen Schritt weiter gehen, das Präparat nachhärten, um es dann der beliebi- gen Schlussbehandlung zuzuführen. *) Als Otologe musste sich der Verf. behufs der Untersuchung des Gehör- organes naturgemäss mehr mit diesen Methoden befassen, als dies in anderen Gebieten vielleicht der Fall ist. VIII, 1. Haug: Die gebräuchlichsten Entkalkungsmethoden. 3 Wir können unter den verschiedenen Metlioden unterscheiden zwi- sclien langsamer, sogenannter schonender, und zwischen schneller Ent- kalkung. Je nach der Concentration und Art der Flüssigkeit, der Tem- peratur des umgebenden Raumes *, erhalten wir langsam oder schnell wirkende Reageutien , und wir wollen jetzt die verschiedenen Methoden besprechen, mit der sogenannten schonenden Entkalkung beginnend. I. Die Chromsäure und ihre Sähe. Die MüLLEK'sche Flüssigkeit (Kalium bichromicum 2*0, Natrium sulfuricum 1"0, Aq. destill. lOO'O) gehört zu den Entkalkungs- flüssigkeiten , in w^elchen mit der Fixiruug und Härtung zugleich die Auflösung der Kalksalze erzielt wird, und zwar geschieht dies hier durch den allerdings sehr geringfügigen Gehalt an freier Chromsäure. Sie kann jedoch bloss zur Entkalkung kleiner knöcherner Gebilde (Gehör- knöchelchen , Knochen von niedereren Vertebraten) oder der Knochen von Embryonen benützt werden, da für ältere Knochen der Procentsatz an lösender Säure ein zu minimer ist, und dadurch einerseits die Decalcination auf geradezu unabsehbare Zeit hinausgeschoben, ander- seits das Präparat durch das übermässig lange Verweilen nicht gerade zu seinem Vortheil verändert werden würde. Die Zeitdauer des Pro- cesses ist an und für sich hier schon eine sehr lange, sich über viele Wochen und Monate erstreckende, selbst bei fötalen Knochen. Etwas beschleunigt kann die Sache werden , wenn man bei dem jedesmaligen (alle 3 bis 5 bis 8 Tage stattfindenden) nothwendigem Wechsel der Flüssigkeit 1 cc Salpetersäure auf 200 bis 300 cc Flüssig- keit zusetzt; trotz alledem bleibt aber die Dauer immer eine lange. Die Elemente des Bindegewebes und der nervösen Organe bleiben recht gut erhalten. Weiter kann unseren Zwecken dienen die reine Chromsäure in 2procentiger Lösung (Thiersch); die Wirkung ist auch hier eine protrahirte. — Eine etwas schneller und dabei auch noch immer sehr schonende Flüssigkeit erhalten wir durch Zusatz von Salzsäure (Ipro- centig), also Chromsäure l'O, Salzsäure 1"0, Aq. destill. lOO'O. Die Resultate sind insbesondere bei jungen Knochen gute, aber man muss bei der Länge der Zeit hier schon die Salzsäurewirkung, auch wenn sie nicht sehr hochgradig ist, mit in den Kauf nehmen. *) Eine Beschleunigung können wir bei allen Methoden erzielen durch Einlegen in den Thermostaten. 1* 4 Hang: Die gebräuchlichsten Entkalkungsmethoden. YIII, 1. Eine andere Composition ist von Waldetee (speciell für die Ent- kalkimg des Felsenbeines) angegeben worden: Die frischen Präparate werden erst in Chromsänre 1"0 : 600*0 fixirt, dann in einer Chromsänre 1*0 : 400*0 nnd 1"0 : 200*0 steigend gehärtet; in der letztgenannten Stärke wird sie nun als Decalcinationsmittel verwendet, in dem bei dem alle 6 Tage stattfindenden Wechsel auf je 100 cc der Lösung 2 cc reine Salpetersäure gegeben werden. Die Dauer der Entkalkung ist ein viertel Jahr und sehr oft noch viel länger, und selbst dann noch kommt es vor, dass in den centralen Parthien noch ungelöste, harte Knochenkerne zurückbleiben. Hinterher wird ausgewaschen, wie gewöhnlich, und mit Alkohol in verschiedener Concentration (bei Lichtabschluss wie bei allen alkoholischen Chrom- nachbehandlungsmethoden) je nach Bedarf weiter gearbeitet. Für sehr zarte (fötale) Objecte kann auch Chromosmiumsäure (Iprocentige Osmiumlösuug 10 cc, Iprocentige Chromsäure 25 cc, Aq. dest. 65 cc) benutzt werden. Auswaschen nachher in TOprocentigem Alkohol im Dunkeln. Die Chromsäuredecalcination repräsentirt im allgemeinen so recht den Typus der langsamen schonenden Entkalkung. Bei allen diesbe- züglich verwendeten Chrompräparaten fallt uns auf, dass, auch trotz des eventuellen Zusatzes von Säuren, die Dauer der Entkalkung eine emi- nent lange, meist sich über Monate erstreckende ist. Dazu kommt noch, was auch gerade nicht zu den Annehmlichkeiten und Vortheilen gehört, dass die sämmtlichen Chromproceduren, sollen sie anders ein gutes Re- sultat zur Folge haben , mit peinlichster Gewissenhaftigkeit ausgeführt werden müssen; hierzu gehört unter Anderem der sehr oft nothwendige Wechsel der Flüssigkeit, das Nachhärten im Dunkeln in Alkohol. Behalten wir das im Auge und berücksichtigen ferner, dass der Gebrauch der Chromsäure und ihrer Salze mit der einzigen Ausnahme ihrer Verwendbarkeit bei der Darstellung der nervösen Centralorgane, der Bulbi und der Verfettungsprocesse eine bedeutende Einbusse erlitten hat gegenüber ihrer in den früheren Zeiten der mikroskopischen Technik geradezu dominirenden Stellung, und zwar geschah das mit vollem Recht, da wir als Ersatz für sie mindestens ebenso gute, meist aber noch besser fixirende und härtende, auch schneller wirkende Reagentien kennen ge- lernt haben , so werden wir , — auch wenn wir ganz und gar ausser Acht Hessen , dass durch die Chromsäure meist fadenartige und netz- ähnliche Gerinnungen , besonders an den zarten Terminalendigungen der nervösen Parthien der Sinnesorgane u. s. w., bewirkt werden, die nur zu leicht Veranlassung zu falscher Deutung geben können — , im VIII, 1. Haug: Die gebräuchlichsten Entkalkimgsmethoden. 5 Grossen und Ganzen die Entkalkimg mittels Chromsäure wohl ziemlich selten anzuwenden Gelegenheit nehmen , um so mehr noch als wir wissen, dass durch den nothwendigen protrahirten Aufenthalt in den Chrorapräparaten die gute Färbbarkeit nicht gefördert sondern geradezu eher geschädigt wird. Verf. hat wenigstens seit einer Reihe von Jahren das Chrom im allgemeinen nur sehr selten (bloss bei nervösen Parthien), zum Entkalken speciell nie mehr angewandt. Wir kommen auf andere Weise besser und schneller zum Ziele , ausser wir haben absichtlich für unser Präparat so viel Zeit und Müsse , diese schonendste und lang- wierigste Methode zu benützen. II. Pikrinsäure. Die Pikrinsäure, die zu unserem Zwecke in gesättigter, wässeriger Lösung verwandt wird , wirkt zugleich härtend , fixirend , färbend und entkalkend; es tritt weder Schrumpfung der. Gewebe noch Coagulation des Albumins ein, und erhalten daher die Präparate eine sehr schöne, angenehme Schnittconsistenz. Die Entkalkung ist eine zarte, gleich- massige, aber auch wieder sehr lange dauernde (Monate). Die Tingi- bilität des ausgewaschenen und in Alkohol (bis zu einem leicht gelb- lichen Ton) entfärbten Stückes ist besonders für Carmine eine sehr gute 5 wir bekommen scharfe, deutlich differenzirte Bilder. Wesentlich beschleunigt kann der Process hier werden durch Hin- zufügen von Salpetersäure (3 bis 5 Procent); die Entkalkung ist aber auch noch eine sehr schonende und, wie die obige, besonders für fötale und weiche Knochen angezeigt. Die KLBiNENBERo'sche Pikrinschwefelsäure kann, wie ja überhaupt alle Schwefelsäure Verbindungen, für Decalciuationszwecke nicht genommen werden wegen der Bildung der beinahe unlöslichen schwefel- sauren Kalksalze (Gypse), die in prismatischen Säulen krystallisiren und durch das NicoL'sche Prisma als deutlich doppelbrechend erkenn- bar sind. III. Milchsäure. Milchsäure lOprocentig und in noch stärkeren Concentrationsgraden wirkt gut, schonend, ziemlich viel schneller als Pikrinsäure und ist so- wohl für embryonale und kleinere Knochen als auch für ältere kalk- haltige Gewebe anwendbar. 6 Hang: Die gebräuchlichsten Entkalkungsmethoden. VIII, 1- IV. Phosphor säure. Die Phosphorsäure kann in 10- bis löprocentiger Lösung ge- nommen werden. Dauer relativ lange. Färbbarkeit hier keine so gute, absolut reine mehr. V. Hohessig. Acidum pyrolignosum purum ist in unverdünntem Zustande beson- ders bei fötalem Knochengewebe und bei niederen Thieren gut anwend- bar, ebenso bei Knorpel-, Knorpelknochengeschwülsten-, er wirkt auch zugleich etwas erhärtend. Die Decalcination ist eine massig langsame. Für erwachsene Knochen eignet er sich nicht gut. VI. Salzsäure. Die reine, d. h. die concentrirte, nicht rauchende Chlorwasserstoff- säure kann für osteologische Zwecke lediglich zur Isolirung der Primi- tivröhrchen der Zähne benützt werden. Sonst wurde sie gewöhnlich in einer wässerigen 0"5- bis lOprocentigen Lösung gehandhabt; diese Mi- neralsäure gehört schon zu den ziemlich energischen Reagentien, und mittels der höheren Concentrationsgrade gelingt es leicht in kurzer Zeit, kleine Knochen in einigen Tagen, grössere resp. härtere entsprechend länger, völlig schnittfähig zu bekommen. Mit ihr, d. h. mit ihren höher procentuirten Lösungen haben wir das Gebiet der schonenden, lang- samen Entkalkung verlassen und sind in das der schnellen eingetreten; bei 0"5- und einprocentiger ist sie natürlich noch ziemlich langsam. Es macht sich aber hier während der Dauer der Einwirkung der wässerigen Lösung ein Uebelstand ausserordentlich fühlbar: die Prä- parate verändern sich stark in Folge der Quellung der Grundsubstanz des Knochens, deren Structur, sowie die der Haupt- und Speciallamellen gleich der der Primitivröhrchen gar nicht mehr zur Beobachtung ge- langen. Um diesen Uebelstand wenigstens theilweise zu paralysireu hat man nun nach v. Ebnee's Vorschlag eine wässerige Kochsalz-Salzsäure- lösung genommen, bei deren Anwendung die berührten Verhältnisse besser erhalten bleiben. Zu diesem Zwecke versetzen wir 100 cc kalt gesättigter Na Gl -Lösung mit 100 cc destillirtem Wasser und fügen dazu 4 cc Salzsäure ; in diese Lösung werden die Kochen gebracht und nun wird täglich 1 bis 2 cc Salzsäure weiter zugesetzt , so lange bis VIII, 1. Hang: Die gebräiichliclisten Entkalkungsniothoden. 7 die Knocheu ganz weich sind. Man kann sie nun in halb Kochsalz halb Wasser auswaschen ; dabei bekommt die Lösung durch Lakmus- papier deutlich nachweisbare saure Reaction, die durch Ammoniak neu- tralisirt werden kann. Wenn irgend möglich ist aber diese Ammoniakneutralisatiou (wegen der schlechten Haltbarkeit der Farbstoffe, wenigstens nach meinen Er- fahrungen) zu ersetzen durch einfaches Auswaschen; sie lässt sich gerade so gut bewerkstelligen, dauert allerdings etwas länger, was übrigens, da ja die ganze Procedur an und für sich zwar schonend, aber langsam vor sich geht, nicht viel mehr bezüglich der Zeit prota- hirt, dafür aber dann sehr dauerhafte und schöne Bilder liefert. Da nun aber durch das lange Verweilen in dieser wässerigen Lösung doch immer Veränderungen sich leicht einstellen können, so wurde (v. Ebnkr) noch eine alkoholische Lösung angegeben, die bedeutend angenehmer und besser ist. Sie besteht aus: Acidum rauriaticum 2'5 Alkohol 5000 Aq. dest 1000 Chlornatrium 25 oder wie ich sie mir umgemodelt habe: Acidum muriaticum TO — 5"0 Alkohol 70-0 Aq. dest 300 Chlornatrium 05 Die Entkalkuug ist auch hier noch eine langsame, aber die Structurverhältnisse bleiben sehr natürlich erhalten. Will man übrigens nicht so lange warten, so hindert nichts, den Säurezusatz auf 5 bis 10 Procent zu erhöhen ; mit ihm natürlich auch den Kochsalzgehalt bis auf die Hälfte des Säurezusatzes ; dadurch wird die Sache sehr beschleunigt. Das Resultat ist bei gutem Auswaschen ein ziemlich befriedigendes. VIT. Salpetersäure. Reine, nicht rauchende Salpetersäure wird analog der Salzsäure zur Isolirung von Knochenkörperchen, Zahnröhrcheu benutzt. Sonst benützen wir für allgemeine Entkalkungszwecke wässerige Lösungen in der Concentration von 3 bis 9 Procent. In diesen, besonders den 9pro- centigen Lösungen geht die Entkalkung rasch vor sich, und es bleiben die Structurverhältnisse entschieden noch reiner erhalten als bei der Salzsäure ; immerhin tritt aber auch hier bei grösseren Knochen und 8 Hang: Die gebräuchliclisten Entkalkungsmethoden. VIII, 1. dem deshalb nothwendig werdenden längeren Verweilen in der blos mit Wasser verdünnten Säure doch einige Alteration ein. Wir werden deshalb auch hier besser thnn, etwa 0'5 Procent NaCl zuzufügen; noch besser aber kommen wir zum Ziele, wenn wir eine alkoholische Solution uns bereiten; wenigstens hat diese dem Verf. immer sehr befriedigende Resultate ergeben ; eventuell können wir auch hier noch etwas Kochsalz zugeben. Die vom Verf. benützte Lösung besteht aus: Acidum nitricum pur. (spec. Gew. 1-5 bis 1-2) . . 30—9 0 (300-900) Alkohol, absolut, 700 (7000) Aq. destill 30-0 (300-0) [Chlornatrium 025 (25)] Diese Lösung entkalkt schnell, doch schonend, erhält alle Elemente und kann sowohl für fötales und jugendliches als für erwachsenes nor- males und pathologisches Knorpel- und Knochenmaterial in gleichem Um- fange benutzt werden. Gut ist es, vorher in Sublimat fixirte Präparate dazu zu verwenden, indess ist auch jede andere Fixation gut zulässig. Temperatur im Brütofen beschleunigt nach Wunsch. Die Färbbarkeit ist bei gutem Auswaschen für alle Farbstoffe in exquisiter und dauerhafter Weise erhalten (Doppel- und Mehrfachtinctionen geben geradezu wunder- bare Bilder). VIII. Die FhlororßucinenfkaVning. Diese Methode ist die jüngste unter den Entkalkungsmethoden, und es kann mittels dieser in kurzer Zeit gut entkalkt werden ; sie übertrifft, besonders was Schnelligkeit anbelangt, alle anderen, dabei bleibt aber auch die Structur völlig erhalten, nur das Blut zeigt sich stark verändert. Das Phloroglucin kann selbst als Derivat des Resorcins wohl schwerlich aus eigener Initiative decalcinirend wirken ; es löst an und für sich die Knochensalze nicht, wohl aber übt es einen sehr stark schützenden Einfluss auf alle Gewebe aus, so dass die kalklösenden starken Mineralsäuren Salz- oder Salpetersäure in Concentrationen an- gewandt werden können, die wir sonst unseren Präparaten im allge- meinen nicht zuzumuthen wagen. Die erste Anwendungsweise zu un- serem Zwecke war nach Angabe Andeek's* die, dass ungefähr eine Messerspitze Phloroglucins in ein Liter warmen Wassers gelöst und dann je nach dem Härtegrade der Knochen 20 bis 40 Procent Salzsäure ') Anueke, J. , Das Resorcinderivat Phloroglucin (Centralbl. f. d. Med. Wiss. 1884, No. 12, 33, p. 193, 579; cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 375, 539). VIII, 1. Hang: Die gebräuchlichsten Entkalkungsmcthotlen. 9 zugegeben wurden. Es gelang auch dadurch in der That oft, Knochen in kürzester Zeit weich zu bekommen, aber es zeigten sicli auch viele Erfolge absolut negativer Natur. Es hat dies zum Theil wohl seinen Grund, wie ich schon ander- orts ^ bei Einführung der Modification dieser Methode betont habe, ein- mal darin, dass die Procentverhältnisse sowohl der Säure- als auch des Phloroglucingehaltes nicht in bestimmten Daten gehalten waren, ins- besondere aber war die Weise, das Phloroglucin zu lösen, nicht die für den Zweck vorth eilhafteste. Das Phloroglucin löst sich nämlich in Wasser sehr schlecht, und die jetzt durch Säurezusatz entstehenden Umsetzungen sind nicht stabil, sie unterliegen vielfachen Veränderungen, sodass die Wirkung der Lö- suug eine schwankende, inconstante war. Es lassen sich aber gut sichere und schöne Resultate erzielen, sowie man die Lösungsverhält- nisse in genaue Procentsätze verwandelt und den Lösungsmodus um- ändert. Auf diesen Grundsätzen beruht die Modification. Es wird näm- lich das Phloroglucin nicht in ungefährer Gewichtsangabe im Wasser gelöst und hinterher Säure in ungefähr passendem Verhältniss zugefügt, sondern die Säure in bestimmtem Verhältniss mit einem bestimmten Gewichtstheil Phloroglucin in der Wärme verbunden; das Phloroglucin löst sich in der erwärmten Säure unter Bildung eines (salpeter-) sauren Salzes, und erst das neu gebildete Salz wird ebenfalls in einem bestimmten Volumen Wasser gelöst erhalten. So bekommen wir eine controllirbare Entkalkungsflüssigkeit, die ausserordentlich schnell und sicher wirkt, indem wir hier meist bloss Stunden und Tage brauchen zu einem Processe, der sonst Wochen und Monate in Anspruch nimmt; sie schliesst aber trotz dieser Rapidität bei- nahe keine Schädigung der Gewebe in sich; sie bleiben alle in jeder Hinsicht gut untersuchbar. Was die bei dem Verfahren zu verwendendende Säure anbelangt, so kann wohl Salzsäure benutzt werden; besser aber, d. h. schonender als sie wirkt entschieden die Salpetersäure; auch muthet sie uns keine so sehr grossen Säureprocentsätze zu, wie dies bei Salzsäure oft der Fall sein müsste. Die Lösung wird nun wie folgt bereitet: Man erwärme 1 g Phlo- roglucin in 10 cc reiner, nicht rauchender Salpetersäure (1"4 spec. Gew.) langsam und sehr vorsichtig unter leichtem Schütteln; bald zeigt ») Haug, R., Ueber eine neue Modification der Phloroglucinentkalkungs- methode (Centralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. II, 1891, No. 5 p. 193). 10 Haug: Die gebräuchlichsten Entkalkungsmethoden. VIII, 1. sich eine sehr lebhafte Reaction, unter heftigem Zischen bildet sich das salpetersaure Salz von tief dunkelrubinrothem Aussehen. Die Lösung ist und bleibt klar. Diese salpetersaure Phloroglucinverbindung (wenig- stens halte ich sie für eine solche) wird nun mit 50 cc destillirtem Wasser verdünnt, wobei die Farbe natürlich heller wird. Da nun aber das eine geringe Quantität Entkalkungsflüssigkeit wäre, so geben wir noch 50 cc Wasser weiter zu, müssen jetzt aber ebenfalls wieder 10 cc Säure zusetzen; dieser Procentsatz (also 20 Procent) muss auch ferner, wenn wir noch mehr Flüssigkeitsmenge haben wollen , beibehalten wer- den, und wir können bis zu 300 cc so fortfahren, von da ab aber sollte wieder eine neue Stammlösung angesetzt werden , weil über das ange- gebene Quantum die schützende Wirkung das Phloroglucins nicht mehr ganz sicher zu sein scheint. In eine solche 20procentige Salpetersäure-Phloroglucinlösung wird das gut fixirte und abgewaschene Präparat eingelegt, und nun be- steht unsere Hauptaufgabe in einem sehr häufigen Controlliren ; denn es geht, wie gesagt, der Entkalkuugsprocess oft sehr rasch vor sich, so dass z. B. fötale oder jugendliche Knochen oder Knochen der nie- deren Wirbelthiere schon innerhalb einer halben Stunde völlig weich sind; grössere, ältere und härtere Knochen (Femur, Schläfenbein vom Menschen, Aflfen etc.) nehmen mehr Zeit in Anspruch, aber meist ist die Dauer bei nicht zu hartem Material nach Stunden zu berechnen. (Na- türlich bloss bei kleinen Stücken.) Ein Mehr als 20procentige Lösung ist wohl kaum oft nothwendig; nur bei dem allerhärtesten Gewebe der Zähne etc. zieht sich der Process etwas mehr in die Lunge oder wir müssen hier, falls wir absolut schnell entkalken wollen , 35procentige Salpeter- oder 45procentige Salzsäure nehmen. Das Präparat höhereu Temperaturen auszusetzen ist im allge- meinen nicht räthlich, es genügt die Zimmertemperatur. Nachdem wir uns nun überzeugt haben, dass die Decalciuation, die in allen Theilen eine völlig gleichmässige ist, zu Ende gebracht ist, bringen wir das bei Salpetersäure leicht röthlich imbibirte (besonders deutlich treten schon während der Einwirkung die Knochenbälkchen hervor, sie stechen gerade durch die röthliche Farbe von dem übrigen Knochengewebe, be- sonders pathologisch verändertem ab) Stück womöglich in fliessendes Wasser und lassen es da ca. 2 Tage lang ganz gründlich entsäuern, was hier noch nothwendiger ist als bei den anderen Methoden. Befolgt man dies, so erhält man ausserordentlich scharfe, deut- liche, nach jeder Richtung gut tingirte, nicht abblassende (seit zwei Jahren unverändert!) Bilder. VIII, 1. Hang: Wiiike zur Durstellung von Präparaten etc. 11 Die Nachbehandlung des entkalkten Präparates ist die gewöhn- liche; Einbettung in Paraffin oder Celloi'din. Statt der Salpetersäure lässt sicli in demselben Lösungsmodus Salzsäure verwenden, der Procentsatz muss aber meist ein höherer sein (30 Procent}. Die erwärmte Salzsäure-Phloroglucinlösung ist hell bern- steingelb; das sonstige Verfahren ist das gleiche, nur sollte bei Salz- säure ein Kochsalzzusatz von 0'5 Procent gemacht werden. Ausser dieser rapiden Entkalkung können wir aber auch noch eine langsamere in Anwendung bringen; zu diesem Zwecke verwenden wir entweder rein wässerige 2- bis 5procentige Lösungen oder Phloroglucin 10 Acidum nitricum 50 Alkohol 700 Aq. destill 300 Die letztere ist eine sehr angenehme Composition, die nicht zu schnell, aber sehr gut und schön zum Ziele führt. [Eingegangen am 20, März 1891.] Winke zur Davstellung" von Pi-äparaten von intra vitain mit Anilinfarbstoften injicirten Geschwülstpartliien. Von Docent Dr. B. Hang in München. Die von Mosetig-Moehof angegebene Behandlung der malignen Geschwülste (Karcinome, Sarkome), die im wesentlichen darin besteht, dass wässerige Lösungen chemisch absolut reiner und daher völlig un- giftiger Auiliufarbstoffe in bestimmter Concentration (1 : 500 bis 1 : 200) in das Parenchym der Tumoren mittels der Punctionspritzc hinein- gespritzt werden, hat uns bezüglich der histologischen Verarbeitung des Materiales vor einige Schwierigkeiten gestellt, die eine eigenartige Umänderung der technischen Manipulationen verlangen , gleich wie die auf ähnlichen Grundsätzen, nämlich auf intravenöser Injection, beruhende Färbung der Ganglienzellen etc. intra vitam, falls wir histologisch ver- 12 Haug: Winke zur Uarstellimg von Präparaten etc. VIII, 1. wertlibare, nicht blos Moment- sondern Dauerpräparate erzielen wollen. Für die intra vitam mit Methylenblau gefärbter Ganglienzellen ging man bisher in der Weise vor, dass man sie, wenigstens eine allerdings blos kurze Zeit lang, in pikrinsaurem Ammoniak oder Jodjodkaliumlösung oder in concentrirter wässeriger Ammoniaklösung, zur Hälfte mit Glycerin ver- setzt, zu conserviren versuchte. Dabei konnte man die Nervenendigung im Muskel, die Spiralfasern der Ganglienzelle, die Nervenfibrillen gut verfolgen, aber in kurzer Zeit war das werthvolle Präparat, das freilich keine andere Contrastfärbung, die gerade d a zur Deutlichkeit um so nothweudiger gewesen wäre, er- halten konnte, zu Grunde gegangen. Durch diese obenerwähnten Versuche zur Bekämpfung der malignen Geschwülste , bei welcher also zum ersten Male beim Menschen in vita farbige Massen in den Organismus gegeben wurden (ich sehe natürlich hier ab von dem bei Tätowirung in das Hautgewebe und eventuell in die Lymphbahnen importirten meist ungelösten, blos präcipitirten Farb- stoffen) , werden ganz analoge Verhältnisse geschaffen , und es soll nun im Folgenden der Versuch, das Problem zu lösen, angegeben wer- den, durch welchen es dem Verfasser gelang, auch von intra vitam ge- färbten Stücken Präparate anzufertigen , die der dauerhaften Conser- virung sowohl als auch der Gegenfärbung und mithin auch der besseren Deutbarkeit fähig sind. Das Verfahren mit dem Namen einer Methode zu bezeichnen, möchte sich Verf. nicht unterfangen; es soll, wie gesagt, lediglich ein Versuch sein, auf dessen Grundlage vielleicht weiter gebaut werden kann. Die intra vitam applicirten Farbstoffe sind zumeist wäs- serige Lösungen von Methylviolett etc. (wenigstens für chirurgische Zwecke) und Methylenblau (bei Nerven). Wir bekommen also, wenn wir ein Stück in solcher Geschwulst dem Lebenden excidiren, kürzere Zeit nach Einy^leibung des Farbstoffes*, ein mehr oder weniger stark blauviolett gefärbtes Präparat, das wir nicht nach den gewöhnlichen Maassregeln behandeln köimen , wenn wir die Einwirkung des Farb- stoffes auf die Geschwulstzellen verfolgen wollen. Ich sehe natürlich hier ab von der Verfertigung von Gefrierschnitten ; aber auch sie lassen sich nicht ohne weiteres zu guten Präparaten, wie ja das überhaupt bei ihnen nicht leicht der Fall ist, umarbeiten : Vor Allem ist das eminente Hinderniss darin gelegen, dass wir Stücke vor uns haben, die mit einem Farbstoff vorgefärbt sind, der in dem in der mikroskopischen Technik *) Wartet man etwas zu lange mit der Entfernung eines Probestückes, so ist der Farbstoff resorbirt (oft schon nach 5 Tagen). VIII, 1. Hang: Winke zur Darstellung von Präparaten etc. 13 beinahe unumgänglich uothwendigen Alkohol sofort sich löst, so dass wir also den Alkohol sowohl bei der Fixatur als bei der Härtung, Ein- bettung, Färbung und Einschliessung völlig vermeiden müssen. Der Alkohol muss bei der ganzen Präparation (bis auf eine Momentausnahme) wegbleiben. Es muss das Präparat in derselben Flüssigkeit fixirt und vollständig schnittfähig erhärtet werden. Wir könnten dazu z. B. Erlicki , Pikrinsäure und die vom Verf. angegebene Härtung mit Cuprum aceticum und Kalium bichromicura verwenden, was auch bei nervösen Organen von Vortheil ist. Für die Geschwulstuntersuchungen nehmen wir aber viel besser eine kalt gesättigte Sublimatlösung. In diese werden die noch lebens- warmen, mehr oder weniger bläulich tingirten Stücke von nicht mehr als 0-75 cm Seite eingelegt und bis zu ihrer völligen Erhärtung gelassen, bei Lichtabschluss, ungefähr 24 Stunden. Die Entfernung der im Prä- parate suspeudirten Sublimatkrystalle dürfen wir nicht mit Alkohol be- werkstelligen. Wir benutzen dazu eine wässerige Jod-Jodkalium-Gly- cerin-Composition : Tinctnra jodi 2'0 Kali jodat 1"0 Aq. destill 500 Glycerin 500 In diese leicht gelblichbraune Lösung bringen wir das Präparat und erneuern so lange die angewendete Flüssigkeitsmenge (die ver- brauchte ist natürlich jedesmal wegzugiessen), bis die Färbung niclit mehr schwindet, also die Sublimatreste entfernt sind. Der durch die Jodtinctur mitgebrachte Alkoholgehalt ist so gering- fügig, dass er nicht in Betracht kommt. Jetzt legen wir das Stück in reines Glycerin, dem wir noch auf 100 cc 2 g gebranntes wasserfreies Kupfersulfat zufügen; darin bleibt es 24 bis 48 Stunden. Nun soll das Präparat eingebettet werden ; unsere sonstigen so werthvollen Paraffin- und Celloidinmethodeu können wir nicht anwenden. Wir nehmen jetzt entweder den Glycerinleim, Transparentseife (Eiweiss ist nicht zu gebrauchen) zur Durchtränkung, besser aber wir um- giessen das Präparat mit ziemlich hartem Paraffin ; ehe wir diese Um- giessung machen, tauchen wir das Object auf blos einen Moment in ganz wasserfreien Alkohol (der einzige Moment , in dem diese Flüssig- keit angewendet wird) und lassen es leicht abtrocknen. Wollen wir diese Umgiessung nicht machen, so lässt sich das Präparat mit dickem Leim auf Kork befestigen oder in Klemmleber schneiden. Das Schnei- den erfolgt jetzt unter halb Wasser, halb Glycerin. Klinge und Prä- 14 Hang: Winke zur Daistellung von Präparaten etc. VIII, 1. parat müssen gut befeuchtet bleiben , weil sonst die an und für sich difficilen Schnitte völlig zerreissen ; die Schnitte werden sofort mit dem Pinsel in Wasser gebracht. Die nun folgende Färbung wird sich am zweckmässigsten, da wir ein partiell blau vorgefärbtes Stück vor uns haben, als Contrastfarbe an Carminsorten halten. Für alle Carminfärbungen hier ist gleichmässig zweckdienlich, die Schnitte, ehe sie in die Farblösung gebracht werden, erst auf ca. eine viertel Stunde in eine gesättigte Lösung von Lithium car- bonicum einzulegen und aus dieser dann nach leichtem Abspülen in die Farbe zu übertragen. Wollen wir das Präparat einfach gefärbt bekommen, so nehmen wir Alauucarmiu oder Cochenille. Viel deutlicher und schöner wird aber das Bild durch Doppeltinction ; wir setzen zu diesem Behuf die Schnitte in guten uns nach seiner Färbungsintensität bekannten neu- tralen Carmin bis beinahe zur DifFasfärbung ; nun erwarten wir in mit Essigsäure angesäuertem Wasser die meist schon mit freiem Auge wahr- nehmbare Differenzirung. Sobald sie erfolgt ist, bringen wir die Schnitte in Glycerin und Wasser zu gleichen Theilen und bewirken hier die Doppeltfärbuug durch Zusetzen von gesättigter wässeriger Pikrinsäure- lösung ; ist dies genügend geschehen , so wird der Schnitt in reines Glycerin übergeführt, dem ebenfalls noch eine Spur Pikrin beigefügt ist, mit Deckglas versehen und das letztere mit Wachscomposition um- randet. Natürlich lässt sich auch Pikrocarmin verwenden (oder Magnesia- carmin); sehr schöne deutliche Bilder, fast noch schärfer als mit Ammo- niakcarmin , erhalten wir durch den vom Verf. angegebenen hellrothen Boraxcarmin *, bei dem wir erst stark überfärben, dann, statt wie zuerst in Salzsäurealkohol, blos in 0"5procentiger wässeriger Salz- oder Oxal- säure differenziren und zum Schlüsse wieder die Glycerin-Pikrinprocedur machen. Das Resultat eines gut gelungenen Präparates ist dann eine Dreifachfärbung, wir sehen deutlich, wie sich der intra vitam applicirte blaue Farbstoff zu dem Geschwulstgewebe verhält, ob er, wie es in früheren und kurz nach derinjection untersuchten Stadien der Fall, sich längs der Gefässbahnen in das gelbe Stroma vertheilt, oder ob er in die Zellen selbst vorgedrungen ist, nnd welche Einwirkung er auf das Sein der epithelioiden Zellen selbst ausübt, indem noch bei lebenswarm fixirten Stücken der Einfluss auf die Karyokinesen nicht zu verkennen ist. War die Injection schon längere Zeit vorher gemacht und öfters erneuert worden, so können wir den Involutionsprocess verfolgen, wir ') Haug, R., Einige empfehlenswcrthc Tinctionsmethoden (Diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 151). VIII, 1. Dogiel: Ein Beitrag zur Farbenlixirung etc. 15 können die vom Farbstoff wiederholt berührten Parthien vergleichen mit den noch ganz und mit den relativ intacten; wir können Schrumpfungs- erscheinungen finden , am deutlichsten an den epithelioiden Zellen der Karcinome. — Gerade so kann sich das Verfahren gestalten, wenn wir Stücke des centralen Nervensystems untersuchen wollen; nur machen da die Härtung etc. noch mehr Schwierigkeiten. Wollen wir das Präparat vor der Einbettung in toto färben, so lässt sich das natürlich ebenfalls ausführen mit einigen Schwierigkeiten. [Eingegangen am 20. März 1891.] Ein Beitrao' zAir Farbenfixiruno' von mit Metlivlenblau tingnrten Präparaten. Von A. S. Dogiel, Professor der Histologie an der Universität Tomsk (Sibirien). Im Laufe von beinahe vier Jahren mit der Färbung der Nerven durch Methylenblau beschäftigt , habe ich ^ vorgeschlagen , zur Fixirung der bereits gefärbten Präparate eine gesättigte wässerige Lösung von pikrinsaurem Ammoniak anzuwenden. Seit jener Zeit haben bereits viele Forscher meine Fixirungsmethode mit Erfolg benutzt, denn sie liefert in der That sehr befriedigende Re- sultate, und es ist noch nicht gelungen, wenigstens bis auf den heutigen Tag, dieses Verfahren durch ein anderes zu ersetzen. Neulich hat M.Law- DOwsKY 2 auf wässerige, gesättigte Pikrinsäurelösung als Fixirungsmittel hingewiesen mit der Behauptung, dass dieselbe in der Anwendung als gleichwerthig mit pikrinsaurem Ammoniak zu betrachten sei. ') AiiNSTEiN, C, Die Methylenblaufärbung als Mstologische Methode (Anat. Anz. Bd. II, 1887, No. 5 p. 125 u. No. 17 p. 551; cfr. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 84, 372). — Dogiel, A. S., Methylenblautinction der motorischen Nervenendigungen in den Muskeln der Amphibien und Reptilien (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXV, 1890, p. 305; cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 509). 2) Lawdowsky, M., Weitere Beobachtungen über die Nervenendigungen auf Grundlage der Methode ihrer Tinction bei Lebzeiten (Arb. d. k. Acad. d. Wiss. zu St. Petersburg Bd. LXI, No. 2, 1889 [Russisch]). 16 Dogiel: Ein Beitrag zur Parbentixirung etc. VIII, 1. Mit Rücksicht auf die Erhärtungseigenscliaften der Pikriusäure hielt ich dieselbe für ganz besonders geeignet zum Fixiren der Färbung in solchen Geweben, die nachher zur Anfertigung von Schnitten dienen sollen; bei mehrfacher Anwendung dieser Säure zu genanntem Zweck habe ich mich jedoch überzeugt, dass sie in beträchtlichem Grade das bereits gefärbte Gewebe entfärbt, und dass ausserdem das Gewebe selbst unter dem Einfluss von Pikrinsäure wenig durchsichtig wird und einen schmutzartigen Schimmer annimmt, wodurch es unmöglich wird, nicht nur verschiedene Membranen, wie Hornhaut, Netzhaut u. dergl., sondern auch dickere Schnitte von Geweben in toto zu untersuchen. Nachdem es mir gelungen, eine vollständige Färbung von Nerven in der Hornhaut, in den Muskeln und anderen Geweben zu erreichen, habe ich vielfach versucht, die erhaltene Nerventinction durch Pikrinsäure- lösung zu fixiren, und bei Untersuchung der so bereiteten Präparate in Glycerin habe ich stets wahrgenommen , dass ein beträchtlicher Theil von Nervenelementen entfärbt wurde. Die Entfärbung der mit Methylen- blau tingirten Nerven beim Fixiren derselben durch Pikrinsäure wird aller Wahrscheinlichkeit nach dadurch verursacht, dass diese Säure bei weitem schwieriger das Gewebe durchtränkt als eine Lösung von pikrin- saurem Ammoniak. Vor kurzem haben S. Mayer ^ und G. Retzius '^ vorgeschlagen, statt wässeriger eine Glycerinlösung von pikrinsaurem Ammoniak, eine sogenannte Ammonium-Pikrat- Glycerin-Mischung als Fixirungsmittel zu gebrauchen. Ein derartiges Gemisch habe ich bereits zu Anfang meiner Studien über Nerventinction durcli Methylenblau anzuwenden versucht. Meiner Erfahrung nach verdient jedoch das erwähnte Gemisch in keiner Weise, einer wässerigen Lösung von pikrinsaurem Ammoniak bevorzugt zu werden : im Gegentheil — unter Einwirkung desselben wird die Nerventinction blass und verschwindet sogar stellenweise vollständig, worauf auch G. Retzius hingewiesen hat, und weshalb er empüehlt, die Mischung zum Präparat vorsichtig hinzuzufügen, und zwar so, dass man zunächst die Ränder des Präparates mit kleinen Tropfen betupft und erst darauf diese Tropfen über die Oberfläche des letzteren ausbreitet. Eine Glycerinlösung von pikrinsaurem Ammoniak durchtränkt nach meinen Beobachtungen die Gewebe bei weitem scliwieriger als eine wässerige Lösung. In solchen Fällen , in denen wir diese Lösung zur ') Mayer, S. , Beiträge zur histologischen Technik. I Die Methode der Methylenblaufärbung (Diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 422). '^) Retzils, Gr., Internat. Monatsschr. f. Anat. u. Physiol. Bd. VII, H. 8, 1890. VIII, 1. Dogiel: Ein Beitrag zur Farbenfixirung etc. 17 Fixlrung der Nerventinction bei gewissen dicken Membranen oder Schnitten irgend eines Organes anwenden, verschwindet daher die Fär- bung von Nervenelementen in tiefen Schichten des zu untersuchenden Objectes früher, als Ammoniumpikratlösung dort hineinzudringen im Stande ist. Die Anwendung der erwähnten Mischung als Fixirungs- mittel für tingirte Nerven muss, wie mir scheint, ganz besonders ver- mieden werden, falls man das zu färbende Mittel behufs Tinction direct in das Blut des Thieres eingeführt hatte. In solchen Fällen tritt zwar die Nervenfärbung sehr sclinell ein, verschwindet jedoch eben so schnell und muss deshalb möglichst bald tixirt werden, und dazu eignet sich viel besser wässerige Lösung von pikrinsaurera Ammoniak. In einer solchen Lösung ist es — unabhängig von ihrem grossen Durchtränkungs- und Fixirungs-Vermögen — am geeignetsten, das betretfende Gewebe während eines grösseren Zeitraumes, etwa 18 bis 24 Stunden und sogar länger liegen zu lassen. Nachdem die Färbung fixirt ist, überträgt man das Präparat in chemisch reines, säurefreies Glycerin. Das so behan- delte Präparat giebt gewöhnlich eine gewisse Menge von pikrinsaurem Ammoniak an das Glycerin ab , wodurch seine Tinction mehr oder weniger gesättigt gelb wird. Das Vorhandensein einer gewissen Menge von pikrinsaurem Ammoniak in Glycerin ist ebenfalls als eine Bedin- gung zu betrachten, die die Erhaltung der Nervenfärbung auf die Dauer begünstigt. Bei Färbung von Nerven in einem beliebigen Gewebe durch un- mittelbare Einwirkung von Methylenblaulösung gelingt es häufig , eine so intensive Tinction von Nervenelementen (Nervenzellen, Achseucj^Iin- der von Nervenfasern u. dergl.) zu erreichen, dass dieselben dunkelblau,' fast schwarz erscheinen. Falls wir in derartigen Präparaten die Fär- bung zu fixiren beabsichtigen , ist es am zweckmässigsten , dieselben während einer ziemlich langen Zeit — 24 Stunden und auch mehr — in wässerige Lösung von Ammoniumpikrat zu übertragen, da sonst nach dem Einlegen des Präparates in das Glycerin die Färbung sehr bald verschwinden wird. Es muss ausserdem hervorgehoben werden, dass überhaupt die mit Methylenblau tingirten und auf oben angegebene Weise fixirten Präpa- rate unter keiner Bedingung einer langandauernden Einwirkung von Sonnenlicht ausgesetzt werden dürfen, da durch dasselbe die Farbe immer blasser wird und schliesslich vollständig verschwindet. Wird die Methylenblaunerventinction nach meinem Verfahren mit allen oben angegebenen Cautelen fixirt, so erhält sie sich ohne irgend welche Veränderungen während einiger Jahre; ich besitze viele und Zeitschr. f. wiss. Miki-oskopie. VIII, 1. 2 18 Dogiel: Ein Beitrag zur Farbenfixirung etc. VIII, 1. verschiedenartige solche Priiparate , die sich bis auf den heutigen Tag vorzüglich gehalten haben , obgleich sie bereits vor etwa drei Jahren angefertigt wurden. In gewissen Fällen ist jedoch die Fixirung vermittels Ammonium- pikratlösung mit manchen Unbequemlichkeiten verbunden , denn die Gewebe werden unter dem Einfluss dieses Reagenz aufgelockert, wobei das die Oberfläche der zu untersuchenden Organe bedeckende Epithel sich löst, und so die Erforschung der Intraepithelialnerven in bedeuten- dem Maasse erschwert wird. Ausserdem wird das Gewebe selbst zu- weilen allzu durchsichtig, und schliesslich tritt die Markscheide der Nervenfasern nur undeutlich hervor, so dass markhaltige P^asern nur mit Hilfe der RANviEK'schen Schnürringe zu unterscheiden sind, wo die Achsencylinder sammt ihren Verdickungen sich sehr intensiv färben. Um den angedeuteten Nachtheilen aus dem Wege zu gehen , ver- suchte ich schon vor längerer Zeit, zur Fixirung ein Gemisch anzuwen- den, welches aus 100 cc gesättigter wässeriger Ammoniumpikratlösung und 1 bis 2 cc einer einprocentigen Osmiumsäurelösung besteht. Dieses Gemisch hat vor der gewöhnlichen Ammoniumpikratlösung den grossen Vorzug, dass es erstlich die Gewebe ein wenig erhärtet und vorzüglich conservirt, und zweitens, dass es die Markscheide der Nervenfasern schwarz färbt. Ausserdem wird das Vermögen, die Gewebe aufzuhellen, bei der Ammonium-Pikrat-Osmiumsäure-Mischung nicht aufgehoben , so dass man dieselbe zur Fixirung und Untersuchung von verschiedenen dickeren Membranen (Hornhaut , Netzhaut u. dergl.) , Muskeln u. s. w. in toto anwenden kann. Wenn man die sympathischen Ganglien beim Frosch durch Methy- lenblau tingirt und darauf die erhaltene Färbung durch das von mir empfohlene Gemisch fixirt, so werden die Nervenzellen in der Regel vorzüglich erhalten, und das dieselben umspinnende Nervennetz, aus welchem der spirale Fortsatz sich bildet, tritt auffallend gut hervor. Motorische Endapparate in quergestreiften Muskeln, intraepitheliale Nervengeflechte in der Hornhaut u. dergl. treten bei Fixirung mit an- gegebener Mischung ebenfalls sehr deutlich und klar hervor, viel besser als in den Präparaten, die nur mit wässeriger Ammoniumpikratlösuug fixirt wurden. In Präparaten, die man auf die eben mitgetheilte Weise fixirt, werden ferner die Achsencylinder mit ihren ringartigen Ver- dickungen dunkelviolett gefärbt, während das Nervenmark eine schwarze Farbe annimmt. Dank diesem Umstände bietet die Unterscheidung von markhaltigen Nervenfasern gar keine Schwierigkeit dar, ebensowenig die Feststellung, wo die letzten ihre Marksubstanz verlieren. VlII, 1. Ciagliiiski: Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. 19 Auf diese Weise werden bei der Anwendung des von mir empfoh- lenen Fixirungsgemisches sämmtliche Mängel der wässerigen Lösung von pikrinsaurem Ammoniak gänzlich beseitigt. Zur Fixirung der Färbung werden die Präparate gewöhnlich auf 18 bis 24 Stunden in das Gemisch hineingelegt, worauf man sie — ganz ebenso wie bei Fixirung mit wässeriger Lösung von Ammoniumpikrat allein — in mit Wasser verdünntes Glyceriu überführt, iu welchem die Farbe der Nerven während einer langen Zeit erhalten bleibt. Falls es nöthig ist, nicht nur die Farbe der Nerven zu fixiren, sondern auch zugleich dem zu untersuchenden Gewebe die zur Anfertigung von Schnitten unentbehrliche Consistenz zu verschaffen, wende ich eine fixi- rende Mischung mit einem grösseren Procentsatze von Osmiumsäure (auf 25 bis 30 cc Ammoninmpikratlösung 1 bis 2 cc einprocentige Os- miurasäure) an. Das Präparat wird auf 24 Stunden in dieses Gemisch übertragen und nach Einbettung in HoUundermark , Leber u. dergl, oder nach vorausgegangenem Gefrierenlassen direct geschnitten. Tomsk, 20. December 1890. [Eingegangen am 27. Februar 1891.] [Aus dem pathologisch - anatomischen Institute der Warschauer Universität.] Ein Beitrag zur mikroskopisclien Teclmik bei der Unters uchuno' des Rückenmarks und der peripheren Nerven. Von Dr. med. Adam Ciaglinski in Warschau. Jedem, der sich einigermaassen mit den mikroskopischen Unter- suchungen des Rückenmarkes beschäftigt hat, sind wohl die Schwierig- keiten, mit welchen nicht nur der praktische Arzt, indem er seine kli- nische Diagnose bestätigen und durch mikroskopische Untersuchungen vervollständigen will, sondern auch der Specialist, welcher die mikro- skopische Technik vollständig beherrscht, zu kämpfen haben, zur Ge- 20 Ciaglinski: Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. VIII, 1. nüge bekannt. Und doch .sind wir genötliigt , uiikroskopische Unter- snchungen des Rückenmarks öfters als anderer Organe auszuführen. In der Mehrzahl der Fälle sind wir bei genau ausgeführten Autopsien im Staude, eine stricte Diagnose der inneren Organe zu stellen, um aber eine solche bei den Erkrankungen des Rückenmarkes statuiren zu können, müssen wir fast immer dieses Organ in mikroskopischen, sorg- fältig ausgeführten und entsprechend gefärbten Schnitten durchmustern. Wenn wir nun die mikroskopische Untersuchung der inneren Organe mit derjenigen des Rückenmarkes vergleichen, so treten auch hier ganz deutlich gewisse Schwierigkeiten, welche mit der mikroskopischen Tech- nik dieses Organes eng verbunden sind, hervor. In der Mehrzahl der Fälle sind wir im Stande, aus Schnitten von unbedeutender Fläche, und im schlimmsten Falle aus mehreren, von verschiedenen Theilen des erkrankten Organs entnommenen Schnitten die pathologischen Processe der Gewebe zu beurtheilen, um aber einen Begriff über die Erkrankungen des Rückenmarkes zu haben, müssen die Schnitte aus der ganzen Oberfläche des Querschnittes — sammt der Pia und selten auch sammt der Arachnoidea, angefertigt werden. Zur genauen Localisation der Rückenmarkserkrankung genügt aber nicht ein Schnitt durch seine ganze Oberfläche mit der Pia und Arach- noidea — hier muss mau sich genau Rechenschaft geben, wo der vor- dere und hintere Theil des Präparates und wo seine rechte und linke Seite liegen. Die Configuration der Hörner der grauen Substanz des Rücken- markes auf verschiedener Höhe ermöglicht uns immer die Unterschei- dung seiner vorderen und hinteren Hörner. Anders gestaltet sich die Sache mit der Bestimmung der linken und rechten Seite des Präparates; hier reicht die Kenntniss des Baues des Rückenmarks nicht aus. — Zwar können uns in zahlreichen Fällen, in der Entscheidung dieser Frage, die beim Leben beobachteten klinischen Symptome oder auch das Resultat der Untersuchung des Gehirnes, zu Hilfe kommen. So zum Beispiel können wir nach einer alten Hämorrhagie in der linken Grosshirnhemisphäre secundäre Veränderungen in den Pyramiden- strängen des Rückenmarkes der rechten Seite vermuthen. Nicht immer reicht aber dieses Mittel aus; es scheint, dass in Fällen, wie z. B, bei Sclerosis disseminata medullae oder bei chronischen disseminirten Rückenmarksentzündungen auf syphilitischer Basis, wo wir fast in jedem Abschnitt des Rückenmarkes ein anderes Bild zu Gesicht bekommen, der Verlauf der Erkrankung nicht gut zur Unterscheidung der linken von der rechten Seite des Präparatschnittes, ohne dabei auf VIII, 1. Oifjglinski: Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. 21 grobe Fehler zu stosseu, verwerthet werden kann. Es bleibt nichts anderes übrig, als bei der Anfertigung der Schnitte das Rückenmarks- segment in seiner Position zu belassen — d. h. seinen oberen Theil nach oben und seinen unteren nach unten zu wenden, und die auf diese Weise erhaltenen Schnitte in der entsprechenden Lage zu bewahren suchen. Diese Umstände haben mich bewogen, die Paraffinmethode, welche mit jedem Tage eine grössere Anerkennung und eine immer grössere Verwendung findet, auch zu mikroskopischen Untersuchungen des Rücken- markes zu verwenden. Ausser diesen obenerwähnten Umständen fand ich hierzu eine Anregung, indem ich möglichst dünne Schnitte erzielen wollte , auf welchen die geringsten Veränderungen , denen die Be- standtheile der Nervensubstanz (Markscheide, Achsencylinder, Nerven- zellen) wie auch die Neuroglia und Pia mater mit den in ihr verlaufen- den Gefässen unterliegen, mit der grössten Klarheit durchschaut werden können. Die grösste Schwierigkeit bestand darin, eine Methode der Pa- raftineinbettung des Rückenmarkes zu finden , bei welcher die feine Nervensubstanz möglichst wenig verändert wird und dabei die Fähig- keit, gut gefärbt zu werden, bewahren sollte. Ich will weder die Zeit noch die Aufmerksamkeit des Lesers mit der Aufzählung der Wege, auf denen ich meinem Ziele zustrebte, in Anspruch nehmen, und werde mich mit der Beschreibung meiner End- resultate begnügen. Das Rückenmark wird nach genügender Eröffnung der Wirbel- säule von hinten sammt der Dura mater nach vorherigem Durch- schneiden der Nervenwurzel herausgenommen. Es ist selbstverständ- lich, dass man eine möglichst vollständige Herausnahme, d. h. von der Medulla oblougata bis zur Cauda equina, anstreben muss. Nach der Herausnahme wird die Dura mater längs der hinteren Rückenmarks- iiäche durchschnitten und die Pia wie auch die Arachuoidea am Rücken- mark belassen. Dann wird das Rückenmark mittels eines scharfen Rasirmessers in einzelne Theile — Segmente von 1 cm Höhe — durch- schnitten, jedoch so, dass alle Segmente, indem sie an der Dura haften, eine continuirliche Kette bilden. Das auf diese Weise zubereitete Rückenmark wird in MCLLER'sche oder ERLicKi'sche Flüssigkeit ver- senkt. In dieser letzteren wird das Rückenmarksgewebe rascher ge- härtet, denn schon nach Verlauf von 3 bis 4 Wochen ist dasselbe zur Untersuchung fertig, nur bilden sich beim längeren Liegenlassen des Rückenmarkes in dieser Flüssigkeit (einige Monate und mehr) im Gewebe 22 Ciagliriski: Ein Beitrag zur mikroskoi)ischeii Technik etc. VIII, 1. desselben Kiipferniederschläge , welche das mikroskopiscbe Bild ver- dunkeln, Deshalb ziehe ich die Erhärtung des Rückenmarkes in Müller' seh er Flüssigkeit (3 bis 4 Monate) vor, was auch für die spä- tere Färbung seines Gewebes von Vortheil ist. Im Verlauf der ersten Woche muss die Flüssigkeit täglich ge- wechselt werden, später seltener, je nachdem dieselbe unklar wird. Nachdem das Rückenmark schon genügend erhärtet, was bei Be- nutzung der MtJLLER'schen Lösung nicht eher als nach Verlauf von 3 bis 4 Monaten eintritt, wählen wir einzelne Segmente zur Untersuchung. — Wenn wir nun das Rückenmark aus der Flüssigkeit, in der dasselbe macerirt wurde, herausnehmen, so können wir uns überzeugen, dass die Umrisse der grauen Substanz, die ziemlich deutlich auf der Ober- fläche der frischen Durchschnitte auftraten, jetzt fast unsichtbar ge- worden sind ; um dieselben wieder sichtbar zu machen , müssen wir einen neuen Schnitt ausführen. Derselbe wird mit einem Rasirmesser, indem eine dünne Schicht von der oberen Fläche des Segmentes abge- nommen wird, ausgeführt, und erst jetzt wird das betreflfende Segment vollständig von der Dura mater getrennt. Es wird auf diese Weise ein Segment des Rückenmarkes erhalten, dessen obere Fläche glatt mit einer deutlichen Zeichnung der grauen Substanz, und dessen untere Fläche ungleich und ohne deutliche Zeich- nung erscheint. Diese Thatsachen werden wir später ausnutzen, näm- lich bei der entsprechenden Lagerung des gegebenen Segments im Mi- krotom zur Anfertigung der Schnitte. Das in dieser Weise sammt Pia und Arachnoi'dea abgetrennte Rückenmarkssegment wird mittels fliesseii- den Wassers aus einem Wasserleitungshahn, zum Zweck einer voll- ständigen Entfernung der chromsauren Salze, ausgespült, darauf auf zwei Tage in schwachen Alkohol (70 Procent) und auf einen Tag in absoluten Alkohol gebracht. Dies genügt vollständig zur Entwässerung des Präparates. Die folgenden Manipulationen bezwecken eine Durchtränkung des Präparates mit Paraffin mit möglichster Schonung der Nervensubstanz. Anfangs habe ich das Präparat in Paraffin nach der GAULE'schen Me- thode eingebettet. Jetzt benutze ich ein etwas modificirtes Verfahren. Es wird das entwässerte Präparat auf 24 Stunden in Anilinöl ge- bracht und bei Zimmertemperatur in demselben gelassen, darauf wird das Präparat auf 2 bis 3 Stunden, ebenfalls bei Zimmertemperatur, in Xylol gelegt. Es folgt das Einsenken des Präparates in eine Mischung von gleichen Theilen Xylol und geschmolzenen Paraffin, in welcher dasselbe während 20 Stunden in einer constanten Temperatur von 37° C. ver- VIII, 1. Ciagliriski; Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. 23 bleibt, worauf sogleich die Einbettung in reines geschmolzenes Paraffin folgt. Was das Paraffin anbetrifft, so benutze ich im Wiuter leicht schmelzbares (bei 45" C.) und im Sommer während der heisseu Zeit härteres Paraffin (schmelzbar bei 52" C). In den Uebergangsperioden wende ich eine Mischung in verschiedeneu Verhältnissen je nach der Temperatur der Luft an. Nachdem das Paraffin über einer Gasflamme (und nicht im Wasser- bade, da die Wasserdämpfe das Paraffin verderben) geschmolzen ist, warte ich eine Zeitlang bis die auch in dem besten GßüBbER'schen Paraffin vorhandenen Beimischungen auf dem Boden des Gefässes sich ansammeln, um bald darauf die obere reine Paraffinschicht in ein an- gewärmtes, flaches Glasgefäss abzugiessen, in welchem die Präparate, die in die Flüssigkeit gebracht werden , bequem , ohne sich gegenseitig zu berühren, liegen können. Zu dem schon geschmolzenen Paraffin werden einige Tropfen Cedernöl hinzugesetzt, und dadurch wird das Paraffin elastischer gemacht. Die in dieser Weise in Paraffin eingebetteten Präparate werden in einen Ofen gebracht — im Winter bei 48" C, im Sommer bei 52 " C, bis zum folgenden Tage in demselben gelassen, und dann in frisch geschmolzenes reines Paraffin, ohne Zusatz von Cedernöl, übertragen. Nach einem Verbleiben von 15 bis 20 Minuten im Ofen werden die Präparate auf ein etwas erwärmtes und mit Glyce- rin überstrichenes Uhrglas ausgegossen. Bei dem Ausgiessen der Präparate müssen einige Vorsichtsmaass- regeln beobachtet werden. Wir dürfen nicht vergessen, dass die in ge- schmolzenem Paraffin deutlich zu Tage tretende, glatte obere Fläche des Rückenmarkes mit der deutlichen Zeichnung der grauen Substanz leicht von der unteren ungleichen Fläche unterschieden werden kann, und dass alle diese Unterschiede beim Erstarren des Paraffins unkennt- lich werden. Deshalb werden auch beim Ausgiessen des Paraffins die in demselben eingebetteten Präparate mit der glatten oberen Fläche nach unten gelegt und gegen die Oberfläche des Uhrgläschens gerichtet, während die untere, ungleiche Fläche nach oben gekehrt und mit einer dickeren Schichte von Paraffin als die obere, dem Gläschen anUegende Fläche bedeckt wird. Nach dem Ausgiessen des Paraffins wird das Uhrgläsclien auf kaltes Wasser gelegt, um dadurch das Paraffin rascher zu erkalten, und nachdem seine Oberfiäche erstarrt ist, wird das Gläs- chen unter das Wasser getaucht. Nach Verlauf von mehreren Minuten sind die Präparate bereits fertig. Es wird dann jedes Präparat einzeln ausgeschnitten und dabei im- 24 Ci^gliriski: Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. VIII, 1. mar ins Auge gefasst, dass die obere Fläche des Kückeumarksegmentes mit einer dünnen Paraffinschichte bedeckt ist, während die untere Fläche eine dickere Paraffinschichte besitzt, die zur Befestigung des Präpa- rates am Mikrotomtisch benutzt wird. Die jetzt angefertigten Schnitte werden sofort, ohne ihre Flächen zu verändern, auf Objectträger mittels eines Tropfen Wassers ange- klebt und mit Löschpapier gut angedrückt. Die so angeklebten und während einiger Stunden im Thermostat bei 37° C. ausgetrockneten Präparate haften dem Glase so fest an, dass sie die Färbung im Ther- mostat während einiger Stunden ganz gut vertragen ohne abzufallen. Mittels der obigen Manipulationen haben wir den ersten Theil unserer Aufgabe gelöst, denn : 1) wir besitzen nur einen Schnitt durch die ganze Rückenmarks- fiäche sammt Pia und Arachnoidea, 2) wir erhalten ideal dünne Schnitte, gewöhnlich von O'Ul mm, ob- gleich auch noch dünnere , 0"005 mm nicht überschreitende Schnitte ganz gut gewonnen werden können, 3) das Präparat ist in der Weise auf dem Gläschen befestigt, dass die Bestimmung der oberen und unteren Hache, und, was daraus folgt, auch der rechten und linken Seite des Präparates, keine Schwierig- keiten bietet, 4) Dank der Auswahl von Flüssigkeiten, mit welchen das Rücken- mark bearbeitet wurde (Anilinöl, Xylol, Paraffin) und einer nicht zu hohen Temperatur (48 bis 50" C.) erhalten wir ein möglichst gering ver- ändertes Rückenmarksgewebe; ich wage sogar zu behaupten, dass das- selbe weniger verändert erscheint als beim Einbetten in Celloidin, welches in Aether und absolutem Alkohol gelöst wurde. Es blieb noch der zweite, nicht minder wichtige Theil der Aufgabe — eine gute Färbung des Präparates. Ausser der allgemein bekannten Färbungsmethode mit Pikrocarmin müssen wir von den verschiedenen anderen Färbemethoden die Färbung mittels Hämatoxylin nach Weigebt ') und die Färbung mittels Safranin nach Adamkiewicz") hervorheben. Beide Methoden habe ich an meinen *) Weigert, C, Neue Färbungsmethode für das Ceutralnervensystcm (Fortschr. d. Med. Bd. II, 1884, No. 6; cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 290), Weigert, C, Eine Verbesserung der Hämatoxylin - Blutlaugensalzmethode für das Centralnervensystem (Fortschr. d. Med. Bd. III, 1885, No. 8 p. 236; cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 399). ^) Adamkiewicz, A., Neue Rückenmarkstinctionen (Sitzgber. k. k. Akad. d. Wiss. Wien. Mathem.-naturwiss. Cl. Bd. LXXXIX, 1884, 3. Abth. p. 245; cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 587). VllI, 1. Ciaglinski: Ein Beitrag zur mikroskoi)ischeii Technik etc. 25 Paraflinpräparaten erprobt. Ich mns« aber aufrichtig gestehen, ilass bei den grössten Bemühungen, die Resultate der WEiuKRx'schen Me- thode in der Anwendung bei den Paraffinpräparaten mich vollständig unbefriedigt Hessen. Dasselbe lässt sich von der WEiGER'r'schen, durch Pal modificirten Methode sagen; und im höchsten Grade lässt sich dieser Ausspruch auf die vor nicht langer Zeit publicirten HAua'schen' Modificationen anwenden. Nachdem ich die Hämatoxylinmethode erprobt hatte, wandte ich mich zur Safraniumethode. Wie bekannt, unterscheidet ädamkiewicz bei seiner Methode dreierlei Arten von Resultaten : 1) Die Färbung der chromoleptischen Substanz bei kurzdauernder, eine oder einige Stunden langer Färbung. 2) Die doppelte Färbung bei der Färbung der Schnitte während eines Tages bis zu einer Woche; bei dieser Färbung werden die Nerven und namentlich ihre ganze Marksubstanz orangegelb , die Neurogliazellen, die Kerne und das Protoplasma der Ganglienzellen nehmen eine violette Farbe an. Die Achsencylinder der Nerven bleiben ungefärbt. 3) Schliesslich, wenn das Färbemittel länger als eine Woche einwirkt, wird die Markscheide entfärbt, dafür aber werden ausser der erwähnten Theile der Neuroglia und der Ganglienzellen, die Stützsubstanz der Neu- roglia und die Achsencylinder der entfärbten Nerven violett gefärbt. Mit dieser Methode erzielen wir bei den Paraffinpräparaten im allgemeinen bessere Resultate. Die Mängel derselben sind folgende : 1) Bei der doppelten Färbung des normalen Rückenmarksgewebes erhalten wir einen für das Auge sehr unangenehmen, und, was noch wich- tiger ist, nicht sehr deutlichen Contrast; die in querer Richtung des Rückenmarks in seiner grauen Substanz verlaufenden Nervenbündel, die so effectvoll in den mit der WEiGEET'schen Methode gefärbten Prä- paraten hervortreten, verlieren sich hier vollständig, inmitten der vio- lett gefärbten grauen Substanz. 2) Die Achsencylinder färben sich nicht gleichzeitig mit der Mark- scheide, was einen grossen Mangel bei der Untersuchung pathologischer Veränderungen, z. B. Varicosis, welche auf der Nervenscheide, am Achsen- cylinder oder auch auf diesen beiden Nervenbestandtheilen gleichzeitig auftreten, bildet. Wenn wir z. B. auf den Querschnitten des Rücken- markes die Scheide in der Gestalt eines dünnen Ringes sehen, so kön- nen wir keinen deutlichen Begriff davon haben, ob der Achsencylinder 0 Haug, R., Einige empfehlenswerthe Tinctionsmethoden (Diese Zeitschr. I3d. VII, 1890, p. 151). 26 Ci^gliiiski: S^iri Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. VIII, 1. eines gegebenen Nerven verdickt, normal, oder auch der Atrophie an- heimgefallen ist. 3) Die degenerirten Stellen des Rückenmarks treten nicht scharf genug hervor, und zwar durch den Mangel an Contrast zwischen dem gesunden und degenerirten Kückenmarksgewebe. Um diesem Mangel abzuhelfen, bemühte ich mich, eine combinirte Färbungsmethode anzuwenden ; für diesen Zweck liabe ich das Safranin als Grundfärbemittel, welches die Markscheiden sehr deutlich färbt, beibehalten und suchte nach einem anderen Färbemittel, welches im Stande wäre, die Achsencylinder und das Neurogliagewebe zu differenziren. Es hat sich die wässerige Lö- sung von Anilinblau für diesen Zweck am besten bewährt. Die ganze Färbungsprocedur wird in folgender Weise ausgeführt : Nachdem das Paraffin in den Präparaten vollständig mittels Xylol gelöst worden ist, werden dieselben gut in absolutem Alkohol gewaschen und dann auf eine halbe bis eine Stunde in ein Gläschen mit destillirtem Wasser behufs sorgfältiger Ausspülung gebracht. Dann werden die Gläschen aus dem Wasser herausgenommen und in einen feuchten Raum (in einem zu Platten- und Kartotfelculturen dienenden Apparate), auf Glasunterlagen gelegt und mit einigen Tropfen einer wässerigen Safraninlösung 0'2 Procent befeuchtet. In diesem Farbstoff bleiben die Präparate 1 bis 3 Tage liegen. Hier muss gleich hervorgehoben werden, dass, je länger das Rückenmark in der MüLLEß'schen oder Eklicki- schen Flüssigkeit gelegen hat, dasselbe desto besser und rascher mit Safranin gefärbt wird. Die aus dem Rückenmark angefertigten Präparate, welche keine zwei Monate in der erhärtenden Flüssigkeit gelegen haben, werden durch Safranin nicht geflirbt. Nach dem Abgiessen der Safraninlösung aus dem Gläschen wird das Präparat gründlich in destillirtem Wasser ausgewässert und später mittels einer wässerigen Anilinblaulösung (eine gesättigte wässerige Lösung wird mit gleichen Theilen destillirten Wassers gemischt) wäh- rend 1 bis 5 Minuten gefärbt. Je stärker das Präparat mit Safranin gefärbt ist, desto länger wird dasselbe unter der Einwirkung der Auilinblaulösung gelassen Und um- gekehrt ; Präparate, welche eine kurze Zeit (2 Monate) in MüLLER'scher Flüssigkeit gelegen haben, müssen während 3 Tagen mit Safranin und später kurze Zeit (1 Minute) mit Anilinblau gefärbt werden. Es folgt dann das Auswässern des Präparates mit Wasser und das Entziehen desselben, wie auch des Ueberschusses von Farbstoffen mittels Alkohol und darauf das Durchtränken der Präparate mit Nelkenöl, welches VIII, 1. Ci^gliriski: Ein Beitrag zur rnikroskopisclicu Technik etc. 27 dann durch Xylol verdrängt wird ; zuletzt schliessen wir das Präparat in Canadabalsam, welcher in Xylol gelost ist, ein. In den Präparaten, die auf diese Weise zubereitet sind, erhalten wir folgende Färbung : 1) Das Myelin resp. die Markscheide der Nerven wird orangegelb gefärbt. 2) Die Achsencylinder werden intensiv blau gefärbt. .3) Die Ganglienzellen und ihre Fortsätze werden ebenfalls blau gefärbt. 4) Die Neurogliazellen und ihre Stützsubstanz werden hellblau gefärbt. 5) Ungewöhnlich deutlich, ja ich möchte sagen sehr efFectvoll, wer- den die Gefässe mit ihrem Inhalt gefärbt. — Die Gefässwände werden im allgemeinen blau gefärbt; roth werden durch Safranin die elastische Membran der Arterien und die Kerne der glatten Muskelfasern tingirt. Was den Inhalt der Gefässe anbetrifft, so werden die rothen Blut- körperchen durch Safranin schön roth und die farblosen Blutkörperchen mittels Anilinblau blau gefärbt. 6) Die Pia mater sammt ihren Ausläufern wird blau gefärbt. Schliesslich sehen wir auf den Präparaten des normalen Rücken- marks die weisse Substanz roth und die graue Substanz blassblau ge- färbt. Die in der grauen Substanz quer verlaufenden Nervenbündel treten sehr deutlich in der Gestalt von orangegelben Strängen auf blauem Grunde hervor. Bei stärkerer Vergrösserung gelingt es, im Centrum eines jeden Stranges eine dunkelblau gefärbte Linie — das heisst den Achsencylinder des Nerven, zu unterscheiden. Ein ähnliches Bild sehen wir auf den Längsschnitten von Bündeln der weissen Rückenmarkssubstanz oder auch auf den Längsschnitten der peripheren Nerven. Auf Querschnitten erscheint die weisse Substanz in der Gestalt von orangegelben Ringen, welche jeden dunkelblauen Punkt umgeben. Die einzelnen Ringe werden durch das blau gefärbte Neurogliagewebe von einander geschieden. In ähnlicher Weise erscheinen auch auf Quer- schnitten die peripheren Nerven. In pathologisch veränderten Rücken - marken sind die degenerirten Parthien intensiv blau gefärbt, was uns erlaubt, schon makroskopisch die Degeneration zu diagnosticiren und mit der grössten Exactheit zu localisiren. Die Grenzen einer vollständigen Degeneration treten besonders klar hervor; beginnende Degenerationen lassen sich durch einen gewissen bläulichen Stich, welcher von einer relativen Vermehrung des Neurogliagew^ebes abhängig ist, erkennen. Was die pathologischen Producte , wie z. B. die Myelinkugeln, Körnchenzellen anbetrifft, so werden dieselben blauviolett gefärbt, man 28 Ci^gliiiski: Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik etc. VIII, 1. trifft aber auch manchmal auf ähnliche Gebilde , welche orangegelb ge- färbt sind. Ob die Färbungsmethode dieser Gebilde ein Licht in die dunkle Frage über ihre Entstehung werfen wird , wage ich zur Zeit nicht end- giltig zu entscheiden. Es wird dies in den Bereich meiner weiteren Untersuchungen in dieser Richtung fallen. Nachdem ich die vorstehende Arbeit zusammengestellt hatte, gelang es mir, eine Modification zu der oben angegebenen Methode der Paraffin- einbettung des Rückenmarks zu finden. Es glückte mir nämlich, Paraffin- präparate des Rückenmarks zu erhalten, ohne dieselben mit Alkohol zu be- handeln. Zu diesem Zweck werden die zur Genüge in MüLLER'scher Flüssigkeit erhärteten und nicht mehr als 3 mm dicken Rückenmarks- segmente in Wasser durchgespült, leicht mit Löschpapier ausgetrocknet und dann auf 3 bis 5 Tage in Anilinöl gebracht. Gewöhnlich ist nach Ablauf dieser Zeit das ganze Segment mit Anilinöl durchtränkt, was schon mit unbewaffnetem Auge sehr gut erkannt werden kann, indem das Präparat vollständig durchsichtig erscheint. Aus dem Anilinöl wird das Präparat in Xylol, dann in Xylolparaffin gebracht und in Paraffin, wie oben an- gegeben, eingebettet. Die erhaltenen Schnitte, welche auf Objectträger geklebt sind, werden wie gewöhnlich mit Xylol behandelt, das letztere wird durch Anilinöl verdrängt, und das Gläschen mit dem Präparat in ein Glas mit Wasser gebracht. Das Wasser wird während mehrerer Minuten den Rest des Anilinöls aus den Schnitten herausziehen, und das Präparat kann dann sogleich mittels Safraninlösungen resp. Anilinblau gefärbt werden. Die gefärbten Präparate werden mit Wasser abgespült und leicht mittels Löschpapier auf dem Objectträger getrocknet, darauf folgt das Durchsichtigmachen derselben und das Entfernen des Ueberschusses von Farbstoffen mittels Anilinöl; dieser letztere Farbstoff wird mittels Xylol abgewaschen ; schliesslich wird das Präparat in Canadabalsam eingeschlossen. In den in dieser Weise angefertigten Präparaten sind das Myelin und die Myelinkugelu besser als in allen anderen erhalten, und aus diesem Grunde sollte diese wenn auch etwas umständliche Methode namentlich in denjenigen Fällen, in welchen subtile Veränderungen in den Markscheiden oder Myelinkugeln nachgewiesen werden sollen, Ver- wendung finden. [Eingegangen am 21. Februar 189L] VIII, 1. Pfeiffer: Venet. Terpentin bei botanischen Danerpräparaten. 29 Mittheilung^en über die Anwendbarkeit des venetiani seilen Terpentins bei botanisclien Dauerpräparaten. Von FeitliiiaiKl Pfeiffer R. von Wellheim in Wien. Durch die in dieser Zeitschrift von Dr. Vosselek • veröffentlichten Mittheihingen über den venetianischen Terpentin als Einschlussmittel wurde ich veranlasst, dieses Medium auch auf botanische Dauerpräparate anzuwenden. Obwohl nun die hierüber angestellten Versuche nur ein Jahr um- fassen, so sind doch die bisher erzielten Resultate so befriedigend aus- gefallen, dass die Anwendung dieses Terpentins botanischen Kreisen gleichfalls auf das Wärmste empfohlen werden kann. Er scheint ge- eignet zu sein, in vielen Fällen die bisher mit Vorliebe angewendete Glyceringelatine zu verdrängen. — Im allgemeinen ist auch bei bota- nischen Objecten seine Handhabung höchst einfach. Handelt es sich um halbwegs resistente Pflanzentheile oder Schnitte, so genügt es, dieselben, wenn sie nicht schon „Alkoholmaterial" sind, in starken Alkohol (92proncentig bis absolut) zu bringen und sie nach mehrstündigem Verweilen aus demselben direct in den auf dem Object- träger befindlichen Terpentintropfen zu übertragen. Es kann sofort das Deckgläschen aufgelegt werden, und ist sodann das Dauerpräparat bis auf die weiter unten zu besprechende, schützende Umrahmung fertig. Miteingeschlossene Luftblasen werden, wenn sie nicht allzu umfangreich waren, in Kürze gänzlich aufgesogen. Da das Brechungsvermögen des venetianischen Terpentins höher als das der Glyceringelatine ist und die Präparate in dem Ersteren da- her durchsichtiger werden als in der Letzteren, so erscheint es in vielen Fällen angezeigt, dieselben entsprechend zu färben. 1) VossELER, J., Venetianisches Terpentin als Einscliliissmittel für Dauer- präparate (Diese Zeitschr. Bd. VI, 1889. p. 292). Cfr. auch Suchaxnek, H., Notiz über die Verwendung des venetianischen Terpentins etc. (Diese Zeitschr. Bd. VII, 1890. p. 463). 30 Pfeiffer: Venet. Tex-pentin bei botanischen Dauerpraparateu. VIII, 1. Als ein hierbei für allgemeine Zwecke ganz ausgezeichnetes Färbe- mittel bewährte sich die stark verdünnte Lösung des DELAFiELü'schen Hämatoxylins, Ich bereite mir dieselbe dadurch, dass zu dem schwach mit Essigsäure versetzten Wasser (einige Tropfen auf 50 cc Wasser) solange tropfenweise altes, concentrirtes Hämatoxylin zugesetzt wird, bis eine lichtere oder dunklere Bordeauxfarbe entsteht. In dieser vor dem Gebrauche gut zu filtrireudeu Farbflüssigkeit haben die Objecte ca. 15 Minuten bis einige Stunden lang zu verweilen. Hierauf werden sie in gleichfalls mit Essigsäure angesäuertem Wasser (halb- bis ein- procentig), sodann mit gewöhnlichem Wasser gut ausgewaschen und in Alkohol übertragen. Wer ein auf diese Weise oder mit anderen zweckdienlichen Farb- stoften gefärbtes Präparat in Glyceringelatine, je ein gleiches in venetia- nischen Terpentin, in Canadabalsam oder in Damarlack einschliesst, kann sich mit leichter Mühe von der wunderbaren Klarheit, Schärfe und Schönheit überzeugen, welche das mit veuetianischem Terpentin be- handelte Präparat, sowohl vor dem in Glyceringelatine, als auch vor dem in Damarlack oder in Canadabalsam eingeschlossenen auszeichnet. Die eingangs erwähnte, einfache Manipulation des directen Ueber- tragens in den venetianischen Terpentin kann aber nur dann angewendet werden , wenn die zu conservireuden Präparate hierdurch keinerlei Schrumpfungen erleiden. Dieses Moment muss durch Versuche fest- gestellt werden. Dabei sind zwei Eventualitäten ins Auge zu fassen: a) Die zu conservireuden Präparate vertragen nach ihrer Fixirung, Härtung etc. ohne Gestaltsveränderuugen die Entwässerung in starkem Alkohol, nicht aber die unmittelbare üebertragung aus diesem in den venetianischen Terpentin. b) Die Präparate vertragen nach ihrer Fixirung, Härtung etc. die directe üebertragung in starken Alkohol nicht und wären in Folge dessen zum Einschluss in harzige Medien ungeeignet. Was den sub a) angeführten Fall betrifft, so gilt das nachstehend modificirte, im Grundprincipe von Dr. Overton * für Canadabalsam- be- ziehungsweise Damarlack-Einschluss angegebene Verfahren, Die bereits gefärbten, in (unter Umständen habe ich selbst 80- bis 85procentigen verwendet) Alkohol liegenden Objecte kommen in eine Lösung von 100 Theilen 94procentigen bis absoluten Alkohol und von 1) OvERTON, E. , Mikrotechnische Mittheilimgen aus dem botanischen Laboratorium der Universität Zürich (Diese Zeitschr. Bd. VIT, 1890, p. 11—13). VIII, 1. Pfeiffer: Venet. Terpentin bei botanischen Dauerpriiparaten. ;U 10 Theilen venetiaiiischen Terpentin. Schrumpfnngen werden durch dieselbe nicht erzeugt. Hierauf wird in einer luftdicht geschlossenen Glasdose mit Chlorcalcium (geschmolzen und wasserfrei) die lang- same Concentrirung des verdünnten Terpentins durch Entfernung des Alkohols und des diesem beigemischten AVassers vorgenommen. Es ist dabei nicht rathsam, das Object mit der Lösung in ein ühr- schälchen beziehungsweise in ein Gläschen mit sehr niedrigen Wänden zu bringen, weil dadurch in hohem Grade die unangenehme Eigenschaft des stark mit Alkohol verdünnten Terpentins, sich theilweise an den inneren Wänden hinanzuziehen und an den äusseren schliesslich herab- zutiiessen, begünstigt wird. Abgesehen davon, dass nun oft nicht die für das Object nöthige Flüssigkeitsmenge zurückbleibt, kann unter Um- ständen auch eine Verunreinigung des Terpentins durch die in der Dose befindlichen Chlorcalciumstückchen, welche durch die Alkoholaufnahme zerfliesseu, stattfinden und dadurch das Object gefährdet werden. Um diesen Nachtheilen zu begegnen und eine reinliche Manipulation zu ermöglichen, verwende ich Gläschen von 2 cm Höhe bei 1'5 cra Durchmesser bis solche von 2-5 cm Höhe bei 2 cm Durchmesser. Vor ihrem jeweiligen Gebrauche überziehe ich den gutgereinigten Rand der- selben innen und aussen in einer Breite von 2 bis 3 Millimeter mit Paraffin. Diese Schichte lässt sich auf demselben überaus leicht durch entsprechend tiefes Eintauchen in geschmolzenes Paraffin und Erstarren- lassen des anhaftenden herstellen. Die so justirten Gläschen werden sodann mit der vorerwähnten Terpentinlösung und dem Objecte beschickt und einzeln oder zu mehreren in eine ihrer Grösse entsprechende, luftdicht schliessende Glasdose ge- stellt, in welcher sich ausserdem eine mit Chlorcalciumstücken gefüllte Glas- oder Porcellanschale befindet. Die Grösse der von mir gewöhnlich verwendeten Glasdosen wechselt zwischen 8 bis 10 cm Durchmesser bei 3-5 bis 4 cm Höhe, die Grösse der Chlorcalciumschalen zwischen 4" 5 bis 5 cm Durchmesser bei 2 bis 2*5 cra Höhe. Nach mehreren Tagen — je nach der verwendeten Flüssigkeits- menge — hat sich der Alkohol und das etwa vorhandene Wasser mit dem Chlorcalcium verbunden. Es befindet sich nunmehr in den Gläs- chen das ganz von dickem Terpentin durchtränkte und umgebene Ob- ject, welches keinerlei Schrumpfungen erlitten hat. Hierauf kann unverzüglich zum Einschluss geschritten werden. Bei dem Herausheben dünner Schnitte oder zarter Pflanzentheile, beziehungsweise bei dem Uebertragen derselben auf den Objectträger, 32 Pfeiffer: Venet. Terpentin bei botanischen Dauerpräparaten. VIII, 1. liat man mit Sorgfalt zu verfahren, weil dieselben oft brüchig werden. Ist der Terpentin zu stark eingedickt worden, so kann man demselben ohne Schaden für das Object einen Tropfen starken Alkohols zusetzen und sich so das Herausheben uud Uebertragen erleichtern. Am ein- fachsten bleibt es freilich, die Concentrirung überhaupt nicht zu weit zu treiben. Im Hinblick auf Anilinfärbungen wäre bei dieser Methode noch zu erwähnen, dass in denjenigen Fällen, wo ein starkes Ausziehen des Farbstoffes durch die verdünnte, alkoholische Terpentinlösung zu ge- wärtigen ist, der Zusatz einer geringen Menge des in Alkohol gelösten Farbstoffes dem Uebelstande abhilft. Uebrigens lässt sich auch auf diese Weise ein ungefärbtes Präparat gleichzeitig zum Einschlüsse vor- bereiten und manchmal ganz vorzüglich färben. Im Falle b), wenn das Object, weil es Schrumpfungen ausgesetzt ist, nicht ohne weiteres in starken Alkohol entwässert werden kann, ist vorerst das Glycerinverfahren Dr. Overton's, welches mir stets gute Resultate geliefert hat, anzuwenden. Nach demselben wird das Object in eine Mischung von 90 Theilen Wasser -f 10 Theilen Glycerin gebracht, das Glycerin durch Wasser- entzug langsam concentrirt und dieses selbst sodann mit starkem oder noch besser absolutem Alkohol aus dem Objecte entfernt. Nur rathe icli an, um die für die Concentrirung nöthige Zeit abzukürzen, diese nicht durch einfaches Stehenlassen der Mischung au freier Luft herbei- zuführen, sondern den Schwefelsäure-Exsiccator zu Hilfe zu nehmen. Selbstverständlich muss die hierbei verwendete Schwefelsäure (sogenannte englische) rein von Beimengungen fremder Stoffe, insbesonders Säuren sein, welche Dämpfe entwickeln und dadurch das Object selbst oder die Färbung desselben schädigen könnten. Ist einmal das Präparat auf diese Weise in Alkohol gebracht und durch denselben möglichst von dem Glycerin befreit worden, so sind für das weitere Vorgehen abermals zwei, versuchsweise festzustellende Momente zu berücksichtigen: a) entweder verträgt es nach einem 12- bis 24stündigen Liegen in Alkohol ohne Schrumpfung den directen Einschluss in den venetia- nischen Terpentin, oder §) es verträgt diesen directen Einschluss nicht. In dem ersten Falle sind keine weiteren Manipulationen als die bereits eingangs dieser Mittheilung erwähnten anzuwendeu. In dem zweiten Falle hat die bereits snb a) ausführlich beschriebene Methode Platz zu greifen. Vill, 1. Pfeift er: Veiiet. Terpentin bei botanischen Dauerpräparaten. 33 Schnitte von in Celloidin eingebetteten botanischen Objecten be- dürfen in der Regel, ebensowenig wie solche von thierischen, einer besonderen Behandluugsweise, Sie werden einfach aus dem 92- bis 94procentigen Alkohol in das Einschlussmittel übertragen. Werden aber fallweise dennoch dabei Schrumpfungen constatirt, so kann man den ausgewässerten Schnitt mit dem Deckgläschen auffangen, ihn möglichst vom überschüssigen Wasser befreien und mit einem Tropfen Eiweissglycerin fixiren. Ist das Festhaften des Schnittes durch das bis zu einem gewissen, durch die Praxis sich ergebenden Punkte erfolgte Trocknenlassen an freier Luft erzielt, so wird Deckgläschen und Object für einige Zeit in 94procentigen Alkohol gebracht, um das Glycerin zu entfernen, und nach dem sub a) erörterten Verfahren weiterbehandelt. Es können sich jedoch auch Verhältnisse ergeben, wo dieses Ver- fahren deshalb nicht genügt, weil der Celloidinschnitt in Folge Behand- lung mit Reagentien , wie Eau de Javelle, Aetzkali etc. oder mit wässe- rigen Farbstofflösungen die directe Rückübertragung in Alkohol nicht verträgt. Ist dieses der Fall, so muss die Glycerin-Methode b) ange- wendet werden, und ist erst nach dieser eine Weiterbehandlung der Objecte nach Methode a) oder nach dem Aufklebeverfahren mit nach- folgender Anwendung der Methode a) möglich. Was die Eigenschaft des venetianischen Terpentins, wie Damarlack äusserst langsam zu trocknen, betrifft, so kann dieselbe ausser durch die von Dr. Vosseler vorgeschlagene Methode, durch Umrahmung des Deckgläschens mit Damarlack (nach Dr. Suchannek) oder noch besser mit Canadabalsam unschädlich gemacht werden. Dem Balsararing kann, nachdem er wenigstens oberflächlich fest geworden ist, eine Schichte Maskenlack etc. aufgetragen werden. Am Schlüsse dieser Arbeit will ich noch hervorheben, dass die vor- stehend beschriebenen Methoden, vor allem die Methode a) sich nicht allein auf botanische, sondern auch mit vorzüglichem Erfolg auf thie- rische Objecte anwenden lassen. Wien, 18. März 1891. [Eingegangen am 20. März 1891. J Zeitschr, f. wiss. Mikroskopie. VIII, 1. 34 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. VIII, 1. Beiträg'e zur pliarüiakognostisclien Mikroskopie. Von Dr. E. Viiiass.a, Director des oantonalen Ijaboratovium für Hygiene zu Lugano. Nachdem ich in dem früher besprochenen Mikrotom ' ein Instrument besass, welches ermöglichte, rasch und sicher mikroskopische Schnitte auch durch härtere Drogen zu erhalten, war mein erstes Bestreben, die Schnitte namentlich für Schulzwecke herzurichten. Mit dem blossen Einbetten in Glyceringelatine, — welche Methode sich ganz vorzüglich bewährt hat, indem die Präparate jetzt, nach fünf Jahren, auch ohne Lackring sich prächtig erhalten haben, — ist der Zweck nicht genügend erreicht, denn will man Schüler speciell auf gewisse Gewebselemente aufmerksam machen, so ist eine Differeuzirung gegenüber dem um- liegenden Gewebe unbedingt erforderlich. Leider wird nun gerade in der botanischen und pharmakognostischen Mikroskopie so viel wie gar nicht gefärbt, auch ist mit Ausnahme der BEUN'schen Methode für Doppelfärbung beinahe keine praktische zu finden. Es war desshalb noth wendig, sich Anilinfarben zu verschaffen, welche mit Leichtigkeit das Färben ausführen lassen, und zwar konnten für diesen Zweck nur subjective Farben in Betracht kommen, Farben, welche ohne Beizen , Mordants , die Faser direct tingiren. Eine An- wendung von Beize musste umgangen werden, da die Möglichkeit, nur gewisse Gewebselemente zu färben, dadurch ausgeschlossen war; es fielen deswegen auch die Naturfarbstoffe, wie Carmin, Campeche etc, von selbst fort. Es konnten ferner aus naheliegenden Gründen auch nur in Wasser leicht lösliche Farbstoffe verwendet, und mussten die in Alkohol löslichen ausgeschlossen werden. Die erste Sendung von Farbstoffen hatte mir der inzwischen leider zu früh verstorbene Herr Prof. Hans Wolff in Winterthur besorgt, welcher mir auch sonst mit grösster Freundlichkeit mit seinem Rathe 0 Vinassa, E., Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie (Diese Zeitschr. Bd. IL 1885, p. 309; Bd. IV, 1887, p. 295). VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur phannakogiiostischeii Mikroskopie. 35 zur Seite stand, und dem ich zum grossen Theil die weitere Ausdehnung der Arbeit auf so viele Farben verdanke. Schon die ersten Versuche förderten für mich überraschende Resul- tate zu Tage, indem sich die Farben in zwei oder besser gesagt drei Gruppen theilen lassen; in solche, welche nur das Parenchymgewebe färben, zweitens in solche, welche nur die verholzten Elemente, CoUen- chym, Gefässe eventuell Kernscheiden etc. tingirten, und schliesslich solche, welche nur das Gewebe diflferenzirten, d. h. aus dem gefärbten Parenchym die verdickten Zellen schärfer heraushoben. Behufs Vorbereitung zum Färben wurde eine grössere Anzahl Schnitte, wie sie das Mikrotom lieferte, also ohne vorherige Auswahl, mit etwas Natronlauge ausgekocht, um die Stärke etc. zu beseitigen, dann mit viel Wasser ausgewaschen eventuell unter Zusatz von etwas Essigsäure und im Trichter abtropfen gelassen. Es ist unbedingt er- forderlich, dass das Protoplasma gelöst sei, und man nur mit dem Gewebe zu arbeiten habe, denn es schlagen sich, wie wir. unten sehen werden, diejenigen FarbstoiFe, welche sonst nur die verdickten Zellwände färben, auch im abgestorbenen Protoplasma nieder, während die feinen Zellwände nicht tingirt erscheinen. Das Färben wurde auf folgende Weise vorgenommen. In einer Porzellanschale wird eine ungefähr halb- bis einprocentige Tinctions- flüssigkeit handwarm gemacht, und in diese werden die Schnitte einige Minuten — meist sind 2 bis 3 Minuten schon genügend — gelegt. Hernach werden sie herausgefischt, in eine gewöhnliche Theekugel eingesperrt und unter constantem Wasserstrahl vollständig ausgewaschen, solange, bis gar kein Farbstoff mehr ins Wasser übergeht. Das Aus- waschen muss so lange fortgesetzt werden, um ein späteres Färben der Gelatine zu verhüten. Beim Auswaschen der gefärbten Schnitte hat man selbstverständlich darauf zu achten, dass der Strahl nicht direct auf die Theekugel fällt, da sonst ein Zerreissen der feinen Gewebe zu leicht eintritt. Eine andere Methode, welche nur den Zweck verfolgt, die Gewebe- tlieile zu differenziren, wobei also nur die einen Elemente stärker als die anderen gefärbt erscheinen, ist folgende: Die gut ausgekochten Schnitte werden in eine sehr stark verdünnte Tinctionsflüssigkeit gelegt, welche bis zum ersten Blasenwerfen erwärmt wurde. Darin nun lässt man die Schnitte so lange liegen, bis die Farbe der Flüssigkeit fast ganz verschwunden ist und die Schnitte dunkler gefärbt erscheinen als die Lösung, worauf sie ebenfalls in einer Draht- kugel unter dem Wasser gut ausgewaschen werden. In der Regel 3* 36 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostisclien Mikroskopie. VIII, 1. erhält man aber nur Differenzbilder, indem diejenigen Farben, welche sonst nur die Gefässe etc. färben, schliesslich auch das parenchymatische Gewebe tingiren. Die mit den ca. 8 bis 10 Farben erhaltenen Resultate spornten mich für weitere Fortsetzung der Arbeit an, und wurde mir eine grosse Auswahl verschiedenster Anilinfarben aufs Freundlichste zur Verfügung gestellt von der Fabrik für chemische Industrie in Basel, von dem Ver- treter der badischeu Aniliu- und Sodafabrik in Zürich, sowie von dem Vertreter der Firma Bayer & Co. in Elberfeld, allen diesen Firmen sei hier der beste Dank abgestattet für das reiche Material. In der nachstehenden Tabelle finden sich die erhaltenen Resultate aufgeführt; um nicht die chemische Zusammensetzung der einzelnen Farben erwähnen zu müssen, habe ich die Zahl beigefügt, unter welcher die betreffenden Farben in Schultz u. Julius „Tabellarische Uebersicht der künstlichen organischen Farbstoffe" zu finden sind. Ich habe das Verhalten der Farben zu Alkalien und Säuren des- wegen beigefügt, weil es mir für die Tinction der Schnitte von Werth schien, und um Verfärbungen zu vermeiden, denn es ist ganz selbstver- ständlich, dass man den Schnitt nicht in ein saures Bad legt, wenn Säure den Farbstoff ausfällt, namentlich wenn dies in einer anderen Farbe geschieht. (Cfr. Tabelle I, p. 37—41.) Die Resultate sind nun allerdings sehr überraschend, indem die weitaus grösste Anzahl Farben nur gewisse Gewebselemente tingirt. Einige nicht subjective Farben wurden deswegen in den Bereich der Untersuchung gezogen, weil dieselben in der Mikroskopie allgemein angewandt werden, wie namentlich das Fuchsin etc. Mit den vorstehend erhalteneu Resultaten war selbstverständlich auch die Möglichkeit der Doppelfärbung gegeben, welche eigentlich das Ziel der Arbeit war. So giebt es eine grosse Anzahl von Doppeltinctionen, welche prächtige Contraste zeigen, dabei hat man folgender Weise vorzugehen. Es wird zuerst der Schnitt in die Tinctionsflüssigkeit gelegt, welche das verdickte Zellgewebe färbt, hierauf muss das Präparat stark ausge- waschen werden und kommt erst dann in das etwas alkalische auf 100 ^ erwärmte Bad, in welchem sich die Farbe für das Parenchym befindet. Es kommt nun sehr häufig vor , namentlich , wenn der Schnitt zu dick oder das Protoplasma nicht ganz zerstört ist, dass durch die Tinc- tionsflüssigkeit, welche eigentlich nur die dickwandigen Zellen färben soll, auch das Parenchym leicht gefärbt erscheint. Dies hat gar nichts zu sagen, denn färbt man z. B. mit annähernd complementären Farben, VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 37 03 ü 23 ^ S 2 =* ^ CO o3 !- P Ch 03 'S 1—4 Eh \ NJ c « o -w CS a ..M .a S < !> ö ' N c r; « « rt ^ ^ :cS Cß .a C o S-i f. i ?^ S >5 J4 ^-^ CJ -^ (D r/1 C CO -^ 'S © :3S =3 ** (3ä S I— I ^ ^ CO a PI, o o "^ Sä (D 03 o > 'S ^ 0 0« :C3 > — 'ß rt S Cm =* ä Ei <» OD rq . 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Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 39 O 03 U (»■■5 j3 ^ 5 « S o a OJ O 3 :CS CS N loS tu ^ £ ^- a> " CS -wog ü -" oj aj o > bjo > •X3 5 . O CS S-i — ] o :::S " '' — CS ^ "*- o ^ o B< ü O -u . • 1, > O i5 ^ 05-5 C CS .pH -^" «^ -eH ^ -3 -a , t- 0) o ü 'S .- . N s ö Eh ^ -:il cs;=! o-^ o i> 5 o 5 « cS ^ &4 O ^ ^ -!:^ +j,a :CS O O fco -a CG CO -a Si :cS CO ^ CO C) ra a a 3-a CD a ^<-i = a .a CO Sh CS o y CO ^ i CS ^ g =4h CA es « ^ iS '* > .a s-, ;cS fco tcS ^5^ I 5S5 i ja o 5!« c fco cS e -5 :a .a !- ü 0.2 ^^ a " Sh (B TS .2 !^ fco CS " O > 03 (D •ä fco O CS |Jh CO O o ^« -a t- o »^ > « HH :_^ fco K 4J Ph.^ es _ :s s CS cS :o3 es O "« es .a ;5 a a d) fcn o CS > ,a ffi S-i O -3 es OJ -a jh '« .^ o c CS S g -fc^ :CS r- a « 5^ .H CO fcCg .2-0 ■O fco r-l ^ ^^ _ a o'^ '^ c -w a • ^ CO a •'=' 2 fco 3-a , CO a -^ a a> ^ Ol ^ fco a fco f— < bo es a ^_( i! a O « :0 M ÜH^ K a o ,a :S3 t^ CO ~4 o ffi.2 aü -ä o o o 13 O 'S in O cS o .O es .HS 1^ -^ o , I CO O S- a"^ o o o TS o TS o -3 O -3 CO to !>• CO CO CD Ol tD cc CO !»■■ .;v. D- (N vT»-- 10 Ol tH T— ( »-H ■i-l !M CN . S;5 0 ^ ö l-I CN • CO ^ iC Cö t^ CO 05 ö (M CN ^ ÖQ ^ CM iM (M CM CM CO 40 Vinassa: Beiträge zur pharmakogtiostischen Mikroskopie. VIII. 1. c 'S o N o a j2 ''S ■> 'a fcX) N ,Üä o ü T^ :=! O •.c3 IS > © 5 fcJO " S o ri CO 3 CD d 'S SO CS a a CS N o « o -TS C Sh O > « ;3^ ^f-3 ^ o ■p CS ^ ü C -tJ ^ «J ^ -^ ^ Zell leic ar. CS D ;i CS ickte och aschb ?'« ^ ^ ^ Sh CJ "^ > -t-3 . .^ ■*J ^ -1 _2 jcs.ii ^ 1 § r« o ö O !^ ■ S rCl s.^ 1 ü m > iH ä ^ = ^ h-i ^ K o ^ -^ "^ ■^ c l5? cS -.cS t^i ^ CJ ,:4 -» o ^^ S-c =3 .a Xi fco O o O p CS c8 ;2i CS a a etter ag Sh •-H Sh 0) c §^^ S3 2-^ E5^ :CS > .^ _3 -^ ,^ Sh -4 Sh -H S- ^^ 2^ u O-ä a.2 Ol 112 ,CS Sh Sh Ü > ^^ Sh o ^ c :CS W a a s CS Sh a o o r3 O -3 CO CO CO 35 05 i Si u i« iß 1-2 i-2 S ^^ o s: CO co CO CO 05 CO © 1-3 VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 41 o a o a u s3 CM :c3 Vinassa: Bei iträj »e zur pharmal kogr lOSt ischen Mikr oskopie ö rl Ö ö ■w « o r;^ o <» o ö .2 'S isch ett. ■2 'r^ o o N C; r-< o öo N • s _tr o tß ^ 3 o 3 ^-2 _fcX) V3 -2f„ >-, c o c cö -bJ S 3 C ' J3 ^ c8 CO M to u a '> ^ ^ fep _2 5 to bX) 0) 0) J3 :3 _2 G :3 > II ^ u ^ -4^ Oh r2 '^ o ^ -g -t-> _2 -1-J -u ;-i ;-l •c^ .■^ j'ä ;^ ■^ ."^ .•c« "^ FT <>» ^ * I ^^ I» S) 1 Ö I r'n i. 1 -d !h ^ äff) ^ ■*^ säi^ ^??^-"ei'' "^ ® ^ I ^ ^ä ^5 ^£ ^ ^ S ^ 1 .^ä -12 •!& .^ .| -g a «s "°aa C bp S^ bp t^ bC ä bp _§ Ö _§ ü JS bp S -S fco 03 23 33 03 23 §-2 ^-^tc |3 g-g §^ gä r-, ''^ r^s-i _S-l ^.h!-' ,-^^^ — . 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Als besonders schöne Doppelfärbungen möchte ich noch erwähnen: Solidgrün und Deltapurpurin; die Gefässe etc. werden pracht- voll grün, das Parenchym aber roth tingirt. Mit Solidgrün gefärbte Prä- parate halten sich Jahre lang. Namentlich ist diese Doppeltinction bei Wurzeln der Monokotyledonen zu empfehlen, es hebt sich die grüne Kernscheide prachtvoll von dem rotheu Grunde ab. Statt Solidgrün kann auch ein anderes Grün, z, B. Brillantgrün, Methylgrün, Victoriagrün etc. angewendet werden, je nachdem eine bläuliche oder gelbliche Nuance gewünscht wird. Die Chry soidine mit irgend einem Azur in oder Pur pur in. Diese Doppelfärbung hat namentlich das Bild der Strychnos nux vomica sehr hübsch differenzirt, indem die äusseren Zellschichten durch das Chry- soidin bräunlich gelb, die inneren z, B. durch Beuzoazurin violett ge- färbt wurden. Methylenblau mit einem Purpurin liefert sehr hübsche Bilder, z. B. der Radix Peregiae. Eine besonders schöne dreifache Färbung, die projicirt ein brillan- tes Bild giebt, ist ein Querschnitt durch die Kartoffel, bei welchem die Gefässe grün, die parenchymatischen Zellen roth und die mächtigen Stärkekörner durch Jodjodkalium violett gefärbt sind. Selbstverständ- lich ist bei diesen Tiuctionen das Präparat nicht auszukochen , auch hat die Färbung bei ganz niederer Temperatur zu geschehen, weshalb man den Schnitt länger in der Lösung lässt. Interessant auch sind Tinctionen der Gefässbündel der Dikotyle- douen, in dem sich wohl die verdickten Gefässe mit der einen Farbe tingiren, während das dazwischen liegende Cambium mit der zweiten Färbung sichtbar gemacht werden muss. Die Reihe der Doppelfärbungen ist dadurch natürlich eine sehr grosse geworden, und kann sich Jeder die zu seinem Zwecke beste Methode selbst zusammenstellen, dies wird namentlich nöthig sein zum Zwecke der Photographie und zwar speciell bei Anwendung orthochro- matischer Platten. Das eigenthümliche Verhalten der Farbstoffe hat auch ein gewisses Interesse für Forstleute ; es ist bekannt, dass die Jahresringe gewisser VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 43 Hölzer schwer zu zählen sind. Streicht man mit einem Pinzel, der z. B. in MethylviolettlösiiDg getaucht ist, rasch über die etwas geglättete Stelle, — Glättung mit Reisser genügt schon, — und wäscht die Farbe aus, so erscheinen die Jahresringe deutlich gefärbt und difFerenzirt. Bei Herstellung der Präparate zu photographischen Zwecken muss das Material ausserordentlich sorgfältig ausgelesen werden. Auch sind die Farbstoffe darnach zu wählen, so z. B. wird man mit Methylen- blau nie wirklich schöne Bilder erhalten, während die mit Chrysoi- dinen gefärbten Zellen sich scharf abheben, besonders wenn daneben ein Purpurin oder Azurin verwendet wurde. Anderseits aber sind die mit Solidgrün, Methylenblau, Methylgrün, Brillantgrün etc. tingirten Präparate für Projectio- nen mittels Pinakoskop oder Sonnenraikroskop zu Vorlesungszwecken ausserordentlich günstig. Die Präparate, in Glyceringelatine einge- bettet, können direct im Einschalter befestigt projicirt werden, ohne dass man ein Schmelzen der Gelatine zu befürchten hat, so habe ich z. B. einen Querschnitt von Lignum Santali direct auf sensibles Papier projicirt und so 10 imd 20 Minuten exponirt, ohne dass das Präparat Schaden gelitten hätte. Präparate, welche zur Projection dienen, müssen stärker tingirt werden als solche zu mikroskopischen Zwecken, man wird deshalb zu concentrirteren Lösungen greifen. Präparate, welche dem Auge über- färbt erscheinen, sind für Projectionen, namentlich mittels Sonnenmikro- skop, sehr günstig, vorausgesetzt, dass sie überhaupt noch durchsichtig sind. Zu Projectionszwecken ist es erforderlich, dass das Präparat mittels feiner Zinnfolie vollständig umgeben und abgeblendet werde, die Photo- graphien sowohl als die Projectionen fallen viel schärfer aus; und wird das Bild von hinten auf eine durchsichtige Wand von Pauspapier ge- worfen, so erhält man ein äusserst günstiges Demonstrationsobject, das in Folge der verschiedenen Farbentöne der Gewebselemeute mit Leichtigkeit auch von grösserer Versammlung betrachtet werden kann. Ist das Schema, die schematische Zeichnung, für Schulen sehr bequem und instructiv, so bietet doch das lebende Bild einer Projection den grossen Vortheil der unmittelbaren Naturausicht, und kann z. B. durch eine Anzahl Präparate die Variation der einzelnen Pflanzen zu besserem Verständniss gebracht werden. Sagt man z. B., die Gefässbündel des Tuber Aconiti bilden einen Stern, und es giebt thatsächlich Wurzeln, die denselben prachtvoll zeigen, so giebt es aber noch eine viel grössere Anzahl, die Figuren aufweisen, welche mit einem Stern auch nicht die 44 Viuassa: Beiträge zur pliarmakognostischen Mikrobkopie. VIII, 1. leiseste Aebnlichkeit haben, in solchen Fällen sind Projectionsbilder verschiedener Präparate mehr am Platze als das reine Schema. Vor allem aber ist das Tingireu mikroskopischer Präparate von praktischem Werthe. Es sind meist eben die sehr charakteristischen Gewebeelemente, welche sich mit Solid grün, Methylenblau, Bril- lant grün etc. färben. Kommt es nun z. B. darauf an, Schlempen zu untersuchen, so hat man einfach die betreffenden Objecto mit Natronlauge auszukochen, mit viel Wasser, das etwas mit Essigsäure angesäuert ist, auszuwaschen und mit der betreftenden Farbe zu tingiren, und man wird die chara- kteristischen Zellen bei weitem rascher finden als ohne Färbung. Will man aber z. B. den Sitz des Gerbstoffes in einem Gewebe feststellen, so hat man dasselbe mit einem sonst nicht fixirbaren Farbstoff zu be- handeln, es wird sich diejenige Parthie dauernd färben, welche das Tannin enthält, da sonst der Farbstoff auswaschbar ist, z. B. mit ge- wissen Oxy azofarbstoffen. Nach Feststellung der Thatsache, dass gewisse Farbstoffe nur Parenchym, andere nur verdickte Zellen färben, war es von Interesse, zu wissen, ob sich diese Versuche und Resultate mit der Praxis decken, und auffallender Weise finden wir, dass diejenigen Farb- stoffe, Av eiche Wolle und Seide subjectiv färben, die verdickten Zellen tingiren, während anderseits d i e - Jen igen Farben, welche nur das Parenchym färben, auf der Baumwolle subjectiv haften bleiben, ein Resultat, das der Beachtung werth ist. (Cfr. Tabelle II p. 45 — 48.) Besonders interessant ist das Verhalten der drei Victoriablau. Ich hatte mir alle Mühe gegeben , den blauen Farbstoff aus dem parenchy- matischen Gewebe zu entfernen und selbst chemische Reagentien ange- wendet. Ich muss hier einschalten, dass ich auf die Idee, ob ein Zu- sammenhang der mikroskopischen Tinction und der Technik bestehe, erst gekommen war, nachdem ich bereits alle Farbstoffe durchprobirt hatte; ich sandte dann die Tabelle Herrn Prof. Wolff mit der Bitte, das Ver- halten der Farben zu Seide, Wolle, Baumwolle etc. einzeichnen zu wollen; das Werk von Schultz und Julius war damals noch nicht er- schienen. Es zeigen nun gerade alle drei Victoriablau die Eigenthüm- lichkeit, sowohl Wolle als Baumwolle subjectiv, also ohne Beize zu tingiren, wodurch das Verhalten des Farbstoffes zu Gefässen und Paren- chym erklärt wird. Gewöhnlich nimmt man in der medicinischen Mikroskopie an, dass betreffende Tinctionsflüssigkeiten mit den Zellelementen, welche sie VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 45 Tabelle II. Farbstoff' 1. Safraiiin T 2. Vesuviii 3. Neuvictoria- "TÜu, extra 4. Lichtgrün SF gelblich 5. Victoriablau R G. Ponceau SR 7. Chrj soiMiii A 8, Clirysoi«lin P 9. Echtroth A 10. Safranin 11. Phloxin Araidofarbstoff Aniidofarbstoft' Farbstoff der Amidorosanilin- reihe Farbstoif der Amidorosanilin- reihe I'arbstoff der Ainidorosanilin- reihe Oxyazofarbstoff Amidoazofarb- stoff Oxyazofarbstoff Amidofarbstoff Resorcinfarbstoff Mikroskopisch färbt Grefässe etc. kirsch- roth, alkalisch Parencbym braunroth färbt verdickte Zelhvände schön braun färbt verdickte Zellwände blaugrün, auch Proto- plasma schwach im angesäuerten Bade fär- ben sich verdickte Zellen grünlich dilferenzirt sehr gut, färbt Gefässe dunkler als Pa- renchyra färbt vei'dickte Zellen, lässt sich jedoch leicht aus- waschen färbt 'verdickte Zellen schön orange färbt Gefässe etc. schön färbt verdickte Zellen roth, leicht auswaschbar färbt verdickte Zellen kirschroth färbt verdickte Zellen roth, Farbe aber nicht haltbar Technisch färbt Seide und Wolle di- rect ohne Beize, Baum- wolle mit Tannin und Brech- weinstein roth. färbt Wolle, Seide und Leder rothbraun, Baumwolle rauss vorher mit Tannin gebeizt sein. färbt Seide, Wolle, Jute und Leder, mit Tannin und Brechweinsteiri gebeizte Baumwolle grün. färbt Seide und Wolle im sauren Bade grün. färbt Seide und Wolle, in saurem Bade auch Baum- wolle direct, und zwar letz- tere sowohl in essigsaurem Bade als nach vorherigem Beizen mit Tannin und Brechweinstein. färbt Wolle in saurem Bade roth färbt Wolle und Seide di- rect, Baumwolle nach Beize mit Tannin. färbt Wolle und Seide di- rect, Baumwolle nach Beize mit Tannin. färbt Wolle in saurem Bade roth. färbt Wolle und Seide di- rect, Baumwolle gebeizt mit Tannin und Brechweinstein. färbt Seide und Wolle ohne Beize, Baumwolle mit Blei- acetat. 46 Vinassa: Beiträge zur pharmakognostisclien Mikroskopie. Tabelle II. VIII/1. Farbstoff Chemiscli Mikroskopisch Technisch 12. Krystallvio- lett 5B0 13. Cousroroth 14. Cvanosin 15. Victoriablau 4R K). Orange II 17. Violett B IS. Phospliiii 19. Vietoriablau Bß 20. Roccellin 21. Solidgrün in Kry.stallen 22. Anraniin 0 23. Benzopnrpn- rin 4B Farbstoff der Eosaniliiireihe Amidotetrazo- farbstoff' Resorcinfarbstofi' Farbstoff der Amidorosanilin- reihe Oxyazofarbstoff Araidofarbstoff der Rosanilin- reibe (?) Amidofarbstoff Farbstoff der Aniidorosanilin- reihe. Sulfosäure Amidofarbstoff" der Rosanilin- reihe Farbstoff der Amidorosaiiilin- reihe Amidotetrazo- farbstoff färbt Gefässe etc. violett färbt parenchyraatisches Gewebe roth färbt Gefässe etc. fiichsin- roth differenzirt sehr gut, Ge- fässe dunkelblauviolett, Parenchym heller färbt verdickte Zellen schön orange, ist aber auswaschbar färbt Gefässe etc. schön violett färbt verdickte Zellen differenzirt sehr gut, Ge- fässe dunkler, Parenchym heller blau färbt verdickte Zellen roth- braun, lässt sich leicht aus- waschen färbt verdickte Zellen prachtvoll blaugrün färbt verdickte Zellen gelb, besondei's auf Zusatz von etwas Salzsäure färbt Seide und Wolle di- rect, Baumwolle nach vor- heriger Beize mit Tannin und Brechweinstein. färl)t Baumwolle ohne Beize färbt Seide und Wolle ohne Beize, Baumwolle mit Blei- acetat gebeizt. färbt Wolle uiul Seide di- rect, Baumwolle sowohl di- i'ect als nach Beizung mit Tannin und Brechweinstein. färbt Wolle in saurem Bade orange. färbt Wolle und Seide di- rect, Baumwolle mit Tannin. fiirbt Seide und Wolle di- rect rothgelb, Baumwolle mit Tannin. färbt Seide und Wolle, ebenso Baumwolle und zwar sowohl direct als gebeizt. färbt Wolle in saurem Bade. färbt Wolle und Seide di- rect blaugrün, Baumwolle nach Beizung mit Tannin und Brechweinstein. färbt Wolle und Seide, Baumwolle mit Tannin und Brechweinstein, wird auch zum Färben von Papier verwendet. färbt dünnwandige Zellen färbt Baumwolle im Seifen- braunroth. verdickte nicht bade i'othbraun. VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostischen Mikroskopie. 47 Tabelle II. Farbstoff Chemisch Mikroskopisch Technisch 24. Deltapui'piiriii 25. Methylgriin 26. Diamantfncli- sin No. 0 27. Erj'throsiii 28. Bordeaux 29. Methylenblau 30. Eosiii 31. Benzopiirpn- riu B 32. Benzopiirpu- rin 6R 33. Chinoliiigelb 34. Rosazurin G 35. Cong-ocoriiith B 36. Hessisch Gelb 37. Tnchroth B Aniidotetrazo- farbstoff Amidofarbstoff der Rosanilin- reihe Rosanilinfarb- stoff Resorcinfarb- stoff Schwefelhaltiger Amidofarbstofl' Resorcinfarb- stoff Amidotetrazo- farbstoff Amidotetrazo- f'arbstoff Chinophthalon Gemischte Amide und Oxy- tetrazofarben wie Rosazurin wie Rosazurin Oxyazofarbstoff färbt parenchymatisches Gewebe schön roth färbt Gefässbündel pracht- voll grün, ähnlich Solid- färbt Gefässe carminroth, parenchymatisches Ge- webe nicht färbt verdickte Zellen rothviolett färbt verdickte Zellen schwach, ist leicht aus- waschbar färbt verdickte Zellen [ mit g Stich schön blau mit grünlichem färbt verdickte Zellwan- dungen gelbroth, leicht auswaschbar färbt parenchymatisches Gewebe braunroth färbt dünnwandige Zellen ziegelroth färbt verdickte Zellwände gelb, aber schlecht färbt dünnwandige Zellen schön kirschroth färbt parenchymatisches Gewebe schön rothviolett färbt dünnwandige Zellen schwach gelb färbt verdickte Zellen rothviolett ; auswaschbar färbt Baumwolle direct ohne Beize. färbt Wolle und Seide di- rect ohne Beize, Baumwolle mit Brechweinstein und Tannin. färbt Wolle, Seide und Le- der direct roth, Baumwolle muss vorher mit Tannin lind Brechweinsteiu ge- beizt sein. färbt Wolle gelblichroth mit gelblichrother Fluorescenz. färbt Wolle und Seide di- rect, Baumwolle gebeizt. wird auf Baumwolle mit Brechweinstein und Tannin fixirt. färbt Wolle und Seide gelb- lichroth, auf Baumwolle mit Bleiacetat zu fixiren. färbt Baumwolle im Seifen- bade roth. färbt nur Baumwolle ohne Beize. färbt nur Wolle und Seide ohne Beize. färbt nur Baumwolle im Seifenbade bläulichroth. färbt nur Baumwolle im Seifenbade braunviolett. färbt nur Baumwolle im Seifenbade gelb. färbt Wolle in saurem Bade braunroth. 48 Vuiässa: Beiträge zur pliarmakognostischen Mikroskopie. VIII. 1. Tabelle II. Farbstoff Chemisch Mikroskopisch Technisch 38. He.ssi.sch Pur- pur 39. Naphtliorubiu 40. P:chtroth 41. (;hry.samiu II 42. Ohrysophenin 43. Azoviolett 44. Azoblan 45. C-hrysaniiu I 4G. Brillautg-rüu in KrystalleBe extra .stark 366 47. Brillauto-eli» 48. C'urcuniin 49. Benzoazurin R 50. Methanilgelb 51. Salpetersau- res Chrysoidüi wie Rosazurin Oxyazofarb Stoff Oxyazofarb.stoff Amidotetrazo- farbstoff Amidotetrazo- farbstofi' Oxytetrazo- farbstoff Oxytetrazo- farbstoPT Amidotetrazo- farbstoff Farbstoff der Amidorosanilin- reihe Amidotetrazo- farbstoff Azoxyfarbstoff Amidotetrazo- farbstoff Amidoazofarb- stoff Amidoazofarb- stoff filrbt dünnwandige Zellen roth färbt verdickte Zellen vio- lett, ebenso Protoplasma färbt verdickte Zellwände röthlich, leicht auswaschbar färbt parenchymatisches Gewebe braiin färbt dünnwandige Zellen gelb färbt parenchymatisches Gewebe blauviolett färbt dünnwandige Zellen grauviolett färbt parenchymatisches Gewebe gelbbraun färbt verdickte Zellwan- dungen schön blaugrün färbt dünnwandige Zellen orangefarben färbt Gefässe etc. gelb färbt parenchymatisches Gewebe blauviolett färbt dickwandige Zellen gelb färbt verdickte Zellen dnnkelgelb färbt Baumwolle im Seifen- bade roth. färbt Wolle und Seide im sauren Bade ohne Beize. färbt Wolle und Seide im sauren Bade ohne Beize. nur auf Baumwolle haftbar. färbt nur Baumwolle im Seifenbade gelb. färbt nur Baumwolle im Seifenbade blauviolett. fäi'bt Baumwolle im Seifen- bade grauviolett. nur auf Baumwolle ohne Beize haftbar. färbt Seide, Wolle, Jute und Leder direct, Baum- wolle nach Behandlung mit Tannin und Brechweinstein. färbt Baumwolle im Seifen- bade gelb. färbt Wolle und Seide im saureu Bade röthlichgelb. nur auf Baumwolle ohne Beize haftbar. färbt Wolle und Seide ohne Beize. färbt Wolle und Seide ohne Beize, auf Baumwolle mit Tannin und Brech Weinstein. VIII, 1. Vinassa: Beiträge zur pharmakognostisclieii Mikroskopie. 49 fiirben oder differenziren, chemische Verbindungen eingehen, dies kann nun hier nicht der Fall sein, denn hätten StickstofFsubstanzen mit der Färbung" etwas zu thun, so müssten nothwendiger Weise gerade die- jenigen Farben, welche Wolle und Seide färben, das parenchymatische Gewebe tingiren, denn nur dieses besitzt lebendes Protoplasma. Allein es ist gerade das Gegentheil der Fall, diejenigen Farben, welche sich der Gefässe und der verdickten Zellen überhaupt bemächtigen, färben Wolle und Seide subjectiv, während diejenigen, die am parenchymatösen Gewebe haften, nur Baumwolle echt färben. In Folge dessen können wir hier von einer chemischen Verbindung nicht reden, es müssen physi- kalische Verhältnisse vorliegen, und zwar kann es nur auf die Schnelligkeit der Imbibition der Tinctionsflüssigkeit ankommen; ich glaube, dass hier mehr die Rauhheit des Gewebes (Gefässe, todtes Protoplasma, Wolle, Jute) sowie die Dicke der Zelle entscheidend sind. Legen wir einen Schnitt in eine concentrirte Farblösung und zwar einer Farbe, welche an verdickten Zellwändeji haftet, so wird nach kurzer Zeit nur das oben erwähnte Zellelement gefärbt, während es sich aus den parenchymatösen Zellen leicht auswaschen lässt; lassen wir aber den Schnitt sehr lange in der Lösung, so wird schliesslich das Paren- chym in einer Weise gefärbt, dass die Farbe nur sehr schwer aus- zuwaschen ist; wird dann ein solcher Schnitt in die andere Farblösung gelegt, so schlägt sich auch der neue Farbstoff nieder, bildet jedoch eine Combinationsfarbe ; auch auf diesem Wege lassen sich ganz hübsche Färbungen erzielen. Der einzige Weg, der hier entscheiden kann, ob es sich um chemische Verbindung oder physikalischen Process handelt, kann das Experiment mit frischen Pflanzen feststellen. Auf meine An- regung hin hat Herr Fankhauser, Gymnasiallehrer in Bern, verschie- dene Versuche angestellt und ist zu folgenden Resultaten gelangt. Wird ein Pflanzenstengel aufrecht in eine Farblösung gestellt, die zum Beispiel Fuchsin oder Methylenblau enthält, so steigt die Farblösuug in den Gefässen in die Höhe und tingirt letztere wie sich das mikro- skopische Präparat färbt. Die Farbe geht durch den Stengel bis in die Blattnerven und die äussersten Gefässbündel, nur stets diese färbend. Dass es sich also hier um Capillarattraction und Imbibition der betreffenden Gefässe und Gefässbündel handelt, liegt auf der Hand. Allein wenn der Versuch umgekehrt vorgenommen wird, erhalten wir genau die gleichen Resultate. In einem umgekehrt zur Wachs- thumsrichtung in die Tinctionsflüssigkeit gesteckten Zweige steigt die Farblösung wieder nur in den Gefässen aufwärts und lässt das paren- chymatöse Gewebe vollständig ungefärbt, womit, glaube ich, der Beweis, Zeitschr. f. wiss. Miki-oskopie. VlII, 1. 4 50 Vinassa: Beiträge zur pliarmakognostiscben Mikroskopie. VIII, 1. dass es sieb lediglich um physikalische Vorgänge handelt, voll- kommen erbracht ist. Endlich war es interessant zu wissen, ob eventuell zwischen diesen vorbesprochenen physikalischen Eigentliümlichkeiten nnd der chemischen Znsammensetzung irgend ein Zusammenhang existire. Wiederum hatte Herr Prof. Hans Wolff in Winterthur die Freundlichkeit, mir darüber Auskunft zu geben, und ich habe in der Tabelle die Verhältnisse zur Anschauung gebracht, wobei ich mich der von Herrn Prof. Wulff ge- brauchten Ausdrücke bediente. Ohne zu viel Gewicht darauf legen zu wollen, zeigt sich nun, dass die Mehrzahl der Oxyazofarben zwar die verdickten Zellen färben, jedoch leicht auswaschbar sind. Die Tetrazo- farben scheinen eine besondere Vorliebe für das parenchymatische Gewebe zu besitzen, während Amidofarben die verdickten Zellen vorziehen. Wie sich die Sache wirklich verhalte, ist Sache des Farbchemikers, und leider ist dieser Theil der Arbeit, den Herr Prof. Wolff behandeln wollte, un- ausgeführt geblieben, eine weitere Untersuchung wäre gewiss interessant. Zum Schlüsse sei es gestattet, noch einzelne Punkte über das Fixiren der gefärbten Präparate zu erwähnen. Da dieselben aus dem Waschwasser direct, also noch feucht in die Einbettungsmasse, hier Glyceringelatine, gelangen, ist es unmöglich, dass die Farbe schon so haftet, dass sie durch das Glycerin nicht gelöst werde. Man thut gut, dieselben zu fixiren und zwar indem man für Amidofarben wie Methylen- blau, Fuchsin etc. eine Beize von Gerbstoff und dann Brechweinstein benützt, Oxyazofarben wie Ponceau etc. mit Ziunchlorid fixirt. Dabei ist natürlich vorher das Fixirungsmittel auszuprobiren, indem sich oft die Zellwanduugen durch das Fixirungsmittel trüben und man ein schleierhaftes Bild erhält. Man wird deshalb auch den Alaun und zwar in ca. lOprocentiger Lösung in Betracht ziehen müssen. Eine Anzahl Amidoazofarben, wie das Benzopurpurin fixiren sich schon im alkali- schen Bade, ohne eine andere Beize. — Um den vielen an mich gerichteten Anfragen zu entsprechen, will ich hier noch mittheilen, dass Herr Büohi, Optiker in Bern, allein die Ausführung meines Mikrotomes übernommen hat, und bitte ich, sich direct an ihn zu wenden. Lugano, 17. März 1891. [Eingegangen am 25. März 1891.] VIII, 1. Kleinere Mittheilungen. 51 Kleinere Mittlieiluno'en. Einige neue empfehlenswerthe Farbstoffconipositionen. Von Docent Dr. R. Hau^ in München. 1. Hämatoxylin in essigsaurer Thonerde. Diese Farbcomposition hat mir in der letzten Zeit sehr gute Dienste geleistet, indem sie ausserordentlich rasch und intensiv färbt und desshalb oft noch in Anwendung gezogen werden konnte mit Er- folg bei Präparaten, die in Folge der Fixation etc. sehr schwer tingibel geworden waren. Es lässt sich sowohl zu allen gewöhnlichen Kern- färbungen benutzen, als auch kann es bei den meisten Nerveufärbungs- methoden in Anwendung gezogen werden, wobei es noch den Vortheil hat, dass es sehr gut haltbar ist. Eine Vorbedingung hat es, wie ja die meisten Hämatoxyliue, es muss sehr gut ausgereift sein. Es eignet sich mehr zur Schnitt- als zur Stückfärbung. Die Bereitung ist folgende sehr einfache: 1 g Hämatoxylin wird in 10 cc Alkohol absolutus gelöst; diese Lösung wird in 200 cc reine wässerige essigsaure Thonerde (Liquor Aluminis acetici) gegeben. Die Flüssigkeit hat unmittelbar nach der Bereitung ein tief violett- schwarzes Aussehen; diese Farbe ändert sich dann während des mehr- wüchentlichen Ausreifens in eine mehr braunschwarze und erinnert, wie ja vorauszusehen, ziemlich an das saure Hämatoxylin Ehelich's. Trü- bungen treten wenig auf, und bleibt die alte Lösung klar, tief braun- roth bei durchfallendem Licht. Will man das Ausreifen beschleunigen, so kann man etliche cc gesättigte Lithion carbonicum-Lösung zugeben. Angezeigt ist es, gut zu überfärben, was bei dieser (reifen) Lösung meist in kürzester Zeit geschehen ist, und hinterher mit Salzsäure- alkohol ad maximum zu entfärben, ein Verfahren, das Verf. auf alle Hämatoxyline (bei pathologischen Objecten) mit Vorliebe anzuwenden 52 Kleinere Mittheilungen. VIII, 1. pflegt, da sonst die Differeazining, besonders wenn eine Gegenfärbung ansgeführt werden soll, selten eine so schöne, exact klare ist als bei maximaler Ueberfärbung und maximaler Entfärbung. Nacli dem Salz- säurealkohol werden die Schnitte am besten bloss in Wasser ausgewaschen bis sie blau geworden sind; Ammoniakneutralisation ist nicht anzurathen. Als Contrastfarbe für die difFerenzirten Schnitte kann natürlich neutraler Carmin oder Eosin genommen werden ; sehr passend ist aber auch Eryth rosin in wässeriger Lösung. Es kann übrigens letzteres auch der Hämatoxjiin-Stammlösung gleich beigefügt werden. 2. Alaun- Borax- Carmin mit essigsaurer Thonerde. Färbt schärfer, heller als Alauncarmin und dauerhafter. Kann auch zum Stückfärbeu benützt werden. Bereitung: 1 g Carmin wird mit 1 g Borax und 2 g Ammoniakalaun verrieben und mit 100 cc Liquor Aluminis acetici eine halbe Stunde (oder länger) gekocht. Dann Decantiren, Filtriren nach 24 Stunden. Meist erst in einigen Wochen gut brauchbar. — Auswaschen in Wasser. — Färbung langsam. 3. Ammoniak- Lithion- Carmin mit Ammonium cMoratum. Färbt prachtvoll intensiv erdbeerroth ; bloss für Schnitte. Färbung in einer bis drei Minuten. DifFerenziren der überfärbten Schnitte in Salzsäurealkohol; dann sofort in absoluten (Pikrin)alkohol. Bereitung: 1 g Carmin wird mit 2 g Ammoniumchlorat verrieben und in 100 cc Wasser gekocht; die Lösung ist trüb. Nach dem Erkalten fügt man tropfenweise zu: 15 bis 20 cc Liquor Ammonii caustici und Lithion carbonicum pur. 0"3 bis 0'5. Jetzt tritt allmählich Lösung ein und die durchscheinende feurig klare Farbe kann filtrirt werden. Färbt sofort nach der Anfertigung intensiv. Die Tinction ist sehr dauerhaft, besonders für schwer tingible Präparte zu verwenden. [Eingegangen am 20. März 1891.] VIII, 1. Kleinere Mittheilungen. 53 Nachtrag zu meiner Mittheilung über die Kochs -Wolz'sche Mikroskopirlampo. Von P. Schiefferdecker in Bonn. Meiner ersten Mittheihmg ' habe ich noch Einiges nachzutragen. Die Leuchtkörper sind inzwischen noch besser und haltbarer ge- worden, sie sind jetzt so widerstandsfähig, dass ein Abplatzen nicht mehr zu befürchten ist. Bei weiterem Gebrauche habe ich noch gefunden, dass bei g r ö s - serenmit Hämatoxylin gefärbten F 1 ä c h e n eine leichte Aenderung des Farbentons eintritt, die indessen kaum störend wirkt. Ferner thut man gut, mit dem Lichtquautum möglichst sparsam zu verfahren. Die Menge des vorhandenen Lichtes verführt leicht, zu viel Licht anzuwenden, dadurch werden die Bilder aber weniger scharf und das Auge ermüdet. Am besten fährt man, wenn man nur gerade so viel Licht anwendet als unbedingt nothwendig ist. Häufig ist es besser, das Stabende nicht unmittelbar unter die Blend- öifnung zu bringen, sondern ein klein wenig tiefer einzustellen, wieviel, probirt man am besten aus. Namentlich bei sehr zarten ungefärbten Objecten, bei denen es sich also um beste Definition und mattes Licht handelt, ist diese tiefe Einstellung zu empfehlen. . Endlich verwende man als Zuleitungsschläuche für die Gase wo- möglich keine neuen Schläuche. Dieselben enthalten in der Regel noch Staub, und dieser setzt sich in dem sehr genau gearbeiteten Brenner fest und verstopft denselben theilweise, wodurch natürlich die Flamme und damit das Licht erheblich beeinträchtigt wird. ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 450 ff. [Eingegangen am 2. April 1891.] 54 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Referate und Besprecliiing*en. 1. Fräparationsmethoden im Allgemeinen. Lo Bianco^ S., Metodi usati nella Stazione zoologica per la conservazione degli animali marini. [Die in der Zoologischen Station (zu Neapel) gebräuch- lichen Conservirungsm ethoden für Seethiere]. (Mittheil. a. d. Zool. Station, Neapel Bd. IX, 1890, p. 435— 474). Lo BiANCo , der Conservator der Zoologischen Station zu Neapel, hat die von ihm angewendeten Conservirungsmethoden für Seethiere nunmehr veröffentlicht. Wenn dieselben auch vorwiegend eine gute Fixirung und Erhaltung der Thiere für Museumszwecke beabsichtigen, so liegt doch auf der Hand, dass sie auch für morphologische und histo- logische Studien von Vortheil sein können. Handelt es sich z. B. darum, besonders bei kleineren Thieren, durch Schnittserien die gegenseitige Lagerung der einzelnen Organe zu einander zu erforschen, so kann man bei Benutzung zusammengezogener oder geschrumpfter Thiere nur zu leicht irre geführt werden, und der Besitz in natürlicher Form conser- virter Thiere ist in vielen Fällen nicht nur wünscheuswerth, sondern absolute Nothwendigkeit. Um dieses zu erreichen, dazu sollen eben die veröffentlichten Methoden dienen. Freilich darf mau bei Anwendung dieser nicht vergessen, dass viele Dinge sich nicht genau vorschreiben lassen. So kommt es z, B. in vielen Fällen sehr darauf an , dass die Fixirungsflüssigkeiten in dem richtigen Moment zugesetzt werden, d. h. dann, wenn das Thier sich in einer bestimmten Verfassung befindet; da der Eintritt derselben aber von vielen, wechselnden Nebenumständen abhängig ist und auch sehr nach den einzelnen Individuen wechselt, so muss darüber das Gefühl, ich möchte sagen, der Tact des Conserviren- den entscheiden, und darin wird man es dem erfahrenen Conservator nicht so leicht nachmachen. Dass dessen Methoden in der That Vor- VIII, 1. Referate und Besprechungen. 55 züglicbes leisten, ist so bekannt, dass es nicht nötliig ist, darüber Worte zu verlieren. Die Aufbewahrung der fixirten Thiere geschieht in 70procentigera Alkohol (nur in bestimmten Fällen in OOprocentigem). Sehr kleine Thiere, Larven und Eier werden in kleinen , mit Watte geschlossenen Tuben aufgehoben, und diese wieder in ein grösseres Gefäss mit Alko- hol gethan. Schliesst man die kleinen Tuben direct mit Korken, so zieht der Alkohol allmählich Gerbsäure aus den letzteren, und diese färbt die Objecte und macht sie zum Theil unbrauchbar. In den Fällen, wo man schwachen Alkohol anwendet und sich denselben unmittelbar durch Verdünnung herstellt, muss man vor seiner Benutzung so lange warten, bis die sich ausscheidenden Luftblasen entwichen sind, weil sich diese sonst an das Object ansetzen und störend wirken. Die Flüssig- keiten von GoADBY, Owen und Wickeksheimer sind nicht anwendbar. Chromsäure dient vorzüglich zum Abtödten und Fixiren gelatinöser und weicher Thiere, Essigsäure für solche, die sich leicht einziehen (darf nicht lauge einwirken) und solche, die transparent sind (Transpa- renz bleibt leidlich erhalteu). Osmiumsäure wird für gelatinöse Thiere (nur bis zur leichten Braunfärbung, mit Süssw^asser uachwaschen), aber nicht so oft als es früher geschah, benutzt. KLEiNENBEKG'sche Flüssigkeit wird nur noch selten und fast ausschliesslich für histologische Zwecke angewendet. Milchsäure (einpromillig) dient für Larven und gelatinöse, kleine Organismen. Salzsäure, Salpetersäre, Schwefelsäure, Holzessig werden selten gebraucht. Subli- mat wird viel benutzt, und nachher mit Jodalkohol (P. Mayee) ausge- waschen, um den üeberschuss zu entfernen und das Brüchigwerden zu verhüten. C h r o m s au re s K a 1 i (öprocentig) ist nicht sehr zu empfehlen, wegen des nachher im Alkohol entstehenden Niederschlages; die Ent- färbung der Alkoholpräparate geschieht durch Zusatz einiger Tropfen concentrirter Schwefelsäure. Kupfersulfat (5- bis lOprocentig, mit warmem Wasser hergestellt) ist gut für Larven und zarte Thiere ; es muss aber, falls nicht Nachbehandlung mit Säuren folgt, sehr gut mit Wasser ausgewasclien werden. Chlor al hydra t (in Seewasser) dient zum Betäuben und ferner dazu, die in Steinen, Kalkalgen, Röhren etc. verborgenen Thiere herauszulocken (6 bis 12 Stunden lange Einwir- kung). Die gebräuchlichsten Mischungen sind: Alkohol, TOprocentig -j- Chromsäure, Iprocentig, zu gleichen Theilen. Alkohl, öOprocentig, 100 cc -|- Salzsaure, concentrirt, 5 cc. Alkohol, 35procentig oder TOprocentig, 100 cc -\- alkoholische Jodtinctur 2-5 cc. Seewasser 100 cc -\- Alkohol, absolut, 5 cc. 56 Referate und Besprechungen. VIII, 1. 1. Chromsäure, Iprocentig, 100 cc + Essigsäure, concentrirt, 5 cc. 2. Chromsäure, Iprocentig, 10 cc + Essigsäure, concentrirt, 100 cc. Chromsäure, Iprocentig, 100 cc -\- Osmiumsäure, Iprocentig, 2 cc. Chromsäure, Iprocentig -\- Kr.EiNENBEKG'sche Flüssigkeit zu gleichen Theilcn. Kupfersulfat, lOprocentig, 100 cc + Sublimat, gesättigte Lösung, 10 cc. Chromsaures Kali, öprocentig, 100 cc -\- Osmiumsäure, 1 procentig, 2 cc. Sublimat, concentrirt, 100 cc -f- Essigsäure, concentrirt, 50 cc. Sublimat, concentrirt, 100 cc -{- Chromsäure, Iprocentig, 50 cc. Iletlioden für die einBeinen AWieilimgen. Trotosoa (nur die grösseren Species). Man fixirt die Gregarina mit KLEiNENBERft'scher Flüssigkeit; von den Radi dar ia die Tlia- lassicoUa mit Chromsäure, balbproceutig (1 Stunde), die Aulacanthidae und Aeauthometrae mit Alkohol, öOprocentig, oder durch Zusatz einiger Tropfen Osmiumsäure, Iprocentig, oder mit Sublimat in Seewasser. — Sphaero zoi dae (Beandt) werden mit Alkohol, oÖprocentig, -[~ Jod (15 bis 60 Minuten; umrühren!) abgetödtet, kommen dann auf einige Stunden in Alkohol, SÖprocentig, und endlich in solchen von 50 Procent (12 Stunden) und 70 Procent. Sphaerozoum mit Isosporen-Bildung wird nicht mit Jodalkohol, sondern mit concentrirtem Sublimat fixirt. Myxo-, Acro- und Collosphaera werden mit Chromsäure, Iprocentig ('/a bis 1 Stunde) conservirt. — Acinetidae behandelt man mit Sublimat -\- Seewasser (Trichophrya), oder mit Osmiumsäure (Acineta). — Vorti- cellidae werden mit kochendem Sublimat, concentrirt, fixirt. Porifera. Für Sammlungszwecke genügt Einlegen in Alkohol, TOprocentig. Die Halisarcidae behandelt man um Coutractionen zu ver- meiden 30 Minuten mit Chromsäure, Iprocentig, oder 15 Minuten mit Sublimat, concentrirt. Für Uutersuchungszwecke kommen die Schwämme, wenn sie nicht grösser als 10 cm sind, direct in Alkohol, 90 procentig oder absolut; sind sie grösser, so werden sie mit einem scharfen Messer vorher zerschnitten, dann aber ebenso behandelt. Um Trockenpräparate herzustellen, wäscht man sie ein Paar Stunden mit Süsswasser, legt sie auf einen Tag iu gewöhnlichen Alkohol und trocknet sie dann an der Luft und der Sonne. Anthozoa müssen sich nach dem Fange erst wieder iu reinem resp. fliessendem Meerwasser erholen und ausstrecken. Einige thun das letztere nur dann, wenn das sie beherbergende Wasser nicht gewechselt wird und anfängt sich zu zersetzen. Bei den Alcy ouaria bewährt sich plötzliches Eintauchen der ausgestreckten Colonien in Alkohol, OÖprocentig oder absolut, mit nachfolgender Injectiou von ebensolchen in die Colonie VIII, 1. Referate imd Besprechungen. 57 (v. Koch). Oder man zieht, wenn die Thiere (Corniilaria, Clavularia, Rhizoxenia, Sympodiiim) ausgestreckt sind, das Wasser mittels Heber soweit ab, dass die Thiere gerade noch davon bedeckt bleiben und giesst dann plötzlich die doppelte Menge (als die des noch vorhandenen Wassers) von Chrom-Essigsäure No. 2 oder Sublimat-Essigsäure darauf. Sowie die Thiere abgetödtet sind, nimmt man sie heraus, damit nicht durch längere Einwirkung der Säuren die Kalkspicula zerstört werden , und legt sie erst in Alkohol, öOprocentig, und dann in solchen von 70 Procent, indem man dabei dem Präparat einen leichten Stoss giebt. Statt Chrom- Essigsäure kann man auch heisses Sublimat, concentrirt, anwenden und nachher mit Süsswasser auswaschen. Grosse Colonien von Alcyonium können direct in Chrom-Essigsäure No. 2 getaucht und gleich nach Eintritt des Todes in schwachem Alkohol frei aufgehängt werden ; etwaige Luftblasen, welche sich an das Präparat ansetzen, werden durch Er- schütterung des Glases entfernt. — Pennatulidae werden ebenso be- handelt. Sie bleiben nur einige Secunden in der Chrom-Essigsäure und die grösseren (P. phosphorea, Cophobelemnon) werden vom Ende der Wurzel aus mit Alkohol, TOprocentig, injicirt und dann dort unterbun- den, damit der Alkohol nicht wieder abfliesst. — Grössere Gorgoni- dae werden ebenfalls mit Chrom-Essigsäure behandelt, müssen aber wegen ihrer Empfindlichkeit in dem Gefässe conservirt werden, wo sie sich befinden und dürfen nicht herausgenommen werden. Kleinere Colonien können auch mit kochendem concentrirten Sublimat abgetödtet werden. — Corallium rubrum muss sich in fliessendem Wasser aus- strecken und wird mit kochendem concentrirten Sublimat (Ya Volum des Wassers) fixirt; die Farbe bleibt dann gut erhalten, während sie in Chrom-Essigsäure verbleicht. — Zoautharia (Antipathes) übergiesst man mit concentrirtem Sublimat (= Volum des die Thiere beherbergen- den See Wassers). — Actinaria. Bei vielen Formen ist das Resultat sehr unsicher. Anemonia sulcata wird mit Chrom-Pikrinsäure (:= Volum des Wassers, 5 bis 10 Minuten) Übergossen, dann in Chromsäure, ^f^- procentig, gethan (verkehrt aufgehängt). Eloactis, Sagartia Dohrnii, Paranthus, Corynactis, kleine Aiptasia tödtet man mit kochendem con- centrirten Sublimat, und giebt sie nachher in Chromsäure, VaPi'ocentig (einige Minuten). Bei Heliactis, Bunodes wird % des Wassers entfernt und durch Chloralhydrat, 2promilIig, ersetzt, dann wird soviel Wasser abgesaugt, dass das Thier noch gerade bedeckt ist und kaltes concen- trirtes Sublimat zugesetzt. Adamsia wird mit der Schale, nach Ent- fernung des Pagurus, umgekehrt aufgehängt, mit einer Glasglocke be- deckt und durch unter diese geblasenen Dampf starken Tabakes narko- 58 Referate und Besprechungen. VIII, 1. tisirt und, wenn sie unempfindlich geworden ist, noch 2 bis 3 Stunden mit Chloroformdämpfen behandelt. Darauf wird mit Chrom-Essigsäure No. 2 fixirt und mit Chromsäure, y.iprocentig, gehärtet. Ad. palliata konnte auch durch allmählichen Zusatz von Alkohol narkotisirt und ausser mit der Chrom-Essigsäure aucli mit warmem concentrirten Subli- mat fixirt werden. Cladactis, Cereactis, Bunodeopsis kommen in Chrom- Essigsäure No. 2, darnach erfolgt Härtung in Chromsäure, Iprocentig. Cerianthus behandelt man mit Essigsäure, concentrirt , Actinia mit kochender Sublimat-Essigsäure (darauf Härtung in Chromsäure, '/apro- centig). Edwardsia narkotisirt man durch allmählichen Alkoholzusatz und tödtet man mit warmem concentrirten Sublimat. Polythoa fixirt man mit kochendem concentrirten Sublimat (gelingt schwer !) — Larven von Actinien werden coiiservirt mit concentrirtem Sublimat oder Chrom- Essigsäure No. 2. — M a d r e p 0 r a r i a (Astroides) giebt man in koclien- des Sublimat -f- Essigsäure (= Volum des Wassers), dann in Alkohol, 35- und TOproceutig, wobei auch jedesmal die Thiere vom Mund aus damit injicirt werden. Hydromedusac. Die aus der Tiefe gefischten Formen kommen sofort direct in Alkohol, die aus geringerer Tiefe werden mit warmem concentrirten Sublimat (Tubularidae auch mit kaltem) fixirt, in Süss- wasser gegossen (zur Abkühlung) und dann mit süssem Wasser ausge- waschen und nach 5 Minuten in schwachen Alkohol gebracht. Grosse Colonien von Tubularia und Pennaria können auch mit Sublimat -\- Chromsäure (= Volum des Wassers) fixirt, und nach wenigen Minuten in Alkohol gebracht werden. — Medusen der Tubularidae (Eleu- theria, Cladoneraa, Podocoryne) tödtet man in Sublimat -|- Essigsäure (grosse Menge); andere (Lizzia, Oceania) in conccntrirter Essigsäure und legt sie dann in ein Gemisch von Alkohol -}- Chrorasäure (sacht umrühren! 15 Minuten) und endlich in Alkohol, 35- und TOproceutig. Oceania conica und Tiara werden vorher durch Seewasser -\- Alkohol (3procentig) narkotisirt, dann ebenso behandelt — Medusen der Campanularidae. Eucope, Gastroblasta, Obelia werden mit Kupfer- sulfat (wenige Minuten) fixirt, Mitrocoma, Aequorea in Essigsäure ge- tödtet, dann auf 15 bis 30 Minuten in Chrom-Osmiumsäure gethan. Tima wird in Chromsäure , 5procentig, getödtet (5 Minuten), dann in Chrom-Osraiumsäure gehärtet ('/> Stunde wenigstens). Olindias wird in Essigsäure getödtet, in Chromsäure, Iprocentig, gehärtet (Tentakel mit der Pincette ausstrecken!). ^ T rachym edusae kommen in Chrom- Osmiumsäure (5 bis 20 Minuten, je nach Grösse), Cunina kann vorher VIII, 1. Referate und Besprechungen. 59 in concentrirter Essigsäure getödtet werden. Das Abplatten der Glocken wird durch ein untergelegtes Uhrglas vermieden. Acalephae. Charybdea wird mit Chrom-Essigsäure No. 2 fixirt, dann in Chromsäure, '/aprocentig, gehärtet (Tentakel aufhängen!). Nausithoe, Ephyra von Pelagia, Rhizostuma werden fixirt, indem man dem sie beherbergenden Wasser 3 Procent einer Iprocentigen Osmium- säure zusetzt ; sowie sie leicht braun geworden sind , kommen sie in Wasser zum Waschen, dann in Alkohol, 35- und TOprocentig. Pelagia noctiluca tödtet man mit Chrom-Osmiumsäure; wenn das Thier sich be- reits in schwachem Alkohol befindet, wird es in umgekehrter Stellung vermittels an die Tentakelenden gebundener Fäden aufgehängt. Cotylo- rrhiza wird nach der Abtödtung mit Osmiumsäure (wie oben) auf wenig- stens 2 Wochen in chromsaures Kali, öprocentig, gelegt (nach ein Paar Tagen Wechseln der Flüssigkeit); dann kommt sie in Alkohol, 35pro- centig (häufig wechseln), dem eventuell anfänglich einige Tropfen con- centrirter Schwefelsäure zugesetzt werden. Die Larven der Acalephen werden mit warmem concentrirten Sublimat, die Strobilaformen auch mit Essigsäure, concentrirt (9 Theile), -)- Osmiumsäure, Iprocentig (1 Theil), fixirt, darnach mit Siisswasser gewaschen. Siphonophora werden sofort nach dem Fang conservirt; die dazu benutzten Gläser müssen ganz rein, ohne Spur von Säuren sein. Atho- rybia fixirt man mit Kupfersulfat -f Sublimat. Die zarten Species müssen unter Wasser aus einem Recipienten in den anderen überge- gossen werden. Physophora, Agalma, Haiistemma werden mit Kupfer- sulfat -f- Sublimat fixirt (nicht direct auf das Thier giessen !) und nach wenigen Minuten direct in Alkohol, 35procentig (ein Paar Stunden) und TOprocentig, mit Hilfe grosser Spateln übergeführt. Die Luft aus den Glocken wird durch leises Drücken entfernt, und in die Glocken rauss Alkohol eingespritzt werden. Forskalia wird ebenso fixirt, kommt aber dann, je nach Grösse, 2 bis 6 Stunden in FLEMMiNo'sche Flüssigkeit, wird mit Süsswasser gewaschen und allmählich in Alkohol übergeführt; grosse Colonien können auch in chromsaurem Kali -|- Osmiumsäure über 24 Stunden gehärtet werden. Die definitive Aufbewahrung ge- schieht in einem entsprechenden, nicht zu weitem Tubus, der vollständig mit Alkohol gefüllt, mit Watte geschlossen und umgekehrt in einen anderen weiteren Tubus mit Alkohol gesteckt wird ; eine Auf bewahrungs- methode, welche sich für alle Thiere mit leicht abreissenden Anhängen empfiehlt. Apolemia wird wie die vorigen getödtet und dann die be- treffende Flüssigkeit durch Chromsäure, Iprocentig (in der das Thier 60 Referate und Besprechungen. VIII, 1. 20 Minuten bleibt), und diese dann durch Süsswasser und Alkohol er- setzt (immer vermittels Heber!). Rhizophysa wird mit warmem con- centrirten Sublimat getödtet, in Wasser gewaschen und erst in schwachen Alkohol gethan. Physalia muss in langen Cyliudern couservirt werden. Es geschieht dies mit Sublimat + Essigsäure (= % Volum des Wassers); gehärtet wird sie mit Chromsäure, ^pi'ocentig (20 Minuten), dann in Alkohol, 50- und TOprocentig, gelegt. Hippopodius, Galeolaria, Abyla werden mit Kupfersulfat -j- Sublimat fixirt und dann direct in schwachen Alkohol gebracht. Praya wird ebenso getödtet, aber dann 2 Tage in chromsaurem Kali -|- Osmiumsäure gehärtet. Diphyes wird mit warmem Sublimat fixirt. Velella tödtet man mit Chrom-Pikrinsäure oder Subli- mat -j- Chromsäure und bringt sie nach wenigen Minuten direct in schwachen Alkohol. Porpita wird allmählich durch Zusatz einiger Tropfen KLEiNENBEKCj'scher Flüssigkeit zu dem Wasser vergiftet, und, wenn sie anfängt roth zu werden, direct in diese Flüssigkeit und nach 15 Minuten in schwachen Alkohol gethan. Ctenophora lässt man in Chrom-Osmiumsäure fallen und bringt sie nach 15 bis 60 Minuten, je nach der Grösse, in Alkohol, dessen Stärke man allmählich bis 70 Procent steigert. Beroe ovata erhält man in ihrer Form, durch Einführung einer mit der nöthigen Luft gefüllten, zuge- stöpselten Glasröhre. Beroe Forskälii bat letzteres nicht nöthig und wird mit Kupfersulfat -\- Sublimat fixirt und mindestens eine Stunde lang in Chrom-Osmiumsäure gehärtet. Callianira kann ausser nach obiger Methode auch durch ein Gemisch von 1 Volum concentrirten Holzessig, 2 Volumina concentrirten Sublimat und 1 Volum Chromsäure, '/iprocentig, fixirt werden. Cestus Veneris lässt man in wenig Wasser, giesst plötzlich Chrom-Essigsäure No. 1 darüber und rollt sie spiralig auf; nach 10 Minuten wird mit Süsswasser nachgewaschen und dasselbe vorsichtig durch immer stärkeren Alkohol ersetzt. Echinoderma. Crinoidea. Antedon rosacea kommt in Alkohol, TOprocentig, A. phalangium aber in solchen von 90 Procent. Penta- crinoide Larvenformeu werden vor dem Einsetzen in Alkohol 2 bis 4 Stunden mit Chloralhydrat, Ipromillig, narkotisirt. — Asteroidea. Stellenden lässt man mit den Ambulacralfurchen nach oben in Alkohol von 20 bis 30 Procent absterben. Auf Luidia (in wenig Wasser) giesst man Chrom-Essigsäure No. 2, und bringt sie dann direct in schwachen Alkohol. Brisinga wirft man plötzlich in Alkohol absolutus. Bipinna- rien werden mit Chrom-Essigsäure oder Chrom-Osmiumsäure (wenige Minuten) fixirt, andere Larvenformen mit concentrirtem Sublimat. Ophiu- VIII, 1. Referate und Besprecliungen. 61 riden lässt man in Süsswasser absterben, kleine Formen legt man direct in schwachen Alkohol. Ophiomyxa wird in Chromsänre, yaproceutig, gehärtet, Ophiopsila direct in absolntem Alkohol getödtet. — Echi- n 0 i d e a. Die Fixirung geschieht (in wenig Wasser) mit Chrom-Essig- sänre No. 2, und dann erfolgt sofortiges Einlegen in Alkohol. Für ana- tomische Zwecke durchbohrt man bei grossen Thieren das Skelett an zwei gegenüberliegenden Punkten und ersetzt die Körperflüssigkeit mit Alkohol, der bei dem Einsetzen in stärkeren jedesmal gewechselt wer- den muss. — Holothuroidea werden erst in reines Meerwasser ge- setzt und sobald sie (Holothuria, Sticliopus) die Mundtentakel ausge- streckt haben, mit einer Pincette hinter denselben gefasst und mit dem Kopftheil in concentrirte Essigsäure getaucht, während zu gleicher Zeit von einem Anderen vermittels einer Spritze Alkohol, 90procentig, in den After injicirt wird. Dann wird der After mit einem Kork ver- schlossen und das Thier in Alkohol, TOprocentig, gelegt. Bei jeder Erneuerung des Alkohols muss auch die Injection wiederholt werden. H. impatiens wird mit Fingern (bei kleinen Individuen mit Pincetten) hinter den Tentakeln (etwas zusammendrücken!) und am hinteren Ende gefasst und in concentrirte Essigsäure getaucht, und dann sofort nach dem Tode in Alkohol gebracht; Injection ist hier nunöthig. Aehnlich wird Thyone, Thyonidium, Phyllophorus behandelt. Cucumaria wird wie Holothuria behandelt, doch geschieht die Injection vom Mund aus ^ bei kleiijen Formen kann die letztere unterbleiben, Syuapta lässt man in einem Gemisch von gleichen Theilen Seewasser und Aether (oder Chloroform) absterben, dann wird mit Süsswasser (dem man auch 2 bis ?) cc Chromsäure, Iprocentig, zusetzen kann) nachgewaschen und ganz allmählich in stärkeren Alkohol übergeführt. Auricularia wird in Kupfer- sulfat -\- Sublimat oder Sublimat allein abgetödtet. JEntcropneusta. Balanoglossus fixirt man mit KLEiNENBEEG'scher Flüssigkeit oder Chromsäure, Yaprocentig; vorher kann man mit alko- holisirtem Meerwasser narkotisireu. Die Tornaria kann mit Kupfer- sulfat -\- Sublimat, Sublimat allein oder Chrom-Osmiumsäure conser- virt werden. Vermes. Cestoden werden mit kaltem, Trematoden mit warmem, Rhabdocoela und Dendrocoela mit kochendem conceutrirten Sublimat conservirt, doch darf bei einigen Polycladen das Sublimat nur massig warm sein. MüLLEE'sche Larven werden mit Sublimat (kalt oder kochend) fixirt. — Nemertinen lässt man 6 bis 12 Stunden in einer Ipromilligen Lösung von Chloralhydrat in Seewasser, die Widerstands- 62 Referate und Besi)rechungeu. VIII, 1. fälilg'eren (Laiigia, Amphiponis, Drepanophorus) darnach noch auf einige Stunden in einer gleichen 2promillig-en Lösung verweilen und härtet dann mit Alkohol. — Pilidi um -Formen werden mit Kupfersulfat -1- Sublimat, oder concentrirtem Sublimat allein, Nematoden mit concen- trirtem Sublimat oder KLEiNENBERG'scher Flüssigkeit, Chaetognaten mit Kupfersulfat -\- Sublimat oder Chrom-Osmiumsäure fixirt. — Ge- phyrea. Sipunculus tödtet man mit Chromsäure , Yaprocentig, oder durch Narkotisiren mit einer Lösung von Chloralhydrat in Seewasser, Ipromillig; doch ist in beiden Fällen das Resultat unsicher. Phascolo- soma lässt man in alkoholisirtem Wasser absterben; Phoronis wird erst mit diesem, dann mit kochendem concentrirten Sublimat behandelt. Bonellia taucht man, indem man das Thier nach dem Ausstrecken des Rüssels mit Hand und Pincette ausgestreckt hält, in KLEiNENBERG'sche Flüssigkeit bis der Tod eintritt, und lässt sie dann eine Stunde darin liegen. Die Zwergmänncheu conservirt man in warmem Sublimat, pe- lagische Larven von Echiurus in Kupfersulfat -j- Sublimat. — Hiru- dinea. Für Pontobdella, Branchellion empfiehlt sich Chromsäure, %- procentig, für Pseudobranchellion warmes coucentrirtes Sublimat. — Chaetopoda werden in Alkohol, 90procentig (!), aufbewahrt. Zumeist narkotisirt man sie durch Einlegen in Meerwasser, welches 5 Procent Alkohol absolutus enthält, bis sie sich nicht mehr bewegen, und härtet dann in Alkohol, 70- und 90procentig. Nicht auf diese Weise werden behandelt : Polymnia und Lanice (getödtet in Sublimat -\- Chromsäure) ; Siphonostamum diplochaetos (getödtet in Chloralhydratlösung, öprocentig, gehärtet in Chromsäure, Iprocentig), Ilcrmionidae (kommt direct in Alkohol); Chaetopteridae, Sternaspidae, Spirographis, Protula (legt man mindestens auf '/g Stunde in Chromsäure, Iprocentig). Mit kaltem con- centrirten Sublimat (nur 15 Minuten) werden getödtet: Amphictenidae, Hermellidae, Serpulidae (einige von dieser Familie legt man erst auf einige Stunden in eine Ipromillige Lösung von Chloralhydrat, um sie aus ihren Röhren herauszubringen) , einige Polynoinae, Polyodontes maxillosus, Eunicinae. Alciopidae werden mit Kupfersulfat -j~ Sublimat (nur 5 Minuten, gut auswaschen !), Tomopteridae ebenso oder mit con- centrirtem kalten Sublimat conservirt. Crustacea. Cladocera conservirt man mit concentrirtem Subli- mat oder Zusatz einiger Tropfen Osmiumsäure, Iprocentig, zum Wasser. — Ostracoda kommen direct mit Alkohol, TOprocentig. — Cope- poda. Freie tödtet man mit concentrirtem Sublimat in Seewasser (5 bis 10 Minuten); parasitische werden behandelt wie die freien oder direct VIII, 1. Referate und Besprecliungen. 63 in schwachen Alkohol gethan. — Cirripedia. Lepas, Concho- derma etc. conservirt man mit Alivohol, 35proceutig, Baianus mit Alko- hol, TOprocentig (wechseln !), Rhizocephala mit einem Gemisch von con- centrirtem Sublimat und Alkohol, 90procentig (gleiche Theile), darnach erfolgt Einlegen in Alkohol, TOprocentig. — Amphipoda giebt man direct in Alkohol, TOprocentig, die durchsichtigen, z. B. Phronima in concentrirtes Sublimat. — Isopoda werden direct mit Alkohol, TOpro- centig, getödtet, die Bopyriden und Entonisciden dagegen wie die Rhi- zocephalen oder mit concentrirtera Sublimat. — Cumacea und Sto- matopoda kommen direct mit Alkohol; die durchsichtigen Larven der letzteren auf wenige Minuten in concentrirtes Sublimat. — Schizo- poda werden direct mit Alkohol oder concentrirtera Sublimat getödtet. — Decapoda legt man, um die Autotomie zu vermeiden, in Süss- wasser, bis sie absterben, aber nicht länger, dann in Alkohol. Bei den Paguren muss der Alkohol oft gewechselt werden , und die Aufbewah- rung geschieht in 90procentigem. Larven werden mit concentrirtera Sublimat oder Zusatz einiger Tropfen Osmiumsäure, Iprocentig, zum Wasser conservirt. Pantopoda lässt man einige Tage leben, damit sie sich von den Fremdkörpern reinigen, und tödtet sie dann mit Chromsäure, y^proceutig. Mollusca. Lamellibranchia und Pr osobranchia wer- den meist mit alkohoHsirtem Wasser narkotisirl, was je nach Species verschieden lange Zeit beansprucht, und dann in Alkohol gethan. Man muss aber den richtigen Zeitpunkt wählen. Eventuell klemmt man zwischen die Schalen der Lamellibranchier ein Stückchen Holz, und bindet man bei den Prosobrauchiern den Deckel des Fusses an der Schale fest. Lima muss mit Chromsäure, y4procentig, abgetödtet wer- den. Natica josephinia wird durch allmählichen Zusatz von Alkohol, TOprocentig, zum Wasser betäubt (2 bis 3 Tage) und dann plötzlich mit concentrirter Essigsäure Übergossen und schnell in schwachen Al- kohol gelegt. Dasselbe geschieht mit N. millepunctata und N. hebrea, Nassa, Columbella, Conus, Trochus, doch werden diese alle durch Ein- legen in ein Gemisch von Meer- und Süsswasser zu gleichen Theilen narkotisirt. — Heteropoda. Atlantidae werden mit alkohoHsirtem Wasser narkotisirt (6 bis 12 Stunden), dann direct in Alkohol gelegt. Pterotracheidae tödtet man mit Chrom-Essigsäure No. 2 (10 bis 30 Mi- nuten, je nach Grösse) oder Chrom- Osmiumsäure; kleine Carinaria auch mit Kupfei'sulfat -f Sublimat. — Opistobranchia werden zum grössteu Theil mit concentrirter Essigsäure getödtet, mit welcher man 64 Referate und Bespreclumgen. VIII, 1. sie übergiesst. Bei manchen geschieht dies direct, nachdem sie sich in so wenig Wasser als möglich ausgestreckt haben (Philine, Elysiidae, Aeolidiidae, Triopa, Idalia, Polycera, Tethys [hier Nachhärten mit Chromsänre, Iprocentig]); andere narkotisirt man vorher mit alkoholi- sirtem Meerwasser (Doridium , Scaphander, Pleurophyllidia, Marionia, grosse Exemplare von Doris, Chromodoris), oder mit einem Gemisch von Süss- und Meerwasser (BuUidae). Mit Chromsäure werden conser- virt: Aplysia (Iprocentig, 15 bis 60 Minuten), A. depilans wird vorher durch 12stündiges Einlegen in eine Lösung von Chloralhydrat, Ipro- millig, betäubt), Pleurobranchaea (Iprocentig), Pleurobranchus (erst in 5procentige bis zum Tode, dann Einlegen auf 15 bis 60 Minuten in Iprocentige). KLEiNENBEECi'sche Flüssigkeit findet Verwendung für Gastropteron , Abtödten in alkoholisirtem Meerwasser bei Umbrella, Chrom -Osmiumsäure oder Chrom -Essigsäure No, 1 (wenige Minuten) bei Phyllirrhoe. Grosse Exemplare von Tritonia legt man in Süss- wasser und setzt einige Tropfen Essigsäure hinzu ; nach dem Absterben wird in Chromsäure, '/opi'ocentig, gehärtet. — Pteropoda. Hyalaeidae (Cavoliniidae) werden in wenig Meerwasser mit coucentrirtem Sublimat Übergossen, Creseis mit alkoholisirtem Wasser getödtet, CymbuUidae behalten die Form in Chrom - Osmiumsäure , bleiben transparent in PERfiNYi'scher Flüssigkeit (nach 15 Minuten üeberfiihrung in Alkohol, öOprocentig). Gymnosomata betäubt man 6 bis 12 Stunden mit Chloral- hydrat (Ipromillig) und tödtet sie dann durch Essigsäure oder Sublimat. — Cephalopoda werden am besten lebend couservirt (todte behandelt man einfach mit Chromsäure, Iprocentig auf 15 bis GO Minuten). Die Octopoden werden mit Chloralhydrat (2promillig) betäubt und kommen dann direct in Alkohol. Sind sie grösser als 15 cm, so werden sie in Chromsäure, Iprocentig (eine halbe bis einige Stunden), fixirt, darnach mit Wasser ausgewaschen und in Alkohol von 70 Procent übergeführt (oft wechseln!). Ocythoe kommt direct in Alkohol, Scaeurgus vorher erst auf 20 Minuten in Alkohol -}- Chromsäure, Die Dekapoden kom- men gleichfalls direct in Alkohol, und nur kleinere Arten werden vorher mit Chloralhydrat, 2promillig, oder alkoholisirtem Meerwasser betäubt. Sehr grosse Exemplare werden nach dem Tode an der Bauchseite etwas eingeschnitten. Loligopsis, Verania tödtet man mit KLEiNENBEKö'scher Flüssigkeit (1 Stunde) und bringt sie dann in schwachen Alkohol. Eier werden conservirt mit Chromsäure, Iprocentig, und kommen dann in immer stärkereu Alkohol bis zu 70 Procent; die in gemeinsamer Hülle eingeschlossenen kommen aus der Chromsäure direct in Alkohol, 50pro- centig, und bleiben darin. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 65 Bryosoa. Fhistra , Cellepora , Crisia , Bugula , Zoobothrium wer- den getödtet, indem man auf das sie enthaltende Wasser vorsichtig- nach und nach Alkohol giesst. Bugula purpurotincta und turbinata übcrgiesst man nach dem Ausstrecken plötzlich mit warmem Sublimat. Pedicellina, Loxosomn betäubt man mit Chloralhydrat, Ipromillig, und tödtet darauf mit Sublimat (sofort auswaschen !). Brachiopoäa. Kleine Exemplare legt man direct in Alkohol, grössere betäubt man vorher mit alkoholisirtem Wasser und klemmt ein Stückchen Holz zwischen die Schalen. T'unicafa. Appeudicularia werden mit Chrom-Osmiumsäure (5 Mi- nuten) fixirt. — Ascidiae simplices. Clavellina, Perophora lässt man in Seewasser sich ausstrecken, betäubt mit Chloralhydrat, Ipro- millig (6 bis 12 Stunden), tödtet mit Chrom -Essigsäure No. 2, härtet mit Chromsäure, Iprocentig (30 Minuten), und bringt sie endlich in Alkohol (von 35 bis allmählich 70 Proceut), indem man dabei immer jedes Thier vom Mund aus injicirt, was auch für die folgenden gilt. Phallusia behandelt man mit Chloralhydrat, Ipromillig, (3 bis 6 Stunden) und Chromsäure, Iprocentig (30 Minuten); Molgula, Polycarpa, Rho- palea und Chevreulius mit Chloralhydrat, Ipromillig (12 Stunden), Chrom -Essigsäure No. 2 und Chromsäure, Iprocentig (kurze Zeit); Cynthia und Styela ebenso aber mit Chloralhydrat, 2promillig (24 Stun- den). Ciona intestinalis tödtet man (in 30 Minuten ca.), indem man einige Tropfen Chrom -Essigsäure No. 2 dem Wasser zusetzt, dann bringt man sie mit Wasser gefüllt in Chromsäure, Iprocentig; nachher in schwachen Alkohol. Ascidia und Rhopalea lässt man mit einer Wasserschicht von 4 bis 5 cm bedeckt sein und giesst tropfenweise Chromsänre, Iprocentig, auf dessen Oberfläche, nach 12 bis 24 Stunden liärtet man in dieser Säure. — Ascidiae compositae. Gelatinöse Formen, z. B. Botryllidae, Polycyclus, Circinalium, Fragarium werden mit Chloralhydrat, Ipromillig, betäubt, durch üebergiessen mit warmem Sublimat getödtet und in Chromsäure, %procentig, gehärtet (30 Mi- nuten). Distaplia wird ebenso betäubt, mit Chrom -Essigsäure No. 2 getödtet und dann direct in schwachen Alkohol gebracht. Diazona violacea wird wie die Botryllidae behandelt, aber mit Chloralhydrat, 2promillig, betäubt (12 Stunden). Consistentere Formen und Lepto- clinum kommen vom Chloralhydrat direct in Alkohol. Pyrosoma hängt man in mit Salzsäure angesäuerten Alkohol auf (15 Minuten), bringt sie dann in Alkohol, 60procentig, und nachher allmählich in stärkeren. — Salpidae. Consistentere Formen kommen erst in ein Gemisch von Zeitschr. f. wiss. Miki-o skopie. VIII, 1. 5 66 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Süsswasser (100 cc) -|- concentrirte Essigsäure (10 cc) auf 15 Minuten, dann werden sie 10 Minuten in Süsswasser gewaschen und allmählich in Alkohol übergeführt (aufhängen !). Mittelweiche Formen werden 10 Mi- nuten lang mit Chrom-Essigsäure No. 1 behandelt uud kommen dann direct in schwachen Alkohol. Weiche Formen taucht man 15 bis 60 Minuten lang in Chrom- Osmiumsäure, wäscht dann mit Süsswasser und bringt sie in schwachen Alkohol. Ganz grosse Salpen hält man in dem schwa- chen Alkohol durch Einführung von Luft in die Höhle (Luftblasen oder mit Luft gefüllter Glastubus) in der Schwebe. Zu histologischen Zwecken conservirt man mit KLEiNENBEEa'scher Flüssigkeit (Todaro), wobei freilich die Form verloren geht. Doliolum tödtet man am besten mit Kupfersulfat -|- Sublimat (ein Paar Minuten) ab. Fisces. Will man die Flossen in guter Form haben, so rauss man lebende Fische verwenden. Amphioxus wird in alkoholisirtem (10 Pro- cent) Wasser getödtet, dann in Alkohol, 50procentig, und allmählich in stärkeren gebracht. Die übrigen Fische bringt man meist direct in Al- kohol, TOprocentig; grössere werden dabei wiederholt mit Alkohol, 90procentig, injicirt. Fische von weicherer ConsiSüCnz, z. B. Torpedo, fixirt man mit Chromsäure, Iprocentig (.30 Minuten), Teleosteer mit silberglänzender Haut, z. B. Trachypterus mit concentrirtem Sublimat (einige Minuten), transparente Larvenformen direct mit schwachem Al- kohol oder concentrirtem Sublimat, durchsichtige befruchtete Eier mit salzsäurehaltigem Alkohol. Grosse Selachier, die man für Präparations- zwecke (Skelett, Haut) längere Zeit aufbewahren will, legt man in Chlorkalinmlösung , lOprocentig. Embryonen von Selachiern (1 bis 10 cm Länge) legt mau 5 bis 15 Minuten in concentrirtes Sublimat, muss aber nachher gut mit Jodalkohol auswaschen ; diejenigen von Torpedo auf 15 Minuten in ein Gemisch von gleichen Theilen Chrom- säure, Iprocentig, und Sublimat, dann in schwachen Alkohol. Grössere Embryonen werden für histologische Zwecke ebenso behandelt, für Er- haltung der Form aber in Chromsäure, Iprocentig, gelegt (1 Stunde), mit Süsswasser gewaschen und in schwachen Alkohol übergeführt. P. SchiemeviB {Neapel). Stirliiig' , W. , Some recent and some new histological methods (Journ. of Anat. and Physiol. vol. XXIV, 1890, p. 601—610). Die „neueren Methoden" sind hauptsächlich nach der Zeitschrift für wissenschaftliche Mikroskopie mitgetheilt, die „neuen" betreffen fol- gende Organe und Gewebe. — Elastische Fasern der Lunge: Dünne VIII, 1. Referate und Besprecliungen. 67 Schnitte aiifg-eblasener und getrockneter Lungen werden auf dem Object- träger mit sehr verdünnter Magentalösung gefärbt und nach Entfernung des überschüssigen Farbstoffs wieder dem Austrocknen überlassen. Ein- schluss in Canadabalsam. — Muskelscheiben: Mehrstündige Maceration in der von Solüer auch zum Nachweis des Sarkolemms ' empfohlenen gesättigten wässerigen Lösung des kohlensauren Ammoniaks ist der Anwendung von Salzsäure vorzuziehen. — RANViER'sche Kreuze und FROMMANN'sche Linien : Der frische Nerv kommt auf 24 Stunden und im Dunkeln in eine halb- bis einprocentige Silbernitratlösung, wird in Wasser ausgewaschen, und zwei bis drei Tage lang in einer Mischung von gleichen Theilen Ameisensäure, Glycerin und Wasser dem Licht ausgesetzt. Einschluss in Glycerin. — Zur Darstellung ähnlicher Quer- streifen , nicht nur in den Achsencylindern der Nerven , sondern auch bei Ganglienzellen des Rückenmarks, wird die von Jakimovitch - modi- ficirte Methode Gkaudry's ^ empfohlen. — Die sehr kleinen, vollkommen frischen Stücke werden in verhältnissmässig grosse Mengen einer 0*25- procentigen (Nervenfasern des Rückenmarks) bis Iprocentigen (Ganglien- zellen des Rückenmarks) Silbernitratlösung eingelegt und 24 (Fasern) bis 48 (Zellen) Stunden lang bei öfterem Wechsel der Flüssigkeit im Dunkeln gehalten. Gut in Wasser ausgewaschen, werden sie dem Licht ausgesetzt bis sie eine braune Färbung annehmen und endlich in eine Mischung von je einem Volumtheil Ameisensäure und Amylalkohol auf 100 Theile Wasser übertragen. Hier verbleiben sie, ebenfalls im Licht und bei wiederholtem Flüssigkeitswechsel, so lange, bis alles überhaupt lösliche Silber wieder in Lösung gegangen ist, was bei Nervenfasern 2 bis 3 , bei Ganglienzellen 5 bis 7 Tage dauert. Einschluss in Gly- cerin. — Endlich wird empfohlen , Rückenmarksschnitte nach Färbung mit Methylenblau austrocknen zu lassen und dann in Canadabalsam ein- zuschliessen. Man erziele so scharfe Differenzirung der nur wenig ge- schrumpften Elemente. Br. Karl Fiedler {Zürich). Hoyer, H. , lieber den Nachweis des Mucins in Ge- weben mittels der Färbemethode (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 310—374). ') SuLGEK, B., Kohlensaures Ammoniak, ein Mittel zur Darstellung des Sarkolemmas (Diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 189). 2) Jakimovitcii, J. , Sur la structure du cylindve-axe et des cellules ner- veuses (Journ. de l'Anat. et de la Physiol. t. XXIII, 2, 1888, p. 142; cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 526). 3) Journ. de l'Anat. et de la Physiol. 1869. 68 Referate und Besprechungen. VIII. 1. Der bekannte Verf. dieser eingehenden vergleichenden Studie stellt zunächst fest, dass Mucin in den Schleimdrüsen und Becherzellen von Wirbelthieren wie Wirbellosen nur durch die sogenannten basischen TheerfarbstofFe Ehrlich'« *, welche später durch Weigert ^ auch als specifische Bacterienfarbstoffe charakterisirt worden sind , mehr oder weniger deutlich hervorgehoben werden können , während die sauren unwirksam sind. Von ersteren wurden mit positivem Resultat geprüft: Salz- und salpetersaures Rosanilin, das Fuchsin des Handels, wie das GRüBLER'sche „neutrale Fuchsin nach Unna", Magentaroth und das echte Magdala, Jodgrün, Methylgrün, Methylgrün 00, Dahlia, Methyl-, Gentiana-, Jod- und Krystallviolett , Victoriablau; von letzteren mit negativem Ergebniss u. A. : Säurefuchsin , Eosin , Fluorescein , Rose bengale, Phloxinroth, Echtroth, Bordeaux R., Crocein, Bibricher Schar- lach, Congoroth, verschiedene Tropäoline, Orange, Aurantia, Metanil- gelb; endlich erwiesen sich auch Corallin, Orcein, Coccinin, Kernschwarz als wirkungslos. Wie die sauren Anilinfarben verhalten sich alle die zahlreichen Carminlösungen, wie die basischen die alaunhaltigen Hä- matoxylinlösungen. Die letzteren theilen jedoch mit den bisher ge- nannten basischen Anilinfarben die Eigenschaft, nicht völlig zuver- lässige oder nicht ausreichend charakteristische Färbungen des Mucins zu geben. Bedeutend werth voller sind in dieser doppelten Richtung das Me- thylenblau und das als Bismarck- oder Vesuvinbraun bekannte Triamidobenzol, das schon von List für den angegebenen Zweck empfohlen worden ist. Beide liefern , in verdünnten Lösungen ange- wendet, intensive und gegen Alkohol sehr widerstandsfähige Mucin- färbungen. Namentlich das Methylenblau markirt selbst geringste Mu- cinspuren noch deutlich, während das Bismarckbraun nur grössere Mucinmengen scharf hervorhebt. Wie das Methylenblau kann das Me- thylen grün der Badischen Anilin- und Sodafabrik, das Dimethyl- phenylengrün von Geigy und Co. in Basel, das Metamidomala- chitgrün der Höchster Farbenwerke zur quantitativen Schätzung mucinhaltigen Secretes verwerthet werden , besonders bei Gebrauch schwacher Lösungen , wo sich das Gewebe nur wenig färbt. Das Safranin liefert, wie Paneth und Steinhaus zeigten, eine meta- chromatische Färbung des Mucins, welches orangefarben von dem rosa Gewebe und seinen rubinrothen Kernen absticht. Aber die Art der ») Aren. f. Anat. u. Physiol. Physiol. Abth., 1879, p. 167 u. 572. -) Arcb. f. pathol. Anat. u. Physiol. Bd. LXXXIV, 1881, p. 275. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 69 Fixirung und ganz iincontroUirbare Nebenumstände sind von solchem Einfluss, dass die Reaction als unbeständig bezeichnet werden muss und nur neben der Methylenblaufärbung benutzt werden sollte. Weitaus übertroffen werden aber auch diese Farbstoffe durch das Thiouin oder LAUTH'sche Violett, ein schwefelhaltiges Indamin- derivat, dessen vierfach substituirte Methylverbindung nichts anderes ist als das eben erwähnte Methylenblau. Es wurde von Ehrlich neben diesem und mit demselben Erfolge zur Färbung der lebenden Nerven- substanz verwendet '. Das LAuin'sche Violett ertheilt dem Gewebe eine schön hellblaue Farbe, von der sich die lebhaft rothvioletten Mucin- haltigen Elemente sehr auffällig abheben; zudem scheint die Intensität der Färbung nach dem jeweiligen Mucinreichthum dieser Elemente abgestuft zu sein. Da dieses Präparat, welches aus der Ba- disclien Anilin- und Sodafabrik stammt und dem Verf. durch Ehrlich übermittelt wurde, nicht im Handel zu haben ist, unterzog sich Hoyer weiterhin der Prüfung mehrerer analog constitiürter Handelspräparate. Als besten Ersatz empfiehlt er das als Amethyst bezeichnete Thionin der Firma Jon. Rud. Geigy u. Co. in Basel; das damit gefärbte Mucin zeigt nur eine etwas bläulichere Nuance gegenüber der mehr rothvioletten des echten Thionins. Recht gut ist auch das Toluidinblau der Höchster Farbwerke und der Badischen Anilin- und Sodafabrik. Eben- falls Metachromasie, aber in wenig auffälliger Nuance lieferten das Pheuylenblau von Oehler in Offenbach und das p-Phenylenblau der Höchster Farbwerke. Als beste Methode zum Zweck nachherigen Mucinnachweises em- pfiehlt Hoyer 2- bis 8stündige Behandlung der frisch entnommenen Organstücke mit öprocentiger Sublimatlösung, Auswaschen in 80pro- centigem Alkohol, Paraffineinbettung, Befestigung der Schnitte auf Cilimmcrplättchen durch Capillarattraction. Die Färbung geschieht mit stark verdünnten wässerigen Lösungen (2 Tropfen einer gesättigten wässerigen Lösung des betreffenden Farbstoffes auf 5 cc Wasser) und ist meist in 5 bis 15 Minuten vollendet. Auch Celloidineinbettung ist anwendbar , nur muss berücksichtigt werden , dass längere Alkoholein- wirkung die Färbbarkeit des Mucins beeinträchtigt (während sie sich in Paraffin unverändert erhält). In demselben Sinne wirken saure Fixi- rungsflüssigkeiten, wie Pikrin-, Chrom-, Salpeter-, Osmiumsäure, Flem- 1) Ehrlich, P., Ueber die Metliylenblaureaction der lebenden Nervensub- stanz (Deutsche med. Wochenschr. 1886, No. 4; cfr. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 97). 70 Referate und Besprechungen. VIll, 1. ming's Gemisch lu s. w. Absoluter Alkohol , rein oder zu gleichen Theilen mit Chloroform gemischt, als Fixiruugsmittel verwendet, liess zunächst die Metachromasie des Thionins nicht recht zur Geltung kom- men ; als aber die Schnitte kurze Zeit (eine halbe Minute etwa) der Einwirkung starker Sublimatlösung ausgesetzt, mit Alkohol ausgewaschen und dann erst gefärbt wurden , stellte sich die Doppelfärbung in voller Schönheit wieder ein. Es erwies sich sogar als vortheilhaft, das nach- trägliche Eintauchen der Schnitte in Sublimat auch nach Fixirung der Stücke in Sublimat vorzunehmen. Obwohl diese Erscheinung nach ver- gleichenden Versuchen nur auf die saure Reaction der starken Subliraat- lösung zurückzuführen ist, lässt sie sich durch Säuren oder andere saure Salze nicht völlig ersetzen, weil solche Stoffe eben die Färbbarkeit der Gewebe beeinträchtigen. Nur durch concentrirte Lösungen von Thionin, Methylenblau und Bismarckbraun in verdünnter Essigsäure ist die cha- rakteristische Mucinreaction ebenfalls hervorzurufen , wie denn auch durch die neutralen Lösungen erzielte Färbungen durch verdünnte Essig- säure nicht wesentlich geschwächt werden. — Der hyaline Knorpel , das Gallertgewebe des Nabelstranges , die EHRLicn'schen Mastzellen haben nicht nur gleich nahe Beziehungen zu den basischen Farbstoffen wie das Mucin der Drüsenzellen , sondern auch ganz identische Metachromasie, besonders bei Färbung mit Thionin und Safranin und nach Sublimatfixirung. Aus diesen und anderen That- sachen und Erwägungen leitet Hoyer eine interessante Hypothese ab über den Mucingehalt dieser verschiedenen Bildungen und über die Zu- sammensetzung des Mucins selbst, bezüglich deren jedoch auf das Ori- ginal verwiesen werden muss. Dr. Karl Fiedler {^Zürich). Pfeifer, W., Zur Kenntniss der Plasmahaut und der Va- cuolen nebst Bemerkungen über den Aggregat- zustand des Protoplasmas und über osmotische Vorgänge (Abhandl. d. math.-phys. Gl. der k. Sachs. Ge- sellsch. d. Wiss. Leipzig. Bd. XVI, 1890. — Leipzig [Hirzel] 157 pp.). In den vorliegenden Untersuchungen beweist der Verf. die von ihm schon früher vertretene Ansicht, dass die Plasmahaut heterogenen Ursprungs sei und durch Differenzirung aus der Leibessubstanz des Cytoplasmas entstehe, während de Veies neuerdings bekanntlich für homogene Bildung dieser Haut eintrat, die wie Zellkern und Chroma- tophoren immer aus ihresgleichen entstehen solle. Verf. untersuchte zunächst nur Myxomyceten, speciell meist Chon- I VIII, 1. Referate und Besprechungen. 71 drioderma difforme, dessen Cultiir und Behandlung er früher ' näher be- schrieb; die Berechtigung der üebertragung der Resultate auf andere Zellen kann aber nicht bezweifelt werden. Als Plasmahant oder Plasma- membran bezeichnet er allgemein die Oberflächenschicht des Proto- plasmas, während er speciell die äussere Plasmahaut als Hautschicht oder Hyaloplasmahäutchen, die innere Plasmahant als Vacuolenhaut oder Vacuolenwand bezeichnet. Neubildung der Hautschicht ist leicht zu beobachten, wenn man unter Wasser dünne Plasmodiensträuge durch- schneidet, deren Oberfläche durch adhärirende Fremdkörper markirt ist, was eventuell durch Aufenthalt in fein suspendirtem Carmin erreicht wird. Das freigelegte Körnerplasma bildet dabei an seiner Oberfläche unmittelbar die Hautschicht, indem die Körnchen von der Peripherie zurücktreten, oder die äusserste Körnerplasmaschicht geht unter dem Einfluss des AVassers zu Grunde, während die nächstfolgende ihre Rolle übernimmt. Die aus Hyaloplasma bestehenden Schnittränder neigen sich dabei nur etwas zusammen, wie es ebenso auch an Strängen erstarrter, 3- bis öprocentiger Gelatine der Fall ist. Anderseits wird aber die Continuität der Hautschicht durch Zusammenschliessen derselben her- gestellt, wenn Plasmodiensträuge dünner werden und sich schliesslich trennen. Verf. beobachtete auch, dass eine fast unbewegliche Pandorina und ein anderes Mal ein Aggregat von Vitellinkrystalloiden, die zwischen zwei Plasmodiumsträngen lagen, vom Protoplasma umwallt und so in einen von Hautschicht und Körnerplasraa" umgebenen Raum gebracht wurde, der mit letzterem als Vacuole fortgeführt wurde. Dadurch wird die directe Umbildung der Plasmahaut zur Vacuolenhaut bewiesen. Verf. wendete sich dann zur künstlichen Neubildung vonVacuolen und benutzte dazu eine Methode von grossem principiellen Werth. Er führte feste Partikel löslicher Körper in die Plasmodien ein und veranlasste dann deren Auflösung. Die dadurch erzielte locale Diö'erenz verursacht Bildung von Vacuolen. Die Einführung der Partikel löslicher Körper geschah mit Hülfe gesättigter Lösungen dieser Körper, worauf dann durch Auswasclien mit Wasser die Partikel theilweise gelöst wurden. Giftige Stofl'e dürfen bei diesen Versuchen natürlich nicht verwendet werden, aber auch sehr leicht lösliche sind gefährlich, weil die Plas- modien durch Steigerung der osmotischen Wirkung der gesättigten Lösung in der zur Aufnahme fester Partikel nothwendigen Bewegung ») Pfeffei;, W., Ueber Aufnahme und Ausgabe ungelöster Körper (Ab- haiull. d. math.-phys. Gl. der k. Sachs. Gesellsch. d. Wiss. Leipzig. Bd. XVI, 1890; cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 490j. 72 Referate und Besprechungen. VIII, 1. gestört werden. So contrabirten sich die Plasmodien immer beim Ein- bringen in concentrirte Lösung des vom Verf. sehr häufig verwendeten Asparagins, aber einige von ihnen begannen im günstigen Falle schon nach Minuten ihre Bewegung wieder und nahmen dann zahlreiche Asparaginstückchen bis zur Grösse von 0*07 mm auf. Das durch Zer- reiben und kurzes Absetzen in Wasser genügend fein erhaltene Aspa- ragin wird den Plasmodien auf offenem Objectträger oder unter auf Papierstreifen liegendem Deckglas am Besten nur von einer Seite dar- geboten. Verf. Hess die Plasmodien so 6 bis 20 Stunden lang Aspara- ginstückchen aufnehmen bei einer Temperatur von 13 bis 18 " C, höhere Versuchstemperaturen sind im Hinblick auf das oben über Aufhören der Bewegung in Lösungen leicht löslicher Salze Gesagte zu vermeiden, weil die Löslichkeit des Asparagins mit der Temperatur schnell steigt. Die meisten der aufgenommenen Asparaginstückchen finden sich dann nicht in bereits vorhandenen Vacuolen sondern direct im Plasma ein- gebettet. Wäscht man dann aber mit Wasser das umgebende Asparagin völlig aus, so entsteht eventuell schon nach Minuien um jedes Asparagin- stück eine Vacuole, die durch die osmotische Wirkung des sich auf- lösenden Salzes sich bis auf einen Durchmesser von 0*08 mm vergrössern. Deshalb begünstigen fortgesetzte Wasserzufuhr und Erwärmung bis auf 30 ° die Vergrösserung der Vacuolen und auch das anfängliche Ent- stehen derselben. Volle Lebensthätigkeit des Plasmodiums ist für die Erzeugung der Vacuolen nicht nöthig, denn dieselben traten auch auf, als nach Aufnahme der Asparaginstückchen die Plasmodien erst mit schwach chloroformhaltiger concentrirter Asparaginlösung und dann mit ebensolchem Wasser behandelt wurden, wodurch die Plasmaströmung sistirt wurde. Die Plasmodien geben das Asparagin durch Exosmose schnell ab und dementsprechend verkleinern sich die Vacuolen ; dasselbe wird erreicht, wenn man die Plasmodien in gesättigte Asparaginlösung legt, weil auch dadurch der Turgordruck in den Asparaginvacuolen auf- gehoben wird. — Ganz entsprechend wie mit Asparagin lassen sich Vacuolen in Plasmodien mit kleinen , durch Fällung erhaltenen und noch weiter zerriebenen Gypskryställchen erzeugen , nur entstehen die- selben wegen der geringeren Löslichkeit des Gypses weit langsamer und erreichen aus sedemlben Grunde auch nur einen Durchmesser von 0*04 mm. Sehr laugsame Vacuolenbildung ist auch mit Vitellinkrystalloiden zu constatiren, welche in Wasser freilich fast unlöslich sind, in den Plas- modien aber langsam gelöst werden; dementsprechend braucht man hier die Plasmodien nach der Aufnahme der Krystalloi'de nicht mit Wasser VIII, 1. Referate und Besprechungen. 73 auszuwaschen. Mit Hülfe dieser Krystalloide können auch lösliche Kör- per, die von diesen gespeichert werden, in die Plasmodien eingeführt wer- den. Verf. arbeitete besonders mit Krystalloiden, welche wasserlösliches Anilinblau gespeichert hatten und erzielte so blaue Vacuolen, die manche Vortheile bieten, z. B. wenn sie in geringer Zahl im Plasmodium vor- handen sind, leicht lange zu verfolgen sind. Auch konnte er die Ver- einigung blauer Vitellinvacuolen mit Asparaginvacuolen und in einem Falle auch mit einer pulsirenden Vacuole beobachten, wobei in letzterem Falle das Product die Pulsation einstellte. Das Anilinblau vermag aus den Vacuolen nicht nach aussen zu diosmiren. Zur Färbung der Kry- stalloide wurden dieselben in der 0"1- bis O'Olprocentigen Farbstoff- lösung 24 Stunden gehalten, dann mit Wasser abgespült und trocken aufbewahrt ; Anilinblau und Congoroth werden reichlich, Methylenblau etwas weniger gespeichert. Für Versuche mit Vitellin ist zu beachten, dass dasselbe aus verschiedenen Gründen in eine unlösliche Modification übergeht und auch in den Vacuolen deshalb oft ein Theil gequollen und ungelöst liegen bleibt. Die Krystalloide werden aus diesem Grunde, und weil an verschiedenen Stellen des Plasmodiums verschiedene Lösungs- bedingungen herrschen, verschieden schnell gelöst; die localen Differen- zen der einzelnen Stellen werden auch dadurch illustrirt, dass Carmin nur selten einmal in einer Vacuole von Chondrioderma gelöst wird. — Mit Methylenblau gefärbte Krystalloide verlieren in Plasmodien diesen offenbar rasch diosmireuden Farbstoff schnell. Anderseits zeigen mit Congoroth gefärbte Vitellinkrystalloide oder Lackmustückchen an, dass die Vacuolenflüssigkeit neutral oder ganz schwach sauer reagirt; Congoroth ist in neutraler oder alkalischer Lösung roth, in saurer blau. — Wie Vitellin verhält sich auch normales Calciumphosphat, welches in Wasser nicht, wohl aber in Plasmodien gelöst wird. Aehnlich, aber weniger gut als durch Gyps, können durch die schwerlöslichen Körper Phloridzin und Gentianablau Vacuolen erzeugt werden. Von ganz allgemeiner Bedeutung sind die Hinweise, die Verf. be- züglich der äusserst vielseitigen Anwendimgsfähigkeit der von ihm in den beschriebenen Versuchen benutzten Methoden macht. Im Vergleich zu nur diosmirende Körper aufnehmenden Zellen bieten die Plasmodien die sehr wichtige Möglichkeit, durch Einführung sehr verschiedener, be- sonders auch löslicher aber nicht diosmirender Körper in der beschrie- benen Weise Vorgänge im Plasma und den Vacuolen zu studiren. In dieser Richtung ist sehr zu beachten, dass Verf. auch auf die Einfüh- rung lebender Organismen und Benutzung derselben als physiologische Reagentien hinweist. Eingeführte Körper können wieder zum Nachweis 74 Referate und Besprechungen. VIII, 1. des Verhaltens anderer benutzt werden, wie Verf. z. B. mit Hülfe der Farbenänderung der mit Congoroth gefärbten Vitelliukrystalloide zeigte, dass 0'02procentige Citronensäure durcli Plasmodien ohne Schädigung derselben diosmirt. An Stelle von Vitellin können zur Einführung lös- licher aber nicht diosmirender Körper auch kleine Bläschen mit Nieder- schlagsmembran aus gerbsaurem Leim oder sehr kleine Splitter von Capillaren mit eingesogenem Inhalt verwendet werden. Verf. beschäftigt sich später auch mit dem Aggregatzustand des Protoplasmas und bildet sich dabei in folgender Weise auch ein Urtheil über die Cohäsionsverhältnisse im Plasmodium. Die ruhenden Rand- schichteu der Stränge werden in keiner Weise deformirt, wenn Körner von Carmiu, Indigo etc., die im strömenden Plasma mitgeführt werden, dagegenstossen, und Oeltropfen und Vacuolen werden beim Durchpressen durch enge Strömungskanäle deformirt, während selbst Vorsprünge des ruhenden Plasmas erhalten bleiben. Genauer lässt sich allerdings der Druck, den diese Oeltropfen oder Vacuolen in ihrem Streben nach der Gleichgewichtsfigur, der Kugelform, auf das ruhende Randplasma aus- üben, derzeit nicht angeben, weil die Spannung an der Grenzfläche der Vacuolen unbekannt ist, ^ aber Verf, macht darauf aufmerksam, dass es fernereu Studien unzweifelhaft gelingen werde, diese Oberflächenspannung resp. den Capillardruck an Vacuolen etc. zu bestimmen, was auch in Bezug auf die dann mögliche Angabe der Grösse der stromerhaltenden Kraft in den Plasmodien von grosser Wichtigkeit sein würde. Verf. weist darauf hin, dass sich hierzu vielleicht eine von Quincke - benutzte Methode verwenden lasse, nach der die Oberflächenspannung einer Flüssigkeits- blase aus dem Abstand von Kuppe und Bauch derselben ermittelt wird. Ausserdem sei Einführung weicher Körper von bekannter Cohäsion möglich, und es Hessen sich vielleicht auch aus der VergrösseruDg und Verkleinerung der Vacuolen bei Kenntniss der dabei wirksamen osmoti- schen Kräfte weitere Mittel entnehmen. Im ganzen kommt Verf. zu dem Schluss, dass das Plasmodium ein weicher Körper ist, dessen absolute Festigkeit 300 bis 1000 mg pro Quadratmillimeter wohl nicht übersteigt, während ein Bleidraht von gleichem Querschnitt erst bei einer Belastung von 1*9 bis 2-2 Kilo zer- reisst. Eine Veranschaulichung der Cohäsion und der anderen Verhält- nisse im Plasmodium erzielte Verf. durch eine Versuchsanordnung, bei der ein Achsenfaden flüssiger Gelatine sich in einem erstarrten Mantel ') Bezüglich einer angenäherten Berechnung vergleiche das Original. 2) Qm.NCKE in PoggexNdokpf's Ann. Bd. CXXXIX, 1870, p. 5. VIII, 1. Keferate und Besprechungen. 75 derselben Substanz bewegte. Zu dem Zwecke wurde 2procentige Gela- tine , in der Carmin aufgeschwemmt war , in eiuem Gefäss flüssig er- luilten und in dieselbe der eine Schenkel eines dünnen Glasrohres ge- taucht, während der andere mit einem Gefäss in Verbindung stand, in dem die Luft mit Hülfe einer Pumpe verdünnt werden konnte. In der Mitte war die Glasröhre zu einer Capillare ausgezogen, die an der Be- obachtungsstelle einen Durchmesser von 0*2 mm hatte. Durch Abküh- len der Capillare wurde eine erstarrte Gelatinewandschicht hergestellt, in der sich ein flüssiger Gelatiuefadeu bewegte ; die Dicke der Wand- schicht wuchs mit sinkender Temperatur. Wie sehr Zähflüssigkeit die Bewegung erschwert, geht daraus hervor, dass leichtflüssige Gelatine in der Capillare bei einem Luftdruck von 10 mm Quecksilber sich so schnell wie der Strom in Plasmodien bewegte, während zähflüssige dem Erstarren sich nähernde Gelatine nur durch einen Druck von 400 bis 500 mm in solcher Bewegung gehalten werden konnte. Zur Beurtheilung der Cohäsion der Plasmodien dienten dem Verf. auch Dehnungsversuche mit Hülfe von Plasmodiensträngen, die von einem Fabastengel frei in danipfgesättigter Luft hingen. Das frei schwe- bende Plasmodium wurde gewogen und dadurch das von dem einfachen, am Stengel ansitzenden Strange getragene Gewicht ermittelt. 30 bis 60 mg pro Quadratmillimeter wurde ohne Ueberschreitung der Elastici- tätsgrenze getragen, wenn die Spannung nicht länger als vier Minuten dauerte. Zur Untersuchung des Einflusses, welchen Aenderungen der Zusam- mensetzung des umgebenden Mediums auf die Oberflächenspannung von Protoplasten ausüben, benutzte Verf. gekappte Haare von Heracleum sibiricum, deren Cuticula schwer permeabel ist. Es konnte dann durch die entstandene Oeffnung Ammoniumcarbonatlösung oder ein sich all- mählich lösender Gypskrystall an die Plasmakuppe gebracht werden; dabei äuderte sich aber die Gestalt der Kuppe nicht wesentlich, woraus folgt, dass die Oberflächenspannung nicht merklich modificirt worden war. Ebenso und mit demselben Resultate kann auch mit durchschnit- tenen Staubfadenhaaren von Tradescantia operirt werden, wobei, wenn diosmirende Stoffe verwendet werden, auch die Vacuolenhaut mit diesen in Berührung kommt. Beiläufig erwähnt Verf. noch, dass die in Ver- band mit den amöboiden Bewegungen der Plasmodien vor sich gehen- den Plasmaströmungeu dementsprechend ganz oder fast ganz aufhören, wenn Plasmodien, die man in 5- oder lOprocentige Gelatine einbettet, mit dem Erstarren der letzteren jene amöboiden Bewegungen einstellen. Zum Schluss sind hier noch Bemerkungen anzuführen, die Verf. 76 Referate und Besprechungen. VIII, 1. als Anhaltspunkte giebt für die in mehrfaclier Beziehung wünschens- werthe Ausbildung leicht und schnell zu handhabender Methoden zur Bestimmung osmotischer Drucke und relativer osmotischer Werthe, da die plasmolytische Methode an lebenden Zellen nur in begrenztem Maasse genau und anwendungsfähig ist. Wenn man bei Thonmasse als Wider- lager bleiben will, so empfiehlt er die Anbringung von Glasurringen, um ohne Einkittung die nöthigen Verschlussstücke, Gummistopfen oder Gummiplatten ansetzen zu können. Vielleicht sei aber Pergamentpapier- masse für geringe Drucke vortheilhafter. Noch besser würde es sein, wenn zur diosmotischen Absperrung eine Masse verwendet würde, welche, wie Protoplasma, keine äusseren Membranogene bedarf, um sich in dauernder Coutinuität zu erhalten. Vielleicht sind in dieser Beziehung genügend dünne Oellamellen ausreichend durchlässig für Wasser, oder das Ziel kann durch Ausbreitung von Oel, durch Herstellung von Iläu ten aus ölhaltigem Collodium n. s. w. erreicht werden. Bei der mög- lichst zu beschleunigenden Messung geringer Drucke werden offene und einstellbare Manometer zu verwenden sein. — Verf. weist hier auch darauf hin, dass Tamman • zur Bestimmung isosmotischer Werthe in Nie- derschlagsmembranen den Schlierenapparat verwendet hat; indessen haben Versuche des Verf. diesen Apparat- zur Bestimmung der Orte von Stoffaustausch, Abgabe von Wasserdampf, ätherischen Oelen u. s. w. zu verwenden, zu keinem befriedigenden Resultat geführt, wenn auch der bei Verwundung, Plasmolyse etc. eintretende ansehnliche Austausch durch Schlieren erkannt werden konnte. Der Natur dieser Zeitsclirift nach kann auf die mit Hülfe der vor- stehend erwähnten Versuchsanordnungen gewonnenen Resultate und die angeschlossenen theoretischen Schlussfolgerungen, die sich besonders auch auf den Aggregatzustand des Protoplasmas und Osmose beziehen, leider nicht eingegangen werden. Aber auch schon ausserhalb dieses Zusammenhanges wird der Hinweis auf die Methoden des Verf. in sehr vieler Beziehung anregend wirken. Alfred Koch (Göttingen). ') Tamman, Ann. d. Physik u. Chemie, 1888, p. 300. ^) Tüi'LEH, PoGLiioNDOKFi-'s Aiin. Bd. CXXXI p. 33. Ucber Verbindung des Schlierenapparates mit dem Mikroskop vcrgl. Lehmann, Ü., Molecuhirphysik, Leipzig 1888, Bd. I p. 11; Exnek's Repert. d. Phys. Bd. XXI p. 555 u. Zcitschr. f. Instrumk. Bd. VI, 1886, p. 139, Seibert, ebenda Bd. II, 1882, p. 92. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 77 2. Präparationsmethoden für specielle Zwecke. A, Wieäere Thiere. Yerworil, M., Biologische Protisteu-Studien II (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. L, 1890, p. 443—468 m. 1 TH. u. 3 llolzschn.). Verf. benutzte zu seinen Untersncliungen Diffliigia lobostoma Leidy, welche Ferra wegen ihrer verhältnissinässigen Grösse leicht mit Hülfe eines zu capillarer Spitze ausgezogenen Glasröhrcheus von einer Glas- platte abgehoben werden kann. Da bei Färbungen sich die im Körper des Thieres befindlichen Körnermassen mitfärben, und auch die Schale Vieles verdeckt, so erhielt Verf. bei Untersuchung der Kernverhältnisse nur dadurch Resultate, dass er die Protisten direct oder nach Durcli- schneidung mit einer feinen Lanzette unter dem Mikroskope zerqueschte mit Hülfe des Deckglases. Die Kerne bleiben wegen ihrer festen Mem- bran ganz gut erhalten. — Der Kern liegt bei dieser Form stets im hinteren Drittel des Plasmakörpers. Man erhält also kerolose Theil- stücke, wenn der Körper etwa in der Mitte des Gehäuses durchschnitten wird. HenJcing (Göttingen). EisinOlid, J., Eine einfache Untersuchungsmethode für lebende Infusorien (Zool. Anz. Bd. XIII, 1890, p. 723). Da die Beobachtung lebender Infusorien durch deren in der Regel grosse Beweglichkeit sehr erschwert wird, so kam Verf. auf den sinn- reichen Einfall, diesen Thieren ein Hemmniss zu bereiten, indem er zu dem betreffenden Wassertropfen einen Tropfen einer dickflüssigen wässe- rigen Kirschleimlösung zusetzte. Jetzt vermochten die Infusorien trotz des lebhaften Spieles der Cilien eine Fortbewegung nicht auszuführen und konnten in Ruhe betrachtet werden. — Zu beachten ist, dass nach des Verf. Angabe Gummi arabicum und andere Klebemittel unbrauchbar sind. — Auf die gleiche Weise waren auch kleine Crustaceen, Würmer und Flagellaten zu zähmen. Heiiking {Göttingen). Ballnani, E. G., Sur la strueture intime du noyau du Loxo- phyllum meleagris (Zool. Anz. Bd. XIII, 1890, p. 110 ff.). Legt man den Körper dieses Infusoriums unter dem Deckglase fest, indem man entsprechend Wasser fortsaugt, so können durch Fixirung mit 0-5- bis Iprocentiger Osmiumsäure und Nachfärbung mit durch Essig- 78 Referate und Besiirechungen. VIII, 1. säure angesäuerter Metliylengrünlösung in den einzelnen Abschnitten des rosenkranzförmigen Kernes eine aufgerollte Kernschleife oder deren mehrere sichtbar gemacht werden. Zur Untersuchung ist Wasser- oder Oelimmersion nothwendig. Verf. vergleicht diese Schleifen denjenigen, welche er früher in den Kernen der Larve von Chironomus gefunden hat '. — Wird zu den wie vorhin behandelten Kernen ein Tropfen einer schwachen Ammoniaklösung (1 bis 2 Tropfen auf 15 bis 20 cc destil- lirtes Wasser) an den Rand des Deckglases gefügt, so blähen sich die Kernschleifen auf bis zum Vierfachen ihres Volumens und entfärben sich. Jetzt können die Schleifen von neuem sichtbar gemacht werden, wenn destillirtes Wasser, welches schwach mit Methylgrün (ohne Essigsäure) gefärbt ist, unter dem Deckglase durcligesogen und so das Ammoniak entfernt wird. Aber nun sind die Kernschleifen in Stücke zerfallen, und diese Stücke sind nur noch im Innern gefärbt und haben anderseits eine farblose Randzone, welche für die achromatische Substanz oder das Hyaloplasma der ursprünglichen Schleifen zu halten Verf. geneigt ist. Henking {Göttingen). Hertwig", 0., Experimentelle Studien am thierischen Ei, vor, während und nach der Befruchtung (Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. XXIV, H. 2, 3, 1890, p. 268—313). Den wichtigen Untersuchungen, welche die Gebrüder Hertwig vor drei Jahren in Betreff des Einflusses äusserer Agentien auf die Ge- schlechtsproducte veröffentlicht haben -, folgt jetzt ein neuer Beitrag über die gleiche Frage. Das erste Capitel behandelt die Ueb er reife der Eier und die dadurch veranlassten Erscheinungen bei Echinus microtuberculatus und Strongylocentrotus lividus. In solchen Eiern tritt fast regelmässig Polyspermie ein. Die Ueberreife der Eier wurde nach Ansicht des Verf. veranlasst durch einen abnorm strengen Nachwinter, welcher die Seeigel am Zusammenschaaren verhinderte. Ein solches Zusammenschaaren ist nach Hertwig's Beobachtungen nöthig, weil die Anwesenheit des anderen Geschlechtes als Reiz fih' die Ausstossung der Geschlechtsproducte wirkt. Fehlen die Männchen, so werden die Eier zurückbehalten, erfahren eine Schwächung, und diese endigt schliesslich mit dem Tode. Ein krankhaftes Zurückhalten der Eier wird schon durch strotzend gefüllte Eierstöcke angedeutet. — Wie der Samen eine ») Bai^biani, E. G., Zool. Anz. Bd. IV, 1881, p. 637. 2) Hertwig, 0. u. R., Ueber den Befruchtungs- imd Theilirngsvorgang des thierischen Eies unter dem Einfluss äusserer Agentien. Jena 1887; vgl. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. ÖO.'S. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 79 viel grössere Widerstandskraft gegen äussere Agentien chemischer und physikalischer Natur besitzt, so verharrt er auch viel länger in einem brauchbaren Zustande, wenn er zurückbehalten wird. Dagegen geht er in Meerwasser rascher zu Grunde als unbefruchtete Eier. — Ver- halten der Geschlechtsproducte gegen Kälte. Die Ergeb- nisse einer Wärmeeinwirkung wurden bereits früher mitgetheilt ^ Eine Kältemischung wandte Verf. in folgender Weise an : Ein Gefäss mit Meerwasser wurde mit einem Geraenge von Eisstücken und Kochsalz umgeben. An der Wand des Gefässes entstand eine fingerdicke Schicht von Eiskrystallen und die Temperatur sank auf — 2 bis — ,3 " C. Das zum Experiment gewählte Eimaterial wurde mit Meerwasser in kleine Rea- gensröhrchen gefüllt und in das Gefäss eingetaucht. — a) Frisch ent- leerte Eier von Strongylocentrotus lividus wurden 15 resp. 30, 60, 105, 120 Minuten in die Kältemischung eingetaucht und dann durch besaam- tes Wasser befruchtet. Es zeigte sich, dass bei Beginn der Abkühlung einfache Befruchtung erfolgt, später mehrfache. Weiter folgt ein Sta- dium völliger Kältestarre, in welchem die Eier unbefruchtet bleiben. Werden solche Eier etwas erwärmt, so tritt Polyspermie ein, besonders bei Zusatz frischer Samenfäden. Die Strahlenbildung im Plasma erlischt bei Abkühlung sofort, stellt sich bei Erwärmung wieder her. — b) Eier von Strongylocentrotus werden normal befruchtet und nach 5 Minuten auf ly^ Stunden in die Kältemischung gebracht. Aus dieser lieraus- genommen, wurden sie nach 10, nach 40 und nach mehr Minuten in Pikrinessigsäure eingelegt. Die Eier zeigten keine erheblichen Ver- änderungen. — c) Verf. hat auch einzelne Stadien der Kerntheilung durch Abkühlung der Eier zu verändern gesucht. Hierbei ergab sich, dass eine kurze Einwirkung der Kälte (40, 80, 105 Minuten) bewirkt 1) eine Zurückbilduug der Plasmastrahlungen an den Polen, 2) ein Un- keuntlichwerden der Spindelfasern. „Es wird der ganze achromatische Theil der Kernfigur vernichtet, während der chromatische aus Kernfäden (Chromosomen) bestehende Theil geringfügigere Veränderungen erlei- det-." — Länger fortgesetzte Einwirkung der Kälte hat folgende Re- sultate : In Eiern, welche 2 ^f^^ Stunde auf — 2 " C. abgekühlt waren, sind die einzelnen Chromosomen verdickt und aufgequollen und häufig ») Vgl. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 508. 2) Dasselbe Resultat hat Ref. nach Einwirkung von Hitze an den Eiei-n von Insecten erhalten. Vgl. Henking, H., Untersuchungen über die ersten Entwicklungsvorgäüge in den Eiern der Insecten. I. Das Ei von Pieris bras- sicae L. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XCIX. 1890, p. .503 ff. ; cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 211.) 80 Referate und Besi^rechimgen. VIII, 1. mit einander verschmolzen. Eine Folge der Kältestarre ist auch darin zn erblicken, dass aus der vorher vorhandenen Spindel ein bläschen- förmiger Kern mit einem Chromatingerüst durch Rückbildung entsteht, wie es ähnlich schon früher von Heetwig nach einer 20 Minuten währenden Einwirkung einer O'Oöprocentigen Chininlösuug beobachtet wurde. In Eiern, welche 3^4 Stunden lang abgekühlt waren, nahm der Dotter eine grob granulirte Beschaffenheit an. Bei ihnen sowohl wie bei den vorigen bildet sich aber nach Aufhebung der Abkühlung wie- derum eine Strahlenfigur aus, welche zu regulärer Theihmg führen kann. — Färbung der lebenden Z e 1 1 s u b s t a n z durch Methylenblau. Verf. löste von dieser Anilinfarbe soviel in Meer- wasser, dass es, „auf weissem Grunde betrachtet, einen violetten Schim- mer zeigte". Unbefruchtete Eier nahmen nun den Farbstoff begierig in sich auf, allerdings mit Unterschieden derart, dass einige schon nach einer halben Stunde dunkelviolett, andere mehr oder minder heller ge- färbt waren. Je dünner die Lösung ist, um so langsamer wird der Farbstoff aufgenommen. Der Zellkern bleibt ungefärbt. Durch die Farbstoffspeicherung werden die Eier mehr oder minder geschädigt, wie sich nach der Befruchtung durch die meist eingetretene Polyspermie ergab. Tritt eine Theilung ein, so ist dieselbe je nach der Intensität der Färbung verlangsamt. Eine einfache Befruchtung wird erreicht, wenn die erst ganz matt violetten Eier in frisches Wasser gesetzt und mit Samen in Berührung gebracht werden. Dann entwickeln sie sich zu normalen Blastulae. In den Zellen derselben sammelt sich das vor der Befruchtung aufgenommene Methylenblau alsdann derart, dass es nur an der Basis der Zellen gefunden wird, während das flimmertragende Ende farblos bleibt. Hcnking {Göttingen). Camerauo, L., I primi momenti della evoluzione dei Gordii [Die ersten Entwicklungsphasen von Gordius]. (Mem. della R. Accad. di Torino (2) t. XL, 1890, p. 1 — 19 c. 2 tavv.). Für die Untersuchung des Eierstockes von Gordius fixirte Verf. das Thier in Drittel-Alkohol oder Pikrinsäure; gute Färbung besonders für die Keimbläschen und den Keimfleck gab das MAVEE'sche Carmin. Für die Eier selbst empfiehlt Verf. als Fixirungsmittel Sprocentige Salpetersäure-Lösung oder ein Gemisch von gleichen Theilen absoluten Alkohol und Essigsäure, als Färbemittel Borax-Carmin oder ein Gemisch von Malachitgrün und Vesuvin (v. Beneden und Neyt). Osmiumsäure von ein Procent und die BovERi'sche Flüssigkeit (kochender absoluter Vlll, 1. Referate und Besprechungen. 81 Alkohol -\- einprocentiger Essigsäure) gaben weniger gute Resultate; dasselbe gilt von dem Schwefelsäureanliydrid (Carnoy). P. Schiemenz {Neapel). Apäthy, S., Die LANCi'schen leeren Ringe, besonders bei Hirudo medicinalis (Zool. Anz. Bd. VIII, 1890, p. 320—322). Will man die Tastkegelchen von Hirudo medicinalis gut zur An- schauung bringen, so giesst man dem Wasser, in welchem sich die aus- gehungerten Thiere befinden, so lange von einer starken alkoholischen Sublimatlösung zu, bis sich die Thiere nicht mehr bewegen. Nun streckt man sie mit Stecknadeln aus und übergiebt sie mit lOprocentiger Sublimatlösung in TOprocentigem Alkohol. Dann springen auf der sonst glatten Bauchfläche die Tastwärzchen hervor, Henking (GöUingeu). Bergh , R. S. , Neue Beiträge zur Embryologie der Anneliden. I. Z u r E n t w i c k 1 u n.g und D i f f e r e n z i - rung des Keimstreifens von Lumbricus (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. L, 1890, p. 469—526 m. 3 Tfln.). Zur Orientirung über die WiLSON'schen Streifen empfiehlt Verf. in Anlehnung an Ranvier * folgendes Verfahren. Man legt Embryonen von 0*5 bis 0'8 mm Länge auf 5 Minuten in frisch ausgepressten und durch Flanell filtrirten Citronensaft, lässt dann 20 Minuten eine ein- procentige Lösung von Goldchlorid auf sie einwirken und reducirt bei Tageslicht mit Hülfe von 1 Theil Ameisensäure und 4 Theilen Wasser während 1 bis 2 Stunden. V^on den röthlich und recht weich gewordenen Embryonen wird auf einem Objectträger die ganze Rückenhaut abge- zogen, die isolirte Bauchseite nach oben gekehrt, ein mit Wachsfüsschen versehenes Deckglas darüber gelegt und in Wasser untersucht. Sind die Präparate nicht überfärbt, so zeigen sie nach Angabe des Verf. die Urzelleu und Zellreihen mit grosser Klarheit. — Diese Methode ist nicht für feinere Untersuchungen anwendbar. Hierfür empfiehlt Verf. die Anwendung von Flemming's Chrom-Osmium-Essigsäure für wenige Minuten, gefolgt von zwei- bis dreimal so lange währender Einwirkung einer Vaprocentigeu Lösung von Platinchlorid. Flächenpräparate sind am besten ungefärbt in Glycerin zu untersuchen; die zum Schneiden bestimmten Embryonen färbt man am besten mit wässeriger Hämatoxylin- lösung. HenJcing (Göttingen). *) Ranviek, L., La mecanisme de la secrötion (Journ. d. Microgr. t. X, 1886, t. XI, 1887; cfr. diese Zeitscbr. Bd. V, 1888, p. 78). Zeitschr. f. wiss. Miki-oskopie. VIII, 1. 6 g2 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Parker, G. H., The histologj^ and development of the eye in the lobster [Homarns] (Bullet. Museum of Comparative Zool. Cambridge ü. S. A. vol. XX, 1890, p. 1-60 w. 4 pltes.). Zur Färbung der Nervenfasern bedient sich Paekkr einer Modili- cation der bekannten WEiGEBT'schen Methode, welch letztere ja bisher nur auf die markhaltigen Fasern der Wirbelthiere anwendbar schien. Ist diese Modification allgemeinerer Ausdehnung auf Wirbellose fähig, so beansprucht sie unzweifelhaft grosse Bedeutung. — Die Fixirung der Gewebsstücke geschah meist mit heissem Wasser, aber aucli mit Chrom- säure und Kleinenbekg's Pikrinschwefelsäure. Die nach Paraffinein- bettung gewonnenen und mit Nelkenöl- Collodium aufgeklebten Schnitte wurden — selbstverständlich nach Entfernung des Paraffins und Durch- laufen der verschiedenen Alkoholgrade — auf eine halbe Minute mit yioprocentiger Kalilauge behandelt, mit Wasser gut abgespült und auf etwa 3 Stunden bei einer Temperatur von 50 " C. in WEiOERT'sches Hämatoxylin gebracht, üeberfärbuug ist selbst bei längerem Verweilen nicht zu befürchten. Man bedarf auch keiner Difterenzirungsflüssigkeit, sondern spült nur in Wasser ab, entwässert und schliesst in Canada- balsam ein. Jede Nervenfaser zeigt deutliche blaugraue Conturen. Dr. Karl Fiedler {Zürich). Parker, 0. H., The eyes in sorpions (Bullet. Museum of Com- parative Zool. Cambridge U. S. A. vol. XIII, 1887, p. 173—208 w. 4 pltes.). Zur p]ntfernung des reichlichen Pigmentes genügen die gebräuch- lichen 5- bis lOprocentigen Salpetersäurelösungen nicht. Man muss bis zu ÖOprocentigen Lösungen der Säure in Alkohol gehen. Bei der Her- stellung derselben ist ein bestimmtes Volumen der concentrirten Säure langsam in ein gleiches Volumen Alkohol zu giessen, nicht umgekehrt; das Gemisch selbst ist kühl zu halten. Andernfalls tritt unter bedeu- tender Erwärmung eine chemische Umsetzung ein, welche die Lösung unbrauchbar macht und das darin befindliche Object verdirbt. Noch besser als die Salpetersäure bewährt sich eine 35procentige Lösung einer Mischung gleicher Theile Salz- und Salpetersäure in starkem Al- kohol. Von den Alkalien ist %- oder '^procentige Kalilauge am besten. In jedem Falle lässt man die Entfärbungsflüssigkeiten auf die nach ScHÄLLiBAüM aufgeklebten, von Paraffin befreiten Schnitte wirken, wäscht nach ca. einer Minute sorgfältig aus, färbt mit Gkenacher's alkoholischem Boraxcarmin, Czokob's Alauncochenille oder Kleinen- berg's Hämatoxylin und schliesst in Glycerin oder Balsam ein. VllI 1. Referate und Besprechungen. 83 Auch der Isolirung der Retinaelemeute rauss die Entfernimg des Pigmentes vorangehen. Die Retina wird auf 5 bis 10 Minuten zu leichter Härtung in '/^procentige Chromsäure gebracht, durch '/apro- centige Kalilauge im Laufe einer Minute entfärbt, in Wasser ausge- waschen und in das alkoholische Boraxcarmin Grenacher's übertragen, worin Färbung und Maceratiou gleichzeitig erfolgt. In 12 bis 24 Stunden können die Zellen in verdünntem Glycerin isolirt werden. Dr. Karl Fiedler {Zürich). StefilllOWSlia, M., La disposition histologique du pigment dans les yeux des arthropodes sous rinfluence de la lumi^re directe et de l'obscurite complete (Rec. Zool. Suisse vol. V no. 2, 1890, p. 151 — 200 av. 2 plches.). Das theoretisch wie praktisch interessante Hauptergebniss der zahlreichen, an 20 Insecten- und 4 Spinnenarten angestellten Versuche ist, dass die Pigraentzellen der Arthropodenaugen schon in kurzer Zeit unter dem Einfluss des directen Lichtes ihre Oberfläche merklich ver- grössern und sich sehr gleichmässig zwischen den Retinulis und Kry- stallkegeln verbreiten, während umgekehrt bei vollkommener Dunkel- heit das Pigment in wenigen Stunden locale Anhäufungen stark contra- hirter Zellen bildet, welche die übrigen histologischen Elemente nur wenig verdecken. Zur Untersuchung von Arthropodenaugen wird es sich also empfehlen, die betreffenden Thiere einige Stunden in abso- luter Finsterniss verweilen zu lassen, bevor man die Präparation und Fixirung vornimmt, welche natürlich möglichst rasch zu erledigen sind. Für letztere wird einprocentige Osmiumsäure empfohlen ; die richtige Einwirkungsdauer niuss für jede Art durch Versuch festgestellt werden, schwankt jedoch im allgemeinen zwischen einer Stunde bis vier Stunden. Nachbehandlung mit oxalsaurem Alkohol, mehrfaches Auswachen in reinem TOprocentigen Alkohol. Bei der Paraffineinbettung wird der Anwendung der Luftpumpe sehr das Wort geredet, weil das Paraffin rascher eindringt, plastischer und durchscheinender wird und so leich- tere und genauere Orientirung der Objecte erlaubt. Dr. Karl Fiedler {Zürich). Dewitz, H., Einige Beobachtungen, betreffend das ge- schlossene Tracheensystem bei Insectenlarven (Zool. Anz. Bd. XIII, 1890, p. 500 ff.). Wenn es zweifelhaft war, ob bei Insectenlarven die Thoraxstigmen offen seien, so erhitzte Lyonet das Wasser, in welchem sich die Thiere 6* 84 Referate und Besprechungen. VIII. 1- (z, B. Libellenlarveu) befanden und beobachtete, ob den Stigmen Lnfr entquoll. Verf. nahm zum gleichen Zwecke 1 Theil 95procentigen Alkohol -f- 1 Theil Wasser und setzte die erwachsenen Nymphen von Libellen etc. hinein. Ist das betreifende Stigma offen, so steigen so- gleich Luftblasen auf. Henking {Göttingen). Wistillghausen, C. V., lieber Tracheenendigungen in den Sericterien der Raupen (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XLIX, 1890, p. 565—582 m. 1 Tfl.). Die Tracheencapillaren sind im Körper der trachenten Arthropoden nur sehr schwer zu sehen, und man hat sich schon vielfach bemüht, eine Methode zu finden , welche ihre Verfolgung erleichtert. So be- nutzte H. Michels einen nach den Angaben von Prof. Ehlers con- struirten doppelwandigen Kupferkessel *. In den angeheizten Kessel- raum kommt das offene Gefäss mit dem in einer farbigen Injections- masse schwimmenden Objecte, und nun wird der Hohlraum mit einer Luftpumpe ausgepumpt. Verf. bestreitet, dass auf diese Weise eine Injection der feinsten Tracheen erzielt werden könne, wie Michels an- gegeben hatte. Besser und preiswerther findet Verf. die Methode von OuDEMANs •. Derselbe stellte die Objecte, eingetaucht in ein Gemisch von Copallack mit viel Aether, dem einige Tropfen einer sehr starken alkoholischen Lösung von Methylgrün zugefügt waren, unter den Re- cipienten einer Luftpumpe. Eine Injection der Tracheencapillaren wird aber auch so nicht erreicht. — R, Dubois giebt an, mit 600 Atmosphären Druck die Tracheen völlig injicirt zu haben, v. Wistinghaüsen äussert auch hiergegen Zweifel, weil Dubois nicht angebe, wie er die Luft aus den Tracheen entfernt habe. — Verf. hat noch einen anderen Weg ein- geschlagen. Nach den Angaben von M. Schultze hing er die Thiere in Osmiumsänredämpfen verschiedener Concentration auf. Er beobachtete dann zwar, dass eine Schwärzung der Peritonealhaut der Tracheen ein- trat, niemals jedoch eine Schwärzung der Tracheencapillaren. Das hatte auch v. Wielowiejski gesehen. Verf. erklärt es daraus, dass bei den Osmiumdämpfen ausgesetzten Insecteu die Athmung scheinbar ganz aufhört; daher dringen die Osmiumsäuredämpfe nicht tief genug ein. — Es ist also auch v. Wistinghaüsen eine völlige Injection des 1) MicHEi.s, H., Beschreibung des Nervensystems von Oryctes nasicornis (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XXXIV, 1880, p. 641—702). 2) GuDEMÄNs, J. T., Bijdrage tot de kennis der Thysannra en Collembola. Amsterdam 1887, p. 72. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 85 Tracheensystemes nicht gelungen '. — In Bezug auf die letzte Methode möchte Ref. bemerken, dass es sich dabei um Injection vermittels eines Gases handelt, und dass eine solche bei dem der Circulation gasförmiger Medien dienenden Tracheensystem theoretisch die meiste Aussicht auf Erfolg hat. Nur müsste man auch hier die Luftpumpe anwenden und die selbstverständlich sehr bald aufhörende natürliche Athmung gewisser- maasseu durch eine künstliche ersetzen. Zunächst gilt es immer, den natürlichen Inhalt der Tracheen zu entfernen. Dabei verdienen auch die Verschlusseinrichtungen an den Stigmen alle Beachtung. — Die Endigungsweise der Tracheencapillaren hat Verf. an den hierfür sehr geeigneten Sericterien der Raupen ohne Injectionsmittel erkannt. Schnitte und Dauerpräparate erwiesen sich als ganz ungeeignet , am besten Untersuchung der frischen Objecte in halbprocentiger Kochsalzlösung oder in Leimglycerin (Herstellung nach Ranviek: Gelatine wird ohne Wasser im Wasserbade geschmolzen, mit gleichen Theilen Glycerin ge- mischt, durch Flanell filtrirt). Die Sericterien werden in der Kochsalz- lösung präparirt, einseitig aufgeschnitten, das Secret möglichst entfernt, entweder durch Abpinseln oder durch Abziehen der aufgeschnittenen Sericterien von der festen Secretmasse. Sie werden mit der Innenfläche auf das Glas gelegt. Erst wird nun Leimglycerin in nicht zu heissem Zu- stande darauf getragen und das Präparat einige Zeit in den Wärmekasten bei 50 " gelegt. Die Präparate halten sich höchstens 1 bis 1 '/j Stun- den, zeigen aber die Tracheencapillaren mancher Raupen (z. B. Ocneria dispar) deutlicher als Kochsalzlösung. Letztere verändert aber das Aus- sehen am wenigsten. — Die Tracheencapillaren bilden ein Netz zwischen Membrana propria und Sericterienzellen, anastomosiren und sind nach Meinung des Verf. mit einer Flüssigkeit gefüllt. Henldng (Göttingen). Dubois, K., Sur les proprietes des priucipes colorants naturels de la soiejaune et sur leur analogie avec Celle de la Carotine vegetale (Comptes rendus de l'Acad. des Sc Paris, t. CXI, 1890, 2. sem. p. 482). Verf. isolirte aus gelber Seide fünf Farbstoffe; ein Gemisch von drei derselben hält er für identisch mit dem pflanzlichen Carotin. Einer dieser Farbstoffe bildet hemitrope, im durchfallenden Lichte gelbrothe, im auffallenden braunrothe Krystalle, ein anderer eine citronengelbe amorphe Masse, der dritte citronengelbe Oktaeder. Alfred Koch (GöUingen). ') Man vergleiche: Cajal S. R., Coloration par la methode de Golgi des terruiuaisons des trachees etc. (Diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 332 — 341). 86 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Crosa, F., Di un modo di conservare le larve dei lepi- dotteri col loro coloro [Ueber eine Methode, Schmetterlingsraupea mit ihren Farben zu con- serviren] (BoUettino dei Miisei di Zool. ed Anat. Compar., Torino vol. V, 1890, no. 85. — 2 pp.). Die Raupen werden in eine Öprocentige Lösung von Chlorzinlc ge- than und die Flüssigkeit bis beinahe zum Sieden erhitzt , damit der Process etwas beschleunigt und Fäulniss vermieden wird. Darauf kom- men sie nach einander in eine 10-, 15-, 20procentige Lösung desselben Salzes und bleiben in jeder so lange, bis sie darin untersinken. Für eine mittelgrosse Raupe sind dazu 6 bis 8 Tage nöthig. Aus der letzten Lösung kommen sie dann zur Aufbewahrung in Glycerin. Das Chlor- zink muss aber völlig neutral sein und darf keine Eisensalze enthalten. Man löst daher das käufliche Zink in reiner Salzsäure und muss dafür sorgen, dass Zink stets im üeberschuss voi'handen ist, um die Bildung von Eisenchlorid zu vermeiden; nachher wird filtrirt. Wendet man käufliches Chlorzink an, so löst man dasselbe in mit Salzsäure ange- säuertem Wasser und kocht die Lösung einige Zeit mit Zink. Da die verdünnten Lösungen sich leicht zersetzen, so lässt man sie in Gegen- wart von metallischem Zink absetzen und filtrirt sie, wenn sie voll- kommen klar geworden sind. Es empfiehlt sich , die Raupen vor der Verwendung eine Zeit lang fasten zu lassen und mit Chloroform zu tödten. Verf. bemerkt, dass derartig präparirte Raupen sich schon zwei Jahre lang gut erhalten haben (auch die grünen und gelben Farben) und sich auch für histologische Studien eigenen. P. Schiemenz (Neapel). Grandis, V., Sülle modificazioni degli epitelii ghiandolari durante la secrezione [Ueber die Veränderungen des Drtiseuepithels während der Secretion] (Atti della R. Accad. delle Scienze di Torino vol. XXV, 1890, p. 765 — 789 c. 8 tavv.). Verf. empfiehlt zum Studium der Veränderungen, welche das Drüsenepithel während der Secretion erleidet, besonders Insecten, wegen deren Zählebigkeit, und zwar im speciellen die MALPiGHi'schen Gefässe von Hydrophilus. Nachdem dem Thiere die Beine und Flügeldecken abgeschnitten sind, wird es auf dem Rücken der Länge nach aufge- schnitten , dann werden senkrecht auf den ersten Schnitt zwei seitliche geführt, das Integumeut nach aussen geschlagen und abgeschnitten. Bei diesen sowohl wie bei den folgenden Operationen muss man sich VIII, 1. Referate und Besprechungen. 87 hüten, die im vorderen Tbeile des Abdomens gelegenen grossen Luft- säcke zu verletzen und die von ihnen zu den genannten Organen ver- laufenden Tracheen zu zerreissen, weil dann das Thier eher abstirbt und demgemäss die Zellen eher nekrobiotische Veränderungen erleiden. Dann wird das Thier auf einer Korkplatte, welche im Centrum ein rundes Loch von circa 1 cm Durchmesser hat, das von unten her durch ein mit Siegellack angekittetes Deckgläscheu geschlossen ist, in der Weise befestigt, dass das Abdomen gerade über das Loch zu liegen kommt. In das letztere fliesst die Lymphe des Thieres, und in diese lässt man, nachdem man etwas Ü'TOprocentige Kochsalzlösung zugesetzt hat, die Eingeweide fallen und breitet dann vorsichtig den Darm an dem Rande des Loches aus und befestigt ihn mit Nadeln. Man kann so die in dem Loche befindlichen MALPiGHi'schen Gefässe lange Zeit lebend beobachten, was dem Studium durch Präparate vorzuziehen ist. Die Zellen genannter Organe zeigen gegen Jodgrün ein vollständig anderes Verhalten, wenn sie lebenskräftig sind, als wenn sie abgestorben sind. Ist ersteres der Fall, so färbt sich der Kern gar nicht, dagegen das Protoplasma purpurviolett. Nach dem Tode färbt sich der Kern, welcher dann eine saure Reaction hat, grün, das Protoplasma dagegen bläulich grau. Das von Mosso * zur Erkennung des Absterbeus der Zellen empfohlene Methylgrün Hess hier im Stich, da sich bei seiner Anwen- dung in wenigen Minuten alle Zellen grün färbten und sich nur ein ganz geringer Unterscliied des Tones der Färbung zwischen normalen und alterirten Zellen zeigte. „Lichtgrün" färbt alle Zellen diffus smaragd- grün, die EHKLicH-BiONDi'sche Flüssigkeit färbt die Kerne grün und bei längerer Einwirkung auch das Protoplasma orange. Methylenblau färbt nur in dem Protoplasma gewisse rundliche Körner blau, purpur- rotli oder violett. Indigschwefelsaures Natron geht durch die Zellen der MALPiGHi'schen Gefässe im farblosen Zustande hindurch, so dass diese niemals eine Blaufärbung zeigen (gegen Schindler), Um das in der Stützwand der MALPiGHi'schen Gefässe befindliche Netz von noch unbestimmter Natur anschaulich zu machen, empfiehlt es sich, dieselben auf einige Zeit in eine 2procentige Lösung von Methylenblau zu tauchen. P. Schiemens {Neapel). Ritter, R., Die Entwicklung der Geschlechtsorgane und des Darmes bei Chironomus (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. L, 1890, p. 408—427 m. 1 Tfi.). ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 38. 88 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Die Tliiere legen die Eier abends nach Dunkelwerden in Wasser ab, und das dieselben zusammenhaltende Drüsensecret quillt gallertartig auf. Diese Eierschnüre wurden mit heissem SOprocentigen Alkohol, dem etwas Sublimat zugesetzt war, abgetödtet, mit Alkohol von 70, 90 100 Procent successive behandelt und aus Paraffin geschnitten, nach vorheriger Durchtränkung mit Chloroform. Eine Färbung der sich sehr schwer tingirenden Eier der frühesten Stadien gelang Verf., wenn er die ganzen Eierschnüre mindestens 4 Tage lang in Pikrocarmin legte unter ganz allmähliger Uebertragung aus absoluten Alkohol in die Färbeflüssigkeit. Ausserdem wurden dann die Schnitte noch mit Iläma- toxylin nachgefärbt. Hetikiny {Göttingen). B, Vertebraten. Kastscheuko, N., lieber den Reifungsprocess des Selachier- ei es (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. L, 1890, p. 428—442). Verf. benutzte zur Untersuchung die Eierstöcke resp. Eier von Pristiurus melanostomus, Torpedo ocellata und Scyllium canicula, indem jene Theile mit der in der Zoologischen Station zu Neapel üblichen Methode (conceutrirte Sublimatlösung, Entwässerung und Erhärtung in Alkohol mit einigen Tropfen Jodtinctur *) behandelt und mit Borax- carmin gefärbt wurden. Die kleinen Ovarialeier können in toto, die grösseren Eier aus Ovarium, Eileiter oder Uterus nach Abhebung der Keimscheibe in Nelkenöl bei durchfallendem Lichte untersucht werden. Die Abhebung der Keimscheibe ist leicht auszuführen resp. geschieht bei der späteren Behandlung des Präparates von selbst. Es ist das nach dem Verf. deshalb werthvoll, weil nur in der Keimscheibe und der von selbst an ihr haften bleibenden Parthie des Nahrungsdotters Kerne gefunden werden. Die übrige Masse des Nahrungsdotters bleibt stets kernlos. — Wichtig ist noch, dass die Eier der beiden Ovai'ien desselben Thieres und also auch die bereits ausgetretenen Eier stets das gleiche Entwicklungsstadium beiderseits darbieten, sodass also das betreffende Stadium stets doppelt vorliegt. Henhing (Göttingcii). Sluhlinaun^ F., Zur Kenntniss des Ovariums der Aal- mutter. [Z 0 a r c e s v i v i p a r u s C u y.\ (Festschrift des Na- turwiss. Vereins Hamburg, 1888, p. 1 — 48 m. 4 Tfln.). 0 Cfr. diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 66. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 89 Die aus dem Körper herauspräparirten Ovarien wurden entweder mit den Embryoneu oder nach Herausnahme derselben mit Sublimat oder FbEJiMiNG'scher Lösung behandelt. Die Embryonen conservirte Verf. mit Sublimat oder Cliromosmiumessigsäure. Zur Fai'bung der Schnitte diente Boraxcarmin, Kleinenberg's oder Flejiming's Häma- toxylin, Safranin und gleichzeitig Ranviek's Pikrocarmin und Hämatoxy- lin, wodurch die Keimbläschen der jüngsten Eier roth, die übrigen Ge- webskerne violett oder blau gefärbt werden. Zur Darstellung des Ge- fässverlaufes injicirte Verf. blaue oder rothe Leimmasse von der Aorta oder von der Arteria respective Vena mesenterica aus. Um die Blut- circulation im Leben zu beobachten, wurden die Thiere durch Injection von 2 bis 3 PEAVAz'schen Spritzen einer öprocentigen Curarelösung in die Rückenmusculatur und in die Bauchhöhle betäubt, sodass man das Ovarium längere Zeit unter dem Mikroskope ausgebreitet beob- achten konnte. G. Brandes {Halle a. S.). Naue, H., U e b e r Bau und Entwicklung der Kiemen der Froschlarven (Zeitschr. f. Naturwissensch. Bd. LXIII, 5. Folge Bd. I p. 129—176 m. 2 Tfln.). Die Conservirung mit Chromsäure ist nicht zu empfehlen, weil die Färbung der Objecte dann nicht gelingt. Auch kalte concentrirte Subli- raatlösung ist nicht zu gebrauchen, weil Verzerrungen der Organe da- nach einzutreten pflegen , erst nach Anwendung von Curare gab diese Lösung brauchbare Resultate. Am besten bewährte sich zur Conservi- rung eine 45" C. warme concentrirte Sublimatlösung, in welcher die Larven bis zum Erkalten (ca. 30 Minuten) gelassen werden. Aus- waschung mit Wasser und Jodalkohol, Färbung mit Pikrocarmin, saurem Carmin und Hämatoxylin. Behufs besserer Verfolgung des Gefässver- laufs versuchte Verf. Injectionen mit salpetersaurera Silber, ammoniak- armer Carrainlösung und chinesischer Tusche. Die letzte Methode be- währte sich ausserordentlich. Nachdem die Frosclilarve curarisirt war, wurde das Herz frei gelegt und das Thier dann aus dem Wasser ge- nommen, damit nicht im Wasser die Tusche wieder ausgewaschen werde. Hierauf wurde eine Glasröhre, die mit feinst zerriebener Tusche gefüllt war, mit ihrer dünn ausgezogenen Spitze in das Herz gebohrt. Das Herz arbeitete eine ganze Zeit lang weiter und pumpte so die schwarze Farbe in die Blutgefässe. Nach stattgehabter Injection wurde das Ob- ject sofort in absoluten Alkohol gebracht. G. Brandes {Halle a. S.). Ficalbi^ E., Sulla architettura istologica di alcuni peli d e g 1 i u c c e 1 1 i c o n c o n s i d e r a z i o n i s u 1 1 a f i 1 o g e n i a 90 Referate und Besprechungen. VIII, 1. dei peli e delle penne [Ueber den histologischen Bau einiger Haare der Vogel, mit Betrachtungen über die Phylogenie der Haare und Federn]. (Atti della Societii Toscana di Scienze Naturali, Pisa. Memorie vol. XI, 1890; 42 pp. c. 1 tav.). Nach FicALBi verhalten sich Schnitte von Vogelhaaren etwas wider- spenstig gegen Färbemittel, doch werden gute Resultate mit Carminen, weniger dagegen mit Anilinfarben erzielt. Die verschiedenen Schichten der Epidermis wurden besonders bei Anwendung der BizzozEKo'schen Methode deutlich; doch auch mit Carminen und Eosin fjirbten sich die einzelnen Schichten verschieden. P. Schiemcns (Neapel). Coggi, A., A proposito di spostamenti del carioplasma e del nucleolo, nelle cellule nervöse [Bemerkung in Betreff der Lageverschiebung des Kernplasmas und des Nucleolus in den Nervenzellen]. (Atti della K. Accad. dei Lincei Roma (4) Rendiconti vol. VI, 1800, 2. sem. p. 236—238). CoGGi weist nach, dass die Fixirungstiüssigkeiten auf das Kern- plasma und den Nucleolus verlagernd einwirken, indem dieselben sich stets nach der Seite des Kernes zusammenziehen, welche dem Angriffs- punkte dieser Flüssigkeiten entgegengesetzt sind. So sind auch die von Bellonci und Magini beschriebenen Verlagerungen zu deuten, welche somit lediglich Kunstproducte sind. P. Schiemeuz (Neapel). Krause, R., Entwicklungsgeschichte der häutigen Bogen- gänge (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXV, 1890, p. 287— 304 m. 1 Tfl. u. 6 Figg.). Die 6 bis 18 mm langen Kaninchen- und Schweinsembryonen, welche als üntersuchungsmaterial dienten, wurden theils in O'lprocentiger Platin- chloridlösung mit einem Zusatz von 0'2 Procent Essigsäure, theils in Chrom-Osmium-Essigsäure fixirt. Die erstere Lösung wird besonders em- pfohlen, da sie viel besser auswaschbar sei als die Chromsäure und ihre Salze und daher die Nachfärbung (mit Boraxcarmin oder Hämatoxylin) bedeutend erleichtere. Das Aufkleben der Paraffinschnitte geschah nach Stöhr's Vorschrift mit einer einprocentigen Lösung von Gummi arabicum, wobei sich die Schnitte gut und unter Ausglättung selbst der kleinsten Falten ausbreiten. — Plastische Reconstructiou lückenloser Schnittserien nach dem BoRN'schen Plattenmodellirverfahren': Richtungsebenen zwei genau parallele, mit dem Mikrotom angelegte Sagittalebenen mit zwei ') Cfr. diese Zeitsclir. Bd. I, 1884, p.278, Bd. V, 1888, p. 433. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 91 angeritzten parallelen Derinirllnien; SchnittricLtung senkrecht zu den beiden, nun noch mit farbigem Lack bestrichenen Ebenen, wodurch in jedem Schnitt zwei farbige Linien mit spitzwinkliger Einknickung er- scheinen. Das durcli Aufeinanderlegen der ausgeschnittenen Platten erhaltene Modell wurde durch momentanes Eintauchen in ganz heisses Wachs mit einer gleichmässigen Oberfiäclienschicht von minimaler Dünne überzogen. Dr. Karl Fiedler {Zürich). Kromayer, E., Zur pathologischen Anatomie der Psoria- sis nebst einigen Bemerkungen über den Ver- hornungsprocess und die Structur der Stachel- zelle (Arch. für Dermatol. u. Syphilis Bd. XXII, 1890, p. 557—607 m. 1 Tfl.). Um zu untersuchen, welche Epithelzellen der Oberhaut zu den ver- hornten Zellen zu zählen seien, und um zu entscheiden, ob diese in ihrer ganzen Dicke Ilornsubstanz geworden seien oder ob nur ein anders- artiger Inhalt von einer Hornmembran umgeben sei , fertigte Verf. mit dem Rasirmesser feinste Schnittchen aus der Hornschicht einer durch Alkohol und Aether möglichst entfetteten Fingerkuppe seiner linken Hand an und liess verdünnte Kalilauge, 30procentige Salzsäure und Salzsäurepepsin (20 Tropfen chemisch reiner Salzsäure und 0'5 käuf- liches Pepsin auf 100 g Aq. dest.), letzteres im Brütofen, auf sie ein- wirken. Nach 20 Minuten für Kalilauge, 30 Minuten für Salzsäure und 2 Stunden für Salzsäurepepsin wurden die Schnittchen in Wasser unter- sucht und mit verschiedenen Färbemitteln behandelt. Das an den zarten dünnen Randparthien der Schnittchen auftretende Maschenwerk (Unna) liess sieh durch Anilinfarben und sehr deutlich auch durch Pikrocarmin färben. Der Zusammenhang desselben mit den Bläschen ist besonders schön erkennbar, wenn man verdaute Schnitte vor der Färbung mit absolutem Alkohol oder Glycerin behandelt. — Verf. konnte da nach- weisen, dass auch die Zellen des Rete Malpighii schon eine, wenn auch nur zarte, Hornmembran besitzen : fertigt man möglichst dünne Quer- schnitte von frischer Haut in der Weise an , dass mau kleine 0'5 cm lange und höchstens 2 mm dicke Hautstückchen der Fusssohle mit dem Rasirmesser soweit wie möglich von der dicken Hornschicht und mit der Scheere von jeglichem subcutanen Bindegewebe befreit, dieselben dann eine halbe Stunde in eine dünne Lösung von Gummi arabicum legt und auf dem Gefriermikrotom schneidet, färbt man diese dann mit stark verdünntem Pikrocarmin nach Fkiedländer ^ (das Keratohyalin >) Fkiedläxdek, C, Mikroskopische Technik. Berlin 1889, bearb. v. Ebeutu. 92 Referate und Besprecliungen. VIII, 1. wird intensiv dunkelroth, das Stratum lucidum hellrotli , Färbung unter dem Deckgläsclien, Auswaschen durch Wasserstrom) uud verdaut dann unter dem Deckglase, so treten die verhornten Membranen deutlich her- vor. Das ganz allmählige Dickerwerden der Membranen lässt sich in hübscher Weise an in Alkohol gehärteten Objecten nachweisen (die be- nutzten Hautstücke hatten 6 Wochen in absolutem Alkohol gelegen). Feinste Hautsclinitte werden einige Stunden mit Kalilauge behandelt: die Zellen und die Kerne werden nicht mehr zerstört, sondern quellen nur massig auf; färbt man nun mit ganz verdünnten Anilinfarben (es wurde Methylviolett benutzt), so erhält man eine fast isolirte Färbung der Zellmembran. Aehnlich gelang die Färbung auch an frischen Schnitten, die 8 Tage in Glycerin aufbewahrt und dann mit Kalilauge und Pepsinsalzsäure behandelt waren. Durch die wasserentziehende Wirkung des Glycerins erhält das Protoplasma und das Keratohyalin eine ähnliche Resistenz wie nach der Härtung in Alkohol. Verf., welcher vor kurzem ' nachgewiesen hat, dass sich mit der WEiGEE'r'schen Fibrin- färbemethode - auch feinere Epithelfasern, die von Zelle zu Zelle ziehen, darstellen Hessen, giebt jetzt noch Näheres über die Färbemethode an. Die WEiGEEx'sche sowie die GBAM'sche Jodmethode sind wie bekannt in ihren Resultaten nicht ganz zuverlässig. Verf. hat die Ursache für die WEiGERT'sche Methode aufzufinden gesucht und zwei Momente fest- gestellt : das eine war der verschiedene Feuchtigkeitsgrad des Schnittes vor dem Einlegen in Anilinxylol , das andere das Mischungsverhältniss des Anilins zum Xylol; es kommen aber ausserdem noch die Dauer der Jodwirkung und die ursprüngliche Färbung mit in Betracht. Verf. ist schliesslich zu folgendem Verfahren gelangt: Der Schnitt wird in einem Tropfen Wasser sorgfältig auf dem Objectträger ausgebreitet und mit Fliesspapier durch sanft festen Druck auf demselben fixirt. Dann ein halbstündiges Färben in concentrirter Anilinfarblösung, Abspülen mit Wasser, Jodjodkaliumlösung. Die Jodwirkuug wird jedes Mal mittels schwacher Vergrösserung verfolgt und sofort unterbrochen , wenn das Epithel eine schwarze Farbe angenommen hat (ziemlich verschiedene Daner von ^/i^ bis 2 Minuten), dann Abtrocknen mit Fliesspapier und sofortiges Einlegen in Anilinxylol (Anilin 1, Xylol 1 bis 4 Theile). Trotz genauester Beobachtung des Verfahrens kommt es doch vor, dass eine ganze Reihe von Präparaten nicht gelingt. Zunächst ist der gewählte ») Kromayek, E., in Arch. f. Dermatol. u. Syphilis Bd. XXII, 1890, p. 87. *) Weigert, C, Ueber eine neue Methode zur Färbung von Fibrin und von Mikroorganismen (Fortschr. d. Med. Bd. V, 1887, No. 8 p. 228; cfr. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 511). VIII, 1. Referate und Besprecbnngen. 93 Farbstoff von Einfluss, Verf. hat Krystallviolett, Methylviolett 2 B, Gentiana- und Metüylviolett 6 B versucht und ist bei letzterem stehen geblieben. Von der allergrössten Wichtigkeit ist ferner das Anilinxylol : je weniger Anilin in der Mischung ist , desto schwächer zieht sie aus, je mehr, desto stärker. Ist die Mischung zu schwach, so bleibt das Präparat zu dunkel, ist sie zu stark, sind die Epithelfasern entfärbt; man rauss hier fast jedes Mal frisch probiren. Es wird noch besonders auf den Umstand aufmerksam gemacht, dass das Anilinxylol seine Con- centration fortwährend durch Verdunsten des Xylols ändert, was sehr in Rechnung zu ziehen ist. Durch die WEiGERT'sche Färbemethode wer- den nun aber nicht nur die Epithelfasern gefärbt, sondern auch, und zwar viel sicherer, das Keratohyalin. Es gelang Verf. nachzuweisen, dass das letztere aus den Epithelfasern durch Zerfall derselben her- vorgelit. Schiefferdecker (Bonn). Naumoff , M. , U e b e r einige p a t h o 1 o g i s c h - a n a t o m i s c h e Veränderungen im Augengrunde bei neugeborenen Kindern (Arch. f. Ophthalm. Bd. XXXVI, 1890, p. 180—246). Die den Kinderleichen entnommenen Augen wurden für eine Woche in MüLLEK'sche Flüssigkeit gelegt, dann durch einen Rasirmesserschnitt im Aequator getheilt, darauf wieder in MtiLLER'scher Flüssigkeit bis zur Untersuchung gelassen. Bei der Oeffnung des Auges lag die Netz- haut gut auf der Gefässhaut auf, löste sich aber bei unvorsichtigem Manipuliren leicht von derselben ab. In allen Augen, sowohl von aus- getragenen, als auch frühgeborenen (7. bis 8. Lunarmonat) Kindern fand sich die Netzhautfalte vor, welche vom äusseren Rande der Papille durch den gelben Fleck in der Richtung des horizontalen Augen - meridians verläuft (Plica centralis s. transversa retinae). Sie ging ge- wöhnlich gerade durch die Mitte des gelben Flecks, so dass die Fovea centralis retinae auf den Theil der Falte zu liegen kam, der am meisten in die Augenhöhle hineinragt. Als Ausnahme verlief die Plica centralis in einigen Fällen nicht in der Mitte der Macula, sondern längs dem oberen oder unteren Rande derselben. Entsprechend der Fovea cen- tralis entstand zuweilen ein Riss in der Netzhaut an Stelle der centralen Falte, in Folge dessen in der Mitte des gelben Fleckes sich eine kleine, gleichsam wie mit einer Stecknadel durchstochene Oeffnung bildete, die mit blossem Auge auf der Höhe der centralen Falte zu sehen war. Die Plica centralis bildet ein sicheres Merkmal für die Lage der Macula in den gehärteten Augen. Zwecks mikroskopischer Untersuchung der Ma- cula wurde ein viereckiges Stück der Netzhaut (mit der centralen Falte) 94 Referate und Besprechungen. VIII, 1. 10 mm lang und G bis 7 mm breit herausgeschnitten. In demselben war auch die Papille enthalten, die centrale Falte befand sich in der Mitte und verlief in der Richtung der langen Achse. Ein solches Stück wurde nach Auswaschen in Wasser in Farbstotfe gelegt (neutrales Am- moniakcarmin, wässerige Nigrosinlösung), dann abermals ausgewaschen und in einer Mischung von Mucilago Gummi arabici mit Glycerin zu gleichen Theilen 12 Stunden liegen gelassen, dann für 8 Stunden in 85procentigen Alkohol gelegt. Die peripheren Theile der Netzhaut wurden in kleine quadratförmige Stückchen geschnitten und auf die- selbe Weise behandelt. Um das Netzhautstück in der Mikrotomklammer zu befestigen, bediente sich Verf. des folgenden Verfahrens: er nahm gewöhnlichen, wo möglich jungen Eydammer Käse und zwar solchen, in dem nur wenige Löcher enthalten waren, zerschnitt denselben in kleine Scheiben und legte diese in ein gut geschlossenes Glasgefäss mit 95procentigem Alkohol. Das Gefäss wurde an einen warmen Ort gestellt (gegen 25 ^ R.), um das im Rase enthaltene Fett zu verflüssigen. Der Alkohol wurde alle drei Tage gewechselt. Die Käsestückchen nahmen allmählich ein bernsteinartiges Aussehen an und schieden das Fett tropfenweise aus, wobei sie eine immer weissere Farbe annahmen und härter wurden. Schliesslich waren sie vollständig weiss, wie Kreide, hart und homogen. Dem so behandelten Käse kann mau eine beliebige Härte verleihen : in 95procentigem Alkohol wird er sehr hart, in SOpro- centigem Avird er weich und elastisch, in 85- bis 90procentigem erhält man eine mittlere Härte; der Käse lässt sich jetzt mit dem Mikrotom leicht in dünne Scheiben schneiden. Zwischen zwei solchen mit ent- sprechenden Aushöhlungen versehenen Käsescheiben wurde das Netz- hautstückcheu eingeklemmt, das Messer des Mikrotoms wurde mit 85- procentigem Alkohol benetzt. Die Käse- und Netzhautschnitte sonderten sich von selbst auf dem Messer. Nachdem 4 bis 5 Schnitte der Netz- haut angefertigt waren, wurden sie mit Alkohol auf einen Objectträger gespült und hier der Reihe nach geordnet. Durch Schrägstellen des Objectträgers wurde der überschüssige Alkohol entfernt, die Reste mit Fliesspapier. Durch Befeuchten des Objectträgers vermittels Anhauchens wurde das in den Schnitten befindliche Gummi arabicum aufgelöst (es genügt eine mittelstarke Exspiration), welches dann zugleich die Schnitte auf dem Objectträger ankleben Hess. Man muss sich hierauf beeilen, Glycerin auf die Schnitte zu bringen, da das Wasser rasch verdunstet und die Präparate eventuell durch Eintrocknen verderben. Der Haupt- vorzug dieses Verfahrens besteht nach Ansicht des Verf. darin, dass bei demselben die Netzhaut nicht der Einwirkung von starkem Alkohol VIlI, 1. Referate und Besprechungen. 95 unterworfen wird, dnrcli welchen die Strnctur derselben sehr ver- ändert wird. Behufs Untersuchung der Macula wurden die Schnitte immer in der Richtung- des verticalen Augennieridians ausgeführt, und zwar von der Papille allmählich in der Richtung nach aussen, die Schnitte gingen quer durch die centrale Falte. Dieselben hatten in Folge dessen eine in der Art eines lateinischen V gebogene Form, wobei die Fovea sich auf der Biegung des Schnittes befand, eine Lage, welche, wie die bei- gegebene Abbildung erkennen lässt, durchaus nicht ungünstig ist. Schieff'erdecker {Bonn). Meyer, H., Die Entwicklung der ürnieren beim Menschen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 138—172 m. 2 Tfln.). Die beiden, völlig unversehrt zur Untersuchung gelangenden Em- bryonen waren, frisch gemessen, 4*25 mm (beziehungsweise 8 mm) lang. Fixlruug in concentrirter wässeriger Sublimatlösung (5 Minuten), Ent- fernung des Sublimats und Nachhärtung in TOprocentigera und absolutem Alkohol (je 12 Stunden), Paraffineinbettung, vierfache Färbung mit Hämatoxyliu, Nigrosin, Safranin, Eosin. Die Reconstruction ergab Län- gen von 2-52 mm (beziehungsweise 5*40 mm), so dass die Verkürzung in Folge der Fixirung und Härtung % beziehungsweise Yg der urspriuig- lichen Länge ausmachte. Letzteres ist nach Gaule der gewöhnliche Betrag der Verkürzung für die in der angegebenen Weise behandelten Objecte. Br. Karl Fiedler {Zürich). Disse, J., Ueber die Lymphbahnen der Säuge thierle bor (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 203—224 m. 1 Tfl.). Spritzt man bei Schlangen und Eidechsen in Kochsalzlösung ver- riebene Tusche in den subcutanen Bauchlymphsack ein, so füllen sich nach einiger Zeit die perivasculären Räume, besonders der Lebercapil- laren mit Tuschekörncheu an. Die vorliegende Arbeit ist nun dem Nachweis gewidmet, dass auch bei Säugethieren die Räume um die Blutcapillaren innerhalb der Leberläppchen, welche sich von den Lymph- gefässen aus injiciren lassen , wirklich eine selbständige Wand haben, die aus einer formlosen Grandsubstanz und verschieden dicken Fibrillen besteht, mit platten, sternförmigen Zellen (identisch mit Kupffer's „Sternzellen") belegt ist und Fibrillennetze in die Leberzellenbalken hinein entsendet. Die benöthigte Füllung der Lymphbahnen einzelner 96 Referate und Besprechungen. Vlll, 1. Leberbezirke geschah durch wiederholten flachen Einstich in die Wand verschiedener grosser Aeste der Vena hepatica und zwar mit löslichem Berlinerblau oder ^/jprocentiger Silbernitratlösung. Mehrmals wurde von der Pfortader aus eine nachfolgende Injection der Blutgefässe mit Carminleim vorgenommen. Nimmt man die Leber unmittelbar nach dem Tode der Tbiere (Katze, Kalb) lieraus, wobei sich das Blut grössten- theils entleert, und injicirt sofort, so kann jedes Erwärmen des Organs umgangen werden. Härtung in Alkohol. Die rothen Capillaren sind im Längsschnitt durch blaue Streifen, im Querschnitt durch blaue Ringe von den Leberzellen getrennt. Eine Endothelauskleidung besitzen diese Capillarscheiden nicht, wie die Injection mit derselben Silberlösung lehrte, welche in der Adventitia der bereits erwähnten Lebervenen und in dem damit zusammenhängenden Bindegewebe, welches die Pfortader- äste und Gallengänge begleitet, den Endothelbelag deutlich nachweist. Dass aber den Capillarscheiden eine eigene Wandung zukommt, kann auf verschiedene Weise erkannt werden. Erstens an Präparationen, wo die von der Pfortader aus eingespritzte rothe Leimmasse in Folge theilweiser Verstopfung der Capillaren unter der Wirkung des Injec- tionsdruckes in farblosem Zustand durch die unverletzte Capillarwand hindurchtritt, die Scheide erfüllt und hier nach Hämatoxylinfärbung in ihrer regelmässigen Form studirt werden kann. Zweitens an ausge- schüttelten Gefrierschnitten von Lebern, die, frisch entnommen, einige Tage in MüLLER'scher Flüssigkeit verweilt hatten. Drittens an Schnitten völlig tadellos, d. b. ohne jede Schrumpfung des Gewebes, von in FLEMMiNCx'schem Gemisch fixirten (menschlichen) Leberstücken. Viertens durch Darstellung des Faserkorbes, welcher in der Wandung der Ca- pillarscheide liegt, nach dem Verfahren von Oppel (Bildung von Chrom- silber-Niederschlägen'), welches sich auch auf injicirte und dann in Alkoliol gehärtete Lebern als anwendbar erwies. Dr. Karl Fiedler {Zürich). Maragliano, E., e Castelliiio, P., SuUe modificazioni de- generative dei globuli rossi [Lieber die Degene- rationserscheinungen der rothen Blutkörperchen]. (Riforma Med., Napoli Anno VI, 1890, p. 620—622). Vertf. halten für die beste Conservirungsmethode das Austrocknen an der Luft und für die beste Färbungsmethode die doppelte von ') Oi'PEL, A., Eine Methode zur Darstellung feinerer Structurverhältnisse der Leber (Änat. Anz. Bd. V, 1890, p. 143; cfr. diese Zeitschr. Bd. VIT. 1S90. p. 222.) VIII, 1. Referate und Besprechungen. 9t LöwiT und Müller (Orange und Methylenblau), oder auch eine Färbung mit Hämatoxylin und Eosin. F. Schiemenis {Neapel). Valeuti, G., e d'Abundo, G., Sulla vascolarizzazioue cere- brale di alcuui maramiferi in varie epoche della vita embrionale ed estrauterina [Ueber die Ge- fässversorgung des Gehirns bei einigen Säuge- thieren in verschiedeneu Epochen ihres embryo- nalen und extrauterinen Lebens]. (Atti della Societa di Sclenze Naturali, Pisa. Memoria vol. XI, 1890, 14 pp. c. 1 tav.). Zum Studium der Gefässvertheilung im Gehirn der Säugethiere eignet sich vor allen übrigen Injectionsmassen am besten eine einfache wässerige Lösung von salpetersaurem Silber, welche aber nicht stärker als 0 öOprocentig sein darf. Bei Injection von gefärbter Gelatine werden die Gefässe, zumal bei Embryonen, aus ihrer natürlichen Lage ver- schoben. Dies wird durch die erstgenannte Lösung vermieden, und werden durch deren Durchdringen durch die Gefässwandungen das Endothel und die perivasculären lymphatischen Scheiden deutlich ge- macht. Auf diese Art injicirte Gehirne können freilich, wegen des ent- stehenden Niederschlages, nicht mit den gewöhnlichen Fixirungsmitteln behandelt werden; sie wurden, nach einem Verweilen von 20 Minuten in directem Lichte, sofort in Alkohol getlian. Als Färbemethode wurde die MEVNERx'sche vorgezogen, und zwar empfahl es sich, die Schnitte auf dem Objectträger zu färben. P. Schiemenz (Neapel). Obregia, A., Fixirungsmethode der GoLGi'schen Präparate des Centralnervensystems (Virchow's Arch. Bd. CXXII, 1890, p. 387 f.). Verf. giebt eine Methode an, um die nach Golgi mit Sublimat oder Silber behandelten Präparate so dauerhaft zu machen , dass man sie färben und unter dem Deckglase aufheben kann. Man schneidet die nach Golgi behandelten Sublimat- oder Silberpräparate (letztere aus absolutem Alkohol) ohne Einbettung, was gut geht, oder nach Einbet- tung in Paraffin oder Celloidin, wobei man sich nur hüten muss, Alkohol anzuwenden, der schwächer ist als 94 bis 95 Procent, wenigstens bei Silberpräparaten. Die Schnitte werden aus absolutem Alkohol in die folgende Mischung gebracht: Goldchloridlösung, einprocentig, .... 8 — 10 Tropfen Alkohol, absolut, 10 cc Zeitschr. i. wiss. Mikroskopie. Vni, 1. • 98 Referate und Bespreciiungen. VllI, 1. welche eine halbe Stunde vorher gemaclit und dem diffusen Licht aus- gesetzt werden soll. Sofort nach dem Einlegen der Schnitte stellt man das betreffende Gefäss ins Dunkle. Das Silber wird allmählich durch Gold ersetzt, das Quecksilber in Goldamalgara umgewandelt: es treten schliesslich schwarze , zierliche Zeichnungen auf weissem Felde hervor. Je nach der Dicke der Schnitte muss die Flüssigkeit 15 bis 30 Minuten einwirken, etwas mehr schadet nicht viel. Darauf werden die Schnitte rasch erst in öOprocentigem Alkohol , dann in destillirtem Wasser ab- gespült, endlich in eine lOprocentige (10 und 100) Lösung von unter- schwefligsaurem Natron gebracht, in der sie, je nach der Dicke, 5 bis 10 Minuten verbleiben. Bei längerer Einwirkung wird die Zeichnung blasser, dann ver- schwinden die feinen Fasern. Schliesslich gründliches Auswaschen in destillirtem Wasser, das man zweimal erneuert. — Die so fixirten Schnitte erlauben jetzt beliebige Färbung, so Carmin, Hämatoxylin, Be- handlung nach Weigert oder PAii etc. , ferner Aufhellen in Kreosot, Einschluss in Dammarharz mit einem Deckgläschen. — Dass Sehe- wald * bei Anwendung des Goldes keinen Erfolg hatte , führt Verf. darauf zurück, dass derselbe nicht eine alkoholische, sondern eine wässerige Lösung gewählt hatte. — Während der Gold- und Natron- behandlung dürfen die Schnitte nur mit Glas , nicht mit metallischen Nadeln berührt werden. Im fertigen Präparat schwanken die Farben- töne vom tiefsten Schwarzgrün bis Dunkelviolett. Schiejferdecker {Bonn). Edinger , L. , Untersucliungen über die vergleichende Anatomie des Gehirns. L Das V^orderhirn (Ab- handl. d. Seukenbergischen Naturf. Gesellsch. Bd. XV H. 3, 1888, p. 91— 119 m. 4 Tfln.). Die Untersuchungen sind hauptsächlich auf Erkennung des Verlaufs der markhaltigeu Nervenfasern gerichtet. Präparate nach Weigert mit alkalischer Hämatoxylinlösung geschwärzt und dann mit Borax-Ferrid- cyankaliumlösung differenzirt , zeigen die markhaltigen Nervenfasern schwarz, die Zwischensubstanz gelblich und die Zellen nach dem Grade der Auswaschung heller oder dunkler braun. Auch Carmin- und Säure- fuchsinpräparate wurden nicht erfolglos benutzt. Es ist aber nöthig, zu diesen Untersuchungen nur ganz frisches Material zu verwenden. Für ') Skhrwai.d, E., Zur Technik der GoLoi'schen Färbung (Diese Zeitschr. Bd. VI, 1885, p. 448). VIII, 1. Referate und Besprechungen. 99 das Vogelhirn genügen nach Urtheil des Verf. die angegebenen Metho- den nicht. 6r. Brandes {Halle a. S.). Honegger, J., Vergleichend-anatomische Untersuchun- gen über den Fornix und die zu ihm in Beziehung gebrachten Gebilde im Gehirn des Menschen und der Säugethiere (Rec. Zool. Suisse vol. V, no. 2, 1890, p. 201—310 av. 5 plches.). Die im vorliegenden Hefte noch nicht zum Abschluss kommende Untersuchung erstreckt sich auf Gehirne von Mensch, Hund, Katze, Ka- ninchen, Maus, 3 Vogel-, 3 Reptilien-, 2 Amphibien-, 4 Knochenfisch- und 5 Knorpelfisch -Arten. Aus den Mittheilungen über die Technik ist erwähnenswerth, dass ganz alte, überhärtete Gehirne, vorausgesetzt, dass vor und während der Härtung nie Fäulniss eintrat, wieder völlig schnitt- und tinctionsfähig gemacht werden können, indem man sie auf mehrere Tage in Wasser einlegt, welches der Siedehitze nahe gehalten und öfter erneuert wird. Zur Färbung der meist in chromsaurem Kali conservirten Gehirne wurde besonders ammoniakalische Carminlösung verwendet. Um dieselbe in kürzester Zeit möglichst ammoniakarm und dadurch möglichst färbekräftig zu gewinnen, schlug der Verf. folgendes Verfahren ein. Das Carmin wird mit nur soviel Ammoniak als unum- gänglich nothwendig, zu einem dicken Brei verrieben, an der Wandung der Reibschale dünn vertheilt und so dem Austrocknen überlassen, end- lich aber fein pulverisirt. Lässt man nun die Luft noch etwa 24 Stun- den einwirken und löst dann das Pulver in kaltem Wasser, so erhält man eine gleich von Anfang an befriedigende Färbflüssigkeit. — Neben dieser Färbung wurde auch die WEiGEKT'sche Methode mit Säurefuchsin, und mit gutem Erfolg eine Goldimprägnation angewendet. Bei letzterer kamen die Schnitte auf dreiviertel Stunde in halbprocentiger Goldlösung ins Dunkle, wurden dann in ganz schwach mit Essigsäure angesäuertem Wasser sofort dem vollen Sonnenlicht oder doch möglichst intensivem weissen Licht ausgesetzt, um endlich noch zwei Tage im Tageslicht zu verweilen. So wurde eine kräftige erste Reduction erreicht und das Nachdunkeln fast ganz vermieden. Dr. Karl Fiedler (Zürich). Fusari, R., e Panasci, A., Sülle terminazione nervöse nella mucosa e nelle ghiandole sierose della lingua dei mammiferi [Ueber die Nervenendigungen in der Mucosa und den serösen Drüsen der Säugethier- Zunge]. (Atti della R. Accad., Torino vol. XXV, 1890, p. 835—857 c. tav. 9.). lOO Referate iiiul Besprechungen. Vlll, 1. Verff. bedienten sich zum Studium der Nervenendigungen in der Zunge der GoLGi'schen Methode und zwar in der Weise , dass die Mucosa mit einer dünnen Lage Muskelgewebe darunter direct in eine reichliche Menge eines Gemisches von 1 Theil einprocentiger Osmium- säure und 5 Theilen zweiprocentigen chromsauren Kalis gegeben und darin 5 bis 9 Tage gelassen wurde. Je nach dem verschieden langen Aufenthalt in dieser Lösung färbten sich bald diese bald jene nervösen Elemente, bald die Gefässe oder die elastischen Elemente oder das intermusculäre Bindegewebe. In der einprocentigen Lösung von sal- petersaurem Silber blieben die Objecte bis zum Gebrauche. Besonders geeignet für derartige Untersuchungen zeigte sich die Zunge der Maus, doch wurden auch mit derjenigen von neugeborenen Katzen, Ziegen- lämmern und Kaninchen gute Präparate erhalten. P. Schiemens (Neapel). C. Bacterien, Eisenberg:, J., Bacteriologische Diagnostik. Hilfstabel- le u zum Gebrauche beim praktischen Arbeiten. 3. umgearb. u. verm. Aufl. Nebst einem Anhange: Bacterio- logische Technik. Hamburg u. Leipzig (Voss) 1891. Eisenbeeg's Tabellen, deren erste Auflage wir bereits in dieser Zeitschrift* willkommen geheissen, liegen jetzt in der dritten, völlig umgearbeiteten und sehr vermehrten Auflage vor uns, zum besten Zei- chen dafür, wie nützlich und brauchbar sich dieselben für das Studium der Bacteriologie erwiesen haben. Aus dem kleinen Heftchen der ersten Auflage ist jetzt ein umfangreicher Band geworden, indem die dreifach so grosse Anzahl von Mikroorganismen in die Tabellen aufgenommen wurde. Ausserdem ist in der neuen Auflage als Anhang noch eine „bac- teriologische Technik" hinzugekommen. Die grösste Schwierigkeit berei- tete die sachgemässe Ein th ei hing der in den Tabellen zusammen- gestellten Mikroorganismen. Da eine systematische Eintheilung der Bac- terien zur Zeit noch unmöglich ist, hat Eisenbebg mit Rücksicht auf die rein praktisch-diagnostischen Zwecke des Buches die Eintheilung in fol- gender Weise vorgenommen : Nachdem zunächst die Trennung in I. „nicht pathogene", H. „pathogene" Bacterien, HL Pilze vollzogen, wurde in der ersten Gruppe die Scheidung in Mikrokken, Bacillen und Spirillen durchgeführt, in diesen drei Abtheilungen wieder die Unterabtheilungen: ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 102. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 101 Gelatine verflüssigend und nicht verflüssigend gebildet nnd in diesen bei- den Unterabtheilungen schliesslich die farbstofTproducirenden von den nicht farbstoffproducirenden Arten getrennt. Die Gruppe der pathogenen Bacterien unterlag der Theihing in vier Untergruppen: 1. für den Menschen, 2. für Thiere specifisch pathogene Bacterien, 3. für Thiere pathogene, beim Menschen gefundene Bacterien, 4. für Thiere patho- gene Bacterien verschiedener Herkunft. Ausserdem sind die in den Tabellen behandelten Bacterien [in sehr zweckmässiger Weise, Ref.] in einer Uebersicht nach ihren Fundorten (Wasser, Luft, Erde etc.) zusammengestellt. Die Rubricirung der Tabellen für die einzelnen Mikroorganismen ist dieselbe geblieben wie in den früheren Auflagen; wir möchten hier den Wunsch aussprechen, dass in den künftigen Auf- lagen auch das Verhalten der diversen Mikroorganismen in Bouillon mit angegeben würde, da dieses ebenfalls wichtige Anhaltspunkte zur Differenzirung der verschiedenen Bacterien liefert. Was den Anhang: Bacteriologische Technik betrifi't, so bietet dei'selbe eine kurz gefasste sehr praktische Zusammenstellung der technischen Vorschriften zum Zwecke der Züchtung und Färbung von Bacterien , welche von den Abnehmern der „Tabellen" gewiss nur sehr dankbar acceptirt wer- den wird. Zum Beweise der Werthschätzung, welche Eisenbeeg's Werk ge- niesst, sei erwähnt, dass dasselbe, nachdem es bereits ins Italienische und Französische übersetzt ist, jetzt auch einer englischen Uebersetzung entgegensieht. Baumgarten. Günther, C, Einführung in das Studium der Bacteriologie mit besonderer Berücksichtigung der mikrosko- pischen Technik. Leipzig (Thieme) 1890. 244 pp. 8" m. 60 Photogr. GüNTHEK bezweckt mit der Herausgabe seines Buches, „dem Me- diciner, und zwar dem Studirenden ebenso wie dem Arzte, eine kurz- gefasste, das Wesentliche vollständig bringende Einführung in das praktische Studium der Bacterien Wissenschaft zu geben". Das gleiche Ziel haben sich auch andere Lehrbücher der Bacteriologie ge- setzt, die sich allgemeiner Beliebtheit erfreuen, und man sollte daher meinen, dass das neue Werk keinem rechten Bedürfniss entgegenkomme. Und doch ist dem nicht so ! Die Besonderheit des GüNXHEK'schen Buches besteht in der grossen Ausführlichkeit, mit welcher die Hand- habung des Mikroskops, die Anstellung der Bacterienfärbungen und Bacterienzüchtungen, die Einrichtung und Gebrauch der Apparate, kurz 102 Referate und Besprechungen. VIII, 1. die ganze elementare bacteriologische Technik, besonders die mikroskopische, auseinandergesetzt ist, so dass selbst Die- jenigen, welche die Anleitung eines Lehrers entbehren müssen, mit Hilfe dieses Buches in den Stand gesetzt werden, bacteriologische Untersuchungen mit Erfolg in Angritf zu nehmen Um so grösseren Nutzen werden natürlich die Praktikandeu bacteriologischer Labora- torien, denen die Aufsicht und der Rath des Lehrers zur Seite steht, aus dem Buche ziehen können. Aber auch für den bacteriologischen Lehrer und Forscher hat GtiNTHER's Werk, ganz abgesehen davon, dass es ihm die Unterweisung und Anleitung der Laboratoriumsschüler er- leichtert, auch dadurch Werth und Interesse, dass manche sehr be- merkenswerthe neue Ermittelungen des um die Förderung der bacterio- logischen Technik wohlverdienten Autors darin niedergelegt sind. Ausser der Methodik der Bacterienbeobachtung und Bacterien- züchtung sind in dem Werk auch die theoretischen Theile der Bacte- riologie: die allgemeine Morphologie und Biologie der Bacterien, sowie die wichtigsten der einzelnen pathogenen und nicht pathogenen Mi- krobien (Bacterien, Schimmelpilze und Protozoen) abgehandelt. Die Darstellung dieser Capitel ist kurz, klar und übersichtlich, berücksichtigt durchweg den neuesten Standpunkt des Wissens und kann daher als Vorbereitung für das Studium ausführlicherer Werke nur empfohlen werden. Der Schwerpunkt, die eigentliche Capacität des Werks liegt aber in dem technischen Theile, welcher bisher in keinem anderen uns bekannten Werke in so eminent praktischer, das Bedürfniss des Anfängers befriedigender Weise entwickelt worden ist. Die dem Werke beigegebenen, vom V^erf. mit bekannter Virtuosität ausgeführten 60 Photogramme, welche die wichtigsten pathogenen Mi- kroorganismen in ihrem morphologischen und culturellen Verhalten darstellen, sind als werthvolle Bereicherung des Werkes anzuerkennen, wenngleich wir gerade zur Orientierung des Anfängers gute Zeich- nungen mehr empfehlen würden, als die immerhin schwieriger aufzu- fassenden Photogramme. — Nach alledem zweifeln wir nicht, dass GtjNTHER's Buch in den Kreisen, für die es bestimmt ist, den grössten Anklang finden und bald zu den beliebtesten Hilfsquellen des bacterio- logischen Unterrichts zählen wird. Saumgarten. (l'ArsoilTal, A., Appareils k temperature fixe pour em- bryologie et cultures microbienne s (Arch. de Physiol. norm, et pathol. 5. ser., t. II, 1890, p. 83—88). VIII, 1. Referate und Besprechimgjeii. 103 Bei diesen neuen Apparaten für constante Temperatur hat Verf. an Stelle des in den sonst gebräuchlichen Thermoregulatoren verwendeten Sperrquecksilbers für den Gaszufluss das zwischen den doppelten Wän- den des Apparates befindliche Wasser direct benutzt und neuerdings anstatt der bei seinen bekannten älteren Apparaten angewandten Kaut- schukmembran eine solche aus Metall eingeführt. Die nebenstehende Abbildung stellt einen solchen Thermostaten im Durchschnitt dar, der durchaus doppelwandig construirt ist und zwischen diesen beiden Wän- den mit Ausnahme der Thür Wasser führt. An der tiefsten Stelle des Bodens bei A befindet sich eine gefaltete Metallmembran ähnlich denjenigen in den Aneroidbarometern, und unter dieser ist ein Kasten angebracht, in den das Gas durch ein central eintretendes Rohr B ein- geleitet wird, um von hier aus durch zwei seitliche Rohre zu den Brennern C zu ge- langen. Diese Brenner erwärmen das Was- ser mit Hülfe zweier Metallschornsteine, die durch die ganze Höhe der Wasser- schicht hindurchgehen. Wenn der Appa- rat in Gebrauch genommen werden soll, so erwärmt man den mit vorher durch Auskochen luftfrei gemachtem Wasser völ- lig gefüllten Thermostaten mit Hülfe der beiden Brenner und lässt den Ueberschuss des sich ausdehnenden Wassers aus dem Rohr D ausfllessen. Sobald die gewünschte Temperatur erreicht ist, verschliesst man dieses obere Loch mit einem Kautschuk- pfropfen, in dem ein oben und unten offenes Glasrohr E steckt; wenn nun das Wasser sich weiter ausdehnt, steigt es in dem Glasrohr in die Höhe und durch den so grösser werdenden statischen Druck wird die Metall- raembran durchgebogen, bis sie die dicht unter ihr liegende OeflFiuing des Gaszuflussrohres so weit verschliesst, dass nur die zum Ersatz der vom Thermostaten abgegebenen Wärmemenge nöthige Gasmenge ein- strömen kann. Dann bleibt die Temperatur des Thermostaten völlig constant. Das Gaszuleitungsrohr kann übrigens durch ein Gewinde der Metallmembran genähert werden. Die übrigen vom Verf. beschriebenen Modelle beruhen auf dem gleichen Princip. Eins derselben ist ein kleinerer Regulator, dessen rohrförmiger, die sich ausdehnende Flüssig- 104 Referate und Besprechungen. VIII, 1. keit enthaltender Theil in das Gefäss oder den Raum gebracht wird, dessen Temperatur constant gehalten werden soll *. Alfred Koch {Göttingen). Miquel, P., Nouveaux regulateurs bases sur ladilatation des metaux solides (Ann. de Microgr. t. III, 1890 — 91, no. 3 p. 151, no. 5 p. 241). Miquel beschreibt zwei Thermo-Regulatoren, welche auf der Aus- dehnung von Zinkkolben (von 25 bis 50 resp. 30 cm Länge) beruhen, die in einer Röhre von Porcellan oder Glas stehen. Diese taucht in das Wasserbad des Thermostaten ein und erhält eventuell am unteren Ende (aber ohne grossen Nutzen) zwei seitliche Fenster. Bei dem ersten Regulator comprimirt das schneidenförmige freie obere Ende des Zinkkolbens bei einer Ausdehnung durch Wärme den zuführenden Gas- schlauch des Thermostaten gegen ein durch eine Schraube näher oder ferner rückbares Widerlager. Beim zweiten Modell trägt der Zinkkolben eine seitlich durch Schraube regulirbare Haube mit schneidenförmiger Spitze , welche durch einen Hebelmechanismus je nachdem eine Com- pression des zuführenden Gasschlauches oder des Schlauches, welcher das abkühlende Medium zuführt, bewirkt. Einzelheiten sind im Original nachzusehen. Csaplewski {Görhersdorf). Biijwid, 0., Eine einfache Filtrirvorrichtung zumFiltri- ren steri lisir ter Flüssigkeit (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 1 p. 4). BujwiD bedient sich zum keimfreien Filtriren von Flüssigkeiten folgender Vorrichtung. Der Hauptbestandtheil ist eine Pasteur-Cham- BEKLAND'sche Bougic (a) mit emaillirtem Deckel (c) (ca. 15 cm lang, 2 bis 3 cm breit, 3 bis 5 mm Wanddicke). Dieselbe wird, mit Watte- pfropf versehen, vor dem Gebrauch mehrmals in strömendem Wasser- dampf sorgfältig sterilisirt. Die Filtrirkerze wird, wie es scheint, mit- tels einer durchbohrten Gummikappe (ft), welche in der Beschreibung zwar nicht erwähnt, aber aus der Zeichnung ersichtlich ist, an eine Eprouvette {d) luftdicht angefügt, welche die zu filtrirende Flüssigkeit enthält und durch ein seitliches Ansatzrohr ein eventuelles Nachsaugen von frischer Flüssigkeit aus einer Flasche {g) gestattet. Die Filtration in der Kerze erfolgt von aussen nach innen durch Absaugen mittels ') Thermostaten nach d'Aksonval sind z. B. zu beziehen von F. u. M. Lautenschlägef, Berlin, Ziegelstrasse 24. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 105 einer Luft- resp. Wasserstrahlluftpumpe, deren Verbindung am Knopfe der Filtrirkerze angebracht wird. Die filtrirte keimfreie Flüssigkeit sammelt sich in einer mit doppelt durchbohrtem Kautschukstopfeu ver- sehenen, als Vorlage dienenden Flasche (h) an. Benutzt man eine Wasserstrahlluftpumpe zum Absaugen, so muss man zwischen diese und die Vorlage eine WouLFF'sche Flasche einschalten. Csaplewshi (Görbersdorf). Miquel^ P., Sur un mode particulier de prelevement du li- quide des cultures (Ann, de Microgr. t. III, 1890, no. 2 p. 88). MiQUEL wendet, um aus grösseren Ballons mit flüssigen Culturen (er arbeitete mit 10 Liter) keimfrei gewisse Mengen von Flüssigkeit entnehmen zu können , folgende Versuchsanordnung an. Der zur Auf- nahme der flüssigen Cultur bestimmte Ballon (Flasche etc. v) wird mit einem doppelt durchbohrten Kautschukstopfen armirt. Durch diesen geht eine kurze gebogene Glasröhre, welche unten kaum den Kaut- schukstopfen überragt und am oberen Ende t^ einen Pfropf aus Glas- wolle als Luftfilter erhält. Durch die andere Durchbohrung geht eine gekrümmte Glasröhre t bis auf den Boden des Gefässes. Das andere Ende t ist schwanenhalsartig gekrümmt und zu einer Spitze i von unge- fähr 2 mm Durchmesser ausgezogen. Durch einen einfach durchbohrten Kautschukstopfen ist es mit einem kleinen ampullenartigen Fläschchen (p) verbunden, welches unten zu einer offenen Spitze f (feiner wie i) aus- 106 Refei'ate und Besprechungen. VIII, 1. gezogen ist und am Halse eine offene Tnbulatur h (mit Glaswollepfropf) trägt. Der Apparat wird im ganzen und mit Culturflüssigkeit beschickt, im Autoklaven sterilisirt und dann abgekühlt. Die Impfung erfolgt durch die kurze zuvor abgeglühte Röhre i!', indem man mit zu einer Spitze ausgezogenen Impfpipette den Glaswollepfropf durchsfösst. Will man nun aus der angegange- nen Cultur Proben entnehmen, so verbindet man t' mit einem Doppelgebläse und fängt die aus f ausströmende Flüssig- keit auf. Bei Nachlassen des Drucks wird die aspirirte Luft durch den Wattepfropf der seitlichen Tnbulatur h filtrirt. Man muss die Spitze f reini- gen und darauf achten, dass die ausströmende Flüssigkeit die Ampulle p nie so weit füllt, dass durch den Flüssig- keitsspiegel die Mündung i er- reicht wird. Auch aus anaero- ben Culturen kann man ohne Luftzutritt Proben entnehmen. Zunächst wird die Spitze f der Ampulle j) unter Quecksilberabschluss gesetzt. Dann leitet man durch die Tnbulatur h einen Strom des zu benutzenden Gases (z. B. Wasserstoff) ein, welcher also bei t' austritt. Glaubt man allen Sauerstoff ausge- trieben, so verbindet man auch t' mit demselben Gasometer, wodurch jetzt also das Gleichgewicht des Gasdruckes im Apparat hergestellt wird. Will man aus dem Apparat Flüssigkeitsproben ohne Sauerstoff-Zutritt entnehmen, so muss man an t' vorher ein Ballon-Gebläse eingefügt haben, welches gestattet, die Flüssigkeit durch i auszutreiben, welches aber an seinem Ventilende mit dem Gasometer verbunden ist, so dass es also mit dem Gas arbeitet, welches den Apparat erfüllt. Zur Entnahme ent- fernt man die den Quecksilberverschluss herstellende Eprouvette. Czapleivshi {Görhersdorf). van Oyerbeck de Meyer, Ueber die Bereitung des Nähr- agars (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasiten k. Bd. IX, 1891, No. 5 p. 163). VIII, 1. Referate und Besprechungen. 107 Verf. lässt 1 '/g bis 2 Procent fein zerschnittenes Agar in 0'5 Liter gewöhnlicher LöFFLEK'scher Bouillon (mit 1 Procent Pepton und 0'5 Procent Kochsalz) eine Stunde quellen und dann drei Viertelstunden in einem Desinfectionsofen in strömendem Wasserdampf bei etwas über 100** gründlich kochen. Es neutralisirt dann , lässt einige Zeit heiss stehen bis einigermaassen Klärung eintritt. Filtration des Geklärten durch einfaches Filter (Zudecken mit Uhrglas, Convexität nach oben) % bis 1 Stunde in seinem Dampfapparat. Der Hals des Trichters ist dabei mit Watte umwickelt, die beim Herausziehen nachträglich als Pfropf dient. Eventuell wird auch der vorher erhaltene Bodensatz noch filtrirt. 500 cc Fleischwasser geben ca. 0-5 1 Nähragar. Sollen Zusätze dazu kommen, so wird die Menge gemessen. Sterilisation an 3 Tagen hintereinander je „eine gute halbe Stunde". Meist braucht Verf. vier Filtrirapparate nebeneinander. Die Reagirgläser und Kolben etc. steri- lisirt er nicht vorher sondern erst mit der Füllung. Er macht zum Schluss auf Besonderheiten des Wachsthums auf Glycerinagar aufmerk- sam und erwähnt das durch einen nach seinen Angaben construirten Apparat keimfrei filtrirte Blutserum. An der ganzen Veröffentlichung ist nichts wesentlich Neues, da man sowohl Agar bei höheren Tempera- turen (aucli über 100") bereitete und filtrirte, als auch die nachherige Sterilisation der Gefässe als nicht durchaus noth wendig fortliess. Des- gleichen sind die Besonderheiten des Wachsthums auf Glycerinagar wohl bekannt. Czaplewski {Görhersdorf). Tischutkin, N., Eine vereinfachte Methode der Bereitung von Fleischpeptonagar (Wratsch 1890, No. 8, Russisch, Ref. nach Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 6 p. 208). Das abgewogene Agaragar wird 15 Minuten in 5procentige Essig- säure gelegt, das gequollene durch Spülen mit Wasser entsäuert, dann durch 3 bis 5 Minuten langes Kochen in der fertigen Bouillon gelöst. Nach Neutralisirung und Abkühlen wird das Weisse von zwei Hühner- eiern zugesetzt, die Mischung ^/^ bis % Stunden im Dampfkochtopf ge- kocht. Danach Filtriren durch ScHULZE'sches Papier ohne Wärme- trichter in sehr kurzer Zeit. Czaplewski {Görhersdorf). Smith, Th., Einige Bemerkungen über Säure- und Alkali- Bildung bei Bacterien (Centralbl. f. Bacteriol. u. Para- sitenk. 1890, Bd. Vm, No. 13 p. 389). 108 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Anknüpfend an die interessante Entdeckung Löffler's * über die Beziehungen, welche zwischen der Alkali- und Säure-Production mancher Bacterienarten und der Färbbarkeit ihrer Geissein bestehen, weist Verf. auf die seinerzeit schon vom Ref. ^ hervorgehobenen Schwierigkeiten hin, welche einer allgemeinen Classification der Bacterieu in Alkali- und Säurebildner entgegenstehen. — Nach seinen Untersuchungen ist die Säurebildung einer Baeterienart meistens eng an das Vorhandensein einer für sie vergährbaren Zuckerart gebunden. So bildet z, B. Bacillus coli sowohl in Traubenzucker als in Milchzucker - Nährböden Säure, der Hog-Cholera-Bacillus dagegen nur in traubenzuckerhaltigen, während er sonst Alkali producirt. Daher erscheint der Hog-Cholera- Bacillus in der vom Ref. empfohlenen Lackmus-Molke als Alkali- Bildner, Bacillus coli als Säurebildner, während in Traubenzuckerlösungen beide Säurebildner sind. Dass die Alkali -Bildung seitens des Hog- Cholera-Bacillus auch in Traubenzucker-Nährböden neben der schnelle- ren Säureproduction langsam einhergeht, bewies Smith durch folgen- den Versuch. Mit Hog- Cholera wurden 4 Nährsubstrate geimpft: a) Pepton - Bouillon , b) Pepton -Bouillon mit 1 Tropfen lOprocentiger Glykose -Lösung, c) Pepton - Bouillon mit 2 Tropfen Zuckerlösung [von welcher Concentration ? Ref.], d) Pepton-Bouillon mit 4 Tropfen Zucker- lösung ; die Anfangsreaction war „leicht alkalisch". Nach 24 Stunden war nun a) „schwach alkalisch", b) und c) „schwach sauer", d) „stark sauer". Nach 2 Tagen wurde b) alkalisch, nach 7 Tagen auch c); d) blieb sauer. In b) und c) war somit die anfänglich gebildete Säure durch die Alkali - Bildung allmählig überneutralisirt worden ; in d) war die Säuremenge nach Verf. schon so reichlich , dass Entwicklungshem- mung eintrat. Ein Parallelversuch mit Typhus -Bacillen ergab in a) anfängliche Säurebildung, welche bald durch Alkalibildung überwogen wurde, in b), c) und d) blieb die Säure bestehen. Durch Zusatz kleiner Zuckermengen ist es nach Verf. möglich, ein besonders reichliches Wachs- thum mancher Alkalibildner zu erzielen, indem die geringe Säurebildung, welche sich einstellt, zur Neutralisirung der andernfalls entwicklungs- hemmenden Alkalimenge dient. — Die mehrfach aufgezeichnete Beob- achtung, dass Bacterienculturen zuerst sauer, später alkalisch reagirten, will Verf aus der Anwesenheit von Traubenzuckerspureu in dem Fleisch- infus erklären ^. Petruschky. ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 368. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 81. 3) Letztere Annahme erscheint nicht einmal erforderlich, da Ref. wieder- holt in seinen entsprechenden Versuchen — wie auch Verf. in den a)-Proben Vlli, 1. Referate und Besprechungen. 109 Eberth, C. J., Zur Untersuchung des Auswurfs auf Tu- berkelbacillen. Berlin (Fischer) 1891. 32 pp. Der rühmlichst bekannte Verf. bringt in dem vorliegenden Büchel- chen eine „kurze übersichtliche Darstellung derjenigen Proceduren, welche bei der Tuberkelbacillenfärbung in Anwendung kommen, nebst Beschreibung der einzelnen Färbemethoden". Er beabsichtigt, durch diese Zusammenstellung dem Lehrer zeitraubende Auseinandersetzungen zu sparen und die Prakticanden resp. den praktischen Arzt in den Stand zu setzen , „die nöthigen üntersuchungsmethoden selbständig auszuführen". Die Fertigkeit in der Handhabung des Mikroskops, im Bacterio- skopiren wird in der kleinen Anleitung natürlich vorausgesetzt. Die- selbe wird gewiss Jedem willkommen sein, der sich mit Tuberkelbacillen- untersuchungen zu beschäftigen hat, denn sie enthält eine Zusammen- stellung der noch gangbaren Methoden aus älterer, neuerer und neuester Zeit mit kurzer Angabe ihrer relativen Vor- und Nachtheile sowie ge- naue Vorschriften zur Präparation des Sputums und zur Herstellung der Deckglaspräparate , wie beides in dieser Uebersichtlichkeit und Vollständigkeit anderweitig nicht zu finden sein dürfte. Baumgarten. Noiiiewicz, E., üeber die innere Construction desBacillus diphtheriae und des Bacillus mallei, und über verbesserte Färbungsmethode der Rotzbacillen in den Geweben (Deutsch. Zeitschr. f. Thiermed. u. vergl. Pathol. Bd. XVn, H. 2 u. 3 p. 196—208). Den Bacillus diphteriae färbte Verf. erst mit schwach alkalischem Methylenblau, dann mit schwachem, wässerigen Bismarckbraun. — Die — die Beobachtimg machte , dass gerade in gewöhnlicher Pepton- Bouillon (ohne Zucker) eine anfängliche geringe Säurebildung später der Alkali -Pro- duction wich (z. B. beim Typhus -Bacillus). Die Pepton-Bouillon wurde daher bei der Anstellung der damaligen quantitativen Untersuchungen zunächst vermieden (abgesehen von den gleichfalls störenden Reductionserscheinungen). Für einzelne Gruppen von Bacterien sind indessen auch Bouillon, ferner Blutserum 1:10, Harn, Pflanzeninfuse u. s. w. mit Vortheil verwerthbar, und gerade die Durchprüfung verschiedener Nährmedien vermehrt die Ge- nauigkeit der biologischen Charakteristik einzelner Bacterienarten , namentlich unter Berücksichtigung der quantitativen Ergebnisse. Die Bezeichnung „ A 1 k a 1 i b i 1 d n e r " und „ S ä u r e b i 1 d n e r " kann natürlich immer nur eine relative bleiben. Da einige Bacterienarten (wie Eef. beobachtete) nicht nur in zuckerfreier Pepton-Bouillon, sondern auch in Blutserum Säure bilden, so ist wohl anzunehmen, dass dieselben auch Pepton respective Eiweiss unter Säurebildung zu zersetzen vermögen. Kef. IIÖ Referate und Besprechungen. VIII, 1. Methode des Aufsuchens der Rotzbacillen in den Geweben mittels der Färbung sei dagegen, bemerkte Verf., nicht leicht. Bis jetzt benutzen Alle die Einzelfärbungen von Löffler, Kühne, Unna, Salt; diese Färbungen erreichen jedoch, trotz der allgemeinen Versicherung , dass die Methode von Löffler und Unna immer gute Resultate liefere, nicht immer ihren Zweck. Alle haben sich in der Mehrzahl aus zwei Gründen als ungenügend erwiesen : erstens das Gewebe färbt sich so intensiv, dass man in ihm die Bacillen nicht sehen kann (Unna's Methode), oder zweitens bei stärkerer Entfärbung der Gewebe werden auch die Bacillen entfärbt (Löffler's Methode). Während zweijähriger unausgesetzter Arbeit auf der Dorpater bacteriologischen Station der Thierarzneischule, die sich hauptsächlich mit dem Auffinden einer richtigen und möglichst raschen Rotzdiagnose beschäftigte , fand Verf. obigen Satz bestätigt. Nach vielen Versuchen glückte es Verf. endlich, eine Methode aufzu- finden, die ausgezeichnete Resultate, selbst bei den ungünstigsten Be- dingungen, z. B. bei bedeutender Dicke des Schnittes, lieferte. Die Färbung hiernach besteht in einer Combination der LöFFLEK'schen und ÜNNA'schen Methode. Das Verfahren hierbei ist folgendes: 1) die Schnitte werden aus dem Alkohol auf 2 bis 5 Minuten in Löffler's alkalisches Methylenblau (Kali caust. 1 : 10 000) eingelegt; 2) dann werden sie in destilirtem Wasser gewaschen und in die entfärbende Mischung übertragen, welche aus 75 Theilen halbprocentiger Essigsäure und 25 Theilen halbprocentigen wässerigen Tropäolin 00 besteht. Die Zeit, während welcher man die Präparate in dieser Flüssigkeit halten muss, hängt von der Dicke des Schnittes ab ; für dünne Schnitte genügt es, sie rasch unterzutauchen; die dicken kann man 2 bis 5 Secunden und selbst länger in der Flüssigkeit halten. Das Präparat ist nun ziemlich stark gefärbt, und ist es schwer die Bacillen zu sehen. 3) Die Präparate werden in destillirtem Wasser ausgewaschen oder ausge- wässert. Dabei wird die Essigsäure und mit ihr ziemlich viel Farbe dem Gewebe entzogen. 4) Die Schnitte werden hierauf mit dem Spatel oder Pauspapier auf die Objectträger übertragen, sorgfältig ausgebreitet; dann wird das Wasser an den Objectträgern mit Filtrirpapier abgesogen, und die Präparate in der Luft oder über der Spirituslampe getrocknet. Das Trocknen muss vollständig sein, wobei die Präparate fast an die Gläser ankleben. 5) Um die Präparate endgültig aufzuhellen , wird fortwährend Xylol auf dieselben getröpfelt. Hierbei beobachtet man, dass, je länger die Präparate in Xylol liegen, desto heller das Bild wird. Die Präparate können nun gleich in Xylol untersucht oder in Canada- balsam gebracht werden; man darf sie jedoch nicht in Nelken-, Ori- Vlil, 1. Referate und Besprechungen. 111 ganum-, Anilinöl etc. übertragen. In den auf solche Weise gefärbten Präparaten sind in mehr oder weniger blauem Gewebe stark gefärbte, fast schwarze Rotzbacillen zu sehen. Die erfolgreichen Resultate dieser Methode muss man dem Umstände zusprechen, dass die Präparate nach der Entfärbung und dem Auswaschen in destillirtem Wasser der Wirkung des Alkohols nicht unterliegen (des Alkohol absolutus nach LöFPiiER und des schwachen Spiritus nach Unna), welcher in gleicher Weise dem Gewebe und den Bacillen, diesen womöglich noch stärker, die Farbe entzieht. In letzter Zeit wendete Verf. nur diese Methode an und zwar mit dem grössten Erfolge. Nur hierdurch gelang es Verf. die Feinheiten in der Construction des Rotzbacillus zu beobachten. Nörner {Dorotheenthal). Behring, Ueber Desinf ection, Desinfection smittel und Desinfectionsmethoden (Zeitschr. f. Hygiene, Bd. IX, 1890, p. 395). In einer ausführlichen Arbeit (83 pp.) fasst Behring die bisherigen Ergebnisse der seit den grundlegenden Arbeiten von Koch angestellten Untersuchungen über Desinfection zusammen, wobei der Verf. sich zum grossen Theil auf eigene Untersuchungen stützen kann. Folgende Gruppen von Desinfectionsmitteln werden einer genauen Erörterung unterzogen: Metallsalze; Säuren und Alkalien; Verbindungen aus der aromatischen Reihe der organischen Chemie; flüssige Desinficientia, die in Wasser unlöslich oder schwer löslich sind ; in festem Zustande wirk- same Mittel; Mittel in gasförmigem Zustande; Stoffwechselproducte von Mikroorganismen ; schliesslich bacterientödtende Körper im thierischen und menschlichen Organismus. Auf alle Einzelheiten kann wegen der Menge des Materials nicht eingegangen werden, auch ist ein Theil der Gegenstände in dieser Zeitschrift bereits referirt worden. Eines Punktes aber, der in der Desinfectionslehre neu ist, sei besondere Erwähnung gethan, der desinficirenden Eigenschaft fester Körper, — Im An- schluss an Beobachtungen, welche Miller über antiseptische Eigen- schaften von Goldplomben für Zähne gemacht hatte, stellte Behring folgende Untersuchung an. Er brachte kleine Stückchen von Gold- plomben-Material oder von Blattgold in Gelatine-Platten, die mit bestimmten Bacterienkeimen (Milzbrand, Diphtherie etc.) besät waren. Wuchsen nun die betrefi'enden Bacterien auf der Platte zu zahllosen Colonien aus, so war kreisförmig um die Goldstückchen herum makroskopisch wie mikroskopisch eine colonienfreie Zone zu bemerken, die je nach der Bacterienart von verschieden grossem llä Referate und ßesprechungen. VlII, 1. Durchmesser war (1 bis 5 cm). Wenn die Goldstückchen alsdann aus der Platte entfernt wurden, blieb die betreffende Zone dennoch unge- eignet für Bacterienwachsthum, woraus Beheing schliesst, dass wohl Spuren des sonst so schwer löslichen Metalls in dem Nährmediura auf- gelöst worden sein mussten, und zwar, wie Verf. annimmt, durch Ein- wirkung bacterieller Stoffwechselproducte. Die gleiche Eigenschaft wie Gold zeigten auch metallisches Silber und Quecksilber, in geringerem Grade auch Kupfer, Nickel und Zink. Unwirksam waren Zinn, Blei und Eisen. — Hinsichtlich der sonstigen interessanten Einzelheiten der Arbeit sei das Studium des Originals empfohlen. Fetruscliky. Heider, A., lieber die Wirksamkeit von Desinfectionsmitteln bei höherer Temperatur (Centralbl. f. Bacteriol, u. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 7 p. 221). Veranlasst durch die vorstehend referirte Arbeit Beheing's giebt Verf. eine vorläufige Mittheilung über die von ihm gewonnenen Experi- mental-Ergebnisse, welche beweisen, dass viele Desinfectionsmittel schon durch geringe Erhöhung ihrer Temperatur erheblich an Wirksam- keit gewinnen *. Milzbrandsporen, welche durch 36tägige Einwirkung öprocentiger Carbolsäure bei Zimmertemperatur nicht vernichtet wurden, erlagen der Wirkung derselben Lösung bei 55 "C. bereits innerhalb 1 bis 2 Stunden. Bei 75*' C. wurden die Sporen durch öprocentige Carbolsäure in 3 Minuten, durch Sproceutige Carbolsäure in 15 Minuten, durch Iprocentige Carbolsäure in 2 bis 272 Stunden ge- tödtet. Eine mehr oder weniger bedeutende Steigerung der Wirksam- keit durch Erhöhung der Temperatur beobachtete Verf. auch bei Schwefelsäure, Kalilauge und Sodalösung. PetruschJcy. D, Botanisches. Mailgin, L., Sur la structure des Peronospore es (Comptes rendus de l'Acad. des Sc. Paris, t. CXI, 1890, 2. sem. p. 923). Verf. glaubt, dass die chemische Beschaffenheit der Wände von Pilzzellen so verschieden ist, dass sie in zweifelhaften Fällen zur Be- stimmung verwendet werden kann ; er bespricht hier zunächst die Wände der Peronosporeen. Dieselben bestehen aus Cellulose und Callose, was man nachweisen kann, wenn man mit Peronospora Ficariae befallene ») Vergl. die analogen Angaben von Hekle in seiner Arbeit über Creolin. VIII, 1. Referate und Besprecliungen. 113 Blätter von Ficaria erst mit starker Salzsäure und dann mit Schweizee's Reagens behandelt. Nach dem Auswaschen kann man dann mit Callose- reagentien die Mycelfäden nachweisen, trotzdem alle Cellulose aus dem Präparat herausgelöst ist. Umgekehrt kann man auch mit Hofmeister's Chlorgemisch die Callose herauslösen und dann die Cellulose in den Mycelfäden nachweisen. Aus Callose und Cellulose bestehen die Wände aller im Innern des Wirthes befindlichen Theile der Peronosporeen, während die Conidienträger Cellulosewände besitzen. Charakteristisch für das Mycel der Peronosporeen ist, dass in den Fäden Ringe mit ver- schieden grosser Oeffnung oder solide Pfropfe von Callose vorkommen (Peronospora parasitica, Plasmopara viticola, P. Schleideni, P, Myosoti- dis). Zwischen der doppelten Wand der übrigens bei den einzelnen Species sehr verschieden gestalteten Haustorien kommen ebenfalls Cal- loseansammlungen vor, die auch das Zelllumen ganz erfüllen können. Callosepfröpfe kommen auch in den Conidienträgern vor; constant finden sie sich an der Basis der Conidien und haben hier eine Bedeutung für den Ausstreuungsmechanismus. Alfred Koch {Göttingen). Zacharias, E., lieber die Zellen der Cyanophyceen (Botan. Zeitg. 1890, No. 1—5). In allen lebend untersuchten Cyanophyceen (Oscillaria, Nostoc, Cylindrospermum, Tolypothrix, Scytonema) fand Verf. nur den peri- pheren Theil des Zellplasmas gefärbt, während in dem farblosen Cen- traltheil vielfach gerüstartige Bildungen vorkommen. Das periphere Plasma unterscheidet sich in seinen Reactionen nicht von dem Zellplasma höherer Pflanzen. Im Ceutraltheil konnten weder in Alkohol, Aether oder Schwefelkohlenstoff lösliche Körper, noch Gerbstoffe durch Kalium- bichromat allein oder in Verbindung mit Essigsäure, oder durch eine ätherisch - alkoholische Lösung von Eisenchlorid nachgewiesen werden. Ein Theil des centralen Plasma ist in Magensaft löslich, ein fast immer vorhandener Theil des Restes steht dem Plastin des peripherischen Plasma nahe, ohne mit ihm völlig übereinzustimmen und erscheint nach Einwir- kung verdünnter Salzsäure als blasses gequollenes Gerüst. Vielfach findet sich im durch Magensaft nicht gelösten Rest des centralen Plasma eine sich an das Kernnuclein anschliessende Substanz, die nach Behandlung mit verdünnter Salzsäure scharf umschrieben und glänzend in verschie- dener Gestalt hervortrat, auf Zusatz concentrirter Säure oder Sodalösung verschwindet und in lOprocentiger Kochsalzlösung quillt. Durch Essig- earmin wird nach verschiedener Vorbehandlung der Ceutraltheil stärker gefärbt, bei Scytonema färbt sich die eben erwähnte, in Salzsäure scharf Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 1. 8 114 Referate und Besprechungen. VIII, 1. hervortretende Substanz besonders intensiv, wenn die Fäden z. B, mit Magensaft behandelt, mit Aether- Alkohol extrahirt, mit Essigearmin überfärbt und mit Essigsäure abgespült werden. Verf. hat früher die Ansicht vertreten, dass diese Nucleinreactionen zeigenden Gerüstwerke im Centraltheil den Zellkernen anderer Organismen an die Seite zu stellen seien. Er findet jetzt aber die merkwürdige, von dem Nuclein der Zellkerne gänzlich unbekannte Erscheinung, dass die wie Nuclein reagireude Substanz sich nur unter gewissen Culturbedingungen im Centraltheil findet und durch Veränderung der Lebensbedingungen zum Verschwinden gebracht werden kann. Oscillariarasen, die von einem schattigen Ort eines Kalthauses stammten, verloren die Nucleinsubstanz, wenn sie im Winter in der Nähe des Fensters im Lichte gehalten wur- den und bildeten sie bei nachträglichem Verdunkeln nicht sicher wieder. Ausserdem fehlte zur Zeit der Zelltheilung die nucleinähnliche Substanz in den Cyanophyceen völlig, während in den Anfangsstadien der Kern- und Zelltheilung bei höheren Pflanzen des Nuclein eine Zunahme zu er- fahren pflegt; von der mit der indirecten Theilung verbundenen Ver- änderung der Bestandtheile der Kerne konnte Verf. im Centraltheil der Cyanophyceen nichts beobachten. Nach alledem ist es dem Verf. zwei- felhaft, ob die Nucleln-ähnliche Substanz der Cyanophyceen dem Kern- nuclein anderer Organismen an die Seite gestellt werden darf, und er fordert zu eingehenderer mikrochemischer Vergleichung beider Substan- zen mit einer grösseren Zahl von Reagentieu auf. Im peripheren Plasma kommen häufig schon von BoEzi, HansCtIRCi und Schmitz gesehene Körner vor, die in Alkohol und Aether unlöslich sind, in kochendem Wasser sich nicht verändern, in 0"3procentiger Salzsäure, Schwefelsäure (2 Voll. -|- 3 Voll. Wasser), Kalilauge (5pro- centig) verquellen, in Essigsäure-Blutlaugensalzlösung scharf hervortreten und vacuolige Structur annehmen, in Millon's Reagens, Jodglycerin, Chlorziukjod sich nicht färben, bei Behandlung mit Schwefelsäure und Jodjodkalium intensiv braun werden und sich mit Essigearmin stark färben. Verf. vermuthet nach diesen Reactionen, dass die erwähnten Körner aus einem nicht näher zu bestimmenden Kohlehydrat bestehen. Alfred Koch {Göttingen). 0 verton, E,, Beiträge zur Histologie und Physiologie der Characeen (Botan. Centralbl. Bd. XLIV, 1890, p. 1—8). Verf. hat zunächst die schon mehrfach untersuchten Stachel- kiigeln oder Wimperkörper der Nitellen auf ihr chemisches Ver- halten geprüft. Dieselben bestehen nach seinen Untersuchungen höchst VIII, 1. Referate und Besprechungen. 115 wahrscheinlich aus proteinartigen Körpern, die zum Theil noch Gerb- stoffe enthalten. — Zum Nachweis der Gerbstoffe benutzte er nament- lich die Braunfärbung' mit Kaliumbichromat, die auch beim Be- handeln mit schwefliger Säure nicht verändert wurde, die Braunfärbung mit 0 smi um säure , die er in gleicher Weise auch bei den mit Tannin durchtränkten Proteinkrj^stalloiden von Ricinus eintreten sah, und die Lebendfärbung mit Methylenblau. — Die Proteinnatur der Stachelkugeln schloss Verf. aus dem Verhalten gegen Jodjodkalium, RASPAiL'sches Reagenz, das HAETia'sche Blutlaugensalz - Essigsäure- Eisenchlorid-Reagenz und gegen Tinctionsmittel. unter diesen erwiesen sich namentlich Boraxcarmin und wässerige Fuchsinlösung als sehr ge- eignet. Bei der Färbung mit dem erstgenannten Farbstoffe und Ein- bettung in Tolubalsam zeigte der centrale Theil der Stachelkugeln eckige Conturen , und es scheint somit Verf. wahrscheinlich , dass sowohl der Centraltheil als auch die demselben aufsitzenden Stacheln eine krystallinische Structur besitzen ; immerhin unterscheiden sich aber die Stachelkugeln von allen bisher beobachteten Proteinkrystalloiden dadurch, dass sie ganz unlöslich sind in concentrirter Schwefelsäure, Salzsäure, Salpetersäure und Eisessig. Auch concentrirte Natronlauge lässt sie in der Kälte unverändert. Erwähnen will ich ferner noch, dass Verf. in den Zellen von Ni- tella syncarpa ausser jenen Stachelkugeln noch wasserhelle Blasen auf- gefunden hat, die ganz das gleiche chemische Verhalten zeigten, und dass auch Uebergänge zwischen diesen und den Stachelkugeln aufzu- finden waren. Innerhalb der untersuchten Ohara sp. fand Verf. nur solche stachellosen Körper *. Zum Nachweis des gleichzeitigen Vorkommens von Chlorophyll und einem rothen Farbstoffe in den Zellen des Antheridiums sowie der Hüllschläuche und der Krönchenzellen benutzt Verf. Chloral- hydrat; bei Einwirkung desselben wird das Chlorophyll alsbald gleich- massig in den Zellen vertheilt, während der rothe Farbstoff zunächst zu rothen Tropfen zusammenfliesst, um bald in Nadeln, die sich meist in rosettenförmige Gruppen anordnen, auszukrystallisireu. Verschiedene Versuche hat sodann Verf. angestellt, um in den stärkereichen Sporen den Kern gut sichtbar zu machen. Da ein mit ') Dieselben sind höchst wahrscheinlich identisch mit den vom Ref. in den Zellen einer Ohara sp. nachgewiesenen Körpei'n, die (wie die Krystalloide !) durch eine starke Tinctionsfähigkeit durch Säurefuchsin ausgezeichnet sind (cf. ZiMjiERMANN, A., Beiträge zur Morphologie und Physiologie der Pfianzen- zelle. H. I p. 51). 8* 116 Referate und Besprecliuiigen. VIII, 1. Diastase angestellter Versuch nicht zum Ziele führte, beliess er die fixirten Eiknospen mehrere Stunden bei 60 " C. in einer mit der sechs- fachen Wassermenge verdünnten Salzsäure. Es trat hier zwar eine Lösung der Stärke ein, aber die Kerne verloren ihre Färbbarkeit, Günstigere Resultate erhielt nun Verf., als er die Eiknospen in ein Gemisch von gelbem Blutlaugensalz und einer mit der 8- bis lOfachen Wassermenge verdünnten Salzsäure brachte. Das durch Zersetzung des gelben Blutlaugensalzes entstehende Berlinerblau bewirkt dann eine sehr intensive Färbung des Kernes, der namentlich nach der Aufhellung durch Chloralhydrat deutlich hervortritt. Uebrigens Hess diese Methode bei der reifen Spore ebenfalls im Stich, weil die verkorkte Membran der Spore sich als undurchlässig für Blutlaugensalz erwies. Hier dürf- ten nach Ansicht des Ref. wohl sicher Mikrotomschnitte am leichtesten zum Ziele führen. Znr Beobachtung der feineren Structur der Sporenmembranen em- pfiehlt Verf. SOprocentige Chromsäure, die alle nicht verkorkten Reste der Hüllschläuche auflöst; die Beobachtung geschieht am besten in concentrirter Chloralhydratlösung. Ä. Zimtnermann (Tühingen). Crilsoil, E., La suberine et les cellules du liege (La Cellule, t. VI, 1890, p. 63—114). Verf. hat aus dem Kork von Quercus Suber drei verschiedene Säuren isolirt, die er als Phellonsäure (C22 H43O3), Suberinsäure (C17H30O3) und Phloion säure (Cj^HaiOj?) bezeichnet. — Von besonderem mikrochemischen Interesse ist die Beobachtung des Verf., dass die Phellonsäure sich mit Chlorzinkjod, besser noch mit Jod und Schwefelsäure, violettrosa färbt. Noch intensiver wird durch Chlor- zinkjod das Kalisalz der Phellonsäure gefärbt und zwar ebenfalls Rosa bis Kupferroth. Zusatz von Wasser bringt die Färbung zum Ver- schwinden. Es folgt hieraus, dass die Violettfärbung, welche von Höhnel an der mit Kalilauge behandelten Suberinlamelle auf Zusatz von Chlorzink- jod eintreten sah, nicht auf der Anwesenheit von Cellulose beruht, son- dern auf das bei der genannten Behandlung entstandene Kaliumphellonat zurückzuführen ist. Die Färbung verschwindet denn auch alsbald auf Zusatz von Wasser und unterbleibt ferner auch, wenn die Membranen vor dem Zusatz des Chlorzinkjod mit kochendem Alkohol extrahirt werden. Die nach der Behandlung mit Chromsäure auf Zusatz von Chlor- zinkjod eintretende Färbung der Suberinlamelle ist wahrscheinlich auf die Bildung freier Phellonsäure zurückzuführen. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 117 Das Unterbleiben der Färbung durch Clilorzinkjod nach der Be- handhing mit Kupferoxydammoniak beruht nach den Untersuchungen des Verf. nicht auf der Lösung von Celhilose aus der Suberinlamelle, sondern auf der Verwandlung des Kaliumphellonat in das Kupfersalz, das mit Chlorzinkjod eine gelbbraune wenig charakteristische Farbe annimmt. — Endlich spricht gegen die Anwesenheit von Cell u lose in der Suberinlamelle der Umstand, dass durch dauernde Behandlung mit 3procentiger kochender alkoholischer Lösung von Kalihydrat, die die Cellulose nachweislich nicht angreift, die ganze Suberinlamelle zum Verschwinden gebracht werden kann. Verf. hält es nun für das Wahr- scheinlichste, dass das Suberin aus zusammengesetzten Aethern oder Condensations- oder Polymerisationsproducten der verschiedenen Säuren besteht. Dass das Suberin aus echten Fetten zusammengesetzt sein sollte, ist nicht wahrscheinlich, denn es ist in allen Lösungsmitteln für Fette unlöslich und auch durch Erhitzen auf 290" nicht zum Schmelzen zu bringen. Die von Küglek ausgesprochene Ansicht, nach der das Suberin deshalb so schwer löslich sein sollte, weil die Suberinmolekeln zwischen den Cellulosemolekeln eingeschlossen lägen, wird unhaltbar, nachdem nachgewiesen, dass die Suberinlamelle höchstens nur Spuren von Cellulose entliält. A. Zimmermann (Tübingen). Keiiiitzer, F., Ueber die wahre Natur des Gummifermen- tes (Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. XIV, 1890, p. 453— 470). Verf. wendet sich gegen die Angaben von Wiesner*, der die mei- sten Gummisorten des Handels, das Wundgummi und den Schleim vieler Samenschalen als Resultat der Wirkung eines in diesen Sub- stanzen vorkommenden Fermentes auf Cellulose auffasst, welches Gummi- ferment er durch dessen Eigenschaft Guajakharz zu bläuen und beim Kochen mit Orcin und Salzsäure einen blauen Farbstoff zu geben, nach- weisen wollte. Dieses Ferment soll ausserdem aus Stärke Dextrin bilden. Von vornherein erscheint dem Verf. die Richtigkeit dieser An- gaben vom chemischen Standpunkte zweifelhaft, weil dieses Ferment aus Cellulose sehr verschiedene Körper bilden müsste, weil es ander- seits Wiesner nicht gelang, aus Geweben abgeschiedene Cellulose durch dieses Ferment in Gummi zu verwandeln und er aus der Lösung der Stärkecellulosehäute bei Gegenwart dieses Fermentes mit Unrecht >) Wiesner, J., Ueber das Gummiferment, ein neues diastatisches Enzym, welches die Gummi- und Schleimbildung in der Pflanze hervorruft (Sitzber. d. k. k. Acad. d. Wiss. Wien, Bd. XCII, 1885, p. 40). 118 Referate und Besprechungen. VIII, 1. auf die Wirkung desselben auf Cellulose überhaupt schliesst, da Stärke- cellulose sehr leicht schon durch Kochen mit Wasser in Granulöse übergeführt werde. Ausserdem legt Verf. aber dar, dass die schon von Keichl bei Gummi und Schleim wahrgenommene Reaction mit Orcin und Salzsäure nicht, wie Wiesner nach Versuchen mit Pepsin und Diastase meint, auf ein Ferment deute, sondern von Kohlehydraten verursacht werde. Möglichst reine Pepsinlösung ergab Verf. auf dem genannten Wege in der That keine Farbenreaction, während auch bei gut gereinigter Diastase eine solche in geringem Grade beobachtet wird, wahrscheinlich, weil beigemengtes oder im Molekül befindliches Kohlehydrat hier nicht zu entfernen ist. Verf. schaltet hier ein, dass die erwähnte Orcinreaction jedenfalls so zu Stande kommt, dass durch Einwirkung der Salzsäure auf das Kohlehydrat Furfurol entsteht, was durch viele neuere Untersuchungen festgestellt ist, und dass dieses Fur- furol dann mit Orcin die Farbenreaction giebt. Beim directen Ver- suche zeigten 0-1- bis O'öprocentige wässerige Furfurollösungen beim Kochen mit Orcin und Salzsäure die der REicHL'schen Reaction ent- sprechende Farbe. Die verschiedenen Farbennüancen , die sich bei Anstellung dieser Reaction mit verschiedenen Kohlehydraten ergaben, erklären sich wahrscheinlich durch die Entstehung zweier Furfurole und einiger Homologen derselben. Vielleicht erklären sich alle bisher von Wiesneb, Molisch, Niggl, Reichl, Ihl zum Nachweis von Kohle- hydraten angewendeten Farbenreactionen, bei welchen Phenole oder Basen der aromatischen Reihe in Verbindung mit Säuren benutzt wer- den, durch Bildung von Körpern der Furfurolgruppe, die dann mit den zugesetzten Verbindungen der Benzolreihe die betreffende Farbreaction geben. — Da nun also die Orcinreaction nicht die Anwesenheit von Fermenten anzeigt, so ist in Wahrheit nach dem Verf. das Gummi- ferment viel weniger weit verbreitet, wie Wiesner auf Grund jener Reaction annahm ; das Ferment ist vielmehr nur in Akazieugummi, Kirschgummi und einigen seltenen Sorten sicher nachgewiesen. Die für den Nachweis von Fermenten übrigens auch nicht sichere Reaction mit Guajak fand Verf. in Schleim von Traganth, Leinsamen und ähn- lichen auch nicht so regelmässig wie Wiesner. Weiter untersuchte Verf. das im Gummi enthaltene Ferment hinsichtlich seiner Wirkung auf Stärkekleister und fand, dass dasselbe nicht nur Dextrin, sondern auch Zucker nicht näher studirter Natur daraus bildete. Diese Versuche wurden mit Gummilösung angestellt, da Reindarstellung des Fermentes nicht gelang. Dunkle Sorten scheinen nach mit Hülfe der Guajakprobe aji Dschesirigummi vorgenommenen Studien fermentreicher zu sein. VIII, 1. Referate und Besprechungen. 119 Aus diesen Versuchen folgert der Verf., dass gegenwärtig nichts zu der Annahme berechtigt, die Gummi- und Schleimarten der Pflanzen werden durch ein Ferment gebildet; wahrscheinlich ist das erwähnte diastatische Ferment ein zufälliger Bestandtheil der gummibildenden Gewebezellen und bildet die fast stets im Gummi sich findende kleine Menge Zucker. Alfred Koch (Göttingen). Moliscli, H., Grundriss einer Histochemie der pflanz- lichen Genussmittel. Jena (Fischer) 1891. 65 pp. 8" m. 15 Holzschn. 2 M. Mit dieser kleinen Schrift hat der Verf. nach des Ref. Ansicht einen besonders glücklichen Griff gethan, um so mehr, als er sich keines- wegs auf eine blosse Zusammenstellung der bisher in der Literatur be- kannt gegebenen mikrochemischen Reactionen der genannten Objecte beschränkt, sondern selbst eine ganze Reihe neuer Verfahren mittheilt. Für die Praxis gewinnt so die mikroskopische Untersuchung der Genuss- mittel eine viel höhere Bedeutung, wenn der Untersucher nicht bloss in den Stand gesetzt ist, zu constatiren, ob das fragliche Object über- haupt vorliegt oder nicht, sondern wenn er zugleich auch eruiren kann, ob die werthvoUen Inhaltsstoffe überhaupt noch vorhanden sind, be- ziehungsweise noch an ihrer ursprünglichen Stelle liegen, und wo diese überhaupt zu suchen ist. Ein weiterer Vorzug der Schrift ist darin zu sehen, dass Verf., so weit es irgend möglich war , auch das frische lebende Object berücksichtigte, um die Chemie desselben und die Ver- theilung der Stoffe innerhalb der Gewebe richtig zu beurtheilen, denn viele der für den Menschen schätzenswerthen Eigenschaften der Genuss- mittel treten erst nach dem Absterben der Zellen oder nach bestimmten Proceduren, wie Gährung, Trocknen, Erhitzen etc. auf. Das Werkchen behandelt im ersten Theile die alkaloidhaltigen Genussmittel: Kaffee- bohne, Colanuss, Theeblatt, Cacaobohne, Pfefferfrucht, Senfsamen und Tabacksblatt, im zweiten die alkaloidfreien: Pimentfrucht, Gewürznelke, Vanillefrucht, Papricafrucht, Safran und Zimmt. Aus dem reichen Inhalte können hier nur eine Reihe der wichtig- sten Punkte hervorgehoben werden. Für die Erkennung des Coffeins, das früher in der Zelle nicht nachzuweisen war, erhalten wir gleich zwei Methoden: ein dünner Schnitt durch das Endosperm der Kaffeebohne wird in ein Tröpfchen concentrirte Salzsäure gelegt und nach einer Minute ein Tröpfchen ca. Sprocentige Goldchloridlösung zugefügt; so- bald ein Theil der Flüssigkeit verdampft ist, schiessen am Rande des Tropfens lange, gelbliche, in charakteristischer Weise büschelig und 120 Referate und Besprechungen. VIII, 1. federig augeordnete Nadeln von chlorwasserstoffsaurem Coffein-Gold- cblorid an. Bei der zweiten , auch für geröstetes Kaffeepulver (und Pasta Guarana) anwendbaren Methode, bringt man einen Schnitt (oder ein Körnchen) in einen Tropfen destillirten Wassers, den man bis zum Aufwallen erhitzt und darauf bei gewöhnlicher Temperatur langsam verdunsten lässt ; fügt man dann zu dem Rückstand ein Tröpfchen Benzol, so lässt dasselbe beim Verdampfen am Tropfenrande Hunderte von farblosen Coffeinnadeln ausfallen. Da jedes kleinste Gewebefrag- ment des so gleichmässig gebauten Kaffeeendosperms diese Reaction giebt , kann wohl angenommen werden , dass alle Eudospermzellen Coffein - haltig sind. Bei der Colanuss hat das Coffein seinen Hauptsitz im Embryo und lässt sich ebenso wie bei der Kaffeebohne nach- weisen ; meist genügt schon das Erwärmen eines Schnittes im Wasser- tropfen. Das mit dem Coffein identische Thein lässt sich mittels der beim Kaffee angegebenen Methoden selbst in sehr kleinen Fragmeuten käuflichen Thees mikrochemisch nachweisen, in frischem Material da- gegen nur in jungen noch in der Entwicklung begriffenen Blättern, während ausgewachsene negative Resultate ergaben , mithin müssen junge Blätter mehr Thein enthalten; der Nachweis der Vertheilnng des Theins im Theeblatt gelang nicht. Behandelt man Schnitte aus der Cacaobohne nach der bei der Kaffeebohne angewandten Methode mit Salzsäure und Goldchlorid, so erhält man gelbe Nadeln von chlorwasser- stoffsaurem Theobromin-Goldchlorid, welche die gleiche charakteristische Anordnung wie diejenigen der entsprechenden Cofteinverbindung zeigten; die Reaction gelingt mit dem kleinsten Stück des Samenkerns und mit echten Cacaopräparaten ; sie gelingt auch mit der Samenschale, nur viel weniger deutlich, entsprechend dem viel geringeren Theobromingehalt. Coffein und Theobromin lassen sich bei gleichzeitigem Vorkommen (Colanuss, Cacao) durch diese Methode nicht unterscheiden. In zahl- reichen Parenchymzellen der Cacaobohne findet sich je ein Aleuron- korn ; diese Aleuronkörner färben sich beim Erwärmen mit heisser con- centrirter Kalilauge rothbräunlich, schmutzigviolett oder schmutzigblau und enthalten je ein grosses Globoid; die Globoide verleihen der Asche der Cacaobohnen ein äusserst charakteristisches Aussehen. — Um fette Oele von ätherischen ebenso leicht wie sicher zu unterscheiden, benutzt Verf. ihre Verseifbarkeit und legt den zu prüfenden Schnitt in einen Tropfen eines Gemisches von gleichen Volumtheilen wässeriger con- centrirter Kalilauge und ebensolcher Ammoniaklösung; nach einer hal- ben bis einer Stunde bringt man den mit dem Deckgläschen bedeckten Schnitt unter das Mikroskop und nimmt nun wahr, wie die Oeltropfen, VIII, 1. Referate imcl Besprechungen. 121 an Liclitbrechungsvermögen mehr und mehr einbüssend, zu myelin- und traubenartigen Körpern oder zu uuregelmässigen, oft ganz und gar aus kleineren Krystallnadeln bestehenden Seifenmassen erstarren. Beim Pfeffer lässt sich das charakteristische Alkaloid, das Piperiu, in Schnitten sowohl wie im reinen Pulver mit Sicherheit nachweisen. Bringt man einen Schnitt auf dem Objectträger in einen Tropfen ab- soluten Alkohol, so nimmt derselbe das Piperin auf; zur Ausscheidung in Krystallen gelangt es aber nur, wenn man zu dem etwa zur Hälfte verflüchtigten Tropfen einen grösseren Tropfen destillirten Wassers setzt, es entsteht eine milchige Trübung, aus welcher nach einer viertel bis einer halben Stunde zalilreiche nadel- (säulen-), peitsclien- oder säbelförmige Piperinkrystalle ausfallen; in noch einfacherer Weise kann man Piperiu- krystalle durch Zerdrücken dünner Schnitte unter dem Deckglas erhalten, sobald das dabei ausgetretene ätherische Oel verdampft, fallen winzige Krystalle aus. Viel grössere Krystalle schiessen in den Schnitten und zwar innerhalb der gelben Zellen des Nährgewebes au, wenn man Schnitte in Glycerin oder Wasser (vor Verdunstung geschützt) mehrere Stunden liegen lässt. Dass das Piperin nur in den gelben Zellen seinen Sitz hat, ergiebt sich beim Betupfen der Schnitte mit concentrirter Schwefelsäure; nur jene färben sich (wie das reine Piperin) tief blut- roth. An Schnitten durch den weissen Senfsamen konnte durch Ein- legen in concentrirte Kalilauge (Gelbfärbung, beim Erwärmen tief orange) festgestellt werden, dass Sinapin und Sinaibin nur im Embryo, nicht in der Samenschale vorkommen, und zwar erstreckt sich die Gelbfärbung nur auf das Plasma incl. Aleuronkörner, nicht auf das Fett. Eine mikro- chemische Reaction für das Nicotin des Tabacksblattes konnte nicht ge- funden werden ; die hier sich findenden Sphärite , auf welche zuerst ScHiMPER aufmerksam machte, finden sich im frischen Blatt noch nicht; sie lassen sich am besten sichtbar machen, wenn man ein Cigarreu- deckblatt mit Essigsäure betupft und so durchsichtig macht. Im Wasser sind sie, wenn auch langsam, löslich und werden darum in aufgeweichten Blättern oft vermisst. Diese Sphärite, die sich auch in Essigsäure (sehr langsam), in Salz-, Salpeter- und Schwefelsäure lösen, die un- löslicli in Alkohol, Aether und Glycerin sind und beim Erhitzen unter Aufblähen verkohlen, sind nach Verf. wahrscheinlich ein apfelsaures Salz. Piment- und Gewürznelkenöl besitzen dieselben Bestand- theile, einen Kohlenwasserstoff C15H24 und Eugenol (Nelkensäure). Euge- nol lässt sich beim Piment nur mit Kalilauge mikrochemisch sicher nachweisen, beide Körper liefern beim Zusammentreffen einen Krystall- brei, nach 3 bis 5 Minuten wachsen aus jedem Oeltropfen, wenn man 122 Referate und Besprechungen. VIII, 1. concentrirte Kalilauge auf den Schnitt bringt , zahlreiche oft recht lange, Säulen- oder nadeiförmige, farblose Krystalle von nelkensaurem Kali heraus. Bei der Gewürznelke gelingen die mikrochemischen Eugenolreactionen viel prägnanter als beim Piment, namentlich auch die mit concentrirter Schwefelsäure, welche den Eugenoltropfen zuerst gelblich, dann sofort intensiv blutroth, nach einiger Zeit mit einem Stich ins Violette und schliesslich braun färbt, und die mit concentrirter Salpetersäure, welche feurig-orange bis braunrothe Färbung bewirkt; diese beiden letzteren Reactionen gelingen beim Piment, andere neben- her verlaufender Reactionen wegen gewöhnlich nicht oder undeutlich. Bei beiden Gewürzen ist Eugenol in fast allen Zellen nachweisbar, nicht bloss in den Oelbehältern, welche es in der lebenden Frucht allein ent- halten. Die frisch geerntete Vanillefrucht enthält höchst wahrscheinlich gar kein oder nur sehr wenig Vanillin, die Hauptmasse desselben entsteht erst beim Trocknen aus einer anderen Substanz; in der käuflichen Vanille durchtränkt das Vanillin alle Zellen und lässt sich hier durch die SiNGEE'sche Reactionen auch mikrochemisch nachweisen , wonach es mit Holzstotfreagentien ganz ähnliche Färbungen ergiebt, wie diese mit Lignin. Am zweckmässigsten fand Verf. entweder einen Schnitt auf dem .Objectträger mit einem Tröpfchen ca. 4procentiger Orcinlösung zu benetzen und dann einen grossen Tropfen concentrirter Schwefel- säure zuzufügen, worauf sich momentan der ganze Schnitt intensiv car- minroth färbt, oder man benutzt statt des Orcins Phloroglucin und er- hält momentan eine ziegelrothe Färbung. Die Reaction muss, um be- weisend zu sein, momentan und schon in der Kälte eintreten. Von dem Capsicin des spanischen Pfeffers konnte Verf. in Bestätigung und Ergänzung von A. Meyer's Beobachtung feststellen, dass dasselbe nur von den Fruchtscheidewänden gebildet wird und seinen Hauptsitz in den Drüsenflecken der Scheidewandepidermis hat, wo es in einem mit Kalilauge leicht verseifbaren Fett gelöst ist. Mikrochemisch verwend- bar ist die augenblickliche Blaufärbung des Papricapulvers (Cayenne- roth) mit concentrirter Schwefelsäure; concentrirte Salzsäure dagegen färbt den rothen Farbstoff nur indigblau, so lange er an die Chromato- phoren gebunden ist, den in abgestorbenen Farbstoffkörpern oder in Oel gelösten Farbstoff aber nicht. Ceylon-, Chinesischer und Malabar- (Holz-), nicht aber der weisse Zimmt färbt sich mit con- centrirter Salzsäure intensiv blutroth, diese Färbung wird besonders durch den Inhalt des Rindenparenchyms und der Markstrahlzellen bedingt; der die Reaction bedingende Körper, dessen Natur noch festzustellen ist, lässt sich leicht mit Wasser, etwas schwerer mit Alkohol extrahiren. VIII, 1. Keferate und Besprechungen. 123 Ueber die Bildimg des Zimmtöls stellte Verf. Folgendes fest: In der frischen Rinde treten zweierlei Secretzellen auf, Schleimzellen und Oelzellen. Die ersteren enthalten einen oft geschichteten, farblosen, in Wasser, Alkohol und Aether unlöslichen, dagegen in Kalilauge lös- lichen Schleim, mitunter durchsetzt von winzigen Kalkoxalatkryställchen, die letzteren dagegen führen ätherisches Oel, welches dem Zimmtöl wohl sehr nahe steht, theilweise aber noch von demselben abweicht. Allmählig erleidet das Oel zum Theil schon in der lebenden Rinde, zum grösseren Theil erst nach der Ernte eine Verharzung, so zwar, dass man in der käuflichen Rinde in den früheren Oelbehältern gewöhn- lich direct kein Oel, sondern nur einen Klumpen farblosen oder gelb- lichen Harzes vorfindet, das offenbar vom Zimmtöl durchdrungen ist, das nicht selten in Tropfen bei Präparation in Kalilauge zum Vorschein kommt. Mit Anilinsulfat färbt sich das Harz im Gegensatz zu den farb- losen Schleimzellen schön gelb, — Ausser den mikrochemischen Reac- tionen ist der anatomische Bau überall eingehend geschildert und be- sonders auf die charakterischen Elemente die „Leitzellen" oder „Leit- fragmente" hingewiesen. L. Klein {Freibitrg i. B.). JE, Mineralog isch- Geologisch es, Beferent: Professor Dr. Arthur Wichmann in Utrecht. Micliel-Levy, A., et Lacroix, A., Tableaux des mineraux des roch es, Paris (Baudry et Cie.) 1889, In ähnlicher Weise, aber etwas ausführlicher als die bekannten „Hülfstabellen" von Rosenbusch ', bieten die Verff, auf 15 Tafeln eine Uebersicht der wichtigsten Eigenschaften der Mineralien in tabellarischer Form für die Zwecke des Mikroskopikers, Eingeleitet wird das Werk durch einige Uebersichtstabellen, welche unter Anderem die mittleren Brechungsexponenten, die im Dünnschliffe erscheinenden Farben u, s. w, der gesteinsbildenden Mineralien , sowie die NEWTON'sche Farbenscala enthalten. Ein Index erleichtert das Auffinden der einzelnen Mineral- Arten und Varietäten. Jäkel, 0., Ueber mikroskopische Untersuchungen im Gebiet der Paläontologie (Neues Jahrb. f, Mineral. 1891, Bd. I p. 178). ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 548. 124 Referate und Besprechimgen. VIII, 1. So alt wie die Paläontologie selbst, sind die mikroskopischen Unter- suchungen, welche in das Gebiet der Morphologie falleu, da es nur ver- möge derselben möglich ist, kleine Organismen zu erkennen. In Bezug auf histologische Untersuchungen hat dagegen das Mikroskop in der Paläontologie eine viel untergeordnetere Rolle gespielt als in der Zoolo- gie. Dass fossile Reste, die oft eine höchst mangelhafte Erhaltung der äusseren Form aufweisen und äusserlich einen sehr dürftigen Eindruck machen, von den feineren Structurverhältnissen ihres inneren Baues erst recht nichts erkennen lassen würden, ist eine weitverbreitete Ansicht, welche in fast allen Fällen durch die Untersuchung eines Dünnschliffes widerlegt wird. Fast ausnahmslos findet man bei fossilen Wirbelthier- resten die feineren und feinsten Structurverhältnisse nicht nur ebenso gut erhalten als bei recenten Objecten, sondern oft noch viel schöner, weil durch einen natürlichen und langsamen Infiltrationsprocess mit ver- schieden gefärbten Lösungen alle Hohlräume und Kanäle sehr deutlich hervortreten, und sich auch die verschiedenen Substanzen durch difFe- renzirte Färbungen unterscheiden lassen. Dieses ist namentlich bei den aus verschiedenen Zellschichten entstandenen Theilen des Hautskeletts, bei Zähnen, Schuppen, Hautkuochen, Stacheln u. s. w. vortrefflich zu erkennen. Die intercellulare Substanz ist bei fossilen Objecten meist farblos, doch treten hier verschiedene Absonderungserscheinungen meist sehr deutlich hervor. Endlich kann man sich bei fossilem Materiale mit grossem Vortheile des polarisirten Lichtes bedienen, was bei recenten Formen zwecklos ist, weil in den frischen Geweben die organische Sub- stanz durch eigene Polarisationserscheinungen die Bilder stört. — Ueber den Schalenbau der Crustaceen und Mollusken liegen bisher nur spär- liche Beobachtungen vor, jedoch ist bezüglich der letztgenannten nach- gewiesen worden, dass der Erhaltungszustand der fossilen Schalen nicht ungünstiger ist als der der recenten Formen. Der Erhaltungszustand der Brachiopodenschalen ist ein im allgemeinen so günstiger, dass sogar Bruchstücke derselben noch sicher bestimmt werden können. Bei den fossilen Echinodermeu findet man, wie bereits durch v. Zittel hervor- gehoben worden ist, einen sehr charakteristischen Erhaltimgszustand. Bei den Corallen ist die Mikrostructur des Kalkskeletts fast immer gut erhalten, während die fossilen Spongien häufig eigenthümliche Umwand- lungen erfahren haben. Der Erhaltungszustand der Schalen fossiler Foraminiferen steht im allgemeinen derjenigen recenter Formen nicht nach. Der Verf. betrachtet es als eine der nächstliegenden Aufgaben der Paläontologie, die fossilen Formen systematisch zu bestimmen, um da- VIII, 1. Referate und Besprechungen. 125 dadurch einerseits eine Basis für alle paläontologischen Arbeiten zu schaffen und um anderseits der Geologie die Mittel an die Hand zu geben, die einzelnen Formatiousglieder zu trennen. Eine weitere Auf- gabe würde dem Paläontologen erwachsen in dem Studium des Zusam- menhanges der fossilen Organismen untereinander und der Beziehungen zu den lebenden Formen, um dadurch deren natürliche Stamm esge- schichte zu ermitteln und eine naturgemässe Systematik der Organismen zu schaffen. Mit der Untersuchung der Mikrostructur gewinnt man ein neues diagnostisches Merkmal zur Bestimmung eines Fossils, da jene eine ebenso grosse Constanz aufweist wie die äussere Form. Die letztere ist namentlich bei Hartgebilden, worauf es in der Paläontologie im wesent- lichen ankommt, oft sehr einförmig und zeigt wenig charakteristische Merkmale. Die innere Structur ist dagegen in der Regel so mannigfach differenzirt, dass sich in ihr eine ganze Reihe eigenthümlicher Merkmale finden lassen, die wesentliche Kennzeichen zur Bestimmung liefern. Da ferner die organischen Reste in den Erdschichten mit anderen unter- mischt vorkommen, so ist es oft geradezu unmöglich, auf Grund ihres äusseren Aussehens die einzelnen Stücke eines Skeletts als zusammen- gehörig zu erkennen. Hier vermag die histologische Untersuchung Klar- heit zu bringen, bei isolirt vorkommenden Skeletttheilen giebt sie sogar allein den Ausschlag. Indem in Bezug auf die weiteren Ausführungen auf die gehaltvolle Abhandlung selbst verwiesen werden muss, möge noch an einem von dem Verf. gegebeneu Beispiele gezeigt werden, welche Bedeutung histo- logischen Untersuchungen für die Stammesgeschichte der Organismen zukommt. Die Höhe der Differenzirung des Schmelzes giebt einen Maassstab für die Organisationsstufe einer Gruppe und deren Beziehungen zu an- deren. So ist bei den Selachiern der Schmelz nicht prismatisch abge- sondert, derselbe ist nicht oder nur wenig vom Dentin geschieden, und ferner durchziehen fast alle Dentinröhren in feineren Verzweigungen die ganze Schmelzschicht. In diesen drei wichtigen Punkten ist aber der Schmelz diametral von dem der höchsten Wirbelthiere unterschieden, indem er bei diesen aus feinen Prismen besteht, scharf getrennt von dem darunter liegenden Dentin und ausserdem durch den Mangel an Kanälen ausgezeichnet. Der Verf. weist nun nach, dass bei höher differenzirten Selachiern sich bereits eine undeutliche Grenzzone zwischen Dentin und Schmelz ausbildet. Bei den älteren Teleostierforraen tritt die Grenze zwischen Dentin und Schmelz ziemlich scharf hervor. Bei 126 Referate und Besprecliimgen. Till, 1. den Gauoiden stellt sich die erste Prismeubildung ein. Bei Amphibien und Reptilien tritt die Grenze gegen das Dentin sehr scharf hervor, der Schmelz erscheint im polarisirten Lichte prismatisch. Die typische Schmelzbildung ist bei den Säugern vorhanden, aber unter diesen zeigen die Marsiipialia und Rodentier eine Ausbildungsform, welche derjenigen der niederen Wirbelthiere am nächsten steht. — Auf Grund dieser Er- gebnisse Hess sich auch die Stellung der Cetaceen ermitteln. Während diese von mancher Seite als die ursprünglichsten Säugethiertypen be- trachtet und ihrer einfachen und Reptilien-ähnlichen Bezahnung wegen an Formen wie Ichthyosaurus angeschlossen wurden, hatte Dames die Ansicht vertreten, dass die Cetaceen stark degenerirte Nachkommen höherer Säugethiere seien. Aus der Untersuchung des Schmelzes von Zeuglodon ergab sich nun, dass derselbe eine Organisationshöhe besitzt, wie sie nur höheren Säugethieren zukommt. Innerhalb des ganzen Cetaceenstammes kann man schrittweise die Verkümmerung der Zähne verfolgen, welche mit der Reductlon des Schmelzes beginnt und bei Balaena mysticetus ihren Abschluss gefunden hat. Behrens, H., Reactionen für mikrochemische Mineral- analysen (Neues Jahrb. f. Mineral. Beilage-Bd. VII, 1891, p. 435—471; Zeitschr. f. analyt. Chemie Bd. XXX, 1891, p. 125—174). In den einleitenden Bemerkungen beschreibt der Verf. die zur Vornahme mikrochemischer Untersuchungen erforderlichen Operationen. Dieselben bieten nichts wesentlich Neues. Dagegen enthält die üeber- sicht der wichtigsten Reactionen eine Reihe bisher noch nicht mit- getheilter, welche im Folgenden kurz wiedergegeben werden sollen. Bezüglich der bereits bekannten ist auf die Arbeiten von Haushofer, Clement und Renabd, Steeng, sowie des Verf. selbst zu verweisen*. Aluminum. Fluorammouium in reichlicher Menge giebt blasse Oktaeder von 0*02 bis 0'06 mm Durchmesser. Die Reaction ist un- statthaft bei Anwesenheit von Na und Fe. Antimon. 1) CsCl bringt in salzsaurer Lösung von SbSl^ dünne sechsseitige Tafeln hervor. RbCl bildet ähnliche Kryställchen, welche bei Zusatz von KJ orangefarben werden. — 2) Oxalsäure setzt SbOCl und Kaliumoxalat SbCP in bräunlich durchscheinende Bündel von Anti- ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 262, 422, 427, 578; Bd. III, 1886, p. 283; Bd. IV, 1887, p, 123; Bd. V, 1888, p. 273, 554; Bd. VI, 1889, p. 250; Bd. VII, 1890, p. 269. VlII, 1. Referate und Besprechungen. 127 moniumoxalat um. — 3) Durch Schmelzen des Minerals mit KNO'', Lösen in heissem Wasser und Fällen mitNaCl erhält man linsenförmige Krystalle von Natriumantimoniat (Na^H-Sb^O'^ -|- H-0). Arsen. 1) As-0^ wird in scharf ausgebildeten Oktaedern aus alkalischer Lösung nach Uebersättigung mit Salpetersäure und Ver- dampfen bei massiger Wärme erhalten. — 2) As^O^ giebt mit Ammo- niak und Calciumsalzen hemimorphe Krystalle des rhombischen Systems. Beryllium. Kaliumoxalat fällt dicke, stark lichtbrechende Kry- stalle eines Doppelsalzes, welche die Formen der Gypskrystalle besitzen. Blei. NaHCO'' fällt verästelte Stäbchen von charakteristischen Formen. Brom. 1) Pt^SO* und KNO^ bewirken die Bildung orangerother Oktaeder. — 2) AuCF und Tl'^SO* veranlassen zuerst eine Ausschei- dung dicker orangerother Prismen von Bromaurat; später entstehen lange gelbe Nadeln. — 3) Stärkekörner färben sich in Lösungen von Bromiden auf Zusatz von wenig H-SO* und KNO- lichtgelb bis orange. Caesium. Ammoniumsilicomolybdat giebt mit Caesiumsalzen sehr kleine reguläre Krystalle des Caesiumsilicomolybdats. Cadmium. 1) Ammonium-Mercurirhodanid liefert dicke Prismen und Pseudopyramiden. — 2) Ferrocyankalium fällt gelbe Würfel, welche jedoch nicht von denen der analogen Zinkverbindung zu unterschei- den sind. Cerium. 1) NaCO^ giebt einen flockigen Niederschlag, welcher im Ueberschuss des Reagens sich zu spitzen Rauten umbildet. — 2) Ferrocyankalium fällt farblose Körner und abgerundete Würfel. C h 1 0 r. T12 SO* fällt kleine farblose, stark lichtbrechende Würfel. Erbium (siehe unter Yttrium). Gold. 1) Tl^SO* bewirkt Bildung langer gelber Nadeln. — 2) NH*CyS fällt anfangs ein rothes Pulver, welches sich später zu blassrothen Rosetten umsetzt. Iridium. RbCl fällt zinnoberrothe Oktaeder von O'Ol mm Durch- messer. Jod. 1) Pt(SO*)^ färbt Lösungen von Jodiden weinroth und scheidet zugleich schwarzes PtJ* ab. Wird KNO^ zugesetzt, so ent- stehen statt PtJ* graphitfarbene Oktaeder von K^PtJ^. — 2) HgCP fällt hochrothes HgJ«. Kalium. 1) Phosphormolybdänsäure fällt Oktaeder, welche denen des K^PtCP ähnlich sind. — 2) Wismuthsulfat bewirkt die Ausschei- dung farbloser, hexagonaler Scheibchen, die langsam zu sternförmigen, rhomboedrischen Gebilden auswachsen. 128 Referate und Besprechungen. VIII, 1. Kobalt. 1) Ammonium - Mercurirhodauld fällt prächtig blaue Rauten. — 2) Na^PO* und NH^ fällen lauggestreckte Krystalle vom Typus des Ammonium-Magnesiumphosphats. Kupfer. 1) KNO^ und PbN-0^ fällen aus Cuprisalzen, die mittels Essigsäure stark angesäuert sind, scharfkantige, dunkel orange- farbene bis schwarze Würfel. — 2) Ammonium -Mercurirhodanid fällt aus schwach sauren Lösungen bräunlich-grüne Gruppen rautenförmiger Kry- ställchen. — 3) Jodkalium fällt pulverförmiges Cu-J- unter Abschei- dung von Jod. Lanthan. Ferrocyankalium fällt zunächst farblose Rhomben, welche sich im üeberschuss des Reagens zu Prismen umbilden. Lithium. Fluorammonium fällt farblose Würfel von O'Olö bis 0"025 mm Seitenlänge. Mangan. Na'PO* und Ammoniak bilden hemimorphe rhom- bische Krystalle, welche durch Na HO und H-0^ braun gefärbt werden. Molybdän. Tl-SO* bewirkt in Lösungen von Molybdänsäure, welche freies Alkali enthalten, die Ausscheidung farbloser hexagonaler Blättchen. Natrium. Wismuthsulfat fällt farblose hexagonale Stäbchen von 0-02 bis 0-08 mm Länge. Nickel. 1) Kaliumnitrit fällt unter Hinzufügung von Bleiacetat und Essigsäure gelbe Würfel. — 2) Na^PO"* und Ammoniak liefern hemimorphe rhombische Krystalle, welche kürzer sind, als die der ent- sprechenden Kobaltverbindung. Osmium. 1) CsCl bewirkt in Lösungen von Osmiumsäure und verdünnter Salzsäure die Abscheidung grüngelber Oktaeder. — 2) NH'*C1 bewirkt, im üeberschuss zu Lösungen von Kaliumnitrit, die Ausscheidung gelber Stäbchen. Palladium. Rhodanammonium bewirkt braune Färbung, darnach fällt Tl-SO* einen braungelben Niederschlag, der in heissem Wasser gelöst, rechtwinklige Rosetten und schillernde Blättchen liefert. Platin. 1) Ammoniak bewirkt in einer Lösung von Kalium- chloroplatinit, die mit wenig CuSO* und viel NH*C1 versetzt ist, die Bildung von Cuprammonium-Chloroplatiuit, welches sich in violetten Nädelchen ausscheidet. — 2) RbCl, sowie CsCl reagiren schnell auf PtCl* und fällen kleine Oktaeder.— ,3) Tl^SO* liefert kleine Oktaeder und zwar noch bei 2000facher Verdünnung des PtCl^. Quecksilber. 1) K-Cr-0''' bewirkt in Lösungen von Mercuro- salzen einen feuerrothen, pulvi-igen Niederschlag, welcher sich allmäh- lich zu kreuzförmigen Kryställchen umwandelt. — 2) Rhodanammonium VIII. 1. Referate und Besprechungen. 129 fällt ans Merciirisalzen farbloses Mercurirhodanid, beim Hinzufügen von Co(NO'^)- erliält man die blauen Krystalle von CoHg(CyS)'». Rhodium. 1) KNO' fällt gelbe Würfel, welche denen des Ka- liumkobaltnitrits gleichen. — 2) K^c^O* fällt feine kurze Nadeln, welche denen des Kobaltoxalats gleichen, Rubidium. 1) Ammoniumsilicomolybdat fällt Oktaeder mit einem Durchmesser von 001 bis 0-02 mm. Um Rb neben Cs zu finden, muss der grösste Theil des letzteren durch SnCl* abgeschieden werden. — 2) PtCH fällt gelbe Oktaeder. Bei Anwendung einer 0-3procentigen Lösung von PtCl* wird KCl nicht gefällt, CsCl sofort, RbCl erst nach einigem Abwarten. Ruthenium. CsCl bewirkt in Lösungen von Ru in Königswasser einen rothbraunen feinkörnigen Niederschlag. Selen. KJ bildet hochrothes pulveriges SeJ*, im üeberschuss von KJ und NaJ entstehen orangerothe, durch Wasser zersetzbare Tafeln und Leisten, welche denen des Antimoniumjodid gleichen. Silicium. RbCl fällt aus sauren Lösungen von Ammoniura- molybdat, die mit löslicher Kieselsäure erwärmt worden sind, kleine gelbe Oktaeder. Strontium. 1) K-CrO* fällt Lösungen von Strontiumsalzen so- fort, K^CrO" erst nach Zusatz von Natriumacetat. Der Niederschlag besteht aus kleinen, lichtgelben Kiigelchen. — 2) NaKC^H^O^ fällt grosse, scharf ausgebildete rhombische Krystalle, welche jedoch von denen des Calciuratartrats nicht zu unterscheiden sind. Tellur. 1) Magnesium fällt aus sauren Lösungen von TeO- Häute und Schuppen von Te. — 2) CsCl fällt aus der Lösung von TeO^ in Salzsäure gelbe Oktaeder, welche durch H'^0 getrübt, durch KJ schwarz gefärbt werden. — .3) K J färbt saure Lösungen von TeO*^ gelb oder braun und fällt undurchsichtige Rauten, Sechsecke und Stäb- chen von TeJ-*. Thallium. PtCH fällt gelbe Oktaeder, denen des Cs^PtCl« ähnlieh. Thorium. Tl-SO* bewirkt in ammouiakalischer Lösung von Thoriumcarbonat Abscheidung flucher, rhombischer Pyramiden. Titan. RbCl fällt fluorhaltige Lösungen von TiO- unter Bildung- rhombischer Kryställchen von Rb-TiF^. Uran. TFSO* bewirkt in ammoniakalischen Lösungen von Uranylcarbonat Abscheiduug klarer, gelblicher Rauten. Wismuth. 1) Oxalsäure fällt pulveriges, weisses Wismuthoxalat. Durch Erwärmen erfolgt theihveise Lösung und Ausscheidung tetra- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 1. 9 130 Referate und Besprechungen. VIII, 1. gonaler Pyramiden beim Erkalten. — 2) RbCl giebt in salz^aurer Lö- sung dünne sechsseitige Täfelchen. — 3) KHSO* liefert einen aus farblosen Scheibchen und Sechsecken bestehenden Niederschlag. Wolfram. 1) Na^PO* fällt aus Lösungen von Kalium- oder Ammoniumwolframat in Salzsäure farblose Oktaeder von Phosphor- wolframat. — 2) TFSO* fällt aus alkalischen Lösungen von Wolfram- säure farblose, sechsseitige Blättchen von Tl-WO*. Yttrium und Erbium. Ammoniumcarbonat löst die Oxalate dieser Elemente. Aus der Lösung krystallisiren tetragonale Pyramiden. Zink. 1) NaHCO^ fällt aus ammoniakalischer Lösung farblose Tetraeder. — 2) Ammonium-Mercurirhodanid fällt rechtwinklige Säul- chen. — 3) K'^Fe^Cy^^ fällt aus sehr verdünnter Lösung gelbe Würfel. Zinn. Oxalsäure giebt in Gegenwart von Strontium- oder Ba- ryumsalzen tetragonale P3Tamiden des Doppelsalzes. Zirkonium. 1) KHC-O"* fällt aus Lösungen von Zirkoniumsulfat farblose Pyramiden (tetragonal?) ähnlicli den Krystallen des Strontium- oxalat. — 2) Rb Cl bewirkt in Lösungen von Zirkoniumsulfat, die mit HCl und NHT versetzt sind, eine Ausscheidung farbloser Oktaeder. Reiiard, A. F., Notice sur les cristaux de phillipsite des Sediments du centre de l'ocean pacifique (Bull, de l'Acad. roy. de Belgique (3) t. XIX p. 88 — 100, 182—196 av. 1 piche.). Unter den vielen merkwürdigen Dingen, welche bei Gelegenheit der Challenger-Expedition aus den Tiefen des Grossen Oceans herauf- befördert wurden, nehmen die Phillipsitkryställchen in mehr als einer Beziehung das Interesse für sich in Anspruch. Der auf der weiten Strecke von den Sandwich- bis südlich von den Tuamotu-Inseln mit der Dredsche, resp. mit der Sonde heraufgeholte Tiefseeschlamm, welcher theilweise einen rothen, aus der Zersetzung vulkanischer Producte ent- standenen Schlamm darstellt, enthält massenhaft mikroskopisch kleine Kryställchen, welche bis zu 20, ja selbst 30 Procent an der Gesammt- menge Theil nehmen. Seltener finden sich dieselben in dem bekannten Radiolarienschlamm und noch weniger in dem Globigerinensehlamm, doch trifft man Foraminiferen, deren Kammern gänzlich mit diesen Kry- ställchen erfüllt erscheinen. Untersucht man den rothen Thonschlamm unter dem Mikroskop, so gewahrt man erst bei starker Vergrösserung die kleinen Nüdelchen, welche in der Art ihrer Verbreitung und hinsichtlich ihrer Gestalt an die in den Thonschiefern so verbreiteten Rutilnädelchen erinnern. Die VIII, 1. Referate und Besprechungen. 131 Kryställchcn treten meist isolirt auf, zuweilen bilden sie jedoch sphäro- litliisclie Aggregate oder häufen sicli zu Kügelchen zusammen, welche letztere, mit dem blossen Auge bereits erkennbar, dem Sedimente einen sandigen Charakter verleihen. Die durch Decantation isolirten Kry- ställchcn sind mit einem äusserst dünnen Häutchen von Mangan- und Eisenhydroxyd umgeben, welches sich mittels sehr verdünnter Salzsäure entfernen lässt. Sie besitzen im Mittel eine Länge von 0"025 mm und eine Breite von 0"005 mm, Zwillingsbildungen sind nicht selten, häu- figer dagegen sind sphärolithische Aggregate. In Uebereinstimmung mit dem krystallographischen und optischen Befunde stellte die chemische Analyse die Thatsache fest, dass die genannten Kryställcheu dem Phil- lipsit angehören, In dem zweiten Theile seiner Abhandlung sucht der Verf. die Frage nach dem Ursprünge der genannten Kryställchcn zu beantworten, welche in der Art und Weise ihres Vorkommens ganz vereinzelt da- stehen, da der Phillipsit bisher ausschliesslich als Secretionsproduct in den Hohlräumen und Spalten basischer Eruptivgesteine angetroften wor- den ist. Da man jedoch in den Regionen, welchen die Kryställchcn entstammen, zahlreiche Fragmente und Lapilli eines porösen Basaltes sowie vulkanische Aschen antraf, so fehlt es nicht an Analogien. Wohl mit Recht vertritt der Verf. die Ansicht, dass die genannten Gesteine unter dem Einfluss des Meerwassers zu Thon zersetzt wurden, wobei sich zugleich der Phillipsit herausbildete. 132 Nene Literatur. VIII, 1. Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Agnilei'a, F. O., Manual de tecnica anatömica que comprende todas las ma- terias de la asignatura de disecion [Handbuch der technischen Anatomie mit Einschluss des Stoffes eines liChrganges der Section]. Madrid 1890. 1081 pp. 8«. c. 7 tabl. Stöhr, P., Lehrbuch der Histologie und der mikroskopischen Anatomie des Menschen mit Einschluss der mikroskopischen Technik. 4. Aufl. Jena (Fischer) 1890. 303 pp. 8'\ m. 211 Figg. Vogt, C, u. Yiiiij^, E., Lehrbuch der praktischen vergleichenden Anatomie. Bd. II, Lieff. 5. 6. Braunschweig (Vieweg) 1890. ä 2 M. Vogt, C, et Yung, E., Traite d'anatomie comparee pratique. Paris (Rein- wald) 1890. 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Objectiv. (Kerber, A.), A microscope System of 3-9 mm t'ocal length of Jena glass (Journ. R. Microsc. Soc. 1890, pt. 6 p. 781 ; cfr. Centralzeitg. f. Opt. u. Mechan. Bd. XI, 1890, p. 73, 86). (Kerber, A.), On the removal of the chroniatic difference of the spherical aberration in microscope Systems (Journ. R. Microsc. 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So lange man den Vorgang der Abbildung im Mikroskop als einen rein dioptrischen ansah, war kein Grund, den Leistungen dieses Instrumentes a priori irgend welche Grenzen zu ziehen. Denn die Auf- gabe, welche man unter diesem Gesichtspunkte als die einzig zu lösende ansehen musste, nämlich die Ve r gross e rung des Mikroskops zu steigern, ist im Princip mit jeder beliebigen Annäherung an den Werth „Unendlich" lösbar, und es brauchten nur noch die geeignetsten pra- ktischen Wege zur Verwirklichung der höchsten Vergrösserungsziflern discutirt zu werden^. Bekanntlich hatte sich aber schon zu Anfang dieses Jahrhunderts und im Laufe desselben durch die Untersuchungen von Harting, Mohl u. A. immer sicherer herausgestellt, dass die gesteigerte Vergrösserung allein nicht genüge, um die Details eines mikroskopischen Objectes sichtbar werden zu lassen. Bei gleicher Vergrösserung, gleicher rein dioptrischer Vollkommenheit (Correction der Abweichungen, gute Strah- lenvereinigung) und gleicher Beleuchtungsweise zeigten die Systeme, deren „Oeflt'nungswinkel" der grössere war, immer noch eine Ueberlegen- heit in der Definition und im Auflösungsvermögen , welche früher auf keine Weise befriedigend erklärt werden konnte. Auch wenn man etwa künstlich den Unterschied in der Helligkeit der Bilder ausglich, welcher ') Cfr. z. B. Listing, B., in Nactr. v. d. k. Gesellscb. d. Wiss. u. d. O. A. Univ. Göttingen 1809, p. 1. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie VIII, 2. 1" 146 Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. VIII, 2. offenbar bei Systemen gleicher Brennweite aber verschiedeneu Oeff- nungswinkels unter gleicher Ocularvergrösserung bestehen muss, wurde jene Ueberlegeuheit nicht beseitigt. Die Erklärung dieser „speeifisehen Function des Oeffnungswinkels" kam dann fast gleichzeitig von Abbe * uud Helmholtz 2. Letzterer setzte bei seinen Betrachtungen stillschweigend das Object als selbst- leuchtend (die einzelnen Punkte als selbständige Erregnngsceutren von Lichtoscillationeu) voraus, wie es etwa dem Fernrohr gegenüber die Sterne sind. Auf dieser Annahme, auf den anerkannten Principien der Undulationstheorie des Lichtes und einigen eigens hergeleiteten be- sonderen Beziehungen beruht seine, auf ihrem Boden unanfechtbare Be- weisführung. Versuche, welche seiner Zeit Abbe mit glühend gemachten Drahtgittern angestellt hat, bestätigen ihre Consequenzen. Wegen der genannten Voraussetzung selbständig leuchtender Objecto findet aber die HELMHOLTz'sche Theorie keine Anwendung auf die in der Praxis der Mikroskopie allein vorkommenden nicht selbstleuchtenden, sondern erst mittels auf- oder durchfallenden Lichtes sichtbar werdenden Prä- parate. Auf diese bezieht sich die Theorie von Abbe. So sehr demnach beide Theorien in ihren Voraussetzungen und ebenso in den meisten ihrer Consequenzen divergiren, so kommen sie doch in einem Punkte fast zu dem gleichen Resultat: Bei centraler Be- leuchtung — d. i. nach Helmholtz, wenn die von den leuchtenden Punkten ausgehenden Strahlenbüschel die ganze OefFnung des Mikro- skops erfüllen; nach Abbe, wenn das Object direct nur von einem dünnen, axialen Strahlenbüschel getroffen ist, das Licht aber durch die Beugung an dem Object eine entsprechend grosse angulare Ausbreitung erfälu't — das Auflösungsvermögen des Systems bei solcher Be- leuchtung ist nach beiden Theorien durch die gleiche Formel bestimmt. Dafür, dass bei schiefer Beleuchtung die auflösende Kraft des Mikro- skops eine gesteigerte ist und für manche andere erfahrungsmässig fest- gestellte Thatsachen , auf diesem Gebiete weiss die HELMHOLTz'sche Theorie — eben entsprechend der Verschiedenheit ihrer Grundlage von den gewöhnlich vorliegenden Verhältnissen — keine Erklärung zu bie- ten, während die von Abbe bis jetzt noch in keinem Falle versagt hat. Wie dem aber auch sein mag: die Deduction, dass das Auflösungs- vermögen von gewissen Factoren abhängig ist, führt sofort auf eine Grenzbestimmung für dasselbe. In der That betitelte auch Helmholtz seine Abhandlung dementsprechend „Die theoretische Grenze für die ») AiiBE, E., in Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. IX, 1873, p. 413. *) Helmholtz, H., in Pcggexdouff's Ann. Jnbelbd. 1874, p. 557. Vill, 2. Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. 14t Leistungsfähigkeit der Mikroskope". Jedoch war es damals nicht seine Absicht, — wie der Titel vielleicht vermuthen lassen könnte — zu er- örtern, bis zu welcher Grenze in absehbarer Zukunft und mit angeb- baren Mitteln etwa die Leistungsfähigkeit des Mikroskops gesteigert werden könnte, sondern allein die oben angegebene: festzustellen, von welchen Factoren und in welcher Art von diesen sie abhängig sei. Dass eine Discussion dieser letzteren Art, wie Abbk und Helmholtz sie angestellt haben, in ihren Entwicklungen wie ihren Resultaten den Vorzug einer grösseren Strenge, ja mathematischer Exactheit besitzt, ist fraglos. Aber doch wird es immer eine verlockende Aufgabe sein, und zwar gerade auf Grund solcher Deductionen, die Beantwortung der anderen oben genannten Frage zu versuchen: wie weit können wir hoffen, zu gelangen? Dass Erörterungen dieser Art und ihre Er- gebnisse nur einen relativen Werth haben, versteht sich von selbst. Wir können natürlich nie voraussagen, mit welchen, jezt vielleicht nicht einmal geahnten Mitteln ein künftiges Genie dem Forschungsdrange der Menschen neue Wege bahnen wird. Einen Simi hat nur die Discussion über das Ziel, bis zu welchem wir hoffen dürfen, mit den gegenwärtig bekannten Mitteln, unter den gegenwärtig gegebenen Bedingungen nach dem gegenwärtigen Stande unserer theoretischen Einsicht in den Zu- sammenhang der betreifenden Verhältnisse zu gelangen. Dass das „wie vielV" bei Ueberleguugen dieser Art stets subjectiven Schwan- kungen unterliegt, ist nicht zu vermeiden. Immerhin ergiebt sich ein ungefährer Anhalt über das erreichbare Resultat und vor allem über die zunächst einzuschlagenden Wege*. I. Gehen wir also von der oben erwähnten fundamentalen Formel für die Leistungsfähigkeit des Mikroskopes aus. Wenn o die kleinste mit einem optisch vollkommenen Objectiv unterscheidbare Distanz der Ele- mente einer regelmässigen Structur bedeutet, X die Wellenlänge des wirksamen Lichtes (im leeren Räume) und a die Apertur des Systems, so ist, nach der Theorie von Abbe ebenso wie nach der von Helmholtz, bei centraler Beleuchtung a ') Die Fortschritte, welche zweifellos noch in reichem Maasse durch Ver- bessermig der Präparations verfahren erzielt werden können, liegen natürlich ausserhalb des Rahmens der hier vorzunehmenden Betrachtungen. Ihre Erörterung ist ein Gegenstand ganz für sich. 10* 148 Czapski: Grenzen der Leistimgsfäliigkeit des Mikroskops. VIII, Ö. Einen Fortschritt in der Leistung des Mikroskopes bemessen wir allgemein nach der Kleinheit der auflösbaren Structur, also nach der Grösse 5, Gemäss obiger Formel können wir diese Grösse auf zwei und, da S einfach der Quotient zweier Grössen ist, n u r auf zwei Wegen ver- kleinern. Wir können entweder 1) a grösser, oder 2) X kleiner machen. — Ad 1. Die Erhöhung der Grösse a, d. h. der Apertur des Systems, ist seit den Arbeiten von Abbe und Helmholtz das vorzügliche Bestreben aller um die Verbesserung des Mikroskops bemühten Optiker gewesen. Sehen wir zu , wie weit man hoffen kann , auf diesem Wege zu gelangen, wie weit man anderseits von dieser erreichbaren Grenze gegenwärtig noch entfernt ist. Es ist a = n sin u, worin n der Brechungsexponent des Me- diums vor der ersten Linse des Systems ist, u der Winkel, welchen der äusserste, durch das System hindurchgelassene, von einem mitleren Objectpunkt ausgegangene Lichtstrahl mit der Achse desselben bildet. Dieser Winkel kann aus rein geometrischen Gründen füglich nicht über etwa 65° gesteigert werden, damit noch ein gewisser, wenn auch sehr klei- ner Raum, zwischen Object und System frei bleibe (für das Deckglas und als Spielraum für die Einstellung). Es kann somit sinu kaum einen höheren Werth erreichen als 0 95. Um die Apertur des Systems zu steigern bliebe daher, wenn man jene geometrische Grenze erreicht hat — und das ist ziemUch allgemein der Fall — kein anderes Mittel, als die Grösse n, den Brechungsexponent des Mediums vor dem Objectiv, zu steigern. Damit ist man auf das Princip der Immersionssystemo geführt. Doch ist zu beachten , dass es nicht genügt, zwischen Deck- glas und Frontlinse eine „Immersiousflüssigkeit" von genügend hohem Brechungsexponent einzuführen, sondern dass auch zwischen Object und Immersionsflüssigkeit kein Medium, auch nicht in der mikroskopisch dünnsten Schicht, vorhanden sein darf, dessen Brechungsexponent geringer ist als der der Immersionsflüssigkeit. Andernfalls wird die Apertur des Systems, ganz gleich wie hoch der Brechungsexponent n der Immersionsflüssigkeit ist , durch Totalreflexion reducirt auf Grösse a' := n', wenn n' der niedrigste zwischen dem Object und der Immer- sionsflüssigkeit in irgend einer Schicht auftretende Brechungsexponent ist, wie ich bereits in meiner Mittheilung „Ueber ein System von der Apertur 1"60 (Monobromnaphthalin), hergestellt nach Rechnungen von Professor Abbe in der optischen Werkstätte von Cakl Zeiss" * her- vorgehoben habe. 0 Cfr. diese Zeitsclir. Bd. VI, 1889, p. 417. VIII, 2. Czapski: Grenzen der Leistungsfälligkeit des Mikroskops. 149 Wir sind nun bei den meisten Präparaton gezwungen , sie mit Deckgläsern zu überdecken. Der Brecbungsexponent der gcwöbn- licb angewandten, d. h. leicbt herstellbaren, im Gebrauch bequemen und im Preise billigen Deckgläser beträgt 1*52 bis 1'53. Bei Anwen- dung solcher ist daher die Grenze der erreichbaren Apertur = 1"44 bis 1*45. Um in der Apertur weiter zu gehen, muss man, wie ich in meiner eben erwälmten Mittheilung über das System von 1'60 Aper- tur ebenfalls bemerkt habe, zunächst Deckgläser von hiUierem Brechungsexponenten an wenden. Und dies hat seine mannig- fachen Schwierigkeiten. Die Jenaer Glasschmelzerei von Schott u. Gen. hat ja allerdings Gläser bis zu einem Brechungsexponenten von fast 2"0 hergestellt. Aber die aus solchem Glase fabricirten Deckgläser sind einerseits natürlich sehr kostspielig. Dieselben lassen sich nicht mehr auf dem sonst üblichen Wege des Ausblasens herstellen, sondern müssen nach den umständlichen Verfahrungsweisen der technischen Optik ganz ebenso wie andere plan- parallele Platten aus dickeren Blöcken erst herausgesägt, dann auf die gewünschte Dicke von 0"15 bis 0*2 mm dünner geschliffen und schliess- lich kunstgerecht polirt werden. Hierbei ist einmal der Materialverlust ein sehr grosser und in noch höherem Maasse macht die aufzuwendende Arbeit solche Deckgläser kostspielig. Ferner führen solche Deckgläser auch im Gebrauch manche Schwierigkeiten mit sich, mit welchen man bei Anwendung der gewöhnlichen nichts zu thun hat. Denn es darf, wie oben hervorgehoben, kein Medium zwischen Object und Frontlinse einen niederen Brechungsexponenten haben als die Ziffer der zu erreichenden Apertur; es müssen also, wie ich am angeführten Orte ebenfalls hervor- gehoben habe, die Objecte selbst in Medien eingebettet sein, deren Brechungsexponent die gewünschte Höhe hat. Auch hier liegt ein absolutes Hinderniss nicht vor 5 wir besitzen Ein- bettungsmedien , deren Brechungsexponent die Zahl 2 sogar über- schreitet. Aber diese Medien und die Methoden der Präparation von Objecten mit ihnen haben ihre unangenehmen Seiten. Wir haben es hier meist mit Arsen- und Phosphorverbindungen zu thun , welche beim Präparireu erwärmt werden müssen und dabei entweder die Gesundheit in hohem Maasse angreifende Dämpfe entwickeln oder auch ausserdem noch sehr leicht explosibel sind, so dass die Präparation eines Objectes mit sol- chen Medien eine fast lebensgefährliche Arbeit ist. Es hat sich ferner bei den mit dem genannten System von der Apertur 1*60 vorgenommenen Versuchen herausgestellt, dass viele dieser Einbettungsmedien auch die Substanz des Deckglases angreifen, corrodiren, so dass die 150 Czapski: Grenzen der Leistungsfälligkeit des Mikroskopes. VIII, 2. Oberfiäclie desselben matt und damit undurchsichtig- wird. Wie weit sich dieser Uebelstand bei anderen Glasarten, als den bei jenem System angewandten, vermeiden lassen wird, wäre allerdings noch besonders zu untersuchen, und es ist kein Grund, in dieser Beziehung von vornherein auf ein besseres Gelingen zu verzichten. Im Gegentheil ! Aber als ganz gewiss muss man hinstellen, dass einerseits das Deckglas von hohem Brechungsexponenten in jedem Falle sehr viel empfindlicher sein wird als das gewöhnliche Deckglas, und dass hierdurch die Auswahl unter den optisch genügenden Einbettungsmedien von vornherein beschränkt werden wird; anderseits, dass die Präparation von Objecten mit den noch zur Verfügung bleibenden Medien jedenfalls eine sehr viel schwie- rigere und kostspieligere sein wird, als die bei den jetzt angewandten Aperturen. Das allergrösste Hinderniss in diesem Punkte bieten jedoch nicht die genannten anorganischen Substanzen, sondern die Sub- stanz des Objectes, wenn dieses aus dem Gebiete der unserem Interesse weitaus am nächsten stehenden organischen Natur stammt. Ist schon bei dem jetzt gebräuchlichen Präparationsverfahren oft- mals Anlass zu Bedenken , ob nicht durch die Präparation das Ob- ject eine wesentliche Veränderung seiner natürlichen Structurverhält- nisse erfahre, so zeigt sich bei Anwendung der jetzt bekannten hoch brechenden Einbettungsmedien oft schon dem unbewaffneten Auge, dass geradezu eine Zerstörung dieses durch jenes eintritt. Grosse Klassen der aus der organischen Natur stammenden Objecto ver- langen zudem, in ganz gewissen Medien zu verbleiben, in ihrer natürlichen Umgebung oder solchen Mitteln, die dieser sehr ähnlich sind. Diese besitzen nun meistens Brechungsexponenten von 1*33 bis höchstens 1"6. Dieser Umstand schliesst eine Erhöhung der Leistungs- fähigkeit des Mikroskops durch Vergrösserung der Apertur von vornherein aus und verweist uns mit Nothwendigkeit auf den anderen der oben genannten Wege als den einzigen, welcher in solchen Fällen überhaupt die Aussicht auf einen möglichen Fortschritt eröffnet. n. Dieser Weg besteht, wie erwähnt, darin, X, die Wellenlänge des wirksamen Lichtes, kleiner zu machen. (Mit der Verkleinerung von X geht zwar an sich bei allen normal zertreuenden Immersionsflüssig- • keiten eine Vergrösserung von n und damit der Apertur Hand in Hand — eine Vergrösserung, welche im selben Sinne auf die Grösse von o wirkt, wie die Verkleinerung von X ; doch können wir diese als relativ zu gering VIII, 2. Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. 151 für die folgende Betrachtung ganz ausser Acht lassen.) Beobachtet man bei gewöhnlichem Tageslicht (reflectirtes Licht weisser Wolken), so kom- men zwar sehr viele verschiedene Wellenlängen auf einmal zur Wirkung, nämlich die des ganzen sichtbaren Spectrums. Nun ist aber einerseits die absolute Energie der Sonnenstrahlen in den verschiedenen Theilcn des Spectrums eine verschiedene, anderseits variirt die Empfindlich- keit des Auges für die verschiedenen Farben des Spectrums bei gleicher physischer Stärke des Reizes ebenfalls. Hieraus resultirt eine Ein- drucksstärke des weissen Tageslichtes, welche durch eine wellen- förmige Curve dargestellt wird , deren Scheitel etwa bei A = 0 55 [x liegt. Es empfängt also das Auge von den Strahlen dieser Wellenlänge und der ihr benachbarten den bei weitem stärksten Eindruck, und dies in so überwiegendem Maasse , dass derselbe die den kleineren und grösseren Wellenlängen entsprechenden farbigen Partialbilder gewisser- maassen unwirksam macht, oder wenigstens nur insoweit zur Geltung kommen lässt, als ihre Eigenschaften denen der Bilder, welche X = 0'55 |JL entsprechen, gleich sind. Schliesst man dagegen diese, absolut und physiologisch am ener- gischsten Avirksaraen Strahlen der Wellenlänge 0*55 [i, und der grösse- ren Wellenlängen auf irgend eine Weise aus und lässt nur den Strahlen kürzerer Wellenlänge den Zutritt zum Auge, so kann unter günstigen Umständen , nämlich bei genügend intensiven Lichtquellen, das Licht dieser kürzereu Wellenlängen sehr wohl bis zu einer ge- wissen Grenze selbständig wirksam werden. Allbekannt ist die auf- fallende Steigung im Auflösungsvermögen eines Objectivs, wenn man, sei es durch einen Beleuchtungsapparat für monochromatisches Licht, sei es durch Einschaltung von Absorptionsgläsern oder dergleichen, ein Präparat in rein blauer Beleuchtung beobachtet. Man sieht dann , wie ein solches , welches bei gewöhnlicher Beleuchtung die Grenzen der Auflösung übersteigt, mit monochromatischem blauen Licht von demselben Objectiv und unter sonst genau gleichen Um- ständen bequem gelöst wird. In der That ist das Auge noch für die Wellenlänge 0*44 [x genügend empfindlich, um unter Ausschluss anders- farbigen Lichtes einen recht intensiven Eindruck erhalten zu können. Eine Verminderung der wirksamen Wellenlänge von 0'55 auf 044 ist aber gleichbedeutend mit einer Erhöhung der Apertur, z. B, von 1'40 auf 1*75! Wie man sieht, ist hier ein relativ grosser Fortschritt mit sehr einfachen Mitteln zu Wege gebracht. Es ist, zuerst wohl von Helmholtz , dann wiederholt von Anderen darauf hingewiesen worden, dass die Photographie ein Hilfsmittel 152 Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. VIII, 2. biete, um auf diesem Wege die Leistungsfähigkeit des Mikroskops zu steigern. Der Erfolg hat aber nicht immer der Theorie entsprochen. In der That hat man oft eine wichtige Voraussetzung unbeachtet gelassen, welche für das praktische Gelingen ausschlaggebend ist. Es ist nämlich bei allen theoretischen Deductionen stillschweigend, oder auch ausdrücklich, vorausgesetzt, dass das zur Photographie benutzte Objectiv mit den Lichtstrahlen der geringen Wellenlänge auch an sich gleich gute Bilder gebe wie bei gewöhnlicher, weisser Beleuchtung. Dies ist aber keineswegs von selbst der Fall. Ja bei den Objectiven des gewöhnlichen Typus, d. h. bei den bis vor wenigen Jahren allein existiren- den „achromatisclien" Objectiven war eine solche Anforderung überhaupt nicht zu erreichen. Wenn das Objectiv für Licht von der Wellenlänge 0-55 (X gute Bilder gab, „corrigirt war", so waren die Bilder vom Licht der Wellenlänge 0*44 [jl für sich betrachtet bereits so schlecht, d. h. die sphärische und chromatische Correction des Objectivs für diesen Theil des Spectrums eine so mangelhafte, dass der theoretisch postulirte Vor- theil eines erhöhten Auflösungsvermögens wenig oder gar nicht zur Geltung kommen konnte. Wohl half man sich auch früher schon in der- selben Weise, wie man sich bei gewöhnlichen (makro)photographischen Objectiven — bei denen die Verhältnisse ganz ähnlich liegen — von jeher beholfen hat und noch heute behilft. Man corrigirte das Objectiv sphä- risch für Strahlen von derjenigen Wellenlänge, welche in der Photo- graphie vornehmlich zur Geltung kommt, z. B. bei Bromsilbergelatine- und mehreren anderen Plattenarten X = 0*44 |x und bewirkte die chroma- tische Correction des Objectivs in der Weise, dass das der Wellenlänge 0-55 entsprechende Bild örtlich mit jenem photographisch wirk- samen zusammenfiel. Hierdurch wurde wenigstens erreicht, dass man das photographisch wirksame Bild mit Hilfe des mit blossem Auge sicht- baren richtig einstellen konnte. Es blieb aber dabei 1) das optisch wirksame Bild an sich schlecht (sphärisch unter-, chromatisch übercor- rigirt) und 2) auch im photo-chemisch wirksamen Theile des Spectrums die Concentration des Lichtes eine sehr unvollkommene: die Bilder, welche den verschiedenen wirksamen Wellenlängen entsprechen, fallen nach Ort und Grösse auseinander (chromatische Untercorrection für diesen Theil des Spectrums). Die diesen verschiedenen Wellenlängen ent- sprechenden Bilder können sich daher nicht verstärken, sondern es liegt im Gegentheile die Gefahr nahe, dass der eine Theil eine Verschleierung des von dem anderen Theile herrührenden Bildes bewirkt. * Man hat sich auch hier einigermaassen zu helfen gewusst, indem man nur einen kurzen Spectralbezirk wirksam werden Hess, worauf VIII, 2. Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. 153 ich gleich näher eingehen werde. Es ist aber klar, dass liierdnrch jeden- falls die Intensität der Beleuchtung ganz ausserordentlich vermindert wird, und dies ist wieder in anderer Hinsicht unangenehm. Jedenfalls konnten Objective, welche vom Optiker für den Zweck der Mikro- photographie construirt waren , gar nicht mehr vortheilhaft für die ge- wöhnliche Beobachtung benutzt werden und umgekehrt. Der grosse Fortschritt, welcher in dieser Hinsicht durch die Con- struction der Apochromate herbeigeführt worden ist, besteht eben darin , dass bei ihnen die den verschiedenen Wellenlängen des ganzen sichtbaren Spectrums bis ins Violette hinein entsprechenden Bilder bis auf praktisch gleichgiltige Unterschiede dem Orte und der Grösse nach zusammenfallen. Der Vorzug, den die Apochromate in der Be- nützung zur Photographie vor Systemen der älteren Art besitzen, ist unvergleichlich grösser als die Ueberlegenheit , welche sie bei blossem optischen Gebrauch, im directen Sehen aufweisen. In der That ist auch nicht zu verkennen und wiederholt hervorgehoben , welchen Auf- schwung die Mikrophotographie seit der Einführung der Apochromate genommen hat, und ebenso haben sich die Fälle gemehrt, in welchen durch die Photographie Structuren sichtbar gemacht worden sind, welche dem Auge ganz oder beinahe verborgen geblieben waren. Aber auch hier sind meines Erachtens nicht immer die Bedingungen eingehalten worden, von welchen eine erhöhte Leistungsfähigkeit des Objectivs abliängt. Dieselbe kann, wie eingangs bemerkt, nur dann er- wartet werden, wenn Licht kürzerer Wellenlänge unter Ausschluss von Licht grösserer Wellenlänge zur Verwendung kommt. Denn wenn gleichzeitig auch Licht grösserer Wellenlänge zur Bildung des Photogramms beiträgt, so kann leicht auf der photographischen Platte dasselbe passiren , was wir bei der Ocular-Beobachtung mit weissem Licht der Netzhaut des Auges gegenüber constatirt haben : dass das den grösseren Wellenlängen entsprechende gröbere Bild das von den kurz- welligen Strahlen entworfene, feiner structurirte, aber auch lichtschwächere überdeckt. Denn bekanntlich hat die photographische Platte nicht so schlechthin , wie man ihn ihr gewöhnlich zuschreibt , den Vorzug vor der Netzhaut des Auges, dass sie nicht „geblendet" werden kann. Es kann dies vielmehr in rein mechanischer (photo-chemischer) Weise eben- falls sehr wohl geschehen. Man wird also von Photogrammen, die z. B. auf sogenannten orthochromatischen Platten erstellt sind , oder gar von solchen, bei welchen grüne, gelbe, selbst braune Lichtfilter an- gewandt sind, in dieser Hinsicht von vornherein nichts erwarten dürfen, 154 Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. VIII, 2. Bekanntlich nöthigt über selir oft die Beschaffenlieit des Präparates, d. li. seine eigene Färbung, zur Anwendung solcLer Filter, aus rein plioto- cliemischen Gründen, um die vorhandenen Details genügend zum Aus- druck zu bringen. Diese Klasse von Präparaten bleiben also von einem Fortschritt in ihrer Abbildung mit Hilfe der Photographie von vornherein ausgeschlossen. Damit soll natürlich keineswegs gesagt sein, dass die Photographie bei solchen gar keinen Vortheil biete; doch liegen diese Vortheile auf einem anderen, hier nicht näher zu erörternden Gebiete. Die Bedingung einer durch die Photographie zu erreichenden ge- steigerten Leistungsfähigkeit der Objective und die Grenzen einer solchen liegen meines Erachtens vielmehr in folgenden Umständen: Erstens in dem schon erwähnten, dass das benutzte System geeignet corrigirt sei, so dass die Bilder, welche von der zur Anwendung zu bringenden kurzen Wellenlänge X = x herrühren, an sich scharf seien und dem Orte nach mit dem auf das Auge wirkenden zusammenfallen — wie oben erwähnt, um die Einstellung zu ermög- lichen. In dem Maasse, in welchem diese Correction früher bei makro- photographischen Objectiven für X = 0*55 etwa und X = 0'44 er- reicht war, würde sie an sich auch für dasselbe X = 0*55 einerseits und noch viel kurzwelligeres Licht anderseits erreichbar sein. Man würde zwar die Brechungsexponenten der Gläser, aus welchen das Ob- jectiv besteht, für Licht von einer Wellenlänge, welche keinen merk- lichen Eindruck mehr auf das Auge macht, nur mit Hilfe der Photo- graphie selbst bestimmen können. Doch würde dies mit genügender Genauigkeit möglich sein, und es würde ebenso möglich sein, mit den Mitteln, über welche jetzt der rechnende und der technische Optiker verfügt, Systeme herzustellen, von denen der Mikrograph a priori sicher sein kann, dass sie für jene unsichtbaren Wellenlängen in der gewünsch- ten Weise corrigirt sind, ohne dass die ControUe durch das Auge zu Hilfe genommen zu werden brauchte. Diese Anforderung ist also an sich bis zu beliebigen Grenzen des X erfüllbar. Die zweite besteht darin, dass das Licht von der gewünschten kur- zen Wellenlänge photographisch wirksam werden muss. Dieselbe zerfällt in vier Unterbedingungen. Es muss 1) die Lichtquelle Wellen von der gewünschten Kürze und diese in hinreichender Intensität überhaupt ausstrahlen. Es müssen 2) die den grösseren Wellen entsprechen- den Strahlen durch geeignete Lichtfilter von der Wirkung ausgeschlo s- sen werden, ohne dass zugleich die Intensität der kurzwelligen Strahlen zu sehr vermindert wird. Es muss 3) die photographische Platte für VIII, 2. Czapski: Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops. 155 das Liebt der betreffenden Wellenlänge genügend empfindlich sein (wenn die Empfindlichkeit der Platte für das betreffende Licht ein ausge- sprochenes Maximum besitzt, so wird hierdurch dasselbe erreicht, wie durch einen Lichtfilter). 4) aber müssen alle Medien zwischen Licht- quelle und photographischer Platte die Strahlen von der betreffenden kurzen Wellenlänge auch durchlassen. Diese letztere Forderung zieht meines Erachtens die Grenzen des möglichen Fortschritts am engsten. Bekanntlich lassen schon die ge- wöhnlichen Gläser nur einen sehr kleinen Bruchthcil des Lichtes von der Wellenlänge 0*3 jj, hindurch. Welche Schwierigkeiten damit verbun- den sind, kurzwelligeres Licht zur Anwendung zu bringen, davon kann man sich eine Vorstellung machen, wenn man die auf Photographie des ultravioletten Spectrums ausgehenden Arbeiten der Physiker, z. B. von CoKNU und Schumann liest. Es scheint mir daher, dass die An- wendung von Licht der Wellenlänge 0*35 [i das äusserste ist, was wir in absehbarer Zeit erhoffen können, d. h. was sich erreichen lässt, ohne die Schwierigkeit des Arbeitens über alles Maass hinaus zu erhöhen. Um diese Anwendung aber wirklich zu erreichen, dazu wird es noch der vereinigten Anstrengungen der Optiker, Physiker, Pliotocheraiker und der Mikroskopiker selbst in den genannten vier Richtungen bedürfen. Der Lohn solcher Bemühungen ist im Vergleich zu den durch eine Steigerung der Apertur erreichbaren Erfolge immerhin gross und daher verlockend genug. Denn eine Wirksammachung der Wellenlänge 0"35 [X statt der mittleren Wellenlänge des gewöhnlichen Tageslichts X = 055 (X wäre gleichbedeutend mit einer Erhöhung der Apertur von z. B. 1-40 auf 2-20. Die Wirksammachung der Wellenlänge X = 030 |x würde einer Steigerung der Apertur von 1"40 auf 2*57 entsprechen. Bei centraler Beleuchtung würden unter diesen Umständen Structuren aufgelöst wer- den, welche im ersteren Falle 4000 Elemente auf der Länge eines Milli- meter enthielten, im zweiten Falle 4667 oder solche, deren gegenseitiger Abstand im ersteren Falle 0-25 |x ist, im letzteren Falle 0'21 |x , wäh- rend jetzt die entsprechenden Zahlen (bei der Apertur 1"40 und weisser Beleuchtung) 2545 und 0"39 |x sind. [Eingegangen am 18. Juni 1891.] 156 Henking: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. VIII, 2. Methoden bei entwickliiDo-soTscliichtliclieii Unters iicliuug'eii an Insecteneiern. Von Dr. H. Henking iu Göttingen. Wenn ich im Folgenden die von mir benutzten Methoden bei der Untersuchung von Insecteneiern ausführlicher niederlege, so hat das zwei Gründe. Erstens verdienen die bei den Untersuchungen gewonne- nen Resultate jedenfalls ein um so grösseres Vertrauen , wenn klar ge- sehen werden kann , auf welchem Wege dieselben gewonnen wurden. Zweitens glaube ich durch meine jahrelange Beschäftigung mit diesem Gegenstaude einige Routine in der Bewältigung des nicht ganz leicht zu behandelnden Materiales gewonnen zu haben, sodass meine Erfah- rungen späteren Forschern auf gleichem Gebiete vielleicht von einigem Nutzen sein können. I. Beschaffung des Materiales. Was die Beschaifung der Eier anbetrifft, so habe ich mich bemüht, dieselben nur unter normalen Bedingungen zu erhalten. Am besten ist es natürlich, wenn die Eier von den Thieren in der Freiheit abgelegt werden. Da es mir auf die frühesten Stadien ankam, so musste ich dem- nach die Thiere im Freien bei der Eiablage beobachten. Es gelang mir dieses bei Pieris brassicae, Leucoma Salicis und Crioceris asparagi. Für nicht wesentlich ungünstiger möchte ich es halten , wenn Crioceris asparagi die Eier ablegte, nachdem sie einen bis zwei Tage an Spargel- pflanzen zugebracht hatte , welche von mir abgeschnitten und in Wasser gestellt waren. So entledigte sich auch Agelastica alni in der Gefangenschaft gern der Eier, wenn ihr frische, in Wasser gestellte Zweige von Erlen zur Nahrung und Ablage dargeboten wurden. Aehn- lich verhielt es sich mit Rhodites rosae. Diese Gallwcspe zog ich aus überwinterten Bedeguaren ; ich setzte sie auf in Töpfe gepflanzte, nicht oculirte Rosenstämmchen und konnte beobachten , wie das Thierchen bald nach dem Ausschlüpfen am Stamme entlang marschirte und nach "VlII, 2. Henking: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. l67 längerer Prüfung an der gut befundenen Stelle den Stacliel einsenkte, um dort eine grössere Zahl der fadenförmigen Eier zu bergen. Bombyx mori hat in der Gefangenschaft eine zweite Heiraath gefunden, und man erhält die befruchteten Eier leicht, unbefruchtete dagegen erst nach langem Zaudern des Thieres. Auch Leucoma Salicis legt die befruchte- ten Eier bald ab, wenn man copulirte Individuen in einen luftigen Käfig sperrt. Unbefruchtete Eier erhält man von diesem Schmetterlinge, wenn das aus einer isolirten Puppe gezogene Weibchen .5 bis 8 Tage isolirt gehalten wird. üeberhaupt sperrte ich nur solche Insecten in die Gefangenschaft ein, welche durch ihren stark aufgetriebenen Hinterleib oder durch sonstige Umstände verriethen, dass die Eier bald gereift seien. Die schwangeren Weibchen von Pyrrhocoris apterus befinden sich meist mit einem Männchen in dauernder Copula und entlassen dieses erst ganz kurz vor Beginn der Ablage. Dann wühlen sie sich in die Erde ein, nur mit dem Kopfe hervorsehend und legen die Eier in einem Haufen ab. Ich hielt demnach die Thiere in einer Glässchale, welche einige Centimeter hoch mit etwas feucht gehaltener Erde angefüllt war. Da die Copula derselben oft mehrere Tage dauert, so ist es gut, etwas Nah- rung, bestehend in Lindensamen, todten Fliegen etc. hinzuzufügen. Be- sonders darf man nicht vergessen , täglich mindestens einmal frisches Wasser in den Behälter zu spritzen. Man erkennt leicht an dem Be- nehmen eines Thieres, ob es zur Ablage schreiten will, und ist es bereits dabei, so wird es durch die charakteristische Art, mit dem Kopfe ans der Erde hervorzusehen, leicht verrathen. Auch Lamprorrhiza splendidula legt wenige Tage nach der Copu- lation die Eier ab und Formica einige Tage nach dem Hochzeitsfluge. Bei Adimonia tanaceti mag etwas längere Zeit vergehen, ich habe nur die stark geschwellten Weibchen im Freien gefunden, welche mir inner- halb der nächsten Tage ihr Eimaterial lieferten, wenn sie mit Schaf- garbe (Achillea millefolium) gefüttert wurden. Tenebrio molitor legte die Eier ab, wenn ich schwangere Weibchen in Glasdosen mit etwas Mehl setzte. Die einzeln abgelegten Eier klebten am Boden der Glas- dose und konnten nach Fortspülen des Mehles conservirt werden. Hy- drometra wird durch merkwürdige Beinbewegungen des Männchen zu öfterer Begattung angespornt und legt bald nach der letzten Copida die Eier an Wasserpflanzen ab, und ähnlich ist es mit Donacia. 158 Henk in g: Metlioden bei Untersuchungen an Insecteneieni. VIII, 2. II. Conservirung der Eier. Die äussere Schale der Insecteneier bietet in Bezug auf ihre Härte beträclitliche Verschiedenheiten, sodass man von hart- und weichschaiigen Eiern sprechen kann ; aber darin stimmen sie überein, soweit meine Er- fahrung reicht, dass sie für die wenigsten Reagentien sofort durcli- lässig sind. Auf die Benutzung solcher Mittel, welche erst nach längerer Einwirkung aotödten, habe ich von vornherein verzichtet; denn es kam mir darauf an, den Entwicklungsgang der Eier nach einer bestimmten Zeitdauer mit Sicherheit sofort zu unterbrechen. Bei langsam wirken- den Mitteln ist keine Controlle mehr vorhanden, da nach individuellen Schwankungen das Eindringen der Flüssigkeit bald früher, bald später erfolgen konnte. Aber auch hiervon abgesehen, kann ich der von an- deren Seiten wohl unternommenen Beweisführung, dass auch langsam eindringende Conservirungsmittel doch momentan wirken sollen, eben in dem Augenblicke, wenn ihnen die Diffusion durch die Hülle gelungen sei, durchaus nicht beipflichten. Nun sind die Eier, besonders die weichschaiigen, nicht nur von ihrer Schale geschützt, sondern es wird von dem Mutterthiere beim Legen der Eier eine grössere oder geringere Menge eines Drüsensecretes darüber ergossen, welches meist noch zu einer besonde- ren Schutzhülle erhärtet. So entleert Adimonia tanaceti einen gelben Saft in reichlicher Menge, dieser aber erstarrt in wenigen Stunden zu einer schwarzen schaumigen Decke für den ganzen Eihaufen. Die weichen Eier von Agelastica alni überzieht ringsum eine Flüssigkeit, welche selbst in Alkohol eine überaus klebrige, fadenziehende Eigen- schaft behält und dadurch recht lästig werden kann. — Möglichst zu vermeiden ist es, dass mit reichlichem Drüsensecret begleitete Eier auf Papier abgelegt werden ; denn sie kleben sehr fest daran, Papier aber schneidet sich sehr schlecht und verdirbt meist die Serien. Ein Mittel aber giebt es zur Conservirung, welchem kein Ei wider- steht, mag die Schale noch so fest, das Drüsensecret noch so undurch- lässig sein, das ist Anwendung hoher Temperatur. Hiervon habe ich denn auch den ausgiebigsten Gebrauch gemacht. Wie ich schon mehr- fach angegeben habe, übergoss ich die Eier, welche ich mit etwas kaltem Wasser in ein Uhrschälchen gelegt hatte, mit heissem Wasser, nachdem ich dieses in einem Probirröhrclien bis zum Aufsteigen reichlicher Blasen erhitzt hatte. Es ist zweckmässig, die Eier nicht länger der Hitzewir- kung auszusetzen, als zu ihrem Abtödten erforderlich ist. Daher waren besonders leicht jene Eier zu hantiren, welche in grösserer Zahl an VIII, 2. Henking: Metlioden bei Untcrsucliungen an Insecteneiern. 159 Blätter oder dergleichen abgelegt waren ; sie können mit ihrer Unter- lage in das Schälchen eingetaucht und nach kurzem gleichzeitig hervor- gezogen werden. Ich brachte sie alsdann in Alkohol von 70 Procent. Derselbe dringt recht rasch ein, wie man daran erkennt , dass der Ei- inhalt sich ringsum oder stellenweise von der Schale zurückzieht. Ausser durch Hitze habe ich ein rasches Abtödten auch noch durch FlemminCt's starkes Chrom-Osmium-Essigsäure-Gemisch erzielt, wie ich durch ControUversuche mit der ersten Methode festgestellt habe. Es hat diese Flüssigkeit, wie auch andere Säuregemische, den Vortheil vor der Conservirung mit Hitze voraus, dass die einzelnen Zellbestand- theile eine scliarfe Umgrenzung erhalten und sehr deutlich hervortreten. Von Nachtheil ist wieder eine nicht leicht zu controllirende Schwärzung durch die Osmiumsäure; denn bei den Eiern mit starker SecretumhüUung pflegte sich diese alsbald schwarz zu färben und somit eine Beobach- tung des Eiinhaltes zu vereiteln. Ich habe Flemming's Flüssigkeit etwa eine viertel bis eine halbe Stunde einwirken lassen, verdünnte dann mit dem dreifachen Volum Wasser, Hess noch etwa zwei Stunden stehen, wusch mit Wasser und dann mit verdünntem Alkohol aus, übertrug in Alkohol von 70 Procent, bewahrte das Material auf in Alkohol von 90 Procent. — Die mit Hitze conservirten Eier geben im ganzen nicht so scharfe Bilder wie die vorigen, oft erscheinen die Gegenstände wie verwaschen, aber dennoch habe ich nach liinreichender Uebung und mit den mir zu Gebote stehenden guten Systemen (Wikkel's homogene Immersionen yi4, Yao, V24) an ihnen nicht weniger gesehen als an den übrigen. Conserviren sie die eigentlichen Spindelfasern auch nur wenig deutlich oder zuweilen gar nicht, so leisten sie erheblich mehr durch Umgrenzung der achromatischen Substanz. Der Conservirung durch Hitze habe ich es zu verdanken, wenn ich über das Verhalten der achro- matischen Substanz und über die Beschaffenheit des Schwanzfadens am Spermatozoon nach seinem Eindringen in das Ei detaillirtere Angaben habe machen können. Die Verwendung von Pikrin-Essigsäure in der von Boveri ange- gebenen Zusammensetzung ist hier leider ausgeschlossen, leider aus dem Grunde, weil ich mich von deren vorzüglichen Eigenschaften in ent- sprechenden Fällen (Befruchtung von Ascidieneiern, Spermatogenese von Pyrrhocoris) zu überzeugen genügend Gelegenheit hatte. Aber die Flüssigkeit vermag die EiliüUen, wenn überhaupt, so nur langsam zu durchdringen. Die von mir zu den verschiedensten Zeiten eingelegten Eier von Pyrrhocoris oder Agelastica zeigten sich stets erst nach Aus- bildung eines zelligen Blastoderms abgetödtet, sodass ich vermuthe, dass 160 Henkiiig: Methoden bei Untersucliungen an Insecteneiern. VIII, '2. die Eier erst durch den zvim Auswaschen zu benutzenden Alkohol cou- servirt wurden. III. Erweichung und Einbettung der Eier. Die Eier der Insecteu sind in der Regel wegen der reichlichen Dottermassen undurchsichtig und wegen ihrer Grösse für eine Unter- suchung in toto nicht geeignet. Bei den kleineren, z. B. Donacia, ge- lingt es unter sonst günstigen Verhältnissen wohl einmal, die Ausstossung der Richtungskörperchen am lebenden Ei zu sehen, das ist aber auch Alles. Selbst bei den langgestreckten und dünnen Eiern von Rhodites habe ich mit Hilfe von Schneidek's Carmin an dem unzerlegten Object keine klaren Bilder erhalten. Zwar färben sich die Kerntheile, aber das ganze Ei ist viel zu dick, als dass man mit den erforderlichen starken Vergrösseruugen heran könnte. Sehr hinderlich ist für eingehendere Untersuchungen die oft mächtig entwickelte Eischale. Sie ist ungemein dick bei Hydrometra und Bom- byx mori, ebenfalls bei Leucoma Salicis, daher beim Schneiden der Eier äusserst hinderlich. Man kann dieselbe allerdings bei Hydrometra an Alkoholmaterial leicht abpräpariren. Der Eiinhalt ist geschrumpft; man kann daher die Eischale am einen Ende aufbrechen und das eigentliche Ei aus seinem ellipsoiden Gefängnisse hier herausdrücken ; aber das Ei ist wegen der Beschaffenheit des Dotters und der Kerntheile von mir weiterhin ganz unberücksichtigt gelassen. — Viel schlechter ist wegen der merkwürdigen Form des Eies die Eischale von Bombyx mori zu entfernen, indem die Kerntheile in dem verbreiterten Abschnitte liegen und nur sehr selten unbeschädigt von der Schale zu trennen sind. Auch bei Leucoma gelingt ein unverletztes Abpräpariren der Hülle selten, so- dass ich hier, wo die Schale nicht allzu dick ist, das Meiste erreichte, wenn ich sie mit schnitt. Dann musste ich allerdings die Schnitte etwas dicker nehmen. Man hat zur Auflösung der Schale verdünntes Eau de Javelle vor- geschlagen, und thatsächlich gelingt es damit. Aber ich habe es doch wenig benutzt, weil dabei kaum zu vermeiden ist, dass der Eiinhalt selbst mit angegriffen wird. Die Region der Mikropyle ist am wenig- sten widerstandsfähig, und dort liegen gerade bei Bombyx und Leucoma die Kerntheile. Für genauere Untersuchungen kann ich demnach die Anwendung von Eau de Javelle nicht empfehlen, rathe dagegen, die Ei- schale an Alkoholmaterial abzupräpariren oder sie mit zu schneiden. Geht das nicht an, so thut man gut, sich nach günstigeren Objecten um- zusehen. VIII, 2. Henking: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. 161 Pyrrhocoris apterus hat ebenfalls eine ziemlich derbe Schale , aber man kann sie recht gut mit schneiden. Die übrigen Eier haben eine weiche Hülle, welche weiter keine Schwierigkeiten macht. Ein weiterer üebelstand giebt sich darin kund, dass die Dotter- substanz sich schlecht schneiden lässt. Das Dottermaterial bleibt brücliig, und wenn auch die äussere Plasmaschicht einen Schnitt ergiebt, so schaut den üntersucher innerhalb des von jener gebildeten Ringes ein Pülverchen trübselig an. Das Pülverchen repräsentirt den Dotterinhalt. Man kann nun zwar jeden Schnitt festigen durch Ueberziehen mit CoUodium oder Paraffin in absolutem Alkohol gelöst ', aber wer hätte Zeit und Geduld zu einer solchen Danaiden-Arbeit, wo schon die Be- schaffung und Weiterbehandlung des vorliegenden Objectes einen mit dem schliesslichen Resultate oft nicht in Einklang stehenden Zeitauf- wand erfordert? Es wäre ferner möglich, mit verdünntem Eau de Javelle die Dotter- substanz zu erweichen und schnittfähig zu machen ; aber, wie ich schon oben sagte, greift dieses Mittel auch die Kernstructur an und ist daher wenig zu empfehlen. Ich bin dagegen mit gutem Erfolge in folgender Weise vorge- gangen. Zunächst färbte ich die Eier mit Borax-Carmin , damit sie später im Paraffin leichter orientirt werden konnten. Zu dem Zwecke war nöthig, die Eischale an einer Stelle zu öffnen. Ich brachte da- her, wie ich schon früher mittheilte, die Eier aus dem stärkeren Al- kohol in solchen von etwa 35 Procent. In demselben bläht sich die Eischale etwas und springt leichter bei einem auf sie ausgeübten Druck. Ich durchstach sie nun mit einer Nadel an der der Mikropyle gegen- überliegenden Seite. Liegt der Eikern, wie bei Pieris, Agelastica, Formica, Apis, an dem Mikropylen-Ende des Eies, so wird man hierbei nichts zerstören, liegt er dagegen in der Mitte zwischen Vorder- und Ilinter- ende des Eies, wie bei Pyrrhocoris, Donacia, Rhodites, so ist grössere Vorsicht nöthig. Die spröde Schale von Pyrrhocoris lässt sich sehr sicher in folgender Weise ohne Verletzung des Inhaltes sprengen. Ich stellte eine selbstschliessende feine Pincette durch ein eingeklemmtes Hölzchen nur ein wenig enger als die Dicke der Eier betrug. Drückte ich nun damit auf die im schwachen Alkohol liegenden Eier, so sprang die Eischale mit einem Riss auf; der dünnere, weil geschrumpfte Ei- inhalt wurde dabei nicht berührt, weil er zwischen die Zinken der Pin- ') Henking, IL, diese Zeifcschr. Bd. III, 1886, p. 478. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, ü. 11 162 Henking: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. VIII, 2. cette zu liegen kam. Oft springt aber die Schale der von stärkerem in schwachen Alkohol übertragenen Eier von Pyrrhocoris von selbst. Bei weichhäntigen Eiern, wie sie Agelastica ablegt, darf man nicht versiinmen, auch das oft am Eiinhalt haften bleibende Oolemm zu durch- stechen, denn sonst gelingt weder die Färbung, noch Erweichung, noch Einbettung. Die alsdann während etwa 12 Stunden im Borax-Carmin gefärbten Eier brachte ich in Alkohol, TOprocentig . . . 20 cc Salzsäure, concentrirt ... 1 Tropfen Pepsin eine Messerspitze. Den angesäuerten Alkohol hielt ich vorräthig und fugte beim Ge- brauch Pepsin hinzu und rührte um. Es bleibt ein Ueberschuss des Pnlvers am Boden liegen, da sich im Alkohol nur Spuren lösen. Die Eier blieben mindestens 12 Stunden darin liegen. Dann war die Fär- bung diöerenzirt, die Eier waren erweicht und konnten nun durch abso- luten Alkohol, Bergamottöl-Alkohol (1 : 1), reines Bergamottöl, Berga- mottöl-Paraffin in reines Paraffin übergeführt werden. Jetzt sclinitten sicli die Eier, mit wenigen Ausnahmen (besonders Bombyx mori), recht gut ohne zu bröckeln. Dass die Kernstructuren durcli diese Behandlung irgendwie ver- ändert wären, habe ich nicht bemerken können. Ich bekam genau die gleichen Bilder wie bei solchen Eiern , von denen ich Pepsin fernge- halten hatte. Selbst die Dottermassen waren in keiner Weise verun- staltet, nur bei Pyrrhocoris sahen sie bei langer Einwirkung etwas wie angefressen aus, und ist das vielleielit auf Reclinung der Pepsinwirkuug zu setzen. IV. Sehneiden, Aufkleben und Färben. Wie ich bereits oben mittheilte, ist es zweckmässig, die Eier vor dem Einbetten zu färben, z. B. mit Borax-Carrain nach Geenacher. Es hat das mehrere Vortheile: 1) Wenn die Eier die Farbe leicht und gleichmässig annehmen, so ist das ein Zeichen dafür, dass die EihüUen gut eröffnet sind; sie werden also auch völlig mit Paraffin durchtränkt werden. Hat die Farbe etwa nur in nächster Umgebung der Einstich- stelle eingewirkt, so ist die hergestellte Oeftnung zu klein, und man wird auch mit dem Einbetten Schwierigkeiten haben. 2) Die gefärbten Eier sind bei den einzelnen Manipulationen besser zu sehen und können vor allen Dingen nach ihrem Einschluss in Paraffin leicliter orientirt werden. Vlil, 2. Henking: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. 163 Es ist dieser Vortheil dni'cliaus nicht zu unterschätzen , wenn es sich um so kleine Eier handelt, wie sie von Formica und Rhodites produ- cirt werden. — Ebenfalls aus Rücksichten der Orientirung ist es nicht zu empfehlen, z. P». von den Eiern von Pyrrhocoris die Schale völlig zu entfernen vor dem Schneiden, was ja keine grossen Schwierigkeiten machen würde. Man kann nämlich an der Schale durch das Vorhandensein der Mikro- pylen sofort feststellen, welches das Vorderende ist. Es ist das für die Untersuchung der jüngsten Stadien nicht unwichtig, da man nun sofort weiss, wo die Samenfäden gesucht werden müssen. Man wird ein solches äusseres Hilfsmittel entbehren können , wenn das Vorder- und Ilinter- ende der Eier eine verschiedene Krümmung besitzen. Sind beide Enden aber sehr ähnlich, und es fehlen leicht sichtbare Mikropylen, wie z. B. bei Käfern, so achte man auf die Dicke der plasmatischen Randschicht. Diese ist meist am vorderen Ende, wo die Samenfäden eindringen, etwas beträchtlicjier als am Hinterende. Die Schnitte habe ich sämmtlich mit quergestelltem Messer ange- fertigt. Sind die Objecto länger gestreckt, z. B. beim Schneiden einer Blattknospe mit daran abgelegten Eiern von Rhodites, so kann es von Vortheil sein, wenn man den Paraffinblock derart rechtwinklig zuschnei- det, dass der Gegenstand in einer Diagonale desselben liegt. Zum Aufkleben der Schnitte benutzte ich besonders P. Mayer's Eiweiss-Glycerin, und kann dasselbe seiner vielen Vortheile wegen nur empfehlen. Allerdings wollte es in einigen Fällen nicht kleben , z. B. gelegentlich bei Pyrrhocoris. Ich möchte das jedoch nicht auf das Alter der ]\Iischung schieben, wie es Vosselee ^ thut, sondern habe mehr den Eindruck, als wenn in solchen Fällen das Object dafür nicht be- netzbar gewesen sei aus Gründen, die ich nicht kenne. Dann habe ich Schällibaum's Nelkenöl-CoUodium genommen. Verwendet man aber dieses, so ist ein Nachfärben so gut wie ausgeschlossen, weil dabei gar zu leicht wenigstens ein Theil der Schnitte fortschwimmt. Das hat man bei Verwendung von Mayer's Gemisch nicht zu fürchten , selbst wenn dieses nach Zusatz von einigen Tropfen einer Lösung von Natrium salicylicum über ein Jahr alt geworden sein sollte. Ich pflege ein Weniges von dem Gemisch mit der Maus der Hand auf dem Object- träger zu einer dünnen gleichmässigen Schicht zu verreiben und die aufgelegten Schnitte sorgfältig anzutupfen. In letzter Zeit befolge ich dabei eine Methode, welche Herr E. Trobitius in unserem Institute zu- 0 VossEi-EK, J., diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 457. 104 Henkiiig: Metboden bei Untersuchungen an Insecteneiern. VIII, 2. erst angewandt hat: Wenn die Ränder der Schnitte zu steil empor- stehen sollten, werden sie zunäclist mit einer Nadel etwas niederge- drückt. Dann wird die Spitze des Zeigefingers mit absolutem Alkohol sorgfältig gereinigt und entfettet, und nun kann man (nach gutem Ab- trocknen) die Schnitte mit der Fingerspitze andrücken ohne befürchten zu müssen, dasg etwas am Finger haften bleibt. Die Methode ist rasch und sicher und daher nur zu empfehlen. Die Schnitte können nun beliebig nachgefärbt werden. Es ist mir niemals vorgekommen , dass dabei von den mit Mayer's Glycerin-Ei- weiss aufgeklebten irgend etwas verloren gegangen sei. Kommt es auf gute Darstellung der Chromatinsubstanz an, so hat sich bei den mit heissem Wasser abgetödteten Eiern eine Nachfärbung mit einer con- centrirten wässerigen Lösung von Bismarckbraun als sehr günstig er- wiesen. Für die Umgrenzung der achromatischen Tlieile, besonders auch jener, welche ich Arrhenoid und Thelyid genannt habe, leistet Ehrlich's Hämatoxylin vorzügliche Dienste. Auch die Anwendung von Pikrinsäure-Terpentinöl (nach P. Mayer) bei den mit Borax-Carrain gefärbten Schnitten ist sehr zu empfehlen. Mit anderen Carminen, mit Safranin, Dahlia, Gentianaviolett und wie die sonst noch anwendbaren Farbstoffe heissen mögen, habe ich nicht mehr erreicht als mit den vor- hin genannten Methoden. Das Aufkleben mit Mayer's Eiweiss gestattet, das Deckglas be- liebig oft abzulösen und die Schnitte mit irgend einem Farbstoffe aber- mals zu färben, sodass bei fraglichen Punkten jede nur irgend mögliche Auskunft erlangt werden kann. Das Ablösen des Deckglases geschieht zweckmässig in einem mit Xylol gefüllten, weithalsigen Stöpselglase, in welches der Objectträger gestellt werden kann. Dann fällt das Deck- glas schliesslich von selbst ab. Die Schnitte bewahrte ich in Xylol-Canadabalsam auf. Nach Auf- legen des Deckglases pflege ich dieses einige Zeit mit einer aufgesetzten Flintenkngel zu beschweren, damit die Balsamschicht zwischen Object und Deckglas möglichst dünn ist. V, Untersuchung des frischen Materiales. Wie ich oben bereits mittheilte , sind die Eier der Insecten (mit ganz wenigen Ausnahmen) völlig undurchsichtig. Dennoch aber kann es erwünscht sein, über den Stand der inneren Vorgänge etwas in Er- fahrung zu bringen, bevor man zu den langwierigen Operationen des Einbettens und Schneidens schreitet. Ich habe mir hierzu eine blaue VIII, 2. Henking: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. 165 Flüssigkeit hergestellt, in welcher die frischen Eier einfach zerquetscht werden. Nach Kurzem werden die Kerntheile sich mit deutlicher Fär- bung präscntiren. Diese blaue Flüssigkeit enthält: Wasser, destillirt 80 cc Glycerin 16 „ Ameisensäure 3 „ Üsraiumsäure, einprocentig 1 „ Dahlia 004 g. Auch für die Untersuchung der Hoden von Insecten hat sich diese Flüssigkeit bewährt, indem besonders die Chromosomen in Zelltheilungs- figuren alsbald sehr scharf sichtbar werden. Die frischen Hoden wer- den direct in der Flüssigkeit zerzupft, sodass dieselbe rasch überall ein- dringen kann. Die Flüssigkeit eignet sich gleichzeitig zur Aufbewahrung der be- treffenden Theilungsfiguren. Man legt das Präparat einige Tage zur Seite und umzieht nun den Rand des Deckglases mit Hilfe einer Kerze mit einem Wachsrande, behandelt überhaupt wi^e ein Glycerin-Präparat. Flüssigkeit und Präparate sind haltbar. Etwa ein Jahr alte Prä- parate zeigen die einzelnen Theile immer noch ganz gut. Die achromatischen Theile werden nicht so deutlich conservirt wie die Chromosomen, jedoch sind sie immerhin erkennbar. Am wenigsten gut erhält sich die Structur des Plasmas, indem hier bei manchen Zellen eine Quellung bemerklich wird. Im übrigen färbt sich das Plasma ebenfalls mit, nimmt sogar oft eine intensivere Färbung an als der ruhende Kern. Um so deutlicher markiren sich aber die Theilungs- figuren. Bei Untersuchung von Epithclien habe ich beobachtet, dass oft ein rasches Zerfallen in die einzelnen Zellelemente eintritt. Bei Flimmer- epithelien werden die Wimpern meist nicht erhalten. Ist somit in dieser Flüssigkeit auch kein Universalmittel geboten, so glaube ich, dass dieselbe doch gelegentlich von Nutzen sein kann, wenn man sich rasch von dem Vorhandensein von Theilungsstadien überzeugen will. Bei eingehender Untersuchung wird man natürlich immer noch die erprobten Conservirungsflüssigkeiten heranziehen müssen. VI. Künstliehe Beeinflussungen. Die Entwicklungsvorgänge in den Eiern von Agelastica alni habe ich durch künstliche Eingriffe abzuändern versucht. Sehr nahe liegt es da, die Wirkung der Schwerkraft zu modificiren. Es legt näm- lich unser Thier seine Eier in Häufchen derart auf die Unterseite von 166 Henkiug: Methoden bei Untersuchungen an Insecteneiern. VIII, 2. Erlenblättern ab, dass es dieselben neben einander auf die untere Spitze stellt. Demnach sieht jener Pol, in welchen die Samenfäden einge- drungen sind, nach abwärts. Dreht mau nun ein mit Eiern besetztes Blatt um, sodass die Unterseite nach oben schaut, so wirkt auf die Eier die Schwerkraft in umgekehrter Weise ein als bisher. Stellt man das Blatt dagegen senkrecht auf, so beiludet sich die Längserstreckung der Eier parallel mit der Erdoberfläche, — In Bezug auf das Ausschlüpfen der Larven will ich hierzu gleich bemerken, dass die abnorme Aufstellung der Eier keine Verhinderung oder auch nur bemerkenswerthe Verzöge- rung veranlasst hatte. Das Eindringen der Samenfäden zu beeinflussen, wie es die Ge- brüder Hektw^ig mit so überraschendem Erfolge bei Echinodermen ver- mocht haben, gelingt hier nicht, weil die Eier im Moment des Ablegens und noch im Innern des Mutterthieres die Spermatozoen aufnehmen. Die bereits abgelegten Eier mit Flüssigkeiten zu behandeln, in welchen Gifte und dergl. aufgelöst sind, dürfte auch nur einen zweifelhaften Erfolg haben, da die Eier eine sehr feste Schale besitzen und ausserdem noch einen Ueberzug eines Drüsensecretes. Ich habe demnach zu Hülfsmitteln gegriffen, welche auf die weichen Eier sofort einen Einfluss haben mussten. So brachte ich die Eier so- fort nach der Ablage oder auch erst nach einstündiger normaler Ent- wicklung für 2 Stunden unter den Recipienten einer Luftpumpe bei einem Luftdruck von 360 mm oder auch nach 2^2 Stunde ruhiger Ent- wicklung für die Zeit von fünf Stunden in den fast völlig luftleeren Raum, wobei allerdings ein Ansteigen bis auf 360 mm Druck langsam stattfand. Anderseits habe ich auch einen erhöhten Druck von 2 oder auch 2y> Atmosphären angewandt. Zu dem Zwecke stand mir ein Kupfer- kessel zur Verfügung, auf welchen ein dicke Glasplatte luftdicht auf- geschraubt werden konnte. In ihn legte ich sofort nach der Ablage die Eier. Der Kessel hatte zwei mit Hähnen vcrschliessbare Eiogangs- röhren. Die eine derselben setzte ich mit Hülfe von Gummi- und Glas- röhren mit einer dickwandigen Vorlegeflasche in Verbindung. Aus der Vorlegeflasche führte ein langes Steigrohr senkrecht nach oben. Die Vorlegeflasche war mit einem neuen, doppelt durchbohrten Gummistopfen verschlossen. Ich hatte denselben gut eingeölt und durch Draht gut auf der Flasche befestigt. In das Steigrohr füllte ich nun mit Hülfe eines darauf befestigten kleinen Trichters soviel Quecksilber, dass es 760 mm resp. 1140 mm hoch über dem Niveau des Quecksilbers der Vorlegeflasche im Steigrohr VIII, 2. Henkln g: Metlioden bei Untersuchungen an Insecteneiern. 167 stand. Damit war ein Druck von 2 resp. 2 '/^ Atmospliären (=^ 1520 bis 19UU mm) erzielt, welcher sich natürlicli durch die Kehren in den Kupferkessel und auf die Eier fortpflanzte. Der ruliige Stand des Queck- silbers bis zu der markirten Stelle des Steigrohres zeigt an, dass der Apparat luftdicht verschlossen ist. Man darf jedoch nicht versäumen, die Gummiverbindungeu der Glasröhren durch darum gewickelte Zeug- stücke zusichern; denn sonst bläht sich der Gummischlauch kugelig auf bis zum Platzen. Die über die Glasröhren gezogeneu Stücke des Gummischlauches müssen durch fest darum geschnürte Bindfäden eine grössere Reibung erhalten. Geschieht das nicht, so fliegt bei höherem Druck sicher irgendwo eine Glasröhre aus dem Gummischlauche heraus. Ich habe bereits kurz, darüber berichtet, dass die für 2 Stunden mit erhöhtem Druck behandelten Eier sich nach der Conserviruug durch starke Strahlungeu am Archenoid und Phelyid auszeichneten. Andere Eier brachte ich in ein Gemisch von zwei Drittel Luft und ein Drittel Sauerstoff auf 2 oder 3 Stunden entweder gleich nach der Ablage oder erst nach 2 Stunden, wieder andere in reine Kohlensäure für 50 Minuten. Ich hatte die Gase in einem gewöhnlichen Glaskolben von etwa 1 • j Liter Inhalt. Ich befestigte die FAer auf einem Kork- scheibchen entweder in normaler oder umgekehrter Stellung, steckte in das Scheibchen einen genügend langen gebogenen Draht, dessen anderes Ende ich in die Innenseite des zum Verschluss des Kolbens dienenden Korkstöpsels drückte. Alsdann führte ich das Korkscheibchen mit den Eieru in den unter Wasser geöffneten Kolben ein. [Eingegangen am 23. Juni 1891]. 168 Fick: Zur Technik der Golgi'sclien Färbung. VIII, 2. Zur Technik der Golo'i'sclien Färbiino\ o o Von Dr. Rudolf Fick, Proseutor am Anatomischen Institut zu Würzburg. Unter obigem Titel erschien im Bd. VII, 1890, H. 1 p. 26 dieser Zeitsclirift eine Mittlieiliing von Paul Samassa in München, worin der Verf. das Verderben der GoLGi'schen Präparate dnrch Auflegen eines Deckglases dem Auftreten eines Diffusionsstromes, der die Silberkörnchen heransschwemme, zur Last legt. Er sagt; „Die Verdunstung des Stoffes, in dem der Canadabalsam gelöst ist, geht bei Bedeckung des Schnittes mit einem Deckglas sehr langsam vor sich, nachdem immer nur die ge- ringe Fläche des Balsams am Rande in der Lage ist, den Lösungsstoff, also z. B. Toluol verdimsten zu lassen. Es wird sich am Rande des Deckglases immer der Toluol-ärmste, im Schnitte, der ja eine gewisse Menge von Toluol mitbringt, der Toluol-reichstc Canadabalsam vorfinden und von dort aus gegen den Rand zu diffundiren. Je weiter nun der Rand des Deckglases vom Schnitte entfernt ist, desto grösser wird die Anfangsgeschwindigkeit, somit auch die lebendige Kraft des Diffiisions- stromes sein müssen, um den Rand zu erreichen, da ja der grösste Theil der lebendigen Kraft darauf verwendet wird, die der Bewegung ent- gegenstehenden Hindernisse zu überwinden, und die Grösse dieser Hin- dernisse neben anderen Umständen offenbar auch von der Länge des Weges abhängig ist. Schliesslich wird dieser Strom dann aufhören, wenn die Differenz des Toluolgehaltes am Rande und in der Mitte nicht mehr genügend gross ist, um einen derartigen Strom zu erzeugen. Ganz anders stellen sich die Dinge, wenn der Schnitt nach Angabe Golgi's nicht mit einem Deckglas bedeckt wird : hier steht der Balsam mit einer im Vergleich zum früheren Fall ausserordentlich grossen Fläche in Be- rührung ; die Verdunstung geht viel reichlicher vor sich ; die Hauptsache scheint mir aber zu sein, dass die Strecke, welche der Diftusionsstrom vom Schnitt bis zur Oberfläche des Balsams zurückzulegen hat, eine sehr kleineist, der Widerstand ist daher gering, die Anfangs- geschwindigkeit und die lebendige Kraft des Stromes also auch". VIII, 2. Fick: Zur Technik der üolgi'schen Färbung. 169 1. Diffusionsverhältnisse. Dagegen ist zu bemerken, dass Abnahme des „Widerstandes" natürlich den Diffnsionsstrom nicht schwä- chen sondern verstärken würde; dass wir aber überhaupt über die Widerstände bei der Diffusion nocli gar nichts wissen; ferner, dass es eigenthümlich erscheinen muss, bei dem Diftusionsstrom wie bei einem lebenden Wesen anzunehmen , dass die Anfangsgeschwindigkeit, ge- wissermaassen die bewusste Anstrengung das Ziel zu erreichen, grösser sei, wenn auf dem Wege viele Hindernisse sind, als wenn der Weg leicht ist; sodann dass die „Anfangsgeschwindigkeit" bei dem ganzen Vorgang überhaupt nicht in Betracht kommt. Die Stärke des Diff'usions- stromes hängt vielmehr nach dem von A. Fick aufgefundenen Grund- gesetz der Diff"usion* lediglich ab von der Concentrationsabnahnie der einander benachbarten Schicliten und der Diffusionsconstante der be- treffenden Flüssigkeit. Die Stromstärke ist = dem Product aus diesen beiden Factoren. Unter Diffusionsconstante verstehen wir aber die Menge des betreffenden Salzes oder gelösten Körpers, die in der Zeit- einheit (24 Stunden) die Querschnittseinheit (1 (I]mm) durchwandert, wenn die Concentrationsabnahme = 1 ist, d. h. wenn auf 1 mm Distanz der Querschnitte die Concentration von vollständiger Sättigung auf Null ab- nimmt. Diese Constante hängt nur ab von der Natur des gelösten Körpers, der Natur des Lösungsmittels und der Temperatur. Die Concentrationsabnahme ist aber in unserem Fall natürlich bei unbedecktem Präparat in der Richtung nach oben, wo die von Toluol fortwährend befreite Balsamschicht unmittelbar über der Toluol -gesättigten liegt, bedeutend stärker, als die Concentrationsabnahme in der Richtung nach den Seiten hin, wo der Uebergang von der Concentration Null bis zur Sättigung auf eine grössere Wegstrecke vertheilt ist. Also ist die Stärke des Diffnsionsstromes in der Riclitung nach oben bedeutend grösser als in der Richtung nach den Seiten. Bei einem mit Deckglas bedeckten Präparat wird demnach der entstehende Diffusionsstrom bei weitem schwächer sein als bei einem ohne Deckglas. Es müssten daher die Silberkörnchen , wenn anders sie vom Diffnsionsstrom mitgeführt werden, leichter bei unbedecktem als bei bedecktem Präparat heraus- geschwemmt werden. Allerdings würden die Körnchen bei unbedecktem Präparat meist senkrecht nach oben geführt, könnten also möglicher- weise scheinbar noch am selben Orte liegend gesehen werden wie vor- her. Ausserdem muss übrigens darauf aufmerksam gemacht werden, dass natürlich nie ein Diftusionsstrom allein stattfindet, sondern stets ') Fick, A., lieber Diffusion. (Poggenuoiui 's Ann. Jan. 1855.) 170 Fick: Zur Technik der Golgi'schen Färbung. VIII, 2. ein zweiter entgegengesetzt gerichteter, d. li. in unserem Falle ein Strom von Canadabalsam an die Stellen, wo vorher Toluol war, sodass die Körnchen also auch in diesem Sinne wandern könnten. Aber der Diffusionsstrom ist ja überhaupt kein Flüssigkeitsstrom, keine hydrodynamische Strömung, bei der sich Flüssigkeitsmassen an- einander verschieben und eventuell feste Tlieilchen mitbewegen können, sondern lediglich eine Bewegung der einzelnen Moleküle selbst, sodass von einer Mitbewegung in bestimmter Richtung fester Körper, wie Silberkörnchen und dergleichen die Aggregate von vielen Millionen von Molekülen darstellen, nicht die Rede sein kann. Sollte das Verderben der GuLGi'schen Präparate bei Deckglasbedeckung wirklich auf einer Herausschwemmung des Silberuiederschlages beruhen, so müsste man viel eher an ein mechanisches Herauspressen als an den Eintiuss von Diffusionsströmen etc. denken. 2. Druck des Deckglases. Beim Auflegen eines Deckglases bei zwischengeschichteter Flüssigkeit entstehen ja in der That mächtige capillare Anziehungskräfte (sogenannte Adhäsionskräfte '), die z. B. be- wirken, dass ein Deckglas bei zwischengeschichteter Flüssigkeit nicht abfällt vom Objectträger beim Umstürzen des letzteren, und dass es schwer ist, das Deckglas wieder abzunehmen ausser durch Verschieben. Diese Kräfte sind um so grösser, je dünner die zwischengeschaltete Flüssigkeitsschicht. Von ihrer Grösse kann man sich leicht überzeugen, wenn man einen Objectträger einfach behaucht, mit einem Deckglas be- deckt und dieses nun zu entfernen versucht. Es gelang mir ohne be- sondere Veranstaltungen und Vorsichtsmaassregeln an einem solchen nur durch Anhauchen am Objectträger adhärirenden (18 qmm) Deck- gläschen beinahe ein Kilo aufzuhängen, ohne dass es dadurch ab- abgerissen wurde. Man könnte sich demnach vorstellen, dass auf dem mit einem Deckglas bedeckten Präparat stets ein beträchtlicher Druck lastet. Das ist aber doch nicht richtig, denn einmal treten diese ge- waltigen, scheinbaren „capillaren Anziehungskräfte" erst auf bei einem Versuch das Deckglas vom Objectträger zu entfernen, und zweitens ist die Entfernung des Deckglases vom Objectträger bei zwischengeschaltetem Präparat eine viel grössere als bei einfacher Behauchung, und desshalb sind die Adhäsionskräfte schon an und für sich hier bedeutend kleiner. Natürlich wäre, bevor man von diesen Andeutungen in praktischer Be- ») Genau genommen handelt es sich hier nicht um die Erscheinung reiner Adhäsionskräfte, sondern um Kräfte, die bei der Rcibimg von Flüssigkeits- theilchen aneinander auftreten. Vni, 2. Fick: Zur Technik der Golgi'schen Färbung. 171 Ziehung Gebrauch machen könnte, vorerst die Thatsache festzustellen, ob denn wirklich das Silber bei Ueckglasbedockung der Präparate unter dem Deckglas hervor ausgeschieden wird. Beim Durchmustern der mir zugänglichen durch Deckglas ver- dorbenen GoLGi-Präparate fand ich nun aber nirgends einen Anhalts- punkt für die Richtigkeit der Behauptung Samassa's. Die Art und Weise des Verderbens schien mir durchaus gegen die Annahme, dass dasselbe durch Herausschwemmen der Silberkörnchen bedingt sei, zu sprechen, denn es müsste sich in diesem Falle doch wohl um eine totale oder partielle einfache Entfärbung handeln, während man den Zustand entschieden mit Verfärbung bezeichnen muss. Die Zellen machen den Eindruck als sei der Niederschlag in ihnen theilweise zerdrückt oder zerflossen. Das erstere Hesse sich also wohl vielleicht aus dem oben besprocheneu Druck des Deckglases erklären. Die Richtigkeit dieser Annahme müsste sich leicht erweisen lassen : Die Präparate müssten das Deckglas vertragen, wenn es unterstützt würde. Bei der Ausführung dieses Experimentes zeigte sich aber das Gegentheil. Ich stützte bei 12 Präparaten das Deckglas in der ver- schiedensten Weise, höher oder niedriger (bis über 1 mm hoch) durch Wachs-, Kitttröpfchen oder Glasstückchen; die Präparate verdarben ebenso schnell wie die unter den gleichen licdingungen gehaltenen ControUpräparate mit ungestütztem Deckglas. 3. Feuchtigkeitscinfluss. Zur Beantwortung der Frage, ob das Verderben der Präparate auf einem Zerfliessen des Silbernieder- schlages vielleicht in Folge von Feuchtigkeitseinwirkung beruhe, stellte ich in der Weise Versuche an, dass ich eine Reihe von Präparaten in eine „feuchte Kammer" verbrachte, eine andere in einen Exsiccator (Schwefelsäureexsiccator). Es zeigte sich nun, dass unter Ein w irkuug der Feuchtig- keit sämmtliche Präparate rasch verdarben. Ich beschickte die feuchte Kammer mit folgenden Präparaten: 1) Rasirmesserschnitte direct nach dem Schneiden aus der Silberlösung heraus i n aqua destillata hineingelegt ohne Deckglas (Beginn des Ver- derbens nach 2 bis 3 Wochen). 2) Mikrotomschnitte, die in Xylol auf- bewahrt waren, von diesem durch Alkohol befreit, dann in HoO gelegt ohne Deckglas (Beginn des Verderbens nach 3 bis 4 Wochen). 3) Mit Xylolcanadabalsam in gewöhnlicher Weise bedeckte ohne Deckglas, nur in die Kammer, nicht direct ins Wasser (Beginn des Verderbens nach 4 bis 5 Wochen). 4) Schnitte in Balsam mit Deckglas ebenso (Beginn des Verderbens nach 3 bis 4 Wochen). 5) Schnitte in Balsam 172 F ick: Zur Technik der Golgi'schen Färbung. VIII, 2. mit gestütztem Deckglas (Beginn des Verderbens nach 3 Wochen). Daraus geht hervor, 1) dass auch die Bedeckung mit Lack die Präparate nicht sicher vor Feuchtigkeit schützt. In der mit Wasserdampf gesät- tigten feuchten Kammer trübt sich nach wenigen Tagen der Lack intensiv, und man kann mit dem Mikroskop constatiren, dass die Trübung durch feinste Wasserbläschen bedingt ist, die allmählich bis zu den Nerven- zellen und Capillaren vordringen und sich an sie reihenweise ansetzen. Der Lack ist übrigens durch Stehen an der Luft oder leichtes, flüchtiges Erwärmen leicht aufzuhellen, die Wasserbläschen verdunsten (wenn kein Deckglas auf dem Präparat liegt) weit schneller, als sie in den Lack eingedrungen sind. Im Beginne des Verderbens sehen die Präparate genau so aus wie die bloss unter dem Deckglas verdorbenen, es bilden sich um die Zellen und Niederschläge gelbe bis gelbbraune Höfe, und allmählich gewinnen die Höfe immer mehr den Anschein von Zerfliessungs- oder Abfärbungs- zonen (bei Präparat 3) war dies nach 7 Wochen der Fall). Die Con- turen der Zellen fangen an sich zu entfärben zu Gunsten der Unterlage, was namentlich mit starker Vergrösserung zu constatiren ist, und schliess- lich sieht man, wie zuerst die Zellfortsätze und dann auch die Zellkörper selbst sich vollständig aufhellen und nurmehr leicht gelblich gefärbt erscheinen, man sieht zugleich, wie die Höfe ausgebreiteter werden und endlich ganz verschwinden (bei Präparat 3) nach 5 Monaten, bei 4) nach 22 Wochen, bei 5) nach 18 Wochen). Einzelne Stellen des Prä- parates halten etwas länger Stand , sodass z. B. im Präparat 3 auch jetzt nach 27 Wochen noch einzelne ganz schwarze oder in der Mitte noch schwarze Zellen zu finden sind. Die ohne Lackeinbettung direct in H^ 0 gelegten Präparate entfärben sich ohne auffällige, ver- färbte Höfe, es bilden sich dabei höchstens zarte Andeutungen eines röthlichen Scheines um die Zellen, der Farbstoff findet nicht wie im Lack ein Hindernis« für seinen Austritt. Bei diesen Präparaten geht die Entfärbung soweit, dass man allmählich gar nichts mehr von den Zellen und Capillaren etc. sehen kann. Es handelt sich dabei also offenbar um eine Lösung des die Zellen färbenden Niederschlages in Wasser und ein Herausdiffundiren der Lö- sung zunächst in die Umgebung und endlich ganz aus dem Präparat heraus, wenn für gehörige Durchfeuchtung des Präparates gesorgt ist. Die Farbe der Lösung scheint gelblich zu sein. Wie hat man sich aber den Unterschied zwischen den Deckglaspräparaten und den un- bedeckten zu denken, wenn man annehmen muss, dass das Verderben auf einer gänzlichen oder theilweisen Auflösung des Niederschlages in VIII, 2. Fick: Zur Technik der Golgi'schen Färbung. 173 Wasser berulit ? Man könnte daran denken, dass das Deckglas gewisser- maassen Wasser aus der Luft anziehe und dadurch scliädlich wirke. Das wird aber durch die Thatsache widerlegt, dass auch diejenigen Deckglaspräparate verderben , die im Exsiccator vor Feuchtigkeits- anziehung absolut sicher geschützt wurden. Ich prüfte die Sicherheit des F"euchtigkeitsabschlusses dadurch, dass ich in den Exsiccator ge- glühtes Kupfervitriol brachte, das sich absolut weiss erhielt. Die Deck- glaspräparate verdarben im Exsiccator ebenso rasch als bei gewöhnlicher Aufbewahrung (also etwa nach 8 Wochen Beginn der Verfärbung). Die Feuchtigkeit muss demnach schon vorher im Präparate gewesen sein; es ist nun ganz wohl denkbar, dass beim Entwässern des Präparates mit Alkohol absolutus vor der Lackeinbettung das Präparat im grossen und ganzen ziemlich wasserfrei geworden ist, sodass sich z. B. das so sehr empfindliche Xylol oder der Xylollack nicht trübt, dass aber trotz- dem in den Zellniederschlägen und namentlich in den dickeren Nieder- schlagsklumpen noch Feuchtigkeit enthalten ist, denn an solchen zeigt sich die Hofbildung fast immer zuerst und am intensivsten. Bedeckt man nun das Präparat mit einem Deckglas, so ist die Feuchtigkeit ab- gesperrt, kann nicht allmählich verdunsten wie beim Einlegen ohne Deckglas, und wird infolge dessen allmählich den Niederschlag lösen, ihn zerfliesseu lassen. Man ist gewiss, namentlich im Hinblick auf die oben mitgetheilte Grösse des „Adhäsionsdruckes", sehr geneigt anzu- nehmen, dass bei dem Zerfliessen vielleicht auch der Druck des Deck- glases, der bei der allmählichen Lackerhärtung immer mehr zunimmt, mitwirke; dem gegenüber stehen aber die oben angeführten Versuche mit dem Stützen der Deckgläser, das sich ja als unwirksam erwies. Nach diesen Versuchen könnte man hoffen, die Präparate durch recht vollständige Entwässerung mittels Alkohol absolutus „Deckglas-beständig" zu machen, das ist aber leider nicht möglich, da die Präparate lange Einwirkung des absoluten Alkohols nicht vertragen; die Niederschläge zerbersten, zerfallen zu lauter feinsten Körnchen. Oefter habe ich auch bereits die Verrauthung aussprechen hören, dass die langsame Verdun- stung des Xylols bei Deckglasbedcckung die Ursache sei, aber diese Ansicht wird dadurch widerlegt, dass sich die GoLGi-Präparate bekannt- lich in reinem Xylol aufbewahrt vorzüglich halten. 4. Lichteinf luss. Da die Silberpräparate sich in vielen Be- ziehungen lichtempfindlich erweisen, so stellte ich auch hierüber mit GoLGi-Präparatcn Versuche an, indem ich Präparate ohne, mit und mit unterstütztem Deckglas in eine sorgfältigst verwahrte Dunkelkammer brachte und nur alle 8 Tage thunlichst schnell durchmusterte. Es 174 Pick: Zur Technik der Clolgi'schen Färbung. VIII, 2. zeigte sich, tlass die Präparate im Dunkeln in- oder ausserhalb eines Exsiccators in der Tliat weit langsamer verdarben als im Hellen; die Säume oder Höfe sind bei den Dunkel-Deckglaspräparaten noch jetzt nach 27 Wochen relativ schwach und bei einzelnen Präparaten sogar viele Zellen noch immer frei. Den Einfluss des Lichtes suchte ich auch noch durch folgendes Experiment zu erproben : ich setzte verschiedene Präparate ohne, mit und mit unterstütztem Deckglas direct der Sonne aus, beklebte aber die eine Hälfte jedes Präparates mit schwarzem Papier. Das Präparat ohne Deckglas blieb ganz intact. Die Deckglaspräparate Hessen schon nach zweimaligem der Sonne Aussetzen deutlich intensive Höfe in dem nicht geschützten Theile erkennen, während in dem vor der Sonne geschützten Theil Höfe noch kaum zu ei'kennen waren, und noch jetzt nach oft- maliger Sonnenbestrahlung ist der Unterschied in der Hofinteusität in beiden Theilen deutlich wahrnehmbar. Es läge hier demnach die auf- fallende, allerdings theoretisch durchaus mögliche Thatsache einer Be- förderung des Lösungsvorganges durch Licht vor. Der Einfluss der Wärme kann den Unterschied kaum bedingen , da der vom schwarzen Papier bedeckte Theil der Präparate jedenfalls von der Sonne stärker erwärmt wurde als der unbedeckte. 5. Wärmeeinfluss. Ueberdies habe ich auch noch den Einfluss der Wärme auf die GoLGi-Präparate untersucht; ich legte Präparate ohne, mit und mit gestütztem Deckglas andauernd in eine Temperatur von GO^bis 70", auf kürzere Zeit auch bis 100": das Präparat ohne Deckglas nahm keinen Schaden, das Deckglaspräparat war bereits nach weniger als 24 Stunden in der bekannten Weise verdorben mit intensiven gelbbraunen, sehr circnmscripten Höfen. Das Präparat mit gestütztem und zwar beson- ders hoch gestützten Deckglas war weniger verdorben, nur die dicken Niederschlagsklumpen wurden gesäumt , vielleicht weil bei dem über l'ömm betragenden Spalt zwischen Deckglas und Objectträger doch eine Verdunstung der Feuchtigkeit vor dem Zerfliessen stattfinden konnte. Der Lack wird durch die Hitze gelb, aber diese Farbe stört die Durchsichtig- keit ebensowenig als die gelbe Farbe dicker Lackschichteu im kühlen Zustande, wie z. B. im Lackvorrathsglas. Dass die Hitze das Verderben durch Auflösung beschleunigt, ist von vorneherein zu erwarten, weil in der Hitze natürlich der Lösungsprocess des Niederschlages in der mit- gebrachten Feuchtigkeit schneller vor sich geht, wenn anders diese letztere an schneller Verdunstung durch Deckglasbedeckung hintange- halten wird, während ein unbedecktes Präparat durch die Hitze am schnellsten entwässert und so vor späterem Verderben durch mitge- VIII, 2. Fick: Zur Tecliiiik der Golgi'scLen Färbung. 175 braclite Feuclitigkeit am besten geschützt wird. Eid solches durch vorsichtiges Erhitzen entwässertes freies Lackpräparat kann dann ohne Schaden nachträglich mit einem Deckglas bedeckt werden, indem man auf den erhärteten Lack noch einmal einen Tropfen flüssigen Lack bringt; auftretende Sprünge bei zu schneller Abkühlung lassen sich durch Xylol wieder heilen. Ich erwähnte oben „nachträgliches Verderben", denn, und das möchte ich betonen, man findet auch bei sehr vielen nicht mit Deckglas bedeckten GoLGi-Präpa- raten, die anfänglich tadellos waren, später eine zarte oder intensivere gelbe Säumung der Zellen und eine Gelbfärbung des Grundes auftreten (letztere ist vielleicht auf Nachdunkelung im Präparate zurückgebliebenen Kaliumbichromates zu beziehen). Ich habe das durch die Güte des Herrn Geheimrath von Kollikek selbst an Originalpräparaten von Herrn Golgi und Herrn Ramön y Cajal zu constatireu Gelegenheit gehabt. 6. Chemismus der Färbung. Man könnte bei der Verfärbung der Zellen und Niederschläge, die durch das Auflegen eines Deckglases in so hervorragender Weise begünstigt wird, eventuell auch an eine chemische Veränderung des Niederschlages denken: Schwerer zu er- klären wäre eine solche Umsetzung, wenn, wie die Mikroskopiker bisher anzunehmen scheinen, die schwarzen Niederschläge metallisches Silber, das durch die Zellen aus den Silbersalzen reducirt sei, wären, leichter begreiflich, wenn, wie die Chemiker das von der Schwarzfärbung der Chlorsilberniederschläge beweisen, diese Farbe durch unvollständig re- ducirte Silberverbindungen bedingt wird. In unserem Falle hätte man an theilweise redncirte (ihres Chromgehaltes theilweise beraubte, „chromärmere") Silberchromate resp. Dichromate zu denken. So bildet sich, wenn man zu Kaliumdichromat Argentum nitricum zufügt (das Natriumsulfat der MüLLEß'schen Flüssigkeit kann auch bei der Golgi- schen Methode ohne Nachtheil weggelassen werden) der bekannte schön goldrothbraune Niederschlag von Silberdichromat Ko Cra 0, + 2 Ag N O3 = Ag, Cra 0, + 2 K N 0, ; filtrirt man davon ab und fügt zu dem Filtrat abermals AgNO.j, so erhält man eine schmutzigbraune bis schwarzbraune, vielleicht chrom- ärmere Silberverbindung. Dass der Niederschlag in den Zellen kein metallisches Silber ist, wird durch den Umstand bewiesen, dass er sich in thioschwefelsaurem Natrium (Na., S., O.i „unterschwetligsaures Natrium") vollständig löst. Die schwarze Farbe der Zellen und der Incrnstationen, Capillaren etc. in den GoLGi-Präparaten besteht nur bei durchfallendem Licht, bei auf- fallendem Licht sehen die Zellen etc. rothbraun aus, geradeso wie der 176 F ick: Zur Technik der Golgi'sclien Färbung. VIII, ± Niederschlag, der bei ihrer Färbung in der Kaliumdichroraatlösung, mit der sie durchfeuchtet waren, erzeugt wurde, und anderseits kann man sich leicht überzeugen, dass dieser staubförmige Niederschlag von Ag2 Crg O7 (anders die Krystalle, die aus saurer Lösung oft in langen Nadeln anschiessen) bei durchfallendem Licht ebenfalls ganz schwarz aussieht, noch bis zu ganz feineu, erst mit starker Vergrösserung deut- lich erkennbaren Körnchen ] nur die allerfeinsten Körnchen zeigen röth- lichen Schimmer, wie wir ihn ja auch an den nach Golgi gefärbten Zellausläufern und Capillaren an den dünnsten Stellen häufig finden ; an Originalpräparateu von Golgi sah ich auch einige Zellen selbst nicht schwarz, sondern fast durchsichtig röthlich gefärbt. Man kann demnach sehr wohl annehmen, dass die „schwarze Farbe" der Zellen bei durch- fallendem Licht durch den rothbraunen Niederschlag Agg Crj 0^ 0 = n— oAgAgo— n =0 0 = \jr 0 \Jr = 0 selbst, nicht erst durch eine Reduction desselben durch die Zellen be- dingt ist. Der Niederschlag selbst ist aber wirklich, wie wir es nach den Untersuchungsresultaten bei den Präparaten annahmen, im Wasser mit gelblicher Farbe löslich. In kaltem Wasser geht der Lösungsprocess nur langsam vor sich, beim Erhitzen rasch ; um sich davon zu über- zeugen, braucht man nur den Niederschlag nach sorgfältigem Auswaschen des etwa noch anhaftenden Kaliumdichromat und Silbernitrat in Hj 0 aufzunehmen und etwas zu kochen, so bemerkt man, dass das Wasser gelblich wird, und wenn man nun abfiltrirt, so findet man in dem Filtrat bereits etwas Silber gelöst, wie sich durch Fällung mit H Cl und Wieder- auflösung durch NH3 leicht nachweisen lässt. Dabei findet übrigens eine theilweise Zersetzung der Verbindung statt, bei der Chromsäure frei wird, üeberdies liefert der Niederschlag, nach Art der Präparate be- handelt, mikroskopisch ganz ähnliche Bilder: bei längerer Wasserein- wirkung z. B. auch gelbbraune Zerfliessungshöfe. Li Alkohol (verdünnt und absolut), Xylol etc. ist der Niederschlag unlöslich, daher sich auch diese Flüssigkeiten zum Conserviren der GoLGi-Präparate vor dem Ein- legen eignen (mit Ausnahme des absoluten Alkohols aus dem oben an- geführten Grunde). Was endlich die P^ingangs erwähnte Theorie Samassa's betrifft, so hatte ich durch die Güte des Herrn Dr. Samassa, der mir das be- treffende Präparat, an dem er seine Beobachtung machte, zum näheren Studium überliess, Gelegenheit, dieses Präparat genauer zu untersuchen: Man sieht in der That an demselben ausserhalb des Präparates zahl- VIII, 2. Fick: Zur Tecbnik der Golgi'schen Färbung. 177 reiche feinste schwarze Körnchen, aber nicht etwa dementsprechend farblose, helle Stellen im Präparat, sondern dasselbe macht ganz den intensiv gelbbraun-braunschwarz verfärbten Eindruck mit seinen Höfen um alle Zellen etc. herum wie ein gewöhnliches Deckglas-Präparat; die schwarzen Körnchen erscheinen als accessorischer Randniederschlag, der vielleicht am Präparat vom primären Niederschlag hängen geblieben ist, denn bei auffallendem Licht erscheint auch er rothbraun. Dass das Verderben auch bei dem Präparat Herrn Dr. Samassa's auf Feuchtig- keitseinwirkuug beruht, gewinnt noch an Wahrscheinlichkeit, weil über einigen Theilen des Präparates sich unter dem Deckglas Wassernebel im Lack zeigen; hier liegt daher wohl unzweifelhaft der Fall vor, dass das Präparat nicht ganz entwässert war. Unter den 41 Präparaten, die ich unter 33 verschiedenen Bedingungen conservirt und zum über- wiegenden Theil 7 Monate lang beobachtet habe, scheint mir keines der oben aufgestellten und im Einzelnen begründeten Ansicht vom Verderben der GoLGi - Präparate bei Deckglasbedeckung zu widersprechen. 7. Einbettung auf dem Deckglas. "Um übrigens den Nach- theil der unbedeckten Präparate zu umgehen, kann man einfach das Präparat auf ein Deckglas in Lack einbetten und nun das Deckglas durch Kitt- oder Wachströpfchen gestützt auf einen Objectträger auf- legen, beziehungsweise mittels der Tröpfchen aufkleben ; dann kann man von der Rückseite her das Präparat ohne Gefahr mit den stärksten Vergrösserungeu untersuchen, ohne dass man besondere Objectträger aus Holz oder Pappe mit Versenkungen benöthigt. Natürlich muss das Präparat frei über dem Objectträger hängen; sowie eine Lackschicht Objectträger und Deckglas verbindet, haben wir die alten Verhältnisse wieder, die Feuchtigkeit kann nicht verdunsten, das Präparat verdirbt in der That nach einiger Zeit; es entspricht dann ja ganz den Präpa- raten „mit gestütztem Deckglas", nur dass in diesem Fall das Präparat am Deckglas hängt, im anderen auf dem Objectträger aufliegt. 8. Ort des Niederschlages. Der Nachweis, dass die Golgi- sclie „Schwarzfärbung" der Zellen höchst wahrscheinlich durch Silber- dichromat selbst hervorgerufen wird, erlaubt einen Schluss auch auf die Art der Färbung : Bei dieser Methode wird offenbar nur da und überall da Silberdichromat erzeugt, wo vorher Kaliumdichromat gewesen. Hat man demnach anzunehmen, dass eine Kaliumdichromatlösung nicht acht färbt, d. h. mit den Geweben keine chemische Verbindung eingeht, was bei der leichten Auswaschbarkeit des Kaliumdichromates aus den Geweben durch H2O sehr wahrscheinlich ist, sondern vielmehr nur in die Molecularinterstitien eindringt, und auch das geschieht ja nur relativ Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 2. 12 178 Fick: Zur Technik der Golgi'schen Färbung. VIII, 2. langsam, so entstellt natürlich auch der Silberdichromatniederschlag nur in den Molecularinterstitien, z. B. auch denen innerhalb der Zellen, könnte aber höchstens erst secundär eine chemische Verbindung mit dem Zellprotoplasma selbst eingehen. Ich habe auch Versuche über die Färbbarkeit der Wolle, des Leinen und des Papiers nach Goloi's Me- thode angestellt und fand, dass an den Wollfasern sich nur an der Peripherie der Niederschlag ansetzt, ebenso au den Fasern des Papiers, beim Leinen jedoch an einzelnen Stellen in die Fasern in Form von kleinsten Körnchen (nicht massigen Niederschlägen) eingedrungen er- scheint. Würzburg, Juni 1891. [Eingegangen am 3. Juli 1891.] Vlir, 2. Kleinere Mittbeilungen. I79 Kloinere Mittheiluno-eD. Ein neuer Apparat zum Zeichnen seh wach er Vergrösserungen. Von Dr. Ludwig E(lini2;er in Frankfurt a. M. Hierzu ein Holzschnitt. Jeder, der längere Erfahrung; in mikroskopischen Arbeiten hat, weiss, dass die Zeichenapparate wesentlich für schwache und mittlere Vergrösserungen gebraucht werden. Umrisszeichnungen, wie sie die reconstruirende Methode, wie sie die Entwicklungsgeschichte und die Anatomie des Centralnervensystemes brauchen, bilden die häufigste Auf- gabe, welche diesen Apparaten gestellt wird. Ebenso bekannt dürfte es sein, dass ein längeres Zeichnen an den gebräuchlichen, meist auf der Anwendung des Prismas beruhenden Apparaten sehr ermüdend ist. Ich benutzte, wie wohl Viele, deshalb zum Zeichnen bei mittleren und schwachen Vergrösserungen immer das Scioptikon. Der Wunsch einen einfacheren Apparat zu besitzen, der das Gleiche leistet, der also das Bild direct auf Papier so projicirt, dass es nur mit dem Bleistift nach- zufahren ist, hat zunächst zu dem Gedanken geführt, ein einfaches Scioptikon mit sehr gutem optischen Apparate zu bauen und vor die projicirende Linse einen Spiegel zu stellen, so dass das Bild auf die Tisch- platte geworfen wird. Auch dieser Gedanke ist wohl nicht neu. Es zeigte sich aber, dass bei einem solchen Apparate das Präparat immer eingeklemmt senkrecht stehen muss, dass Verschiebungen, wie sie ja beim Zeichnen von Schnittserien immer nöthig werden, rasches Durch- sehen etc. nur schwer sich bewerkstelligen lassen. Dcsshalb wurde der eingeschlagene Weg verlassen und versucht, ein neues Instrument her- zustellen, welches die freie Bewegung des horizontal einfach auf einem 12* 180 Kleinere Mittheilungen. VIII. 2. Objecttiscb liegenden Präparates ermöglichen sollte. So ist nnter frennd- licher Beiliülfe des Herrn Leitz in Wetzlar ein Zeichenapparat zn Stande gekommen, der folgendermaassen gebaut ist: Auf polirter Holzplatte, welche zugleich als Zeichentisch dient, erhebt sich ein Holzstativ. Dieses trägt eine horizontale Röhre, welche vorn durch eine Sammellinse, hinten durch einen im Winkel von 45 Grad stehenden Spiegel geschlossen ist. Die Strahlen einer Lampe werden durch die Linse auf dem Spiegel concentrirt. Durch eine Oeffnung unter dem Spiegel fällt das Licht dann nach abwärts auf einen Objecttiscb. Dieser ist, ebenso wie ein unter ihm angebrachter Lupenhalter, verschieb- bar. So entsteht auf der Tischplatte ein objectives Bild von Präparaten, die auf den Objecttiscb gebracht werden. Dasselbe ist bei guter Lampen- beleuchtung ausserordentlich scharf und kann direct auf untergelegtem Papier nachgefahren werden. Je nach der Stellung von Lupe und Tisch zur Zeichenfläche kann man Vergrösserungen von 2 bis 20 aufnehmen. Ja, es ist möglich, auch Schnitte einfach in natürlicher Grösse aufzu- VIII, 2. Kleinere Mittheilungen. 181 fangen. Der letztere Umstand ist oft bei Zeichnungen von grossen Hirnschnitten sehr angenehm. Es empfiehlt sich aber nicht, alle Ab- stufungen der Vergrösseruugen nur durch Verschieben zu erzielen. Dess- halb wird Herr Leitz das Instrument mit drei Lupen ausstatten. Der Preis beträgt 50 Mark für das Instrument mit zwei, und 60 Mark für das gleiche, wenn drei achromatische Lupen beigegeben werden. Der neue Zeichenapparat ist seit längerem in Prüfung und hat sich als gut bewährt. Er kann auch, wie das schon an einigen Kliniken der Fall ist, sehr gut zum Demonstriren von Schnitten bei schwachen Vergrösserungen gebraucht werden. Es wäre ein Leichtes, ihn auch für stärkere Lichtquellen als Petroleumlicht einzurichten, wobei seine Leistungskraft sich so steigern würde, dass man viele Mikroskopobjective anschrauben könnte, doch wurde absichtlich an der einfachen und billig herzustellenden hier beschriebenen Form festgehalten , weil sie den häufigsten Bedürfnissen entspricht. [Eingegangen am 23. Juni 1891.] Das Magnesium-Blitzlicht in der Mikrophotographie. Von Dr. ß. Neuhauss in Berlin. In dem Bestreben, das in unseren Breiten mitunter recht rare Sonnenlicht durch eine künstliche Lichtquelle zu ersetzen, welche billig, leicht zu beschaifen und von grosser Intensität ist, versuchte man sein Heil auch mit dem Magnesium-Blitzlicht. Wir konnten bereits vor einem Jahre über derartige, wohlgelungene Versuche berichten, die sich sowohl auf Pustlicht, wie auf gemischtes Blitzpulver erstreckten ^ Das Pustlicht ist für mikrophotographische Arbeiten im grossen und ganzen weniger geeignet, da dasselbe vorwiegend blaue, violette und ultra- violette Strahlen enthält und daher bei der Aufnahme gefärbter Präpa- rate, welche in der Regel ein grüngelbes Liclitfilter erfordern, kaum in Frage kommen kann. Bei gemischten Blitzpulvern ist die Möglichkeit gegeben, für Beschaffung auch solcher Strahlen Sorge zu tragen, welche ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 148. 182 Kleinere Mittheilimgen. VIII, 2. dem rothen Ende des Spectrums nahe liegen. Newcomb ' hat das Ver- dienst, zuerst derartige praktische Versuche unternommen zu haben. Er mischte 1 Theil Magnesiumpulver mit 5 bis 7 Theilen reinen, sal- petersauren Natrons und erhielt damit ein intensiv gelbes Licht. Dann experimentirten Röhmann und Galewsky mit einer Reihe verschieden- artiger Mischungen und erhielten mit folgendem Recept gute Resultate: Mischung A. Magnesium, fein piUverisirt, 9"6 g Ueberchlorsaures Kali, wasserfrei, 13-8 „ Mischung B. Weinsaures Baryum, wasserfrei, 5-7 g Ueberchlorsaures Kali, wasserfrei, 2*7 „ Man mischt 10 Theile von A mit 1 Theil von B und setzt 0-5 g wasser- freies Kochsalz hinzu. Diese Mischung hält sich unverändert. Zur Exposition schüttet man 1 bis 3 g derselben auf ein kleines Metall- schälcheu und entzündet mit einem Zünder. Die Mischung A ist insofern nicht ganz zweckmässig, als sie äqui- valente Mengen von Magnesium und überchlorsaurem Kali enthält. Richtiger wäre die Mischung beider Substanzen in gleichen Gewichts- mengen. Da nämlich der Sauerstoff der Luft bei der Verbrennung mitwirkt, so wird bei äquivalenten Mengen nicht alles überchlorsaure Kali zur Verbrennung erfordert; dasselbe verbraucht nur unnütz Hitze zur Zersetzung und vermindert dadurch das Licht. Röhmann und Galewsky ^ empfehlen ferner noch zwei andere Mischungen, von denen die erste wegen ihres Kupfergehaltes besonders reich an grünen Strahlen sein soll: L a) 138 chlorsaures Kali, 96 Mag- nesium; b) 1108 chlorsaures Kali, 724 essigsaures Kupfer; c) 131 chlor- saures Kali, 342 Magnesium. Man mischt 6 a, Ib, 4 c. — IL 7 chlor- saures Kali werden mit 7 neutralem, weinsaurem Baryt gemischt, bei 100'^ getrocknet und dann 3 Magnesium und 0*5 Chlornatrium zugesetzt. Die Verbrennung dieser Gemische dauert 1 bis 2 Secunden, ver- hältnissmässig also sehr lange Zeit. Das Licht ist für Vergrösserungen von 1000 linear nicht hell genug. Die langsame Verbrennung und das relativ schwache Licht sind Folge von Wärme -Verbrauch der bei- gemengten Substanzen. Es bleibt die Frage, ob die Beimischung von Baryum-, Kupfer- oder anderen Verbindungen, welche den Gehalt an gelben und grünen Strahlen •) Neuhauss, R., Lehrbuch der Mikrophotographie, 1890, p. 90 u. 263. 2) Anthony's Bull. p. 552; Photogr. Nachr. 1890, No. 51, p. 789. VIII, 2. Kleinere Mittheilungen. 183 erhöhen sollen, der Schnelligkeit der Verbrennnng und der Intensität des Lichtes aber gewaltigen Abbruch thun, überhaupt notliwendig ist, um ein für die Mikrophotographie geeignetes Magnesium-Blitzlicht zu erzielen ? Gestützt auf eine grössere Reihe spectrographischer Untersuchungen muss Verfasser diese Frage in verneinendem Sinne beantworten. Im Handel befindet sich ein Blitzpulver, welches den Anforderungen des Mikrophotograplien voll entspricht und die complicirten Mischungen völlig überflüssig macht: es ist das sogenannte rauchschwache Blitz- pulver von Gaedicke, eine Mischung von Magnesium und übermangan- saurem Kali, welche unter geringer Rauchentwicklung schnell verbrennt und ein äusserst intensives Licht giebt. Macht man mit dem Spectro- graphen eine Aufnahme dieses Blitzlichtes auf gewöhnlicher Platte, so zeigt sich im Roth, Gelb und Grün nicht die mindeste Lichtwirkung. Auf der Grenze zwischen Grün und Blau treten scharf abgegrenzt mehrere helle Linien auf, an welche sich die continuirliche helle Zone im Blau und Violett anschliesst. Ganz anders gestalten sich die Ver- hältnisse auf der Erythrosin-Platte ^ Hier beginnt die helle Zone be- reits im Gelb bei der FKAUNHOFBR'schen Linie D. In der Mitte zwischen den Linien D und E ist der Silberniederschlag auf dem Negativ ein überaus dichter. Es macht in der That den Eindruck, als habe hier so viel Licht gewirkt, wie im ganzen Blau und Violett zusammen- genommen. Zwischen den Linien E und F ist die Lichtwirkung eine verschwindend geringfügige. Im Blau und Violett ergiebt sich kein Unterschied gegenüber der gewöhnlichen Platte. Wiederholt man die Aufnahme auf der Erythrosin-Platte, unter Zwischenschaltung des gelb- grünen ZETTNOw'schen Filters -, so wird das blaue und violette Licht vollkommen absorbirt, und es bleibt nur das starke Maximum im Gelb- grün zwischen den Linien D und E. Das sind genau die Verhältnisse, wie der Mikrophotograph sie braucht, und wie sie ganz entsprechend beim Sonnenlichte sich finden. Auf der Erythrosin-Platte vertheilen sich die Maxima und Minima der Lichtwirkung dieses Blitzlichtes genau so wie beim Sonnenlicht, nur ist das Maximum im Gelbgrün, von dem auf gewöhnlicher Platte keine Spur sichtbar wird, beim Magnesiumlicht ein noch intensiveres. Es muss daher allen Mikrophotographen, die ein helles, kurz wirkendes Licht brauchen, das rauchscliwache Magnesium- Blitzlicht von Gaedicke in Verbindung mit ZsTTNOw'schem Filter und ») Verf. arbeitete mit selbst gebadeten Platten von Jon. Sachs in Berlin. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 55. 184 Kleinere Mittheilungen. VIII, 2. Erythrosin-Platte dringeud empfohlen werden. Man wird hierbei, selbst beim Photographiren mit mangelhaften Systemen, durch etwa vor- handene Focus-Diflerenz niemals gestört werden, da man mit Licht von eng begrenzter Wellenlänge arbeitet. [Eingegangen am 1. JiiU 1891.] Gläser zum Aufbewahren von Immersionsöl. Von W. Behrens iu Göttingeu. Flaschen, welche eigens zu dem Zwecke construirt sind, das für Homogen-Immersionen zu verwendende Oel aufzunehmen, und welche gleichfalls gestatten, den gewünschten Tropfen ohne weiteren Verlust und ohne die Finger zu beschmutzen aus denselben zu entnehmen, gab es unseres Wissens bislang in passender Form nicht. Man pflegte die genannte Flüssigkeit in gewöhnlichen Flaschen zu bewahren, aus denen man das zur Verwendung kommende Tröpfchen mit einem dünnen Glas- stäbchen oder auch mit einem Knochen- oder Elfenbeinstabe entnahm. Dieser Stab war entweder ein- für allemal in dem Korkstöpsel des Fläschchens befestigt, oder er wurde auch wohl bei Nichtgebrauch auf den Rand des Mikroskopirtisches gelegt, wo er eiuestheils diesen be- schmutzte, anderntheils Staub und dergl. auffing. Die Firma Cael Zeiss in Jena hat daher kürzlich Flaschen für Immersionsöle hergestellt und einige derselben zur Probe freundlichst eingesandt, bei deren Construction besonders auf folgende Punkte Rück- sicht genommen wurde. Es sollte ein Uebertreten des Oeles über den Flaschenrand möglichst vermieden werden, die Finger des Arbeitenden sollten vor dem Oel thunlichst geschützt sein, aus Rücksicht auf Sparsam- keit und Sauberkeit sollten nur kleine Tröpfchen aus dem Glase her- vorgeholt werden, das Glas sollte möglichst fest stehen, um vor Umfallen geschützt zu sein, und schliesslich sollte die Kappe , wenn sie für sich auf den Tisch gelegt wird, nicht voll Oel fliessen, sondern es sollte in diesem Falle der Griffel vielmehr eine solche Lage einnehmen, dass das Oel am verdickten Ende verbliebe. VIII, 2. Kleinere Mittbeilungen. 185 Die ZKiss'scben Fläschclien sind cylinderförmige, weitlialsige Gläser von 60 mm Höhe, 30 mm Durchmesser, einer lichten Halsweite von 15 mm und fassen 20 cc Flüssigkeit, lieber den Hals stülpt sich eine aufgeschliffene Kappe, deren Deckel mitten durchbohrt ist und hier einen bis fast auf den Boden des Glases reichenden GlasgrifFel von eigen- thümlicher Form eingekittet trägt. Dieser Glasgriffel, durchweg solide, also nicht röhrenförmig, besitzt am oberen Ende eine gläserne Halb- kugel und ist mit dieser durch Schellack einer entsprechenden runden Oeffnung der Glaskappe eingekittet. Der senkrecht nach unten ge- richtete Griffel hat die Gestalt eines cylindrischen , nach unten sich ein wenig verjüngenden Glasstabes von 1*5 (resp. 2) mm Durch- messer und 60 mm Länge. Am unteren Ende ist er nicht einfach abgeschmolzen, sondern erweitert sich zu einer kleinen Glaskugel von 2 (resp. 3) mm Durchmesser. Die eingeklammerten Zahlen gelten für ein Glas mit etwas stärkerem Griffel. Die kugelförmige Griffelerweiterung ist zu dem Zwecke angebracht, um ein Abtropfen des hervorgeholten Immersionsöles zu verhindern. Füllt man das Glas z. B. mit einer 20 mm hohen Schicht von Cedernholzöl an und holt mit dem Griffel ein Tröpfchen heraus, so umgiebt dasselbe das Glaskügelchen fast ganz gleichmässig, und beim Uebertrageu auf eine Glasplatte entstehen Tröpfchen von 5 bis 6 mm Durchmesser, also in einer für die Beob- achtung entspechenden Grösse. Die Firma C. Zeiss theilte dem Verf. mit, dass die Herstellung der Flaschen nicht geringe Schwierigkeiten bereitete. Die Kappe wird von einer, der Griffel von einer zweiten Glashütte geliefert, während das Einkitten nach vielen Versuchen mit verschiedenen Kittmassen von der Firma selbst besorgt wird. Der Preis eines Fläschchens beträgt 1 Mark. Göttingen, 7. Juli 1891. 186 Kleinere Mittheilungen. VIII. 2. Apparat zum Piltriren baeterienhaltiger Flüssigkeiten. Von Dr. Alfred Koch in Göttingen, Hierzu ein Holzschnitt. Dr. Robbet Muencke (Berlin N. W., Liiisenstrasse 58) bringt neuer- dings einen Apparat zum Filtrireu baeterienhaltiger Flüssigkeiten in den Handel, den die nebenstehende Figur in ungefähr V4 natürlicher Grösse darstellt. Derselbe soll alle die Uebelstände der bisher zu diesem Zwecke construirten Apparate vermeiden, welche in schwieriger Steri- lisirung, geringem Rauminhalt des Filters und in Verbindung des Filters mit der Sammelflasche durch Watte, Kautschuk oder dergleichen be- stehen sollen. Der Apparat besteht aus einem Sammelgefäss aus star- kem Glase, in dem das bis h reichende cylindrische Thonfilter hängt. Letzteres besitzt einen auf der Unterseite plangeschliffenen Rand, mit dem es bei a auf dem ebenfalls plangeschliffenen Rand des Sammel- VIII, 2. Kleinere Mittheilungen. 187 gefässes resp. einem zur Diclitimg zwischen beide gelegten Asbestring aufliegt. Der Apparat wird zur Benutzung vorbereitet, indem man in die Kugel des am Sammelgefäss angebrachten Glasrohres d und in das Rohr e Watte bringt und das Ganze durch trockene Hitze sterilisirt; dann zieht man zum Zwecke des luftdichten Verschlusses über den Rand des Sammelgefässcs und des Thonfilters die bei c dargestellte durchbohrte Gummikappe und über das Rohr e einen Gummischlauch mit Glasstab und Quetschhahn, und kann nun unter Anwendung einer mit d verbundenen Saugvorrichtung filtriren, wobei eine Ueberschreitung eines Druckes von 200 mm Quecksilber nicht nothwendig und auch nicht anzurathen ist. Der Rauminhalt des Thonfilters beträgt im äussersten Falle 90 cc, der der Sammelflasche 200 cc. Das Thonfilter hat eine Wandstärke von etwa 3"5 mm. Die Filtration geht ziemlich schnell von statten; in einem meiner Versuche mit einer recht schmierigen abgegohrenen Amylobacter-Cultur, hergestellt aus einer mit einigen KartofFelstücken aufgekochten einprocentigen Fleischextractlösung, passirten das schon zweimal benutzte und dann nicht besonders gereinigte Thonfilter, nachdem die Flüssigkeit es durchdrungen hatte, in 45 Minuten 22 cc bei 200 mm Quecksilberdruck. Eine schwache Seite des Apparates sind dagegen seine Dimensionen, denn nicht alle Sterblichen sind so glücklich ein Luftbad zu besitzen, welches einen 25 cm breiten und ungefähr ebenso hohen Apparat fassen kann; ich habe daher auch keine Versuche über die Bacterienfreiheit des Filtrates bis jetzt anstellen können. Der Apparat könnte aber wohl leicht handlicher hergestellt werden, wenn das Rohr e, welches zur Entnahme von Proben mittels des Platindrahtes zur Prüfung der Reinheit des Filtrates bestimmt ist, kürzer und senkrecht stehend angebracht würde. Eventuell könnte auch Rohr d noch etwas gekürzt werden. — Der Preis des beschriebenen Apparates beträgt 6 Mark. [Eingegangen am 7. Juli 1891. J 188 Kleinere Mittheilungen. VIII, 2 Mikroskopisch - teehnische Notizen. Von Dr. M. Nikiforoflf in Moskau. Die Celloidineinbettiuigsmethode hat für die histologische Technik eine grosse Bedeutung, und die Anwendungsmethoden dieses treff- lichen Mittels wurden in kurzer Zeit sehr vervollkommnet. In dieser Notiz möchte ich nur auf einen kleinen, doch, wie mir scheint, nicht unwich- tigen Kunstgriff hinweisen, der mir bei Anfertigung von Mikrotom- schnitten nicht nur bei den in Celloi'din eingebetteten, sondern auch bei einfach in Spiritus gehärteten Präparaten immer gute Dienste geleistet hat. Beim Schneiden von Präparaten, die eine beträchtliche Grösse, z. B. anderthalb bis zwei Quadratceutimeter haben, und besonders, wenn die Schnitte dünn (0"01 bis 0"015 mm für Celloidiupräparate) sein sollen und in lückenloser Reihe folgen müssen, ist die Neigung der oberen Fläche des Mikrotommessers zur Horizontalebene von nicht ge- ringer Bedeutung. Steht die obere Fläche des Messers beim Schneiden zur Horizontalebene unter einem grösseren oder kleineren Winkel, wie es bei allen gebräuchlichen Mikrotomen stets der Fall ist, so fliesst der auf dem Messer sich befindende Spiritus bei der ersten Berührung des- selben mit dem Schnittpräparate stromweise auf dasselbe herunter. Abgesehen von einer unnützen Verschwendung von Spiritus, hat dieser Umstand auch nicht selten auf die Schnitte selbst eine schädliche Wir- kung, indem der abfliessende Spiritus den beginnenden Schnitt, und dabei auch gewiss das ganze Präparat, in Schwankungen versetzt, so dass beim weiteren Schneiden der Schnitt verderben kann; nicht sel- ten werden auch feine Schnitte durch abfiiessenden Spiritus vom Mikro- tommesser bis tief in die Klemme fortgeschwemmt. Alle diese Miss- erfolge treten besonders deutlich bei Anfertigung feiner und grosser Schnitte hervor, wenn man ein langes Messer benutzt. Steht aber die , Oberfläche des Mikrotommessers horizontal oder noch besser zur Schlitten- messerebene (resp. nach rechts) etwas geneigt, so wird eine nicht ge- ringe Menge von Spiritus erspart, und es werden die oben erwähnten Uebelstände beseitigt. Es ist leicht, dem Mikrotommesser die gewünschte Lage zu geben, wenn man unter das Mikrotombrett Kork oder Holz- stückchen unterlegt ; noch besser wäre es, wenn die Instrumentenmacher VIII, 2. Kleinere Mittlieilungen. 189 die Mikrotome mit einer Vorrichtung versehen wollten, die es ermög- lichte, dem Instrumente eine beliebige Lage resp. Neigung zur Hori- zontalebene zu geben. Zu diesem Zwecke wäre es am einfachsten, das Mikrotombrett mit Köpfchen tragenden Schrauben zu versehen. — Die Celloidinschnitte sollen, wie bekannt, vor der Oel- resp. Xylol- behandlung mittels wasserfreien Alkohols tüchtig entwässert werden. Da ein guter absoluter Spiritus leicht eine geringe, in Celloidinschnitten sich befindende Celloidinmeuge auflöst, so muss man bei der Entwässerungs- procedur sorgfältig Acht geben, und trotzdem können einige, besonders feinere Schnitte leicht durch Auflösung des Celloidins verloren gehen, indem die durch das Celloidin fest mit einander verbundenen einzelnen Bestandtheile des Schnittes aus demselben herausfallen, oder der letztere bei der Uebertragung in Xylol fest auf dem Spatel kleben bleibt, da das gelöste Celloidin durch Xylol sofort unlöslich wird. Um solche Inconvenienzen zu vermeiden, ist es gut, dem absoluten Alkohol irgendwelche wasserlose, Celloidin nicht lösende, sich mit Alkohol gut vermischende Flüssigkeit zuzufügen. Zu diesem Zwecke eignet sich reines Chloroform am besten, und ist es rathsam, Alkohol und Chloro- form zu gleichen Theilen zu nehmen. In einer solchen Mischung kann man selbst die feinsten Celloidinschnitte lange Zeit ohne jede Gefahr liegen lassen, und es gelingt die Entwässerung immer recht gut. ü e b e r Anwendung der E h k l i c h ' s c li e n a c i d o p h i 1 e n Mischung zur Färbung von Schnitten. Die von Ehelich zur Blutuntersuchung angewandten Farbmischungen haben trotz ihrer man- nigfaltigen, sehr eigenthümlichen Eigenschaften bei der Schnittfärbung relativ wenig Anwendung gefunden. In der histologischen Technik ist bisher, soviel mir bekannt ist, von allen diesen EHKLicn'schen Färbungs- methoden nur die zur Färbung der neutrophilen Körnung der Leuko- cyten empfohlene angewandt worden, und zwar hat Haidenhain diese von BioNDi etwas modificirte Färbungsmethode zuerst für Schnittpräparate gebraucht. Die acidophile Mischung von Ehrlich wurde zur Schnittfär- bung von Niemandem bisher angewandt, obgleich sie vorzügliche, sehr electiv gefärbte und auch haltbare Präparate liefert. Besonders ist die Färbung für Drüsengewebe, respective für Organe, die relativ wenig Bindegewebe enthalten, sehr geeignet. Das Zellplasma nimmt bei An- wendung der acidophilen Mischung (Glycerin-Eosin-Aurantia-Indulin) eine zarte graue Nuance an, die der Beobachtung der feinsten Structurdetails 190 Kleinere Mittheiluiiffen. VIII, 2. ö^ der Kerne nicht im geringsten hinderlich ist. Die Kerne selbst er- scheinen dunkelgran bis schwarz (Kerne der fragmentirten Leukocyten), die Structnr der Kerne tritt scharf hervor, die in Theilnng begriffenen Kerne färben sich intensiver als die sich in Ruhe befindenden. Das faserige Bindegewebe wird grau, Membrana propria dunkelgrau gefärbt, so dass die letztere in den Präparaten sehr deutlich zu sehen ist. Auch die übrigen farbigen Bestandtheile der EHKLicn'schen Mischung lassen in verschiedenen Theilen der Präparate ihre electiven Eigenschaften scharf hervortreten, indem Eosin die eosinophile Körnung gewisser Zellen rosa färbt, und die letztere daher sehr leicht in Präparaten auf- zufinden ist, Aurantia dem Hämoglobin respective den rothen Blutkör- perchen eine schöne, leuchtend orangefarbene Nuance giebt. Die Elec- tion, die zarte Schärfe der Färbung lässt die EHELicn'sche Mischung für Schnittpräparate dringend empfehlen. Die besten Resultate liefern feine Paraffinschnitte von in Sublimat fixirten Organen. Leider sind die Celloidinpräparate für diese Fär- bungsmethode weuig brauchbar. Die Paraffinschnitte sind am besten auf Deckgläsern bloss mit diluirtem Spiritus zu fixiren. (Man befestigt die aufgelegten Schnitte mit Fingerdruck auf dem Deckgläschen, dann befeuchtet man mittels eines Pinsels mit öOprocentigem Spiritus und überträgt in einen Trockenschrank bei 35 bis 40". Nachdem diese Spiritusbefeuchtung nach je 15 Minuten dreimal wiederholt wurde, sind die Schnitte vollkommen fest auf das Deckgläschen aufgeklebt.) Bei der Färbung giebt man auf die Paraffinschichte einige Tröpfchen der EHELiCH'schen acidophilen Mischung und lässt sie 24 Stunden ein- wirken. Die alsdann gefärbten Deckgläsclien nimmt man mit einer Pincette und spült dieselben vorsichtig in Wasser so lange, bis das Präparat von den letzten Spuren der überschüssigen dicken Glycerin- lösung befreit ist. Alsdann muss das Präparat rasch mit absolutem Alkohol entwässert und mit Xylol behandelt werden. [Eingegangen am 21. April 1891.] VIII, 2. Kleinere Mittheilungen. 191 Eine Entkalkungsmethode. Von Dr. Richard Tlioma, Professor in Dorpat. Vor einigen Jahren habe ich im Archiv für pathologische Anatomie Bd. CIV eine Entkalkungsmethode besclirieben, welche mir ausgiebige Dienste geleistet hat bei der Untersuchung sowohl von Knochen als von verkalkten Weichtheilen. Ich möchte sie demgem.äss, da sie an einem etwas verborgenen Orte in einer Abhandlung über Gefäss- erkrankungen niedergelegt ist, weiteren Kreisen empfehlen. Knochen und andere kalkhaltige Gewebe werden entweder frisch oder nach Behandlung mit anderen Reagentien mit Alkohol von 95 bis 96 " Tkalles vollständig durchtränkt. Sodann gelangen sie in die Entkalkungsflüssigkeit, bestehend aus 5 Raumtheilen Alkohol (95 bis 96° Tralles) und 1 Ranmtheil officineller, concentrirter, reiner Salpetersäure (deutsche Pharmakopoe). In dieser Flüssigkeit verweilen die Präparate bei öfterem Um- schütteln mehrere Tage. Dann wird die Flüssigkeit erneuert und dies so oft wiederholt, bis vollständige Entkalkung eingetreten ist. Die genannte Flüssigkeit entkalkt die Gewebe sehr rasch, da der gebildete salpetersaure Kalk in dem schwach wasserhaltigen Alkohol ziemlich leicht löslich ist. Versetzt man, um dies zu erproben, obiges alkoholhaltige Säuregemisch* mit einem Ueberschusse von präcipitirtem kohlensauren Kalk, so finden sich in 100 cc des Filtrates nach dem Abdampfen (bis zur Gewichtsconstanz, wozu hohe Temperaturen er- forderlich) 8*67 g salpetersaurer Kalk, Demgemäss können auch umfangreiche Knochenstücke auf diesem Wege in zwei bis drei Wochen völlig kalkfrei gemacht werden, wenn man in dieser Zeit die Flüssigkeit drei- bis viermal erneuert. Nur hat man selbstverständlicher Weise dafür Sorge zu tragen, dass die Ge- sammtmenge der verwendeten Säure wirklich genügt zur Auflösung der Salze. Nach der Entkalkung werden die Präparate mit Spiritus abge- spült und in ein Gefäss verbracht, in welchem sich Alkohol von 95 bis ') Bei dieser Probe verwendete ich das Acid. nitr. pur. conc. der rus- sischen Pharmakopoe, welches sich von dem eintsprechenden Präparate des deutsehen Arzneibuches nicht wesentlich unterscheidet. 192 ffleinere Mittheilungen. VIII, 2. 96" Tealles und ein Ueberscliiiss von präcipitirtem kohlensaurem Kalk befindet. Letzterer ist gleichfalls officinell und im Handel überall zu haben. Auch diese Flüssigkeit ist wiederholt umzuschüttein und zu erneuern. Sie entzieht den Präparaten in 8 bis 14 Tagen jede Spur der Säure, so dass erstere sich wieder genau ebenso leicht färben wie vor der Entkalkung. Dies wird bekanntlich bei Anwendung an- derer Entkalkungsflüssigkeiten , etwa mit Ausnahme der Pikrinsäure, nur unvollständig erreicht. Pikrinsäure aber ist bekanntlich ein sehr langsam wirkendes Entkalkungsmittel. Schliesslich werden die Präparate mit einem feinen Strahle von Spiritus abgespült, um das anhängende Kalkpulver zu entfernen. Das gelingt allerdings nicht vollkommen. Doch sind die Reste des Kalk- pulvers mikroskopisch in der Regel nicht zu sehen, auch greifen sie bei Anwendung präcipitirten kohlensauren Kalkes die Schneide des Mikrotommessers nicht an. Will man indessen das Anhaften von Kalkpulver vermeiden, so ge- nügt es, wenn man die Präparate vor dem Einlegen in den kalkhaltigen Spiritus mit Filtrirpapier umhüllt, oder aber einen mit Filtrirpapier be- spannten Dialysator anwendet, der mit Spiritus gefüllt ist. Die aus Filtrirpapier bestehende Membran trennt dann den die Präparate um- gebenden Alkohol von dem kalkhaltigen Alkohol. Es versteht sich, dass in diesem Falle mehr Zeit zur vollständigen Entsäuerung erforder- lich ist. Die Verwendung von Lakmuspapier zur Controlle der verschiedenen Operationen spart in der Regel Zeit, doch muss man die Behandlung mit kalkhaltigem Spiritus noch einige Tage fortsetzen, wenn bereits das Lakmuspapier keine Säure mehr angezeigt. Die Vorzüge der Methode sind darin zu suchen, dass sie gestattet, selbst voluminöse, kalkreiche Gewebe rasch und vollständig zu ent- kalken, und sie sodann von dem Ueberschuss der Säure wieder voll- ständig zu befreien. Auch werden die Weichtheile dabei keinen er- heblichen Quellungen ausgesetzt, und bekanntlich greift die Salpeter- säure selbst zarte Gewebsstructuren wenig oder gar nicht an. [Eingegangen am 28. April 1891.] Vill, 2. Referate und tiesprechungeii. 193 Reforate und Besprecliuno'en. 1. Lehr- und Handbücher. Giltay, E., Hoofdzaken uit de leer vau liet zien door den raicroscop, met behulp van zeven objecten [Hauptsachen aus der Lehre vom Sehen mit dem Mikroskop an der Hand von sieben Objecten]. A. u. d. T. : Sept objets regard^s au microscope. Expose de quelques principes de la microscopie. Leiden (Brill) 1890. XI u. 68 pp. 8» ra. 6 Tfln. Es giebt, wie der Verf. in dem Vorwort zu seinem Werkchen her- vorhebt, zwei Wege, um durch das Mikroskop „sehen", d. h. aus dem mikroskopischen Bilde die zulässigen Schlüsse auf die Eigenschaften des Objects ziehen zu lernen. Der eine, den ich als den empiri- s tischen bezeichnen möchte, beruht darauf, dass man auf Grund lan- ger und reicher Erfahrung Anhaltspunkte für jene Beziehung zwi- schen Object und Bild erwirbt. Der andere, kürzer zum Ziele führende Weg ist der systematische und beruht darauf, dass man „an einigen ausgewählten Objecten genau die Eigenthümlichkeiten studirt, welche sie mit einer grossen Zahl anderer gemein haben, dass man sich Rechenschaft giebt von den Eigenschaften der Objecte und von den Umständen der mikroskopischen Beobachtung, deren Zusammentreffen jene Eigenthümlichkeiten bedingt". — Auf diesem zweiten Wege — dem einzigen, welcher einen gewissen Unterricht gestattet — sucht Verf. seine Leser, oder vielmehr seine Schüler zu führen. Denn um blosses Lesen kann es sich hier natürlich nicht handeln, vielmehr will und muss jeder Satz durch den Versuch bestätigt werden. Wie wichtig es für den Anfänger in der Mikroskopie ist, über die Eigenthümlichkeiten des mikroskopischen Sehens aufgeklärt zu werden, weiss Jeder, der es öfters mit solchen Anfängern zu thun hat, auch wenn ihm selbst die Erinnerung daran entschwunden ist, auf Grund wie vieler Erfahrungen Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 2. 1^ 194 Referate und Besprecliungen. VlII, 2. er selbst von dem Aussehen des Bildes auf die Natur des Objectes zu schliessen gelernt hat, auf wie vielen meist unbewussten Gedanken- verbindungen jeder solche Schluss stets beruht. An einer kurzgefassten Anleitung zum Studium dieser Beziehungen aber hat es, soviel Ref. bekannt, trotz der umfangreichen sonstigen Literatur über das Mikro- skop und die mikroskopische Technik durchaus gefehlt. Das Erscheinen eines hierauf gerichteten Werkchens hat Ref. daher von vornherein mit Freuden begrüsst und dieses günstige Vorurtheil hat sich bei dem näheren Studium des Schriftchens in jeder Beziehung bestätigt. — Der den Lesern dieser Zeitschrift durch seine lichtvollen Auseinander- setzungen über den AßBE'schen Zeichenapparat u. A., sowie weiteren Kreisen durch sein Buch „Inleiding tot het gebruik van den microscoop" bereits rühmlich bekannte Verf. wählt, wie im Titel angegeben, sieben Objecte aus, um den Schüler an ihnen systematisches Studium der Eigenschaften mikroskopischer Bilder durchmachen zu lassen. Es sind dies 1) Tintenstriche auf Object- und Deckgläsern, 2) berusste Glas- fäden, 3) Mehl, 4) Luftblasen in Emulsionen, 5) Milch, 6) Collenchym und 7) die ABBE'sche Diffractionsplatte. Diese für Jedermann leicht herstellbaren oder zu habenden Ob- jecte geben Gelegenheit, successive alle wichtigen Begriife der Mikro- skopie kennen zu lernen und die verschiedenen Modificationen, die das Licht bei seinem Durchgang durch dieselben erfährt, sowie die hier- aus sich ergebenden Erscheinungen im Bilde zu erörtern. So gelangt der Studirende von der „Einstellung" und „Sehfeld" allmählich zu „Gren- zen des Abbildungsvermögens" für regelmässige Structuren und isolirte Elemente. — Da der Text des Büchleins französisch und holländisch (in Gegenüberstellung) ist, so nimmt dasselbe eigentlich nur 34 Seiten ein. Sein Studium kann also jedem angehenden Mikroskopiker nicht nur angelegentlich empfohlen, sondern auch gewiss zugemuthet werden. Für ein solches erstes Studium wäre nur noch die Hinzufügung einer kurzen Beschreibung des Mikroskops selbst erwünscht, damit der An- fänger wenigstens die Bezeichnung der verschiedenen Theile desselben kennen lernt. Dies ist das einzige Wesentliche, was ich an dem Schriftchen auszusetzen finde; denn über einige belanglose Differenz- punkte will ich mit dem Verf. nicht rechten. Im übrigen wünsche ich den „Sept Objets" eine möglichst weite Verbreitung und — baldige Uebersetzung ins Deutsche und Englische. S. Czapski {Jena). Behrens, W., Leitfaden der Botanischen Mikroskopie. 208 pp. 8" m. 150 Figg. Braunschweig (Bruhn) 1890. M. 4. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 195 Wie Verf. im Vorwort sagt, mag die vorliegende Schrift als eine Neubearbeitung der ersten drei Abschnitte seines Hilfsbuches (1883) angesehen werden und zwar als eine solche in abgekürzter Form, da für den Benutzer des Buches diese propädeutischen Dinge in erster Linie in Frage kommen 5 die ausführliche Darstellung bleibt der neuen Auflage des Hilfsbuches vorbehalten, dessen Schwerpunkt in den letzten beiden Abschnitten, dem mikroskopischen Nachweis der Pflauzenstoffe liegt. Wenn sich nun auch genetisch dieses Werkchen an das Hilfsbuch des Verf. anlehnt, so stellt es anderseits eine vollkommene neue, von Grund ans geschaffene Bearbeitung, keineswegs einen vielleicht etwas verän- derten Neudruck dar. In demselben war man bestrebt, allen neuen Errungenschaften, soweit sie iu Frage kommen, Rechnung zu tragen, ohne aber durch den schwerfälligen Apparat der Literaturcitate den Umfang zu vergrössern, wenn auch nicht unerwähnt bleiben soll, dass die vorhandene Literatur in ausgiebigster Weise zu Rath gezogen und geprüft worden ist. Der kundige Leser wird sodann eine Reihe neuer Methoden etc. in dem Buche entdecken, die hier zum ersten Male an die OefiFentlichkeit treten, ohne dass der Verf. es für nöthig befand, bei denselben stets mit Nachdruck auf seine Autorschaft hinzuweisen. — Anderseits ist von dem in der Literatur Bekanntgegebenen nur ein kleiner Bruchtheil, als für die Zwecke des Anfängers passend, berück- sichtigt worden, denn für den Anfänger soll in erster Linie dieses Werk- clien berechnet sein und wir empfehlen ihm, neben demselben, nämlich um sich bezüglich der einzelnen zu studirenden mikroskopischen Objecte zu informiren, das „Kleine Botanische Prakticum" von Steasbukgee zu benutzen. Diese Worte der Einleitung, mit denen der Verf. die Tendenz des Buches charakterisirt, kann Ref. nur voll und ganz unterschreiben. Wie schon die oben citirte Empfehlung von Steasbuegee's Botanischem Prakticum andeutet, haben wir es hier in keiner Weise mit einem Con- currenzunternehmen zu thun, wie der Eine oder Andere, der nur den Titel gelesen hat, etwa vermuthen könnte. Ref. lässt im Laboratorium beide Werke von seinen Prakticanten mit bestem Erfolg benutzen und ist beiden Verff., deren Schriften sich aufs Schönste ergänzen, in gleicher Weise für die wesentliche Hilfe dankbar, die sie dem Lehrer wie dem Lernenden gewähren. Nahezu unentbehrlich aber dürfte die Beheens- sche Schrift für alle Diejenigen sein, die gezwungen sind, sich ohne fachmännische Anleitung in die botanisch-mikroskopische Technik ein- zuarbeiten und die nicht nur die leidliche Handhabung des Mikroskopes für einige .speciclle Zwecke erlernen wollen, sondern die zugleich auch einen Ueberblick über die ganze Technik wünschen, als sicheres Funda- 13* 196 fteferate imct Besprechungen. VIIl, 2. ment eigener Beobachtungen. Einen wesentlichen Vorzug sieht der Ref. endlich in der besonderen auf die Zahlenangaben verwandten Sorgfalt, denn nichts ist beim praktischen Arbeiten lästiger und stören- der, als die bei vielen Autoren leider nur allzu beliebte Unsitte, ihre Recepte für neue Untersuchungsmethoden, Reactionen etc. an Stelle positiver Zahlenangaben mit den vieldeutigen Ausdrücken etwas, ziemlich, ein wenig u. s. w. zu versehen. Verf. giebt ausnahmslos positive Zahlenangaben, „die nicht zum geringen Theile zum vorliegenden Zwecke eigens, oft auf zeitraubendem Wege, ermittelt wurden". Möge das Buch die wohlverdiente Verbreitung und Benutzung finden. L. Klein {Freihurg i. B.). 2. Mikrophotographie. Referent Dr. R. Neuhauss in Berlin. Albarraciii, T., Mikrophotogramme nach Präparaten des normalen Gehör or gans. Neue Folge 1890. Selbstverlag d. Verf. Als ALBAKRAcm vor etwa einem Jahre seine ersten Mikrophoto- gramme nach Präparaten des normalen Gehörorgans veröffentlichte ' musste, abgesehen von der recht mangelhaften mikrophotographischen Technik, die Auswahl der zur Publication verwendeten Präparate als eine nicht sehr glückliche bezeichnet werden. Bei den Bildern, welche Albar- RAciN jetzt veröffentlicht, benutzte derselbe Präparate, welche ein anschau- liches Bild von den darzustellenden Verhältnissen geben. Damit diese Aufnahmen jedoch ihren Zweck ganz erfüllen, müsste die mikrophoto- graphische Technik des Autors eine vollkommenere sein. Ueber - und Unterexpositiou , zu lange und zu kurze Entwicklung uud dergleichen Dinge mehr thun der Klarheit der Bilder erheblichsten Abbruch. Katz^ L., Mikrophotographischer Atlas der normalen und pathologischen Anatomie des Ohres. I. Theil. Berlin (Hirschwald) 1891. Die erste Lieferung des vorliegenden Atlas, welcher in drei Theilen erscheinen soll, enthält auf 10 Tafeln von R. Neuhauss nach Prä- paraten von L. Katz hergestellte Mikrophotogramme des gesunden ') Sitzber. d. k. Acad. d. Wiss. Wien 1890, Matheni.-uatiirw. Cl., Bd. XCIX, Abth. 3: cfr. diese Zeitscbr. Bd. VII, 1890, p. 187. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 197 und kranken Ohres. Der Verfertiger der in jeder Beziehung rauster- giltigen Präparate hat seine Präparationsmethode auf der letzten Natur- forscher-Versammlung in Köln näher beschrieben, und ist dieselbe im Archiv für Ohrenheilkunde Bd. XXVII p, 233 angegeben. Die Prä- parate fanden auf jener Versammlung wegen ihrer Vollständigkeit und Klarheit den ungetheilten Beifall der Anwesenden. Durch eine ver- vollkommnete Methode der Conservirung gelang es, das früher seiner schwierigen Darstellung wegen gefürchtete membranöse Labyrinth mit seinen zartesten und wunderbaren Gebilden in vollständigster Weise zur Anschauung zu bringen. So ist das Fundament gegeben, auf welchem manche bisher nur durch Hypothese zu erklärende P>age einer Lösung entgegen geführt wird. — Der Werth der Mikrophotographie erfährt durch vorliegenden Atlas eine grelle Beleuchtung: Mehrere der ungemein leicht verletzbaren Präparate sind zu Grunde gegangen und könnten nur mit grössten Mühen und Kosten — in vereinzelten Fällen bei besonders interessanten pathologischen Objecten überhaupt nicht — ersetzt werden. Wären hiervon nur Zeichnungen vorhanden, so Hesse sich der hartnäckige Zweifler nicht überzeugen. Bei dem durch keine Retusche veränderten Photogramm hört jeder Zweifel auf. Wir erhalten einen klaren Einblick in die anatomische Grundlage der Schwerhörigkeit oder völligen Taubheit: Hier ist, in Folge eines Falles auf den Kopf, die untere Schneckenwindung mit Knochenmasse angefüllt und das Gehörvermögen dadurch völlig aufgehoben; dort durchzieht den Vorhof ein Bindegewebsstrang und fixirt die Platte des Steigbügels derart, dass letzterer die Schallwellen nicht weiter fort- zupflanzen vermag. In einem anderen Falle ist der halbzirkelförmige Kanal zum Theil mit Bindegewebe angefüllt, welches das Functioniren des Organs vollständig unmöglich macht u. s. w. Durch sorgfältigste Ausnutzung aller gegebenen Mittel gelang es, denjenigen Fehler zu vermeiden, welcher den Werth von Photogrammen nach histologischen Präparaten ungemein zu beeinträchtigen pflegt: die Schärfe nur einer einzigen Ebene und die Unscharfe aller Dinge, welche auch nur wenig ausserhalb dieser Ebene liegen. Besonders lehrreich ist in dieser Beziehung das Bild der Lamina reticularis *, bei dem die ganz verschiedenen Ebenen angehörenden äusseren und inneren Pfeiler scharf abgebildet sind. 1) Genanntes Mikrophotogramm ist den Lesern dieser Zeitschrift bekannt durch ein in Heliogravüre ausgeführtes Blatt, welches die Anstalt von RiFtAiixn in Berlin dem Inseratentheil zu Heft 4 des vorigen Jahrganges (Bd. VIII) bei- legte. 198 Referate imtl Besprechungen. VIII, 2. Die Bilder sind, abweichend von dem bei derartigen Veröffent- lichungen jetzt beinahe allgemein üblichen Verfahren der Vervielfältigung durch Lichtdruck, von dem Verfertiger der Negative auf Silberpapier copirt. Da ein Atlas wie vorliegender naturgemäss nur einen be- schränkten Käuferkreis hat, so würden sich die Lichtdrucke kaum billiger stellen als Silbercopien. Letztere haben aber den unschätz- baren Vortheil, die Einzelheiten des Negativs weit besser wiederzugeben als der Lichtdruck. Unter den verschiedenen Arten der Silberpapiere wurde das KuKz'sche Celloidin- (ClüorsilbercoUodium-) Papier gewählt, da es, ebenso wie das Chlorsilbergelatine- (Aristo-) Papier, viel feiner zeichnet, als das in der Porträt-Photographie allgemein übliche, für Mikrophotogramme ganz unbrauchbare Albumin-Papier. Das Celloidiu-Papier^ ist für den Mikrophotographen unstreitig das werthvoUste. Der Werth desselben würde freilich ein noch höherer sein, wenn der Verfertiger sich entschliessen könnte, statt des rosa oder violetten Tones einen rein weissen Ton zu liefern, und wenn etwas weniger Präparationsfeliler, die sich in der Copie als weisse Stellen markiren, vorhanden wären. Dem Aristo-Papier ist das Celloidin-Papier durch billigeren Preis, grössere Lichtempfindlichkeit, weicheres Copiren und vorzügliches Tonen im Tonfixirbade überlegen. Die Lichtempfind- lichkeit desselben ist so gross, dass an hellen Tagen im Schatten von jedem nicht zu dichten Negative 30 bis 40 Copien gedruckt werden konnten. Ein Negativ (Cupula terminalis) lieferte stündlich 10 Copien. Wer — wie leider die meisten Mikrophotographen — Gelegenheit hatte, mit Lichtdrucken die traurigsten Erfahrungen zu machen, wird von dem durch vorliegenden Atlas erbrachten Beweis, dass es nicht nur möglich, sondern auch vortheilhaft ist, massig grosse Auflagen in directen Silberdrucken herzustellen, gewiss gern Notiz nehmen. Eder, J. M., Photographie des Netzbautbildes im Insecten- auge (Edeb's Jahrb. f. Photogr. u. Reproductionstechuik Bd. V, 1891, p. 50). Um das Netzhautbild des Insectenauges zu photographiren, verfuhr ExNER (Wien) in Verbindung mit J. M. Eder folgendermaassen : Das Auge eines lebenden Leuchtkäfers (Lampyris splendidula) wurde mit einer gut schneidenden Staarnadel frisch abgeschnitten, in ein Schälchen gebracht, die concave Seite zur Entfernung des Pigmentes abgepinselt und dann auf einem dünnen Glimmerblättchen mit sehr verdünntem >) Etwa ein halbes Dutzend Exemplare wurde auf Aristo-Papier gedruckt. VIII, 2. Referate iind Besprechungen. 199 Glycerin befestigt. Die Dichte des Glycerins war so gewählt, dass der Brechungsindex = 1"346 betrug. Da dies nämlich der Brechungsindex des Käferblutes ist, so war das Facettenauge möglichst in jenem Zu- stande, in welchem es sich im lebenden Käfer befindet. Das Auge wurde nun vor das Mikroskop gebracht, der Apparat in horizontale Lage umgelegt und gegen das Kreuz eines hell erleuchteten Fensters gerichtet. Stellt man das Mikroskop auf das Käferauge ein, so sieht man zuerst die Facetten des Auges ; hebt man nun langsam den Tubus mit Hilfe der Mikrometerschraube, so erblickt man ungefähr 1 mm hinter dem Käferauge das Luftbildchen jenes Gegenstandes, gegen welchen das Auge gerichtet ist. — Die Aufnahme geschah mit Zeiss'- schen Apochromaten [welche Nummer?] und Projectionsocular. Die Vergrösserung ist angeblich eine lOOfache. Auf dem beigegebenen Lichtdrucke ist das Fensterkreuz, ein auf die Scheiben geklebtes grosses R aus schwarzem Papier und eine durch das Fenster in der Ferne sichtbare Kirche leidlich scharf. Damit ist der Beweis erbracht, dass der Leuchtkäfer mittels seiner Facettenaugen, welche mehr als 100 Facettenglieder besitzen, deutlich sieht und eine ziemlich grosse Tiefe der Sehschärfe hat. Gkimm's Mikrophotographien (Edeb's Jahrb. f. Photogr. u. Repro- ductionstechnik Bd. V, 1891, p. 96). Der 22 Seiten des EoER'schen Jahrbuches umfassende, mit zahl- reichen Holzschnitten ausgestattete Aufsatz: „Geimm's Mikrophoto- graphien" gehört zu denjenigen Arbeiten über Mikrophotographie, welche leider 25 Jahre zu spät das Licht der Welt erblickt haben. Es verlohnt sich in der That nicht , auf all die Fehler und Ungenauig- keiten besonders aufmerksam zu macheu, welche sich der Verf. des Artikels in völliger Unkeuutniss der gesammten neueren Literatur zu Schulden kommen lässt. Wir wollen es ihm verzeihen, dass er Hei-rn Prof. R. Koch zum Vorsteher und Leiter des Reichsgesundheitsarates in Berlin macht, dass er ferner Präpositionen mit dem falschen Fall gebraucht. Weniger harmlos, und auf die von Grimm veröffentlichten Mikrophotogramme ein eigenthümliches Licht werfend, ist die Be- merkung, dass es nothwendig sei, die Fehler der Aufnahme durch Retusche zu ergänzen und mitunter ganze Theile durch Retusche zu ersetzen (p. 106). Ein höchst eigenartiges Recept ist es fernerhin, dass man verhältnissmässig dicke Objecte mit freier Oeffnung des Ob- jectivs, ohne Blendung „wenn möglich mit einer aplauatischen Linse" aufnehmen und etwa sich geltend machende störende Flecke durch 200 Referate iind Besprechungen. VIII, 2. Retusche beseitigen soll (p. 107). Als grossen ZEiss'schen Apparat bildet der Autor ein Modell ab, welches aus den ZEiss'schen Katalogen längst verschwunden ist. Bei Aufnahme undurchsichtiger Körper müsse man mit ziemlich grosser Blendenöffnung arbeiten (p. 114). Was hier Gbimm mit Blendenöffnungen will, die doch unter dem Objecte sitzen, während er kurz zuvor gesagt hat, dass bei derartigen Objecten nur das auffallende Licht zur Geltung kommt, ist schwer verständlich. Die wenigsten Leser werden wissen, wie sie es anzustellen haben, dass bei ihnen „das Gefühl eines scharf empfindlichen Technikers" wirke (p. 114). Wir wollen uns mit diesen Stichproben begnügen. Das EoER'sche Jahrbuch würde nur gewinnen, wenn es in Zukunft Schriftstellern dieses Schlages sich verschlösse. Marlitauiier-Tiiriieretscher, G., Fortschritt auf dem Gebiete der Mikrophotographie (Edek's Jahrb. f. Photogr, u. Reproductionstechnik Bd. V, 1891, p. 137). Wie in den früheren Jahrgängen, so giebt Maektanneb-Turnee- ETSCHEE auch iu dem Jahrbuch für 1891 einen kurzen Ueberblick über die Leistungen und Fortschritte der Mikrophotographen im Jahre 1890. Er erwähnt kurz die Arbeiten von Thil und Thoueonde, Hitchcock, PiEEsoL, ferner das neue Immersionssystem von Zeiss mit 1"63 nume- rischer Apertur und den DuNKEE'schen Apparat, um dann auf die beiden beinahe gleichzeitig erschienenen Lehrbücher der Mikrophoto- graphie näher einzugehen, nämlich dasjenige von G. Maektannee- Tüeneeetschee (Halle, Knapp) und von R. Neuhauss (Braunschweig, Bruhn). 3. Präparationsmethoden im Allgemeinen. Zoth, 0., Versuche über die beugende Structur der quer- gestreiften Muskelfasern (Sitzber, d. k. Acad. d. Wiss. Wien. Math. - Naturwiss. Classe. Bd. XCIX , Abth. 3, 1890, p. 421—443). Es handelt sich um den Versuch, aus den FEAUNHorEE'schen Beu- gungserscheinungen, welche dünne Muskelpräparate im durchfallenden Lichte geben, einen Schluss zu ziehen auf die Feinheit der Structur, welche mit dem Mikroskop direct oft schwer oder gar nicht wahrzu- nehmen ist. Die von Zoth angenommene Beobachtungsmethode war folgende; Eine schmale Lichtquelle (am besten ein schwach gespannter VIII, 2. Referate und Besprechungen. 201 Faden aus dem Gewebe des Glilhkörpers einer AuER-Lampe) wird durch Spiegel und Condensor des Beleuchtungsapparats eines Mikroskops in eine für die Messung geeignete Höhe über oder unter dem Präparate abgebiklet. Das durch dieses hervorgebrachte Spectrum wird mit einem schwachen System (Zeiss A und Ocular 3 mit Mikrometer) beobachtet und die Distanz der eiuzehien Maxima gemessen. — Diese Distanz ist nach bekannten Sätzen der physikalischen Beugungstheorie einerseits proportional der Entfernung vom Präparat, anderseits umgekehrt pro- portional der mittleren Entfernung der beugenden Elemente von ein- ander. Hält man also erstere Entfernung bei allen Versuchen constant, so kann man aus der Messung der Beugungsmaxima einen Schluss ziehen auf die Feinheit der beugenden Structur. Man hat nur noch die Entfernung der Maxima von Gittern bekannter Dimension unter sonst genau gleichen Umständen zu bestimmen, um den Reductionsfactor der Messungen zu gewinnen. Der Vergleich der auf diese Weise erhaltenen Ergebnisse mit den bei directer Beobachtung (mit Immersion Yig) sich ergebenden führte zu dem merkwürdigen Resultat, dass die Beugungs- spectren Structuren entsprachen, in welchen nur die eine Art von Fasern, entweder die Q oder die Z (nach der bekannten Bezeichnung Rollett's) vorhanden waren, bei ungeändertem gegen- seitigen Abstand. Um sich über die physikalischen Unterlagen zu einem in dieses Gebiet fallenden Schlüsse näher zu informiren, stellte Zoth zwei Reihen von Versuchen an. Zuerst construirte er ein Gitter von va- riabelem Streifenabstand, indem er zwei parallelgestellte, mit ihren getheilten Seiten aufeinanderliegende Glasgitter senkrecht zur Strich- richtung gegeneinander verschob und die den verschiedenen Stellun- gen entsprechenden Beugungserscheinungen in der früheren Weise beobachtete. Ferner stellte er sich auch auf dem Wege photographi- scher Verkleinerung Gitter her, bei denen das Verhältniss zwischen Spaltbreite und Stegbreite ein verschiedenes war und welche zum Theil eine doppelte Periodicität hatten (schmaler Steg zwischen je zwei breiten und dergl). Auf diese Weise constatirte Zoth die den Physikern seit den Arbeiten von Fkaunhofer, Schvterd und Anderen wohlbekannte Thatsache, dass die Beugungserscheinungen durch jene Momente er- heblich beeinflusst werden , so dass zwei Structuren von gleichem mitt- leren Streifenabstand sich noch sehr verschieden verhalten je nach den genannten Umständen. Es können sogar einzelne Maxima ganz ver- schwinden , z. B. bei einem Gitter mit genau gleich breiten Stegen und Spalten alle von ungerader Ordnungszahl. — Aus diesen Versuchen 202 Referate und Besprechungen. YIII, 2. glaubt ZoTH den Schhiss ziehen zu müssen, dass es „vorläufig nicht an- geht, aus den Beugungserscheinungen, welche man von den reicher ge- streiften Muskelfasern der Insecten oder von den Querstreifungeu der- selben nachahmenden complicirten Gittern erhält, Schlüsse auf die Gitteranordnuüg derselben zu machen und daraus etwa Folgerungen für deren Abbildung im Sinne der ABBE'schen Theorie abzuleiten; so wie man das für Gitter mit äquidistanten und gleich breiten Streifen nach bekannten Gesetzen thun kann". [Dass man es nicht nach den- selben Gesetzen thun kann , versteht sich von selbst ; dass man es aber überhaupt nicht thun kann , ist gewiss unrichtig. Man muss eben die Gesetze der Gitter von doppelt periodischer St ru et ur mit lieranziehen, welche, wie erwähnt, ebenfalls bekannt sind. Auf die Theorie der Lamellen- (Verzögeruugs-) Gitter, welche doch eigent- lich allein erst Analoga zur Structur von Muskelstreifungen bieten, geht Verf. gar nicht ein. D. Ref.] S. CmpsU {Jena), Webster^ J. C, An improved method of preparing large sections of tissues for microscopic examination. (Journ. of Anat. and Physiol. vol. XXV, 1891, p. 278—281). Da die bisherigen Methoden, grosse Schnitte herzustellen. Gefrieren- lassen und Celloidineinbettung, dem Verf. aus mehreren Gründen nicht genügten, so hat derselbe eine neue und billige Methode ausfindig ge- macht solche anzufertigen. Es ist dieses die folgende: die Gewebsstücke werden auf eine beliebige Weise fixirt und gehärtet, zuletzt aber immer für 12 bis 18 Stunden in absoluten Alkohol gebracht. Für besonders günstig hält Verf. das folgende Verfahren: die frischen Gewebstheile kommen für eine Nacht in eine durch Kochen gesättigte Lösung von Sublimat (in a boiled saturated Solution), dann Auswaschen in Wasser, Uebertragen in eine Mischung von einem Theil Methylalkohol auf zwei Theile Wasser, hierin 24 Stunden, dann in eine solche Mischung zu gleichen Theilen für 2 Tage. Bei fortwährendem Wechseln der Flüssig- keit lässt man den Gehalt derselben an Methylalkohol mehr und mehr steigen, bis nach 8 oder 10 Tagen das Präparat in reinem Methylalko- hol liegt, worin es beliebig lange verbleiben kann. Zur weiteren Unter- suchung entnimmt man demselben ein Stück von 5 bis 11 mm Dicke und legt dieses für 12 bis 18 Stunden in absoluten Alkohol, dann über- trägt man dasselbe für 24 Stunden in reines Petroleum (pure naphta), darauf in eine Mischung von gleichen Theilen Petroleum und leicht schmelzenden Paraffins in einem Wärmekasten von 46 bis 49" C. für 18 bis 24 Stunden. Verf. wählt Petroleum, da dieses Paraffin bei einer VIII, 2. Referate und Besprechungen. 203 weit niedrigeren Temperatur löst als Terpentin und weit billiger ist als Clilorofurm oder Xylol. Dann wird das Präparat in geschmolzenes, leicht schmelzbares Paraffin übertragen und ungefähr bei derselben Temperatur darin gelassen. Nun überträgt man es in eine Mischung von einem Theil leicht schmelzbaren und 4 bis 5 Theilen schwer schmelzbaren Paraffins, ebenfalls für 24 Stunden, aber bei höherer Temperatur, die indessen nicht über 60" C. steigen darf. In diese letzte Mischung wird das Präparat eingebettet, wobei wichtig ist, dass man das Paraffin in kaltem Wasser schnell abkühlt. Geschnitten wird in einem massig warmen Räume. Verf. hat das „Bruce microtome" ver- wendet. Zum Aufkleben der Schnitte wird die CoUodium-Nelkenöl- mischung am meisten empfohlen. Die Schnitte werden mit Hülfe eines weichen Haarpinsels über einem kleinen Flämmchen geebnet und ange- drückt. Das Paraffin wird durch zwei- bis dreimaliges Waschen mit Petroleum entfernt, welches man jedes Mal etwa für eine Minute auf dem Objectträger einwirken lässt. Das Petroleum wird schliesslich durch Methylalkohol entfernt. Dann kann man färben: Hämatoxylin, Hämatoxylin und Eosin, Hämatoxylin und Bismarckbraun, Alauncarmin geben gute Resultate. Am besten wirkt die folgende Hämatoxylin- färbung: man färbe drei Minuten oder länger in der EnßLiCH'schen Hämatoxylinlösung, übertrage den Schnitt in ein Gefäss mit destillirtem Wasser, das wenige Tropfen Salzsäure enthält. Das Gewebe wird bis auf die Kerne entfärbt. Dann übertrage mau in eine sehr schwach alkalische Flüssigkeit (doppelt kohlensaures Natron), bis der Schnitt wieder blau ist. Wünscht man eine Doppelfärbung mit Eosin, so wasche man den Schnitt in Wasser aus und bringe ihn in eine '/gprocentige Eosinlösung für 2 Minuten. Soll Bismarckbraun angewandt werden, so nehme man eine '/jprocentige Lösung. Dann Auswaschen in Wasser, Methylalkohol, absoluter Alkohol, Nelkenöl oder Xylol, Balsam gelöst in Petroleum, Xylol oder Benzol. — Wünscht man eine Stückfärbung vor der Einbettung, so verfahre man folgendermaassen. Man färbe das in Alkohol gehärtete Stück 18 bis 20 Stunden lang in der folgenden Boraxcarminlösung : man löse 4 g Borax in 100 cc Aq. dest. und erhitze bis zum Kochen, füge dann 2*5 g Carmin zu und koche 12 Minuten, lasse abkühlen und setze die gleiche Menge TOprocentigen Alkohols zu, lasse .3 bis 4 Tage stehen und filtrire (Geenacher's alkoholischer Borax- carmin). Das überfärbte Gewebsstück wird dann für 12 bis 14 Minuten in eine Mischung von 4 Tropfen Salzsäure auf 70 cc absoluten Alkohols und 30 cc Aq. dest. gebracht. Dann wird es für 3 Stunden in Methyl- alkohol gelegt und endlich für 18 bis 24 Stunden in absoluten Alkohol. 204 Referate und Besprechungen. VIII, 2 Darauf in Nelkenöl, bis es untersinkt. Scliliesslicli kommt es in Petroleum und dann wie oben in Paraffin. Schiefferdeclier (Bonn). Hansemauii, D., Ueber pathologische Mitosen (Vibchow's Archiv, Bd. CXXIII, p. 356—370 m. 2 Tfln.). Für das Studium der pathologischen Mitosen hält Verf. nur ganz einwandsfreie Präparate verwerthbar. Die Gewebsstückchen müssen daher unmittelbar vom lebenden Körper in eine wenn möglich körper- warme Fixirungsflüssigkeit gebracht werden. Als soche ist am meisten eine concentrirte wässerige Sublimatlösung zu empfehlen. Verf. löst Sublimat in kochendem Wasser im Ueberschuss und lässt dasselbe beim Erkalten auskrystallisieren. In dunkler Flasche aufbewahrt hält sich diese Flüssigkeit auf dem Ueberschuss längere Zeit. Die möglichst kleinen Organstückchen bleiben in dieser Lösung je nach der Grösse 10 Minuten bis eine Stunde. Für grössere Organstücke, die länger darin bleiben müssteu, wähle man lieber eine andere Methode, da die meisten Organe, besonders glatte Musculatur und Epidermis, in der Sublimatlösung bei längerer Einwirkung so hart werden, dass das Messer an ihnen ausbricht. Aus dem Sublimat werden die Präparate direct in verdünnten Alkohol übertragen, dann steigender Alkohol, Paraffin- einbettung. Zur Darstellung der Mitosen verwende man nicht Stück- färbung, man klebe die Schnitte auf dem Objectträger auf und färbe dieselben stehend in einem hohen Glase. Es werden so Niederschläge vermieden, besonders wenn man mit Hämatoxylin arbeitet. Man nehme die Farbe möglichst verdünnt und lasse die Präparate 1.5 bis 24 Stunden darin. Alle Anilinfarben erzeugen leicht an den Chromosomen Niederschläge, mit Ausnahme der Flemming 'sehen Safran in meth od e. Durch diese erhalten aber die Chromosomen einen starken Glanz, der die Grenzen weniger deutlich hervortreten lässt. Bei der Kleinheit der menschlichen Mitosen giebt gerade die matte und scharfe Färbung des verdünnten BöHMER'schen Hä- matoxylins die besten Resultate. Scliiefferdecker {Bonn). Rctziiis, Cf. , Muskel fibrille und Sarkoplasma (Biologische Untersuchungen. Neue Folge. Bd. I, 1890, p. 51 — 89 m. Taf. 15—17). Verf. hebt als besonders günstig für die Untersuchung aus der Zahl der Arthropoden Oryctes nasicornis hervor, ferner Cetonia und Carabus. Von anderen Arthropoden erschien Astacus fluviatilis am besten. Bei sonstigen Wirbellosen schien die Musculatur des Schwanzes von Appen- VIII, 2. Referate and Besprechungen. 2Ö6 dicularia besonders interessant zu sein. Unter den Wirbelthieren hebt Verf. als Beispiel die Structur der Muskelfasern von Myxine, Raja, Ka- ninchen, und theilweise auch die des Menschen hervor. Was die Fixi- rung anlangt, so erhielt Verf. die schönsten und klarsten Präparate nach Einlegen des lebenden Gewebes in Chrom-Osmium-Essigsäure, Färbung mit Rosanilin und Aufbewahi'en in Kaliacetat. SchiefferdccJccr {Bonn). 4. Präparationsmethoden für specielle Zwecke. A, Niedere Thiere. Maas, 0., Ueber die Entwicklung des Süsswasser- schwammes (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. X H. 4, 1890, p. 527—554 m. 2 Tfln.). Das Material zu vorliegender Untersuchung erhielt Verf. aus der Spree in Berlin (Waisenbrücke) und zwar benutzte er die in stärkeren Strömungen angesiedelte grünliche Spongilla lacustris, besonders aber die mehr in der Tiefe befindlichen blendend weissen Krusten von Spon- gilla fluviatilis. Die mit einem Netz hervorgeholten Krusten wurden gleich im Kahne mit Hilfe einer Lupe auf Furchungsstadien geprüft, welche an ihrer weisslichen Farbe im übrigen Gewebe erkannt werden können. Die passenden Stücke kamen in Gläser mit Spreewasser und später in besondere Aquarien. Letztere müssen , entsprechend den natürlichen Lebensbedingungen, im Schatten aufgestellt werden. Das Ausschwärmen der Larven geschieht meist über Nacht. - — Zur Beob- achtung der fortschreitenden Entwicklung (Festsetzen der Larve und Ausbildung des jungen Schwammes) erwies sich dem Verf. besonders ein „Deckglasaquarium" sehr günstig. Dasselbe ruht auf einem Stativ, die 1 cm tiefen Seiten werden durch massive Glasstützen, die vordere und hintere Wand durch je ein 1 qdm grosses Deckglas gebildet. Das Aquarium fasst gegen 100 cc Wasser und kann Bodentheile und Elodea- pflänzchen aufnehmen. Die Beobachtung geschieht mit einem horizon- tal gestellten Mikroskope unter Anwendung von Vergrösserungen bis zu Zeiss f. Der Spiegel wird besonders aufgestellt, am Aquarium eine Blende angebracht. Für die Weiterentwicklung der Larven ist Ver- dunkelung nöthig. — Die Larven setzten sich auch an grosse Deck- gläser an, welche von selbst auf der Wasseroberfläche schwimmen, können dann in der feuchten Kammer beobachtet oder zu Dauerpräpa- ^06 Referate und Besprecliimgen. VlII, 2. raten (besonders bei Ag NO3 -Einwirkung) verarbeitet werden, welche eine Betrachtung von beiden Seiten gestatten. — Die Conservirung ganzer Schwammstücke geschah mit absolutem Alkohol nach vorherigem Ausschwenken (nach F. E. Schulze). Für die Larven kam Sublimat und Ueberosmiumsäure, mit besonders gutem Erfolge aber PLEMMiNrr's Chrom-Osmium-Essigsäure zur Verwendung. Zur Färbung benutzte Verf. für ganze Schwammstücke und Larven Boraxcarmin und Häma- toxyliu, zur Differenzirung des Dottermaterials in Schnitten Nachfärbung mit Bleu de Lyon und Malachitgrün. Letzteres in schwach alkoholischer Lösung mit nachherigem Auswaschen durch stärkeren Alkohol lieferte die besten Bilder. Die Einbettung geschah in Paraffin, bei Benutzung ganzer Schwammstücke und von an Elodeablättern festgehefteten Lar- ven direct, sonst mussten die Larven mittels Eiweiss (Mayer's Eiweiss- Glyceringemisch nach Semon) ' auf Leberstückchen aufgeklebt werden. Ilenhing {Göttinge'}!). Scllllberg, A., Zur Kenntniss des Stent or coeruleus (Zool, Jahrb. Abtheil. f. Anat. u. Ontog. Bd. IV, 1890, p. 197—238 m. 1 Tfl.). Zur isolirten Darstellung der „Basalsäume", auf welchen die Mem- branellen aufsitzen, kann nach Fixirung mit Chrom-Osmium-Essigsäure verdünntes Eau de Javelle verwendet werden. Die Membranellen selbst zerfasern übrigens durch verschiedene Reagentien ausserordentlich leicht, d. h. die Plättchen zerfallen in AVimpern, wenn auch je nach der Stärke der Reagentien verschieden tief. Während beispielsweise bei der unter- suchten Art einprocentige Osmiumsäure fast gar nichts verändert, wir- ken die Dämpfe dieser Säure ziemlich stark verändernd ein. Der Verf. betont daher, dass alle auf conservirte Exemplare gestützte Angaben über die Structur dieser Gebilde der Revision an ganz frischem Material bedürftig sind. K. Fiedler (Zürich). Braem, F.^ Untersuchungen über die Bryozoen des süssen Wassers (Bibliotheca Zoologica. H. 6, 1890, 134 pp. 4° m. 15 Tfln. u. zahlr. Figg. im Text). Zur Untersuchung des Keimstockes und der Statoblastenbildung wurden die Colonien in der Regel mit Sublimat, seltener mit Pikrin- oder Chromsäure fixirt und mit Pikrocarmin gefärbt. Aus isolirten Zweigen oder (bei fungoi'den Formen) aus mittels des Rasirmessers her- ') Semon klebte nach Angaben von 0. Hertwio die gefärbten Eier oder Larven von Synapta digitata mit Mavek's Eiweiss-Glycerin auf Leberstückeben (Jen. Zeitschr. f. NaturM'. Bd. XXII. 1888, p. 177), VIII, 2. Referate und Besi^rechungen. 207 gestellten etwa 1 mm dicken Schnitten durch die ganze Colonie (sagittal auf die Polypide, senkrecht zum Podium) wurden geeignete Knospen in Nelkenöl vorsichtig herausprilparirt, gezeichnet und nun erst ein- gebettet. Aus dem Paraffin in dünner Tafel herausgeschnitten, konnte dann der Funiculus bei intensiver Beleuchtung unter dem Mikroskop besichtigt und mit Zuhilfenahme der Zeichnung völlig genau orientirt werden. Querschnitte waren geeigneter als Längsschnitte, da eine leichte Drehung des Keimstockes gerade an der Stelle, wo die Ab- schnürung der Statoblasten beginnt, die Spaltung in zwei symmetrische Hälften unmöglich macht. Die Untersuchung der Embryonalentwicklung im keimenden Stato- blasten stiess auf mehrfache Schwierigkeiten. Gerade bei der Form, welche die grössten Statoblasten (von ca. 1 mm Durchmesser) aufweist, bei Cristatella ist der Embryo durch eine eigenthümliche Modification des Schwimmrings ausserordentlich wirksam, und selbst noch wenn die Schalen bereits merklich gelüftet sind, gegen äusssere Einflüsse ge- schützt. Nur bei den viel kleineren Statoblasten der Plumatellen tritt sofort nach dem Aufbrechen der Embryonalkörper zu Tage und kann daher leicht von den verschiedenen Fixirungs- und Fäi'bungsflüssigkeiten erreicht werden. Ein Oeffnen der Statoblasten im frischen Zustand führt nur zu sofortigem Austritt des Dotters und damit zu völliger Zer- störung des Inhaltes. Schliesslich wurden jedoch im heissen Sublimat (concentrirte Lösung) und in der Pikrinsäure Fixirungsmittel gefunden, welche die Schalen schnell durchdringen und keine Schrumpfung be- wirken. Um das Innere der Cristatellen-Statoblasten nun auch den zur weiteren Untersuchung nöthigen Reagentien zugänglich zu machen, wurden dieselben nach 10 Minuten in destillirtes Wasser übertragen und sogleich durch einen kleinen Rasirmesserschnitt eröffnet. Man führt denselben am besten als Tangentialschnitt, d. h. parallel zur Fläche des Statoblasten in die Wölbung der beim Schwimmen nach oben gekehrten, etwas flacheren Seite der Schale. (An der unteren Seite wird das Primärpolypid gebildet und auch am Rande liegen wich- tige Parthien). Nach etwa einstündigem Auswässern wird der Stato- blast allmählig in immer stärkeren Alkohol übergeführt, im 96procentigen 24 Stunden belassen, nun ebenso allmählig wieder in Wasser zurück- gebracht und in Pikrocarmin gefärbt. Um den Statoblasten später im Paraffin nach Wunsch orientiren zu können, muss er beim Passiren des Oeles skizzirt werden; die Umrisse der künstlichen Oefi'nung dienen dann als Leitlinien. Beim Schneiden ist es vortheihaft, den Theil des Statoblastenrandes, den das Messer zuerst berühren müsste, vorher ab- 2Ö8 Referate und Besprechungen. VIII, 2. zutragen; andernfalls werden die Paraffinblättchen von den abspringen- den Clütinstückchen leicht verletzt. — Die freien Larven sind durch Einwerfen in kalte concentrirte Sublimatlösung sehr gut zu conserviren. Genaue Untersuchung der äusseren Ursachen der Keimung, in der freien Natur wie durch das Experiment, setzten den Verf. in den Stand, in einem beliebigen Theil seines Vorrathes an keimfähigen Statoblasten den Entwicklungsprocess einzuleiten und so sehr vollständige Reihen zu erhalten. Zunächst zeigte sich, dass zur Erreichung der blossen Keimfähigkeit die Statoblasten einmal geradezu eingefroren, mindestens einige Tage der Einwirkung des Frostes ausgesetzt gewesen sein müssen. Da aber auch Abschluss der Luft, d. h. im Experiment länge- res Liegen in luftdicht verschlossenen Wassergefässen, in der Natur das Verweilen auf dem Grunde der Gewässer, die Statoblasten keimfähig macht, dürfte „die so oft erprobte Wirksamkeit des Frostes darin be- stehen , dass sie die Athmung des Statoblasten unterbricht und den In- halt desselben zu absoluter Ruhe zwingt ^^ Der nun keimfähig gewordene Statoblast kann in diesem Zustand lange Zeit, „vielleicht mehrere Jahre, selbst an der Oberfläche des Wassers verharren, vorausgesetzt, dass die Temperatur sich nicht über den Nullpunkt erhebt. Es kann unterdessen beliebig oft einfrieren, und ohne Zweifel wird gerade durch den Frost sein Inhalt am wirksamsten conservirt". Ueberschreitet aber die Temperatur eine gewisse untere Grenze, die für Cristatella bei etwa 9 bis 10" C. liegt, so beginnt die Entwicklung der Statoblasten und geht bis zu einer oberen Grenze von etwa 30" C. um so rascher vor sich, je höher die Temperatur steigt. Die Statoblasten der genannten Art öffnen sich bei 10" C. in 8 bis 12 Tagen, bei 12 bis 13" in 6 bis 7 Tagen, bei 15 bis 16" in 5 Tagen, bei 17 bis 18" in 4 Tagen. Ausser der Temperatur ist für die Keimung des Statoblasten noch der Zutritt der atmosphärischen Luft von grösster Bedeutung: in der Tiefe des Wassers der Versuchsgläser festgehalten, zeigten sie wochenlang keine Entwicklung, Hess man sie an die Oberfläche steigen, setzte die- selbe sofort ein. Es ist selbstverständlich der Schwimmring, welcher die Erfüllung dieser Bedingung sichert. Ist der Statoblast einmal auf- gebrochen, so dauert es unter normalen sommerlichen Temperatnr- verhältnissen nur ca. 4 Tage bis der Embryo die Schalen verlässt und sich an den Gefässwandungen festheftet. K. Fiedler {Züricii). Ehlers, E., Zur Kenntniss der Pedicellinen (Abhandl. d. K. Gesellsch. d. Wiss. Göttingen Bd. XXVI, 1890. — 200 pp. 4". m. 5 Tfln.). VIII, 2. Referate und Besprechungen. 209 Verf. erbeutete Ascopodaria macropus Ehl. stets nur vor dem Ein- gange des Kriegshafeus von Cartagena, woselbst die Tliiere in 6 bis 8 Faden Tiefe sieb ausschliesslich auf Caulerpa angesiedelt hatten. Sie blieben bei genügendem Wasserwechsel in kleinen Aquarien eine Zeit lang am Leben. War das Wasser zu warm oder wurde es ungenügend gelüftet, so fielen an den Stöcken die Köpfe ab. — Die beste Conser- viruug wurde erzielt, wenn die lebenden Thiere eine kurze Zeit den Dämpfen von Ueberosmiumsäure ausgesetzt blieben. Die Härtung er- folgte mit Alkohol von steigenden Concentrationsgraden. Die dann mit Pikrocarmin gefärbten und in Glyceriu aufgestellten Thiere geben gute und dauerhafte üebersichtspräparate. Pikrinschwefelsäure , schwache Chromsäure, Alkohol sind weniger brauchbare Couservirungsmittel, wie aus dem Verlust der Flimmerhaare und dem Zerfall der Drüsenzellen des Lebermagens kenntlich wurde. Einbettung in Paraffin und Nach- färbung der mit Mayek's Eiweiss-Glycerin aufgeklebten Schnitte mit Safranin, Gentianaviolett, Jod-Jodkalium oder Dahlia oder Ehrlich's Hämatoxylin, Eosin. -Henking {GöUinyen). Baveiiport, C. B., Cristatella; the origin and development of the individual in the colony (Bullet. Museum of Comparative Zool. Cambridge U. S. A. vol. XX, 1890, p. 101 —152 w. 11 pltes.). Von den zahlreich angewendeten Fixirungsmitteln war Sublimat, von den Farbstoffen Czokor's Alauncochenille am brauchbarsten. K. Fiedler {Zürich). Haniaiin, 0., Monographie der Acauthocephalen [Echi- norrhynchen] (Jen. Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. XXV, H. 1, 2, 1890, p. 113—231 m. 10 Tfln.). Verf. übergoss die aus dem Darme der eben geschlachteten Wirthe entnommenen Thiere direct mit gesättigter Sublimatlösung und erhielt sie so in völlig ausgestrecktem Zustande, benutzte in gleicher Weise auch Alkohol, dem einige Tropfen einer Platinchloridlösung zugefügt waren. Zur Erreichung tadelloser Schnittserien ist es aber nöthig, die Würmer in Stücke zu schneiden, damit die Conservirungsflüssigkeit rasch eindringt. Verf. stellt Sublimat, auch in Verbindung mit Essig- säure gebraucht, über die von Saepftigen empfohlene O'lprocentige Osmiumsäure. Es sei besonders für jüngste Larven bei Einwirkung von 2 bis 3 Minuten und nachfolgender Härtung in Alkohol sehr empfehlens- werth. Für Furchungsstadien bewährte sich Osmiumsäure, ferner Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 2. 14 210 Referate und Besprechungen. VIII, 2. Flemming's Gemisch und ygprocentige Platincbloridlösung mit nach- heriger Färbung durch Anilinfarben. Andere Conservirungsmittel, wie Chromsäure, tödten zu langsam, leisten daher wenig. — Zur Isolirung der Ganglienzellen diente mit Erfolg Drittelalkohol. Henking {Göttingen). Cerfoiltaine, P., Recherches sur le Systeme cutane et sur le Systeme musculaire du Lombric terrestre (Arch. de Biol. t. X, 1890, p. 327—428 av. 4 plches.). Verf. giebt eine ausführliche Untersuchung über den feineren Bau des Regenwurms, aus welcher wir die folgenden technischen Bemer- kungen mittheilen wollen. Um die Cuticula für sich in grösserer Aus- dehnung darzustellen, macerire mau den Wurm in einer sehr verdünnten Chromsäurelösung (1 : 2000) oder in stark verdünnter MüLLEß'scher Flüssigkeit. Das zu diesem Zwecke von Vejdovsky ' angegebene Ein- legen des Wurms in Wasser ist nicht empfehlenswerth, da hierin sehr schnell eine Zersetzung eintritt, dagegen wirkt der gleichfalls von diesem Autor empfohlene schwache Alkohol sehr günstig. Man lege vorher getödtete Thiere in eine ziemlich beträchtliche Quantität von Drittel- alkohol; nach 3 bis 4 Tagen durchtrenne man die Körperwand der ganzen Länge nach; die Cuticula löst sich dann fast von selbst ab. Man bedient sich hierzu am besten einer gekrümmten Scheere, macht einen leichten Einschnitt in der mittleren Parthie des Körpers und ver- längert denselben nach beiden Seiten. Stärkerer Alkohol, z. B. solcher von 65", wirkt ebenso: die Cuticula löst sich nicht allein in Folge der Maceration ab, sondern hauptsächlich in Folge der allseitigen Coutrac- tion der unter ihr befindlichen Weichtheile. Um dasThier zu tödten, kann man die folgenden Methoden anwenden: 1) Das Chloroform. Dasselbe darf nicht direct einwirken, es kommt sonst zu heftigen Con- tractionen und einer reichlichen Schleimsecretion , sondern es wird am besten nach den Angaben von Peeeier- angewendet: Man bringe die Würmer in eine flache Schale unter Wasser, stelle in eine Ecke der- selben ein Uhrschälchen mit einigen Tropfen Chloroform und bedecke das Ganze mit einer Glasplatte. Nach einer halben Stunde oder länger werden die Thiere betäubt, schlafen allmählich ohne Contractionen ein und sterben in einem Zustande vollständiger Extension ab. 2) Wünscht ') Vejdovsky, Fb., System und Morphologie der üligochaeten, Prag 1884. ^) Perrier, E., Organisation des Lombriciens terrestres (Avch. de Zoo), exper. et gen. 1873—1874). VIII, 2. Referate und Besprechungen. 211 man die Gewebe cliu'ch Alkohol zu tixiren, so bringe man die Würmer in eine Scliale, welche eine Schiclit Wassers von ungefähr Ya cm Dicke enthält, decke ein Stück Filtrirpapier darüber und lasse tropfenweise starken Alkohol (z. B. 95") daraufträufeln. Nach einiger Zeit sind die Würmer in völliger Ausdehnung abgestorben. 3) Eine ausgezeichnete, vielleicht die beste Methode, ist die Anwendung des Curare. Man inji- cire mittels einer kleinen Spritze nach Einstich in die Körperwand etwa 2 cc einer Curarelösung von 1 : 500, bringe das Thier in Wasser, nach einer Viertelstunde ist es unbeweglich. — Chi oral wirkt auf die Thiere durchaus ungünstig. — Die Structur der Cuticula untersucht man am besten durch Einlegen des frischen Präparats in Wasser oder Methylalkohol. Aufbewahren lassen sich solche Präparate nicht; Sub- stanzen mit höherem Brechungsindex lassen die Structur nicht erkennen. — Man färbe die Cuticula auf folgende Weise: Nachdem man von einem Stücke des Haut-Muskelschlauches Schnitte (unter einem Winkel von 45" zur Körperachse) angefertigt hat, klebe man dieselben mit einer CoUodium-Nelkenöllösung auf dem Objectträger fest, lasse auf einem Ofen bei 50 bis 60" eine oder zwei Stunden abdunsten, wasche mit Terpentin, dann mit Alkohol absolutus, färbe für eine Stunde in der feuchten Kammer mit einer Hämatoxyliulösung nach Paul Mayer. — Um das Hypoderm zu studiren, tödte man einen Wurm nach einer der angegebenen Methoden, am besten durch Alkoliol, ab und bringe ihn für einige Tage in Drittelalkohol. Mau reisse dann die Cuticula an mehreren Stellen vorsichtig ein und ziehe sie gleich einem Handschuh- finger vom Körper ab. Dann wasche man den Wurm in Aq. dest. ab und bringe ihn in eine Mischung von zwei Dritteln pikrocarminsauren Ammoniaks und einem Drittel Glycerin. Nach 24 Stunden schabe man leicht über die Körperoberfläche und untersuche die losgelösten Elemente in Drittelglycerin. — Was die im Hypoderm befindlichen Drüsen an- langt, so wird ihr Inhalt durch Alkohol stark verändert. Besser con- servirt sich derselbe bei Einwirkung einer Chromsäurelösung von 1 : 2000. — Um Schnitte durch das Hypoderm anzufertigen, ist eine Härtung in starkem Alkohol nicht zu empfehlen, am besten wirkt die starke FLEMMiNG'sche Chromosmiumessigsäurc. Man klebe auf und färbe wie oben oder mittels Safranin, Fuchsin oder Bleu de Lyon. — Was den Ver dann gsk anal anlaugt, so ist derselbe häufig mit Erde angefüllt. Um Schnitte zu erhalten, muss man diese entfernen und durch eine andere Substanz ersetzen. Am besten eignet sich dazu der Kaffeesatz (marc de cafe), der zuerst zu diesem Zwecke von C. Vogt und E. Yung angewendet worden ist. Das von Feiedlaendek auf Empfehlung von Kükenthal be- 14* 212 Referate und Besprechungen. Vlll, 2. nutzte aufgeweichte Filtrirpapier ist nicht günstig, da es bei der Einbettung zu hart wird, um gute Schnitte zu erlauben. — Um die Muskelfasern zu isoliren, kann man wieder den Drittelalkohol anwenden, doch ist es weit empfehlenswerther, ein Stück der Körperwand für 24 Stunden in 20procentige Salpetersäure zu legen. Hiernach vermag man leicht Fetzen der Riugschicht abzulösen, die man in ein Reagenzglas mit Drittelalkohol überträgt und durch Schütteln isolirt. Man lasse dann absetzen, decantire, giesse Boraxcarmin zu, schüttele leicht, lasse den Carmiu 24 Stunden einwirken, decantire wieder und setze Alkohol von 65" zu. Man untersuche dann in Alkohol oder bette durch ansteigenden Alkohol und Terpentin in Canadabalsam ein. — Um Schnitte von den Muskelfasern zu machen, härte man in Alkohol (dann Boraxcarminfärbuug im Stück) oder FLEMMiNG'scher Flüssigkeit (mit Anilinfärbung der Schnitte auf dem Objectträger), und schneide parallel zur Längsachse des Körpers. — Um Uebersichtsbilder über die Anordnung der Borstenmuskeln zu erhalten, verfahre man auf folgende Weise: Man tödte einen Wurm durch Curare (s. o.), härte ihn in FLEMMiNö'scher Lösung, dann in ansteigen- dem Alkohol. Darauf nehme man ein Stück aus der Mitte des Körpers von ungefähr 1 cm Länge und trenne von diesem mit einem Rasir- messerschuitt den Theil der Körperwand ab, in dem die beiden Borsten- reihen derselben Seite sich eingefügt finden. Dieses abgeschnittene Stück bringe man in Alkohol absolutus, dann für längere Zeit in Nelkenöl. Man bette in Canadabalsam ein, indem man durch seitlich angebrachte Korkstückchen einen zu starken Druck des Deckglases verhindert. Schiefferdccker {Bonn). Böhmig^ L., Untersuchungen über rhabdocöle Turbel- larien. IL Plagiostomina und Cylindrostomina Graff. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LI H. 2, 3, 1890, p. 167 —479 m. 10 Tfln. u. 21 Figg.). Es ist schwierig, im Epithel der Alloiocölen Zellgreuzen nachzu- weisen. Auf Schnitten sind kaum Spuren derselben zu sehen. Jedoch gelang es dem Verf. verhältnissmässig leicht an Plagiostoma Girardi und an noch pigmentlosen Exemplaren von Monophorum striatum, wenn die Thiere 12 bis 24 Stunden in Seewasser verweilten, dem eine ge- ringe Menge von Ehrlich's Methylenblau zugefügt war. Auch ein längere Zeit währender leichter Druck und dann Anwendung verdünnter Essigsäure Hess die Zellgrenzen als Linien hervortreten. Die Be- nutzung von Silbernitrat ergab wenig zufriedenstellende Resultate. Durch Methylenblau wird am lebenden Plagiostoma Girardi ferner VIII, 2. Referate und Besprechungen. 213 ein unterhalb des Hautmuskelsclilauclies liegendes System sich kreuzen- der und anastomosirender Stränge in blass blauer Farbe sichtbar, welche Verf. für einen subcutanen Nervenplexus zu halten geneigt ist. In Bezug auf die detaillirteren Angaben der Methoden bei Unter- suchung der verschiedeneu Gewebssysteme rauss auf das Original ver- wiesen werden. Henking (GöUingen). Woochvorth, W. M., Contribution to the morphology of the Turbellaria. 1. On the structure of Phagocyta gracilis Leidy (Bull. Museum of Comparative Zool. Cam- bridge U. S. A. vol. XXI, 1891, p. 1—42 w. 4 pltes.). Als Fixirungsflüssigkeit diente eine Combination der LANG'schen concentrirten Sublimatlösung und der KENNEL'schen öOprocentigen Salpetersäure, nämlich eine kalt gesättigte Lösung von Sublimat in öOprocentiger Salpetersäure, die nach wenigen Minuten durch die ge- wöhnliche gesättigte Sublimatlösung ersetzt wurde, welche ihrerseits ca. eine halbe Stunde einzuwirken hatte. Färbung mit Gkenacher's alko- holischem Boraxcarmin oder mit Oeth's Lithioncarmin. Die letztere Flüssigkeit wurde neben schwacher Osmiumsäure auch zu Macerirungs- zwecken verwendet. Zur Entfernung des oft sehr reichlich vorhandenen Pigmentes kann man einprocentige Kalilauge einige Minuten auf die aufgeklebten Schnitte einwirken lassen. Das Epithel der Pharyngeal- apparate, welche bei dieser merkwürdigen Form in Mehrzahl ausgebildet sind, wurde durch Uebergiessen mit heisser einprocentiger Silbernitrat- lösung dargestellt. K. Fiedler (Zürich). Wagner, F. V., Zur Kenntniss der ungeschlechtlichen Fortpflanzung von Microstoma (Zool. Jahrb. Abtheil, f. Anat. u. Ontog. Bd. IV, 1890, p. 349—423 m. 4 Tfln.). Die Mikrostomeen (M. lineare Oerst. und M. giganteum Hall.) wur- den in kleinen Zuchtaquarien gehalten (15 cm lang, 10 breit, 6 hoch), deren Boden mit einer dünnen Schlammschicht bedeckt war, deren Wasser wöchentlich gewechselt wurde. Trotz reichlicher Fütterung mit Daphniden hielten sich die Thiere darin höchstens zwei bis drei Wochen, in den noch kleineren Isoliraquarien (9 cm lang, 7 breit, 3 tief) sogar nur acht Tage. — Zur Fixirung war auf 60" erwärmte concentrirte wässerige Sublimatlösung am geeignetsten. Die Ketten, welche durch andere Reagentien, z. B. Pikrinschwefelsäure, fast regel- mässig zerfielen, blieben so fast stets im Zusammenhang. Brauchbare Ergebnisse wurden auch mit LANG'scher Flüssigkeit und mit halb- 214 Referate und Besprecliungen. VIII, 2. procentiger Osmiumsäiire erzielt. — Diircbfärbiing in Weigert's Pikrocarmin. — Zum Schneiden sind Thiere mit wenig gefülltem, namentlich von Daphnidenschalen möglichst freiem Darm zu benutzen. K. Fiedler {Zürich). Cori, C. J., Untersuchungen über die Anatomie und Hi- stologie der Gattung Phoroni s (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LI H. 2, 3, 1890, p. 480—568 m. 7 Tfln.). Verf. benutzte mit Vortheil die Betäubung des Thieres durch die von S. Lo BiANCO eingeführte Alkohol-Seewassermischung *, verwandte auch mit gleichem Nutzen hierzu Methylalkohol. Lösungen von Chloral- hydrat hatten nicht so gute Wirkung, während durch Tabakrauch die Thiere ebenfalls völlig regungslos gemacht werden konnten. Es war Hatschek im Hochsommer (nach der Laichzeit) unschwer gelungen, die Thiere aus ihren Sandröhren zu befreien, welche sie beim Schlecht- werden des Wassers im Aquarium wohl schon selbst verliessen; Cori dagegen berichtet, dass es im Frühjahr wegen der stark verdickten Hinterenden nur sehr mühsam durch stückweises Abreissen der Sand- röhren erreicht werden kann. — Von Conservirungsmitteln bewährte sich am besten die Chrom-Osmium-Essigsäure nach Fol (gute Erhaltung der Form und der histologischen Elemente, zuweilen allerdings zu starke Schwärzung). Verf. nahm die Härtung auf Glasplatten vor und hielt die Thiere mit Hilfe von Pinseln in gestreckter Lage. Später übertrug er sie auf 12 Stunden in eine grössere Flüssigkeitsmenge. Ausserdem kam zur Verwendung Sublimat, Pikrinsäuresublimat, Pikrinsäureplatin- chlorid und Alkohol. Meist Färbung in toto mit Boraxcarmiu, seltener mit Alauncochenille und Häraatoxylin. Einbettung in Paraffin. — Eine Maceration des frischen Objectes gelang mit Osmiumessigsäure (nach Hertwig) oder mit Chromosmiumessigsäure in sehr starker Verdünnung mit Zusatz von wenig Glycerin. Färbung der isolirten Elemente mit Pikrocarmin, Untersuchung in Seewasser. Henliing (GöUingen). Crrassi, B., e Castronovo, A., Dimostrazione di alcuni pre- parati fatti col metodo di Golgi [Demonstration einiger nach der GoLOi'schen Methode angefertigter Präparate]. (BuUett. Mens, della Accad. Gioenia Catania [2], 1890, Fase. 10 p. .3—4). Zum Nachweise, dass bei Cephalopoden und Crustaceen in der Punktsubstanz des Centralnervensystemes keine Anastomosen vorkom- ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 55. VIII, 2. Referate und Besprecliungen. 215 men, sondern nnr ein ausserordentlich verflochtenes Fasernetz besteht, bedienten VerfF. sich mit Erfolg der GoLGi'schen Methode. P. Schietnens (Neapel). Parker, G. H., The eyes in blind crayfishes (Bullet. Museum of Comparative Zool. Cambridge U. S. A. vol. XX, 1890, p. 153—162 w. 1 plte.). Gegenstand der Untersuchung bildeten die drei bisher aus Nord- amerika bekannten blinden Krebsarten, Cambarus pcUucidus Tellk. (aus der Mammutshöhle), C. hamulatus Cope & Packard (Tennessee) und C. setosus Faxon (Missouri). Die Exemplare waren sämmtlich in starkem Alkohol conservirt worden und wurden mit Czokor's Alauncochenille gefärbt. E. Fiedler (Zürich). Retziiis, G., Zur Kenntniss des Nervensystems der Cru- staceen (Biologische Untersuchungen. Neue Folge. Bd. I, 1890, p. 1—50 m. Taf. 1—14). Was die Technik der Methylenblaufärbung anlangt, so fand Verf. als Hauptpunkte , dass die Gewebe au der Luft liegen müssen , jedoch ohne zu trocknen und zweitens, dass es bei Wirbellosen viel länger dauert, bis Nervenfärbung eintritt, als bei Wirbelthieren. Bei Garneeleu injicirte Verf. mit einer gewöhnlichen kleinen Stichcanüle in das Abdomen, neben dem Bauchstrange 1 bis 2 cc einer 0'2procentigen Methylenblaulösung, schnitt dann die ventrale Haut- decke des Abdomens ab und legte die Thiere reihenweise in eine niedrige , fast ganz zugedeckte Schale. Nach 8 Stunden zeigten sich die Ganglienzellen theilweise gefärbt und nach 12 bis 20 Stunden (je nach der Temperatur) waren viele Ganglienzellen nebst den Fortsätzen intensiv blau und Hessen sich bis in die Punktsubstanz verfolgen. Bei diesen Thieren enthält die bindegewebige Haut, welche den Bauchstrang umgiebt, grosse verzweigte Pigmentzellen und muss daher vor der Untersuchung abgezogen werden. Hierdurch wird das zarte Gewebe leicht beschädigt, und es beginnt auch die Entfärbung, da man beim Abstreifen der Haut genöthigt ist, etwas Flüssigkeit zuzusetzen. Um das Gewebe durchsichtiger zu machen, fügt man etwas Glycerin zu, welches mit ein wenig pikrinsaurem Ammoniak versetzt ist. Man muss dann schnell untersuchen und zeichnen, weil die Entfärbung das Prä- parat rasch verdirbt. Noch besser eignet sich zur Untersuchung der Fl uss krebs, bei dem man auch die bindegewebige Hülle des Bauchstrangs nicht abzu- 216 Referate und Besprechungen. VIII, 2. streifen braucht, weil die seltenen Pigmentzellen die Untersuchung nicht stören. Methode wie oben. Es wurden kleine Exemplare gewählt und jeden Tag 1 bis 2 Dutzend untersucht. Nach Injection ins Abdomen wurde der ventrale Hautpanzer entfernt. Der Bauchstrang lag somit völlig frei an der Luft. Die Thiere wurden reihenweise auf den Rücken in eine beinahe zugedeckte Schale gelegt und am besten nach 18 bis 20 bis 24 Stunden untersucht. Dazu wurde der Bauchstrang vorsichtig herausgenommen und in einen Tropfen Glycerin gelegt, welcher schwach mit pikrinsaurem Ammoniak versetzt war. So fuhr Verf. fort, nahm jedesmal ein Ganglion und zeichnete nach Aufhellung des Präparates sogleich alles Deutliche und Wesentliche. Schiefferdechr (Bonn). Wrzesniowski, A., üeber drei unterirdische Gammariden (Zeitschr. f, wiss. Zool. Bd. L, 1890, H. 4 p. 600—724 m. 6 Tfln.). Verf. verschaffte sich nach langem vergeblichen Bemühen eine grössere Anzahl des blinden Höhlenkrebschens Niphargus unter Be- nutzung der AsPEE'schen Methode * auf folgende Weise: Er füllte den Bodensatz aus einem Kellerbrunnen in einen lose gewebten Musselinsack und spülte denselben in einem mit Wasser gefüllten Becken aus. Die grösseren Exemplare blieben im Sacke zurück, die kleineren wurden erhalten, indem das Spülwasser durch ein dichtes Maschennetz geseiht wurde. HenUncj {Göttingen). Heuchmaii^ A. P., The origin and development of the central nervous System in Limax maximus (Bullet. Museum of Comparative Zool. Cambridge U. S. A. vol. XX, 1890, p. 169—208 w. 10 pltes. a. 7 figg. in the text). Als beste Fixirungsmittel erwiesen sich '/jprocentige Chromsäure und Pekenyi's Chromsalpetersäure, Sollte die erstere angewendet werden, so wurden die Embryonen durch leichten Druck und noch von der inneren Hülle und dem Albumin umgeben, aus der angeschnittenen äusseren Hülle herausbefördert und auf zwei bis drei Minuten in die Chromsäure gelegt. So wurde nur der Embryo getödtet, nicht aber das Albumin gehärtet. Nun wurde in Wasser mit nur einigen Tropfen Chromsäure übertragen, auch die innere Eimembran angeschnitten, der Embryo mittels Nadeln, aber ohne jeden Druck, herausgedrängt und das Albumin so vollständig wie möglich entfernt. Jetzt erst kann auf ein ') Zool. Anz. Bd. III, 1880, p. 130. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 217 bis zwei Stunden in die '/gprocentige Chromsäiire eingelegt werden, worauf zwei- bis dreistündiges Auswaschen in fiiessendem Wasser und sehr allmählige Entwässerung in Alkohol folgt. — Bei Anwendung der PEKENYi'sclien Flüssigkeit muss der lebende Embryo in gewöhnlichem Wasser von Albumin und sämmtlichen Hüllen befreit werden, bevor er in die Lösung kommt, weil ersteres sich sonst in eine Gallerte umwan- delt, aus welcher der Embryo nicht unverletzt heraus zu schälen ist. Zwei bis drei Minuten der Säureeinwirkung genügen; es folgt Aus- waschen in destillirtem Wasser (5 Minuten), Einlegen in öprocentige wässerige Alaunlösung (30 Minuten), nochmaliges Auswaseben und end- lich Alkoholnachhärtung. — Färbung mit alkoholischem Boraxcarmin oder Czokor's Alauncocbenille oder Pikrolithioncarmiu, welch letzteres jüngere Stadien in % bis 1 Stunde, ältere in 1 bis 2 Stunden färbt. Paraffineinbettung mittels der Chloroformmethode, wobei die Zeit des Aufenthaltes im Wärmofen alles in allem anderthalb Stunde nicht überschreiten soll und bei 50 bis 52'' C schmelzbares Paraffin zu wählen ist. K. Fiedler {Zürich). Weinland, E., Ueber die Schwinger (Halteren) der Di- pteren (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LI H. 1, 1890, p. 55—166 m. 5 Tfln. u. 2 Figg.). Verf. hat eine grosse Zahl von Fiiegenarten aus den verschiedenen grösseren Gruppen untersucht und führt deren Namen auf p. 62 u. 63 an. Wollte derselbe sich über Befestigung und Bewegung der Schwinger Orientiren, so entfernte er vom Thorax den Kopf, das Abdomen und die Flügel und steckte eine dünne Nadel meist in der Richtung der Längsachse durch den Thorax. Die Spitze der Nadel wurde in ein Wachsklümpchen gesteckt, welches auf dem Objecttische des Mikro- skopes aufgesetzt war, und somit konnte durch Drehung und Verschie- bung der Nadel dem Thorax jede Lage gegeben werden. Mit Hilfe einer feinen Nadel oder besser eines zarten Pinsels konnte „durch die Hand einer zweiten Person" * der Schwinger bewegt werden, welcher übrigens an frisch getödteten Exemplaren zuweilen von selbst Bewe- gungen ausführt. Die Vertrocknung des Objectes wurde durch Auf- setzen eines Tropfens physiologischer Kochsalzlösung an die Abtren- nungsstellen verhindert, und zur Beleuchtung eine Beleuchtungslinse verwandt. — Chitinskelette wurden gewonnen, indem die Schwinger ') Mit Hilfe von Winkel's bildumdrehendem Oculare dürfte der Beob- achter selbst derartige Operationen ausführen können. Ref. 218 Referate und Besprechungen. VIII, 2. einige Tage in lOproceutiger Kalilauge macerirt, ausgewaschen, mit Eosin gefärbt und in Canadabalsam eingeschlossen wurden. — Zur Untersuchung des feineren Baues kam eine Conservirung mit absolutem Alkohol oder alkoholischem Eisenchlorid zur Verwendung. Die in Längs- oder Querschnitte zerlegten Schwiuger färbten sich gut mit Boraxcarmin, Pikrocarmin oder Hämatoxylin. Für die Darstellung der Nervenendapparate schlug Verf. (im Anschluss an Thanhoffer) folgen- den Weg ein : An einem ganz frischen Thiere wird der Schwinger un- verletzt sorgfältig von allen Thoraxtheilen befreit , alsdann wird Stiel und Köpfchen nahe über den Sinnesorganen abgeschnitten und das übrig bleibende, die Nervenendigungen enthaltende Stück auf eine viertel bis mehrere Stunden (5 bei Leptis, Caliphora) in eine einprocen- tige , etwas mit Essigsäure angesäuerte, im Dunkeln befindliche Gold- chloridlösung gelegt. War die Einwirkung genügend (die Zeitdauer hängt ab von der Länge und Weite des zu conservirenden Chitinrohres), so wird in der gewöhnlichen Weise oder besser in 2procentiger Essigsäure am Tageslichte reducirt, was 1 bis 2 Tage (bis dunkele Färbung eintritt) dauern kann. Nach Auswaschen kommt der Schwinger successive in absoluten Alkohol und wird in möglichst dünne Längs- und Querschnitte zerlegt (Canadabalsam). In Alkohol absolutus aufbe- wahrte Objecto ergaben nach Behandlung mit Goldchlorid keine guten Erfolge mehr. Henhing (Göttingen). B, Vei'tebraten. Spengel, J. W., Beitrag zur Kenntniss der Kiemen des Amphioxus (Zool. Jahrb. Abtheil. f. Anat. u. Ontog. Bd. IV, 1890, p. 257—296 m. 2 Tfln.) Die besten Ergebnisse lieferten horizontale Längsschnitte. (Zur Verfolgung des Gefässverlaufes müssen die Gefässe aber einigermaassen gut mit Blut gefüllt sein), welche mit der PEKBiER'schen Gelatine *, die alle Runzeln und Fältchen der Schnitte vollkommen ausglättet, anfge- geklebt wurden. K. Fiedler {Zürich). Holt, W. L., Observations upon the development of the teleostean brain, with special reference to that of Clupea harengus (Zool. Jahrb., Abtheil. f. Anat. u. Ontog. Bd. IV, 1890, p. 478—500 m. 3 Tfln. u. 4 Figg.). ») Ann. des Sc. Nat. Ser. 7. Zool., t. VIII, p. 77. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 219 Fixirung in Klkinenberg's Pikrinscliwefelsäure ist derjenigen in Sublimat-Eisessig (2 : 1) vorzuziehen. Beste Färbung mit Geenacher's alkoholischem Boraxcarmin. K. Fiedler {Zürich). Erlaiiger, K. v., Ueber den Blastoporus der anuren Am- phibien, sein Schicksal und seine Beziehungen zum bleibenden After (Zool. Jahrb. Abtheil. f. Anat. u. Ontog. Bd. IV, 1890, p. 239—256 m. 2 Tfin.). Das üntersuchungsmaterial stammt von je zwei Rana- und Bufo- Arten und von Bombinator igneus. Conservirung in Flkmming's Gemisch, nach achtstündiger Auswässerung Entfernung der Gallerte nach Bloch- MANN ' durch Eau de Javelle, eventuell Borax- oder Alauncarminfärbung (die Zellgrenzen sind bei ungefärbten Präparaten noch deutlicher), Pa- raffin-Einbettung. — Gehärtete Eier bringt man zum Studium der Ober- flächenverhältnisse zweckmässiger Weise in absoluten Alkohol und lässt sie langsam trocknen: die Form bleibt gut erhalten, jede einzelne Zelle tritt deutlich hervor. Eier, die wegen der grossen inneren Höhle leicht collabireu, tränkt man mit Paraffin und reinigt ihre Oberfläche wieder durch Terpentin oder Chloroform. K. Fiedler (Zürich). Schoebel, E., Zur postembryonalen Entwicklung des Auges der Amphibien (Zool. Jahrb. Abthl. f. Anat. u. Ontog. Bd. IV, 1890, p. 296—348 m. 2 Tfln.). Fixirung der Larven (hauptsächlich von Hyla arborea und Siredon pisciformis) mit auf 40** C. erwärmter concentrirter Sublimatlösung, worin die Objecto bis zum Erkalten der Flüssigkeit belassen werden. Auswaschen zuerst in Wasser, dann in Alkohol. Die Chromsäure (halb- procentige und einprocentige Lösung) wirkte bei probeweiser Anwen- dung bei Rana temporaria stark verändernd auf die Gewebe ein und erschwerte die Färbbarkeit derselben bedeutend; nur Bismarckbraun und Cochenille waren noch verwendbar. K. Fiedler {Zürich). Wiederslieim, R., Beiträge zur Entwickelungsgeschichte von Salamandra atra (Arcb. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 468—482 m. 1 Tfl.). WiEDEESHEiM bestätigt zunächst die schon von Schreibers^ und ') Bi.ocHMANN, F., Eine einfache Methode zur Entfernung der Gallerte und Eischaale bei Froscheiern (Zool. Anz. Bd. XII, 1889, No. 307, p. 269; cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 203. 2) ScHREiBEKs iu Isjs 1833, p. 527. 220 Referate und Besi)rechiuigen. VIII, 2. Siebold* gemachte Angabe, dass bei dem lebendig gebärenden schwar- zen Erdsalamander wie bei dem gefleckten Erdsalamander zwar 40 bis 60 Eier jederseits in den Eileiter resp. Uterus eintreten, dass aber von denselben meist nur das unterste zur Entwicklung kommt; nur in zwei Fällen unter 38 wurden mehr als zwei (3 beziehungsweise 4) Embryonen angetroffen. Um über die hiernach zu erwartenden eigenthümlichen Stoffwechsel-, besonders Respirationsverhältnisse des Embryos Klarheit zu erlangen , wurde Fixirung des Uterus in situ versucht. Da jedoch selbst nach 10 Minuten langer Einwirkung von Sublimat auf das Mutter- thier die Lösung nicht durch das offenbar hermetisch schliessende distale Uterusende einzudringen vermochte, muss man den isolirten Uterus je- weilen selbst noch durch einen vorsichtig geführten kleinen Schnitt öffnen, um nun Eibrei, Embryo und Mucosa uteri in situ conserviren zu können. K. Fiedler {Zürich). Oppel, A., Ueber Vor derkopfsomiten und die Kopfhöhle von Anguis fragilis (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 602—627 m. 1 Tfl.). Fixirung der Embryonen mit Sublimat - Eisessig oder Sublimat- Chromsäure, Paraffineienbettung, Färbung mit Hämatoxylin oder Borax- carmin, Nachfärbung mit Eosin oder Pikrinsäure im ersteren, mit Pikrin- säure im letzteren Fall. K. Fiedler {Zürich). Ritter, W. E., The parietal eye in some'lizards from the Western United States (Bullet. Museum of Comparative Zool. Cambridge U. S. A. vol. XX, 1891, p. 209—228 w. 4 pltes.). Die Untersuchung bezieht sich auf die Parietalorgane von Phryno- soma Douglassii, P. coronata und Uta Stansburiana. Zur Entfernung des reichlichen Pigmentes erwies sich weder Salzsäure noch Salpeter- säure noch irgend ein Alkali als wirksam genug. Erst durch Chlor, das innerhalb eines gut schliessenden Gefässes aus Kaliumchlorat und Salzsäure entwickelt wurde, konnten die mit 90procentigem Alkohol bedeckten, auf horizontal liegendem Objectträger befestigten Schnitte bei dreiviertel- bis einstündiger Einwirkung des Gases genügend ge- bleicht werden. Um das Chlor aus den Geweben wieder zu entfernen, muss zuerst mit Wasser und dann während 12 bis 14 Stunden mit 90procentigem Alkohol ausgewaschen werden. K. Fiedler {Zürich). ») Siebold in Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. IX, 1858. Vlll, 2. Referate und Besprechungen. 221 Nathusius, W. t., Untersuchungeu über HARTiNG'sche Körpercheu (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XLIX, 1890 p. 002 - 648 m. 1 Tfl.). Verf. bat einige der bekannten HARTiNo'scben Versiiclie wieder- holt, um die durcb Beriibrung von Kalksalzen mit Eiweiss entstehenden Calcosphärite und Conostaten näher zu untersuchen. Er färbte die mit destillirtem Wasser abgewaschenen Kalkkörperchen mit säurefreiem Goldchlorid in wässeriger Lösung, „die ca. yiooo Gold enthielt". Auch Goldchlorid - Natrium ist mit Erfolg verwendet. Die genügende Ein- wirkung wird an der Gelbfärbung erkannt. Ferner färben sich die HARTiNo'schen Körperchen z. Th. nach dem Verfasser in wässerigem Methylengrün „in blau oder violett stark" (?), im Gegensatz zu den Kalkkörperchen in den sogenannten Ueberzügen von Vogeleischalen, welche diesen Farbstoff nur wenig annehmen. Rasch dringt dagegen in letztere Goldchlorid ein, färbt jedoch die äusseren Schichten gar nicht oder nur schwach, um so mehr aber den Mittelpunkt und die inneren Schichten. Auch hierin liegt ein unterschied von den Har- TiNo'schen Körperchen, welche eine gleichmässige, nur am Rande stärker erscheinende Farbe darbieten. Das zeigte sich am besten, wenn Verf. einen Theil der recht stark gefärbten Körperchen in einem Agatschälchen zerdrückte und die einzelnen Splittern in Canadabalsam untersuchte. Gegen Kochen mit Kalilauge im Platintiegel erwiesen sich die Körperchen in den Eischalenüberzügen sehr resistent und werden schwer isolirt. Die HARTiNG'schen Körperchen zerfallen bald, wenn das beim Kochen verdunstete Wasser einige Male ersetzt wird. Bei Zerdrücken in Glycerin erhält man die Krystallnädelchen von kohlensaurem Kalk. Also handelt es sich bei der radiären Streifung der Calcosphärite um Krystallisation. — Ausser den HARTiNCx'schen Körperchen sind auch früher schon Membranen und membranöse Ge- bilde auf die gleiche Weise dargestellt worden. Nathusius hält die- selben aber nicht für etwas neu Entstandenes, sondern für die durch Niederschlag von kohlensaurem Kalk consisteuter gewordenen, irallühner- eiweiss vorliandenen Membranen. Auch die Entstehung der (halbkuge- lich-trichterförmigen) Conostaten erklärt er aus einer an der Oberfläche des Eiweisses vorhandenen Membran, durch welche dieselben anfangs schwimmend erhalten werden. Henldmj {Göttinyen). Barfurtli, I)., Versuche zur functionellen Anpassung (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 392-405 m. 1 Tfl.). 222 iieferate und Besprechungen. Vlll, 2. Barfurth, D., Zur Regeneration der Gewebe (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 406—491 m. 3 Tflu.). Aus der ersten Arbeit sei der Nachweis erwähnt, dass die Schnellig- keit der Regeneration durchaus von der Temperatur abhängig ist, wogegen die Ernährung ohne wesentlichen Einfluss bleibt und selbst hungernde Thiere gerade so gut regeneriren wie gefütterte. Bei unseren einheimischen Amphibien und ihren Larven hört die Regeneration bei 10" C. fast ganz auf, während sie bei 28*' C. sehr schnell verläuft. Bis zur Vernarbung der Operationswunden hält man die Thiere jedoch besser in kühlem Wasser (10 bis 15° C), weil das warme die Blutung zu lange unterhält. Bei den Untersuchungen über die histologischen Vorgänge bei der Regeneration wurden als Fixirungsmittel für die abgeschnittenen Schwänzenden besonders die Flemming' sehen Chromsäuregemische, als Färbungsmittel Hämatoxylin oder Boraxcarmin verwendet. Für das Studium von Capillaren und jungen Muskelfasern erwies es sich als zweckmässig, die regenerirten Schwanzenden in einem Glycerin-Alkohol- Gemisch (Wasser 350, Alkohol 125, Glycerin 25) so lange zu belassen, bis sich die Epidermis gut entfernen Hess; nach leichter Hämatoxylin- färbung wurden sie als Totalpräparate in Glycerin oder Canada ein- geschlossen. Um in den Schnitten die Fibrillen der jungen Muskel- fasern sichtbar zu machen, leistete das von Merkel empfohlene Napli- thylamin und das Vesuvin sehr Gutes. K. Fiedler {Zürich). Loewy, J. , Beiträge zur Anatomie und Physiologie der Oberhaut (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 159—191 m. 1 Tfl. u. 1 Fig.). Nach dem Verf. ist der schon von Blaschko versuchte Holzessig in sechsprocentiger , für zarteste Gewebe in einprocentiger Lösung ein der '/sprocentigen Essigsäure Philippson's ' gleichwerthiges Mittel, um rasch und schonend die Oberhaut von der Lederhaut zu trennen und so Flächenbilder der Haut zu gewinnen. Wendet man eine constante Temperatur von 40 " an, so kann man nach 24 bis 48 Stunden stets die Epidermis von der Cutis abziehen. Auch die verschiedenen Säuren, organische wie Miueralsäuren, liefern bei zweckentsprechender Verdün- nung ähnliche, doch minder sichere Ergebnisse. — Der Versuch, Flächenbilder der ganzen Haut herzustellen , um etwaige Bezichnn- ') PiiiMri'soN, L., üeber die Herstellung von Flächenbildern der Oberhaut und der Lederhaut (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. VIII, 1889, No. 9, p. 389). VIII, 2. ' Referate und Besprechungen. 223 gen zwischen der Verlaufsricbtung der Leisten und den Endausbrei- tungen der Nerven und Gefässe aufzufinden, misslang. Weder die von Sappey empfohlene Methode (Einlegen der Hautstücke in eine Mischung von einem Theil Salzsäure auf sechs Theile Wasser, dann 4 bis 5 Mi- nuten langes Kochen in 2y,proceutiger Salzsäure) noch die eigenen in dieser Richtung angestellten Versuche lieferten brauchbare Präparate. K. Fiedler (Zürich). ZimmerniJiim, K. W., üeber die Theilung der Pigment- zellen, speciell der verästelten intraepithelialen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 404—410 m. 1 Tfl.). Der Verf. wird durch eine Nachuntersuchung der FLEMMma'schen Objecte mit den FLEMMiNo'schen Methoden' zu dem Schlnss geführt, dass eine verzögerte Zellleibtheilung bei den Pigmentzellen der Sala- manderlarven wohl bisweilen vorkommt, aber abnormer Natur ist. K. Fiedler {Zürich). Fleniniiiig, W., üeber Theilung und Kern formen bei Leu- kocyten und über deren Attractionssphären (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 249—298 m. 2 Tfln.). Das Material lieferten wieder Salamanderlarven und zwar wurde besonders benutzt: das parietale Bauchfell'^, Bindegewebsplättchen aus dem Kopf, namentlich aus der Gegend der ersten Kiemenbögen, die Lunge und das Lungeumesenterium; auch in der Bindegewebsplatte unter dem Zungenwulst neben dem Mylohyoideus finden sich häufig Wanderzellen; sie werden am besten nach Abpinselung jenes „Mund- bodenepithels" untersucht. Wendet man die Chromosmiumessigsänre- Gemische während längerer Zeit (bis zu zwei Monaten und am Licht) an, oder fixirt man mit der HEEMAXN'schen Lösung ^, so heben sich die Leukocytenleiber bei der nachfolgenden Färbung mit Hämatoxylin oder ') Flemming, W., Ueber die Theilung von Pigmentzellen und Ca2:)illar- wandzellen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXV, 1890, p. 276; cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 508). ■^) Flemming, W., üeber die Theilung von Pigmentzellen und Capillar- wandzellen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXV, 1890, p. 276; cfr. diese Zeitschr. Bd. Vll, 1890, p. 508). ^) Hermann, F., Beiträge zur Histologie des Hodens (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXIV, 1889, p. 58; cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 325). ^24 Referate und Besprechungen. VIII, 2. bei Doppelfärbung successive mit Safranin und Gentiaua nach dem GBAM'scheu Verfahren und dann noch folgender Hämatoxylintinction sehr dunkel von den fixen Zellen ab. Soll die Form der Leukocyten erhalten bleiben, so dürfen die erwähnten Fixirungsgemische nicht allzulange gestanden haben, weil sonst die Wirkung der Osmiumsäure zu schwach, die der Essigsäure zu stark ausfällt. Vorzüglich scharf sichtbar werden die bislier von Leukocyten nicht bekannten Centralkörper und Attractionssphären sowie die Spindelfäden, wenn man nach der Safranin-Gentiana-Färbuug kurz in Wasser abspült und nun concentrirte wässerige Orangelösung anwendet, welche ver- möge ihrer sauren Eigenschaften nach und nach den grössten Theil der Gentianafarbe auszieht. „Wenn nur noch schwache violette Wölkchen beim Schütteln des Gefässes abtreiben — der richtige Grad der Aus- ziehung muss sehr genau getroffen werden — überträgt man die Objecte in absoluten, neutralen Alkohol, bis sich keine oder sehr wenig Farbe mehr löst, darauf in Nelken- oder Bergamottöl und schliesst in Dammar oder Canada ein. — Die Chromatinfärbung ist dann gleich- massig, purpurroth in etwas schwankender Nuance, die Nucleolen nicht besonders gefärbt; die achromatischen Spindelfäden aber graubraun, grau oder in manchen Fällen violettgrau und sehr deutlich, die Central- körper entweder ebenso oder leicht röthlich gefärbt; die Attractions- sphäre zwar ohne besondere Färbung, aber etwas dunkler als der um- gebende Zellkörper", K. Fiedler {Zürich) Oppei, A.^ Ueber Gitterfasern der menschlichen Leber und Milz (Anat. Anz. VI, 1891, No. 6, p. 165—173 m. 4 Figg.). Ueber die vom Verf. angewandte Methode (Kalium chromicum und Argcntum nitricum) ist bereits in Bd. VII, 1890, p. 222 dieser Zeit- schrift referirt worden. Verf. giebt jetzt an, dass er zur Zeit mit Vor- theil stärkere Lösungen als früher von dem Kalium chromicum flavum verwende (bis zu 10 Procent) , sodann viel Argentum nitricum (das 20- bis .SOfache Volumen im Vergleiche zu dem Präparat), das nach einer Stunde zum ersten und nach 2 bis 3 Stunden zum zweiten Male ge- wechselt werde. Paraffiudurchtränkung mache die Präparate hart und brüchig, Verf. schneidet daher die in Alkohol liegenden Stücke parallel einer Seite nahe der Oberfläche mit der Hand. Verf. theilt ferner mit, dass die langsame GoLGi'sche Methode ge- eignet sei, die Gallencapillaren in grossen Leberstücken über grosse Strecken darzustellen, während bei der BöHM'schen Methode, bei der Behandlung kleiner Stücke, sämmtliche Elemente der Leber besser er- VIII, 2. Referate und Besprechungen. 226 halten und daher schärfer erkennbar bleiben. Nach den Beobachtungen des Verf. und BriHjfs gelingt die Darstellung der Gallencapillaren übrigens auch , wenn die Leber erst 24 Stunden nach dem Tode vor- genommen wird, was für die Untersuchung beim Menschen ja von Wichtigkeit ist. — Verf. giebt sodann noch Abbildungen von den Gitter- fasern , wie sie nach der Silbermethode an der menschlichen Milz her- vortreten. Schie/ferdeder (Bonn). Kuczynski, A., Beitrag zur Flistologie der BRUNNEn'schen Drüsen (Internat. Monatsschr. f. Anat. u. Physiol. Bd. VIT, 1890, p. 419-446 m. 1 Tfl.). Verf. hat die BRUNNER'schen Drüsen des Menschen und einer grosseren Anzahl von Thieren untersucht. Das Duodenum mit der Pars pylorica des Magens wurde der Leiche möglichst bald (gewöhnlich einige Minuten) nach dem Tode entnommen, der Länge nach aufgeschnitten, auf einer dünnen Korkplatte in ausgespanntem Zustande mittels Igel- stacheln befestigt und meist in gesättigter oder fast gesättigter (öpro- centiger) wässeriger Sublimatlösung fixirt, in welcher sie eine halbe Stunde oder auch länger verblieben. Um ein schnelles Eindringen der Snblimatlösung zu ermöglichen , wurde eine Temperatur von 40 bis 50" C. in einem Thermostaten angewendet. Bei gewöhnlicher Stuben- temperatur blieben die Präparate bis zu 24 Stnnden in der Flüssigkeit. Weiter wurde mehrmals gründlich in immer frischem , bis zu 50^ 0. erwärmtem destillirten Wasser abgespült, worauf die Präparate für einige Zeit in verdünnten, ebenfalls erwärmten Alkohol (40 bis 50" C.) übertragen wurden. Dann wurden sie von der Korkplatte abgenommen und in absolutem Alkohol entwässert. So wurde die Bildung von stö- renden Niederschlägen möglichst vermieden. Als günstige Fixirungs- mittel zeigten sich weiter: absoluter Alkohol, die PEEENYi'sche Flüssig- keit ^ (Acidi chromici, 0-5procentig, 3 Voll.; Acidi nitrici, lOpro- centig, 4 Voll.; Alkohol 3 Voll.) und die schwächere FLEMMiNo'sche Flüssigkeit '^ (Acidi chromici, Iprocentig, 25 Voll.; Acidi osmici, Ipro- centig, 10 Voll.; Acidi acetici, Iprocentig, 10 Voll.; Aq. dest. 55 Voll.). Bei Präparaten von grösseren Thieren wurde eventuell die Muscularis externa abpräparirt oder wenigstens die des Sphincter. Einbettung meist in Paraffin, einiges in Celloidin. Paraffinserienschnitte wurden nach Gaule mit Wasser oder besser verdünntem Alkohol auf dem Ob- ') Zool. Anz. Bd. V, 1882, p. 459. ■') FhEMMixu, W., Zellsnbstanz, Kern- und Zelltbeilung. 1882, p. 381. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VEI, 2, 15 226 Referate und Besprechungen. VIII, 2. jectträger festgeklebt, dann von Paraffin befreit und gefärbt. Um eine gut sich abhebende Färbung der Drüsen zu erhalten, hat Verf. sehr verschiedene Methoden durchprobirt : 1) Hämatoxylinlösung (De- LAFiELD , Ehelich) mit oder ohne Nachfärben durch Helianthin oder Metanilgelb. 2) Safran in in wässeriger Lösung von 1 Procent (Fär- bungsdauer 30 See). 3) Azoblau mit Metanilgelb (10 Minuten in einer Mischung von gleichen Theilen gesättigter wässeriger Lösungen beider Farbstoffe *). Nachträgliche Färbung mit Methylgrün lässt die Kerne deutlicher hervortreten. 4) Azoblau mit Carmin: Ueber- färbung mit Alauncarmin oder irgend einer anderen Carminlösung(?), Ausziehen mit Salzsäure-Alkohol (0*5 bis 1*0 Procent Säure), dann für 3 bis 5 Minuten in gesättigte wässerige Lösung von Azoblau. 5) Wasserlösliches Aniliublau und Carmin (Bentkowski -): Entweder wirkten die Farbstoffe nach einander ein oder gemischt, dann in stark verdünnter Lösung 24 Stunden lang. So gefärbte Schnitte dürfen nicht mit Alkohol behandelt werden, daher Einschluss in Gummi- Chloral-Glycerin oder Glycerin-Gelatine. 6) Victoriablau: Durch Alkohol werden alle Gewebe entfärbt, mit Ausnahme der tiefblau blei- benden Schleimzellen. Doppelfärbung mit Carmin : Neutrale ammo- niakalische Carminlösung und eine mit Essigsäure angesäuerte Lösung von Victoriablau (0"5 g zu 100 cc einprocentiger Essigsäure). 7) Thio- n i n (von Hoyer ^ für Mucin geprüft) : Ausgezeichnetes Reagens auf Schleim, dabei Doppelfärbung, schleimhaltige Zellen röthlich-violett, das übrige Gewebe blau. Pankreas wird sehr intensiv blau gefärbt. An- wendung in verdünnter alkoholischer Lösung (1 Voll, gesättigte alko- holische Lösung auf 10 Voll. Wasser), Einwirkungsdauer einige Minuten, da Alkohol den Farbstoff nur wenig auszieht. — Um die Drüsen zu isoliren, wurden eine 40procentige Kalilauge (darin sofort zerzupft) so- wie Drittelalkohol mit einem Zusatz von Iprocentigem Chloralhydrat (24 bis 48 Stunden) angewandt. Schiefferdecker {Bonn). Ribl)ert, Ueber die Regeneration der Mamilla nebst Be- merkungen über ihre Entwicklung (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 139—158 m. 1 Tfl.). Zur Fixirung der zu verschiedenen Zeiten des Heilungsvorganges ausgeschnittenen Gewebsstücke diente FLEMMiNG'sche Lösung oder i ') Ueber Metanilgelb vergl. Griesbach, H. , diese Zeitschr. Bd. IV, 1888, 439. 2) Bentkowski, K., Gazeta lekarska. 1870. 0 Cfr. diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. G9. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 227 0"2procentige Chromsäure mit nachfolgender Alkoholliilrtnng. Material: Kaninchen und Hund. K. Fiedlet' {Zürich). Klebs, E., Zur vergleichenden Anatomie der Placenta (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 335—356 m. 1 Tfl.). Die Fixirung der weissen Ratten entstammenden Placenten ge- schah wohl mit Sublimat, die Färbung der Schnitte erfolgte mit Dela- FiELD'schem Hämatoxylin und mit Eosin; letzteres wurde später mit besonderem Erfolg durch Ponceau 4 R und Orange 2 L (von Meister und Lucius) ersetzt. K. Fiedler (Zürich). Schottlaender, J., Beitrag zur Kenntniss der Follikel- atresie nebst einigen Bemerkungen über die un- veränderten Follikel in den Eierstöcken der Säugethiere (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 192—238 m. 1 Tfl.). Ausdehnung der bekannten Untersuchungen Flemming's * am Kanincheneierstock auf einige weitere Tliierformen (Meerschwein, Maus, Ratte, Hund) und den Menschen (theilweise). Fixirung und Färbung nach den Methoden Flemming's. K. Fiedler (Zürich). Suchaimek, H., Beiträge zur feineren normalen Anatomie des menschlichen Geruchsorganes (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 375—403 m. 1 Tfl.). Als Härtungsflüssigkeiten kamen MüLLER'sche Flüssigkeit, Chrom- säurelösungen, Chromessigsäure und mit besonderem Vortheil 40^ warme 7procentige Sublimatlösung zur Verwendung. Letztere erhielt nament- lich bei Thieren, wo unmittelbar post mortem fixirt werden konnte, die Kernstructur sehr gut und erlaubte den Nachweis von Kernverschieden- heiten zwischen Riech- und Stützzellen. Die ersteren verlieren übrigens auch bei systematischem Ueberhitzen ihr Färbungsvermögen viel schneller als die letzteren. Färbemittel: Delapield's Hämatoxylin und Eosin oder Congo als Contrastfärbung. K. Fiedler (Zürich). Schaifer, J., Die Färbung der menschlichen Retina mit Essigsäur ehämatoxylin (Sitzber. d. k. k. Acad. d. \Viss. Wien Bd. XCIX, 1890, 3. Abth. p. 110—121 m. 1 Tfl.). ») Fi.EMMixo, W., Die Bildung von Riclitungsfiguren in Saugethiereiern beim Untergang GKAAp'scher Follikel (Arch. f. Anat. u. Eutwicklungsgesch. 1885). 15* 228 Referate und Besprecliungen. VIII, 2. Verf. verwandte das KuLTSCHiTZKY'sche Essigsäure -Hämatoxylin zur difFerenzirten Färbung der Retina. Celloidinschnitte von Präparaten aus MtJLLER'scher Flüssigkeit oder Alkohol wurden über Nacht in einer einprocentigen Chromsäurelösung gelassen, dann kurze Zeit ausge- wässert (dauert das Wässern zu lange, so wird die Färbung undeutlich), darauf für 20 Stunden in Essigsäurehämatoxylin gelegt, sodann für 12 Stunden in die WEiGERx'sche Boraxferridcyankaliumlösung gebracht. Endlich Abspülen in Wasser, Balsameinschlnss. Es treten je nachdem bald nur die Zapfen im ganzen dunkel hervor, bald blaugefärbt die Zapfen- oder die Stäbchen- und Zapfenaussenglieder. Schiefferdecker (Bonn), Nuel et Corilil, De rendothelium de la chambre anterieure de l'o^il, particulierem ent de celui de la cornee (Arch. de Biol. t. X, 1890, p. 235—271 av. 2 plches.). Die Verff. empfehlen zum Studium des Endothels auf der Descemet- schen Membran, dem betreffenden Thiere (Vogel, Kaninchen) den Kopf abzuschneiden und dann sofort eine 1- bis 2procentige Osmiumsäure- lösnng in die vordere Kammer zu injicireu, nachdem zuerst der Humor aqueus entleert ist. Dann wird das Auge enucleirt und für 3 bis 5 Minuten in die Osmiumlüsung eingetaucht. Man kann nun schon die Cornea ausschneiden und direct oder nach Carmiufärbung in Glycerin untersuchen. Besser ist es indessen, das Auge erst noch für ein paar Tage in die HAENSEL'sche Flüssigkeit zu legen (Acidi chromici, ein- procentig, 25 Voll., Acidi picrici coucentrati 10 Voll., Aq. dest. 65 Voll., Acidi acetici einige Tropfen). Bevor man die Cornea ausschneidet, entferne mau die vorderen Schichten mittels eines Rasirraessers möglichst vollständig an einer Stelle. Dann tauche man die Cornea für 5 bis 10 Minuten in Pikrocarmin oder Boraxcarmin und bringe sie hierauf zur Untersuchiuig in Glycerin. Die zuerst mehr diffuse Färbung wird nach ein oder zwei Tagen distinct, da das Glycerin das überflüssige Carmin auszieht. Leider entfärben sich allmählich die Präparate zu stark. — Man muss sicli hüten, die mit Osmium behandelte Cornea längere Zeit in Wasser zu lassen und besonders sie in reinen Alkohol oder Salzsäure- Alkohol zu bringen, da hierdurch die Structuren verwischt werden. Da- her kann man auch nicht das Carmin mittels Salzsäurealkohols fixiren. Schic/f'erdccJier {Bonn). Tiimäuzew U. Bogiel, J., Zur Lehre über das Nervensystem des Herzens (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 483—506 m. 3 Tfln.). I VIII, 2. Referate und Besprechungen. 229 Die Untersuchung bezieht sich besonders auf den Frosch und die Schildliröte. Zur Verfolgung der Herzzweige des Vagus leistete eine halbproccntige Essigsäure, zum Studium der Nerven- und Ganglienver- theilung in Herz und Vorliöfen, im Bulbus arteriosus, an den Hohlvenen und am Sinus venarum cavarum halbprocentige Osmiumsäure gute Dienste. (Das Verfahren bei der Präparation dieser Theile ist im Ori- ginal ausführlich angegeben.) Um die Elemente zu isoliren, bringt man den mit Osmiumsäure behandelten Sinus venosus, die Vorhofscheide- wand etc. auf einige Tage bis Wochen in Glycerin, welches mit ein wenig einprocentiger Essigsäure versetzt ist, und zerzupft dann. Schnitte werden nach Fixirung mit FLEMMma'scher Lösung oder Subli- mat oder Osmiumsäure , Färbung mit (beziehungsweise) Grenacher- schem Boraxcarmin oder Hämatoxylin oder Bismarckbraun durch Pa- raffin- oder Seifeneinbettung gewonnen. — Endlich kam auch die Methylenblau- Methode zur Anwendung. Benutzte Lösung: 0"2 g Me- thylenblau, 0'7 g Kochsalz, 100 cc Wasser. Injection in die Vena subcutanea magna oder die Vena abdominalis, Einwirkungsdauer '/^ bis 2 Stunden. Fixirung der Färbung an den ausgeschnittenen, während der Beobachtung mit Kochsalzlösung befeuchteten Theilen nach Er- reichung der grössten Färbungsintensität mit pikrinsaurem Ammoniak oder Hoyer's Pikrocarmin. K. Fiedler {Zürich). Retzius, 0., Ueber die Ganglienzellen der Cerebrospi- nalganglien und über subcutane Ganglienzellen bei Myxine glutinosa (Biologische Studien. Neue Folge. Bd. I, 1890, p. 97—99 m. 1 Tfl.). Bei Myxine gelang es, die Ganglienzellen der Spinalganglien in situ zu untersuchen, wenn dem Thiere Methylenblau in den Rückenmarks- canal oder interstitiell in die Musculatur neben der Wirbelsäule injicirt wurde. Besonders günstig war das hintere Körperende, gegen den Schwanz hin, bei kleineren Individuen. Nahm man hier die äusseren Muskelparthien fort, so vermochte man die ganzen Ganglien in ihrer Lage bei durchfallendem Lichte zu überblicken , besonders nach Auf- hellung mittels Glycerins. — Im subcutanen Gewebe des Bauches, Kopfes und Schwanzes von Myxine, wo die Fettzellenlage nur sparsam ist oder ganz fehlt, gelang es mittels Methylenblaus in einem dichten Nervenplexus periphere Ganglienzellen aufzufinden mit umspinnenden Fasernetzen. Derartige Zellen fanden sich auch bei Auguis fragilis in dem Nervenplexus der Muskellagen des Darms und des Ventrikels. Schiejferdccl'er (Bon n). 230 Referate und Besprechungen. VITI, 2. Sclimaiis, Technische Notizen znr Färbung der Achsen- cylinder im Rückenmark (Münchener med. Wochenschr. 1891, No. 8, 24. Febr., p. 147). Durch eine Modification der von Gierke gegebenen Vorschrift * hat Verf. eine Carminlösung, Urancarmin, erhalten, welche die Achsen- cylinder constant färbt und das Celloidin so gut wie ungefärbt lässt: 1 g carminsaures Natron wird mit 0*5 g Uranum nitricum in einer Reibschale verrieben, das Ganze in 100 cc Wasser eine halbe Stunde lang gekocht und nach dem Erkalten filtrirt. Rückenmarksschnitte färben sich hierin in 15 bis 20 Minuten, doch überfärbt die Lösung auch nach 24 Stunden nicht ; dann Auswaschen in Wasser, Alkohol etc. — Das Rückenmark muss vorher in MüLLER'scher Flüssigkeit gehärtet und ohne Auswaschen im Dunkeln in Alkohol aufbewahrt sein, also wie für die WEiGEBx'sche Methode. Gerade wie bei dieser erzielt man auch hier noch ziemlich gute Bilder, wenn man Schnitte von ausge- wässerten Präparaten vor der Färbung einen halben Tag lang in MüLLER'sche Flüssigkeit legt. — Das Urancarmin eignet sich auch für andere Präparate als diffuse Grundfärbung bei Kernfärbung mittels Hä- matoxylins. Es färbt auch gut die Intercellularsubstanzen und den Bürstenbesatz der Nierenepithelien. — Bei Knochenpräparaten färbe man 24 Stunden und ziehe dann mit Salzsäure-Alkohol (einprocentig) aus. Als weiteres gutes Färbemittel für Achsencylinder empfiehlt Verf. das englische black-blue (von G. Grübler, Leipzig): eine 0'25procen- tige Lösung in Alkohol, öOprocentig, mit wenig Pikrinsäurezusatz, Fär- bungsdauer eine Stunde. Auch hierbei bleibe das Celloidin fast unge- färbt, während es von der einfachen wässerigen Lösung stark gefärbt wird. Diese Färbung ist auch ohne weiteres verwendbar bei Schnitten, die für die WEiGEBT'sche Färbung schon mit Kupfer behandelt worden sind. Schiefferäechcr {Bonn). Teusclier, P., Ueber Degeneration am normalen peri- pheren Nerven (Arch. f mikrosk. Anat. Bd. XXXVI, 1890, p. 574—602). Die beste Methode zur deutlichen Unterscheidung normaler und in Degeneration begriffener Markscheiden ist nach dem Verf. die von Marchi und Algeri- eingeführte, welche in Deutschland zuerst von 1) Gierke, H., Diese Zeitschr. Ed. I, 1884, p. 92. '^) Marchi ed Algeri in Rivista sperimcntale di freniatria e di med. legale 1887. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 231 MüNZKK und Singer' angewendet wurde. Man legt in MüLLKK'sche Flüssigkeit auf 8 Tage (kann jedoch auch bis zu 3 Monaten darin be- lassen), dann in ein Gemisch von MüLLER'scber Flüssigkeit und ein- proceutiger Osmiumsäure im Verhältniss 2 : 1 auf 5 bis 8 Tage, bettet in Celloidin ein und bringt die Schnitte ungefärbt in erwärmten Canada- balsam ; keinenfalls darf letzterer in Chloroform gelöst sein , weil sonst auch die degenerirenden Markscheiden ihre dunkle Färbung einbüssen. Die Differenzirung scheint darauf zu beruhen , dass durch die vorher- gegangene Chrombeize die normale Markscheide die Eigenschaft ver- liert, in einer Mischung von der oben gegebenen Zusammensetzung die Osmiumsäure zu reduciren, während die degenerirenden Fasern — sowie das Fett — diese Fähigkeit bewahren. Das Ergebniss ist jedenfalls eine tiefe Schwärzung der degenerirenden, eine nur hellbräunliche Fär- bung der normalen Scheiden. K. Fiedler {Zürich). Carlier, W., The fate of the notochord and development of the intervertebral diso in the sheep, with observa- tions on the structure of the adult tissues in these animals (Journ. of Anat. and Physiol. vol. XXIV, 1890, p. 573—584 1 plte.). Fixirung der Embryonen in der Pikrinsalpetersäure Kleinenberg's [sollte wohl heissen P. Mayer's, Ref.], der bezüglichen Gewebe erwach- sener Thiere in einer 5"2procentigen Chromsäurelösung mit einem nach- lierigen Zusatz von einem Procent Salpetersäure zur Entkalkung. [Dass die Zellen eine „Neigung zum Schrumpfen" zeigten, dürfte wohl haupt- sächlich diesem wenig schonenden Verfahren , die Entkalkung mit der Fixirung zu verbinden , zuzuschreiben sein ; Ref.] Gummieinbettung, Anwendung des Gefriermikrotoms. Um die Fibrillen deutlich aus der Grundsubstanz heraustreten zu sehen, wird empfohlen, die Schnitte min- destens zwei Tage lang in Methylspiritus zu legen, mit Wasser auszu- waschen und je eine Stunde lang mit wässerigen Lösungen von Eosin und Jodgrün (1 : 1200) zu färben. Auch für die Zellkapseln sei dies Verfahren „unschätzbar", da die feinsten Fortsätze deutlich grün her- vortreten. Dr. Karl Fiedler {Zürich). ») Münzer u. Singkf, Beiträge zur Kenntniss der Sehnervenkreuzung (A. d. physiol. Instit. d. k. k. deutschen Univ. zu Prag. Wien 1888). 232 Referate und Besprecliungen. VIII, 2. C, Bacferien, Kamen, L., Ein neues Cultiirgefäss (Centralbl. f. Bacteriol. ii. Parasitenk. Bei. IX, 1891, No. 5 p. 165). Verf. beschreibt ein nach seinen Angaben von der Firma Dr. Her- mann RoHKBECK construirtes feldflasclienartiges Culturgefäss, welches, wie der Verf. übrigens selbst eingebend hervorhebt, mit dem von Pe- TRUSCHKY ^ empfohlenen platten Kölbchen die weitgehendsten Aehnlich- keiten aufweist. Es ist hauptsächlich dazu bestimmt, Platten von Wasser- proben an Ort und Stelle anlegen zu können. Um Colonien von jeder Stelle des Culturgefässes entnehmen zu können, ist die unbequeme Krümmung des Halstheiles, die sich bei den LiPEz'schen Culturgläsern störend bemerkbar machte, beseitigt und die Form unter Vermeidung todter Winkel ähnlich wie bei Petruschky modificirt. Die Unterschiede von Petruschky's platten Kölbchen sind folgende : Kamen's Culturge- fäss ist grösser 16 : 7 cm, während Peteuschky's Muster A 10 bis 11 : 5Y2 bis 6, Muster B 12*5 : 6*0 cm als Maasse haben. Ferner unter- scheiden sich diese Gefasse etwas hinsichtlich der Halskerbung. Pe- teuschky's Muster A besitzt ringförmige Halskerbung, Muster B eine solche nur an den beiden Breitseiten, das KAMEN'sche Muster dagegen nur eine einseitige Halskerbung und zwar an der ünterfläche, auf die man das Glas zum Erstarren des eingeführten gelatinirbaren Nährbodens legt. Von dieser einseitigen Einkerbung aus fällt die dadurch entstan- dene Einziehung des Glases nach der flachen Unterfläche in Form einer schiefen Ebene sanft ab. Czapleiüski {Görher sdorf). Blüclier, H., Eine Methode zur Plattencultur anaerober Bacterien (Zeitschr. f. Hygiene Bd. VHI, 1890, 499—506). Blüchek empfiehlt zur Plattencultur für Anaeroben folgenden Apparat: In einer weiteren Glasschale a steht die ofi'ene 7 cm im Durchmesser haltende Culturschale &, in der Mitte der grösseren Schale festgehalten durch einen umgelegten Drahtring mit drei federnden Armen. Die Culturscliale wird bedeckt von dem in die grössere Schale a möglichst genau hineinpassenden Glockentrichter (7, welcher oben mit einem Bleimantelstück /" beschwert ist und in seiner Spitze c einen Watte- •) Peteuschky, J., Ein plattes Kölbclien (modificirte Feldflasche) zur An- legung von Flächenculturen (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. VIII, 1890, No. 20 p. 609; cfr. diese Zeitscbr. Bd. VII, 1890, p. 519). VJII, Referate und Besprechungen. 233 pfropf c trägt. Der ganze Apparat wird trocken bei 160" sterilisirt, dann giesst man den verflüssigten inficirten Nährboden vorsichtig in die Culturschale h und sperrt den Glockenraum durch eine Sperrflüssigkeit aus 1 Theil Glycerin auf 3 bis 4 Theile Wasser ab. Durch einen mög- lichst engen und sehr guten Gummischlauch wird jetzt das gewünschte Gas von oben durch die Trichteröff"nung c eingeleitet, sodass die Blasen unten durch die Sperrflüssigkeit entweichen müssen (5 bis 10 Minuten). Dann wird der Gummi- schlauch durch einen Schraubenquetsch- hahn dicht am Appa- rat zugequetscht und dahinter abgeschnit- ten. Sein offenes Ende füllt man ev. noch mit einigen Tropfen Gly- cerin. Beim OefFnen des Apparates wird der G lockentrichter an der Spitze geöff"uet und dann unter sanf- tem Neigen des Appa- rates (um ein Umher- "3*S1b^^^»^^^^^=^^' ^-=— spritzen der Sperrflüs- sigkeit zu vermeiden) vorsichtig und zunächst an der nun zu oberst befindlichen Stelle seines Randes gelüftet und darauf ganz abgehoben. Der Apparat functionirt gut. Mau braucht aber für jede Platte einen eigenen Apparat. Er ist in seinen Leistungen durch den BoTKiN'schen Apparat bereits bedeutend überholt. Für die Cultivirung der Anaerobien in Stichculturen empfiehlt Blücher folgendes Verfahren: Nach Anlegung des Stiches wird das Reagirglas umgekehrt nach Entfernung des Wattepfropfens die Mündung nach unten in ein zur Hälfte mit Wasser oder besser noch verdünntem Glycerin gefülltes Becherglas gestellt. Mittels einer U-förmig ge- krümmten Röhre wird ca. 5 Minuten lang ein massig schneller Wasserstoff- strom eingeleitet um die Luft zu verdrängen. Tetanus wuchs bei der- artiger Anordnung des Versuchs im Brütschrank an der freien Oberfläche besser als im Stich selbst. — Die BüCHNER'sche Pyrogallolmethode macht Blüchek auch für Plattenculturen in folgender Weise nutzbar: Die inficirte Doppelschale von 6 cm. Diameter wird unter Abheben dei' 234 Referate und Besprechungen. VIII, 2. Deckelschale in eine ca. 10 cm im Durchmesser haltende und 4 cm hohe Krystallisationsschale gesetzt, deren oberer Rand convex in einen con- caven Ausschliff des Deckels passt, welcher vorher mit Vaseline am Rande bestrichen wird. Vor dem Einsetzen der Culturschale wird in die äussere Schale etwas feste Pyrogallussäure und kurz vor dem Ver- schluss eine entsprechende Menge Kalilauge eingebracht. Durch die Absorption und Luftverdünnung wird der Deckel festschliessend ange- presst. Als Nachtheil der Methode ist zu erwähnen, dass der Nährboden [wohl nicht durch Luftverdünnung, wie BLtiCHER meint, sondern wegen Wasserdampfabsorption durch die Kalilauge, Ref.] nach einiger Zeit ziemlich stark eintrocknet. Gzaplewski (Görbersdorf). Nikiforoff, M., Ein Beitrag zu den Culturmethoden der Anaeroben (Zeitschr. f. Hygiene Bd. VIII, 1890, p. 489 —498). Um Anaeroben auch im hängenden Tropfen zu cultiviren, empfiehlt NiKiFOEOFF folgende Verfahren. Mau legt das mit dem inficirten Tropfen versehene Deckglas auf den vorher mit Vaseline umrandeten AusschlifF eines hohl geschliffenen Objectträgers derart, dass noch eine feine Spalte offen bleibt. In eine Ecke derselben bringt man mit einer Pla- tinöse einen Tropfen starke wässerige Pyrogallussäurelösung, darauf nach entsprechender Verschiebung des Deckgläschens an die gegenüber- liegende Kante in gleicher Weise einen Tropfen Kalilauge. Durch Capil- larität verbreiten sich die beiden Tröpfchen von dem Ausgangspunkt aus in Form dünner Halbringe an der Grenze zwischen Deckglas und Objectträgerausschliff, worauf sich die Flüssigkeiten vermischen. Das gewählte Quantum genügt zur Sauerstoflfabsorption der kleinen Luft- kammer. Da bei solchen Präparaten aber nach dem Herausnehmen aus dem Thermostaten leicht wegen condensirter Wassertropfen ein Zu- sammenfliessen der Cultur- und Absorptionsflüssigkeit eintritt, so räth NiKiFOEOFF für diesen Fall, die Objectträger von F. E. Schultze oder solche mit eingeschliffener Rinne, bei denen aber, um das Zusammen- fliessen zu vermeiden, die centrale Glassäule niedrig sein muss ', anzu- wenden. Um die Concentrationsvermehrung des Culturtropfens durch Verdunstung (in Folge der starken Luftverdünnung) zu compensiren, empfiehlt Nikifoeoff von vornherein die Bouillon mit '/i bis % Aq. dest. zu verdünnen und vor Gebrauch nochmals aufzukochen. Obligate Aeroben blieben in solchen Culturen ohne Vermehrung und waren unbe- ') Zu beziehen von C. DESAüA-Heidelberg, 10 Stück 8 Mk. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 235 Ä. weglicli. Erst nach Luftzutritt trat Vermehrung und Beweglichkeit auf. Bei Chülerabacillen war Vermehrung sehr mangelhaft; auch sie waren unbeweglich. Nach Luftzutritt erfolgte auch hier sofort Bewegung und in 24 Stunden sehr starke Vermehrung. Obligate Anae- roben wuchsen gut. Rauschbraud zeigte deutliche Ver- melirung nach 24, Tetanus erst nach 48 Stunden im Brüt- schrank. Zur Cultivirung von Anaeroben in Bouillon oder in anderen Culturflüssigkeiteu verfährt Nikiforoff wie folgt: Ein Glasrohr von ca. 1 cm lichter Weite wird an einer Stelle zu einer Capillare ausgezogen. Dasselbe wiederholt man an einer zweiten Stelle, sodass zwischen den beiden Capillaren eine cylindrische Ampulle von 3 bis 5 cm Länge entsteht. Die eine Capillare wird in einer Entfernung von 3 bis 4 cm davon abgeschmolzen. Die an- dere, welche ca. 25 cm lang und in ihrem Anfangstheil von 8 bis 10 cm möglichst gleichmässig 1 bis 2 mm Durchmesser haben soll, wird in dieser Entfernung von der Ampulle U-förmig umgebogen (Figur 1). Die offene Spitze taucht man in eine Eprouvette mit sterilem Wasser und erhitzt das Reservoir unterdessen ein wenig, sodass nach dem Erkalten etwas Wasser in die Ampulle einge- saugt wird. Um das Culturgefäss nun mit Culturflüssigkeit zu füllen, führt man das mittels Durchziehen durch die Flamme sterilisirte offene lange Capillarrohr in das Reagenz- glas, welches die Flüssigkeit enthält, bis nahe über den Flüssigkeitsspiegel ein, erwärmt mit kleiner Flamme zunächst die Capillare und erhitzt darauf das Reservoir bis das Wasser siedet und verdampft. Ehe alles Wasser verdampft ist, taucht man das offene Ende in die Nährflüssig- keit ein. Nach Abkühlung stürzt diese in das Gefäss hinein und füllt es. Danach schmilzt man die lange Capillare an der Umknickungs- 1. 236 Referate und Besprechungen. VIII, 2. stelle ab, wodurch sich oben ein kleiner luftleerer Raum (Wasserhammer- phänomeu) bildet. Da flüssiges Blutserum die Einfiilluug auf diese Weise nicht ver- trägt, wird das Blutserum mittels einer Röhre eingesogen, solange noch beide Capillaren offen sind, worauf die letzteren abgescbmolzen werden. Um solche Culturgefässe zu impfen, wird das Ende der langen Capillare abgeschnitten und in der Flamme erhitzt. Man impft dann mit dem Platindraht oder lässt ein Stückchen sterilen haarfeinen Capillarrohrs, welches man durch Eintauchen mit der inficirenden Flüssigkeit gefüllt hat, in das Culturgefäss hineingleiten, worauf man wieder zuschmilzt. (Figur 2). Bei Prüfung mit Pyrogallol erwiesen sich solche Culturen als sauerstofffrei. Obligate Aeroben wuchsen erst nach Sauerstoffzutritt. Rauschbrand wuchs schon nach 24 Stunden in Bouillon mit leichter Opalescenz der Bouillon unter Bildung feiner Flöckchen; Tetanus erst nach 36 Stunden unter gleichmässiger Trübung. Flüssiges Blutserum wurde nach 5 Tagen bei 37*^ durch Tetanus coagulirt, unter Abschei- dung wenig flüssigen Serums. Auch für Gelatine war die Methode gut anwendbar. Csaplewski {Görhersdorf). (FArsonvul , M. A. , E m p 1 o i de 1' a c i d e c a r b o n i q u e 1 i - quefie pour la filtration et la Sterilisation ra- pides des liquides organiques (Comptes rend. de l'Acad. des Sc. Paris, t. CXII, 1891, 1 sem., p. 667). Zur Sterilisirung eiweisshaltiger oder colloidaler Flüssigkeiten, zu- nächst für medicinische Zwecke der subcutanen Injection, empfiehlt Verf. ein Verfahren, bei dem die unter einem Druck von 45 Atmo- sphären stehende Kohlensäure erstens als bacterienfeindliches Agens direct auf die zu sterilisirende Flüssigkeit wirkt und zweitens zum Durchtreiben dieser Flüssigkeit durch ein Porcellanfilter dient. — Der Apparat besteht aus einer schmiedeeisernen Flasche, die 500 g flüssige Kohlensäure enthält, oben einen Hahn trägt und mit einem senkrecht stehenden Kupfer- oder Stahlrohr, welches 200 Atmosphären Druck aushält und 300 cc fasst, in Verbindung steht. Dieses Rohr ist oben und unten verschlossen; durch den unteren Verschluss geht ein Metall- rohr, welches durch Kautschukschlauch mit einer im Innern des er- wähnten Kupferrohres befindlichen Porcellaubougie verbunden ist. Die in dem Kupferrohr befindliche, zu sterilisirende Flüssigkeit wird also durch den Druck der Kohlensäure in die Bougie gepresst und läuft durch das mit dieser in Verbindung stehende Metallrohr in ein steriles VIII, 2. Referate und Besprechungen. 287 Gefäss. Die Bougie ist leicht in der Flamme zu reinigen. Durch ge- eignete Einwirknngszeit und verschiedene Stärke des Druckes kann man die Organismcnentwickhing in der Versuchsflüssigkeit abscliwächen, verlangsamen oder verhindern. Wichtig ist auch die Bemerkung des Verf., dass in dem beschriebenen Apparat aus Fermentgemischen die verschiedenen Fermente sehr verschieden schnell durch das Porcellan hltriren. — Ausgeführt wird der in Rede stehende Apparat von DucEETET. Alfred Koch {(Jöftingen). Petri, K. J., Ein neuer Apparat zum Sterilisiren mit strömendem Wasser dampf, von Atmosphären- druck (Arbeiten a. d. k. Gesundheitsamt Berlin. Bd. VI, 1890, p. 498). Der Verf. empfiehlt zum Sterilisiren mit strömendem Dampf den dampferzeugenden Kochtopf a von etwa 40 cm Weite und 30 cm Höhe neben dem z. B. 93 cm hohen, 37 cm weiten Sterilisir- cylinder c aufzustellen und die oberen Oeffnungen beider durch ein zweimal rechtwinklig geboge- nes, 10 cm weites Rohr h zu ver- binden, am Boden des Sterilisir- cylinders aber einen conischen Auslauf // zum Austritt von Luft, Condensationswasser und Dampf herzustellen. Der oben in den Cylinder eintretende Dampf kann viel leichter die schwerere Luft aus der unteren Oeffnung heraus- drängen wie bei dem Kocn'schen Sterilisirapparat, wo der Dampf unten entstellt und die Luft oben herausgetrieben werden muss. Ausserdem ist bei dem Apparat des Verf. das Einstellen und Heraus- nehmen der zu sterilisirenden Ge- genstände gegenüber dem Kocn'schen Apparat sehr erleichtert durch eine seitlich im Cylinder angebrachte Thür und eine am obersten Punkte des die beiden Apparattheile verbindenden Dampfrohres angebrachte verschliess- bare OefFnung r7, durch welche man den aus dem im Kochen bleibenden 238 Referate und Besprechungen. VIII, 2. Wassergefäss kommenden Dampf ausströmen lässt, während man Gegen- stände in oder aus dem Cylinder setzen will. Alfred Koch [Göttinge))). Kulme, W. , Kieselsäure als Nährboden für Organismen. (Zeitschr. f. Biol. Bd. XXVII, 1890, p. 172). Der Verf. empüehlt als festes Cultursubstrat für Bacterien Kiesel- säure, die nach folgendem Recept dargestellt wird. 3 Voll, käuflichen, dünnflüssigen Wasserglases von 1*08 spec. Gewicht lässt man in 1 Vol. Salzsäure (1 Vol. Wasser und 1 Vol. Salzsäure von 1'17 spec. Gewicht) fliessen und dialysirt das Gemisch zur Entfernung von Salzsäure und Chlornatrium. Die reine wässerige Kieselsäurelösung wird dann in der Platinschale direct über der Flamme durch massiges Kochen bis zum ersten Entstehen eines Häutchens unter Fortblasen der sich am Rande aus- scheidenden festen Säure concentrirt, worauf sie das spec. Gewicht 1*02 und einen Gehalt von 3 '4 Procent wasserfreier Säure zu besitzen pflegt. Diese Lösung ist dünnflüssig wie Wasser, zeigt mit empfindlichstem Lak- muspäpier etwas zweifelhafte saure Reaction, verändert sich in geschlos- senen Gefässen mehrere Wochen lang nicht, kann auch beliebig gekocht werden. Durch manche neutrale Salze, besonders durch Chlornatrium, erstarrt sie in einer mit der Menge des Zusatzes und dem Steigen der Temperatur abnehmenden Zeit. Vioooo NaCl lässt bereits die reine Lö- sung nach einmaligem Aufkochen in 4 Stunden dicklich werden, in 12 bis 24 Stunden erstarren. Für die Herstellung alkalischer Nährböden ist wichtig, dass 3*4procentige Kieselsäure, die durch 0*2 Procent phos- phorsaures Natron oder 0-02 Procent Soda schwach alkalisch gemacht wird, auf Zusatz von 0'25 Procent Chlornatrium nach dem Kochen in weniger als einer Stunde erstarrt. Als Nährstoffzusatz verwendete Verf. zunächst Fleischextract, löst ein bohnengrosses Klümpchen des Liebig- schen Präparates in 25 cm, sterilisirt diese Lösung und die erwähnte 3*4procentige Kieselsäure durch getrenntes Erhitzen, giesst dann 4 cc der Säure und 0*5 bis 1 cc Fleischextract zusammen und kocht noch- mals auf. Schnelles Erstarren wird durch Zusatz von 0*5 Procent NaCl erzielt und dies ist praktisch, wenn das Kieselsäurenährsubstrat in Röhr- chen schnell erstarren soll, für Plattenculturen darf dagegen kein oder viel weniger NaCl zugesetzt werden. Für Sterilisirung der Kieselsäure durch Ueberhitzung darf man kein Glas verwenden, da dieses bei 140 bis 170" stark angegriffen wird und dadurch wieder Wasserglas aus der Kieselsäure entsteht; Verf. verwendete zugelöthete, mit Alkohol und Aether gereinigte Bleiröhreu von 6 bis 10 mm Weite und 1 bis 2 mm Wandstärke, die in Glasröhren mit etwas Wasser eingeschmolzen wurden. VIII, 2. Referate und Besprechungen. 239 Die überhitzte Kieselsäure war stets völlig flüssig und klar. Der Fleisch- extract wird am besten gleich in öprocentiger Kochsalzlösung gelöst und zwar doppelt so concentrirt, wie oben angegeben, in geschlossenen Glasröhren durch Ueberhitzen sterilisirt. Von den entstehenden Flocken von Erdphosphaten ist er dann leicht klar abzugiessen ; seine aus dem Glas herstammende alkalische Reaction hindert das Erstarren des Kiesel- säurefleischextractgemisches nicht, wenn dasselbe 0"25 bis 0*5 Procent NaCl enthält. Die erstarrte Mischung ist für Culturzwecke sehr ange- nehm consistent, durchsichtig wie Glas und kaum gelblich gefärbt. Beim Coaguliren sich bildender Schaum wird vermieden, wenn man die noch siedende Mischung in ein zweites Röhrchen umgiesst. Ob die Gal- lerte homogen ist, bemerkt man an dem eigenthümlich lang anhaltenden Schwirren der Masse beim Aufstossen des Glases. Die Kieselsäure verträgt auch das Kochen mit manchen organischen Stoffen, wie Zucker, Glycerin, Deuteroalbumose, Peptonen und Alkali- albuminat, aber nicht mit Leim. Die in dünnen Stückchen der Kiesel- säure eingeschlossenen Culturen kann man auch' weiterer chemischer Be- handlung unterwerfen. Fermente werden von der Kieselsäure nicht wie von Celloidin fixirt. Die Kieselsäure wird von absolutem Alkohol schwach getrübt, von gesättigter Kochsalzlösung schwach opak gemacht; ein Ein- trocknen derselben, vor dem die Präparate geschützt werden müssen, ist durch Zusatz von Glycerin vor dem Gelatiniren zu erreichen. Diese Angaben des Verf. haben bereits sehr erfolgreiche Anwendung gefunden, da WiNOGRADSKY ncucrdings mit solcher Kieselsäure zusammengesetzte Nährsubstrate für die Reincultur nitrificirender Organismen verwendet hat* und es steht zu hoffen, dass damit eine Reihe anderer Organismen der Isolirung zugänglich werden, die heute noch der Reincultur in der modernen Gelatine spotten. Alfred Koch {Göttinf/en). Smith, Th., Einige Bemerkungen zu dem Aufsatze „Eine Methode der Blutentnahme beim Menschen" (Centralbl. f. Bacteriol. n. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 2 p. 41). Scheurleii, Zusatz zu dem Aufsätze „Eine Methode der Blutentnahme beim Menschen" (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 7, p. 221). Smith macht zu der — seinerzeit referirten '-* — Veröffentlichung Scheurlen's über die von ihm befolgte Methode der Blutentnahme *) Ann. de l'Inst. Pasteir 1891, no. 2. «) Cfr. diese Zeitschr. Bd. Yll, 1890. p. 522. 240 Referate und Besprectimgen. VIII, 2. beim Menschen die Bemerkung, dass eine ähnlich gestaltete Pipette wie die ScHEURLEx's schon viel früher von ihm selbst (Smith) verwendet und verötFentlicht sei ^ zur Entnahme und zum Transport von Herzblut bezw. seröser Flüssigkeit von Thierleichen. Scheuelen hebt in seiner Erwiderung hervor, dass nicht sowohl die Beschaffenheit der Pipette, als vielmehr die Methode der Benutzung derselben als Operations-Instrument für Blutentnahmen vom lebenden Menschen das Wesentliche seiner Veröffentlichung sei. Ab- schmelzbare Glasgefässe zum Transport von Flüssigkeiten seien schon früher für bacteriologische Zwecke benutzt worden. Ihm diene die Pipette nicht zur Aufbewahrung, sondern nur zur Entnahme des Blutes. Fetrusclilnj. vail SeilUS, A. H. C, Bijdrage tot de kennis der cellulose- gisting. [Beiträge zur Kenntniss der Cellulose- gährung.] Proefschrift. Leiden (Leonards) 1890. 186 pp 8» m. 2 Tfln. Der Verf. beschreibt ein Paar Apparate, welche dazu dienen, die von gälirungserregenden, anaeroben Organismen gebildeten gasförmigen Producte ohne Verlust oder Verunreinigung mit fremden Gasen zu sam- meln und zu untersuchen. In dem in Figur 1 dargestellten, für quali- tative Prüfung bestimmten Apparat nimmt die Kugel a (GO Cubikcenti- meter) die Gährflüssigkeit auf, während }> sowie das Rohr zwischen 1) und c und ein Theil der Kugel fi, welche 100 Cubikcentimeter fasst, mit Quecksilber gefüllt werden. Darauf wird das Ganze sterilisirt und dann die durch das Kochen ausgetriebene Luft, welche sich unter dem Hahn d gesammelt hat, durch OefFnen desselben ausgetrieben, wobei man Sorge trägt, dass auch ein Theil der Gährflüssigkeit über den Hahn tritt ; diesen Theil der Flüssigkeit besäet man dann nach dem Abkühlen mit dem Gährungserreger und lässt einen Theil dieser Flüssigkeitsraenge durch Oeffnen des Hahnes und geeignetes Neigen des Apparates in die Kugel a fliessen. Die bei der nunmehr unter völligem Luftabschluss anheben- den Gährung sich bildenden Gase sammeln sich unter dem Hahn d. — Der in Figur 2 dargestellte Apparat dient für quantitative Gasanalysen. Die Gährflüssigkeit befindet sich mit einer abgewogenen Menge des zu vergährenden Körpers hier in Kugel v. Aus dem Verhalten der Mischkrystalle beider Verbindungen im parallelen polarisirten Lichte leitet der Verf. einige Sätze ab, die auf allgemeines Interesse Anspruch erheben dürfen. Dünne Blättchen dieser Mischkrystalle löschen zwischen gekreuzten Nicols in keinem Azimuth aus, sondern ersclieinen immer in leuchtenden und beim Drehen des Präparates in wechselnden Farben. Blättchen, deren Achsenwinkel für Roth 0 " und für Blau 32 ** beträgt, löschen im blauen Lichte völlig aus, im rothen Lichte bleiben sie in allen Lagen hell. Im Tageslichte erscheinen dieselben in der Auslöschungslage in dunklem Roth, weil sie hier für Blau auslöschen u. s. w. Allgemein gesprochen lautet der Satz, dass eine stark doppelbrechende zweiachsige Substanz, welche für eine bestimmte Farbe einen kleinen, für eine andere einen grossen ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 421. 2) XXVIII. Bericht d. Oberhess. Gcsellsch. f. Natiu'- u. Heilk. üiesseU 1891. 264 Referate und Besprechungen. VIII, 2. Achsenwinkel besitzt, in dickeren Platten senkrecht zur ersten Mittellinie für die erste Farbe weniger auslöscht als für die andere. Ein ent- sprechendes Verhalten zeigen Kalium- und Ammonium-Seignettesalze, Titanit u. s. w. Die Ursache der unvollkomuienen Auslöschung beruht ausschliess- lich darauf, dass das einfallende Licht nicht vollkommen parallel ist. Die Auslöschung ist um so vollkommener, je weniger convergent die einfallenden Lichtstrahlen sind, je schwächer die Doppelbrechung, je dünner die Platten und je grösser (in den zweiachsigen Krystallen) der Achsenwinkel ist. In Folge der nicht zu vermeidenden Convergenz des Lichtes erscheinen daher dickere Plättchen aus einachsigen Krystallen senkrecht zur optischen Achse bei gekreuzten Nicols hell und zwar in ihrer Eigenfarbe, z. B. Kalkspath weiss, Rothzinkerz roth, Nickelvitriol grün. Aus demselben Grunde erscheinen Platten aus zweiachsigen Krystallen senkrecht zur ersten Mittellinie im polarisirten Lichte in ihrer Auslöschungsrichtung oft farbig, selbst wenn sie selbst farblos, und zwar in der Farbe, für welche der optische Achsenwinkel am kleinsten ist. Sie erscheinen überhaupt nur dann farbig, wenn die Dispersion der Achsen stark und der Achsenwinkel für eine Farbe klein ist. Derartige Platten löschen für die Farbe aus, für welche der Achsenwinkel gross, nicht aber für die, für welche er klein ist. Ist die Dispersion keine sehr starke, so verhalten sie sich ähnlieh wie die einachsigen. I 4 l VIII, 2, Neue Literatur. 265 Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Bernheim , H. , Taschenbuch für den bacteriologischen Prakticanten , ent- haltend alle technischen Detail -Vorschriften zur bacteriologischen Labora- toriumsarbeit. 2. Aufl. Würzburg (Stuber) 1891, 56 pp. 12". 1-50 M. Cornevin, Ch., Traite de zootechnie generale. Paris (Bailliere) 1891. 8". 1 fasc. 512 pp. av. 4 plches. et 204 figg. 22 fr. Crookshank, E. M. , Manual of bacteriology. 3. ed. London (Lewis) 1891. 8". 21 sh. Fraenkel, C, Grundriss der Bacterienkunde. 3. Aufl. 2. unveränd. Abdruck. Berlin (Hirschwald) 1891. 8«. 10 M. Israel, O., Traite pratique d'histologie pathologiquo. Traduit par Ciutzmann. Paris (Steinheil) 1891. Av. 135 tig. et atlas de 7 plches. col. par M. Letuli.e. 8». 14 fr. Lehmann, O. , Die Krystallanalyse oder die chemische Analyse durch Beob- achtung der Krystallbildung. Leipzig (Engelmann) 1891, 8". mit 78 Figg. 2 M. Woodliead, Gr. S., Bacteria and their products. With an appendix giving a Short account of bacteriological methods, and a diagnostic description of the commoner bacteria. London (Scott) 1891. 459 pp. 8". w. 20 photo- 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Neue Mikroskope. Czapski, S., Mikroskope von Carl Zeips in Jena für krystallographische und petrographische Untersuchungen (Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. XI, 1891, H. 3 p. 94). (Fuess, R.), lieber Mikroskope für krystallograi^hische und petrographische Untersuchungen (Centralzeitg. f. Üpt. u. Mechan. Bd. XII, 1891, No. 3 p. 33; cfr. Neues Jahrb. f. Mineral. Beilagebd. VII, 1890, p. 55; diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 177). (Mason, R. G.), Improvements in oxy-hydrogenmicroscopes(Journ. R. Microsc. Soc. 1890 pt. 1 p.89; cf. Engl. Mechan. vol. LH, 1890, p. 306). 266 Neue Literatur. VIll. 2. Swift and Son's improved student's microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 1 p. 87). b. Objectiv. (Blackliaiu, G. E.)? On the amplifyiug power of objectives and oculars in the Compound microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 1 p. 114; cfr. Proceed. Amer. Soc. Microscopists vol. XI, 1889, p. 22). (Cox, J. D.); The new apochromatic objective (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt.2 p.248; cfr. The Microscope vol. X, 1890, p. 164). (Malassez , L.) , On a new System of erecting and long focus objectives (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 2 p. 246; cfr. Arch. de Med. Exper. t. I, 1889, p. 449). N. W. , Neuer Objectivwechsler für das Mikroskop (Centralzeitg. f. Opt. u. Mechan. Bd. XII, 1891, No. 4 p. 46). c. Ocular. (Ligthon , W.), A new ocular diaphragm (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 2 p.255; cfr. The Microscope vol. X, 1890, p. 8). d. Tisch. (Hyatt), Substage condenser (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 2 p. 256; cfr. Journ. New York Microsc. Soc. vol. VII, 1891, p. 54). (Nelson, E. M.), The substage condenser: its history, construction, and mana- gement; and its effect theoretically considered (Journ. R. 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Brunnee, R., Ueber eine neue Vorrichtung für Mikroskope zum Zwecke eines schnellen Uebergangs von parallelem polarisirten zu convergontem Licht (Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. XI, 1891, H. 4 p. 136). (Grosse, AV.), Polarizing prisms (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 2 p. 253; cfr. Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. X, 1890, p. 445). (Wülflng, E. A.), Apparatus for the rapid change from parallel to convergent polarized light in connection with the microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 1 p. 105; cfr. Neues Jahrb. f. Mineral. 1889 Bd. II p. 199; diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 545). h. Camera lucida. (Govi, G.), A new camera lucida (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 2 p. 254; cfr. Centralzeitg. f. Opt. u. Mechan. Bd. X, 1889, No. 22 p. 260; diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 481). 1. Testobjecte. Cox, D. , Diatom structure (Journ. New York Microsc. Soc. vol. VII, 1891, no. 2 p. 73). Smith, Th., Structure of the Pleurosigma (Journ. New York Microsc. Soc. vol. 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October 1891.1 Hierzu vier Holzschnitte Wenn wir das optische Vermögen eines modernen Mikroskopes untersuchen wollen , müssen wir hauptsächlich auf Folgendes ein be- sonderes Augenmerk richten : auf das definirende nnd das Abbildungs- Vermögen und auf den Grad der Vergrösserung, Würden sich unsere Anforderungen nur auf den Grad der Ver- grösserung beziehen , so wäre die praktische Ausführung derselben keine schwere Aufgabe gewesen. Doch wir wissen es schon von Hugo V, MoHL, dass wir uns allein hiermit nicht begnügen dürfen, denn die gesteigerte Vergrösserung führt nicht auch zur Erkenutniss der Details — und was würde uns ein noch so grosses Bild nützen, wenn darin die Details fehlten? Mit Recht legt man daher bei der Prüfung und Benutzung der Mikroskope das Hauptgewicht auf die reine Definition und auf das Sichtbarmachen der feinen Structur. In Folge dieser Anforderungen und Dank der Bemühungen gelehrter Optiker, Mechaniker und der Mikroskopiker selbst, ist eben in dieser Hinsicht ein wirklich be- deutender Aufschwung eingetreten, und die ausgezeichneten Objeetive und Immersionssysteme lassen sozusagen nichts mehr zu wünschen übrig. Doch kommt nun auch das andere, für den Mikroskopiker Zeitschr. 1'. wiss. Mikroskopie Vlll, 3. 19 282 Lendl: Eine neue Construction für Mikroskope. VIII, 3. ebenso wichtige Moment hinzu, nämlich in manchen Fällen mit der Beibehaltung des erreichbar höchsten Abbildungs- nnd Definitions-Ver- mögens auch eine möglichst starke Vergrösserung zu verbinden *, denn ebensowenig wie für uns ein übermässig vergrössertes Bild ohne Details nützlich sein kann, ebensowenig bedürfen wir eines Bildes, welches zwar noch die kleinsten Details enthält, jedoch nur so weit vergrössert, dass wir dieselben nicht mehr gehörig sehen können. Es muss eben, um gute Resultate zu erreichen, ein bestimmtes Verhältniss innegehalten werden. Gewiss wäre es ein verfehltes Bestreben, die Vergrösserung zum Schaden der gut definirten Umrisse und der Erkennung feinerer Struc- turen zu steigern ; aber so weit es möglich ist, müssen wir auch der Vergrösserung selbst Rechnung tragen, denn gerade unsere ausgezeich- neten Immersionssysteme führten uns an jene Grenze, wo wir unbefrie- digt die Untersuchungen aufgeben müssen, da wir hier die zartesten Details im Bilde sehen oder zu sehen meinen, jedoch können wir sie nicht mehr gehörig betrachten und sicher beurtheilen, weil das von der gut auflösenden Immersion gebotene Bild nicht auch so weit ver- grössert ist, um das wahrnehmbar Kleinste gross genug erscheinen zu lassen. Man sieht einen Punkt, einen Strich — doch kann man es nicht mehr unterscheiden, ob dieser Punkt rund oder viereckig ist, ob der Strich drei-, viermal so lang als breit ist. Es ist das Detail des Bildes unserem Auge nicht in fassbarer Grösse geboten. Selbst die Form der Felder des Pleurosigma angulatum ist noch ein Räthsel ge- blieben ! Diesem Uebel abzuhelfen , ist es zum Bestreben geworden , auch die Vergrösserungskraft der Mikroskope hinaufzuschrauben. Die Ocu- lar- Vergrösserung konnte aber, abgesehen von der Verdunkelung des Sehfeldes, nicht genügen, und die Objectiv- Vergrösserung — abgesehen davon, dass nicht Jeder in der Lage ist, sich die best auflösenden und dabei zugleich am stärksten vergrössernden , natürlich auch am theuersten zu stehen kommenden Immersionssysteme anzuschaffen — konnte auch nur bis zu einer bestimmten Grenze ohne andere Nach- theile hinaufgeführt werden. Wollen wir daher in bestimmten Fällen eine gesteigerte Vergrösse- rung unseren Zwecken dienlich machen, wollen wir ein fragliches De- tail betrachten, so müssen wir diese Vergrösserung auf einem ganz an- deren Wege, unabhängig vom Objectiv und ohne Ocular-Vergrösserung zu erreichen suchen. Dies gelang mir auf sehr einfache Weise durch Veränderung der Construction des Mikroskopes. I VIII, 3. Lendl: Eine neue Constructioii für Mikroskope. 283 Das Princip der Construction der bisher gebrauchten Mikroskope ist, in kurze Worte gefasst, das folgende : Das vom Objectiv erzengte Bild wird durcli die Collectivlinse gesammelt und sodann durch die nochmals vergrössernde Ocularlinse betrachtet. Wenn wir mit Hilfe eines Immersionssystemes irgend ein Object untersuchen und im Bilde ein Detail wahrnehmen können, welches wir jedoch, um es z. B, seiner Gestalt und Grösse nach gehörig beurtheilen zu können, noch mehr vergrössert sehen wollen , da die eben benützte Vergrösserung noch nicht genügt: so setzen wir ein stärkeres Ocular statt des schwächeren ein. Aber weit kommen wir auf diese Weise nicht, denn die Benutzung starker Oculare bringt nicht nur Vortheile, sondern auch Nachtheile mit sich — und dann müssen wir uns damit begnügen, das fragliche Detail eben nur bemerkt zu haben, ohne es näher untersuchen und sicher be- urtheilen zu können. In solchen Fällen kann man sich nun leicht durch eine von mir erdachte Veränderung des Mikroskopes helfen. Diese besteht im Folgenden: Man schaltet die Ocularlinse des Mikroskopes gänzlich aus und setzt an ihre Stelle ein zweites, geringe vergrösserndes ganzes Mikroskop. D. h. man betrachtet das durch die Collectivlinse gesammelte Bild nicht mehr durch eine vergrössernde Ocularlinse, sondern durch ein zweites Mikroskop. Es kommen also zwei Mikroskope übereinander; vom unteren fehlt die Ocularlinse. Mit Hilfe der mechanischen Vorrichtung stelle man das obere Mikroskop auf das Bild der Collectivlinse ein ; — blickt man nun in dieses doppelte Mikroskop , so erkennt man das vordem zu kleine Detail wieder, jetzt aber schon so weit vergrössert, dass man seine Gestalt und Grösse ganz leicht erkennen und beurtheilen kann. Dabei ist weder das Abbildungsvermögen , noch die reine Definition nachtheilig beeinflusst worden; auch das Sehfeld hat sich nicht so ver- dunkelt als bei starker Ocularvergrösserung. Mau arbeitet mit dem- selben Mikroskop, mit demselben Immersionssysteme; nur darin ist der Unterschied, dass man statt einer Linse nun ein ganzes Mikroskop zu Hilfe nahm. Da die Mikroskope im allgemeinen schon an und für sich auch mit schwachen Objectiven und Ocularen versehen sind , kann man gleich diese zur Armirung des oberen Mikroskopes verwenden, und so ist eigentlich nur eine geringe Veränderung des mechanischen Theiles am Mikroskop durchzuführen. Ein Hilfsapparat kommt noch hinzu, welcher das obere Mikroskop in sich fasst. Ich habe bei meinen Versuchen ein grosses Mikroskop aus dem 19* 284 Lendl: Eine neue Construction fiu' Mikroskope. Vill. 3. optischen Institute von C. Reichert in Wien benutzt; es sei mir daher gestattet, die weitere Erläuterung darauf zu begründen. Das Stativ dieses Mi- kroskopes wurde von DippEL im V. Bande dieser Zeitschrift • lo- bend beschrieben und abgebildet; deshalb brauche ich hier nicht weiter darauf einzuge- hen, umsomehr, da am Stativ selbst gar keine Veränderung erforder- lich ist. (Besitzen wir dieses neueste Stativ nicht, so können wir uns auch mit einem einfa- cheren begnügen , wie ein solches in der bei- stehenden Figur 1 abge- bildet ist. Hierzu muss ich nur noch bemerken, dass die Mikrometer- schrauben der älteren und kleineren Stative nicht immer genügen, da bei sehr starker Ver- grösserung auch die mi- nimalsten Höhendifleren- zen in Betracht kom- men.) Der Tubus dieser Mikroskope, an dessen unteres Ende die Objec- - " tive mit oder ohne Re- volver - Vorrichtung an- geschraubt werden, trägt an seinem oberen Ende i 1. ') DuM'Ei,, L., Ans (lern optischen Institute von Carl Reichert in Wien (Diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 145). VIII, 3. Lendl: Eine neue Construction für Mikroskope. 285 einen ebenfalls angeseschraubten Ring (Figur 2), welchem eine zweite Röhre eingefügt ist. Diese letztere kann je nach Bedarf hineinge- schoben oder ausgezogen werden und trägt in ihrer oberen Oeffnung das Ocular. — Wünschen wir nun das Mikroskop mit dem erwälinten Hilfsapparat versehen zu lassen, um in bestimmten Fällen auch die sehr gesteigerte Vergrösserung in Anspruch nehmen zu können, so müssen wir in erster Reihe den Ring der Röhre umän- dern lassen und zwar auf solche Weise, dass er ohne Schraubengang in den Tubus gleite und daher, wenn es nöthig wird, leicht heraus- gehoben werden könne (Figur 3). Zieht man nun den Ring sammt der oberen Röhre und dem Ocular ganz heraus , so kann man auf den Tu- bus einen zweiten, noch längeren Tubus, eben- falls auf sehr einfache Weise, glatt aufsetzen ; in dem letzteren befindet sich unten eine Collectiv- 1 r s.^ G j L ü 3. 4. linse, oberhalb dieser aber das ganze Mikroskop, welches durch Zahn und Trieb verstellbar ist (Figur 4). Das obere Mikroskop kann heraus- genommen werden und mit den schwachen Objectiven (REiCHERT'sche Objective No. 1, 2 und 3) versehen werden; die Oculare (I oder II) können von oben eingefügt werden. Die praktische Durchführung dieser neuen Construction stösst 286 Leiidl: Eine neue Construction für Mikroskope. VIII, 3. daher auf gar keine Schwierigkeiten; aber sie bietet uns in manchen Fällen sehr grosse Vortheile. Gewiss werden wir es nicht beabsichtigen, mit sehr starker Ver- grösserung langandauernde Untersuchungen zu machen, sondern wir werden uns nur auf die nähere Betrachtung der auf andere Weise be- merkten Details beschränken. Haben wir dann ein fragliches Detail schon zur Genüge besehen, so können wir den langen Tubus wieder ganz leicht und glatt herausheben und das vorhin bei Seite gelegte Ocnlar sammt Röhre und Ring an seine Stelle zurücksetzen. Da wir uns eben nur auf die Untersuchung der einzelnen Details beschränken werden, wird es kaum als ein Mangel gedeutet werden können, dass das Sehfeld etwas kleiner geworden ist, als bei Anwen- dung der Ocularvergrösserung. Zur Beleuchtung habe ich die KocH-WoLz'sche Mikroskopirlampe', combinirt mit dem AuER'schen Glühlicht -, ganz vortrefflich benutzen können; aber noch viel besser ist das elektrische Glühlicht. Dasselbe gestattet eine Vergrösserung, welche beiläufig 8000- bis lOOOOfach ist. (Ich habe diese Zahl durch Vergleichen mit dem bekannten Vergrösse- rungsgrad eines anderen Mikroskopes durch beiläufiges Abschätzen er- halten.) In der letzten Sitzung der Königl. Ungarischen Naturwissenschaftl. Gesellschaft" habe ich zwei REiCHERx'sche Mikroskope mit denselben Immersionssystemen, mit derselben Beleuchtung und mit denselben Test- objecten vorgeführt : eines derselben war mit meinem Hilfsapparate ver- sehen*, letzteres war also ein doppeltes Mikroskop, das andere dagegen nicht'^. Sämmtliche anwesende Fachmänner konnten sich dabei von dem Werth der Neuerung überzeugen — denn nur im Grad der Ver- grösserung war ein Unterschied, und zwar ein grosser zu constatiren, während das Definitions- und Abbildungsvermögen und die Lichtstärke nicht naclitheilig beeinflusst waren. Viele Mikroskopiker werden so sehr gesteigerte Vergrösserungen überhaupt nicht benöthigen, denn ihre Objecto erheischen dieselben nicht; wie sehr es jedoch in manchen Fällen eben auch auf die mög- ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 188H, p. 477 u. Bd. VII, 1890, p. 450. ■^) Cfr. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 35. 3) Sitzung am 21. October 1891. •*) Homogen - Immersion Vao" m^d übjectiv 2 nebst Ocular I (beiläufig 7000fache Vei-grösserung). 5) Homogen - Immersion '/20" und Ocular V bei ausgezogenem Tubus (1900fache Vergrösserung). Vin, 3. Lendl: Eine neue Construction für Mikroskope. 287 liehst starke Vergrösserung ankommen kann, das beweist am schönsten das allgemein bekannte Testobject: Pleurosigma angulatum. Die Sculptur dieses Objectes bietet nicht einmal so ausserordentlich kleine Details, denn der Durchmesser eines Feldchens beträgt nahezu 0*0005 mm. Und doch hat die Gleichförmigkeit und die grosse Anzahl der nahe aneinander gereihten Feldchen schon so viele beobachtende und geübte Augen, trotz der starken Immersionssysteme, täuschen können. Dies war nur aus dem Grunde möglich, weil die Vergrösse- rung dennoch nicht bis zu jenem Maasse gesteigert wurde , bei welclier jedes Feldchen allein, für sich, ohne Beeinflussung der nachbarlichen Feldchen, durch das Auge hätte erfasst und fixirt werden können. Je geringer die Vergrösserung ist, desto mehr Feldchen sehen wir auf einmal und um so viel näher sind sie beisammen — und daher meinen wir auch, sie seien wirklich sechseckig! Schon seit langer Zeit wird die Frage, ob die Feldchen sechseckig seien oder nicht, von den verschiedensten Autoren besprochen — aber endgültig entschieden ist sie noch immer nicht. Die meisten stimmen darin überein, dass wir es wirklich mit Sechsecken zu thun haben, andere dagegen behaupten das Gegentheil. Schon Naohet, Stein und Andere meinten, es wären diese fraglichen Feldcheu Kreise, die uns aber in ihrer besonderen Gruppirung täuschen und daher sechseckig erscheinen. Selbst in neuerer Zeit sind hierüber verschiedene An- sichten ausgesprochen worden. E. M. Nelson bespricht die möglichen Täuschungen ' ; J. B. Dancee meint, die schiefen Linien wären auf der Oberfläche, die transversalen jedoch auf der inneren Fläche - und folg- lich können die Feldchen keine Sechsecke sein; Dr. H. van Heukck behauptet wieder, die Feldchen seien hexagonal ^. Aehnlich entzweiten sich die Ansichten auch schon in früheren Jahren, man meinte Sechs- ecke oder Kreise zu sehen ; dazu bemerkte Prof. Dr. L. v. Than- HOFFEK ^ ganz richtig: „Aber auch angenommen, dass wir uns beim Betrachten solcher Bilder immer irren müssen , so folgt doch daraus nicht, dass die Felder des Pleurosigma angulatum nicht sechseckig sind". — Eben um solche möglichen Täuschungen zu vermeiden, müssen wir in einzelnen Fällen die Vergrösserung so weit verstärken — was, wie schon gesagt, ohne andere nachtheiligen Folgen möglich ist — dass <) Nelson, E. M., im Journ. R. Microsc. Soc. 1891. pt. 1, p. 90. 2) Dancek, J. B., 1. c. 1886. Ser. IL vol. VI. pt. 2, p. 691. 3) VAN Heueck, H., 1. c. 1890. pt. 1, p. 103. *) Thanhoffek, L. V., Das Mikroskop imd seine Anwendung. Stuttgart 1880. p. 68. 288 Lendl: Eine neue Construction für Mikroskope. VIII, 3. wir jedes einzelne Detail an und für sich gross genug sehen und richtig beurtheilen können. Nur so werden wir seine wahre Gestalt, Grösse u. s. w. erkennen und mit anderen Details vergleichen können. Mit demselben Immersionssysteme, welches nur mit einem starken Ocular verbunden (Reichekt's homogene Immersion '/,(," und Ocular V) die Feldchen, ebenso wie jedem anderen Beobachter, als Sechsecke zeigte, habe ich dieselben, nachdem ich die Vergrösserung mit dem Ob- jective No. 2 und Ocular I oder II am oberen Mikroskop verstärkte, ganz sicher und unleugbar als rhombische Feldchen erkannt! Es war bei dieser Vergrösserung jedes Feldchen so gross, dass ich es genau betrachten und einzeln fixiren konnte, ohne dass die übrigen Feldchen meine Augen gestört hätten. Die Oberfläche der Feldchen ist gewölbt; die Ecken und Kanten sind abgestumpft. Die schiefen Linien sind Furchen. Besonders die spitzen Ecken sind abgerundet, daher zieht auf sie ein dunkler Schatten, wodurch je zwei dieser Ecken die parallelen Längsseiten der vermeint- lichen Sechsecke imitiren. Bei geringerer Vergrösserung sieht man wohl diese Schatten auch als dunkle Punkte, doch kann man ihr Wesen nicht gehörig deuten, und sie fliessen bei der angenommen richtigen Einstel- lung mit den Furchen in ein Bild zusammen , wodurch sie sechseckige Rahmen herstellen. Stellt man das Mikroskop etwas hoch ein, so sieht man nur die Schatten der spitzen Ecken als dunkle Punkte (dreieckige Flecke), während die übrigen Details dem Auge noch unerkenntlich sind. Diese Punkte gruppiren sich immer nur nach rhombischen Vierecken, niemals aber in solcher Weise, wie es einem hexagonalen Muster entspräche. Lässt man die Mikroskopröhre sachte hinab , dann kommen auch die Furchen im Bilde deutlich zum Vorschein ; bei dieser Einstellung sieht man gleich und leicht ein , wie die rhombische Figur zum Sechseck werden kann; zugleich erscheint es so, als würden die Furchen rund- liche Feldchen begrenzen, denn man sieht lichtere Kreise oder ovale Feldchen ; es sind das die erhaben gewölbten Kuppeln der rhombischen Feldchen. Lässt man das Mikroskop noch etAvas weiter hinabsinken, so erreicht man den Punkt des deutlichsten Sehens; allsogleich erlangt man die Ueberzeugung , dass wir es nur mit rhombischen, aber nicht mit hexagonalen Formen zu thun haben. Fahren wir weiter fort mit Hinabsenken der Mikroskopröhre, so sehen wir nun dieselben Bilder wieder, aber in umgekehrter Reihenfolge: ein Zeichen dafür, dass die innere Fläche des Panzers dieselbe Sculptur aufweist wie die obere. Betrachte man nun auch noch solche Objecte, deren Kieselpanzer VIII, 3. Lendl: Eine neue Construction für Mikroskope. 289 beschädigt oder zerrissen ist; betrachte man die Kante des Risses selbst: überall wird man sich bei genügender Vergrössening immer wieder davon überzeugen können , dass eine hexagonale Gestalt der Feldchen ausgeschlossen ist. An manchen Stellen haben sich diese Feldchen, welche eigentlich die Oberflächen kleiner krystallähnlicher Körperchen sind, losgelöst, d. h., die Körperchen sind aus dem Kieselpanzer herausgefallen. An solchen Stellen bemerkt man, dass auch noch eine sehr feine Membran vorhanden ist , auf welcher die Körperchen aufsassen ; diese Membran bewahrte die Eindrücke derselben als ein rhombisches Muster. Man kann auch einzelne herausgefallene Körperchen finden , die etwas ab- gerundet und sehr stark lichtbrechend erscheinen. Es ist jeder Zweifel , dass die Feldchen nicht rhombisch wären, ausgeschlossen. Auch alle die nach Mikrophotographien erzeugten, stark vergrösserten Bilder bezeugen dies, denn alle die verschiedenen Formen der Feldchen sind auf ein gewölbtes rhombisches Muster zurück- zuführen, aber nicht auf ein hexagonales. Auch mit Surirella Gemma habe ich ein zufriedenstellendes Resultat erhalten. Die Querstreifen sind ebenfalls von kleinen , etwas länglichen Körperchen zusammengestellt ; daher rührt das sogenannte „korbähnliche Gewebe"; jede Querreihe erscheint als eine Perlschnur* — und bei einer beiläufig 6000 fachen Vergrösserung habe ich selbst die Zahl der Perlen in einer Querreihe , ohne meine Augen anzu- strengen , abzählen können ! Auch bei dieser Art fallen die kleinen Körperclien aus manchem Panzer heraus, und dann bleibt nur noch eine äusserst feine Membran zurück, welche die feinste Längsstreifung zeigt. Diese Streifung fällt an den unbeschädigten Objecten nicht mit den Linien des korbälnilichen Gewebes zusammen , sondern sie wird durch dieses verdeckt. Aber eben bei einer äusserst starken Vergrösserung sind auch die minimalsten Höhendifferenzen leicht zu unterscheiden, und so kommt es, dass man am selben Object zuerst das „korbähnliche Ge- webe", d. h. die Perlschnüre, sehen kann, dann aber, bei äusserst sachtem und aufmerksamem Hinablassen des Mikroskoprohres auch die feinen Längslinien der Membran ganz deutlich einstellen kann. Diese Längslinien mit den scheinbar punktirten, perlschnurartigen Querreihen zusammengenommen können ein Bild ergeben, in welchem man länglich- hexagonale Feldchen zu sehen meint, wie sie H. Frey- in seinem Buche 1) Die beste Mikrophotographie, welche diese Sculptur sehr schön wieder- giebt, habe ich im Journ. R. Microsc. Soc. 1890, pt. 1, plte. II, gesehen. 2) Fkey, H., Das Mikroskop. Leipzig 1881, p. 47, Figur 67. 290 Lendl: Eine neue Construction für Mikroskope. VIII, 3. zeichnete. Als ich diese laugen Sechsecke einmal gesehen hatte, habe ich mir noch wiederholt viele Mühe gegeben, das ähnliche Bild auch bei anderen Exemplaren zu erzeugen, aber es ist mir nicht bei jedem gelungen. Bei einzelnen Exemplaren konnte ich immer nur die Perl- schnüre allein sehen ; bei den meisten aber sah ich diese aus Körper- chen zusammengesetzten Querreihen und auch die Läugsstreifung der Membran, jedes Bild für sich ; bei einigen ist es mir jedoch gelungen, beide auf einmal zu sehen und so das täuschende Bild der länglich- hexagonalen Feldchen zu erzeugen. Ich habe dies Alles mit demselben Immersionssysteme wahrnehmen können, welches mich sonst, mit einem starken Ocular vereint, eben nur das „korbähnliche Gewebe" sicher erkennen Hess. Ich glaube, aus diesen Beispielen wird der Leser ersehen, welche Vortheile uns in manchen Fällen die sehr gesteigerte Vergrösserung bietet; sie schützt uns vor Täuschungen und ermöglicht es, das, was wir sonst eben nur sehen können , deutlich und sicher wahrzunehmen und der Gestalt und Grösse nach zu beurtheilen. Wir müssen daher zur Aushülfe und zur ControUe auch solche Vergrösserungen benutzen. Jedem Mikroskopiker , der in die Lage kommt, starke Vergrösse- rungen zu benutzen, kann ich diese einfache Veränderung in der Con- struction des Mikroskopes anrathen, um so mehr, da er auf diese Weise auch mit schwächeren Systemen und schwächeren Ocularen viel weiter kommt, als sonst mit den stärksten. Herr C. Reichert in Wien hat es übernommen , solche doppelte Mikroskope, eventuell Hilfsapparate für die schon im Gebrauch stehen- den Mikroskope verfertigen zu lassen. Zum Schluss sei es mir gestattet, allen Denen, die mir bei meinen Versuchen behülf lieh waren , meinen besten Dank auch hier öffentlich auszusprechen; besonders den folgenden Herren: Dr. GfizA Entz, Pro- fessor am Polytechnicum , mit dessen Einwilligung ich die Mikroskope seines Institutes benützen konnte; Dr. L. v. Thanhoffeb, Professor an der Universität, der mich mit seinen fachmännischen Rathschlägen unterstützte ; hauptsächlich aber C. Reichert , Mikroskopfabricant in Wien, dem ich das erste Mikroskop dieser Art verdanke. [Eingegangen am 30. üctober 1891.] VIII, 3. Bernhard: Neue Modification d. Abbe'«clieii Zeichenapparates. 291 Eine neue Modification des Abbe'schen Zeicbenapparates. Von Dr. med. Wilhelm Beruliard iu Braunschweig. Hierzu ein Holzschnitt. Gegenüber den enormen Fortscliritten, wie sie die Photographie, speciell die Mikrophotographie, in den letzten Jahren aufzuweisen hat, ist das mikroskopische Zeichnen entschieden etwas in Misscredit ge- rathen, und es hat nicht an Ausdrücken der Verwunderung gefehlt darüber, dass überhaupt noch Jemand Zeit und Arbeit auf die Her- stellung einer Zeichnung verwendet, anstatt diese Arbeit der photo- graphischen Platte zu übergeben, die schneller und noch dazu in ob- jectivster Weise sich ihrer Aufgabe entledigt. Es wäre ein Unrecht, wollte man diesen praktischen Nutzen der Photographie auch nur für einen Augenblick leugnen, es wäre auch eine positive Unmöglichkeit, aber es ist doch erlaubt, die Frage aufzuwerfen, ob dieser Nutzen sich wirklich stets als Nutzen erweist, ob es nicht Fälle genug giebt, wo uns die Objectivität des Photogramms direct unerwünscht sein kann und muss. Dieser Fall tritt gerade in der mikroskopischen Forschung ein ; denn hier soll uns die Abbildung zeigen, nicht was hätte gesehen werden können, sondern was von dem Forscher gesehen wurde, d. h. also die Beobachtung des Forschers, die stets nur eine subjective sein kann, und dieser subjectiven Beobachtung vermag nur eine eigenhändige Zeichnung Ausdruck zu verleihen. Mühsam ist das Zeichnen, zeitraubend ist's auch unzweifelhaft — wenn schon für den Geübten, in einem wieviel höheren Grade erst für den Ungeübten — und, haben wir demnach Mittel, das Zeichnen zu er- leichtern, sogenannte Zeichenapparate, mit Freuden zu begrüssen, so 292 Bernhard: Neue Moclification d. Abbe'schen Zeichenapparates. VIII, 3. müssen wir doch mit Bedauern sehen, wie mancher Zeichner enttäuscht den Apparat bei Seite legt. Da kommen denn die zahllosen Klagen über Undeutlichkeit des mikroskopischen Bildes, über ündeutlichkeit der zeichnenden Bleistift- oder Federspitze und über die daraus resultirende Ungenauigkeit und Unvollkommenheit der Zeichnung selbst, Klagen, deren Grund in der verschiedensten Weise gedeutet und nicht zum min- densten den Zeichenapparaten zur Last gelegt wurde und wird. Den rein optischen Theil der Zeichenapparate, d. h. also die reflec- tirenden, beziehungsweise brechenden Medien trifft die Schuld indessen nicht — an dem ist in den allerseltensten Fällen etwas auszusetzen — wohl aber die so häufig unrichtige Construction des Zeichentisches und vor allem den constructiven Theil der Zeichenapparate insofern, als an fast allen Einrichtungen zur Regulirung der Liclitzufuhr fehlen. Alle Zeichenapparate haben doch das Gemeinsame, dass sie Bildfläche und Zeichenfläche auf einander projicirt erscheinen lassen. Beide Licht- flächen nun schwächen sich gegenseitig schon bedeutend ab, und es ist leicht verständlich, dass bei ungleicher Lichtintensität beider, wie sie fast immer vorhanden ist, die lichtstärkere die lichtschwächere über- strahlen, dadurch undeutlicher machen, ja sogar unter Umständen ganz unterdrücken wird. Hierin liegt vor allem der Grund zu den oben er- wähnten Klagen. Will man also die Zeichenfläche und den zeichnenden Stift einerseits und das mikroskopische Bild anderseits zu gleicher Zeit gleich deutlich sehen, so muss man die Lichtintensität Beider einander gleich machen, und man erreicht dieses dadurch, dass man entweder die lichtschwächere Fläche stärker erleuchtet oder die lichtstärkere dämpft. Da es sich indessen empfiehlt, nur bei Tagesbeleuchtung zu zeichnen, und man nicht im Stande ist, diese Beleuchtung nach Belieben zu verstärken, wird man meist die letztere Art der Lichtregnlirung als die einfachere und leicht zu bewerkstelligende wählen : man wird die lichtstärkere Fläche dämpfen müssen. Dieses erreicht man bekanntlich dadurch, dass man die lichtstärkere Fläche durch matte Scheiben, Rouleaux, Pappscheiben etc. etc. bis zu dem gewünschten Grade be- schattet. Für gewöhnlich ist ja die Zeichenfläche die lichtstärkere und demnach zu beschatten. Tritt dagegen der umgekehrte Fall ein, be- sonders bei schwächeren Vergrösserungen und sehr conceutrirter Be- leuchtung, etwa durch Condensor eventuell mit voller Oefl'nung, so wäre es fehlerhaft, die Cylinder-Diaphragmen oder Irisblende zur Dämpfung zu verwenden ; dieselben behalten vielmehr diejenige Oeffnung bei, bei welcher man die zu zeichnenden Bilddetails am deutlichsten sieht. Es ist das ja eigentlich selbstverständlich, da sich mit Veränderung der VIII, 3. Bernhard: Neue Modification d. Abbe'schen Zeiclienapparates. 293 Blendungsöffnung auch das Structurbild des Objectes ändert. Also auch hier Dämpfung- durch Schirme etc. Es wird mir mm ein Jeder zugeben, dass derartige Abblendungs- vorrichtungen ausserordentlich umständlich sind, ganz besonders aber für denjenigen Mikroskopiker, welcher nicht über ein mit allem Raffine- ment ausgestattetes Laboratorium verfügt. Geradezu merkwürdig aber ist es, dass man nicht früher auf die Idee kam, diese umständlichen Vorrichtungen durch einfachere am Zeicheuapparate selbst befindliche zu ersetzen, und es war daher als ein sehr glücklicher Gedanke und entschiedener Fortschritt zu bezeichnen, als Abbe seinen Zeichenapparat mit zwei auswechselbaren Rauchgläschen versah, durch welche er, wenn nöthig, die meist lichtstärkere Zeichenfläche abzublenden gedachte. Aber auch in dieser Form leistete der Apparat nur unter besonders günstigen Beleuchtungsverhältnissen das, was man von ihm verlangen musste, in anderen Fällen Hess er im Stiche ; denn einmal berücksichtigt diese Lichtregulirung nur die eine Lichtfläche — nämlich Zeichenfläche — und zum Anderen lässt dieselbe nicht genug (nur 4) Abstufungen zu, wie sie bei so ausserordentlich feinen Abstufungen der Tagesbeleuchtung — ich erinnere nur an vorüberziehende Wolken — nothwendig sind. Dem Wunsche, diesen Uebelständen abzuhelfen, liegt nun die nacli- folgend zu beschreibende Abänderung des AsBE'schen Zeichenapparates 294 Bernhard: Neue Modification d. Abbe'schen Zeichenapparates. VlII. 3. zu Grunde, die, wie ich glaube, alle genannten Unbequemlichkeiten glücklich überwunden hat. Der Zeichenapparat an sich ist, was Grösse und Form anbelangt, durchaus derselbe geblieben; die Aenderung beruht einzig und allein in der Lichtdümpfungsvorrichtung. Gänzlich neu ist daran die Dämpfungs- vorrichtung für die mikroskopische Bildfläche. An die Stelle der bis- herigen zwei Rauchgläser zur Dämpfung der Lichtintensität der Zeichen- fläche sind hier zwei runde Scheiben getreten, deren jede vier Rauch- gläser von verschiedener Dunkelheit in feiner Abstufung enthält. Diese Scheiben sind drehbar je an einem umzukippenden Arme befestigt so, dass jede für sich oder auch beide zusammen ein- oder ausgeschaltet werden können. Die centrale Stellung der Rauchgläser zwischen Spiegel und Prisma wird durch ein einschnappendes Zähnchen markirt. Diese Scheiben dienen also mit ihren Gläschen zur Dämpfung der Lichtinten- sität der Zeichenfläche. Unterhalb des Prismas und fest, aber drehbar mit dem Gehäuse desselben verbunden, befindet sich nun excentrisch eine dritte horizon- tale Drehscheibe von gleicher Grösse wie die erstgenannten mit eben- falls vier Oeffnungen, von denen allerdings nur drei durch Rauchgläschen ausgefüllt sind. Die vierte Oeifnung enthält kein Glas, um bei ihrer Einschaltung den aus dem Mikroskop kommenden Lichtstrahlen freien Durchtritt zu gewähren, während die anderen drei diese Strahlen mehr oder weniger abzuschwächen bestimmt sind. Auch an dieser Scheibe wird die centrale Stellung der Rauchgläser durch einen einschnappenden Zahn markirt. Diese drei Scheiben zusammen lassen nun genau 100 mögliche Combinationen zu, aus denen man bei Aenderung der Beleuch- tung durch Drehen der Scheiben in jedem Augenblicke rasch und leicht die passende heraussuchen kann und zwar ohne die Beobachtung dabei zu unterbrechen. Der Vortheil dieser Einrichtung gegenüber der alten ist sofort er- sichtlich: Hatten wir dort nur eine vierfache Abstufung der Lichtdäm- pfung, so haben wir hier eine hundertfache, die an Mannigfaltigkeit nichts zu wünschen übrig lässt. Mussten wir dort ein eventuell licht- stärkeres Gesichtsfeld durch Blendschirme dämpfen, so macht uns hier die horizontale Scheibe von derartigen Abbiendungen unabhängig. Dass wir auch von der Abbiendung der Zeichenfläche unabhängig sind, lassen die beiden verticalen Scheiben sofort verständlich erscheinen. Und das ist gerade der Hauptzweck und Hauptvortheil des Apparates, Alles in sich zu vereinigen, was ausser Mikroskop und Zeichentisch zum erfolg- reichen Zeichnen nöthig ist. Allen Beleuchtungsverhältnissen lässt er Vlll, 3. Henking: Winkel's neuer Zeichenapparat. 295 sich anpassen, und an jedem beliebigen Orte ist er ohne weiteres zu ge- brauchen. Als weiterer Vortheil gegenüber der alten Construction wäre zu nennen erstens, dass die Rauchgläschen ein- für allemal mit dem Apparate untrennbar verbunden sind; es kann also nie Eines derselben verloren gehen, was bei den beiden losen Rauchgläschen dort nicht aus- geschlossen ist. Zweitens bleiben die Rauchgläschen auch beim Aus- wechseln stets klar, weil der die Scheiben drehende Finger nicht mit den Gläsern selbst sondern nur mit ihrer Metallfassung in Berührung kommt, während bei den losen Gläschen sich ein Blindwerden derselben durch Anfassen und ein unnöthiger Zeitverlust durch das nachfolgende nothwendige Putzen gar nicht vermeiden lässt. Indessen das sind nur nebensächliche Vortheile, die zu den besprochenen Hauptvortheilen in gar keinem Verhältnisse stehen. Ob dieser Apparat nicht noch weiterer bedeutender Verbesserungen fähig ist, lasse ich dahingestellt; vorläufig glaube ich ihm das Zeugniss ausstellen zu können, dass er allen berechtigten Anforderungen in vollem Maasse genügt. (Der Apparat wird von der Firma Cael Zeiss in Jena zum Preise von 40 Mark geliefert.) [Eingegangen am 10. September 1891.] Wiiilvel's neuer Zeiclieuapparat. Von Dr. H. Henking- in Göttingen. Hierzu ein Holzschnitt. Der anbei abgebildete, von R. Winkel in Göttingen construirte Zeichenapparat ist im Principe wohl nicht neu, verdient jedoch durch manche praktische Einrichtung die Beachtung der Mikroskopiker. Im allgemeinen gleicht derselbe, wie schon der Augenschein lehrt, sehr dem früher von G. Kohl * beschriebenen und von W. E. Boeckek in ') Kohl, G., Boeckek's neuer Zeichenapparat nach Dippel (Botan. Centralbl. Bd. XVL 1883, No. 52 p. 385). 296 Henking: Winkels neuer Zeichenapparat. VIII, 3. Wetzlar angefertigten Apparate für mikroskopisches Zeichnen, sowie auch dem bekannten in neuerer Zeit von der Firma C. Zeiss in Jena in den Handel gebrachten Zeichenapparate. Bei allen dreien wird nach einem schon von alten Mikroskopverfertigern benutzten Principe das Bild durch einen unter 45" geneigten Spiegel auf die horizontale Tiseh- fläche neben das Mikroskop projicirt. Die Vereinigung der Objectebene und der Bildebene auf der Retina geschieht bei Winkel mit Hülfe eines Prismas, welches an der nach unten gewandten schrägen Fläche in der Mitte einen aufgeklebten kleinen Glascylinder trägt. Bei dem Glas- cylinder ist die zum Festkleben benutzte obere Fläche abgeschrägt, so- dass er senkrecht steht und die vom Objecto herkommenden Strahlen in das Auge gelangen lässt. Die schräge Fläche des oberen Prismas ist zu aller Sicherheit versilbert. * Die Abstimmung der Helligkeit des Objectbildes und der Zeichen- fläche wird sehr zweckmässig durch eine zwischen Prismen und Spiegel eingeschaltete, drehbare Scheibe bewerkstelligt. In der Scheibe befinden sich fünf Oeffnungen, drei derselben enthalten drei verschieden dunkele Fensterchen von Rauchglas, die vierte besitzt ein bläuliches Glas, die fünfte ist frei. Durch eine Einschnappvorrichtung wird jedesmal ange- zeigt, wann sich ein Fensterchen an der richtigen Stelle befindet. Der Arm, welcher den Spiegel trägt, lässt sich durch Verschieben verkürzen. Dadurch nimmt der Apparat bei Verpackung einen möglichst kleinen Raum ein. Bei ganz verlängertem Arme fällt das ganze Ge- sichtsfeld des Mikroskopes neben den Fuss desselben auf die Tischfläche, wenn der Spiegel die normale Neigung von 45 " besitzt, welche durch VIII, 3. Henking: Winkels neuer Zeichenapparat. 297 eine Einschnappvorrichtung angegeben wird. Verkürzt man den Arm, so rückt ein Theil des Gesichtsfeldes auf den Fuss des Mikroskopes. Wollte man hier durch stärkeres Neigen des Spiegels eine Aenderung herbeizuführen suchen, wie es bei den kleineren Apparaten der Firma Zeiss geschieht, so würde damit eine geringe Verzerrung der Zeichnung eintreten. Prismen, Drehscheibe und Spiegel sitzen an einem gemeinsamen Arme. Derselbe ist jedoch mit der federnden Hülse, welche den Ap- parat auf dem Mikroskope befestigt, nicht unbeweglich verbunden, son- dern vielmehr um einen horizontalen Zapfen drehbar. Dadurch können Prismen und Zubehör zur Seite geschlagen werden, und der Einblick in das Mikroskop wird frei. Weiterhin aber gestattet eine besondere Klemmschraube, den Zapfen und mit ihm Prismen und Spiegel höher oder tiefer zu stellen. Es ist das nicht unwesentlich, da die verschieden starken Oculare eine ungleiche Austrittspupille besitzen und zum Zweck der Erzielung eines guten Bildes die Möglichkeit einer Höhenverstellung des Zeichenapparates verlangen. Der Zapfen ist mit einer Markirung versehen, aus welcher erkannt wird, wie hoch der Apparat für das zu benutzende Ocular gestellt werden muss. Ich benutze einen solchen WiNKEL'schen Zeichenapparat bereits seit mehreren Jahren, hauptsächlich bei Anwendung starker Systeme (Oel-Immersion y^j, Yoo, 734), und hat derselbe sich recht gut bewährt. Nur dürfte es sich empfehlen, hauptsächlich mit eingeschobenem Tubus zu arbeiten, da bei ausgezogenem Tubus infolge der schwächeren Wan- dung Vibrationen des Zeichenapparates nicht immer zu vermeiden sind. [Eingegangen am 12. Oetober 1891.] Zeitschr. 1. wiss. Mikroskopie. VIII, 3. 20 298 Schaff er: Fromme's Mikrotom ohne Schlittenführimg etc. VIII, 3. Fromme's Patent-Mikrotom ohne Sclilittenfüliruno- vT* und eine neue Präparatenklammer. Von Dr. Jos. Scliaffer, Assistent am histologischen Institute der k. k. Universität Wien. Hierzu zwei Holzschnitte. Die zahlreichen Verbesserungen und Erfindungen in der Mikrotom- technik der jüngsten Zeit kommen zumeist der Serienschneiderei zugute, d. h. die vollkommensten und präcisesten Instrumente werden jetzt fast ausschliesslich für das Trockenschneiden von Paraffinpräparaten con- struirt. Für die Zerlegung von Celloidinpräparaten findet das Schlitten- mikrotom in seinen verschiedenen Constructionen die meiste Verwen- dung. Allen Schlittenmikrotomen haftet jedoch der eine Fehler an, dass die Messerführung eine labile ist, d. h., dass das Messer, wenn es auch von einem sehr schweren Schlittenblock getragen wird, durch ein hartes Präparat oder durch unvorsichtige Handführung gehoben werden kann. Ausserdem erfordert die Handhabung und Instandhaltung des complicirten Mechanismus meist grosse Aufmerksamkeit, Mühe und Ge- schicklichkeit. Es dürfte daher für Diejenigen, welche viel mit Celloidin- einbettung arbeiten , von Interesse sein , ein Instrument kennen zu lernen, welches nach meiner erfahrungsgemässen Meinung manche Vor- züge besitzt, die Jedem, der mit dem Mikrotom arbeitet, willkommen sein dürften. Das Instrument verkörpert eigentlich eine einfache Lösung der principiellen Erfordernisse der Mikrotomie : sichere, von der Ruhe der Hand unabhängige Messerführung und präcise, mikrometrische He- bung des fixirten Präparates gegen das Messer. Wie diese Anforde- rungen verwirklicht sind, das versucht die folgende Beschreibung an der Hand beistehender Abbildung zu erläutern. Eine durch ihr bedeutendes Gewicht stabile Grundplatte R (Figur 1), VIII, 3. Schaffer: Fromme's Mikrotom ohne Schlittenführung etc. 299 deren untere, ausgehöhlte Fläche den verschiedenen Schraubenspindeln Spielraum giebt, trägt von einander unabhängig die Vorrichtung zur Führung des Messers und zur Feststellung und Hebung des Präparates. Die erstere besteht aus einem zwischen zwei Spitzen »?, n laufenden, massiven Krahn w, an dessen freiem Ende das Messer a mittels der Schraube L befestigt werden kann. Die Bewegung desselben , welche mit der rechten Hand vorgenommen wird, ist eine leichte und durch die Art der Befestigung vollkommen sichere in einer unverrückbaren hori- zontalen Ebene. Bei der geringen Länge der starken Messer von 13 bis 16 cm kommt ein Federn derselben nicht in Betracht; bei grosser Messerlänge von 20 bis 24 cm wird auch die Möglichkeit dieses Fehlers durch eine eigene Vorrichtung zu beheben gesucht. Entsprechend der Halbkreisführung des Messers und dem Grundsatze, bei Celloidinprä- paraten eine möglichst lange Schneide auszunützen, ist das Messer säbelförmig gekrümmt, d. h., seine Schneide stellt das Bogenstück eines Kreises dar; daher wird beim Schneiden jedes stärkere Drücken und Quetschen des Präparates vermieden und rein im Zuge ge- schnitten. Was den zweiten Theil des Instrumentes anlangt, so wird das Prä- parat durch eine Mikrometerschraube g gehoben, deren Mutter in der Grundplatte fixirt ist. Die Schraube ist mit einer Drehscheibe H fix verbunden, welche an ihrem Rande eine Theilung von 100 Theilstrichen trägt, üeber der Drehscheibe wird durch eine am Pfeiler F befestigte Parallelogrammverschiebuug E die Präparatenklammer c getragen. Dreht man nun die Scheibe (mit dem Mittel- oder Zeigefinger der linken 20* 300 Schaff er: Fromme's Mikrotom ohne Schlittenführung etc. VIII, 3. Hand) gegen sich, so wird die auf der Spindel der Mikrometerschraube aufruhende Parallelogrammverschiebung und mit ihr das Präparat gegen die Messerschneide gehoben. Das Ausmaass der Hebung, beziehungs- weise die Schnittdicke wird durch eine an der Parallelogrammverschie- bung befestigte Feder, welche in die Theilstriche der Drehscheibe ein- schnappt, leicht nach dem Gehör bestimmt, und zwar entspricht ein Theilstrich gleich 5 [x. Die Schraube hat selbstverständlich einen be- schränkten Gang; ist sie nach oben zu ausgelaufen, so wird sie in entgegengesetzter Richtung zurückgedreht, welcher Bewegung auch die Parallelogrammverschiebung durch Druck der Feder o folgt. Zum Fixiren des Präparates kann eine beliebige Klammer verwendet, be- ziehungsweise adaptirt werden. Meist wird man mit der Kugelklammer ausreichen ; für genau zu orientirende Schnittflächen Hess ich mir eine Neapler Klammer anbringen. Aus dieser ganzen Einrichtung erhellt die Handlichkeit des Instrumentes , die wirklich ein ausserordentlich rasches Arbeiten gestattet ; ausser der Fixirung des Objectes und Ein- stellung des Messers ist keine weitere Vorbereitung nöthig; man schneidet dann, wie mit dem Rasirmesser, rasch, leicht und sicher. Der ab- tropfende Alkohol kann durch eine eigene Schale aufgefangen werden ; im übrigen ist die Reinhaltung des Instrumentes durch die Vernickelung aller wichtigen Theile eine leichte. Die Drehkegel des Krahns und die Mikrometerschraube sind so vor Staub geschützt, dass eine Reinigung oder Oelung derselben jahrelang unnöthig ist. Das Instrument wird in zwei Grössen verfertigt; das kleinere, welches für die meisten Zwecke ausreicht, hat eine Grundplatte von 32 cm Länge und einen Consolarm von 18 cm Länge, das grosse eine Grundplatte von 43 cm Länge und einen Consolarm von 22 cm Länge. Was das Instrument noch besonders empfehlenswerth macht und ihm auch bei praktischen Aerzten und in Schülerlaboratorien Eingang ver- schaffen dürfte , ist ausser der leichten Handhabung und präcisen Lei- stung der geringe Preis. Das kleine Stativ kostet sammt Kasten und Messer von 13 cm Länge 45 fl., das grosse sammt Kasten und 20 cm langem Messer 95 fl. Um zum Schlüsse ein Beispiel der Leistungsfähigkeit des Instru- mentes zu geben , dessen ich mich seit einem Jahre bediene , erwähne ich, dass ich Hals und obere Thoraxhälfte eines 13 bis 14 Wochen alten menschlichen Embryo in eine lückenlose Serie von 30 [x dicken Schnitten zerlegen konnte und anderseits von kleinen, gut schnittfähigen Objecten auch tadellose Schnitte von 5 [x Dicke erhielt, was für Celloidin wohl die Grenze der Möglichkeit bedeuten dürfte. Zum Schneiden VIII, 3. Schaffer: Fromme's Mikrotom ohne Schlittenführiing etc. 301 von Paraffinpräparaten kann das lustrnment auch verwendet werden und wird dazu ein gerades Messer nach Henking * beigegeben. Herr Fromme hat seither eine, wie ich ghmbe, sehr zweckmässige Klammer construirt, bei der die grobe Einstellung durch ein Kugel- gelenk, die feine durch zwei Stellschrauben vorgenommen wird; dieselbe ist in erster Linie zur genauen Orientirung von Paraffinpräparaten be- stimmt, kann aber durch eine sehr einfache Vorrichtung auch für Cel- loidinpräparate verwendet werden. Ich gebe hier eine Abbildung und Beschreibung derselben, da sie vielleicht weiteres Interesse beanspruchen 2. dürfte (Figur 2). Sie besteht eigentlich aus einer Art Nivellirvorrichtung, welche die Paraffinaufklebeplatte trägt, und einer nach Bedarf ansetzbaren Celloidinklammer, die aber auch mittels der ersteren genau für eine bestimmte Schnittrichtung orientirt werden kann. Der Zapfen ö, der zur Befestigung des Apparates am Mikrotom dient, ist bei e mittels eines Kugelgelenkes A; mit einer kreisförmigen Scheibe verbunden, die über sich wieder mittels eines freien Gelenkes eine ähnliche Platte trägt. Diese obere Platte geht an einem Theile ihrer Peripherie in ein tangential gestelltes Prisma g über, dessen Aussenfläche gerieft ist, und das einen Querbalken der Celloidinklammer bildet. Getragen oder vielmehr fixirt wird die obere Platte durch vier von der unteren aus- gehende Füsse: zwei kurze, sehr starke Federbüchsen hh und zwei Stellschrauben ao, welche dem Druck der ersteren das Gleichgewicht halten. Durch Gebrauch dieser Schrauben kann die obere Platte um zwei aufeinander senkrechte, horizontale Achsen gedreht werden. Die obere Platte trägt die abhebbare und mittels der Schraube d festzu- ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 509. 302 Schaff er: Fromme's Mikrotom ohne Schlitteiiführunff etc. VIII, 3 stellende Aufklebeplatte i, auf der der Paraffinblock n aufgeschmolzen ist. Durch Heben und Senken derselben oder der ganzen „Klammer" ist die Verschiebung in der Verticalen ermöglicht. Die Handhabung des ganzen Apparates ist nun sehr einfach : man stellt mittels des Kugel- gelenkes h und der Schraube c grob ein, während die zwei Stell- schrauben aa zur feinen Einstellung oder zur Aenderung der Schnitt- ebene während des Schneidens dienen. Will man Celloidinpräparate einspannen, so hakt man die schlitten- förmige Klammer l an dem Prisma der oberen Scheibe ein, wo sie mittels zweier Schrauben festgestellt werden kann und hat dann eine gewöhnliche Klammer, die aber ebenfalls mittels Kugelgelenk und Stell- schrauben orientirt werden kann. Will man den Celloidinblock nicht direct einklemmen, sondern auf- kleben, was ja in den meisten Fällen besser ist, dann werden Kitt- platten aus Buchsholz beigegeben, auf die man das Präparat in gewöhn- licher Weise mit Celloidin festklebt ; dadurch wird die ganze Vorrichtung noch einfacher. Mikrotom und Klammer sind zu beziehen von Gebrüder Fromme, Wien HL, Hainburgerstrasse 21, Vertreter der optischen Werkstätte Cakl Zeiss in Jena. [Eingegangen am 21. Oetober 1891.] ( VIII, 3. Mayer u. Seh oebel: Vorrichtung zum Heben des Objectes. 303 Einfache Vorrichtung zum Heben des Objectes am Juno''scheii Mikrotom. Von Paul Mayer «nd Emil Schoebel in Neapel. Hierzu zwei Holzschnitte. Vor einiger Zeit hat L. Koch in Heidelberg „Objectlialter mit ver- ticaler Verscliiebung" zum Gebrauche für die Mikrotome Jung-Thoma angegeben ^ Sie sind auch gut, leider aber nicht billig, und bei der einen Form lässt sich zudem die Lage des Objectes seitlich nicht mehr 1. in so hohem Grade ändern wie es ohne die neue Vorrichtung gehen würde. Von diesen Fehlern ist unser kleiner Objectheber frei, hat dafür allerdings den anderen, dass er ohne Zahn und Trieb, also viel- «) Cfr. auch diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 165. 304 Mayer u. Schoebel: Vorrichtung zum Heben des Objectes. VIII, 3. leicht nicht so fein geht, und dass er nur hebt, nicht auch senkt. Gleich- wohl halten wir ihn für eine nützliche Zugabe zum Mikrotom, nament- lich beim Schneiden langer Objecto, wo bisher die Hebung aus freier Hand kaum ganz ohne Drehung ausführbar war. Er besteht aus einem Ring mit Führstäbchen (Figur 2) und einem gekrümmten Hebel (Figur 1). Der Ring ist gespalten und lässt sich mittels eines Schräubchens und des Stiftes am anderen Ende des Hebels fest um die Cylinder anlegen, auf welche die Paraffiublöcke aufge- kittet werden; das Führstäbchen passt in einen senkrechten Gang neben der grossen Oeffnuug für den Cylinder. Will man den Objectheber nicht anwenden, so operirt man wie bisher; bei seiner Benutzung hingegen schiebe man den Ring von unten auf den Cylinder bis dicht an dessen oberen Rand und schraube ihn erst dann fest, wenn man dem Cylinder (und mit ihm dem Objecto) die Richtung zu dem Messer gegeben hat, welche er haben soll. Nun hebe man ihn, indem man (Figur 1) den Hebel unter dem Ringe ansetzt, bis zur gewünschten Höhe und schraube ihn wie ge- wöhnlich in seiner eigenen Führung fest; auch bei grossen Objecten und ungünstiger Stellung derselben oder des Messers wird man immer einen Punkt finden, wo man den Hebel ohne Gefahr für Hand oder Messer angreifen lassen kann. Wird es nöthig, noch weiter zu heben, als auf ein Mal möglich ist, so löse man das Schräubchen am Ringe, schiebe ihn auf dem Cylinder nach unten , befestige ihn dort von neuem u. s. w. Hat man hingegen zu hoch gehoben , so ist man für die Senkung auf die Finger angewiesen. Der kleine Apparat, mit dem sich nach geringer Uebung leicht und bequem arbeiten lässt, kostet nur 2y2 Mk. Herr Jung ist auch dazu erbötig, ihn an den älteren Objecthaltern, sofern sie sich ihrem Bau nach überhaupt dazu eignen, nachträglich anzubringen. Neapel, Zoologische Station, im Juli 1891. [Eingegangen am 16. Juli 1891.] VIII, 3. Bernhard: Kleiner Tropfapparat für Mikrotome. 305 Kleiner Tropfapparat für Mikrotome. Von Dr. med. Wilhelm Bernhard in Braunschweig. Hierzu zwei Holzschnitte. Wie bei allen mechanischen Verrichtungen , so gilt im besonderen auch bei mikroskopischen Arbeiten, soweit dabei eben das Mechanische in Frage kommt, der Satz, dass man die besten Resultate mit denjenigen Methoden und denjenigen Apparaten erzielt, an die man sich gewöhnt und auf die man sich eingeübt hat. Man kann sich deshalb auch nicht darüber wundern, dass in der einschlägigen Literatur die Ansichten der verschiedenen Autoren über die Brauchbarkeit ein und desselben Appa- rates, ein und derselben Methode oft erheblich von einander abweichen. Was der Eine für praktisch und vielleicht für nothwendig hält, erscheint dem Anderen als unpraktisch, unnöthig, ja vielleicht sogar als Spielerei. Dieses gilt ganz besonders von denjenigen Vorrichtungen , welche an sich nicht etwas Wesentliches darstellen, sondern in Verbindung mit etwas Wesentlichem ausschliesslich Bequemlichkeitszwecken dienen. Dahin gehören auch die sogenannten Tropfapparate für Mikrotome, mittels welcher auf mechanischem Wege dem Messer beim Feucht- schneiden die nöthige Menge Befeuchtungsflüssigkeit zugeführt wird. Soviel steht jedenfalls fest, dass gegenüber denen, welche sich durch die bisherigen oder sonst gebräuclilichen Vorrichtungen , nämlich Spritzflasche und Pinsel, in ihren Bedürfnissen hinreichend befriedigt fühlen, eine ganze Reihe Anderer dieses Gefühl der Befriedigung nicht theilt und deshalb besonderen Tropfapparaten den Vorzug giebt. Haben indessen die Tropfapparate im grossen und ganzen einen allgemeineren Eingang noch nicht gefunden, so ist der Grund hierfür, abgesehen von dem individuellen Geübtsein in der bisherigen Weise, wohl hauptsächlich in ihrem verhältnissmässig hohen Preise zu suchen. Wem wollte man 306 Bernhard: Kleiner Tropfapparat für Mikrotome. VIII, 3. es auch verargen , wenn er sich gegen die Anschaffung eines Instru- mentes sträubt, ohne welches er bisher ganz gut ausgekommen ist und an welches er sich bis zu einem gewissen Grade doch erst gewöhnen müsste ? ! Sollen sich daher derartige Apparate einbürgern , so müssen sie vor allem den Beweis liefern , dass sie ihre Aufgabe besser erfüllen als Spritzflasche und Pinsel, daneben aber auch den Vorzug der Einfach- heit mit dem der Billigkeit verbinden. — Von diesen Gesichtspunkten ausgehend habe ich den nachstehend zu beschreibenden Tropfapparat construirt, der sich mir beim Feuchtschneiden noch stets als sehr hand- lich erwiesen hat. Wie aus der Figur 1 ersichtlich , besteht der Apparat im wesent- lichen aus zwei Theilen, nämlich einem Fussstück (d) und dem Flüssig- keitsbehälter (a), welch letzterer mittels Zapfens in einer auf ersterem 1. befestigten verticalen Hülse sowohl auf und ab bewegt wie auch gedreht und in jeder Stellung durch eine seitliche Klemmschraube (siehe Figur 2 g) festgestellt werden kann. Das Flüssigkeitsreservoir besitzt oben in der Mitte eine Eingussöffnung, unten seitlich eine zweite kleinere Oeffnung (6), durch welche in einen durchbohrten Kork eingefügt ein kleines gebogenes und mit Hahn versehenes Abflussrohr (c), das eigentliche Tropfrohr, in den Behälter führt. NatürUch lässt sich dieses Rohr in der Korkdurch- bohrung drehen. Um den Apparat zu gebrauchen , schraubt man das Fussstück (d) zugleich m i t dem Messer und über oder unter demselben auf dem VIII, 3. Bernhard: Kleiner Tropfai^parat für Mikrotome. 307 Messerschlitten (h) des Mikrotoms fest und steckt sodann den Zapfen des Tropfreservoirs in die Hülse, in welcher man ihn durch die seitliche Klemmschraube (g) in einer Höhe fixirt, wie es unter anderem auch die Flügelmutter (f), über welcher sich ja theilweise das Reservoir befindet, gestattet. Sodann füllt man das Reservoir mit der Tropfflüssigkeit, in der Regel also Alkohol, bei ge- schlossenem Abflusshahu und dreht diesen nach der Gegend des Mes- sers, auf welche die Flüssigkeit tropfen soll. Je nachdem man nun den Hahn öffnet, wird schneller oder langsamer die Flüssigkeit auf das Messer tropfen und sich an der Schneide desselben rasch ausbreiten. Da der Tropfapparat, weil auf dem Messerschlitten be- festigt, auch die Bewegungen des letzteren mitmacht, wird dieses Betropfen des Messers ununter- brochen stattfinden, soweit eben der Vorrath in dem Reservoir reicht. Zugleich aber auch wird beim jedesmaligen Zurückführen des Messers, wobei ja meistens — wenn eben keine besondere Hebevorrichtung vorhanden ist eben entstandene Schnittfläche wieder mit dem Messer in Berührung kommt, der Schnittblock selbstthätig befeuchtet durch Ueberfliesseh der Tropfflüssigkeit auf ersteren. Muss es nun meine Aufgabe sein, diesen Apparat hinsichtlich seiner Leistungsfähigkeit gegenüber Spritzflasche und Pinsel kritisch zu be- leuchten, so möchte ich doch zunächst einem Vorwurfe begegnen, den man demselben mit gewissem Rechte machen könnte, nämlich dem, dass der Apparat auf dem Messerschlitten und in Berührung mit dem Messer angebracht sei. Es ist theoretisch durchaus richtig, dass der Messer- schlitten ausschliesslich für das Messer reservirt bleiben soll; denn das Messer soll durch nichts in seiner Stellung beeinflusst werden , was ja durch andere Apparate möglicherweise geschehen könnte. Praktisch indessen hat sich mir das Messer stets als durchaus unbeeinflusst er- wiesen, und es ist das ja auch leicht verständlich, da der Schueidentheil des Messers überhaupt mit dem Apparate gar nicht in Berührung kommt 2. die 308 Bernhard: Kleiner Tropfapparat für Mikrotome. VIII, 3. sondern nur der Griff, welchem man durch Anziehen der Mutter jede gewünschte Sicherung zukommen lassen kann. Jedenfalls ist der Fehler, wenn man überhaupt von einem solchen sprechen will, nicht grösser als bei dem JuNo'schen Tropfapparate , wo das Tropfrohr mittels kleiner Rollen und einer besonderen Messerstütze an dem Klingentheile des Messers hin und her gleitet. Ich gebe zu, dass der JuNo'sche Apparat insofern einen Vorsprung vor dem meinigen hat , als er alleraal die- jenige Stelle des Messers zu betropfen ermöglicht, an welcher sich das Object befindet. Indessen ist dieser Vorsprung deshalb kein bedeutender und höchstens für lange Schlittenbahn und lange Messer in Frage kommender, weil, wie gesagt, die Tropfflüssigkeit einmal auf das Messer gelangt, das Bestreben hat , sich sofort an der Schneide desselben aus- zubreiten, mithin sofort das ganze Messer überschwemmt. Ein zweiter Vorwurf könnte sich noch gegen die durch den Apparat herbeigeführte Belastung des Messerschlittens richten, allerdings nur insofern, als diese Belastung zum Theil eine einseitige ist ; denn eine Belastung des Messer- schlittens an sich ist kein Nachtheil, erhöht im Gegentheil die Stabilität desselben. Einen solchen einseitigen Druck aber übt z. B. auch das Messer mit seinem weit überhängenden Klingentheil auf den Schlitten aus, und ceteris paribus wird mit zunehmender Messerlänge auch die Gefahr der Entgleisung des Messerschlittens zunehmen. Dagegen ist die Abweichung der Druckrichtung von der Mitte des Schlittens bei dem Tropfapparate eine so geringe, dass sie für die Sicherheit des Schlittens kaum in Betracht kommt. Schliesslich Hesse sich auch der ganze Apparat aus Aluminium anfertigen und dadurch eine bedeutende Herabsetzung des Gewichtsdruckes erzielen. Dem gegenüber bietet der Apparat aber eine ganze Reihe Vor- theile, die sich hauptsächlich als Ersparniss an Zeit, Raum, Material und Arbeit der Hände darstellen. Betrachten wir z. B. die Spritzflasche, so benöthigen wir für dieselbe einmal einen Platz auf dem Arbeitstische; ferner, da das Messer gewöhnlich mit Alkohol zum Schneiden ange- feuchtet wird, werden wir sogar vielleicht für den Zweck eine be- sondere Spritzflasche nöthig haben. Drittens müssen wir nach jedem Schnitte, beziehungsweise nach einigen Schnitten, je nachdem das Messer trockener wird, die Spritzflasche ergreifen und wieder fortsetzen, haben dazu also eine Hand nöthig. Viertens aber, und das ist ein sehr wesentlicher Funkt, sind wir garnicht in der Lage, die nüthige Tropf- menge auch nur einigermaassen abzuschätzen ; es ist vielmehr auch bei bestem Geübtsein der reine Zufall, wenn wir die gerade passende treffen. l VIII, 3. Bernhard: Kleiner Tropfapparat für Mikrotome. 309 Wesentlich einfacher ist dagegen der Gebrauch eines dicken weichen Haarpinsels, den man so wie so meist zur Hand hat, zum Abheben der Schnitte von der Messerklinge. Aber auch für diesen hat man zum Eintauchen ein besonderes mit Alkohol gefülltes Gefäss , Schaale oder dergl. auf dem Arbeitstische nöthig, und ausserdem theilt er mit der Spritzflasche die Unmöglichkeit, die zum Befeuchten des Messers uöthige Flüssigkeitsmenge abzumessen. Dem gegenüber ermöglicht nun der Tropfapparat einmal eine per- manente Befeuchtung des Messers und beim Zurückführen des letzteren auch des Präparates, zweitens eine gleichmässige Befeuchtung des Messers sowohl nach Zeit wie auch nach Material und somit auch eine Ersparniss Beider, drittens eine leichte und sichere Regulirung der Tropfeufolge je nach Dicke und Grösse der Schnitte und viertens ein Freibehalten der einen Hand zum Abheben der Schnitte, beziehungs- weise zu Manipulationen, welche, wie z. B. b^i Serienschnitten, der Be- handlung der entstehenden Schnitte zu gute kommen. Etwa in dem Reservoir übrig bleibender Alkohol kann bis zu späterem Gebrauch in demselben gelassen und durch einen auf die Eingussöffnung gesetzten Kork vor dem Verdunsten bewahrt werden. Ich bin weit davon entfernt, diesem kleinen Apparate das Lob der Vollkommenheit für alle Fälle zu vindiciren , vielmehr wird man bei sehr grossen und zarten Schnitten ohne besondere Tauchvorrichtung oder ein vollständiges Unterwasserschneiden kaum auskommen; für die kleineren und mittleren Mikrotome indessen, die ja nur Schnitte von immerhin beschränkten Dimensionen gestatten , erweist er sich meinen Ei'fahrungen nach als äusserst handlich. Anzuwenden ist er mit allen Schlittenmikrotomen der gebräucli- lichen Art , bei welchen das Messer durch eine einfache Schraube , be- ziehungsweise Schraubenmutter auf dem Messerschlitten befestigt wird, auch ist er hinsichtlich seiner Grössenverhältnisse so bemessen, dass er mit dem MiEHE'schen Hebelmikrotom ohne weiteres zu verwenden ist. (Der Apparat ist zum Preise von 12 Mk. erhältlich bei Gustav MiEHE, Mechanische Werkstatt, Hildesheim, Prov. Hannover, Kaiser- strasse 13.) Neben der beschriebenen Form des Tropfapparates wird nun noch eine zweite geliefert, die sich durch die Art der Anbringung am Messer- schlitten von der ersteren unterscheidet und zwar insofern, als hier das Messer selbst mit dem Apparate garnicht in Berührung kommt, sondern nur der Messerschlitten. Zu dem Zwecke befindet sich auf der abge- wandten Querseite des Messerschlittens (s. Figur 2. Der Apparat am ;M0 Stoss: Construction eines Külilmessers. VIII, 3. Schlitten des MiKHE'schen Hebelmikrotoms befestigt.) ein Winkelstück I I aufgeschraubt, in welches die rechtwinkelig umgebogene Fussplatte (/) eingehängt wird. Im übrigen auch hinsichtlich seiner Anwendungsweise bleibt der Apparat derselbe wie bei der ersterwähnten Einrichtung. [Eingegangen am 22. üctober 1891.] [Aus dem Anatomischen Institut der Thierärztlichen Hochschule zu München.] Construction eines Külilmessers. Von Prosector A. Stoss in München. Hierzu ein Holzschnitt. Die in den Sommermonaten so oft eintretende Unmöglichkeit, mit Paraffin als Einbettungsmasse embryologischer und histologischer Ob- jecte zu arbeiten, veranlasste mich, eine Vorrichtung zu construiren, welche die Anfertigung von Präparaten von der Temperatur unabhängig macht, und glaube ich meinen Zweck durch nachfolgend beschriebenen Apparat erreicht zu haben. A. Paraffinkühlung. Ein massig starker Luftstrom, am be- quemsten durch Wassergebläse erzeugt, wird durch eine mit klein ge- klopftem, reinem, ungesalzenem Eise gefüllte Flasche geleitet, so dass die Luft von oben nach unten das Eis durchzieht. Hierzu eignet sich am besten eine 2 Liter fassende Flasche mit all- mählig sich verjüngendem Halse und einer Wandöffnung (a) nächst dem Boden. Nach Füllung der Flasche wird dieselbe mit einem Gummipfropf verschlossen, welcher doppelt durchbohrt ist. — Die eine OefFnung (b) nimmt eine Glasröhre auf, die den Hals der Flasche durchsetzt und dann U-förmig abgebogen ist, um den Verschluss der OefFnung durch das herabsinkende, schmelzende Eis zu verhüten ; in die andere OefF- vm, 3. Stoss: Construction eines Kühlmessers. 811 nung (c) wird eine kurze Glasröhre gebracht, welche nicht in die Flasche hineinragt. Die Flasche wird umgestürzt mittels eines Stativs in einer Höhe von 30 bis 50 cm gehalten und die Oeffnung a mit dem Gebläse verbunden. Die in der Flasche auf 0" abgekühlte Luft wird nun durch die OeflFnung h mittels eines möglichst kurzen, mit Wolle umwickelten Guramischlauches (dicke Drainageröhre) zum Paraffinblock geleitet. Die Fixirung des Endes dieses Schlauches 1 bis 2 cm vom Paraffin ist durch ein kleines hölzernes Stativ zu erreichen oder mittels zweckmässig ge- bogenen Drahtes, welcher am Objectschlitten befestigt ist. Bei hoher Temperatur und sehr weichem Paraffin muss die Luft die linke Kante des Paraffinblockes treffen, so dass Oberfläche und Seitenflächen gleich- massig bespült werden. Dies hat jedoch den Nachtheil, dass die Schnitte leicht fortgeblasen werden. Für gewöhnliche Verhältnisse wird es ge- nügen, wenn der Block seitlich vom Luftstrom getroffen wird. 312 Stoss: Construction eines Külilmessers. VIII, 3. B. Messerkühluug. Das besonders bei Thätigkeit des Gebläses sieb bildende Eiswasser sammelt sich über dem Gummipfropf im Halse der Flasche und wird durch die Oeffnung c mittels eines feinen Gummi- schlauches (c, (?) in das Messer geleitet, um dann durch einen zweiten Schlauch (e, f) in ein am Boden stehendes Gefäss abzulaufen. Das Messer ist zu diesem Zwecke nahe dem Rücken der Länge nach durch- bohrt. In diesen Kanal ist eine Messing- oder Neusilberröhre {d — e) von IV2 bis 2 mm Lumendurchmesser eiugelöthet. An beiden Enden trägt die Röhre Verdickungen, um die Gummischläuche gut befestigen zu können. Am zuleitenden Gummischlauch befindet sich ein Quetschhahn, der zu schliessen ist, wenn das Messer bis zum Thaupunkt abgekühlt ist, und welcher wieder geöffnet werden muss, wenn das Niveau des Wassers der Oeffnung der Luftröhre b sich nähert. Der ableitende Schlauch (e, f) ist am besten in ein auf dem Boden stehendes, mit Wasser halb gefülltes Cylinderglas zu leiten und zwar so, dass der Gummischlauch, resp. eine daran befestigte Glasröhre bis zum Boden des Gefässes reicht. Hierdurch wird verhindert, dass die Luft durch Röhre c, also durch das Messer statt durch Röhre b zum Paraffinblock strömt. Statt des Wassergebläses wäre wohl auch ein tretbarer Blasebalg verwendbar, jedoch wegen der dadurch bedingten Störung im Arbeiten nicht anzurathen. Bei Benutzung dieses Apparates lässt Sich bei 25" R. Zimmer- temperatur Paraffin von 40 bis 44" C. Schmelzpunkt so fein schneiden, als es überhaupt die Güte des Messers und die homogene Beschaffen- heit des Paraffins erlauben. Bei Verwendung eines Paraffins von 48 bis 50 0 C. Schmelzpunkt dürfte bei einer Zimmertemperatur bis 21° R. die Messerkühlung ohne Gebläse vollständig genügen um beliebig feine Schnitte anzufertigen. Man hat sich nur daran zu gewöhnen, das Messer nach jedem Schnitte einige Secunden über dem Paraffinblock ruhen zu lassen, um die Oberfläche des letzteren genügend zu kühlen, was ja schon ohnehin unbewusst geschieht, während die Schnitte auf den Objectträger übergeführt werden. Als Eisreservoir ist in diesem Falle am einfachsten ein an die Wand gehängtes Biechkästchen mit Abflusshahn zu benutzen , durch welchen das Wasser mittels eines Gummischlauches zum Messer geleitet wird. Das dem Messer entströmende Wasser kann in irgend ein Ge- fäss auf oder unter dem Tische geleitet werden. Die Regulirung der Kühlung geschieht mit dem Hahn am Biechkästchen oder dem Quetsch- "V^ill, 3. Stoss: Construction eines Kühlmessers. 313 hahn derart, dass in jeder Secunde ein bis zwei Tropfen abfliessen. Die Schläuche sind der Arbeit durchaus nicht hinderlich. Mikrotom und sonstige Utensilien kommen mit dem Kühlwasser in keine Berührung. Das Messer ist vor dem Gebrauche mit Paraffinum liquidum schwach zu bestreichen um Rostflecken zu vermeiden. Zwei kg Eis reiclien bei 25 bis 26" R. und Anwendung des Ge- bläses 4 Stunden; ohne Gebläse über die doppelte Zeit durch Benutzung von Brunnenwasser, das durch Eis gekühlt wird, kann an Eis bedeutend gespart werden, da hierbei auch die latente Kälte des Eises ausge- nutzt wird. Neben der Möglichkeit, bei jeder Temperatur schneiden zu können, ist es bei Verwendung des Kühlmessers nicht uöthig, feine Objecte der hohen Schmelztemperatur eines harten Paraffins auszusetzen, was Starr- werden und Schrumpfen zur Folge hat, oder wobei doch die Gefahr des Zugrundegeliens sehr nahe liegt. Ausserdem habe ich die Verwendung des Kühlmessers besonders von Vortheil gefunden, wenn es sich darum handelt, Embryonen zum Zwecke plastischer Reconstruction zu schneiden, wenn gleichzeitig die Schnittdicke feinere mikroskopische Untersuchung gestatten soll. Es wird hierbei eine Verkürzung der Schnitte durch Zusammenschieben in der Schnittrichtung möglichst vermieden. Es ist selbstverständlich, dass bei Messer geringerer Qualität und mit zu starker Neigung zur Schnittebene, welche demnach mehr schaben als schneiden, Temperatureinflüsse auf das Paraffin viel auffälliger sind und auch bei Kühlung des Messers der gewünschte Erfolg oft ausbleibt. Das am hiesigen Institut benützte Kühlmesser ist von der Firma R. Jung in Heidelberg ausgeführt. Die Kosten eines solchen Messers betragen je nach dessen Länge 3 bis 6 Mark mehr als für ein gewöhn- liches Messer. Meinem Chef, Herrn Professor Dr. Rückert, welcher durch guten Rath und Bereitstellung der nöthigen Mittel meine diesbezüglichen Ver- suche freundlichst unterstützte, spreche ich hiermit meinen besten Dank aus. München, den 15. Juli 1891. [Eingegangen am 17. Juli 1891.] Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. VIII, :i. 21 314 Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellatenforschung. VIII, 3. Kleine Beiträo^e zur Teclinik der Flao^ellatenforscliuno«. Von Dr. phil. A. J. Schilling, Assistent am Botanischen Institut der Universität Marburg. Hierzu ein Holzschnitt. Da ich bei Abfassung meiner umfangreichen Arbeit über die Süss- wasserperidineen * keine passende Gelegenheit ftmd , auf die technische Seite der Untersuchung einzugehen, so will ich in den nachfolgenden Zeilen versuchen, einige Erfahrungen, welche ich mir während meiner fast zweijährigen Beschäftigung mit dieser Flagellatengruppe sammeln konnte, in Kürze mitzutheilen. Dadurch, dass in einer in dieser Zeit- schrift niedergelegten Arbeit von Professor L. Klein ^ in Freiburg i. B. die Methoden zur Aufsammelung, Behandlung und Aufbewahrung von niederen Organismen überhaupt bereits in umfassender Weise zur Dar- stellung gekommen sind, so ist mir eine einlässliche Besprechung der- selben erspart geblieben. Unter Hinweis auf die erwähnte Arbeit brauche ich deshalb uur auf ihre Anwendung bei der Untersuchung der von mir besonders bearbeiteten Gruppe einzugehen. Die Peridineen oder Dinoiiagellaten bilden eine kleine, aber scharf begrenzte Gruppe von Organismen, welche auf der Grenze zwischen Thier- und Pflanzenreich stehen. Sie weisen unter allen Flagellaten die weitgehendsten Beziehungen zwischen den beiden Naturreichen auf, in- dem es Formen sowohl mit rein thierischer, als auch mit rein pflanz- licher Ernährung giebt. Ihre grösste Entfaltung erlangen sie in der Mannigfaltigkeit der Formen sowohl, wie in der Arten- und Individuen- zahl im Meere, in dessen sogenanntem „Plankton" sie mit den Diato- 1) Die Süsswasserperidineen. Inauguraldissertation (Basel). (Flora 1891, Heft 3.) 2) Klein, L., Beiträge zur Technik mikroskopischer Dauerpräparate von Süsswasseralgen (Diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 456). VIII, 3. Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellateuforschung. 315 meen wohl die einzigen Lebewesen bilden. Im Slisswasser sind sie nur in einer verhältnissraässig geringen Anzahl vertreten. Von sämmtlichen 28 Gattungen, auf welche sich etwas mehr als hundert Arten vertheilen, gehören nur sechs mit etwa .30 Arten dem letzteren an, wovon indessen nur eine einzige in ihrem Vorkommen auf dieses beschränkt ist, wäh- rend die übrigen fünf im Meere auch vertreten sind. Aus dieser Ver- theilung geht mit einiger Wahrscheinlichkeit hervor, dass die ganze Familie ursprünglich dem Meere angehört hat und dass die wenigen Formen des Süsswassers bei der Vertheilung von Meer und Festland im Binnenlande zurückgeblieben sind. Die Süsswasser-Peridineen besitzen eine sehr grosse Verbreitung und treten in der Regel in beträchtlicher Individuenzahl auf. Man findet sie allenthalben in stehendem oder langsam fliessendem Wasser, welches durch die assimilatorische Thätigkeit lebender Pflanzentheile Sauerstoff und durch die Zersetzung von abgestorbenen auch Mineral- Salze in genügender Menge enthält. Ihre Einsammelung gestaltet sich zu einem einfachen Geschäft, welches eine grössere Ausrüstung nicht erforderlich macht. Es bedarf nämlich dazu nur eines oder mehrerer Saramelgefässe, um das aufgesammelte Material aufzunehmen. Ich habe hierzu stets möglichst grosse Flaschen mit weitem Hals verwendet, an welchen ich zum Zwecke eines bequemeren Tragens eine Handhabe aus festem Eisendraht angebracht hatte. In einer Botanisirbüchse habe ich ausserdem noch eine Anzahl von kleineren Gefässen mitgeführt, um darin das Material von verschiedenen Orten voneinander getrennt auf- zubewahren. Was beim pjinsammeln an Geräthschaften allenfalls sonst noch dienlich sein kann, bestellt höchstens in einem Stock und in einem Algenrechen , welche sich unter Umständen ganz bequem miteinander verbinden lassen. Will man aus einem Graben Material zur Untersuchung nehmen, so verfährt man am einfachsten in der Weise, dass man mit der Hand eine Portion der untergetaucht lebenden Wassergewächse herausholt, das an ihnen haftende Wasser herauspresst und in einem Sammelgefässe auf- fängt. Je nach der Beschaffenheit der auszupressenden Pflanzen wird man nach längerer oder kürzerer Zeit schon soviel Material beisammen haben als zur Untersuchung nöthig ist. Im allgemeinen zeigt sich das Auspressen von Utricularien und Myriophyllen weit ergiebiger als bei den Ceratophyllen und Charen, da an diesen keine so grossen Mengen Was- sers haften bleiben als an jenen. Auch in Verwesung begriffene Pflan- zenreste liefern gerade kein sehr reichliches und gut conservirbares Material, doch sollten derartige Umstände nicht davon abhalten, das- 21* 316 Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellatenforschung. VIII, 3. selbe trotzdem in eine recht sorgfältige Bearbeitung zu nehmen, da man darin häufig die interessantesten Formen antreffen kann. Um sich die Arbeit des Einsammelns besonders dann, wenn die Wasserpflanzen nicht gut erreichbar sind, etwas bequemer zu gestalten, empfiehlt es sich, einen Stock dabei zu Hilfe zu nehmen, welcher am besten einen Haken be- sitzt. Bei grösseren Gewässern, wie Sümpfe und Teiche , muss man sich auf andere Art zu helfen suchen, besonders wenn man keinen Kahn zur Verfügung hat, mit welchem man zu den Wassergewächsen gelangen kann. Ich habe in solchen Fällen immer einen Algenrechen benutzt. In seinem kleinen Werke: Anleitung zum Sammeln von Kryptogamen, Stuttgart (Hoffmann) 1886 hat P. Sydow einen solchen beschrieben und namentlich zum Sammeln von Characeen empfohlen. Ich habe mir den meinigen selber verfertigt. Zwei Eisenstäbe von etwa l^/j Fuss Länge werden U-förmig zurechtgebogen und die beiden Enden eines jeden nach einer Seite hakenförmig aufgerichtet. Beide werden hierauf durch festen Draht so miteinander verbunden, dass das Ganze einen Rechen mit vier Haken bildet, von welchen sich doch mindestens einer in jeder Lage, in welcher er nach dem Wurfe den Boden des Teiches erreicht, in den Wasserpflanzen fangen muss. Man befestigt ihn an einer möglichst lan- gen und starken Schnur, welche man am zweckmässigsten auf ein Brett- chen aufgewickelt hält. Wenn man ihn in Gebrauch nehmen will, so wickelt man zunächst von der Schnur soviel ab, als unbedingt nöthig ist und hält mit einem Fuss das Brettchen fest, damit es nicht beim Schleudern von der Schnur nachgezogen werden kann. Hierauf wird der Rechen fortgeschleudert, indem man ihn erst einige Male im Kreise herumschwingt und ihn dann aus der Hand fahren lässt. Durch ein anfänglich ruckweises Ziehen werden sich die Haken in den Wasser- pflanzen festheften und soviel davon aufnehmen, als sie zu fassen ver- mögen. Hierauf zieht man den Rechen so rasch als möglich ans Land, um nicht die feinen Schlammtheile, welche an den Pflanzen haften und die Organismen bergen, abzuwaschen. Am Lande angelangt hebt man ihn am besten aus dem Wasser heraus. Ein Schleifen auf der Erde ist nach Möglichkeit zu vermeiden, damit das Material nicht unnöthigerweise mit Sand, Erde und anderen störenden Beimischungen verunreinigt wird. Im übrigen verfährt man auf die bereits angegebene Art und Weise. Beim Durchsuchen von Torfmooren, welche ein sehr interessantes, aber noch nicht genügend durchforschtes Gebiet bilden, lassen uns auch die bisher besprochenen Methoden zum Einsammeln des Materiales durchaus im Stich. Es bleibt uns denn hier nichts anderes übrig, als sich mit wasserdichtem Scliuhwerk zu versehen oder vor dem Betreten eines VIII, 3. Schilling: Beiträge zur Technik der Flagcllatenforschung. ;U7 solchen Gebietes seine Fussbekleidiing abzulegen. Zur Bergung des Materiales ist das Mitführen von Gefässen nicht unbedingt nothwendig, denn die Torfmoose halten, wenn sie nicht gar zu stark ausgedrückt werden, immer noch so viel Wasser zurück, dass die zwischen denselben enthaltenen Organismen darin ungestört weiterleben können. Man kann deshalb das überschüssige Wasser aus denselben durch gelinden Druck entfernen und legt sie hierauf, ohne weitere Umstände zu machen, in die Botanisirbüchse. Zum Einsammeln von Süsswasseralgen hat Prof. Klein in seiner oben angeführten Arbeit ein Geräth empfohlen, welches wohl auch für unsere Zwecke sehr gut zu verwenden ist. Es besteht in einer Spritze, welche er sich selbst hergestellt hat. Es wird eine ca. 2 cm weite und 30 bis 40 cm lange Röhre von dickwandigem Glas au dem einen Ende mit einem durchbohrten Korkstopfen verschlossen. In die OefFnung des- selben wird eine kurze Glasröhre eingesetzt, die eine Spitze mit 1 bis 2 mm weiter Oeffnung ausgezogen ist. An dem anderen Ende setzt man den Stempel ein. Man fertigt ihn aus einem Kork , welcher mit Werg gehörig umwickelt und an einem entsprechend langen Eisendraht befestigt wird. Ich habe zwar nie von diesem Instrument Gebrauch gemacht, jedoch gelegentlich Aufsammelungen, welche damit gemacht worden waren, gesehen, und von seiner Zweckmässigkeit mich über- zeugen können. Ich kann es deshalb für unsere Zwecke nur empfehlen, besonders, wenn es sich darum handeln sollte, Ruhezustände vom Boden des Teiches aufzunehmen. Auf der anderen Seite scheint ihre Anwen- dung doch auch wieder nur eine äusserst beschränkte sein zu können, da sie beim Durchsuchen grösserer Gewässer mit einem Nachen nur zu gebrauchen ist. Das aufgesammelte Material muss man so rasch als irgend möglich zur weiteren Behandlung nach Hause zu bringen suchen. Bei dem Transport empfiehlt es sich, möglichst diejenigen Tageszeiten zu be- nutzen, wo die Sammelgefässe nicht allzusehr der Wirkung der Sonnen- strahlen ausgesetzt sind. Zwar haben nicht alle Peridineen in gleichem Maasse unter der Hitze zu leiden. Manche gehen bei der Erwärmung des Wassers nur in einen Ruhezustand über, welcher bei Eintritt einer kühleren Temperatur wieder aufgehoben wird. Andere dagegen, so namentlich die beiden Süsswasserceratien, sterben schon auf dem Trans- port nach kurzer Zeit ab. Es ist deshalb gut, seine Excursion entweder schon morgens früh oder erst abends spät anzutreten. Nur auf solche Weise war es mir möglich, das Ceratium cornutum in lebendem Zustande noch nach Hause zu bringen, wogegen das Ceratium hirundinella auf 318 Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellatenforschung. VIII, 3. dem Transport doch so sehr gelitten hatte, dass es in der Regel schon im Absterben begriffen war, als ich zu Hause ankam. Wie hieraus hervorgeht, ist es unumgänglich nothwendig, dass die Aufsammelung sofort nach der Ankunft zu Hause in eine geeignete Be- handlung genommen wird, um die darin enthaltenen Peridineen am Le- ben zu erhalten. Den Inhalt der kleineren Sammelgefässe bringt man deshalb am besten in eine flache Glasschale und giesst frisches Wasser dazu, um ihm damit neue Mengen von Sauerstoff zuzuführen. Den In- halt von grösseren Gefässen braucht man nicht unbedingt umzugiessen, sondern kann allenfalls etwas Wasser oben wegnehmen und frisches dafür hinzugeben. Man stellt hierauf das Material an einem Fenster auf, wo es tags über nicht zu lange der Sonne ausgesetzt ist und durch die Erwärmung in Fäulniss geräth. Wenn die Aufsammelung nicht schon von vornherein mit faulenden Stoffen überladen war, kann man sie dann schon auf einige Zeit sich selbst überlassen ; man muss nur darauf be- dacht sein, einer eintretenden Fäulniss zur rechten Zeit noch entgegen- zutreten. Diese verhältnissmässig sehr einfache Form der Behandlung eignet sich nicht für alle Formen im gleichen Maasse. Diejenigen , welche sehr leicht zu Grunde gehen, lassen sich nur im Frühjahr und im Herbst allenfalls mit Erfolg auf diese Weise behandeln. Im Hochsommer muss man zu einer anderen Methode seine Zuflucht nehmen , die in meiner Arbeit über die Süsswasserperidineen auf Seite 32 zur Darstellung ge- kommen ist. Lageeheim ' hat sie früher schon für die Cultur von Hy- drurus mit bestem Erfolge angewandt. Bei der Empfindlichkeit der Ceratien, welche auf dem Transport in der Regel Schaden leiden, reicht die Zugabe von frischem Wasser nicht mehr hin, sie vom Untergang zu bewahren. Man muss deshalb das Material in einem geeigneten Gefässe in einen grösseren Behälter bringen, in welchen ständig frisches Wasser zuläuft. In dem botanischen Garten in Basel war mir dies dadurch besonders leicht gemacht, indem ich die Sammelgefässe mit ihrem In- halte in den steinernen Trog eines ständig laufenden Röhrbruunens setzen konnte. Auf diese Weise gelang es mir, die Culturen von Cera- tium cornutum auf lange Zeit zu erhalten und mit deren Hülfe die Fort- pflanzungserscheinungen dieser Form näher zu studiren. Das Material aus Torfmooren, mag es nun in einem Sammelgefäss untergebracht, oder nur lose in der Botanisirbüchse mit herumgeführt •) Lagekheim, G., Zur Entwicklungsgeschichte des Hydrurus (Ber. d. Deut- schen Botan. Gesellsch. Bd. VI, 1888, p. 73). Vni, 3. Schilling: Beiträge zur Teclinik der Flagellatenforschung. 319 worden sein, verlangt keineswegs eine sorgfältigere Behandlung wie das bisher betrachtete. Man bringt die Torfmoose nur in eine geeignete Glasschale und füllt soviel Wasser als nöthig erscheint nach. Man darf dabei aber nicht vergessen, zu Regenwasser zu greifen, wenn das Wasser, welches man zur Verfügung hat, sehr kalkhaltig ist, denn die Spha- gnaceen gehen darin sehr gerne zu Grunde. An ihrer Erhaltung hängt nämlich das Schicksal der ganzen Cultur, indem sie durch ihre assimi- latorische Thätigkeit das Wasser stets mit genügenden Sauerstoffmengen versehen und dadurch vor Fäulniss bewahren. Ohne auch nur irgend- welche Mühe und Arbeit zu verursachen, lassen sich solche Culturen auf Wochen und Monate unverändert erhalten. Ich habe eine Aufsamme- lung, welche im Hochsommer gemacht worden war, in einem ungeheizten Zimmer über Winter stehen lassen und zum Beginn des nächsten Früh- jahres reiches Leben in derselben sich entfalten sehen. Zur Untersuchung muss mau , sobald als es irgend Zeit und Um- stände erlauben, schreiten. Wenn es an dem gleichen Tage nicht mehr möglich ist, so muss mau sie am folgenden Morgen um so sicherer vor- nehmen, als sich um diese Zeit die Peridiueen in der lebhaftesten Be- wegung befinden. Auch ist eine alsbaldige Durchmusterung der Culturen insofern noch von ganz besonderer Wichtigkeit, weil schon nach sehr kurzer Zeit ein Formenwechsel in derselben eintreten kann. Denn unter den Bedingungen, in welche die Culturen bei ihrer Aufstellung im Zim- mer kommen, gehen manche Formen in Ruhe, während andere dadurch in Bewegung übergehen. Man muss deshalb Tag für Tag die Durch- musterung des Formenschatzes von neuem wiederholen, indem man die Sammelgefässe der Reihe nach vornimmt und durchsiebt, bis sich keine neuen Formen mehr zeigen. Findet man auf diese Art und Weise interessante Formen, welche nur in geringer Anzahl sich zeigen, so muss man sogleich darauf aus sein, sich neues Material zu verschaffen, um sie mit Sicherheit wieder zu erlangen, denn sie verschwinden in der Regel sehr bald wieder. Bei der Durchmusterung der Culturen verfährt man in der Weise, dass man nach der Lichtseite hin vom Grunde des Gefässes eine Portion Wasser mit einer Pipette herausnimmt und auf ein ührglas überträgt, welches, wenn es auf seiner Unterlage feststehen soll, unten etwas an- geschliffen sein muss. Hierauf stellt man dasselbe auf eine kurze Weile hin, damit sich der Schlamm langsam absetzen kann und die Peridineen, welche einen starken positiven Heliotropismus besitzen, sich nach der Lichtseite hin ansammeln. Man setzt es dann auf den Objecttisch des Mikroskopes und durchmustert es mit einem Objectiv von geringer 320 Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellatenforschung. VIII, 3. Stärke. Ich habe in der Regel mit Lbitz 3, also mit etwa 80- bis lOOfacher Vergrösserung gearbeitet, manchmal jedoch auch zu etwas stärkeren Systemen greifen müssen, wenn es sich um die Aufsuchung kleinerer Formen gehandelt hat. Bei diesem Verfahren wirken die feinen Schlammtheile, welche man mit der Pipette aufgenommen hat, oftmals sehr störend. Will man sie aber vermeiden, so bleibt keine andere Wahl, als das Wasser nicht vom Grunde des Gefässes, sondern vom Wasserspiegel zu nehmen. Man wird indessen hierbei die Erfahrung machen, dass hier die Formen lange nicht so zahlreich und mannigfaltig sind wie dort. Um die einzelnen Formen zur Untersuchung ihrer Organisation und zur Beobachtung ihrer Fortpflanzungsweise zwischen Objectträger und Deckglas zu bringen, kann man verschiedene Wege einschlagen. Die einfachste Methode dürfte wohl darin bestehen, dass man den Inhalt der zuvor gefüllten Pipette tropfenweise auf den Objectträger bringt, mit einem Deckglas bedeckt und hierauf absucht. Sie hat den unangenehmen Nachtheil, dass sie viel Zeit unnöthiger Weise in Anspruch nimmt, in- dem man die Procedur meistens sehr oft wiederholen muss, bis man das Gewünschte findet. Nichtsdestoweniger wird sie noch von Vielen den zuverlässigeren, dafür aber auch meist umständlicheren Methoden vor- gezogen. Ich selbst habe sie auch hier und da verwendet; wenn es sich etwa nur um eine oberflächliche Durchsicht von Culturen gehandelt hat, oder wenn ich mir über einfachere Organisationsverhältnisse oder Thei- lungsvorgänge einige Aufschlüsse verschaß'en wollte. Bei genaueren Arbeiten habe ich mich stets einer anderen Methode bedient, welche im Princip mit einer von Prof. Klein angegebenen übereinstimmt; Klein sucht nämlich unter dem Mikroskop bei schwacher Vergrösserung die gewünschten Organismen in der mit der Pipette in ein Uhrglas ge- brachten Portion Wasser auf und holt sie mit einem Glasröhrchen, wel- ches an seinem einen Ende in eine feine Capillare ausgezogen ist, aus derselben heraus. Zum Zwecke einer leichteren Handhabung hat er das Röhrchen an seinem vorderen Ende um einen Winkel von ca. 120" knieförmig zurechtgebogen und es am hinteren Ende auf noch etwa 2 cm Länge vom Knie ab gerechnet verkürzt. Er stützt es nun mit der in- neren Biegung des Knies auf den unteren Rand der Linsenfassung und senkt es nach und nach, bis die Spitze der Capillare im Gesichtsfeld in undeutlichen Umrissen sich zeigt. Er rückt hierauf das Uhrglas so zu- recht, dass das Object sich nahe am rechten Rand des Gesichtsfeldes befindet, um sich mit der Capillare möglichst frei bewegen zu können. Nachdem er diese möglichst genau aus freier Hand eingestellt hat, taucht VIII, 3. Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellatenforücluuig. ;^21 er sie vor dem Object ein. Durch die Wirkung der Capillarität wird dieses mit dem in dem Röhrchen aufsteigenden Wasser aufgesogen. Es mag sein, dass diese etwas schwierig in ihrer Ausführung erscheinende Methode den Beobachter bei einiger Uebung, welche man sich leicht verschaffen kann, zum gewünschten Ziele führt. Bei der grossen Be- hendigkeit, mit welclier sich die Peridineen bewegen, schien sie mir für meine Zwecke nicht gut verwendbar, weil die Wirkung der Capillarität nicht gross genug sein dürfte, um die Objecto mit solcher Geschwindig- keit, wie sie hier erforderlich ist, in die Glasröhre zu befördern. Ich habe deshalb die Methode so umgebildet, dass ich die Mitwirkung dieser Kraft dabei nicht mehr in Anspruch zu nehmen brauche, denn so lange ich sie nicht nach Belieben beherrschen kann, bleibt sie für meine Zwecke werthlos. Ich habe deshalb darnach getrachtet, sie nach Mög- lichkeit sogar noch auszuschliessen und den Eintritt des Stromes in die Röhre auf eine andere Art und Weise zu ermöglichen , welche ich von meinem Willen einigermaassen abhängig maclien kann. Es wird dies mit einer Pipette erreicht, welche sich Jedermann ohne grosse Mühe und Arbeit selber herstellen kann. Die nebenstehende Figur giebt eine Abbildung derselben. lieber einer Löthrohrflarame wird zunächst das eine Ende einer 5 bis 7 cm langen und 2 bis 3 mm dicken Glasröhre in eine möglichst kurze, aber feine Spitze ausgezogen. Hierauf wird eine andere, etwa 3 cm lange Röhre von gleichem Durchmesser über einen BuNSEN'schen Brenner etwas angeschmolzen , ura die scharfen Kanten derselben zu beseitigen. Es werden sodann beide an ein Stück geschmeidigen Gummischlauches angesetzt, dessen Länge etwa 12 bis 15 cm betragen kann. Die Pipette ist jetzt zum Gebrauche fertig. Wem sie in dieser Form nicht handlich genug erscheint, mag die Grössen- verhältnisse der einzelnen Theile nach seinem Belieben ändern. So kann Derjenige, welcher die ausgezogene Röhre wie eine Schreibfeder zwischen die Finger nehmen will, sie etwas länger, dafür aber den Schlauch ein wenig kürzer machen. Beim Gebrauch nimmt man das von der kürzeren Glasröhre gebildete Ende der Pipette in den Mund, während man das andere Ende mit den Fingern der rechten Hand fasst. 322 Schilling: Beiträge zur Technik der Flagellatenforschiing. VIII, 3. Man führt hierauf die Spitze desselben unter dem Objectiv hin nnd her, bis man sie im Gesichtsfeld in schwachen Umrissen auftauchen sieht. Um dies mit etwas grösserer Sicherheit zu Wege zu bringen, stützt man sich am besten dabei mit dem Handbackeu auf den Eand des Object- tisches oder auf eine feste Unterlage. In der linken Hand hält man das Uhrglas fest, welches bereits auf den Objecttisch des Mikroskopes gesetzt worden ist, und rückt dasselbe so lange, bis man die gewünschte Form angetroffen hat. Ohne lange zu zögern, taucht man die Spitze der Pipette nahe der Stelle, wo das Object sich befindet, unter Wasser und saugt es damit auf, worauf man es zur weiteren Untersuchung auf den Objectträger bringen und mit einem Deckgläschen bedecken kann. Auf den ersten Blick scheinen die mit dieser Methode verbundenen Ma- nipulationen recht schwer ausführbar. Bei einiger Uebung wird man aber bald die erforderliche Sicherheit in der Handhabung der Pipette erlangen. Wenn man überdies noch durch sorgfältiges Abschleifen an der Spitze der Pipette auf die Herstellung einer passenden Einfluss- öffuung bedacht war, so wird man wohl nur selten mit zu grossen Wasser- mengen zu arbeiten haben, worin eine gewisse Gewähr für die sichere Wiederauffindung der eingefangenen Formen liegt, und sollte man wohl einmal mehr als einen Tropfen aufgesogen haben, so muss man durch eine zweckmässige Vertheilung des eingeströmten Wassers auf mehrere Objectträger sich vor dem Verluste des gewünschten Objectes zu be- wahren suchen. Bei genauer Beobachtung der hier gegebenen Maass- regelu wird man es bald dahin bringen, dass man jede beobachtete Form, ob gross oder klein, mit Sicherheit aus einer Cultur zu isoliren vermag. Im übrigen ist zur Erhaltung ihrer tadellosen Function eine sehr sorgfältige Behandlung der Pipette ein unbedingtes Erforderniss. Sie besteht in einer gründlichen Ausspülung mit reinem Wasser nach einem jedesmaligen Gebrauche, damit in Röhre und Schlauch kein Wasser zurückbleibt und eintrocknet. Neben vielen anderen Unannehm- lichkeiten wird die Nichtbeachtung dieser Maassregel die Verstopfung der capillaren EinflussöfFnung im Gefolge haben. Sollte dies zwar einmal aus Versehen eingetreten sein, so darf man nicht etwa mit einer Schweinsborste oder gar mit einer feinen Nadel die Oeffnung wiederherstellen wollen, weil man dabei die Spitze sehr leicht zer- stören kann, sondern man taucht die Pipette auf kürzere oder längere Zeit in kochendes Wasser, wodurch das Ilinderniss ohne Schaden be- seitigt wird. Auf die weitere Behandlung der isolirten Objecto kann ich nicht mehr eingehen, weil dies auf jenes Gebiet gehört, wo die selbständige VIII, 3. Schilling: Beitrage zur Technik der Flagellatent'orschung. 323 Forschung zu Hause ist. Die gegebenen Mittheilungen mögen hinreichen, allen Denen , welche sich für die Untersuchung der mikroskopischen Thier- und Pflanzenwelt des Süsswassers interessireu , eine kurze An- leitung zur Einsammelung, Behandlung und Bearbeitung der Peridineen, „der Kürassire unter den Flagellaten", zu geben. Eich (Hessen), am 31. August 1891. [Eingegangen am 12. September 1891.] 324 Referate und Besprechungen. VIII, 3. Referate und Besprecliuno^eu. 1. Lehr- und Handbücher. Marktsimier-Turneretsclier, G., Die Mikrophotographie als Hilfsmittel naturwissenschaftlicher Forschung. Halle (Knapp) 1890. 344 pp. 8» m. 195 Figg. u. 2 Tfln. M. 8. Neilhauss, R., Lehrbuch der Mikrophotographie. Braunschweig (Bruhn) 1890. 272 pp. 8° m. 65 Figg. u. 3 Tfln. M. 8, geb. M. 9. Während bis zum verflossenen Jahre ein Handbuch der Mikro- photographie ein Desiderat war, welches durch die bis dahin vorhan- denen, entweder veralteten oder von unberufenen Federn geschriebenem nicht erfüllt wurde, und nur der „Specialkatalog" von R. Zeiss *, das einzige , über die eigentliche mikrophotographische Aufnahme vortreff- liche Auskunft gebende Werk darstellte, hat uns das vorige Jahr gleich- zeitig zwei derartige Lehrbücher gebracht. Bei der Gleichheit des behandelten Stoffes sind dieselben jedoch einander äusserst unähnlich, und es wird daher am besten eine Vergleichung beider mit ihren Eigen- thümlichkeiten bekannt machen. Wenn wir hierbei etwas gründlicher auf die Werke und die Sache eingehen, als es sonst der Raum an diesem Orte gestattet, so mag das durch das neuerlich so wichtig gewordene Gebiet gerechtfertigt werden. Marktanner-Tukneeetschek beschreibt zunächst das Mikroskop und dessen Ausrüstung (ZEiss'sche Apparate), wobei jedoch auch die „Lichtfilter" genau erörtert werden, und wir erfahren, dass die „Apo- chromate" das secundäre Spectrum durch passende Glassorten besei- tigen 2. Er geht dann zur Betrachtung der mikrophotographischen Camera und deren Zubehör über, beschreibt und bildet eine genügende ') Cfr. diese Zeitschr. Bd V, 1888, p. 218. 2) Das ist bekanntlich nicht der Fall, das wesentliche Element hierfür ist eine Flussspathlinse, eine Thatsache, die allerdings v»n den Herstellern lange verheimlicht wurde. Vtll, 3. Referate und Besprechungen. 325 Anzahl neuerer derartiger Apparate ab. Die optische und mecha- nische Ausrüstung macht uns zunächst mit dem AsBE'schen Beleuch- tungsapparat bekannt, sodann mit dem centrirbaren Condensor, Beleuclitungslinsen, photographischen Objectiven ^, Blenden, Cuvetten, Prismen für monochromatisches Licht, dann auf p. 90 zum zweiten Mal (wieder mit Abbildung) mit dem ZEiss'scheu Centrircondensor, mit dem Heliostat (auf 9 [!!] Seiten werden verschiedene Heliostatformen mit 7 Abbildungen beschrieben), ferner mit Hilfsapparaten für schwach ver- grösserte Aufnahmen, Einrichtungen zum Aufstellen von Spaltpilzculturen und Momentverschlüssen. Dann werden die zur Beleuchtung verwandten Lichtquellen (Sonnenlicht, elektrisches Licht , diffuses Tageslicht, Ma- gnesiumlicht, Petroleum- und Gaslicht, Kalk- und Zirkonlicht) besprochen, wobei der Bereitung des zu letzteren nöthigen Sauerstoffgases unter Abbildung von Gasometern etc. nicht weniger als 6 Seiten geopfert werden. Es folgt ein Capitel über die Aufstellung des Apparates und des „Beleuchtungs- Instrumentariums", Vorbereitung zur Aufnahme, die Benutzung der verschiedenen, oben angegebenen Lichtquellen zu der- selben. Was dabei über die Beleuchtung des zu photographirenden Objectes gesagt wird, lehnt sich fast ganz an die oben citirte Darstellung von Zeiss an. Wir wollen mit dem Verf. über viele in diesem Abschnitte befindlichen Angaben nicht rechten , möchten aber sehr bezweifeln , ob er je eine brauchbare Photographie vermittels elektrischen Glühlichtes zu Stande gebracht hat, wenn er, wie er p. 127 schreibt, das Glüh- lämpchen „direct unter das Object bringt, so dass dieses gleichsam dem Lichte aufliegt". ') Hierbei sagt Verf., dass mancbe Mikrographen Aufnahmen machten, indem sie das mit Ocular moiitirte Mikroskop dicht vor der mit gewöhnlichem photographischen Objectiv (Aplanat, Weitwinkel) versehenen Camera an- brächten. „Durch den Achromatismus des photographischen Objectivs soll bei dieser Anordnung selbst eine nicht unbedeutende Focusdifferenz des Mikroskop- Objectives ausgeglichen werden" (p. 76). Verf. scheint diese Anordnung nicht versucht zu haben , obgleich sie , wie Ref. aus eigener Erfahrung bestätigen kann und wie auch im Neuhauss nachzulesen ist, vortreffliche Resultate giebt. Aber die P'ocusdififerenz wird nicht durch den Achromatismus der photographi- schen Objective ausgegHchen (achromatisch sind Mikroskopobjective in noch viel höherem Grade als photographische!), sondern eben dadurch, weil photo- graphische Objective auf chemischen Focus corrigirt sind, mikroskopische aber gewöhnlich nicht. Die geometrische Verfolgung des Strahlenganges lehrt, dass hierbei die Focusdifferenz thatsächlich ausgeglichen wird. — (Bei dieser An- ordnung wird die Blende des photographischen Objectivs ausgeschaltet, da die Austrittspupille des Mikroskopes an deren Stelle tritt. Ein Weitwinkel von 19 bis 20 cm Brennweite hat dem Ref. die besten Resultate ergeben.) ,^26 fteferate and ßesprechungen. Vlll, 3. Im weiteren Verlaufe werden speciellere mikrophotographische Me- thoden beschrieben, die Herstellung von Bildern „mit stereoskopischem Effect" * von Momentphotographien (wobei ein vom Verf. construirter, riesiger Apparat vorgeführt wird, p. 191), Aufnahmen mit polarisirtem und monochromatischem Lichte. Hieran schliessen sich Angaben über die für mikrophotographische Zwecke passenden Tinctionen mikroskopi- scher Objecto. Damit ist der eigentliche m i k r o photographische Theil des Werkes auf 212 Seiten abgeschlossen; das Folgende beschreibt in ausführlicher Weise auf 114 Seiten die gewöhnliche photographische Praxis. Unseres Erachtens gehört dieselbe, wenigstens in diesem Umfange, in ein Lehrbuch der Mikrophotographie nicht hinein. Wer dieselbe noch nicht beherrscht, wird gewiss keine brauchbaren Mikrophotogramme fertig bekommen; es ist hierzu nöthig, dass er zumal der schwierigen Kunst des Entwickeins bereits völlig Meister sei. Aber auch zugegeben, dass Fingerzeige für das photographische Verfahren einem Lehrbuch der Mikrophotographie angehängt werden dürfen : wer in aller Welt wird daraufkommen, dabei genau zu beschreiben, wie man Gelatine- emulsion herstellt (p. 216 — 226), oder wie man sich nasse Col- lodiumplatten macht (p. 255 — 262) V Wir glauben nicht, dass irgend ein Mikrophotograph so thöricht sein wird, seine Zeit in dieser völlig nutzlosen Weise zu vergeuden, da man Trockenplatten in fast jeder Drogenhandlung fertig kaufen kann, und zwar für ganz billiges Geld, und da nasse CoUodiumplatten zu unserem Zwecke völlig ungeeignet sind. Dafür hätte lieber bei den verschiedenen Entwicklern angegeben werden sollen , wie sie zu behandeln sind , wenigstens hätte Verf. das von demjenigen Entwickler sagen können, mit welchem er selbst arbeitet und Erfahrungen gesammelt hat. An Stelle dessen werden Oxalat-, Pyrogallol-, Hydrochinon- und Eikonogenentwickler dürftig neben ein- ander mit je ein paar Recepten aufgezählt ^. Auch der Positiv-Process ist viel zu ausführlich ausgefallen ; die laugen Auseinandersetzungen über das Albuminpapier z. B. sind völlig unnöthig, da sich Albumin- 1) Verf. irrt, wenn er p. 185 schreibt, dass die stereoskopisclie Wippe zuerst von Benpxke construirt und von Fritsch modificirt sei. Sie ist vielmehr von MoiTEssiER angegeben worden. Die Wippe von Fritsch ist eine durchaus selbständige Construction ohne Anlehnung an Moitessier. ■') Ref. bezweifelt, dass man mit „Eikonogen" in der Mikrophotographie brillante Negative erzielen wird; es arbeitet zu weich und giebt nicht ge- nügende Contraste. Jedenfalls ist ein nur wenig überbelichtetes Mikrophoto- gramm mit Eikonogen unrettbar verloren, während es z. B. mit Hydrochinon noch gerettet werden kann. VIII, 3. Referate und Besprechungen. 327 papier zur Herstellung von positiven Mikropbotogrammen als viel zu stumpf erweist. Jetzt, wo man haltbare Chlorsilbergelatine- und Chlor- silbercollodiumpapiere überall käuflich erstehen kann, die dem Albumin- papier gegenüber alle Feinheiten des Negativs wiedergeben, wird wohl Niemand mehr auf das Albuminpapier zu gedachtem Zwecke verfallen, zumal da dessen Behandlung viel umständlicher ist, als die der letzt- genannten Fabricate. Der Schluss dieses Abschnittes, „Verzeichniss der in der photo- graphischen Praxis häufiger vorkommenden Fehler und deren Abhilfe", ist lediglich ein kurzer Auszug aus Eder *. Was die Ausstattung des Werkes anbelangt, so ist Ref. leider nicht in der Lage, derselben seine Anerkennung zu zollen. Der Druck selbst ist ja recht gut, allein die Abbildungen genügen leider nicht denjenigen Erwartungen, die man heutigentags an dieselben stellen muss. Sehr Vieles ist aus Preisverzeichnissen zusammengeholt, das andere ist uns aus den in gleichem Verlage erschienenen Werken von Edek, David und Scolik, PizziGHELLi, Stein u. A. zur Genüge bekannt, eine Originalabbildung haben wir nirgends bemerkt. Verf. scheint geglaubt zu haben, dass viele Bilder den Werth eines Buches erhöhen , und so bildet er die unglaublichsten Dinge ab: eine Reisfeder (Figur 71), Tropfflaschen (Figuren 144 , 145) , einen Waschbottich (Figur 148), Holzklammern (Figuren 169—171). Auch Bilder wie Figuren 151, 152, 158, 160, 167 gehören nicht in ein wissenschaftliches Werk. — Von den dem Werke beigegebenen Lichtdrucktafeln stellen Tafel I, 1, 5, 6; Tafel H, 1 , .3 Mikrophotogramme mit ganz schwachen Vergrösserungen dar, deren Herstellung gar keine Schwierigkeiten bereitet 5 aber auch bei diesen fragen wir uns, was sollen Darstellungen wie Figur 5, Tafel I, oder Figur 1, Tafel II, bezwecken? Zumal die letztere (Plattencultur einer in verdorbener Milch vorkommenden Oidiumart), eine nichtssagende Mycelwucherung, ist doch ohne jeglichen Werth, und bei Figur 5 (Querschnitt durch den Stengel von Mercurialis) hätte wohl ein voll- kommener Schnitt gewählt werden können: Mercurialis lässt sich ja so ungemein leicht schneiden. Die beiden Bacterienaufnahmen haben zu stark ausgeprägte Diffractionssäume (Tafel I, Figur 3, 4). — Wir kommen nun zu dem Buche von Neuhauss. Es unterscheidet sich von dem soeben besprochenen wenig durch den Titel, viel durch den Inhalt. Verf. theilt sein Werk in 8 Abschnitte: 1. Der mikro- 0 Edek, J. M., Ausführliches Handbuch der Photographie. Bd. III, 1890, p. 433-456. ä28 Referate und Besprechungeli. VlII, 3. photographische Apparat; 2. Objective und Oculare; 3. Die Lichtquelle; 4, Die Beleuchtung; 5. Vorrichtungen für besondere Zwecke; 6. Das negative Bild; 7, Das positive Bild; 8. Die Präparate und die Bedeu- tung der Mikrophotographie. Verf. giebt zunächst, unter Vorführung der wichtigsten Modelle in Abbildungen, eine geschichtliche Entwicklung des mikrophotographischen Apparates, von seinen ersten Anfängen (Mayek, 1844) bis auf die Jetzt- zeit (p. 1 — 31), indem er mit dem bekannten, grossen Apparate von Zeiss schliesst. Es werden darauf die Gesichtspunkte besprochen, welche bei Anschaffung eines mikrophotographischen Apparates ins Auge zu fassen sind, es wird mit Recht betont, dass man schliesslich jeden eigens zu dem Zwecke gebauten Apparat entbehren kann , wenn man eine Touristen-Camera in geeigneter Weise mit einem umlegbaren Stativ verbindet '. Nach Angaben über das Aufstellen des Apparates wendet sich Verf. der Betrachtung der Objective ^ und Oculare zu ; er ') Aucli Ref. hat bislang ausschliesslich in dieser Weise gearbeitet ; es ist ihm noch nie das Bedüi'fniss eines eigenen mikrophotographischen Appa- rates gekommen. ^) Verf. stellt a. v. 0. seines Buches die A p o c h r o m a t e als die für mikrophotographische Zwecke vollkommensten Systeme hin, da bei ihnen che- mischer und optischer Focus zusammenfallen. Ref. ist hiermit vollkommen einverstanden, möchte aber zum Tröste für Diejenigen, denen die Beschaffung stärkster Apochromate (500 M.) nicht möglich ist, anfügen, dass man auch mit guten Achromaten ganz vollkommene Resultate erzielen kann. Man braucht eben nur zu einem Lichtfilter zu greifen, welcher nur Lichtstrahlen gleicher Wellenlänge durchlässt, z. B. zum ZeTTxow'schen Lichtfilter im Verein mit der orthochromatischen Platte. Denn auch die Apochromate lassen sich nicht ohne jedes Lichtfilter anwenden, da sie nicht auf die ultravioletten Strahlen corrigirt sind. Eine Cuvette mit Chininsulfat- oder Aesculinlösung zur Absorption der ultravioletten Strahlen ist auch hier wie dort erforderlich. Sodann ist es bei dem gewölbten Gesichtsfelde der Apochromate schwierig, einen grossen Theil desselben in der Mikrophotographie scharf wiederzugeben, üebrigens sind die besten Achromate aus den Jenenser Glassorten fast frei von chemischem Focus. So hat Ref. ein WiNKEi/sches Trockensystem No. 8, neuester Con- struction und vorzüglicher Leistung in Besitz, bei dem chemischer und optischer Focus sehr nahe beisammen liegen. — Als orthochromatische Platten verwendet Ref. nur noch selbstgebadete Erythrosinplatten (Neuhauss, p. 178), da die so- genannten haltbaren käuflichen, z. B. auch die PERUTz'schen , bald schieiern. Eine kräftige Landschaftsplatte (von Sachs, Schleussnek), die brillante, für Platindruck passende Negative giebt, eignet sich in den Händen des Ref. am besten zu genanntem Zwecke, sie wird dicht vor der Belichtung hergestellt und nach genügendem Abtropfen feucht in die Cassette gelegt. Weiche, zu Portrait-Zwecken geeignete Platten, z. B. von Schippang & Cu., eignen sich jiach des Ref. Erfahrung für Mikrophotographien viel weniger. VIII, 3. Referate und Besprechungen. 329 bespricht die verscliiedenen Arten der Projection des Bildes auf der Visirscheibe, behandelt in einem eigenen Capitel ausführlich die Focus- difFerenz und deren Beseitigung (Liclitfilter etc.), endlich die zu erzielende Vergrösserung des Objectes. Sich den verschiedenen Lichtquellen zu- wendend, behandelt er Sonnenlicht, elektrisches Licht, Magnesiumlicht, Kalklicht, Gaslicht, AuER'sches Glühlicht und Petroleum. Der sich daran schliessende Abschnitt über die Beleuchtung bei mikrophoto- graphischen Aufnahmen ist einer der elegantesten des ganzen Werkes. Ohne sich auf eingehende theoretische Erörterungen einzulassen , führt Verf. die ganze Wichtigkeit der richtigen Beleuchtung bei photographi- schen Aufnahmen vor, aber nicht in aus anderen Büchern abgeschrie- benen „Belegen", sondern man sieht es der ganzen Darstellung an, dass hier der denkende und geschickte Experimentator redet, und zwar redet aus Erfahrung, nicht von Hörensagen. Auch Demjenigen, der das Mi- kroskop nicht zu photographischen Aufnahmen benutzt, ist die Leetüre dieses Abschnittes dringend zu empfehlen; auch dem nur beobachten- den Mikroskopiker wird dadurch zum Bewusstsein kommen, was er von den Aperturen seiner Systeme ausnutzt und was nicht '. — Ein fünfter Abschnitt des Werkes behandelt die Vorrichtungen zur Aufnahme von Objecten in Flüssigkeiten, von embryologischen Präparaten, von Moment- bildern , von Objecten im polarisirten , im prismatisch zerlegten Lichte und von Stereoskopbildern. Die nun folgenden Capitel besprechen die Herstellung des mikro- photographischen negativen und positiven Bildes; sie enthalten genaue Angaben über die Ausführung der Belichtung und die Entwicklung, geben Fingerzeige über die Beurtheilung des fertigen Negativs, über nachträgliche Vergrösserung desselben. Beim „positiven Bilde" wird eingehend die Herstellung von Abzügen auf Chlorsilbergelatinepapier (s.o.) beschrieben, sowie der Positivcopien auf Glas (Chlorsilbergelatine- platten) zum Zweck der Projection. Für Diejenigen, welche Mikro- photogramme zu Veröffentlichungen vervielfältigen lassen wollen, werden schliesslich, an der Hand von Tafeln und eingedruckten Proben , die verschiedenen photographischen Vervielfältigungsarten besprochen. — Ein Schlusscapitel handelt über die Natur der zu photographirenden Präparate sowie über die Bedeutung der Mikrophotographie; eine Uebersicht der bis jetzt publicirten Mikrophotogramme beschliesst das Werk. ') Man vergl. hiermit den Aufsatz von Czapski, S., Die voraussichtlichen Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskopes (Diese Zeitschr. Bd. VIII, 1S91, p. 145 ff.). Zeitsohr. t. wiss. Mikroskopie. VIII, 3. 22 330 Referate und Besprecliungen. VIII, 3. lieber die Ausstattung des NEUHAuss'schen Buches brauchen wir nichts hinzuzufügen , es ist in gleichem Verlage und in gleicher Ausstattung wie diese Zeitschrift erschienen. Die drei beigegebenen Tafeln, zwei photographische Lichtdrucke und eine Photogravüre, brin- gen vier Darstellungen , Amphipleura pellucida bei 2000- und 3500- facher Vergrösserung, Cholerabacillen mit Geissein (1000), die bekanntlich zuerst vom Verf. photographisch nachgewiesen wurden, endlich das CoETi'sche Organ vom Meerschweinchen bei 200facher Ver- grösserung. Nach den vorstehenden Auseinandersetzungen kann es nicht zweifel- haft sein, welchem der beiden Werke wir den Preis zuerkennen müssen. Wäre das Buch von Maektannek allein erschienen , so würden wir es unbedingt als das beste empfehlen , denn trotz seiner Mängel erhebt es sich über die vorangegangenen Publicationen von Stenglein und Schultz-Henke ^ und von Jeserich'^. Es wird aber von dem Neu- HAuss'schen Werke weit überragt. Ref. benutzt seit Jahresfrist beide Werke nebeneinander ; wo es aber gilt, sich wirklich zuverlässigen Rath zu erholen, da greift er stets zu dem zwar viel figurenärmeren, aber viel inhaltsreicheren „Neuhauss". Und der Verf. des letzteren ist sich auch wohl bewusst, dass er Rath ertheilen kann, das geht aus seiner ganzen Darstellung zur Genüge hervor, auch da, wo er über seine kümmerlichen Vorgänger die volle Schale des Spottes oder bitteren Hohnes ausgiesst. Behrens. 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. Eeferent: Prof. Dr. Arthur Wichmann in Utrecht. Czapski , H.f Mikroskope von Carl Zeiss in Jena für krystallographische und petrographische Un- tersuchungen (Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. IX, 1891, p. 94—99). Die Mikroskope von Zeiss haben sich bisher in mineralogischen Kreisen nur geringen Beifalls zu erfreuen gehabt. Seit kurzem hat die genannte Firma Instrumente in den Handel gebracht, welche sich hin- sichtlich ihrer Ausstattung den jetzt allgemein benutzten anschliessen ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 53. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 223. VIII, 3. Referate und Besprechungen. 331 und die in dem oben angeführten Aufsatze eine nähere Beschreibung erfahren. Es sind drei Modelle, welche zu den genannten Zwecken aus- gewählt worden sind. Das grosse Modell (siehe die umstehende Figur 1) besitzt die Form und Grösse des Stativs I und Ja (Zeiss). Der Beleuchtungsapparat be- steht aus dem Condensor C von der Apertur 1-40 und kann gegen eine Cyliuderblendung ausgetauscht werden, wenn der Uebergang von con- vergentera Lichte zu parallel polarisirtem erfolgen soll. Ebenso kann ein Austausch gegen besondere Beleuchtungsvorrichtungen (achromati- scher Condensator \ Beleuchtungsapparat für monochromatisches Licht nach Haktnack, Mikrospectralobjectiv nach Exgelmann, Spectralpolari- sator nach Rollet) erfolgen. Den zweiten Haupttheil des Beleuchtungs- apparates bildet der Diaphragmen- und Polarisatorträger, welcher um einen Zapfen geschlagen werden kann und in seiner Ebene mittels Zahn und Trieb R beweglich ist. In demselben findet dem Condensator zu- nächst die Irisblende ^ Platz. Namentlich aber dient er zur Aufnahme des Polarisators P. Der um die optische Achse des Mikroskops drehbare Tisch be- sitzt einen Durchmesser von 120 mm und eine weite (33 mm) centrale Oeffnung, welche durch Diaphragmen auf den oberen Durchmesser der Condensorlinse reducirt werden kann. Der Obertheil des Stativs (Figur 1) besteht aus dem Tubusträger, welcher sich in Prismeuführung ^ durch die Mikrometerschraube 31 zur genauen Einstellung des Objectes bewegt. Die auf dem Kopfe dieser Schraube aufgetragene Theilung gestattet Messungen in die Tiefen- dimension bis zu Einheiten der dritten Decimale. Der Tubus wird mittels der Zahn- und Triebvorrichtung G zur gröberen Einstellung auf- und abbewegt. An das untere Ende des Tubus, welches die Centrirvorrichtung cc trägt, werden die Objective angeschraubt, be- ziehungsweise mittels des Schlittenobjectivwechslers befestigt. Nahe seinem unteren Ende ist der Tubus ferner durchbrochen und lässt mittels des Knöpfchens K ein verschiebbares Rähmchen hindurch, welches eine KLEiN'sche Quarzplatte trägt, an deren Stelle auch eine Viertelundu- lationsglimmerlamelle oder ein Gypsblättchen vom Roth I. Ordnung ein- gefügt werden kann, — In dem Tubus ist durch Zahn und Trieb g der 1) Diese Einrichtung ist bei den für mineralogische Zwecke bestimmten Mikroskopen sehr alt; sie ist 1878 fast gleichzeitig von Klein, Lasaui.x und Bertrand vorgeschlagen. Ref. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 178. 3) Cfr. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 207. 22* 332 Referate und Besprechungen. VIII, 3. VIII, 3, Referate und Besprechungen. 333 334 Referate und Besprechungen. vin, 3. Ausziehtubus beweglich, in welchem in markirter Lage die Oculare ein- gesetzt und auf diese der Analysator Ä ge- steckt, dessen Fassung einen Index trägt, wel- cher über der Kreis- theilung T spielt. Für stauroskopische Unter- suchungen kann eine Kalkspathplatte ' zwi- schen Ocular und Ana- lysator eingefügt werden, falls man nicht das Bek- TEAND'sche Ocular vor- zieht. Am unteren Ende trägt das Tubusauszug- rohr eine Kulisse, in welche das AMici'sche Hilfsobjectiv(BEKTKAND' sehe Linse) B zur Unter- suchung derAchsenbilder eingeführt werden kann. Dies geschieht durch ein in den äusseren Tubus angebrachtes Fenster, welches mittels einer Klappe geschlossen wer- den kann. Das mittlere (Figur 2) und das kleinere (Figur 3) Modell sind ihren Dimen- sionen entsprechend ein- facher ausgestattet. 3. 1) Die einfache Kalk- spathplatte ist nicht zu empfehlen , dagegen wohl die CALDEKON'sche Doppel- platte. VIII, 3. Referate und Besprechungen. 335 Brunuee, R.» Ueber eine neue Vorrichtung für Mikro- skope zum Zwecke eines schnellen Uebergangs von parallelem zu convergentem Licht (Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. XI, 1891, p. 136—137). Den vor kurzem von Wülfing, sowie von Fuess gemachten Vor- sclilägen * lässt der Verf. einen neuen , sehr beachtenswerthen folgen : Im Schieber P, durch welchen der Polarisator mit dem Objecttisch ver- bunden wird, ist ein Schlitten S angebracht, der, sobald das Rohr II durch Trieb nach unten gebracht wird, die Linse C* von der Linse C^ abhebt. Ein Zug mit dem Arme G genügt alsdann, um dieselbe in eine C' Ah^WJ^. L- procentigen Essigsäure oder (besser) mit der bisherigen Boraxferridcyankaliumlösung, welche man indessen noch verdünnt (der Untergrund wird dann gelb). — Wird das Chrom bei der Behandlung nicht genügend durch Kupfer ersetzt, indem man z. B. die Behandlung der Stücke in der wässerigen Kupfer- lösung statt im Brütofen bei Stubentemperatur vornimmt, dann erhält man in manchen Ganglienzellen sehr schöne Structurelemente. Bei den Purkinje' sehen Zellen der Kleinhirnrinde treten die Ausläufer bis zu den allerfeinsten hin durch eine feine schwarze Strichelung und Punk- tirung hervor. Aehnlich verhalten sich die eine Art der Körnerzellen des Kleinhirns, ferner gewisse Zellen der Grosshirnrinde etc. [Danach liefert diese Methode in den angegebenen Regionen also ganz ähnliche Bilder wie die eine der von Wolters'^ beschriebenen Methoden. Uebrigens habe ich auch mit der früheren WEioERT'schen Methode unter Umstän- den ganz ähnliche Bilder erhalten, nur nicht ganz so schön wie die nach der Methode von Woltebs und also wahrscheinlich auch der neuen 1) „Das Anilinöl greift die Farbe gar nicht an und ist daher dem Carbol- xylol für diese Fälle vorzuziehen. Nur muss es sorgfältig in reinem Xylol ausgewaschen werden, wenn man nicht mit der Zeit eine Bräunung des Bal- sams bekommen will. Die Aufhellung mit Anilinölxylol und die Auswaschung des Anilinöls kann man auch auf dem Objectträger vornehmen, auf den man die Schnitte direct aus dem Alkohol bringt". 2) Wolters, M., Drei neue Methoden zur Mark- und Achsencylinderfär- bung mittels Hämatoxylin (Diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 4G6 ff.). VIII, 3. Referate und Besprechungen. 395 von Weigert, Ref.] Je besser die Zellen gefärbt sind , um so leichter dunkeln die Schnitte nach, während an den sorgfältig gekupferten Schnitten ein störendes Nachdunkeln nicht zu bemerken war. [So auge- nehm es sicher auch ist, dass wir hier wieder eine neue und einfachere Methode der Markscheidenfärbung kennen gelernt haben, so scheint mir doch, dass es noch werthvoller ist, eine Methode zu haben, welche den Achsencylinder scharf färbt, wie das die dritte von Wolters an- gegebene Methode thut, Ref.] Schiefferdecker {Bonn). Obregia , A., lieber die Nervenendigungen in den glat- ten Muskelfasern des Darms beim Hunde (Ver- handl. d. X. Internat, med. Congr. zu Berlin 1891, Bd. II, Abth. 1 p. 48—50). Als Methoden wurden benutzt: 1) Untersuchung des frischen un- gefärbten Gewebes mit Zusatz von 2procentiger Essigsäure zur Aufhellung. Präparate natürlich nicht haltbar. 2) Methylenblau- färbung nach Ehelich. Schöne Bilder, doch war die intravitale In- jection nicht anwendbar. Die von Dogiel ' angegebene Modification wurde benutzt, doch waren für die glatten Muskelfasern die Resultate nicht so gut wie für die quergestreiften. 3) Goldchlorid. Das Verfahren nach Ranvier mit Citronensaft war das günstigste. Da das Darmgewebe, besonders beim Hunde, sehr dicht ist, so ist es gut, die Stückchen länger in Citronensaft zu lassen. Die Reduction, sei es im Licht (mit Essigsäure) , sei es im Dunklen (mit Ameisensäure) , muss vollständig sein. Nach gutem Auswaschen kommen die Stückchen in Alkohol absolutus für längere Zeit; je länger, desto besser. Die vor- sichtig auszuführende Trennung der Schichten wird durch Drittel-Alkohol erleichtert. Die Färbung muss so ausfallen, dass der protoplasmatische Körper der Muskelzellen sehr schwach oder garnicht gefärbt erscheint, während die Kerne und die Nervenfasern dunkelroth werden. Schiefferdecker (Bonn). C Bacterien, Prausnitz, W., Kleinere Mittheilungen zur bacteriologichen Technik (Münchener Med. Wochenschr. 1890 No. 48 u. Cen- ') DüoiEL, A. S. , Die Nervenendköq^erchen (Endkolben W. Krause) in der Cornea und Conjunctiva bulbi des Menschen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 602). 26* 396 Referate und Besprechungen. VIII, 3. tralbl. f. Bacteriol. ii. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 3, 4 p. 128). Prausnitz beschreibt zunächst eine Vorrichtung zum Abimpfen einzelner Colouien von der KocH'schen Platte, welche bezweckt, ein Anstossen der Impfnadel an das Objectiv beim Abimpfeu zu vermeiden und der Führung der Nadel mehr Sicherheit zu geben. Die Vorrichtung (Figur 1) besteht aus einem an das Objectiv anzuschraubenden Klemm- ring, welcher seitlich ein senkrecht nach unten gerichtetes, unten mit dreieckigem Ausschnitt versehenes Platinblech eingesetzt erhält. Dieser schlitzförmige Ausschnitt dient der Impfnadel zur Führung während des Abimpfens und erleichtert dadurch ^ vor allem die ControUe des „Fi- schens" unter dem Mikroskop *. — Es folgt die Beschreibung eines Apparats zur gleichzeitigen Anfertigung mehrerer EsMAEcn'schen Rollröhrchen (Figur 2). Die entsprechend vorbereiteten Röhrchen werden in die correspondirenden Löcher zweier in 14 cm Abstand von einander auf einer Achse angebrachten Biech- scheibcn eingesteckt, welche mittels einer kleinen Curbel in einem (zum Erstarren der Gelatine mit ca. 10 bis 12" C. warmem Wasser ') Der Apparat ist zu beziehen vom Ilofinstrumentenraacher Katsih in München. VIII, 3. Referate und Besprechungen. 397 gefüllten) Blechkasten um die erwähnte horizontale Achse bis zur Er- starrung? der Gelatine rotirt werden können *. Der im folgenden beschriebene Apparat zur bacteriologischen Wasseruntersucliung enthält in einem Kasten ein Thermometer, einige Glaspipetten, Fettstift, 20 Reagirgläser, Schöpfgefäss, einen kleinen Spirituskocher zum Verflüssigen der Gelatine, Blechschachtel mit Gummi- kappen und zwei Fläschchen mit Spiritus, ferner eine zerlegbare Roll- maschine für EsMAßCH'sclie Rollröhrchen -. Hervorzuheben ist, dass die Fehlerquellen bei Verwendung des Apparates möglichst vermieden sind, da die Anfertigung der Röhrchen eben an Ort und Stelle erfolgt. Die von Pkausnitz daran anschliessend beschriebene Methode zur Anfertigung von Dauercultureu besteht darin, dass das Culturröhrchen, welches man zu conserviren wünscht, mit einer autiseptischeu Gelatine (öprocentige Essigsäure oder einprocentige Carbolsäure) vollgegossen, dann mit einem Korkstopfen verschlossen wird, welchen man am Rande abschneidet und dann versiegelt. Einige Röhrchen verflüssigten sich aber nach einem halben bis einem Jahr ohne sichtlichen Grund. Auch sonst dürfte wegen der anhaftenden Mängel die Methode wenig Freunde finden. Die älteren Methoden von Soyka-Kkäl und der einfache vom Ref. angegebene Paraffinverschluss leisten zudem bedeutend mehr. Czapleivski {Tübingen). Unna, P. Gr., Der Dampf triebt er (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 23 p. 749). Unna schliesst den gewöhnlichen lleisswassertrichter (dem er jedoch ebenfalls eine halbkuglige Form gegeben) oben mit einem halbkugligen Deckel, welcher mittels eines eisernen Bügels und Flügelschraube dicht angesetzt werden kann, und ausserdem noch einen Ventilhahn besitzt. Die eine halbe Stunde auf ofi'enem Feuer gekochte Agarlösung wird auf ein einfaches Filter, welches 2 cm hoch mit geglühtem Kieseiguhr gefüllt ist, in den Trichter gegeben, das Wasserbad um den inneren Trichter bis ca. 3 cm unter den Rand des inneren Trichters gefüllt, darauf der Deckel aufgeschraubt und der Apparat bei geschlossenem Ventilhahn mittels des seitlichen Ansatzrohres wie gewöhnlich angeheizt. Der Wasserdampf presst das Agar durch das Filter. Als Vorzüge des Apparates rühmt Unna Schnelligkeit der Filtration, Gasersparniss, Weg- ») Der Apparat ist zu beziehen von Ulrich u. Reinig München Zweigstr. 6; Preis 8 M. 2) Der Apparat ist zu beziehen von Johannes Greiner München Nen- hauserstr. 49 für den immerhiu etwas hohen Preis von 18 M. 398 Referate und Besprechungen. VIII, 3. fallen des bisherigen Klärens und langen Garkochens. Das Ventil ist nur zu öffnen, wenn die Plltration zu stürmisch geht, dann aber sehr vorsichtig, um Ueberkochen zu vermeiden. Man kann die durchfil- trirende Agarlösung in sterilen Gefässen direct steril auffangen, er- spart daher auch das discontinuirliche Sterilisiren *. Czapleiüski {Tühlngen). Stevenson, W. F., u. Bruce , D., Eine neue Methode, Flüssigkeiten in die Bauchhöhle der Versuchs- thiere einzuspritzen (Centralbl. f. Bacteriol. u. Para- sitenk. Bd. IX, 1891, No. 21 p. 689). Stevenson und Bruce bedienen sich, um das Anstechen der Därme bei intraperitonealer Injection zu vermeiden, einer gekrümmten Canüle, deren scharfe Spitze a solide ist und welche dafür eine Aus- flussöffnung an der Convexität, ziemlich in der Mitte h der Krümmung besitzt. Zur Aus- führung der Injection werden Bauchdecken mit Peritoneum 1) Der Apparat ist in zwei Grössen zu 1 und V.' Liter von Bauer u. Häsel- BAKTH, Instrumentenfabrik, Eimsbüttel bei Hamburg, zu beziehen. VIII, 3. Referate und Besprechungen 399 als Falte emporgehoben, die gekrümmte Canüle durch die gebildete Falte durchgestossen , sodass die Spitze frei heraiisragt, während die Mündung an der Convexität noch in der Bauchhöhle liegt. Man kann dann, ohne Gefahr die Därme anzustechen, die Injection ausführen, Csapleivski {Tübingen). Botkin, S., Eine einfache Methode zur Isolirung anaero- ber Bacterien (Zeitschr. f. Hygiene Bd. IX, 1890, p. 383). Um die mannigfachen Uebelstände der bisher zur Plattencultur für Anaeroben angegebenen Apparate zu umgehen, empfiehlt Botkin fol- genden Apparat: Auf einem Kreuz aus plattgehämmertem Bleirohr e steht in einer nicht zu niedrigen, 20 bis 25 cm im Durchmesser haltenden Glasschale a eine ziemlich hohe Käseglocke h, die oben mit Bleirohr c beschwert ist. In ihr steht eine kleine Drahtetagere fZ, in deren Fächern 4 bis 5 PETBi'sche Schalen offen (die Deckel werden entfernt) über einander Platz finden. In das Innere der Glocke führen zwei feste dünne Gummischläuche, denen man mittels eines alsMandrin dienenden dünnen Kupferdrahtes eine U-förmige Krümmung giebt. Der längere [f) mit dem Gasentwicklungsapparat verbundene reicht fast bis an die Decke der Glocke, der kürzere {g) endet innen bald oberhalb des Glockenrandes und ist mit einer als Rückschlagsventil dienenden kleinen mit Wasser gefüllten Waschflasche h verbunden, deren anderes Aus- führungsrohr i mit einem Schraubenquetschhahn verschlossen wird. 400 Referate und Besprecliungen. VIII, 3. Zum Gebrauch wird zunächst die Innenfläche der Glocke h mit Sublimat, Alkohol und Aether und das Gestell d durch Ausglühen steri- lisirt. Dann schiebt man die wie gewöhnlich gegossenen PETRi'schen Schälchen, aber offen, in die Mittelfächer des Gestells, setzt in das Ober- respective ünterfach je ein Schälchen mit Pyrogallussäurelösung und fügt kurz vor dem Zudecken der Glocke etwas Kalilauge zu. Nun lässt man durch den zuführenden Gasschlauch f das vorher gewaschene Wasserstoffgas zuströmen, sodass das Gas in Blasen durch die Sperr- flüssigkeit entweichen muss (5 bis 10 Minuten), darauf öffnet man den Quetschhahn, sodass das Gas nun bei i ausströmt. Nach einiger Zeit versucht man, es bei i anzuzünden. Wenn es schon ruhig brennt, kann man den Hahn des Kipp'schen Apparates schliessen und die Schläuche f und g herausziehen. Der Apparat behält einen gewissen inneren Ueberdruck. Man stelle ihn des bequemeren Transports wegen gleich von vornherein in der Nähe des Thermostaten auf. — Der Apparat functionirt vorzüglich und dürfte sich wegen seiner Einfachheit sehr empfehlen. Czapleiüski {Tübingen). Kaufmann, P., Ueber einen neuen Nährboden für Bacterien -- (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk, Bd, X, 1891, No. 2, 3 p. 65). Kaufmann empfiehlt als Nährboden Jequiritydecoct. — 10 g Je- quiritysamen werden im Mörser enthülst, dann mit 100 ec Aqua dest. 2 Stunden im Dampfkochtopf gekocht, abgekühlt (wobei sich Nieder- schlag bildet) und filtrirt. Für viele Arten kann diese Lösung ohne weiteres verwendet werden, andere bedürfen Alkalizusatz. Die Lösung wird durch die Bacterien in der Farbe entweder gar nicht verändert (meistens gar nicht oder schlecht wachsende Arten) oder sie wird ent- färbt oder grün gefärbt. Die grün gefärbten Culturen reagiren al- kalisch, die entfärbten sauer. In der That wird die Lösung durch Säuren entfärbt, durch Alkalien aber grün. Durch Zusatz von Gelatine oder Agar kann man die Lösung auch zur Herstellung fester Nährböden verwenden. Erstere erfordert Alkalizusatz. Für das Wachsthum in den verschiedenen Lösungen kommt wohl ausser dem Alkalescenzgrade nicht sowohl, wie Kaufmann meint, der Virulenzzustand der Bacterien, als vielmehr ihre Wachsthumsenergie in Frage. Kaupmann meint, dass die Jequiritylösung mitunter von Vortheil sein könnte für die Differentialdiagnose sehr ähnlicher Bacterienarten. So färbt sie der Bacillus typhi grünlich, während durch Bacillus coli communis Entfärbung eintritt. Verf. hat auch Jequiritylösung mit Zusatz VIII, 3. Referate und Besprechungen. 401 von Pepton, Glycerin etc. versucht. Tuberkelbacillen sollen in alkali- scher Peptonjequiritylösung bereits nach drei Tagen starke Vermehrung mit deutlicher Trübung [?] zeigen (für gewöhnlich bleiben Culturen von Tuberkelbacillen in flüssigen Medien klar!). Auifallend war es Ref., dass Verf. für Tuberkelbacillen eine Peptonjequiritygelatine versucht zu haben scheint. Gewisse ältere Culturen geben mit Salpetersäure be- handelt Rothfärbung, so Bacillus prodigiosus, Pneumobacillus, Ilogcholera, Swinepest, Neapolitanus , Frettchenseuche, Bacillus aus Leberabscess, Cholera. Als Vortlieile der Jequiritylösung hebt Kaufmann hervor : 1) leichte Darstellung, 2) DifFerentialdiagnostischeVerwerthbarkeit, 3) Begünstigung des Wachsthums bei einzelnen Arten, so Bacillus pyocyaneus. Als Nachtheil derselben ist es zu bezeichnen, dass einige Arten darauf ge- züchtet ihre Beweglichkeit verlieren und sich nicht weiter als 3 bis 4 Generationen cultivireu lassen. Ferner färbt sich in davon hergestellten Präparaten der Untergrund unliebsam mit (durch vorheriges Abspülen in Säurelösung 1- bis 3procentige und Wasser zu vermeiden). GKAJu'sche und GBAM-WBiGEKT'sche Methode ergeben brauchbare Bilder. ümpleiüski {Tübingen). Sclliiltz, N. K., Zur Frage von der Bereitung einiger Nähr Substrate (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasiteuk. Bd. X, 1891, No. 2, 3, p. 52). Von einigen anfänglichen Misserfolgen in der Bereitung der Nähr- substrate (wie sie übrigens wohl Jedem im Anfang passiren dürften) ausgehend, hat Verf. die Bereitung der Nährsubstrate einem eingehen- deren Studium unterzogen. Man müsste den Artikel fast wörtlich ab- schreiben, wenn man den Inhalt genau wiedergeben wollte. Ich will mich daher auf die hauptsächlichsten Punkte beschränken. Verf. em- pfiehlt, die bei Bereitung der Nährsubstrate sich bildenden Niederschläge stets einzeln zu entfernen, d. h. also zuerst das Fleischwasser etc. zu kochen, dann zu neutralisiren, Zusätze zu machen, von neuem zu kochen, die neuen Niederschläge wieder abzufiltriren etc. Bei der Neutrali- sation verwirft Verf. das Lakmuspapier als unzuverlässig und empfiehlt die Reactiou durch Titriren mit 0*4 Proceut Aetznatronlauge (statt Sodalösung, da Phenolphthalein auch gegen Kohlensäure empfindlich ist) festzuhalten (Mittel aus drei Proben von je 1 cc) und dann mit 4procentiger Aetznatronlauge danach die Reaction der Lösung zu corri- giren. Als Indicator empfiehlt Verf. das Phenolphthalein (1 Tropfen auf 1 cc). Ref. hat bereits Anfang April 1889 mit Dr. Stboschein- 402 Referate und Besprechungen. VIII, 3. Würzburg gemeinsame Versuche mit Phenolphthalein angestellt, welche so befriedigend ausfielen, dass Ref. seitdem das Phenolphthalein aus- schliesslich zum Titriren von Culturmedien und Culturen benutzt. Verf. meint, die Bouillon müsse vor dem Zusatz von Agaragar oder Gelatine neutralisirt werden und setzt der Bouillon für Gelatine Alkali bis zu schwacher Rothfärbung des Phenolphthalein zu, für Agar- agar aber 8 bis 10 cc weniger der 4procentigen Lösung als zur voll- ständigen Neutralisation erforderlich ist '. Zur Klärung setzt Verf. der Gelatine Hühnereiweiss zu, hält dies für Agaragar aber für ganz zweck- los. Dem gegenüber muss Ref. bemerken, dass er stets gute Resultate erhalten, auch wenn er, wie wohl viele andere mit ihm, Gelatioe oder Agar in der heissen nicht neutralisirten Bouillon gerade löst, dann neutralisirt, etwas abkühlt, Ei weiss zufügt, zunächst scharf im offenen emaillirten Topf und dann im Dampfkochtopf (Gelatine 1 Stunde, Agar 4 bis 5 Stunden bis zum Absitzen) weiter kocht. Verf. bemerkt eben- falls, dass das Agar auf freiem Feuer sich viel leichter löst als im Kol- ben im Dampf kochtopf. Ref. glaubt, dass dies darauf zurückzuführen ist, dass die Flüssigkeit im Kolben weniger leicht von der Hitze gleich- massig durchdrungen wird als im offenen Topf, zumal bei Rühren. Er hält dies erste scharfe Kochen für sehr wesentlich, weil dadurch gewisse Niederschläge , welche im Kolben viel später ausfallen , in kürzester Zeit gebildet werden. Zur Erleichterung der Bildung und Mitreissung dieser feinen Niederschläge setzt Ref. im Gegensatz zu Verf. auch dem Nähragar stets Hühnereiweiss zu. Wenn also Ref. auch nicht in Allem mit Verf. übereinzustimmen vermag, so möchte er von ihren Vorschlägen doch folgende allgemeiner Beachtung empfehlen : 1) Sich bildende Niederschläge einzeln zu entfernen ; 2) Zum Neutralisiren kann ») Verf. giebt an, dass ein in neutralisirter Bouil]on gekochter Agaragar ehie rothbräunliche Farbe hat und wenig durchsichtig sei. Wenn man aber, wie Ref. den Agaragar nach Tischutkin (referirt in dieser Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 107) mit Essigsäure einweicht, abspült bis zum Verschwinden der sauren Reaction, in der warmen sauren Bouillon gerade löst, dann neutralisirt, so erhält man durchaus keinen rothbraunen undurchsichtigen, sondern vielmehr hellgelblichen nicht ganz durchsichtigen, annähernd klaren, in der Wärme ganz klaren Agaragar. Die neuen zur Bereitung des Agaragar vorgeschlagenen Methoden scheinen dem Ref. weniger auf einem directen Einfluss der Säuren zu beruhen, wie Verf. anzunehmen scheint, indem dadurch die Reaction der Lösung saurer wird, als vielmehr auf dem Umstände, dass das Agaragar vor dem Einbringen und Lösen in Bouillon bereits aufgequollen wird. Die Lösung selbst wird dadurch bedeutend beschleunigt; ferner dürfte das Agar dabei noch zugleich gereinigt werden (^Eiweissstoffe?). Ref. VIII, 3. Referate und Besprechungen. 403 man statt Sodalösung auch ev. eine Aetznatronlauge' benutzen; 3) Titriren mit einer entsprechenden '/(, Lauge und Phenolphthalein als Indicator; 4) Gelatine darf nicht lange, Agar muss dagegen lange (am besten zuerst in einem eisernen emaillirten Topf über offener Flamme) gekocht werden - ; 5) Das Filtriren kann durch vorheriges Absetzenlassen der Niederschläge im Dampfkochtopf unterstützt werden. Dagegen ist nach des Ref. Erfahrungen ein so langes Sterilisiren, wie Verf. angiebt, dreimal täglich eine halbe Stunde für Gelatine resp. eine Stunde für Agaragar nicht nur nicht meistens unnöthig, sondern sogar schädlich für die Qualität des Nährbodens. Czaplewski {Tübingen). Marpmaim, Mittheilungen aus der Praxis (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. X, 1891, No. 4 p. 122). Marpmann empfiehlt, nicht das mehr oder weniger verunreinigte käufliche Agaragar zu benutzen, sondern sich das Agaragar aus den Muttersubstanzen selbst herzustellen. Zu Versuchen wurde benutzt Sphaerococcus confervoides. — 30 Theile davon werden mit 2 Theilen Salzsäure und 1 Liter Wasser 2 Stunden macerirt, dann ausgewaschen bis zum Verschwinden der sauren Reaction und mit 700 Theilen Wasser, 40 Theilen Glycerin, 20 Theilen Pepton liquid. Koch., 2 Theilen ge- schlagenem Eiweiss im Damptkochtopf gekocht, neutralisirt und im Sy- rupfilter durch Wildleder mit Filtrirpapier und Filz vermittels Druck- birne durchgepresst. Als Ersatz für Gelatine (Glutin) empfiehlt Makpmann Chondrin. Rippenknorpel oder Ohrmuscheln werden mit Wasser ausgekocht, das Perichondrium entfernt, die Knorpelstücke fein zerkleinert und bei zwei Atmosphären Druck im PAPiN'schen Topf oder in Druckflaschen, welche in concentrirter Lösung von Natr. sulf. cryst. stehen, mit Wasser ge- kocht. Heiss filtriren durch Papierfilter. Mabpmann rühmt den Chon- drinnährböden grössere Festigkeit, Festbleiben bis über -\- 30" C. und langsamere Verflüssigung durch Spaltpilze nach. Längeres Kochen zer- stört die Consistenz nicht. Chondrin wird im Gegensatz zu Glutin durch 1) Ref. ist jedoch der Ansicht, dass man nicht sowohl für alle Mikrobien den Nährboden gleichmässig neutralisiren solle, sondern demselben vielmehr den von jedem einzelnen beansiDruchten Grad von Acidität geben müsse (wenigstens für genaue Studien). Ob die Natronlauge sich zu diesem Zwecke bewährt, muss die Erfahrung lehren. «) Zu langes Kochen schadet auch dem Erstarrungsvermögen des Agar- agar. Vor allem muss man sich davor bei Anwendung eines Autoclaven hüten ! Ref. 404 Referate und Besprecliungen. VIII, 3. Alaun gefällt. Chondrinböden eignen sich nach Marpmann gut zum Conserviren von Plattenculturen. CmplewsM {Tühingeu). Beyerinck, M. W., Verfahren zum Nachweis der Säure- absonderung bei Mikrobien (Centralbl. f Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. IX, 1891, No. 24 p. 781). Beyeeinck geht in dem vorliegenden Artikel von dem Gedanken aus, dass, wenn man einen guten gelutinirenden Nährboden durch Ver- mischen mit einem indifferenten unlöslichen Salz (Carbonat von Calcium, Magnesium, Mangan, Baryum, Zink etc.) undurchsichtig macht durch Auftropfen gewisser Säuren, welche mit den genannten Körpern farb- lose Salze bilden, durchsichtige Diffusionsfelder in undurchsichtiger Masse entstehen müssen. Für einen geeigneten Nährboden giebt er folgendes Recept: 20 g Hefe werden in 100 cc Leitungswasser gekocht, 8 g Gelatine oder % g Agar und 5 bis 10 g Glucose zugesetzt. Nach erneutem Kochen filtrireu, bis eine vollständig klare durchsichtige, schwach gelbliche Masse erhalten wird, welche auch nach dem Erstarren klar bleibt. Dazu gebe man einige Tropfen einer Suspension von reiner geschlemmter Kreide in Wasser, bis die Masse selbst in einer ca. 1 mm dicken Schicht undurchsichtig bleibt. Ebenso kann man statt der Kreide das Carbonat von Baryum , Magnesium , Mangan und Zink dem Nähr- boden zusetzen. Man giesst nun entweder die zu untersuchende Flüssig- keit über die Oberfläche (pro 1 cc Gelatine bleibt nach Verf 3*3 cc Flüssigkeit zurück) oder impft in Strichform, am besten in Glasdosen (PETEi'schen Schälchen) und stellt dabei die Dose umgekehrt, den Deckel nach unten. Um jeden säurebildendeu Keim entstehen nun Diffusions- felder*. Alkahbildende Bacterien markiren sich dadurch, dass sie aus- fallende Ausschnitte an den ihnen nahegelegenen Diffusionsfeldern säure- bildender Bacterien verursachen. Will man daher einen Mikroben auf Alkalibildung prüfen, so impfe man ihn in Strichen, welche senkrecht zu Impfstrichen eines säurebildenden Mikrobion gerichtet sind. Unter Umständen können diese gemischten undurchsichtigen Nährböden zur Differentialdiagnose zwischen Milchsäure- und Essigfermenten dienen. Sind auf dem Kreideboden ausserdem noch Hefepilze (z. B. wie bei Maischeuntersuchung) zugegen, so wird der von den Hefen gebildete Alkohol von den Milchsäurebacterien nicht umgewandelt, wohl aber von den Essigsäurebacterien in Essigsäure, welche daher das Diffusionsfeld ') Cfr. hierzu auch: Beyerinck, M. W., L'auxanographie ou la methode de rhydrodiffusion dans la gelatine appliquee aux recherches microbiologiciues (Arch. Nderland. t. XXII, 1889, p. 367; diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 525). VIII, 3. Referate und Besprecliungen. 405 vergrössert. Milchsäurebacterien sind gegen Zinkcarbonat ziemlicli empfindlich, weniger freilich hinsichtlich ihrer säurebildenden Thätig- keit; Essigsäurebacterieu sind dagegen nicht empfindlich; das Wachs- thum der von Beyekinck gefundenen Essigätherhefe werde dadurch sogar entschieden begünstigt. — Die Präparate kann man conserviren, indem man sie mit sehr verdünnter Sublimatlösung übergiesst und nach- her eintrocknet. Csaplewshi {Tübingen). ßoux, Gv Quelques remarques ä propos de la colora- bilite du bacille de la tuberculose (La Province med. 1891, no. 4 p. .37. — Referat nach Centralbl. f. Bac- teriol. u. Parasitenk. Bd. XI, 1891, No. 20 p. 678). Nach einer Einführung in die Entwicklung der Tuberkelbacillen- färbemethoden weist Roux auf die Unterschiede hin, welche zu Tage treten, je nachdem man für die Bereitung des Aniliuwassers zur Ehe- Licn'schen Färbung altes dunkles oder frisches helles Anilinöl ver- wendet. Farbloses Oel ergab bessere Resultate, zahlreichere, dickere und brillanter gefärbte Bacillen als gelbliches Oel. Bei Benutzung dunkelfarbigen Oels schienen die Bacillen überhaupt zu fehlen. Ganz reines Anilin ist aber sehr schwer zu erhalten, meist ist es mit mehr oder weniger 0-Toluidin verunreinigt. Dieses verunreinigte Oel zersetzt sich leichter und wird dabei braun. Man soll sich also möglichst farb- losen Anilinöls bedienen. Ferner bemerkt Roux, dass Zahl und mor- phologischer Charakter der Bacillen je nach der Färbemethode wechselt. Nach dem HEEMANN'schen Verfahren sollen sie dicker und zahlreicher erscheinen, als nach Anilin- und Carbolsäuremethoden, was Ref. nach seinen Erfahrungen durchaus in Abrede stellt. Bei vergleichenden Untersuchungen, z. B. im Laufe der Behandlung, solle man sich stets nur einer und derselben Methode bedienen. CsaplewsJd {Tübingen). Unna, P. Gr., Eine neue Färbemethode für Lepra- und Tu- berkelbacillen (Monatsh. f. prakt. Derraatol. Bd. XII, 1891, No. 11 p. 477). Unna hat gefunden, dass „jodirte Methyleublauschnitte von Lepra- gewebe in Kreosol eine schöne Doppelfärbung annehmen, indem das thierische Gewebe stark entfärbt wird, aber die blaue Farbe behält, während die Leprabacillen in der Form des Coccothrix sich braun - roth bis mahagonibraun umfärben". In die Tripelverbindung : Gewebe -\- Jod -|- Methylenblau greift nämlich das genannte Lösungs- mittel derartig ein, dass aus dem thierischen Gewebe das Jodmethylen- 406 Referate und Besprechungen. VIII, S. blau als chemisches Ganzes langsam getrennt wird, wobei ersteres stets blau bleibt, während aus den Mikroorganismen nur das Methylenblau ausgezogen wird, diese mithin ,godirt", also braun gefärbt zurück- bleiben. Während es nicht gelingt, vom Gewebe befreite Leprabacillen durch Jod direct und dauerhaft zu färben, ist hier auf dem indirecten Wege der „Umfärbung" eine Jodfärbung der Bacillen erzielt worden. Ebenso wie die Leprabacillen verhalten sich , dieser „Jodablösungs- methode" gegenüber, wie vorauszusehen war, die Tuberkelbacillen. Doch hat Unna vorläufig nur an Lepra schnitten das neue Verfahren systematisch erprobt. Die neue Methode beansprucht vor Allem theo- retisches Interesse, da sie zunächst wohl das erste Beispiel einer auf die Bacterien beschränkten, speciellen Umfärbung liefert und weil sie ferner die Perspective einer ausgedehnteren Anwendung des in Rede stehenden wichtigen Reagens in der animalen Histologie eröffnet, inso- fern als nunmehr die Möglichkeit gegeben ist, das Jod auf indirectem Wege auch an solche Substanzen zu binden, mit welchen es sich direct nicht verbinden lässt. Der praktische Werth der neuen Methode ist vorläufig darauf beschränkt, die photographische Aufnahme der Bacillen (Lepra- und Tuberkelbacillen) zu erleichtern und zu verbessern. Die technische Procedur, um die erwähnte Doppelfärbung zu er- halten, gestaltet sich, nach Unna's Ermittlungen für Lepraschnitte, folgendermaassen : 1) Färbung in wässeriger Boraxmethylenblaulösung (1:1: 100): 5 Minuten. 2) Abspülen der Schnitte in Wasser. 3) Jodirung in einem Schälchen öprocentiger JKa-Lösung mit Zusatz eines Jodkrystalles : 5 Minuten. 4) Abspülen in absolutem Alkohol bis zur Abgabe einer blauen Wolke. 5) Differenzirung in Kreosol, je nach der Stärke der Färbung einige Secunden bis eine halbe Minute. 6) Fixirung in rectificirtem Terpentinöl. 7) Montirung in Balsam. Um die Methode der „Jodablösung des Methylenblaus" allgemein auf alle möglichen Jod-Methylenblaufärbungen auszudehnen, bei denen der Ersatz der blauen Farbe durch die braune von Vortheil sein könnte, bedarf es eines anderen Differenzirungsmittels als des Kreosols, da die- ses die Umfärbung nur an den (Lepra- und Tuberkel-) Bacillen und einigen anderen Substanzen (Keratin, Fibrin), welche eine ähnlich starke Affinität zu dem an Methylenblau gebundenen Jod, wie der Leib der VIII, 3. Referate und Besprechungen. 407 genannten Bacillen besitzen, bewirkt, an anderen Substanzen aber das Jod gleichzeitig mit dem Methylenblau auszieht. Als ein solches, dieser allgemeinen Anwendung der Jodablösungsmethode dienendes Mittel erwies sich die Essigsäure. Das ganze Verfahren ist dann folgendes: 1) bis 4) wie bei dem Verfahren für Lepraschnitte. 5) Differenzirung in einer Mischung von gleichen Theilen Eis- essig, Alkohol absolutus und Aether im Schälchen bis zur gewünschten Helligkeit, etwa 10 bis 60 Secunden. 6) Härten und Glätten der erweichten Schnitte durch Eintauchen in absoluten Alkohol. 7) Fixirung der Jodirung in rectificirtem Terpentinöl. 8) Montirung in Kolophonium-Terpentinölbalsam. Es steht nach Verf. zu erwarten, dass die Methode der Methylen- blau-Jod-Ablösung noch mancher werthvoUer Modificationen fähig sein werde. So hat Unna schon jetzt unter anderem gefunden, dass, wenn auch die Entfärbung in Essigsäure fortgelassen wird und die Schnitte lediglich in Alkohol absolutus, also unvollkommen (so lange, bis der Schnitt an einigen Stellen farblos wird), entfärbt und dann sofort in Terpentinöl gebracht werden, eine vorzügliche positive, blaue Färbung der gesammten Lymphcapillaren der Haut zu Stande kommt, ähnlich wie sonst nach Imprägnationen mit Silber- oder Goldsalzen, aber vollständiger und auf die Lymphräume der gesammten Oberhaut sich erstreckend. Baiimgarten. Bang, B., üeber Rothlauf-Endocarditis bei Schweinen (Deutsche Zeitschr. f Thiermed u. vergl. Pathol. Bd. XVIII, H. 1 p. 27—43 m 1 Tfl.). Verf beobachtete wiederholt Fälle von hochgradig obturirender, verrucöser Endocarditis valvularis bei Schweinen. Bei der Durchmuste- rung von Deckglaspräparaten, die von den weichen, oberflächlichen throm- benartigen Lagen derartiger Vegetationen hergestellt waren, fand Verf. eine grosse Menge feiner Bacillen und feiner gebogener Fäden, die sich mit alkalischer Methylenblaulösung, mit Gentianaviolett und namentlich nach der GEAM'schen Methode leicht färbten. Senkrechte Schnitte durch die verdickte Klappe gaben nach Gkam sehr schöne Bilder. Schon mit dem blossen Auge sah man dicht an der Oberfläche der Klappe einen breiten tiefblauen Saum, welcher sich gegen das (mit Carmin rothgefärbte) Grundgewebe scharf abzeichnete. Bei Oelimmersion enthüllte sich das Blaue als eine Reincultur der oben erwähnten feinen Bacillen und Fäd- chen. Es zeigte sich, dass der blaue Saum nicht ganz an die Oberfläche 408 Referate und Besprechungen. VIII, 3. der Vegetation reichte, sondern dass ein ganz schmaler Saum bacillen- armer, fast homogener Thrombeumasse den Bacillenschwarm bedeckte und denselben somit gegen den Blutstrom schützte. Die Form und Grösse dieser Bacillen und ihr Benehmen Farbstoffen gegenüber stimmte mit den entsprechenden Verhältnissen der Rothlaufbacillen überein. Zum grossen Theil traten die Endocarditisbacterien zwar als Fädchen auf, aber die Rothlaufbacillen wachsen ja auch in Culturen zu Fädchen aus. Mit kleinen Stückchen der weichen Thrombenmasse endocarditischer Vegetationen hat Verf. Mäuse subcutan geimpft und hat im Blute, in der Milz, sowie in anderen Organen derselben immer Rothlaufbacillen in grosser Menge gefunden. Stichculturen in Gelatine, aus solchen Mäuse- organen hergestellt, zeigten das bekannte schöne Bild einer glasbürsten- ähnlichen Vegetation. Auch auf Agar und in Bouillon wuchsen die von Endocarditis stammenden Bacillen ganz wie solche des acuten Schweine- rothlaufes. Es konnte daher kaum ein Zweifel darüber walten, dass die Schweine-Endocarditis eine chronische Form des Schweine-Rothlaufes sei. — Schliesslich bemerkt Verf. noch, er habe einige Fälle von Schweine- Endocarditis gesehen, in welchen die Erkrankung nicht durch Rothlauf- bacillen, sondern durch Mikrokokken hervorgerufen war. Dieselben lagen in ähnlicher Weise und in ebenso grosser Menge wie die Rothlautbacillen in den Thrombenlagen der verdickten Klappen; sie färbten sich nach Gkam sehr gut. Sie waren verhältnissmässig gross und bildeten in zwei Fällen an vielen Stellen schöne Ketten, während die Streptococcus-Form natürlich an solchen Stellen, an welchen die Anhäufung sehr gross war, nicht immer deutlich zu erkennen war. In einem dritten Falle sah Verf. ausser grösseren unregelmässigen Anhäufungen nur kurze Ketten. Nörner {Dorothecnthal). jD. Botanisches, m Humphrey, J. E., Notes on technique II (Botan. Gazette 1891, p. 71, 72). Verf. empfiehlt für das Studium von Schwärmsporen, von Algen und Pilzen, insbesondere um Zahl und Insertion der Cilien genau feststellen zu können, anstatt der mitunter Schrumpfungen und Verzerrungen her- vorrufenden Jodlösung als Fixirungsmittel einprocentige Ueberosraium- säure und als Färbemittel Hanstein's Rosanilinviolett (Fuchsin- und Methylviolett zu gleichen Theilen) in 90procentigem Alkohol. Als Probe- VIII, 3. Referate und Besprechungen. 409 object führt Verf. die Zoosporen von Achlya an, bei denen sich Cornu's und Haetog's Angabe, dass die Zoosporen beim Austritt aus dem Zoosporangium mit Cilien versehen seien, im Gegensatz. zu der Dar- stellung von De Baey und Zopf leicht demonstriren lässt. L. Klein {Freiburg i. B.). Dangeard, P. A., Recherches histologiques sur les Cham- pignons (Le Botaniste 2 ser., 1890, p. 63 — 149 av. 4 plches.). Die Pilze, um die es sicli hier handelt, sind fast ausschliesslich Pliycomyceten, die zu untersuchenden Organe Sexualorgaue, Sporangien und Sporen, und ihre Kernverhältnisse. Die üntersuchungstechnik ist im allgemeinen die in Stkasbuegeb's Prakticum mitgetheilte ; für den Nachweis der Kerne in reifen Oosporen, da wo kein anderes Reagens eindringen konnte , erwies sich Boraxcarmin allein als tauglich *, doch mussten die Objecte über eine Woche darin liegen. Weshalb Verf. bei der Beobachtung so gefärbter Objecte in Glycerin das „klassische Ver- fahren", die Anwendung von stark verdünntem Glycerin, das sich an der Luft conceutrirt, als „fort ennuyeux" bezeichnet, ist Ref. nicht recht verständlich; wenn mau sich gewöhnt, die in verdünntes Glycerin gebrachten Objecte jeweils erst nach 24 Stunden zu untersuchen, ist die Sache so einfach wie möglich ; und die vom Verf. als „weit be- quemer" vorgeschlagene successive Entwässerung in Alkohol, um dann direct in gewöhnlichem Glycerin oder besser in Nelkenöl oder Canada- balsam beobachten zu können, erfordert, wenn sie gründlich sein soll, auch Zeit, vor allem bei Oosporen und Cysten, welche, falls man nicht zahlreiche Misserfolge erleben will, 24 Stunden in TOproceutigem Alkohol liegen sollen, bevor sie in absoluten kommen. L. Klein (Freiburg i. B.) Graziani, A., Des reactifs utilises pour l'etude micro- scopique des Champignons (Bull, de la Soc. mycol. de France t. VII, 1891, p. 189 ff.). Enthält der Aufsatz auch nichts Neues, sondern nur Angaben aus den Lehrbüchern der mikroskopischen Technik und einer Anzahl nicht speciell genannter Aufsätze in Fachjournalen, so möge doch auch in vorliegender Zeitschrift auf denselben als eine, brauchbare Zusammen- stellung der wichtigsten Reagentien und Reactionen für mikroskopische Untersuchung ausdrücklich hingewiesen werden. Bei vielen Reagentien *) Vgl. das Verfahren von Klebahn; referirt in dieser Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 252. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie VIII, 3. 27 410 Referate und Besprecliungen. YlII, 3. sind kurze Recepte zur Bereitung derselben sowie für die Ausführung der Reaction an bestimmten Objeeten gegeben. L. Klein {Freihurg i. B.). Bastit, E., Recherches anatomiques et pliysiologiquos sur la tige et la feuille des mousses (Rev. gen. de Bot. t. III, 1891, no. 30—35). Bei Polytrichum juniperinum (und anderen Laubmoosen) ist in einem frischen, noch nicht mit Reagentien behandelten Stämmchen die pericyklische Zone von der Rinde nur durch den starken Amylongehalt ihrer Zellen zu unterscheiden; die Grenze der beiden Gewebe ist wenig deutlich und nur durch ein sinnreiches Färbeverfahren, das gewiss in vielen anderen Fällen ähnlich günstige Resultate liefert, mit Sicherheit festzustellen. Lässt man durch ein beblättertes Moos- stämmchen concentrirte Tanninlösung aufsaugen und legt man dann Querschnitte durch ein solches Stämmchen in Cougorothlösung, so färbt dieses Reagens zunächst die ganzen Schnitte, aber das Tannin fixirt überall da, wo es in die Gewebe eingedrungen ist, eine grössere Menge Farbstoff. Die Schnitte werden sodann in Natron-Eau de Javelle, dann auf ungefähr eine Minute in Kalilauge gebracht, was hinreicht, um den Zellinhalt zum Verschwinden zu bringen. Die eiligst gewachsenen Schnitte werden hierauf durch eine Phosphorlösung gezogen und neh- men sofort eine blaue Farbe an. Durch Eintauchen in absoluten Alko- hol lässt sich die Blaufärbung mit Ausnahme der Parthien, welche Tannin aufgenommen haben, wieder aufheben, wobei man, um gänzliche Entfärbung zu verhüten, den Alkohol freilich nicht allzulange einwirken lassen dai'f; man soll die Schnitte aus dem Alkohol nehmen, wenn die Rinde eine orangegelbe Farbe annimmt. Die Schnitte kommen nun in Nelkenöl und lassen sich in Canadabalsam einschliessen. — Ein so be- handelter Schnitt lässt an der Peripherie des Centralcylinders die blau gefärbte pericyklische Zone scharf von dem Rindenparenchym unter- scheiden. Geht der Schnitt durch die blättertragende Parthie des Stämmchens, so beben sich die blau gefärbten Blattspurstränge gleich- falls scharf von dem blassgefärbten Rindengewebe ab. Bei der speciell studirten Art ist das Pericykel aus drei Zellschichten zusammengesetzt; die beiden innersten, die im frischen Zustande mit Stärkekörnchen voll- gestopft sind, blieben ungefärbt, während die äusserste Schicht, die im frischen Zustande einen weniger stark lichtbrechenden Inhalt führt, von den beiden anderen durcli ihre Blaufärbung verschieden ist. L. Klein {Freiburg i. BX VIII, 3. Referate und Besprechungen. 411 Bredow, H., Beiträge zur Kenntniss der Cliromatophoren (Pkingsheim's Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXII, p. 348—414). Für den Nachweis der Chromatoplioren in den Kotyledonen reifer Samen von Lupinus (aber auch anderer Pflanzen) empfiehlt Verf., da die Massen von Aleuronkörnern, Stärke und Oel, mit welchen die Zellen erfüllt sind, eine directe Beobachtung nicht zulassen, folgen- des Verfahren. Möglichst dünne Schnitte werden erst mit absolutem Alkohol und dann mit Aether entfettet, sodann gelinde erwärmt, um jeglichen Aether zu verjagen , und dann in dickes Glycerin eingelegt. Nun stellten sich die eingeschrumpften Chlorophyllkörper deutlich als meist längliche, seltener runde, nicht über 0'5 {j, grosse, blasse, nicht glänzende, sondern matte Gebilde dar, an denen auch noch eine Structur zu erkennen war. Bei Zusatz von alkoholischer Jodlösung zum Glycerin färbten sie sich nicht gelb oder gar blau, sondern deutlich braun, wo- durch ihre Proteinnatur erwiesen war. Härtet man zarte Schnitte mehrere Tage in concentrirter Pikrinsäurelösung, in der sich aber noch ungelöste Krystalle befinden müssen, und untersucht dann dieselben in Oel oder Gly- cerin, ohne vorher die gelbe Farbe durch Auswaschen entfernt zu haben, so werden ebenfalls die kleinen Chromatophoren gut sichtbar. Da auch die Aleuronkörner und die schmalen Plasmastreifen von der Pikrinsäure gelb gefärbt sind, so heben sich diese kleinen Gebilde von den Aleuron- körnern , denen sie auch aufgelagert sind , als gelbem Untergründe mit ihren helleren und dunkleren Structurparthien gut ab. Wäscht man ein mit Pikrinsäure mehrere Tage gehärtetes Präparat sehr gut mit Wasser aus und färbt dann mit Hämatoxylinalaun, so nehmen die Chloro- phyllkörper eine dunklere Farbe an als ihre Umgebung. Bringt man nicht zu dünne Schnitte, welche man vorher mit Alkohol und Aether entfettet hatte, in concentrirte Schwefelsäure und untersucht, so findet man, dass sofort die Aleuronkörner gelöst werden. Wenn nach ganz kurzer Zeit, sobald die Zellmembran anfängt undeutlich zu werden, das Präparat schnell mit Wasser ausgewaschen, dann mit Ueberosmiumsäure gehärtet und mit Hämatoxylin-Alann gefärbt wird, so ist das Aleuron vollständig weggelöst, und die Chromatophoren sind, wenn auch ge- quollen , so doch als dunkler gefärbte Gebilde zu erkennen , in denen auch noch die einzelnen Parthien des Stroma zu unterscheiden sind. — Bei Pisum sativum (grüne Markerbse) erwiesen sich Schabepräparate besser als Schnittpräparate, weil dabei der Zelliuhalt herausfällt und so einzeln liegende Chromatophoren besser sichtbar werden 5 in concen- trirter Bromkaliumlösung wird die grosskörnige Stärke vollkommen ge- löst, während die Chromatophoren intact bleiben und nun sehr gut und 27* 412 Referate und Besprechungen. VIII, 3. deutlich mit gelblichgrüner Farbe zu erkennen sind ; bei der gelben Erbse sind die Chromatophoren , weil von viel blasserer Farbe, schwieriger zu erkennen. — Für Robinia pseudacacia (voll Aleuron, ohne Stärke) wurde als Beobachtungsflüssigkeit Bromkaliumlösung und dickes Glycerin angewendet, und, bei hoher Einstellung, concentrirte Pikrinsäurelosung zufliessen gelassen, weil sich die Chromatophoren von der gelben Farbe sehr gut abheben; bei Cucurbita Pepo genügt Glycerin mit Jod, noch besser ist concentrirte Bromkaliumlösung, desgleichen bei Cacyle aqua- tilis, wobei auch Ueberosmiumsäurelösung geeignet war ; bei Acer cra- taegifolium ist für die sehr kleinen (0-2 bis O'S |Jt grossen) Chromato- phoren dickes Glycerin mit Jod am besten; bei Ipomoea splendens: Pikrinsäure und auch Oel ; bei Pinus austriaca : dickes Glycerin mit Jod oder Ueberosmiumsäure mit Jod. Bei der Keimung der Samen quellen die Chlorophyllkörper wieder auf und vermehren sich sehr rasch durch eine meist unregelmässige Vieltheilung oder Spaltung, so dass die Zellen mit kleinen, gerinnsel- artigen Körperchen erfüllt sind, die man früher für Mikrosomen hielt. Zur Beobachtung dieser Vorgänge erwies sich (bei Lupinus Intens) Gly- cerin am geeignetsten, das, nur klarer, die gleichen Bilder gab wie Oel, concentrirte Chlornatrium- und Brorakaliumlösung, concentrirte Pikrin- säure imd Ueberosmiumsäurelösung. Bei Pisum sativum beeinträchtigten die grossen Stärkeköruer die Beobachtung in Glycerin zu stark , Verf. löste darum die Stärke durch Einlegen der Objecte in concentrirte Bromkaliumlösung, brachte dann einen Tropfen wässerige Fuchsinlösung ans Object, Hess dasselbe eine halbe Stunde darin liegen und wusch dann mit concentrirter Bromkaliumlösung gut aus, wobei die Chromato- phoren, schön roth gefärbt, zurückblieben. L. Klein {Freiburg i. B.). Wakker, J. H., Ein neuer Inhaltskörper der Pflanzenzelle (Pkingsheim's Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXIII, 1891, p. 1—12). Im peripheren Gewebe und besonders in der Epidermis alter Knol- len der kleinen Amaryllidee Tecophilea cyanocrocus fand Verf. zumeist in der Einzahl einen sehr dünnen (ca. 4 \}) Faden von wechselnder Länge (ca. 60 |jl), der an beiden Enden fein zugespitzt und bald gerade oder leise geschlängelt, bald auch mannigfach gekrümmt ist. In den Zellen der Blattscheiden ist dieser Faden immer länger und dünner (nie mehr als ca. 1 [i breit). Er lagert sich während des Wachsthums der Knolle im Frühling in den oberflächlichen Zellen derselben ab und verschwindet im nächsten Winter und Frühling zu gleicher Zeit mit den Reservestoffen, vielleicht auch etwas früher. Dieser neue Körper, den VIII; 3. Referate und Besprccliuiigen. 413 sein Entdecker auf den Namen Rhabdoid tauft, ist vermutblich ein aus eiweissartigen Stoffen bestehendes Product des Plasmas; es scheint hinsichtlich der Gestalt ziemliche Aehnlichkeit mit den von Mikosch ' in den Epidermiszellen von Oncidium microchilum entdeckten, eiweiss- artigen Inhaltskörpern zu haben , nicht aber hinsichtlich der mikro- chemischen Reactionen. Es ist löslich in lOprocentiger Salpeter- und anderen Salzlösungen, dergleichen in Jodjodkaliumlösung, wird aber durch alkoholische Jod- oder Sublimatlösung und durch blossen Alkohol unlöslich gemacht; so fixirt wird es durch Jodlösungen (auch Jodjodkalium) gelb, durch lOprocentige eosinhaltige Salpeterlösung deutlich roth und in wässerigem Anilinblau schön blau gefärbt. Derartige Präparate, seit zwei Jahren in Glycerin aufbewahrt, haben bis jetzt noch nichts an Deutlichkeit eingebüsst. Dagegen versagt sowohl an lebendem wie fixirtem Material die Xantoprotein-, die MiLLOs'sche und die Tkommer- sche Reaction, die ja auch sonst vielfach unzuverlässig sind ; es zeigte sich dabei nur, dass die Rhabdoide in Salpetersäure ebensowenig löslich waren wie in salpetersauren Salzen. Lässt man Kalilauge einwirken, so zieht sich das Rhabdoid zurück, schlängelt sich, quillt bedeutend und schwindet schliesslich völlig, indem es sich löst ; die Lösung schreitet oft regelmässig und langsam von einem Ende bis zum anderen fort ; ähnlich wie Kalilauge wirkte auch Ammoniak. L. Klein {Freiburg i. B.). ChauTeaud, L. G., Recherches embryogeniques sur l'appa- reil lactif^re des Euphorbiacees, Urticacees, Apo- cynees et Asclepiadees (Ann. des sc. nat. Botanique, ser. 7, t. XIV, 1891; — 161 pp. 8« av. 8 plches.). Das erste Capitel dieser wichtigen Abhandlung ist ausschliesslich der Untersuchungstechnik gewidmet, die auf 9 Seiten eingehend mit- getheilt wird, wofür dem Verf. der Dank aller Mikroskopiker um so gewisser ist, als er uns hier mit einer Art Ei des Columbus beschenkt, mit zwei ebenso einfachen wie praktischen und handlichen Apparaten. Um die Milchsaftgefässe vollkommen studiren zu können, muss man nothwendig die zur Untersuchung bestimmten Pflanzentheile besonders präpariren : Vogel isolirte die Schläuche durch Maceration oder Kochen in Wasser oder verdünnten Säuren, Hanstein machte die Blätter durch Einlegen in Kalilauge durchscheinend, wozu, nach des Ref. Erfahrungen, ') MiKoson, C, lieber ein neues Vorkommens geformten Eiweisses (Ber. d. Deutsclien Bot. Gesellscli. Bd. VIII, 1890, H. 1 p. 33; cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 265). 414 Referate und Besprechungen. VIII, 3. sich Cbloralhydrat noch besser eignet, Schmalhausen schnitt und rei- nigte die Schnitte erst mit dem Pinsel, dann durch successives Schwen- ken in Aether, Kalilauge und Essigsäure, Schulleeus verfuhr ebenso, bisweilen erhitzte er auch die Schnitte auf dem Objectträger in einem Tropfen Kalilauge, presste sie dann leicht mit dem Deckglas und erhielt so, aber nur ein einzig Mal, Resultate, die er als wunderbar bezeichnet. Die Macerationsverfahren , besonders das mit verdünnter, heisser Chromsäurelösung, bieten gewisse Vortheile , wenn es sich nur darum handelt, den ganzen Verlauf der Verzweigung kennen zu lernen, für die Kenntniss der Vertheilung in der Pflanze und für die Bestimmung ihres Entstehungsortes versagt es natürlich, dafür sind nur Schnitte zu gebrauchen , die für feine Details durchaus dünn und rein sein müssen. Zuerst versuchte Verf. Natron - Eau de Javelle , um das Plasma, und Kalilauge, um die Kerne zu entfernen ; dabei wurden aber die Schnitte durch die Kalilauge so durchsichtig, dass sie, namentlich wenn sie klein waren, sich aus der Kalilauge nicht mehr herausfischen Hessen. Durchaus befriedigende Resultate erhielt Verf. nun auf folgen- dem Wege: In die ca. 1 cm weite Röhre eines kleinen Trichters (dessen Herstellung aus einem Glasröhrchen sogar genau beschrieben ist !) wird unten ein sehr feinmaschiges Platinnetz eingeschmolzen , der Trichter auf einen Glaskolben gesetzt und nun der Reihe nach zuerst die in Alkohol suspendirten Schnitte, dann Aether zur Lösung der Fette, hierauf Alkohol zum Waschen, Eau de Javelle, Kalilauge, mit Essig- säure angesäuertes Wasser, Bismarckbraun- Lösung zur Färbung der Membranen und endlich Alkohol zur letzten Waschung eingegossen. Dann stülpt man den Trichter über ein Uhrglas und schwemmt die Schnitte durch ein Paar auf die Unterseite des Filters gegossene Tropfen Alkohol heraus. Dieses ebenso einfache wie sinnreiche Verfahren um- geht so den langweiligen Transport der Schnitte aus einem Reagens ins andere, schliesst den Verlust von Schnitten nahezu aus und ist gewiss für viele andere Fälle höchst empfehlenswerth. Wendet man statt Platin- ein Messingnetz an, so ist natürlich die Dauer des Apparates eine ziemlich beschränkte. Um zu verhüten , dass sehr kleine , durch die Kalilauge erweichte Schnitte sich falten und dann durch die feinen Netzmaschen gespült werden, füllt Verf. auf das Netz eine 8 bis 10 mm hohe Schicht Glaspulver, die durch ein Paar Tropfen Wasser oder Al- kohol festgelegt wird, dann wird der die Präparate enthaltende Alkohol aufgegossen und hierauf eine zweite, 4 bis 5 mm hohe Schicht Glas- pulver nachgefüllt. Das Glaspulver bietet ausserdem den Vortheil lang- VIII, 3. Referate und Eesprechungen. 415 sanieren Filtrirens, sparsamere Verwendung der Reagentien, es verhindert das Aufsteigen einzelner Schnitte, das Austrocknen, wenn die Reagentien nicht schnell genug auf einander folgen und es gestattet endlich die Verwendung stärkerer und darum widerstandsfähigerer Netze, die auch der Röhre nicht so vollkommen eingeschmolzen sein müssen. Das im Mörser zerstossene Glaspulver befreit man dui'ch ein etwas gröberes Sieb von zu grossen Körnchen, durch Waschen in Wasser und Decan- tiren von zu kleinen. Gerade Glaspulver verwendete der Verf., weil es durch die zu verwendenden Reagentien nicht angegriffen und vor allem, weil es durch Waschen mit Alkohol wieder völlig von den angewandten Farbstoflen befreit werden kann, was unumgänglich nöthig ist, um Ver- luste an Präparaten zu vermeiden. Dieser Apparat , den Verf. mit dem schönklingenden Namen M i - croplyne (von tiXuvco, ich wasche) belegt, bietet aber auch grosse Vortheile, wenn es sich um grosse und dünne Schnitte handelt, hier verhütet es das so lästige Rollen und Falten der Schnitte, das beim Transport von einem Reagens ins andere so leicht eintritt. Man braucht nur den Trichter höher mit dem Glaspulver anzufüllen, um so eine ge- nügend grosse Fläche zu erhalten, auf welcher sich die Schnitte voll- kommen ausbreiten können. Die durch den Alkohol bewirkten Con- tractionen und Kräuselungen solcher Schnitte lassen sich durch Beigabe einiger Tropfen Eau de Javelle aufheben, bevor man eine zweite, sehr dünne Schicht Glaspulver aufschüttet. Um des weiteren die in Uhrgläser gespülten Schnitte zu verarbeiten, hat Verf. einen zweiten Apparat ersonnen, ein ca. 30 cm langes Tisch- chen mit sechs Löchern zur Aufnahme der Gläser ; an einer Kante läuft in einem Falz eine Lupe mit Stativ zum Betrachten der Gläser, unter der Platte befindet sich ein drehbarer Spiegel, um die Schalen zu be- leuchten und zwar je nachdem die Präparate farblos oder gefärbt sind, mit seiner schwarzen oder weissen Seite. Der Tisch dieses Gestells besitzt ausserdem fünf kleine quadratische Löcher (von der Grösse der zu verwendenden Deckgläser), über welche die zur Aufnahme der Prä- parate bestimmten Objectträger gelegt werden. Der Spiegel besteht aus einer berussten Glasscheibe, welche mit der berussten Seite auf die Folienseite einer gewöhnlichen gleich grossen Spiegelscheibe gelegt ist; so construirt, wird er durch vergossene Reagentien nicht verdorben. Alle anderen Theile bestehen, um gleichfalls möglichst wenig angegriffen zu werden, aus vernickeltem Kupfer. Dieses sinnreiche Instrument, das auch als Präparirlupe dienen kann, hat der Verf. Microzete (von l^rj-cso), ich suche) getauft. L. Klein {Freiburg i. B.). 416 Kefcrate und BesprecTiungen. VIII, ^. Mineralogisch - Geologisches, Beferent: Professor Dr. Arthur Wichmann in UtrecJit. Kinue, F., Ueber eine einfache Methode, den Charakter der Doppelbrechung im convergenten .polari- sirten Lichte zu bestimmen (Neues Jahrb. f. Mineral. Bd. II, 1891, p. 21—27). Die allgemein übliche Methode der Bestimmung des Charakters der Doppelbrechung bei der Untersuchung von Krystallplättchen im con- vergenten polarisirten Lichte beruht bekanntlich auf der Einschaltung des Viertelundulationsglimmerblättchens. Dieselbe versagt jedoch sehr häufig bei mikroskopischen Objecten, da alsdann oft die schwarzen Punkte ausbleiben, deren Lage zur Bestimmung des Charakters der Doppelbrechung benutzt wird. — Der Verf. macht nun den Vorschlag, statt der Gliramerlamelle ein Gypsblättchen vom Roth I. Ordnung ein- zuschieben, wodurch folgende Erscheinungen veranlasst werden: 1) Optisch-einachsige Krystalle. Beim Einschalten des Gypsblättcbens wird das schwarze Kreuz der Interferenzfigur durch ein rothes ersetzt. Die Ringe des Bildes zerfallen in Ringstücke, und zwar erweitern sich bei positiven Krystallen diejenigen im positiven Qua- dranten (rechts oben), bei negativen diejenigen im negativen Quadranten (links oben). Besonders charakteristisch sind jedoch die grossen Farben- verschiedenheiten in den abwechselnden Quadranten. An der Kreuzungs- stelle der beiden Kreuzesarme erblickt man die Quadranten abwechselnd in blauen und gelben Tönen. Die Doppelbrechung ist positiv, wenn das Blau im positiven Quadranten liegt, dagegen negativ, wenn das Blau im negativen Quadranten liegt. Diese Farbenverschiedenheiten setzen sich auch auf die Ringstücke fort, und zwar besitzen bei positiven Krystallen die Ringstücke des positiven, bei negativen die des negativen Quadranten die höhere Interferenzfarbe. Die Theile des ersten Ringes erscheinen in den der niedrigen Farbentöne schwarz oder fast schwarz. Da die obengenannte Art der Bestimmung nicht an das Auftreten des Ringes gebunden ist, so versagt sie auch weder bei sehr dünnen Platten, noch bei schwach doppelbrechenden Krystallen. 2) Optisch-zweiachsige Krystalle. Bei der Beobachtung des diagonal gestellten Interferenzbildes um die erste Mittellinie gewahrt man in der Mitte des Gesichtsfeldes ein grösseres Feld mit bestimmter Interferenzfarbe. Mit dem Einschieben des Gypsblättcbens vom Roth VIII, 3. Referate und Besprechungen. 417 I. Ordiiimg ändert sich dieser Farbenton. Derselbe geht abermals in einen anderen über beim Drehen des Präparates um 90" in die zweite Diagonalstellung, Erscheint nun in der Mitte des Gesichtsfeldes der höhere Polarisationston, wenn die Ebene der optischen Achsen senkrecht auf der Achse c des Gypses steht, so ist die Doppelbrechung positiv, erscheint er dagegen in der Parallelstellung der optischen Achsen mit der c-Achse des Gypses, so ist die Doppelbrechung negativ. Diese Art der Ermittelung ist an keine bestimmte Grösse des Achsenwinkels ge- bunden, die Achsen brauchen überhaupt nicht im Gesichtsfelde zu er- scheinen. Ist das letztere dennoch der Fall, so sind noch einige chara- kteristische Veränderungen des Interfereuzbildes wahrzunehmen, die sich gleichfalls zur Bestimmung des Charakters der Doppelbrechung verwen- den lassen. Man bringt zu diesem Zwecke die Platte in die Normal- stellung, worauf beim Einschalten des Gypsblättchens zu beobachten ist eine Erweiterung resp. Verengerung der Interferenzcurven , sowie eine verschiedene Färbung derselben in den abwechselnden Quadranten, ganz entsprechend den Erscheinungen bei optisch-einachsigen Krystallen. Besonders auffallend ist auch die Färbung der Curven, welche sich den Spuren der optischen Achsen zunächst anschliessen. Es wird nämlich ein Zerfallen in schwärzliche und lebhaft gefärbte Theilstücke beob- achtet. Die schwarzen liegen wie die schwarzen Punkte, welche man bei Einschaltung der Viertelundulationsglimmerlamelle erhält, sie sind aber in Folge ihrer bedeutenden Grösse deutlicher in ihrer Lage be- stimmt als die dunklen Flecke, welche das Glimmerblatt liefert. Renartl, R., Les concretions de phosphate de chaux dra- guees au large du Cap de Bonne-Esperance (Bull. de l'Acad. roy. de Belgique, Bruxelles, 3, t. XVIII, 1889, p. 164—660). Auf der Fahrt vom Cap der guten Hoffnung nach der Insel Marion wurden von Seiten der Challenger-Expedition an den Tagen des 17., 18. und 19, December 1873 Dredschungen vorgenommen. Unter dem dem Meeresgrunde entnommenen Material befanden sich jedesmal eine Anzahl Knollen, welche einen Durchmesser von 1 bis 2 cm, selten bis 4 cm besassen und sich durch einen beträchtlichen Gehalt an phosphorsaurem Kalk auszeichneten. Die mikroskopische Untersuchung der genannten Concretionen lehrte zunächst, dass die Beschaffenheit derselben eine Abhängigkeit von derjenigen des Sedimentes, dem sie entstammten, aufweist. — Am 19. December wurde in einer Tiefe von 1900 Faden Globigerinen- Schlamm angetroffen. Auch die Hauptmasse der Knollen 418 Referate und Besprechungen. VIII, 3. setzt sich aus Foraminiferen zusammen, welche jedoch nicht allein durch das Calciumphosphat verkittet werden, sondern das Letztere erfüllt zu- gleich die Kammern, wie auch die Schalen derselben einer Umwandlung in das Phosphat anheimgefallen sind. Die Substanz erscheint im durch- fallenden Lichte gelblichbraun und trübe in Folge der eingestreuten massenhaften, äusserst winzigen Einschlüsse. An den Rändern, sowie im Innern der Formaniferen-Schalen ist sie dagegen honiggelb von Farbe und weist häufig eine radial-faserige Structur auf. Die Proben der ersten beiden Stationen stammen aus nur 98 resp. 150 Faden Tiefe. Dieselben enthalten neben zahlreichen Foraminiferen noch eine grosse Menge von Mineralfragmenten, welche den Gesteinen des unfernen afrikanischen Contiuentes entstammen, so namentlich Körner von Quarz, zersetztem Feldspath, Glaukonit, Granat, Biotit und Horn- blende. Die Knollen stellen hier Gemenge der gleichen Bestandtheile dar, welche durch das Calciumphosphat verkittet worden sind. Vergleicht man die Concretionen mit solchen, die sich in den Ablagerungen ver- schiedener geologischer Formationen vorfinden, so ergiebt sich, dass die Uebereinstimmung eine sehr grosse ist. Der Ursprung der Phosphor- säure ist ausschliesslich in den die Meere bewohnenden Thieren zu suchen. VIII, 3. Neue Literatur. 419 Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Duval, A., I^a technique microscopique et histologique. Paris (Bailiiere) 1891. 16" av. 43 figg. 3 fr. 50. van Heiirck, H., Le microscope, sa construetion, son maniement, la technique microscopique en general; la photomicrographie ; le passe et Tavenir du microscope. 4 i^me ed. Anvers et Bruxelles (Ramlot) 1891. 316 pp. gr. 8", av. 1 piche, et 227 figg. Kircliner, A., Grundriss der Militär-Gesundheitspflege. Braunschweig (Brulin) 1891, Lief. 1. 80 pp. 8". 2 M. Lehmann, K. 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Diese Geschichte ist Lendl mit Pleurosigma passirt ^ Seine Beobachtung, mit welcher er den Irrthum seiner Vorgänger corrigiren zu können glaubt, bleibt weit unter den Anforderungen, welche man an einen Forscher, der mit den neuesten optischen Hilfsmitteln arbeitet, stellen kann. Ich wäre wahrscheinlich gar nicht dazu gekommen, die Angaben Lendl's über Pleurosigma zu kritisiren, wenn ich die Zeiss- schen apochromatischeu Oelimmersionssysteme und Compensations-Ocu- lare nicht gerade an Pleurosigma -Panzern eingehend geprüft und dabei bereits vor längerer Zeit Resultate erzielt hätte, welche auf die Structur dieses Testobjects ein vielleicht neues Licht werfen und mit den Be- hauptungen Lendl's sehr wenig übereinstimmen. Dass der Panzer von Pleurosigma augulatum durch ein rhombisches Muster charakterisirt wäre , ist nicht , wie Lendl glaubt , „ganz sicher und unleugbar", sondern vollkommen falsch ; ein Kern der Wahrheit ist 1) Lendi., A., Eine neue Construction für Mikroskope. (Diese Zeitschr. Bd. VHI, 1891, p. 281—290.) Zeitschr. f. wiss. Milfroskopie VIII, 4. 29 434 Apäthy: Plourosigma angulatum ii. d. LencU'sche Mikroskop. VIII, 4. jedoch in der Aussage von ihm verborgen, dass „die rhombischen Feld- chen" „erhaben gewölbte Kuppeln" besitzen , und dass die Feldchen „eigentlich die Oberflächen kleiner krystallähnlicher Körperchen sind", welche aus dem Kieselpanzer herausfallen können. Ich will es nicht bezweifeln, dass man mit dem Werkzeuge, welches Lendl benutzt hat (eine REiCHERT'sche homogene Immersion ^joo" imd Objectiv No. 2 mit Ocular I und II am oberen Mikroskop), nichts Besseres erreichen kann; ebensowenig bezweifle ich es aber, dass es mit den optischen Hilfsmitteln, welche ich benutzt habe, jedem sehr leicht gelingen wird, zu constatiren, was ich gesehen habe, und sich auch davon zu überzeugen , dass die Angaben von Lendl , zum Theil wenigstens, eine Unmöglichkeit sind. Ich habe ein Apochromat-Objectiv, homogene Immersion von 1'40 numerischer Apertur und 3'0 äquivalenter Brennweite benutzt und dasselbe, ohne Nachtheil für die Helligkeit und Schärfe des Bildes, mit Compensationsocular 18 combinirt. Unvermeid- lich ist es auch , um die Structur von Diatomaceenpanzern überhaupt richtig beurtheilen zu können, polarisirtes Licht anzuwenden. Die Polarisationseinrichtung von Zeiss leistete mir sogar bei den aller- stärksten Vergrösserungen ausgezeichnete Dienste. Im Folgenden werde ich zuerst die Structur von Pleurosigma an- gulatum, wie sie mit den genannten Hilfsmitteln leicht zu eutzifFern ist, beschreiben. Dann werde ich beweisen, dass eine Structur, wie sie Lendl beschreibt, unmöglich ist, und endlich, dass keine andere Structur von Pleurosigma angulatum, als die hier beschriebene und abgebildete, möglich, d. h. mit den augenfälligsten Thatsachen zu vereinigen sei. Die Figuren sind bei 1000-, resp. 2000facher Vergrösserung (letztere auf Millimeterpapier) mittels des AsBE'schen Zeichenapparates gezeichnet. Die Testobjecte sind, trocken eingelegt, von Klönnb und Müller; ich habe solche gewählt, in welchen möglichst grosse und viele zertrümmerte Panzer vorhanden (und mit einigen Pleurosigma balticum vermengt) waren. Jedes Panzerstück von Pleurosigma angulatum besteht aus drei Schichten, das sind a) die äussere Membran (auf der convexen Fläche), b) die Körnchen- oder Krystallschichte, c) die innere Membran (auf der concaven Oberfläche). Die wichtigste, welche dem Panzer sein eigen- thümliches Gepräge verleiht, ist — wahrscheinlich bei allen Diatomaceen — die Krystall- oder Körnchenschichte. Die äusere, sehr dünne Membran ist bräunlichgelb und struc- turlos. Sie zieht über die Mittelrippe des Panzers glatt hinweg (z. B. bei U in Figur 1) und geht an den Seiten in die innere Membran direct I VIII, 4. Apätliy: Pleurosigma angulatnra u. tl. Lendl'sclie Mikroskoi). 435 1. Ein Stück aus der Mitte des Panzers von Pleurosigma angulatum. Bei lOOOfacber Vergrösserung mit Camera nach Abbe gezeichnet. Am. : äussere Membran, resp. alle drei Schichten übereinander. Ü.: Stelle, wo die äussere Membran über die Mittelrippe hinwegzieht. Br. : Bruchlinie der äusseren Mem- bran. Ksch.: Körnchenschichte (resp. Kürnchenschichte und innere Membran übereinander, h. Sj).: horizontale, d. S}).: diagonale Spaltlinien. fZ. AV. ; dia- gonale Körnchenreihe. i. K.: isolirte (in situ gebliebene, oder verschobene) Körnchen. F.: aus der Körnchenschichte herausgebrochenes rhombisches Fenster. L. : Löcher in der Körnchenschichte, durch Herausfallen kleinerer Körnchen- gruppen verursacht. Im.: innere Membran, mit bei jEJ angedeuteten Körnchen- eindrücken. Mr.: Mittelrippe an der Stelle des spindelförmigen Knotens. i. Grl. : innere Grenzlinie der inneren Membran. Sg. : seitliche Grenze der Körnchenschichte. 29* 436 Apäthy: Pleurosigma angulatum u. d. Lendl'sche Mikroskop. VIII, 4. über. Sie ist durch zwei scliräge Furchensysteme resp. Leistchensysteme, welche sich unter 60 (resp. 120) Grad kreuzen und die Hauptachse des Panzers unter 30 Grad treffen, in die unterliegende Körnchenschichte hinelngepresst. Die Furchen oder leistchenförmige Verdickungen, deren Abstand ^/o [i ist, sind sehr schmal und sehr wenig tief, so dass sie nur bei einer sehr genauen Einstellung der convexen Oberfläche des Panzers sichtbar sind; dann erscheinen sie als sehr scharfe gerade, nicht zickzackförmig verlaufende Linien, immer in dunklerer Farbe und einer Breite von höchstens '/s H- ^- Ihi*6 Deutlichkeit wechselt in be- kannter Weise je nach der Richtung der beleuchtenden Strahlen zur Panzerachse. So werden auf der convexen Oberfläche durch ausser- ordentlich feine Linien rhombische Feldcheu begrenzt, deren Längsachse mit der Panzerachse parallel gerichtet ist , die Mitte aber gar nicht emporgewölbt wird. Diese Membran und diese rhombischen Feldchen hat Lendl wahrscheinlich nicht gesehen , wohl aber der von ihm citirte Dancee, welcher von auf der Oberfläche liegenden schiefen Linien spricht, die sich mit den transversalen nicht in derselben Ebene befinden. Es wäre ja ganz erstaunlich und auch keine grosse Empfehlung, wenn Lendl mit seinem Apparat nur die äussere Membran und ihre Zeichnung hätte wahrnehmen können ! Von der Existenz der äusseren Membran kann man sich am leichtesten au Panzern überzeugen, wo dieselbe zum Theil abgesprungen ist. Hier finden wir die Bruchlinie der Membran bald auf, welche Linie einen helleren Theil des Panzers, wo die Membran nicht vorhanden, von einem dunkleren, bräunlicheren trennt, wo die Membran noch da ist. (Figur 1, i?rZ.) Diese beiden Theile des Panzers, mit und ohne äussere Membran, verhalten sich auch im polarisirten Licht verschieden. Das Vorhandensein der äusseren Membran beeinflusst also die polari- sirten Lichtstrahlen. Gelegentlich finden wir Panzer, an welchen stellen- weise nur die äussere Membran vor uns liegt und die Körnchenschicht und innere Membran entfernt ist. Hier sehen wir, dass die Membran, 1) Walirsclieinlieh shid diese Linien nicht Furchen, sondern dünne und niedrige keillörmige Leistchen, solide Fortsätze, Verdickungen der äusseren Membran. Bloss nach dem optischen Effecte so Etwas zu ent- scheiden, bin ich nicht im Stande, und wahrscheinlich auch kein Anderer. Positive Beweise, welche die Frage entscheiden könnten, habe ich für diesen Punkt nicht gefunden. Es giebt aber einen negativen Beweis, nämlich, dass die äussere Membran nach aussen gar keine, den Körnchen entsprechende Unebenheiten wahrnehmen lässt und auch in der Seitenlinie keinen wellen- förmigen optischen Durchschnitt zeigt. VIII, 4. Apätby: Pleurosigmii angulatum ii. d. Lendl'sche Mikroskop. 437 i.Gi-1 von der Fläche betrachtet, für sich allein nicht im Stande ist, das Ge- sichtsfeld bei gekreuzten Nicols merklich aufzuhellen , wohl aber sehen wir, der Membran entsprechend, dort eine schmale helle Linie, wo sie sich an den Seiten des Panzers auf die innere Fläche umbiegt: die Körnchenschichte reicht nämlich nie ganz bis zur Seitenlinie des Panzers. (Figur 1, Su.) Die Körnchenschichte besteht aus einer einzigen Lage dicht aneinander gereihter, beinahe kugeliger Körnchen, welche stark glänzende isodiame- trische Krystalle sind. Die im allgemeinen gleich grossen Körn- chen von ungefähr (ich glaube, genau) Yi (X Durchmesser befinden sich in pa- rallelen Querreihen, welche mit der Längs- achse des Panzers einen Winkel von ge- nau 90" bilden. Die Körnchen der benach- barten Querreihen al- te r n i r e n ganz re- gelmässig mit einan- der. Die Folge dieses Alterni- rens, der glei- chen Grösse und der beinahe ku- geligen, immer iso diametrischen Gestalt der Körn- chen ist, dass sie in dreiEich- t u n g e n ununter- brochene gerade GrLK Körnchenscliicbte und Mittelrippe des Plenrosigma- panzers. Bei 2000facher Vergrösserung mit Camera auf Milli- meterpapier gezeichnet. (Der Durchmesser jedes Körnebens ein Millimeter.) Mr.: Mittelrippe, i. Grh: innere Grenzlinie der inneren Membran. Grl. K.: Beschaffenheit der natürlichen (longitudinalen) Grenz- linie der Körnchenschichte, h. Sp.: horizontale Spalt- linie der Körnebenschichte, z. Br.: zackige Bruch- Ti . , I • 1 1 linie derselben. Reihen bilden, nämlich a) in querer Piichtung, unter 90" zur Längsachse des Panzers, b) in der einen schrägen Richtung unter 30" (resp. 150") zur Längsachse, 438 Apäthy: Pleurosigma angulatum u. d. Lendl'sche Mikroskop. VIII, 4. c) in der anderen schrägen Richtung unter 150" (resp. SO**) zur Längs- achse. (Figur 1, 2 u. 4.) Also bilden die beiden schrägen Richtungen mit einander einen Winkel von genau 60 resp. 120", nur an den beiden Enden der Panzer erleiden diese Richtungen eine gleich zu besprechende Aenderung. Die Köruchenschichte reicht nicht ganz bis zur Mittelrippe 5 in unbeschädigten Panzern hört sie beider- seits in einer Entfernung von nicht ganz 1 [x von der Mittelrippe mit einer gezackten Linie auf. (Figur 1 und 4.) Auch vor der Seiten- linie hört die Körnchenschichte in derselben Entfernung und in derselben Weise auf; aber die überhängenden Seitenstreifen entbehren einer Körnchenschichte doch nicht, in diesen sind die Körnchen jedoch anders geordnet und erinnern mehr an die Anordnung bei Pleurosigma balticum und an die in den ausgezogenen Enden von PI. angulatum. An den beiden Enden (Figur 3) von PI. angulatum ändert sich nämlich die An- ordnung der Körnchen in der Weise, dass sie wohl in Querreihen stehen, aber in den benachbarten Querreihen mit einander nicht alterniren, sondern gleichzeitig auch gerade Längsreihen bilden, wodurch parallele Quer- und Längslinien entstehen , welche einander unter 90" schneiden: ein Verhalten, welches bekannterweise PI. balticum charakterisirt. Man kann also die Structur von PI. angula- Anordnung und Form der Körnchen an einem Panzerende. Bei etwas mehr als 2000- facher Vergrösserung mit Camera gezeichnet. Nur ein Theil der Körnchen eingezeichnet. ÜJi.: Rhom- boederkrystalle. Fr.: Pris- menkrystalle. 3Ir.: Mittel- rippe. tum aus der von PI. balticum durch eine seitliche Verschiebung der Körnchenreihen unter einem Winkel von 27 "/g" ableiten, mit welcher ein Zusammen- rücken der Querreihen Hand in Hand geht ^ (Vgl. Figur 4 mit Figur 5.) 1) Eine Vergleichung von Figur 5 mit Figur 4 erklärt, weshalb eine Ver- schiebung der Körnchenreihen gegen einander mit resultirendem Alterniren der Körnchen nicht genügen würde, um aus der Anordnung der Körnchen bei PI. balticum die bei PI. angulatum entstehen zu lassen. Die Körnchen, welche unzweifelhaft isodiametrisch sind, können in allen drei Reihen nur dann in gleicher Entfernung von einander bleiben , und die drei Reihen mit einander einen Winkel von 60" bilden, wenn die Querreihen nach der Verschiebung in transversaler Richtung, auch in longitudinaler Richtung verschoben, d. h. zu- VIII, 4. Apäthy: Pleurosigma angulatura u. d. LencU'sche Mikroskop. 439 Ausserdem sind die Distanzen der einzelnen Körnchen von einander bei PI, balticum bedeutend grösser als bei PI. angulatum, und gerade des- halb ist die Structur des ersteren viel leichter zu entziffern. — Auch die Gestalt der Körnchen bleibt an den Enden von PI. angulatum nicht unverändert; sie sind nicht mehr isodiametrisch, sondern meist zwei- mal so lang als breit. Nicht selten ist die Längslinie, in welcher diese länglichen Körnchen verlaufen, regelmässig wellig, so dass die Längs- achsen der hintereinander liegenden Körnchen mit einander einen Winkel von 120" bilden. (Figur 3.) In den überhangenden Seitenstreifeu sind die Körnchen, wie gesagt, so wie an den Enden angeordnet; sie bleiben aber isodiametrisch, nur alterniren sie in den parallelen Quer- resp. Längsreihen nicht miteinan- der. Der Seitenstreifen des oberen, gewölbteren Panzerstückes ist blos ein, der des flacheren unteren Panzerstückes drei Körnchen breit. Nicht selten findet man auch in der Mitte des Panzers, nicht nur an den Enden, einzelne gröbere Körnchen und auch ganze Querreihen, welche aus solchen bestehen. Diese Körnchen und diese Querreihen fallen durch ihren stärkeren Glanz leicht auf. Niemals findet man aber solche aus gröberen Körnchen bestehende schräge Reihen: ein Beweis dafür, dass der Grundplan des Panzerbaues bei Pleurosigma eine An- ordnung der Körnchen in Querreiheu ist. Das mikroskopische Projectionsbild der Körnchen scheint ein Kreis zu sein, wodurch aber keineswegs ausgeschlossen ist, dass es in der sammcngeschoben werden. Dass dies in der Tbat geschehen ist, dafür liefert folgende Beobachtung den schlagendsten Beweis. Ich habe das mikroskopische Bild von Pleurosigma bei annähernd 2000facher Vergrösserung mittels des ÄBBE'schen Zeichenapparates auf Millimeterpapier projicirt; dann habe ich die auf der Zeichenfläche entstandene Vergrösserung so geregelt, dass jedes Körn- chen genau in einen Quadratmillimeter hineingepasst hat, und schliesslich habe ich das Papier so gerichtet, dass ein Querstreifen des Panzers (der Zwischen- raum zwischen den queren Körnchenreihen) mit einer dickeren Querlinie des Papiers, mit der Seite eines Quadratcentimeters zusammengefallen ist. Nim habe ich, bei sehr oft und an verschiedenen Stellen wiederholter Zählung, in querer Richtung auf ein Centimeter immer 8 Körnchen zählen können, wogegen in der Längsrichtung immer 9 Körnchenreihen auf ein Centi- meter gekommen sind. Figur 4 zeigt dieses in Figur 2 dargestellte Verhalten 8mal (also im ganzen IßOOOmal) vergrössert: man sieht, dass 8 Körnchen in einer Qiierreihe gerade so viel Raum in der Breite, wie 9 Körnchenreihen in der Länge einnehmen. {AB = AG in Figur 4.) Aus dem Gesagten folgt auch, was die directe Beobachtung bestätigt, dass, wenn der Durchmesser der Körnchen '/a IJ' ist, so müssen sie sich von einander in einer Entfernung von '/s \i befinden. 440 Apäthy: Pleurosigma angulatum u. d. Lendl'sche Mikroskop. VIII, 4. C Mr. -LBr Darstellung der Anordnung der Körnchen. Schematisch bei 16000 facher Vergrösserung AB = AC. Mr.: ]\Iittelrippe. h. Sp.: horizontale Spaltlinie, d. Sp : diagonale Spaltlinie, l. Br.: longitudinale Bruchlinie. S.: ein isodiametrisches und gleichseitiges Sechseck, welches zwi- schen die ki'eisförmigen Territorien der Körnchen hineinzuconstruiren ist. VIII, 4. Apäthy: Pleurosigma angulatum u. d. LencU'sche Mikroskop. 441 That ein Sechseck mit abgestumpften Ecken sei. Sie sind voll- kommen farblos , fallen aber durch ihre sehr starke Lichtbrechung um so mehr auf, da die Zwischenräume, welche sie voneinander trennen, im Trockenpräparat wenigstens , mit Luft gefüllt sind. Wird die Luft durch ein stark lichtbrechendes Medium ersetzt, so wird, da der Con- trast nicht mehr so gross ist, die Structur des Panzers nicht mehr so leicht zu entzitfern sein: deshalb ist Pleurosigma in Balsam einge- schlossen so viel schwieriger als trocken eingelegt. Die Körnchen könnten sich, ihrer beinahe kugeligen Gestalt entsprechend, nur an Punkten berühren ; aber nicht einmal das scheint der Fall zu sein : auch dort trennt sie ein sehr geringer, aber doch merklicher Zwischen- raum von *'s [J- (s. Anmerkuug a. p. 439). Je drei Körnchen, welche ein gleichseitiges Dreieck bilden, schliessen natürlich einen dreieckigen Zwischenraum ein. Diese dreieckigen , immer dunkel erscheinenden Punkte vor und hinter jedem Körnchen bilden die nach vorne und hinten gerichteten Ecken (Spitzen) der scheinbaren sechseckigen Feldchen ; der Zwischenraum von zwei nebeneinander liegenden Körnchen (welcher den Eindruck eines longitudinalen dunkeln Striches macht) repräsentirt die Längsseiten (nicht Langseiten) der Sechsecke, wie sie bisher beschrieben worden und auch in den besten Mikrophotogrammen ^ dargestellt sind. Das ist, nach meiner Ansicht, ein glänzendes Beispiel dafür, wie wenig einerseits die besten Mikrophotogramrae eine directe Beobachtung ersetzen können , und wie hoch anderseits die apochromatischen Ob- jective über den älteren achromatischen stehen , welche alles Sichtbare als eine ebene Flächenzeichnung erscheinen und von der Körperlichkeit der Structurelemente nichts wahrnehmen lassen, wogegen uns ein apo- chroraatisches llomogenimmersionssystem von der Existenz kugeliger Körnchen, als hauptsächlicher Componenten des Panzers von Pleuro- sigma, auf den ersten Blick überzeugt. Andere Beweise für die that- säc bliche Existenz der Körnchen werde ich weiter unten an- führen. Fixirt man die Körnchen im polarisirten Licht bei starker (1500- facher) Vergrösserung zuerst im hellen Gesichtsfelde und dreht man nachher den Analysator, die Körnchen nicht aus dem Auge lassend, so lange, bis das Gesichtsfeld ganz dunkel wird, so erscheinen an der Stelle der Körnchen glänzend weisse Punkte, durch dunkle Zwischenräume von einander getrennt, deren Gesammteindruck dem ') Ich habe mit meinen Resultaten besonders die als Reclame dienenden, also bestmöglichen Mikrophotogramme des ZKiss'schen Specialkatalogs über Apparate für Mikrophotographie von 1888 verglichen. 442 Apdthy: Pleurosigma angulatum u. d. Lendl'sche Mikroskop. VIII, 4. Anordnung der Körnchen, nicht alternirend und alternirend, aber in nicht zusammengeschobenen Querreihen. Si : isodiametrisches, aber nicht gleichseitiges Sechseck ; >% : gleichseitiges, aber nicht isodiametrisches Sechseck. VIII, 4. Apcäthy: Pleurosigma angulatum u. d. LencU'sche Mikroskop. 443 „sechseckigen , chocoladebraunen Gitterwerke" der Autoren entspricht. Die Körnchen sind zwischen gekreuzten Nicols dann am hellsten und glänzendsten, wenn über ihnen die oben beschriebene äussere Membran fehlt. Durch das Vorhandensein der letzteren wird die Doppelbrechung der Körnchen, welche — im Verhältniss zur dünnen, kaum ^jo ^ dicken, durch sie gebildeten Schichte — eine sehr starke zu nennen ist, auf- fallend geschwächt. Daraus schliesse ich, dass auch die äussere Mem- bran des Panzers, aber in Bezug auf die Längsachse des Panzers in einem anderen Sinne doppelbrechend ist. Durch die beschriebene Beschaffenheit und Anordnung der beinahe Ya [i, grossen Körnchen sind die drei Streifensysteme, welche „die Con- turen der sechseckigen Feldchen" bilden sollen , das „chocoladebraune Gitterwerk", vollkommen erklärt. Es ist klar, dass bei verschiedener Beleuchtung bald das eine, bald das andere Streifensystem deutlicher werden muss. Ein Blick auf die schematische Darstellung der Structur von PI. angulatum in Figur 4 erklärt endlich auch die — übrigens durch die neuesten Mikrophotogramme genügend widerlegte — Ueberzcugung mancher Forscher , dass die Querstreifen weiter als die schrägen von einander abstehen (dass die Längsseiten der Sechsecke zu gleicher Zeit auch ihre Langseiten sind). Die ebenfalls sehr dünne innere Membran ist farblos, structurlos und durchsichtiger als die äussere; sie ist nicht so spröde, sondern elastischer und zäher. Solche Stellen an den Panzern, wo sie nicht vorhanden wäre , sind sehr selten. Sie schmiegt sich der Körnchen- schichte eng an und folgt den Unebenheiten derselben, so dass man an 6. Schematischer Panzerdurchschnitt bei IGOOOfacher Vergrösserung in diagonaler Richtung gedacht, xhn.: äussere, Im.: innere Membran. Ksch.: Körnchenschichte. 7^..- Furchen, resp. L.: Leistchen der Am. xy: die Ebene, welche für Mikrophotogramme gewöhnlich eingestellt wird. Stellen , wo die Körnchenschichte von ihr abgesprungen ist , was sehr häufig vorkommt, die Eindrücke der Körnchen deutlich wahrnimmt. Die Eindrücke erscheinen als dunklere, rundliche Pünktchen, deren Durchmesser geringer ist als der der Körnchen. Deshalb ist ihre alter- 444 Apäthy: Pleurosigma angiilatum u. d. Lendl'sche Mikroskop. VIII, 4. nirende Lagerung in regelmässigen Querreihen besonders auffallend. Figur 6 ist ein schematischer Querschnitt durch den Panzer, welcher das Verliältniss der drei Schichten zu einander illustrirt. Die innere Membran hört beiderseits von der Mittelrippe in derselben Linie wie die Körnchenschichte auf; und diese Linie sieht, bei flüchtiger Betrach- tung, so aus, als ob sie die äussere Contur der doppeltconturirten Mittel- rippe wäre. (Figur 1.) In gewöhnlichem Lichte erscheinen Panzerstücke, wo auch die äussere Membran vorhanden ist (Am. in Figur 1), am dunkelsten (be- deutend dunkler als das Gesichtsfeld), und zwar gelblich oder hell chocoladebraun ; Stellen, wo über der Köruchenschichte die äussere Membran fehlt (Ksch.), sind die lichtesten (viel lichter als das Gesichts- feld) und glänzen auffallend ; Stellen , wo die Körnchenschichte abge- sprungen ist und die innere Membran allein vor uns liegt (/?».), sind viel matter als die Körnchenschichte, aber nicht viel dunkler als das Gesichtsfeld, so dass der unterschied nur an den Linien, wo die innere Membran aufhört, sicher zu constatiren ist. In mikroskopischen Bildern, wie sie Figur 1 bei centraler Beleuchtung darstellt, hat man also folgende Abstufimgen von Helligkeit vor sich: am lichtesten ist die Körnchen- schichte, dann kommt das Gesichtsfeld, weiter die innere Membran und endlich die äussere (resp. alle drei Schichten übereinander). Die innere Membran beeinflusst die Helligkeit der Körnchenschichte in gewöhn- lichem Licht sehr wenig, in polarisirtem Licht gar nicht. Ich habe an ihr keine Doppelbrechung wahrgenommen. Das dunkelste aber, was man im Bilde, besonders bei schräger Beleuchtung, wahrnimmt, sind die Zwischenräume der Körnchen , d. h. die Liniensysteme. Die Punkte auf der inneren Membran, welche den Eindrücken der Körnchen ent- sprechen , sind bei der schärfsten Einstellung etwa so dunkel wie die äussere Membran ^ 1) Es wurde bereits von verschiedener Seite hervorgehoben, dass, „bei falscher Einstellung" im Gegensatze zu dem Gesagten, die „Flächen" dunkel und die Conturen bell erscheinen. Es ist, da wir stark lichtbrechende Kügcl- chen (in einem noch stärkeren Contrast zu ihrer Umgebung, als Ocltropfcn zum Wasser) zu untersuchen haben, glaube ich, einleuchtend, dass jene Erschei- nung dann eintreten muss, wenn wir ihre untere Hemisphäre einstellen: das Centrum ist beschattet, die Peripherie dagegen, ein mehr oder weniger breiter Ring, ist von reflectirtem Licht stark beleuchtet. Die lichten Reflexringe der benachbarten Körnchen fliessen zusammen und lassen ganz besonders schön ein glänzendes Gitterwerk mit sechseckigen Maschen erscheinen. Stellt man dagegen die obere Hemisphäre der Körnchen genau ein, weini also die soge- nannte „richtige Einstellung" erreicht ist, so erscheinen die Centren hell (nicht VIII, 4. Apätliy: Pleurosigraa angulatum u. d. Lencirsche Mikroskop. 445 Die Mittelrippe bildet einen nicht immer gleichmässig dicken, sich gegen die Spitzen des Panzers nur wenig verjüngenden Stab von höchstens 1% [x Stärke. In ihrer Mitte, wo sie einen spindelförmigen Knoten bildet, erreicht die Mittelrippe eine Dicke von 3 [x (Figur 2, 3Ir.). Sie ist ganz homogen, gelblich glänzend und in demselben Sinne wie die Körnchen doppeltbrechend. Die Rippe spaltet sich sehr leicht und zwar sowohl in ihrer Breite als auch in ihrer Dicke. Gehen wir nun dazu über, zu zeigen, weshalb Pleurosigma so, wie Lendl will , nicht beschaffen sein kann ! Zuerst muss ich aber ge- stehen, dass ich aus seiner Beschreibung nicht ganz ins Klare darüber kommen kann , wie er es eigentlich meint. Ist die Zeichnung von Pleurosigma „ganz sicher und unleugbar" ein rhombisches Muster, so können von den herkömmlichen drei Liuiensystemen blos zwei in der That vorhanden sein. Welches System aber Lendl leugnet, sagt er mit keinem Wort. Wird das rhombische Muster durch die zwei schrägen Systeme gezeichnet, oder durch das quere System mit einem — aber welchem — der schrägen ? Es wären drei Comtinationen möglich. In der That ist jedoch keine möglich. „Die schiefen Linien sind Furchen". Wenn Lendl das hervor- hebt, so sieht er vielleicht auch nicht schiefe Linien, welche nicht Furchen sind. Wenn aber nach ihm auch nicht schiefe, dann also quere Linien existiren, so ist eine Möglichkeit wenigstens ausgeschlossen: die Rhomben können nicht durch zwei diagonale Systeme gebildet sein. Nur eines derselben wäre vorhanden. Aber welches? „Besonders die spitzen Ecken (der rhombischen Feldchen) sind abgerundet, daher zieht auf sie ein dunkler Schatten , wodurch je zwei dieser Ecken die paral- lelen Längsseiten der vermeintlichen Sechsecke imitiren". Das lässt so leuchtend, wie bei diametraler Einstellung!) und sind von einem dunklen Ring umgeben, welcher, je höher die Einstellung ist, um so breiter, aber weniger dunkel, mehr verschwommen wird. Durch das Zusaramenfllessen der dunklen Ringe „müssen die sechseckigen kleinen Flächen farblos, ihre scharf begrenzten Conturen etwa chocoladefarbig erscheinen". (Cfr. Beiike.ns, W., Hilfs- buch zu Ausführungen mikroskopischer Untersuchimgen etc. Braunschweig, 1883. p. 51.) Alle Mikrophotogramme, welche ich gesehen habe, sind bei Ein- stellung der oberen Hemisphäre der Körnchen — und nicht ihres grössten Durchmessers — aufgenommen. Noch bevor man, von oben her, den oberen Pol der Körnchen erreicht hat, geben letztere ihre starke Lichtbrechung durch helle, aber verschwommene Fleckchen kund. Solche helle Fleckchen sieht man (abgesehen von der oberen Membran) zuerst, und ich begreife es nicht, wie Lendi, zuerst „die Schatten der spitzen Ecken" seiner rhombischen Feld- chen „als dunkle Punkte (dreieckige Flecke)" wahrnehmen konnte, „während die übrigen Details dem Auge noch unerkenntlich' waren (1. c. p. 288). 446 Apätliy: Pleurosigma angulatum u. d. Lendl'sche Mikroskop. VIII, 4. sich wieder mehr , obwohl nicht ganz , mit dem Fehlen der Querlinien vereinigen. Die folgende Thatsache lässt sich aber mit dem Fehlen keines der drei Liniensysteme vereinigen. Dort , wo die äussere Membran abge- sprungen ist, sieht man eine unregelmässige, immer krumme, nie gerade oder eckig gezähnte Bruchlinie (Figur 1); wo dagegen die Körnchen- schichte zersplittert ist, sieht man immer eine gerade, oder nach einer bestimmten Regel gezähnte, resp. zickzackförmige Spaltlinie. Es entstehen immer in drei Richtungen vollkommen gleiche, gerade und möglichst glatte Spaltlinien, an welchen kein Körnchen weiter als das andere hervorsteht, nämlich in querer Richtung und in den zwei diagonalen (schrägen, schiefen) Richtungen , nie aber auch in der Längsrichtung, parallel mit der Mittelrippe. (Figur 1, 2 u. 4.) Ist die Körnchenschichte jedoch in der Länge gesprungen, so ist die Sprung- linie immer aus kleineren oder grösseren Zacken zusammengesetzt. Die Seiten der Zacken bilden mit einander einen Winkel von 120 oder 60 Grad , je nachdem in ihnen zwei diagonale Spaltlinien oder eine diagonale mit der transversalen (queren) combinirt ist. Auch jene natürlichen Längslinien, mit welchen die Körnchenschichte gegen die Mittelrippe oder die Seitenlinie aufhört, sind in der Weise gezackt, dass die Einbuchtungen immer durch das Fehlen eines Körnchens in der Längsreihe verursacht werden: jedes zweite Körnchen der äusser- sten, nie geraden Reihe ragt um seine Hälfte über seinen vorderen und hinteren Nachbarn hervor. (Figur 2, Grl. und Figur 4.) An den diagonalen und transversalen Spaltliuien fehlt da- gegen kein Körnchen in der äussersten, geraden Reihe. Die Körn- chen sind eben nur in den zwei diagonalen Richtungen und in der transversalen unmittelbar (d. h. in der kleinsten Entfernung) nebenein- ander gereiht. (Schema in Figur 4.) Es kommt an beschädigten Panzerstücken sehr oft vor, dass von dem abgesprungenen Theil der Körnchenschichte blos isolirte Körnchen- reihen und zwar entweder in einer der diagonalen oder in der transver- salen Richtung zurückgeblieben sind. An solchen oft sehr langen perlschnurartigen Köruchenreihen, besonders aber a;i in situ zurückgebliebenen einzelnen Körnchen ist ihre iso- diametriche Gestalt und sonstige Beschaffenheit sehr klar zu sehen: sie sind glänzende Kügelchen von beinahe '/^ [i- Durchmesser, welche in die unterliegende (innere) Membran nicht mit ihrer ganzen inneren (unteren) Hemisphäre eingedrückt sind. (Fig. 6.) Solche einzelne Körnchen und Köruchenreihen glänzen auch VIII, 4. Apäthy: Pleurosigma angulatura u. d. Lendl'sche Mikroskop. 447 zwischen gekreuzten Nicola auffallend. Stücke der Körnchen- scliichte sind ebenfalls sehr häufig in Form von rhombischen, kleineren oder grösseren Fenstern herausgebrochen : die längere Achse der Rhom- ben (immer mit genau 60- resp. 120gradigen Winkeln) ist bald mit der Mittelrippe parallel, bald steht sie unter 60** zur selben. (Stehende und liegende Rhomben.) Nicht selten fehlen sogar nur einzelne Körnchen aus der Schichte, oder kleinere Gruppen, besonders von 4 bis G Körnchen, welche ein Loch, von der Form eines Kreuzes, frei lassen. (Figur 1.) Dem Fehlen der Körnchen entspricht immer ein Dunkelbleiben der be- treffenden Stelle zwischen gekreuzten Nicols. Darüber, ob man blos zwei oder drei Streifensysteme im mikro- skopischen Bild wahrnehmen kann , Hesse es sich noch streiten ; hier handelt es sich noch um Wahrnehmungen , welche subjectiven Schwan- kungen unterworfen sind. Die eben angeführten Thatsachen sind aber derartig, dass sie von Jedem, der übei-haupt sehen kann — zum Theil schon mit ganz massigen optischen Hilfsmitteln — gesehen werden müssen. Auch die Mikrophotogramme des ZEiss'schen „Special-Katalogs über Apparate für Mikrophotographie" aus 1888 zeigen die meisten „ganz sicher und unleugbar". Diese Thatsachen wären ganz unmöglich , wenn die LENDL'sche Auffassung, eine Zusammensetzung aus rhombischen Feldchen oder Körnchen, richtig Aväre; die Körnchenschichte könnte sich in transver- saler Richtung gewiss nicht mit ebenso glatten Linien , wie in den dia- gonalen, spalten; sie könnte höchstens so, wie in longitudinaler Rich- tung , mit gezackter Bruchlinie brechen. Die Thatsachen sind aber da, also ist eine Zusammensetzung des Pleurosigmapanzers, wie es Lendl will, unmöglich. Oder doch ! Sie ist möglich, nur müssen die spitzen Ecken der Rhomben gehörig abgestumpft werden. Aber sind denn Rhomben , deren spitze Ecken senkrecht zur Längsachse so weit abge- hackt sind, etwas Anderes als isodiametrische Sechsecke? Und sind solche Sechsecke , deren „Ecken und Kanten" abgerundet sind , nicht mit Kreisen gleichbedeutend? Dann hat aber Lendl mit seinem neuen Mikroskop absolut nichts Neues entdeckt. Drei Systeme von parallelen Linien in gleichen Abständen bilden, wenn ein System vertical zur Längsachse steht und die anderen beiden sowohl gegen einander als auch gegen das erste System unter einen Winkel von GO'' geneigt sind, ein Gitterwerk, deren grössere Maschen gleichseitige Sechsecke, die kleineren gleichseitige Dreiecke sind. Diese Sechsecke , welche aus zur Längsachse des Panzers queren und diago- nalen Seiten bestehen , entsprechen aber den sechseckigen Feldern von 448 Apäthy: Pleurosigma angulatum ii. d. Lendrscte Mikroskop. VIII, 4. Pleurosigma, wie sie sichtbar und in allen Mikrophotogrammen — aus- genommen die mit den allerstärksten Vergrösseriingen gemachten , wo die Felder keine Sechsecke , sondern deutliche Kreise repräsentiren — dargestellt sind, keineswegs, denn diese besitzen überhaupt keine Quer- seiten, sondern, ausser den nach vorne und nach hinten convergirendeu diagonalen Seiten, Längsseiten, welche mit der Mittelrippe parallel sind. Wäre also die Zeichnung von Pleurosigma durch drei Streifensysteme verursacht, so müsste das eine, mit der Mittelrippe parallel, in Längs- richtung verlaufen. Solche Linien wurden aber noch von Niemandem gesehen. Reihen wir jedoch in den angegebenen drei Richtungen beinahe kugelige, oder wenigstens isodiametrische Körnchen aneinander, deren Zwischenräume wegen der starken Lichtbrechung der Körnchen selbst dunkel erscheinen, so — und in keiner anderen Weise — bekommen wir als optischen Effect unfehlbar die Zeichnung von Pleurosigma an- gulatum. Um sich zu überzeugen , braucht man nur die schematische Darstellung in Figur 4 mit dem Mikrophotogramm bei 4900facher Ver- grösserung im ZEiss'schen Katalog zu vergleichen. Man wähle eine Stelle des Photogramms, wo die hellen Felder am genauesten kreisför- mig sind, wo also das Object in genau verticaler Lage zur optischen Achse des photographischen Apparates abgebildet ist, und ziehe durch die Mittelpunkte der Kreise gerade Linien in transversaler Richtung und in den beiden diagonalen. Die Winkel, welche diese Linien mit- einander bilden , sind so genau , wie man es nur wünschen kann , von 60, resp. 120 Graden. Die Abstände der lichten Kreise von einander scheinen im Photogramm grösser, als sie in der That, bei genauer Ein- stellung des optischen Schnittes im grössten Durchmesser der Körnchen, sind ; daran ist der Photograph Schuld , welcher das Mikroskop in der Höhe, wo die Liniensysteme, nach seiner Meinung offenbar das Wich- tigste, am deutlichsten zu sehen waren, eingestellt hat. Diese Höhe {xy in Figur 6) ist aber nicht die des grössten Körnchendurchmessers, wo die Zwischenräume am engsten, also die Streifen weniger deutlich zu sehen sind. Ich glaube mich nicht zu irren, wenn ich die Körnchen für Rhora- boederkrystalle (Rhombhexaeder) von Kieselsäure halte, deren krystallo- graphische und optische Hauptachse mit der Mittelrippe parallel liegt, eine optische Nebenachse jedoch vertical auf die Panzerebene, parallel mit der optischen Achse des Mikroskops, steht. Die Gründe, welche mich zu dieser Annahme veranlassen, sind folgende. Die anorganische Asche der Diatomaceenschalen ist Kieselsäure. Die Spaltlinien der VIII, 4. Apäthy: Pleurosigma angulatura u. d. Lendl'sche Mikroskop. 449 Körnchenschichte, welche miteinander in drei Richtungen ganz constante Winkel bilden , deuten auf eine krystallinisclie Beschaffenheit. Die Körnchenschichte ist sehr deutlich doppelbrechend. Ebenso deutlich ist es, dass die Doppelbrechung nur von den Körnchen erzeugt wird. Die Doppelbrechung möge ein Anderer genauer bestimmen. Für uns genügt es vorläufig, durch sie zu beweisen, dass die Körnchen Krystalle und zwar nicht in das tesserale System gehörende Krystalle sind. Wir wissen aber, dass die Kieselsäure im hexagonalen System krystallisirt. Keine andere Form dieses Systems als das Rhomboeder, kann selbst isodiametrisch sein und dabei von einer Nebenachse betrachtet, als opti- sches Projectionsbild ein gleichseitiges Sechseck liefern. (Würden uns die Krystalle, bei Betrachtung der Panzerfläche , ihre Hauptachse ent- gegenhalten, so könnten sie in dieser Lage des Panzers zwischen ge- kreuzten Nicols nicht hell bleiben, geschweige denn stark glänzen.) Und grade in rhomboedrischen Krystallformen kommt die Kieselsäure in der Natur sehr oft vor. In Figur 4 sind die Kanten, welche in die Seiten- spitze, von der wir die Rhomboeder betrachten, zusammenlaufen, in ein Körnchen bei x hiueingezeichnet. Die länglichen Krystalle, welche an den beiden Enden des Panzers an die Stelle dieser isodiametrischen Körnchen treten, müssen, aus den eben hervorgehobenen Gründen, für irgend welche liegende hexagonale Prismen, deren Hauptachse mit der Mittelrippe parallel ist, gehalten werden. Es sei mir nun gestattet, das Gesagte nochmal kurz zusammenzu- fassen. Der Panzer von Pleurosigma angulatum ist lediglich aus isolir- baren isodiametrischen (beinahe kugeligen), doppelbrechenden Krystallen von nicht ganz % (x Durchmesser zusammengesetzt, welche, einander beinahe berührend, in parallele Querreihen so angeordnet sind, dass die Körnchen der benachbarten Reihen mit einander alterniren. Die Körn- chen werden in einer einschichtigen Lage zwischen zwei dünnen Mem- branen, einer äusseren und einer inneren, ohne besondere Kittsubstanz zusammengehalten. Die innere Membran ist durch jedes Körnchen nach innen vorgewölbt; die äussere, bräunliche Membran, welche durch die einzelnen Körnchen nicht hervorgewölbt wird, senkt sich in Form von zwei diagonalen Furchensystemen (oder verdickten Leisten), ein wenig zwischen die diagonalen Reihen der Körnchen ein. Die drei Richtungen, in welchen die Körnchen, in Folge ihrer alternirenden Lage in Querreihen, ununterbrochene Reihen bilden, sind gegeneinander unter einem Winkel von 60° (resp. 120") geneigt. Ich habe die Structur von Pleurosigma angulatum deshalb so ein- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 4. 30 450 Apäthy: Pleurosigma angulatum u. d. Lendl'sclie Mikroskoix Vlll. 4. gehend geschildert, weil in der Ueberzeiigung der meisten Mikroskopiker noch immer die alte Auffassung vorherrscht. Es würde mich aber wirk- lich wundern, wenn die von mir angeführten und mit den apochroma- tischen homogenen Immersionssystemen so leicht zu constatirenden Thatsachen neu wären. Sie aufgefunden zu haben halte ich überhaupt nicht für ein besonderes Verdienst. Dass Lendl so wenig davon erkannt hat, ist allerdings keine grosse Empfehlung für die von ihm „erdachte Modification des Mikroskops". Möglich, dass auch sein Apparat mehr leisten könnte, wenn man ihn mit apochromatischen Systemen an- wenden würde. Im allgemeinen halte ich es aber für verfehlt, beinahe für einen Rückschritt, die Vergrösserungskraft der Mikroskope in der von ihm eingeschlagenen Richtung forciren und nicht lieber ihr Definitionsver- mögen heben zu wollen. Wenn mit der Vergrösserung nicht auch das Definitionsvermögen gestärkt wird , so werden nur die möglichen opti- schen Täuschungen , wie Lendl's Beispiel mit Pleurosigma beweist, vermehrt. Lendl hat wahrscheinlich besonders den Umstand nicht genug in Betracht gezogen, dass nur bei vollkommen centraler Beleuchtung alle drei Liniensysteme auf einmal in gleicher Weise , dann aber nicht am deutlichsten, erscheinen können; schon bei etwas schiefer Beleuchtung können unmöglich alle drei Systeme auf einmal deutlich gesehen werden, immer treten nur zwei scharf hervor und diese bilden natürlich ein scheinbar rhombisches Muster. Und es wurde ihm durch seine neue Construction erst recht unmöglich gemacht, diese Täuschung gewahr zu werden. Kolozsvär, im Januar 1892. [Eingegangen am 19. Februar 1892.] VUl, 4. Brauer: Reichert's neuer Zeichenapparat. 451 Reichert's neuer Zeiclienapparat. Von Prof. Dr. Friedr. Brauer in Wien. Hierzu ein Holzschnitt. Seit in den letzten Jahren die Mikroskop -Photographie so bedeu- tende Fortschritte aufzuweisen hat, ist der Gebrauch des Zeichenapparats etwas vernachlässigt worden und hat scheinbar an Bedeutung verloren. Aber ebensowenig wie für gewisse Zwecke ein Holzschnitt nicht durch Photographie oder Photolithographie ersetzt werden kann, ebensowenig kann die Mikrophotographie das Zeichnen mikroskopischer Objecte er- setzen. Die Mikrophotographie liefert bekanntlich nur da gute Resultate, wo es sich um dünne, gut gefärbte Präparate mit genügenden Con- trasten handelt wie z. B. bei Diatomeen, Bacterienculturen u. s. w. Bei weniger günstigen Objecten, wo es sich darum handelt, wichtige Details besonders hervorzuheben und klar zum Ausdruck zu bringen, besitzen wir bis heute kein besseres Hilfsmittel als den Zeichenapparat. Obwohl wir nun eine grosse Anzahl von vorzüglichen gewiss alle Anerkennung verdienenden Zeichenapparaten besitzen, so hat doch keiner der mir bekannten meiner" Anforderung voll entsprochen. Ich befasse mich seit Jahren mit dem Zeichnen von kleinen ento- mologischen Objecten bei schwachen Vergrösserungen von 10 bis 30mal. Bei diesen Arbeiten leistete mir zwar der bekannte ZEiss'sche Zeichen- apparat gute Dienste; derselbe hat jedoch den Nachtheil, dass, um cor- recte Bilder zu erhalten, die Zeichenfläche geneigt sein muss, was sehr unbequem ist. Dies veranlasste mich, bei Herrn C. Reicheet einen Zeichenapparat mit ebener Zeichenfläche zu bestellen. Der mir gelie- ferte AßBE'sche entspricht zwar diesen Anforderungen, hat aber den an- deren Nachtheil, dass er für meine schwach, nur von gewöhnlichem Tages- 30* 452 Brauer: Reichert's neuer Zeichenapparat. VIII, 4. licht beleuchteten Objecte — gespiessten Fliegen und anderen Insecten werthvoUer Sammlungen, Original-Exemplare, an deren Zustande nichts geändert werden soll und die von der Nadel nicht herabgenommen werden dürfen, sondern auf ein mittels Klammern auf dem Objecttische befestigtes Korkstück gesteckt werden, bei denen eine directe Spiegel- beleuchtung nicht verwendbar ist, — das Gesichtsfeld zu sehr verdunkelt, wodurch die Schärfe der Bilder in der Weise beeinträchtigt wird , dass er für diese Arbeiten nicht verwendbar ist. Von der Zeichenfläche müsste im letzteren Falle durch einen Schirm das Licht vorne etwas abgeblendet werden. Dies ist erklärlich, wenn man bedenkt, dass bei dem ABBE'schen Zeichenapparat das Licht, ehe es vom Object ins Auge gelangt, seinen Weg durch zwei Prismen nehmen muss, wodurch natürlich ein Theil der Lichtstrahlen durch Reflexion absorbirt wird. Der neue, mir vor einigen Wochen, Ende November 1891, von Herrn C. Reichert gelie- ferte, in beistehender Figur abgebildete Zeichenapparat, bei dem die Bildfläche ganz horizontal liegt und die Zeichenfläche, wie in der Figur durch die punktirte Linie augedeutet, ins Auge geleitet wird, können gleichzeitig die Lichtstrahlen vom Object ohne irgend eine Verminderung direct ins Auge gelangen, und kommt so die Bildschärfe des Objectes voll zur Geltung, es entspricht somit dieser Apparat für meine schwach, nur von einer darunter liegenden weissen Papierfläche beleuchteten Ob- jecte wie keiner der mir bekannten Apparate meinen Anforderungen. VIII, 4. Brauer: Reichert's neuer Zeichenapparat. 453 Er liefert lichtstarke Bilder ohne verminderte Sehschärfe, wie der ZEiss'sche, ohne dessen Nachtheil der Schiefstellung der Zeichenfläche und gestattet weiter eine horizontale Zeicheufläche, wie der ÄBBE'sche, ohne Verminderung der Sehschärfe, so dass beide Vorzüge dieser Appa- rate für den erwähnten Zweck in demselben vereinigt sind. Der Apparat lässt sich weiter, wie die erwähnten, mit gleichem Vortheil am Mikro- skop verwenden; bei schwachen Vergrösserungen, wo durch die grosse Lichtfülle des mikroskopischen Bildes die Zeichenfläche etwas weniger deutlich erscheint, ist es zweckmässig, dass entweder in den Beleuch- tungsapparat des Mikroskopes, oder auch direct unter das zu zeichnende Object ein blaues Glas eingeschaltet werde, ausserdem kann durch die beiden an a und h gefassten blauen Gläser das Licht am Apparat selbst nach Bedarf abgedämpft werden. Am Mikroskop oder am Präparirmikroskop wird der Apparat, wie in der Figur ersichtlich, mittels der Schraube c befestigt, das Prisma ist fix, der Spiegel Sp drehbar und hat bei Th eine Theilung, an welcher genau ersichtlich, wenn der Spiegel auf 45° oder einige Grade mehr oder weniger zur Zeichenfläche geneigt ist. Obwohl theoretisch die Stellung auf 45*" die einzig richtige ist, so ist doch manchmal aus räumlichen Bedürfnissen eine kleine Abweichung wünschenswerth und praktisch auch ohne Bedeutung, dies aber an der Theilung ersichtlich. Um nun beim Gebrauch auch das mikroskopische Bild ohne den Apparat beobachten zu können, ist derselbe an dem in der Figur nicht sichtbaren Stifte leicht drehbar und lässt sich dadurch bequem, um das Ocular zu wechseln, aus- und nach Belieben auf das früher beobachtete Bild wieder ein- schalten. Damit letzteres mit voller Sicherheit geschieht, dient ein Stift als Anschlag. Am zweckmässigsten ist der Apparat am Mikroskop mit Reichert's Ocular 2 zu verwenden, um aber auch schwächere oder stärkere Oculare verwenden zu können, ist er in dem Stifte D etwas verschiebbar, über- dies kann er durch Verschieben auf der Hülse T in seiner Entfernung von den Ocularen etwas verstellt und dann mit der Schraube C in der richtigen Stellung fixirt werden. [Eingegangen am 1. Februar 1892.] 454 Zimmermann: Eine einfache Einstellungsmethode etc. VllI, 4. Eine einfache Einstellungsmetliode des mikroskopisclien Beleuchtung-sapparates. Von Dr. A. Zimmermann in Tübingen. Bei der grossen Bedeutung, welche die Art der Beleuchtung für das mikroskopische Bild besitzt, dürfte es wohl jedem Mikroskopiker willkommen sein, ein einfaches Mittel zu besitzen, um in jedem spe- ciellen Falle die günstigste Beleuchtung in möglichst kurzer Zeit ermitteln zu können. Es scheint mir nun allerdings nicht unwahrscheinlich, dass zu diesem Zwecke auch bereits andere Mikroskopiker in der sogleich zu beschreibenden Weise verfahren sind, um so mehr, da dies für Jeden, der sich einmal mit der AßBE'schen Theorie der optischen Wahrneh- mung beschäftigt hat, sehr nahe liegt. Immerhin glaube ich doch, dass diese Methode sicher noch nicht allgemeiner verbreitet ist; wenigstens habe ich sie bisher in keinem Lehrbuche der Mikroskopie erwähnt ge- funden. Um nun den obengenannten Zweck zu erreichen , verfährt man in der Weise, dass man, nachdem man das Mikroskop auf das zu unter- suchende Object eingestellt hat, das Ocular aus dem Tubus herausnimmt und von oben her in denselben hineinblickt. Man beobachtet dann, gleichgiltig ob man mit einfachem Spiegel oder mit dem AsBE'schen Beleuchtungsapparat, mit natürlichem oder künstlichem Lichte arbeitet, ein umgekehrtes reelles Bild von der Lichtquelle, und es kommt nun darauf an, den Spiegel und ev, auch den ÄBBE'schen Condensor so zu Orientiren, dass das ganze Gesichtsfeld möglichst gleichmässig hell er- scheint. Beobachtet man einfach bei Tageslicht, wird es in dieser Weise leicht, die günstigte Stelle am Himmel ausfindig zu machen und auch zu verhindern, dass durch das Fensterkreuz oder dergl. ein Theil des Beleuchtungskegels abgehalten wird. Bei Lampenlicht kann man in gleicher Weise ohne grosse Mühe die Flamme selbst in die Mitte des Bildes bringen, resp. wenn man zur Beobachtung gefärbter Objecte VIII, 4. Zimmermann: Eine einfache Einstellungsmethode etc. 455 einen grossen Beleuchtungskegel anwenden muss, Lampe , Beleuchtungs- linse * und Spiegel so orientiren , dass das ganze Gesichtsfeld gleich- massig hell erscheint. Da man bei diesem Verfahren die einzelnen Theile der Lichtquelle stets deutlich erkennen kann, so ist die Auffindung und centrirte Einstellung der günstigsten Beleuchtungsquelle in allen diesen Fällen in kürzester Zeit ausführbar; jedenfalls viel schneller, als wenn man ohne Entfernung des Oculars durch einfaches Herumprobiren die günstigste Beleuchtung ermitteln wollte. Hervorheben will ich ferner noch, dass das oben beschriebene Ver- fahren sowohl bei schwachen als auch bei starken Vergrösserungen an- wendbar ist; bei letzteren giebt sie ferner zugleich darüber Aufschluss, ob der Beleuchtungskegel den gleichen Oeflfnungswinkel besitzt, als das angewandte Objectiv und ob nicht vielleicht von der Entfernung der Luftschicht zwischen Beleuchtungslinse und Objectträger durch Ein- schalten von Glycerin oder Oel eine Verbesserung des mikroskopischen Bildes zu erwarten ist. Schliesslich kann die beschriebene Methode aber auch sehr wohl dazu dienen, um dem Anfänger in mikroskopischen Untersuchungen den grossen Einfluss der Beleuchtung auf das mikroskopische Bild direct ad oculus zu demonstriren. So kommt es ja z. B. in mikroskopischen Prak- tiken oft genug vor, dass mit ganz excentrischeu Beleuchtungskegeln ge- arbeitet wird, was natürlich im allgemeinen die Schärfe des Bildes sehr beeinträchtigt. Zeigt man dann dem betreffenden Praktikanten durch Entfernung des Oculars die verwandte Beleuchtungsart und wie man durch eine geringe Verschiebung des Spiegels ein viel schärferes Bild erhalten kann, so wird derselbe dadurch veranlasst, dem Beleuchtungs- apparate mehr Aufmerksamkeit zuzuwenden, und, wenn er nicht vor der Mitte eines grossen Fensters sitzt, wo natürlich im allgemeinen ein be- sonderes Herumsuchen nach einer günstigen Lichtquelle überflüssig sein würde, wird er es bald lernen, sich mit Vortheil der im Obigen be- schriebenen Methode zur Erlangung des günstigsten Beleuchtungskegels zu bedienen. 1) Als Beleuchtungsliüse schalte ich in diesem Falle seit Jahren mit bestem Erfolg den unteren kugelförmigen Theil einer gewöhnlichen mit Wasser oder schwachblauer Lösung gefüllten Kochflasche zwischen die Lampe und das Mikroskop ein und orientire dieselbe derartig, dass der ganze Mikro- skopspiegel gleichmässig hell beleuchtet ist. [Eingegangen am 20. Januar 1892.] 456 S V. d. Kolk: Ueber die Vortheile schiefer Beleuchtung etc. VIII, 4. lieber die Vortheile schiefer Beleuchtung- bei der Untersuchung' von Dünnschliffen im parallelen polarisirten Lichte. Von Dr. J. L. C. Schroeder van der Kolk in Leiden. Wenn man eine beliebig geschliflfene, planparallele Quarzplatte zwischen gekreuzten Nicols senkrecht zum Strahlenbündel betrachtet und sie um ihre Normale um 360'* dreht, so löscht sie bekanntlich vier- mal aus. Man drehe die Platte nur um ihre Normale (p o) um 45" aus dem Auslöschungsstande, damit man den Stand grösster Helligkeit erhält. Es seien nun zwei Strecken parallel den Schwingungsrichtungen durch einen beliebigen Punkt o gedacht ; die Endpunkte dieser Strecken seien z. B. a, h und c, d. Es sei die Farbe der Platte z. B. Roth erster Ordnung. Jetzt drehen wir den Quarz um einen Winkel cp erstens um aö, zweitens um cd. Man wird nun bekanntlich im allgemeinen Fol- gendes beobachten : 1) c nähert sich unserem Auge ; die Interferenzfarben steigen bis Violett zweiter Ordnung; 2) d nähert sich-, es entsteht dasselbe Violett; 3) a nähert sich; die Platte zeigt Blau zweiter Ordnung; 4) h nähert sich; die Platte Aveist Gelb erster Ordnung auf; die Interferenzfarben sind gefallen. Aus diesen Beobachtungen geht hervor, dass die optische Achse in der Ebene p^ a, h liegt. Im Folgenden soll nun versucht werden, obenstehendes Verfahren in der mikroskopischen Praxis anzuwenden. Zuvor sei es mir gestattet, noch einige Bemerkungen vorauszuschicken. Indem man die Platte um einen Winkel cp dreht, verlängert sich der vom Lichtstrahl zurückzulegende Weg, und zwar im Verhältniss sec, cp, wenn wir der Einfachheit wegen die Platte als isotrop und deren Brechungsindex gleich dem des umgebenden Mediums betrachten. Trifft dies, wie gewöhnlich nicht zu, so haben wir noch mehrere Correctionen VIII, 4. S. V. d. Kolk: lieber die Vortheile schiefer Eeleuchtung etc. 457 einzuführen. Denken wir uns die Platte noch immer isotrop , die Brechungsindex aber von demjenigen des Mediums verschieden und diesem gegenüber zwar = w, fi so wird jetzt der Correctionsfactor = , /-- . l/n^ — sin'^ ^ welcher für )i = 1 wieder in sec. cp übergeht. Es ist von den Umständen abhängig , ob man sich der ersten oder zweiten Correction bedienen muss. Der Fehler, welcher jetzt noch ent- steht, darf für gewöhnlich ausser Acht gelassen werden. Alle einachsigen Mineralien, welche nicht genau senkrecht oder parallel zur Achse geschliffen sind, werden, wenn wir bei der Drehung abwechselnd die vier Endpunkte der Strecken nach unserem Auge hin- bewegen, während der Drehung um die eine der Strecken ihre Interferenz- farben erhöhen und erniedrigen, um die andere Strecke in beiden Fällen erhöhen und zwar bei einer Drehung von cp ^ und — ^ cp " um genau den gleichen Betrag. Diese vollständige Symmetrie um eine der beiden Strecken (die Schwingungsrichtungen) ist ein brauchbares Merkmal der einachsigen Substanzen, indem sie bei zweiachsigen Mineralien nur ganz ausnahms- weise zutrifft. Indem man jetzt weiss, in welcher der beiden Strecken die Projection der optischen Achse auf die Ebene des Blättchens fällt, kann man ohne weiteres mit Gyps- oder Glimmerblättchen bestimmen, ob das zu untersuchende Mineral optisch positiv oder negativ ist *. Für die zweiachsigen Mineralien wird die Sache zwar etwas weniger einfach, es ist jedoch sehr oft möglich, ein brauchbares Resultat zu erhalten. Ist der Schliff' senkrecht zur Achsenebene, so lässt sich verhältuiss- mässig leicht ausfindig machen , ob die Normale der Platte im spitzen oder im stumpfen Achsenwinkel liegt. Mittels des Gyps- oder des Glimmerblättcheus lässt sich nun wiederum ohne Schwierigkeit die Lage der Elasticitätsellipse bestimmen. Sieht man in den spitzen Winkel hinein und liegt die kurze Achse der Ellipse in der Verbindungslinie der Austrittspunkte der optischen Achse, so hat man es mit einem optisch negativen Mineral zu thun u. s. w. Der Fall, wo die Schliffebene senkrecht zur optischen Achsenebene steht, ist in der Praxis nur selten verwirklicht. Das Verfahren gestattet aber beträchtliche Abweichungen vom ideellen Fall, bevor es sich als unbrauchbar erweisen wird. *) Rosenbusch, H, Mikroskopische Physiographie. 2. Aufl. Bd. I, 1885, p. 144. — Rinne, F., Ueber eine einfache Methode, den Charakter der Doppel- brechung ini convergenten polarisirten Lichte zu bestimmen. (Neues Jahrb. f. Mineralog. Bd. II, 1891, p. 23; cfr. diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 416.) 458 S. V. d. Kolk: Ueber die Vortheile schiefer Beleuchtung etc. VIII, 4. Bei der Untersuchung von Gesteinsdünnschliffen unter dem Mikro- skop lässt sich die Methode in der folgenden Weise verwenden: 1) Bei schwachen, bis etwa hundertfachen Vergrösserungen wird der Tubus etwa ein Centimeter höher als gewöhnlich gehoben, nachdem man das zu untersuchende Körnchen in die Lage der grössten Helligkeit gelegt hat. Man hebe den Schliff jetzt einseitig, indem man eine der beider Schwingungsrichtungen des Körnchens zur Drehungsachse wählt u. 8. w. 2) Bei stärkeren Vergrösserungen verfahre man wie folgt: Man verschiebe den Polarisator um einige Millimeter, während er sich selbst parallel bleibt, und drehe den Spiegel um den entsprechenden Winkel ; das polarisirte Licht durchsetzt den Schliff in schiefer Richtung. Man braucht jetzt nur den Tisch zu drehen, und hat den Vortheil, das ganze Feld scharf zu sehen und die Augen entschieden weniger zu ermüden, den Nachtheil aber, den Winkel, unter welchem der Strahl den Schliff durchsetzt, weniger leicht reguliren zu können. Es ist vortheilhaft, den Polarisator nicht mit seiner Achse senkrecht zu stellen, sondern diese in die Richtung der vom Spiegel reflectirten Strahlen zu bringen. Unter Umständen ist es einfacher, den Polarisator gänzlich aus dem Cylinder (unter dem Centrum des Tisches) zu entfernen und an seine Stelle eine verticale kleine Glasplatte unter den Schliff zu bringen; das von dem Spiegel zurückgeworfene Licht wird, bei gut gewähltem Einfallswinkel, von dem Glasplättchen polarisirt und pflanzt sich mit belrächtlicher Abweichung von der Normalen in dem Präparat fort. Sehr einfach und dann und wann brauchbar ist folgendes Verfahren: Man bringe den Finger in horizontaler Stellung zwischen den Lichtbrenner und den Spiegel. Indem man den Finger vertical auf- und abbewegt, wirft er auf verschiedene Theile des Spiegels Schatten, und der zurückgeworfene Lichtstrahl hat verschiedene Richtung. Der Nutzen der beschriebenen Methode dürfte darin liegen, dass man bei Aggregaten winzigster Körnchen, wo die krystallographische Begrenzung gänzlich fehlt, erstens die einachsigen Mineralien von den zweiachsigen unterscheiden kann, zweitens dass bei den einachsigen immer, bei den zweiachsigen sehr häufig sich das Zeichen bestimmen lässt. In einem feinkörnigen Aggregat von Quarz und Orthoklas konnte ich bei Körnchen von 15 ji, des erstgenannten Minerals ohne Mühe die Einachsigkeit und das positive Zeichen der Doppelbrechung feststellen. Leiden, den 1. Januar 1892. [Eingegangen am 6. Januar 1892.] VIII, 4. S. V. d. Kolk: Beobachtung der opt. Intert'erenzerscheinungen. 459 lieber eine Methode zur Beobachtung* der optischen Interferenzerscheinung^en im converg'enten pohirisirten Lichte, insbesondere in Gesteinsschliffen. Von Dr. J. L. C. Schroeder van der Kolk in Leiden. Nachdem ich vergeblich versucht hatte, in einem GesteinsschliflF bei einem Quarzkörnchen, welches undulös auslöschte, das Achsenbild scharf zu erhalten, indem die Sache immer daran scheiterte, dass das Mineral im Gesichtsfelde selbstbei starker Vergrösserung, nie ein einziges optisches Individuum darstellte, versuchte ich folgendes Verfahren, welches ermög- lichen sollte, einen noch kleineren Theil des Körnchens auf seinen optischen Charakter zu prüfen. Oben auf das Deckgläschen des Präparats wurde ein Tropfen Glycerin gebracht und mit einem Stäbchen schnell gerührt, sodass ganz feiner Schaum entstand. Jetzt brachte ich ein Deckgläschen darauf und beobachtete mit massiger Vergrösserung (Zeiss B oder auch Haet- NACK 4) zwischen gekreuzten Nicols die ganz kleinen Libellen, welche im Glycerin schwebten, senkte nun den Tubus um ein Geringes und, indem die Libellen an die Stelle des Objectivs* beim gewöhnlichen Ver- fahren traten, erschien in jeder Libelle ein schönes Achsenbild, dessen optischer Charakter ganz gut zu untersuchen war. Mit Muscovit wiederholte ich den Versuch, benetzte aber das Blättchen direct mit Glycerin; die Dispersion der optischen Achsen Hess sich deutlich beobachten, und der negative optische Charakter war leicht zu bestimmen. Es erwies sich als vortheilhaft, die Flüssigkeit auf das Mineral selbst zu tupfen, eventuell das Deckgläschen zu entfernen. Ich glaubte die obengenannten Beobachtungen mittheilen zu sollen, ') Es sind aber die Libellen biconeave Linsen, daher man den Tubus senken muss. 460 S- V. d. Kolk: Beobachtung der opt. Interferenzerscheinungen. VIII, 4. da sie vielleicht in den nachstehenden Fällen von einiger Bequemlichkeit sein dürften : 1) Es stehen stärkere Objective nicht zur Verfügung; nach dem gewöhnlichen Verfahren sind aber keine guten Achsenbilder zu erhalten. 2) Es ist erwünscht, zugleich mit dem Achsenbilde auch das Prä- parat, soweit es im Gesichtsfelde liegt, überblicken zu können. .S) Die Mineralkörner weisen undulöse Auslöschung oder auch Aggre- gatpolarisafion auf und sind für die gewöhnlichen üntersuchungsmethoden untauglich. Auch den Fall der sogenannten optischen Anomalien*, wo zwischen gekreuzten Nicols eine sehr feinkörnige Mosaik auftritt, dürfte hierher zu rechnen sein, wie schliesslich auch der Fall einer feinkörnigen Grund- masse oder innige Verwachsung zweier oder mehrerer Mineralien. In Bezug auf die Praxis möchte ich noch Folgendes bemerken. Die Libellen können natürlich einen sehr verschiedenen Durchmesser besitzen ; eine obere Grenze existirt nur insofern, als die Libelle kleiner als das Gesichtsfeld und vollkommen kugelförmig sein muss; eine untere Grenze wird dadurch gegeben, dass das Lumen genügend weit sein soll, um das Achsenbild bequem beobachten zu können, diese ist die einzige Grenze womit man in der Praxis zu schaffen hat. Interfereuzfiguren habe ich noch erhalten bei Lumina, welche zwischen 1 und 0002 mm Durchmesser abwechselten. Obwohl nun aber ein Lumen von 0*002 mm genügt, so soll doch das Mineralkörnchen grösser sein, damit man ein ungestörtes Bild erhält, und zwar um so grösser, je mehr die Libelle vertical vom Mineral ent- fernt ist. Wo ich bei einem Quarzkörnchen von 0"025 mm Durchmesser von Feldspath umgeben, mit einem HABTNACK'schen Immersiousobjectiv (Yia) keine brauchbare Interferenzfigur erhielt, war die von einer Libelle gebildete sehr schön. V\/^enn man einen Gesteinsdünnschliff mit dem Schaum präparirt hat, übersieht man mit einem Blick die optische Orientirung derjenigen Körnchen, über welchen eine Libelle schwebt; indem man den Tisch dreht und die Kreuz- oder Hyperbelzweige im Lumen erblickt, lässt sich, zumal bei den einachsigen Mineralien leicht das Zeichen der Doppel- brechung bestimmen. Es ergiebt sich sofort die Richtung der Projection der Hauptachse auf den Schliff. Die Lage der „Elasticitätsellipse" und damit das Zeichen lassen sich sofort durch den Vergleich mit der Ellipse *) Durch Herrn Prof. A. Wichmanx erhielt ich einige Beispiele optischer Anomalien, wie auch a-Monobromnaphthalin zur Untersuchung. Es sei mir gestattet, ihm hierfür meinen verbindlichsten Dank auszusprechen. VIII, 4. S. V. d. Kolk: Beobachtung der opt. Interferenzerscheinungen. 461 eines Glimmersblättchena bestimmen. Auch bei zweiachsigen Mineralien, wie z. B. bei Topas, gelang dies ohne Schwierigkeit. Da es in einzelnen Fällen vortheilhaft sein dürfte, will ich schliesslich noch erörtern, wie sich das Verfahren mehr oder weniger abändern lässt. Wie ich schon oben bemerkt habe, erhält man die besten Resultate, wenn die Libelle unmittelbar dem Minerale aufliegt, es ist dies aber nicht immer durchaus nöthig. Für diese Fälle ist es zweckmässig, den folgenden Weg einzuschlagen: Auf ein Objectgläschen wird ein Tropfen Canadabalsam oder Glycerin- Gelatine gebracht und wenn nöthig gekocht. Nachdem hierin durch schnelles Rühren Schaum entstanden ist, wird ein Deckgläschen aufgelegt und der Apparat ist fertig. Derselbe wird nun mit dem Deckgläschen nach unten auf das Präparat gelegt, und indem man den Apparat hin und her schiebt, kann man jedes Körnchen mit einer Libelle zur Deckung bringen. Statt der Libellen kann man auch kleine Tropfen benutzen, wobei man sodann, wie ersichtlich ist, den Tubus ein wenig heben muss. Um diese Tröpfchen ganz klein zu erhalten, verfahre man in der folgenden Weise: Auf einem Objectglase wird ein wenig a-Monobromnaphthalin aufgetragen ; etwa 1 cm darüber legt man, das Deckgläschen nach unten, den zu untersuchenden Schliff, welchen man oben mit Wasser benetzt. Man braucht das a-Monobromnaphthalin nur zu erhitzen und erhält sodann auf dem Schliff ein Destillat äusserst feiner Tröpfchen jener Flüssigkeit. In den meisten Fällen kommt man völlig mit dem Schaum einer dünnflüssigen Glyceringelatine aus. Leiden, December 1891. [Eingegangen am 27. December 1891.] 462 Busse: Celloidin-Einbettung in der Pflanzenanatomie. VIII, 4. Die Anwendung* der Celloidin-Einbettung- in der Pflanzen-Anatomie. Von Walter Busse in Freiburg i. B. Hierzu ein Holzschnitt. Die ausserordentlich günstigen und siclieren Resultate, welche die Anwendung des Mikrotoms in der Pflanzen-Anatomie geliefert hat, die einfache und bequeme Handhabung dieses Instrumentes beginnen das oft recht mühsame, erfolglose und zeitraubende Schneiden mit dem Rasirmesser, wie es früher allgemein üblich gewesen, mehr und mehr zu verdrängen. Von den Einbettungs- Massen, welche beim Schneiden weicherer Objecte mittels des Mikrotoms verwendet werden, kommen in erster Linie das Celloidin und das Paraffin in Betracht. Wenn das letztere, obwohl es als Einbettungsmittel manche wesentliche Vortheile vor dem Paraffin voraus hat, noch nicht eine so allgemeine Verwendung in der botanisch-mikroskopischen Technik gefunden hat, wie es zu wünschen wäre, so liegt das wohl hauptsächlich daran, dass bisher eine einheitliche , einigermaassen erschöpfende und bis ins Detail genaue Darstellung des Celloidin- Verfahrens für botanische Zwecke in der Fachliteratur fehlte. Das Celloidin wurde, wie bekannt, 1882 von Schiepfeedecker * in die mikroskopische Technik eingeführt, nachdem bereits 1879 Mathias DuvAii- die Collodi um -Einbettung — im Princip dasselbe 1) ScHiEFFERDECKEH, P., ücber dio Verwendung des Celloidins in der mikro- skopischen Technik (Arch. f Anat. u. Pbysiol. I. Abth. 1882, p. 199.) (Ausser- dem giebt ScHiEFKEitDECKEii in Bd. V 1888 dieser Zeitschr. p. 503 eine kurze Darstellung seines Verfahrens im Anschluss an eine kritische Besprechung der DüVAL'schen CoUodium-Einbettung). -) DuvAL, Sur l'emploi du collodion humide pour la pratique des coupes microscopiques. (Journ. de l'Anat. et de la Physiol. t XV, 1879, p. 185). VIII, 4. Busse: Celloidin-Eiubettung in der Pflanzenanatoinie. 463 Verfahren — erfunden hatte. Später wurde sowohl in America', wie in England 2 das ScHiEFFEEDECKER'sche Verfahren als „Original-Me- thode" publicirt, ohne dass die „Erfinder" es für nöthig gehalten hätten, Schieffebdecker's Namen auch nur zu erwähnen. Im Jahre 1887 ver- öffentlichte Dr. med. Kültschitzky ' in Charkow ein Einbettungs-Ver- fahren mittels Celloidin und Paraffin, welches die Vorzüge beider Ein- bettungsmedien mit einander verbinden, dagegen sämmtliche Mängel derselben vermeiden sollte. Später ist diese Combination nicht mehr erwähnt worden. Dagegen sind in den bisher erschienenen Jahrgängen dieser Zeitschrift zahlreiche, mehr oder weniger ausführliche Ergänzungen und Beiträge zur Celloidin-Technik von Weigeet*, Strasser ^, Apäthy^, Flormann''', Nikifoeoff^ u. A. veröffentlicht worden. Ich werde im Folgenden an geeigneter Stelle auf diese Mittheilungen zurückzukommen haben. Anweisung für die Verwendung der Cello idin-Einbettung in der Pflanzen-Anatomie haben bis jetzt, soweit ich ermitteln konnte, nur Strasburgee^ und Behrens '^ gegeben, doch haben beide Autoren den Gegenstand nicht so ausführlich behandelt, wie es für Den- jenigen erforderlich, der darauf angewiesen ist, die Technik in ihrem ganzen Umfange ohne praktische Anleitung seitens einer anderen Per- son zu erlernen. So ist nun der Lernende im übrigen darauf angewiesen, sich aus den in acht Jahrgängen dieser Zeitschrift, in wissenschaftlichen „Berichten" und einigen Leitfäden^* zerstreuten Mittheilungen das für ihn Wichtige mit einem mehr oder minder grossen Aufwände an Zeit und Mühe herauszusuchen. Da aber diese Mittheilungen fast ausschliess- ') LiBBEY, W., Celloidine as an imbedding mass. (Amer. Monthly Microsc. Journ. vol. V, 1884, no. 10, p. 183. Cfr. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 137). *) Barret, J. W., A new method of cutting sections for microscopical exa- mination (.Journ. of Anat. and Physiol. vol XIX, 1884, p. 94; cfr. diese Zeit- schrift Bd. IL .1885, p. 279). 3) Cfr. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 48 ff. *) Diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 490 ff. ^) Diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 350; Bd. VII, 1890, p. 304 ff. 6) Diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 360; Bd. VI, 1887, p. 164 ff; Bd. VI, 1887, p. 301 ff. ') Diese Zeitschr. Bd. VI, 1887, p. 184 ft'. «) Diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 188 ff. ■•) STRAsnuRGER, E., Das Botattischc Prakticum. Jena 1887, p. 268 f.. p, 273; p. 517. •") Behrens, W., Leitfaden der Botanischen Mikroskopie. 1890, p. 110 ff. '') Z. B. Behrens, W., Kossel, A, und Schiefperdecker, P., Das Mikro- skop und die Methoden der mikroskopischen Untersuchung. Braunschweig 1889. 464 Busse: Celloülin-Einbettung in der Pflanzenanatomie. VIII, 4. lieh von Medicinern und Zoologen und für solche geschrieben sind und Vieles enthalten, was für den Botaniker werthlos und überflüssig, auf Anderes dagegen nicht eingehen, was für diesen von Wichtigkeit ist, so muss der Lernende im Anfang viel Zeit darauf verwenden, Alles auszuprobiren, bis er schliesslich nach eigener Erfahrung das Wesent- liche vom Unwesentlichen zu sondern im Stande ist. Angeregt einerseits durch die soeben gekennzeichnete Lücke in der Literatur der botanisch-mikroskopischen Technik, anderseits durch eine ausführliche und instructive Beschreibung der Paraffin-Einbet- tungs-Methode (für botanische Zwecke) von L. Koch' will ich im Folgenden versuchen , den erwähnten Mängeln abzuhelfen. Selbst- verständlich kann diese Mittheilung in der Hauptsache nichts Neues bringen, da sich die Celloidin-Technik für unsere Zwecke eng an das in der medicinischen Anatomie überall gebräuchliche Verfahren an- schliesst. Bei der Celloidin-Einb ettung können nur völlig ent- wässerte und von Luft befreite Objecte zur Verarbeitung kommen; Glycerin-Material ist zum Einbetten nicht geeignet. Aelteres Alkohol- Material wird vortheilhaft noch zweimal je 24 Stunden mit abso- lutem Alhohol behandelt, frische Pflanzentheile, soweit sie der Ge- fahr des Schrumpfens durch directe Einwirkung von starkem Alkohol ausgesetzt sind, werden zur Entwässerung nach und nach in 25-, 50-, 75- und lOOprocentigen Alkohol gebracht. Lässt man jede dieser Flüssig- keiten etwa 24 Stunden einwirken, so darf man in den meisten Fällen sicher sein, dass nicht die geringste Gewebeschrumpfung eingetreten ist. Sehr kleine Objecte sind, wie Strasburger (p. 268) empfiehlt, vor der Einbettung mit wässeriger Hämatoxylin-Lösung zu färben, damit ihre Lage im Celloidin später erkennbar sei; diese müssen natürlich nach der Färbung noch entwässert werden. Sind die einzubettenden Objecte in der angegebenen Weise mit Al- kohol behandelt, so werden sie mit einem Gemisch aus gleichen Theilen absoluten Alkohols und wasserfreien Aethers übergössen und etwa 48 Stunden der Einwirkung desselben ausgesetzt. Für die weitere Be- handlung ist es nun nothwendig, sich drei Celloidin-Lösungen von ver- schiedenener Concentration darzustellen-. Zu dem Zwecke wird eine 1) Koch, L., Die Paraffin-Einbettung und ihre Verwendung in der Pflanzen- anatomie. (Pringsheim's Jahrb. für wiss. Bot., Bd. XXI, 1890, H. 3, p. 367; cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 194). -) Ich verwandte ausschliesslich Celloidin aus der Chemischen Fabrik auf Actien. vormals E. Scheuixg in Berlin. VIII, 4. Busse: Celloidin-Einbettuiig in der Pflaiizenanatomie. 405 Celloitlin-Tafel, sofort, naclidem sie der als Verpackung dienenden Bleclikapsel entnommen , in dünne Sclinitzel geschnitten , welche auf einer flaclien Schale ausgebreitet , durch Ueberdeckeu derselben mit Papier vor Staub geschützt, bei Zimmertemperatur getrocknet werden, bis sie vollkommen harte und hornartige Consistenz angenommen haben. Man erhält auf diese AVeise eine vortheilhaftere Consistenz der Eiii- bettungs-Masse selbst, als wenn man das noch Wasser enthaltende, frische Celloidin direct auflijst. Die getrockneten Celloidin-Schnitzel bringt man nun am besten in weithalsige sogenannte Opodeldoc-Gläser von ca. 200 cc Inhalt und übergiesst sie mit Aether-Alkohol , in oben ge- nanntem Verhältniss gemischt. Die Gläser werden mit Korkstopfen gut verschlossen. Man schüttelt den Inhalt der Gläser häufiger um, rührt eventuell den dichteren Absatz vom Boden mit einem Glasstabe auf und kann auf diese Weise innerlialb 36 Stunden eine völlige Lösung des Celloidins bewirken. Diese Lösung wird mit soviel Aether-Alkoliol ver- dünnt, bis sie etwa die Constistenz von dünnflüssigem Honig erlangt hat, und stellt so die eigentliche Einbettungsflüssigkeit (No. III) dar. Aus dieser Lösung stellt man sich durch Verdünnen mit Aether- Alkohol noch zwei weitere dar: No. II von der Consistenz des CoUo- dium duplex und No. I von der Consistenz des einfachen dünnen Collo- diums. Auch die Aufbewahrung dieser Lösungen geschieht am besten in weithalsigen, mit Korkstopfen verschlossenen Opodeldoc-Gläsern. Die Objecte werden nun aus dem Aether-Alkohol für zwei bis drei Wochen in die Lösung No. I übertragen. Je länger sie in dieser Lösung bleiben können, desto besser; denn es ist, um gute Sclinitte zu erlialten, in den meisten Fällen wünschenswerth, dass das Celloidin nicht nur das Object umhülle, sondern es auch durchdringe, was nur erzielt werden kann , wenn man das Object der ersten Lösung längere Zeit aussetzt '. Nach Verlauf der oben angegebenen Frist wird die Lösung No. I abgegossen und mit No. II vertauscht'-. Die Lösung No. II bildet den Uebergang zwisclien No. I und No. III; man lässt sie am besten mindestens drei Tage einwirken. Wer, wie icli, mit grossen Mengen von Material zu arbeiten hat — ich bette meist CO bis 80 Objecte ') Wenn Apatiiv (diese Zeitsclir. Bd. VL 1889, p. 303) sagt: „Wo eine dünne Cello'ulin-Lösung in zwei Tagen nicht eindringt, da dringt sie in vier- zehn Tagen ebenso wenig ein", so mag das für thierische Objecte zutreffen, für pflanzliche jedenfalls nicht, wie mir mannigfache Versuche bewiesen haben. -) Die abgegossene Flüssigkeit kann ohne weiteres wieder für andere Objecte verwendet werden. Zejtsebr. f. wiss. Mikroskopie. Vlll. 1. 31 46G Busse: Celloülin-Einbettung in der Pflanzenanatomie. Till, 4. zu gleicher Zelt ein — wird gut tluin, das von Apäthy ' und danach von Behrens- empfohlene Verfahren mittels Glas dosen nicht anzn- Avenden. Denn erstens würde die Anschaffung einer grosseren Anzahl von Glasdoseu mit Glasdeckeln die Arbeit unnöthigerweise vertheuern, und zweitens muss bei diesem Verfahren die Verdunstung des Aethers genau beobachtet und je nach der im Zimmer herrschenden Temperatur geregelt werden, was einen grösseren Zeitaufwand unvermeidlich machen würde. Und ich brauche wohl kaum hervorzuheben, dass die Vortheile der Celloidin-Einbettung für den Einzelnen wesentlich an Werth ver- lieren, wenn nicht auch mit der Anwendung dieses Verfjihrens, min- destens bei der Verarbeitung grösserer Mengen von Material, eine Zeit- er spar niss erzielt würde. Und dieses kann nur dann der Fall sein, wenn mau eine praktische Zeiteintheilung für die Ausführung säramt- licher Manipulationen jederzeit im Auge behält. Ich Hess mir für meine Zwecke kleine C vi in der- Gläser, 5 cm hoch und 1"5 cm im Durchmesser, herstellen, die ich mit gut schliessen- den Korkstopfen versah. In diesen Gläsern wurden die Objecte von Anfang au sämmtlichen angegebenen Behandlungen unterworfen und verblieben darin bis zur eigentlichen Einbettung, auf die ich im Folgenden näher einzugehen habe. Ich wandte hier zwei Verfahren an, je nachdem ich es mit einzel- nen Objecten zu thun hatte, welche nothwendig von einander getrennt bleiben mussten , oder mit einer Anzahl gleichartiger Objecte , die in einem gemeinsamen Behälter eingebettet werden konnten. Im ersteren Falle gebraucht man cylindrisch geschnittene Korkpfropfen, die man mit einer Hülse von Schreibpapier umklebt, deren Rand das Ende des Pfropfens , soweit es jedem Falle wünschenswerth ist , überragt. Will man dagegen mehrere Objecte gemeinsam einbetten, so ist es empfehlenswerth, sich Kästchen aus gutem Schreibpapier mittels Gummi arabicum herzustellen. Dieselben macht man 1 bis 1*2 cm hoch, 2-,5 cm breit und je nach Zahl und Grösse der einzubettenden Objecte 2*5 bis 4*5 cm lang. Man giesst nun möglichst schnell die dickste CelloTdin-Lösung (No. III), welche vorher nicht geschüttelt oder umgerührt werden darf, um die Entstehung von Luftblasen möglichst zu vermeiden, in eine Korkpatrone oder ein Kästchen, entnimmt darauf mittels eines kleinen Spatels das oder die Objecte dem betreifenden Cylinderglas und ') Cfr. diese Zeitsclir. Bd. VI, 1889, p. 165. -) Bhiihkni-, W., Leitfaden der Botanischen Mikroskopie p. 111. VIII, 4. Busse: Celloülin-Einbettung in der PHanzenanatomie. 467 trägt sie schnell in die dicke Flüssigkeit ein. Es ist gut, die Objecte sofort, vordem sich eine Haut auf dem Celloidin bildet, oberflächlicli mit einer Präparirnadel zu richten und, soweit sie sich in Kästchen befinden, einige Millimeter weit von einander anzuordnen, damit später jedes Object, inmitten eines kleinen Celloidin-^YUrfels liegend, aus dem grösseren Blocke herausgeschnitten werden kann. Die grobe Orientirung der Objecte ist einer der wichtigsten Factoren bei der Einbettung und darf ja nicht übersehen werden, wenn man sich viel Zeit und Mühe ersparen will. Die feine Einstellung erfolgt erst beim Schneiden selbst durch Drehung des Objecthalters am Mikrotom, Ein zweiter, für das Gelingen der Einbettung sehr wesentlicher Umstand, ist die Entfernung von Luftblasen, deren Entstehung weder beim Eingiessen der Celloidin-Lösung in die Papierhülsen resp. Kästchen, noch beim Eintragen der Objecte ganz vermieden werden kann. Sowohl das Richten der Objecte, wie die Entfernung der stören- den Luftblasen werden durch folgendes Verfahren ermöglicht. Man stellt Pfropfen und Kästchen, unmittelbar, nachdem die Objecte einge- legt sind, in eine geräumige, mit Deckel versehene gläserne „Krystalli- sationsschale", in welcher eine Glasplatte liegt, die durch kleine Kork- oder Pappklötze in einiger Entfernung vom Boden der Schale gehalten wird. Die Glasplatte wird mit 8 bis 10 Lagen glatt gefalteten Fliess- papiers belegt. In die Schale wird ein wenig Aether gegossen, so dass der Boden eben damit bedeckt ist. Keinesfalls darf aber der Aether die Oberfläche der Glasplatte befeuchten und auf diese Weise in directe Berührung mit den Papierschächtelchen treten. Nachdem man die Schale zugedeckt hat, bleibt der Inhalt derselben etwa 2 '/a Stunden den sich entwickelnden Aetherdämpfen ausgesetzt. Diese haben zur Folge, dass einmal das auf der Oberfläche des Celloidins gebildete Häutchen wieder gelöst, die Bildung eines neuen verhindert und anderseits die Erhärtung der Celloidinflüssigkeit so lange verzögert wird, bis sämmt- liche Luftblasen entwichen sind. Auf diese Weise kann man zu gleicher Zeit eine grössere Anzahl mit Celloidin gefüllter Korkpatroueu oder Kästchen in einer und derselben Schale behandeln. Ab und zu liat man nur mit einer Nadel die Orientirung derjenigen Objecte vorzuneh- men, welche inzwischen ihre Lage verändert haben. Behalten diese in dem sich immer mehr verdickenden Celloidin endlich die gewünschte Lage bei, so lässt man die Schale noch mindestens 20 Minuten ver- schlossen, damit auch die bei dem letzten Eindringen der Präparirnadel entstandenen Luftblasen an die Oberfläche des Celloidins treten können. 31* 4G8 Busse: Celloidin-Einbettung in der Pflanzenanatomie. YIII, 4. Dann wird der Deckel der Schale ein wenig gelüftet, um den Aether- dämpfen ein allmähliges Entweichen zu ermöglichen. Sobald ein Druck der Fingerspitze auf der Oberfläche des Celloidins keine bleiben- den Spuren mehr hinterlässt, kann man die Papierkästchen resp. Patro- nen mit TOprocentigem Alkohol übergiessen, in welchem sie sich unbe- grenzte Zeit aufbewahren lassen*. Besser jedoch lässt man von Beginn der Bildung eines festen Celloiidin-Häutchens au, welches sehr bald nach OefFnen der Glasschale entsteht, etwa zwei Stunden vergehen, ehe man den Alkohol aufgiesst; so wird man unter allen Umständen eine vortheilhaftere Consistenz der Schnittraasse erhalten-. Nachdem die Präparate 24 Stunden in TOprocentigem Alkohol gelegen, hat das Celloidin die zum Schneiden geeignete Consistenz erlangt. Behufs weiterer Bearbeitung mittels des Mikrotoms sind die Korkpatronen nun von der Papierhülle zu befreien , was sich leicht be- werkstelligen lässt ; dann beschneidet man den dem Kork anhaftenden Cclloidin-Block, soweit das zulässig, und kann darauf den Kork direct in den Objecthalter des Mikrotoms einspannen. Es ist übrigens em- pfehlenswerth, den Celloidin-Block so zu beschneiden, dass er sich der Form einer stumpfen Pyramide nähert, deren Basis sich mit der Fläche des Pfropfens soviel wie möglich deckt. Auf diese Weise wird man ') Die Angaben in der Literatur über die Stärke des hier zu verwenden- den Alkohols sind sehr schwankend ; sie liegen zwischen 50 und 82 Procent. Ich habe ausschliesslich TOprocentigen Alkohol angewandt und keine Ursache gehabt, von dieser Concentration abzuweichen. 2) Den Einwendungen Ai-äthy's (Cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 1G5) gegen die Benutzung von Papierschäch telchen zur Einbettung kann ich mich nicht anschliessen. Denn wenn man nur gutes Schreibpapier zur Herstellung der Schächtelchen verwendet, wird deren Formveränderung nach Aufnahme des Celloidins eine ganz geringfügige sein. Ferner kann der Boden der Kästchen nicht uneben werden, wenn man die Glasplatte mit völlig glattgefaltetem Fliesspapier bedeckt. Das Gewicht der in den Kästchen enthaltenen Flüssigeit wird zudem den Boden der ersteren gleichmässig be- schweren. Die Entstehung von Luftblasen endlich, hervorgerufen durch das Entweichen des Aether- Alkohols aus dem Celloidin, erscheint mir in den mit Aetherdampf gesättigten verschlossenen Glasdosen gerade wegen der Durchlässigkeit des Papiers für Gase unmöglich. Stellt man näm- lich die Kästchen ohne eine Unterlage von Fliesspapier direct auf die Gias- ])latte, so wird man in den meisten Fällen ])eim sjiäteren Entfernen des Bodens der Kästchen an der Unterseite des erhärteten Celloiden-Blockes mehr oder weniger grosse Hohlräume finden, von Luftblasen herrührend, die nicht hatten entweichen können, da am Boden ein Gasaustausch zwischen der Celloi- dinflüssigkeit und der umgebenden Aetber-Atmnsphilre unmöiilich gemacht war. VIII, i. Busse: Celloidin-Eiiibcttiing in der Pflanzenanatoraie. 469 der Gefahr des Abbrechens der Blöcke am besten begegnen können, welche namentlich beim Schneiden solcher Objecte eine beträchtliche ist, die dem Messer einen verhältnissmässig starken Widerstand entgegen- setzen, so z. B. bei der Herstellung von Stengelquerschnitten. Diejenigen Objecte, welche in Papierkästchen eingebettet wurden, werden nun aus dem sie umhüllenden Celloidin-Block so herausge- schnitten, dass jedes inmitten eines kleinen Würfels liegt, den man zur Verarbeitung mittels des Mikrotoms auf einen Korkpropfen oder ein Stück Holiundermark aufzukleben hat. Beim Beschneiden der Würfel, besonders bei der Herstellung der basalen Fläche, ebenso später beim Aufkleben derselben, ist natürlich Rücksicht darauf zu nehmen , ob das Object behufs Anfertigung von Längs- oder Querschnitten eine horizontale oder verticale Lage einnehmen soll. Das Auf- kleben der Würfel geschieht am besten in folgender Weise, Man trocknet den Celloidin-Block sorgfältig ab, wobei es sich empfiehlt, die- jenige Fläche, mit welcher der Würfel aufgeklebt werden soll, ein wenig auf einem leinenen Lappen zu reiben, um auch die letzte Spur an- haftender Feuchtigkeit zu entfernen. Dann wird die ebene Oberfläche des Korkcylinders resp. Holhindermarkstückchens mit einem Tropfen Celloidin-Lösung No. HI befeuchtet und der Celloidin-Würfel schnell aufgesetzt und schwach angedrückt *. Die Präparate lässt man noch etwa 5 Minuten an der Luft stehen, damit das zum Kleben verwandte Celloidin erhärten kann und legt sie — nunmehr schnittfähig — bis zur weiteren Verarbeitung in TOprocentigen Alkohol, Vor der Behandlung mittels des Mikrotoms beschneide man die AVürfel in Form einer stumpfen Pyramide; doch so, dass man ihre ur- sprüngliche Basis nicht verändert. Ich will hier nicht unterlassen , zu bemerken , dass man sämmtliche beim Beschneiden der Würfel und später abfallende Celloidin-Reste wieder verwerthen kann, indem man ») ApIthy (Cfr. diese Zeitschr. Ed. VI, 1889, p. 167) und später Behrens (Leitfaden p. 111) betonen, man solle das an den Kändern des Würfels her- vorquellende Celloidin sofort entfernen, damit die Klebkraft der miter dem Würfel befindlichen Celloidin-Lösung erhöht werde. Ich habe im Gegen- theil gefunden, dass es rathsam sei, dieses zu unterlassen, da der die Basis des Würfels umgebende Celloidin-Ring die Unannehmlichkeit des späteren Ab- brechens der Würfel wesentlich vermindert, indem er die letzteren noch fester mit ihrer Unterlage verbindet. Zahlreiche Versuche haben mir das Vortheil- hafte dieser Arbeitsweise gezeigt. Uebrigens genirt der sich bildende Celloidin- Ring später beim Schneiden nicht im mindesten , da er sich sofort von jedem Schnitt ablöst und dann mit Leichtigkeit entfernt werden kann. 470 Busse: Celloiclin-Einljettung in der Pflanzenauatomie. VIII, 4. sie, wie das frischbezogene Celloidin vollständig trocknet und dann wieder in Aether- Alkohol auflöste Was die Technik des Schneidens mit dem Mikrotom anbetrifft, so verweise ich im allgemeinen auf die bereits citirte Arbeit von L. Koch , die an Ausführlichkeit in der Anleitung nichts zu wün- schen übrig lässt, halte es jedoch für uothwendig, auf einige Details noch besonders aufmerksam zu machen 2. Zunächst empfiehlt es sich, das Messer des Mikrotoms fortwährend mit TOprocentigem Alkohol gut zu befeuchten und ebenso die Schnittfläche des Celloidin-Blockes mit demselben zu benetzen, so- bald man genöthigt ist, während des Schneidens eines und desselben Objectes zu pausiren , was behufs mikroskopischer Prüfung der erhalte- nen Schnitte öfters erforderlich ist^. Das Messer werde „längs" ein- gestellt, so dass zur Herstellung eines Schnittes ein möglichst grosser Theil der Schneide zur Verwendung komme, es werde langsam, aber gleichmässig bewegt. Es ist nicht nothwendig, dass das Messer den Celloidin-Block sofort ganz treffe, wie dies Koch für die Paraffin- Methode angiebt. Die Schnittdicke richtet sich einmal nach der Con- sistenz des als Einbettungsmasse verwendeten Celloidins, anderseits nach der Beschaffenheit und der Grösse der Objecte. Die Schnitte reihe man am besten vorläufig nebeneinander auf dem Messer auf und übertrage sie dann mit Hülfe eines kleineu Blättchens schwarzen Seidenpapiers, •) Steasburger (Botanisches Prakticum p. 517) giebt für das Schneiden der Samenknospen von Aconitum Napellus eine Einbettungs-Methode an, die ich zwar niemals anzuwenden Gelegenheit hatte, die mir aber für geeignete kleine Objecte überhaupt vortheilhaft erscheint, besonders wenn die letzteren bereits eine Zeit lang in dünnerer Celloidin-Lösung gelegen haben. Stuas- BURGER senkt die Samenknospe in einen Tropfen Celloidin-Lösung ein, den man vorher auf einen Korkstopfen gebracht hat, orientirt ihre Lage und schneidet entweder direct, nachdem das Ccllo'idin entsprechend erhärtet ist, oder er legt den Pfropfen zuvor eine Zeitlang in Alkohol, welches letztere Ver- fahren ich übrigens für das bessere halte. 2) Wie Koch benutzte auch ich ausschliesslich ein von R. Jung in Heidel- berg bezogenes RivET-LEisER'sches, (von Thiima verbessertes) Schlitten-Mikrotom und planconcave Messer. •■») Apathy (Cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 167) räth, das Mikrotom- Messer mit gelber Vaseline zu bestreichen. Dieses Agens wäre für unsere Zwecke von erheblichem Nachtheil; denn gerade darin liegt, wie wir später sehen werden, ein Haupt- Vorzug des Celloidin- Verfahrens , dass man die er- haltenen Schnitte ohne weiteres in Glycerin -Gelatine einbetten kann. Müsste dagegen die störende Vaseline vor der Herstellung von Dauerpräparaten erst entfernt werden, so würde der soeben erwähnte Vortheil aufgehoben. VIII, 4. Busse: Celloülin-Einbcttung in der Pflanzenanatomic. 471 das man vorlier in TOprocentigen Alkohol getaucht hat, auf den Object- träger. Man legt das Seideupapierblättclien auf den Schnitt, drückt es sanft darauf und zieht es dann über die Schneide des Messers langsam her- unter. Der Schnitt legt sich der Unterseite des Blättchens vollständig an und bleibt auf dem Objectträger ausgebreitet haften, wenn man das Blättchen diesem wiederum sanft aufdrückt und es dann vorsichtig hochhebt. Hat sich jedoch der Schnitt zusammengerollt, so kann man ihn auf dem Objectträger in einem Tropfen Wasser oder Glycerin mit Hülfe von Nadeln bequem wieder auseinanderfalten. Im allgemeinen ist die Nachbehandlung d e r S c h n i 1 1 e bei An- wendung der Celloidin-Einbettung sehr einfach und darin liegt ein wesent- licher Vortheil, welchen diese Metliode vor dem Paraffin-Verfahren besitzt. Sind die Objecto vor der Einbettung gefärbt, oder ist eine Färbung überhaupt unnöthig, so kann man die Schnitte, ohne das ihnen anhaf- tende Celloidin vorher entfernt zu haben, zur Herstellung von Dauer- präparaten direct in Glycerin- Gelatine eintragen. Ich lege die Schnitte zu diesem Zwecke, nachdem ich sie vom Messer genommen, in einen oder zwei Tropfen verdünnten Glycerins (1 Hh ^ '^^0 und stelle die Objectträger, ohne Deckgläschen aufzulegen, nur mit einer Glas- glocke bedeckt, 24 Stunden bei Seite. Nach dieser Zeit ist sowohl der vom Messer hier übertragene Alkohol, wie sämmtliches überflüssige Wasser verdunstet uud nur soviel Glycerin übrig geblieben, als nothwen- dig ist, um die Schnitte feucht zu erhalten. Will man, um Objectträger und Deckgläser zu sparen, mehrere Schnitte zu einem Dauerpräparat vereinigen, so ordnet man sie nun mit der Nadel in der gewünschten Reihenfolge an und lässt die flüssige Gelatine auftropfen , ohne Gefahr zu laufen, dass die Schnitte ihre Lage wesentlich verändern werden. Ein vorheriges Bestreichen der Objectträger mit Celloidin und Fixiren der Schnitte auf diesem ist bei dem soeben beschriebenem Verfahren vollkommen überflüssig. Schnitte, welche in Canadabalsam eingelegt werden sollen, sind mit Oöprocentigem (nicht absolutem!) Alkohol zu entwässern und dann mittels Origauum- oder Bergamottöl aufzuhellen, ehe sie in den Balsam übertragen werden. Sind mit den Schnitten noch Tiuctionen vorzunehmen, bei welchen das ihnen anhaftende Celloidin störend wirkt, wie z. B. beim Färben mit Anilin- Farben , oder hat man sie mit Eau de Ja v eile oder Kalilauge zu behandeln, so ergiebt sich die Nothwendigkeit, die Schnitte zunächst vom Celloidin zu befreieu. 472 Busse: Celloidin-Einbettuiig in der PHauzcnanatoniie. VIII, 4. Hierbei erweist sich die Anwendung eines von Chaveaud con- struirten und „Mikroplyne" genannten Apparates als sehr praktisch'. Uebrigens hielt ich es für angebracht, an der CnAVEAUD'schen „Mikroplyne" einige Vereinfachungen vorzunehmen. Ich Hess mir einen Trichter aus dünnem Ghise herstellen, mit einem Halse von ca. 12 mm im Durchmesser, dessen Ende zuschmelzen und den Boden mehrfach durchlöcliern (s. nebenstehende Figur). Dieser Trichter wird in ein mit durchbrochenem Kautschuk-Stopfen (r) versehenes solides kleines Cylinderglas (7) so eingesetzt, dass der Boden des Trichters den Boden des Glases fast unmittelbar berührt. In den Hals des Trichters wird wenig Glas wol Ic (nicht Glaspulver!) fest eingedrückt (/t;). Darauf spült man die zu bearbeitenden Schnitte mit etwas Alkohol in den Trichter, bis sie auf die Glaswolle zu liegen kommen, und bedeckt sie vorsichtig mit einem zweiten Bauscli von Glaswolle (iv^). Auf diese Weise erspart man sich einmal das Platinnetz und zweitens die Herstellung und das mehr- fache Absieben des von Chaveaud vorgeschla- genen Glaspulvers, dessen Feinheit sich jeweils nach der Grösse der Maschen des Netzes zu richten hätte. Zur Beseitigung des die Schnitte umgebenden Celloidins wird nun zu- nächst Aether- Alkohol aufgegossen, bis das Cylinder-Glas etwa zur Hälfte damit gefüllt ist; nach Verlauf von 1 bis 2 Minuten hebt und senkt man den Trichter einige Male in der Flüssigkeit, um die jetzt entstandene Celloidin- Lösung aus der Glaswolle herauszuspülen. Darauf wird die Flüssigkeit abgegossen, mit einer neuen Quantität Aether-Alkohol nachge- spült, dieser mittels Alkohol verdrängt und letzterer endlich durch Wasser ersetzt, wenn die nächste Flüssigkeit, welche in Anwendung kommen soll, eine wässerige ist. Man hat nun in den meisten Fällen nur soviel des betreffenden Reagens oder Färbemittels aufzugiessen, dass die Glaswolle völlig durch- tränkt und das Cylinderglas soweit mit Flüssigkeit erfüllt ist, dass das ') Chaveaud, L. G., Recherches embryogeniques sur l'appareil lactifere des Euphorbiacees, Urticacees, Apocynees et Asclepiadees (Ann. des sc. nat., Botanique ser. 7 t. XIV, 1891, p. 19 ff.; cfr. diese Zeitschr. Bd. VIII, 1890, p. 414 f.). VIII, 4. Busse: Celloidhi-Eiubcttung in der Pflanzenanatomle. 473 Ende des Tricliters noch eben in dieselbe eintauchen kann. Zum Aus- waschen der Reagentien aus den Schnitten setzt man den Trichter in einen EELENJiEYER'schen Kolben von passender Grösse und darf dann einen beliebig starken Strahl von Wasser oder Alkohol einwirken lassen, ohne ein Zerreissen der Schnitte befürchten zu müssen, da diese zwischen der Glaswolle in ihrer Lage nicht verändert werden können, ein Vor- tlieii, der bei Anwendung von Glaspulver in Wegfall käme. Sind sämmtliche Reactionen, beziehungsweise Tinctionen beendet, so zieht man die Glaswolle sammt den Schnitten mittels einer gebogenen Nadel aus dem Trichter heraus und schwenkt sie in einer geräumigen Uhrschale voll Wasser aus, wobei sich die Schnitte schnell von der Glas- wolle ablösen und ihnen etwa noch anhaftende Splitter der letzteren zu Boden sinken. Selbstverständlich wird die Nachbehandlung der Schnitte eine wesentlich andere, sobald es sich darum handelt, ganze Schnittserien in bestimmter Reihenfolge auf den Objectträgern zu lixiren und zu färben. Ich habe niemals mit Schnittserien in dieser Weise arbeiten müssen und kann deshalb in diesem Punkte nicht die eigene Erfahrung sprechen lassen. Dagegen finden sich in der Literatur vielfache Angaben für die Herstellung und Behandlung von Serien- Präparaten, auf welche ich hier verweisen muss. Mehr oder minder ausführlich haben in dieser Zeitschrift Weigert ', GlEEOED^, SCHÄLLIBAUJI^, StBASSER^, ApÄTHY^ Und SCHIEFEEEDEOKER^ den Gegenstand erörtert 5 auch geben Strasbueger in seinem „Botanischen Prakticum"' und Jgx. Dionisio^ Anleitungen zur Nachbehandlung von Schnit tseri en. In allgemeinen wird an den Botaniker die Aufgabe, lückenlose Schnittserien aufzubewahren, nicht allzuhäufig herantreten 5 vielmehr wird er in den meisten Fällen nur nöthig haben, sich aus jeder Serie die geeigneten Schnitte auszulesen. Aber dass man bei geeigneter Handhabung des Einbettungs-Ver- fuhrens und des Mikrotoms — unvorhergesehene Zwischenfälle ausge- ') Cfr. diese Zeitsclir. Bd. 11, 1885, p. 490 ff. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 45 ff. ^) Cfr. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 210 ff. ■») Cfr. diese Zeitschr. Bd. III, 1886, p. 350; Bd. VIII, 1890, p. 304 ff. ■-) Cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 45 ff.; p. 360. '■) Cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 506 ff'. ") Str.^sbüroei!, E., Botanisches Prakticum p. 273 f. 0 DioNYsio, J., in Med. Jahrb. 1888, (Wien 1889) p. 329—333 (Ref. im Butan. Ccntralbl. Bd. XL, 1889, p. 206). 474 Busse: Celloidiii-Einbcttung in der Pflanzenanatomic. VIII, 4. iiommen — in verliältuissmässig kurzer Zeit ohne jegliche Mühe und mit absoluter Sicherheit da die gewünschten Schnitte erhält, wo man beim Schneiden mit dem Messer aus freier Hand ganz und gar vom Zufall abhängig ist , das bedeutet einen Vorzug von ausserordentlicher Wichtigkeit. Selbstverständlich kommt es hier, wie bei der Anwendung sämmt- licher Einbettungsmittel, in erster Linie auf eine praktische Arbeitsein- tbeilung an. Hat man sich erst einmal daran gewöhnt, alle erforderlichen Manipulationen an einer möglichst grossen Anzahl von Objecten zu gleicher Zeit auszuführen, so wird man sehr bald zu der Einsicht ge- langen, dass das Celloidin-Einbettungs-Verfahren absolut kein complicirtes und zeitraubendes, sondern ein im höchsten Grade einfaches ist. Zum Schlüsse noch eine kritische Betrachtung: Mannigfach sind, wie gesagt, die Vortheile, welche das Celloidin- Verfahren vor der Paraffin-Einbettung auszeichnet. Einmal nimmt sowohl die Präparation der einzubettenden Objecto bis zu deren Schnittfähigkeit, wie auch diö Behandlung der fertigen Schnitte bei ersterem Verfahren weniger Zeit und Mühe in Anspruch , als bei der Benutzung von Paraffin als Ein- bettungsmittel, anderseits sind die Vorzüge nicht zu unterschätzen, welche das Celloidin in seiner zähen, von jeder Temperatur unabhängigen Consistenz mit sich bringt. Doch ist ein Uebelstand des Celloidin- Verfahrens, soweit ich aus der einschlägigen Literatur ersehen konnte, bisher nicht beseitigt worden, der die Anwendung dieses Verfahrens in vielen Fällen unmöglich macht. Ich meine den Umstand, dass sich mit dem Paraffin bedeutend dünnere Schnitte erzielen lassen, als mit der Celloidin-Einbettung. Es ist mir bis jetzt nicht gelungen, unter- halb einer Schnittdecke von 15 [x lückenlose Schnittserien herzustellen, zusammenhängende Schnitte von 10 |x sehr selten und solche von 5 \x überhaupt nicht zu erhalten , während die Herstellung derartig dünner Schnitte durch die Anwendung von Paraffin ermöglicht wird. Dagegen waren die in einer durchschnittlichen Dicke von 15 oder 20 |ji hergestellten Schnitte, wie sie für botanische Zwecke in der Regel ausreichen, in jeder Beziehung musterhaft und gaben je nach der Wahl der Objecte ausgezeichnet klare mikrophotographische Bilder. Geschnitten wurden in erster Linie Vegetationskegel , dann unter Anderem Laubblätter, Coniferen-Nadeln, Farn-Prothallien , Stengel, Rhizome und Ausläufer krautiger Pflanzen und zwar wurden jeweils Längs- wie Querschnitte hergestellt, stets mit gleichem Erfolge. VIII, 1. Unna: Uebcr die Reifung unserer Farbstoffe. 475 Herrn Prof. Dr. Klein hierselbst, in dessen Laboratorium meine Arbeiten ausgefülirt wurden, und welcher die Liebenswürdigkeit hatte, mir sowolil das Mikrotrom , wie seine Bibliothek bereitwilligst zur Ver- fügung zu stellen , spreche ich an dieser Stelle meinen ergebenen Dank aus. Ebenso danke ich Herrn Dr. med. J. Tüestig ans St. Petersburg für manche freundlichen Rathschläge, die mich seinerzeit beim Erlernen der Technik wesentlich gefördert haben. Freiburg i. B., 25. Januar 1892. [Eingegangen am 2(j. Januar 1892.] Ueber die Keiluno^ unserer Farbstolie. o Von Dr. P. G. Unna in Hamburg. Seit geraumer Zeit hat mich das Wesen des „Reifens" unserer Farblösungen beschäftigt, und ich bin durch Nachdenken und Versuche zu einigen praktischen Ergebnissen gekommen, die ich den Fachgenos- sen zur Verwerthung und weiteren Vervollkommnung mittheilcn möchte. Da ich in den letzten Jahren nicht im Stande war, die einschlägige Literatur genau zu verfolgen, so kann es sein, dass Manches von dem, was ich gefunden habe, bereits anderweitig bekannt und vielleicht auch beiläufig publicirt ist. Da jedoch die Ziele, die ich mir hierbei steckte, soviel ich weiss, von anderen Autoren nicht erstrebt wurden, so werden auch in diesem Falle wohl die auf meinem Wege gefundenen Resultate noch mittheilenswerth erscheinen. Es ist eine alte Thatsache, dass eine grosse Reihe unserer Farb- stoffe, der Aniliuperiode sowohl wie der Vorzeit, sich in unseren Stand- gefässen fortdauernd verändern. Dieser Umstand kann uns, wenn wir das Ziel vor Augen haben, dass alle unsere Tinctionen den Werth eines jeden Augenblick mit dem gleichen Resultat wiederholbaren Experi- mentes besitzen, nicht gleichgültig sein. Diese Veränderungen, die wir also kennen lernen müssen, um sie beherrschen zu können, stellen ent- 476 Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. VIII, 4. weder Verschlechterungen oder Verbesserungen dar. Die ersteren können in dem chemisclien Charakter der Farblösung oder der unserer Standgefässe begründet sein. Es handelt sich in einem Falle um ein „Ueberreifen", den Beginn einer Ausfällung in der Farblösung, eine von der „Schwebefällung" zur wirklichen Fällung übergehende Metamorphose, die eigentlich erst im Beginn der Ausfärbung stattfinden sollte, statt dessen uns aber nun die Farblösung zur Tiuction überhaupt unbrauchbar macht. Oder es handelt sich im anderen Falle um eine Ausfällung an der Glaswand, um eine echte Tinction, eine Verbindung des Glases mit der Farbe, besonders wenn das Glas einen Ueberschuss an Alkali besitzt. Auch hierdurch wird allmählig die Farblösung ver- ändert und unbrauchbar. Auf diese Veränderungen und die Mittel, sie zu verhindern, will ich hier nicht näher eingehen. Denn ungleich wichtiger erscheinen mir die Verbesserungen, welche — gewollt oder ungewollt — viele Farblösungen mit der Zeit erfahren. Mau hat diesen Vorgängen den ganz passenden Namen des „Reifens" gegeben , der deshalb besonders am Platze ist, weil die Farblösung gerade wie die Frucht einem be- stimmten Zeitpunkte der Brauchbarkeit entgegenreift, nach deren Ueber- windung sie auch gewöhnlich „überreif" und unbrauchbar wird. Da in allen Laboratorien der Welt ähnliche Beobachtungen über das Reifen gemacht sind, da es sich dabei nach meinen Erfahrungen niemals um eine schon beginnende Schwebefällung oder Anfärbung des Glases handelt, so müssen wir zur Erklärung des Reifens auf diejenigen Factoren recurriren, die sonst noch von aussen her, nämlich aus der Luft, mit der Farblösung in Berührung kommen. Der Universalität der Erscheinung wegen kommen nur die universellsten in Betracht und zwar: 1) der Sauerstoff, 2) die Kohlensäure, 3) der Ammoniak und 4) die Mikroorganismen der Luft. Der letztere Factor kann auch dem Farbstoffe von vornherein anhaften. Der Gang meiner Versuche war nun immer der, dass ich die be- treffenden Farblösungen der Reihe nach mit diesen Factoren in concen- trirtem Zustande und unter den günstigsten Umständen zusammen- brachte und beobachtete, ob die sonst mit der Zeit spontan eintretende Reifung hier künstlich schnell herbeigeführt werden könnte. Ich be- handelte sie also einzeln mit Wasserstoffsuperoxyd, Kohlensäure, Ammo- niak, resp. kohlensaurem Ammoniak, und mit Nährlösungen für Bacte- rien in der Wärme. Von den Farben habe ich bisher nur Cochenille, Hämatoxylin und Methylenblau, als die mir nächstliegenden, in dieser Richtung bearbeitet, YIII, 4. Unna: lieber die Reifung unserer Farbstoffe. 477 imdich beginne mit dem Metliylenblau lediglich aus dem äusseren Grunde, weil ich seit meiner Mittheilung über die Darstellung der Plasraazellen und der Mastzellen olme Säure mehrfiich um genauere Daten über diese Methylenblaulösungen angegangen bin. I. Methylenblau. Die Metachromasie der Mastzelleu bei Metliylenblaufärbung kennt man so lange wie jene selbst. Diese Zellen nehmen stets einen röthe- ren Farbenton an als das übrige Gewebe, erscheinen daher meist violett, bei Säuredarstellung (in mit Säure abgeschwächten Lösungen oder bei Säureentfärbung) dunkelviolett. Bei meinen ersten Versuchen über die Darstellung der Plasmazellen des Lupus und anderer Hautkrankheiten erhielt ich aber die Mastzellen nebenbei rein roth, und diese uner- wartete Zugabe war um so erfreulicher und wichtiger, da nicht in allen Fällen Körnung und Form die Mastzellen von meinen Plasmazellen so ganz leicht unterscheiden lassen, und da ausserdem jeder spontan bei der Färbung auftretende Farbencontrast das Arbeiten sehr erleichtert. Weitere Versuche zeigten mir jedoch bald, dass diese schöne und reine Rothfärbung nicht allein von den neu von mir eingeführten Entfärbungs- mitteln (Kreosol, Styron, Glykol) herrühren konnte, denn es gelang mir eine Zeit lang nicht wieder, diese schöne Contrastfarbe der Mastzellen zu erhalten. Ich hatte damals eine alte alkalische Methylenblaulösung von der Formel: Methylenblau 1, Kali caust. 0-05, Aq. dest. 100 benutzt. Die gute Nüancirung konnte also in dem Alter der Lösung, in einer Rei- fung liegen , und dieses war für mich die nächste Veranlassung, den Veränderungen des Methylenblaues in unseren Standgefässen nachzu- gehen. Eine Veränderung durch Bacterien ist nun beim Methylenblau wegen seines stark bactericiden Charakters ausgeschlossen. Sodann be- lehrten mich die nächsten Versuche, dass Behandlung des Methylen- blaus mit Wasserstoftsuperoxyd und Kohlensäure keinen Einfluss auf die Färbung der Mastzellen hatte. Es blieb also für das Methylenblau nur die Einwirkung der Alkalien und kohlensauren Alkalien zu erfor- schen übrig. Ich verfuhr zunächst so, dass ich 2procentige spirituöse Blaulösuu- gen mit 2promilligen wässerigen Lösungen von Alkalien und 2procen- tigen der kohlensauren Alkalien zu gleichen Theilen kochte. Dabei ent- standen zuerst braune , dann blaue klare Lösungen , die beim Ver- dampfen des Spiritus auf dem Wasserbade immer mehr violett wurden. 478 Unna: üeber die Reifimg nnserer Farbstoffe. VIII, 4, Beim Ausfärben erwiesen diese Lösungen sich aber völlig unbrauchbar für Mastzellen trotz ihrer ins Röthliche spielenden Farbe. Dagegen er- gaben sie eine geradezu prachtvolle Nüancirung aller protoplasmatischen und intercellularen Bestandtheile vom Dunkelviolett der Plasmazellen zum helleren Violett der Epithelien und Bindegewebszellen bis zum grau- lichen Ton des schwächstgefärbten Protoplasmas und blaugrünlichen des Nucleins und Collagens. Für die Darstellung der Mastzellen waren diese Lösungen jedoch geradezu schlecht, wie denn auch nirgends der erwünschte rothe Ton auftrat. Durch diese Versuche ging mir ein Licht auf über viele schon früher von mir zufällig erhaltene Methylenblaufärbungen, bei denen die Plasmazellen prachtvoll dunkelviolett statt dunkelblau, und das schwächer gefärbte Gewebe in grauvioletten, fein abgestuften Tönen, allerdings neben röthlichen Mastzellen gefärbt waren. Es hatte sich dabei offenbar um starke alkalische Lösungen gehandelt, welche allmählig reifend, spontan Methylenviolett entwickelt hatten, ohne dass in ihnen das Roth bereits geschwunden war wie in den lange gekochten Lösungen. Aus Methylenblau, CjeHigNgSCl, entsteht nämlich bei Behandlung mit Alkalien unter Wasseraufnahme und Abspaltung von salzsaurem Dime- thylamin : Methylenviolett, C, 4 H, 2 N2 S 0. Es ging weiter aus diesen Versuchen hervor, dass die rothe Mast- zellenfärbung, obwolil auch sie mit alten alkalischen Methylenblaulösun- gen gut zu erhalten ist, durch zu starke Einwirkung der Alkalien ver- loren geht und also keinesfalls auf einer Färbung mit Methylenviolett beruht. Weiter kam ich erst, als ich der Thatsache Beachtung schenkte, dass spiritushaltige Methylenblaulösungen beim Eintrocknen oft einen äussersten rein rothen Saum hinterlassen. Da eine Oxydation hierbei keine Rolle spielt, so kann dieser Umstand wohl nur darin begründet liegen, dass an diesem Rande stets der wasserfreieste Spiritus sich be- findet und verdunstet. Vielleicht besass der rothe Farbstoff andere Lösungsverhältnisse als das Methylenblau. In der That war es mir leicht, aus meinen Lösungen sowohl wie aus deren Trockenrückstand mit Aether einen lediglich rosarothen Farbstoff auszuziehen. Ich schich- tete verschiedene fertige Lösungen im Reagirglase mit Aether über. Am stärksten färbte sich der letztere über alten alkalischen , weniger über frischen alkalischen, am wenigsten über Lösungen ohne Alkali- zusatz. Noch intensiver gefärbte Lösungen erhielt ich , wenn ich alte alkalische Methylenblaulösungen abdampfte und den Rückstand mehr- fach mit Aether auszog. Auf diese Weise konnte ich grössere Mengen VIII, 4. IJnna:^neber die Reifung unserer Farbstoffe. 479 der kirschroth gefärbten ätlierischen Lösung sammeln und zu einigen Versuchen benutzen. Der Niedersclilag löste sich nach dem Verdun- sten wieder leicht in Aether und absolutem Alkohol. Alkalien, auch Anilinöl entfärbten die Lösung oder verfärbten sie bläulich. Bei der Einwirkung von Säuren trat die rothe Farbe wieder und sogar kräftiger hervor. Diese Reactionen kommen dem Metliylenblau nicht, wohl aber dem Methylenroth zu, welches denn in meinen rothen Farbstoffen mehr oder weniger rein vorgelegen haben muss. Mit den ätherischen, Spirituosen, Carbolsäure oder Salzsäure halti- gen Lösungen des Methylenroths gelang mir eine deutliche Mastzellen- färbung leider nicht. Doch spricht dies nicht dagegen, dass in dieser rothen Farbe das Färbeprincip der Mastzellenkörnung vorliegt ; denn die Tinctionsfähigkeit hängt bekanntlich auch vom Vehikel des Farbstoffes ab, und wahrscheinlich ist die Methylenblaulösung eben das zur Färbung allein geeignete Vehikel. Jedenfalls wird durch das Mitgetheilte die oft gemachte Beobach- tung verständlich, dass bei der Entwässerung und Entfärbung der Me- thylenblaupräparate die sich ablösende FarbHotte bald rein blau , bald blauviolett ist. Darauf hin gerichtete Versuche bestätigten die Ver- muthung, das rein blaue Wolken nur bei Anwendung vou verdünntem Spiritus sich ablösen, uud dass die violette Farbe um so stärker auftritt, je wasserfreier der Alkohol ist, Ebenso verständlich wurde mir weiter die Thatsache, dass mittels des Glykols und Styrons die Mastzellen sich viel leichter metachromatisch darstellen als mittels Kreosols, denn letz- teres hat eine ätherartige Structur, während Styron ein dickflüssiger Alkohol, und Glykol sogar mit Wasser in allen Verhältnissen mischbar ist. Es kommt also, die Existenz der rothen Componente im Methylen- blau vorausgesetzt. Alles darauf an, dieselbe beim Entfärben und Ent- wässern nur nicht auszuziehen, sondern in den Mastzellen , wo sie sich angehäuft hat, zu lassen. Man muss zu diesem Zwecke durchaus den absoluten Alkohol, Aether, Kreosol und ähnliche ätherartige Substanzen vermeiden. Dagegen kann man die Schnitte gerne in verdünnutem Spiritus entfärben, ebenso in Glykol oder Styron und von hier aus direct in Bergamottöl bringen. Man wird dann die Mastzellen stets roth oder wenigstens dunkel- blauroth finden. Um ganz reine Contrastfärbuugen hervorzubringen, hat man sich dann nur noch sonstiger bekannter Principien zu bedie- nen. ]\Ian wird vor allem langsam in stark verdünnten Lösungen aus- färben, sodass von vornherein das Blau möglichst nur die Plasmazelleu, das Roth nur die Mastzellen anfjü-bt. Sodann wird man, da bekanntlich 480 Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. VIII, 4. das Roth der Mastzellen säurefest ist, eine ganz schwachsaure Beize anwenden, die doch nicht so stark sauer ist, dass sie die Plasmazellen- färbung beeinträchtigt und die blaue Kernfärbung der Mastzellen auf- hebt, sonst würde die reine Contrastfärbung innerhalb der Mastzellen wieder in die gewöhnliche, seit Ehelich bekannte, mittels Säuren be- wirkte übergehen. Ein solcher auf der Grenze stehender Körper ist die Carbolsäure. Mit etwa 2procentiger wässeriger Phenollösung verdünnt (bis auf das 50- und lOOfache) geben die obengenannten alkalischen Methylenblaulösungen bei nachfolgender Differenzirung mittels Styrons prachtvolle Contrastbilder der Mastzellen. Hierbei ist aber immer noch vorausgesetzt, dass die angewandte Methylenblaulösung eine hinreichende Menge des rothen Farbstoffes enthält. Es ist nun bekannt, dass bei der früher gewöhnlichen Darstellungs- weise des Methylenblaus sich daneben geringe Mengen von Methyleu- roth, C,o HigNjSj, bildeten, besonders bei Anwendung grösserer Mengen von Schwefelwasserstoff. Jetzt scheinen solche „rothstichigen" Methylen- blaus bei geänderter Darstellungsweise nicht mehr so viel im Handel vorzukommen. Für unsere Zwecke der Doppelfärbung waren sie aber ausgezeichnet ; ich zweifle nicht, dass das Methylenroth, eine ungewollte Verunreinigung jener Methylenblausorten , den Mastzellenkörnern die rothe Farbe verlieh. Weiter aber ist aus obigen Versuchen zu ersehen, dass in alkalischen Lösungen die Menge des zur Tinction gelangenden rothen Farbstoffes bis zu einer gewissen Grenze wächst, und somit werden auch die reineren, blaustichigeu Sorten, mit Alkalien versetzt, mit der Zeit für die Mastzellenfärbung „reif". Es lag mir nach diesen Erfahrungen nun noch daran, ausfindig zu machen, welche Alkalien die Rothfärbung mit der Zeit am besten hervor- bringen und wie sich die Reifung bei diesen schliesslich erklärt. Ich prüfte zu diesem Zwecke eine grosse Reihe von Lösungen des- selben etwas rothstichigen Methylenblaus an ein und demselben Objecto, welches an Plasma- und Mastzellen reich war (Alkoholschnitte von hartem Schanker): zunächst mit verschieden starken Zusätzen von Kali causti- cum, sodann mit Zusatz von Ammoniak, Amnion, carbon., Kali carbon., Natron carbon., Borax und zwar mit und ohne Anilinöl, mit und ohne Spiritus; dann weiter zum Vergleiche mit Zusätzen von Carbolsäure, Choroform, P]ssigsäure, Salzsäure und sauren Farbstoffen. Allen voran bewährten sich die Färblösungen, welche Kali carbon., Natron carbon. oder Ammon. carbon. enthielten; sie zeigten die reinsten VIII, 4. Unna: üeber die Reifung unserer Farbstoffe. 481 Contrastfarben zwischen Blau des Kernes und Roth der Körner der Mastzellen. Unter ihnen war kaum ein Unterschied zu finden. Sie waren den Lösungen mit Zusatz von Kali causticum noch überlegen, obgleich auch diese und zwar in allen Stärken gute Contrastfärbung er- gaben, jedoch blieb noch immer zu viel Blau in den Mastzellenkörnern zurück, wenigstens dort, wo zugleich die Plasmazellenfärbung eine mög- lichst gute, starke war. Nach diesen Lösungen kam die mit Boraxzusatz. Beigabe von Anilinöl schwächte die Mastzellenfärbung ab; ein geringer Zusatz von Spiritus schien ohne Eicfluss zu sein. Auf der anderen Seite hob der Zusatz der Essigsäure und Salz- säure selbstverständlich die Mastzellen hervor; doch auf Kosten der Plasmazellenfärbung (und der Kernfärbung der Mastzellen). Dagegen litten die Plasmazellen nicht bei einem Zusatz von Carbolsäure oder Chloroform, obwohl die Mastzellenköruung scharf hervortrat. Man kann also zur Lösung der alkoholischen Flotten sehr wohl Carbol- oder Chloro- formwasser gebrauchen, vielleicht mit Vortheil. Damit klärte sich denn auch die Frage nach der hier vorliegenden Art der Reifung auf. Die alten Lösungen von Methylenblau, die nach LöFFLER mit geringem oder mit stärkerem Zusatz (2 Promille) von Kali causticum versehen sind, werden deshalb mit dem Alter besser, weil sie aus der Luft Kohlensäure anziehen und sich allmählich in solche mit Kali-carbonicum-Zusatz verwandeln. — Recapituliren wir kurz die Resultate, so haben wir es bei länger aufbewahrten Lösungen von Methylenblau, die einen Zusatz von Kali causticum (Natron caust., Ammoniak) erhalten haben, mit zwei ver- schiedenen Arten der Reifung zu thun. Einerseits entsteht in der Lösung durch Umsetzung allmählich eine grössere Menge Methylen violett. Damit schwächt sich die Mast- zellenfärbung ab, aber die Plasmazellenfärbung und die Tinction aller protoplasmatischen und intercellularen Substanzen erhält eine ausge- zeichnet feine Nüancirung zwischen violetten, graublauen und blaugrünen Tönen. Anderseits kommt durch allmähliche Einwirkung der Kohlensäure der Luft eine Sättigung des überschüssigen Alkalis der Lösung zu Stande, welche bewirkt, dass nun die Mastzellenfärbung in reinerem Roth stattfindet. Diese Art der Reifung setzt mithin die Existenz des Methylenroths als Verunreinigung schon voraus, lässt dasselbe aber bei der Ausfärbung besser zur Geltung kommen. Nunmehr lassen sich auch einfache Vorschriften aufstellen, wie die gewünschten Vortheile der reifen Lösungen sich sofort erzielen lassen. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 4. 32 482 Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. VIII, 4. Das Detail der folgenden Vorschriften erklärt sich vollkommen aus dem Mitgetheilten. Ä. Farhflotte sur PlasmazeUenfärbung. Handelt es sich darum, die Plasmazellen möglichst scharf (dunkel) allein unter allen Zellenarten herauszuheben, so genügt die ursprünglich von mir gegebene Vorschrift: Methylenblau 10 Kali causticum 0'05 Aq. destill 1000. Einige Tropfen verdünnt man in einem Schäle hen Anilinwasser auf das 10-, 50-, lOOfache und färbt je nachdem eine halbe Stunde, mehrere Stunden oder eine Nacht. Dann folgt rasche Entwässerung in absolutem Alkohol, Differenzirung in Kreosol, Abspülen in Xylol und Balsameinschluss '. B. Farbflotte zur Differenzirung aller Zellen und Intercellular- suhstanzen nehst Hervorhebung der Tlasniazellen. Man kocht auf dem Wasserbade: Methylenblau l-Q Kali carbonicum 10 Aq. destill lOO'O Spiritus 200 laugsam bis auf lOO'O ein. Es entsteht eine dunkelviolette Lösung, welche reich an Methylenviolett ist. Da sie schwächer färbt als eine entsprechende Methylenblauflotte, so wird sie unverdünnt oder mit Anilinwasser zur Hälfte verdünnt gebraucht. Die Differenzirung kann man mit Glykol, Styron oder Kreosol vornehmen. Die Mastzellen treten nicht deutlich hervor. C. Farhflotte zur Darstellung rother Mastzellen neben blauen PlasmazeUen. Methylenblau 1-0 Kali carbon. (Natron carbon., Ammon. carb.) l'O Aq. destillata (Aq. carbolisata, chloroforma) . 1000 ») Zur Plasmazellenfärbung eignen sich nur Schnitte aus Präparaten, die in Alkohol, höchstens noch solche, die in Sublimat und Alkohol conservirt sind. VIII, 4. Unna: üeber die Reifung unserer Farbstoffe. 483 Man färbt am besten mit sehr stark (bis lOOfacb) verdünnten Lö- sungen langsam aus, bringt die Schnitte in Alkohol von 70 bis 80 Procent, dann in Styron und nach bald erfolgter Differenzirung in Bergamottöl (Xylol) oder direct in Balsam. Oder man bringt die Schnitte aus dem verdünnten Alkohol auf den Objectträger, trocknet wieder, hellt in Bergamottöl auf und schliesst in Balsam ein. Bei diesen Proceduren wird das Methylenroth in den Mastzellenkörnern erhalten. II. Hämatoxylin. Die Reifung der Hämatoxylinlösungen ist ein längst von der Chemie klar gelegter Process. Wir wissen, dass die braun werdende, alko- holische Lösung der BöHMER'schen Vorschrift nicht mehr wie anfangs Hämatoxylin (C, ^ H, ^ Og), sondern bereits Hämatein (CV, H,., Og) enthält, welches mit dem Alaun sofort eine blauviolette Verbindung eingeht. In den fertig gehaltenen Lösungen, wie der FRiEDLÄNDEE'schen, bildet sich allmählich in der Luft dieselbe Verbindung, und wir brauchen diese Lösungen erst nach einiger Zeit, wenn sie recht dunkel geworden, ge- reift sind. Es ist aus der chemischen Zusammensetzung beider Körper auch eo ipso klar, dass hier die Reifung speciell durch den Luftsauerstoff ge- schieht. Immerhin untersuchte ich ausser der Einwirkung des Wasser- stoffsuperoxyds auch den der Alkalien zum Vergleiche, Dieselben ergaben, dass noch unoxydirte, mit Alaun versetzte Hämatoxylinlösungen aller- dings durch Alkalien sofort blauviolett gefärbt werden, aber lange nicht so tiefdunkel wie durch einen Zusatz von Wasserstoffsuperoxyd. Die Einwirkung der Kohlensäure ergab negative Resultate, Von einer bacteriellen Zusetzung glaubte ich bei dem positiven Ausfall der Hg Og -Versuche ganz abstehen zu können. Es ist nun höchst interessant zu beobachten — und diese That- sache scheint den meisten Mikroskopikern und Chemikern unbekannt zu sein — dass ein geringer Zusatz von neutralisirter Wasserstoffsuperoxyd- lösung eine hellröthliche, frisch bereitete, mit Alaun versetzte Häma- toxylinlösung fast momentan in eine dunkelblaue Hämateinlösung ver- wandelt. Dieselbe ist nicht nur sofort zum Färben reif, sondern sie färbt viel intensiver als die gebräuchlichen, vorräthig gehaltenen Häma- toxylinlösungen. Ich gebrauche deshalb schon seit langer Zeit, wo ich eine besonders starke Tinction erzielen will (z. B. um Bacterien mit Hämatoxylin zu färben), nur solche momentan gereifte Lösungen. Der Grund ist klar. In jeder reifenden Lösung finden sich noch unreife, 32* 484 Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. VIII, 4. reife und überreife Farbtheilchen bei einander. Die letzten — als störende Niederschläge bekannt und gemeiniglich abfiltrirt — sind für die Färbung ganz nutzlos, ebenso die noch unreifen, insofern sie nicht während des Ausfärbens noch reif werden. Es kommt also nur ein mittlerer Theil der gesammten Farbmenge zur Wirksamkeit, und dieser verringert sich bei total reifen Lösungen noch von Tag zu Tage. Die kräftige Oxydation mittels Wasserstoffsuperoxyd bewirkt jedoch ein momentanes Reifen des Gesammtvorraths an Hämatoxylin, und wenn man nun sofort die Schnitte in die Farbflotte hineinbringt, kommt die ganze noch in Lösung befindliche, aber bereits in Schwebefällung über- gehende Farbmenge auf einmal zur Wirkung. Wartet man, so wird allerdings die Lösung überreif, fällt aus und wird ebenso rasch untaug- lich zur Ausführung, wie sie gereift ist. Die momentane Reifung ver- langt also sofortige Ausfärbung. Im ganzen hat diese Methode der Hämatoxylinfärbung zwei Vor- theile. Erstens erreicht man mit ihr die höchsten, mit diesem Farbstoti' überhaupt möglichen Farbwirkungen, und zweitens ist sie ökonomischer, denn man braucht bei weitem schwächere Lösungen um denselben Effect zu erreichen. Da man jedoch auch bei dieser Methode lieber irgendwelche Hämatoxylinlösungen mit oder ohne Alaun vorräthig halten wird, als sich die Hämatoxylin-Krystalle jedes Mal zum Gebrauche auflösen, so versuchte ich, ob es nicht möglich sei, die Reifung der Lösungen durch Luftsauerstoff bis zum Moment des Gebrauches vollkommen zu verhindern, d. h. also beständige Hämatoxylinlösungen herzustellen, um sie dann jeden beliebigen Moment in eine maximal starke Hämatein- lösung zu verwandeln. Auch dieser Theil der Aufgabe ist sehr leicht lösbar. Ich versetzte ein und dieselbe frisch hergestellte alaunhaltige Hämatoxylinlösung mit verschiedenen reducirenden Mitteln und zwar mit Pyroyllol, Hydrochinon, Brenzkatechin, Resorcin, Ichthyol, Hydroxyl- amin, Anilin, Natrium subsulfurosum, Schwefelammonium, Schwefel- wasserstoff und Calcium bisulfurosum. Die schweflige Säure zerstörte den Farbstoff sofort, das unterschwef ligsaure Natron langsam doch ebenso gründlich, sodass durch Ho 0., die blaue Farbe nicht herstellbar war. Die basischen Stoffe : Schwefelammonium und Anilin fällten, wie zu erwarten, die ganze Farbmenge aus. Dagegen zeigten sich alle anderen Reducentien mehr oder minder geeignet — abgesehen von einer theil- weisen Fällung bei Ichthyolzusatz — die spontane Oxydation zurück- zuhalten, wie der Vergleich mit der sich selbst überlassenen Original- VIII, 4. Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. 485 lösung lehrte. Dabei ordneten sie sich in eine Reihe, je nachdem die Tinction der der Originallösung naheblieb oder weit unter dieselbe zurückging. Am einen Endpunkte der Reihe stand Hydroxylaminum muriaticum, welches die Lösung auf ein helles Gelbrosa reducirte, ohne die spätere künstliche Hämateinbildung völlig aufzuheben. Sodann kam Pyrogallol, dann Schwefelwasserstoff (die Lösung war eine ältere und recht schwache), Hydrochinon und Brenzkatechin auf gleicher Stufe, endlich Resorcin und Ichthyol. Die Lösung mit Resorcinzusatz schien erst noch mehr zu dunkeln als die Originallösung, blieb aber später hinter ihr zurück. Der Ichthyolzusatz bewirkte milchige Trübung und eine theilweise Fällung. Auch die Phenole gaben sämmtlich zu einer leichten Fällung Anlass, ohne dass dieses die spätere Färbung beinträchtigte. Vom Schwefelwasserstoff an bis zum Ichthyol erhielt ich von allen Lösungen gute Hämateinfärbungen, sowohl ohne weiteren Zusatz wie nach Zusatz von neutralisirtem Hg O2 . Die letzteren Tinctionen waren natürlich viel stärker. Dagegen erwiess sich der Pyrogallolzusatz als zu eingreifend; die nachfolgende Färbung mit und ohne Hg O2 fiel wegen der starken Farbfällung nur ganz schwach aus. Ein ganz merkwürdiges Resultat gab der Zusatz von salzsaurem Hydroxylamin. Die Schnitte färbten sich darin grünlich in schwacher Kernfärbung ; wurde die Lösung aber vorher mit H,, O2 oxydirt, so trat eine eigenartige Contrastfärbung auf, indem das Collagen grünlich blieb, die Kerne aber violett wurden. Der einzige Zusatz, welcher gute Färberesultate gab, ohne irgend eine Fällung herbeizuführen, war das Schwefelwasserstoffwasser. Da dieses nur sehr schwach gewesen war, kam mir der Gedanke, ob nicht ein einfacher Zusatz von Schwefel in Substanz die Oxydation der Häma- toxylinlösung auch verhindern würde. Und dies verhielt sich in der That so. Bringt man in ein Reagirglas einige Tropfen einer massig gereiften Hämatoxylinlösung und so viel Wasser, dass eine schwach blaue Lösung entsteht, giebt dann eine Messerspitze sublimirten, gewöhn- lichen Schwefels hinzu, so findet man nach kurzer Zeit die Lösung stark aufgehellt, rothgelb. Eine schon stark hämateinhaltige Lösung wird allerdings nicht viel verändert, aber in dünnen Schichten doch merklich heller und röthlicher. Diese Aufhellung beruht, wie ein Vergleich mit gewaschenen Schwefel zeigt, auf den Spuren von SO2, welche jedem sublimirten Schwefel anhaften. Diese Differenz betrifft aber nur die Anfangswirkung. Später wirken beide Schwefelsorten einfach so, dass die Lösungen nicht weiter nachdunkeln, keinen Niederschlag und keine Glasfärbung aufweisen. Sie sind immer unreif, aber auch nie 486 Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. VUI, 4. überreif. Diese Wirkung miiss wohl auf Bildung von geringen Mengen H2 S aus dem Schwefel zurückgeführt werden. Man kann mithin wirklich durch einen einfachen Zusatz von Schwefel die Reifung des Hämatoxylins beliebig aufhalten, was deshalb von be- sonderer Bedeutung ist, da dieses Mittel jeden Augenblick rein von der Lösung abfiltrirt werden kann. Es ist ein immer bereites Reservoir wirksamer Substanz, aus welchem diese in dem Maasse zur Wirksamkeit gelangt, wie der Luftsauerstoff das Hämatoxylin zu oxydiren strebt. Anderseits ist die Schwefelwirkung nie stark genug, um das Hämatoxylin zu zerstören, wie die schweflige Säure, oder Niederschläge zu erzeugen, wie das Pyrogallol. Endlich kann man die reducirende Wirkung des Schwefels jeden Augenblick durch H^ O2 übercompensiren. Die praktische Anwendung dieser Erfahrungen würde sich etwa folgendermaassen gestalten. Man hat zu unterscheiden 1) eine directe maximale Hämateinfärbung mittels momentan gereifter Lösung, wie sie gewiss hin und wieder wünscheuswerth ist und 2) die Ausfärbung in einer vorräthig gehaltenen, constanten halb- reifen Lösung. Bei letzterer hat man wieder die Wahl, ob man ohne oder mit Hg O2 ausfärben will, d. h. ob man eine massige, gut diffe- renzirte Totalfärbung ohne Entfärbungsmittel vorzieht oder für den be^ treffenden Fall eine ungemein starke, aber reine Kernfärbung durch nachträgliche Benutzung von Eisessig oder saurem Alkohol erzielen will. — A. Momentan gereifte Losung. Man löst einige Krystalle Hämatoxylin in Spiritus, etwa das Fünf- fache davon an Alaun in Wasser und mischt beide Lösungen in einem Reagirglase. Sodann giesst man einige Tropfen der käuflichen H2 O2 - Lösung in ein Schälchen , legt einen Sodakrystall hinein und nimmt ihn wieder heraus wenn ein in die Lösung eingetauchtes, blaues Reagirpapier blau bleibt, giesst diese neutralisirte Lösung auch in das Reagirgläschen und erhitzt einen Augenblick über der Flamme. Man erhält dann eine tiefblaue, sehr stark und rasch färbende Flotte, in welche die Schnitte allerdings sofort hineingethan werden müssen, da . das Hämatein sich mit der Zeit flockig niederschlägt. B. Constante^ halbreife Lösung zum VorräthigJialten. a) Ohne Wasserstoffsuperoxyd. Hämatoxylin l'O Alaun 100 VIII, 4. Unna: Ueber die Reifung unserer Farbstoffe. 487 Spiritus 1000 Aq. destill 2000 Sulf. sublimatum 2 0 Wenn man den Schwefel erst dann der Hämatoxylinlösung zufügt, wenn dieselben schon ziemlich stark blau geworden ist, also etwa 2 bis 3 Tage nach dem Ansetzen , so bewirkt der Schwefel nur eine Fixation der Lösung auf der gegebene Stufe der Oxydation. Man kann natürlich mit derselben allein schon prächtige Färbungen erzielen, und wenn die- selben auch lange nicht so stark ausfallen als die mit vollständig aus- gereiften Lösungen, so entgeht man anderseits der Nothwendigkeit, mit Säuren zu entfärben, und erzielt dadurch statt reiner Kernfärbungen mehr allgemeine Tinctionen des Gewebes, vor allem der intercellularen Substanzen. b) Mit Wasserstoffsuperoxyd bei der Ausfärbung. Will man dagegen nur rasch eine maximale Kernfärbung oder eine Bacterienfärbung erzielen, so neutralisirt man in einem Schälchen etwas Wasserstoffsuperoxyd und tropft einen oder einige Tropfen der Lösung B zu, am besten, nachdem die Schnitte schon in dieselbe gelegt sind. Die Lösung färbt sich in einigen Minuten blauschwarz, und dann ist die maximale Färbung auch bereits erreicht. Die Schnitte kommen dann auf einen Moment in Eisessig oder in salzsauren Alkohol zur Entfärbung und Differenzirung. (Fortsetzung folgt). [Eingegangen am 25. Februar 1892.] 488 Martinotti: L'ematossilina, l'emateina ed il carminio. VIII 4. L'ematossilina, Temateina ed il carminio. Per il Prof. Giovanni Martinotti in Siena. Paolo Maybe, cosJ altamente benemerito della tecnica istologica, ha fornito ad essa im nuovo e prezioso contributo studiando le modifica- zioni che avvengono nelle soluzioni di ematossilina, quali si adoperano per le ricerche microscopiche'. Da assai tempo si sa che queste soluzioni diventano atte alla colorazione micleare solamente dopo un certo lasso di tempo, devono subire una specie di maturazione , durante la quäle il colore della soluzione si fa piü cupo. Ora P. Mayer ha dimostrato che il fenomeno consiste nella tras- formazione della ematossilina in un composto ammoniacale dell'emateina, al quäle in realtä h dovuto il potere colorante delle soluzioni suddette, ed ha conseguentemente proposto di sostituire siflfatto composto alla ematossilina nella preparazione delle soluzioni coloranti per avere ira- mediatamente un liquido del potere colorante desiderato. Secondo il Mateä nessun istologo aveva finora espressa la spiega- zione suddetta; solo il Flemming ed il Weigert avrebbero fatto un cenno fugace della presenza della emateina nelle soluzioni di ematossilina, e della importanza dell'ammoniaca per affrettare la maturazione delle soluzioni stesse. Ora precisamente in questo giornale (vol. III, 1886, p. 391) io aveva scritto: „Non parlo giä, di quelle scomposizioni di natura esclusivamente chimica che si verificano in certi liquidi per es di quelle che avvengono nelle soluzioni di ematossilina per lento assorbimento di ammoniaca dall'aria e trasformazione della ematossilina in un com- posto ammoniacale della emateina: non parlo dico di tutte queste alterazioni le quali sono, per quanto oggi si sa, di natura puramente chimica legate a leggi chimiche abbastanza note;" ») Mayer P., üeber das Färben mit Hämatoxylin (Mittheil. a. d. Zool. Station zu Neapel Bd. X, 1891, H. I, p. 170; questo giorn. vol. VIII, 1891, p. 337). VIII, 4. Martinotti: L'ematossilina, remateina ed il carminio. 489 Si potrebbe disciitere se la parola scomposwione da me usata sia la piü appropriata, perchö si tratta in realtä di una combinazione ; mi sembra perö che dalle mie parole risiilti abbastanza chiaro il concetto del processo chimico che vi si svolge. Ne si creda che io avessi messo la per caso quelle parole; occu- pandomi di preparare e confrontare le varie soluzioni di ematossilina proposte, e cercando di interpretarme la natura ed il modo di agire avevo naturalmente ricorso ai trattati di chimica ed avevo trovato precisamente nel Richter * e nello Schwanbrt^ iudicata questa pro- prietä dell'ematossilina di formare in presenza della NH^ e dell'O un composto colorato. Siccome l'esposizione all'aria mette la soluzione di ematossilina in contatto di 0 e di NH^, era evidente che questa trasformazioiie doveva avvenire nelle soluzioni di ematossilina; anzi siccome le soluzioni recenti di ematossilina sono incolore e si vanno colorando in presenza dell'aria diventava ovvio per me che il fenomeno era dovuto alla trasformazione sopra accennata. E fondandomi su questa suppossizione tentai la preparazione della emateina, ma essendomi falliti i primi tentativi non ne feci altro. Convinto perö che la natura del processo stesse cosi come ho es- posto scrissi le parole sopra citate in quel mio articolo. Non ho bisogno di dichiarare che io non intendo ora di scemare menomamente il merito del Mayer, e neanche di fargli colpa della sua dimenticanza. E dico dimenticanza perchfe quel mio lavoro non era ignoto al Mayer, il quäle anzi ebbe a citarlo a proposito della opinione da me espi'essa intorno ai rapporti fra l'acido carminico ed il carminio ordinario'. Anche qui io aveva parlato in base a ricerche da me eseguite per conoscere il modo di colorazione e la composizione del carminio ordinario. Depo aver comparato fra di loro tutte le qualitä di carminio che potei avere a mia disposizione, dopo avere stabilito il modo di com- portarsi dell'acido carminico (sotto questo nome vanno in commercio prodotti assai disparati) mi provai a preparare io stesso il carminio secondo le formule che mi fu dato raccogliere modificandole, adottandone delle nuove e poi confrontando i risultati tanto riguardo alla qualitä. >) Richter, Chimica organica (trad, ital.) p. 697. '^) SciiwANERT, Artikel Färberei in Muspratt's technischer Chemie. 2 Aufl. p. 626. 3) Mayer P., Aus der Mikrotechnik (Internat. Monatsschr. f. Anat. u. Phys. Bd. IV, 1887, p. 46. Zusatz). 490 Martinotti: L'ematossilina, remateina ed il carminio. VIII, 4. ed alla qiiantita del prodotto, quanto al suo potere colorante, come reattivo istologico. Di queste mie ricerche che datano dal 1884 e che finora non ho pubblicato darö un breve cenno con la speranza che possano giovare a chi voglia studiare a foudo la questione. I metodi antichi di preparazione del carmiuio consistevano uel trattare con alliime o con cremortartaro il decotto acquoso bollente di cocciniglia. Piü tardi si introdusse il metodo di estrarre il carminio dalla cocciniglia mediaute il carbonato sodico, e precipitare poi la materia colorante con un acido allungato dopo aver aggiunto dell'albu- mina o della gelatina. Un altro metodo piii complicato e quello col nitrato di potassio. Applif-ando questi metodi, modificando le proporzioni, adoperando altri solveuti (borato di soda, carbonato di NH^) impiegando diflferenti qualitä di allume (allume di soda, allume ammoniacale, allnme di Cromo ') ottenni qualitä di carminio diversissime, diversamente adatte alle colorazioni istologiche, Sopra tutto varia e la quantitä del prodotto che se ne ottiene in confronto con la qiiantita di cocciniglia adoperata; in genere mi risulto che i metodi recenti danno un prodotto incomparabil- mente maggiore ed anche di aspetto piü brillante. Ma il curioso e che questi carminii preparati con le formule piü recenti (come quelli attualmente in commercio) hanno un colore piü elegante degli altri, ma che non e piü il vero colore carminio, bensi un colore volgente al giallo"^. Stando perö alle prove che io ne ho fatte, queste qualitä di carminio sono assai meno adatte per la istologia di quelle preparate con le vecchie formule, le quali danno un prodotto meno abbondante e meno brillante. Ecco perche si sente dai vecchi istologi ripetere che non si puö piü avere del buon carminio come una volta'; forse h questa la ragione per cui Hoter raccomanda di preparare 11 suo carminio con del carminio comraerciale ma non di prima qualitä*. II carminio preparato secondo i vecchi metodi conteneva sempre dell'allume, scarso nelle qualitä migliori, abbondante nelle scadenti e >) Queste esperienze sono ricordate nel mio articolo: SulVuso deW allume di Cromo nella tecnica microscopica stampato in questo giornale vol. I, 1884, p. 862, 363. 2) I fabbricanti designano le miglioni qualitä col nome di carminio nacarat. Ora nacarat in francese vuole precisamente dire di colore rosso ranciato. 3) Frey, Das Mikroskop. 8. Aufl., 1886, p. 99. «) HoYEE, Beiträge zur histologischen Technik (Biol. Centralbl. Bd. II, 1883, p. 19). VIII, 4. Martinotti: L'ematossilina, remateina ed il carminio. 491 forse in queste qualitä si e imbattuto il Liebekmann il quäle vi ha trovato fino il 43-09 per cento di AlO^. ^ Ma non saprei dire se sia esattissima la opinione del Mayer che il carminio commerciale debba sempre contenere alliime ^. A questo allume che il carminio contiene esso deve, secondo me, la facoltä di fissarsi sui tessuti. L'allume manifesta qui le sue qualitä di mordcnte per le quali trova assai larga applicazione nell'arte tintoria. Come si esplichi tale proprieta non e facile dire. Nelle soluzioni ammoniacali I'allurae e la calce sono cosi saldamente uniti al carminio che nemmeno con l'ossalato di NH^ si possono precipitare^ Fino dal 1884 io scriveva che „noi sappiamo ancora troppo poco „intorno al modo con cui le materie coloranti agiscono sui tessuti e sugli ,,elementi del corpo umano" e ricordavo „che l'azione sui tessuti animali „della soluzione ammoniacale di carminio non e stata finora bastante- „mente spiegata"*. P. Mayeb confermava poco dopo col suo autorevole giudizio le mie asservazioni scrivendo che nelle colorazioni del carminio come in quasi tutte le colorazioni istologiche noi dobbiamo ancora procedere a tasti, e forse ci toccherä di fare ugualmente per molto tempo ancora*. Certo nessuno crederä piü col Beale che il nucleo per la sua reazione acida decomponga la soluzione alcalina di carminio neutra- lizzando l'alcali e fissando la sostanza colorante^. La spiegazione e molto semplice ma poco conforme al vero perch^ la soluzione ammoniacale di carminio non h una soluzione di carminato di ammoniaca (certuni parlano persino di un picrocarminato di am- moniaca !) e poi perche la colorazione si produce anche in tessuti fissati con liquidi alcalini, nei quali ogni reazione acida del nucleo dovrebbe essere neutralizzata. Ma non voglio addentrarmi in questa difficile questione: forse lo farö un altra volta; piuttosto mi sia lecito esprimere l'augurio che un istologo di vaglia unendo le sue forze a quelle di un chimico competente ') Liebermann, Zur Kenntniss der Cochenille und des Cochenillecarmins (Ber. d. Deutschen Chem. Gesellsch. Bd. XVIII, H. 12, No. 391, p. 1973). 2) Mayer P., Aus der Mikrotechnik (1. c. p. 43). •') Liebermann, 1. c. p. 1974. *) Martinotti, G., SuH'uso dell'allume di cromo nella tecnica microscopica (Questo Giern, vol. III, 1886, p. 361, 362). •^) Mayer, P., Aus der Mikrotechnik (1. c. p. 44). «) Beale, How to werk with the microscope. 1. ed. London 1868, p. 107. — Cfr. altresi: Ranke, Grundzüge der Physiologie. 3. Aufl. Leipzig 1875, p. 80. 492 Feist: Zur Technik d. Mikroskopie d. Centralnervensystems. VIII, 4. ci fornisca intorno alle colorazioni col carminio quelle spiegazioni che il Mayer ci ha molto lodevolmente data per la colorazione con l'ema- tossilina. Siena, 4. febbraio 1892. [Eingegangen am 6. Februar 1892.] Zur Technik der Mikroskopie des Centralnervensystems. Von Dr. Bernhard Feist, Aizt an der Provinzial-Irrenanstalt Eichberg im Rheingau. Durch die modernen Arbeiten in der normalen und pathologischen Anatomie des Centralnervensystems hat die Technik der mikroskopischen Untersuchung dieses Organs einen ausserordentlichen Aufschwung ge- nommen, und besonders die Herstellung von Schnittserien hat durch das WEiGEET'sche CoUodiumplattenverfahren eine bedeutende Erleichterung und Vereinfachung erfahren. Jedoch ist nicht bei allen Untersuchungen diese Methode anwendbar, besonders ist dies der Fall, wenn man die Schnitte der Serie abwechselnd mit verschiedenen Färbungen behandeln will, so z. B., dass der 1., 5., 9. etc. mit Carmin, der 2., 6., 10. mit Nigrosin, der 3., 7. etc. mit Hämatoxylin, der 4., 8. etc. nach Pal ge- färbt sein soll. Hierbei hat man es mit einzelnen Schnitten zu thun, die in verschiedenen Schalen liegen, und es scheint, dass die Bezeichnung der linken oder rechten Seite des einzelnen Schnittes bei diesem Vorgehen bisher — wenigstens bei manchen Forschern — auf Schwierigkeiten stösst. So hat C14GLINSK1* fast einzig aus diesem Grunde die bequeme Celloidineinbettung verlassen und die difficilere Paraffinmethode bei seinen Untersuchungen angewandt. Es ist deshalb vielleicht angebracht, wenn *) Cii^GLiiisKi, A., Ein Beitrag zur mikroskopischen Technik bei der Unter- suchung des Rückenmarks und der peripheren Nerven (Diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 19). VIII, 4. Feist: Zur Technik d. Mikroskopie d. Centralnervensystems. 493 ich eiu von mir vor vier Monaten erdachtes und seitdem vielfach ge- übtes, sehr einfaches Verfahren zur Bezeichnung der Seiten der Rücken- marksschnitte einem grösseren Kreise vorführe. Das in Chromsalz gehärtete, im Dunkeln in Alkohol extrahirte Rückenmark wird vor dem Einlegen in Alkohol absolutus in Stücke von 10 bis 15 mm Höhe zerlegt. An jedem einzelnen dieser Stücke wird das proximale Ende durch einen Igelstachel bezeichnet, der durch die vorderen Längsgefässe der Pia hindurchgesteckt wird. Die Stücke machen so bezeichnet der Reihe nach die gewöhnliche Procedur der Celloidin- resp. Photoxylineinbettung durch. Gleichzeitig werden aus in Alkohol gehärteten Leberstücken, wie sie ja als beliebtes Material zum Einklemmen kleiner Präparate in keinem Laboratorium fehlen, Prismen von ca. 1 n ^^ Querschnitt und 15 mm Höhe geschnitten. Dieser Leberprismen werden so viele angefertigt, als man Rückenmarkstücke zum Einbetten hat und sie machen, in ein gut schliessendes Gefäss mit Alkohol absolutus gebracht, dieselben Pro- ceduren der Celloidineinbettung durch, wie die Rückenmarksstücke. Sind diese letzteren nach einiger Zeit soweit mit Celloidin durch- tränkt, dass man zum Aufkleben auf Korken schreiten kann, so verfährt man hierbei wie gewöhnlich. Nur zieht man, sobald das Stück auf dem Kork in die gewünschte Positur gebracht ist, den nun nicht mehr nöthigen Igelstachel heraus, was stets ohne Mühe gelingt. Alsdann nimmt man mit der Pincette ein Leberprisma aus der dicken Celloidinlösung und drückt es der Länge nach an die Seite des mit noch flüssigem Celloidinmantel umgebenen Rückenmarkstücks, die man bezeichnen will. Es ist sehr empfehlenswerth, bei allen Stücken beim Aufkleben so- wohl stets dasselbe Ende nach oben zu dirigiren, als auch stets dieselbe Seite zu bezeichnen. Man sorgt durch leichtes Andrücken mit der Nadel dafür, dass das Leberprisraa überall durch Celloidin mit dem Rückenmarkstück ver- bunden ist. Alsdann kommt der so beschickte Kork in TOprocentigen Alkohol. Die von so präparirten Objecten hergestellten Schnitte haben alle ein kleines Leberviereck an einer Seite ankleben, das so gut wie keinen Raum beim Einlegen unter das Deckglas beansprucht und für alle Zeit die Seite bezeichnet. Eine Gefahr könnte entstehen , wenn das Leberstückchen bei den Färbe-, Entwässerungs- und Aufhellungsproceduren sich von den Schnitten ablöst. 494 Feist: Zur Technik d. Mikroskopie d. Ceiitralnervensystems. VIII, 4. An ca. 5000 Schnitten, an denen ich nach der geschilderten Art die Seite bezeichnete, hat sich diese Störung jedoch nie ereignet. Selbstverständlich muss man alle Berührungen der Schnitte mit Celloidin lösenden Substanzen vermeiden. Man darf also kein Nelkenöl anwenden und keinen stärkeren Alkohol als 98procentigen. Ferner muss man dafür sorgen, dass die benutzten aufhellenden Oele (Berga- mottöl, Lavendelöl etc.) von tadelloser Beschaffenheit sind und darf die allerdings hohen Preise für die Primaqualitäten dieser Reagentien nicht scheuen. Indem ich nun mein Verfahren, das auch für die Paraffineinbettung mutatis mutandis zu verwenden ist, einer Prüfung der Fachgenossen empfehle, bemerke ich noch, dass dasselbe viel schonender ist, als das vielfach übliche Einschneiden oder Einstechen in eine Seite des Prä- parats. Ich hätte meine Methode nicht publicirt, wenn mich nicht Ci4Glinski's Unbekanntschaft mit einem so einfachen Hilfsmittel dazu bewogen hätte. [Eingegangen am 16. December 1891.] VIII, 4. Referate und Besprechungen. 495 Referate und Bespi'ecliunö'en. 1. Apparate und Präparationsmethoden im Allgemeinen. Wyroubofif, G., Sur un nouveau microscope propre aux ob- servations ä haute temperature (Bull, ,de la Sog. fran^. de Mineral, t. XIV, 1891, p. 198—203). Das umgekehrte Mikroskop von Nachet ^, welches sich nie recht einzubürgern gewusst hat, wird vom Verf. in modificirter Form vorge- schlagen zur Beobachtung der optischen Eigenschaften von Krystallen und Krystallpräparaten unter hohen Temperaturen. Die umstehende Abbildung des Instrumentes bedarf nur weniger Worte der Erläuterung. Mit dem Fusse des Mikroskops ist zunächst fest verbunden ein Stativ, an dessen oberen Ende ein Halter den Spiegel trägt. An einem zweiten Halter, dessen Verschiebbarkeit die grobe Einstellung ermöglicht, be- findet sich der Objecttisch in Gestalt eines mit kreisförmigem Quer- schnitte versehenen Kupferbleches P. Zum Schutze der Objective hän- gen an demselben die in dem Charnier r bewegbaren Eisenbleche d und e, sowie der zum Schutze des Beobachters angebrachte Asbest- schirm a. Zu dem gleichen Zwecke ist der Nicol N von den Blechen h und c umgeben. Dem als Objectträger fnngirenden Kupferblech ist die Gestalt eines V verliehen worden, um gleichzeitig durch zwei Lampen erwärmen zu können. Für die meisten Versuche ist ein BuNSEN'scher Brenner L ausreichend. In Folge der Stabilität des Objectträgers musste dem Mikroskope selbst eine grössere Beweglichkeit verliehen werden, sowohl um einzelne, Theile der zu untersuchenden Objecte in das Gesichtsfeld zu bringen, als auch zur Beobachtung der Auslöschungsrichtungen. Der Mikroskop- körper kann zunächst in zwei zu einander senkrechten Richtung in Schlittenführung mittels der Schrauben Fund P bewegt werden. Sodann aber kann das ganze Instrument in einer Horizontalebene gedreht, und das Maass der Drehung mittels der mit Kreistheilung versehenen ') Cfr. DippEL, L., Das Mikroskop Bd. I, 1882, p, 567, 496 Referate und Besprechungen. VIII, 4. Platte C gegen einen Iudex abgelesen werden. Diese letztgenannte Bewegung wird mittels des Stativs T ausgeführt und, da sich auf diese Weise der Polarisator N und der Analysator Ä gleichzeitig drehen, so kann der Auslöschungswinkel unmittelbar abgelesen werden. Mit Hülfe des Kuöpfchens m kann der andere Nicol, der bei Anwendung hoher Temperaturen durch ein Turmalin-Plättcheu zu ersetzen ist, auch für sich allein gedreht werden. — Der Schlitz F im Tubus dient zur Einführung von Gypsblättchen u. s. w. Die feine Einstellung wird durch die Schraube v bewirkt. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 497 Ref. ist der Meinung, dass es nicht erforderlich gewesen wäre, ein besonderes und noch dazu complicirtes Instrument für den erwähnten Zweck zu construiren. Die namentlich von Fuess und Beunnee einge- führten Erhitzungsapparate ^, die sich direct an die Mikroskope anbringen lassen, bieten zum mindesten dieselben Vortheile des WYEOußOFE'schen Instruments, entbehren aber des Nachtheils desselben, der darin besteht, dass die Erwärmung einseitig erfolgt. Wichmann. Emery, C, Due nuovi apparecchi per studi entomolo- gici [Zwei neue Apparate für entomologische Studien] (BuUett. della Soc. Entomol. Ital., anno XXII, 1891, p. 85—92 c. 5 figg.). 1, Emeky hat zur genauen Messung kleiner Insecten oder ihrer Theile unter dem Mikroskop ein „Entomometer" construirt, welches bei KoKisTKA in Mailand für 80 Lire käuflich ist. Er besteht aus einem 13 cm langen Rohre, dessen Enden durch das Objectiv und Ocular ge- schlossen werden. Das apochromatische Objectiv hat eine Brennweite von 5 cm, das ebenfalls achromatische Ocular eine solche von 3 cm. In einer Entfernung von 10 cm über dem Objectiv befindet sich ein auf eine Glasplatte eingravirtes Mikrometermaass von 11 Linien, welche 0*5 mm weit von einander abstehen und durch eiue oder mehrere Linien senkrecht geschnitten werden. Zwischen dem Mikrometer und dem Ocu- lar ist eine Kalkspathlamelle von etwas mehr als 0"5 cm Dicke einge- schaltet, welche durch einen drehbaren Ring, in den sie vermittels einer Handhabe eingelassen ist, gedreht werden kann. Durch diese Drehung, deren Grösse gegenüber einer am Instrument augebrachten Linie nach ^20 'T^iü genau abgelesen, nach Yiooo ^^ ziemlich genau geschätzt werden kann, bewegt sich das ausserordentliche Bild, je nach der Rich- tung der Drehung, nach rechts oder links und mit ihm die betreffenden Linien des Mikrometers. Indem man diese nun auf die Grenzen des Objectes resp. deren Theile, welche kleiner als 0'5 mm sind, einstellt, kann man mit Hilfe des aussen angebrachten Indexes und eventueller Addition resp. Subtraction die Grösse des Objectes genau feststellen. 2. Emery hat den KocHS-WoLz'schen Beleuchtungsapparat (vergl. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 478) dahin modificirt, dass er sich an jeder gewöhnlichen Petroleumlampe anbringen lässt, ohne die Lampe als solche zu verdunkeln, indem er nur die Flamme selbst verdeckt. Ein kurzer Blechcylinder, welcher unten auf den Trägern der Glocke ») Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 33, 484. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 4. 498 Referate und Besprechungen. VIII, 4. aufsteht, oben mit der Flamme abschneidet, trägt seitlieh einen kurzen Cylinder in welchem der Glasstab mit Hilfe eines durchbohrten Korkes befestigt werden kann. Der von Kochs Wolz benutzte Glasstab ist nach Verf. zu stark gebogen. P. Schiemens {Neapel). Rüssel, H. L., Apparat zur Entnahme von Wasser aus einer bestimmten Tiefe [Aus „Untersuchungen über im Golf von Neapel lebende Bacterien"] (Ztschr. f. Hygiene u. Infectionskrankh. Bd. XI, 1891, H. 2 p. 167). Zur Entnahme von Wasserproben aus bestimmten Tiefen des Meeres behufs bacteriologischer Untersuchung bediente sich Rüssel folgenden Apparates. Auf einer flachen als Stativ dienenden Eisen- platte, welche vom Standort aus an einer Leine ins Wasser gelassen und durch ein gehöriges Gewicht im Wasser stets in senkrechter Stellung erhalten wird, ist das zur Aufnahme der Wasserprobe be- stimmte Gefäss angebracht. Eine gegen das obere Ende der Eisenplatte hin befestigte, mit Gummi ausgelegte Klammer und ein in einem senk- rechten Schlitz der Eisenplatte verstellbares eisernes Fussstück ermög- lichen, Gefässe von verschiedener Länge und Durchmesser zu benutzen. Das Gefäss selbst besteht aus einer stark wandigen, unten zuge- schmolzenen Glasröhre von 200 bis 300 cc Inhalt. Dieselbe wird ebenso wie ein ca. 15 cm langes, rechtwinklig gebogenes und an einer Stelle etwas ausgezogenes, an beiden Enden mit Wattepfropf armirtes GLisröhrchen im Trockenschrank sterilisirt. Dann verschliesst man die grosse Röhre mit einem in Sublimat sterilisirten und in sterili- sirtem destillirtem Wasser abgespülten passenden Gummipfropf und fügt das rechtwinklig gebogene Röhrchen in diesen ein. Zur besseren Dichtung werden die Fugen mit heisser Wachsmischung (Wachs und Harz aa) gedichtet. Man evacuirt darauf den Apparat mit der Luft- pumpe und zwar für weniger als 100 m möglichst vollkommen , für grössere Tiefen aber nur theilweise, (ev, würden sich für diese Röhren aus Metall empfehlen) und schmilzt das Röhrchen noch während des Evacuirens an der ausgezogenen Stelle ab. Das Gefäss wird auf dem beschriebenen Stativ in der Weise befestigt, dass der freie Schenkel des Röhrchens über den Rand der Eisenplatte ragt. Durch einen an der Leine nach Erreichung der gewünschten Meerestiefe herabgleitenden Bleiring wird er dann zertrümmert. Der Apparat füllt sich sofort zu % bis % mit Wasser, in dem beim Erreichen der Oberfläche infolge des aufgehobenen starken Drucks reichliche Gasperlen aufsteigen. Die in dem Apparat noch vorhandene Luft, welche sich beim Einholen des VIII, 4. Refei'ate und Besprechungen. 499 Apparats infolge Abnahme des Drucks immer mehr ausdehnt, verliin- dert ein nachträgliches Einströmen von Wasser aus geringerer Tiefe. Das erhaltene Wasser wird so schnell wie möglich bacteriologisch verarbeitet. CzaplewsJvi {Tnhingen). ßussel, H. L., Apparat zur Gewinnung von Schlamm- proben [Aus „Untersucliungen über im Golf von Neapel lebende Bacterien"] (Ztschr. f. Hygiene u, Infectionskrankh. Bd. XI, 1891, H. 2 p. 169). Rüssel bediente sich zur Gewinnung von Meeresschlammproben behufs bacteriologischer Untersuchung folgenden Apparates. Der Apparat besteht aus einem mehrere cm langen eisernen Röhrchen, von ca. 10 mm Durchmesser, welches am unteren Ende offen und schreib- federartig zugestutzt ist, am oberen Ende dagegen mittels eines Ge- windes mit einer kleinen Kappe verschlossen wird , die ein Stempel- ventil mit Kautschukdichtung trägt, welche ev. durch ringförmige Nuthen noch besser schliessend gemacht werden kann. Das so armirte Röhr- chen wird an einer schweren Eisenstange befestigt an einer Leine ver- tical ins Wasser hinabgelassen und füllt sich beim Aufstossen auf den Grund mit Schlamm. Sofort nach dem Einholen des Apparats wird die Ventilkappe ab- geschraubt, mit einem Stempel die Schlammsäule ca. 2 bis 3 cm weit aus dem Röhrchen hinausgedrückt und mit sterilisirtera Messer abge- schnitten. In die Mitte der übrigbleibenden Schlamrasäule bohrt man ein 2 bis 3 mm weites sterilisirtes Messingröhrchen (Korkbohrer) ein. Mit Hilfe eines Stempels wird aus diesem das entnommene Schlamm- säulchen herausgepresst. Rüssel, benutzte davon zu seinen Versuchen ein Stück derselben von 0-5 cm Länge, welches ein Volum von 0'05 cc ergab als Einheit, brachte es in 25 cc sterilisirtem destillirtem Wasser in EKLENMEYEE'schen Kölbchen durch Schütteln zur Vertheilung und entnahm von der genügend fein vertheilten Aufschwemmung 0-5 cc mit sterilisirter Pipette zur Plattenuntersuchung; er hatte also 0*001 cc Schlamm als Einheit. CmpUivsU {Tiibivgeri). Litten, M., Die Cent ri fuge im Dienste der klinischen Medicin (Deutsche Med. Wochenschr. 1891, No. 23 p. 743). Litten empfiehlt zur Erleichterung der mikroskopischen Unter- suchung von Flüssigkeiten Sedimentation durch Centrifugiruug. Die benutzte kleine Centrifuge ist von einem seiner Zuhörer, cand. med. Thor St^inbeck construirt und wird mit der Hand oder durch einen 33* 500 Referate und Besprechungen. VIII, 4. Motor in Bewegung gesetzt. Die zu untersuchende Flüssigkeit ündet in zwei Röhrchen mit kugelförmiger Abschnüriing am Boden Platz, welche in Metallhülseu in dem horizontal rotirenden Träger der Centri- fuge leicht beweglich eingefügt sind. Das Sediment sammelt sich in dem kleinen kugelförmigen Reserv^oir der Röhrchen an. Das Sediment ist dichter als ein natürlich abgesetztes Sediment. Die schwersten Bestandtheile sind dabei zu unterst gelagert. Der Apparat ist nament- lich sehr werthvoU für Untersuchung des Harns und erlaubt leichten Nachweis von Krystallen, rothen Blutkörperchen, Harncylindern, Mi- kroben etc. Da sich letztere uaturgemäss in der kurzen Yersuchszeit nicht wesentlich weiter vermehren, so gestattet der Apparat die Ent- scheidung, ob die vorhandenen Mikroben aus dem Körper selbst stammen, VIII, 4. Referate und Besprechungen. 501 wenn der Harn steril aufgefangen nnd sofort untersucht wird. So kann man auch speciell den Nachweis von Tuberkelbacillen erleichtern (auch im verflüssigten Sputum). Die Angabe Bizzozeko's, dass im frischen Harn Saccharomyces nicht selten sei, konnte Litten nicht bestätigen. Dagegen beobachtete er Harnsarcine. Für gewöhnlich genügt einmaliges Centrifugiren von 3 Minuten Dauer (ca. 3000 Umdrehungen). — Litten macht auf die Wichtigkeit der Methode für den Nachweis und Be- urtheilung von Oxalurie aufmerksam. Ferner glaubt er, dass der Appa- rat für eine rasche Volumbestimmung des Eiweisses im (bereits durch vorheriges Centrifugiren von corpusculären Elementen befreiten) Harn (combinirt mit EsBAcn'scher Methode) zu verwerthen sei. Ebenso wie den Harn kann man auch Exsudate und andere Flüssigkeiten vortheil- haft mit dem beschriebenen Apparat untersuchen. In jedem serösen Exsudat gelang ausnahmslos der Nachweis von rothen Blutkörperchen. Schnell gerinnende Exsudate und Cystenflüssigkeiten kann man noch vor Gerinnung centrifugiren. Die Untersuchung der Flüssigkeit eines punc- tirten Milzechinococcus ergab mit leichter Mühe zahlreiche Haken und sich bewegende scolices aus der vorher klaren Flüssigkeit, in der vor- her nur einzelne weissliche Körnchen erkennbar waren. — Der Apparat scheint nach dem Angeführten in hohem Grade geeignet, die klinische Diagnose wesentlich zu erleichtern und zu sichern, doch wird er natur- gemäss wohl nur für Kliniken und Krankenhäuser in Betracht kommen. Csaplewslii ( Tiibiugen). White, T. Ch., A new method of infiltrating osseous and dental tissues (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 p. 307 f.). Beim Einschluss von Dünnschliffen in Canadabalsam tritt bekannt- lich nicht selten der unangenehme Fall ein, dass der Balsam allmählig die Luft aus den Knochenkanälchen verdrängt, wodurch der Verlauf derselben undeutlich wird. Um dies zu verhindern, legt der Verf. die massig dünnen Schliffe auf 24 Stunden oder länger in Aether und über- trägt sie hierauf in eine dünne, mit Fuchsin gefärbte CoUodiumlösung, wo sie 3 bis 4 Tage zu verweilen haben. So füllen sich die Knochen- kanälchen und Zahnröhrchen , oft bis in ilire letzten feinsten Verzwei- gungen hinein, mit einer röthlichen Masse, welche durch Einlegen der Stücke in Spiritus gehärtet werden kann und das definitive Dünnschlei- fen nicht hindert. Einschluss in dicken Canadabalsam oder Styrax, wo- möglich ohne oder mit nur geringer Erwärmung. Was die Fuchsin- Collodiumlösung betrifft, so muss der Farbstoff in dem zur Herstellung 502 Referate und Besprechungen. VIII, 4. der Celloidinlösung bestimmten Alkohol gelöst und dann die Schiess- baumwolle zugesetzt werden. K. Fiedler {Zürich). 2. Mikrophotographie. Referent Dr. R. Neuhatiss in Berlin. Möller, J. D., Lichtdrucktafeln hervorragend schöner und vollständiger MöLLER'scher Diatomaceen- Präparate. 59 Tafeln nebst Vorwort, in Leinewandmappe. Wedel (Selbstverl.) 1891. Der durch seine musterhaften Diatomaceen - Präparate seit Jahr- zehnten einen Weltruf geniessende Präparator Möller in Wedel (Hol- stein) übergiebt mit vorliegendem, mikrophotographischen Diatomaceen- Atlas der Oeffentlichkeit ein Werk, welches nicht verfehlen wird, das allergrösste Aufsehen zu erregen. Seit 1867 befasst sich Mollek mit der Herstellung von Diatomaceen- Typen-Platten, bei denen jedes einzelne Präparat in Strichen angeordnet eine mehr oder minder grössere Zahl verschiedener Kieselpanzer ent- hält. Im Laufe der Jahre vervollkommnete sich die Technik des Prä- parators dergestalt, dass nicht nur die Zahl der auf jeder Platte unter- gebrachten Formen in gewaltigen Proportionen anschwoll, sondern auch die Uebersichtlichkeit des Ganzen eine früher für unmöglich gehaltene Höhe erreichte. Die vor wenigen Jahren ausgegebenen Kataloge be- richteten bereits über Typenplatten mit 1600 verschiedenen Formen. Durch seine neuesten Arbeiten stellte Möller jedoch alles Frühere weit in den Schatten: Er vollendete eine Typenplatte mit nicht weniger als 4026 Species, Varietäten und Formen, die in streng systematischer Folge angeordnet sind. Mikrophotographische Abbildungen dieser Typen- platte — sowohl der ganzen Platte, wie einzelner Theile derselben — bilden einen wesentlichen Theil vom Inhalte des vorliegenden Atlas. Ein so einzig in seiner Art dastehendes Präparat, welches im kleinsten Räume (6 mm X 6" 7 mm) die gesammte Diatomaceenkunde umfasst, kann schliesslich nur Eigenthum eines Einzelnen werden, vielleicht eines Solchen, den mehr die Sucht nach Raritäten, als Lernbegierde zum Er- werbe des unvergleichlichen Prachtstückes bewog. Wir sind daher dem Verfertiger des Präparates zu Dank verpflichtet, dass er dafür Sorge trug, ein so vorzügliches Lehrmaterial auch weiteren Kreisen zugäng- lich zu machen. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 503 Tafel 1 zeigt die grosse, 4026 Formen enthaltende Typenplatte — der Präparator nennt sie Universum Diatomacearnm Moellerianum — in 88facher Linearvergrösserung. Die Platte ist eingetheilt in 9 Felder, von denen jedes 13 bis 17 Reihen enthält. Es ist klar, dass die schwache Vergrösseruug nur eine ungefähre Vorstellung von dem riesen- haften Inhalte der Platte zu geben vermag. Wir staunen über die fabelhafte Regelmässigkeit, in der eine Kieselschale neben der anderen und eine Reihe neben der anderen liegt. Tafeln 2 bis 10 sind die Interpreten von Tafel 1: Auf jedem Blatte wird uns eine der 9 Ab- theilungen in stärkerer Vergrösseruug (125) vorgeführt. Obgleich auch diese Vergrösserung für Diatomaceen noch ziemlich geringfügig ist und hinter dem von Ehrenbeeg angenommenen Normalmaass (300) erheb- lich zurückbleibt, so enthüllt sie doch dem Auge bereits eine erstaun- liche Fülle von Einzelheiten. Hier tritt der Werth der Typen-Platten klar vor Augen. Aus Einzelpräparaten, selbst wenn sie in vollkom- menster Reinheit nur eine einzige Form enthalten, ist es unmöglich, einen Ueberblick über eine grössere Reihe mehr oder minder ähnlicher Formen zu gewinnen. Wo die verschiedenen Kieselschalen in Reihe und Glied aufmarschirt sind, machen sich die geringsten Abweichungen sogleich bemerkbar. Als Tafeln 11 bis 28 folgen, ebenfalls in 1 25 facher Vergrösserung, Aufnahmen von Typen-Platten, welche die an verschiedenen Punkten der Erde nebeneinander vorkommenden Diatomaceenformen in übersicht- licher Reihen -Anordnung zeigen. Hochinteressant sind besonders die- jenigen Blätter, wo man die gegenwärtig lebenden Formen den fossilen gegenüberstellte, z. B. (Taf. 13) Süsswasser, westliche Halbkugel, jetzt lebend und fossil. Ebenso: Süsswasser, östliche Halbkugel (Taf. 14). Die Tafeln 29 bis 58 zeigen 30 Aufnahmen (Vergr. 125) von Ty- pen-Platten, auf denen die einzelnen Kieselschalen, nach Fundorten zu- sammengestellt, nicht in Reihen angeordnet sind, sondern bunt durch- einander liegen. So macht das Ganze den Eindruck natürlicher Auf- tragung; doch ist wohlgemerkt jedes kleine Schälchen einzeln auf seinen Platz gelegt und man trug dafür Sorge, dass sich niemals zwei Schalen gegenseitig bedecken. Unter diesen Aufnahmen machen wir als hervorragend schön namhaft den Polycystinenmergel von Jereray (Haiti) und von Barbados; brackische Erde von South-Yarra (Australien); Hafenschlamm von Pernambuco (Brasilien); Guano (Süd- Amerika); Darminhalt von Holothurien (Sandwichs-Inseln, stiller Oceau) u. s. w. Die 59. und letzte Tafel giebt in GOfacher Vergrösserung vier Präparate von Diatomaceen wieder, welche in kunstvollen Rosetten zu- 501 Referate und Besprechungen. VIII, 4. sammengestellt sind. Obgleich ohne wissenschaftlichen Werth, sprechen diese Bilder doch in beredtester Weise von dem feinen Geschmack des Präparators und der unglaublichen Geschicklichkeit seiner Hand. Vorläufig fehlt noch jede nähere Bezeichnung der auf den Tafeln dargestellten Formen. Jedoch verspricht Möllee, ein genaues Ver- zeichniss nachzuliefern, sobald die vielen neuen und ungenügend be- schriebenen Arten sicher bestimmt sind. Die mikrophotographische Technik ist eine vorzügliche. Möller arbeitete mit gelbempfindlichen Erythrosin-Platten, ZEXTNOw'schem Ku- pferchromfilter und Lampenlicht, welch letzteres hier einen neuen, glänzenden Beweis seiner Leistungsfähigkeit gegeben hat. Selbstver- ständlich ist es sehr schwer, bei so grossen Gesichtsfeldern ausreichende Ebenheit herbeizuführen ; doch hat Möller auch hierin alle Schwierig- keiten überwunden. Manche werden vielleicht zu rügen haben, dass die Bilder einzelner Kieselschalen nur ganz schwach sichtbar sind und hinter der Mehrzahl der übrigen, kräftig gezeichneten allzusehr zurück- bleiben. Der Vorwurf ist nicht unberechtigt; doch ist dieser Fehler hervorgebracht nicht etwa durch mangelnde Kunstfertigkeit des Mikro- photographen. Vielmehr haben wir es hier mit einer schwachen Seite der Mikrophotographie zu thun. Da die Lichtstärke der verschiedenen Kieselschalen eine überaus verschiedene ist, so werden die hellsten und durchsichtigsten Formen im Vergleich zu den undurchsichtigeren im Negativ stets zu stark gedeckt sein. An einzelnen Stellen hätte Möller, um diese Contraste ein wenig auszugleichen , getrost eine partielle Ab- schwächung des Negativs vornehmen können, ohne sich hierdurch dem Vorwurfe der Anwendung unerlaubter Retusche auszusetzen. Die Ausführung der von Strumper u. Co. in Hamburg hergestellten Lichtdrucke ist vorzüglich. Die Feinheit des Kornes — ein für mikro- photograpliische Vervielfältigungen überaus wichtiger Punkt — kann schwerlich übertroffen werden. Alles in Allem haben wir es hier mit einem Werke zu thun, welches nach jeder Richtung hin als ein mustergiltiges zu bezeichnen ist. Möge der staunenswerthe Fleiss dem Verfertiger bald reelle F'rüchte tragen ! Martens, A., Die mikrophotographische Ausrüstung der königlichen mechanisch-technischen Versuchs- anstalt zu Berlin (Mittheil. a. d. k. technischen Versuchs- anstalten. 1891. p. 278—293). In richtiger Würdigung der Bedeutung der Mikrophotographie für die verschiedensten Zweige der Technik richtete Herr Prof. Marxens VIII. 4. Referate und Besprechungen. 505 in der königlichen mechanisch-technischen Versuchsanstalt zu Berlin ein mikrophotographisches Laboratorium ein , welches besonders insofern bemerkenswerth ist, als das Mikroskopstativ und die an dem raikro- photographischen Apparate angebrachten Vorrichtungen zur Beleuchtung nndurchsicbtiger Objecto von einer Vollkommenheit sind , wie sie sich kaum an einem anderen Orte finden. Der Natur der Sache nach han- delt es sich hier zumeist um Aufnahmen undurchsichtiger Objecto, ins- besondere von geschliffenen und geätzten Flächen der Metalle. Da in Ermangelung von besonderen Mitteln die Einrichtung nach und nach angeschafft werden rausste, so wurde von der Beschaffung eines der be- kannten grossen Apparate Abstand genommen. Das Mikroskop ist nach dem Plane von Prof. Maktens von der Firma Carl Zeiss entworfen und ausgeführt. Es steht auf einem durch Schraube in der Richtung der optischen Achse verschiebbaren Schlitten und ist auf einer Guss- eisenplatte befestigt, die auf zwei festen Spitzen und einer Stellschraube ruht, so dass man die optische Achse des Mikroskops wagerecht ein- stellen kann. Das Mikroskop besteht aus einem für sich mit grober und feiner Einstellung beweglichen Tisch und aus einem mit Trieb be- wegbaren Tubus von 50 mm Weite. Tisch und Tubus finden ihre directe Stützung auf dem gemeinsamen Träger. Die Beweglichkeit des Tisches ist eine sehr ausgiebige , um sowohl bei der Anbringung um- fangreicher Objecte (Bruchstücke von Metallen u. s. w.), als auch der verschiedenen Hilfsvorrichtungen nicht beengt zu sein. Der Tisch hat die Einrichtung des ZEiss'schen photographischen Kreuztisches, welche eine am Nonius ablesbare Verschiebung um 10 mm der Tischplatte sammt Object von oben nach unten und von rechts nach links, sowie ausserdem die Drehung der Tischplatte in ihrer Ebene gestattet. Die Anfangslage in letzterer Beziehung ist durch einen Riegel gesichert, der in eine Lücke der runden Tischplatte eingreift und gegebenen Falls deren Verbleiben in der Nulllage bewirkt. Die Platte hat eine Einlage, sodass eine Tischöffnung bis zu 35 mm Durchmesser zur Verfügung steht. Die Beleuchtung für durchfallendes Licht geschieht mit den ge- wöhnlichen Coudensoren. Mittels der gewöhnlichen Federklemmen kann auf dem Tisch ein Objecthalter angebracht werden , welcher es ge- stattet , auch bei unregelmässig geformten Stücken die abzubildende Ebene des Objectes senkrecht zur optischen Achse einzustellen; der Rahmen ist um zwei zu einander senkrechte Achsen drehbar. Die grobe Verschiebung des Tisches erfolgt mit Trieb und Zahnstange, die feine durch Mikrometerschraube von der matten Scheibe aus durch ab- nehmbaren Schlüssel mit HooKE'schen Gelenken. 506 Referate und Besprechungen. VIII, 4. Für die Beleuchtung mit auffallendem Lichte werden mehrere Ein- richtungen benutzt, und zwar für die schwachen Objective entweder ein unter 45*' vor dem Objectiv aufgestelltes Planparallelglas, oder ein Prisma, letzteres gegebenen Falls so weit vorgeschoben, dass die eine Hälfte der ObjectivöfFnung bedeckt ist. Beide Vorrichtungen werden von dem am Tubus verstellbar befestigten Träger gestützt, der an einem wagerechten und einem in Kugelgelenk beweglichen senkrechten Arm das Planparallelglas oder das Prisma in der richtigen Lage hält. Für die stärkeren Objective wird die Beleuchtung mit auffallendem Licht von oben her durch das Objectiv bewirkt, indem das Licht durch eine Seitenöffnung durch ein Prisma und die eine Hälfte des Objectivs auf das Object geworfen wird, welches dann durch die andere Hälfte abge- bildet wird. Mit dieser Einrichtung sind die apochromatischen Ob- jective (Zeiss) von 0"30 und 0'95 numerischer Apertur (16 mm und 4 mm Brennweite) versehen. Die Fassung der Prismen besteht aus einem kleinen Kasten, der sich seitlich verschieben lässt, so dass man das Prisma nach Belieben etwas aus der Mitte herausrücken oder auch ganz bei Seite schieben kann. Hierdurch ist es ermöglicht, das Licht ein wenig schief zur optischen Achse einfallen zu lassen, oder auch das Objectiv mit seiner vollen Oeffnung für durchfallendes Licht zu benutzen. Für die Begrenzung der Bewegungen sind Schräubchen vorgesehen. Um das Prisma senkrecht zur optischen Achse des Beleuchtungsapparates einzustellen, ist ein um die optische Achse drehbares Zwischenstück an- gefertigt worden , an welches beide Objective passen. Ausser diesen Apochromaten mit besonderem Prisma ist noch eine Fassung vorhanden, in welcher das Prisma fest und nicht seitlich verrückbar angebracht ist; an diese Fassung passen die Objective A, B und DD von Zeiss. Die übrigen Einrichtungen weichen von den in jedem mikrophoto- graphischen Laboratorium vorhandenen nicht wesentlich ab, lassen aber überall die Hand des geschickten , erfahrenen Praktikers erkennen. Zwei dem lehrreichen Aufsatze beigegebeue Lichtdrucktafeln mit 33 Mi- krophotogrammen von undurchsichtigen Objecten beweisen zur Genüge die Brauchbarkeit der vom Autor ausgebildeten Methode. Mills, F. W., Photography applied to the microscope. London 1891. Das bescheidene Heftchen , welches den Anfänger in die mikro- photographische Praxis einführen soll, beginnt mit einer von Chakteks White verfassten Anleitung zur Herstellung mikroskopischer Präparate. Wer sich einbildet , eine irgendwie nutzbringende Anleitung dieser Art VIII, 4. Referate und Besinechungen. 507 auf 11 kleinen Octavseiten geben zu können, muss von Mikroskopie herzlich wenig verstehen, Uebrigens gehört eine solche Anleitung durchaus nicht — das mögen auch deutsche Autoren beherzigen! — in ein Buch über Mikrophotographie. Das mikrophotographische Special- werk hat lediglich darüber Aufschluss zu geben, wie das vom Anatomen, Botaniker, Bacteriologen oder Mineralogen dargebotene Präparat zu photographiren ist. Zieht man in vorliegendem Büchlein Dasjenige ab, was nicht streng zur Sache gehört, so bleiben im ganzen etwa 25 Seiten übrig, auf denen der Autor in oberflächlicher Weise aus veralteten Lehrbüchern einige Recepte zusammengeschrieben und einige unbrauchbare mikrophoto- graphische Apparate abgebildet hat. Hätte sich Mills in der neueren Fachliteratur des In- und Auslandes ein wenig mehr umgesehen, so wäre ihm wahrscheinlich der Muth geschwunden, sein Machwerk der Oeflfentlichkeit preiszugeben. Wolflf, M., u. Israel, J., Ueber Reincultur des Actinomyces und seine Uebertragbarkeit auf Thiere. Mit 39 mikro- photogr. Abb. (Viechow's Arch. f. pathol. Anat. u. Physiol. u. f. klin. Med. Bd. CXXVI, 1891). Es ist eine erfreuliche Thatsache, dass unsere Gelehrten in grund- legenden histologischen und bacteriologischen Arbeiten sich in immer grösserem Umfange als Illustrationsmethode der mikrophotographischen Abbildung bedienen. Vorliegende Schrift, auf deren epochemachenden Inhalt näher einzugehen hier nicht der Ort ist, enthält auf 7 Tafeln eine recht erhebliche Anzahl von Mikrophotogrammen, deren weitaus grösster Theil vom Ref. hergestellt wurde. Leider sind die grossen Opfer, welche Autoren und Verleger für die Illustrationen brachten, in Folge der mangelhaften Ausführung der Lichtdrucke (Alb. Fbisch in Berlin) beinahe ganz vergebliche. Das Korn der Drucke ist ein so überaus grobes und die Wiedergabe der feinen Einzelheiten der Nega- tive daher eine so mangelhafte , wie wir dies in gleicher Weise bisher nur sehr selten sahen. Man glaubt nicht Lichtdrucke, sondern die bei weitem billigeren Zinkätzungen vor sich zu haben. Wir möchten dem Verfertiger rathen, sich an Steumpek u. Co. zu Hamburg (cfr. p. 504) ein Beispiel zu nehmen. Gewisse Lichtdrucker pflegen , wenn mau ihnen über die Mangel- haftigkeit ihrer Leistungen Vorwürfe macht, einzuwenden, dass sich keine guten Resultate erzielen lassen, wenn nicht abziehbare Negative zu verarbeiten sind. Dass die Sache mit abziehbaren Negativen leichter 508 Referate und Besprechungen VIII, 4. ist, unterliegt keinem Zweifel. Dem Lichtdnicker , welcher nicht mit unabziehbaren Platten arbeiten will, bleibt es unbenommen, nicht ab- ziehbare auf abziehbare umzudrucken. Es ist leicht gesagt, man möge die Originalaufnahmen nur auf Abziehplatten herstellen, Ref. arbeitet seit Jahren zu grösster Zufriedenheit mit Sachsplatten, die in kleineren Formaten ausschliesslich unabziehbar geliefert werden, und verspürt nicht die geringste Lust, irgend einem Lichtdrucker zu Liebe sich auf die Suche nach brauchbaren Abziehplatten zu begeben. Gott sei Dank sind uns Anstalten bekannt, wo man auch nach nicht abziehbaren Platten unübertreffliche Resultate erzielt. 3. Präparationsmethoden für specielle Zwecke. A, Niedere Thiere. Rhuinbler, L., Beiträge zur Kenntnis« der Rhizop öden L (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LH H. 4, 1891, p. ölf) — 550 m. 1 Tfl. und 2 Holzschn.). Als Conservirungsmittel für die untersuchten Süsswasserrhizopoden benutzte Verf. Pikrinschwefelsäure und Flbmming's Chrom -Osmium- Essigsäure, zur Färbung Pikrocarmin, Alauncarmin, Boraxcarmin und Hämatoxylin. Da Canadabalsam die Präparate zu sehr aufhellt (in Rücksiclit auf die Gehäuse), so kam neben diesem noch FARRANT'sche Flüssigkeit, Glyceriu und Sandarak zur Verwendung. Henking {Göttingen). McMurrich , J. P., The Actinaria of the Bahama Is- lands, W. J. (Journ. of Morphol. vol. III, 1889, p. 1—80 w. 4 pltes). Zu rascher und in den meisten Fällen ausreichend guter Conser- virung werden die Actinien in ein Glasgefäss gebracht, das gerade weit genug ist, um ihnen volle Entfaltung zu erlauben und gerade genug Wasser enthält, um sie in voller Entfaltung zu bedecken; sobald dieser Moment eingetreten ist, wird PEKENvi'sche Flüssigkeit mittels einer Glasspritze plötzlich und so rasch wie möglich durch den Mund in das Innere des Thieres gespritzt. Gleichzeitig wird das Thier mit derselben Flüssigkeit Übergossen. Nach ca. einer halben Stunde beginnt die Nach- härtung mit 50-, 70- und 90procentigem Alkohol, von welchem jedes- mal auch eine beträchtliche Menge eingespritzt werden muss. K. Fiedler {Zürich). VIII, 4. Referate und Besprechungen. 509 Wilsou, H. A'., Oll tlie de velopmen t of Mauiciua areolata (Journ. of Morphol. vol. II, 1888, p, 191—240 w, 7 pltes). Die Coralle lässt sich in kleinen Aquarien sehr gut halten , wenn das Wasser zweimal täglich gewechselt wird. Die freischwimmenden Larven müssen ebenfalls zweimal täglich mittels Pipette in eine Schale mit frischem Wasser übertragen werden, Haben sie sich einmal fest- gesetzt, so kann dies langwierige Verfahren dadurch vereinfacht werden, dass man die ganze Schale in eine grössere mit frischem Wasser setzt. Bestes Fixirungsmittel für die Larven PEEiSNYi'sche Flüssigkeit und Osmiumsäure, für die ausgebildeten Thiere absoluter Alkohol. K. Firdler (Zürich). Brauer, A., lieber die Entwicklung von Hydra (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LH H. 2, 1891, p. 169—216 m. 4 Tflu.). Wegen der Undurchsichtigkeit des Hydra -Eies mussten Schnitte durch dasselbe angefertigt werden. Zn dem Zwecke wurden die unbe- schalten Eier mit FLEMMiNG'scher Flüssigkeit, die beschälten dagegen mit heissem Sublimat conservirt, da in letztere kalte Flüssigkeiten schlecht eindrangen. Der Unterschied zwischen den Dotterköruern (den soge- nannten Pseudozellen) und den Kernen kann durch Doppelfärbung mit Boraxcarmin und Malachitgrün hervorgehoben werden, doch tritt bessere Kernfärbung mit Geknacher's * Hämatoxylin bei Einwirkung bis zu 12 Stunden auf unbeschalte Eier ein. Auswaschen mit salzsaurera Alkohol. Geschnitten wurde in Paraffin. Hierbei machten die älteren beschälten Eier (besonders von Hydra grisea) Schwierigkeiten. Das Schneiden gelang, wenn das Ei vor jedem Schuitt mit der von Heider empfohlenen Mastixlösung bestrichen wurde. (Heider's Mastixlösung: Eine syrupdicke Lösung von Mastix in Aether wird zu gleichen Theilen mit Collodium gemengt und das Gemisch mit Aether verdünnt bis es ganz dünnflüssig geworden ist. Aufstreichen der Flüssigkeit mit einem Pinsel, Fortwisfhen des Ueberschusses mit einem Finger^). Henkwg (Göttinf/en). vom Rath, 0., lieber eine eigenartige poly centrische Anordnung des Ch roraat ins (Zool. Anz. Bd. XIII, L'^OO, No. 3:U p. 231). In den Köpfen von Anilocra mediterranea Leach beobachtete Verf. eine eigenthümliche sternförmige Anordnung des Chromatins der Zell- ») Cfr. hierzu die Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 57, 144, 288. -) Cfr. Heideü, K., Die Kmbryonaleutwicklung von HydropLilus piceus L. Tb. 1. Jena 1889. 4". p. 12. 510 Referate und Besprechungen. VIII, 4. kerne. Es ist hierzu jedoch eine gute Conserviruag nöthig, welche Verf. erreichte, indem er die Köpfe lebender Thiere mit einer scharfen Scheere abschnitt und sofort in bereit gehaltene Schalen mit Pikrin- schwe feisäure, erwärmten absoluten Alkohol, Sublimat, Chrom-Osmium- Essigsäure oder Pikrinsalpetersäure brachte. Besonders rühmt er die letztere. Die Köpfe wurden z. Th. in Grenacher's Alauncarmin, z. Th. in Grenacher's Boraxcarmin gefärbt und aus Paraffin geschnitten oder in Cedernholzöl zerzupft. Verf. hält die betreffenden Zellen für Speichel- drüsen. Henhing {Göttingen). TOm Katll, 0., Ueber die Bedeutung der amitotischen Kerntheilung im Hoden II (Zool. Anz. Bd. XIV, 1891, p. 363). Verf. untersuchte besonders Astacus und empfiehlt zur Conservirung der Hoden vor allem Pikri n- E s sig -0 smi um säur e in folgen- der Zusammensetzung : Pikrinsäurelösung, gesättigt, wässerig, filtrirt . . . 1000 cc Eisessig 4 „ Osmiumsäure lg Der Hoden wird etwa eine Stunde lang in der Flüssigkeit erhärtet, dann nur einige Minuten ausgewässert, in Alkohol nachgehärtet und in toto mit einer der folgenden Farben (Pikrocarmin, Alauncarmin, Borax- carmin, Alauncochenille) durchgefärbt, die Schnittserien auf dem Object- träger meist mit Hämatoxylin, Methylenblau oder Bleu de Lyon nach- gefärbt. Zur Aufhellung wurde Origanumöl benutzt. Ausserdem wurde zur Härtung noch heisser Sublimat-Alkohol oder FLEMMiNG'sche Flüssig- keit angewandt. — Die oben angegebene Mischung hat sich nach dem Verf. auch für Conservirung anderer Gewebe bei Vertebraten und Evertebraten bewährt, jedoch dürfen kleine Stücke nur kurze Zeit damit behandelt werden, oder die Flüssigkeit muss durch Zusatz von Pikrin- säure verdünnt werden. HenMng (Göttingen). Wheeler, W. M., The embryology of Blatta germanica and Doryphora decemlineata (Journ. of Morphol. vol. III, 1889, p. 291—372 w. 6 pltes). Bei Blatta wurden die Ovarialeier aller Stadien in physiologischer Kochsalzlösung herauspräparirt und 15 Minuten lang der Einwirkung der PERi;NYi'schen Flüssigkeit ausgesetzt. Mehrfaches Auswaschen in 70pro- centigem Alkohol, Färbung mit Boraxcarmin. Junge Ovarialeier konnten auch in gesättigter wässeriger Sublimatlösung gut fixirt werden. Ab- VIII, 4. Referate und Besprecbiuigeii. 511 gelegte Eier werden durch Einlegen der Eikapselu in langsam auf 80 bis 90" C. erwärmtes Wasser getödtet, die Schalen mittels feiner Zäng- chen aufgebrochen und die so isolirten Eier entweder sofort in 35pro- centigen und nach 10 Minuten in TOprocentigen Alkohol oder aber in Kleinenbekg's Pikrinschwefelsäure übertragen, und nachher mehrfach mit TOprocentigem Alkohol ausgewaschen. Färbung mit Gkenacher's Boraxcarmin. Bei Doryphora wurden die besten Ergebnisse durch Er- wärmung der Eier auf 80*^ C. und zwar in der mit drei Raumtheilen Wasser verdünnten KLEiNENBERG'schen Pikrinschwefelsäure für ca. 10 Minuten erzielt. Dadurch heben sich die Eihüllen ab und können ausser bei den allerjüngsten Stadien leicht mit Präparirnadeln entfernt werden. Erwärmt man weniger oder verwendet man PERfiNYi'sche Flüssigkeit oder Sublimat oder Alkohol, so haften die Eihüllen dem Dotter allzufest an. Durch die Pikrinschwefelsäure wird übrigens auch die Zellstructur vortrefflich fixirt und dem Dotter eine Consistenz ertheilt, welche Paraffineinbettung (bei ca. 50" C.) und Herstellung von Schnitt- serien ohne jede Schwierigkeit erlaubt, Durchfärbung oder Schnitt- färbung wiederum mit Boraxcarmin. K. Fiedler {Zürich). Mazzsirelli^ G. F., Eicerche sulla morfologia e fisiolo- gia dell'apparato riproduttore nelle Aplysiae del Golfo di Xapoli [Untersuchungen über die Morpho- logie und Physiologie des Fortpflanzungsapparates der Aplysien des Golfes von Neapel] (Atti della R. Accad. delle Scienze di Napoli [2] vol. IV, 1891, append. no. 5. — 50 pp. c. 4 tavv.). Mazzaeelli findet, dass das Keimorgan einer Aplysia am besten durch 10 Minuten langes Eintauchen kleiner Stücke davon in bis auf 70" bis 80' erwärmten Alkohol conservirt wird. Hierdurch wird auch die Färbbarkeit in sonst schwach färbenden Substanzen, z. B. Alaun- carmin, wesentlich gesteigert. Eine Conservirung mit FLEMMiNo'scher Flitssigkeit und Färbung mit Pikrocarmin in toto ist nicht zu empfehlen, weil erstere das Object brüchig, letztere dasselbe quellen macht und macerirt. Für Schnitte dagegen sind beide mit Erfolg zu gebrauchen. P. Schiemeuii {Neapel). Lee, A. B.» 0" ^ little-known sense-organ in Salpa (Quart. Jouru. Microsc. Sei. New Ser. vol. XXXII, 1891, p. 89—97, w. 1 pite.). Das 1876 von Ussow entdeckte Sinnesorgan, von Lee als ein „sensorisches Aräometer" gedeutet, wurde an Salpa mucronata genauer 512 Referate und Besprechungen. VIII, 4. studirt, besonders durch lutra-vitam-Färbung mit Geutianaviolett und Dahlia und nach Fixirung mit Flemming' scher Flüssigkeit sowie Fäx*- bung mit Henneguy's essigsaurem Alauncarmin, K. Fiedler (Zürich). B. Vertebraten, Iheriiig, H. y., lieber die zoologisch- systematische Be- deutung der Gehörorgane der Teleostier (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LH H. 3, 1891, p. 477—514 m. 1 Tfl.)- Verf. macht darauf aufmerksam, dass an sonst gut conservirten Fischen die kleinsten Otolithen doch sehr oft macerirt resp. aufgelöst seien. Es tritt das in dem Falle ein, dass die Schädelhöhle nicht er- öftnet ist. Sic werden dann durch den sich gering ansäuernden Alkohol entweder aufgelöst oder doch so mürbe, dass sie bei der Präparatiou zerfallen. Deshalb ist die Untersuchung von frischem Materiale anzu- rathen, vielleicht aber würde auch Einsalzen nach Oeffnung der Schädel- höhle oder auch Benutzung von getrocknetem Materiale genügen. HenJäncj {Göttingen). Magilii, G., Ancora sulla ubicazione del nucleolo nella cellula nervosa motoria [Noch einmal über die Lage des Kernes in der motorischen Nervenzelle] (Atti della R. Accad. dei Lincei Roma (4) Rendic. vol. VII, 1891, 1. sem. p. 277—279). Magini hält daran fest, dass die Lage der Kerne der motorischen Nervenzellen in deu elektrischen Loben von Torpedo eine physiologische Bedeutung habe, trotz der Einw^endungen von Coggi, der diese Lagerung für ein durch die Einwirkung der conservirenden Reagentien hervorge- rufenes Kuustproduct hält. P. Schiemens (Neapel). AUis, E. Ph., The anatomy and development of the lateral line System in Amia calva (Journ. of Morphol. vol. II, 1888, p. 463—566 w. 13 pltes). Um den Verlauf der Kanäle in den Hautknochen zu verfolgen, wurde der Kopf des Fisches auf einige Minuten in siedendes Wasser gebracht, so sorgfältig wie möglich gereinigt und dann der Maceration überlassen bis zu völliger Erweichung der Gewebe. Alle Knochen, welche irgend welche Theile des Systems enthielten, wurden sorgfältig gereinigt, äusserlich mit einer Bürste, im Kanalwerk durch Einspritzen VIII, 4. Referate und Besprechungen. 513 von Wasser mittels einer Pipette. Nach Anwärmen der Stücke in Wasser wurden sie mit einer blauen Leimlösung injicirt, und nach kur- zem Verweilen au der Luft in öOprocentigen Alkohol übertragen. Wo die Injectionsflüssigkeit in kleinere Kanäle nicht eingedrungen war, wurde die kalte Masse von der Oberfläche aus mittels Nadelu in die Oeffuungeu hineingepresst. Endlich wurde die Knochensubstanz auf der inneren Oberfläche unter den Kanälen soweit entfernt, dass unter dem Mikroskop jeder Ast genau verfolgt werden konnte. Macerirt man ohne vorheriges Sieden, so findet man in den Kanälen ein kalkähnliches De- positum, welches jede erfolgreiche Lijection verhindert. K. Fiedler {Zürich). Rossi, U., II nucleo nelle uova dello Spelerpes fus- cus 0 Geotriton fuscus. 1. Nota [Der Eikern von Spelerpes oder Geotriton fuscus] (Lo Spe- rimentale 1890, 11 pp.). Verf. fand zum Studium des Eikernes eine Gonservirung mit Chrom- Essigsäure nach 0. Schultze (1887) oder mit Sublimat vorzüglich. P. Schiemens {Neapel). Meves, Fr., lieber amitotische Kerntheilung in den Sperma- togonien des Salamanders und Verhalten der Attrac- tionssphäre bei derselben (Anat. Anz. Bd. VI, 1891, No. 22 p. 626—639 mit 11 Figg.). Nach Verf. kommen die Amitosen verhältnissmässig selten im Sala- manderhoden vor. Reichlich finden sie sich im März, weniger häufig im September und October. Doch zeigten keineswegs die Hoden aller Thiere aus diesen Jahreszeiten Amitosen; wenn sie überhaupt vor- kommen, findet man sie meist reichlich. Neben den Amitosen kommen selten im Frühjahr, häufiger im Herbst, in derselben Zellenart auch Mitosen vor. Letztere überwiegen von Anfang Mai bis etwa Ende August bei weitem ; daneben kommen dann Amitosen nur in ganz ver- einzelten Exemplaren vor. Fixirt wurde durch lange Vorbehandlung (Flemming) mit HEKMANN'scher Lösung oder dem FLEMMiNö'schen Gemisch. Einbettung in Paraffin. Färben der mit Eiweiss aufgeklebten Schnitte mittels Safranin -Gentiana, meist zusammen mit GiiAM'scher Behandlung, oder mit Safranin-Gentiana-Orange nach Flemming. Gute Resultate ergab auch die Fixation mit HEEMANN'scher Lösung und riach- herige Reduction mit Holzessig nach Heemann. ScJdefferdecler {Bonn). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 4. •''* 514 Referate und Bes2)reclinngen. VIII, 4. van der Stricht, Division mitosique des erythroblastes et des leiicoblastes a Tinterieur du foie embry- onnaire des mammiföres (Anat. Anz. Bd. VI, 1891, No. 20, 21 p. 591—594). Verf. empfiehlt zu diesem Studium Fixiruug iu HEEMANN'scher Flüssigkeit, Celloidineinschluss, Safraninfärbung. Während die Leuko- b 1 a s t e u einen breiten Protoplasmahof um den Kern zeigen, der deutlich gekörnt ist, wobei die Körnchen das Safranin stark festhalten, besitzen die Erythrob lasten nur einen schmalen und homogenen Protoplas- mahof. Sie nehmen allmählich Hämoglobin auf. Die verschiedenen Stadien dieser Aufnahme treten nach Fixirung mit HEKMANN'scher Flüssigkeit sehr deutlich hervor, da dieses Reagenz das Hämoglobin im Inneren des Protoplasma sehr gut fixirt. SchiefferdecJcer {Bonn). Daremberg, (j., Sur le pouvoir globulicide du serum sanguin (Comptes rend. de l'Acad. des Sc. de Paris t. CXIII, 1891, p. 508—509). Bekanntlich besitzt das Blutserum eines Thieres die Fähigkeit, die rothen Blutkörperchen eines Thieres anderer Art zu zerstören, üeber diese „pouvoir globulicide" hat Verf. Versuche angestellt. Bringt man 2 bis 3 Tropfen Blutserum des Hundes (gewonnen durch Gerinnung des Blutes und Stehenlassen oder noch besser durch die Centrifuge) auf den Objectträger und setzt eine Spur von Meerschweinchen- oder Kaninchen- blut zu, so sieht man die rothen Körperchen dieses in 2 bis 3 Minuten verschwinden, als wenn sie aufgelöst würden. Dasselbe geschieht bei Zusatz von Tauben- und Froschblut, nach 25 bis 30 Minuten sieht man nur noch die Kerne, die noch lange färbbar bleiben. Kaninchenserum wirkt weniger energisch auf Blut von Säugethieren, Vögeln, Fröschen. Diese „pouvoir globulicide" kann man dem Blutserum nehmen, wenn man es auf 50 bis 60° C. erwärmt. Schon nach 5 Minuten wird die Zerstörungsfähigkeit geringer und nach 25 bis 30 Minuten ist sie ver- schwunden. Die rothen Blutkörperchen conserviren sich dann in dem fremden Blutserum ebenso lange und ebenso gut wie in dem Serum der eigenen Thierart. Ebenso hört die Zerstörungsfähigkeit auf, wenn man das Blutserum 8 bis 10 Tage laug dem diffusen Tageslicht aussetzt. Ebenso, wenn mau das Serum für einige Stunden der Einwirkung einer Spur von Knoblauchöl unterwirft. Die „pouvoir globulicide" wird etwas verzögert durch Spuren von Su- blimat, Schwefelkohlenstoff, Paraldehyd und Quecksilberdämpfen; sie wird nicht verändert durch Einwirkung des luftleeren Raumes, durch VIII, 4. Referate und Besprechungen. 515 Spuren von Xylol, Diraetliylamin, Aether, Amyl- oder Methylalkohol. Das tödteude und das nicht tödtende Serum sind gleich stark alkalisch. Das Eiereiweiss besitzt keine „pouvoir globulicide". Schiefferdccker {Bonn). Zoja, L. e R., Intomo ai plastiduli fucsinofili (biob- lasti dell'ÄLTMANN) [Ueber die fuchsi n ophil en Plastidule (Bioblasten Alt man n's)] (Mem. del R. Ist. Lombardo di Scienze e Lettere vol. XVI, 1891. Sc.-Xat. p. 237—270, tav. 9—10). Altmann's Methode bewährt sich zum Studium der Plastidule, je- doch ist es nicht nöthig, dass die Objecto ganz frisch sind. Zur Be- obachtung der Lagerungsverhältnisse der Plastidule zu den Elementen des Kernes, besonders während der Karyokinese, empfiehlt es sich, nach der Behandlung mit Pikrinsäure das Object noch eine halbe Stunde in nicht verdünntes DELAriELü'sches Hämatoxylin zu legen. P. Schicmens {Neapel). Ballowitz, E., Weitere Beobachtungen über den feineren Bau der Säugethierspermatozoen (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LH H. 2, 1891, p. 217—293 m. 3 Tfln.). Verf. bestätigt die Angaben von Niessing und von Jensen, dass durch Zusatz von einprocentiger Essigsäure zu dem Hodenpräparate die fibrilläre Structur des Achsenstranges im Verbindungsstücke demonstrirt werden kann. Zu dem Zwecke übt mau nach jenem Zusatz einen Druck auf das zuvor fixirte Deckglas aus und färbt dann mit Geutianaviolett. Um das Verhalten des Endknopfes der Geissei zum Kopfe sicher zu stellen, benutzte Verf. folgende Methode : Frisches Sperma, z. B. vom Ochsen oder Dachs wird mit Osmiumsäuredämpfen fixirt, und die Deckglas- trockenpräparate werden intensiv mit Gentianaviolett oder Safranin ge- färbt und dann längere Zeit dem Lichte ausgesetzt, bis ein gewisser Grad von Entfärbung eingetreten war. Dann tritt an dem etwas abge- blassten Kopfe zwischen den wohl etwas stärker gefärbten hinteren Kanten der Endknopf mit intensiver Färbung hervor. — Die Deckglas- trockenpräparate fertigte Verf in der Weise an, dass er frisches Sperma mit physiologischer Kochsalzlösung verdünnte und nun mit Osmiumsäure- därapfen fixirte. Die Flüssigkeit wurde an der Luft verdunsten gelassen und die Masse über einer Spirituslampe vorsichtig angetrocknet. Darauf intensive Färbung mit Gentianaviolett oder Safranin. Nach Einschluss in Canadabalsam kommen die Präparate einige Zeit in directes Sonnen- 34* 516 Referate und Besprechungen. VIII, 4. licht. Bei der dadurch bewirkten Entfärbiiug tritt eine Difterenzirung in der Färbung des Spermatozoenkopfes ein. Henking {Güttwgen). Benda, C, Neue Mittheilungen über die Entwicklung der Genitaldrüsen und über die Metamorphose der Samenzellen (Verhandl. d. Pliysiol. Gesellschaft Berlin, 1891/92, No. 4 und 5). Es handelt sich in erster Reihe um Säugethiere. Fixirungs- und Härtungsmittel: FLEMMma'sche Lösung, HERMAKN'sche Lösung, lOpro- centige Salpetersäure mit Nachbehandlung mittels Osmium oder Kali bichromicum, Sublimat, Pikriuosmiumsäure. Färbung: Celloidin- oder aufgeklebte Paraffiuschnitte wurden erst 24 Stunden mit Anilin-Safrauin- lösung (1 g Safranin, 90 g Anilinwasser, 10 g Alkohol) gefärbt, daun in einer Lösung von 0'5 g Lichtgrün, F.-S. oder Säureviolett (beides von Dr. G. Geüblee, Leipzig) in 200-0 Alkohol etwa eine halbe Minute ausgewaschen, und durch Alkohol absolutus, Bergamottöl, Toluol in Canadabalsam gebracht. Die Schnitte zeigen eine sehr scharfe rothe Färbung der Chromatintheile durch Safranin, eine lebhafte grüne oder violette Färbung des Nebenkerns (Archiplasma) und eiue diffuse des Zellprotoplasmas durch die sauren Anilinfarben; einzelne Theile (Centro- somen und Spitzenknopf) zeigten sich bald grün bald roth. Schiefferdecker (Bonn). Jariscli^ Zur Anatomie und Herkunft des Oberhaut- und Haarpigmentes beim Menschen und den Säugethieren (Ergänzungshefte z. Arch. f. Dermatol. u. Syphilis. Jahrg. 1891. H. H, p. 35—55 m. 1 Tfl.). Verf. bediente sich zur Untersuchung der braunen Flecken der Con- junctiva bulbi des Ochsen. Die noch warmen Conjunctivalstücke wurden theils in RABL'sche Flüssigkeit, theils in ansteigenden, theils in absoluten Alkohol gebracht. Die ersteren wurden nach 2 Tagen in TOprocentigem Alkohol, der während einer Woche häufig gewechselt wurde, von der Pikrinsäure befreit und in Alkohol absolutus aufbewahrt. Von diesen Präparaten wurden Stücke in toto in Boraxcarmin gefärbt, wurden dann in Wasser flüchtig abgespült, dann in häufig gewechselten Salzsäure- Alkohol (6 Tropfen auf 100 cc eines TOprocentigen Alkohols) für mehrere Stunden eingelegt, bis sie hellroth geworden waren und keine Farbe mehr abgaben. Dann Alkohol absolutus, Toluol (ca. 2 Stunden), Pa- raffiubad. Die Mikrotomschnitte (Serien) wurden mittels schwacher Gummilösung (1 Tropfen des officinellen Mucilago gummi arabici auf "VIII, 4. Referate und Besprechungen. 517 eine kleine Dose von Aq. dest.) in Reihen auf dem Objeetträger fixirt und nacli vollständiger Antrocknung in Terpentin von dem Paraffin be- freit und dann in Damarlack eingeschlossen. — Zur Fixirung der Haut- und Haarpräparate vom Menschen benutzte Verf. ansteigenden Alkohol, absoluten Alkohol und Sublimat; sonst ebenso. SchiefferdecJicr (Bonn). Riese, H., Die feinsten Nervenfasern und ihre Endigungen im Ovarium der Säugethiere und des Menschen (Anat. Anz. Bd. VI, 1891, No. 14, 15 p. 401—420 m. 8 Figg.). Verf. hat recht gute Resultate erhalten , indem er auf die Nerven des Ovariums die jetzt so viel benutzten beiden Methoden der Nerven- untersuchung (Bichromat-Osmium-Silber und Methylenblau) anwandte. Seine Methode war folgende : 1) Die Ovarien wurden dem frisch ge- tödteten Thiere (meist durch Chloroform) entnommen, durch Querschnitte, die bis auf den Hilus drangen , in ganz kleine Abschnitte zerlegt und in die starke Mischung von Ramön y Cajal gebracht: Kalium bichromatum . 3 Th. Osmiumsäurelösung, einprocentig, ... 25 „ Aq. dest 100 „ Hierin blieben die Stücke bei häufigem Wechsel der Flüssigkeit 6 bis 8 Tage; dann wurden sie in Y4Procentige Silbernitratlösung übertragen, die zuerst schon nach 15 Minuten, dann in längeren Zeitabständen er- neuert wurde und im ganzen 48 Stunden und länger einwirkte. Zu langes Verweilen darin erschien aber auch nicht günstig. Darauf wur- den die Stücke entweder in HoUunder eingeklemmt mit der Hand ge- schnitten , oder es wurde in eine Höhlung des Holkmdermarks um das Präparat herum Celloidin gegossen (wie Ramön y Cajal Paraffin her- umgiesst), das Verf. nur eben erstarren liess, worauf die Schnitte mittels eines JuNG'schen Mikrotoms angefertigt wurden. Sie wurden in Dam- marharz mit der Zeit immer klarer und haben sich (ohne Deckglas) bis jetzt ein Jahr gut gehalten. Die Resultate waren so, dass im ganzen nur eine unvollkommene Färbung eintrat, unter Umständen aber gerade die feinsten Nervenfasern sehr schön hervortraten. Es wurden so unter- sucht die Ovarien von Kaninchen, Hunden, Katzen, Schafen und Mensch. — 2) Durch Injection von Methylenblau erhielt Verf. nach mehrfachen vergeblichen Versuchen schliesslich sehr schöne Resultate bei einer zweijährigen Katze. Es wurde eine 4procentige Lösung von Geibler's rectificirtem Methylenblau in 0-7procentiger Kochsalzlösung in die Aorta des eben getödteten Thieres dicht oberhalb des Abgangs der Renal- arterien injicirt, nachdem vorher die Carotis eröffnet war, um etwas ausbluten zu lassen. Dann wurden die Ovarien hervorgezogen, um sie 518 Referate und Besprechungen. VIII, 4. möglichst mit atmosphärischer Luft in Berührung zu bringen und eine halbe Stunde nach der Injection herausgenommen. Nachdem eine An- zahl bis zum Hilus reichender Querschnitte angelegt worden waren, wurden sie in ein offenes , mit Humor aqueus angefülltes Schälchen ge- bracht, ein kleines Stückchen wurde herausgeschnitten und zerzupft. Als die ausserordentlich reichen Nervenfasern hierin etwa eine Stunde nach der Injection die schönste Blaufärbung zeigten , wurden beide Ovarien fixirt, das eine in einer gesättigten Ammoniumpikratlösung, das andere in sehr stark mit destillirtem Wasser verdünntem Hoyer- schen Pikrocarmin. In der ersten Lösung blieb das Präparat 18 Stun- den, in der anderen 2 Stunden. Dann wurde das erste Präparat sofort in HoUundermark , theils mit der Hand, theils mit dem Mikrotom ge- schnitten ; ein Stück auch , nachdem es mit Celloidin umgössen war, wobei die ersten Schnitte noch brauchbar wurden. Die in Pikrocarmin fixirten Stücke wurden einen Tag in verdünntem Glycerin gelassen, dem wenig von der Fixirungsflüsslgkeit zugesetzt war. Sie ergaben Präparate , die namentlich zuerst weniger klar waren als die übrigen, wenn auch die Blaufärbung besser erhalten war, die aber doch nach längerer Zeit noch recht brauchbar wurden. Später wandte Verf. auch das Ammoniumpikrat - Osmiumgemisch von Dogiel an *, ebenfalls mit gutem Erfolge. Die Methylenblaumethode lieferte im ganzen vollkom- menere Bilder als die erste. • Schiefferäeclcer {Bonn). Spaiiik, P. F., Ueber die Einwirkung reinen Alkohols auf den Organismus und insbesondere auf das peripherische Nervensystem (Moleschott's Unters, z. Naturlehre d. Menschen u. d. Thiere. Bd. XIV H. 5, 1891, p. 449—514 m. 1. Tfl.). Zur Untersuchung- der an den peripheren Nerven durch Alkoholi- sirung des Thieres hervorgerufenen Degenerationserscheinungen hat Verf. einmal FixirungMn EELicKi'scher Lösung angewendet mit einer Anzahl darauf folgender Färbungsmethoden, und zweitens Fixirung in Flem- MiNG'scher Flüssigkeit mit Färbemetlioden. Die erstere Methode ergab indessen nicht genügend scharfe Bilder; bei der zweiten waren die fol- genden Färbungsmethoden die günstigsten. Der Nerv wurde auf einem mit einer Rinne versehenen Streichhölzchen der Länge nach aufgebunden und dann für 8 bis 20 Stunden in FLEMMiNG'sche Flüssigkeit gebracht, darauf mindestens 2 Tage in fliessendem Wasser ausgewaschen und 1) DoGiEi, A. S., Ein Beitrag zur Farbenfixirung von mit Methylenblau tingirten Präparaten (Diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 15). VIII, 4. Referate und Besijrechungen. 519 dann in Alkohol absolutus aufbewahrt. Dann Färbung : 1) P i k r o - carmin wirkte verschieden. Oefter wurde eine schöne Färbung des Achsencylinders erzielt, wenn die Fasern aus der Tinctionsflüssigkeit (1 Stunde bis 7 Tage) [ein etwas weiter Spielraum! Ref.] sofort in Alkohol absolutus, Oleum caryophyllorum, Canadabalsara gebracht wur- den; in anderen Fällen blieb jedoch auch hier die Tinction diffus. 2) Hämatoxylin: a, Hämatoxylin 1 Alkohol, absolut, 10 Aq. dest 90 gekocht, gab, nachdem die frischbereitete Flüssigkeit 8 Tage lang der Luft ausgesetzt worden war, in vielen Fällen (Einwirkungsdauer 10 Minuten bis 24 Stunden) eine ausreichende, aber meist dunkle Tinction, wobei die Achsencylinder in den meisten Fällen leicht verfolgt werden konn- ten, b, Hämatoxylin (von Maequart) 1 : 200 Aq. dest. wird viele Stunden lang mit kaltem Wasser geschüttelt. Ungefähr 6 Tage nach Bereitung färbt diese Flüssigkeit schnell. Später trotz Aufbewahrung im Dunklen langsamer (36 Stunden und mehr). Aus der Färbeflüssig- keit kamen die Nerven sofort in Alkohol absolutus, dann Oleum caryo- phyllorum, cedri oder Xylol, dann Canadabalsara. 3) Nigrosin- Safranin -Alkohol. Nigrosin (1:90 Aq. dest., 10 Alkohol abs., gekocht), Safranin (1 : 200 Alkohol abs., 100 Aq. dest.) wurden mit Alkohol abs. im Verhältniss von 3:1:1 gemischt. Diese Flüssigkeit gab nach 3- oder mehrtägiger Einwirkung ein scharfes, prachtvolles Bild des Achsencylinders und zeigte zugleich die Kerne und die Gren- zen des Myelins wie der Nervenfaser in schöner und deutlicher Weise. Nach der Färbung kamen die Nervenfasern in Alkohol absolutus (mit oder ohne Na Gl), Olenm cedri, Canadabalsara. — Die Farbstoffe waren von Geübler in Leipzig bezogen, das Carmin von Fr. Schäfer in Darmstadt. Schieff'erdecJcer (Bonn). Dogiel, A. S., Die Nervenendkörperchen (Endkolben, W. Krause) in der Cornea und Conjunctiva bulbi des Menschen (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXXVII, 1891, p. 602—619 m. 2 Tfln.). Die Methylenblaufärbung der Nervenendigungen erfolgte im wesent- lichen nach der früher beschriebenen Methode'. Die in toto ausge- ») DoGiEL, A. S., Methylcnblautinction der motorischen Nervenendigungen in den Muskeln der Amphibien und Reptilien (Arch. f. mikrosk, Anat. Ed. XXXV, 1890, p. 305; cfr. diese Zeitschr. Bd. VIII, 1890, p. 509). 520 Referate und Besprechungen. VIII, 4. schnittene Cornea muss ca. eine bis anderthalb Stunde in der aus einigen Tropfen Humor aqueus und 2 bis 3 Tropfen Yigprocentiger Methylen- blaulösung bestehenden Mischung verweilen, 18 bis 20 Stunden in ge- sättigter Lösung von pikrinsaurem Ammoniak oder pikrinsaurem Kali liegen, und in verdünntem Glycerin, das nach 24 Stunden meist ge- nügend aufgehellt hat, untersucht werden. Die Conjunctiva wird zur Färbung der Endkolben am besten mit Sclera und Cornea im Zusam- menhang belassen ; der Augapfel daher sammt seiner Bindehaut längs einer Linie durchschnitten, welche 5 bis 8 mm weit hinter dem Corneal- rande und dem Aequator parallel verläuft; der so erhaltene vordere Abschnitt des Bulbus von Ciliarkörper, Linse etc. befreit und in Theile zerschnitten, die wie oben zu behandeln sind. K. Fiedler {Zürich). Dog'iel, A. S., Die Nervenendigung in Tastkörperchen (Arch. f. Anat. u. Entwicklungsgesch. 1891, p. 182—192 m. 1 Tfl.). Um die GBANDRY'schen und HERBSi'schen Körperchen in Bezug auf die in ihnen vorhandene Art der Nervenendigung zu untersuchen, verfuhr Verf. auf folgende Weise: Es wurde eine Injection der Blut- gefässe des Kopfes einer Gans oder einer Ente mit auf 40" C. erwärmter 4procentiger Methylenblaulösung vorgenommen. [Ob das Thier vorher getödtet, ev. der Kopf abgeschnitten war, wird nicht gesagt.] Sofort nach der Injection wurde ein Theil der Schnabelhaut ausgeschnitten, in Hollunder eingebettet und zur Anfertigung von Schnitten verwendet, die auf dem Objectträger mit Humor aqueus oder Glaskörperfiüssigkeit desselben Thieres betupft wurden. Um die Tinction der Nerven zu steigern, war es zweckmässig, zu den erwähnten Flüssigkeiten einige Tropfen 16procentiger (?) Methylenblaulösung zuzufügen. Das Präparat blieb unbedeckt und wurde von Zeit zu Zeit mit schwacher Vergrösserung angesehen. Gewöhnlich schon nach 10 bis 30 Minuten konnte man auf den Schnitten eine prächtige blaue Färbung der Achsencylinder, Tastscheibchen und knopfartigen Verdickungen (HEEBsx'sche Körperchen) wahrnehmen. Dann wurden die Schnitte auf 24 Stunden in eine gesättigte Ammonium-Pikrat-Lösung oder, in eine Ammonium-Pikrat- Osmiumsäure-Mischung übergeführt. Darauf wurden sie mit Glycerin behandelt oder zunächst mit Pikrocarmin gefärbt, wobei sie nach Verlauf von 24 Stunden vollständig durchsichtig und zur Unter- suchung geeignet waren. Die besten und am meisten demonstrativen Präparate erhielt man nach Fixirung mittels der Mischung. Schi eff er (lecker {Bonn). VIII, 4. Referate und Besprechungen. 521 Oddi, R. e Rossi, U., Sul decorso delle vie afferenti del midollo spinale st u diäte col metodo delle de- generazioni [lieber den Verlauf der zuführen- den Wege der Med u IIa spinalis, untersucht mit Hülfe der Degenerationsmethode] (Pubbli- caz. del R. Ist. di Studi Superiori Pratici e di Perfezionamento. Firenze. 1891, 47 pp. 8" c. 4 tav. Vorl. Mitth. auch in: Lo Sperimentale vol. XLV. Memorie Originali 23 pp. c. 1 tav.). Zum Studium der Degenerationen diente das MARCHi'sche Ver- fahren, für das der Sklerosen gaben das WEiGERT'sche (mit der Aende- rung von Vassale), das MARTiNOTTi'sche ' und das von Rossi^ die besten Resultate. Die Methode von Adamkiewicz^ steht den genannten sehr nach. Gutes leistete auch die Rossi'sche Methode mit nachfolgender Färbung in einer öOprocentigen, wässerigen Lösung von Eosin. P. Schiemeuz {Neapel). C, Bacterien, Gabritschewsky , G., Zur Technik der bacteriologischen Untersuchungen (Centralbl. f. Bacteriol. u. Parasitenk. Bd. X, 1891, No. 8 p. 248). I. Graduirte Capillarpipetten zum Abmessen sehr kleiner Flüssigkeitsmengen (Figur 1). Gabritschewsky ver- wendet zum genauen Abmessen kleinster Flüssigkeitsmengen behufs Anlegung von Culturverdünnungen etc. Capillarpipetten, welche nach Art des Melangeurs beim TnojiA-ZEiss'schen Blutkörperchenzählapparat 1. construirt sind. Er verwendet eine kleinere Sorte, welche von O'OOl bis 0*01 bis 0*1 cc, und eine grössere, welche in 0-01 bis 0*1 bis l'Occ getheilt ist. Die Pipette wird trocken sterilisirt, am oberen Ende mit einem kurzen Gummischlauch versehen, dessen freies Ende mit einem Glas- 1) Cfr. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 328. 2) Cfr. diese Zeitschr. Bd. VI, 1889, p. 182. 3) Cfr. diese Zeitschr. Bd. I, 1884, p. 587. 522 Referate und Besprechungen. VIII, 4. knöpf verschlossen ist und der durch einen Schraubenquetschhahn com- primirt werden kann. Durch entsprechendes Einstellen der Schraube wird nach Eintauchen ihrer Spitze in die Flüssigkeit die Pipette gefüllt (Vorsicht vor Aufsteigen von Luftbläschen), dann äusserlich gut abge- trocknet, und nachher die Flüssigkeit ebenso mit Hilfe des Schrauben- quetschhahns ausgetrieben. Nach Gebrauch ist die Pipette sorgfältig ■mit Wasser, Alkohol, Aether zu reinigen und zu sterilisiren^ IL Schalen zur Cultur von Anaerobien (Figur 2). Ga- BRiTSCHEWSKY hat zur Cultur von Anaerobien Platten construirt, welche einen erhöhten Mittelboden von 7 bis 8 cm Durchmesser besitzen, welcher von einem 1 cm tiefen und breiten Hohlring umfasst wird. Auf die obere plangeschliffene Seite der übergreifenden Wand des letzteren ist eine plane Glasplatte luftdicht aufgeschliffen. Der Linenraum steht bei gewisser Stellung nur durch je zwei 0*5 cm im Durchmesser haltende Bohrungen in der Deckplatte und in der Oberwand des Hohlrings mit 2. der Aussenluft in Verbindung. Die Deckplatte wird mit Vaseline ge- dichtet, eine Drehung genügt, um den Abschluss von der Aussenluft herzustellen. Die Schalen werden trocken sterilisirt, dann unter der Glocke des Giessapparats der iuficirte verflüssigte Nährboden auf dem Mittelboden zur Erstarrung gebracht, die mit Vaseline bestrichene Deck- platte aufgelegt, durch eine Bohrung 5 Minuten lang Wasserstoff ein- geleitet, darauf durch die andere 3 cc 20procentige Pyrogallussäure und 3 cc verdünnter (1 : 5) lOprocentiger Kalilauge in die Hohlrinne des Hohlrings gegossen und darauf unter beständigem Einleiten von Wasser- stoff der Deckel durch Drehen geschlossen. Der Verschluss kann durch umgelegten Gummiring noch verstärkt werden , was aber nicht erforderlich ist. Die Pyrogallusmischung muss dauernd unverändert bleiben und darf sich nicht bräunen. CzapleivsTii {Tübingen). Schill^ Beiträge zur bacteriologischen Technik (Centralbl. f. Bacteriol, u. Parasitenk. Bd. X, 1891, No. 20 p. 657). 0 Die graduirten Capillarpipetten sind zu beziehen von Cnu. Fuchs München, Schillerstr. 11. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 523 1) Ersatz des Wattepfropfens. Um den Wattepfropf an den Reagensgläsern zu vermeiden, schlägt Schill vor, das Reagensglas mit einem zweiten , eng anschliessenden zu bedecken , welches ca. % der Länge der ersteren hat. Die Gläser haben grössere Wandstärke als die gewöhnlichen und keinen umgebogenen Rand. Der Zwischen- raum zwischen beiden darf nur papierdick sein. Schill benutzt zwei Grössen a) 16 cm Länge bei 15 mm innerer Weite und b) 18 cm Länge bei 25 mm innerer Weite (für Kartoflfeln). Der Verschluss ist bacteriensicher. Behufs Signatur werden dünne mit Bleistift be- schriebene Papierstreifen ringförmig zwischen die Gläser eingefügt oder ein schmaler hakenförmig umgebogener Pergamentpapierstreifen an den Rand des innern Glases eingehakt. Zur Herstellung von Dauer- culturen giesst man flüssiges Paraffin in den Spaltraum. Für Cultur von Anaerobien werden die geimpften Röhrchen unter Quecksilber um- gekehrt mit Wasserstoff in bekannter Weise erfüllt, dann das Deckel- röhrchen unter Quecksilber aufgesetzt (welches dann als Quecksilber- wanne dienen soll) und umgekehrt im Brutschrank oder sonst wie aufgestellt. 2) Filterapparate für Nährgelatine. Zur Beschleunigung des Filtrirens der Nährgelatiue räth Schill, den Boden des Filters zu vergrössern. Leicht ist dies zu erreichen durch Einlegen einer gläser- nen, siebartig durchlöcherten Platte in den Trichter, noch einfacher, wenn man den Boden einer Conservenbüchse mit einer Ahle von aussen nach innen in concentrischen Ringen siebartig durchbohrt, dann von aussen mit einem allerseits mindestens 2 cm breiten Fliesspapier und darüber einer doppelten Lage entfetteten Mulls (der Haltbarkeit wegen), z. B. mittels eines Gummiringes, stramm überbindet. Durch dieses an- gefeuchtete Filter filtrirt Nährlösung in unterbrochenem Strom, Gelatine aber schneller als durch ein gewöhnliches Filter. Noch mehr be- schleunigt wird die Filtration, wenn man keine offene Conservenbüchse zu dem Versuche gewählt hat, sondern eine Blechflasche, durch deren Pfropf luftdicht ein langer Trichter fast bis auf den durchlöcherten Boden der Flasche eingeführt ist. Die zu filtrirende Flüssigkeit wird durch den Trichter oben eingegossen. Die Filtration regulirt sich mit durch den Druck der in der Flasche eingeschlossenen Luftmenge. Man darf nicht zu schnell nachgiessen, um das Filter nicht abzureissen. Besser wäre die Herstellung des Apparates aus Glas. :^) Die einfachste Injections- und Aspiratiousspritze. Schill armirt ein an einem Ende spitz ausgezogenes, am anderen Ende mit Wattepfropf versehenes Glasrohr mit einem ca. '/^j m langen Gummi- 524 Referate und Besprechungen. VIII, 4. schlauch. Man hält die Spitze des Rohres in die anzusaugende Flüssig- keit, worauf diese beim Ausrecken des am Ende zusammengedrückten Gummischlauchs in das Rohr eingesogen wird. Beim Zusammenpressen des Gummischlauchs wird die Flüssigkeit wieder ausgetrieben. Czapleivski (Tübingen). Unna, P. Gr., Die Färbung der Mikroorganismen im Horngewebe (Monatsh. f. prakt. Dermotol., Bd. XIII, 1891, No. 6 p. 225, No. 7 p. 286). Unna schildert und erörtert eine Reihe von Methoden, welche er zum Zwecke tinctorieller Isolirung von Mikroorganismen im Hornge- webe ausfindig gemacht hat, nachdem er die seitherigen Methoden von V. Sehlen, Bizzozeko und Boeck als nicht für alle Fälle ausreichend erkannt hatte. Er giebt zunächst einen übersichtlichen Abriss über den Gang seiner Untersuchungen, bespricht sodann die bemerkens- werthesten Methoden einzeln ausführlicher und stellt schliesslich die besten und für den praktischen Gebrauch besonders geeigneten formular- weise zusammen. Um die Hornsubstanzen zu Augenblicks- und Dauerpräparaten vorzubereiten, empfiehlt Unna zuförderst folgendes Verfahren : Die betreffende Hornschnppe (Kruste, Comedo etc.) wird mitten auf einen Objectträger von englischem Format gelegt und mit einem Tropfen starker Essigsäure befeuchtet. Dann lege man einen zweiten Objectträger kreuzweise über den ersten und zerreibe unter drehen- den und drückenden Bewegungen beider das im Essig sofort weich werdende Material in einigen Secunden zu einem Brei , der etwa die 4- bis Gfache Ausdehnung der frühereu Hornmasse besitzt. Dann werden beide Objectträger von einander gehoben (nicht über einander hinweg- gezogen) und rasch über der Flamme getrocknet. Nunmehr nimmt man der Reihe nach die noch warmen (nicht heissen) Objectträger in Daumen und Zeigefinger der linken Hand, welche mit einem Handtuch bedeckt ist, klemmt sie zwischen eine Falte des letzteren, hält die Objectträger etwas schräge aufwärts und giesst auf ihr oberes freies Ende einige Tropfen Aether- Alkohol, deren Menge sich nach dem Fettgehalt des Materiales richtet und die im Nu alles durch die Wärme verflüssigte Fett ins Handtuch abwärts spülen. Hierauf tropft man sofort zwei Tropfen Borax- Methylenblaulösung (Borax , Methylenblau aä 1, Aqua destill. 100) auf den einen Objectträger, deckt ihn wieder kreuzweise mit dem anderen, wodurch sich die augewandte minimale Quantität der Farblösung gleichmässig über das ganze Präparat aus- VIII, 4. Referate und Besprechungen. 525 breitet und hält die gekreuzten Objectträger 10 bis 20 Secunden über die Flamme. Nach sauberem Abspülen mit Wasser werden die Präparate entweder gleich weiter entfärbt oder ohne weiteres über der Flamme getrocknet. Alle seine einschlägigen Färbungsversuche hat Verf. an genau in der beschriebenen Weise hergestellten Druck-Präparaten durchgeführt. ControUirt wurden aber alle Versuche an zwei Serien von Schnitten, erstlich von gewöhnlichen, meist doppelt gefärbten Schnitten verschiede- ner Dermatosen (besonders Akne, Ekzem, Furunkel), sodann an specieli hierfür hergerichteten Comedonenschnitten, die, nach Unna, ein besonders brauchbares Object zum Studium der verschiedensten Hornpilze abgeben. Zur Herstellung derselben verfährt Unna folgender- maassen : Von frisch entnommenen Comedonen werden die grössten und geradesten Exemplare herausgesucht und, unentfettet, wie sie sind, alle mit den Köpfen nach oben in eine mit warmer Agarlösung ausgegossene Rinne versenkt. Letztere wird hergestellt durch zwei dicht nebenein- ander mit einer Harz- Wachsmischung auf Glas aufgeklebte, ca. 1 cm hohe Glasleisten, deren Zwischenraum etwa 2 mm beträgt und an beiden Enden ebenfalls durch vorgeklebte Glasleisten geschlossen wird. Das Agar erstarrt nach einigen Minuten , wenn man die Glasplatte , die während des Einsenkens warm (z. B. auf Dampf) stehen muss, erkalten lässt. Nach Wegnahme der Glasleisten hat man ein durchsichtiges Agarplätt- chen gewonnen, welches alle Comedonen in derselben Richtung liegend enthält. Dasselbe wird in kleine, je 2 bis 3 Comedonen enthaltende Stücke zerschnitten , welche in Alkohol , Aether und Celloidin kommen, wobei sie zugleich entfettet werden. Mit dem Mikrotom lassen sich dann feinste Schnitte in Masse durch die Comedonen herstellen. Bei der Beurtheilung der Leistungsfähigkeit der einzelnen Methoden wurde wesentlich auf zwei Mikroorganismenarten Rücksicht genommen, welche sich in ihrer Tingibilität möglichst verschieden ver- halten und leicht in grösserer Menge in den Horngebilden der Haut an- zutreffen sind : erstens die Sporen von Malassez, welche bei jeder Pity- riasis capitis die Hornschicht in reichlicher Zahl durchsetzen , und zweitens ein sehr kleiner, in Gloeamasse eingebetteter Bacillus, welcher in keinem Comedo vermisst wird und auch sonst alle in Zersetzung und Verfärbung begriffene Hornsubstanz begleitet. Erstere bezeichnet Unna, da er die Hefenatur derselben nicht mit Bizzozeko anerkennen kann, sie vielmehr für Bacillensporen hält, als „grosse Flaschenbacillen", letztere als „kleine Hornbacillen". Manche sonst gute Methoden stellen 526 Referate und Besprechungen. VIII, 4. ausschliesslich erstere dar, nur wenige speciell die letzteren, da ihre Farbenreactionen derjenigen der Hornschicht selbst allzu nahe kommen 5 wieder andere Methoden lassen beide Arten gleich gut hervortreten. Die Schwierigkeit einer distincten Färbung der Mikroorganismen in den Hornsubstanzen beruht darauf, dass letztere eine ähnlich starke Affinität zu den basischen Auilinfarbstoffen besitzen wie erstere und mit- hin entweder leicht zu stark m i t gefärbt oder zu wenig e n t färbt wurden, oder aber bei erzwungener Entfärbung nichts mehr von den darin enthalten gewesenen Bacterien erkennen lassen , weil diese ebenfalls entfärbt wurden. Es kommt also auf die Auswahl ge- eigneter Färbungs- und Entfärbungs- resp. Umfärbungsmittel an, um die immerhin , und zwar zu Gunsten der Bacterien vorhandene graduelle Differenz in der Affinität zu den Auilinfarbstoffen zum Zwecke einer iso- lirten Färbung der Bacterien in den Horngeweben auszunutzen. Diesen Zweck hat nun Unna, zum Theil in Anlehnung an die schon bekannten Methoden von v. Sehlen, Bizzozeko und Boeck, aber unter wesent- licher Erweiterung und Vervollkommung derselben, in sehr verschiedener Weise erreicht. Er gruppirt seine bezüglichen Methoden nach der von ihm in seiner bekannten Studie: Die Entwicklung der Bacterienfärbung (Jena, 1888, G. Fischer)^ aufgestellten Eintheilung , wonach die Färbungen in monochromatische und polychromatische zerfallen mit folgenden Unterabtheilungen : I. Monochromatische Färbungen; a) directe Färbungen, 1. in ver- dünnten Lösungen, 2. in abgeschwächten Lösungen ; b) indirecte Färbungen, 1. Entfärbung durch physikalische Mittel (Alkohol, Anilin, Oxydationsmittel -\- Alkohol) 2. Entfärbung durch chemische Mittel (Säuren -\- Alkohol, Salze -|- Alkohol, Jod -|- Alkohol, Reducentia). IL Polychromatische Färbungen; a) Zwei- oder mehrzeitige Färbung. 1. Contrastfärbung farbloser Gewebsreste. 2. Partielle Umfärbung des Gewebes; b) Einzeitige Färbung. Der Weg der d i r e c t e n Färbung mittels verdünnter resp. abge- schwächter Lösungen ist schon in Bizzozeeo's Verfahren eingeschlagen. Unna verbesserte dies Verfahren durch Anwendung verschiedener, noch stärker abgeschwächter Lösungen, als sie der italienische Forscher be- nutzt hatte, z. B. Mischungen von Glykol und Methylenblaulösung zu gleichen Theilen oder von Glycerinäther 1 Tropfen mit 2 Tropfen der Farblösung. Den Weg der iudirecteu Färbung hatte bereits BoECK mit seiner Methode der Entfärbung der, durch Borax-Me- ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 382. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 527 tliylenblau vorgefärbten Prcäparate mittels Resorcins betreten. Unna hat auch hier eine grosse Zahl neuer, auf diesem Dar- stellungsprincip gegründeter Einzelmethodeu ausßndig gemacht, unter welchen namentlich diejenigen auch theoretisch von Interesse sind, welche die Entfärbung d. h. die Differenzirung zwischen Horngewebe und Mikroorgansmen, durch die von Unna hierbei neu eingeführte Combination chemischer und physikalischer Entfärbungsmittel, nämlich der Salze und der Oxydationsmittel , specieller gesagt, der verschiedensten Salze und des Wasserstoffsuperoxyds, bewirkten. — Der Weg der polychromatischen Färbung war durch V. Sehlen mit seiner hier einschlägigen Methode („Contrastfärbung farbloser Reste"), welche sich im wesentlichen mit der Koch-Ehrlich- schen, zur Darstellung der Tuberkelbacillen im Gewebe verwandten Doppelfärbung deckt , inaugurirt worden. v. Sehlen's Methode eignet sich indessen , nach Unna , gut nur für die Darstellung der Haarbacterien; andere Hornsubstanzen als die Haare halten den ersten Farbstoff, der Säure gegenüber, nicht genügend fest, so dass sie dann zu leicht in der zweiten Farbe mitgefärbt werden. Die wenigen Verbesserungen, die Unna hier seinerseits erzielt hat, betreffen haupt- sächlich die Einführung der Minimalfärbungen als Nachfärbung und den Gebrauch des Glykols und der Salz - H2 O2- Methode zur zweiten Ent- färbung. Noch weniger als die Contrastfärbungsmethoden haben Unna bisher die Versuche, mittels der anderen polychromatischen Methoden, die „Umfärbuugen" und die „einzeitige polychroraatische Färbung mitttels Farbengemisches", reine Gegenfärbungeu von Hornsubstanzen und den darin enthaltenen Mikroorganismen herzustellen gelingen lassen. Im „speciellen Theile" werden nun von Unna die einzelnen neuen Methoden — 24 an Zahl — eingehend besprochen und der Technicis- mus sowie die Färbungsresultate derselben an den oben erwähnten Testobjecten genau angegeben. Wir begnügen uns diesbezüglich, den von Unna selbst dargebotenen Auszug wiederzugeben, in wel- chem er diejenigen unter den angeführten Methoden noch einmal genauer beschreibt und zusammenstellt, „welche am einfachsten auszu- führen sind und für die gewöhnlich vorkommenden Fälle auch wohl immer ausreichen" dürften. Auch bei diesen „Formeln" geht Unna von dem regelrecht mit Borax-Methylenblau in der oben referirten Weise vorge- färbten Schnitt- oder Druckpräparate aus. In der folgenden Zusammen- stellung bedeutet Bmb. : Borax-Methylenblau (Borax, Methylenblau aa 1, Aq. dest. 100 ) 528 Referate und Besprechungen. VIII, 4 I. Druckpräparate. 1. Bmb. 1 Minute. 2. Abspülung in Spiritus 10 Secunden. 3. Entfärbung in Styron 2 Minuten. 4. Abspülung in Xylol. 5. Balsam. Styronmethode. Schnittpräparate. 1. Bmb. 1 Minute. 2. Spiritus 10 Secunden. 3. Styron 2 bis 5 Minuten. 4. Xylol oder Cedernöl. 5. Balsam. II. GlyJiolmethode. Druckpräparate. 1. Bmb. 1 Minute. 2. Abspülung in Wasser. 3. Entfärbung in Glykol 2 bis 5 Min. 4. Abspülung in Wasser. 5. Abspülung in Alkokol. 6. Trocknen über der Flamme. 7. Balsam. Schnittpräparate. 1. Bmb. V2 Minute. 2. Abspülung in Wasser. 3. Glykol 5 Minuten. 4. Abspülung in Wasser. 5. Alkohol absolutus. 6. Oel (Bergamott, Cedern). III. Glycerinätherm ischungsmethode Druckpräparate. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Abspülung in Wasser. 3. Glyceriuäther 2 Minuten. 4. Abspülung in Wasser. 5. Trocknen über der Flamme. 6. Balsam. IV. D r u c k p r ä p a r a t e. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Abspülung in Iprocent. Essigsäure. 3. Abspülung in Wasser. 4. Abspülung in Alkohol. 5. Trocknen über der Flamme. 6. Balsam. S c h n i 1 1 p r ä p a r a t e. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Wasser. 3. Glyceriuäther 2 Minuten. 4. Wasser. 5. Antrocknung. 6. Balsam. EssigmetJiode. Schnittpräparate. 1. Bmb. 5 Minuten. 2. Iprocent. Esssigsäure 2 See. 3. Alkohol absolutus, 4. Oel. 5. Balsam. V. Säuremethode für Iprocentige Oxalsäure, Iprocentige Cüronen- säure oder Iprocentige Arsensäure. Druck Präparate. 1. Bmb. 5 Minuten. 2. Säurelösung 5 Secunden. 3. Abspülung in Wasser, ev. Alkohol. 4. Trocknen über der Flamme. 5. Balsam. Schnittpräparate. Bmb. 5 Minuten. 2. Säurelösung '/a bis 1 Minute. 3. Alkohol absolutus. 4. Oel. 5. Balsam. 1 ») Die hier angegebene Glycerinäthermischung kann bezogen werden durch SciiucHAHUT, Chemische Fabrik, Görlitz. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 529 VI. Hydroxylaminmetliode. Druckpräparate. 1. Bmb. 5 Minuten. 2. Abspülung in Wasser. 3. Iprocentige Hydroxylaminchlorid- lösung 5 Secunden. 4. Abspülung in Alkohol. 5. Trocknen über der Flamme. 6. Balsam. Schnittpräparate. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Wasser. 3. Hydroxylamin »/, Minute. 4. Alkohol absolutus. 5. Oel. 6. Balsam. VII. Seifenmethode. Druck Präparate. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Iprocentige neutrale wässerige Seifenlösung 5 Secunden. 3. Abspülung in Wasser. 4. Abspülung in Alkohol. 5. Trocknen über der Flamme. 6. Balsam. Schnittpräparate. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Seifenlösung V4 Minute. 3. Wasser 10 Secunden. 4. Alkohol absolutus 1 bis 2 Minuten. 5. Oel. 6. Balsam. VIII. Kochsah- Wasserstoff superoxydmethode. Druckpräparate. 1. Bmb. 5 Minuten 2. Iprocent.Kochsalzlösung 5 Secunden. 3. Wasser. 4. Abspülung in Alkohol. 5. 3procent. H, O2 -Lösung 5 Secunden. 6. Abspülung in Alkohol. 7. Trocknen über der Flamme. 8. Balsam. Schnittpräparate. 1. Bmb. 2 Minuten. 2. Kochsalzlösung V4 Minute. 3. H2O2 - Lösung 10 Secunden. 4. Alkohol absolutus 10 bis 20 Secunden. 5. Oel. 6. Balsam. IX. liesorcinmethodr. Druckpräparate. 1. Bmb. 5 Minuten. 2. öprocentige wässerige Resorcin- lösung 10 Secunden. 3. Glycerinäthermischung (oder 1 pro- centige Oxalsäurelösuug) 10 bis 20 Secunden. 4. Abspülung in Wasser. 5. Abspülung in Alkohol. 6. Trocknen über der Flamme. 7. Balsam. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. Bd. VIII, 4. Schnittpräparate. 1. Bmb. 5 Minuten. 2. öprocentige wässerige ßesorcin- lösung 2 Mmnten. 3. Glycerinäthermischung (oder Ipro- centige Oxalsäurelösung) V4 Minute. 4. Wasser. 5. Alkohol absolutus. 6. Oel. 7. Balsam. 35 530 Referate und Besprechungen. VIII, 4. X. Hydrochinonmethode. Druckpräparate. Schnittpräparate. 1. Bmb. Ve Minute. 1. Bmb. V« Minute. 2. Iprocentige spirituöse Hydrochinon- 2. Hydrochinonspiritusi^bisYj Minute. lösung Vz Minute. 3. Anilinöl 5 bis 10 Secunden. 3. Abspülung in Alkohol. 4. Xylol oder Cedernöl. 4. Anilinöl Vj Minute. 5. Balsam. 5. Abspülung mit Alkohol. 6. Trocknen über der Flamme. 7. Balsam. Baumgarten {Tübingen). Schailtyr, J., üntersuchungeu über die Mikroorganismen der Hundestaupe (Deutsche Zeitschr. f. Thiermed. u. vergl. Pathol. Bd. XVIII, IL 1 p. 1—20; m. 2 Tfln.). Zunächst wurden von Verf. Reinculturen der von Skmmek, Feied- BERGEB, Kbajewsky, Laosson, Rabe, Mathis, Maecone, Meloni u. A. bei der Staupe gefundenen Mikrokokken aus dem Blute, den Pusteln und den Lungen dargestellt. Dieselben erwiesen sich als sehr ähnlich, wenn nicht identisch mit Staphylococcus pyogenes albus. Impfungen mit diesen Mikrokokken erzeugten locale Entzündungen und Abscessbildung, und aus dem Blute der geimpften Thiere wurden Reinculturen von Staphylo- coccus pyogenes albus erhalten. Bei einzelnen Impflingen erschienen auch Pusteln auf der Haut, bisweilen auch Ausfluss aus den Augen und in einem Falle eine starke Trübung der Cornea. Das Auftreten der Eiterkokken im Blute und in den inneren Organen bei der Staupe hängt mit der eiterigen Lungenaflfection, die häufig als Complication der Staupe auftritt, zusammen. Bei fehlender Lungenaflfection fehlen auch die Eiter- kokken im Blute und den inneren Organen. Ausser Stophylococcus pyo- genes albus wurden in zwei Fällen ein kettenbildender, die Gelatine nicht verflüssigender Kokkus, einmal ein Kapselkokkus, ähnlich dem Feied- LÄJSTDER'schen Pueumoniekokkus gefunden, die alle bei Verimpfungen auf junge Hunde keinerlei Wirkung äusserten. Daraus geht hervor, dass die von verschiedenen Autoren bei der Staupe beschriebenen Kokken nicht die Erreger der Staupe sein können, und dass pustulöser Haut- , ausschlag und der unbedeutende Ausfluss aus Nase und Augen, der nach Impfungen mit Staphylococcus sich zuweilen einstellt, irrthümlicher- weise für Staupe gehalten worden ist, oder aber es sind bei den Impf- versucheu nicht Reinculturen der Kokken, sondern mit Staupe-Mikro- organismen gemischte Culturen in Anwendung gekommen. Die Frage über die specifischen Staupe-Mikroorganismen war daher ofi'en geblieben, VIII, 4. Referate und Besprechungen. 531 da bisher noch Niemand mit Reinculturen gearbeitet hatte. Die von Verf. angestellten Versuche sollten nun diese Lücke auszufüllen dienen. Verf. hat durch seine Untersuchungen herausgefunden, dass die in Dorpat und Umgebung mit dem Namen Staupe bezeichneten Hautkrankeiten drei verschiedenen Krankheitsgruppen angehörten, nämlich 1) einem Typhus abdominalis, 2) einem Typhoid und 3) der eigentlichen Staupe. — 1) Verf. fand bei einigen Hunden im Blute, in den Transsudaten, in der Milz und den Mesenterialdrüsen einzelne oder zu Gruppen vereinigte kurze, kleine Bacillen, welche mit den von E. Semmer beim Abdominaltyphus der Hunde gefundeuen Bacillen identisch waren. Aus dem Blute und der Milz dieser Thiere wurden Reinculturen von Typhusbacillen in Bouillon, auf Gelatine, Agar und Kartoffeln angestellt und diese Reinculturen zu Impfversuchen verwendet, und wurden hierzu Hunde, Meerschweine, weisse Mäuse, weisse Ratten, Katzen und Kaninchen benutzt. Der Impfstoff wurde entweder mit einer PKAVAz'schen Spritze unter die Haut, in die Brusthöhle, in die Luftröhre eingeführt, oder per os; in einigen Fällen wurde er in die Nasenschleimhaut eingerieben. Bei dem Hundetyphus konnte Verf. also im Blute, in den Transsudaten, in der Milz, den Mesen- terialdrüsen und in der Leber durch Anwendung von Anilinfarbstoffen kleine einzeln oder in Gruppen liegende Bacillen nachweisen. Die farb- losen Blutkörperchen enthielten oft bis zu 20 Bacillen. Bei längerer Dauer der Krankheit verschwanden diese zuletzt, und es Hessen sich dann nur noch welche in den Mesenterialdrüsen nachweisen. In solchen Fällen ergaben auch nur Culturen aus Mesenterialdrüsen positive Resul- tate. Bei Aussaaten von Blut und Milzsaft auf Gelatine erschienen nach .36 bis 48 Stunden kleine grauweisse Pünktchen, die bis zum 5. oder 6. Tage mohnsamengross wurden und zusammenflössen. Am 3. Tage nach der Aussaat erschien auf der Oberfläche der Gelatine ein dünner, durchsichtiger, grauweisser Anflug, der allmählich die ganze Oberfläche bedeckte und zuletzt milchweiss wurde. Auf Agar erschien nach 24 Stun- den im Thermostaten am Impfstrich ein dünner bläulichweisser Anflug, der sich allmählich nach den Seiten ausbreitete, ohne jedoch die Wan- dungen der Gläschen zu erreichen. Auf Blutserum bildete sich ein grau- weisser Anflug. Auf Kartoffeln blieben die Colonien selbst mehrere Wochen lang unsichtbar; die Kartoffeloberfläche erschien nur etwas feuchter und glänzender; mikroskopisch Hessen sich zahlreiche Bacillen nachweisen. Im hängenden Tropfen waren die Bacillen beweglich, an einem Ende mit einem glänzenden Punkt versehen. Längere Bacillen hatten an beiden Enden glänzende Körperchen. Auf Kartoffeln bildeten sich längere Fäden, ebenfalls mit glänzenden Körperchen, die hier auch 35* 532 Referate und Besjjrechungen. VIII, 4. in der Mitte auftreten [beginnende Sporenbildung? Anm. des Ref.]. Die Bacillen des Hundetyphus färbten sich gut mit Fuchsin ; dagegen ent- färbten sie sich nach dem GEAM'schen Verfahren behandelt. Frische Culturen waren am virulentesten; in 18 bis 20 Tagen fingen sie an sich abzuschwächen. Im hängenden Tropfen verloren die Bacillen im Laufe der Zeit ihre Beweglichkeit, sie wurden körnig und färbten sich dann schlecht. Zur Sporenbildung kam es nicht. Auf Kartoffeln behielten die Bacillen ihre Beweglichkeit einen Monat lang ; sie färbten sich gut ; nur die glänzenden Körperchen nahmen keinen Farbstoff an. — 2) Die eigentliche Hundestaupe unterscheidet sich von den anderen, vom Verf. beschriebenen Hundekrankheiten dadurch, dass sich die Mikroorganismen derselben auf den gebräuchlichen Nährböden entweder gar nicht oder sehr schlecht entwickelten nnd Reinculturen dieser Mikroben daher sehr schwer herzustellen waren. In allen Fällen der Hundestaupe gelang es Verf., im Blute, in den Transsudaten, in der Milz, der Leber und an- deren Organen eine Menge kleiner, 1 bis 2 [Jt langer, in Gruppen bei- sammenliegender, oft zu zweien unter einem Winkel zusammenhängender, etwas gebogener Bacillen nachzuweisen. Dieselben färbten sich mit allen Anilinfarben gut, gediehen jedoch nicht bei Zimmertemperatur auf den gebräuchlichen Nährböden, im Thermostaten bildeten sie jedoch bei 33 bis 35 " C. in der sich verflüssigenden Gelatine wolkige Trübung und senkten sich zu Boden. Nur in einem Falle glückte es Verf., eine Agar- cultur der Staupebacillen im Thermostaten zu erzielen und dieselbe auf Blutserum zu übertragen. Von drei mit der Blutserumcultur geimpften jungen Hunden erkrankten zwei an der Staupe und fielen mit den bei der Staupe eigenthümlichen pathologischen Veränderungen, während gleichzeitig geimpfte Katzen und Meerschweine gesund blieben. — Die dritte vom Verf. beschriebene Kranklieit, das Typhoid, wird durch einen charakteristischen, vom Typhus verschiedenen Bacillus verursacht. Verf. konnte nämlich im Blute, in den Transsudaten, in der Milz und in der Leber vermittels Färbung in Gruppen liegende kleine Bacillen consta- tiren, die zwar grosse Aehnlichkeit mit den Staupebacillen hatten, jedoch etwas kleiner und dünner als diese waren. Sie färbten sich gut mit Fuchsin, Gentianaviolett, Methylviolett und auch nach dem GEAM'schen Verfahren. Aus dem Blute und aus der Milz wurden Aussaaten auf Agar und Gelatine gemacht. Auf Agar begann im Thermostaten bei 35 bis 37 ^ C. nach 24 Stunden eine Wucherung, nach 48 Stunden er- schien auf der Oberfläche ein grauweisser Belag, der in wenigen Tagen die ganze Oberfläche bedeckte. Im Impfkanal bildeten sich milchweisse Colonien, die bald zusammenflössen. In älteren Culturen nahmen die VIII, 4. Referate und Besprechungen. 533 Colonien eine gelbliche Färbung an. In Gelatine bei Zimmertemperatur erschienen erst nach 2 Wochen am Impfstich kleine Pünktchen, die sich sehr langsam vergrösserten. Auf der Oberfläche war das Wachsthum ein sehr unbedeutendes. Eine Uebertragung der Culturen von Agar auf Pferdeblutserum gelang nicht. Sowohl die Agar- als auch die Gelatine- colonien bestanden aus Reinculturen eines kleinen, wenig beweglichen Bacillus von der Dicke der Tuberkelbacillen, aber bedeutend kürzer als diese. Auf Kartoffeln wuchsen die Typhoidbacillen in Form eines bräun- lichen, dünnen, trockenen Anfluges. Mit den Culturen wurden Hunde, Meerschweine und Kaninchen geimpft. — Seine interessanten Resultate fasst Verf. folgendermaassen zusammen : „Diese drei bisher unter dem^ Namen „Hundestaupe" beschriebenen Krankheiten haben eine grosse Aehnlichkeit miteinander und nur eine genaue mikroskopische Unter- suchung der specifischen Mikroorganismen ermöglicht eine genaue Grup- pirung dieser Krankheiten. Die Typhusbacillen finden sich meist ein- zeln im Blute und den inneren Organen. Die Staupe- und Typhoidbacillen liegen meist in Gruppen beisammen. Die Typhusbacillen färben sich schlechter mit Fuchsin und entfärben sich beim GßAM'schen Verfahren, was bei den Staupe- und Typhoifdbacillen nicht der Fall ist. Die Typhus- und Typhoidbacillen geben auf Agar, Gelatine und Kartoffeln charakte- ristische Culturen, während die Staupebacillen auf genannten Nährmedien gar nicht oder nur spärlich gedeihen". Nörner {Dorotheenthal). D, Botanisches, Wildeman^ E. de, Premiöres recherches au sujet de l'influence de la temperaturesur la marche, la duree et la frequence de la caryocin^se dans le rfegne vegetal (Journ. public par la soc. roy. des sc. med. et nat. de Bruxelles 1891, 27 pp. avec 3 plches.). Diese Arbeit ist die Beantwortung einer von der Brüsseler Acade- mie gestellten Preisfrage; die Untersuchungsobjecte waren eine dicke Spirogyra (crassa ?) und die Staubfadenhaare von Tradescantia. Die Beobachtungen wurden, wie das bei solcher Fragestellung selbstver- ständlich, durch lückenlose Verfolgung am Individuum gemacht und zwar ohne Anwendung weiterer Kunstgriffe am Tage, Vormittags zwischen 8 und 10 Uhr beginnend, mitunter auch des Mittags zwischen 3 und 4. Die Untersuchung wurde nämlich im Winter ausgeführt und das Mate- rial jeweils im Freien aus einem Graben, dessen Wassertemperatur 2" C. nicht überstieg, eingesammelt. Am Tage gesammeltes, Nachts 12 Uhr 534 Referate und Besprechungen. VIII, 4. fixirtes Material zeigte stets nur wenige Zelltheiliing und solche fast stets in den letzten Stadien, Die Literaturangaben, wonach Zellthei- lungen bei Spirogyra immer Nachts stattzufinden pflegen (Sachs, Steas- BüKGEB etc.), beziehen sich alle auf die Zelltheilung im Sommer. Die wohlberechtigte Frage,- ob solche Pflanzen, wie die hier benutzten, zur generellen Beantwortung der Frage geeignet waren und überhaupt nur als physiologisch normal betrachtet werden konnten, scheint der Verf. völlig ausser Acht gelassen zu haben, obwohl er selbst unter 3" keine Zelltheilung constatiren konnte! Auch zwischen 3 und 4 und selbst 4 und 5" konnte eine vollständige Theilung nicht beobachtet werden; da hilft sich Verf., indem er das, was erst nachgewiesen werden soll, schon als bekannt voraussetzt, mit einer „approximativen" Bestimmung und berechnet (sie !) die Dauer durch Vergleich der beiden Eudphasen mit den entsprechenden Phasen bei einem vollständig abgelaufenen Thei- lungsvorgang bei höherer Temperatur. Im übrigen hält es Verf. selbst für sehr wahrscheinlich, dass die Temperatur, bei welcher die Spirogyrafäden im Freien lebten, von Einfluss auf die Schnelligkeit der Zelltheilung sein dürfte, wenigstens nach unvollständigen Beobachtungen an im October eingesammeltem Material. Leider wnrde damals die Wassertemperatur nicht beobachtet, und so „berechnet" sie Verf. nach- träglich in dieser „Experimentalstudie" auf 14", die Mitteltemperatur des Octobers ! ! — Ueber die genauere Anordnung der Versuche, nament- lich über die Art und Weise, wie die Versuchsfäden einer bestimmten Temperatur ausgesetzt wurden, fehlt jede Angabe. Die Experimente an den Tradescantiahaaren wurden in feuchter Kammer mit einem Tropfen 3procentiger Zuckerlösung im Sommer an- gestellt, imWinter entnommenes Gewächshausmaterial lieferte kein Resultat. Zur Erzielung der gewünschten Tempe- ratur wurde hier der bekannte SACHs'sche Wärmekasten gebraucht. Die zur Beobachtung günstigsten Haare sind solche, deren Wände noch parallel und deren Zellsaft noch nicht gefärbt ist, die günstigste Zelle ist die Endzelle. L. Klein {Karlsruhe). Hansen, E. Chr., Qu'est-ce que la levure pure de M. Pa- STEUE? Une recherche experimentale (Compte-rendu des travaux du Laboratoire de Carlsberg t. III, 1891, p. 24 — 43). Die von Pasteub in seinen Etudes sur la biere mitgetheilten Ver- fahren zur Cultur der Brauereihefe, vor allem die Cultur in lOprocentiger Rohrzuckerlösung, der etwas Weinsäure zugesetzt war, hatten nicht den Zweck, eine Hefereincultur in dem Sinne zu erzielen, in dem wir heute VIII, 4. Referate und Besprechungen. 535 das Wort Reincultur verstehen; Pasteur wollte die Hefe nur von Bacterien befreien, da diese Organismen damals allein als Erreger von Krankheiten des Bieres bekannt waren. — Verf. weist in vorliegen- der Schrift vornehmlich die Angriffe zweier französischer Forscher ab: die von Duclaux , der 19 PASTEUR'sche Hefeballons, die seit 14 bis 17 Jahren nicht geöffnet waren, untersuchte, in 14 derselben wirkliche Reinculturen fand und auf Grund dieser Befunde das PASTEUR'sche Verfahren als geeignet zur Erzieliing einer wirklichen Reincultur er- achtete, und die von Velten, welcher die Verwendung einer einzigen Hefespecies als für die Praxis ungeeignet bekämpft und die Reinigung der Brauereihefe nach dem PASTEUR'schen Recepte verlangt, das zwar keine Reincultur, aber doch ein reines, d. h. bacterienfreies Gemisch verschiedener Hefearten liefere, wie es zur Erzielung eines wohl- schmeckenden Gährproductes nothwendig sei. Beide Forscher hatten völlig ausser Acht gelassen, dass, wie HA^^^EN längst gezeigt, einige der häufigsten und gefährlichsten Krankheiten des Bieres durch Saccharo- mycesspecies hervorgerufen werden. Wie es um die Richtigkeit jener Behauptungen steht, erhellt aufs Klarste aus einer Reihe von ad hoc angestellten Versuchen des Verf.'s, die zeigen, was Alles als End- product derartiger Culturverfahren erhalten werden kann, und die aus letzterem Grunde auch ein allgemeineres, ein methodologisches Interesse beanspruchen dürfen. Dem von Duclaux befürworteten Verdrängungs- verfahren haftet nicht nur vom rein theoretischen Standpunkte aus der grosse Uebelstand an, dass der Zeitpunkt, zu welchem aus dem Gemisch eine Reincultur geworden ist, sich in jedem Einzelfalle nur durch Probiren feststellen lässt, sondern es nimmt vor allem ohne weiteres an, dass die genannte Nährlösung für die Brauereihefen günstiger als für die wilden Hefen sei. Hansen prüft zunächst durch vier Versuchsreihen mit bestimmtem Aussaatraaterial die theoretische Seite des Pasteur- schen Reinculturverfahrens. Zehnprocentige mit Vao Procent Weinsäure versetzte Rohrzuckerlösung wurde in PASTEUR'schen zweihalsigen Bal- lons mit gleichen Mengen verschiedener Cultur- und wilder Hefen be- schickt, die 10 Tage alten Reinculturen in Bierwürze bei Laboratoriums- temperatur entnommen waren. Der eine Ballon erhielt Saccharomyces cerevisiae I, S. Pastorianus I und HI, und S. ellipsoideus II; der zweite Unterhefe No. I von Carlsberg, S. Pastorianus I und III, und S. ellip- soideus II; der dritte Unterhefe No. I und II von Carlsberg, S. Pasto- rianus I und II und S. ellipsoideus II. Diese Ballons blieben bei Zimmertemperatur einen Monat laug stehen, wurden dann durchge- schüttelt und aus jedem eine kleine Probe in neue Ballons mit der 536 Referate und Besprechungen. VIII, 4. gleichen Nährlösung gebracht; nach einem weiteren Monat wurde aus dieser zweiten Serie eine dritte auf die gleiche Weise angesetzt, die ebenfalls einen Monat stehen blieb. Nachdem so die Cultur im ganzen 3 Monate gedauert hatte, wurden aus den Ballons letzter Serie neue Ciilturen sowohl in Bierwürze wie in lOprocentiger Dextroselösung in Hefewasser angesetzt, um zu sehen, welche Arten lebenskräftig geblieben waren. Sobald sich in diesen Culturen eine Hefevegetation gebildet hatte, wurden Proben davon in Gelatine ausgesät, welche das eine Mal mit Würze, das andere Mal mit der genannten Dextroselösung gemischt war; ferner wurden in gleicher Weise Gelatineplatten nach Ablauf der Hauptgährung besät und schliesslich solche mit Hefeproben, welche direct aus den Culturen entnommen wurden , welche 3 Monate lang in Zuckerlösung gelebt hatten. So gelangten drei verschiedene Entwick- lungsphasen der in Rede stehenden Hefeculturen zur Prüfung. Die Platten wurden bei 25 "^ cultivirt, die darauf gewachsenen Hefeflecke theils mikroskopisch untersucht, theils in zahlreiche Ballons mit Bier- würze ausgesät und die hier erwachsenen Vegetationen auf die bekannten Eigenschaften der zur ersten Aussaat verwendeten Hefen untersucht. Das Resultat war ein sehr bemerkenswerthes: von den sechs verschie- denen Hefearten waren im ganzen nur zwei lebendig geblieben , die beiden Krankheitserreger S. ellipsoideus II und S. Pa- storianus I; der erste in allen Ballons, der zweite in einem, vielleicht auch in zweien. Die Anwesenheit des zweiten Hess sich nur in einem Falle mit Sicherheit nachweisen und da erst nach Cultur in Dextrose- lösung mit Hefewasser. Der Versuch lehrt also, dass einmal S. ellipsoideus II sich am lebenskräftigsten gezeigt hatte und ferner, dass das Verfahren nicht genügte, selbst hiervon eine Reine ultur zu garantireu. Eine zweite Ver- suchsreihe mit genau gleichem Endresultat wurde ebenso an- gestellt, nur stammte hier die Hefe nicht von 10 Tage alten Culturen, sondern von eintägigen Culturen in Würze bei 28". — Beim dritten Versuch wurden Unterhefe I von Carlsberg, S. cerevisiae I und Pasto- rianus III nur in einem einzigen Ballon, anstatt in 3, ausgesät und die Versuchsanordnung in der Weise geändert, dass die Culturen in Rohr- zuckerlösung mit Weinsäure nur vier Wochen dauert, während welcher Zeit in oben beschriebener Weise in ungefähr gleichen Zeitintervallen vier neue Culturen daraus angesetzt wurden. Das Endresultat ergab S. cerevisiae I und Pastorianus III als lebend, der erste deutlich in einer Cultur in Würze, der zweite erst nach Cultur in Dextrose mit Hefe- wasser; also auch hier keine Rein cultur. — Der vierte Versuch VIII, 4. Referate und Besprechungen. 537 dauerte in 2 Ballons mit Rohrzuckerlösung mit Weinsäure einen Monat, nur je eine neue Cultur wurde, nach 18 Tagen, angesetzt; die Versuchs- species waren S. Pastorianus II, III und ellipsoideus II. Alle stammten von kräftigen, aber 3 Monate alten Culturen, erwachsen auf Nährgelatine mit Fischabkochung und Rohrzucker. Das Resultat war S, ellipsoideus IL Die Verfahren, welche zum Nachweis der überlebenden Species benutzt wurden , waren stets solche , die sich nach mehrjähriger Erfahrung als die geeignetsten für die zu den Versuchen gebrauchten Hefen gezeigt hatten. Verf. glaubt, dass er bei grösserer Anzahl und stärkerer Va- riation der Versuche wohl noch die eine oder andere Species hätte nachweisen können , die zu Grunde gegangen schien , dass also mehr Species am Leben blieben, als gefunden wurden, und dass die gefundenen Species nur diejenigen waren, welche am stärksten und am zahlreichsten waren. Selbst wenn man diese Möglichkeiten ausser Berücksich- tigung lässt, zeigen die verschiedenen Resultate doch übereinstimmend, dass auf diesem Wege eine Reincultur überhaupt nicht sicher erhalten werden kann, der einzige Weg dazu ist die Aussaat einer einzigen Zelle in ein sterilisirtes Nährsubstrat. Der fünfte und sechste Versuch wenden sich gegen Velten. Als Nährlösung diente beim fünften lOprocentige Rohrzuckerlösung mit vier Procent Weinsäure. 4 Ballons wurden mit jungen, kräftigen, 24 Stunden alten Culturen aus Würze bei 26" mit folgenden Arten zu gleichen Theilen beschickt: A mit S. cerevisiae I, Pastorianus I und III, B mit Unterhefe I und II von Carlsberg, Pastorianus I und III, C mit Unterhefe I und II von Carlsberg, Pastorianus I und III und ellip- soideus II, D mit S. cerevisiae I, Pastorianus I und III und ellipsoideus IL Von diesen 4 Ballons wurde eine zweite, aus der zweiten eine dritte Versuchsreihe und so fort bis zu der fünften jeweils im Zwischenraum von 48 Stunden in der gleichen Zuckerlösung angesetzt. Die Ballons der vierten und fünften Reihe wurden nach 8 bezw. 10 Tagen, vom Beginne des ganzen Versuchs an gerechnet, untersucht und von jedem nach vorherigem Durchschütteln eine Probe in Bierwürze gebracht. Nachdem die Originalballons ihre Hefe wieder abgesetzt hatten, wurde sorgfältig decantirt und nunmehr eine geeignete Menge Bierwürze zu- gefügt. Auf diese Weise wurde nicht allein mit Stichproben , sondern auch der ganzen Hefemasse der beiden letzten Culturreihen operirt, und die letzte Versuchsreihe hat so gut wie nichts von der stark sauren Culturflüssigkeit erhalten, ein Umstand, der wichtig ist, wenn es sich wie hier darum handelt, geschwächte Culturen zu kräftiger Entwicklung anzuregen. Wäre die Behandlung mit der sauren Zuckerlösung wirk- 538 Referate und Besprechungen. VIII, 4. lieh geeignet , die Brauereihefen von Krankheitskeimen zu befreien , so durften sich in den Würzeculturen nur Brauereihefen entwickeln, das Resultat war aber ein total anderes: Von den im Thermostat bei 26" gehaltenen Culturen zeigten nur die Ballons der Reihe A und B, die 8 Tage lang der Behandlung mit saurer Zuckerlösung unterworfen waren , noch Leben ; alle anderen erwiesen sich als abgestorben und Hessen selbst nach 15 Tagen keine Spur von Leben erkennen. Die beiden genannten Ballons zeigten deutliche Erscheinung von Unter- gährung, das Bier hatte den unangenehm bitteren Geschmack von S. Pastorianus I und bei genauem Zusehen erwies sich dieser Krank- heitserreger als die einzige überlebende Hefespecies. Im letzten (6.) Versuch wurden die Brauereihefen mit den wilden im Verhältniss von 5: 1 gemengt, so dass sie diesmal von vornherein in erheblicher summarischer Ueberlegenheit in den Versuch eintraten ; die Zuckerlösung bekam nur 3-8 Procent Weinsäurezusatz. Von fünf Ballons erhielt: A S. cerevisiae I und Pastorianus I, B eine Brauerei- unterhefe und Pastorianus I, C Unterhefe No. 2 von Carlsberg und Pastorianus I, D S. cerevisiae I und ellipsoideus II, E eine Brauerei- unterhefe und ellipsoideus II. Die Arten des Ballon D waren nach zehntägiger Cultur abgestorben, lebten aber nach 8 Tagen noch, und in allen anderen Ballons war theils nach 8, theils nach 10 Tagen mindestens eine Species am Leben. Diese Residua wurden nun geprüft, aus jedem Ballon eine Anzahl Gelatineplattenculturen (in einzelnen Fällen bis zu 80) angelegt und so festgestellt, dass in A beide Hefen am Leben waren, aber das Mengenverhältniss sich umgekehrt hatte, und zwar hatte die wilde Hefe die Bierhefe derart zurückgedrängt, dass sie nachzuweisen war nur noch mit Hilfe von Specialculturen in Würze bei 37 bis 38" C, einer Temperatur, die für S. cerevisiae I noch günstig ist, während sie das Maximum für Pastorianus für dieses Medium überschreitet. In B fand sich nur Pastorianus I ohne eine Spur Brauereihefe. In C herrschten wenigstens die Zellen von Pastorianus durchaus vor ; von der ünterhefe No. 2 waren bloss zweifelhafte Spuren vorhanden. In D hatte S. ellip- soideus II den S. cerevisiae I derart zurückgedrängt, dass er auch in diesem Falle nur durch eine Würzecultur bei 37 bis 38" nachgewiesen werden konnte; in B zeigten sich günstigere Verhältnisse, aber immer- hin bildete die Brauereihefe nur die Hälfte. Diese gesammten Versuche zeigen einleuchtend, dass die beiden krankheitserregenden He- fen die Brauereihefen mehr oder weniger vollständig ver- nichtet haben. Das PASTEUB'sche Verfahren, um Brauereihefe zu reinigen, versagt also völlig, wenn es sich nicht um Bacterien, sondern VIII, 4. Referate und Besprechungen. 539 um krankheitserregende Hefen handelt; dieselben vermehren sich im Gegentheil sowohl bei Anwesenheit von Ober- wie Unterhefe, sodass das Verfahren für Brauereien nicht anwendbar ist, und der 6. Versuch lehrt ausserdem, was übrigens Velten nicht behauptet hatte, dass auch keine Reincultur auf diesem Wege zu erziehen ist. — Die HANSEN'schen Versuche sind auch noch in anderer Hinsicht von Bedeutung, sie zeigen, dass die hier geschilderte Untersuchungsmethode ein werthvoUes Hilfs- mittel für die praktische Analyse der Brauereihefen ist, die wilden Hefen vermehren sich stärker dabei und sind dann natürlich viel leichter nach- zuweisen wie anfänglich. L. Klein {Karlsruhe). Hansen^ E. Chr., Recherches sur la physiologie et la morphologie des ferments alcooliques. VHI. Sur la germination des spores chez les Sac- charomyces (Compte - rendu des travaux du laboratoire de Carlsberg t. HI, 1891, p. 44—66). Es ist lediglich die mikroskopische Untersuchung der morpholo- gischen Vorgänge bei der Sporenkeimung, über welche der Verf. hier berichtet, die physiologischen Bedingungen bleiben unberücksichtigt. Zum ersten Male ist dieser Process hier an absolut reinem Material durch lückenlose directe Beobachtung des Individuums constatirt, die Untersuchung entspricht also in dieser Hinsicht den strengsten logischen Forderungen. Verf. betont, dass gewisse Phänomene bei der Keimung sich nur auf diesem Wege feststellen lassen, so z. B. die merk- würdige Thatsache, dass bei S. cerevisiae I verwachsene, aber durch eine deutliche Membran geschiedene Sporen bei der Keimung zu fusioniren vermögen , und dass eine Sprossung der Sporen schon in der Mutter- zelle stattfinden kann , dass bei Ludwigii eine Fusion eine sehr häufige Erscheinung ist, aber nur an neu gebildeten Zellen auftritt. Die Selbständigkeit der Sporenmembran bei der Keimung lässt sich durch chemische Reagentien oder Druck auf das Deckglas erweisen , wo- durch diese Membran platzt und sich stark contrahirt; dabei stellt sich denn auch heraus, dass die „Scheidewände" zwischen einzelnen Sporen theils eine optische Täuschung, hervorgerufen durch gegen- seitigen Druck der bei der Keimung stark angeschwollenen Sporen, theils wirklich homogen sind. Lebhafte Knospung der Sporen findet nur statt bei günstigem Substrat, freiem Zutritt des Sauerstoffs der Luft und genügend hoher Temperatur, z. B. in gehopfter, stark durchlüfteter Bierwürze bei 25" C. Nahezu ebenso starke Entwicklung ist bei Zusatz von 4 bis 5 Procent Gelatine zu beobachten. Von Einfliiss auf den 540 Referate und Besprechungen. VIII, 4. Beginn wie die Morphologie der Keimimg ist auch die Beschaffenheit der Sporen, ob jung oder alt, frisch oder länger ausgetrocknet. Bei S. anomalus empfiehlt es sich, nur wenige, womöglich nur eine einzige Spore in die feuchte Kammer zu bringen, weil dann die Keimung viel leichter von Statten geht, als wenn die Sporen in Gruppen beisammen liegen. L. Klein {Karlsruhe). Eberdt, 0., Beiträge zur Entstehungsgeschichte der Stärke (Pkingsheim's Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXII, p. 293—348 m. 2 Tfln). Aus der Abhandlung, die der Hauptsache nach die „Entstehung der Stärkekörner durch Umbildung einer aus dem Plasma sich ausscheiden- den Masse zu Stärke" behandelt und die ScHiMPER'sche Lehre von der Function der Stärkebildner verwirft, ist für unsere Zeitschrift nur das VI. Capitel von Interesse : „Experimenteller Nachweis der Entstehung der Stärkebildner und ihrer chemischen Zusammensetzung". Verf. will hier darthun: „dass die sogenannten ScHiMPEE'schen Stärkebildner nicht schon in den Zellen des Vegetatiouspunktes vorhanden sind, dann, dass sie, wenn fertig ausgebildet, aus durchgehends gleichartig zusam- mengesetzter eiweissartiger Substanz bestehen — endlich, dass es eine protoplasmatische Substanz ist, mit welcher sie von dem Moment an, in welchem ihre Umbildung zu Stärke beginnt, in Verbindung stehen, und dass dieselbe bezüglich der Concentration ihres Eiweissgehaltes grundverschieden von ihnen ist". Verf. benutzt die Fähigkeit des mit Salz- oder Essigsäure angesäuerten gelben Blutlaugensalzes, Eiweiss- stoffe aus ihren Lösungen zu fällen , zu seinen Versuchen und „bringt eine Anzahl Schnitte durch Fhajus-KnoUen , welche, von den jüngsten Zellen des Vegetationspunktes ausgehend, nach und nach durch ältere Stadien geführt sind, in eine salz- oder essigsaure Blutlaugensalzlösung, wäscht nach einem nicht zu langem Zeitraum, einer Stunde etwa, mit Alkohol, der nicht absolut, sondern nur etwa öOprocentig sein darf, sehr sorgfältig aus, und setzt eine verdünnte Lösung von Eisenchlorid zu". Das Plasma in den jüngsten Zellen des Vegetationspunktes zeigt sich dann fast vollkommen farblos, mit Ausnahme einiger wolkiger, bläulich gefärbter unregelmässiger Stellen, sowie einiger Mikrosomen, die deutliche Blaufärbung zeigen. In einem nur wenig älteren Stadium ist das klarer gewordene Plasma fast farblos geblieben, und es sind eine ziemliche Menge kleiner Körperchen darin sichtbar, die sich unge- mein scharf von dem übrigen Plasma abgrenzen und schön und gleich- massig blau gefärbt sind. „Blaufärbung zeigten auch einige Parthien VIII, 4. Referate und Besprechungen. 541 des Zellkerns, besonders die Nucleoli. Im folgenden Stadium, in wel- chem diese Körperchen sich aus dem übrigen Plasma abgesondert und vollkommen dem Zellkern zugewandt haben , auch grösser geworden sind, bleibt ihre Blaufärbung durchgehend ebenso gleichmässig und ebenso intensiv, das übrige Plasma ist ebenfalls noch fast farblos. Ein deutlicher, sehr auffälliger Unterschied aber ist zu bemerken zwischen der Färbung der Körperchen und der sich ihnen jetzt anhaftenden Klümpchen anderer Substanz , in welcher nun sehr schnell ein röthlich schimmerndes Pünktchen , das erste Stadium des späteren Stärkekorns, sichtbar wird. Diese Substanz zeigt nämlich, im Gegensatz zu der in- tensiven Färbung der ScHiMPEK'schen Stärkebildner, nur einen leichten Anflug von Blaufärbung und umschliesst den sogenannten Stärkebildner, der sehr scharf conturirt ist, vollkommen. Daraus ergiebt sich", dass die Zusammensetzung dieser Substanz von derjenigen der Stärkegrundsub- stanz (Schimper's Stärkebildner) durchaus verschieden und dem übrigen Plasma sehr nahe verwandt ist, so dass man sie jedenfalls als proto- plasmatisch bezeichnen darf. Die Stärkegrundsubstanz ragt nach den hier mitgetheilten Reactionen besonders durch ihren reichen Gehalt an Eiweiss- stoffen vor den übrigen Inhaltsstoffen der Zellen hervor, und lässt sich dadurch leicht von ihnen unterscheiden". L. Klein {Karlsruhe). Heiuricher, E., lieber massenhaftes Auftreten von Krystalloiden in Laubtrieben der Karte ffel - pflanze (Ber. d. Deutschen Botan. Gesellsch. Bd. IX, 1891, H. 8 p. 287—291). Verf. beschreibt das pathologische Auftreten grosser Mengen von EiweisskrystalloTden im Stamme wurzelfauler Kartoffelpflanzen. Zur Erzielung schöner Dauerpräparate von Kartoffelkrystalloiden wird die Färbung mit Pikrocarmiu empfohlen, welches die Krystalloide gelb, Pro- toplasma und speciell die Zellkerne roth färbt. Um den störenden Ein- fluss der, oft in grosser Menge in den Zellen vorhandenen Stärkekörner zu beschränken, empfiehlt sich der Einschluss in Canadabalsam, welcher be- wirkt, dass jene nur mehr in zarten Conturen sichtbar sind. Heinricher. E. 3Iineralo(jisch - Geologisch es. Beferenten: Professor Dr. Arthur Wichmann in Utrecht und Dr. F. Rinne in Berlin. Brauns, R., Die optischen Anomalien der Krystalle. Leipzig (Hirzel), 1891, 370 pp. m. 6 Tfln. 542 Referate und Besprechungen. VIII, 4. Die Preisaufgabe der Fürstlich JABLONOwsKi'schen Gesellschaft zu Leipzig für 1890 lautete : „Die Gesellschaft wünscht eine übersichtliche und kritische Zusammenstellung der auf die „optischen Anomalien" der Krystalle bezüglichen bisherigen Forschungen , sowie die Ausführung neuer Untersuchungen, welche geeignet sind, die Ursachen jener ano- malen Erscheinungen näher zu erläutern". Die umfang- und inhaltreiche Arbeit des Verf. wurde mit dem Preise gekrönt. Dem Ref. scheint der Zeitpunkt noch nicht gekommen zu sein, um auf die Frage nach den optischen Anomalien eine unanfechtbare Antwort zu geben, und auch die Resultate, zu welchen der Verf., einer der Eifrigsten und Erfolgreichsten im Streite über die optischen Ano- malien, kommt, werden in verschiedenen Punkten schwerlich all- seitige Anerkennung finden. Vielfache Specialuntersuchungen sind noch nöthig, um die Meinungsverschiedenheiten in der Beantwortung der in Rede stehenden Frage, welche die Fundamente der Mineralogie berührt, auszugleichen. Verf. giebt im ersten Theil seiner Abhandlung eine historische Uebersicht über die bisherigen, auf die optischen Anomalien bezüglichen Forschungen und im zweiten eine specielle Darstellung der optischen Verhältnisse der bisher untersuchten, optisch anomalen Krystalle. Viel- fach sind neue Untersuchungen veranstaltet. Unter „optischer Anoma- lie" versteht Verf. Abweichungen von dem einer krystallisirten Substanz eigenthümlichen oder dem durch die Symmetrie der Form bestimmten, optischen Verhalten. Mimetisch hingegen sind nach ihm die Krystalle, welche durch Form und Zwillingsbildung höhere Symmetrie nachahmen als sie in Wirklichkeit besitzen. Die typisch anomalen Krystalle sind höher symmetrisch als sie scheinen , die mimetischen scheinen höher symmetrisch als sie sind. Dass die praktische Durchführung dieser Gliederung öfters schwierig oder nicht angängig ist, wird auch vom Verf. betont. Ein Theil seiner optisch anomalen Krystalle sind nach ihm selbst mimetisch. Optische Anomalien kommen nach R. Bkauns zu Stande 1) durch Ueberlagerung von verschieden orientirten Lamellen, 2) bei Dimorphie der Substanz, 3) durch innere Spannung. Die zu 1) gehörigen Krystalle sind von niederer Symmetrie, nähern sich aber in ihren Formverhältnissen höher symmetrischen. Sie können mit einander lamellar der Art verwachsen, dass in den auf einander folgenden Krystalllamellen nahezu gleiche Richtungen vertauscht und gleichnamige, optische Elasticitälsachsen gekreuzt werden. Durch diese Ueberlagerung treten in optischer Hinsicht Compensationserccheiuungen VIII, 4. Referate und Besprechungen. 543 auf, und die Krystalle näheru sich in ihrem optischen Verhalten dem höher sj^mmetrischer Krystalle. Zu dieser Gruppe werden gerechnet das quadratisch erscheinende, in Wirklichkeit monokline Ferrocyanka- lium, Kalkuranglimmer, Ekdemit, Prehnit, die Glieder der Penningruppe, Natrolith (?). Die zu 2) zu rechnenden Krystalle sind Beispiele dimorpher Sub- stanzen. Die eine Modification hat die Form geliefert, die andere liegt als Ausfüllung der Krystallform in der Substanz des Krystalles vor. Durch Aenderungeu in den Temperaturverhältnissen kann die zweite Modification in die erste übergeführt werden, und dann stehen Form und optische Verhältnisse im Einklang. So hat der Boracit eine regu- läre Form, aber die optischen Verhältnisse des rhombischen Systems. Bei 265" wird die Substanz optisch isotrop d.h. regulär : reguläre Theil- chen füllen nunmehr die reguläre Form. In diese Abtheilung sind weiter- hin zu stellen: Leucit, die zweifachen Uranyldoppelacetate, Tridymit, Cristobalit, Katapleit. Die dritte Gruppe, die durch innere Spannung anomalen Krystalle, umfasst a) die, welche durch mechanischen Druck, schnelle Kühlung u. s. w. b) die, welche durch isomorphe Beimischung anomal sind. Die ersteren besitzen eine unregelmässige Doppelbrechung. Feldertheiluugen sind selten. Die anomalen Parthien sind auf Streifen beschränkt , die Spalt- oder Gleitflächen parallel gehen oder finden sich in der Um- gebung von Einschlüssen oder an Stellen, welche besonders der Ein- wirkung von mechanischen Kräften ausgesetzt waren, bisweilen sind sie unregelmässig im Krystall vertheilt. Hierher gehören Steinsalz, Sylvin, Salmiak etc., Zinkblende, Bleinitrat z. Th., Diamant, Senarmontit, ar- senige Säure, Beryll, Brucit, Eis, Quarz, überjodsaures Natrium, Zirkon, Quecksilberjodid, Leukophan. Die durch isomorphe Beimischung optisch anomalen Krystalle stehen unter dem Einfluss in ihrem Wesen noch nicht erkannter Zug- und Druckkräfte. Charakteristisch ist für sie die Abhängigkeit der optischen Structur von der äusseren Begrenzung. Die chemisch reinen Krystalle des Bleiuitrats sind optisch normal , die Mischkrystalle von Blei- und Baryumnitrat im allgemeinen doppel- brechend. Sie sind einfach brechend nach den Würfelflächen, optisch einachsig positiv nach den Oktaederflächen, optisch zweiachsig negativ nach den Pyritoederflächen. Durch einseitigen Druck werden sie nach den Oktaederflächen negativ, nach den Pyritoederflächen positiv doppel- brecheud. Quadratische und hexagonale Krystalle werden durch iso- morphe Beimischung optisch zweiachsig, bei rhombischen tritt auf den von den Prismenflächen ausgehenden Sectoren gekreuzte Dispersion 544 Referate und Besprecbungen. VIII, 4. auf, während die von den Pinakoiden ausgehenden Felder orientirt aus- löschen. Anomal durch isomorphe Beimischung sind die Nitrate von Blei, Baryum, Strontium, Alaun, Granat, vielleicht Faujasit, Hauyn, No- sean, Sodalith, Ralstonit, ferner die unterschwefelsauren Salze von Blei, Strontium, Calcium, Kalium und Rubidium, Chabasit, Turmalin, Apatit, Diadelphit, Jeremejewit(?), Korund z. Th., Pyromorphit, Mimetesit, Vesu- vian, Apophyllit, Scheelit ('?), schwefel- und chromsaures Natron-Ammon, die Seignettesalze und Topas. Während Verf. mit einer gewissen Vorliebe optisch anomale Krystalle in der letzteren Gruppe unterbringt, schliesst er die Meinung, dass auch durch Wasserverlust optische Anomalien her- vorgerufen werden können, fast vollständig aus, nach der Ansicht des Ref. nicht mit Recht. Denn da es gelungen ist, durch künstlichen Wasserverlust an Krystallen alle Anzeichen der optischen Anomalien hervorzurufen, so muss jedenfalls erst eine genaue Untersuchung vieler natürlicher Vorkommnisse, bei der chemische und optische Untersuchun- gen Hand in Hand gehen müssen , abgewartet werden, ehe eine sichere Behauptung bezüglich des fraglichen Punktes aufgestellt werden kann. Bei einer Reihe von Krystallen sind nach dem Verf. die Ursachen der optischen Anomalien noch unbekannt oder durch die obigen An- nahmen nicht zu erklären. Hierher werden gestellt Analcim, Anatas, chlorsaures und bromsaures Natrium , Eulytin , Flussspath , Heulandit, Mellit, Milarit, Perowskit, Pharmokosiderit, Rhodizit, Rutil. Dr. F. Rinne. Cross, eil. W., Constitution and origin of spherulites in acid eruptive rocks (Bullet. Philos. Soc. of Washington vol. XI, 1891, p. 441—444. n. 2 pltes.). Nachdem der Verf. zunächst in einem historischen Ueberblick die Ansichten der verschiedenen Forscher über den Begriff „Sphärolith" wiedergegeben und zum Theil einer scharfen, aber wohl berechtigten Kritik unterzogen hat, wendet er sich zu der Beschreibung der von ihm untersuchten sphärolithischen Gesteine, vom Silver Cliif-Rosita Berg- district in Custer Co. Colorado. Die genannten Felsarten enthalten eine Reihe von Sphärolithen in den verschiedensten Formen und Dimensionen und bieten so die denkbar günstigste Gelegenheit, die Beziehungen dieser Gebilde zu dem erstarrenden Magma, die verschiedenen Modificationen ihrer inneren Structur, sowie die durch secundäre Processe veranlassten Veränderungen zu erforschen. Während die genannten Sphärolithen einestheils zu mikroskopischer Kleinheit herabsinken, erreichen sie anderntheils zuweilen einen Durchmesser von mehr als 3 m. Ebenso VIII, 4. Referate und Besprechungen. 545 schwankt ihre Gestalt zwischen derjenigen einer Kugel und ganz un- regelmässigen Formen. Abgeselien von den mikroskopisch kleinen Sphärolithen, die zum Theil deutlich mikropegmatische Verwachsungen darstellen und zwischen gekreuzten Nicols ein Interferenzkreuz zeigen, welches einen negativen Charakter besitzt, zum Theil aber zu dicht sind, um noch eine bestimmte Verwachsungsart erkennen zu lassen, unterscheidet der Verf. 1) hohle Sphärolithe, die im Innern hohl sind und eine unregelmässige Gestalt besitzen. Ihre solide Schale setzt sich im wesentlichen aus radial an- geordneten Feldspathmikrolithen zusammen. — 2) trichitische Sphäro- lithe, die eine Tendenz besitzen büschelförmig verzweigte Aggregate darzustellen. Die ausserordentlich zarten Feldspathnädelchen biegen und verzweigen sich, ihr Einfluss ist ein so starker, dass selbst das da- zwischen geklemmte Magneteisenerz gezwungen wird , die trichitisclie Form anzunehmen. — 3) Die hohlen und die trichitischen Sphärolithe sind häufig umgeben von einer Zone , die ein supplementäres sphäro- lithisches Wachsthum verrathen , daher als Ergänzungs-Sphärolithe zu bezeichnen sind. Diese drei sphärolithischen Generationen betheiligen sich local ausschliesslich an der Zusammensetzung des Gesteins, gewöhn- lich ist jedoch zwischen ihnen ein Residuum des Magmas vorhanden geblieben, welches entweder aus Glas besteht oder die Bildung einer vierten sphärolithischen Generation veranlasst hat. Stehen die drei erstgenannten Generationen zu der vierten in einem untergeordneten \"erhältnisse, so war die letztere im Stande regelmässige Gestalten zu erzeugen, und war die ausscheidende Thätigkeit in dieser Periode ausser- dem eine energische, so können auf diese Weise zusammengesetzte Sphärolithe von einigen Centimetern im Durchmesser entstehen. In einem derartigen Sphärolith sind die ursprünglichen Gestalten , gleich fremden eingeschlossenen Körpern, umrandet, und der Verf. bezeichnet diesen Typus als umhüllende Sphärolithe. Aus der Thatsache, dass die Sphärolithe in sauren Gesteinen im allgemeinen dieselbe chemische Zusammensetzung besitzen als das Ge- stein selbst, lässt sich schliessen, dass die ersteren bei holokrystallini- scher Ausbildung auch eine Zusammensetzung aus einem Alkalifeldspatli und Kieselsäure in krystallisirter Form (Quarz, Tridymit) zeigen würden. Die bei mikroskopischen Untersuchungen gefundenen optisch-negativen Nädelchen hat man demgemäss auf Feldspath , die positiven auf Quarz bezogen, wie der Verf. darthut, jedoch mit Unrecht. Denn die Feld- spathe der hohlen, trichitischen und Ergänzungs-Sphärolithe wurden als positiv erkannt. Diejenigen der zusammengesetzten Sphärolithe sind Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. VIII, 4. gg 546 Eeferate und Besprechungen. VIII, 4 theils positiv, theils negativ, ebenso diejenigen der ümbüUungsspbäro- lithe. Die freie Kieselsäure ist amorpb , wasserbaltig und bildet die Basis der Spbärolitbe. In Bezug auf die Entstebung lassen sich dem Verf. zufolge zwei Gruppen von Spbärolitben unterscbeiden und zwar erstens die mikro- pegmatitiscbe oder granopbyriscbe , der die oben kurz erwähnte dichte Ausbildungsform aequivalent zu sein scheint. Die hierzu gehörigen Spbärolitbe stellen eine regelmässige Verwachsung von Quarz und Feld- spathnadeln dar, setzen sich demnach aus den beiden Hauptcoustituenten des Rbyoliths zusammen. Ihre Grösse ist durch dieselben Umstände bedingt, wie diejenige der sich aus dem Magma ausscheidenden Krystalle. Die zweite Gruppe der Spbärolitbe ist von der ebeugenannten wesent- lich verschieden, indem ihre Gebilde zunächst die Verfestigung der ge- sammten Magmas für einen gewissen Zeitraum repräsentiren mit Aus- nahme derjenigen Bestandtheile, welche sich bereits zuvor ausgeschieden hatten. Eine Abtheilung dieser Gruppe zeichnet sich durch die Bildung baumförmig verzweigter Feldspatbnadeln aus, während die andere mehr durch eine concentrische Structur gekennzeichnet ist, doch kommen auch Uebergänge zwischen beiden Abtheilungen vor. Die Bildung der baum- förmig verzweigten Aggregate von Feldspatbnadeln wird auf Spannungen zurückgeführt, die Biegungen und schliesslich ein Brechen derselben ver- anlasst, wodurch eine Gabelung hervorgerufen wird. Bei Fortsetzung der Gabelungen entstehen schliesslich farnkrautähnliche und baumförmige Aggregate. Als wesentliche Factoren bei der Ausscheidung dieser Ge- bilde werden eine gewisse Viscosität des Mediums, in welchem der Krystallisationsprocess vor sich ging, sowie eine grosse Schnelligkeit im Verlauf des Processes angenommen. Einige der ausserordentlich grossen, zusammengesetzten Spbärolitbe tragen eine scharf ausgeprägte Breccien- structur zur Schau. Die Entstehung derselben wird dadurch zu erklären gesucht, dass die Lava sich in einem steifen viscosen Zustande der völligen Erstarrung nahe befand, als dieselbe in Folge vulcanischer Erschütterungen zerbrochen wurde, dabei besassen die einzelnen Stücke aber noch genügende Plasticität um wieder zu verkitten. Der Verf. glaubt die verschiedenen Erscheinungen, welche die Spbärolitben in Bezug auf Structur und Zusammensetzung darbieten, mit Hülfe einer Hypothese erklären zu können, die zum Schluss noch ganz kurz skizzirt werden möge. Die Ausscheidung der Feldspathe in radialen, verzweigten Ge- stalten, die den Spbärolitben ihr charakteristisches Gepräge aufdrücken, stellen nur einen Act in der Geschichte derselben dar. Diesem musste ein anderer, weit wichtigerer vorhergehen, der die eigenthüm- VIII, 4. Referate und Besprechungen. 547 liehen Wachsthumserscheinungen bedingte, und zwar bestand derselbe darin, dass eine locale Aenderung im Charakter der Lava erfolgte. Innerhalb des Bezirkes eines jeden Sphärolithen schied sich eine colloide Substanz aus, indem das Magma sich in seine beiden Ilauptbestandtheile: wasserhaltige Kieselsäure und Feldspath spaltete. Es giebt jedoch auch Fälle, bei welchen die colloide Substanz, deren Ausscheidung stets die Anskrystallisirung des Feldspathes vorherging, nicht einfach wasser- haltige Kieselsäure darstellen konnte, sondern ihr noch Feldspathsub- stanz zugemischt sein musste, ja wo dieselbe sogar die gleiche chemische Zusammensetzung wie das Magma selbst besessen haben musste. Der Verf. giebt selbst zu, dass mit einer derartigen Hypothese keineswegs alle Schwierigkeiten behoben werden, unter allen Umständen kommt ihm aber das Verdienst zu, die Kenntniss der Sphärolithe durch eine Reihe wichtiger Beobachtungen vermehrt zu haben. Wichmann. Becke, F., Unterscheidung von Quarz und Feldspathen mittels Färbung (Tschermak's Mineral, u. Petrogr. Mitth. Bd. XII, 1891, p. 257). Vor einigen Jahren hatte der Verf. eine Methode angegeben , um Quarz und Feldspath durch Aetzeu der Schliffflächen und Färbung mittels Anilinfarbstofflösung im Dünnschliffe von einander zu unterscheiden '. Diese Methode hat sich bei vielfacher Anwendung nicht allein vortreff- lich bewährt, sondern es gelingt, durch entsprechende Abstufung der Aetzung selbst die verschiedenen Feldspatharten zu unterscheiden. Orthoklas nimmt die Färbung viel schwieriger an als die Plagioklase, und unter den letztgenannten Arten sind die Ca-reichen leichter färbbar, als die Na-reichen. Für die Abstufung der Aetzung lassen sich keine bestimmte Regeln geben, da die Concentration der käuflichen Flusssäure stark variirt. Unter Abänderung der früheren Vorschrift, giebt der Verf. jetzt die folgende : Auf die gereinigte Schlifffläche wird ein grosser Tropfen Flusssäure gebracht und nach Einwirkung von einer viertel bis einer Minute mittels Fliesspapier, vom Rande her, aber ohne den Schliff zu berühren, abgehoben. Die zurückbleibende Flüssigkeitsscliicht wird unter Daraufblasen auf dem Wasserbade rasch verdampft. Hierauf trägt man einen Tropfen der Farbstofflösung z. B. Anilinblau auf, der über den Rand des Präparates greifen soll. Nach 5 bis 10 Minuten wird derselbe mit einer Pipette abgesogen und der Schliff durch vor- ') Cfr. diese Zeitschr. Bd. V, 1888, p. 559. 36* 648 Referate und Besiirecliungen. VIII, 4. sichtig-es Auftropfen von AVasser abgespült. Hierauf wird die Farb- haut mittels absoluten Alkohols entwässert und der Schliff während einiger Minuten in Benzol gelegt. Nachdem derselbe noch mit einem Tropfen Lavendelöl benetzt worden ist, wird er mit in Aether gelösten Canadabalsam und endlich einem Deckgläschen bedeckt. Wickmann. Belowsky, M., Ueber dieAenderungen, welche die op- tischen Verhältnisse der gemeinen Horn- blende beim Glühen erfahren (Neues Jahrb. f. Mineral. 1891, Bd. I, p. 291—292). Die interessanten Versuche des Verf. lassen erhoffen, die Ent- stehungsbedingungen der Hornblende als „gemeine, grüne" und als „ba- saltische" näher kennen zu lernen. Es gelang ihm, gemeine Hornblende durch Glühen in einem Platinschälchen unter Luftzutritt der Art umzu- wandeln , dass die auf die Ermittelung der optischen Verhältnisse ge- richtete, mikroskopische Untersuchung keinen Unterschied von der ba- saltischen Hornblende erkennen Hess. Verf. vermuthet, wohl mit Recht, dass auch in der Natur analoge Umwandlungen vor sich gegangen sind. Dr. F. Fänne. Bönier, A., Beiträge zur Kenntniss des Quarzes (Neues Jahrb. f. Mineral. Beilage-Bd. VH, 1891, p. 516—555). Die hier in Betracht kommenden Resultate der in Rede stehenden Arbeit beziehen sich auf die mikroskopischen Aetzfiguren, die vermittels Flusssäure am Quarz erhalten wurden : 1) Sämmtliche Aetzfiguren auf der Basis sind Aetzhügel. (Sicher konnte dies allerdings bei den mit concen- trirter Säure in der Wärme entstehenden Aetzfiguren nicht erkannt werden.) 2) Die Aetzfiguren auf der Basis erleiden mit zunehmender Concentration der Flusssäure eine Drehung um die Verticalachse um fast 60°, die stets in demselben Sinne erfolgt, und zwar bei Rechtsquarz rechts, bei Linksquarz links herum. 3) Durch die Combination zweier Aetzfiguren von verschiedener Lage entstehen auf der Basis einseitige Verlängerungen der Seiten der einen Aetzfigur. Dieselben verlaufen, wenn man die dreieckigen Figuren so aufstellt , dass eine Seite rechts links verläuft und die derselben gegenüberliegende Ecke vom Beschauer abgewendet ist, bei rechten Krystallen nach rechts, bei linken nach links. 4) Anomalien der Aetzfiguren scheinen mit Wachsthumserschei- nungen des Quarzes verbunden zu sein. — Um die Zwillingsnatur einer Platte allein durch die Aetzfiguren zu erkennen, muss man eine 20- bis yOprocentige Flusssäure anwenden. Br. F. Finne. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 549 Mügge, 0., lieber den Krystallbau der pyrogenen Quarze (Neues Jahrb. f. Mineral. 1892, Bd. I, p. 1—11). Verf. untersuchte die Quarzeinsprenglinge der an SiO' reichen Eflfusiv- und Ganggesteine bezüglich ihres Baues durch Anwendung der Aetzmethode. Es wurden je nach der Grösse der zu studirenden Quarze aus dem Gestein Sclinitte von 0*5 bis O'l mm Dicke hergestellt, beiderseits gut fein geschliffen , gehörig gereinigt und alsdann ca. 24 Stunden mit 40procentiger Flusssäure in kleinen Bleinäpfchen bei Zimmertemperatur behandelt. Es war dann meist ein Zerfall des Schliffes eingetreten (im entgegengesetzten Falle wurde die Operation wiederholt). Die schleimige Masse, in welcher die Quarze in Form kleiner Tafeln und Körner lagen, wurde darauf mehrfach mit Salzsäure erhitzt. Die unangreifbaren Quarze blieben rein zurück. Sie wurden auf ihre Aetzfiguren und den durch letztere hervorgerufenen Lichtschein im reflec- tirten Licht untersucht. Ergänzend trat die optische Untersuchung hin- zu. Unter 141 orieutirten Plättchen waren 70 einfache und 67 nach ooR verzwillingte und nur 4 Verwachsungen von Rechts- und Links- quarz. Die Zahl der rechten Quarze war 65, die der Linken 72, also fast gleich. In jedem der untersuchten Gesteine fanden sich einfache und Zwilliugskrystalle nach ooR (rechte wie linke) neben einander. Besonders auffallend erscheint das Zurücktreten der Zwillinge von Rechts- mit Linksquarz, die bei den Quarzen, welche aus wässerigen Lösungen entstanden sind, so häufig sind. Aus der Gesammtheit der untersuchten Plättchen lässt sich ferner- hin der Schluss ziehen, dass auch unter den pyrogenen Quarzen einfache Krystalle erheblich seltener sind als nach coR verzwillingte. Verf. schätzt das Verhältniss zwischen einfachen und verzwillingten Stückchen auf höchstens 1 : 2. — Es ist zu hoffen, dass vom Verf. auch die Quarze der Tiefengesteine und der krystallinen Schiefer in den Kreis seiner interessanten Untersuchungen hineingezogen werden. Dr. F. Rinne. Osanil, A., Ueber Zwillingsbildung an Quarzein- sprenglinge n aus liparitischen Gesteinen des Cabo de Gata (Neues Jahrb. f. Mineral. 1891, Bd. I, p. 108—109). Das Untersuchungsmaterial gaben Quarze aus einem leicht zerreib- lichen Bimssteine ab. Sie wurden nach der KLEiN'schen Methode der Umhüllung mit Medien ähnlicher Brechbarkeit ^ studirt und zwar in Ca- 1) Referirt diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 411, p. 414. 550 Referate und Besprechungen. VIII, 4. nadabalsam eingebettet. Von 12 Krystallen waren 7 rechts und 5 links drehend. AiKY'sche Spiralen (Anzeichen für Verwachsungen von Rechts- und Linksquarz) wurden nicht bemerkt. Drei geätzte Krystalle erwiesen sich als Zwillinge nach aR. Dr. F. Rinne. Cohen, E., u. Weiuschenk, E., Meteoreisen- Studien (Ann. d. K. K. Naturhist. Hofmuseums. Wien. Bd. VI, 1891, p. 131—165). Die VerflP. beschreiben zunächst die behufs Isolirung der Gemeng- theile der Meteoreisen dienenden Methoden. Die Bearbeitung geschah in der Weise, dass die Stücke erst mit sehr verdünnter Salzsäure (1 HCl : 20 H-0) in der Kälte behandelt wurden, um den Kamazit auf- zulösen, die übrigen Gemengtheile aber möglichst unversehrt zurückzu- lassen. Bei grösseren Stücken bedarf es in P'olge dessen mehrerer Monate, um eine vollständige Lösung zu erzielen. Auch ist die Angreif- barkeit der einzelnen Meteoreisen eine abweichende, so dass in einzelneu Fällen eine Lösung von 1 : 10 zur Anwendung gelangte. Die Säure blieb so lange über dem Material stehen, bis sie nur noch in sehr ge- ringem Maasse einwirkte , worauf die Lösung abgegossen, eingedampft und gesammelt wurde. Vor jeder Erneuerung des Lösungsmittels wur- den alle isolirten Gemengtheile entfernt, um sie vor weiterer Einwirkung der Säure zu schützen, was besonders nöthig ist, um die „zackigen Stücke" zu gewinnen, welche nicht besonders widerstandsfähig und wahrscheinlich nur als Lösungsskelette des Kamazit aufzufassen sind. Das auf diese Weise gewonnene Material muss sorgfältig gereinigt wer- den, und zwar geschieht dies, indem man der Reihe nach mit Wasser, Alkohol und Aether decantirt und auf dem Wasserbade trocknet. In einigen Fällen gelang es trotzdem nicht, die Taenitblättchen frei von Anlauffarben zu erhalten. Die Löslichkeit der einzelnen Theile ist eine recht verschiedene. Am leichtesten löst sich der Wickelkamazit, welcher alsdann die von ihm eingehüllten Krystalle (Schreib ersit, Cohenit) fallen lässt. Sodann wird der übrige Kamazit theilweise gelöst, und es resultiren Skelette, aus welchen die zinnweissen Taenitblättchen über den schwarzen Ka- mazit, welcher schliesslich ganz in Lösung geht) hervorragen. Aus dem entstandenen Rückstand lassen sich zunächst allmählich grössere Schrei- bersitkrystalle, Taenitlamellen, Cohenitkrystalle und zackige Stücke aus- lesen. Der verbleibende Rest, welcher aus kohligen Substanzen, kleinen zackigen Stücken, Schreibersit, Taenitblättchen, Cliftonit und diversen Körnern besteht, muss einer weiteren Separirung unterzogen werden. VIII, 4. Referate und Besprechungen. 551 Am zweckmässigsten sondert man denselben iu einen magnetischen und einen unmagnetischen Theil. Für diese Operation bedient man sich des von Cohen vorgeschlagenen Verfahrens '. Ein Bogen Papier wird feucht auf einen Holzrahmen gespannt, welcher auf vier Beinen von hin- reichender Länge ruht, um bequem unter dem Tische operireu zu können. Nach Ausbreitung des getrockneten Pulvers auf letzterem führt man die magnetischen Theile durch Streichen mit einem magnetisch gemachten, breiten Stahlkamm an der unteren Seite des Papiers gegen den Rand des Rahmens und entfernt dieselben mit einem Pinsel. Je feiner das Pulver ist, desto häufiger ist das gleiche Verfahren zu wiederholen, da einzelne nicht magnetische Partikel meist mit fortgerissen werden. Aus dem magnetischen Antheil lassen sich mittels Kupferchloridammonium Schreibersit resp. Rhabdit isoliren. Der unmagnetische Theil setzt sich aus Roststückchen, kohligen Substanzen, Cliftonit und verschiedenartigen Körnern und Kryställchen zusammen. Nach Behandlung mit concen- trirter Salzsäure, Glühen und abermaliger Behandlung mit Salzsäure lassen sich Rost und kohlige Partikel entfernen. Der Rest muss unter dem Mikroskope ausgelesen werden. Nach einer Darlegung der zur Anwendung gelangten analytischen Methoden wenden die Verff. sich den einzelnen von ihnen untersuchten Meteoreiseu zu, deren Beschreibung den grössten Theil der Abhandlung ausmacht. WichnKinn. ») Cohen, E., Zusammenstellung petrographisclier Untersuchungsmethoden Berlin (Greifswakl) 1890, p. 9. 552 * Neue Literatur. VIII 4. Neue Literatur. 1. Lehr- und Handbücher. Gage, S. H., The microscope and histology for the use of laboratory students in the anatomical department of Cornell University, Pt. I. The micro- scope and microscopical methods. Ithaca, 1891, 90 pp. 8". w. 40 figs. Mascart, E., Traite d'optique IL Paris (Gauthier-Villars) 1891. 643 pp. 8". 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Neue Mikroskope. (Czapski, S.,) Zeiss's crystallographic and petrographical microscopes (Journ. R. Microsc. Soc. 1891 pt. 4 p. 516; cfr. Zeitschr. f. Instrumentenk. Bd. XI, 1891, p. 94; diese Zeitschr. Bd. VIII, 1891, p. 330). (Seaman, W. 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Bernhard, W., 291, 305. Beyerinck, M. W., 336, 404. Blücher, H., 232. Böhmig, L., 212. Bömer, A., 548. Botkin, S., 399. Braem, F., 206. Brauer, A., 509. Brauer, F., 451. Brauns, R., 263, 541. Bredow, H., 411. Brefeld, 0., 246. Bruce, D., 398. Brunnee, R., 335. Bujwid, 0., 104. Busse, W., 462. Castellino, P., 96. Castronovo, A., 214. Cerfontaine, P., 210. Chauveaud, L. G., 413. CLigliriski, A., 19. Coggi, A., 90, Cohen, E., 550. Cori, C. J., 214. Cornil 228. Crety, C, 366. Crosa, F., 86. Gross, Ch. W., 544. Czapski, S.. 145. 330. Dangeard, P. A., 409. Daremberg, G., 514. Davenport, C. B., 209. Dendy, A., 362. Dewitz, H.,_83. Disse, J., 95. Dogiel, A. S., 15, 228, 519, 520. Dubois, R., 85. Eberdt, 0., 540. Eberth, C. J., 109. Eder, J. M., 198. Edinger, L , 98, 179. Ehlers, E,, 208. Eisenberg, J., 100. Eismond, J., 77. Emery, C. 497. Enderlen, E., 245, 385. Erlanger, R. v.. 219. Etzold, F., 369. Camerano, I;., 80. Caplewski, E., 242. Carlicr, W , 231. Faminzin, A.. 351. Feist, B., 492. Felix, W., 368. 568 Autoren-Register. Ficalbi, E., 89. Fick, R., 168. Fiedler, K., 362. Flemming 223, 343. Forel, A.. 386. Friede!, G., 262. Fusari, L., 99. Gabritschewsky, G., 521. Gilson, E., 116. Giltay, E., 193. Golgi, C, 388. Grandis, V., 86. Grassi, B., 214. Graziani, A., 409. Griffiths, A. B., 359. Günther, C, 101. Hamann, 0., 209. Hansemann, D., 204. Hansen, E. Chr., 534, 539. Hang, K, 1, 11, 51. Heider, A., 112. Heinricher, E., 541. Henchmann, A. P., 216. Henking. H., 156, 295. Hermann, F.. 367. Hertwig, 0., 78. Hieronymus, G., 247. Holt, W. L., 218. Honegger, J., 99. Hoyer, II., 67. Humphrey, J. E., 408. Ihering, H. v., 512. Israel, J., 507. Jäckel, 0., 123. Jarisch, 516. Jungengel, M., 378. Kaes, Th., 388. Kamen, L., 232. Kartulis 361. Kastschenko, N., 88. Katz, L., 196. Kaufmann, P., 400. Keiser, J., 363. Klebahn, H., 251. Klebs, E., 227. Klein, C, 256. Koch, A., 186. Kowalewsky, A., 347. Krause, R., 90. Kromayer, E , 91. Kühne, W., 238. Kuczyiiski, A., 225. Lachi, P., 39. Lacroix, A., 123. Lamounette. B., 254. Lee. A. B., 511. Lebmann, 0., 255. Lemberg, J., 258. Lendl. A., 282. Lewoff, B., 382. Litten, M., 499. Lo Bianco, S., 54. Lode, A., 369. Löwit, M., 371. Loewy. J., 222. Ludwig, H., 363. Maas, 0., 205. Magini. G., 512. Mallory, F. B , 341. Mangln, L., 112. Maragliano, E., 96. Marktanner-Turneretscher 200, 324. Marpmann, 403. Martens, A., .504. Martinotti. G., 488. Mayer, P., 303, 337. MazzarelU, G. F., 511. McMurrich, J. P., 508. Mewes, Fr., 513. Meyer, H., 95. Michel- Levy, A., 123. Mihäjlovits, N., 377. Mills, F. W., 506. Miquel, P., 104, 105. Möller, J. D. 502. Molisch, H., 119. Mügge, 0., 549. Nathusius, W. v., 221. Naue, H., 89. Naumoff, M , 93. Neuhauss, R., 181, 324. Nikiforoff, M., 188, 234. Noniewicz, E., 109. Nuel 228. Obregia, A., 97, 395. Oddi, R., 521. Oppel, A., 220, 224. Osann, A., 549. van Overbeck de Meyer 106. Overton, E., 114. Autoren-Register. 569 Panasci, A., 99. Pansini, S., 383. Parker, G. H., 82, 215. Petri, R. J., 237. Pfeffer, W., 70. Pfeiffer, L , 355. Pfeiffer von Wellheim, R., 29. Plebn, F., 359. Plessen, J. v., 390 Penisen, V. A., 254. Prausnitz, W., 395. Rabinovicz, J., 390. vom Rath, 0., 509, 510. Reinitzer, F., 117. Renard, A. F.. 131. Renard, R., 417. Retzius, G.. 204, 215, 229. Rhumbler, L., 508. Ribbert 226. Riese, H., 517. Rinne, F., 416. Ritter, R., 87. Ritter, W. E., 220. Rohde, E., 365. Rollett, A., 380. Rosenthal, J., 342. Rossi, U., 513. 521. Rothert, W., 252. Roux, Gr., 405. Rüssel, H. L., 498, 499. Sala, L., 389. Schaffer, J., 227, 298. Schaffer, K., 392. Schantyr, J., 530. Scheurlen 239. Schiefferdecker, P., 53. Schill 522. Schilling, A. J., 314. Schmidt, F., 366. Schmorl, G., 242. Schmaus 230. Schneider, C. C, 346. Schoebel, E., 219, 303. Schottlaender, J., 227. Schroeder van der Kolk, J. L. C, 456, 459. Schuberg, A., 206. Schultz, N. K, 401. Seiler, R. v., 379. van Senus, A. H. C, 240. Smith, Th., 107, 239. Spaink, P. F., 518. Spengel, J. W., 218. Stephanowska, M., 83. Stevenson, W. F., 398. Stirling. W., 66. Stöhr, Ph., 379. Stoss, A., 310. van der Stricht 514. Stuhlmann, F., 88. Suchannek, H., 227. Teuscher, P., 230. Thoma, R., 191. Tisch utkin, N., 107. Tumänzew 228. Unna, P. G.. 397, 405, 475, 524. Valenti, G., 97. Verwom, M., 77. Vinassa, E., 34. Wagner, F. v., 213. Wakker, J. H, 412. Webster. J. C, 202. Weigert, C, 392. Weinland, E.. 217. Weinschenk, E , 550. Wheeler, W. M.. 510. White, T. Ch., 501. Wiedersheim, R.. 219. de Wildeman. E., 533. Wilson, H. V., 509. Wistinj^hausen, C. v., 84. Wolff, M., 507. Wolters, M., 383. Woodworth, W. M.. 213. Wrzesniowsky, A., 216. Wyrouboft; G., 495. Xacharias, E., 113. Ziehen, Th., 385. Zimmermann, A., 454. Zimmermann, K. W., 223. Zoja, L., 515. Zoth, 0., 200. Sacli-Register. Aalmutter, Ovarium 88. Abbe's Beleuchtungsapparat, Einstel- lung 454. — Zeichenapparat 291. Abimpfapparat von Prausnitz 396. Abyla 60. Acalephen 59. Acanthocephalen 209. 363. Acanthometrae 56. Achsencylinder 25, 67, 230. — , Färbung der 25, 230. acidophile Mischung von p]hrlich 189. Acidum pyrolignosum zur Entkalkung 6. Acineta 56. Acinetiden 56. Acrosphaera 56. Actinien 57, 58, 508. Actinomyces, Reincultur 507. Adamsia 57. adenoides Gewebe 379. Aeolidiiden 64. Aequorea 58. ätherische Oele, Nachweis 120. Agalma 59. Aiptasia 57. Alaun-Boraxcarmin mit Aluminium von Hang 52. Alciopodiden 62. Alcyonarien 56. Alcyonium 57. Aleuronkörner 255. Algen. Symbiose mit Thieren 351. Alkalibildung von Bacterien 107. Alkohol, Wirkung auf das periphere Nervensystem 518. alkoholische Kochsalz-Salzsäurelösung zur Entkalkung 7. Alstonit 260. Altmann's Thermoregulator 335. Aluminium, Nachweis 126. Aluminiuraacetat mit Alaun-Boraxcar- min von Hang 52. — — Häniatoxylin von Hang 51. Amethyst 69. Amia calva 512. Amitose 510, 513. amitotische Kerntheilung 510, 513. Ammoniumpikrat für mit Methylen- blau tingirte Präparate 15. Amöben der Dysenterie 361. Amphibien, anure, Blastoporus 219. — Auge 219. Amphicteniden 62. Amphioxus 66. ■^^ Kiemen 218. Amphipoden 63. Aniphiporns 62. Amylum, Entstehung des 540. anaerobiotische Bacterien 232, 23i, 241, 399, 522. — — , Cultur nach Blücher 232. , Botkin 399. — — , — — Gabritschewsky 529. , Nikiforoff 234. Analcim 260. Anemonia 57. Anglesit 261. Anguilla fragilis 220. Anguis, Zungendrüse 379. Anilin blau 226. Aiiilinfarbstoffe zur Injection lebender Geschwulstparthien 11. Anilocra 509. Anodonta 350. Anomalien, optische, der Krystalle 541. Antedon 60. Antimon, Nachweis 126. Antipathes 57. Anthorybia 59. Anthozoen 56. anure Amphibien, Blastoporus 219. Aplysia 64, 511. Apochromatc 325, 328. Apocyneen, Milchsaftgefässe 413. Apolcmia 59. Sach-Register. 571 Apparat zur Wasserentnahme aus be- stimmten Tiefen 498. Appendicularia 65. Aragonit 260. Arsen, Nachweis 127. Arsensäuremethode von Unna 528. d'Arsonval's Thermoregulator 103. — Thermostat 103. Arthropoden, Augen 83. Ascidien 65, 350. Asclepiadeen, Milchsaftgefässe 413. Aspirationsspritze von Schill 523. Astacus 215, 348. Asteroidea 60. Astroides 58. Astropecten 350. Athalia 349. Atlantidae 63. Attractionssphäre 513. Auge, Endothel 228. — von Amphibien 219. — — Arthropoden 83. Eidechsen 220. — — Homarus 82. — — Insecten. Photographie des Netz- hautbildes 198. — — Krebsen 82, 215. ■— — Scorpionen 82. Augengrund 93. Aulacanthiden 56. Aulastomum 365. Auramin 0 39, 46. Azoblau 41, 48, 226. Azo violett 41, 48. Azurin 42, 43. Bacillus diphtheriae 109. — Mallei 109. Bacterien, Alkalibildung 107. — , anaerobiotische 241. — , — , Cultur nach Blücher 332. — , — , Botkin 399. — , — , Gabritschewsky 522. — , — , Nikiforoflf 234. — , Säurebildung 107, 404. Bacterienfilter von Bujwid 104. — von Muencke 186. Balanoglossus 61. Baianus 63. Barytocalcit 260. basische TheerfarbstoiTe 68. Bast 254. Bauchlymphsack 95. Befruchtung 78. Beleuchtung, schiefe, zur Untersuchung von Dünnschliffen 456. Beleuchtungsapparat, Einstellung 454. — von Brunn de 335. Benzoazurin R 41, 48. Benzopurpurin B 40, 47. — 4 B 39, 46. — 6 R 40. Bernhard's Zeichenapparat 291. Beroe 60. Beryllium, Nachweis 127. Beyerinck's Capillarhebermikroskopir- tropfenflasche 336. Bindegewcbslibrillen 382. Bioblasten 515. Bipinnarien 60. Bismarckbraun ÖS. Black-blue 230. Blastoporus der anuren Amphibien 219. Blatta germanica 510. Blei, Nachweis 127. Bleiglanz 261. Blitzlicht in der Mikrophotographie 181. Blücher's Apparat zur Cultur anaero- biotischer Bacterien 232. Blutentnahme für bacteriologische Zwecke 239. Blutkörperchen, rothe 370, 514. — , — , Degenerationserscheinungen 96. — , weisse 371. — , Zählapparat von Thoma 369. Blutserum 514. Blutzellen, Färbung 373, 377. — , Fixirung 372. — , rothe, Aufbewahrung 377. Bogengänge, häutige 90. Bombyx 349. Bonellia 62. Bopyriden 63. Boi'axmethylenblaulösung von Unna 524. Bordeaux 47. botanische Dauerpräparate, Einschluss in venetianischen Terpentin 29. Botanisches 112. 246, 408, 533. Botkin's Apparat zur Cultur anaero- biotischer Bacterien 399. Botrylliden 65. Brachiopoden 65. Branchellion 62. Branchipus 348. Brauer's Zeicbenapparat 451. Brillantgelb 41. 48. Brillantgrün 41, 42, 43, 44, 48. Brisinga 60. Brom, Nachweis 127. Bromzimmtaldehyd 263. Bruce-Stevenson's Injectionsspritze 398. Brünnee's Wechselvorriclitung für pa- ralleles und convergentes Licht 335. Brunner'sche Drüsen 225. Bryozoen 65, 206. Bufo 351. Bugula 65. Bullidac 64. 572 Sach-Register. Bunodeopsis 58. Bunodes 57. Bujwid's Vorrichtung bacterieiihaltige Flüssigkeiten zu filtriren 104. Busse's Mikroplyne 472. Cadmium, Nachweis 127. Cäsium, Nachweis 127. Callianira 60. Callose 112. Campanularidae 58. Capillarhebermikroskopirtropfenflasche von Beyerinck 336. Capillarpipetten, graduirte 521. Capsicin, Nachweis 122. Carbolsäure zur Desinfection 112. Cardium 350. Carinaria 63. Carmin 14, 52, 75, 80, 99, 226, 230 488. — von Haug 52. — zur Tinction von mit Anilinfarb- stoffen injicii'ten Tumoren 14. Carotin 85. Cavoliniiden 64. Cellepora 65. Celloidin, Einbetten in 188, 462, 492. Celloidineinbettung in der Pflanzen- anatomie 462. Celloidinpapier 198. Cellulose 112, 117. Cellulosegährung 240. Centralnervensystem 19, 216, 385, 387, 389, 492. — , Tinction nach Ziehen 385. — von Limax 216. Centrifuge von Litten 499. Cephalopoden 64, 214. Cerebrospinalganglien 229. Cereactis 58. Cerianthus 58. Cerium, Nachweis 127. Cerussit 260, 261. Cestodon 61. Cestus 60. Chabasit 259, 260. Chaetognaten 62. Chaetopoden 62. Chaetopteriden 62. Characeen 114. Charybdea 59. Chauveaud's Mikroplyne 472. Chevreulius 65. Chinolingelb 40, 41. Chinolinlösung von Rosenthal 342. Chironomus 87, 349. — , Darm 87. — , Geschlechtsorgane 87. Chlor, Nachweis 127. Chloral 210. Chloralhydrat 55. 115. — zur Untersuchung der Antheridien von Characeen 115. Chlorammon-Lithiumcarmin von Haug 52. Chloroform 210. Chlorophyll 115. Chlorzimmtaldehyd 263. Chondrin als Nährboden für Bacterien . 403. Chromatin 374, 509. Chromatophoren 411. Chromodoris 64. chromoleptische Substanz 25. Chromosmiumsäure zur Entkalkung 4. Chromsäure 3, 55, 415 — mit Salzsäure zur Entkalkung 3. — zur Entkalkung 3. Chrysamin I, 41, 48. — II, 40, 48. Chrysoidin A 37, 42, 43, 45. — P 37, 42, 43, 45. — , salpetersaures 41, 48. Chrysophenin 41, 48. Cilien, Untersuchung 408. Ciona 65. Circinalium 65. Cirripedien 63. Citronensäuremethode von Unna 528. Cladactis 58. Cladocera 62. Cladonema 58. Clavellina 65. Clavularia 57. Clepsine 350, 365. Closterium, Keimung 251. Clupea harengus, Gehirn 218. Coffein, Nachweis 119. Collodium zum Einbetten 254. Collosphaera 56. Columbella 63. Conchoderma 63. Congocorinth B 40, 47. Congoroth 38, 46. Conjunctiva bulbi, Nervenendkörper- chen 519. Conservirung von Raupen 86. Conservirungsflüssigkeiten von IiO Bi- anco 55. contractile Vacuolen 359. Conus 63. convergent polarisirtes Licht zum Stu- dium der Doppelbrechung 416. — — — zur Kry stall Untersuchung 257. — — — — Untersuchung von Ge- steinsschliffen 459. Copepoden 62. Cophobelemuon 57. Sach-Register. 573 Corallium 57. Corethra 349. Cornea, Nervenendkörperchen 519. Cornularia 57. Corynactis 57. Cosmarium, Keimung 251. Cotylorrhiza 59. Creseis 64. Crinoidea 60. Crisia 65. Cristatella 209. Crustaceen 62, 2 14, -348. — , Auge 215. —, Nervensystem 215. Ctenophoren 60. Cucumaria 61. Culex 349. Cultur anaerobiotiscber Bacterien 234. 321, 399, 523. — von Actin omyces 507. — — Dvsenterieamöben 361. Pilzen 247. Culturgefäss von Kamen 232. Cultursubstrate 401, 403. Curaaceen 63. Cunina 58. Curare 210. Curcumaria 363. Curcumin 41, 48. Cuticula von Lumbricus 210. Cyanopbyceen 113. Cyanosin 38, 46. Cylindrospermum 113. Cylindrostominen 212. Cymbuliiden 64. Cynthia 65. Dampftrichter von TTnna 397. Daphuiden 348. Darm 87, 395. — von Chironomus 87. Dauerpräparate, botanische, Einschluss in venetianischen Terpentin 29. Decapoden 63, 64. Degeneration normaler peripherer Ner- ven 230. Degenerationserscheinungen der rothen Blutkörperchen 96. Degenerationsmethode 521. Deltapurpurin 39, 42, 47. Desinfection 111, 112. — mit Carbolsäure 112. Desraidiaceen 251. Diamantfuchsin 0 39, 47. Diatomeenphotographien 502. Diazona 65. Dicranochaete reniformis 247. Difflugia lobostoma 77. diffuses Nervennetz des Centralnerven- systems 389. Dimethylphenylengrün 68. Diphyes 60. Dipteren, Schwinger 217. Distaplia 65. Dogiel's Methode der Farbenfixirung von mit Methylenblau tingirten Präparaten 15. Doliolum 66. Doppelbrechung, Charakter der 416. Doridium 64. Doris 64. Doryphora decemlineata 510. Drepanophorus 62. Drüsen, Brunner'sche 225. — , seröse, der Zunge, Nervenendigun- gen in 99. Drüsenepithel 86. Dünnschliffe, Untersuchung bei schie- fer Beleuchtung 456. — von Fossilien, Untersuchung 124. Duval's Collodiumverfahren 254. Dysenterieamöben 361. Ebner's alkoholische Kochsalz - Salz- säurelösung zur Entkalkung 7. — Kochsalz-Salzsäurelösung zur Ent- kalkung 6. Echinodermen 60, 350, 362. — , Eier 362. Ecbinoiden 61. Ecbinorrbynchen 209. Ecbinus 362. Echiurus 62. Echtroth 40, 48. — A 37, 45. Edwardsia 58. Edinger's Zeichenapparat 179. Ehrlich's acidophile Mischung 189. Ei, Befruchtung 78. Eidechsen, Auge 220. Eier, Verhalten gegen Kälte 79. — von Blatta 510. — — Doryphora 511. — — Echinodermen 362. Hydra .509. — — Insecten, Aufkleben 162. — , Conservirung 158. _ ^ Einbetten 160. , Färben 162. — , Schneiden 162. — , Untersuchung 156. 161. — — Selachiern 88. Eierstock der Säugethiere 227. Eikern 513. Einbetten gehärteter Geschwülste in Glycerinleim 13. — Paraffin 13. 574 Sach-Register. Einbetten gehärteter Geschwülste in Transparentseife 13. — in Celloidin 188, 462, 492. — für botanische Zwecke 462. Paraffin 13, 22, 364. Einstellen des Beleuchtungsapparates 454. Eisenspath 261. elastische Fasern im Knorpel 383. Eloactis 57. Eleutheria 58. Elysiiden 64. Embryonen, Fixirung 231. Emery's Entnraometer 497. — Modification der Kochs-Wolz'schen Mikroskopirlampe 497. Endokarditis 407. Endkolben der Cornea und Conjunc- tiva bulbi 519. Endothel der Descemet'schen Mem- bran 228. Enteropneusten 61. Entkalkung, langsame 3. — mit Acidum pyrolignosum 6. — — Chromosmiumsäure 4. — — Chromsäure 3. — — Chrom-Salzsäure 3. — — Ebner's Kochsalz -Salzsäurelö- sung 6, 7. — — Holzessig 6. — — Kochsalz-Salpetersäure 8. — — Milchsäure 5. — — Müller'scher Flüssigkeit 3. — — Phloroglucin 8. — — Phosphorsäure 6. — — Pikrinsäure 5. — — Pikrinsalpetersäure 5. — — Salpetersäure 7. — — Salzsäure 6. — , schnelle 3. Entkalkungsflüssigkeit von Waldeyer 4. Entkalkungsmethode von Thoma 191. Entkalkungsmethoden 1. Entomometer von Emery 497. Entonisciden 63. Eosin 39, 47. Ephemeriden 349. Erbium, Nachweis 127. Erlicki'sche Flüssigkeit 13, 390. — — zum Fixiren injicirter Ge- schwulstparthien 13. Eruptivgesteine, Sphärolithe 544. Erythroblasten, Theilung 514. Erythrosin 39, 47. Essigmethode von Unna 528. Essigsäure 55, 395. Essigsäurehämatoxylin zur Tinction der menschlichen Retina 227. Eucope 58. Eugenol, Nachweis 121. Eunice 62. Euphorbiaceen, Milchsaftgefässe 413. Excretionsorgane 347. Excretionssystem des Hühnchens 368. Fadenbacterien 242. P'ärbung der Achsencylinder 25, 230. — der menschlichen Retina 227. — des Centralnervensystems nach Ziehen 385. — mit Carminen von mit Anilinfarb- stoffen injicirten Tumoren 14. — — Hämatoxylin 24, 51, 226, 227, 337, 341, 367, 384, 391. 483, 486, 488, 519. — — Pikrocarmin 24. — — Safranin 24 — — von Blutzellen 373. — — Feldspath 547. — — Ganglienzellen 27. Golgi 168 — — Malariaparasiten 361. — — Mastzellen 482. — — Mikroorganismen im Hornge- webe 524. — — Plasmazellen 482. — — Quarz 547. Rotzbacillen 109. — — Tuberkelbacillen 405. Färbemittel 51, 475. Farbstoffe, Reifen der 475. Fasern der Hirnrinde 388. — , elastische, im Knorpel 383 — im Knochenmark 385. Federn der Vögel 89. Feldspath, Tinction 547. Felsenbein, Entkalkung 4. fette Oele. Nachweis 120. Fibrillen des Bindegewebes 382. Filter für Bacterien von Muencke 186. Filtrirapparate für Nährgelatine 522. Filtrirvorrichtung für Bacterien von Bujwid 104. Fische 66. Fixiren injicirter Geschwulstparthieu mit Erlicki's Flüssigkeit 13. — Pikrinsäure 13. — Sublimat 13. — von Blutzellen 372. — — mit Methylenblau tingirten Prä- paraten 15. Fixirungsmethode der Golgi'schen Prä- parate 97. Flagellaten. Untersuchung 314. Fleischpeptonagar von Tischutkin 107. flüssige Kohlensäure zu bacteriologi- schen Zwecken 236. Flustra 65. fötales Knochengewebe, Entkalkung 6. Sach-Register. 575 Follikel 227. FoUikelatresie 227. Foraminiferen 418. Forskälia 59. Fossilien, Untersuchung von Dünn- schliffen 124. Fragarium 65. Fromme's Mikrotom 298. — Präparatenklammer 301. Frosch 229. Frosch larven, Kiemen 89. Fringilla. Testikel 369. Fuchsin 248. Grabritschewsky's Methode, anaerobio- tische Bacterien zu cultiviren 522. — Pipette 521. Galeolaria 60. Gammariden 216. Ganglienzellen der Cerebrospinalgang- lien 229. — , Färbung 27. — , subcutane 229. Garneelen 215. Gastroblasta 58. Gastropteron 64. Gefässvertheiluug im Gehirn 97. Gehirn 97, 98, 99, 218, 512. — der Teleosteer 218, 512. — , Gefässvertheilung 97. — , Verlauf der markhaltigen Nerven- fasern 98. Geisseikammern von Halichondria 362. gelbe Seide 85. Genitaldrüsen 516. Gentianaviolett 515. Geotriton fuscus 513. Gephyreen 62. Gerbstoffe, Nachweis 115. Geruchsorgan, menschliches 227. Geschlechtsorgane von Chironomus 87. Geschwülste, Präparate von lebend mit Anilinfarbstoffen injicirten 11. Geschwulstparthien, gehärtete, Ein- bettung 13. — , Färbung mit Carmiiien 14. — , Fixirung mit Erlicki's Flüssigkeit 13. — , Pikrinsäure 13. — , Sublimat 13. Gesteine, liparitische 549. Gesteinschlifte, Untersuchung der Inter- ferenzerscheinungen 459. Gewebe, adenoides 379. Gläser für Immersionsöl 184. Glastinte 270. glatte Muskelfasern, Nervenendigungen 395. Zellbrucken 382. Globigerinen-Schlamm 417. Glycerinäthermethode von Unna 528. Glykolmethode von Unna 528. Gold, Nachweis 127. Goldchloridlösung i»7, 395. Golgi'sche Methode 97, 100, 168, 214. — Präparate, Fixirung von Obregia 97. Gordius 80. Gorgoniden 57. graduirte Capillarpipette 521. Grandry'sche Körperchen 520. Granula 346. Gregarinen 56. Grenzen der Leistungsfähigkeit des Mikroskops 145. Grundsubstanz des Knorpels 383. Gummiferment 117. Gummiwaaren, Conservirung 423. Gymnosomata 64. Haare der Vögel 89. Haarpigment 516. Hämacalcium von Mayer 310. Hämalaun, saurer, von Mayer 338. Hämammon von Mayer 340. Hämateinlösungen 337, 484, 488. Hämatoxylin 24, 51, 226 227. 337, 341, 367, 384, 391, 483, 486, 488. 519. — mit Aluminiumacetat von Hang 51. — von Mallory 341. Pal 367. — — Plessen-Rabinovicz 391. Spaink 519. Hämatoxylinlösung von Unna 486. Hämatoxylin-Pikrinsäure zur Knorpel - färbung 384. Hämocyten 357. häutige Bogengänge 90. Halichondria panicea 362. Halisarciden 56. Haiistemma 59. Halteren von Dipteren 217. Harmotom 260. Harnsäure 359. Harting'sche Körperchen 221. Haug's Alaun-Boraxcarmin 52. — alkoholische Kochsalz - Salzsäure- lösung zur Entkalkung 7. — Hämatoxylin 51. — Kochsalz - Salpetersäure zur Ent- kalkung 8. — Lithiumcarmin 52. — Methode der Pbloroglucinentkal- kung 8. — — , Präparate von lebend mit Anilin - farbstoffen injicirten Geschwulst- parthien darzustellen 11. — Phlorogiucin-Salpetersäure zur Ent- kalkung 11. 576 Sach-Register. Hautknochen von Amia calva 512. Hauttransplantation 378. Hauyn 259. Hefe, Pasteur'sche 534. Heicler's Mastixlösung 509. Heizkasten von Plehn 360. heizbarer Objecttisch von Pfeiffer 357. Heliactis 57. Helix 350. 368. Herbst'sche Körperchen 520. Hermann's Platinchloridlösung 364. Hermelliden 62. Hermioniden 62. Herrschelit 260. Hessisch-Gelb 40, 47. Hessisch-Purpur 40, 48. Heteropoden 63. Hippopodius 60. Hirnrnide, Fasern 388. Hirudineen 62. — , Nervensystem 365. Hirudo medicinalis 81, 350, 365. Hoden, amitotische Kerntheihing 510. Holothuria 61. Holothurien 61, 363. Holzessig 55. — zur Entkalkung 6. Homarus 82. — Auge 82. Hornblende 548. Horngewebe , Mikroorganismen des. Färbung 524. Hundestaupe, Mikroorganismen der 530. Hyalaeiden 64. Hydra 353, 509. Hydrochinonmethode von Unna 530. Hydromedusen 58. Hydroxylaminmethode von Unna 529. Hyponomeuta 349. Idalia 64. Immersionsöl, Gläser für 184. Infectionskrankheiten, nicht-bacterielle 355. ^ Infusorien 77. Injectionsspritze von Schill 523. — — Stevenson-Bruce 398. Insecten 348. Insectenauge, Netzhautbild, Photogra- phie 198. Insecteneier, Aufkleben 162. — , Conservirung 158. — , Einbettung 160. — , Färben 162, — , Schneiden 162. — , Untersuchung 156, 164. Insectenlarven, Tracheensystem 83. Interferenzerscheinungen in Gesteins- schliffen, Untersuchung 459. Iridium, Nachweis 127. Isolirung der Primitivröhrchen der Zähne 6, 7. — von Knochenkörperchen 7. Isopoden 63. J equiritydecoct als Nährboden für Bacterien 400. Jodjodkalium- Glycerinlösung z. Weiter- behandlung fixirter Geschwnlst- parthien 13. Jod, Nachweis 127. Jung's Mikrotom, Objectheber 303. Kälte, Wirkung auf Eier 79. — , Kerntheilungen 79. Kalium, Nachweis 127. Kaliumbichromat 55. Kalkspath 260. Kamen's Culturgefäss 232. Karcinome, lebende, Injection mit Anilinfarbstoffen 11. Kartoffeltriebe, Krystalloide 541. Kartulis' Methode, Dysenterieamöben zu züchten 361. Karyokinese, pflanzliche, Einfiuss der Temperatur 533. karyokinetische Spindel 367. Kaufmann's Nährboden für Bacterien 400. Keimstock der Bryozoen 206. Keimung von Closterium 251. — — Cosmarium 251. Keiser's Pikrinchromsäure 364. — Sublimatlösung 363. Kern 77, 79, 90, 115, 204, 223, 343, 367, 509, 510, 512, 513, 514. — in motorischen Nervenzellen 512. Kernplasma in Nervenzellen 90. Kerntheilung, amitotische 510, 513. — , mitotische 514. — , Verhalten gegen Kälte 79. Kerntinctionen 343. Kiemen von Amphioxus 218. — — Froschlarven 89. Kieselsäure-Nährboden 238. Kieselzinkerz 261. Klebermehl 255. Kleinenberg's Pikrinschwefelsäure 5. Knochen, Entkalkung 1. Knochenkörperchen, Isolirung 7. Knochenmark, Fasern im 385. Knochenpräparate 501. Knorpel, Grundsubstanz 383. — , Saftbahnen 383. — , Structur 383. Kobalt, Nachweis 128. Sach-Registcr. bi i Kochsalz-Salpetersäure z. Entkalkung S. Kochsalz-Salzsäurelösung von Ebner zur Entkalkung 6. Kochsalz-Wasserstoffsuperoxydmethodc von Unna 529. Kochs-Wolz'sche Mikroskopirlampc 53. 497. ■ , Modification von Emcry 497. Kolilensilurc, Üüssige, zu bacteriolo- giscben Zwecken 236. Kopfhöhle von Anguilla 220. Kopfnerven von Salamandra 390. Korkzellen 116. Kotyledonen. Chroniatophoren 411. Krebse, blinde. Auge 215. Krystalle, optische Anomalien 541. — , optisch-einachsige 416. — , optisch-zweiachsige 416. Krystallisationsniikroskop von Leh- mann 255. krystallographische Untersuchungen, Mikroskope für 330. Krystalloide 249, 541. — in Kartoffeltrieben 541. Krystalluntersuchungen 256. Krystallviolett 5 BO 38, 46. Kühlmesser von Stoss 310. Kultschitzky's Essigsäure-Hämatoxyhn 228. Kupfer, Nachweis 128. Kupfersulfat 55. Lackmusmolke 108. Lacerta, Zungendrüse 379. Lamellibranchiaten 63, 350. Langia 62. Lanice 62. Lanthan. Nachweis 128. Larven von Insecten, Tracheensystem 83. — — Salamandra 223. Lauth'sches Violett 69. Lawdowsky's Methode, mit Methylen- blau tingirte Präparate zu tixiren 15. Leber 95, 224, 514. — der Säugethiere, Lymphbahnen 9i). — . embryonale 514. Lehmann's Krystallisationsmikroskop 255. Lendl's INIikroskop 282, 433. Leonhardit 260. Lepas 63. . , Leprabacillen, Färbung von Unna 40.). Leptoclinum 65. Leucit 260. Leukoblasten, Theilung 514. Leukocyten 223, 357, 360, 514^ Lichtdrucktafeln von Möller 502. Lichtgrün SF. 37, 45. Zeitsclir. f. wiss. Mikroskopie. VIII. i. Lima 63. Limax maxiraus, Centralnervensystem 216. liparitische Gesteine 549. Lithium, Nachweis 128. Lithiumcarmin mit Clilorammon von Hang 52. Litten's Centrifuge 499. Lizzia 58. Lo Bianco's Conservirungstlüsäigkeiten 55. Lollgopsis 64. Loxo])hylIum mcleagris 77. Loxosoma 65. Luidia 60. Lumbricus terrestris 81, 210, 350. Lymphbahnen der Säugethierleber 95. Madreporarien 58. Magnesium-Blitzlicht in der Mikro- photographie 181. Malaria 359, 361. Malariaparasiten, Färbung 361. Mallory's Hämatoxylin 341. — Phosphormolybdänsäure- Hämatoxy- lin 341. maligne Geschwülste, Injection mit Anilinfarbstoffen 11. Mamilla 226. Mandeln des Menschen 879. Mangan, Nachweis 128. Manganspath 261. Manicina arcolata 509. Marionia 64. , r. • markhaltige Nervenfasern, Verlauf nn Gehirn 98. Markscheidenfärbung von Weigert 392. Wolters 388. INIastixlüsung von Heider 509. MastzcUen, Tinction 482. Mayer's Hämacalcium 340. — Hämalaun 338. — Hämammon 340. — Hämateinlösungen 337. _ :Slethodo, mit Methylenblau tingirte Präparate zu tixiren 16. Medulla spinalis 391, 521. Melanophlogit 262. Matamidomalachitgrün 68. :VIetanilgelb 41, 48, 226. Meteoreisen 550. Methylenblau 12, ^-^^ ^^\J\3 ^^^ 68, 80, 229, 361, 370. 39o 4/ <,482. — zum Färben lebender Zellsubstanz — zur Injection von Tumoren 12. _ _ Nervenfärbung 15. Methylenblau-Eosinlösung von i lehn 361. 38 578 Sacli-Rcgister. Methylenblaulösiuific von Unna 482. Metliylenblanpräparate. Farbenfixirung der 15. Metliylengrün 68. Methylenroth 480. 481 Methylenviolett 478, 481. Methylgrün 39. 42. 43. 44, 47. 78. Methylviolett 12, 92. — zur Injection von Tumoren 12. Meyer's Nähragar lOG. Microstoma 213. mikrochemische Mineralanalyse 126. Mikroorganismen der Hundestaupe 530. — des ilorngewebes, Tinction 524. Mikrophotographie 181. 196, 324, .'502. — , Anwendung des Magnesium-Blitz- licht 181. Mikroplyne von Busse 472. — von Chauveaud 415. Mikroskop f. krystallographische Unter- suchungen von Zeiss 330. — , Grenzen der Leistungsfähigkeit 145. — von Lendl 282, 433. — , umgekehrtes von Wyrouboff 495. Mikroskopirlampe von Emerv 497. Kochs-Wolz 53, 497. ' mikroskopische Schnitte, grosse 202. Mikrotom, Tropfapparat für 305. — von Fromme 298. — ■ — Jung, Objectheber 303. Mikrozete 415. Milchsäure 5, 55. — zur Entkalkung 5. Milchsaftgefässe 413. Älilz 224. Mimetesit 261. Mineralanalyse, mikrochemische 126. mineralogisch-geologisches 123, 2,55, 416, 541. Miquel's Thermoregulatoren 104. — Vorrichtung, Culturflüssigkeiten in andere Gefässe zu übertragen 105. Mitosen 204, 514. mitotische Kerntheilung 204, 514. Möllers Lichtdrucktafeln 502. Molgula 65, 350. Mollusken 63, 349. Molybdän, Nachweis 128. Monophorum 212. Moose, Blatt 410. — , Stamm 410. ■motorische Nervenzellen, Kern in 512. Mucin. Nachweis im Gewebe 67. Mucosa, Nervenendigungen in der 99. MüUer'sche Flüssigkeit zur Entkal- kung 3. Muencke's Bacterienfilter 186. Muskelfasern, glatte, Nervenendigungen 395. — , — , Zellbrücken 382. Muskelfasern, quergestreifte, beugende Structur 200. — , — , Nebenscheiben 380. — von Lumbricus 211. Muskeltibrille 204. Mysis 348. Myxosphacra 56. Nähragar von Meyer 106. — — Tischutkin 107. Nährbouillon 101. Nährgelatine, Filtrirapparate für 522. Nährsubstrate 401, 403. Naphthorubin 40, 48. Nassa 63. Natica 63. Natrium, Nachweis 128. Nausithoe 59. Nebalia 348. Nebenkern 368. Nebenscheiben der quergestreiften Muskelfasern 380. Nelkensäure, Nachweis 121. Nematoden 62. Nemertinen 61. Nephelis 350, 365. Nereis 350. Nerven, periphere, Degeneration 230. — . — , Untersuchungsmethoden 19. Nervenendigungen in der Mucosa und serösen Drüsen 99. — — glatten Muskelfasern 395. — — Tastkörperchen 520. Nervenendkörperchen der Cornea und Conjunctiva bulbi 519. Nervenfärbung mit Methylenblau 15. Nervenfasern 517. — , markhaltige, Verlauf im Gehirn 98. Nervennetz, diffuses des Centralnerven- systems 389. Nervensystem der Hirudineen 365. — . peripheres, Wirkung von Alkoho 518. — von Crustaceen 215. — — Limax 216. — — Pulmonaten 366. — • — Solenophorus 366. Nervenzellen, Kernplasma 9(i. — , motorische, Kern 512. — , Nucleolus 90. Netzhautbild des Insectenauges, Photo- graphie 198. Netzknorpel, Structur 383. Neuroglia 391. Neuvictoriagrün, extra 37, 42, 45. Nickel, Nachweis 128. niedere Thiere 77. 205, 351, 508. Nigrosin-Safranin-Alkohol von Spaink 519. Sach-Registcr. 579 Nikiforoff's Methode . anaerobiotisclie Bacterien zu cultiviren 234. — — , in Celloidin einzubetten 188. Nosean 259. Nostoc 113. Nuclein 374. Nucleolin 374. Xucleolus in Nervenzellen 90. Objectheber zum Jung'schen Mikro- 'tom 303. Objecttisch, beizbarer, von Pfeitfer 357. Oberhaut 222. Oberhautpigment 516. Obregia's Methode, Golgi'sche Präija- rate zu fixiren 97. Oceania 58. Octopoden 64. Ocythoe 64. Oele, ätherische, Nachweis 120. — , fette, Nachweis 120. Ohr, pathologische Anatomie, Photo- gramme 196. Olindias 58. Ophiomyxa 61. Ophiopsila 61. Ophiuriden 60. Opistobranchiaten 63. optische Anomalien der Krystalle 541 . Orange II 38, 46. Oscillaria 113. Osmium, Nachweis 128. Osmiumsäure 55. osmotische Vorgänge 70. Ostracoden 62. Ovarium der Aalmutter 88. — , Endigung der Nervenfasern 517. Oxalsäuremethode von Unna 528. Oxalschwefelsäure von Pal 368. Oxyazofarbstoffe 44. Paguren 63. Palaemon 348. Paläontologie, mikroskopische Unter- suchungen in der 123. Palladium, Nachweis 128. Pal's Hämatoxylin 367. — Oxalschwefelsäure 368. Paludina 350. Pantopoden 63. Parafün, Einbetten in 22, 364. parallel polarisirtes Licht zur Krystall- untersuchung 258. — Untersuchung von Dünn- schliffen 456. Paramaecium 353. Paranthus 57. Parapodopsis 348. Pasteur'schc Hefe 534. Pccten 350. Pedicellina 65. Pedicellinen 208. — , Conservirung 209. Pelagia 59. Pennaria 58. Pennatuliden 57. Pentacrinus 60. Pepsinlösung 249. periphere Nerven, Degeneration 230. — — , Untersuchungsmethoden 19. peripheres Nervensystem, Wirkung von Alkohol 518. Peronosporeen 112. Perophora 65. Petri's Öterilisationsapparat 237. Pfeiffer's heizbarer Objecttisch 357. Phagocyta gracilis 213. Phagocyten 357. Phallusia 65, 350. pharmakognostische Mikroskopie 34. Phascalosoma 62. Phellonsäure 116. Philine 64. " Philipsit 131, 260. Phloionsäiu'e 116. Phloroglucin zur Entkalkung 8. Phloroglucin-Salpetersäure von Haug zur Entkalkung 11. Phloxin 38, 45. Phoronis 62, 214. Phosphin 38, 46. Phosphormolybdänsäurc - Hämatoxylin von Mallory 341. Phosphorsäure zur Entkalkung 6. Photographie des Netzhautbildes im Insectenauge 198. Photographien von Diatomeen 502. Phronima 63. Phrynosoma 220. Phykomyceten 409. Phyllirrhoe 64. Phyllophorus 61. Physalia 60. Physophora 59. Pigment der Haare 516. — — Oberhaut 516. Pigmentzellcn 223. Pikrincbromsäure von Keiscr 364. Pikrin-Essig-Osmiumsäure v. Rath 510. J'ikrinsäure zum Entkalken 5. — — Fixiren injicirter Geschwulst- parthien 13. von mit Methylenblau tm- girten Präparaten 15. Pikrinsalpetcrsäure zur Entkalkung 5. pikrinsaures Ammon zur;Fixirung von mit Methylenblau gefärbten Prä- paraten 15. 38* 580 Sach-Register. Pikrinschwefelsäure von Kleinenberg o. Pikrocarmin 24, 519. Pilidium 62. Pilzculturen 247. Pilze, Untersuchung 409. Piperin, Nachweis 121. Placenta 227. Plagiostoma 212. Plagiostorainen 212. Plasma 113, Plasmahaut 70. Plasmazellen, Tinction 482. Plastidulen 515. Platin, Nachweis 128. Platin Chloridlösung von Hermann 364. Plehn's Heizkasten 360. — Methylenblau-Eosinlösung 361. Plessen-Rabinovicz'Hämatoxylinlösung 391. Pleurobranchus 64. Pleurophyllidia 64. Pleurosigma angulatum, Structur 287, 433. Podocoryne 58. polarisirtes Licht zur Krystallunter- suchung 257, 258. — — — Untersuchung von Dünn- schliffen 456, 459. — — — — quergestreifter Muskel- fasern 200. Polycarpa 65. Polycera 64. Polycladen 61. Polycyclus 65. Polymnla 62. Polynoina 62. Polyodontes 62. Polythoa 58. Ponceau 3 R 37, 45. Pontobdella 62. Poriferen 56. Porpita 60. Präparate von lebend mit AniUnfarb- stoffen injicirten Geschwulstpar- thien 11. Präparatenklammer von Fromme 301. Prausnitz' Apparat zum Abimpfcu 396. — Rollculturapparat 396. Praya 60. Primitivröhrchen der Zähne, Isolirung 6, 7. Prosobranchiaten 63. Proteinreactionen 115. Protisten 77. Protococcaceen 247. Protoplasma 70. Protozoen 56, 355. Protula 62. Pseudobranchellion 62. Pseudopus, Zungendriise 379. Psoi'iasis 91. Pteropoden 64. Pterotracheidae 63. Pulmonaten, Nervensystem 366. Purpurin 42, 43. Pyelo-Nephritis 245. Pyrenin 37. Pyrenoide 248. — Doppelfärbung 250. pyrogene Quarze 549. Pyromorphit 261. Pyrosoma 65. Quarz 547. 548, 549. — Tinction 547. Quarze, pyrogene 549. Quecksilber, Nachweis 128. quergestreifte Muskelfasern, beugende Structur 200. — — . Nebenscheiben 380. Kadiolarien 56. Rath's Pikrin-Essig-Osmiumsäure 510. Raupen, Conservirung 86. — , Tracheenendigungen in Sericterien 84. Reichert's Zeichenapparat 451. Reifen der Farbstoffe 475. Reincultur von Actinomyces 507. Reptilien. Auge 220. Resorcin 527. Resorcinmethode von Unna 529. Retina, menschliche 227. Retzius' Methode, mit Methylenblau tlngirte Präparate zu fixiren 16. rhabdocöle Turbellarien 212. Rhabdoid 413. Rhizocephala 63. Rhizophysa 60. Rhizopoden 508. Rhizostoma 59. Rhizoxenia 57. Rhodium, Nachweis 129. Rhopalea 65. RocccUin 39, 46. Rollculturapparat von Prausnitz 396. Rosazurin G 40, 47. Rosenthal's Chinolinlösung 342. rothe Blutkörperchen 96, 370, 514. — — Degenerationserscheinungen 96. Rothlauf-Endokarditis 407. Rotzbacillen. Tinction 109. Rubidium, Nachweis 129. Rückenmark, Achsencylinder- Färbung 230. Rückenmarksfaserung 392. Russeis Apparat zur Entnahme von Wasser aus bestimmten Tiefen 498. Sach-Register 581 Russel's Apparat zur Gewinnung von Schlaramproben 499. Ruthenium. Nachweis 129. Saccharomyces 534. — , Keimung der Sporen 539. Säurebildung von Bacterien 107, 404. Säureraethode von Unna 528. Safranin 24, 38, 45, 68, 226, 248, 250, 515, 519. — T 37, 45. Saftbahnen des Knorpels 383. Sagartia 57. Salamandra atra 219. — , Kopfnerven 390. — , Larven 223. Salpa 511. Salpetersäure 55. — zur Entkalkung 7. salpetersaures Chrysoidin 41, 48. Salpidae 65. Salzsäure 55. — zur Entkalkung 6. Samenzellen 516. Saprolegniaceen, Sporangien 252. Sarkome, lebende, Injection mit Ani- linfarbstoffen 11. Sarkolemma 67. Sarkoplasma 204, 380. Scaphander 64. schiefe Beleuchtung zur Untersuchung von Dünnschliffen 456. Schildkröte 229. Schill's Aspirationsspritze 523. — Injectionsspritze 523. Schizopoden 63. Schlamraproben, Apparat zur Entnahme von 499. Schnitte, mikroskopische, grosse 202. Schwärmsporen, Untersuchung 408. Schwefelsäure 55. Schwinger von Dipteren 217. Scorpione, Augen 82. Scorpioniden 349. Scytonema 113. Secretion 86. Seepferdefuss, Anatomie 389. Seide, gelbe 85. Seifenmethode von Unna 529. Selachicr 66. — Eier 88. — Embryonen 66. Selen, Nachweis 129. Senus' Apparate 241. Sepia 350. Sepiola 350. Sericterien von Raupen, Trachecnendi- gungen in 84. seröse Drüsen der Zunge, Nerven- endigungen in 99. Serpuliden 62. Silicium, Nachweis 129. Sinaibin, Nachweis 121. Sinapin. Nachweis 121. Sinnesorgane von Salpa 51 1 . Siphonophoren 59. Siphonostomum 62. Sipunculus 62. Skapolith 259. Skolecit 260. Sodalith 259, 261. Solenophorus, Nervensystem 366. Solidgrün 39, 42, 43, 44. 46. Spaink's Hämatoxylin 519. — Nigrosin-Safranin-Alkohol 519. Spelerpes fuscus 513. Spermatozoiden 369, 515. — der Säugethiere 515. Spliaerechinus 362. Sphärolithe in Eruptivgesteinen 544. Sphaerozoiden 56. Sphaerozoum 56. Spindel, karyokinetische 367. Spirographis 62. Spirogyra 533. Spongien 362. Spongilla 205, 351. — Conservirung 206. — Färbung 206. Sporangien der Saprolegniaceen 252. Sporen von Saccharomyces, Keimung 539. Sputum, Untersuchung 242. Squilla 348. Stachelkugeln der Nitellen 114. Stachelzelle, Structur der 91. Stärkebildung 540. Statoblasten der Bryozoen 206. Staupe, Mikroorganismen der 530. Stelleriden 60. Stentor coeruleus 206. Sterilisationsapparat von Petri 237. Sternaspiden 62. Stichopus 61. Stilbit 260. Stomatopoden 63 Stoss' Kühlmesser 310. Streptothrix cuniculi 242. Strongylocentrotus 362. Strontianit 260. Strontium, Nachweis 129. Styela 65. Styronmethode von Unna 528. Subei'in 116. Suberinsäure 116. Snblimatlösung von Keiser 363. — zum Fixiren injicirter Geschwulst- parthien 13. .582 Sach-Register. Substanz, cliromoleptische 25. Süsswasserrhizopoden 508. Süsswasserschwamm 205. • — , Conservirung 206. — , Färbimg 206. Surirella Gemma 289. Symbiose von Algen und Thieren 351. Sympodium 57. Synapta 61. Tastkörperchen, Nervenendigungen in 520. Teleosteer 66, 218, 512. — , Gehirn 218. Teilina 350. Tellur, Nachweis 129. Temperatur, Einfluss auf Karyokinese 533. Terpentin, venetianischer. für botani- sche Dauerpräparate 29. Testikel von Fringilla 369. Tethys 64. Thalassicolla 56. Thallium, Nachweis 129. Theerfarbstofie, basische 68. Thein, Nachweis 120. Theobromin, Nachweis 120. Thermoregulator von Altmann 335. — — d'Arsonval 103. Miquel 104. Thermostat von d'Arsonval 103. Plehn 360. Thionin 69, 226. Thiere, niedere 77, 205, 351, 508. Thiersch' Chromsänrelösung zur Ent- kalkung 3. Thoma's Blutkörperchenzählapparat 369. — Entkalkungsmethode 191. Thomsonit 260. Thorium, Nachweis 129. Thyone 61. Thyonidium 61. Tiara 58. Tima 58. Tinction der Achsencylinder 25, 230. — — menschlichen Retina 227. des Centralnervensystems nach Ziehen 385. — mit Carminen von mit Anilinfarb- stoffen injicirten Tumoren 14. ' Hämatoxylin 24, 51, 226. 227, 337, 341, 367, 384, 391, 483, 486, 488, 519. — — Pikrocarmin 24. — — Safranin 24. — von Blutzellen 373. — — Feldspath 547. ■ — - Ganglienzellen 27. Tinction von Golgi 168. — — Malariaparasiten 361. Mastzellen 482. — — Mikroorganismen im Hornge- webe 524. — — Plasmazellen 482. — — Quarz 547. — — Rotzbacillen 109. — — Tuberkelbacülen 405. Tinctionsmittel 51, 475. — , Reifen der 475. Tischutkin's Fleischpeptonagar 107. Titan, Nachweis 129. Toluidinblau 69. Tolypothrix 113. Tomopteriden 62. Tornaria 61. Torpedo 66. Tracheenendigungen in Sericterieu von Raupen 84. Tracheensystem von Insectenlarven 83. Trachymedusen 58. Trachypterus 66. Tradescantia 533. Triamidobenzol 68. Trichophrya 56. Triopa 64. Tritonia 64. Trochus 63. Tropfapparat für Mikrotome 305. Tuberkelbacillen 109, 242, 405. — , Färbung 405. — , - von Unna 405. Tubularia 58. Tubularidae 58. 'Tuchroth B 40, 47. Tunicata 65. Turbellarien 213. — , rhabdocöle 212. Umbrella 64. umgekehrtes Mikroskop von Wyrouboff 495. Unio 350. Unna's Arsensäuremethode 528. — Boraxmethylenblaulösung 524. — Citronensäuremethode 528. — Dampftrichter 397. — Essigmethode 528. — Glycerinäthermethode 528. — Glykolmethode 528. — Hämatoxylinlösung 486. — Hydrochinonmethode 530. — Hydroxylaminmethode 529. — Kochsalz -Wasserstoffsuperoxydme- thode 529. — Methode. Lepra- und Tuberkel- bacillen zu färben 405. — Methylenblaulösnngen 482. Sach-Register. 583 Unna's Oxalsäuremethode 528. — Resorcinmethode 529. — Säuremethode 528. — Seifenmethode 529. — Styronraethode 528. Uran, Nachweis 129. Uran car min 230. Urnieren des Menschen, Entwickhing 95. Urticaceen, Milchsaftgefässe 413. Vacuolen 70, 359. — contractile 359. Vanillin, Nachweis 122. Velella 60. venetianischer Terpentin für hotanische Dauerpräparate 29. Venus 350. Verania 64. Verdauungsflüssigkeit 249. Vergoldung der Golgi'schen Präparate 97. Verhornungsprocess 91. Vertebraten 88, 218, 367, 512. Vesuvin 37, 45, 68. Victoriablau 226. — , B 37, 45. — , BB 38, 46. — , 4 R 38, 46. Violett B 38, 46. Violett, Lauth'sches 69. A'ögel, Federn 89. - ,' Haare 89. Vorderkopfsomiten von Anguilla 220. Vorgänge, osmitische 70. Waldeyer's Entkalkungsflüssigkeit 4. Wasserentnahme aus bestimmten Tie- fen, Apparat zur 498. Wasserstoffsuperoxyd zu Hämatoxylin- tinctionen 487. Wattepfropfen, Ersatz für 522. Wechselvorrichtung für paralleles und convergentes Licht von Brünne'e 335. Weigert's Methode der Markscheiden- färbnng 392. weisse Bhukörperchen 371. White's Methode Knochen und Zähne zu präpariren 501. Wimperkörper der Nitellen 114. Winkel's Zeichenapparat 295. Wismuth, Nachweis 129. Witherit 260. Wolfram, Nachweis 130. Wolters" Methode der Markscbeiden- färbung 388. Würmer 61, 350. — dendrocöle 61. — rhabdocöle 61. Wulfenit 261. Wyrouboff's umgekehrtes Mikroskop 495. Yttrium, Nachweis 130. Zähne, Primitivröhreben, Isolirung der 6. 7. Zahnpräparate 501. Zeichenapparat von Bernhard 291. — — Brauer 451. — — Edinger 179. — — Reichert 451. Winkel 295. _ — Zeiss 291. Zeiss' Mikroskope f. krystallographische Untersuchungen 330. — Zeichenapparat 291. Zellbrücken der glatten Muskelfasern 382. Zellgranula 346. Zellkern 77, 79, 90. 115, 204, 223, 343, 367, 509, 510, 512, 513, 514. Ziehen's Färbemethode für Central- nerven System 385. Zimmtöl, Nachweis 123. Zink, Nachweis 130. Zinkblende 261. Zinkspath 261. Zinn, Nachweis 130. Zirkonium, Nachweis 130. Zoantharia 57. Zoarces viviparus 88. Zoobothryum 65. Zoochlorellen 351. Zoo.xanthellen 351. Züchtung von Dysenterieamöben 361. Zunge der Säugethiere 99. Zungenbälge 379. Zungendrüse 379. Zygoten 251. Hiirli.li-mkPi-fi von ApppHiaii'; k I'fcMining^tnvIV in P.iMunscliweig. ^^ l^LE fl ^6^ vv M ♦ ^ -^-^^ ' ''^^■Jf0- . vt: V J r f ör,*^ \^^'< Ha^ ri v^